## Rakyat Direktorat Jenderal Cipta Karya. (2017).
Petunjuk  Teknis  Tempat  Pengolahan  Sampah (TPS) 3R Primasari,  Indri.  (2010).  Perencanaan  Pengelolaan Sampah  Terpadu  Berbasis  3R  di  Kecamatan Ngaliyan. Tugas Akhir . Universitas Diponegoro. Raharjo,  Slamet.  (2017).  Development  of  3R Waste Treatment  Facilities  for  Mitigating  Greenhouse Gas  emission:  A  Case  Study  of  Padang  City, Indonesia. ARPN Journal of Engineering and Applied Sciences . Vol. 12 (12): 3789-3794 Raharjo,  Slamet;  Ihsan,  Taufiq;  dan  yuned,  Sri
Rahmiwati. (2016). Pengembangan Pengelolaan Sampah Perkotaan dengan Pemanfaatan Sampah Berbasis Masyarakat. Jurnal Dampak. Vol.13 (1): 10-25
Rakhmawati,  Arna  Puji;  Soemitro  Ria  A.A.;  dan Warmadewanthi,  I.D.A.A.  (2016).  Waste management  Analysis  At  TPS  3R  Mandiri Sejahtera Singosari Malang. The 2nd International  Conference  on  Civil  Engineering Research (ICCER) 2016. p 65-70 Sahwan,  Firman  L.  (2010).  Tempat  Pengolahan Sampah  Terpadu  (TPST),  Urgensi  dan Implementasinya. JRL . Vol.6 (2): 151-157
Subekti,  Sri.  (2010).  Pengelolaan  Sampah  Rumah Tangga  3R  Berbasis  Masyarakat.  Prosiding Seminar Nasional Sains dan Teknologi 2010. p
24-30 Undang-Undang Republik Indonesia Nomor 18 Tahun 2008 tentang Pengelolaan Sampah

## Ekstraksi Satu Tahap Pada Makroalga Basah dan Kering Sebagai Bahan Baku Biodiesel
Vera Viena 1,* , Bahagia 2 , Restu Ginanjar Wibowo 3
1,2,3 Program Studi Teknik Lingkungan, Universitas Serambi Mekkah Jl. Tgk Imum Lueng Bata, Batoh, Kota Banda Aceh, Indonesia 23245 * Koresponden email : veraviena@serambimekkah.ac.id
Diterima: 21 Maret 2019 Disetujui: 29 Maret 2019

## Abstract
Macroalgae has potency to expand as one of alternatives for feedstock of biodiesel. The research has aim to  extract  the  wet  and  dried  macroalgae  using  one  step  method.  Extraction  was  done  by  comparing  the conventional methods of Bligh-Dyer, sochletation to one steps method. One step extraction method resulting a higher total lipid in wet biomass (49.67 % W.W) than dried biomass (45.67 % D.W), while conventional methods of sokhletation and Bligh-Dyer resulting total lipids of 37.67% and 39.33% Wet Weight (W.W); and 45.67% and 40.67% Dried weight (D.W), respectively. Identification of oil/lipid content of the macroalgae extract  using  Gas  chromatography  showed  3  highest  peak  e.i  which  contained  9- Octadecanoic acid (Z), methyl ester ( Asam oleat ) of 52.44 % area, 9-12,Octadecadienic, (Z.Z) ( Asam linoleat ) of 22.12 % area and Octadecanoic acid, (CAS) methyl stearate, of 20.36 % area. Those three main fatty acid compounds were commonly found in algae oil and had great potention to be used as one of alternative feedstock for biodiesel. Keywords: Macroalgae, extraction, one step method, fatty acid of algae.
Abstrak Makroalga sangat berpotensi dikembangkan di Indonesia sebagai alternatif bahan baku biodiesel masa depan. Penelitian ini bertujuan untuk mengekstraksi makroalga basah dan kering dengan metode satu tahap sebagai bahan baku biodiesel. Ekstraksi dilakukan dengan membandingkan proses ektraksi konvensional sokhletasi, Bligh-Dyer  dan  metode  satu  tahap.    Metode  ekstraksi  satu  tahap  menghasilkan  total  lipida  lebih  tinggi dalam bentuk biomassa basah  (49,67% BB) dibandingkan biomassa kering (45,67%). Sedangkan Metode konvensional sokletasi dan Bligh Dyer menghasilkan kandungan total lipida sebesar 37.67 % dan 39.33 % Berat kering (BB) dan sebesar 45,67 dan 40,67 % (BK). Hasil identifikasi senyawa minyak/lemak pada ekstrak makroalga menggunakan alat Gas Chromatography menunjukkan hasil 3 puncak tertinggi, yaitu mengandung senyawa 9- Octadecanoic acid (Z), methyl ester ( Asam oleat ) sebesar 52,44 % area, 9-12,Octadecadienic, (Z.Z) ( Asam linoleat ) sebesar 22,12 % area dan Octadecanoic acid, (CAS) methyl stearate, sebesar 20,36 % area. Ketiga asam lemak ini merupakan komponen utama yang umumnya terdapat didalam minyak nabati alga dan berpotensi besar untuk dimanfaatkan sebagai bahan baku biodiesel.
Kata kunci : makroalga, ekstraksi, metode satu tahap, asam lemak alga.
1. Pendahuluan Dewasa ini kebutuhan akan minyak bumi sebagai sumber bahan bakar semakin meningkat. Hal ini dapat dilihat dari data BPH Migas tentang jumlah konsumsi Bahan Bakar Minyak (BBM) nasional pada tahun 2014 lalu untuk Jenis BBM Tertentu (JBT) sudah mencapai 47.789.625,18 L per tahun. Terjadi peningkatan jika dibandingkan  pada  tahun  2009,  kebutuhan  akan Jenis  BBM  Tertentu  (JBT)  di  Indonesia  berkisar 37.836.379,19 L per tahun nya (www.bphmigas.go.id). Akan tetapi ketergantungan akan sumber energi dari minyak bumi ini tidak diimbangi dengan kepedulian
bahwa sumber energi dari fosil ini terbatas jumlahnya dan suatu saat dapat habis. Selain itu, minyak bumi merupakan salah satu sumber energi yang tidak dapat diperbarui  karena  membutuhkan  waktu  yang  sangat lama untuk beregenerasi.
Salah satu contoh dari vegetable oil adalah minyak dari alga. Alga merupakan salah satu sumber biodiesel yang  paling  baik.  Untuk  luas  tempat  penumbuhan yang  sama,  alga  dapat  menghasilkan  minyak  (yang kemudian  dapat  diolah  menjadi  biodiesel)  250  kali lebih  banyak  daripada  minyak  yang  dihasilkan  oleh tanaman  hasil  pertanian  (Susanto,  2012).  Ekstraksi
minyak dari alga juga sangat sederhana. Salah satu alga  yang  dapat  digunakan  untuk  biodiesel  adalah Makroalga.
Makroalga  atau  rumput  laut  adalah  ganggang multiseluler  yang  hidup  di  perairan  laut  yang tergolong dalam divisi Thallophyta . Makroalga belum terdeferensiasi menjadi akar, batang, dan daun seperti lazimnya  tanaman  tingkat  tinggi  (Dawes,  1998). Makroalga  banyak  mengandung  senyawa  organik yang sangat penting dalam dunia obat-obatan maupun dunia mikrobia (Winarno, 1990).
Makroalga  dapat  ditemukan  di  habitat  yang memiliki salinitas, temperatur, intensitas cahaya dan nutrisi  yang  cukup.  Selain  itu  sebaran  makroalga dapat  ditemukan  di  seluruh  perairan  laut  yang memiliki terumbu karang. Kadar salinitas yang baik untuk makroalga pada umumnya yaitu 30-35 permil sedangkan  untuk  temperatur  25-29 o C, kedalaman minimal  sekitar  50  cm  dan  mendapatkan  arus  yang cukup  yaitu  sekitar  0,2-0,4  m/detik  (Nugroho  dan Agung, 2010).
Makroalga terkenal sebagai bahan baku untuk makanan, obat-obatan dan untuk kosmetik, selain itu  berpotensi  sebagai  penghasil  biodiesel  karena makroalga dapat memproduksi biomasssa yang cukup signifikan yaitu 1-2 ton selain itu makroalga mudah dibiakkan di tempat yang tidak banyak membutuhkan pupuk,  proses  pemanenan  makroalga  lebih  mudah dibanding  dengan  mikroalga.  Proses  pemanenan mikroalga  dengan  menggunakan  teknik  flokulasi, sentrifugasi  dan  filtrasi  sedangkan  pemanenan makroalga  hanya  butuh  dipetik  saja  tidak  serumit pemanenan  untuk  mikroalga  (Ariyanti,  2012). Karakteristik ini membuat makroalga menjadi sumber energi yang cocok di masa mendatang (Narsi, 2007).
Untuk mendapatkan minyak dari proses ekstraksi makroalga  beberapa  metode  telah  digunakan,  dan diantara metode konvensional yang sering digunakan dalam proses ekstraksi untuk mikroalga adalah metode Folch , Bligh Dyer dan Soxhletasi .  Berdasarkan Axelsson  (2014),  p erbedaan  utama  antara  protokol Folch et al. (1957) dan Bligh dan Dyer (1959) adalah volume sistem pelarut terhadap jumlah sampel, rasio antara  pelarut  dalam  sistem,  dan  ada  atau  tidaknya NaCl dalam fraksi air yang ditambahkan. Metode Bligh dan Dyer (1959) menggunakan ekstraksi dengan penambahan  kloroform-metanol  1:2  dan  1:1  (v/v), jumlah volume akhir setara dengan empat kali jumlah sampel. Penggunaan kloroform yang bersifat beracun telah  banyak  dikembangkan  untuk  dapat  digantikan dengan  sistem  pelarut  lain  sebagai  alternatif  dari metode  konvensional,  tetapi  ini  umumnya  kurang efisien untuk ekstraksi total  lipid basah dan sensitif
terhadap  kadar  air  dalam  sampel  (Fishwick  dan Wright,  1977).  Metode  konvensional  berbasis kloroform  dianggap  unggul  untuk  ekstraksi  total lipid, tetapi mereka juga memiliki kelemahan karena membutuhkan tenaga dan memakan waktu, sehingga membatasi jumlah perlakuan sampel. Namun sampai saat ini belum ada penelitian tentang ekstraksi lipida makroalga menggunakan metode konvensional dan metode satu tahap, karena umumnya metode tersebut hanya dipakai pada ekstraksi lipida mikroalga. Untuk itu,  peneliti  mencoba  membandingan  penggunaan metode ekstraksi lipida mikroalga terhadap makroalga hijau lokal perairan Aceh.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  membandingkan aplikasi  proses  ekstraksi  konvensional  Bligh-Dyer dan Sokhletasi dengan metode satu tahap ( one step ) pada  makroalga  basah  dan  kering  sebagai  alternatif bahan  baku  biodiesel.  Metode  Satu  Tahap  adalah metode lanjutan dari metode Bligh Dyer dengan penambahan  pelarut  kloroform,  metanol  dan  katalis sebesar 4% ke dalam labu operasi untuk memperoleh ekstrak  lipida  secara  total.  Diharapkan  metode  satu tahap ini dapat diterapkan untuk ekstraksi makroalga dalam bentuk basah maupun kering, sehingga dapat dijadikan  sebagai  dasar  untuk  alternatif  pengolahan bahan baku biodiesel.

## 2. Metode Penelitian
1.  Biomassa dan Preparasi Sampel
Makroalga  lokal  diperoleh  dari  perairan  Banda Aceh dibudidayakan dalam fotobioreaktor denga aerasi dalam kondisi pencahayaan 24 jam (suhu  28-30 o C dan kultivasi di Laboratorium Lingkungan,  Universitas  Serambi  Mekkah). Dengan media perikanan dan aerasi 10 L / mnt, mikroalga  mencapai  akhir  pertumbuhan  fase log dan dipanen pada hari ke 6. Untuk ektraksi lipida, Makroalga diperoleh dengan sentrifugasi suspensi  (pada  4.500  rpm  selama  10  menit) diikuti oleh liofilisasi. Sedangkan untuk ekstraksi makroalga basah diperoleh dengan filtrasi setelah 6  hari  kultivasi  dan  diperas  untuk  mengurangi kandungan air.
Untuk studi transesterifikasi, sel liophilized dari makroalga digunakan.  Semua  sampel  disimpan pada suhu 4 o C sampai digunakan.
2.  Metode dan Ekstraksi Lipida Berbagai  metode  ekstraksi  seperti  ekstraksi Soxhlet dan Bligh Dyer diuji cobakan untuk melihat efeknya pada hasil dan komposisi lipida yang  diekstraksi.  Prosedur  dan  kondisi  yang diperiksa untuk setiap metode disediakan sebagai
minyak dari alga juga sangat sederhana. Salah satu alga  yang  dapat  digunakan  untuk  biodiesel  adalah Makroalga.
Makroalga  atau  rumput  laut  adalah  ganggang multiseluler  yang  hidup  di  perairan  laut  yang tergolong dalam divisi Thallophyta . Makroalga belum terdeferensiasi menjadi akar, batang, dan daun seperti lazimnya  tanaman  tingkat  tinggi  (Dawes,  1998). Makroalga  banyak  mengandung  senyawa  organik yang sangat penting dalam dunia obat-obatan maupun dunia mikrobia (Winarno, 1990).
Makroalga  dapat  ditemukan  di  habitat  yang memiliki salinitas, temperatur, intensitas cahaya dan nutrisi  yang  cukup.  Selain  itu  sebaran  makroalga dapat  ditemukan  di  seluruh  perairan  laut  yang memiliki terumbu karang. Kadar salinitas yang baik untuk makroalga pada umumnya yaitu 30-35 permil sedangkan  untuk  temperatur  25-29 o C, kedalaman minimal  sekitar  50  cm  dan  mendapatkan  arus  yang cukup  yaitu  sekitar  0,2-0,4  m/detik  (Nugroho  dan Agung, 2010).
Makroalga terkenal sebagai bahan baku untuk makanan, obat-obatan dan untuk kosmetik, selain itu  berpotensi  sebagai  penghasil  biodiesel  karena makroalga dapat memproduksi biomasssa yang cukup signifikan yaitu 1-2 ton selain itu makroalga mudah dibiakkan di tempat yang tidak banyak membutuhkan pupuk,  proses  pemanenan  makroalga  lebih  mudah dibanding  dengan  mikroalga.  Proses  pemanenan mikroalga  dengan  menggunakan  teknik  flokulasi, sentrifugasi  dan  filtrasi  sedangkan  pemanenan makroalga  hanya  butuh  dipetik  saja  tidak  serumit pemanenan  untuk  mikroalga  (Ariyanti,  2012). Karakteristik ini membuat makroalga menjadi sumber energi yang cocok di masa mendatang (Narsi, 2007).
Untuk mendapatkan minyak dari proses ekstraksi makroalga  beberapa  metode  telah  digunakan,  dan diantara metode konvensional yang sering digunakan dalam proses ekstraksi untuk mikroalga adalah metode Folch , Bligh Dyer dan Soxhletasi .  Berdasarkan Axelsson  (2014),  p erbedaan  utama  antara  protokol Folch et al. (1957) dan Bligh dan Dyer (1959) adalah volume sistem pelarut terhadap jumlah sampel, rasio antara  pelarut  dalam  sistem,  dan  ada  atau  tidaknya NaCl dalam fraksi air yang ditambahkan. Metode Bligh dan Dyer (1959) menggunakan ekstraksi dengan penambahan  kloroform-metanol  1:2  dan  1:1  (v/v), jumlah volume akhir setara dengan empat kali jumlah sampel. Penggunaan kloroform yang bersifat beracun telah  banyak  dikembangkan  untuk  dapat  digantikan dengan  sistem  pelarut  lain  sebagai  alternatif  dari metode  konvensional,  tetapi  ini  umumnya  kurang efisien untuk ekstraksi total  lipid basah dan sensitif
terhadap  kadar  air  dalam  sampel  (Fishwick  dan Wright,  1977).  Metode  konvensional  berbasis kloroform  dianggap  unggul  untuk  ekstraksi  total lipid, tetapi mereka juga memiliki kelemahan karena membutuhkan tenaga dan memakan waktu, sehingga membatasi jumlah perlakuan sampel. Namun sampai saat ini belum ada penelitian tentang ekstraksi lipida makroalga menggunakan metode konvensional dan metode satu tahap, karena umumnya metode tersebut hanya dipakai pada ekstraksi lipida mikroalga. Untuk itu,  peneliti  mencoba  membandingan  penggunaan metode ekstraksi lipida mikroalga terhadap makroalga hijau lokal perairan Aceh.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  membandingkan aplikasi  proses  ekstraksi  konvensional  Bligh-Dyer dan Sokhletasi dengan metode satu tahap ( one step ) pada  makroalga  basah  dan  kering  sebagai  alternatif bahan  baku  biodiesel.  Metode  Satu  Tahap  adalah metode lanjutan dari metode Bligh Dyer dengan penambahan  pelarut  kloroform,  metanol  dan  katalis sebesar 4% ke dalam labu operasi untuk memperoleh ekstrak  lipida  secara  total.  Diharapkan  metode  satu tahap ini dapat diterapkan untuk ekstraksi makroalga dalam bentuk basah maupun kering, sehingga dapat dijadikan  sebagai  dasar  untuk  alternatif  pengolahan bahan baku biodiesel.

## 2. Metode Penelitian
1.  Biomassa dan Preparasi Sampel
Makroalga  lokal  diperoleh  dari  perairan  Banda Aceh dibudidayakan dalam fotobioreaktor denga aerasi dalam kondisi pencahayaan 24 jam (suhu  28-30 o C dan kultivasi di Laboratorium Lingkungan,  Universitas  Serambi  Mekkah). Dengan media perikanan dan aerasi 10 L / mnt, mikroalga  mencapai  akhir  pertumbuhan  fase log dan dipanen pada hari ke 6. Untuk ektraksi lipida, Makroalga diperoleh dengan sentrifugasi suspensi  (pada  4.500  rpm  selama  10  menit) diikuti oleh liofilisasi. Sedangkan untuk ekstraksi makroalga basah diperoleh dengan filtrasi setelah 6  hari  kultivasi  dan  diperas  untuk  mengurangi kandungan air.
Untuk studi transesterifikasi, sel liophilized dari makroalga digunakan.  Semua  sampel  disimpan pada suhu 4 o C sampai digunakan.
2.  Metode dan Ekstraksi Lipida Berbagai  metode  ekstraksi  seperti  ekstraksi Soxhlet dan Bligh Dyer diuji cobakan untuk melihat efeknya pada hasil dan komposisi lipida yang  diekstraksi.  Prosedur  dan  kondisi  yang diperiksa untuk setiap metode disediakan sebagai
berikut.  Untuk  semua  metode,  setiap  ekstrak disaring menggunakan kertas saring untuk menghilangkan residu biomassa. Larutan yang disaring  kemudian  diuapkan,  dan  lemak  kasar yang tersisa diukur secara gravimetri. a.  Ekstraksi Soxhlet Ekstraksi soxhlet diasumsikan sebagai metode yang dapat sepenuhnya mengekstraksi semua lipida  yang  disajikan  dalam  mikroalga, menghasilkan  pemulihan  100%.  Dengan demikian,  jumlah  lipida  yang  diekstraksi dari  metode  lain  dilaporkan  berdasarkan pada yang diekstraksi dengan metode ini. Di sini,  3  gram  ganggang  diekstraksi  selama  4 jam  dengan  180  ml  pelarut  dalam  peralatan Soxhlet . Efek dari dua pelarut yang berbeda dipelajari,  yaitu  hexane  dan  campuran khloroform  dan  methanol    pada  2:1  (v/v). Rasio ini dikembangkan oleh Folch et al., (1957)  berdasarkan  pada  prinsip  bahwa pelarut  ekstraksi  lipida  harus  cukup  polar untuk menghilangkan lipida dari hubungannya dengan membran sel dan konstituen jaringan tetapi juga tidak begitu polar sehingga pelarut tidak siap. larutkan semua triasilgliserol dan lipida nonpolar lainnya.
b. Bligh Dyer
Sel alga basah yang dipanen dikeringkan dan dihancurkan dengan mortar dan dipindahkan kedalam  corong  pemisah.  Lipid  diekstraksi dengan larutan kloroform metanol (2:1, v/v) dan terpisah menjadi lapisan cairan kloroform dan metanol dengan penambahan metanol dan air  untuk  menghasilkan  rasio  pelarut  akhir dari kloroform : metanol : air sebesar 1:1:0.9. Lapisan kloroform dicuci dengan 20 ml larutan NaCl 5%, dan diuapkan sampai kering, total lipid ditentukan secara gravimetri. c. Metode Satu Tahap Metode  Satu-Tahap  dilakukan  dengan  3 gram  ganggang  kering  dan/atau  (ganggang basah)  dimasukkan  ke  dalam  labu,  di  mana katalis,  alkohol  dan  pelarut  ditambahkan untuk  memungkinkan  ekstraksi  lipida dan  transesterifikasi  berlangsung  secara bersamaan. Untuk membandingkan kinerjanya dengan  produksi  biodiesel  Dua-Tahap konvensional, kondisi yang dipilih digunakan untuk  kedua  metode,  yaitu  transesterifikasi pada  4%  katalis,  rasio  alkohol  terhadap biomassa 16:1 (v/w) dan waktu reaksi 2 jam. Setelah reaksi biomassa disaring dengan kertas Whatman (Prommuak et al , 2012).
3.  Analisis Ekstrak Lipida dari Berbagai Pelarut Untuk  memilih  pelarut  yang  cocok  untuk ekstraksi  lipida  mikroalga,  lipida  mentah  yang diekstraksi  oleh  heksana  dan  C/M  dikonversi menjadi biodiesel. Jumlah biodiesel dianalisis oleh  GC-MS  mengikuti  metode  standar AOAC (2005).  Persamaan  yang  digunakan  untuk menghitung  berat  ekstrak  lipida  adalah  sebagai berikut:
Yield = % 100 ker min x ing biomassa berat yak berat ............................ (1) Yield = % 100 min x basah biomassa berat yak berat ............................ (2) 4.  Transesterifikasi Lipida Mikroalga a.  Produksi Biodiesel Konvensional Dua Tahap Dalam produksi Dua-Tahap, transesterifikasi dilakukan  pada  lipida  yang  sebelumnya diekstraksi dari 3 gram ganggang kering dengan  rasio  kloroform/methanol  (C/M) menggunakan  peralatan Soxhlet , mengikuti metode yang dijelaskan sebelumnya. Ke dalam sebuah bejana yang dilengkapi dengan kondensor, minyak yang diekstraksi diisi bersama dengan larutan alkosida dari katalis alkali  KOH  (Merck,  Jerman)  (2-8%  dari berat  ganggang)  dan  metanol  pada  berbagai metanol  menjadi  alga  biomassa  (v/w)  rasio (8:1,  12:1  dan  16:1).  Campuran  dipanaskan sampai  suhu  terkontrol  60 o C. Reaksi dibiarkan berlangsung selama 1, 2, 3 atau 4 jam. Labu didinginkan hingga suhu kamar untuk menghentikan reaksi (Prommuak et al , 2012). Pemisahan fase selanjutnya dilakukan mengikuti metode Folch et al. (1957). Di sini, kloroform dan air ditambahkan ke dalam campuran  dengan  perbandingan  campuran: kloroform : air 10:10:9. Setelah dikocok dengan  kuat,  campuran  disentrifugasi  pada 2000  rpm  selama  10  menit,  menghasilkan pemisahan menjadi dua fase. Metanol, gliserol produk  samping  dan  polar  lainnya  pengotor yang dilarutkan dalam air membentuk fase atas sementara  ester  metil  asam  lemak  (FAME), asam lemak bebas (FFA), lipid dan senyawa non-polar lainnya terlarut dengan baik dalam fase  dasar  kloroform,  yang  dikumpulkan untuk analisis GC lebih lanjut.
b.  Produksi Biodiesel Satu Tahap Metode  Satu-Tahap  dilakukan  dengan  3 gram  ganggang  kering  dan/atau  ganggang
basah dimasukkan ke dalam labu, di mana katalis,  alkohol  dan  pelarut  ditambahkan untuk  memungkinkan  ekstraksi  lipida dan  transesterifikasi  berlangsung  secara bersamaan. Untuk membandingkan kinerjanya dengan  produksi  biodiesel  Dua-Tahap konvensional, kondisi yang dipilih digunakan untuk  kedua  metode,  yaitu  transesterifikasi pada  4%  katalis,  rasio  alkohol  terhadap biomassa 16:1 (v/w) dan waktu reaksi 2 jam. Setelah reaksi, biomassa disaring oleh kertas Whatman  No.  5.  Pemisahan  fase  dilakukan dan produk biodiesel dikumpulkan mengikuti metode yang dijelaskan sebelumnya.
5.  Analisis GC Biodiesel
Produk  yang  diperoleh  dari  percobaan Transesterifikasi  Lipida  Mikroalga    dianalisis untuk jumlah FAME menggunakan Kromatografi Gas  (GC),  Shimadzu  GC-14B,  dilengkapi dengan  detektor  ionisasi  nyala  (FID)  di  mana 0,1  mikroliter  sampel  diinjeksikan  ke  dalam kolom.  Pemisahan  sampel  produk  dicapai  oleh kolom  kapiler,  25  m  (panjang),  0.32  mm,  0.3 μm (ketebalan film). Suhu injektor dan detektor masing masing diatur pada 270 o C dan 300 o C. Program  suhu  elusi  memiliki  suhu  awal  100 o C tahan selama 5 menit sebelum melandai secara linear dengan laju 10 o C  /  menit  hingga suhu akhir 250 o C. Temperatur  akhir  kemudian ditahan selama 20 menit, sehingga total jangka
waktu 40 menit. Hasil analisis sampel dihitung menggunakan  metil  heptadekanoat  sebagai standar internal.

## 3.   Hasil Dan Pembahasan
3.1 Hasil ekstraksi lipida makroalga
Ekstraksi  lipid  adalah  salah  satu  proses  yang paling  penting  dan  terbatas  untuk  produksi  biofuel berbasis mikroalga dalam skala besar. Metode konvensional  untuk  ekstraksi  lipid  umumnya melibatkan pengeringan sebelum mengekstraksi lipid karena sisa air dalam biomassa mikroalga basah dapat menghambat  perpindahan  massa  lipida  dari  sel  dan akibatnya menyebabkan penurunan efisiensi ekstraksi lipid  (Yang et al ,  2014).  Penelitian  ini  mencoba membandingkan  metode  ekstraksi  lipida  untuk mikroalga  dengan  penerapan  pada  makroalga  yang banyak  tersebar  di  perairan  Indonesia.  Penggunaan metode  konvensional  Folch,  Bligh  -  Dyer  dan Sokhletasi adalah sudah umum dalam ektraksi mikroalga,  tetapi  pada  penelitian  ini  kami  mencoba mengaplikasikan  metode  tersebut  untuk  ekstraksi makroalga dari ganggang hijau lokal Aceh dengan harapan kandungan total lipida memiliki karakteristik hampir sama dengan kandungan lipida mikroalga.
Pada  Tabel  1  ditabulasikan  hasil  perbandingan ektraksi  total  lipida  menggunakan  metode konvensional  Sokletasi  dan  Bligh-Dyer  dan  satu tahapan.  Hasil  ektraksi  konvensional  menunjukkan kandungan  total  lipida  makroalga  basah  dan  kering sedikit  berbeda,  dimana  untuk  proses  sokletasi  total lipida  sebesar  37.67  %  B.B  dan  45.67  B.K.  Untuk metode Bligh – Dyer lipida diperoleh 39.33 % B.B dan 40.67 % B.K. Perbandingan dengan metode satu tahap menunjukkan  kenaikan  kandungan  total  lipida  yang sedikit lebih signifikan (45.67 % B.K dan 49.67 % B.B) dibandingan metode konvensional, dimana setengah dari berat sampel telah dapat diekstrak total lipidanya.
Tabel 1 . Hasil ektraksi total lipida makroalga
Catatan: BB = Berat Basah; dan BK = Berat Kering
Tabel 2 . Profil Asam Lemak Makroalga Hasil Ekstraksi Satu-Tahap
basah dimasukkan ke dalam labu, di mana katalis,  alkohol  dan  pelarut  ditambahkan untuk  memungkinkan  ekstraksi  lipida dan  transesterifikasi  berlangsung  secara bersamaan. Untuk membandingkan kinerjanya dengan  produksi  biodiesel  Dua-Tahap konvensional, kondisi yang dipilih digunakan untuk  kedua  metode,  yaitu  transesterifikasi pada  4%  katalis,  rasio  alkohol  terhadap biomassa 16:1 (v/w) dan waktu reaksi 2 jam. Setelah reaksi, biomassa disaring oleh kertas Whatman  No.  5.  Pemisahan  fase  dilakukan dan produk biodiesel dikumpulkan mengikuti metode yang dijelaskan sebelumnya.

## 5.  Analisis GC Biodiesel
Produk  yang  diperoleh  dari  percobaan Transesterifikasi  Lipida  Mikroalga    dianalisis untuk jumlah FAME menggunakan Kromatografi Gas  (GC),  Shimadzu  GC-14B,  dilengkapi dengan  detektor  ionisasi  nyala  (FID)  di  mana 0,1  mikroliter  sampel  diinjeksikan  ke  dalam kolom.  Pemisahan  sampel  produk  dicapai  oleh kolom  kapiler,  25  m  (panjang),  0.32  mm,  0.3 μm (ketebalan film). Suhu injektor dan detektor masing masing diatur pada 270 o C dan 300 o C. Program  suhu  elusi  memiliki  suhu  awal  100 o C tahan selama 5 menit sebelum melandai secara linear dengan laju 10 o C  /  menit  hingga suhu akhir 250 o C. Temperatur  akhir  kemudian ditahan selama 20 menit, sehingga total jangka
waktu 40 menit. Hasil analisis sampel dihitung menggunakan  metil  heptadekanoat  sebagai standar internal.

## 3.   Hasil Dan Pembahasan 3.1 Hasil ekstraksi lipida makroalga
Ekstraksi  lipid  adalah  salah  satu  proses  yang paling  penting  dan  terbatas  untuk  produksi  biofuel berbasis mikroalga dalam skala besar. Metode konvensional  untuk  ekstraksi  lipid  umumnya melibatkan pengeringan sebelum mengekstraksi lipid karena sisa air dalam biomassa mikroalga basah dapat menghambat  perpindahan  massa  lipida  dari  sel  dan akibatnya menyebabkan penurunan efisiensi ekstraksi lipid  (Yang et al ,  2014).  Penelitian  ini  mencoba membandingkan  metode  ekstraksi  lipida  untuk mikroalga  dengan  penerapan  pada  makroalga  yang banyak  tersebar  di  perairan  Indonesia.  Penggunaan metode  konvensional  Folch,  Bligh  -  Dyer  dan Sokhletasi adalah sudah umum dalam ektraksi mikroalga,  tetapi  pada  penelitian  ini  kami  mencoba mengaplikasikan  metode  tersebut  untuk  ekstraksi makroalga dari ganggang hijau lokal Aceh dengan harapan kandungan total lipida memiliki karakteristik hampir sama dengan kandungan lipida mikroalga.
Pada  Tabel  1  ditabulasikan  hasil  perbandingan ektraksi  total  lipida  menggunakan  metode konvensional  Sokletasi  dan  Bligh-Dyer  dan  satu tahapan.  Hasil  ektraksi  konvensional  menunjukkan kandungan  total  lipida  makroalga  basah  dan  kering sedikit  berbeda,  dimana  untuk  proses  sokletasi  total lipida  sebesar  37.67  %  B.B  dan  45.67  B.K.  Untuk metode Bligh – Dyer lipida diperoleh 39.33 % B.B dan 40.67 % B.K. Perbandingan dengan metode satu tahap menunjukkan  kenaikan  kandungan  total  lipida  yang sedikit lebih signifikan (45.67 % B.K dan 49.67 % B.B) dibandingan metode konvensional, dimana setengah dari berat sampel telah dapat diekstrak total lipidanya.
Tabel 1 . Hasil ektraksi total lipida makroalga
Catatan: BB = Berat Basah; dan BK = Berat Kering
Tabel 2 . Profil Asam Lemak Makroalga Hasil Ekstraksi Satu-Tahap
Hal  ini  dipengaruhi  oleh  penggunaan  pelarut  dan juga semua pelarut, serta katalis KOH kedalam labu operasi sehingga memungkinkan untuk mengekstrak secara keseluruhan kandungan total lipida makroalga basah.  Makroalga  dalam  pelaksanaan  ektraksi  lebih mudah  untuk  diekstraksi  karena  sel-sel  pengotor lebih  sedikit  dibandingkan  dengan  penanaman  pada limbah cair atau limbah artificial lainnya. Selain itu, penggunaan  makaroalga  basah  lebih  efisien  untuk diterapkan  dimasa  depan  karena  tidak  memerlukan penggunaan energi untuk pengeringan.
3.2  Analisa asam lemak makroalga
Tabel  2.  menunjukkan  hasil  identifikasi  senyawa minyak/lemak  menggunakan  alat  GC  dengan  hasil grafik  5  puncak.  Tiga  puncak  tertinggi  diketahui mengandung  senyawa  9- Octadecanoic acid (Z), methyl ester ( Asam oleat )  sebesar  52.44  %  area, 9-12,Octadecadienic, (Z.Z) methyl ester ( Asam linoleat ) sebesar 22.12 % area dan Octadecanoic acid,
(CAS) methyl stearate, sebesar 20.36 % area. Pada  kajian  yang  dilakukan  oleh  Knothe  (2005) disebutkan  berat  molekul  metil  oleat  (asam  oleat) yang  dihasilkan  adalah  sebesar  282.468  gram/mol yang berkorelasi dengan salah satu asam lemak yang berpotensi  sebagai  salah  satu  bahan  baku  biodiesel berdasarkan  sifat  fisik  asam  lemak  yang  dihasilkan. Ketiga asam lemak ini merupakan komponen utama yang  umumnya  terdapat  didalam  minyak  alga  dan berpotensi  untuk  dimanfaatkan  sebagai  bahan  baku biodiesel.  Selain  itu  juga  dapat  diketahui  bahwa asam oleat termasuk salah satu senyawa lemak yang berperan  cukup  penting  dalam  pembentukan  asam- asam lemak bebas makroalga, dikarenakan prosentase methyl oleat (asam oleat) yang cukup tinggi (52.44%) dibandingkan senyawa asam  lemak lainnya.
Asam lemak jenuh tidak memiliki ikatan yang solid, sedangkan asam oleat merupakan asam lemak tidak jenuh yang memiliki satu ikatan yang kuat (juga  digambarkan  sebagai  olefin). Asam  lemak  tak jenuh ganda seperti asam linolenat mengandung dua atau  lebih  ikatan  padat.  Asam  laurat  (juga  disebut asam dodecanoic) adalah asam utama dalam minyak kelapa  (45-50%)  dan  minyak  sawit  (45-55%) (http:chemicalland21.com).
Hasil identifikasi profil asam lemak menunjukkan bahwa  proses  ektraksi  satu  tahap  menghasilkan kandungan asam lemak yang tinggi dengan kandungan asam oleat sebesar 52.44 % area dengan berat molekul rata-rata asam lemak yang dihasilkan dari ekstraksi satu  tahap  makroalga  basah  adalah  282.77  gram/ mol (Tabel 2), dan berada dalam range berat molekul asam lemak metil ester. Dengan ini dapat disimpulkan
bahwa  proses  ektraksi  satu  tahap  pada  makroalga basah  berpotensi  dan  dapat  diterapkan  dimasa  yang akan datang untuk memproduksi bahan baku biodiesel skala besar dari makroalga, terutama makroalga dalam bentuk basah dengan kandungan air tinggi.

## 4. Kesimpulan
Proses  ekstraksi  satu  tahap  berpotensi  untuk digunakan sebagai salah satu metode untuk ekstraksi lipida  makroalga  baik  dalam  bentuk  basah  maupun kering. Terbukti dari profil asam lemak yang dihasilkan yaitu Asam oleat sebesar 52.44 % area, Asam linoleat sebesar 22.12 % area dan Octadecanoic acid, (CAS) methyl  stearate,  sebesar  20.36  %  area.  Ketiga  asam lemak ini berpotensi sebagai bahan baku biodiesel.

## 5. Ucapan Terimakasih
Ucapan terima kasih kami yang sebesarnya kepada mahasiswa  dan  laboran  Teknik  Lingkungan  yang telah  banyak  membantu  dalam  pengambilan  sampel makroalga dan karakterisasi makroalga perairan lokal Aceh.
6. Daftar Pustaka AOAC, 2005, Official  method  of  Analysis . 18th Edition,  Association  of  Officiating  Analytical Chemists, Washington DC
Ariyanti, D. dan Handayani N. A. 2012. Mikroalga Sebagai Sumber Biomassa Terbarukan : Teknik Kultivasi  dan  Pemanenan. Skripsi . Fakultas Teknik  Kimia.  Universitas  Dipenegoro. Semarang.
Axelsson,  M.  2014.  A  Single-Step  Method  for Rapid  Extraction  of  Total  Lipids  from  Green Microalgae. Plos One . 9 Bligh,  E.G.;  Dyer,  W.J.  1959.  A  rapid  method  of total  lipid  extraction  and  purification. Can. J. Biochem. Physiol. 37 , 913–917. Dawes, J. 1998. Marine Botany . University of Florida. Florida. Fishwick.  M.J,  Wright  A.J  (1977)  Comparison  of methods  for  the  extraction  of  plant  lipids. Phytochemistry 16: 1507–1510.
Folch ,  J.  M.  Less,  G.H.S  Stanley,  1957.  A  simple method  for  the  isolation  and  purification  of total lipids from animal tissues. J. Biol. Chem ., 226. Knothe,  G.  2005.  Dependence  of  biodiesel  fuel properties  on  the  structure  of  fatty  acid  alkyl esthers, Fuel Processing Technology . 86. 1059- 1070. Narsi. 2007. Oilgae Guide to Fuels from Macroalgae . A Report by Oilgae. Tamilnadu. India.
Nugroho, A. 2010. Rumput Laut. Laboratorium Budidaya Perairan .  Fakultas  Perikanan  dan Ilmu  Kelautan.  Universitas  Diponegoro. Semarang.
Prommuak,  C.  Pasavati,  P.  Quintain,  A.T.  Goto,
M.  Shotipruk,  A.  2012.  Microalgal  Lipid Extraction  and  Evaluation  of    Single-Step Biodiesel Production. Engineering Journal. Vol 16 Issue 5. Susanto,    E.,  2012.  Pembuatan  Biodiesel  Dari Alga Nannochloropsis sp dalam Prosiding Seminar Nasional Teknik Kimia Soebardjo
Brotohardjono Ix. Jawa Timur: Program Studi Teknik Kimia UPN Veteran.
Winarno,  F.G.  1990. Teknologi Pengolahan Rumput
Laut . Pustaka Sinar Harapan.Jakarta. Yang, F., Xiang W., Sun X., Wu H., Li T., and Long,
L . 2014.  A  Novel  Lipid  Extraction  Method from Wet Microalga Picochlorum sp. at Room Temperature. Marine drugs. 12. 1258-1270 http://www.bphmigas.go.id/konsumsi-bbm-nasional [diunduh 9 Januari 2019].
http://chemicalland21.com/index.html  [diunduh  18
Januari 2019]