## HUBUNGAN TINGKAT ASUPAN SENG DAN ZAT BESI DENGAN JUMLAH LEUKOSIT ATLET SEPAK BOLA REMAJA
Liani Setyarsih 1* , Iqlima Safitri 1 , Hardhono Susanto 2 , Suhartono 3 , Deny Yudi Fitranti 1
1 Departemen Ilmu Gizi, Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro. Jl. Prof. Soedarto SH, Tembalang, Semarang, Jawa Tengah 50275, Indonesia. *Penulis Penanggungjawab : E-mail: liani.setyarsih@gmail.com.
2 Departemen Anatomi, Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro. Jl. Prof. Soedarto SH, Tembalang, Semarang, Jawa Tengah 50275, Indonesia.
3 Departemen Kesehatan Masyarakat, Fakultas Kesehatan Masyarakat, Universitas Diponegoro. Jl. Prof. Soedarto SH, Tembalang, Semarang, Jawa Tengah 50275, Indonesia.

## ABSTRACT
Background:  High-intensity  physical  exercise  causes  physical  stress  that  will  suppress  the  immune  system  in  the athlete's  body.  Decreased  immune  system  function  will  increase  the  risk  of  infection and  reduce  athlete  performance. Leukocytes are a component that affects the immune system homeostasis. One of the factors that influence the immune system is the intake of nutrients, such as zinc and iron.
Objectives:  To  determine  the  correlation  of  zinc  and  iron  intake  levels  with  the  total  leukocytes  in  adolescent  soccer athletes.
Methods:  This  was  an  observational  research  with  a  cross-sectional  study  design.  The  research  was  conducted  at Sekolah  Sepak  Bola  (SSB)  Terang  Bangsa  Semarang  involving  24  adolescent  athletes  by  Simple  Random  Sampling method. Food intake was assessed through 24-hour food recall, physical activity data, sleep quality and psychological stress  conditions  were  measured  using  a  questionnaire,  and  blood  samples  were  measured  from  veins.  Data  were analyzed using Pearson and Spearman tests.
Results:  91.7%  of  subjects'  total  leukocytes  were  in  the  normal  category.  The  mean  zinc  intake  level  of  subjects  was 56.22%  while  iron  was  57.7%.  There  was  no  significant  correlation  of    zinc  and  iron  intake  level  with  the  total leukocytes.
Conclusion: There was no significant correlation of  zinc and iron intake level with the total leukocytes.
Keywords : Zinc intake level; iron intake level; total  leukocyte; immune system

## ABSTRAK
Latar  belakang:  Latihan  fisik  intensitas  tinggi  dapat  menyebabkan  timbulnya  stres  fisik  yang  akan  menekan  sistem imun  pada  tubuh  atlet.  Penurunan  fungsi  sistem  imun  tersebut  akan  meningkatkan  risiko  infeksi  dan  menurunkan performa  atlet.  Leukosit  adalah  komponen  yang  berperan  dalam  homeostasis  sistem  imun.  Salah  satu  faktor  yang mempengaruhi sistem imun adalah asupan zat gizi termasuk seng dan zat besi.
Tujuan: Untuk mengetahui hubungan tingkat asupan seng dan zat besi dengan jumlah leukosit pada atlet sepak bola remaja.
Metode:  Penelitian  ini  merupakan  penelitian  observasional  dengan  rancangan  Cross  sectional.  Penelitian dilaksanakan di Sekolah Sepak Bola (SSB) Terang Bangsa Semarang. Jumlah subjek sebanyak 24 atlet remaja dengan metode pengambilan sampel Simple Random Sampling. Data asupan makan diperoleh melalui food recall 24 jam, data aktivitas  fisik,  kualitas  tidur  dan  kondisi  stres  psikologis  diambil  menggunakan  kuesioner,  dan  sampel  darah  diambil melalui pembuluh darah vena. Data dianalisis menggunakan uji korelasi pearson dan rang spearman. Hasil: Sebanyak 91,7% jumlah leukosit subjek dalam kategori normal. Rerata tingkat asupan seng subjek yaitu 56,22% sedangkan zat besi sebesar 57,7%.Tidak terdapat hubungan signifikan antara  tingkat asupan seng dan zat besi dengan jumlah leukosit.
Simpulan: Tidak terdapat hubungan signifikan antara  tingkat asupan seng dan zat besi dengan jumlah leukosit.
Kata Kunci : Tingkat asupan seng; tingkat asupan zat besi; jumlah leukosit; sistem imun

## PENDAHULUAN
Sepak  bola  merupakan  olahraga endurance (ketahanan)  berintensitas  tinggi  yang  berlangsung selama 90 menit. 1,2 Olahraga endurance berlangsung dalam  jangka waktu  lama  dan  fokus  pada  durasi serta  intensitas  latihan. 2 Jadwal  latihan  yang  berat dan  pertandingan  dapat  menyebabkan  timbulnya stres  fisik  yang  akan  menekan  sistem  imun  pada
tubuh  atlet. 3,4 Perubahan  fungsi  sistem  imun  tubuh merupakan bentuk respon terhadap aktivitas olahraga  akut  dan  kronis  sehingga  memicu perubahan fisiologis dan patologis seperti munculnya  kelelahan,  penurunan  performa  latihan, serta risiko munculnya infeksi. 5 Penelitian menunjukkan  bahwa  beberapa  aspek  fungsi  imun tidak  kembali  normal  hingga  beberapa  jam  setelah
Submitted : 8 Maret 2020 Accepted : 30 Maret 2020 Volume 9, Nomor 1, Tahun 2020, Halaman 31-37 Online di : http://ejournal3.undip.ac.id/index.php/jnc/

## J OURNAL OF N UTRITION C OLLEGE
latihan  sehingga  berimplikasi  pada  kerentanan terjadinya infeksi pada atlet. 6
Salah  satu  komponen  yang  berperan  dalam homeostasis  sistem  imun  adalah  leukosit. 4 Leukosit sebagai sistem imun tubuh berfungsi untuk melawan zat  asing  yang  masuk  dan  mencegah  terjadinya infeksi. 7,8 Perubahan  jumlah  leukosit  dapat  terjadi karena  latihan  fisik  dengan  intensitas  berat. Jumlah leukosit  yang  tinggi  dapat  menjadi  tanda  bahwa kemungkinan  atlet  belum  pulih  dari  latihan sebelumnya  atau  juga  menandakan  bahwa  atlet mengalami infeksi. 4 Penelitian terdahulu melaporkan bahwa  terjadi  peningkatan  leukosit  setelah  latihan dengan  intensitas  tinggi  (75% Maximum  heart rate ). 9 Maximum  heart  rate (HR max )  digunakan untuk menunjukkan besarnya intesitas latihan dalam sepak  bola. 10 Rata-rata  HR max atlet  dalam  satu  kali permainan  sepak  bola  sebesar  80-90%. 11 Total leukosit  meningkat  sebanyak  70%  segera  setelah latihan  pada  atlet  sepak  bola. 12 Latihan  fisik menyebabkan  perubahan  jumlah  leukosit  karena terjadi  peningkatan  kadar  hormon  stres  seperti kortisol dan katekolamin. 4,13
Selain  aktivitas  fisik,  faktor  lain  yang mempengaruhi  sistem  imun  adalah  asupan  zat  gizi. Penelitian  menunjukkan  bahwa  beberapa  zat  gizi dibutuhkan  untuk  sistem  imun  dan  kekurangan asupan  zat  gizi  tersebut  akan  mengganggu  fungsi sistem  imun. 14 Seng  dan  zat  besi  adalah  zat  gizi mikro yang berperan penting dalam sistem imun. 14,15
Seng  berfungsi  meningkatkan  fungsi  sistem  imun karena berperan sebagai antioksidan yang mengurangi pengeluaran penanda stres oksidatif dan sitokin  inflamasi. 14,16 Kemampuan  seng  sebagai antioksidan  menunjukkan  bahwa  ia  memiliki  peran dalam  pencegahan  cedera  akibat  radikal  bebas selama  proses  inflamasi. 17 Kurangnya  asupan  seng dapat  menyebabkan  gangguan  sistem  imun  dan meningkatkan  kerentanan  terjadinya  infeksi  pada saluran pencernaan dan pernapasan. 14,16
Asupan  zat  besi  juga  berperan  dalam  sistem kekebalan  tubuh  karena  asupan  zat  besi  yang  tidak memenuhi  kebutuhan  dapat  mempengaruhi  respon imun bawaan sehingga meningkatkan risiko terjadinya  infeksi. 18 Kekurangan  zat  besi  dapat menghambat  efektifitas  kerja  leukosit  dalam menghancurkan  bakteri  yang  masuk  ke  tubuh. 19 Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  sebesar  90% atlet  sepak  bola  memiliki  tingkat  asupan  zat  besi kurang  dari  kebutuhan  dan  sebesar  100%  atlet memiliki tingkat asupan seng kurang dari kebutuhan. 20 Studi sebelumnya mengenai hubungan asupan seng dan zat besi terhadap sistem imun menunjukkan  hasil  yang  berbeda-beda.  Penelitian yang  dilakukan  pada  balita  menyebutkan  bahwa
tidak  terdapat  hubungan  asupan  seng  dan  zat  besi dengan  status  imunitas  yang  dinilai  dari  jumlah limfosit. 21 Hasil  studi  lainnya  juga  menunjukkan tidak  ada  hubungan  asupan  seng  dengan  status imunitas, namun  terdapat hubungan  yang  signifikan antara  asupan  zat  besi  dengan  status  imunitas. 22 Terdapat interaksi antara seng dan zat besi pada saat penyerapan  di  saluran  pencernaan.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  konsumsi  zat  besi  yang  lebih banyak  akan  mengganggu  penyerapan  seng,  begitu pula  sebaliknya.  Suplementasi  kombinasi  antara seng  dan  zat  besi  dengan  perbandingan  1:1  efektif menurunkan  defisiensi  zat  besi  dan  zat  seng,  hal tersebut  menunjukkan  tidak  ada  interaksi  negatif antar  kedua  zat  gizi  apabila  dikonsumsi  dalam jumlah yang sama. 23
Sistem  imun  selain  dipengaruhi  asupan  zat gizi,  juga  dipengaruhi  oleh  usia,  jenis  kelamin, kondisi  stres  (fisik  dan  psikologis),  kualitas  tidur, serta  durasi,  frekuensi,  dan  intensitas  latihan. 24,25 Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis hubungan  tingkat  asupan  seng  dan  zat  besi  dengan jumlah leukosit pada atlet sepak bola remaja.

## METODE
Penelitian ini merupakan penelitian observasional  dengan  rancangan Cross  sectional . Penelitian  dilaksanakan  di  Sekolah  Sepak  Bola (SSB)  Terang  Bangsa  Semarang.  Subjek  dalam penelitian  ini  sebanyak  24  atlet  sepak  bola  yang diambil  menggunakan  metode Simple  Random Sampling .  Kriteria  inklusi  sampel  yaitu  laki-laki berusia  15-18  tahun,  tergabung  dalam  klub  sepak bola  minimal  1  tahun,  tidak  sedang  sakit,  cidera, atau dalam perawatan dokter, tidak sedang menjalani diet  khusus  atau  diet  penyakit  tertentu,  tidak merokok dan tidak mengonsumsi alkohol.
Data  yang  dikumpulkan  meliputi  data identitas subjek, asupan makan dan jumlah leukosit. Data  variabel  perancu  yang  diambil  yaitu  aktivitas fisik,  kondisi  stres  psikologis,  dan  kualitas  tidur. Data  identitas  subjek  meliputi  nama,  usia,  dan tanggal  lahir  diambil  menggunakan  kuisioner.  Data aktivitas  fisik  diambil  menggunakan  PAL  ( Physical Activity  Level)  Quetionnaire untuk  mengetahui aktivitas  fisik  subjek  dalam  24  jam  terakhir. Kategori  tingkat  aktivitas  fisik  berdasarkan  PAL dikatakan ringan apabila nilainya 1,40-1,69 kkal/jam,  sedang  apabila  1,70-1,99  kkal/jam,  dan berat apabila 2,00-2,40 kkal/jam. 26
Asupan  makan  diteliti  untuk  mengetahui asupan energi, karbohidrat, lemak, protein, seng, dan zat besi yang dikonsumsi subjek melalui food recall 24 jam sebanyak 3 hari yaitu 2 hari kerja dan 1 hari di  akhir  pekan,  kemudian  hasilnya  dirata-rata. Pengambilan  data  asupan  makan  dilakukan  oleh  4
orang  enumerator  yang  merupakan  lulusan  gizi  dan telah  diberikan  pengarahan  sebelumnya.  Kebutuhan energi subjek dihitung menggunakan rumus kebutuhan  gizi  atlet  yang  memperhitungkan  usia, jenis kelamin, aktivitas fisik, faktor tumbuh, Specific Dynamic  Action (SDA)  dan Basal Metabolism  Rate (BMR). Kebutuhan karbohidrat sebesar 60%, protein sebesar 15%, dan lemak sebesar 25% dari kebutuhan energi.  Asupan  energi,  karbohidrat,  lemak,  dan protein dikategorikan lebih apabila >110% kebutuhan,  cukup  apabila  80-110%  kebutuhan  dan kurang  apabila  <80%  kebutuhan. 27 Kebutuhan  seng dan  zat  besi  dikategorikan  berdasarkan  Angka Kecukupan  Gizi  (AKG)  2019.  Kebutuhan  seng remaja  laki-laki  usia  15-18  tahun  adalah  11  mg sedangkan  kebutuhan  zat  besi  sebesar  11  mg. Tingkat  asupan  seng  dan  zat  besi  dikategorikan cukup apabila ≥65% AKG dan kurang apabila <65% AKG. 28 Data kondisi stres psikologis diukur menggunakan  kuesioner The  Perceived  Stress  Scale (PSS).  Tingkat  stres  dikategorikan  stres  ringan apabila  total  skor  1-  14,  stres  sedang  apabila  total skor  15-26,  dan  stres  berat  apabila  total  skor  >26. 29
Data  kualitas  tidur  diukur  menggunakan  kuesioner
Pittsburgh  Sleep  Quality  Index (PSQI).  Kategori kualitas  tidur  baik  apabila  skor  <5  dan  kategori kualitas tidur buruk apabila skor >5. 30 Sampel darah diambil  dari  pembuluh  darah  vena  untuk  mengukur jumlah  leukosit  subjek.  Pengambilan  sampel  darah dilakukan  oleh  petugas  laboratorium  dan  diuji  di laboratorium.  Kategori  nilai  normal  leukosit  yaitu 3,2-10  x  10 3 /µL. 31 Analisis  data  menggunakan  uji korelasi Pearson apabila  data  berdistribusi  normal, data  tersebut  meliputi  tingkat  asupan  energi, karbohidrat,  lemak,  protein,  seng,  zat  besi,  kondisi stres, dan kualitas tidur. Uji korelasi Rank Spearman digunakan  apabila  data  berdistribusi  tidak  normal, seperti data aktivitas fisik.

## HASIL Karakteristik Subjek Penelitian
Sebanyak  24  atlet  sepak  bola  laki-laki  yang berasal  dari  SSB  Terang  Bangsa  Semarang  menjadi subjek  dalam  penelitian  ini.  Data  karakteristik subjek terdiri dari usia, aktivitas fisik, kondisi stres, dan kualitas tidur (Tabel 1). Subjek dalam penelitian ini  yaitu  remaja  berusia  antara  15-17  tahun  dengan rerata jumlah leukosit sebesar 7,4 x 10 3 /µL.
Tabel 1. Karakteristik Usia, Aktivitas Fisik, Kondisi Stres, Kualitas Tidur dan Jumlah Leukosit
Karaktersitik Subjek Minimal Maksimal Rerata±SD Usia (tahun) 15 17 15,88±0,79 Aktivitas Fisik (kkal/jam) 1,13 1,88 1,51±0,25 Kondisi Stres (skor) 8 22 15,58±3,75 Kualitas Tidur (skor) 0 11 6,63±2,43 Jumlah Leukosit (10 3 /µL) 4,68 11,43 7,4±1,54
Data  tingkat  kecukupan  asupan  zat  gizi meliputi  asupan  energi,  karbohidrat,  lemak,  protein, seng,  dan  zat  besi  tersaji  dalam  Tabel  2.  Rerata tingkat  asupan  energi  subjek  sebesar  75,43% tergolong  kurang  dari  kebutuhan,  sementara  rerata
tingkat  asupan  lemak  sebesar  96,42%  tergolong cukup sesuai kebutuhan. Rerata tingkat asupan seng sebesar  56,22%  dan  zat  besi  sebesar  57,7% tergolong kurang dari kebutuhan.
Tabel 2. Tingkat Kecukupan Asupan Energi, Karbohidrat, Lemak, Protein, Seng, dan Zat Besi
Karaktersitik Subjek Minimal Maksimal Rerata±SD Tingkat kecukupan asupan energi (%) 41,03 116,82 75,43±23,48 Tingkat kecukupan asupan karbohidrat (%) 31,43 106,79 65,77±19,33 Tingkat kecukupan asupan lemak (%) 31,1 153,41 96,42±31,69 Tingkat kecukupan asupan protein (%) 28,9 133,58 73,12±26,40 Tingkat kecukupan asupan seng (%) 17,65 87,06 56,22±16,24 Tingkat kecukupan asupan zat besi (%) 29,33 98,78 57,7±15,35
Distribusi  Frekuensi  Asupan  Zat  Gizi,  Aktivitas Fisik, Kondisi Stres, Kualitas Tidur, dan Jumlah Leukosit
Variabel  bebas  dalam  penelitian  ini  yaitu jumlah leukosit yang dikategorikan normal dan tidak normal.  Tabel  3  menunjukkan  bahwa  sebanyak  22 subjek  memiliki  jumlah  leukosit  normal  (91,7%).
Sebesar 70,8% subjek memiliki aktivitas fisik ringan dan  29,2%  memiliki  aktivitas  fisik  sedang.  Subjek yang  mengalami  kondisi  stres  dengan  kategori sedang  lebih  banyak  daripada  kategori  ringan  dan subjek  yang  memiliki  kualitas  tidur  buruk  lebih banyak daripada kualitas tidur baik.
Tabel 3. Distribusi Frekuensi Aktivitas Fisik, Kondisi
Stres, Kualitas Tidur dan Jumlah Leukosit Variabel Jumlah (n) Persentase (%) Aktivitas Fisik Ringan Sedang Berat 17 7 0 70,8 29,2 0 Kondisi Stres Ringan Sedang Berat 9 15 0 37,5 62,5 0 Kualitas Tidur Baik Buruk 7 17 29,2 70,8 Jumlah Leukosit Normal Tidak Normal 22 2 91,7 8,3
Tabel 4. Distribusi Frekuensi Tingkat Asupan Energi,
Karbohidrat, Lemak, Protein, Seng, dan Zat Besi Variabel Jumlah (n) Persentase (%) Tingkat kecukupan asupan energi Lebih Cukup Kurang 3 6 15 12,5 25 62,5 Tingkat kecukupan asupan karbohidrat Lebih Cukup Kurang 0 4 20 0 16,7 83,3 Tingkat kecukupan asupan lemak Lebih Cukup Kurang 9 8 7 37,5 33,3 29,2 Tingkat kecukupan asupan protein Lebih Cukup Kurang 2 5 17 8,3 20,8 70,8 Tingkat kecukupan asupan seng Cukup Kurang 8 16 33,3 66,7 Tingkat kecukupan asupan zat besi Cukup Kurang 9 15 37,5 62.,5
Distribusi frekuensi tingkat kecukupan asupan zat  gizi  disajikan  dalam  Tabel  4.  Sebagian  besar subjek  memiliki  tingkat  kecukupan  asupan  energi, karbohidrat,  protein,  seng,  dan  zat  besi  dalam kategori  kurang  dari  kebutuhan.  Subjek  dengan tingkat kecukupan asupan seng cukup hanya sebesar 33,3%, sementara tingkat kecukupan asupan zat besi kategori cukup hanya sebesar 37,5%.
Hubungan  antara  tingkat  kecukupan  asupan seng,  zat  besi,  dan  variabel  perancu    dengan jumlah leukosit
Tabel  5.  menunjukkan  uji  korelasi  antara variabel terikat dan variabel perancu dengan jumlah leukosit.  Hasil  analisis  menunjukkan  bahwa  tidak terdapat hubungan signifikan antara tingkat kecukupan  asupan  seng  dan  zat  besi  dengan jumlah leukosit  (p>0,05).  Begitu  pula  dengan  variabel perancu  juga  menunjukkan  tidak  ada  hubungan signifikan dengan jumlah leukosit (p>0,05).
Tabel 5. Hubungan antara Variabel Terikat dan Variabel Perancu dengan Jumlah Leukosit
Variabel Jumlah Leukosit Koefisien Korelasi (r) p Tingkat asupan seng 0,329 0,116 a Tingkat asupan zat besi 0,184 0,388 a Tingkat asupan energi -0,034 0,876 a Tingkat asupan karbohidrat -0,180 0,401 a Tingkat asupan lemak -0,133 0,535 a Tingkat asupan protein 0,005 0,980 a Aktivitas fisik 0,135 0,528 b Kondisi Stres -0,183 0,391 a Kualitas Tidur 0,075 0,726 a
a Uji korelasi Pearson, b Uji korelasi Rank Spearman

## PEMBAHASAN
Hasil  penelitian  ini  melaporkan  bahwa  tidak terdapat  hubungan  signifikan  antara  tingkat  asupan seng  dengan  jumlah  leukosit  (p>0,05).  Hal  tersebut sejalan dengan penelitian sebelumnya yang menyebutkan  bahwa  asupan  seng  tidak  memiliki hubungan  signifikan  dengan  status  imunitas  yang dinilai dari jumlah limfosit. 21,22 Seng berperan dalam sistem  imun  sebagai  antioksidan  karena  berikatan dengan  protein  di  membran  sel  untuk  menghambat produksi  radikal  bebas  hidrogen  peroksida,  memicu perkembangan  dan  aktivitas  sistem  imun  non- spesifik  seperti  neutrofil  dan  sel natural  killer (NK). 32 Hasil  penelitian  sebelumnya  melaporkan bahwa pemberian suplementasi seng dapat meningkatkan  sistem  imun  melalui  peningkatan Immunoglobulin A pada atlet futsal. 33
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa tidak terdapat  hubungan  antara  tingkat  asupan  zat  besi dengan  jumlah  leukosit  (p>0,05).  Asupan  zat  besi yang  rendah  akan  mengganggu  perkembangan jaringan  sistem  imun  dan  mengakibatkan  gangguan aktivitas seluler imun seperti sel NK dan neutrofil. 34 Penelitian ini menunjukkan hasil yang sama dengan penelitian sebelumnya bahwa tidak terdapat hubungan  asupan  seng  dan  zat  besi  dengan  sistem imun pada balita. 21
Tidak  adanya  hubungan  tingkat  asupan  seng dan  zat  besi  dengan  jumlah  leukosit  pada  penilitian
ini  kemungkinan  karena  lebih  banyak  subjek  yang tingkat  asupan  seng  dan  zat  besi  kurang  dari kebutuhan yaitu >60%. Berdasarkan konsep “imunonutrisi”, kemampuan zat gizi untuk berperan dalam  sistem  imun  terjadi  apabila  zat  gizi dikonsumsi  dalam  jumlah  yang  cukup  sesuai kebutuhan.  Asupan  zat  gizi  akan  terlibat  dalam metabolisme  energi  dan  sintesis  protein  sehingga dapat  memodulasi  aktivitas  dan  fungsi  sel  imun. 35 Alasan  lain  tidak  terdapatnya  hubungan  tersebut yaitu  selain  asupan  seng  dan  zat  besi,  sistem  imun juga  dipengaruhi  zat  gizi  lain  seperti  vitamin  A,  D, E, dan selenium. Zat gizi tersebut dibutuhkan tubuh untuk  menjalankan  fungsi  sistem  imun  dan kekurangan  satu  atau  lebih  asupan  zat  gizi  itu  akan mengganggu  fungsi  sistem  imun  dan  meningkatkan peluang masuknya patogen ke dalam tubuh. 14
Indikator  yang  digunakan  untuk  menilai sistem imun pada penelitian ini adalah leukosit atau sel darah putih. Fungsi fisiologis sistem imun adalah sebagai pertahanan terhadap mikroba infeksius yang masuk  ke  dalam  tubuh. 36 Jumlah  leukosit  dan komponen leukosit dapat menggambarkan gangguan sistem  imun  terkait  adanya  inflamasi  yang  akan mengganggu  kesehatan. 37 Salah  satu  faktor  yang menyebabkan  menurunnya  fungsi  sistem  imun adalah  latihan  fisik  dengan  intensitas  tinggi.  Hal tersebut  terjadi  pada  atlet  sepak  bola  karena  sepak bola termasuk olahraga endurance dengan intensitas tinggi. 1 Penurunan  fungsi  imun  yang  terjadi  pada atlet  dapat  meningkatkan  kerentanan  terjadinya infeksi. 3 Gangguan fungsi sistem imun tubuh karena latihan  fisik  disebabkan  oleh  adanya  peningkatan kadar hormon stres seperti kortisol dan katekolamin setelah  adanya  paparan  stres  fisik  dari  latihan fisik. 4,13 Latihan fisik yang berat dapat meningkatkan jumlah  radikal  bebas  sehingga  menyebabkan  stres oksidatif dan dapat merangsang aktivitas sel leukosit sehingga  memicu  terjadinya  peningkatan  jumlah leukosit. 38
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa sebagian besar atlet di SSB Terang Bangsa memiliki jumlah leukosit normal (91,7%). Hal tersebut karena pengambilan  sampel  darah  dalam  kondisi  istirahat (resting) bukan  setelah  latihan  fisik.  Hasil  tersebut sejalan  dengan  penelitian  sebelumnya  bahwa  rerata jumlah  leukosit  atlet  karate  berada  dalam  kategori normal. 39 Perubahan  leukosit  dapat  terjadi  karena efek  jangka  pendek  (akut)  dari  latihan  intensitas tinggi.  Perubahan  tersebut  terjadi  segera  setelah latihan  hingga  2  jam  setelah  latihan. 40 Jadi  dalam kondisi  istirahat  leukosit  akan  berada  dalam  jumlah normal,  tetapi  akan  meningkat  ketika  melakukan latihan fisik dengan intensitas tinggi.
Faktor  lain  yang  mempengaruhi  sistem  imun yaitu  kualitas  tidur  dan  kondisi  stres  psikologis.
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  tidak terdapat  hubungan  antara  kualitas  tidur  dan  kondisi stres  psikologis  dengan  jumlah  leukosit.  Kualitas tidur  yang  buruk  dapat  mempengaruhi  respon  imun adaptif  dan  bawaan  melalui  dua  sistem  yaitu hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis dan sistem  saraf  simpatik.  Gangguan  tidur  kronis menyebabkan  aktivasi  HPA axis dan  sistem  saraf simpatik sehingga meningkatkan proinflamasi. 41 Kondisi  stres  berkaitan  dengan  aktivasi  HPA axis dan  sistem  saraf  simpatik  yang  menyebabkan peningkatan kadar hormon adrenal seperti glukokortikoid, epinefrin, dan norepinefrin. 42 Peningkatan  hormon  stres  tersebut  memiliki  efek signifikan  pada  distribusi  dan  fungsi  sel  imun. 43 Atlet  dapat  mengalami  stres  psikologis  karena adanya  kompetisi,  cedera,  perjalanan,  gangguan tidur,  dan  tekanan  psikologis  dalam  kehidupan pribadi. 25 Terdapat keterbatasan dalam penelitian ini yaitu jumlah sampel yang terlalu kecil. Hal tersebut karena ketersediaan subjek di lokasi penelitian tidak terlalu banyak. Sehingga untuk penelitian selanjutnya  perlu  menggunakan  sampel  yang  lebih banyak agar data yang didapat lebih bervariasi.

## SIMPULAN
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa tidak terdapat  hubungan  tingkat  asupan  seng  dan  zat  besi dengan jumlah leukosit pada atlet sepak bola remaja (p>0,05).  Hasil  yang  sama  juga  ditunjukkan  pada hubungan  variabel  perancu  dengan  jumlah  leukosit. Perlunya  menjaga  kondisi  sistem  imun  atlet  agar mengurangi  risiko  terjadinya  infeksi,  sehingga  atlet disarankan  untuk  mengonsumsi  zat  gizi  yang berperan untuk memperkuat sistem imun.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penelitian  telah  dibiayai  oleh  hibah  riset pengembangan  dan  penerapan  Fakultas  Kedokteran Universitas Diponegoro Tahun 2019.

## DAFTAR PUSTAKA
1.   Kirkendall  DT.  The  complete  guide  to  soccer fitness  and  injury  prevention:  A  handbook  for players, parents and coaches. The University of North Carolina Press; 2011.
2.   Reilly  T.  The  Science  of  Training  –  Soccer:  A Scientific  approach  to  developing  strength, speed  and  endurance.  New  York:  Routledge; 2007.
3.   Gunzer W, Konrad M, Pail E. Exercise-induced immunodepression  in  endurance  athletes  and nutritional  intervention  with  carbohydrate, protein  and  fat-what  is  possible,  what  is  not? Nutrients. 2012;4(9):1187–212.
4.   Gleeson  M.  Immune  function  in  sport  and
exercise. J Appl Physiol. 2007;103:693–9. 5.   Bagchi  D,  Nair  S,  Sen  CK.  Nutrition  and
Enhanced Sports Performance: Muscle
Building,  Endurance,  and  Strength.  Elsevier. USA: Elsevier; 2013.
6.   Kakanis  MW,  Peake  J,  Brenu  EW,  Simmonds M, Gray B, Hooper SL, et al. The open window of susceptibility to infection after acute exercise in  healthy  young  male  elite  athletes.  Exerc Immunol Rev. 2010;16:119–37.
7.   Horn  PL,  Pyne  DB,  Hopkins  WG,  Barnes  CJ. Lower  white  blood  cell  counts  in  elite  athletes training  for  highly  aerobic  sports.  Eur  J  Appl Physiol. 2010;110(5):925–32.
8.   Orysiak  J,  Witek  K,  Zmijewski  P,  Gajewski  J. White  blood  cells  in  polish  athletes  of  various sports  disciplines.  Biol  Sport.  2012;29(2):101– 5.
9.   Abdossaleh  Z,  Fatemeh  A,  Frozan  K,  Amin SM.  Leukocytes  subsets  is  differentially affected by exercise intensity. Int J Sport Stud. 2014;4(2):246–53.
10.   Nikolaidis  PT.  Maximal  heart  rate  in  soccer players :  measured  versus  age-predicted. Biomed J. 2015;38(1):84–9.
11.   Alexandre  D,  Silva  CD  da,  Hill-Haas  S,  Wong DP,  Natali  AJ,  Lima  JRP  De,  et  al.  Heart  rate monitoring in soccer: interest and limits during competitive  match  play  and  training,  practical application.
J Strength Cond Res. 2012;26(10):2890–906.
12.   Avloniti  AA,  Douda  HT,  Tokmakidis  SP,
Kortsaris  AH,  Papadopoulou  EG,  Spanoudakis EG.  Acute  effects  of  soccer  training  on  white blood  cell  count  in  elite  female  players.  Int  J Sports Physiol Perform. 2007;2(3):239–49.
13.   Maughan  RJ,  Gleeson  M.  The  biochemical basis  of  sports  performance.  2nd  ed.  Oxford: Oxford University Press; 2010.
14.   Calder  PC.  Feeding  the  immune  system.  Proc Nutr Soc. 2013;72(3):299–309.
15.   Gleeson  M.  Nutritional  support  to  maintain proper  immune  status  during  intense  training. Nestle Nutr Inst Workshop Ser. 2013;75:85–97.
16.   Khanam S. Impact of zinc on immune response. Immunol Curr Res. 2018;2(1):1–2.
17.   Prasad AS. Zinc in human health: Effect of zinc on immune cells. Mol Med. 2008;14(5–6):353– 7.
18.   Ward RJ, Crichton RR, Taylor DL, Della Corte L,  Srai  SK,  Dexter  DT.  Iron  and  the  immune system. J Neural Transm. 2011;118(3):315–28.
19.   Syafrizar,  Welis  W.  Gizi  Olahraga.  Malang: Wineka Media; 2009.
20.   Nurdini  DA,  Probosari  E.  Tingkat  kecukupan zat  gizi  dan  kadar  hemoglobin  pada  atlet
sepakbola. J Nutr Coll. 2017;6(1):28.
21.   Dewi R, Zulaekah S. Hubungan asupan energi, protein, besi, seng dengan status imunitas anak balita di perkampungan kumuh Kota Surakarta. J Kesehat. 2010;3(2):129–39.
22.   Angraini DI, Ayu PR. The relationship between nutritional  status  and  immunonutrition  intake with immunity status. J Kesehat. 2014;4(8):158–65.
23.   Ridwan  E.  Kajian  interaksi  zat  besi  dengan  zat gizi mikro lain dalam suplementasi. Penelit Gizi dan Makanan. 2012;35(1):49–54.
24.   Gleeson  M.  Immune  function  in  sport  and exercise-advances in sport and exercise science series.  Philadelphia:  Churchill  Livingstone Elsevier; 2006.
25.   Walsh  NP.  Recommendations  to  maintain immune  health  in  athletes.  Eouropean  J  Sport Sci. 2018;18(6):820–31.
26.   FAO. Human energy requirements: Report of a Joint  FAO/  WHO/UNU  expert  consultation. Rome; 2001.
27.   Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia.
Widyakarya Nasional Pangan dan Gizi. Jakarta:
LIPI; 2004. 28.   Hardinsyah,  Briawan  D,  Retnaningsih,  Tin  H.
Modul  Pelatihan  Ketahanan  Pangan  “Analisis Kebutuhan Konsumsi Pangan.” Bogor: Lembaga Penelitian dan Pemberdayaan Masyarakat Institut Pertanian Bogor; 2004.
29.   Cohen S, Kamarck T, Mermelstein R. A global measure  of  perceived  stress.  J  Health  Soc Behav. 1983;24(4):385–96.
30.   Buysse  DJ,  Reynolds  CF,  Monk  TH,  Berman SR,  Kupfer  DJ.  The  pittsburgh  sleep  quality index:  A  new  instrument  for  psychiatric practice and research. Psychiatry Res. 1989;28(2):193–213.
31.   Kementrian  Kesehatan  Republik  Indonesia. Pedoman  Interpretasi  Data  Klinik.  Jakarta: Kementrian Kesehatan RI; 2011.
32.   Prasad  AS.  Zinc  is  an  Antioxidant  and  Anti- Inflammatory Agent: Its Role in Human Health. Front Nutr. 2014;1(14):1–10.
33.   Saeedy M, Bijeh N, Moazzami M. The effect of six  weeks  of  high-intensity  interval  training with  Zinc  supplementation  on  some  humoral immunity markers in female futsal players. Ann Appl Sport Sci. 2018;6(1):11–9.
34.   Subowo.  Imunologi  Klinik.  2nd  ed.  Jakarta: Sagung Seto; 2013. 415–434 p.
35.   Moreira A, Kekkonen RA, Delgado L, Fonseca J,  Korpela  R,  Haahtela  T.  Nutritional modulation of exercise-induced immunodepression  in  athletes:  A  systematic review  and  meta-analysis.  Eur  J  Clin  Nutr.
2007;61(4):443–60.
36.   Fathima  SJ,  Khanum  F.  Blood  cells  and leukocyte  culture  –  A  short  review.  Blood  Res Transfus J. 2017;1(2):1–2.
37.   Ochizuki KM, Iyauchi RM, Isaki YM, Asezawa NK.  Associations  between  leukocyte  counts and  cardiovascular  disease  risk  factors  in apparently  healthy  japanese  men.  J  Nutr  Sci
Vitaminol. 2012;58:181–6. 38.   Copper KH. Antioxidant Revolution.
Tennessee: Thomas Nelson Publisher; 2000.
39.   Wahyudi  I,  Kinanti  RG,  Andiana  O,  Abdullah A.  Survei  kadar  leukosit  pada  atlet  karate  di koni Kota Malang. J Sport Sci. 2019;9(1):1–5.
40.   Neves  PRDS,  Tenório  TRDS,  Lins  TA,  Muniz MTC,  Pithon-Curi  TC,  Botero  JP,  et  al.  Acute effects of high- and low-intensity exercise bouts on  leukocyte  counts.  J  Exerc  Sci  Fit. 2015;13(1):24–8.
41.   Irwin MR. Why sleep is important for health: A psychoneuroimmunology  perspective.  Annu Rev Psychol. 2015;66:143–72.
42.   Pruett  SB.  Stress  and  the  immune  system. Pathophysiology. 2003;9:133–53.
43.   Dhabhar  FS.  Effects  of  stress  on  immune function:  The  good,  the  bad,  and  the  beautiful. Immunol Res. 2014;58:193–210.