Sandra et al.;Efektivitas Antibakteri Ekstrak Metanol…..Pharmacoscript Volume 5 No. 2, Agustus 2022

## EFEKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK METANOL DAUN BALIK ANGIN
( Alphitonia incana ) TERHADAP Escherichia coli MENGGUNAKAN DIFUSI SUMURAN
Eka Sandra * , Fitriyanti, Azmi Yunarti
Program Studi Farmasi, STIKES Borneo Lestari *Email: ekasandra91113@gmail.com
Received: 23/08/2022 , Revised: 30/08/2022 , Accepted: 30/08/2022, Published: 31/08/2022

## ABSTRAK
Indonesia  memiliki  hutan  tropis  terluas  di  dunia  dengan  potensi    tanaman  obat.  Salah  satunya tanaman  balik  angin  ( Alphitonia  incana (Roxb.)  Teijsm.  &  Binn.  Ex  Kurz.)  yang  merupakan genus  dari  Alphitonia  dilaporkan  memiliki  aktivitas  farmakologis  yaitu  antidiare,  antimikroba, dan antibakteri. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui apa saja golongan senyawa yang terkandung pada ekstrak metanol daun balik angin dan untuk mengetahui efektivitas antibakteri dari  ekstrak  metanol  daun  balik  angin  terhadap  bakteri E.  coli .  Uji  aktivitas  antibakteri  pada ekstrak  menggunakan  metode  difusi  sumuran  terhadap  bakteri E.Coli .  Dilakukan  skrining fitokimia  ekstrak  metanol  daun  balik  angin  ( Alphitonia  incana (Roxb.)  Teijsm.  &  Binn.  Ex Kurz.) dan uji antibakteri menggunakan metode difusi sumuran dengan variasi konsentrasi 1,66 mg/mL;  3,32  mg/mL;  6,64  mg/mL;  13,28  mg/mL;  26,56  mg/mL;  ciprofloxacin  5  µg/disk sebagai  kontrol  positif  dan  Na-CMC  0,5%  sebagai  kontrol  negatif.  Kandungan  senyawa  yang terdapat pada ekstrak metanol daun balik angin ( Alphitonia incana (Roxb.) Teijsm. & Binn. Ex Kurz.)  adalah  alkaloid,  steroid,  flavonoid,  fenol,  saponin,  dan  tanin.  Hasil  uji    antibakteri didapatkan rata-rata diameter zona hambat konsentrasi 1,66 mg/mL; 3,32 mg/mL; 6,64 mg/mL; 13,28  mg/mL;  26,56  mg/mL  beruturut-turut  adalah  6,9  mm;  8,28  mm;  9,41  mm;  10,05  mm; 10,91  mm  dan  klasifikasi  daya  hambat  pertumbuhan  bakteri  menunjukkan  bahwa  konsentrasi 1,66 mg/mL, 3,32 mg/mL, 6,64 mg/mL, dan 13,28 mg/mL memiliki kategori antibakteri sedang, konsentrasi  26,56  mg/mL  memiliki  kategori  antibakteri  kuat,  dan  kontrol  positif  memiliki kategori  sangat  kuat.  Hal  ini  juga  dibuktikan  dengan  analisis  SPSS  pada  uji Mann-Whitney didapatkan  bahwa  semua  konsentrasi  ekstrak  terdapat  perbedaan  bermakna  terhadap  kontrol positif.
Kata  kunci :  Antibakteri,  Daun  Balik  Angin  ( Alphitonia  incana Teijsm.  &  Binn.  Ex  Kurz.), Escherichia coli .

## ABSTRACT
Indonesia the large tropical forest in the world with potential medicinal plants. One of them is plant  turning  wind  (Alphitonia  incana (Roxb.)  Teijsm.  &  Binn.  Ex  Kurz .).  The  purpose  this study  was  to  determine  what  groups  of  compounds  contained  in  the  methanol  extract  and  to determine the antibacterial effectiveness of the methanol extract of leaves against the bacteria E. coli.  Antibacterial  activity  test  on  extract  using  well  diffusion  method  against  E.coli  bacteria. Phytochemical screening of the methanol extract the leaf of the wind (Alphitonia incana (Roxb.)
Sandra et al./Pharmacoscript, Volume 5, No, 2, Agustus 2022, 201-211 Safitri.,et al./Pharmacoscript, Volume 1, No. 2, Februari 2019, 1-12

## Pharmacoscript Volume 5 No. 2 Agustus 2022
Teijsm. & Binn. Ex Kurz.) and antibacterial test using the diffusion method with a concentration variation  of  1.66mg/mL;  3.32mg/mL;  6.64mg/mL;  13.28mg/mL;  26.56mg/mL;  ciprofloxacin 5g/disk  as  a  positive  control  and  0.5%  Na-CMC  as  a  negative  control.  The  content  of compounds  contained  in  the  methanol  extract  of  the  leaves  of  the  windsor  (Alphitonia  incana (Roxb.) Teijsm. & Binn. Ex Kurz.) are alkaloid, steroid, flavonoid, phenol, saponin, and tanin. The  results  the  antibacterial  test  showed  that  the  average  diameter  of  the  inhibition  zone  was 1.66mg/mL;  3.32mg/mL;  6.64mg/mL;  13.28mg/mL;  26.56mg/mL  respectively  were  6.9mm; 8.28mm; 9.41mm; 10.05mm; 10.91mm, and the classification the inhibition of bacterial growth showed that the concentrations of 1.66mg/mL, 3.32mg/mL, 6.64mg/mL, and 13.28mg/mL had a medium antibacterial category, the concentration was 26.56 mg/mL  has a strong antibacterial category, and positive control has a very strong category. This also evidenced by SPSS analysis on  the  Mann-Whitney  test,  it  was  found  that  there  were  significant  differences  in  all  extract concentrations against the positive control.
Keywords : Antibacterial Effectiveness, Leaf Balik Angin (Alphitonia incana Teijsm. & Binn. Ex Kurz. ), Escherichia coli.

## PENDAHULUAN
Indonesia  memiliki  hutan  tropis  terluas di dunia dengan potensi  tanaman obat. Dari sekitar  40.000    tanaman  obat  yang    dikenal di  dunia,  30.000  di  antaranya  diyakini berada  di  Indonesia.  Hanya  1.200  jenis tumbuhan  yang  digunakan  sebagai  bahan baku  obat  herbal.  Indonesia  mempunyai keunggulan  dalam  hal  varian  tanaman  yang tidak  dimiliki  oleh  kebanyakan  negara lainnya  di  dunia  (Nugroho  &  Ningsih, 2017). Salah satunya adalah pulau Kalimantan yang memiliki potensi pengetahuan  obat  tradisional  oleh  berbagai suku  dan  penggunaannya  masih  dalam bentuk  yang  sederhana.  Kalimantan  Selatan merupakan salah satu wilayah yang memiliki hutan yang kaya bahan alam  yang berkhasiat sebagai obat. Pemanfaatan keanekaragaman  hayati  obat  herbal  di Kalimantan didukung dengan potensi
pengetahuan  tradisional  dari  berbagai  suku asli  di  Kalimantan.  Pemanfaatan  berbagai tanaman  berkhasiat  sebagai  obat  atau sebagai  zat  esensial  yang  telah  digunakan secara empiris.
Salah  satu  etnis  di  Kalimantan  yang masih  memanfaatkan  pengetahuan  lokal tentang  pemanfaatan  tumbuhan  sebagai kebutuhan  sehari-hari  yaitu  tumbuhan  balik angin ( Alphitonia incana (Roxb.) Teijsm. & Binn.  ex  Kurz)  yang  digunakan  sebagai sabun dan sampo oleh etnis Dayak Tunjung. Balik  angin  ( A.  incana (Roxb.)  Teijsm.  & Binn.  ex  Kurz)  merupakan  keluarga  dari Rhamnaceae.  Studi  etnofarmakologi  telah mendokumentasikan bahwa banyak komunitas lokal di Filipina masih menggunakan  tumbuhan  ini  sebagai  obat untuk  menyembuhkan  berbagai  penyakit seperti  masuk  angin  dan  sakit  perut.  Genus dari Alphitonia dilaporkan memiliki
Sandra et al.;Efektivitas Antibakteri Ekstrak Metanol…..Pharmacoscript Volume 5 No. 2, Agustus 2022
aktivitas farmakologis yaitu antidiare, antimikroba, dan antibakteri  (Fuentes et  al ., 2020).
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui  apa  saja  golongan  senyawa yang terkandung pada ekstrak metanol daun balik  angin  ( A.  incana (Roxb.)  Teijsm.  & Binn.  ex  Kurz).  Dan  untuk  mengetahui efektivitas  antibakteri  dari  ekstrak  metanol daun balik angin ( A. incana (Roxb.) Teijsm. & Binn. ex Kurz) terhadap bakteri E. coli .
Penelitian  dari  Australia  Cock  (2020) menyebutkan  bahwa  ekstrak  metanol  daun balik  angin  ( A.  incana (Roxb.)  Teijsm.  &
Binn.  ex  Kurz)  terdapat  senyawa  metabolit sekunder  yaitu  alkaloid,  fenol,  saponin, flavonoid,  tanin,  triterpena,  dan  fitosteroid. Dari  data  tersebut  ekstrak  metanol  daun balik  angin  ( A.  incana (Roxb.)  Teijsm.  &
Binn.  ex  Kurz)  lebih  banyak  mengandung senyawa  metabolit  sekunder,  sehingga peneliti  lebih  memilih  metanol  sebagai pelarutnya.
Senyawa-senyawa yang terkandung dalam ekstrak metanol  daun balik angin  ( A. incana (Roxb.)  Teijsm.  &  Binn.  ex  Kurz) dilaporkan  mempunyai  aktivitas  sebagai antibakteri  dan  menghambat  pertumbuhan bakteri  patogen  (Rini  et  al.,  2017).  Cock (2020)  melaporkan  bahwa  MIC  ( Minimum Inhibitory  Concentration )  ekstrak  metanol
daun balik angin ( A. incana (Roxb.) Teijsm. &  Binn.  ex  Kurz)  terhadap  bakteri E.  coli sebesar  415μm/mL  yang  menggunakan dengan  metode  difusi  cakram.  Berdasarkan uraian  tersebut,  peneliti  tertarik  untuk melakukan  penelitian  tentang  uji  efektivitas antibakteri  menggunakan  ekstrak  metanol daun balik angin ( A. incana (Roxb.) Teijsm. &  Binn.  ex  Kurz)  terhadap  bakteri E.  coli menggunakan  metode  difusi  sumuran  untuk melihat diameter zona hambat.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah  autoklaf  (ALL  amerikan ® ),  baki, batang  L,  batang  pengaduk,  bunsen,  cawan penguap,  cawan  petri,  corong  kaca,  cotton swab,  erlemenyer  (Pyrex ® ),  gelas  beker (Pyrex ® ),  gelas  ukur,  inkubator,  jangka sorong,  kaca  arloji, Laminar  Air  Flow (LAF), magnetic stirrer hotplate , mikropipet,  ose, oven (Thermo Scientific ® ), rotary  evaporator (IKRF10 ® ),  spatula, tabung  reaksi  (Iwaki ® ),  dan waterbath (Memmart ® ).
Bahan  yang  digunakan  pada  penelitian ini  adalah  alkohol,  amil  alkohol,  asam asetat,  asam  klorida  (HCl),  asam  sulfat (H2SO4),  aquadest,  BaCl2,  biakan E.  coli , ciprofloxacin  5  µg,  Na-CMC  0,5%,  ekstrak

## Pharmacoscript Volume 5 No. 2 Agustus 2022
metanol  daun  balik  angin  ( A.  excelsa ), FeCl3, gelatin, kloroform, magnesium (Mg), media  MHA  ( Mueller  Hinton  Agar ),  media NA ( Nutrient Agar ), NaCl, pelarut metanol, pereaksi Dragendorff ,  pereaksi Mayer , pereaksi Wagner dan spiritus.

## Jalannya Penelitian
1. Pengumpulan Bahan dan Determinasi
Sampel  daun  balik  angin  ( A.  incana (Roxb.)  Teijsm.  &  Binn.  ex  Kurz)  diambil dari  Tahura,  Karang  Intan,  Kalimantan Selatan.  Pengambilan  dilakukan  pada  bulan November  2021.  Sampel  yang  digunakan berupa daun hijau yang segar dan masih ada dipohonnya.  Tanaman  balik  angin  ( A. incana (Roxb.)  Teijsm.  &  Binn.  ex  Kurz) dideterminasi di Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Pusat
Penelitian  Biologi  Cibinong  Bogor  dengan nomor B-208/VDI.05.07/1/2022.

## 2. Pembuatan  Simplisia  Daun  Balik

## Angin
Daun  balik  angin  ( A.  incana (Roxb.)
Teijsm.  &  Binn.  ex  Kurz)  yang  hijau  dan segar dilakukan sortasi basah, dicuci dengan air  bersih  dan  mengalir.  Daun  balik  angin ( A.  incana (Roxb.)  Teijsm.  &  Binn.  ex Kurz)  dilakukan  proses  perajangan  agar mempermudah proses pengeringan.
Selanjutnya  daun  dikeringkan  dengan  cara diangin-anginkan  atau  dijemur  di  bawah
sinar  matahari  menggunakan  wadah  yang ditutup dengan kain hitam. Setelah simplisia kering  dilakukan  sortasi  kering  untuk memisahkan tanaman yang tidak diinginkan dan  kotoran  yang  tertinggal,  lalu  diblender sampai  halus,  dan  ayak  dengan  pengayakan nomor mesh 40 (Fitriyanti et al ., 2019).
3. Pembuatan  Ekstrak  Metanol  Daun Balik Angin
Metode  ekstrak  yang  digunakan  pada penelitian ini adalah metode ekstraksi dingin yaitu maserasi. Daun balik angin ( A. incana (Roxb.)  Teijsm.  &  Binn.  ex  Kurz) dihaluskan  menggunakan  blender  menjadi serbuk kasar. Simplisia daun balik angin ( A. incana (Roxb.)  Teijsm.  &  Binn.  ex  Kurz) ditimbang  sebanyak  50  g.  Serbuk  simplisia daun  balik  angin  direndam  dengan  pelarut metanol sebanyak 500 mL (1:10) selama 3 x 24  jam.  Lalu  disaring  dengan  kertas  saring setiap  24  jam  dengan  pengadukan  setiap  6 jam pertama dan pengadukan juga dilakukan setiap  24  jam.  Dilakukan  remaserasi sebanyak dua kali agar dapat mengoptimalkan penyarian. Filtrat dipisahkan dengan pelarutnya menggunakan rotary  evaporator lalu  ekstrak  dipekatkan dengan  waterbath  hingga  diperoleh  ekstrak kental  dengan  bobot  tetap.  Ekstrak  kental dihitung rendemen yang diperoleh persentase  bobot  (b/b)  antara  bobot  yang
diperoleh  dengan  bobot  serbuk  simplisia yang  digunakan  atau  dihitung  dengan rumus:
% Rendemen ekstrak = (Bobot Ekstrak yang
Diperoleh)/(Bobot
Simplisia yang Diekstraksi) x 100%
(Cock, 2020; Fitriyanti et al ., 2019).
4. Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Metanol Daun Balik Angin
4.1. Uji Alkaloid
Ekstrak  ditimbang  sebanyak  0,5  g  lalu ditambah 1 mL HCl 2 N dan 9 mL aquadest, digojog sampai homogen, kemudian dipanaskan  di  atas  penangas  air  selama  2 menit, ditunggu hingga dingin dan disaring. Filtrat  direaksikan  dengan  pereaksi Mayer,
Dragendorff ,  dan Wagner masing-masing  2 tetes.  Endapan  kekuningan  yang  terbentuk dengan  pereaksi Mayer ,  endapan  merah dengan  pereaksi Dragendorff ,  dan  endapan coklat  yang  terbentuk  dengan  pereaksi Wagner  menunjukkan  adanya  alkaloid (Kumalasari & Musiam, 2019).

## 4.2. Uji Steroid – Triterpenoid
Sampel  ekstrak  metanol  daun  balik angin  ditimbang  sebanyak  0,1  g  kemudian ditambahkan 2-3 mL kloroform dan 10 tetes asam  asetat  anhidrat  serta  2-3  tetes  asam sulfat (pereaksi Lieberman - Bourchad ) melalui  dinding  tabung.  Uji  positif  steroid memberikan  warna  biru  sampai  hijau,
sedangkan  terbentuknya  warna  merah  atau ungu  menandakan  bahwa  ekstrak  positif mengandung  triterpenoid  diujikan  dengan reagen Liebermann-Bourchard (Ramadhan et al ., 2020).

## 4.3. Uji Flavonoid
Ekstrak  sebanyak  0,5  g  ditambah dengan  serbuk  magnesium  dan  diaduk sampai  homogen,  kemudian  ditetesi  dengan HCl 2 N dan beberapa amil alkohol. Larutan dikocok  dan  biarkan  hingga  terbentuk larutan  yang  memisah.  Adanya  flavonoid ditandai  dengan  perubahan  warna  larutan menjadi kuning sampai merah, warna merah pada  flavonoid  dikarenakan  terbentuknya garam flavilium (Maslahat et al ., 2017).

## 4.4. Uji Fenol
Larutan  uji  sebanyak  1  mL  direaksikan dengan  larutan  besi  (III)  klorida  10%,  jika terjadi  perubahan  warna  biru  tua  atau kehitaman menunjukan adanya fenol (Fitriyanti et al ., 2019).

## 4.5. Uji Saponin
Sebanyak 0,5 g ekstrak ditambahkan 10 mL  aquadest  hangat  dan  dikocok  kuat hingga  terbentuk  buih  1-10  cm  yang  stabil selama  tidak  kurang  dari  10  menit.  Pada penambahan  1  tetes  HCl  2  N,  buih  tidak hilang (Fitriyanti et al ., 2019).

## Pharmacoscript Volume 5 No. 2 Agustus 2022

## 4.6. Uji Tanin
Sebanyak 0,1 g ekstrak kental ditambah 10  mL  aquadest,  kemudian  disaring  dan ditambahkan  2  mL  filtrat  dengan  2  mL larutan  gelatin  1%  yang  mengandung  NaCl 10%. Adanya tanin ditandai dengan terbentuknya endapan putih (Fitriyanti et al .,
2019).
5. Uji Antibakteri
5.1. Sterilisasi Alat dan Bahan Alat-alat gelas disterilkan menggunakan oven  dengan  suhu  170 o C  selama  1  jam.
Untuk  media  disterilkan  menggunakan autoklaf  pada  suhu  121 o C  selama  15  menit.
Sedangkan jarum ose disterilkan menggunakan  pemijaran  dengan  nyala  api Bunsen (Fitriyanti et al ., 2019).
5.2. Peremajaan Bakteri
Media  NA  sebanyak  0,56  g  dilarutkan dalam  20  mL aquadest (28  g/1000  mL) menggunakan erlenmeyer. Selanjutnya dihomogenkan  dengan  magnetic  stirrer hotplate.  Dituangkan  pada  3  tabung  reaksi dan  ditutup  dengan  aluminium  foil.  Media disterilkan  dalam  autoklaf  dengan  suhu 121ºC  selama  15  menit  dan  tekanan  1  atm, lalu  dibiarkan  pada  suhu  ruangan  selama  ± 30  menit  sampai  media  memadat  pada kemiringan  30ºC  (Fitriyanti et  al .,  2019).
Selanjutnya  bakteri E.  coli diambil  dengan menggunakan ose steril dari kultur
murninya  lalu  digoreskan  secara  zig-zag. Kemudian diinokulasikan dalam media agar miring.  Diinkubasi  dalam  inkubator  pada suhu  37ºC  selama  1x24  jam  (Retnaningsih et al ., 2019).
5.3. Pembuatan Larutan Standar 0,5 Mc-

## Farland
Membuat  larutan  standar  0,5 Mc farland yaitu  dengan  cara  mencampurkan Campurkan  larutan  H 2 SO 4 1%  sebanyak 9,95  mL  dan  larutan  BaCl 2 1%  sebanyak 0,05 mL, kemudian kocok sampai terbentuk larutan yang keruh.
5.4. Pembuatan Suspensi Bakteri Biakan  bakteri E.  coli yang  telah diinokulasi  diambil  menggunakan  ose  steril dan  dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi yang  berisi  NaCl  0,9%  steril  2  mL. Kemudian  dihomogenkan  menggunakan vortex  dan  inkubasi  selama  24  jam  pada suhu  37 o C  lalu  dibandingkan  kekeruhannya dengan larutan Mc Farland .

## 5.5. Pembuatan  Media  Mueller  Hinton Agar (MHA)
Sebanyak  7,6  g  media Mueller  Hinton Agar (MHA)  (38  g/1000  mL)  dilarutkan dalam  200  mL  aquadest  dipanaskan  sampai larut.  Media  disterilisasi  menggunakan autoklaf selama 15 menit pada suhu 121°C. Dinginkan sampai suhu ± 50°C, selanjutnya dibagi ke dalam 8 cawan petri steril. Setelah
Sandra et al.;Efektivitas Antibakteri Ekstrak Metanol…..Pharmacoscript Volume 5 No. 2, Agustus 2022
dingin,  medium  padat  disimpan  dalam kulkas (Fitriyanti et al ., 2019).

## 5.6. Uji  Antibakteri  dengan  Metode Sumuran
Media  MHA  dituang  kedalam  cawan petri  dan  biarkan  memadat.  Bakteri E.  coli di  goreskan  ke  dalam  media  MHA, kemudian  buat  lubang  sebanyak  yang diperlukan  menggunakan cork  borer .  Pada masing-masing  lubang  masukan  ekstrak dengan berbagai konsentrasi, kontrol positif, dan  kontrol  negatif.  Ekstrak  metanol  daun balik  angin  ( A.  incana (Roxb.)  Teijsm.  & Binn. ex Kurz) dengan bermacam konsentrasi  dimasukan  ke  dalam  sumuran pada  media  MHA  sebanyak  20  μL menggunakan mikropipet dengan pengerjaan  secara  steril.  Media  yang  sudah dilakukan  pengujian  dibungkus  dengan alumunium  foil.  Selanjutnya  cawan  petri yang berisi bakteri dengan berbagai konsentrasi  esktrak  dimasukkan  ke  dalam kulkas  pada  suhu  4°C  selama  24  jam  agar senyawa  berdifusi  pada  media.  Dilanjutkan proses  inkubasi  ke  dalam  inkubator  dengan suhu  37°C  selama  2  kali  24  jam.  Setelah zona  hambat  terbentuk  ukur  diameter  zona hambat  menggunakan  jangka  sorong  (Basir et al ., 2017; Fitriyanti et al ., 2019).

## Analisis Data
Data hasil yang didapat berupa diameter zona  hambat.  Data  tersebut  dianalisis dengan  menggunakan  SPSS  untuk  melihat apakah  ada  perbedaan  dari  masing-masing kelompok  uji  yang  mengandung  kontrol positif ciprofloxacin dan kontrol negatif Na- CMC  0,5%  dengan  berbagai  konsentrasi ekstrak metanol daun balik angin ( A. incana (Roxb.)  Teijsm.  &  Binn.  ex  Kurz)  dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri E.  coli . Data  yang  didapat  dianalisis  menggunakan uji normalitas dan uji homogenitas. Jika data yang  didapat  terdistribusi  normal  dan homogen  maka  dilanjutkan  dengan  uji One Way ANOVA .  Jika  data  yang  didapat  tidak terdistribusi  normal  dan  tidak  homogen maka  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  uji Kruskall-Wallis dan  uji Mann- whitney .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  determinasi  menunjukkan  bahwa tanaman  yang  digunakan  adalah  tanaman balik  angin  yang  termasuk  dalam  spesies Alphitonia  incana (Roxb.)  Teijsm.  &  Binn.  ex Kurz .  Daun  balik  angin  ( A.  incana (Roxb.) Teijsm.  &  Binn.  ex  Kurz)  hijau  dan  segar sebanyak  1.119  g  dibuat  simplisia.  Tahap- tahap  pembuatan  simplisia  dimulai  dari pengumpulan,  sortasi  basah,  pencucian,
perajangan,  penjemuran,  sortasi  kering, penyerbukan,  dan  penyimpanan.  diperoleh bobot  simplisia  330,3  g  pada  bobot  daun 1.119  g.  Dan  didapatkan  hasil  rendemen simplisia  daun  balik  angin  ( A.  incana (Roxb.)  Teijsm.  &  Binn.  ex  Kurz)  adalah sebesar  29,51%.  Lalu  dilakukan  ekstraksi dengan  metode  maserasi  dilakukan  dengan serbuk  daun  balik  angin  ( A.  incana (Roxb.)
Teijsm.  &  Binn.  ex  Kurz)  ditimbang sebanyak 50 g, ditambahkan pelarut metanol sebanyak  500  mL  (1:10).  Kemudian didiamkan selama 3 hari sambil diaduk tiap 24  jam,  disaring  dan  diambil  filtratnya. Filtrat dipekatkan sampai ekstrak didapatkan  bobot  tetap.  Diperoleh  bobot ekstrak 13,1118 g dengan rendemen ekstrak sebesar 26,2236%.
Hasil  skrining  fitokimia  yang  terdapat pada  ekstrak  metanol  daun  balik  angin  ( A. incana (Roxb.)  Teijsm.  &  Binn.  ex  Kurz) menunjukan  bahwa  sampel  mengandung alkaloid,  fenol,  flavonoid,  tanin,  saponin, steroid.
Pengujian efektivitas antibakteri ekstrak daun  balik  angin  dilakukan  menggunakan media  MHA  yang    yang  sudah  steril  lalu ditanami bakteri menggunakan cotton swap . Pengujian  antibakteri  ekstrak  metanol  daun balik  angin  ( A.  incana (Roxb.)  Teijsm.  & Binn.  ex  Kurz) dibuat dengan 5 konsentrasi yaitu  1,66  mg/mL,  3,32  mg/mL,  6,64 mg/mL,  13,28  mg/mL,  dan  26,56  mg/mL dengan  ciprofloxacin  5µg/disk  sebagai kontrol  positif  dan  Na-CMC  0,5%  sebagai kontrol negatif.
Tabel 1. Diameter zona hambat
Konsentrasi ekstrak metanol daun balik angin & kontrol Replikasi Rata-rata (mm) ± Standar Deviasi Kategori 1 (mm) 2 (mm) 3 (mm) 4 (mm) 1,66 mg/mL 6,8 6,9 6,9 7 6,9 ± 0,081 Sedang 3,32 mg/mL 8,05 8,1 8,5 8,5 8,28 ± 0,246 Sedang 6,64 mg/mL 8,4 8,9 9,7 10,65 9,41 ± 0,983 Sedang 13,28 mg/mL 8,55 9,7 10,45 11,5 10,05 ± 1,242 Sedang 26,56 mg/mL 9,8 11 11,35 11,5 10,91 ± 0,77 Kuat Kontrol + 27,6 28,05 28,8 29,5 28,48 ± 0,837 Sangat kuat Kontrol - 0 0 0 0 0 ± 0 Tidak ada daya hambat Keterangan : Kontrol (+) : Ciprofloxacin 5µg Kontrol (-)  : NaCMC 0,5% Berdasarkan  klasifikasi  daya  hambat pertumbuhan  bakteri  (Tabel  1),  hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  konsentrasi
1,66 mg/mL; 3,32 mg/mL; 6,64 mg/mL; dan
13,28 mg/mL dikategorikan sebagai antibakteri  sedang,  pada  konsentrasi  26,56
mg/mL  dikategorikan  sebagai  antibakteri kuat,  sedangkan  pada  kontrol  positif dikategorikan  sebagai  antibakteri  sangat kuat.
Analisis  data  dilakukan  menggunakan SPSS  versi  25,  data  dengan Test  of Normality diperoleh  nilai  sig  (p>0,05) sehingga  data  terdistribusi  normal.  Pada Test  of  Homogenity  of  Variances diperoles nilai  sig  (p<0,05)  sehingga  data  tidak homogen.  Uji  analisis  dilanjutkan  dengan uji  non  parametrik  yaitu  uji Kruskal  Wallis dan uji Mann-Whitney .
Hasil  uji Mann-Whitney dapat  dilihat pada  Tabel  2,  adanya  perbedaan  antara  dua kelompok dapat dikatakan terdapat perbedaan  bermakna  apabila  nilai  sig  yang diperoleh (p<0,05). Pada hasil analisis dapat
diperoleh  nilai  sig  pada  konsentrasi  ekstrak metanol daun balik angin ( A. incana (Roxb.) Teijsm. & Binn. ex Kurz) 1,66 mg/mL, 3,32 mg/mL,  6,64  mg/mL,  13,28  mg/mL,  dan 26,56  mg/mL  terhadap  kontrol  positif antibiotik  ciprofloxacin  5  µg/ disk bertutur- turut yaitu 0,020; 0,020; 0,021; 0,021; 0,021 yang  berarti  data  (p<0,05),  maka  dapat disimpulkan  bahwa  semua  konsentrasi ekstrak terdapat perbedaan bermakna terhadap  kontrol  positif.  Hal  tersebut menunjukkan  bahwa  semua  konsentrasi ekstrak metanol daun balik angin ( A. incana (Roxb.) Teijsm. & Binn. ex Kurz) memiliki aktivitas  sebagai  antibakteri  terhadap E. coli ,  akan  tetapi  tidak  memiliki  kekuatan penghambatan  yang  setara  dengan  kontrol positif antibiotik ciprofloxacin 5µg/ disk . Tabel 2. Hasil analisis SPSS dengan uji Mann-Whitney
Konsentrasi Ekstrak (mg/mL) dan Kontrol +/- K (+) K (-) 1,66 3,32 6,64 13,28 26,56 K (+) - 0,014 0,020 0,020 0,021 0,021 0,021 K (-) 0,014 - 0,013 0,013 0,014 0,014 0,014 1,66 0,020 0,013 - 0,019 0,020 0,020 0,020 3,32 0,020 0,013 0,019 - 0,081*  0,020 0,020 6,64 0,021 0,014 0,020 0,081* - 0,468* 0,043 13,28 0,021 0,014 0,020 0,020 0,468* - 0,309* 26,56 0,021 0,014 0,020 0,020 0,043*  0,309 * - Keterangan :  K (+) : Kontrol Positif Ciprofloxacin 5µg/ disk K (-) : Kontrol Negatif Na-CMC 0,5 %
(*) : Menunjukkan tidak ada perbedaan yang signifikan (p>0,05)
Sedangkan  untuk  nilai  sig  konsentrasi ekstrak  dengan  kontrol  negatif  Na-CMC 0,5%  secara  berturut-turut  pada  konsentrasi
1,66  mg/mL,  3,32  mg/mL,  6,64  mg/mL, 13,28  mg/mL,  dan  26,56  mg/mL  yaitu 0,013;  0,013;  0,014;  0,014;  0,014  yang
berarti data (p<0,05) maka dapat disimpulkan  bahwa  terdapat  perbedaan bermakna  dari  semua  konsentrasi  ekstrak terhadap kontrol negatif Na-CMC 0,5%.

## KESIMPULAN
Ekstrak  metanol  daun  balik  angin  ( A. incana (Roxb.)  Teijsm.  &  Binn.  ex  Kurz) yang  diekstraksi  mempunyai  kandungan senyawa  berupa  alkaloid,  fenol,  flavonoid, tanin, saponin, dan steroid.
Ekstrak  metanol  daun  balik  angin  ( A. incana (Roxb.)  Teijsm.  &  Binn.  ex  Kurz) dapat  menghambat  bakteri E.  coli dengan rata-rata zona hambat terbesar pada konsentrasi  26,56  mg/mL  yaitu  10,91  mm yang  termasuk  dalam  kategori  daya  hambat kuat.  Namun  efektivitas  hambatan  masih belum setara dengan kontrol positif.

## DAFTAR PUSTAKA
Basir,  A.,  K.  Tarman,  Desniar.  2017.
Aktivitas Antibakteri dan Antioksidan Alga  Hijau Halimeda  gracilis dari Kabupaten  Kepulauan  Seribu. JPHPI.
20(2) : 211-218.
Cock, I. E. 2020. Alphitonia excelsa (Fenzl) Benth .  Leaf    Extracts  Inhibit  the
Growth  of  a  Panel  of  Pathogenic Bacteria. Pharmacognosy Communications. 10(2): 67 – 74.
Fitriyanti.,  Abdurrazaq,  M.  Nazarudin. 2019.  Uji  Efektivitas  Antibakteri
Esktrak  Etil  Asetat  Bawang  Dayak ( Eleutherine palmifolia Merr.) Terhadap Staphylococcus Aureus Dengan  Metode  Sumuran. Jurnal Ilmiah Manuntung. 5(2) : 174-182.
Fuentes,  R.G.,  Valencio,  A.L.,  Cassera,
M.B., Kingston, D.G.I. 2020.
Antiproliferative  and  Antiplasmodial Investigation  of Alphitonia  excelsa and Arcanngelesia  flava.  Phillippine Journal of Science. 149(1): 115-120.
Kumalasari,  E.  &  S.  Musiam.  2019.
Perbandingan Pelarut Etanol-Air
Dalam Proses Ekstraksi Daun Bawang
Dayak  ( Eleutherine  Palmifolia Linn) Terhadap Aktivitas Antioksidan
Dengan  Metode  Dpph. Jurnal  Insan Farmasi Indonesia. 2(1) : 98-107.
Maslahat,  M.,  Nurilmala,  F.,  &  Harpeni,  L.
2017.  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak Air Simplisia Daun Sembung ( Blumea balsamifera ). Jurnal  Sains  Nat.  3(2):
129-136 .
Nugroho,  R.A.  &  E.A.  Ningsih.  2017. Info Komoditi  Tanaman  Obat.  Produksi Tanaman Obat. Badan Pengkajian dan Pengembangan Perdagangan, Jakarta. Ramadhan, H., Andina, L., Vebruati, Nafila,
Yuliana,  K.A.,  Baidah,  D.,  Lestari,
N.P.  2020.  Perbandingan  Rendemen dan  Skrining  Fitokimia  Dari  Ekstrak Etanol  96%  Daun,  Buah  dan  Kulit
Buah Terap ( Artocarpus
odoratissimus Blanco). Jurnal  Ilmiah
Farmako Bahari. 11(2) : 103-112.
Retnaningsih,  A.,  A.  Primadiamanti,    A.
Febrianti.  2019.  Uji  Daya  Hambat
Ekstrak Etanol Daun Ungu ( Graptophyllum  pictum (L.)  Griff)
Terhadap Bakteri Staphylococcus epidermidis dan Bakteri
Propionibacterium  acnes Penyebab
Jerawat  Dengan  Metode  Cakram.
Jurnal Analis Farmasi. 4(1) : 1- 9.
Rini,  A.A.,  Suprianto,  H.  Rahmatan.  2017.
Skrining Fitokimia
dan Uji
Antibakteri  Ekstrak  Metanol  Buah Kawista  ( Limonia  acidissima L.)  dari
Daerah Kabupaten Aceh Besar
Terhadap  Bakteri Escherichia  coli .
Jurnal  Ilmiah  Mahasiswa  Fakultas
Keguruan dan Ilmu Pendidikan
Unsyiah. 2(1).