ISSN Cetak         : 2087-9423
ISSN Elektronik : 2620-309X

## DIAGNOSIS DAN PENGENDALIAN PENYAKIT INFEKSIUS PADA INDUK KUDA LAUT, Hippocampus kuda DI HATCHERY

## DISEASES INFECTION AND CONTROL MEASUREMENT ON SEAHORSE,
Hippocampus kuda BROODSTOCK IN HATCHERY

## Des Roza*
Balai Besar Riset Budidaya Laut dan Penyuluhan Perikanan Gondol, Bali *E-mail: desrozaboer14@gmail.com

## ABSTRACT
Seed production of seahorse, Hippocampus kuda from hatchery has been developed in North Bali. The purpose of this research to diagnose and control the causative agent of infectious disease on seahorse broodstock. However, high mortality of the seahorse broodstock occured during rearing period in the hatchery  which  caused  by  diseases  infection.  This  experiment  was  done  to  diagnose  and  control measurement the causative agent of the seahorse diseases found in the hatchery. The results showed that MIC test using 1 ppm nifurpirinol 10% and 2.5 ppm vetstrep was effective to inhibit the growth of Vibrio alginolyticus. Bath method in mixed solution of 0.5 ppm copper sulfate and 20 ppm formalin was effective for Cryptocaryon irritans infection, while bath solution of 5 ppm acriflavin neutral and 20  ppm  had  killed  Trichodina sp. Based  on  result  of  showed  seahorse  broodstock  infected  by bacterium  fit  to  V.  alginolyticus  characteristics  and  parasitic  protozoan  Cilliates,  C.  irritans  and Trichodina sp.
Keywords : bacterium, control measurement, diseases, protozoa, seahorse

## ABSTRAK
Produksi  benih  kuda  laut, Hippocampus  kuda di hatchery telah  berkembang  di  Bali  Utara.  Tujuan penelitian  ini  untuk  mendiagnosis  dan  pengendalian  penyakit  infeksius  pada  induk  kuda  laut  di hatchery. Tetapi masalah yang dihadapi adalah tingginya tingkat kematian induk selama pemeliharaan di hatchery ,  yang  diduga  akibat  infeksi  penyakit.  Penelitian  ini  dilakukan  untuk  mendiagnosis  agen penyakit  melalui  serangkaian  observasi,  isolasi,  dan  identifikasi  serta  melakukan  pengendalian penyakit.  Hasil  menunjukkan  bahwa  dari  uji  MIC  memperlihatkan  bahwa  pertumbuhan  bakteri V. alginolyticus dapat dihambat dengan larutan campuran 1 ppm nifurpirinol 10% dan 2,5 ppm vetstrep. Sedangkan  penggunaan  copper  sulfat  0,5  ppm  dan  formalin  20  ppm  mampu  mematikan C. irritans, sementara  itu  acriflavin  netral  5  ppm  dan  formalin  20  ppm  efektif  membunuh Trichodina sp. Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan dari induk kuda laut telah diperoleh satu isolat bakteri Vibrio  alginolyticus dan  duajenis  protozoa  Cilliata  parasitic,  yaitu Cryptocaryon  irritans dan Trichodina sp.
Kata kunci : bakteri, kuda laut, pengendalian, penyakit, protozoa

## I. PENDAHULUAN
Daerah  Bali  Utara  telah  dikembang- kan budidaya kuda laut terutama Hippocampus  kuda di hatchery .  Awalnya usaha  ini  hanya  sebagai  alternatif  pada  saat harga  benih  kerapu  dan  nener  bandeng anjlok.  Tetapi  setelah  berjalan,  beberapa pengusaha  justru  menjadikan  usaha  ini sebagai  komoditas  utama  karena  harga  kuda
laut  ini  sangat  menjanjikan.  Sebagaimana diketahui bahwa kuda laut ini selain diminati sebagai  ikan  hias  akuarium  juga  banyak dicari  sebagai  bahan  baku  obat-obatan tradisional.
Kuda  laut  merupakan  ikan  hias akuarium  yang  sangat  unik  dengan  daya tarik yang sangat mempesona, ini terlihat dari posisi  tubuhnya  yang  tegak  disaat  berenang. Menurut  Koldewey  dan  Smith  (2010)
keunikan  lainnya  adalah  dalam  proses reproduksinya,  yaitu  hewan  jantan  yang hamil  dan  mengerami  telur  sampai  menetas. Sejak  ribuan  tahun  silam  kuda  laut  banyak digunakan  sebagai  bahan  baku  obat-obatan tradisional Cina “ Traditional  Chinese Medicine ”  (Hansen  dan  Cummins,  2002). Kuda  laut  berkhasiat  untuk  mengobati berbagai  macam  penyakit  antara  lain disfungsi  jantung,  ginjal  dan  hati,  mem- perlancar peredaran darah, disfungsi vitalitas seksual,  memperkuat  rahim,  mencegah kanker  payudara,  sakit  kulit,  gangguan pencernaan, pernapasan dan fungsi otak, anti aging  serta  masih  banyak  lagi.  Hal  ini  yang menjadikan kuda laut bak primadona baik di pasar  lokal  maupun  ekspor.  Salah  satu spesies  kuda  laut  yang  banyak  diminati adalah H.  kuda atau  dikenal  juga  dengan tangkur  kuda.  Syafiuddin et  al. (2008) melaporkan  sebagai  ikan  hias  harga  seekor kuda laut berkisar antara Rp. 30.000-50.000, sedangkan untuk bahan obat-obatan kuda laut kering harganya Rp. 3.000.000-5.000.000/kg bahkan  di  Hongkong  dan  Cina  harganya mencapai  US  $  1.000-1.500/kg.  Akibat tingginya  permintaan  pasar  akan  kuda  laut kering,  menyebabkan  terjadinya  eksploitasi yang berlebihan dan tanpa kendali, sehingga berdampak  terhadap  populasi  kuda  laut  di alam terancam punah “vurnarable ” (Asmanelli dan Ikhsan, 2000; Sadili, 2005). Tahun  2004  dikeluarkan  keputusan bahwa  kuda  laut  termasuk  ke  dalam Appendix  II  CITES,  dimana  ekspor  dan impor hewan ini menurut Mira dan Yulianto (2007)  harus  mempunyai  izin  ( certificate  of origin ). Pawar et al. (2011) mengatakan kuda laut  hidup  pada  zona  litoral  atau  perairan lepas  pantai,  dimana  penetrasi  cahaya matahari  dapat  masuk  ke  dasar  perairan. Sedangkan penyebarannya meliputi Samudera  Hindia  dan  Samudera  Pasifik sampai  ke  kepulauan  Hawai  dan  Jepang berdasarkan  hasil  penelitian  Faleiro et  al . (2008) dan Raj et al . (2010). Di alam musim memijah  kuda  laut, H.  kuda hanya berlangsung  beberapa  bulan  dalam  setahun
dan  puncaknya  pada  Oktober-Pebruari. Family  Syngnathidae  termasuk  kuda  laut mempunyai  musim  kawin  sepanjang  tahun. Vincent  and  Clifton (2001)  menyatakan pemijahan terjadi biasanya di pagi, siang dan sore  hari  karena  hewan  ini  termasuk “ diurnal ”  atau  aktif  pada  siang  hari. Umumnya seekor induk betina Hippocampus spp. menghasilkan 100-200 butir telur, tetapi seekor induk betina H. kuda dengan panjang tubuh  10-14  cm  bisa  menghasilkan  300-600 butir  telur  (Ari et  al .,  2005;  Mira  dan Yulianto,  2007).  Setelah    10-15  hari  kuda laut ini dapat memijah kembali, karena hanya butuh  waktu  10-12  hari  untuk    pematangan gonadnya  (Vincent  and  Clifton,  2001; Asmanelli dan Ikhsan, 2000).
Berdasarkan hal tersebut telah banyak dilakukan  upaya  budidaya  kuda  laut  ini, salah  satunya  dengan  usaha  pembenihannya di hatchery .  Beberapa  tahun  belakangan  ini di hatchery sering  mengalami  kendala  yaitu terjadinya  kematian  induk  secara  massal. Salah  satu  penyebabnya  diduga  akibat adanya infeksi penyakit, untuk itu dilakukan monitoring  dan  observasi  terhadap  induk kuda  laut  yang  dipelihara  di hatchery di daerah  Bali  Utara,  diharapkan  dengan mengetahui  agen  penyebab  serta  teknik penanggulangannya  dapat  meminimalisir tingkat kematian sehingga produksi kuda laut meningkat.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mendiagnosis  dan  pengendalian  penyakit infeksius pada induk kuda laut di hatchery.

## II. METODE PENELITIAN
2.1. Waktu dan Lokasi Penelitian Penelitian ini dilakukan di Laboratorium  Patologi  Balai  Besar  Riset Budidaya  Laut  dan  Penyuluhan  Perikanan (BBRBLPP)  Gondol,  Gerokgak,  Buleleng, Bali  dari  bulan  September  2016  sampai Februari 2017.

## 2.2. Hewan Uji
Hewan  uji  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  induk  kuda  laut,
Hippocampus kuda milik hatchery swasta  di Sanggalangit,  Gerokgak,  Buleleng,  Bali (Gambar  1  dan  2).  Terhadap hatchery yang mengalami kasus kematian dilakukan pengambilan sampel induk kuda laut masing- masing  sebanyak  20  ekor  pada  bulan September dan November 2016 serta Januari 2017  dengan  panjang  berkisar  antara  11-15 cm  dan  berat  tubuh  10-17  g.  Induk-induk kuda  laut  tersebut  dibawa  ke  Laboratorium Patologi  Balai  Besar  Riset  Budidaya  Laut dan  Penyuluhan  Perikanan  (BBRBLPP) Gondol,  Gerokgak,  Buleleng,  Bali  dalam keadaan  hidup  dengan  dimasukan  ke  dalam kantong  plastik  dan  ditambahkan  oksigen untuk  diobservasi.  Pengamatan  induk  di- lakukan  secara  visual  untuk  mengetahui gejala  klinis  dan  secara  mikroskopis  untuk mengetahui  adanya  organisme  penempel penyebab  infeksi,  baik  bakteri  maupun parasit.  Kemudian  dilanjutkan  dengan serangkaian  proses  isolasi  terutama  untuk bakteri.

## 2.3. Isolasi Bakteri
Isolasi bakteri dari sampel induk kuda laut  dilakukan  menggunakan  empat  jenis media agar, antara lain TSA (Trycticase Soy Agar)  media  ini  merupakan  media  yang umum  untuk  tumbuh  semua  jenis  bakteri, TCBSA  (Thiosulphate  Citrate  Bile  Sucrose Agar)  adalah  agar  selektif  untuk Vibrio . Sebagian  kecil  potongan  tubuh  kuda  laut yang  diduga  terinfeksi  bakteri  masing- masing  diinokulasikan  pada  ke  2  media tersebut, kemudian diinkubasi pada inkubator dengan  suhu  27°C  selama  8-12  jam. Terhadap  koloni  bakteri  yang  tumbuh dominan  dilakukan  purifikasi  dengan  meng- gunakan media MA (Marine Agar) dan isolat bakteri  yang  telah  dipurifikasi  diuji karakteristik  morfologi  seperti  penelitian Holt et al. (2000) dan Roza (2017).

## 2.4. Pengamatan Parasit
Pengamatan parasit dilakukan dengan mengamati preparat segar  lendir permukaan tubuh dan potongan organ tubuh induk kuda
laut termasuk organ dalam antara lain ginjal, hepar dan lambung. Lendir dan bagian organ tubuh  tersebut  diletakkan  pada  gelas  objek dan ditutup dengan gelas penutup, kemudian diamati  di  bawah  mikroskop  pada  pem- besaran  5  x  10  dan  10  x  20.  Parasit  yang ditemukan kemudian diidentifikasi mengikuti Vincent dan Clifton (2001) dan Sanaye et al . (2013).

## 2.5. Pencegahan dan Penanggulangan Penyakit
Pencegahan  dan  penanggulangan infeksi  bakteri  dan  protozoa  dilakukan dengan  uji  MIC  secara  in  vitro  ( Minimum Inhibitory  Concentration )  menggunakan  2 jenis  antibiotik  dan  2  jenis  anti  parasit berdasarkan  Roza et  al. (2010)  dan  Roza (2011).  Ke  dalam  cawan  petri  berisi  20  mL air  laut  steril  yang  sudah  dicampur  dengan masing-masing konsentrasi antibiotik yaitu 0; 0,1;  0,25;  0,5;  1;  2,5;  5;  10;  25;  50  dan  100 ppm diinokulasikan V. alginolyticus , kemudian  inkubasi  pada  25°C  selama  24 jam.  Setelah  masa  inkubasi  diamati pertumbuhan bakteri tersebut, lalu dilakukan reisolasi  pada  media  TSA  untuk  konfirmasi pertumbuhan  bakteri.  Konsentrasi  antibiotik dan  antiparasit  diaplikasikan  langsung  pada bak induk kuda laut dengan cara perendaman selama  satu  jam.  Konsentrasi  dikatakan efektif  apabila  dapat  menghambat  atau membunuh pertumbuhan bakteri atau parasit.

## III. HASIL  DAN PEMBAHASAN

## 3.1.    Hasil
Selama  periode  bulan  September 2016  sampai  Februari  2017  terjadi  kematian massal  induk  kuda  laut, Hippocampus  kuda di hatchery milik  swasta  di  wilayah  Bali Utara.  Hal  ini  sudah  sering  terjadi sebelumnya  tapi  tidak  dilaporkan.  Secara visual  induk  kuda  laut, H.  kuda yang  mati terlihat warna tubuhnya mengalami perubahan menjadi pucat agak keputihan dan juga  ditemukan  adanya  bintik-bintik  putih. Gejala klinis yang terlihat sebelum terjadinya
kematian,  beberapa  ekor  induk  kuda  laut diam di dasar bak dan tidak lincah berenang seperti  biasanya,  kadang-kadang  bergerak tidak  terkontrol,  bahkan  ada  yang  meng- gesekkan badannya ke dinding bak. Beberapa hari  setelah  itu  induk  kuda  laut  ditemukan mati.
3.1.1.   Morfologi Kuda Laut H. kuda Secara morfologi tubuh kuda laut, H. kuda tergolong  unik  karena  kepalanya berbentuk  segitiga  mirip  kepala  kuda,  mulut atau moncong panjang dan membentuk sudut 90°  dengan  badannya.  Menurut  Lin et  al . (2006)  dan  Lourie et  al. (2001)  bagian tubuhnya  tidak  bersisik  tetapi  ditutupi  oleh segmen  tulang  yang  menyerupai  perisai, mempunyai satu sirip punggung ( dorsal fin ), sepasang  sirip  dada  ( pectoral  fin )  dan  satu sirip anus ( anal fin ). Kuda laut sangat lambat ketika  berenang  karena  posisi  tubuhnya vertikal  sehingga  tekanan  air  pada  tubuhnya menjadi  besar,  yang  membuat  gerakannya lambat.  Sadili  (2015)  melaporkan  di  saat kuda  laut  berenang  lambat,  maka  dengan kecepatan  penuh  sirip-siripnya  bergetar selaju 35 getaran/detik, tetapi menurut Lourie et  al .  (2001);  Lin et  al. (2008;  2009b)  dan Sadili (2015) kemampuan kuda laut merubah warna  tubuhnya  atau  mimikri  merupakan suatu upaya berkamuflase dalam mengelabui musuh,  predator  maupun  mangsanya.  Kuda laut  memiliki  baju  zirah  terbaik,  bentuk tulangnya  cenderung  kotak  dan  memiliki kerangka tulang yang cukup kompleks.
Hewan  ini  sangat  rakus  karena  tidak memiliki  perut  untuk  menampung  makanan, makanan  hanya  lewat,  itulah  sebabnya mereka  harus  makan  terus  menerus sepanjang  hari  atau  mereka  tidak  akan bertahan  hidup  (Lourie et  al. ,  1993; Asmanelli  dan  Ikhsan,  2000).  Kuda  laut termasuk karnivora karena memakan zooplankton  dan  udang  kecil,  moncongnya yang  panjang  berfungsi  untuk  menyedot mangsa.  Selain  itu  kuda  laut  hidup  dengan satu  pasangan  (monogami),  sangat  setia dengan  pasangannya  dan  mereka  ber-
hubungan  hampir  sepanjang  tahun  berdasar- kan  penelitian  Wooten  (2005)  dan  Lin et al . (2009a).  Kuda  laut  kering  yang  dijadikan obat  dalam  bentuk  tepung  berwarna  kuning dan putih, rasanya manis, hangat dan sedikit asin yang berkhasiat untuk kesehatan karena mengandung  asam  stearat,  protease,  y- caroten,  astacene,  melanin,  cholimesterase, sodium  klorida,  magnesium  dan  sulfat (Sanaye et al. , 2013).

## 3.1.2. Bakteri
Telah diisolasi 1 isolat bakteri dengan karakteristik  antara  lain  gram  negatif, oksidase  dan  katalase  positif,  fermentatif, motil  dan  tidak  dapat  mensintesa  sukrosa sehingga  koloni  pada  TCBSA  berwarna kuning dan menyebar ( swarming ) pada TSA. Isolat  ini  diisolasi  dari  organ  eksternal, sedangkan  dari  organ  internal tidak ditemukan adanya bakteri.
Berdasarkan  karakteristik  tersebut yang  sesuai  dengan  hasil  penelitian  Holt et al .  (2000)  dan  Roza  (2017),  disimpulkan isolat  termasuk  genus Vibrio dan  di- identifikasi sebagai V. alginolyticus . Karakteristik  isolat  bakteri  disajikan  pada Tabel 1.
Tabel 1. Karakteristik
isolat Vibrio
alginolyticus yang  diisolasi  dari induk kuda laut, H. kuda .
Karakteristik Isolat Vibrio alginolyticus Gram - 1 Oksidase + 2 Katalase + Motil + O-F F 3 Koloni pada TCBSA Y 4 Koloni menyebar pada TSA
+
Keterangan 1 =  negatif, 2 =  positif, 3 = fermentatif, dan 4 = kuning.
Hasil  pengamatan  Roza  (2017) memperlihatkan  bahwa  bakteri Vibrio alginolyticus merupakan bakteri gram negatif yang  berbentuk  batang  bengkok,  oksidase dan  katalase  positif,  memfermentasi  glukosa tanpa  menghasilkan  gas  dan  mempunyai flagel polar.

## 3.1.3.   Parasit
Pengamatan  terhadap  lendir  yang diambil  dari  permukaan  tubuh  dan  insang induk  kuda  laut  terlihat  banyak ektoparasit protozoa Ciliata , Cryptocaryon  irritans dan Trichodina sp.,  sedangkan  dari  jaringan  otot dan internal  organ tidak  ditemukan  adanya endoparasit C.  irritans. Bulan  September prevalensi C.  irritans menempati  urutan terbesar  yaitu  60%,  November  hanya  40% dan  Januari  sebesar  55%.  Sedangkan prevalensi Trichodina sp.  terlihat  lebih rendah  hanya  35%  di  bulan  September, November 45% dan Januari hanya 30%.
Infeksi Cryptocaryon disebut  juga Cryptocariosis  atau  penyakit  ( white  spot ) karena  menyebabkan  adanya  bercak  putih pada operkulum (tutup  insang)  dan permukaan  tubuh  inang.  Roza et  al .  (2010) melaporkan  bahwa  protozoa ciliata ini merupakan ektoparasit yang  umum  di- temukan pada ikan budidaya.
Kondisi  infeksi  berat  protozoa  bisa menutupi  seluruh  tubuh,  sehingga  produksi lendir  akan  meningkat  dan  berpeluang terjadinya  infeksi  sekunder  yang  berakibat pada kematian. Protozoa ini akan menyerang apabila kondisi ikan lemah.
Menurut  Vincent  dan  Clifton (2001); Roza et al .  (2010)  dan  Zafran  (2016)  gejala klinis  ikan  yang  terserang  parasit  ini  terlihat nafsu  makan  menurun,  bergerak  lamban, berenang  di  permukaan  bahkan  berdiam  di dasar  bak  tanpa  bergerak,  warna  tubuh keputih-putihan dan anoreksia.
Ikan yang terinfeksi pada bagian mata akan  menyebabkan  terjadinya  radang  pada mata  dan  kalau  infeksi  ini  tidak  cepat ditangani, akan memberi peluang bagi infeksi
sekunder  bakteri.  Shin et  al .  (2011)  dan Sanaye et  al .  (2013)  menemukan  insang pucat  dan  kadang-kadang  lamelanya  rusak sehingga proses respirasi terganggu.
Umumnya  ikan  yang  terinfeksi C. irritans akan mengalami kematian dalam 2-3 hari,  selain  itu  juga  ditemukan  induk  kuda laut  terinfeksi  Trichodiniosis  penyebabnya adalah  protozoa  ciliata, Trichodina sp. bentuk tubuhnya datar seperti cawan dengan diameter  100 µ m,  disekeliling  tubuhnya terdapat  bulu  getar  atau cilia ( marginal dan lateral ),  bentuk  susunannya  khas  mirip dengan  susunan  gigi.  Menurut  Lom  (2005) pada  tubuh  bagian  bawah  terdapat  lingkaran pelekat  ( adhesive  disk )  untuk  melekatkan dirinya ke tubuh inang.
Umumnya parasit ini hidup menempel  pada  insang  dan  kulit  dengan pergerakan  memutar  dimana  hal  ini  dapat merusak  jaringan  inang.  Infeksi Trichodina sp. ini bisa ditemukan pada budidaya ikan air tawar maupun laut.
Bila dibandingkan dengan C. irritans, Trichodina sp.  tidak  begitu  patogen,  tetapi hasil  penelitian  Castrillo et  al. (2005)  pada tingkat  infeksi  parah,  baik  pada  insang maupun  permukaan  tubuh  akan  memicu produksi  lendir  yang  berlebihan,  sehingga menimbulkan peradangan.
Hasil  penelitian  Zafran et  al. (1998) dan  Cruz-Lacierda  (2001)  menunjukkan bahwa Trichodina sp.  pada  infeksi  dini gejalanya  tidak  terlihat,  hanya  terlihat  kuda laut  banyak  diam  di  dasar  bak,  sedangkan infeksi  berat  ditandai  dengan  meningkatnya produksi  lendir,  terjadinya  iritasi  akibat  alat pengait  ( hook )  dari  parasit  tersebut  dan anoreksia (Shin et al . 2011) dan Sanaye et al . (2013).
Ikan  yang  terinfeksi  umumnya terlihat  menggesekkan  badannya  pada dinding  atau  dasar  bak. Trichodina sp. tergolong  parasit  yang  kosmopolit  karena ditemukan diseluruh perairan dan menginfeksi ikan air tawar dan laut.
Tabel 2. Prevalensi ektoparasit pada induk Kuda Laut H. kuda .
Parasit Prevalensi (%) September 2016 November 2016 Januari 2017 Cryptocaryon irritans 60 40 55 Trichodina sp. 35 45 30

## 3.2. Pencegahan dan Penanggulangan Infeksi Bakteri dan Parasit
Pencegahan  infeksi  bakteri  dan parasit dapat dilakukan dengan sterilisasi air dan  peralatan  yang  akan  digunakan, treatment /desinfeksi  dan  karantina  induk sebelum  dipelihara  di hatchery ,  menjaga kualitas  air  pemeliharaan  yang  baik, menghindari  stres  akibat  padat  tebar  yang tinggi  dan handling yang  kurang  baik  serta pemberian  pakan  yang  berkualitas  baik.  Raj et  al. (2010)  menyatakan  penggunaan  obat dengan  dosis  tertentu  dapat  mengganggu respons  imun  ikan,  selain  dari  sensitivitas masing-masing  patogen  berbeda  terhadap jenis obat.
3.2.1. MIC test atau Konsentrasi Hambat terendah nifurpirinol 10% dan vetstrep terhadap bakteri V. alginolyticus Uji  MIC  nifurpirinol  10%  dan vetstrep  memperlihatkan  hasil  yang  berbeda terhadap V.  Alginolyticus. Pada  perlakuan
nifurpirinol 10% dengan konsentrasi  0; 0,1; 0,25; 0,5 ppm bakteri masih tumbuh dengan baik,  sedangkan  pada  konsentrasi    1;  2,5;  5; 10; 25; 50 dan 100 sama sekali tidak terlihat pertumbuhannya.  Tetapi  vetstrep  dengan konsentrasi  0;  0,1;  0,25;  0,5  dan  1  ppm belum  mampu  menekan  pertumbuhan V. alginolyticus dan  baru  bisa  membunuhnya pada  konsentrasi  2,5;  5;  10;  25;  50  dan  100 ppm.  Hal  ini  ditandai  dengan  jernihnya warna  media,  selain  itu  dari  reisolasi  pada media  TSA  juga  tidak  ada  pertumbuhan V. alginolyticus .  Hasil  uji  MIC  disajikan  pada Tabel 3.
Berdasarkan  hasil  uji  MIC  diatas, konsentrasi  1  ppm  nifurpirinol10%  dan  2,5 ppm  vetstrep  efektif  untuk  menanggulangi infeksi V. alginolyticus pada induk kuda laut. Hasil  penelitian  Roza et  al .  (2001) menunjukkan  bahwa  nifurpirinol  10%  dan vetstrep  termasuk  jenis  antibiotic  yang mempunyai  spektrum  luas  karena  mampu membunuh  bakteri  gram  positif  maupun gram  negatif.  Selain  itu  Roza  (2017)
Tabel 3.  MIC nifurpirinol 10% dan vetstrep terhadap pertumbuhan V. Alginolyticus . Konsentrasi (ppm) Antibiotik Reisolasi Nifurpirinol 10% Vetstrep Nifurpirinol 10% Vetstrep 0,00 ++ 1 ++ + + 0,10 ++ ++ + + 0,25 ++ ++ + + 0,50 + 2 + + + 1,00 - 3 + - + 2,50 - - - - 5,00 - - - - 10,00 - - - - 25,00 - - - - 50,00 - - - - 100,00 - - - -
Keterangan: 1 = tumbuh optimal, 2 = tumbuh, dan 3 = tidak tumbuh.
melaporkan  bahwa  sensitivitas  bakteri terhadap  antibiotik  juga  tergantung  pada genus,  spesies  maupun  strainnya,  seperti V. alginolyticus yang menginfeksi ikan capungan  Banggai, P.  kauderni dapat dikendalikan  dengan  2  ppm  nifurpirinol  dan 5  ppm vetstrep .  Berdasarkan  data  ini diketahui  bahwa  isolat V. alginolyticus yang menginfeksi induk kuda laut ini lebih sensitif dibandingkan  dengan  isolat V. alginolyticus yang menginfeksi ikan capungan Banggai.

## 3.2.2. MIC Copper Sulfate, acriflavin dan
Formalin Terhadap Protozoa Ciliata, C. irritans dan Trichodina sp.
Hasil  uji  MIC  antiparasit  copper sulfate  dan  formalin  terhadap  protozoa Ciliata, C. irritans dapat dilihat pada Tabel 4 dan  hasil  uji  dengan  acriflavin  netral  dan formalin  dalam  menanggulangi  infeksi protozoa, Trichodina sp. (Tabel 5).
Tabel  4.  MIC  test  copper  sulfate  dan formalin terhadap protozoa Ciliata, C. irritans . Konsentrasi (ppm) Antiparasit Copper sulfate Formalin 0,00 + 1 + 0,10 + + 0,25 + + 0,50 - 2 + 1,00 - + 2,50 - + 5,00 - + 10,00 - + 15,00 - + 20,00 - - 25,00 - - 50,00 - - 100,00 - - Keterangan: 1 = parasit bertahan hidup dan 2 = parasit mati.
Perendaman  dalam  larutan  copper sulfate  dan  formalin  dengan  konsentrasi
masing-masing  0,5  dan  20  ppm  berdampak mematikan bagi C. irritans, dan terbukti pada pengamatan ulang terhadap lendir permukaan tubuh,  insang  dan  mata  setelah  perendaman tidak ditemukan lagi. Menurut Zafran (2016) bagian  tubuh  tersebut  merupakan  bagian yang  disukai  protozoa  ini  untuk  hidup menempel.  Infeksi C.  irritans pada  tingkat parah  ditandai  dengan  adanya  bintik-bintik putih  pada  tubuh  inang.  Ektoparasit  ini tergolong  sangat  berbahaya  pada  marikultur karena  hasil  penelitian  Roza et  al. (2010) kalau  terlambat  ditangani  infeksinya  akan menyebar  dengan  cepat,  sehingga  ikan  yang sehatpun  akan  terinfeksi  dan  dapat  berujung pada kematian massal hanya dalam 2-3 hari. Sedangkan  Vincent  dan  Clifton  (2001) mengatakan Cryptocaryon mengganggu proses  respirasi  karena  memakan  lamela insang.
Tabel 5.  MIC  test  acriflavin  netral  dan formalin terhadap protozoa Ciliata, Trichodina sp. Konsentrasi (ppm) Antiparasit Acriflavin netral Formalin 0,00 + 1 + 0,10 + + 0,25 + + 0,50 + + 1,00 + + 2,50 + + 5,00 - 2 + 10,00 - + 15,00 - - 20,00 - - 25,00 - - 50,00 - - 100,00 - - Keterangan: 1 = parasit bertahan hidup dan 2 = parasit mati
Berdasarkan  Tabel  5,  perendaman dalam  larutan  acriflavin  netral  5  ppm  dan formalin  20  ppm  efektif  membunuh Trichodina sp.,  sementara  pada  konsentrasi
yang lebih rendah parasit ini masih bertahan hidup.  Pada  prinsipnya  infeksi  parasit  pada budidaya  tidak  hanya  ditentukan  oleh  jenis dan  jumlah  parasit  yang  menyerang,  tetapi dipengaruhi  oleh  kondisi  lingkungan  dan daya tahan tubuh ikan.

## 3.3. Pembahasan
V.  alginolyticus merupakan  bakteri yang  umum  ditemukan  pada  perairan  laut dan  estuaria,  bakteri  ini  bersifat  patogen oportunistik hal ini sesuai dengan pernyataan Balcazar et  al. (2010);  Johnny  dan  Roza (2014) dan Roza (2011; 2017), dimana akan patogen  apabila  ada  faktor  lain  yang mendukung, misalnya kondisi kuda laut yang stress,  kualitas  air  yang  buruk,  pakan berkualitas  rendah,  padat  tebar  yang  terlalu tinggi, handling yang  kasar,  dan  lain-lain. Keberadaan V.  alginolyticus akan  mem- bahayakan apabila populasinya tinggi, dalam jumlah  yang  kecil  dengan  lingkungan budidaya yang optimal bakteri ini justru akan menguntungkan  karena  dapat  membantu proses  pencernaan  (Roza  dan  Zafran,  1998; Roza et al. , 1999). Bahkan Roza et al. (2001) menemukan  bahwa V.  alginolyticus pada kepadatan  tertentu  dapat  berperan  sebagai musuh  alami  dari V.  harveyi .  Sanaye et  al . (2013)  dan  Adiputra et  al. (2005) menyatakan  bahwa  bakteri  yang  menjadi ancaman pada budidaya kuda laut diantaranya  adalah Vibrio , Photobacterium , Bacillus dan Pseudomonas ,  bahkan  Alcaide et  al. (2001)  dan  Raj et  al .  (2010) menyebutkan  bahwa V.  harveyi pada kepadatan  10 4 CFU/mL  sudah  mematikan bagi kuda laut.
Bakteri V.  alginolyticus termasuk fermenter  sukrosa  yang  ditandai  dengan koloninya  berwarna  kuning  pada  media TCBSA  yang  merupakan  media  selektif untuk Vibrio .  Menurut  Desrina et al. (2006) bahwa Vibrio yang  bersifat  enteropatogenik termasuk ke dalam fermenter sukrosa dengan ciri  khas  koloninya  berwarna  kuning, sedangkan  bakteri  nonfermenter  koloninya berwarna  hijau.  Karakter  lain  dari V.
alginolyticus yaitu  koloninya swarming (menyebar)  pada  media  padat,  hal  ini disebabkan  karena  bakteri  ini  mensintesa flagella lateral yang banyak. Pada marikultur kematian  massal  yang  disebabkan  oleh infeksi V.  alginolyticus mencapai  90-100%. Gejala klinis serangan bakteri ini terlihat dari menurunnya  nafsu  makan,  bergerak  lamban, keseimbangan  terganggu  (berputar-putar/ whirling ),  perubahan  tingkah  laku  dan  ter- jadinya luka borok.  Menurut Yanuhar (2009) V.  alginolyticus merupakan  bakteri  yang lebih virulen berdasarkan titer haemoglutinin. Patogenisitas  bakteri  ini  tergantung  pada peran  dan  fungsi  dari  protein  reseptor  dan protein adesi yang melibatkan peran reseptor spesifik pada permukaan sel.
Beberapa  peneliti  Roza et  al. (2010) dan  Zafran  (2016)  melaporkan  bahwa C. irritans protozoa ciliata merupakan ektoparasit yang umum ditemukan pada ikan budidaya.  Infeksi  berat  protozoa  bisa menutupi  seluruh  tubuh,  sehingga  produksi lendir  akan  meningkat  dan  berpeluang terjadinya  infeksi  sekunder  yang  akhirnya berakibat  pada  kematian.  Biasanya  infeksi protozoa ini akan menyerang apabila kondisi ikan  lemah.  Gejala  klinis,  ikan  yang terserang  parasit  ini  menurut  Roza et  al . (2010)  akan  terlihat  nafsu  makan  menurun, bergerak  lamban,  berenang  di  permukaan bahkan berdiam di dasar bak tanpa bergerak, warna  tubuh  keputih-putihan  dan  anoreksi. Ikan  yang  terinfeksi  pada  bagian  mata  akan menyebabkan  terjadinya  radang  pada  mata dan  kalau  infeksi  ini  tidak  cepat  ditangani, akan memberi peluang bagi infeksi sekunder bakteri.  Bahkan  Shin et  al .  (2011)  dan Sanaye et  al .  (2013)  menemukan  insang pucat  dan  lamelanya  rusak  sehingga mengakibatkan  proses  respirasi  terganggu. Umumnya  ikan  yang  terinfeksi C.  irritans akan mengalami kematian dalam 2-3 hari.
Parasit C.  irritans ini  dapat  terlihat langsung  di  bawah  sinar  matahari  tanpa bantuan  mikroskop.  Parasit  ini  mempunyai beberapa  stadia  dalam  siklus  hidupnya. Stadia  parasit  yang  hidup  menempel  pada
inang  disebut  “ trophont ”  berbentuk  bulat seperti  buah  pir  dengan  ukuran  0,3-0,5  mm, mempunyai  cilia  pada  permukaan  tubuhnya, hidup  dan  bergerak  aktif  dibawah  kulit  dan insang.  Parasit  dewasa  atau  “ tomont ”  akan meninggalkan inang dan aktif berenang di air dan  setelah  beberapa  jam  kemudian tomont akan  membentuk  kista  di  dasar  bak.  Dalam waktu  6-9  hari  kista  akan  menetas  dan  bisa menghasilkan  200  atau  lebih  parasit  muda atau  “ theront ”  dengan  ukuran  35 µ m. Wooten  (2005)  melaporkan theront ini  akan berenang aktif untuk mencari inang baru dan apabila  dalam  waktu  24  jam  atau  lebih theront tidak  menemukan  inang  baru,  maka ia akan mengalami kematian.
Penanggulangan  sangat  diperlukan pengamatan  khusus  untuk  mengetahui stadianya  karena  belum  ditemukan  bahan kimia  atau  antiparasit  yang  efektif  untuk membunuh  pada  stadia trophont maupun kista.  Roza et  al .  (2010)  menyatakan  anti- parasit hanya efektif untuk menanggulangi C. irritans pada  stadia tomont dan theront . Terlihat copper sulfate 0,3 ppm dan formalin 20  ppm  efektif  membunuh tomont dan theront .  Selain  itu  perendaman  induk  kuda laut  dalam  air  payau  (10-15  ppt)  juga  dapat mematikan theront .  Hal  yang  sangat  penting diperhatikan  dalam  penanganan  parasit adalah  mempertahankan  konsentrasi  anti- parasit pada dosis yang mematikan selama 5- 7  hari.  Pada  kondisi  ini  parasit  akan melepaskan  diri  dari  inang  dan  dengan memindahkan  induk  kuda  laut  sesegera mungkin  setelah  ditreatmen  ke  dalam  bak yang  bersih  dan  bebas  parasit,  hal  ini bertujuan  untuk  mencegah  kemungkinan adanya kista yang tertinggal di dasar bak saat pengobatan.
Sebagaimana diketahui bahwa pertahanan  pertama  ikan  terhadap  infeksi penyakit  berada  dipermukaan  kulit,  yaitu lendir  (mukus),  jaringan  epitalia  dan  insang. Lendir  yang  melapisi  seluruh  permukaan integumen termasuk  kulit,  insang  dan  perut. Beberapa  peneliti  diantaranya  Roza et  al . (2010)  dan  Zafran  (2016)  menemukan  pada
saat  terjadi  infeksi  atau  iritasi  fisik  dan kimiawi  sekresi  mukus  akan  meningkat. Lapisan mukus secara tetap dan teratur akan diperbarui, sehingga kotoran yang menempel ditubuhnya  ikut  dibersihkan.  Mukus  ikan mengandung  lisosim,  komplemen,  antibodi (Ig  M)  dan  protease  yang  berperan  untuk mendegradasi dan mengeliminir patogen.
Mekanisme kerja antibiotik digolong- kan  2  kelompok  yaitu bactericidal dan bacteriostatic . Bactericidal cara  kerjanya dengan  merusak  satu  persatu  bakteri  yang menginfeksi dengan menghancurkan dinding sel  bakteri    sehingga  bakteri  tersebut  mati. Sedangkan bacteriostatic dengan menghenti- kan perkembangan bakteri. Disaat konsentrasi  nifurpirinol  10%  1  ppm  dan vetstrep  2,5  ppm  berhasil  menekan perkembangan  serta  pertumbuhan  bakteri V. alginolyticus maka  bakteri Vibrio tersebut akan  sama  jumlahnya  dan  tidak  bertambah. Dengan  demikian  sistem  kekebalan  tubuh induk  kuda  laut  dapat  mengatasinya langsung,  dengan  kata  lain  mekanisme  kerja nifurpirinol  dan  vetstrep  adalah  dengan mengganggu sintesis protein V . alginolyticus . Antibiotik bacteriostatic berikatan    dengan sub  unit  16S-30S  dan  mencegah  pengikatan aminoasil  tRNA  dari  situs  A  pada  ribosom, sehingga akan menghambat translasi protein.
Adapun cara kerja anti parasit  copper sulfate,  acriflavin  dan  formalin  terhadap protozoa  Ciliata, C.  irritans dan Trichodina sp.  adalah  dengan  menghambat  sintesis protein  pada  ribosom,  yaitu  30S  dan  50S. Kedua  komponen  ini  akan  bersatu  pada pangkal rantai mRNA menjadi ribosom 70S. Sintesis protein ini berlangsung pada ribosom dengan  bantuan  mRNA  dan  tRNA.  Ada  2 proses  yang  terjadi  dalam  masuknya  anti parasit  ke  dalam  ribosom  parasit,  pertama disebut difusi  pasif melalui  kanal  hidrofilik, kedua  adalah  sistim transport  aktif .  Anti parasit  tersebut  berikatan  dengan  ribosom 30S dan menghalangi masuknya tRNA-asam amino  sehingga  sintesa  protein  parasit  akan terhenti dan kemudian mati.
Pengendalian  infeksi  bakteri  dan ektoparasit  agak  lebih  mudah  dilakukan dibandingkan  infeksi internal .  Treatmen untuk ektoparasit dapat  dilakukan  dengan metode  perendaman,  sedangkan  untuk internal bisa  dengan  injeksi  ( intra muskular dan intra peritonial ) atau secara oral melalui pakan.  Roza et al. (1997);  Roza  dan  Zafran (1998)  melaporkan  bahwa  umumnya  infeksi bakteri  yang  ditemukan  merupakan  infeksi sekunder.  Metode  yang  aman,  praktis, ekonomis  dan  efektif  untuk  mencegah  dan mengontrol  terjadinya  infeksi  penyakit adalah dengan mengkarantina dan mentreatmen induk yang baru datang dengan desinfektan  serta  menjaga  kualitas  air pemeliharaan  yang  baik,  menghindari  padat tebar  yang  berlebihan  dan  pemberian  pakan yang  bermutu  baik.  Jadi  diharapkan  dengan pengelolaan  dan  manajemen  budidaya  yang benar  infeksi  penyakit  dapat  dihindari, dengan mendiagnosa cepat dapat mengetahui agen  penyebab  penyakit  sehingga  dapat mencegah  kematian  massal  yang  berdampak kegagalan produksi, bahkan kerugian.

## IV. KESIMPULAN
Satu  isolat  bakteri V.  alginolyticus dan  2  spesies  protozoa Cilliata yaitu C. irritans dan Trichodina sp.,  ditemukan menginfeksi  induk  kuda  laut.  Bakteri V. alginolyticus yang  berasal  dari  kuda  laut tersebut tidak  tumbuh  secara in vitro dengan penambahan 1 ppm nifurpirinol 10% dan 2,5 ppm  vetstrep.  Serangan C.  irritans dapat dikendalikan  dengan  perendaman  kuda  laut terinfeksi  dalam  larutan  copper  sulfat  0,5 ppm  dan  formalin  20  ppm,  sedangkan
Trichodina
dapat dibasmi dengan perendaman  kuda  laut  dalam  larutan acriflavin netral 5 ppm dan formalin 20 ppm masing-masing selama 1 jam.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  kepada  Alm.  Fris Johnny  yang  terlibat  langsung  dalam
penelitian  ini  dan  Bapak  Edi  Santoso  yang telah  memfasilitasi  pengadaan  sampel  dan hewan uji, serta Slamet Haryanto yang telah membantu  terlaksananya  penelitian  ini. Penelitian  ini  dibiayai  oleh  PT.  Dilatur Prima.

## DAFTAR PUSTAKA
Adiputra, Y.T., Triyanto, dan N. Probosunu. 2005.  Identifikasi  bakteri  patogen pada  kuda  laut  ( Hippocampus  kuda ) di  Balai  Budidaya  Laut  Lampung. J. Fisheseries Science, 7(1):101-107. Alcaide,  E.,  C.  Cill-Sanz,  D.  Esteve,  C. Amaro, and L. Silvenia. 2001. Vibrio harveyi caused  diseases  in  seahorse, Hippocampus  kuda . J.  of  Fish Disease , 24(5):311-313.
Ari,  W.K.,  Anindiastuti,  A.  Hafiz,  dan Sudjiharno.  2005.  Produksi  massal kuda laut ( Hippocampus kuda ) dalam upaya  mendukung  ikan  hias  dan industri obat-obatan tradisional. Balai Budidaya  Laut  Lampung.  Direktorat Jendral Perikanan Budidaya Kelautan Perikanan. Lampung. 13 hlm. Asmanelli  dan  Ikhsan.  2000.  Beberapa catatan  mengenai  kuda  laut  dan kemungkinan pengembangannya.
Oseana, 18(4): 145-151.
Balcazar,  J.L.,  A.  Gallo-Bueno,  M.  Planas, and  J.  Pintado.  2010.  Isolation  of Vibrio  alginolyticus and Vibrio splendidus from captive-bred seahorse  with  disease  symptoms. Antonie  van  Leuweenhoek J.  of Microbiol., 7(9):207-215.
Castrillo,  A.,  D.W.  Roberts,  and  J.D. Vandenberg.  2005.  The  fungal  past, present  and  future  :  Germination, ramification  and  reproduction. J.  of Invertebrate Pathology, 80: 46-56.
Cruz-Lacierda,  E.R.  2001.  Parasitic  diseases and  pests. In Health  Management  in Aquaculture,  Lio-Po et  al. (Eds.). Aquaculture  Department,  South-East
Asia  Fisheries  Development  Center, Tigbauan, Iloilo, Philippines. P.55-77. Desrina,  A.  Taslihan,  Ambariyanto  dan  S. Suryaningrum.  2006.  Uji  keganasan bakteri Vibrio pada  ikan  kerapu  macan
( Epinephelus fuscoguttatus). Ilmu Kelautan, 2(3):119-125. Evelyn,  T.P.T.  2002 . Finfish  immunology and  its  use  in  preventing  infectious diseases  in  cultured  finfish. In Lavilla- Pitogo,  C.R.  and  E.R.  Cruz-Lacierda (Eds.)  Diseases  in  Asian  Aquaculture IV. 303-324 pp.
Faleiro,  F.,  L.  Narciso,  and  L.  Vincente.
2008. Seahorse behavior and aquaculture: How to improve
Hippocampus guttulatus husbandry and reproduction. Aquaculture , 282:33-40. Hansen, C. and H. Cummins. 2002. Tropical marine  ecology.  http://www.pbs.org/ wgbh/nova/seahorse.htm.
Holt,  J.G.,  N.R.Krieg,  P.H.A.  Sneath,  J.T. Staley,  and  S.T.  Williams.  2000. Bergey’s  manual  of  determinative bacteriology, 9 th ed . Maryland, USA. 787 p.
Johnny, F. dan D. Roza. 2014. Infeksi bakteri
Vibrio  alginolyticus pada  lumba- lumba hidung botol, Tursiops aduncus yang  dipelihara  di  Lovina, Singaraja,  Bali.  Berita  Biologi. J. Ilmu-ilmu Hayati, 13(3):297-302. Koldewey,  H.J.  and  K.M.  Smith.  2010.  A
global review of seahorse aquaculture. Aquaculture, 302:121- 152.
Lin,  Q.,  L.  Junyi,  G.  Yongli,  S.  Li,  C.  Jin, and  L.  Junning.  2006.  The  effect  of temperature  on  gonad,  embryonic development  and  survival  rate  of juvenile seahorse. Aquaculture, 254:701-713.
Lin,  Q.,  L.  Junyi,  and  D.  Zhang.  2008. Breeding  and  juvenile  culture  of  the lined  seahorse, Hippocampus erectus Perry  1810  from  live  to  frozen  food. Aquaculture, 277:287-292.
Lin,  Q.,  L.  Junyi,  D.  Zhang,  and  Y.  Wang. 2009a. Weaning of juvenile seahorse, H.  erectus Perry  1810  from  live  to frozen  food. Aquaculture, 291:224- 229.
Lin,  Q.,  L.  Junyi,  D.  Zhang,  and  Y.  Wang. 2009b.  Effect  of  light  intensity, stocking  density,  feeding  frequency and  salinity  on  the  growth  of  sub- adult Hippocampus  erectus Perry 1810. Aquaculture, 292:111-116. Lom, J. 2005.Trichodinidae and other ciliates (phylum  Ciliopgora) In Diseases and Disorders, 1:229-257. Lourie, S.A., T.H. Haq, dan A.
Tjakrawidjaja. 2001. Seahorses genus Hippocampus di  Indonesia.  Laporan Survey Lapangan. Bali. 72 hlm. Mira, S. dan K. Yulianto. 2007. Durasi hidup Hippocampus  kuda Bleeker  1852 pada  percobaan  pemeliharaan  kuda laut  secara indoor maupun outdoor . J. Oseanologi dan Limnologi , 33:281- 293.
Pawar, H.B., S.V. Sanaye, A. Muruqan, R.A. Sreepada,  and  Tanu.  2011.  Effect  of tank background colour on the growth and  survival  of  juvenile  yellow seahorse. H.  kuda (Bleeker  1852)  in the  pelagic  phase. The  Israel  J.  of Aquaculture-Bamidgeh , 63(4):1-6. Raj,  S.T.,  A.P.  Lipton,  and  G.S.  Chanchan. 2010. Characterization and infectivity evaluation  of Vibrio  harveyi causing white  patch  disease  among  captive reared  seahorse, Hippocampus  kuda . Indian  J.  Marine  Science, 39(1):151-
156.
Roza,  D.,  Zafran,  I.  Taufik  dan  M.A. Girsang.  1997.  Pengendalian Vibrio harveyi secara  biologis  pada  larva udang  windu  ( Penaeus  monodon ):
Isolasi  bakteri  penghambat. J.  Penel.
Perikanan Indonesia, 4(2):13-23. Roza,  D.  dan  Zafran.  1998.  Pengendalian Vibrio  harveyi secara  biologis  pada larva udang windu ( Penaeus monodon ):
Aplikasi  bakteri  penghambat. J. Penel. Perikanan Indonesia , 4(2):1-10.
Roza,  D.,  F.  Johnny,  dan  Yunus.    2001.
Pengendalian  vibriosis  pada  larva kepiting  bakau  melalui  penggunaan bakterin. J. Penel.
Perikanan
Indonesia, 7(3): 28-32.
Roza,  D.,  F.  Johnny,  dan  Tridjoko.  2004. Peningkatan  imunitas  yuwana  ikan kerapu  bebek, Cromileptes  altivelis terhadap  infeksi  Viral  Nervous Necrosis (VNN) dengan cara vaksinasi  melalui  perendaman. J. Penel.  Perikanan  Indonesia, 10(1): 61-70.
Roza,  D.,  F.  Johnny,  dan  K.M.  Setiawati.
2010.  Infeksi  parasit  protozoa, Cryptocaryon irritans
dan
Scuticociliata pada  induk  ikan  letter six, Parachanturus  hephatus .  299- 305 hlm.
Roza,  D.  2011.  Infeksi  bakteri  pada  induk ikan  clown, Amphiprion  ocellaris. Buku Pengembangan Teknologi Budidaya Perikanan. 263-268 hlm. Roza,  D.  2017.  Peningkatan  imunitas  benih ikan  kerapu  hibrid  cantik  dengan lipopolisakarida  (LPS). J.  Ilmu  dan Teknologi Kelautan Tropis, 9 (1):161- 172.
Sadili,  D.  2015.  Pedoman  identifikasi  dan monitoring  populasi  kuda  laut. Direktorat  Konservasi  Kawasan  dan Jenis  Ikan.  Ditjen  Kelautan,  Pesisir dan  Pulau-Pulau  Kecil.  Kementrian Kelautan  dan  Perikanan  Jakarta.  43 hlm.
Sanaye, S.V., H.B. Pawar, A. Murugan, R.A. Sreepada,  T.  Singh  and  Z.A.  Ansari. 2013.  Diseases  and  parasites  in cultured  yellow  seahorse, H.  kuda (Bleeker 1852). Fish Chimes, 32(11):
65-67.
Shin, S.P., J.E. Han, D.K. Gomes, J.H. Kim, C.H.  Choresca  Jr,  J.W.  Jun  and  S.C.
Park. 2011. Identification of Scuticociliate, Philasterides dicentrarchi from Indo-Pacific
seahorse, Hippocampus kuda . African J.  of  Microbiology  Res .,  5(7):738- 741.
Syafiuddin,  M.  Zairin  J.R.,  D.  Jusadi,  O. Charman,  R.  Affandi,  D.D.  Trijuno, dan Mutmainna. 2008. Pengaruh suhu terhadap  perkembangan  ovari  kuda laut  ( Hippocampus  barbouri )  dalam wadah  budidaya.  Torani J.  Ilmu Kelautan dan Perikanan, 18:81-86. Vincent,  A.C.J.  and  R.S.  Clifton-Hadley. 2001.  A  case  report.  Parasitic infection  of  the  seahorse H. erecfull. J. Wild Dis., 25:404-406.
Wooten,  W.  2005.  A  guide  to  the  most common  seahorse  diseases  and medical conditions. Seahorse.org. 9 p.
Yanuhar, U. 2009. Mekanisme infeksi Vibrio pada  reseptor  ikan  kerapu  tikus Cromileptes  altivelis . J.  Ilmiah Perikanan dan Kelautan, 1(1):15-19. Zafran,  D.  Roza,  I.  Koesharyani,  F.  Johnny and  K.  Yuasa.  1998.  manual  for  fish diseases  and  diagnosis:  marine  fish and  crustacean  diseases  in  indonesia. Lolitkanta  Gondol,  Puslitbangkan, Balitbang  Pertanian-JICA  ATA-379. 44 p.
Zafran.  2016.  Infeksi Cryptocaryon  irritans pada  benih  kerapu  hibrid  cantik  dan penanggulangannya.  Indonesia.  189- 1943 pp.
Diterima : 30 Mei 2018 Direview : 25 Juni 2018 Disetujui : 05 Agustus 2018