CURRENT BIOCHEMISTRY
ISSN: 2355-7877 e-ISSN: 2355-7931 Journal homepage: http://journal.ipb.ac.id/index.php/cbj Journal E-mail: current.biochemistry@gmail.com

## Perbedaan Bagian Tanaman Krokot (Portulaca grandiflora Hook.) Terhadap Kandungan Total Fenolik dan Flavonoid serta Aktivitas Antioksidan
Husnawati 1 *, Ukhradiya M Safira Purwanto 1 , Aulia Ayu Rispriandari 1
1 Department of Biochemistry, IPB University, Bogor, 16680, Indonesia
Received: 31 July 2019 ; Accepted: 1 February 2020
Corresponding author : Husnawati, Departemen Biokimia IPB; e-mail: dr.husnawati1983@gmail.com

## ABSTRACT
Portulaca grandiflora Hook. was known to have a potency as antioxidant. Differences in plant  parts  can  cause  differences  in  phytochemical  content,  which  can  affect  its  antioxidant activity. This study aims to compare the content of total phenolic and flavonoid in leaf, old stem, young stem, and flower organs of purslane plant (Portulaca grandiflora Hook.) which is extracted using ethanol 96% and determined the antioxidant activity of the extract with DPPH methode. The result showed that each plant organ of purslane contains different concentration of phenolic and  flavonoid  compounds.  The  highest  total  phenolic  and  flavonoid  content  was  found  in  the leaves( 113.26 ± 3.85 mg GAE/g and 97.99 ± 1.28 mg QE/g), but the highest antioxidant activity was found in the old stem with IC50 value 122.15 ± 1.30 ppm (classified as medium antioxidant).
Keywords: Antioxidant, Flavonoid, Phenolic, Portulaca grandiflora Hook

## ABSTRAK
Portulaca grandiflora Hook. diketahui memiliki potensi sebagai antioksidan. Perbedaan bagian-bagian  tanaman  dapat  menyebabkan  perbedaan  kandungan  fitokimia,  yang  kemudian dapat  mempengaruhi  aktivitas  antioksidannya.  Penelitian  ini  bertujuan  membandingkan kandungan total fenolik dan flavonoid pada organ daun, batang tua, batang muda, dan bunga dari  tanaman  krokot  (Portulaca  grandiflora  Hook.)  yang  diekstrak  menggunakan  etanol  96% serta  menentukan  aktivitas  antioksidan  dari  ekstrak  tersebut  dengan  metode  DPPH.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa setiap organ tanaman krokot mengandung konsentrasi senyawa fenolik dan flavonoid yang berbeda. Kandungan total fenolik dan flavonoid paling tinggi terdapat pada  bagian  daun  (113.26  ±  3.85  mg  GAE/g  dan  97.99  ±  1.28  mg  QE/g),  tetapi  aktivias antioksidan  tertinggi  terdapat  pada  bagian  batang  tua  dengan  nilai  IC50  122.15  ±  1.30  ppm (tergolong antioksidan sedang).
Kata kunci: Antioksidan, Fenolik, Flavonoid, Portulaca grandiflora Hook .

## 1. PENDAHULUAN
Antioksidan merupakan suatu komponen  yang  dapat  menangkal  radikal bebas  yang  apabila  jumlahnya  berlebih akan memicu efek patologis (Selawa et al. 2013).  Antioksidan  juga  berperan  dalam mencegah  stress  oksidatif  yang  berperan penting  dalam  etiologi  terjadinya  proses penuaan  dan  berbagai  penyakit  degenera- tif (Werdhasari 2014). Radikal bebas yang terdapat  dalam  tubuh  dapat  berasal  dari metabolisme tubuh, polusi udara, cemaran makanan,  dan  sinar  matahari.  Salah  satu tanaman  obat  yang  memiliki  potensi sebagai antioksidan adalah tanaman krokot ( Portulaca grandiflora Hook.) (Lim et al.
2014).
Krokot  ( Portulaca  grandiflora
Hook.)  dikenal  juga  dengan  nama Sutra Bombay atau Moss Rose , biasa digunakan sebagai  tanaman  hias  dan  tanaman  obat (Sari et  al .  2017).  Krokot  dapat  tumbuh dengan  baik  meski  mendapat  pengaruh signifikan dari iklim dan komposisi tanah yang  buruk,  sehingga  tanaman  ini  dapat dikategorikan  sebagai  gulma.  Krokot dalam  bidang  pengobatan  tradisional bermanfaat dalam mengobati sakit tenggorokan, ruam kulit, dan detoksifikasi (Anghel et al . 2013).
Kandungan  fitokimia  dari  herba krokot yaitu sterol, karotenoid, flavonoid, asam  polifenol,  polisakarida,  dan  agen pereduksi  (Zhou et  al. 2015).  Perbedaan fungsi organ tanaman dapat menyebabkan perbedaan  jalur  biosintesis  kandungan fitokimia  pada  bagian-bagian  tanaman, termasuk kandungan senyawa fenolik dan flavonoid (Heldt dan Piechulla 2011).
Penelitian  tentang  aktivitas  anti- oksidan  dari  tanaman  krokot  secara  utuh telah  banyak  dilakukan  (Lim et  al .  2014;
Andarwulan et al. 2010; Lolo et al . 2017), tetapi  belum  ada  yang  mengamati perbedaan aktivitas antioksidan dan kandungan senyawa fenolik dan flavonoid pada  tiap  organ  tanaman  krokot.  Hal  ini mendorong  studi  lanjutan  untuk  mencari bagian organ tanaman krokot yang paling berpotensi sebagai antioksidan.
Penelitian  ini  bertujuan  mengukur kandungan  total  fenolik  dan  flavonoid pada organ daun, batang tua, batang muda, dan bunga dari tanaman krokot ( Portulaca grandiflora Hook.)  asal  Bogor  yang diekstrak menggunakan etanol 96%, serta menentukan  aktivitas  antioksidan  dari ekstrak  tersebut  menggunakan  uji  DPPH (2,2-difenil-1-pikrihidrazil).

## 2. METODOLOGI
Sampel  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  bagian  bunga,  daun, batang muda, dan batang tua krokot yang didapat  dari  kebun  Pusat  Studi  Bio- farmaka  Institut  Pertanian  Bogor.  Alat yang digunakan adalah rotary evaporator , spektrofotometer  nano  (LABTECH)  dan desikator.  Bahan-bahan  yang  digunakan dalam  pengujian  antara  lain  etanol  96%, reagen DPPH (2,2-difenil-1-pikrihidrazil), vitamin  C,  asam  galat,  Na 2 CO 3 ,  reagen folin-ciocalteu ,  kuersetin  (TCL),  AlCl 3 , dan CH 3 COONa.
Preparasi Simplisia Krokot (Modifikasi Gazali et al. 2016, Lolo et al. 2017)
Tiap bagian tanaman krokot disortasi. Batang muda berwarna hijau dan berukuran  kecil,  sedangkan  batang  tua berwarna  kecoklatan  dan  berukuran  lebih besar.  Kemudian  tiap  bagian  tanaman dikeringkan dengan suhu 50 ºC selama 2-3 hari. Krokot kering kemudian dihaluskan
dan  diayak  dengan  ayakan  60  mesh  dan disimpan  dalam  suhu  ruang.  Pengukuran kadar  air  simplisia  dilakukan  dengan metode pengeringan di oven pada suhu 105 ºC.

## Ekstraksi Krokot (Modifikasi Gazali  et
al. 2016, Lolo et al. 2017)
Ekstraksi  dilakukan  dengan  cara maserasi.  Simplisia  krokot  direndam dalam  etanol  96%  dengan  perbandingan 1:10  selama  3  hari  dalam  kondisi  gelap. Pengadukan  dan  penyaringan  dilakukan tiap 24 jam. Filtrat kemudian disaring dan diperoleh ekstrak cair. Filtrat yang didapat kemudian  diuapkan  menggunakan rotary evaporator sehingga  diperoleh  ekstrak kental.
Uji  Total  Fenolik  (Modifikasi  Hidayati et al. 2019)
Sebanyak  0.2  mL  sampel  dengan konsentrasi 1000 ppm ditambahkan dengan  1  mL  Na 2 CO 3 7.5%  lalu  didiam- kan  di  inkubator  selama  8  menit.  Setelah itu  ditambahkan  dengan  1.25  mL  reagen folin-ciocalteu lalu  diinkubasi  selama  30 menit.  Absorbansi  dibaca  pada  panjang gelombang  750  nm.  Kurva  standar  asam galat dibuat dengan konsentrasi 0, 25, 50, 100, 125, 150, dan 250 ppm. Total fenolik dihitung  dalam  milligram  ekivalen  asam galat/gram sampel (mg GAE/g).

## Uji Total Flavonoid (Modifikasi Azizah
et al. 2014)
Sebanyak  0.5  mL  sampel  dengan konsentrasi  1000  ppm  ditambahkan  0.1 mL CH 3 COONa 1 M, 0.1 mL AlCl 3 10%, 1.28  mL  akuades,  dan  1.5  mL  etanol. Campuran kemudian diinkubasi selama 30 menit.  Absorbansi  dibaca  pada  panjang
gelombang  430  nm.  Kurva  standar kuersetin  dibuat  dengan  variasi  konsen- trasi 0, 25, 50, 100, 125, 150, 200, dan 250 ppm.  Total  flavonoid  dihitung  dalam milligram  ekivalen  kuersetin  per  gram sampel (mg QE/g).
Uji Antioksidan Metode DPPH (Modifikasi Yanuarti et al. 2017)
Sebanyak  200  µL  sampel  dengan variasi konsentrasi 100, 200, 400, 600, 800 dan  1000  ppm  dicampurkan  dengan  100 µL  DPPH  125  µM  dalam  etanol. Campuran  dikocok  dan  dibiarkan  pada suhu  ruang  (25  ºC)  dalam  kondisi  gelap selama  30  menit.  Blanko  dibuat  dengan mencampurkan 200 µL sampel dan 100 µL etanol.  Kontrol  negatif  dibuat  dengan mencampurkan  100  µL  DPPH  125  µM dengan 200 µL etanol. Vitamin C diguna- kan sebagai kontrol positif, masing-masing dibuat  dengan  variasi  konsentrasi  0-20 ppm  dengan  sampel  sebanyak  200  µL dalam  etanol  ditambah  dengan  100  µL DPPH 125 µM. Absorbansi diukur meng- gunakan  panjang  gelombang  518  nm. Persen  inhibisi  ditentukan  menggunakan rumus berikut:
Nilai  IC 50 ditentukan  dengan  membuat kurva  antara  persen  inhibisi  dan  konsen- trasi hingga diperoleh persamaan regresi.

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh  dianalisis menggunakan Analysis of Variance (ANOVA) pada tingkat kepercayaan 95%
(α  =  0.05).  Uji  lanjut  dilakukan  dengan menggunakan uji Tukey .

## 3. HASIL

## Kadar Air
Penentuan  kadar  air  dilakukan  3 kali ulangan dengan  hasil rerata kadar air paling  tinggi  terdapat  pada  organ  batang muda,  yaitu  6.97%  ±  0.12  dan  paling rendah pada bunga (Gambar 1A). Analisis statistik  menunjukkan  kadar  air  pada batang  muda  tidak  berbeda  nyata  dengan daun  (p>0.05),  tetapi  berbeda  nyata dengan  bagian  batang  tua  dan  bunga (p<0.05).

## Kandungan Total Fenolik
Uji  total  fenolik  yang  dilakukan menggunakan  kurva  standar  asam  galat. Kurva  yang  diperoleh  memiliki  nilai regresi  0.977  atau  mendekati  1.  Nilai  R 2 yang  semakin  mendekati  1  menunjukkan persamaan  yang  diperoleh  semakin  bagus dan  semakit  tepat  kepastian  nilai  yang diperoleh  dari  persamaan  garis  tersebut (Suryohastari 2016). Persamaan garis yang diperoleh adalah Y = 0.0886X + 0.0176.
Kandungan total fenolik Portulaca grandiflora paling  tinggi  adalah  pada organ  daun  dengan  rerata  113.26  mg GAE/g  (Gambar  1B).  Kandungan  paling rendah terdapat pada bagian batang muda dengan  rerata  59.91  mg  GAE/g.  Analisis statistik  menunjukkan  kandungan  total fenolik  pada  tiap  organ  berbeda  nyata (p<0.05).

## Kandungan Total Flavonoid
Uji total flavonoid yang dilakukan menggunakan  kurva  standar  kuersetin. Kurva  yang  diperoleh  memiliki  nilai regresi  0.984,  dengan  persamaan  garis yang  diperoleh  adalah  Y  =  0.1927X  + 0.034.  Kandungan  total  flavonoid  paling tinggi adalah pada bagian daun dan paling
rendah  pada  bagian  batang  tua  dengan rentang  rerata  97.99  dan  50.77  mg  QE/g (Gambar  1C).  Hasil  analisis  statistik menunjukkan  kandungan  total  flavonoid pada  tiap  bagian  tanaman  berbeda  nyata (p<0.05).

## Aktivitas Antioksidan Tanaman Krokot
Nilai  IC 50 kontrol  positif  (vitamin C)  yang  diperoleh  pada  pengujian  DPPH adalah  10.08  ppm.  Nilai  IC 50 tanaman krokot  yang  paling  rendah  adalah  batang tua dengan nilai 122.15 ppm (Gambar 1D). Nilai  tersebut  masih  jauh  dari  nilai  IC 50 vitamin C. Nilai IC 50 paling tinggi adalah batang muda (334.54 ppm).
Ekstrak etanol batang tua krokot ini tergolong  ke  dalam  antioksidan  sedang karena  memiliki  IC 50 pada  rentang  100- 150  ppm,  sedangkan  bunga,  daun,  dan batang muda tergolong antioksidan sangat lemah  karena  memiliki  IC 50 >200  ppm. Vitamin C tergolong ke dalam antioksidan sangat kuat karena memiliki IC 50 <50 ppm
(Molyneux 2004). Analisis statistik menunjukkan  nilai  IC 50 pada  batang  tua berbeda nyata dengan ketiga organ lainnya (p<0.05).

## 4. PEMBAHASAN

## Kadar Air
Proses  preparasi  sampel  krokot yang  dilakukan  menghasilkan  simplisia daun, batang tua, batang muda, dan bunga yang  memiliki  kadar  air  sesuai  standar tanaman obat menurut BPOM (2014) yaitu tidak  melebihi  10%  (Gambar  1A).  Kadar air  menunjukan  banyaknya  air  yang terdapat dalam sampel dan mempengaruhi umur  simpan  suatu  bahan.  Suatu  bahan dengan kadar air yang tinggi akan semakin rentan terhadap serangan mikroba
(Sulihono et al . 2012). Kadar air juga dapat mempengaruhi  laju  aktivitas  enzimatik yang  akan  memicu  produksi  senyawa samping  yang  dapat  meng-ganggu  efek farmakologi  suatu  tanaman  obat  (Manoi 2006). Rendahnya kadar air akan menghambat aktivitas enzimatik (Indah et al . 2017).
Penanganan pascapanen yang kurang  tepat  dapat  menurunkan  mutu simplisia.  Terdapat  beberapa  metode pengeringan  untuk  membuat  simplisia
tanaman  diantaranya  adalah  metode pengeringan  dibawah  sinar  matahari  dan pengeringan dengan oven (Cahyono et al . 2011).
Pembuatan simplisia tanaman krokot  ( Portulaca  grandiflora Hook.) menggunakan oven pada suhu 50 ºC dapat mempercepat  proses  pengeringan  dan diperoleh  berat  kering  yang  konstan. Penggunaan  suhu  50ºC  memiliki  hasil kadar  air  simplisia  yang  baik  (Winangsih et al. 2013).
Gambar 1  Kadar air (A), kandungan total fenolik (B), total flavonoid (C), dan nilai IC50 (D) dari tanaman krokot Portulaca  grandiflora .  Nilai  dalam  bentuk  rerata  ±  standar  deviasi.  Huruf  superskrip yang berbeda menunjukkan beda nyata pada taraf uji 95% (p <0.05)
Kandungan Total Fenolik
Penelitian  Lim et  al .  (2014)  yang menguji  lima  varietas  ekstrak  etanol Portulaca  grandiflora asal  Malaysia, menunjukkan  kandungan  total  fenolik yang  berkisar  antara  41.46-85.70  mg GAE/100  g  sampel.  Kandungan  total fenolik  pada  penelitian  ini  lebih  tinggi yaitu  59.91-113.26  mg  GAE/g  sampel (Gambar  1B).  Hal  ini  dapat  disebabkan karena  faktor  lokasi  tanam.  Spesies  yang sama  yang  ditanam  pada  lokasi  berbeda akan memberikan karakteristik kandungan fitokimia  yang  berbeda  (Andrianto et  al . 2020). Jalur  metabolisme  pembentukan metabolit sekunder dapat dipengaruhi oleh beberapa  faktor  eksternal  yaitu  cahaya, pH, ketinggian, kelembapan, waktu panen, dan nutrisi (Gustina 2017; Nofiani 2008).
Kandungan  total  fenolik  tertinggi terdapat  pada  daun  (113.26  mg  GAE/g) diikuti  secara  berturut-turut  pada  bunga, batang tua dan batang muda (Gambar 1B). Perbedaan  ini  dapat  disebabkan  oleh fungsi  organ  tanaman  yang  berbeda. Senyawa  fenolik  berperan  dalam  per- lindungan  terhadap  radiasi  sinar  UV, kehilangan  air  berlebih,  menarik  hewan dalam membantu penyerbukan dan penyebaran  benih,  perlindungan  diri  dari herbivora  dan  patogen,  alelopati,  dan sinyal yang memicu reaksi pertahanan dari tekanan  biotik  dan  abiotik  (Yahia  dan Lopez 2018).
Metabolit sekunder dibentuk sebagai  hasil  samping  atau  hasil  antara pada  metabolisme  primer  (Setyorini  dan Yusnawan 2016). Daun merupakan organ utama  tempat  terjadinya  fotosintesis  dan menghasilkan karbohidrat yang merupakan  sumber  utama  karbon  pada tanaman (Pertamawati 2010). Karbohidrat
akan dimetabolisme sehingga membentuk fosfoenolpiruvat  (PEP)  yang  kemudian berkondensasi  dengan  eristrosa-4-fosfat membentuk 3-deoksi-darabino-heptulo- sonat-7-fosfat (DAHP). Lalu DAHP akan mengalami serangkaian reaksi membentuk 3-DHS  yang  menjadi  prekursor  beberapa senyawa  fenolik  seperti  asam  galat, ellagitannin, dan gallotanin.
Perkembangan  yang  terjadi  pada tanaman krokot dapat dilihat dari pembentukan  daun  dan  bunga  sebagai organ  reproduksi.  Perubahan  yang  terjadi mempengaruhi kandungan senyawa biokimia yang ada pada krokot (Hapsari et al. 2018; Kusumaningrum 2017; Sarjani et al .  2017).  Sistem  vaskular  pada  batang membantu  dalam  pengangkutan  air  dan hasil  fotosintesis  untuk  ditranspor  ke organ lain, sehingga mendorong keragaman  komponen  fitokimia  yang terdapat dalam krokot (Heldt dan Piechulla  2011).  Uddin et  al .  (2012) menyatakan  semakin  bertambah  umur krokot maka kandungan total fenolik pada tanaman krokot semakin meningkat.
Kandungan  fenolik  berkolerasi positif  dengan  aktivitas  antioksidan. Semakin  tinggi  kandungan  fenolik  maka semakin  tinggi  aktivitas  antioksidan (Kusumowati et  al .  2011).  Kemampuan senyawa  fenolik  dipengaruhi  oleh jumlah gugus hidroksil dan ikatan konjugasi pada cincin  aromatik  benzena.  Mekanisme senyawa fenolik sebagai antioksidan dapat dilakukan  dengan  mendonorkan  atom hidrogen  (Sedjati et  al .  2018).  Senyawa golongan  fenolik  pada  krokot  yang berfungsi  sebagai  antioksidan  adalah gallotanin,  asam  klorogenat,  dan  asam kafeat  (Zhou et  al .  2015,  Anghel et  al .
2013).
Kandungan Total Flavonoid Krokot Senyawa fenolik  terdapat di berbagai  jaringan  tanaman  seperti  buah, biji, daun, dan batang. Terdapat lebih dari 8000  senyawa  fenolik  yang  kemudian dibagi  menjadi  dua  kelompok,  yaitu flavonoid  dan  nonflavonoid.  Kandungan total flavonoid pada tanaman krokot  juga berbeda  nyata  pada  tiap  organ,  dengan konsentrasi  tertinggi  pada  bagian  daun (Gambar  1C).  Penelitian  El  Kashef et  al . (2018)  menggunakan  krokot  asal  Mesir menghasilkan  kandungan  total  flavonoid ekstrak  etanol  krokot  yang  lebih  kecil, yaitu  34.66  ±  4.00  mg  QE/g.  Hal  ini membuktikan  bahwa  kandungan  total flavonoid  juga  dapat  dipengaruhi  oleh kondisi lokasi asal tanaman.
Flavonoid  umumnya  berfungsi sebagai  sinyal  interaksi  dengan  simbion, pigmen bunga, dan subtansi perlindungan cahaya. Senyawa flavonoid seperti flavon dan flavonol memiliki serapan maksimum pada  wilayah  UV.  Senyawa  ini  dapat berperan  juga  sebagai  pigmen  pelindung dari kerusakan akibat radiasi UV. Karena itulah,  daun  yang  merupakan  pusat  foto- sintesis, menghasilkan senyawa flavonoid lebih  banyak  daripada  bagian  tanaman lainnya.  Radiasi  UV  pada  daun  memicu peningkatan  biosintesis  flavonoid  (Heldt dan Piechulla 2011).
Krokot  merupakan  gulma  yang dapat  tumbuh  dalam  iklim  yang  kurang baik (Kurniawati 2018). Kondisi cekaman seperti kekeringan, panas, dingin, kelebihan  cahaya,  defisiensi  fosfat,  dan kadar garam yang tinggi merupakan faktor stress lingkungan yang dapat menginduksi akumulasi  senyawa  metabolit  sekunder seperti  flavonoid  untuk  pertahanan  diri. Senyawa  flavonoid  yang  diproduksi  pada
kondisi  stress  lingkungan  akan  menurun- kan  pemakaian  energi  kimia  seperti NADPH dan  ATP sehingga reaksi terang pada  fotositesis  akan  berkurang  dan mencegah  pemakaian  energi  dan  reduksi berlebih dari rantai transport elektron pada fotosintesis (Heldt dan Piechulla 2011).
Kemit et  al .  (2017)  menyatakan kandungan  flavonoid  berkolerasi  positif dengan  aktivitas  antioksidan.  Semakin tinggi kandungan flavonoid maka semakin tinggi  aktivitas  antioksidannya.  Aktivitas antioksidan  flavonoid  disebabkan  oleh keberadaan gugus hidroksil. Jumlah gugus hidroksil  yang  semakin  banyak  akan  me- ningkatkan aktivitas antioksidan. Senyawa golongan  flavonoid  pada  krokot  yang dapat berperan sebagai antioksidan adalah epigenin, kaempferol, dan kuersetin (Zhou et al . 2015).

## Aktivitas Antioksidan Krokot
Senyawa  fenolik  dan  flavonoid memiliki  fungsi  sebagai  antioksidan dilihat dari kemampuannya dalam menangkal  radikal  bebas  (Sedjati et  al . 2017; Heldt dan Piechulla 2011). Menurut Molyneux  (2004),  suatu  senyawa  dapat digolongkan  sebagai  anti-oksidan  sangat kuat  (IC 50 <50  ppm),  kuat  (IC 50 50-100 ppm), sedang (IC 50 100-150 ppm), lemah
(IC 50 150-200  ppm),  dan  sangat  lemah
(IC 50 >200 ppm).
Nilai  IC 50 terbaik  krokot  adalah pada  ekstrak  etanol  batang  tua  yang tergolong  ke  dalam  antioksidan  sedang dengan  nilai  IC 50 122.15  ppm  (Gambar 1D).  Tetapi  nilai  ini  masih  jauh  dari aktivitas  antioksidan  Vitamin  C  yang merupakan antioksidan sangat kuat dengan  nilai  IC 50 10.08  ppm.  Sedangkan bunga, daun, dan batang muda tergolong
ke dalam antioksidan sangat lemah karena memiliki IC 50 >200 ppm. Hasil penelitian ini  jauh  lebih  baik  jika  dibandingkan dengan  penelitian  Lim et  al .  (2014)  pada ekstrak  etanol  tanaman  krokot  utuh  asal Malaysia, dimana nilai IC 50 yang diperoleh adalah berkisar 0.76 hingga 1.82 mg/ml atau setara dengan 760-1820 ppm.
Nilai  IC 50 yang  diperoleh  pada penelitian  ini  tidak  berkorelasi  positif dengan  kandungan  total  fenolik  dan flavonoid  tanaman  krokot.  Daun  yang memiliki  kandungan  total  fenolik  dan flavonoid  tertinggi  memiliki  aktivitas antioksidan yang sangat lemah, sedangkan batang tua yang kandungan total flavonoidnya  paling  rendah  memiliki aktivitas antioksidan yang lebih baik. Hal ini  ternyata  tidak  berbeda  dengan  hasil penelitian  Lim et  al .  (2014)  yang menunjukkan bahwa aktivitas antioksidan dengan  kandungan  fenolik  dan  flavonoid pada  tiap  varietas  krokot,  tidak  selalu berkolerasi  positif.  Hal  ini  kemungkinan disebabkan oleh peran senyawa metabolit sekunder lain yang terdapat dalam bagian- bagian tanaman krokot.
Komponen bioaktif metabolit
sekunder  secara  umum  tidak  bekerja sendiri. Beberapa senyawa bioaktif bekerja  secara  sinergis  dengan  saling menguatkan  senyawa  bioaktif  lainnya (Darwis et  al .  2012).  Senyawa  lain  pada tanaman  krokot  yang  dapat  berfungsi sebagai  antioksidan  adalah  alkaloid  dan terpenoid (Firdiyani et al . 2015). Menurut Zhou et  al .  2015  kedua  senyawa  ini banyak  terdapat  pada  organ  batang. Kemampuan  organ  yang  lebih  tua  untuk memproduksi  metabolit  sekunder  yang lebih  banyak  memungkinkan  metabolit sekunder  lain  yang  berperan  sebagai
antioksidan  berjumlah  lebih  banyak  pada batang  tua  (Anwar et  al .  2017),  sehingga menghasilkan efek antioksidan yang lebih tinggi pada batang tua krokot.
Komponen  bioaktif  lain  yang terdapat  pada  tanaman  krokot  juga  dapat bekerja secara antagonis yaitu dengan cara melemahkan  aktivitas  senyawa  bioaktif lainnya  (Darwis et  al .  2012).  Kandungan fenolik  dan  flavonoid  pada  tanaman krokot  yang  berbeda  menghasilkan  efek yang  tidak  sinergis  pada  aktivitas antioksidannya.  Hal  ini  dapat  disebabkan karena  penggunaan  ekstrak  kasar  etanol tanaman  krokot  sehingga  memungkinkan adanya senyawa lain yang belum teridentifikasi  yang  mengganggu  kerja senyawa  bioaktif.  Menurut  Zhou et  al . (2015)  dan  Anghel et  al .  (2013)  ekstrak krokot  mengandung asam  organik  seperti asam fenolkarboksilat. Penelitian Zhang et al . (2019) menunjukkan bahwa kandungan asam organik dalam ekstrak memiliki efek antagonis  dengan  aktivitas  antioksidan senyawa fenolik.

## 5. DAFTAR PUSTAKA
[BPOM]  Badan  Pengawas  Obat  dan Makanan.  2014.  Peraturan  Kepala Badan Pengawas Obat Dan Makanan Tentang  Persyaratan  Mutu  Obat Tradisional. Jakarta (ID): BPOM.
Andarwulan  N,  Batari  R,  Sandrasari  DA, Boilling  B,  Wijaya  H.  2010. Flavonoid  content  and  antioxidant activity of vegetables from
Indonesia. Food  Chem .  121(4):
1231-1235.
Anghel  AI,  Olaru  OT,  Gatea  F,  Dinu  M,
Ancuceanu  RV,  Istudor  V.  2013.
Preliminary  research  on Portulaca grandiflora Hook. Species
( Portulacaceae ) for therapeutic use. FARMACIA . 61(4): 294-702.
Anwar  K,  Rahmanto  B,  Triyasmono  L, Rizki  MI,  Halwany  W,  Lestari  F. 2017.  The  influence  of  leaf  age  on total  phenolic,  flavonoids,  and  free radical  scavenging  capacity  of Aquilaria beccariana . RJPBCS . 8(1S): 129-133.
Azizah  DN,  Kumulowati  E,  Faramayuda F.  2014.  Penetapan  kadar  flavonoid metode AlCl3 pada ekstrak metanol kulit buah kakao ( Theobroma cacao L.). KJIF . 2(2): 45-49.
Cahyono  B,  Huda  MDK,  Limantara  L. 2011.  Pengaruh  proses  pengeringan rimpang temulawak ( Curcuma xanthorriza ROXB) terhadap kandungan dan komposisi kurkuminoid . J Reaktor . 13(3): 165-
171.
Darwis  W,  Hafiedzani  M,  Astuti  RRS.
2012.  Efektivitas  ekstrak  akar  dan daun  pecut  kuda Stachytarpetha jamaicensis (L) Vahl dalam menghambat  pertumbuhan  jamur candida albicans penyebab kandidasiasis  vaginalis. J  Koservasi Hayati . 8(2): 1-6.
El  Kashef  RKH,  Soliman  AS,  Hassan HMM, Abd-Elhak NA. 2018. Evaluation of total phenolic content and  antioxidant  activity  of  different solvent  extract  of  egyptian  purslane leaves. Curr Sci J . 7(4): 616-623.
Firdiyani  F,  Agustini  TW,  Ma’ruf  WF. 2015.  Ekstraksi  senyawa  bioaktif sebagai  antioksidan  alami Spirulina plantensis segar dengan pelarut yang berbeda. JPHPI . 18(1):28-37.
Gazali AMF, Anam S, Khumaidi A. 2016. Isolasi  senyawa  antibakteri  ekstrak etanol akar krokot ( Portulaca oleracea Linn) menggunakan bakteri
uji Staphylococcus  aureus . Natural Sci J . 5(1): 49-59.
Hapsari  AT,  Darmanti  S,  Hastuti  ED. 2018. Pertumbuhan batang, kar, dan daun  gulma  katumpangan  ( Pilea microphylla (L.) Liebm.). JANAFIS .
3(1): 79-84.
Heldt  HW,  Piechulla  B.  2011. Plant Biochemistry  4 th Edition .  London
(UK): Academic Press.
Hidayati  JR,  Yudiati  E,  Pringgenies  D, Arifin  Z,  Oktaviani  DT.  2019. Antioxidant activities, total phenolic compound  and  pigment  of  total Sargassum sp. extract, macerated in different  solvents  polarity. J  Kel
Trop . 22(1): 73-80. Indah, Mappiratu, Musafira. 2017. Produksi enzim lipase dari Aspergillus  niger isolate  kapang kopra dengan menggunakan medium kelapa parut. KOVALEN . 3(3): 269-
276.
Kemit  N,  Widarta  IWR,  Nocianitri  KA. 2017.  Pengaruh  jenis  pelarut  dan waktu maserasi terhadap kandungan senyawa  flavonoid  dan  aktivitas antioksidan  ekstrak  daun  alpukat ( Persea  Americana Mill). JITEPA . 5(2):130-141.
Kurniawati IY. 2018. Peningkatan keragaman krokot ( Portulaca grandiflora ) melalui mutase induksi dengan  iradiasi  sinar  gamma  secara berulang  [skripsi].  Bogor  (ID):
Institut Pertanian Bogor.
Kusumaningrum R. 2017. Peranan xylem dan  floem  dalam  pertumbuhan  dan perkembangan tumbuhan. Di dalam:
Seminar Nasional Pendidikan Biologi. 2017 Desember 2. Yogyakarta,  Indonesia.  Yogyakarta (ID): Universitas Negeri Yogyakarta. B123-130.
Kusumowati  ITD,  Melannisa  R,  Ratri  K. 2011.  Korelasi  kandungan  fenolik dan aktivitas antioksidan daun jambu mete. JBM . 3(2): 25-30.
Lim  CK,  Tiong  WN,  Loo  JL.  2014.
Antioxidant activity and total phenolic content of different varieties  of Portulaca  grandiflora .
IJPP . 4(1): 2277-2928.
Lolo  WA,  Sudewi  S,  Edy  HJ.  2017.
Penentuan  nilai Sun  Protecting Factor (SPF) herba krokot
( Portulaca  oleracea L.). JPSCR . 2(1):1-5.
Manoi F. 2006. Pengaruh cara pengeringan terhadap mutu simplisia sambiloto. Bul. Littro . 17(1): 1-5.
Molyneux  P.  2004.  The  use  of  the  stable free  radical  diphenylpicrylhydrazyl (DPPH)  for  estimating  antioxidant activity. SJST. 26(2): 212-219.
Pertamawati.  2010.  Pengaruh  fotosintesis terhadap pertumbuhan tanaman kentang  ( Solanum  tuberosum L.) dalam lingkungan fotoautotrof
secara in vitro. JSTI . 12(1): 31-37.
Sarjani  TM,  Mawardi,  Pandia  ES,
Wulandari  D.  2017.  Identifikai morfologi  dan  anatomi tipe  stomata family Piperaceae di  Kota  Langsa. JIPI . 1(2): 182-191.
Sari BP, Karno, Anwar S. 2017. Karakter morfologi dan sitologi tanaman sutra Bombay ( Portulaca grandiflora
Hook.)  hasil  poliploidisasi  dengan kolkisin  pada  berbagai  konsentrasi dan frekuensi aplikasi. JOAC . 1(12): 39-48.
Sedjati  S,  Supriyantini  E,  Ridlo  A, Soenardjo  N,  Santi  VY.  2018.
Kandungan pigmen, total fenolik dan aktivitas  antioksidan Sargassum sp. J Kel Trop . 21(2): 137-144.
Sedjati S, Suryono, Santosa A, Supriyantini  E,  Rdlo  A.  2017. Aktivitas antioksidan dan kandungan senyawa fenolik makroalga  coklat Sargassum sp. J Kel Trop . 20(2): 117-123. Selawa W, Runtuwene MRJ, Citraningtyas  G.  2013.  Kandungan flavonoid  dan  kapasitas  antioksidan total  ekstrak  etanol  daun  binahong [ Anredera cordifolia (Ten.) Steenis.]. Pharmacon . 2(1): 18-22.
Setyorini  SD,  Yusnawan  E.  2016. Peningkatan  kandungan  metabolit sekunder  tanaman  aneka  kacang sebagai  respon  cekaman  biotik. J Iptek Tanaman Pangan . 11(2): 167-
174. Sulihono  A,  Tarihoran  B,  Agustina  TE. 2012. Pengaruh waktuk,
temperature, dan jenis pelarut terhadap  ekstraksi  pektin  dari  kulit jeruk  bali  ( Citrus  maxima ). IJC . 18(4): 1-8.
Suryohastari  RB.  2016.  Analisis  protein defensin  dari  biji  jinten  hitam ( Nigella sativa L.) pada mencit ( Mus musculus )  yang  diberi  biji  jinten hitam  melalui  teknik  SDS-PAGE. Al-Kauniyah J Biol . 9(1): 26-36.
Uddin  MK,  Juraimi  AS,  Ali  ME,  Ismail MR. 2012. Evaluation of antioxidant properties  and  mineral  composition of  purslane  ( Portulaca  oleracea L.) at different growth stages. Int J Mol Sci . 13(8): 10257-10267.
Werdhasari  A.  2014.  Peran  antioksidan bagi kesehatan. JBMI . 3(2): 59-68.
Winangsih, Prihastanti E, Parman S. 2013.
Pengaruh metode pengeringan terhadap kualitas simplisia lempuyang wangi ( Zingiber aromaticum L.). JANAFIS .  21(1):
19-25.
Yahia  E,  Lopez  AC.  2018. Postharvest Physiology  and  Biochemistry  of Fruit  and  Vegetables .  Cambridge (UK): Woodhead Publishing.
Yanuarti  R,  Nurjanah,  Anwar  E,  Hidayat
T. 2017. Profil fenolik dan aktivitas antioksidan dari ekstrak rumput laut
Turbinaria  conoides dan Eucheuma cottoni . JPHPI . 20(2): 230-237.
Zhang B, Tia T, Duan W, Zhang Z, Li Y, Fang  B,  Xia  M,  Wang  M.  2019. Effects of organic acid, amino acid, and phenolic compounds on antioxidant characteristic of Zhenjiang aromatic vinegar. Molecules . 24(3799): 1-12. Zhou YX, Xin HL, Rahman K, Wang SJ, Peng  C,  Zhang  H.  2015. Portulaca oleracea L.: review of phytochemistry and pharmacological  effects. Biomed
Res Int . 2015: 1-11.
.