Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 194-202 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902

## IDENTIFIKASI DAN UJI ANTI KANKER TABLET EKSTRAK DAUN PALIASA (Kleinhovia hospita Linn) SECARA MTT ASSAY
Yetri Elisya 1 , Junaedi 1* , Maratu Saleha 2
1 Jurusan Farmasi Politeknik Kesehatan Kemenkes Jakarta II 2 Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan
*Email: junaedi@poltekkesjkt2.ac.id
Artikel diterima: 6 Januari 2022; Disetujui: 15 Maret 2022 DOI: https://doi.org/10.36387/jiis.v7i1.859

## ABSTRAK
Telah  banyak  tanaman  di  gunakan  sebagai  co  terapi  obat  kanker  untuk memperkecil  efek  samping  dari  obat  kanker  yang  ada.  Penelitian  ini  bertujuan membuat  sediaan  tablet  yang  mengandung  ekstrak  daun  Paliasa,  agar  nantinya menghasilkan  sediaan  farmasi  yang  dapat  digunakan  sebagai  antikanker.  Daun Paliasa  diekstraksi  dengan  maserasi  menggunakan  alkohol  70%,  lalu  dilakukan pembuatan  tablet  dengan  metoda  granulasi  basah.  Ekstrak  yang  diperoleh  dari 2,207 kg simplisia kering daun paliasa sebesar 542 gram, dengan rendeman sebesar 24,56%.  Kadar  flavonoid  pada  ekstrak  1,79%  dan  pada  tablet  0,75%.  Terdapat senyawa aktif yaitu 4H-Pyran-4-one,  2,3-dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl merupakan senyawa antioksidan yang kuat, hexadecanoic acid atau asam palmitat berfungsi sebagai antibakteri dan antioksidan, serta senyawa kaempferol salah satu senyawa  yang  mempunyai  potensi  sebagai  anti  kanker.  Identifikasi  ekstrak  dan tablet  daun  paliasa  ( Kleinhovia  hospital Linn)  secara  MTT  assay,  menghasilkan IC 50 diatas  > 30 ppm dalam kategori tidak aktif.
Kata kunci : ekstrak daun Paliasa, MTT assay

## ABSTRACT
Many plants have been used as co-therapy for cancer drugs to minimize the side effects of existing cancer drugs. This study aims to make tablet preparations containing  Paliasa  leaf  extract  to  produce  pharmaceutical  preparations  for anticancer use. Paliasa leaves were extracted by maceration using 70% alcohol, and  then  the  tablets  were  made  using  the  wet  granulation  method.  The  extract obtained from  2,207  kg  of  dried  simplicia  paliasa  leaves  was  542  grams,  with a yield of 24.56%. The flavonoid content in the section was 1.79%, and the tablet was 0.75%.  The  active  compound  as  4H-Pyran-4-one,  2,3-dihydro-3,5-dihydroxy-6- methyl,  a  powerful  antioxidant  blend,  hexadecanoic  acid,  or  palmitic  acid, functions  as  an  antibacterial  and  antioxidant,  and  kaempferol  is  one  of  the compounds,  which  has  potential  as  an  anticancer.  Identification  of  extracts  and tablets of paliasa leaves (Kleinhovia hospital Linn) by MTT assay resulted in IC50 above > 30 ppm in the inactive category.

## Keywords: Paliasa leaf extract, MTT assay
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 194-202 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902

## PENDAHULUAN
Kanker  merupakan  salah  satu penyebab  utama  morbiditas  dan mortalitas  di  seluruh  dunia.  Jenis kanker  yang  menyebabkan  banyak kematian antara lain kanker paru-paru, hati,  perut,  kolorektal,  payudara,  dan esofagus (WHO, Kemenkes).
Tingginya  prevalensi  kanker  di Indonesia  harus  diwaspadai  dengan strategi  pencegahan  dan  deteksi  dini yang  telah  dilakukan  oleh  penyedia layanan kesehatan. Kasus kanker yang terdeteksi  pada  tahap  awal  dan menjalani  perawatan  yang  cepat  dan
tepat akan
meningkatkan
penyembuhan  dan  memperpanjang harapan hidup. Oleh karena itu, sangat penting  untuk  sering  melakukan pemeriksaan  secara  rutin  sebagai upaya  pencegahan  dan  diagnosis kanker sejak dini (Kemenkes, 2015).
Pembedahan,  kemoterapi  dan radioterapi  dianggap  sebagai  metode pengobatan kanker yang paling umum, namun  efek  samping  yang  timbul sangat besar. Efek samping kemoterapi  bervariasi  berdasarkan protokol  kemoterapi  yang  diberikan. Berdasarkan National
Cancer Institute,  efek  samping  yang  dapat
timbul  akibat  kemoterapi  berbasis antrasiklin  (adriamycin/doxorubicin) dikelompokkan menjadi mual, muntah,  diare,  stomatitis,  alopecia,
rentan terhadap
infeksi, trombositopenia, neuropati, dan mialgia (Darmawan, 2019).
Strategi  yang  umum  dilakukan dalam  pengobatan  kanker  adalah dengan menghambat pertumbuhan sel dan  membunuh  sel  kanker. Obat kanker  diharapkan  bekerja  selektif pada sel yang terjangkit serta mempunyai efek samping yang minimal  pada  sel  normal  (Partridge, 2001).
Indonesia  mempunyai  beberapa tumbuhan  yang  berpotensi  untuk  di kembangkan  menjadi  obat  kanker. Penelitian  obat  kanker  diperlukan untuk  menguji  khasiat  tanaman  yang berpotensi sebagai obat kanker.
Sediaan  tablet  adalah  sediaan padat  yang  umumnya  diperoleh dengan  cara  kompresi  tunggal  atau berganda dari serbuk atau granul dapat tidak disalut maupun disalut. Ada dua macam proses pembuatan tablet, yaitu metode  kempa  langsung  dan  metode granulasi.  Ada  dua  jenis  prosedur granulasi,  yaitu  granulasi  kering  dan
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 194-202 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
granulasi  basah.  Metode  granulasi basah cocok untuk senyawa aktif yang sulit  larut  dalam  air  dan  bahan  aktif yang  tahan  terhadap  pemanasan  dan kelembaban. Pada umumnya pendekatan granulasi basah digunakan untuk  zat  aktif  yang  sulit  dibentuk karena  memiliki  sifat  alir  dan kompresibilitas  yang  buruk,  seperti
ekstrak (Hadisoewignyo,
2013). /III/20071

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilakukan  dengan menggunakan  metode  eksperimental, penelitian ini dilaksanakan pada bulan Maret  2021  s.d  November  2021  di
Labolatorium Farmakognosi, Laboratorium Teknologi Farmasi
Politeknik  Kesehatan  Kementerian Kesehatan Jakarta II Jurusan Farmasi.
Ekstrak  daun  paliasa  dibuat dengan maserasi dengan pelarut etanol 70%  sampai  di  dapat  ekstrak  kental (Najihudin,  2019,  Budiarti,  2020). Kemudian dilakukan formulasi pembuatan  sediaan  tablet  dengan menggunakan metoda granulasi basah.
Sediaan  tablet  yang  didapat dilakukan  identifikasi  dan  pengujian untuk  melihat  aktifitas  antikanker.
Pengujian
yang dilakukan diantaranya:  uji  mutu  tablet  dari pembuatan sampai
setelah penyimpanan,  uji  MTT,  GCMS- LCMSMS,  dan  uji  kadar  flavonoid total.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Ekstraksi
Berdasarkan hasil tabel 1
didapat  ekstraksi  dengan  metoda maserasi menggunakan pelarut alkohol  70%  di  dapat  rendeman sebesar  24,56%,  pelarut  alkohol  96% sebesar  4,17%  dan  metoda  perkolasi dengan  pelarut  alkohol  96%  sebesar 8,84%.
Tabel 1. Ekstraksi dan rendemannya
No.  Metoda Pelarut Rendeman 1 Maserasi alkohol 70% 24,56%
2 Perkolasi  alkohol 96% 8,84 %

## Uji mutu tablet
Berdasarkan  tabel  2,  hasil  uji mutu fisik tablet ekstrak daun  paliasa memenuhi  persyaratan  Farmakope Indonesia  kecuali  uji  waktu  hancur. Hasil  uji  higroskopitas  tablet  ekstrak daun  paliasa  memenuhi  persyaratan, yaitu  tidak  ada  perubahan  selama penyimpanan.
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 194-202 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
Tabel 2. Pengujian mutu tablet No. Uji Fisik Persyaratan F.I 1 Kadar lembab memenuhi 2 Sifat alir memenuhi 3 Kompressibilitas memenuhi 4 Uji Visual memenuhi 5 Keseragaman bobot memenuhi 6 Keseragaman ukuran memenuhi 7 Kekerasan memenuhi 8 Kerapuhan memenuhi 9 Waktu hancur tidak memenuhi 10 Higroskopisitas memenuhi

## Uji GCMS
Tabel 3. Uji GCMS
No.  Sample Senyawa
Kandungan (%) 1 Ekstrak
4H-Pyran-4-one, 2,3-dihydro-3,5- dihydroxy -6- methyl- 1,23 Hexadecanoic Acid, Methyl Ester 14,33 Hexadecanoic Acid 14,99 Methyl Linolenate 14,56 Linolenic acid 4,31 Decanoic Acid, Silver (1+) Salt 2,55
2 Tablet Hexadecanoic acid, methyl ester 2.58 Hexadecanoic Acid 9,66 9,12,15- Octadecatrienoic acid, methyl ester 7,73 Octadecanoic acid 12,76 Octadecanoic acid 6,09 Hexadecanoic acid, 2,3- dihydroxypropyl ester 4,13
Berdasarkan  tabel  3,  uji  GCMS ekstrak  dan  tablet  didapat  senyawa aktif  yaitu  :  4H-Pyran-4-one,  2,3- dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl, hexadecenoic acid, oktadecanoic acid.

## Uji LCMS-MS
Berdasarkan  tabel  4,  pada ekstrak  dan  tablet  terdapat  senyawa Citrusin C, Kaempferol dan
Melianone.
Tabel 4. Uji LCMS-MS No. Senyawa metabolit Rumus Molekul Massa RT 1 Citrusin C C 17 H 26 O 7 343.18  5.78 2 Kaempferol- 3,7- diglucoside C 27 H 30 O 16 611.16  3.13 3 Kaempferol- 7-O-α-L- rhamnoside I C 21 H 20 O 10 433.11  3.18 4 Melianone C 30 H 46 O 4 471.35  6.95

## Uji Stabilitas

## Tabel 5. Uji Stabilitas
No./ Minggu ke Sampel Kadar (%) Rata- rata kadar (%) 1 Ekstrak 1 1.901 1.79  ± 0.14 2 Ekstrak 2 1.827 3 Ekstrak 3 1.635 2 Tablet 0.773 0.72 + 0.08 5 Tablet 0.617 7 Tablet 0.785 9 Tablet 0.689 2 Tablet+silika 0.827 0.72 + 0.09 5 Tablet+silika 0.675 7 Tablet+silika 0.755 9 Tablet+silika 0.619 Berdasarkan data tabel 5 di atas, kadar  flavonoid  total  pada  ekstrak
p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
1.79%,  pada  sediaan  tablet  dan  tablet yang  diberi  silika  gel  sebesar  0.72%. Selama  penyimpanan  tablet  masih memenuhi  uji  mutu  sesuai  dengan Farmakope Indonesia.
MTT Assay
Tabel 6. Uji MTT No. Sel kanker IC 50 (ppm) Ekstrak Tablet 1 A549 - - 2 Sel Hela 70583.47 6101.07 3 Widr 204.69 182.18 4 MCF-7 - 1893564
Berdasarkan  tabel  6,  uji  MTT terhadap sel kanker, ekstrak dan tablet daun paliasa menunjukkan IC 50 masih di  atas  30  ppm  baik  untuk  sel  kanker A549, sel Hela, WiDr maupun MCF- 7.

## PEMBAHASAN
Hasil  ekstraksi  dengan  metoda maserasi  ekstrak  yang  di  dapat  lebih banyak  dengan  rendeman  sebesar 24,56%.  Berdasarkan  penelitian  yang telah dilakukan, ekstraksi daun paliasa dengan  metoda  perkolasi  di  dapat ekstrak dengan rendeman lebih sedikit yaitu sebesar 8,84%. Penelitian Desiana menunjukkan bahwa prosedur maserasi  dengan  pelarut  etanol  96 persen  (%)  menghasilkan  rendemen
4,17  persen(%)    saat  mengekstraksi daun paliasa (Desiana, 2018).
Konsentrasi  zat  terlarut,  karakteristik pelarut,  pH  larutan,  suhu,  dan hidrofobisitas  komponen  yang  akan diekstraksi  semuanya  berpengaruh pada  hasil  ekstraksi  cair-cair.  Karena variabel-variabel  ini,  sulit  untuk memperkirakan  nilai  hasil  ekstraksi cair-cair. Dibandingkan dengan molekul  nonpolar  atau  semipolar, bahan  kimia  polar  mendominasi susunan  Paliasa.  Nilai  rendemen pelarut  metanol  menunjukkan  hal tersebut (Budiarti, 2020).
Pada penelitian ini, daun Paliasa di  ekstraksi  dengan  metoda  maserasi menggunakan alkohol 70%
(Najihudin,  2019,  Budiarti,  2020 Sebagai  prosedur  ekstraksi  dingin, maserasi menggunakan peralatan atau botol  maserasi  sederhana  dan  dapat dengan  mudah  diterapkan  tanpa perlakuan  khusus,  terutama  dengan merendam  sampel  dalam  pelarut ekstraksi dan terkadang mengocoknya.  Ini  adalah  proses ekstraksi  dingin,  namun  metode perkolasi  unik  karena  memerlukan peralatan  tambahan  yang  dikenal sebagai perkolator (Nofiandi, 2017).
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 194-202 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
Berdasarkan tabel 1 dan tabel 2, hasil  uji  mutu  sediaan  tablet  ekstrak daun  paliasa,  menunjukkan  bahwa persyaratan  uji  mutu  tablet  sudah memenuhi  syarat.  Hanya  untuk  uji waktu hancur belum memenuhi syarat mutu tablet pada Farmakope Indonesia (Weller,  2003).  Namun  berdasarkan Peraturan  Kepala  Badan  POM  RI  no. 12 Tahun 2014, waktu hancur sediaan tablet  obat  tradisional  ≤  30  menit, sehingga  tablet  ekstrak  daun  Paliasa masih  memenuhi  syarat  mutu  tablet (Anonim, 2014).
Berdasarkan  tabel  3,  di  dapat senyawa  aktif  pada  ekstrak  yaitu  4H-
Pyran-4-one, 2,3-dihydro-3,5-
dihydroxy-6-methyl
merupakan
senyawa antioksidan yang kuat
(Xiangying, 2013). Hexadecanoic acid atau asam palmitat yang terdapat pada ekstrak dan tablet daun paliasa, adalah merupakan asam lemak jenuh. Sebagian  besar  asam  lemak  dapat berfungsi  sebagai  antibakteri  dan antioksidan (Wayan, 2013). Berdasarkan tabel 4,
pemeriksaan  LCMSMS  di  lakukan untuk  mendeteksi  secara  kualitatif senyawa yang terkandung pada ekstrak maupun tablet dengan metoda
LCMSMS.  Salah  satu  senyawa  yang mempunyai  potensi  sebagai  anti kanker  adalah  senyawa  Kaempferol (Paramita,  2016).  Hasil  pemeriksaan menunjukan  4  metabolit  aktif  yang mempunyai  kelimpahan  yang  cukup besar baik pada ekstrak maupun pada tablet.  Kelimpahan  zat  aktif  di  dalam tablet  dan  ekstrak  tidak  terlalu  besar dibawah  5%,  kecuali  melianone terdapat perbedan sekitar 37%.
Berdasarkan  tabel  5,  kadar flavonoid  total  ekstrak  daun  paliasa adalah  sebesar  1.79%.  Berdasarkan penelitian  Desiana,  bahwa  jumlah kadar flavonoid total yang terkandung dalam  ekstrak  daun  paliasa  di  daerah Takalar  sebesar  1,13%  (Desiana, 2018). Berdasarkan penelitian Rahayu, kandungan senyawa
flavonoid infus paliasa 10 %, diperoleh  sebesar  4,37  %  (Rahayu, 2012).  Namun  berdasar  penelitian Saputra,  kadar  flavonoid  bubuk  daun Paliasa  yang  dididihkan  sampai larutan pekat sebesar 0,4945%
(Suroto, 2017). Sehingga hasil penelitian  kadar  flavonoid  total  yang di  uji,  masih  dalam  batas  tersebut. Tidak terdapat perbedaan yang signifikan kadar flavonoid total
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 194-202 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
selama  penyimpanan.  Demikian  pula pada  pada  pengujian  tablet  setelah penyimpanan,  pengujian  mutu  tablet masih memenuhi persyaraan Farmakope Indonesia.
Berdasarkan  tabel  6,  hasil  uji MTT terhadap beberapa sel kanker sel kanker A549, sel Hela, WiDr maupun MCF-7,  baik  ekstrak  maupun  tablet masih  di  atas  30  ppm  (Makroalga, 2008).  Namun  demikian,  nilai  IC 50 ekstrak  etanol  terhadap  sel  tumor WiDr  (+  200  ppm)  yang  mendekati nilai  ambang  untuk  dikategorikan aktif. Berdasarkan penelitian sebelumnya,  ekstrak  daun  Paliasa dengan metoda perkolasi
menghasilkan nilai IC 50 masih di atas > 30 ppm yaitu =74,27 ppm terhadap sel MCF-7.
Aktivitas  antiproliferatif  pada sel  karsinoma  kolorektal  (HCT  116) dan sel karsinoma lambung ditemukan pada  triterpenoid  pentasiklik  dan steroid  C29  yang  diisolasi  dari  K. hospita  (SGC-7901).  Ketika  diuji terhadap  sel  kanker  serviks  manusia (HeLa), alkaloid kuinolin tersubstitusi benzena  metoksiallik  dari  bakteri K.hospita hanya menunjukkan bioaktivitas  IC50  429,54  ug/mL.
Sitotoksisitas ekstrak daun K. hospita pada sel kanker payudara juga terbukti sangat  rendah  (MCF-7).  Sementara itu, tidak ditemukan dampak sitotoksik pada  sel  karsinoma  hepatoseluler untuk eleutherol dan kaempferol yang diisolasi dari daun K. hospita (HepG2) (Paramita, 2016).
Berdasar  ulasan  di  atas,  dapat disimpulkan  sangat  menarik  untuk terus  dipelajari  bioaktivitas  ekstrak daun paliasa lebih lanjut. Pengukuran efek  sitotoksik  menunjukkan  fraksi dietil  eter  adalah  yang  terkuat  jika dibandingkan  dengan  fraksi  n-heksan dan etil asetat (Paramita, 2016).

## KESIMPULAN
Identifikasi  ekstrak  dan  tablet daun  paliasa  ( Kleinhovia  hospital Linn), dengan uji MTT assay menghasilkan  IC 50 diatas    >  30  ppm dalam kategori tidak aktif.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  kepada  Politeknik Kesehatan  Kemenkes  Jakarta  II  dan Jurusan  Farmasi  yang  memfasilitasi dosen serta mendukung penulisan ini.
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 194-202 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim.  (2014)  Peraturan  Kepala Badan  Pengawas  Obat  dan
Makanan  Republik  Indonesia Nomor 12 Tahun 2014 Tentang Persyaratan Mutu Obat Tradisional. Anonim. (1979). Farmakope Indonesia  III.  In:  Farmakope Indonesia III. Jakarta: Departemen Kesehatan RI.
Budiarti  M,  Jokopriyambodo  W, Besar  B,  Tanaman  L.  (2020).
Potensi  Ekstrak Daun Paliasa  ( Kleinhovia  hospita  )  Sebagai Anti Plasmodium falciparum.
Darmawan  E,  Melani  R,  Raharjo  B,
Prof  R,  Soekarjo  M.(2019) Gambaran  Hubungan  Regimen Dosis dan Efek Samping Kemoterapi pada Pasien Kanker di  RSUD  Prof  .  Dr.  Margono Soekarjo  Purwokerto  Periode Bulan  Januari-Februari  Tahun 2019 The Description of Relationship of Dosage Regimen  and  Side  Effects  of Chemotherapy  in  .  Maj  Farm. 2019;15(2):113–22. Desiana S D. (2018). Efek antipiretik ekstrak daun paliasa (Biocelebes, April 2018, 2(1):47–53. Hadisoewignyo  L.(2013).  Sediaan Solid. Yogyakarta: Pustaka Pelajar.
Kementerian  Kesehatan  RI.(2015) Pusat Data dan Informasi
Kementrian Kesehatan RI 2015. Buletin Kanker. Makroalga E, Ulva H, Marraskuranto E,  Fajarningsih  ND,  Januar  HI.
(2008).  Aktivitas  Antitumor  (
HeLa dan T47D ) dan Antioksidan; 3(2):107–12 Najihudin  A,  Rahmat  D,  Evani  S,
Anwar R, Kaler T, Farmasi F, et al. (2019). Jurnal Ilmiah Farmako Bahari. Formulasi Sediaan    Granul  Instan  dari Ekstrak Etanol Daun Tangohai ( Kleinhovia hospita L .) Sebagai Antioksidan; 91–112. Nofiandi  D.  (2017)  Kadar  Fenolat Total dan Aktivitas Antioksidan Daun Salam (Syzygium polyanthum            (Wight)  Walp .);2(2):53–60. Paramita  S.  (2016)  Tangohai  (
Kleinhovia hospita L .): Review Sebuah  Tumbuhan  Obat  dari Kalimantan  Timur.    Jurnal Tumbuhan Obat Indonesia, vol 9 (1):29–36.
Partridge AH, Burstein HJ, Winer EP.
(2001). Side effects of chemotherapy  and  combined chemohormonal therapy in women  with    early-stage  breast cancer.  J  Natl  Cancer  Inst Monogr.;(30):135–42.
Rahayu C. (2012) Kandungan
Senyawa    Total  Polifenol  dan Flavonoid  Madu  Paliasa  Secara
SpektrofotometriUV-VIS.;
Suroto Hadi Saputra, Kurniawaty SN. (2017).  Bubuk  Instan  dari Ekstrak  Tangohai  (Kleinhovia hospital).  Balai  Ris  dan  Stand Ind  Samarinda  Pros  Semin  Nas Ke-1. 2017;352–8
Wayan  N,  Agustini  S,  Afriastini  M, Maulida  Y.(2013).  Potential  of Fatty  Acid  from  Microalgae
Nannochloropsis Sp as Antioxidant  and  Antibacterial
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 194-202 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
Seminar Nasional XI Pendidikan  Biologi  FKIP  UNS Biologi, Sains, Lingkungan , dan
Pembelajarannya:149–55.
Weller  W.  (2003).  Handbook  of
Pharmaceutical  Excipient.  4th
ed. Washington: American Pharmaceutical Association;
WHO.  (2013)  Buletin  Of  The  World
Organization.
Xiangying  Yu    et  all.  (2013). Identification  of  2,3-dihydro- 3,5-dihydroxy-6-methyl-4H-
pyran-4-one as a strong antioxidant  in  glucose–histidine
Maillard reaction products. Food
Res Int. 51(1):397 – 403.