Abstrak — Semakin  meningkatnya  sampah  plastik  ini  akan mencemari  lingkungan.  Salah  satu  penyelesaiannya  dapat dilakukan  dengan  proses  biodegradasi  yang  dilakukan  oleh mikroorganisme.  Bacillus  PL01  diketahui  mampu  bersinergi dengan  bakteri  indigenous  pasir  dalam  mendegradasi  plastik  di skala  laboratorium  dengan  penambahan  1  gr/L  Monosodium glutamat (MSG), sehingga dilakukan penelitian untuk mengetahui  pengaruh  dari  Bacillus  PL01  dan  MSG  terhadap bakteri  indigenous  pasir  dalam  mendegradasi  plastik  dengan metode  penimbunan  tanah  dalam  skala  lapangan  selama  12 minggu  masa  inkubasi.  Setelah  12  minggu  masa  inkubasi, pertumbuhan  bakteri  indigenous  pada  permukaan  plastik transparan  sebesar  0,9  AU,  sedangkan  pada  penambahan Bacillus  PL01  dan  1  gr/L  MSG  pertumbuhannya  mengalami penurunan yakni 0,3AU. Degradasi juga  diamati  dari  kecepatan waktu  apung  plastik,  yaitu  plastik  transparan  sebelum didegradasi  kecepatannya  hanya  mencapai  10.54  detik  dan ketika  plastik  transparan  telah  didegradasi  kecepatannya mencapai 28.71 detik, sehingga dapat disimpulkan bahwa bakteri indigenous pasir mampu mendegradasi plastik.
Kata Kunci — Bacillus PL01, Bakteri indigenous pasir, Biodegradasi, Monosodium Glutamat (MSG).

## I. PENDAHULUAN
LASTIK  merupakan  senyawa  polimer  yang  unsur penyusun utamanya adalah karbon dan hidrogen [1]. Sejak ditemukan  pertama  kali  pada  tahun  1907,  penggunaan  plastik dan barang-barang berbahan dasar plastik semakin meningkat. Di  Indonesia,  kebutuhan  plastik  terus  meningkat  hingga mengalami  kenaikan  rata-rata  200  ton  per  tahun  [1]. Penanganan  sampah  plastik  yang  ada  selama  ini  adalah dengan  3R  [1]. Reuse adalah  memakai  berulang  kali  barang- barang  yang  terbuat  dari  plastik. Reduce adalah  mengurangi pembelian atau penggunaan barang-barang dari plastik,terutama  barang-barang  yang  sekali  pakai. Recycle adalah mendaur ulang barang-barang yang terbuat plastik [1].
Biodegradasi merupakan metode degradasi dengan menggunakan  mikroorganisme. Metode ini tidak berpengaruh negatif terhadap lingkungan dalam pemecahan polimer karena tidak  menghasilkan  residu  toksik  dan  terlibat  dalam  siklus biogeokimia dari substrat polimer tersebut [2]. Proses tersebut dapat  terjadi  di  tanah,  perairan  dan  instalasi  pengolahan  air limbah.
Mikroorganisme  seperti Bacillus dan Pseudomonas diketahui  dapat  melakukan  proses  biodegradasi  polimer  [3]. Isolat Bacillus koleksi  Laboratorium  Mikrobiologi  dan
Bioteknologi ITS telah teruji memiliki kemampuan biodegradasi  plastik.  Isolat Bacillus mampu  mendegradasi plastic kantong plastik hitam dan putih sebesar 1,9% dan 2,3% pada Mineral  Salt  Medium (MSM)  selama  4  bulan  masa inkubasi [4].
Monosodium Glutamat (MSG) diketahui dapat mempercepat pertumbuhan dan menambah ukuran sel bakteri. Salah satu fungsi MSG adalah sebagai substansi untuk sintesis protein  [5].  MSG  merupakan  garam  natrium  yang  berikatan dengan asam amino non esensial berupa asam glutamat. Asam glutamat  merupakan  salah  satu  asam  amino  yang  paling banyak ditemukan di alam [6]. Rahmawati melaporkan bahwa adanya  pengaruh  MSG  komersial  terhadap  pertumbuhan Bacillus PL01  [7].  Hal  ini  ditunjukan  dengan  adanya penambahan  ukuran  sel  pada Bacillus PL01,  semakin bertambahnya  konsentrasi  MSG  semakin  bertambah  pula ukuran  sel  dari Bacillus PL01.  Pada  sel Bacillus PL01 pertumbuhan  tertinggi  terjadi  setelah  16  jam  masa  inkubasi dengan  konsentrasi  0,5  gr/L  MSG  yakni  mencapai  1,8  µm  x 1,2 µm .
Salah  satu  metode  yang  banyak  digunakan  dalam  uji biodegradasi  suatu  senyawa  oleh  mikroorganisme  adalah metode  penimbunan  [8].  Metode  penimbunan  telah  banyak digunakan  untuk  mengetahui  degradasi  plastik  di  lingkungan karena  kesamaan  dengan  kondisi  aktual  yang  terjadi  dalam tanah [8]. [9] melaporkan bahwa dengan  metode penimbunan ( soil  burial) pada  skala  laboratorium,  bakteri Bacillus PL01 dan  bakteri indigenous pasir  mampu  bersinergi  dalam mendegradasi  plastik  kantong  plastik  hitam,  putih  dan transparan, yaitu masing-masing sebesar 10%, 10%, dan 18% selama  16  minggu  masa  inkubasi  dan  penambahan  1  gr/L MSG.
Seiring dengan adanya penambahan jumlah sampah plastik pada  lingkungan,  maka  diperlukan  biodegradasi  plastik dengan  metode  penimbunan  tanah  dalam  skala  lapangan dengan  menggunakan polybag sebagai  tempat  untuk biodegradasi .

## II. METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
A.
Penelitian  dilakukan  pada  Bulan  Maret  -  Juni  2017  di Laboratorium  Mikrobiologi  dan  Bioteknologi,  Departemen Biologi,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam, Institut Teknologi Sepuluh Nopember, Surabaya.

## Pengaruh
Bacillus PL01 dan Monosodium Glutamat terhadap Bakteri Indigenous Pasir dalam Mendegradasi Plastik
Dian Yanita Rahmi dan Maya Shovitri Departemen Biologi, Fakultas Ilmu Alam, Institut Teknologi Sepuluh Nopember (ITS)
e-mail : maya@bio.its.ac.id
P
Gambar 1. Pertumbuhan Sel Bakteri Indigenous Pasir pada Pemukaan Plastik.
Metode yang Digunakan B.
1. Persiapan Kantong Plastik
Plastik  yang  digunakan  untuk  uji  biodegradasi  yakni kantong  plastik  kantong  plastik  dengan  warna  hitam,  putih, dan  plastik  kemasan  makanan  transparan.  Plastik  dipotong dengan  ukuran  10x6  cm 2 sebanyak  3  kali  ulangan  pada  tiap jenis plastik untuk setiap area dan terdapat 3 kali pengulangan area. Penelitian ini merupakan penelitian destruktif selama 12 minggu  dengan  interval  waktu  3  minggu  untuk  pengambilan data.
Plastik  direndam  menggunakan  alkohol  70%  selama  30 menit kemudian dikeringanginkan dibawah UV di Lamina Air Flow (Bio  60-M)  selama  15  menit.  Potongan  plastik  yang telah kering dimasukkan ke dalam oven 80°C selama 24 jam, kemudian  dimasukkan  ke  dalam  desikator  (diberi silica  gel pada dasarnya) selama 24 jam.
2. Peremajaan Isolat dan Pembuatan Starter
Isolat bakteri yang digunakan adalah Bacillus PL01 (Nafiah dan Shovitri, 2016). Isolat Bacillus PL01 disubkulturkan pada medium Nutrient  Agar (NA) dengan  metode streak continuous . Isolat diiinkubasi selama 24 jam dalam inkubator dengan suhu 37°C.
Pembuatan  starter  dilakukan  secara  bertingkat  dengan pengambilan  subkultur Bacillus PL01  sebanyak  1  ose  dan dimasukkan  ke  dalam  10  ml  medium Nutrient  Broth (NB) diinkubasi  selama  24  jam . Biakkan  bakteri  tersebut  diambil sebanyak  1  ml  dimasukkan  ke  9  ml  NB baru  dan  diinkubasi selama  24  jam.  Biakkan  bakteri  kemudian  diambil  sebanyak 10 ml dimasukkan ke 90 ml NB baru dan diinkubasi selama 24 jam. Kemudian biakkan bakteri diambil sebanyak 100 ml dan dimasukkan  ke  900  ml  medium  NB baru  dan  diinkubasi selama  24  jam.  Proses  subkultur  yang  terakhir  merupakan starter yang siap digunakan. Pembiakan bakteri Bacillus PL01 pada  medium  NB sebanyak  1000  ml  dilakukan  sebanyak  12 kali  digunakan  untuk  proses  selanjutnya. Starter yang digunakan  untuk  uji  adalah  10%  dari  total  medium  dengan kepadatan  sel  10 5 -10 8 sel/ml  yang  dihitung  menggunakan Haemacytometer .  Sampel  uji  diambil  sebanyak  1-2  tetes  dan diletakkan di atas Haemacytometer . Preparat diamati di bawah mikroskop  dengan  perbesaran  1000  kali.  Starter  tersebut disebut starter bakteri.
Selanjutnya,  dilakukan  pembuatan starter aplikasi. Starter aplikasi  merupakan  starter  yang  dapat  diaplikasikan  di  media pasir yang terdiri dari air kolam steril yang bercampur dengan 10% starter bakteri. Air kolam diambil dari kolam 8 ITS. Air kolam  diambil  sebanyak  1000  ml  kemudian  disaring menggunakan saringan dan disterilisasi dengan  menggunakan autoklaf  selama  15  menit  pada  suhu  121°C  pada  tekanan  1,5 atm. Starter aplikasi  terdapat  2  macam  perlakuan  antara  lain starter aplikasi  ditambahkan  1  gr/L  Monosodium  Glutamat dan starter aplikasi  tanpa  penambahan  1  gr/L  Monosodium Glutamat.  Penambahan  1  gr/L  Monosodium  Glutamat dilakukan setelah proses sterilisasi.
3. Biodegradasi Plastik
Biodegradasi  plastik  ini  dilakukan  dengan  metode penimbunan  tanah  pasir  ( soil  burial )  pada polybag dengan ukuran  100x80  cm 2 .  Tahap  pertama  pasir  dicampur  dengan starter aplikasi  dengan  perbandingan  1:1.  Selanjutnya,  pasir yang bercampur dengan starter aplikasi dimasukkan ke dalam polybag hingga setinggi 10 cm. Selanjutnya diletakkan sampel pastik.  Pasir  yang  telah  bercampur  dengan starter aplikasi ditimbun  kembali  diatas  plastik  di  dalam polybag .  Pada penelitian ini terdapat perlakuan antara lain:
a. Penambahan 1 gr/L MSG
b. Tanpa Penambahan 1 gr/L MSG
c. Kontrol  dengan  penambahan  1  gr/L  MSG  dan  air  kolam steril
d. Kontrol  tanpa  penambahan  1  gr/L  MSG  dan  air  kolam steril
Perlakuan  c,d  merupakan  perlakuan  kontrol.  Perlakuan kontrol  adalah  perlakuan  tanpa  penambahan starter  Bacillus PL01.
Proses  degradasi  menggunakan  metode  penimbunan  dalam pasir  dilakukan  selama  12  minggu  dan  biodegradasi  plastik diukur  setiap  3  minggu  sekali.  Setiap  jenis  plastik  dilakukan uji  pembentukan  biofilm  dan  perhitungan  degradasi  plastik yang  dilakukan  secara  berurutan.  Pembentukan  biofilm meliputi  pengukuran Optical  density (OD)  biofilm  dan visualisasi biofilm, serta adanya degradasi dengan velositas.

## III. HASIL DAN DISKUSI
Pertumbuhan  bakteri  Indigenous  Pasir  pada  Biofilm A.

## Plastik dengan Penambahan Bacillus PL01 dan 1 gr/L MSG
Biofilm  merupakan  bentuk  struktural  dari  sekumpulan mikroorganisme  yang  dilindungi  oleh  matriks  ekstraseluler yang  disebut Extraceluller  Polymer  Substance (EPS).  EPS merupakan produk yang dihasilkan sendiri oleh mikroorganisme  tersebut  dan  dapat  melindungi  dari  buruk lingkungan  [10].  Gambar  1  menunjukan  bahwa  pertumbuhan Bacillus PL01  dan  1  gr/L  MSG  memiliki  pertumbuhan  yang lebih  tinggi  pada  permukaan  plastik  dibandingkan  ketika ditambahkan Bacillus PL01 dan 1 gr/L MSG.
Pada Gambar 1. terlihat bahwa tanpa penambahan Bacillus PL01 dan 1 gr/L MSG, pertumbuhan bakteri indigenous pasir pada  permukaan  plastik  transparan  selama  12  minggu  masa inkubasi  mencapai  0,9  AU.  Namun,  ketika Bacillus PL01 ditambahkan menyebabkan terjadinya penurunan pertumbuhan yakni sebesar 0,45 AU.
Gambar  2.  Visualisasi  Pembentukan  Biofilm  pada  Permukaan  Plastik  oleh Bakteri Indigenous Pasir dengan Penambahan Bacillus PL01 dan 1 gr/L MSG pada Perbesaran 1000x.
Gambar 3. Perbandingan Kerapatan Sel di Kolom Tanah Pasir dengan Biofilm Plastik.
Penurunan  pertumbuhan  diduga  karena  adanya  kompetisi antara  bakteri indigenous pasir  dengan Bacillus PL01  dalam memperebutkan nutrisi. Menurut [11], kebutuhan zat makanan atau  nutrisi  yang  sama  dapat  menyebabkan  terjadinya persaingan antar spesies. Penurunan pertumbuhan juga terjadi ketika bakteri indigenous pasir ditambahkan 1 gr/L MSG. Hal ini  diduga  karena  terdapat  nutrisi  yang  lebih  mudah dimanfaatkan oleh bakteri indigenous pasir yang terdapat pada air  kolam,  dibandingkan  dengan  pemanfaatan  MSG  dan plastik sebagai nutrisinya sehingga menyebabkan pertumbuhan pada permukaan plastik menurun.
Bakteri indigenous pasir  menggunakan  nutrien  pada  air kolam  (perairan  tawar)  antara  lain  karbon  (C),  oksigen  (O2), nitrogen  N),  sulfur  (S),  kalium  (K)  dalam  proses pertumbuhannya [12]. Kemudian ketika ditambahkan Bacillus PL01  dan  1  gr/L  MSG  di  minggu  ke-3  masa  inkubasi  terjadi peningkatan  pertumbuhan  bakteri indigenous pasir  pada permukaan  plastik  yang  mencapai  1,25  AU.  Namun,  pada minggu  ke-12  masa  inkubasi  terjadi  penurunan  pertumbuhan pertumbuhan bakteri indigenous pasir pada permukaan plastik. Hasil  ini  berbeda  dengan  penelitian  [9]  yang  melaporkan bahwa pada skala laboratorium penambahan 1 gr/L MSG pada Mineral Salt Medium (MSM) dapat meningkatkan pertumbuhan Bacillus PL01 dan bakteri indigenous pasir pada permukaan  plastik.  Perbedaan  hasil  ini  diduga  karena  adanya pengaruh  faktor  lingkungan  terhadap  pertumbuhan  bakteri. Pada  skala  lapangan  terdapat  faktor  abiotik  tidak  dapat dikendalikan, sedangkan faktor abiotik pada skala laboratorium sudah dibatasi. Adapun faktor abiotik lingkungan yang  dapat  mempengaruhi  pertumbuhan  bakteri  yaitu  suhu, cahaya, kelembapan, pH, dan oksigen [13].
Pada  penelitian  ini  terlihat  bahwa  adanya  penambahan  1 gr/L  MSG  mempengaruhi  penurunan  pertumbuhan  dari Bacillus PL01  dan  bakteri indigenous pasir  hal  ini  diduga karena  menurut  [7]  peningkatan  MSG  berpengaruh  terhadap konsentrasi lingkungan ekstraseluler, menjadi lebih pekat bagi Bacillus PL01.  Semakin  tinggi  konsentrasi  MSG  yang diberikan, semakin tidak tersedia atau sulit diserap masuk oleh Bacillus PL01  karena  terhalang  oleh  lapisan  peptidoglikan, sehingga  nutrisi  alternatif  dari  MSG  tidak  tersedia  untuk mendukung pertumbuhan bakteri.
Biofilm  yang  telah  diukur  kepadatan  selnya  maka  dapat dilanjutkan  dengan  melihat  hasil  visualnya  (Gambar  2).  [14] menyatakan bahwa kenampakan biofilm  secara visual dengan menggunakan pewarnaan memiliki korelasi sebanding dengan nilai  OD600nm.  Nilai  OD600nm  yang  rendah  memiliki struktur yang lebih renggang dilihat dari warna methylene blue yang  pudar  dan  tidak  mencolok.  Sedangkan  nilai  OD  biofilm yang  lebih  tinggi  terlihat  memiliki  struktur  yang  lebih  rapat dan  warna  mencolok.  Berdasarkan  klasifikasi  intensitas pembentukan  biofilm  [15]  bakteri indigenous pasir  memiliki nilai  OD600nm  biofilm  >  0,240  yang  mengidikasikan  bahwa bakteri indigenous pasir merupakan pembentuk biofilm kuat. Penelitian ini juga dilakukan pengukuran kerapatan sel pada kolom  tanah  pasir  bedasarkan  nilai  OD 600nm .  Pada  Gambar  3. terlihat  bahwa  kerapatan  sel  bakteri indigenous pasir  tanpa penambahan Bacillus PL01  dan  1  gr/L  MSG  di  kolom  tanah pasir mempunyai nilai yang lebih tinggi dibandingkan dengan kerapatan  sel  pada  permukaan  plastiknya.  Hasil  ini menunjukan bahwa bakteri indigenous pasir tanpa penambahan Bacillus PL01  dan  1  gr/L  MSG  lebih memanfaatkan air kolam sebagai sumber nutrisinya.
Menurut [16] habitat alami mikroorganisme terdiri dari dua yakni planktonik (bebas) dan sesil (diam). Bakteri indigenous pasir  lebih  menyukai  habitat  planktonik  atau  bebas dikarenakan terdapat nutrisi yang mudah untuk dimanfaatkan. Bakteri indigenous pasir  lebih  memanfaatkan  nutrisi  yang lebih sederhana yang berasal dari air kolam

## Velositas
B.
Proses  pelekatan  bakteri  pada  permukaan  plastik  yang membentuk  biofilm  merupakan  proses  fisik,  kimia,  dan enzimatis  yang  termasuk  dalam  mekanisme  awal  dari  proses biodegradasi  [17].  Parameter  untuk  mengetahui  degradasi plastik  salah  satunya  adalah  velositas.  Berdasarkan  hasil kerapatan sel pada permukaan plastik Gambar 1 dan kerapatan sel  pada  kolom  tanah  3,  terlihat  bahwa  bakteri indigenous pasir  dan Bacillus PL01  dapat  menggunakan  plastik  sebagai sumber  C  nya.  Velositas  adalah  suatu  metode  pengukuran degradasi  plastik  yang  menggunakan  parameter  waktu kecepatan  apung  plastik  didalam  air.  Tujuan  dari  velositas adalah  untuk  membandingkan  hidrofobisitas  plastik  sebelum dan  sesudah  perlakuan  degradasi.  Pada  pengukuran  velositas terdapat kontrol awal yakni plastik yang tidak didegradasi.
Gambar 4. Velositas Plastik .
Pada Gambar 4 terlihat bahwa plastik yang telah didegradasi oleh  bakteri indigenous pasir  dengan/tanpa  penambahan Bacillus PL01  dan  1  gr/L  MSG  dalam  12  minggu  masa inkubasi  rata-rata  kecepatan  waktu  apungnya  meningkat, terutama dibandingkan dengan plastik yang tidak didegradasi. Penambahan Bacillus PL01  dan  1  gr/L  MSG  terlihat  tidak mempengaruhi kecepatan waktu apug plastik menjadi semakin lambat. Pada Gambar 4 setelah 12 minggu masa inkubasi yang telah  didegradasi  oleh  bakteri indigenous pasir  tanpa penambahan Bacillus PL01  dan  1  gr/L  MSG  waktu  apung plastik  mencapai  24.49,  sedangkan  ketika  ditambahkan Bacillus PL01 dan 1 gr/L MSG kecepetan waktu apung plastik transparan menjadi lebih cepat yakni 28.71 detik. Selanjutnya ketika  ditambahkan Bacillus PL01  saja  kecepatan  waktu apung  plastik  transparan  hanya  mencapai  19.42  detik  dan ketika  ditambahkan  1  gr/L  MSG  kecepatan  apungnya  hanya mencapai  19.56  detik.  Hal  ini  diduga  bahwa  bakteri indigenous pasir  mampu  mendegradasi  plastik  lebih  tinggi dibandingkan  dengan  penambahan Bacillus PL01  dan  1  gr/L MSG.
Hidrofobisitas  pada  plastik  merupakan  sifat  penting  dari permukaan  plastik  dalam  proses  biodegradasi.  Hal  ini disebabkan  karena  adanya  hubungan  antara  hidrofobisitas permukaan plastik dengan kemampuan mikroorganisme dalam berkolonisasi  pada  substrat  polimer.  Semakin  hidrofilik  suatu permukaan  maka  akan  lebih  mudah  suatu  mikroorganisme untuk  menempel  dan  berkolonisasi  [18].  Pada  proses biodegradasi  terjadi  penambahan  gugus  hidroksil  untuk menurunkan tegangan permukaan plastik sehingga hidrofibisitas  plastik  akan  menurun.  Penurunan  hidrofobisitas plastik  tersebut  juga  akan  mempengaruhi  persebaran  plastik dilingkungan perairan (waktu apung plastik) [19].
Proses  biodegradasi yang  dilakukan  oleh  aktivitas mikroorganisme  melibatkan  serangkaian  reaksi  enzimatik [20].  Plastik  yang  mengandung  gugus  karbonil,  akan  diubah oleh  enzim  monooksigenase  menjadi  alkohol.  Selanjutnya, alkohol  akan  dioksidasi  menjadi  aldehid  oleh  enzim  alkohol dehidrogenase.  Asam  lemak  akan  mengalami  proses  β - oksidasi di dalam sel [21]. Degradasi plastik juga dapat terjadi melalui reaksi abiotik. Ketika plastik terpapar sinar ultraviolet akan  membentuk  radikal  dan  akhirnya  akan  meghasilkan gugus  karbonil  yang  umumnya  berada  dalam  bentuk  gugus
keton  [22].  Adanya  gugus  karbonil  akan  meningkatkan hidrofilitas  dari  plastik,  sehingga  mikroorganisme  dapat melekat pada permukaan .

## IV. KESIMPULAN
Secara  umum  setelah  12  minggu  masa  inkubasi, pertumbuhan  bakteri  indigenous  pada  permukaan  plastik transparan  sebesar  0,9  AU,  sedangkan  pada  penambahan Bacillus PL01  dan  1  gr/L  MSG  pertumbuhannya  mengalami penurunan  yakni  0,3AU.  Degradasi  juga  diamati  dari kecepatan  waktu  apung  plastik,  yaitu  plastik  transparan sebelum  didegradasi  kecepatannya  hanya  mencapai  10.54 detik  dan  ketika  plastik  transparan  telah  didegradasi kecepatannya  mencapai  28.71  detik,  sehingga  dapat disimpulkan  bahwa  bakteri  indigenous  pasir  mampu mendegradasi plastik.

## DAFTAR PUSTAKA
[1]  U.B. Surono, “ Berbagai Metode Konversi Sampah Plastik menjadi Bahan Bakar Minyak, ” J. Tek. , vol. 3, no. 1, pp. 32 – 40, 2013.
[2]  N.  P.  Cheremisinoff, Biotechnology  for  Waste  And  Wastewater Treatment . USA: Noyes Publications, 1996.
[3]  M.  Sharma,  P.  Sharma,  A.  Sharma,  and  S.  Chandra, “ Microbial Degradation of Plastic – A Brief Review, ” CIBTech J. Microbiol. , vol. 4, no. 1, pp. 85 – 89, 2015.
[4]  F.  Fadlilah  and  M.  Shovitri, “ Potensi  Isolat  Bakteri  Bacillus  dalam Mendegradasi  Plastik  dengan  Metode  Kolom  Winogradsky, ” J.  Tek. Pomits , vol. 3, no. 2, 2014.
[5]  Anonymous, “ A  Safety  Assessment:  Monosodium  Glutamate.  Australia and  New  Zealand :  Food  Standards  Australia  New  Zealand  (FSANZ),”
2003.
[6]  T.  Giacometti, Free  and  bound  glutamate  in  natural  products.  In: Glutamic Acid:Advances in Biochemistry (Filer, L.J., Garattini, S., Kare, M.R., Reynolds, W.A. and Wurtman, R.J., eds) . New York: Raven Press, 1979.
[7]  Rahmawati,  Rizka,  and  M.  Shovitri, “ Pengaruh  Monosodium  Glutamat (MSG)  terhadap  pertumbuhan  isolat  bakteri  Bacillus  PL01  dan Pseudomonas  PL01  pada  Mineral  Salt  Medium  (MSM), ” Institut Teknologi Sepuluh Nopember, 2016.
[8]  S.  Kiatkamjornwong,  P.  Thakeow,  and  M.  Sonsuk, “ Chemical Mod iﬁcation  Of  Cassava  Starch  For  Degradable  Polyethylene  Sheets,” Polym Degrad Stab , 2001.
[9]  R.  Nafiah  and  M.Shovitri, “ Degradasi  plastik  oleh  isolat  Bacillus  PL01 dan Pseudomonas PL01 Dengan Metode Penimbunan Tanah (Soil burial) dan  Penambahan  Monosodium  Glutamat, ” Institut  Teknologi  Sepuluh Nopember, 2016.
[10] R.  Yuliandari, “ Uji  Aktivitas  Antibiofilm  Sari  Buah  Belimbing  Wuluh (Averrhoa  bilimbi  L)  terhadap  Biofilm  Pseudomonas  aeruginosa  Secara In Vitro, ” UIN Syarif Hidayatullah, 2015.
[11] D. Dwijosoeputro, Dasar-dasar Mikrobiologi . Jakarta: Djambatan, 2005.
[12] S. Almatsier, Prinsip Dasar Ilmu Gizi , 6th ed. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama, 2006.
[13] I.  Entjang, Mikrobiologi  dan  Parasitologi .  Bandung:  PT  Citra  Aditya Bakti, 2003.
[14] S.  A.  Ochoa et  al. , “ Pathogenic  Characteristic  of  Pseudomonas aeruginosa  Strains  Resistant  to  Carbapenems  Associated  with  Biofilm Formation, ” Bol.  Med.  Hosp.  Infant.  Mex ,  vol.  70,  no.  2,  pp.  133 – 144, 2013.
[15] S. Sharvari and P. Chitra, “ Evaluation of Different Detection Methods of Biofilm Formation in Clinical  Isolates of Staphylococci, ” Int. J. Pharma Bio Sci. , vol. 3, no. 4, p. 724, 2012.
[16] B.  M.  Prakash,  Krishnappa,  Veergowda,  and  G., “Biofilm :  A  survival strategy of bacteria, ” Curr. Sci. , vol. 85, no. 9, pp. 9 – 10, 2003.
[17] J. Arutchelvi, M. Sudhakar, A. Arkatkar, M. Doble, S. BAdhuri, and P. V. Uppara, “ Biodegradation  of  Polyethylene  and  Polypropylene, ” Indian  J. Biotechnol. , vol. 7, no. 9 – 22, 2008.
[18] K. Sen and S. Raut, “ Microbial degradation of low density polyethylene (LDPE): A review, ” J. Environ. Chem. Eng. , vol. 3, pp. 462 – 473, 2015.
[19] J.  Reisse,  B.  Slat.,  K.  Noble.,  D.  Pleises.,  and  M.  Epp, “ The  Vertical
Distribution  of  Buoyant  Plastics  at  Sea :  an  observational  study  in  the North Atlantic Gyre, ” J. Biogeosciences , vol. 12, pp. 1249 – 1256, 2015. [20] Y.  S.  Dewi, “ Efektivitas  Degradasi  Surfaktan  Dengan  Bakteri Pseudomonas putida, ” J. Ilm. Univ. Satya Negara Indones. , vol. 5, no. 1, pp. 39 – 43, 2012.
[21] R. Gautam, A. S. Bassi, and E. K. Yanful, “ A Review Of Biodegradation Of Synthetic Plastic And Foams, ” Appl. Biochem Biotechnol. , p. 141. [22] I. Winursito, “ Mekanisme Reaksi Degradasi Plastik Oxo-Degradabel, ” in Prosiding Seminar Nasional Kulit, Karet dan Plastik , 2014.