## PENGARUH ZAT PENGATUR TUMBUH ALAMI TERHADAP JUMLAH AKAR
DAN DAUN PLANLET ANGGREK BULAN ( Phalaenopsis amabilis )

## SECARA IN VITRO
Effects of Natural Growth Regulators on Number of Roots and Leaves in Planlets of Phalaenopsis amabilis (Moth Orchid) In Vitro
Nova Triani 1 , Achmad Ilham 1
1 Program Studi A groteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Pembangunan Nasional “Veteran”
Jawa Timur
Diterima redaksi: 29 Mei 2024/ Direvisi: 10 Juni 2024 / Disetujui: 10 Juli 2024/ Diterbitkan online: 17 Juli 2024 DOI: 10.21111/agrotech.v10i1.12282
Abstrak. Anggrek  bulan (Phalaenopsis  amabilis) merupakan  tanaman  hias  yang  banyak  digemari  masyarakat karena  keindahan  bunganya.  Perbanyakan  anggrek  bulan  dapat  dilakukan  dengan  metode  kultur  jaringan/  in vitro. Media yang digunakan pada kultur jaringan anggrek bulan yaitu media MS (Murashige and Skoog) yang diperkaya  dengan  zat  pengatur  tumbuh  (ZPT).  Penggunaan  ZPT  alami,  seperti  ekstrak  bawang  merah  dan  air kelapa dapat menjadi alternatif dan potensi sumber nutrisi pada media kultur in vitro anggrek bulan, sehingga dapat  menggantikan  penggunaan  ZPT  sintetik.  Tujuan  dari  penelitian  adalah  untuk  mengetahui  pengaruh penggunaan ZPT alami yaitu ekstrak bawang merah dan air kelapa terhadap planlet anggrek bulan. Metode yang digunakan yaitu percobaan Rancangan Acak Lengkap Faktorial 2 faktor, dengan faktor pertama yaitu konsentrasi ekstrak bawang merah (0 g/L, 20 g/L, 30 g/L dan 40 g/L), faktor kedua yaitu konsentrasi air kelapa (0 mL/L, 50 mL/L, 100 mL/L dan 150 mL/L). Pengamatan dilakukan pada penambahan jumlah akar dan daun. Hasil percobaan didapatkan bahwa konsentrasi ekstrak bawang merah 20 g/L  berpengaruh terhadap penambahan jumlah akar, tetapi  tidak  berpengaruh  terhadap  penambahan  jumlah  daun.  Sedangkan  konsentrasi  air  kelapa  tidak berpengaruh pada penambahan jumlah akar dan penambahan jumlah daun.
Kata Kunci: air kelapa, ekstrak bawang merah, konsentrasi, kultur in-vitro, kultur jaringan
Abstract. The  moth  orchid (Phalaenopsis  amabilis) is  a  popular  ornamental  plant  due  to  its  beautiful  flowers. Propagation of moth orchids can be performed using tissue culture or in vitro methods. The medium used in moth orchid tissue culture is the MS (Murashige and Skoog) medium, which is enriched with plant growth regulators (PGRs). The use of natural PGRs, such as onion extract and coconut water, can serve as an alternative and potential source nutrition substitute for synthetic PGRs in orchid tissue culture media. The aim of this study is to determine the effect of using natural PGRs, namely onion extract and coconut water, on moth orchid plantlets. . The method employed is a Complete Randomized Design (CRD) factorial experiment with two factors: the first factor is the concentration  of onion  extract  (0  g/L,  20  g/L,  30  g/L,  and  40  g/L),  and  the  second  factor is  the  concentration  of coconut  water  (0  mL/L,  50  mL/L,  100  mL/L,  and  150  mL/L).  Observations  were  focused  on  the  increase  in  the number of roots and leaves. The results showed that a concentration of 20 g/L onion extract had a significant effect on  the increase  in  the  number  of  roots  but  did  not  affect the  increase  in  the  number of  leaves.  Meanwhile,  the concentration of coconut water did not affect the increase in the number of roots or leaves.
Keywords: coconut water, concentration, onion extract, , in-vitro culture, tissue culture
* Korespondensi email:  novatriani.agrotek@upnjatim.ac.id Alamat : Jl. Raya Rungkut Madya Gunung Anyar Surabaya

## Gontor AGROTECH Science Journal
Vol. 10 No. 1, Juni 2024: 57-65 http://ejournal.unida.gontor.ac.id/index.php/agrotech

## PENDAHULUAN
Anggrek bulan (Phalaenopsis amabilis) adalah  salah  satu  spesies  anggrek  yang sangat bernilai dalam industri florikultura karena  keindahan  dan  daya  tahan bunganya (Pangestu et al., 2015).
Perbanyakan  tanaman  sering  dilakukan melalui kultur jaringan untuk menghasilkan  planlet  yang  seragam  dan berkualitas  tinggi.  Namun,  keberhasilan perbanyakan  dan  pertumbuhan  planlet sering  kali  tergantung  pada  penggunaan Zat  Pengatur  Tumbuh  (ZPT)  yang  tepat untuk  memaksimalkan  jumlah  daun  dan akar. ZPT alami merupakan alternatif yang ramah  lingkungan  dan  berkelanjutan dibandingkan  dengan  ZPT  sintetik.  Dua sumber  alami  yang  sering  digunakan adalah  ekstrak  bawang  merah  dan  air kelapa. Kedua bahan ini kaya akan hormon tumbuh yang dapat merangsang pertumbuhan tanaman.
Bawang merah mengandung berbagai fitohormon seperti auksin, sitokinin dan enzim yang dapat
merangsang pembentukan akar dan daun pada  tanaman  (Keluarga  Pangestu,  2023). Auksin  dalam  bawang  merah  diketahui berperan penting dalam proses pembentukan  akar  adventif,  sementara sitokinin dapat meningkatkan pembelahan sel dan pembentukan daun.
Air  kelapa  adalah  sumber  alami sitokinin  yang  terkenal,  terutama  kinetin dan  zeatin.  Sitokinin  berfungsi  dalam pembelahan  sel  dan  diferensiasi  jaringan, serta  dapat  meningkatkan  jumlah  daun dan  mempercepat  pertumbuhan  planlet (Triani  et  al.,  2019).  Selain  itu,  air  kelapa juga  mengandung  mineral  dan  nutrisi penting yang dapat mendukung pertumbuhan  tanaman.  Ekstrak  bawang merah dan air kelapa dapat meningkatkan pertumbuhan  berbagai  jenis  tanaman  (Al
Ayyubi et al., 2019; A et al., 2022;  Marlina, 2023; Asyahidah et al., 2023). Penggunaan ekstrak bawang merah dan air kelapa pada kultur  jaringan  anggrek  bulan  masih terbatas  hasil  yang  didapatkan  terutama pada jumlah daun dan akar planlet.
Penelitian ini bertujuan  untuk mendapatkan  pengaruh  ekstrak  bawang merah  dan  air  kelapa  terhadap  jumlah daun  dan  jumlah  akar  planlet  anggrek bulan (Phalaenopsis amabilis). Secara khusus,  penelitian  ini  mengidentifikasi konsentrasi  optimal  dari  ekstrak  bawang merah  dan  air  kelapa  yang  dapat digunakan untuk memaksimalkan pertumbuhan  planlet  dalam  kondisi  in vitro.
Hasil  dari  penelitian  ini  diharapkan dapat  memberikan  informasi    mengenai penggunaan ZPT alami dalam perbanyakan  anggrek  bulan.  Penggunaan ekstrak bawang merah dan air kelapa yang efektif dapat menjadi alternatif yang lebih ramah lingkungan dan ekonomis dibandingkan dengan ZPT sintetik.

## METODE PENELITIAN
Penelitian dilaksanakan di
Laboratorium  Kultur  Jaringan  Dinas Ketahanan  Pangan  dan  Pertanian  (DKPP) Surabaya  pada  bulan  Mei sampai  dengan bulan Agustus 2023. Alat yang digunakan dalam  penelitian  ini  yaitu  LAF  (Laminar Air  Flow),  autoklaf,  kompor,  blender, mortar,  oven,  botol  kultur,  gelas  ukur, erlenmeyer, beaker  glass ,  cawan  petri, pinset,  gunting,  skalpel,  pipet  tetes, hot plate , magnetic stirrer , lampu bunsen, botol sprayer , tissue ,  pH  meter,  alumunium  foil, rak  kultur,  plastik wrap ,  gunting  dan timbangan analitik. Bahan yang digunakan yaitu  planlet  anggrek  bulan  ukuran seragam  berumur  3-4  bulan  dan  sudah terdapat  akar  serta  helai  daun, media  MS
(Murashige and Skoog), bawang merah, air kelapa,  NaOH,  HCl,  arang  aktif,  alkohol 70%,  alkohol  96%,  kertas,  detergen, pemutih,  agar-agar,  sukrosa,  kertas  label, aquadest, karet gelang dan kertas saring.
Penelitian  menggunakan  percobaan Rancangan Acak Lengkap (RAL) Faktorial 4  x  4.  Faktor  pertama  yaitu  konsentrasi ZPT dari ekstrak bawang merah dengan 4 taraf  perlakuan,  yaitu  0  (kontrol),  20,  30 dan 40 g/L. Faktor kedua yaitu konsentrasi ZPT  dari  air  kelapa  dengan  4  taraf perlakuan,  yaitu  0  (kontrol),  50,  100  dan 150 ml/L. Sehingga diperoleh 16 perlakuan kombinasi dengan ulangan masing- masing  5  kali.  Setiap  botol  kultur  berisi  2 eksplan  tanaman.  Total  yang  didapatkan adalah 80 botol kultur dengan 160 eksplan.
Pelaksanaan penelitian meliputi sterilisasi  tempat  dan  ruangan,  sterilisasi alat  dan  bahan,  pembuatan  ekstrak bawang  merah,  persiapan  air  kelapa, pembuatan  media  MS  (Murashige  dan Skoog), penanaman planlet anggrek bulan dan pemeliharaan ruang kultur.
Pembuatan ZPT . Pemilihan bawang merah  yang  dalam  kondisi  tampak  utuh dan  padat  serta  memiliki  ukuran  sedang. Kemudian bawang merah dibersihkan dan dicuci hingga bersih lalu ditunggu hingga kering.  Bawang  merah  yang  telah  bersih dan  kering  ditimbang  sesuai  dengan perlakuan lalu dimasukkan ke blender dan ditambahkan  sedikit  aquadest  hingga halus  sehingga  menjadi  ekstrak  bawang merah  yang  siap  digunakan  sebagai perlakuan (Khurniawanty, F., 2020)
Air kelapa yang digunakan berasal dari  air  kelapa  muda  yang  dicirikan dengan volume air masih memenuhi buah dan  airnya  yang  masih  terlihat  bening (belum keruh) dengan kisaran umur buah 6-8  bulan.  Pembuatan  ekstrak  air  kelapa dilakukan  dengan  cara  menyaring  air
kelapa dengan kertas saring agar mendapatkan air kelapa yang murni.
Pembuatan  media  MS. pembuatan media  diawali  dengan  memasukkan aquadest sebanyak 300 ml, lalu memasukkan larutan stok sesuai komponen  media  MS  yaitu  unsur  hara makro,  mikro,  vitamin  dan  zat  pengatur tumbuh  yang  sudah  disiapkan  (ekstrak bawang merah dan air kelapa) dicampurkan  sesuai  dengan  kombinasi perlakuan.  Setelah  itu  ditambahkan  gula sebanyak  20  g/L  dan  arang  3  g/L  lalu menambahkan  aquadest  hingga  1000  mL, kemudian  dihomogenkan  pada hot  plate dan magnetic stirrer. Setelah homogen, pH media  diukur  menggunakan  kertas  pH sehingga menjadi kisaran 5,8 – 6,0. Apabila pH  kurang  dari  5,8  maka  ditambahkan
NaOH  0,1  N  dan  jika  pH  lebih  dari  6,0 ditambahkan HCl 0,1 N untuk menurunkan  pH  media.  Setelah  itu ditambahkan  agar-agar  sebanyak  6,8  g/L dan  media  dipindahkan  ke  panci  untuk dipanaskan dan juga diaduk. Media yang sudah berbuih menandakan sudah mendidih dan dituangkan ke botol kultur sebanyak  40  mL  pada  tiap  botol  kultur kemudian ditutup menggunakan alumunium  foil.  Media  disterilkan  di dalam  autoklaf  pada  suhu  12 1˚C  dengan tekanan  1,5  atm  selama  20  menit.  Media yang  telah  disterilisasi  diletakkan  dalam ruang inkubasi selama satu minggu untuk melihat ada tidaknya media yang terkontaminasi. Penelitian dilakukan selama 3 bulan.
Parameter  yang  diamati. Parameter yang  diamati  adalah  penambahan  jumlah akar  dan  penambahan  jumlah  daun. Analisis  data  menggunakan  ANOVA  dan dilanjutkan  dengan  uji  lanjut  Beda  Nyata Jujur (BNJ) 5%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan bahwa  tidak  terjadi  interaksi  pengaruh nyata pada kombinasi perlakuan konsentrasi ekstrak bawang merah dan air kelapa  terhadap  parameter  penambahan jumlah  akar  planlet  anggrek  bulan. Perlakuan  tunggal  konsentrasi  ekstrak bawang merah menunjukkan hasil pengaruh  nyata  terhadap  parameter penambahan  jumlah  akar,  sedangkan perlakuan  tunggal  air  kelapa  tidak berpengaruh nyata. Nilai rata-rata penambahan jumlah akar akibat pengaruh konsentrasi ekstrak bawang merah dan air kelapa disajikan pada Tabel 1.
Tabel  1.  Pengaruh  Konsentrasi  Ekstrak
Bawang  Merah  dan  Air  Kelapa terhadap Parameter Penambahan Jumlah Akar Perlakuan Penambahan Jumlah Akar (helai) Konsentrasi Ekstrak Bawang Merah 0 g/L 20 g/L 30 g/L 40 g/L 1,58 a 1,73 ab 2,05 b 1,80 ab BNJ 5% 0,40 Air Kelapa 0 mL/L 1,70 50 mL/L 1,65 100 mL/L 1,92 150 mL/L 1,87 BNJ 5% tn
Keterangan:  Angka  yang  diikuti  oleh  huruf yang sama pada kolom yang sama menunjukkan tidak berbeda nyata pada uji BNJ 5%; tn = tidak berpengaruh nyata.
Perlakuan  30  g/L  ekstrak  bawang merah menghasilkan nilai rata-rata penambahan jumlah akar terbanyak yaitu 2,05 helai dan tidak berbeda nyata dengan
perlakuan  20  g/L  dan  40  g/L  ekstrak bawang merah. Sedangkan pada perlakuan kontrol menghasilkan nilai rata- rata  penambahan  jumlah  akar  paling sedikit yaitu 1,58 helai.
Ekstrak bawang merah (Allium cepa)
dikenal mengandung berbagai fitohormon, terutama auksin dan sitokinin, yang  memainkan  peran  penting  dalam pertumbuhan dan perkembangan tanaman (Pradita  et  al.,  2022).  Auksin  adalah hormon tumbuh yang mendorong pembentukan  akar,  sedangkan  sitokinin mendorong pembelahan sel dan pertumbuhan tunas (Ekawati et al., 2022).
Auksin yang terdapat dalam ekstrak bawang merah, seperti indole-3-acetic acid (IAA), berperan dalam merangsang pembentukan  akar  adventif  (Luo  et  al., 2018).  Auksin  meningkatkan  ekspresi gen yang terlibat dalam inisiasi akar, mempercepat  pembentukan  sel  akar  baru dari  eksplan.  Auksin  juga  meningkatkan aktivitas meristematik pada jaringan akar, yang mengarah pada pembelahan sel yang lebih  cepat  dan  pembentukan  akar  yang lebih  banyak.  Auksin  membantu  dalam pembentukan  gradien  hormon  yang mengarahkan pertumbuhan akar (Yang et al.,  2021).  Konsentrasi  auksin  yang  lebih tinggi  di  daerah  tertentu  dari  eksplan merangsang diferensiasi sel menjadi akar.
Eksplan anggrek bulan yang ditanam  dalam  media  yang  mengandung ekstrak bawang merah cenderung menghasilkan lebih banyak akar dibandingkan dengan media tanpa tambahan  ekstrak  tersebut.  Hal  ini disebabkan  oleh  tingginya  konsentrasi auksin  yang  merangsang  pembentukan akar adventif (Firgiyanto & Arbi Juliantoro,  2022;  Lestari,  2011;  Fauziah  & Maula, 2020). Selain meningkatkan jumlah akar,  ekstrak  bawang  merah  juga  dapat mempercepat  laju  pertumbuhan  akar, membuat  planlet  lebih  cepat  siap  untuk
aklimatisasi  (Fitriani,  2019).  Penggunaan ekstrak  bawang  merah  sebagai  sumber auksin alami dalam media kultur jaringan dapat  secara  signifikan  meningkatkan pertumbuhan  akar  pada  planlet  anggrek bulan. Hal ini menjadikan ekstrak bawang merah  sebagai  alternatif  yang  efektif  dan ramah  lingkungan  dibandingkan  dengan zat pengatur tumbuh sintetik.
Air kelapa adalah sumber alami yang kaya  akan  sitokinin,  yang  merupakan hormon  tumbuh  yang  berperan  dalam pembelahan  sel  dan  pertumbuhan  tunas (Nitasari  et  al.,  2023).  Namun,  meskipun air kelapa sering digunakan dalam kultur jaringan  untuk  mendorong  pertumbuhan tanaman, dalam beberapa kasus, terutama pada  planlet  anggrek  bulan (Phalaenopsis amabilis), konsentrasi  air  kelapa  tidak berpengaruh  nyata  pada  penambahan jumlah akar.
Air kelapa kaya akan sitokinin yang mendorong pembelahan sel dan pertumbuhan  tunas,  tetapi  kurang  efektif dalam  merangsang  pembentukan  akar. Akar  lebih  responsif  terhadap  auksin, sementara sitokinin cenderung menghambat  pembentukan  akar  jika konsentrasinya  terlalu  tinggi  (Rosniawaty et al., 2023). Pembentukan akar memerlukan rasio auksin terhadap sitokinin  yang  seimbang.  Air  kelapa mengandung proporsi sitokinin yang lebih tinggi  dibandingkan  auksin,  sehingga tidak optimal untuk induksi akar (Tanjung, 2021).
Hasil  percobaan  didapatkan  bahwa konsentrasi  air  kelapa  yang  digunakan tidak  berada  pada  rentang  yang  optimal untuk  merangsang  pertumbuhan  akar. Konsentrasi  yang  terlalu  rendah  tidak memberikan  stimulus  hormon  yang cukup, sedangkan konsentrasi yang terlalu tinggi  dapat  menghambat  pembentukan akar. Pada konsentrasi yang tinggi, nutrisi dan  hormon  dalam  air  kelapa  dapat
mengalami efek pengenceran, yang menyebabkan penurunan efektivitasnya.
Pada  hasil  penelitian  didapatkan bahwa  air  kelapa  mengandung  berbagai nutrisi,  tetapi  tidak  seimbang  atau  tidak mencukupi untuk mendukung pembentukan  akar  yang  optimal.  Nutrisi yang  berlebihan  atau  kurang  dapat menghambat  pertumbuhan  akar.  Selain itu, air kelapa juga dapat memengaruhi pH media kultur. Jika pH menjadi terlalu asam atau  basa,  hal  ini  dapat  mengganggu pertumbuhan  akar.  Komposisi  kimia  air kelapa juga berpengaruh, sebab komposisinya dapat bervariasi tergantung pada faktor-faktor seperti usia kelapa, jenis kelapa dan kondisi lingkungan.
Variabilitas tersebut dapat menyebabkan  inkonsistensi  dalam  hasil percobaan pada pengamatan penambahan jumlah  akar.  Planlet Phalaenopsis  amabilis memiliki  respon  yang  spesifik  terhadap hormon  tertentu.  Pada  penambahan jumlah  akar,  planlet Phalaenopsis  amabilis lebih  responsif  terhadap  auksin  untuk pembentukan  akar  dan  kurang  responsif terhadap  sitokinin  yang  dominan  dalam air  kelapa.  Faktor  genetik  dan  fisiologis tanaman  anggrek  bulan  juga  dapat menentukan  seberapa  efektif  air  kelapa dalam memengaruhi pertumbuhan akar.
Sehingga,  tidak  adanya  pengaruh nyata  dari  konsentrasi  air  kelapa  pada penambahan  jumlah  akar  pada  planlet anggrek bulan dalam kultur jaringan dapat disebabkan  oleh  dominansi  sitokinin dalam air kelapa, ketidakseimbangan rasio auksin  terhadap  sitokinin,  konsentrasi yang  tidak  tepat,  serta  variabilitas komposisi  kimia  dan  nutrisi  dalam  air kelapa.  Planlet Phalaenopsis  amabilis lebih membutuhkan auksin yang spesifik untuk merangsang  pembentukan  akar  yang efektif.
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan bahwa  tidak  terjadi  interaksi  pengaruh
nyata pada perlakuan kombinasi konsentraksi  ekstrak  bawang  merah  dan air kelapa terhadap parameter penambahan jumlah daun planlet anggrek bulan.  Perlakuan  tunggal  konsentrasi ekstrak  bawang  merah  dan  air  kelapa memberikan  hasil  tidak  berpengaruh nyata. Nilai rata-rata penambahan jumlah daun akibat pengaruh konsentrasi ekstrak bawang  merah  dan  air  kelapa  disajikan pada Tabel 2.
Tabel  2.  Pengaruh  Konsentrasi  Ekstrak
Bawang  Merah  dan  Air  Kelapa terhadap Parameter Penambahan Jumlah Daun Perlakuan Penambahan Jumlah Daun (helai) Konsentrasi Ekstrak Bawang Merah 0 g/L 20 g/L 30 g/L 40 g/L 1,38 1,78 1,78 1,68 BNJ 5% tn Air Kelapa 0 mL/L 1,48 50 mL/L 1,50 100 mL/L 1,83 150 mL/L 1,80 BNJ 5% tn
Keterangan: tn = tidak berpengaruh nyata
Tabel  2.  menunjukkan  bahwa perlakuan  tunggal  konsentrasi  ekstrak bawang merah dan air kelapa memberikan hasil  tidak  berbeda  nyata  terhadap parameter  penambahan  jumlah  daun planlet anggrek bulan.
Konsentrasi ekstrak bawang merah tidak berpengaruh nyata terhadap jumlah daun planlet anggrek bulan pada kultur in vitro  dapat  disebabkan  karena  beberapa faktor.  Bawang  merah  mengandung berbagai senyawa seperti flavonoid, sulfur
dan  berbagai  enzim  yang  tidak  berfungsi secara optimal dalam mendukung pertumbuhan daun planlet anggrek bulan. Jika  senyawa  aktif  yang  mendukung pertumbuhan  daun  tidak  ada  atau  dalam konsentrasi  rendah,  maka  pengaruhnya terhadap jumlah daun menjadi minimal.
Lingkungan  kultur  in  vitro  sangat terkendali  dan  seringkali  menggunakan media yang kaya akan nutrisi dan hormon pertumbuhan spesifik yang sudah dioptimalkan untuk pertumbuhan anggrek (Syamsiah et al., 2020; Nasution et al., 2021; Ningsih et al., 2023). Penambahan ekstrak  bawang  merah  tidak  memberikan tambahan  nutrisi  atau  hormon  yang signifikan  dibandingkan  dengan  media standar yang sudah digunakan. Selain itu, respon tanaman terhadap senyawa tertentu  sangat  spesifik.  Anggrek  bulan tidak  merespon  dengan  baik  terhadap senyawa-senyawa  dalam  bawang  merah seperti  halnya  tanaman  lain  (Tania  et  al., 2023) (Safira, 2022). Demikian pula dengan beberapa  senyawa  yang  bermanfaat  bagi tanaman  tertentu  tetapi  tidak  untuk  yang lain.  Ekstrak  bawang  merah  tidak mengandung atau tidak memiliki konsentrasi  yang  cukup  dari  hormon tumbuh  seperti  auksin,  sitokinin,  atau giberelin yang penting untuk pertumbuhan  daun  pada  anggrek.  Tanpa hormon  yang  tepat  atau  dalam  jumlah yang  memadai,  jumlah  daun  tidak  akan meningkat secara signifikan.
Penggunaan  ekstrak  bawang  merah pada kultur in vitro planlet anggrek bulan dapat menjadikan senyawa dalam ekstrak bawang merah berinteraksi dengan komponen  lain  dalam  media  kultur, sehingga mengurangi efektivitasnya. Interaksi kompleks antara berbagai senyawa  ini  dapat  memengaruhi  hasil akhir  pada  pertumbuhan  daun.  Setiap spesies  tanaman  memiliki  toleransi  yang berbeda  terhadap  senyawa  eksternal.
Anggrek  bulan  memiliki  toleransi  rendah terhadap komponen tertentu dalam ekstrak  bawang  merah,  sehingga  tidak menunjukkan peningkatan jumlah daun.
Dalam  penelitian  lanjutan,  perlu dilakukan analisis lebih mendalam terhadap komposisi kimia ekstrak bawang merah  dan  percobaan  dengan  berbagai konsentrasi  serta  kombinasi  dengan hormon  pertumbuhan  spesifik  untuk melihat  efek  yang  lebih  jelas  terhadap pertumbuhan daun planlet anggrek bulan.
Konsentrasi air kelapa tidak berpengaruh nyata terhadap penambahan jumlah  daun  planlet  anggrek  bulan  pada kultur  in  vitro  karena  beberapa  faktor, yaitu  meskipun  air  kelapa  mengandung sejumlah  hormon  pertumbuhan  seperti auksin,  sitokinin,  dan  giberelin,  serta nutrisi yang berguna untuk pertumbuhan tanaman, kandungannya tidak sesuai atau tidak  cukup  spesifik  untuk  kebutuhan planlet  anggrek  bulan.  Planlet  anggrek bulan  memerlukan  konsentrasi  atau  jenis hormon  dan  nutrisi  yang  berbeda  yang tidak  disediakan  cukup  oleh  air  kelapa. Konsentrasi  hormon  dalam  air  kelapa dapat  terlalu  rendah  atau  tidak  seimbang untuk  merangsang  pertumbuhan  daun pada anggrek bulan.
Senyawa dalam air kelapa berinteraksi dengan komponen lain dalam media  kultur,  yang  dapat  mengurangi efektivitasnya (Istikomah, 2020). Misalnya, beberapa  senyawa  dapat  berkompetisi atau menghambat penyerapan nutrisi lain yang  esensial  bagi  pertumbuhan  daun. Faktor-faktor  lingkungan  seperti  cahaya, suhu  dan  kelembapan  yang  dikendalikan dalam  kultur  in  vitro  dapat  pula  tidak sesuai untuk memanfaatkan penuh potensi air kelapa.
Misalnya,
hormon pertumbuhan dalam air kelapa memerlukan  kondisi  lingkungan  tertentu untuk bekerja secara efektif.
Penelitian  lebih  lanjut  diperlukan untuk  mendapatkan  pemahaman  yang lebih  jelas  tentang  pengaruh  air  kelapa pada kultur in vitro planlet anggrek bulan. Hal  ini  termasuk  analisis  kandungan kimiawi  air  kelapa  yang  digunakan  dan eksperimen  dengan  berbagai  konsentrasi serta kombinasi dengan hormon pertumbuhan  tambahan  yang  spesifik untuk planlet anggrek bulan.

## KESIMPULAN
Penggunaan  konsentrasi  ekstrak bawang merah 20 g/L pada kultur in vitro planlet anggrek bulan (Phalaenopsis amabilis)
berpengaruh terhadap penambahan  jumlah  akar  tetapi  tidak berpengaruh  pada  penambahan  jumlah daun.  Sedangkan  konsentrasi  air  kelapa pada  kultur  jaringan  anggrek  bulan (Phalaenopsis  amabilis) tidak  berpengaruh terhadap penambahan jumlah akar maupun jumlah daun.

## DAFTAR PUSTAKA
Al  Ayyubi,  N.  N.  A.,  Kusmanadhi,  B.,
Siswoyo, T. A.,  Wijayanto, Y. (2019). Pengaruh
Konsentrasi
Ekstrak Bawang  Merah  dan  Air  Kelapa Terhadap  Pertumbuhan  Stek  Pucuk Jambu  Air  Madu  Deli  Hijau ( Syzygium samarangense ). Berkala Ilmiah Pertanian , 2 (1).
https://doi.org/10.19184/bip.v2i1.161
48
Asyahidah,  R.  K.,  Nugrahani,  P.,  & Makhziah,  M.  (2023).  Pengaruh Kombinasi  Ekstrak  Bawang  Merah dan Air Kelapa Pada Tahap Multiplikasi Planlet Kentang ( Solanum tuberosum [L.] cv. Granola)
Menggunakan Media Murashige dan Skoog  (MS). Plumula :  Berkala  Ilmiah Agroteknologi , 11 (1).
https://doi.org/10.33005/plumula.v11
i1.105
Ekawati, Y., Anggraeni, A., Dyah Prawestri, A., & Nurtjahya, E. (2022). Induksi  Kalus  Sisik  Umbi Lilium longiflorum Thunb.  oleh  Auksin  dan Sitokinin, serta Respons Pertumbuhannya  Secara  In  Vitro. AGROSAINSTEK:  Jurnal  Ilmu  Dan Teknologi Pertanian , 6 (2). https://doi.org/10.33019/agrosainstek .v6i2.316
Fauziah,  A.,  &  Maula,  N.  A.  H.  (2020).
Pengaruh  Zat  Pengatur  Tumbuh
Auksin Terhadap Pembentukan Akar  Adventif  dan  Pertumbuhan
Bougainvillea sp . Seminar Nasional VI , 2019 .
Firgiyanto, R., & Arbi Juliantoro, I. (2022). Respon  Pemberian  Jenis  ZPT  dan Lama  Perendaman  yang  Berbeda Terhadap Pertumbuhan Stek Batang Tanaman  Anggur  ( Vitis  vinifera L.). Jurnal  Penelitian  Pertanian  Terapan , 22 (3). https://doi.org/10.25181/jppt.v22i3.2 220
Fitriani,  N.  (2019).  Pengaruh  Ekstrak
Bawang Merah dan Ekstrak Bawang Putih  Terhadap  Pertumbuhan  Akar Stek  Batang  Mawar  ( Rosa  damascena Mill). Uin Sunan Ampel Surabaya . Istikomah.  (2020).  Pengaruh  Penambahan Pumpkin  dalam  Subkultur  Anggrek Hitam  ( Coelogyne  pandurata Lindl.) secara In Vitro. Universitas Muhammadiyah Yogyakarta .
Keluarga Pangestu, D. M. (2023). Pengaruh Pemberian  Ekstrak  Bawang  Merah ( Alium  Cepa) Sebagai  Zpt  Alami untuk  Meningkatkan  Pertumbuhan Anggrek Bulan ( Phalaenopsis hibrida) Pasca  Aklimatisasi. Biofarm :  Jurnal Ilmiah Pertanian , 19 (1).
https://doi.org/10.31941/biofarm.v19 i1.2946
Khurniawanty, F., A. I. L.  & A. M. (2020).
Pengaruh Penambahan Ekstrak Bawang  Merah Allium  cepa L.
Terhadap Pertumbahan Planet Talas Jepang Colocasia esculenta var. antiqourum  (Schott)  F.T.  Hubb  & Rehder  Secara  In  Vitro. Jurnal Agroteknologi .
Lestari.E.G.  (2011).  Peranan  Zat  Pengatur Tumbuh dalam Perbanyakan
Tanaman  melalui  Kultur  Jaringan The  Role  of  Growth  Regulator  in Tissue  Culture  Plant. Agrobiogen ,
7 (1).
Luo,  J.,  Zhou,  J.  J.,  &  Zhang,  J.  Z.  (2018).
Aux/IAA  Gene  Family  in  Plants: Molecular  structure,  regulation,  and function.  In International  Journal  of Molecular  Sciences (Vol.  19,  Issue  1). https://doi.org/10.3390/ijms19010259
Marlina, M. (2023). Pengaruh Zat Pengatur Tumbuh Organik terhadap Pertumbuhan Benih Tomat ( Lycopersicum  esculentum Mill.)  yang Bersumber  dari  Hasil  Panen  Petani. Savana Cendana , 8 (01).
https://doi.org/10.32938/sc.v8i01.199 7
Nasution,  L.  Z.,  Manurung,  E.  D.,
Hasibuan,  M.,  &  Handayani,  M.  A. (2021). Pengaruh Arang Aktif (Charcoal)  pada  Media  MS  untuk Meningkatkan Pertumbuhan Anggrek  pada  Kultur  In  Vitro.
Seminar  Nasional  Dies  Natalis  UNS
2021 , 5 (1).
Ningsih,  R.,  Herman  Estu  Eka  Putra,  & Andre Eka Nanda. (2023). Modifikasi Media  Tanam  Sebagai  Optimalisasi
Transplanting Kultur Jaringan Anggrek Bulan (Phalaenopsis Amabilis). Jurnal Pengembangan
Potensi Laboratorium , 2 (2).
https://doi.org/10.25047/plp.v2i2.368 4
Nitasari,  I.,  Yuliana,  F.,  &  Ariyanto,  S.  E. (2023). Regenerasi Eksplan Artemisia annua  L.  secara  In  Vitro  dengan
Perlakuan Sitokinin dan Air Kelapa.
Muria  Jurnal  Agroteknologi  (MJ-
Agroteknologi) ,
2 (1).
https://doi.org/10.24176/mjagrotek.v 2i1.9770
Pangestu, F., Arifin Aziz, S., & Sukma, D.
(2015). Karakterisasi Morfologi Anggrek Phalaenopsis Hibrida.
Jurnal  Hortikultura  Indonesia , 5 (1). https://doi.org/10.29244/jhi.5.1.29-35
Pradita,  A.  I.,  Kasifah,  K., Firmansyah,  A.
P., & Pudji, N. P. (2022). Pertumbuhan  Tanaman  Jahe  Merah ( Zingiber officinale var. Rubrum) Pada Berbagai Konsetrasi Ekstrak Bawang Merah  ( Allium  cepa L.). Jurnal AGrotekMAS , 3 (1).
Rosniawaty,  S.,  Al-  Adawiah,  A.  R., Mubarok, S., Sudirja, R., & Ariyanti, M.  (2023).  Respons  Pertumbuhan Akar Bibit Secang (Caesalpinia sappan
L.)  di  Dataran  Rendah  Terhadap
Sitokinin dan Giberelin. AGRISAINTIFIKA:  Jurnal  Ilmu-Ilmu Pertanian , 7 (1). https://doi.org/10.32585/ags.v7i1.366 0
Safira, T.
(2022). Proliferasi Tunas
Tanaman  Peace  Lily  ( Spathiphyllum paeonifolius) dengan Pemberian
Kinetin  dan  Ekstrak  Bawang  Merah Secara  In  Vitro. Ilmiah  Mahasiswa Pertanian , 2 (1).
Syamsiah,  M.,  Imansyah,  A.  A.,  Suprapti,
H. K., & Badriah, D. S. (2020). Respon
Multiplikasi Anggrek Bulan
( Phalaenopsis sp.) Terhadap
Penambahan  Beberapa  Konsentrasi BAP  (Benzyl  Amino  Purine)  Pada
Media  In  Vitro. AGROSCIENCE (AGSCI) , 10 (2).
https://doi.org/10.35194/agsci.v10i2.1
157
Tandi  A.  F,  I., Meylani,  D.,  &  Ashar,  J.  R.
(2022). Pemanfaatan Air Kelapa dan
Ekstrak Bawang Merah pada Pembibitan Bulbil Porang ( Amorphophallus  muelleri Blume). Jurnal Agroekoteknologi Dan Agribisnis , 6 (2).
https://doi.org/10.51852/jaa.v6i2.556
Tania,  R.,  Nurcahyani,  E.,  Wahyuningsih,
S.,  &  Tripeni  Handayani,  T.  (2023). Pemberian  Ekstrak  Bawang  Merah Allium ascalonicum L. Secara In Vitro Pada  Media  Hyponex  Terhadap Respon Pertumbuhan Planlet Buncis Phaseolus  vulgaris L. BIOMA:  Jurnal
Biologi Makassar , 8 (2).
Tanjung, T. Y. (2021). Pengaruh Penggunaan ZPT Alami dan Buatan Terhadap Pertumbuhan Setek Tanaman  Delima  ( Punica  granatum L.). HORTUSCOLER , 2 (01). https://doi.org/10.32530/jh.v2i01.323
Triani,  N.,  Nugrahani,  P.,  &  Syafriani,  E.
(2019).  Induksi  Tunas  Tin (Ficus carica L.)  Secara  In  Vitro. Berkala Ilmiah Agroteknologi - Plumula , 6 (2). https://doi.org/10.33005/plumula.v6i 2.6
Yang, L., You, J., Li, J., Wang, Y., & Chan, Z.  (2021).  Melatonin  Promotes Arabidopsis Primary Root Growth in an IAA-dependent Manner. Journal of Experimental Botany , 72 (15).
https://doi.org/10.1093/jxb/erab196