## ANALISIS KUALITATIF RHODAMIN B PADA KUE KU YANG BEREDAR DI PASAR TRADISIONAL KABUPATEN SLEMAN, YOGYAKARTA
Siti Fatimah, Dian Wuri Astuti, Suryani Dwi Lestari
Prodi D3 Analis Kesehatan STIKes Guna Bangsa Yogyakarta; Jl.Ringroad Utara Depok Sleman Yogyakarta, telp/Fax: ( 0274)4477701 /( 0274)4477702
e-mail: 1 siti_fatimah@gunabangsa.ac.id

## ABSTRACT
Background : A food additive used  to obtain food products that taste  delicious, attractive, durable,  easy  in  its distribution.  Food  additives  that  are often  used  in  society  is  dye.  Many fraud  by  producers  to  attract  consumers  such  as  the  use  of  non-food  grade  dyes  or  food grade with doses exceeding the rules. Rhodamine B is a dangerous synthetic dyes are often added to foods as a dye. Kue Ku is made from a mixture of potatoes, coconut milk, glutinous rice flour, salt, sugar and red dye. The red color on my cake due to the addition of the dye rhodamine  B.  The  use  of  rhodamine  B  can  cause  negative  impacts  on  the  health  of consumers, thus attracting researchers to examine the presence of rhodamine B dye on my cake circulating in traditional markets Sleman, Yogyakarta.
Method  : The  method  is  a  descriptive  study  with  the  aim  to  describe  or  illustrate  the existence  of  rhodamine  B  on  kue  Ku    samples  circulating  in  traditional  markets  Sleman, Yogyakarta. The method used for laboratory test is by thin-layer chromatography.
Results : In this study showed 15,38% of Kue Ku samples have been investigated positive for rhodamine B.
Conclusion : There dye  rhodamine  B on Kue Ku circulating in traditional markets Sleman, Yogyakarta.
Keywords : Food dye, rhodamine B, Kue Ku, thin layer chromatography.

## PENDAHULUAN
Keamanan pangan merupakan kondisi  dan  upaya  yang  diperlukan  untuk mencegah  pangan  dari  kemungkinan cemaran  biologis,  kimia  yang  dapat mengganggu, merugikan dan membahayakan kesehatan manusia.
Pangan  yang  aman  serta  bermutu  dan bergizi  tinggi  penting  bagi  pertumbuhan, pemeliharaan, peningkatan kesehatan serta peningkatan kecerdasan masyarakat (Saparinto dan Hidayati, 2006).
Kualitas makanan merupakan keseluruhan sifat-sifat dari makanan yang berpengaruh  terhadap  penerimaan  dari
konsumen. Teknologi pengolahan pangan pada  saat  ini  berkembang  cukup  pesat, termasuk  Indonesia.  Bahan  tambahan makanan  digunakan  untuk  memperoleh produk  pangan  yang  bercita  rasa  lezat berpenampilan  menarik,  tahan  lama, mudah dalam pengangkutan dan pendistribusiannya. Bahan tambahan makanan  yang  sering  digunakan  dalam masyarakat adalah pewarna. Penggunaan pewarna  makanan  saat  ini  digunakan dalam  upaya  memberikan  kenampakan visual  yang  menarik  pada  makanan. Banyak  kecurangan  yang  dilakukan  oleh produsen untuk menarik konsumen seperti penggunaan  pewarna non  food  grade
atau food  grade dengan  dosis  yang melebihi aturan (Nugraheni, 2013).
Penyalahgunaan  bahan  tambahan pangan  seperti  penggunaan  pewarna rhodamin  B  telah  dilarang  digunakan. Penggunaan pewarna ini banyak ditemukan  pada  produk  makanan  seperti kue-kue  basah,  saus,  sirup,  kerupuk  dan terasi  yang  seharusnya  pewarna  tersebut tidak  diperbolehkan  untuk  makanan.  Ciri- ciri  makanan  yang  mengandung  pewarna rhodamin B yaitu warna akan terlihat lebih cerah  sehingga  tampak  menarik,  jika dicoba  sedikit  rasa  pahit  pada  makanan. Metode  yang  digunakan  dalam  analisis kualitatif rhodamin B yaitu metode kromatografi  lapis  tipis  (KLT).  Prinsip kromatografi  lapis  tipis  dimana  teknik pemisahan  senyawa  berdasarkan  fase diam  berupa  silika  gel  dan  fase  gerak berupa  pelarut.  Keuntungan  dari  metode ini dimana pemeriksaannya dapat dilakukan  dengan  cepat,  mudah  dan menggunakan  peralatan  yang  murah  dan sederhana (Sastrohamidjojo, 2005).
Penelitian yang dilakukan  oleh Kumawa tahun 2013 di Balai Laboratorium Kesehatan  Yogyakarta  ditemukan  50% rainbow cake positif menggunakan rhodamin  B  (Kumawa,  2013).  Hasil pemeriksaan di Balai Laboratorium Kesehatan  Yogyakarta  pada  tanggal  26 November  2014,  menunjukkan  bahwa 44%  jajanan  pasar  (kue  kukus,  aromanis dan kue ku) positif menggunakan rhodamin  B  yang  salah  satunya  kue  ku. Kue  ku  dibuat  dari  campuran  kentang, santan,  tepung  ketan,  garam,  gula  dan pewarna  merah.  Timbul  rasa  gatal  di tenggorokan saat dikonsumsi. Pewarna ini mengandung bahan yang memiliki dampak negatif bahkan dapat
menimbulkan  kanker  (Alsuhendra  dan Ridawati,  2013).  Kue  Ku  terdiri  dari campuran  kacang  hijau  tanpa  kulit  yang sudah  dihaluskan,  gula  pasir,  santan  dan daun  pandan.  Sebagian  warna  merah pada kue ku disebabkan karena penambahan pewarna rhodamin B.
Rhodamin  B  merupakan  salah  satu pewarna  sintetis  berbahaya  yang  sering ditambahkan  pada  makanan  sebagai pewarna,  sehingga  hal  tersebut  menarik peneliti untuk melakukan penelitian apakah  ada  pewarna  rhodamin  B  pada
kue  ku  yang  beredar  di  pasar  tradisional Kabupaten  Sleman,  Yogyakarta.  Kriteria kue  ku  yang  dibeli  yaitu  kue  ku  dengan warna  merah  mencolok.  Pasar  tradisional tersebut  meliputi  pasar  Ngijon,  pasar Godean, pasar Balangan, pasar Gamping, pasar  Ngino,  pasar  Sleman,  pasar  Mlati, pasar  Tempel,  pasar  Prambanan,  pasar Kalasan,  pasar  Maguwo,  pasar  Gentan, pasar  Turi,  pasar  Tanjung  Tirto,  pasar Jangkang, pasar Pakem dan pasar Banjar Harjo.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  merupakan  penelitian deskriptif  dengan  tujuan  mendeskripsikan atau menggambarkan ada tidaknya rhodamin  B  pada  sampel  kue  ku  yang beredar  di  pasar  tradisional  Kabupaten Sleman, Yogyakarta. Metode yang digunakan  untuk  uji  laboratorium  yaitu dengan kromatografi lapis tipis. Penelitian dilakukan  pada  pedagang  yang  menjual kue  ku  yang  beredar  di  pasar  tradisional yang  berada  di  Kabupaten  Sleman, Yogyakarta  kemudian  diuji  di  Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta pada bulan Februari 2015.
Bahan : Kue ku
Reagensia :  NH 4 OH  2%,  NH 4 OH  10% Asam  asetat  10%,  Aquades,  Etanol Metanol dan n-butanol, Standar Rhodamin B
Peralatan: Satu  set  alat  kromatografi lapis  tipis,  neraca, waterbath ,  alat-alat gelas,  kertas  lakmus,  cawan  porselin, benang wool

## Tahap Pelaksanaan Penelitian
a.  Pembuatan standar rhodamin B 25,00 mg bubuk rhodamin B ditimbang, kemudian  dilarutkan  dalam  35  mL methanol
b.  Proses ekstraksi
1)  Sampel  kue  ku  yang  bewarna merah  ditimbang  sebanyak  5  gram dan dimasukkan ke dalam erlemenyer  kemudian  ditambahkan NH 4 OH  2%  dalam  alkohol  70% hingga  sampel  kue  ku  terendam seluruhnya
2)  Residu yang didapatkan dipindahkan kedalam cawan porselin, kemudian diasamkan dengan  penambahan  asam  asetat 10%  hingga  bereaksi  asam  yang ditandai  dengan  perubahan  warna biru  menjadi  merah  pada  kertas lakmus 3)  Benang wool ditambahkan secukupnya,  dikeringkan  di  atas water bath sampai kering
selanjutnya  benang wool dicuci dengan aquades
4)  Benang wool dimasukkan  ke  dalam cawan  porselin,  ditambahkan  5  mL NH 4 OH  10%  sampai  warna  larut, benang wool dibuang  dan  cairan dikeringkan  di  atas water  bath sampai kering
5)  Residu  dilarutkan  dengan  metanol dan  siap untuk  diteteskan  pada  plat KLT
c.  Analisis  mengunakan kromatografi  lapis tipis
1)  Plat KLT disiapkan, chamber dan bahan yang akan digunakan
2)  20  µl  sampel  ditotolkan  dan  standar pembanding  rhodamin  B  dengan  tabung mikrokapiler pada plat KLT dengan jarak 2  cm  dari  bagian  bawah  plat  dan  jarak antar noda 2 cm biarkan hingga kering
3)  Eluen  dibuat  dengan  campuran  n- butanol  :  etanol  :  aquades  (20  :  12  :  5) dengan  total  volume  37  mL,  kemudian dimasukkan dalam chamber
4)  C hamber dijenuhkan  menggunakan kertas  saring,  jika  kertas  saring sudah  basah  menandakan chamber sudah terjenuhkan oleh pelarut
5)  Plat  KLT  dimasukkan  ke  dalam chamber dan diamati
6)  Pelarut  dibiarkan  merambat  dengan jarak rambat elusi 10 cm dari totolan
7)  Setelah  mencapai  jarak  elusi,  plat KLT dikeluarkan dan dikeringkan
8)  Hasil  bercak  warna  yang  timbul pada  plat  KLT  dilihat  dibawah  sinar ultraviolet  kemudian  tandai  bercak menggunakan pensil
9)  Nilai faktor retensi (Rf)

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  yang  berjudul  “Analisis Kualitatif Rhodamin B Pada Kue Ku Yang Beredar  Di  Pasar  Tradisional  Kabupaten Sleman, Yogyakarta” telah dilakukan pada tanggal  6-14  Februari  2015  di  Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta. Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan menggunakan
metode kromatografi  lapis  tipis,  didapatkan  hasil pemeriksaan  kue  ku  positif  mengandung rhodamin  B  sebesar  15,38%  dan  hasil negatif  tidak  mengandung  rhodamin  B sebesar 84,62%.
Identifikasi rhodamin B pada  kue ku yang beredar di pasar tradisional
Kabupaten
Sleman, Yogyakarta menggunakan  metode  KLT.  Terlebih dahulu  dilakukan  survei  sampel  pada pedagang  kue  ku  yang  beredar  di  pasar tradisional Kabupaten Sleman,
Yogyakarta  dan  dilakukan  pembelian sampel  pada  26  pedagang  yang  menjual kue  ku  dengan  kriteria  warna  merah mencolok, kemudian dilakukan pemberian label  pada  setiap  sampelnya.  Sebanyak 26  sampel  kue  ku  ditindaklanjuti  dengan melakukan pemeriksaan di Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta.
Pengkodean  terhadap  sampel  yang  akan diteliti  dilakukan  untuk  mempermudah dalam  proses  identifikasi.  Kode  diberikan berdasarkan  nomor  urut  sampel  yang masuk  di  Balai  Laboratorium  Kesehatan Yogyakarta.
Identifikasi  kue  ku  metode  KLT terlebih dahulu dengan melakukan proses ekstraksi.  Bagian  kulit  dari  kue  ku  yang berwarna  merah  ditimbang  sebanyak  5 gram  dimasukkan  ke  dalam  erlemenyer dan  diberi  kode  sesuai  sampel.  Setiap sampel  kue  ku  ditambahkan  dengan larutan  NH 4 OH  2%,  tujuan  penambahan larutan NH 4 OH 2% yaitu untuk melarutkan pewarna rhodamin B pada sampel kue ku sehingga  warna  merah  akan  terpisah, kemudian  dilakukan  pendiaman  selama  ± 1 jam. Setelah didiamkan selama ± 1 jam cairan yang bewarna merah pada sampel dipindahkan  ke  dalam  cawan  porselin, kemudian ditambahkan asam asetat 10%. Penambahan  asam  asetat  10%  dilakukan dengan  tujuan  untuk  menghilangkan  zat pengganggu  yang  terdapat  pada  sampel
kue  ku  dan  sebagai  pengatur  keasaman dengan menambahkan kertas lakmus biru ke  dalam  sampel.  Sampel  bersuasana asam  yang  ditandai  dengan  terjadi perubahan warna pada kertas lakmus biru menjadi merah.
Sampel  yang  telah  bersuasana asam ditambahkan benang wool, kemudian  dikeringkan  dengan waterbath hingga  kering.  Benang  wool  berfungsi untuk  mengikat  zat  warna  rhodamin  B agar  menempel  dan  berikatan  dengan benang  wool,  pengeringan  bertujuan untuk  menghilangkan  cairan  lain  yang terdapat  pada  sampel  selain  pewarna yang  terkandung  pada  benang  wool. Benang  wool  yang  terdapat  pada  sampel yang  telah  dikeringkan  diambil,  kemudian dicuci dengan aquades untuk membersihkan dari sisa-sisa kotoran yang ikut  bercampur  dalam  cairan.  Benang wool  dimasukkan  ke  dalam  cawan porselin  dan  ditambahkan  NH 4 OH  10% dengan tujuan untuk melarutkan zat warna yang terserap pada benang wool,
kemudian cairan dikeringkan dalam waterbath untuk  mendapatkan  residu. Residu kemudian dilarutkan dengan metanol  dan  siap  ditotolkan  pada  plat KLT,  penambahan  metanol  berfungsi untuk  mengencerkan  zat  warna  yang terkandung  pada  sampel  setelah  proses pengeringan
Residu  yang  didapat  dari  proses pengeringan  dilarutkan  dengan  metanol, kemudian  ditotolkan  pada  fase  diam berupa silika  gel  dengan fase  gerak  yang terdiri  dari  campuran  n-butanol  :  etanol  : aquades  dengan  perbandingan  (20  :  12  : 5). Pemilihan fase gerak didasarkan pada sifat  fisika  dan  kimia  yang  dimiliki rhodamin B yaitu dapat larut dalam air dan menghasilkan fluoresensi bewarna merah. Residu  yang  telah  dilarutkan  dengan metanol  ditotolkan  pada  plat  KLT  secara perlahan  untuk  mendapatkan  hasil  yang baik dengan jarak 2 cm dari bagian bawah plat  dan  jarak  antar  noda  2  cm.
Gambar 1. Proses pemisahan rhodamin B metode KLT Plat silika gel chamber Eluen Garis batas atas Garis batas bawah Standar rhodamin B Sampel kue ku Sampel kue ku
Positif rhodamin B
Fase gerak yang akan digunakan dijenuhkan  terlebih  dahulu  dengan  cara memasukkan  kertas  saring  ke  dalam campuran  n-butanol  :  etanol  :  aquades yang  terdapat  di  dalam chamber ,  jika kertas  saring  sudah  basah  menandakan chamber sudah  terjenuhkan  oleh  pelarut.
Tujuan
penjenuhan untuk menghomogenkan
campuran
dan menghilangkan uap air/gas lain pada fase penyerap  yang  akan  menghalangi  laju eluen. Plat KLT dimasukkan pada chamber yang  sudah  jenuh,  kemudian ditunggu hingga eluen begerak  mencapai garis  batas.  Hasil  pemisahan  rhodamin  B dengan  metode  KLT  terdapat  pada gambar 1.
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan  menggunakan  metode kromatografi  lapis  tipis,  didapatkan  hasil pemeriksaan  sampel  kue  ku  positif mengandung rhodamin B sebesar 15,38% dan  hasil  negatif  tidak  mengandung rhodamin B  sebesar  84,62%  seperti  yang ditunjukkan pada gambar 2.

## Gambar 2. Persentase keberadaan rhodamin B pada kue ku
Hasil  tersebut  bila  dibandingkan dengan penelitian (Kumawa, 2013) dengan  judul  “Identifikasi  Rhodamin  B pada Rainbow  Cake dengan  Metode Kromatografi  Lapis  Tipis  di  Kabupaten Sleman,  Yogyakarta”.  Hasil  penelitian menunjukkan  50%  sampel rainbow  cake positif  mengandung  rhodamin  B.  Hal  ini mengindikasikan  bahwa  sebagian  besar produsen  makanan  telah  mengetahui penggunaan  pewarna  makanan  yang tepat,  dapat  dilihat  dari  penurunan persentase penyalahgunaan pewarna
rhodamin  B  pada  makanan  terutama  di Kabupaten Sleman, Yogyakarta.
Rhodamin B tidak hanya disebabkan oleh  senyawa  organik,  tetapi  dapat disebabkan oleh senyawa anorganik yang terdapat  pada  rhodamin  B.  Rhodamin  B bila terkontaminasi oleh senyawa anorganik  seperti  timbal  dan  arsen menjadikan  pewarna  ini  berbahaya  bila dikonsumsi. Rhodamin B bersifat senyawa halogen yang berasal dari struktur rhodamin  B  yaitu  klorin  (Cl),  dimana  sifat halogen  yaitu  mudah  bereaksi  atau memiliki reaktivitas yang tinggi. Rhodamin B  akan  mencapai  kestabilan  didalam tubuh  dengan  cara  berikatan  dengan senyawa-senyawa  yang  ada  didalam tubuh  sehingga  pada  akhirnya  memicu kanker pada manusia. Ion klorin (Cl) pada suhu kamar akan membentuk gas beracun yang tanpa sengaja terhirup oleh manusia  akan  menyebabkan  kanker. Rhodamin  B  memiliki  senyawa  CH 3 -CH 3 yang  bersifat  radikal  bebas  sehingga didalam  tubuh  akan  berikatan  dengan dengan  protein,  lemak  dan  DNA  didalam tubuh  manusia.  Keberadaan  rhodamin  B pada  makanan  dapat  menimbulkan  efek kronis  apabila  dikonsumsi  dalam  jangka waktu  lama  yang  menyebabkan  kanker (Cahyadi,  2012).  Pencegahan  dalam memilih  produk  makanan  dapat dilakukan dengan cara:
1.  Lebih  teliti  dalam  membeli  produk makanan seperti menghindari jajanan yang  berwarna  terlalu  mencolok terutama jajanan yang dijual di pinggir jalan.
2.  Mengenali  kode  registrasi  produk seperti  produk  makanan  yang  sudah terdaftar  di  Badan  POM  atau  untuk pangan  industri  rumah  tangga  yang sudah terdaftar di Dinas Kesehatan.
3.  Tidak membeli produk makanan yang tidak mencantumkan informasi kandungannya pada bagian label.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## A.Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  “Analisis kualitatif  Rhodamin B  Pada  Kue  Ku  Yang Beredar  Di  Pasar  Tradisional  Kabupaten
85% 15% Keberadaan rhodamin B pada Kue Ku tidak mengandu
ng rhodamin B
Sleman, Yogyakarta” yang
telah dilakukan,  dapat diambil  kesimpulan yaitu 15,38% sampel kue ku positif mengandung rhodamin B.

## B.Saran
Setelah  dilakukan  evaluasi  pada penelitian  ini,  penulis  menyampaikan beberapa  pesan  bagi  pembaca  yang tertarik  untuk  melanjutkan  penelitian  ini. Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut untuk  mengetahui  kandungan  bahan tambahan  lain  seperti  pengawet  dan sakarin yang terdapat pada kue ku.

## DAFTAR PUSTAKA
Alsuhendra.,  Ridawati.,  2013, Bahan Toksik  Dalam  Makanan, PT  Remaja Rosdakarya  Offset,  Bandung  :  Hal. 17, 134-135, 241-242.
Cahyadi,  W.,  2012, Analisis  dan  Aspek Kesehatan Bahan Tambahan Pangan ,   terbitan  ke-3,  PT  Bumi
Aksara Jakarta : Hal. 1-2, 61. Kumawa, P., 2013, “Identifikasi Rhodamin B  Pada  Rainbow  Cake  Dengan Kromatografi Lapis Tipis Di Kabupaten Sleman Yogyakarta”,
Karya  Tulis  Ilmiah STIKES  Guna Bangsa Yogyakarta.
Nugraheni,  M.,  2013, Pewarna  Alami
Sumber dan Aplikasinya pada
Makanan  &  Minuman ,  Graha  Ilmu,
Yogyakarta : Hal 1. Saparinto,  C.,  Hidayati,  D.,  2006, Bahan Tambahan Pangan , Penerbit Kanisius, Yogyakarta : Hal. 55
Sastrohamidjojo,  H.,  2005, Kromatografi, Liberty Yogyakarta : Hal. 5, 35.