## UJI KONSENTRASI HAMBAT MINIMUM (KHM) EKSTRAK KULIT
NANAS ( Ananas comosus L) TERHADAP Staphylococcus aureus
Indria Wiharningtias 1) , Olivia Waworuntu 2) , Juliatri 1)
1) Program Studi Pendidikan Dokter Gigi Fakultas Kedokteran UNSRAT Manado, 95115
2) Fakultas Kedokteran UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Staphylococcus  aureus  is  one  of  the  bacteria  in  oral  cavity  that  can  lead  to  an  abscess. Treatment  of  abscesses  can  be  done  by  use  of  systemic  antibiotics,  but  now  the  increasingly  of Staphylococcus aureus bacteria resistant to antibiotics has become a problem in the medical. Various alternatives  have  been  developed,  one  of  them  using  natural  materials  to  inhibit  the  growth  of Staphylococcus aureus. Pineapple (Ananas comosus L) was a plant that grows in Indonesia. The peel of pineapple contains of bromelain enzyme and has anti-bacterial effect, but the pineapple’s peel were not  widely  used  in  Indonesia.  The  purpose  of  this  research  is  to  determine  the  Minimum  Inhibitory Concentration (MIC) of pineapple peel extract (Ananas comosus L) to Staphylococcus aureus growth. This research is a true experimental research with randomized pretes- posttest control group design. The method used in this research is serial dilution methods with turbidimetry and spectrophotometry as  the  test  methods.  Pineapple  peel  was  extracted  with  maceration  method  using  ethanol  96%.  The extract used in this study are 0.39 %, 0.78 %, 1.56%, 3.125 %, 6.25%, 12.5 %, 25 %, 50 % and 100 %.The result of this research showed that the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of pineapple peel extract (Ananas comosus  L) to Staphylococcus aureus was 1,56%.
Keywords : Staphylococcus aureus, Minimum Inhibitory Concentration (MIC), pineapple peel

## ABSTRAK
Staphylococcus  aureus merupakan  salah  satu  bakteri  di  dalam  rongga  mulut  yang  dapat menyebabkan  terjadinya  abses.  Perawatan  terhadap  abses  dapat  dilakukan  secara  sistemik  yaitu dengan  penggunaan  antibiotik,  namun  saat  ini  peningkatan  resistensi  bakteri Staphylococcus  aureus terhadap antibiotik telah menjadi permasalahan dalam bidang kesehatan. Berbagai cara alternatif telah dikembangkan,  salah  satunya  dengan  memanfaatkan  bahan  alami  untuk  menghambat  pertumbuhan Staphylococcus  aureus .  Nanas  ( Ananas  comosus  L) merupakan  tanaman  yang  banyak  tumbuh  di Indonesia.  Kulit  buah  nanas  mengandung  enzim  bromelain  dan  memiliki  efek  sebagai  anti  bakteri, namun  pemanfaatan  kulit  nanas  belum  banyak  dilakukan  di  Indonesia.  Tujuan  penelitian  ini  yaitu untuk  mengetahui  konsentrasi  hambat  minimum  (KHM)  dari  ekstrak  kulit  nanas  terhadap pertumbuhan Staphylococcus  aureus. Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental  murni  ( true experimental design) dengan rancangan penelitian randomized pretes- posttest control group design. Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  metode  serial  dilusi  dengan  metode  pengujian turbidimetri dan spektrofotometri. Ekstrak kulit nanas didapat dengan metode maserasi menggunakan pelarut  etanol  96%.  Konsentrasi  ekstrak  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  0,39%,  0,78%, 1,56%,  3,125%,  6,25%,  12,5%,  25%,  50%,  dan  100%.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa, konsentrasi  hambat  minumum  ekstrak  kulit  nanas  ( Ananas  comosus  L) terhadap Staphylococcus aureus yaitu konsentrasi 1,56%.
Kata kunci: Staphylococcus aureus, Konsentrasi Hambat Minimum (KHM), kulit nanas

## PENDAHULUAN
Flora normal merupakan organisme yang biasanya  dijumpai  di  dalam  rongga  mulut, serta  pada  umumnya  tidak  menyebabkan penyakit  apabila  berada  pada  keadaan  yang seimbang  dengan  hospes.    Salah  satu  flora normal yang terdapat di dalam rongga mulut yaitu Staphylococcus aureus . Staphylococcus  aureus merupakan  salah satu  bakteri  yang  dapat  bersifat  invasif.  Hal ini  terjadi  apabila  terdapat  perubahan  sifat dari  bakteri,  serta  terganggunya  sistem pertahanan  dan  kekebalan  tubuh  hospes. Kombinasi kedua hal tersebut dapat menyebabkan  terjadinya  infeksi  (Pederson, 1996). Salah  satu  infeksi  di  dalam  rongga mulut  yang  dapat  terjadi  yaitu  abses.  Abses merupakan suatu infeksi akut yang terlokalisir, manifestasinya berupa pembengkakan, peradangan, nyeri tekan dan kerusakan  jaringan  setempat.  Perawatan yang dapat  dilakukan  yaitu secara lokal  dan sistemik.  Perawatan  secara  sistemik  salah satunya yaitu menggunakan antibiotic (Pederson,  1996;  Harty  &  Ogston,  2012). Namun peningkatan resistensi bakteri
Staphylococcus  aureus terhadap  berbagai
jenis  antibiotik  menjadi  suatu  permasalahan yang dapat mempersulit proses penyembuhan  (Refdanita  dkk,  2004;  Sari, 2006).
Pemanfaatan  tumbuhan  yang  memiliki khasiat terhadap kesehatan sudah sejak lama dilakukan  oleh  masyarakat,  karena  secara empiris tumbuhan mempunyai efek samping yang  minim    dan  lebih  ekonomis  karena mudah  didapatkan  (Sari,  2006). Salah  satu tumbuhan  yang  memiliki  potensi  bagi kesehatan  adalah  nanas  ( Ananas  comosus L).  Tumbuhan  nanas  mengandung  enzim bromelain,  termasuk  juga  pada  bagian  kulit nanas  yang  memiliki  kemampuan  sebagai
antibakteri,  antiinflamasi  dan  analgesic (Sudjaewo,  2005;  Kumaunang  &  Kamu, 2011;  Manaroinsong  dkk,  2015;  Audies, 2015). Penelitian  yang  dilakukan  oleh Manaroinsong  dkk  pada  tahun  2015, membuktikan  bahwa  ekstrak  kulit  nanas 100%  memiliki  efek  antibakteri  terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus (Manarionsong dkk, 2015).
Penelitian  mengenai  konsentrasi  hambat minimum  (KHM)  ekstrak  kulit  nanas terhadap Staphylococcus  aureus belum pernah  dilakukan  sebelumnya.  Konsentrasi hambat minimum adalah konsentrasi terendah  dari  suatu  bahan  antibakteri  yang mampu menghambat pertumbuhan mikroorganisme.  Melalui  cara  tersebut, kemampuan suatu antibakteri dalam menghambat pertumbuhan  mikroorganisme pada  konsentrasi  terendah  dapat  diketahui (Soelama dkk, 2015). Penelitian ini bertujuan  untuk  mengetahui  KHM  dari ekstrak  kulit  nanas  ( Ananas  comosus  L ) terhadap Staphylococcus aureus.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental  murni  ( true  experimental design ) dengan rancangan penelitian randomized  pretest-posttest  control  group design .  Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan  Februari-Juni  2016.  Bahan-bahan yang  digunakan    dalam  penelitian  ini  yaitu kulit nanas, etanol 96%, bakteri Staphylococcus  aureus , nutrient  agar (NA), brain heart infusion broth (BHI-B), larutan BaCl 2 ,  larutan  H 2 SO 4 ,  akuades  dan  bakteri Staphylococcus  aureus yang  diperoleh  dari Laboratorium Mikrobiologi Fakultas  MIPA Universitas Sam Ratulangi Manado. Prosedur  kerja  meliputi  pembuatan  ekstrak
kulit  nanas,  pengenceran  ekstrak  dan pengujian KHM ekstrak kulit nanas terhadap bakteri Staphylococcus aureus.
Pembuatan  ekstrak  kulit  nanas  ( Ananas comosus  L )  dilakukan  dengan  metode maserasi.  Buah  nanas  yang  digunakan  yaitu sebanyak  10  buah,  yang  diperoleh  dari daerah  Kotamobagu.  Sampel  buah  nanas dikupas  kemudian  di  ambil  kulitnya.  Kulit nanas kemudian dicuci dan dipotong-potong kecil,  selanjutnya  diangin-anginkan  selama ±  3  hari  tanpa  terkena  sinar  matahari langsung.  Kulit  nanas  yang  telah  kering kemudian  dihaluskan  menggunakan  blender hingga  berbentuk  serbuk  yang  disebut simplisia,  kemudian  ditimbang  sebanyak 1.000  gram.  Simplisia  tersebut  di  rendam menggunakan  pelarut  etanol  96%  sebanyak 1  liter  selama  24  jam.  Hasil  maserasi pertama  kemudian  disaring  menggunakan kertas  saring,  sehingga  diperloleh  zat  cai (filtrat) dan ampas simplisia (debris). Debris hasil  dari  penyaringan  tersebut  di  maserasi kembali.  Langkah-langkah  tersebut  dulang sehingga  didapatkan  filtrat  1-3.  Filtrat  dari hasil penyaringan 1-3 dicampur dan disaring ulang,  kemudian  hasil  dari  penyaringan tersebut  diuapkan  dengan  menggunakan Rotary  Vacum  Evaporator dengan  suhu 50 0 C sampai didapatkan ekstrak pekat.
Konsentrasi ekstrak kulit nanas diperoleh dengan  menggunakan  metode  serial  dilusi atau  pengenceran  secara  bertingkat  dengan perbandingan 1:2 (w/v) sehingga didapatkan beberapa  konsentrasi.  Tabung  reaksi  steril yang  digunakan  pada  perlakuan  pertama yaitu  sebanyak  11  tabung  diberi  lebel  1-9, dan  tabung  10  diberi  label  K(+)  yang berisikan  suspensi  bakteri Staphylococcus aureus , dan tabung 11 diberi lebel K(-) yang merupakan  kontrol  negatif  yang  berisikan ekstrak  kulit  nanas  dengan  konsentrasi
100%.  Tabung  1  diisi  dengan  ekstrak  kulit nanas  sebanyak  4mL  dengan  konsentrasi 100%. Tabung 2-9 diisi dengan 2 mL media cair  BHI-B.  Kemudian  2  mL  larutan  dari tabung  1,  dimasukkan  ke  dalam  tabung  2 dan  dicampur  hingga  homogen  sehingga diperoleh  konsentrasi  50%.  Hal  yang  sama dilakukan  hingga  tabung  9.  Pada  penelitian ini dilakukan dua kali perlakuan.
Bakteri Staphylococcus  aureus yang disimpan di mendia agar, diambil menggunakan jarum ose steril, lalu ditanamkan  pada  media  agar  miring  dengan cara menggores, kemudian diinkubasi dalam inkubator pada suhu 37°C selama 1x24 jam. Bakteri  yang  telah  diremajakan  pada  media agar  miring,  kemudian  diambil  koloninya dari media agar miring dengan menggunakan  jarum ose steril.  Koloni  yang diambil dimasukkan ke dalam media BHI-B dalam  tabung  reaksi  dan  diinkubasi  1x24 jam di dalam inkubator. Kemudian kekeruhan  suspensi  bakteri  disesuaikan dengan standar kekeruhan McFarland 1.
Metode  pengujian  yang  dipakai  dalam penelitian ini yaitu metode turbidimetri atau pengujian  kekeruhan  secara  visual  dan dilanjutkan dengan menggunakan spektrofotometer untuk  menentukan  nilai absorban  sebagai  penentu  kekeruhan  yang lebih  akurat.  Untuk  menguji  kekeruhan, suspensi  bakteri Staphylococcus  aureus yang  telah  disetarakan  dengan  standar kekeruhan McFarland 1  sebanyak  0,5  mL dimasukkan ke dalam tabung reaksi perlakuan  label  1  kemudian  diukur  nilai absorban awal sebelum dilakukan diinkubasi menggunakan  spektrofotometer.  Hal  yang sama  dilakukan  pada  tabung  perlakuan dengan  lebel  2-9.  Kemudian  seluruh  tabung yang  telah  diketahui  nilai  absorban  awal,
diinkubasi  pada  suhu  37 0 C  selama  1  x  24 jam.
Setelah  tabung  perlakuan  diinkubasi, penentuan KHM dengan metode turbidimetri dilakukan dengan cara melakukan  pengamatan  kekeruhan  secara visual.  Apabila  kekeruhan  masing-masing tabung terlihat masih setara atau lebih keruh dari tabung K(+) berarti bakteri masih dapat bertumbuh,  tetapi  apabila  larutan  dalam tabung  perlakuan  terlihat  mulai  jernih  dari pada  tabung  K(+)  berarti  pertumbuhan bakteri  mulai  terhambat.  Hal  inilah  yang menunjukkan  KHM.  Kemudian  tabung- tabung perlakuan diukur nilai absorbansinya dengan menggunakan spektrofotometer UV- Vis.  Jika  nilai  absorbansi  akhir  (sesudah inkubasi) masing-masing tabung lebih besar dari nilai absorbansi awal (sebelum inkubasi)  berarti  masih  terjadi  pertumbuhan bakteri.  Namun,  jika  sebaliknya  tidak terdapat  perubahan  nilai  absorbansi  antara nilai absorbansi akhir dengan nilai absorbansi  awal  atau  nilai  absorbansi  akhir lebih kecil dari nilai absorbansi awal, hal ini berarti  pertumbuhan  bakteri  dihambat.  Hal ini  merupakan  KHM  yang  ditentukan  dari konsentrasi  ekstrak  terkecil  pada  tabung perlakuan yang mulai menghambat pertumbuhan bakteri staphylococcus aureus .

## HASIL PENELITIAN
Penentuan konsentrasi hambat minimum  ekstrak  kulit  nanas  terhadap bakteri Staphylococcus  aureus dilakukan dengan pengujian turbidimetri, serta pengukuran nilai absorbansi dengan menggunakan  Spektrofotometer  UV-Vis setelah dilakukan inkubasi selama 1x24 jam pada  suhu  37 o C.  Data  hasil  penelitian  yang didapatkan pada metode turbidimetri
kemudian dimasukkan ke dalam tabel (Tabel 1).
Tabel 1. Hasil pengujian ekstrak kulit nanas terhadap Staphylococcus    aures dengan metode turbidimetri pada perlakuan pertama dan kedua
Keterangan :  Tanda  (+):  larutan  di  dalam tabung  terlihat  keruh,  artinya  terdapat pertumbuhan  bakteri.  Tanda  (-):  larutan  di dalam  tabung  mulai  jernih,  yang  artinya pertumbuhan bakteri mulai dihambat.
Hasil pengujian dengan metode turbidimetri setelah dilakukan inkubasi 1x24 jam, didapatkan hasil pada tabung konsentrasi  3,125%  (tabung  nomor  6) terlihat  mulai  jernih  baik  pada  perlakuan  1 dan  perlakuan  ke  2.  Hal  tersebut  ditentukan pada saat dibandingkan dengan tabung K (+) yang berisikan suspensi bakteri Staphylococcus  aureus .  Hasil  yang  berbeda telihat  pada  tabung  nomor  7,  8  dan  9  yang kekeruhannya  mendekati  kekeruhan  tabung K(+).
Pengujian  kemudian  dilanjutkan  dengan menggunakan spektrofotometer untuk mengukur  nilai  absorbansi  sebelum  dan sesudah inkubasi dengan panjang gelombang  285,00  nm.  Hal  tersebut  sesuai dengan  panjang  gelombang  dari  tabung kontrol positif. Hasil pengukuran spektrofotometri  dapat  dilihat  pada  tabel  2.
Nomor Tabung Konsentrasi Ekstrak kulit nanas Hasil Perlakuan I Perlakuan II 1 100% - - 2 50% - - 3 25% - - 4 12,5% - - 5 6,25% - - 6 3,125% - - 7 1,56% + + 8 0,78% + + 9 0,39% + + 10 K(+) + + 11 K(-) - -
Tabel  2.  Hasil  uji  KHM  ekstrak  kulit  nanas  ( Ananas  comosus L)  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus dengan menggunakan Spektrofotometer UV-Vis
Berdasarkan hasil pengujian KHM dengan menggunakan Spektrofotometer pada  Tabel  2,    penurunan  nilai  rata-rata absorbansi  pertama  kali  terjadi  pada konsentrasi  1,56%.  Konsentrasi  ekstrak 1,56% mengalami penurunan nilai absorbansi  baik  pada  perlakuan    pertama maupun  perlakuan  kedua.  Berdasarkan pengujian  menggunakan  Spektrofotometer, konsentrasi  hambat  minimum  ekstrak  kulit nanas  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus berada pada konsentrasi 1,56%.

## PEMBAHASAN
Pengujian yang dilakukan setelah inkubasi  terhadap  tabung-tabung  perlakuan pada  pengulangan  1  dan  2,  dilakukan dengan metode turbidimetri dan spektofotometri.  Pengujian  dengan  metode turbidimetri,  dilakukan  dengan  melihat kekeruhan  yang  terjadi  pada  tabung  uji secara  visual  setelah  dilakukan  inkubasi (Eucast,  2003;  Harmita  &  Radji,  2008; Rakhmanda,  2008).  Sedangkan  pengujian dengan  metode  spektrofotometri  dilakukan dengan  membandingkan  nilai  absorbansi
yang  dihasilkan  sebelum  dan  sesudah inkubasi dengan menggunakan spektrofotometer UV-Vis (Coyle, 2005). Berdasarkan  hasil  penelitian  dengan metode  turbidimetri,  konsentrasi  hambat minimum  ekstrak  kulit  nanas  terhadap bakteri Staphylococcus  aureus yaitu  pada konsentrasi  3,125%.  Hal  ini  terlihat  dari mulai  jernihnya  larutan  dalam  tabung konsentrasi 3,125% pada perlakuan pertama dan kedua, yang berarti pertumbuhan bakteri sudah  dapat  terhambat.  Sedangkan  pada konsentrasi  ekstrak  yang  lebih  rendah  yaitu konsentrasi  0,39%-1,56%  larutan  terlihat semakin  keruh  mendekati  kekeruhan  dari tabung K(+) yang berisi bakteri Staphylococcus  aureus .  Hal  ini  karena konsentrasi  larutan  ekstrak  yang  rendah, sehingga  kemampuan  dari  ekstrak  tidak mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri dan  akhirnya  pertumbuhan  bakteri  dapat meningkat. Menurut penelitian yang dilakukan  oleh  Rakhmanda  tahun  2008, pada  konsentrasi  ekstrak  yang  semakin rendah,  kemampuan  senyawa  aktif  dalam ekstrak  tersebut  semakin  kecil  jumLahnya sehingga  kemampuan  dalam  menghambat
Konsentrasi ekstrak kulit nanas Hasil Rata-rata Keterangan Perlakuan 1 Perlakuan 2 Sebelum inkubasi Sesudah inkubasi Sebelum inkubasi Sesudah inkubasi Sebelum inkubasi Sesudah inkubasi 100% 4.000 3.988 4.000 4.000 4.000 3.994 Turun 50% 3.987 4.000 3.976 4.000 3.981 4.000 Naik 25% 3.966 4.000 4.000 4.000 3.983 4.000 Naik 12.5% 3.929 3.935 4.000 3.972 3.964 3.953 Turun 6.25% 3.989 3.884 3.929 3.842 3.959 3.863 Turun 3.125% 4.000 3.670 3.623 3.904 3.811 3.787 Turun 1.56% 3.750 3.035 3.842 3.758 3.796 3.396 Turun 0.78% 3.287 3.997 3.863 3.490 3.575 3.743 Naik 0.39% 3.393 3.461 3.569 3.879 3.481 3.670 Naik Kontrol (+) 2.573 3.333 - - 2.573 3.333 Naik Kontrol (-) 4.000 4.000 - - 4.000 4.000 Tetap
pertumbuhan bakteri berkurang (Rakhmandar, 2008).
Pengamatan  yang  dilakukan  untuk menentukan KHM dengan metode turbidimetri  bersifat  subjektif,  karena  hanya dilakukan  secara  visual  dan  warna  larutan uji yang kecoklatan (pekat) pada konsentrasi ekstrak  yang  semakin  tinggi,  mempersulit proses  pengamatan  dan  penentuan  KHM. Maka perlu dilakukan pengujian lebih lanjut untuk  mendapatkan  hasil  yang  akurat. Pengujian dilanjutkan untuk mengetahui ada tidaknya pertumbuhan bakteri dengan menggunakan spektrofotometer UV-Vis (Coyle, 2005; Astutiningsih dkk, 2014). Penentuan  KHM  dengan  menggunakan spektrofotometer,  dilakukan  berdasarkan perbandingan  nilai  rata-rata  absorbansi sebelum dan sesudah inkubasi. Apabila nilai absorbansi  sebelum  inkubasi  lebih  besar dibandingkan dengan nilai absorbansi sesudah  inkubasi,  pertumbuhan  bakteri sudah  dapat  terhambat.  Sebaliknya  apabila nilai  absorbansi  setelah inkubasi  lebih besar dari nilai absorbansi sebelum inkubasi, maka pertumbuhan  bakteri  masih  dapat  terjadi (Astutiningsih, 2014; Dewi, 2010).
Berdasarkan  pengujian  yang  dilakukan dengan menggunakan spektrofotometer, pada  konsentrasi  1,56%-100%  sudah  mulai terjadi penghambatan pertumbuhan bakteri . Kecuali  pada  konsentrasi  50%  dan 25%  yang  mengalami  peningkatan  nilai absorban.  Konsentrasi  ekstrak  yang  lebih rendah  dari  konsentrasi  1,56%  yaitu  0,78%, dan  0,39%,  terjadi  peningkatan  rata-rata nilai  absorbansi  setelah  inkubasi  yang menandakan  bahwa  pada  kedua  konsentrasi tersebut masih terdapat pertumbuhan bakteri (Tabel 2).
Berdasarkan hasil pengukuran menggunakan spektrofotometer, KHM
ekstrak  kulit  nanas  terhadap staphylococcus aureus yaitu  pada  konsentrasi  1,56%. Konsentrasi  tersebut  merupakan  konsentrasi terkecil  yang  mengalami  penurunan  nilai absorbansi  pada  pengulangan  satu  dan pengulangan dua setelah dilakukan inkubasi, yang  menunjukkan  terjadinya  penurunan pertumbuhan bakteri.
Semakin tinggi konsentrasi ekstrak  yang digunakan  maka  aktivitas  pertumbuhan bakteri  dapat  semakin  terhambat,  karena kandungan  senyawa  yang  bersifat  sebagai antibakteri  dalam  ekstrak  semakin  besar. Namun  pada  penelitian  ini,  ekstrak  dengan konsentrasi  50%  dan  25%  mengalami peningkatan nilai absorbansi setelah dilakukan inkubasi. Penelitian yang dilakukan  oleh  Dewi  tahun  2010  di Surakarta  mendapatkan  hasil  yang  sama, yaitu  terjadi  peningkatan  nilai  absorbansi pada  konsentrasi  yang  tinggi.  Peningkatan nilai  absorbansi  tersebut  tidak  sepenuhnya disebabkan oleh pertumbuhan bakteri, tetapi disebabkan karena masih terdapatnya  residu ekstrak  pada  konsentrasi  yang  pekat,  serta penyerapan  cahaya  oleh  sel  bakteri  yang telah  mati,  sehingga  peningkatan  nilai absorbansi  dapat  terjadi  (Dewi,  2010; Purwoko, 2009).
Perbedaan hasil pengukuran pada metode turbidimetri dan spektrofotometri disebabkan oleh perbedaan prinsip kerja dari kedua  metode  tersebut.  Pengujian  dengan menggunakan  metode  turbidimetri  bersifat subjektif karena pada metode ini pengamatan  hanya  dilakukan  secara  visual, serta  sulitnya  pengamatan  pada  larutan  uji yang  pekat  sehingga  resiko  terjadinya kesalahan  lebih  besar.  Sedangkan  metode spektrofotometri  memiliki  hasil  pengujian berupa  data  kuantitatif  sehingga  memiliki kecermatan  lebih  tinggi  dalam  perincian
nilai pengukuran yang dihasilkan (Hendayana, 1996).
Kemampuan  senyawa  antibakteri  dalam ekstrak  kulit  nanas  yaitu  enzim  bromelain, dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri. Hal  ini  disebabkan  senyawa  antibakteri tersebut,  mampu  merusak  bakteri  uji sehingga  bakteri  menjadi  lisis  dan  jumLah pertumbuhan  bakteri  semakin  menurun (Bagg,  2006). Pada  konsentrasi  ekstrak 1,56%  kemampuan  senyawa  antibakteri pada  ekstrak  kulit  nanas  lebih  besar dibandingkan kemampuan perbaikan dari sel bakteri,  sehingga  pada  konsentrasi  tersebut pertumbuhan bakteri sudah dapat terhambat. Berdasarkan penelitian  Eshmah  tahun 2013, enzim  bromelain  bekerja  dengan  merusak struktur  dinding  sel  luar  bakteri  yang mengandung  protein.  Hal    tersebut  dapat menyebabkan  pecahnya  protein  penyusun dinding sel bakteri, akibatnya sel mengalami kebocoran  atau  pecah  dan  pertumbuhan bakteri dapat terhambat (Eshamah, 2013). Berdasarkan  penelitian  ini  konsentrasi hambat  minimum  (KHM)  ekstrak  kulit nanas  ( Ananas  comosus L)  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus yaitu pada konsentrasi  1,56%.  Hasil  tersebut  sesuai dengan  hasil  pengukuran  dengan  metode spektrofotometri, yang memiliki kecermatan yang  lebih  tinggi  dalam  perincian  nilai pengukuran.

## KESIMPULAN
Konsentrasi  hambat  minimum  (KHM) ekstrak  kulit  nanas  ( Ananas  comosus L) terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus yaitu pada konsentrasi 1,56%.

## SARAN
1.  Diharapkan  dapat  dilakukan  penelitian lanjutan  mengenai  uji  konsentrasi  bunuh minimum  (KBM)  ekstrak  kulit  nanas
( Ananas  comosus L)  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus.
2.  Diharapkan  dapat  dilakukan  penelitian mengenai  konsentrasi  hambat  minimum (KHM)  ekstrak  kulit  nanas  ( Ananas comosus L)  terhadap  bakteri  rongga mulut lainnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Astutiningsih  C,  Setyani  W,  Hindratna H.2014.    Uji  daya  antibakteri  dan identifikasi  isolate  senyawa  katekin dari daun teh ( Camellia sinensis L. var Assamica ). Jurnal  Ilmiah  farmasi sains dan komunitas . Semarang. 11(2):
55.
Audies  A.2015. Uji  efektivitas  antibakteri ekstrak  kulit  nanas  (Ananas  comosus.
L) terhadap pertumbuhan streptococcus mutans penyebab karies gigi. [skripsi]. Padang: Universitas Andalas;. h.43.
Bagg  J,  MacFarlane,  Poxton  IR,  Smith AJ . 2006 .  Essential  of  Microbiology for  Dental  Students. 2 nd Edition.
Glasgow: Oxford University
Pres.p.115-6.
Coyle  MB. Manual  of  antimicrobial susceptibility  testing .  USA:  American society  for  microbiology;  2005.  p.53- 60.
Dewi FK. 2010. Aktivitas antibakteri ekstrak etanol buah mengkudu (Morindacitrifolia,  linnaeus)  terhadap bakteri pembusuk daging
segar. [skripsi].  Surakarta:  Universitas
Sebelas Maret. h.32.
Eshamah  H,  Han  I,  Naas  H,  Rieck  J,
Dawson  P.  2013.  Bactericidal  effects of  natural  tenderizing  enzymes  on escherichia coli and listeria monocytogenes. Journal of food research ; 2(1).p.16-7.
European  Committee  for  Antimicrobial
Susceptibility Testing (EUCAST).
2003.  Determination  of  minimum
inhibitory  concentrations  (MICs)  of antibacterial  agents  by  broth  dilution. Clinical  Microbiology  and  Infection :9(8):1-7.
Harmita,  Radji  M.  2008. Buku  ajar  analisis hayati . Jakarta: EGC; 2008. h. 12-3.
Harty  FJ,  Ogston R.  2012. Kamus
Kedokteran Gigi. Jakarta: EGC; 2012.h.1.
Hendayana  S,  Kadorohman  A,  Sumarna  A,
Supriatna  A.  1994. Kimia  analitik instrumen.  Edisi1 .IKIP:  Semarang; 1994. h.30.
Kumaunang  M,  Kamu  V.  2011.  Aktivitas enzim  bromelin  dan  ekstrak  kulit nanas  (Ananas  comosus). Jurnal Ilmiah  Sains- UNSRAT.  Oktober; 11(1):198-201.
Manaroinsong  A,  Abidjulu  J,  Siagian  KV.
Uji  daya  hambat  ekstrak  kulit  nanas (Ananas  comosus  L)  terhadap  bakteri staphylococcus  aureus  secara  in  vitro. Jurnal  Ilmiah  Pharmacon-  UNSRAT. November 2015; 4(4): 27-33.
Pederson  GW.  1996. Buku  ajar  praktis bedah mulut (oral surgery).
Jakarta:EGC; 1996. h.191-203.
Purwoko  T.  2009. Fisiologi  Mikroba.
Jakarta: BumiAksara; 2009. h.1-4.
Rakhmanda  AP.  2008.  Perbandingan  efek antibakteri jus nanas ( ananas comosus L.merr )  pada  berbagai  konsentrasi terhadap Streptococcus  mutans.  Arikel karya  tulis  ilmiah -  UNDIP.  2008.
h.11.
Refdanita,  Maksum  R,  Nurgani  A,  Endang P.  2004.  Pola  kepekaan  kuman terhadap  antibiotika  di  ruang  rawat intensif rumah sakit Fatmawati Jakarta tahun 2001-2002. Jurnal Ilmiah Makara Kesehatan. ; 8(2): 41-8. Sari LO. 2006. Pemanfaatan obat tradisional dengan  pertimbangan  manfaat  dan keamanannya.
Majalah
Ilmu kefarmasian J ember. April 2006; 3(1): 1-7.
Soelama  HJJ,  Kepel  BJ,  Siagian  KV.  2015. Uji  minimum  inhibitor  consentration (MIC)  ekstrak  rumput  laut  (eucheuma cottonii)  sebagai  antibakteri  terhadap streptococcus mutans. Jurnal Ilmiah e- gigi UNSRAT: 2015; 3(2): 376.
Sudjarwo SA. 2005. Efek analgesic dan anti inflamasi  dari  bromelain  pada  mencit dan  tikus. Jurnal  Ilmiah  Universa medicina ; 24 (4):155-60.