Stannum : Jurnal Sains dan Terapan Kimia, 5 (1) (2023) 8-14
Stannum : Jurnal Sains dan Terapan Kimia
Website: https://journal.ubb.ac.id/index.php/stannum doi: 10.33019/jstk.v5i1.3847 Research paper
Cholesterol Lowering Activity from Methanol Extract of Bidara Leaves ( Ziziphus mauritiana )
Aktivitas Penurun Kolesterol dari Ekstrak Metanol Daun Bidara ( Ziziphus mauritiana )
Isna Lailatusholihah 1 , Weny JA Musa 2 , Lintang Panji Setyoko 1 , Holisha Widiyanto 1 , Nurhayati Bialangi 2 dan Boima Situmeang 1 *
1) Department of Chemistry, Sekolah Tinggi Analis Kimia Cilegon, Banten 043259 Jalan Lingkar Selatan KM 1,7, Cilegon, Banten 42411
2] Department of Chemistry, Faculty of Mathematic and Natural Sciences, Universitas Negeri Gorontalo, Jurusan Matematika. FMIPA - Universitas Negeri Gorontalo. Kampus 1 UNG, Jl. Jenderal Sudirman No. 6, 96128. Kota Gorontalo, Indonesia.
* Corresponding author: boimatumeang@gmail.com
Received: February 9, 2023,  Accepted: April 28, 2023  Published: April 30, 2023

## ABSTRACT
Study  on  Bidara  leaves  ( Ziziphus  mauritiana )  extracted  with  methanol,  qualitative  tests  of secondary  metabolites  compounds  and  cholesterol-lowering  activity  tests  have  been  conducted. The  objective  of  this  study  was  to  determine  the  cholesterol-lowering  activity  of  Bidara  leaf methanol extract. This study employed extraction, screening for phytochemicals such as alkaloids, tannins, triterpenoids, flavonoids, and saponins, and testing for cholesterol-lowering activity using UV-Vis  spectrophotometry  at  a  wavelength  of  405  nm.  According  to  research  findings,  methanol extract  of  Bidara  leaves  has  been  shown  to  reduce  cholesterol  levels  by  80.4598%  due  to  the presence of active secondary metabolites such as triterpenoids, tannins, and flavonoids.
Keywords : extraction, bidara, cholesterol lowering activity, ziziphus mauritiana

## PENDAHULUAN
Makanan  dengan  kandungan  lemak  yang tinggi  umumnya  berasal  dari  sumber  hewani dan  sangat  digemari  masyarakat  hingga  saat ini.  Namun,  hal  tersebut  menjadi  salah  satu faktor  pemicu  terjadinya  peningkatan  kadar kolesterol dalam tubuh (Sharrett et al., 2001).
Kolesterol di dalam tubuh manusia menjadi salah satu jenis lemak yang dapat menimbulkan  permasalahan  serius  ketika terjadi peningkatan kolesterol total darah atau total  cholesterol (TC)  sehingga  berpotensi menyebabkan  risiko  terjadinya  penyakit jantung  koroner  (PJK).  Terdapat  dua  jenis
kolesterol  dalam  bentuk  lipoprotein  yang terdapat  dalam  darah  yaitu low-density lipoprotein  (LDL)  dan high-density lipoprotein (HDL)  (Sigarlaki  &  Tjiptaningrum,  2016) (Sharrett et al., 2001).
Kolesterol  merupakan  salah  satu  jenis lemak  yang  berada  dalam  tubuh  manusia. Ketika  kolesterol  total  darah  (TC)  mengalami peningkatan  maka  dapat  menyebabkan  risiko terjadinya  penyakit  jantung  koroner  (PJK). Terdapat  dua  jenis  kolesterol  berupa lipoprotein  yang  terdapat  dalam  darah  yaitu low-density lipoprotein  (LDL)  dan high-density
lipoprotein  (HDL)  (Sigarlaki  &  Tjiptaningrum, 2016) (Sharrett et al., 2001).
Tanaman  Bidara ( Ziziphus  mauritiana ) sebagai  vegetasi  tanaman  herbal  yang  banyak ditemukan  di  daerah  tropis maupun  subtropis khususnya  di  Asia.  Indonesia  menjadi  salah satu  daerah  yang  banyak  ditemukannya tanaman ini, terutama di pulau Jawa, Bali, dan Nusa  Tenggara  Barat  (NTB).    Tanaman  Bidara dikenal sebagai tanaman liar yang diklasifikasikan  dalam  famili Rhamnaceae . Tanaman  tersebut  mampu  bertahan  hidup pada  lingkungan  yang  cukup  kering.  Hasil  kaji literatur  lain  mengatakan  bahwa  tanaman  ini memiliki  kemampuan  untuk  tumbuh  pada kondisi  tanah  yang  bersifat  basa,  asin,  serta sedikit asam (Nairfana et al., 2022).
Jarald et al . , (2009) mengungkapkan bahwa dalam  ekstrak  etanol  dari  tanaman Z. mauritiana mengandung  berbagai  senyawa fungsional  seperti  karbohidrat,  flavonoid, alkaloid,  saponin,  serta  karbohidrat.  Ekstrak tersebut  dilaporkan  dapat  menurunkan glukosa  darah  postprandial  secara  in  vivo. Sedangkan  ekstrak  metanol  daun  bidara dilaporkan  memiliki  kemampuan  dalam menurunkan  glukosa  darah  pada  uji  toleransi glukosa  oral  mencit  Swiss  albino  (Mauludiyah et  al.,  2020)).  Pada  penelitian  yang  sudah pernah dilakukan menunjukkan bahwa ekstrak daun  bidara  positif  memiliki  kandungan flavonoid  (Anggraini  &  Ali,  2017).  Kandungan flavonoid  di  dalam  daun  bidara  berkontribusi dalam  penurunan  kolesterol  dalam  tubuh (Nofianti et al., 2015).
Berbagai  penelitian  yang  telah  dilakukan menunjukkan  bahwa  peningkatan  TC  dan kolesterol  LDL  (LDL-C)  yang  terjadi  secara tidak  normal,  menyebabkan  penumpukan kadar kolesterol dan lipid lainnya pada dinding arteri  dan  menyebabkan  aterosklerosis  dalam perkembangan  PJK.  Sebaliknya,  HDL  dapat membantu  mengurangi  kolesterol  dari  arteri dan  membawanya  kembali  ke  hati  untuk dihilangkan (Zhang et al., 2017).
Kolesterol  yang  terdapat  dalam  tubuh  kita dapat  dikurangi  dengan  mengkonsumsi  obat- obatan baik obat yang sudah terdaftar maupun obat-obatan  herbal.  Indonesia  memiliki  1.300 jenis  tumbuhan  yang  dapat  dimanfaatkan debagai  obat  herbal  (Nuryanti  &  Pursitasari, 2014)  (Siregar  et  al.,  2020). World  Health Organization (WHO)  menyarankan  untuk mengkonsumsi  obat  herbal  baik  sebagai pemeliharaan  kesehatan,  pencegahan  maupun
mengobatan  penyakit  degeneratif  seperti penyakit kolesterol (Nobertson et al ., 2018) Uji  skrining  fitokimia  dapat  digunakan untuk menganalisis adanya beberapa senyawa metabolit sekuder yang berpotensi untuk dapat digunakan  sebagai  obat-obatan,  seperti  uji alkaloid, flavonoid, tanin, dan saponin (Ningsih et al., 2020).
Pada  penelitian  yang  sudah  pernah dilakukan  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun bidara  positif  memiliki  kandungan  flavonoid (Mauludiyah  et  al.,  2020)  (Anggraini  &  Ali, 2017).  Kandungan  flavonoid  di  dalam  daun bidara berkontribusi dalam penurunan kolesterol  dalam  tubuh  (Nofianti  et  al.,  2015). Berdasarkan  latar  belakang  tersebut,  maka peneliti  tertarik  untuk  melakukan  penelitian mengenai  uji  aktivitas  penurun  kolesterol ( Cholesterol  Lowering  Activity )  dari  ekstrak metanol daun bidara.

## METODOLOGI Bahan
Metanol, Aquadest, Garam Kolesterol, Asam Sulfat 98%, Asam Asetat anhidrat, Etanol 96%, FeCl 3 ,  Serbuk  Mg,  Asam  Klorida  37%, Kloroform,  Pereaksi Liebermann-Burchard ,
Pereaksi dragen droff .

## Alat
Neraca  Analitik,  Botol  Kaca,  maserasi, gunting, Grinder , Spatula, Tabung Reaksi, Pipet Mohr 5 mL, Pipet Tetes, Micro Pipet, Penangas Air,  Kertas  Saring,  Corong  Gelas, Rotary Evaporator ,  Gelas  Piala  1  L,  Spektrofotometer UV-Vis.

## Prosedur
Prosedur  kerja  dalam  penelitian  ini  terdiri dari  ekstraksi,  pengujian  skrining  fitokimia, dan pengujian aktivitas antikolesterol.

## Ekstraksi
Sampel  daun  bidara  sebanyak  500  g dimasukkan  ke  dalam  botol  kaca  maserasi, kemudian  direndam  dengan  menggunakan metanol sebanyak 1000 mL, didiamkan selama 2  hari,  disaring.  dan  hasil  ektraksinya dievaporasi  pada  suhu  40 o C  hingga  diperoleh ekstrak  yang  kental  (Hidajati  and  Rokhmania, 2019).

## Pengujian skrining Fitokimia
Identifikasi Flavonoid
Sebanyak  1  mL  ekstrak  dilarutkan  dengan Etanol  99%,  kemudian  2  mL  sampel
ditambahkan serbuk Mg dan 0,4 mL campuran asam  klorida  37%  dengan  Etanol  99%  (1:1).
Terbentuknya  warna pink atau  ungu menandakan adanya flavonoid (Halimatussakdiah et al., 2018). Identifikasi Tanin Sebanyak 5 mL ekstrak sampel ditambahkan 15 mL aquadest panas, kemudian dipanaskan  selama  5  menit.  Setelah  5  menit, sampel  uji  tersebut  ditambahkan  FeCl 3 1%. Terbentuknya  warna  biru  tua  atau  hijau kehitaman  menandakan  adanya  tanin  dalam sampel tersebut (Harliananda et al., 2019).

## Identifikasi Saponin
Sebanyak  5  mL  ekstrak  sampel  dimasukan ke  dalam  tabung  reaksi,  ditambahkan  10  mL aquadest panas,  dan  dikocok  kuat  selama  10 detik.  Terbentuknya  busa  pada  lapisan  atas yang stabil menunjukan adanya saponin dalam sampel tersebut (Situmeang dkk, 2019).

## Identifikasi Alkaloid
Sebanyak 5 mL ekstrak sampel ditambahkan  5  mL  Kloroform,  didiamkan hingga  homogen,  kemudian  ditambahkan Pereaksi Dragendorff's  reagent .  Jika  terbentuk warna  merah  coklat,  maka  positif  adanya kandungan alkaloid pada sampel uji (Situmeang dkk, 2019). Identifikasi Terpenoid dan Steroid Sebanyak 2 mL ekstrak sampel ditambahkan kloroform, kemudian ditambahkan  asam  asetat  dan  beberapa  tetes asam  sulfat  pekat  (Pereaksi Liebermann- Burchard ).  Apabila  terbentuk  warna  hijau kegelapan  menunjukkan  adanya  kandungan terpenoid,  namun  jika  terbenuk  warna  merah muda  atau  jingga,  maka  menunjukkan  adanya kandungan  steroid  dalam  sampel  tersebut (Situmeang dkk, 2019).

## Pengujian aktivitas antikolesterol
Pembuatan  Larutan  Baku  Kolesterol  200 µg/mL
Pembuatan lautan baku 200 µg/mL dengan melarutkan  serbuk  Garam  Kolesterol  40  mg dalam 200 mL etanol 96%.

## Pembuatan Larutan Deret Standar
Pembuatan  larutan  deret  standar  dengan konsentrasi  40,  50,  60,  70,  80,  90,  100  µg/mL yang  diperoleh  dari  larutan  induk  kolesterol 1000  µg/mL  dengan  cara  memipet  sebanyak
0.2, 0.25, 0.3, 0.35, 0.4, 0.45, 0.5 mL. Kemudian ditambahkan  Etanol  sampai  volume  tepat  5 mL.  Dari  masing-masing  larutan  tersebut ditambahkan Asam Asetat Anhidrat sebanyak 2 mL dan Asam Sulfat 98% sebanyak 0,1 mL dan dihomogenkan.  Setelah  itu  tutup  permukaan tabung  reaksi  dengan  alumunium  foil  untuk melindungi  dari  cahaya  matahari  selama  15 menit  dan  diukur  absorbansinya  dengan menggunakan  panjang  gelombang  423  nm. Kemudian  dibuat  kurva  kalibrasi  derer standarnya.

## Penentuan Aktivitas Antikolesterol
Pembuatan  larutan  standar  uji  sebanyak  5 mL dengan konsentrasi 50, 100, 150, 200, 250 µg/mL  menggunakan  pelarut  etanol  96% kemudian ditambahkan ke dalam sampel uji 5 mL larutan garam kolesterol 200 µg/mL dan 2 mL  asam  asetat  anhidrat  dan  0,1  mL  asam sulfat  98%  kemudian  diinkubasi  pada  ruang gelap  selama  15  menit  dalam  suhu  kamar, absorbansi larutan diukur dengan menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis  pada panjang  gelombang  423  nm  (Situmeang  dkk, 2016).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Ekstraksi
Sampel  daun  tunaman  bidara  kering  yang digunakan  pada  penelitian  ini  yakni  sebanyak 500  g.  Sampel  daun  bidara  kering  tersebut dihaluskan  dengan  cara  dipotong  dan selanjutnya  diblender  untuk  memperoleh bentuk  serbuknya.  Ekstraksi  serbuk  daun bidara  dilakukan  menggunakan  metode maserasi dengan metanol sebanyak 1 L. Proses penyaringan  dilakukan dengan  metode  vakum filtrasi  untuk  memperoleh  ekstrak  metanol daun  bidara.  Filtrat  yang  telah  disaring, selanjutnya dipekatkan dengan rotary evaporator pada  temperature  40  °C.  Hasil ekstrak  pekatnya  diperoleh  sebanyak  9,7  g dengan rendemen sebesar 1,94%.

## Skrining Fitokimia Ekstrak
Pada  penelitian  ini,  skrining  fitokimia dilakukan  dengan  cara  mengambil  ekstrak pekat  metanol  daun  bidara  sebanyak  1  g. Pengujian  ini  dilakukan  guna  mengidentifikasi senyawa  metabolit  sekunder  dalam  ekstrak metanol  daun  bidara  seperti  alkaloid, triterpenoid,  steroid,  saponin,  tanin  dan flavonoid.  Hasil  uji  skrining  fitokimia  ekstrak metanol  daun  bidata  disajikan  pada  Tabel  1 berikut.
Tabel 1. Hasil uji skrining fitokimia Golongan senyawa Pereaksi Hasil Alkaloid Dragen droff (-) Triterpenoid Liebermann- Bouchard (+) Steroid (-) Saponin Aquadest Panas (-) Tanin FeCl 3 (+) Flavanoid Serbuk  Mg  +  HCl Pekat (+)
Berdasarkan  hasil  yang  tercantum  pada Tabel  1,  ekstrak  metanol  daun  bidara mengandung  senyawa  golongan  triterpenoid, tanin  dan  flavonoid.  Uji  steroid  dan triterpenoid  dilakukan  menggunakan  metode Liebermann-Bouchard ,  dimana  ekstrak  sampel tersebut dilarutkan dalam kloroform, ditambah Pereaksi Liebermann-Bouchard (asam  asetat anhidrat  -  asam  sulfat  pekat).    Hasil  tersebut teridentifikasi  adanya  triterpenoid,  karena ekstrak  sampel  tersebut  menghasilkan  warna merah-jingga,  sedangkan  adanya  kandungan steroid  ditunjukkan  melalui  warna  hijau-biru. Kemunculan  warna  spesifik  tersebut  karena kemampuan  senyawa  triterpenoid  maupun steroid dalam ekstrak sampel bereaksi dengan asam  sulfat  pekat  dalam  pelarut  asam  asetat anhidrat.  Perbedaan  warna  yang  dihasilkan oleh  triterpenoid  dan  streoid  disebabkan perbedaan  gugus  pada  atom  C-4  sebagaimana yang dilaporkan oleh Situmeang dkk (2019).
Oleh karena itu, dapat dikonklusikan bahwa ekstrak  metanol  daun  bidara  tersebut  positif mengandung  triterpenoid  maupun  steroid yang  ditandai  pada  munculnya  perubahan warna tersebut.
Pengujian pada ekstrak metanol menunjukkan  positif  adanya  kandungan  tanin yang  ditandai  dengan  perubahan  warna menjadi hijau kehitaman. Hal ini terjadi Ketika dilakukan  penambahan  larutan  FeCl 3 1% terhadap  ekstrak  sampel  tersebut.  Perubahan warna  tersebut  disebabkan  karena  adanya reaksi antara FeCl 3 dengan gugus hidroksil dari tannin yang terdapat pada ekstrak sampel.
Pengujian  terhadap  ekstrak  metanol dilakukan  dengan  menambahkan  etanol  yang berfungsi  sebagai  pelarut  polar.    Selanjutnya ditambahkan  serbuk  Mg  dan  asam  klorida pekat dengan tujuan untuk menghidrolisis dan mengidentifikasi  kandungan  flavonoid  dalam sampel,  yang  kemudian  direduksi  oleh  serbuk Mg. Hasil dari reaksi reduksi ini menghasilkan warna  merah  atau  jingga  pada  sampel  yang
menunjukkan  adanya  senyawa  golongan flavonoid di dalam ekstrak sampel tersebut
Penentuan  Deret  Standar  Dan  Kurva Kalibrasi Kolesterol
Pengujian  aktivitas  penurunan  kolesterol diawali  dengan  pembuatan  kurva  kalibrasi larutan  deret  standar  kolesterol.  Pembuatan kurva kalibrasi deret standar dilakukan dengan mereaksikan  7  seri  konsentrasi  larutan  baku kolesterol  dalam  etanol  96%  dengan penambahan  2  mL  asam  asetat  anhidrat  dan 0,1  mL  asam  sulfat  pekat.  Deret  serial  yang dibuat dari larutan kolesterol pada konsentrasi 0;  40;  50;  60;  70;  80;  90  dan  100  ppm.  Hasil yang  diperoleh  dapat  dilihat  pada Tabel  2 berikut:
Tabel  2 .  Hubungan  absorbansi  dan  deret standar kolesterol Konsentrasi (ppm) Absorbansi   Persamaan Regresi 0 0,000 y = 0,0007x+0,000 4 R² = 0,9996 40 0,0280 50 0,0348 60 0,0406 70 0,0471 80 0,0542 90 0,0606 100 0,0675
Gambar 1. Kurva kalibrasi deret standar kelsterol
Koefisien  korelasi  (R)  dari  kurva  kalibrasi larutan  baku  kolesterol  sebesar  0,9996.  Hasil linearitas  dari  kurva  yang  baik  diperoleh  jika nilai  koefisien  regresinya  diantara  0,8-1 sebagaimana  diungkapkan  oleh  Musa  et  al (2019).  Manafaat  dari  uji  korelasi  ini  yakni untuk mencari hubungan antara variabel bebas (X)  dan  variabel  terikat  (Y).  Selain  itu,
digunakan juga sebagai acuan dalam menghitung kadar kolesterol yang diperoleh.

## Pengujian Aktivitas Penurunan Kolesterol
Uji aktivitas penurunan kolesterol dilakukan menggunakan metode spektrofotometri UV-Vis yang  mana  sampelnya  telah  reaksikan  dengan pereaksi Liebermann-Bourchard .    Pereaksi tersebut berfungsi untuk mengukur kandungan kolesterol  bebas  yang  terdapat  di  dalam sampel  uji  melalui  reaksi  secara  kompleks sehingga menghasilkan warna hijau dan diukur nilai absorbansinya. Selain itu, pada pengujian ini  reaksi  dilakukan  secara  anhidrat  karena reaksinya  sangat  sensitif  dan  tidak  stabil  jika terdapat kandungan air. Pengujian dilakukan dengan cara
menambahkan  5  mL  larutan  kolesterol  200 µg/ml  kedalam  masing-masing  seri  standar larutan uji, kemudian ditambahkan 2 mL asam asetat  anhidrat  dan  0,1  mL  asam  sulfat  pekat. Untuk  larutan  blanko,  hanya  menggunakan  5 mL  larutan  Kolesterol  200  µg/ml,  kemudian ditambahkan  2  mL  asam  asetat  anhidrat  dan 0,1 mL asam sulfat pekat.  Selanjutnya  larutan uji  dan  larutan  blanko  didiamkan  ditempat tertutup  dan  gelap  (terhindar  dari  cahaya) selama  15  menit.    Hal  ini  dilakukan  karena larutan kolesterol memiliki sifat fotodegradasi, yang  mana  larutan  dapat  rusak  oleh  cahaya dan  cahaya  tersebut  akan  mengkonversi kolesterol  menjadi  kolestenon.    Setelah  15 menit,  larutan  tersebut  akan  berubah  menjadi warna  hijau  karena  mengalami  reaksi kompleks,
yang kemudian diukur
absorbansinya  dengan  spektrofotometer  UV- Vis  pada  panjang  gelombang  423  nm.  Data hasil pengukuran serapan terhadap larutan uji ditunjukkan pada Tabel 3 berikut:
Tabel 3. Hasil absorbansi aktivitas penurunan kolesterol Konsentrasi (ppm) Absorbansi 50 0,023 100 0,021 150 0,018 200 0,016 250 0,014
Nilai  absorbansi  yang  ditunjukkan  oleh masing-masing  konsentrasi  berbeda.  Semakin tinggi  konsentrasi  sampel  maka  nilai absorbansinya  semakin  menurun.  Hal  ini terjadi  karena  dengan  tingginya  konsentrasi dan jenis pelarut sampel yang digunakan, dapat menurunkan  kadar  kolesterol  dengan  baik,
sehingga  nilai  absorbansinya  lebih  kecil  dan persentase  aktivitas  penurunan  kolesterolnya besar.  Data  sisa  kadar  kolesterol  dari  masing- masing  konsentrasi  ditunjukkan  pada  Tabel  4 berikut:
Tabel 4 . Sisa kolesterol dari masing-masing konsentrasi sampel Konsentrasi ekstrak (ppm) % sisa kolesterol 50 32,2857 100 29,4286 150 25,1429 200 22,2857 250 19,4286 Setelah  dilakukan  pengujian  terhadap larutan  uji  dan  dihitung  persen  kolesterolnya dari setiap larutan, selanjutnya dihitung persen penurunan kolesterolnya. Hasil persen penurunan  kolesterol  dari  ekstrak  sampel  uji ditunjukkan pada Tabel 5 berikut:
Tabel  5. Persen  penurunan  kadar  kolesterol ekstrak  metanol  daun  tumbuhan bidara Konsentrasi (ppm) Persen penurunan kolesterol (%) 50 67,5287 100 70,4023 150 74,7126 200 77,5862 250 80,4598
Penurunan  nilai  absorbansi  terjadi  karena adanya  senyawa-senyawa  seperti  fenolik  dan flavonoid  yang  berperan  dalam  menurunkan kadar  kolesterol.  Hal  tersebut  terjadi  karena gugus  hidroksil  pada  kolesterol  bereaksi dengan gugus keton pada flavonoid membentuk  hemiasetal.  Selain  itu,  gugus karbonil  pada  flavonoid  akan  bereaksi  dengan gugus  hidroksil  pada  kolesterol  membentuk ikatan  hidrogen.  Senyawa  yang  tidak  terikat oleh  sampel  inilah  disebut  dengan  kolesterol bebas  yang  bereaksi  dengan  asam  asetat anhidrat  dan  asam  sulfat  pekat  seperti  yang diungkapkan  oleh  Anggraini  dan  Ali,  (2017). Semakin  banyak  kandungan  kolesterol  bebas didalam  larutan  tersebut  maka  akan  semakin pekat  warna  yang  dihasilkan,  sehingga  cahaya yang  diserap  akan  semakin  besar  dan  sedikit cahaya  yang  ditransmisikan.  Prinsip  dari pengujian ini adalah membandingkan
absorbansi  dari  larutan  kontrol  negatif  hasil reaksi antara kolesterol bebas dengan pereaksi Liebermann-Bouchard terhadap  absorbansi larutan  uji  dari  ekstrak  daun  bidara  yang berperan sebagai kontrol positifnya, kemudian dihitung nilai persen penurunan kolesterolnya.
Tumbuhan  yang  mengandung  senyawa flavonoid  dan  fenolik  memiliki  khasiat  untuk menurunkan  kadar  kolesterol.  Hal  ini  sejalan dengan hasil uji sampel dari ekstrak methanol yang  menunjukkan  adanya  kandungan  kedua senyawa tersebut sehingga mampu menurunkan  kadra  kolesterol  sebagaimana dilaporkan oleh Musa et al ., (2019).
Dari Tabel 5 tersebut, ekstrak metanol daun bidara  dengan  konsentrasi  250  µg/ml menunjukkan memiliki aktivitas dalam menurunkan kadar kolesterol sebesar
80,4598%.  Hal  ini  membuktikan  bahwa ekstrak  sampel  tersebut  mempunyai  aktivitas dalam  menurunan  kadar  kolesterol  melalui peran kandungan senyawa metabolit sekunder seperti fenolik dan flavonoid didalamnya .
KESIMPULAN Ekstrak metanol terbukti dapat menurunkan kadar kolesterol sebesar 80,4598
%  karena  mengandung  senyawa  metabolit sekunder  aktif  seperti  triterpenoid,  tanin,  dan flavonoid.  Senyawa  ini  berperan  aktif  dalam dunia  pengobatan,  khususnya  flavonoid  yang berperan  aktif  dalam  aktivitas  penurunan antikolesterol,  selain  itu  adanya  senyawa fenolik  seperti  tanin,  triterpenoid  juga membantu  dalam  aktivitas  antikolesterol  dan antioksidan  untuk  menangkal  radikal  bebas dalam tubuh.

## REFERENSI
Anggraini, D. I., & Ali, M. M. (2017). Uji Aktivitas Antikolestrol  Ekstrak Etanol Daun Binahong  (Anredera  cordifolia  (Ten) Steenis)  Secara  In  Vitro. Jurnal  Ilmiah
Kesehatan , 9 (1), 1 – 6. Halimatussakdiah, H., Amna, U., & Wahyuningsih,  P.  (2018).  Preliminary Phytochemical  Analysis  And  Larvicidal Activity  Of  Edible  Fern  ( Diplazium esculentum (Retz.)  Sw.)  Extract  Against Culex. Jurnal  Natural , 18 (3),  141 – 147. https://doi.org/10.24815/jn.v0i0.11335 Harliananda, N., Halimatussakdiah, & Amna, U. (2019).  Analisis  Kualitatif  Senyawa Metabolit Sekunder Daun Betadin (Jatropha  multifida  L.). Quimica:  Jurnal
Kimia Sains Dan Terapan , 1 (1) (April), 7.
Jarald,  E.  E.,  Joshi,  S.  B.,  &  Jain,  D.  C.  (2009). Antidiabetic  activity  of  extracts  and fraction of Zizyphus mauritiana.
Pharmaceutical  Biology , 47 (4),  328 – 334.
https://doi.org/10.1080/138802009027
52488
Mauludiyah, E. N., Darusman, F., & Darma, G. C.
E.  (2020).  Skrining  Fitokimia  Senyawa Metabolit  Sekunder  dari  Simplisia  dan Ekstrak  Air  Daun  Bidara  Arab  (Ziziphus spina-christi L.). Prosiding Farmasi , 1084 – 1089. Musa, J. A., Situmeang, B., & Sianturi, J. (2019). Anti  cholesterol  triterpenoid  acids  from Saurauia  vulcani  Korth  Actinidiaceae . International  Joirnal  of  Food  Properties, 22(1), 1439-1444.
Nobertson, R., Antara, G. P., & Tandi, J. (2018). Kadar Kolesterol Total Tikus Putih Model Hiperkolesterolemia-Diabetes. Farmakologika Jurnal Farmasi , XV (2), 89 – 97.
Nofianti, T., Windiarti, D., & Prasetyo, Y. (2015). Uji  Aktivitas  Ekstrak  Etanol  Krop  Kubis Putih  (Brassica  Oleracea  L.  Var.  Capitata) Terhadap  Kadar  Kolesterol  Total  Dan Trigliserida  Serum  Darah  Tikus  Putih Jantan  Galur  Wistar. Jurnal  Kesehatan Bakti  Tunas  Husada:  Jurnal  Ilmu-Ilmu Keperawatan,  Analis  Kesehatan  Dan Farmasi , 14 (1), 74. https://doi.org/10.36465/jkbth.v14i1.11 3 Nuryanti,  S.,  &  Pursitasari,  D.  (2014). Metabolites Compounds in Palado Leaves (  Agave  Angustifolia  )  Extracted  With Water  and  Ethanol. Jurnal  Akademika Kimia , 3 (August), 165 – 172.
Sharrett,  A.  R.,  Ballantyne,  C.  M.,  Coady,  S.  A., Heiss,  G.,  Sorlie,  P.  D.,  Catellier,  D.,  &
Patsch, W. (2001). Coronary heart disease prediction  from  lipoprotein  cholesterol levels, triglycerides, lipoprotein(a),
apolipoproteins  A-I  and  B,  and  HDL density  subfractions:  The  Atherosclerosis Risk  in  Communities  (ARIC)  Study.
Circulation , 104 (10), 1108 – 1113. https://doi.org/10.1161/hc3501.095214
Sigarlaki,  E.  D.,  &  Tjiptaningrum,  A.  (2016). Pengaruh  Pemberian  Buah  Naga  Merah (Hylocereus  polyrhizus)  Terhadap  Kadar Kolesterol Total. Jurnal Majority , 5 (5), 14 –
17.
Siregar,  R.  S.,  Tanjung,  A.  F.,  Siregar,  A.  F., Salsabila,  Bangun,  I.  H.,  &  Mulya,  M.  O.
(2020). Studi Literatur tentang Pemanfaatan  Tanaman  Obat  Tradisional. Seminar  of  Social  Sciences  Engineering  &
Humaniora , 385 – 391. Situmeang, B., Ibrahim, A.M., Bialangi, N., Musa, W.J.A.,  &  Silaban,  S.  (2019).  Antibacterial activity  and  phytochemical  screening  of Kesambi  ( Sapindaceae )  against Eschericia coli and Staphylococcus  aureus . J.  Pend. Kimia , 11(1), 14-17.
Zhang, C., Zhang, R., Li, Y. M., Liang, N., Zhao, Y.,
Zhu, H., He, Z., Liu, J., Hao, W., Jiao, R., Ma, K.  Y.,  &  Chen,  Z.  Y.  (2017).  Cholesterol- Lowering  Activity  of  Tartary  Buckwheat
Protein. Journal  of  Agricultural  and  Food Chemistry , 65 (9), 1900 – 1906.
https://doi.org/10.1021/acs.jafc.7b00066