PENGARUH EKSTRAK BUAH TOMAT (Lycopersicum esculentum L.) TERHADAP KADAR HORMON TESTOSTERON TIKUS PUTIH (Rattus novergicus L.) YANG DIBERI PAKAN

## TINGGI KOLESTEROL
Firstia Ritri Wulandari 1 , Teuku Mamfalutfi 2 , Dasrul 3 , Rajuddin 4 1 Mahasiswa Fakultas Kedokteran Universitas Syiah Kuala
2 Staf Pengajar Fakultas Kedokteran Universitas Syiah Kuala
3 Staf Pengajar Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Syiah Kuala;
4 Bagian Obstetri dan Ginekologi Fakultas Kedokteran Universitas Syiah Kuala
Corresponding author : rajud88@gmail.com

## Abstrak
Penelitian ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh pemberian  ekstrak  buah tomat  ( Lycopersicum  esculentum L.)  terhadap kadarhormontestosterontikus putih ( Rattus novergicus L.) yang diberi pakan tinggi kolesterol. Penelitian ini merupakan penelitian  eksperimental  laboratorik  jenis Posttest  Only  Control  Group  Design , dengan  menggunakan 30  ekor  tikus  putih  jantan  yang  dibagi  secara  acak  dalam lima  kelompok  perlakuan  masing-masing,1) kelompok kontrol  negatif(KN)tikus diberi  pakan  standar, 2) kelompok kontrol  positif  (KP)tikus diberi  pakan  tinggi kolesterol, 3) kelompok tikus yang diberi pakan tinggi kolesterol dan eksrak tomat 25 mg/kgBB/hari (D1), 4) kelompok tikus yang diberi pakan tinggi kolesterol dan ekstrak  tomat  dosis 50  mg/kgBB/hari (D2) dan  5) kelompok  tikus  yang  diberi pakan  tinggi kolesterol dan, ekstrak tomat dosis 100 mg/kgBB/hari (D3) selama 60  hari. Koleksi  sampel  darah  dilakukan  melalui  vena  orbitalis  menggunakan mikropipet.  Pengukuran  kadar  testosteron  darah  tikus  dilakukan  dengan menggunakan metode Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Data dianalisis dengan  uji  statistik non  parametric menggunakan  uji Kruskall  Wallis dan  di lanjutkan  dengan  uji Mann-Whitney .Hasil    penelitian  menunjukkan    pemberian ekstrak  tomat dapat  meningkatkan  kadar  hormon  testosteron  darah  tikus  putih yang  diberi  pakan  tinggi  kolesterol  seiring  dengan  tingkat  dosis  yang  diberikan. Pemberian  ekstrak  tomat  dosis  100  mg/kgBB/hari  (D3)berbeda  secara  nyata (p<0,05) dibandingkan  dengan  kontrol  positif  (KP).,  ekstrak  tomat  dosis  25 mg/kgBB/hari (D1)dan ekstrak tomat dosis 50 mg/kgBB/hari (D2)., namun tidak berbeda  dengan  kontrol  negatif  (KN).  Pemberian  ekstrak  tomat  dapat meningkatkan  kadar  hormon  testosteron  serum  darah  tikus  putih  yang  diberi pakan tinggi kolesterol.

## Kata Kunci: kolesterol; testosterone; tomat; tikus putih
EFFECT OF EXTRACT OF TOMATO (Lycopersicum esculentum L.)

## TOWARD TESTOSTERONE LEVELS OF WHITE MICE (Rattus novergicus L.) FED HIGH CHOLESTEROL

## Abstract
The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the  effect  of  the  extract  of  tomato (Lycopersicum  esculentum)  against  the  testosterone  levels  of  white  mice  (Rattus novergicus  L.)  fed  high  cholesterol.  This  research  was  a  experimental  laboratory research using  30  male  mice randomly divided  into  five  treatment  groups.  1) negative control  group (KN) mice   fed by a standard feeding, 2) positive control group (KP) mice were fed by a high-cholesterol, 3) groups of mice  fed by a high- cholesterol and extracts tomatoes 25 mg/kg/ day (D1), 4 ) mice were fed by a high- cholesterol  feeding  and  tomato  extract  dose  of  50  mg/kg/day  (D2)  and  5)  the group of mice fed high cholesterol, tomato extract dose 100 mg- kg- day (D3) for 60 days.  Blood  sample was collectedthrough  the  orbital  vein  using  a  micropipette. The  measurement  of  mice  blood  testosterone  levels  performed  using  enzyme- linked  immunosorbent  assay  (ELISA).  Data  were  analyzed  using  non-parametric statistical tests using Kruskal Wallis test and proceed with the Mann-Whitney test. The  results  showed  the  tomato  extract  could  increase  the  blood  levels  of testosterone hormones in white mices fed by a high cholesterol level in line with the  dose  administered.  Which  dose  100  tomato  extract  mg/kg/day (D3)  differed significantly (p<0.05) compared to positive control (KP), group, 25mg/kg/day, 50 mg/kg/day(D2), but there was no differentcet from the negative control (KN). It was concluded  that  the  tomato  extract  may  increase  blood  serum  levels  of testosterone in white mice fed with a high cholesterol.

## Keywords: cholesterol; teststosterone; tomato; white mice

## Pendahuluan
Kemajuan  teknologi  informasi  dan ekonomi menyebabkan terjadinya
perubahan  pola  makan.  Mengkonsumsi makanan  berkolesterol  tinggi  berisiko terhadap peningkatan kadar kolesterol yang melebihi  batas  normal dalam  darah. Penyakit  ini  dikenal  dengan  istilah hiperkolesterolemia. (1,2) dindikasikan denganpeningkatan  kadar  kolesterol  total, trigliserida  dan Low    Density    Lipoprotein (LDL)  serta  penurunan  kadar High    Density Lipoprotein (HDL). (2,3) Banyak penelitian
menunjukkan, terjadi  peningkatan  produksi  radikal  bebas dan  ketidaksesuaian  perkembangan  lipid peroksida  pada  tingkat  jaringan  pada keadaan  hiperkolesteterolemia,  sehingga dapatmenyebabkan  terjadinya  gangguan fungsional tubuh secara umum. (4) Salah  satu gangguan fungsional tubuh yang ditimbulkan akibat hiperkolesterolemiayaitu terjadinya gangguan fungsi reproduksi pria, berupamenurunnya libido (kegairahan/doronganseksual), gangguan ejakulasi, disfungsi  ereksi dan  penurunan produksi  sperma  yang selanjutnya  dapat menyebabkan  penurunan  dari  kualitas spermatozoa. (5,6) Hiperkolesterolemia dilaporkan juga  dapat  menyebabkan gangguan  fungsi  jalur  hipofise-pituitari- gonad, regulasi  hormon  testosteron  yang disertai gangguan spermatogenesis, perubahan morfologi
spermatozoa, degenerasi  sel  gonad dan penurunan kualitas  spermatozoa. (5,7,8,9) Hasil  penelitian yang dilakukan terhadap tikus oleh Feng et al.,  ditemukan  bahwa kadar  testosteron plasma tikus  hiperkolesterolemia  menurun secara  signifikan dibandingkan  dengan tikus normal. (9) Penurunan kadar testosteron ini  sebagai akibat  terjadinya  degenerasi  sel Leydig, dan  penurunan  sekresi Luitunizing Hormone (LH) dari hipofisa anterior . (10,11)
Testosteron  merupakan  hormon  yang sangat mendasar pada pria yang dihasilkan
oleh  sel  Leydig. (6) Testosteron  sangat dibutuhkan  dalam  proses  spermatogenesis dari mulai pembelahan hingga pelepasan sel spermatozoa dari sel Sertoli menuju duktus epididimis. (8) Selain  bertanggung  jawab dalam  spermatogenesis,  testosteron  juga bertanggung  jawab
dalam  mengatur perilaku  kejantanan,  memicu  kegairahan seksual, membantu terjadinya
dan pemeliharaan  ereksi  pada  penis. (5,11) Telah terbukti bahwa ada korelasi yang erat antara kadar  testosteron  dalam  darah  dengan penurunan  kegairahan  seksual, disfungsi ereksi atau  kesulitan  ereksi  dan  penurunan produksi spermatozoa. (11,12) Beberapa peneliti membuktikan faktor utama pemicu
terjadinya  penurunan  kadar  hormon testosteron, gangguan disfungsi ereksi danpenurunan  kualitas  spermatozoa  pada penderita hiperkolesterolemia adalah akibat adanya  peningkatan senyawa oksigen reaktif  atau reactive  oxygen  spesies (ROS) yang  selanjutnya  menyebabkan  stres oksidatif  pada  organ  reproduksi dan sperma. (1,9,12) Kondisi ini  terjadi  karena kemampuan  pertahanan  tubuh meredam reaktivitas  ROS melalui  sistem  antioksidan tubuh berkurang,  sehingga  dibutuhkan suplai antioksidan dari luar tubuh. (7)
Sejalan  dengan Program  Organisasi Kesehatan Dunia ( World Health Organization /WHO)  yang  mencetuskan suatu slogan “ kembali ke alam ” dalam upaya mencari,  meneliti  dan  menggunakan  bahan alami  nabati untuk  mengatasi  berbagai macam  penyakit  degenerative,  salah satunyainfertilitas para  peneliti  dari berbagai  bidang  ilmu kini mulai  mencoba menggunakan  bahan  kimia  alami  berupa senyawa  fitokimia  yang  banyak  terdapat dalam  buah-buahan  dan  dikenal  sebagai infertility prevention.
Penggunakan senyawa fitokimia untuk pencegahan  infertilitas  merupakan salah satu upaya menggunakan bahan kimia alam yang  diharapkan  dapat  mencegah  tahap awal  infertilitas,  sebelum  terjadi  secara
permanen.  Kriteria  pemilihan  senyawa kimia  yang  digunakan  sebagai infertility prevention sangat  berbeda  dengan  senyawa yang digunakan sebagai terapi
infertilitas.Senyawa  terapi  infertilitas  sering digunakan  untuk  meningkatkan  libido  dan produksi  sperma  secara  cepat,  bahkan  juga menghasilkan  pengaruh  yang  kurang  baik pada penderita.Sebaliknya senyawa infertility prevention
yang  digunakan umumnya bersifat tidak beracun dan relatif bebas  dari  pengaruh  buruk  lainnya. Senyawa  kimia  pencegah  infertilitas  pada berbagai  tanaman  diantaranya  adalah senyawa-senyawa antioksidan seperti senyawa  karatinoid,  flavonoid,  vitamin  C dan vitamin E yang banyak ditemukan pada sayuran dan buah-buahan. (13)
Tomat ( Lycopersicum esculentum )
merupakan  salah  satu  sayuran  kaya  akan senyawa antioksidan  seperti  vitamin  E, vitamin  C, likopen, karatinoid,  dan flavonoid yang penting untuk kesehatan. (13) Buah  tomat  selain  sebagai sayuran juga
banyak dimanfaatkan masyarakat  untuk  mengobati  beberapa penyakit antara lain sebagai antiradang, anti kanker terutama kanker prostat, (14) hipertensi dan
penyakit
jantung koroner,
(15) menurunkan kadar kolesterol dan LDL yang tinggi (16,17) dan meningkatkan kualitas spermatozoa. (18) Hasil penelitian
menunjukan bahwa pemberian ekstrak buah tomat dosis 40 – 80  mg/kgBB/hari, selama 60  haripadatikus  putih  yang  diberi pakan tinggi  kolesterol dapat meningkatkan spermatogensis dan kualitas spermatozoa. (19) Namun kajian tentang pengaruh pemberian ekstrak buah tomatterhadap peningkatan kadar
testosteron darah  tikus  putih  yang  diberi pakan  tinggi  kolesterol  belum pernah dilaporkan.  Berdasarkan  hal  tersebut,  maka peneliti  inginmelakukan suatu  penelitian yang  mengkaji  tentang  perbandingan efektivitas  pemberian  ekstrak tomat terhadap  kadar  hormon  testosteron plasma
darah tikus ( Rattus norvegicus) strain Wistar yang diberi pakan tinggi kolesterol.

## Metode Penelitian
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental  laboratorik  jenis Postest  Only Control Group Design , dengan menggunakan Rancangan Acak Lengkap  (RAL)  pola  satu arah  dengan  lima  kelompok  perlakuan. Kelompok  1  sebagai  kontrol  negatif  (KN) yaitu tikus  yang diberi  pakan  normal. Kelompok  2  sebagai  kontrol  positif  (KP) yaitu  tikus  yang  diberi  pakan  tinggi kolesterol.Kelompok  3  sebagai dosis  1 (D1) yaitu tikus  yang  diberi  pakan  tinggi kolesterol dan ekstrak tomat 25mg/kgBB/hari. Kelompok 4 sebagai dosis 2  (D2) yaitu  tikus  yang  diberi  pakan  tinggi kolesterol dan ekstraktomat 50 mg/kgBB/hari.Kelompok  5  sebagai  dosis  3 (D3)  yaitu  tikus  yang  diberi  pakan  tinggi kolesterol dan ekstrak tomat 100
mg/kgBB/hari.Pemberian  ekstak  tomat dilakukan selama 60 hari.
Adaptasi  hewan  uji  hingga  akhir perlakuan  dilakukan  di  Laboratorium Hewan  Coba  Fakultas  Kedokteran  Hewan Universitas Syiah Kuala (Unsyiah).Selanjutnya analisis hormon testosteron serum tikus yang telah diberikan perlakuan  dilakukan  di  Laboratorium  Riset Fakultas Kedokteran Hewan
Unsyiah.Sementara  itu  pembuatan  ekstrak tomat  dilakukan  di  Laboratorium  Kimia FMIPA  Unsyiah.Waktu  penelitian  mulai dari bulan Juni hingga Desember 2015.
Hewan  uji  tikus  putih  ( Rattus norvegicus )  strain  Wistar  diperoleh  dari Laboratorium  Hewan  Coba  Fakultas Kedokteran  Universitas  Sumatera  Utara. Tikus  putih  yang  digunakan  berjenis kelamin  jantan,  berumur  3-4  bulan  dengan berat badan 150-200
gram, tidak memperlihatkan  abnormalitas  anatomis makro  dan  belum  pernah  mendapatkan perlakuan  apapun  sebelumnya. Pada  tahap
adaptasi  semua tikus  putih diberi  ransum standar T79-4.
Pakan  tinggi kolesterol yang  diberikan pada saat perlakuan mengandung kolesterol 2%,  terbuat  dari  bahan-bahan:  3  gram  telor itik  (kuning  telur),  3  gram  mentega,  2.5 gram  keju,  dan  1.5  gram  minyak  kelapa. Bahan-bahan tersebut dicampurkan menjadi satu,  lalu  diberikan  kepada  hewan  coba dengan  cara  oral  melalui  sonde  lambung sebanyak 1cc/ekor.
(20,21) Sebanyak 1500 gram tomat (Lycopersicum  esculentum) jenis  apel  segar diperoleh  dari  perkebunan  masyarakat sekitar  Banda  Aceh.  Tomat dipilih  dalam kondisi  yang  segar,  memiliki  tingkat kematangan  yang  sama.  Tomat  dicuci dengan  air  sampai  bersih, dipotong  kecil- kecil  lalu  diblender.  Tomat  dimaserasi dengan  menggunakan  pelarut  etanol  70% selama  3x24  jam  sampai  didapat  maserat yang  jernih,  kemudian  dievaporasi  dengan menggunakan rotary  evaporator  vacum sampai  diperoleh  ekstrak  pekat  dan ditimbang beratnya.
(22,23) Masing-masing tikus
ditimbang pada  akhir  masa  adaptasi
untuk mengetahui  beratnya guna  memenuhi kriteria  inklusi  yang  telah  ditetapkan, kemudian  semua  tikus  diambil  darahnya.
Sebelum
pengambilan darah tikus dipuasakan  terlebih  dahulu  selama  10-12 jam,  dan  hasilnya  digunakan sebagai patokan  awal ( baseline )  kadar  kolesterol tikus  sebelum  perlakuan.  Selanjutnya sebanyak 30  ekor  tikus  dibagi  secara acak menjadi lima
kelompok
perlakuan sebagaimana  telah  dijelaskan  di  atas  dan masing-masing  perlakuan  terdiri  dari enam ulangan.
Pemberian  ekstrak  tomat  sesuai perlakuan  dilakukan  15  menit  sebelum pemberian pakan tinggi kolesterol. Pemberian  ektrak dengan  volume  0,5 ml/ekor dilakukan secara oral,
menggunakan sonde  lambung. Pemberian ekstak  tomat  dilakukan  selama  60
hari.Semua tikus  perlakuan  diberi  air minum secara ad libitum selama penelitian.
Darah  tikus  diambil  menggunakan pipet  kapiler    melalui  vena  orbitalis sebanyak 1cc, setelah 60 hari perlakuan.Darah tersebut selanjutnya
dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  steril dengan  cara  dialirkan  secara  perlahan melalui dinding tabung. Selanjutnya tabung reaksi  tersebut  diletakkan dalam  termos berisi  es  pada  posisi  miring selama  5-6  jam atau  sampai  terlihat  pemisahan  antara serum dengan benda darah. Serum diambil dengan  menggunakan  pipet  steril  dan  di masukkan ke dalam ependorf , lalu di simpan dalam refrigerator dengan suhu -20ºC hingga dilakukan  pemeriksaan  terhadap  kadar testosteron.
Kadar  hormon testosteron  yang terdapat  dalam  serum  darah, dianaliis dengan  metode Enzyme-linked  immune- sorbent assay (ELISA), menggunakan kit total testosteron ( COAT-A-COUNT Total Testosterone, EIA 1559, DRG, Germany ). Analisis data dilakukan terhadap kadar hormon testosteron secara statistik, sebelumnya  dilakukan  uji  normalitas dengan  menggunakan  uji Kolmogorov- Smirnov dan homegenitas dengan menggunakan  uji Levene. (24) Hasil uji normalitas  menunjukkan  bahwa  data  tidak terdistribusi  normal.  Oleh  karena  itu  data dianalisis  dengan  uji  statistik  non parametrik menggunakan uji Kruskall Wallis dan  di  lanjutkan  dengan  uji Mann- Whitney .Analisis  data di  lakukan  dengan bantuan Software SPSS versi 20.

## Hasil Penelitian
Hasil analisis
kadar hormon testosteron serum darah tikus putih stran Wistar yang  diberi  pakan  tinggi  kolesterol dan  perlakuan  berbagai  dosis  ekstrak  buah tomat dapat dilihat pada tabel 4.1.
Secara  histogram  rata-rata  kadar testosteron  serum  darah  kelompok  kontrol
normal  (KN),  yang  diberi  pakan  tinggi kolesterol  (KP),  yang  diberi  pakan  tinggi kolesterol  dan ekstrak buah tomat dosis 25 mg/kgBB/hari (D1), 50 mg/kgBB/hari (D2) dan  100  mg/kgBB/hari  (D3)  dapat  dilihat pada gambar 1.
Tabel 1 Data kadar hormon testosteron serum darah tikus putih strain Wistar pada berbagai kelompok perlakuan ekstrak tomat (ng/ml)
Ulangan Kelompok Perlakuan KN KP D1 D2 D3 Tikus I 1,332 0,512 0,606 0,734 1,024 Tikus II 2,338 0,328 0,368 0,652 1,823 Tikus III 1,422 0,432 0,618 0,586 1,230 Tikus IV 1,070 0,397 0,452 0,875 1,512 Tikus V 2,314 0,413 0,583 0,703 1,690 Tikus VI 2,024 0,476 0,666 0,633 1,334 Rata-rata 1,83 0,41 0,54 0,69 1,52 SD 0,56 0,05 0,12 0,11 0,24 Keterangan: KN  =  Kelompok  tikus  putih  yang  diberi pakan normal
KP  =    Kelompok  tikus  putih    yang  diberi pakan  tinggi  kolesterol  selama  60 hari D1  =    Kelompok  tikus  putih    yang  diberi pakan  tinggi  kolesteroldan  ekstrak tomat  25  mg/KgBB/hari  selama  60 hari D2  =    Kelompok  tikus  putih    yang  diberi pakan  tinggi  kolesteroldan  ekstrak tomat  50  mg/KgBB/hari  selama  60 hari D3  =    Kelompok  tikus  putih    yang  diberi pakan  tinggi  kolesteroldan  ekstrak tomat 100 mg/KgBB/hari selama 60 hari
Gambar 1. Histogram kadar hormon testosteron serum darah tikus putih strain Wistar kelompok KN, KP, D1, D2 dan D3
Berdasarkan  tabel  1  dan  gambar 1 diatas  terlihat  bahwa  distribusi  data  kadar hormon testosteron serum darah tikus strain Wistar  berkisar  antara  0,328  sampai  2,338 ng/mL.  Nilai  rata-rata  kadar  hormon testosteron  serum  pada  perlakuan  kontrol negatif  (KN)  adalah  1,750  ng/mL, mengalami  penurunan  menjadi  0,426 ng/mL pada kelompok kontrol positif (KP), kemudian  meningkat  kembali  seiring dengan peningkatan dosis 25 mg/kgBB/hari,  50  mg/kgBB/hari  dan  100 mg/kgBB/hari secara berturut-turut adalah menjadi  0,549  ng/ml,  0,697ng/mL,  dan 1,463ng/mL. Hasil uji normalitas dengan menggunakan  uji
Kolmogorov  Smirnov didapatkan  bahwa  data  terdistribusi  secara tidak  normal  dengan nilai p untuk  30  unit sampel (lima perlakuan dan enam ulangan) tidak  berdistribusi  normal  dengan nilai  p adalah  <0.001  (Tabel 2).  Menurut  kaidah statistik, jika data terdistribusi tidak normal maka  analiasis  data  tidak  boleh  dilakukan secara  parametrik,  namun  harus  dilakukan secara  non  parametrik.Oleh  karena  itu, analisis  data  penelitian  ini  dilakukan dengan analisis non parametrik menggunakan  uji Kruskal-Wallis
.Uji Kruskal-
Wallis berfungsi  untuk  melihat  ada  atau tidaknya pengaruh perlakuan terhadap nilai konsentrasi  hormon  testosteron  di  dalam darah tikus putih yang diujikan.

## Tabel 2 Hasil uji Kolmogorov Smirnov terhadap sebaran data konsentrasi Hormon
Testosteron
Kolmogorov- Smirnov a Shapiro-Wilk Stat. df Sig. Stat. df Sig. Testosteron .222 30 .001 .864 30 .001
a. Lilliefors Significance Correction
Keterangan : Nilai p dihitung  menggunakan  uji kolmogorov  smirnov * p  < 0.05  (data terdistribusi tidak  normal)
Gambar 2 Histogram uji normalitas hormon testosteron
Hasil  uji Kruskal-Wallis sebagaimana terdapat  pada  Tabel  4.2,  menunjukkan bahwa  terdapat  pengaruh  perlakuan terhadap  kadar  hormon  testosteron  darah tikus putih ( Chi-square 24,942; Sig. <0,05).
Tabel 3 Hasil uji Kruskal-Wallis Hormon
Testosteron Testosteron Chi-Square 24.942 Df 4 Asymp. Sig. .000 a. Kruskal Wallis Test b. Grouping Variable: Perlakuan
Keterangan :
Nilai p dihitung  menggunakan  uji Kruskal-Wallis p value < 0.05 (didapatkan perbedaan)
Untuk  mengetahui  perlakuan  mana saja yang berpengaruh dan mana yang tidak berpengaruh  maka  dilakukan  uji  lanjut dengan  uji Mann-Whitney. Hasil  uji  lanjut
Mann-Whitney menunjukkan bahwa perlakuan  kontrol  negatif  (KN)  berbeda nyata  dibandingkan  dengan  kontrol  positif (KP), dosis 25 mg/kgBB/hari (D1) dan dosis 50  mg/kgBB/hari  (D2),  namun  tidak berbeda  dengan dosis  100  mg/kgBB/hari (D3).  Perlakuan  KP  berbeda  nyata dibandingkan  dengan  D2  dan  D3,  namun tidak  berbeda  dengan  D1,  selanjutnya semua  perlakuan  D1,  D2  dan  D3  berbeda nyata diantaranya (Tabel 3).

## Tabel 3 Hasil uji Mann-Whitney Hormon
Testosteron Perlakuan Mann- Whitney U Sig. Z KN – KP 0,000 0,004* -2,882 KN – D1 0,000 0,004* -2,882 KN – D2 0,000 0,004* -2,882 KN – D3 12,000 0,337 ns -0,961 KP – D1 7,000 0,075 ns -1,701 KP – D2 0,000 0,004* -2,882 KP – D3 0,000 0,004* -2,882 D1– D2 5,000 0,037* -2,082 D1 – D3 0,000 0,004* -2,882 D2 – D3 0,000 0,004* -2,882
Keterangan  : ns )  tidak  berbeda  nyata;  *) berbeda nyata pada taraf Z = 95%
Uji Mann-Whitney  menunjukan  ada perbedaan  yang  nyata  (p<0,05)  antara kelompok  perlakuan  KP  dengan  KN,  D2 dan  D3,  namun  tidak  terdapat  perbedaan yang  nyata  (p>0,05)  dengan  kelompok  D1. Kadar  hormon  testosteron  serum  pada kelompok D1 berbeda secara nyata (p<0,05) dengan  D2,  D3  dan  KN.    Kadar  hormon testosteron  serum  pada  kelompok  D2 berbeda  secara  nyata  (p<0,05)  dengan  D3 dan  KN.  Sedangkan  kadar  hormon testosteron  serum  pada  kelompok  D3  tidak berbeda secara nyata (p>0,05) dibandingkan
dengan  KN. Hasil  ini  mengindikasikan bahwa  pemberian pakan  tinggi kolesterol dan ekstrak  buah  tomat  pada  tikus  putih dapat  mempengaruhi  kadar  hormon testosteron dalam serum darah.

## Pembahasan
Hormon  testosteron  merupakan  suatu hormon  steroid  androgen  yang  penting dalam  kehidupan  seksual  dan  reproduksi baik  wanita  maupun  pria.  Selain  fungsinya yang berpengaruh besar terhadap
kehidupan  seksual,  testosteron  juga memiliki  efek  biologik  yang  penting diantaranya  pada  metabolisme,  integritas tulang, otot, sistem kardiovaskular dan otak berkurangnya hormon testosteron berpengaruh terhadap penurunan sensitivitas  insulin,  kelemahan otot, gangguan metabolisme
karbohidrat, gangguan  fungsi  kognitif,  berkurangnya dorongan  motivasi,  lelah  dan  letargi, peningkatan  lemak  tubuh,  serta  penurunan dorongan dan kemampuan seksual. (25)
Hormon testosteron pada pria diproduksi  oleh  sel  Leydig  di  dalam  testis sebanyak 95% sedangkan sisanya
diproduksi  oleh  cortex  adrenal.Sebanyak 98% testosteron terikat pada protein plasma, yang  meliputi  albumin  dan steroid  hormon- binding  globulin (SHBG).Sisanya  sebesar  2% merupakan  testosteron  bebas  karena beredar  dalam  keadaan tidak  terikat  pada protein apapun yang mengalir dalam darah. Persentase  testosteron  yang  terikat  pada SHBG bervariasi antar individu, tetapi pada umumnya  sekitar  40-80%  dari  testosteron yang  beredar. (25) Banyak  bukti  menunjukan bahwa  tinggi  rendahnya  kadar testosteron dalam  darah  dipengaruhi  oleh  banyak faktor  diantaranya  faktor  eksternal  seperti alkohol,  obat-obatan,  trauma  testis,  infeksi dan  merokok  sementara  faktor  internal dipengaruhi oleh penuaan, obesitas, kurang tidur, penyakit kronis dan
hiperkolesterolemia.  Hubungan  antara
tingginya  kadar  kolesterol  dalam  darah dengan konsentrasi testosteron berpengaruh secara  berbanding  terbalik.  Hal  ini  terjadi akibat munculnya enzim inhibisi pada testis yang  menurunkan  konversi  kolesterol menjadi  testosteron.Kadar  testosteron  kira- kira 25% pada keadaan hiperkolesterolemia. (12)
Hasil  pengukuran  kadar  hormon testosteron  serum  pada  penelitian  ini memperlihatkan  adanya  perbedaan  yang nyata  diantara  perlakuan.  Rata-rata  kadar hormon  testosteron  serum  yang  diperoleh pada  kelompok  tikus  putih  strain  Wistar normal  atau  kontrol  negatif  (KN)  adalah yaitu
1,83±0,56
ng/mL, mengalami penurunan menjadi  0,41 ±0,05 ng/ml pada kelompok tikus yang pakan tinggi kolesterol (KP). Kemudian  meningkat pada kelompok tikus  yang  diberi  pakan  tinggi  kolesterol dan ekstrak buah tomat dosis 25 mg/kgBB, 50  mg/kgBB  dan  100  mg/kgBB.  Hasil analisis  statistik  menunjukan  perbedaan yang  nyata  diantar  kelompok  perlakuan. Kadar  hormon  testosteron  serum  pada kelompok  KP  lebih  rendah  secara  nyata (p<0,05)  dibandingkan  dengan  kelompok KN, D2 dan D3, namun tidak berbeda secara nyata  (p>0,05)  dibandingkan  dengan  D1. Kadar  hormon  testosteron  serum  pada kelompok  D1  lebih  rendah    secara  nyata (p<0,05)  dengan  D2,  D3  dan  KN.    Kadar hormon  testosteron  serum  pada  kelompok D2  lebih  rendah  secara  nyata  (p<0,05) dibandingkan  dengan  D3  dan  KN. Sedangkan  kadar  testosteron  serum  pada kelompok  D3  tidak  berbeda  secara  nyata (p>0,05) dibandingkan  KN. Hal  ini membuktikan  bahwa  pemberian  pakan tinggi  kolesterol  pada  tikus  putih  dapat menurunkan  kadar  hormon  testosteron serum  tikus  putih  strain  Wistar,  sedangkan pemberian  ekstrak  buah  tomat  dosis  50-100 mg/kgBB/hari dapat mencegah penurunan kadar  testosteron  dalam serum  tikus  putih yang  diberi  pakan tinggi  kolesterol.  Hasil penelitian  ini  sesuai  dengan  hasil  yang
dilaporkan  oleh  Yamamoto  et  al.  pada kelinci  yang  diberi  pakan  tinggi  kolesterol terjadi penurunan kadar hormon testosteron dalam  serum  dan  jaringan  testis  secara bermakna. (8)
Terjadinya  penurunan  kadar hormon testosteron  serum  darah tikus  putih  pada kelompok  perlakuan  pemberian  pakan tinggi  kolesterol  (KP)  penelitian  ini kemungkinan  disebabkan    karena  pakan tinggi  kolesterol  dapat  meningkatkan produksi    senyawa  oksigen  reaktif  ROS
(reactive oxygen species) dalam tubuh. (9,26) Peningkatan  konsentrasi senyawa oksigen reaktif ini bila tidak diimbangi oleh aktivitas antioksidan dalam
tubuh menyebabkan terjadinya stres oksidatif yang dapat  meningkatkan  peroksidasi  asam lemak  tak  jenuh  pada  membran  sel, gangguan  fungsi  jalur  hipofise-pituitari- gonad disertai terjadinya penurunan sekresi hormon
Leutinizing dari hipofisa anterior, (10) gangguan  perkembangan  dan fungsi  sel  leydig  yang  akhirnya  akan menyebabkan  produksi  hormon  testosteron menurun. (8,10,27) Hiperkolesterolemia juga dapat  menyebabkan  penurunanan  aktivitas enzim 17-beta    hydroxysteroid  dehydrogenase dan  enzim    antioksidan
Superokside dismutase (SOD), Catalase (CAT), dan, glutatione peroxidase (GPx), (28,29) peningkatan jumlah degenerasi sel Leydig, pengurangan diameter inti Leydig sel, (30) kerusakan fungsi sel-sel Leydig. (10,27) Rusaknya  sel-sel  Leydig mengakibatkan  proses    sintesis  hormon testosteron serum mengalami penurunan. (25)
Penelitian  ini  menunjukkan  bahwa pemberian ekstrak buah tomat dengan dosis 25  mg/kgBB/hari,  50  mg/kgBB/hari  dan 100  mg/kgBB/hari  pada  kelompok  tikus putih yang diberi pakan
tinggi kolesterolmampu  menghambat  penurunan kadar hormon testosteron serum darah, bahkan  pada  kelompok  D3  kadar  hormon testosteron serum darah relatif sama dengan pada  kelompok  kontrol  (KN). Hasil  ini
membuktikan  bahwa  pemberian  ekstrak buah tomat  berperan  aktif  dalam peningkatan  kadar  testosteron serum tikus putih  yang  diberi  pakan  tinggi  kolesterol. Peningkatan  kadar  hormon  testosteron serum  ini  kemungkinan  disebabkan  efek positif  dari  bahan  aktif  yang  terkandung dalam  ekstrak  buah  tomat seperti  likopen, vitamin  E,  vitamin  C  dan  flovanol  yang bersifat  sebagai  antioksidan  yang mampu melindungi sel Leydig testis dari kerusakan akibat peningkatan senyawa oksigen reaktif. Adanya  kandungan  zat-zat  antioksidan pada  ekstrak  buah  tomat  akan  meredam aktivitas  senyawa  oksigen  reaktif,  sehingga akan  menghambat  terjadinya  peroksidasi lipid  dan  kerusakan  pada  sel-sel  interstitial testis  terutama  sel-sel  Leydig,  sehingga produksi  hormon  testosteron  terjaga  baik. Sebagaimana dilaporkan oleh Mohammed et al. bahwa  pemberian  jus campuran  tomat dan  wortel    pada  tikus  yang  menderita hiperlipidemia  selama  14  hari  dapat memperbaiki sel-sel Leydig
disertai peningkatan  kadar  hormon  testosteron dalam plasma darah secara nyata. (31)
Likopen  atau  yang  sering  disebut sebagai ß-karoten adalah  suatu  karotenoid pigmen  merah  terang,  yang  tinggi  dalam buah tomatserta bersifat sebagai antioksidan dan mampu melindungi sel dari peroksidasi lipid. Kemampuan likopen dalam meredam oksigen  tunggal  dua  kali  lebih  baik  dari pada  beta  karoten  dan  sepuluh  kali  lebih baik
daripada vitamin E (alfa- tokoferol).Sebagai antioksidan kuat, likopen melindungi  DNA  dari  stress  oksidatif dengan menonaktifkan
hidrogen peroksidase  dan nitrogen  dioksidase  serta melindungi  limphosit  dati  nitrit  dioksidase (NO)  yang  merusak  membran  dan terjadinya  kematian  sel. (32) Likopen  sebagai antioksidan juga berperan dalam menangkal radikal  bebas  melalui  mekanisme  oksidatif yaitu  memberikan  elektronnya  kepada elektron  bebas  yang  terdapat  pada  radikal bebas sehingga akan menghasilkan senyawa
yang  lebih  stabil. (28) Selain  itu,  penelitian yang  telah  dilakukan  oleh  Dasrul  juga membuktikan  bahwa  pemberian  ekstrak tomat dengan dosis 40-80 mg/kg selama 60 hari dapat meningkatkan kualitas spermatozoa tikus yang diberi pakan tinggi kolesterol. (32) Selain kandungan
antioksidan golongan  likopen,  ekstrak  buah  tomat  juga mengandung Vitamin C, dan E yang bersifat sebagai  antioksidan.  Vitamin  C  atau  asam askorbat  merupakan  antioksidan  penting yang  mampu  melindungi  sel  spermatozoa dan  DNA  dari  stress  oksidatif  dengan  cara menetralisir  senyawa  ROS.  Sedangkan Vitamin  E  yang  merupakan  bagian  dari golongan
tokoferol adalah senyawa antioksidan  yang  mampu  menghambat terjadinya  kerusakan  akibat  pembentukan radikal bebas pada membran sel, mencegah peroksidasi  lipid  dan  meningkatkan aktivitas  antioksidan  lainnya. Banyak  bukti menunjukan  bahwa    pemberian  vitamin  E mampu  merangsang  fungsi  testis  dalam memproduksi  hormon  testosteron  melalui fungsinya  mencegah  kerusakan  oksidatif pada  sel  Leydig.  Vitamin  E  sebagai antioksidan  akan  mencegah  oksidasi  lemak khususnya Poly  Unsaturated  Fatty  Acid (PUFA)  untuk  bereaksi  dengan  radikal bebas  sehingga  struktur  dan  fungsi  sel membran tetap  terjaga.  Vitamin  E  bekerja secara chain-breaking di  dalam  tubuh,  yang berartivitamin  E  memutuskan  hubungan radikal  peroksil  lipid  dengan  cara menyumbangkan  satu  atom  hidrogennya sehingga  mampu  melindungi  lipid  dari serangan  stres  oksidatif. (33) Vitamin  E mampu  menghentikan  reaksi  berantai peroksidasi  lipid  asam  lemak  tidak  jenuh pada  fosfolipid  membran  sel  testis, membantu  mencegah  akumulasi  ROS  pada jaringan-jaringan
yang
memproduksi spermatozoa,  serta  melindungi  fungsi spermatozoa. (10,32) Selain  itu vitamin  E mampu mencegah kerusakan Deoxyribonucleic Acid (DNA) yang
menyebabkan  mutasi,  mempertahankan LDL dan  unsur  tubuh  lainnya  yang  kaya akan  lipid  dalam  menangkal  radikal  bebas.
Kemampuan vitamin E dalam mempertahankan LDL sangat mempengaruhi  kadar  hormon  testosteron serum.  LDL  sendiri  merupakan  pembagian dari  kolesterol,  dimana  LDL  merupakan prekursor  hormon  testosteron  serum. Apabila  kadar  LDL  dapat  dipertahankan oleh  vitamin  E  maka  prekursor  bagi pembentukan  hormon  testosteron  serum juga  tersedia  didalam  tubuh,  sehingga produksi  dari  hormon  testosteron  serum dapat  meningkat.  Vitamin  E  selain berperansebagai  antioksidan,  juga  berperan aktif  dalam  memperbaiki  organel  sel  testis, seperti  reticulum  endoplasma  halus  atau mitokondria dari
kerusakan akibat peroksidasi  lipid. (22,34) Perbaikan  dari organel  sel  oleh  vitamin  E  sangat mempengaruhi aktivitas sel Leydig, menjadi lebih maksimal kinerjanya dalam memproduksi hormon testosteron, sehingga menyebabkan terjadinya peningkatan hormon  testosteron  dalam  serum  darah. Selain  itu  vitamin  E  menyebabkan penurunan aktivitas dari aromatase testis.Aromatase  testis  merupakan  enzim yang terlibat dalam produksi estrogen yaitu sebagai  katalis  bagi  konversi  testosteron menjadi  estradiol.  Penurunan  dari  aktivitas aromatase ini  meningkatkan  kadar  hormon testosteron.  Mekanisme  untuk  peningkatan total level  testosteron dapat dipengaruhi via sentral  yaitu  mampu  meningkatkan gonadotropin  atau  secara  lokal  melalui peningkatan  angka  darisel-sel  Leydig  atau sensitivitas merekaterhadap hormon luteinizing (LH). (34)

## Kesimpulan dan Saran

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  analisis  dan pembahasan  yang  telah  diuraikan  oleh
peneliti, dapat diambil beberapa kesimpulan sebagai berikut:
1. Pemberian ekstrak tomat ( Lycopersicum esculentum ), dapat menghambat penurunan kadar hormon  testosteron  pada  tikus  yang diberi pakan tinggi kolesterol. 2. Pemberian ekstrak tomat  dosis  100 mg/kgBB/hari lebih baik dibandingkan  dengan  dosis  25
mg/kgBB/hari dan 50 mg/kgBB/hari dalam menghambat penurunan kadar hormon  testosteron  pada  tikus  yang diberi pakan tinggi kolesterol.

## Saran
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini  dapat disampaikan saran-saran sebagai berikut:
1. Perlu  dilakukan  penelitian  lebih lanjut  untuk  mengetahui  pengaruh pemberian  ekstrak  tomat  terhadap perubahan  histologi  dan  jumlah  sel Leydig  tikus Rattus  norvegicus yang diberi pakan tinggi kolesterol.
2. Perlu  dilakukan  penelitian  lebih lanjut  untuk  mengetahui  pengaruh ektrak  tomat  terhadap  tingkat peroksidasi  lipid  pada  tikus  yang diberi pakan tinggi kolesterol.
3. Perlu dilakukan  penelitian  lebih lanjut  untuk  mengetahui  pengaruh ektrak  tomat  terhadap  tingkat  libido dan  daya  fertiltas  tiks  putih Rattus norvegicus yang  diberi  pakan  tinggi kolesterol.

## Daftar Pustaka
1. Tremellen K. Oxidative stress and male infertility - a  clinical  perspective. 2008;14(3):243–58.
2. Cahyana  HN,  Kaswidjanti  W  dan Kartikasari  AA.  Sistem  informasi berbasis  web  panduan  diet  bagi penderita  penyakit  jantung.  2003. p.154-157 3. Almatsier  S.  Penuntun  Diet.  Jakarta: Gramedia Pustaka Utama; 2004. p.28-35 4. Sargowo,  HD.  Peran  Radikal  Bebas Dalam  Patogenesa  Arterosklerosis. Jurnal  Kardiologi  Indonesia.  1997. 12(3): 15 5. Diska  P.  Pengaruh  Diet  Tinggi  Lemak Hewani  dan  Nabati  Terhadap  Kualitas Spermatozoa  Pada  Tikus  Jantan  strain Wistar.  1.  Kedokteran Andalas.  2014.
10. 6. Pramudito,  H.  Perbandingan  Kualitas Spermatoxzoa  Pada  Tikus  Wistar Diabetes  Melitus  Dan  Hiperlipidemia Artifisial.Semarang: Universitas Diponegoro: 2009. 7. Bashandy,  AES.Effect  of  Fertility  of Nigella  Sativa  on  Male  Infertility  in normal  and  hyperlipidemic  Rats. International jurnal of Pharmacology.2007: 3(1): 27-33. 8. Yamamoto Y, Shimamoto K, Sofikitis N and Miyagawa I. Effects of hypercholesterolaemia  on  Leydig  and
Sertoli  cell  secretory  function  and  the overall sperm fertilizing capacity in the rabbit.  Hum  Reprod.  1999;14(6):1516– 21.
9. Feng  Y,  Zhu  Y,  Chen  X,  Sha  J,  Fan  L and  Chen  Q.  Effects  of  diet-induced hypercholesterolemia  on  testosterone- regulated  protein  expression  in  mice liver. J Nanosci Nanotechnol.
2005;5(8):1273–6.
10. Tanaka,  M,  S.  Nakaya,  T.  Kumai,  M.
Watanabe,  N.  Matsumoto  and  S. Kobayashi,  2001.  Impaired  testicular function    in  rats  with  diet  induced hypercholesterolemia and or streptozotocin induced diabetes mellitus. Endocrinal. Res., 27: 109-117.
11. Šulcova, J., Štulc T,. Hill M., Hampl R.,
Masek,  Z.,  Vondra  K., et  al., 2010. Decrease in Serum Dehydroepiandrosterone  Level  after Fenofibrate  Treatment  in  Males  with
Hyperlipidemia. Physiol.  Res.  54:  151- 157, 2005.
12. Agarwal  A,  Cocuzza  M,  Abdelrazik  H and Sharma  RK.  Oxidative  stress measurement  in  patients  with  male  or female  factor  infertility.  Handb Chemilumin  Methods  Oxidative  Stress Assess. 2008;661(2):195–218.
13. Sumardiono S, Basri M dan Sihombing RP.  Analisis  Sifat-Sifat  Psiko-Kimia Buah Tomat (Lycopersicum esculentum)  Jenis  Tomat  Apel,  Guna Meningkatkan  Nilai  Fungsi  Buah
Tomat Sebagai Komoditi Pangan Lokal.
Semarang:  Universitas  Diponegoro: 2009.
14. Campbell  JK,  Canene-Adams  K, Lindshield  BL,  Boileau  TW-M,  Clinton SK  and  Erdman  JW.  Tomato phytochemicals  and  prostate  cancer risk. J Nutr. 2004;134(12 Suppl):3486S – 3492S.
15. Rao LG and Rao LG. Lycopene: Its role in human health and disease. Nutr Res. 1982;25–30.
16. Mokhtar,  MA.  ,  Pengaruh  Pemberian Jus  Tomat  Terhadap  Kadar  Kolesterol LDL  Tikus  Putih.Surakarta.Universitas Sebelas Maret; 2008.
17. Isnawati,  Sadikin  M,  Sriwidya,  Jusman dan  Aulia  A.  Efek    Pemberian  Tomat Terhadap    Perubahan  Konsentrasi Proteason Pada Karsinogenesis Hati.Jurnal Kedokteran Indonesia.2008;58(7): 237-241. 18. Zulfah  I.  Pengaruh  Pemberian  Jus Tomat Terhadap Morfologi Spermatozoa  Mencit  Strain  Balb/C Jantan yang Dipapar Asap Rokok.Semarang.Universitas Diponegoro:2006. 19. Selamet  RN,  Sugito  and  Dasrul.  The
Effect  of  Tomato  Extract  (Lycopersicon esculentum)  on  The  Formation  of Athero- Sclerosis in White Rats (Rattus norvegicus) Male. Jurnal natural Saince 2013;13(2):5–9.
20. Supranto  J.  Teknik  Sampling  Untuk Survei  dan  Eksperimen  Jakarta:  PT
Rineka Cipta. 2000. p. 32-38. 21. Khairuddin,  Manggau  MA  dan Mufidah.  Uji  Efek  Ekstrak  Etanol Sarang Semut ( Hydnophtum sp ) Terhadap  Perubahan  Bobot  Badan Mencit. Majalah Farmasi dan Farmakologi .2012; 16: 1. p. 45-50. 22. Goyal A, Chopra M, Lwaleed B a., Birch B,  Cooper  AJ.The  effects  of  dietary lycopene  supplementation  on  human seminal plasma. BJU Int. 2007;99(6):1456–60. 23. Andayani  R,  Lisawati  Y  dan Maimunah. Penentuan Aktivitas Antioksidan,  Kadar  Fenolat  Total  dan Likopen Pada Buah Tomat ( SolanumLycopersicum  L ). Jurnal  Sains dan Teknologi Farmasi .2008; 13: 1. 24. Budiarto  E.  Biostatistika  Untuk Kedokteran dan Kesehatan Masyarakat Jakarta: EGC. 2001. p. 54-60.
25. Guyton  C  and  Hall  JE.  Buku  Ajar Fisiologi  Kedokteran.  Jakarta:  EGC. 2007.p.882-891.
26. Ohara  Y,  Peterson  T,E  and  Harrison
D,G.  Hypercholesterolemia  Increases Endhotelial Superoxide Anion Production. Journal Clinical Invest.1993; 91.p. 2546-2551. 27. Preedy  VR,  Watson  RR.  Tomatoes  and Tomato Products.United States America.Publish  by  Publish  Science Publisher; 2008.
28. Bashandy,  AES.Effect  of  Fertility  of Nigella  Sativa  on  Male  Infertility  in normal  and  hyperlipidemic  Rats. International jurnal of Pharmacology.2006: 2(1):104-109. 29. Bohm,  Y  and  R.  Bitsch.  Interstinal Absorption Of Lycopene From Different  Matrices  and  Interactions  To Other Carotenoids, the Lipid Status and
Antioxsidant  Capacity  Of  Human Plasma. Eur. J. Nutr.1999 38:118-125.
30. Gupta  NP  and  Kumar  R.  Lycopene therapy in idiopathic male infertility--a preliminary  report.  Int  Urol  Nephrol.
2002;34(3):369–72. 31. Mohammed,  D.A.,  T.E.  Hamed,  and S.Y. Al-Okbi. Reduction in hypercholesterolemia and risk cardiovascular  diaseas  by  mixturesof plant food extracts: a study on a plasma lipid  profile,  oxidative  stress  amd testosterone  in  rats.  Grass  Y  Acietes. 61(4):378-389.
32. Fuhrman,  B.  Hypocholesterolemic effect  of  lycopene  and  ß – karotene  is relatedisi  to  supression  of  cholesterol syntesis  and  augmentation  of  LDL receptor  activity  in  macrophage. Biochemical  and  Biophysical  Research Communications,1997. 233:658-62.
33. Dasrul S.  Pemanfaatan  Ekstrak  Tomat ( Lycopersicum  esculentum  Mill )  Sebagai Antioksidan  dan  Antiinfertilitas  Serta Potensinya Dalam Pencegahan Infertilitas Tikus Putih ( Rattus norvegicus ) Strain Wistar Hiperkolesterolemik.  Laporan  Hasil Penelitian  Hibah  Pasca  Sarjana. Universitas Syiah Kuala, 2013.
34. Momeni,  Hamid  R,  Mehranjan,  Malek
S, Abnosi MH, Mahmoodi, et.al ., Effects of vitamin E on sperm parameters and reproductive  hormones  in  developing rats  treated  with  para-nonylphenol. Iranian  Journal  of  Reproductive Medicine 2009. 7 (3):111-116.