10.52523/maskermedika.v9i2.462

## JUMLAH ERITROSIT DENGAN TEKNIK  HOMOGENISASI SEKUNDER INVERSI 5 KALI DAN 8 KALI
Margareta Haiti 1 , Hotman Sinaga 2 , Ummi Rizky Ramadani 3
Prodi DIV Teknologi Laboratorium Medis, Unika Musi Charitas Palembang Email Korespondensi : haititasti@gmail.com

## ABSTRAK
Pendahuluan: Pemeriksaan  eritrosit  dilakukan  sebagai  skrining  rutin  bagian  dari pemeriksaan  darah  lengkap  maupun  darah  rutin  guna  mendiagnosis  gangguan hematologis. Hal yang penting dalam tahap pra analitik adalah homogenisasi. Darah dalam tabung  yang  berisi  antikoagulan  harus  segera  dicampur  agar  tidak  terjadi  pembekuan. Penundaan  pemeriksaan  menyebabkan  darah  mengendap,  maka  perlu  homogenisasi sekunder sebelum darah diperiksa supaya darah terdistribusi normal. Homogenisasi primer dilakukan  sebanyak  10  kali; Tujuan penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  apakah  ada perbedaan  hasil  pemeriksaan  eritrosit  yang  dihomogenesasi  sekunder  5  kali  dan  8  kal. Darah  yang  belum  langsung  diperiksa  harus  dilakukan  homogenesasi  sekunder,  namun belum ada standar untuk homogenisasi sekunder Metode:  J enis penelitian ini adalah pra eksperimen  dengan  Static  Group  Comparison  dan  dengan  teknik  pengambilan  sampel secara Total sampling. Hasil : Pemeriksaan eritrosit yang dihomogenisasi sekunder 5 kali diperoleh hasil nilai median 461 X10 6 µ, nilai minimum 42 X10 6 µL dan nilai maksimum 586 X10 6 µL. Sedangkan yang dihomogenisasi sekunder 8 kali diperoleh hasil nilai median 456 X10 6 µL,  nilai  minimum  47  X10 6 µL  dan  nilai  maksimum  588  X10 6 µL.  Hasil  uji  statistik menunjukkan tidak ada perbedaan bermakna p = 0,416 (>0,05). S impulan : berdasarkan uji  statistik  dapat  disimpulkan  tidak  terdapat  perbedaan  eritrosit  dengan  teknik homogenisasi sekunder 5 kali dan 8 kali.
Kata kunci: Eritrosit, Homogenisasi, Sekunder

## THE NUMBER OF ERYTHROCYTES WITH SECONDARY HOMOGENIZATION TECHNIQUE INVERSION 5 TIMES AND 8 TIMES

## ABSTRACT
Introduction:  Erythrocyte  examination  is  carried  out  as  a  routine  screening  part  of  a complete blood count and routine blood to diagnose hematological disorders. The important thing  in  the  pre-analytic  stage  is  homogenization.  Blood  in  a  tube  containing  an anticoagulant must be mixed immediately to prevent clotting. The delay in the examination causes the blood to precipitate, so secondary homogenization is necessary before the blood is  examined  so  that  the  blood  is  normally  distributed.  Primary  homogenization  was  carried out 10 times;  The  Research purposes was to determine whether there was a difference in the results of the secondary homogenized erythrocyte examination 5 times and 8 cal. Blood that  has  not  been  directly  examined  must  be  subjected  to  secondary  homogenization,  but there  is  no  standard  for  secondary  homogenization.  Methods:  This  type  of  research  was pre-experimental  with  Static  Group  Comparison  and  total  sampling  technique.  Results: Examination  of  secondary  homogenized  erythrocytes  5  times  obtained  a  median  value  of 461 X106µ, a minimum value of 42 X106µL and a maximum value of 586 X106µL. While the secondary  homogenized  8  times,  the  median  value  was  456  X106µL,  the  minimum  value was 47 X106µL and the maximum value was 588 X106µL. Statistical test results showed no significant  difference  p  =  0.416  (>  0.05).  Conclusion:  Based  on  statistical  tests,  it  can  be concluded  that  there  is  no  difference  in  erythrocytes  using  the  secondary  homogenization technique 5 times and 8 times.
Keywords: Erythrocytes, Homogenization, Secondary
10.52523/maskermedika.v9i2.462
PENDAHULUAN Eritrosit merupakan sel yang berbentuk  cakram  bikonkaf,  tidak  berinti, tidak  bergerak,  berwarna  merah  karena mengandung hemoglobin, jumlah di dalam  tubuh  paling  banyak  kira-kira mencapai  4,5  -  5  juta/mm 3 (Nugraha, 2017).
Pemeriksaan eritrosit dilakukan sebagai skrining rutin bagian  dari pemeriksaan  darah  lengkap  maupun darah rutin guna mendiagnosis gangguan hematologis  (Daniels,  2006).  Gangguan hematologis  merupakan  gangguan  yang terjadi pada  darah, pada sel darah merah gangguan  dapat  berupa  anemia  dan polisitemia (Baradero, 2008).
Anemia adalah kondisi tubuh seseorang  yang  mengalami  penurunan terhadap  sel  darah  merah  (Jotowiyono, 2018). Anemia merupakan suatu keadaan dimana kadar hemoglobin, hematokrit dan jumlah  eritrosit  dalam  darah  berkurang dari nilai normal(Nabill JA dkk, 2020).
Anemia menjadi masalah kesehatan masyarakat global yang umum dijumpai di seluruh  dunia.  Menurut  data  WHO  tahun 2015, lebih dari 30 % atau 2 milyar orang di dunia berstatus anemia.
Menurut  Riskesdas  tahun  2013 dikutip  dari  Otty  Chairunnisa  (2019), prevalensi anemia di Indonesia mencapai 21,7%  dengan  penderita  anemia  berusia 5  -  14  tahun  sebesar 26,4%  dan  18,4% penderita berusia15 - 24 tahun. Berdasarkan  data  Riskesdas  tahun  2018 di  Indonesia  sebesar  48,9%  ibu  hamil mengalami  anemia.  Diagnosis  anemia dapat  ditegakkan  melalui  pemeriksaan laboratorium,  salah  satu  pemeriksaan yang  dilakukan  yaitu  hitung  jumlah eritrosit  atau  disebut  juga  dengan  red blood cell (RBC) merupakan pemeriksaan yang bertujuan menentukan jumlah eritrosit  dalam  1  µL  darah,  satuan  yang digunakan  secara  umum adalah  sel/mm3 (Nabill JA dkk, 2020)
Hitung  jumlah  eritrosit    merupakan suatu  pemeriksaaan  untuk  menentukan jumlah  eritrosit  dalam  1  µL  darah (Nugraha,
2015)
Pada umumnya beberapa  rumah  sakit  seperti  Charitas
Hospital  Group  melakukan  pemeriksaan hitung jumlah
eritrosit sudah menggunakan alat otomatis seperti hematology analyzer.
Hitung  jumlah  eritrosit  merupakan suatu  pemeriksaaan  untuk  menentukan jumlah  eritrosit  dalam  1  µL  darah (Nugraha, 2015) Pada umumnya beberapa  rumah  sakit  seperti  Charitas Hospital  Group  melakukan  pemeriksaan hitung jumlah eritrosit sudah menggunakan  alat  otomatis  seperti hematology analyzer. Pada pemeriksaan Eritrosit di laboratorium biasanya menggunakan sampel  darah  vena,  darah  yang  berada di  luar  tubuh  cepat  membeku  maka dilakukan dengan penambahan antikoagulan (Wahdaniah, 2018) Anti koagulan adalah    zat     yang ditambahkan  ke  dalam  darah  dengan tujuan untuk     menghambat      dan mencegah  proses  pembentukan  bekuan darah.  Antikoagulan  yang  digunakan dalam  pemeriksaan  hematologi  untuk hitung jumlah     eritrosit    adalah antikoagulan EDTA atau Etthelin Diamine  Tetra  Acited  Acid  (Nughraha,
2015).
Darah yang ditampung dalam tabung EDTA perlu dilakukan homogenisasi  guna  mencampur  sampel darah dengan antikoagulan.
Homogenisasi  dilakukan  dengan  cara membolak-balikan tabung sampel beberapa  kali  selama  minimal  2  menit.
(Riswanto,  2013)  Homogenisasi  yang dilakukan  terhadap  darah  yang  baru dimasukan  ke  dalam  tabung  berisi antikoagulan (EDTA) disebut homogenisasi  primer.  Tujuannya  agar darah  tidak  membeku,  karena  pada pemeriksaan  darah  lengkap  tidak  boleh ada  bekuan.  Bila  ada  bekuan, meskipun hanya  bekuan  kecil  dapat  menyebabkan kesalahan,  hasil  menjadi  rendah  palsu. Menurut Permenkes No.43 (2013),
homogenisasi primer dilakukan sebanyak 10 - 12 kali. Darah  yang  dihomogenisasi  primer biasanya  tidak  langsung  diperiksa  tetapi didiamkan dahulu. Penundaan
pemeriksaan sering terjadi karena beberapa  faktor,  seperti  pengiriman  dari bangsal  yang  tidak  segera  dilakukan atau petugas laboratorium dalam pengambilan sampel  darah  tidak  segera diperiksa  dikarenakan  pergantian  shif jaga  atau  petugas  laboratorium  dalam melakukan  pengambilan  sampel  terlalu lama  di  bangsal  dikarenakan  pasien yang  mau  diambil  darahnya  terlalu banyak  (Sujud,  2015)  Darah  dengan antikoagulan yang dibiarkan dalam waktu tertentu  akan  mengalami  pemisahan menjadi dua lapisan. Lapisan atas berupa plasma, sedangkan  lapisan bawah berupa eritrosit (Nugraha, 2017).
Darah  dengan  antikoagulan  yang didiamkan  harus  dilakukan  homogenisasi jika  akan  diperiksa  karena  sel-sel  telah mengendap saat didiamkan,
homogenisasi  ini  disebut  homogenisasi sekunder.  Pada  saat  sel-  sel  darah  yang sudah  mengendap  dan  jika  dilakukan pemeriksaan tanpa melakukan homogenisasi  maka  hasilnya  akan  salah. Jika darah dan antikoagulan tidak dilakukan  pencampuran  dengan  baik maka  akan  menyebabkan  bekuan  yang akan  memberikan  hasil  rendah  palsu. Sedangkan,  jika  pencampuran  dilakukan berlebihan  maka  akan  menyebabkan hemolisis  yang  akan  memberikan  hasil rendah palsu. Oleh karena itu homogenisasi  harus  dilakukan  dengan baik supaya darah terdistribusi normal.
Homogenisasi  sekunder  sangat penting sebelum melakukan pemeriksaan dan  belum  adanya  literatur  tentang homogenisasi
sekunder yang
menyatakan  berapa  kali  darah  harus dibolak-balik.  Maka,  penulis  tertarik melakukan penelitian pemeriksaan eritrosit pada darah yang dihomogenisasi sekunder  5  kali  dan  dihomogenisasi sekunder  8  kali  setelah darah  didiamkan 60 menit pasca homogenisasi primer.

## METODE
Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan Mei-Juni 2021, bertempat di Laboratorium
Bagian Hematologi, Fakultas Ilmu Kesehatan UKMC, Palembang. Penelitian  ini  dilakukan  untuk  melihat
perbedaan  hasil  pemeriksaan hitung jumlah eritrosit dengan teknik
homogenisasi sekunder 5 kali dan 8 kali.
Sampel  darah  diperiksa  dengan metode impedanse. Darah diambil sebanyak  2  tabung  masing-masing  berisi 2  cc.  Kemudian  dilakukan  homogenisasi 10  kali  dengan  teknik  inversi  dan didiamkan  selama  60  menit.  Darah  yang telah didiamkan kemudian dihomogenisasi sekunder  5  kali  dan  8  kali  lalu  diperiksa dengan  menggunakan  alat  hematologi analyzer.
Analisis  data  yang  dilakukan  untuk membandingkan  jumlah  eritrosit  dengan homogenesasi  sekuder  teknik  inversi (bolak  balik)  5  kali  dan  8  kali  setelah didiamkan  60  menit  menggunakan  uji normalitas Saphiro wilk dan  uji komparasi uji Wilcoxon dengan  tingkat  kemaknaan p<0,05 dengan program statistik komputer.

## HASIL Analisis Univariat
Tabel 1 Nilai Statistik Jumlah Koloni h Eritrosit dengan Homogenesasi Sekunder 5 Kali dan 8 Kali setelah diendapkan 60 Menit
Nilai Homogenisasi sekunder 5 kali Homogenisasi sekunder 5 kali Median 461,0 456,5 Minimum 42 47 Maksimum 586 588 Tabel  1  diketahui  bahwa  hasil pemeriksaan eritrosit dengan teknik homogenisasi sekunder 5 kali nilai median 461,0  x10 6 /µl,  nilai  minimum  42  x10 6 /µl dan nilai maksimum 586 x10 6 /µl. Sedangkan  hasil  pemeriksaan  eritrosit dengan  teknik  homogenisasi  sekunder  8 kali  nilai  median  456,5  x10 6 /µl,  nilai minimum  47  x10 6 /µl  dan  nilai  maksimum 588 x10 6 /µl. Menggunakan median karena sebaran data tidak terdistribusi normalitas.

## Analisis Bivariat
Berdasarkan hasil Uji Wilcoxon didapatkan  nilai  p  =  0,416  >  0,05  artinya tidak  terdapat  perbedaan  antara  jumlah
eritrosit  yang  dihomogenesasi  sekunder dengan teknik konversi (bolak balik) 5 kali dan 8 kali.

## PEMBAHASAN
Pemeriksaan          eritrosit       digunakan untuk mengetahui  apakah seseorang menderita  anemia.  Seseorang  disebut anemia  bila  sel  darah  merah  lebih rendah dari nilai rujukan  (Jitowiyono, 2018). Nilai  rujukan    pada  penelitian  ini untuk  laki-laki  4,50 –  6,50  x10 6 µl  dan untuk  perempuan  3,80 –  4,80  x10 6 µl (Riswanto,  2013).  Hasil  pemeriksaan eritrosit penting untuk mengetahui apakah seseorang  ada  kelainan  jumlah  eritrosit, maka  hasil  pemeriksaan  eritrosit  harus dapat dipercaya.
Menurut  PerMenKes  No.43 tahun 2013 Pemantapan mutu internal dilakukan  untuk mendeteksi tidak adanya kesalahan (random dan sistematik) pada saat  melakukan  pemeriksaan.  Tujuan PMI  jika  terjadi  kesalahan  harus  segera diperbaiki  agar  hasil  yang  dikeluarkan dapat  dipercaya.  Pada  penelitian  ini pemantapan  mutu  internal  dilakukan dengan  memeriksa  bahan  kontrol level low (no.batch  :  11140821),  didapatkan hasil sebesar 2,34 x10 6 /µl , bahan kontrol level  normal  (no.batch  :  11140822) didapatkan  hasil  sebesar  4,51  x10 6 /µl  , dan  bahan  kontrol level  high (no.batch  : 11140823) didapatkan hasil sebesar 5,34 x10 6 /µl, dalam satuan SD yaitu low 0,03, normal  0,04,  dan high 0,05  kemudian diplotkan pada grafik Levey Jenning Chart dan  hasil  yang  diperoleh  masuk  dalam batas  ±  1  SD.  Berdasarkan  aturan Westgard  Multi-rule hasil  pemantapan mutu  internal  yang  dilakukan  pada tanggal  03  Juli  2021  memenuhi  aturan, sehingga  pemeriksaan  eritrosit  dapat dilakukan.
Hasil  pemeriksaan  eritrosit  pada darah  yang  dihomogenisasi  sekunder  5 kali  diperoleh  nilai  mean  4,67  x10 6 µL sedangkan pada darah yang
dihomogenisasi sekunder 8 kali diperoleh nilai mean 4,69 x10 6 µL. Hasil uji statistik pada  penelitian  ini  diperoleh  nilai p = 0,416  >  0,05  yang  berarti  tidak  terdapat perbedaan  terhadap  hasil  pemeriksaan
eritrosit  dengan  teknik  homogenisasi sekunder 5 kali dan 8 kali. Tidak terdapat perbedaan hasil tersebut karena homogenisasi  yang  dilakukan  sebanyak 5 kali sudah membuat sel darah tersebut terdistribusi rata.
Penelitian  yang  dilakukan  Lippi 2007, dengan tiga perlakuan  yang pertama dihomogenisasi primer 6 kali dan didiamkan  30  menit,  perlakuan  kedua dihomogenisasi  primer  12  kali  dan didiamkan  60  menit  tidak  terdapat perbedaan pada kadar eritrosit. Sedangkan pada perlakuan pertama dan kedua  dibandingkan  dengan  perlakuan tiga tidak dilakukan homogenisasi primer terdapat  perbedaan.  Dibandingkan pada penelitian  ini  tidak  terdapat  perbedaan hasil pada jumlah eritrosit.
Penelitian  Lima-Olieveira et al 2014, dengan 3 perlakuan pertama darah yang dihomogenisasi 5 kali setelah diambil lalu diperiksa, kedua darah yang didiamkan 5 menit lalu dilakukan  homogenisasi  5  kali lalu  di  periksa,  dan  ketiga  darah  yang tidak dihomogen setelah diambil langsung  diperiksa  secara  signifikan tidak terdapat perbedaan pada pemeriksaan eritrosit.
Penelitian  ini    menggunakan  uji  analisis Wilcoxon didapatkan  nilai  sig  0,416  (> 0,05)  artinya  tidak  terdapat  perbedaan pada  homogenisasi  sekunder  inversi (bolik balik) 5 kali dan 8 kali karena darah yang  dihomogenesasi  sekunder  inversi (bolak  balik)  5  kali  sudah    tercampur merata  sebelum  dilakukan  pemeriksaan pada alat.Hal ini juga sejalan dengan yang diungkapkan  oleh  Nugroho  (2015)  Tujuan dari  dilakukan  homogenisasi  sekunder yaitu  agar  darah  terdistribusi  normal sebelum  melakukan  pemeriksaan  dan untuk menghindari terjadinya pengendapan  pada  sel-sel  darah  setelah didiamkan.

## SIMPULAN DAN SARAN Simpulan
Berdasarkan penelitian ini peneliti menyimpulkan  bahwa tidak terdapat perbedaan  bermakna  hasil  pemeriksaan jumlah  eritrosit  dengan    homogenisasi
e-ISSN : 2654-8658 p-ISSN : 2301-8631
10.52523/maskermedika.v9i2.462
sekunder  trknik  inversi  (bolak balik)  5  kali dan 8  kali.

## Saran
Bagi  ATLM  untuk  pemeriksaan eritrosit  di laboraturium pada saat pengolahan specimen dalam melakukan homogenisasi sekunder  dapat  dilakukan  dengan  5  kali homogenisasi dengan teknik inversi (bolak-balik).
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut homogenesasi  teknik  inversi  dengan homogenesasi menggunakan alat rotator.
KONFLIKA KEPENTINGAN Tidak ada kemungkinan terjadinya konflik kepentingan dalam publikasi arikel ini

## KEPUSTAKAAN
Nugraha, G. (2017). Pemeriksaan
Hematologi  Dasar.  Jakarta:  CV
Trans Info Media
Daniels  R.  2006. Delmar’s  Manual  & Laboratory and Diagnostic Tests Baradero, M., et.al . (2008). Klien Gangguan Kardiovaskular Seri Asuhan Keperawatan. Jakarta: EGC Jitowiyono,S. (2018). Asuhan Keperawatan  pada  Pasien  dengan Gangguan Sistem Hematologi. Yogyakarta: Pustaka Baru
Ahmad  Jazuly  Nabil  JA,  dkk,  (2020),
P emanfantan  Cairan  Infus  sebagai
Pengganti  Reagen  Alternatif  Hayem dalam  Pemeriksaan  Hitung  Jumlah Eritrosit , Journal of Indonesian
Medical  Laboratory  and  Science, JoIMedLabS. 2020;1(1):23-31 Otty,C. (2019). Perbedaan Kadar Hemoglobin Pada Santriwati Dengan  Puasa  Daud  Nrowot  dan Tidak Berpuasa Di Pondok Pesantren Temanggung Jawa Tengah . Vol.8 No.2 Nugraha, G. ( 2015). Pemeriksaan Laboratorium Hematologi Dasar. Jakarta:  CV Trans Info Media Peraturan  Menteri  Kesehatan  Republik Indonesia  Nomor  43  (2013).  Cara Penyelenggaraan Laboratorium Klinik Yang Baik Sujud, et.al .  (2015). Perbedaan  Jumlah Trombosit  pada  Darah  EDTA  yang Segera  Diperiksa  dan  Penundaan
Selama  1  Jam  di  Laboratorium  RSJ Ghrasia Yogyakarta. Medical Laboratory Technology Journal. Vol. 1 (12): 91 – 95 Riswanto. (2013). Pemeriksaan Laboratorium Hematologi. Yogyakarta:  Alfamedia  dan  Kanal Medika
Lippi,  G., et.al. (2007). Evaluation  of Different  Mixing  Procedures  for K 2 EDTA Primary Samples on
Hematological  Testing . Laboratory Medicine Nomor 1. April 2016 : 34 – 41. Lima,  O.  G., et.al. (2014). Processing  of Diagnostic  Blood  Specimens:  Is  It Really  Necessary  to  Mix  Primary Blood  Tubes  after  Collection  with
Evacuated Tube System? Biopreservation and Biobanking. Vol.12 No.1