Juni, 2022
online version : https://ojs.unimal.ac.id/index.php/agrium                                   Vol. 19, No2,
P-ISSN 1829-9288.  E-ISSN 2655-1837 Hal. 168- 173 Author(s): Rosnina A.G,, et al

## Perbaikan Strain Jamur Tiram dengan Teknik Fusi
Kultur Spora Tunggal Jamur Tiram Putih dan Jamur Tiram Kelabu
Strain Improvement of Oyster Mushroom by Using  Fusion Technique of Single Spore Culture White-oyster Mushroom and  Gray-oyster Mushroom
Rosnina  A.G 1 * , Yusra 1 , Zurrahmi  Wirda 1
Jurusan Agroteknologi Fakultas Pertanian Universitas Malikussaleh Muara Batu Lhokseumawe. *rosnina@unimal.ac.id

## ABSTRAK
Jamur tiram  putih  ( Pleurotus  ostreatus ) dan jamur tiram  abu-abu  ( P.  pulmonarius ) termasuk dalam  famili  Pleurotacea  yang  belum  dapat  mencapai  hasil  yang  optimal.  Selain  itu  sporophora jamur  ini  mudah  rusak  ( perishable )  sehingga  menyukarkan  proses  pemanenan  dan  selama pengangkutan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  meningkatkan  kualitas  benih  jamur  tiram  melalui teknik  fusi  antara  kultur  spora  tunggal  isolat  jamur  tiram  putih  dan  jamur  tiram  abu-abu.  K oleksi isolasi  spora  tunggal  yang  berasal  dari sporophora  dewasa  dari jamur tiram  putih  dan jamur tiram kelabu  yang  ditumbuhkan  pada  media  agar  dalam  memperoleh  kultur  monokarion.  Untuk memastikan  isolasi  kultur  monokarion  pada  hifanya  tidak  terdapat  koneksi  penjepit  ( clamp connection ).  Masing-masing  kultur  monokaryon  yang  berasal  dari  kedua  tetua    diuji kompatibilitasnya  dengan  cara meletakkan miselia plug dengan bantuan cob borer berdiameter 0.7 cm yang diletakkan secara berjajar  pada bagian tengah cawan petri yang berisi media PDA ( potato dextrose agar ). K eberhasilan peleburan dua jenis kultur monokaryon  yang kompatibel ditunjukkan dengan  adanya clamp  connection pada  zona  pertemuan  dua  misela  ( junction  zone )  yang  tampak terintegrasi  secara  merata,  sedangkan  penyatuan  monokaryon  kultur  yang incompatibel ditandai dengan  ketiadaan  clamp  connection  dan  tidak  akan  menghasilkan  tubuh  buah  jamur  jika dibudidayakan. Dikaryon  baru  hasil  persilangan  disubkulturkan  dan  dibudidayakan  untuk mendapatkan  sporophora  jamur  baru.  Miselia  jamur  hasil  persilangan  memiliki  kecepatan  tumbuh memenuhi media baglog lebih tinggi dari miselia kedua tetuanya. Kecepatan tumbuh dan ketebalan miselia merupakan karakteristik yang akan dipilih sebagai tanda dalam seleksi benih unggul jamur tiram.
Key word; kompatibilitas, hibridisasi, sporopphora

## ABSTRACT
White oyster mushrooms and gray oyster mushrooms are included in the Pleurotacea family which  have  not  been  able  to  achieve  optimal  yield.  In  addition  that  sporophore  of  this  species  is perishable,  due  to  harvesting  and  transportation.  This  study  aims  to  improve  the  quality  of  oyster mushroom  spawn  through  a  fusion  technique  between  single  spore  isolates  of  white  oyster mushroom and gray oyster mushroom. The study aims to improve the quality of oyster mushroom spawn through a fusion technique between single spore cultures of white oyster mushrooms and gray oyster mushroom isolation. A collection of single spore isolation derived from mature sporophores was grown on agar media to obtain monokarion culture. To confirmation the isolation of monokarion culture in the hyphae there is no clamp connection. Each monokaryon culture from both parents was tested for compatibility by placing a mycelial plug 0.7 cm diameter with the aid cob borer and placed in the center of a petri dish containing PDA (potato dextrose agar) media. The successful fusion of
Juni, 2022
online version : https://ojs.unimal.ac.id/index.php/agrium                                   Vol. 19, No2,
P-ISSN 1829-9288.  E-ISSN 2655-1837 Hal. 168- 173 Author(s): Rosnina A.G,, et al
compatible  mating  between  two  monokaryon  cultures  were  indicated  by  the  presence  of  a  clamp connection  which  appears  to  be  evenly  integrated,  while  the  union  of  incompatible  monokaryon cultures is indicated by the absence of a clamp connection and will not produce mushroom fruiting bodies  if  cultivated.  New  dikaryon  crosses  were  subcultured  and  cultured  to  obtain  new  genotipe sporophores.  New  genotipe  mycelia  had  a  higher  growth  rate  run  compared  than  both  of  parental mycelia to completed spawn run. Radial growth rate and thicknesses of mycelia are characteristics that will be concider marker to selection of quality mushrooms spawn.
Keywords; Compatibility, hybridization, sporophora

## Pendahuluan
Jamur  telah  digunakan  dalam  diet bergizi  sejak  zaman  kuno,  sebagai  makanan eksotis  dan  mewah.  Salah  satu  jenis  jamur yang  banyak  diusahakan  adalah  jamur  tiram. Jamur  tiam  termasuk  family  Pleurotus  yang merupakan  species  jamur  yang  dapat  tumbuh pada limbah pertanian  yang bervariasi dengan kondisi  agroklimat  yang  berbeda.  Selain  itu enzyme  yang  dimilikinya  sebagai  pelapuk yang  mampu  mendegradasi  lignin  pada  kayu merupakan peran penting lainnya dalam siklus kehidupan. Karakteristik jamur tiram dan sifat fleksibel  yang  dimilikinya  merupakan  hal utama  dan  penting  dalam  penelitian  dan perkembangbiakan jamur tiram serta menyumbang  25%  dari  total  produksi  jamur secara Internasional, International Society for mushroom sciences (2016).
Pada  tahun  1904  Blakeslee  adalah orang  pertama  yang  menemukan  seksualitas jamur Mucorales melalui perkawinan miselium  dari  spora  tunggal.  Kemudian  pada tahun 1918-20 ditemukan
mekanisme seksualitas pada kelas basidiomycetes. Sekarang  hari  untuk  peningkatan  ketegangan di  jamur  beberapa  teknik  pemuliaan  yang dimodifikasi  seperti  seleksi  dan  hibridisasi oleh  proses  fusi  Protoplas,  penggunaan mutagenesis  kimia,  penggunaan  penanda resistensi,  memiliki  telah  digunakan  dengan temuan  baru  hasil  tinggi,  lebih  bergizi,  tahan penyakit  dan  efisiensi  biologis  yang  lebih tinggi. Untuk mengembangkan galur Pleurotus yang baik, beberapa strategi pemuliaan seperti anastomosis  hifa  pada  P.  sajor  caju  telah banyak digunakan (Jandaik, 1997).
Penyatuan  dua  monokaryotik  kultur (Dikariotisasi)  merupakan  hibidisasi  moderen yang dengan teknik  fusi protoplas (protoplast
fusion)  dan  penggunaan  mutasi  dengan aplikasi sinar UV dan Gamma-ray Co60 untuk menghasilkan  new-genotipe  unggul  sesuai karakteristik  yang  diinginkan  ( desired  traits ) merupakan  seleksi  strain  secara  konvensional yang  sangat  penting  dalam  perbaikan  strain untuk  membawa  rekombinasi  genetik  dan mengembangkan  hibrida  somatik  yang  telah digunakan  oleh  beberapa  pekerja  untuk mengembangkan  galur  baru  Pleurotus  dengan temuan  kemampuan  kolonisasi  cepat  yang mengarah  pada  pembilasan  awal  buah  tubuh dengan  bentuk,  ukuran  yang  baik,  tingkat kematian  tunas  yang  rendah,  warna  pelius yang  baik  dan  kandungan  protein  yang  tinggi (Bahukhandi  dan  Sharma,  2002,  Rosnina et al .,  2007,  Kumara  and  Edirimanna,  2009, Jaswal et  al .,  2013,  Rosnina et  al 2016). Spesies Pleurotus secara komersial menempati peran  penting  sebagai  jamur  budidaya  secara luas di seluruh dunia.
Oleh karena itu, peningkatan penelitian  dalam  pengembangan  strain  baru yang memiliki produksi tinggi dan karakteristik  jamur  yang  lebih  baik  perlu ditingkatkan. K.R. Jyothi dan Susha S. Thara. 2020.  melakukan  penelitiannya  perbaikan strain  spesies  Pleurotus  dilakukan  dengan hibridisasi  interspesifik  melalui  persilangan kultur  spora  tunggal  pada Pleurotus  djamor efisiensi  biologis  (BE)  yang  rendah,  setelah disilangkan  dengan  jamur  tiram  putih  terjadi inisiasi pembentukan tubuh buah  jamur  yang lebih cepat dan hasil yang  lebih tinggi.
Persilangan antarspesies yang diperoleh dengan teknik penyatuan monokaryon kultur dapat menghasilkan galur jamur  yang  lebih  baik  untuk  perbaikan genetik  dalam  family  Peurotus  Noorlidah et
Juni, 2022
online version : https://ojs.unimal.ac.id/index.php/agrium                                   Vol. 19, No2,
P-ISSN 1829-9288.  E-ISSN 2655-1837 Hal. 168- 173 Author(s): Rosnina A.G,, et al
al .  (2014).  Karakter  morfologi  tiga  hibrida baru  yang  dipilih  menunjukkan  karakteristik sporofora  berdaya  hasil  tinggi yaitu peningkatan warna, aroma, tekstur dan hasil.
Diantara
family
Pleurotus yang dibudidayakan secara besar-besaran adalah P.
ostreatus dan P. pulmonarius dikatakan umur simpan  jamur  berbanding  terbalik  dengan suhu  budidaya  (Bazanella et  al., 2013). Namun,  hasil  jamur  tiram  belum  dapat mencapai  produksi  yang  optimal  dan  mudah
rusak  ( perishable )  karena  perlakuan  selama panen  dan  transportasi  yang  lama.Hibridisasi berdasarkan  persilangan  galur  homokariotik yang  infertile  antar  galur  dari  spesies  yang berbeda  sifat  genetik  yang  dikembangkan dapat  menghasilkan  strain  hibrida  unggul. Hibridisasi antar galur benih yang digunakan oleh Gupta et al . (2011) menggunakan isolasi spora tunggal antara P. sajor-caju , P. florida, P. eous dan Hypsizygus ulmaris mengakibatkan periode spawn run yang lebih pendek yaitu 17 dan 18 hari setelah inokulasi dibandingkan  dengan  periode  normal  spawn run  yaitu  sekitar  25-30  hari.  Selain  itu, dikaryon  hibrida  menunjukkan  sifat  yang lebih baik dalam hal hasil  tinggi,  yang dapat menjadi dasar untuk perbaikan strain. Tujuan utama  dari  penelitian  ini  adalah  untuk menghasilkan  benih  jamur  tiram  yang berkualitas  yang  lebih  baik  ciri-cirinya  dari galur induk.
Adanya  sambungan  klem  ( clamp  connection ) pada  dikaryon  hasil  persilangan  menunjukkan reaksi  kompatibel  fusi  hifa  antara  kultur monokaryon  kedua  tetua  yang  menghasilkan pembentukan  miselium  heterokariotik  pada zona  pertemuan  ( junction  zone )  antara  kedua monokaryon. Pembentukan heterokaryon terbatas  pada  zona  kontak.  Kemudian  zona pertemuan  antara  dua  monokaryon  menjadi tidak dapat dikenali dari awal pertumbuhannya hingga memenuhi cawan petri (Kothe E, 2001). Pada  pengamatan  dikaryon  kultur  yang
kompatibel  terlihat adanya pembentukan klem koneksi.  Dengan  demikian,  beberapa  alel ditemukan ada diantara kedua lokus tipe kawin. Alel tipe mating secara acak terjadi pada setiap kultur monokaryon.
Pertukaran  inti  timbal  balik  diasumsikan karena  antagonisme  miselium  tidak  diamati pada saudara kandung yang kompatibel. Ketika monokaryon  yang mewakili  setiap jenis kawin dari  masing-masing  dari  tiga  basidioma disilangkan dalam semua kombinasi Untuk  mendapatkan  jamur  galur  baru  yang memiliki karakteristik dan nilai komersial yang diinginkan  telah  dilakukan  fusi  hifa  dari  galur parental  yang  berbeda.  Ada  dua  kelas  sistem kawin,  "diri"  dalam  garis  murni,  dan  kawin "silang",  yang  menggambarkan  hibridisasi dengan  garis  monokaryon  yang  sama  atau berbeda.  Pada  penelitian  ini  dilakukan persilangan  hypal  fusion  cross  antar  genus diantara  sejumlah  kultur  spora  tunggal  spesies dari  tetua  yang  berbeda  dari  family Pleurotuceae yaitu Pleurotus  ostreatus dan P. pulmonarius . Faktor ketidaksesuaian/ incompatibility antra A dan B dari ketiga jamur memiliki sistem perkawinan tetra polar.  Empat jenis  standar  kawinnya,  A1B1,  A2B2,  A1B2 dan  A2B1.  Fusi  hifa  kultur  homokariotik  dari basidiokarp  lain juga  memiliki pola tetra polar (Jaswal et al ., 2013).
Fusi  hifa  Pleurotus  pulmonarius,  P. ostreatus untuk mendapatkan keturunan baru
Bahan dan Metode
Hibridisasi  kultur monokaryon  dengan  fusi  hifa kultur monokaryon diperoleh dengan melekatkan  1  cm  pileus  cap  jamur  dewasa dengan bantuan vaseline ke bagian dalam tutup petri dengan gills menghadap petri  yang  berisi media  potato dextrose agar (PDA). Selanjutnya diinkubasi  dalam  posisi  miring  selama  tiga sampai  empat  jam  untuk  mendapatkan  spora tunggal.  Setelah  sekitar  2  hari,  spora  yang
berkecambah  diisolasi  secara  manual  dengan menggunakan  jarum  pindah    yang  dilakukan dengan  bantuan  mikroskop  pada  pembesaran 400x.  Spora  tunggal  yang  telah  ditransfer  ke media baru  diinkubasi selama  7  hari  pada suhu 25 o C. Miselium dikonfirmasi sebagai monokaryon  dengan  tidak  adanya  koneksi penjepit  ( clamp  connection )  seperti  yang ditunjukkan oleh tanda (panah) pada Gambar 1.
Juni, 2022
online version : https://ojs.unimal.ac.id/index.php/agrium                                   Vol. 19, No2,
P-ISSN 1829-9288.  E-ISSN 2655-1837 Hal. 168- 173 Author(s): Rosnina A.G,, et al
Kultur  monokaryon  dari  kedua  tetua  dengan karakteristik  kultur  yang  baik  seperti  laju pertumbuhan  dan  kepadatan  miselia  dipilih untuk disilangkan. Persilangan antara dua kultur monokaryon  dengan  menempatkan  plug  agar yang berisi miselia  pada jarak sekitar 1 cm pada bagian tengah media PDA dan diinkubasi selama 7  hari.  Reaksi  penyatuan/fusi  yang  kompatibel dengan bantuan mikroskop diidentifikasi dengan
adanya clamp  connection sedangkan  reaksi negatif  sebaliknya  miselianya  tidak  memiliki sambungan  klem.  Karakteristik  kultur  dan  laju pertumbuhan kultur hibrida dikariotik ditentukan dengan  mengukur  diameter  rata-rata  koloni miselium  setiap  hari  selama  7  hari.  Pembacaan rata-rata  diplot  terhadap  waktu  (hari)  untuk mendapatkan laju pertumbuhan dalam mm/hari.
Gambar-1. Clamp connection  ( arrow ) of compatible mating strain
Source ( http://www.botany.hawaii.edu/faculty/wong/Bot201/Basidiomycota/Cla mp_connection_formation.html ) .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penyatuan  du  kultur  mono  antara  jamur tiram putih dan jamur tiram abu-abu menunjukkan adanya  hubungan  klem  setelah  berfusinya/ penyatuan    antar  monokaryon  kultur  kedua monokaryon  tetua  yang  kompatibel  menunjukkan adanya  kesesuaian  mating  yaitu  (alel  A  dan  B berbeda).  Pada  persimpangan  pertemuan  ke-dua monorkayon yang kompatibel dilakukan subkultur dengan  cara  mengambil  miselia  pada  zona pertemuan antara kedua monokultur tersebut yang dapat membentuk dikaryon baru.
Pada  percobaan  ini  terdapat  dua  faktor kromosom ekstra yang jelas telah ditemukan, yang memiliki  efek  nyata  pada  spesifisitas  persilangan dan  pada  heterokaryon  yang  terbentuk  setelah terjadinya  hibridisasi.  Kedua  faktor  ini  untuk sementara  diberi  nama  faktor  P  (untuk pseudoclamp )  dan  faktor  F  (untuk  flat).  Terdapat empat  jenis  reaksi  persilangan/perkawinan  yaitu perkawinan  kompatibel  yang  ditunjukkan  dengan
adanya pembentukan clamp connection monokaryon  A≠  B≠  yang  terdeteksi dan  perkawinan  inkompatibel  yang terdiri  dari  3  jenis;    Kawin  yang  tidak sesuai dengan persilangan monokaryon, A=B=,  ii.  Persilangan  klem  palsu monokaryon  (barrage,  A≠B=,  iii. persilangan  monokaryon  (flat,  A=B≠), ditunjukkan pada Gambar 2.
Gambar  2.  Colony  characteristics  of mating  between  some  pairs of  monokaryon  culture  ( P. ostreatus , P. pulmonarius
A. crossing of single spore (compatible (Figure  1 A)  clamp connections are detected
B.  crossing  of  single  spore  (overlap, A=B=) incompatible mating
C.  crossing  of  single  spore  (barrage, A≠B=, false clamps (Figure 1B) are found
D. crossing of single spore (flat, A=B≠) ( Sumber Rosnina AG)
Karakterisasi koloni miselia
Juni, 2022
online version : https://ojs.unimal.ac.id/index.php/agrium                                   Vol. 19, No2,
P-ISSN 1829-9288.  E-ISSN 2655-1837 Hal. 168- 173 Author(s): Rosnina A.G,, et al
Berdasarkan pengamatan kesesuaian
persilangan  antara  monokaryon  kultur  hibrida P. pulmonarius yang  berfusi  dengan P.  ostreatus memiliki    karakteristik  miselia  yang  berbeda dengan  tetuanya.  Kultur  hibrida  umumnya memiliki pola dan kepadatan miselium yang lebih tebal,  hal  ini  termasuk  salah  satu  karakteristik yang  dapat  menandakan  bahwa  ciri  ini  mampu beradaptasi  terhadap  parameter  fisiologis  yang dapat  memicu  laju  pertumbuhan  miselium  yang kuat. Beberapa kultur hibrida memiliki pertumbuhan  yang  sangat  tebal,  padat  yang berwarna putih kusam, sementara yang lain mirip dengan  strain  tetua  dengan  pertumbuhan  yang sangat  tebal  dan  padat  dengan  untaian rhizomorfik.
Dalam  kajian  ini    reaksi  penyatuan  dua monokaryon  kultur  yang  berbeda  species  yang berhasil/kompatibel  ( compatible  mating  reaction ) banyak  mengalami  kontaminasi  yangdi  sebabkan kekurangan peralatan pendukung ( limited equipment )  sehingga  memiliki  persentase  yang rendah.  Keberhasilan  penyatuan  antara  dua monokaryon  kultur beberapa species Pleurotus sp yang  berhasil  15,38-20,59%,  yaitu  antara monokaryon  kultur  yang  berasal  dari  spora tunggal Pleurotus  sajor-caju , P.  sapides dan P. cornocupiae Gupta et  al .  (2011).  Pada  percobaan skala  kecil  sebelumnya  persilangan  antara  kedua monokaryon kultur dari  spesies P. sajor-caju dan P.  flabellatus menunjukkan  tingkat  kompatibility yang  juga  lebih  rendah  yaitu  7%  untuk  adanya koneksi sambungan/ clamp connection (Rosnina et al ., 2007).
Sebagian  besar  kultur  dikaryon  dari persilangan  yang  kompatibel  memiliki  pola miselial  mat  yang  lebih  tebal  dan  pertumbuhan yang  lebih  cepat  dibandingkan  dengan  dikaryon kultur  tetuanya.  Kumara,  2009  melakukan kombinasi  dua  kultur  monospora,  yang  berhasil mempercepat pembentukan tubuh buah dan siklus budidaya  jamur  hasil  persilangan  yang  lebih singkat.  Hasil  penyatuan  kultur  yang  berasal  dari dua  spora  tunggal  sebagai  hibrida  terbaik menunjukkan  tingkat  pertumbuhan  yang  lebih tinggi,  tingkat  pertumbuhan  miselium  terkait dengan pertumbuhan dan hasil yang tinggi,  Gupta et  al .  (2011)  menemukan  bahwa  basidiospora tunggal  Pleurotus  steril  yang  mampu  membentuk
miselia  dikariotik  hasil  persilangan antara  sesame  beberapa  isolat  spora tunggal yang kompatibel.
Rosnina et  al .,  (2016)  pada hibridisasi  yang  dilakukan  antara  dua monokaryon kultur P. pulmonarius dan P. citrinopileatus menghasilkan hibrida yang  memiliki  karakteristik  sama dengan  induknya  yaitu P. citrinopileatus memiliki laju pertumbuhan  miselia  lebih  tinggi dibandingkan dikaryon kultur tetuanya.
Persilangan pada family Pleurotus yang  dilakukan  mengarah  pada pembentukan  dikaryon  yang  dapat menghasilkan  sporofor,  ditentukan oleh heterotalisme bifaktorial (tetrapolar)  yang  dikendalikan  oleh dua  faktor  multi-alel  yang  tidak terkait,  A  dan  B.  Gen  tipe  kawin  dan faktor  kompatibilitas lainnya sekarang digunakan  dalam  tipe  kawin  program pemuliaan dibantu untuk menghasilkan  spesies  jamur  konsumsi yang ekonomis, Kothe E (2001).

## KESIMPULAN
Untuk  meningkatkan  kualitas benih  jamur  tiram  (Pleurotus  sp)  dapat dicapai  melalui  kultur  monokaryon dengan  hyfal  fusion  antar genus  dalam satu family Plerotaceae dalam meningkatkan  karakteristik  atau  sifat jamur  berkualitas  yang  diinginkan ( desired traits ).

## ACKNOWLEDGMENTS
The  authors  would  like  to  thank Malikussaleh  University  for  grant PNBP/UNIMAL/Geran
(PPP)
248/PPK-2/SPK.JL/2020

## REFERENCES
Bahukhandi        D,      Sharma            RK.
Interspecific hybridization between Pleurotus species. Indian Phytopathology. 2002; 55(1):61-66.
Juni, 2022
online version : https://ojs.unimal.ac.id/index.php/agrium                                   Vol. 19, No2,
P-ISSN 1829-9288.  E-ISSN 2655-1837 Hal. 168- 173 Author(s): Rosnina A.G,, et al
Bazanella,  G.  C.  S.,  Souza,  D.  F.,  Castoldi,  R., Oliveira,  R.  F.,  Bracht,  A.,  &  Peralta,  R. M.  (2013).  Production  of  laccase  and manganese  peroxidase  by  Pleurotus pulmonarius  in  solid-state  cultures  and application  in  dye  decolorization.  Folia Microbiologica, 58, 641–647.
Gupta  B,  Reddy  BPN,  Kotasthane  AS  (2011) Molecular  characterization  and  mating type  analysis  of  oyster  mushroom ( Pleurotus spp.) using single basidiospores  for  strain  improvement. World J Microb Biot 27:1–9
Jaswal  R,  Sodhi  K,  Kapoor  S,  Khanna  PK.  2013
Development of high yielding
morphologically  improved  strains  of Pleurotus  ( Oyster  Mushroom )  through inter-specific hybridization. Indian Journal of Agricultural Sciences.; 83(4):374-379.
Jonathan,  SG,  Popoola,  KOK,  Olawuyi,  OJ, Ajiboye,  M,  &  Oyelakan,  AO.  (2012). Insect  and  fungal  pests  of  some mushrooms  collected  from  university  of Ibadan,  Nigeria  campus. Nature  and Science, 10 (9), 142-147.
Kibar,  B,  &  Peksen,  A.  (2008).  Modelling  the effects  of  temperature  and  light  intensity on the development and yield of different Pleurotus  species.  Agric  Trop  Subtrop, 41(2), 68-73.
K.R.  Jyothi  and  Susha  S.  Thara.  20220. Development  of  improved  strain  of
Pleurotus species by interspecific hybridization. Journal of Tropical
Agriculture. 58( 2 ). 246-254
Kothe  E  (2001)  Mating-type  genes  for basidiomycete  strain  improvement  in mushroom  farming.  Appl  Microbiol Biotechnol 56:602–612
Kumara KLW, Edirimanna ICS (2009) Improvement  of  strains  of  two  oyster mushroom  cultivar  using  dual  culture technique. World J Appl Sciences 7:654–
660
Rosnina A.G., Yee Shin Tan, Vikineswary S (2016) Morphological  and molecular characterization  of    Yellow oyster mushroom, P. citrinopileatus , hybrids obtained      by  interspecies mating.  World  Journal  of Microbiology  &  Biotechnol. https://doi.org/10.1007/s11274- 015-1959-2 .
Rosnina AG, Noorlidah A, Vikineswary  S  (2007)  Strain improvement of edible mushrooms  by  mating.  In Abstracts of the Proceedings of the Asian Mycological Congress (AMC 2007)