## MEDIA BERINDIKATOR WARNA SEBAGAI PENDETEKSI
Salmonella typhimurium

## COLORED INDICATOR MEDIA AS Salmonella typhimurium DETECTOR
Endang Warsiki *) , Mulyorini Rahayuningsih, dan Roseiga Retno Anggarani
Departemen Teknologi Industri Pertanian, Fakultas Teknologi Pertanian, IPB Kampus IPB Dramaga, PO Box 220, Bogor, Indonesia 16680
Email: endangwarsiki@ipb.ac.id
Makalah: Diterima 10 Maret 2015; Diperbaiki 27 Juni 2016; Disetujui 10 Juli 2016

## ABSTRACT
Smart label is a label which could inform the quality and provide safety assurance of the food product. In this research, the label was produced from colored media and purposed to detect the growth of Salmonella. typhimurium. This bacterium is a pathogenic bacterium that causes salmonellasis disease with symptoms of poisoning type of infection. This bacterium is commonly appear in the fresh meat and meat product. The rapid detection of this bacterium would assure the freshness and safety of the meat. This research was aimed to produce the media based in color changing for rapid detection of the presence of S. typhimurium. The media indicator was produced from 2% (w/v) agar powder, 0.5% (w/v) tapioca starch, 1% (w/v) glycerol and 1% (w/v) selective media and then dissolved into distilled water until 100 mL solution. Four kind of selective medias were used, i.e. Xylose Lysine Deoxychoalate agar (XLD), Hektoen Enteric Agar (HEA), Salmonella Shigela Agar (SSA) and Bismuth Salt Agar (BSA). XLD media was found to be a very sensitive media to the S. typhimurium growth and presented a transparent color change to pink color that can be seen visually. The concentration range of 1-1.5% (w/v) of XLD was the best to develop the media. On the other hand, BSA and SSA media was notsensitiveon the S. typhimurium. Furthermore, another enrichment media of Brain Heart Infussion (BHI) with phenol red indicator has resulted in the rapid detection of 24 h after incubation compare to media without BHI in the same time. This media indicator gave in changing color from red to yellow.
Keywords: media indicator, selective media, color changing, S. typhimurium

## ABSTRAK
Label  cerdas  adalah  label yang dapat  menginformasikan  kualitas dan  memberikan  jaminan keamanan produk  pangan.  Pada  penelitian  ini,  label  diproduksi  dari  media  berindikator  warna  dan  ditujukan  untuk mendeteksi  pertumbuhan Salmonella typhimurium .  Bakteri  ini  adalah  bakteri  patogen  yang  menyebabkan penyakit  salmonelosis  dengan  gejala  jenis  keracunan  infeksi.  Bakteri  ini  umumnya  muncul  pada  daging  segar dan produk olahan daging. Deteksi cepat bakteri ini akan menjamin kesegaran dan keamanan daging. Penelitian ini  bertujuan  untuk  menghasilkan  media  berindikator  yang  berbasis  pada  perubahan  warna  untuk  mendeteksi secara cepat keberadaan S. typhimurium . Media indikator dibuat dari agar bubuk 2% (b/v), tepung tapioka 0,5% (b/v), gliserol 1% (b/v) dan media selektif 1% (b/v) dan kemudian dilarutkan dalam air destilata sampai menjadi 100 mL larutan media. Empat jenis media selektif ditambahkan yaitu Xylose Lysine Deoxychoalate agar (XLD), Hektoen Enteric Agar (HEA), Salmonella Shigela Agar (SSA) dan Bismuth Salt Agar (BSA). Media XLD sangat sensitif  terhadap  pertumbuhan S. typhimurium dan  menghasilkan  perubahan  warna  dari  transparan  menjadi merah  muda  yang  bisa  dilihat  secara  visual.  Konsentrasi  XLD  1-1,5%  (b/v)  adalah  konsentrasi  terbaik  untuk mengembangkan media indikator ini. Media lain berbahan BSA dan SSA tidak sensitif terdahap pertumbuhan S. typhimurium .  Selanjutnya  media  lain  yang  diperkaya  dengan Brain Heart Infussion (BHI)  dengan  indikator warna phenol red dapat berubah warna dari merah menjadi kuning dalam waktu 24 jam setelah inkubasi.
Kata kunci : Media indikator, media selektif, perubahan warna, S. typhimurium

## PENDAHULUAN
Bahan  pangan  sangat  rentan  terhadap penurunan kualitas karena tumbuhnya mikroorganisme.  Penurunan  kualitas  tersebut terkadang  tidak  diketahui  secara  cepat  dan  produk pangan  dapat  berbahaya  jika  dikonsumsi.  Oleh karena  itu,  dibutuhkan  alat pendeteksi  pertumbuhan mikroorganisme  yang  dapat  membantu  konsumen dalam mengetahui tingkat penurunan kualitas produk pangan yang akan dibeli atau dikonsumsi, khususnya
pendeteksi  keberadaan  bakteri  berbahaya.    Sejauh ini,  terdapat  beberapa  karya  inovatif  yang  sedang berkembang  untuk  mendeteksi  bakteri  patogen  dan kontaminan produk pangan seperti teknik konsentrasi-pemisahan, epifluorosen-membran filtrasi dan pemisahan  immunomagnetik  (Mandal et al., 2011).  Namun  demikian,  sebagian  temuan  ini harus  menggunakan  perangkat  yang  komplek  dan memerlukan  ekstraksi  sampel  untuk  menentukan kehadiran  mikroba  yang  ditargetkan  (Rasooly  dan Herold,  2006;  Velusamy et al., 2009;  Kuswansi et
Jurnal Teknologi Industri Pertanian 26 (3): 276-283 (2016)
al., 2011).  Sistem  yang  lebih  sederhana  patut dikembangkan  dengan  label  yang  diintegrasikan pada  kemasan produk (Pavelvoka, 2012). Label ini akan  memberikan  respon  yang  mudah  dilihat (biasanya  dengan  perubahan  warna)  jika  terdapat bakteri patogen dalam produk atau kemasan produk.
Label  indikator  atau  sering disebut  sebagai label cerdas banyak dikembangkan seperti indikator mikroba. ToxinGuard TM (Ontario, Kanada) mengembangkan  indikator  biosensor  yang  memiliki sistem  diagnostik  visual.  Sistem  tersebut  dicetak pada  plastik  polietilen  yang  mampu  mendeteksi bakteri  patogen  (Bodenhammer et al., 2004).  Food Sentinel  System TM adalah  indikator  bakteri  patogen yang diintegrasikan pada bar code sehingga produk akan  tertolak  secara  otomatis  ketika  produk dilewatkan  pada bar code scanner (Goldsmith, 1994).  Beberapa  penelitian  kemasan  cerdas berbentuk  label  juga  telah  banyak  dilakukan. Warsiki  dan  Putri  (2012)  telah  meneliti  label indikator  untuk  mendeteksi  kerusakan  buah  potong karena perubahan pH dan juga kemasan antimikroba yang  mampu  menghambat  mikroba  pembusuk pangan  (Warsiki et al. , 2009;  Warsiki et al. , 2010; Warsiki et al., 2013a).  Selain  itu  Nofrida et al.
(2013)  dan  Warsiki et al. (2013b)  telah memanfaatkan  daun  erpa  sebagai  indikator  warna untuk  produk  rentan  suhu  dan  cahaya.  Selanjutnya pengembangan  label  indikator  warna  dari  ekstrak buah  bit  (Warsiki et al. ,  2013 c )  yang  mengalami perubahan  warna  dari  merah  muda  menjadi  tidak berwarna karena suhu tinggi.
Label cerdas berindikator warna juga dapat diaplikasikan  sebagai  pendeteksi  kerusakan  produk, salah  satunya  bahan  pangan  yang  disebabkan  oleh bakteri  patogen  seperti  daging  dan  produk olahannya.  Kontaminasi  bakteri  dimungkinkan karena  ketidak  cukupan  proses  (tidak  higien), kerusakan  kemasan,  kebocoran  keliman,  serangga, kesalahan  suhu  penyimpanan  dan  lain  lain  (Prasad dan  Kochahar,  2014). S.typhimurium merupakan bakteri  patogen  yang  menyebabkan  keracunan  tipe infeksi yang menular dari hewan ke manusia melalui makanan  asal  hewan  yang  terkontaminasi  ( food – borne disease )  (Agricultural  Research  Service, 2002). Bakteri ini sangat mudah tumbuh pada daging segar  dan  produk  olahan  daging.  Bakteri  ini  sangat berbahaya  bagi  manusia  dan  dapat  menyebabkan kematian.  Keberadaan  bakteri  ini  pada  produk pangan  dalam  kemasan  harus  negatif. Salmonella tidak  kasat  mata,  namun  demikian  bakteri  ini  dapat dideteksi  dengan  media  berindikator  yang  akan member respon perubahan warna.
Konsep pendeteksian mikroorganisme pada umumnya  didasarkan  pada  pengukuran  gas  atau senyawa  lain  hasil  metabolisme  mikrooranisme, seperti  hydrogen  sulfida  (Wanihsuksombat et al., 2010;  Smolander et al., 2002),  karbon  dioksida (Kerry et al. ,  2006;  Nopwinyuwong et al. ,  2010), amina  (Pacquit et al., 2006;  Pacquit et al., 2007),
asam-asam  organik  (Hong  dan  Park,  2000)  dan enzim  (DeCicco  dan  Keeven,  1995).  Biosensor berbahan conducting polymer nanocomposite telah berhasil  mendeteksi Salmonella sp., Bacillus cereus dan Vibrio parahaemolyticus dengan menangkap gas hasil metabolisme mikroorganisme tersebut (Arshak et al .,  2007).  Pada  penelitian  ini  media  indikator S. thypimurium dikembangkan  dari  media  selektif  dan media  yang  diperkaya  dengan  bahan  lain  yang diperlukan  untuk  pertumbuhan  mikroorganisme target. Adapun tujuan penelitian adalah mengujicoba media  berindikator  warna  dari  berbagai  formulasi media,  untuk  mendeteksi  cepat  pertumbuhan Salmonella thypimurium .

## METODE PENELITIAN

## Bahan dan Alat
Bahan  yang  digunakan  untuk  membuat media  indikator  adalah  media  pembawa  yaitu  agar bubuk,  tepung  tapioka,  gliserol  dan  media  selektif untuk pertumbuhan Salmonella , yaitu Xylose Lysine Deoxychoalate (XLD), Salmonella Shigella Agar (SSA), Bismuth Salt Agar (BSA), Hecton Enteric agar (HEA).  Selain  itu  juga  digunakan  bahan  lain seperti Brain Heart Infussion (BHI),  glukosa, tetrathionate, Na 2 S 2 O 3 dan Ferric Amonium Citrate (FAC)  sebagai  bahan  pengkayaan  media  serta indikator  warna phenol red, NaCl  fisiologis, aquades,  biakan E.coli dan  biakan S.typhimurium . Sebagai  media  kultur  murni  digunakan Trypticase Soy Agar (TSA)  dan Lactosa Broth Agar (LBA). Sedangkan  alat  –  alat  yang  digunakan  meliputi cawan petri, gelas piala, water bath, magnetic stirer , autoklaf, oven (pengering), inkubator, hot plate , hot stirer , batang penyebar, termometer, neraca analitik, pipet  volumetrik,  sudip  alumunium,  tabung Scotch , tabung reaksi dan alat gelas.

## Metode

## Media Indikator
Pada  penelitian  ini  media  indikator  warna dibuat  dari  media  pembawa  dan  bahan  lain.  Media pembawa  disiapkan  dari  campuran  agar  bubuk, tapioka  dan  gliserol.  Sebagai  bahan  indikator sekaligus media selektif digunakan bahan paten yang umumnya digunakan untuk mendeteksi pertumbuhan bakteri S. thypimurium yaitu XLD,  SSA, HEA,  dan BSA.  Bahan  indikator  juga  diformulasikan  dari bahan lain yang terdiri campuran 0,02 g phenol red , 1  g  glukosa,  0.85  g  Na 2 S 2 O 3 , dan  0,15  g ferric amonium citrate ,  7,7  g  indikator  warna phenol red dan 3,7 g bahan pengkayaan. Terdapat 2 jenis bahan pengkayaan yang dicobakan pada campuran ini yaitu BHI dan tetrathionate .
Media  pembawa  adalah  media  untuk membawa  pewarna  sekaligus  media  tempat Salmonella tumbuh.  Sedangkan  bahan  selektif digunakanan sebagai indikator adanya S. thypimurium pada media.  Indikator akan mengalami perubahan warna. Perubahan warna media ini terjadi
karena  penurunan  pH  media  yang  disebabkan  oleh adanya  produksi  berbagai  asam  organik  hasil metabolisme Salmonella tersebut .
Pada  pembuatan  media  indikator  ini diperlukan  ruangan  steril  untuk  proses  pengeringan media.  Ruang  steril  pengeringan  disiapkan  dengan memanaskan  suhu  oven  sampai  120 o C  selama  24 jam  yang  ditujukan  untuk  membunuh  semua mikroorganisme  pada  ruangan  terebut.  Setelah  itu, suhu  oven  diturunkan  sampai  mencapai  suhu konstan 37 o C.
Proses  pembuatan  media  indikator  adalah sebanyak 2 g agar bubuk, 5 g tapioka, 1 mL gliserol dan  1  g  bahan  indikator  pewarna  ke  dalam  air destilata  sampai  terbentuk  100  mL  larutan.  Larutan kemudian  dipanaskan  dalam water bath sampai larutan  mendidih  dan  diaduk  hingga  homogen. Setelah  itu  larutan  didisterilisasi  pada  suhu  121 o C selama  15  menit.  Larutan  kemudian  dicetak  pada cawan  petri  dengan  volume  20  mL,  dibiarkan memadat  dan  kemudian  dikeringkan  pada  ruang pengeringan bersuhu 37 o C selama 24  jam. Diagram alir  pembuatan  media  indikator  disajikan  pada Gambar 1.
Gambar 1. Diagram alir pembuatan media indikator

## Uji Sensitivitas Media Indikator
Uji  sensitivitas  media  indikator  dilakukan dengan  2  jenis  bakeri  Gram  negatif  yaitu S.thypimurium dan Escherichia coli. Sel S.thypimurium yang  digunakan  untuk  menguji sensitivitas  media  indikator  disiapkan  dengan  cara membiakkan 1 ose kultur murni S.thypimurium dari media  umum Trypticase Soy Agar (TSA)  kedalam 100  mL  larutan  BHI.  Sedangkan  biakan E.coli disiapkan  dari  1  ose  kultur E. coli pada  media Lactosa Broth Agar yang diencerkan dengan l00 mL larutan NaCl.
Uji  sensitivitas  media  dilakukan  dengan cara  metode  sebar.  Sebanyak  0,1  mL  sel S. typhimurium dalam  larutan  BHI  atau  0,1  mL  sel E.coli dalam larutan NaCl, dipipet dan disebarkan ke permukaan  media  indikator  yang  telah  dicetak  di dalam  cawan  petri.  Kemudian  sel  diratakan  dengan batang penyebar dan diinkubasi pada suhu optimum pertumbuhan Salmonella sp .  yaitu  37 o C  selama  24 jam.
Media  indikator  juga  diuji  perubahan warnanya  terhadap  pertumbuhan E.coli .  Hal  ini dimaksudkan  untuk  memberi  keyakinan  hasil  uji bahwa media indikator hanya berubah warna karena adanya  pertumbuhan S. thypimurium dan  bukan disebabkan  oleh  pertumbuhan  bakteri  gram  negatif lainnya  seperti E.coli .  Gambar  2  menunjukkan langkah uji sensitivitas media terhadap pertumbuhan S.  typhimurium.

## Uji Perubahan Visualisasi Warna Label
Menurut  beberapa  literatur,  XLD  diyakini sebagai bahan pewarna yang memberikan  visualisai perubahan  warna  terbaik  untuk  mendeteksi Salmonella sp. dibandingkan  dengan  bahan  lain. Pada  penelitian  ini  diujicobakan  penambahan  XLD dengan  berbagai  konsentrasi  yang  berbeda.  Media indikator  diproduksi  sesuai  diagram  alir  seperti Gambar 1 dengan 4 konsentrasi XLD yang berbeda yaitu 0,5;  1; 1,5 dan  2% per 100  mL larutan media yang dipersiapkan. Kemudian media diuji sensitivitasnya  terhadap  pertumbuhan  bakteri S. typhimurium seperti pada Gambar 2.
Gambar 2. Langkah uji sensitivitas media indikator
Sterisilasi pada suhu 121 o C selama 15 min Pengeringan pada 37 o C, 24 jam Pemanasan dan pengadukan Larutan media Campuran bahan Media indikator Pencetakan 20 mL pada cawan Batang penyebar Media indikator Cawan petri Biakan Salmonella typhimurium/Escherichia coli
Pemiliha Sensitivit M perubahan Perubaha transparan muda ( fus
72.  Form bakteri  G melalui  p sensitifita menunjuk S tidak  terj tidak jauh (sebelum (media ta perubahan menghasi yang  dico
Media  HE jam  ke-7 yang sam pada jam diaplikasi dengan S.
B
diperoleh warna  t typhimuri lain (Kan
Tabel  1. M XLD SSA HEA BSA
HASIL DAN an  Bahan  M tas Label Cer Media  selek n  warna  yang an  warna  yan n  (tidak  berw
schia ) pada w mulasi  terseb Gram  negatif perbedaan  wa as  dengan E.
kkan adanya p Selanjutnya, m adi  perubaha h berbeda anta
S. typhimuri anpa biakan S. n  warna  me ilkan warna m obakan pada  w EA  dapat  me 72  penyimpan ma dapat mend ke-24. Denga ikan sebgai pe . thypimurium Berdasarkan h  bahwa  XL terbaik  untu ium dan  ini  s ng dan Fung,
Hasil uji sens Media selektif

## N PEMBAHA
Media  Indik rdas ktif  XLD g  mudah  dilih ng  terjadi  yait warna)  menja waktu pengam but  juga  dap f S. typhimur arna  yang  diha
coli, media perubahan war media berbaha an  warna  kare ara sampel aw ium tumbuh) typhimurium edia  indikator merah muda pa waktu inkuba endeteksi S. ty nan,  namun deteksi E.coli an demikian H endeteksi E.co m . hasil pen LD  menghasi uk  mendetek sesuai  dengan 2000; Maddo sitivitas media S. typ E. col S. typ E. col S. typ E. col
S. typ
E. col
ASAN kator  dan memperlihat hat  secara  vis tu  warna  ben adi  warna  me matan jam ke 2 pat  membeda rium dan E. asilkan.  Pada a  indikator  ti rna. an SSA dan B ena  warna  me wal pada jam k dan  juga  kon m ). Uji sensitiv r  dengan  HE ada kedua bak asi yang berbe yphimurium p demikian  me lebih cepat y
HEA lebih ses oli dibanding ngamatan j ilkan  peruba ksi  bakteri n  hasil  penelit ocks et al. , 20
a indikator dar

## Jenis Bak
himurium li
himurium
li himurium li himurium li
dang Warsiki, M
Uji tkan ual. ning erah 24 – akan coli a  uji idak BSA edia ke-0 ntrol vitas EA, kteri eda. pada edia aitu suai gkan uga ahan S. tian 002; Ny den kon wa lain ini fer org for Per bah Tab
dif pem phe me dan den tela me me E.
ter me L-l et me den ind ri berbagai me kteri Mulyorini Rahay yel et al., 2002 ngan  media  i nstan  (tidak  a aktu  lama  dib n.  Menurut  D disebabkan rmentasi  gluk ganik  seperti rmat  sehingg rubahan  warn han  media  ya bel 1. Pada  p formulasikan mbawa  deng enol red se enunjukkan ha n  dengan  tam ngan  indikato ah menghasilk erah.  Tidak  te edia dalam me coli . Hal  ini sebut  akan  m enghasilkan  a laktat,  D-lakta
al. ,  2010). enurunkan  pH ngan  peruba dikator.
edia selektif
P
0
ayuningsih, dan
2). Perubahan ini  dapat  terl ada  perubahan bandingkan  d Doyle et al .  (1 oleh  penurun kosa  oleh Sal menjadi  as ga  pH  medi na  media  seca ang  diujicoba penelitian  ini, dengan  m gan  bahan  p ebagai  indika asil uji sensiti mbahan  BHI. or  warna phen kan perubahan erdapat  perbe endeteksi bakt i  disebabkan memfermentas asam-asam  org at  dan  asam Selanjutnya, H  media  y ahan  warna Pengamatan ( 24 48 Roseiga Retno
n warna yang lihat  secara  v n  warna)  dala engan  media 1989)  perubah nan  pH  med lmonella menj am  laktat,  a a  menjadi  s ara  visual  dar akan  dapat  di ,  media  indik menambahkan pengakayaan ator  warna. ivitas media t Uji  sensitivi nol red dan  t n warna dari edaan  perubah teri S. typhim karena  kedu i  gula  pada  m ganik  seperti asetat  (Wanih asam-asam yang  direpres phenol red Jam)
8 72
dihasilkan visual  dan am  jangka berbahan han  warna dia  karena njadi  asam asetat  dan sekitar  4. ri  berbagai lihat  pada kator  juga n media BHI  dan Tabel  2 tanpa BHI itas  media tanpa  BHI kuning ke han  warna urium dan ua  bakteri media  dan n-butirat, hsuksomat ini  akan sentasikan d sebagai
Tabel 2. H Phenol r Phenol r Glukosa H oleh  Smo coli deng mikroorg dari  biru berindika mendetek dibanding F BHI dan perubahan mendetek merah  m ditimbulk pH  media 7,6.  Berd
phenol re warna  ya permukaa BHI dan adalah  ba mikroorg yang dipe sensitif  d ataupun E jam. F
pewarna yang  terl gram  neg thypimuri selektif  ji ini dis (pengham bakteri pertumbu dapat  di mencegah salts, bri (Baird et berpotens pendeteks F bahan  in pengkaya
rindikator Warn Hasil uji sensi Indikator red red + BHI + a Hal  yang  seru olander et al. gan  memanfaa ganisme  dan  m menjadi  mer ator phenol ksi  keberadaan gkan dengan E Formulasi lain glukosa. Hasi n  warna  dar ksi S. typhim media  berasa kan oleh BHI. a  BHI  cender dasarkan  hasil
ed + BHI + gl ang  sangat  ce an media diba glukosa. Sepe ahan enrichm ganime  untuk erkaya dengan dalam  mendet Escherichia d
Formulasi  me phenol red, alu  umum  un gatif  famili E ium. Namun ika  dibanding sebabkan X mbat) berupa s Gram p uhannya.  Kom gunakan  ole h  mikroorgan illiant green, al., 1995). D si  untuk  dik si Salmonella Formulasi sel ndikator  war aan tetrathiona
itivitas media S. typ E.coli S. typ E.coli upa  juga  tela
(2002)  untu atkan  toxin  ha mampu  merub rah. Namun red (tanpa n S.thypimuri E.coli .
n dibuat deng il uji sensitivit ri  merah  ke
murium dan al  dari  kond
Seperti diket rung  basa  yai l  pengamatan lukosa membe epat  dan  mera andingkan den erti diketahui ent yang  akan k  tumbuh.  A n BHI dan glu teksi  pertumb dengan  waktu edia  yang  ter merupakan ntuk  dapat  me
Enterobacteri demikian,  m gkan  dengan  m XLD memi sodium deoxy positif dap mponen  pengh eh Enterobac nisme  lain  tum dan sodium Dengan demik kembangkan . anjutnya adal rna phenol ate . Tetration

## indikator den
Jenis Bakte himurium i himurium i
ah  dikembang uk  mendeteksi asil  metabolis bah  warna  me demikian,  me BHI)  ini  da ium lebih  ce
gan menamba tas menghasil e  kuning  da
E. coli .  Wa disi  basa  y tahui bahwa n itu  sebesar  7, n  tersebut,  me erikan peruba ata  pada  selu ngan media ta BHI dan gluk n  mempermu Akibatnya,  me ukosa akan le uhan Salmon u  kurang  dari
rbuat  dari  ba formulasi  me endeteksi  bak aceae seperti media  ini  kur media  XLD. iliki inhibit ycholate sehin pat diham hambat  lain  y cteriaceae un mbuh  adalah lauryl sulph kian media X sebagai  me
ah media den red dan  ba ate broth ada
ngan bahan pen
eri gkan i E. sme edia edia apat epat ahan lkan lam arna yang nilai ,2  – edia ahan uruh anpa kosa udah edia ebih ella 24 ahan edia kteri i S. rang Hal tors ngga mbat yang ntuk bile hate XLD edia ngan ahan alah bah unt has tetr me ber sep me BH me tetr
Sal tetr me
me ses per dil dia typ wa Per ber wa Tab me bah aka dan
Pe Pe seb pen ber me mu vis XL den per me

## ngkayaan BH
Penga 0 24 han  pengkaya tuk  isolasi Sa sil  uji  sensitiv rathionate + enghasilkan  p rbeda  dengan perti  formula enjadi kuning. HI  telah  me endeteksi  ke
rathionate  – lmonella pad rathionate tan enunjukkan pe Penamb enghasilkan  m suai jika akan rubahan  warn ihat  dari  sa aplikasikan phimurium tum arna  terbaik rtumbuhan S rubahnya  war arna  merah  m bel  1.  Di  s emiliki  kandu han inhibitor b an  lebih  mud n menghamba ngaruh K rubahan Visu Pada  p bagai media te ndeteksi S. rikutnya,  kon endapatkan  p udah  dilihat sualisasi  warn
LD  dapat  dilih ngan  konsentr rubahan  vis endeteksi bakt
HI amatan (Jam) 4 48 aan  media  ya
almonella sp. vitas  media  d BHI  dan  t perubahan  w n  media  ber asi  sebelumn . Ketidakberad enyebabkan beradaan Sa
– BHI  dapat da  jam  ke-2 npa BHI, pada erubahan warn bahan te media  yang  l n digunakan se na  dari  uji  se atu  sisi,  seh menjadi m mbuh  dan  m k  pada  m S. typhimurium rna  media  dar muda  seperti  y samping  itu ungan sodium bakteri Gram dah  mendeteks at pertumbuha Konsentrasi ualisasi Warn penelitian  ini erbaik untuk thypimurium . nsentrasi  XL perubahan  wa dengan  ma na  media  pad hat  pada  Tab rasi  XLD  1% sualisasi  wa teri S. typhimu
) 72 ang  banyak  d
Tabel  3  men dengan  bahan tanpa  BHI . M warna  yang  ti rindikator ph ya,  yaitu  da daan bahan pe media  lamb almonella in mendeteksi 24,  sedangka a jam yang sa na yang signif etrathionate lembek  sehin ebagai label. ensitivitas  han hingga  kura media indik menghasilkan  p edia  selekti
m ditunjukka ri  bening  tran yang  ditunjuk media  selek m deoxycholat positif, sehing si  bakteri  gra an bakteri gram
XLD T na Label i  media  XLD dikembangka Pada pe D  divariasik arna  yang  c ata.  Hasil  p a  berbagai  ko el  4.    Media %  dan  1,5%  m arna  terbaik
urium .
digunakan nunjukkan tambahan Media  ini idak  jauh henol red ari  merah engkayaan bat  dalam ni.  Media i  bakteri an  media ama belum fikan. telah ngga  tidak Selain itu, nya  dapat ang  dapat kator. S. perubahan if  XLD. an  dengan nsparan  ke kkan  pada ktif  XLD te sebagai gga media am  negatif m positif.
Terhadap
D  dipilih an sebagai erlakukan an  untuk cepat  dan perubahan onsentrasi indikator mengalami k  untuk
Tabel 3. H
Phenol r + Gluko
Phenol r Tetrathi Tabel 4. H Konsent XLD (% 0.5 1 1.5 2
Hasil uji sensi Komposisi m red + BHI + T osa + Na 2 S 2 O 3
red + Glukos onate + Na 2 S 2
Hasil perubah trasi %) K
S.ty
S.ty S.ty S.ty
itivitas media media Tetrathionate 3 + FAC sa + 2 O 3 + FAC han visualisasi Keterangan Kontrol yphimurium Kontrol yphimurium Kontrol yphimurium Kontrol yphimurium
dengan tetray Jenis Bak S. typhimur E.coli S. typhimur E.coli i warna terhad 0 dang Warsiki, M yhionate + BH kteri rium rium dap berbagai k P 2 Mulyorini Rahay

## HI
Pengama 0 konsentrasi XL Pengamatan (J 24
atan (Jam) 24 LD Jam) 48
4 72
Pada  Tabel  4  terlihat  bahwa  perubahan warna  dapat  dibedakan  dari  jam  ke-0  sampai  jam ke-72. Media indikator dengan konsentrasi XLD 1% dan  1,5%  memiliki  warna  awal  pada  jam  ke-0 transparan  dan  berubah  secara  perlahan  menjadi warna  merah  muda  pada  jam  ke-24,  48,  dan  72. Perbedaan  hasil  perubahan  warna,  pada  kedua konsentrasi  media  XLD  terlihat  pada  jam  ke-24. Pada  konsentrasi  XLD  1%  perubahan  warna  ke merah  muda  cukup  terlihat  jelas  secara  langsung, sedangkan  media  dengan  konsentrsai  XLD  1,5% memiliki  perubahan  warna  yang  terlihat  lebih  jelas dan  lebih  baik  dibandingkan  dengan  konsentrasi XLD  1%.  Dengan  demikian  konsentrasi  XLD  1- 1,5%  adalah  rentang  konsentrasi  terbaik  dalam pembuatan  media indikator  yang dapat pemberikan perubahan warna yang signifikan dalam mendeteksi keberadaan S. thypimurium .

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Media  berbahan  XLD  sangat  sesuai  untuk mendeteksi
pertumbuhan
S. thypimurium dibandingan  dengan  SSA,  EXA  dan  BHA.  Bahan pengkayaan  BHI  dapat  mempercepat  perubahan warna  media  dari  merah  menjadi  kuning  dalam waktu  24  jam  inkubasi.  Media  indikator  berbahan XLD  dengan  konsentrasi  1-1,5%  menghasilkan perubahan  warna  terbaik  dari  transparan  menjadi merah muda. Media ini mampu menteksi keberadaan
Salmonella pada jam ke 24.

## Saran
Penelitian  lanjutan  patut  dilaksanakan untuk  menghitung  sensitivitas  media  terhadap jumlah S. typhimurium yang  tumbuh  pada permukaan  media.  Sebaiknya,  media  harus  dapat mendeteksi  jumlah  bakteri  dengan  jumlah  yang sedikit  dan  tetap  memberikan  perubahan  warna signifikan yang terlihat kasat mata.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti  mengucapkan  terima  kasih  kepada Direktorat  Jendral  Pendidikan  Tinggi,  Kementrian Riset,  Teknologi  dan  Pendidikan  Tinggi,  Republik Indonesia  atas  pendanaan  penelitian  ini  melalui Skim Hibah Kompetensi.

## DAFTAR PUSTAKA
Agricultural  Reasearch  Service.  2002.  A  Focus  on Salmonella sp. [Internet].  Tersedia  pada: http://fsrio.nal.usda.gov . [ 2014 Jun 14].
Arshak K, Adley C, Cunniffe C, Campion M, Harris J.  2007.  Characterisation  of  polymer nanocomposite  sensor  for  quantification  of bacterial  cultures. Sensor and Actuator B: Chemical 126 (1):226-231.
Baird R, Curtis G, dan Corry J. 1995. Culture Media for  Food  Microbiology.  Volume  34. Amsterdam (NL). Elsevier Science B. V.
Bodenhammer  WT,  Jakowski  G,  dan  Davies  E. 2004.
Surface
binding of an immunoglobulin to a flexible polymer using a  water  soluble  varnish  matrix.  US  Patent 6692973.
DeCicco  BT  dan  Keevem  JK.  1995.  Detection system  for  microbial  contamination  in health care product. US Patent 5443987.
Goldsmith RM. 1994. Detection of contamination in food. US Patent 5 306 466.
Hong SI dan Park WS. 2000. Use of color indicators as  an  active  packaging  system  for evaluating  kimchi  fermentation. J Food
Eng . 46 (1): 67 – 7.
Kang DH dan Fung DYC. 2000. Application of thin agar  layer  method  for  recovery  of  injured Salmonella typhimurium. Int J Food Microbiol. 54 (1-2): 127-132. Kerry JP, O’Grady MN, dan Hogan SA. 2006. Past, current  and  potential  utilization  of  active and  intelligent  packaging  system  for  meat and muscle-based product. A review. Meat Sci. 74 (1): 113 130.
Kuswandi B, Wicaksono Y, Abdullah A, Heng LY, Ahmad M. 2011. Smart Packaging : Sensor for Monitoring of Food Quality and Safety . Volume 5. US: Springer. P137-146.
Mandal  PK,  Biswas  AK,  Choi  K,  Pal  UK.  2011.
Methods  for  rapid  detection  of  food  borne pathogens : An overview. Am J Food Tech. 6 (2):82-102.
Maddocks  S,  Olma  T,  dan  Chen  S.  2002. Comparison  of  CHROM  agar  Salmonella Medium and Xylose-Lysine-Desoxycholate and  Salmonella-shigella  agars  for  isolation of Salmonella Strains from stool samples. J. Clin. Microbiol. 40 (8): 2999-3003. Nofrida  R,  Warsiki  E,  dan  Yuliasih  I.  2013. Pengaruh  suhu  penyimpanan  terhadap perubahan  warna  label  cerdas  indikator warna  daun  erpa  ( Aerva sanguinolenta ). J Tek Ind Pert. 23 (3) : 232-241.
Nopwinyuwong  A,  Trevanich  S,  dan  Suppakul  P. 2010. Development  of  a  novel  colometric indicator  label  for  monitoring  freshness  of intermediate-moisture  dessert  spoilage. J Talanta. 81 : 1126 – 1132.
Nye  KJ,  Fallon  D,  Frodsham  D,  Geel  B,  Howel  S, Messer  S,Turner  T,  Warren  RE.  2002.  An evaluation  of  the  performance  of  XLD, DCA,  MLCB,  and  ABC  agars  as  direct plating  media  for  the  isolation  of Salmonella enterica from  faeces. J Clin Pathol. 55: 286-288.
Pacquit A, Crowley K, Lau KT, Diamond D. 2006. Real-Time  Monitoring of  Microbial Spoilage  Using  Smart  Packaging  Sensor.
Proc of IUFoST Conference 2006,  Nantes, France (Digital Object Identifier IUFoST2006/702).
Padhye  VV,  Zhao  T,  dan  Doyle  MP.  1989.
Production  and  characterisation  antibodies to Verotoxins I and 2 of serotype 0 157: H7 of monoclonal from Escherichia coli. J Med Microbiol. 30: 219-226.
Paquit  A,  Frisby  J,  Lau  KT,  McLaughlin  H,  Quilty
B,  Diamond  D.  2007.  Development  of  a smart  packaging  for  monitoring  of  fish spoilage. J Food Chem. 102 (2):466-470. Pavelkova  A.  2012.  Intelligent  packaging  as  device for  monitoring  of  risk  factor  in  food. J Microbiol Biotechnol Food Sci. 2(1):  282- 292.
Prasad P dan Kochhar A. 2014. Active packaging in food industry : A Review. IOSR J Env Sci. 8 (1):01-07.
Rasooly  A  dan  Herold  K.  2006.  Biosensor  for  the analysis  of  food  and  waterborne  pathogens and  their  toxins. J AOAC Int. 89  (3):873- 883.
Smolander  M,  Hurme  E,  Latva-Kala  K,  Louma  T, Alakomi  H-L,  Ahvenainen  R.  2002. Myoglobin-basd indicator for evaluation of freshness  of  unmarinated  broiler  cuts. Innovative Food Sci. and Emerging Tech. 3 (2): 279-298.
Velusamy  V,  Arshak  K,  Korostynska  O,  Oliwa  K, Adley C. 2010. An Overview of foodborne pathogen  detection  :  In  the  perspective  of biosensors. Biotech Adv. 28 (2) : 232-254.
Wanihsuksombat C, Hongtrakul V, dan Suppakul P. 2010. Development and characterization of a  prototype  of  lactic  acid-based  time temperature  indicator  for  monitoring  food product quality. J Food Eng. 100: 427-434. Warsiki  E,  Sunarti  TC,  dan  Damanik  R.  2009. Efficacy  of  Chitosan-base  Antimicrobial (AM) Packaging. Proc The 11st
International Conference on QIR (Quality in Research) .  ISSN  :  114-1284.  Jakarta Agustus 2009.
Warsiki  E,  Sunarti  TC,  dan  Damanik  R.  2010. Pengembangan  Kemasan  Antimikrobial untuk  Memperpanjang  Umur  Simpan Produk.  Prosiding  .  Seminar  Tahunan Hasil-hasil Riset IPB Tahun 2009. Buku ke- 5 : Rekayasa dan Teknologi Pangan. ISBN : 978-602-8853-03-3, 978-602-8853-08-8. Bogor, Desember 2010: 579-588.
Warsiki  E  dan  Putri  CDW.  2012.  Colored  label indicator  from  natural  and  synthetic  dyer.
Electronic J Agroind Ind. 1 (2): 82-87. Warsiki  E,  Sunarti  TC,  dan  Nurmala  L.  2013a
Kemasan antimikroba
untuk memperpanjang umur simpan bakso ikan. J Ilmu Pert Ind. 18 (2): 125 – 131.
Warsiki  E,  Nofrida  R,  dan  Yuliasih  I.  2013b Pemanfaatan  ekstrak  daun  erpa  ( Aerva sanguilenta )  untuk  label  cerdas  indikator warna. J Ilmu Pert Ind. 18 (1):.16 -19.
Warsiki  E dan Utami AS.  2013c. Color  Stability  of Beat Dyes Label During Heating. Proc The 2nd Int on Adaptive and Intelligent Agroind. Bogor, September 2013.