Uji Efek Analgetik Minyak Daun Cengkeh ( Syzygium aromaticum )

## Terhadap Mencit Jantan Galur Balb/C
Wima Anggitasari, M. Sc., Apt 1
1 Program Studi Farmasi, STIKES dr. Soebandi Jember, Indonesia wimaanggitasari@gmail.com

## ABSTRAK
Daun  cengkeh  ( Syzygium  aromaticum )  merupakan  salah  satu  tanaman  Indonesia  yang  dapat digunakan  masyarakat  sebagai  obat  tradisional  yang  salah  satu  khasiatnya  adalah  analgetik.  Minyak daun  cengkeh  merupakan  salah  satu  bagian  dari  daun  cengkeh.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk membuktikan  bahwa  minyak  daun  cengkeh  memiliki  efek  analgetik.  Penelitian  ini  menggunakan metode  reflek  geliat    dengan  20  mencit  jantan  galur  Balb/C  yang  terbagi  menjadi  empat  kelompok. Kelompok I sebagai kontrol diberi CMC Na 0,5%, kelompok II dan II masing-masing diberi minyak daun cengkeh dengan dosis 100 mg/kgBB dan 200 mg/kgBB, dan kelompok IV diberi aspirin. Bahan yang  digunakan  untuk  menginduksi  nyeri  adalah  asam  salisilat.  Data  yang  diamati  berupa  jumlah geliat  mencit.  Data  dianalisis  dengan  uji Kruskal-Wallis, dilanjutkan  dengan  uji Mann-Whitney dengan  tingkat  kepercayaan  95%.    Hasil  penelitian  tentang  jumlah  geliat  mencit  menunjukkan  hasil yang berbeda bermakna  antara kelompok I dengan  kelompok II,  III dan  IV (p < 0,05). Kelompok II dan  III  berbeda  tidak  bermakna  (p  >  0,05).  Kelompok  II  dan  IV  maupun  kelompok  III  dan  IV menunjukkan hasil yang berbeda bermakna (p < 0,05). Kesimpulan penelitian ini menunjukkan bahwa minyak daun cengkeh dosis 100 mg/kgBB dan 200 mg/kgBB memiliki efek analgetik
Kata kunci: Minyak daun cengkeh, analgetik, reflek geliat

## ABSTRACT
Clove  leaf  ( Syzygium  aromaticum )  is  one  of  plant  that  is  widely  used  as  an  alternative  medicine community, one of the benefit of clove leaf  is analgesic. Clove leaf oil is the part of clove leaf. The aim  of  the  research  to  proved  clove  leaf  oil  has  the  analgesic  activity.  The  data  were  analyzed  with Kruskal-Wallis test,  continuated  by Mean-Whitney test  with  trust  level  95%.  This  research  was conducted with writhing reflex method with animal test of male mice Balb/C by 20 mice divided into 4  group.Group  I  as  a  control  was  treated  with  CMC  Na  0,5%  suspension,  group  II  and  III    were treated  with  doses  of  100  mg/kgBB  and  200  mg/kgBB  clove  leaf  oil,  group  IV  was  treated  with aspirin.  Number  of  streches  (writhing  reflex) was  observed . The  data  were  analyzed  with  Kruskal- Wallis  test,  continuated  by  Mean-Whitney  test  with  trust  level  95%.  This  research  of  number  of streches  (writhing  reflex)  result  significant  difference  between  group  I  with  group  II,  III  and  IV (p<0,005). Group II compare  with  III not significant difference (p>0,05). Group II  compare with  IV and group II compare with IV showed significant difference (p<0,05). The conclution of this research showed that clove leaf oil doses 100 mg/kgBB and 200 mg/kgBB has snalgesic activity.
Keywords : clove leaf oil, analgesic, writhing reflex

## Pendahuluan:
Nyeri merupakan salah satu hal  yang sering  dikeluhkan  masyarakat.  Terjadi peningkatan prevalensi nyeri pada populasi  orang  tua  (Marazzitil,  2006). Untuk  mengatasi  nyeri  yang  timbul sebagian orang mengkonsumsi obat pereda nyeri  (analgetik)  dimana  sebagian  pasien diberikan  obat  antiinflamasi  nonsteroid (OAINS) seperti aspirin (Neal, 2005). Efek samping dari obat golongan OAINS antara lain dispepsia, pendarahan lambung, ulkus peptikum,  kerusakan  saluran  cerna  dan gangguan ginjal (Kneale and Davis, 2011).
Indonesia  memiliki  keanekaragaman hayati,  seperti  tumbuhan  yang  dapat digunakan  sebagai  sumber  senyawa- senyawa  baru  yang  masih  perlu  diteliti mengenai  struktur  maupun  khasiatnya (Djauhariyah,  2004).  Cengkeh  ( Syzygium aromaticum )  merupakan  tumbuhan  asli Indonesia  dan  Indonesia  merupakan  salah satu  produsen  cengkeh  terbesar  di  dunia (Kamataou et  al .,  2012).  Senyawa  aktif yang  terkandung  di  dalam  daun  cengkeh antara  lain  eugenol,  flavonoid,  saponin, alkaloid  (Talahatu  dan  Papilaya,  2015). Penelitian  yang  dilakukan  Dewi    dkk (2017)  menyimpulkan  bahwa  ekstrak etanol  daun  cengkeh  memiliki  efek analgetik.  Menurut  Nurdjannah  (2004) kandungan flavonoid dan eugenol mempunyai efek analgetik.
Uraian  di  atas  menjadi  dasar  penulis untuk  meneliti  efek  pemberian  minyak daun cengkeh sebagai salah satu komponen  yang  terdapat  pada  daun cengkeh  terhadap  efek  analgetik  mencit jantan galur Balb/c sehingga bisa bermanfaat  dalam  perkembangan  obat tradisional  di  Indonesia. Penelitian  ini bertujan untuk membuktikan bahwa minyak  daun  cengkeh  memiliki  efek analgetik terhadap mencit.

## Metode:
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimen  laboratorium.  Penelitian  ini dilakukan di Laboratorium Farmasi
STIKES  dr.  Soebandi  Jember.  Hewan  uji
dibagi  menjadi  4  kelompok.  Kelompok  I merupakan  kelompok  kontrol  negatif diberi  CMC  Na  0,5%,  kelompok  II merupakan kelompok minyak daun cengkeh  dengan  dosis  100  mg/kgBB, kelompok III merupakan kelompok minyak  daun  cengkeh  dengan  dosis  200 mg/kgBB, kelompok IV merupakan kelompok kontrol positif diberi aspirin.
Larutan CMC Na 0,5% dibuat dengan menimbang 0,05 gram CMC Na dalam 10 mL larutan, pelarut yang digunakan adalah aquadest.  CMC  Na  digunakan  sebagai kontrol  negatif  dalam  penelitian  ini. Minyak  daun  cengkeh  yang  digunakan diperoleh  dari  penyulingan  daun  cengkeh di  daerah  Samigaluh,  Kulon  Progo, Yogyakarta.
Larutan  aspirin  sebagai  kontrol  positif dibuat  dengan  mencampurkan  6,5  mg aspirin  dengan  10  mg  CMC  Na  yang dilarutkan  dalam  2  mL  aquadest  steril dimana  setiap  mencit  diberikan  0,2 mL/20gramBB  larutan  aspirin.  Larutan yang  digunakan  sebagai  zat  perangsang geliat  mencit  adalah  asam  asetat  0,6%, cara pembuatannya adalah dengan mengambil  0,06  mL  asam  asetat  100% ditambahkan  dengan  10  mL  aquadest steril.  Larutan  ini  diinjeksikan  secara intraperitonial 0,2 mL/20gramBB mencit.
Hewan yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  mencit  jantan  galur Balb/C  dengan  bobot  25-30  gram  yang sebelumnya  telah  diadaptasikan  selama  1 minggu.  Hewan  uji  terbagi  menjadi  4 kelompok  dimana  masing-masing  terdiri dari  5  mencit  dan  ditimbang  untuk menghitung  dosis  dan  volume  pemberian. Larutan  susensi  CMC  Na,  minyak  daun cengkeh dosis 100 mg/kgBB, 200 mg/kgBB  dan  larutan  aspirin  diberikan secara peroral, setelah 10 menit perlakuan, mencit  kemudian  diinnduksi  dengan  asam asetat  secara  intraperitonial  kemudian dilakukan  pengamatan  terhadap  jumlah geliat mencit per 5 menit selama 30 menit. Satu  geliat  adalah  ketika  kaki  mencit meregang  ke  depan  dan  kebelakang  dan perut menekan ke dasar. Data yang diamati
Anggitasari, W.........................................................................hal. 01 - 10
berupa jumlah geliat mencit. Data dianalisis  dengan  uji Kruskal-Wallis, dilanjutkan  dengan  uji Mann-Whitney dengan tingkat kepercayaan 95%.

## Hasil :
Penelitian  ini  menggunakan  metode reflek  geliat  ( Writhing  reflex  test ).  Hewan yang  digunakan  adalah  mencit  Balb/C jantan  dikarenakan  kemiripan  struktur hewan  dengan  manusia  dan  sistem  imun pada  mencit  jantan  cenderung  lebih  baik serta  tidak  dipengaruhi  oleh  hormon reproduksi  (Dao et al,  2011).  Metode geliat dilakukan dengan melihat kemampuan obat analgesik dalam menekan  ataupun  menghilangkan  nyeri yang disebabkan oleh rangsang kimia pada hewan uji (Milind and Monu, 2013). Rata- rata jumlah geliat pada kelompok perlakuan  dibandingkan  dengan  kontrol. Hasil  penelitian  rata-rata SD  jumlah geliat  pada  masing-masing  kelompok dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel  1 .  Hasil  pengamatan  jumlah  geliat mencit  jantan  setelah  diinduksi  dengan asam asetat
Kelompok Mean ± SD Jumlah geliat I 36,6  ± 4,1 II 19,2  ± 5,3* III 13,8  ± 2,5* IV 18,8  ± 2,2* Keterangan
 P < 0,05 (ada perbedaan terhadap kontrol )
Berdasarkan  Tabel  1  dan  hasil  analisis statistik  maka  diperoleh  hasil  sebagai berikut:  data  pada  Tabel  1  terlihat  bahwa kelompok  minyak  cengkeh  100  mg/kgBB (19,2  ±  5,3),  minyak  cengkeh  200 mg/kgBB (13,8 ± 2,5) dan aspirin  (18,8 ± 2,2)  memberikan    perbedaan  signifikan (p<0,05)  dengan  kelompok  kontrol    (36,6 ±  4,1)  maka  dapat  dikatakan  bahwa kelompok minyak cengkeh 100 mg/KgBB dan  200  mg/kgBB    mempunyai  efek analgetik. Efek ini dilihat dari
pengaruhnya  yang  dapat  mengurangi jumlah  geliat  mencit.  Hasil  keseluruhan analisis dapat diperoleh kesimpulan bahwa kelompok  kontrol  tidak  memiliki  efek analgetik  dalam  mempengaruhi  jumlah geliat  pada  mencit  jantan  yang  diinduksi asam  asetat.  Hal  ini  disebabkan  karena kelompok  kontrol  hanya  diberi  suspensi CMC Na 0,5%.
Hasil  uji  statistik  untuk  minyak  daun cengkeh dosis 100 mg/kgBB jika dibandingkan  dengan  kelompok  aspirin memiliki perbedaan tidak signifikan  untuk jumlah  geliat  (p>0,05).  Sedangkan  untuk minyak daun cengkeh dosis 200 mg/kgBB jika  dibandingkan  dengan kelompok aspirin memiliki perbedaan yang signifikan (p<0,05) sehingga dapat disimpulkan bahwa daya analgetik minyak daun  cengkeh  dosis  200  mg/kgBB  lebih besar dibandingkan aspirin dan sedangkan apabila dibandingkan dengan minyak daun cengkih  dosis  100  mg/kgBB  perbedaanya tidak signifikan (p>0,05).
Diskusi: Cengkeh merupakan salah satu tumbuhan  dengan  ketinggian  10-20  meter yang  merupakan  famili  dari  Myrtaceae yang  dibudidayakan  di  beberapa  negara seperti  Malysia,  Indonesia,  Sri  Lanka, Madagaskar  dan  Tanzania  (Arung et  al ., 2011).  Beberapa  bagian  dari  cengkeh seperti  daun  dan  bunga  cengkeh  bisa digunakan  untuk  memasak,  pengolahan makanan  dan  juga  untuk  wangi-wangian (Daniel et  al .,  2009).  Penelitian  ini dilakukan  dengan  menggunakan  minyak daun  cengkeh  yang  merupakan  salah  satu bagian  dari  daun  cengkeh.  Minyak  daun cengkeh  diperoleh  dari  daerah  Samigaluh, Kulon  Progo,  Yogyakarta  dimana  di daerah  ini  banyak  ditemukan  tumbuhan cengkeh.  Penduduk  sekitar  memanfaatkan daun  cengkeh  kering  yang  telah  gugur untuk  membuat  minyak  daun  cengkeh dengan penyulingan air. Kandungan minyak  daun  cengkeh  kurang  lebih  2,5% dari  berat  daun  cengkeh  kering  (Afifah dkk, 2016).
Penelitian  ini  menggunakan  metode writhing reflex test dengan obat pembanding yang digunakan adalah aspirin.  Aspirin  merupakan  obat analgesik dan  antiinflamasi  yang  sering  digunakan untuk  mengobati  nyeri  dengan  intensitas ringan  sampai  sedang.  Aspirin  sebagai ukuran  standar  bagi  semua  agen-agen analgesik  dan  antiinflamasi  dalam  sebuah penelitian (Syaif, 2012).
Dari  hasil  penelitian  di  atas  diketahui bahwa minyak daun cengkeh dengan dosis 100 mg/kgBB dan 200 mg/kgBB memiliki efek  analgetik  dilihat  dari  kemampuannya mengurangi  jumlah  geliat  mencit  yang diinduksi  dengan  asam  asetat.  Penelitian ini  mendukung  penelitian  sebelumnya yaitu  penelitian  yang  dilakukan  Dewi  dkk (2017)  dimana  ekstrak  dari  daun  cengkeh berpotensi sebagai analgetik. Minyak daun cengkeh sebagai bagian dari daun cengkeh mengandung  beberapa  senyawa  kimia seperti  eugenol,  eugenol  asetat  dan  β- caryophyllene. Eugenol merupakan senyawa  utama  dalam  minyak  tersebut (Bhuiyan et al., 2010). Beberapa penelitian menyebutkan  bahwa  kandungan  eugenol yang  merupakan  senyawa  aromatik  yang memiliki  efek  analgesik  (Muller, et  al., 2006).
Eugenol  bekerja  dengan  cara  memblok jalur  enzim  siklooksigenase  sehingga menurunkan produksi prostaglandin. Menurunnya prostaglandin mengakibatkan berkurangnya rasa nyeri (Kong et al., 2014).
Dalam  penelitian ini  penulis  memiliki keterbatasan antara lain adalah bahan yang digunakan  adalah  minyak  daun  cengkeh yang digunakan pada penelitian ini berasal dari  penyulingan  masyarakat  sehingga belum  dilakukan  analisis  tentang  faktor- faktor  yang  bisa  berpengaruh  terhadap kandungan  zat  aktif  di  dalam  minyak tersebut    seperti  misalnya  adanya  zat pengotor, tingkat kekeringan daun cengkeh dll.  Selain  itu  pengamatan  jumlah  geliat dilakukan  dalam  waktu  sehari  sehingga belum  diketahui  apabila  minyak  daun cengkeh  diberikan  dalam  jangka  waktu
yang lama apakah akan memperbagus efek atau timbul efek yang lain.
Dengan  keterbatasan  yang  dimiliki peneliti, diharapkan ada penelitian lanjutan mengenai identifikasi baik secara kualitatif maupun  kuantitatif  zat  kimia  yang terkandung  dalam  minyak  cengkeh  yang memiliki  efek  analgetik.  Selain  itu  perlu dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  tentang efek  analgetik  serupa  dengan  dosis  yang lebih  variatif  baik  dosis  lebih  tinggi maupun  lebih  rendah  meupun  penelitian menggunakan  obat  pembanding  yang berbeda  yang  memiliki  efek  analgetik lebih rendah maupun lebih tinggi daripada aspirin  sehingga  dapat  mengetahui  dosis yang paling efektif dan kekuatan analgetik dari  minyak  daun  cengkeh  sehingga minyak  daun  cengkeh  dapat  digunakan sebagai alternatif untuk pengobatan nyeri.

## Kesimpulan:
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dapat ditarik kesimpulan bahwa minyak  daun  cengkeh  memiliki  efek analgesik  dilihat  dari  kemampuan  untuk mengurangi  jumlah  geliat  mencit  jantan galur  Balb/C.  Minyak  daun  cengkeh dengan dosis 200 mg/kgBB lebih berpotensi sebagai analgetik.

## Daftar pustaka:
Afifah,  F.A.,  Lutfi,  M.,  Kadarisman,  D., 2016, Studi  Fasilitas  Penyulingan Minyak  Daun  Cengkeh  ( Syzygium aromaticum L);  Studi  kasus  UKM di Malang , Jurnal Keteknikan Pertanian  Tropis  dan  Biosiste,  4 (1), 20-26.
Arung, E.T., Matsubara, E., Kusuma, I.W., Sukaton,  E.,  Shimizu,  K.,  Kondo,  R., 2011, Inhibitory  component  from the buds of clove ( Syzygium aromaticum) on  Melanin  Formation in  B16  Melanoma  Cells, Fitoterapia, 82, 198-202.
Bhuiyan,  M.  Z.I.,  J.  Begum,  N.C.  Nandi, F.  Akter,  2010, Constituents  of  The Essential  Oil  From  Leaves  and
Buds of Clove ( Syzygium
Anggitasari, W.........................................................................hal. 01 - 10
caryophyllatum L) , African Journal of Plant Science, 4 (11), 451-454.
Damiani, C.E.N., Rossoni,  L.V., Vassallo, D.  V,  2003, Vasorelaxant  Effects  of Eugenol  on  Rat  Thoracic  Aorta. Vascpharmacol, 40, 59-66.
Dao,  Rui,  Na,  Yong,  Gang,  He,  and  Wei,
2011, Differences in Spatial Learning and Memory for Male and Female  Mandarin  Votes  (Micratus andarinus) and Balb/c Mice , Zoological Studies , 50 (1), 24-30.
Dewi,  N.  S.,  Rochim,  A.,  Hikmah,  N.,
2017, Potensi  Ekstrak  Etanol  Daun Cengkeh  sebagai  Analgesik  pada Mencit  Balb-C  Jantan ,  Prosiding The  4th  Dentistry  Scientific  Meeting of Jember . Djauriyah,  E.,  2004, Tumbuhan  sebagai
Obat , Seri Agrisehat, Penebar
Swadaya, Jakarta.
Kamataou, G.P., Vermaak, I., dan Viljoen,
A.  M.,2012, Eugenol  from  the
Remote  Maluku  Island  to  the
International  Market  Place:  A
Review of Remarkable and Versatile Molecule , Molecules, 17(6), 6953-6981
Kneale,  J.D  dan  Davi,  P.  S.,  2011,
keperawatan Ortopedik dan Trauma , Edisi 2, EGC, Jakarta.
Kong,  X.,  Liu,  X.,  Li,  J.,  Yang,  Y.,  2014,
Advances in Pharmacological
Research  of  Eugenol ,  Curr  Opin Complement Alternat Med, 1(1), 8-11.
Marazzitil,  D.,  Mungai,  F.,  Vivarellil,  L.,
Presta, S., Osso, B.D., 2006, Pain and Psychiatry: A Critical Analysiis and Pharmacological  Review ,  Clinical Practice  and  Epidemiology  in  Mental
Health, 2, 31.
Milind, P. and Monu, Y., 2013, Laboratory  Models  for  Screening Analgesic ,  International  Journal  of
Pharmacy, 4 (1), 15-19. Muller, M., Pape, H.C., Speckmann, E. J., Gorji, A., 2006, Effect of Eugenol on Spreading Depression and
Epileptiform  Discharges  in  Rat
Neocortical and Hippocampal
Tissues , Neurosci , 140, 743-751. Neal,  M.  J.,  2005, At  a  Glance Farmakologi  Medis , Edisi  Kelima, Erlangga, Jakarta. Nurdjannah,  N.,  2004, Diversifikasi Penggunaan  Cengkeh , Perspektif, 3
(2), 61-70.
Syaif, A.,2012, Farmakologi dan Terapi , Edisi  5,  Departemen  Farmakologi  da Terapetik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta. Talahatu,  D.R.  dan  papilaya,  P.M.,  2015, Pemanfaatan Ekstrak Daun Cengkeh (Syzygium aromaticum L.) sebagai  Herbisida  Alami  Terhadap
Pertumbuhan  Gulma  Rumput  Teki (Cyperus  Rotundus  L.) ,  Biopendix , 1  (2), 149-159.