UJI AKTIVITAS ANTI-INFLAMASI KRIM EKSTRAK ETANOL BAWANG DAYAK (Eleutherine palmifolia (L) Merr) PADA LUKA SAYATAN TIKUS PUTIH JANTAN
Submitted : 25 April 2021 Edited : 6 Desember 2021 Accepted : 13 Desember 2021
Amalia Khairiah 1 , Eka Wisnu Kusuma 2
1 Program Studi D-III Farmasi 2 Program Studi S1 Farmasi
2 Lab Farmakologi Email: kusuma.3ka@gmail.com

## ABSTRACT
Inflammation  is  a  body  mechanism  for  destroy  and  disable  organism  that  attack accompanied by inflammation with perfect healing process, inflammation can be treated with anti-inflammatory  drugs  non  steroid  and  steroid.  But  that’s  have  an  effects.  Bawang  dayak (Eleutherine palmifolia (L) Merr) contain flavonoid used to anti inflammatory. The objective to knowing  anti-inflammatory  effect  of  extract  bawang  dayak  to  incision  wounds  in  male  white rats.  There  is  5 method  to  used,  that  positive  control  with  krim  hidrokortison  2,5%,  negative control with basis cream. Group 1 with give KEEBD 5%, group 2 with give KEEBD 10% and group 3 with KEEBD 15%. The test result used the Shapiro-wilk with one way anova (α=0,05) giving  cream  extract  ethanol  Bawang  dayak  (KEEBD)  has  an  anti-inflammatory  effect  and closes the length of the cut with the most effective concrentration of 15%
Keywords : Bawang dayak, cream, male rats, incision wound, inflamasi

## PENDAHULUAN
Inflamasi  merupakan  mekanisme tubuh  untuk  merusak  dan  menonaktifkan organisme  yang  menyerang  disertai dengan peradangan melalui proses penyembuhan  yang  sempurna.  Obat  anti- inflamasi yang biasa digunakan yaitu obat golongan  steroid  dan    non  steroid.  Efek samping obat anti-inflamasi dapat menyebabkan menurunnya imunitas tubuh. Oleh  karena  itu,  untuk  mengurangi  efek samping  dari  pemakaian  obat  anti- inflamasi dipilih alternatif lain
menggunakan  bahan  alam  yang  mudah didapatkan  di  sekitar  masyarakat.  Salah satunya yaitu Bawang Dayak (Eleutherine palmifolia (L). Merr)
Bawang Dayak (Eleutherine
palmifolia (L). Merr) mempunyai senyawa
aktif berupa alkaloid, glikosida, flavonoid, fenolik,  triterpenoid  atau  steroid  dan antrakuinon.  Senyawa  aktif  yang  terdapat dalam  bawang  dayak  dapat  digunakan sebagai  anti-inflamasi  yaitu  flavonoid (1) . Hal  tersebut  didukung  dengan  penelitian Roji  Septian,dkk  (2018)  bahwa  ekstrak etanol  bawang  dayak  dapat  digunakan sebagai  anti-inflamasi  paling  tinggi  yaitu 0,08%  pada  uji  mikrobiologi  dan  pada sediaan krim ekstrak etanol bawang dayak yang  diteliti  oleh  Husnani  dan  Fitri  Sri Rizky  (2019)  paling  efektif  sebagai  anti jerawat  yaitu  konsentrasi  10% (2,3) .  Dalam penelitian  bertujuan  untuk  mengetahui konsentrasi  ekstrak  etanol  bawang  dayak dalam  bentuk  sediaan  krim  yang  paling efektif  aktivitasnya  untuk  penyembuhan
anti-inflamasi  pada  luka  sayatan  tikus putih jantan.

## METODE PENELITIAN Alat
APD  (sarung  tangan,  masker,  jas lab),  timbangan  analitik,  rak  dan  tabung reaksi,  oven  merk  Philips,  botol  maserasi, timbangan  analitik,  beaker  glass  merk Pyrex,  Gelas  ukur  merk  Pyrex,  rotary vacuum evaporator, pisau, tangas air, kaca arloji, mortir dan stamfer, gelas ukur merk Pyrex, Kertas perkamen, timbangan, sudip, beaker glass merk pyrex, batang pengaduk,  lempengan  kaca,  pH  universal, anak  timbang,  objek  glass,  kertas  saring, sarung  tangan  hewan,  masker,  kandang tikus,  makanan  dan  minuman,  alat  cukur, surgical, pisau bedah, jangka sorong.

## Bahan
Serbuk  Bawang  Dayak,  tikus  putih jantan dengan berat 100g  –  200g  berumur 2  –  3  bulan,  Hcl  2N,  FeCl3  10%, Magnesium  P,  Krim  Hidrocortison  2,5%, PP,  KoH  0,1N,  Asam  stearat,  TEA, gliserin,  metil  paraben,  setil  alkohol, aquadest, etanol 96%, dan methanol.

## Determinasi Tanaman
Determinasi untuk mengetahui kebenaran dari sampel bawang dayak agar tidak  terjadi  kesalahan  pada  pengambilan sampel  dari  tanaman.  Sampel  bawang dayak  dideterminasikan  di  Balai  besar Penelitian  dan  Pengembangan  Obat  dan Obat  Tradisional  Karanganyar  dengan nomor determinasi yaitu
YK.01.03/2/552/2021.

## Pembuatan Simplisia
Bawang  dayak  disortasi  basah kemudian diiris kecil-kecil dan ditimbang. Bawang  dayak  kemudian  dikeringkan  dan diblender  selanjutnya  diayak  dengan ayakan nomor 40.
Preparasi Sampel Serbuk umbi bawang dayak diesktraksi  dengan  metode  maserasi selama 5 hari dan remaserasi selama 2 hari menggunakan  pelarut  yang  sesuai  yaitu etanol  96%.  Ekstraksi  maserasi  dan remaserasi  dilakukan  untuk  menyari senyawa  yang  berkhasiat  sebagai  anti- inflamasi  dengan  cara  direndam  selama beberapa hari dengan pelarut yang sesuai.

## Uji Kualitatif
Uji  kualitatif  dalam  penelitian  ini antara  lain  uji  tannin,  uji  saponin  dan  uji flavonoid.

## Uji Farmakologi
Uji  farmakologi  menggunakan  tikus berjumlah  20  ekor,  dengan  5  kelompok tiap  perlakuan  terdiri  dari  4  ekor  dan diberikan perlakuan :
Kelompok I :  Tikus  dilukai  dan  diberi basis krim Kelompok II :  Tikus  dilukai  dan diberi krim hidrokortison 2,5% Kelompok III :  Tikus  dilukai  dan diberi Krim Ekstrak Etanol Bawang Dayak 5% (KEEBD 5%) Kelompok IV :  Tikus  dilukai  dan diberi Krim Ekstrak Etanol Bawang Dayak 5% (KEEBD 10%) Kelompok V :  Tikus  dilukai  dan
diberi Krim Ekstrak Etanol Bawang Dayak 15% (KEEBD 15%)
Sehari  sebelum  dilakukan  sayatan, pada punggung hewan uji di cukur terlebih dahulu  bulunya  sampai  bersih.  Kemudian dibersihkan dengan etanol 70%, kemudian punggung  yang  akan  di  beri  luka  sayatan di  anestesi  dengan  dengan  etil  klorida semprot.  Selanjutnya  diberi  luka  sayatan dengan panjang 2 cm dan kedalaman luka 1,5  mm  dengan  pisau  bedah.  Kemudian luka  sayat  diberikan  perlakuan  dua  kali sehari.

## Pengamatan Luka Sayat
Pengamatan  luka  sayat  dilakukan pada  hari  ke-1  sampai  ke-14.  Pengukuran panjang  luka  sayat  menggunakan  jangka sorong.

## Analisis Data Penelitian
Data pengukuran panjang luka sayat setelah  pemberian  perlakuan  dinyatakan dalam  dx  (cm),  kemudian  dianalisa menggunakan  SPSS  metode one  way anova dengan  α  0,05  dengan  rumus  :  P%
= 𝑥 100% Dimana : P   = persentase penyembuhan luka d0 = panjang awal luka sayat dx = panjang luka sayat setelah pemberian perlakuan

## HASIL DAN PEMBAHASAN Determinasi Tanaman
Sebelum  penelitian  sampel  di determinasikan  terlebih  dahulu  di  Balai besar  Penelitian  dan  Pengembangan  Obat dan  Obat  Tradisional  (B2P2TOOT) Karanganyar.  Hasil  determinasi  sesuai dengan  surat  nomor  YK.01.03/2/552/2021 menyatakan bahwa tanaman yang dideterminasikan benar bawang dayak. Ekstraksi Bawang  dayak  yang  telah  dibuat serbuk
kemudian di ekstraksi menggunakan  metode  maserasi  selama  5 hari  dan  remaserasi  selama  2  hari menggunakan pelarut etanol 96%.
Didaptkan  Hasil  rendemen  sejumlah
6,48%. Uji Kualitatif Tabel 1. Hasil Uji Kualitatif No. Senyawa  Hasil Keterangan 1. Tanin + Perubahan warna menjadi hijau kehitaman 2. Saponin - Tidak
terbentuk buih 3. Flavonoi d + Terbentuk warna merah jingga Sumber : data yang diolah (2021) Ekstrak  etanol  bawang  dayak dinyatakan positif tannin dengan penambahan  FeCl 3 dengan  terbentuknya perubahan warna menjadi hijau kehitaman hal  ini  terjadi  karena  terbentuknya senyawa  kompleks  tannin  dengan  Fe 2+ yang  memberikan  perubahan  warna  hijau, merah,  ungu,  biru  dan  hitam  yang  kuat. Pada  pengujian  Saponin  ekstrak  etanol bawang dayak dengan penambahan air lalu di  lakukan  pengocokan  didapatkan  hasil negatif karena tidak terbentuknya buih, hal ini  dikarenakan  pada  saat  melakukan proses ekstraksi penarikan zat aktif belum tertarik secara sempurna.
Pada  pengujian  flavonoid  degan penambahan  serbuk  Mg  dan  Hcl  pekat didapatkan hasil positif dengan menunjukkan  hasil  terbentuknya  warna merah  jingga.  Hal  ini  dikarenakan penambahan Hcl pekat akan menghidrolisis  flavonoid  menghidrolisis flavonoid  menjadi  aglikonnya,  yaitu  O- glikosil. Glikosil mempunyai sifat elektrofilik  sehingga  tergantikan  oleh  H+ dari  asam.  Warna  merah  atau  coklat terbentuk  karena  reduksi  pada  flavonol, flavanon, flavanonol dan xanton menggunakan Mg dan HCl pekat Pengujian Farmakologi Dalam penelitian ini metode pengujian antiinflamasi menggunakan luka sayat  pada  tikus  putih  jantan Rattus norvegicus dengan  usia  2-3  bulan  dan bobot  100-200 gram.  Digunakan  sejumlah 20  ekor  hewan  uji  dibagi  menjadi  5 kelompok  dengan  tiap  perlakuan  berisi  4 ekor.  Sebelum  dilakukan  penujian  tikus diadaptasi  dalam  kandang  selama  7  hari,
hal  ini  agar  hewan  uji  dapat  beradaptasi dan tidak stress.
Sebelum dilakukan pengujian, sehari sebelumnya  pada  punggung  hewan  uji  di cukur  terlebih  dahulu  bulunya  sampai bersih.  Kemudian  dibersihkan  dengan etanol  70%,  kemudian  punggung  yang akan  di  beri  luka  sayatan  di  anestesi dengan  dengan  etil  klorida  semprot.
Selanjutnya  diberi  luka  sayatan  dengan panjang 2 cm dan kedalaman luka 1,5 mm dengan  pisau  bedah. Kemudian luka sayat diberikan perlakuan dua kali sehari
Pengamatan  luka  sayat  pada  hewan  uji dilihat dari kemampuan penutupan panjang  luka  sayat  pada  daerah  punggung tikus  putih  jantan  selama  14  hari,  dengan data pada table 2 sebagai berikut :
Tabel 2. P% LUKA SAYATAN No. KONTROL NEGATIF KONTROL POSITIF KEEBD 5% KEEBD 10% KEEBD 15% 1. 0% 0% 0% 0% 0% 2. 0% 4% 3,5% 5% 5,5% 3. 0% 6,5% 4,5% 9% 10,5% 4. 2,5% 10% 10,5% 19% 19% 5. 4,5% 16,5% 13,5% 20% 27% 6. 6,5% 21% 17,5% 24,5% 37% 7. 8% 27% 22% 30,5% 41,5% 8. 12% 33% 26,5% 39% 48% 9. 15,5% 37% 33,5% 42,5% 70,5% 10. 20% 45% 38,5% 45,5% 90% 11. 24% 48,5% 43,5% 51,5% 96,5% 12. 28% 61% 61% 74% 100% 13. 32% 66,5% 76% 84% 100% 14. 38,5% 71% 88,5% 94% 100%
Kemudian  dari  data  diperoleh  rata- rata  pengukuran  panjang  luka  sayat kemudian dihitung persentase dari penyembuhan  luka.  Didapatkan  hasil  grafik pada gambar 1 sebagai berikut :
Gambar 1. Hasil Persentase Penyembukan Luka Sayat Tikus (%)
Sumber : data yang diolah (2021)
Berdasarkan  hasil  grafik  tersebut, data persentase diambil pada hari ke-1, hari ke-4, hari ke-8 dan hari ke-12 karena untuk mengetahui  perubahan  panjang  luka  sayat pada  setiap  fase  penyembuhan  luka.  Fase penyembuhan luka ada 4 tahap yaitu :
1. Fase Hemostatis
Fase  ini  terdapat  respon  awal  dari pembuluh  darah  yaitu  vasokontriksi  dan hemostatis.  Fase  ini  terjadi  sekitar  5  –  10 menit awal dari terbentuknya luka. Fase ini akan terjadi peningkatan perlekatan platelet.  Platelet  ini  bertugas  mensekresi factor  yang  merangsang  pembekuan  darah. Trombosit kemudian beragregasi sepanjang endothelium pembuluh darah dan
fibrinogen  diubah  menjadi  monomer  fibrin sehingga  akan  membentuk  bekuan  darah yang  mencegah  kebocoran  pembuluh darah (4) .  Pada  fase  ini  belum  terjadi perubahan pada penyembuhan luka hari ke- 1  karena  hewan  uji  masih  mengalami vasodilatasi dan aliran  darah disekitar  luka masih keluar.

## 2. Fase Inflamasi
Fase  inflamasi  ditandai  dengan vasokontriksi  dan  agresi  platelet  untuk menginduksi  dari  pembekuan  darah  yang kemudian  mengalami  vasodilatasi  dan fogositosis  yang  menghasilkan  inflamasi pada luka sayatan (5) .
Kandungan  flavonoid  dalam  krim ekstrak  etanol  bawang  dayak  dapat berkhasiat sebagai antiinflamasi. Flavonoid menghambat  arakidonat  dan  sekresi  enzim lisosom  dari  membran  dengan  jalan memblock  jalur  siklooksiginase,  jalur lipooksiginase dan folipase A2. Terhambatnya  pelepasan  asam  arakhidonat pada  sel  radang  akan  menyebabkan berkurangnya  substrat  arakhidonat  bagi pada jalur siklooksiginase dan lipooksigenase menyebabkan produksi prostaglandin  dan  leukotriene  berkurang (6) . Penurunan  produksi  dari  prostaglandin dapat  mempersingkat  reaksi  radang  dan mempercepat penyembuhan dan
kolagenasi.
Pada  perlakuan  kelompok  1  pemberian basis krim pada fase inflamasi berlangsung paling  lama  diantara  4  kelompok  lainnya karena  tidak  adanya  kandungan  obat antiinflamasi  didalamnya.  Pada  perlakuan kelompok  2  pemberian  krim  hidrokostison 2,5%.  Hidrokortison  2,5%  merupakan kortikosteroid  ringan.  Mekanisme  kerjanya yaitu  dengan  cara  menghambat  jalur siklooksiginase dan juga jalur lipooksiginase (7) .

## 3. Fase Proliferasi
Pada kelompok perlakuan 3, 4 dan 5 persentase dari penyembuhan luka menunjukkan  perbedaan  yang  signifikan, hal  ini  dikarenakan  semakin  banyak kandungan  ekstrak  dalam  krim  maka semakin baik pula krim untuk menyembuhkan luka sayat. Flavonoid  pada  fase  proliferasi  dapat merangsang  makrofag  untuk  menghasilkan
0% 20% 40% 60% 80% 100% 120% ha ri ke -1 ha ri ke -4 ha ri ke -8 ha ri ke -1 2 PE RS EN Persentase penyembuhan luka (%) kontrol negatif kontrol positif KEEBD 5%
growth  factor dan  sitokin  sehingga  dapat mempercepat fase proliferasi dan
penyembuhan  luka.  Pada  fase  proliferasi, fibroblast  bermigrasi  menuju  daerah  luka dan  merangsang  sintesis  kolagen  secara bertahap.

## 4. Fase Maturasi
Kandungan  flavonoid  pada  krim ekstrak  etanol  bawang  dayak  dapat menekan pada fase inflamasi, mempercepat fase  poliferasi  sehingga  memaksimalkan fase  maturasi,  luka  mengalami  proses maturasi  yaitu  serat  kolagen  dan  elastin terus  menerus  disimpan  dan  dibentuk kembali  bersamaan  dengan  perubahan fibroblast  ke  miofibroblast.  Perubahan  dari fibroblast  menjadi  miofibroblast  akan menyebabkan kontraksi akan menyebabkan kontraksi  dan  peregangan  jaringan  luka untuk  memperkecil  luas  permukaan  luka hingga  jaringan  granulasi  berubah  menjadi jaringan bekas luka.
Uji  normality  dilakukan  untuk mengetahui  apakah  hasil  terdistribusi normal  sehingga  dapat  dilanjutkan  ke  uji
Anova (Tabel 3). Uji Normality menggunakan shpiro-wilk dikarenakan data
<100.  Berdasarkan  hasil  uji  normality didapatkan  sig  >0,05  sehingga  data terdistribusi normal.
Berdasarkan hasil uji anova didapatkan hasil sig 0,01>0,05 yang berarti terdapat  perbedaan  signifikan  antar  setiap kelompok  perlakuan.  Dilanjutkan  uji Post
Hoc  test untuk  mengetahui  apakah kelompok perlakuan memberikan pengaruh efek antiinflmasi yang signifikan.
Berdasarkan  hasil  output post  hoc test menunjukkan  nilai  signifikan  >  0,05 yang berarti tidak ada perbedaan signifikan atau tidak memberikan pengaruh satu sama lain.  Dari  tabel  diatas  untuk  pemberian kelompok  perlakuan  KEEBD  5%,  KEEBD 10%  dan  juga  KEEBD  15%  menunjukkan hasil    >  0,05  yang  berarti  tidak  ada perbedaan signifikan dengan control positif atau dengan kata lain pemberian kelompok perlakuan  sama-sama  memberikan  efek antiinflamasi  yang  sebanding  dengan  krim hidrokostison 2,5%.
Pada  kontrol  negatif  dan  kontrol positif bernilai sig > 0,05 yang berarti tidak berbeda  signifkan  atau  dengan  kata  lain sama  sama  dapat  memberikan  efek  anti- inflamasi, tetapi pada kontrol negatif hanya menggunakan  basis  cream,  dan  tidak mengandung  obat  yang  digunakan  sebagai anti  inflamasi  hal  ini  dikarenakan  adanya faktor  fisiologis  pada  hewan  uji  yg  tidak dapat  diprediksi,  antara  lain  hormon  pada hewan uji, dan infeksi luka pada hewan uji. Berdasarkan  hasil  dari  penyembuhan  luka sayat  pada  masing  –  masing  konsentrasi krim  ekstrak  etanol  bawang  dayak (KEEBD)  15%  memiliki  kemampuan antiinflamasi  pada  luka  sayatan.  Hasil tersebut  menunjukkan  semakin  besar konsentrasi ekstrak yang terkandung dalam sediaan maka semakin baik efek antiinflamasi yang dihasilkan.
Tabel 3. Hasil Uji ANOVA
ANOVA
rataratalukasayat
Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between Groups ,835 4 ,209 7,299 ,001 Within Groups ,572 20 ,029 Total 1,408 24

## SIMPULAN
Sediaan  krim  ekstrak  etanol  bawang dayak (Eleutherine  palmifolia  (L).  Merr) mempunyai  aktivitas  antiinflamasi  yang dapat mempercepat penyembuhan luka sayat pada  hari  ke-12  dengan  persentase  100%. Sediaan  krim  ekstrak  etanol  bawang  dayak (Eleutherine  palmifolia  (L).  Merr) pada formula  3  dengan  konsentrasi  15% mempunyai  aktivitas  antiinflamasi  yang paling  baik  untuk  menyembuhkan  luka sayatan.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Indrawati,  N,  L.,  dan  Razimin.,  2013. Bawang Dayak Si  Umbi Ajaib Penakluk Aneka Penyakit. Agromedia Pustaka : Halaman 27 2. Roji,  S.H.,  Slamet.,  dan  Laila  Kamilla., 2018,  Uji  Aktivitas  Anti  Inflamasi Ekstrak  Bawang  Dayak (Eleutherine Americana  L.  Merr) Terhadap  Stabilitas Membran  Sel  Darah  Merah, Jurnal Ilmiah, Jurusan  Analis  Kesehatan
Poltekkes Kemenkes Pontianak. 3. Husnani.,  dan  Fitri  Sri  Rizki.,  2019,
Formulasi  Krim  AntiJerawat  Ekstrak Etanol  Bawang  Dayak (Eleutherine palmifolio  (L)  Merr) , Jurnal  Ilmiah, Volume 16 No 1 halaman 8-14
4. Shai,  A.,  and  Maibach,  H.I.,  2005,
Wound  Healing  and  Ulcers  of  the  Skin: Diagnosis  and  Therapy  –  The  Practical Approach , 7-15, Springer Berlin Heidelberg, New York, 8-15. 5. Nagori,  B.D.,  dan  Solanki,  R.,  2011., Role  Of  Medicinal  Plants  In  Wound Healing., Research Journal Of Medicinal
Plant., Volume 5 Nomor 4
6. Pariyana.,  Mgs.  Irsan,  Saleh.,  Suryadi, Tjekyan., Hermansyah., 2016, Efektivitas Pemberian  Ekstrak  Daun  Binahong (Anredera ssCardifolia) Terhadap
Ketebalan  Jaringan  Granulasi  dan  Jarak Tepi  Luka  Pada  Penyembuhan  Luka Sayat  Tikus  Putih (Rattus  Norvegicus) , Jurnal  Kedokteran  dan  Kesehatan, Volume 3 Nomor 3
7. Katzung, B.G., 2002, Farmakologi dasar dan  Klinik. Ed  ke-1,  450-455,  Salemba
Medika, Jakarta.