POTENSI AFRODISIAK KANDUNGAN AKTIF BUAH CABE JAWA ( Piper retrofractum Vahl) PADA TIKUS JANTAN GALUR WISTAR
Aphrodisiac Potency of the Active Constituents of Piper retrofractum Vahl Fruit in Male Wistar Rats
Siti Muslichah 1)
1) Dosen Bagian Biologi Farmasi, Fakultas Farmasi UNEJ Email:siti.m3@gmail.com

## ABSTRACT
Java long pepper (Piper retrofractum Vahl) is one of the Indonesian original plants having aphrodisiac activity. This study was aimed to isolate piperine and to evaluate aphrodisiac potency of piperine and piperine-free insoluble n-hexane fraction from ethanolic extract of P. retrofractum. Twenty five male rats were randomized into 5 groups. Oral repeated administration once a day for 27  days  were  given  to  andriol  group  (0.72  mg/day),  CMC-Na  1%,  piperine  (1.6  mg/kg  body weight),  piperine-free  insoluble  n-hexane  fraction  (2.1  mg/kg  body  weight),  insoluble  n-hexane fraction  (31.72  mg/kg  body  weight).  Rat’s  sexual  behavior  including  sexual  introduction  and climbing were observed in day 0, 1, 3, 5, 7, 11, 15, 19, 23, and 27. Normal and homogenous data were analyzed statistically with one-way ANOVA, followed by LSD test. The result showed that the administration  of  andriol,  piperine,  piperine-free  insoluble  n-hexane  fraction,  and  total  insoluble n-hexane  fraction  has  a  significant  increase  in  the  frequency  of  introduction,  compared  to  the group  of  CMC-Na  1%  (p<0.05).  There  was  also  a  significant  increase  of  piperine  and  piperine- free insoluble n-hexane fraction in the frequency of climbing (p<0.05).
Keywords: Piper retrofractum Vahl, sexual behavior, piperine, aphrodisiac

## PENDAHULUAN
Afrodisiak berasal dari nama Aphrodite , dewi kecantikan, cinta, dan seks dalam  mitos  Yunani.  Afrodisiak  adalah semua  bahan  (obat  dan  makanan)  yang dapat membangkitkan gairah seksual (Pallavi et al., 2011). Cabe jawa merupakan salah  satu  tanaman  yang  mempunyai potensi  sebagai  afrodisiak.  Ekstrak  cabe jawa  mengandung  senyawa-senyawa  yang di  duga  mempunyai  efek  afrodisiak.  Cabe jawa  digunakan  sebagai  afrodisiak  karena mempunyai  efek  androgenik  dan  anabolik (Sa’roni et  al .,  1989).  Ekstrak  cabe  jawa dosis  3,75  mg  yang  diberikan  pada  anak ayam  mempunyai  respon  yang  tidak berbeda nyata dengan pemberian metiltestosteron dosis 500 μg/100 gram BB (Wahjoedi et  al .,  2004).  Ekstrak  cabe  jawa juga  dapat  meningkatkan  kadar  testosteron pada pria hipogonad (Moeloek et al ., 2009).
Cabe jawa secara empiris digunakan oleh masyarakat sebagai analgetik, antipiretik,  mencegah  mulas,  stimulansia, sakit  gigi,  lemah  syahwat,  dan  lain-lain (Nuraini, 2003; Dalimarta, 1999; Muslisah, 2001). Kandungan minyak atsirinya berefek sebagai  antibakteri,  rasa  pedas  piperinnya menghangatkan dan melancarkan peredaran darah serta menyegarkan (Supriyadi, 2001). Selain  itu  piperin  juga  mempunyai  efek antiinflamasi  dan  antiartritis  (Bang et  al. , 2009),  efek  antidepresan  (Li et  al .,  2007), antikonvulsan  dan  relaksasi  otot  (Pei, 1983).
Penelitian
Dwiprastyo (2010) menunjukkan  bahwa  fraksi  tak  larut n - heksana ekstrak etanolik cabe  jawa  berefek afrodisiak  sementara  fraksi n -heksananya tidak berefek. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi  piperin  dari  fraksi  tak  larut n - heksana  ekstrak  etanolik  cabe  jawa  dan melihat pengaruh dari piperin dan fraksi tak
larut n -heksana  bebas  piperin  terhadap perilaku  seksual  tikus  jantan.  Dosis  yang diberikan  pada  tikus  adalah  dosis  dari penelitian  Ikawati  (2007)  yaitu  500  mg/kg BB dikalikan rendemen hasil fraksinasi dan isolasi.

## METODE PENELITIAN

## Rancangan Penelitian
Jenis penelitian ini adalah penelitian true  experimental  laboratories . Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium Biologi Farmasi dan Laboratorium Farmakologi  dan  Toksikologi  Universitas Gadjah  Mada  pada  bulan  Maret  -  Juni 2011.

## Rancangan Percobaan
Pada  penelitian  ini  digunakan rancangan  percobaan post  test  only control  group  design dengan  3  kelompok perlakuan,  1  kelompok  kontrol  negatif, dan  1  kelompok  kontrol  positif.  Masing- masing  kelompok  dilakukan  perlakuan dengan 5 replikasi.

## Bahan dan Alat
Simplisia  cabe  jawa  berasal  dari pengumpul  di  Pasar  Bringharjo  yang mendapatkan  kiriman  dari  petani  di daerah  Wonogiri.  Identifikasi  simplikasi buah  cabe  jawa  dilakukan  di  Bagian Biologi  Farmasi,  Universitas  Gadjah Mada,  Yogyakarta.  Senyawa  pembanding piperin  dengan  kemurnian  97%  (Aldrich, USA).  Pelarut  yang  digunakan  adalah etanol  95%  dan n -heksana.  Bahan  kimia lain  adalah  KOH,  toluena-etil  asetat  (7:3) v/v  berderajat  analisis,  pereaksi  semprot vanilin  asam  sulfat,  CMC-Na  kualitas pharmaceutical  grade (Daiichi,  Korea), dan  Andriol  ( Testosterone  undecanoat ) kualitas pharmaceutical  grade .  Alat-alat utama  yang  digunakan  adalah  maserator, rotary evaporator , alat-alat gelas, lempeng  KLT, chamber, dan  lampu  UV (254 dan 365 nm).

## Hewan uji
Tikus putih jantan galur Wistar yang sehat dan belum pernah kawin sebelumnya, berumur  2,5-3  bulan  dengan  berat  150-250 gram  dan  tikus  betina  umur  2,5-3  bulan dengan  berat  150-200  gram.  Hewan  uji diperoleh  dari  Laboratorium  Farmakologi dan Toksikologi Fakultas Farmasi UGM.

## Metode Analisis
Sebanyak  750  g  simplisia  kering buah  cabe  jawa  ditimbang,  diserbuk menggunakan  mesin  penyerbuk  kemudian diekstraksi  menggunakan  metode  maserasi dengan  pelarut  etanol  96%.  Maserasi dilakukan  selama  3  hari  dengan  cara  1 bagian  serbuk  buah  cabe  jawa  dimasukkan dalam bejana lalu ditambah 5 bagian etanol 96%  teknis.  Dilakukan  pengulangan  proses yang sama.
Ekstrak  kental  tersebut  difraksinasi menggunakan n -heksana dengan cara ekstrak kental dimasukkan dalam erlenmeyer  kemudian  ditambahkan n - heksana dan divortex. Setelah divortex akan didapat  bagian  yang  larut n -heksana  dan bagian  tak  larut n- heksana  atau  fraksi  tak larut n -heksana.  Fraksi n -heksana  diambil, kemudian  fraksi  tak  larut n -heksana dikocok kembali dengan n -heksana menggunakan  cara  dan  pelarut  yang  sama hingga  semua  zat  yang  larut  dalam n - heksana  dapat  terpisah  dengan  baik  atau sudah  tidak  ada  bagian  yang  terlarut  ke dalam n -heksana. Fraksi tak larut n -heksana diuapkan  hingga  didapat  fraksi  kental  tak larut n -heksana.
Isolasi  piperin  dilakukan  dengan  cara bagian yang tak larut n -heksana ditambahkan  larutan  KOH-etanol  10%, akan terbentuk endapan, kemudian dipisahkan  bagian  sari  dengan  bagian endapan  melalui  kertas  saring.  Endapan tersebut dibuang. Bagian sari yang mengandung piperin diambil dan didiamkan  di  lemari  pendingin  sampai terbentuk  kristal,  kristal  yang  terbentuk (piperin)  disaring,  dicuci  dengan  alkohol
dingin, dikeringkan dalam lemari pengering  pada  suhu  40 0 C  selama  45 menit.  Cairan  sisa  pembentukan  kristal piperin diambil, dipekatkan, dan digunakan  sebagai  bahan  uji  (fraksi  tak larut n -heksana  bebas  piperin).  Piperin hasil isolasi dan piperin standar kemudian ditotolkan  pada  lempeng  kromatografi lapis  tipis  dengan  pengembang  toluena  : etil  asetat  (7:3)    dan  penampak  bercak anisaldehida dalam asam sulfat. Fraksi tak larut n -heksana  bebas  piperin  dan  fraksi tak  larut n -heksana  ditotolkan  pada lempeng  kromatografi  lapis  tipis  dengan pengembang  toluena  :  etil  asetat  (7:3) dan penampak bercak vanilin asam sulfat.

## Pengelompokan  hewan  dan  pemberian bahan uji
Tikus  jantan  sebanyak  25  ekor dibagi  5  kelompok  masing-masing  5  ekor tikus.  Pemberian  berulang  per-oral  sekali sehari  dilakukan  selama  27  hari  pada kelompok kontrol CMC-Na 1%, pembanding andriol (0,72 mg/hari), piperin (1,6 mg/kg BB), fraksi tak larut n - heksana  bebas  piperin  (29,1  mg/kg  BB), fraksi  tak  larut n -heksana  (31,72  mg/kg BB).  Perhitungan  dosis  menggunakan rumus  =  dosis  x  rendemen.  Rumus tersebut  diperoleh  dari  dosis  serbuk  buah cabe  jawa  dari  penelitian  Ikawati  (2007) yaitu  500  mg/kg  BB  dikalikan  dengan rendemen masing-masing fraksi  dan isolat.  Pemberian  bahan  uji  dilakukan secara  per  oral  sekali  sehari  pada  jam 07.00-09.00.

## Uji perilaku seksual hewan tikus jantan
Tikus  betina  estrus  dimasukkan  ke dalam kotak yang digunakan untuk kawin setelah  tikus  jantan  diadaptasikan  selama 10  menit.  Hewan  uji  diamati  perilaku seksualnya  pada  hari  ke  0,  1,  3,  5,  7,  11, 15,  19,  23, dan  27  pada  jam  18.00-20.00. Pengamatan  dilakukan  selama  1  jam, dicatat  frekuensi introduction dimana tikus  jantan  mendekati  tikus  betina  dan melakukan kissing  vagina serta  frekuensi climbing yaitu  keadaan  tikus  jantan
menindih  tikus  betina  dari  belakang  baik ada atau tidak ada penetrasi dan ejakulasi.

## Analisis statistik
Data  pengamatan  perilaku  seksual yaitu  jumlah introduction dan climbing disajikan  dalam  bentuk  mean  ±  SE.  Dari data  frekuensi introduction dan climbing yang  diperoleh  kemudian  dibuat  kurva frekuensi introduction dan climbing vs waktu yaitu hari ke-0, 1, 3, 5, 7, dan setelah itu  tiap  4  hari  sekali  selama  27  hari.  Lalu dihitung  luasan  a rea  under  curve (AUC) pada  masing-masing  tikus.  Untuk  perilaku seksual  dibuat  kurva  frekuensi  vs  waktu lalu  dianalisis  menggunakan  ANOVA  dan dilanjutkan  dengan  uji  LSD  dengan  taraf kepercayaan  95%.  Nilai  P<0,05  dianggap signifikan.  Analisis  statistik  menggunakan SPSS  versi  19,  sedangkan  grafik  dibuat dengan menggunakan program excel.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Isolasi dan Identifikasi
Efek  afrodisiak  dari  ekstrak  etanol maupun  ekstrak n -heksana  buah  cabe  jawa telah  diteliti  yang  menunjukkan  hasil ekstrak  etanol  berefek  sebagai  afrodisiak sementara ekstrak n -heksana tidak (Ikawati, 2007).  Juga  telah  dilakukan  penelitian menggunakan fraksi tak larut n -heksana dan fraksi  larut n -heksana  ekstrak  etanol  buah cabe  jawa  yang  hasilnya  menguatkan penelitian  tersebut,  dimana  fraksi  tak  larut n -heksana  berefek  afrodisiak  sementara fraksi n -heksananya tidak berefek (Dwiprasetyo, 2010).
Berdasarkan penelitian tersebut kemudian  dilakukan  isolasi  piperin  yang merupakan  salah  satu kandungan dari  buah cabe  jawa  yang  diduga  berefek  afrodisiak dalam  fraksi  tak  larut n -heksana.  Proses penyarian  menghasilkan  fraksi  tak  larut n - heksana  sebesar  47,58  g  atau  rendemennya 6,34%.  Dari  fraksi  ini  dilakukan  isolasi piperin,  diperoleh  kristal  piperin  2,4  g, sehingga rendemenya adalah 0,32%. Kondisi  piperin  yang  diperoleh  berwarna
kuning  pucat,  rasa  pedas,  sedangkan fraksi tak larut n -heksana berwarna coklat tua. Isolat piperin  diperiksa  kebenarannya dengan  membandingkan  spektra  isolat piperin  dengan  piperin  standar.  Pada spektra  UV  isolat  piperin  menunjukkan adanya  peak  dengan  panjang  gelombang
maksimal  342,7  nm  hampir  sama  dengan spektra piperin standar yang menunjukkan peak pada panjang gelombang  343,4  nm  ( Gambar  1 ), sehingga  kesimpulannya  keduanya  adalah senyawa yang sama yaitu piperin.
Gambar 1. Spektra isolat piperin (A) dan piperin standar (B)
Analisis kualitatif kromatografi lapis  tipis  dilakukan  terhadap  kedua  fraksi hasil  fraksinasi  ( Gambar  2 ).  Analisis kualitatif  ini  bertujuan  untuk  memastikan apakah  telah  terjadi  pemisahan  kandungan senyawa pada masing-masing fraksi. Pemisahan  kandungan  senyawa  dapat diketahui dengan melihat harga Rf ( retention  factor )  dari  setiap  bercak  yang muncul.  Harga Rf bercak  yang  muncul dibandingkan  antara  fraksi  tak  larut n - heksana  dengan  fraksi  tak  larut n -heksana bebas  piperin,  sehingga  dapat  dilihat
pemisahan komponen yang ada pada kedua fraksi  utamanya  bercak  senyawa  piperin. Harga  Rf  isolat  piperin  dan  piperin  standar adalah  0,5.  Adanya  piperin  pada  analisis KLT  dilihat  pada  panjang  gelombang  254 dan  366  nm  serta  disemprot  dengan penampak  bercak  vanilin  asam  sulfat  lalu dipanaskan.  Bercak  pada Rf 0,42  berwarna ungu  kehijauan  di  duga  adalah  saponin karena  dengan  fase  gerak  toluen:etil  asetat (7:3)  senyawa  polar  seperti  saponin  akan tertahan  pada  fase  diam  sehingga  harga Rf rendah.
B A
Gambar  2.  Kromatogram  fraksi  tak  larut n -heksana  bebas  piperin  dan  fraksi  tak  larut n -heksana total  pada  silika  gel  60  F 254 dengan  fase  gerak  toluena:etil  asetat  (7:3)  dan  penampak bercak vanillin-asam sulfat. A (fraksi tak larut n -heksana), B (fraksi tak larut n -heksana bebas piperin), dan C (piperin standar)

## Hasil Pengamatan Perilaku Seksual
Piperin dan fraksi tak larut n -heksana bebas  piperin  diberikan  secara  per  oral  pada tikus  jantan  untuk  mengetahui  manakah  dari keduanya  yang  mempunyai  efek  afrodisiak. Parameter  perilaku  seksual  yang  digunakan adalah introduction dimana  tikus  jantan mendekati tikus betina dan melakukan kissing
vagina .  Hasil  tabulasi  frekuensi introduction digunakan  untuk  menghitung  AUC  masing- masing hewan uji yang selanjutnya digunakan untuk analisis statistik. Luas AUC menggambarkan  keseluruhan  efek  selama pengamatan  setelah  pemberian  bahan  uji. Harga rata-rata AUC tiap kelompok disajikan dalam Tabel 1.
Tabel 1. Rata-rata AUC frekuensi introduction tikus selama 27 hari pengamatan dengan 5 ekor tikus jantan tiap perlakuan
Keterangan: hari ke-0, 1, 3, 5, 7, 11, 15, 19, 23, dan 27 *p<0,05 dibandingkan dengan kontrol CMC-Na 1%
Berdasarkan Gambar 3 dapat dilihat bahwa pemberian sediaan fraksi tak larut n -heksana bebas piperin, kelompok yang diberi andriol dan  fraksi  tak  larut n -heksana  total
mempunyai selisih harga rata-rata AUC yang dekat,  dimana  ketiga  sediaan  tersebut memberikan  efek  yang  hampir  sama  dalam meningkatkan frekuensi introduction .
Perlakuan N Nilai AUC Kontrol (CMC-Na 1 %) 5 501,60 ± 52,60 Andriol 5 848,40 ± 24,27* Piperin 5 773,30 ± 73,32* Fraksi tak larut n -heksana bebas piperin 5 863,80 ± 101,39* Fraksi tak larut n -heksana total 5 844,5 ± 57,83*

## A     B   C
Gambar  3.  Histogam  rata-rata  frekuensi introduction tikus  selama  27  hari  dengan  5  ekor  tikus jantan tiap perlakuan. *p<0,05 dibandingkan kontrol CMC-Na 1%.
Dari  hasil  statistik  menunjukkan  bahwa data  pengamatan introduction adalah normal  dan  homogen  (p>0,05)  sehingga bisa dilakukan uji Anava. Untuk pengamatan introduction nilai anava 0,01 (p  <  0,05)    jadi  dilanjutkan  dengan  uji LSD.  Dari  hasil  analisis,  pemberian andriol,  piperin,  fraksi  tak  larut n - heksana  bebas  piperin,  dan  fraksi  tak larut n -heksana  total  terdapat  perbedaan yang  signifikan  dengan  CMC-Na  1% (p<0,05). Sementara tidak ada beda nyata antar  kelompok  yang  lain  (p>0,05).
Parameter selanjutnya adalah pengamatan frekuensi
climbing.
Climbing atau
penunggangan menggambarkan  terjadinya  ereksi  tikus jantan  saat  bertemu  dengan  tikus  betina. Peristiwa climbing ini  biasanya  dimulai dengan introduction dan berlanjut hingga sampai terjadinya penetrasi dan ejakulasi.  Tetapi  terkadang climbing terjadi  langsung  tanpa introduction dan
penetrasi .  Sehingga  frekuensi climbing tikus  jantan  terhadap  tikus  betina  yang dihitung adalah climbing diawali introduction namun  tanpa  penetrasi  dan ejakulasi, climbing diawali introduction dan  diakhiri  penetrasi  dan  ejakulasi, climbing tanpa introduction tetapi diakhiri  penetrasi  dan  ejakulasi,  dan climbing tanpa introduction dan  juga tanpa penetrasi dan ejakulasi.
Data perhitungan frekuensi climbing dalam  bentuk  rata-rata  AUC aktivitas  seksual  ( climbing )  terhadap waktu tiap perlakuan tersaji  dalam Tabel 2 dan  histogram Gambar  4 .  Data  AUC aktivitas seksual terhadap waktu menggambarkan keseluruhan jumlah climbing selama 27 hari selama pengamatan  yang  dilakukan.  Dari  data juga  akan  dapat  diketahui  efek  total sediaan yang diberikan terhadap frekuensi climbing yang  terjadi  selama 27 hari pengamatan.
501.6
848.4* 773.3* 863.8* 844.5* 0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 CMC-Na 1% Andriol Piperin
Fraksi tak larut heksan bebas piperin Fraksi tak larut heksan total AUC In tr odu c ti on
Tabel 2. Rata-rata AUC frekuensi climbing tikus selama 27 hari pengamatan dengan 5 ekor tikus tiap perlakuan
Keterangan: hari ke-0, 1, 3, 5, 7, 11, 15, 19, 23, dan 27
*kelompok  perlakuan  dibandingkan  dengan  kontrol  CMC-Na  1%;  a,  dibandingkan dengan andriol; b, dibandingkan dengan piperin p<0,05.
Berdasarkan  histogram  rata-rata  AUC frekuensi climbing pemberian  fraksi  tak larut n -heksana  total  mempunyai  nilai rata-rata  AUC  paling  tinggi.  Dwiprastyo (2010)  menyatakan  bahwa  nilai  rata-rata AUC perlakuan  fraksi tak  larut n -heksana tidak  berbeda  jauh  dengan  perlakuan serbuk  buah  cabe  jawa.  Hal  ini  berarti efek  total  pemberian  fraksi  tak  larut n -
heksana  hampir  sama  dengan  efek  total pemberian sediaan serbuk buah cabe jawa. Sementara  itu  pemberian  fraksi  tak  larut n -heksana bebas piperin  memberikan efek lebih tinggi dibandingkan dengan pemberian  andriol  pada  dosis  0,72  mg. Sedangkan pemberian CMC-Na 1%  rata- rata AUC adalah 518,4 seperti ditunjukkan pada Gambar 4.
.  Gambar  4.  Histogram  rata-rata  frekuensi climbing tikus  vs  waktu  selama  27  hari  pengamatan dengan 5  ekor tikus jantan tiap perlakuan.*dibandingkan kelompok  kontrol  CMC-Na 1%; a, dibandingkan andriol; b , dibandingkan piperin , p<0,05.
Pemberian  andriol,  piperin,  fraksi  tak  larut n -heksana bebas piperin, dan fraksi tak larut n -heksana  total  masing-masing  mempunyai perbedaan  yang  signifikan  dibandingkan dengan kontrol CMC-Na 1%. Hal ini berarti pemberian  ke  empat  perlakuan  dapat meningkatkan frekuensi climbing pada tikus jantan.  Pada  perlakuan  dengan  fraksi  tak larut n -heksana  bebas  piperin  maupun fraksi  tak  larut n -heksana  total  jika dibandingkan  dengan  pemberian  andriol memberikan  perbedaan  yang  bermakna dengan nilai masing-masing 0,09.

## Pembahasan
Pada  umumnya  tanaman yang berkhasiat  sebagai  afrodisiak  mengandung senyawa  turunan  saponin,  alkaloid  dan senyawa  lain  yang  berkhasiat  sebagai penguat tubuh serta memperlancar peredaran darah (Khomsan, 2007). Beberapa  kandungan  kimia  cabe  jawa adalah  turunan  steroid,  alkaloid  terutama piperin,  dan  saponin.  Efek  afrodisiak  dari ekstrak  etanol  maupun  ekstrak n -heksana buah  cabe  jawa  telah  diteliti  yang menunjukkan  hasil  ekstrak  etanol  berefek
518.4 686* 694.2* 879* ab 1037.3* ab 0 200 400 600 800 1000 1200 CMC-Na 1% Andriol Piperin
Fraksi tak larut heksan bebas piperin Fraksi tak larut heksan total AUC C li m bi n g
Perlakuan N Nilai AUC Kontrol (CMC-Na 1%) 5 518,40 ± 27,47 Andriol 5 686,00 ± 46,70* Piperin 5 694,20 ± 49,26* Fraksi tak larut n -heksana bebas piperin 5 879,00 ± 32,22* a,b Fraksi tak larut n -heksana total 5 1037,30 ± 70,17* a,b
sebagai  afrodisiak  sementara  ekstrak n - heksana  tidak  memberikan  efek  afrodisiak (Ikawati,  2007).  Juga  telah  dilakukan penelitian  menggunakan  fraksi  tak  larut n - heksana  dan  fraksi  larut n -heksana  ekstrak etanolik  buah  cabe  jawa  yang  hasilnya menguatkan  penelitian  tersebut,  dimana fraksi tak larut n -heksana berefek afrodisiak sementara  fraksi n -heksana  tidak  berefek (Dwiprastyo, 2010).
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah untuk membuktikan apakah senyawa piperin atau fraksi tak larut n -heksana bebas piperin yang mempengaruhi perilaku seksual  terhadap  tikus  jantan.  Piperin  tidak larut  dalam  petroleum  eter  (Sudarsono et al .,  1996),  yang  mempunyai  kontanta dielektrik 2,00. Konstanta dielektrik merupakan  ukuran  kasar  polaritas. n - Heksana  mempunyai  konstanta  dielektrik 1,88,  sehingga  piperin  juga  tidak  larut dalam n -heksana atau sedikit larut dalam n - heksana. Skrining fitokimia dalam fraksi tak larut n -heksana menunjukkan adanya metabolit  alkaloid  piperin  dan  saponin. Isolat piperin menunjukkan harga Rf yang sama  dengan  piperin  standar  yaitu  0,5. Piperin  dikenal  dapat  mengganggu  proses reproduksi.  Pada  tikus  betina  piperin menghambat  implantasi,  menyebabkan keguguran dan mengganggu keseimbangan  estrogen-progesteron  yang dibutuhkan  untuk  menjaga  kehamilan (Piyachaturawat et  al , 1982). Piperin  juga dilaporkan meningkatkan kadar gonadotropin  serum  dengan  mengganggu signal  umpan  balik  pada pituitary dan menurunkan konsentrasi testosteron intratestikular  (Malini et  al ,  1999).  Pada penelitian  ini  pemberian  piperin  dengan dosis  1,6  mg/kg  BB  pada  tikus  jantan dapat meningkatkan frekuensi introduction ( kissing  vagina )  maupun climbing tikus  jantan  secara  signifikan dibanding  dengan  kontrol  CMC-Na  1%. Secara  umum  terdapat  bukti  bahwa alkaloid  mempunyai  sifat ergogenic yang menyebabkan vasodilatasi pembuluh darah  yang  berakibat  terjadinya  ereksi (Agmo,  1997  didalam  Yakubu,  2010).
Jadi  efek  piperin  dalam  meningkatkan perilaku  seksual  tidak  secara  hormonal tapi  non  hormonal  karena  aktivitasnya sebagai  stimulan  maupun  vasodilator. Meningkatnya aliran darah menuju organ- organ reproduksi akan memperbaiki fungsi  organ  reproduksi  pria.  Selain  itu piperin  juga  berefek  antidepresan  (Li et al ,  2007),  menurunkan  anxietas  dan stress.  Hasrat  seksual  kemungkinan  juga dipengaruhi oleh depresi, stress (Kumar et al ,  2001)  dan anxietas (Rowland et  al , 1987).
Pada  penelitian  ini  parameter perilaku  seksual  yang  diamati  adalah introduction dan climbing baik  ada  atau tidak  ada coitus .  Terjadinya coitus mensyaratkan  tikus  betina  yang  reseptif terhadap  tikus  jantan,  sementara  untuk pengamatan dalam waktu lama dan sering seperti  dalam  penelitian ini  terjadi kesulitan  mendapatkan  tikus  betina  yang reseptif  dalam  jumlah  cukup.  Jika  tetap dilakukan  pengamatan  terhadap coitus dikhawatirkan hasilnya bias.
Fraksi  tak  larut n -heksana  bebas piperin  maupun  fraksi  total  mengandung turunan  steroid  dalam  bentuk  glikosida (saponin  steroid)  yang  larut  air  dan  etanol, dalam lambung akan lepas ikatan glikosidanya menjadi aglikon sterol. Sediaan  non  hormonal  non  sintetik  ekstrak tumbuhan Tribulus terrestris telah digunakan  secara  luas  untuk  mengobati disfungsi ereksi. Sediaan tersebut mengandung  furostanol  suatu  saponin steroid yang terbukti mampu meningkatkan potensi  seks  dan  fertilitas  (Gauthaman  and Adaikan,  2008).  Furanosterol,  stigmasterol dan sitosterol  mempunyai kemiripan rumus kimia  dan  sifat.  Keduanya  sama-sama mempunyai  gugus  OH  yang  terikat  pada atom karbon ke-3 dari inti siklopentanoprehidro-fenantren, sehingga mampu mengadakan ikatan dengan oligosakarida. Akibat ikatan glikosida yang terbentuk  menyebabkan  saponin  steroid larut  dalam  air.  Dengan  demikian  substrat yang  diduga  sebagai  salah  satu  pemicu timbulnya perilaku seksual setelah
diberikan  fraksi  tak  larut  heksan  bebas piperin  dan  fraksi  tak  larut  heksan  total merupakan saponin steroid.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan, dapat diambil kesimpulan:
1. Piperin  dosis  1,6  mg/kg  bb  dapat meningkatkan  perilaku  seksual  tikus jantan.
2. Fraksi  tak  larut n -heksana  bebas piperin ekstrak etanolik buah cabe jawa dosis 29,10/mg kg bb dapat meningkatkan  perilaku  seksual  tikus jantan.

## Saran
Perlu  dilakukan  pengujian  dengan pemberian  piperin  dengan  beberapa  variasi dosis untuk mendapatkan efek yang optimal dalam meningkatkan  perilaku  seksual maupun pengaruhnya pada kadar testosteron.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih kepada  Prof.  Dr.  Suwidjiyo  Pramono, DEA,  Apt  dan  Prof.  Dr.  Sugiyanto,  SU, Apt yang banyak membantu dan membimbing penulis selama penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Agmo    A  (2001).  Male  Rat  Sexual  Behavior, Brain  Research  Protocols.  1:  203-209 dalam  Yakubu,  and  Akanji,  2010,  Effect of  Aqueous  Extract  of  Massularia acuminate  Stem  on  Sexual  Behavior  of Male  Wistar  Rats, Evidence  –Based Complementary
and Alternative
Medicine .
Bang  JS, Oh  DH , Choi HM , Sur BJ , Lim SJ ,  Kim    JY,Yang    HI,  Yoo    MC,  Hahm DH  and    Kim  KS  (2009).  Anti-
inflammatory  and  antiarthritic  effects  of piperine  in  human  interleukin  1β- stimulated  fibroblast-like  synoviocytes and  in  rat  arthritis  models, Arthritis
Research & Therapy 2009, 11 :R49.
Dalimartha    S  (1999). Atlas  Tumbuhan  Obat Indonesia Jilid I , 25-28. Jakarta.
Dwiprastyo  T  (2010).  Pengaruh  Pemberian Berulang  Fraksi  Heksan  dan  Fraksi  Tak Larut  Heksan  Ekstrak  Etanolik  Cabe Jawa  ( Piper  retrofractum Vahl)  terhadap Efek  Aprodisiaka  Tikus  Jantan, Skripsi , Fakultas  Farmasi  Universitas  Gadjah Mada.
Gauthaman  K,  Adaikan    PG,  Prasad  NRV
(2002). Aphrodisiac Properties of
Tribulus  terrestris  extract  (protodioscin) in  normal  and  castrated  rats,” Life Sciences , 71 (12): 1385-1396.
Ikawati (2007). Pengaruh ekstrak n-heksana dan etanol  70%  buah  cabe  jawa  ( Piper retrofractum Vahl.)  terhadap  minat  tikus putih  jantan  sebagai  parameter  uji aprodisiaka, Skripsi, Fakultas  Farmasi Universitas Setia Budi, Surakarta.
Khomsan  A  (2007). Kembali  perkasa  dengan aprodisiaka ,  ww.bookoopedia.com/pid, Akses 25 Februari 2009.
Kumar V, Singh, PN, Battacharya, SK   (2001).
Antistress Activity of Indian Hypericum  perforatum  L., Indian J.Exp Biol 39:344-349.
Li S, Wang C, Wang M , Li W, Matsumoto  K,
Tang    Y    (2007).  Antidepressant  like effects  of  piperine  in  chronic  mild  stress treated mice and its possible mechanisms,  Life  Sciences  80  (2007) 1373–1381.
Malini    T,  Manimaran    RR,    Arunakaran  J, Aruldas  MM    and  Govindarajulu    P (1999).  Effects  of  piperine  on  Testis  of Albino  Rats, J.Ethnopharmacology .  64: 219-25.
Moeloek  N,  Lestari    SW,  Yurnadi  dan Wahjoedi  B  (2009). Uji  Klinik Ekstrak Cabe  Jawa  ( Piper  retrofractum Vahl)
Sebagai  Fitofarmaka    Androgenik  Pada Pria  Hipogonad, Laporan  Penelitian ,
Departemen Biologi Kedokteran Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta.
Muslisah    F  (2001). Tanaman  Obat  Keluarga , 14-16, Penebar Swadaya.
Nuraini  A  (2003). Mengenal  Etnobotani Beberapa  Tanaman  yang  Berkhasiat Sebagai Aprodisiaka , InfoPOM,Vol
IV,Ed 10, BADAN POM R.I., Jakarta.
Pallavi    KJ,  Ramandeep  S,  Sarabjeet  S,  Karam S,  Mamta  F,  Vinod    S    (2011). Aphrodisiac  agents  from  Medicinal Plants: A Review, J. Chem. Pharm. Res., 3(2): 911-921.
Pei  YQ  (1983).  A  Review  of    Pharmacology and  Clinical  Use  of  Piperine  and ItsDerivatives. Epilepsia , 24: 177–182.
Pitechaturawat  P  and  Pholpramool  C    (1982)  .
Poscoital  antifertility  effect  of  Piperine, Contraception , 26:625-33.
Rowland  DI,  Heiman  Jr,  gladue  BA,  hatch  JP, Doering,  CH,  Weiler    SJ  (1987). Endocrine,  Physicologycal  and  Genital Response  to  Sexual  Arousal  in  Men, Psyconeuroendocrinology , 12: 149-158.
Sa’roni,  Pudjiastuti,  Adjirni  (1989).  Penelitian efek  androgenik  dan  anabolik  buah  cabe jawa. Cermin  Dunia  Kedokteran 1989; 59: 22-24.
Sudarsono,  Pudjoarinto    A,  Gunawan    D, Wahyuono  S,  Donatus    IA,  Drajad  M,
Wibowo  S  dan  Ngatidjan  (1996). Tumbuhan Obat , 130-134 Pusat
Penelitian  Obat  Tradisional  Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Supriadi  (2001). Tumbuhan  Obat  Indonesia: Penggunaan  dan  Khasiatnya ,  25-27, Pustaka Populer, Jakarta
Wahjoedi  B,  Pudjiastuti,  Adjirni,  Nuratmi  B, Astuti  Y  (2004).  Efek  androgenik ekstrak  etanol  cabe  jawa  ( Piper retrofractum Vahl.)  pada  anak  ayam.
Jurnal  Bahan  Alam  Indonesia 2004; 3(2): 201-204.