Versi Online:
Pro Food (Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan)
http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood

## EFEKTIVITAS BUBUK KOPI ROBUSTA FUNGSIONAL DIFORTIFIKASI BUBUK DAUN KERSEN TERHADAP PENURUNAN KADAR GULA DARAH MENCIT DIABETES
[The Effectiveness of Functional Robusta Coffee Powder Fortified by Muntingia calabura L. Leaves Powder to Lower Blood Glucose Level in Diabetic Mice]
Imam Adriansyah * , Dody Handito dan Rucitra Widyasari Program Studi Ilmu dan Teknologi Pangan, Fakultas Teknologi Pangan dan Agroindustri, Universitas Mataram *Email: Adriansyah.imam555@gmail.com
Diterima 28 Desember 2020 / Disetujui 06 Juli 2020

## ABSTRACT
The  aim  of  this  present  study  was  to  determine  the  effectiveness  of  fucntional  Robusta  coffee powder fortified by Muntingia calabura L. leaves to lower blood glucose level in diabetic mice according to the antioxidant  activity  and  total  phenolic  content,  and  the  effectivness  of  the  chosen  ratio  of  the  antidiabetic functional coffee beverage  to the  body  weight  and  blood  glucose  level  in  diabetic  mice.  This research  was conducted in two stages. First, determining the best ratio of the antidiabetic functional coffee beverage using randomized complete design. Second, testing the best ratio to the speciment using the randomized post test- only  control  group  design  to  perform  the  chosen  ratio  of  the  antidiabetic  functional  coffee  beverage  to diabetic mice in seven days treatment. The results showed that the best ratio of the antidiabetic functional coffee beverage was 25% robusta coffee powder and 75% Muntingia calabura L. leaves powder with 88.26% antioxidant  activity  and  1.05  mg  GAE/g  sample,  and  the  chosen  ratio  of  the  antidiabetic  functional  coffee beverage proved the activity to reduce the blood glucose level in diabetic mice with the decrease level was 266 mg/dl or 45% effective to reduced the blood glucose level in diabetic mice. This blood glucose reduced activity was not significant to the positive control group given glibenclamid, but it was found significant to the negative control group that given aquades per oral. While the body weight of the diabetic mice given aquades only decreased twice higher than positive control group and antidiabetic functional coffee beverage group.
Keywords : blood glucose level, diabetic, Muntingia calabura L. leaves, robusta coffee

## ABSTRAK
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  menentukan  rasio  terbaik  antara  bubuk  kopi  robusta  dan bubuk  daun  kersen  sebagai  minuman  fungsional  yang  difortifikasi  bubuk  daun  kersen terhadap  penurunan kadar  gula  darah  mencit  diabetes,  yang  ditinjau  dari  aktivitas  antioksidan  dan  kadar  fenolik  total,  serta pengaruh rasio terpilih terhadap berat badan dan penurunan kadar gula darah mencit diabetes. Penelitian ini dilakukan  dalam  dua  tahap,  yang  pertama  yaitu  penentuan  rasio  terbaik  antara  bubuk  kopi  robusta  dan bubuk daun kersen menggunakan metode rancangan acak lengkap (RAL) dengan faktor tunggal berupa rasio bubuk  kopi  robusta  dan  bubuk  daun  kersen.  Kedua,  yaitu  pengujian  rasio  terbaik  pada  hewan  percobaan menggunakan metode rancangan acak dengan tes akhir dan kelompok kontrol dengan parameter kadar gula darah dan berat badan mencit selama tujuh hari perlakuan. Hasil dari penelitian ini adalah rasio terbaik dari kopi  fungsional  antidiabetes  diperoleh  dari  rasio  25%  bubuk  kopi  robusta  dan  75%  bubuk  daun  kersen dengan  aktivitas  antioksidan  sebesar  88,26%  dan  kadar  fenolik  total  sebesar  1,05  mg  GAE/g  bahan. Berdasarkan  uji in vivo,  produk  kopi  fungsional  antidiabetes  mampu  menurunkan  kadar  gula  darah mencit diabetes  sebesar  266  mg/dl  atau  sekitar  45%,  tidak  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  kontrol  positif  yang diberikan obat glibenklamid dengan penurunan sebesar 268 mg/dl atau sekitar 47%, namun berbeda nyata dengan kelompok perlakuan kontrol negaif menggunakan aquades yang mengalami peningkatan kadar gula darah  sebsar  4,2%.  Sedangkan  untuk  parameter  berat  badan,  bahwa  penurunan  berat  badan  mencit kelompok  perlakuan  kontrol  negatif  menggunakan  aquades  mengalami  penurunan  dua  kali  lebih  besar dibandingkan kelompok kontrol positif dan kelompok produk kopi fungsional.
Kata kunci : daun kersen, diabetes, kadar gula darah, kopi robusta

## PENDAHULUAN
Berdasarkan data yang diperoleh dari 130  negara  di  dunia,  terdapat  382 juta  jiwa menderita  diabetes  selama  tahun  2013  dan diperkirakan jumlah ini akan terus meningkat
hingga  592  juta  jiwa  pada  tahun  2035. Sebagian  besar  penderita  diabetes  tersebut berasal  dari  negara  berpenghasilan  rendah dan  menengah  (Guariguata dkk.,  2014).  Di Indonesia,  data  Riset  Kesehatan  Dasar
Versi Online:
Pro Food (Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan)
http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood
(Riskesdas)  2013  menunjukkan  prevalensi diabetes  sekitar  6,9  persen,  meningkat  dari data  Riskesdas  2007  yang  mencatat  5,7 persen. Kementerian
Kesehatan memperkirakan  hanya  30  persen  pasien diabetes yang terdiagnosis (Badan Penelitian dan  Pengembangan  Kesehatan,  2013). Penanganan  penyakit  diabetes  umumnya menggunakan  obat-obatan  sintetis  seperti glibenklamid,  metformin,  maupun  kombinasi keduanya  (Harfina dkk,  2012).  Namun, penggunaan  obat  sintetis  memiliki  efek samping  terhadap  tubuh  yang  lebih  besar dibandingkan  dengan  obat  tradisional  (Sari, 2006).
Salah  satu  upaya preventif  dan treatment  untuk  mengurangi  resiko  dan komplikasi  diabetes  dengan  efek  samping yang  jauh  lebih  rendah  adalah  melalui konsumsi  pangan  fungsional.  Hal  ini  senada dengan  yang  dinyatakan  oleh  Sani dkk.,
(2014)  bahwa  konsumsi  pangan  fungsional akan  dirasa  lebih  tepat  di  mana  selain  kita bisa  mendapatkan  zat  gizi,  kita  juga  bisa mendapatkan senyawa bioaktif yang bersifat alami dari bahan pangan fungsional tersebut. Beberapa bahan alami yang dapat dikembangkan  sebagai  pangan  fungsional penurun  kadar  gula  darah  dan  ditemukan dalam  jumlah  yang  banyak  adalah  daun kersen ( Muntingia calabura) dan kopi robusta ( Coffea canephora).
Kopi memiliki kandungan antioksidan yang  cukup  baik.  Selain  sebagai  sumber utama  kafein,  kopi  juga  mengandung beberapa  senyawa  terutama  fenol,  vitamin B3,  magnesium,  potasium  dan  serat (Castelnuovo dkk.,  2012).  Hasil  penelitian Paynter  (2006)  menyatakan  bahwa  apabila seseorang  meminum  kopi  sebanyak  4  gelas perhari,  maka  akan  memiliki  resiko  terkena diabetes  sebesar  23%  lebih  rendah dibandingkan  dengan  seseorang  yang  tidak meminum  kopi.  Hal  ini  disebabkan  oleh adanya  kandungan  asam  klorogenat  yang terdapat dalam biji kopi yang diduga memiliki potensi  untuk  menghambat  enzim  α- glukosidase.  Menurut  Clarke  dan  Macrae (1987) kandungan asam klorogenat pada biji
kopi  robusta  lebih  tinggi  dibandingkan  biji kopi arabika, yaitu 7,0-10,0  berbanding  5,5- 8,0. Selain itu, menurut Chandra dkk. (2012), masyarakat  Indonesia  lebih  menyukai  untuk mengonsumsi  kopi  jenis  robusta  dibanding arabika  karena  harganya  yang  relatif  lebih murah  dan  rasanya  yang  khas.  Oleh  karena itu, dalam penelitian ini digunakan kopi jenis robusta.
Daun kersen juga memiliki kandungan  antioksidan  yang  cukup  baik dengan nilai IC 50 sebesar 22 µg/ml (Siddiqua dkk.,  2010)  dan  telah  digunakan  sebagai obat  antidiabetes  oleh  masyarakat  Lombok secara  turun-temurun  dari  generasi  ke generasi.  Menurut  Kuntorini dkk.,  (2013) Daun kersen mengandung senyawa flavonoid,  saponin,  polifenol  dan  tannin sehingga dapat digunakan sebagai antioksidan.  Aktivitas  antioksidan  pada  daun kersen  tua  lebih  kuat  dengan  nilai  IC 50 sebesar  18,214  ppm  dibandingkan  dengan aktivitas antioksidan pada daun kersen muda dengan  nilai  IC 50 sebesar  21,786  ppm.
Sedangkan,  Kadar  fenolat  total  dari  ekstrak air daun kersen menurut penelitian  Marjoni dkk . (2015) adalah sebesar 2,86 mg/50 g. Pemanfaatan  daun  kersen  sebagai minuman  obat  antidiabetes  oleh  masyarakat dilakukan dengan cara merebus daun kersen kemudian  air  hasil  rebusan  diminum. Berdasarkan  penelitian  Stevani  dkk .  (2017), rebusan  daun  kersen  dengan  konsestrasi 15%  efektif  menurunkan  kadar  glukosa darah  mencit  dibandingkan  rebusan  daun kersen dengan konsentrasi 5% dan 10% dan rata-rata penurunan sebesar 98 mg/dl. Rata- rata  penurunan  ini  mendekati  rata-rata penurunan kadar glukosa darah mencit yang diberikan  suspensi  obat  glibenklamid. Menurut  Utama  (2011),  frkasi  etil  asetat daun  kersen  memiliki  aktivitas  sebagai antidiabetes.  Fraksi  etil  asetat  daun  kersen dosis  240  mg/kgBB  memberikan  efek antidiabetes terbesar dibandingkan kelompok perlakuan  yang  lain.  Senyawa  yang terkandung  di  dalam  fraksi  etil  asetat  daun kersen  adalah  flavonoid,  terpenoid  dan polifenol.
Versi Online:
Pro Food (Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan)
http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood
Namun, rasa pahit dan sedikit sepat serta aroma yang kurang menyenangkan dari rebusan  daun  kersen  membuat  beberapa orang tidak tertarik untuk mengkonsumsinya. Rasa pahit dan sedikit sepat ini mirip dengan rasa khas dari kopi robusta serta aroma yang kurang  menyenangkan  ini  diharapkan  dapat tertutupi oleh aroma khas dari kopi robusta. Oleh  karena  itu,  penelitian  mengenai Efektivitas  Bubuk  Kopi  Robusta  Fungsional Yang  Difortifikasi  Bubuk  Daun  Kersen Terhadap  Penurunan  Kadar  Gula  Darah Mencit Diabetes dilakukan.
Adapun  tujuan  dari  penelitian  ini adalah  untuk  mengkaji  rasio  bubuk  kopi robusta  dan  bubuk  daun  kersen  sebagai minuman  kopi  fungsional  antidiabetes  yang ditinjau  dari  aktivitas  antioksidan  dan  kadar fenolik total produk, serta efektivitas produk dalam  mengurangi  kadar  gula  darah  dan meminimalisir penurunan berat badan mencit yang dikondisikan diabetes.

## BAHAN DAN METODE

## Bahan
Bahan-bahan yang digunakan antara lain:  Biji  kopi  Robusta  yang  diperoleh  dari petani  kopi  di  Kabupaten  Sumbawa  Barat, daun  kersen  yang  diperoleh  dari  pohon kersen  di  lingkungan  Universitas  Mataram, pakan  standar  tikus  BR-2  (mengandung  air, abu,  protein  dan  serat  kasar),  Bahan  kimia yang  digunakan  untuk  pengujian  yaitu aquades,  asam  galat,  methanol,  NaCl, Alloxan  monohidrat,  pakan  standar,  larutan DPPH  0,1  M,  Na2CO3  7%,  Folin  ciocalteu, Glibenklamid 5 mg dan mencit galur BALB-C jantan.

## Alat
Alat-alat yang digunakan antara lain: Spektrofotometer UV-Vis merek Thermo tipe Evolution  201,  Neraca  analitik,  Timbangan digital tipe SF-400C, vortex 2.500 rpm merek Heidolph,  Sentrifus  15.000  rpm  merek Hettich  tipe  Universal  320, Cabinet  dryer, roaster,  grinder  latina  600N,  tabung  reaksi merek  Zyrex  Iwaki,  pipet  ukur,  pipet  mikro, rak  tabung  reaksi,  rubber  bulb  merek  merk
Vitlab, erlenmeyer merek Schott Duran, gelas piala,  labu  ukur  100  ml  merek  Herma, kandang    mencit,  ayakan  mesh  40,  blender merek  Panasonic,  gunting  medis,  jarum suntik  ( syringe)  merek  One  Med,  jarum sonde ( force feeding needle), alat glukometer  dan  strip  glukometer  merek Autocheck.

## Metode
Metode  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  metode  eksperimental yang  dilaksanakan  di  Laboratorium  dengan tahapan  penelitian  meliputi:  pembuatan bubuk  daun  kersen  (Puspitasari  dan  Lean, 2017  dengan  modifikasi),  pembuatan  bubuk kopi  robusta  (Purwaningsih,  dkk  (2002) dengan  modifikasi),  pemformulasian  kopi fungsional  dengan  6  rasio  berbeda, pengujian  aktivitas  antioksidan  dan  kadar fenolik  total,  pelarutan  kopi  fungsional  dan pengaplikasian  pada  hewan  percobaan (Mayaswari,  2017).  Hewan  percobaan  yang digunakan  adalah  mencit  galur  BALB/C jantan yang berusia 2-3 bulan dengan berat 20-30  g  dan  dikondisikan  diabetes  melalui induksi aloksan dengan dosis 125 mg/Kg BB mencit  secara  intraperitoneal.  Parameter yang  diamati  meliputi  aktivitas  antioksidan dengan metode DPPH (Rohman dan Riyanto (2005)  dengan  modifikasi),  kadar  fenolik total  dengan  metode  folin  cioceltau (Farmakope Herbal Indonesia (2011) dengan modifikasi),  perubahan  berat  badan  mencit dan  kadar  gula  darah  mencit  selama perlakuan (Mayaswari, 2017).
Rancangan Penelitian dan Analisis Data Rancangan penelitian yang digunakan  adalah  rancagan  acak  lengkap (RAL)  dengan  faktor  tunggal  berupa pebedaan  rasio  bubuk  kopi  robusta  dan bubuk  daun  kersen  yang  terdiri  dari  6  aras perlakuan sebagai berikut:
P1 = Bubuk kopi robusta 100% : bubuk daun kersen (kontrol) 0%
P2 = Bubuk kopi robusta 85% : bubuk daun kersen 15%
P3 = Bubuk kopi robusta 70% : bubuk daun kersen 30%
Versi Online:
Pro Food (Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan)
http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood
P4 = Bubuk kopi robusta 55% : bubuk daun kersen 45%
P5 = Bubuk kopi robusta 40% : bubuk daun kersen 60%
P6 = Bubuk kopi robusta 25% : bubuk daun kersen 75%
Masing-masing  perlakuan  diberikan ulangan  sebanyak  3  kali  untuk  menghindari bias,  sehingga  diperoleh  18  unit  percobaan, setiap  unit  percobaan  dilakukan  uji  aktivitas antioksidan  dan  kadar  fenolik  total. Kelompok  perlakuan  dengan  persentase aktivitas  antioksidan  dan  kadar  fenolik tertinggi  kemudian  digunakan  untuk  uji in vivo pada mencit yang dikondisikan diabetes.
Uji in vivo pada mencit
menggunakan  rancangan  penelitian The Randomized  Post  Test  Only  Control  Group Design.  Penelitian  ini  dilakukan  pada  3 kelompok  perlakuan  yang  terdiri  dari  3 mencit  untuk  setiap  kelompok  perlakuan. Kelompok-kelompok  perlakuan  tersebut, yakni:
K1  =  pakan  standar  +  aloksan  +  aquades (kontrol negatif) K2 = pakan sandar + aloksan + aquades + glibenklamid (kontrol positif) K3 = pakan sandar + aloksan + aquades + produk  kopi  fungsional  dengan  persentase aktivitas antioksidan tertinggi.
Analisis data dilakukan menggunakan  uji Analysis  of  Variance
(ANOVA)  pada  taraf  nyata  5%  dengan menggunakan software SPSS 21. Jika terjadi perbedaan yang nyata pada hasil pengamatan  akan  dilakukan  uji  lanjut dengan uji Least Significant Difference (LSD) pada  taraf  nyata  5%.  Sebelumnya  data primer  hasil  pengamatan  pada  hewan percobaan  diuji  normalitas  dengan  uji Shapiro Wilk untuk melihat sebaran distribusi data  dan  uji  Levene’s  test  untuk  melihat homogenitas data (Mayaswari, 2017).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Kadar Fenolik Total
Kadar  fenolik  total  dari  produk  kopi fungsional  dengan  rasio  bubuk  kopi  robusta dan  bubuk  daun  kersen  yang  berbeda-beda
ditentukan menggunakan alat spektrofotometri  UV-VIS  dengan  pereaksi folin  ciocalteau.  Folin  ciocalteau  bereaksi dengan senyawa fenolik yang terdapat pada ekstrak  dan  menghasilkan  larutan  berwarna yang  dapat  diukur  absorbansinya.  Senyawa fenolik  ini  hanya  dapat  bereaksi  pada suasana  basa,  oleh  karena  itu  larutan  uji dikondisikan  basa  dengan  cara  penambahan Na2CO3,  sehingga  terjadi  disosiasi  proton pada  senyawa  fenol  menjadi  ion  fenolat. Reaksi  yang  terbentuk  ditandai  dengan terbentuknya warna biru setelah penambahan  Na2CO3  dan  absorbansinya dapat diukur pada panjang gelombong 744,8 nm.  Gugus  hidroksil  dari  fenolik  akan mereduksi  asam  heteropoli  (fosfomolibdat- fosfotungstat)  yang  terdapat  pada  folin ciocalteau  menjadi  kompleks  molibdat- tungstat  yang  berwarna  biru  (Alawiyah, 2016).  Semakin  pekat  warna  biru  yang terbentuk,  maka  kadar  fenolik  pada  kopi fungsional  semakin  besar  yang  artinya semakin  banyak  ion  fenolat  yang  mereduksi asam heteropoli menjadi kompleks molibdat- tungstat.  Hasil  pengamatan  kadar  fenolik total minuman kopi fungsional dapat ditinjau pada Gambar 1.
Gambar 1. Grafik pengaruh rasio bubuk daun kersen  dan  bubuk  kopi  robusta terhadap  kadar  fenolik  total minuman kopi fungsional
Keterangan: P1  =Bubuk  kopi  robusta  100%:  bubuk  daun  kersen (kontrol) 0%
P2 = Bubuk kopi robusta 85%: bubuk daun kersen 15% P3 = Bubuk kopi robusta 70%: bubuk daun kersen 30% P4 = Bubuk kopi robusta 55%: bubuk daun kersen 45% P5 = Bubuk kopi robusta 40%: bubuk daun kersen 60% P6 = Bubuk kopi robusta 25%: bubuk daun kersen 75%
Berdasarkan  Gambar 1,  dapat  diamati bahwa  terjadi  hubungan  yang  berbanding
P1       P2       P3       P4      P5       P6 Perlakuan Fe no l t ot al (m g G A E /g ba ha n)
Versi Online:
Pro Food (Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan)
http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood
lurus  antara  peningkatan  rasio  bubuk  daun kersen  terhadap  peningkatan  kadar  fenolik total pada minuman kopi fungsional, dimana perlakuan  terbaik  ditemukan  pada  rasio bubuk  daun  kersen  75%  dan  bubuk  kopi robusta  25%  dengan  kadar  fenolik  total sebesar  1,05  mg  GAE/g  bahan  atau  setara dengan 0,10%, sedangkan kadar fenolik total terendah  pada  perlakuan  0%  bubuk  daun kersen  dan  100%  bubuk  kopi  robusta dengan  kadar  fenolik  total  sebesar  0,65  mg GAE/g  bahan  atau  setara  dengan  0,065%. Hal  ini  disebabkan  karena  berdasarkan analisis bahan baku, kadar fenolik total pada bubuk  daun  kersen  adalah  sebesar 1,14  mg GAE/g  bahan,  lebih  besar  dibandingkan dengan  kadar  fenolik  total  bubuk  kopi robusta  yang  hanya  0,65  mg  GAE/g  bahan. Sehingga  penambahan  bubuk  daun  kersen pada bubuk kopi robusta mampu meningkatkan  kandungan  total  fenol  dari minuman  kopi  dan  besaran  peningkatan kandungan  total  fenol  dari  minuman  kopi sejalan  dengan  besaran  bubuk  daun  kersen yang ditambahkan.

## Aktivitas Antioksidan
Antioksidan  adalah  senyawa  yang dapat menghambat, mencegah atau menghilangkan  kerusakan  oksidatif  pada suatu  molekul  (Halliwel  dan  Gutteridge, 1999).  Hasil  pengamatan    pengaruh  rasio bubuk  kopi  robusta  dan  bubuk  daun  kersen terhadap aktivitas antioksidan minuman kopi fungsional dapat ditinjau pada Gambar 2.
Gambar 2. Grafik Pengaruh Rasio Bubuk Kopi Robusta  dan  Bubuk  Daun  Kersen Terhadap  Aktivitas  Antioksidan Minuman Kopi Fungsional Antidiabetes Keterangan: P1  =  Bubuk  kopi  robusta  100%  :  bubuk  daun  kersen
(kontrol) 0%
P2 = Bubuk kopi robusta 85% : bubuk daun kersen 15% P3 = Bubuk kopi robusta 70% : bubuk daun kersen 30% P4 = Bubuk kopi robusta 55% : bubuk daun kersen 45% P5 = Bubuk kopi robusta 40% : bubuk daun kersen 60% P6 = Bubuk kopi robusta 25% : bubuk daun kersen 75%
Hasil pengamatan menunjukan bahwa aktivitas antioksidan tertinggi diperoleh  dari  rasio  bubuk  daun  kersen sebesar  75%  dan  bubuk  kopi  robusta sebesar  25%  dengan  rata-rata  aktivitas antioksidan  sebesar  88,26%.  Sedangkan aktivitas  antioksidan  terendah  pada  rasio bubuk  daun  kersen  0%  dan  bubuk  kopi robusta  100%  dengan  rata-rata  sebesar 49,24%.  Berdasarkan  pada  Gambar  2  juga dapat diamati bahwa terjadi tren peningkatan  aktivitas  antioksidan  minuman kopi  fungsional  sejalan  dengan  peningkatan rasio bubuk daun kersen pada minuman kopi fungsional.    Hal  ini  disebabkan  karena aktivitas  antioksidan  pada  bubuk  daun kersen  berdasarkan  analisis  bahan  baku adalah  lebih  besar  dibandingkan  bubuk  kopi robusta,  yakni  89,77%  berbanding  50%. Sehingga  peningkatan  rasio  bubuk  daun kersen  akan  lebih  mampu  meningkatkan aktivitas antioksidan minuman kopi fungsional.
Peningkatan  aktivitas  antioksidan  ini juga  sejalan  dengan  peningkatan  kadar fenolik  total  pada  prouk.  Berdasarkan penelitian  Holsova  dkk  (2002),  terdapat hubungan  yang  signifikan  antara  kadar fenolik  total  dan  kadar  rutin  (kuersetin-3- rutinosida)  terhadap  aktivitas  antioksidan pada  sampel  buckwheat.  Menurut  Marjoni dkk  (2015),    Dari  sejumlah  penelitian  pada tanaman  obat  dilaporkan  bahwa  terdapat banyak  tanaman  obat  yang  mengandung antioksidan  dalam  jumlah  besar.  Efek antioksidan  terutama  disebabkan  karena adanya senyawa fenol seperti flavonoida dan asam fenolat.
Mekanisme  senyawa  fenolik  sebagai antioksidan  didasarkan  pada  kemampuan gugus  fenol  untuk  mengikat  radikal  bebas dengan  memberikan  atom  hidrogen  melalui proses  transfer  elektron,  sehingga  fenol berubah  menjadi  radikal  fenoksil.  Radikal
49.24 57.20 65.15 74.24 82.20 93.94 y = 0.5859x + 48.359 R ² = 0.9955 0.00 20.00 40.00 60.00 80.00 100.00 0 15 30 45 60 75 Ak ti vi ta s An ti ok si d an ( % ) Rasio Bubuk Daun Kersen (%) Perlakuan P1         P2         P3         P4          P5        P6
Versi Online:
Pro Food (Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan)
http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood
e-ISSN: 2443-3446
fenoksil  yang  terbentuk  sebagai  hasil  reaksi fenol  dengan  radikal  bebas  kemudian  akan menstabilkan  diri  melalui  efek  resonansi. Karena  alasan  ini  maka  derivat  dari  fenol merupakan  donor  hidrogen  yang  baik  yang dapat  menghambat  reaksi  yang  terjadi  oleh senyawa radikal (Jasson, 2005).

## Penurunan Kadar Gula Darah Mencit
Rata-rata  kadar  gula  darah  mencit setelah  2  hari  injeksi  aloksan  yang dinyatakan sebagai kadar gula darah hari ke- 0 dan kadar gula darah mencit setelah 7 hari pemberian perlakuan dan dipuasakan 24 jam dinyatakan sebagai kadar gula darah hari ke- 8 dapat ditinjau pada Gambar 3.
Gambar 3. Diagram Batang Penurunan Kadar Gula  Darah  Mencit  Hari  Ke-0 Hingga Hari Ke-8
Berdasarkan Gambar 3 dapat diamati bahwa  rata-rata  kadar  gula  darah  puasa pada  mencit  hari  ke-0  adalah  diatas  200 mg/dl,  sehingga  dikategorikan  diabetes  dan memenuhi  kriteria  inklusi  sebagai  hewan  uji diabetes.  Rata-rata  kadar  gula  darah  yang berbeda-beda pada hari ke-0 meski diberikan aloksan  dengan  dosis  yang  sama,  dapat diakibatkan karena daya tahan tubuh mencit tidak  sama  sehingga  kondisi  awal  diabetes tidak seragam (Jung dkk., 2006).
Pada  kelompok  perlakuan  kontrol negatif  memiliki  rata-rata  kadar  gula  darah puasa  setelah  injeksi  aloksan  sebesar  572 mg/dl  dan  setelah  7  hari  hanya  diberikan aquades  dan  pakan  standar,  kadar  gula darah  meningkat  menjadi  596  mg/dl. Kelompok perlakuan kontrol positif pada hari ke-0  memiliki  kadar  gula  darah  sebesar  569 mg/dl  dan  mengalami  penurunan  menjadi
301  mg/dl  setelah  7  hari  perlakuan menggunakan  obat  glibenklamid,  pakan standar  dan  aquades ad  libitum.  Pada kelompok  perlakuan  dengan  pemberian produk  minuman  kopi  fungsional,  diperoleh rata-rata  kadar  gula  darah  puasa  sebesar 587  mg/dl  dan  mengalami  penurunan menjadi 321 mg/dl setelah 7 hari perlakuan. Sehingga  dapat  dikatakan  bahwa  produk minuman  kopi  fungsional  dengan  volume pemberian  0,5  ml  per  hari  dari satu  cangkir kopi  fungsional  konsentrasi  9  gram/200  ml terbukti dapat memberikan efek hipoglikemik pada  mencit  yang  dikondisikan  diabetes, namun  kondisi  normal  dari  mencit  yang dikondisikan diabetes belum tercapai.
Hal ini dapat diakibatkan oleh durasi penelitian  yang  tergolong  singkat,  sehingga peran  dari  produk  dalam  mengatasi  radikal bebas  dan  stres  oksidatif  akibat  kondisi diabetes  masih  belum  teramati  secara optimal.
Sedangkan untuk besaran penurunan dan presentase penurunan kadar gula  darah  puasa  untuk  setiap  kelompok perlakuan  selama  7  hari,  dapat  dilihat  pada Tabel 1.
Tabel  1.  Presentase  Penurunan  Kadar  Gula
Darah Puasa Kelompok perlakuan Δ (mg/dl) % Penurunan Kontrol negatif -24 -4,20 Kontrol positif 268 47,10 Produk kopi fungsional 266 45,32
Keterangan: (-): berarti peningkatan
Pada  kelompok  kontrol  negatif mengalami  peningkatan  sebesar  24  mg/dl dari hari ke-0 hingga hari ke-8. Hal ini terjadi karen  sel  β  pulau  langerhans  dalam pangkreas  mengalami  kerusakan  akibat diinduksi  aloksan,  sehingga  pankreas  tidak mampu menghasilkan insulin dan memperburuk  kondisi  diabetes.  Kondisi  ini berbeda dengan kelompok perlakuan kontrol positif  dan  kelompok  perlakuan  produk, dimana  ditemukan  rata-rata  penurunan kadar  gula  darah  puasa  sebesar  268  mg/dl dan  266  mg/dl.  Pada  kelompok  kontrol
Versi Online:
Pro Food (Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan)
http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood
e-ISSN: 2443-3446
positif,  penurunan  kadar  gula  darah  puasa dapat  terjai  karena  pada  kelompok  tersebut diberikan perlakuan
dengan obat glibenklamid,  yaitu  obat  komersial  yang sering digunakan dalam terapi medis.
Menurut  Tjay  dan  Raharja  (2002), Glibenklamid  memiliki  efek  hipoglikemik kerena  mampu  menstimulasi  pengeluaran insulin  pada  setiap  pemasukan  glukosa. Selain  itu,  berdasarkan  penelitian  Jeli  dan Mukiyah  (2011),  pemberian  glibenklamid dapat membantu proses perbaikan kerusakan  pankreas  akibat  induksi  aloksan yang ditinjau dari penurunan diameter pulau lingerhans  dan  jumlah  sel  β  di  dalamnya. Sedangkan  pada  kelmpok  perlakuan  produk kopi fungsional, penurunan kadar gula darah puasa  dapat  terjadi  karena  potensi  dari aktivitas  antioksidan  pada  produk  kopi fungsional yang relatif besar, yakni 89,77%. Pada  penelitian  terdahulu  dari  Hairani (2018), aktivitas antioksidan sebesar 31,44% pada  produk  sosis  analog  telah  mampu menurunkan  kadar  gula  darah  sebesar  387 mg/dl dalam rentang penelitian 14 hari.
Kemampuan antioksidan
menurunkan  kadar  gula  darah  didasarkan dari kemampuan antioksidan dalam memperbaiki fungsi dari β-sel, meningkatkan sensitivitas  insulin,  dan  menjaga  sel  endotel vaskular.  Selain  itu,  antioksidan  dapat mengurangi  stres  oksidatif  dan  beberapa agen  hipoglikemik yang  mampu  mengurangi stres  oksidatif  secara  tidak  langsung mengurangi kadar gula darah dan mencegah hiperinsulinemia  serta  secara  langsung bekerja  sebagai  agen  penangkal  radikal bebas  (Ruhe  dan  McDonald,  2001).  Selain aktivitas  antioksidan  yang  tinggi  pada produk,  kandungan  asam  klorogenat  pada biji kopi robusta juga diduga berperan dalam menurunkan kadar gula darah mencit. Asam klorogenat  diduga  mampu  menghambat aktivitas  enzim  alfa  glukooksidase  (Paynter dkk., 2006), apabila aktivitas dari enzim alfa glukooksidase  terhambat  maka  penyerapan glukosa  dari  saluran  pencernaan  juga terhambat  sehingga  kadar  gula  di  darah berkurang (Utami dan Desty, 2013).
Berdasarkan hasil uji lanjut menggunakan  LSD  dan  berdasarkan  pula pada  tabel  1,  dapat  disimpulkan  bahwa terjadi  penurunan  yang  signifikan  antara kadar gula darah puasa pada kontrol negatif terhadap  kontrol  positif  dan  produk  kopi fungsional,  namun  tidak  berbeda  signifikan antara  kontrol  positif  terhadap  produk  kopi fungsional.  Perlakuan  terbaik  diperoleh  dari kelompok  mencit  yang  diberikan  perlakuan obat  glibenklamid,  namun  perbedaan  ini hanya  sedikit  sekali  dan  tidak  signifikan terhadap  kelompok  mencit  yang  diberikan terapi  kopi  fungsional  dengan  selisih penurunan  hanya  2  mg/dl.  Sedangkan  jika dilihat  dari  keaktifan  motorik,  kelompok mencit yang diberikan produk kopi fungsional lebih  aktif  dibandingkan  kelompok  mencit lainnya.  Hal  ini  dapat  disebabkan  karena pada  produk  kopi  fungsional  masih mengandung  kafein  yang  dapat  bekerja sebagai  perangsang  psikoaktif  dan  diuretik ringan (Maughan, 2003).

## Penurunan Berat Badan Mencit
Berat  badan  mencit  menjadi  salah satu  indikator  yang  penting  untuk  diamati. Pengukuran  berat  badan  mencit  dilakukan pada  awal  sebelum  injeksi  aloksan  yang dinyatakan  sebagai  berat  badan  awal,  dua hari  setelah injeksi  aloksan  yang  dinyatakan sebagai berat badan hari ke-0 dan setelah 7 hari pemberian perlakuan dan dipuasakan 24 jam  sebagai  berat  badan  hari  ke-8  yang dapat dilihat pada Gambar 4.
Gambar 4.   Diagram Batang Rata-Rata Penurunan  Berat  Badan  Mencit
Pada Hari Ke-0 dan Hari ke-8
Versi Online:
Pro Food (Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan)
http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood
Berdasasrkan  Gambar  4,  dapat diamati bahwa rata-rata berat badan mencit mengalami  penurunan  selama  dikondisikan diabetes.  Rata-rata  penurunan  berat  badan mencit  pada  kelompok  perlakuan  negatif adalah  sebesar  6,07  g,  pada  kelompok perlakuan  positif  sebesar  3,49  g  dan  pada kelompok  perlakuan  kopi  fungsional  sebesar 3,28  g.  Selisih  penurunan  berat  badan mencit  pada  kelmopok  kontrol  positif  dan kelompok  kopi  fungsional  hampir  setengah dari  penurunan  berat  badan  mencit  pada kelompok kontrol negatif.
Hal  ini  berarti  bahwa,  kelompok mencit  diabetes  yang  diberikan  terapi  obat glibenklamid  dan  terapi  kopi  fungsional, efektif dalam meminimalisir sekresi urin yang menyebabkan  penurunan  berat  badan  pada mencit  diabetes  yang  ditinjau  dari  7  hari terapi.  Sedangkan,  pada  penelitian  Pratiwi (2019),  berat  badan  tikus  diabetes  rata-rata mengalami  penurunan  sebesar  6  g  pada kelompok tikus yang diberikan terapi ekstrak eugenol  dengan  dosis  15  mg/kg  BB  selama 10 hari. Menurut Rizmahardian (2008), Terjadinya  penurunan  bobot  badan  pada kondisi diabetes diakibatan karena ketidaksediaaan  glukosa  dalam  sel  karena insulin yang membatasi
proses glukoneogenesis  sangat  sedikit  atau  tidak ada  sama  sekali.  Glukosa  yang  dihasilkan kemudian  akan  terbuang  melalui  urine akibatnya,  terjadi  pengurangan  jumlah jaringan  otot  dan  jaringan  adipose  secara signifikan dan terjadi penurunan bobot berat badan.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil analisis dan uraian pembahasan  yang  terbatas  pada  ruang lingkup  penelitian,  maka  ditarik  beberapa kesimpulan sebagai berikut:
1. Peningkatan  rasio  bubuk  daun  kersen pada minuman kopi fungsional
memberikan  pengaruh  yang  signifikan terhadap peningkatan kadar fenolik total dan  aktivitas  antioksidan  dari  minuman kopi fungsional.
2. Terapi  menggunakan  produk  minuman kopi fungsional dengan rasio bubuk kopi robusta  25%  dan  bubuk  daun  kersen 75% pada mencit diabetes memberikan pengaruh  penurunan  kadar  gula  darah puasa  yang  signifikan  dan  mendekati atau  hampir  sama  dengan  perlakuan pada  mencit  yang  diberikan  obat glibenklamid (obat hipoglikemik komersial)  dengan  rata-rata  penurunan kadar  gula  darah  puasa  sebesar  266 mg/dl  pada  kelompok  mencit  yang diberikan  produk  kopi  fungsional  dan 268  mg/dl  pada  kelompok  mencit  yang diberikan obat glibenklamid.
3. Seluruh  kelompok  mencit  diabetes mengalami  penurunan  berat  badan selama  perlakuan,  penurunan  berat badan pada kontrol negatif dua kali lipat dari  penurunan  berat  badan  kontrol positif dan produk kopi fungsional.

## DAFTAR PUSTAKA
Alawiyah, A. L. 2016. Kadar Fenol Total dan Bioaktivitas  Flavon  dari  Kulit  Kacang Tanah  sebagai  Antioksidan  dan Antiproliferasi  Terhadap  Sel  Kanker Hela . Tesis. Institut Pertanian Bogor.
Bogor. Badan Penelitian dan Pengembangan
Kesehatan  Kementerian  Kesehatan RI. Riset  Kesehatan  Dasar  2013. Jakarta: Depkes RI.
Castelnuovo,  A.  D.,  Romina  D.  G.,  Licia  L.
dan Giovanni D. G. 2012. Consumtion  of  Cocoa,  Tea  and Coffee  and  Risk  of  Cardiovascular Disease. European  Journal  of Internal Medicine. (23): 15-25.
Chandra, D., R. H. Ismono dan Eka K. 2012.
Prospek  Perdagangan  Kopi  Robusta Indonesia  di  Pasar  Internasional.
Lampung: Fakultas Pertanian Universitas Lampung.
Clarke,  R.  J.  dan  R.  Macrae.  1987. Coffe
Chemistry  (volume  1).  London: Elsevier Applied Science.
Direktorat Jendral Bina Kefarmasian dan Alat Kesehatan.  2011. Suplemen  II
Versi Online:
Pro Food (Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan)
http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood
e-ISSN: 2443-3446
Farmakope  Herbal  Indonesia Edisi  I. Jakarta: Kementrian Kesehatan RI.
Guariguata,  L.,  D.R.  Whiting,  I.  Hambelton, J.  Beagley,  U.  Linnenkamp  dan  J.E. Shaw.  2014.  Global  Etimates  of Diabetes  Prevalance  for  2013  and Projections  for  2035. Elsevier.  103: 137-149.
Hairani,  M.,  Satrijo  S.,  Dody  H.  2017.  Uji Aktivitas  Antioksidan  Sosis  Analog Tempe Dengan Penambahan Tepung Ubi Jalar Ungu  Terhadap  Penurunan Kadar  Gula  Darah    Mencit  Diabetes .
Pro Food (Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan). 4: 383-390. Halliwel,  B.,  dan  J.M.C.  Gutteridge.  1999. Free  Radicals  in  Biology  and Medicine. New York: Oxford University Press.
Harfina, F., Saiful B. dan Awaluddin S. 2012. Pengaruh  Serbuk  Daun  Puguntano (Curanga  fel-terrae  merr.)  pada Pasien  Diabetes  Mellitus. Journal  of Pharmaceutics  and  Pharmacology,
1(2): 112-118.
Holsova,  M.  V.  Fiedlerova,  H.  Smrcinova,  M.
Orsak, J. Lachman dan S.
Vavreinova.  2002.  Buckwheat-the
Source  of  Antioxidant  Activity  in Functional  Foods. Food  research international. 35: 207-211. Jasson, N. 2005. The Determination of Total Phenolic Compounds in GreenTea. http://folinciocalteu/metho
d/colorimetric .  Diakses  pada  4
Agustus 2019. Jeli,  M.M.  dan  SN.  N.  Mukiyah.  2011. Pengaruh Pemberian Infusa Tumbuhan Sarang Semut ( Hydnophytum formicarum) Terhadap Gambaran Histologi Pankreas pada Tikus (Rattus norvegicus)  Diabetes    Terinduksi Aloksan. PharmaMedika.  1  (3):  200-
2014.
Jung, Mankil, Moonsoo P., Hyun C.L., Yoon- Ho  K.,  Eun  Seok  K.  dan  S.K.  Kim. 2006.  Antidiabetic  Agents  from Medicinal  Plants. Current  Medicinal Chemistry. (13): 1203-1218.
Kuntorini, Evi Mintowati, Setya F., dan Maria D. A. 2013. Struktur Anatomi dan Uji
Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol Daun  Kersen  (Muntingia  calabura). Prosiding Semirata FMIPA Universitas Lampung. Lampung. Hal. 291-295.
Marjoni, M. R., Afrinaldi, A. D. Devita. 2015. Kandungan Total Fenol dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak  Air Daun  Kersen (Muntingia  calabura  L.). Jurnal Kedokteran YARSI 23 (3): 187-196.
Maughan,  J.  2003.  Caffeine  Ingestion  and Fluid  Balance:  a  review. Journal  of Human  Nutrition  Dietetics.  16:  411- 420.
Mayaswari, L. N. 2017. Perbandingan Efikasi Ekstrak  Ramuan  Obat  Tradisional Khas  NTB  Dengan  Glibenklamid Dalam  Menurunkan  Gula  Darah Mencit  BALB/C  yang  Diinduksi Aloksan. Skripsi. Fakultas Kedokteran.  Universitas  Mataram. Mataram. Paynter  N.P.  2006.  More  Support  for  Coffee Antiadiabetes Benefits, Nutraingredient. American Journal of
Epidemiology: 1075-1084.
Pratiwi,  Iin  P.  2019.  Evaluasi  Pemberian Senyawa  Eugenol  Isolat  Bunga
Cengkeh  ( Syzygium  Aromaticum) Terhadap  Kadar  Gula  Darah  Mencit Diabetes. Skripsi. Fakultas
Kedokteran.  Universitas  Mataram.
Mataram.
Purwaningsih,  H.,  Sri  A.  dan  Umar  S.  2002. Pengaruh  Penyangraian  Biji  Kopi dengan  Microwave  Oven  Terhadap Profil  Aroma  dan  Organoleptik Seduhan Kopi Arabika . Agrosains. 15 (1) : 73-83.
Puspitasari,  Anita  Dewi  dan  Lean  Syam
Prayogo. 2017. Perbandingan
Metode  Ekstraksi  Maserasi  dan Sokletasi  Terhadap  Kadar  Fenolik Total  Ekstrak  Etanol  Daun  Kersen ( Muntingia  calabura).  Jurnal  Ilmiah Cendekia Eksakta: 1-7. Rizmahardian,  A.  K.  2008. Kaitan  antara Metabolisme Karbohidrat dan Diabetes Mellitus. Pontianak:
Universitas Pontianak.
Rohman,  A.  dan  S.  Riyanto.  2005.  Daya Antioksidan  Ekstrak  Etanol  Daun Kemuning  ( Murraya  paniculata  (L)
Versi Online:
Pro Food (Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan)
http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood
e-ISSN: 2443-3446
Jack)  Secara  In  Vitro.  Majalah Farmasi Indonesia. 16 (3) : 136-140.
Ruhe, R. C., dan R. B. McDonald. 2001. Use of  Antioxidant  Nutrients  in  the Prevention and Treatment of Type 2 Diabetes. Journal  of  the  American College  of  Nutrition,  20  (5):  363S– 369S.
Sani,  R.N.,  Fithri  C.N.,  Ria  D.A.,  dan  Jaya M.M.  2014.  Analisis  Rendemen  Dan Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Etanol Mikroalga  Laut  Tetraselmis  chuii. Jurnal Pangan dan Agroindustri. (2): 121-126.
Sari,  L.  O.  R.  K.  2006.  Pemanfaatan  Obat
Tradisional dengan Mempertimbangkan  Manfaat  dan Keamanannya. Majalah Ilmu Kefarmasian. 3(1): 1-7.
Siddiqua,  Ayesha,  K.B.  Premakumari,  S. Roukiya,  Vithya  dan  Savitha.  2010. Antioxidant  Activitiy  and  Estimation of  Total  Phenolic  Content  of Muntingia  Calabura  by  Colorimetry. International  Journal  of  ChemTech Research. 2(1): 205-208.
Stevani, H., Nurul H. B., Husnul A. T. 2017. Efektifitas  Rebusan  Daun  Kersen ( Muntingia  calabura  L)  Terhadap
Penurunan  Kadar  Glukosa  Darah Pada  Mencit  ( Mus  musculus).  Jurnal Kesehatan. 1-5.
Tjay, T. H. dan K. Raharja. 2002. Obat-obat Penting. Jakarta: Elex Media Komputind.
Utama, R. P. 2011. Uji Aktivitas Anti Diabetes Fraksi  Etil  Asetat  Daun  Kersen ( Muntingia  calabura  L.)  pada  Mencit Diabetes  Akibat  Induksi  Aloksan. Skripsi. Fakultas Farmasi. Universitas Jember. Jember.
Utami, Prapti dan Desty Ervira P. 2013. The Miracle  of  Herbs.  Jakarta:  PT. AgroMedia Pustaka.