Jurnal Pro-Life, Volume 10 Nomor 2, Juli 2023
Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kulit Buah Kawista (Limonia acidissima L.) Asal Desa Pasinan, Kabupaten Pasuruan terhadap Koloni Salmonella sp. secara In Vitro
Sisca Desi Prastyaningtias 1* , Sari Dian A.S. 2
1 Pendidikan Biologi, Fakultas Ilmu Pendidikan, Institut Teknologi dan Sains Nahdlatul Ulama Pasuruan
2 Pendidikan Fisika, Fakultas Ilmu Pendidikan, Institut Teknologi dan Sains Nahdlatul Ulama Pasuruan
*Corresponding author : siscadesi@itsnupasuruan.ac.id

## Article History
Received    :   12 June 2023 Approved   :   20 June 2023 Published  :   22 July 2023
Keywords
Antibacterial, L. acidissima L.,
Salmonella sp.

## ABSTRACT
The large consumption of this fruit was caused an abundance of fruit peel. Based on the research results of phytochemical test, the extract of kawista fruit peel contains saponins, tannins, alkaloids, flavonoids, and  terpenoids.  Another  income  source  of  Pasinan  residents  comes from marine resources, that can be served in fresh fish, dried fish and other processed fish is susceptible to contaminated by microorganisms such as Salmonella sp. Salmonella sp. is pathogenic microbe lives on intestines of animals and humans. This study aims to determine  the  antibacterial  activity  of  kawista  peel  extract  on  the growth of Salmonella sp. in-vitro and to determine the concentration of  Kawista  extract  which  is  effective  for  inhibiting  the  growth  of Salmonella  sp  using  the  paper  disc  diffusion  method.  The  results  of this  study,  the  diameter  of  the  inhibitory  zone  for  the  growth  of Salmonella sp. using variables concentrations of kawista rind extract at  12.5%;25%;50%;75%;100%,  with  negative  control  are  distilled water  and  methanol  and  positive  control  is  tetracycline.  At  a concentration  of  100%  extract,  the  diameter  of  the  bacterial inhibition test was the largest and significantly different from another treatment  group  at  concentrations  of  12.5%;25%;50%;75%. However, the 100% extract showed a smaller inhibitory zone than the tetracycline treatment group, but not significantly different. Based on the  results  of  this  research,  it  can  be  determined  that  kawista  peel extract is effective for inhibited the growth of Salmonella sp. Kawista peel extract at a concentration of 100% is most effective for inhibiting the  growth  of  Salmonella  sp  and  shows  results  that  are  not significantly different from tetracycline.

## PENDAHULUAN
Desa pasinan yang merupakan salah satu wilayah di kecamatan Lekok, Kabupaten Pasuruan Provinsi Jawa Timur yang sebagian penduduknya

## Prolife

## Jurnal Pendidikan Biologi, Biologi, dan Ilmu Serumpun
https://ejournal.uki.ac.id/index.php/prolife
© 2023 Universitas Kristen Indonesia Under the license CC BY-SA 4.0
menggantungkan  hidupnya  pada  sektor pertanian,  serta  letak  wilayahnya  yang cukup  dekat  dengan  laut  sehingga beberapa warganya bekerja sebagai nelayan (Radar Bromo, 2018).  Salah satu potensi  hasil  pertanian  yang  cukup  besar dari  Desa  Pasinan  adalah  Buah  Kawista Limonia  acidissima L.  Buah  yang memiliki  nama  latin.  atau  kawista umumnya dibudidayakan di daerah pantai, dan  padang  rumput  yang  kering  terutama dekat  laut  dan  menuju  ke  arah  daratan (Sukamto, 2000).
Limonia acidissima L. atau Kawista, dan  memiliki  bahasa  daerah  yaitu  Kwisto ini  adalah  tanaman  golongan    famili Rutaceae.  Tanaman  ini  berasal  dari  India dan pada umumnya dimanfaatkan sebagai tanaman  obat  (Panda,  dkk.,  2013). Masyarakat juga telah menggunakan buah kawista yang masih muda untuk mengobati  sakit  diare  (Rini,  dkk.,  2017). Warga Pasinan memanfaatkan buah kawista  untuk  dikonsumsi  baik  dalam kedaan mentah maupun matang.
Banyaknya  konsumsi  buah  kawista  ini menyisakan  kullit  buahnya  yang  cukup melimpah.
Salah  upaya  untuk  menanggulangi limbah  kulit  buah  kawista  adalah  dengan mengolahnya  menjadi  suatu  bahan  yang bermanfaat.  Berdasarkan  hasil  uji  analisis fitokimia  pada  ekstrak  kulit  kawista, mengandung  saponin,  tanin,  terpenoid,
alkaloid,  dan  flavonoid.  Salah  satu kandungan  kulit  buah  kawista  yaitu alkaloid  dapat  merusak struktur penyusun dinding  sel  bakteri  yaitu  peptidoglikan, sehingga  lapisan  dinding  sel  tidak  utuh dan  menyebabkan  sel  mengalami  lisis (Taufiq, dkk., 2015).
Sumber  pendapatan  lain  penduduk Pasinan  yang  berupa  hasil  laut  berupa Ikan  segar,  ikan  awetan  dan  olahan  ikan lainnya  rentan  terhadap  kontaminasi mikroorganisme  seperti Salmonella sp. Salmonella sp. yang  bersifat  patogen  di usus  hewan  dan  manusia.  Sehingga dengan demikian proposisi yang dibangun dalam  penelitian  ini  adalah:  untuk memanfaatkan  kulit  buah  kawista  untuk diekstrak  menjadi  senyawa  antibakteri Salmonella sp. yang umumnya mencemari produk  hasil  laut  seperti  ikan  segar,  ikan awetan dan olahan ikan lainnya.
Sumber  pendapatan  lain  penduduk Pasinan  yang  berupa  hasil  laut  berupa Ikan  segar,  ikan  awetan  dan  olahan  ikan lainnya  rentan  terhadap  kontaminasi mikroorganisme  seperti Salmonella sp. Salmonella  sp. yang  bersifat  patogen  di usus  hewan  dan  manusia.  Sehingga dengan demikian proposisi yang dibangun dalam  penelitian  ini  adalah:  untuk memanfaatkan  kulit  buah  kawista  untuk diekstrak  menjadi  senyawa  antibakteri Salmonella sp. yang umumnya mencemari
produk  hasil  laut  seperti  ikan  segar,  ikan awetan dan olahan ikan lainnya.
Salmonella sp. merupakan  bakteri patogen  berbentuk  batang  yang  tergolong Enterobacteriaceae yaitu  bakteri  gram negatif yang bersifat parasit di usus hewan dan  manusia  (Brooks,  2005).    Penyakit yang  disebabkan  oleh  bakteri  ini  disebut salmonellosis yang dapat ditularkan melalui  kotoran,  makanan  dan  minuman yang  terkontaminasi  oleh  bakteri  tersebut (Pui,  2011).  Upaya  untuk  menurunkan sebaran  pathogen Salmonella tersebut yaitu  dengan  menggunakan  antibiotik dapat  menyebabkan  resistensi  bekteri terhadap antibiotik, namun dapat memberikan dampak negatif pada produk- produk  pangan  sehingga  menjadi  tidak layak untuk dikonsumsi.
Selain  itu  dapat menyebabkan terjadinya  hipersensitivitas,  serta  depresi sumsum  tulang  belakang  (Wibowo,  dkk., 2010)  serta  gangguan  fisiologis  lain. Beberapa  jenis  spesies Salmonella yang bersifat patogen ada tiga, yaitu:
Salmonella typhi , Salmonella choleraesuis ,  dan Salmonella  enteritidis .
Infeksinya Salmonella sp .  pada  manusia hampir semua disebabkan karena mengkonsumsi  makanan  atau  minuman yang  tercemar  patogen  tersebut.  Tujuan penelitian  ini  adalah  untuk  menguji adanya  aktivitas  antibakteri  ekstrak  kulit kawista terhadap pertumbuhan Salmonella
sp. secara  in  vitro  serta  mengetahui konsentrasi  ekstrak  kulit  Kawista  yang efektif  untuk  menghambat  pertumbuhan bakteri Salmonella sp.

## METODE PENELITIAN

## Metode
Metode  penelitian  yang  digunakan adalah  eksperimental  laboratorik    yang bersifat kuantitatif dan kualitatif.

## Pembuatan ekstrak kulit buah Kawista
Ekstrak  kulit  kawista  dibuat  dengan teknik  maserasi  menggunakan  pelarut metanol  dengan  perbandingan  serbuk  dan metanol 1:7. Maserasi dilakukan 5x24 jam dengan  sesekali  dilakukan  pengadukan menggunakan magnetic  stirer .  Hasil maserasi  disaring  dengan  kertas  saring hingga didapat filtrat. Selain itu dilakukan pula  remaserasi  1  kali  dengan  metanol menggunakan  perbandingan  serbuk  dan metanol 1:5. Seluruh filtrat yang diperoleh dipekatkan  menggunakan vacum  rotary evaporator pada  suhu  63˚C  hingga diperoleh ekstrak yang kental. Selanjutnya disimpan  dalam  wadah  tertutup  rapat sebelum digunakan untuk uji selanjutnya.

## Analisis Fitokimia
Analisis  fitokimia  dilakukan  untuk deteksi adanya kandungan senyawa metabolit  sekunder  pada  ekstrak  kulit kawista.
1. Pengujian Flavonoid
Sebanyak  1  ml  sampel  ekstrak dicampur  dengan  20  ml  air  panas,  lalu dipanaskan  hingga  mendidih  selama  5 menit. Menambahkan magnesium sebanyak  0,5  gr  dan  10  tetes  larutan  HCl dan  dikocok  secara  perlahan.  Apabila terjadi  perubahan  warna  merah/  jingga/ ungu,  hal  tersebut  menunjukkan  adanya senyawa flavonoid (Harborne, 1987).

## 2.Uji Alkaloid
Memasukkan 0,5 ml ekstrak kemudian  menambahkan  1  ml  HCl  2  N dan 9 ml  aquades ke dalam  tabung  reaksi kemudian dipanaskan selama 2 menit lalu didinginkan  dan  disaring.  Sebanyak  3 tetes  filtrat  dicampur  dengan  2  tetes Mayer (HgCl 2 dan Kalium Iodida) setelah itu  terbentuk  gumpalan  endapan  warna putih atau kuning. 3 tetes filtrat dimasukkan ke dalam tabung lalu ditambahkan  2  tetes  larutan  Bouchardat (Kalium  iodide  serta  Iodium)  kemudian terbentuk  endapan  berwarna  coklat  atau hitam. Sebanyak 3 tetes filtrat dimasukkan ke  tabung  lalu  menambahkan  2  tetes Dragendorff (asam nitrat pekat, Bismut III nitrat,  dan  kalium  Iodida)  hingga  terjadi perubahan  warna  jingga/merah.  Apabila positif  mengandung  alkaloid  maka  akan terbentuk  endapan  keruh  dimana  paling sedikit  2  atau  3  percobaan  menimbulkan endapan yang keruh (Harborne, 1987).

## 3. Uji Terpenoid
Memasukan  1  ml  ekstrak  kawista dan 2 ml kloroform ke tabung. menambahkan  3  tetes  asam  sulfat  pekat dan  10  tetes  asam  asetat  anhidrid  lalu dikocok  serta  didiamkan  beberapa  menit. Apabila terbentuk warna merah atau ungu menunjukkan  adanya  senyawa  terpenoid (Harborne, 1987).

## 4. Uji Tanin
Memasukan 1 ml ekstrak dan 12 ml air  panas  ke  tabung  dan  lalu  dididihkan 15  menit.  Selanjutnya  disaring  lalu menambahkan  1  ml  larutan  FeCl 3 1  %. Apabila  terbentuk  warna  biru  tua/  hijau kehitaman  menunjukkan  adanya  senyawa tannin (Harborne, 1987).

## 5. Uji Saponin
Memasukan  0,5  ml  ekstrak  dan  air panas  ke  dalam  tabung,  lalu    didinginkan dan  dikocok  dengan  kuat  10  detik. Apabila  terdapat  buih  setinggi  1-10  cm kurang dari 10 menit dan buih tidak hilang setelah  menambahkan  HCl  2  N,  hal  ini menandakan  terdapat  senyawa  saponin pada ekstrak (Harborne, 1987).

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Pengujian adanya aktivitas antibakteri  pada  ekstrak  kulit  kawista dilakukan secara in-vitro dengan menggunakan  metode  difusi  cakram kertas.    Jarum  ose  yang  telah  disterilkan dimasukkan ke dalam tabung berisi biakan
bakteri Salmonella sp . Selanjutnya digoreskan  pada  cawan  petri  yang  telah diisi  media  Nutrient  Agar  ( NA )  dengan metode Streak sesuai  dengan  kelompok perlakuan.  Memasukkan  kertas  cakram kedalam  tabung  yang  berisi  2  ml  ekstrak kulit kawista di berbagai konsentrasi yaitu 12,5  %,  25%,  50%,  75%  dan  100%  lalu direndam  selama  1  jam.    Memasukkan kertas  cakram  yang  telah  direndam tersebut    ke  dalam  masing-masing kelompok  cawan  petri  yang  telah  berisi biakan Salmonella sp . dalam media NA .
Kontrol  negatif  memasukkan  kertas cakram ke tabung yang berisi aquades dan metanol  lalu  direndam  selam  1  jam. Kemudian  mengambil  kertas  cakram tersebut  dan  meletakkan  ke  dalam  cawan petri  yang  berisi  media NA dan  koloni Salmonella  sp. ,  sebagai  kontrol  positif, memasukkan  kertas  cakram  ke  dalam tabung yang berisi tetrasiklin lalu direndam  selama  1  jam.  Kemudian mengambil kertas cakram dan meletakkan ke  dalam  cawan  yang  telah  berisi  media NA dan Salmonella  sp. Selanjutnya diinkubasi  pada  suhu  36-37 o C  selama
3x24  jam.  Pengamatan  zona  hambat bakteri  yaitu  dengan  melihat  area  yang berwarna  bening  disekitar  kertas  cakram kemudian dilakukan pengukuran menggunakan  jangka  sorong.  Masing- masing  pengamatan  dilakukan  dengan pengulangan sebanyak 4 kali.

## Analisis Data
Analisis data penelitian menggunakan One-Way  Anova (Analisis varian  satu  arah)  dengan  menggunakan aplikasi  SPSS  ( Statistical  Program  for Social  Science ) . Uji Anova digunakan untuk  melihat  ada  perbedaan  dari  hasil setelah pemberian perlakuan atau rata-rata tiap perlakuan apakah memiliki hasil yang berbeda signifikan atau tidak.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan  hasil  analisis  fitokimia terhadap  ekstrak  kulit  kawista  dapat ditemukan  adanya  kandungan  alkaloid, flavonoid,  terpenoid,  tanin,  dan  saponin. Berdasarkan hasil pengamatan uji antibakteri  pada  ekstrak  kulit  kawista terhadap Salmonella secara in-vitro menunjukkan hasil sebagai berikut.
Gambar 1 . Diagram Diameter Uji Hambat Pertumbuhan Bakteri Salmonella sp. (mm) Catatan : a/b menunjukkan beda signifikan diameter zona hambat antar   kelompok
Hasil  penelitian  ini  didapatkan  data panjang diameter zona hambat
pertumbuhan  bakteri Salmonella  sp. yang menggunakan variabel ekstrak kulit Kawista  konsentrasi  12,5%;  25%;  50%; 75%;  100%  dengan  kontrol  negatif aquades  dan  metanol  serta    kontrol  positif antibiotik tetrasiklin.
Konsentrasi  ekstrak  Kawista  100% menunjukkan  diameter  uji  hambat  bakteri yang  paling  besar  serta  berbeda  signifikan dibandingkan kelompok perlakuan konsentrasi  12,5%;  25%;  50%;  75%. Pada konsentrasi ekstrak Kawista 100% menunjukkan  diameter  uji  hambat  bakteri yang lebih kecil dibandingkan dengan
perlakuan  tetrasiklin,  namun  tidak  ada beda signifikan.
Pada  konsentrasi  ekstrak  Kawista 12,5%;  25%;  50%;  75%  menunjukkan adanya  diameter  uji  hambat  yang  semakin besar seiring dengan meningkatnya konsentrasi  ekstrak  (berbanding  lurus), namun  pada  masing-masing  perlakuan tidak  menunjukkan  adanya  perbedaan signifikan.  Pada  perlakuan    metanol menunjukkan  adanya  uji  hambat  diameter bakteri  lebih  besar  dibandingkan  dengan kelompok  perlakuan  ekstrak  Kawista 12,5%;  25%;  50%;  75%  namun  tidak berbeda signifikan.
Gambar 2. Daerah Zona Hambat (Zona Bening) Salmonella sp. di Berbagai Konsentrasi Ekstrak Kulit Kawista, Antibiotik tetrasiklin, Metanol dan Aquades ( distilled water )
Zona  hambat  (daerah  bening)  dapat terbentuk  disebabkan  ekstrak  pada  paper disk berdifusi ke media NA serta mencegah pertumbuhan  koloni Salmonella sp . yang terdapat  di  daerah  tersebut.  Berdasarkan hasil  uji  analisis  fitokimia  menunjukkan bahwa  ekstrak  kulit  Kawista  mengandung flavonoid,  alkaloid,  terpenoid,  tanin,  dan saponin.  Senyawa-senyawa  tersebut  dapat menghambat  perkembangbiakan  bakteri Salmonella sp .
Flavonoid  termasuk  senyawa  fenol yang  dapat  merusak  struktur  protein  pada enzim  sehingga  mengganggu  aktivitas metabolisme  sel.  Flavanoid  juga  memiliki kemampuan  membentuk  ikatan  dengan protein  pada  dinding  sel,  sehingga  bakteri tidak  mampu  melekat  atau  menginvasi  sel inang  (Susanti,  2016).  Flavonoid  pun
mampu  melepas  energi  transduksi  pada membran sel bakteri sehingga mengganggu  kemampuan  motilitas  pada bakteri  (Manik et  al .,  2016).  Selain  itu, flavonoid juga dapat memecah ikatan pada dinding sel bakteri dengan cara menghambat  penggabungan  rantai  glikan dan  peptidoglikan  pada  dinding  sel sehingga  menyebabkan  struktur  dinding sel  menjadi  lemah  (Sulatstrianah,  dkk ., 2014). Aktivitas flavonoid dapat menghambat  perkembangbiakan  bakteri dengan menghambat pembentukan makromolekul  penyusun  membran  sel bakteri (Dzoyem dkk., 2013).
Senyawa alkaloid yang juga terdapat pada  kulit  kawista  memiliki  kemampuan untuk mencegah perkembangbiakan bakteri  (Pfoze  dkk.,  2011),  dengan  cara
menghambat sintesis enzim reverse transcriptase dan sintesis DNA (Schmeller dkk., 1997). Selain itu alkaloid melepaskan senyawa  asam  lipoteikoat  dari  permukaan membrane  sel  (Mawan  dkk.,  2018)  yang dapat  mempengaruhi  permeabilitas  dari membran  dan  menyebabkan  lisis  pada lapisan  dinding  sel  bakteri.  Senyawa terpenoid yang terkandung pada kulit buah ini juga dapat mencegah perkembangbiakan bakteri (Mariajancyrani dkk., 2013).
Namun Aktivitas pengaruhnya  dalam  pertumbuhan  koloni bakteri  belum  sepenuhnya  dipahami, namun  diperkirakan,  adanya  senyawa lipofilik  yang  mengganggu  membran  sel bakteri (Cowan, 1999).
Senyawa  tanin  memiliki  efek berupa spasmolitik yang dapat menurunkan  aktivitas  gerak  peristaltik pada  usus,  serta  mampu  mengerutkan dinding sel bakteri sehingga dapat mengakibatkan terganggunya permeabilitas bakteri. Senyawa tanin dapat mencegah  pembentukan  enzim reverse transkriptase serta DNA topoisomerase yang  memiliki  peran  dalam  pembelahan sel sehingga bakteri tidak dapat bereplikasi (Mukhriani dkk., 2014).
Kemampuan saponin sebagai
antibakteri  adalah  sebagai  bahan  kimia penghalang pada sistem pertahanan
tanaman untuk menghadapi invasi patogen.  Saponin  dapat  mengakibatkan kerusakan protein  serta  tidak berfungsinya enzim  tertentu  pada  bakteri  (Ravi  dkk., 2016). Selain dapat menghambat perkembangbiakan  bakteri,  saponin  juga bersifat  anti  jamur  (Yuliana  dkk.,  2015). Cara  kerja  saponin  sebagai  antibakteri yaitu dengan merusak membran sel dengan menurunkan  permeabilitas  membran  sel (Sulastrianah  dkk.,  2014).  Selain  itu, saponin dapat menghambat perkembangbiakan  koloni  bakteri  dengan menurunkan efisiensi penggunaan glukosa, sehingga mempengaruhi proliferasi, mengganggu  aktivitas  kerja  enzim  dalam metabolisme  fisiologis  serta  menekan produksi  protein  pada  bakteri,  sehingga dapat  menyebabkan  kematian  sel  (Zhi-hui dkk., 2013).

## SIMPULAN
Ekstrak  kulit  buah  kawista  efektif untuk  menghambat    pertumbuhan  bakteri Salmonella sp., ekstrak kulit buah Kawista pada  konsentrasi  100%  paling  efektif untuk  menghambat  pertumbuhan  bakteri Salmonella  sp serta  menunjukkan  hasil tidak berbeda signifikan dengan antibiotik tetrasiklin.
.

## DAFTAR PUSTAKA
Brooks  GF.  et  al. Medical  Microbiology Textbook . Jakarta: Salemba Medika. 2005. 364-370 Cowan,  M.M.  1999.  Plant  Product  as Antimicrobial Agents. J . Microbiology  Reviews .  12(4):564-
582.
Dyozem,  J.  P.,  Hamamoto,  H.,  Ngameni,
B.,  Ngadjui,  B.  T.,  dan  Sekimizu,
K.  2013.  Antimicrobial  Action
Mechanism  of  Flavonoids  from Dorstenia species. Drug Discoveries  &  Therapeutics, 7(2): 66-72.
Harborne,  J.  B.  1987.  Metode  Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Institut Teknologi Bandung (Diterjemahkan oleh Kosasih  Padmawinata  dan  Iwang Soediro) Manik, D.F., Hertiani, T., dan Anshory, H. 2014.  Analisis  kolerasi  antara  kadar flavanoid dengan aktivitas antibakteri  ekstrak etanol  dan fraksi- fraksi daun kersen ( Muntingia calaburam L.) terhadap Staphylococcus  aurues . Khazanah , 6(2):1-11.
Mariajancyrani,  J.,  Chandramohan,  G.,
Saravanan, dan Elayaraja, A. 2013.
Isolation  and Antibacterial Activity of  Terpenoid  from Bougainvillea glabra Choicy Leaves. Asian Journal  of  Plant  Science  and Research, 3(3):70-73.
Mawan,  A.  R.,  Indriwati,  S.  E.,  & Suhadi.(2018). Aktivitas antibakteri ekstrak  metanol  buah Syzygium polyanthum terhadap  pertumbuhan bakteri Escherchia coli . Bioeksperimen, 4(1), 64-68. Mukhriani,  Nurlina,  Baso  FF.  2014.  Uji aktivitas antimikroba dan
identifikasi  ekstrak  buah  sawo manila ( Achras zapota L .) terhadap beberapa  mikroba  patogen  dengan metode  difusi agar. JF  FIK UINAM . 2(2):69-74.
Panda  N,  Patro  VJ,  Jena  BK,  Panda  PK. 2013.  Evaluation  of  phytochemical
and anti-microbial activity of Limonia acidissima L. Int J Herbal Med . 2013; 1(1):22-27.
Pfoze,  N.  L.,  Kumar,  Y.,  Myrboh,  B.,
Bhagobaty,  R.  K.,  dan  Joshi,  S.  R. 2011. In vitro Antibacterial Activity  of  Alkaloid  Extract  from Stem Bark of Mahonia
manipurensis Takeda. Journal  of Medicinal  Plants  Research, 5(5): 859-861.
Pui CF. Salmonella: A foodborne pathogen. International Food Research  Journal .  2011.  18:  465-
470
Radar  Bromo.  2018.  Artikel  : Hasil  laut melimpah  dijadikan  kerupuk  ikan desa  pasinan .  Sabtu  8  september 2018
Ravi,  L.,  Manasvi,  V.,  dan  Praveena,  L.B. 2016. Antibacterial  and  antioxidant activity  of  saponin  from Abutilon indicum leaves. Asian J Pharm Clin Res , 9:344-347.
Rini, dkk., 2017. Phytochemical Screening and  Antibacterial  Test  of  Ethanolic Extract of Kawista (Limonia Acidissima  L.)  From  Aceh  Besar Against  Escherichia  Coli. Jurnal Ilmiah    Fakultas  Keguruan  dan Ilmu Pendidikan Unsyiah . 2(1), 12 . Schmeller, T., Latz-Brüning, B., dan Wink,
M. 1997. Biochemical Activities of Berberine, Palmatine and
Sanguinarine  Mediating  Chemical Defence  Against  Microorganisms and  Herbivores. Phytochemistry . 44(2): 257-266.
Sukamto,  L.  A.  2000.  Kultur  Biji  Kupas dan  Tanpa  Kupas  Kawista  Secara in Vitro. Dalam: Prosiding Seminar Nasional III. Universitas Lampung. Bandar Lampung. 160-163.
Sulastrianah., Imran, dan Fitria, E.S. 2014.
Uji  daya  hambat  ekstrak  daun sirsak  ( Annona  muricata L)  dan daun  sirih  ( Piper  betle L)  terhadap pertumbuhan  bakteri Escherichia coli. Jurnal UHO, 1(1):76-84.
Susanti,  N.  2016.  Aktivitas  antimikroba ekstrak  rimpang  jeringau  terhadap
pertumbuhan Candida  albicans . Jurnal Biodjati , 1(1):55-58.
Taufiq,  S.,  Umi,  Y.  dan  Siti,  H.  2015.  Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak
Etanol  Biji  Buah  Pepaya  ( Carica papaya L.) terhadap Eschericia coli dan Salmonella  typhi . Prosiding Penelitian  Spesia  Unisba .  ISSN
2460-6472. Wibowo,  Muliana,  dan  Prabowo.  2010. Analisis Residu Antibiotik Kloramfenikol  Dalam  Daging  Ikan Gurami (Osphronemus  gouramy, Lac) Menggunakan  Metode  High Performance Liquid Chromatography .  Jurnal  Ilmiah Farmasi Volume 7 Nomor 1 Tahun 2010
Yuliana,  S.R.I.,  Leman,  M.A.,  dan Anindita,  P.S.  2015.  Uji  daya hambat  senyawa  saponin  batang pisang ( Musa paradisiacal) terhadap  pertumbuhan Candida albicans . Jurnal e-GiGi , 3(2):2. Zhi-hui,  Y.,  Xue-zhi,  D.,  Li-qiu,  X.,  Xiu- quing, X., Sha, X., Shuang, L., dan Xue-mei,  L.  2013.  Antimicrobial Activity  and  Mechanism  of  Total Saponins  from  Allium  chinense. Food Science , 34(15): 75-80.