## KUALITAS SPERMATOZOA KAMBING BOERAWA DAN KAMBING KACANG PADA PENGGUNAAN TRIS-KUNING TELUR YANG BERBEDA
Rahmiyanti Ismet Inonie 1 , La Ode Baa 2 , Takdir Saili 2
1) Alumnus Fakultas Peternakan UHO
2) Staf Pengajar Fakultas Peternakan UHO

## ABSTRAK
Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengkaji  pengaruh  interaksi  antara  bangsa  kambing  dan konsentrasi pengencer Tris-Kuning Telur terhadap kualitas spermatozoa. Penelitia n ini menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL) Pola  Faktorial  dengan  2  faktor  x  4  perlakuan  dengan  4  ulangan. Faktor pertama adalah jenis kambing, yaitu kambing Kacang (K1) dan kambing Burawa (K2) sedang Faktor kedua adalah pengencer Tris-Kuning Telur yang terdiri atas 4 (empat) konsentrasi kuning telur yang  berbeda  yaitu  5%  (P1),  10%  (P2),  15%  (P3)  dan  20% (P4). Parameter  yang  diukur  adalah evaluasi kualitas semen segar secara makroskopis kambing Burawa dan kambing Kacang terdiri atas : volume, warna, bau dan derajat keasaman (pH) dan secara mikroskopis  terdiri atas : gerak massa, konsentrasi, persentase spermatozoa hidup, persentase motilitas dan persentase membran plasma utuh. Hasil penelitian    menunjukan karakteristik  semen  segar  kambing  Boerawa dan kambing Kacang kualitasnya hampir sama. Interaksi  perlakuan  bangsa  kambing  dan  konsentrasi  pengencer Tris-Kuning  Telur  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  kualitas  spermatozoa  kambing.Faktor konsentrasi  pengencer  Tris-Kuning  Telur  secara  mandiri  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  kualitas spermatozoa kambing. Rataan persentase membran plasma utuh spermatozoa kambing Kacang nyata lebih  baik  dibandingkan  kambing  Boerawa  setelah  pengenceran. Penurunan  persentase  motilitas spermatozoa  selama  4  hari  penyimpanan  pada  suhu  3-5 o C  lebih  rendah  pada  kambing  Kacang dibandingkan  pada  kambing  Boerawa. Konsentrasi  pengencer  Tris-Kuning  Telur  10% mampu mempertahankan motilitas spermatozoa kambing lebih baik dibandingkan konsentrasi pengencer yang lain,konsentrasi  pengencer  Tris-Kuning  Telur  15%  mampu  mempertahankan  persentase  MPU spermatozoa dibandingkan konsentrasi yang lain selama 4 hari penyimpanan pada suhu 3-5 o C.
Kata kunci : Kualitas spermatozoa, kambing Burawa, kambing Kacang,  pengencer TRIS .

## ABSTRACT
This  research  was  aimed  to  investigate  interaction  effect  of  goat  breed  and  concentration of Tris-yolk diluents on spermatozoa quality.  This study was using completely randomized design with factorial  pattern  2  factors  x  4  treatments  with  4  repetitions.    First  factor  was  type  of  goat,  that  is Kacang goat (K1) and Boerawa goat (K2).  Second factor was Tris-yolk diluents consist of 4 different concentration of yolk, that is 5% (P1), 10% (P2), 15% (P3),  and 20% (P4). Parameters observed were macroscopic  evaluation  of  cement  quality  of  Boerawa  and  Kacang  goat  consist  of  volume,  color, odor,  and  acidity  (pH),  and  by  microscopic  evaluation  consist  of  mass  motion,  concentration, percentage  of  living  spermatozoa,  motility,  and  intact  plasma  membrane.    Result  of  this  research showed  that  cement  characteristic  of  Boerawa  and  Kacang  goat  has  similar  quality.    Treatment interaction  of  goat  breed  and  diluents  concentration  of  Tris-yolk  has  no  real  effect  on  spermatozoa quality of goat.  Factor of diluents Tris-yolk concentration itself has no real effect on quality of goat spermatozoa.    The  average  of  intact  plasma  membrane  of  Kacang  goat cement  was  better  be compared with Boerawa goat after dilution.  Reduction of spermatozoa motility percentage for 4 days storage  at  3-5°C  was  lower  on  Kacang  goat  be  compared  with  on  Boerawa  goat.    Concentration  of Tris-yolk  diluents  10%  could  keep  spermatozoa  motility  of  goat  better  than  other  concentration  of diluents.  Concentration  of Tris-yolk  diluents  15%  could  keep  percentage  of  spermatozoa  MPU  than other concentration for 4 days storage at 3-5°C of temperature.
Key words: spermatozoa quality, Boerawa goat, Kacang goat, and Tris diluents

## PENDAHULUAN
Kambing  atau  sering  dikenal  sebagai ternak  ruminansia  kecil  merupakan  ternak herbivora  yang  sangat  populer  di  kalangan petani. Menurut  data  statistik  peternakan dan  kesehatan  hewan tahun  2015  (Dirjen PKH,  2015),  populasi  ternak  kambing  di Indonesia sampai dengan tahun 2015 tercatat sebanyak  18.880.000  ekor.    Angka  tersebut mengalami peningkatan sebanyak  1.934.000 ekor  atau  (2.85%  per  tahun)  sejak  tahun 2011  yang  hanya  berjumlah  16.946.000 ekor.    Perkembangan  populasi  kambing nasional  tersebut  juga  mirip  dengan  kondisi populasi  ternak  kambing  di  Sulawesi Tenggara. Berdasarkan data statistik peternakan dan kesehatan hewan tahun 2015,  populasi  ternak  kambing  di  Sulawesi Tenggara pada tahun 2015 sebanyak 144.383 ekor,  sedangkan  populasi  ternak  kambing pada  tahun  2011  hanya  berjumlah    124.113 ekor atau meningkat sebesar 4,1% per tahun (Dirjen  PKH,  2015).    Hal  ini  menunjukkan bahwa rataan perkembangan populasi ternak kambing  di  Sulawesi Tenggara  masih  lebih tinggi  dibandingkan  dengan  perkembangan populasi  ternak  kambing  secara  nasional. Namun  demikian,  potensi  wilayah  yang  ada di Sulawesi
Tenggara masih mengindikasikan belum optimalnya
pemanfaatan  lahan  untuk  produksi  ternak kambing.      Oleh  karena  itu,  peluang peningkatan  populasi  dan  produktivitas ternak  kambing  masih  terbuka  lebar  melalui perbaikan sistem pemeliharaan dan penerapan bioteknologi, khususnya bioteknologi reproduksi.
Salah satu upaya yang dapat dilakukan untuk meningkatkan populasi dan produktivitas  ternak  kambing  di  Sulawesi Tenggara adalah dengan menerapkan metode kawin  silang  menggunakan  jenis  kambing yang telah terbukti mempunyai produktivitas tinggi, seperti kambing Boerawa. Pamungkas  dkk.  (2008)  menyatakan  bahwa kambing Boerawa merupakan kambing tipe pedaging yang baik dengan bobot lahir 3 – 4 kg dan laju pertambahan bobot badan harian sekitar 140-250  g/hari/ekor. Walaupun kambing  Boerawa  mempunyai  produktivitas
yang  tinggi,    akan  tetapi  kambing  Boerawa mempunyai  sisi  kelemahan  dalam  proses perkawinan  dengan  kambing  kacang.  Postur kambing kacang yang relatif kecil dibandingkan  dengan  kambing  Boerawa menyebabkan  sulitnya  melakukan  kawin alam pada kedua jenis kambing ini, sehingga kawin dengan menggunakan metode inseminasi  buatan  (IB)  merupakan  satu pilihan yang harus ditempuh.
Teknologi  IB  diharapkan  mampu mengoptimalkan  penggunaan  semen  karena semen dari seekor pejantan dapat digunakan untuk  mengawini  lebih banyak  betina. Program  IB  akan  berhasil  dengan  baik apabila  spermatozoa  diproduksi  dalam jumlah  dan  kualitas  yang  baik  (Toelihere, 1993). Program  IB  dapat  berkembang, diperlukan semen beku sehingga semen yang berasal  dari  pejantan-pejantan  unggul  dapat disimpan  dalam  waktu  yang  lama  dan didistribusikan ke berbagai wilayah (Amalia, 2002).  Namun  di  lain  pihak,  penerapan teknologi  IB  dengan  menggunakan  semen beku  pada  kambing  belum  menunjukkan hasil yang memuaskan. Salah satu penyebab rendahnya angka kebuntingan kambing pada program IB adalah rendahnya kualitas semen beku  yang  digunakan  (Alawiyah  dan Hartono, 2006).
Semen  yang  digunakan  pada  program IB dapat berupa semen cair atau semen beku. Proses produksi semen cair dan semen beku merupakan  hal  yang  sangat  kritis  untuk mendapatkan  spermatozoa  dengan  kualitas yang  masih  memenuhi  standar  untuk pelaksanaan  IB.    Salah  satu  faktor  yang menentukan di dalam proses produksi semen cair  dan  beku  adalah  pemilihan  pengencer yang tepat.
Pengenceran semen  merupakan  salah satu  tahap  yang  penting  dalam prosedur pengemasan  semen  beku.  Syarat  penting yang  harus  dimiliki  pengencer  yang  baik yaitu  (1)  murah,  sederhana,  praktis  dan mempunyai  daya  preservasi  yang  tinggi,  (2) mengandung unsur-unsur  yang hampir sama sifat  fisik  dan  kimiawinya  dengan  semen, dan  (3)  dapat  mempertahankan  dan  tidak membatasi daya spermatozoa.

## METODE PENELITIAN A. Waktu dan Tempat
Penelitian  ini  dilaksanakan selama  4 (empat) bulan di Laboratorium Unit
Pelaksanaan
Teknis
Daerah (UPTD)
Perbibitan  Ternak  dan  Pakan  Ternak, Dinas Pertanian  dan Peternakan  Provinsi  Sulawesi Tenggara  yang  berlokasi  di  Desa  Morome, Kecamatan  Konda,  Kabupaten  Konawe Selatan.

## B. Materi Penelitian
Materi  penelitian yang  digunakan pada  penelitian  ini  terdiri  atas  semen dan pengencer  Tris-kuning  telur. Semen diperoleh dari 5 ekor kambing  berumur 1-3 tahun terdiri atas  1  ekor  kambing  betina sebagai  pemancing,  dan  4  ekor kambing jantan  masing-masing  2  ekor  kambing Kacang dan  2  ekor  Boerawa.    Semua kambing  dipelihara  di Laboratorium Unit Pelaksanaan Teknis
Daerah (UPTD) Perbibitan dan Pakan Ternak Dinas
Pertanian  dan Peternakan  Provinsi  Sulawesi
Tenggara.  Bahan  pengencer  semen  yang digunakan  adalah    pengencer Tris Kuning Telur.
Alat yang  digunakan  pada  penelitian ini yaitu mikroskop, vagina buatan, mikropipet, haemocytometer, kertas indikator pH,  water  bath,  lemari  es, gelas enlemeyer,  gelas  ukur,  gelas  objek, gelas penutup,  spoit,  tissue,  lampu  bunsen,  dan alat tulis.
C. Desain Penelitian Desain percobaan yang  digunakan adalah Rancangan  Acak Lengkap Pola Faktorial 2  x  4 dengan 4  ulangan.  Faktor pertama adalah jenis kambing, yaitu kambing  Boerawa  (K1)  dan  kambing Kacang (K2), sedangkan faktor kedua adalah pengencer Tris-Kuning  Telur yang  terdiri atas 4 (empat) konsentrasi kuning telur yang berbeda, yaitu 5% (P1), 10% (P2), 15% (P3), dan 20% (P4).  Ringkasan  struktur  data penelitian ini dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Kombinasi Perlakuan Jenis Ternak dan Bahan Pengencer
Jenis Kambing Pengencer Tris-Kuning Telur Total P1 P2 P3 P4 K1 Y11 Y12 Y13 Y14 Y1. K2 Y21 Y22 Y23 Y24 Y2. Total Y.1 Y.2 Y.3 Y.4 Y.. Keterangan : K1  = Kambing Burawa
K2  = Kambing Kacang P1   = Pengencer Tris-Kuning Telur 5% P2   = Pengencer Tris- Kuning Telur 10%
P3   = Pengencer Tris-Kuning Telur 15% P4   = Pengencer Tris-Kuning Telur 20% Y1. = Total pengaruh Jenis Kambing K1 Y2. = Total pengaruh Jenis Kambing K2 Y.1 = Total pengaruh pengencer P1 Y.2 = Total pengaruh pengencer P2 Y.3 = Total pengaruh pengencer P3
Y.4 = Total pengaruh pengencer P4 Y..  = Total pengaruh kedua faktor
Model matematik yang mendasari desain ini yaitu:
Y ijk = μ + A i + B j + AB ij + є ijk i = 1, 2, 3,............,a j = 1,2,3...........,b dan k =1.2.3,.......u Keterangan :
Y ijk : Pengamatan Faktor A taraf ke-i, Faktor B taraf ke-j dan Ulangan ke-k µ : Rataan Umum
A : Pengaruh Faktor A pada taraf k - i B j : Pengaruh Faktor B pada taraf ke-j AB ij : Interaksi antara Faktor A dengan Faktor B Є ijk : Pengaruh galat Faktor A taraf ke-i, Faktor B taraf ke-j dan ulangan ke-k
D. Prosedur Penelitian
1. Pembuatan Pengencer
Pengencer dibuat  dengan beberapa tahapan sebagai berikut :
(1) Menimbang 1,3g  Tris  Aminomethan,
0,7g  asam  sitrat  dan  laktosa  1,5g, kemudian  dimasukan ke dalam  100  ml erlenmeyer;
(2)  Tambahkan  ke  dalam  erlenmeyer fruktosa  dan  kuning  telur  sesuai perlakuan
masing-masing secara terpisah,  kemudian  tambahkan  dengan aquades  steril  80  ml  ke  dalam  masing- masing  perlakuan  lalu  dihomogenkan dengan magnetic stirer selama 5 menit;
(3)  Gelas  erlenmeyer  yang  berisi  kuning telur  dan  fruktosa,    laktosa  (sesuai perlakuan)  dimasukan ke dalam  panci berisi air dan dimasak di atas nyala api, biarkan  sampai  mendidih  lalu  diangkat.
Setelah  suhu  bahan  mencapai  37 0 C tambahkan dengan 0,1g pennicilin,  0,1g streptomicin kemudian dihomogenkan;
(4) Masukan  masing-masing  5%  (5g),  10% (10g),  15%  (15g), 20%  (20g)      kuning telur  ke  dalam  campuran  pengencer sehingga  diperoleh  4  perlakuan.    Tiap bahan  perlakuan  dimasukan ke dalam tabung  reaksi  kemudian  dihomogenkan selama  5  menit  dan  ditutup  dengan aluminium  foil  dan  disimpan di dalam refrigerator;
(5)  Endapan  dari  pengencer  akan  terbentuk setelah 2-3 jam penyimpanan. Supernatan  dipisahkan  dari  endapan dengan menggunakan pipet; dan
(6) Setiap  perlakuan  diperiksa  pH-nya,  pH pengencer yang baik berkisar 6,2 -6,8.
2. Penampungan Semen Penampungan semen dilakukan dengan  menggunakan  vagina  buatan  pada temperatur  yang  stabil dan  dilaksanakan antara pukul  07.30 – 10.00  pagi  (WITA).
Secara  detail  proses  penampungan  semen dijelaskan  sebagai  berikut.    Penampungan semen  diawali  dengan  mempersiapkan betina  pemancing  pada  kandang  jepit  dan vagina  buatan  untuk  menampung  semen. Selanjutnya  kambing  jantan  yang  akan ditampung  semennya  diarahkan  ke  betina pemancing    yang  sudah  siap  dikandang penampungan  semen.    Pada  saat  kambing jantan  mengalami  ereksi,  maka  penis kambing tersebut diarahkan ke dalam tabung vagina  buatan  yang  dikendalikan  oleh seorang  petugas.    Vagina  buatan  dilengkapi dengan tabung sperma  yang terbungkus rapi agar  terlindung  dari  kontak  langsunng
dengan  matahari.    Semen  yang  sudah ditampung, selanjutnya di bawah ke laboratorium untuk dievaluasi.
3. Evaluasi Semen Segar
Evaluasi semen segar meliputi evaluasi secara makroskopik dan mikroskopik. Evaluasi  makroskopik  meliputi  :  volume, warna,  bau  dan  ph.  Sedangkan  evaluasi secara  mikroskopik    meliputi:  gerakan massa,  konsentrasi,  persentase  motilitas, persentase  spermatozoa  hidup,  persentase membran plasma utuh (MPU).

## 4. Pengenceran Semen
Semen  segar  yang  telah  dievaluasi  dan layak  untuk  diproses  lanjut  diencerkan dengan tahapan sebagai berikut :
a. Penyediaan pengencer Tris-Kuning Telur
Pengencer Tris-Kuning Telur
dicampurkan  dengan  konsentrasi  kuning telur  yang  berbeda-beda  sesuai  dengan perlakuan,  yaitu  5%  (P1),  10%  (P2), 15% (P3) dan 20% (P4).
b. Pengenceran semen Semen diencerkan dengan terlebih dahulu mencampur semen dan Pengencer Tris-Kuning  Telur dengan  perbandingan 1:1.  Campuran semen tersebut kemudian dimasukkan  ke  dalam  kulkas  untuk penyesuaian  suhu.    Selanjutnya  semen tersebut  ditambahkan  pengencer  Tris kuning telur sehingga konsentrasi akhirnya menjadi 100 x 10 6 spermatozoa/ml.

## 5. Pemeriksaan  Kualitas  Semen  Setelah Pengenceran
Pemeriksaan  kualitas  semen  setelah pengenceran hanya dilakukan secara mikroskopik  meliputi  :  persentase  motilitas dan persentase  membran plasma utuh.
6. Parameter yang diamati
Parameter yang diamati pada penelitian ini adalah sebagai berikut :
a. Penilaian  secara  makroskopik  meliputi  : volume, warna, bau dan pH semen.
b. Penilaian secara mikroskopik meliputi  :  gerakan massa,  konsentrasi spermatozoa, persentase motilitas, persentase membran plasma utuh. Sedangkan  kualitas  spermatozoa  setelah pengenceran,
pengamatan
secara
mikroskopis  hanya  terbatas  pada  persentase motilitas dan persentase  membran  plasma utuh.
a. Gerakan  massa spermatozoa  diketahui dengan cara membuat tetesan semen pada gelas  obyek kemudian  diamati  dibawah mikroskop  dengan  menggunakan  lensa obyektif 10X.
Gerakan massa dikategorikan  ke  dalam  tiga  golongan, yaitu  1)  pergerakan  massa  spermatozoa menyerupai  awan  tebal  dan  bergerak cepat  (+++),  2)  pergerakan  massa spermatozoa  menyerupai awan  tebal tetapi  bergerak  agak  lambat  (++),  3) pergerakan massa spermatozoa menyerupai  awan  tipis  dan  bergerak lambat (+). b. Evaluasi konsentrasi spermatozoa dilakukan dengan menggunakan haemocytometer  dan  evaluasi  dilakukan di bawah mikroskop dengan menggunakan lensa obyektif 10x.
Perhitungan dilakukan terhadap spermatozoa  yang  terdapat  pada  lima kotak teracak.  Jumlah spermatozoa  yang dihitung  pada  lima  kotak  tersebut  (Sh) merupakan  faktor  yang  dipergunakan dalam mengestimasi konsentrasi spermatozoa dengan menggunakan rumus (Hafez, 1987) sebagai berikut :
KS  =  Sh x FM x P Keterangan: KS : kosentrasi spermatozoa Sh      : jumlah  spermatozoa  yang  terhitung pada haemocytometer FM : faktor multiplikasi P : pengenceran
c. Persentase  motilitas  spermatozoa dapat diketahui  dengan  cara  mengestimasi persentase  spermatozoa  yang  bergerak progresif  ke  depan  di  bawah  mikroskop dengan  pembesaran  10x40.    Skala penilaian  berkisar  antara  0%  (tidak  ada spermatozoa  yang  bergerak)  sampai 100%  (semua  spermatozoa  bergerak progresif ke depan).  Penilaian persentase hidup  spermatozoa  dilakukan  dengan menggunakan zat pewarna eosin.  Sampel semen  ditetaskan  pada  gelas  obyek,
ditambahkan satu tetas eosin dan dicampur  secara  homogen  lalu  dibuat preparat  ulas.    Preparat  ulas  tersebut dikeringkan  di  atas  lampu  bunsen  dan selanjutnya  dilakukan  pengamatan  di bawah  mikroskop  dengan  pembesaran 10x40.  Pengamatan dilakukan pada lima lapang  pandang  dan  menghitung  jumlah spermatozoa  yang  kepalanya  berwarna merah  dan  yang  tidak  berwarna  merah. Spermatozoa  yang  kepalanya  berwarna merah  digolongkan  sebagai  spermatozoa mati, sedangkan spermatozoa yang kepalanya tidak berwarnna merah digolongkan  sebagai  spermatozoa  hidup. Persentasi  hidup  spermatozoa  dihitung dengan  menggunakan  rumus  sebagai berikut :
d. Persentase  membran  plasma  utuh  (MPU) diketahui  dengan  cara    membuat  larutan hipotonik (NaCl 0,032 M dengan tekanan osmotik  53-63  m0smol/1)  (Saili  dkk. 2006).    Evaluasi  membran  plasma spermatozoa yang utuh dilakukan dengan cara  menghitung  jumlah  spermatozoa yang  ekornya  melingkar  dan  yang  tidak melingkar.    Spermatozoa  yang  ekornya melingkar dikategorikan sebagai spermatozoa  yang  membran  plasmanya masih utuh, sedangkan spermatozoa yang ekornya  tidak  melingkar  dikategorikan sebagai  spermatozoa  yang  membran plasmanya  tidak  utu  lagi.    Evaluasi persentase membran plasma utuh dilakukan  dengan  menghitung  jumlah spermatozoa  pada  lima  lapang  padang  di bawah mikroskop, lalu ditentukan dengan menggunakan rumus :

## 7. Analisis Data
Data hasil penelitian dianalisis
menggunakan sidik ragam dan perbedaan antar perlakuan diuji menggunakan metode Uji Beda Nyata Terkecil/ BNT (Hanafiah, 2008).

## HASIL DAN PEMBAHASAN A. Kualitas Semen Segar Kambing Boerawa dan Kambing Kacang
Kualitas  semen  dan  spermatozoa kambing  Boerawa dan kambing Kacang yang dievaluasi meliputi kualitas makroskopis  (volume,  warna,  bau dan  pH) dan  mikroskopis  (gerak  massa, konsentrasi, persentase  spermatozoa  hidup, permentase
motilitas, persentase keutuhan  membran plasma).

## B. Evaluasi Semen Kambing secara Makroskopis
Hasil  evaluasi  karakteristik  semen kambing Boerawa dan kambing  kambing Kacang secara makroskopis selama penelitian  ditampilkan  pada  Tabel  5.1.

## Tabel 5.1. Perbandingan  Karakteristik  Semen  Kambing Boerawa  dan kambing Kacang Secara Makroskopis
Parameter Bangsa Kambing Boerawa Kacang Volume (ml) 1,86±0,55 1,08±0,15 Warna Krem Krem Bau Khas Khas pH 6,2±0,25 6,4±0,26 C. Volume Semen. Data  pada  Tabel  3 menunjukkan bahwa rataan volume  semen kambing Boerawa adalah 1,86 ml/ejakulasi sedangkan rataan  volume  semen kambing  Kacang sedikit  lebih  rendah yaitu  1,08  ml/ejakulasi. Hasil ini sesuai dengan pendapat Pamungkas et  al., (2008)  bahwa  volume  semen  segar kambing  Boerawa dengan  kambing  Kacang yaitu  0,77-0,83  ml/ejakulat  dan  0,69-1,03 ml/ejakulat  (Hastonoet  al., 2002). Beberapa laporan  menunjukkan  bahwa volume  semen kambing Boerawa yaitu 0,69-1,03 ml/ejakulat  (Hastonoet  al.,  2002)  dan 0,53±0,21  ml/ejakulat  (Mahmalia et  al., 2006). Beragamnya volume semen ini selain dipengaruhi oleh perbedaan rumpun kambing, dapat  pula  dipengaruhi  cara pengambilan, frekuensi  penampungan  dan umur  kambing, berat,  status  kesehatan  dan kualitas makanan (Setiadi et al., 2002).

## D. Warna Semen
Hasil pemeriksaan makroskopis semen segar  kambing  Boerawa  dan  kambing Kacang  menunjukkan  warna  putih  krem, ini menunjukkan bahwa  semen  tersebut  masih dalam  kisaran  normal. sesuai  pendapat Gardner  dan  Hafez  (2008)  rata-rata  warna semen  yang  baik  adalah  warna  putih kekuningan  atau  krem jika  berwarna  hijau kekuning-kuningan berarti mengandung
kuman pseudomonas  aeruginosa, semen yang  berwarna  merah  berarti  mengandung darah  dan  semen  yang  berwarna  coklat berarti  semen  tersebut  mengandung  darah yang  telah  membusuk. Warna  semen  pada penelitian  ini  sama  dengan  penelitian  yang dilakukan oleh Triwulanningsih et al. (2013) dan Pamungkas et al. (2008) pada kambing adalah warna putih kekuningan (krem).

## E. Bau Semen
Bau  semen  segar  kambing  Boerawa dan  kambing  Kacang  pada  saat  penelitian didapatkan  bahwa  bau  khas  ternak.  Bau tersebut menunjukkan semen tersebut dalam keadaan normal dan tidak terdapat kontaminasi. Semen dengan keadaan normal umumnya  mempunyai  bau  yang  khas disertai  bau  dari  hewan  tersebut.  Sesuai dengan  pendapat  Kartasudjana  (2001)  yang menyebutkan bahwa semen normal umumnya  memiliki  bau  yang  khas  dari hewan  tersebut.  apabila  terdapat  bau  busuk menunjukkan  semen  bercampur  dengan nanah.

## F. Derajat Keasaman (pH) Semen.
Hasil  pengamatan  terhadap  pH  semen kambing  Boerawa  dan  kambing  Kacang adalah 6,2±0,25  dan  6,4±0,26. Dari  data tersebut nilai derajat keasaman masih berada pada  kisaran  pH  semen  kambing  yang
normal  yaitu  6,2-6,8  (Susilawati.  2011). Taringan  (2004)  menyatakan  pH  semen segar untuk kambing berkisar antara pH 5,9- 7,3. Suyadi et  al., (2004) menambahkan bahwa  derajat keasaman  (pH)  semen kambing Boer relatif normal yaitu berkisar antara 6,4-7,6.

## G. Evaluasi Semen Kambing secara Mikroskopis
Perbandingan  Karakteristik  Semen Kambing Boerawa dan Kambing Kacang Secara MikroskopisDisajikan pada Tabel 5.2 Tabel 5.2. Perbandingan  Karakteristik  Semen  Kambing Boerawa dan Kambing Kacang SecaraMikroskopis Parameter Bangsa Kambing Boerawa Kacang Gerakan Massa +++ +++ Konsentrasi (10 9 /ml) 4,38±0,98 4,52±0,12 Persentase Spermatozoa Hidup (%) 96,28±0,24 93,43±1,20 Persentase Motilitas (%) 85,0±0,15 85,0±1,40 Persentase MPU (%) 96,4±0,86 95,1±0,42

## H. Gerakan Massa.
Gerakan massa  memberikan  gambaran tentang  daya  gerak  spermatozoa secara massal  yaitu semakin  tebal  dan  besar gelombang  serta  pergerakannya  semakin cepat menandakan kualitasnya baik (Tambing et  al., 2000).  Gerakan  massa spermatozoa  mempunyai  kecenderungan untuk  bergerak  bersama-sama  ke  satu  arah membentuk  gelombang-gelombang  yang tebal  dan  tipis, bergerak  cepat  atau  lambat, tergantung  konsentrasi  spermatozoa  hidup. Hasil  pengamatan  menunjukkan  bahwa gerakan massa spermatozoa kambing Boerawa dan Kacang sama-sama mempunyai kualitas yang sangat baik (+++).

## I. Konsentrasi.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa konsentrasi  spermatozoa  kambing Boerawa (4,38x10 9 /ml) sedikit lebih rendah dibandingkan  dengan kambing  Kacang (4,52x10 9 /ml).    Hasil  yang  di  peroleh  tidak jauh  berbeda  dengan  laporan Mahmilia et al., (2006)  dan  Hartono  (2008) yang menyetakan  bahwa konsentrasi  spermatozoa kambing berturut-turut sebesar 2,58x10 9 /mldan  4,24x10 9 /ml. Perbedaan konsentrasi  spermatozoa  ini  kemungkinan disebabkan oleh perbedaan
rumpun kambing. Husin dkk. (2007)  menyebutkan bahwa  konsentrasi spermatozoa dipengaruhi
oleh    pakan, bangsa  ternak, umur, suhu  dan frekuensi ejakulasi.

## J. Persentase Spermatozoa Hidup.
Persentase spematozoa hidup kambing Boerawa  dan kambing Kacang yang diperoleh pada penelitian ini yaitu 96,28±0,24%  dan  93,43±1,20%. Hasil  ini hampir  sama  dengan  penemuan  Hartono (2008)  dengan  persentase  hidup  sebesar 92,9%, Demikian halnya dengan Husin dkk. (2007)  menyebutkan  bahwa  nilai persentase spermatozoa  hidup semen  segar  kambing Boer  sebesar  83,64±0,65%. Persentase spermatozoa  hidup merupakan  salah  satu parameter  penentu  kualitas  semen karena dari  persentase spermatozoa  hidup dapat diketahuiberapa  persen  spermatozoa  yang hidup.  Nilai persentase  spermatozoa  hidup berhubungan erat dengan kemampuan fertilisasi  spermatozoa.  Bila  nilai persentase spermatozoa  hidup tinggi  maka  kemampuan fertilitas akan tinggi. Penentuan spermatozoa yang hidup dapat dilakukan dengan pewarnaan eosin negrosin, kemudian diamati menggunakanmikroskop  perbesaran  400x. Bila  semen  dicampur  dengan  zat  warna tersebut maka spermatozoa hidup tidak akan menyerap warna (Partodihardjo, 1992).
K. Persentase Motilitas.
Hasil  yang  didapat  pada  penelitian untuk persentase motilitas spermatozoa kambing Boerawa  adalah 85,0±0,15%, sedangkan kambing Kacang adalah 85,0±1,40%. Hasil  yang  diperoleh  tidak jauh  berbeda  dengan  hasil  penelitian Pamungkas et  al., (2008)  bahwa  rataan persentase  motilitas  kambing  kacang  adalah 88,57±7,85%    sedangkan  kambing  Boer sebesar    87,00±8,66%. Motilitas  individu sangat  penting  dilakukan  untuk  mengetahui kualitas  semen  segar.  Motilitas  tinggi  akan memberikan  peluang  terjadinya  fertilisasi lebih  besar  dibanding  dengan  semen motilitas  rendah.  Persentase  spermatozoa motil yang bergerak progresif dapat digunakan sebagaiukuran kesanggupan untuk  membuahi          ovum  (Setiadi  dkk. 2002).
L. Persentase Membran Plasma Utuh (MPU).
Kualitas spermatozoa juga dapat diukur dengan mengetahui keutuhan membran  plasma.  Hasil  pemeriksaan  MPU yang  didapatkan pada  kambing  Boerawa adalah 96,4±0,86%. Hasil tersebut tidak jauh berbeda dibandingkan dengan  kambing
Kacang 95,1±0,42%.      Penelitian    ini    jauh lebih   baik dengan laporan Tambing et al., (2003)  yaitu 82,40±5,08%.  Secara  fisiologi terdapat  hubungan antara  membran  plasma utuh  dengan  motilitas dan  daya  hidup spermatozoa. Apabila terjadi kerusakan pada membran plasma dapat menyebabkan hilangnya  enzim-enzim  yang diperlukan dalam  proses  metabolisme  sehingga tidak dihasilkan energi sehingga motilitas menjadi rendah serta  daya  hidup  juga  rendah (Rizal et  al., 2003).  Beberapa  hal  yang  dapat mempengaruhi perbedaan kualitas spermatozoa secara  keseluruhan  antara  lain faktor  individu, pakan, lingkungan, teknik dan  frekuensi  koleksi semen  serta  kondisi media  pengencer  di antaranya  pH  dan tekanan osmotik.

## M. Kualitas Spermatozoa Setelah
Pengenceran 1. Persentase Motilitas Spermatozoa Kambing Burawa Dan Kacang Hasil pengamatan motilitas
spermatozoa  didapatkan  rataan motilitas spermatozoa  setelah diberi pengencer Tris Kuning  Telur yang  berbeda selama  4  hari.
Seperti  yang  tercantum  pada  Tabel  5.3

## Tabel 5. 3. Rataan Persentase Motilitas Spermatozoa Setelah Pengenceran (%)
Bangsa Kambing Pengencer Tris-Kuning Telur Rataan Total 5% 10% 15% 20% K1 82,02 83,97 84,15 83,49 83,41 333,63 K2 83,67 84,87 86,73 84,23 84,88 339,50 Rataan 82,85 84,42 85,44 83,86 84,14 84,47 Total 165,69 168,84 170,88 167,72 168,28 673,13
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan bahwa  interaksi  antara  bangsa  kambing  dan konsentrasi  pengencer  Tris-Kuning  Telur tidak berpengaruh (P>0,05) terhadap persentase  motilitas  spermatozoa  setelah pengenceran.    Rataan  persentase  motilitas spermatozoa  tertinggi  (85,44%)  diperoleh pada bangsa  kambing  Kacang  dengan konsentrasi  pengencer  Tris-Kuning  Telur 15%.  Sedangkan  rataan  persentase  motilitas spermatozoa  terendah  (82,02%)  diperoleh pada  kambing  Boerawa  dengan  konsentrasi pengencer  Tris-Kuning  Telur  5%.  Rataan
persentase  motilitas  spermatozoa  kambing Kacang  relatif  lebih  tinggi  dibandingkan rataan  persentase  motilitas  spermatozoa kambing  Boerawa. Hal  ini  mungkin disebabkan oleh tingkat toleransi spermatozoa  kambing  kacang  relatif  lebih baik  terhadap  bahan  pengencer  Tris-Kuning telur  dibandingkan  dengan  spermatozoa kambing Boerawa.
Motilitas kambing Boerawa dan kambing Kacang  yang  diperoleh pada penelitian ini masih dalam kisaran  normal. Kartasudjana  (2001)  menyatakan  bahwa
spermatozoa yang memiliki motilitas kurang dari  60%  tidak  dianjurkan  untuk  digunakan dalam program inseminasi buatan.
Berdasarkan pendapat  tersebut  maka  hasil evaluasi motilitas spermatozoa pada beberapa  konsentrasi berbeda  masih  layak untuk diproses lebih lanjut. Hal ini didukung oleh  pendapat  Susilawati  (2011)  yang menyatakan  bahwa semen  yang  ditampung dan diuji  kualitasnya,  bila  motilitas  lebih dari  70%  maka  dapat  diproses  lebih  lanjut.
Feradis  (2010)  menyatakan  kebanyakan pejantan yang fertil mempunyai 50% sampai 80% spermatozoa yang motil aktif progresif.
2. Persentase MPU Spermatozoa Kambing  Boerawa  dan Kambing

## Kacang Setelah Pengenceran
Hasil  pengamatan persentase  MPU spermatozoa kambing Boerawa dan kambing Kacang  setelah  pengenceran  yang  diperoleh pada penelitian ini tercantum pada Tabel 5.4.

## Tabel 5.4. Rataan Persentase MPU Spermatozoa Setelah Pengenceran (%)
Bangsa Kambing Pengencer Tris-Kuning Telur Rataan Total 5% 10% 15% 20% K1 63,24 a 62,74 a 63,13 a 63,10 a 63,05 A 252,21 K2 79,95 ab 86,37 b 92,69 b 87,22 ab 86,56 A 346,23 Rataan 71,60 A 74,56 A 77,91 A 75,16 A 74,81 299,22 Total 143,19 149,11 155,82 150,32 149,61 598,44 3. Persentase Viabilitas Spermatozoa Kambing  Boerawa  dan Kambing Kacang Setelah Pengenceran Hasil  pengamatan  persentase  MPU spermatozoa kambing Boerawa dan kambing Kacang  setelah  pengenceran  yang diperoleh pada penelitian ini tercantum pada Tabel 5.5.
Tabel 5.5. Rataan Persentase Viabilitas Spermatozoa Setelah Pengenceran (%)
Bangsa Kambing Pengencer Tris-Kuning Telur Rataan Total 5% 10% 15% 20% K1 89,88 91,76 91,36 93,98 91,74 366,98 K2 86,94 89,83 85,90 85,22 86,97 347,89 Rataan 88,41 90,80 88,63 89,60 89,36 357,43 Total 176,82 181,59 177,25 179,21 178,72 714,87
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan bahwa baik interkasi antara bangsa kambing dan  konsentrasi  pengencer  Tris-Kuning Telur  maupun  pengaruh  tunggal  faktor konsentrasi Tris-Kuning Telur tidak berpengaruh nyata (P>0,05) terhadap persentase  Viabilitas  spermatozoa.  Rataan persentase viabilitas spermatozoa kambing Boerawa (93,98)  pada  konsentrasi  Tris- Kuning Telur20% lebih tinggi dibandingkan kambing Kacang (89,83%) pada konsentrasi Tris-Kuning  Telur  10%. Rataan  persentase viabilitas  spermatozoa  kambing  Kacang relatif  lebih  tinggi  dibandingkan  rataan persentase  motilitas  spermatozoa  kambing Boerawa.
Nilai  viabilitas  berhubungan  erat dengan kemampuan
fertilisasi spermatozoa,apabila  nilai  viabilitas  tinggi maka  kemampuan  fertilitas  akan  tinggi. Menurut Hidayahturrahmah (2007) mengatakan  bahwa  viabilitas  spermatozoa dipengaruhi  oleh  kebutuhan  akan  nutrisi. Nutrisi  akan  digunakan  oleh  spermatozoa untuk  dijadikan  energi  sehingga  apabila kebutuhan  nutrisi  spermatozoa  berkurang maka akan mengakibatkan viabilitas spermatozoa menurun. Pengamatan viabilitas  dapat  dilakukan  dengan  metode pewarnaan  diferensial  menggunakan  zat warna  eosin  saja  atau dengan  kombinasi eosin-nigrosin (Partodihardjo, 1992).
4. Perubahan Persentase Motilitas Spermatozoa  Hasil  Sexing  Selama
Penyimpanan
Evaluasi dilakukan empat hari berturut-turut  untuk  melihat  pola  penurunan motilitas  spermatozoa  selama  penyimpanan
di dalam lemari es (3-5 o C).  Pola penurunan motilitas spermatozoa kambing Boerawa dan kambing  Kacang  selama  penyimpanan disajikan pada Gambar 5.1.sedangkan persentase penurunan motilitasnya tercantum pada Tabel 5.6.
Gambar 5.1. Rataan Persentase Motilitas Spermatozoa Selama Penyimpanan

## Tabel 5.6. Persentase Penurunan Motilitas Spermatozoa Kambing Boerawa dan
Kambing Kacang Selama Penyimpanan (%) Bangsa Kambing Pengencer Tris-Kuning Telur Rataan Total 5% 10% 15% 20% K1 10,18 10,75 12,41 12,12 11,36 45,45 K2 7,98 8,81 9,51 8,28 8,64 34,58 Rataan 9,08 9,78 10,96 10,20 10,00 10,23 Total 18,16 19,56 21,92 20,40 20,01 80,03
Persentase  motilitas  spermatozoa  secara umum  menurun  dengan  bertambahnya  lama penyimpanan  baik  pada  kambing  Boerawa maupun kambing Kacang.  Data pada Tabel 5.6.  menunjukkan  bahwa  rataan  persentase penurunan  motilitas  spermatozoa  pada kambing  Boerawa  lebih  tinggi  (11,36%) dibandingkan  kambing  Kacang  (9,57%). Sedangkan  konsentrasi  pengencer  Tris- Kuning Telur yang mampu mempertahankan penurunan  motilitas  spermatozoa  dengan nilai  penurunan  terendah  (9,08%)  baik kambing Boerawa maupun kambing Kacang adalah  konsentrasi  pengencer  5%  Tris- Kuning Telur.
5. Perubahan Persentase MPU Spermatozoa  Hasil  Sexing  Selama Penyimpanan
Evaluasi dilakukan empat hari berturut-turut  untuk  melihat  pola  penurunan persentase MPU spermatozoa selama penyimpanan di  dalam  lemari  es  (3-5 o C). Pola  penurunan  MPU  spermatozoa  kambing Boerawa  dan  kambing  Kacang  selama penyimpanan  disajikan  pada  Gambar  5.2., sedangkan  persentase  penurunan  MPU-nya tercantum pada Tabel 5.7.
Gambar 5.2.Rataan Persentase MPU Spermatozoa  Selama Penyimpanan
Tabel 5.7. Persentase Penurunan MPU Spermatozoa Kambing Boerawa dan Kambing Kacang Selama Penyimpanan (%)
Bangsa Kambing Pengencer Tris-Kuning Telur Rataan Total 5% 10% 15% 20% K1 15,56 12,46 15,9 11,83 13,94 55,75 K2 14,57 13,50 17,48 16,0 15,46 61,85 Rataan 15,07 12,98 16,69 14,07 14,70 14,61 Total 30,13 25,96 33,38 28,13 29,40 117,60
Persentase  MPU  spermatozoa  secara  umum menurun dengan bertambahnya lama penyimpanan. Data pada Tabel 5.7. menunjukkan  bahwa  rataan  persentase penurunan MPU spermatozoa pada  kambing Boerawa  secara  statistik lebih  rendah (K1) (13,94%)  dibandingkan  dengan  persentase penurunan  MPU  spermatozoa  kambing Kacang (K2) (15,46%). Sedangkan konsentrasi  pengencer  Tris-Kuning  Telur yang  mampu  mempertahankan  penurunan MPU  spermatozoa  dengan  nilai  rataan penurunan  terendah  (12,98%)  baik  kambing Boerawa maupun  kambing  Kacang  adalah konsentrasi  pengencer  10%  Tris-Kuning Telur.
6. Perubahan Persentase Viabilitas Spermatozoa  Hasil  Sexing  Selama Penyimpanan
Evaluasi dilakukan empat hari berturut-turut  untuk  melihat  pola  penurunan viabilitas spermatozoa  selama  penyimpanan di dalam lemari es (3-5 o C).  Pola penurunan motilitas spermatozoa kambing Boerawa dan kambing  Kacang  selama  penyimpanan disajikan  pada  Gambar  5.3.  sedangkan persentase penurunan motilitasnya tercantum pada Tabel 5.8.
Gambar 5.3. Rataan Persentase Motilitas Spermatozoa Selama Penyimpanan
Tabel 5.8. Persentase Penurunan Motilitas Spermatozoa Kambing Boerawa dan Kambing Kacang Selama Penyimpanan (%)
Bangsa Kambing Pengencer Tris-Kuning Telur Rataan Total 5% 10% 15% 20% K1 35.68 35.70 36.76 37.80 36.48 145.94 K2 34.15 43.14 41.51 44.96 40.94 163.76 Rataan 34.91 39.42 39.14 41.38 38.71 39.66 Total 69.83 78.84 78.27 82.76 77.42 309.70
Persentase  motilitas  spermatozoa  secara umum  menurun  dengan  bertambahnya  lama penyimpanan  baik  pada  kambing  Boerawa maupun kambing Kacang.  Data pada Tabel 5.8.  menunjukkan  bahwa  rataan  persentase penurunan  Viabilitas  spermatozoa  pada kambing  Boerawa  lebih  rendah (36,48%) dibandingkan  kambing  Kacang  (40,94%). Sedangkan  konsentrasi  pengencer  Tris- Kuning Telur yang mampu mempertahankan penurunan  viabilitas  spermatozoa  dengan nilai  penurunan  terendah  (34,91%)  baik kambing Boerawa maupun kambing Kacang adalah  konsentrasi  pengencer  5%  Tris- Kuning Telur.
Persentase  MPU  spermatozoa  secara umum menurun dengan bertambahnya lama penyimpanan. Data pada Tabel 5.6.
menunjukkan  bahwa  rataan  persentase penurunan MPU spermatozoa pada  kambing Boerawa  (K1)  (12,31%)  hampir  sama dengan persentase penurunan MPU spermatozoa kambing Kacang (K2)
(12,69%). Sedangkan konsentrasi pengencer Tris-Kuning Telur yang mampu
mempertahankan penurunan
MPU
spermatozoa  dengan  nilai  rataan  penurunan terendah  (6,53%)  baik  kambing  Boerawa maupun kambing Kacang adalah konsentrasi pengencer 15% Tris-Kuning Telur.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil dan pembahasan maka dapat disimpulkan sebagai berikut : 1. Karakteristik semen segar kambing Boerawa dan kambing Kacang
menunjukkan kualitas yang hampir sama.
2. Interaksi  perlakuan  bangsa  kambing  dan konsentrasi  pengencer  Tris-Kuning  Telur tidak berpengaruh nyata terhadap kualitas spermatozoa kambing.
3. Faktor konsentrasi pengencer Tris- Kuning  Telur  secara  mandiri  tidak berpengaruh  nyata  terhadap  kualitas spermatozoa kambing.
4. Rataan  persentase  membran  plasma  utuh spermatozoa kambing Kacang nyata lebih baik  dibandingkan  kambing  Boerawa setelah pengenceran.
5. Penurunan
persentase motilitas spermatozoa  selama  4  hari  penyimpanan pada  suhu  3-5 o C  lebih  rendah  pada kambing  Kacang  dibandingkan  pada kambing Boerawa.
6. Konsentrasi pengencer Tris-Kuning Telur 10% mampu  mempertahankan  motilitas spermatozoa kambing lebih baik dibandingkan konsentrasi pengencer yang lain,  sedangkan  konsentrasi  pengencer Tris-Kuning
Telur 15%
mampu mempertahankan persentase MPU spermatozoa  dibandingkan  konsentrasi yang  lain selama  4  hari  penyimpanan pada suhu 3-5 o C.

## DAFTAR PUSTAKA
Ariantie  OS,  Yusuf  TL,  Sajuthi  D, Arifiantini RF.  2004.  Kualitas Semen Cair  Kambing  Peranakan  Etawah Dalam  Modifikasi  Pengencer  Tris Dengan Trehalosa dan Rafinosa. Jurnal Veteriner 15 (1) : 111 – 22.
Alawiyah,  D  dan  M.  Hartono.  2006. Pengaruh  Penambahan  Vitamin  E Dalam Bahan Pengencer Sitrat Kuning Telur  Terhadap  Kualitas  Semen  Beku Kambing Boer.
Bergeron.  A.,  M.H,  Crete,  Y.  Bridle,  and  P, Manjunath.    2004.  Low  Density Lipoprotein  Fraction  from  Hen’ s  Egg York  Decreases  the  Binding  of  the Major  of  Bovine  Seminal  Plasma  to
Sperm and Prevents Lipid Efflux from the  Sperm  Membrane.    Biol.    Reprod 70:708-717.
Gardner.D.L.,  and    E.S.E,  Hafez.  2000. Spermatozoa  and  Seminal  Plasma. Reproduction in Farm Animal.  Hafez, B dan Hafez, E.S.E. 7 th ed.  Lippincott Willims and Wilkins. Awollers Klitiwer  Company.  Philadelphia.
Hanafiah,  K.    2008.    Rancangan  Percobaan Teori  dan  Aplikasi  Ed.Revisi  II Jakarta: Raja Grafindo Persada.
Hartono, M. 2008.  Optimalisasi Penambahan Vitamin E dalam Pengencer Sitrat Kuning Telur untuk mempertahankan kualitas semen kambing Boer.  Fakultas Pertanian Universitas  Lampung, Bandar Lampung.
Hardijanto,  Sardjito,  T.,  Hernawati,  T., Susilowati,  T.  Dan  Suprayogi,  TW. 2008.  Penuntun  Praktikum  Fisiologi dan Teknologi Reproduksi (IB). Fakultas Kedokteran Hewan. Universitas Airlangga.  Surabaya. P: 8- 18. Hafez,  E.S.E.  2000.  Reproduction  in  Farm Animal. 7th Edition. Lippincott Wlliams & Wilkins. Maryland. USA.
Hastono, I.K. Sutama, P. Situmorang, I.G.M. Budiarsana.  T.  Kostaman,  U.  Adiati, M.S.  Hidayat  dan  Mulyawan.  2002.
Pengaruh Intensitas Ejakulasi Terhadap  Kualitas  Semen  Kambing Peranakan Etawah Dan Boer. Kumpulan Hasil-Hasil Penelitian APBN  Tahun  Anggaran  2001.  Balai Penelitian  Ternak  Ciawi,  Bogor.  hlm.
181 – 190
Husin    et.al.  2007.    Pengaruh Penambahan Pentoksifilin pada Pengencer Kambing Boer. Uhudabdullah. Blogspot.com.  diakses  tanggal  5  Juni 2015.
Kartasudjana,  R.  2001.  Teknik  Inseminasi Buatan Pada Ternak. Jakarta.
Mahmilia,  F.,  S.  Elieser,  M.  Doloksaribu, F.A.  Pamungkas  dan  M.  Hutauruk. 2006.  Karakteristik  Produksi  dan Reproduksi  Kambing  Boer  pada  Iklim
Tropis basah. Laporan Akhir Kegiatan Penelitian  PAATP  2006.  Sumatera Utara.
Manjunath,  P  and  I.  Therien.  2002.  Role  of Seminal  Plasma  Phospholipid-binding Protein  in  Sperm  Membran  Lipid. Modication That Occurs During
Capacitation  Journal  Reproduction Immunology. 53 : 109-119. Pamungkas,  F. A., Mahmilia dan S. Elieser. 2008. Perbandingan Karakteristik Semen Kambing Boer Dengan Kacang. Seminar  Nasional  Teknologi
Peternakan  dan  Veteriner.  Sungei Putih, Galang. Sumatera Utara.
Partodihardjo,  S.  1992.  Ilmu  Reproduksi
Hewan.    Mutiara  Sumber  Widya, Jakarta.
Pramono,  E.  Dan  Taswin  R.T.    2008.
Pengaruh Penambahan Adenosin Triphosphat  ke  dalam  Pengencer Semen Terhadap Kualitas Spermatozoa  Ekor  Gemuk.    J.  Anim.
Prod. 10 (3): 151 -156.
Putra,  A.M.,  T.  Susilawati  dan  N.  Isnaini.
2012.    Kualitas  Proporsi  Spermatozoa
X  dan  Y  Sapi  Limousi  Setelah  Proses
Sexing Menggunakan Gragien Densitas  Albumin Putih  Telur.    Jurnal Peternakan.    Malang:    Universitas Brawijaya
Rizal.  M.,  M.R  Toelihere,  T.L.,  Yusuf,  B.
Purwantara  dan  P.  Sitomorang.    2003. Karakteristik  Penampilan  Reproduksi
Pejantan  Domba  Garut. JITV 8:134 – 140.
Setiadi,B.,Subandriyo, M.Martawidjaja, I.K. Sutama, U.Adiati,D.Yulistiani dan D Priyanto.  2002.  Evaluasi  Keunggulan Produktivitas Dan Pemantapan Kambing Persilangan. Kumpulan Hasil-Hasil  Penelitian APBN  Tahun Anggaran  2001. Balai  Penelitian Ternak Ciawi, Bogor. hlm. 123 – 142. Susilawati  T.      2011.    Spermatology. Universitas Brawijaya Press. Malang. Suyadi,  Susilawati,  T  dan  Isnaini,  N.  2004.
Uji  Coba  Produksi  Semen  Beku Kambing  Boer.  Laporan  Penelitian. Fakultas peternakan.UB. Malang.
Tambing,  S.N.,  M.R.  Toelihere,  T.L.  Yusuf dan  IK. Sutama.  2000.  Motilitas  daya Hidup  Dan  Tudung  Akrosom  Utuh Semen  Kambing  Peranakan  Etawah Pada  Berbagai  Suhu  Thawing.  Pros. Seminar  Nasional  Peternakan  dan Veteriner.  Bogor,  18 – 19  Oktober 1999. Puslitbang Peternakan, Bogor.
Tarigan.    2004.    Effect  of  Extenders  and Cryoprotectants  on  Stallion  Sperm Head Morphometry.
Toelihere,  S.N. 1993.  Inseminasi  Buatan Pada Ternak. Angkasa Bandung.
Tarigan,  A.    2004.    Pengaruh  Konsentrasi Tocopheral  Yang  Berbeda  Dalam Pengencer Tris Aminomethane Kuning Telur terhadap kualitas semen kambing Boer.  Fapet.ub.ac.id.uploads.