Analisis Kadar Nikotin Pada Rokok Tingwe (Linting Dewe) Menggunakan Metode Spektrofotometri Ultraviolet- Visibel
Analysis Of Nicotine Levels In Tingwe (Linting Dewe) Cigarette Using Ultraviolet-Vision Spectrophotometry Method
Suharyanto*, Annisaa Shafaa Rahmadhani Program Studi DIII Farmasi, STIKES Nasional Surakarta, Surakarta, Indonesia *E-mail: suharyanto@stikesnas.ac.id
Received: 18 Mei 2022; Accepted: 23 Desember 2023; Published: 30 Desember 2023

## Abstrak
Nikotin merupakan bahan kimia yang sangat berbahaya dimana zat ini merupakan komponen terbesar dalam tembakau  rokok.  Nikotin  dapat  menyebabkan  kanker,  gangguan  pernafasan  dan  bersifat  adiktif.  Rokok Tingwe adalah rokok yang dibuat masyarakat dengan menggunakan alat sederhana tanpa  campuran bahan lain.  Tujuan  penelitian  untuk  menetapkan  kandungan  kadar  nikotin  pada  rokok  Tingwe  dengan  metode Spektrofotometri UV. Hasil penelitian menunjukkan kadar nikotin pada merk A sebesar 1,5496 mg/batang (CV= 0,0382%), merk B sebesar 2,1169 mg/batang (CV= 0,0096%) dan merk C sebesar 1,9987mg/batang (CV= 0,0139%). Berdasarkan Peraturan Pemerintah Nomor 81 tahun 1999 kadar nikotin yang diperbolehkan adalah 1,5 mg/batang sehingga rokok Tingwe merk A,B dan C tidak memenuhi standar.
Kata Kunci : Nikotin, rokok tingwe, spektrofotometri UV-Vis

## Abstract
The most hazardous ingredient in cigarette tobacco is nicotine, which is also the main ingredient. In addition to being addicting, nicotine can cause cancer and lung issues. Tingwe cigarettes are produced locally with basic equipment and no addition of extra substances. The study's goal was to use UV Spectrophotometry to ascertain the amount of nicotine present in Tingwe cigarettes. According to the data, the nicotine content of brands A,  B, and  C  was 1.5496  mg/cigarette (CV  = 0.0382%,  2.1169 mg/cigarette  (CV =  0.0096%),  and 1.9987 mg/cigarette (CV = 0.0139%). Government Regulation Number 81 of 1999 states that a cigarette of tobacco can only contain 1.5 mg of nicotine, hence Tingwe brands A, B, and C do not adhere to this regulation. Keywords: Nicotine, tingwe cigarettes, UV-Vis Spectrophotometry

## PENDAHULUAN
Rokok  adalah  produk  olahan  tembakau yang  terbungkus  dan  digunakan  oleh  orang dengan  menghirup  asapnya  (WHO,  2021). Rokok  merupakan    salah  satu  faktor  resiko primer  beberapa  penyakit  kronis,  dan  hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  merokok dapat  menaikkan  resiko  timbulnya  berbagai penyakit  yang  bisa  menyebabkan  kematian (Nururrahmah,  2011;  Pracilia et  al. ,  2019; Puspawati et  al. ,  2019).  Hal  ini  memberikan indikasi  bahwa  rokok  merupakan  problem besar  bagi  kesehatan  rakyat.  Ketagihan nikotin  dapat  terjadi  pada  orang  dewasa
dengan  dosis  4-6  mg  nikotin  per  hari.  Di Amerika  rokok  putih  yg  tersebar  di  pasaran mempunyai  kadar  nikotin  8-10  mg/batang rokok, di Indonesia kadar nikotin mencapai 17 mg per batang (Aji et al. , 2015; Thabrany and Sarnantio,  2012).  WHO    tahun  2015 melaporkan  bahwa  ASEAN  menyumbang 20% dari kematian akibat tembakau di dunia dan  10%  dari  seluruh  perokok  dunia. (Alamsyah and Nopianto, 2017; Mirnawati et al. , 2018).
Produk  rokok  khas  asal  indonesia mempunyai  efek  rasa  serta  aroma  eksklusif waktu  dibakar  yang  dikenal  dengan  rokok
kretek  (Ung et  al. ,  2018).  Sementara  Rokok tingwe  (linting  dewe)  biasa  juga  disebut masyarakat sebagai rokok lintingan memiliki berbagai  tipe  berdasar  jenis  tembakau  yang digunakan.  Rokok  tingwe  (linting  dewe) dibuat  sendiri  yang  cara  pembuatannya memakai  metode  digiling  ataupun  dilinting dengan  memakai  tangan  ataupun  alat  bantu sederhana  dengan  harga  yang  ekonomis. Rokok jenis ini lebih banyak digunakan oleh orang-orang di pedesaan karena lebih murah, memiliki  aroma  yang  unik,  cita  rasa  yang sama dengan rokok buatan pabrik, dan murni tanpa campuran zat kimia. Disamping itu juga faktor budaya juga menjadi alasan penggunaannya (Ulfa et al. , 2017).
Dampak  negatif  yang  diakibatkan  oleh rokok sangat beresiko tinggi untuk kesehatan. Ada  4.000  senyawa  kimia  berbahaya  dalam asap rokok, dan mengandung zat  karsinogen yang  mengendap  pada  organ  paru    sehingga paru    menjadi  berlubang  dan  menyebabkan kanker  paru  (Morgan et  al. ,  2017;  Balatif, 2020;  Thabrany  and  Sarnantio,  2012).  Sifat toksik  serta  karsinogen  yang  diperoleh  oleh pembakaran  tembakau  bisa  menimbulkan kanker  (Puspawati et  al. ,  2019).  Nikotin merupakan  zat  kimia  yang  ada  pada  rokok, nikotin  bersifat  adiktif.  Selain  itu,  nikotin merupakan    aspek  resiko  penting  untuk penyakit    pada  jantung,  gigi  dan  mulut (Kusuma,  2011;  Yudanardi et  al. ,  2016; Afolalu et al. , 2021; Le Foll et al. , 2022).
Hasil penelitian sebelumnya menyebutkan bahwa kandungan nikotin rokok tingwe dan rokok kretek berturut-turut sebesar 0,74  miligram  perbatang  dan  0,80  miligram perbatang.  Hasil  ini  menunjukkan  keduanya telah memenuhi persyaratan Peraturan Pemerintah  No  81  Tahun  1999  yaitu  1,5 miligram  per  batang.  Gambaran  kandungan dari  berbagai  rokok  perlu  dilakukan  pada varian rokok tingwe yang lain. Pada penelitian akan  ditetapkan  kadar  nikotin  dari  3  varian rokok  tingwe  yang  beredar  di  masyarakat sebagai  bentuk  kepedulian  produk  yang beredar belum diketahui kadar nikotinya.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  bersifat  deskriptif,  yaitu menetapkan kandungan nikotin rokok tingwe dengan  secara  kualitatif  dan  kuantitatif (Zellatifanny and Mudjiyanto, 2018).
Alat
Alat yang digunakan adalah spektrofotometer  UV-Vis  (Shimadzu  seri mini), alat lat gelas (Pyrex, Herna), centrifuge (oregon LC-04S), kertas saring whattman No 1, neraca analitik (timbangan analitik (Ohaus PA214  dengan  sensitivitas  penimbangan 0,0001  gram  dan  maksimal  kapasitas penimbangan 210,0 g), shaker (Rotator H-SR- 200), waterbath, dan mikropipet.

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  adalah tembakau merk  SW,  tembakau  merk  RN,  Merk  VR, metanol  (p.a),  akuabidest  (p.a),  NaOH  2  N, zink  asetat,  kalium  heksasianoferat  (II), H 2 SO 4 Pekat,  HCl  pekat,  asam  asetat  10% (Merck).

## Preparasi sampel
Setiap  merek  rokok  ditimbang  saksama sebanyak  4  gram  dan  dikeringkan  di  oven suhu  45°C.  Sampel  direndam  dalam  10  mL metanol dan diaduk dengan shaker selama 30 menit  dengan  200  rpm,  ditambahkan  25  mL aquabidest  dan  1  mL  NaOH  2  N.  Campuran diaduk  selama  5-10  menit  di  atas  waterbath hingga  metanol  menguap  dan  dibiarkan dingin. Untuk mendapatkan supernatan, kertas whatman  digunakan  untuk  menyaring.  Zink asetat  1  mL,  potasium  heksasianoferat  (II)  1 mL  ditambahkan  sampai  50  mililiter  dengan aquabides.  Selama  lima  menit,  campuran disentrifugasi  pada  4000  rpm.  Beningan sebanyak 0,4 mL yang dipipet ke dalam labu ukur 10 mL, dan metanol ditambahkan sampai tanda (Ulfa et al. , 2017).
Uji kualitatif dengan pereaksi H 2 SO 4 P
Larutan  hasil  preparasi  sampel  diambil sebanyak  1  mL  dimasukan  ke  dalam  tabung reaksi, ditambah 2-4 tetes H 2 SO 4 pekat. Hasil positif nikotin ditunjukkan dengan terbentuknya  garam  berwarna  coklat  pekat (Parbuntari et al. , 2018).

## Uji kualitatif dengan HCl Pekat
Larutan  hasil  preparasi  sampel  diambil sebanyak 1 mL dalam tabung reaksi ditambah 2-4  tetes  HCl  pekat.  Jika  terbentuk  garam berwarna coklat terang, menunjukkan adanya nikotin  (Hidayat et  al. ,  2016;  Susanna et  al. , 2003).

## Pembuatan baku nikotin 100 ppm
Larutan  baku  merupakan  larutan  utama untuk uji kuantitatif diambil sebanyak 0,1 mL nikotin  ditambahkan  dengan  metanol  sampai 100 mL.

## Penentuan panjang gelombang maksimum
Baku nikotin 100 ppm dipipet sebanyak 1 mL dalam labu ukur 10 mL diencerkan dengan metanol  dengan  konsentrasi  10  ppm,  diukur nilai  absorbansi  dalam  range  panjang gelombang 200-300 nm.

## Penentuan kurva baku nikotin
Kurva  baku  nikotin  disiapkan  dalam konsentrasi  2  ;  4  ;  6  ;  8  ;  10  ppm.  serapan sampel  dibaca  pada  panjang  gelombang maksimum yang diperoleh.
Penetapan  kadar  nikotin  pada  sampel rokok tingwe
Larutan  preparasi  sampel  tembakau dipipet  sebanyak  0,4  mL  ditambah  methanol sampai 10 ml, kadar nikotin ditetapkan dengan Spektrofotometri  UV-Vis  pada  panjang gelombang maksimum (Susanna et al. , 2003; Hidayat et al. , 2016)

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Analisis  kualitatif  ini  bertujuan  untuk menetapkan keberadaan nikotin dalam tembakau.  Pada  uji  kualitatif  dilakukan  juga uji  terhadap  kontrol  positif  yang  berguna sebagai  pembanding  hasil  uji  pada  tiap sampel.  Hasil  uji  H 2 SO 4 pekat  positif mengandung  nikotin  dengan  menunjukkan perubahan  warna  menjadi  coklat  pekat  yang berarti  terdapat  kandungan  nikotin.  Hasil  uji HCl  (pekat)  sampel  tembakau  positif mengandung  nikotin  dengan  menunjukkan perubahan  warna  menjadi  coklat  bening ( Tabel  1 ).  Perubahan  warna  menjadi  coklat terang  terjadi  karena  reaksi  penggaraman
nikotin dengan larutan HCl pekat. Pada reaksi penggaraman,  larutan  HCl  akan  terionisasi menjadi  ion  H + dan  Cl.  Pada  saat  reaksi berlangsung,  ion  H + akan  memprotonasi
molekul nikotin membentuk garam nikotin. Penentuan panjang gelombang maksimum Panjang gelombang maksimum ditentukan  dengan  cara  membaca  serapan baku nikotin pada rentang panjang gelombang yang 200 nm – 300 nm ( Gambar 1 ).
Hasil  yang  diperoleh  menunjukkan bahwa panjang gelombang maksimal sebesar
260,0 nm dengan absorbansi 0,695. Hasil ini serupa  dengan  penelitian  sebelumnya  yang diperoleh hasil panjangnya gelombang larutan baku  nikotin  yakni  261  nm.  Perbedaan  hasil dapat dipengaruhi oleh beberapa faktor seperti sensitifitas  alat  yang  digunakan  (Ulfa et  al. , 2017).
Tabel 1 . Hasil uji kualitatif 3 varian rokok tingwe Sampel Pereaksi H 2 SO 4 P HCl P Keterangan
Sampel 1 Garam berwarna coklat pekat Garam berwarna coklat terang Positif Nikotin Sampel 2 Garam berwarna coklat pekat Garam berwarna coklat pekat Positif Nikotin
Sampel 3 Garam berwarna coklat pekat Garam berwarna coklat pekat Positif Nikotin
Gambar 1. Hasil Penentuan Panjang Gelombang Maksimum

## Pembuatan Kurva Baku Nikotin
Kurva  baku  nikotin  bertujuan  untuk memperoleh  persamaan  regresi  linier  yang akan  digunakan  sebagai  penentuan  kadar sampel  ( Gambar  2 ).  Hasil  kurva  kalibrasi menunjukkan persamaan regresi diperoleh y = 0,051x + 0,1837 dengan nilai r = 0, 9948. Nilai Y merupakan absorbansi yang diperoleh dari sampel rokok. mengalami kenaikan sebanding dengan konsentrasi, dihasilkan nilai koefisien korelasi  pengukuran  kurva  baku  nikotin 0,9948,  nilai  r  yang  di  dapat  mendekati  ±  1, yang  menunjukan  terdapat  korelasi  yang sangat  kuat  antra  konsentrasi  (X)  dan absorbansi  (Y).  Nilai  r  yang  didapat mengindikasikan  hubungan  konsentrasi  dan absorbansi nikotin menunjukan linier.

## Penentuan kadar Nikotin
Penetapan kadar nikotin dalam tembakau dilakukan  tiga  replikasi  masing  dianalisis secara triplo. Hasil kadar nikotin dari rokok A, B dan C disajikan dalam tabel 2. Hasil rata rata kadar  nikotin  yang  terkandung  pada  rokok tingwe adalah pada sampel A sebesar 1,549 ± 0,059  mg/batang,  sampel  B  2,116  ±0,020 mg/batang, dan pada sampel C sebesar 1,998 ± 0,027 mg/batang ( Tabel 2 ). Pada penelitian sebelumnya mengunakan metode Spektrofotometri  UV-Vis  pada  penetapan kadar  nikotin  pada  sampel  rokok  tingwe
merek  TM  di  dapatkan  hasil  rata-rata  kadar sebesar  0,74  mg/batang  dan  pada  sampel rokok  tingwe  merek  RKD  di  dapatkan  hasil rata-rata  kadar  sebesar  0,80  mg/batang  (Ulfa et al., 2017).
Pada penetapan kadar nikotin  ini dihitung nilai  koefiensi  variasi  yang  bertujuan  untuk mengetahui  kesesuaian  hasil  analisis  satu dengan  yang  lainnya  yang  diperoleh  dari sampling acak syarat % KV yang baik adalah 2% (Harmita, 2004).
Dari data yang diperoleh dari sampel  A, B dan C didapatkan nilai %KV sebesar secara 0,0382%,  0,009%,  dan  0,013%.  Hal  tersebut menunjukkan  bahwa  data  pada  penetapan kadar nikotin pada sampel rokok A, B, dan C diperoleh dengan tingkat ketelitian kerja yang baik. Untuk mengetahui homogenitas data dan perbedaan  kandungan  Nikoten  dilakukan  uji statistik  menggunakan  Anova.  Berdasarkan output  SPSS,  diperoleh  nilai  signifikansi sebesar 0,060. Karena nilai signifikansi lebih besar  dari  0,05  dapat  disimpulkan  bahwa varian kandungan ketiga rokok tersebut adalah homogen.
Dari  hasil  post  hoc  test,  dapat disimpulkan  bahwa  perbedaan  kandungan Nikotin  pada  rokok  A  dapat  dikatakan signifikan  karena  memiliki  nilai  sig  lebih besar  dari  (0.05),  sedangkan  perbedaan kandungan  pada  rokok  B  dan  C  tidak signifikan karena nilai sig < dari 0,05
Gambar 2. Kurva baku Nikotin yang diukur pada dengan spektrofotometer pada panjang
gelombang 260 nm y = 0,051x + 0,1837 r  = 0,9948 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0 5 10 15 Abs o rb an si ( y) Konsentrasi (ppm)
Tabel 2. Hasil analisis kadar nikotin yang terkandung dalam rokok Sampel Rokok Kadar Rata-rata ± SD (mg/batang) %KV A 1,549 ± 0,059* 0,038 B 2,116 ±0,020* 0,009 C 1,998 ± 0,027* 0,011 *) Tidak memenuhi  persyaratan Peraturan Pemerintah
No.81 tahun 1999

## KESIMPULAN
Dari  hasil  penelitian  dapat  dinyatakan
Rokok Tengwe Varian A,B dan C mengandung  nikotin  melabihi  persyaratan yang  ditetapkan  pemerintah,  yaitu  lebih  dari (>)  1,5  mg/  batang,  sehingga  tidak  boleh digunakan  untuk  mencegah  bahaya  untuk kesehatan Paru.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis mengucapkan banyak
terimakasih kepada LPPM STIKES Nasional yang  telah  mendanai  penelitian  ini  sehingga dapat terselesaikan dengan baik.

## Daftar Pustaka
Afolalu  E.F.,  Spies  E.,  Bacso  A.,  Clerc  E.,  Abetz-Webb  L.,  Gallot  S.  and  Chrea  C.,  2021, Impact of tobacco and/or nicotine products on health and functioning: a scoping review and findings from the preparatory phase of the development of a new self-report measure, Harm Reduction Journal , 18 (1), 1–15.
Aji  A.,  Maulinda  L.  and  Amin  S.,  2015,  Isolasi  Nikotin  dari  Puntung  Rokok  Sebagai Insektisida, Jurnal Teknologi Kimia Unimal , 4 (1 (Mei 2015)), 100–120.
Alamsyah  A.  and  Nopianto,  2017,  Determinan  Perilaku  Merokok  Pada  Remaja, Jurnal Endurance , 2 (1), 25–30.
Balatif R., 2020, Cigarettes and Its Effects on Health, Scripta Score Scientific Medical Journal , 2 (1), 44–52.
Le Foll B., Piper M.E., Fowler C.D., Tonstad S., Bierut L., Lu L., Jha P. and Hall W.D., 2022, Tobacco and nicotine use, Nature Reviews Disease Primers , 8 (1), 1–16.
Harmita,  2004,  Review  Artikel:  Petunjuk  Pelaksanaan  Validasi  Metode  Dan  Cara Perhitungannya, Majalah Ilmu Kefarmasian , I (3), 117–135.
Hidayat  R.N.,  Ramadhan  A.M.  and  Rusli  R.,  2016,  Analisis  Kadar  Nikotin  Rokok  Herbal Indonesia, Prosiding  Seminar  Nasional  Kefarmasian  Fakultas  Farmasi  Universitas Mulawarman , 3 (April), 20–21.
Kusuma  A.R.P.,  2011,  Pengaruh  Merokok  Terhadap  Kesehatan  Gigi  Dan  Rongga  Mulut, Kedokteran Gigi Unissula , 49 (1), 124.
Mirnawati, Nurfitriani, Zulfiarini F.M. and Cahyati W.H., 2018, Perilaku merokok pada remaja umur 13-14 tahun, Higeia Journal Of Public Health Research And Development , 2 (3), 396–405.
Morgan J.C., Byron J., Baig S.A., Stepanov I. and Brewer N.T., 2017, How people think about the chemicals in cigarette smoke: A systematic review, Journal of Psychiatric Research , 94 (3), 36–46.
Nururrahmah, 2011, Pengaruh Rokok Terhadap Kesehatan Manusia, Jurnal Dinamika , 02 (2), 45–51.
Parbuntari  H.,  Prestica  Y.,  Gunawan  R.,  Nurman  M.N.  and  Adella  F.,  2018,  Preliminary Phytochemical Screening (Qualitative Analysis) of Cacao Leaves (Theobroma cacao L.), Eksakta , 19 (2), 40–45.
Pracilia P.C.S., Nelwan J.E. and Langi F.F.L.., 2019, Hubungan Antara Kebiasaan Merokok
Dengan Kejadian Penyakit Jantung Koroner Pada Pasien Yang Berkunjung Di Instalasi Cardiovascular and Brain Centre (CVBC) RSUP Prof. Dr. R. D. Kandou Manado, Jurnal KESMAS , 7 (4), 1–6.
Puspawati  P.R.,  Kristina  S.A.  and  Wiedyaningsih  C.,  2019,  The  Effect  of  Smoking  on Premature  Death  Due  to  Cancer  in  Indonesia:  Years  of  Life  Lost  (YLL), Majalah Farmaseutik , 16 (1), 101–106.
Susanna D., Hartono. B. and Fauzan H., 2003, Level of Nicotine Content in Cigarettes, Jurnal ekologi kesehatan , 2 (3), 272–274.
Thabrany H. and Sarnantio P., 2012, The Heaven For Cigarette Companies and the Hell For People ,  First  Edit.,  Center  for  Anti  Smoking  School  of  Public  Health  Universitas Indonesia, Jakarta.
Ulfa A.M., Winahyu D.A. and Anggraini D.G., 2017, Analisa Kadar Nikotin Pada Tembakau Dengan Perlakuan Dalam Bentuk Rokok Lintingan Dan Rokok Kretek Di Pasar Mandala, Lampung  Tengah  Menggunakan  Metode  Spektrofotometri  Uv-Vis  Analysis, Jurnal Analis Farmasi , 2 (3), 155–159.
Ung J.E., Sasputra I.N. and Liana D.S., 2018, Pengaruh Perbedaan Waktu Paparan Asap Rokok Kretek  Non  Filter  Terhadap  Gambaran  Histopatologi  Paru  Mencit  (Mus  musculus), Cendana Medical Journal , 15 (3), 362–368.
WHO, 2021, WHO global report on trends in prevalence of tobacco use 2000–2025 , Fourth ed., WHO, Geneva.
Yudanardi M., Setiawan A. and Sofia S., 2016, Hubungan Tingkat Adiksi Merokok Dengan Derajat  Keparahan  Aterosklerosis  Pada  Pasien  Penyakit  Jantung  Koroner, Diponegoro Medical Journal (Jurnal Kedokteran Diponegoro) , 5 (4), 1207–1213.
Zellatifanny  C.M.  and  Mudjiyanto  B.,  2018,  Tipe  Penelitian  Deskripsi  Dalam  Metode Penelitian, Diakom : Jurnal Media dan Komunikasi , 1 (2), 83–90.