## IDENTIFIKASI SENYAWA METABOLIT SEKUNDER DAUN
PETAI CINA ( Leucaena leucocephala (Lamk.) De Wit) DAN UJI
AKTIVITAS ANTIBAKTERI Staphylococcus aureus
1 Ermi Abriyani, S.Si., M.Si, 2 Neneng Nurfalah
1 Prodi Farmasi Fakultas Teknologi dan Ilmu Komputer Universitas Buana Perjuangan Karawang ( ermiabriyani@ubpkarawang.ac.id , )
2 Prodi Farmasi Fakultas Teknologi dan Ilmu Komputer Universitas Buana Perjuangan Karawang ( fm15.nenengnurfalah@mhs.ubpkarawang.ac.id)

## ABSTRAK
Salah  satu  tumbuhan  yang  digunakan  sebagai  obat  tradisional  adalah  petai  cina (Leucaena leucocephala (Lamk.) de Wit ) . Secara etnobotani, masyarakat Indonesia telah memanfaatkan daun petai cina sebagai obat-obatan diantaranya sebagai obat luka dan obat bengkak. Petai cina diketahui potensial untuk dikembangkan lebih lanjut  pada  penyakit  infeksi.  Berdasarkan  hal  ini  dilakukan  penelitian  mengenai identifikasi  metabolit  sekunder  daun  petai  cina.  Metode  yang  digunakan  yaitu soxhlet,  uji  fitokimia,  ekstraksi  cair-cair,  kromatografi  kolom,  uji  antibakteri mengunakan metode difusi paper disk dengan konsentrasi 10% b/v, 20% b/v, 30% b/v, 40% b/v, 50%. b/v. Pada pengujian karakteristik senyawa metabolit sekunder daun petai cina memiliki potensi yaitu senyawa alkaloid, flavonoid, tanin, polifenol dan steroid. Pada pengujian antibakteri menunjukkan konsentrasi 50% zona hambat paling besar dengan hasil pengukuran 6,16 mm pada ekstrak etanol dan pada ekstak n- heksana 4,44 mm.
Kata Kunci : Daun Petai Cina (Leucaena leucocephala (Lamk.) de Wit)), Ekstraksi cair-cair, Kromatografi lapis tipis, Kromatografi kolom, St

## ABSTRACK
One of the plants used as traditional medicine is (Leucaena leucocephala (Lamk.) De  Wit) .  Ethnobotany,  Indonesian  people  have  used  Chinese  petai  leaves  as medicines,  including  wound  medicine  and  swollen  medicine.  Chinese  petai  is known to be potential for further development in infectious diseases. Based on this, a study was conducted on the identification of secondary metabolites of Chinese petai  leaves.  The  method  used  is  soxhlet,  phytochemical  test,  liquid-liquid extraction, column  chromatography,  antibacterial  test  using  paper  disk  diffusion method with a concentration of 10% b / v, 20% b / v, 30% b / v, 40% b / v, 50%. b / v. In testing the characteristics of secondary metabolites of Chinese petai leaves, they have the potential of alkaloid compounds, flavonoids, tannins, polyphenols and steroids. The antibacterial test for a concentration of 50% has the largest inhibition zone with results of measurements of 6.16 mm on ethanol extract and on n-hexane extract 4.44 mm.
Keywords : ( Leucaena  leucocephala (Lamk.)  De  Wit)), Liquid-  liquid  Extraction Cromatography column , Thin Layer Cromatography , Staphylococcus aureus

## PENDAHULUAN
Seiring  dengan  kemajuan  teknologi  dan  kehidupan  masyarakat  yang  ingin  serba cepat dan praktis, pola makanan pun ikut bergeser. Sarapan dengan sereal instan merupakan  salah  satu  pilihan  yang  mulai  populer  dan  digemari  oleh  masyarakat Indonesia  (Dewanti,T,  2012).  Penggunaan  bahan  alam  kini  semakin  meningkat, terlebih lagi dengan adanya isu back to nature , serta krisis keuangan menyebabkan menurunnya  daya  beli  masyarakat.  Salah  satu  obat  tradisional  yang  saat  ini berpotensi  untuk  dikembangkan  adalah  tanaman  petai  cina  ( Leucaena leucocephala ).  Tanaman  petai  cina  merupakan  salah  satu  tanaman  tropis  yang kelimpahannya  cukup  besar  di  kabupaten  Karawang,  Indonesia.  Tanaman  ini mempunyai  potensi  senyawa  bioaktif    yang  dapat  dimanfaatkan  sebagai  obat- obatan  herbal.  Masyarakat  telah    memakai  daun  dari  tanaman  petai  cina  sebagai obat luka dan obat bengkak (Praja, M.H., dan Oktarina, R.Z., 2016).
Dari penelitian yang sudah dilakukan menurut Sartinah (2010) ekstrak daun petai cina  menunjukkan  aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus . Menurut Togubu (2013) Daun petai cina dapat menurunkan kadar glukosa darah karena  memiliki  senyawa  aktif  yaitu  flavonoid,  saponin,  alkaloid,  dan  tanin. Beberapa  penelitian  menyebutkan  bahwa  daun  petai  cina  mengandung  zat  aktif alkaloid, saponin, flavonoid, lektin dan tanin. (Rahmawati, 2014). Berdasarkan hal diatas  maka  dilakukanlah  penelitian  dengan  mengidentifikasi  senyawa-  senyawa metabolit  sekunder  dan  uji  aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus.

## METODE PENELITIAN

## Peralatan yang digunakan dalam penelitian
Peralatan  yang  digunakan  adalah  peralatan  gelas  yang  umum  dipakai  penelitian kimia organik bahan alam, satu set alat soxhlet, seperangkat alat destilasi pelarut, rotary evaporator, oven, memmert basic water bath- WNB 14, LAF, neraca analitik, autoklaf, lampu UV model UV GL 58 UV 245 dan 366 nm, plat KLT (silika gel G 60 F254), kolom, inkubator, jarum ose, kertas saring, silika, pipet tetes, pipa kapiler, paper disk, DMSO, Ciprofloxsasin,

## Bahan yang digunakan dalam penelitian
Sampel  yang  digunakan  adalah  daun  petai  cina  yang  dikumpulkan  dari  area pemukiman Karawang Timur, Jawa Barat.
Bahan lain yang digunakan adalah n-heksana, etil asetat, etanol, metanol, aquadest, serbuk magnesium, silika gel, kertas whatcman , kapas steril, ciprofloxacin, DMSO (Dimetil  sulfoksida),  bakteri Staphylococcus  aureus ,  plat  KLT  (silika  gel  G  60
F254),  pipa  kapiler,  aluminium  foil,  dan  kertas  saring.  Pereaksi  mayer  untuk identifikasi alkaloid, pereaksi lieberman burchard untuk identifikasi terpenoid dan steroid,  sianidin  tes  untuk  identifikasi  flavonoid,  dan  FeCl 3 untuk  identifikasi fenolik dan tanin.
Penelitian ini menggunakan metode soxhlet, ekstraksi cair-cair, fraksinasi dengan kromatografi kolom, uji antibakteri menggunakan metode paper disk.

## PEMBAHASAN
Determinasi  tumbuhan  dimaksudkan  untuk  mendapatkan  jenis  tumbuhan  yang digunakan dengan jelas. Tanaman daun petai cina ini dideterminasi di Laboratorium Institut  Teknologi  Bandung  Fakultas  Sekolah  Ilmu  dan  Teknologi  Hayati. Determinasi  dilakukan  dengan  mencocokkan  tanaman    No.  407/D/KM/2018 dengan ciri- ciri morfologi tumbuhan petai cina yang digunakan penelitian dengan acuan  pustaka.  Hasil  determinasi  menunjukkan  bahwa  tanaman  yang  digunakan dalam penelitian ini adalah Leucaena leucocephala (Lamk.) de Wit.
Ekstrak  yang  dihasilkan  dari  300  gram  serbuk  petai  cina  dengan  soxhlet menggunakan  pelarut  etanol  adalah  27,3  gram,  61,72  gram,  13,71  gram. Didapatkan  hasil  ekstraksi  cair  cair  menggunakan  pelarut  n-heksana  yaitu  22,81 gram, 20,17 gram, 53,95 gram.

## Uji Fitokimia
Berdasarkan dari uji fitokimia ekstrak daun petai cina, didapatkan sebaga berikut:
Tabel 1. Hasil Uji Fitokimia No.  Kandungan Kimia Pereaksi Hasil Keterangan 1. Flavonoid Sianidin test + Orange kemerahan 2. Saponin H 2 O - Tidak terdapat busa 3. Tanin FeCl + Warna hijau 4. Polifenol FeCl + Hitam pekat 5. Steroid Lieberman Burchard + Warna Hijau 6. Terpenoid Lieberman Burchard - Kuning jernih 7. Alkaloid Dragendorf + ada endapan jingga
Keterangan : (+) Ada, Tidak ada (-)

## Fraksinasi dengan kolom
Ekstrak kental etanol dilakukan fraksinasi untuk memisahkan senyawa komponen yang ada pada ekstrak daun petai cina menggunakan kromatografi kolom dengan absorben silika gel G 60 F254 sebagai fasa diam dan eluen n-heksana : etil asetat, etil asetat : metanol sebagai fasa gerak yang kepolarannya terus ditingkatkan. Hasil fraksinasi didapatkan 17 fraksinasi dalam 145 vial . Didapatkan noda yang sama dengan menggabungkan tiap vial kedalam satu fraksi lalu diuapkan pelarutnya.

## Gambar 1. Hasil Fraksinasi dengan Kolom
Berdasarkan gambar 1 dilakukan elusi dengan perbandingan 5:5 (etil asetat: etanol) dilihat  dibawah  lampu  UV  254  nm    didapat  hasil  Rf  0,33  pada  vial  30-  39 menunjukkan  warna  floresensi,  Pada  lampu  UV  366  nm  menunjukkan  warna kuning muda.
Dilakukan pengujian dengan sedikit mengambil ekstrak didalam vial (fraksi 1) dan diuji  dengan  pereagen  fitokimia,  tujuannya  memperkirakan  hasil  yang  didapat dalam  suatu  metabolit  sekunder.  Dilakukan  dengan  penambahan  FeCl 3 5% menunjukkan warna orange yang termasuk kedalam polifenol.

## Gambar 2 Hasil uji fitokimia dan KLT (fraksi 1)
Lalu  dilakukan  elusi  pada  fraksi  1  dengan  perbandingan  6:4  dapat  dilihat  pada Gambar 2 Didapatkan hasil Rf 0,25 dengan menunjukkan warna floresensi dlihat pada lampu UV 254 nm. Sedangkan pada lampu UV 366 nm menunjukkan sedikit warna  kuning.  Menurut  Achmad  (1996)  jika  senyawa  yang  diuji  dengan  KLT memberikan noda tunggal maka hasil isolasi sudah murni. Dapat diketahui bahwa ekstrak  daun  petai  cina  masih  mengandung  berbagai  komponen  senyawa  (belum murni), hal ini dibuktikan dengan hasil KLT yang masih mengandung banyak noda.

## Uji Antibakteri Staphylococcus aureus
Uji aktivitas antibakteri dengan metode difusi dilakukan replikasi sebanyak 3 kali pada  tiap  konsentrasi  uji  dan  kontrol  uji.  Pengujian  antibakteri  dengan menggunakan medium utrient Agar (NA). Digunakan kontrol positif ciprofloxacin dan  kontrol  negatif    DMSO  dengan  konsentrasi  10%,  20%,  30%,  40%,  50%. Berdasarkan  hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  petai  cina menghasilkan diameter zona hambat kategori lemah hingga sedang. Pada ekstrak n-  heksana  menghasilkan  diameter  zona  hambat  kategori  lemah  disebabkan memiliki  aktivitas  antibakteri  yang  rendah  terhadap  kandungan  senyawa  aktif sehingga  senyawa  pada  ekstrak  n-  heksan  yang  tertarik  sedikit.  Ekstrak  etanol
memiliki  zona  hambat  paling  luas  dikarenakan  komponen-komponen  yang  dapat diekstrak  oleh  pelarut  etanol  dapat  menarik  senyawa  polar  dan  non-polar, sedangkan  n-heksan  hanya  dapat  menarik  senyawa  non-polar.  Oleh  sebab  itu, etanol  dapat  mengekstrak  lebih  banyak  senyawa  dibandingkan  pelarut  n-heksan. Hal ini juga telah dibuktikan pada uji fitokimia senyawa aktif dalam daun petai cina menunjukan bahwa ekstrak etanol memiliki kandungan senyawa aktif lebih banyak di  bandingkan  dengan  ekstrak  n-heksan . Menurut  Susanto,  Sudrajat  dan  Ruga, 2012, kriteria kekuatan antibakteri yaitu 0 – 5 mm rendah jika diameter zona hambat 5  mm  atau  kurang  maka  aktivitas  penghambatan  dikategorikan  lemah,  diameter zona hambat sebesar 6-10 mm maka dikatagorikan sedang, diameter zona hambat sebesar 11-20 mm maka dikatagorikan kuat dan jika diameter zona hambat 21 mm atau lebih maka aktivitas penghambatan dikatagorikan sangat kuat.

## Gambar 3. Diameter Zona Hambat Ekstrak n-heksana
Pemilihan  pelarut etanol 96% dan n-heksan adalah karena pada penelitian ini di harapkan mendapatkan zat aktif yang terlarut dalam pelarut polar dan  non polar, sehingga dapat menjadi acuan untuk mengetahui zat aktif yang di peroleh dari daun peta  cina. Staphylococcus  aureus merupakan  gram  positif  yang  sensitif  terhadap antibiotik  ciprofloxacin.  Hal  ini  menunjukan  bahwa  ekstrak  daun  petai  cina mengandung  zat  antibakteri  yang  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri walaupun  daya  hambatnya  dalam  rentang  lemah  sampai  sedang.  Kemampuan ekstrak  daun  petai  cina  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus
3.29 3.52 3.59 3.88 4.1 10.5 0 0 2 4 6 8 10 12 konsentrasi 10% konsentrasi 20% konsentrasi 30% konsentrasi 40% konsentrasi 50% kontrol positif kontrol negatif

## Diameter Zona Hambat Ekstrak n- heksana
Rata-…
aureus karena adanya beberapa kandungan senyawa metabolit pada daun petai cina yaitu  senyawa  flavonoid,  tanin,  polifenol,  alkaloid,  steroid  yang  dapat  memiliki aktivitas  antibakteri.  Fenol  dapat  bersifat  desinfektan  yang  bekerja  dengan  cara mendenaturasi  protein  yanag  dapat  menyebabkan  aktifitas  metabolisme  ini  akan mengakibatkan  kematian  sel  bakteri  (Miranti,  2013).  Flavonoid  yaitu  dengan menyebabkan  kerusakan  permeabilitas  dinding  bakkteri  dan  mengahambat motilitas  bakteri  (Darsana,  2012).  Tanin juga  menyerang  polipeptida  dinding  sel sehingga menyebabkan kerusakan dinding sel pada bakteri (Ji Ys, 2012). Steroid sebagai  antibakteri  berhubungan  dengan membran  lipid  dan  sensitivitas  terhadap komponen  steroid  yang  menyebabkan  kebocoran  pada  liposom  menyebabkan integritas  membran  menurn  seta  morfologi  membran  sel  berubah  yang menyebabkan sel rapuh dan lisis (Ji Ys, 2012).

## PENUTUP

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan dapat disimpulkan sebagai berikut:
1. Daun  petai cina  mengandung  senyawa  flavonoid,  tanin,  polifenol,  steroid  dan alkaloid.
2. Daun petai cina memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus dengan  konsentrasi  10%,  20%,  30%,  40%,  50%  .  Pada  pengujian antibakteri  menunjukkan  konsentrasi  50%  zona  hambat  paling  besar  dengan hasil pengukuran 6,16 mm pada ekstrak etanol dan pada ekstak n- heksana 4,44 mm.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahmad, H. (1996). Penuntun Belajar Kimia Dasar: Kimia Larutan. Bandung: PT Citra Aditya Bakti
Darsana,  I.  G.  O.  (2012).  Potensi  Daun Binahong  (Anredera  Cordifolia  (Tenore) Steenis) dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Escherichia Coli secara In Vitro. Indonesia Medicus Veterinus, 1(3), 337 –351
Dewanti,  Tri.  Dkk.  2012.  Tepung  Bubur  Sereal  Instan  Metode  Ekstruksi  dari Sorgum dan Kecambah Kacang Tunggak (Kajian Proporsi Bahan dan Penambahan Maltodekstrin).  Jurnal  Teknologi  Pertanian  Vol.  3  No.1  :  35-44.  Universitas Brawijaya
Miranti,  S,  T.  Pembuatan  Karbon  Aktif  Dari  Bambu  Dengan  Metode  Aktivasi Terkontrol  Menggunakan  Aktivating  Agent  H3PO4  dan  KOH.  Jurusan  Teknik Universitas Indonesia, Departemen Teknik Kimia, Universitas Indonesia. 2012
Praja, M.H. dan Oktarina, R. Z., 2016, Uji Efektivitas Daun Petai Cina (Laucaena glauca)  Sebagai  Antiinflamasi  Dalam  Pengobatan  Luka  Bengkak  .,  Majority, Volume 5, Nomor 5.
Rahmawati, I. 2014. Perbedaan Efek Perawatan Luka Menggunakan Gerusan Daun Petai Cina (Leucaena glauca, Benth) Dan Povidon Iodine 10% Dalam Mempercepat Penyembuhan Luka Bersih Pada Marmut (Cavia porcellus). Jurnal Wiyata 1 (2).
Sartinah A., 2010. Isolasi Dan Identifikasi Senyawa Antibakteri Dari Daun  Petai Cina. Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada, Majalah Obat Tradisional, 15 (3), 146 – 152, 2010, Yogyakarta.
Susanto, Sudrajat D, Ruga R. 2012. Studi kandungan bahan aktif tumbuhan meranti merah ( Shorea leprosula Miq ) sebagai sumber senyawa antibakteri . Mulawarman scientific. (2):181-90