Resistensi Eschericia coli Dari Isolat Daging Ayam Broiler Terhadap Tetrasiklin
Tetracycline Resistant Eschericia coli From Broiler Chicken Meat Isolate
Anisa Rizca Putri 1 , Enny Suswati 2 , Laksmi Indreswari 3
1 Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran Universitas Jember
2 Laboratorium Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran Universitas Jember
3 Laboratorium Anatomi, Fakultas Kedokteran Universitas Jember Jalan Kalimantan No. 37, Jember, Indonesia, 68121 e-mail korespondensi: ennysuswati.fk@unej.ac.id ; anisarizca@gmail.com

## Abstrak
Resistensi  antibiotik  menjadi  masalah  serius  di  bidang  kesehatan  dunia  karena  mengakibatkan  kegagalan pengobatan.  Penyebab  terjadinya  resistensi  antibiotik  80%  berasal  dari  bahan  pangan  asal  hewan  salah satunya  Ayam broiler .  Kontaminasi E.  coli resisten  dalam  daging  ayam  terbukti  dapat  mentransfer  faktor genetik antar bakteri dalam sistem intestinal manusia. Hampir semua peternak ayam broiler menggunakan pakan  komersial  mengandung  antibiotik  tetrasiklin.  Penggunaan  antibiotik  dalam  campuran  pakan merupakan  salah  satu  faktor  risiko  terjadinya  resistensi.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mendapatkan gambaran  resistensi  antibiotik  tetrasiklin  terhadap  bakteri E.  coli dari  isolat  daging  ayam broiler di Peternakan. Idetifikasi E. coli terdiri dari tahap presumtive test dan confirmed test dan pengujian kepekaan bakteri E. coli dengan metode difusi Kirby Bauer . Penelitian ini menggunakan 6 sampel daging ayam broiler bagian paha atas yang didapatkan dari 6 peternakan di Sumbersari. Data dianalisis secara deskriptif. Hasil penelitian ini menunjukkan dari 6 sampel daging ayam, 4 sampel positif terkontaminasi E. coli dan 2 isolat menunjukkan  resistensi  terhadap  antibiotik  tetrasiklin.  Kesimpulan  dari  penelitian  ini  menunjukkan  telah terjadi resistensi E. coli terhadap antibiotik tetrasiklin pada 50% sampel.
Kata kunci : Eshericia coli , tetrasiklin, resistensi, daging ayam broiler

## Abstract
Antibiotic resistance is a serious health problem that have ben uneffective therapy. The cause of antibiotic resistance 80% comes from food of animal origin such as Broiler Chicken. E. coli contamination in antibiotic resistant  chicken  has  been  shown  to  transfer  genetic  factors  between  bacteria  in  the  human  intestinal system.  Almost  all  broiler  breeders  use  commercial  feed  containing  tetracycline  antibiotics.  The  use  of antibiotics in the feed mixture is one of the risk factors for resistance. The aim of this study was to get an information of antibiotic resistance E. coli which isolated from broiler meat. Identification test of E. coli used two phase, presumtive test and confirmed test. Sensitivity test for E. coli to antibiotic by disc diffusion Kirby Bauer  method.  This  study  used  6  sample  of  upper  thigh  broiler  meat,  the  antibiotic  use  tetracycline.  The data  were  analyzed  descriptively.  The  results  of  this  study  show  that  from  6  isolate  sample,  there  are  4 isolate identificated as E. coli and 2 isolate show resistance to the tetracycline antibiotic. The conclusion of this study showed resistance has occurred on 50% sample.
Keywords : Eshericia coli, tetracycline, resistance, broiler chicken meat

## Pendahuluan
Resistensi  antibiotik  menjadi  masalah  kesehatan  di seluruh  dunia  karena  dapat  mengakibatkan  proses pengobatan  akibat  infeksi  bakteri  menjadi  tidak efektif.  Bahkan  jika  tidak  dilakukan  upaya  untuk menanggulangi  hal  ini  resistensi  antibiotik  dapat menjadi penyebab kematian nomor satu mengalahkan  kanker  dalam  kurun  waktu  50  tahun mendatang.
Sumber  terjadinya  resistensi  antimikroba  20% berasal  dari  pola  pemakaian  antibiotika  pada manusia  yang  tidak  rasional  dan  80%  disebabkan oleh  faktor  rantai  pangan  asal  hewan.  Pangan  asal hewan  merupakan  salah  satu  media  penyebaran bakteri  yang  telah  resisten  dari  hewan  ke  manusia dan  lingkungan  baik  bakteri  komensal  maupun patogen.
Salah  satu  sumber  pangan  asal  hewan  yang  tinggi distribusinya  di  masyarakat  adalah  daging  ayam broiler .  Konsumsi  daging  ayam broiler masyarakat Indonesia  per  kapita  tahun  2016  sebesar  4,797  kg, mengalami  peningkatan  sebesar  21,1  %  dari konsumsi tahun 2015 sebesar 3,963 kg. Daging ayam broiler mejadi  kegemaran  masyarakat  untuk konsumsi  sehari-hari  karena  ukuran  daging  yang lebih besar, mudah di dapat di pasaran dan harganya juga  terjangkau.    Kandungan  air  dan  nutrisi  dalam daging  ayam  broiler  yang  cukup  tinggi  menjadi tempat  yang  mendukung  untuk  berkembangnya mikroba seperti E. coli .
Eschericia coli merupakan salah satu bakteri enterik penyebab  infeksi  yang  telah  banyak  dilaporkan mengalami  resistensi  terhadap  beberapa  antibiotik . Resistensi E.  coli terhadap  antibiotik  enrofloxacin mencapai 99% di Amerika Serikat. Eshericia coli telah mampu mengembangkan mekanisme untuk melawan  efek  antibiotik  dengan  cara  membentuk enzim yang dapat merusak antibiotik dan melakukan modifikasi pada proses metabolismenya. E. coli yang resisten  terhadap  antibiotika  telah  terbukti  dapat mentransfer  faktor  genetik  antar  bakteri  dalam sistem  intestinal  manusia  melalui  rantai  makanan atau  secara  kontak  langsung.  Tingginya  tingkat resistensi E.  coli terhadap  antibiotik  telah menyebabkan  wabah  diare  berdarah  pada  10% penduduk di London Selatan.
Dalam  perawatan  kesehatan  ternak  ayam  broiler diberikan  vaksinasi,  vitamin,  serta  antibiotik. Antibiotik  dalam  sistem  peternakan  digunakan sebagai imbuhan pakan untuk perangsang pertumbuhan,  pengobatan,  serta  pencegahan terhadap  penyakit.  Tetrasiklin  merupakan  antibiotik berspektrum  luas  yang  banyak  digunakan  untuk mengobati  penyakit  infeksi  pada  manusia  maupun hewan.  Hasil  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Balai Penelitian  Veteriner  (Balitvet)  Bogor    menunjukkan bahwa  71,43%  pabrik  pakan  di  Jawa  Barat memberikan tambahan antibiotika golongan tetrasiklin  dan  sulfonamide  pada  produk  pakan ayam.  Konsentrasi  antibiotik  tetrasiklin  yang ditambahkan  dalam  pakan  ternak  merupakan  dosis rendah yaitu berkisar 2,5 – 12,5mg/kg (ppm). Hal ini terbukti  dapat  meninggalkan  residu  dalam  daging dan  memicu  terjadinya  resistensi  bakteri  terhadap antibiotik.
Kecamatan  Sumbersari  adalah  salah  satu  daerah pemasok  ayam broiler di  Kabupaten  Jember  yang sebagian  besar  peternaknya  menggunakan  pakan komersial mengandung antibiotik. Pemakaian antibiotik  di  peternakan  berperan  besar  dalam perkembangan  resistensi  bakteri  komensal  dan patogen  serta  dapat  meningkatkan  risiko  pada manusia  yang  terinfeksi  oleh  bakterri  yang  resisten. Monitoring  mengenai  kejadian  resistensi  antibiotik dari  rantai  pangan  diperlukan  untuk  menentukan langkah  serta  kebijakan  yang  tepat  guna  mencegah terjadinya  resistensi  antibiotik  lebih  lanjut.  Peneliti bertujuan  untuk  melakukan  uji  resistensi  antibiotik untuk mengetahui apakah E. coli yang di isolasi  dari daging  ayam broiler di  Kecamatan  Sumbersari mengalami resistensi terhadap tetrasiklin.

## Metode Penelitian
Sampel penelitian Penelitian dilakukan di Laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas  Kedokteran Universitas  Jember  Jember  pada  bulan  Desember 2017.  Penelitian  ini  merupakan  penelitian  dekriptif untuk  mengetahui  adanya  kontaminasi dan resistensi  bakteri E.  coli dari  isolat  daging  ayam broiler terhadap  antibiotik  Tetrasiklin  di  Peternakan Kecamatan  Sumbersari,  Kabupaten  jember . Sampel yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  bakteri E. coli yang di isolasi dari daging ayam broiler bagian
paha  atas.  Ayam broiler di  dapatkan  dari  6  lokasi peternakan  di  Kecamatan  Sumbersari  Kabupaten Jember  yaitu  2  peternakan  di  desa  Antirogo,  2 peternakan di desa Sumbersari, 1 peternakan di desa Wirolegi,  dan  1  peternakan  di  Tegal  Gede  dengan kondisi sehat dan telah memasuki masa panen yaitu 30-35 hari.
Data  Primer diperoleh  dari  uji  resistensi  bakteri E. coli yang diisolasi dari daging ayam broiler terhadap tetrasiklin  dengan  metode  difusi Kirby  Bauer untuk melihat zona hambat antibiotik.
Analisis  data. Data  dianalisis  secara  deskriptif dengan  menyajikan  hasil  penelitian  dalam  bentuk tabel dan gambar.

## Tabel 1. Data hasil presumptive test
No. Isolat Bakteri E. coli Hasil Identifikasi Pewarnaan Gram 1 Isolat A Positif - 2 Isolat B Positif - 3 Isolat C Positif - 4 Isolat D - Negatif 5 Isolat E Positif - 6 Isolat F - Negatif

## Hasil Penelitian
Berdasarkan  hasil  pengamatan,  pada presumptive
test dilakukan pewarnaan Gram untuk mengidentifikasi  bakteri  Gram  negatif  yang  di  duga sebagai bakteri E. coli .  Dari 6 sampel bakteri E.  coli yang  di  isolasi  dari  daging  ayam broiler di  6  lokasi peternakan  Kecamatan  Sumbersari  Kabupaten Jember,  didapatkan  hasil  4  isolat  positif    yang  di identikasi  sebagai  bakteri  berbentuk  batang  gemuk berwarna merah yang sesuai dengan ciri E. Coli . Hasil presumtive test dapat dilihat pada tabel 1. Dan hasil pewarnaan gram dapat dilihat pada gambar 1.
Gambar 1. Gambaran E. Coli pada pewarnaan Gram
Isolat yang di identifikasi positif pada presumtive test dilanjutkan  uji confirmed  test dengan  kultur  isolat bakteri E.  coli pada  media  spesifik Eosin  Methilen Blue (EMB). Hasil identifikasi bakeri E. coli positif bila dalam  media  EMB  setelah  di  inokulasikan  dengan metode continuous streaking dan diinkubasi selama 24  jam  dengan  suhu  36 0 C  akan  tampak  pendaran berwarna hijau metalik. Keseluruhan hasil confirmed test dari  sampel  bakteri E.  coli yang  dikultur  ke dalam  media  EMB  dari  6  isolat  daging  ayam broiler dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel 2. Data hasil confirmed test No. Isolat Bakteri E. coli Hasil 1 Isolat A Positif 2 Isolat B Positif 3 Isolat C Positif 4 Isolat D Negatif 5 Isolat E Positif 6 Isolat F Negatif
Hasil  identifikasi  positif E.  coli pada confirmed  test dapat dilihat pada gambar 2.
Gambar 2. Pertumbuhan E. coli pada media EMB
Pola  kepekaan  antibiotik  tetrasiklin  terhadap pertumbuhan bakteri E. coli dapat diketahui dengan mengukur  diameter  zona  hambat  yang  tebentuk  di sekitar  disk  antibiotik  tetrasiklin  30 μ g  diameter  5 mm.  Pengujian  kepekaan  bakteri E.  coli terhadap antibiotik tetrasiklin dilakukan menggunakan
metode difusi Kirby Bauer.
Tabel 3. Hasil pengukuran zona hambat antibiotik
No. Isolat Bakteri E.coli Hasil Pengukuran Zona Hambat Kategori 1 Isolat A 14 mm Intermediet 2 Isolat B 10,15 mm Resisten 3 Isolat C 20,5 mm Sensitif 4 Isolat E 8,5 mm Resisten
Pengukuran  diameter  zona  hambat  menggunakan jangka  sorong  dengan  tingkat  ketelitian  0,05  mm. Pengamatan diameter zona hambat dilakukan oleh 3 orang  untuk  menghindari  terjadinya  bias.  Hasil pengukuran  zona  hambat  antibiotik  ditampilkan  di tabel  3.  Dan  hasil  terbentuknya  diameter  zona hambat  resistensi  antibiotik  dapat  dilihat  pada gambar 3.
Gambar 3. Hasil terbentuknya zona hambat antibiotik
Dari  4  sampel  isolat  positif E.  coli selanjutnya  di lakukan  uji  sensitivitas  antibiotik  untuk  mengetahui pola  kepekaan  antibiotik  tetrasiklin  terhadap pertumbuhan  bakteri E.  coli. 1  isolat  yaitu  isolat  C menunjukkan  kategori  sensitif  dengan  zona  hambat antibiotik 20,55 mm yang artinya bakteri E. coli yang di  isolasi  dari  ayam  broiler  di  Peternakan  C  masih peka  terhadap  antibiotik  tetrasiklin.  Isolat  A menunjukkan  hasil  kategori  intermediet  dengan zona  hambat  14  mm  yang  berarti  bakteri E.  coli kurang peka terhadap tetrasiklin dan  2  isolat  dalam kategori  resisten  yaitu  isolat  B  dan  D  dengan diameter  zona  hambat  masing-masing  yaitu  10,15 mm dan 8,5 mm.

## Pembahasan
Pertumbuhan  mikroba  pada  produk  pangan  dapat terjadi  karena  ketersediaan  nutrisi  meliputi  lemak dan  protein,  pH,  suhu  serta  kadar  air  yang  sesuai. Bakteri E.  coli dapat  tumbuh  dengan  baik  dengan kandungan  lemak  dan  protein  yang  merupakan sumber  nutrisi  bagi  mikroba.  Daging  ayam  memiliki kandungan  lemak  dan  protein  yang  tinggi  sehingga daging  ayam  dapat  menjadi  media  pertumbuhan yang baik untuk E. coli . Bakteri E. coli adalah bakteri yang  normal  ditemukan  di  saluran  pencernaan hewan  maupun  manusia  dan  bersifat  komensal. Bakteri  ini  juga  dapat  berfungsi  sebagai  bakteri indikator  tingkat higiene sanitasi  suatu  produk pangan asal hewan.
Dalam  penelitian  ini,  sampel  daging  ayam  broiler yang di isolasi adalah bagian paha bagian atas. Isolat E.  coli yang  didapatkan  lebih  besar  jika  diambil  dari bagian  paha  atas  dari  hasil  isolasi  yang  dilakukan oleh  Susanto  (2014)  yaitu  sebesar  87.5%  dari  total sampel. Dari keseluruhan sampel daging ayam dari 6 peternakan  bakteri E.  coli yang dapat  diisolasi sebanyak  4  isolat  yaitu  sampel  A,B,C,  dan  E. Sebanyak  50%  isolat  mengalami  resistensi  terhadap antibiotik  Tetrasiklin.  Isolat E.  coli yang  diperoleh dari  ayam broiler menunjukkan  tingkat  resistensi yang  cukup  tinggi  terhadap  antibiotik  tetrasiklin. Hasil  ini  sejalan  dengan  penelitian  Suandy  (2011) yang  menyatakan  tingkat  resistensi  bakteri E.  coli terhadap  antibiotik  tetrasiklin  merupakan  resistensi antibiotik  yang  tertinggi  dari  bakteri E.  coli. Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Jiang et  al. (2011)  di Cina menunjukkan bahwa resistensi E. coli dari ayam broiler terhadap  antibiotik  tetrasiklin  mencapai 90.8%.  Penelitian  lain  yang  dilakukan  oleh  Apun et al. (2008)  di  Malaysia  menyatakan  bahwa  tingkat resistensi  dari  isolat E.  coli dari  ayam  broiler terhadap antibiotik tetrasiklin adalah 95.8%.
Dari  hasil  penelitian  di  dapatkan  2  isolat  bakteri mengalami resistensi yaitu pada isolat B dan  E yang keduanya  berada  di  lokasi  peternakan  yang berdekatan  yaitu  di  Desa  Antirogo.  Hal  ini kemungkinan  dapat  terjadi  karena  penyebaran organisme  yang  telah  resisten  melalui  faktor lingkungan melihat dari kualitas kebersihan kandang yang  sangat  kurang.  Selain  itu  dapat  pula dikarenakan  karena  penggunaan  antibiotik  dalam pakan  sebagai  perangsang  pertumbuhan  mengingat berat  ayam  pada  peternakan  E  yaitu  rata-rata
berkisar  2,7kg  per  ekor  jauh  diatas  berat  normal ayam broiler yang biasa dipanen yaitu 1,5-1,9 kg kg. Sedangkan  1  isolat  masuk  ke  dalam  kategori intermediet yaitu pada isolat E. coli dari peternakan A.  Berdasarkan  survey  yang  telah  di  lakukan peternak  menggunakan  pakan  komersial  yang mengandung  antibiotik  yang  di  dapat  dari perusahaan  kemitraan.  Hal  ini  perlu  diwaspadai karena  bakteri  sudah  mulai  kurang  peka  terhadap antibiotik  dan  dapat  berpotensi  menjadi  resisten. Berdasarkan  hasil  penelitian  ini  diharapkan  dapat dilakukan  pengawasan  serta  kebijakan  mengenai penggunaan antibiotik agar sesuai indikasi dan tidak berlebihan.
Kategori sensitif didapatkan dari isolat bakteri E. coli yang di dapat di peternakan D. Peternakan tersebut tetap  mengunakan  pakan  yang  mengandung antibiotik  komersial  tetapi  di  selingi  dengan campuran  pakan  herbal  yang  seperti  daun  sirih  dan temulawak  yang  mengandung  antibakteri  alami sehingga  hewan  ternak  tidak  mudah  terserang penyakit. Hal ini tentu akan mengurangi penggunaan antibiotik  dalam  peternakan  tersebut.  Selain  itu, perusahan  kemitraan  yang  mengelola  peternakan tersebut  berada  di  bawah  pengawasan  dokter hewan.
Perbedaan pola resistensi yang terjadi kemungkinan diakibatkan  penggunaan  jenis  antibiotik,  perbedaan geografis, dan sistem produksi unggas yang beragam (Bywater et al. 2004). Resistensi antibiotik dari isolat yang  diperoleh  dari  ayam broiler merupakan  akibat pemakaian  antibiotik  yang  telah  dilakukan  oleh peternak  secara  terus-menerus  dalam  rangka pencegahan maupun pengobatan penyakit. Pengamatan di peternakan ayam broiler menunjukkan bahwa semua peternakan menggunakan pakan ayam komersial yang didapatkan  dari  pabrik  pakan.  Penelitian  yang dilakukan oleh Bahri et al. (2005) menyatakan bahwa 71.43%  pabrik  pakan  di  Kabupaten  Bogor,  Cianjur, Tangerang,  Bekasi,  dan  Sukabumi  menambahkan antibiotik  golongan  tetrasiklin  dan  sulfonamid  pada pakan  ayam.  Peternak  menggunakan  antibiotik tersebut  karena  merupakan  antibiotik  yang mempunyai spektrum luas (Guilfoile 2007).
Penambahan  antibiotik  dalam  pakan  merupakan faktor  utama  terjadinya  peningkatan  kejadian resistensi  antibiotik  (Silbergerd et  al .,  2008).  Pakan dalam  usaha  peternakan  ayam  broiler  merupakan
komponen utama yaitu mencapai 60%, sehingga jika pakan  yang  beredar  di  peternakan  mengandung antibiotik bisa menjadi sumber terjadinya resistensi. Faktor yang mempengaruhi kepekaan dan resistensi antibiotik  adalah  konsentrasi.  Konsentrasi  yang digunakan  dalam  pengobatan  dapat  menghambat pertumbuhan  mikroorganisme  namun  harus  di bawah  ambang  toksisitas  obat  (Chambers,  2006). Menurut Balai Penelitian dan Pengembangan (2014) penggunaan  antibiotik  di  Indonesia  yang  cukup dominan adalah golongan tetrasiklin dan Sufonamid . Seperti  di  negara  lain,  pola  penggunaan  antibiotik tersebut telah mencapai tingkat yang berlebihan dan banyak  diantaranya  digunakan  secara  tidak  tepat. Perkembangan resistensi kuman terhadap antibiotik sangat  dipengaruhi  oleh  intensitas  pemaparan antibiotik  di  suatu  wilayah.  Tidak  terkendalinya penggunaan antibiotik cenderung akan meningkatkan  resistensi  bakteri  yang  semula sensitif.  Hasil  ini  menunjukkan  bahwa  pemakaian antibiotik  di  peternakan  ayam  broiler  baik  untuk pengobatan  maupun  sebagai  imbuhan  pakan  sudah dalam  tahap  yang  mengkhawatirkan  (Miranda, 2009).
Organisme patogen yang telah mengalami resistensi tehadap  antibiotika  dalam  hewan  ternak  dapat mencemari  pakan  ternak  dalam  satu  kandang  dan berpotensi  menyebarkan  gen  resisten  tersebut kepada  hewan  tenak  lain  secara  luas.  Penyebaran bakteri  patogen  dalam  peternakan  dapat  melalui interaksi  kompleks  dari  lingkungan  meliputi  udara, tanah,  dan  air  dengan  perubahan  sosial  misalnya interaksi antar hewan dalam satu kandang, peternak dengan  hewan  ternak,  dan  migrasi  hewan,  serta pada pola pengolahan saat akan dikonsumsi. Burung liar juga bisa menyebarkan bakteri E. coli yang telah resistensi  dari  dan  ke  hewan  lainnya  melalui  proses migrasinya  (Guenther et  al., 2010).  Teuber et  al. (2012)  juga  menyatakan  bahwa  30-90%  antibiotik akan  dikeluarkan  melalui  urin  dan  feses  hewan  dan menjadi  sumber  terjadinya  resistensi  antibiotik terhadap bakteri yang ada di lingkungan.
Tingginya tingkat resistensi bakteri menjadi masalah serius di bidang kesehatan. Ketika E. coli mengalami resistensi  terhadap  antibiotik  tetrasiklin,  maka pilihan  terapi  efektif  menjadi  sangat  terbatas. Bakteri E.  coli yang  mencemari  daging  ayam broiler dapat  mengakibatkan  infeksi  pada  manusia  yang mengkonsumsinya  dan  jika  bakteri  tersebut  telah resisten terhadap antibiotik maka dapat
mengakibatkan penyakit yang serius akibat kegagalan  pengobatan  yang  ditimbulkan.  Resistensi antibiotik pada bakteri asal hewan dapat berdampak langsung  maupun  tidak  langsung  bagi  manusia. Dampak  langsung  dapat  terjadi  akibat  kontak langsung  dengan  bakteri  asal  hewan  yang  telah resisten  terhadap  antibiotik  dan  dampak  tidak langsung  dari  kontak  dengan  organisme  resisten yang  menyebar  dalam  ekosistem  lingkungann seperti  air,  udara,  dan  tanah  sebagai  hasil  sisa penggunaan antibiotik pada hewan (Landers, 2012).
Meskipun  telah  diketahui  sebagian  besar  resistensi antibiotik  disebabkan  karena  penggunaan  antibiotik pada  hewan  yang  tidak  rasional,  tetapi  pemerintah belum  memberikan  perhatiannya  pada  masalah  ini. Dengan  hasil  penelitian  ini  diharapkan  pemerintah melakukan  pengawasan  serta  membuat  kebijakan untuk  mengatasi  penyebaran  resistensi  dan mencegah  kegagalan  pengobatan  sebagai  akibat yang ditimbulkan dari resistensi antibiotik.

## Ucapan Terima Kasih
Peneliti  mengucapkan  terimakasih  kepada  dr.  Enny Suswati,  M.  Kes  dan  dr.  Laksmi  Indreswari,  Sp.  B. atas  bimbingan  yang  diberikan  dalam  penulisan artikel penelitian ini.

## Daftar Pustaka
Aarestrup,  F.  M.  2005.  Veterinary  drug  usage  and antimicrobial  resistance  in  bacteria  of  animal origin. Basic  Clinicalal  Pharmacologi  Toxicol . 96:271-281.
Adam,  R.  2002. Veterinary  Pharmacology  and Therapeutics . IOWA State University Press/Ames. USA
Anonimus.  2012. Ringkasan  Imbuhan  Pakan  (Feed Additive)  untuk  Hewan .  Edisi  Kedua.  Jakarta: Direktorat Jenderal Peternakan
Apata,  D.  F.  2009.  Antibiotic  Resistance  in  poultry. International  Journal  Poultry            Science .  8(4): 404-408.
Apun, K.,  Y. L. Chong, M. T. Abdullah, dan V. Micky.
2008. Antimicrobial susceptibilities of Escherichia coli isolates from food animals and wildlife  animals  in  Sarawak,  East  Malaysia.
Asian  Journal  of  Animal  and  Veterinary Advances. 3(6):409-416.
Barton, M. D. 2000. Antibiotic use in animal feed and its impact on human health. Nutrition Research Review . 13: 279-229.
Bell,  C.,  dan  A.  Kyriakides.  2002. Pathogenic Escherichia  coli  dalam  Foodborne  Pathogen: Hazard,  Risk  Analysis  and  Control .  Cambridge (UK): Woodhead Pub.
Bahri,  S.  2008.  Beberapa  aspek  keamanan  pangan asal  ternak  di  Indonesia.  Pengembangan Inovasi Pertanian. 1(3): 225-242
Budiarto, E. 2007. Metodologi Penelitian Kedokteran. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.
Butaye,  P.,  A.  Devriese,  dan  F.  Haesebrouck.  2003. Antimicrobial  Growth  Promotors  Used  in Animal  Feed:  Effects  of  Less  Well  Known Antibiotics  On  Gram  Positive  Bacteria. Clinical Microbiology Reviews . 16(2):175-188.
Bywater, R., H. Deluyker, E. Deroover, A. D. Jong, H.
Marion,  M.  McConville,  T.  Rowan,  T.  Shryock, D. Shuster, V. Thomas, M Valle, dan J. Walters. 2004.  A  European  survey  of  antimicrobial susceptibility  among  zoonotic  and  commensal bacteria isolated from food-producing animals. Journal  of  Antimicrobiology  and  Chemistry. 54(4):744-754.
Chambers, L. H., G. W. David, J. M. John, M. Cesar, L.
Christine, dan H. Charlene. 2001. Characterization of Antibiotic-Resistant
Bacteria  in  Rendered  Animal  Products. Avian
Diseases . 45:953-961.
Centers  for  Dissease  Control  and  Prevention  (CDC).
2016. Eschericia coli Factsheet.
http//cdc.gov/e.coli/  [Diakses  pada  2  Agustus 2017].
Clinical  and  Laboratory  Standards  Institute  (CLSI).
2017. Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing; Twenty-Second Informational  Supplement.  West  Valley  (US): Clinical and Laboratory Standards Institute.
Dinas  Peternakan  Kabupaten  Jember  (Disnak  Kab. Jember).  2017. Data  Peternakan  Ayam  Broiler Kabupaten  Jember  2017. Jember:  Disnak Kabupaten Jember.
Direktorat  Jenderal  Peternakan  dan  Kesehatan Hewan  (Ditjen  PKH).  2016. Statistik  Konsumsi
dan  Populasi  Hewan  Ternak  2016 .  Jakarta: Kementerian Pertanian Republik Indonesia.
Focosi,  D.  2005.  Antimcrobial  for  Bacteria. http://focosi.altervista.org/ [Diakses  pada  2 Agustus 2017].
Guenther,  S.,  M.  Grobbel,  A.  L.  Becker,  A.  Goedcke, N. D. Friedrich, L.H. Wieler, dan C. Ewers. 2010.
Antimicrobial  resistance  profiles  of  Escherichia coli  from  common  European  wildbird  species. Veterinary Microbiology . 144:219-225.
Heuer, O. E., A. M. Hamemerum, P. Collignon, dan H.
C. Wegener. 2006. Human Health Hazard from Antimicrobial-resistant  Enterococci  in  Animals and Food. Food Safety. 43: 911-914.
Jawetz,  E.,  J.  L.  Melnick,  dan  E.  A.  Adelberg.  1996. Dasar-dasar  Mikrobiologi .  Edisi  XVI.  Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.
Jiang,    H.  X.,  D.  H.  Lu,  Z.  L.  Chen,  X.  M.  Wang,  J.  R. Chen,  Y.  H.  Liu,  X.P.  Liao,  J.  H.  Liu,  dan  Z.  L. Zeng.    2011.  High  prevalence  and  widespread distribution  of  multi-  resistant Esherichia  coli isolates in pigs and poultry in China. Journal of Veterinary. 187:99-103.
Kartasudjana, R. dan E. Suprijatna. 2006. Manajemen Ternak Unggas . Jakarta: Penebar Swadaya.
Katzung,  B.G.  2013. Farmakologi  dasar  dan  klinik . Edisi  XII.  Jakarta:  Penerbit  Buku  Kedokteran EGC.
Landers,  T.  F.,  B.  Cohen,  T.  E.  Wiltum,  E.  I.  Larson. 2012.  A  review  of  Antibiotic  Used  in  Food Animals  :  Perspective,  Policy,  and  Potential. Public Health Review . 127: 4-21.
Lindquist  dan  John.  2004.  Diferential  Media:  Eosin Methylen  Blue  Agar  (Levine’s  Formulation).
http://www.jlindquist.com/generalmicro/dfem b.html/ [Diakses pada 26 November 2017]
Martin, B. S., L. Campos, V. Bravo, M. Adasne, dan C. Borie.  2005.  Evaluation  of  antimicrobial resistance  using  indicator  bacteria  isolated from  pigs  and  poultry  in  Chile. International Journal  of  Application  Research  Veterinary Medicine . 2(3):171-178.
Mattjik  A.  A.,  dan  I.  M.  Sumertajaya.  2002. Perancangan  Percobaan  dengan  Aplikasi  SAS dan Minitab Jilid I . Bogor: IPB Press.
Mead  G.C.  2007. Microbiological  Analysis  of  Red Meat,  Poultry  and  Eggs .  Cambridge  (UK): Woodhead Pub.
Miranda  J.  M.,  B.  I.  Vazquez.  2009.  Microbiological quality  and  antimicrobial  resistance  of Eschericia  coli and Staphilococcus  aureus isolated  from  conventional  and  organic  pork meat. Journal of food producing . 17:319-325.
Nguyen,  F,  A.  L.  Starosta.,  S.  Arenz,  D.  Sohmen,  A. Dhonofer,  dan  D.  N.  Wilson.  2014.  Tetracyclin antibiotic  and  resistant  mechanism. Journal  of Biological Chemical 395:(5):559-575.
Office  Internationale  des  Epizooties  (OIE).  2013.
Harmonisation of national antimicrobial resistance surveillance and monitoring programmes chapter 6.7.www.oie.int/fileadmin/Home/eng/Health_s tandards/tahc/2010/en_chaptire_1.6.7.htm.
[Diakses pada 2 September 2017].
Phillips,  I.  M.  Casewell,  T.  Cox,  B.  Groot,  C.  Friis,  R. Jones,  C.  Nightingale,  R.  Preston,  dan  J. Waddell.  2004.  Does  the  Use  of  Antibiotics  in Food  Animals  Pose  A  Risk  to  Human  Health?. Journal Of Antimicrobial Chemotherapy . 53;28- 52. [ Diakses pada 2 September 2017].