BioEksakta: Jurnal Ilmiah Biologi Unsoed Volume 2, Nomor 2 (2020): 266 - 272 E-ISSN: 2714-8564
Isolasi dan Uji Resistensi Bakteri Endofit Eceng Gondok ( Eichhornia crassipes Mart.) terhadap Krom secara In-Vitro

## Ade Nurmalasari, Oedjijono, Sri Lestari
Fakultas Biologi, Universitas Jenderal Soedirman Jalan Dr. Soeparno No.63, Grendeng, Purwokerto, 53122 Email: adenurma07@gmail.com
Rekam Jejak Artikel:
Submited : 29/08/2019 Disetujui  : 07/04/2020

## Abstract
Endophytic bacteria are bacteria that live in plant tissues and are not pathogenic to the host. One of  endophytic  bacterial  host  is  water  hyacinth.  Water  hyacinth  could  accumulate  heavy  metals, one  of  which  is  chrome.  The  purpose  of  this  study  was  to  obtain  endophytic  bacteria  of  water hyacinth ( Eichhornia  crassipes Mart.), to identify the endophytic bacteria of water hyacinth, and to  determine  the  resistance  of  endophytic  bacteria  of  water  hyacinth  to  Chrome  (Cr).  The research  method  used  was  a  survey  with  a  purposive  random  sampling  technique.  Stages  of research  include  root  sampling,  sterilization  of  root  samples  using  2%  NaOCl3,  isolation  of water hyacinth endophytic bacteria on agar nutrient medium (NA), characterization of bacterial endophytes and resistance test of water hyacinth bacteria to chromium.  Based on the results of the study, 8 isolates of endophytic bacteria were isolated from the roots of water hyacinth. Based on Bergey's Manual Determinative of Bacteriology, 6 bacterial isolates (E1, E2, E3, E5, E6, E8) were  identified  as  Bacillus  and  2  isolates  (E4,  E7)  were  identified  as  Pseudomonas.  All  water hyacinth  endophytic  bacteria  obtained  were  resistant  to  chromium  to  a  concentration  of  750 mg/L.
Key word : Chromium, Endophytic Bacteria, Resistance, Water Hyacinth.

## Abstrak
Bakteri  endofit  merupakan  bakteri  yang  hidup  pada  jaringan  tumbuhan  dan  tidak  bersifat patogen  bagi  inangnya.  Salah  satu  inang  bakteri  endofit  adalah  eceng  gondok  ( Eichhornia crassipes Mart.). Eceng gondok memiliki kemampuan untuk mengakumulasi logam berat, salah satunya krom. Tujuan penelitian ini adalah untuk mendapatkan isolat bakteri endofit akar Eceng gondok,  mengetahui  identitas  bakteri  endofit  akar  Eceng  gondok,  dan  mengetahui  resistensi bakteri  endofit  akar  Eceng  gondok  terhadap  Krom  (Cr).  Metode  penelitian  yang  digunakan adalah  survai  dengan  teknik  pengambilan  sampel  purposive  random  sampling.  Tahapan penelitian meliputi pengambilan sampel akar, strerilisasi sampel akar menggunakan NaOCl3 2%, isolasi bakteri endofit akar eceng gondok pada medium Nutrient Agar (NA), karakterisasi bakteri endofit akar eceng gondok dan uji resistensi bakteri eceng gondok terhadap krom. Berdasarkan hasil  penelitian,  diperoleh  8  isolat  bakteri  endofit  yang  diisolasi  dari  akar  Eceng  gondok. Berdasarkan  Bergey’s  Manual  Determinative  of  Bacteriology,  6  isolat  bakteri  (E1,  E2,  E3, E5, E6, E8) teridentifikasi sebagai Bacillus dan 2 isolat (E4, E7) teridetifikasi sebagai Pseudomonas. Semua bakteri endofit eceng  gondok yang diperoleh resisten terhadap krom hingga  konsentrasi 750 mg/L.
Key word : Bakteri Endofit, Eceng Gondok, Krom, Resistensi.

## PENDAHULUAN
Pertambahan  jumlah  penduduk,  meningkatnya industrialisasi dan aktivitas manusia dapat mengakibatkan  bertambahnya  limbah  di  lingkungan (Apriadi,  2008).  Limbah  yang  berasal  dari  aktivitas industri  umumnya  merupakan  limbah  anorganik seperti  logam  berat.  Salah  satu  agen  pencemar lingkungan  yang  perlu  dikelola  secara  benar sebelum  dibuang  ke  lingkungan  diantaranya  adalah logam  berat  (Maulana et  al., 2017).  Logam-logam tersebut  meliputi  kadmium  (Cd),  timbal  (Pb), merkuri  (Hg),  nikel  (Ni),  selenium  (Se),  seng  (Zn) dan krom (Cr).
Krom  dapat  berasal  dari  limbah  industri penyamakan  kulit, electroplating ,  dan  tekstil. Industri  penyamakan  kulit  menggunakan  proses chrome  tanning merupakan  penghasil  limbah  yang
mengandung  krom  (Lasat,  2002;  Hartanti et  al., 2014). Pengelolaan limbah krom yang tidak diatur di negara  berkembang  dan  maju  telah  menyebabkan kontaminasi  tanah,  sedimen,  air  permukaan,  dan  air tanah (Szulczewski et al., 1997; Abou-Shanab et al.,
2007). Krom  valensi  3  (Cr 3+ )  merupakan  nutrisi penting  bagi  banyak  organisme,  namun  bersifat toksik  jika  bervalensi  6  (Cr 6+ ),  Cr 6+ dapat  terbentuk akibat  adanya  proses  reduksi  (Abou-Shanab et  al., 2007).  Krom  (Cr)  yang  terdapat  di  alam  biasanya berada  pada  valensi  3  (Cr 3+ )  dan  valensi  6  (Cr 6+ ). Cr 6+ lebih  toksik  dibandingkan  dengan  Cr 3+ ,  karena kelarutan  serta  memiliki  mobilitas  yang  tinggi  di lingkungan  (Kristianto et  al., 2017).  Akumulasi krom  dalam  jumlah  banyak  pada  tubuh  manusia berdampak  negatif  terhadap  organ  hati  dan  ginjal, bersifat  karsinogen  (penyebab  kanker),  teratogen
(menghambat  pertumbuhan  janin)  dan  mutagen (Schiavon et  al., 2008;    Kristianto et  al., 2017). Dampak  Krom  yang  terakumulasi  dalam  tubuh organisme akuatik menyebabkan metabolisme tubuh terganggu  karena  terhambatnya  kerja  enzim  dalam proses fisiologis, akan bersifat kronis dan mengakibatkan  kematian  organisme  (Palar,  2008; Kristianto et  al., 2017).  Sutamihardja  (2006) menyatakan  bahwa  mekanisme  toksisitas  logam berat  di  dalam  tubuh  organisme  yaitu  memblokir serta  menghalangi  kerja  gugus  biomolekul  esensial untuk  proses-proses  metabolisme  seperti  gugus  SH, menggantikan ion-ion logam esensial dalam molekul terkait  dan  memodifikasi  atau  merubah  bentuk gugus aktif biomolekul.
Pengendalian logam berat yang terdapat dalam limbah  dapat  dilakukan  secara  kimia,  fisika  dan biologi.  Pengolahan  limbah  secara  biologis  salah satunya  dengan  cara  memanfaatkan  bakteri  yang mampu  mendegradasi  logam  berat,  pemanfaatan bakteri  tersebut  memerlukan  kajian  resistensinya terhadap logam berat. Kajian terkait mikroorganisme  yang  dapat  digunakan  sebagai penurun atau pendegradasi logam berat serta bersifat resisten  telah  banyak  dilakukan  (Arinda et  al., 2012).  Sifat  resisten  mikroba  ditunjukkan  dengan kemampuan  tumbuh  mikroba  dalam  berbagai konsentrasi  logam  berat  pada  skala  laboratoium maupun  di  habitat  aslinya.  Sifat  tersebut  berupa kemampuan  mikroba  untuk  bertahan  terhadap  efek toksik logam berat (Gadd, 1992; Yazid et al., 2007). Genus  mikroba  tersebut  diantaranya Bacillus , Citrobacter , Pseudomonas, Plectonema, Saccharomyces dan Aspergillus (Park et  al., 2011; Maulana et  al., 2017).  Sifat  resisten  terhadap  krom diantaranya  ditemukan  pada  spesies Pseudomonas, Alcaligenes,  Salmonella,  Streptococcus,  Aeromonas dan Enterobacter . Bakteri tersebut umumnya berasal atau  tumbuh  di  tanah,  perairan  maupun  berasosiasi dengan  tumbuhan  sebagai  mikroba  endofit  (Misra, 1992; Yazid et al., 2007).
Bakteri  endofit  merupakan  bakteri  yang  hidup di  dalam  jaringan  tumbuhan  tanpa  menyebabkan efek  negatif.  Sifat  mikroba  endofit  tersebut memungkinkan adanya hubungan simbiosis mutualisme  antara  mikroba  endofit  dan  inangnya (Putri,  2017).  Bakteri  endofit  masuk  ke  dalam tumbuhan melalui luka, stomata, atau karena mampu menghasilkan  enzim  selulase  untuk  degradasi dinding  sel  tumbuhan  (Kaga et  al., 2009;  Marlinda et  al., 2014).  Tumbuhan  yang  dapat  menjadi  inang bakteri endofit diantaranya eceng gondok.
Eceng  gondok    merupakan    spesies  tanaman penting yang telah menarik banyak perhatian karena kemampuannya untuk tumbuh dalam air yang sangat tercemar dan kemampuannya untuk  mengakumulasi ion logam (Santos & Lenzi, 2000; Soltan & Rashed, 2003;  Abou-Shanab et  al .,  2007).   Tanaman  eceng gondok  dapat  tumbuh  di  daerah  terkontaminasi logam dan bersimbiosis dengan berbagai
mikroorganisme  yang  toleran  terhadap  konsentrasi logam yang tinggi (Rajkumar et al., 2012). Interaksi sinergis antara tanaman dan mikroorganisme endofit bermanfaat  dalam  meningkatkan  toleransi  tanaman terhadap logam berat (Abou-Shanab et al ., 2007).
Adapun  tujuan  penelitian  adalah  mendapatkan isolat bakteri endofit akar Eceng gondok, mengetahui identitas bakteri endofit pada akar eceng gondok dan  mengetahui  resistensi  bakteri  endofit akar eceng gondok terhadap Krom (Cr).

## METODE

## Pengambilan  dan  Preparasi  Sampel  Akar
Tanaman Eceng Gondok.
Bahan utama yang digunakan dalam penelitian adalah akar eceng  gondok  yang diperoleh dari TPA Dusun  5,  Banjaran,  Bojongsari,  Purbalingga.  Akar tanaman  dipotong,  dicuci  dengan  air  mengalir, selanjutnya  dikeringkan  dan  ditimbang  1  g.  Akar kemudian disterilisasi permukaannya dengan larutan NaOCl 3 2%.
Isolasi  Bakteri  dari  Akar  Tanaman  Eceng Gondok (Resti et al ., 2013)
Isolasi  dilakukan  dengan  metode  maserasi, dengan  cara  5  g  akar  eceng  gondok  dihancurkan menggunakan  mortal dan pastel  steril dan ditambah 45 mL akuades sebagai pengenceran 10 -1 . Pengenceran  dilakukan  hingga  10 -3 dan  10 -4 . Sebanyak 0,1 mL suspensi tingkat pengenceran 10 -3 dan  10 -4 dibiakkan  dalam  medium Nutrient  Agar (NA),  dan  diinkubasi  2x24  jam  suhu  ruang.  Isolat yang  tumbuh  dilakukan  perhitungan  jumlah  koloni dengan metode Standard Plate Count (SPC). Jumlah koloni  dihitung  per  gram  sampel  (CFU/g)  dengan rumus:
CFU g -1 akar = rata-rata jumlah koloni x  x
Keterangan: n  = faktor pengenceran SP  = spread plate (0,1 mL)
Permurnian  Isolat  Bakteri  Endofit  (Kismiyati et al., 2009)
Pemurnian  dilakukan  dengan  mengambil koloni bakteri yang tumbuh dominan dan diinokulasikan  pada  medium  baru  dengan  metode gores  kuadran.  Medium  yang  digunakan  untuk pemurnian  sama  dengan  medium  yang  digunakan untuk  isolasi  bakteri  sehingga  mendapatkan  koloni tunggal. Cawan kemudian diinkubasi 2x24 jam pada suhu ruang.

## Uji  Resistensi  Bakteri  Endofit  terhadap  Logam Berat Cr (modifikasi Sari dan Zulaika, 2015)
Uji  resistensi  bakteri  endofit  akar  eceng gondok  terhadap  krom  dilakukan  dengan  uji viabilitas  isolat  bakteri.  Satu  ose  bakteri  endofit diinokulasikan  pada  medium Nutrient  Broth (NB) yang  mengandung  krom  konsentrasi  100,  250,  500,
da  750  mg/L,  tabung  uji  kemudian  diinkubasi  24 jam  pada  suhu  ruang.  Kepadatan  sel  diukur menggunakan  spektrofotometer  dengan  panjang gelombang  600  nm.  Nilai  absorbansi  kemudian dicatat dan dijadikan data kepadatan sel.

## Karakterisasi Isolat Bakteri Endofit Pengamatan Morfologi (Habazar & Rivai, 2004)
Pengamatan morfologi bakteri meliputi bentuk,  tepi,  elevasi,  warna,  permukaan  dan  ukuran koloni.

## Pewarnaan Gram (Hadioetomo, 1993)
Pewarnaan Gram dilakukan dengan cara isolat bakteri  diambil  menggunakan  ose  dan  dicampurkan dengan akuades pada object glass . Apusan difiksasi dengan  melewatkan  2-3  kali  di  atas  api buncen . Apusan  diteteskan  dengan  gram  A  ( Crystal  violet ) dan  dibiarkan  selama  60  detik  kemudian  dicuci kering-anginkan, diteteskan dengan gram B ( iodine ), dibiarkan  selama  60  detik  kemudian  dicuci  kering- anginkan,  diteteskan  dengan  gram  C  (alkohol) hingga  jernih  kemudian  dicuci  kering-anginkan, diteteskan  dengan  gram  D  (safranin)  dan  dibiarkan selama  45  detik  kemudian  cuci  keringanginkan. Hasil  pewarnaan  gram  diamati  dengan  mikroskop. Bakteri  Gram  positif  terwarnai  ungu  dan  Gram negatif terwarnai merah.

## Pengamatan Endospora (Pearce, 2009).
Pewarnaan  endospora  dilakukan  setelah  isolat bakteri  endofit  difiksasi  agar  bakteri  dapat  melekat dan  membuat  spora.    Preparat  selanjutnya  ditetesi Malachite  green 5%  sebagai  warna  primer  dan dipanaskan.  Preparat  kemudian  dicuci  dengan akuades dan dikering-anginkan. Preparat selanjutnya ditetesi  dengan  safranin  dan  didiamkan  selama  2 menit  kemudian  dicuci  kering-anginkan.  Endospora akan terwarnai hijau.

## Uji Motilitas (Anastiawan, 2014)
Uji  motilitas  dilakukan  dengan  cara  isolat diambil menggunakan tusuk steril dan diinokulasikan  dengan  cara  ditusuk  pada  medium Sulfide  Indole  Motility  Agar (SIMA)  tegak,  lalu diinkubasi  suhu  ruang  2x24  jam.  Hasil  positif (motil)  ditandai  dengan  adanya  pertumbuhan  di sekitar bekas tusukan.
Uji Katalase (Fithriyah et al., 2015) Uji katalase dilakukan dengan cara meneteskan  hidrogen  peroksida  (H 2 O 2 )  pada  gelas objek  steril  kemudian  isolat  bakteri  endofit dioleskan  menggunakan  ose.  Hasil  positif  ditandai dengan terbentuknya gelembung gas .
Uji Oksidase (Atlas et al., 1984) Isolat  bakteri  diulas  pada  kertas  saring, kemudian  ditetes  reagen  oksidase  ( Tetramethyl  P- Phenylenediamine  Dihydrochloride )  dan  ditunggu
selama  60  detik.  Hasil  positif  jika  kertas  saring berubah warna dari tidak berwarna menjadi biru tua.
Uji O/F (Oksidatif/Fermentatif) (Kismiyati, 2009) Uji  O/F  dilakukan  dengan  cara  setiap  isolat bakteri endofit di stab inoculation pada dua medium basal,  salah  satu  media  diberi  paraffin.  Tabung reaksi uji OF diinkubasi 2x24 jam pada suhu ruang. Hasil  positif  jika  terjadi  perubahan  warna  pada medium.

## Pengaruh  Suhu  (Modifikasi  Saha  &  Subhas, 2014)
Pengukuran  suhu  dilakukan  dengan  cara sebanyak satu ose isolat bakteri endofit diinokulasikan  pada  medium  Nutrient  Broth  (NB) kemudian  diinkubasi  pada  suhu  yaitu  4 0 C,  suhu ruang  (SR),  37 0 C  dan  80 0 C  selama  2x24  jam. Interpretasi positif ditandai dengan adanya perubahan kekeruhan pada medium.

## Pengaruh pH (Modifikasi Saha & Subhas, 2014)
Pengukuran  pH  dilakukan  dengan  cara sebanyak satu ose isolat bakteri endofit diinokulasikan  pada  medium  NB  dengan  pH  3,  7 dan 9 secara aseptis, kemudian diinkubasi 2x24 jam pada suhu ruang. Interpretasi positif ditandai dengan adanya perubahan kekeruhan pada medium.

## Pengaruh Salinitas
Pengukuran  suhu  dilakukan  dengan  cara sebanyak satu ose isolat bakteri endofit diinokulasikan  pada  medium  NB  dengan  tingkat salinitas  berbeda  yaitu  0%,  0,85%  dan  5%  secara aseptis,  kemudian  diinkubasi  2x24  jam  pada  suhu ruang.  Interpretasi  positif  ditandai  dengan  adanya perubahan kekeruhan pada medium.

## Kemampuan Menghasilkan Asam dari Beberapa Karbohidrat (Soemarno, 2003)
Uji  gula  dilakukan  dengan  cara  sebanyak  0,1 mL  isolat  bakteri  dari  kultur  cair  diinokulasikan  ke dalam  masing-masing  medium  yang  mengandung gula  glukosa,  sukrosa  atau  laktosa.  Tabung  yang mengandung  gula  diinkubasi  2x24  jam  pada  suhu ruang. Interpretasi positif ditandai dengan perubahan warna media dari merah menjadi kuning.

## Analisis
Data  hasil  pengamatan  dianalisis  secara deskriptif.  Karakterisasi  bakteri  endofit  dilakukan sampai  tingkat  genus  dengan  cara  membandingkan karakter  yang  dimiliki  oleh  isolat  mengacu  pada Bergey's  Manual  of Determinative  Bacteriology . Hasil  dari  uji  resistensi  disajikan  dalam  bentuk tabulensi dan dianalisis secara deskriptif .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan hasil penelitian diperoleh sebanyak  8  isolat  bakteri  endofit  asal  akar  eceng gondok di daerah TPA Purbalingga yang diberi kode E1,  E2,  E3,  E4,  E5,  E6,  E7,  dan  E8.  Kepadatan bakteri  endofit  pada  akar  tanaman  eceng  gondok rata-rata  sebanyak  4,54  x  10 6 cfu/gram.  Abou- Shanab et  al. (2007)  melaporkan  bahwa  kepadatan populasi  bakteri  pada  akar  eceng  gondok  yang tumbuh  di  Danau  Mariout,  Mesir  adalah  sebanyak 6,6 x 10 6 cfu/gr.
Hasil  pengamatan  karakteristik  morfologi koloni  menunjukkan  bahwa  semua  isolat  memiliki bentuk  koloni  sirkuler,  4  isolat  memiliki margin entire (E1,  E2,  E3,  E7)  dan  4  isolat undulate (E4, E5, E6, E8), 3 isolat  memiliki elevasi  konveks (E1, E2,  E3) dan  5  isolat raised (E4,  E5,  E6,  E7,  E8), 4 isolat bakteri endofit eceng  gondok  memiliki  warna koloni  putih  transparan  (E1,  E2,  E4,  E8),  2  isolat putih tulang (E6, E7), dan 2 isolat kuning (E3, E5). Permukaan  koloni  kedelapan  isolat  bakteri  endofit mengkilap dengan ukuran pin point hingga  medium (Tabel1).
Hasil pengamatan karakteristik mikro- morfologi isolat bakteri endofit menunjukkan bahwa sebanyak 6 isolat bersifat Gram positif (E1, E2, E3,
E5,  E6,  E8)  dan  2  isolat  Gram  negatif  (E4,  E7). Kedelapan isolat bakteri berbentuk basil dan bersifat motil. Beberapa isolat bakteri endofit eceng gondok diketahui  dapat  membentuk  spora  (E1,  E2,  E3,  E5, E6, E8) (Tabelv 1).
Hasil pengujian karakteristik biokimia menunjukkan  6  isolat  (E3,  E4,  E5,  E6,  E7,  E8) bersifat katalase positif, 2 isolat katalase negatif (E1, E2),  3  isolat  oksidase  positif  (E1,  E2,  E4),  dan  5 isolat  oksidase  negatif  (E3,  E5,  E6,  E7,  E8). Sebanyak  5  isolat  bakteri  endofit  bersifat  oksidatif (E3,  E4,  E5,  E6,  E8),  2  isolat  fermentatif  (E2,  E7), dan  1  isolat  oksidatif  fermentatif  (E1).  Berdasarkan pengamatan produksi asam dari berbagai karbohidrat,  semua  isolat  bakteri  endofit  dapat memproduksi  asam  dari  glukosa  dan  sukrosa  tetapi tidak  dapat  memproduksi  asam  dari  laktosa  (Tabel 1).
Hasil  pengamatan  karakteristik  fisiologis menunjukkan  bahwa  kedelapan  isolat  bakteri tumbuh pada suhu ruang (SR) dan suhu 37 o C, pH 7 hingga  9,  dan  salinitas  sampai  5%.  Bakteri  endofit dapat  tumbuh  pada  pH  9  namun  pertumbuhannya menurun, begitu pula pada salinitas 5%. Hal tersebut dapat  diketahui  dari  pengamatan  kekeruhan  bakteri pada medium pertumbuhan (Tabel 1).
Tabel 1. Karakteristik Bakteri Endofit yang Diisolasi Akar Eceng Gondok
Karakter Isolat E1 E2 E3 E4 E5 E6 E7 E8 Makromorfologi Bentuk Sirkuler Sirkuler Sirkuler Sirkuler Sirkuler Sirkuler Sirkuler Ireguler Margin Entire Entire Entire Undulate Undulate Undulate Entire Undulate Elevasi Convex Convex Convex Raised Raised Raised Raised Raised Warna Putih transparan Putih transparan Kuning Putih transparan Kuning Putih tulang Putih tulang Putih transparan Permukaan Mengkilap Mengkilap Mengkilap Mengkilap Mengkilap Mengkilap Mengkilap Mengkilap Ukuran Small Medium Small Pin point Small Small Small Medium Mikromorfologi Gram + + + - + + - + Bentuk sel Basil Basil Basil Basil Basil Basil Basil Basil Spora + + + - + + - + Motilitas + + + + + + + + Biokimia Katalase - - + + + + + + Oksidase + + - + - - - - O/F OF F O O O O F O Produksi asam Glukosa +
+ + +
+ + + + Sukrosa + + +
+
+ + + + Laktosa - - - - - - - - Fisiologi Suhu SR-37 0 C SR-37 0 C SR-37 0 C SR-37 0 C SR-37 0 C SR-37 0 C SR-37 0 C SR-37 0 C Ph 7 7 7-9 7-9 7-9 7-9 7-9 7-9 Salinitas 0%-5% 0%-5% 0%-5% 0%-5% 0%-5% 0%-5% 0%-5% 0%-5%
Berdasarkan  hasil  karaterisasi  pada  Tabel  1 dan mengacu pada Bergey’s Manual of Determinative  Bacteriology (Holt et  al., 1994), sebanyak  6  isolat  bakteri  endofit  asal  akar  Eceng Gondok  termasuk  anggota  genus  Bacillus  (E1,  E2, E3,  E5,  E6,  E8)  dan  2  isolat  adalah  anggota  genus Pseudomonas  (E4,  E7).  Abou-Shanab et  al. (2007)
juga  mendapatkan  8  isolat  bakteri  endofit  dari tanaman  eceng  gondok  di  Danau  Mariout,  Mesir yang  diantaranya  merupakan  spesies  anggota  genus Bacillus dan Pseudomonas.
Spesies  anggota  genus  Bacillus merupakan bakteri  berbentuk  batang,  membentuk  endospora, Gram  positif,  bergerak  dengan  flagel  peritrikus,
bersifat  aerobik  atau  fakultatif  anaerobik,  memiliki kisaran  suhu  pertumbuhan  yang  luas  serta  bersifat katalase positif. Karakteristik spesies anggota genus Pseudomonas  merupakan  bakteri  yang  memiliki ciri-ciri yaitu berbentuk batang, motil, Gram negatif, aerob dan katalase positif (Pelczar dan Chan, 2014).
Berdasarkan  hasil  pengujian  resistensi  bakteri endofit  eceng  gondok  terhadap  krom  menunjukkan bahwa  bakteri  endofit  memiliki  toleransi  yang bervariasi  (fluktuatif)  (Tabel  2).  Uji  resistensi  yang dilakukan  pada  bakteri  endofit  eceng  gondok menunjukkan  jika  semua  isolat  bakteri  mampu tumbuh pada media yang mengandung krom dengan konsentrasi 100, 250, 500, dan 750 mg/L. Resistensi Isolat  bakteri  E2  dan  E8  menurun  seiring  dengan kenaikkan  konsentrasi  krom  sedangkan  isolat bakteri  E1,  E3,  E4,  E5,  E6,  E6,  dan  E7  memiliki
resistensi  yang  fluktuatif.  Resistensi  yang  fluktuatif mengindikasikan  bahwa  beberapa  isolat  bakteri memanfaatkan krom untuk menunjang pertumbuhannya. Enzyme-catalysed  transformation merupakan  salah  satu  aktivitas  enzimatis  bakteri yang mampu
menggunakan
atau mentransformasikan senyawa polutan sebagai sumber  energi  dan  karbonnya  (Lloyd,  2002). Perbedaan  resistensi  bakteri  terhadap  krom  juga dapat  terjadi  karena  adanya  bakteri  yang  telah  mati kemudian  mengendap  di  dasar  medium  cair  yang kurang  homogen  karena  kurangnya  pengocokan sebelum  isolat  diukur  nilai  kekeruhannya.  Hal tersebut  menyebabkan  nilai  OD  yang  terukur  pada spektrofotometer  menjadi  rendah  (Respati et  al., 2017).
Tabel 2 . Resistensi Bakteri Endofit terhadap Krom
Konsentrasi Krom (mg/L) Nilai OD E1 E2 E3 E4 E5 E6 E7 E8 0 0,151 0,399 0,302 0,311 0,447 0,384 0,292 0,286 100 0,364 0,249 0,318 0,186 0,302 0,278 0,192 0,232 250 0,149 0,166 0,153 0,081 0,194 0,093 0,114 0,195 500 0,178 0,123 0,174 0,142 0,160 0,102 0,128 0,104 750 0,074 0,092 0,118 0,193 0,193 0,115 0,109 0,090
Larashati (2004) berhasil mengisolasi  Bacillus yang  tahan  terhadap  krom  dalam  konsentrasi  tinggi (500  mg/L).  Kelompok  Bacillus banyak  ditemukan di  tempat  pembuangan  sampah  dan  ada  yang memiliki  resistensi  dan  kemampuan  reduksi terhadap  krom.  Kemampuan  mikroorganisme  untuk hidup dalam lingkungan yang terkontaminasi logam berat disebabkan oleh sejumlah mekanisme pertahanan  yang  dikembangkan  mikroorganisme dalam  mengatasi  toksisitas  logam  berat.  Abou- Shanab et al. (2007) melaporkan bahwa Pseudomonas  memiliki  resistensi  mencapai  200 mg/L.

## SIMPULAN
Berdasarkan hasil pembahasan dapat disimpulkan  diperoleh  8  isolat  bakteri  endofit  hasil isolasi dari akar eceng gondok. Isolat bakteri E1, E2, E3,  E5,  E6,  dan  E8  merupakan  spesies  anggota genus  Bacillus  sedangkan  isolat  E4  dan  E7 merupakan  spesies  anggota  genus  Pseudomonas. Bakteri  endofit  eceng  gondok  resisten  terhadap logam  berat  krom  hingga  konsentrasi  750  mg/L. Semakin  tinggi  konsentrasi  krom  resistensi  bakteri endofit semakin rendah.

## DAFTAR REFERENSI
Abou-Shanab, R.A.I., J.S. Angle & P. van Berkum. 2007. Chromate-Tolerant Bacteria for Enhanced  Metal  Uptake  by Eichhornia
crassipes (Mart.). International  Journal  of Phytoremediation , 9, pp. 91-105.
Anastiawan. 2014.  Isolasi dan Karakterisasi Bakteri Probiotik  yang  Berasal  dari  Usus  Itik Pedaging Anas domesticus . [ Skripsi ]. Jurusan Biologi    Fakultas  Matematika  Dan  Ilmu Pengetahuan  Alam  Universitas  Hasanuddin Makassar.
Apriadi, T. 2008. Kombinasi Bakteri dan Tumbuhan Air Sebagai Bioremediator dalam Mereduksi Kandungan  Bahan  Organik  Limbah  Kantin. [ Skripsi ]. Departemen Manajemen Sumberdaya  Perairan  Fakutas  Perikanan  dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor.
Arinda,  T.,  Maya  S.  &  Enny  Z.  2012.  Resistensi Bakteri  Bacillus  Terhadap  Logam  Berat.
Scientific  Conference  Of  Environmental Technology , IX, pp. 1-5.
Atlas, R.M., A.E. Brown, K.W. Dobra, & L. Miller. 1984. Experimental  Microbiology. New York: Macmillan Publishing Company.
Fithriyah, N.L. 2015. Isolasi dan Identifikasi Bakteri
Endofit  dari  Rumput  Kebar  ( Biophytum sp.) sebagai Senyawa Antibakteri terhadap Bakteri Eschericia  coli dan Staphylococcus aureus . Skripsi . Fakultas Sains dan
Teknologi, Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim.
Gadd,  G.M.  1992. Heavy  Metal  Pollutants: Environmental  and  Biotechnological  Aspect.
Encyclopedia of Microbiology. Volume 2. D- L . USA: Academic Press Inc.
Habazar,  T.  &  Rivai,  F.  2004. Bakteri  Patogenik Tumbuhan .  Padang:  Andalas  University Press.
Hadioetomo,  R.S. 1993. Mikrobiologi Dasar dalam Praktek . Jakarta: Gramedia.
Hartanti,  P.I.,  A.T.S.  Haji  &  R.  Wirosoedarmo. 2014.  Pengaruh  Kerapatan  Tanaman  Eceng Gondok  ( Eichornia  crassipes )  Terhadap Penurunan  Logam  Chromium  pada Limbah Cair  Penyamakan  Kulit. Jurnal  Sumberdaya Alam dan Lingkungan , pp. 31-37.
Holt, J.G., Krieg, N.R., Sneath, P.H.A., Staley, J.T. &  Williams,  S.T.  1994. Bergey’s  Manual  of Determinative Bakteriology, 9th edn. Baltimore: Williams & Wilkins.
Kaga,  H.,  Mano,  H.,  Tanaka,  F.,  Watanabe,  A., Kaneko, S., & Morisako, H. 2009. Rice seeds as  source  of  endophytic  bacteria. Microbes Environ , 24(2) pp. 154–162
Kismiyati,  S.,  Subekti,  R.W.N.  Yusuf,  &  R. Kusdarwati.  2009.  Isolasi  dan  Identifikasi Bakteri  Gram  Negatif  pada  Luka  Ikan Maskoki ( Carassius auratus )
Akibat Infestasi  Ektoparasit Argulus sp . Jurnal Ilmiah  Perikanan  dan  Kelautan, 1(2),  pp. 129-134.
Kristianto,  S.,  S.  Wilujeng,  &  D.  Wahyudiarto. 2017. Analisis Logam Berat Krom (Cr) pada Kali  Pelayaran  Sebagai  Bentuk  Upaya Penanggulang  Pencemaran  Lingkungan  di Wilayah Sidoarjo. Jurnal Biota , 3(2), pp. 66- 70.
Lasat, M.M. 2002. Phytoextraction of Toxic Metals: A  review  of  Biological  Mechanisms. J. Environ . Qual¸ 31, pp 109- 120.
Lloyd, Jonathan R. 2002. Bioremediation of metals; the application of micro-organisms that make and break minerals. Microbiology Today , 29, pp. 67-69.
Larashati  S.  2004.  Reduksi  Krom  (VI)  Secara  In Vitro  Oleh  Kultur  Campuran  Bakteri  Yang Diisolasi  Dari  Lindi  Tempat  Pembuangan Akhir  (TPA)  Sampah. Tesis .  Departemen Biologi Institut Teknologi Bandung.
Marlinda,  S.,  S.  Devi,  &  Saryono.  2014.  Seleksi Sembilan  Belas  Bakteri  Endofit  dari  Umbi
Tanaman Dahlia (Dahlia variabilis) Penghasil Enzim Selulase. Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Kampus Binawidya Pekanbaru , pp. 1-6.
Maulana,  A.,  Supartono,  &  S.  Mursiti.  2017.
Bioremediasi Logam Pb pada Limbah Tekstil dengan Staphylococcus  aureus dan Bacillus
subtilis .  Indo.  J.  Chem.  Sci.  6  (3),  pp.  268- 273.
Misra,  T.K.  1992. Heavy  metals,  Bacterial resistances . Encyclopedia  of  Microbiology, Volume  2  D-L .  USA:  American  Society  For Microbiology.
Palar, H. 2008. Pencemaran dan Toksikologi Logam
Berat. Jakarta: Penerbit Rineka Cipta.
Park,  J.  H.,  D.  Lamb,  P.  Paneerselvam,  G.
Choppala,  J.  W.  Chung,  &  N.  Bolan.  2011. Role  of  Organic  Amendments  on  Enhanced Bioremediation  of  Heavy  Metal  (Loid) Contaminated  Soils. Journal  of  Hazardous Materials , 1(85), pp. 549-574.
Pearce,  E.  2009.  Anatomi  dan  Fisiologi  untuk Paramedis.  Jakarta:  PT  Gramedia  Pustaka Utama.
Pelczar Jr, M.J. & E.C.S. Chan. 2014. Dasar-Dasar Mikrobiologi .  Jakarta:  Universitas  Indonesia Press
Putri,  D.  M.  2017.  Isolasi,  Karakterisasi  dan  Uji Aktivitas  Antibiotik  Bakteri  Endofit  dari Tumbuhan  Eceng  Gondok  [ Eichhornia crassipes (Mart.)]  di  Danau  Maninjau, Sumatera  Barat.  [ Skripsi ].  Fakultas  Farmasi Universitas Andalas Padang.
Rajkumar,  M.,  S.  Sandhya,  M.N.V.  Prasad,  &  H.
Freitas. 2012. Perspectives of plant- associated microbes in heavy metal phytoremediation. Biotechnology  Advances , pp. 1-35.
Respati, Ningtyas Y., Evy Yulianti, Anna Rakhmawati.  2017.  Optimasi  Suhu  dan  pH Media  Pertumbuhan  Bakteri  Pelarut  Fosfat dari  Isolat  Bakteri  Termofilik. Jurnal  Prodi Biologi, 6 (7), pp. 423-430.
Resti  Z.,  T.  Habazar,  D.P.  Putra,  &  Nasrun.  2013.
Skrining  dan  Identifikasi  Isolat  Bakteri Endofit  untuk  Mengendalikan  Penyakit Hawar Daun Bakteri pada Bawang Merah. J. HPT Tropika , 13(2), pp. 167-178.
Saha, Amrita & Santra, Subhas., 2014. Isolation and Characterization  of  Bacteria  Isolated  from Municipal  Solid  Waste  for  Production  of Industrial  Enzymes  and  Waste  Degradation.
Journal microbiology , 1(1).
Santos,  M.  and  Lenzi,  E.A.A.  2000.  The  use  of aquatic  macrophytes  ( Eichhornia  crassipes ) as  a  biological  filter  in  the  treatment  of  lead contaminated  effluents. Environ.  Technol. 21, pp. 615–622.
Sari, A.P.N. & Enny Z. 2015. Viabilitas Bacillus S1, SS19  dan  DA11  pada  Medium  yang Terpapar Logam Kromium (Cr). Jurnal Sains Dan Seni Its, 4(2), pp. 2337-3520.
Schiavon, M.E.A.H. Pilon. Smits, M. Wirtz, R. Hell and M. Malagoli. 2008. Interactions Between
Chromium  And  Sulfur  Metabolism  In Brassica  juncea. Journal  Of  Enviromental Quality , 37, pp. 1536-1545.
Soemarno.,  2003. Isolasi  dan  Identifikasi  Bakteri Klinik. Akademi Analisis Kesehatan Yogyakarta. Departemen Kesehatan
Republik Indonesia. Yogyakarta.
Soltan,  M.E.  &  Rashed,  M.N.  2003.  Laboratory study on the survival of water hyacinth under several conditions of heavy metal concentrations. Adv. Environ. Res 7, pp. 321–
334.
Sutamihardja. 2006. Toksikologi Lingkungan . Jakarta:  Buku  Ajar  Program  Studi  Ilmu
Lingkungan Universitas Indonesia.
Szulczewski, M. D., Helmke P. A., & Bleam W. F. 1997.  Comparison  of  XANES  analysis  and extractions
to determine chromium speciation  in  contaminated  soils. Environ.
Sci. Technol, 31, pp. 2954-2959.
Yazid,  M.,  A.  Bastianudin  &  W.  Usada.  2007. Seleksi  Bakteri  Pereduksi  Krom  di  Limbah Cair  Industri  Penyamakan  Menggunakan Metode  Ozonisasi. Prosiding  PPI  -  PDIPTN 2007 Pustek Akselerator dan Proses Bahan - BAT AN Yogyakarta , pp. 46-54.