Uji Efektivitas Aplikasi Cendawan Entomopatogen Metarhizium anisopliae Terhadap Mortalitas Wereng Batang Coklat ( Nilaparvata lugens Stal.)
Erika Prisilya 1 , Lutfi Afifah 1 , Sugiarto 1 , Anik Kurniati 2
1 Program Studi Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Singaperbangsa Karawang
2 Balai Besar Penelitian Organisme Pengganggu Tumbuhan, Jawa Barat E-mail:lutfiafifah@staff.unsika.ac.id

## ABSTRACT
Nilaparvata  lugens  is  one  of  the  harmful  pests  that  causes  the  quantity  and  quality  of  rice  yields  to decrease. The use of chemical pesticides to control pests has a negative impact on the environment and farmers.  Biological  control  using  the  entomopathogenic  fungus  Metarhizium  anisopliae  safe  to  use  to treat  pest  attacks.  The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the  effectiveness  of  using  the entomopathogenic  fungus  M.  anisopliae  on  mortality  N.  lugens.  The  method  used  in  this  study  is  an experimental method with a single factor Completely Randomized Design (CRD). This study used liquid suspension  conidia  density  of  M.  anisopliae  consisting  of  5  treatments  and  4  repetitions:A(sterile distilled  water)  as  control;  B(density  10 6 conidia/ml);  C(density  10 7 conidia/ml);  D(density  10 8 conidia/ml); E(density 10 9 conidia/ml). Each experimental unit was infested with 10 instar 3 N. lugens and observed mortality for 7 days after application (hsa). The highest mortality calculation result for N. lugens was shown by application of M. anisopliae suspension at density 10 9 conidia/ml of 97,50% and probit  analysis  yielded  an  LC 50 value  of  8,78  x  10 8 conidia/ml  which  killed  50%  N.  lugens  pests. Biological control using the entomopathogenic fungus M. anisopliae is effective for controlling N.lugens and high conidia density can infect the pest with higher mortality.
Keywords:Conidia density , Metarhiziumanisopliae , Mortality

## ABSTRAK
Nilaparvata  lugens  merupakan  salah  satu  hama  merugikan  penyebab  kuantitas  dan  kualitas  hasil tanaman  padi  menurun.  Penggunaan  pestisida  kimia  untuk  mengendalikan  hama  berdampak  negatif bagi lingkungan dan petani. Pengendalian hayati menggunakan cendawan entomopatogen Metarhizium anisopliae  aman  digunakan  untuk  mengatasi  serangan  hama.  Tujuan  dari  penelitian  ini  untuk mengetahui  efektivitas  penggunaan  cendawan  entomopatogen  M.  anisopliae  terhadap  mortalitas  N. lugens.  Metode  penelitian  yang  digunakan  yaitu  metode  eksperimen  pola  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL) faktor tunggal. Penelitian ini menggunakan suspensi dari kerapatan konidia  M. anisopliae yang terdiri  dari  5  perlakuan  dan  4  kali  pengulangan:A(Akuades)kontrol;  B(kerapatan  10 6 konidia/ml);C(kerapatan  10 7 konidia/ml);  D(kerapatan  10 8 konidia/ml);  E(kerapatan  10 9 konidia/ml). Setiap unit percobaan diinfestasikan 10 instar 3 N. lugens dan dilakukan pengamatan mortalitas selama 7  hari  setelah  aplikasi  (hsa).  Mortalitas  N.  lugens  tertinggi  ditunjukkan  oleh  aplikasi  suspensi  M. anisopliae kerapatan 10 9 konidia/ml yaitu 97,50% dan analisis probitnilai LC 50 yaitu konsentrasi 8,78 x 10 8 konidia/ml  dapat  mematikan  50%  hama  N.  lugens.  Pengendalian  hayati  menggunakan  cendawan entomopatogen M. anisopliae efektif untuk mengendalikan N.lugens dan kerapatan konidia yang tinggi mampu menginfeksi hama dengan hasil mortalitas lebih tinggi .

## Kata Kunci: Kerapatan konidia, Metarhiziumanisopliae, Mortalitas

## PENDAHULUAN
Tanaman  padi  merupakan  tanaman  pangan  pokok  bagi  sebagian  masyarakat  dunia  karena memiliki  kandungan  nutrisi  yang  memenuhi  kebutuhan  gizi  dalam  tubuh(Kumalasari et  al .,  2017). Berdasarkan  Badan  Pusat  Statistik  (2022)tercatat  produksi  tanaman  padi  di  Indonesia  tahun  2021 menunjukkan  penurunan  sebesar  233,91  ribu  ton  dibandingkan  tahun  sebelumnya.  Salah  satu  hama
utama tanaman padi yaitu wereng batang coklat ( Nilaparvata lugens Stal.). N. lugens merupakan hama yang  sering  menyerang  dan  merusak  tanaman  padi  sehingga  menurunkan  hasil  produksi  bahkan menyebabkan  gagal  panen  (Sianipar et  al .,  2015).  Fase  nimfa  dan  dewasa N.  lugens dapat  menghisap cairan  pada  sel  tanaman  padi  sehingga  menimbulkan  gejala  sakit  berupa  tanaman  layu  dan  daun menguning  hingga  kecoklatan  seperti  terbakar  disebut hopperburn (Firdaus  dan  Haryadi,  2022). Penyakit lain penyebab serangan N. lugens yaitu rice grassy stunt virus atau virus kerdil rumput dengan gejala  sakit  berupa  tanaman  padi  menjadi  kerdil  dan  daunnya  terlihat  pucat  (Darmadi  dan  Alawiyah, 2018)
Pengendalian N. lugens saat ini banyak petani yang menggunakan pesisida kimia sebagai sarana utamanya.  Penggunaan  pesisida  kimia  berlebih  akan  berdampak  negatif  seperti  merusak  lingkungan, menimbulkan resistensi hama, menyebabkan resurjensi hama, dan mengakibatkan keracunan bagi petani serta  konsumen  (Kardinan et  al .,  2020).  Penggunaan  pestisida  kimia  masih  menjadi  budaya  yang  sulit ditinggalkan  para  petani,  perlu  upaya  yang  dapat  menggiring  petani  agar  mengganti  pestisida  kimia dengan  cara  yang  lebih  aman  untuk  mengendalikan  hama  seperti  Pengendalian  Hama  terpadu  (PHT). PHT  merupakan  teknik  pengendalian  Organisme  Penganggu Tumbuhan  (OPT)  dengan  pengaplikasian sumber  daya  alam  bersifat  ramah  lingkungan  seperti  memakai  pestisida  nabati  dan  pengendalian hayati(Nusantara dan Kurniawan, 2020). Pengendalian hayati memiliki prinsip pengendalian hama yaitu memanfaatkan  musuh  alami  seperti  predator,  parasitoid,  dan  patogen(Indiati  dan  Saleh,  2010).  Salah satu pengendalian hayati yang dapat diterapkan untuk mengatasi serangan hama N. lugens yaitu dengan penggunaan agens hayati berupa cendawan entomopatogen.
Cendawan  entomopatogen  merupakan  agens  hayati  yang  menimbulkan  gejala  sakit  pada serangga  merugikan  penyebab  penyakit  tanaman  dan  tidak  berdampak  pada  serangga  lainnya  selain hama utama. Cendawan entomopatogen yang banyak diaplikasikan untuk mengendalikan hama tanaman yaitu Beauveria  bassiana dan Metarhizium  anisopliae (Sari  dan  Rosmeita,  2019).  Cendawan M. anisopliae memproduksi  senyawa Cylic  peptide berupa  destruksin  yang  bersifat  racun  serta menyebabkan  kelainan  fungsi  pada  sel  jaringan  otot,  tubulus  malphigi,  hemosit,  lambung  tengah, sampai kelumpuhan sel  (Akhsan et  al ., 2022). Menurut Atta et  al . (2020) penggunaan agens  hayati M. anisopliae konsentrasi  10 8 konidia/ml  dengan  penyemprotan  langsung  pada  tubuh N.  lugens menghasilkan  mortalitas  sebesar  93,33%.  Mohan et  al .  (2016)mengemukakan  mortalitas N.  lugens berhubungan  dengan  konsentrasi  suspensi  konidia  yang  diaplikasikan,  suspensi  10 8 konidia/ml menghasilkan mortalitas hama pada hari ke 10 tertinggi yaitu 76,67%.
Upaya  meningkatkan  pertumbuhan  cendawan M.  anisopliae guna  memengaruhi  efektivitas kematian N. lugens yaitu dengan memberi nutrisi berupa minyak nabati dalam media tumbuh cendawan. MenurutSuhardi  dan  Sepe  (2021)  minyak  nabati  yang  ditambahkan  dalam  media  tumbuh  cendawan dapat  memengaruhi  jumlah  konidia  dan  meningkatkan  daya  kecambah.  Kandungan  nutrisi  media tumbuh  menentukan  jumlah  konidia  cendawan,  semakin  banyak  jumlah  konidia  maka  kemampuan mematikan  serangga  akan  semakin  tinggi(Anisa’a et  al .,  2020).    Salah  satu  minyak  nabati  yang  dapat ditambahkan dalam media tumbuh cendawan  yaitu minyak jagung ( Zea mays L.). MenurutManurung et al . (2012)formulasi 75 ml minyak jagung/kg media jagung pada M. anisopliae menghasilkan mortalitas Oryctes  rhinoceros sebesar  87,50%.  Menurut  Aryo et  al .  (2017)semakin  tinggi  kerapatan  konidia peluang  penempelan  pada  tubuh  serangga  semakin  besar,  maka  konidia  yang  berkecambah  akan semakin  banyak, dan dalam percobaannya  menghasilkan  mortalitas Spodoptera litura tertinggi sebesar 86,67% pada kerapatan konidia M. anisopliae 2,25x10 9 konidia/ml.
Penelitian  ini  menggunakan  media  tumbuh  jagung  karena  jagung  memiliki  nutrisi  yang  baik untuk pertumbuhan cendawan.  Fitrah et  al . (2021)mengemukakan kandungan  nutrisi protein, nitrogen, karbohidrat  baik  untuk  pertumbuhan  cendawan,  dan  kandungan  lemak  tinggi  dapat  memengaruhi jumlah konidia. Menurut Afifah et al . (2022) kerapatan konidia Lecanicilium lecanii pada media jagung memiliki nilai tertinggi sebesar 4,2x10 8 konidia/ml dibandingkan media lainnya karena jagung memiliki protein  berperan  dalam  pertumbuhan  hifa  serta  miselium.  Maksud  dilakukannya  penelitian  ini  yaitu memberi  informasi  kepada  pembaca  guna  membantu  dalam  perbanyakan  cendawan  entomopatogen untuk  pengendalian  hama.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  efektivitas  cendawan entomopatogen M.  anisopliae terhadap  mortalitas N.  lugens dan  mendapatkan  konsentrasi  kerapatan konidia paling efektif untuk mematikan hama.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium  Agens  Hayati  dan  Laboratorium  Entomopatogen, BBPOPT.  Pelaksanaan  penelitian  pada  bulan  Januari  sampai  April  2023.  Penelitian  ini  menggunakan metode eksperimen pola Rancangan Acak Lengkap (RAL) Faktor Tunggal yang terdiri dari 5 perlakuan dan  4  kali  pengulangan.  Perlakuan  suspensi  kerapatan  konidia M.  anisopliae yang  digunakan  adalah sebagai  berikut: A  (Akuades)  kontrol,  B  (kerapatan  10 6 konidia/ml),  C  (kerapatan  10 7 konidia/ml),  D (kerapatan 10 8 konidia/ml), E (kerapatan 10 9 konidia/ml).

## Persiapan alat dan bahan
Alat  dan  bahan  yang  digunakan  pada  penelitian  disterilisasi  terlebih  dahulu.  Sterilisai  panas kering dilakukan pada alat-alat seperti cawan Petri, Erlenmeyer, dan lainnya menggunakan oven selama 2  jam  sampai  suhu  150°  C.  Sterilisasi  panas  basah  dilakukan  pada  bahan-bahan  seperti  media  PDA, media jagung, dan akuades menggunakan autoclave selama 15 menit dengan suhu 121° C. Pembuatan  media  PDA  dengan  200  g  kentang,  20  g dextrose ,  dan  20  g agar  bacteriological dalam  1  liter  akuades.  Media  PDA  dituang  10  ml/cawan  Petri.    Pembuatan  media  jagung  giling dilakukan dengan merendam jagung selama 16 jam dan dicuci bersih, jagung dikeringkan dan ditimbang 100 g/plastik tahan panas, plastik dilipat rapat dan dikukus dalam panci selama 2 jam.

## Perbanyakan kultur murni M. anisopliae
Isolat cendawan M. anisopliae diperoleh dari BBPOPT dan diperbanyak pada media PDA dalam cawan Petri. Perbanyakan dilakukan di Laminar Air Flow (LAF). Cendawan diinkubasi selama 21 hari. Setelah itu dilakukan perbanyakan M. anisopliae pada media jagung.

## Perbanyakan M. anisopliae untuk aplikasi
Perbanyakan  dilakukan  di Laminar  Air  Flow (LAF).  Menyiapkan  100  g  media  jagung  giling steril  dalam  plastik  tahan  panas.  Lalu  meneteskan  10  ml  minyak  jagung  ke  media  menggunakan micropipette .  Plastik  diaduk  agar  homogen,  kemudian  cendawan M.  anisopliae diinokulasikan  dengan spatula steril dan plastik dilipat rapat. Cendawan diinkubasi 21 hari.

## Perbanyakan serangga N. lugens
Perbanyakan  dilakukan  di greenhouse dengan  menanam  padi  varietas  pelita  sampai  berumur  3 minggu. Membuat sungkup perbanyakan dengan kurungan besi, insect net dan ember. Memasukan padi umur 3 minggu dan 6 ekor wereng bunting ke dalam  sungkup. Dilakukan perawatan  mengganti pakan padi  dan  penyiraman  sampai N.  lugens bertelur.  Serangga  uji N.  lugens instar  3  digunakan  dalam penelitian.

## Aplikasi M. anisopliae terhadap N. lugens
Menyiapkan larutan induk berupa 1 g cendawan hasil perbanyakan pada  media jagung dan 100 ml  air  steril  ke  dalam  erlenmeyer,  diaduk  dengan magnetic  stirrer selama  15  menit.  Lalu  menghitung kerapatan konidia dengan mengambil 0,2 ml suspensi kemudian meneteskannya pada Haemocytometer dan  diamati  menggunakan  mikroskop.  Hasil  perhitungan  kerapatan  konidia  tertinggi  digunakan  untuk uji mortalitas. Mengambil 1 ml suspensi induk dari perhitungan tertinggi dan dimasukan dalam tabung reaksi berisi 9 ml air steril, diaduk dengan vortex selama 3 menitPengenceran dilakukan bertingkat pada 10 6 , 10 7 , 10 8 , dan 10 9 konidia/ml. Suspensi 10 9 konidia/ml diperoleh dari kelipatansuspensi induk yaitu 10 g cendawan pada 100 ml air steril.
Lalu membuat wadah uji mortalitas (Gambar 1). Wadah uji dibuat dari gelas plastik berisi media tanah, gelas ditutup dengan cover glass yang dilubangi untuk meletakkan 2 rumpun tanaman padi umur 3 minggu dan cover glass dilapisi parafilm pada  sekitar lubang batang padi, bagian atas  terdapat  gelas plastik  yang sudahdilubangi untuk lubang penyemprotan dan  ditutup  kapas agar serangga tidak keluar, diinfestasikan  10  ekor N.  lugens instar  3/unit  percobaan.  Aplikasi  penyemprotan  cendawan M. anisopliae dilakukan 1 kali di sore hari sebanyak 1 ml/perlakuan menggunakan hand sprayer berukuran 10 ml.
Gambar 1.  Wadah uji mortalitas N. lugens

## Variabel pengamatan
Pengamatan  dilakukan  setelah  melakukan  aplikasi  suspensi  kerapatan  konidia  cendawan entomopatogen M.  anisopliae terhadap  serangga  instar  3 N.  lugens .  Variabel  pengamatan  yang diamatimeliputi:

## 1. Mortalitas N. lugens
Perhitungan mortalitas dilakukan selama 7 hari setelah aplikasi kerapatan konidia cendawan M. anisopliae dengan  menghitung  banyaknya  instar 3 N.  lugens yang  mati  akibat terinfeksi  cendawan pada  masing-masing  unit  percobaan.  MenurutMulyani et  al .  (2022)  rumus  perhitungan  mortalitas adalah sebagai berikut:
𝑀 = 𝑎 𝑏 𝑥 100%
Keterangan: M = Persentase mortalitas (%) a   = Jumlah serangga uji yang mati (ekor) b   = Jumlah serangga yang diamati (ekor)
Dilakukan  Uji  F  dengan  analisis  ragam  taraf  5%.  Jika  hasil  uji  F  menunjukkan  berbeda  nyata diuji lanjut DMRT taraf 5%.

## 2. Lethal Concentration (LC 50 )
Lethal  concentration (LT 50 )  merupakan  pengujianuntuk  mengetahui  konsentrasi  yang dibutuhkan agar dapat mematikan 50% serangga uji. Data pengamatan hasil LC 50 penelitian ini akan diolah  secara  analisis  probit  menggunakansoftware  aplikasi  IBM  SPSS  Statistics  versi 25(Anggarawati et al ., 2017).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Mortalitas N. lugens
Hasil uji mortalitasmenunjukkan suspensi kerapatan konidia cendawan M. anisopliae berpengaruh  nyata terhadap  mortalitas  instar  3 N.  lugens .  Berdasarkan  (Tabel  1),  persentase mortalitas  akhirtertinggi  ditunjukkan  pada  aplikasi M.  anisopliae kerapatan  10 9 konidia/ml  sebesar 97,50%  dan  mortalitas  terendah  pada  kerapatan  10 6 konidia/ml  sebesar  55,00%.Pengamatan  hari pertama,  kerapatan  10 7 ,  10 8 ,  dan  10 9 konidia/ml  sudah  mampu  mematikan N.  lugens sedangkan kerapatan 10 6 konidia/ml mampu mematikan lebih lama yaitu pada hari keduaserta pada hari berikutnya persentase mortalitas N. lugens terus mengalami peningkatan. Penelitian ini menunjukkan semakin tinggi kerapatan  konidia  maka  kemampuan  menginfeksi N.  lugens semakin  baik.  Sejalan  denganAryo et  al . (2017)bahwa semakin tinggi kerapatan konidia M. anisopliae peluang penempelan pada tubuhserangga semakin besar, maka konidia yang berkecambah semakin banyak.
Tabel 1.   Mortalitas  harian N.  lugens selama  7  hari  pengamatan  setelah  aplikasi  suspensi  kerapatan konidia cendawan M. anisopliae .
Kerapatan
Konidia (konidia/ml) Mortalitas Kumulatif (%) N. lugens Pengamatan Hari Ke- 1 2 3 4 5 6 7 A (Akuades) 0,00 0,00 0,00 0,00 5,00 12,50 22,50
B (10 6 ) 0,00 2,50 7,50 15,00 25,00 40,00 55,00 C (10 7 ) 2,50 5,00 12,50 22,50 35,00 50,00 67,50 D (10 8 ) 5,00 10,00 17,50 30,00 55,00 80,00 80,00 E (10 9 ) 7,50 17,50 30,00 47,50 97,50 97,50 97,50
Hasil  percobaan  ini  menunjukkan  persentase  akhir  mortalitas N.  lugens akibat  terinfeksi cendawan M.  anisopliae lebih  dari  50%  tiap  perlakuannya,  hal  tersebut  dapat  dikatakan  cendawan M. anisopliae memiliki  senyawa  toksin  bersifat  patogen  untuk  mengendalikan  hama.  Sejalan denganMulyani et al . (2022) menunjukkan mortalitas serangga N. lugens yang disebabkan oleh aplikasi suspensi cendawan M. anisopliae pada kerapatan konidia 10 6 konidia/ml  sebesar 50%. Menurut Athifa et  al .  (2018)kemampuan M.  anisopliae dalam  mematikan  serangga  disebabkan  oleh  enzim  berupa amilase,  lipase,  proteinase,  kitinase,  dan  pospatase  yang  berfungsi  saat  infeksi  dalam  tubuh  inang. Mondal et al . (2016)mengemukakan cendawan M. anisopliae memproduksi enzim setelah berkecambah untuk tahap  penetrasi  berupa  enzim  protease  untuk  memecahkan  senyawa  protein,  enzim  lipase  untuk mendegradasi  lapisan  kutikula  serangga,  dan  enzim  kitin  untuk  menunjang  pertumbuhan  cendawan. Senyawa  toksin  yang  diproduksi M.  anisopliae yaitu Cylic  peptide berupa  destruksin  dan desmethyldestruksin B  yang  dapat  mengganggu  fungsi  sel  lalu  menyerang  organel  pada  jaringan  otot, tubulus malphigi, hemosit, lambung tengah serta kelumpuhan sel sampai mematikan serangga  (Akhsan et al ., 2022).
Infeksi cendawan M. anisopliae percobaan ini mampu menghasilkan mortalitas N. lugens sampai 97,50%  pada  kerapatan  tertinggi  yaitu  1x10 9 konidia/ml.  Berdasarkan  hasil  analisis  regresi  pada (Gambar  2)bahwa  hubungan  antara  mortalitas  hama N.  lugens dengan  kerapatan  konidia  cendawan entomopatogen M.  anisopliae menunjukkan  nilai  R 2 sebesar  0,757  dengan  nilai  P  value  yaitu  0,129. Hasil  analisis  regresi  penelitianini  dapat  dikatakan  bahwa  pengujian  kerapatan  konidia  cendawan M. anisopliae mampu  menghasilkan  nilai  yang  baik  terhadap  mortalitas N.  lugens sebesar  75,7%  dan konsentrasi tingkatan kerapatan konidia tidak mempengaruhi mortalitas N. lugens . Sejalan dengan hasil penelitian  oleh  Permadi et  al .  (2018)yangmenunjukkan  kerapatan  10 8 konidia/ml  cendawan M. anisopliae mampu  menyebabkan  infeksi terhadap serangga kepik hijau Nezara viridula sebesar 97,2% dengan  nilai  R 2 yaitu  0,972  hal  tersebut  menyatakan  97,2%  mortalitas  serangga  dipengaruhi  oleh kerapatan konidia cendawan M. anisopliae .
Gambar 2.  Regresi hubungan antara kerapatan konidia M. anisopliae dengan mortalitas N. lugens .
Menurut Dannon et al . (2020)infeksi serangga oleh cendawan entomopatogen terdapat 4 tahapan yaitu  pertama  tahap  inokulasi  merupakan  kontak  antara  konidia  cendawan  dengan  lapisan  kutikula serangga.  Tahap  germinasi  (perkecambahan)  dimana  konidia  yang  menempel  pada  tubuh  serangga membentuk  tabung  kecambah  lalu  berkembang  menjadi  apresorium  (tabung  kecambah  yang menggembung untuk pelekat pada awal infeksi). Tahap penetrasi yaitu pembentukan tunas (blastospora) di  ujung  apresorium  dan  proses  masuknya  cendawan  ke  dalam  tubuh  serangga  dengan  bantuan  enzim dan  toksin  yang  dimiliki  cendawan  sehingga  membentuk  hifa  primer.  Tahap  akhir  diseminasi  dimana blastospora menghasilkan toksin, senyawa beracun yang dimiliki M. anisopliae yaitu Cylic peptide yang menyebabkan  sakit  seperti  hilang  nafsu  makan,  gerakan  yang  lambat,  sistem  syaraf  terganggu  sampai
10 6 R 2 = 0,757 P value = 0,1298 10 7 10 8 10 9
kematian  serangga.  Lalu  cendawan  membentuk  hifa  sekunder  untuk  penyebaran  ke  seluruh  tubuh serangga.
Persentase mortalitas N. lugens penelitian ini menunjukkan hasil yang meningkat tiap kerapatan konidianya  (Tabel  1). Aplikasi  suspensi  cendawan M.  anisopliae dilakukan  dengan  semprot  langsung pada serangga dan konidia dapat menempel langsung pada permukaan tubuh serangga sehingga mampu mematikan  50% N.  lugens .  Sejalan  dengan  penelitian  Octriana  dan  Istianto  (2021)aplikasi  pestisida nabati  dengan  metode  semprot  langsung  pada  tubuh  serangga  lebih  efektif  mematikan  dibandingkan semprot  pada permukaan daun. Tetapi hasil penelitian  ini  berbeda denganNgatimin et  al . (2020)bahwa aplikasi cendawan M. anisopliae menggunakan  beberapa  metode yaitu penyiraman suspensi  cendawan pada  media  tanaman  padi,  merendam  benih  padi  dengan  suspensi  cendawan,  dan  menyelubungi  benih padi  dengan  bubuk  cendawan  hanya  menghasilkan  mortalitas N.  lugens tertinggi  sebesar  27%  pada metode perendaman benih.
Berdasarkan  penelitian  ini  dapat  dikatakan  cendawan  entomopatogen  dapat  mengendalikan hama  karena  data  perhitungan  mortalitas N.  lugens dengan  aplikasi  kerapatan  konidia M. anisopliaemenunjukkan  hasil  yang  berbeda  nyata.  Sejalan  dengan  Wongkar et  al .  (2022)dalam penelitiannya  menggunakan  spesies  cendawan Metarhizium sp.  yang  baru  diketahui  yaitu M. huainamdangense pada  konsentrasi  kerapatan  konidia  10 6 ,  10 7 ,  10 8 ,  dan  10 9 konidia/ml  menyebabkan kematian N. lugens mencapai 100% selama 7  hari dengan waktu kematian tercepat 1 hari ditunjukkan oleh  kerapatan  10 9 konidia/ml.  Penelitian  lain  oleh  Aryo et  al .  (2017)  menunjukkan  mortalitas Spodoptera  litura tertinggi  sebesar  86,67%  pada  kerapatan  konidia  cendawan M.  anisopliae tertinggi yaitu 2,25x10 9 konidia/ml.
Tular et  al .  (2022)  menunjukkan  tingginya  kerapatan  konidia M.  anisopliae mengakibatkan mortalitas Scotinophara coarctata semakin tinggi, pada 10 7 dan 10 8 konidia/ml menyebabkan mortalitas 81% dan 91%,hari pertama sudah menunjukkan kematian dan gejala terinfeksi M. anisopliae muncul di hari  kedua  dengan  pertumbuhan  vegetatif  miselium  berwarna  putih  pada  serangga  serta  di  hari  ketiga mengalami pertumbuhan generatif yaitu perubahan warna menjadi hijau dengan sebaran miselium yang tidak  merata,  sejalan  dengan  percobaan  ini  pada  hari  ketiga  setelah N.  lugens terinfeksi  sudah menunjukkan  pertumbuhan  cendawan.  Hasil  mortalitas N.  lugens akibat  terinfeksi  cendawan M. anisopliae penelitian  ini  menunjukkan  ciri  morfologis  tubuh  serangga  berwarna  kehitaman,  bagian abdomen  mengkerut  dan  terlihat  organ  dalam  serangga,  tubuh  menjadi  kaku,  mengeras,  serta  muncul miselium  pada  tubuh  serangga  berwarna  hijau  tua.  Kondisi  tubuh  instar  3 N.  lugens yang  terinfeksi cendawan M. anisopliae diamati dengan  mikroskop stereo binokuler khusus spesimen dan dapat dilihat pada Gambar 3.
Gambar 3.  Kematian  instar  3 N.  lugens akibat  terinfeksi  cendawan M.  anisopliae (a)  Gejala  awal pertumbuhan cendawan, (b) Miselium menjadi berwarna hijau.
Lethal Concentration (LC 50 )
Berdasarkan  perhitungan  analisis  probit  mortalitas N.  lugens penelitian  ini  menghasilkan  nilai LC 50 dari  kerapatan  konidia M.  anisopliae sebesar  8,7x10 8 konidia/ml.  Tingkat  patogenitas  cendawan entomopatogen  untuk  mematikan  serangga  uji  dipengaruhi  oleh  faktor  konsentrasi  kerapatan  konidia yang  diaplikasikan.  Percobaan  ini  menunjukkan  nilai  LC 50 memiliki  range  kerapatan  konidia  kisaran 4,05x10 7 sampai  3,36x10 9 mampu  mematikan  serangga  uji  dengan  kerapatan  paling  efektif  untuk mematikan 50% serangga yaitu 8,78 x 10 8 konidia/ml, hal tersebut sejalan dengan penelitian Wongkar et
a
b
al .  (2022)  yang  menyatakan  bahwa  tingginya  kerapatan  konidia  cendawan  dapat  memicu  kematian serangga N. lugens lebih cepat bahkan dalam kurun waktu tujuh hari mampu mematikan 100% serangga uji, dan pada percobaannya aplikasi kerapatan konidia cendawan entomopatogen M. huainamdangense terhadap hama N. lugens memberikan nilai LC 50 sebesar 10 8,9 konidia/ml. Kerapatan  konidia M.  anisopliae efektif  untuk  mematikan  50%  serangga  pada  percobaan  ini ditunjukkan dari nilai LC 50 yaitu 10 8 konidia/ml sejalan denganKastilong et al . (2022)yang menyatakan bahwa  nilai  LC 50 dari  pengujian  cendawan B.  bassiana terhadap  walang  sangit  ( Leptocorisa  acuta ) sebesar  1x10 8 konidia/ml.Penelitian  Ulya et  al .  (2016)  menjelaskan  pengujian  patogenisitas  cendawan M.  anisopliae terhadap  hama Lepidiota  stigma instar  tiga  menghasilkan  nilai  LC 50 sebesar  8,2x10 8 konidia/ml  selama  7,7  hari.  Begitupun  penelitian  Akmal et  al .  (2020)aplikasi  cendawan B.  bassiana terhadap  hama  kumbang  tepung  merah  ( Tribolium  castaneum )  menunjukkan  hasil  perhitungan  LC 50 yaitu  3,31x10 8 konidia/ml  dan  aplikasi  pada Isaria  fumosorosea menghasilkan  nilai  LC 50 sebesar 4,18x10 8 konidia/ml.Mortalitas  dan  waktu  kematian  serangga  inang  dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor diantaranya  tingkat  patogenisitas,  kerapatan  konidia,  media  tumbuh  yang  digunakan,  jenis  dan  umur serangga,  ketahanan  serangga  terhadap  senyawa  patogen,  frekuensi  dan  waktu  aplikasi,  serta  faktor lingkungan seperti suhu dan kelembapan (Manurung et al ., 2012).
Hasil  percobaan  ini  memberikan  nilai  LC 50 10 8 konidia/ml  lebih  besar  dibandingkan  dengan Novitasari  (2023)yang  menyatakan  bahwa  aplikasi  cendawan M.  anisopliae terhadap  larva Aedes aegypti memberikan  nilai  analisis  probit  LC 50 sebesar  1,98x10 6 konidia/ml.  Pernyataan  tersebut  sama halnya dengan penelitian Pertiwi et al . (2022)yang menghasilkan perhitungan LC 50 yaitu sebesar 1x10 6 konidia/ml  untuk  patogenisitas  cendawan M.  anisopliae terhadap  hama Crocidolomia  binotalis . Menurut  Tular et  al .  (2022)semakin  tinggi  konsentrasi  cendawan M.  anisopliae yang  diberikan  pada serangga  uji  maka  semakin  cepat  cendawan  untuk  menginfeksi  serangga,  dan  dalam  penelitiannya bahwa  aplikasi  cendawan M.  anisopliae terhadap  serangga  kepinding  tanah  ( Scotinophara  coarctata ) memperoleh nilai LC 50 sebesar 1x10 7 konidia/ml.

## KESIMPULAN
Cendawan  entomopatogen M.  anisopliae merupakan  agens  hayati  yang  aman  digunakan  dan efektif  untuk  mengendalikan  hama.  Kerapatan  konidia  cendawan M.  anisopliae 10 9 konidia/ml memberikan  hasil  tertinggi  terhadap  mortalitas N.  lugens sebesar  97,50%  dan  analisis  probit menghasilan nilai LC 50 sebesar 8,78 x 10 8 konidia/ml mampu mematikan 50% hama N. lugens .

## DAFTAR PUSTAKA
Afifah,  L., Aena, A.  C.,  Saputro,  N.  W.,  Kurniati, A.,  Maryana,  R.,  Lestari, A., Abadi,  S.,  &  Enri,  U. 2022.  Maize  Media  Enhance  the  Conidia  Production  of  Entomopathogenic Fungi  Lecanicillium lecanii also  Its  Effective  to  Control  the  Weevil Cylas  formicarius (Fabricius)  (Coleoptera: Brentidae). Journal of AGRIVITA , 44 (3), 513–525.
Akhsan,  N.,  Sila,  S.,  &  Noviana,  T.  E.  2022.  Isolasi  Jamur  Entomopatogen  pada  Lahan  Tanaman Pangan,  Hortikultura,  dan  Perkebunan  di  Kabupaten  Penajam  Paser  Utara  dan  Uji  Patogenisitas pada Spodoptera litura . Jurnal Agrifor , 21 (2), 265–274.
Akmal,  M.,  Freed,  S.,  Bilal,  M.,  &  Malik,  M.  N.  2020. A  Laboratory  Evaluation  for  the  Potential  of Entomopathogenic  Fungi  Against Tribolium  castaneum (Herbst.)  (Coleoptera:  Tenebrionidae). Turkish Journal of Agriculture - Food Science and Technology , 8 (6), 1232–1235. Anggarawati, S. H., Santoso, T., & Anwar, R. 2017. Penggunaan Cendawan Entomopatogen Beauveria bassiana (Balsamo)  Vuillemin  dan Lecanicillium  lecanii (Zimm)  Zare  dan  Gams  Untuk Mengendalikan Helopeltis  antonii Sign  (Hemiptera:  Miridae). Jurnal  Silvikultur  Tropika , 8 (3), 197–202.
Anisa’a, N., Imaningsih, W., & Muhammat. 2020. Potensi Limbah Kulit Udang Sebagai Sumber Nutrisi bagi  Pertumbuhan Metarhizium  anisopliae yang  Diujikan  pada  Nyamuk Aedes  aegypti . Jurnal Bioscientiae , 17 (1), 52–62.
Aryo, K., Wibowo, L., Purnomo, & Aeny, T. N. 2017. Virulensi Beberapa Isolat Metarhizium anisopliae Terhadap  Ulat  Grayak  ( Spodoptera  litura F.)  di  Laboratorium. Jurnal  Agrotek  Tropika , 5 (2),  96– 101.
Athifa,  S., Anwar,  S.,  &  Kristanto,  B. A.  2018.  Pengaruh  Keragaman  Jamur Metarhizium  anisopliae, Terhadap  Mortalitas  Larva  Hama Oryctes  rhinoceros dan Lepidiota  stigma . Journal  of  Agro Complex , 2 (2), 120–127.
Atta,  B.,  Rizwan,  M.,  Sabir,  A.  M.,  Gogi,  M.  D.,  Farooq,  M.  A.,  &  Batta,  Y.  A.  2020.  Efficacy  of Entomopathogenic  Fungi  Against  Brown  Planthopper Nilaparvata  Lugens (Stal)  (Homoptera: Delphacidae) Under Controlled Conditions. Journal Gesunde Pflanzen , 72 (2), 101–112. Badan Pusat Statistik (BPS). 2022. Budget Issue Brief Industri dan Pembangunan (Vol. 02).
Dannon, H., Dannon, A., Douro-Kpindou, O., Zinsou, A., Houndete, A., Toffa-Mehinto, J., Elegbede, I., Olou, B., & Tamo, M. 2020. Toward The Efficient Use of Beauveria bassiana in Integrated Cotton Insect Pest Management. Journal of Cotton Research , 3 (1), 1–21. Darmadi, D., & Alawiyah, T. 2018. Respons Beberapa Varietas Padi ( Oryza sativa L.) terhadap Wereng Batang Coklat ( Nilaparvata lugens Stall) Koloni Karawang. Jurnal Agrikultura , 29 (2), 73–81. Firdaus, F., & Haryadi, N. T. 2022. Fluktuasi Populasi Wereng Batang Coklat Nilaparvata lugens (Stal) pada  Padi  di  Desa  Sumberagung  Kecamatan  Sumberbaru  Kabupaten  Jember. Jurnal  Hama  Dan Penyakit Tumbuhan , 10 (2), 46–59.
Fitrah, Z., Suryanti, & Netty. 2021. Uji Pertumbuhan Jamur Beauveria bassiana Pada Beberapa Media Pertumbuhan. Jurnal Ilmu Pertanian , 2 (2), 18–23.
Indiati,  S.  W.,  &  Saleh,  N.  2010.  Hama  Boleng  pada  Tanaman  Ubi  Jalar  dan  Pengendaliannya.
Kementerian Pertanian Buletin Palawija , 19 , 27–37.
Kardinan,  A.,  Rizal,  M.,  &  Maris,  P.  2020.  Pengaruh  Insektisida  Nabati  Kamandrah  dan  Akar  Tuba terhadap Wereng Batang Coklat. Jurnal Ilmu-Ilmu Pertanian Indonesia , 22 (2), 93–98.
Kastilong, E. B., Lengkong, M., & Engka, R. 2022. Uji Patogenisitas Jamur Entomopatogen Beauveria bassiana Bals. Terhadap Walang  Sangit Leptocorisa  acuta Thunb.  Pada Tanaman  Padi. Jurnal  of Sam Ratulangi University , 14 (3), 1–9.
Kumalasari,  S.  N.,  Sudiarso,  &  Suryanto,  A.  2017.  Pengaruh  Jarak  Tanam  dan  Jumlah  Bibit  Pada Tanaman Padi ( Oryza sativa L.) Hibrida Varietas PP3. Jurnal Produksi Tanaman , 5 (7), 1220–1227. Manurung,  E.  M.,  Tobing,  M.  C.,  Lubis,  L.,  &  Priwiratama,  H.  2012.  Efikasi  Beberapa  Formulasi Metarhizium  anisopliae terhadap  Larva Oryctes  rhinoceros L.  (Coleoptera:Scarabaeidae)  di Insektarium. Jurnal Online Agroekoteknologi , 1 (1), 47–63.
Mohan,  C.,  Sridhar,  R.  P.,  &  Nakkeeran,  S.  2016.  Studies  on  Efficacy  of  Entomopathogenic  Fungi Metarhizium  anisopliae (Metchnikoff)  Sorokin  Against Nilaparvata  lugens (Stal). International Journal of Agricultural Science and Research (IJARS) , 6 (6), 227–234.
Mondal,  S.,  Baksi,  S.,  Koris, A.,  &  Vatai,  G.  2016.  Journey  of  Enzymes  in  Entomopathogenic  Fungi.
Journal of Pacific Science Review A: Natural Science and Engineering , 18 (2), 85–99.
Mulyani, F., Soesanto, L., Sastyawan, M. W. R., & Mujiono.  2022. Aplikasi Metabolit Sekunder Jamur Entomopatogen  terhadap  Wereng  Batang  Coklat  ( Nilaparvata  lugens Stall.)  In  Planta. Jurnal Media Pertanian , 7 (1), 13–22.
Ngatimin,  S.  N.  A.,  Abdullah,  T.,  Syatrawati,  &  Lestari,  N.  I.  2020.  Kemampuan  Cendawan Entomopatogen Metarhizium  anisopliae Sebagai  Agens  Pengendali  Hayati  Wereng  Coklat ( Nilaparvata lugens Stall). Jurnal Biologi Makassar (BIOMA) , 5 (1), 103–110.
Novitasari,  A.  2023.  Effectivity  of  Entomopathogen  Fungus Metarhizium  anisopliae (Metchnikoff) Sorokin to Mortality of Aedes aegypti Linnaeus. Jurnal Berkala Ilmiah Biologi , 14 (1), 1–7. Nusantara, R. M., & Kurniawan, B. 2020. Pemberdayaan Petani Melalui Penerapan Pengendalian Hama Terpadu di Jawa Timur. Jurnal Publika , 8 (5), 1–12.
Octriana,  L.,  &  Istianto,  M.  2021.  Efektivitas  Minyak  Sereh  Wangi  dalam  Mengendalikan  Kutu  Putih Pepaya Paracoccus marginatus L. Jurnal Budidaya Pertanian , 17 (1), 15–22.
Permadi, M. A., Lubis, R. A., & Lia, A. S. 2018. Virulensi  Beberapa Isolat Cendawan Entomopatogen Terhadap  Nimfa  Kepik  Hijau Nezara  viridula Linn.  (Hemiptera:  Pentatomidae). Jurnal  Agrohita ,
Pertiwi, S. A., Nanang, D., & Haryadi, T. 2022. >Uji Toksisitas Jamur Metarhizium anisopliae Terhadap Hama  Krop  Kubis Crocidolomia  binotalis Zell. Jurnal  Ilmu  Pertanian  Kehutanan  Dan Agroteknologi , 23 (1), 15–20.
Sari, W., & Rosmeita, C. N. 2019. Identifikasi Molekuler Cendawan Entomopatogen Beauveria bassiana dan Metarhizium anisopliae Asal Isolat Cianjur. Jurnal Pro-Stek , 1 (1), 1–9.
Sianipar, M. S., Djaya, L., Santosa, E., Soesilohadi, R. H., Natawigena, W. D., & Ardiansyah, M. 2015. Populasi  Hama  Wereng  Batang  Coklat  ( Nilaparvata  Lugens Stal.)  dan  Keragaman  Serangga Predatornya  pada  Padi  Sawah  Lahan  Dataran  Tinggi  di  Desa  Panyocokan,  Kecamatan  Ciwidey, Kabupaten Bandung. Jurnal Agrikultura , 26 (2), 111–121. Suhardi,  &  Sepe,  M.  2021.  Pertumbuhan  Empat  Isolat  Cendawan Penicillium sp.  pada  Tiga  Media Tumbuh. Jurnal Tabaro , 5 (2), 566–574.
Tular, M. A. M., Tulung, M., &  Kaligis, J. B. 2022. Patogenisitas  Jamur Entomopatogen Metarhizium anisopliae Metch.  Terhadap  Kepinding  Tanah Scotinophara  coarctata Fabricius  Pada  Tanaman Padi Sawah. Journal of Sam Ratulangi University , 14 (2), 1–10.
Ulya, L. N., Himawan, T., & Mudjiono, G. 2016. Uji Patogenisitas Jamur Entomopatogen Metarhizium anisopliae (Moniliales:  Moniliaceae)  Terhadap  Hama  Uret Lepidiota  stigma F.  (Coleoptera: Scarabaeidae). Jurnal Hama Penyakit Tumbuhan , 4 (1), 24–31. Wongkar,  J.,  Tarore,  D.,  &  Rimbing,  J.  2022.  Patogenisitas Metarhizium  huainamdangense Isolat Dumoga Timur Terhadap Wereng Batang Coklat ( Nilaparvata lugens ) Pada Tanaman Padi Sawah. Jurnal Bios Logos , 12 (1), 25–30.