Ekstrak Etanol Daun Mangga ( Mangifera indica L.) pada Uji Efektivitas Analgetik Mencit ( Mus musculus )
Ethanol Extract of Mango Leaves (Mangifera indica L.) on the Analgesic Effectiveness Test of Mice (Mus musculus)
Eri Kurniawan Kardiansyah 1 , Susi Endrawati 2, 1,2 Politeknik Kesehatan Bhakti Mulia susiendrawati6@gmail.com 1 , erieiikurniawan01@gmail.com 2
DOI: https://doi.org/10.55181/ijms.v10i2.430
Abstract : Mango leaves contain chemical compounds such as alkoloids, flavonoids, steroids, tannins, phenolic  acids,  flavonols,  phenolic  esters  and  mangiferin  (C-glucoxanthones).  The  leaves  have properties as a pain reliever. Mangiferin is a substance contained in mango leaves (Mangifera indica L.) which can provide a pain reliever effect. The aim of this study was to examine the ethanol extract of mango leaves (Mangifera indica L.) to test the power of pain relief and determine the levels of extracts that have analgesic effectiveness. The hypothesis that the ethanol extract of mango leaves has the best analgesic effectiveness in mice (Mus musculus). Types of experimental research. The ethanol extract of mango leaves was made in several doses, including 25 mg/kgBB, 50 mg/kgBB, 100 mg/kgBB, the positive control for the analgesic drug was Acetosal 65 mg and the negative control for cooking oil. The results of the observations included the organoleptic test of the extract, the number of stretches that occurred in the test animals after being induced by acetic acid and the percentage of analgesic power. The data analysis technique uses the ANOVA method with the support of the SPSS program. Statistical data from the study showed that the ethanol extract of mango leaves was significantly different from the positive control, namely p value < 0.05. The ethanol extract of mango leaves at doses of 25 mg/kgBB, 50 mg/kgBB, 100 mg/kgBB provided analgetic power of 22.14%, respectively. 22.46%, and 25.31%. Keywords: Mangifera indica L., analgesic effect, ethanol extract
Abstrak : Daun  mangga  mengandung senyawa  kimia  seperti  alkoloid,  flavonoid,  steroid,  tanin,  acid fenolik, flavonol, ester fenolik serta mangiferin (C- glucoxanthones) . Daun tersebut mempunyai khasiat sebagai  pereda  nyeri.    Mangiferin  merupakan  zat  yang  dikandung  dalam  daun  mangga  ( Mangifera indica L. )  yang  dapat memberikan  efek  Pereda  sakit.  Tujuan  penelitian  ekstrak  etanol  daun mangga ( Mangifera  indica  L. )  untuk  menguji  daya  pereda  rasa  nyeri  dan  menentukan  kadar  ekstrak  yang mempunyai efektivitas analgetik.  Hipotesis ekstrak etanol daun mangga memiliki efektivitas analgetik pada mencit ( Mus musculus ) paling baik. Jenis penelitian eksperimental. Ekstrak etanol daun mangga dibuat beberapa dosis antara lain 25mg/kgBB,50mg/kgBB,100mg/kgBB, kontrol positif obat analgetik digunakan  Asetosal  65  mg  dan  kontrol  negatif  minyak  goreng.  Hasil  pengamatan  meliputi  uji organoleptis ekstrak, banyaknya jumlah geliat yang terjadi pada hewan uji setelah diinduksi asam asetat dan  persen  daya  analgetik.  Teknik  analisa  data  menggunakan  metode  ANOVA  ddengan  dukungan program SPSS. Data statistik penelitian menunjukkan bila ekstrak etanol daun mangga berbeda nyata terhadap kontrol positif yaitu nilai p < 0,05.Ekstrak etanol daun mangga dosis 25 mg/kgBB, 50mg/kgBB, 100mg/kgBB memberikan daya analgetik masing-masing 22,14%, 22,46%, dan 25,31%. Kata kunci : Mangifera indica L., efek analgetik, ekstrak etanol

## PENDAHULUAN
Daun  mangga  dan  manga  ( Mangifera indica L.) adalah tanaman buah yang  memiliki kandungan steroid, alkoloid, flavonoid, flavonol, tanin  fenolik  acid,  fenolik  ester  dan mangiferin (c -gluc xanthones ). Zat aktif simplisia berfungsi sebagai  analgetik  yaitu  mangiferin,  sudah diteliti  oleh  lebih dari  satu peneliti.  Zat  aktif  ini mempunyai  khasiat  sebagai,  antiinflamasi, antidiabetes,  antioksidan,  analgetic,  antitumor, immunodulator dan antipiretik (Jutiviboonsuk & Sardsaengjun, 2010).
Mangiferin  memiliki  salah  satu  manfaat sebagai  analgetik.  Analgetik  dikenal  sebagai
obat pereda sakit nyeri, dapat mengurangi atau mencegah rasa nyeri, tetapi kesadaran pasien tidak  hilang.  (Tjay  &  Rahardja,  2007).  Nyeri adalah rasa sakit, tidak merasa nyaman, terkait dengan kerusakan jaringan. Psikologis seseorang  juga  dapat  memperkuat  rasa  sakit, atau  mencegah  rasa  sakit  (Tjay  &  Rahardja, 2007).
Obat kimiawi di era modern saat ini relatif mahal untuk masyarakat  menengah ke bawah dan memiliki efek samping lebih kuat dibanding obat  tradisional,  Obat  kimia  memberikan  efek samping terhadap tubuh bila di konsumsi pada
kurun  waktu  yang  pendek  maupun  lama. Khasiat  obat  sudah  diteliti    dan  dibuktikan secara  ilmiah,  jadi  apabila  dikonsumsi    bisa lebih  aman.  Pada  penelitian  sebelumnya Mifthaquljanah  (2015),  menggunakan  metode infusa daun mangga sebagai analgetik. Proses ekstraksi  memakai  metode    maserasi,  sebab zat  aktif  daun  mangga  larut  dengan  dalam etanol  dan  bisa  di  pakai  lebih  dari  satu  hari, perbandingan    pada    metode  infusa  hanya mampu bertahan dalam satu hari.

## METODE PENELITIAN
Sampel d aun mangga diambil dari daerah Sukoharjo,  Jawa  Tengah  yaitu  daun  Mangga manalagi  di  petik  dari  daun  ke  tujuh  sampai habis,  warna  daun  hijau  ketuaan.  Uji  dosis menggunakan  hewan  mencit    galur  Swiss jantan,  berumur  3  bulan,  secara    fisik  tidak cacat  dan  syarat  berat  badan  17-20  gram. Pengambilan  sampel  menggunakan Simple Random Sampling .
Data  variabel  bebas  adalah  dosis  ekstrak etanol  daun  mangga,  variabel  tergantung adalah banyaknya frekuensi geliat dan % daya analgetik Mus musculus.
Alat praktikum pada penelitian menggunakan  blender,  bangan  analitik,  kain fanel,  Oven,  waterbath,  kertas  saring,  spuit peroral 1ml, gelas ukur 100 ml, beker gelas 500 ml, cawan poselin 300 ml, dan peralatan glass lainnya.  Bahan  habis  pakai  penelitian  uang disiapkan adalah : daun mangga simplisia 300 g,  acetosal,  asam  asetat,  etanol  70  %,  etanol 96%, Minyak Goreng, Mencit.
Analisis data statistik memakai uji ANOVA dibantu  dengan SPSS programe (Sarwono.J,
2015).  Pengujian  data  sampel  dengan One-
Sample Kolmogorov-Smirnov Test. Uji homogenitas  dengan Test  of  Homogenity  of Variances, dan  perlakuan  pada  sampel menggunakan Uji Post Hoc Tests (LSD) .
Gambar 1 . Skema Pengenceran ekstrak etanol dengan minyak
Keterangan : P1= Dosis 100 mg/kgBB P2= Dosis 50 mg/kg/BB P3= Dosis 25 mg/kgBB
Prosedur  penelitian,  langkah  pertama pemilihan sampel. Sampel  diambil dari daerah Kabupaten  Sukoharjo,  Jawa  Tengah,  daun mangga  manalagi  dipetik  dari  daun  ketujuh sampai  habis,  warna  daun  hijau  ketuaan. Langkah  kedua  membuat  ekstrak  maserasi, dengan menimbang  simplisia  sebanyak  300  g dimasukkan  kedalam  bekerglass,  dilarutkan dengan etanol 96% 1500 ml, diaduk enam jam, didiamkan18  jam  dan  ditutup  plastik,  hasil disaring  dengan  kain  flanel  kedalam  beker glass,  setelah  cawan  porselen  ditara  filter
dimasukan kemudian diuapkan diatas penangas  air,  Ekstrak  ditimbang,  kemudian dihitung rendemennya. (Andrian, Peyne 2000). Langkah ketiga perlakuan kepada mencit.
Hewan  uji  mencit  yang  digunakan  memiliki berat badan berat 17-20 gram dan usia 3 bulan, jumlah  mencit  25  ekor  dibagi  menjadi  lima kelompok  perlakuan,  masing-masing  dosis diberikan secara oral, yaitu :Perlakuan kelompok  I  (kontrol  negatif),  mencit  diberi pelarut  minyak  kelapa.  Kelompok  II  dosis ekstrak 25 mg/kgBB, mencit diberi ekstrak daun
Menimbang 200 mg ekstrak etanol daun mangga + minyak
Ditambah minyak sampai tanda batas Dipipet 25 ml P1 P1 Dipipet 25 ml Ditambah minyak sampai tanda batas P2 P2 P3 P3
mangga.  Kelompok  III  dosis  50  mg/kgBB, mencit  diberi  ekstrak  dosis  50  mg/kg  BB. Kelompok IV dosis 100 mg/kgBB, mencit diberi ekstrak  dosis  100  mg/kgBB.  Kelompok  V kontrol  positif,  mencit  diberi  acetosal  dosis  65 mg/kg  BB.  Untuk  menimbulkan  efek  geliat, mencit  disuntik  dengan  asam  asetat  100
mg/kgBB  melalui intraperitoneal, selanjutnya pengamatan  geliat,  menghitung  jumlah  geliat mencit  setiap  5  menit  sekali  dalam  satu  jam. Gambar  1  menunjukkan  skema  pengenceran sediaan  ekstrak  etanol  daun  mangga  dengan pelarut minyak kelapa.

## HASIL PENELITIAN
Simplisia  300  g  dilarutkan  dengan  etanol 96 % dengan perbandingan 1:5 sebanyak 1500 ml  .  Hasil  ekstrak  kental  sebanyak  42,33  g, sedangkan  hasil rendemen 14,04 % b / b. Organoleptis  yang  dihasilkan  adalah  bau aromatik, bentuk ekstrak kental. Rasa pahit dan warna hitam kehijauan
Hasil  pengamatan  uji  efek  analgetik ekstrak  etanol  daun mangga  terhadap mencit, dapat dilihat pada penjelasan tabel 1. Hewan uji dibagi dalam lima perlakuan kelompok masing- masing terdiri dari lima ekor mencit. Perbedaan sediaan    ekstrak  yang  dibuat  adalah  dosis  25 mg/kgBB,  50  mg/kgBB  dan  100  mg/kfBB. Kontrol positif (Acetosal) dosis 65 mg/kgBB dan kontrol  negatif  (minyak  kelapa)  dengan  dosis 25mg/kgBB.  Pengamatan  jumlah  geliat  reaksi nyeri  yang  diperlihatkan  oleh  hewan  uji, dilakukan  selama  satu  jam,  dan  jarak  waktu pengamatan geliat mencit tiap lima menit sekali.
Rata-rata  jumlah  persen  daya  analgetik untuk  kontrol  positif  (asetosal  65  mg/kgBB)
40,65%, 25mg/kgBB, 50mg/kgBB, dan 100mg/kgBB  terhadap  mencit  yang  diinduksi Asam  Asetat  berturut-turut  adalah  22,14%, 22,46%,  25,31%  dapat  dilihat  pada  tablet  1. Daya  analgetik  ekstrak  etanol  daun  mangga lebih  kecil  dari  kontrol  positif  (acetosal)    dosis 65  mg/kg  BB.  Hasil  yang  diperoleh  dari pengujian, selanjutnya dianalisis secara statistik  menggunakan  SPSS  dengan  metode uji One Way Anova.
Untuk melihat data geliat mencit, dilakukan pengamatan tiap 5 menit sekali. Hasil geliat  mencit  dengan  waktu  percobaan  dapat dilihat  pada  gambar  2.  Pada  kontrol  negatif (minyak  kelapa)  sering  terlihat  adanya  geliat, sedangkan  pada  kontrol  positif  (acetosal) terlihat sedikit atau jarang terlihat. Hal tersebut disebabkan minyak kelapa netral, tidak berefek analgetik,  dan  untuk  acetosal    adalah    obat kimia yang mengandung zat aktif  dengan efek analgetik.  Zat  aktif  mangiferin  larut  lebih maksimal dalam pelarut atanol, dalam penelitian ini digunakan etanol 96% Tabel 1 . Rata-Rata Jumlah  Geliat dan % Daya Analgetik Perlakuan Rata-Rata Jumlah Geliat Rata-Rata Daya Analgetik (%) Minyak kelapa 63,2 0 Acetozal dosis 100mg/kgBB 37 40,65 Ekstrak etanol daun mangga Dosis 100mg/kgBB 47,2 25,31 Ekstrak etanol daun mangga Dosis 50mg/kgBB 49 22,46 Ekstrak etanol daun mangga Dosis 25mg/kgBB 49,2 22,16
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 5` 10` 15` 20` 25` 30` 35` 40` 45` 50` 55` 60` ge lia t m en ci t waktu Negatif (Minyak goreng) Positif
(Acetosal)
Dosis 100 mg
Dosis 50 mg
Dosis 25 mg
Gambar 2 . Grafik Hubungan Antara Waktu Percobaan dengan Geliat Mencit
Gambar 3 . Grafik Rata-Rata Geliat Mencit
Grafik  geliat  rata-ratat  mencit,terlihat pada gambar 3. minyak memliki   jumlah geliat rata  rata  paling  besar,  karena  minyak  tidak memiliki  aktivitas  analgetik,  acetosal  memliki rata  rata  jumlah  geliat  paling  sedikit  sebab acetosal  mempunyai  daya  analgetik  kuat. Semakin  tinggi  kadar  atau  dosis  ektrak  etanol
daun  mangga,  maka  semakin  kecil  rata-rata geliat yang ditimbulkan, karena ekstrak tersebut memiliki daya analgetik. Hal tersebut disebabkan,  efek  ekstrak  etanol  dosis  100 mg/kg/BB  dapat  terabsorbsi  didalam  saluran pencernaan  lebih  banyak  dari  pada  dosis  25 mg/kgBB dan 50 mg/kgBB.
Gambar 4. Presentase Uji Daya Analgetik
Hasil  rata-rata  %  daya  analgetik  ekstrak daun  mangga  dapat  dilihat  pada  gambar  4. Pada dosis 100 mg/kgBB menghasilkan persen daya  analgetik  25,31%,  mendekati  kontrol positf  (acetosal)  40,65%,  dari  pada  dosis  25 mg/kgBB (22,14%) dan 50 mg/kgBB (22,46%). Hal  ini  menunjukkan  bahwan  dosis  100  mg memliki efek analgetik yang lebih dibandingkan 25  mg/kgBB  dan  50  mg/kgBB,    sebab  pada dosis  100  mg/kgBB  memiliki  kandungan  zat aktif  lebih  banyak  dibandingkan  dengan  dosis lainnya.
Uji One-sample Kolmogorov-Smirnov digunakan  untuk  menguji  data,  dengan  hasil
nilai  signifikansi  0,291  >  0,05,  terlihat  bahwa data  terdistribusi  normal.  Pada  uji Test  of Homogenity of variances dengan nilai signifikansi 0,783 > 0,05, artinya menunjukkan bahwa  varian  adalah  homogen.  Selanjutnya dilakukan  uji Anova hasil  nilai  probabilitas diperoleh 0,000 < 0,05
Acetosal  sebagai  kontrol  positif,  sediaan uji  ekstrak  etanol  daun  mangga  ada  empat dosis  (a)  65  mg/kgBB,  (b)  25mg/kgBB,  (c) 50mg/k BB, (d) 100mg/kgBB. Hasil uji Post Hoc Tests  (LSD) menunjukkan  ada  beda  antar perlakuan, ab, ac, dan ad. Antara perlakuan, bc, bd, dan cd, menunjukkan tidak ada perbedaan
63.2 37 47.2 49 49.2 0 10 20 30 40 50 60 70 Negatif (Minyak Goreng)
Positif (Acetosal)
Dosis 100 mg Dosis 50 mg Dosis 25 mg Rata-Rata Geliat Positf (Acetosal)
Dosis 100 mg Dosis 50 mg Dosis25 mg Series 1 40.65
25.31 22.46 22.16 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 RA ta % D A
yang  signifikan  antar  perlakuan.hasil  uji. Terdapat  geliat  mencit  antar  kelompok  uji acetosal  dengan  semua  perlakuan  dosis ekstrak dilihat dari signifikans i (p) 0,000 < 0,05.

## PEMBAHASAN
Simplisia  bahan  uji  penelitian  daun mangga  ( Mangifera  indica L.),  dibuat  sediaan ekstrak  etanol,  sebagai  pengujian  analgetik. Simplisia ini memiliki kandungan mangirefin (C- glucoxanthones ),  tanin,  alkaloid,  asam  fenolik, flavonoid,  steroid,  ester  fenolik  dan  flavonol. (Jutiviboonsuk & Sardsaengjun, 2010).
Metode maserasi dilakukan selama 48 jam agar  tercapai  keseimbangan  antara  bahan yang diekstraksi pada bagian dalam sel dengan bahan yang masuk ke dalam cairan, sehingga diharapkan  zat  yang  diekstraksi  sempurna. Maserasi dilakukan dengan  perendaman tertutup, terlindung dari cahaya langsung untuk mencegah  reaksi  dikatalis  cahaya  atau perubahan warna.
Maserasi dilakukan dengan pencampuran berulang, sehingga permukaan pelarut menutupi seluruh permukaan serbuk simplisia, dan  pencampuran  juga  berfungsi  untuk menyeimbangkan  konsentrasi  larutan  di  luar serbuk simplisia, sehingga perbedaan konsentrasi  larutan  di  dalam  dan  di  luar  sel diupayakan bisa sekecil mungkin.
Pencampuran yang dilakukan, akan menyeimbangkan  konsentrasi  bahan  ekstraksi lebih  cepat  dalam  cairan.  Hasil  maserasi kemudian  diangin-anginkan  dalam  cawan sampai cairan penyari menguap. Ekstrak kental akan  diperoleh  dengan  memanaskan  secara perlahan diatas waterbath . Maserasi dilakukan dengan cara merendam  potongan  kering  simplisia  daun mangga  300  yang  direndam  dengan  pelarut etanol  96%  1500  ml,  kemudian  diperoleh ekstrak  kental  42,13  g,  hasil  rendemen  14,04 % b / b, dan  organoleptis  yang  dihasilkan  adalah bau aromatik, bentuk ekstrak kental. Rasa pahit dan  warna  hitam  kehijauan.  Hasil  rendemen 14,04  % b / b, dan  organoleptis  yang  dihasilkan adalah  bau  aromatik,  bentuk  ekstrak  kental. Rasa  pahit  dan  warna  hitam  kehijauan.  Data menunjukkan bila ekstrak etanol daun mangga memiliki perbedaan signifikansi dengan kontrol positif  dari  nilai  p  <  0,05. Ekstrak  etanol  daun mangga pada dosis 25 mg/kgBB *22,14%), 50 mg/kgBB 22,46%, dan 100 mg/kgBB (25,31%).
Pemilihan  proses  ekstraksi  untuk  isolasi zat  sangat  menentukan  hasil  isolat  yang dihasilkan.  Maserasi  merupakan  salah  satu metode ekstraksi yang keunggulannya terletak pada  metode  pengolahannya,  peralatan  yang dipakai sederhana dan mudah didapat. Metode ekstraksi  dipilih  karena  zat aktif  yang terkandung  dalam  daun  mangga  dapat  larut
dalam  etanol.  Maserasi  dilakukan  tanpa pemanasan langsung untuk  menghindari kerusakan pada komponen ruas daun mangga yang tidak tahan panas. Berdasarkan penelitian (  Islam et  al ,  2010  ),  ekstrak  etanolik  daun manga  terbukti  berpotensi  efek  analgesik, antiinflamasi,  antibakteri dan  antijamur.  Hal  ini relevan  dengan  penelitian  (Mohanvelu et  al , 2015),  bila  ekstrak  daun  mangga  yang dimaserasi menggunakan air juga terdapat efek analgesik ketika diujikan  pada tikus albino. Pada  penelitian  (Khafida,  R  &  Endrawati, S,  2020)  flavonoid  dan  alkaloida  yang terkandung pada daun sirsak juga mempunyai efek analgetik, pengujian menggunakan mencit Daun  sirsak  mempunyai  kandungan  zat  aktif alkaloida, steroid, kumarin, terpenoid, flavonoid,  dan  tanin.  Senyawa  golongan flavonoid  dan  alkaloida  ini  yang  bertanggung jawab  memberikan  efek  analgetik  yang menghambat biosintesis prostaglandin (Wulandari, S.A & Aznam, N, 2018). Perbedaan penelitiannya,  pada  uji  daun  sirsak  dibuat sediaan dekokta dengan menggunakan konsentrasi 1%, 2% dan 4%, sediaan dekokta paling  efektif  sebagai  daya  analgetik  pada kadar  4%  sebesar  38,07%  ±  1,07%,  masih dibawah daya analgetik kontrol positif (asetozal).
Keunggulan mencit sebagai hewan penelitian adalah, umur mencit relative singkat, jumlah  keturunan  banya,  mudah  dalam penanganan,  karakteristik  reproduksi  mirip dengan hewan mamalia lain, struktur anatomi, fisiologi  dan  genetic  hamper  sama  dengan manusia (Fianti, 2017). Hewan uji penelitian ini mencit  putih  jantan  (Mus  musculus)  jenis kelamin jantan, berat badan 17-20 gram, umur 3 bulan, ditempatkan didalam wadah kandang, tiap  kandang    diberi  makanan  yaitu  pellet. Hewan uji dipuasakan lebih dulu selama 18 jam namun  tetap  diberi  minum ad  libitum, agar kondisi  mencit  sama,  juga  untuk  mengurangi pengaruh  makanan  yang  dikonsumsi  dan mengurangi  stress.    Hewan  uji  diadaptasikan dengan kondisi laboratorium selama 7 hari.
Penelitian  (Olorunfemi et  al, 2012)  juga meneliti  daun  mangga  sebagai analgesic, bedanya menggunkan metode maserasi dingin pada dosis 100mg/kg BB, Penelitian (Mohanvelu et al , 2015), pada penelitian daun manga  digunakan  sebagai  analgetik  dengan metode esktrak aqueous pada dosis 400 mg/kg BB  dan  (Garrido et  al, 2001),  menggunakan metode  dekokta  dengan  pelarut  polar  pada dosis 50-1000 mg/ lg BB,

## SIMPULAN
Ekstrak  etanol  daun  mangga  memiliki daya  analgetik  terhadap  hewan  uji  mencit.
Ekstrak  etanol  daun  mangga  dosis  25 mg/kgBB, 50mg/kgBB, 100mg/kgBB
memberikan  daya  analgetik  masing-masing sebesar 22,14%, 22,46%, dan 25,31%.

## DAFTAR PUSTAKA
Adrian, Peyne. 2000. Analisis Ektraktif Tumbuhan  Sebagai  Sumber  Bahan Obat. Pusat  Penelitian:  Universitas Negeri Andalas. Padang
Fianti LL. 2017. Efektivitas perasan daun afrika (Vernonia  amygdalina  Del)  terhadap penurunan  kadar  glukosa  darah  mencit (Mus  musculus).  [Disertasi].  Bandung. Universitas Pasundan.
Garrido,  Gabino,  D  Gonzalez,  C  Delporte,  N Backhouse,  G  Quintero,  AJ  Nunez- Selles and MA Morales. 2001. Analgesic and anti-inflammatory effects of Mangifera indica L. extract
(Vimang ).Phytotherapy Research. 15: 18- 21
Islam,  M.,  Mannan,  M.,  and  Kabir,  M.2010. Analgesic  and  Antimicrobial  Effects  of etanol Extract of Mango Leaves . Journal Bangladesh 8 (2), 239-234.
Jutiviboonsuk,  A.,  &  Sardsaengjun,  C.  2010. Mangiferin  in  Leaves  of  Three  Thai Mango  (Mangifera  indica  L.). Varieties journal  IJPS, 6 (3).
Khafida,  R  &  Endrawati,  S.  2020.  Uji  Daya Analgetik Dekokta Daun Sirsak (Annona Muricata  L.)  terhadap  Mencit  Jantan (Mus  Musculus)  Galur  Swiss. Jurnal
IJMS  vol  7  no  1 .  Politeknik  Kesehatan Bhakti Mulia. Sukoharjo.
Miftaquljanah,  N.  2017.  Efek  Analgetik  Daun Mangga  ( Mangifea  Indica L.)  Pada Mencit  Yang  DIinduksi  Asam  Asetat. Universitas Muhammadiyah. Surakarta.
Mohanvelu,  Rajalakshmi,  A.  Sudha  Madhuri, Ramabhimaiah,  S.  2015.  Eva;uation  of analgesic  activity  of  agueous  extract  of Mangifera  indica  leaves  in  albino  rats. International Journal of Basic and Clinical Pharmacology. 4(1): 107-110
Sarwono.J.  2015. Rumus-Rumus  Populer dalam  SPSS  22  untuk  riset  skripsi. C.V ANDI  OFFSET  hal: 154,  164,  194, 195, 204. Jogyakarta.
Tjay,  T.,  &  Rahardja,  K.  2007. Obat-obat penting  khasiat,  penggunaan,  dan  efek efek sampingnya edisi VI. PT Elex Media Komputindo Kelompok Gramed. Jakarta.
Olorunfemi, O.J, D.C Nworah, J.N Egwurugwu and V.O  Hart. 2012. Evaluatiom  of  anti- inflamatory,  analgesic  and  antipyretic effect of Mangifera indica leaf extract on fever-induced albino rats (wistar). Brittish journal of Pharmacology and Toxicology . 3(2):54-57.
Wulandari, S,A & Aznam. 2018. Uji Analgetik Infusa Daun Sirsak (Annona muricataL.) Dengan Metode Geliat . Jurusan
Pendidikan  Kimia,  FMIPA  Universitas Negeri Jogyakarta. Yogyakarta.