## Standarisasi Simplisia Kering Daun Beluntas ( Pluchea indica L.) dari Tiga Daerah Berbeda
Sela Talia (a)* , Sumi Wijaya (a) , Henry Kurnia Setiawan (a)
(a) Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya
Beluntas ( Pluchea indica L.) biasa digunakan sebagai tanaman pagar dan secara tradisional daunnya digunakan sebagai lalapan atau obat untuk menghilangkan bau badan, obat penurun panas, obat batuk, dan obat antidiare. Seiring dengan meningkatnya teknologi bahan alam dan kecenderungan masyarakat dalam penggunaan produk yang  berasal  dari  bahan  alam  terutama  tumbuhan  obat,  maka  diperlukan  adanya  suatu  acuan  yang  memuat persyaratan  mutu  bahan  alam  agar  sesuai  digunakan  sebagai  bahan  obat.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk menetapkan profil standarisasi spesifik dan non spesifik dari simplisia kering daun beluntas. Standarisasi daun beluntas yang meliputi parameter spesifik dan parameter non spesifik, karakterisasi terhadap ciri-ciri mikroskopik daun  beluntas  ( Pluchea  indica L.),  karakterisasi  kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  menggunakan kromatografi lapis tipis (KLT), penetapan profil spektrum dengan menggunakan spektrofotometer infra merah (IR), dan  penetapan  kadar  senyawa  metabolit  sekunder  dengan  spektrofotometri.  Data  yang  diperoleh  merupakan data deskriptif yang mencerminkan perolehan data dari 3 lokasi yang berbeda.  Berdasarkan hasil pengamatan mikroskopik,  simplisia  daun  beluntas  mempunyai  berkas  pembuluh  dengan  penebalan  spiral,  stomata  tipe anomositik, dan rambut penutup. Kadar sari larut etanol dari simplisia > 5% sedangkan kadar sari larut air >26%. Hasil skrining fitokimia menunjukkan hasil positif pada pengamatan alkaloid, flavonoid, fenol, steroid dan terpen. Kadar  abu  total  dari  simplisia  <  16%,  kadar  abu  larut  air  <  10%,  kadar  abu  tidak  larut  asam  <  8%,  susut pengeringan < 12%, dan pH 5.
Kata kunci : Simplisia, daun beluntas, profil standarisasi, spesifik, non spesifik

## Standardization of Dried Powder of Indian Fleabane Leaves
( Pluchea indica L.) from Three Different Areas
Indian  Fleabane  ( Pluchea  indica L.)  are  commonly  used  as  hedgerows  and  traditionally  the  leaves  are  used  as fresh salad or medicines to eliminate body odor, febrifuge, cough medicine, and antidiarrheal drugs. Along with the increasing technology of natural materials and the tendency of people to use products derived from natural materials,  especially  medicinal  plants,  a  reference  which  contains  the  requirements  for  the  quality  of  natural ingredients  that  are  suitable  for  use  as  medicinal  ingredients  is  needed.  This  research  aims  to  determine  the profile of specific and non specific standardization of dried powder of indian fleabane leaves. Standardization of indian fleabane leaves covers specific parameters and non specific parameters, characterization of microscopic characteristics  of  indian  fleabane  ( Pluchea  indica L.)  leaves,  characterization  of  the  content  of  secondary metabolites  using  thin  layer  chromatography  (TLC),  determination  of  spectrum  profiles  using  infrared spectrophotometer (IR), and determination of the levels of secondary metabolites by spectrofotometry. The data obtained is descriptive data that reflect the acquisition of data from 3 different locations. Based on microscopic observations indian fleabane leaf dried powder has vascular bundles with spiral thickening, anomocytic stomata, and  multicellular  trichomes.  Ethanol  solubility  of  dried  powder  indian  fleabane  is  ≥5%  while  water  solubility  in water is ≥26%. The results of phytochemical screening showed positive results on the observations of alkaloids, flavonoids, phenols, steroids and terpenes. Total ash content is <16%, water soluble ash content is <10%, acid insoluble ash content is <8%, drying shrinkage is <12%, and pH 5.
Keywords: Indian Fleabane leaves, dried powder, standarization profile, non spesific, spesific
*Corresponding  author:  Fakultas  Farmasi Universitas  Katolik  Widya  Mandala  Surabaya , Jl.  Raya  Kalisari Selatan No. 1 Surabaya, e-mail: sheilatalia@yahoo.co.id

## PENDAHULUAN
Bangsa Indonesia telah lama mengenal dan menggunakan  tanaman  berkhasiat    obat    sebagai salah    satu    upaya    dalam    menanggulangi masalah  kesehatan.    Pengetahuan    tentang tanaman    berkhasiat    obat    berdasar    pada pengalaman  dan  ketrampilan  yang  secara  turun temurun  telah  diwariskan dari  satu  generasi  ke generasi    berikutnya    (Lusia,    2006).    Tanaman Obat  Indonesia      telah      banyak      dimanfaatkan baik      sebagai      Obat      Tradisional  Indonesia (jamu),    Obat    Herbal    Terstandar    ataupun Fitofarmaka.    Berbagai  penelitian    dan pengembangan    yang    memanfaatkan    kemajuan teknologi dilakukan sebagai upaya meningkatkan    mutu    dan    keamanan    produk yang  diharapkan    dapat    lebih  meningkatkan kepercayaan  terhadap  manfaat  obat bahan alam tersebut (BPOM RI, 2005).
Dalam    proses    pembuatan    Obat Tradisional,  bahan  baku   yang digunakan  harus memenuhi    persyaratan    mutu,    baik    parameter spesifik    dan  non  spesifik.  Standarisasi  adalah serangkaian  parameter,  prosedur,  dan  cara pengukuran  yang  hasilnya  merupakan  unsur- unsur  terkait  seperti  paradigma  mutu    yang memenuhi    standar    dan    jaminan    stabilitas produk.    Standarisasi  dilakukan    agar    tanaman yang  akan  digunakan  sebagai  bahan  baku  obat tradisional  memiliki  kualitas  yang  baik  sesuai dengan  persyaratan  (BPOM RI, 2005).
Beluntas  merupakan  salah  satu  tanaman dari  suku Asteraceae ,  biasanya  hanya  digunakan sebagai  tanaman  pagar  dan  secara  tradisional daunnya  digunakan  sebagai  lalapan  atau  obat untuk  menghilangkan  bau  badan,  obat  penurun panas,  obat  batuk,  dan  obat  antidiare.  Beluntas dapat  tumbuh  di  daerah  kering  pada  tanah  yang keras  dan  berbatu,  pada  daerah  dataran  rendah hingga  dataran  tinggi  (Widyawati  dkk.,  2015). Penelitian  tentang  daun  beluntas  pernah dilakukan  oleh  Sukaryana  dan  Priabudiman (2014)  yang  meneliti  pengaruh  pemberian  daun beluntas  terhadap  total  kolesterol  pada  hewan coba  ayam. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa ekstrak etanol daun beluntas mampu menurunkan kolesterol dalam darah.
Penelitian   yang   dilakukan   oleh   Radjani (2013),      membuktikan  adanya        aktivitas antibakteri    ekstrak    etanol    daun    beluntas dengan  menggunakan    metode    difusi    agar. Ekstrak  dibagi  menjadi  5  kelompok konsentrasi yaitu    12%,    24%,    36%,    48%,    60%,    dan    1 kelompok    kontrol.  Hasil      penelitian menunjukkan      bahwa      ekstrak      etanol      daun beluntas  mempunyai    daya    hambat    terhadap bakteri Staphylococcus    aureus , Bacillus  subtilis dan Pseudomonas    aeruginosa pada    semua konsentrasi,    dengan  diameter    daya    hambat antara  1,203-1,593  cm  terhadap Staphylococcus aureus ,    1,051-1,430    cm    terhadap Bacillus
subtilis ,    dan    1,143-1,525    cm  terhadap Pseudomonas  aeruginosa .  Penelitian    lain dilakukan   oleh   Sibarani,   Wowor   dan  Henoch (2013),  yaitu  uji  efek  analgesik  ekstrak  etanol daun    beluntas.    Kelompok  kontrol    negatif diberikan   akuades,  kelompok   kontrol   positif diberikan  parasetamol,    dan    3    kelompok eksperimental  diberikan  ekstrak  etanol    daun beluntas,    masing-masing    dengan    dosis    150 mg/kgBB,    300    mg/kgBB,    dan  600    mg/kgBB. Pengujian    efek    analgesik    dilakukan    dengan memberikan rangsangan  nyeri  pada  hewan  uji, berupa    rangsangan    panas    dengan    suhu  55°C. Respon    mencit    yang    diamati    yaitu    gerakan menjilat  kaki  dan  atau melompat.  Pengamatan dilakukan    selama    1    menit.    Pengamatan dilakukan sebelum  pemberian  zat  uji,  kemudian berturut-turut    pada    menit    ke-30,  60,  90,  dan 120  setelah  pemberian  zat  uji.  Hasil  penelitian menunjukkan  ekstrak  etanol    daun    beluntas menunjukkan    adanya    efek    analgesik,    namun efek analgesiknya lebih rendah dari parasetamol.
Berdasarkan  uraian  di  atas  terbukti  bahwa daun  beluntas  sangat  bermanfaat  sebagai tanaman  obat.  Seiring  dengan  meningkatnya teknologi  bahan  alam  dan  kecenderungan masyarakat  dalam  penggunaan  produk  yang berasal dari bahan alam terutama tumbuhan obat untuk  pemeliharaan  kesehatan,  maka  diperlukan adanya  suatu  acuan  yang  memuat  persyaratan mutu  bahan  alam  agar  sesuai  digunakan  sebagai bahan  obat.  Pada  penelitian  ini  akan  dilakukan standarisasi  dari  daun  beluntas  yang  meliputi parameter  spesifik  dan  parameter  non  spesifik, karakterisasi  terhadap  ciri-ciri  mikroskopik  daun beluntas  ( Pluchea  indica L.),  karakterisasi kandungan senyawa metabolit sekunder menggunakan  kromatografi  lapis  tipis  (KLT), penetapan profil spektrum  dengan menggunakan spektrofotometer infra merah (IR), dan penetapan kadar  senyawa  metabolit  sekunder  dengan spektrofotometri. Data yang diperoleh merupakan data  deskriptif  yang  mencerminkan  perolehan data dari 3 lokasi yang berbeda.
Standarisasi simplisia kering daun beluntas diambil  dari  tiga  daerah  berbeda  dikarenakan kandungan kimia pada daun beluntas tidak dapat dijamin  selalu  konstan,  karena  dipengaruhi  oleh variabel  bibit,  tempat  tumbuh,  iklim,  kondisi (umur dan cara panen). Tujuan dari penelitian ini adalah  menetapkan  profil  standarisasi  spesifik dan  non  spesifik  dari  simplisia  kering  daun beluntas.

## METODE PENELITIAN

## Alat
Alat-alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah IR  Moisture  Balance (Kett,  Germany), oven  (Memmert,  Germany),  timbangan  analitik (Sartorius, Germany), satu set bejana kromatografi  lapis  tipis  (Camag,  Switzerland),
tabung  reaksi  (pyrex,  Germany),  cawan  porselen, gelas  ukur  (Pyrex,  Germany),  gelas  kimia  (Pyrex, Germany),  pengaduk,  pipet  tetes,  papan  tetes porselen,  mikroskop,  kaca  obyek  dan  penutup, kertas  saring, waterbath ,  kertas  perkamen, spektrofotometer  UV-Vis  tipe  Multiskan  Go (Thermo Fisher Scientific), lampu UV 254 nm dan UV 366 nm (Camag, Switzerland), spektrofotometer  infrared  UATR  (Perkin  Elmer spectrum two, America).

## Bahan
Bahan yang digunakan daun segar beluntas dan simplisia kering daun beluntas dari tiga lokasi berbeda (Batu, Bogor, Surabaya).
Pengamatan
Mikroskopis dan Makroskopis Daun Segar Beluntas Pengamatan terhadap bagian daun beluntas yang  dilakukan  meliputi  bentuk  daun,  tepi  daun, tulang  daun,  permukaan  daun,  warna  pemukaan atas  dan  bawah,  panjang  daun,  diameter  daun serta letak tumbuh daun. Pengamatan mikroskopis  yang  dilakukan  meliputi  irisan melintang  dan  irisan  membujur  daun  beluntas, dengan  media  air,  kloralhidrat,  dan  floroglusin HCl.

## Standarisasi Spesifik
Standarisasi spesifik yang dilakukan meliputi  identitas,  organoleptis,  mikroskopis, kadar  sari  larut,  skrining  fitokimia  (alkaloid, steroid,  triterpenoid,  saponin,  kuinon,  flavonoid, polifenol  dan  tanin),  Penetapan  Profil  Spektrum Simplisia  dengan  Spektroskopi infrared (IR) UATR, Penetapan  profil  kromatogram  simplisia dengan  kromatografi  lapis  tipis,  Penetapan  profil spektrum  dengan  spektrofotometri  UV-Vis, Penetapan kadar senyawa metabolit (Dirjen POM RI, 2000).
Identifikasi  secara  KLT  menggunakan lempeng silika gel F254 berukuran 20 cm x 20 cm dengan fase gerak n -heksan : etil asetat (9:1,v/v), kloroform  :  metanol  (7:3,v/v), n -heksan  :  etil asetat  (7:3,v/v), n -heksan  :  etil  asetat  (5:5,v/v), butanol  :  asam  asetat  :  air  (4:1:5,v/v/v)  serta toluene  :  etil  asetat  (7:3).  Disiapkan  terlebih dahulu  larutan  stok  simplisia  yang  berasal  dari tiga  daerah  tersebut  dengan  konsentrasi  1  gr/10 ml. Uji KLT dilakukan dengan konsentrasi totolan 10  μl  dan  pengamatan  hasil  eluasi  menggunakan lampu  UV  254  serta  UV  366  (Koirewoa,  2012; Wulandari dkk., 2014; Sulastry dkk., 2010).

## Penetapan kadar flavonoid
Kuersetin  ditimbang  sebanyak  10  mg  dan dilarutkan dalam  labu  takar  10  ml  dengan  etanol 96% sehingga diperoleh larutan induk konsentrasi 1000  ppm.  Dibuat  larutan  standar  dengan  5 konsentrasi  yaitu  20,  40,  60,  80,  100  ppm. Masing-masing  larutan  standar  dipipet  0,5  ml
kemudian ditambahkan 1,5 ml etanol 96%, 0,1 ml AlCl 3 10%,  0,1  ml  kalium  asetat  1%  dan  2,8  ml akuades,  diinkubasi  selama  30  menit  di  suhu ruang,  lalu  dilakukan  pengamatan  absorbansi pada  panjang  gelombang  415  nm  dengan spektrofotometer UV.
Serbuk  simplisia    sebanyak  1  gram diekstraksi  dengan  10  ml  etanol  96%,  kemudian disentrifus  selama  10  menit.  Supernatan dikumpulkan  lalu  diekstraksi  dengan  5  ml  etanol 96%  sebanyak  2  kali.  Ekstrak  ditampung  dan dimasukkan  pada  labu  takar  25  ml,  lalu ditambahkan  etanol  sampai  batas  tanda.  Larutan ekstrak dipipet 0,5 ml kemudian ditambahkan 1,5 ml  etanol  96%,  0,1  ml  AlCl 3 10%,  0,1  ml  kalium asetat  1%,  dan  2,8  ml  akuades.  Larutan  tersebut diinkubasi  selama  30  menit  pada  suhu  ruang, kemudian dilakukan pengamatan absorbansi pada panjang gelombang 415 nm (Chang et al ., 2002).

## Penetapan kadar fenol
Larutan  standar  asam  gallat  1000  ppm dibuat  dengan  menimbang  10  mg  asam  gallat dilarutkan  dengan  metanol  p.a  hingga  volume  10 ml.  Dari  larutan  induk  dipipet  0,1,  0,2,  0,3,  0,4, 0,5  ml  dan  ditambah  dengan  metanol  p.a  hingga 10 ml, sehingga dihasilkan konsentrasi 10, 20, 30, 40  dan  50  ppm.  Dari  tiap  larutan  selanjutnya dipipet 1 ml dan ditambahkan 0,4 ml reagen Folin Ciocalteau, dikocok  dan  dibiarkan  4-8  menit. Ditambahkan  4,0  ml  larutan  Na 2 CO 3 7%  dan dikocok  hingga  homogen.  Kemudian  ditambah dengan  akuades  hingga  10  ml  dan  didiamkan selama  2  jam  pada  suhu  ruangan.  Absorbansi dibaca  pada  panjang  gelombang  maksimal  744,8 nm,  kemudian  dibuat  kurva  kalibrasi  hubungan antara  konsentrasi  asam  galat  (μg/ml)  dengan absorbansi (Ahmad dkk., 2015).
Ditimbang  10  mg  ekstrak  etanol  daun beluntas  kemudian  dilarutkan  dengan  10  ml etanol  p.a  dan  dihomogenkan.  Dipipet  1  ml  dari larutan  tersebut,  kemudian  ditambahkan  0,4  ml reagen Folin Ciocalteau , dikocok dan dibiarkan 4- 8  menit.  Setelah  itu  ditambahkan  4,0  ml  larutan Na 2 CO 3 7%,  dikocok  hingga  homogen  dan ditambah  dengan  akuades  hingga  10  ml, didiamkan selama 2 jam pada suhu ruangan, lalu diamati  serapannya  dengan  spektrofotometer  UV (Chun, Kim dan Lee, 2003).

## Penetapan kadar alkaloid
Larutan  standar  kafein  dibuat  dengan melarutkan  10  mg  kafein  dalam  100  ml  akuades. Kafein  standar  yang  sudah  disiapkan  dipipet sebanyak  0,2,  0,4,  0,6,  0,8  dan  1  ml,  kemudian ditambahkan 5 ml pH 4,7 buffer fosfat dan larutan bromocresol green (BCG)  5  mL.  Sampel  tersebut kemudian  diekstraksi  dengan  5  ml  kloroform. Filtrat  kloroform  dikumpulkan  dalam  labu volumetrik  10  mL  dan  diencerkan  dengan
kloroform sampai batas tanda. Absorbansi diukur pada λ 415 nm.
Serbuk  simplisia  sebanyak  2  gram diekstrasi  dengan  20  ml metanol  sebanyak  3  kali pada  suhu  50°C-60°C.  Ekstrak  metanol  yang didapat diuapkan hingga diperoleh residu. Residu dilarutkan dengan 2 ml HCl dan disaring. Larutan ini  dipindahkan  1  ml  ke  corong  pemisah, ditambahkan  5  ml  larutan  BCG  dan  5  ml  buffer fosfat  hingga  pH  4,7.  Campuran  dikocok  dan diekstraksi  dengan  5  ml  kloroform.  Ekstrak dikumpulkan  dalam  10  ml  labu  ukur  dan diencerkan dengan kloroform sampai batas tanda, kemudian  didiamkan  selama  2  jam.  Absorbansi diukur pada λ 415 nm (John et al. , 2014).

## Standarisasi Non Spesifik
Standarisasi  non  spesifik  yang  dilakukan meliputi penetapan kadar abu, kadar abu tak larut asam,  kadar  abu  larut  air,  susut  pengeringan, persentase  bahan  asing  dan  pengukuran  pH (Dirjen POM RI, 2000).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada pengamatan makroskopis dan mikroskopis  daun  segar  beluntas  diperoleh  hasil pengamatan makroskopik yaitu panjang daun 3-8 cm  dan  lebar  daun  1-3  cm  (Gambar  1).  Warna daun bagian depan dan belakang berwarna hijau, bentuk  daun  oval  dan  lebar  pada  bagian  tengah, ujung  daun  bagian  atas  dan  bawah  runcing,  tepi daun  bergerigi,  tekstur  daun  pada  bagian  depan licin  sedangkan  pada  bagian  belakang  kasar, tulang  daun  menyirip  dan  letak  tumbuh  daun tersebar (Tabel 1). Berdasarkan hasil pengamatan mikroskopik,  daun  segar  beluntas  memiliki  tipe berkas  pembuluh  kolateral,  stomata  tipe
anomositik.  Fragmen  spesifik  yang  ditemukan yaitu  rambut  penutup,  fragmen  epidermis  daun, fragmen  epidermis  tulang  daun,  pembuluh  kayu dengan penebalan spiral (Gambar 2).
Gambar 1. Daun Beluntas
Tabel  4.1. Hasil  pengamatan  morfologi  daun Beluntas.
Parameter Hasil Pengamatan Bentuk daun Oval –lebar tengah ke bagian bawah daun -Apeks Runcing -Base Runcing -Margin Bertoreh Pertulangan daun Menyirip Ukuran daun Panjang: 3 – 8 cm Lebar: 1 – 3 cm Warna daun Warna permukan atas daun hijau tua dan Warna permukaan bawah daun hijau muda Tekstur daun Kasar Filotaksis daun Berseling
Gambar 2. Irisan Penampang Melintang Daun Beluntas pada Media Air dengan Perbesaran 4 x 42.3 Keterangan: 1. Epidermis atas, 2. Jaringan bunga karang, 3. Parenkim, 4. Epidermis bawah, 5. Xylem, 6.
Floem, 7. Palisade, 8. Trikoma, 9. Sklerenkim, 10. Kolenkim
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Gambar 3. Irisan penampang membujur daun Beluntas pada media air dengan pembesaran 10 x 42.3
Hasil  standarisasi  spesifik  simplisia  daun beluntas  adalah  organoleptisnya,  yaitu  berupa serbuk  berwarna  hijau  dan  berbau  khas. Berdasarkan  hasil  pengamatan  mikroskopik simplisia  daun  beluntas  mempunyai  berkas pembuluh  dengan  penebalan  spiral,  stomata  tipe anomositik serta rambut penutup. Kadar sari larut etanol  simplisia  daun  beluntas  dari  Batu  adalah 12,3804  ±  1,0587  %,  dari  Bogor  5,9753  ±  0,5615 %,  dan  dari  Surabaya  16,5070  ±  0,2801  %, sehingga dapat dinyatakan bahwa kadar sari larut etanol  simplisia  daun  beluntas  ≥  5%.  Pada penetapan  kadar  sari  larut  air  didapatkan  hasil 26,1777 ± 3,0547 % untuk Batu, 32,1722 ± 2,7107 %  untuk  Bogor,  dan  28,2762  ±  2,0343  %  untuk Surabaya,  sehingga  dapat  dinyatakan  bahwa kadar  sari  larut  air  dari  simplisia  daun  beluntas ≥26%.  Berdasarkan  hasil  pengamatan  skrining fitokimia  dari  ketiga  daerah  didapatkan  hasil positif  pada  pengamatan  alkaloid,  flavonoid, fenol, steroid dan terpen. Hasil pengamatan profil spektrum  UV  dan  IR  menunjukkan  bahwa simplisia  daun  beluntas  dari  tiga  lokasi  memiliki spektrum  yang  sama.  Hal  tersebut  menunjukkan bahwa  simplisia  dari  ketiga  lokasi  tersebut memiliki kandungan yang sama.
Hasil penetapan standarisasi non spesifik terhadap  simplisia  daun  beluntas  meliputi  kadar abu total < 16%, kadar abu larut air < 10%, kadar abu  tidak  larut  asam  <  8%,  susut  pengeringan  <
12%,  persentase  bahan  asing  <  4%,  dan  pH  5. Penetapan  profil  kromatogram  dengan  KLT menggunakan  fase  gerak  butanol  :  asam  asetat  : air (4:1:5), n -heksan : etil asetat (7:3), n -heksan : etil  asetat  (5:5),  dan  kloroform  :  metanol  (7:3) serta  toluene  :  etil  asetat  (7:3).  Pada  hasil  eluasi dengan  fase  gerak n -heksan  :  etil  asetat  (7:3,v/v) didapatkan  7  noda,  dengan  fase  gerak  toluene  : etil  asetat  (7:3)  dapat  memunculkan  noda  dalam jumlah  yang  lebih  banyak  dengan  keterpisahan baik (Gambar 4).
Penetapan kadar flavonoid dalam simplisia dilakukan  menggunakan  metode  kolorimetri dengan  pereaksi  AlCl 3 dan  baku  kuersetin.  Pada penetapan  kurva  baku  kuersetin  diperoleh persamaan  baku  standar  kuersetin  y  =  0,005x  - 0,0416 dengan  nilai korelasi  atau r hitung  0,999. Hasil  penetapan  kadar  flavonoid  dari  ketiga simplisia  menunjukkan  bahwa    kadar  flavonoid untuk  simplisia  asal  Batu  adalah  0,4328%, simplisia  asal  Bogor  0,6034%,  da  nasal  Surabaya 1,2273%. Dengan demikian diperoleh nilai standar kadar  flavonoid  pada  simplisia  daun  beluntas adalah > 0,4%.
Penentuan  kadar  fenol  simplisia  daun beluntas  dilakukan  dengan  pereaksi Follin ciocalteau dan  Na 2 CO 3 .  Pembanding  yang digunakan adalah asam tanat dengan  persamaan baku  standar  y  =  0,0005x  -  0,0512  dan  nilai korelasi  dengan  harga  r  hitung  0,9858.
Keterangan:
A. Stomata anomositik (1. Celah, 2. Sel penutup, 3. Sel tetangga, 4. Sel
epidermis B. Rambut penutup multiseluler tipe kolaberasi
C. Rambut kelenjar tipe compositae A B C 1 3 2 4
Berdasarkan  hasil  penetapan  kadar  fenol diperoleh  data  kadar  fenol  untuk  simplisia  asal Batu  6,8306  %,  asal  Bogor  6,3908%,  dan  asal Surabaya 7,6897%. Oleh karena itu diperoleh nilai standar  kadar  fenol  total  pada  simplisia  daun beluntas sebesar >6%.
Penentuan  kadar  alkaloid  simplisia  daun beluntas  dilakukan  dengan  pereaksi bromocresol
green dan  buffer  pH  4.7.  Pembanding  yang digunakan adalah kafein dengan persamaan baku standar y = 0,0004x - 0,006 dan korelasi dengan harga  r  hitung  0,7602.  Kadar  alkaloid  dalam simplisia daun beluntas asal Batu adalah 1,3756%, asal  Bogor  0,9351%,  dan  asal  Surabaya  1,9792%. Dengan  demikian  nilai  standar  kadar  fenol  total pada simplisia daun beluntas adalah > 0,9%.
Gambar 4. Profil kromatogram dari simplisia daun Beluntas dengan menggunakan fase gerak toluen:etil asetat (7:3), fase diam silika gel F254 dan penampak noda vanilin sulfat 5%
Keterangan:
A: Simplisia kering daun Beluntas pada pengamatan visibel
B: Simplisia kering daun Beluntas pada pengamatan UV 254 nm C: Simplisia kering daun Beluntas pada pengamatan UV 366 nm
D: Simplisia kering daun Beluntas pada pengamatan visibel, setelah disemprot dengan Vanilin sulfat 5%
1: Simplisia kering daun Beluntas dari  Bogor
2: Simplisia kering daun Beluntas dari Batu
3: Simplisia kering daun Beluntas dari Surabaya

## KESIMPULAN
Profil  standarisasi  spesifik  simplisia  daun beluntas  meliputi  organoleptis  berupa  serbuk berwarna hijau dan berbau khas. Bentuk simplisia daun beluntas  secara  mikroskopik  yaitu  memiliki berkas  pembuluh  dengan  penebalan  spiral, stomata  tipe  anomositik,  dan  rambut  penutup. Simplisia daun beluntas memiliki kadar sari larut etanol ≥ 5% dan kadar sari larut air ≥ 26%, serta mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, polifenol, steroid dan terpen. Profil kromatogram
kandungan  metabolit  sekunder  simplisia  daun beluntas  secara  KLT  yang  terbaik  diperoleh dengan  menggunakan  fase  diam  silika  gel  F254 dan  fase  gerak  toluene  :  etl  asetat  (7:3).  Nilai standar  kadar  flavonoid  >  0,4%,  fenol  >  6%,  dan alkaloid  >0,9%.  Profil  standarisasi  non  spesifik simplisia  daun  beluntas  meliputi  kadar  susut pengeringan < 12%, kadar abu total < 16 %, kadar abu  larut  air  <  10%,  kadar  abu  tak  larut  asam  < 8%, dan pH simplisia 5.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahmad,    A.R.,    Juwita.,    Ratulangi,    S.A.D.,    dan    Malik,    A. 2015, PenetapanKadar  Fenolik  dan  Flavanoid  Total  Ekstrak Metanol    Buah    dan  daun  Patikala  ( Etlingera  elatior (Jack) R.M.SM), Pharm Sci Res , 2 (1) : 1-10.
BPOM    RI.    2005,  Standarisasi    Ekstrak    Tumbuhan    Obat Indonesia    Salah  Satu        Tahapan        Penting        Dalam Pengembangan    Obat    Asli Indonesia Info POM, Info POM , 6(4), Badan POM RI,Jakarta. Chang,  C.C.,  Yang,  M.H.,  Wem,  H.M.,  and  Chern,  J.C.,  2002. Estimation  of  Total  Flavonoid  Content  in  Propolis  by  Two Complementary  Colometric  Methods, Journal  of  Food  and Drug Analysis , 10(3):178-182.
Chun, O.K., Kim D.O., and Lee C.Y., 2003. Superoxide radical scavenging  activity  of  the  mayor  polyphenols  in  fresh  plums. Journal  of  Agricultural  and  Food  Chemistry, 51(27):8067- 8072.
Departemen    Kesehatan    RI.    1989,  Materia    Medika Indonesia.    Jilid    V,  Departemen  Kesehatan  Republik Indonesia, Jakarta.
John, B., Sulaiman C T., George, S.,  and Reddy, V.R.K., 2014. Spectrophotometric  Estimation  of  Total  Alkaloids  in  Selected Justicia  Species, International  Journal  of  Pharmacy  and Pharmaceutical Sciences, 6(5):647-648.
Koirewoa,  Y.A.,  2012,  Isolasi  dan  Identifikasi  Senyawa Flavonoid  dalam  Daun  Beluntas (Pluchea  indica  L.),  Jurnal Pharmacon, 1(1):47-52.
Radjani,  R.  S.M.  2013,  ‘Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol Daun Beluntas ( Pluchea  indica L.)  Terhadap Staphylococcus aureus,    Bacillus  subtilis dan Pseudomonas    aeruginosa ’. Skripsi ,    Fakultas Farmasi, Universitas Surabaya, Surabaya.
Sibarani,    V.R.,    Wowor,    P.M.,    Henoch,    A.    2013,    Uji Analgesik    Ekstrak  Daun    Beluntas  ( Pluchea  indica L.)    Pada Mencit  ( Mus  muculus ). Jurnal e-Biomedik , 1(1) : 621-628.
Sukaryana,  Y.  dan  Priabudiman,  Y.,  2014.  Pengaruh Pemberian Ekstrak Daun Beluntas ( Pluchea indica L) terhadap Total  Kolesterol  Darah  Broiler, Jurnal Penelitian  Pertanian Terapan, 14(3):152-157.
Sulastry,  T.  dan  Kurniawati,  N.  2010,  Isolasi  Steroid  dari Ekstrak  Metanol daun  Beluntas  ( Pluchea  indica L.). Jurnal Chemica , 11(1):  52-56.
Widyawati,  P.S.,  Budianta,  T.D.W.,  Gunawan,  D.I.,  dan Wongso, R.S., 2015 . Evaluation Antidiabetic Activity of Various Leaf Extracts of Pluchea indica Less. , International Journal of Pharmacognosy and Phytochemical Research, 7(3):597-603.
Wulandari,  V.,  Husain,  D.R.,  Sartini,  dan  Haedar,  N.,  2014, Pengujian  aktivitas  Antibakteri  dari  Ekstrak  Etanol  daun Beluntas ( Pluchea indica L.) Terhadap Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa, Skripsi.