## Research Articles
Uji  aktivitas  antidiabetes  ekstrak  etanol  akar  kabau  ( Archidendron  bubalinum (Jack) I.C. Nielsen) terhadap tikus putih jantan yang diinduksi diet tinggi lemak dan fruktosa

## Annisa Amriani*, Fitrya, Rennie Puspa Novita, Dapid Caniago
Jurusan  Farmasi,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Universitas  Sriwijaya,  Sumatera Selatan 30862, Indonesia
Received 16 April 2021; Accepted 30 Juni 2021; Published 02 Juli 2021
Keywords: Ethanol extract ; Kabau root ; A ntidiabetic ; High fat and fructose diet;
ABSTRACT: The purpose of this research to study the antidiabetic activity of extract in type 2 diabetes mellitus rats induced by high fat and fructose diet. Induction is done by giving fructose 1800 mg/kgBW and high fat (15% pork oil and 5% duck egg yolk) 15 g/rat for 30 days. Male Wistar albino rats are used as animal models which divide into 6  group,  normal  (aquadest),  negative  control  (Na  CMC  0,5%),  positive  control (Metformin 151,20 mg/kgBW), and 3 test (ethanol extract of kabau root 100, 200, and 400  mg/kgBW).  Preprandial  blood  glucose  levels  are  measured  using  DTN-410-K photometer, on day 0, 30, 35, 40, and 45. The result  of AUC 30-45 and percentage of decreasing blood glucose level for positive control group are 1727,01 and 73,29%, and 3  test  group  (100  mg/kgBW,  200  mg/kgBW,  dan  400  mg/kgBW)  are  1893,32  and 43,50%;  1849,14  and  51,41%;  1789,15 and  62,16%.  This  point  indicate  that  ethanol extract of kabau root has an antidiabetic activity and there is no significant difference compared with metformin (p>0,05). According to the relation between percentage of blood glucose level with dose, value of ED 50 is 194,64 mg/kgBW. @2021 Published by UP2M, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, Sriwijaya University
Kata Kunci:
Ekstrak etanol; Akar kabau ; Antidiabetes ;
Diet tinggi lemak dan fruktosa;
ABSTRAK: Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mempelajari  aktivitas  antidiabetes  ekstrak etanol akar kabau terhadap tikus diabetes mellitus tipe 2 diinduksi diet tinggi lemak dan fruktosa. Induksi dilakukan dengan pemberian fruktosa 1800 mg/kgBB dan lemak tinggi (15% minyak babi dan 5% kuning telur bebek) 15 g/tikus selama 30 hari. Tikus putih jantan galur Wistar dibagi ke dalam 6 kelompok, yaitu normal (akuades), kontrol negatif (Na CMC 0,5%), kontrol positif (Metformin 151,20 mg/kgBB), dan perlakuan I － III (ekstrak etanol akar kabau dosis 100, 200, dan 400 mg/kgBB). Kadar glukosa darah preprandial diukur menggunakan fotometer DTN-410-K pada hari ke 0, 30, 35, dan 45. Hasil AUC 30-45 dan persentase penurunan kadar glukosa darah untuk kelompok positif yaitu  1727,01  dan  73,29%,  serta  3  kelompok  perlakuan  (dosis  100  mg/kgBB,  200 mg/kgBB, dan 400 mg/kgBB) berturut-turut yaitu 1893,32 dan 43,50%; 1849,14 dan 51,41%; 1789,15 dan 62,16%. Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol akar kabau memiliki aktivitas antidiabetes, dan tidak terdapat perbedaan signifikan dibandingkan metformin  (p>0,05).  Berdasarkan  hubungan  persentase  penurunan  kadar  glukosa darah  terhadap  dosis,  maka  nilai  ED50  ekstrak  etanol  akar  kabau  adalah  194,64 mg/kgBB. @2021 Published by UP2M, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, Sriwijaya University

## Jurnal Penelitian Sains
Journal Home Page: http://ejurnal.mipa.unsri.ac.id/index.php/jps/index
∗ Corresponding author. E-mail address: annisamriani@gmail.com
2597-7059 Online, 1410-7058 print/ @2021 Published by UP2M, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, Sriwijaya University

## PENDAHULUAN
Diabetes mellitus merupakan salah satu dari 10 penyakit penyebab kematian secara global. Indonesia menempati peringkat 10 besar Negara dengan angka penderita diabetes terbanyak dengan jumlah 10,3 juta atau  8,9 – 11,1%  penduduk  umur  20 – 79  tahun menderita  diabetes.  Diabetes  mellitus  tipe  2 merupakan  tipe  diabetes  yang  paling  sering  terjadi, dimana 87 – 91% kasus diabetes merupakan diabetes mellitus tipe 2 [1].
Diabetes  mellitus  tipe  2  merupakan  tipe diabetes  yang  terjadi  karena  sel-sel  sasaran  insulin gagal  atau  tidak  mampu  merespon  insulin  secara normal.  Keadaan  ini  lazim  disebut  sebagai  resistensi insulin,  dimana  banyak  terjadi  akibat  dari  obesitas. Obesitas merupakan salah satu faktor risiko penyakit diabetes  tipe  2  yang  disebabkan  karena  perubahan gaya  hidup  masyarakat  yang  suka  mengkonsumsi makanan  tinggi  lemak  dan  fruktosa  yang  tidak diimbangi dengan aktivitas fisik yang cukup [2].
Ekstrak  etanol  biji  tanaman  kabau  yang mengandung flavonoid dan fenolik dengan dosis 100, 200,  dan  400  mg/kgBB  berpengaruh  terhadap penurunan kadar gula darah mencit putih jantan yang diinduksi  aloksan  pada  diabetes  mellitus  tipe  1  [3]. Flavonoid  berperan  menstimulasi  ekspresi  GLUT  4 ( Glucose  Transporter 4)  di  otot,  sehingga  glukosa darah  berkurang  [4]  Fenolik  berperan  sebagai antioksidan dengan mengikat radikal bebas sehingga dapat mengurang stres oksidatif [5]
Hewan  uji  dalam  penelitian  ini  mengikuti prosedur  pengkondisian  diabetes  mellitus  tipe  2 dengan  cara  pemberian  pakan  diet  tinggi  lemak dan fruktosa  (DTLF)  yang  mampu  menginduksi  resistensi insulin [6]. Pemberian DTLF dapat menurunkan jumlah ekspresi  protein  GLUT  4  penanda  resistensi  insulin. Semakin sedikit ekspresi GLUT 4 maka semakin sedikit penggunaan  glukosa  di  jaringan,  sehingga  kadar glukosa  dalam  darah  meningkat  [7].  Penelitian  ini diharapkan  mampu  memberikan  informasi  tentang karakteristik  ekstrak  etanol  akar  kabau,  dosis  efektif (ED50)  dan  gambaran  nilai  AUC  ( Area  Under  Curve ) sebagai parameter penting antidiabetes.

## BAHAN DAN METODE

## Waktu dan Tempat
Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan  Februari hingga  Juni  2019  di  Laboratorium  Farmakologi, Laboratorium  Biologi  Farmasi  dan  Laboratorium
Teknologi  Farmasi  Program  Studi  Farmasi  Fakultas Matematika dan Ilmu  Pengetahuan Alam Universitas Sriwijaya,  Laboratorium  Biologi  Jurusan  Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pengetahuan, Laboratorium  Kimia  Organik  UPT.  Laboratorium Terpadu,  dan  Laboratorium  UPT.  Klinik  Universitas Sriwijaya, Indralaya.

## Alat dan Bahan
Bahan  yang  digunakan  antara  lain  akar tanaman  kabau  ( Archidendron  bubalinum (Jack)  I.C. Nielsen), tikus putih jantan galur Wistar, etanol 70%, plat  silika  gel  GF254,  GOD-PAP  kit,  glukosa  standar, pakan  diet  tinggi  lemak  dan  fruktosa  (15%  minyak babi, 5% kuning telur bebek, 80% pakan standar dan 1800  mg/kgBB  fruktosa),  metformin,  akuades,  Na CMC, dan NaCl 0,9%.

## Prosedur Penelitian

## Persiapan hewan uji
Hewan  uji  yang  digunakan  adalah  tikus  putih jantan galur Wistar yang berusia 2 – 3 bulan dengan berat badan 150 – 200 g sebanyak 24 ekor. Kelompok perlakuan dibagi menjadi 6 seperti pada Tabel 1.
Tabel 1. Kelompok Perlakuan Hewan Uji Kelompok Perlakuan Normal Kontrol Negatif Kontrol Positif Kelompok I Kelompok II Kelompok III Tidak diberikan perlakuan DTLF + suspensi Na CMC
DTLF + suspensi metformin 151,20
mg/kgBB
DTLF + suspensi ekstrak etanol 100 mg/kgBB DTLF + suspensi ekstrak etanol 200 mg/kgBB DTLF + suspensi ekstrak etanol 400 mg/kgBB

## Pengukuran kadar glukosa darah
Pengukuran  kadar  glukosa  darah  tikus dilakukan pada hari ke-0 (setelah aklimatisasi), hari ke- 30 (setelah induksi DTLF), dan hari ke-35, 40, dan 45 setelah  pemberian  sediaan  uji  atau  ekstrak.  Tikus dipuasakan  selama  ±  16  jam  (air  minum  tetap diberikan)  terlebih  dahulu.  Darah  diambil  secara plexus retroorbitalis sebanyak 0,5 － 1 ml menggunakan pipet hematokrit dan ditampung dalam vacutainer  non-EDTA.  Kemudian  sentrifugasi  dengan kecepatan 2.500 － 4.000 rpm selama 10 menit. Serum
diambil sebanyak 10 μl dengan pipet mikro dilanjutkan dengan penambahan 1 ml pereaksi Glucose Oxidase- Phenol  4-Aminophenazone  (GOD-PAP)  dan  inkubasi pada  suhu  25 o C  selama  10-15  menit.  Pengukuran menggunakan  fotometer  pada  panjang  gelombang 505 nm. Prosedur pemeriksaan sampel darah seperti dilihat pada Tabel 2.
Tabel  2. Prosedur  Pengukuran  Kadar  Glukosa  Darah (KGD) GOD-PAP Larutan Sampel (mL) Baku (mL) Blanko (mL) Serum darah 10 (µL) - - Glukosa standar - 10 (µL) - Pereaksi 1,0 1,0 1,0

## Analisis Data
Hasil  dari  perhitungan  penurunan  kadar glukosa dianalisis menggunakan uji statistik normalitas deskriptif (Shapiro-wilk) untuk menentukan  distribusi  normal  data  dan  dilanjutkan dengan statistik parametrik one-way ANOVA dengan taraf kepercayaan 95%. Untuk menentukan signifikansi  antar  data  dan  kelompok,  dilanjutkan dengan  uji  pos  hoc  LSD.  Pengolahan  data menggunakan program SPSS versi 22.0 (for windows).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Uji Aktivitas Antidiabetes
Uji  Aktivitas  antidiabetes  ekstrak  etanol  akar kabau  telah  dilakukan  pada  tikus  putih  jantan  galur Wistar yang diinduksi diet tinggi lemak dan fruktosa. Tikus  jantan  galur  Wistar  mempunyai  kemampuan metabolisme  obat  yang  relatif  cepat  sehingga  lebih sensitif bila digunakan dalam penelitian dibandingkan tikus  betina  dan  dapat  memberikan  hasil  penelitian yang lebih stabil karena tidak dipengaruhi kehamilan atau pengaruh hormonal. Hormon estrogen pada tikus betina  mempunyai  reseptor  pada  sel  beta  pankreas yang  menyebabkan  rangsangan  pelepasan  insulin. Akibatnya  hasil  pengukuran  dengan  menggunakan tikus  betina  tidak  akurat  karena  estrogen  memiliki efek penyembuhan [8].
Pengambilan  darah  tikus  dilakukan  dengan menggunakan metode plexus retroorbitalis dari vena bagian  mata  sebanyak  1 － 2  ml  menggunakan  pipet hematokrit  berheparin  (warna  merah).  Metode  ini dipilih  karena  volume  darah  yang  didapat  cukup banyak  karena  pada  mata  tikus  terdapat  pembuluh
darah vena mata. Selain itu, regenerasi jaringan pada daerah  ini  berlangsung  lebih  cepat  [9].  Darah  yang didapat  ditampung  dalam  tabung  vacutainer  non- EDTA dengan tutup tabung berwarna merah. Sampel darah  kemudian  disentrifugasi  dengan  kecepatan 2500  rpm  selama  10  menit  hingga  komponen penyusun  darah  terpisah.  Serum  kemudian  diambil dan direaksikan dengan reagen GOD-PAP pada tabung reaksi,  kemudian  tabung  dikocok  pelan  agar  serum dan  reagen  tercampur  homogen.  Serum  memiliki kandungan  air  yang  lebih  banyak  dibandingkan plasma,  sehingga  kadar  glukosa  lebih  tinggi  pada sampel serum [10].
Sampel diinkubasi pada suhu 20 － 25 ℃ selama 10 － 15  menit  karena  reaksi  optimum  antara  enzim glukosa oksidase dan peroksidase memerlukan waktu tertentu.  Kemudian  baca  hasil  absorbansi  kadar glukosa  dengan  menggunakan  fotometer  DTN-410-K pada panjang gelombang 505 nm. Adapun kelebihan menggunakan  metode  GOD-PAP  dibandingkan metode  strip  (glukosa-DR)  yaitu  hasil  yang  didapat lebih spesifik serta akurasi dan presisinya lebih tinggi. Namun,  dalam  segi  pemeliharaan  dan  perawatan serta harga dibutuhkan biaya yang cukup tinggi [11].
Setelah  didapatkan  glukosa  darah  awal,  pada penelitian  ini  tikus  dibuat  mengalami  diabetes mellitus tipe 2 dengan cara induksi pakan diet tinggi lemak dan fruktosa (DTLF). Pakan ini terdiri atas pakan standar 80%, minyak babi 15%, kuning telur bebek 5% dan  fruktosa  yang  diberikan  dengan  dosis  1800 mg/kgBB  secara  oral.  Jumlah  konsumsi  maksimum makanan yang diberikan dalam 15 g/tikus selama 30 hari [4].
Penggunaan  fruktosa  pada  induksi  ini  karena fruktosa  lebih  dimetabolisme  sebagai  lemak dibandingkan  glikogen  sehingga  menyebabkan tingginya  kadar  kolesterol  dan  asam  lemak  bebas dalam darah. Fruktosa juga menyebabkan kegagalan signaling  insulin  sehingga  menurunkan  sintesis glikogen  dan  meningkatkan  glikogenolisis  dan glukoneogenesis, akibatnya terjadi peningkatan kadar glukosa darah. Pemberian pakan tinggi lemak (kuning telur dan minyak babi) akan meningkatkan kandungan kolesterol  dan  asam  lemak  bebas  dalam  darah  yang mengakibatkan  penurunan  sensitifitas  insulin  pada jaringan  perifer.  Pemberian  makanan  tinggi  lemak tersebut  akan  menurunkan  kemampuan  substrat reseptor  insulin  untuk  mengaktifkan  P13-kinase  dan menyebabkan ekspresi GLUT 4 menurun.
Menurunnya  ekspresi  GLUT  4  ini  menyebabkan transpor  glukosa  ke  dalam  membran  sel  terganggu
sehingga  aktivitas  pengangkutan  glukosa  menurun akibatnya kadar glukosa dalam darah meningkat [4].
Gambar 1. Diagram perbandingan kadar glukosa darah tikus sebelum induksi DTLF dan setelah induksi DTLF
Kadar glukosa darah tikus kembali diukur pada hari  ke-30.  Tujuannya  menilai  apakah  tikus  sudah mengalami  kondisi  diabetes  mellitus  setelah  induksi selama  30  hari.  Berdasarkan  Gambar  1,  dapat diketahui  bahwa  kadar  glukosa  kelompok  normal tetap  berada  pada  rentang  kadar  glukosa  normal (<126  mg/dl),  dikarenakan  pada  kelompok  normal tidak  diberikan  perlakuan  apapun  selain  pemberian pakan standar dan air minum.
Kelompok  perlakuan  yang  diberikan  induksi DTLF  yakni  kelompok  kontrol  positif,  kelompok kontrol negatif, dan kelompok perlakuan I, II,  dan III mengalami peningkatan kadar glukosa darah. Hal ini menandakan  tikus  mengalami  diabetes  mellitus, dimana  kadar  glukosa  darahnya  >126  mg/dl.  Hal  ini disebabkan karena pemberian DTLF dapat menyebabkan  kegagalan  signaling  insulin  sehingga dapat menurunkan sintesis glikogen dan meningkatkan  glikogenolisis  dan  glukoneogenesis. Selain  itu,  pemberian  DTLF  menyebakan  penurunan ekspresi  dari  GLUT  4  sehingga  kadar  glukosa  darah meningkat [4].
Hasil  analisis  statistika  paired  sample  T-Test menggunakan  aplikasi  SPSS  menunjukkan  nilai signifikansi  (p<0,05)  pada  semua  kelompok  kecuali kelompok normal. Nilai signifikansi (p<0,05) menunjukkan  bahwa  ada  perbedaan  antara  data sebelum dan setelah induksi. Hal ini mengindikasikan bahwa  pemberian  pakan  diet  tinggi  lemak  dan fruktosa  selama  30  hari  mampu  menginduksi terjadinya diabetes mellitus tipe 2.
Setelah hewan uji mengalami diabetes mellitus tipe  2,  tikus  selanjutnya  diberikan  perlakuan  selama 15  hari.  Kelompok  normal  tidak  diberikan  apa-apa, kelompok kontrol negatif diberikan Na CMC 0,5%, dan kelompok kontrol positif diberikan metformin dengan dosis  151,20  mg/kgBB.  Sedangkan  kelompok perlakuan  I,  II,  dan  III  diberikan  ekstrak  etanol  akar kabau masing-masing dengan dosis 100, 200, dan 400 mg/kgBB.  Kadar  glukosa  darah  kembali  diukur  pada hari  ke-35,  hari  ke-40,  dan  hari  ke-45  setelah pemberian  ekstrak  etanol  akar  kabau.  Tujuannya menilai  efektivitas  dari  ekstrak  etanol  akar  kabau terhadap tikus yang telah diinduksi DTLF.
0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 N or ma l N ega tif P os it if P er la ku an I P er la kua n I I P er la kua n I II K ada r G lu ko sa D ar ah ( mg/ dl ) Sebelum Setelah Induksi DTLF
Gambar 2. Grafik hubungan rata-rata kadar glukosa darah tiap kelompok pada hari ke-30 sampai 45
Berdasarkan  Gambar  2,  diketahui  kadar glukosa kelompok normal tetap berada pada rentang normal dikarenakan tidak diberikan perlakuan apapun selain  pemberian  pakan  standar  dan  air  minum. Kelompok kontrol negatif diberikan suspensi Na CMC 0,5%,  dimana  Na  CMC  sebagai  pensuspensi  sediaan uji,  sehingga  dapat  dipastikan  bahwa  Na  CMC  tidak akan berpengaruh terhadap penurunan kadar glukosa darah [12]
Kadar  glukosa  darah  kelompok  kontrol  positif mengalami  penurunan  yang  signifikan.  Hal  ini disebabkan  karena  pemberian  metformin  dengan dosis 151,20 mg/kgBB. Metformin mampu meningkatkan  sensitifitas  insulin  sehingga  insulin dapat dengan mudah berikatan dengan reseptornya. Selain itu, metformin mampu menurunkan kolesterol dan asam lemak bebas, dimana kolesterol dan asam lemak bebas menginduksi terjadinya resistensi insulin sehingga mengakibatkan diabetes mellitus tipe 2 [13].
Kelompok  perlakuan  I,  II,  dan  III  (suspensi ekstrak  etanol  akar  kabau  dosis  100,  200,  dan  400 mg/kgBB) mengalami penurunan kadar glukosa darah yang  cukup  signifikan.  Kelompok  perlakuan  yang memiliki efek menurunkan kadar glukosa darah paling besar yaitu perlakuan III dengan dosis 400 mg/kgBB, diikuti  kelompok  perlakuan  II  dengan  dosis  200 mg/kgBB, dan kelompok perlakuan I dengan dosis 100
mg/kgBB.  Penurunan  terjadi  karena  kandungan flavonoid  dan  fenolik  yang  ada  pada  ekstrak  etanol akar  kabau.  Flavonoid  diduga  mampu  meningkatkan penggunaan  glukosa  di  dalam  jaringan  dengan  cara meningkatkan fosforilasi tirosin kinase pada substrat reseptor insulin sehingga terjadi peningkatan aktivitas enzim  Pl3-kinase  yang  akan  membentuk  dan mentranslokasikan proteiun GLUT 4 ke membran sel sehingga  kadar  glukosa  darah  menurun  [4].  Fenolik berperan  sebagai  antioksidan  dengan  mengikat radikal  bebas  sehingga  dapat  mengurang  stres oksidatif.  Jika  stres  oksidatif  berkurang  maka  dapat mengurangi  resistensi  terhadap  kerja  insulin  dan dapat  mencegah  disfungsi  dan  kerusakan  sel  beta pancreas [5].

## Pengukuran Berat Badan
Pengukuran  berat  badan  dilakukan  untuk melihat pengaruh pemberian DTLF terhadap kenaikan berat  badan.  Pengukuran  dilakukan  setelah  tikus diaklimatisasi, dihitung sebagai hari ke-0. Selanjutnya pengukuran dilakukan setiap 15 hari sekali yakni hari ke-15 dan hari ke-30 setelah induksi DTLF. Hari ke-45 setelah  pemberian  perlakuan  berupa  ekstrak,  berat badan  tikus  kembali  diukur  untuk  mengamati perkembangan berat badan tikus.
0 20 40 60 80 100 120 140 160 30 35 40 45 K ada r gl uko sa da ra h ( m g/dl ) Hari ke- Normal Negatif Positif Perlakuan I Perlakuan II Perlakuan III
Tabel 4. Persen kenaikan dan persen penurunan berat badan
Berdasarkan  Tabel  4,  kelompok  normal memiliki  persen  kenaikan  berat  badan  yang  paling rendah yakni 6,10 ± 1,06%. Hal ini disebabkan karena kelompok normal hanya diberikan pakan standar dan air  minum,  sehingga  kenaikan  berat  badan  yang terjadi  kecil.  Kelompok  perlakuan  yang  diberikan induksi DTLF menunjukkan kenaikan berat badan yang lebih besar dengan persen peningkatan terbesar yakni 23,80 ± 3,61%.
Hasil persen penurunan berat badan kelompok normal  dan  kelompok  kontrol  negatif  menunjukkan nilai  minus  yang  artinya  berat  badan  tikus  tidak mengalami  penurunan  melainkan  tetap  mengalami kenaikan  berat  badan.  Hal  ini  dikarenakan  pada kelompok normal hanya diberikan pakan standar dan air  minum,  sedangkan  kelompok  kontrol  negatif diberikan  tambahan  Na  CMC  yang  tidak  mempunyai efek dalam menurunkan berat badan.
Berat  badan  tikus  kelompok  kontrol  positif (Metformin  151,20  mg/kgBB)  mengalami  penurunan yang  cukup  signifikan.  Selain  mempunyai  efek menurunkan  glukosa  darah,  metormin  juga  mampu menekan  nafsu  makan,  sehingga  berat  badan  tikus mengalami  penurunan.  Metformin  juga  mampu menurunkan  kolesterol  dan  asam  lemak  bebas sehingga mengurangi resiko obesitas [14].
Kelompok  perlakuan  I,  II,  dan  III  (suspensi ekstrak  etanol  akar  kabau  dosis  100,  200,  400 mg/kgBB)  mengalami  penurunan  berat  badan  yang cukup  signifikan  pada  hari  ke-45  atau  hari  ke-15 setelah  pemberian  ekstrak.  Kelompok  perlakuan  III memberikan efek penurunan berat badan paling besar dibandingkan  dengan  kelompok  perlakuan  I  dan  II dengan nilai persen penurunan sebesar 23,79 ± 1,30%.
Penetapan Nilai Area Under Curve (AUC) Setelah diketahui rata-rata kadar glukosa darah dari hari ke-30 sampai hari ke-45, kemudian dihitung nilai  AUC 30-45 untuk  mengetahui  perubahan  kadar glukosa darah dari hari ke-30 sampai hari ke-45. Data hasil  perhitungan  AUC 30-45 terdapat  pada  Tabel  5. Perubahan  kadar  glukosa  darah  dari  tiap  kelompok perlakuan  dapat  diketahui  dengan  menghitung  luas daerah di bawah kurva / Area Under Curve (AUC) pada hari  ke-30  sampai  hari  ke-45  (AUC 30-45 ).  Nilai  AUC menggambarkan jumlah obat yang masuk ke sirkulasi sistemik.  Jika  nilai  AUC  rendah  maka  obat  terpakai sempurna  untuk  penurunan  kadar  glukosa  darah sehingga  nilai  AUC  berbanding  terbalik  dengan aktivitas antidiabetes. Semakin rendah nilai AUC yang didapat  maka  semakin  baik  aktivitasnya  dalam penurunan kadar glukosa darah.
Tabel 5. Data hasil perhitungan AUC 30-45 dan persen penurunan kadar glukosa darah (%PKGD)
Kelompok Rata-rata AUC 30-45 %PKGD Normal Kontrol negative Kontrol positif Perlakuan I (100) mg/kgBB) Perlakuan II (200) mg/kgBB) Perlakuan III (400) mg/kgBB) 1577,94 ± 0,90
2136,13 ± 26,94
1727,01 ± 69,51 1893,32 ± 37,54 1849,14 ± 73,05 1789,15 ± 66,09 － 0% 73,29% 43,50% 51,41% 62,16%
Berdasarkan  Tabel  5,  kelompok  normal memiliki  nilai  rata-rata  AUC 30-45 yang  paling  rendah yakni  1577,94  ±  0,90.  Hal  ini  dikarenakan  tidak
diberikan  perlakuan  uji,  melainkan  hanya  pakan standar  dan  air  minum.  Kelompok  kontrol  negatif memiliki rata-rata nilai AUC 30-45 yang paling tinggi yaitu
Kelompok Perlakuan %Kenaikan %Penurunan Normal 6,10 ± 1,06% -4,83 ± 1,70% Kontrol negatif 19,34 ± 3,27% -3,21 ± 7,72% Kontrol positif 18,63 ± 4,12% 19,94 ± 2,41% Perlakuan I 23,80 ± 3,61% 7,94 ± 2,69% Perlakuan II 15,92 ± 1,39% 19,91 ± 9,51% Perlakuan III 20,95 ± 4,89% 23,79 ± 1,30%
2136,13  ±  26,94.  Ini  disebabkan  kelompok  kontrol negatif hanya diberikan suspensi Na CMC 0,5% yang tidak memiliki efek dalam menurunkan kadar glukosa darah  tikus.  Kelompok  kontrol  positif  memiliki  rata- rata AUC 30-45 paling rendah setelah kelompok kontrol normal diikuti kelompok perlakuan III, II, dan I.
Berdasarkan  data  dari  Tabel  5,  kelompok kontrol  positif  memiliki  persen  penurunan  kadar glukosa yang paling tinggi yakni sebesar 73,29%. Hasil berikutnya  menunjukkan  persen  penurunan  kadar glukosa  tertinggi  setelah  kelompok  kontrol  positif adalah kelompok perlakuan III sebesar 62,16%, diikuti kelompok  perlakuan  II  dan  I  masing-masing  sebesar 51,41%  dan  43,50%.  Artinya  kelompok  perlakuan  III memiliki  aktivitas  antidiabetes  lebih  baik  dibanding kelompok perlakuan I dan II.
Data  penurunan  kadar  glukosa  darah  masing- masing  kelompok  yang  telah  didapat,  kemudian dianalisis secara statistik dengan menggunakan SPSS 22.0.    Hasil  uji  normalitas  Shapiro-Wilk  didapatkan nilai siginifkansi (p>0,05). Artinya data masing-masing kelompok  terdistribusi  normal.  Analisis  selanjutnya yakni  analisis  parametrik  dengan  ANOVA  satu  jalan (One  Way)  dengan  taraf  kepercayaan  95%.  Hasil analisis  diketahui  bahwa  terdapat  perbedaan  yang signifikan antar kelompok (p<0,05) dimana diperoleh nilai signifikansi yakni 0,020.
Data  yang  didapat  dari  analisis  statistik parametrik  dengan  ANOVA  satu  jalan  terdapat perbedaan yang siginfikan, maka dilanjutkan dengan uji post hoc LSD (Least Significant Differences). Hasil analisis  uji  pos  hoc  LSD,  diketahui  bahwa  tidak terdapat  perbedaan  signifikan  antara  kelompok kontrol positif dibandingkan kelompok perlakuan I, II, dan  III  (p>0,05),  dimana  diperoleh  nilai  signifikansi masing-masing  0,222;  0,363;  dan  0,639.  Tetapi terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok kontrol  positif  dan  kelompok  perlakuan  II,  dan  III dengan  kelompok  kontrol  negatif  (p<0,05),  dimana diperoleh  nilai  signifikansi  masing-masing  0,008; 0,046; dan 0,020.
Berdasarkan hasil analisis statistik menggunakan  aplikasi  SPSS  versi  22.0  diatas,  efek penurunan kadar glukosa darah tikus dari metformin (kontrol  positif)  lebih  baik  dibandingkan  pemberian ekstrak  etanol  akar  kabau  dosis  100  mg/kgBB,  200 mg/kgBB,  dan  400  mg/kgBB,  tetapi  tidak  terdapat perbedaan  yang  signifikan  antara  kelompok  kontrol positif  dan  kelompok  perlakuan.  Ketiga  dosis
perlakuan ekstrak tersebut memilki potensi terhadap penurunan  kadar  glukosa  darah  tikus  putih  jantan galur  wistar  yang  terinduksi  pakan  diet  tinggi  lemak dan fruktosa.
Effective Dose 50 (ED 50 ) Nilai  ED 50 dihitung  dengan  regresi  linear hubungan  antara  dosis  ekstrak  yang  digunakan  dan persen  penurunan  kadar  glukosa  darah  (%PKGD). Dosis  efektif  50%  (ED 50 )  adalah  dosis  yang menimbulkan efek terapeutik pada 50% populasi. Nilai ED 50 ekstrak  etanol  akar  kabau  ditentukan  untuk mengetahui  dosis  yang  dapat  menimbulkan  efek penurunan  kadar  glukosa  darah  pada  50%  individu (hewan uji).

## Gambar 3. Grafik regresi linier antara dosis (mg/kgBB) dan persen penurunan kadar glukosa darah tikus (%PKGD)
Persamaan  linier  yang  diperoleh  adalah  y  = 0,061x + 38,127 dengan nilai koefisien korelasi (R2) = 0,9895.  Dari  persamaan  yang  diperoleh,  dapat dihitung  nilai  ED 50 dari  ekstrak  etanol  akar  kabau, dimana x adalah dosis ekstrak yang digunakan dan y adalah persen penurunan kadar glukosa darah tikus. Dari hasil perhitungan diperoleh nilai ED 50 dari ekstrak etanol akar kabau adalah sebesar 194,64 mg/kgBB.

## KESIMPULAN
Ekstrak etanol akar kabau mampu menurunkan kadar  glukosa  darah  dengan  persen  penurunan terbesar  ditunjukkan  oleh  dosis  400  mg/kgBB  yaitu sebesar  62,16%  dengan  nilai  AUC 35-40 1789,15.  Dosis Efektif  (ED 50 )  ekstrak  etanol  akar  kabau  sebesar 194,64 mg/kgBB.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penelitian ini biayai oleh Anggaran DIPA Badan Layanan Umum Universitas Sriwijaya tahun anggaran
y = 0.061x + 38.127 R² = 0.9895 0 10 20 30 40 50 60 70 0 200 400 600 % P K G D ( % ) Dosis (mg/kgBB) %PKGD Linear (%PKGD)
2019  [Nomor  Kontrak:  0016/UN9/SK.LP2M.PT/2019 Tanggal 21 Juni 2019].

## REFERENSI
[1]  International  Diabetes  Federation.  2017,  IDF Diabetes Atlas Eight Edition, diakses tanggal 10 September 2018, <http://diabetesatlas.org>.
[2]    Mutiyani, M., Soetmadji, D.W., dan Sunindya, B.R. 2014,  Efek  Diet  Tinggi  Karbohidrat  dan  Tinggi Lemak  terhadap  Kadar  Glukosa  Darah  dan Kepadatan Sel Beta Pankreas pada Tikus Wistar, Indonesian  Journal  of  Human  Nutrition, 1(2):106-113.
[3] Wahidah, L.K., Suri, N., dan Komalasari, R.A, 2018, Pengaruh  Ekstrak  Biji  Kabau  (Archidendron buballinum  (Jack.)  I.C.  Nielsen)  Terhadap Penurunan  Kadar  Gula  Darah  Mencit  Putih Jantan  Diabetes  Yang  Diinduksi  Aloksan,  Jurnal Farmasi Lampung, 7(1):39-51.
[4]  Puspitaningrum,  I.,  Kusmita,  L.,  dan  Mutmainah. 2015,  Pembuatan  Tepung  Umbi  Kimpul (Xanthosoma violaceum Schott.) dan Pemanfaatannya  Sebagai  Antidiabetes  Mellitus Tipe 2, Prosiding Seminar Nasional Perkembangan  Terbaru  Pemanfaatan  Herbal Sebagai  Agen  Kemopreventif  Pada  Terapi Kanker, Semarang, Indonesia.
[5] Lin., D., Xiao, M., Zhao, J., Li, Z., Xing, B., Li, X., et al. 2016, An Overview of Plant Phenolic Compounds and  Their  Impertance  in  Human  Nutrition  and Management  of  Type  2  Diabetes,  Molecules, 21:1374-1393.
[6]  Nugroho,  A.E.,  Andrie,  M.,  Warditiani,  N.K., Siswanto,  E.,  Pramono,  S.,  and  Lukitaningsih,  E. 2012, Antidiabetic  and antihiperlipidemic Effect of  Andrographis  paniculata  (Burn.  f.)  Nees  and andrographolide  in  High-Fructose-Fat-Fed  Rats, Indian Journal of Pharmacology, 44(3):377-381.
[7]  Syamsul,  E.S.,  Nugroho,  A.N.,  dan  Pramono,  S.
2011,  Aktivitas  Antidiabetes  Kombinasi  Ekstrak Terpurifikasi  Herba  Sambiloto  ( Andrographis paniculata (Burn.F.) Ness.) dan Metformin pada Tikus DM Tipe 2 Resistensi Insulin, Majalah Obat Tradisional, 16(3):124-132.
[8]  Primadina,  M.A.  2015,  The  Effect  of  Menstrual Cycle  to  Blood  Glucose  Levels,  J  Majority, 4(3):65-70.
[9] Parasuraman, S., Zhen, K.M., Raveendran, R. 2015, Retro-orbital  Blood  Sample  Collection  in  Rats-a Video Article, PTB Reports, 1(2):37-40.
[10]  Subiyono.,  Martiningsih,  M.A.,  dan  Gabrela,  D. 2016,  Gambaran  Kadar  Glukosa  Darah  Metode GOD-PAP (Glocose Oxydase-Peroxidase Aminoantypirin) Sampel Serum dan Plasma EDTA (Ethylen  Diamin  Tetra  Acetat),  Jurnal  Teknologi Laboratorium, 5(1):45:48.
[11] Santoso, K. 2015, Pengaruh Pemakaian Setengah Volume  Sampel  dan  Reagen  pada  Pemeriksaan Glukosa Darah Metode GOD-PAP terhadap Nilai Simpangan  Baku  dan  Koefisien  Variasi,  Jurnal Wiyata, 2(2):114-119.
[12]  Illyyani,  S.,  Intannia,  D.,  &  Triyasmono,  L.  2015, Pengaruh  Pemberian  Ekstrak  Etanol  Tanaman Iler  (Coleus  atropurpureus  Benth)  terhadap Penurunan  Kadar  Glukosa  Darah  pada  Tikus Putih  Jantan  yang  Diinduksi  Aloksan,  J.  Pharm., 2(1):19-25.
[13]  Goodman  &  Gilman.  2007,  Dasar  Farmakologi Terapi  Volume  2,  Edisi  10,  diterjemahkan  oleh Tim  Ahli  Bahasa  Sekolah  Farmasi  ITB,  Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, Indonesia.
[14] Katzung, B.G. 2002, Farmakologi Dasar dan Klinik, Buku  2,  Edisi  8,  diterjemahkan  oleh  Bagian Farmakologi  Fakultas  Kedokteran  Universitas Airlangga, Salemba Medika, Jakarta, Indonesia.