Jurnal Pharmascience, Vol .03, No.02, Oktober 2016, hal: 57 - 63 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 http://jps.unlam.ac.id/
Research Article
Uji Aktivitas  Infusa Akar Tawas Ut ( Ampelocissus rubiginosa L.) Sebagai Hepatoprotektor Terhadap Mencit Putih Jantan Balb/C Yang Diinduksi Karbon Tetraklorida (CCl 4 )
*Karunita Ika Astuti 1 , Khoerul Anwar 2 , Agung Biworo 3
1 Program Studi Farmasi Sekolah Tinggi Farmasi Borneo Lestari, Banjarbaru 2 Program Studi Farmasi Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru 3 Program studi Kedokteran Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru *Email : karunitaika@gmail.com

## ABSTRAK
Hepatoprotektor  adalah  senyawa  atau  zat  yang  berkhasiat  melindungi  sel  hati terhadap  pengaruh  zat  toksik  yang  dapat  merusak  hati.  Tumbuhan  Tawas  ut ( Ampelocissus rubiginosa L.) merupakan tanaman yang secara empiris digunakan oleh masyarakat  Kalimantan  Tengah  sebagai  hepatoprotektor.  Tujuan  dari  penelitian  ini adalah  memberikan  bukti,  mengetahui  dosis  efektif,  dan  gambaran  kerusakan  hati mencit  sebagai  efek  hepatoprotektor  ekstrak  infusa  akar  tawas ut  pada  mencit  jantan Balb/C. Penelitian dilakukan dengan pemberian infusa akar tawas ut pada dosis 30%, 40%,  dan  50%  selama  7  hari  pada  mencit  putih  jantan  yang  kemudian  diinduksi karbon tetraklorida (CCl 4 ). Penelitian untuk melihat nilai SGPT dan SGOT pada serum darah serta histopatologi hati. Metode menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan  perlakuan  dibagi  menjadi  6  kelompok  dengan  5  kali  pengulangan.  Kontrol positif  menggunakan  Hepa-Q  dan  kontrol  negatif  menggunakan  CCl 4 .  Hasil  paling efektif  dari  semua  kelompok  terdapat  pada  dosis  30%  dengan  nilai  SGPT  dan  SGOT sebesar  97,80  ±  18,40  U/L  dan  157,00  ±  16,914  U/L,  sedangkan  untuk  kontrol  negatif memiliki  nilai  375,80  ±  96,693  U/L  pada  SGPT  dan  435,60  ±  96,432  U/L  pada  SGOT. Gambaran kerusakan hati secara histopatologi menunjukkan tidak adanya perbedaan yang  signifikan  antara  kelompok  positif  dengan  kelompok  dosis  30%  yang  juga  pada kelompok  normal,  sehingga  menunjukkan  adanya  daya  hepatoprotektor  infusa  tawas ut pada dosis 30%.
Kata Kunci : infusa, akar tawas ut, Ampelocissus rubiginosa L., hepatoprotektor.

## Abstract
Hepatoprotector  is  an  efficacious  compound  or  substances  to  protect  liver  cells from  the  effects  of  toxic  substances  who  can  damage  the  liver.  Tawas  ut  (Ampelocissus rubiginosa  L.)  is  a  plant  that  is  used  by  the  public  empirically  at  Central  Kalimantan  as hepatoprotector.  The  purpose  of  this  research  are  to  provide  an  evidence,  determine  the effective dose, and give a description of mice liver demage as hepatoprotector’s effect the
infusa extract of Tawas ut’s root in male Balb/C. This research was made with gave infusa of tawas ut’s root at three different doses, they were 30, 40, and 50% in male and then they were  induced  by  CCl 4 .  This  research  was  done  to  know  the  value  of  SGPT  ang  SGOT  in blood  serum  to  histopatology   of  the  animal  tester  after  were  given  infusa  of  Tawas  ut’s root. Infusa of tawas ut’s root was made daily by aquadest as the solvent. The method was randomized  complete  design  with  treatment  was  divided  into  6  groups  with  5  repetitions. Positive control was used Hepa-Q and negative control was used CCl 4 . The most effective result from all groups was founded in 30% dose. SGPT and SGOT showed the number of value,  they  were  97.80  ±  18.40  U/L  and  157.00  ±  16.914  U/L  and  the  negative  control 375.80 ± 96.693 U/L in SGPT and 435,60 ± 96.432 U/L in SGOT. There was no significant difference  between  the  positive  group  in  30%  dose  and  the  normal  group,  so  it  can conclude that hepatoprotector activity was founded in 30% dose.
Key words : infusa, tawas ut’s root, Ampelocissus rubiginosa L., hepatoprotector.

## I. PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  negara  tropis yang  kaya  akan  keanekaragaman  hayati. (Rusdi,  1988).  Penyakit  hati  kronis  di negara  maju  merupakan  penyakit  terbesar ketiga  pada  pasien  yang  berusia  45-46 tahun (setelah penyakit kardiovaskuler dan kanker).  Di  seluruh  dunia  penyakit  hati kronis menempati urutan ke tujuh penyebab  kematian  dan  sekitar  25.000 orang  meninggal  setiap  tahun  akibat penyakit  ini  (Soleh,  2011).  Salah  satu tumbuhan Kalimantan Tengah yang secara empiris berkhasiat sebagai hepatoprotektor adalah  tawas  ut.  Bagian  akar  yang besarnya kira-kira berdiameter 3 cm. Akar tersebut diolah dengan cara direbus selama 15  menit  dengan  menggunakan  air sebanyak  satu  gelas.  Air  rendaman  dapat diminum  setelah  air  mulai  dingin  dan berwarna merah (Aryzki, 2011).
Akar tawas ut ( Ampelocissus
rubiginosa L.)  mengandung  flavonoid
(Latifah,  2010).  Chodidjah et  al. (2004) melakukan  penelitian  bahwa  air  rebusan meniran  ( Phyllanthum  niruri Linn)  yang mengandung  flavonoid  dengan  dosis  3 mL/Kg  BB  dapat  memperbaiki  jejas  sel yang reversibel. Perbaikan sel hati tersebut dimungkinkan  kandungan  zat  aktif  pada meniran yaitu phyllanthin dan hypophyllanthin yang merupakan golongan  flavonoid  dapat  mengaktifkan sel Kupffer dalam  regenerasi  sel  hati. Penelitian ini dilakukan untuk memberikan bukti  efek  hepatoprotektor  ekstrak  infusa akar  tawas  ut,  mengetahui  dosis  efektif dari  infusa  akar  tawas  ut  yang  memiliki efek  hepatoprotektor  pada  mencit  jantan Balb/C yang telah diinduksi CCl 4 sekaligus menunjukkan gambaran kerusakan  histopatologi  terhadap  aktivitas hepatoprotektor  pada  pemberian  infusa tawas ut yang kemudian diinduksi CCl 4

## II. METODE

## A. Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  meliputi  alat  pemotong, blender,  saringan,  neraca  analitik,  batang pengaduk,  kain  flannel,  gelas  beker, termometer,  tabung  reaksi,  corong  kaca, pipet  tetes,   penjepit  kayu,  timbangan hewan,  pipet  volume, syringe peroral,  alat bedah  hewan, freezer ,  cetakan  blok parafin, Parrafin bath , mikrotom,
automatic tissue processor , hotpate , waterbath ,   mikroskop  cahaya,  kamera foto,  kaca  objek,  penutup, sentrifuge, tabung sentrifuge, mikropipet, venoject , dan spektofotometer UV VIS.
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah akar Tawas ut, Hepa-Q ® ,  Na  CMC  0,5%, aquadest , EDTA,  asam  asetat  anhidrat,  ammonium hidroksida,  HCl  pekat,  pereaksi  mayer, pereaksi dragendroff, serbuk logam magnesium,  kloroform,  FeCl 3 ,  H 2 SO 4 2N, larutan  buffer  Neutral  Formalin  10% (BNF),  paraffin  cair,  larutan  besi  (III), etanol  85%,  etanol  90%,  etanol  absolute, larutan Mayer hematoksilin, larutan Eosin, karbon tetraklorida, pereaksi SGPT SGOT, dan xilol..

## B. Determinasi tumbuhan tawas ut
Determinasi sampel tawas ut
dilakukan di  Balai  Penelitian  Pertanian
Lahan  dan  Rawa  Banjarbaru,  Kalimantan Selatan .

## C. Pembuatan infusa akar tawas ut
Haksel  tanaman  tawas  ut  yang telah  dikeringkan  dipanaskan  dengan menggunakan  akuades  selama  15  menit terhitung  saat  suhu  airnya  mencapai  90 º C, dan  infusa  tawas  ut  yang  siap  diberikan pada hewan uji (Depkes RI, 1979).

## D. Reaksi  pendahuluan  identifikasi kimia akar tawas ut
Reaksi  identifikasi  meliputi  saponin, flavonoid,  tanin,  alkaloid  dan  steroid. Saponin  ditambahkan  10  mL  air  panas, dan  dikocok  selama  10   detik.  Flavonid ditambah 10 tetes HCl pekat dan 0,1 gram serbuk logam magnesium. Steroid ditambahkan kloroform dan menambahkan Lieberman-burchard  (Depkes  RI,  1995). Tanin  ditambahkan  dengan  larutan  besi (III) (Depkes RI, 1979). Alkaloid campuran  kloroform  dan  ammonium hidroksida  sebanyak  5  mL,  dikocok  dan disaring, ditambahkan H 2 SO 4 2 N sebanyak  10  tetes  dan  dikocok  hingga lapisan  air  dan  kloroform  terpisahkan  dan lapisan bagian atas diambil, dibagi dua dan ditambahkan  pereaksi  Mayer  LP  dan ditambahkan Dragendroff (Seniwaty,
2009).
E. Persiapan karbon tetraklorida
(CCl 4 )
Larutan  CCl 4 sebagai  penginduksi hepatosit  pada  25  hewan  uji  sebanyak  0,5 mL/Kg BB.

## F. Persiapan  penetapan  kadar  SGPT dan SGOT
Sampel  darah  dan  ditambahkan EDTA dan disentrifuge untuk memisahkan serum  dan  plasma  darah.  Pengukuran SGPT  dan  SGOT  dengan  mengambil serum  sebanyak  50   µL  dan  ditambahkan 500  µL  larutan  pereaksi  dan  diukur absorbansinya  pada  panjang  gelombang 340 nm (Widyaningrum & Wijoyo, 2004).

## G. Pembuatan preparat histologi hati
Pembuatan  preparat  mikroanatomi hati  mencit  putih  jantan  menggunakan metode  paraffin.  Hewan  uji  sebanyak  30 ekor dinekropsi dan organ hati dimasukkan dalam  larutan  BNF  ( Buffer  Neutral Formalin) 10%.  Pewarnaan jaringan dilakukan dengan pewarna Mayer hematoksilin-Eosin.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## A. Determinasi Tumbuhan Tawas ut
Determinasi   merupakan  proses untuk menentukan nama dan jenis tumbuhan  secara  spesifik  dan  tawas  ut memiliki  nama  spesies Ampelocissus rubiginosa L.

## B. Uji Pendahuluan Infusa Tawas ut
Identifikasi  senyawa  dalam  akar tawas  ut  meliputi  uji  senyawa  saponin, tannin,  steroid,  flavonoid  dan  alkaloid. Hasil pengamatan infusa tawas ut menunjukkan  adanya  senyawa  saponin, tannin,  dan  flavonoid,  namun  tidak menunjukkan  adanya  steroid  dan  alkaloid dengan hasil pengamatan yang negatif.

## C. Pemeriksaan SGPT dan SGOT
Aktivitas  dari  nilai  SGPT ( serum glutamic pyruvic transaminase ) dan SGOT ( serum glutamic oxaloacetic transaminase ) dapat tabel 1 hasil pengamatan dan ditunjukkan pada  gambar 1dengan menunjukkan adanya peningkatan yang  signifikan  pada  kelompok  negatif. Nilai SGPT kelompok negatif yaitu 375,80 ± 96,693 U/L dan SGOT 435,60 ± 96,432 U/L.  Nilai  tersebut  menunjukkan  bahwa aktifitas  CCl 4 sebagai  penginduksi  dapat merusak  hati  dengan  adanya  peningkatan yang  cukup  tinggi.  Menurut  Ganda et  al .
(2007)  aktivitas  CCl 4 dengan  dosis  tinggi yang diberikan dapat menyebabkan kerusakan  hati  yang  dapat  menyebabkan pembengkakan  hati  sehingga  kerusakan hepatosit yang terjadi dapat mempengaruhi nilai  SGPT  yang  tinggi  dalam  serum akibat cedera hepatoseluler yang terjadi.
Tabel  1 .  Tabel  hasil  pengamatan  kadar
SGPT dan SGOT pada masing masing perlakuan. Kelompok perlakuan SGPT (U/L) SGOT (U/L) Kontrol normal  31,40 ± 3,250 67,00 ± 4,827 Kontrol  Positif (Hepa-Q ® ) 24,00 ± 1,581 77,00 ± 6,626 Kontrol Negatif 375,80  ± 96,693 435,60 ± 96,432 Dosis I (30%) 97,80 ± 18,40 157,00 ± 16,914 Dosis II (40%) 179,00  ± 77,302 260,00 ± 150,529 DosisIII (50%) 319,40  ± 78,191 333,60 ± 85,104
Gambar 1 . Grafik Hasil Pengamatan Nilai SGPT dan SGOT pada perlakuan
Jika  dilihat  pada  dosis  kedua  dan ketiga,  dosis  ketiga  menunjukkan  adanya peningkatan  yang  tinggi  pada  nilai  SGPT dan  SGOT  sebesar  319,40  ±  78,191U/L dan  333,60  ±  85,104.  Hal  tersebut menandakan bahwa aktivitas hepatoprotektor  dalam  dosis  30%  lebih tinggi  jika  dibandingkan  dengan  kontrol negatif  dilihat  dari  nilai  SGPT  dan  SGOT pada serum. Menurut Pramono &
Sumastuti  (2003)  kandungan  flavonoid yang tinggi pada sampel dapat meningkatkan resistensi dan dapat mengurangi  permeabilitas  kapiler  darah
yang  dapat  mengganggu  transportasi metabolisme  dalam  darah.  Hal  tersebut menunjukkan bahwa semakin tinggi kandungan flavonoid maka memungkinkan  terjadinya  peningkatan enzim dalam darah.

## D. Pemeriksaan histopatologi
Hasil  histopatologi  dapat  dilihat pada gambar 2 dibawah ini:
(a) (b) (c) (d) (e) (f)
Gambar 2. Gambaran histopatologi.
(a)Kelompok normal.
(b)Kelompok Positif. (c)Kelompok Negatif.
(d)Dosis I. (e)Dosis II. (f)Dosis  III.  A)  Inti  sel.  B) Vena  sentralis.  Pewarnaan H& E. Perbesaran 10x40.
Perlakuan yang diberikan
khususnya induksi CCl 4
akan menunjukkan  perbedaan  struktural  akibat
reaksi  yang  diberikan  oleh  hati  yang melakukan  metabolisme  dengan  adanya toksis yang masuk (Ahsan et al ., 2009).
Tabel  3. Tabel  jumlah  dari  4  lapangan pandang  kerusakan  hati  setiap perlakuan Perlak uan Da ta ke- Nilai Skor Degen erasi Megaloh epati Nekr osis Kelom pok I (Norm al) 1 0 0 0 2 0 0 0
3
0 0 0 4 0 0 0 5 0 0 0 Kelom pok II (Positi f) 1 0 0 0 2 0 0 0 3 0 0 0 4 0 0 0 5 0 0 0 Kelom pok III (Negat if) 1 0 0 3 2 4 0 0
3 2 0 0 4 8
0 0 5 3 0 0 Kelom pok IV (Dosis I) 1 0 0 0
2 0 0 0 3 4 0 0
4 0
0 0 5 4 0 0 Kelom pok V (Dosis II) 1 0 0 0
2
0 0 0
3
4 0 0
4 4 0 0 5 2 0 0 Kelom pok VI (Dosis III) 1 4 0 0 2 4 0 0 3 8 0 0 4 4 0 0 5 4 0 0
Gambar  a  menunjukkan  gambaran
histopatologi
kelompok normal menunjukkan  struktural  yang  normal dengan tidak adanya perubahan. Gambar d merupakan kelompok dosis 1 sebesar 30%
menunjukkan  adanya  degenerasi  dengan adanya  keluarnya  degenerasi  dari  inti  sel menuju luar sel sebesar 25%. Nilai scoring dari  4  lapangan  pandang  setiap  kelompok dapat dilihat pada tabel 3.
Hal  tersebut  menunjukkan  bahwa perlakuan dosis lebih baik jika dibandingkan  dengan  kelompok  negatif dengan  adanya  kerusakan  hati  berupa nekrosis.  Dosis  30%  menunjukkan  data yang paling baik dengan nilai skoring yang lebih  rendah  jika  dibandingkan  dengan dosis  40%  dan  50%.  Hal  ini  relevan dengan  data  nilai  SGPT  dan  SGOT  yang menunjukkan dosis efektif sebesar 30%.

## IV. KESIMPULAN
Kesimpulan  yang  diperoleh  dari penelitian  ini  adalah  perlakuan  kelompok dosis  infusa  memberikan  efek  sebagai hepatoprotektor  dengan  dosis  efektif  pada perlakuan  adalah  kelompok  dengan  dosis infusa  30%  dengan  menunjukkan  nilai yang  tidak  signifikan  pada  kelompok normal  dan  kelompok  kontrol  positif  dan adanya nilai yang paling signifikan dengan kelompok  kontrol  negatif  dan  adanya gambaran  histopatologi  yang  baik  pada perlakuan  kelompok  infusa  dibandingkan dengan  kelompok  kontrol  negatif   dilihat dari   kerusakan  hati  setelah  diinduksi dengan CCl 4.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahsan, R. K.M. Islam, A. Musaddik, & E. Haque. 2009. Hepatoprotective Activity  of  Methanol  Extract  of Some  Medicinal  Palnts  Against Carbon Tetrachloride Induced Hepatotoxicity  in  Albino  Rats.
Global  Journal  of  Pharmacology .
3(3): 116-122.
Aryzki,  S.  2011. Isolasi  dan  Identifikasi
Senyawa Kimia dari Fraksi Petroleum  Eter  Ekstrak  Etanol
Akar  Tawas  Ut  (Ampelocissus rubiginosa L .).  Skripsi. Program Strata  Satu,  Universitas  Lambung Mangkurat, Banjarabru.
Chodidjah,  E.  Widayati,  &  Utari.  2007.
Pengaruh  Pemberian  Air  Rebusan Meniran  ( Phyllanthm  niruri Linn)
terhadap  Gambaran  Histopatologi
Hepar Tikus Wistar yang Terinduksi  CCl 4 . Jurnal  Anatomi Indonesia . 2 (1):8-12. Depkes  RI.  1979. Farmakope  Indonesia
Edisi  III.  Departemen  Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
-------------.  1995. Farmakope  Indonesia
Edisi  IV.  Departemen  Kesehata
Republik Indonesia, Jakarta.
Ganda,  R.,  E.  Handayani, Chairul, Masriani,  Zakiah,  &  W.  Manalu.
2007.  Pengaruh  Pemberian  Karbon
Tetraklorida  Terhadap  Fungsi  Hati
dan Ginjal Tikus. Makara Kesehatan . 11(1): 11-16.
Green,  J.H.  2004. Fisiologi  Kedokteran .
Terjemahan Lyndon
Saputra.
Binapura Aksara, Jakarta.
Latifah,  A.  2010. Kajian  Farmakognostik Akar  Tawas  Ut  (Ampelocissus rubiginosa   L.)  Asal  Kalimantan
Tengah.  Skripsi .  Program  Strata Satu, Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru. Pramono,  S.  &  R.  Sumastuti.  2003.
Deteksi  Kandungan  Kimia  dan
Efek  Oksitosik  Fraksi  Tidak  Larut
Etanol  Infusa  Daun  ( Kaempferia angustifolia Roscue) Terhadap
Uterus  Marmut  Terpisah. Majalah Farmasi  Indonesia .  14(3):  114- 118.
Rusdi. 1988. Tetumbuhan sebagai Sumber Bahan  Obat. Pusat  Penelitian Universitas Andalas, Padang.
Seniwaty,  Raihanah,  K.  N.  Ika  &  Dewi. 2009 . Skrining  Fitokimia  dari Alang-Alang  ( Imperata  cylindrica L.Beauv) dan Lidah Ular ( Hedyotis corymbosa L.Lamk). Sains  dan Terapan Kimia . 3(2): 124-133.
Soleh,  D.  I.G.  Arinton,  &  W.  Siswandari. 2011.  Hubungan  APRI  (AST- Platelet  Ratio  Index)  Terhadap Derajat  Fibrosis  Pasien  Penyakit Hati  Kronis. Mandala  of  Health . 5(2).