Jurnal Pharmascience, Vol. 9, No. 2, Oktober 2022, hal: 248-257 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 https://ppjp.ulm.ac.id/journal/index.php/pharmascience Research Article

## Evaluasi Docking Molekular Potensi β-Sitosterol dari Kelakai (Stenochlaena palustris) sebagai Inhibi- tor Estrogen Receptor
Noer Komari 1 *, Tazkia Safarina 1 , Mirza Maulana Ahmad 1 , Nugi Maulana 1 , Eko Suhartono 2 , Samsul Hadi 3
1 Program Studi Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Lam- bung Mangkurat, Banjarbaru, Kalimantan Selatan, Indonesia
2 Bagian Biokimia/Kimia Kedokteran, Fakultas Kedokteran, Universitas Lambung Mangku- rat, Banjarmasin, Kalimantan Selatan, Indonesia
3 Program Studi Farmasi, Fakultas Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Univer- sitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru, Kalimantan Selatan, Indonesia
Email: nkomari@ulm.ac.id

## ABSTRAK
Tumbuhan  khas  rawa  Kalimantan  yang  banyak  dikaitkan  dengan  kesehatan adalah  Kelakai  (Stenochlaena  palustris).  Kelakai  mengandung  senyawa  kimia antioksidan,  antibakteri,  antijamur,  antianemia  dan  antiinflamasi.  β-sitosterol  adalah fitosterol penting di tumbuhan kelakai. β-sitosterol dikatakan mampu menekan pertum- buhan sel kanker payudara. Protein penting dalam perkembangan sel kanker payudara adalah Estrogen Receptor (ER) yang juga merupakan target protein untuk kerja obat. Penelitian ini bertujuan melihat potensi senyawa β-sitosterol sebagai inhibitor ER secara in  silico.  Energi  bebas  Gibbs  (ΔG),  koefisien  inhibisi  (Ki)  dan  interaksi  ligan  dengan residu  ER  dianalisis  sebagai  parameter  docking.  Sifat  farmakokinetik  β-sitosterol diprediksi menggunakan server web pkCSM dan SwissADME. Hasil molekular docking menunjukkan bahwa β-sitosterol membentuk kompleks dengan ER dengan energi bebas Gibbs  (ΔG)  =  -5,27  kkal/mol dan  raloxifene  =  -5,71  Kkal/mol. β-sitosterol  berinteraksi dengan residu Gln-441, Asn-439, Met-438, Ala-493, Leu-495, Arg-503, Gln-499, Gln-502, Gln-506 dan raloxifene berinteraksi dengan residu Phe-425, Met-421, Leu-428, Ile-424, Met-388, Leu-391, Leu-387, Phe-404, Met-502, Met 348, Leu-525, Leu-346, Asp-347, Glu- 348, Ala-350, Pro-515, Asp547, Trp-383, Met-383, Glu-524, Val-528, Trp-383, Asn-502, Pro-508,  Leu-589,  Val-524,  Val-327.  β-sitosterol  tidak  bersifat  hepatotoksik  dan  tidak menyebabkan  alergi  kulit.  Protein  ER  berinteraksi  stabil  dengan  β-sitosterol  dengan Sembilan  residu.  β-sitosterol  berpotensi  sebagai  kandidat  obat  antikanker  dengan menghambat pertumbuhan ER.
Kata kunci: Raloxifen, Kanker Payudara, In Silico, Target Protein, SwissADME

## ABSTRACT
A typical plant of the Borneo swamp that is widely associated with health is Kelakai (Stenochlaena palustris). Kelakai  contains  antioxidant,  antibacterial,  antifungal, antiane- mic and anti-inflammatory chemical compounds. β-sitosterol is an important phytosterol in Stenochlaena palustris. β-sitosterol is said to be able to suppress the growth of breast cancer cells. An important protein in the development of breast cancer cells is the Estrogen Receptor (ER) which is also a protein target for drug action. This study aims to see the potential of β- sitosterol compounds as ER inhibitors in silico. Gibbs free energy (ΔG), inhibition coeffi- cient (Ki) and ligand interaction with ER residues were analyzed as docking parameters. The pharmacokinetic  properties  of  β-sitosterol  were  predicted  using  pkCSM  and  SwissADME web servers. The  results  of  molecular  docking  showed  that β-sitosterol  formed a complex with ER with Gibbs free energy (ΔG) = -5.27 kcal/mol and raloxifene = -5.71 kcal/mol. β- sitosterol interacts with Gln-441, Asn-439, Met-438, Ala-493, Leu-495,  Arg-503, Gln-499, Gln-502,  Gln-506  residues  and  raloxifene  interacts  with  Phe-425,  Met-421,  Leu-428,  Ile- 424, Met-388, Leu-391, Leu-387, Phe-404, Met-502, Met 348, Leu-525, Leu-346, Asp-347, Glu-348  ,  Ala-350,  Pro-515,  Asp547,  Trp-383,  Met-383,  Glu-524,  Val-528,  Trp-383,  Asn- 502, Pro-508, Leu-589, Val-524, Val-327 residues. β-sitosterol is not hepatotoxic and does not cause skin allergies. The ER protein interacts stably with β-sitosterol with nine residues. β-sitosterol has potential as an anticancer drug candidate by inhibiting ER growth.
Key words: Raloxifene, Breast Cancer, In-Silico, Protein Target, SwissADME

## I. PENDAHULUAN
Kelakai  ( Stenochlaena  palustris ) adalah  tumbuhan  rawa  lahan  basah  di Kalimantan. Stenochlaena palustris adalah sejenis paku-pakuan anggota suku
Blechnaceae .  Kecambah  dan  daun  muda pakis  ini  banyak  dimanfaatkan  sebagai sayuran  di  berbagai  daerah  di  Pulau Kalimantan    bagian  tengah  dan  selatan (Nurinayah et  al .,  2016).  Kelakai  sering
dikaitkan  dengan  Kesehatan (Suhartono et
al .,  2012)  .  Ekstrak  etanol  daun  kelakai mempunyai  daya  hambat  terhadap  bakteri Salmonella  thypi  dan  Salmonella  ureus (Rostinawati et al ., 2018), bakteri Ralstonia solanacearum  dan  Strepcococcus  sobrinus (Egra et al. , 2019), dan bakteri
Porphyromonas  gingivalis  (Khotimah et
al .,  2020).  Ekstrak  kelakai  berpotensi sebagai  antioksidan  (Suhartono et  al.,
2012), mengatasi anemia (Cahaya & Aulia,
2016) dan menekan demam pada Marmota caligata (Suhartono, 2010). Ekstrak kelakai berpotensi  sebagai  pelindung  kulit  akibat paparan  sinar  UV  (Mashuri et  al. ,  2019) dan  agen  antiinflamasi  penyakit  malaria
(Margono et al., 2016).
Sebagai asupan ibu menyusui, daun kelakai  diduga  dapat  meningkatkan  dan mempercepat produksi ASI. Hal ini terkait dengan  kecukupan  zat  besi  pada  ibu  dan bayinya (Indrayanti et al ., 2016). Menyusui merupakan salah satu cara untuk mencegah kanker payudara. Perubahan hormonal ter- jadi  berupa  penurunan  hormon  estrogen selama menyusui. Estrogen memicu kanker
payudara.  Untuk  menyusui,  progesteron lebih  dominan  daripada  hormon  estrogen, sehingga  memungkinkan  wanita  terhindar dari  kanker  payudara  (Mashar  &  Annah, 2020).
Ekstraksi tumbuhan kelakai menghasilkan  beberapa  senyawa  kimia fenolik,  alkaloid,  flavanoid,  dan  terpenoid (Nurmilatina,  2017).  Beberapa  senyawa fitosterol  juga  ditemukan  pada  kelakai  (S. palustris)  antara  lain α-tocoferol,  campes- terol,  stigmasterol,  β- sitosterol dan  fucos- terol (Chear et  al .,  2016).  Senyawa  kimia tersebut  banyak  dikaji  sebagai  obat  anti kanker  (Marisa et  al .,  2021).  Kaemferol adalah  flavonoid  yang  dapat  menurunkan gangguan kanker (M. Calderon-Montano et
al., 2011). β- stosterol  adalah senyawa bi- oaktif  utama  sebagai  antikanker  kuat  ter- hadap banyak sel kanker manusia  (Rajavel et  al., 2018). β-sitosterol dan campesterol adalah fitosterol yang  mempengaruhi  per- tumbuhan  dan  metatesis  sel  kanker payudara (Awad et al. , 2003)  dan (Shahzad
et al. , 2017).
Beberapa penelitian telah mengkaji hubungan  antara  fitosterol,  termasuk β-si- tosterol dan risiko kanker, termasuk kanker payudara,  tetapi  hasilnya  tidak  konsisten.
Mekanismenya  juga  belum  diketahui dengan  jelas.  Oleh  karena  itu  senyawa fitosterol,  khususnya β- sitosterol  pada  ke- lakai  akan  dievaluasi  potensinya  sebagai obat  anti  kanker  pada  pertumbuhan  sel
kanker.  Kajian  dilakukan  secara  in  silico menggunakan  metoda  molecular docking .
Docking molekular  dapat  menjelaskan mekanisme  interaksi  antara  senyawa  me- tabolit sekunder dari tumbuhan dengan pro- tein  yang  berperan  pada  pertumbuhan  sel kanker. Kajian diarahkan pada interaksi β- sitosterol  dengan  residu  asam  amino  pada reseptor  estrogen,  teruatama  pada  jenis ikatan  dan  interaksinya.  Hasil docking molekular  dapat  digunakan  sebagai  acuan atau  dugaan  untuk  menentukan  potensi  β- sitosterol sebagai penghambat receptor es- trogen  dan  berperan  sebagai  obat  anti kanker payudara.

## II. METODE

## A. Preparasi Protein dan Ligan
Reseptor protein, yaitu estrogen re- septor  (ER)  diambil  dari  database  RCSB PDB (https://www.rcsb.org/) dengan  kode PDB:  7KBS.  Preparasi  protein  dilakukan dengan  program  Chimera  1.1.4  (Water- house et al. , 2009). Program ini digunakan untuk  menghilangkan  ligan  alami  dari struktur  protein.  Struktur  protein  keluaran diubah menjadi format pdb. Struktur ligan, yatitu  β-sitosterol  diambil  dari  database PubChem
(https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/) dengan  kode  PubChem  222284.  Ligan disiapkan  oleh  Chimera  1.14.  Ligan keluaran  dikonversi  ke  format  mol2 (Komari & Suhartono, 2021).

## B. Docking Molekul
Docking dilakukan  menggunakan
AutoDockTools  1.5.6  (Morris  &  Lim- Wilby, 2008). Ligan β-sitosterol ditambat- kan  pada  reseptor  protein.  File  keluaran docking dianalisis  menggunakan  BIOVIA
Discovery Studio (https://dis- cover.3ds.com/discovery-studio-visual- izer-download). Reseptor protein dan ligan divisualisasikan  untuk  menunjukkan  in- teraksi antara ligan dan residu asam amino.
Data yang akan ditampilkan  adalah energi bebas  Gibbs,  koefisien  inhibisi,  ikatan hidrogen  dan  interaksi  hidrofobik  antara ligan  dan  residu  asam  amino  dari  protein reseptor.  Hubungan  antara  energi  bebas Gibbs sebagai energi ikat dengan koefisien inhibisi  ln(1/Ki)  adalah  sebagai  korelasi linier  pada  pembentukan  kompleks  ligan- reseptor.  Hubungan  antara  energi  bebas Gibss sebagai energi ikat dengan konstanta inhibisi  dapat  digambarkan  dalam  rumus (1).

## ∆G= -RT ln IC50                       (1)
Dimana  ∆G  =  energi  bebas  Gibbs  (ebergi ikat), R = Tetapan  gas,  T  =  suku (K), dan IC50 = kontsntas inhibisi.
Senyawa  obat  yang  digunakan sebagai  pembanding  adalah  raloxifene, yang juga merupakan ligan alami.

## C. Analisis ADME
Senyawa β-sitosterol dipelajari sifat
ADME  (adsorpsi,  distribusi,  metabolisme dan ekskresi) untuk mengetahui potensinya sebagai obat anti kanker payudara. Analisis ADME  menggunakan  web  server  pkCSM (http://biosig.unimelb.edu.au/pkcsm/pre-
diction) dan SwissADME
(http://www.swissadme.ch/)  (Daina et  al .,
2017).  Web  server  tersebut  digunakan untuk memprediksi parameter farmakokinetik obat.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## A. Docking Molekular
Validasi docking dilakukan dengan docking kembali ( redocking ) dengan Auto-
DockTools  1.5.6  (Morris et  al., 2009).
Validasi  dilakukan  terhadap  ligan  alami yaitu  Raloxifene  (C28H27NO4S).  Hasil validasi  menunjukkan  nilai  RMSD  yang didapatkan sebesar 0 Å, yang menunjukkan posisi  atom-atom  pada  hasil  validasi  ini tidak  berbeda  dengan  posisi  ligan  alami semula.  Hasil  validasi  digunakan  untuk proses docking selanjutnya  dengan  β- sitosterol  sebagai ligan.  Hasil validasi  dan
docking molekular disajikan pada Tabel I.
Hasil  molekular  docking  pada Tabel I menunjukkan bahwa senyawa β-si- tosterol  memiliki  afinitas  yang  mendekati raloxifene sebagai pembanding. Harga en- ergi  bebas  Gibbs  (ΔG)  pada  β-sitosterol adalah  -5,27  kkal/mol  dan  nilai  Ki  (kon- stanta  inhibisi)  dan  137,32  μM.  Energi
bebas Gibbs (ΔG) pada raloxifene adalah - 5,71 kkal/mol dan nilai Ki (konstanta inhi- bisi)  adalah  64,89  μM.  Spontanitas  suatu reaksi  menunjukkan  bahwa  suatu    reaktan akan  bereaksi  sendiri  dan  memerlukan sumber  energi  eksternal  untuk  belang- sungnya reaksi. Tanda negatif  pada energi bebas  Gibbs  menandakan  bahwa  reaksi
akan  terjadi  dengan  sendirinya  pada keadaan standar suhu dan tekanan. Docking molekular  bertujuan  mencari  ligan  yang dapat berikatan dengan mudah dengan pro- tein target dengan pose terbaik. Kondisi ter- sebut  ditandai  adanya  nilai  Energi  Bebas Gibbs yang lebih negatif.
Tabel I. Hasil validasi dan docking molekular Parameter Hasil Reseptor PDB 7KBS PDB 7KBS Ligan Raloxifene β-sitosterol RMSD (Å) 0 -- ΔG (kcal/mol) -5.71 -5,27 Ki (μM) 64.89 137,32 Residu Phe-425, Met-421,  Leu-428, Ile-424, Met-388, Leu-391, Leu-387, Phe-404, Met-502, Met 348, Leu-525, Leu-346, Asp-347, Glu-348, Ala-350, Pro-515, Asp547, Trp-383, Met-383, Glu-524, Val- 528, Trp-383, Asn-502, Pro-508, Leu- 589, Val-524, Val-327 Gln-441, Asn-439, Met-438, Ala-493, Leu-495, Arg-503, Gln-499, Gln-502, Gln-506 Jumlah residu 27 9 Ikatan Hidrogen 5 0
Senyawa  β-sitosterol  berinteraksi dengan residu Gln-441, Asn-439, Met-438,
Ala-493,  Leu-495,  Arg-503,  Gln-499,  Gln 502,  Gln506  dan  raloxifene  berinteraksi dengan residu Phe-425, Met-421, Leu-428, Ile-424, Met-388,  Leu-391, Leu-387, Phe- 404, Met-502, Met 348, Leu-525, Leu-346, Asp-347,  Glu-348,  Ala-350,  Pro-515, Asp547, Trp-383, Met-383,  Glu-524, Val- 528, Trp-383, Asn-502, Pro-508, Leu-589,
Val-524,  Val-327. Terdapat 9  residu asam amino  yang  berikatan  dengan  β-sitosterol, dengan rincian 7 residu asam amino mem- bentuk ikatan Van der Waals dan 2 residu asam amino berikatan alkil. Tidak terdapat- nya  ikatan  hidrogen  antara  residu  asam amino  dengan  β-sitosterol  menunjukkan bahwa β-sitosterol tidak memiliki atom hi- drogen potensial positif atau atom yang po- tensial  negatif,  seperti  C,  O,  N,  S  atau  P.
Residu yang berinteraksi dapat dilihat pada
Gambar 1.
A B
Gambar 1. Visualisasi 3D dan 2D interaksi ligan dengan estrogen reseptor (ER): A. Raloxi- fene, B.  β-sitosterol

## B. Analisis ADME β-sitosterol
Penelitian ini menggunakan β-sitos-
terol dari tumbuhan kelakai. Hasil penelitian Chear et al . (2016) menunjukkan bahwa kelakai mengandung senyawa fitos- terol  antara  lain  α- tocopherol , Campes-
terol ,  stigmasterol,  β-sitosterol  dan fucos-
terol .  Senyawa  β-sitoterol  umumnya  di dapat  dari  daun  muda  tumbuhan  kelakai. Senyawa tersebut yang dijadikan sebagai li- gan  untuk  docking  molekular  dengan  pro- tein estrogen reseptor (ER). Rumus struktur
sitosterol seperti pada Gambar 2.
Gambar 2 . Struktur  β-sitosterol
Β-sitosterol  merupakan  salah  satu anggota golongan fitosterol yaitu stigmast-
5-ene  yang  tersubstitusi  oleh  gugus  β- hidroksi  pada  posisi  3.  Senyawa  tersebut berperan sebagai inhibitor sterol methyltransferase,  obat  antikolesteremia, antioksidan,  metabolit  tumbuhan  dan metabloit  pada  tikus.  Senyawa  tersebut adalah  3  beta-sterol,  sterol  stigmastan,  3
beta-hidroksi-Delta(5)-steroid dan menjadi anggota  fitosterol.  β-sitosterol  adalah turunan dari hidrida stigmastan https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compou nd/222284.  β-sitosterol  adalah  senyawa yang  ditemukan  di  banyak  tanaman.
Sejumlah sifat biomedis yang menarik telah dikaitkan dengan β-sitosterol, termasuk ak- tivitas anti-inflamasi. β-sitosterol memiliki kapasitas  anti-inflamasi  yang  kuat  untuk jenis  peradangan  akut  yang  spesifik  dan non-spesifik pada hewan pengerat
(Paniagua-Pérez et al ., 2017).
Senyawa β-sitosterol  dianalisis sifatnya  dengan  menentukan  karakteristik absorbsi,  distribusi,  metabolisme,  ekskresi
dan toksisitas (ADMET). Analisis karakteristik  tersebut  dapat  dilakukan secara  online  menggunakan  web  server
pkCSM (http://biosig.unimelb.edu.au/
pkcsm/prediction)    yang  meliputi  analisis Oral  Rat  Acute  Toxicity  (LD50),  Hepato- toxicity, Skin Sensitisation. Aanalisis Bio- availability menggunakan web server Swis- sADME (http://www.swissadme.ch/).
Prediksi ADME secara virtual menggunakan web server SwissADME dan pkCSM  dapat  dilakukan  dengan  mudah, murah dan cepat serta ketepatan yang san- gat baik.  Selain itu cukup banyak data yang dapat digali dari dua web server tersebut se- bagai  data  tambahan  penguatan  sifat  dan karakteristik senyawa  uji.  Tabel II menunjukan hasil analisis farmakotoksik β- sitosterol.
Tabel II. Sifat farmakokinetika β-sitosterol Parameter Hasil LD-50 (mol/Kg) 2,552 Hepatotoxicity No Skin Sentitisation No Bioavabilitas 0.55 Lepinski Yes
Analisis  toksisitas  dengan  pkCSM meliputi analisis LD50, Hepatotoxycity dan Skin  sensitisation.  Senyawa  β-sitosterol memiliki nilai LD-50 2,552 mol/Kg dengan kategori  toksik  level  IV  (cukup  toksik). Tabel  2  menunjukkan  bahwa  β-sitosterol
tidak bersifat hepatotoksik dan tidak  men- imbulkan  sifat  alergi  kulit  ( Skin  Sensitisa- tion ). Hepatotoxycity adalah  reaksi  yang disebabkan oleh akumulasi sifat obat yang berbahaya  di  dalam  hati  (Andrade et  al .,
2007).  Skin  sensitisation  adalah  efek samping  oleh  produk  yang  diaplikasikan secara  dermal  dan  dapat  menyebabkan alergi (Goebel et al. , 1970). Analisis bioa-
vailability  dan  uji  Lepinsky  menggunakan
SwissADME.  Senyawa  β-sitosterol  mem- iliki  nilai  bioavailabilitas  baik  yaitu  0,55. Nilai  bioavailability  lebih  dari  0,55 dikatakan  baik  karena  laju  dan  jumlah relatif obat yang mencapai sirkulasi di da- lam tubuh berjalan dengan baik (Le, 1989).
Senyawa  β-sitosterol  memenuhi  aturan
Lipinski sehingga berpotensi sebagai obat.
Analisis ADME memberi gambaran kemungkinan  sistesis  obat  yang  mirip dengan β-sitosterol dan turunannya.

## IV. KESIMPULAN
Senyawa  β-sitosterol  dari  kalakai berpotensi sebagai inhibitor reseptor estro- gen,  sehingga  diprediksi  dapat  digunakan sebagai  obat  anti  kanker  payudara  pada jalur penghambatan estrogen reseptor.

## KONFLIK KEPETINGAN
Seluruh penulis menyatakan bahwa tidak  ada  konflik  kepentingan  dalam penelitian ini.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  disampaikan kepada  Direktorat  Jenderal  Pembelajaran dan  Kemahasiswaan  Kementerian  Riset, Teknologi, dan  Pendidikan  Tinggi  Repub- lik  Indonesia  dalam  Program  Kreativitas Mahasiswa  tahun  2020  yang  mendanai riset.

## DAFTAR PUSTAKA
Andrade,  R.  J.,  Robles,  M.,  Fernández- Castañer,  A.,  López-Ortega,  S.,  Ló- pez-Vega,  M.  C.,  &  Lucena,  M.  I. (2007).  Assessment  of  drug-induced hepatotoxicity in clinical practice: A challenge  for  gastroenterologists.  In World  Journal  of  Gastroenterology (Vol. 13, Issue 3). https://doi.org/10.3748/wjg.v13.i3.3 29
Awad,  A.  B.,  Williams,  H.,  &  Fink,  C.  S. (2003). Effect of phytosterols on cho- lesterol metabolism and MAP kinase in MDA-MB-231 human breast can- cer cells. Journal of  Nutritional Bio- chemistry. https://doi.org/10.1016/S0955- 2863(02)00274-7 Cahaya,  N,  Aulia,  R,  N.  (2016).  EFEK DAUN  KELAKAI  (  Stenochlaena palustris  )  TERHADAP  JUMLAH ERITROSIT , BENTUK ERITROSIT DAN KADAR HEMOGLOBIN ( Hb ). Lahan Basah
ULMSeminar Nasional.
Chear, N. J. Y., Khaw, K. Y., Murugaiyah, V., & Lai, C. S. (2016). Cholinester- ase  inhibitory  activity  and  chemical constituents of Stenochlaena palustris fronds at two different stages of ma- turity.  Journal  of  Food  and  Drug Analysis. https://doi.org/10.1016/j.jfda.2015.1 2.005
Daina,  A.,  Michielin,  O.,  &  Zoete,  V.
(2017). SwissADME: A free web tool to  evaluate  pharmacokinetics,  drug- likeness  and  medicinal  chemistry friendliness  of  small molecules. Sci- entific
Reports. https://doi.org/10.1038/srep42717 Egra, S., -, M., Patriawan, R., -, K., Sirait, S.,  &  Kuspradini,  H.  (2019). Aktivitas Antimikroba Tanaman Paku  (Stenochlaena  palustris  dan Pteridium caudatum) Terhadap
Bakteri (Ralstonia solanacearum dan Streptococcus sobrinus). Jurnal Jamu Indonesia.
https://doi.org/10.29244/jji.v4i1.93 Goebel,  C.,  Diepgen,  T.  L.,  Krasteva,  M., Schlatter, H., Nicolas, J. F., Blömeke, B.,  Coenraads,  P.  J.,  Schnuch,  A., Taylor,  J.  S.,  Pungier,  J.,  Fautz,  R., Fuchs, A., Schuh, W., Gerberick, G. F., & Kimber, I. (1970). Quantitative risk assessment for skin sensitisation:
Consideration  of  a  simplified  ap- proach for hair dye ingredients. Reg- ulatory  Toxicology  and  Pharmacol- ogy, 64(3).
https://doi.org/10.1016/j.yrtph.2012.
10.004
Indrayanti,  A.  L.,  Hidayati,  N.,  &  Hanafi, N.  (2016).  Studi  Kasus  Analisis
Pendapatan  Usaha  Keripik  Kalakai Imur  di  Kota  Palangka  Raya.  Daun: Jurnal Ilmiah Pertanian Dan Kehutanan, 3(1 SE-Articles). https://doi.org/10.33084/daun.v3i1.1
54
Khotimah,  D.  K.,  Krishnawan  Firdaus,  I.
W.  A.,  &  Apriasari,  M.  L.  (2020).
THE  INHIBITORY  ACTIVITY  OF KELAKAI LEAF EXTRACT AGAINST THE GROWTH OF Por- phyromonas gingivalis ATCC®
33277TM. Dentino : Jurnal Kedokteran Gigi. https://doi.org/10.20527/dentino.v5i
2.8945
Komari, N., & Suhartono, E. (2021). Cad- mium  binding  to  antioxidant  en- zymes:  in  silico  study.  IOP  Confer- ence  Series:  Materials  Science  and
Engineering, 980,
012038. https://doi.org/10.1088/1757- 899x/980/1/012038 Le,  J.  (1989).  Drug  Bioavailability,  MSD
manual, Professional version.
https://www.msdmanuals.com/pro- fessional/clinical-pharmacol- ogy/pharmacokinetics/drug-bioavail- ability
M.  Calderon-Montano,  J.,  Burgos-Moron,
E.,  Perez-Guerrero,  C.,  &  Lopez- Lazaro, M. (2011). A Review on the Dietary Flavonoid Kaempferol. Mini- Reviews  in  Medicinal  Chemistry. https://doi.org/10.2174/1389557117 95305335 Margono, D., Suhartono, E., & Arwati, H. (2016).  PENGARUH  EKSTRAK KELAKAI  (Stenochlaena  palustris (Burm.f)  Bedd)  TERHADAP  KA- DAR  INTERLEUKIN-10  (IL-10) MENCIT. Medical Laboratory Tech- nology
Journal. https://doi.org/10.31964/mltj.v2i1.43
Marisa,  D.,  Hayatie,  L.,  Juliati,  S.,  Suhar- tono,  E.,  &  Komari,  N.  (2021).  Mo- lecular  docking  of  phytosterol  com- pounds  from  kelakai  (  Stenochlaena palustris ) as anti-breast cancer. Acta Biochimica Indonesiana, 4(2), 59–66. https://doi.org/https://doi.org/10.328 89/actabioina.59
Mashar, H. M., & Annah, I. (2020). Cyto- toxicity  of  Kelakai  (Stenochlaena palustris)  Extract  to  MCF-7  Breast Cancer  Cell.  Jurnal  Fitofarmaka  In- donesia.
https://doi.org/10.33096/jffi.v7i3.59 0
Mashuri,  M.,  Sihombing,  L.  D.  M., Alfaqihah,  S.,  Edyson,  E.,  &  Suhar- tono, E. (2019). Kelakai Extract Pro- tects  Skin  from  UV-Induced  Oxida- tive  Damage.  Journal  of  Physics: Conference
Series. https://doi.org/10.1088/1742- 6596/1374/1/012014 Morris,  G.  M.,  &  Lim-Wilby,  M.  (2008).
Molecular  docking. Methods  in  Mo- lecular
Biology.
https://doi.org/10.1007/978-1- 59745-177-2_19 Nurinayah,  M.  H.,  Soendjoto,  M.  A.,  & Darmono.  (2016).  Jenis  tumbuhan paku  di  Kawasan  Rawa  Sungai Lumbah,  Kabupaten  Barito  Kuala. Prosiding  Seminar  Nasional  Lahan Basah Tahun 2016, 1(1), 141–145.
Nurmilatina,  N.  (2017).  Analisis  Kompo- sisi  Kimia  Daun  Kelakai  (Sten- ochlaena  palustris  Bedd.)  dengan Berbagai Pelarut menggunakan
GCMS (Chemical Composition
Analysis  of  Stenochlaena  palustris Bedd. Leaves using Various Solvents on  GCMS).  Jurnal  Riset  Industri Hasil Hutan. https://doi.org/10.24111/jrihh.v9i1.2
952 Paniagua-Pérez, R., Flores-Mondragón, G., Reyes-Legorreta,  C.,  Herrera-López, B.,  Cervantes-Hernández,  I.,  Madri- gal-Santillán,  O.,  Morales-González, J. A., Álvarez-González, I., & Madri- gal-Bujaidar,  E.  (2017).  EVALUA- TION OF THE ANTI-INFLAMMA- TORY  CAPACITY  OF  BETA-SI- TOSTEROL IN RODENT ASSAYS. African Journal of Traditional, Com- plementary,  and  Alternative  Medi- cines :
AJTCAM, 14(1). https://doi.org/10.21010/ajtcam.v14i 1.13 Rajavel, T., Packiyaraj,
P., Suryanarayanan,  V.,  Singh,  S.  K., Ruckmani,  K.,  &  Pandima  Devi,  K. (2018).  β-Sitosterol targets Trx/Trx1 reductase  to  induce  apoptosis  in A549  cells  via  ROS  mediated  mito- chondrial dysregulation and p53 acti- vation. Scientific Reports, 8(1), 2071. https://doi.org/10.1038/s41598-018- 20311-6
Rostinawati, T., Suryana, S., Fajrin, M., & Nugrahani,  H.  (2018).  Aktivitas
Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun
Kelakai (Stenochlaena palustris (Burm.F) Bedd) Terhadap Salmonella typhi dan Staphylococcus aureus  dengan  Metode  Difusi  Agar CLSI M02-A11. Pharmauho : Majalah Farmasi, Sains, Dan Kesehatan.
Shahzad,  N.,  Khan,  W.,  MD,  S.,  Ali,  A., Saluja, S. S., Sharma, S., Al-Allaf, F. A., Abduljaleel, Z., Ibrahim, I. A. A., Abdel-Wahab, A. F., Afify, M. A., & Al-Ghamdi,  S.  S.  (2017).  Phytoster- ols as a natural anticancer agent: Cur- rent status and future perspective.  In Biomedicine  and  Pharmacotherapy. https://doi.org/10.1016/j.bio- pha.2017.01.068 Suhartono, E.  (2010).  Stenochlaena  palus- tris  aqueous  extract  reduces  hepatic peroxidative  stress  in  Marmota  ca- ligata  with  induced  fever.  Universa Medicina.
Suhartono,  E.,  Viani,  E.,  Rahmadhan,  M. A., Gultom, I. S., Rakhman, M. F., & Indrawardhana, D. (2012). Screening of  Medicinal  Plant  for  Total  Flavo- noid  and  Antioxidant  Activity  in South Kalimantan of Indonesian. In- ternational Journal of Chemical Engi- neering and
Applications.
https://doi.org/10.7763/ijcea.2012.v3
.203
Waterhouse,  A.,  Bertoni,  M.,  Bienert,  S.,
Studer, G., Tauriello, G., Gumienny, R.,  Heer,  F.  T.,  de  Beer,  T.  A.  P., Rempfer, C., Bordoli, L., Lepore, R.,
Schwede, T., Pollet, R. M., D’Agostino,  E.  H.,  Walton,  W.  G., Xu, Y., Little, M. S., Biernat, K. A., Pellock,  S.  J.,  …  Henrissat,  B. (2009).  UCSF  Chimera--a  visualiza- tion  system  for  exploratory  research and analysis. The Journal of Biologi- cal Chemistry.