## EKSPLORASI POTENSI MIKROBA TANAH DALAM MENINGKATKAN
HASIL PANEN KEDELAI ( Glycine max ) PADA LAHAN KERING
(Exploration Potential of Soil Microbes in Increasing Yields of Soybeans (Glycine max) on Dry Land)
Kartina AM 1 , Nurmayulis 1 , Andi Apriany Fatmawaty 1 dan Dewi Firnia 1
1 Staf Pengajar Jurusan Agroekoteknologi, Fakultas Pertanian Universitas Sultan Ageng Tirtayasa Jl. Raya Jakarta Km 4, Pakupatan, Serang, Banten, 42121 Telp. 0254-280330, Fax. 0254-280706, e-mail: Kartina_plg@yahoo.com

## ABSTRACT
A  research  has  been  conducted  to  produce  products  of  various  microbial  inoculants which  synergistically  function  as  a  biological  fertilizer  and  could  improve  soybean production on dry land, especially land that was marginal.  Excavation of potential soil microbes on marginal dry land was conducted in Cibaliung District, Pandeglang Banten with  a  screening  technique  that  had  been  tested  in  comparison  with  isolates  that  had been  successfully  tested  its  superiority.  After  proving  the  superiority  of  microbial synergism between multiple test isolates that had different roles in the transformation of nutrients,  especially  N  and  P.  Microbial  isolates  demonstrated  synergism  effect formulated with a variety of carrier as inoculant  products.  In this research, isolation of microbes  was  conducted  in  the  first  year  that  was  isolation  of  Azotobacter  and Azospirillum with microbial  enrichment  with  selective liquid  media Ashby and Media Okon,  BPF  Pikovskaya  media.  The  selection  of  microbial  population  density,  which was  aimed  to  produce  a  microbial    consortium  to  produce  microbes  that  work synergistically  enhance  the  growth  of  plants  was  conducted  in  the  second  year.  The experiment  used  a  randomized  completely  block  design  (RCBD  )  with  a  population density factor Azotobacter sp., Azospirillum and BPF: without treatment ( Z0, AZ0 and BP0) , 10 2 cfu/ml (Z1 AZ1 and BP1), 10 4 cfu/ml (Z2, AZ2, and BP2 ), 10 6 cfu/ml (Z3, AZ3  and  BP3),  10 8 cfu/ml  (Z4,  AZ4  and  BP4)  and  10 10 cfu/1ml  (Z5,  AZ5  and  BP5) soybean plants inoculated at the age of 2 M1ST repeated four times with further testing DMRT 5%. The parameters measured were: plant height, number of leaves, root length, leaf area, dry weight and root dry weight crown. Research showed that treatment of the various levels of population density Azotobacter sp. significantly effect on plant height, while  density  of  population Azosprillium sp.  significantly  effect  on  plant  height.  BPF population density showed significant effect on the number of leaves.
Key words: Soybean, Azospirillum, Azotobacter, and  BPF
PENDAHULUAN Pemenuhan kebutuhan pangan yang  meningkat  dari  tahun  ke  tahun tidak  tercukupi  dengan  produksi  dalam negeri,  hal  ini  berdampak  pada  impor bahan  pangan  termasuk  kedelai  yang terus dilakukan. Produksi kedelai Nasional pada tahun 2008 mencapai 0,65 juta  ton,  tahun  2004  produksi  sekitar 0,71  juta  ton,    sedangkan  kebutuhan kedelai mencapai 1,2 juta ton, sementara pada tahun 2003 produksi mencapai 0,68 juta  ton  dan  pada  tahun  2004  produksi sekitar  0,71  juta  ton.  Pada  tahun  2005 produksi kedelai 2,04 juta ton sedangkan kebutuhan  mencapai  2,8  juta  ton, selisihnya  0,76  juta  ton  dipenuhi  dari impor  yang  akan  terus  berlanjut  dari tahun  ke  tahun  apabila  produktivitas tidak  dapat  ditingkatkan  (Husni  dan Arinong, 2009).
Permasalahan yang sering dihadapi dalam  bercocok  tanam  kedelai  pada lahan  kering  adalah  kandungan  hara  N dan  P  yang  rendah  dan  tidak  tersedia bagi  tanaman.  Sebagian  besar  lahan kering  bersifat  masam.    Pemberian pupuk  N  dan  P  untuk  meningkatkan status  hara  pada  lahan  tersebut  kurang berdampak  maksimal  karena  unsur  N yang  bersifat  mobil  mudah  tercuci  dan hilang  akibat  proses  denitrifikasi  di dalam  tanah.  Di  samping  itu  unsur  P yang  diberikan  tidak  tersedia  akibat terfiksasi  mineral  Fe  dan  Al  yang kelarutannya tinggi pada tanah masam.
Pemanfaatan  mikroba  tanah  yang potensial  dalam  mengefisienkan  pupuk yang  diberikan  merupakan  alternatif yang  penting  dalam  meningkatkan  hasil tanaman  kedelai  pada  lahan  kering. Beberapa  mikroba  yang  berperan  dalam meningkatkan  serapan  N  pada  rhizosfer tanaman  kedelai  di  antaranya  bakteri Azotobacter
dan Azospirillum,
sedangkan  mikroba  yang  berfungsi meningkatkan  ketersedian  P  adalah bakteri  dan  cendawan  pelarut  fosfat
(BPF dan CMF) serta cendawan endomikoriza.  Mikroba  indigen/asli  dari lahan pertanaman kedelai biasanya lebih cocok untuk  dijadikan inokulan di  lahan asalnya  karena  sifatnya  yang  lebih toleran dibandingkan mikroba introduksi yang  telah  teruji  keunggulannya.  Oleh karena  itu  perlu  diuji  keunggulan  dari masing-masing mikroba indigen tersebut, dilanjutkan dengan kombinasinya  yang  bersifat  sinergis untuk  dihasilkan  produk  inokulan  yang unggul.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  untuk  isolasi  mikroba dilaksanakan
di Laboratorium Agroekologi  dan  inokulasi  mikroba Azotobacter sp .,  Azospirillum sp . dan BPF  dilaksanakan  Kebun  Percobaan Fakultas  Pertanian.  Waktu  penelitian dimulai  dari  bulan  Agustus  sampai Oktober  2013.  Metode  penelitian  yang diajukan terdiri dari percobaan eksplorasi  dan  percobaan  eksperimental. Percobaan  berupa  eksplorasi  dan  seleksi mikroba yang unggul dalam meningkatkan ketersediaan unsur hara N dan  P  serta  seleksi  media  pembawa produk inokulan. Isolasi mikroba Azotobacter ,
Azospirillum dan BPF
Kegiatan  yang  dilakukan  pada tahap  ini  adalah  eksplorasi  sumber inokulan.  Contoh  tanah  rhizosfir  yang akan  dijadikan  sumber  inokulan  berasal dari  lahan  kering  petani  di  Kecamatan Cibaliung Kabupaten Pandeglang Provinsi Banten. Pemilihan lokasi pengambilan  contoh  tanah  ditentukan berdasarkan  sentra  pertanaman  kedelai di  lokasi  tersebut.  Contoh  tanah  yang diambil  di  sekitar  rhizosfir  dikumpulkan dalam  kantung  plastik  dan  diberi  label keterangan  lokasi,  vegetasi,  dan  data visual  lainnya  yang  dapat  memberi informasi  habitat  mikroba  yang  akan diisolasi.
Untuk mengisolasi bakteri Azotobacter dan Azospirillum, perlu dilakukan  pengayaan  mikroba  tersebut karena  populasinya  di  dalam  tanah rendah.    Sebanyak  satu  gram  contoh tanah  komposit  dimasukkan  ke  dalam 100  ml  media  cair  selektif  Ashby  dan media  malat  dalam  erlenmeyer  250  ml, masing-masing untuk
mengisolasi
Azotobacter dan Azospirillum. Inkubasi bakteri Azospirillum dilakukan  di  atas mesin  pengocok  yang  bergerak  dengan kecepatan  120  rpm , setiap    3  hari sebanyak  5  ml  biakan  dipindahkan  ke dalam  medium  baru  dan  kembali diinkubasikan  pada  kondisi seperti semula.  Hal  tersebut  diulang  5-6  kali sehingga diperoleh biakan murni. Inkubasi  bakteri Azotobacter pada  suhu ruang  selama  7  hari.  Setelah  masa inkubasi  akan  dihasilkan pellicle /lapisan tipis  pada  permukaan  media  cair. Pellicle ini digoreskan dengan menggunakan  jarum  inokulasi  pada media  Ashby  padat  dan  diinkubasikan selama  4  hari.    Koloni Azotobacter dicirikan  dengan  koloni  yang mucoid , berwarna  transparan  atau  berpigmen. Setelah diperoleh koloni yang mempunyai ciri di atas, kemudian dibuat biakan  murninya    dengan  memindahkan pada  media  agar  miring  Ashby  dan diinkubasikan  pada  inkubator  28 o C selama 4 hari.
Untuk  mengisolasi  bakteri  dan cendawan  pelarut  fosfat,  yaitu  contoh tanah yang dikumpulkan secara komposit  dibuat  satu  seri  pengenceran dengan  menggunakan  larutan  garam fisiologis  sampai  tingkat  pengenceran 10 -7 .    Kemudian  dilakukan  isolasi dengan  metode  agar  tuang  ( pour  plate method ) dengan media selektif Pikovskaya  untuk  bakteri  pelarut  fosfat, sedangkan  untuk  cendawan  pelarut fosfat  pada  media  Pikovskaya  diberi antibiotik khloramfenicol 1 ppm. Setelah  inkubasi  4-5  hari,  koloni
mikroba  yang  menunjukkan  ciri-ciri terdapat  zona  bening  di  sekitar  koloni bakteri  dipindahtanamankan  pada  agar miring media Pikovskaya.  Biakan murni pada  agar miring tersebut  dijadikan  stok untuk perlakuan selanjutnya.
Untuk  mengisolasi  cendawan
mikoriza arbuskula (CMA) perlu
dilakukan  traping  pada  contoh  tanah yang  diambil.    Sebanyak  5  kg  contoh tanah dicampur pasir steril 3:1 kemudian dimasukan  ke  dalam  polibag.  Benih jagung ditumbuhkan pada tanah tersebut dan  diberi  pupuk  lengkap  rendah  P, kemudian  tanaman  dipelihara  selama  6 minggu dan dilakukan stressing selama 2 minggu.    Spora  CMA  diisolasi  dari media  tanah  tersebut  dengan    metode penyaringan    basah  dengan  saringan spora bertingkat beberapa ukuran (12-45 m). Spora diambil dengan menggunakan pipet kapiler atau pinset dan dikumpulkan  berdasarkan  ciri  morfologi spora  yang  sama.  Spora  CMA  tersebut kemudian  diinokulasikan  pada  bibit kedelai  umur  seminggu  pada  media zeolit  selama  4  minggu  dan  dilakukan stressing. Media  tanam  kedelai  beserta potongan akar kedelai selanjutnya digunakan sebagai sumber inokulan.

## Seleksi isolat mikroba
Mikroba  hasil  seleksi  tersebut diseleksi  keunggulannya  dengan  uji bioassay.  Isolat-isolat  mikroba  beserta kombinasinya  tersebut  diinokulasikan pada  bibit  kedelai  umur  seminggu  yang ditanam  pada  2  kg  media  tanah  steril selama 6 minggu.
Pertumbuhan  tanaman  dan  bobot kering  tanaman  dijadikan  parameter pengamatan  untuk  menseleksi  isolat- isolat mikroba tersebut. Perlakuan berupa isolat-isolat mikroba dan
kombinasinya  diulang  sebanyak  lima kali.  Dari  percobaan  di  atas  dapat  kita seleksi  isolat-isolat  mikroba  yang  secara sinergis
dapat meningkatkan
pertumbuhan  dan  bobot  kering  tanaman
kedelai  dibandingkan  kontrol.  Untuk menguji  apakah  CMA  berperan  dalam meningkatkan  pertumbuhan  tanaman kedelai, maka pada akar tanaman kedelai dilakukan analisis derajat infeksi dengan metode slide.
Uji  statistik  yang  digunakan adalah  Rancangan  Acak  Kelompok dengan uji beda antar perlakuan digunakan  uji  jarak  berganda  Duncan (DMRT). Percobaan seleksi isolat mikroba akan menghasilkan satu konsorsium mikroba yang bekerja secara sinergis meningkatkan pertumbuhan tanaman.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil sidik ragam menunjukkan bahwa  perlakuan  pemberian  berbagai kepadatan  populasi Azotobacter sp. memberikan pengaruh yang nyata terhadap tinggi tanaman kedelai. Perlakuan kepadatan populasi Azospirillum sp . tidak berpengaruh nyata terhadap  tinggi  tanaman  pada  umur  2 MST,  tetapi  berpengaruh  nyata  pada umur  3-5  MST  dan  berpengaruh  nyata pada  umur  6  MST  dan  perlakuan pemberian  berbagai  kepadatan  populasi BPF  (Tabel  3.)  memberikan  pengaruh yang tidak berbeda nyata terhadap tinggi tanaman  sejak  2  MST  hingga  6  MST. Tujuh  hari  setelah  inkubasi  jumlah koloni Azotobacter sp.  yang  tumbuh pada  media  Ashby  dihitung  dengan metode hand counting .
Nilai rata-rata yang terlihat pada Tabel  1.  menunjukkan  nilai  tinggi tanaman tertinggi  adalah pada perlakuan kepadatan  populasi Azotobacter sp. 102 cfu/ml yaitu sebesar 66,45 cm, sedangkan terendah berturut turut adalah pada perlakuan tanpa kepadatan populasi Azotobacter sp. yaitu  sebesar  46,09  cm, perlakuan
kepadatan
populasi
Azotobacter sp . 106 cfu/ml yaitu sebesar 50,05  cm,  perlakuan  kepadatan  populasi Azotobacter  sp. 108  cfu/ml  yaitu  53,55 cm, perlakuan kepadatan populasi
Azotobacter sp . 1010 cfu/ml  yaitu 64,35 cm  dan  perlakuan  kepadatan  populasi Azotobacter sp. 104 cfu/ml   yaitu 66,27
cm. Inokulasi kepadatan populasi Azotobacter sp. 102  cfu/ml,  104  cfu/ml dan  1010  cfu/ml  tidak  menunjukkan perbedaan  tinggi  tanaman  terhadap  rata rata  tinggi  tanaman  kedelai.  Kepadatan populasi Azotobacter sp. 102  cfu/ml menunjukkan  perbedaan  tinggi  tanaman dengan  106  cfu/ml  dan  108  cfu/ml  . Berdasarkan  penelitian  Pitriana  (1999) pemberian  inokulan  mikroba  tanah  yang salah  satunya  pemberian  tunggal  bakteri Azotobacter sp. Mampu  meningkat  kan tinggi  tanaman  sebesar  6-25,  N  dan  P serta  6,70-  11,50  %  pada  tanaman  padi dengan  pupuk  N  dan  P.  Secara  umum tanaman  yang  diberi  kepadatan  populasi Azotobacter sp. memiliki tinggi tanaman yang  lebih  baik  dari  tanaman  tanpa kepadatan  populasi Azotobacter sp . ,  hal tersebut  diduga  bakteri Azotobacter sp . menghasilkan zat pengatur tumbuh yang mampu meningkatkan pertumbuhan tanaman seperti yang dilaporkan Hindersah (2004) bahwa bakteri Azotobcter sp. menghasilkan fitohormon dan mampu memfiksasi nitrogen menjadi  ammonium  yang  tersedia  untuk tanaman  yang  berfungsi  meningkatkan tinggi  tajuk  pada  tanaman  sayuran. Diduga  fitohormon  tersebut  adalah hormon  akusin.  Menurut  Weerasooriya (2005)  dalam  Simanungkalit  (2007) auksin  20%  pada  merupakan  senyawa yang  mampu  menginduksi  pemanjangan batang  pada  wilayah  sub-apikal  dan menginduksi pertumbuhan bagian tanaman  lainnya.  Beberapa  pengaruh morfogenetik  yang  penting  dari  IAA terhadap  pertumbuhan  tanaman  adalah pemanjangan  batang  da pembentukan bintil  yang  merupakan  reaksi  inang terhadap  auksin  (Rao,  1994).  Menurut Tarigan  (2013)  bakteri  pengahasil  IAA dan  penambat  nitrogen  yang  diisolasi dari rizosfer pertanaman kedelai    secara
bersamaan dapat meningkatkan
pertumbuhan tanaman kedelai.
Selain  hormon  IAA,  diduga cahaya  matahari  merupakan  faktor  lain yang mempengaruhi pertumbuhan tinggi tanaman  kedelai.  Cahaya  mempunyai pengaruh  nyata  terhadap  pertumbuhan batang. Namun  tanaman  yang menerima sedikit  cahaya  matahari  atau  tanaman yang  terkena  naungan  memiliki  tinggi tanaman  dan  ruas  yang  lebih  tinggi  dari tanaman  yang  tidak  ternaungi  hal tersebut    disebabkan    karena tingginya hormon  auksin  yang  dihasilkan  oleh tanaman
sehingga menyebabkan
meningkatnya pertumbuhan tinggi tanaman  dan  pemanjangan  ruas  pada tanaman  tanaman  padi  tanpa  pupuk. Menurut Goldsworthy dan Fisher (1992) dalam Anggraeni  (2010)  menyatakan auksin  yang  tertimbun  di  sisi  batang dengan penangkapan cahaya yang rendah dapat mengakibatkan pemanjang- an  yang  lebih  cepat  sehingga  terjadi etiolasi dalam naungan kedelai.
Tabel 1. Tinggi tanaman umur 2-6 MST pada berbagai kepadatan populasi Azotobacter sp .
Kepadatan Populasi
Azotobacter sp. (cfu/ml) Tinggi Tanaman Umur (MST) Rata-rata
2 3 4 5 6 -----------------------cm-------------------------- Z 0 24,8 38,0 52,3 54,9 60,50 46,09   b Z 1 24,8 47,9 68,5 86,1 105,0 66,45   a Z 2 25,4 51,8 73,8 86,6 93,87 66,27   a Z 3 23,6 37,6 52,5 68,0 66,75 50,05   ab Z 4 26,0 42,5 55,5 70,5 73,00 53,55   ab Z 5 24,6 44,3 62,9 83,8 106,1 64,35   a
Keterangan  :  Angka-angka  yang  diikuti  oleh  huruf  yang  sama  menunjukkan  berbeda tidak nyata menurut uji DMRT pada taraf 5%
Tabel  2.  Tingkat  kepadatan  populasi  bakteri  penambat  nitrogen Azospirillum sp.  yang diisolasi  dari  rhizosfer  pertanaman  kedelai  terhadap  pertumbuhan  vegetatif kedelai pada parameter tinggi tanaman umur 2-6 MST
Kepadatan Populasi Azotobacter sp. (cfu/ml) Tinggi Tanaman Umur 2 MST 3 MST 4 MST 5 MST 6 MST ------------------------------------ cm  ----------------------------------- AZ 0 AZ 1 AZ 2 AZ 3 AZ 4
AZ 5 22,38 24,50 26,00 25,63 26,00 23,50 34,00 abc 45,05 ab 50,25 a 47,00 ab 38,50 bc 50,25 b 66,63 ab 73,63 a 77,13 a 75,75 a 58,88 ab 66,63 b 87,00 ab 104,25 a 101,25 a 101,75 a 71,25 b 91,38 bc 111,38 ab 137,38 a 131,50 a 121,50 ab
77,38 c Keterangan: Angka-angka yang diikuti oleh huruf yang sama menunjukan berbeda tidak nyata menurut uji  DMRT pada taraf 5%
Tabel 3. Respons tinggi tanaman terhadap pemberian kepadatan populasi BPF yang berbeda
Umur Kepadatan Populasi BPF (cfu/ml) MST Bp0 Bp1 Bp2 Bp3 Bp4 Bp5 ---------------------cm------------------------ 2 20,90 22,90 24,12 23,62 20,75 20,07 3 30,25 36,42 40,70 37,62 34,47 31,27 4 34,25 47,50 50,65 52,5b 41,50 39,62 5 39,40 57,92 55,62 51,15 43,77 47,02 6 36,75 51,20 58,12 56,47 48,22 47,37
Tabel 4. Rata rata jumlah daun umur 2-6 MST pada berbagai kepadatan populasi Azotobacter sp. Kepadatan MST
2 3
4 5 6 Rata- rata ---------------------helai------------------------------------- Z 0 2,00 3,00 3,00 3,75 5,50 3,70 Z 1 2,00 3,00 4,25 4,50 6,25 3,85 Z 2 2,00 3,25 4,75 4,75 5,75 4,10 Z 3 2,00 2,75 4,75 5,25 7,25 4,35 Z 4 1,75 3,00 4,50 4,25 5,50 3,85 Z5 1,75 3,00 4,00 4,50 7,25 4,10
Tabel 5.  Kepadatan populasi bakteri penambat nitrogen Azospirillum sp . yang diisolasi dari  rhizosfer  pertanaman  kedelai  terhadap  pertumbuhan  vegetatif    kedelai pada parameter jumlah daun umur 2-6 MST Kepadatan Jumlah Daun  (MST) 2 3 4 5 6 Rata-rata --------------------------------- trifoliate ------------------------------- AZ 0 2,75 4,00 4,75 6,50 9,75 5,55 AZ 1 3,00 4,00 6,00 6,00 8,25 5,45 AZ 2 3,00 3,75 5,75 8,00 10,50 6,20 AZ 3 3,00 4,25 6,25 7,25 10,75 6,30 AZ 4 3,00 4,00 6,20 8,00 10,75 6,45 AZ 5 2,75 3,25 5,75 6,75 10,75 5,85
Tabel 6. Jumlah Koloni Azotobacter sp. pada Media Ashby
Tingkat pengenceran Pengenceran ke- I II III --------cfu/ml----------- 10 -1 24,00 x 10 2 186 x 10 2 7 x 10 2 10 -3 2,02 x 10 4 87 x 10 4 40 x 10 4 10 -5 12,00 x 10 6 Tak hingga 7 x 10 6 10 -7 1,00 x 10 8 213 x 10 8 2 x 10 8 10 -9 4,00 x 10 10 145 x 10 10 2 x 10 10 Rata Rata 8,30 x 10 9 Tak hingga 5 x 10 9
SIMPULAN
1. Kepadatan  populasi  10 10 cfu/ml memberikan  respons  yang  lebih tinggi terhadap tinggi tanaman (106,12 cm) dan jumlah daun dengan rata  rata  7,25  helai,  kepadatan populasi sebanyak 10 2 cfu/ml
memberikan  respons  yang  lebih tinggi  panjang  akar  (5,00  cm)  dan rata rata bobot kering akar   (1,22 g). Kepadatan  populasi Azotobacter sp . 10 8 cfu/ml memberikan rata rata luas daun    (17,46  cm 2 ) dan    bobot  kering tajuk (1,46 g).
2. Ditemukannya 3 isolat bakteri Azospirillum sp. yang berkemampuan  dalam  menambat nitrogen dari tanah rhizosfer pertanaman  kedelai  ( Glycine  max L.
Merr.)  dengan  menunjukkan  hasil pada medium  Okon. Perlakuan dosis kepadatan populasi bakteri penambat nitrogen Azospirillum sp.  mampu memberikan  hasil  berbeda  nyata pada  pertumbuhan  vegetatif  kedelai ( Glycine  max L.  Merr.)  terutama pada  pertumbuhan  tinggi  tanaman pada umur 3-6 MST.
3. Pemberian berbagai kepadatan
populasi  bakteri  pelarut  fosfat  (BPF) tidak  berpengaruh  nyata  terhadap tinggi  tanaman,  luas  daun,  panjang akar,  bobot  kering  tanaman,  bobot kering akar, namun memberikan
pengaruh  nyata  terhadap  jumlah daun pada 4 MST.

## DAFTAR PUSTAKA
Agustian, Syafei, Rimadhani, Maira, dan Lusi.  2012.  Keragaman  Bakteri Penambat  N  pada  Rhizosfir Titonia  ( Tithonia  diversifolia ) yang Tumbuh pada Tanah Masam  Ultisol.  Laboratorium Biologi Tanah Fakultas Pertanian Universitas  Andalas.    J.  Solum Vol IX No 2, Juli 2012: 98-105.
Anggraeni,  B.W.  2010.  Studi  Morfo-
Anatomi dan Pertumbuhan Kedelai ( Glycine max (L.) Merr.) pada Kondisi Cekaman Intensitas Cahaya Rendah. Skripsi Departemen Agronomi dan Hortikultura.  Fakultas  Pertanian. Institut Pertanian Bogor, Bogor. Bagyaraj, D.J. 1990. Biological Interaction  Between VAM Fungi and Other Beneficial. Proceeding of  the  National  Conference  on Mycorrhiza at Haryana Agricultural  University.  Hisar.  p :76. Boddey,  R.M.,  and  J.  Dobereiner.  1994. Biological Nitrogen Fixation
Associated  with  Graminacecus
Plants. p 119-135 in . Y. Okon Ed
Azospirillum /Plant  Associations. CRC Press., Tokyo. Cosico,  W.C.,  M.U.  Garcia,  R.A.Jr. Alog,  and  T.S.J.  Santos.  1991. Azospirillum Inoculation  and  Corn Growth in 1991. Organic Recycling  in  Asia  and  the
Pacific.  Rapa  Bulletin  Abstracts. 7:8.
Gardner,  Franklin  P.,  Pearce,  R.  Brent dan  Mitchel,  Roger,  L.  1991. Fisiologi  Tanaman  Budidaya.  UI Press, Jakarta.
Hindersah,  R.,  dan  Simarmata,  T.  2004. Potensi  Rizobakteri Azotobacter dalam  Meningkatkan  Kesehatan Tanah. Laboratorium  Biologi Tanah, Fakultas Pertanian, Universitas Padjadjaran, Bandung.  Jurnal  Natur  Indonesia 5 (2): 127-133. Husni,  H.,  dan  A.R.  Arinong.  2009. Pertumbuhan dan Produksi Kedelai  yang  Diaplikasi  Pupuk Organik  dan  Waktu  Pemberian Berbeda in Jurnal  Agrivigor.  8 (3). Fakultas Pertanian Universitas Hasanuddin, Makasar. P. 279-291. Okon,  Y.  1985. Azospirillum as  a potential  for  agriculture.  Trends in Biotech. 3:223-228. Rao, S.N. 1991. Biofertilizer in Agriculture.  Oxford  and  IBH Publishing Co. New Delhi. Bombay. Calcuta.
Simanungkalit,  R.D.M.,  Suriadikarta, Didi, A., Saraswati, R., Setyorini,
D., dan Hartatik, W . 2006. Pupuk Organik dan Pupuk Hayati. Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Sumberdaya Lahan Pertanian, Bogor. Tarigan,  Ratna  Sari,    Jamilah,  It.,  dan Elimasni.    2013.  Seleksi  Bakteri Penambat Nitrogen dan Penghasil  Hormon  IAA (Indole Acetic  Acid) dari  Rizosfer  Tanah Perkebunan  Kedelai  ( Glycine max L . ).  Departemen  Biologi, Fakultas MIPA, Universitas Sumatera Utara, Medan.