.
DOI: https://doi.org/10.36376/bmj.v9i3
Bali Medika Jurnal Vol 9 No 3, 2022: 309-316
Bali Medika Jurnal .
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License. (CC BY 4.0)
Submitted 28 November 2022 Reviewed 17 December 2022 Accepted 24 December 2022

## Perbandingan sensitivitas dan spesifisitas  rapid test anti-hbs dan elisa

## The comparison of sensitivity and specificity rapid tests anti-hbs and elisa
Gela Setya Ayu Putri 1* , Budi Santosa 2
1 Progam Studi D4 Analis Kesehatan, Fakultas Ilmu Keperawatan dan Kesehatan, Universitas Muhammadiyah Semarang, Indonesia
2 Program Studi Magister Sains Laboratorium Medis, Universitas Muhammadiyah Semarang, Indonesia
gela@unimus.ac.id

## ABSTRAK
Hepatitis  B  merupakan  penyakit  inflamasi  dan  nekrosis  sel  hati  yang  disebabkan  oleh infeksi  virus  hepatitis  B  (VHB).  Kehadiran  anti-HBs  merupakan  faktor  penting  dalam diagnosis  dan prognosis  infeksi VHB. Rapid test adalah  salah satu  metode  pemeriksaan selain  ELISA  untuk  mendeteksi  adanya  anti-HBs,  lebih  praktis  dalam  penggunaan  dan ekonomis. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui perbandingan tingkat sensitivitas dan spesifisitas antara rapid test anti-HBs  Intec ® dan ELISA. Penelitian ini merupakan studi observasional  menggunakan  metode  uji  diagnostik.  Populasi  penelitian  ini  adalah mahasiswa D4 Analis Kesehatan FIKKES Universitas Muhammadiyah Semarang semester tujuh post vaksinasi hepatitis B sejumlah 32 orang untuk didapatkan serum darah. Analisis
* How to Cite
Putri,  G.  S.  A.,  &  Santosa,  B.  Perbandingan  sensitivitas  dan  spesifisitas  rapid  test  anti-hbs  dan  elisa:  The comparison  of  sensitivity  and  specificity  rapid  tests  anti-hbs  and  elisa.  Bali  Medika  Jurnal,  9(3),  309–316. https://doi.org/10.36376/bmj.v9i3.298
statistik  dilakukan  uji  Mc  Nemar.  Hasil  pemeriksaan  dengan rapid  test yaitu  positif  26 sampel (81,2%), dan  negatif 6 sampel (18,8%). Hasil pemeriksaan dengan ELISA yaitu reaktif 27 sampel (84,4%), dan nonreaktif 5 sampel (15,6%). Kesimpulan akhir yaitu Rapid test  anti-HBs  Intec ® memiliki  nilai  sensitivitas  dan  spesifisitas  yang  sangat  baik dengan persentase sensitivitas 96,3% dan persentase spesifisitas 100%. Tidak terdapat perbedaan yang bermakna pada sensitivitas dan spesifisitas metode rapid test dan ELISA (p= 1,000) sehingga Rapid test anti-HBs Intec ® dapat digunakan sebagai skrining untuk pemeriksaan anti-HBs.
Kata Kunci : Anti-HBs; Rapid test; ELISA; Sensitivitas; Spesifisitas.

## ABSTRACT
Hepatitis B is inflammation and necrosis diseases of liver cells caused by hepatitis B virus (HBV)  infection.  The  presence  of  anti-HBs  is  an  important  factor  in  diagnosis  and prognosis of HBV infection. Rapid test is the one of laboratory methods besides ELISA to detect the presence of anti-HBs, more practically use and economically. The aim of this study is to compare the sensitivity and specificity value of Intec ® rapid test anti-HBs and ELISA. This study was an observational study with diagnostic test design. The population in  this  research  were  32  students  of  medical  laboratory  Muhammadiyah  University  of Semarang  seventh  semester  post  vaccination  hepatitis  B.  The  sample  used  was  blood serum.  Statistical  analysis  used  was  Mc  Nemar  test.  The  result  of  rapid  tests  showed positive in 26 samples (81,2%), and  negative in 6 samples (18,8%). The result of ELISA tests  showed  reactive in  27  samples  (84,4%),  dan  nonreactive in  5  samples  (15,6%).  In conclusion, Intec ® rapid test anti-HBs has excellent sensitivity and specificity value with percentage  of  sensitivity  96.3%  and  percentage  of  sensitivity  100%.  There  are  no significant differences of sensitivity and specificity between rapid tests and ELISA method (p  =  1.000)  thus  Intec ® rapid  test  anti-HBs  can  be  used  as  a  screening  for  anti-HBs detection.
Keywords : Anti-HBs; Rapid test; ELISA; Sensitivity; Specificity.

## PENDAHULUAN
Hepatitis  B  adalah  penyakit  inflamasi  dan  nekrosis  dari  sel-sel  hati  yang disebabkan  oleh  virus  hepatitis  B  (VHB)  (Yulia,  2019),  infeksi  dari  VHB  dapat menyebabkan  peradangan  hati  akut  atau  kronik  (Busca  dan  Kumar,  2014)  yang pada sebagian kecil kasus dapat berlanjut menjadi sirosis hati atau kanker hati (Hou et  al .,  2019).  Penderita  dengan  infeksi  hepatitis  B  akut  ditemukan  antibodi permukaan hepatitis B (anti-HBs) di hampir 80 % dari subyek dalam 1 sampai 3 bulan setelah hilangnya antigen permukaan hepatitis B (HBsAg) (Borzooy, 2016). Anti-HBs merupakan komponen antibodi yang secara khusus mampu menghambat penempelan virus dan masuknya VHB ke dalam sel inang (Boyd et al , 2017; Beretta dan Hugo, 2022). Anti-HBs dapat timbul setelah terinfeksi oleh virus hepatitis B atau setelah vaksinasi hepatitis B (Lall et al , 2021; Rosalina, 2012).
Metode  yang  sering  digunakan  dan  direkomendasikan  oleh  Kemenkes  RI (2012) untuk pemeriksaan anti-HBs adalah ELISA (Enzym Linked Immunosorbent Assay ).  Metode  ini  sering  dijadikan gold  standart karena  dianggap  mempunyai beberapa kelebihan, namun dengan perkembangan waktu terdapat kompetitor yang mengunggulkan  metode rapid  test immunochromatography karena  praktis  dan murah (Fardhani, 2014).
ELISA dan rapid test sebagai alat diagnostik mempunyai indikator validitas yaitu nilai sensitivitas dan spesifitas (Hartantoroa et al ., 2021). Perbedaan metode dari  ELISA  dan rapid  test menimbulkan  nilai  sensitivitas  dan  spesifisitas  yang berbeda.  Sensitivitas  adalah  kemampuan  suatu  tes  untuk  mengidentifikasi  atau mendiagnosa individu dengan tepat, dengan hasil tes positif dan benar sakit (Bartol, 2015; Obuchowski dan Bullen, 2018), sedangkan spesifisitas adalah kemampuan suatu tes untuk mengidentifikasi atau mendiagnosa individu dengan tepat dengan hasil tes negatif dan benar tidak sakit (Bolin dan Lam, 2013).
Menurut  Fardhani  (2014)  ELISA  merupakan  pengukuran  yang  obyektif dibandingkan dengan hasil rapid test yang berupa visible way atau hasil pengamatan mata  dari  pengamatnya,  ELISA  dapat  mendeteksi  keberadaan  antigen  walaupun kadar  antigen  tersebut  sangat  rendah.  Namun  metode  ELISA  juga  memiliki kelemahan diantaranya dibutuhkan waktu yang cukup lama dan keterampilan dalam pengerjaannya,  serta  mempunyai  keterbatasan  dalam  pengerjaannya  karena membutuhkan peralatan khusus.
Fenomena banyaknya kasus Hepatitis B khususnya di kota daerah Indonesia (Aswati et al , 2013) maka dibutuhkan suatu metode deteksi yang cepat, praktis, dan dapat dilakukan langsung tanpa membutuhkan peralatan yang khusus seperti rapid test. Namun,  validitas  dari rapid  test anti-HBs  Intec®  belum  dilaporkan.  Tujuan penelitian ini untuk mengetahui perbandingan tingkat sensitivitas dan spesifisitas antara rapid test anti-HBs Intec® dan ELISA.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini merupakan studi observasional metode uji diagnostik untuk mengetahui  nilai  sensitivitas  dan  spesifisitas.  Populasi  penelitian  ini  adalah mahasiswa D4 Analis Kesehatan FIKKES Universitas Muhammadiyah Semarang semester tujuh post vaksinasi hepatitis B yang berjumlah 32 orang untuk dilakukan pengambilan serum darah.
Bahan  yang  digunakan  adalah  tabung  vacutainer (clot) berwarna  merah, tourniquet, kapas alkohol 70%, cup sampel, spuit 3cc, tip kuning, microplate, rapid test anti-HBs  Intec ® (lot: 2015080302), ELISA kit anti-HBs ReiGed Diagnostics (lot:  15A17-M62).  Alat  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah centrifuge , mikropipet, inkubator, stopwatch , ELISA reader.
Data primer dimasukkan ke dalam tabel uji diagnostik kemudian dilakukan perhitungan nilai sensitivitas dan spesifisitas secara manual. Nilai sensitivitas dan spesifisitas kemuadian dikategorikan dengan kriteria >90-100%: sangat baik; >80-
90%: baik; >70-80%: sedang; >60-70%: lemah; >50-60%: sangat lemah. Analisis statistik dilakukan dengan uji Mc Nemar.

## HASIL DAN DISKUSI

## Hasil Penelitian
Data  mengenai  distribusi  frekuensi  jenis  kelamin  dan  usia  sampel  penelitian dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Distribusi sampel berdasarkan jenis kelamin dan usia Karakteristik Frekuensi (n=32) Persentase (%) Jenis Kelamin Laki-Laki 10 31,2 Perempuan 22 68,8 Usia 21 tahun 2 6,2 22 tahun 24 75,0 23 tahun 5 15,6 24 tahun 1 3,1 Sumber : Data primer
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  sebagian  besar  sampel  didominasi  oleh  perempuan dengan  usia  terbanyak  pada  22  tahun.  Semua  serum  yang  diuji  dalam  keadaan normal (tidak ditemukan serum lipemik dan serum hemolisis). Sampel dilakukan pemeriksaan anti-HBs dengan rapid test Intec ® , hasil pemeriksaan tersebut dapat dilihat pada Tabel 2. Hasil pemeriksaan anti-HBs dengan rapid test yang dilakukan memberikan hasil yang sebagian besar positif.
Tabel 2. Distribusi sampel berdasarkan hasil pemeriksaan anti-HBs dengan rapid test Hasil Pemeriksaan  Jumlah Persentase (%) Positif 26 81,2 Negatif 6 18,8 Total 32 100,0 Sumber : Data primer
Gambar 1. Hasil pemeriksaan anti-HBs dengan metode rapid test Intec ®
Keterangan : (a) Hasil rapid test positif, (b) Hasil rapid test negatif
Gambar  1  menunjukkan  visualisasi  hasil  pemeriksaan  rapid  test.  Hasil positif pada rapid test ditunjukkan dengan munculnya dua garis pada line Test (T) dan Control (C). Hasil negatif ditunjukkan dengan munculnya satu garis pada line Control (C).
Tabel 3. Distribusi sampel berdasarkan hasil pemeriksaan anti-HBs dengan
ELISA Hasil Pemeriksaan Jumlah Persentase (%) Reaktif 27 84,4 Nonreaktif 5 15,6 Total 32 100,0 Sumber : Data primer
Tabel  3  menunjukkan  hasil  pemeriksaan  anti-HBs  dengan  ELISA  yang dilakukan  didominasi  oleh  hasil  yang  reaktif.  Penentuan  hasil  pemeriksaan  anti- HBs dengan ELISA ditentukan oleh nilai cut off yaitu 0,6930 yang diperoleh dari 2,1 kali rata-rata absorbansi kontrol negatif. ELISA menggunakan kromogen yaitu tertramethylbenzidine (TMB)  yang  akan  memberikan  perubahan  warna  dari  biru menjadi kuning.
Data primer dari hasil pemeriksaan anti-HBs dengan rapid test dan ELISA yang  telah  terkumpul  dimasukkan  ke  dalam  tabel  uji  diagnostik  yang  disajikan dalam tabel 2 x 2.
Tabel 4. Sensitivitas dan spesifisitas rapid test dengan ELISA sebagai gold
standart ELISA Reaktif Nonreaktif Total Rapid test Positif 26 (a) 0 (b) 26 (a+b) Negatif 1 (c) 5 (d) 6 (c+d) Total 27 (a+c) 5 (b+d) 32 (a+b+c+d) Keterangan = a : positif benar c : negatif semu b : positif semu d : negatif benar
Tabel 4 menunjukkan terdapat satu sampel yang hasilnya merupakan negatif semu. Sampel memberikan hasil yang berbeda, dimana dengan pemeriksaan ELISA (gold  standar) memberikan  hasil  positif,  namun  dengan rapid  test memberikan hasil  negatif.  Perhitungan  nilai  sensitivitas  dan  spesifisitas rapid  test anti-HBs dengan ELISA sebagai gold standart yaitu : Sensitivitas = a : (a + c) x 100 % = 26 : 27 x 100% = 96,3%; Spesifisitas = d : (b + d) x 100 % = 5 : 5 x 100% = 100%.

## Diskusi Hasil
Nilai sensitivitas rapid test anti-HBs adalah 96,3% menunjukkan kemampuan rapid test anti-HBs Intec ® sangat baik dalam mendeteksi adanya anti-HBs di dalam serum, namun masih ditemukan hasil negatif semu pada hasil pemeriksaan rapid test .  Negatif  semu  pada  metode rapid  test menurut  penelitian  Fardhani  (2014) dikarenakan kadar anti-HBs pada sampel yang terlalu rendah, sehingga pada rapid immunochromatography tidak bisa mendeteksi, sedangkan menurut Wowor et al (2019) karena penentuan hasil rapid test yang bersifat subjektif berdasarkan hasil pengamatan  yang visible  way atau  berdasarkan  mata  dari  pengamatnya  yang tentunya  berbeda-beda  pada  tiap  individu.  Fardhani  (2014)  dalam  penelitiannya juga menyatakan negatif semu dipengaruhi oleh faktor-faktor seperti kelembaban, kontak langsung dengan sinar matahari saat penyimpanan, dan jenis antigen yang dilekatkan.  Prosedur  penyimpanan  kit rapid  test harus  lebih  diperhatikan  karena rapid test sangat sensitif terhadap kondisi lingkungan dan mudah  rusak sehingga dapat mempengaruhi hasil pemeriksaan (Fuadzy dan Santi, 2013).
Nilai spesifisitas rapid test anti-HBs adalah 100% menunjukkan kemampuan rapid  test anti-HBs  Intec ® sangat  baik  dalam  menyingkirkan  serum  yang  tidak memiliki kadar anti-HBs. Spesifisitas yang sangat baik juga menunjukkan bahwa antigen yang digunakan pada rapid test Intec ® bersifat spesifik terhadap anti-HBs sehingga jarang menimbulkan positif semu.
Analisis  statistik  dilakukan  menggunakan  uji Mc  Nemar didapatkan  nilai probabilitas atau signifikansi yaitu 1,000 (p > 0,05; H 0 diterima) sehingga diketahui bahwa tidak terdapat perbedaan sensitivitas dan spesifisitas yang bermakna antara metode rapid  test dan  ELISA,  oleh  karena  itu rapid  test anti-HBs  Intec ® dapat digunakan  sebagai  skrining  untuk  pemeriksaan  anti-HBs  dengan  kelebihan pemeriksaan cepat, praktis dan murah.

## SIMPULAN
Simpulan yang didapat dari penelitian ini adalah Rapid test anti-HBs Intec ® memiliki  nilai  sensitivitas  dan  spesifisitas  yang  sangat  baik  dengan  persentase sensitivitas 96,3% dan persentase spesifisitas 100%. Tidak terdapat perbedaan yang bermakna pada sensitivitas dan spesifisitas metode rapid test dan ELISA (p= 1,000) sehingga Rapid  test anti-HBs  Intec ® dapat  digunakan  sebagai  skrining  untuk pemeriksaan anti-HBs dengan kelebihan pemeriksaan cepat, praktis dan murah.

## DAFTAR PUSTAKA
Aswati,  L.,  Y.D.  Jurnalis.,  Y.  Sayoeti.,  H.  Bachtiar.  2013.  Faktor-faktor  yang berhubungan  dengan  kadar  anti-HBs  pada  anak  setelah  10-12  tahun imunisasi  hepatitis  B.  Sari  Pediatri.  14(5):  303-8.Bartol,  Tom.  (2015). Thoughtful use of diagnostic testing: Making practical sense of sensitivity, specificity,  and  predictive  value.  Nurse  Pract.  15;40(8):10-2  DOI: 10.1097/01.NPR.0000470366.64804.35
https://doi.org/10.14238/sp14.5.2013.303-8
Beretta,  Maxime.,  Hugo,  M.  (2022).  Advances  in  human  monoclonal  antibody therapy for HBV infection. Current Opinion in Virology. 53(2022); 101205 https://doi.org/10.1016/j.coviro.2022.101205
Bolin,  Elijah.,  Lam,  W.  (2013).  A  Review  Of  Sensitivity,  Specificity,  and Likelihood  Ratios:  Evaluating  The  Utility  of  The  Electrocardiogram  as  a Screening  Tool  in  Hypertrophic  Cardiomyopathy. Congenit  Heart  Dis . 8(5):406-10. DOI: 10.1111/chd.12083
Borzooy, Z. (2016). Identification of occult hepatitis B virus (HBV) infection and viral antigens in healthcare workers who presented low to moderate levels of  anti-HBs  after  HBV  vaccination. International  Journal  of  Infectious Diseases . 45(2016) 432–433. doi:10.1016/j.ijid.2016.02.919
Boyd,  Anders.,  Canini,  L.,  Gozlan,  J.,  Lascoux-Combe,  C.,  Miailhes,  P., Fonquernie,  L.,  Girard,  P.M.,  Lacombe,  K.  (2017).  Development  of  anti- hepatitis B surface (HBs) antibodies after HBs antigen loss in HIV-hepatitis B virus co-infected patients. Journal of Clinical Virology , 95(2017); 55–60. doi:10.1016/j.jcv.2017.08.008
Busca, A., Ashok, K. 2014. Innate immune responses in hepatitis B virus (HBV) infection. Virology Journal. 11(22);1-8 doi: 10.1186/1743-422X-11-22
Fardhani, A.L. 2014. Uji Sensitivitas dan Spesifitas Anti-HIV. Analis Kesehatan Sains. 3(1);149–153
Fuadzy, H., M. Santi. 2013. Gambaran Penggunaan Rapid Diagnostic Test Parasit Malaria Di Desa Pasirmukti Kecamatan Cineam Kabupaten Tasikmalaya. Aspirator .5(2): 55-60.
Hartantoroa, Dwi., Anik, N., Siti, N. (2021). Uji Diagnostik Uji Antigen Sars-Cov-
2  pada  Pemeriksaan  Laboratorium  Covid-19:  Studi  kasus  di  RS  Beriman Kota  Balikpapan,  Indonesia. PUINOVAKESMAS .  2(2);  55-61  doi: :10.29238/puinova.v2i2.1171
Hou, Jinlin., Cui, F., Ding, Y., Dou, X., Duan, Z., Han, G., Jia, J., Mao, Q., Li, J., Li,  Z.,  Liu,  Z.,  Wei,  L.,  Xie,  Q.,  Yang,  X.,  Zhang,  H.,  Zhuang,  H. (2019). Management  Algorithm  for  Interrupting  Mother  to  Child Transmission  of  Hepatitis  B  Virus .  Clinical  Gastroenterology  and Hepatology. 17(10); 1929-36 doi: 10.1016/j.cgh.2018.10.007
Lall,  Mahima.,  Sourav,  S.,  Seema,  P.,  Santosh,  K.,  R.M.  Gupta.  (2021).  Post vaccination  antibody  titres  of  hepatitis  B  surface  antigen  (anti-HBs)  in  a mixed cohort of health care workers. Medical Journal Armed Forces India . 78(2); 198-203 doi:10.1016/j.mjafi.2020.11.023
Obuchowski, N. A., Bullen, J.A. (2018). Receiver Operating Characteristic (ROC) curves:  Review  Of  Methods  With  Applications  In  Diagnostic  Medicine. Physics in Medicine and Biology . 63(7) doi:10.1088/1361-6560/aab4b1
Rosalina, Ina. (2012). Hubungan Polimorfisme Gen TLR 9 (RS5743836) dan TLR
2 (RS3804099 dan RS3804100) dengan Pembentukan Anti-Hbs pada Anak Pascavaksinasi Hepatitis B. IJAS . 2(3); 123-7 DOI :
https://doi.org/10.24198/ijas.v2i3.2746.g2382
Wowor, M. F., Olive A.W., Hedison P. (2019). Sensitivitas dan Spesifisitas Rapid Diagnostic Test Malaria sebagai Diagostik Laboratorium Malaria di RSUD Noongan. Jurnal Kedokteran Klinik . 3(2); 27-33
Yulia,  Dwi.  (2019).  Virus  Hepatitis  B  Ditinjau  dari  Aspek  Laboratorium. Jurnal Kesehatan Andalas . 8(4);247-254 DOI: https://doi.org/10.25077/jka.v8i4.1108