## LAMA PENYIMPANAN DARAH TERHADAP JUMLAH TROMBOSIT PASIEN DBD di RS X MOJOKERTO
Farida Anwari 1 , Khurin In Wahyuni 2 , Acivrida Mega Charisma 3 , Elva Oktaviani 4 1,3,4 DIII Teknologi Laboratorium Medik, STIKES Rumah Sakit Anwar Medika, Sidoarjo, Indonesia Email: faridamph@gmail.com
2 S1 Farmasi, STIKES Rumah Sakit Anwar Medika, Sidoarjo, Indonesia email: khurinain87@gmail.com

## ABSTRAK
Penyakit  Demam  Berdarah  Dengue  (DBD)  merupakan  penyakit  yang  disebabkan  oleh  infeksi  virus dengue  yang  sampai  saat ini  masih  merupakan  masalah  kesehatan  masyarakat  (Djuni  Djunaidi,  2006). Tujuan  penelitian  ini  untuk  mengetahui  adanya  pengaruh  lama  penyimpanan  darah  terhadap  hasil trombosit  pada  pasien  demam  berdarah  dengue  (DBD).  Manifestasi  klinis  infeksi  virus  dengue  dapat bersifat asimtomatik atau dapat berupa demam yang tidak khas, demam dengue, DBD atau sindrom syok dengue (SSD). Penyimpanan sampel di laboratorium patologi klinik RS X  pasca analitik disimpan dalam suhu kulkas terkontrol 4-6’C dalam waktu tiga hari bertujuan untuk mengulang kembali pemeriksaan jika terjadi beberapa kasus pasien demam berdarah dengue (DBD) dengan hasil trombosit terpaut jauh dari sebelumnya, penambahan jenis pemeriksaan, dan evaluasi sampel pasca analitik. Salah satu faktor yang dapat  mempengaruhi  pemeriksaan  trombosit  yaitu  penundaan  pemeriksaan  pada  sampel  EDTA  pada suhu kamar lebih dari 2 jam dapat menyebabkan terjadinya serangkaian perubahan nilai trombosit. Penelitian ini berupa observasi experimental. Yang dilakukan pada bulan Mei-Juni 2020. Menggunakan sampel  pasien  yang  terinfeksi  virus  dengue  dengan  metode  pemeriksaan  automatic  menggunakan  alat hematologi  analyzer.  Berdasarkan  hasil  penelitian  dan  analisa  data  tentang  adanya  pengaruh penyimpanan  darah  terhadap  hasil  trombosit  pada  pasien  DBD  (demam  berdarah  dengue)  dengan metode automatic. hasil uji statistik non parametrik Kruskal- Wallis menunjukkan bahwa nilai signifikan pada  data  jumlah  trombosit  0,90.  Jika  dibandingkan  dengan  nilai  α  =  0,10,  maka  nilai  signifikan  (p- value)  <  0,10.  Sehingga  dapat  diambil  kesimpulan  adanya  pengaruh  penyimpanan  darah  terhadap pemeriksaan trombosit pada pasien demam berdarah dengue.
Kata Kunci : Penyimpanan Darah, Pemeriksaan trombosit, Demam berdara dengue

## ABSTRACT
Dengue  Fever  disease  (DBD)  is  a  disease  caused  by  Dengue  virus  infection,  which  is  still  a  matter  of public  health  (Djuni  Djunaidi,  2006).  The  purpose  of  this  research  is  to  determine  the  old  influence  of blood  storage  on  the  results  of  platelets  in  dengue  fever  patients  (DBD).  The  clinical  manifestations  of dengue  virus  infection  can  be  asymptomatic  or  can  be  a  non  characteristic  fever,  dengue  fever,  DBD  or dengue (SSD) shock syndrome. Sample storage in  he Clinical pathology Laboratory of RS X post analytic stored in 4-6’C controlled refrigerator temperature within three days aims to reiterated the examination in case  of  some  cases  of  dengue  fever  patients  (DBD)  with  the  results  of  a  long-linked  platelet  from  the previous,  the  addition  of  the  type  of  examination,  and  evaluation  of  post-analytical  samples.  One  of  the factors that can affect platelet check i.e. delayed inspection on EDTA samples at room temperature over 2 hours  may  result  in  a  series  of  changes  in  platelet  value.  This  research  is  in  the  form  of  experimental observation.  Conducted  in  May-June  2020.  Using  a  sample  of  virus-infected  patients  with  automatic examination  method  using  Hematology  Analyzer.  Based  on  the  results  of  research  and  analysis  on  the presence  of  blood  storage  influence  on  platelet  outcomes  in  patients  with  DBD  (dengue  fever)  with automatic method. Non-parametric statistical test results Kruskal-Wallis indicates that the significant value of platelet count data is 0.90. When compared to α value = 0.10, then the significant value (P-value) is > 0.10. So the influence of blood storage on the examination of platelets in dengue fever patients.

## Keywords: Blood storage, Platelet screening, Dengue fever

## PENDAHULUAN
Demam  berdarah  telah  muncul  sebagai masalah  kesehatan  masyarakat  yang  utama di  daerah  tropis  dan  subtropis  di  seluruh dunia.  Dengan  sebuah  peningkatan  beban global  dari  infeksi  arboviral  ini,  kesehatan layanan  perawatan  terus  berupaya  untuk meningkatkan pasien manajemen dan mencari pendekatan inovatif untuk mengontrol  transmisi  vektor.  Berbagai tingkatan  manifestasi  perdarahan  telah ditetapkan oleh Organisasi Kesehatan Dunia.(Kaur  &  Kaur,  2014).  Fenomena pendarahan  sering  terjadi  pada  demam berdarah. Jenis pendarahan terbanyak adalah pendarahan  kulit  seperti  petekie,  purpura, dan  pendarahan  konjungtiva.  Pendarahan lainnya  seperti  epistaksis,  perdarahan  gusi, hematemesis,  melena  dan  pendarahan  otak juga  dapat  terjadi  meskipun  lebih  jarang terjadi. Petekie merupakan tanda perdarahan yang paling sering ditemukan, terutama pada dahi  dan  ekstremitas  distal.  Tanda  ini muncul  pada  hari-hari  pertama  demam, namun  dapat  pula  dijumpai  pada  hari  ke 3,4,5 demam. Terjadinya pendarahan adalah akibat  interaksi  3  komponen  yaitu  faktor pembuluh  darah,  faktor  faktor  pembekuan dan  trombosit.  Trombositopenia  adalah salah  satu  penyebab  terjadinya  perdarahan. Akan  tetapi  pada  pasien  DBD  yang mengalami  trombositopenia  tidak  selalu disertai  dengan  perdarahan.  (Yulianingsih Anwar & Nurhamsiah, 2018).
Pemeriksaan  jumlah  trombosit  di laboratorium terdapat beberapa metode yaitu manual  dan  otomatik.  Cara  manual  yaitu cara langsung dan cara tidak  langsung. Cara langsung menggunakan kamar hitung sedangkan cara tidak langsung menggunakan  apusan  darah  tepi.  Cara otomatik  menggunakan  alat  Hematolgy
Analyzer.  Trombosit  mudah  sekali  pecah dan  sukar  dihitung.  Pemeriksaan  hitung trombosit perlu memperhatikan waktu penyimpanan.  Apabila  pemeriksaan  jumlah trombosit  ditunda  lebih  dari  1  jam  akan menyebabkan  penurunan  jumlah  trombosit karena trombosit akan terus aktif mengumpul  dan  membengkak  kemudian membentuk fragmen yang lebih kecil.(Sujud et  al.,  2015)  Penurunan  jumlah  trombosit <150.000/μl dikategorikan sebagai trombositopenia.  Pada  fase  kritis  trombosit bisa  turun  hingga  <40.000/μl  pada  infeksi dengue  terjadi  melalui  mekanisme  supresi sumsum  tulang,  destruksi  dan  pemendekan masa hidup trombosit. Penyebab trombositopenia  pada  demam  beradarah adalah  akibat  terbentuknya  kompleks  virus antibodi yang merangsang terjadinya agregasi trombosit. Agregat tersebut melewati sistem retikulo endetolial sehingga dihancurkan.
Peningkatan destruksi trombosit  di  perifer juga merupakan penyebab  trombositopenia  pada  demam berdarah.(Rena  et  al.,  2009).  Penyimpanan sampel di laboratorium patologi klinik RS X Mojokerto  pasca  analitik  disimpan  dalam suhu  kulkas  terkontrol  4-6’C  dalam  waktu tiga  hari  bertujuan  untuk  mengulang kembali  pemeriksaan  jika  terjadi  beberapa kasus  pasien  demam  berdarah  dengue (DBD)  dengan  hasil  trombosit  terpaut  jauh dari sebelumnya, penambahan jenis pemeriksaan,  dan  evaluasi  sampel  pasca analitik.  Berdasarkan  latar  belakang  diatas maka maksud dari penelitian ini yakni untuk mengetahui  perbedaan  jumlah  trombosit darah  yang  segera diperiksa dan darah  yang disimpan  3  hari  dalam  suhu  4-6’C  pada pasien demam berdarah dengue (DBD).

## METODE PENELITIAN
Metode penelitian Eksperimental dengan pendekatan  kuantitatif  menggunakan  uji beda  dan  uji  korelasi.  Populasi  pada penelitian ini adalah pasien dengan diagnosis  DBD  di  Rumah  Sakit  X, perhitungan  sampel  sebanyak  170  Pasien. Pengambilan sampel darah vena dengan cara lengan pasien dipasang tourniquet setelah itu lengan dipalpasi menggunakan alkohol swab pada  sekitar  area  yang  akan  ditusuk  lalu masukkan  spuit  pada  area  vena  sampai jarum  masuk pada  lumen  vena, ambil darah 3  mL  dengan  spuit  dan  masukkan  pada tabung vakum EDTA. Kemudian
menghitung  jumlah trombosit menggunakan alat  Hematology  Analyzer,  Alat  dipastikan sudah  terkontrol  dan  sudah  ready  untuk pemeriksaan,  diinput  identitas  pasien  pada layar  alat  dan  ditekan  enter  dua  kali  lalu dihomogenkan  sampel  kemudian  masukkan sampel  pada  aspirator  sambil  menekan tombol  start  maka  hasil  akan  keluar  secara otomatis melalui printer alat.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan  hasil  pemeriksaan  jumlah trombosit  pada  pasien  yang  terinfeksi  virus dengue dengan menggunakan alat Hematology  Analyzer Sysmex  XP-100  dan pada pemeriksaan hari ke 0 dan pemeriksaan setelah  penyimpanan  pada  suhu  4-6 o C  pada hari  ke  1  dan  ke  3.  Dengan  kriteria  pasien demam  berdarah  yang  jumlah  trombosit dibawah  150.000  sel/mm 3 dan  pada  pasien berjenis  kelamin  laki-laki  dan  perempuan tanpa  batasan  umur,  kemudian  hasil  dari penelitian  tersebut  akan  dilakukan  uji  SPSS untuk  mengetahui  ada  tidaknya  pengaruh lama  penundaan  pemeriksaan  pada  pasien DBD  (Demam  Berdarah  Dengue)  terhadap jumlah trombosit . Penelitian ini dilakukan di Rumah  Sakit  Mawaddah  Medika  dilakukan pada  bulan  Mei  –  Juni  2020.  Hasil pemeriksaan  hitung  jumlah  trombosit  pada pasien demam berdarah dengue pada hari ke 0,  dan  setelah  disimpan  di  suhu  4-6 o C  pada hari ke 1 dan pada hari ke 3 maka diperoleh
data hasil penelitian  yang dapat  dilihat pada grafik berikut ini
Gambar  1  Grafik  Rata  Rata  Hasil Jumlah Trombosit
Gambar 2 Grafik Pasien DBD Menurut Kelompok Usia
Gambar 3 Grafik Pasien Berdasarkan Jenis Kelamin
Sesuai  pada  gambar  1  pada  pemeriksaan hitung  jumlah  trombosit  pada  hari  ke  0 didapat  hasil  rata-rata  jumlah  trombosit sebanyak 90.753 sel/mm3, pada pemeriksaan  trombosit  setelah  disimpan pada suhu 4-6’C pada hari ke 1 didapat hasil rata-rata  jumlah  trombosit  sebanyak  88.457 sel/mm3  dan  pemeriksaan  trombosit  setelah disimpan  pada  suhu  4-6’C  pada  hari  ke  3 didapat  hasil  rata-rata  jumlah  Trombosit sebanyak  83.463  sel/mm3.  Berdasarkan grafik  rata  rata  pemeriksaan  trombosit  pada pasien  demam  berdarah  dengue  setiap perlakuan  terjadi  penurunan,  penurunan tersebut  tidak  lebih  dari  10%.  Pada pemeriksaan  hari  ke  0  dan  dilakukan pengulangan  pemeriksaan  pada  hari  ke  1 rata  rata  hasil  menunjukkan  penurunan sebesar  3%.  Pada  pemeriksaan  hari  ke  3 menunjukkan  penurunan  kembali  sebesar 9%.  Berdasarkan  hasil  penelitian,  distribusi pasien  demam  berdarah  dengue  silihat  pada gambar  4.2  di  Rs  X  berdasarkan  kelompok usia  dapat  dilihat  pada  gambar  4.2  terdapat 39%  pada  kelompok  usia  0-12  tahun,  23% pada kelompok usia 13-25 tahun, 22% pada kelompok  usia  26-40  tahun  dan  16%  pada usia 41-70 tahun. Maka dalam penelitian ini pasien  demam  berdarah  dengue  pada  bulan Mei-Juni  di  Rs  X  Mojokerto  presentase tertinggi  di  kelompok  usia  dewasa  0-12 tahun  yaitu  39%.  Berdasarkan  distribusi pasien  demam  berdarah  dengue  menurut jenis kelamin didapatkan jenis kelamin laki- laki  lebih  banyak  pada  gambar  4.3 presentase  pada  pasien  laki-laki  yaitu  52% dan  perempuan  48%.  Untuk  mengetahui apakah ada atau tidaknya pengaruh penyimpanan darah terhadap hasil trombosit pada  pasien  demam  berdarah  dengue  maka dilakukan analisis data.
Tabel 1. Uji Beda dan Hubungan Lama Hari dengan Jumlah Trombosit
Variabel kelompok Intervensi SSign Uji Beda Sign Korelasi Korelasi Lama Hari- Jumlah Trombosit 0,001 0,036 -0,78
Pada Tabel 1 dapat dilihat bahwa lama waktu hari  penyimpanan  berhubungan  dengan jumlah  trombosit  secara  signifikan.  Hasil pemeriksaan  rata-rata  jumlah  trombosit  pada pemeriksaan  hari  ke  0  yang  digunakan sebagai kontrol menunjukkan jumlah trombosit  sebesar  90.753,  dan  pemeriksaan setelah penyimpanan di suhu 4-6oC pada hari ke 1 jumlah trombosit  mengalami penurunan sebesar  3%  dan  pada  pemeriksaan  setelah penyimpanan  di  suhu  4-6oC  pada  hari  ke  3 jumlah  trombosit  mengalami  penurunan sebesar 9%. .
Menurut  Buoro  et  al  (2016),  sampel darah  EDTA  yang  disimpan  di  suhu  ruang dan  kemudian  diperiksa  setelah  ditunda selama  2  jam,  maka  akan  menunjukkan perubahan hasil  yang tidak signifikan.(Buoro et al., 2016) Sampel darah akan menunjukkan hasil  pemeriksaan  pada  titik  kritis  ketika ditunda  selama  8  jam  pada  pemeriksaan darah  lengkap.  Penelitian  yang  dilakukan Sujud  dkk  (2015)  bahwa  pada  parameter trombosit  mengalami  penurunan  disebabkan oleh  sifat  trombosit  yang  terus  aktif melakukan  metabolisme  jika  disimpan  pada suhu ruang. Semakin lama dilakukan pendiaman, maka dapat menyebabkan trombosit akan mengumpul dan membengkak kemudian membentuk fragmen dengan ukuran  yang  lebih  kecil  dari  trombosit sehingga  tidak  terhitung  sebagai  trombosit pada alat  (Sujud et al., 2015). Teori  menurut Zini (2013) menyebutkan bahwa pemanjangan  waktu  pemeriksaan  sehingga menyebabkan perubahan konsentrasi trombosit  dari  bentuk  semula  berupa  diskoid menjadi  bulat  ketika  spesimen  disimpan menggunakan  pengawet  EDTA.(Zini,  2014) Menurut  Pintér  et  al  (2016)  dalam  buku International  Council  for  Standardization  in Hematology, menyarankan
bahwa
penyimpanan  darah  untukpemeriksaan  darah lengkap  maksimal 6  jam pada suhu 18–22°C dan  24  jam  pada  suhu  2–6°C.(Pintér  et  al., 2012)
Pada  penelitian  ini  sesuai  dengan Penelitian  yang  dilakukan  Sujud  dkk  (2015) bahwa  pada  parameter  trombosit  mengalami penurunan  disebabkan  oleh  sifat  trombosit yang terus aktif  melakukan  metabolisme  jika disimpan  pada  suhu  ruang.  Semakin  lama dilakukan pendiaman, maka dapat menyebabkan  trombosit  akan  mengumpul dan  membengkak  kemudian  membentuk fragmen dengan ukuran  yang  lebih kecil dari trombosit  sehingga  tidak  terhitung  sebagai trombosit jika  menggunakan alat hematology analyzer. (Sujud et al., 2015) Pada penelitian ini  menggunakan  alat  automatic  Hematology Analyzer  Sysmex  XP-100  dengan  prinsip kerja  impedansi  aliran  listrik,  impedansi aliran  listrik  berdasarkan  pada  variasi impedansi  yang  dihasilkan  oleh  sel-sel  darah didalam  mikrooperture  (  celah  chamber mikro  ) dimana sampel darah yang diencerkan  dengan  elektrolit  diluent/  sys  DII akan  melalui  mikroaperture  yang  dipasangi dua  elektroda  pada  dua  sisinya  yang  pada masing-masing  arus  listrik  pada  kedua elektroda  sesuai  dengan  volume  sel  (ukuran sel)  yang  meleati  impuls  yang  dihasilkan amplifer  circuit  ditingkatkan  dan  dianalisa oleh  elektronik  system  lalu  hemoglobin diukur  dengan  melisiskan  Red  Blood  Cels dengan sys.
LYSE
membentuk methamoglobin  cyanmetheglobin  dan  diukur secara spektrofotometri pada panjang gelombang 550 nm pada chamber. Hasil yang dikeluarkan berupa nilai lain grafik sel.
Berdasarkan hasil penelitian, distribusi  pasien  demam  berdarah  dengue  di Rs  X  Mojokerto  berdasarkan  kelompok  usia terdapat 39% pada kelompok usia 0-12 tahun, 23%  pada  kelompok  usia  13-25  tahun,  22% pada  kelompok  usia  26-40  tahun  dan  16% pada  usia  41-70  tahun.  Maka  rata  rata tertinggi  pasien  demam  berdarah  dengue yaitu pada usia 0-12 tahun dengan presentase 39%.  hal  ini  sejalan  dengan  penelitian Karyanti  dkk  (2009)  pada  usia  anak  anak  6- 11 tahun rentan akan tingginya kasus demam berdarah  dengue  hal  ini  dikarenakan  anak anak masih belum mengerti tentang penularan  dan  pencegahan  pengetahuan tentang penyakit demam berdarah dengue.(Karyanti  &  Hadinegoro,  2016)  hal
ini  juga  sejalan  dengan  pernyataan  dari Carribean Epidemiology Centre (2000) menyatakan  bahwa  epidemiologi  penderita demam  berdarah  dengue  adalah  anak  anak. (Caribbean  Epidemiology  Center  et  al., 2000)berdasarkan  hasil  penelitian  distribusi pasien  demam  berdarah  dengue  di  Rs  X Mojokerto berdasarkan jenis kelamin presentase  pada  pasien  laki-laki  yaitu  52% dan  perempuan  48%.  hal  tersebut  sejalan dengan  penelitian  dengan  penelitian  lainnya yang  menunjukkan bahwa penderita  laki-laki lebih  banyak  daripada  perempuan  seperti menurut Juranah dkk (2011) bahwa penderita laki-laki  lebih  banyak  dengan  presentase 60%.(Juranah  et  al.,  2018)  berdasarkan penelitian  Kleton  dkk  (2011)  bahwa  jenis kelamin  berhubungan  dengan  sensitifitas agregasi  trombosit  karena  trombosit  laki-laki lebih  sensitif  dalam  agregasi  dibandingkan trombosit  perempuan.(Kleton  JG,  Powers  P, Julian J, Boland V, Carter J, 1980).

## DAFTAR PUSTAKA
Buoro,  S.,  Mecca,  T.,  Seghezzi,  M., Manenti,  B.,  Cerutti,  L.,  Dominoni,  P., Napolitano, G., Resmini, S., Crippa, A., Ottomano,  C.,  &  Lippi,  G.  (2016). Assessment  of  blood  sample  stability for  complete  blood  count  using  the Sysmex  XN-9000  and  Mindray  BC- 6800  analyzers. Revista  Brasileira  de Hematologia  e  Hemoterapia , 38 (3),
225–239.
https://doi.org/10.1016/j.bjhh.2016.05. 010 Caribbean Epidemiology Center, Pan American  Health  Organization,  &
World  Health  Organization.  (2000). Clinical and Laboratory Guidelines for Dengue Fever
and Dengue
Hemorrhagic  Fever  /  Dengue  Shock Syndrome  for  Health  Care  Providers .
1–10.
Juranah,  Muhadi,  D.,  Arif,  M.,  &  Bahar,  B.
(2018). Uji Hematologi Pasien Terduga Demam  Berdarah  Dengue  Indikasi Rawat  Inap. Indonesian  Journal  of Clinical Pathology and Medical Laboratory , 17 (3), 139. https://doi.org/10.24293/ijcpml.v17i3.1
169
Karyanti,  M.  R.,  &  Hadinegoro,  S.  R.
(2016). Perubahan Epidemiologi Demam Berdarah Dengue Di Indonesia. Sari  Pediatri , 10 (6),  424. https://doi.org/10.14238/sp10.6.2009.4 24-32
Kaur,  P.,  &  Kaur,  G.  (2014).  Transfusion support  in  patients  with  dengue  fever. International  Journal  of  Applied  and
Basic  Medical  Research , 4 (3),  8. https://doi.org/10.4103/2229- 516x.140708 Kleton  JG,  Powers  P,  Julian  J,  Boland  V, Carter  J,  G.  M.  2011.  (1980). Sex Related Different agregation : influence  of  the  hematocrit.  Blood Journal of American Society
Hematology . 56 (1), 38–41.
Pintér, L., Hardi, P., Martinuzzi, A., & Hall,
J.  (2012).  Bellagio  STAMP:  Principles for sustainability assessment and measurement. Ecological  Indicators ,
17 ,
20–28.
https://doi.org/10.1016/j.ecolind.2011.0 7.001 Rena, N. M. R. A., Utama, S., & Parwati, T.
(2009).  Kelainan  Hematologi  pada Demam  Berdarah  Dengue. Journal Penyakit Dalam , 10 (3), 218–225.
Sujud,  S.,  Hardiasari,  R.,  &  Nuryati,  A. (2015).  Perbedaan  Jumlah  Trombosit Pada  Darah  EDTA  Yang  Segera
Diperiksa  dan  Penundaan  Selama  1 Jam  di  Laboratorium  RSJ  Grhasia Yogyakarta. Medical Laboratory Technology Journal , 1 (2), 91.
https://doi.org/10.31964/mltj.v1i2.21
Yulianingsih  Anwar,  A.,  &  Nurhamsiah.
(2018).  Penentuan  Kriteria  Penilaian Kesan Jumlah Leukosit Pada
Pemeriksaan  Apusan  Darah  Tepi.
Jurnal  Kesehatan  Panrita  Husada , 3 (2),
27–34. https://doi.org/10.37362/jkph.v3i2.156
Zini, G. (2014). Stability of complete blood count parameters with storage:  Toward defined  specifications  for  different diagnostic  applications. International
Journal  of  Laboratory  Hematology ,
36 (2), 111–113.