Indonesian Journal of Pharmaceutical Science and Technology Journal Homepage : http://jurnal.unpad.ac.id/ijpst/ UNPAD
Evaluation Patch of Rhizoma Extract Kencur ( Kaempferia galanga L.) as

## Anti-Inflammatory with Enhancer

## Hesti Riasari*, Revika Rachmaniar, Sri Wahyuni
Department of Pharmaceutical Biology, Indonesia School of Pharmacy, Bandung - Indonesia
Submitted 9 October 2018; Revised 8 January 2019; Accepted 16 January 2019; Published 27 June 2019 *Corresponding author: hmm_riasari@yahoo.com
Abstract Kencur ( Kaempferia galanga L.) is a family of Zingiberaceae. Several studies have shown that kencur can  help  reduce  inflammation  because  kencur  is  known  to  contain  anti-inflammatory  compounds, namely  marker  compounds  from  flavonoids,  kaempferol.  For  the  development  of  pharmaceutical preparations, research on anti-inflammatory plasters containing 96% ethanol extract, n-hexane extract, ethyl acetate extract and 70% ethanol extract from ginger rhizome with the addition of penetration enhancer  (enhancer),  namely  propylene  glycol.  This  anti-inflammatory  plaster  was  tested  for  its activity in 5 groups of Wistar strain rat feet which had been induced 1% carrageenan (negative control); positive control (diclofenac sodium), ethanol96% extract, n-hexane extract, ethyl acetate extract and 70% ethanol extract from kencur rhizome and compared with plaster of kencur rhizome ethanol extract without enhancer. The results showed the effect of adding enhancers 30 minutes after administration. 96% ethanol extract and ethyl acetate extract had reduced inflammation by 79.99% in rat test animals compared to plaster ethanol extract of rhizome kencur without the addition of enhancers.
Keywords: Anti-inflammatory, enhancer, Kaempferia galanga . L., patch, propylene glycol.
Evaluasi Sediaan Plester dari Ekstrak Rimpang Kencur ( Kaempferia galanga L.) sebagai Anti-Inflamasi dengan Penambahan Peningkat Penetrasi
Abstrak Kencur ( Kaempferia galanga L.) merupakan famili Zingiberaceae. Beberapa penelitian membuktikan bahwa kencur dapat membantu mengurangi peradangan karena kencur diketahui mengandung senyawa antiradang yaitu senyawa penanda dari flavonoid, kaempferol. Untuk pengembangan sediaan farmasi, dilakukan  penelitian  tentang  plester  antiinflamasi  yang  mengandung  ekstrak  etanol  96%,  ekstrak n-heksan, ekstrak etil asetat dan ekstrak etanol 70% dari rimpang kencur dengan penambahan peningkat penetrasi ( enhancer ) yaitu propilen glikol. Plester antiinflamasi ini diiuji aktivitasnya pada 5 kelompok kaki tikus galur Wistar yang telah diinduksi karagenan 1% (kontrol negatif); kontrol positif (natrium diklofenak),  ekstrak  etanol96%,  ekstrak  n-heksan,  ekstrak  etil  asetat  dan  ekstrak  etanol  70%  dari rimpang kencur dan dibandingkan dengan plester ekstrak etanol rimpang kencur tanpa enhancer. Hasil penelitian menunjukkan pengaruh penambahan enhancer pada 30 menit setelah pemberian, Ekstrak etanol 96% dan ekstrak etil asetat sudah mengurangi peradangan sebanyak 79,99% pada hewan uji tikus dibandingkan dengan plester ekstrak etanol rimpang kencur tanpa penambahan enhancer .
Kata Kunci: Anti-inflamasi, Kaempferia galanga L, plester, peningkat penetrasi, propilen glikol
1. Pendahuluan Kulit adalah bagian terluar dari tubuh sehingga merupakan organ pertama yang dapat kontak dengan berbagai rangsangan fisika atau kimia. Pemberian obat melalui kulit sering menawarkan alternatif rute pelepasan yang lebih lambat dan lebih terkontrol ke aliran darah. Mekanisme bagaimana obat berpenetrasi ke kulit dan masuk ke aliran darah bukanlah hal yang mudah karena kulit bertindak sebagai pembatas alami. Oleh karena itu, penting untuk memahami struktur kulit dan pada stratum korneum tertentu atau permukaan lebih luar sebelum mencoba menempatkan obat untuk melaluinya. Secara struktural, kulit terdiri dari dua bagian utama; bagian luar, lapisan tipis disebut epidermis dan bagian dalam lebih tebal disebut dermis. 1
Ada tanda-tanda peradangan, seperti rubor (kemerahan), kalor (panas), dolor, tumor (bengkak), dan penurunan fungsi dari organ yang terkena radang. Respon peradangan dapat dikenali dari rasa sakit, kulit lebam, demam yang  disebabkan  karena  terjadi  perubahan pada pembuluh darah di area infeksi, seperti pembesaran diameter pembuluh darah disertai peningkatan aliran darah di daerah infeksi. Hal ini yang membuat kulit  tampak lebam kemerahan.
Kencur ( Kaempferiae galanga L.) yang termasuk suku temu-temuan (Zingiberaceae) merupakan terna kecil yang tumbuh subur di daerah dataran rendah atau pegunungan yang tanahnya gembur. 2 Kandungan kimia dalam ekstrak minyak atsiri dari kencur yang telah diteliti oleh 3 diantaranya yaitu 1,21-dokosadin, asam tridekaoat, pentadekan, asam propionate, beta-sitosterol dan kandungan kimia terbesar didalam kencur yaitu Etil p- metoksisinamat, juga disebutkan bahwa kandungan eukaliptol, karvon, pentadekan dan metal sinamat.
Gambar 1. Struktur kimia kaempferol
Salah  satu  zat  kimia  pada  rimpang kencur bersifat antiinflamasi atau antiradang, yaitu kaempferol. Kaempferol mempunyai kemampuan  menghambat  proses  inflamasi dengan  cara  menghambat  ekspresi  enzim cyclooxygenase-2 (COX-2).
Penelitian  tentang  efek  anti-inflamasi ekstrak etanol rimpang kencur dengan menggunakan model in vitro mengatakan bahwa rimpang kencur terbukti memiliki efek  antiinflamasi.  Oleh  karena  itu,  ekstrak kencur  berpotensi  untuk  dijadikan  plester antiinflamasi untuk membantu mempercepat proses penyembuhan inflamasi. 4,5
Plester obat merupakan sediaan yang bersifat lentur mengandung satu atau lebih zat  aktif.  Sediaan  tersebut  dimaksudkan untuk digunakan pada kulit. Plester obat dirancang  untuk  mempertahankan  zat  aktif kontak langsung dengan kulit yang mungkin diabsorbsi secara perlahan, atau bertindak sebagai bahan keratolitik atau protektif. 6 Peningkat penetrasi ( enhancer ) adalah bahan yang dapat meningkatkan permeabilitas kulit ataupun mengurangi impermeabilitas kulit. Bahan peningkat penetrasi tidak memiliki efek terapi, tetapi dapat mentransport obat dari bentuk sediaan ke dalam kulit. 7 Alasan dibutuhkan penggunaan bahan peningkat penetrasi adalah adanya barier penetrasi, yaitu stratum korneum. Peningkatan penetrasi obat dapat dilakukan menggunakan peningkat penetrasi kimia maupun fisika. 8

## 2. Metode
2.1.  Alat Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah timbangan analitik (Henherr dan Sartorius), maserator, rotavapor ( rotary vaporator ) (IKA), labu vaporasi (IKA), vakum (IKA) dan labu penampung (IKA), oven, mortir dan stamper, cawan penguap, pinset (Meiden), batang pengaduk, spatula, pelat tetes, disposable spuit (OneMed), serta alat-alat gelas (pyrex) yang biasa digunakan dalam laboratorium.
2.2.  Bahan Bahan yang digunakan pada penelitian
ini adalah rimpang kencur ( Kaempferia galanga L.),  pelarut untuk maserasi etanol 96%  (Brataco),  n-heksan  (Brataco),  etil asetat (Brataco), pereaksi-pereaksi skrining, gliserin, propilen glikol, aquadest (Brataco), kasa steril (Husada), plester (Hansaplast) dan sediaan gel mengandung natrium diklofenak. Hewan percobaan yang digunakan dalam penelitian ini adalah tikus putih jantan galur  Wistar  yang  berumur  2,5-3  bulan dengan bobot badan 140-210 gram.
2.3. Determinasi Tanaman Tumbuhan dideterminasi di bagian Herbarium Laboratorium Taksonomi, Jurusan Biologi,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Padjadjaran.

## 2.4.  Penyiapan Simplisia Rimpang Kencur
( Kaempferiae galanga L.) Rimpang kencur (umur 10-12 bulan) diperoleh dari Perkebunan Manoko, Lembang, Jawa Barat. Rimpang kencur disortasi basah, dicuci, ditiriskan, dirajang melintang dengan ketebalan 2-5 mm dan dikeringkan di dalam oven dengan suhu 40 – 50 0 C hingga kering (kadar air  ≤ 10%). 9
2.5. Ekstraksi Ekstraksi  dilakukan  dengan  cara maserasi dari simplisia 250 gram dengan pelarut  etanol  96%  800  ml,  dengan  3  kali penggantian  pelarut  selama  3  hari.  Ekstrak cair yang telah dikumpulkan diuapkan dengan rotary vaporator pada suhu 40-50 0 C. Selanjutnya  dalam  cawan  penguap,  maserat dipanaskan di atas penangas air dengan suhu tidak lebih dari 50 0 C, sehingga diperoleh ekstrak kental. 10 Metode ekstraksi kepolaran bertingkat dilakukan dengan cara maserasi dari simplisia 250 gram dengan pelarut n-heksan sebanyak 800  ml,  dengan  3  kali  penggantian  pelarut selama  3  hari.  Setelah  itu  ampas  dilakukan hal yang sama dengan menggunakan pelarut etil asetat dan etanol 70%.
2.6. Skrining Fitokimia Ekstrak Untuk mengetahui kandungan metabolit sekunder yang terdapat dalam ekstrak rimpang
kencur, maka dilakukan penapisan fitokimia steroid dan terpenoid berdasarkan metode pada 11 dan metode 12 untuk  Flavonoid, Saponin. Pengujian untuk senyawa alkaloid, polifenol dan tanin menggunakan metode. 13 Pengujian  untuk  senyawa  kumarin,  quinon menggunakan metode. 14
2.7. Pembuatan Plester Antiinflamasi Pada penelitian 4 ekstrak etanol dijenuhkan  ke  dalam  bantalan  luka  yang telah disiapkan, lalu ditambahkan etanol 96%.  Setelah  itu,  bantalan  luka  tersebut ditempelkan pada plester perekat (Dosis ekstrak yang diberikan adalah 18 mg). Sediaan  plester  antiinflamasi  yang dibuat  terdiri  dari  5  kelompok  uji,  yaitu kelompok kontrol negatif yang hanya diberikan gliserol dan propilen glikol. Kelompok kontrol positif diberikan gel natrium diklofenak dan propilen glikol sebagai standar. Kelompok plester ekstrak etanol 96% diberikan senyawa ekstrak etanol dan propilen glikol. Kelompok plester ekstrak n-heksan dan propilen glikol, kelompok ekstrak etil dengan propilen glikol, kelompok ekstrak  etanol  70%  dengan  propilen  glikol, semua kelompok ditambahkan propilen glikol sebagai peningkat penetrasi  Ekstrak n-heksan diteteskan ke dalam bantalan luka yang telah disiapkan, lalu ditambahkan n-heksan. Setelah itu, bantalan luka tersebut ditempelkan pada plester perekat. Dosis ekstrak yang digunakan sebanyak 18 mg. Hal yang sama dilakukan pada ekstrak etil asetat dan etanol 70%.
2.8. Uji Plester Antiinflamasi
Pengujian antiinflamasi plester rimpang kencur yang ditambah propilen glikol dilakukan  terhadap  5  kelompok  hewan  uji, masing-masing kelompok terdiri dari 3 ekor tikus putih galur Wistar. Kaki kiri tikus diberi tanda batas dengan spidol agar pemasukan kaki ke dalam air raksa setiap kali selalu sama. Lalu volume kaki tikus diukur sebelum (Vo) dan sesudah (Vt) diinduksi larutan karagenan 1 % pada bagian telapak kakinya secara subkutan dan ditempelkan plester uji, dengan cara dimasukkan ke dalam cairan
air raksa, lalu dicatat volume kakinya setiap 1  jam  sekali  hingga  jam  ke-5.  Kemudian dicatat hasil pengamatannya dan dibuat tabel ANOVA.  Kelompok  hewan  uji  I  sebagai kontrol  negatif,  kelompok  hewan  uji  II sebagai kontrol positif, kelompok hewan uji III diberikan plester yang dijenuhkan ekstrak etanol rimpang kencur 18 mg. 4
Hal yang sama dilakukan untuk sediaan plester fraksi n-heksan, fraksi etil asestat dan fraksi etanol rimpang kencur sebagai  kelompok  hewan  uji  IV,  V  dan  VI dengan penambahan propilen glikol sebagai peningkat penetrasi.
3.  Hasil Determinasi tanaman yang dilakukan di bagian Herbarium Laboratorium Taksonomi, Jurusan  Biologi,  Fakultas  Matematika dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Universitas Padjadjaran  menunjukkan  bahwa  tanaman yang digunakan dalam penelitian adalah rimpang kencur ( Kaempferiae galanga L.). Hasil pengamatan inhibisi radang rata- rata dapat dilihat pada Gambar 2.
4.  Pembahasan Pada proses ekstraksi digunakan metode maserasi dengan cairan penyari etanol 96%. Maserasi dipilih pada proses ekstraksi rimpang kencur karena kandungan minyak atsiri dan flavonoid  yang  berkhasiat  dalam  kencur bersifat termolabil. Etanol 96% dipilih karena dapat melarutkan hampir semua metabolit sekunder yang terkandung dalam simplisia. Dari 250 gram simplisia rimpang kencur yang diekstraksi dengan pelarut etanol 96%, diperoleh  rendemen  ekstrak  adalah  20,56% yang artinya sesuai dengan persyaratan 15 yaitu hasil rendemen lebih dari 8,3%. Dalam
proses ekstraksi suatu bahan tanaman, banyak faktor yang dapat mempengaruhi kandungan senyawa  hasil  ekstraksi  diantaranya:  jenis pelarut, konsentrasi pelarut, metode ekstraksi dan suhu yang digunakan untuk ekstraksi. 16 Hasil yang diperoleh dari penapisan fitokimia  pada  semua  sampel,  positif mengandung  flavonoid,  senyawa  tersebut merupakan senyawa yang memiliki aktivitas antiinflamasi.  Untuk  senyawa  tanin,  yang memberikan hasil positif pada ekstrak etanol, ekstrak bersinambung n -heksan dan ekstrak bersinambung  etil  asetat.  Untuk  golongan fenolat, hanya pada ekstrak etanol dan ekstrak  bersinambung  etil  asetat  saja  yang menunjukkan  hasil  positif,  karena  fenolat merupakan senyawa semi polar.
Pada proses ekstraksi berdasarkan kepolaran yang bertingkat dengan cairan penyari menggunakan n -heksan untuk menarik senyawa-senyawa yang bersifat non polar. Dari 250 gram simplisia rimpang kencur dengan pelarut n-heksan dengan rendemen 13,12%;  rendemen  dengan  menggunakan pelarut  etil  asetat  yaitu  sebesar  5,52%  dan rendemen etanol sebesar 5,8%.
Berdasarkan hasil rendemen pada metode ekstraksi dengan kepolaran yang bertingkat lebih besar persentase nya dibandingkan metode ekstraksi dengan pelarut etanol  96%.  Hal  ini  disebabkan  oleh  proses penarikan metabolit sekunder yang lebih baik dan efektif karena masing masing senyawa tertarik oleh pelarut yang sesuai dengan kepolarannya sehingga total dari masing masing rendemen pada ektrsk n -heksan, etil asetat dan etanol 70% lebih besar. Hasil pengamatan inhibisi radang rata- rata dapat dilihat pada Gambar 2. Setelah diamati dari Gambar 2, dari keempat sampel

## Tabel 1. Hasil pemeriksaan parameter mutu simplisia rimpang kencur
Jenis Karakterisasi Kadar (%) Simplisia Persyaratan Kadar Air 10 ≤ 10 Kadar Abu Total 5,5 <  8,7 Kadar Sari Larut Air 17 >14,2 Kadar Sari Larut Etanol 37 > 4,2 Susut Pengeringan 6,68 ≤ 10
yang diberikan dengan dosis 18 mg, sampel ekstrak  etanol  96%  dan  ekstrak  etil  asetat yang diberi peningkat penetrasi sangat baik mengurangi radang dibandingkan kontrol positif (natrium diklofenak) memberikan efek antiinflamasi terbaik. Parameter volume udem berkurang setelah 30 menit pemberian persentasi  sebesar  79,99%  yaitu  dilihat  dari grafik  persen  inhibisinya  yang  semakin meningkat  menit  ke-60  sebesar  100% dibandingkan kontrol positif sebesar 80,01%.
Perbedaan dari penelitian sebelumnya, yaitu 4 yang tidak menambahkan propilen glikol itu terlihat pada hasil dari perbedaan dosis. Pada plester ekstrak rimpang kencur dosis terendah dari penelitian sebelumnya, yaitu dosis 18 mg yang tidak menambahkan propilen glikol tidak memberikan aktivitas antiinflamasi  pada  menit  ke-30  dan  baru memberikan  aktivitas  antiinflamasi  pada menit ke-90 dengan nilai inhibisi 29,59%.
Sediaan  plester  ekstrak  etanol  96% dan ekstrak etil asetat dosis 18 mg dengan penambahan propilen glikol ini menunjukkan peningkatan efektifitas yang cukup signifikan mengurangi radang. dibandingkan dengan sediaan plester ekstrak rimpang kencur dosis 18 mg tanpa penambahan propilen glikol karena propilen glikol merupakan senyawa yang inert dan dapat meningkatkan penetrasi senyawa  sebagai  antiinflamasi.  Dengan demikian, dosis 18 mg merupakan dosis yang baik dan efektif untuk dibuat sediaan plester anti-inflamasi.
Berdasarkan hasil analisis one way ANOVA pada hewan percobaan tikus jantan
dengan  tingkat  kepercayaan  95%  didapat angka yang signifikan yaitu ρ<0,05 sehingga dapat disimpulkan bahwa semua sediaan plester dengan penambahan peningkat penetrasi  memiliki  aktivitas  antiinflamasi dengan variasi waktu yang berbeda.

## 5. Simpulan
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol  96%  dan  ekstrak  etil  asetat  rimpang kencur dengan penambahan propilen glikol sebagai peningkat penetrasi ( enhancer ) dalam dosis 18 mg merupakan dosis yang baik dan efektif untuk mengurangi inflamasi.
6. Ucapan Terimakasih
Penulis mengucapkan terimakasih kepada Ristekdikti yang telah memberikan kesempatan kepada peneliti dan memberikan pembiayaan penelitian pada Hibah Dosen Pemula.
Daftar Pustaka 1. Kalangi, Sonny J.R. Histofisiologi Kulit. Jurnal  Biomedik. Unsrat. 2013
2.  Armando R. Memproduksi Minyak Atsiri Berkualitas. Jakarta: Penebar Swadaya. 2009.
3.  Umar,  Muhammad  I,  Asmawi,  M., Z., Sadikun,A. Atangwho, I.J., Yam, F.  Y.,  Altaf,  R.  and  Ahmed,  A.  2012. Bioactivity-Guided  Isolation  of  Ethyl-p- methoxycinnamate, an Anti-inflammatory from  Kaempferia  galangal  L.  Extracts. Molecules 2012, 17, 8720-87-8734.
Gambar 2. Grafik inhibisi (%) terhadap waktu pengukuran volume kaki tikus(t)
4.  Aroonrerk N, Kamkaen N. Anti- inflamatory Activity of Querous Infectoria Glycyrrhiza  Uralensis,  Kaempferia galanga L. and Coptis chinensis the Maincomponent of Thai Herbal Remedies for  Aphthous  Ulcer.Lagos,  Nigeria: Journal of Health Res. 2009. Hal 17-22
5. Riasari, H., dkk. “Effectiveness of Anti-
Inflammatory  Plaster  From  Kencur (Kaempferia  Galanga  L.)  Rhizome Ethanol Extract”. International Journal of Pharmaceutical Science and
Research(IJPSR),2016.Vol.&(4):1746- 1749.
6.  Patel, S., Shah, N., Nagesh, C.,
Venkatesh, J.S., dan Shankraiah, M.
2011. Formulation  and  Evaluation of Transdermal Patches of Losartan Potassium.Pharmacology online. Hal. 50- 57
7.  Kumar V. Cotran RS, Robbins Sl.Buku Ajar  Patologi.  7nd  ed.  Jakarta:  Penerbit Buku Kedokteran EGC. 2010.
8.  Pathan, I.B., dan Setty, C.M. “Chemical Penetration Enhancers
For Transdermal  Drug  Delivery  System”,
Trop. J. Pharm. Res. 2009. 8 (2): 173-179
9.  Depkes RI, Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, Direktorat Pengawasan Obat Tradisional. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta. 2000. Hal.
17
10. DitjenPOM.  Sediaan  Galenik.  Jakarta: Departemen Kesehatan RI. 1986. Hal.
10-11
11. Sangi, M.S., Momuat, L.I. dan Kumaunang,  M.,  2013.  Uji  toksisitas dan  skrining  fitokimia  tepung  gabah pelepah aren (Arange pinnata). Manado: Universitas Sam Ratulangi.
12. Farnsworth,  N.  R.,  Biological  and Phytochemical Screening of Plants, J.Pharm. Sci., 1966. 55(3), 225-276.
13. Dewi, L. D. A. D. Y, Astuti, K. W., Warditiani,  N.K.  2013.  Penapisan Fitokimia  Ekstrak  Etanol  95%  Kulit Buah Manggis (Garcinia mangostana L.), Jurnal Farmasi Udaya.
14. Wardhani, Lilies Kusuma dan Nanik
Sulistyani. 2012. Uji Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etil  Asetat  Daun Binahong (Anredera scandens L. Moq.) terhadap  Shigella  flexneri  Beserta  Profil Kromatografi  Lapis  Tipis,  Jurnal  Imiah Kefarmasian, Vol. 2, No. 1, 2012: 1-16.
15. Depkes RI. Farmakope Herbal Indonesia.: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Edisi I. Jakarta 2008.  Hal. 54- 58
16. Senja,  R.  Y.,  Issusilaningtyas,  E., Nugroho,  A.  K.,  &  Setyowati,  E.  P. (2015).  The  comparison  of  extraction method and solvent variation on yield and antioxidant activity of Brassica oleracea l. Var. Capitata f. Rubra extract. Traditional Medicine Journal, 19(1), 43-48.