Vol. 7, No. 2 April 2024, Hal. 381 – 391 p-ISSN: 2622 – 6014; e-ISSN: 2745 – 8644

## JURNAL PROMOTIF PREVENTIF
Uji Aktivitas Antioksidan Fraksi Ekstrak Etanol Tali Kuning ( Anamirta cocculus ) Dengan Metode DPPH
Antioxidant Activity Test of Fraction Extract Ethanol Tali Kuning (Anamirta cocculus) Using the DPPD Method
Rika Erawati, AM. Muslihin, Lukman Hardia
Program Studi Farmasi, Fakultas Sains Terapan, Universitas Pendidikan Muhammadiyah Sorong
Article Info
ABSTRACT / ABSTRAK
Article History Received: 05 Apr 2024 Revised: 25 Apr 2024 Accepted: 29 Apr 2024 Tali kuning plant (Anamirta cocculus) is a medicinal plant that has been used for generations  as  an  antimalarial  medicine.  Research  on  the  separation  and determination  of  active  substances  in  these  plants  shows  that  they  contain quaternary alkaloid compounds in the roots and stems. The aim of this research was  to  determine  the  antioxidant  activity  of  the  ethyl  acetate  extract  fraction, chloroform extract fraction and n-hexane extract fraction using the DPPH method.
The yellow rope was extracted using the maceration method using 70% ethanol solvent. The ethanol extract of tali kuning (Anamirta cocculus) was fractionated with three solvents, namely ethyl acetate, chloroform and n-hexane. Each fraction was  tested  for  its  activity  against  DPPH  free  radicals  and  its  absorbance  was measured using uv-vis spectrophotometry at a wavelength of 516.2 nm. The results showed that the ethyl acetate fraction, chloroform fraction and n-hexane fraction of  tali  kuning  (Anamirta  cocculus)  had  antioxidant  activity  with  IC 50 values  of 16.16 μg/mL, 42.56 μg/mL and 129, respectively. 03 μg/mL. Based on the results of the research conducted, it can be concluded that the ethyl acetate fraction and the chloroform fraction have very strong antioxidant activity, while the n-hexane fraction has moderate.
Keywords: Yellow string (Anamirta cocculus), Antioxidant, DPPH
Tumbuhan  tali  kuning  ( Anamirta  cocculus )  ialah  tumbuhan  obat  yang  secara turun-temurun sudah dimanfaatkan sebagai obat antimalaria. Penelitian tentang pemisahan  serta  penentuan  zat-zat  aktif  di  tumbuhan  tersebut  menunjukkan adanya kandungan senyawa alkaloid kuartener di akar serta batangnya. Tujuan penelitian ini adalah untuk menentukan aktivitas antioksidan fraksi ekstrak etil asetat,  fraksi  ekstrak  kloroform  dan  fraksi  ekstrak  n-heksan  dengan  metode DPPH. Tali kuning diesktraksi dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 70%. Ekstrak etanol tali kuning ( Anamirta cocculus ) di fraksinasi dengan tiga pelarut yaitu etil asetat, kloroform dan n-heksan. Masing-masing fraksi diuji aktivitasnya  terhadap  radikal  bebas  DPPH  dan  diukur  absorbansinya menggunakan spektrofotometri uv-vis pada panjang gelombang 516,2 nm. Hasil penelitian menunjukkan bahwa fraksi etil asetat, fraksi kloroform dan fraksi n- heksan  tali  kuning  ( Anamirta  cocculus )  memiliki  aktivitas  antioksidan  dengan nilai  IC 50 masing-masing  16,16 μg/mL,  42,56  μg/mL,  dan  129,03  μg/mL. Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan  dapat  disimpulkan  bahwa  fraksi  etil asetat  dan  fraksi  kloroform  memiliki  aktivitas  antioksidan  sangat  kuat sedangkan fraksi n-heksan sedang.
Kata kunci: Tali kuning ( Anamirta cocculus ), Antioksidan, DPPH
Corresponding Author :
Name
: Rika Erawati
Affiliate  : Porgram Studi, Fakultas Sains Terapan, Universitas Pendidikan Muhammadiyah Sorong Address  : Jl. K. H. Ahmad Dahlan No. 1 Distrik Aimas, Kab. Sorong, Prov. Papua Barat Daya 98457 Email : rikaerawati2002@gmail.com

## PENDAHULUAN
Dewasa  ini,  kemajuan  teknologi  serta  ilmu  pengetahuan  mengakibatkan  perubahan gaya hidup masyarakat yang membahayakan kesehatan seperti mengonsumsi makanan yang tidak  sesuai  kebutuhan,  kurang  berolahraga  dan  beristirahat,  kebiasaan  merokok  dan mengonsumsi minuman beralkohol. Selain itu, situasi lingkungan yang semakin buruk  yaitu pencemaran  lingkungan  yang  tinggi  dapat  menurunkan  kualitas  hidup  masyarakat  dengan menurunkan  produksi  zat  yang  berperan  dalam  menjaga  kesimbangan  tubuh,  yaitu antioksidan  alami  yang  dimanfaatkan  untuk  menetralisir  radikal  bebas  yang  terbentuk  oleh polusi  udara,  radiasi,  zat  kimia  berbahaya,  serta  pembentukan  radikal  bebas  lainnya. Keterpaparan  polusi  udara  dan  gaya  hidup  yang  kurang  sehat  dapat  menyebabkan  tubuh terpapar senyawa radikal bebas secara bertahap (Maharani et al. 2021; ).
Banyak tumbuhan dan tanaman yang mempunyai potensi untuk dimanfaatkan sebagai obat karena adanya proses pembentukan zat-zat senyawa dengan struktur, fungsi, dan kadar yang  berbeda-beda.  Zat-zat  sekunder  terbentuk  sebagai  hasil  adaptasi  tanaman  terhadap lingkungan. Zat-zat tersebut dapat menghambat terjadinya reaksi oksidasi untuk melindungi tubuh  dari  radikal  bebas,  diperlukan  antioksidan  (Anisa,  M., et.  al .,  2023)  Antioksidan  yang dapat  diperoleh  dari  berbagai    sumber,  termasuk  dari  makanan,  minuman,  serta  suplemen (Novatama,  Kusumo,  and  Supartono  2014).  Tanah  Papua  yang  sejak  dahulu  dikenal  akan kekayaan  sumber  daya  alamnya  memiliki  keanekaragaman  hayati  yang  bisa  dikembangkan sebagai  bahan  obat.  Beberapa  tanaman  dan  tumbuhan  yang  bisa  ditemukan  di  Papua  dan mengandung  berbagai  khasiat  seperti  antidiabetes,  antibakteri,  antianemia,  meningkatkan stamina diantaranya yaitu buah merah, daun gatal, kayu akway, dan tali kuning (Fabanyo, S., et. al. , 2023; Rahayu, D., et al ., 2023; Hardia, L., et. al., 2023; Prabawati, R., et al ., 2021). Tumbuhan  tali  kuning  ( Anamirta  cocculus )  ialah  tumbuhan  obat  yang  secara  turun- temurun  sudah  dimanfaatkan  sebagai  obat  antimalaria.  Penelitian  tentang  pemisahan  serta penentuan  zat-zat  aktif  di  tumbuhan  tersebut  menunjukkan  adanya  kandungan  senyawa alkaloid  kuartener  di  akar  serta  batangnya.  Alkaloid  kuartener  tersebut  berupa  berberine, palmatine, magnoflorine dan columbamine(Marhamah 2019).
Berdasarkan  uraian  di  atas  tumbuhan  tali  kuning  ( Anamirta  cocculus )  memiliki kandungan alkaloid kuartener. Salah satu manfaat alkaloid adalah dapat menghancurkan sel kanker yang disebabkan oleh radikal bebas. Namun belum ada penelitian yang menjelaskan tentang  aktivitas  antioksidan  tumbuhan  tali  kuning  ( Anamirta  cocculus ).  Oleh  karena  itu, penelitian bertujuan untuk mengamati aktivitas antioksidan tumbuhan tali kuning ( Anamirta cocculus ) terhadap DPPH menggunakan variasi pelarut etil asetat, kloroform serta n-heksan.

## BAHAN DAN METODE

## Jenis Penelitian
Penelitian  ini  merupakan  jenis  penelitian  dengan  metode  eksperimental  yang  akan dilaksanakan  di  Laboratorium Bahan  Alam  Farmasi  Universitas  Pendidikan  Muhammadiyah Sorong  (UNIMUDA)  pada  bulan  Februari-April  2024,  dengan  tahapan  prosedur  yaitu: pengambilan  dan  preparasi  sampel  tali  kuning  ( Anamirta  cocculus) ,  pembuatan  ekstrak,
fraksinasi,  analisis  aktivitas  antioksidan  dengan  kromatografi  lapis  tipis,  analisis  aktivitas antioksidan dengan spektrofotometri ultraviolet-visibel dan analisa data.

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan  Februari-April  2024.  Penelitian  dilaksanakan  di Laboratorium  Bahan  Alam  Farmasi  Universitas  Pendidikan  Muhammadiyah  (UNIMUDA) Sorong.

## Populasi dan Sampel

## Populasi
Populasi  dalam  penelitian  ini  yaitu  tali  kuning  ( Anamirta  cocculus) yang  terletak  di wilayah Misool Timur, Raja Ampat.

## Sampel
Sampel yang digunakan untuk penelitian ini ialah batang tali kuning ( Anamirta cocculus) dengan ciri-ciri apabila dibelah bagian batangnya berwarna kuning dan akan terlihat bentuk berlapis – lapis yang diambil di kampung Folley, Kabupaten Raja Ampat, Provinsi Papua Barat Daya.

## Teknik Pengumpulan Sampel
Pengambilan sampel dilakukan di wilayah Misool Timur Kabupaten Raja Ampat. Sampel yang digunakan dalam penelitian yaitu tali kuning ( Anamirta cocculus ) yang diambil pada pagi hari.  Kemudian  setelah  sampel  diperoleh  dilakukan  penyortiran  basah,  pencucian, pemotongan,  pengeringan  menggunakan  oven  dengan  suhu  50°C,  penghalusan  sampel menggunakan blender dan ditimbang. Selanjutnya diekstraksi menggunakan metode maserasi sampai  diperoleh  ekstrak  kental.  Setelah  didapatkan  ekstrak  kental  yang  dihitung rendamennya lalu dilakukan fraksinasi ekstrak tali kuning menggunakan variasi pelarut etil asetat, kloroform serta n-heksan.

## Instrumen Penelitian

## Alat Penelitian
Peralatan yang dibutuhkan untuk penelitian ini yaitu Alumunium Foil, Blender, Camber, Cawan Porselen, Centrifuge, Corong, Corong Pisah, Erlenmeyer, Gelas Beaker, Kertas Saring, Klem,  Labu  Tentukur,  Magnetik  Stirer,  Mikropipet,  Pipa  Kapiler,  Plat  KLT,  Plastik  Wrap, Saringan, Spektrofotometer Uv-vis, Statif, Toples Kaca, Tabung Centrifuge,Timbangan Analitik, Tissue, Vial, Wadah Sampel, dan Water Bath.

## Bahan Penelitian
Bahan  yang  dibutuhkan  untuk  penelitian  ini  yaitu sampel  tali  kuning  ( Anamirta cocculus ) aquadest, DPPH ( 1,1-diphenyl-2-pycrylhydrazyl ), etanol 70%, etanol p.a, etil asetat, kloroform, dan n-heksan.

## Prosedur Kerja

## Pengolahan Sampel Tali Kuning (Anamirta cocculus)
Sampel tali kuning ( Anamirta cocculus ) sebanyak 5 kg dibersihkan dari pengotor, dicuci, kemudian  ditiriskan  lalu  sampel  dikeringkan  dengan  oven  pada  suhu  50°C  selama  8  jam (Kusuma  et  al.  2020).  Selanjutnya  tali  kuning  ( Anamirta  cocculus ) dihaluskan  dengan
menggunakan  blender  sampai  diperoleh  serbuk  tali  kuning  ( Anamirta  cocculus )  untuk dijadikan sampel.

## Pembuatan Ekstrak
Ditimbang serbuk kering tali kuning ( Anamirta cocculus ) sebanyak 500gram selanjutnya direndam dengan cara dimasukkan kedalam toples kaca kemudian ditambahkan etanol 70% dengan perbandingan 1:4 sampai sampel itu terendam serta didiamkan selama 72 jam di dalam toples  kaca  yang  di  tutup  rapat  serta  terlindungi  dari  sinar,  sewaktu  -  waktu  diaduk,  lalu disaring. Proses perendaman dapat diulang 3 kali dengan memakai pelarut yang sama. Maserat yang didapatkan selanjutnya dipekatkan dengan menggunakan water bath hingga didapatkan ekstrak pekat (Muslihin et al. n.d.)

## Fraksinasi Ekstrak Tali Kuning (Anamirta cocculus)
Ditimbang  hasil  maserat  yang  sudah  diukur  rendamennya  dengan  total  5gram.  Selanjutnya hasil ekstraksi diletakkan di dalam wadah Erlenmeyer 250 ml serta ditambahkan pelarut n- heksan dengan total 75 ml, dicampurkan dengan cara mengaduk memakai pengaduk magnetik stirer dalam waktu 15 menit. Kemudian hasil campuran disentrifugasi dengan kekuatan 3000 rpm dalam waktu 10 menit. Filtrat yang larut dan tidak larut n-heksan dipisahkan. Pada proses maserasi ini dapat diulang 3 kali. Ekstrak yang tidak larut n-heksan ditambahkan pelarut etil asetat  dengan  total  75  ml.  Setelah  proses  selesai,  filtrat  yang  tidak  larut  dalam  etil  asetat ditambahkan pelarut kloroform dengan total 75 ml. Proses fraksinasi untuk etil asetat dan juga kloroform diulang seperti proses awal (Muslihin et al. n.d.).

## Skrining Fitokimia

## Uji Senyawa Alkaloid
Sebanyak 2 ml sampel dilarutkan dengan 2 ml HCL 2% dan dipanaskan selama 5 menit, kemudian disaring. Filtrat yang didapatkan ditetesi menggunakan pereaksi Mayer, Bouchardat dan Dragendrof sebanyak 2-3 tetes. Senyawa alkaloid ditandai dengan terbentuknya endapan putih atau kuning, endapan cokelat hitam dan endapan merah bata (Ningsih 2017).

## Uji Senyawa Flavonoid
Sebanyak 2 ml sampel dilarutkan dengan 2 ml etenol, selanjutnya ditambahkan serbuk magnesium dan HCl pekat sebanyak 5 tetes. Senyawa flavonoid ditandai dengan terbentuknya warna merah, kuning atau jingga (Ningsih 2017).

## Uji Senyawa Tanin
Ekstrak kental sebanyak 2 ml ditambahkan pereaksi FeCl 3 . Terbentuknya warna biru tua atau hijau kehitaman adalah tanda adanya senyawa tanin (Ningsih 2017).

## Uji Senyawa Saponin
Ekstrak  kental  2  ml  dicampur  dengan  10  ml  air  panas  dalam  tabung  rekasi,  lalu didinginkan dan dikocok hingga muncul buih. Larutan didiamkan selama 10 menit, selanjutnya tambahkan 1 tetes HCl 2N. Buih konstan menunjukkan adanya senyawa saponin (Ningsih 2017).

## Uji Senyawa Terpenoid/Steroid
Sebanyak 2 ml sampel ditambahkan menggunakan pereaksi asam asetat anhidrat 2 tetes dan asam sulfat pekat 1 tetes. Adanya senyawa terpenoid ditandai terbentuknya warna ungu atau merah dan steroid ditandai terbentuknya warna biru (Ningsih 2017).

## Analisis Aktivitas Antioksidan Dengan Kromatografi Lapis Tipis
Analisis aktivitas antioksidan secara kromatografi lapis tipis (KLT) dilakukan dengan cara menandai  ekstrak  F254  di  plat  silika  gel  setelah  itu,  pelarut  kloroform  dan  metanol  dielusi menggunakan perbandingan 4:1. Noda yang terbentuk diteliti di bawah lampu ultraviolet (UV) 366 nm dan 254 nm, kemudian disemprot menggunakan larutan DPPH dan didiamkan selama 30 menit, selanjutnya titik kuning diukur untuk mendapatkan nilai Rf (Muslihin, Rifai, and Rante 2022).

## Pengujian Aktivitas Antioksidan Dengan Spektrofotometri Ultraviolet-Visibel Pembuatan Larutan DPPH
Larutan  DPPH  0,4  mM  disiapkan  dengan  ditimbang  0,0157gram  DPPH,  kemudian dilarutkan pada wadah ukur 100 ml dengan etanol p.a sehingga didapatkan larutan DPPH 0,4 mM.

## Penetapan Jarak Gelombang (λmaks) DPPH
Larutan kontrol disiapkan dengan dipipet 1 ml DPPH 0,4 mM, lalu dimasukkan etanol p.a sampai volumenya mencapai 5 ml. Larutan ini kemudian dibiarkan dalam waktu 30 menit ditempat  gelap,  selanjutnya  diukur  absorbansinya  di  panjang  gelombang  400-600  nm,  hasil pengukuran absorbansi yang didapatkan yaitu 516,2 nm.

## Pembuatan Larutan Stok Tali Kuning (Anamirta cocculus)
Ditimbang ekstrak n-heksan, etil asetat serta kloroform dengan total setiap sampel 10 mg. Untuk membuat larutan stok 1000 ppm, masing-masing ekstrak dilarutkan dalam pelarut etanol p.a dalam gelas kimia sambil diaduk hingga homogen, kemudian dituangkan di  dalam wadah ukur 10 ml serta ditambahkan etanol p.a hingga tanda batas.

## Pengukuran Aktivitas Antioksidan Fraksi Tali Kuning (Anamirta cocculus) Menggunakan DPPH
Dilakukan  pengukuran  aktivitas  antioksidan  fraksi  tali  kuning (Anamirta  cocculus) dengan cara mengambil larutan stok 1000 ppm. Diambil fraksi n-heksan, fraksi etil asetat serta fraksi kloroform 0,1 ml, 0,2 ml, 0,3 ml, 0,4 ml dan 0,5 ml. Kemudian dituangkan di dalam wadah ukur  5  ml  yang  telah  ditutup  aluminium  foil,  selanjutnya  ditaruh  1,0  ml  DPPH  0,4  mM, kemudian  disesuaikan  volumenya  dengan  etanol  p.a  sampai  tanda  batas,  dengan  demikian didapatkan konsentrasi 10 ppm, 20 ppm, 30 ppm, 40 ppm serta 50 ppm. Dibiarkan dalam waktu 30  menit,  lalu  absorbansinya  dihitung  dengan  menggunakan  spektrofotometri  ultraviolet- visibel di panjang gelombang 516,2 nm.
Pembuatan Larutan Vitamin C (Asam Askorbat) dan Pengukuran Aktivitas Antioksidan Larutan asam askorbat dengan konsentrasi 100 ppm disiapkan dengan ditimbang asam askorbat  10  mg  dan  dicampur  dalam  etanol  p.a  sembari  diaduk  hingga  homogen.  Larutan kemudian  disesuaikan  volumenya  menggunakan  etanol  p.a  hingga  10  ml.  Larutan  asam askorbat 1000 ppm diencerkan hingga 100 ppm. Untuk mengukur aktivitas antioksidan larutan
asam askorbat dipipet larutan stok 100 ppm dengan total 0,005 ml, 0,01 ml, 0,015 ml, 0,02 ml dan  0,025  ml.  Kemudian  dituangkan  kedalam wadah  ukur  5  ml  yang  dilapisi  menggunakan alumunium foil, dicampur 1 ml larutan DPPH konsentrasi 0,4 mM, ditambahkan pelarut etanol p.a sampai volumenya mencapai tanda batas, sampai  didapat konsentrasi 0,1 ppm, 0,2 ppm, 0,3  ppm,  0,4  ppm,  dan  0,5  ppm.  Ditutup  rapat  serta  dibiarkan  dalam  waktu  30  menit. Absorbansi  larutan  kemudian  dihitung  menggunakan  spektrofotometri  ultraviolet-visibel dengan panjang gelombang 516,2 nm

## Teknik Analisis Data

## Persentase Penghambatan Senyawa Radikal Bebas DPPH
Data aktivitas antioksidan penangkal radikal bebas DPPH dapat dihitung dengan rumus:
% Aktivitas antioksidan = (𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜−𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 x 100%
Keterangan:
Absorbansi blangko  = absorbansi DPPH
Absorbansi sampel  =  absorbansi  antioksidan  fraksi  ekstrak  etil  asetat,  fraksi  ekstrak kloroform dan fraksi ekstrak n-heksan
Penentuan Konsentrasi Penghambatan 50% (IC 50)
Konsentrasi sampel uji (x) dan persentase penghambatan (y) diplotkan pada persamaan regresi linear. Bentuk persamaannya adalah:
𝑦 = 𝑎𝑥 +  𝑏
Keterangan: y = % Inhibisi x = Konsentrasi sampel a = Titik potong kurva pada sumbu Y b = Kemiringan kurva Nilai IC 50 merupakan nilai x pada persamaan tersebut. Nilai y bisa diisi dengan angka 50 karena yang dicari adalah penghambatan 50%, kemudian nilai a dan b diperoleh dari hasil pengeplotan terhadap y.

## HASIL
Tabel 1. Hasil Skrining Fitokimia Uji Fitokimia Senyawa Perekasi Pengamatan Hasil Fraksi etil asetat Fraksi kloroform Fraksi n-heksan Flavonoid HCl pekat Warna kuning (+) Alkaloid Mayer Bouchardat Dragendroff Endapan berwarna kuning Endapan berwarna cokelat Endapan berwarna jingga (+) (+)
(+)
R² = 0.8707 y = 1.5316x + 25.253 0.00 20.00 40.00 60.00 80.00 100.00 120.00 0 10 20 30 40 50 60 Akt iv itas An tio ks id an (% ) Konsentrasi ( μ g/mL) y = 0.3297x + 7.4576 R² = 0.9398 0.00 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 0 10 20 30 40 50 60 Akt iv ita s An tio ksi d an (% ) Konsentrasi ( μ g/mL)
Tabel 2. Fraksi Etil Asetat Tali Kuning
No Konsentrasi (μg/mL) Aktivitas Antioksidan (%) Nilai IC- 50 (μg/mL) 1 10 29,75
16,16
2 20 62,66 3 30 81,65 4 40 88,61 5 50 93,35
Gambar 1. Kurva Persamaan Regresi Linear Aktivitas Antioksidan Fraksi Etil Asetat Tali Kuning ( Anamirta cocculus )
Tabel 3. Fraksi N-heksan Tali Kuning
No Konsentrasi (μg/mL) Aktivitas Antioksidan (%) Nilai IC- 50 (μg/mL) 1 10 9,40
129,03
2 20 14,64 3 30 18,80 4 40 21,42 5 50 22,50
Gambar 2. Kurva Persamaan Regresi Linear Aktivitas Antioksidan Fraksi N-HeksanTali Kuning ( Anamirta cocculus )
y = 1.1702x + 0.1912 R² = 0.9504 0.00 10.00 20.00 30.00 40.00 50.00 60.00 70.00 0 10 20 30 40 50 60 Akt iv ita s An tio ksi d an (% ) Konsentrasi ( μ g/mL) y = 160.76x + 19.081 R² = 0.9661 0.00 20.00 40.00 60.00 80.00 100.00 120.00 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 Akt iv ita s an tio ksId an (% ) Konsentrasi ( μ g/mL)

## Tabel 4. Fraksi Kloroform Tali Kuning
No Konsentrasi (μg/mL) Aktivitas Antioksidan (%) Nilai IC- 50 (μg/mL) 1 10 8,03
42,56
2 20 24,47 3 30 40,34 4 40 49,71 5 50 53,92
Gambar 3. Kurva Persamaan Regresi Linear Aktivitas Antioksidan Fraksi Kloroform Tali Kuning ( Anamirta cocculus )

## Tabel 5. Vitamin C
No Konsentrasi (μg/mL) Aktivitas Antioksidan (%) Nilai IC- 50 (μg/mL) 1 10 30,72
0,19
2 20 53,14 3 30 71,08 4 40 87,89 5 50 93,72
Gambar 4. Kurva Persamaan Regresi Linear Aktivitas Antioksidan Vitamin C

## PEMBAHASAN
Ekstrak  uji  yang  digunakan  adalah  tali  kuning  ( Anamirta  cocculus )  yang  telah difraksinasi menggunakan tiga pelarut yang memiliki tingkat tingkat kepolaran berbeda hingga menghasilkan tiga fraksi yaitu fraksi etil asetat, fraksi n-heksan dan fraksi kloroform. Masing- masing  diuji  aktivitasnya  terhadap  radikal  bebas  DPPH  dan  diukur  menggunakan spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang 516 nm.  Hasil analisis menunjukkan bahwa aktivitas  antioksidan  fraksi  etil  asetat  didapatkan  nilai  IC 50 sebesar  16,16 μg/mL ,  fraksi  n- heksan  diperoleh  nilai  IC 50 sebesar  129,03 μg/mL dan  fraksi  kloroform  diperoleh  nilai  IC 50 sebesar 42,56 μg/mL Pembanding yang digunakan sebagai kontrol adalah vitamin C, Vitamin C  merupakan  pereduksi  kuat  bagi  tubuh  berperan  sebagai  antioksidan  yang  bekerja menghalangi beberapa kerusakan yang disebabkan oleh radikal bebas dan menghambat reaksi oksidasi dalam tubuh yang merusak strukturfungsi sel (Leo and Daulay 2022).
Antioksidan menstabilkan radikal bebas dengan melengkapi kekurangan elektron yang dimiliki radikal bebas, dan menghambat terjadinya reaksi berantai dari pembentukan radikal bebas yang dapat menimbulkan stres oksidatif. Stres oksidatif merupakan ketidakseimbangan antara  radikal  bebas  dan  antioksidan  yang  dipicu  oleh  dua  kondisi  umum  yaitu  kurangnya antioksidan  dan  kelebihan  produksi  radikal  bebas  (Wibawa,  Wati,  and  Arifin  2020).  Secara spesifik  tingkat  kekuatan  antioksidan  senyawa  uji  menggunakan  metode  DPPH  dapat digolongkan berdasarkan nilai IC 50 .  Sangat kuat kurang dari 50 μg/mL , kuat dengan IC 50 50- 100 μg/mL , sedang dengan IC 50 101-150 μg/mL , dan lemah dengan nilai IC 50 lebih dari 150 μg/mL . Nilai IC 50 fraksi n-heksan jauh lebih rendah dibandingkan dengan nilai IC 50 fraksi etil asetat dan fraksi kloroform.  Hal ini kemungkinan disebabkan karena pada saat ekstrak etanol tali  kuning  ( Anamirta  cocculus )  di  fraksinasi  dengan  pelarut  n-heksan  menyebabkan pemisahan senyawa kimia yang terkandung di dalam ekstrak tali kuning ( Anamirta cocculus ), dimana hal ini dapat mengakibatkan senyawa yang satu dengan yang lain tidak dapat bekerja secara  maksimal  karena  tidak  adanya  kerja  sama  antara  senyawa  yang  satu  dengan  yang lainnya.  Proses  ekstraksi  dan  fraksinasi  dengan  pelarut  organik  yang  berbeda  tingkat kepolaran  akan  mempengaruhi  jenis  dan  kadar  senyawa  bioaktif  serta  aktivitas antioksidannya.    Perbedaan  aktivitas  antioksidan  terhadap  suatu  sistem  yang  mengandung lebih dari satu jenis senyawa aktif disebabkan oleh adanya interaksi yang terjadi antara dua atau  lebih  senyawa  aktif.  Interaksi  ini  dapat  bersifat  protagonis  atau  antagonis.  Protagonis merupakan  interaksi  antara  dua  senyawa  aktif  yang  mengakibatkan  aktivitas  antioksidan ketika bersama akan lebih tinggi dibandingkan secara individu. Sedangkan antagonis adalah interaksi antara dua senyawa aktif yang justru mengakibatkan penurunan terhadap aktivitas antioksidan ketika bersama dibandingkan secara individu (Muslihin et al. n.d.).

## KESIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan penelitian yang dilakukan dapat disimpulkan bahwa fraksi etil asetat dan fraksi kloroform memiliki aktivitas antioksidan sangat kuat sedangkan fraksi n-heksan sedang.
Disarankan  kepada  peneliti  selanjutnya  untuk  melakukan  pengujian  lebih  lanjut terhadap  fraksi  ekstrak  etanol  tali  kuning  ( Anamirta  cocculus )  sehingga  dapat  diketahui manfaat  lainnya  selain  sebagai  antioksidan  dan  disarankan  dapat  melanjutkan  pembuatan formulasi dari fraksi ekstrak etanol tali kuning ( Anamirta cocculus ).

## DAFTAR PUSTAKA
Anisa  M,  Hardia  L,  Budiyanto  AB.  Literature  Review:  Aktivitas  Antioksidan Ekstrak  Tongkol Jagung  (Zea  mays  L.).  jikes  [Internet].  2023  Dec.  1  [cited  2024  Apr.  21];2(1):1-13. Available from: http://qjurnal.my.id/index.php/jik/article/view/60
Constanty, Irene Cornelia, and Tukiran Tukiran. 2021. “Aktivitas Antioksidan Dari Fraksi N - Heksana  Kulit  Batang  Tumbuhan  Jambu  Semarang  ( Syzygium  Samarangense ).” Jurnal Kimia Riset 6(1):1. doi: 10.20473/jkr.v6i1.24467.
Fabanyo, S., Hardia, L., Muslihin, A., Budiyanto, A., & Irwandi, I. (2023). Analisis Fitokimia dan Gugus  Fungsi  Kulit  Kayu  Akway  (Drymis  sp.). urnal  romotif  reventif , 6 (6),  976-982. https://doi.org/10.47650/jpp.v6i6.1165
Hardia,  L.,  Arfiani,  E.S.N.,  Anisa,  M.,  Z.F.,  S.F.,  Fabanyo,  S.H.  &  Rozi,  D.F.,  2023,  ‘Efektivitas Formulasi  Salep  Ekstrak  Daun  Gatal (Laportea  aestuans)Terhadap  Luka  Bakar  Pada Kelinci (Oryctolagus cuniculus)’, Biolearning Journal, 10(2), 29– 35.
Maharani,  Aura  Iga,  Ferix  Riskierdi,  Intan  Febriani,  Kaprian  Alsyah  Kurnia,  Natasya  Aulia Rahman,  Nurul  Fadila  Ilahi,  and  Siska  Alicia  Farma.  2021.  “Peran  Antioksidan  Alami Berbahan Dasar Pangan Lokal Dalam Mencegah Efek Radikal Bebas.” Prosiding Seminar Nasional Bio 1(2):390 – 99.
Marhamah,  Husna  Ismalia.  2019.  “Aktivitas  Antimalaria  Tanaman  Tali  Kuning  ( Anamirta cocculus ) Terhadap Plasmodium Sp.” 6:828– 32.
Muslihin, A. M., Ratih Arum Astuti, Program Studi, Farmasi Fakultas, Sains Terapan, Universitas Pendidikan,  Muhammadiyah  Sorong,  Nama  Penulis  Koresponden,  Email  Penulis Koresponden, Alamat Penulis Koresponden, Kecamatan Aimas, Kabupaten Sorong, and Papua  B arat  Daya.  n.d.  “Analisis  Aktivitas  Antioksidan  Fraksi  Ekstrak  Daun  Mimba ( Azadirachta Indica A.Juss ) Dengan Metode DPPH.” 2022 .
Muslihin,  A.  M.,  Yusnita  Rifai,  and  Herlina  Rante.  2022.  “Isolation  and  Identification  of Endophytic Fungi Producing of Antioxidant Compound from Azadirachta Indica A . Juss Based on Gen 18s RRNA.” 45(01):3635– 44.
Nafsiah, Minhatun, Turkiran, and Nurul Hidayati. 2014. “ Uji Skrining Fitokimia Pada Ekstrak Heksan, Kloroform Metanol Dari Tanaman Patikan Kebo ( Euphorbiae hirtae ).”
Ningsih,  Dian  Riana.  2017.  “Ekstrak  Daun  Mangga  ( Mangifera  Indica L.)  Sebagai  Antijamur Terhadap Jamur Candida Albicans Dan Identifikasi Golongan Senyawanya.” Jurnal Kimia Riset 2(1):61. doi: 10.20473/jkr.v2i1.3690.
Novatama,  Mutiara  Stephanie,  Ersanghono  Kusumo,  and  Supartono.  2014.  “Identifikasi Betasianin  Dan  Uji  Antioksidan  Ekstrak  Buah  Bit  Merah  ( Beta  vulgaris L).” Indonesian Journal of Chemical Science 5(3):3 – 6. doi: 10.5962/bhl.title.81730.
Nugroho, Agung. 2017. Buku Ajar: Teknologi Bahan Alam .
Prabawati, R., Aji, W., Putro, S., Goa, Y. La, Hardia, L. & Utami, D.P., 2021, ‘The effectiveness test of   wound   healing   daun   gatal (Laportea   decumana) against   mice (Mus   musculus)’, Proceedings of the International Colloqium on Environmental Education, 25 – 26.
Putri, Fatma Eka, Andarini Diharmi, and Rahman Karnila. 2023. “Identifikasi Senyawa Metabolit Sekunder  Pada  Rumput  Laut  Coklat  ( Sargassum  plagyophyllum )  Dengan  Metode Fraksinasi.” Jurnal  Teknologi  Dan  Industri  Pertanian  Indonesia 15(1):40 – 46.  doi: 10.17969/jtipi.v15i1.23318.
Putri, W. S., N. K. Warditiani, and L. P. .. Larasanty. 2018. “Skrining Fitokimia Ekstrak Etil Asetat
Kulit Buah Manggis ( Garcinia mangostana L .).” Jurnal Farmasi Udayana 2(4):56 – 60.
Rahayu,  D.,  Hardia,  L.,  &  Irwandi,  I.  (2023).  Uji  Efek  Hipoglikemik  Ekstrak  Buah  Merah ( Pandanus conoideus L.) Terhadap Mencit ( Mus musculus ). JURNAL ETNOFARMASI , 1 (01), 38-45.
Reiza, Inul Ahmanda, Laode Rijai, and Febrina Mahmudah. 2019. “Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol  Kulit  Nanas  ( Ananas  comosus (L.)  Merr).” Proceeding  of  Mulawarman Pharmaceuticals Conferences 16 – 17.
Yulianti, Wina, Gilang Ayuningtyas, Rina Martini, and Ika Resmeiliana. 2021. “Pengaruh Metode Ekstraksi Dan Polaritas Pelarut Terhadap Kadar Fenolik Total Daun Kersen ( Muntingia calabura L).” Jurnal Sains Terapan 10(2):41 – 49. doi: 10.29244/jstsv.10.2.41-49