* Corresponding Author: email: angraininovi311@gmail.com
https://doi.org/10.56064/jps.v25i1.725 Naskah diusulkan: 16 Desember 2022;  Naskah disetujui:  25 Januari 2023
p-ISSN: 1410-7058 e-ISSN: 2597-7059 © 2023 JPS MIPA UNSRI

## Jurnal Penelitian Sains
Journal Home Page: http://ejurnal.mipa.unsri.ac.id/index.php/jps/index

## Pembuatan sampel ekstrak mangrove Rhizophora Apiculata dengan variasi suhu evaporasi guna pengayaan praktikum bioteknologi laut
Novi Angraini 1*) , Nyayu Nurul Husna 2) , dan Naomi Tosani 2)
1) Jurusan Ilmu Kelautan, FMIPA, Universitas Sriwijaya, Indonesia
2) Budidaya Perairan, Fakultas Pertanian, Universitas Sriwijaya, Indonesia
Kata kunci: Rhizophora Apiculata , ekstrak mangrove, suhu evaporasi
ABSTRAK: Pembuatan ekstrak mangrove Rhizophora Apiculata telah dilakukan. Daun utuh yang sudah tua digunakan sebagai sampel untuk diekstrak. Sampel dikering-anginkan, diha- luskan lalu diayak. Maserasi serbuk kering dilakukan menggunakan metanol perbandingan 1 : 3 selama 3 x 24 jam. Filtrat disaring dengan kertas saring whatman 41 lalu diekstrak meng- gunakan rotary evaporator . Suhu evaporasi divariasikan 40 o C dan 65 o C. Hasil penelitian me- nunjukkan lamanya proses evaporasi pada suhu 40 o C sekitar 10 jam perliter  filtrat dan pada suhu 65 o C adalah 6 jam perliter filtrat. Semakin tinggi suhu evaporasi maka semakin cepat proses penguapan namun penggunaan suhu yang tinggi pada proses evaporasi perlu mem- perhatikan karakteristik zat aktif yang terdapat didalam ekstrak apakah zat aktif tersebut ta- han terhadap suhu tinggi atau tidak. Pengujian kualitatif fitokimia menunjukkan ekstrak dari proses evaporasi pada suhu 40 o C mengandung steroid, flavonoid, dan fenol sedangkan ek- strak dari proses evaporasi pada suhu 65 o C mempunyai kandungan alkaloid, steroid, flavo- noid, dan fenol. Hal ini menunjukkan bahwa suhu evaporasi mempengaruhi lamanya waktu evaporasi namun untuk kualitas ekstrak memberikan hasil yang tidak berbeda jauh.
Keywords:
Rhizophora Apiculata , mangrove extract, evaporation temperature ABSTRACT: Preparation of Rhizophora Apiculata mangrove extract has been carried out. Old whole leaves were used as samples to be extracted. The samples were air-dried, crushed and then sifted. Dry powder maceration was carried out using methanol in a ratio of 1: 3 for 3 x 24 hours. The filtrate was filtered using w hatman 41 filter paper and then extracted using a rotary evaporator . Evaporation temperature varied 40 o C and 65 o C. The results showed that the  evaporation  process  took  10  hours  per  liter  of  filtrate  at  40 o C  and  6  hours per  liter  of filtrate  at  65 o C.  The  higher  the  evaporation  temperature,  the  faster  the  reduction  process, but using high temperatures in the evaporation process, it is necessary to pay attention to the characteristics  of  the  substances  contained  in  the  extract,  whether  the  active  substance  is resistant to high temperatures or not. Phytochemical qualitative testing showed that extracts from the evaporation process at 40 o C contained steroids, flavonoids, and phenols while ex- tracts  from  the  evaporation  process  at  65 o C  contained  alkaloids,  steroids,  flavonoids,  and phenols. This shows that the evaporation temperature affects the length of evaporation time, but the quality of the extract gives results that are not much different.

## 1 PENDAHULUAN
ndonesia  merupakan  negara  maritim  yang  ber- bentuk  kepulauan  dengan  sumber  daya  hayati laut yang besar (1) . Pemanfaatan sumber daya hayati laut  semakin  berkembang  baik  sebagai  bahan  pan- gan baru, sebagai bahan baku dalam industri farmasi dan industri kosmetik. Untuk meningkatkan manfaat dan  nilai  jual  sumber  daya  hayati  laut  diperlukan suatu  ilmu  pengetahuan  mengenai  teknik  pengola- han  dan  pengembangan  sumber  daya  hayati  laut tersebut. Bidang ilmu yang berkaitan adalah Biotek-
nologi  Kelautan.  Biotekologi  Kelautan  merupakan salah satu cabang ilmu pengetahuan yang mempela- jari  pengolahan  dan  pengembangan  sumber  daya hayati  laut  baik  tanaman  maupun  hewan  serta  ba- gian yang terkandung didalamnya (2) .
Teknik pengolahan dan pengembangan ini telah banyak dilakukan oleh industri-industri yang mengo- lah sumber daya hayati laut. Namun sebelum dipro- duksi  dalam  skala  industri,  dilakukan  pengujian- pengujian  terhadap  bahan  aktif  yang  terkandung didalamnya.  Pengujian  dilakukan  di  laboratorium dengan  menggunakan  metode  pengujian  dan  alat
I
tertentu.  Sebelum  dilakukan  pengujian,  sampel sumber  daya  hayati  laut  harus  dipreparasi  sedemi- kian rupa sehingga bahan aktif yang terkandung di- dalamnya dapat diketahui. Pada umumnya, mengu- bah  sampel  menjadi  bentuk  ekstrak  akan  memper- mudah mendapatkan dan menguji bahan aktif yang terdapat  di  dalam  sampel  tersebut.  Ekstrak  dengan kualitas yang baik akan memberikan hasil pengujian yang baik pula.
Laboratorium  Bioekologi  Kelautan  Jurusan  Ilmu Kelautan FMIPA memberikan mata kuliah Praktikum Bioteknologi  Laut kepada  pada  mahasiswanya den- gan  tujuan  memberikan  ilmu  pengetahuan  dan  ke- mampuan praktis dalam melakukan pengolahan dan pengembangan sumber daya hayati laut. Salah satu sumber  daya  hayati  laut  yang  digunakan  sebagai sampel adalah mangrove. Bahan aktif yang terdapat di  dalam  ekstrak  tanaman  mangrove  seperti  kan- dungan  flavonoid,  saponin,  tanin,  dan  terpenoid dapat  menjadi  salah satu bahan    baku  dalam  pem- buatan kosmetik dan obat-obatan (3) . Namun selama ini  ekstrak  yang  dihasilkan  dari  kegiatan  praktikum mahasiswa tidak dilakukan pengujian kualitas mela- lui skrining fitokimia  sehingga  bahan  aktif  yang  ter- dapat  didalamnya  tidak  diketahui  secara  pasti.  Se- lain  itu  suhu  evaporasi  yang  digunakan  pada  saat pembuatan ekstrak mengacu pada titik didih pelarut yang  digunakan  sehingga  terdapat  kemungkinan bahan  aktif  akan  rusak  karena  suhu  yang  terlalu tinggi.  Kebutuhan  sampel  ekstrak  mangrove  pada kegiatan praktikum dan penelitian dib idang Biotek- nologi  laut  sangat  tinggi.  Waktu  praktikum  yang singkat dan jumlah alat rotary evaporator yang sedi- kit  belum  memadai  untuk  memenuhi  kebutuhan akan sampel ekstrak tersebut. Oleh karena itu, labo- ratorium menyiapkan sediaan ekstrak mangrove siap pakai  guna  memberikan  kemudahan  dan  efisiensi waktu bagi praktikan dan peneliti.

## 2 METODE PENELITIAN

## Bahan
Sampel  daun  mangrove Rhizophora  Apiculata ,  me- thanol,  reagen  Mayer,  kloroform,  logam  Mg,  HCl, akuades, asam sulfat, asam asetat glasial, dan FeCl 3 .

## Metode
Pembuatan  ekstrak  mangrove  dilakukan  dengan menggunakan  sampel  berupa daun  mangrove  jenis Rhizophora  Apiculata yang  diambil  dari  daerah  pe- sisir Tanjung Api-Api, Banyuasin, Sumatera Selatan. Bagian  daun  yang  diambil  adalah  daun  utuh  yang sudah  tua.  Preparasi  sampel  dilakukan  dengan membawa sampel daun mangrove segar ke labora-
torium untuk dicuci dengan air tawar dan dikering- anginkan. Daun yang telah kering dihaluskan meng- gunakan  blender  lalu  diayak  untuk  mendapatkan ukuran serbuk yang seragam.

## Gambar 1 Proses preparasi sampel mangrove Rhizophora Apiculata
Sebanyak  1  kg  serbuk  daun  mangrove  kering selanjutnya  dimaserasi  dengan  menggunakan  pela- rut metanol dengan perbandingan 1 : 3 selama 3 x 24  jam (4) .  Pemilihan  pelarut  metanol  pada  proses maserasi  dilakukan  karena  metanol  dapat  mela- rutkan  hampir  semua  golongan  metabolit  sekunder (5) . Serbuk kering  ditimbang sebanyak 300 gram lalu ditambahkan  900  mL  metanol,  campuran  diaduk rata  dengan  menggunakan  spatula  dan  dibiarkan selama 3 x 24 jam. Setelah dimaserasi, cairan sampel disaring  menggunakan  kertas  saring whatman 41 untuk memisahkan filtrat dan ampasnya. Selanjutnya ampas  dimaserasi  kembali  dengan  menggunakan pelarut  yang  sama  hingga  filtrat  hampir  tidak  ber- warna.

## Gambar 2 Proses maserasi serbuk kering dan penyaringan
Proses  maserasi  dilakukan  secara  berulang  den- gan  tujuan  agar  zat  aktif  terserap  secara  maksimal pada pelarut yang digunakan. Selanjutnya filtrat ha- sil maserasi di evaporasi menggunakan rotary evapo- rator dengan  variasi  suhu  40 o C  dan  65 o C.  Proses evaporasi  dihentikan  apabila  semua  pelarut  telah menguap. Hal ini ditandai dengan tidak adanya tete- san uap pelarut.
Gambar 3 Proses evaporasi dengan rotary evaporator, suhu evaporasi 40 o C dan 65 o C
Persen randeman ekstrak mangrove yang dihasil- kan  dihitung  dengan  menggunakan  rumus  sebagai berikut :
Persen Rendeman = 𝑏𝑒𝑟𝑎𝑡  𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘 𝑏𝑒𝑟𝑎𝑡  𝑏𝑎ℎ𝑎𝑛  𝑎𝑤𝑎𝑙 ×  100%
Ekstrak  mangrove  yang  dihasilkan  selanjutnya diperiksa  kualitasnya  dengan skrinning fitokimia. Skrinning fitokimia yang akan dilakukan untuk men- getahui  kandungan  senyawa  metabolit  sekunder mengacu  pada  Metode  Fitokimia  :  Penuntun  Cara Modern Menganalisis Tumbuhan yang telah dirang- kum sebagai berikut (6) (7) : a. Uji Alkaloid
Ekstrak mangrove diambil sebanyak 1 mL dan dima- sukkan  ke dalam  tabung reaksi  yang  bersih.  Kemu- dian  ke  dalam  sampel  ditambahkan  3  tetes  kloro- form dan 3 tetes Reagen Mayer. Adanya kandungan alkaloid ditandai dengan terbentuknya endapan pu- tih pada campuran.
b. Uji Flavonoid
Ekstrak mangrove diambil sebanyak 1 mL dimasuk- kan ke dalam tabung reaksi yang bersih. Kemudian ditambahkan logam Mg sebanyak 1 g dan 1 mL HCl
pekat.  Adanya  kandungan  flavonoid  pada  sampel ditunjukkan dengan perubahan warna kuning pada campuran.
c. Saponin
Ekstrak mangrove diambil sebanyak 2 mL dan dima- sukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  yang  bersih.  Tam- bahkan air sebanyak 10 mL lalu kocok dengan kuat selama  kurang  lebih 10  menit dan diamkan selama 10 menit. Adanya kandungan saponin pada sampel ditandai dengan adanya buih atau busa yang terben- tuk dan bertahan lebih dari 10 menit.
d. Steroid
Ekstrak  mangrove  diambil  sebanyak  2  mL  lalu  di- tambahkan asam asetat glasial sebanyak 10 tetes dan asam sulfat pekat sebanyak 2 tetes. Campuran laru- tan kemudian dikocok secara perlahan dan diamkan beberapa menit. Adanya kandungan steroid apabila larutan menunjukkan warna biru atau hijau.
e. Fenol
Ekstrak  mangrove  sebanyak  2  mL  ditambahkan dengan  FeCl 3 1%  lalu  kocok  perlahan  dan  diamati perubahan  warna  yang  terjadi.  Adanya  kandungan fenol apabila campuran larutan menunjukkan warna biru kehitaman.

## 3 HASIL PENELITIAN

## Data hasil maserasi dan ekstrak yang dihasilkan
Data  hasil  maserasi  dan  ekstrak  yang diperoleh  un- tuk masing-masing variasi suhu evaporasi diperlihat- kan pada Tabel 1 di bawah ini.
Tabel 1 Data hasil maserasi dan evaporasi pada variasi suhu evaporasi Keterangan Suhu evaporasi 40 o C Suhu evaporasi 65 o C Berat serbuk awal 300 gram 300 gram Total volume pelarut 3 liter 3 liter Lama waktu maserasi 3 x 24 jam (pen- gulangan 3 kali sampai bening) 3 x 24 jam (pen- gulangan 3 kali sampai bening) Lama waktu evaporasi untuk 1 liter hasil ma- serasi 10 jam 6 jam Berat ekstrak 45,62 gram 37,2 gram Persen rende- man 15,21 % 12,40 %
Pada Tabel 1 dapat dilihat bahwa proses evapo- rasi  yang  dilakukan  pada  suhu  rendah  yaitu  40 o C
memerlukan waktu 10 jam untuk perliter filtrat ma- serasi dan proses evaporasi pada suhu 65 o C hanya membutuhkan waktu 6 jam untuk perliter filtrat hasil maserasi.  Waktu  evaporasi  untuk  suhu  40 o C  lebih lama  jika  dibandingkan  dengan  proses  evaporasi pada suhu 65 o C. Hal ini menunjukkan bahwa suhu evaporasi mempengaruhi lamanya waktu evaporasi. Semakin  tinggi  suhu  evaporasi  maka  proses  pen- guapan  akan  semakin  cepat  begitupun  sebaliknya semakin  rendah  suhu  evaporasi  yang  digunakan maka proses penguapan akan semakin lama (8) . Na- mun penggunaan suhu evaporasi yang tinggi terka- dang dapat merusak zat aktif yang tidak tahan panas yang  terdapat  di  dalam  sampel  sehingga  perlu diketahui  karakteristik  dari  zat  aktif  dalam  sampel apakah tahan terhadap panas atau tidak.
Ekstrak  yang  dihasilkan    dari  proses  evaporasi pada suhu 40 o C lebih banyak yaitu 45,62 gram den- gan  persen  rendeman  15,21  %.  Jika  dibandingkan dengan ekstrak yang diperoleh dari proses evaporasi dengan  suhu  65 o C  yang  hanya  37,2  gram  dengan persen  rendeman  12,40  %.  Suhu  evaporasi  tidak berpengaruh  secara  signifikan  terhadap  jumlah  ek- strak yang dihasilkan karena tujuan utama evaporasi hanyalah menguapkan pelarut dalam maserat. Fak- tor yang lebih berpengaruh terhadap jumlah ekstrak yang  dihasilkan  adalah  suhu  dan  lamanya  waktu maserasi dimana pada proses maserasi inilah bahan aktif dalam sampel akan diekstrak sehingga semakin lama  waktu  maserasi  maka  akan  semakin  banyak bahan  aktif  yang  akan diserap  oleh  pelarut  dan  se- makin  tinggi  suhu  pada  proses  maserasi  maka  se- makin banyak bahan aktif dalam sampel yang akan diserap oleh pelarut (9) .
Penelitian ini hanya memvariasikan suhu evapo- rasi  bukan  suhu  maserasi  sehingga tidak  dapat din- yatakan  suhu  evaporasi  mempengaruhi  banyaknya jumlah ekstrak yang dihasilkan. Jumlah ekstrak yang lebih besar dari hasil evaporasi suhu 40 o C kemung- kinan  disebabkan  oleh  masih  terdapatnya  sisa  air dari  pelarut  metanol  yang  dipakai  sehingga  perlu dilakukan  pengeringan  lebih  lanjut  untuk  mem- peroleh ekstrak yang benar-benar kering.

## Hasil Uji Kualitatif Ekstrak Mangrove dengan Skrinning Fitokimia
Pengujian  kualitas  ekstrak  mangrove  dilakukan dengan  uji  fitokimia  secara    kualitatif  untuk mengetahui  kandungan  metabolit  sekunder  seperti alkaloid,  steroid,  flavonoid,  saponin,  dan  fenol  di dalam ekstrak.
Hasil  pengujian  fitokimia  dari  ekstrak  mangrove dengan  variasi  suhu  evaporasi  40 o C  dan  65 o C ditunjukkan pada Tabel 2.
Tabel 2 Hasil uji kualitatif fitokimia ekstrak mangrove dengan variasi suhu 40 o C dan 65 o C Jenis ba- han aktif Indikator Hasil uji kualitatif pada suhu evaporasi 40 o C 65 o C Alkaloid Endapan putih x  Steroid Warna biru atau hijau   Flavonoid Warna kuning   Saponin Terbentuk busa yang bertahan ± 10 menit x x Fenol Adanya warna Biru kehitaman  
Tabel  2  menunjukkan  hasil  pengujian  fitokimia secara  kualitatif  dari  sampel  ekstrak  mangrove Rhi- zophora  Apiculata. Pada  suhu  evaporasi  40 o C  kan- dungan  metabolit  sekunder  yang  teridentifikasi hanya steroid, flavonoid, dan fenol. Sedangkan pada suhu evaporasi 65 o C kandungan metabolit sekunder yang teridentifikasi lebih banyak yaitu meliputi alka- loid,  steroid,  flavonoid,  dan  fenol.  Hal  ini  ditunjuk- kan oleh adanya perubahan-perubahan warna pada campuran  setelah  ditambahkan  reagen  tertentu yang  menunjukkan  adanya  kandungan  metabolit- metabolit sekunder tersebut.
Pada pengujian yang dilakukan untuk steroid pa- da campuran larutan terjadi perubahan warna biru atau  hijau  yang  menunjukkan  adanya  kandungan steroid  pada  ekstrak  mangrove.  Hal  ini  sesuai  den- gan  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Mondong,  F. dkk.  (2015) (10) yang  menyatakan  bahwa  sampel  ek- strak positif mengandung steroid jika ada warna hi- jau atau biru setelah penambahan reagen uji steroid. Kedua  ekstrak  juga  menunjukkan  adanya  kandun- gan fenol yang ditandai dengan adanya warna biru kehitaman  setelah  penambahan  FeCl 3 .  Hal  ini  juga sesuai dengan penelitian yang dilakukan oleh Harya- ti et  al .  (2015) (11) yang  menyatakan  bahwa  adanya kandungan fenol pada sampel ekstrak ditandai den- gan  adanya  warna  biru  kehitaman  karena  adanya reaksi antara FeCl 3 dan gugus –OH aromatik. Peneli- tian lain yang meneliti kandungan metabolit sekund- er  pada  ekstrak  mangrove Rhizophora  Apiculata yang  diekstrak  dengan  pelarut  methanol  juga  me- nunjukkan  adanya  kandungan  alkaloid,  flavonoid, steroid,  dan  fenol  namun  variasi  suhu  evaporasi  ti- dak  menunjukkan  hasil  yang  signifikan  dalam  me- nentukan  kandungan  metabolit  sekunder  dalam sampel ekstrak.

## 4 KESIMPULAN
Variasi  suhu  evaporasi  mempengaruhi  lamanya waktu evaporasi dimana semakin tinggi suhu evapo- rasi  maka  semakin  cepat  proses  penguapan  namun variasi suhu evaporasi tidak terlalu berpengaruh pa- da kualitas ekstrak yang dihasilkan.

## ACKNOWLEDGEMENT
“Penelitian/publikasi  artikel  ini  dibiayai  oleh:  Anggaran DIPA  Badan Layanan  Umum  Universitas  Sriwijaya  Tahun Anggaran 2022 SP DIPA-023.17.2.677515/2022, tanggal 13 Desember  2021  Sesuai  dengan  SK  Rektor  SK  Rektor 0013/UN9/SK.LP2M.PT/2022 Tanggal 1 April 2022

## REFERENSI ______________________________
[1] Rangkuti, A.M., Cordova, M.R., Rahmawati, A., Yulma, dan Adimu, H.E. 2017. Ekosistem Pesisir & Laut Indone- sia . ISBN 978-602-444-089-3. Bumi Aksara.
[2] Prihanto, A.A., dan Jaziri, A.A. 2019. Bioteknologi Peri- kanan dan Kelautan . ISBN 978-602-432-908-2. UB Press.
[3] Ridlo, A., Pramesti, R., Koesoemadji, Supriyantini, E., dan Soenardjo, N. 2017. Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Mangrove Rhizopora Mucronata. Buletin Osea- nografi Marina Oktober 2017 Vol. 6 No.2 : 110-116. ISSN : 2089-3507.
[4] Danata, R. H. 2014. Analisis Aktivitas Antibakteri Ek- strak Daun MangroveAvicennia Marina dari Kabupa-
ten Trenggalek dan Kabupaten Pasuruan terhadap Per- tumbuhan Staphylococcus Aureus dan Vibrio Alginoly- ticus. Jurnal Kelautan 7(1): 12-19. ISSN: 1907-9931.
[5] Oktavianus, S. 2013. Uji Daya Hambat Ekstrak Daun Mangrove Jenis Avicennia Marina Terhadap Bakteri Vibrio Parahaemolyticus . Universitas Hasanuddin, Ma- kassar.
[6] Harbone, J.B. 1987. Metode Fitokimia : Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan , Terbitan kedua. Ban- dung : ITB.
[7] Sirait, S.M., dan Enriyati, R. 2021. Skrining Fitokimia dan Pengaruh Cara Pengeringan Terhadap Kualitas Ekstrak Etanol Daging Buah Pala ( Myristica Fragrans Houtt ). WARTA AKAB VOLUME 45, NO. 2, DESEMBER 2021, PP: 17-23.
[8] Modul Praktikum Teknologi Pertanian. 2011. Universi- tas Negeri Jakarta.
[9] Damanik, D.D.P., N. Surbakti dan R. Hasibuan. 2014. Ekstraksi katekin dari daun gambir (Uncaria gambir roxb) dengan metode maserasi. Jurnal Teknik Kimia . 3(2):10-15.
[10] Mondong, F.R., Sangi, M.S., dan Kumaunang, M. 2015. Skrining Fitokimia dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Patikan Emas (Euprorbia prunifo- lia Jacq.) dan Bawang Laut (Proiphys amboinensis (L.) Herb. Jurnal MIPA UNSRAT ONLINE 4(1)81-87 .
[11] Haryati, E. S, Diba, F., dan Wahdina. 2015. Etnobotani Tumbuhan Berguna oleh Masyarakat Sekitar Kawasan KPH Model Kapuas Hulu. Jurnal Hutan Lestari 3(3):
434-445. ________________________________________