## STANDARISASI  EKSTRAK ETANOL HERBA TESPONG (Oenanthe javanica (Blume) DC)
Lia Fikayuniar * , Ermi Abriyani, Siti Aminah
Fakultas Farmasi, Universitas Buana Perjuangan Karawang, Karawang, Indonesia.
*Penulis Korespondensi: lia.fikayuniar@ubpkarawang.ac.id

## ABSTRAK
Pemeriksaan  standarisasi  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  standar  mutu  dari  ekstrak  dan  juga memastikan  agar  ekstrak  herba  tespong  ( Oenanthe  javanica (Blume) DC)  memenuhi persyaratan  yang  telah  ditetapkan  sehingga  ekstrak  yang  digunakan  terjamin  kemananan, efikasi, dan kualitas-nya dengan baik. Metode yang digunakan yaitu uji parameter spesifik dan non-spesifik  standar  mutu  ekstrak  yang  memenuhi  persyaratan  yang  telah  ditetapkan  pada literatur.  Hasil  penelitian  dapat  disimpulkan  bahwa  standarisasi  dari  ekstrak  etanol  herba tespong  baik  uji  parameter  standar    spesifik  maupun  non  spesifik  yaitu  secara  identitas  nama latin ( Oenanthe javanica (Blume) DC) bagian yang digunakan herba, organoleptik  kental, bau khas dan berwarna hijau kehitaman, kadar sari yang larut dalam air 9,82%±1,76, kadar sari yang larut dalam etanol 40,45% ±1,32 dan susut pengeringan 7,38% ±1,01, penetapan kadar abu total 7,81%±0,61.  Hasil  skrining  fitokimia  ekstrak  herba  tespong  mengandung  senyawa  metabolit flavonoid,  alkaloid,  fenol,  kuinon,  steroid,  dan  saponin,  sedangkan  pada  profil  kromatogram KLT ditandai adanya bercak berwarna biru berfluoresensi pada panjang gelombang  (ʎ) 366 nm dengan latar belakang berwarna ungu, memiliki nilai Rf sebesar 0,7, berarti memiliki metabolit sekunder.
Kata kunci: Herba tespong ( Oenanthe javanica (Blume) DC), Kromatografi lapis tipis, Standarisasi

## ABSTRACT
This  Standardization  Examination  aims  to  know  the  quality  standards  of  extracts  and  also ensure that the herbal extract tespong Oenanthe javanica (Blume) DC meets the requirements that have been set  so that the extract used is  guaranteed security, efficacy, and good quality. The  method  used  is  to  test  the  specific  parameters  and  non-specific  quality  standards  of extracts  that  meet  the  requirements  set  out  in  the  literature.  The  results  of  the  study  can  be concluded that the standardization of herbal ethanol extract tespong both test specific and non- specific  standard  parameters  namely  identity  Latin  name  ( Oenanthe  javanica (Blume)  DC) part  used  herb,  organoleptic  viscous,  distinctive  smell  and  blackish  green  colour,  water- soluble  sari  content  9.82%±1.76,  ethanol-soluble  cider  content  40.45%  ±1.32  and  shrink drying  7.38%  ±1.01,  determination  of  total  ash  content  of  7.81%±0.61.  The  results  of phytochemical  screening  of  tespong  herb  extract  contain  flavonoid  metabolite  compounds, alkaloids, phenols, quinine, steroids, and saponins. While in the chromatogram profile of KLT is  characterized  by  blue  patches  fluorescence  at  wavelengths  (ʎ)  366  nm  on  a  purple background, has an Rf value of 0.7, meaning it has secondary metabolites.
Keywords: Tespong herbs  ( Oenanthe  javanica (Blume)  DC),  Thin  layer chromatography, Standardization.

## PENDAHULUAN
Tanaman herba tespong ( Oenanthe  javanica (Blume) DC)  yaitu tumbuhan  berupa  perdu  tegak,  yang tingginya  mencapai  sekitar  10-150  cm, memiliki  daun  bertangkai,  anak  daun yang  tersusun  berselang    dan  bunga berwarna putih tersusun dari satu tandan (Rostinawati,  2010).  Selain  banyak digunakan  sebagai  lalapan, O.  javanica (Blume) DC  juga  sering  digunakan sebagai  anti  nyeri  pinggang,  demam, flu,  memar,  digigit  ular  dan  kala jengking (Rostinawati, 2010). O. javanica (Blume) DC tidak
mengandung oenanthe racun/toksin seperti yang terkandung dalam oenanthe lainnya. O.  javanica (Blume) DC mengandung  minyak  atsiri  dengan  117 komponen senyawa yang dapat dijadikan  fungisida,  dan  mengandung vitamin A, C, B2, selain itu tanaman ini pula kaya akan mineral seperti P, Fe dan Ca juga mengandung senyawa flavonoid dan golongan fenolat (Rostinawati, 2010).
O.  javanica (Blume) DC  juga
kaya akan kandungan senyawa sesquiterpen  diantaranya  α-Copaene (18.3%),  z-caryophyllene  (0.34%)  α- cuprenene  (0.40%)  dan  cembrene-type diterpen  seperti  incensole  (26.4%)  dan
cembrenol  (0.45%)  (Pattiram et  al. , 2011), memliki aktivitas hepatoprotektif dari  total  fenolik    (Ai et  al. ,  2016), memiliki  efek  anti-hepatitis    B  virus (HBV) (Han et al. , 2008), dan memiliki aktivitas antioksidan (Bhaigyabati et al. , 2017).  Pemeriksaan  Standarisasi  ini bertujuan untuk mengetahui standar dari Ekstrak  dan  juga  memastikan  agar ekstrak  herba  tespong O.  javanica (Blume) DC yang di teliti ini memenuhi persyaratan yang telah ditetapkan sehingga ekstrak yang digunakan terjamin kemananan, efikasi, dan kualitas-nya  dengan  baik  (Depkes  RI, 1995).

## METODE PENELITIAN

## a. Pembuatan Ekstrak
Sejumlah  Serbuk  Herba  tespong ditimbang, lalu diekstraksi dengan cara  maserasi  selama  24  jam dengan  etanol  96%    selama  tiga hari, kemudian dikentalkan menggunakan Rotary Evaporator .
b. Penentuan Parameter- Parameter Standarisasi
1. Parameter Non Spesifik
a. Parameter  Susut  Pengeringan (kadar air secara gravimetri)
Penentuan  susut  pengeringan dilakukan menggunakan
metode gravimetri yaitu
dengan  memasukkan  1  gram ekstrak  dan  timbang  dalam wadah  yang  telah  ditara. Kemudian  dikeringkan  pada suhu    105 0 C  selama  5  jam dan ditimbang. Lanjutkan pengeringan dan timbang
kembali  pada  jarak  1  jam hingga bobot konstan (Depkes, 2000).
b. Parameter Bobot Jenis Menimbang piknometer
kosong ukuran 25 mL,
kemudian  piknometer  diisi
penuh dengan air dan
ditimbang ulang dapat ditetapkan kerapatan air. Kemudian piknometer kosong  diisi  penuh  dengan ekstrak yang telah diencerkan sebanyak 5% dengan air, lalu ditimbang dengan berat
ekstrak yang mempunyai volume 25 ml paa suhu 25 0 C,
Sehingga  dapat  ditetapkan kerapatan  ekstrak  (Depkes RI,2000).
c. Parameter Kadar Abu
Lebih  kurang  2  sampai  3 gram  ekstrak  digerus  dan ditimbang, kemudian
dimasukkan  ke  dalam  krus
silikat  yang  telah  dipijarkan dan ditara, ratakan. Dipijarkan  perlahan  hingga arang  habis,  dinginkan  dan ditimbang (Depkes, 2000).
2. Parameter Spesifik
a. Identitas (Determinasi)
Pendeskripsian tata nama diantaranya    nama  ekstrak, nama  latin  tumbuhan,  bagian tumbuhan  yang  digunakan dan nama Indonesia tumbuhan (Depkes, 2000).
b. Organoleptik
Pengujian organoleptik ekstrak  herba  tespong O. javanica (Blume) DC
dilakukan secara visual untuk mengetahui mengenai bentuk, warna,  dan  bau  dari  ekstrak herba tespong (Depkes,2000). c. Kadar sari larut dalam air
Maserasi  sebanyak  0,5  gram ekstrak selama 24 jam dengan 100 ml air kloroform menggunakan labu bersumbat  sambil  sesekali dikocok selama 6 jam pertama dan dibiarkan selama 18  jam.  Kemudian  disaring, sebanyak  20  ml  filtrat  yang dihasilkan  diuapkan  hingga
kering  dalam  cawan  dangkal yang  telah  ditara,  lalu  residu dipanaskan  pada  suhu  105 0 C hingga  bobot  tetap.  Dihitung kadar  dalam  persen  senyawa yang larut air, terhadap ekstrak awal (Depkes, 2000).
d. Kadar Sari larut dalam etanol
Maserasi  sebanyak  0,5  gram ekstrak selama 24 jam dengan  100  ml  etanol  (98%) menggunakan labu bersumbat  sambil  sesekali dikocok selama 6 jam
pertama dan dibiarkan selama  18  jam.  Kemudian disaring,  sebanyak  20  ml filtrat yang dihasilkan diuapkan hingga kering dalam  cawan  dangkal  yang telah  ditara,  lalu  residu dipanaskan pada suhu 105 0 C hingga  bobot  tetap.  Dihitung kadar  dalam  persen  senyawa yang  larut  dalam  etanol,
terhadap ekstrak awal (Depkes, 2000) 3. Uji Skrining Fitokimia
Skrining fitokimia dilakukan
terhadap  simplisia  herba  tespong O.  javanica (Blume) DC  dan ekstrak etanol 96% herba tespong.
Skirining Fitokimia yang dilakukan meliputi skrining
metabolit sekunder alkaloid, flavonoid,  tanin,  fenol,  saponin, steroid,  terpenoid  dan  kuinon (Harborne, 1987).
4. Profil  Kromatrografi  Lapis  Tipis ( KLT )
Plat  KLT  di  oven  pada  suhu 105 ℃ untuk  diaktifkan  dan  diberi batas atas 0,5 cm dan batas bawah 1  cm,  lalu  ditotolkan  ekstrak etanol  herba  tespong O.  javanica (Blume) DC.  Campuran  eluen yang  digunakan  etanol  -  asam asetat  -  aquades  (2:6:2)  disiapkan sebanyak 10 ml. Eluen dimasukan ke  dalam Chamber yang  telah dijenuhkan terlebih dahulu.
Setelah  jenuh,  plat  KLT  yang telah ditotol kan sampel, dimasukan  dan  dibiarkan  hingga proses  elusi  selesai.  Plat  KLT diamati  dibawah  sinar  lampu  UV pada  ʎ  254  nm,  sinar  lampu  UV pada  ʎ  366nm,  dan  diamati perbedaannya.

## HASIL PENELITIAN
Herba  Tespong  yang  digunakan pada  penelitian    ini  adalah  dalam bentuk  simplisia  yang  dikeringkan,
pelarut  yang  cocok  akan  mudah berpenetrasi    ke  dalam   herba  tespong, agar  zat-zat  pada  sampel  uji  mudah untuk  diekstrkasi.  Sampel  di  ekstraksi dengan  metode  dingin  yaitu  maserasi
menggunakan  pelarut  universal  yaitu etanol  dengan  sifat  nya  yang  mampu menarik  metabolit  sekunder  yang  sifat kepolaran  nya  polar,  semi  polar,  dan non  polar  (Harborne,  J.B.,  1987).
Tabel 1. Hasil pemeriksaan parameter non-spesifik ekstrak herba tespong ( O. javanica ).
No Parameter Standarisasi Ekstrak Hasil 1. Kadar Air (%) 6,73 + 0,89 2. Kadar Abu Total (%) 9,20 + 1,10 3. Bobot Jenis Ekstrak (g/ml) 1,03 + 0,06 Identitas (Determinasi) Tahap pertama penelitian ini yaitu dilakukannya determinasi tanaman.
Determinasi dari suatu tanaman
bertujuan untuk membuktikan kebenaran tanaman yang akan digunakan sebagai bahan dari
penelitian,  tanaman  herba  tespong  di determinasi di Pusat Penelitian Biologi - LIPI, Bogor, Jawa Barat. Hasil determinasi Nomor 20/ IPH.1.01/If.07/1.2020 menunjukan bahwa  tanaman  yang  digunakan  benar Oenanthe javanica (Blume) DC .
Tabel 2. Hasil pemeriksaan parameter spesifik standarisasi ekstrak herba tespong ( O. Javanica ).
No Parameter Standarisasi Ekstrak Hasil 1 Organoleptik: Bentuk, bau, dan warna bentuk     : Kental warna      : Hijau kehitaman bau          : Khas 2 Kadar Sari larut etanol (%) 40,45 + 1,32 3 Kadar Sari larut air (%) 9,76 + 1,75

## Uji Skrining Fitokimia
Hasil  skrining  fitokimia  simplisia ekstrak  herba  tespong  ( O.  javanica ) dapat  dilihat  pada  Tabel  3  bahwa ekstrak  herba  tespong  ( O.  javanica ) positif  mengandung  metabolit  sekunder
alkaloid,  flavonoid,  fenol,  saponin,  dan steroid.  sejalan  dengan  penelitian  yang dilakukan  Kancanawatie,  menyatakan bahwa ekstrak herba tespong mengadung senyawa polifenolat, saponin, dan kuinon.
Tabel 3. Hasil pengujian skrining fitokimia ekstrak herba tespong ( O. javanica ).
Senyawa metabolit sekunder Ekstrak etanol 96 % herba tespong Alkaloid + + Flavonoid + Fenol + Tanin - Terpenoid - Kuinon + Saponin + Steroid + Keterangan :
(+)     :  Mengandung golongan senyawa.
(-)      : Tidak mengandung golongan senyawa.
Profil  Kromatrografi  Lapis  Tipis  ( KLT )
Analisis KLT dilakukan terhadap ekstrak  etil  asetat  herba  tespong  ( O.
javanica (Blume) DC) untuk
memperoleh eluen yang sesuai sehingga  dapat  memisahkan  senyawa-
senyawa yang terkandung dalam sampel. Dengan mengamati pola kromatogram dan nilai Rf yang tampak ketika  plat  KLT  disinari  lampu  UV dengan panjang gelombang (ʎ) 254 nm dan ʎ 366 nm.
Gambar 1. Profil KLT dari ekstrak etanol herba tespong, (1) Sebelum dilihat dibawah lampu UV, (2) dilihat pada lampu UV λ 254 nm, (3) dilihat pada lampu UV λ 366 nm.

## PEMBAHASAN
Hasil  pada  Tabel  1  menunjukkan hasil  kadar  air  ekstrak  etanol  herba tespong  sebesar  6,73  %  +  0,89  artinya nilai  kadar  air  dari  ekstrak  herba tespong  ini  memenuhi  standar  yang diperbolehkan.  Standar  kadar  air  yang diperbolehkan  dalam  sediaan  obat tradisional  termasuk  ekstrak  adalah tidak  melebihi  10%  (Depkes,  1994). Kadar  air  yang  melebihi  10%  dapat mengakibatkan  ekstrak  akan  mudah  di tumbuhi jamur (Isnawati dan arifin,2006). Sedangkan pengujian kadar abu total menunjukkan hasil yang memenuhi  persyaratan  ialah  kadar  abu ekstrak herba tespong sebesar 9,20 % + 1,10  hal  ini  menunjukkan  bahwa  sisa bahan  anorganik  dalam  ekstrak  etanol herba tespong sebesar 9,20%. Kadar abu seharusnya  mempunyai  nilai  kecil, berdasarkan  kemenkes  RI  Nomor  26 bahwa nilai kadar abu tidak boleh lebih
dari  10,2%  karena  parameter  standar kadar  abu  ini  menunjukkan  adanya cemaran  logam  berat  yang  tahan  pada suhu  tinggi  (Depkes  RI,  2009).  Secara organoleptik    ekstrak   adalah   ekstrak kental, berwarna  hijau  kehitaman, bau khas.  Pengujian  Standarisasi  kadar  sari larut air dan etanol merupakan indikator kadar  senyawa  aktif  yang  dapat  tersari baik  oleh  pelarut  etanol  maupun  air. Hasil  pengujian  menunjukkan  bahwa nilai  kadar  sari  larut  etanol  lebih  besar dari  kadar  sari  larut  air  yaitu  sebesar 40,45%  +  1,32  untuk  kadar  sari  larut etanol,  hal  ini  menunjukkan  bahwa kadar  senyawa  aktif  dalam  ekstrak etanol  herba  tespong  cukup  mudah tersari  oleh  pelarut  etanol.  Sedangkan untuk kadar sari larut air sebesar 9,76 % + 1,75.
Berdasarkan penelitian yang sudah  dilakukan  menyatakan  bahwa ekstrak  herba  tespong  mengandung
1 2 3
senyawa  metabolit  flavonoid,  alkaloid, fenol,  kuinon,  steroid,  dan  saponin, senyawa-senyawa tersebut yang memiliki  khasiat  sebagai  antioksidan dan  berkhasiat  sebagai  antibakteri. Ekstrak herba tespong memiliki kandungan  senyawa  flavonoid  yang umumnya memiliki khasiat dapat menghambat pertumbuhan bakteri (Cushinie,  2005),  sedangkan  senyawa fenol  yang  terkadung  didalam  ekstrak herba  tespong  umumnya  memiliki khasiat sebagai antioksidan (Janeiro and Brett, 2004). Hasil kromatografi menggunakan eluen etanol - asam asetat -  aquades  (2:6:2)  Menunjukkan  hasil bahwa  dalam  ekstrak  herba  tespong mengandung  senyawa,  ditandai  adanya bercak  berwarna  biru  berfluoresensi pada  ʎ  366  nm  dengan  latar  belakang berwarna  ungu,  memiliki  nilai  Rf sebesar  0,7  seperti  yang  ditunjukkan pada Gambar 1.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan,  maka  dapat  diambil kesimpulan  bahwa  standarisasi  dari ekstrak  etanol  herba  tespong  baik  uji parameter standar  spesifik maupun non spesifik yaitu secara identitas nama latin ( Oenanthe javanica (Blume)DC) bagian yang  digunakan  herba,  organoleptik
kental,  bau  khas  dan  berwarna  hijau kehitaman,  kadar  sari  yang  larut  dalam air  9,82%  ±  1,76,  kadar  sari  yang  larut dalam etanol  40,45%    ±  1,32  dan  susut pengeringan  7,38%  ±  1,01,  penetapan kadar  abu  total  7,81%  ±  0,61.  Hasil skrining  fitokimia  kstrak  herba  tespong mengandung senyawa metabolit flavonoid,  alkaloid,  fenol,  kuinon, steroid,  dan  saponin.  Sedangkan  pada profil  kromatogram  KLT ditandai adanya bercak berwarna biru berfluoresensi  pada  ʎ  366  nm  dengan latar belakang berwarna ungu, memiliki nilai  Rf  sebesar  0,7,  berarti  memiliki metabolit sekunder.

## DAFTAR PUSTAKA
Ai,  G. et  al .  The  protective  effect  of total  phenolics  from Oenanthe Javanica on  acute  liver  failure induced by D-galactosamine. Journal  of  Ethnopharmacology . 2016; 53-60.
Bhaigyabati,  T. et  al .  Antioxidant Activity, Total Phenolic and Total Flavonoid  Content  of Oenanthe Javanica  Blume (Dc)  Collected From Imphal West District.
International  Research  Journal  of Pharmacy, 2017: 63-68.
Cushnie, TPT., and Lamb, AJ. Antimicrobial Activity of Flavonoids. International  Journal of Antimicrobia l, 2005: 343-356.
Depkes  RI.  1994.  Keputusan  Menteri Kesehatan  Republik  Indonesia Nomor:
661/MENKES/SK/VII/1994 tentang Persyaratan Obat Tradisional.  Jakarta:  Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Departemen Kesehatan  Republik
Indonesia.   1995.  Farmakope Indonesia,  Edisi IV.
Depkes,  RI.  2000.  Parameter  Standar
Umum  Ekstrak  Tumbuhan  Obat. Cetakan Pertama. Jakarta: Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan Makanan. Depkes  RI.  2009.  Keputusan  Mentri Kesehatan  Republik  Indonesia Nomor: 261/MENKES/SK/IV/2009 tentang Farmakope Herbal Indonesia. Jakarta: Menteri Kesehatan Republik Indonesia.
Depkes, RI. 2010. Suplemen 1
Farmakope  Herbal  Indonesia .
Jakarta:  Departemen  Kesehatan RI. Han, YQ. et al. In vivo and in vitro anti- hepatitis  B  virus  activity  of  total phenolics from Oenanthe javanica . Journal of Ethnopharmacology ,  2008:  148- 153. Harborne,  J.B.  Metode  Fitokimia, Penuntun Cara Modern Menganalisis  Tumbuhan  Edisi kedua, diterjemahkan oleh Kosasih  Padmawinata  dan  Iwang
Soediro.  Bandung:  Penerbit  ITB.
1987 Isnawati, A dan Arifin K.M. Karakterisasi Daun Kembung Sungsang ( Gloria superba L.) dari Aspek  Fitokimia. Media  Litbang
Kesehatan , 2006; 16 (4): 8-14. Janeiro,  P.,  and  Brett,  A.  M.  Cathecin Electrochemical Oxidation Mechanisms. Analytica  Chimica Acta , 2004. 110. Jawetz,  Melnick,  Adelberg. 2014. Mikrobiologi Kedokteran (Medical  Microbiology  Edisi  25 (diterjemahkan  oleh  Aryanditho,
dkk).  Jakarta:  Buku  Kedokteran EGC.
Jawetz,  E.  1995. Mikrobiologi  untuk Profesi Kesehatan . Jakarta: EGC.
Kancanawatie,  D.G.  2001.  Penapisan Antioksidan  Ekstrak  Etanol  Daun Kemangi,  Daun  Tespong  dan
Daun Cincau Hijau dengan Metode  Spektrofotometri  UV- Visible  Menggunakan  Pereaksi Difenil  Pikrilhidrazil  (DPPH). Jatinangor  –  Sumedang:  Fakultas
Farmasi Universitas Padjadjaran.
Rostinawati, T. 2010. Aktivitas Antimikroba Ekstrak Herba Tespong ( Oenanthe javavica D.C) Terhadap Eschericia coli , Staphylococcus aureus
dan Candida  albicans .  Universitas Stuttgar.