Uji Tingkat Kontaminasi Eksplan Anggrek.....
DOI: 10.32663/ja.v%vi%i.1502

## UJI TINGKAT KONTAMINASI EKSPLAN ANGGREK Bromheadia finlysoniana L.miq DALAM KULTUR IN-VITRO DENGAN PENAMBAHAN EKSTRAK TOMAT
(Test of contamination level of orchid explants bromheadia finlysoniana l.miq in in-vitro culture with addition of tomato extract )
Pebra Heriansyah *1 , Elfi Indrawanis 1
1 Jurusan Agroteknologi, Universitas Islam Kuantan Singingi Jl. Gatot Subroto. KM. 7 Jake-Teluk Kuantan
* Corresponding author, Email: hperba92@gmail.com

## ABSTRACT
Bromheadia finlaysoniana L. Miq orchid, is a ground orchid whose population is threatened with  extinction  due  to  various  human  activities,  so  it  needs  to  be  reproduced  using  tissue culture.  The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the  level  of  contamination  in  various types of explants and administration of tomato extract. The treatment used consisted of two factors,  namely  the  combination  of  various  types  of  explants  and  tomato  extract,  each  of which consisted of several levels. The treatment of the first factor was the concentration of explants consisting of 4 types: seeds, leaves, stems and roots, each of which was combined with Tomato Extract at 4 levels: 0, 100 g /  L, 200  g /  L, and 300 g /  L. Observation of the percentage of contamination showed that the best explants for tissue culture propagation of Bromheadia  finlaysoniana L.  Miq  were  seed  and  root  explants  with  a  contamination percentage of 36.81% and 37.50%. Observations for the percentage of fungal contamination parameters  showed  that  single  explants,  with  the  best  treatment  were  root  explants  with  a contamination percentage of 17.36%. Meanwhile, the best treatment combination was found in root and seed explants without tomato extract, with a percentage of fungal contamination of 8.33%. Observations for the percentage of bacterial contamination, the best single explant treatment  was  stem  explants,  with  a  bacterial  contamination  percentage  of  29.17%. Meanwhile, for the contamination treatment, the best treatment was found in seed and stem explants without giving tomato extract with a percentage of fungal contamination of 16.67%
Keywords: bacteria, contamination, fungi, orchids, tissue culture

## PENDAHULUAN
Bromheadia finlaysoniana (Lind.) Miq. Merupakan  anggrek  alam  Sumatra    yang tergolong  kedalam  kategori  anggrek  tanah (Terrestrial),  yang  memiliki  ciri  yang  khas, bunga  yang  sangat  indah  dan  toleran  jika ditanam  ditempat terbuka  dengan  persentase naungan  kecil  dari  20%,  tanaman  ini  juga sangat akrab dengan masyarakat  yang hidup dipulau  Sumatra,  Kalimantan,  dan  Maluku
(Isnaini, Wahyuni, & Wanda, 2015).
Keberadaan anggrek alam Bromheadia finlaysoniana (Lind.)  Miq  di  habitatnya semakin terancam karena gencarnya kegiatan konversi  lahan  hutan  menjadi  lahan perkebunan  maupun  pemukiman,  terbukti dengan  masuknya  anggrek  ini  dalam  IUCN red  list  2013,  hal  ini  menjelaskan  bahwa keberadaan anggrek
Bromheadia finlaysoniana (Lind.)  Miq  di  Alam  sudah
Uji Tingkat Kontaminasi Eksplan Anggrek.....
DOI: 10.32663/ja.v%vi%i.1502
memprihatinkan,  dan  terancam  punah (Brummit,  2013).  Untuk  mengantisipasi kepunahan,  maka  harus  dilakukan  langkah konservasi secara ex-situ . Konservasi ex-situ dapat  dilakukan  melalui  teknik  kultur jaringan.
Kultur  jaringan  merupakan  teknik perbanyakan  yang  dapat  memperbanyak tanaman  dalam  waktu  yang  singkat,  dan dalam  jumlah  yang  banyak  (Santoso, Hardiyati,  Dwiati,  &  Kamsinah,  2020). Perbanyakan tanaman anggrek melalui kultur jaringan  dengan  tujuan  konservasi  telah dilakukan  oleh  Heriansyah  (2019)  tentang konservasi  anggrek Dendrobium  sp, juga dilakukan  oleh  Setiaji  &  Annisa  (2020) untuk  konservasi  untuk  penyimpanan  bibit anggrek melalui kriopreservasi, dan konservasi Dendrobium  sp untuk  induksi perakaran  embriosomatis  dilakukan  oleh Heriansyah,  Jumin,  &  Maizar,  M.  (2020). Perbanyakan melalui kultur jaringan mengalami  kendala  dalam  aplikasinya, masalah  utama  yang  muncul  adalah tingginya tingkat kontaminasi, ketika memperbanyak anggrek spesies yang berasal dari alam.
Kontaminasi merupakan kondisi lingkungan kultur yang terganggu akibat dari masuknya  kontaminan  baik  jamur  dan bakteri  (Adihaningrum  &  Rahayu,  2019). Jamur  dan  bakteri  yang  masuk  kedalam lingkungan  kultur,  berasal  dari  berbagai sumber,  salah  satunya  adalah  eksplan tanaman. Eksplan tanaman yang berasal dari pohon  induk  yang  berasal  dari  alam membawa  spora  maupun  benih  jamur  dan bakteri.  Sehingga  ketika  eksplan  ditanam spora  dan  benih  jamur  dan  bakteri  tersebut tumbuh dan merusak eksplan
(Rahmadi et al, 2020). Untuk meminimalisir terjadinya kontaminasi maka perlu dilakukan
perbanyakan  dari  berbagai  sumber  eksplan, agar  diperoleh  informasi  tentang  eksplan dengan  tingkat  kontaminasi  yang  rendah. Penelitian  terdahulu  tentang  jenis  eksplan pada  tanaman  anggrek  telah  dilakukan  oleh Destiani,
(2017), hasil risetnya menyimpulkan  bahwa  terdapat  perbedaan jenis  eksplan  terbaik  diantara  dua  jenis anggrek yang berbeda, anggrek Dendrobium . ‘Zahra-27  ekplan  terbaik  untuk  tujuan emriogenesi  adalah  tunas  pucuk,  pada  D. ‘Zahra  58’  yaitu  tunas  lateral,  untuk  inisiasi embrio  somatik  pada  D.  ‘Zahra-58’  ekspaln terbaik  yaitu  tunas  pucuk  dan  untuk  inisiasi tunas  eksplan  terbaik  pada  kedua  genotipe yaitu  eksplan  tunas  pucuk.  Selain  eksplan, penambahan  bahan  organik  kedalam  media juga  dapat    dilakukan  untuk  menopang pertumbuhan  eksplan,  salah  satu  bahan organik  yang  dapat  ditambahkan  adalah ekstrak tomat.
Ektrak  tomat  merupakan  bahan  alami yang  mengandung  nutrisi  yang  dapat digunakan  oleh  tanaman  pada  media  kultur embrio, selain itu ektrak tomat juga memiliki kandungan  zat  pengatur  tumbuh  dari golongan  sitokinin  yang  berfungsi  dalam pembentukan klorofil pada tanaman (Sandjaya, Mursyanti, dan Purwijantiningsih, 2013)  Penelitian  terdahulu  yang  dilakukan Sandjaya,  Mursyanti,  dan  Purwijantiningsih (2013),  menyimpulkan  bahwa  pemberian ektrak  tomat  200  g/L  memberikan  pengaruh yang  nyata  terhadap  viabilitas  protocorm anggrek  phalaenopsis.  Namun  pemberian bahan  organik  ini  akan  menjadi  sumber kontaminan  ketika  ditambahkan  kedalam media.  Untuk  itulah  perlu  diteliti  tentang hubungan  konsentrasi  penambahan  bahan organik dengan tingkat kontaminasi.
Uji Tingkat Kontaminasi Eksplan Anggrek.....
DOI: 10.32663/ja.v%vi%i.1502

## BAHAN  DAN METODE
Penelitian ini dilaksakan di Laboratorium  Kultur  jaringan  Universitas Islam Riau, Pekanbaru. Bahan tanaman yang dijadikan
eksplan adalah anggrek Bromheadia finlaysoniana L.miq berasal dari Teluk  Kuantan,  Kab.  Kuantan  Singingi. Eksplan  yang  diambil  lalu  di  isolasi  dan dibawa  ke  laboratorium,  eksplan  lalu diisolasi dan disterilisasi melalui tiga tahapan yaitu menggunakan detergen, larutan Clorox 90% dan Twin.
Eksplan  ditanam  pada  media  pada medium  padat  MS  (Murashige  &  Skoog, 1962) Tingkat keasaman medium diatur pada pH  5,6  selanjutnya  ditambahkan  Gelrite  7 g/L  dan  Sukrosa  30  g/L  pada  media  padat, Selanjutnya  media  tersebut  disterilisasi dalam  autoklaf  pada  suhu  121  0C  dengan tekanan 1 kg/cm2 selama 20 menit.
Perlakuan  yang  digunakan  terdiri  atas dua  faktor    yaitu  kombinasi  berbagai  jenis eksplan  dan  ekstrak  tomat  yang  masing- masing terdiri atas beberapa level. Perlakuan faktor  pertama  yaitu  konsentrasi  eksplan yang terdiri atas 4 jenis: Biji, Daun, Batang, dan Akar yang masing-masing dikombinasikan  dengan  Ekstrak Tomat  pada 4 level : 0, 100 g/L, 200 g/L, dan 300 g/L.
Penelitian ini menggunakan  rancangan acak  lengkap  metode  faktorial  dengan  tiga ulangan.  Data-data  hasil  pengamatan  pada setiap parameter diuji statistik menggunakan analisis  keragaman  (ANOVA).  Perbedaan antar-perlakuan  ditentukan  dengan  uji  beda nyata jujur (BNJ) pada taraf uji 5%.  Analisis statistik    untuk    data-data    setiap  parameter menggunakan program SPSS versi 19.
Parameter yang diamati pada penelitian ini  terdiri  atas  persentase  kontaminasi  (%), persentase  kontaminasi  jamur  (%),  dan persentase kontaminasi bakteri (%).
Pengambilan  data  persentase  kontaminasi dilakukan  dengan  melakukan  pengamatan pada  umur  16  minggu  setelah  tanam. Pengamatan dilakukan dengan menggunakan mikroskop  untuk  melihat  kontaminan  dari bakteri atau jamur.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Persentase Kontaminasi (%)
Hasil  analisis  sidik  ragam  terhadap parameter persentase kontaminasi menunjukkan  bahwa  jenis  eksplan  secara tunggal berpengaruh nyata terhadap persentase  kontaminasi,  dengan  eksplan terbaik  terdapat  pada  eksplan  biji  dan  akar. Sedangkan  untuk  perlakuan  pemberian ekstrak tomat secara tunggal juga berpengaruh  nyata  terhadap  persentase kontaminasi,  dengan  perlakuan  dengan tingkat  kontaminasi  terendah  terdapat  pada perlakuan  tanpa  pemberian  ekstrak  tomat. Data  hasil  pengamatan  akan  diajikan  pada Gambar 1.
Berdasarkan analisis statistik terhadap  parameter  persentase  kontaminasi, maka  didapatkan  hasil  perlakuan  eksplan secara  tunggal  berpengaruh  nyata  terhadap persentase  kontaminasi,  dengan  perlakuan terbaik  terdapat  pada  eksplan  biji,  dengan persentase  kontaminasi  36,81  %.  Perlakuan ini  tidak  berbeda  nyata  dengan  perlakuan eksplan akar, dengan persentase kontaminasi 37,50 %, perlakuan ini berbeda nyata dengan dua  jenis  eksplan  lainnya  yaitu  batang dengan persentase kontaminasi 54,17 %, dan eksplan daun dengan persentase kontaminasi 58,33 %.
Rendahnya  persentase  kontaminasi pada  eksplan  biji,  disebabkan  oleh  biji terlindung  oleh  kulit  biji  yang  menjaganya dari  paparan  jamur,  baik  dari  habitatnya maupun dari lingkungan ketika diisolasi. Hal
Uji Tingkat Kontaminasi Eksplan Anggrek.....
DOI: 10.32663/ja.v%vi%i.1502
ini sesuai dengan penelitian yang menjelaskan  tentang  biji  tanaman  anggrek, yang  dilakukan  oleh  Setiawan,  Hasibuan,  & Gunawan, (2020), dan penelitian Rachmawati,  (2020)  tentang  kultur  biji tanaman  anggrek.  Selain  biji  eksplan  akar juga  memiliki  tingkat  kontaminasi  yang
rendah,  hal  ini  dikarenakan  akar  termuda memiliki  tingkat  kemudahan  dalam  proses sterilisasi. Tingkat kontaminasi pada eksplan akar  juga  dipengaruhi  oleh  akar  yang memiliki  lapisan  yang  terlindung  dari kontaminasi                             jamur endofit (Putri, 2020).
Perlakuan Berbagai Jenis Eksplan dan Konsentrasi Ekstrak Tomat g/l
*)  Huruf  kapital  atau  non  kapital    yang  sama  pada  diagram  yang  sama  menunjukkan  tidak  berbeda  nyata menurut uji beda nyata jujur (BNJ) pada taraf = 5%
Gambar 1. Persentase kontaminasi eksplan anggrek Bromheadia fnlaysonianan L.miq
Perlakuan  dengan  tingkat  persentase kontaminasi teritinggi terdapat pada perlakuan  eksplan  daun,  hal  ini  dikarenakan daun  memiliki  stomata  dan  permukaan epidermis  yang  memungkinkan  jamur  dan bakteri  masuk,  lalu  berkembang  menjadi jamur  dan  bakteri  yang  hidup  pada  jaringan daun.  Hal  ini  sesuai  dengan  pendapat Saptiani, & Rahmi, (2020) yang menjelaskan bahwa kendala dalam perbanyakan menggunakan eksplan daun adalah tingginya serangan jamur endopit pada daun tersebut.
Hasil analisis statistik terhadap parameter  persentase  kontaminasi  dengan perlakuan  pemberian  ekstrak  tomat  secara tunggal  memberikan  pengaruh  yang  nyata
terhadap  tingkat  persentase  kontaminasi eksplan  anggrek Bromheadia  finlaysoniana L.miq. Semakin tinggi konsentrasi penambahan ekstrak tomat pada media, maka persentase kontaminasi juga semakin meningkat.  Persentase  kontaminasi  terendah terdapat  pada  perlakuan  tanpa  pemberian ekstrak  tomat  yaitu  33,33  %,  perlakuan  ini berbeda  nyata  dengan  perlakuan  lainnya yaitu pemberian 100, 200, dan 300 g/L media dengan  persentase  kontaminasi  41,67  %, 51,39 %, dan 60,42 %. Penambahan ekstrak tomat  kedalam  media  yang  semakin meningkat, menyebabkan peluang kontaminan  terbawa  oleh  bahan  ekstrak semakin  besar.  Karena  tidak  semua  bakteri
a b c e d e g h d e f g a b d e 0,00 10,00 20,00 30,00 40,00 50,00 60,00 70,00 80,00 0 100 200 300 0 100 200 300 0 100 200 300 0 100 200 300 P er se nt ase K ont am ina si ( % ) Biji Daun Batang
Akar
Uji Tingkat Kontaminasi Eksplan Anggrek.....
DOI: 10.32663/ja.v%vi%i.1502
dan  jamur  dapat  diatasi  dengan  metode sterilisasi  (Tobing,  2019).  Penelitian  yang sama  juga  dilakukan  oleh  Ningsih,  (2019) tentang  penggunaan  ektrak  tomat  pada tanaman Krisan.
Berdasarkan  hasil  analisis  statistik, kombinasi  perlakuan  jenis  eksplan  dan pemberian  ekstrak  tomat  berpengaruh  nyata terhadap  parameter  persentase  kontaminasi. Perlakuan  dengan  tingkat  kontaminasi terendah terdapat pada perlakuan eksplan biji tanpa  pemberian  ektrak  tomat,  dengan persentase  kontaminasi  25  %,  perlakuan  ini tidak  berbeda  nyata  dengan  perlakuan eksplan  akar  tanpa  pemberian  ektrak  tomat, dengan  persentase  kontaminasi  25  %.  Dari data tersebut dapat kita lihat bahwa ada dua eksplan yang memberikan tingkat kontaminasi yang rendah, yaitu biji dan akar, yang  dikombinasikan  tanpa  pemberian ekstrak tomat. Hal ini terjadi karena biji dan
akar  memiliki  respon  yang  baik  terhadap sterilisasi yang dilakukan sebelum penanaman,  dan  memiliki  morpologi  yang tidak memberi cukup ruang untuk kontaminan  berkembang  dan  terbawa  ketika proses inisiasi kultur (Sjahril, et al, 2019). Persentase kontaminasi jamur (%)
Hasil  analisis  sidik  ragam  terhadap parameter  persentase  kontaminasi  jamur menunjukkan  bahwa  jenis  eksplan  secara tunggal berpengaruh nyata terhadap persentase  kontaminasi,  dengan  eksplan terbaik  terdapat  pada  eksplan  biji  dan  akar. Sedangkan  untuk  perlakuan  pemberian ekstrak tomat secara tunggal juga berpengaruh  nyata  terhadap  persentase kontaminasi,  dengan  perlakuan  dengan tingkat  kontaminasi  terendah  terdapat  pada perlakuan  tanpa  pemberian  ekstrak  tomat. Data  hasil  pengamatan  disajikan  pada Gambar 2.
Perlakuan Berbagai Jenis Eksplan dan Konsentrasi Ekstrak Tomat g/l
*)  Huruf  kapital  atau  non  kapital    yang  sama  pada  diagram  yang  sama  menunjukkan  tidak  berbeda nyata menurut uji beda nyata jujur (BNJ) pada taraf = 5%
Gambar 2. Persentase kontaminasi jamur pada eksplan anggrek Bromheadia fnlaysonianan L.miq
a b d e d f g i d f h i a a c e 0,00 10,00 20,00 30,00 40,00 50,00 60,00 70,00 80,00 0 100 200 300 0 100 200 300 0 100 200 300 0 100 200 300 BIJI DAUN BATANG
AKAR
P er se n tas e K on tam in as i Jam u r (% )
Uji Tingkat Kontaminasi Eksplan Anggrek.....
DOI: 10.32663/ja.v%vi%i.1502
Berdasarkan  analisis  statistik  terhadap parameter  persentase  kontaminasi  jamur, maka  didapatkan  hasil  perlakuan  eksplan secara  tunggal  berpengaruh  nyata  terhadap persentase  kontaminasi  jamur,  dengan perlakuan terbaik terdapat pada eksplan akar, dengan  persentase  kontaminasi  jamur 17,36 %. perlakuan ini berbeda nyata dengan tiga  jenis  eksplan  lainnya  yaitu  batang dengan  persentase  kontaminasi  jamur 50,00  %,  eksplan  daun  dengan  persentase kontaminasi jamur 47,92%. Dan eksplan biji dengan  persentase  kontaminasi  jamur 20,83 %.
Eksplan  akar  memiliki  persentase kontaminasi  jamur  terendah,  hal  ini  terjadi karena  akar  termuda  yang  bentuknya transparan,  memiliki  lapisan  yang  mudah sekali  dibersihkan  ketika  proses  sterilisasi. Bagian  ini  juga  memiliki  pori  yang  sangat sulit  ditembus  oleh  jamur.  Sehingga  ketika proses  strerilisasi  dengan  perendaman Clorox maupun Twin ,  maka  yang  terjadi eksplan akar akan terlepas dari kotoran yang dapat  menimbulkan  kontaminasi  jamur (Putri, 2020).
Persentase kontaminasi tertinggi terdapat  pada  eksplan  batang,  dengan persentase  kontaminasi  jamur  50,00  %.  Hal ini  dikarenakan  batang  memiliki  epidermis yang besar, dan rawan sekali mengalami luka pada bagiannya. Sehingga hal ini memberikan  peluang  masuknya  spora  jamur yang kemudian berkembang didalam jaringan  batang.  Spora  jamur  ini  biasanya dapat  bertahan  dalam  waktu  yang  lama, selama tanaman masih menyediakan air, dan kelembaban  pada  jaringan  tanaman  masih terjaga.  Kontaminasi  jamur  umumnya merupakan  jamur  endofit,  karena  tidak berpengaruh ketika disterilisasi menggunakan Clorox maupun Twin
(Khaerunnisa, 2020).
Hasil analisis statistik terhadap parameter  persentase  kontaminasi  jamur dengan  perlakuan  pemberian  ekstrak  tomat secara  tunggal  memberikan  pengaruh  yang nyata terhadap tingkat persentase kontaminasi jamur eksplan anggrek Bromheadia  finlaysoniana L.miq.  Semakin tinggi konsentrasi penambahan ekstrak tomat pada  media,  maka  persentase  kontaminasi juga semakin meningkat. Persentase kontaminasi  jamur  terendah  terdapat  pada perlakuan  tanpa  pemberian  ekstrak  tomat yaitu  16,67  %,  perlakuan  ini  berbeda  nyata dengan  perlakuan  lainnya  yaitu  pemberian 100,  200,  dan  300  g/L  media  dengan persentase  kontaminasi  27,08%,  38,19  %, 54,17  %.  Penambahan  ekstrak  tomat kedalam  media  yang  semakin  meningkat, menyebabkan  peluang  jamur  terbawa  oleh bahan  ekstrak  semakin  besar.  Apalagi sumber  buah  tomat  yang  digunakan  berasal dari  pasar,  yang  lingkungannya  berpeluang besar  terpapar  jamur.  Spora  jamur  yang berada  pada  pori  buah  tomat  akan  larut dalam ekstrak dan berkembang saat dikultur (Mahmudah, 2019).
Hasil  analisis  statistik  parameter persentase  kontaminasi  jamur  dengan perlakuan  kombinasi  jenis  eksplan  dan ekstrak  tomat  memberikan  pengaruh  yang nyata,  dengan  perlakuan  dengan  tingkat kontaminasi terendah terdapat pada perlakuan  eksplan  biji  tanpa  pemberian ektrak tomat, dengan persentase kontaminasi jamur  8,33  %.  Perlakuan  ini  tidak  berbeda nyata  dengan  perlakuan  kombinasi  eksplan akar  tanpa  ekstrak  tomat  dan  kombinasi eksplan  akar  dengan  pemberian  100  g/L media.  Eksplan  biji  dan  akar  memiliki tingkat  kontaminasi  jamur  yang  rendah, karena  pada  bagian  ini  adalah  bagian  yang
Uji Tingkat Kontaminasi Eksplan Anggrek.....
DOI: 10.32663/ja.v%vi%i.1502
sulit  dihinggapi  spora  jamur,  memliki permukaan  yang  licin  dan  pori  yang  sangat halus. Hal inilah yang menyebabkan biji dan ujung  akar  termuda  memiliki  tingkat kontaminasi yang rendah.
Sementar kombinasi terbaik untuk toleransi
penggunaan  ektrak  tomat  adalah  pada konsentra  100  g/L  media,  konsentrasi  ini adalah  konsentrasi  terbaik  jika  ingin menambahkan  ekstrak  tomat  pada  kultur jaringan  anggrek Bromheadia  finlaysoniana L.miq (Fierda, 2019).
Gambar  3. Kontaminasi  pada  kultur  jaringan  anggrek Bromheadia  finlaysoniana L.miq  .

## Kontaminasi Bakteri b. Kontaminasi jamur
Persentase kontaminasi bakteri (%)
Hasil  analisis  sidik  ragam  terhadap parameter  persentase  kontaminasi  bakteri menunjukkan  bahwa  jenis  eksplan  secara tunggal berpengaruh nyata terhadap persentase  kontaminasi,  dengan  eksplan terbaik  terdapat  pada  eksplan  batang. Sedangkan  untuk  perlakuan  pemberian ekstrak tomat secara tunggal juga berpengaruh  nyata  terhadap  persentase kontaminasi,  dengan  perlakuan  dengan tingkat  kontaminasi  terendah  terdapat  pada perlakuan  tanpa  pemberian  ekstrak  tomat. Data  hasil  pengamatan  akan  disajikan  pada Gambar 4.
Berdasarkan analisis statistik terhadap  parameter  persentase  kontaminasi bakteri,  maka  didapatkan  hasil  perlakuan eksplan  secara  tunggal  berpengaruh  nyata terhadap  persentase  kontaminasi  bakteri, dengan  perlakuan  terbaik  terdapat  pada
eksplan batang, dengan persentase kontaminasi  bakteri  29,17  %.  perlakuan  ini berbeda  nyata  dengan  tiga  jenis  eksplan lainnya  yaitu  biji  dengan  persentase kontaminasi  bakteri  45,83  %,  eksplan  daun dengan  persentase  kontaminasi  bakteri 60,42  %.  Dan  eksplan  akar  dengan persentase kontaminasi bakteri 59,03 %.
Eksplan  batang  memiliki  tingkat kontaminasi  bakteri  terendah,  hal  ini dikarenakan    bakteri  mengalami  kesulitan bertahan  dalam  jaringan  batang  yang  keras dan  kaku.  Sehingga  peluang  terbawa  ketika diperbanyak  secara  kultur  jaringan  menjadi semakin sedikit. Bakteri lebih senang  hidup di jaringan yang lunak dan memiliki banyak cairan,  seperti  jaringan  yang  tersapat  pada pucuk  dan  ujung  akar.  Hal  inilah  yang menjadikan  batang  sangat  rendah  tingkat kontaminasi  bakteri  ketika  di  kultur.
( Shofiyani et al, 2019).
a b
Uji Tingkat Kontaminasi Eksplan Anggrek.....
DOI: 10.32663/ja.v%vi%i.1502
Hasil  analisis  statistik  terhadap parameter  persentase  kontaminasi  bakteri dengan  perlakuan  pemberian  ekstrak  tomat secara  tunggal  memberikan  pengaruh  yang nyata terhadap tingkat persentase kontaminasi bakteri eksplan anggrek Bromheadia  finlaysoniana L.miq.  Semakin tinggi konsentrasi penambahan ekstrak tomat pada  media,  maka  persentase  kontaminasi
juga semakin meningkat. Persentase kontaminasi  bakteri  terendah  terdapat  pada perlakuan  tanpa  pemberian  ekstrak  tomat yaitu  29,17  %,  perlakuan  ini  berbeda  nyata dengan  perlakuan  lainnya  yaitu  pemberian 100,  200,  dan  300  g/L  media  dengan persentase  kontaminasi  bakteri  43,06  %, 56,25 %, 65,97 %.
Perlakuan Berbagai Jenis Eksplan dan Konsentrasi Ekstrak Tomat g/l
*)  Huruf  kapital  atau  non  kapital    yang  sama  pada  diagram  yang  sama  menunjukkan  tidak  berbeda  nyata menurut uji beda nyata jujur (BNJ) pada taraf = 5%
Gambar 4. Persentase kontaminasi jamur pada eksplan anggrek Bromheadia fnlaysonianan L.miq Penambahan ekstrak tomat
memberikan  kontribusi  terhadap  tingkat kontaminasi,  hal  ini  dikarekan  tomat  yang digunakan  memiliki  peluang  pembawa kontaminasi bakteri. Bakteri yag dibawa oleh tomat  dapat  berasal  dari  proses  pemanenan, distribusi,  hingga  tempat  penjual  di  pasar. Proses  sterilisasi  hanya  membersihkan bagian luar tomat yang akan diekstrak, tetapi tidak  akan  mampu  mengendalikan  bakteri pada bagian dalam buah tomat. Kontaminasi bakteri  juga  dapat  berasal  dari  tangan
pengelolah  yang  membuat  ekstrak  tomat, namun  peluangnya  sangat  kecil  karena melalui  sterilisasi  menggunakan  alkohol (Syaris, 2019)
Hasil  analisis  statistik  parameter persentase  kontaminasi  bakteri  dengan perlakuan  kombinasi  jenis  eksplan  dan ekstrak  tomat  memberikan  pengaruh  yang nyata,  dengan  perlakuan  dengan  tingkat kontaminasi terendah terdapat pada perlakuan  eksplan  biji  tanpa  pemberian ektrak tomat, dengan persentase kontaminasi
a cd f gh d f g h a b c d d e g i 0,00 10,00 20,00 30,00 40,00 50,00 60,00 70,00 80,00 90,00 0 100 200 300 0 100 200 300 0 100 200 300 0 100 200 300 BIJI DAUN BATANG AKAR P er se n tas e K on tam in as i B ak te ri (% )
Uji Tingkat Kontaminasi Eksplan Anggrek.....
DOI: 10.32663/ja.v%vi%i.1502
bakteri 16,67 %. Perlakuan ini tidak berbeda nyata  dengan  perlakuan  kombinasi  eksplan batang  tanpa  ekstrak  tomat  dengan persentase  kontaminasi  bakteri  16,67  %. Eksplan  biji  dan  batang  merupakan  eksplan dengan tingkat kontaminasi bakteri terendah, karena  kedua  eksplan  ini  memiliki  lapisan kulit  yang  kaku  dan  keras,  sera  memiliki kandungan  air  yang  rendah.  Hal  inilah  yang menyebabkan  bakteri  semakin  sulit  untuk bertahan  pada  jaringan  kedua  eksplan  ini (Nuraini et al, 2020).

## KESIMPULAN
Pengamatan  persentase  kontaminasi menunjukkan  bahwa  eksplan  terbaik  untuk perbanyak kultur jaringan anggrek Bromheadia  finlaysoniana L.Miq  adalah eksplan  biji  dan  akar  dengan  persentase kontaminasi  36,81  %  dan  37,50  %. Pengamatan  untuk  parameter  persentase kontaminasi  jamur  menunjukkan  bahwa eksplan  secara  tunggal,dengan  perlakuan terbaik  adalah  eksplan  akar  dengan persentrase kontaminasi 17,36 %. Sedangkan untuk  kombinasi  perlakuan  terbaik  terdapat pada  ekplan  akar  dan  biji  tanpa  pemberian ektrak tomat, dengan persentase kontaminasi jamur 8,33 %. Pengamatan untuk persentase kontaminasi  bakteri,  perlakuan  eksplan secara tunggal terbaik adalah eksplan batang, dengan  persentase  kontaminasi  bakteri 29,17  %.  Sementara  untuk  perlakuan kontaminasi  perlakuan  terbaik  terdapat  pada eksplan  biji  dan  batang  tanpa  pemberian ekstrak tomat dengan persentase kontaminasi jamur 16,67 %.

## DAFTAR PUSTAKA
Adihaningrum,  H.,  &  Rahayu,  T.  (2019). Potensi  biosida  serbuk  pelepah  pisang kepok  pada  kultur  in  vitro  benih  beras hitam. In Seminar Nasional Pendidikan
Biologi dan Saintek (SNPBS) ke-IV (p.
133). Brummitt N. (2013).
Bromheadia finlaysoniana.  In:  IUCN  2013.  IUCN Red  List  of  Threatened  Species. Version  2013.  2.  www.iucnredlist.org Diakses 20 November 2020.
Destiani,  A.  (2017). Pengaruh  Konsentrasi
Metatopolin dan jenis Eksplan terhadap  Dua  Genotipe  Dendrobium .
Skripsi. Unpad. Jawa Barat
Dutta, S., Chowdhury, A., Bhattacharjee, B., Nath,  P.  K.,  &  Dutta,  B.  K.  (2011).  In vitro  multiplication  and  protocorm development of Dendrobium aphyllum (Roxb.) CEC Fisher. Assam University Journal  of  Science  and  Technology, 7(1), 57-62.
Fierda,  M.  (2019). Pertumbuhan  Vegetatif Eksplan  Kentang  (Solanum  tuberosum L.)  Kultivar  Atlantik  Pada  Medium Murashige And Skoog Dengan
Penambahan  Ekstrak  Tomat  (Solanum Lycopersicum  L.)  Secara  In  Vitro . Skripsi . UNILA. Lampung
Heriansyah,  P.  (2019).  Multiplikasi  embrio somatis  tanaman anggrek  (dendrobium sp)  dengan  pemberian  kinetin  dan sukrosa  secara  in-vitro.  Jurnal  Ilmiah Pertanian 15, no. 2.
Heriansyah,  P.,  Jumin,  H.  B.,  &  Maizar,  M. (2020).  In-vitro  rooting  induction  on the  embryo  somatic  of  dendrobium species  from  Riau  Province  Indonesia. Paspalum:  Jurnal  Ilmiah  Pertanian, 8(2), 93-98.
Isnaini,  Y.,  Wahyuni,  S.,  &  Wanda,  I.  F.
(2015, December). Inventory of orchids  in  small  islands  of  the  Abang Island  and  its  surrounding,  Batam,
Riau Archipelago. In Prosiding Seminar Nasional Masyarakat
Biodiversitas Indonesia (Vol. 1, No. 8, pp. 2039-2043).
Khaerunnisa,  L.  (2020).  Analisis  Ketahanan Planlet  Anggrek  Bulan  [ Phalaenopsis amabilis (L.)  Bl.]  Hasil  Induced
Uji Tingkat Kontaminasi Eksplan Anggrek.....
DOI: 10.32663/ja.v%vi%i.1502
Resistance  Terhadap  Penyakit  Layu Fusarium Secara In Vitro.
Mahmudah,  L.  (2019). Efek  Pemberian Ekstrak Tomat (Solanum Lycopersicum L.)  Pada  Medium  Murashige  And Skoog  (MS)  Terhadap  Pertumbuhan Eksplan  Kentang  (Solanum  tuberosum L.)  Kultivar  Granola  Secara  In  Vitro . Skripsi. Unila. Lampung Ningsih,  G.  P.  (2019). Efektivitas  Ekstrak Tomat  (Solanum  Lycopersicum  L.) Pada  Medium  Murashige  &  Skoog (Ms)  Terhadap  Pertumbuhan  Planlet Krisan  (Chrysanthemum  morifolium Ramat) Kultivar Socakawani Secara In Vitro . UNILA, Lampung.
Nuraini, C., Saida, S., Suryanti, S., & Nontji, M.  (2020).  Isolasi  dan  identifikasi bakteri  rhizosfer  tanaman  jagung  pada fase vegetatif dan generatif. Agrotekmas  Jurnal  Indonesia:  Jurnal Ilmu Peranian, 1(1), 24-30
Putri,  N.  (2020). Induksi  Protocorm  Like
Body  Dari  Eksplan  Akar  Beberapa Spesies  Anggrek  Yang  Ditanam  Pada
Medium Ms Dengan Berbagai
Konsentrasi  Auksin  Dan  Sitokinin (Sebuah Studi Pustaka sebagai Pengganti Studi Eksperimen Perbanyakan Tanaman Anggrek Silangan  Dendrobium  ‘Sonia’melalui
Induksi PLB dari Eksplan Akar dengan Medium  MS) .  Doctoral  Dissertation. Universitas Pendidikan Indonesia. Rachmawati,  S.  (2020). Pengaruh  Umur Buah,  Ekstrak Yeast, Dan  Naa Terhadap  Perkecambahan  Biji  Dan
Perkembangan Tunas Embrio Anggrek Dendrobium Lasianthera JJ Sm Secara In-Vitro . Doctoral dissertation. Universitas Airlangga.
Santoso,  I.  B.,  Hardiyati,  T.,  Dwiati,  M.,  &
Kamsinah, K. (2020). Teknologi kultur invitro  anggrek  untuk  meningkatkan keragaman  tanaman  di  agrowisata Serang. Prosiding, 9(1)
Saptiani,  E.,  &  Rahmi,  H.  (2020).  Induksi kalus  dari  eksplan  daun  tanaman Kawista  ( Limonia  acidissima L.) secara  in  vitro  pada  media  ms  dengan penambahan  beberapa  konsentrasi  air kelapa  ( Cocos  nucifera L.).  Jurnal Agrotek  Indonesia  (Indonesian  Journal of Agrotech), 5(2), 51-56
Setiaji,  A.,  &  Annisa,  R.  R.  (2020). Pemanfaatan kriopreservasi untuk penyimpanan  bibit  anggrek  jangka panjang. Jurnal Bios  Logos, 10(2), 71- 78.
Setiawan,  A.,  Hasibuan,  S.,  &  Gunawan,  H. (2020). Pengaruh pemberian air kelapa dan  GA3  terhadap  perkecambahan  biji anggrek Lidah Ular ( Cymbidium dayanum )  secara  in  vitro.  Bernas, 15(1), 126-133
Sjahril,  R.,  Haring,  F.,  Rukka,  R.  M.,  &
Dermawan,  R.  (2019).  Perbenihan kultur  jaringan  anggrek  pada  teaching industry Universitas Hasanuddin. Jurnal  Dinamika  Pengabdian  (JDP),
4(2), 146-156
Shofiyani,  A.,  Purnawanto,  A.  M.,  Zahara, R.,  &  Aziz,  A.  (2019,  December). Pengaruh  berbagai  sterilan  dan  waktu perendaman terhadap keberhasilan sterilisasi eksplan daun Kencur
( Kaempferia  galanga L)  pada  teknik kultur  in  vitro.  In  Prosiding  Seminar Nasional Lppm Ump (pp. 668-678)
Syaris,  S.  R.  (2019). Analisa  Bakteri Salmonella  sp  Pada  Saus  Tomat  Yang Diperdagangkan  Di  Pasar  Simpang Limun  Medan .  Skripsi. Poltekkes. Medan
Tobing, O. (2019). Efektivitas  Benzyl Amino Purin  (Bap)  Dan  Ekstrak  Tomat
Terhadap Pertumbuhan
Anggrek Dendrobium  Lineale  Pada  Medium
Vacin  And  Went .  Naskah  Publikasi Progam Studi Agroteknologi. Universitas Mercubuana. Yogyakarta.