Penulis Korespondensi : Ratna Umi Nurlila Universitas Mandala Waluya Email : ratna_stikesmw@yahoo.com
Informasi Artikel Submitted : 10 November 2021 Accepted : 26 Desember 2021 Published : 31 Desember 2021
Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia, Vol 7.No.2 Desember 2021 Avaiable online at www.jurnal-pharmaconmw.com/jmpi p-ISSN : 2442-6032 e-ISSN :  2598-9979

## Efek  Antibakteri  Daun  Sagu  (Metroxylon  saguRottb.)Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureusdan Escherichia coli
Ratna Umi Nurlila 1 , Sudiana 2 , Jumarddin La Fua 3 1 Universitas Mandala Waluya
2 Universitas Mandala Waluya
3 Institut Agama Islam Negri Kendari

## ABSTRAK
Peningkatan resistensi bakteri terhadap antibiotik mendorong para  peneliti  untuk  mencari  alternatif  pengobatan  yang  lebih efektif  dan  aman,  yaitu  dengan  memanfaatkan  bahan  alam salah  satunya  adalah  daun  sagu  ( Metroxylon  sagu Rottb.). bakteri  uji  yang  digunakan  adalah  bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Tujuan penelitian ini yaitu untuk mengetahui  skrining  fitokmimia  dan  uji  aktivitas  antibakteri ekstrak  etanol  96%  daun  sagu  ( Metroxylon  sagu Rottb.) terhadap Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli . Penelitian  ini  merupakan  jenis  penelitian  analitik.  Sampel diekstraksi  dengan  metode  maserasi  menggunakan  pelarut etanol  96%.  Pengujianaktivitas  antibakteri  dibagi  menjadi  6 kelompok  perlakuan  yang  terdiri  dari  kelompok  kontrol negatif  (DMSO),  kontrol  positif  (Kloramfenikol)  dan  4 kelompok  perlakuan  dengan  konsentrasi  ekstrak  etanol  96% daun  sagu  secara  berturut-turut  yaitu  5,  10,  15  dan  30%. Analisis datadi lakukan dengan metodekualitatif
danmenggunakan  Uji  parametrik  yaitu  uji  one  way  anova. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  96% daun  sagu  ( Metroxylon  sagu Rottb.)  dengan  konsentrasi  5, 10, 15 dan 30% pada bakteri Staphylococcus aureus memiliki rata-rata  diameter  zona  hambat  berturut-turut  yaitu  14,22 mm,  15,11  mm,  16,11  mm  dan  17,55  mm.  sedangkan  pada bakteri Escherichia  coli memiliki  rata-rata  diameter  zona hambat berturut-turut yaitu 13,33 mm, 13,89 mm, 15,00 mm, dan  18,55  mm.  Kesimpulannya  adalah  ekstrak  etanol  daun sagu  ( Metroxylon  sagu Rottb.)  memiliki  aktivitas  antibakteri terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli, konsentrasi  5%,  10%,  15%  dan  30% kategori kuat
Kata kunci : Daun sagu, Bakteri, Staphylococcus aureus dan Escherichia Coli

## ABSTRACT
The increase in bacterial resistance to antibiotics encourages the researcher to look for alternative treatments that are more effective  and  asfe,  namely  by  utilizing  natural  ingredients. One  of  them  is  sago  leaf  ( Metroxylon  sago Rottb.).  The  test bacteria  used  are Staphylococcus  aureus and Escherichia coli. The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the phytochemical screening and antibacterial activity tes of 96% ethanol  extract  from  sago  leaves  ( Metroxylon  sago Rottb.) towards Staphylococcus  aureus and Escherichia  coli. This  study  was  a  type  of  analytical  research.  The sample  was  extracted  by  the  maceration  method  using  96% ethanol as solvent. The antibacterial activity test was divided into 6 treatment groups: a negative control group (DMSO), a positive  control  group  (Chloramphenicol),  and  4  treatment groups  with  a  96%  ethanol  extract  of  sago  leaves, respectively,  namely  5,  10,  15  and  30%.  The  data  analysis was  carried  out  using  qualitative  methods  and  a  parametric
tes,  namely  the  one  way  ANOVA  test.  The  results  showed that 96% ethanol from sago leaves ( Metroxylon sago Rottb.) with concentrations of 5, 10, 15 and 30% on Staphylococcus aureus bacteria  had  an  average  diameter  of  the  inhibition zone, respectively, namely 14.22  mm, 15.11 mm, 16.11 mm and 17.55 mm. Moreover,  the Escherichia coli bacteria had an average inhibition zone diameter of 13.33 mm, 13.89 mm, 15.00  mm,  and  18.55  mm,  respectively.  In  conclusion,  the ethanolic  extract  from  sago  leaves  ( Metroxylon  sago Rottb.) has antibacterial activity towards the growth of Staphylococcus  aureus and Escherichia  coli bacteria, concentrations of 5%, 10%, 15% and 30% strong categories.
Keywords: Sago leaves, bacteria, Staphylococcus aureus and Escherichia coli.

## PENDAHULUAN
Latar Belakang Bakteri patogen lebih berbahaya dan menyebabkan
infeksi baik secara sporadik maupun  endemik,  antara  lain Staphylococcus aureus, Escherichia  coli  dan  Pseudomonas aeruginosa (Djide, 2008). Peningkatan resistensi bakteri terhadap  antibiotik  memberikan peluang  besar  untuk  mendapatkan senyawa antibakteri
dengan memanfaatkan  senyawa  bioaktif dari  kekayaan  keanekaragaman hayati.  Oleh  karena  itu  penelitian ini  bertujuan  untuk  mengetahui adanya aktivitas antibakteri ekstrak etanol  daun  sagu  (Metroxylon saguRottb.) terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Staphylococcus aureus termasuk salah satu bakteri penyebab terjadinya penyakit infeksi.  Luka  terbuka  merupakan pemicu  utama  masuknya  bakteri Staphylococcus  aureus  kedalam tubuh  manusia  dan  menimbulkan penyakit  infeksi,  dimana  benda
seperti  debu  dan  kapas  dapat menyebabkan  terkontaminasinya luka  terbuka  tersebut.  Selain Staphylococcus  aureus,  ada  juga bakteri Escherichia coli yang dapat menginfeksi  manusia.  Escherichia coli  adalah  bakteri  yang  banyak ditemukan  dalam  usus  besar manusi  infeksi  saluran  kemih  juga kemampuannya menimbulkan infeksi  pada  jaringan  tubuh  lain dari luar usus (Croxen et al., 2013). Infeksi  bakteri  yang  paling  sering menimbulkan  diare  adalah  infeksi bakteri Escherichia coli.
Saat  ini  pengobatan  secara tradisional sudah banyak digunakan  oleh  masyarakat.  Obat tradisional  telah  diterima  secara luas di negara-negara yang tergolong  berpenghasilan  rendah sampai sedang, bahkan di beberapa negara berkembang obat tradisional  telah  dimanfaatkan dalam pelayanan kesehatan terutama dalam pelayanan kesehatan  strata  pertama  (Depkes RI,  2007).    Pengetahuan  tentang khasiat  dan  keamanan  tanaman obat  di  Indonesia  biasanya  hanya berdasarkan  pengalaman  empiris
yang  biasanya  diwariskan  secara turun  temurun  dan  belum  teruji secara ilmiah. Untuk itu diperlukan penelitian tentang obat tradisional, sehingga  nantinya  obat  tersebut dapat aman digunakan oleh masyarakat (Irnawati et al., 2016).
Peningkatan  resistensi  bakteri terhadap  antibiotik  mendorong para peneliti untuk mencari
alternatif  pengobatan  yang  lebih efektif  dan  aman,  yaitu  dengan memanfaatkan
bahan alam (Herawati  &  Rizkika  Nur  Amelia, 2018).  Selain  itu  pemanfaatan bahan  alam  ini  juga  dapat membantu  masyarakat  pedesaan dengan  kondisi  ekonomi  lemah yang  terkendala  dengan  harga obat-obatan  yang  cukup  mahal, serta  jarak  tempuh  menuju  apotek atau  pusat  pelayanan  kesehatan yang cukup jauh. Salah satu bahan alam  yang  dapat  dimanfaatkan untuk obat tradisional adalahtanaman  sagu  (Metroxylon sagu  Rottb.).  Tanaman  ini  oleh masyarakat  di  daerah  Aranio  dan Hulu  Sungai  Utara  (Kalimantan Selatan)  sering  digunakan  untuk mengobati  penyakit  diare  pada
manusia  (Mellyani,  2009).  Sagu termasuk  tumbuhan  tahunan  dan tumbuh  dihutan  rawa  air  tawar ataupun  hutan  tropis  daratan rendah.  Sagu  tumbuh  baik  pada lahan  marginal  seperti  gambut, rawa, atau lahan tergenang dimana tanaman  lainnya  tidak  dapat tumbuh (Maulana, 2011).
Studi etnomedisin yang dilakukan  oleh  di  Wulan  (2019)  di Provinsi Sulawesi Tenggara terdapat  banyak  tanaman  lokal yang  sering  dimanfaatkan  sebagai obat  tradisional  untuk  mengobati berbagai  penyakit  seperti  penyakit gula,tekanan  darah  tinggi,batu ginjal,kolesterol  asam  urat  dan diare. Salah Satunya adalah tanaman sagu (Metroxylon
saguRottb.).Berdasarkan studi fitokimia  yang  telah  dilakukan, tanaman  sagu  (Metroxylon  sagu Rottb.)  dilaporkan  mengandung senyawa  golongan  alkaloid,  tanin dan  saponin  (Bakhriansyah  et  al., 2011).  Alkaloid  (Pfoze  et  al.,  2011), tanin  (Doss  et  al.,  2009),  dan saponin  (Akinpelu  et  al.,  2014) adalah senyawa kimia yang memiliki potensi sebagai
antibakteri.
Berdasarkan studi literatur  belum  banyak  penelitian yang  meneliti  tentang  aktivitas antibakteri dari ekstrak daun sagu. Menurut hasil penelitian Irawati,  (2020)  bahwa  ekstrak etanol  akar  sagu  memilikiaktivitas antibakteri  terhadap  pertumbuhan bakteri  Staphylococcus  aureusdan Escherichia  coli.  Ekstrak  etanol akar  sagu  (Metroxylon  sagu
Rottb.) memiliki aktivitas antibakteri  terhadap  pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus,selanjutnya  ekstrak  etanol akar  sagu  (Metroxylon  sagu Rottb.) memiliki aktivitas
antibakteri  terhadap  pertumbuhan bakteri Escherichia coli.
Tujuan    penelitian  ini  adalah Untuk  mensekrening  kandungan senyawa  metabolit  sekunder  dan uji  aktivitas  antibakteri  yang terdapat  pada  ekstrak  etanol  daun
sagu (Metroxylon sagu
Rottb.)melalui petumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan bakteri Escherichia coli

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  merupakan
penelitian analitik, dengan mengestrak  daun  sagu  dengan mengunakan  methanol  96%  dan sampel  di  ambil  dari  propinsi Sulawesi tenggara.
A. Bahan Dan alat
1. Bahan
Bahan-bahan yang digunakan adalah  daun  sagu,  akuades,etanol 70%,natrium agar(NA),paper disk,aquadest,NaCl,FeCl 3 ,HCL2N,p ereaksi dragendroff,pereaksi
mayer,asam
asetat anhidrat,kloroform,dimetylsulfoxid a(DMSO),kloramfenikol 1%.

## 2. Alat
Alat yang digunakan adalah rotary evaporator,erlenmeyer (pyrex), gelas  ukur  (pyrex),gelas  kimia (pyrex),betang pengaduk, timbangan  digital,  autoklaf,  oven, tabung  reaksi(pyrex),  pipet  tetes, cawan  petri  (pyrex),vial,pembakar bunsen  dan  korek  api,wadah toples,aluminium  foil,hot  plate, pinset,  gunting,  jarum  ose  lurus, jarum  ose  bulat,  penggaris,rak tabung,  toples,  batang  pengaduk, inkubator.

## B. ProsedurKerja

## 1. Pegambilan sampel
Sampel  dicuci  bersih  dengan  air mengalir  setelah  itu  ditiriskan  dan dilakukan  perajangan  kemudian dijemur dengan tidak terkena sinar matahari langsung
untuk mengurangi  kandungan  airnya.
Kemudian  daun  sagu  (Metroxylon
sagu Rottb. )yangtelah
kering dihaluskan  dengan  blender  sampai menjadi  agak  halus.  Selanjutnya dilakukan ekstraksi 2. Ekstraksi
Ditimbang  serbukdaun  sagu (Metroxylon sagu Rottb. )kurang lebih  300gram  lalu  dimasukkan kedalam bejana maserasi, ditambahkan  pelarut  3  liter  etanol
96%dengan perbandingan 1:1,kemudian  diaduk  lalu  ditutup rapat  bejana  maserasi,  dimaserasi selama  3  x  24  jam  disimpan  pada suhu kamar terlindung dari cahaya, dengan  perlakuan tiap hari diaduk setiap  3-4  jam  dalam  sehari,
disaring menggunakan
kain flannel, sehingga di dapatkan filtrat Maserat kemudian ditampung
dalam  bejana  kaca  lalu  dipekatkan dengan menggunakan Rotary
Evaporator pada suhu 70 0 C hingga diperoleh  ekstrak  yang  kental, proses ini bertujuan untuk menguapkan etanol sehingga diperoleh  ekstrak  yang  kental  dari ekstrak  daun  sagu  (Metroxylon sagu Rottb. )setelah kental dimasukkan  kedalam  wadah  yang sesuai.
3. Skrining fitokimia Skrining fitokimia merupakan analisis kualitatif terhadap senyawa-senyawa
metabolit sekunder. Suatu ekstrak dari bahan alam  terdiri  atas  berbagai  macam metabolit  sekunder  yang  berperan dalam aktivitas biologinya.
Senyawa-senyawa  tersebut  dapat diidentifikasi  dengan  pereaksi- pereaksi yang mampu memberikan ciri  khas  dari  setiap  golongan  dari metabolit  sekunder  (Harborne, 1987).

## a. Pemeriksaan Alkaloid
Ekstrak  sampel  ditambah HCL2N dan larutan dibagi dalam 2 tabung.  Tabung  1  ditambah  2-3 tetes  pereaksi  dragendroff  dan tabung  2  ditambah  2-3  tetes pereaksi mayer. Terbentuknya endapan  jingga  pada  tabung1,
endapan  putih  kekuning-kuningan pada  tabung  2  menunjukkan adanya alkaloid (Harborne, 1987).
b. Pemeriksaan Fenol
Ekstrak sampel 2 ml
dimasukan  kedalam  tabung  lalu ditambah  10  tetes  air  panas  dan  3 tetes pereaksi FeCl3 3% jika warna larutan  berubah  menjadi  warna hijau  kebiruan  atau  biru  gelap, menunjukkan  adanya  senyawa fenol (Harborne, J.B., 2006).
c. Pemeriksaan Flavonoid
Ekstrak sampel 2 ml dimasukan  kedalam  tabung  reaksi lalu  ditambahkan  dengan  etanol sebanyak 5 tetes, kemudian dikocok sampai homogen selanjutnya ditambahkan 0,2 gr Mg serbuk  dan  5  tetes  HCl  pekat apabila  terlihat  hasil  berwarna orange, merah dan kuning menandakan  adanya  flavonoid (Harborne, J.B., 2006).
d. Pemeriksaan Saponin
Ekstrak sampel 2 ml
dimasukan  kedalam  tabung  reaksi yang  telah  terisi  air  hangat, kemudian  dikocok  vertical  selama 10  detik.  Pembentukan  busa setinggi 1-10 cm yang stabil selama
tidak  kurang  dari  10  menit, menunjukkan adanya saponin pada penambahan  1  tetes  HCl2N,  busa tidak  hilang  (Harborne,  J.B., 2006).
e. Pemeriksaan Tanin
Ekstrak sampel 2 ml dimasukan  kedalam  tabung  reaksi dilarutkan  kedalam  2  ml  air  dan ditambahkan  3  tetes  larutan  FeCl3 1% timbulnya warna biru kehitaman  dan  hijau  kehitaman menunjukkan  adanya  senyawa tannin (Robinson, 1995).

## f. Pemeriksaan  Steroid  dan Triterpenoid
Larutan  uji  sebanyak  2  ml diuapkan  dalam  cawan  penguap. Residu  dilarutkan  dengan  0,5  ml kloroform,  ditambahkan  0,5  ml asam  asetat  anhidrat  dan  2  ml asam  sulfat  pekat  melalui  dinding tabung. Terbentuknya cincin kecoklatan atau violet pada perbatasan  larutan  menunjukkan adanya  triterpenoid,  sedangkan bila  muncul  cincin  hijau  kebiruan menunjukkan adanya steroid (Ciulei, 1984).
1. Pengujian
Aktivitas Antibakteri a. Pengujian aktivitas
antibakteri
Sebanyak  15  ml  media  NA diambil dengan menggunakan spoit  steril  dan  dimasukkan  ke dalam tabung reaksi.Diambil
sebanyak  1ml  suspensi NaCl dimasukkan  ke  dalam  media  NA dan  dihomogenkan  lalu  media dituang  ke  dalam  cawan  petri  dan dibiarkan  media  tersebut  menjai padat.paper  disk  berdiameter  6 mm  direndam  selama  15  menit kedalam  masing  masing  bahan  uji ekstrak  etanol  96%  daun  sagu dengan  konsentrasi  55%,10%,  15%
dan 30%,DMSO (-) dan kloramfenikol(+).Selanjutnya paper disk diletakkan pada permukaan  media  yang  telah
memadat  secara  aseptis  dengan menggunakan  pinset  steril,lalu diinkubasi  pada  suhu  37˚C  selama 1x24 jam dengan posisi terbalik.prosedur  ini  dilakukan replikasi  sebanyak  3  kali.  Aktivitas antibakteri diamati keesokan
harinya berdasarkan diameter zona hambat  atau  zona  bening  yang
terbentuk disekeliling paper
disk.Daerah bening diukur menggunakan jangka sorong manual. Setelah didapatkan diameter zona hambat dari masing masing percobaan,kemudian nilainya  dirata-  ratakan  sehingga diperoleh  diameter  zona  hambat pada  masing-masing  konsentrasi ekstrak.  Menurut  Haspari  (2015), diameter  zona  hambat  >  20  mm dikategorikan sangat kuat,diameter zona hambat 10-20 mm dikategorikan  kuat,diameter  zona hambat  5-10  mm  dikategorikan sedang, dan diameter zona hambat 0-5 mm dikategorikan lemah.

## b. Pengolahan  dan  analisis data
Data  diolah  dan  di  analisis menggunakan  uji  analysis  of varlance(Anova)

## HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil Penelitian
1. Analisis Univariat
a. Determinasi Sampel Determinasisampel daun sagu (Metroxylon sagu Rottb.)dilkakukan di Laboratorium Jurusan m pendidikan Biologi
Fakultas  Keguruan  dan  Ilmu Pendidikan i Universitas Haluoleo Kendari.Hasil determinasi ini digunakan untuk menunjukan
bahwa  tanaman  yang  digunakan untuk  menjamin  keberadaan  jenis atau  spesies.  Hasil  determinasi menunjukan  bahwa  tanaman  yang digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  daun  sagu  (Metroxylon sagu Rottb.).
b. Rendamen  Ekstrak  etanol daun  sagu  (Metroxylon sagu Rottb.)
Hasil  ekstraksi  daun  sagu (Metroxylon  sagu  Rottb.)dapat
dilihat pada tabel dibawah ini.
Tabel  3.Hasil  Perhitungan Persen  Rendemen  daun  sagu (Metroxylon sagu Rottb.)
Berat ekstrak (g) Berat simplisia (g) Rendamen ekstrak (%) b/b 90 300 30 Hasil ekstraksi daunsagu (Metroxylon  saguRottb.)  dengan menggunakan    pelarut  etanol  96% dengan metode maserasimdari 300 gram yang diekstraksi diperoleh 90 gram ekstrak kental dengan rendemen 30%.

## c. Hasil Identifikasi Kadungan Senyawa Kimia
Tabel  4.  Hasil  Identifikasi  Kandungan  Senyawa  Kimia  Ekstrak  Daun
Sagu (Metroxylon sagu Rottb.) No.  Golongan Senyawa Nama Pereaksi Hasil (+/-) Keterangan 1. Alkaloid Mayer Dragendorff - + Tidak terbentuk endapan putih kekuning-kuningan Terbentuk endapan jingga 2. Fenol FeCl 3 + Terbentuk warna hijau kebiruan atau biru gelap 3. Flavonoid HCl + Terbentuk warna kuning 4. Saponin HCl 2 N + Terbentuk busa 5. Tanin FeCl 3 1% + Terbentuk warna biru kehitaman atau hijau kehitaman 6. Triterpenoid  H 2 SO 4 - Tidak terbentuk cincin kecoklatan atau violet 7. Steroid H 2 SO 4 + Terbentuk warna cincin hijau kebiruan
Keterangan :
(+) : Mengandung senyawa metabolit sekunder (-)  : Tidak mengandung senyawa metabolit sekunder

## d. Hasil  Aktivitas  Antibakteri

## Ekstrak Etanol Daun Sagu
Adapun  hasil  pengukuran diameter  zona  hambat  ekstrak etanol  daun  sagu  (Metroxylon
sagu Rottb.) terhadap bakteriStaphylococcus aureusdan Echerichia coli dengan menggunakan metodepaper disk yaitu :
Tabel  5.  Diameter  zona  hambat  Ekstrak  Etanol  Daun  sagu  terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli
Bakteri Uji Perlakua n Zona Hambat (mm) Rata- rata (mm ) Standa r Deviasi Replikas i I Replikas i II Replikas i III Staphylococcu s aureus K1 13,66 14,33 14,67 14,22  0,508 K2 15 15 15,33 15,11  0,190 K3 16,33 16 16 16,11  0,190 K4 16 16,33 20,33 17,55  2,410 K + 27,67 26,33 27,33 27,11  0,696 K - 0,00 0,00 0,00 0,00  0.000 Escherichia coli K1 13,33 13,33 13,33 13,33  ,000 K2 14,33 13,67 13,67 13,89  ,381 K3 15 15,33 14,67 15,00  ,330 K4 16,67 16,67 22,33 18,55  3,267 K + 27 25,33 31,36 27,89  3,113 K - 0,00 0,00 0,00 0,00  0.000

## Keterangan:
K1 = Konsentrasi ekstrak etanol daun sagu 5% K2 = Konsentrasi ekstrak etanol daun sagu 10% K3 = Konsentrasi ekstrak etanol daun sagu 15% K4 = Konsentrasi ekstrak etanol daun sagu 30% K + = Kontrol positif (Kloramfenikol)
K - = Kontrol negatif (DMSO)
Tabel  6.  Penggolongan  Rerata  Diameter  Zona  Hambat  Ekstrak Etanol Daun Sagu terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli
Bakteri Uji  Perlakua n Rerata Diameter Zona Hambat (mm) Kriteria Kekuatan Antibakteri Staphylococcu s aureus K1 14,22 Kuat K2 15,11 Kuat K3 16,11 Kuat K4 17,55 Kuat K + 27,110 Sangat Kuat K - 0,00 Tidak ada zona hambat Escherichia coli K1 13,33 Kuat K2 13,89 Kuat K3 15,00 Kuat K4 18,55 Kuat K + 27,89 Sangat Kuat K - 0,00 Tidak ada zona hambat Keterangan :
Diameter zona hambat 0-5 mm       : daya hambat lemah Diameter zona hambat 5-10 mm     : daya hambat sedang Diameter zona hambat 10-20 mm   : daya hambat kuat Diameter zona hambat > 20 mm     : daya hambat sangat kuat

## 2. Analisis Bivariat
a. Hasil uji Normalitas dan Homogenitas Data Hasil  uji  normalitas  data menggunakan uji One-Sample Kolmogorov-Smirnov  Test  pada bakteri  Staphylococcus  aureus diperoleh  nilai  p  value  0,150  >α 0,05.  Sedangkan  pada  bakteri Escherichia  coli  diperoleh  nilai  p value  0,155  >α  0,05.  Hal  ini
menandakan  data  terdistribusi normal  sehingga  uji  statistik  yang digunakan  adalah  uji  statistik parametrik  yaitu  uji  one  way anova.Selanjutnya hasil uji homogenitas  data  menunjukkan bahwa pada bakteri Staphylococcus aureus  diperoleh  nilai  p  value 0,000  <α  0,05.  Sedangkan  pada bakteri  Escherichia  coli  diperoleh nilai p value 0,001 <α 0,05. Hal ini
menandakan data dikatakan
homogen
b. Hasil uji Statistik bakteriStaphylococcus

## aureus
Hasil  uji  statistik  one  way anova  menunjukkan  bahwa  nilai signifikansi  p  <  0,05  yaitu  0,000 yang  menandakan  data  berbeda signifikan  dari  masing  konsentrasi
dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri.
Untuk mengetahui konsentrasi  berapa  yang  berbeda signifikan  dilakukan  dengan  uji lanjutan yaitu uji LSD. Dimana bila nilai  p  >  0,05  maka  tidak  terdapat perbedaan  atau  hampir  sama. Sedangkan  bila  p  <  0,05  maka terdapat  perbedaan  dari  masing- masing konsentrasi.

## Tabel 7. Hasil Uji LSDStaphylococcus aureus
Kelompok Kelompok Pembanding Nilai P Signifikansi Konsentrasi 5% Konsentrasi 10% 0,322 Konsentrasi 15% 0,048* Konsentrasi 30% 0,002* Kontrol positif 0,000* Kontrol negatif 0,000* Konsentrasi 10% Konsentrasi 5% 0,322 Konsentrasi 15% 0,266 Konsentrasi 30% 0,015* Kontrol positif 0,000* Kontrol negatif 0,000* Konsentrasi 15% Konsentrasi 5% 0,048* Konsentrasi 10% 0,266 Konsentrasi 30% 0,118 Kontrol positif 0,000* Kontrol negatif 0,000* Konsentrasi 30% Konsentrasi 5% 0,002* Konsentrasi 10% 0,015* Konsentrasi 15% 0,118 Kontrol positif 0,000* Kontrol negative 0,000* Kontrol positif Konsentrasi 5% 0,000* Konsentrasi 10% 0,000* Konsentrasi 15% 0,000* Konsentrasi 30% 0,000* Kontrol negatif 0,000* Kontrol negative Konsentrasi 5% 0,000* Konsentrasi 10% 0,000* Konsentrasi 15% 0,000* Konsentrasi 30% 0,000* Kontrol positif 0,000* Keterangan : (*) : berbeda signifikan

## c. Hasil Uji Statistik BakteriEscherichia coli
Hasil  uji  statistik  one  way anova  menunjukkan  bahwa  nilai signifikansi  p  <  0,05  yaitu  0,000 yang  menandakan  data  berbeda signifikan  dari  masing  konsentrasi dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri. Untuk mengetahui
konsentrasi  berapa  yang  berbeda signifikan  dilakukan  dengan  uji lanjutan yaitu uji LSD. Dimana bila nilai  p  >  0,05  maka  tidak  terdapat perbedaan  atau  hampir  sama. Sedangkan  bila  p  <  0,05  maka terdapat  perbedaan  dari  masing- masing konsentrasi.
Tabel 8. Hasil Uji LSD Escherichia coli
Kelompok Kelompok Pembanding Nilai P Signifikansi Konsentrasi 5% Konsentrasi 10% 0,718 Konsentrasi 15% 0,292 Konsentrasi 30% 0,005* Kontrol positif 0,000* Kontrol negatif 0,000* Konsentrasi 10% Konsentrasi 5% 0,718 Konsentrasi 15% 0,478 Konsentrasi 30% 0,009* Kontrol positif 0,000* Kontrol negatif 0,000* Konsentrasi 15% Konsentrasi 5% 0,0292 Konsentrasi 10% 0,478 Konsentrasi 30% 0,037* Kontrol positif 0,000* Kontrol negatif 0,000* Konsentrasi 30% Konsentrasi 5% 0,005* Konsentrasi 10% 0,009* Konsentrasi 15% 0,037* Kontrol positif 0,000* Kontrol negatif 0,000* Kontrol positif Konsentrasi 5% 0,000* Konsentrasi 10% 0,000* Konsentrasi 15% 0,000* Konsentrasi 30% 0,000* Kontrol negatif 0,000* Kontrol negative Konsentrasi 5% 0,000* Konsentrasi 10% 0,000*
Konsentrasi 15% 0,000* Konsentrasi 30% 0,000* Kontrol positif 0,000* Keterangan : (*) : berbeda signifikan

## B. Pembahasan
Penelitian  ini  dilakukan  untuk menguji aktivitas antibakteri ekstrak  etanol  daun  sagu  terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan
Escherichia  coli.  Sampel  yang digunakan  adalah  daun  sagu (Metroxylon  sagu  Rottb.),  sampel diperoleh  dari  Desa  Simbalai Kecamatan Loea Kabupaten Kolaka Timur, Provinsi Sulawesi Tenggara.
Hasil  identifikasi  yang  dilakukan oleh Laboratorium Fakultas Keguruan  dan  llmu  Pendidikan Jurusan Pendidikan Biologi Universitas Halu Oleo Kota
Kendari,  menunjukan  bahwa  jenis tanaman  yang  diteliti  adalah Metroxylon  sagu  Rottb.  Tujuan dilakukan  determinasi  adalah  agar pada  saat  pengambilan  sampel benar  spesies  dari  sampel  yang akan di lakukan penguian.
Metode ekstraksi yang digunakan adalah maserasi. Metode
ini dipilih karena
merupakan  metode  yang  paling sederhana, alatnya mudah didapatkan,  dan  tidak  merusak kandungan  senyawa  yang  tidak tahan panas. Pelarut yang digunakan  dalam  maserasi  ini adalah  etanol  96%  sebagai  pelarut penyari. Pelarut etanol 96% sangat efektif dalam menghasilkan jumlah bahan  aktif  yang  optimal,  dimana bahan  pengganggu  hanya  skala kecil  yang  turut  ke  dalam  cairan pengekstraksi.  Pengadukan  dalam proses  ekstraksi  bertujuan  untuk mencapai keseimbangan konsentrasi  bahan  ekstraktif  yang lebih  cepat  ke  dalam  cairan  dan menghilangkan  bahan  pengekstrak maka dilakukan pemekatan dengan rotary  evaporator  (Illing,  2017). Evaporasi dilakukan untuk menguapkan  sisa  pelarut  sehingga didapatkan  ekstrak  etanol  daun sagu  yang  kental  berwarna  hitam pekat  dengan  berat  90  g  dan perhitungan  rendemen  ekstrak
yang diperoleh adalah sebesar 30%. Rendemen  adalah  perbandingan antara  ekstrak  yang  diperoleh dengan simplisia awal. Perhitungan rendemen  ini  berfungsi  untuk mengetahui  perbandingan  jumlah (kuantitas) ekstrak yang dihasilkan dari  proses  ekstraksi  simplisia.
Pada penelitian
ini, dari perhitungan % rendemen
menghasilkan nilai rendemen  yang sedikit  yang  berarti  sedikit  pula kandungan zat yang tertarik.
Uji fitokimia merupakan salah satu  langkah  penting  dalam  upaya mengungkap  potensi  sumber  daya tumbuhan  obat  Astuti  (2012) skrining  ini  dilakukan  untuk memberi gambaran tentang
golongan  senyawa  yang  tekandung dalam  ekstark  etanol  daun  sagu. Hasil  dari  skrining  fitokimia ekstrak etanol daun sagu menunjukan  bahwa  ekstrak  etanol daun  sagu  positif  mengandung beberapa  senyawa  yaitu  alkaloid, fenol,  flavonoid,  saponin,  tannin dan steroid.
Sedangkan  pada  penelitian yang  dilakukan  oleh  Bakhriansyah et  al.,  (2011),  menunjukan  bahwa
infusa akar sagu positif mengandung  senyawa  alkaloid, tanin,  dan  saponin.  Perbedaan tersebut bisa saja dipengaruhi oleh pelarut  yang  digunakan  dimana diketahui  bahwa  air  hanya  bisa menarik senyawa aktif polar seperti flavonoid.  Menurut  (Depkes  RI, 2007;  Lenny,  2006).  Flavonoid  ini berupa  glikosida,  saponin,  dan kuinon. Sedangkan etanol merupakan  pelarut  yang  bersifat universal  sehingga  dapat  menyari lebih banyak dibandingkan dengan pelarut lain.
Pengujian  alkaloid  dilakukan dengan  menggunakan  dua  jenis reagen/pereaksi
yaitu pereaksimayerdan dragendorff
dimana hasil positif yang dihasilkan  yaitu  endapan  putih untuk pereaksimayer dan endapan jingga  untuk  pereaksidragendorff. Langkah  awal  dalam  pengujian alkaloid yaitu diambil ekstrak daun sagu sebanyak 2 ml dimasukkan ke dalam  tabung  reaksi  kemudian ditambahkan  asam  klorida  pekat, dimana  fungsi  larutan  ini  untuk meningkatkan  kelarutan  alkaloid, karena  senyawa  alkaloid  akan
bereaksi  dengan  asam  klorida  dan akan membentuk garam.
Menurut Robinson (1995)
alkaloid  memiliki  peran  sebagai antibakteri  yakni  dengan  merusak dinding  sel  melalui  komponen penyusun  peptidoglikan  pada  sel bakteri.  Perusakan  peptidoglikan dapat  melalui  perusakan  ikatan hidrogen  antara  peptida  yang menyusunnya  sehingga  lapisan dinding  sel  tidak  terbentuk  secara utuh dan menyebabkan kematian.
Pada uji fenol, ekstrak dilarutkan  dalam  air  panas  dan direaksikan dengan FeCl 3 3%, hasil
pengujian didapatkan terbentuknya warna biru kehitaman yang menandakan adanya fenol.
Menurut  Aini  Haryati  &  Saleh (2016)  fenolik  bereaksi  dengan FeCl 3 3%  membentuk  warna merah, ungu, biru, atau hitam yang pekat karena FeCl 3 bereaksi dengan gugus –OH aromatis.
Menurut Robinson (1995) senyawa fenolik dapat memutuskan  ikatan  peptidoglikan ketika melewati dinding sel (Pelczar  &  Chan,  2008).  Senyawa
alkaloid dapat menghambat pembentukan  peptidoglikan  pada sel bakteri sehingga lapisan dinding  sel  pada  sel  bakteri  tidak terbentuk secara utuh dan menyebabkan kematian sel
Pengujian  flavonoid  dilakukan dengan  mengambil  ekstrak  daun sagu  sebanyak  2  ml  dan  kemudian dilakukan pemanasan selama kurang  lebih  5  menit.  Selanjutnya ditambahkan  0,2  gram  serbuk logam magnesium kemudian ditambahkan  tetes  demi  tetes larutan  HCl  pekat.  Hasil  yang didapatkan  yaitu  terbentuknya warna  kuning  yang  menandakan adanya senyawa flavonoid.
Menurut  Cut  Nuria  et  al., (2009)  mekanisme  kerja  flavonoid sebagai antibakteri adalah membentuk  senyawa  kompleks dengan  protein  ekstraseluler  dan terlarut  sehingga  dapat  merusak membran  sel  bakteri  dan  diikuti dengan keluarnya senyawa
intraseluler Identifikasi  saponin  dilakukan dengan  penambahan  HCl  pekat yang  menunjukan  hasil  positif dengan terbentuknya busa.
Saponin  bersifat  polar  sehingga dapat  larut  dalam  pelarut  seperti air  dan  saponin  juga  bersifat  non polar  karena  memiliki  gugus hidrofob,
yaitu aglikon (sapogenin).  Busa  yang  dihasilkan pada  uji  saponin  disebabkan karena adanya glikosida yang dapat membentuk  busa  dalam  air  dan terhidrolisis  menjadi  glukosa  dan senyawa lainnya.
Menurut  Amrulloh  (2008) senyawa saponin dapat menghambat sintesis protein karena terakumulasi dan menyebabkan kerusakan komponen-komponen penyusun sel bakteri. Sintesis protein merupakan  proses  metabolisme utama  pada  bakteri  yang  sangat berhubungan  langsung  dengan kelangsungan
hidup bakteri dimana  rusaknya  komponen  sel terutama rusaknya DNA, RNA, dan protein  memegang  peranan  amat penting  dalam  sel.  Hal  tersebut mengakibatkan  kerusakan  total pada  sel  sehingga  bakteri  tidak bisabereplikasi karena lisis
Pada  uji  tanin,  2  ml  ekstrak daun  sagu  dipanaskan  selama
kurang  lebih  5  menit.  Setelah  itu, ditambahkan  tetes  demi  tetes larutan  FeCl 3 1%.  Hasil  yang didapatkan  adalah  terbentuknya warna  hijau  kehitaman  yang menandakan terbentuknya senyawa  kompleks  antara  tanin dan  Fe 3 yang  memberikan  indikasi perubahan  warna  hijau,  atau  biru yang  kuat.  Menurut  Harborne (1987) uji fitokimia dengan menggunakan  FeCl 3 digunakan untuk  menentukan  apakah  sampel mengandung  gugus  fenol.  Adanya gugus  fenol  ditunjukkan  dengan warna  hijau  kehitaman  atau  biru tua  setelah  ditambahkan  dengan FeCl 3 , sehingga apabila uji
fitokimia dengan FeCl 3 memberikan hasil positif dimungkinkan dalam sampel terdapat senyawa fenol dan dimungkinkan salah satunya adalah tanin karena tanin merupakan senyawa polifenol.
Menurut  Fahriya  &  Shofi (2011) tanin memiliki peran sebagai  antibakteri  dengan  cara mengikat protein sehingga pembentukan  dinding  sel  akan terhambat.  Tanin  juga  mempunyai
target pada polipeptida dinding sel sehingga  pembentukan  dinding  sel menjadi  kurang  sempurna.  Hal  ini menyebabkan  sel  bakteri  menjadi lisis  karena  tekanan  osmotik maupun  fisik  sehingga  sel  bakteri akan mati
Uji  triterpenoid  menggunakan metode Liebermann-Burchad, 2 ml ekstrak  daun  sagu  ditambahkan reagen  Libermann-Burchad  yakni campuran antara HCl pekat dengan H 2 SO 4 pekat. Analisis ini didasarkan pada kemampuan senyawa  triterpenoid  membentuk warna  oleh  H 2 SO 4 pekat  dalam pelarut  asam  klorida.  Hasil  positif triterpenoid diberikan pada sampel yang membentuk cincin kecoklatan atau violet (Ciulei, 1984). Hasil dari pengujian  senyawa  triterpenoid yaitu tidak terbentuk cincin
kecoklatan  atau  violet.  Hasil  yang diperoleh disebabkan karena pelarut  yang  digunakan  dalam proses ekstraksi merupakan pelarut yang  bersifat  polar  sedangkan senyawa  triterpenoid  cenderung bersifat non polar sehingga triterpenoid  tidak  dapat  diekstrak dengan  sempurna  pada  pelarut
tersebut.
Adanya  kandungan  tersebut memungkinkan ekstrak etanol daun  sagu  (Metroxylon  sagu Rottb.) mempunyai efek antibakteri yang dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Menurut penelitian  Fitrya  et  al.,  (2010) bahwa senyawa flavonoid merupakan  senyawa  yang  paling kuat dalam menghambat partumbuhan  bakteri,  khsusunya bakteri  Escherichia  coli.  Flavonoid diketahui memiliki sifat antibakteri yang paling kuat dimana mekanisme kerjanya adalah membentuk  senyawa  kompleks dengan  protein  ekstraseluler  dan terlarut    sehingga  dapat  merusak membran sel bakteri.
Pengujian aktivitas antibakteri bertujuan untuk menentukan kemampuan  ekstrak  etanol  daun sagu  (Metroxylon  sagu  Rottb.) dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri.  Adapun  bakteri  yang digunakan  adalah  Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Media kultur yang digunakan yaitu media
NA  (Nutrient  Agar),  pembuatan
media dilakukan
dengan mencampurkan  serbuk  NA  dengan aquadest  kemudian  dihomogenkan diatas  hot  plate  pada  suhu  50°C hingga  media  larut,  setelah  itu dimasukan media ke dalam autoklaf selama 15 menit pada suhu 121°C  agar  media  tersebut  tetap steril dan terhindar dari
kontaminasi mikroba.
Kontrol positif yang digunakan dalam penelitian ini adalah kloramfenikol 1% sedangkan kontrol  negatif  digunakan  DMSO. Kontrol  positifdiperlukan  sebagai pembanding,  hal  ini  digunakan untuk  membandingkan  perlakuan (sampel)  dengan  antibiotik  murni
(kloramfenikol). Kloramfenikol merupakan antibiotik yang
berspektrum  luas  sehingga  dapat menghambat  bakteri  Gram  positif dan Gram negatif (Pelczar & Chan, 2008),  sedangkan  kontrol  negatif digunakan untuk mengetahui
apakah pelarut dan bahan tambahan  yang  digunakan  dapat mempengaruhi  hasil  uji  bakteri atau tidak.
Ekstrak  etanol  daun  sagu
dibuat  4  variasi  konsentrasi  yaitu 5%, 10%, 15% dan 30 yang diujikan ke  media  yang  telah  ditanami bakteri dengan bantuan paper disk. Kelebihan  paper  disk  adalah mudah dilakukan, tidak memerlukan  peralatan  khusus  dan relatif  murah  (Otto,  2013).  Pada penelitian  ini  replikasi  dilakukan sebanyak 3 kali, replikasi merupakan  banyaknya  unit  yang mendapatkan perlakuan sama pada kondisi  tertentu.  Fungsi  dari replikasi yaitu agar kesalahan pada saat pengerjaan dapat diestimasi.
Daya antibakteri ekstrak etanol  daun  sagu  pada  bakteri Staphylococcus aureus konsentrasi 5,  10,  15  dan  30%  dikategorikan kuat.  Sedangkan  diameter  zona hambat  bakteri  Escherichia  coli pada konsentrasi  5, 10, 15 dan 30% juga dikategorikan kuat.
Berdasarkan data tersebut, menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun  sagu  mampu  menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Sedangkan
penelitian  yang  dilakukan  oleh Bakhriansyah  dkk.  (2011),  infusa
akar  sagu  dikategorikan  sedang (7,25  mm)  pada  konsentrasi  10%, kategori  sedang  (9,25  mm)  pada konsentrasi  20%,  dan  kuat  (10,00 mm) pada konsentrasi 40%.
Pada  penelitian  ini  antibiotik kloramfenikol  membentuk  zona hambat terhadap bakteri Staphylococcus  aureus  dengan nilai sebesar 27,11 mm dikategorikan sangat kuat dan zona hambat terhadap bakteri Escherichia  coli  dengan  nilai  rata- rata sebesar 27,89
mm dikategorikan  sangat  kuat.  Hal  lni karena  kloramfenikol  merupakan senyawa  murni  yang  bersifat stabil.Dari    zona    hambat    yang dihasilkan  tersebut  terlihat  bahwa kloramfenikol mampu menghambat  pertumbuhan  E.  coli dan  S.    aureus    dengan    diameter hambat    >20    mm,sehingga  dapat disimpulkan  bahwa  baik  bakteri  E. coli  dan  S.  aureus  memiliki
sensitifitas
terhadap disk kloramfenikol yang digunakan dalam penelitian ini.
Hasil  penelitian  menunjukan
bahwa kontrol negatif tidak memberikan  zona  hambatan.  Hal
tersebut membuktikan bahwa DMSO  (pelarut  yang  digunakan untuk membuat variasi konsentrasi ekstrak) tidak berpengaruh terhadap  pertumbuhan  bakteri sehingga  aktivitas  hanya  berasal dari larutan uji, bukan dari pelarut yang dipakai.
Menurut  Brooks.,  dkk  (2013), aktivitas  antibakteri  dipengaruhi oleh beberapa faktor, yaitu konsentrasi  ekstrak,  kandungan senyawa  antibakteri,  daya  difusi ekstrak  dan  jenis  bakteri  yang dihambat.
Penelitian ini menunjukan semakin tinggi konsentrasiekstrak  etanol  daun sagu, semakin besar diameter zona hambat terhadap bakteri
Staphylococcus aureus dan
Escherichia  coli  sehingga  dapat diasumsikan bahwa semakin tinggi konsentrasi  ekstrak,  maka  jumlah senyawa antibakteri yang dilepaskan semakin besar sehingga mempermudah  penetrasi  senyawa tersebut  ke  dalam  sel  bakteri dengan  mekanismenya  masing- masing.
Menurut  Pelczar  &  Chan, (1986) zona bening yang dihasilkan
pada bakteri Staphylococcus
aureus  lebih  besar  dibandingkan dengan  bakteri  Escherichia  coli. Komponen dinding selyang berbeda dari kedua bakteri tersebut,  mempengaruhi  aktivitas ekstrak daun sagu sebagai antibakteri.  Bakteri  gram  positif cenderung  lebih  sensitif  terhadap antibakteri.  Hal  ini  dikarenakan struktur  dinding  sel  gram  positif lebih  sederhana,  maka  dapat memudahkan  senyawa  antibakteri masuk ke dalam sel dan menjumpai  target  untuk  bekerja.
Bakteri  gram  positif  memiliki dinding  sel  yang  tebal  (15-80  mm) dan tersusun dari lapisan peptidoglikan  40-50%,  lipid  2% dan  asam  teikoat.  Sedangkan bakteri  gram  negatif  memiliki
dinding sel sangat tipis (10-15 mm) yang terdiri dari lapisan peptidoglikan  5-20%,  lipid  20%, protein, lipopolisakarida dan lipoprotein.  Sehingga  keduanya membentuk mantel pelindung yang kuat  dan  sulit  ditembus  untuk senyawa antibakteri.
Pada  penelitian  ini  data-data yang terkumpul dianalisis
menggunakan  uji  statistik  ANOVA (Analysis  of  Variance)  satu  arah dengan  tingkat  kepercayaan  95% (=0,05)  menggunakan  program SPSS. Tahap pertama dilakukan uji normalitas dan homogenitas terhadap  data  ekstrak  etanol  daun sagu  (Metroxylon  sagu  Rottb.) pada bakteri
Staphylococcus aureus  dan  Escherichia  coli.  Uji normalitas bertujuan untuk memperlihatkan sebaran data pada sebuah variabel terdistribusi normal  atau  tidak,  sedangkan  uji homogenitas bertujuan untuk memperlihatkan apakah data dalam  variabel  bersifat  homogen atau  tidak.  Dikatakan  normal  dan homogen  jika  hasil  dari  masing- masing uji memiliki nilai signifikan p>0,05.
Kemudian  dilanjutkan  uji  One Way  Anova  memberikan  nilai p<0,05  artinya  ada  pengaruh pemberian  ekstrak  etanol  daun sagu terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli, kemudian
dilakukan  analisis  uji  Post  Hoc apabila  dari  hasil  uji  One  Way Anova  diketahui  ada  pengaruh
signifikan,  maka  dilanjutkan  uji Post  Hoc  yaitu  untuk  mengetahui perbedaan bermakna pada masing- masing kelompok.
Analisis menggunakan variansi  satu  arah  pada  bakteri Staphylococcus aureus
dan
Escherichia coli menghasilkan data dengan  nilai  signifikansi  p  <  0,05 yang  menunjukkan  bahwa  ekstrak etanol  daun  sagu  memiliki  efek antibakteri.  Berdasarkan  hasil  uji statistikOne  Way  Anova  diperoleh hasil  yang  signifikan  dengan  nilai 0.000 pada Staphylococcus aureus dan  0,000  Escherichia  coli  yang artinya  lebih  kecil  dari  0,05
(p<0,05). Sehingga dapat
disimpulkanbahwa  ekstrak  etanol daun  sagu  memiliki  aktivitas antibakteri  terhadap  pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli.
Hasil analisis dilanjutkan
dengan  uji  Post  Hoc  untuk menentukan  kelompok  perlakuan yang mempunyai perbedaan bermakna.  Konsentrasi  ekstrak daun  sagu  5%  berbeda  nyata dengan  konsentrasi  15%,  30%, kontrol  positif  dan  kontrol  negatif.
Namun tidak berbeda nyata dengan konsentrasi 10% dalam menghambat bakteri Staphylococcus aureus.
Konsentrasi ekstrak daun sagu 10% berbeda  nyata  dengan  konsentrasi 30%,  kontrol  positif  dan  kontrol negatif.  Namun  tidak  berbeda nyata  dengan  konsentrasi  5%  dan 15%  dalam  menghambat  bakteri Staphylococcus aureus.
Konsentrasi ekstrak daun sagu 15% berbeda nyata dengan konsentrasi 5%, kontrol positif dan kontrol  negatif.  Namun  tidak berbeda  nyata  dengan  konsentrasi 10%  dan  30%  dalam  menghambat bakteri  Staphylococcus  aureus. Konsentrasi ekstrak daun sagu 30% berbeda  nyata  dengan  konsentrasi 5%,  10%,  kontrol  positif  dan kontrol  negatif.  Namun  tidak berbeda  nyata  dengan  konsentrasi 15%  dalam  menghambat  bakteri Staphylococcus  aureus.  Kontrol positifberbeda nyata dengan konsentrasi  ekstrak  5%,  10%,  15%, 30%  dan  kontrol  negatif.  Begitu juga  Kontrol  negatif  berbeda  nyata dengan  konsentrasi  ekstrak  5%, 10%, 15%, 30% dan kontrol positif.
Ardiansyah (2007) menyatakan bahwa ketentuan kekuatan antinbakteri adalah sebagai  berikut;  daerah  hambat sebesar  20  mm  atau  lebih  berarti sangat  kuat,  daerah  hambat  10-20 mm  (kuat),  5-10  (sedang)  dan daerah  hambat  5  mm  atau  kurang berarti lemah.  Dari hasil penelitian menunjukkan bahwa keempat konsentrasi yang digunakan menunjukkan  bahwa  konsentrasi yang paling kuat dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri
Staphylococcus aureus adalah konsentrasi  30%  dengan  rata-rata diameter  zona  hambat  yaitu  17,55 mm.  hal  ini  menunjukkan  bahwa semakin  tinggi  tingkat  konsetrasi ekstrak  etanol  96%  daun  sagu (Metroxylon  saguRottb.)  maka akan  semakin  kuat  daya  hambat terhadap  bakteri  Staphylococcus aureus.
Untuk  bakteri  Escherichia colikonsentrasi  ekstrak  daun  sagu
5% berbeda nyata dengan konsentrasi  30%,  kontrol  positif dan  kontrol  negatif.  Namun  tidak berbeda  nyata  dengan  konsentrasi
10%  dan  15%  dalam  menghambat bakteri
Escherichia
coli.
Konsentrasi ekstrak daun sagu 10% berbeda  nyata  dengan  konsentrasi 30%,  kontrol  positif  dan  kontrol negatif.  Namun  tidak  berbeda nyata  dengan  konsentrasi  5%  dan 15%  dalam  menghambat  bakteri Escherichia coli.
Konsentrasi ekstrak daun sagu 15% berbeda nyata dengan konsentrasi  30%,  kontrol  positif dan  kontrol  negatif.  Namun  tidak berbeda  nyata  dengan  konsentrasi 5%  dan  10%  dalam  menghambat bakteri Escherichia coli.
Konsentrasi ekstrak daun sagu 30% berbeda  nyata  dengan  konsentrasi 5%,  10%,  15,  kontrol  positif  dan kontrol negative dalam menghambat bakteri Staphylococcus  aureus.  Kontrol positifberbeda
nyata dengan konsentrasi  ekstrak  5%,  10%,  15%, 30%  dan  kontrol  negatif.  Begitu juga  Kontrol  negatif  berbeda  nyata dengan  konsentrasi  ekstrak  5%, 10%, 15%, 30% dan kontrol positif.
Dari keempat konsentrasi yang digunakan  menunjukkan  bahwa konsentrasi yang paling kuat dalam
menghambat  pertumbuhan  bakteri Escherichia coli adalah konsentrasi 30%  dengan  rata-rata  diameter zona  hambat  yaitu  18,55  mm.  hal ini  menunjukkan  bahwa  semakin tinggi  tingkat  konsetrasi  ekstrak etanol 96% daun sagu (Metroxylon saguRottb.)  maka  akan  semakin kuat daya hambat terhadap bakteri Escherichia  coli.  Menurut  Hapsari
(2015) kriteria kekuatan antibakteri sebagai berikut : Diameter  0  mm  sampai  5  mm dikategorikan daya hambat
lemah,diameter zona hambat 5 mm sampai  10  mm  dikategorikan  daya hambat  sedang,  diameter  zona hambat  10  mm  sampai  20  mm dikategorikan  daya  hambat  kuat, diameter zona hambat lebih dari 20 mm

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol    daun  sagu  positif mengandung  senyawa  alkaloid,
flavonoid,  saponin,  fenol,  tannin dan  steroid  dan  ekstrak  etanol daun  sagu  (Metroxylon  sagu
Rottb.) memiliki aktivitas antibakteri  terhadap  pertumbuhan bakteri  Staphylococcus  aureus,
konsentrasi 5%, 10%, 15% dan 30% kategori  kuat  serta memiliki aktivitas antibakteri terhadap pertumbuhan  bakteri  Escherichia coli, konsentrasi 5%, 10%, 15% dan 30%  kategori  kuatdikategorikan daya hambat sangat kuat.

## DAFTAR PUSTAKA
Aini Haryati, N., & Saleh, C. (2016). Uji Toksisitas dan Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Merah Tanaman Pucuk Merah (Syzygium myrtifolium Walp.) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. JURNAL KIMIA MULAWARMAN, 13(1). http://jurnal.kimia.fmipa.unmul. ac.id/index.php/JKM/article/vie w/43
Akinpelu, B. A., Igbeneghu, O. A., Awotunde, A. I., Iwalewa, E. O., & Oyedapo, O. O. (2014). Antioxidant and antibacterial activities of saponin fractions of Erythropheleum suaveolens (Guill. and Perri.) stem bark extract. Scientific Research and Essays, 9(18), 826–833. https://doi.org/10.5897/SRE201 4.5844
Amrulloh, I. (2008). Uji potensi ekstrak daun sirih (Piper betle L.) sebagai antimikroba terhadap  bakteri  Xanthomonas oryzae  pv.  oryzae dan jamur Fusarium  oxysporum.

## Ardiansyah. (2007). Antioksidan dan
Peranannya Bagi Kesehatan. Artikel Iptek. http://ardiansyah.multiply.com/j ournal/item/14
Astuti, S. M. (2012). Skrining Fitokimia dan Uji Aktifitas Antibiotika Ekstrak Etanol Daun, Batang, Bunga dan Umbi Tanaman Binahong (Anredera cordifolia (Ten) Steenis). Artikel Ilmiah. Fakulti Kejuteraan Kimia Dan Sumber Asli (Bioproses). Universiti Malaysia Pahang. Malaysia.
Bakhriansyah, M., Febria, A., & Rahmah, D. D. (2011). Efek antibakteri in vitro dan antidiare in vivo infusa akar sago (Metroxylon sagu) Antibacterial invitro and antidiarrhea invivo effects of the infusion of sago roots (Metroxylon sagu). Majalah Farmasi Indonesia, 22(223), 158–165.
Ciulei, I. (1984). Methodology for Analysis of Vegetable Drugs. Practical Manual on the Industrial Utilisation of Medicinal and Aromatic Plants. Faculty of Pharmacy.
Croxen, M. A., Law, R. J., Scholz, R., Keeney, K. M., Wlodarska, M., & Finlay, B. B. (2013). Recent advances in understanding enteric pathogenic Escherichia coli. Clinical Microbiology Reviews, 26(4), 822–880. https://doi.org/10.1128/CMR.00
022-13 Cut Nuria, M., Faizatun, A., Pengajar Fakultas Farmasi Universitas
Wahid Hasyim Semarang, S., &
Pengajar Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta, S. (2009). Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Jarak Pagar (Jatropha curcas L) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus Atcc 25923, Escherichia coli
ATCC 25922, dan Salmonella typhi ATCC 1408. Mediagro:
Jurnal Ilmu-Ilmu Pertanian, 5(2). https://doi.org/10.31942/MD.V5 I2.559
Depkes RI. (2007). Kebijakan Obat Tradisional Nasional. Kementerian Kesehatan Republik Indonesia.
Djide, N. (2008). Analisis Mikrobiologi Farmasi. In Analisis Mikrobiologi Farmasi.
Doss, L. A., Mubarack, H. M., & Dhanabalan, R. (2009). Antibacterial activity of tannins from the leaves of Solanum trilobatum Linn. Indian Journal of Science and Technology, 2(2), 41–43. https://doi.org/10.17485/IJST/2 009/V2I2.5
Fahriya, P. S., & Shofi, M. S. (2011). Ekstraksi Zat Aktif Antimikroba dari Tanaman Yodium (Jatropha multifida Linn) Sebagai Bahan Baku Alternatif Antibiotik Alami.
Fitrya, F., Anwar, L., & Novitasari, E. (2010). Isolasi Senyawa Fenolat dari Fraksi Etil Asetat Kulit Batang Tumbuhan Gandaria. Jurnal Penelitian Sains, 13(1). https://doi.org/10.26554/jps.v13i
1.156
Hapsari, M. E. (2015). Uji aktivitas antibakteri ekstrak herba meniran (Phyllanthus niruri) terhadap pertumbuhan bakteri bacillus cereus dan escherichia coli.
Harborne, J.B. (2006). Metode Fitokimia, Edisi ke-2. ITB.
Harborne, J. B. (1987). Metode Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Institut Teknologi Bandung.
Herawati, E., & Rizkika Nur Amelia, T. (2018). Potensi Bahan Herbal
Ekstrak Etanol Daun Mengkudu Asal Desa Wajak Lor, Tulungagung, Jawa Timur Terhadap Bakteri Penyebab Jerawat. https://jurnal.stikesganeshahusa da.ac.id/index.php/juke/article/v iew/122 Irawati, N. (2020). Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Akar
Sagu (Metroxilon sagu Rottb) terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan
Escherichia coli. In Skrispsi.
Irnawati, I., Haqqa, L. O. I., Reymon, R., & Karmila, K. (2016). Uji Toksisitas Akut Infusa Kulit Batang Ubi Kayu (Manihot esculenta Crantz) menggunakan Metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT). Pharmauho: Jurnal Farmasi, Sains, Dan Kesehatan, 2(1). https://doi.org/10.33772/PHAR MAUHO.V2I1.3473
Lenny, S. (2006). Senyawa Flavonoida, Fenil Propanoida dan Alkaloida. Karya Ilmiah FMIPA, USU, Medan.
Maulana, A. (2011). Pengelolaan Perkebunan Sagu (Metroxylon spp) di PT. National Sagu Prima, Selat Panjang Riau: Seleksi Bibit
Sagu Berdasarkan Jenis Tinggi Pohon Induk dan Bobot Bibit Sagu Terhadap Pertumbuhan Bibit Sagu dipersemaian. Fakultas Institut Pertanian Bogor.
Mellyani, A. H. (2009). Uji Anti Bakteri Infusa Akar Sagu (Metroxylon sagu Rottb.) pada Bakteri Escherichia coli dan Shigella dysentriae secara In Vitro.
Pelczar, M. J., & Chan. (1986). Dasar- Dasar Mikrobiologi. UI-Press.
Pelczar, M. J., & Chan, E. C. S. (2008). Dasar-dasar mikrobiologi 1 = Elements of microbiology. 443. http://lib.ui.ac.id
Pfoze, N., Kumar, Y., Myrboh, B., Bhagobaty, R., & Joshi, S. (2011). In vitro antibacterial activity of alkaloid extract from stem bark of Mahonia manipurensis Takeda. Journal of Medicinal Plants Research, 5(5), 859–886.
Robinson, T. (1995). Kandungan organik tumbuhan tinggi / trevor Robinson ; penerjemah, Kosasih Padmawinata | OPAC Perpustakaan Nasional RI. ITB Press. https://opac.perpusnas.go.id/Det ailOpac.aspx?id=250633