## ISOLASI PROTEIN SELAMA PROSES PENGAMBILAN KITIN DARI KULIT UDANG
Kherliyanda Febriani, Fitri Hariani Nurza, Iriany Departemen Teknik Kimia, Fakultas Teknik, Universitas Sumatera Utara, Jl. Almamater Kampus USU, Medan 20155, Indonesia
Email : kherliyandafebriani@yahoo.com

## Abstrak
Udang  merupakan  salah  satu  komoditas  perikanan  Indonesia  yang  bernilai  ekonomis  tinggi . Produksi kulit udang ini biasanya berkisar 40-45% dari udang mentah. Kulit udang ini tersusun atas protein, kitin, mineral dan karoten, sehingga sangat potensial digunakan sebagai bahan baku isolasi protein. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui faktor-faktor yang berpengaruh dalam pengambilan kembali protein serta mengoptimasi kondisi proses deproteinasi untuk menghasilkan jumlah protein yang maksimal. Rancangan percobaan  ini  menggunakan response  surface  methodology melalui  2  tahapan  proses  yaitu  deproteinasi dan  ekstraksi  protein  menggunakan  kulit  udang  dan  pelarut  KOH  dengan  rasio  1:10  (w/v)  pada konsentrasi 1,3 M; 2 M; 3 M; 4 M; 4,7 M, suhu reaksi 37 o C; 40 o C; 45 o C; 50 o C; 53 o C dan waktu reaksi 40  menit;  60  menit;  90  menit;  120  menit;  140  menit.  Suhu  reaksi  merupakan  faktor  yang  sangat mempengaruhi  dalam  proses  pengambilan  kembali  protein.  Diperoleh  yield  protein  maksimum  sebesar 64,5826%  dengan  kadar  protein  sebesar  86,24%  pada  kondisi  proses  konsentrasi  KOH  2,98  M,  suhu reaksi 45,76 ºC dan waktu reaksi 90,51 menit. Potensi ekonomi dari pengambilan kembali protein selama proses isolasi kitin dari kulit udang sangat menguntungkan.
Kata kunci : kulit udang, response surface methodology , deproteinasi, protein, ekstraksi

## Abstract
Shrimp is one of the Indonesia fishery commodities with high economic value. The production of shrimp shells  is  usually  40-45%  from  crude  shrimp.  Shrimp  shell  contain  protein,  chitin,  minerals  and carotenoids.  It  is  very  potential  to  be  used  as  materials  for  isolation  of  protein.  This  experiment  is  to determine factors that effect protein recovery and optimize deproteination process conditions to produce high yield of protein. The design of experiment used response surface methodology. It is 2 steps consist of deproteination and protein extraction process using shrimp shells and KOH solution in comparison 1:10 (w/v). The concentration of KOH are 1,3 M; 2 M; 3 M; 4 M; 4,7 M. The reaction temperatures are 37 o C; 40 o C; 45 o C; 50 o C; 53 o C and the reaction times are 40 minutes, 60 minutes, 90 minutes, 120 minutes, 140  minutes.  Reaction  temperature  is  the  main  factor  influence  protein  recovery  process.  The  highest protein yield obtained is 64,5826 % with protein content is 86,24% using KOH solution 2,98 M, reaction temperature  45,76  ºC  and  reaction  time  90,51  minute.  Economic  potential  by  protein  recovery  during isolation of chitin from shrimp shells is profitable.
Keywords : shrimp shell, response surface methodology, deproteination, protein, extraction

## Pendahuluan
Total  produksi  penangkapan  dan  perikanan udang  dunia  menurut Food  and  Agriculture Organization pada tahun 2009 berkisar 6 juta ton pada  tahun  2006  dan  mempunyai  nilai  dagang yang  cukup  tinggi  dengan  persentase  16%  dari total  perdagangan  produk  perikanan  dunia [10,17].  Udang  juga  merupakan  salah  satu komoditas  sektor  perikanan  Indonesia  yang bernilai  ekonomis  tinggi  dengan  pangsa  pasar  di manca  negara  cukup  luas  dan  cenderung meningkat,  sehingga  pada  era  1980-an  udang pernah  menjadi  penyumbang  devisa  negara keempat  dari  sektor  non  migas  setelah  kayu, tekstil dan karet [16].
Menurut Kementerian Kelautan dan Perikanan pada tahun 2014, bahwa perkembangan produksi  udang  nasional  tahun  2010-2014
mengalami  kenaikan  rata-rata  sebesar  14,03% dengan  rincian  kenaikan  rata-rata  udang  windu 4,08% dan udang vaname 20,49% [6]. Kemudian, pemerintah  telah  menargetkan  produksi  udang sebesar  786.000  ton  pada  tahun  2015  dengan rincian  udang  windu  189.700  ton,  udang  vaname 518.600  ton  dan  jenis  udang  lain  sebesar  77.600 ton [12].
Data realisasi nilai ekspor  produk perikanan oleh  Kementerian  Kelautan  dan  Perikanan  pada tahun 2014 mencapai USD 4,64 miliar. Berdasarkan data ekspor tersebut, komoditas yang memberikan  kontribusi  nilai  tertinggi  adalah udang,  yakni  sebesar  45,4%  atau  setara  dengan USD  2,11  miliar.  Volume  ekspor  udang  tersebut mencapai  191.139  ton  atau  meningkat  dari pencapaian  tahun  2013  sebesar  165.000  ton  [6]. Jumlah limbah  ekspor ini sangatlah besar, karena normalnya  udang  dijual  tanpa  kepala  dan  kulit.
Produksi  kulit  udang  oleh  industri  pengolahan udang  ini  biasanya  berkisar  40-45%  dari  udang mentah,  itu  berarti  akan  tersedia  kulit  udang sebanyak  76.455  ton  apabila  kita  bandingkan dengan  volume  ekspor  pada  tahun  2014.  Kulit tersebut  akan  dibuang  begitu  saja  ke  lingkungan sehingga akan menyebabkan polusi yang berbahaya bagi lingkungan [13].
Kandungan yang terdapat dalam kulit udang tersusun  atas  protein  (35-40%),  kitin  (10-15%), mineral  (10-15%)  dan  karoten,  sehingga  kulit udang  sangat  berpotensi  sebagai  sumber  protein yang  baik.  Protein  tersebut  bisa  digunakan sebagai suplemen dalam makanan hewan dan juga suplemen diet bernilai tinggi bagi manusia [1,4].
Tujuan  utama  penelitian  ini  adalah  untuk mengkaji  faktor-faktor  yang  berpengaruh  dalam pengambilan  kembali  protein  dan  kadar  prorein yang  diperoleh  dari  kulit  udang.  Selain  itu  untuk mengoptimasi  kondisi  proses  deproteinasi  untuk menghasilkan jumlah protein yang maksimal.

## Metodologi Penelitian

## Alat dan Bahan
Bahan  baku  yang  digunakan  adalah  kulit udang  dan  larutan  KOH  dengan  perbandingan 1:10  (w/v),  sebagai  bahan  pembantu  digunakan HCl  1  N  dan  air.  Rangkaian  alat  utama  yang digunakan  ialah  alat  proses  deproteinasi,  filtrasi dan sentrifuge. Rangkaian peralatan yang digunakan dapat dilihat pada Gambar 1.
(a) (b)
Gambar 1. (a) Deproteinasi (b) Filtrasi

## Rancangan Percobaan
Penelitian  dilakukan  dengan  memvariasikan konsentrasi  KOH,  temperatur  dan  waktu  reaksi. Rasio bahan baku dan KOH yang digunakan 1:10 (w/v)  dengan  ukuran  partikel  sampel  50 mesh . Massa  kering  bahan  baku,  yaitu  100  gram. Dengan memasukkan nilai masing–masing variabel  di  atas  (nilai  terendah  dan  tertinggi) seperti  Tabel  1  pada Minitab  16  Statistical Software  (trial  version) ,  diperoleh central composite  design dengan  total  run  sebanyak  20, seperti yang terlihat pada Tabel 2.
Tabel 1.  Kode  Level  dan  Nilai  Level  Variabel Berubah
Variabel Berubah  (-α)  (-1) (0)  (+1)  (+α) X 1 1,3 2 3 4 4,7 X 2 37 40 45 50 53 X 3 40 60 90  120  140

## Prosedur Percobaan
Serbuk  kulit  udang  (disimbolkan  dengan huruf K) sebanyak 100 gram ditambahkan larutan KOH  (disimbolkan  dengan  huruf  C).  Campuran serbuk  kulit  udang  dan  KOH  dipanaskan  sambil diaduk.  Larutan  didinginkan  kemudian  disaring dan  dinetralkan  dengan aquadest sehingga diperoleh  padatan  dan  filtrat.  Filtrat  yang diperoleh  dicuci  dengan  air  lalu  ditambahkan larutan  HCl  1  N  agar  pH-nya  menjadi  4,5  yang merupakan  pH  isoelektrik  protein.  Kemudian campuran  tersebut  disentrifugasi  lalu  didekantasi sehingga  diperoleh  endapan  protein.  Endapan yang  diperoleh  disaring  menggunakan  kertas saring  Whatmann  No.1.  Endapan  tersebut  dicuci hingga pH kembali netral. Kemudian, dikeringkan menggunakan  oven  pada  suhu  40 o C.  Hasil  yang diperoleh dilakukan analisis  kadar air, kadar abu, kadar protein dan kadar pH.
Tabel 2. Central  Composite  Design Untuk  Isolasi Protein dari Kulit Udang
Run   K : C (w/v) Nomor Mesh Konsentrasi KOH (M) Suhu (ºC) Waktu (menit) 1 1:10 50
2 40 60 2 4 40 60 3 2 50 60 4 4 50 60 5 2 40 120 6 4 40 120 7 2 50 120 8 4 50 120 9 1,3 45 90 10 4,7 45 90 11 3 37 90 12 3 53 90 13 3 45 40 14 3 45 140 15 3 45 90 16 3 45 90 17 3 45 90 18 3 45 90 19 3 45 90 20 3 45 90

## Hasil Karakteristik Bahan Baku
Analisis  terhadap  bahan  baku  serbuk  kulit  udang berukuran  50  mesh,  meliputi  analisis  kadar  air, kadar abu dan kadar protein.  Hasil analisis bahan baku tersebut ditunjukkan pada tabel 3.
Tabel 3.  Hasil  Analisis  Karakteristik  Bahan  Baku Kulit Udang Parameter Hasil Analisis Kadar air 2,25% Kadar abu 3,78% Kadar Protein 30,20% Kadar pH 7 Kadar  air  pada  bahan  baku  cukup  rendah,  yaitu sebesar 2,25%. Kadar air yang tinggi mengakibatkan  mudahnya  bakteri,  kapang  dan khamir  untuk  berkembang  biak,  sehingga  akan terjadi  perubahan  pada  bahan  [11].  Selain  itu kadar  abu  bahan  baku  juga  cukup  rendah,  yaitu sebesar  3,78%  dimana  kadar  abu  yang  tinggi mempengaruhi  kelarutan  bahan  [14].  Kemudian juga  dilakukan  analisis  kadar  protein  untuk mengetahui  kadar  protein  bahan  baku  yang digunakan  dan  hasil  analisisnya  menunjukkan bahwa kadar protein pada bahan baku juga cukup tinggi, yaitu sebesar 30,20% sehingga bahan baku ini  cukup  potensial  digunakan  sebagai  sumber protein. Adapun  untuk kadar pH bahan baku dari kulit udang yang digunakan adalah 7 yang berarti kulit udang tersebut berada pada pH netral.

## Analisis Pengaruh Variabel
Tabel  4  menunjukkan  rancangan  percobaan yang  telah  dilakukan  sesuai  dengan  desain  tabel pengkodean percobaan.
Tabel 4.  Yield  Protein  dengan Central  Composite Design
Run  Konsentrasi
KOH (X 1 )
Suhu (X 2 ) Waktu (X 3 ) % Yield (Y) 1 2 40 60 34,24 2 4 40 60 34,77 3 2 50 60 55,56 4 4 50 60 29,27 5 2 40 120 33,44 6 4 40 120 32,25 7 2 50 120 32,72 8 4 50 120 57,69 9 1,3 45 90 46,02 10 4,7 45 90 42,91 11 3 37 90 46,75 12 3 53 90 40,13 13 3 45 40 35,43 14 3 45 140 37,42 15 3 45 90 64,44 16 3 45 90 64,42 17 3 45 90 64,40 18 3 45 90 64,41 19 3 45 90 64,40 20 3 45 90 64,39
Tabel  5  menunjukkan  pengaruh  linier, kuadratik  dan  interaksi  antara  faktor-faktor  yang
diamati  terhadap  parameter  respon.  Adapun  suku yang  terdiri  dari  satu  faktor  (X n )  menunjukkan efek  linier  sedangkan  suku  yang  terdiri  dari  dua faktor  (X n X n )  menunjukkan  efek  interaksi  antara ke  dua  faktor  (variabel).  Suku  yang  berpangkat dua  (X n 2 )  menunjukkan  efek  kuadratik  terhadap hasil. Nilai P dan T digunakan untuk  mengetahui signifikan atau tidaknya masing-masing suku dan interaksi  antara  faktor,  dengan  nilai  P  yang diinginkan <0,05. Semakin kecil nilai P, semakin signifikan  harga  koefesiennya  dan  semakin berperan terhadap hasil yang diperoleh. Sedangkan  nilai  T  menunjukkan  perbedaan  rata- rata  yang  signifikan  antara  satu  variabel  dengan variabel-variabel  lainnya.  Semakin  besar  nilai  T maka  semakin  signifikan  harga  koefisiennya  dan semakin berperan terhadap hasil penelitian.

## Tabel 5. Koefisien Regresi
Model Parameter Koefisien T-value P -value Intercept -651,399 21,869 0,000* X 1 25,6025 0,270 0,793 X 2 27,4965 1,101 0,297 X 3 1,09471 0,210 0,838 X 1 2 -7,32757 -3,849 0,003* X 2 2 -0,307599 -4,040 0,002* X 3 2 -0,0113002 -5,343 0,000* X 1 X 2 -0,0165000 -0,032 0,975 X 1 X 3 0,206417 2,424 0,036* X 2 X 3 0,00741667 0,435 0,672
*signifikansi pada nilai p ≤ 0,05
Hasil  komputasi  dengan  menggunakan perangkat  lunak Minitab dapat  dilihat  pada persamaan  (1)  yang  menggambarkan  hubungan antara  yield  protein  dengan  faktor  konsentrasi KOH,  suhu  dan  waktu  reaksi  dengan  R 2
(koefisien korelasi) = 85,20%.
Y yield =  –651,399  +  25,6025X 1 +  27,4965X 2 + 1,09471X 3 –  7,32757X 1 2 –  0,307599X 2 2 –  0,0113002X 3 2 –  0,0165000X 1 X 2 + 0,206417X 1 X 3 + 0,00741667X 2 X 3 ......(1)
Gambar  2.  Perbandingan  Yield  Protein  Hasil Percobaan dengan Yield Prediksi Model
10 20 30 40 50 60 70 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1011121314151617181920 Yield ( %) Run Percobaan yield -- yield perhitungan
Gambar  2  menunjukkan  perbandingan yield  protein  yang  dihasilkan  dari  percobaan dengan yield prediksi yang diperoleh menggunakan  persamaan  model  (1)  dengan  titik optimum  untuk  kondisi recovery  protein selama proses  isolasi  kitin  dari  kulit  udang,  yaitu konsentrasi  KOH  2,98  M,  suhu  reaksi  45,76  ºC dan  waktu  reaksi  90,51  menit.  Uji  validasi persamaan  model  (1)  dilakukan  pada  titik optimum,  dimana  yield  yang  diperoleh  pada  titik optimum  adalah  64,5826%  sedangkan  hasil perhitungan  model  sebesar  64,6139%.  Dengan demikian, diperoleh persen error rata-rata sebesar 0,0484%.

## Pengaruh  Variabel  Konsentrasi  KOH  dan Waktu Reaksi terhadap Yield Protein
Gambar  3  menampilkan  hubungan  antara konsentrasi KOH dan waktu reaksi terhadap yield protein yang diperoleh.
Yield :

## Hot Values : Suhu 45
Gambar  3.  Interaksi  antara  Konsentrasi  KOH  dan Waktu Reaksi dengan Yield Protein
Zona  kondisi  operasi  optimum  berdasarkan gambar  3  di  atas,  yaitu  pada  penggunaan konsentrasi KOH 2,25 M – 3,75 M dengan waktu reaksi  antara  70  menit  –  110  menit  akan menghasilkan  yield  protein  60%  –  70%. Berdasarkan grafik tersebut maka pada temperatur  yang  tetap,  peningkatan  konsentrasi KOH dan waktu reaksi akan meningkatkan persen yield  protein  yang  dihasilkan  sampai  mencapai kondisi  operasi  optimum,  kemudian yield menurun.
Pengambilan kembali protein ( protein recovery )  dari  kulit  udang  yang  telah  dilakukan oleh Benhabiles, dkk., menjelaskan bahwa derajat pengambilan  kembali  protein  yang  dihasilkan ditentukan  oleh  beberapa  hal,  yaitu  konsentrasi, suhu, lama proses dan perbandingan rasio padatan dengan  pelarut.  Berdasarkan  penelitian  tersebut
maka  penggunaan  KOH  pada  konsentrasi  dan waktu  yang  optimum  menghasilkan  yield  protein yang lebih baik [10,15].
Kemudian  dengan  bertambahnya  waktu reaksi,  maka  kontak  antara solute dan solvent semakin  lama  semakin  meningkat,  sehingga banyak solute yang terambil, hal ini menyebabkan kadar protein meningkat [7].

## Pengaruh  Variabel  Konsentrasi  KOH  dan Temperatur terhadap Yield Protein
Gambar  4  menunjukkan  hubungan  antara konsentrasi  KOH  dan  temperatur  reaksi  terhadap yield protein yang diperoleh.
Yield :

## Hot Values : Waktu 90
Gambar  4.  Interaksi  antara  Konsentrasi  KOH  dan Temperatur Reaksi dengan Yield Protein
Zona  kondisi  operasi  optimum  berdasarkan gambar  4  di  atas,  yaitu  pada  penggunaan konsentrasi  KOH  2,25  M  -  3,75  M  dengan  suhu reaksi  43 o C  -  49 o C  akan  menghasilkan  persen yield  protein  60%  -  70%.  Berdasarkan  grafik  di atas  maka  pada  waktu  yang  tetap,  peningkatan konsentrasi KOH dan suhu reaksi akan meningkatkan persen yield protein yang dihasilkan  sampai  mencapai  kondisi  operasi optimum, kemudian yield menurun.
Dari  hasil  analisis  yang  diperoleh  bahwa variabel  suhu  reaksi  memiliki  pengaruh  dengan nilai  positif  yang  lebih  besar  dibandingkan variabel  lainnya,  yaitu  27,4965.  Hal  ini  sesuai dengan  sifat  fisik  protein  bahwa  protein  akan mengalami  denaturasi  atau  perubahan  struktur sekunder,  tersier  dan  kuartener  karena  panas biasanya  terjadi  pada  suhu  50 o C  –  80 o C  [5]. Pengambilan  kembali  protein  ( protein  recovery ) dari  kulit  udang  yang  telah  dilakukan  oleh Benhabiles,  dkk.,  ,menunjukkan  bahwa  pada proses  deproteinasi  dengan  penggunaan  KOH pada  konsentrasi  dan  waktu  yang  optimum menghasilkan  yield  protein  yang  lebih  baik [3,10].  Sehingga  protein  yang  diperoleh  akan lebih tinggi menggunakan KOH.
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, yield terus meningkat hingga konsentrasi 4 M dan temperatur  reaksi  50 o C  kemudian  akan  menurun pada temperatur reaksi di atas 50 o C, hal ini dapat dikarenakan  rantai  polimer  protein  akan  rusak pada  temperatur  yang  lebih  tinggi  sehingga menyebabkan  penurunan  protein  [9].  Kelarutan protein  juga  efektif  pada  suhu  di  bawah  60 o C karena  suhu  reaksi  di  atas  60 o C  akan menyebabkan  ikatan  struktur  protein  mengalami denaturasi  sehingga  protein  yang  tertinggal  di dalam  serbuk  kulit  udang  akan  semakin  banyak dan kelarutan protein dalam larutan akan menurun [7].  Sehingga,  filtrat  yang  diperoleh  setelah deproteinasi  memiliki  kandungan  protein  yang rendah.

## Pengaruh  Variabel  Waktu  Reaksi  dan Temperatur terhadap Yield Protein
Gambar  5  menampilkan  hubungan  antara waktu  dan  temperatur  reaksi  terhadap  yield protein yang diperoleh.
Yield :

## Hot Values : Konsentrasi 3
Gambar  5.  Interaksi  antara  Waktu  Reaksi  dan Suhu Reaksi dengan Yield Protein : (a) Permukaan Respon ; (b) Plot Kontur
Zona  kondisi  operasi  optimum  berdasarkan gambar  5  di  atas,  yaitu  pada    waktu  70  menit  - 110 menit dengan temperatur reaksi 43 o C - 50 o C akan  menghasilkan  persen  yield  protein  60%  - 70%. Sehingga pada waktu yang tetap, peningkatan  waktu  reaksi  dan  suhu  reaksi  akan meningkatkan persen yield protein yang dihasilkan  sampai  mencapai  kondisi  operasi optimum, kemudian yield menurun.
Dari  hasil  analisis  yang  telah  dilakukan bahwa  suhu  merupakan  variabel  yang  sangat berpengaruh  seperti yang  telah  dijelaskan sebelumnya.  Selain  suhu  dapat  dilihat  bahwa waktu juga mempunyai pengaruh signifikan yang cukup  besar  terhadap  persen  yield  yang dihasilkan.  Semakin  meningkatnya  waktu  reaksi,
maka  akan  semakin  meningkatkan  kelarutan protein  dan  semakin  banyak  protein  yang terambil.  Hubungan  waktu  reaksi  terhadap  hasil protein yang diperoleh dibandingkan dengan hasil penelitian  lainnya  sudah  dijelaskan  sebelumnya begitu  pula  dengan  hubungan  suhu  reaksi. Berdasarkan  penelitian  tersebut  juga  diperoleh hasil  yang  sama  bahwa  yield  akan  terus meningkat  seiring  bertambahnya  waktu  dan  juga suhu reaksi, kemudian menurun. Selain itu waktu reaksi yang lebih lama akan menghasilkan protein dengan viskositas dan berat molekul yang rendah [15].

## Karakteristik Protein
Protein  yang  diperoleh  dapat  digunakan sebagai  bahan  pakan  yang  cukup  baik.  Adapun perbandingan  parameter  standar  mutu  protein sebagai  bahan  pakan  dengan  hasil  penelitian ditunjukkan pada tabel 6.
Tabel 6.  Perbandingan  Standar  Mutu Protein sebagai  Bahan  Pakan  dengan  Hasil Penelitian Parameter Standar Mutu Protein Hasil Penelitian Kadar air 10% 1,31% Kadar abu 40% 86,24% Kadar protein 9% 1,96% Kadar pH 7 7
Pada tabel 6 terlihat bahwa kadar air protein yang  diperoleh  telah  memenuhi  standar  mutu protein  sebagai  pakan,  dimana  kadar  air  yang diperoleh sebesar 1,31% kurang dari 10%. Kadar abu  yang  diperoleh  sebesar  1,96%  yang  telah memenuhi standar mutu kadar abu protein sebagai bahan pakan, yaitu maksimal 9%.

## Gambar 6. Protein Kulit Udang
Kadar  protein  merupakan  parameter  untuk menentukan  tingkat  kemurnian  protein.  Kadar protein  menentukan  kandungan  protein  yang terdapat  dalam  suatu  bahan  [8].  Tabel  6 menunjukkan  kadar  protein  yang  diperoleh sebesar 86,24% dan telah memenuhi standar mutu protein  sebagai  bahan  pakan,  yaitu  sekurang- kurangnya  adalah  40%.  Kadar  pH  merupakan
parameter  yang  menunjukkan  tingkat  keasaman dan  kebasaan  suatu  bahan.  Oleh  karena  itu  hasil protein  yang  diperoleh  harus  dipastikan  memiliki pH  netral  mengingat  penggunaannya  di  bidang pakan.

## Kesimpulan
Kondisi optimum untuk proses pengambilan protein selama proses isolasi kitin dari kulit udang adalah konsentrasi KOH (X 1 ) 2,98 M, suhu reaksi (X 2 ) 45,76 o C dan waktu reaksi (X 3 ) selama 90,51 menit  dengan  yield  tertinggi  sebesar  64,5826%. Protein  yang  telah  diperoleh  memenuhi  Standar Nasional  Indonesia  (SNI)  mutu  protein  sebagai pakan  ternak  dengan  kadar  protein  sebesar 86,24%.

## Daftar Pustaka
[1]  A.E.El-Beltagy  and  S. M.  El-Sayed, Functional  and  Nutritional  Characteristic  of Protein  Recovered  During  Isolation  of Chitin  from  Shrimp  Waste,  International Journal of Food and Bioproducts Processing, 90, (2012) 635-638.
[2]   Agung  Marssada  Biorata,  Optimasi  Produk Selulase  dari Bacillus  sp. BPPT  CC  RK  2 Menggunakan  Metode  Respon  Permukaan dengan  Rasio  C/N  dan  Waktu  Fermentasi, Skripsi, Fakultas Teknik, Universitas Indonesia, Depok, 2012.
[3]   Azhar,  Minda,  Jon  Efendi,  Erda  Syofyeni, Rafni  Marfa  Lesi  dan  Sri  Novalina, Pengaruh  Konsentrasi  NaOH  dan  KOH terhadap  Derajat  Deasetilasi  Kitin  dari Limbah  Kulit  Udang,  Jurnal  Eksakta,  1, (2010).
[4]   D.  Ramyadevi,  Subathira  A.  and  Saravanan S.,  Potential  Recovery  from  Shrimp  Waste in  Aqueous  Two  Phase  System,  Research Journal of Chemical Sciences, 2, (2012) 47- 52.
[5]  Ichda  Chayati  dan  Andian  Ari  A.,  Bahan Ajar  Kimia  Pangan,  Universitas  Negeri Yogyakarta, Yogyakarta, 2008.
[6]  Kementerian Kelautan dan Perikanan
Republik Indonesia, Laporan Kinerja Kementerian Kelautan dan Perikanan Tahun 2014, Jakarta, 2014, www.kkp.go.id, diakses pada 30 Maret 2016.
[7]  Lucky  Indrati  Utami,  Isolasi  Protein  dari Ampas  Kecap  dengan  Cara  Ekstraksi  Soda ( Insulation  of  Protein  from  Dregs  Taste  by Extraction  Soda ),  Skripsi,  UPN  Veteran, Jawa Timur, 2009.
[8]  Meirinda Hermiastuti, Analisis Kadar
Protein  dan  Identifikasi  Asam  Amino  pada Ikan  Patin  ( Pangasius  djambal ),  Skripsi, Universitas Jember, Jember, 2013.
[9]  Mini  Bajaj,  Josef  Winter  and  Claudia Gallert,  Effect  of  Deproteination  and Deacetylation  Condisions  on  Viscosity  of Chitin and Chitosan Extracted from Crangon crangon Shrimp Waste, Biocheimcal Engineering Journal , 56,
(2011) 51 – 62.
[10]  M. S. Benhabiles, N. Abdi, N. Drouiche, H. Lounici,  A.  Pauss,  M.  F.  A.  Goosen  and  N. Mameri,  Protein Recovery by Ultrafiltration During  Isolation  of  Chitosan  from  Shrimp Shells
Parapenaeus
longirostris , International Journal of Food Hydrocolloids, 32, (2012) 28-34.
[11]  Nurjana Ahmad, Kajian Terhadap Kadar Air Tepung  Jagung  dan  Tepung  Karaginan sebagai  Bahan  Baku  Puding  Jagung, Unspecified  Thesis,  Universitas  Negeri Gorontalo, Gorontalo, 2014.
[12]  Pusat Kajian Sumberdaya Pesisir dan Lautan Institut  Pertanian  Bogor,  Menuju  Produksi Udang Nomor Satu, Bogor, 2015, www.pkspl.ipb.ac.id, diakses pada 30 Maret 2016.
[13]  Rokshana  Naznin,  Extraction  of  Chitin  and Chitosan from Shrimp ( Metapenaeus Monoceros) Shell  by  Chemical  Method, Pakistan  Journal  of  Biological  Sciences , 8,
(2005) 1051-1054.
[14]  Sri  M.  F.  Mulyaningsih,  Rudi  Firyanto, Ahmad  Shobib  dan  Nofrin  Susilowati, Prosiding  SENATEK,  ISBN  :  978  –  602  – 1435  –  0  –  2,  Universitas  Muhammadiyah, Purwokerto, 2015.
[15]  Sun-Ok Fernandez B. S. Kim, Physicochemical  and  Functional  Properties of  Crawfish  Chitosan  as  Affected  by Different  Processing  Protocols,  Thesis, Seoul National University, Seoul, 2004.
[16]  Yudhi Soetrisno Garno,Pengembangan Budidaya Udang dan Potensi
Pencemerannya pada Perairan Pesisir, Jurnal Lingkungan  P3TL-BPPT5,  3,  (2004)  187- 192.
[17]  Z.  Randriamahatody.,  K.  S.  B.  Sylla,  H.  T. M. Nguyen, C. Donnay-Moreno, L. Razanamparany,  N.  Bourgougnon  and  J.  P. Berge,  Proteolysis  of  Shrimp  By-Products ( Paneus monodon ) from Madagascar, CyTA–Journal of Food, 11, (2011) 220-228.