Isolasi dan Identifikasi Metabolit Sekunder dari Ekstrak Etil Asetat Batang Nangka ( Artocarpus heterophyllus Lmk.) dan Aktivitasnya Sebagai Antibakteri
[Isolation and  Identification of Secondary Metabolite from Ethyl Acetate Extract of Jackfruit Stem ( Artocarpus heterophyllus Lmk.) and Its Antibacterial Activity]
Indriani 1* dan Iswan 1
1) Jurusan Kimia, Fakultas MIPA, Universitas Tadulako, Jl. Soekarno Hatta Km.9, Kampus Bumi Tadulako Tondo Palu
* ) Coresponding author: indri.2707@gmail.com
ABSTRACT. Isolation  and  identification  of  secondary  metabolite  of  ethyl  acetate  extract  of  jackfruit  stem ( Artocarpus heterophyllus Lmk.) as well as its activity as antibacterial have been carried out. The purpose of this study  was  to  know  the  characterization  and  antibacterial  activity  of  secondary  metabolites  from  ethyl  acetate extract  of  the  Jackfruit  stem. Ethyl  acetate  extract  was  fractionated  and  purified  using several  chromatographic techniques. The identification of the isolated compound was elucidated by spectroscopic UV-Vis, IR, and NMR. Based  on  data  analysis  of  UV,  IR,  and  NMR  spectra  showed  that  the  isolated  compound  was  a  flavonoid derivative. Antibacterial activity test of the isolated compound to Escherichia coli and Staphylococcus aureus was done  by  a  well  diffusion  method.  The  inhibitory  zone  values  of  flavonoid  compound  in  concentration  series  of 1000 µg/ml, 3000 µg/ml, and 5000 µg/ml against E. coli were 9.65 mm, 10.25 mm, and 11.00 mm, respectively. While, the inhibitory zone values in the same concentration series against S. aureus were 9.00 mm, 10.75 mm, and 11.38 mm.
Keywords : Jackfruit , Artocarpus heterophyllus Lmk. , flavonoid, antibacterial activity.
ABSTRAK. Telah  dilakukan  isolasi  dan  identifikasi  metabolit  sekunder  dari  ekstrak  etil  asetat  batang  nangka ( Artocarpus  heterophyllus Lmk.).serta  aktivitasnya  sebagai  antibakteri.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  mengetahui karakteristik  dan  aktivitas antibakteri    metabolit  sekunder  ekstrak  etil asetat  batang  nangka.    Ekstrak etil  asetat batang  nangka  difraksinasi  dan  dimurnikan  menggunakan  berbagai  teknik  kromatografi.  Identifikasi  senyawa isolasi dilakukan dengan teknik spektroskopi UV-Vis, FTIR,  dan NMR.  Berdasarkan analisis data  spektrum UV, IR  dan  NMR  senyawa  isolasi  adalah  turunan  flavonoid.  Uji  antibakteri  senyawa  isolasi  terhadap  bakteri Escherecia  coli dan Staphylococcus  aureus dilakukan  mengunakan  metode  sumur  difusi.  Nilai  zona  hambat senyawa  turunan  flavonoid  pada  seri  konsentrasi  1000  µg/ml,  3000  µg/ml,  dan  5000  µg/ml  terhadap  bakteri E. coli yakni  9,65  mm,  10,25  mm,  dan  11,00  mm,  secara  berturut-turut.  Sedangkan  zona  hambat  pada  seri konsentasi yang sama terhadap S. aureus yakni 9,00 mm, 10,75 mm, dan 11,38 mm.
Kata Kunci : Nangka , Artocarpus heterophyllus Lmk., flavonoid, aktivitas antibakteri.
Riwayat artikel: Diterima 3 April 2020, Disetujui 15 April 2020 Cara sitasi: Indriani., & Iswan. (2020). Isolasi dan Identifikasi Metabolit Sekunder dari Ekstrak Etil Asetat  Batang Nangka ( Artocarpus heterophyllus Lmk.) dan Aktivitasnya Sebagai Antibakteri. KOVALEN: Jurnal Riset Kimia , 6(1): 81-89.
DOI: https://doi.org/10.22487/kovalen.2020.v6.i1.15047

## LATAR BELAKANG
Artocarpus merupakan  genus  utama  dari famili  Moraceae  yang  terdiri  dari  50  spesies dan tersebar dari Asia Selatan, Asia Tenggara ke  kepulauan  Solomon,  Kepulauan  Pasifik, Australia Utara, dan Amerika Tengah (Kochummen  1987;  Verheij  &  Coronel,  1992). Sebanyak  23  spesies  terdapat  di  kawasan hutan tropis Indonesia (Heyne, 1987).
Beberapa spesies dari genus Artocarpus yang tersebar  di  Asia  Tenggara  digunakan  sebagai obat  tradisional  (Perry,  1980;  Heyne,  1987), salah  satu  diantaranya  adalah Artocarpus heterophyllus .
A.  heterophyllus atau  yang  dikenal dengan nama lokal nangka telah dimanfaatkan sebagai  obat  diare,  demam,  perangsang produksi  air  susu  pada  wanita  dan  hewan, antisifilis,  obat  cacing,  penyembuhan  abses, gigitan  ular,  pembengkakan  kelenjar,  obat anemia, asma, dermatitis, dan  batuk (Balbach and  Boarim,  1992).  Kemampuan  pengobatan oleh A.  heterophyllus tersebut  disebabkan bioaktivitas  senyawa  metabolit  sekunder  yang terkandung  di  dalamnya.  Hasil  penelitian terdahulu  menunjukkan    genus Artocarpus mengandung senyawa metabolit sekunder dari golongan  flavonoid,  terpenoid,  neolignan, stilbenoid, dan arilbenzofuran (Hakim, 2010).
Senyawa  metabolit  sekunder  ataupun ekstrak  dari A.  hetephyllus memiliki  berbagai bioaktivitas,  diantaranya  sebagai  antioksidan (Ko et al.,  1998  )  antiinflamasi  (Wei et  al ., 2005),  antineoplasma  (Arung et  al .,  2010), penghambat  biosintensis  melanin  (Arung et al .,  2006),  antidiabetes ( Fernando et  al .,
1991),  antikariogenik  (Sato et  al .,1996), antifungi  dan  antibakteri  (Khan et  al .,  2003).
Aktivitas antibakteri metabolit sekunder merupakan  spektrum  yang  paling  luas  dalam
pemanfaatan  dan  pengembangan  sebagai bahan baku obat.
Bakteri Escherichia coli dan
Staphylococcus  aureus merupakan  bakteri yang  menyebabkan  penyakit  pada  manusia.
E.  coli dapat  menginfeksi  saluran  kencing (Jawetz et al., 2005), infeksi selaput pada otak (Madappa,  2011),  serta  menginfeksi  usus buntu  dan  infeksi  pada  luka  pasca  operasi (Kayser et al., 2005).
Bakteri  lain  yang  dapat  menyebabkan infeksi  adalah  bakteri Staphylococcus  aureus . Jenis  penyakit  yang  ditimbulkan  oleh S.
aureus yaitu  adanya  bakteri  di  dalam  aliran darah  manusia  atau  istilah  medis  yaitu bacteremia, penyakit  endocarditis  yaitu  infeksi pada  bagian  lapisan  dalam  jantung  manusia (Lowy, 1998), infeksi pada paru-paru (pneumonia)  (Kollef et  al., 2005),  serta  dapat menyebabkan  infeksi  supuratif  (bernanah) pada manusia ataupun hewan (Quinn, 2002).
Penelitian terdahulu
telah
mengungkapkan  bahwa A.  heterophyllus
memiliki aktivitas antibakteri. Golongan senyawa flavonoid yang  terkandung  dalam daun A.  heterophyllus dapat  menghambat pertumbuhan S.  aureus pada  konsentrasi 10000  ppm  dengan  nilai  zona  hambat  10,50 mm untuk fraksi FA dan 7,25 mm untuk fraksi FH  (Darmawati et  al .,  2015).  Konsentrasi  50 mg/ml dan 100 mg/ml ekstrak metanol, etanol, dan  kloroform  getah  buah A.  heterophyllus mampu menghambat bakteri E. coli sebesar14±2.82  mm  dan  16.3±3.55  mm;
10.3±1.53  mm  dan  14±2  mm;  13.6±1.52  mm dan  15.3±1.52,  secara  berturut-turut  (Madhavi et  al .,  2013).  Penelitian  yang  telah  dilakukan Loizzo et  al .  (2010)  menunjukkan  bahwa ekstrak  etil  asetat  daun A.  heterophyllus mampu menghambat E.  coli dengan  nilai  MIC
( Minimum  Inhibitor  Concentration )  225.6±4.5 µg/mL  dan  diameter  zona  hambatnya  9.5±1 mm,  sedangkan  nilai  MIC  untuk S.  aureus sebesar  221.9±2.8  µg/mL  dan  diameter  zona hambatnya  12±1  mm.  Secara  berturut-turut nilai  zona  hambat  fraksi  etil  asetat  pada  kulit batang,  empulur  batang,  kulit  akar,  empulur akar,  buah,  daun,  dan  biji A.  heterophyllus pada  konsentrasi  4  mg/disk  terhadap S. aureus, yaitu 20 mm, 10 mm, 16 mm, 18 mm,
18 mm, 12 mm, dan 16 mm serta untuk E. coli , yaitu 14 mm, 12 mm, 16 mm, 14 mm, 16 mm, 16 mm, dan 18 (Khan et al ., 2003).
Sejauh ini uji aktivitas antibakteri terhadap  tumbuhan A.  heterophyllus hanya pada  ekstrak  kasar  ataupun  fraksi  saja,  oleh karena  itu  untuk  lebih  mengetahui  bioaktivitas metabolit  sekunder  maka  akan  dilakukan isolasi  dan  identifikasi  senyawa  metabolit sekunder  ekstrak  etil  asetat  batang  nangka, serta  uji  aktivitas  antibakteri  melalui  tahapan ekstraksi, fraksinasi, dan pemurnian.
Identifikasi  senyawa  akan  dilakukan  melalui analisa hasil UV-Vis, FTIR, dan NMR.

## METODE PENELITIAN

## Bahan dan Peralatan
Bahan  dasar  yang  digunakan  dalam penelitian ini yaitu batang nangka yang diambil dari  Perumahan  Untad,  Kelurahan  Tondo, Kecamatan Mantikulore, Palu, Sulawesi Tengah.  Pelarut  yang  digunakan  untuk ekstraksi  dan  kromatografi  berkualitas  teknis sedangkan  untuk  analisis  spektrofotometer berkualitas  pro-analisis  (p.a).  Bahan-bahan yang  digunakan  antara  lain  metanol, n - heksan, akuades, etil asetat (EtOAc), kloroform,  kertas  saring Whattman ,  silika  gel Merck  60  (70-200  mesh)  untuk  kromatografi kolom  gravitasi  dan  impregnasi,  silika  gel
Merck  60  GF 254 (ukuran  silika  >  200  mesh) untuk  KVC,  silika  gel  Merck  (35-70  Mesh) untuk  KKG  dan  plat  KLT  silika  gel  Merck kiesegal  60  F 254 0,25  mm  untuk  KLT.  Bahan lain  yang  umum  digunakan  sebagai  uji aktivitas  antibakteri  seperti  Nutrien  Agar, Lactose  Broth,  bakteri S.aureus,  E.coli, DMSO, kloramfenikol, dan alkohol 70%.
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini antara  lain rotary  vacum  evaporator ,  neraca analitik,  satu  set  alat  kromatografi  vakum  cair (KVC),  kromatografi  kolom  gravitasi,  lampu UV,  kuvet,  serta  alat-alat  gelas  yang  umun digunakan  dalam  penelitian  kimia  organik. Untuk analisis senyawa hasil isolasi digunakan instrumen UV-Vis, FTIR, dan NMR.

## Prosedur Penelitian

## Ekstraksi dan isolasi
Ekstraksi sampel dilakukan dengan maserasi  menggunakan  pelarut  metanol. Serbuk  batang  nangka sebanyak  4  kg dimaserasi menggunakan  metanol selama 3 x 24  jam.  Ekstrak  metanol  dipekatkan  dengan rotary  vacum  evaporator .  Ekstrak  metanol pekat  dipartisi  berturut-turut  dengan n- heksan dan etilasetat. Ekstrak etilasetat yang diperoleh  diuapkan  pelarutnya  sampai  kering. Ekstrak etil asetat sebanyak  40 g difraksinasi menggunakan  kolom  kromatografi  vakum  cair (KVC)  dengan  eluen  (heksan  :  etil  asetat) pada perbandingan 7:3, 6:4, 5:5, 4:6, 3:7, 2:8, 1:9,  dan  100%  etil  asetat.  Hasil  fraksinasi dianalisis    dengan  Kromatografi  Lapis  Tipis (KLT).  Hasil  analisis  diperoleh  17  subfraksi yang dibagi menjadi 2 fraksi utama yakni fraksi A  (0.038  g)  dan  fraksi  B  (9.3  g).  Fraksi  B dilakukan  fraksinasi  dan  diperoleh    fraksi  Ba (450  mg)  dan  Bb  (71  mg).  Fraksi  Ba difraksinasi  lebih  lanjut  menggunakan  teknik kromatografi  kolom  gravitasi  dengn  campuran
pelarut.  eluen  (heksan  :  aseton)    pada perbandingan 9:1, 8:2, 7:3, 6:4, 5:5, dan 100% aseton  dan  menghasilkan  fraksi  Ba1  (39  mg), Ba2  (80  mg)  dan  Ba3  (223  mg)  .  Fraksinasi Ba2  secara  berulang  diperoleh  senyawa dengan  noda  tunggal,  yang  selanjutnya  diuji dengan  dua  sistem  eluen  yang  berbeda  yakni campuran heksan-etil asetat (7:3) dan campuran heksan : aseton (7,5:2,5).
Senyawa yang diperoleh dilakukan identifikasi  menggunakan  spektrofotometer UV, IR, dan NMR.

## Pengujian aktivitas antibakteri

## 1.  Persiapan bahan uji antibakteri
Nutrien agar (NA) dilarutkan sebanyak 5  gram  dalam  250  ml  akuades,  kemudian disterilkan  ke  dalam  autoklaf  pada  suhu 121 o C  dengan  tekanan  1  atm  selama  15 menit (Fitrial, 2009).

## 2.  Pembuatan suspensi bakteri uji
Satu  mata  ose  bakteri  diambil  dari biakan  agar  miring  dan  diinokulasikan  ke dalam  media  cair  steril  Lactose  Broth, kemudian  diinkubasi  selama  18-24  jam pada suhu 37 o C.Kultur bakteri siap digunakan untuk pengujian aktivitas antibakteri (Fitrial, 2009).
3.  Pengujian  aktivitas  antibakteri  metode difusi sumur
Senyawa  hasil  isolasi  yang  berasal
dari tumbuhan nangka
dilakukan
pengujian aktivitas antibakteri menggunaka metode difusi sumur. Sebanyak tiga variasi konsentrasi  yaitu  1000  µg/ml,  3000  µg/ml, dan  5000  µg/ml,  sampel  uji  dalam    pelarut DMSO  (Dimetil  Sulfoksida).  Media  NA sebanyak  15  mL,  dimasukkan  ke  dalam cawan  petri  kemudian  dimasukkan  bakteri dengan  cara  dituangkan  ke  permukaan media  dan  didiamkan  hingga  memadat.
Setelah  itu,  dibuat  sumuran  dengan diameter ±8 mm dengan menggunakan alat pelubang  media.  Sampel  senyawa,  kontrol positif  kloramfenikol  dan  kontrol  negatif DMSO  dimasukkan  dalam  masing-masing lubang  dalam  cawan  petri  yaitu  sebanyak 50  µL  dan  diinkubasi  selama  24  jam  pada suhu  37 o C,  kemudian  diamati  untuk melihat  zona  hambatnya  (Normayunita, 2015).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Senyawa  isolasi  yang  diperoleh  berupa padatan  berwarna  kuning  pucat  sebanyak  13 mg.  Hasil  uji  KLT  dengan  2  sistem  eluen  yang berbeda    yaitu  (heksan  :  etil  asetat)  (7:3)  (1) dan (heksan : aseton) (7,5:2,5) (2) memperlihatkan  noda  tunggal  dengan  nilai  R f masing-masing adalah 0,5 dan 0,3 (Gambar 1).
1 2
Gambar 1. Kromatogram  KLT  senyawa  hasil isolasi

## Senyawa Hasil Isolasi
Hasil identifikasi senyawa dengan UV-Vis Senyawa hasil isolasi diidentifikasi menggunakan  UV-Vis,  untuk  melihat  adanya gugus  kromofor,  yaitu  diena  terkonjugasi (C=C –C=C)  dan  enon  (C=C - C=O),  dengan kisaran sinar dengan panjang gelombang 200- 400  nm.  Panjang  gelombang  maksimum merupakan  dasar  dari  analisis  kuantitatif
karena  setiap  senyawa  yang  mengandung kromofor  dan  berwarna  memiliki  panjang gelombang  maksimum  yang  spesifik  (Ibrahim dan Marham, 2013).
Spektrum  UV  senyawa  hasil  isolasi dalam  pelarut  metanol  memberikan  serapan maksimum  pada  pita  I  λ maks =  344  nm  dan pada pita II λ maks = 288 nm yang menunjukkan
adanya  transisi  dari  π  π*  dari  ikatan rangkap  C=C.  Pola  spektrum  UV-Vis  tersebut menunjukkan  bahwa  senyawa  hasil  isolasi spesifik  untuk  pola  kromofor  senyawa  flavon. Pita  I  menunjukan  adanya  kromofor  sinamoil (340-380  nm),  dan  pita II  menunjukan  adanya kromofor  benzoil  (250-280  nm)  (Markham, 1998).
Gambar 2. Spektrum UV senyawa isolat
Hasil identifikasi
senyawa dengan spektroskopi Inframerah
Senyawa hasil isolasi menunjukkan beberapa  gugus  fungsi.  Serapan  lebar  pada 3402,43  cm -1 menunjukkan  adanya  gugus
hidroksil (O –H) (Gambar 3). Alkohol dan fenol
memberikan  serapan    lebar  yang  terjadi  lebih ke  kanan  pada  3500  cm -1 hingga  3200  cm -1 , kadang-kadang  saling  tumpang  tindih  dengan serapan  rentangan  C –H  (Sastrohamidjojo, 2013).
1/cm
Hasil
identifikasi senyawa dengan spektroskopi NMR
Data 13 C dan 1 H NMR di bawah ini hanya dijelaskan secara parsial sebagai data
penguatan  hasil  analisis  IR,  agar  dapat memastikan  golongan  dari  senyawa  hasil isolasi.
Gambar 4. Spektrum 13 C-NMR senyawa isolat
Spektra 13 C-NMR menunjukkan kedudukan pergeseran kimia 183,3316 merupakan  kedudukan  yang  khas  sebagai serapan  karbonil  (C=O)  (Gambar  4).  Hal  ini sekaligus menguatkan bahwa serapan 1620,21 cm -1 pada data IR benar menunjukkan keberadaan gugus karbonil.
Spektra 1 H-NMR  memperlihatkan  adanya sinyal  yang berada pada pergeseran kimia (δ)
6-8 ppm, yang merupakan ciri khas pergeseran  untuk  senyawa-senyawa  aromatik (Gambar  5).  Berdasarkan  data  spektra  UV- Vis,  IR,  dan  NMR  isolat  batang  nangka  ( A. heterophyllus Lmk) yang diperoleh merupakan senyawa turunan flavonoid.
Gambar 5. Spektrum 1 H-NMR senyawa isolat

## Aktivitas  Antibakteri  dengan  Metode  Difusi Sumur
Hasil  uji  antivitas  antibakteri  senyawa isolat menunjukkan penghambatan pada semua  konsentrasi  terhadap E.  coli dan S. aureus ,  seperti  yang  terlihat  pada  tabel  1. Penghambatan  tertinggi  terhadap E.  coli yaitu pada konsentrasi 5000 ppm dengan nilai zona hambat 11 mm dan terendah pada konsentrasi
1000 ppm dengan nilai zona hambat 9,65 mm, serta  terhadap S.  aureus penghambatan tertinggi  pada  konsentrasi  5000  ppm  dengan nilai  zona  hambat  11,38  mm  dan  terendah pada konsentrasi 1000 ppm dengan nilai zona hambat  9  mm.  Hal  ini  membuktikan  bahwa senyawa  turunan  flavonoid  memiliki  aktivitas antibakteri.
Tabel 1. Diameter zona hambat isolat, kontrol negatif dan kontrol positif pada E. coli dan S. aureus .
Konsentrasi (µg/ml) Zona hambat ( E. coli ) (mm) Zona hambat ( S. aureus ) (mm) Isolat (AH2) Kontrol (+)* Kontrol (-)** Isolat (AH2) Kontrol (+) Kontrol (-) 1000 9,65 17,50 - 9,00 18,5 - 3000 10,25 24,00 - 10,75 17,50 - 5000 11,00 26,00 - 11,38 24,00 -
*Kontrol positif = Kloramfenikol **Kontrol negatif = DMSO
Senyawa  golongan  flavonoid  dalam menghambat  bakteri  setidaknya  terdiri  atas  3 mekanisme,  yaitu  menghambat  sintesis  asam nukleat,  menghambat  fungsi  dari  membran sitoplasma,  dan  menghambat  metabolisme energi. Galangin menunjukkan aktivitas antibakteri dengan menyebabkan peningkatan yang  nyata  dalam  kehilangan  kalium  dari  sel S. aureus , sebagai indikasi kerusakan langsung  pada  membran  sitoplasma  (Cushnie and  Lamb,  2005).  Kuersetin,  apigenin,  dan 3,6,7,3`,4`-pentahidroksiflavon mampu menghambat E.  coli dengan  cara  menyerang aktivitas  DNA  girase E.  coli (Ohemeng et  al .,
1993).

## KESIMPULAN
Hasil  isolasi  senyawa  metabolit  sekunder dari fraksi etil asetat batang nangka ( Artocarpus heterophyllus Lmk) adalah
senyawa  golongan  flavonoid.  Uji  antibakteri menunjukkan bahwa senyawa turunan flavonoid memiliki kamampuan dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri  baik  pada bakteri
Escherichia coli maupun Staphylococcus aureus

## UCAPAN TERIMAKASIH
Secara  khusus  peneliti  menyampaikan ucapan  terimakasih  kepada  Laboran  Jurusan Kimia,  khususnya  Dewi  Indriani,  S.Si.  atas bantuan  dan  kerjasamanya  selama  kegiatan penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Arung,  E.  T.,  Wicaksono,  B.  D.,  Handoko,  Y. A.,  Kusuma, I. W.,  Shimizu,  K.,  Yulia, D., &  Sandra,  F.  (2010).  Cytotoxic  Effect  of Artocarpin  on  T47D  Cells. Journal  of Natural Medicine , 64: 423−429.
Balbach,  A.,  Boarim,  D.S.F.  (1992). As  Frutas na  Medicina  Natural. Editora  Missionaria, Sao Paulo.
Cushnie,  T.P.T.,  and  Lamb,  A.  J.  (2005).
Detection of Galangin-Induced Cytoplasmic Membrane Damage in Staphylococcus  aureus by  Measuring Potassium Loss. Journal of Ethnopharmacology , 101 (1-3): 243-245.
Darmawati,  A.A.S.K.,  Bawa  I.G.A.G.  dan Suirta  I.W.  (2015).  Isolasi  dan  Identifikasi Senyawa Golongan Flavonoid pada Daun Nangka  ( Artocarpus  heterophyllus Lmk) dan aktivitas antibakteri Terhadap Bakteri Staphylococcus  aureus . Jurnal  Kimia , 9 (2): 203-210.
Fernando, M.R., Wickramasinghe, S. M. D. N., Thabrew,  M.  I.,  Ariyananda,  P.  L.,  and Karunanayake,  E.  H.  (1991).  Effect  of
Artocarpus heterophyllus and Asteracanthus  longifolia on  Glucose Tolerance in Normal Human Subjects and in Maturity-Onset Diabetic Patients. Journal  of  Ethnopharmacology , 31 (3):
277 –282.
Fitrial,  Y. 2009. Analisis Potensi Biji dan Umbi Teratai  ( Nymphaea  pubescens Willd) untuk  Pangan  Fungsional  Prebiotik  dan
Antibakteri Escherichia coli
enteropatogenik  K  1.1.  [ Tesis ].  Pasca
Sarjana Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Hakim, Aliefman. (2010). Diversity of
Secondary Metabolites from Genus Artocarpus (Moraceae). Nusantara Bioscience , 2 (3): 146 –156.
Heyne K. (1987). Useful Plants of Indonesia II. Penerbit Badan Litbang Kehutanan. Jakarta.
Ibrahim,  S.  dan  Marham,  S.  (2013). Teknik Laboatorium Kimia Organik. Garaha Ilmu, Yogyakarta.
Jawetz, E., Melnick, J. L., dan Adelberg, E. A. (2005). Mikrobilogi  Kedokteran. Edisi XXII, 327-335, 362-363, Salemba medika, Jakarta.
Kayser,  F.  H.,  Bienz,  K.  A.,  and  Zinkernagel, R.M.  (2005). Fungi  as  human  pathogen. Medical  Microbiology. Thieme  Sttugart, New York.
Khan,  M.  R.,  Omoloso,  A.  D.,  and  Kihara,  M.
(2003). Antibacterial activity of Artocarpus heterophyllus . Fitoterapia , 74 (5):  501 – 505.
Ko,  F.  N.,  Cheng,  Z.  J.,  Lin,  C.  N.,  and  Teng, C.  M.  (1998).  Scavenger  and  antioxidant properties of prenylflavones isolated from Artocarpus  heterophyllus . Free  Radical Biology and Medicine , 25 (2): 160 –168.
Kochummen,  K.  M.  (1987). Moracea  in  tree flora  of  Malaya. Vol.  2.  Forest  Research Institute. Kepong, Malaysia.
Kollef M.H., and Micek S.T. (2005).
Staphylococcus  aureus Pneumonia  a “Superbug”  Infection  in  community  and hospital settings. CHEST 128: 1093-7.
Lowy,  F.D.,  (1998). Staphylococcus  aureus Infections.  NEJM.
Madappa,  Tarun.  (2011). Escherichia  coli
Infections. (diunduh dari http://emedicine.medscape.com/article/21 7485overview#showall . Mei 2019).
Markham,  K.R.  (1988). Cara  Mengidentifikasi Flavonoid. Alih Bahasa Kosasih Padmawinata. Institut Teknologi Bandung. Bandung. Normayunita,  S.,  Anam,  dan  Khumaidi,  A.
(2015). Aktivitas antibakteri Fraksi Ekstrak Kulit Buah Mentah Pisang Ambon ( Musa  paradisiaca auleus). Online  Jurnal of Natural Science , 4 (3): 300-309.
Ohemeng,  K.  A.,  Schwender,  C.  F.,  Fu  K.  P., and  Barrett  J.  F.  (1993).  DNA  gyrase inhibitory  and  antibacterial  activity  of some flavones . Bioorg Med Chem Lett 3:
225 –230.
Perry,  L.  M.  (1980). Medicinal  plants  of  east and  south-east  asia  attributed  properties and uses. MIT-Pres, Cambridge.
Quinn,  J.P., Annie,  W.,  Michael,  L.,  Lee,  D.
(2002).  Molecular  correlation  for  the treatment outcomes in bloodstream Infections  caused  by Escherichia  coli and Klebsiella  pneumoniae with  reduced susceptibility to  ceftazidime. Clinical Infectious Diseases . 34 (2): 135 –146
Sastrohamidjojo,  Hardjono.  (2013). Dasar- dasar Spektroskopi . UGM Press, Yogyakarta.
Sato,  M.,  Fujiwara,  S.,  Tsuchiya,  H.,  Fujii,  T., Iinuma,  M.,  Tosa,  H.,  and  Ohkawa,  Y. (1996). Flavones with antibacterial activity against  cariogenic  bacteria. Journal  of Ethnopharmacology , 54 (2 –3): 171–176.
Verheij  E.  W.  M.,  and  Coronel,  R.  E.  (1992). Plant resources of south asia No. 2 edible fruits and nuts. Prosea Foundation. Bogor
Wei, B. L., Weng, J. R., Chiu, P. H., Hung, C. F.,  Wang,  J.  P.,  and  Lin,  C.  N.  (2005). Antiinflammatory flavonoids
from Artocarpus  heterophyllus and Artocarpus communis . Journal  of  Agricultural  and Food Chemistry , 53 (10): 3867 –3871.