Intek Akuakultur. Volume 7. Nomor 1. Tahun 2023. E-ISSN 2579-6291. Halaman 1-11
Penggunaan Madu untuk Maskulinisasi Ikan Cupang Betta splendens (Teleostei: Osphronemidae) Melalui Metode Perendaman Embrio Muh. Herjayanto 1 , Madinawati 2* , Irawati Mei Widiastuti 2
1 Program Studi Ilmu Perikanan, Fakultas Pertanian, Universitas Sultan Ageng Tirtayasa
2 Program Studi Akuakultur, Jurusan Perikanan dan Kelautan, Fakultas Peternakan dan Perikanan, Universitas Tadulako
Naskah Diterima : 13 Januari 2023, Disteujui publikasi : 14 Maret 2023
INFO NASKAH ABSTRAK Kata Kunci: Budidaya monoseks, Ikan hias, Maskulinisasi Individu jantan Betta splendens memiliki warna dan bentuk yang digemari di pasar ikan hias dibandingkan betina. Karena itu budidaya cupang dapat dilakukan melalui produksi  jantan  menggunakan  teknologi  seks  reversal  dalam  mengarahkan perkembangan  kelamin  ikan  menjadi  jantan  (maskulinisasi).  Bahan  alami  yang telah digunakan untuk maskulinisasi ikan adalah madu. Karena itu tujuan penelitian adalah  mengkaji  penggunaan  madu  melalui  perendaman  embrio  untuk maskulinisasi  ikan  cupang.  Keberhasilan  maskulinisasi  dianalisis  melalui karakteristik madu, persentase ikan jantan, tingkat penetasan telur, mortalitas tiap 15 hari, dan sintasan pada akhir pemeliharaan. Embrio yang digunakan berumur 20 jam setelah pembuahan. Perlakuan penelitian adalah perendaman embrio cupang di dalam larutan madu (mL L -1 ) 5, 10, 15, 20, dan 25. Perendaman dilakukan selama 7 jam. Hasil penelitian menunjukkan bahwa madu yang digunakan memiliki kalium 0,31% dan pH 4. Pada penelitian ini pemberian madu tidak berpengaruh terhadap jumlah cupang jantan. Pemberian madu 25 mL L -1 air menghasilkan 56,98±4,58% jantan,  tingkat  penetasan  telur  99,17±1,67%,  dan  sintasan  umur  90  hari  setelah menetas  79,89±4,50%.  Mortalitas  terjadi  pada  awal  pemeliharaan  larva.  Setelah umur  60  hari  setelah  menetas  tidak  terjadi  kematian  pada  cupang.  Nilai  tingkat penetasan telur dan sintasan yang tinggi menunjukkan bahwa madu adalah bahan alami yang aman digunakan untuk maskulinisasi ikan dalam budidaya monoseks. Jl. Soekarno  Hatta Km. 9 Palu – Sulawesi Tengah.  Telpon: 0451 – 422611, Fax:
0451 – 422844.* Email: madinawati@untad.ac.id
The  Use  of  Honey  to  Masculinize Betta  splendens (Teleostei:  Osphronemidae) Through Soaking Embryo Muh. Herjayanto 1 , Madinawati 2* ,  Irawati Mei Widiastuti 2
1 Fisheries Science Department, Faculty of Agricultural, University of Sultan Ageng Tirtayasa
2 Aquaculture  Study  Program,  Department  of  Fisheries  and  Marine,  Faculty  of  Animal  Husbandry  and  Fisheries,  Tadulako University
ARTICLE INFO

## ABSTRACT
Keywords
Mono-sex aquaculture, Masculinization, Ornamental fish Betta splendens males have colours and shapes that are popular in the ornamental fish  market  compared  to  females.  Because  of  that,  betta  cultivation  can  be  done through  male  production  using  sex  reversal  technology  in  directing  the  sex development of fish to become male (masculinization). The natural ingredient that has  been  used  to  masculinize  fish  is  honey.  So  the  research  objective  was  to examine the use of honey by immersing the embryo to masculinize betta. Analyzed masculinization success through characteristics of honey, percentage of male fish, egg hatching rate, mortality every 15 days, and survival at the end of rearing. The embryos  used  were  20  hours  post-fertilization.  The  research  treatment  was immersion  of  betta  embryos  in  honey  solution  (mL  L -1 )  5,  10,  15,  20,  and  25. Soaking was carried out for 7 hours. The results showed that the honey used had 0.31% potassium and a pH of 4. In this study, the administration of honey did not
Intek Akuakultur. Volume 7. Nomor 1. Tahun 2023. E-ISSN 2579-6291. Halaman 1-11
affect the number of male betta. Giving honey 25 mL L-1 water produced 56.98 ± 4.58%  of  males,  egg  hatching  rate  99.17  ±  1.67%,  and  survival  at  90  days  after hatching 79.89 ± 4.50%. Mortality occurs at the start of larval rearing. After the age of 60 days after hatching, there is no death in betta. The high values of egg hatching and survival rates indicate that honey is a natural material safe for masculinizing fish in mono-sex aquaculture.
Jl. Soekarno  Hatta Km. 9 Palu – Sulawesi Tengah.  Telpon: 0451 – 422611, Fax: 0451 – 422844. *Email: madinawati@untad.ac.id

## PENDAHULUAN
Betta  splendens atau  ikan  cupang  adalah  salah  satu  komoditas  budidaya  ikan hias  air  tawar.  Ikan  ini  termasuk  mudah  dipelihara  dan  dikembangbiakkan  sehingga kegiatan budidayanya banyak tersebar di Indonesia. Spesies ini merupakan kelompok ikan yang memiliki dimorfisme kelamin yang terlihat dari ciri seksual sekunder pada individu jantan dan betina. Ikan cupang jantan lebih digemari karena keindahan warna, bentuk  sirip  punggung,  sirip  anal,  dan  sirip  ekornya  (Monvises et  al. 2009, Wahyudewantoro 2017, Lichak et al. 2022). Karena itu dalam budidaya ikan cupang dapat  dilakukan  produksi  tunggal  kelamin  (monoseks)  jantan  untuk  memberikan keuntungan.
Strategi  pengarahan  perkembangan  kelamin  ikan  dapat  dilakukan  melalui pengarahan  perkembangan  kelamin  ikan  ( sex  reversal )  (Devlin  &  Nagahama  2002, Zairin  2004).  Teknologi  ini  dapat  dilakukan  melalui  pemberian  hormon  sintesis (Herjayanto et  al. 2019,  Safir et  al. 2021),  pengaturan  suhu  media  pemeliharaan (Afriyaningrum et al. 2016) atau bahan alami yang dapat membuat ikan menjadi jantan (maskulinisasi) (Devlin & Nagahama 2002, Zairin 2004). Salah satu bahan alami yang dapat  digunakan  yaitu  madu  lebah  yang  telah  dilaporkan  keberhasilannya  untuk maskulinisasi  ikan.  Kemampuan  madu  mengarahkan  perkembangan  kelamin  ikan menjadi  jantan  disebabkan  oleh  kandungan  kalium  dan  flavonoid  seperti chrysin . Kandungan  madu  tersebut  memiliki  mekanisme  menghambat  aktivitas  aromatase (Heriyati et al. 2015, Balam et al. 2020) yaitu enzim yang mengkatalis pembentukan estrogen dari androgen (Piferrer & Blázquez 2005).
Penggunaan madu untuk maskulinisasi dapat dilakukan menggunakan metode perendaman.  Penelitian  penggunaan  madu  telah  dilaporkan  pada  ikan  hias  gapi Poecilia reticulata (Soelistyowati et al. 2007, Nurlina & Zulfikar 2016), ikan cupang (Lubis et al. 2017, Siregar et al. 2018, Laheng et al. 2022), ikan platy Xipophorus sp. (Johan  &  Hasby  2021),  dan  ikan  nila Oreochromis  niloticus (Heriyati et  al. 2015). Umumnya  pemberian  dapat  dilakukan  melalui  perendaman  telur  ikan  yang  telah memasuki fase embrio bintik mata (Zairin 2004, Indreswari et al. 2017, Laheng et al. 2022).  Berdasarkan  hal  tersebut,  maka  tujuan  penelitian  adalah  untuk  mengkaji penggunaan  madu  terhadap  keberhasilan  maskulinisasi  ikan  cupang  melalui  metode perendaman embrio. Keberhasilan maskulinisasi dianalisis melalui karakteristik madu, persentase ikan jantan, tingkat penetasan telur,  dan sintasan pada akhir pemeliharaan ikan cupang.

## BAHAN DAN METODE
Intek Akuakultur. Volume 7. Nomor 1. Tahun 2023. E-ISSN 2579-6291. Halaman 1-11

## Persiapan induk ikan
Induk  ikan  cupang  yang  digunakan  berasal  dari  pembudidaya  ikan  hias  di Kabupaten  Gowa,  Sulawesi  Selatan.  Jumlah  induk  yang  disiapkan  sebanyak  lima pasang. Panjang total induk ikan yang digunakan 4,5-5,0 cm. Umur induk ikan 5 bulan. Ikan  jantan  dan  betina  diadaptasikan  di  Laboratorium  Program  Studi  Budidaya Perairan,  Fakultas  Peternakan  dan  Perikanan,  Universitas  Tadulako.  Ikan  dipelihara selama satu minggu di dalam wadah soliter berukuran diameter alas 15 cm, tinggi 20 cm dan diisi air 16 cm. Pakan yang digunakan yaitu jentik nyamuk yang diberikan pada pagi dan sore secara at satiation . Penyifonan feses dilakukan setiap hari. Pergantian air dilakukan tiap tiga hari sekali sebanyak 30%. Kualitas air selama pemeliharaan induk dipertahankan dengan kisaran suhu 24-30°C, pH 7-8 dan oksigen terlarut 2,45-3,54 mg L -1 . Induk ikan yang matang gonad dipilih untuk dipijahkan. Karakteristik induk ikan cupang  yang  matang  gonad  berdasarkan  Arfah et  al. (2013)  yaitu  ciri  ikan  cupang jantan yang  siap memijah yaitu telah membuat sarang busa. Ciri ikan cupang betina yang siap mijah yaitu perut gemuk dan terlihat bintik putih pada lubang urogenital.

## Pemijahan dan panen telur ikan
Pemijahan diawali dengan kegiatan perjodohan induk ikan cupang. Induk ikan cupang  jantan  terlebih  dahulu  dimasukkan  ke  dalam  wadah  pemijahan  berukuran diameter alas 24,5 cm, diameter atas 28,5 cm, tinggi 25,5 cm dan diisi air 15 cm. Induk ikan  betina  dimasukkan  ke  dalam  wadah  bening  dan  diletakkan  di  tengah  wadah pemijahan. Selain itu, potongan plastik bening ditambahkan di dalam wadah pemijahan sebagai tempat ikan jantan membuat sarang busa. Setelah ikan jantan membuat sarang busa (< 24 jam setelah penjodohan), ikan betina disatukan di dalam wadah pemijahan (sore atau malam hari). Umumnya pemijahan terjadi 15 jam setelah pemasangan induk (pagi  atau  siang  hari).  Proses  pemijahan  berlangsung  selama  ±3  jam.  Tingkah  laku pemijahan  ikan  cupang  yaitu  ikan  jantan  merapatkan  tubuhnya  ke  ikan  betina membentuk  huruf  ‘U’  dan  beberapa  saat  mereka  diam  dan  melayang  di  dalam  air. Setelah  beberapa  saat telur  ke  luar  dan  jatuh  ke  dasar  wadah.  Ikan  jantan  kemudian memungut  telur  menggunakan  mulutnya  dan  kemudian  diletakkan  di  sarang  busa. Setelah pemijahan berakhir, ikan betina dikeluarkan dari wadah pemijahan, sedangkan ikan  jantan  dibiarkan  menjaga  telur.  Embrio  yang  digunakan  untuk  perlakuan maskulinisasi berasal dari hasil pemijahan sepasang induk ikan.
Panen  telur  dilakukan  pada  saat  embrio berumur  20 jam  setelah  pembuahan. Telur  tersebut  telah  memasuki  fase  organogenesis  yaitu  embrio  bintik  mata  yang terlihat  dari  organ  mata  yang  jelas  (Zairin  2004)  (Gambar  1).  Telur  diambil menggunakan sendok, kemudian dihitung sebanyak 30 butir untuk tiap unit percobaan. Total telur  yang dibutuhkan sebanyak 600 butir  yang diperoleh dari satu induk ikan betina.
Intek Akuakultur. Volume 7. Nomor 1. Tahun 2023. E-ISSN 2579-6291. Halaman 1-11
Gambar 1. Embrio ikan cupang umur 20 jam setelah pembuahan pada suhu inkubasi 27-28°C.

## Persiapan larutan madu
Maskulinisai  ikan  cupang  menggunakan  madu  hasil  budidaya  kelompok peternak  lebah  madu,  Kembang  Sari  Murni,  Desa  Lolu,  Kabupaten  Sigi  Sulawesi Tengah.  Media  perendaman  dibuat  dengan  cara  melarutkan  madu  sesuai  dosis perlakuan  di  dalam  1  L  air  tawar.  Kandungan  kalium  dan  pH  madu  dianalisis  di Laboratorium Unit Ilmu Tanah, Fakultas Pertanian, Universitas Tadulako.

## Perlakuan maskulinisasi
Dosis madu (mL L -1 air ) yang digunakan adalah 5, 10, 15, 20, dan 25. Masing- masing  perlakuan  diulang  sebanyak  4  kali,  sehingga  terdapat  20  unit  percobaan. Metode  yang  digunakan  yaitu  perendaman  embrio  sebanyak  30  butir  dalam  larutan madu berdasarkan dosis perlakuan. Lama perendaman dilakukan selama 7 jam (Zairin, 2004).  Wadah  perendaman memiliki  ukuran  diameter  alas  15  cm  dan  tinggi  20  cm. Kualitas air selama perlakuan perendaman embrio dipertahankan dengan kisaran suhu 27-28°C, pH 6-8, dan oksigen terlarut 2,67-3,65 mg L -1 .

## Penetasan telur dan pemeliharaan larva
Embrio ikan cupang diinkubasi di dalam wadah berukuran diameter alas 24,5 cm, diameter atas 28,5 cm, tinggi 25,5 cm dan diisi  air 3 cm. Wadah inkubasi tidak ditambahkan  aerasi.  Setelah  menetas,  dilakukan  penghitungan  jumlah  larva  untuk mengetahui tingkat penetasan. Larva selanjutnya tetap dipelihara di dalam wadah yang sama sampai umur 90 hari setelah menetas (hsm). Tinggi air dinaikkan secara bertahap, sehingga  setelah  umur  30  hari tinggi  air  di  wadah  pemeliharaan  yaitu  20  cm.  Larva yang baru menetas tidak diberi pakan karena masih terdapat cadangan makanan yaitu kuning telur ( yolk ). Ukuran panjang total larva umur 0 hsm yaitu 0,4 cm. Jenis dan cara pemberian pakan selama penelitian dapat dilihat pada Tabel 1. Penyifonan feses dan pergantian air dilakukan seperti saat kegiatan pemeliharaan induk.  Kualitas air selama pemeliharaan yaitu suhu 24-30°C, pH 7-8, dan oksigen terlarut 2,25-3,56 mg L -1 .
Intek Akuakultur. Volume 7. Nomor 1. Tahun 2023. E-ISSN 2579-6291. Halaman 1-11
Tabel 1. Jenis dan cara pemberian pakan ikan cupang berdasarkan umur Jenis pakan Sistem pemberian pakan Umur (hsm) Suspensi kuning telur ayam rebus At satiation (pagi, siang, sore, malam) 3-5 Naupli Artemia (hidup) At satiation (pagi dan sore) 5-30 Cacing sutera (hidup) At satiation (pagi dan sore) 30-60 Cacing darah (beku/segar) At satiation (pagi dan sore) 60-90 Keterangan: hsm: hari setelah menetas
Selama pemeliharan dilakukan pengamatan jumlah ikan yang mati tiap 15 hari, sintasan  dan  jumlah  ikan  jantan  pada  akhir  penelitian.  Pengamatan  ikan  jantan berdasarkan  metode  Arfah et  al. (2015)  yaitu  melihat  ciri  kelamin  sekunder  pada ukuran  sirip  punggung,  sirip  ekor,  dan  sirip  anal.  Ikan  cupang  jantan  memiliki  sirip yang lebih panjang dibandingkan ikan cupang betina (Gambar 2).
Gambar 2. Ciri morfologi ikan cupang jantan (A) dan betina (B).

## Prosedur analisis data
Data persentase ikan jantan dan sintasan umur 90 hsm dianalisis ragam dengan tingkat kepercayaan 95%, kemudian diuji lanjut menggunakan uji Tukey. Kedua data tersebut merupakan data primer untuk melihat tingkat keberhasilan maskulinisasi ikan. Data  tingkat  penetasan  telur  dan  tingkat  mortalitas  tiap  15  hari  dianalisis  secara deskriptif  karena  merupakan  data  sekunder  untuk  melihat  tingkat  keberhasilan maskulinisasi ikan. Data diolah menggunakan Minitab 16 dan Microsoft Excel 2010, dan disajikan dalam bentuk gambar.

## HASIL

## Karakteristik madu dan Persentase ikan jantan
Berdasarkan  hasil  analisis  diperoleh  kandungan  madu  alami  yang  digunakan yaitu pH 4 dan kalium 0,31%. Perendaman embrio dalam larutan madu dengan dosis berbeda  tidak  memberikan  pengaruh  terhadap  jumlah  ikan  cupang  jantan  yang dihasilkan (p>0,05). Persentase ikan jantan yang diperoleh pada semua perlakuan yaitu berkisar 48,51±3,13% sampai 56,98±4,58% (Gambar 3).
Intek Akuakultur. Volume 7. Nomor 1. Tahun 2023. E-ISSN 2579-6291. Halaman 1-11
Gambar 3. Persentase jantan ikan cupang Betta splendens pada umur 90 hari setelah menetas  berdasarkan  perlakuan  dosis  madu.  Tanda  bintang  (*) menunjukkan tidak berbeda nyata pada taraf α=0,05.

## Tingkat penetasan
Tingkat penetasan telur ikan cupang pada semua perlakuan penggunaan madu berkisar 86,67±5,44% sampai 99,17±1,67% (Gambar 4). Hal ini menujukkan bahwa pemaparan  embrio  di  dalam  larutan  madu  tidak  berdampak  negatif  terhadap perkembangan embrio dan proses penetasan telur ikan cupang.
Gambar 4. Tingkat penetasan telur ikan cupang Betta splendens berdasarkan perlakuan dosis madu.

## Mortalitas
Pada awal pemeliharaan larva ikan mengalami kematian. Hal ini terjadi sampai ikan  berumur  60  hari  setelah  menetas  (hsm).  Namun,  setelah  umur  60  hsm  tidak ditemukan ikan cupang yang mati (Gambar 5).
48.51
53.07 53.90 54.17 56.98 0 10 20 30 40 50 60 70 5 10 15 20 25 Ika n ja n ta n ( % ) Dosis madu (mL L -1 ) * * * * * 97.50 92.50 91.67 86.67 99.17 0 20 40 60 80 100 5 10 15 20 25 Ti n gka t p e n e ta sa n t e lu r (% ) Dosis madu (mL L -1 )
Intek Akuakultur. Volume 7. Nomor 1. Tahun 2023. E-ISSN 2579-6291. Halaman 1-11
Gambar 5. Mortalitas ikan cupang Betta splendens tiap 15 hari berdasarkan perlakuan dosis madu.

## Sintasan
Perendaman  embrio  ikan  cupang  dalam  larutan  madu  dengan  dosis  berbeda tidak  memberikan  pengaruh  terhadap  sintasan  ikan  cupang  pada  umur  90  hsm (P>0,05).  Sintasan  ikan cupang  umur  90  hsm  pada  semua  perlakuan  berkisar  antara 79,89±4,50% sampai 85,34±7,10% (Gambar 6).
Gambar 6. Sintasan ikan cupang Betta splendens pada umur 90 hari setelah menetas berdasarkan perlakuan dosis madu. Tanda bintang (*) menunjukkan tidak berbeda nyata pada taraf α=0,05.

## PEMBAHASAN
Pengarahan perkembangan kelamin yang berlawanan (seks reversal) pada ikan dilakukan pada fase gonad belum definitif dan masih labil untuk diarahkan (Devlin & Nagahama 2022, Zairin 2004). Penggunaan telur fase embrio bintik mata telah terbukti dapat digunakan untuk perlakuan seks reversal (Zairin 2004,  Indreswari et al. 2017, Laheng et al. 2022). Telur dianggap cukup kuat serta bahan pengarah perkembangan
14.66 20.11 0 5 10 15 20 25 0 15 30 45 60 75 90 M or ta lit as (% ) Umur ikan (hari) 5 10 15 20 25 84.54 81.98 85.34 81.82 79.89 0 20 40 60 80 100 5 10 15 20 25 Si n ta sa n ( % ) Dosis madu (mL L -1 ) * * * *
*
Intek Akuakultur. Volume 7. Nomor 1. Tahun 2023. E-ISSN 2579-6291. Halaman 1-11
kelamin  dapat  masuk  secara  difusi  untuk  mempengaruhi  embrio  yang  sedang berkembang.  Kandungan  madu  yaitu  kalium  dapat  mempengaruhi  perkembangan kelamin ikan menjadi jantan. Pemberian madu bakau dan madu hutan yang memiliki kalium masing-masing 0,33% dan 0,35% dapat menghasilkan nila jantan 98,76% dan 100% (Heriyati et al. 2015). Karena itu nilai kalium 0,31% pada madu yang digunakan dalam penelitian ini masih tinggi. Selain itu madu juga memiliki kandungan chrysin . Bahan  ini  memiliki  fungsi  menghambat  aktivitas  enzim  aromatase  yang  mengubah androgen  menjadi  estrogen  (Heriyati et  al. 2015,  Balam et  al. 2020).  Kalium  dan chrysin dapat menekan ekspresi gen aromatase tipe gonad (aroma-g) pada ikan setelah jam  ke-12  pascaperlakuan  perendaman.  Penghambatan  aktivitas  aromatase menyebabkan  androgen  di  dalam  tubuh  ikan  menjadi  tinggi,  sehingga  ikan  menjadi jantan (Heriyati et al. 2015).
Pada  penelitian  ini  dosis  madu  25  mL  L -1 belum  dapat  meningkatkan  secara signifikan  jumlah  ikan  cupang  jantan.  Jumlah  ikan  jantan  yang  dihasilkan  dalam perlakuan maskulinisasi dapat dipengaruhi oleh dosis  dan jenis bahan, lama paparan atau perendaman, stadia dan spesies ikan (Tabel 2). Hasil yang tidak signifikan pada penelitian ini diduga karena lama waktu perendaman  yang singkat (7 jam) sehingga bahan aktif madu tidak terdifusi dengan optimal ke dalam embrio. Peredaman embrio ikan  selama  12  jam  menggunakan  dosis  madu  yang  lebih  rendah  (5  mL  L -1 ) dapat menghasilkan jumlah jantan 86,19% (Laheng et al. 2022). Selain itu jenis madu yang digunakan juga dapat mempengaruhi  keberhasilan maskulinisasi ikan. Heriyati et al. (2015)  melaporkan  penggunaan  madu  ternak  dapat  menghasikan  ikan  nila  jantan sebanyak  97,70%.  Penggunaan  madu  hutan  menghasilkan  98,76%  jantan  dan  madu bakau menghasilkan 100% jantan.
Tabel 2. Hasil maskulinisai ikan menggunakan madu
Ikan Stadia Dosis (mL L -1 ) Perendaman (jam) Jantan (%) Referensi Cupang Embrio 20 jsp 28 jsp 25 7 56,98 Penelitian ini 5 12 86,19 Laheng et al. 2022 Larva 5 hsm 5 hsm 4 hsm 5 12 81,75 Laheng et al. 2022 5 12 77,33 Lubis et al. 2017 5 24 81,14 Siregar et al. 2018 3-5 hsm 5 10 77,18 Iryanto et al. 2021 Gupi Betina bunting 60 10 59,50 Soelistyowati et al. 2007 60 15 89,93 Nurlina & Zulfikar 2016 Platy Larva 3 hsl 5 12 72,25 Johan & Hasby 2021 Nila Larva 12 hsm 10 10 100,00 Heriyati et al. 2015
Keterangan: jsp: jam setelah pembuahan, hsm: hari setelah menetas, hsd: hari setelah lahir.
Intek Akuakultur. Volume 7. Nomor 1. Tahun 2023. E-ISSN 2579-6291. Halaman 1-11
Sebagai bahan alami penggunaan madu dengan dosis tertinggi pada penelitian ini tidak memberikan kematian yang tinggi pada embrio cupang. Hal ini terlihat pada tingkat  penetasan  telur  berkisar  86,67-99,17%  pada  semua  perlakuan  (Gambar  4). Stadia embrio dan larva cupang nampaknya kuat terhadap paparan madu. Penggunaan dosis madu 5 mL L -1 memberikan sintasan embrio dan larva 100% (Laheng et al. 2022), sintasan  larva  98,33%  setelah  12  jam  perendaman  (Lubis et  al. 2017).  Pada perendaman  yang  lebih  lama  yaitu  24  jam  menghasilkan  sintasan  81,10%  setelah perendaman (Siregar et al. 2018). Semakin tinggi dosis menyebabkan sintasan selama perendaman menurun (Lubis et al. 2017).
Pengaruh perendaman madu tidak memberikan kematian yang tinggi pada awal hidup  larva  cupang.  Kematian  ikan  tidak  ditemukan  setelah  umur  60  hari  setelah menetas  (hsm)  (Gambar  5).  Hal  ini  diduga  berkaitan  dengan  perkembangan  ikan cupang yang mencapai stadia juvenil pada umur 32 hsm (Valentin et al. 2013) dan 40 hsm (Poungcharean & Limpivadhana 2022). Karena itu setelah umur 60 hsm ikan lebih kuat dan diduga organ labirin juga telah berfungsi dengan baik. Penggunaan madu pada ikan lain juga memberikan sintasan akhir pemeliharaan yang tinggi seperti ikan cupang 86,19-97,78% (Laheng et al. 2022), 90% (Siregar et al. 2018) dan 100% (Lubis et al. 2017).  Oleh  karena  itu,  madu  merupakan  bahan  yang  aman  digunakan  untuk maskulinisasi ikan.

## KESIMPULAN
Pemberian madu yang mengandung 0,31% kalium melalui perendaman embrio fase  bintik  mata  selama  7  jam  belum  dapat  meningkatkan  jumlah  jantan  secara signifikan. Pada dosis madu 25 mL L -1 air menghasilkan 56,98±4,58% jantan, tingkat penetasan telur 99,17±1,67%, dan sintasan umur 90 hari setelah menetas 79,89±4,50%.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terima kasih banyak kepada Bapak Suryadi yang membantu menyiapkan induk ikan  cupang.  Bapak  Herman,  Ibu  Hujah,  dan  Saudara  Muh.  Juraid  atas  bantuannya dalam pelaksanaan penelitian. Ibu Mayse Sofien Siby dan Ibu Irmawati atas bantuanya di laboratorium.

## DAFTAR PUSTAKA
Afriyaningrum  MD,  Soelistyowati  DT,  Alimuddin,  Zairin  MJr,  Setiawati  M, Hardiantho D. 2016. Maskulinisasi ikan nila melalui perendaman larva pada suhu 36°C dan kadar residu 17α-metiltestosteron dalam tubuh ikan. Omni-Akuatika , 12(3): 106-113.
Arfah  H,  Soelistyowati  DT,  Bulkini  A.  2015.  Maskulinisasi  ikan  cupang Betta splendens melalui  perendaman  embrio  dalam  ekstrak  purwoceng Pimpinella alpina . Jurnal Akuakultur Indonesia , 12(2): 144-149.
Balam  FH,  Ahmadi  ZS,  Ghorbani  A.  2020.  Inhibitor  effect  of  chrysin  on  estrogen biosynthesis by supperssion of enzyme aromatase (CYP19): a systematic review. Heliyon , 6(e03557): 1-8. doi: 10.1016/j.heliyon.2020.e03557.
Devlin RH, Nagahama Y. 2002. Sex determination and sex differentiation in fish: an overview of genetic, physiological, and environmental influences. Aquaculture , 208(3-4): 191-364.
Herjayanto  M,  Carman  O,  Soelistyowati  DT.  2019.  Maskulinisasi  ikan  pelangi Iriatherina werneri Meinken, 1974 menggunakan hormon 17α-metiltestosteron melalui perendaman embrio. Jurnal Akuatika Indonesia , 4(2): 31-37. Heriyati  E,  Alimuddin,  Arfah  H,  Sudrajat  AO.  2015.  Ekspresi  gen  aromatase  pada pengarahan  diferensiasi  kelamin  ikan  nila  ( Oreochromis  niloticus Linnaeus 1758) menggunakan madu. Jurnal Iktiologi Indonesia , 15(1): 39-50. Indreswari AR, Susilowati T, Yuniarti T. 2017. Pengaruh pemberian propolis melalui perendaman embrio dengan dosis yang berbeda terhadap keberhasilan jantanisasi pada ikan cupang  ( Betta  splendens ). Journal  of  Aquaculture  Management  and Technology , 6(4): 20-29.
Iryanto,  Amir S, Setyono  BDH. 2021.  Pengaruh lama waktu perendaman larva ikan cupang dalam madu terhadap persentase jenis kelamin. Jurnal Perikanan , 11(1): 56-65. doi: 10.29303/jp.v11i1.150.
Johan TI, Hasby M. 2021. Effectiveness of sialang forest honey in maleisation of the palty  pedang  fish  ( Xiphophorus sp.). Egyptian  Journal  of  Aquatic  Biology  & Fisheries , 25(1): 953-963. doi: 10.21608/EJABF.2021.164361. Laheng  S,  Putri  DU,  Putri  IW,  Kantri.  2022.  Efektifitas  maskulinisasi  ikan  cupang ( Betta splendens ) menggunakan madu dan air kelapa. Jurnal Akuakultur Rawa Indonesia , 10(2): 150-159.
Lichak MR, Barber JR, Kwon YM, Francis KX, Bendesky A. 2022. Care and use of siamese  fighting  fish  ( Betta  splendens )  for  research. Comparative  Medicine , 72(3): 169-180. doi: 10.30802/AALAS-CM-22-000051.
Lubis  MA,  Muslim,  Fitrani  M.  2017.  Maskulinisasi  ikan  cupang  ( Betta sp.) menggunakan  madu  alami  melalui  metode  perendaman  dengan  konsentrasi berbeda. Jurnal Akuakultur Rawa Indonesia , 5(1): 97-108. Monvises  A,  Nuangsaeng  B,  Sriwattanarothai  N,  Panjipan  B.  2009.  The  siamese fishting fish: well-known generally but little-known scientifically. Science Asia , 35(1): 8-16. doi: 10.2306/scienceasia1513-1874.2009.35.008. Nurlina,  Zulfikar.  2016.  Pengaruh  lama  perendaman  induk  ikan  guppy  ( Poecilia reticulata )  dalam  madu  terhadap  nisbah  kelamin  jantan  ( sex  reversal )  ikan guppy. Acta Aquatica , 3(2): 75-80.
Piferrer  F,  Blázquez  M.  2005.  Aromatase  distribution  and  regulation  in  fish. Fish Physiology and Biochemistry , 31(2-3): 215-26. doi:10.1007/s10695-006-0027-0. Poungcharean  S,  Limpivadhana  D.  2022.  Morphology  of  developing  larvae  and  a dichotomos  key  for  five  bubble-nesting Betta species  (Teleostei: Osphronemidae). Zootaxa , 5214(1): 104-116. doi: 10.11646/zootaxa.5214.1.4.
Safir M, Ndobe S, Madinawati, Mangitung SF, Serdiati N, Ryaldi M. 2021. Pengaruh perendaman  larva  ikan Pterapogon  kauderni dengan  hormon  17α- methyltestosteron  menggunakan  dosis  yang  berbeda  terhadap  rasio  kelamin jantan. Jurnal Pertanian Terpadu , 9(2): 130-139. doi: 10.36084/jpt..v9i2.330. Siregar S, Syaifudin M, Wijayanti M. 2018. Maskulinisasi ikan cupang menggunakan madu  alami  melalui  metode  perendaman. Jurnal  Akuakultur  Rawa  Indonesia , 6(2): 141-152.
Soelistyowati  DT,  Martati  E,  Arfah  H.  2007.  Efficacy  of  honey  on  sex  reversal  of guppy ( Poecilia reticulata Peters). Jurnal Akuakultur Indonesia , 6(2) : 155-160. doi: 10.19027/jai.6.155-160.
Valentin  FN,  do  Nascimento  NF,  da  Silva  RC,  Fernandes  JBK,  Giannecchini  LG,
Nakaghi  LSO.  2013.  Early  development  of Betta  splendens under stereomicroscopy  and  scanning  electron  microscopy. Zygote ,  23(2):  1-10.  doi: 10.1017/S0967199413000488.
Wahyudewantoro  G.  2017.  Mengenal  cupang  ( Betta spp.)  ikan  hias  yang  gemar bertarung. Warta Iktiologi , 1(1): 28-32. Zairin  MJr.  2004. Memproduksi  Benih  Ikan  Jantan  atau  Betina .  Penebar  Swadaya. Jakarta.