# Korespondensi:  Balai  Besar  Riset  Budidaya  Laut  dan Penyuluhan  Perikanan.
Jl.  Singaraja  -  Gilimanuk,  Banjar  Dinas  Gondol,  Penyabangan, Gerokgak  Kabupaten  Buleleng,  Bali  81155,  Indonesia E-mail:  zeny23ast@gmail.com
Tersedia  online  di:  http://ejournal-balitbang.kkp.go.id/index.php/ma

## PENGARUH PENGAYAAN Artemia sp.  DENGAN SUMBER DHA YANG BERBEDA TERHADAP SINTASAN LARVA LOBSTER PASIR (Panulirus homarus)
Zeny Widiastuti # , Fahruddin,  dan I  Gusti  Ngurah  Permana
Balai Besar Riset Budidaya Laut dan Penyuluhan Perikanan Jl. Singaraja - Gilimanuk, Banjar Dinas Gondol, Penyabangan, Gerokgak Kabupaten Buleleng, Bali 81155
(Naskah diterima: 5 April 2021; Revisi final: 10 Juni 2021; Disetujui publikasi: 10 Juni 2021)

## ABSTRAK
Kegiatan pembenihan lobster masih  dikembangkan di Indonesia. Sintasan yang rendah  dan pakan yang sesuai masih menjadi masalah utama dalam kegiatan pembenihan lobster. Artemia sebagai pakan utama diduga belum mencukupi kebutuhan nutrisi larva lobster. Upaya pemberian bahan pengaya sebagai alternatif untuk  meningkatkan  nutrisi  diharapkan  dapat  meningkatkan  sintasan  larva  lobster.  Pemberian  bahan pengaya yang mengandung asam lemak dokosa heksanoid acid (DHA) ke Artemia dianggap penting bagi pertumbuhan dan sintasan pada krustasea. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui performa larva lobster berdasarkan tingkat sintasan maupun perkembangan larva dengan pemberian pakan artemia yang diperkaya dengan DHA. Perlakuan yang diberikan meliputi Artemia yang baru menetas (A), Artemia yang diperkaya dengan plankton Isochrysis galbana strain Tahiti konsentrasi (1-1,5 x 10 6 sel/mL) (B), DHA selco dosis 0,6 g/ L  (C),  dan  Artemia  inkubasi  18  jam  tanpa  pengayaan  (D).  Pemeliharaan  larva  dilakukan  pada  bak  100  L dengan sistem air stagnan. Perkembangan larva yang mampu dicapai pada semua perlakuan adalah stadia- IIIa. Pemberian  Artemia  yang  diperkaya  dengan  DHA  selco menunjukkan  hasil  sintasan  yang  lebih  baik pada  pemeliharaan  enam  hari  pertama  namun tidak  memberikan  pengaruh  yang  signifikan.  Pada  masa pemeliharaan  sampai  20  hari  terjadi  penurunan  sintasan  (SR)  mencapai  hanya  1%.  Hal  ini  disebabkan adanya  bakteri  dan  protozoa  seperti  jenis  protozoa Zoothamnium  sp.  dan  bakteri  berfilamen  teramati menempel pada tubuh larva sehingga mengganggu pergerakan dan kemampuan larva dalam menangkap mangsa.  Berdasarkan  penelitian  ini  maka  penggunaan  pakan Artemia  yang  diperkaya  DHA  Selco  dapat menjadi alternatif pakan larva lobster namun tetap diperlukan kontrol kualitas air yang baik.
KATA KUNCI: Artemia; DHA selco; Isochrysis; phyllosoma
ABSTRACT: The effects of different sources of DHA-enriched Artemia sp. on survival rate of spiny lobster, (Panulirus homarus) larvae. By: Zeny Widiastuti, Fahruddin, and I Gusti Ngurah Permana
Efforts to culture spiny lobster, Panulirus homarus larvae are still being developed in Indonesia. One of the main challenges in lobster hatcheries is to find an appropriate feed and improving larval survival. Artemia has been used as the main feed and considered to have insufficient nutritional ingredient for lobster larvae. Enrichment  of  feed  to  improve  its  nutrient  contents  is  expected  to  increase  the  larval  survival.  DHA- enriched feed is considered essential for growth and survival of crustaceans. The aim of this study was to determine the survival and development of larvae fed with DHA-enriched Artemia. The treatments consisted of newly hatched Artemia (A), enriched Artemia with phytoplankton, Isochrysis galbana strain Tahiti at a density of 1-1.5 x 10 6 cells/mL (B), enriched Artemia with DHA selco at a dose of 0.6 g/L (C), and Artemia incubated  for  18  hours  without  DHA  enrichment  (D).  Each Artemia  enrichment  was  performed  for  18 hours.  Larval  rearing  was  carried  out  in  a    00  L  tank  with  static  water  system.  The  achieved  larval developmental stage in all treatments was stage-IIIa. Administration of enriched Artemia with DHA selco
showed a better larval survival during the first six days of larval rearing. But, it did not give any significant effect. The survival was then decreased to only 1% on day-20. This was due to the presence of bacteria and protozoa  which  decreased  water  quality.  Protozoa  Zoothamnium  sp.  and  filamentous  bacteria  were observed attaching to the body of the larvae, disrupting the movement and ability of larvae in capturing prey. Based on this research, the use of Artemia enriched with DHA selco as an alternative for lobster larvae feed, but better water quality control is still needed.

## KEYWORDS: Artemia; DHA selco; Isochrysis; phyllosoma
Larva  lobster  memiliki  lima  tingkatan  stadia. Penanda paling mudah untuk menentukan stadia larva adalah dengan menghitung bulu (setae) pada periopod (kaki renang) ke-1 dan 2. Pada stadia-I, jumlah setae pada  periopod  ke-1  dan  2  berjumlah  lima  pasang. Jumlah setae terus bertambah dengan meningkatnya stadia.  Jumlahnya  berturut-turut  adalah  sebagai berikut:  stadia-II  jumlah  enam  pasang,  stadia-IIIa sebanyak tujuh pasang, stadia-IIIb sebanyak delapan pasang, stadia-IVa sebanyak sembilan pasang, Stadia- IVb sebanyak 10 pasang, stadia-IVc sebanyak 11 pasang, stadia-IVd sebanyak 12 pasang; dan stadia-V sebanyak 13 pasang (Abrunhosa et al., 2008).
Abrunhosa et al. (2008) juga menyebutkan bahwa larva  lobster  (P.  echinatus)  yang  diberikan  pakan Artemia  dan  gonad  kerang  mampu  melewati  fase moulting delapan kali. Di Indonesia, dilaporkan upaya pembenihan  lobster  pernah  dilakukan  dengan pemberian  kombinasi  jenis  pakan  dari  Chaetoceros sp.,  Tetraselmis  sp.,  dan  Artemia  salina.  Pada pemeliharaan tersebut larva mampu melewati stadia- IIIa dengan waktu pemeliharaan 27 hari (Junaidi et al., 2011). Vijayakumaran et al. (2014) juga menggunakan Artemia yang baru menetas sebagai pakan utama dalam pemeliharaan  larva  lobster.  Ketika  larva  memasuki stadia-III  diberikan  Artemia  yang  baru  menetas  dan Artemia  umur  2-3  hari  dengan  pakan  campuran fitoplankton.
Pemberian pakan Artemia saja dalam pemeliharaan jangka panjang mengakibatkan menurunnya sintasan larva dan sulit untuk mencapai perkembangan stadia berikutnya.  Spesies  Artemia  yang  tersedia  secara komersil memiliki profil nutrisi yang kurang optimal karena  memberikan  sedikit  sumber  asam  lemak esensial rantai panjang (Matsuda et al., 2009). Karena asam lemak dapat menjadi cadangan energi yang sangat penting  dalam  keberhasilan  perkembangan  dan metamorfosis  larva  lobster  (Conland  et  al.,  2014). Artemia  dapat  diperkaya  sebagai  salah  satu  upaya meningkatkan  profil  nutrisinya  sehingga  menjadi pakan  berkualitas  tinggi  yang  diperlukan  dalam perkembangan  larva  (Matsuda  et  al.,  2009).  Oleh karena itu, pada penelitian ini diujicobakan dua jenis bahan pengaya untuk meningkatkan kandungan asam

## PENDAHULUAN
Lobster merupakan krustasea yang harganya mahal dibandingkan jenis udang-udangan yang lainnya. Menu lobster  jarang  ditemukan  diwarung  makan  biasa. Hidangan ini lebih banyak dijumpai di restoran mewah. Permintaan lobster tidak hanya untuk memenuhi pasar dalam  negeri  namun  juga  pasar  luar  negeri  dengan nilai yang cukup menjanjikan. Harga jual per kilogram lobster  pada  size  500  g  untuk  lobster  mutiara  P. ornatus Rp900.000,00; lobster bambu Rp750.000,00; lobster batik Rp800.000,00; dan lobster pasir sebesar Rp700.000,00 (Elvantra, 2021). Besarnya permintaan pasar mengakibatkan tingginya penangkapan lobster di  alam  dan  dikhawatirkan  akan  menyebabkan penangkapan berlebih (over fishing). Salah satu upaya untuk mencukupi kebutuhan pasar dan mengurangi kegiatan penangkapan adalah dengan melakukan usaha pembudidayaan lobster.
Kegiatan pembudidayaan  lobster di  Indonesia di mulai  pada  awal  tahun  2000-an  di  Pulau  Lombok. Industri akuakultur di sana mengembangkan teknik sendiri untuk menangkap puerulus atau lebih dikenal benih  bening  lobster  (BBL)  dan  kemudian menumbuhkannya hingga ukuran yang dapat dipasarkan (Priyambodo et  al., 2015;  Priyambodo et  al.,  2020). Selain di Pulau Lombok, budidaya lobster di Indone- sia juga sudah dilakukan di Aceh, Nusa Tenggara Timur, dan Sulawesi Selatan (Mustafa, 2013). Namun sampai saat ini kegiatan budidaya lobster masih mengandalkan benih  hasil  tangkapan  alam  karena  benih  hasil  dari budidaya  belum  berhasil  dikembangkan.  Salah  satu kendala  dalam  pembenihan  lobster  adalah  belum diketahuinya secara pasti jenis pakan dan teknologi pemeliharaan  yang  sesuai.  Selain  itu,  waktu  yang dibutuhkan pada stadia phyllosoma yang merupakan sebutan  bagi  larva  lobster  hingga  berubah  menjadi BBL membutuhkan waktu lama. Stadia planktonik lob- ster mutiara  P.  ornatus  berkisar  4-6 bulan  (Ikeda  et al.,  2011).  Sedangkan  stadia  larva  jenis  P.  argus membutuhkan  waktu  4,5-8  bulan  (Goldstein  et  al., 2008). Durasi stadia larva planktonik yang cukup lama menyebabkan  sampai  saat  ini  belum  ada  usaha pembenihan  lobster  yang  berhasil  memenuhi kebutuhan usaha budidaya.
lemak pada Artemia yaitu DHA selco dan Isochrysis galbana  strain  Tahiti.  Penggunaan  bahan-bahan tersebut didasarkan pada Vijayakumaran et al. (2014) yang menyebutkan beberapa bahan pengaya alternatif yaitu shark liver oil, minyak cumi, cod liver oil, dan media pengaya komersil “super selco (inve, inc Bel- gium) dapat digunakan untuk memperkaya highly un- saturated  fatty  acid  (HUFA)  dari  Artemia  yang  baru menetas. Produk selco tersebut memiliki kandungan DHA sebesar 2,5 mg g -1 (Prusinska et al., 2020). Selain produk komersil tersebut jenis marine microalga yang banyak  digunakan  sebagai  bahan  pengkaya  dalam budidaya perikanan adalah jenis Isochrysis galbana yang kaya  akan  sumber  lemak.  Kandungan  DHA  pada Isochrysis  galbana  berkisar  antara  3,59%-6,37% bergantung pada pH, mikronutrien, dan vitamin pada media  kulturnya  (Grima  et  al.,  1992).  Tingginya kandungan asam lemak DHA tersebut dapat dijadikan sebagai sumber DHA alternatif yang potensial.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui performa larva lobster pasir (P. homarus) baik sintasan maupun tingkat perkembangannya dengan pakan yang diperkaya  DHA  selco  dan  Isochrysis  galbana  strain Tahiti dalam kegiatan pembenihan. Selain itu, dengan pemberian  bahan  pengaya  diharapkan  nilai  nutrisi Artemia  menjadi  lebih  tinggi  sehingga  mampu mencukupi  kebutuhan  larva  untuk  mencapai  stadia perkembangan selanjutnya.

## BAHAN DAN METODE

## Seleksi  Induk  Lobster
Kegiatan penelitian dilakukan pada bulan Mei-Juni 2017.  Induk-induk  lobster  yang  digunakan  pada penelitian ini merupakan induk lobster hasil budidaya berukuran  150-200  g  berjumlah  259  ekor.  Induk dipelihara  secara  massal  dengan  diberikan  pakan berupa ikan rucah dan cumi segar. Pemberian pakan dilakukan  setiap  hari  dengan  dosis  5%  dari  bobot induk.  Induk-induk  yang  membawa  telur  diseleksi setiap dua hari sekali dengan memperhatikan warna telur  untuk  menentukan kesiapan  induk  mendekati proses penetasan. Telur yang berwarna orange atau kuning  menandakan  telur  masih  muda  dan  telur ber warna  kecoklatan  atau  bening  kehitaman menunjukkan telur telah siap untuk menetas. Induk yang mendekati periode penetasan telur dipisahkan dalam bak kerucut satu volume ton.

## Penetasan  Telur  dan  Pemanenan  Larva
Induk yang mendekati waktu penetasan dalam bak satu ton diberikan pakan tiga hari sekali. Dosis pakan yang diberikan hanya 1% pada pagi hari dan pada sore hari induk dipindahkan pada bak berisi air baru. Hal
ini bertujuan agar larva yang menetas dalam kondisi bersih dan kualitas air terjaga dari sisa pakan. Seleksi larva dilakukan dengan memisahkan larva yang aktif berenang  di  permukaan.  Sementara  larva  yang mengendap  di  dasar  bak  dibuang.  L ar va  yang digunakan dalam penelitian ini berasal dari satu induk yang  sama.  Larva  yang  telah  dipanen  didesinfeksi dengan iodine 100 mg/L selama 10 menit. Selanjutnya dilakukan pencucian dengan air laut dan di-sampling sesuai jumlah kepadatan larva yang dibutuhkan di setiap bak perlakuan (50 ekor/liter).

## Pengayaan  Artemia
Cyste Artemia yang telah dikultur selama 18 jam dipanen dan didesinfeksi dengan iodine. Selanjutnya ditambahkan bahan pengaya DHA selco (dosis 0,6 g/ mL) sesuai saran pada kemasan produk dan Isochrysis galbana strain Tahiti dengan kepadatan 1-1,5 x 10 6 sel/ mL.  Pengayaan  dilakukan  selama  18  jam  kemudian dilakukan pemanenan pada keesokan harinya.

## Pemeliharaan  Larva
Larva  hasil  seleksi  dipelihara  dalam  bak  100  L dengan  sistem  air  stagnan.  Air  laut  bersalinitas  35 ppt disaring menggunakan membran filter berukuran 0,5  mikron.  Volume  air  pada  setiap  bak  di  awal pemeliharaan sebanyak 80 L dan ditambahkan air dalam jumlah sedikit pada awal pemeliharaan yaitu 10 L setiap harinya  untuk  mengurangi  stres  pada  larva  dan menurunkan  konsentrasi  metabolit  pada  air  media. Pada  saat  mencapai  volume  100  L  dilakukan penggantian  air  sebanyak  20%  hingga  akhir pemeliharaan.
Penelitian ini menggunakan tiga perlakuan dengan satu kontrol dan dilakukan pengulangan sebanyak tiga kali pada masing-masing perlakuan. Larva diberikan pakan  Artemia  dengan  masing-masing  perlakuan sebagai berikut:
- Perlakuan  A:  Artemia  yang  baru  menetas  tanpa pengayaan (kontrol)
- Perlakuan  B:  Artemia  yang  baru  menetas  diberi bahan pengaya DHA selco
- Perlakuan  C:  Artemia  yang  baru  menetas  diberi bahan pengaya Isochrysis galbana strain Tahiti
- Perlakuan D: Artemia yang diinkubasi  selama 18 jam tanpa pengayaan
Jumlah  Artemia  yang  diberikan  pada  setiap  bak diketahui dengan menghitung jumlah larva dan sisa Artemia  di  dalam  bak  secara  sampling  volumetrik. Dosis  Artemia  yang  diberikan  adalah  dua  individu Artemia  per  satu  ekor  larva  lobster.  Dosis  pakan meningkat pada hari selanjutnya disesuaikan dengan tingkat  konsumsi  larva  yang  meningkat  dengan
bertambahnya umur. Sampling sisa Artemia dilakukan setiap hari untuk mengontrol jumlah Artemia dalam bak. Sintasan larva dihitung dengan melakukan sam- pling setiap enam hari sekali dan dihitung secara to- tal pada akhir penelitian, sedangkan parameter kualitas air meliputi salinitas dan pH diukur lima hari sekali.

## Kultur  Bakteri  Media  Pemeliharaan
Pengukuran total bakteri dan Vibrio pada air me- dia  pemeliharaan  dilakukan  setiap  minggu  sekali sebagai  kontrol  kualitas  air  media.  Kultur  bakteri dilakukan  dengan  mengambil  1  mL  air  media  dan dikultur  pada  media  marine  agar  (MA)  dengan pengenceran 100x dan tanpa pengenceran pada me- dia  TCBS  agar.  Hal  ini  bertujuan  untuk  mengetahui kelimpahan  total  bakteri  dan  Vibrio  pada  media pemeliharaan terhadap pengaruh pengayaan.

## Analisis  Data
Data  sintasan,  total  bakteri,  dan  total  Vibrio ditampilkan dalam nilai rata-rata. Analisis data dalam penelitian  ini  menggunakan  uji  statistik  dengan metode one-way ANOVA karena data yang diperoleh memenuhi asumsi sebaran normal. Pengujian statistik menggunakan  program  SPSS  ver.16  dengan  nilai signifikansi  P<0,05.

## HASIL DAN BAHASAN

## Sintasan  Larva
Pengayaan  Artemia  dengan  menggunakan  DHA selco menunjukkan hasil sintasan (SR) lebih baik dari perlakuan lainnya pada enam hari awal pemeliharaan. Nilai SR yang ditunjukkan oleh perlakuan Artemia yang diperkaya selco adalah sebesar 94,6% dengan jumlah rata-rata larva 4.732 ekor lebih banyak dibandingkan perlakuan lainnya (kontrol 0 H : 3.044 ekor, Artemia 18 H : 4.244 ekor, Isochrysis : 4.310 ekor) dan terus menurun  hingga  pemeliharaan  20  hari  dengan  SR hanya mencapai 1,1% (Gambar 1) dengan jumlah larva yang mampu bertahan hidup pada perlakuan DHA selco, Isochrysis, dan Artemia kontrol berturut-turut yaitu 54, 53, dan 68 ekor. Analisis data sintasan larva dengan menggunakan  uji statistik  dengan metode  one  way ANOVA diperoleh hasil yang tidak berbeda dengan nilai P value  > 0,05.
Salah  satu  faktor  penentu  sintasan  larva  adalah pakan  yang  sesuai.  Pakan  sebagai  sumber  nutrisi berperan penting bagi pertumbuhan dan sintasan larva. Laju akumulasi penyimpanan nutrisi selama stadia awal hingga  pertengahan  pada  larva  P.  ornatus  menjadi komponen vital untuk sintasan dan kesuksesan tahap metamorfosis  (Wu  et  al.,  2011;  Fitzgibbon  et  al., 2014). Salah satu komponen nutrisi yang vital adalah
lemak. Di  alam, akumulasi lemak oleh  larva berasal dari mangsa  zooplankton (Wang  et  al.,  2015).  Pada penelitian  ini,  analisis  kadar  lemak  dari  pakan perlakuan  (Tabel  1)  diperoleh  nilai  kadar  lemak tertinggi terdapat pada perlakuan pengayaan dengan DHA selco (21,16%) sehingga pengayaan dengan selco lebih berpotensi mampu mencukupi kebutuhan lemak larva lobster. Lemak memainkan peran utama sebagai cadangan  energi  selama  pertumbuhan  dan perkembangan  larva  krustasea.  Ia  memanfaatkan sejumlah lemak sebagai sumber energi selama  proses metamorfosis (Jensen et al., 2013). Komponen asam lemak  tersebut  salah  satunya  adalah  DHA  yang merupakan  komponen penting  untuk  pertumbuhan dan sintasan larva. DHA berperan dalam meningkatkan aktivitas  enzim  dan  fluiditas  membrane  seluler, memfasilitasi  aktivitas  metabolisme  dan  membantu proses  osmoregulasi  yang  diperlukan  dalam meningkatkan densitas larva ketika proses tansisi dari pelagis menjadi bentik (Gendron et al., 2013).
Komponen nutrisi penting lainnya adalah protein. Protein  merupakan  bagian  integral  untuk pertumbuhan, perbaikan, dan pemeliharaan sel, serta asam  amino  elemen penting  untuk  semua  makhluk hidup. Protein terhidrolisis yang diformulasikan dalam pakan komersial sangat potensial dalam meningkatkan pertumbuhan larva lobster P. ornatus (Gamble et al., 2015). Sedangkan dalam penelitian ini, nilai proksimat untuk kadar protein sebagai salah satu nutrisi yang berperan dalam pertumbuhan menunjukkan bahwa pada Artemia yang baru menetas telah memiliki kadar pro- tein yang cukup tinggi (51,6%), perlakuan pengayaan dengan  fitoplankton  Isochrysis  memberikan  sedikit peningkatan kadar protein Artemia (52,55%), namun pada perlakuan  lain menunjukkan  penurunan kadar protein  setelah  dilakukan  inkubasi  selama  18  jam. Penurunan ini diduga karena adanya pemanfaatan pro- tein  untuk  metabolisme  Artemia  selama  masa inkubasi.

## Pengamatan  Bakteri  Media  Pemeliharaan
Menurunnya sintasan pada pemeliharaan D-12 dan D-20  dapat disebabkan  oleh  penurunan kualitas  air media  pemeliharaan  dengan  jumlah  bakteri  yang meningkat  pada  pengamatan  D-18  (Gambar  2). Peningkatan bakteri disebabkan adanya sisa Artemia yang  mati  dan  mengendap,  serta  lumut  yang  mulai menempel di permukaan bak. Keberadaan bakteri pada media pemeliharaan dapat mengganggu, menginfeksi maupun menjadi penyebab kematian larva. Penyiponan sisa pakan sulit dilakukan karena terdapat larva yang berenang  pada  bagian  dasar  bak.  Sedangkan  hasil pengukuran kualitas air media (pH dan salinitas) tidak ada perubahan yang signifikan (Tabel 2).
Gambar 1. Persentase sintasan larva lobster.
Figure  1. Survival rate of lobster larvae. 94,7 15,0 1,1 86,2 5,7 1,1 84,9 15,7 2,7 60,9 13,6 1,4 0,0 20,0 40,0 60,0 80,0 100,0 120,0 D6 D12 D20 Si n ta sa n ( Su rvi va l ra te ) (% ) Umur pemeliharaan (Rearing time) Selco Isochrysis Artemia 18 H Kontrol (Control) 0 H
Tabel 1. Hasil uji proximat pakan alami Artemia Table 1. Result of Artemia proximate analysis
Gambar 2. Jumlah total bakteri dan total Vibrio pada media pemeliharaan larva. Figure  2. Total number of bacteria and Vibrio during the experiment.

## Kontrol 0 jam setelah menetas
Control 0 hour after hatching 18  jam setelah menetas 18 hours after hatching Selco Isochyrisis Kadar lemak Fat  content  (%) 17,34 11,69 21,16 11,92 Kadar protein Protein content  (%) 51,60 50,52 46,43 52,55 Parameter Parameters Artemia  tanpa  pengayaan Artemia  without enrichment Artemia  dengan pengayaan Artemia  with enrichment
533 800 267 333 36767 2300 933 2100 100
200
200 100 200 333 100 133 1 10 100 1000 1 10 100 1000 10000 100000 Artemia + Selco Artemia + Isochrysis 18 jam
(tanpa pengayaan) 18 hours (non enrich) Kontrol 0 jam (tanpa pengayaan) Control 0 hour (non enrich)
Total bakteri D-18 D-18 bacteria total Total Vibrio D-7 D-7 Vibrio total
Total Vibrio D-18 D-18 Vibrio total Total bakteri D-7 D-7 bacteria total Total Vibrio D-7 D-7 Vibrio total Total bakteri D-18 D-18 bacteria total Total Vibrio D-18 D-18 Vibrio total Selco

## Isochrysis
Artemia 18 H Kontrol (Control) 0H

## Perkembangan  Larva
Larva lobster memberikan respons positif dengan pemberian  Artemia  sebagai  pakan  awal.  Hal  ini ditunjukkan  dengan  organ  pencernaan  berwarna oranye yang terisi penuh oleh makanan (Gambar 3a) dan  kemampuan  larva  dalam  menangkap  Artemia (Gambar  3b)  dengan  menggunakan  kaki  paling belakang  (periopod  ke-3)  yang  di  bagian  ujungnya memiliki bentuk  berduri (Gambar  3c). Larva  lobster mulai makan segera setelah menetas dengan sedikit ketergantungan pada cadangan kuning telur (Ikeda et al., 2011). Larva lobster makan Artemia dengan cara menombak menggunakan terminal dactyl pada kakinya kemudian  mangsa  di  arahkan  ke  mulut  dengan maxilipeds.  Artemia  dicabik-cabik  dan  material  cair dari  tubuh  Artemia  disedot  ke  dalam  usus  bagian depan.  Karapas  Artemia  seringkali  dibuang  setelah dikosongkan (Wang et al., 2014).
Larva  yang  baru  menetas  berwarna  transparan dilengkapi  empat  pasang  kaki  (periopod)  yang bertangkai  seperti  kipas  dengan  bulu  (setae)  yang digunakannya  untuk berenang.  Perkembangan  larva lobster  dari  stadia-I  ke  stadia  berikutnya  ditandai dengan penambahan umbai-umbai dan bulu (setae), serta  perubahan  selubung  kepala  (cephalic  shield) (Abrunhosa et al., 2008). Pada larva stadia-I ini organ yang  digunakan  untuk  berenang  terdapat  pada periopod  1-2  dengan  jumlah  setae  sebanyak  lima pasang.  Sedangkan  pada  periopod  ke-3  belum berkembang  (Gambar  4a).  Hal  paling  mudah  untuk membedakan setiap stadia larva diketahui dari jumlah setae yang bertambah. Pada penelitian ini, karena larva hanya  mampu  bertahan  pada  umur  20  hari  (hanya mampu  mencapai  larva  stadia-IIIa)  dengan  setae berjumlah  tujuh  pasang  (Gambar  4c).  Pada  semua perlakuan mampu mencapai stadia-IIIa pada 20 hari pemeliharaan.

## Tabel 2. Kualitas air media pemeliharaan larva
Table 2. Water quality of rearing tank during the experiment
Gambar 3. Larva lobster P. homarus dengan organ pencernaan penuh makanan berwarna oranye (a);  larva  membawa  Artemia  (b);  larva  memiliki  periopod  yang  berduri  untuk menangkap Artemia (c).
Figure  3. Lobster larvae of P. homarus with fully digestive organs indicated by orange colour (a); larvae eating Artemia (b); larvae with spine in periopod to catch artemia (c). pH Salinitas Salinity  (ppt) pH Salinitas Salinity  (ppt) pH Salinitas Salinity  (ppt) pH Salinitas Salinity  (ppt) D-11 8,21 35,3 8,17 35,6 8,21 35,0 8,11 35,6 D-16 8,19 35,0 8,16 35,0 8,20 35,0 8,20 35,6 D-19 8,22 35,0 8,19 35,0 8,22 35,0 8,19 35,0 Umur pemeliharaan Rearing time DHA selco Isochrysis 18 jam (tanpa pengayaan) 18 hours (non-enriched ) Kontrol 0 jam (tanpa pengayaan) Control 0 hour (non-enriched)
Selain jumlah setae yang berbeda pada setiap sta- dia, perkembangan larva juga dapat dilihat dengan jelas dari  jumlah  setae  pada  periopod  ketiga.  Pada  larva stadia-1  dan  2,  setae  pada  periopod  ketiga  belum berkembang. Pada stadia-II setae tersebut masih dan berbentuk  seperti  duri  yang  sedikit  memanjang. Sedangkan pada larva stadia-III, setae pada periopod ketiga telah berjumlah tiga pasang (Gambar 5). Pada perkembangan tangkai mata stadia-I berbentuk sedikit membulat dan belum bersegmen. Sedangkan pada sta- dia-II dan III tangkai mata telah bersegmen dan terlihat adanya ruas membentuk tangkai. Pada selubung kepala berbentuk  bulat  pada  larva  stadia-I  dan  menjadi lonjong pada stadia berikutnya (Gambar 6).
Artemia terbukti mampu diterima sebagai pakan awal larva lobster. Pemberian pakan Artemia saja telah mampu mencukupi kebutuhan larva lobster mencapai perkembangan  stadia-IIIa  dengan  morfologi  sesuai Abrunhosa et al. (2008). Pemberian bahan pengaya pada Artemia sebagai pakan utama lobster memberikan hasil yang tidak berbeda nyata pada sintasan larva (P value >  0,05).  Pada  pemeliharaan  enam  hari  pertama, pengayaan dengan selco menunjukkan sintasan yang lebih  tinggi  (SR=  94,6%)  dibandingkan  dengan perlakuan lain. Hal ini didukung dengan hasil analisis proksimat  pengayaan  dengan  selco  memiliki  nilai kadar lemak yang paling tinggi yaitu 21,16%. DHA selco mampu  memperkaya  Artemia  setelah  24  jam
Gambar 6. Bentuk selubung kepala cs dan tangkai mata: tm pada larva stadia-I (a), stadia- II (b), stadia-IIIa (c).
Gambar 5. Bentuk periopod ke-4 pada stadia-I (a), stadia-II (b), stadia-IIIa (c).
Figure  5. Shape of periopod 4 in stage-I (a), stage-II (b), stage-IIIa (c).
Gambar 4. Jumlah setae stadia-I : lima pasang (a), II : enam pasang (b), IIIa : tujuh pasang (c).
Figure  4. Setae number in stage-I : five pairs (a), II : six pairs (b), IIIa : seven pairs (c).
pengayaan  dengan  nilai  konsentrasi  DHA  15,4% dibandingkan dengan pengayaan menggunakan alga yang hanya 0,2% (Phleger et al., 2001).
Nilai sintasan tertinggi pada akhir penelitian dicapai pada  Artemia  yang  diinkubasi  selama  18  jam  tanpa diberikan bahan pengaya. Hal ini diduga karena pada perlakuan pemberian bahan pengaya dan Artemia yang baru menetas memiliki nilai nutrisi yang lebih tinggi dibandingkan dengan perlakuan kontrol 18 jam (Tabel 1),  sehingga  menjadi  sarana  media  yang  baik  bagi pertumbuhan bakteri yang ditunjukkan dengan nilai total bakteri dan total Vibrio yang relatif lebih tinggi. Pemberian  nauplii  Artemia  yang  diperkaya  dapat bertindak  sebagai  vektor  bagi  masuknya  bakteri patogen  (Haché  &  Plante,  2011).  Beberapa  strain bakteri  yang  diisolasi  dari  produksi  nauplii  Artemia antara lain  dari genus  Vibrio,  Pseudomonas,  Micro- coccus, Brevundimonas, Spingomonas, dan Rhizobium (Hoj et al., 2009).
Kegiatan pembenihan lobster di berbagai negara masih terus dikembangkan sampai saat ini. Sintasan yang  rendah  menjadi  kendala  utama  keberhasilan pembenihan.  Pada  kegiatan  pembenihan  lar va Carribean lobster (Panulirus argus) di Florida diperoleh nilai SR 47% pada D-30, 36% pada D-60, 28% pada D- 100, dan 23% pada D-150. Total terdapat 13 larva yang berhasil bermetamorfosis menjadi BBL pada 151-311 hari  pemeliharaan  (Goldstein  et  al.,  2008).  Hasil penelitian mereka lebih baik dari penelitian ini diduga karena  tingkat  kepadatan  yang  lebih  rendah  yaitu menggunakan bak berukuran 40 L dengan jumlah larva 550  ekor/bak.  Selain  itu,  tindakan  preventif  akan introduksi  penyakit  juga  dilakukan  dengan menggunakan  sistem  air  membrane  filtrasi  0,2  m dengan pemberian antibiotik chloramphenicol 10 mg/ L selama 24 jam setiap minggu (Goldstein et al., 2008).
Pada penelitian ini dalam masa pemeliharaan banyak ditemukan  larva  yang  berkerumun  di  dasar  bak terutama pada siang hari. Hal diduga menjadi penyebab banyaknya  kematian  larva  pada  keesokan  harinya. Sebagian  besar  larva  pada  stadia-II  dan  seterusnya cenderung berada di bagian bawah bak pemeliharaan dan kebanyakan ikut terbawa saat penyiponan dasar bak untuk mengurangi kotoran dan larva yang mati (Vijayakumaran  et  al.,  2014).  Stres  pada  saat penanganan,  berkerumunnya  larva,  dan  tingginya jumlah  Vibrio  pada  perkembangan  stadia  menjadi beberapa penyebab kematian  (Vijayakumaran et  al., 2014).
Agen  utama  penyakit  pada  larva  cukup  umum ditemui  seperti  pada  budidaya  lainnya,  meliputi  vi- rus,  bakteri,  jamur,  protozoadan  metazoa  (Shield, 2011). Organisme ini ditemukan banyak terdapat pada
air laut. Oleh karenanya perlu perhatian khusus pada kualitas air laut yang masuk utamanya pada tempat penetasan  karena  ini dapat  menyebabkan  kematian yang  signifikan  melalui  induksi  tertentu  yang menyebabkan  larva  stres,  penurunan  aktivitas, perubahan  warna,  perilaku  makan  yang  terganggu, perubahan  bentuk  tubuh,  dan  pernapasan.  Apabila tanda-tanda  klinis  tersebut  telah  teramati  maka mungkin sudah terlambat untuk melakukan tindakan dalam mengurangi kematian massal (Hall et al., 2013).
Pada  penelitian  ini  penyebab  lain  yang  diduga menjadi penghambat dalam pemeliharaan larva lob- ster adalah mudahnya bagian tubuh Artemia menjadi kotor  (Gambar  7a)  akibat  adanya  penempelan  oleh protozoa. Penempelan kotoran biasa pada tubuh larva lobster  sebenarnya  mampu  dibersihkan  oleh  maxil- liped  ketiga  maupun  kaki  pertama  hingga  kelima (Kamio  et  al.,  2015).  Namun  penempelan  protozoa pada  kaki-kaki  tersebut  sulit  dibersihkan  dan mengganggu pergerakan, serta aktivitas larva untuk menangkap mangsa. Larva yang tubuhnya kotor dan berenang lesu merupakan ciri larva yang tidak sehat (Matsuda et  al.,  2012).  Pada akhirnya  akan  menjadi salah satu penyebab kematian. Beberapa jenis proto- zoa  yang  ditemukan  menyerang  larva  pada  masa pemeliharaan diduga adalah dari jenis Zoothamnium sp. (Gambar 7b), dan filamentous bacterium (Gambar 7c). Vijayakumaran et al. (2014) menyebutkan bahwa protozoa  yang  umum  ditemukan  adalah  jenis Zoothamnium  sp.,  filamentous  bacterium,  dan Leucotrix  sp.;  sementara  Acinata  sp.,  Ephistylis  sp., dan vorticella tercatat sesekali menyerang larva.
Pada penelitian pendahuluan juga ditemukan pro- tozoa  jenis  Zoothamnium  sp.  maupun  filamentous bacterium pada larva lobster bahkan pada telur. Infeksi jamur pada telur juga dilaporkan terjadi pada lobster mutiara yang mengakibatkan perubahan warna telur (Yap  et  al.,  2020).  Infeksi  jamur  menjadi  penyebab utama kegagalan dan kematian massal dalam produksi benih krustasea (Hatai, 2012). Selain itu, jenis siliata yang  juga  sering  teramati  menempel  pada  lobster dewasa maupun embrio telur yang berasal dari Genus Vorticella  dan  Zoothamnium,  Acineta,  Ephelota, Cyanobacteria,  dan  diatom.  Dampak  akibat penempelan ini berakibat pada kematian larva akibat gangguan  respirasi  (Shields  et  al.,  2006).  Tindakan preventif dalam mencegah munculnya parasit ini harus dilakukan sejak pemeliharaan induk maupun sebelum penebaran larva. Perendaman selama 10 menit dengan malachite green (10 mg/L), formalin (25 mg/L), strep- tomycin (0,5-1 mg/L) dapat digunakan sebagai treat- ment untuk mendesinfeksi induk dan larva dari jenis protozoa  tersebut  (Vijayakumaran  et  al.,  2014). Namun, penggunaan beberapa desinfektan tersebut
tidak disarankan untuk kegiatan budidaya terutama pada  penggunaan  antibiotik  streptomycin  bahkan malachite green termasuk salah satu jenis obat ikan dan udang yang dilarang dalam Permen KP No.39 tahun 2015. Oleh sebab itu, dalam penelitian ini digunakan iodine  yang  merupakan  desinfektan  yang  tidak tercantum pada peraturan tersebut.
Keberhasilan  pembenihan  larva  lobster  sangat ditentukan oleh kesesuaian jenis pakan yang mampu ditangkap  oleh larva  lobster  dan kandungan  nutrisi yang  diperlukannya.  Sedangkan  kualitas  media pemeliharaan yang baik dengan bebas dari bakteri dan protozoa menjadi salah satu kunci pertumbuhan dan sintasan  larva.  Francis  et  al.  (2014)  menyebutkan keberhasilan pemenuhan kebutuhan nutrisi dari larva lobster  terkait  erat  dengan  beberapa  aspek  khusus dari  persyaratan  biologis  larva.  Khususnya,  untuk pertumbuhan  dan  sintasan  yang  maksimal. Keseimbangan yang baik antara nutrisi dan kualitas air harus  dijaga termasuk  kontrol mikrobiologi  dan hidrodinamik. Fluktuasi dan sub optimal kualitas air dapat  menyebabkan  eksoskeleton  menjadi  kotor sehingga  berpengaruh  pada  pergerakan  dan kemampuan menangkap makananan secara efektif.
Pengaruh lain dari fluktuasi kualitas air termasuk deformity  (kecacatan)  pada  saat  moulting  (berganti kulit). Larva membutuhkan kebebasan dalam kolom air  sehingga  dapat  secara  maksimal  menangkap makanan, sementara itu perlu menjaga kontak mini- mal antar individu agar tidak saling terpaut di dalam bak pemeliharaan (Francis et al., 2014).
Kualitas  air  pemeliharaan  yang  baik  dan  nutrisi, serta  jenis  pakan  yang  tepat  menjadi  faktor  yang penting  bagi  perkembangan  larva  lobster  untuk mampu  melewati  fase  larva  yang  panjang  hingga berubah menjadi BBL.

## KESIMPULAN
Perkembangan larva lobster yang mampu dicapai pada penelitian ini adalah perkembangan stadia IIIa dengan waktu pemeliharaan larva 20 hari pada semua perlakuan.  Pengayaan  artemia  dengan  DHA  selco memberikan  hasil  sintasan  tertinggi  dibandingkan perlakuan lain pada enam hari pertama pemeliharaan larva. Pemberian pakan artemia yang diperkaya dengan DHA selco akan menjadi lebih efektif bila kualitas air dikontrol dengan baik selama pemeliharaan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis sangat  berterima kasih pada Ir.  Sari Budi Moria Sembiring, M.Biotech., Sudewi M.Si., dan staf laboratorium  kimia  Balai  Besar  Riset  Perikanan Budidaya Laut dan Penyuluhan Perikanan Gondol, Bali atas dukungan dan bantuannya dalam penelitian ini.

## DAFTAR  ACUAN
Abrunhosa,  F.A.,  Santiago,  A.P.,  &  Abrunhosa,  J.P.
(2008). The early phyllosoma stages of spiny lob- ster Panulirus echinatus Smith, 1869 (Decapoda: Palinuridae) reared in the laboratory/Os primeiros estagios de filosoma da lagosta Panulirus echinatus (Decapoda: Palinuridae) cultivados em laboratorio. Brazilian Journal of Biology, 68,(1), 187-195.
Elvantra.  (2021).  Harga  terbaru  lobster  air  laut  dan tawar  hari  ini  lokal  dan  ekspor.  Maret  2021. Diakses  pada  7  Juni  2021,  dari:  https:// elvantra.blogspot.com/2020/01/harga-lobster.html.
Conland,  J.A.,  Jones,  P.L.,  Turchini,  G.M.,  Hall,  M.R., & Francis, D.S. (2014). Changes in the nutritional composition of captive early-mid stage Panulirus ornatus phyllosoma over ecdysis and larval devel- opment. Aquaculture, 434, 159-170.
Gambar 7. Penempelan pada bagian tubuh larva lobster; tubuh larva yang kotor (a), Zoothamnium sp.
(b), filamentous bacterium (c).
Figure  7. Microorganisme attaching to the body part of larvae (a), Zoothamnium sp. (b), filamen- tous bacterium (c).
Fitzgibbon, Q.P., Jeffs, A.G., & Battaglene, S.C. (2014).
The Achilles heel for spiny lobsters: the energet- ics of the non-feeding post-larval stage. Fish Fish, 15, 312-326.
Francis, D.S., Salmon, M.L. Kenway, M.J., & Hall, M.R. (2014). Palinurid lobster aquaculture: Nutritional progress and considerations for successful larval rearing. Reviews in Aquaculture, 6, 180-203.
Gamble,  S.,  Pirozzi,  I.,  Hall,  M.R.,  Zeng,  C.,  Conlan, J.A., & Francis, D.S. (2015).  The effect of pre-di- gested protein source on the performance of early – mid stage Panulirus ornatus phyllosoma. Aquac- ulture, 440, 17-24.
Gendron,  L.,  Tremblay,  R.,  Belvin,  S.,  Génard,  B., Motnikar,  S.,  &  Côté,  J.  (2013).  Condition,  sur- vival and growth in situ of hatchery-reared stage IV lobster (Homarus americanus) fed Artemia and lipid-rich wild zooplankton. Aquaculture, 416-417, 380-389.
Goldstein, J.S., Matsuda, H., Takenouchi, T., & Butler, M.J. (2008). The complete development of larval caribbean spiny lobster Panulirus argus (Latreille, 1804)  in culture.  Journal  of  Crustacean  Biology, 28(02), 306-327.
Grima, E.M.,. Pérez, J.A.S., Sánchez, J.L.G., Camachoa, F.G.,  &  Alonso,  D.L.  (1992).  EPA  from  Isochrysis galbana. Growth conditions and productivity. Pro- cess Biochemistry, 27, 299-305.
Haché,  R.  &  Plante,  S.  (2011).  The  relationship  be- tween enrichment, fatty acid profiles and bacte- rial load in cultured rotifers (Brachionus plicatilis L-strain)  and  Artemia  (Artemia  salina  strain Franciscana). Aquaculture, 311, 201-208.
Hall,  M.R.,  Kenway,  M.,  Salmon,  M.,  Francis,  D., Goulden, E.F., & Høj, L. (2013). Palinurid lobster larval rearing for closed-cycle hatchery production. Australian  Institute  of  Marine  Science  (AIMS), Australia.  Woodhead  Publishing  Limited,  2013. DOI: 10.1533/9780857097460.2.289.
Hatai, K. (2012). Diseases of fish and shellfish caused by marine fungi. In Raghukumar, C. (Ed.). Biology of Marine Fungi. Springer, p. 15-52.
Høj, L., Bourne, D.G., & Hall, M.R. (2009). Localisation, abundanceand  community  structure  of  bacteria associated with Artemia: effects of nauplii enrich- ment  and  antimicrobial  treatment.Aquaculture 293: 278–285 Growth Conditions and Productiv- ity. Process Biochemistry,  27, 299-305.
Ikeda, T., Smith, G., McKinnon, A.D., & Hall, M. (2011).
Metabolism  and  chemical  composition  of phyllosoma larvae, with special reference to the
tropical rock lobster Panulirus ornatus (Decapoda; Palinuridae). Journal of Experimental Marine Biol- ogy and Ecology, 405, 80-86.
Jensen, M.A., Carter, C.G., Adams, L.R., & Fitzgibbon, Q.P. (2013). Growth and biochemistry of the spiny lobster Sagmariasus verreauxi cultured at low and high density from hatch to puerulus. Aquaculture, 376-379, 162-170.
Junaidi,  M.,  Cokrowati,  N.,  &  Abidin,  Z.  (2011). Tingkah  laku  induk  betina  selama  proses pengeraman telur dan perkembangan larva lobster pasir (Panulirus homarus, Linneaus, 1785). Jurnal Akuatika, 2(1), 1-10.
Kamio,  M.,  Furukawa,  D.,  Wakabayashi,  K.,  Hiei,  K., Yano,  H.,  Sato,  H.,  Yosie-Stark,  Y,  Akiba,  T.,  & Tanaka, Y. (2015). Grooming behavior by elongated third  maxillipeds  of  phyllosoma  larvae  of  the smooth fan lobster riding on jellyfishes. Journal of Experimental Marine Biology and Ecology, 463, 115-124.
Matsuda, H., Takenouchi, T., Tanaka, S., & Watanabe, S.  (2009).  Relative  contribution  of  Artemia  and mussel as food for cultured middle-stage Panulirus japonicus phyllosomata as determined by stable nitrogen  isotope  analysis.  New  Zealand  Journal of Marine and Freshwater Research, 43, 217-224.
Matsuda,  H.,  Abe,  F.,  &  Tanaka,  S.  (2012).  Effect  of photoperiod on metamorphosis from phyllosoma larvae to puerulus postlarvae in the Japanese spiny lobster Panulirus japonicus. Aquaculture, 326-329, 136-140.
Mustafa, A. (2013). Budidaya lobster Panulirus sp. di Vietnam  dan  aplikasinya  di  Indonesia.  Media Akuakultur, 8(2), 73-84.
Phleger,  C.F.,  Nelson,  M.M.,  Nichols,  P.D.,  Ritar,  A.J., Smith,  G.G.,  Hart,  P.R.,  &  Jeffs,  A.G.  (2001).  Lip- ids  and  nutrition  of  the  southern  rock  lobster, Jasus  edwardsii  from  hatch  to  puerulus.  Marine and Freshwater Research, 52, 1475-1486.
Priyambodo, B. (2015). Study tour of Indonesian farm- ers  to  Vietnam  lobster  aquaculture  industry  in 2013. Chapter 5.8. In Jones, C.M. (Ed.). Spiny lob- ster aquaculture development in Indonesia, Viet- nam and Australia. Proceedings of the International Lobster Aquaculture Symposium Held in Lombok, Indonesia, 22-25 April 2014. Australian Centre for International  Agricultural  Research,  Canberra, Australia, p. 136-141.
Priyambodo,  B.,  Jones,  C.M.,  &  Sammut,  J.  (2020).
Assessment  of  the  lobster  puerulus  (Panulirus homarus  and  Panulirus  ornatus,  Decapoda:
Palinuridae) resource of Indonesia and its poten- tial for sustainable harvest for aquaculture. Aquac- ulture, 528, 735563.
Prusinska,  M.,  Nowasad,  J.,  Jarmo³owicz,  S., Mikiewicz, M., Duda, A., Wiszniewski, G., Sikora, M., ....., & Kucharczyk, D. (2020). Effect of feed- ing barbel larvae (Barbus barbus (L, 1758)) Artemia sp. nauplii enriched with PUFAs on their growth and survival rate, blood composition, alimentary tract histological structure and body chemical com- position. Aquaculture Reports, 18, 100492. https:/ /doi.org/10.1016/j.aqrep.2020.100492.
Shields, J.D., Stephens, F.J., & Jones, B. (2006). Patho- gens, parasites and other symbionts. Lobster: Bi- ology,  management,  aquaculture  and  fisheries. Blackwell Publishing Ltd. Chapter 5, 146-204.
Shields, J.D. (2011). Diseases of spiny lobsters: A re- view’. J. Invertr. Pathol., 106, 79-91.
Vijayakumaran,  M.,  Maharajan,  A.,  Rajalakshmi,  S., Jayagopal, P., & Remani, M.C. (2014). Early larval stages of the spiny lobsters, Panulirus homarus, Panulirus versicolor and Panulirus ornatus cultured
under  laboratory  conditions.  International  Jour- nal of  Development Research, 4(2), 377-383.
Wang,  M.,  O’Rorke,  R.,  Nodder,  S.D.,  &  Jeffs,  A.G.
(2014). Nutritional composition of potential zoop- lankton prey of the spiny lobster phyllosoma (Jasus edwardsii). Mar.  Freshw.  Res.,  64,  1-13.
Wang, M., Mackenzie, A.D., & Jeffs, A.G. ( 2015). Lipid and fatty acid composition of likely zooplankton prey of spiny lobster (Jasus edwardsii) phylosomas. Aquaculture Nutritition, 21, 385-400.
Wu, X., Smith, G., & Hall, M. (2011). Patterns of larval growth, lipid composition and fatty acid deposi- tion  during early  to  mid  stages of  development in Panulirus ornatus phyllosoma. Aquaculture, 330- 333, 63-73.
Yap,  S.Y.,  Hamasaki,  K.,  Maran,  B.A.V.,  Tuzan,  A.D., Ch’ng, C.L., & Lal, T.M. (2020). First report of plant fungal  pathogen  Zasmidium  musae  associated with  moribund  eggs  of  ornate  spiny  lobster (Panulirus ornatus) in Sabah. Aquaculture Reports, 18, 100500.