Disetujui: 24 April 2020 Jl. Soekarno-Hatta No.9, Malang, Indonesia © 2020 Politeknik Negeri Malang
E-mail: sri.rulianah@polinema.ac.id

## Penurunan Kadar Lignin pada Fermentasi Limbah Kayu Mahoni Menggunakan Phanerochaete chrysosporium
Sri Rulianah*, Prayitno, Christyfani Sindhuwati, Dessi Ria Ambar Ayu , Khalimatus Sa’diyah
Jurusan Teknik Kimia, Politeknik Negeri Malang, Jl. Soekarno Hatta No. 9, Malang 65141, Indonesia
*E-mail: sri.rulianah@polinema.ac.id

## ABSTRAK
Limbah  Kayu  Mahoni  merupakan  limbah  pertanian  jenis  kayu  keras  yang  mengandung  lignoselulosa  (lignin, selulosa,  hemiselulosa)  yang  cukup  tinggi.  Selulosa  sangat  berpotensi  untuk  didegradasi  oleh Phanerochaete chrysosporium menjadi  glukosa.  Tujuan  penelitian  ini  untuk  mengetahui  pengaruh  lama  fermentasi  dan penambahan  serbuk  Kayu  Mahoni  terhadap  penurunan  kadar  lignin  pada  fermentasi  limbah  Kayu  Mahoni menggunakan  kapang Phanerochaete  chrysosporium .  Penelitian  dilakukan  dengan  cara  mengeringkan  dan mengecilkan ukuran limbah Kayu Mahoni, kemudian melakukan proses fermentasi limbah Kayu Mahoni dengan Phanerochaete chrysosporium dengan rentang waktu 9, 11, 13, 15, dan 17 hari, dan penambahan limbah serbuk Kayu Mahoni sebanyak 5, 6 dan 7%. Sebelum dan sesudah proses fermentasi dilakukan analisa kadar lignin. Hasil terbaik dari penelitian yaitu penurunan kadar lignin sebesar 85,33 % diperoleh pada lama fermentasi 17 hari dan penambahan serbuk Kayu Mahoni sebanyak 5 %.
Kata kunci : Fermentasi, kayu mahoni, lignoselulosa, lignin, Phanerochaete chrysosporium

## ABSTRACT
Mahogany wood waste is a type of hard wood agricultural waste containing lignocellulose which is quite high. In mahogany wood waste also contains lignin which is quite high, so the level of lignin must be reduced so that the cellulose can be used as glucose. Phanerochaete chrysosporium is a type of mold that is able to degrade lignin, cellulose and hemicellulose simultaneously. The purpose of this study was to determine the effect of fermentation time and the addition of mahogany wood waste to the reduction of lignin content in the fermentation of mahogany wood waste using Phanerochaete chrysosporium molds. The study was conducted by drying and reducing the size of mahogany wood waste, then fermentation of mahogany wood waste with Phanerochaete chrysosporium with a span of 9, 11, 13, 15, and 17 days, and the addition of mahogany wood waste 5, 6 and 7%. Before and after the fermentation process, lignin levels were analyzed. The best results from this study were obtained at 17 days of fermentation and the addition of 5% mahogany wood powder, obtained a decrease in lignin content of 85,33 %.
Keywords : Fermentation, lignin, lignocellulose, mahogany, Phanerochaete chrysosporium

## 1. PENDAHULUAN
Limbah  serbuk  kayu  mahoni  merupakan limbah  hasil  penggergajian  Kayu  Mahoni, yang jumlahnya dari waktu ke waktu semakin bertambah banyak seiring dengan meningkatnya  permintaan  Kayu  Mahoni untuk peralatan rumah tangga. Kayu Mahoni adalah  salah  satu  jenis  kayu  keras  yang mengandung  lignoselulosa  cukup  tinggi, sehingga  bisa  dimanfaatkan  sebagai  bahan baku pembuatan crude selulase. Lignosellulosa terdiri dari tiga polimer, yaitu
selulosa, hemiselulosa, dan lignin [1]. Limbah Kayu  Mahoni  memiliki  kadar  lignin  yang cukup  tinggi  sekitar  18 – 33%  [2],  sehingga kadar  lignin  tersebut  harus  diturunkan (didegradasi)  lebih  dahulu  supaya  jaringan selulosanya  dapat  didegradasi.  Kapang Phanrochaete  chrysosporium merupakan kapang  yang  bisa  mendegradasi  lignin, selulosa dan hemiselulosa [3,4].
Mahoni termasuk pohon besar dengan tinggi pohon  mencapai  35 – 40  meter,  berbentuk silindris  dan  berdiameter  mencapai  125  cm.
Kayu Mahoni termasuk dalam golongan kayu keras  dengan  kadar  selulosa  40 – 54%,  kadar lignin 18 – 33%, dan kadar air 13% [2].
Lignin  adalah  polimer  dengan  struktur aromatik  yang  terbentuk  melalui  unit-unit fenil propane [5] yang berhubungan bersama oleh beberapa jenis ikatan yang berbeda [6]. Jaringan  lignin  sulit  didegradasi  disebabkan mempunyai  struktur  yang  kompleks  dan heterogen yang berikatan dengan selulosa dan hemiselulosa dalam jaringan tanaman. Lebih dari 30% tanaman  tersusun  atas lignin  yang memberikan bentuk  kokoh  dan  memberikan proteksi  terhadap  serangga  dan  patogen  [7]. Selain memberikan bentuk yang kokoh pada tanaman, lignin juga membentuk ikatan yang kuat  dengan  polisakarida  yang  melindungi polisakarida  dari  degradasi  mikroba  dan membentuk struktur lignoselulosa [8]. Secara fisik  Lignin  membungkus  mikrofibril  dalam suatu  matriks  hidrofobik  dan  terikat  secara kovalen  dengan  hemiselulosa.  Hubungan antara lignin karbohidrat  ini berperan dalam mencegah  hidrolisis  polimer  selulosa  [9]. Lignin sangat tahan terhadap degradasi kimia, termasuk  degradasi  enzimatik  [10].  Lignin sering  digolongkan  sebagai  karbohidrat karena  hubungannya  dengan  selulosa  dan hemiselulosa  dalam  menyusun  dinding  sel, namun  lignin  bukan  karbohidrat.  Hal  ini ditunjukkan oleh proporsi karbon yang lebih tinggi pada lignin [11].
Jamur Phanerochaete chrysosporium merupakan  jamur  pelapuk  putih  yang  ada pada kayu.  Jamur  ini  menghasilkan  enzim ekstraseluler  LiP,  MnP,  dan  Lakase  [11]. Kapang  ini  mampu  mendegradasi  lignin, selulosa,  dan  hemiselulosa.  Hal  ini disebabkan kapang tersebut dapat menghasilkan  enzim  pendegradasi  lignin, selulosa,  dan  hemiselulosa.  Rulianah,  dkk. [12]  menyebutkan  bahwa Phanerochaete chrysosporium mampu  menghasilkan crude selulase dari bahan baku ampas tebu dengan aktivitas  yang  cukup  tinggi  bahkan  lebih tinggi daripada yang dihasilkan oleh kapang Asprgillus niger.
Phanerochaete  chrysosporium tidak  dapat tumbuh pada substrat yang hanya
mengandung  lignin  sebagai  sumber  karbon untuk  menunjang  perkembangbiakan  sel, sehingga  dibutuhkan  sumber  karbon  lain seperti  glukosa,  sukrosa,  dan  lain-lain  [13]. Phanerohaete  chrysosporium mempunyai suhu  pertumbuhan  optimum  37 o C,  pH  4-7, dan aerob [11]. Kemampuan dalam degradasi lignin  yang  tinggi  dan  minimal  dalam memanfaatkan  polimer  selulosa  dibanding fungi  pelapuk  putih  yang  lain  menjadikan Phanerochaete chrysosporium sebagai pilihan  terbaik  dalam  perlakuan  lignin  [11] .
Selanjutnya [3] menyebutkan bahwa
Phanerochaete chrysosporium mampu mendegradasi selulosa dan lignin yang cukup tinggi pada fermentasi daun nilam, dan pada fermentasi    ampas  tebu  (bagas).  Hal  ini merupakan  temuan  baru  untuk  kemampuan dan  kemanfaatan  kapang Phanerochaete chrysosporium. Adapun tujuan penelitian ini adalah  untuk  mengetahui  penurunan  kadar lignin pada fermentasi limbah Kayu Mahoni menggunakan kapang Phanerochaete chrysosporium ,  dan  untuk  mengetahui kondisi  operasi  terbaik  dari  variabel  yang digunakan.

## 2. METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilaksanakan di  Laboratorium Bioproses  dan  Laboratorium  Analisa Instrumentasi,  Jurusan  Teknik  Kimia, Politeknik Negeri Malang.
Alat yang digunakan dalam penelitian, antara lain: furnace, gelas  ukur , erlenmeyer,  labu ukur,  tabung  reaksi,  corong, beaker  glass , kaca masir, spatula, water bath , kaca arloji, thermostat , oven, shaker , kawat ose, bunsen, autoklaf ,  pipet  ukur, ball  pipet ,  desikator, kulkas, neraca digital, pH meter.
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini meliputi, kapang Phanerochaete chrysosporium , limbah serbuk Kayu Mahoni, Potato  Dextrosa  Agar (PDA),  Asam  sulfat, aquades, asam asetat, Cetyltrimetyl Ammonium bromide (CTAB), CMC ( Carboxymethyl  cellulose ), Sodium  lauryl sulfate , Sodium  ethylene  diamine  tetra acetate , Sodium borate decadydrate , Sodium hydrogen phosphate , 2-ethoxy ethanol , kapas,
Potassium  tartart , Natrium  metabisulfat , MgSO 4 .H 2 O  (merck), Nutrient  Agar (NA), (NH 4 ) 2 PO 4 ,  kertas  indikator  pH  universal, Asam sulfat.

## 2.1. PRETREATMENT SERBUK KAYU MAHONI
Serbuk kayu mahoni dikeringkan, kemudian dihaluskan  sampai  ukuran  30 – 60  mesh (Gambar 1), kemudian dianalisa kadar airnya.
Gambar  1. Serbuk  Kayu  Mahoni  setelah dikeringkan dan dikecilkan ukurannya

## 2.2. STERILISASI ALAT
Penelitian diawali dengan persiapan alat dan bahan yang digunakan, semua peralatan yang digunakan  dicuci  bersih  dan  dibungkus dengan  kertas,  kemudian  dilakukan  proses sterilisasi  pada suhu  121 o C  dalam  waktu  30 menit. Selanjutnya peralatan disimpan dalam oven pada suhu 50 o C.
2.3.  REGENERASI Phanerochaete chrysosporium Regenerasi kapang Phanerochaete
chrysosporium menggunakan PDA sebanyak 3,9  gram  dilarutkan  dalam  100  ml  aquades, kemudian  dipanaskan  sambil  diaduk.  PDA tersebut  kemudian  dipindahkan  sebanyak  ⅓ volume tabung reaksi pada tiap tabung reaksi yang  berjumlah  20  buah.  Sterilisasi  media pada  suhu  121 o C  selama  30  menit.  Setelah steril,  tabung  yang  telah  berisi  PDA  steril kemudian  didiamkan  dalam  posisi  miring hingga  PDA  memadat.  Selanjutnya  jamur Phanerochaete  chrysosporium diinokulasi pada media agar miring, kemudian, dilakukan fermentasi  pada  suhu  37 o C  selama  5 – 7  hari (Gambar  2).  Setelah  tumbuh  subur  baru dipindahkan  ke  dalam  pendingin  atau langsung dikembagkan dalam media cair.
Gambar  2. Hasil  regenerasi  kapang Phanerochaete  chrysosporium pada  media agar miring

## 2.4. PEMBUATAN INOKULUM MEDIA
CAIR Phanerochaete chrysosporium Pembuatan Inokulum Phanerochaete chrysosporium dilakukan dengan cara  NLM ( Nitrogen  Limited  Media )  dilarutkan  dalam aquades  sampai  200  ml  kemudian  100  ml NLM  dimasukkan ke dalam dua  erlenmeyer ukuran  250  ml.  Kemudian,  media serbuk Kayu  Mahoni  dimasukkan  ke  dalam erlenmeyer yang telah berisi NLM sebanyak 0,2 gram.
Selanjutnya  dilakukan  sterilisasi  pada  suhu 121 o C  selama  30  menit.  Media  yang  telah disterilisasi  tersebut  didinginkan,  kemudian ditambahkan  inokulum  sebanyak  10%  dari volume  NLM.  Inokulum  dalam  media difermentasi selama 5 hari (data sesuai kurva pertumbuhan) pada suhu 37 o C dan kecepatan 150 rotasi per menit (rpm).

## 2.5.  PENENTUAN  KADAR  AIR  PADA MEDIA SERBUK KAYU MAHONI
Untuk penentuan kadar air media, hal pertama yang  dilakukan  adalah  menimbang  media Kayu  Mahoni sebanyak  1  gram  kemudian dikeringkan  dalam  oven  selama        ±  2  jam pada  suhu  100 – 105 o C.  Setelah  dikeluarkan dari oven, media didinginkan dalam desikator selama  ±  20  menit.  Kemudian  ditimbang. Perlakuan ini dilakukan berulang kali hingga didapatkan  berat  yang  konstan.  Kadar  air dihitung dengan rumus (1).
Kadar air(%) = berat awal − berat akhir (gram) berat awal (gram) × 100% (1)

## 2.6.  PENENTUAN  KADAR  LIGNIN,
HEMISELULOSA, DAN SELULOSA  DENGAN  METODE VAN SOEST

## PADA MEDIA SERBUK KAYU MAHONI
Penentuan  Kadar Acid  Detergent  Fiber (ADF)  mengikuti  metoda  yang  telah dipublikasi  [14,15].  Sampel  ditimbang sebanyak ± 0,4 gram  kemudian  dimasukkan ke dalam erlenmeyer 250 ml, ditambah 40 ml larutan  ADF  kemudian  erlenmeyer  tersebut tersebut  ditutup  rapat  lalu  direbus  dalam  air mendidih  selama  1  jam  sambil  sesekali dikocok. Cairan yang telah direbus kemudian disaring  dengan sintered  glass No.  1  yang telah  diketahui  beratnya  (a  gram)  sambil dihisap  dengan  pompa  vakum.  Selanjutnya padatan  hasil  penyaringan  dicuci  dengan  ± 100  ml  air  mendidih  dan  50  ml  alkohol. Padatan  dalam sintered  glass dioven  pada suhu  105 0 C  selama  8  jam,  kemudian didinginkan  dalam  desikator  ±  ½  jam, selanjutnya  timbang  (b  gram).  Kadar  ADF dihitung dengan rumus (2).
K adar ADF(%) = b − a ( gram ) berat contoh ( gram ) ×100% (2)
Penentuan Neutral  Detergent  Fiber (NDF), dilakukan  dengan  menimbang  sampel  ±  0,2 gram, dimasukkan ke dalam erlenmeyer 250 ml,  ditambahkan  30  ml  larutan  NDF, kemudian  erlenmeyer  ditutup  rapat  lalu direbus  dalam  air  mendidih  selama  1  jam (sekali-kali  dikocok).  cairan  yang  telah direbus kemudian disaring ke dalam sintered glass No.1 yang diketahui beratnya (a gram) sambil  dihisap  dengan  pompa  vakum. Selanjutnya padatan hasil penyaringan dicuci dengan air panas ± 100 ml (secukupnya), dan dengan  alkohol  ±  50  ml.  Padatan  dalam sintered  glass dioven  pada  suhu  105 0 C selama  8  jam,  kemudian  didinginkan  dalam desikator selama ½ jam, selanjutnya timbang (b gram). Kadar NDF dihitung dengan rumus (3)  dan  kadar  hemiselulosa  dihitung  dengan rumus (4).
Kadar NDF(%)= b − a ( gram ) berat contoh ( gram ) × 100% (3)
Kadar Hemiselulosa ( % ) = %NDF − %ADF (4)
Penentuan kadar lignin dan selulosa. Sintered glass yang  berisi  ADF  diletakkan  diatas petridisk ,  ditambahkan  20  ml  H 2 SO 4 72%, dan  dihomogenkan  sehingga  serat  terbasahi dengan  H 2 SO 4 72%,  kemudian  dibiarkan selama 2 jam. Sampel dihisap dengan pompa vakum  sambil  dibilas  dengan  air  panas secukupnya.  Padatan  dioven  selama  8  jam pada  suhu  105 0 C,  kemudian  dimasukkan kedalam deksikator, selanjutnya ditimbang (c gram).  Sampel  kemudian  dimasukkan kedalam tanur listrik atau dipanaskan hingga 500 ⁰ C selama 2 jam,  didinginkan kemudian dimasukkan  kedalam  desikator  selama  ½ jam, kemudian ditimbang (d gram).
Kadar  Lignin,  abu  yang  tak  larut,  dan selulosa  dihitung  berturut-turut  dengan rumus (5), (6), dan (7).
Kadar Lignin (%) = c − d ( gram ) berat contoh ( gram ) × 100% (5)
Kadar abu yang tak larut(%) = d ( gram ) berat contoh ( gram ) × 100% (6)
Kadar Selulosa ( % ) = %ADF − %Lignin − % Abu tak larut (7)

## 2.7.  FERMENTASI  LIMBAH  SERBUK KAYU MAHONI
Fermentasi  limbah  serbuk  Kayu  Mahoni dilakukan dengan cara membuat NLM  yang dilarutkan  dalam  buffer  pH  5  sebanyak  1,5 liter  kemudian  50  ml  NLM  dimasukkan  ke dalam masing-masing botol cokelat. Kemudian,  media  serbuk  Kayu  Mahoni dimasukkan ke dalam botol cokelat yang telah berisi NLM dengan variabel yang ditentukan (5%,  7%,  9%  (m/v)) . Setelah  itu,  dilakukan sterilisasi  pada  suhu  121 o C  selama  ±  30 menit. Media yang telah disterilisasi tersebut didinginkan, kemudian ditambahkan inokulum Phanerochaete  chrysosporium (10%  (v/v)  dari  volume  NLM).  Setelah  itu dilakukan fermentasi selama 9, 11, 13, 15, 17
hari, pada suhu 37 o C dan kecepatan      150 rpm.  Kemudian  masing-masing  sampel disaring secara vakum, lalu dipisahkan antara supernatan  dan  biomassa.  Selanjutnya biomassa dianalisis kadar ligninnya, sehinga diperoleh  data  besarnya  penurunan  kadar lignin.

## 3.  HASIL DAN PEMBAHASAN
Tahap awal penelitian ini adalah mengembangbiakan  kapang Phanerochaete chrysosporium (Gambar 3) pada media padat dan  cair  sehingga  diperoleh  pertumbuhan kapang yang subur baik pada media padat dan media  cair.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa kapang Phanerochaete chrysosporium cocok dengan  media  serbuk  Kayu  Mahoni  sebagai media  pada  pertumbuhannya,  sehingga  bisa tumbuh  subur  dengan  membentuk  pelet dengan warna mendekati orange (Gambar 4). Ukuran  pelet  yang  terbentuk  dengan kecepatan  shaker  50  rpm,  hasilnya  cukup bagus,  tidak  terlalu  kecil  dan  tidak  terlalu besar.  Ukuran  pelet  yang  terbentuk tergantung  dari  kecepatan  shaker  yang diberikan,  semakin  tinggi  kecepatan  akan menghasilkan  ukuran  pelet  yang  kecil,  dan semakin  rendah  kecepatan  shaker  maka semakin besar ukuran peletnya.
Gambar 3 . Kapang Phanerochaete chrysosporium ,  hasil  foto  dengan  optilab pada mikroskop dengan perbesaran 1000 x
Gambar  4. Hasil  regenerasi  kapang Phanerochaete  chrysosporium pada  media cair
Hasil analisa awal bahan baku menunjukkan bahwa  kadar  lignin  pada  Kayu  Mahoni berbeda  dengan  kadar  lignin  sebelumnya yang dinyatakan oleh [2,16] dimana dari hasil penelitian ini lebih tinggi 33 %. Hal ini bisa terjadi  karena  kadar  air  yang  berbeda  atau umur  Kayu  Mahoni  yang  berbeda.  Pada bahan  baku  serbuk  Kayu  Mahoni  ini mempunyai  kadar  air  13,6%  setelah dikeringkan  menunjukkan  penurunan  kadar air yang signifikan. Adapun kandungan bahan baku  serbuk  Kayu  Mahoni  sebelum difermentasi ditunjukkan pada Tabel 1.
Tabel  1. Data  analisa  bahan  baku  serbuk Kayu Mahoni.
Kandungan % Massa NDF 88,09 ADF 66,04 Lignin 42,72 Selulosa 42,61 Hemiselulosa 22,05 Air 13,65 NDF (Neutral Detergent  Fiber) merupakan komponen  dinding  sel  yang  larut  dalam deterjen  netral.  NDF    merupakan  metode yang cepat untuk mengetahui total serat dari dinding  sel  yang  terdapat  dalam  serat makanan.
Gambar  5  menunjukkan  bahwa  kandungan NDF Kayu Mahoni yang difermentasi dengan kapang Phanerochaete chrysosporium
mengalami penurunan. Semakin lama waktu fermentasi maka semakin kecil kandungan
NDF.  Kandungan  NDF  Kayu  Mahoni terendah pada perlakuan waktu fermentasi 17 hari  dan  penambahan  substrat  5%  sebesar 41,54%  dan  yang  tertinggi  adalah  pada perlakuan fermentasi 9 hari dan penambahan substrat  7%  sebesar  68,45%.  Penurunan kandungan  NDF  ini  menunjukan  enzim Lignoselulase  yang  dihasilkan  oleh  kapang
Phanerochaete chrysosporium mampu melonggarkan
ikatan Lignin
dan Hemiselulosa  sehingga  ikatan  yang  tadinya kuat  menjadi  terurai,  penurunan  kandungan
NDF  ini  menunjukkan  kandungan  substrat berkurang  yang  kemudian  berpengaruh terhadap komposisi komponen serat.
Penurunan  kandungan  NDF  Kayu  Mahoni pada  penelitian  ini  disebabkan  terjadi pemutusan  sel  ikatan  lignoselulosa.  Hasil penelitian  ini  sejalan  dengan  penelitian Imsya, dkk.  [17],  yang menyebutkan  bahwa menurunnya  kandungan  NDF  selama fermentasi disebabkan karena terjadi pemutusan ikatan lignoselulosa dan aktivitas mikroba yang berkembang.
Gambar  5 .  Kadar  NDF  pada  berbagai penambahan Kayu Mahoni.
ADF  ( Acid  Detergent  Fiber )  merupakan komponen  dinding  sel  yang  larut  dalam deterjen asam. ADF digunakan sebagai suatu langkah persiapan untuk mendeterminasikan lignin sehingga hemiselulosa dapat diestimasi dari perbedaan struktur dinding sel [18]. ADF dapat  digunakan  untuk  mengestimasi kecernaan bahan kering dan energi makanan ternak. ADF ditentukan dengan menggunakan larutan Detergent Acid , dimana residunya terdiri atas selulosa dan lignin [13] . ADF mengandung 15% pentosa yang disebut micellar  pentose yang  sulit  dicerna dibandingkan  dengan  jenis  karbohidrat lainnya. Pentosa adalah campuran araban dan xilan  dengan  zat  lain  dalam  tanaman  yang dalam  hidrolisis  keduanya  menghasilkan arabinosa  dan  xilosa  yang  ditemukan  dalam hemiselulosa.  Perubahan  kandungan  ADF Bagasse dan  Kayu  Mahoni  pada  proses
fermentasi  dengan  kapang Phanerochaete chrysosporium dapat dilihat pada Gambar 6.
Gambar  6 .  Kadar  ADF  pada  berbagai penambahan kayu mahaoni
Gambar  6  menunjukkan  bahwa  kandungan ADF Kayu Mahoni yang difermentasi dengan kapang Phanerochaete chrysosporium
mengalami penurunan, dimana semakin lama waktu  fermentasi  maka  semakin  kecil kandungan  ADF.  Kandungan  ADF  serbuk Kayu Mahoni terendah pada perlakuan waktu fermentasi 17 hari dan penambahan substrat 5% sebesar 26,46% dan yang tertinggi adalah pada  perlakuan  fermentasi  9  hari  dan penambahan substrat 7% sebesar 47,14 %. Terjadinya penurunan kandungan ADF Kayu Mahoni ini disebabkan enzim yang dihasilkan oleh  kapang Phanerochaete  chrysosporium mampu melonggarkan ikatan enzim selulase sehingga  ikatan  yang  tadinya  kuat  menjadi renggang,  penurunan  kandungan  ADF tertinggi  terjadi  pada  perlakuan  waktu fermentasi 17 hari dan penambahan substrat sebanyak  5%,  karena  proses  fermentasi berjalan  secara  optimal  dan  produksi  enzim selulase  juga  optimal  pada  fermentasi. Penurunan  kandungan  ADF  untuk  substrat Kayu Mahoni tertinggi sebesar 59,9 % untuk penambahan  substrat  5  %  dan  lama  waktu fermentasi  17  hari.  Penurunan  ADF  pada hasil  penelitian  ini  lebih  besar  dari  Imsya, dkk.  [18]  yang  menggunakan  mikroba  yang berbeda  tetapi  menggunakan  substrat  yang
sama,  dapat  menurunkan  kandungan  ADF sebesar 50,32%.
Gambar  7. Kadar  lignin  pada  berbagai penambahan Kayu Mahoni
Gambar 7 menunjukkan bahwa semakin lama waktu  fermentasi  semakin  tinggi  penurunan kadar  ligninnya.  Kadar  lignin  terendah diperoleh pada waktu fermentasi 17 hari dan penambahan  substrat  5%,  diperoleh  kadar lignin  sebesar  6,27%,  dan  kadar  lignin tertinggi  diperoleh  pada  waktu  fermentasi  9 hari dan penambahan substrat 7%, diperoleh kadar lignin 17,50%. Penurunan kadar lignin tertinggi sebesar 85,33%, dicapai pada waktu fermentasi 17 hari dan penambahan substrat 5%.
Pada  sisi  lain,  Rulianah,  dkk.  [19] menyebutkan  bahwa  fermentasi  daun  nilam menggunakan Phanerochaete chrysosporium dengan  lama  fermentasi  21  hari  dan penambahan  CMC  sebesar  0,8%  mampu menurunkan  kadar  lignin  sebanyak  69,22%. Dengan demikian, Phanerochaete chrysosporium memiliki  kemampuan  lebih tinggi  dalam  ferementasi  Kayu  Mahoni dibanding daun nilam.
Terjadinya  penurunan  kandungan  Lignin pada Kayu Mahoni pada perlakuan fermentasi dengan kapang Phanerochaete chrysosporium ini  disebabkan  kehidupan Phanerochaete chrysosporium mencapai fase lignolitik  dan  segera  mendegradasi  Lignin secara  efektif  dengan  cara  menghasilkan enzim periksodase ekstraseluler yang berupa Lignin  peroksidase  (LiP)  dan  mangan peroksidase  (MnP).  Semakin  lama  waktu
fermentasi,  maka  semakin  banyak  jumlah enzim  pendegradasi  lignin  yang  dihasilkan, sehingga  mengakibatkan  penurunan  kadar lignin yang semakin besar.
Apabila  dilihat  dari  jumlah  substrat  Kayu Mahoni  yang  ditambahkan,  maka  semakin kecil  jumlah  substrat  yang  ditambahkan semakin  besar  persentase  penurunan  kadar lignin yang dihasilkan. Hal ini terjadi karena semakin  kecil  jumlah  substrat  yang ditambahkan,  semakin  cepat  degradasi  yang dilakukan oleh Phanerochaete chrysosporium, sehingga  semakin  efektif proses degradasi ligninnya. Fadilah, dkk. [20] menggunakan jamur pelapuk putih Phanerochaete  chrysosporium yang  mampu mendegradasi  lignin  hingga  81,4%  pada fermentasi  selama  30  hari  dengan  substrat batang  jagung.  Penurunan  kadar  lignin  oleh jamur  menunjukkan  bahwa  jamur  pelapuk putih  mampu  menurunkan  kadar  lignin. Rulianah,  dkk.  [3] menyebutkan  bahwa kapang Phanerochaete chrysosporium mampu  menghasilkan  enzim  crude  selulase dari bahan baku ampas tebu dengan aktivitas enzim yang cukup tinggi.
Rulianah,  dkk.  [12] menyebutkan  bahwa dalam pembuatan crude selulase dari limbah Kayu  Mahoni  juga  menghasilkan  crude selulase dengan aktivitas yang cukup tinggi. Dengan demikian crude selulase yang cukup tinggi  aktivitasnya  ini  menunjukkan  bahwa kapang ini mampu mendegradasi kadar lignin yang  ada  pada  ampas  tebu  maupun  pada limbah Kayu Mahoni [3,21].

## 4. KESIMPULAN
Dari  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan bahwa  semakin  lama  waktu  fermentasi,  dan semakin  sedikit substrat Kayu  Mahoni  yang ditambahkan, maka semakin besar penurunan kadar lignin yang dihasilkan. Kondisi operasi yang  terbaik  yaitu  penurunan  kadar  lignin sebesar 85,33% diperoleh pada kondisi waktu fermentasi  17  hari,  dan  penambahan  serbuk Kayu Mahoni sebesar 5 %. Penurunan kadar lignin  pada  Kayu  Mahoni  lebih  tinggi dibandingkan dengan penurunan kadar lignin pada bagas pada waktu fermentasi yang sama.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada Politeknik  Negeri  Malang  yang  telah memberikan Dana DIPA, sehingga penelitian iini  bisa  terlaksana,  dan  juga  terimakasih kepada  Mahasiswi  yang  telah  membantu menyelesaikan penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] A.  Meryandini,  W.  Widosari,  B. Maranatha,  T.  C.  Sunarti,  N. Rachmania,  dan  H.  Satria,  Isolasi Bakteri  Selulolitik  Dan  Karakterisasi Enzimnya, MAKARA Sci. Ser. , vol. 13, no. 1, hal. 33 – 38, 2010.
[2] H.  Krisnawati,  M.  Kallio,  dan  M.
Kannien, Swietenia Macrophylla King Ecology , Silviculture and Productivity . 2011. [3] S. Rulianah, Z. Irfin, Mufid, Prayitno, Produksi Crude Selulase  dari  Bahan
Baku  Ampas  Tebu  Menggunakan Kapang Phanerochaeta chrysosporium, J.Tek. Kim. Ling., vol.
1, no. 1, hal. 17 – 27, 2017.
[4] P.  H.  Suharti,  S.  Rulianah,  Y. Maryanty, B. Irawan, F. Chen, dan M.
J. Tsai, The degradation of cellulose in the  fermentation  of  patchouli  leaves using  Phanerochaete  chrysosporium, in Advanced Science Letters , vol. 23, no. 6, hal. 5669 – 5671, 2017.
[5] G.  Sjoberg,  Lignin  degradation,
Swedish  University  of  Agricultural Sciences, 1988.
[6] J. Pérez, J. Muñoz-Dorado, T. De La Rubia, and J. Martínez, Biodegradation and biological treatments of cellulose, hemicellulose and  lignin:  An  overview, Int. Microbiol. ,  vol.  5,  no.  2,  hal.  53 – 63,
2002.
[7] M.  Tayyab,  A.  Noman,  W.  Islam,  S.
Waheed, Y. Arafat, F. Ali, M. Zaynab, S. Lin, H. Zhang, W. Lin, Bioethanol Production from Lignocellulosic
Biomass  by  Environment-Friendly Pretreatment  Methods:  A  Review, Applied  Ecology  and  Environmental
Research , vol. 16, no. 1, hal. 225 – 249, 2018.
[8] K.  T.  Steffen,  Degradation  of Recalcitrant Biopolymers and Polycyclic Aromatic Hydrocarbons by Litter-decomposing  Basidiomycetous Fungi, University of Helsinki, 2003. [9] R. L. Howard, E. Abotsi, E. L. J. van Rensburgand, S. Howard, Lignocellulose  Biotechnology:  Issues of  Bioconversion  and  Enzyme Production, African  Journal  of Biotechnology ,  vol.  2,  no.  12,  hal.
602 – 619, 2003.
[10]  M. Dashtban, H. Schraft, T. A. Syed, and  W.  Qin,  Fungal  biodegradation and enzymatic modification of lignin, Int. J. Biochem. Mol. Biol. , vol. 1, no. 1, hal. 36 – 50, 2010.
[11]  Suparjo, degradasi komponen lignoselulosa, 2008. [12]  S. Rulianah, Sindhuwati C., Prayitno, Produksi Crude Selulase dari Limbah Kayu Mahoni Menggunakan Phanerochaete chrysosporium , J. Tek. Kim.  Ling ,  vol.  3,  no.1,    hal.  39 – 46,
2019.
[13]  G.  Janusz,  A.  Pawlik,  J.  Sulej,  U. Świderska -Burek, A. Jarosz- Wilkolazka,  and  A.  Pasz czyński, Lignin  degradation:  Microorganisms, enzymes  involved,  genomes  analysis and evolution, FEMS Microbiol. Rev. , vol. 41, no. 6, hal. 941 – 962, 2017.
[14]  P.  J.  van  Soest,  J.  B.  Robertson,
Systems  of  Analysis  for  Evaluating Fibrous Feeds, Workshop on Standardization of Analytical
Methodology  for  Feeds,  hal.  49 – 60,
1979.
[15]  P. J. van Soest, Plant Fiber and its Role in  Herbivore  Nutrition, Cornell  Vet . , vol. 67, no. 3, hal. 307 – 326, 1977.
[16]  H.  Krisnawati,  E.  Varis,  M.  Kallio, and K. Markku, Ecology , silviculture and productivity, Cent. Int. For. Res. , no. November 2014, hal. 1 – 12, 2011.
[17]  A.  Imsya,  E.  B.  Laconi,  K.  G. Wiryawan,  and  Y.  Widyastuti,
Biodegradasi  Lignoselulosa  dengan Phanerochaete chrysosporium terhadap Perubahan Nilai Gizi Pelepah
Sawit, J. Peternak. Sriwij. , vol. 3, no. 2, hal. 12 – 19, 2014.
[18]  A.  Imsya  dan  R.  Palupi,  Perubahan Kandungan Lignin , Neutral Detergent
Fiber  (  NDF  )  dan  Acid  Detergent Fiber ( ADF ) Pelepah Sawit Melalui Proses Biodegumming sebagai Sumber  Bahan  Pakan  Serat  Ternak
Ruminansia, J. Ilmu Ternak dan Vet. , vol. 14, no. 4, hal. 284 – 287, 2009.
[19]  S.  Rulianah,  H.  S.  Profiyanty,  Y. Maryanty, dan B. Irawan, The effect of fermentation  time  and  addition  of CMC to decrease of lignin content in fermentation of patchouli leaves using
Phanerochaete  chrysosporium,  in Advanced  Science  Letters ,  2017,  vol. 23, no. 6, hal. 5666 – 5668.
[20]  Fadilah,  S.  Distantina,  S.  R.
Dwiningsih,  dan  D.  S.  Ma’rifah, Pengaruh  Penambahan  Glukosa  Dan Ekstrak Yeast Terhadap Biodelignifikasi Ampas Batang Aren, Ekuilibrium , vol. 8, no. 1, hal. 29-33, 2009. [21]  S. Rulianah dan Hardjono, Pemanfaatan  Bagasse  Sebagai  Crude Selulase Menggunakan Kapang Phanerochaete  chrysosporium,  in Seminar Rekayasa Kimia dan Proses , 2014.