## PENGARUH KONSENTRASI EKSTRAK ETANOL BUAH
PARE ( Momordica charantia L) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Shigella dysenteriae SECARA IN VITRO

## Sri Rahayu
Universitas Muhammadiyah Banjarmasin Email : rahayu.dds15@gmail.com

## ABSTRAK
Salah  satu  penyakit  saluran  pencernaan  adalah  disentri  yang  ditandai dengan  buang  air  besar  encer  disertai  lendir  dan  darah  lebih  dari  3  kali per  hari. Disentri  disebabkan  oleh  bakteri Shigella  dysenteriae, penyakit  ini  dapat  diobati dengan  tanaman  yang  berkhasiat  sebagai  antibakteri,  salah  satunya  adalah  pare.
Bagian  tanaman  yang  digunakan  adalah  buahnya.  Buah  pare  ( Momordica charantia L)  mengandung senyawa flavonoid yang berkhasit sebagai antibakteri. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  konsentrasi  ekstrak etanol buah pare ( Momordica charantia L) terhadap bakteri Shigella dysenteriae . Aktivitas antibakteri diuji menggunakan metode difusi cakram dengan konsentrasi ekstrak  10%,  25%,  dan  50%.    Zona  bening  yang  terbentuk  di  sekitar  kertas cakram menunjukkan adanya zona hambat.
Hasil  penelitian  ekstrak  etanol  buah  pare  menunjukkan  pada  konsentrasi 10%, 25% dan 50% ada aktivitas antibakteri terhadap bakteri Shigella dysenteriae dengan  diameter  rata-rata  zona  hambat  8,3  mm, 9,3  mm  dan  11,7  mm.  Semakin besar  konsentrasi  ekstrak  etanol  buah  pare  semakin  besar  juga  diameter  zona hambat yang di hasilkan.
Kata kunci : Konsentrasi, ekstrak etanol, buah pare, bakteri Shigella dysenteriae

## ABSTRACT
One of the gastrointestinal diseases are dysentery, which is characterized by  loose,  watery  stools  with  mucus  and  blood  of  more  than  3  times  per  day. Dysentery  caused  by  Shigella  dysenteriae  bacteria,  the  disease  can  be  treated with  an  antibacterial  nutritious  plants,  one  of  which  is  bitter  melon.  Plant  part used  is  fruit.  Bitter  melon  fruit  (Momordica  charantia  L)  contains  flavonoids which efficacious as antibacterials.
This  study  aims  to  determine  the  effect  of  extract  concentrations  against the bacteria Shigella dysenteriae. Antibacterial activity was tested using the disc diffusion  method  with  extract  concentrations  of  10%,  25%  and  50%.  Clear  zone formed around the paper discs showed inhibition zone.
Results showed the ethanol extract of bitter melon extract at concentration 10%, 25% and 50% showed their antibacterial activity against bacteria Shigella dysenteriae  with    average  diameter  of  inhibition  zone  8.3  mm,  9.3  mm  and  11.7 mm.  Increased  concentration  of  bitter  melon  fruit  extract  could  increased inhibition zone.
Keywords  : Concentration,  ethanol  extract,  bitter  melon,  bacteria  Shigella dysenteriae

## PENDAHULUAN
Data  WHO  pada  tahun  2009 menunjukkan  bahwa  penyakit  diare adalah penyebab utama kedua kematian pada  anak  – anak di  bawah lima  tahun.  Diare  akut  disebabkan terinfeksi  bakteri yaitu Shigella dysenteriae. Infeksi shigella disebarkan  oleh  makanan,  jari,  tinja dan  lalat  dari  orang  ke  orang.  Gejala yang  ditimbulkan    peradangan  usus, terutama  di  usus  besar,  yang  dapat menyebabkan  diare  berat  dengan lendir atau darah dalam tinja. Shigella Sp. merupakan keluarga dari Enterobacteriaceae  termasuk  bakteri patogen  gram  negatif  berbentuk batang  yang  bersifat  anaerob.  Infeksi ini  dapat  diobati  dengan  antibiotik seperti ciprofloxacin, ampisillin, tetrasiklin, trimetoprim,- sulfomethoxazole,  dan  kloramfenikol (Jawetz et  al, 2005).  Tetapi  perlu diperhatikan  penggunaan  antibiotik secara  besar  –  besaran  tentunya  akan menimbulkan  resistensi  bagi  bakteri tersebut  (Tjay  dan  Rahardja,  2007). Oleh karena itu perlu adanya alternatif  penggunaan  bahan  alam
sebagai  pilihan  dalam  pengobatan penyakit menular (Achryya et al .,2010).  Salah  satu  tanaman  yang digunakan  secara  empiris  berkhasiat sebagai obat demam, disentri, kencing manis dan radang tenggorokan adalah pare ( Momordica charantia L ) yang  mengandung senyawa alkaloid, saponin, flavonoid, triterpenoid,  dan  asam  momordica (Komala et  al .,  2005).  Penelitian sebelumnya  oleh  Jayanto  (2015) menunjukkan adanya aktivitas antibakteri  pada  ekstrak  daun  daun pare ( Momordica charantia ) terhadap bakteri Staphylococcus aureus.
Penelitian  lainnya  oleh  Mada et  al (2012)  menunjukkan  bahwa  hasil ekstraksi secara maserasi pada ekstrak  etanol    15,6  %  lebih  efisien dari  pada  ekstrak  aquadest  13,4  %. Hasil skrining fitokimia menunjukkan adanya  senyawa  saponin,  steroid, tannin, glikosida, alkaloid dan flavonoid  yang  memiliki  aktivitas antimikroba.  Buah  Pare (Momordica charantia L ) mempunyai daya antibakteri  terhadap  bakteri Subtillis aureus, Bacilullus subtilis dan E. colli
karena  kandungan  senyawa  alkaloid glikosida,  saponin,  resin,  tannin,  dan flavonoid.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilakukan  di
Laboratorium Universitas Muhammadiyah  Banjarmasin.  Jenis penelitian ini adalah penelitian eksperimen.  Determinasi  tanaman dilakukan  di  Laboratorium  FMIPA
Universitas Lambung Mangkurat
Banjarbaru .
Prosedur Penelitian
Sebanyak  200  gram  serbuk simplisia buah pare dimaserasi dengan  etanol  2  L  selama  2  hari sambil  sesekali  digojog,  kemudian disaring menggunakan ekstrak saring. Filtrat yang  diperoleh  diuapkan hingga diperoleh ekstrak kental. Pembuatan Stok Kultur dan
Penyiapan Inokulum
Ambil  koloni  bakteri Shigella dysenteriae dengan  menggunakan jarum ose steril, lalu ditanamkan pada media  nutrient  agar  miring  dengan cara  menggores  kemudian  diinkubasi dalam  incubator  pada  suhu  ±  35˚C selama 24 jam. Kemudian ambil stok kultur  bakteri Shigella  dysenteriae
dengan  menggunakan  jarum  ose steril, setelah itu disuspensikan dalam ampul yang berisi larutan NaCl 0,9% sampai  diperoleh  kekeruhan  yang sama  dengan  larutan  standar  Mc. Farland  dimana  konsentrasi  bakteri 1,5x10 8 CFU/ml.
Uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak etanol buah pare
Media  agar  dituang  kedalam cawan  petri  steril  kemudian  diberi nomor 1-5 sebagai tanda untuk kertas cakram,  nomor  1  yaitu  tanda  untuk kontrol positif (Ampicillin), nomor 2- 4  tanda  untuk  ekstrak  etanol  buah pare dengan berbagai konsentrasi dan nomor 5  tanda untuk  kontrol negatif (etanol  96%).  Selanjutnya  0,1  ml inokulum  dimasukkan  ke  dalam cawan  petri,  diratakan  menggunakan cotton  bud agar  media  dan  suspensi bakteri  tercampur  rata.  Setelah  itu, cakram  kertas  yang  telah  ditetesi dengan  sejumlah  ekstrak  etanol  dan pelarut  ditempatkan  pada  medium padat yang sebelumnya telah diinokulasi bakteri uji pada permukaannya.  Setelah  diinkubasi, dilakukan  pengukuran  diameter  zona hambat disekitar cakram untuk
mengukur  kekuatan  hambatan  dari obat terhadap mikroorganisme.

## Analisa Data
Data  hasil  pengujian  akan dianalisa secara statistik
menggunakan  metode  One  Way Anova dengan taraf kepercayaan 95% atau α = 0,05, dilanjutkan dengan uji Duncan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Buah pare
dimaserasi menggunakan  pelarut  etanol  96%. Pemilihan  metode  ekstraksi  dan pelarut  yang  digunakan  berdasarkan senyawa aktif yang terkandung dalam pare. Buah Pare ( Momordica charantia L)  mengandung  alkaloid, glikosida,  saponin,  resin,  tannin, flavanoid  (Makhija  et  al,  2011). Pembuatan ekstrak pada penelitian ini menggunakan  pelarut  etanol  96% yang  bersifat  universal  sehingga diharapkan  zat  aktif  yang  diperlukan dapat  tertarik  sepenuhnya.  Metode maserasi ini memiliki kelebihan yaitu alat  yang  digunakan  sederhana  dan relatif  mudah  serta  aman  untuk  zat- zat  yang  tidak  tahan  pemanasan. Ekstrak  yang    diperoleh  kemudian
diuapkan  sehingga  diperoleh  ekstrak kental. Ekstrak yang diperoleh kemudian  dibuat  menjadi  beberapa konsentrasi yaitu 10%, 25% dan 50%. Uji  aktivitas  antibakteri  dilakukan dengan  menggunakan  metode  difusi cakram.
Ekstrak diteteskan di atas kertas cakram  sampai  terbasahi  seluruhnya, diamkan  hingga  ekstrak  terserap sempurna,  kemudian  kertas  cakram tersebut diletakkan di atas permukaan agar  yang  telah  digores  bakteri. Lakukan  inkubasi  selama  24  jam pada  suhu  37˚.  Zona  hambat  bakteri dapat  dilihat  setelah  masa  inkubasi selesai  dengan  terbentuknya  zona bening  di  sekitar  kertas  cakram. Pengukuran  zona  hambat  dengan menggunakan penggaris dalam satuan millimeter (mm). Suatu bahan dikatakan mempunyai aktivitas antibakteri apabila diameter hambatan  yang  terbentuk  lebih  besar atau  sama  dengan  6  mm.  Perlakuan tersebut  juga  dilakukan  pada  kontrol negatif  dan  kontrol  positif.  Hasil pengukuran  diameter  zona  hambat dapat  dilihat  pada  Gambar  1  dan Tabel I.
Gambar 1 . Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Buah Pare ( Momordica charantia L) terhadap Bakteri Shigella dysenteriae
Tabel  I .  Hasil  Pengukuran  Diameter  Zona  Hambat    Ekstrak  Etanol  Buah  Pare  ( Momordica charantia L.) Terhadap Bakteri Shigella dysenteriae .
Konsentrasi Ekstrak Diameter Zona Hambat (mm) Rata-Rata Perlakuan I II III 10% 8 mm 9 mm 8 mm 8,3 mm 25% 10 mm 9 mm 9 mm 9,3 mm 50% 12 mm 13 mm 10 mm 11,7 mm Kontrol (+) 36 mm 30 mm 33 mm 33 mm Kontrol (-) 0 mm 0 mm
0 mm 0 mm Replikasi 2 Replikasi 1 Replikasi 3
Menurut  (Susanto et  al ,  2012) persyaratan  diameter  zona  hambat jika lebih  dari 20 mm dikategorikan sangat  kuat,  11  sampai  20  mm dikategorikan kuat, 6 sampai 10 mm dikategorikan sedang dan  5 mm atau kurang  dikategorikan  lemah.  Hasil yang di dapat pada setiap konsentrasi memberikan  zona  hambat  yang berbeda. Hasil penelitian yang diperoleh  pada  konsentrasi  ekstrak buah pare 10% dan 25% memberikan kategori  respon  hambatan  sedang dengan  diameter  zona  hambat  6  mm -  10  mm  dan  pada  konsentrasi  50%, memberikan kategori respon hambatan kuat dengan diameter zona hambat  11  mm  -  20  mm.  Hasil perhitungan  ANOVA  diameter  zona hambat  terhadap  bakteri Shigella dysenteriae menunjukkan nilai signifikan  0,000  (p<0,05)  yang berarti  ada    perbedaan  signifikan pengaruh  perlakuan  yang  diberikan pada  bakteri  uji.  Kontrol  positif  dan ekstrak  etanol  buah  pare  dengan konsentrasi  10%,  25%  dan  50% dapat    menghambat  pertumbuhan bakteri Shigella  dysenteriae .  Uji lanjut  yang  digunakan  adalah  uji Duncan yang bertujuan untuk
melihat perlakuan mana yang memiliki  efek  yang  sama  atau berbeda  dan  efek  yang  terkecil sampai  terbesar  antara  satu  dengan lainnya  (Simanjuntak,  2008).  Hasil analisa dengan uji Duncan menunjukkan  perbedaan  yang  nyata pada    kontrol  positif  dan  berbagai konsentrasi  ekstrak.  Kontrol  negatif yang  digunakan  etanol  96%  jika etanol  tersebut  tidak  memberikan daya  hambat  pada  bakteri Shigella dysenteriae ,  maka  dapat  dikatakan zona  hambat  ekstrak  yang  terbentuk tidak  terpengaruh  dari  pelarut  yang digunakan.  Pada  tabel  1  kontrol negatif  tidak  memberikan  daya hambat  untuk  ketiga  perlakuan. Kontrol  positif  yang  digunakan adalah  Ampicillin.  Kontrol  positif bertujuan  sebagai  pembanding  untuk membuktikan  bahwa  penelitian  yang dilakukan  sudah  tepat.  Ampicillin digunakan  untuk  mengatasi  infeksi saluran  nafas  ( bronchitis  kroni ), saluran  cerna  dan  saluran  kemih. Berdasarkan  tabel  1,  kontrol  positif memberikan  diameter  zona  hambat dengan  kategori  sangat  kuat  karena lebih  dari  20  mm.  Uji  Duncan terhadap  diameter  zona  hambat
bakteri Shigella  dysenteriae ,  pada konsentrasi 10% dan 50% menunjukkan  perbedaan  nyata.  Hal
ini berarti konsentrasi ekstrak tersebut  telah  menunjukkan  efek yang  berbeda  dalam  menghambat pertumbuhan  bakteri.  Konsentrasi ekstrak 10%  menunjukkan tidak ada perbedaan yang nyata dengan konsentrasi  ekstrak  25%.  Hal  ini berarti  konsentrasi  ekstrak  tersebut menunjukkan  efek  yang  sama  dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri Shigella  dysenteriae. Demikian  pula konsentrasi ekstrak 25% menunjukkan  tidak  ada  perbedaan
yang nyata dengan konsentrasi ekstrak 50%.

## KESIMPULAN
Ekstrak etanol buah pare ( Momordica  charantia  L )  dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri Shigella  dysenteriae .  Semakin  besar konsentrasi  ekstrak  etanol  buah  pare semakin  besar  juga  diameter  zona hambat yang di hasilkan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima kasih kepada Universitas Muhammadiyah
Banjarmasin yang telah
memfasilitasi penelitian ini .

## DAFTAR PUSTAKA
Achryya,  S.,  Dash,  G.  K.,  Mondal,
S.,  &  Dash,  S,  K.,  2010, Antioxidative an Antimicrobial Study of Spondias mangiferaWilld Root ,  International  Journal  of Pharmacy and Pharmaceutical  Sciences,  2 (4), 68-71. Jawetz M; Adelberg’s, 2005, Mikrobiologi Kedokteran . edisi  23.  Jakarta,  Penerbit Buku Kedokteran ECG.
Jayanto,  H,  2015  ,  Uji  Aktivitas
Antibakteri Ekstrak Daun
Pare  ( Momordica  charantia L.)  dengan  Metode  Dilusi, Skripsi ,  Fakultas  Sains  dan Teknologi  Universitas  Islam Negeri Sunan Kalijaga,Yogya
Komala,  O.,  Sari,  L.H.,  Sakinah,  N., 2012, Uji  Efektivitas  Ekstrak Etanol Buah Pare (Momordica  charantia L ) Sebagai Antibakteri Salmonella typhi. Bogor Murhadi    (2007). Efesiensi  Proses
Ekstraksi dengan Metode Ekstraksi Multi Tahap. Malang : Universitas Brawijaya. Simanjuntak,  M.R.  2008    Ekstraksi dan  Fraksinasi  Komponen Ekstrak Daun Tumbuhan Senduduk ( Melastoma malabathricum L) serta Pengujian Efek Sediaan Krim Terhadap Penyembuhan Luka Bakar, Skripsi , Fakultas Farmasi USU, Medan.
Susanto,  Sudrajat  D,  Ruga  R.,2012, Studi  kandungan  bahan  aktif tumbuhan meranti merah
( Shorea leprosula Miq) sebagai sumber senyawa antibakteri. Mulawarmnan Scientific. 11(2):181-90.
Tjay,  TH  dan  Rahardja,K.,  2007,
Obat-obat  Penting  Khasiat, Penggunaan  dan    Efek-efek
Sampingnya Edisi  Keenam.
Jakarta: Elex Media Komputindo.