## AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN ANTI HIPERKOLESTEROLEMIA EKSTRAK UMBI BAWANG DAYAK (Eleutherine bulbosa [Mill.] Urb)

## ANTIOXIDANT AND ANTI HYPERCHOLESTEROLEMIA ACTIVITY OF DAYAK ONION BULBUS ( Eleutherine bulbosa (Mill.) Urb) EXTRACT
Yani Andryani 1 , Anna Maria Dewajanti 2, * , Adelina Simamora 2,3
1 Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Kristen Krida Wacana, Jl. Arjuna Utara No. 6, Jakarta Barat 11510
2 Departemen Biokimia, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Kristen Krida Wacana, Jl. Arjuna Utara No. 6, Jakarta Barat 11510
3 Center for Enzyme Research in Health and Diseases, Universitas Kristen Krida Wacana, Jl. Arjuna Utara No. 6, Jakarta Barat 11510
* Korespondensi: anna.dewajanthi@ukrida.ac.id

## ABSTRACT
Introduction: High cholesterol levels can build up plaque inside the lining of the artery wall leading to coronary heart  disease.  Dayak  onion  bulbs  (Eleutherine  bulbosa  (Mill.)  Urb)  contain  flavonoids  that  can  act  as antioxidant and are believed to reduce blood cholesterol level.  This study investigated the flavonoid content and antioxidant activity of Dayak onion tuber extract, and its effect on total blood cholesterol levels in rats. Methods: Dayak onion bulbs were extracted by maceration (ethanol 70%). Total flavonoid was determined by a colorimetric method using AlCl 3 . Antioxidant activity was determined based on a DPPH radical scavenging activity. Anti-hypercholesterolemia effect was studied  in vitro. Thirty-six white male rats (Rattus novergicus) were divided into 6 groups: healthy rats, hyper-cholesterol rats, hyper-cholesterol rats treated with simvastatin (18 mg/bw) (a positive control), rutin (75 mg/bw) (a positive control), and Dayak union bulbs extracts (75 and 150  mg/bw).  Measurement  of total  cholesterol  levels  was  performed  using  CHOD-PAP  method. Data were analyzed using paired t-test and one-way anova.
Results: Flavonoids were present in onion bulb extract with a concentration of 1.7 mg/g dried biomass. The antioxidant  activity  of  the  extract  (IC 50 0.37  mg/mL)  was  weaker  than  that  of  rutin  (IC 50 15.58  µg/mL).  The addition  of  Dayak  onion  bulbs  extract  dose  of  150  mg/kg  bw  was  the  best  dose  in  reducing  total  blood cholesterol levels on the 14th day, p=0,001.
Conclusion: Dayak onion bulbs can be further investigated for application as anti hypercholesterolemia agent. Key Words: Dayak onion bulbs, DPPH, flavonoid content, hypercholesterolemia.

## ABSTRAK
Pendahuluan: Kadar  kolesterol  yang  tinggi  dapat  membentuk  plak  pada  dinding  arteri,  sehingga  dapat menyebabkan  penyakit  jantung  koroner  (PJK).  Umbi  bawang  Dayak  ( Eleutherine  bulbosa (Mill.)  Urb mengandung  flavonoid  yang  dapat  berperan  sebagai  antioksidan  dan  dipercaya  dapat  menurunkan  kadar kolesterol darah. Penelitian ini bertujuan untuk menguji kandungan flavonoid dan aktivitas antioksidan ekstrak umbi bawang Dayak, juga pengaruhnya terhadap kadar kolesterol darah total.
Metode: Umbi bawang Dayak diekstrasi dengan cara maserasi (etanol 70%). Kadar flavonoid total ditentukan dengan metode colorimetry menggunakan AlCl 3 . Aktivitas antioksidan ditentukan dengan metode pemadaman radikal bebas DPPH. Aktivitas antihiperkolesterolemia diujikan secara in vitro . Sebanyak 36 ekor tikus ( Rattus novergicus ) dibagi menjadi 6 kelompok yaitu kelompok sehat (kontrol), kelompok hiperkolesterolemia (kontrol negatif),  simvastatin  (18  mg/kgBB)  (kontrol  positif),  rutin  (75  mg/kgBB)  (kontrol  positif),  dan  kelompok hiperkolesterolemia dengan pemberian ekstrak umbi bawang Dayak (75 dan 150 mg/kgBB). Kadar kolesterol total diukur menggunakan kit pereaksi cholesterol-oxidase para amino antipyrine (CHOD-PAP). Data dianalisis menggunakan t-test berpasangan dan One way Anova dilanjutkan dengan uji Post Hoc LSD.
Hasil: ekstrak umbi bawang Dayak mengandung kadar total flavonoid sebesar 1,7 mg/gram biomassa kering. Aktivitas pemadaman radikal bebas umbi bawang  Dayak lebih lemah (IC 50 0,37 mg/mL) dibandingkan rutin (IC 50 15,58 µg/mL). Pada penelitian ini, ekstrak umbi bawang  Dayak dosis 150 mg/kgBB, merupakan dosis terbaik dalam menurunkan kadar kolesterol darah total pada hari ke-14, dengan nilai p=0,001.
Simpulan: Umbi bawang Dayak dapat diteliti lebih lanjut untuk dikembangkan sebagai agen antikolesterol. Kata Kunci: DPPH, hiperkolesterolemia, kadar flavonoid, umbi bawang Dayak .

## ARTIKEL PENELITIAN

## PENDAHULUAN
Penyakit  jantung  koroner  merupakan gangguan  penyimpanan  kolesterol  yang ditandai  dengan  penumpukan  kolesterol secara  progresif  dan  terdapat  plak  pada dinding  arteri  yang  disebut  aterosklerosis. 1
Hiperkolesterolemia  dapat  disebabkan  oleh gaya  hidup  yang  tidak  sehat  seperti mengonsumsi  makanan  yang  tinggi  lemak secara  berlebihan  yang  akan  menyebabkan kadar  lemak  di  dalam  darah  meningkat. Menurut CDC ( Center for Disease Control and Prevention )  73,5  juta  atau  31,7%  orang dewasa  di  Amerika  Serikat  yang  memiliki kadar  LDL  lebih  tinggi  dibandingkan  orang normal  dapat  berisiko  terjadinya  penyakit jantung koroner (PJK). 2,3
Statin merupakan salah satu terapi obat yang  dapat  menurunkan  kadar  kolesterol darah  dan  menurunkan  faktor  risiko  penyakit jantung  koroner.  Namun,  obat  statin  dapat memberikan efek samping yang tidak diinginkan  oleh  penderita  hiperkolesterole- mia. 3
Bawang  Dayak  ( Eleutherine  bulbosa (Mill.)  Urb . )  merupakan  salah  satu  tanaman khas  Kalimantan  yang  memiliki  senyawa flavonoid yang berperan sebagai antioksidan. Bawang  Dayak  dipercayai  oleh  masyarakat sebagai  obat  alternatif  dalam  mengobati berbagai penyakit seperti menurunkan koleterol, bisul, diabetes, dan luka. 4
Berdasarkan  penggunaan  tanaman  bawang Dayak sebagai obat alternatif dalam menurunkan  kadar  kolesterol  darah,  maka penelitian  ini  bertujuan  untuk  membuktikan apakah  ekstrak  umbi  bawang  Dayak  dengan
dosis  75  dan  150  mg/kg  berat  badan  (BB) dapat  menurunkan  kadar  kolesterol  darah total  pada  tikus  hiperkolesterolemia.  Pada penelitian  ini  juga  akan  diuji  kandungan flavonoid  yang  terdapat  pada  ekstrak  umbi bawang Dayak yang dihasilkan, serta aktivitas antioksidan  ekstrak  tersebut.  Penelitian  ini diharapkan  dapat  menambah  bukti  ilmiah mengenai  pengaruh  umbi  bawang  Dayak dalam  menurunkan  kadar  kolesterol  darah total,  serta  mengetahui  kandungan  flavonoid dan  aktivitas  antioksidan  di  dalam  umbi bawang Dayak.

## METODE
Reagens kimia yang digunakan bermutu pro  analisis,  yaitu  kalium  asetat  (CH 3 COOK) (Merck,  Darmstadt,  Jerman),  aluminium klorida (AlCl 3 6H 2 O) (Sigma-Aldrich, St. Louis, AS), cholesterol-oxidase para amino antipyrine reagen  (CHOD-PAP)  ( DiSys, Jer- man), 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (Sigma- Aldrich St. Louis, AS), rutin (Sigma-Aldrich, St. Louis, AS), Ethylene diamine tetra-acetic acid (EDTA)  (Sigma-Aldrich  St.  Louis,  AS). Reagens  kimia  bermutu  teknis,  yaitu sodium carboxymethyl  cellulose (Na-CMC),  propiltio- urasil (PTU), methanol, dan etanol.
Pengukuran  serapan  dilakukan  meng- gunakan  spektrofotometer  UV-Vis  (Biochorm Libra  S-22,  Cambridge,  Inggris).  Evaporasi sampel  tanaman  dilakukan  dengan rotary evaporator ( Heidolph, Jerman).
Studi in  vivo dilakukan  menggunakan tikus jantan ( Rattus novergicus ), berumur 2-3 bulan, berat badan 150 -250 gram, sehat, dan tidak  ada  kelainan  morfologi.    Penelitian  ini
telah lolos kaji etik dari Komisi Etik Penelitian Media  dan  Kesehatan  Fakultas  Kedokteran Universitas  Kristen  Krida  Wacana  (UKRIDA) dengan nomor: 1083R/SLKE-IM/UKKW/ FKIK/KE/V/2021.
Tanaman  bawang  Dayak  diambil  dari Kota  Sintang,  Kalimantan  Barat.    Umbi bawang  Dayak  dibersihkan  dan  dikeringkan selama 7 hari pada suhu ruang. Setelah kering, umbi  bawang  Dayak  dibuat  menjadi  serbuk halus.  Sebanyak 250 gr serbuk umbi bawang Dayak  diekstraksi  dengan  etanol  70%  (500 mL)  pada  wadah  maserasi  dan  direndam selama 4 x 24 jam.  Kemudian disaring meng- gunakan  kertas  saring.  Setelah  itu,  residu kembali dimaserasi menggunakan etanol 70% dan  dilakukan  pengulangan  sebanyak  3  kali. Filtrat  digabung  dan  diuapkan  menggunakan rotary  evaporator ( Heidolph, Jerman)  pada suhu 60 o C tekanan 220 mmHg. Ekstrak kering disimpan  pada  wadah  bersih  dan  tertutup dalam  lemari  pendingin  pada  suhu  4 o C, hingga digunakan untuk percobaan.
Penetapan kadar flavonoid total dilakukan  berdasar  metode  yang  dilaporkan dalam  literatur. 5 Larutan  uji  ekstrak  bawang Dayak  dibuat  dengan  melarutkan  20,1  mg ekstrak kering dalam campuran pelarut DMSO (500 µL), etanol 96% (500  L) dan methanol (1  mL).  Sebanyak  0,5  mL  larutan  uji ditambahkan  metanol  (1,5  mL),  larutan  AlCl 3 10% (0,1 mL), larutan kalium asestat (0,1 mL, 1  M),  dan  akuades  (2,8  mL).  Campuran tersebut  divorteks  dan  diinkubasi  selama  30 menit.  Serapannya  diukur  pada  panjang gelombang  415  nm  menggunakan  spektro- meter UV-Vis ( Biochrom , Inggris).   Percobaan
dilakukan  sebanyak  tiga  kali  pengulangan. Kandungan  flavonoid  total  ditentukan  dari kurva standar rutin( 25 - 400  g/ml) dan hasil- nya  dinyatakan  sebagai  mg  rutin  ekuivalensi (mgRE)/gram biomassa kering bahan tanaman.
Pengujian  aktivitas  antioksidan  ektrak umbi bawang Dayak dilakukan dengan meng- gunakan  metode  2,2-diphenyl-1-picrylhydra- zyl  (DPPH). 6 Sebanyak  3  mL  ekstrak  etanol umbi  bawang  Dayak  pada  berbagai  konsen- trasi ditambahkan dengan 1 mL larutan DPPH (0,6 mM dalam etanol) dan divorteks. Setelah itu  didiamkan  selama  30  menit  pada  tempat gelap. Setelah diinkubasi, absorbansi larutan diukur  menggunakan  spektrofotometer  pada panjang gelombang 517 nm. 6 Rutin digunakan sebagai  kontrol  positif.  Aktivitas  antioksidan ekstrak  dan  kontrol  positif  dinyatakan  dalam nilai  IC 50 .  Semakin  kecil  nilai  IC 50 maka  ke- kuatan aktivitas antioksidan semakin tinggi. 7-9
Besar sampel ditentukan dengan rancangan  acak  lengkap,  menggunakan rumus  Frederer,  sebagai  berikut:  (t-1)(n- 1)  ≥ 15,  dengan  t  adalah  jumlah  kelompok  perla- kuan  dan  n  adalah  jumlah  sampel  untuk  1 kelompok perlakuan.  Pengelompokan hewan coba dilakukan setelah masa adaptasi selama 10  hari,  dibagi  menjadi  6  kelompok  sebagai berikut:  (1)  Kelompok  kontrol  negatif  (K1) terdiri  dari  tikus  sehat,  dan  hanya  diberikan perlakuan  dengan  aquades  dan  pakan standar;  (2)  Kelompok  kontrol  negatif  (K2) terdiri dari tikus hiperkolesterol, diberikan Na- CMC dan pakan standar; (3) Kelompok kontrol positif  (K3)  terdiri  dari  tikus  hiperkolesterol, diberikan  simvastatin  dengan  dosis  0,18
mg/kgBB  dan  pakan  standar;  (4)  Kelompok kontrol positif (K4) terdiri dari tikus hiperkoles- terol,  diberikan  rutin  dengan  dosis  75 mg/kgBB  dan  pakar  standar;  (5)  Kelompok perlakuan  1  (P1)  terdiri  dari  tikus  hiperkoles- terol,  diberikan  ekstrak  umbi  bawang  dayak dengan dosis 75mg/kgBB dan pakan standar; dan (6) Kelompok perlakuan 2 (P2) terdiri dari tikus  hiperkolesterol,  diberikan  ekstrak  umbi bawang  dayak  dengan  dosis  150mg/KgBB dan pakan standar. Tiap kelompok terdiri dari 6  ekor  tikus.  Pemberian  perlakuan  dilakukan setiap  hari  selama  14  hari,  secara  oral sebanyak 1 mL menggunakan sonde.
Pemeliharaan hewan coba dilakukan di laboratorium hewan FKIK UKRIDA. Keadaan hiperkolesterolemia  dilakukan  dengan  pem- berian  hati  sapi  sebanyak  5  gram/tikus  dan otak  sapi  5  gram/tikus  yang  dipotong  kecil- kecil  dan  digoreng  menggunakan  minyak jelantah.  Untuk  membantu  menaikkan  kadar kolesterol, tikus diberikan propiltiourasil (PTU) secara  oral  menggunakan  sonde  sebanyak 12,5  mg/hari  selama  14  hari. 10 Setelah  tikus berada  dalam  keadaan  hiperkolesterolemia, selama  perlakuan  pemberian  ekstrak  umbi bawang  Dayak,  tikus  diberikan  pula  pakan
standar sebanyak 25 gram/hari.  Kadar normal kolesterol darah total tikus 10-54 mg/dL. 11
Sebelum  pengambilan  darah,  tikus dipuasakan  selama  16  jam. 12 Darah  tikus diambil  sebanyak  1,5  mL  dari  ekor  tikus  dan ditampung  di  dalam microtube berisi  EDTA.
Plasma  darah  dipisahkan  dengan  cara sentrifugasi  pada  kecepatan  3000  ppm selama 5 menit.  Pengukuran kadar kolesterol dilakukan menggunakan metode CHOD-PAP ( cholesterol-oxidase  para  amino  antipyrine ) yaitu dengan cara sebagai berikut: sebanyak 10  L plasma ditambahkan 1000  L reagen kit kolesterol,  kemudian  diinkubasi  pada  suhu 37 0 C selama 5 menit. Kadar kolesterol diukur menggunakan  alat  spektrofotometer  UV-Vis dengan  panjang  gelombang  500  nm. 12,13
Pengambilan sampel darah untuk pengukuran kadar  kolesterol  dilakukan  di  awal,  sebelum pemberian  perlakuan  (H0).    Setelah  itu  tikus diberi perlakuan setiap hari, dan pada hari ke- 14  (H14)  dilakukan  pengambilan  darah kembali setelah 14 hari diberi perlakuan.
Data  yang  diperoleh  dianalisis  meng- gunakan  program  statistika  SPSS  versi  28, diuji dengan t-test berpasangan dan One way Anova dilanjutkan dengan uji Post Hoc LSD.
Gambar 1. Kurva Standar Rutin Data pada kurva merupakan nilai rata-rata dari tiga kali pengulangan
y = 0,0024x - 0,0486 R² = 0,9888 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 0 100 200 300 400 500 A b sor b an si

## HASIL
Maserasi  umbi  bawang  Dayak  meng- gunakan  etanol  menghasilkan yield ekstrak sebesar 3,1% (b/b). Kandungan flavonoid total ekstrak  umbi  bawang  Dayak  didapatkan  dari kurva standar rutin dengan persamaan regresi linear  y=0,0024x –  0,0486  dengan  nilai R 2 sebesar 0,9888 (Gambar 1).
Hasil ekstrapolasi nilai absorbansi sam- pel  umbi  bawang  Dayak  (tiga  kali  pengu- langan) mendapatkan rata-rata total flavonoid umbi  bawang  Dayak  sebesar  1,7  ±  0,07  mg rutin ekuivalen (mgRE)/gram biomassa kering.
Aktivitas  antioksidan  umbi  bawang Dayak diuji dengan metode pemadaman radi- kal  bebas  DPPH.  Pada  metode  ini,  radikal
bebas DPPH dapat dinetralkan oleh zat anti- oksidan  yang  terdapat  pada  ekstrak  tanam- an. 14,15 Rutin digunakan sebagai kontrol posi- tif/pembanding.  Aktivitas  antioksidan  ekstrak umbi bawang Dayak dan rutin ditentukan ber- dasarkan nilai IC 50 -nya.  Terlihat pada Gambar 2, bahwa persen pemadaman radikal mening- kat  dengan  semakin  tingginya  konsentrasi ekstrak umbi bawang Dayak. Hal yang sama terlihat  pada  rutin.  Diperoleh  nilai R ²=0,9944 untuk rutin dan R ²=0,9082 untuk umbi bawang Dayak (Gambar 2a dan 2b). Nilai IC 50 aktivitas penangkal  radikal  bebas  pada  ekstrak  umbi bawang Dayak sebesar 0,37 mg/mL dan pada rutin sebesar 15,58  g/mL (Tabel 2).
Gambar 2. Kurva IC 50 : (a) rutin; (b) umbi bawang Dayak. * Nilai % inhibisi merupakan rata- rata dari tiga kali pengulangan
Tabel 1. Aktivitas Antioksidan Ekstrak Umbi Bawang Dayak ( Eleutherine bulbosa (Mill.) Urb.) dan Rutin
Sampel Konsentrasi Rata-rata  SD (%)* IC 50  SD Ekstrak Umbi Bawang Dayak (mg/mL) 0,096 15,95  1,45 0,37  0,013 mg/ml 0,192 28,46  2,04 0,256 43,51  1,47 0,4 49,88  2,17 Rutin (µg/mL) 4,375 14,37  0,45 15,58  0,315  g/ml 12,25 38,61  2,54 17,5 51,18  11,66 24,5 77,12  3,61
* Nilai % inhibisi dan IC 50 merupakan rata-rata dan standard deviasi dari tiga kali pengulangan.
y = 113,96x + 7,5574 R² = 0,9082 0 10 20 30 40 50 60 0 0,2 0,4 0,6 in h ib isi (% )* C (mg/mL) b a y = 3,0676x + 0,3665 R² = 0,9944 0 20 40 60 80 100 0 10 20 30 in h ib isi (% )* C (  g/mL)
Pada Tabel 2 terlihat nilai rata-rata kadar kolesterol  darah  total  tikus  pada  setiap kelompok  pada  hari  ke-0  (H0:  hari  sebelum diberi perlakuan) dan pada hari ke-14 setelah diberi perlakuan (H14).  Nilai kadar kolesterol tertinggi  pada  hari  ke-0  ditemukan  pada kelompok  4  sebesar  78,71  mg/dL  dan  kadar kolesterol terendah yaitu sebesar 42,11 mg/dL ditemukan pada tikus kelompok 1. Hasil kadar kolesterol darah total tertinggi pada hari ke-14 didapatkan  pada  kelompok  2  sebesar  67,63 mg/dL  dan  kadar  kolesterol  darah  total terendah  pada  hari  ke-14  didapatkan  pada kelompok 6 yaitu sebesar 34,09 mg/dL.
Berdasarkan  perhitungan  selisih  kadar kolesterol darah total tikus pada hari ke-0 dan hari  ke-14  pada  masing-masing  kelompok, diperoleh  hasil  penurunan  kadar  kolesterol darah total tertinggi terdapat pada kelompok 6
sebesar  36,06  mg/dL  dan  penurunan  kadar kolesterol  darah  total  terendah  ditemukan pada  kelompok  1  sebesar  1,63  mg/dL.  Pada kelompok  2  didapatkan  penurunan  kadar kolesterol  darah  sebesar  2,73  mg/dL  dan kelompok  3  merupakan  kelompok  sebagai pembanding  karena  simvastatin  adalah  obat yang  dapat  memberikan  efek  penurunan kolesterol,  didapatkan  selisih  penurunan kadar kolesterol darah sebesar 28.83 mg/dL. Hasil  penurunan  kadar  kolesterol  darah  total pada  kelompok  4  (tikus  hiperkolesterolemia dengan  pemberian  rutin)  hanya  dapat menurunkan  sebesar  15,14  mg/dL  dan kelompok 5 (tikus hiperkolesterolemia dengan pemberian  ekstrak  umbi  bawang  Dayak  75 mg/kb  BB  terjadi  penurunan  kolesterol sebesar 11,77 mg/dL .
Tabel 2. Rata-Rata Kolesterol Darah Total Tikus Setelah Diberi Perlakuan (H14)
dan Sebelum Diberi Perlakuan (H0) Kelompok Rata – Rata H0 (mg/dL) Rata- Rata H14 (mg/dL) ∆ (mg/dL) 1 42,11 40,48* 1,63 2 70,36 67,63 2,73 3 77,56 48,73* 28,83 4 78,71 63,57 15,14 5 70,78 59,01 11,77 6 70,15 34,09* 36,06
Uji  statistik one  way ANOVA  dilakukan untuk  mengetahui  adanya  perbedaan  yang signifikan  kadar  kolesterol  darah  total  pada hari ke-0 dan hari ke-14 pada masing-masing kelompok. Untuk memenuhi syarat uji one way ANOVA  dilakukan  uji  normalitas  terlebih dahulu  menggunakan  uji Shapiro  Wilk , dikarenakan kelompok yang digunakan berjumlah kecil.  Uji normalitas pada hari ke-0
dan hari ke-14 ke-enam kelompok mendapatkan  nilai  p>0,05,  sehingga  dapat disimpulkan data berdistribusi normal. Setelah itu  dilakukan  uji  homogenitas  pada  hari  ke-0 dan  hari  ke-14,  diperoleh  nilai  p>0,05  pada semua kelompok sehingga dapat disimpulkan sebaran data homogen.
Uji T-test berpasangan  dilakukan  untuk mengetahui  adanya  perbedaan  rata-rata
kadar  kolesterol  darah  total  pada  setiap kelompok pada hari ke-0 dan hari ke-14. Hasil uji T-test berpasangan  antara  data  rata-rata kadar kolesterol darah total hari ke-0 dan ke- 14 mendapatkan nilai p ≤0,001 pada kelompok 3,4,5 dan nilai p=0,001 pada kelompok 6; oleh karena nilai p<0,05, maka dapat disimpulkan bahwa  terdapat  perbedaan  yang  signifikan rata-rata kadar kolesterol darah total sebelum perlakuan  (H0)  dan  setelah  perlakuan  (H14) pada kelompok 3, 4, 5, dan 6. Hal ini menun- jukkan bahwa terjadi penurunan kadar koles- terol darah yang signifikan pada kelompok 3, 4, 5, dan 6 (Tabel 3).
Uji T-test berpasangan antara data rata- rata kadar kolesterol darah total hari ke-0 dan ke-14  pada  kelompok  1  dan  2  mendapatkan nilai  p>0,05,  sehingga  dapat  disimpulkan bahwa  tidak  ada  perbedaan  yang  signifikan rata-rata kadar kolesterol darah total sebelum perlakuan  (H0)  dan  setelah  perlakuan  (H14) pada kelompok 1 dan 2. Hal ini menunjukkan bahwa penurunan kadar kolesterol darah total tidak signifikan pada kelompok 1 (tikus sehat yang  hanya  diberi  perlakuan  akuades)  dan kelompok  2  (tikus  hiperkolesterolemia  yang diberi Na-CMC), seperti terlihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil Uji Statistik Rerata Kadar Kolesterol Darah Total Hari ke-0 dan Hari ke-14 Tiap Kelompok
Uji T berpasangan Rerata  SD (mg/dL) Nilai P Kelompok 1 Hari ke-0 42,11  6,25 0,228 Hari ke-14 40,48  5,71 Kelompok 2 Hari ke-0 70,36  12,75 0,242 Hari ke-14 67,63  16,30 Kelompok 3 Hari ke-0 77,56  17,69 <0,001* Hari ke-14 48,73  15,82 Kelompok 4 Hari ke-0 78,71  14,18 <0,001* Hari ke-14 63,57  13,95 Kelompok 5 Hari ke-0 70,78  11,58 <0,001* Hari ke-14 59,01  11,31 Kelompok 6 Hari ke-0 70,15  12,79 0,01* Hari ke-14 34,09  10,41 *terdapat perbedaan yang signifikan
Uji Post  Hoc LSD  dilakukan  untuk mengetahui  adanya  perbedaan  yang  signi- fikan  antara  kelompok  perlakuan.  Berda- sarkan hasil uji Post Hoc LSD pada hari ke-0
antara  kelompok  perlakuan,  diketahui  data rata-rata kadar kolesterol darah antara kelom- pok 1 dan 2, 1 dan 3, 1 dan 4, 1 dan 5, dan 1 dan  6  memperoleh  nilai  p<0,05,  maka  dapat
diambil kesimpulan bahwa terdapat perbeda- an yang signifikan data rata-rata kadar koles- terol  darah  total  pada  hari  ke-0  (sebelum
perlakuan)  antara  kelompok  1  (tikus  sehat) dengan kelompok 2, 3, 4, 5, dan 6, yaitu tikus hiperkolesterolemia (Tabel 4).
Tabel 4. Hasil Uji Statistik Post Hoc LSD Rerata Kadar Kolesterol Darah Total Hari ke-0 dan Hari ke-14 antar Kelompok Uji Post Hoc LSD Rerata  SD P Hari ke-0 Hari ke-14 Hari ke-0 Hari ke-14 Kelompok 1 42,11  6,25 40,48  5,71 0,007* 0,008* Kelompok 2 70,36  12,75 67,63  16,30 Kelompok 1 42,11  6,25 40,48  5,71 0,001* 0,376 Kelompok 3 77,56  17,69 48,73  15,82 Kelompok 1 42,11  6,25 40,48  5,71 <0,001* 0,020* Kelompok 4 78,71  14,18 63,57  13,95 Kelompok 1 42,11  6,25 40,48  5,71 0,006* 0,056 Kelompok 5 70,78  11,58 59,01  11,31 Kelompok 1 42,11  6,25 40,48  5,71 0,007* 0,491 Kelompok 6 70,15  12,79 34,09  10,41 Kelompok 2 70,36  12,75 67,63  16,30 0,447 0,52 Kelompok 3 77,56  17,69 48,73  15,82 Kelompok 2 70,36  12,75 67,63  16,30 0,379 0,660 Kelompok 4 78,71  14,18 63,57  13,95 Kelompok 2 70,36  12,75 67,63  16,30 0,965 0,355 Kelompok 5 70,78  11,58 59,01  11,31 Kelompok 2 70,36  12,75 67,63  16,30 0,982 0,002* Kelompok 6 70,15  12,79 34,09  10,41 Kelompok 3 77,56  17,69 48,73  15,82 0,903 0,120 Kelompok 4 78,71  14,18 63,57  13,95 Kelompok 3 77,56  17,69 48,73  15,82 0,473 0,273 Kelompok 5 70,78  11,58 59,01  11,31 Kelompok 3 77,56  17,69 48,73  15,82 0,434 0,124 Kelompok 6 70,15  12,79 34,09  10,41 Kelompok 4 78,71  14,18 63,57  13,95 0,402 0,622 Kelompok 5 70,78  11,58 59,01  11,31 Kelompok 4 78,71  14,18 63,57  13,95 0,367 0,004* Kelompok 6 70,15  12,79 34,09  10,41 Kelompok 5 70,78  11,58 59,01  11,31 0,947 0,013* Kelompok 6 70,15  12,79 34,09  10,41
* terdapat perbedaan yang signifikan
Hasil uji Post Hoc LSD pada hari ke-14 antara  kelompok  perlakuan,  memperlihatkan bahwa rata-rata kadar kolesterol darah antara kelompok 1 dan 2, 1 dan 4, 2 dan 6, 4 dan 6, dan 5 dan 6 memiliki nilai p<0,05. Oleh karena itu  dapat  diambil  kesimpulan  bahwa terdapat perbedaan  yang  signifikan  data  rata-rata kadar  kolesterol  darah  total  pada  hari  ke-14 (setelah perlakuan) antara kelompok- kelompok tersebut, seperti terlihat di Tabel 4.

## DISKUSI
Kadar flavonoid total ditentukan dengan metode  kolorimetri  dan  menggunakan  rutin sebagai standar. Penggunaan larutan rutin se- bagai pembanding dikarenakan rutin merupa- kan  flavonoid  yang  paling  sering  ditemukan dalam  tanaman  dan  rutin  merupakan  bentuk glikosida  dari  kuersetin. 5 Nilai R 2 yang  men- dekati satu pada kurva standar dan kurva IC 50 menunjukkan  hubungan  yang  linear  antara konsentrasi dan absorbansi. 14
Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan oleh Kumalasari, et al ., ekstrak daun bawang Dayak  dengan  menggunakan  etanol  70% menujukan  nilai  rata-rata  kadar  flavonoid sebesar  34,08  %  (8.6  mg)  dalam  25,3  mg sampel  daun  bawang  Dayak. 15 Dalam penelitian  ini,  umbi  bawang  Dayak  memiliki kandungan seperti daun bawang Dayak.
Metode  DPPH  dipilih  untuk  uji  aktivitas antioksidan  dalam  penelitian  ini  dikarenakan metode DPPH cepat, sederhana, dan mudah terutam  untuk  skrining  sampel  tanaman. DDPH  adalah  radikal  bebas  yang  dapat dinetralkan oleh zat antioksidan yang terdapat pada  ekstrak  tanaman. 16 Rutin  digunakan
sebagai  kontrol  positif.  Aktivitas  antioksidan rutin  ditentukan  berdasarkan  nilai  IC 50 -nya. Nilai  IC 50 merupakan  besarnya  nilai  konsen- trasi larutan/ekstrak yang dapat menghambat radikal  bebas  sebanyak  50%.  Semakin  kecil nilai  IC 50 maka  aktivitas  antioksidan  suatu larutan/ekstrak semakin tinggi. 16 Berdasarkan Gambar  2  (a  dan  b)  dapat  dilihat  bahwa dengan  semakin  tingginya  konsentrasi  rutin dan ekstrak umbi bawang Dayak, maka sema- kin tinggi persen inhibisinya dan menunjukkan bahwa grafik tersebut linear. Berdasarkan per- samaan  garis  IC 50 ,  diperoleh  hasil  kemam- puan  aktivitas  penangkal  radikal  bebas  pada ekstrak  umbi  bawang  Dayak  menunjukkan nilai IC 50 sebesar 0,37 mg/mL dan pada rutin menunjukkan nilai IC 50 sebesar 15,58  g/mL.
Hal  ini  menunjukkan  rutin  memiliki  kemam- puan aktivitas antioksidan yang jauh lebih baik dibandingkan  dengan  ekstrak  umbi  bawang Dayak.
Berdasarkan penelitian Kadri, et al . me- ngenai penelitian aktivitas ekstrak etanol daun pelawan  yang  menggunakan  rutin  sebagai kontrol  positif  menunjukkan  hasil  sebesar 4,837  g/mL. Hal ini menunjukkan bahwa rutin memiliki  efek  aktivitas  antioksidan  yang sangat  kuat  dikarenakan  rutin  merupakan senyawa murni. 17
Dalam  penelitian  ini,  tikus  percobaan harus  dalam  kondisi  hiperkolesterol  untuk melihat pengaruh ekstrak umbi bawang Dayak terhadap  penurunan  kadar  kolesterol  total darah  tikus.  Untuk  mendapatkan  tikus hiperkolesterolemia, diberi pakan tinggi kolesterol  selama  14  hari  yang  dibantu dengan  pemberian  PTU.    Kadar  kolesterol
darah  total  diukur  menggunakan  metode CHOD-PAP.
Hasil  yang  diperoleh  menunjukkan bahwa tikus yang diberi pakan tinggi kolesterol memiliki kadar kolesterol darah total diatas 70 mg/dL  dengan  kadar  normal  kolesterol  tikus sebesar  10-54  mg/dL. 14 Hasil  pengukuran kadar  kolesterol total  hari  ke-0  atau  sebelum mendapatkan  perlakuan,    pada  kelompok  1 (tikus  sehat)  memiliki  kadar  kolesterol terendah,  dibandingkan  kelompok  lainnya (Tabel 3). Perbedaan kadar kolesterol ini dise- babkan  karena  pada  tikus  kelompok  1  tidak diberikan  pakan  tinggi  kolesterol  sedangkan pada tikus kelompok lainnya diberikan pakan tinggi  kolesterol  dan  pemberian  PTU  selama 14 hari.
Pada  Tabel  3,  menunjukkan  adanya penurunan  kadar  kolesterol  darah  total tertinggi  yaitu  terdapat  pada  kelompok  6 (kelompok  tikus  hiperkolesterolemia  dengan pemberian ekstrak umbi bawang Dayak dosis 150  mg/kgBB)  dan  secara  statistik,  dapat disimpulkan  bahwa  pemberian  ekstrak  umbi bawang  Dayak  dosis  150  mg/kgBB  dapat menurunkan kadar kolesterol darah total tikus hiperkolesterolemia secara signifikan dengan nilai p=0.001 pada hari ke-14.  Pada Tabel 3, juga menunjukkan penurunan kadar kolesterol darah  total  tikus  hiperkolesterolemia  yang diberikan  diberikan  ekstrak  umbi  bawang Dayak  dosis  150  mg/kgBB  (kelompok  6) melampaui penurunan kadar kolesterol darah total  pada  tikus  hiperkolesterolemia  yang diberikan  simvastatin  (kelompok  3),  hal  ini menunjukkan  ekstrak  umbi  bawang  Dayak dosis  150  mg/kgBB  memiliki  efek  penurunan
kadar  kolesterol  darah  total  lebih  baik dibandingkan simvastatin dosis 0.18 mg/kgBB. Penurunan  yang  signifikan  kadar  kolesterol darah  total  tikus  hiperkolesterolemia  dengan pemberian ekstrak umbi bawang Dayak pada hari  ke-14  dikarenakan  di  dalam  tanaman bawang Dayak memiliki kandungan flavonoid yang  dapat  menurunkan  kadar  kolesterol dengan berbagai cara, salah satunya dengan menghambat  aktivitas  enzim  3-hidroksi-3- metilglutaril koenzim A (HMG-KoA) reduktase yang  berfungsi  sebagai  penghambat  sintesis kolesterol di dalam sel tubuh. 4
Pada  kondisi  hiperkolesterolemia  dapat mempengaruhi  biomarker  stres  oksidatif  dan meningkatkan  produksi reactive  oxygen species (ROS)  melalui  berbagai  mekanisme, yang mengarah pada peningkatan peroksidasi lipid. 18 Efek  kerja  flavonoid  yang  berperan sebagai antioksidan, dapat menurunkan kadar kolesterol  darah  dengan  berbagai  cara  yaitu dengan  menurunkan  aktivitas  HMG-KoA reduktase, meningkatkan reseptor low density lipoprotein (LDL)  dan  meningkatkan  aktivitas lecithine  cholesterol  acyl  transferase (LCAT) yang  bekerja  mempercepat  reaksi  pemben- tukan  ester  kolesterol  dari  kolesterol  bebas pada  molekul high  density  lipoprotein (HDL) dalam  proses  pengambilan  kolesterol  dari sel/jaringan, dan  menurunkan  kadar  enzim hepatic HMG-Koa reduktase. 19,20
Pada  Tabel  2,  dapat  dilihat  bahwa  ke- lompok 1 memiliki penurunan kadar kolesterol darah total terendah, hal ini dikarenakan pada tikus  kelompok  1  hanya  diberikan  aquades saja  sehingga  penurunan  kadar  kolesterol darah  total  hanya  sedikit  saja  dan  secara
statistik  penurunan  kadar  kolesterol  ini  tidak signifikan  dengan  nilai  p=0,228.  Begitu  juga pada  kelompok  kelompok  2,  kelompok  tikus hiperkolesterolemia  yang  diberikan  larutan Na-CMC memiliki penurunan kadar kolesterol darah  yang  tidak  signifikan,  dengan  nilai p=0,242. Pada kelompok 3 tikus hiperkoleste- rolemia yang diberikan obat simvastatin terjadi penurunan  rata-rata  kadar  kolesterol  darah total  pada  hari  ke-14,  dengan  nilai  p ≤0,001.
Hal  ini  dikarenakan  obat  simvastatin  memilki fungsi menghambat enzim HMG-KoA reduktase  yang  berperan  dalam  mengubah HMG-KoA  menjadi  mevalonat. 21 Pada  ke- lompok 4 dan 5 yaitu tikus hiperkolesterolemia dengan  pemberian  rutin  75mg/kgBB  dan ekstrak  umbi  bawang  Dayak  75mg/kgBB dapat  menurunkan  kadar  kolesterol  darah secara signifikan dengan nilai p ≤0.001.
Hasil  uji  statistik  menggunakan  uji Post Hoc  LSD perbedaan  kadar  kolesterol  darah total  tikus  pada  hari  ke-0  antara  kelompok tikus sehat (tidak diberi pakan hiperkolesterol) dan tikus hiperkolesterolemia dengan pemberian larutan Na-CMC, tikus hiperkoles- terolemia  dengan  pemberian  simvastatin, tikus  hiperkolesterolemia  dengan  pemberian rutin  75  mg/kgBB,  tikus  hiperkoelsterolemia dengan  pemberian  ekstrak  umbi  bawang Dayak 75 mg/kgBB, tikus hiperkolesterolemia dengan  pemberian  ekstrak  umbi  bawang Dayak  150  mg/kgBB,  menunjukkan  nilai p<0,05,  artinya  terdapat  perbedaan  yang signifikan rata-rata kadar kolesterol darah total antara  tikus  sehat  dan  tikus  hiperkoles- terolemia. Hal ini menunjukkan bahwa pakan tinggi kolesterol dan PTU yang diberikan pada
penelitian  ini,  telah  berhasil  membuat  tikus menjadi  kondisi  hiperkolesterolemia.  Propil- tiourasil  atau  PTU  merupakan  zat  antitiroid yang  menghambat  produksi  hormon  tiroid  di kelenjar tiroid.  Hormon tiroid berperan meng- induksi 3-hyroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A (HMG-KoA)  reduktase,  yang  merupakan langkah pertama dalam biosintesis kolesterol. Bila  diberikan  PTU  maka  produksi  hormon tiroid  akan  dihambat  dan  menyebabkan penurunan aktivitas dari HMG-koA reduktase serta menurunkan aktivitas reseptor LDL, dan mengalami  penurunan clearance  of  TG-rich lipoproteins sehingga  kolesterol  di  dalam darah meningkat. 22,23
Sementara  itu,  dari  hasil  uji  statistik menggunakan uji Post Hoc LSD tidak terdapat perbedaan  yang  signifikan  data  rata-rata kadar kolesterol darah total tikus pada hari ke- 0  antara  kelompok  tikus  hiperkolesterolemia atau kelompok tikus perlakuan (kelompok 2, 3, 4, 5, dan 6). Hal ini menunjukkan bahwa kadar kolesterol  tikus  perlakuan  semuanya  berada pada  kondisi  kadar  kolesterol  tinggi  yang sama  (tidak  berbeda  secara  signifikan) sebelum perlakuan diberikan (hari ke-0)
Kadar  kolesterol  darah  total  tikus  pad hari ke-14 antara kelompok 1 (kelompok tikus sehat)  dan  kelompok  2  (tikus  hiperkolesterol yang  diberikan  Na-CMC)  memiliki  nilai p=0,008.  Dapat  diambil  kesimpulan  bahwa terdapat  perbedaan  yang  signifikan  antara kedua kelompok tersebut, dikarenakan kelompok 1 merupakan kelompok tikus dalam keadaan sehat dan hanya diberikan akuades saja,  sehingga  tidak  terjadi  penurunan kolesterol secara signifikan ;  sementara pada
kelompok 2  tikus dalam keadaan hiperkoles- terolemia  dan  hanya  diberikan  pelarut  Na- CMC saja sehingga tikus kelompok 2 ini tidak mengalami  penurunan  yang  signifikan  pada hari  ke-14.  Oleh  karena  itu,  perbedaan  yang signifikan  antara  kelompok  1  dengan  kelom- pok  2  merupakan  hal  yang  wajar,  baik  pada hari  ke-0  (sebelum  perlakuan)  maupun  hari ke-14 (setelah perlakuan).
Antara  kelompok  1  dan  kelompok  3 memiliki  perbedaan  kadar  kolesterol  darah total  yang  tidak  signifikan  pada  hari  ke-14 yaitu  dengan  nilai  p=0,376.  Hal  ini  dikarena- kan pada kelompok 3 tikus hiperkoleterolemia yang  diberikan  obat  simvastatin  memiliki  ka- dar  kolesterol  darah  total  dalam  keadaan normal dan mendekati kadar kolesterol darah total pada kelompok 1 hari ke-14, ini menun- jukkan  bahwa simvastatin  sangat  baik  dalam menurunkan kadar kolesterol darah total.
Antara kelompok 1 dan kelompok 4 me- miliki  perbedaan  kadar  kolesterol  darah  total yang signifikan pada hari ke-14 yaitu dengan nilai p=0,020.  Hal ini dikarenakan penurunan rata-rata  kadar  kolesterol  darah  total  tikus pada  kelompok  4  (tikus  hiperkolesterolemia yang diberikan rutin 75 mg/kgBB) tidak sampai angka normal kadar kolesterol darah tikus dan penurunan  kadar  kolesterol  darah  totalnya tidak sebaik pada kelompok 5 dan kelompok 6, di  mana  tikus  hiperkolesterolemia  diberikan ekstrak umbi bawang Dayak dengan dosis 75 mg/kgBB dan 150 mg/kgBB.
Pada kelompok 2 dan 6 memiliki perbe- daan  yang  signifikan  kadar  kolesterol  darah total  pada  hari  ke-14,  dengan  nilai  p=0,003. Hal  ini  dikarenakan  kelompok  2  (tikus  hiper-
kolesterolemia dengan pemberian larutan Na- CMC)  memiliki  rata-rata  kadar  kolesterol darah  total tikus  yang  paling  tinggi  pada  hari ke-14 karena tidak terjadi penurunan rata-rata kadar  kolesterol  darah  yang  signifikan,  se- dangkan  kelompok  6  (tikus  hiperkolesterole- mia dengan pemberian esktrak umbi bawang Dayak 150 mg/kgBB) memiliki rata-rata kadar kolesterol darah total tikus yang paling rendah. Na-CMC merupakan suspending agent , untuk meningkatkan  kestabilan  suspensi,  yang diberikan  pada  ekstrak  umbi  bawang  Dayak. Na-CMC bekerja dengan mekanisme mening- katkan  viskositas  atau  kekentalan  sediaan. Kelompok  tikus  dengan  pemberian  Na-CMC dijadikan sebagai kontrol, dimana terbukti Na- CMC tidak berpengaruh terhadap penurunan kadar kolesterol darah.
Antara  kelompok  3  dan  kelompok  6 memiliki  perbedaan  kadar  kolesterol  darah total  tidak  signifikan  pada  hari  ke-14,  yaitu dengan  nilai  p=0,124.  Hal  ini  dikarenakan kelompok 6 (tikus hiperkolesterolemia dengan pemberian ekstrak umbi bawang Dayak dosis 150 mg/kgBB) memiliki kadar kolesterol yang rendah, yang hampir sama dengan kelompok 3 (tikus hiperkolesterolemia pemberian simvastatin), sehingga dapat disimpulkan eks- trak umbi bawang Dayak dosis 150 mg/kgBB dapat  menurunkan  kolesterol  darah  total  sa- ma baiknya seperti efek obat simvastatin.
Antara  kelompok  4  dan  kelompok  6 memiliki  perbedaan  kadar  kolesterol  darah total yang signifikan pada hari ke-14, dengan nilai  p=0,004.  Hal  ini  dapat  dilihat  bahwa kelompok  6  (tikus  hiperkolesterolemia  yang diberikan ekstrak umbi bawang Dayak dengan
dosis  150  mg/kgBB)  menyebabkan  penurun- an kadar kolesterol lebih besar dibandingkan dengan kelompok 4 yang diberikan rutin seba- nyak 75 mg/kgBB. Rutin merupakan senyawa antioksidan  alami  yang  termasuk  golongan flavonoid. Hasil uji aktivitas antioksidan mem- perlihatkan  bahwa  rutin  memiliki  aktivitas antioksidan  yang  lebih  kuat  (IC 50 rutin=15,58 µg/mL) daripada ekstrak umbi bawang Dayak (IC 50 =0,37 mg/ mL). Namun pada penelitian ini pengaruh  rutin  terhadap  penurunan  kadar kolesterol  darah  tidak  sebaik  ekstrak  umbi bawang Dayak dosis 150 mg/kgBB), mungkin hal ini disebabkan karena rutin yang dicampur dengan  Na-CMC  tidak  dapat  larut  dan tersuspensi secara sempurna dan pada pem- berian  secara  oral  kepada  tikus  tidak  ter- campur  dengan  baik,  sehingga  hasil  yang didapatkan  tidak  sesuai  dengan  hasil  uji aktivitas antioksidan.
Antara  kelompok  5  dan  kelompok  6 memiliki  perbedaan  kadar  kolesterol  darah total yang signifikan pada hari ke-14, dengan nilai  p=0,013.    Pemberian  ekstrak  umbi  ba- wang  Dayak  dengan  dosis  150  mg/kgBB mampu  menurunkan  kadar  kolesterol  darah total  secara  signifikan  dikarenakan  senyawa flavonoid  pada  dosis  150  mg/kgBB  memiliki kadar  yang  lebih  besar  dari  pada  dosis  75 mg/kgBB;  pemberian dosis 75 mg/kgBB pada kelompok 5, memberikan pengaruh penurun- an kadar kolesterol darah total, namun belum mampu melampui penurunan kadar kolesterol darah total tikus pada kelompok tikus hiperko- lesterolemia  yang  diberikan  simvastatin  dan kelompok  yang  diberikan  ekstrak  umbi  ba- wang Dayak dengan dosis 150 mg/kgBB.

## SIMPULAN
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa ekstrak  umbi  bawang  Dayak  mengandung flavonoid. Ekstrak umbi bawang Dayak mem- perlihatkan aktivitas antioksidan. Pada peneli- tian  ini,  pemberian  ekstrak  umbi  bawang Dayak  dosis  150mg/kgBB,  merupakan  dosis terbaik  yang  mampu  menurunkan  kadar  ko- lesterol darah total secara signifikan pada hari ke-14,  sama  seperti  pengaruh  simvastatin sehingga  dapat  mencapai  kadar  kolesterol yang normal.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Fioranelli  M,  Bottaccioli  AG,  Bottaccioli  F,  et  al. Stress and inflammation in coronary artery disease: a review psychoneuroendocrineimmunology- based. Front  Immunol .  2018;9:1-15.  Diunduh  dari doi: 10.3389/fimmu.2018.02031
2. Ulfa L, Hermawan R. Kejadian hiperkolesterolemia pada  pelaut  PT.  Samudera  Indonesia.  JBIK. 2015;5(1): 270-6.
3. Brahim  MA,  Asuka  E,  Jialal  I.  Hypercholesterole- mia.  In: StatPearls [Internet].  2021  [dikutip  28
Maret].  Diunduh  dari https://pubmed.ncbi.nlm.nih. gov/29083750/
4. Jannah  N,  Yustina,  Latifah,  Mahedra  DN,  et  al. Pengaruh pemberian ekstrak umbi bawang Dayak ( Eleutherine Americana Merr. ) terhadap penurunan kolesterol  pada  tikus  jantan  putih  galur  wistar. Journal of Biology. 2018;1(11):33-40.
5. Azizah  DN,  Kumolowati  E,  Faramayuda  F. Penetapan  kadar  flavonoid  metode  AlCl 3 pada ekstrak  methanol  kulit  buah  kakao  ( Theobroma cacao L.). KJIF. 2014; 2(2): 45-49.
6. Simamora  A,  Santoso  AW,  Timotius  KH.  - glucosidase inhibitory effect of fermented fruit juice of Morinda Cirtifolisa L and Combination effect with acarbose . Current Research in Nutrition and Food Sciende. 2019;7(1):221-226.
7. Filbert,  Harry  SJ,  Koleangan  et  al.  Penentuan aktivitas antioksidan berdasarkan nilai IC 50 ekstrak metanol  dan  fraksi  hasil  partisinya  pada  kulit
pinang yaki ( Areca vestiaria Giseke). Jurnal MIPA UNSRAT. 2014;3(2):149-54
8. Pramiastuti  P,  Solikhati  DIK,  Suryani  A.  Aktivitas antioksidan fraksi umbi bawang Dayak ( Eleutherine bulbosa (Mill.)  Urb.)  dan  dengan  metode  DPPH
( 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil ). Jurnal Wiyata. 2021;8(1):55-66.
9. Zeka  K,  Ruparelia  K,  Arroo  RRJ,  Budriesi  R, Micucci  M.  Flavonoids  and  their  metabolites: Prevention in  cardiovascular  diseases  and
diabetes. Diseases . 2017;5(3):19
10.  Posangi I, Posangi J, Wuisan J. Efek ekstrak daun sirsak  ( Annona  muricate L.)  pada  kolesterol  total tikus wistar. Jurnal Biomedik. 2012;4(1):37-42.
11.  Sukmawati,  Asgap  ARP.  Uji  efek  taoge  terhadap kadar  kolesterol  tikus  ( Rattus  norvegicus )  jantan hiperlipidemia. Jurnal Farmasi. 2017;9(2):188-94.
12.  Magfirah, Utami IK, Alaydrus S. Efek ekstrak etanol rumput laut ( Eucheumacottonii J. Agardh ) terhadap kadar  kolesterol  dan  obesitas  pada  tikus  putih jantan. Jurnal Jamu Indonesia. 2020;5(3):98-105.
13.  Widada  ST,  Martsiningsik  MA,  Carolina  SC. Gambaran  perbedaan  kadar  kolesterol  total metode CHOD-PAP ( Cholesterol Oxidase- Peroxsidase  Aminoantypirin )  sampel  serum  dan sampel  plasma  EDTA.  Jurnal  Teknologi  Labo- ratorium. 201;5(1):41-44
14.  Nurmila,  Sinay  H,  Watuguly  T.  Identifikasi  dan analisis  kadar  flavonoid  ekstrak  getah  angsana ( Pterocarpus  indicus Willd)  di  Dusun  Wanath Kecamatan  Leihitu  Kabupaten  Maluku  Tengah. Biopendix. 2019;5(2):65-7.
15.  Kumalasari  E,  Nazir  MA,  Putra  AMP.  Penetapan kadar  flavonoid  total  ekstrak  etanol  70%  daun bawnag  Dayak  ( Eleutherine  palmifolia  L. )  dengan metode spektrometri UV-Vis. Jurnal Insan Farmasi Indonesia. 2018;1(2):201-9.
16.  Pramiastuti  P,  Solikhati  DIK,  Suryani  A.  Aktivitas antioksidan fraksi umbi bawang Dayak ( Eleutherine bulbosa (Mill.)  Urb.)  dan  dengan  metode  DPPH ( 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil ). Jurnal Wiyata.
2021;8(1):55-66.
17.  Kadri  MFA,  Sunarni  T,  Pamudji  G,  Zamzani  I. Aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun pelawan ( Tristaniopsis obvate. Benn ) dengan penangkapan radikal  bebas  2,2-difenil-1-pikrilhidrazil.  JCPS. 2019;2(2):167-72.
18.  Aleisa  AM,  Abuohashish  HM,  Ahmed  MM,  et  al. Ameliorative effects of rutin and ascorbic acid com- bination on hypercholesterolemia-induced hepato- toxicity in female rats. AJPP. 2013;7(6):280-88.
19.  Eddouks M, Lemhadri A, Michel JB. Hypolipidemic activity of aqueous extraxt of Capparis spinose L. in normal and diabetic rats. Jethpharm . 2005;98(3): 345-50.
20.  Lee  JS,  Jeon  SM,  Park  EM,  et  al.  Cinnamate supplementation enhances hepatic lipid metabolism  and  antioxidant  defense  systems  in high  cholesterol-fed  rats. J  Med  Food .2003;6(3): 183-191.
21.  Talreja  O,  Kerndt  CC,  Cassagnol  M.  Simvastatin. In: StatPearls .  [Internet].  2020  [dikutip  3  April]. Diunduh dari https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/ 30422514/
22.  Efendi  A,  Ahmad  I,  Ibrahim  A.  Efek  antimitosis ekstrak bawang Dayak ( Eleutherina Americana L. Merr) terhadap  sel  telur  bulu  babi  ( Tripneustes gratilla Linn.) . JSK. 2015;1(3):99-104.
23.  Saputri LO, Satriyasa BK, Yasa WPS. Ekstrak air biji  pepaya  ( Carica  Papaya )  dapat  menurunkan kadar  kolesterol  total  dan  kadar  serumglutamat piruvat transaminase (Sgpt) pada tikus putih jantan galur  wistar  yang  hiperkolesterolemia.  WMJ. 2017;2(1): 1-10.