## Sasambo Journal of Pharmacy
https://jffk.unram.ac.id/index.php/sjp
___________ Email: farras803@gmail.com (*Corresponding Author)
Copyright © 2024, The Author(s). This article is distributed under a Lisensi Creative Commons Atribusi 4.0 Internasional .
Skrining  fitokimia  ekstrak  air  dan  ekstrak  etanol  70%  Propolis Trigona sp. asal Lombok Utara
Muhammad Naufal Farras Ananta 1* , Imasayu Nuralyza 1 , Kurnia Solehah 1 , Iman Surya Pratama 1 , Siti Rahmatul Aini 1 1 Program Studi Farmasi, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, Universitas Mataram, Kota Mataram, Indonesia
DOI: https://doi.org/10.29303/sjp.v5i1.305
Article Info Abstract: Propolis Trigona sp. has many benefits closely related to the secondary metabolites contained therein. Previous research related to propolis screening of Trigona sp . from North Lombok has been carried out. Still, it has yet to be carried out in the maceration method (1:20 w/v) with 70% water and ethanol solvent to obtain a comparison of secondary metabolites between the two solvents. This study aims to identify the content of secondary metabolites in the water extract and 70% ethanol extract of propolis Trigona sp. from North Lombok. Propolis was macerated with water and 70% ethanol solvent. The viscous extract was identified for its physical  characteristics,  consistency,  color,  and  chemical  characteristics  through phytochemical  screening.  The  results  of  the  phytochemical  screening  showed  that  the aqueous  extract  and  70%  ethanol  extract  contained  alkaloids,  flavonoids,  tannins, triterpenoids, and quinones. Both extracts showed negative saponin results.
Received : 2023-08-18 Revised : 2024-06-28 Accepted : 2024-06-28
Keywords: phytochemical screening , propolis , Trigona sp., water, ethanol 70%
Citation: Ananta, M, N, F., Nuralyza, I., Solehah, K., Pratama, I, S., Aini, S, R. (2024). Skrining fitokimia ekstrak air dan ekstrak etanol  70% Propolis  Trigona  sp. asal  Lombok  Utara. Sasambo  Journal  of  Pharmacy,  5 (1),  38-45.  doi: https://doi.org/10.29303/sjp.v5i1.305

## Pendahuluan
Propolis  merupakan  campuran  lengket  seperti lem  yang  dihasilkan  oleh  lebah  madu yang mengandung  sekresi  atau  eksudat  (Nagai  et.al,  2003). Propolis berwujud seperti resin yang dikumpulkan oleh lebah  madu  dari  berbagai  macam  bagian  tumbuhan, mulai  dari  tunas,  daun  hingga  eksudat  pohon,  resin yang dihasilkan bercampur dengan serbuk sari, lilin dan enzim (Hasan et.al, 2013; Rismawati dan Ismiyati, 2017). Propolis mengandung campuran kompleks yang terdiri dari  resin,  balsam,  lilin,  minyak  esensial,  dan  polen (Ding  et.al,  2020)  serta  metabolit  lain  seperti  asam amino, terpenoid, asam benzoat, ester, mineral, etanol, vitamin A, vitamin B, vitamin E, senyawa fenolik, dan flavonoid  yang  dapat  bervariasi,  tergantung  pada sumber tanamannya.
Propolis dapat diperoleh dari lebah madu tanpa sengat salah satunya adalah Trigona sp. (Suriawanto dan
Narwan, 2021; Rakhmat et.al, 2021). Di Pulau Lombok, pembudidayaan  lebah Trigona  sp .  berkembang  pesat dikarenakan  lebah  tersebut  dapat  memproduksi  tiga produk yaitu madu, propolis, dan roti lebah ( bee bread ). Daerah  penghasil  propolis  di  Lombok  terletak  pada daerah  Lombok  Utara,  Lombok  Timur,  dan  Lombok Barat  dengan  masing-masing  kondisi  geografisnya. Propolis Trigona  sp. asal  Lombok  Utara  dipilih  karena daerah ini merupakan daerah penghasil propolis yang tinggi, dengan stup yang sebagian besar dekat dengan lokasi  perkebunan  dan  diletakkan  diantara  rumah penduduk  yang  cukup  rapat  dan  padat,  sehingga peternak  dapat  memperhatikan  kondisi  lebahnya dengan baik, selain itu daerah ini memiliki kelembapan yang  sesuai  bagi  lebah Trigona  sp. (Riendrasari  dan Krisnawati, 2017).
Metode  ekstraksi  propolis  yang  digunakan adalah metode maserasi dengan pelarut air dan pelarut etanol 70%. Pelarut air dan pelarut etanol dipilih karena
kedua  pelarut  ini  dapat  menarik  senyawa-senyawa metabolit  sekunder  dari  propolis  yang  bersifat  polar. Berdasarkan  Bankova  et.al  (2021),  propolis  dapat diekstraksi dengan etanol 60-95% dengan perbandingan yang bervariasi. Metode ekstraksi propolis asal Lombok sejauh ini, pada penelitian Zahra (2021), propolis Trigona sp. asal Lombok Utara diekstraksi menggunakan pelarut etanol 75% dengan metode Ultrasound Assisted Extraction (UAE)  yang  digunakan  pada  penentuan  sifat fisikokimia, analisis kadar fenolik total, dan uji aktivitas penghambatan  radikal  bebas.  Pada  penelitian Rahmayani  et.al  (2021),  propolis Trigona  sp .  asal  Desa Bengkaung,  Lombok  Barat  diekstraksi  dengan  pelarut etanol  70%  dengan  metode  maserasi  yang  digunakan untuk mengetahui konsentrasi propolis terhadap mutu kimia, mikrobiologi, dan organoleptis dari yoghurt.
Pemilihan pelarut air dan etanol 70% didasarkan pada  kemampuan  air  menarik  senyawa  polar  serta ketersediaannya,  sedangkan  etanol  70%  lebih  polar dibandingkan  etanol  96%,  sehingga  efektif  untuk senyawa  polar  (Ambaro  et  al.,  2020).  Air  memiliki kepolaran 9,0, sementara etanol 70% memiliki kepolaran 5,2 (Widayanti et a., 2009; Sela, 2022). Kedua pelarut ini sama-sama  bersifat  polar,  sehingga  dapat  menarik senyawa-senyawa polar dalam propolis.
Skrining  fitokimia  propolis  berfungsi  untuk menentukan  kandungan  senyawa  metabolit  sekunder menggunakan  reagen  secara  kualitatif  berdasarkan perubahan warna dan pembentukan endapan. Senyawa metabolit  sekunder  yang  diidentifikasi  yaitu  alkaloid, flavonoid,  triterpenoid,  tanin,  saponin,  dan  kuinon (Putri  et  al.,  2013). Skrining  fitokimia  propolis  Trigona Sp. telah dilakukan dengan ekstrak air, etanol 70%, dan metanol 96% oleh Khairunnisa et al. (2020), etanol 75% oleh Zahra et al. (2021), dan etanol 70% oleh Sylvia et al. (2022) dan Thamrin dan Syafrizal (2016). Pada penelitian Zahra  et  al.  (2021)  ditemukan  flavonoid,  alkaloid, saponin,  dan  tanin  propolis  Trigona  sp.  asal  Lombok Utara.
Penelitian  pada  propolis Trigona  sp. Kabupaten Lombok  Utara  menggunakan  pelarut  air  sejauh  ini belum  dilakukan.  Berdasarkan  permasalahan  diatas, perlu dilakukan skrining fitokimia pada ekstrak air dan ekstrak  etanol  70% propolis Trigona  sp sebagai pembanding.  Tujuan  penggunaan  air  sebagai  pelarut adalah  untuk  membandingkan  senyawa  metabolit sekunder  yang  dapat  ditarik  dibandingkan  dengan pelarut lainnya. Sehingga penelitian ini bertujuan untuk menentukan  kandungan  senyawa  metabolit  sekunder pada ekstrak air dan ekstrak etanol 70% propolis Trigona sp. Lombok  Utara  secara  kualitatif  dengan  metode skrining fitokimia menggunakan uji tabung.

## Metode Penelitian

## Alat dan Bahan
Alat-alat  penelitian  terdiri  atas  alat  gelas laboratorium,  blender  (Miyako®),  bulbus, pengaduk magnetik  (Labnet®),  evaporator  putar  (Heidolph®), spatula,  timbangan  analitik  (Ohauss®),  tangas  air (Labnet®).
Bahan yang digunakan antara lain aquades, asam asetat  anhidrat,  asam  klorida  2  N,  asam  klorida  2  N, asam klorida pekat, asam sulfat pekat, etanol 70% (v/v), FeCl 3 5% (b/v), gelatin  10%  (b/v),  kertas  aluminium, kertas  saring  Whatmann  no.  41,  kloroform,  natrium hidroksida  0,1  N,  propolis  lebah Trigona  sp ,  reagen Dragendorff, Mayer, Wagner, dan serbuk magnesium.

## Pengambilan dan Preparasi Sampel
Propolis Trigona sp. diperoleh dari peternak lebah di  Dusun  Gol  Munjid,  Desa  Karang  Bajo,  Kecamatan Bayan,  Kabupaten  Lombok  Utara.  Propolis  diperoleh melalui  pengikisan  kerangka  dari  sarang  lebah. Kemudian, propolis dipotong kecil-kecil dan disimpan di  dalam  lemari  pendingin  pada  suhu  4 ℃ .  Propolis dihaluskan menjadi bentuk serbuk saat digunakan.

## Ekstraksi Sampel
Prosedur  ekstraksi  propolis  menggunakan metode  maserasi  yang  tercantum  pada  Halkan  dan Yildirim (2022). Sebanyak 20 g propolis serbuk masing- masing  ditambahkan  400  mL  air  dan  etanol  70%  (1:20 b/v).  Suspensi  diaduk  secara  merata,  wadah  ditutup rapat dan dilapisi dengan kertas alumunium. Suspensi propolis  diekstraksi  selama  3  hari  pada  suhu  25 ℃ . Suspensi  propolis  disaring  dengan  kertas  saring Whatmann no. 41. Remaserasi dilakukan sebanyak 2 kali setiap  24  jam  dengan  perbandingan  simplisia  dan pelarut yang sama. Pelarut pada filtrat diuapkan dengan evaporator  putar  pada  suhu  40 ℃ .  Ekstrak  dipekatkan meggunakan penangas air pada suhu 50 ℃ . Ekstrak yang telah  pekat  ditutup  dengan  kertas  alumunium  dan disimpan dalam lemari pendingin pada suhu 4 ℃ .

## Karakterisasi Ekstrak Uji konsistensi
Uji  konsistensi  dilakukan  untuk  menentukan wujud dari ekstrak kental yang diperoleh menggunakan pancaindera untuk mendeskripsikannya.

## Uji warna
Uji  warna  dilakukan  untuk  menentukan  warna dari  ekstrak  kental  yang  diperoleh  menggunakan pancaindera untuk mendeskripsikannya.

## Penapisan fitokimia propolis
Penapisan  fitokimia  dilakukan  pada  ekstrak  air dan etanol 70% propolis untuk menentukan kandungan senyawa-senyawa metabolit sekunder yang terdiri dari
alkaloid,  flavonoid,  tanin,  steroid/triterpenoid,  dan kumarin.
1. Identifikasi Alkaloid
Ekstrak kental sebanyak 0,5 g dilarutkan dengan 10 mL pelarut yang sesuai. Filtrat ditetesi 6 mL HCl 2  N,  kemudian  dipanaskan  diatas  penangas  air selama  2  menit.  Filtrat  dibagi  menjadi  tiga  bagian masing-masing  3  mL,  pertama  ditetesi  dengan pereaksi Dragendorff , kedua ditetesi dengan pereaksi Mayer ,  dan  ketiga ditetesi  dengan  pereaksi Wagner . Hasil positif alkaloid ditandai dengan pembentukan endapan  jingga  pada  filtrat  dengan  pereaksi Dragendorff ,  endapan  putih  pada  penambahan pereaksi Mayer ,  dan  endapan  coklat  pada penambahan pereaksi Wagner (Muthmainnah, 2017). 2. Identifikasi Flavonoid
Ekstrak kental sebanyak 0,2 g dilarutkan dalam 4 mL pelarut yang sesuai. Filtrat ditambahkan 0,2 mg serbuk magnesium, 1 mL HCl pekat, dan 1 mL amil alkohol.  Filtrat  dikocok  kuat.  Perubahan  warna merah, kuning, atau jingga pada lapisan amil alkohol diamati  yang  menandakan  hasil  positif  flavonoid (Zahra, 2021).
3. Identifikasi Saponin Ekstrak kental sebanyak 0,2 g dilarutkan dalam
4  mL  pelarut  yang  sesuai.  Larutan  sampel  dikocok secara  vertikal  selama  10  detik.  Pembentukan  busa yang  terjadi  diamati.  Pembentukan  busa  1-10  cm selama  10  menit  dengan  stabil  menunjukkan  hasil positif  saponin.  HCl  2  N  ditambahkan  ke  dalam filtrat. Jika busa tidak hilang saat penambahan HCl 2 N  menunjukkan  hasil  positif  saponin  (Padmasari et.al, 2013).
4. Identifikasi Tanin Identifikasi  tanin  pada  ekstrak  kental  propolis menggunakan FeCl 3 5% (b/v) dan gelatin 10% (b/v). Sebanyak 0,2 g dilarutkan dengan 4 mL pelarut yang sesuai. Filtrat dipipet masing-masing 2 mL ke dalam 2  tabung  reaksi.  Filtrat  pada  tabung  reaksi  1 ditambahkan  5  tetes  gelatin  10%.  Pembentukan endapan pada penambahan gelatin 10% menunjukkan  hasil  positif  tanin  (Puspitasari  et.al, 2013).  Perubahan  warna  biru  tua  atau  hitam kehijauan  pada  penambahan  FeCl 3 5%  (b/v) menunjukkan hasil positif tanin (Astarina, 2013).
5. Identifikasi Steroid/Terpenoid Identifikasi  ekstrak  kental  propolis  pada  uji steroid/triterpenoid  menggunakan  uji  Salkowski. Ekstrak  kental  sebanyak  0,2  g  dilarutkan  dengan  4 mL  pelarut  yang  sesuai.  Filtrat  sebanyak  2  mL dipipet ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan 1 mL kloroform, serta 1 mL asam sulfat pekat. Terjadi pembentukan dua fase berwarna merah atau kuning ketika  penambahan  asam  sulfat  pekat  yang
menunjukkan  hasil  positif  keberadaan  sterol  dan sterol termetilasi (Das et.al, 2014).
6. Identifikasi Kuinon Ekstrak kental sebanyak 0,2 g dilarutkan dalam 4  mL  pelarut  yang  sesuai.    Filtrat  dipipet  4  mL  ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan 6 tetes NaOH 0,1  N.  Perubahan  warna  filtrat  menjadi  merah menunjukkan hasil positif kuinon (Noer, 2016).

## Hasil dan Diskusi
Pada  penelitian  ini,  propolis  diperoleh  dari Dusun  Gol  Munjid,  Desa  Karang  Bajo,  Kecamatan Bayan,  Kabupaten  Lombok  Utara. Setelah  propolis diperoleh dari peternak, propolis di potong kecil-kecil. Potongan-potongan  kecil  propolis  disimpan  di  dalam lemari pendingin pada suhu 4 ℃ . Penyimpanan propolis pada suhu 4 ℃ bertujuan untuk mencegah pembusukan dan mempertahankan kandungan metabolit sekundernya (Wulansari et.al, 2020). Sebelum ekstraksi, potong-potongan kecil propolis dibilas dengan air yang bertujuan  untuk  menghilangkan  sifat  lengketnya. Kemudian,  propolis  dihaluskan  dengan  blender  yang bertujuan  untuk  memperbesar  luas  permukaan  ketika proses  ekstraksi  agar  kontak  antara  pelarut  dengan propolis terjadi lebih banyak.
Propolis  yang  telah  disimpan  di  dalam  lemari pendingin  selanjutnya  diekstraksi  dengan  metode maserasi selama 3 hari. Pelarut yang digunakan masing- masing adalah etanol 70% dan air dengan perbandingan 1:20 (propolis: pelarut) di ruang gelap atau di bungkus dengan  kertas  aluminium.  Metode  maserasi  dipilih karena  metode  ini  merupakan  metode  ekstraksi  cara dingin  atau  termostabil  sehingga  tidak  merusak kandungan  metabolit  sekunder  pada  propolis.  Hal  ini didukung  pada  penelitian  Pratami  et.al  (2021)  dan Hikmawanti  et.al  (2021)  yang  menyatakan  bahwa propolis  mengandung  senyawa-senyawa  yang  bersifat termolabil  seperti  senyawa  antioksidan,  sehingga metode  maserasi  relatif  lebih  aman  dibandingkan metode ekstraksi dengan pemanasan. Selain itu, metode ini  tidak  memerlukan  suhu  yang  tinggi  pada  proses ekstraksinya  (Rismawati  dan  Ismiyati,  2017).  Pelarut etanol  70%  dipilih  dikarenakan  bersifat  polar,  titik didihnya  79 ℃ ,  dan  memerlukan  sedikit  pemanasan untuk  pemekatannya,  serta  berdasarkan  Bankova  et.al (2021)  bahwa  etanol  70%  yang  digunakan  dalam ekstraksi propolis memiliki tingkat efektivitas ekstraksi berkisar  antara  10,6%  sampai  55%.  Sedangkan pemilihan air sebagai pelarut adalah pelarut ini mudah diperoleh,  dapat  mengekstraksi  senyawa  yang  polar. Akan  tetapi,  pelarut  ini  dapat  menjadi  media pertumbuhan  bagi  mikroba,  sehingga  diperlukan pemantauan  ekstraksi  yang  lebih  ketat  dibandingkan dengan pelarut etanol 70% (Ambaro et.al, 2020). Ekstrak
kental yang diperoleh memiliki warna yang coklat tua untuk  ekstrak  etanol  70%  dan  coklat  muda  untuk ekstrak  air,  serta  keduanya  memiliki  tekstur  yang lengket Tabel 1 .
Tabel 1. Hasil Penetapan Karakteristik Fisik Ekstrak Propolis Nama Uji Hasil Ekstrak air Ekstrak etanol 70% Uji Konsistensi Kental dan lengket Kental dan lengket Uji Warna Coklat muda Coklat tua
Setelah  didapatkan  ekstrak  kental,  kemudian dilakukan  skrining  fitokimia  pada  kedua  ekstrak. Skrining  fitokimia  merupakan  uji  pendahuluan  yang
digunakan  sebagai  dasar  untuk  pengujian  berikutnya yaitu  berupa  gambaran  terkait  senyawa  yang terkandung  pada  ekstrak  yang  diteliti  (Susanti  et.al, 2014).  Skrining  fitokimia  yang  digunakan  pada penelitian  ini  bersifat  kualitatif,  yaitu  mengidentifikasi kandungan  metabolit  sekunder  pada  propolis menggunakan  pereaksi  warna  (Vifta  et.al,  2018). Skrining fitokimia secara kualitatif meliputi identifikasi alkaloid  yang  masing-masing  menggunakan  reagen Dragendorff, Mayer, dan Wagner, identifikasi flavonoid dengan metode Shinoda menggunakan reagen Mg dan HCl,  identifikasi  tanin  dengan  masing-masing penambahan  reagen 𝐹𝑒𝐶𝑙 3 1%  dan  gelatin  10%, identifikasi  saponin,  identifikasi  steroid/terpenoid dengan  metode  Salkowski,  dan  identifikasi  kuinon. Hasil  skrining  fitokimia  kualitatif  ekstrak  etanol  70% dan air propolis dijabarkan pada Tabel 2 .
Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Propolis Pengujian Ekstrak Air Ekstrak Etanol 70% Hasil Pengamatan Interpretasi Hasil Pengamatan Interpretasi Alkaloid Dragendorff Endapan jingga (+) Endapan jingga (+) Mayer Endapan putih (+) Endapan putih (+) Wagner Endapan coklat (+) Endapan coklat (+) Tanin FeCl 3 5% Biru tua (+) Biru tua (+) Gelatin 10% Terbentuk endapan putih (+) Terbentuk endapan putih (+) Triterpenoid Salkowski Terbentuk dua fase berwarna merah (+) Terbentuk dua fase berwarna merah (+) Flavonoid Kuning (+) Jingga (+) Kuinon Merah (+) Merah (+) Saponin Busa yang terbentuk tidak stabil selama 10 menit (-) Busa yang terbentuk tidak stabil selama 10 menit (-) Keterangan: (+) = Positif mengandung senyawa (-)  = Negatif mengandung senyawa
1. Alkaloid
Identifikasi  alkaloid  menggunakan  tiga  reagen yaitu Dragendorff , Mayer, dan Wagner yang ditambahkan pada masing-masing ekstrak. Sebelum penambahan  ketiga  reagen  tersebut,  kedua  ekstrak ditambahkan  dengan  asam  klorida  yang  bertujuan untuk  meningkatkan  kelarutan  alkaloid,  karena senyawa  ini  akan  bereaksi  dengan  asam  klorida membentuk  garam  yang  mudah  larut  dalam  air, serta  dapat  mengekstrak  alkaloid  karena  sifatnya yang basa (Reiza et.al, 2019).
Pada  penambahan  reagen Dragendorff (kalium tetraiodobismutat),  alkaloid  megandung  atom nitrogen  dengan  elektron  bebas  berpasangan digunakan  dalam  pembentukan  ikatan  kovalen koordinat  dengan  ion  kalium  dari  kalium tetraiodobismutat  untuk  menghasilkan  kompleks kalium alkaloid berwarna merah atau cokelat (Fajrin dan  Susila,  2019;  Affandy  et.al,  2021).  Pada  reagen Mayer (kalium  tetraiodomerkurat  (II)),  alkaloid memiliki  atom  nitrogen  dengan  pasangan  elektron bebas yang akan bereaksi dengan ion logam kalium dari  kalium  tetraiodomerkurat  (II)  membentuk
kompleks  endapan  kalium-alkaloid  berwarna  putih (Ergina  et.al,  2014).  Pada  reagen Wagner ,  atom nitrogen  pada  alkaloid  bereaksi  dengan  ion  logam kalium  membentuk  ikatan  kovalen  koordinat menjadi kompleks kalium alkaloid yang mengendap berwarna coklat muda (Marliana et.al, 2005).
Pada  pengujian,  kedua  sampel  positif mengandung alkaloid setelah ditambahkan masing- masing  ketiga  reagen  tersebut.  Pada  ekstrak  air propolis terbentuk endapan berwarna jingga setelah penambahan reagen Dragendorff , pada penambahan Mayer sampel  berwarna  lebih  jingga  dan  terlihat sedikit  endapan  putih,  dan  pada  penambahan Wagner sampel  berwarna  lebih  gelap  dan  terlihat sedikit  endapan  coklat.  Selanjutnya  pada  ekstrak etanol  70%  setelah  penambahan  reagen Dragendorff sampel berwarna jingga dengan sedikit pembentukan  endapan  jingga,  pada  penambahan Mayer sampel  berwarna  jingga  dengan  sedikit pembentukan endapan putih, dan pada penambahan Wagner berwarna  lebih  coklat  dengan  sedikit pembentukan endapan coklat. Berdasarkan pengujian, kedua ekstrak mengandung alkaloid.
2. Flavonoid
Identifikasi  flavonoid  dilakukan  dengan penambahan  asam  klorida  pekat  yang  berperan dalam  menghidrolisis  senyawa  flavonoid  menjadi aglikon  dengan  menghidrolisis  O-glikosil.  Glikosil digantikan  oleh  proton  dari  asam  karena  sifatnya elektrofilik. Serbuk magnesium berfungsi agar gugus karbonil  flavonoid  dapat  berikatan  dengan  Mg. Kedua  pereaksi  tersebut  dapat  membentuk kompleks yang berwarna kuning atau jingga. Fungsi penambahan amil alkohol adalah membantu dalam identifikasi  keberadaan  flavonoid  dengan  cara membentuk kompleks warna atau endapan, karena warna yang timbul setelah penambahan reagen asam klorida pekat dan serbuk Mg cepat hilang.
Pada  pengujian  kualitatif  flavonoid,  kedua ekstrak  yaitu  ekstrak  air  dan  ekstrak  etanol  70% propolis  ditambahkan  dengan  asam  klorida  pekat dan  logam  magnesium.  Kedua  ekstrak  mengalami perubahan  warna,  ekstrak  air  propolis  mengalami perubahan  warna  menjadi  kuning,  sedangkan ekstrak  etanol  70%  propolis  mengalami  perubahan warna menjadi jingga. Berdasarkan pengujian, kedua ekstrak mengandung flavonoid.
3. Tanin Identifikasi  tanin  menggunakan  dua  reagen yaitu besi (III) klorida 5% (b/v) dan gelatin 10% (b/v) dengan  hasil  positif  masing-masing  berwarna  biru tua  atau  hitam  kehijauan  dan  endapan  putih. Berdasarkan pengujian, setelah ditambahkan dengan masing-masing  reagen,  ekstrak  air  propolis menunjukkan hasil positif keberadaan tanin dengan
perubahan warna hitam kehijauan pada penambahan reagen besi (III) klorida dan terbentuk endapan  putih  pada  penambahan  reagen  gelatin. Ekstrak etanol 70% propolis juga menunjukkan hasil positif  keberadaan  tanin  dengan  perubahan  warna hitam kehijauan pada penambahan reagen besi (III) klorida dan endapan putih pada penambahan gelatin 10%.
Penambahan  reagen  besi  (III)  klorida  akan menimbulkan  warna  hijau  kehitaman  yang disebabkan oleh ion Fe 3+ bereaksi dengan tanin dan membentuk senyawa kompleks trisianoferitrikalium Ferri  (III).  Pada  penambahan  dengan  gelatin  akan membentuk  endapan  berwarna  putih  kekuningan bahwa  tanin  dapat  menggumpalkan  protein  dari gelatin,  karena  tanin  dapat  membentuk  suatu kopolimer yang tidak larut dalam air (Desinta, 2015). 4. Triterpenoid Pada  pengujian  triterpenoid  menggunakan metode  Salkowski  dengan  reagen  kloroform  dan asam  sulfat  pekat  dengan  hasil  positif  yaitu terbentuknya  dua  fase  yang  berwarna  merah  dan kuning.  Ekstrak  air  dan  ekstrak  etanol  70% meberikan  hasil  positif  triterpenoid  dengan pembentukan dua fase berwarna merah.
5. Kuinon
Pada  pengujian  kuinon  menggunakan  reagen natrium  hidroksida  dengan  hasil  positif  berwarna merah. Ekstrak air memberikan hasil positif melalui perubahan  warna  menjadi  jingga  kemerahan. Ekstrak  etanol  memberikan  hasil  positif  dengan perubahan warna menjadi warna jingga. Warna yang dihasilkan  tersebut  disebabkan  oleh  kadar  kuinon yang  relatif  sedikit  di  dalam  ekstrak,  sehingga kejenuhan warnanya sedikit.
Prinsip  reaksi  dari  uji  kuinon  adalah  reaksi Borntrager  yang  didasarkan  atas  kemampuannya dalam  pembentukan  garam  berwarna  antara hidrokuinon  dengan  larutan  alkali  kuat.  Gugus keton  pada  hidrokuinon  akan  terionisasi  oleh natrium  hidroksida  membentuk  ikatan  rangkap terkonjugasi sehingga membentuk garam alkali yang berwarna merah.
6. Saponin
Identifikasi  saponin  menggunakan  metode Forth  yaitu  dengan  pengocokan  sampel  selama  30 detik dan terbentuknya busa yang mantap selama 30 detik  sebagai  hasil  positif  keberadaan  saponin. Terbentuknya  busa  tersebut  dikarenakan  terdapat gabungan  struktur  senyawa  penyusunnya  adalah sapogenin  yang  merupakan  rantai  non-polar  dan rantai  samping  yang  larut  air  yang  bersifat  polar (Maya  et.al,  2015).  Pemberian  asam  klorida menyebabkan  hidrolisis,  sehingga  memutus  gugus gula pada sampel (Marliana et.al, 2005).
Kedua  ekstrak  memberikan  hasil  negatif saponin.  Terdapat  perbedaan  dengan  penelitian Zahra  et.al  (2021)  pada  ekstrak  etanol  75%  yang positif  mengandung  saponin.  Hal  ini  dapat disebabkan oleh kondisi geografis sumber tanaman, musim,  genetik  dari  lebah,  dan  faktor-faktor lingkungan  seperti  suhu,  curah  hujan,  dan kelembapannya (Sativa dan Agustin, 2018; Ding et.al, 2020; Suran et.al, 2021; Rakhmat et.al, 2021) sehingga mempengaruhi kandungan saponin pada propolis.

## Kesimpulan
Ekstrak  air  dan  ekstrak  etanol  70%  propolis Trigona  sp. asal Lombok  Utara  memiliki  lima  senyawa metabolit  sekunder  berdasarkan  identifikasi  dengan metode skrining fitokimia dengan uji tabung antara lain alkaloid, flavonoid, tanin, triterpenoid, dan kuinon.

## Daftar Pustaka
Affandy,  F.,  Wirasisya,  D.  G.,  &  Hanifa,  N.  I.  (2021). Skrining  fitokimia  pada  tanaman  penyembuh luka  di  Lombok  Timur. Sasambo  Journal  of Pharmacy , 2 (1), 1-6. DOI: https://doi.org/10.29303/sjp.v2i1.84
Ambaro,  F.  Y.,  Darusman,  F.,  &  Dewi,  M.  L.  (2020). Prosedur  Ekstraksi  Maserasi  Daun  Bidara  Arab (Ziziphus spina-christi L.) Menggunakan Pelarut Etanol  dan  Air. Prosiding  Farmasi , 6 (2),  890-893. DOI: http://dx.doi.org/10.29313/.v6i2.24050
Astarina, N. W. G., Astuti, K. W., Warditiani, N. K. 2013. Skrining  fitokimia  ekstrak  metanol  Rimpang Bangle ( Zingiber purpureum Roxb. ). Jurnal Farmasi Udayana , 2(4), 1-7.
Bankova, V., Trusheva, B., & Popova, M. (2021). Propolis extraction  methods:  A  review. Journal  of apicultural research , 60 (5), 734-743. DOI:
https://doi.org/10.1080/00218839.2021.1901426
Das,  B.  K.,  Al-Amin,  M.  M.,  Russel,  S.  M.,  Kabir,  S., Bhattacherjee,  R.,  &  Hannan,  J.  M.  A.  (2014). Phytochemical  screening  and  evaluation  of analgesic  activity  of  Oroxylum  indicum. Indian journal of pharmaceutical sciences , 76 (6), 571-575.
Depkes,  R.  I.  (2000).  Parameter  standar  umum  ekstrak tumbuhan  obat. Jakarta:  Departemen  Kesehatan Republik Indonesia , 31.
Desinta,  T.  (2015).  Penentuan  Jenis  Tanin  Secara Kualitatif dan Penetapan Kadar Tanin dari Kulit
Buah  Rambutan  (Nephelium  Lappaceum  L.) Secara Permanganometri. CALYPTRA , 4 (1), 1-10.
Ding,  Q.,  Sheikh,  A.  R.,  Gu,  X.,  Li,  J.,  Xia,  K.,  Sun,  N.
(2021).  Chinese  Propolis:  Ultrasound ‐ assisted enhanced ethanolic extraction, volatile components
analysis, antioxidant and antibacterial  activity  comparison. Food  Science  &
Nutrition , 9 (1), 313-330. DOI: https://doi.org/10.1002/fsn3.1997
Hasan,  A.  E.  Z.,  Sunarti,  D.  M.  T.  C.,  Suparno,  O.,  & Setiyono,  A.  (2013).  Optimasi  ekstraksi  propolis menggunakan  cara  maserasi  dengan  pelarut etanol  70%  dan  pemanasan  gelombang  mikro serta  karakterisasinya  sebagai  bahan  antikanker payudara. Jurnal Teknologi Industri Pertanian , 23 (1). 13-21.
Hikmawanti,  N.  P.  E.,  Fatmawati,  S.,  Arifin,  Z.,  & Vindianita,  V.  (2021).  Pengaruh  variasi  metode ekstraksi terhadap perolehan senyawa antioksidan  pada  daun  katuk  (Sauropus androgynus  (L.)  Merr). J  Farm  Udayana , 10 (1),  1- 12.
DOI: https://doi.org/10.24843/JFU.2021.v10.i01.p01
Khairunnisa,  K.,  Mardawati,  E.,  &  Putri,  S.  H.  (2020).
Karakteristik Fitokimia dan Aktivitas
Antioksidan  Ekstrak  Propolis  Lebah  Trigona Sp. Jurnal Industri Pertanian , 2 (1).
Marliana,  S.  D.,  Suryanti,  V.,  &  Suyono,  S.  (2005). Skrining fitokimia dan analisis kromatografi lapis tipis  komponen  kimia  buah  labu  siam  (Sechium edule Jacq. Swartz.) dalam ekstrak
etanol. Biofarmasi , 3 (1), 26-31.
Maya,  S.  W.  (2015).  Phytochemical  screening  and antipyretic effect of stem juice from kepok banana (Musa  paradisiaca  L)  on  white  male  rats  stain wistar  (Rattus  norvegicus)  induced  with  DTP- Hb. Pharmacon , 4 (1).
DOI:
https://doi.org/10.35799/pha.4.2015.6475
Milah, N., Bintari, S. H., & Mustikaningtyas, D. (2016). Pengaruh  konsentrasi  antibakteri  propolis terhadap  pertumbuhan  bakteri  Streptococcus pyogenes secara in vitro. Life Science , 5 (2), 95-99.
Muthmainnah,  B.  (2019).  Skrining  fitokimia  senyawa metabolit  sekunder  dari  ekstrak  etanol  buah delima  (Punica  granatum L.) dengan metode  uji warna. Media Farmasi , 13 (2), 36-41. DOI: https://doi.org/10.32382/mf.v13i2.880
Nagai,  T.,  Inoue,  R.,  Inoue,  H.,  &  Suzuki,  N.  (2003). Preparation  and  antioxidant  properties  of  water extract  of  propolis. Food  chemistry , 80 (1),  29-33. DOI: https://doi.org/10.1016/S0308- 8146(02)00231-5
Noer, S., Pratiwi, R. 2016. Uji kualitatif fitokimia Daun Ruta  Angustifolia. Faktor  Exacta .  9(3).  200-206. DOI: http://dx.doi.org/10.30998/faktorexacta.v9i3.87
9
Padmasari,  P.  D.,  Astuti,  K.  W.,  &  Warditiani,  N.  K. (2013).  Skrining  fitokimia  ekstrak  etanol  70% rimpang bangle (Zingiber
purpureum Roxb.). Jurnal Farmasi Udayana , 2 (4).
Pratami,  D.  K.,  Desmiaty,  Y.,  Simorangkir,  E.  M.,  & Faradhila,  D.  (2021).  Standardisasi  dan  uji aktivitas antioksidan ekstrak bahan alam propolis untuk  terapi  infeksi  SARS-CoV2. Jurnal  Ilmu Kefarmasian Indonesia , 19 (2), 272-280.
Puspitasari, L., Swastini, D. A., & Arisanti, C. I. A. (2013). Skrining fitokimia ekstrak etanol 95% kulit buah manggis (Garcinia mangostana L.). Jurnal Farmasi Udayana , 2 (3), 1-4.
Putri, W. S.,  Warditiani, N.  K.,  dan Larasanty, L.  P.  F.
(2013).  Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Etil  Asetat Kulit  Buah  Manggis  (Garcinia  mangostana  L). Journal Pharmacon, 09 (4), 56– 59.
Rahmayani,  N.,  Nazaruddin,  N.,  &  Amaro,  M.  (2021).
PENGARUH KONSENTRASI PROPOLIS TERHADAP  MUTU  KIMIA,  MIKROBIOLOGI DAN ORGANOLEPTIK YOGHURT. Jurnal Teknologi Pangan , 15 (1). DOI: https://doi.org/10.33005/jtp.v15i1.2743
Rakhmat,  A.  S.,  Hasyim,  W.,  &  Huda,  M.  (2021).
Meningkatkan  Pendapatan  Masyarakat  melalui Program Kemitraan Budidaya Lebah Trigona. IKRA-ITH ABDIMAS , 4 (3), 230-235.
Riendriasari,  S.  D.,  &  Krisnawati,  K.  (2017).  Produksi propolis  mentah  (raw  propolis)  lebah  madu trigona spp di pulau lombok. ULIN: Jurnal Hutan Tropis , 1 (1). DOI: http://dx.doi.org/10.32522/ujht.v1i1.797
Rismawati, S. N., & Ismiyati, I. (2017). Pengaruh variasi pH  terhadap  kadar  flavonoid  pada  ekstraksi propolis dan karakteristiknya sebagai
antimikroba. Jurnal  Konversi , 6 (2),  89-94.  DOI: https://doi.org/10.24853/konversi.6.2.89-94
Rivera-Yañez,  C.  R.,  Ruiz-Hurtado,  P.  A.,  Mendoza- Ramos, M. I., Reyes-Reali, J., García-Romo, G. S., Pozo-Molina,  G.,  Rivera-Yañez,  N.  (2021).
Flavonoids  present  in  propolis  in  the  battle against photoaging and psoriasis. Antioxidants , 10(12), 2014.
https://doi.org/10.3390/antiox10122014
Sa’adah, L. (2010). Isolasi dan identifikasi senyawa tanin dari  daun  belimbing  wuluh  (Averrhoa  bilimbi l.). Universitas  Islam  Negeri  (UIN)  Maulana  Malik Ibrahim, Malang .
Sativa,  N.,  &  Agustin,  R.  (2018).  Analisis  uji  kadar senyawa  dan  uji  antioksidan  ekstrak  propolis coklat  dari  lebah Trigona  sp . JAGROS:  Jurnal Agroteknologi  dan  Sains  (Journal  of  Agrotechnology Science) , 2 (2), 61-68.
Suhendra,  S.  T.,  &  Feby  Nopriandy,  S.  T.  (2021). Lebah Trigona: Petunjuk Budidaya dan Teknis Panen Madu .
Penerbit Insan Cendekia Mandiri.
Šuran, J., Cepanec, I., Mašek, T., Radić, B., Radić, S., Tlak Gajger, I., & Vlainić, J. (2021). Propolis extract and its  bioactive  compounds—From  traditional  to modern extraction technologies. Molecules , 26 (10), 2930. https://doi.org/10.3390/molecules26102930
Suriawanto,  N.,  &  Setyawati,  E.  (2021).  PENGARUH PEMBERIAN  EKSTRAK  PROPOLIS  LEBAH TANPA  SENGAT  PADA  PENYEMBUHAN
LUKA BAKAR TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus). Jurnal Bioteknologi & Biosains Indonesia (JBBI) , 8 (1), 68-76. DOI: https://doi.org/10.29122/jbbi.v8i1.4585
Susanti, N. M. P., Budiman, I. N. A., & Warditiani, N. K. (2014).  Skrining  fitokimia  ekstrak  etanol  90% daun  katuk  (Sauropus  androgynus  (L.) Merr.). Jurnal Farmasi Udayana , 3 (1), 83-86.
Sylvia, D., Safitri, M., & AlHuda, Y. R. (2022). Physical Properties  Test  On  The  Formulation  Of  Honey Propolis (Trigona Sp) Scrub and Aloe Vera (Aloe Vera)  Skin  For  Body  Treatment. Jurnal  Ilmiah Farmako  Bahari  Diana  Sylvia , 13 (2).  DOI: http://dx.doi.org/10.52434/jfb.v13i2.1407
Thamrin,  A.  (2016).  Uji  Fitokimia,  Toksisitas  serta Antioksidan Ekstrak Propolis Pembungkus Madu
Lebah  Trigona  Incisa  dengan  Metode  2,  2- diphenyl-1-picrylhidrazyl  (DPPH). Jurnal  Kimia Mulawarman , 14 (1). 54-60.
Vifta,  R.  L.,  &  Advistasari,  Y.  D.  (2018).  Skrining Fitokimia,  Karakterisasi,  dan  Penentuan  Kadar Flavonoid  Total  Ekstrak  dan  Fraksi-Fraksi  Buah Parijoto  (Medinilla  speciosa  B.).  In Prosiding Seminar Nasional Unimus (Vol. 1), pp. 8-14.
Widayanti, S. M., Permana, A. W., & Kusumaningrum, H.  D.  (2009).  Kapasitas  dan  kadar  antioksidan ekstrak  tepung  kulit  buah  manggis  (Garcinia mangostana  L.)  pada  berbagai  pelarut  dengan metode maserasi. Indonesian Journal of Agricultural Postharvest
Research , 6 (2),
61-68. DOI: https://dx.doi.org/10.21082/jpasca.v6n2.2009.61 -68
Wulansari,  I.  D.,  Admadi,  B.,  &  Mulyani,  S.  (2020).
Pengaruh Suhu Penyimpanan
terhadap Kerusakan  Antioksidan  Ekstrak  Daun  Asam (Tamarindusindica  L). J.  Rekayasa  Dan  Manaj. Agroindustri , 8 (4),
544-550.
DOI:
https://doi.org/10.24843/JRMA.2020.v08.i04.p0
7
Yıldırım, H. K. (2022). Assessment of propolis treated by different extraction methods. Brazilian Archives of
Biology
and Technology , 65 . 2-11. DOI: https://doi.org/10.1590/1678-4324-2022210251
Zahra, N. N., Muliasari, H., Andayani, Y., & Sudarma, I. M. (2021). Karakteristik fisikokimia ekstrak madu dan  propolis  Trigona  sp.  asal  Lombok Utara. Jurnal  Agrotek  Ummat , 8 (1),  7-14.  DOI: https://doi.org/10.31764/jau.v8i1.3826