UJI EFEKTIVITAS EKSTRAK BUAH PINANG YAKI ( Areca vestiaria ) TERHADAP PENURUNAN KADAR GULA DARAH TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR ( Rattus norvegicus ) YANG DI INDUKSI

## ALOKSAN
Raynaldo M. Ludong 1) , Edwin de Queljoe 2) , Herny E. I. Simbala 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115
2) Jurusan Biologi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
The  result  of  phytochemical  analysis  showed  that  Pinang  Yaki  extracts  contains  tannins,  flavonoids  and triterpenoid. One of the compounds thought to have antidiabetic activity is flavonoids. Flavonoids are generally thought to regenerate pancreatic beta cell damage due to aloxan induction and can reduce blood glucose levels by stimulating pancreatic beta cell to produce insulin. This study aims to determine the effectiveness of areca nut extract  to  reduce  blood  sugar  levels  of  male  white  wistar  rats  which  are  induced  by  aloxan.  This  Type  of research  is  laboratory  experiments  using  Complete  Random  Design  (CRD).  Twelve  rats  were  divided  into  4 treatment groups with each group consisting of 3 rats. The first group was the negative control group (K-) only given  aquades,  the  second  Group  was  positive  control  (K+)  given  metformin,  group  three  was  the  sample treatment  group  (PS1)  with  an extract  dose  of  400 mg,  and the  sample  treatment group  (PS2)  with  an  extract dose of 800 mg. Previously rats were examined the fasting blood sugar, then induced aloxan monohydrate dose of 150 mg/kgBW intraperitoneally, and blood sugar levels were examined once in every two days for 7 days. On the 8 th day extract was given and blood sugar levels were examined every two days until the 14 th day. The result showed  that  extract  of  Pinang  Yaki  fruit  at  a  dosage  of  400  mg    and  800  mg  had  activities  to  reduce  blood sugar levels on the 8 th to 14 th day with a decrease of 38 mg/dL for the PS1 treatment groups and 29 mg/dL for the PS2 sample treatment group.
Keywords : Areca vestiaria, Rattus Norvegicus, Blood Sugar Levels, Flavonoids

## ABSTRAK
Hasil analisis Fitokimia menunjukkan bahwa ekstrak buah Pinang yaki (Areca vestiaria) mengandung senyawa tanin, flavonoid dan triterpenoid. Salah satu senyawa yang diduga memiliki aktivitas sebagai antidiabetes adalah flavonoid.  Flavonoid  secara  umum  diduga  dapat  meregenerasi  kerusakan  sel  beta  pankreas  akibat  induksi aloksan dan dapat menurunkan kadar glukosa darah dengan merangsang sel beta pankreas untuk memproduksi insulin. Penelitian ini bertujuan mengetahui efektivitas ekstrak buah Pinang Yaki terhadap Penurunan kadar gula darah tikus putih jantan galur wistar yang dinduksi aloksan. Jenis penelitian ini ialah eksperimen laboratorium. Menggunakan  Rancangan Acak  Lengkap  (RAL).  Dua  belas  ekor tikus  di  bagi  kedalam  4  kelompok  perlakuan dengan  masing-masing  kelompok  terdiri  dari  3  ekor  tikus.  Kelompok  Pertama  merupakan  kelompok  Kontrol negative (K-) dengan hanya di berikan aquades, kelompok kedua merupakan kontrol positif (K+) yang diberikan metformin,  Kelompok  tiga  merupakan  kelompok  Perlakuan  sampel  (PS1)  dengan  dosis  ekstrak  400  mg,  dan kelompok perlakuan sampel (PS2) dengan dosis ekstrak 800 mg. Sebelumnya tikus dilakukan pemeriksan gula darah puasa, selanjutnya diinduksi aloksan monohidrat dosis 150 mg/kgBB secara intraperitoneal, dan dilakukan pemeriksaan  kadar  gula  darah  dua  hari  sekali  selama  7  hari.  Pada  hari  ke-8  dilakukan  pemberian  ekstrak  dan dilakukan pemeriksaan kadar gula darah setiap dua hari sekali sampai hari ke-14. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak buah pinang yaki dosis 400 mg dan 800 mg memiliki aktivitas menurunkan kadar gula darah pada hari ke-8 sampai hari ke-14 dengan penurunan sebesar 38 mg/dL untuk kelompok perlakuan sampel PS1 dan 29 mg/dL untuk kelompok perlakuan sampel PS2.
Kata kunci : Areca vestiaria , Rattus norvegicus , Kadar Gula Darah, Flavonoid

## PENDAHULUAN
Kesehatan merupakan keadaan sejahtera dari  badan,  jiwa,  raga  dan  sosial  yang memungkinkan  setiap  orang  hidup  produktif secara  sosial  dan  ekonomi.    Saat  ini  tingkat kesehatan  menghadapi  tantangan  yang  sangat berat,  hal  ini  disebabkan  oleh  tingkat  biaya kesehatan  yang  cenderung  meningkat,  seperti harga  obat-obatan  dan  biaya  rumah  sakit  yang semakin  memperburuk  kualitas  hidup  dan kesehatan masyarakat. Salah satu penyakit yang tergolong  sangat  sulit  untuk  disembuhkan  dan dibutuhkan  penanganan  secara  serius  melalui pengobatan  yaitu  penyakit  diabetes  mellitus (Sahputra, 2008).
Kerusakan  pada  sel-sel  beta  penghasil insulin  menyebabkan  produksi  atau  sekresi isulin mengalami penurunan. Keadaan ini dapat menyebabkan  kondisi  hiperglikemia  yang mengakibatkan  terjadinya  penyakit  diabetes. Oleh  karena  itu,  perlu  dicari  suatu  obat alternatif  yang  mengandung  bahan  aktif  yang berfungsi sebagai penurun kadar glukosa darah dan  dapat  mempercepat  regenerasi  sel  beta. Akhir-akhir  ini,  komponen  bahan  aktif  dari beberapa tanaman obat, dan bahan pangan telah dilaporkan  mempunyai  aktivitas  biologis  yang berguna  untuk  pengobatan  penyakit  diabetes secara  empiris.  Efek  hipoglikemik  komponen bioaktif  pada  tanaman  tersebut  berkontribusi dalam mengembalikan fungsi sel beta pankreas sehingga  menyebabkan  peningkatan  sekresi insulin. Dilaporkan pula, kebanyakan tumbuhan yang mengandung flavonoid, glikosida, alkaloid,  terpenoid,  dan  keratenoid  mempunyai efek  sebagai  antidiabetes  (Widyastuti  and Suarsana, 2011).
Pinang yaki ( Areca vestiaria )
merupakan  salah  satu  tumbuhan  yang  tumbuh di  daerah  Sulawesi  Utara  tepatnya  di  lereng
gunung Soputan dan gunung Mahawu kabupaten  Minahasa  (Simbala,  2007).  Menurut Simbala  (2006),  pinang  yaki  yang  merupakan sejenis palem liar, ternyata merupakan tanaman multi  fungsi.  Masyarakat  Sulawesi  Utara biasanya menggunakan secara empiris tanaman ini  untuk  menyembuhkan  berbagai  macam penyakit  seperti  salah  satunya  ialah  penyakit Diabetes Melitus (DM).

## METODOLOGI PENELITIAN Alat
Alat  yang  digunakan  :  Ayakan  100 mesh, oven, Glukometer Autochek,strip glukosa,  gunting,  sonde  oral,  disposible  1ml (One  Med),  batang  pengaduk,  timbangan analitik,  sonifikator,  gelas  ukur  ( Pyrex ),  beker gelas ( Pyrex ), toples kaca,  kertas saring, sarung tangan  lateks,  masker  (SENSI Mask ),  botol sampel,  gunting,  blender,  cawan  petri  ( Pyrex ), pipet tetes, kandang, tempat makan dan tempat minum tikus.

## Bahan
Bahan  yang  digunakan:  Tikus  putih jantan galur wistar ( Rattus novergicus ) 12 ekor, ekstrak  Buah  Pinang  Yaki (Areca  vestiaria), aquades,  etanol  96  %,  Kloroform,  Aloksan, Metformin,  pangan  tikus  putih  jantan  galur wistar ( Rattus novergicus ) berupa pellet.

## Jenis dan rancangan penelitian
Jenis  penelitian  ini  ialah  eksperimen laboratorium.  Menggunakan  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL).  Hewan  uji  dikelompokan dalam 4 kelompok masing-masing terdiri dari 3 ekor  hewan  uji  yaitu  tikus  putih  jantan  galur wistar  dengan  berat  rata-rata  200  gram. Kelompok 1 tidak diberi perlakuan dan sebagai kontrol  negatif.  Kelompok  2  dan  3  diberi perlakuan  dengan  dosis  yang  berbeda-beda yaitu  400  mg  dan  800  mg.  Sementara  itu
kelompok  4  diberi  perlakuan  dengan  dosis metformin  500  mg.  Pemberian  dosis  terlebih dahulu  dikonversikan  dengan  menggunakan faktor  konversi  untuk  Manusia  70  kg  BB  ke Tikus  200  g  BB  dengan  dikalikan  0,018. Sehingga pembagian perlakuan sebagai berikut:
a. Kelompok  I  :  Tikus  putih  tidak  diberikan perlakuan (Kontrol).
b. Kelompok II : Tikus putih dengan DM diberi dosis  I  (400  mg  dikonversikan  dalam  dosis tikus  menjadi  7,2  mg/mL)  ekstrak  buah pinang  yaki  sebanyak  2  mL  setiap  2  hari sekali, selama 7 hari.
c. Kelompok  III:  Tikus  putih  dengan  DM diberi dosis II (800 mg dikonversikan dalam dosis  tikus  menjadi  14,4  mg/mL)  ekstrak buah pinang  yaki  sebanyak 2 mL setiap  dua hari sekali, selama 7 hari.
d. Kelompok  IV:  Tikus  Putih  dengan  DM diberi  metformin  (500  mg  dikonversikan  ke dosis  tikus  menjadi  9  mg/mL),  sebanyak  2 mL setiap dua hari sekali, selama 7 hari.

## Populasi dan sampel
Sampel  yang  digunakan  yaitu  tikus putih  jantan  galur  wistar  ( Rattus  norvegicus ) yang berusia 2 - 3 bulan dengan bobot rata-rata 150-200 gram.

## Prosedur Kerja Penyiapan hewan uji
Hewan  uji  diadaptasi  selama  kurang lebih  1  minggu  sebelum  perlakuan,  dilakukan adaptasi  (Animal  house)  pada  hari  pertama sampai  hari  ketujuh.  Hewan  uji  diadaptasikan dengan  tempat  tinggal  barunya,  dengan pemberian  makanan  dan  minuman.  Perlakuan ini  disamakan  pada  semua  tikus.  Adaptasi cukup  dilakukan  selama  7  hari.  Adaptasi  ini bertujuan untuk  semua objek penelitian supaya
hewan uji dalam kondisi tidak stress dan dalam keadaan yang sama saat dimulai penelitian.

## Pengambilan sampel
Tahap awal dilakukan dengan pengumpulan  bahan  baku  buah  Pinang  Yaki yang  diambil  di  Lereng  Gunung  Mahawu, Tomohon.  Buah  Pinang  Yaki  dibersihkan, dilepaskan dari tangkainya dan ditimbang berat basahnya.  Buah  Pinang  Yaki  yang  telah dibersihkan  dan  di  pisahkan  dari  tangkainya diangin-anginkan  didalam  ruangan  selama kurang  lebih  5  hari.  Buah  yang  telah  kering diblender  sampai  menjadi  halus  dan  diayak menggunakan ayakan mesh 100.

## Pembuatan ekstrak buah Pinang Yaki
Pinang  Yaki  yang  telah  menjadi  serbuk simplisia  ditimbang  sebanyak  500  gram  dan dimasukan  dalam  toples  kaca  kemudian diekstraksi  menggunakan  metode  maserasi dengan  cara  serbuk  simplisia  direndam  dalam pelarut  etanol  96%  sebanyak  2500  mL, dibiarkan  selama  5  hari  pada  suhu  kamar  dan ditutup rapat. Kemudian disaring menggunakan kertas  saring.  Residu  yang  diperoleh  dilakukan remaserasi  selama  2  hari.  Filtrat  yang  peroleh dipekatkan  dengan  cara  dievaporasi  pada  suhu 40 o C  sampai  diperoleh  ekstrak  kental.  Ekstrak kental serbuk simplisia buah Pinang Yaki  yang di peroleh sebanyak 50,23 gram.

## Pembuatan larutan uji
Pembuatan  larutan  uji  diawali  dengan menimbang  ekstrak  kental  Buah  Pinang  Yaki (Areca vestiaria) sesuai dengan masing-masing dosis  (7.2  mg/mL;  14.4  mg/mL),  kemudian masing-masing  ekstrak  yang  telah  ditimbang dimasukan  dalam    labu  ukur  10  mL  dan ditambahkan larutan aquadest hingga tanda tera
dan  disonifikasi  sampai  homogen  selama  30 menit.  Setelah  homogen,  masing-masing  dosis ekstrak di masukkan ke dalam botol sampel dan diberi  label.  PS1  untuk  ekstrak  buah  pinang yaki  dengan  dosis  7.2  mg/mL  dan  PS2  untuk ekstrak  buah  pinang  yaki  dengan  dosis  14.4 mg/mL.

## Pembuatan larutan aloksan
Serbuk  aloksan  monohidrat  dilarutkan dengan  menggunakan  aquades.  Dosis  induksi aloksan  untuk  tikus  ialah  150  mg/kgBB  untuk pemberian  secara  intraperitoneal,  BB  tikus  = 200  g,  maka  jumlah  aloksan  yang  diberikan ialah 30 mg.

## Pembuatan larutan metformin
Berdasarkan  tabel  konversi  perhitungan dosis  untuk  berbagai  jenis  hewan  uji  dari berbagai  spesies  dan  manusia,  maka  konversi dosis  manusia  dengan  berat  badan  70  kg  pada tikus  dengan  berat  badan  200  g  ialah  0,018 (Ngatidjan,  1991).  Dosis  metformin  yang dipakai untuk orang dewasa iaalah 500 mg, jadi dosis untuk tikus  200gr = 500mg x 0,018/tikus = 9 mg (Ngatidjan, 1991).

## Pemberian perlakuan Pemberian larutan aloksan
Tikus  dibuat  menjadi  diabetes  dengan menginjeksikan larutan aloksan melalui interperitonial.  Aloksan  diberikan  pada  hari pertama  setelah  peeriksaan  Gula  Darah  Awal. Dengan  sekali  pemberian  aloksan  sebanyak  2 mL  pada  hari  pertama.  Proses  penyimpanan sampai  proses  penyuntikan  aloksan  dilakukan pada  suhu  dingin  supaya  aloksan  tidak  rusak (Sujono dan Munawaroh, 2009).

## Pemberian ekstrak buah pinang yaki
Pemberian  perlakuan  untuk  penelitian ini  masing-masing  konsentrasi  menggunakan  3
Tikus  untuk  tiap  kelompok  hewan  uji.  Ekstrak buah  pinang  yaki  diberikan  sesuai  dosis perlakuan  yaitu  2  mL  pada  setiap  tikus  untuk masing-masing konsentrasi secara oral menggunakan  alat  penyekok  oral  (Sonde) dengan dispo dua hari sekali selama 7 hari dari hari ke delapan sampai hari ke empat belas.

## Pemberian larutan metformin
Pemberian  perlakuan  untuk  kelompok pembanding dengan 3 ekor tikus sebagai hewan uji.  Larutan  Metformin  diberikan  sesuai  dosis yaitu 2 mL, perlakuan secara oral menggunakan alat  penyekok  oral  (Sonde)  dengan  dispo  dua hari  sekali untuk  satu  ekor tikus selama 7 hari, dari hari ke delapan sampai hari ke empat belas.

## Pemeriksaan gula darah
Sebelum  dilakukan  pengambilan  darah, bagian  ekor  tikus  dibersihkan  terlebih  dahulu dengan menggunakan alkohol 70%. Selanjutnya  darah  diambil  pada  bagian  ekor menggunakan  autoklik  sehingga  keluar  darah dan  diukur  kadar  gula  darah  dengan  alat glukometer autocheck. Caranya dengan meneteskan  darah  tikus  yang  berasal  dari  ekor tikus  yang  diteteskan  pada  strip  glukosa  yang telah  dimasukkan  kedalam  glukometer,  setelah darah diteteskan pada strip, kemudian ditunggu selama  10  detik  untuk  hasil  dari  pembacaan kosentrasi  glukosa  darah  pada  glukometer. Hasil  yang  tertera  pada  glukometer  merupakan hasil  dari  nilai  kosentrasi  glukosa  darah  dalam satuan mg/dL.

## Analisis data
Hasil  percobaan  yang  dianalisis  untuk melihat  adanya  perubahan  yang  nyata  tehadap kadar gula darah dari masing-masing kelompok tikus  perlakuan.  Analisis  data  yang  diperoleh diolah  dengan  menggunakan  program  SPSS
yang  meliputi,  uji  statistik  menggunakan Kruskal Wallis Test.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan  metode  ekstraksi.    Prinsip  dari ekstraksi  sendiri  ialah  penarikan  senyawa- senyawa  dalam  tanaman  oleh  pelarut  yang sesuai,  baik  dari  segi  keamanan  maupun kepolarannya.  Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi  simplisia  buah  pinang  yaki (Areca vestiaria) dengan  menggunakan  pelarut  etanol 96%.
Ekstrak  etanol  adalah  sediaan  yang paling  umum  digunakan  pada  penelitian  awal mengenai aktivitas farmakologis suatu tanaman.  Hal  ini  dikarenakan  pada  penelitian awal  seperti  ini,  masih  belum  diketahui
senyawa  mana  yang  bertanggung  jawab  atas efek farmakologis dari tanaman, oleh karena itu perlu  digunakan  pelarut  universal  yang  dapat melarutkan  metabolit  sekunder  dari  berbagai tingkat  polaritas,  seperti  etanol  yang  bersifat semi polar (Yasmiwar et al., 2016).
Hewan  uji  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  ialah  tikus  putih  jantan  galur wistar  yang  memenuhi  syarat  untuk  digunakan dalam penelitian. Adapun hasil penelitian  yang di  dapatkan  dari  penelitian  ini  pada  hari pertama  saat  pemeriksaan  gula  darah  puasa (T0),  pada  saat  pemberian  aloksan  dari  hari pertama  sampai  hari  ke  tujuh  dan  pemberian ekstrak  buah  pinang  yaki  dan  juga  metformin dari hari ke delapan sampai hari ke empat belas, dapat di lihat pada tabel berikut.
Tabel 1. Rata-rata Kadar Gula Darah Tikus Selama Perlakuan (mg/dL)
Perlakuan Waktu T0 T1 T3 T5 T7 T8 T10 T12 T14 K- 93.67 93.67 79.67 112.33 69.00 93.33 96.33 105.67 74.33 PS1 95.67 120.00 117.00 144,67 123.33 90.33 101.00 113.00 85.33 PS2 111.33 123.33 97.67 124.67 137.33 95.33 92.33 116.00 108.33 K+ 64.33 87.33 117.33 169.33 156.33 115.00 56.33 75.00 101.67
Keterangan :
T0         :Rata-rata kadar gula darah puasa tikus. T1-T14 :Waktu Pemberian Perlakuan dari Hari Pertama sampai hari ke Empat belas.
K-          :Kelompok Kontrol Negatif dengan Pemberian aquades dari T1-T14.
PS1        :Kelompok  Perlakuan  Sampel  ekstrak buah  pinang  yaki  dosis  400mg  (7,2 mg/mL),  dengan  pemberian  aloksan dari  T1-T7,  dan  Pemberian  ekstrak dari T8-T14.
PS2      :Kelompok  Perlakuan  Sampel  ekstrak buah  pinang  yaki  dosis  800mg  (14,4 mg/mL),  dengan  pemberian  aloksan
dari  T1-T7,  dan  Pemberian  ekstrak dari T8-T14.
K+    :Kelompok  Kontrol  Positif,  dengan pemberian  aloksan  dari  T1-T7,  dan Pemberian  larutan  metformin  500mg dari T8-T14.
Sebelum  dilakukan  pengujian,  semua tikus  dipuasakan  selama  8  jam  dengan  tidak diberikan  makanan  agar  tidak  mempengaruhi absorbsi obat dalam tubuh. Setelah dipuasakan, semua  tikus  diperiksa  kadar  gula  darah  puasa (T0) dan diperoleh data kadar gula darah puasa
tikus berada pada keadaan normal dengan rata- rata  64,33-111,33  mg/dL.  Kusumawati  (2004), menyatakan  bahwa  kadar  gula  darah  puasa normal pada tikus dalam rentang antara 50-135 mg/dL.
Kelompok  kontrol  negatif  yang  hanya diberikan  aquades  tanpa  diberikan  perlakuan apapun,  baik  pemberian  aloksan  maupun ekstrak.  Rata-rata  kadar  gula  darah  kelompok kontrol  negatif  dapat  dilihat  pada  tabel  di  atas. Hasil pengukuran kadar gula darah dibandingkan  dengan  kelompok  perlakuan lainnya,  kadar  gula  darah  kelompok  negatif tidak  mengalami  kenaikan  yang tinggi  maupun penurunan  yang  signifikan  dari  waktu  T0 sampai  pada  waktu  T14,  dengan  kata  lain kontrol negatif memiliki kadar gula darah yang normal.  Penggunaan  aquades  pada  kelompok kontrol  negatif  hanya  sebagai  pembanding untuk  melihat  peningkatan  maupun  penurunan kadar  gula  darah  dengan  perlakuan  kelompok positif  maupun  kelompok  sampel  ekstrak  buah pinang yaki.
Pembuatan diabetes pada tikus dilakukan  dengan  menginduksi  larutan  aloksan 150 mg/kgBB secara intraperitonial  pada tikus wistar (Sujono dan Munawaroh, 2009). Larutan aloksan  dibuat  dengan  cara  melarutkan  serbuk aloksan  monohidrat  menggunakan  aquabidest steril  of  injection.  Hal  ini  disebabkan  aloksan merupakan  salah  satu  agen  diabetogenik  yang bersifat  toksik,  terutama  terhadap  sel  beta pankreas  yang apabila diberikan kepada hewan uji  seperti  tikus  maka  akan  menyebabkan hewan  uji  menjadi  diabetes.  Aloksan  bereaksi dengan merusak substansi esensial di dalam sel beta pankreas sehingga menyebabkan berkurangnya granula-granula pembawa insulin di dalam sel beta pankreas (Manurung, 2012).
Kondisi  hiperglikemia  pada  hewan  uji dicapai  dengan  cara  semua  tikus  diinduksi
larutan  aloksan  dengan  dosis  150  mg/kgBB. Pada  hari  pertama  (T1)  setelah  diinduksi dengan aloksan, dan dilakukan pemeriksaan 1.5 jam  kemudian,  hasil  rata-rata  kadar  gula  darah dari  kelompok  perlakuan  tikus  kelompok kontrol  positif,  PS1,  dan  PS2  semuanya mengalami kenaikan  antara  87.33-123.33 mg/dL.    Begitu  pula  kadar  gula  darah  Tikus pada  T3,  T5,  dan  T7  rata-rata  pengalami kenaikan.  Kenaikan  kadar  gula  darah  paling besar  terjadi  pada  T5  meskipun  ada  beberapa tikus yang mengalami penurunan, namun secara rata-rata semua kelompok pengujian mengalami peningkatan  kadar  gula  darah.  Hal  ini menunjukan  telah  terjadi  penyerapan  glukosa oleh tubuh tikus dikarenakan pengaruh fisiologis tubuh tikus itu sendiri, sehingga telah tercapai  kondisi  peningkatan  kadar  gula  darah pada  kelompok  perlakuan  tikus  tersebut. Kemampuan  dari  aloksan  yaitu  menimbulkan diabetes  juga  tergantung  pada  dosis  senyawa, jalur  penginduksian,  hewan  percobaan  dan status  gizinya  (Amma,  2009),  hal  ini  yang menyebabkan  kenaikan  gula  darah  pada  tikus berfariasi  dan  kadang  mengalami  penurunan dengan sendirinya.
Kelompok kontrol positif yang diberikan  suspensi  Metformin  500  mg  (9 mg/mL)  menunjukkan  hasil  pengukuran  kadar gula darah pada T8 telah mengalami penurunan, begitu pula pada T10 dan T12 telah terjadi  penurunan  yang  signifikan.  Akan  tetapi pada  T14  terjadi  peningkatan  kadar  gula  darah dari  kelompok  kontrol  positif  yaitu  sebesar 26.67 mg/dL.  Hal ini dapat di karenakan tikus pada  kontrol  positif  mengalami  stress  akibat faktor  lingkungan  maupun  kondisi  kesehatan yang  mengakibatkan  terjadinya  peningkatan kadar gula darah tikus.
Hasil pengukuran kadar gula darah pada kelompok  perlakuan  sampel  satu  (PS1)  yang
diberikan  ekstrak  buah  pinang  yaki  dengan dosis  400  mg  (7.2  mg/mL),  menunjukkan penurunan  kadar  gula  darah  pada  T8,  yang sebelumnya  kadar  gula  darah  tikus  sebesar 123.33  mg/dL  pada  T7,  menjadi  90.33  mg/dL pada  T8,  akan  tetapi  mengalami  kenaikan kembali  kadar  gula  darah  pada  T10    dan  T12, namun  terjadi penurunan kadar  gula darah dari T12  ke  T14  sebesar  27.67  mg/dL.  Dengan demikian  dapat  dikatakan  bahwa  ekstrak  buah pinang yaki dengan dosis 400 mg (7.2 mg/mL) dapat memberikan efek menurunkan kadar gula darah tikus pada T14.
Pada  kelompok  perlakuan  sampel  dua (PS2)    yang  diberikan  ekstrak  buah  pinang dengan dosis 800 mg (14.4 mg/mL), menunjukkan  hasil  terjadi  penurunan  kadar gula darah pada waktu T8 sampai T10, dimana kadar gula darah  tikus pada T7 sebesar 137.33 mg/dL menjadi 95.33 mg/dL pada T8 dan 92.33 mg/dL pada T10. Akan tetapi terjadi peningkatan kadar gula darah pada T12 menjadi 116.00 mg/dL . Sama halnya dengan kelompok PS1,  pada  kelompok  PS2  juga  terjadi penurunan  pada  T14  sebesar  7.67  mg/dL. Dengan  demikian,    ekstrak  buah  pinang  yaki dengan  dosis  800  mg  (14.4  mg/mL),  dapat memberikan efek menurunkan kadar gula darah pada  tikus  pada  T14  meskipun  tidak  terlalu besar.
Rata-rata  peningkatan  dan  penurunan kadar gula darah pada kelompok perlakuan baik kontrol  negatif  yang  hanya  diberikan  aquades, kontrol  positif  yang  diberi  metformin,  maupun perlakuan  sampel  PS1  dan  PS2  yang  diberi ekstrak  buah  pinang  yaki,  dapat  dilihat  pada saat  gula  darah  puasa  T0,  setelah  pemberian aloksan T7 dan setelah pemberian ekstrak buah pinang  yaki  dan  metformin  T14,  dapat  dilihat dari tabel 2.
Tabel 2 . Rata-rata Kadar Gula Darah Tikus saat Puasa,  Pemberian  Aquades,  Setelah diberikan  aloksan,  dan  setelah  di berikan ekstrak Buah Pinang Yaki dan Metformin.
Kelompok Rata-rata Kadar Gula Darah Tikus (mg/dL) T0 T7 T14 K- 93.67 69.00 74.33 PS1 95.67 123.33 85.33 PS2 111.33 137.33 108.33 K+ 64.33 156.33 101.67
Berdasarkan  data  tersebut  kelompok kontrol  negatif  yang  hanya  diberikan  aquades memiliki  kadar  gula  darah  yang  normal  serta tidak  memiliki  peningkatan  dan  penurunan kadar  gula  darah  yang  signifikan.  Kadar  gula darah  dari  kelompok  kontrol  negatif  antara 69.00 mg/dL-93.67 mg/dL. Sementara itu untuk kelompok kontrol positif sendri  yang diberikan aloksan  dan  metformin  memilik  peningkatan kadar gula darah yang cukup signifikan setelah pemberian  aloksan  dari  gula  darah  puasa  T0 64.33  mg/dL,  menjadi  156.33  mg/dL  pada  T7, dan  mengalami  penurunan  kadar  gula  darah yang  signifikan  setelah  pemberian  metformin pada T14 menjadi 101.67 mg/dL.
Untuk  kelompok  perlakuan  sampel  PS1 mengalami  peningkatan  kadar  gula  darah setelah pemberian aloksan yaitu dari T0 sebesar 95.67  mg/dL  menjadi  123.33  mg/dL  pada T7,dan mengalami penurunan kadar gula darah setelah  pemberian  ekstrak  buah  pinang  yaki dosis  400  mg  menjadi  85.33  mg/dL  pada  T14. Untuk  kelompok  perlakuan  sampel  PS2 mengalami  peningkatan  kadar  gula  darah setelah pemberian aloksan yaitu dari T0 sebesar 111.33 mg/dL menjadi 137.33 mg/dL pada T7, dan  mengalami  penurunan  kadar  gula  darah setelah  pemberian  ekstrak  buah  pinang  yaki dosis 800 mg menjadi 108.33 mg/dL pada T14. Untuk lebih jelasnya mengenai peningkatan dan
penurunan  kadar  gula  darah  tikus  dapat  dilihat dari grafik dibawah ini.
Gambar 1 . Rata-rata peningkatan dan penurunan  kadar  gulah  darah  pada tikus
Pada  grafik  di  atas  terlihat  peningkatan dan  penurunan  kadar  gula  darah  tikus  yang tajam setelah pemberian aloksan dan perlakuan sampel  pada  kelompok  kontrol  negatif,  diikuti kelompok  PS1,  PS2  dan  kelompok  kontrol positif.  Kelompok  kontrol  negatif  yang  hanya diberi aquadest juga mengalami penurunan dan peningkatan kadar gula darah yang lebih stabil. Sementara  itu  untuk  kelompok  perlakuan  PS1, PS2  dan  kontrol  negatif  memiliki  peningkatan dan  penurunan  kadar  gula  darah  yang  cukup signifikan.  Untuk  mengetahui  ada  tidaknya penurunan  kadar  gula  darah  kelompok  tikus yang  di  beri  perlakuan  (PS1,PS2,  K+)  maka dilakukan perhitungan ∆GD yang dihitung dari kadar  gula  darah  setelah  induksi  aloksan  (T7) dikurangi  dengan  kadar  gula  darah  setelah pemberian  perlakuan  (T14).  Penurunan  kadar gula  darah  tersebut  kemudian  dibuat  rata- ratanya dan digolongkan berdasarkan kelompok perlakuan.  Penurunan  rata-rata  yang  didapat dari ketiga perlakuan adalah sebagai berikut:
Tabel 3 . Rata-rata Penurunan Kadar Gula Darah Tikus setelah diberi Ekstrak Buah Pinang Yaki dan Metformin Kelompok Rata-rata Penurunan Kadar Gula Darah Tikus (mg/dL) PS1 38.00 PS2 29.00 K+ 54.67
Berdasarkan table di atas maka dapat di katakan  bahwa  kelompok  kontrol  positif  yang diberikan metformin memiliki penurunan kadar gula  darah  paling  besar  di  bandingkan  dengan perlakuan  Pemberian  kedua  sampel  Ekstrak Buah  Pinang  Yaki.  Pemilihan  metformin sebagai pembanding dianggap tepat, selain obat ini  sering  digunakan  juga  karena  mekanisme kerja metformin dalam tubuh yaitu dengan cara memperbaiki  sensitivitas  hepar  dan  jaringan perifer  terhadap  insulin  tanpa  mempengaruhi sekresi  insulin.  Efek  ini  terjadi  karena  adanya aktivasi  kinase  di  sel  (AMP-activated  kinase). Di  samping  itu,  metformin  meningkatkan pemakaian  glukosa  oleh  sel  usus  sehingga menurunkan  glukosa  darah  dan  juga  diduga menghambat  absorbsi  glukosa  di  usus  sesudah asupan makan (Soegondo, 2006).
Selanjutnya  diikuti  dengan  PS1  dengan dosis  400  mg  (7,2  mg/mL)  yang  mengalami penurunan kadar gula darah kedua terbesar dan terakhir  PS2  dengan  dosis  800mg  (14.4 mg/mL).  Hal  ini  menunjukan  bahwa  ekstrak buah  pinang  yaki  dapat  memberikan  efek penurunan  kadar  gula  darah.  Penurunan  kadar gula  darah  yang  di  hasilkan  dari  ekstrak  buah pinang  yaki  tersebut  tidak  lepas  dari  adanya kadungan  senyawa  bioaktif  pada  buah  pinang yaki  yang salah satunya adalah Flavonoid yang merupakan salah satu antioksidan paling baik.
Hasil  analisis  Fitokimia  menunjukkan bahwa  ekstrak  buah  Pinang  yaki (Areca vestiaria) mengandung senyawa tanin,
flavonoid  dan  triterpenoid.  Senyawa-senyawa
0 50 100 150 200 t0 t7 t14 KG D Waktu (Hari) Rata-rata Kadar Gula Darah K- Ps1 Ps2
K+
tersebut  berpotensi  sebagai  agen  pendamping kemoterapi  (Anggraeni,  2017).  Penelitian  yang dilakukan  oleh  Ismail, et  al., (2012)  juga menyatakan  bahwa  total  fenolik  ekstrak  biji buah pinang Yaki adalah 85,9 mg/kg sedangkan antioksidan sebesar 88,2%. Sehingga berdasarkan  penelitian  tersebut  pinang  yaki dapat  digunakan  sebagai  antioksidan  dan  dapat digunakan  sebagai  alternative  terapi  penyakit degeneratif.
Flavonoid  secara  umum  diduga  dapat meregenerasi  kerusakan  sel  beta  pankreas akibat  induksi  aloksan  dan  dapat  menurunkan kadar  glukosa  darah  dengan  merangsang  sel beta  pankreas  untuk  memproduksi  insulin. Selain itu flavonoid juga dapat berperan sebagai antioksidan  dengan  mengikat  radikal  bebas sehingga dapat mengurangi stres oksidatif. Jika stres oksidatif berkurang maka dapat mengurangi  resistensi  terhadap  kerja  insulin dan  dapat  mencegah  perkembangan  disfungsi dan kerusakan sel beta pancreas (Muhtadi et al ., 2012).
Aktivitas antioksidan mampu menangkap  radikal  bebas  penyebab  kerusakan sel  beta  pankreas  dan  menghambat  kerusakan sel beta pankreas, sehingga sel beta yang tersisa masih  tetap  berfungsi.  Antioksidan  tersebut diperkirakan  mampu  melindungi  sejumlah  sel- sel beta yang tetap normal, sehingga memungkinkan  terjadinya  regenerasi  sel-sel beta yang masih ada melalui proses mitosis atau melalui  pembentukan  pulau  baru  dengan  cara proliferasi dan diferensiasi endokrin dari sel-sel ductal dan ductular (Suryani, et al ., 2013).
Untuk  memperoleh  data  yang  lebih spesifik  mengenai  pengaruh  ekstrak  buah pinang  yaki  dan  metformin  maka  dilakukan Pengujian  signifikansi  Ekstrak  Buah  Piang Yaki  dan  Metformin  menggunakan  uji  statistik
dengan  analisis Kruskal-Wallis Test dengan aplikasi SPSS.
Nilai signifikansi atau Sig.> 0.05 (0.584 >  0.05),  maka  H0  diterima  yaitu  tidak  terdapat perbedaan  bermakna  antara  ekstrak  buah pinang  yaki    dengan  metformin.  Hal  ini menunjukan  bahwa  ekstrak  buah  pinang  yaki memiliki  efektifitas  terhadap  penurunan  kadar gula darah tikus, karena dapat memberikan efek penurunan kadar  gula darah  yang hampir sama atau tidak jauh berbeda dengan metformin.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  diatas maka dapat di simpulkan bahwa, Ekstrak Buah Pinang Yaki (Areca vestiaria) dapat memberikan  efek  terhadap  penurunan  kadar gula  darah  tikus  putih  jantan  galur  wistar ( Rattus norvegicus L) yang diinduksi aloksan.

## SARAN
1. Perlu  diadakan  penelitian  lebih  lanjut  untuk menentukan  dosis  efektif  ekstrak  buah pinang  yaki  yang  berpengaruh  dalam menurunkan  kadar  gula  darah,  yaitu  dosis terbawah  dan  teratas  dari  ekstrak  buah pinang yaki (Areca vestiaria).
2. Perlu  pemberian  dosis  aloksan  secara berulang  yang  menyebabkan  kerusakan  sel beta  pankreas  yang  ireversibel  sehingga pengaruh  ekstrak  buah  pinang  yaki (Areca vestiaria) dalam  menurunkan  kadar  gula darah dapat terlihat lebih jelas.

## DAFTAR PUSTAKA
Amma,  R.  2009. Efek  Hipoglikemik  Ekstrak Daun  Murbei  (Morus  Multicaulis) Terhadap  Kadar  Glukosa  Darah  Tikus Dm. [ Tesis ].  Program  Studi  Gizi Masyarakat  Dan  Sumberdaya  Keluarga IPB.
Anggraeni,  D.A.R.,  Widdhi,  B.,  Herni,  S., 2017.  Pengaruh  Ekstrak  Etanol  Buah
Pinang Yaki (Areca vestiaria) Terhadap Gambaran  makroskopis  Organ  Jantung Pada  Tikus  Putih  Jantan  Galur  Wistar (Rattus  norvegicus). Jurnal  Ilmiah Frmasi. Vol. 6 No.  3  Agustus  2017, 2302-2493
Ismail,  J.,  Runtuwene,  M.R.J.,  Fatimah,  F.
2012.  Penentuan  Total  Fenolik  dan  Uji Aktivitas  Antioksidan  pada  Biji  dan Kulit Buah Pinang Yaki (Areca vestiaria Giseke). Jurnal Ilmiah Sains, 12(2) , 84- 88.
Kusumawati,  D.,  2004. Bersahabat  Dengan Hewan  Coba. Gadjah  Mada  University Press. Yogyakarta.
Manurung,  S.  2012.  Efek  Antihiperglikemik dari  Ekstrak  kulit  Buah  Manggis (Garcia  mangostana  L.)  terhadap  Tikus Putih  Jantan  Galur  Wistar  (Rattus norvegicus L.)  yang Diinduksi Sukrosa. Pharmacon .  Jurnal  Ilmiah .  Farmasi- UNSRAT  Vol. 1 No.02.  ISSN  2302  – 2493, Hal. 58-67
Muhtadi.,  Eni  Setyowati.,  Tanti  Azizah,  2012. Aktivitas  Antidiabetes  Melitus  Ekstrak
Kulit Buah Jeruk Manis (Citrus sinensis)  dan  Kulit  Buah  Kelengkeng (Euphoria longan (Lour.)Steud)
Terhadap  Tikus  Putih  Jantan  Galur Wistar  yang  Diindukdi  Aloksan. Jurnal Penelitian  Sains  &  Teknologi, Vol. 13 , No. 1, April 2012: 21 – 30
Ngatidjan. 1991 . Petunjuk Laboratorium Metode Laboratorium dalam Toksikologi. Yogyakarta:  Pusat  Antar
Universitas Bioteknologi UGM, pp: 94- 152.
Sahputra,  F.M.  2008. Potensi  Ekstrak  kulit Buah Salak sebagai Antidiabetes
[ skripsi ]. FMIPA  Institut  Pertanian Bogor, Bogor.
Simbala,  2006. Kajian  Etnobotani,  Proksimat dan  Fitokimia  Pinang  Yaki  (Areca vestiaria Giseke) . Eugenia 2006.
12:173-183
Simbala,  H.  E.  I.  2007. Keanekaragaman Floristik  dan  pemanfaatan  Sebagai Tumbuhan Obat di Kawasan Konservasi  II  Taman  Nasional  Bogani NaniWartabone  (Kabupaten  Bolaang Mongondow, Sulawesi Utara). [ Disertasi ].  Institut  Pertanian  Bogor,
Bogor
Soegondo  S.  2006. Farmakoterapi  pada Pengendalian Glikemia Diabetes Melitus  Tipe  2  dalam  Buku  Ajar  Ilmu Penyakit Dalam. Jakarta: Pusat
Penerbitan  Fakultas  Ilmu  Penyakit Dalam FKUI.
Sujono  T.A.,  Munawaroh,  P.  2009.  Interaksi Quercetin  Dengan  Tolbutamid:  Kajian Terhadap  Perubahan  Kadar  Glukos Darah  Tikus  Jantan  Yang  Diinduksi Aloksan. Jurnal  Penelitian  Sains  &
Teknologi. Vol 10:2, 121-129
Suryani,  Nani.,  Endang,  Tinny.,  Aulanni’am,
2013.  Pengaruh  Ekstrak  Biji  Metanol terhadap  Peningkatan  Kadar  Insulin, Penurunan Ekspresi TNF-α dan
Perbaikan  Jaringan  Pankreas  Tikus Diabetes, Jurnal Kedokteran Brawijaya ,

## 27 (23)
Widyastuti,  S.,  I  Nyoman  Suarsana.  2011.
Ekstrak  Air  Tapak  Dara  Menurunkan Kadar  Gula  dan  Meningkatkan  Jumlah Sel Beta Pankreas Kelinci Hiperglikemia. Jurnal  Veteriner .  12(1 ):
7-12 . Yasmiwar,  S.,  Muhtadi,  A.,  Moelyono,  M., Arifin, P.C., 2016. Aktivitas Antidiabetes  Ekstrak  Etanol  Daun  Iler (Plectranthus  scutellarioides  (L.)  R.Br.) Pada  Tikus  Putih  Galur  Wistar  Dengan Metode Induksi Aloksan. Jurnal
Farmaka. Vol. 14 No. 2