UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL RIMPANGLENGKUAS PUTIH ( Alpinia galanga L. Willd) TERHADAPBAKTERI Klebsiella pneumoniae ISOLAT URIN PADA PENDERITA INFEKSI SALURAN KEMIH
Arini Shintia 1) , Fatimawali 1) , Jainer Pasca Siampa 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
White galangal rhizome is a plant that has properties such as antifungal and antibacterial. White  galangal  rhizome  contains  of  active  compounds,  namely  flavonoid,  phenol  and terpenoid  compounds  which  can  inhibit  microbes.  This  study  aimed  to  determine  the antibacterial  activity  of  ethanol  extracts  of  white  galangal  rhizome  against  Klebsiella pneumoniae urine isolate in  patients  with urinary tract infections.  White  galangal rhizome plants were extracted using 96% ethanol solvent. Antibacterial activity test was performed using the disc and wells method. The result showed that ethanol extracts of white galangal rhizome  has  antibacterial  activity  against  the  bacteria  Klebsiella  pneumoniae.  In  the  disc method with concentrations of 80%, 60%, 40%, 20% and 10% the diameter of the inhibition zone formed are 9,8 mm; 9 mm; 7,8 mm; 7,9 mm and 7,7 mm. Inhibition of the disc method is  categorized  as  medium  because  the  diameter  of  the  zone  formed  is  only  around  an average  of  5-10  mm.  Whereas  in  the  wells  method  for  concentrations  of  80%,  60%,  40%, 20% and 10% the diameter of the inhibition zone are 11,3 mm; 10,3 mm; 9,3 mm; 6,3 mm and  2,6  mm.  The  inhibitory  ability  at  concentrations  of  80%  and  60%  is  categorized  as strong  because  it  has  an  average  of  10-20  mm,  for  concentrations  of  40%  and  20%  are categorized as medium, because it has an average inhibition zone diameter of 5-10 mm, and for  concentration  of  10%  is  categorized  as  weak  because  it  has  a  inhibition  diameter  <5 mm.
Keywords : White Galangal Rhizome (Alpinia galanga L. Willd), Klebsiella pneumonia

## ABSTRAK
Rimpang  lengkuas  putih  merupakan  tanaman  yang  memiliki  khasiat  di  antaranya  sebagai antifungi  dan  antibakteri.  Rimpang  Lengkuas  putih  mengandung  golongan  senyawa  aktif yaitu  golongan  senyawa  flavonoid,  fenol  dan  terpenoid  yang  dapat  menghambat  mikroba. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  rimpang Lengkuas  putih  terhadap  bakteri Klebisella  pneumoniae isolat  urin  pada  penderita  infeksi saluran kemih. Tanaman rimpang Lengkuas putih di ekstraksi dengan menggunakan pelarut etanol 96%. Uji  aktivitas  antibakteri  dengan metode cakram  dan sumuran. Hasil penelitian menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  rimpang  Lengkuas  putih  memiliki  aktivitas  antibakteri terhadap  bakteri Klebsiella  pneumoniae. Pada  metode  cakram  dengan  konsentrasi  80%, 60%,  40%,  20%  dan  10%  diameter  zona  hambat  yang  terbentuk  ialah  9,8  mm;  9  mm;  7,8 mm; 7,9 mm dan 7,7 mm. Penghambatan pada metode cakram dikategorikan sedang karena diameter  zona  yang  terbentuk  hanya  berkisar  pada  rata-rata  5-10  mm.  Sedangkan  pada metode  sumuran  untuk  konsentrasi  80%,  60%,  40%,  20%  dan  10%  diameter  zona hambatnya  ialah  11,3  mm;  10,3  mm;  9,3  mm;  6,3  mm  dan  2,6  mm.  Kemampuan penghambatan pada konsentrasi 80% dan 60% di kategorikan kuat karena memiliki diameter zona  hambat  rata-rata  10-20  mm,  untuk  konsentrasi  40%  dan  20%  di  kategorikan  sedang, karena  memiliki  diameter  zona  hambat  rata-rata  5-10  mm,  dan  untuk  konsentrasi  10%  di kategorikan lemah karena memiliki diameter zona hambat <5 mm.
Kata  Kunci : Rimpang  lengkuas  putih  (Alpinia  galanga  L.  Willd),  Klebsiella  pneumoniae

## PENDAHULUAN
Penyakit infeksi merupakan
salah satu masalah dalam dunia kesehatan  (Rambiko,  2016).  Penyakit infeksi  pada  manusia  salah  satunya disebabkan oleh infeksi bakteri patogen. Beberapa  tahun  terakhir  ini,  bakteri patogen  yang  resisten  terhadap  obat semakin banyak dikarenakan pemakaian obat  antimikroba  komersil  yang  tidak tepat  pada  pengobatan  penyakit  infeksi (Merchese and Shito, 2001; Karaman et al .,  2003  dalam  Aliero et  al .,  2008).
Pengobatan  penyakit  infeksi  umumnya menggunakan  antibiotik.  Pemakaian antibiotik secara rasional sudah menjadi keharusan. Ketidakrasionalan penggunaan  dan  pemakaian  yang  tidak tepat  akan  menyebabkan  munculnya banyak  efek  samping  dan  resistensi bakteri (Sutrisna, 2012). Situasi tersebut ditambah  dengan  efek  samping  yang tidak  diinginkan  dari  beberapa  obat antibiotik dan kebutuhan yang mendesak untuk penyembuhan penyakit infeksi. Masalah-masalah di atas merupakan  problem  yang  serius  dalam dunia  kesehatan,  sehingga  mendesak para  ilmuwan  untuk  mencari  obat antibakteri  yang  baru  yang  berasal  dari tanaman  (Merchese and Shito,  2001; Karaman et  al .,  2003  dalam  Aliero et al ., 2008).
Rimpang  Lengkuas  putih  mengandung kurang lebih 1% minyak atsiri berwarna kuning  kehijauan.  Selain  itu  rimpang Lengkuas  juga  mengandung  resin  yang disebut  galangol,  kristal  berwarna kuning yang disebut kaemferid,
galangin,
kadinen, heksabidrokadalen hidrat, kuersetin dan
amilum (sinaga, 2005). Hasil penapisan fitokimia  menujukkan  bahwa  ekstrak etil  asetat  dan  ekstrak  etanol  rimpang Lengkuas putih mengandung flavonoid, tanin, kuinon dan steroid atau terpenoid.  Rimpang  Lengkuas  putih memiliki kandungan senyawa flavonoid yang diduga dapat menghambat pertumbuhan bakteri yang telah resisten terhadap antibiotik (Kusriani dan shofia, 2015).
Infeksi  Saluran  Kemih  (ISK) adalah  suatu  keadaan  yang  disebabkan karena  adanya  invasi  bakteri  pada saluran  kemih.  Infeksi  saluran  kemih disebabkan  oleh  bakteri Escherechia coli, Klebsiella pneumoniae dan Pseudomonas  aeruginosa (Tessy  & Suwanto, 2001). Antibiotik yang digunakan  untuk  pengobatan  ISK sebagian  besar  yakni  fluoroquinolon dan nitrofurantoin (Useng, 2014).
Salah satu keanekaragaman hayati yang mempunyai banyak manfaat yaitu  Lengkuas  putih (Alpinia  galanga
L. Willd ) .  Lengkuas  putih (Alpinia galanga L. Willd ) merupakan  anggota familia Zingiberaceae. Rimpang
lengkuas  mudah  diperoleh  di  Indonesia dan  manjur  sebagai  obat  gosok  untuk penyakit  jamur  kulit  (panu)  sebelum obat-obatan modern berkembang seperti sekarang. Lengkuas telah dipelajari oleh ilmuwan terdahulu, ditemukan kandungan  bermacam-macam  khasiat lengkuas  diantaranya  sebagai  antifungi dan  antibakteri.  Hal  ini  dibuktikan dengan penelitian Yuharmen dkk (2002) yang  melihat  aktivitas  penghambatan oleh  minyak  atsiri  dan  fraksi  methanol rimpang Lengkuas pada beberapa
spesies bakteri dan fungi.
Menurut penelitian Puput (2018) ekstrak rimpang Lengkuas putih mempunyai daya antibakteri. Berdasarkan  latar  belakang  di  atas maka  peneliti  merasa  perlu  untuk melakukan suatu penelitian yang bertujuan untuk  membuktikan aktivitas antibakteri  dari  ekstrak  etanol  rimpang Lengkuas  putih  ( Alpinia  galanga L.
Willd)    terhadap  bakteri Klebsiella pneumoniae isolat  urin  pada  penderita infeksi saluran kemih.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  pada bulan  Mei  2019  –  Juli  2019  di laboratorium Farmasi Lanjutan Program Studi Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu  Pengetahuan  Alam  Universitas Sam Ratulangi Manado.
Alat dan Bahan Alat Alat yang digunakan dalam
penelitian yaitu timbangan analitik (aeADAM ® ),  blender  ( Philips ® ),  oven, gelas ukur ( Pyrex ® ), tabung reaksi (Pyrex ® ), Erlenmeyer ( Pyrex ® ), beker gelas ( Pyrex ® ) , corong,  batang  pengaduk,  cawan  petri ( Pyrex ® ),  kertas  saring,  ayakan,  jarum  ose, pecadang, pingset, mikropipet (ecopippette TM ), laminar  air  flaw (N- Biotecck ® ),  autoklav  (ALP ® ),  incubator (MMM  Group ® ), aluminium  foil , Hot  plate (NESCO ® Lab),  mistar  berskala  (Combo ® ), kertas lebel dan spritus.

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu  bakteri Klebsiella pneumoniae , ekstrak rimpang Lengkuas putih,  etanol  96%,  aquades,  media nutrient  agar  (NA), kertas  cakram, kertas cakram  antibiotik,  Ciprofloxacin, NaCl  0,9%,  H 2 SO 4 0,36  N  dan BaCl 2. 2H 2 O 1,175%, larutan McFarland dan CMC 1%.

## Prosedur Kerja Pengambilan Sampel
Sampel  yang  digunakan  diambil dari  Desa  Kolongan  Tetempangan, Kecamatan Kalawat, Kabupaten Minahasa Utara, Sulawesi Utara.
Sampel  yang  diambil  adalah  bagian rimpang Lengkuas putih.

## Preparasi Sampel
Pada  tahap  awal  sampel  rimpang Lengkuas putih ditimbang dengan berat 2  kg.  Selanjutnya  dicuci  dibawah  air mengalir dengan tujuan untuk menghilangkan pengotor. Sampel kemudian dirajam sebelum dikeringkan.
Pengeringan  sampel  dilakukan  dengan cara di oven pada suhu 40 ℃ . Selanjutnya  sampel  diblender  hingga menjadi  serbuk  dan  ditimbang.  Serbuk yang dihasilkan di ayak dengan ayakan , hingga diperoleh serbuk halus.

## Pembuatan Ekstrak
Metode  yang  digunakan  untuk mengekstraksi sampel rimpang Lengkuas putih ( Alpinia galanga L.Willd) yaitu dengan metode maserasi. Sampel  ditimbang  sebanyak  150  g, kemudian  dimasukkan  ke  dalam  wadah tertutup  rapat.  Sampel  yang  telah ditimbang  di  ekstraksi  dengan  750  mL pelarut  etanol  96%  pada  suhu  kamar selama  3  hari  sambil  sesekali  diaduk. Setelah 3 hari sampel disaring
menggunakan kertas saring menghasilkan filtrat satu. Sisa sampel di maserasi  kembali  dengan  450  mL pelarut etanol 96% selama 2 hari sambil sesekali  diaduk  kemudian  disaring dengan  kertas  saring  dan  diperoleh filtrat  dua.  Sisanya  dimaserasi  kembali dengan  450  mL  pelarut  etanol  96% selama  2  hari  sambil  sesekali  diaduk kemudian  diperoleh  filtrat  tiga.  Filtrat satu, dua dan tiga kemudian dikumpulkan dan diuapkan menggunakan inkubator , sehingga diperoleh  ekstrak  kental  Lengkuas putih.  Ekstrak  kental  yang  diperoleh disimpan  dalam  wadah  tertutup  dan dimasukkan dalam lemari pendingin.

## Sterilisasi Alat
Sebelum  alat  digunakan  harus disterilisasi  terlebih dahulu  dengan cara dibungkus menggunakan aluminium foil
kemudian dimasukkan ke dalam autoklaf  dan  disterilisasi  selama  15
menit.
Pembuatan  Media  Dasar  dan  Media Pembenihan
Diambil Nutrient  Agar  (NA) sebanyak  5,6  g    dilarutkan  dalam  200 mL aquadest menggunakan erlenmeyer. Setelah itu, media dihomogenkan dengan stirer diatas  penangas  air sampai  mendidih.  Media  yang  sudah homogen  ini  disterilkan  dalam  autoklaf pada  suhu  121 0 C  selama  15  menit, kemudian  didinginkan  sampai  suhu  ± 45-50 0 C.  Media  dasar  dan  media
pembenihan digunakan
dalam pembuatan  media  pengujian  sebagai lapisan dasar dan lapisan kedua.

## Regenerasi Bakteri Uji
Bakteri Klebsiella  pneumoniaee yang  akan  di  ujikan  harus  terlebih dahulu  diregenerasikan.  Hal  pertama yang  dilakukan  yaitu  membuat  media miring nutrient  agar  (NA) . Media (NA) dituangkan  kedalam  tabung  reaksi kemudian diletakkan pada posisi miring dan  di  biarkan  hingga  memadat. Selanjutnya  bakteri  uji  digoreskan  ke agar  miring nutrient  agar  (NA) dan  di inkubasi pada suhu 37 ℃ selama 24 jam.
Pembuatan  Larutan Mc.  Farland 0,5 (Standar Kekeruhan)
Larutan  H 2 SO 4 1%  sebanyak  9,95  mL dicampurkan  dengan  larutan  BaCl 2 .2H 2 O 1,175% sebanyak 0,05 mL dalam erlenmeyer.  Kemudian  dikocok  sampai terbentuk larutan yang keruh.
Kekeruhan  ini  dipakai  sebagai  standar kekeruhan suspensi bakteri uji.

## Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Bakteri uji Klebsiella pneumoniae yang  telah  diregenerasi  di ambil dengan jarum ose lalu dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi berisi  5  mL  larutan  NaCl  steril  0,9%. Dan  suspensi  yang  telah  terbentuk disetarakan kekeruhannya dengan larutan standar McFarland 0,5.

## Larutan Uji
Larutan  uji  dibuat  dari  hasil ekstraksi  yang  diperoleh  kemudian diencerkan menggunakan aquadest sebanyak lima kali pengenceran dengan masing-masing  konsentrasi  80%,  60%,
40%, 20% dan 10% dengan menggunakan rumus :

## Larutan Kontrol Positif
Larutan  kontrol  positif  dibuat  dari sediaan  obat  tablet  Ciprofloxacin  500 mg,  dengan  cara  di  ambil  1  tablet kemudian  digerus  dan  di  timbang seberat  65  mg  Selanjutnya  di  encerkan dalam  50  mL  aquadest.  Selanjutnya dibuat  dengan  cara  di  ambil  1  mL larutan  dan  ditambahkan  aquadest hingga  10  mL  untuk  memperoleh larutan Ciprofloxacin 5µg/50µL.

## Uji Aktivitas
a. Metode Cakram
Pada pengujian dengan metode cakram, yaitu  sebanyak  15  mL  media Nutrient Agar  (NA) dituangkan  ke  dalam  cawan petri  dan  dibiarkan  hingga  menjadi padat.  Kemudian  dimasukkan  1  mL suspensi  bakteri Klebsiella  pneumoniae dan  disebarkan  biakan  bakteri  dengan menggunakan  pipa  bentuk  L  agar suspensi  tersebar  merata  pada  media dan  diamkan  selama  10  menit  agar suspensi terserap pada media.
Diletakkan kertas cakram Ciprofloxacin (kontrol  positif),  kertas  cakram  yang  di tetesi larutan CMC (kontrol negatif) dan kertas  cakram  yang  ditetesi  larutan  uji dengan  konsentrasi  80%,  60%,  40%, 20%  dan  10%  menggunakan  pinset steril. Dilakukan pengulangan sebanyak 3  kali.  Selanjutnya  semua  media  di inkubasi ke dalam inkubator selaama 24 jam  pada  suhu  37 ℃ .  Lalu  diukur  zona bening yang terbentuk dengan menggunakan penggaris ukuran millimeter. b. Metode Sumuran
Pada pengujian dengan menggunakan  metode  sumuran,  dibuat dengan  2  lapisan  media  nutrient  agar,
yaitu dengan cara :
1. Lapisan dasar dibuat dengan menuangkan  masing-masing  10  mL media  nutrient  agar  ke  dalam  cawan petri  kemudian  dibiarkan  hingga memadat.
2. Lapisan  dasar  media  ditanam  7 pencadang  baja  dan  diatur  jaraknya agar daerah pengamatan tidak bertumpu.
3. Suspensi bakteri dicampurkan dalam media nutrient agar
4. Dituangkan  10  mL  media  nutrient agar  pada  tiap  cawan  petri  yang diletakkan    pencadang  sebagai lapisan  kedua.  Setelah  memadat, pancadang  diangkat  secara  aseptik dari  masing-masing  cawan  petri menggunakan pinset steril.
Sehingga terbentuk sumur-sumur.
5. Masing-masing  lubang  sumuran  di isi  dengan  larutan  uji,  larutan kontrol  positif  dan  larutan  kontrol negatif  masing-masing  50  µL dilakukan  pengulangan  sebanyak  3 kali.
6. Selanjutnya semua media diinkubasi  pada  suhu  37 0 C  selama 24 jam didalam incubator.

## Pengukuran Zona Hambat
Pengamatan  dilakukan  setelah 1x24 jam masa inkubasi. Zona bening merupakan petunjuk kepekaan
mikroba  terhadap  bahan  antimikroba yang  digunakan  sebagai  bahan  uji
M 1 x V 1 = M 2 x V 2

## Metode Sumuran

## Uji Aktivitas Metode Cakram
Tabel 1. Hasil Pengukuran Diameter Zona
Hambat menggunakan Metode Cakram
yang dinyatakan dengan lebar diameter zona hambat. Diameter zona hambat diukur kemudian dikategorikan kekuatan daya antibakterinya berdasarkan penggolongan Davis dan Stout (1971).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Identifikasi Sampel
Tanaman Lengkuas Putih ( Alpinia  galanga L.  Willd)  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  di identifikasi  pada  bagian  taksonomi tumbuhan,  Jurusan  Biologi  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan
Alam Universitas Sam Ratulangi Manado. Tujuan di lakukannya identifikasi  adalah  untuk  mengetahui kebenaran dari sampel yang di gunakan

## Hasil Ekstraksi
Sampel basah rimpang
Lengkuas  putih  sebanyak  2  kg  yang dibuat  menjadi  simplisia  dan  ekstraksi selama  7  hari  dengan  menggunakan pelarut  etanol  96%  menghasilkan  filtrat sebanyak  1140  mL.  Filtrat  yang dihasilkan kemudian di uapkan menggunakan  inkubator  dengan  tujuan menguapkan etanol dari proses maserasi sehingga  menghasilkan  ekstrak  kental rimpang  Lengkuas  putih  sebanyak  9,6 gram.  Dari  perolehan  ekstrak  ini,  telah dilakukan perhitungan rendemen.
Dengan rendemen sampel yang diperoleh yaitu sebesar 7,5%, rendemen ekstrak  yang  diperoleh  yaitu  sebesar 0,83%  dan  rendemen  total yang diperoleh yaitu sebesar 6,4%.

## KESIMPULAN
1. Ekstrak  rimpang  Lengkuas  putih (Alpinia galanga L. Willd ) memiliki aktivitas antibakteri  terhadap bakteri Klebsiella pneumonia
2. Untuk  metode  sumuran  konsentrasi 80%  dan  60%  termasuk  kategori kuat,  konsentrasi  40%  dan  20% termasuk kategori sedang dan konsentrasi  10%  termasuk  dalam kategori lemah. Dalam penelitian ini metode  sumuran  menghasilkan  daya hambat  yang  lebih  baik  di  banding dengan metode cakram.
SARAN Perlu di  lakukan penelitian  yang lebih lanjut mengenai potensi aktivitas  antibakteri  dari  rimpang Lengkuas  putih  pada  jenis  bakteri yang lain.

## DAFTAR PUSTAKA
Aliero, A., Aliero, B. L. and Buhari, U. 2008. Preliminary phytochemical  and  antibacterial screening of Scadoxus multiflorus, Int.  Jor.  P.  App. Scs ., 2(4) :13-17.
Davis,  W.  W.,  T.R.  Stout.  1971.  Disc plate  method  of  microbiological assay . Journal  of  microbiology
22 : 659-665.
Kusriani,  R.H.,dan  Shofia  Az  Zahra,
2015,  Skrinning  Fitokimia  dan Penetapan Kadar Senyawa Fenolik  Total  Ekstrak  Rimpang Lengkuas  Merah  dan  Rimpang Lengkuas Putih (Alpinia galangal L.), Prosiding  Seminar Nasional  Penelitian  dan  PKM
Kesehatan ,  Vol.  1,  No.  1 ,  Hal.
295-302.
Puput, H. S. H. 2019. Uji Daya Hambat Ekstrak Rimpang Lengkuas
Putih (Alpinia  galanga (L).
Willd)  Terhadap  Pertumbuhan Bakteri  Klebsiella  pneumoniae Isolat  Sputum  Pada  Penderita Pnemonia  Resisten  antibiotik
Seftriakson .  [Skripsi] .  Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan  Alam:  Universitas
Sam Ratulangi Manado.
Rambiko, C. S., Fatimawali., Bodhi, W.
2016.  Uji  sensitivitas  bakteri penyebab  infeksi  nosokomial saluran kemih akibat penggunaan  kateter  terhadap antibiotic ampicillin, amoxicillin dan  Ciprofloxacin  di  RSUP Prof.dr.R.D.Kandou Manado. Jurnal Ilmiah Farmasi Pharmacon . 5(1):1-7. Sinaga, Ernawati. 2005. Alpinia galanga (L)  Willd  [online]. Pusat Penelitian dan Pengembangan  Tumbuhan  Obat Universitas Nasional/P3TO UNAS. Jakarta Selatan. Tersedia ( http://iptekapiji.or.id/artikel/tent angtanaman obat /unas/ lengkuas.  pdf )    diakses  pada tanggal 2 Januari 2013. Sutrisna,  E.  M.  2012.  Penggunaan Antibiotik Secara Rasional . Seminar IDI Girobogan, Purwodadi.
Tessy  A,  Ardayo.,  Suwanto.  2001.
Infeksi  salauran  kemih  dalam
Buku Ajar Ilmu Penyakit.Dalam. Jilid  3.  Edisi  3.  Balai  Penerbit FKUI, Jakarta
Yuharmen,  Eryanti,  dan  Nurbalatif.
2002. Uji  Aktivitas  Antimikroba Minyak Atsiri dan Ekstrak Methanol  Lengkuas  (Lenguas galang). Jurusan Kimia, FMIPA. Universitas Riau, Riau.