## Research Article
Determination of Polifenol Content and Antioxidant  Activity Test of Ethanol  Extract  70%  Awar-Awar  (Ficus  septica  Burm.  F)  Leaf  using DPPH Method (1,1-Difenil-2-Pikrilhidrazil)
Kadar Polifenol dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol 70% Daun Awar-Awar (Ficus septica Burm. F) dengan Metode DPPH (1,1-Difenil-2-Pikrilhidrazil)
Devi Sahyuni Putri Koto, Mustofa Ahda, Zainab, Any Guntarti*
Faculty of Pharmacy, Universitas Ahmad Dahlan, Yogyakarta 55164 Indonesia *Corresponding author: Any Guntarti | Email: any_guntarti@yahoo.co.id
Received: 8 August 2019; Revised: 22 August 2019; Accepted: 25 September 2019; Published: 29 September 2019
Abstract:  Free  radicals  are  molecules  with  unpaired  electrons  that  can  react  with  body  cell  mollecules.  As  a result, cell became damaged or death because oxidation of the lipid components of cell membranes, proteins and DNA. The purpose of this study was to determine the antioxidant activity test, and total polyphenol content. The  ethanol  extract  was  done  by  phytochemical  screening  by  KLT  method  and  the  antioxidant  activity  was performed with DPPH. The extract were obtained from 200 gram awar-awar leaf powder was macerated with 70%  ethanol.  Antioxidant  activity  was  measured  by  DPPH  purple  color  change.  The  antioxidant  activity parameter was the ES50 yes obtained from the linear regression equation between the concentration and the percent of the damping. The results of phytochemical screening test of the awar-awar leaf ethanol extract showed that the sample contained flavonoid and polyphenol compounds. Determination of total phenolic content of 8,11 ±  0,364%  EAG.  The  potential  of  antioxidant  can  be  seen  from  the  price  of  ES50,  the  value  of  ES50  standard quercetin of 4.542 ± 0.0767 μg / mL, ethanol extract of 21,19± 0,565 μg / mL. Data analyzed with non parametric test Krukal Wallis with 95% showed the result of ES50 of ethanol extract of awar-awar leaves was significantly different with ES50 quercetin. Conclusion of this research were ethanol extract 70% of awar-awar leaves had a total polyphenol content of 8.11% equivalents of gallic acid, and antioxidant activity of 21.19 μg / mL with very strong antioxidant strength, ie ES50 ˂ 50 μg / mL, while the standard quercetin was 4,542 μg / mL. Polyphenol compounds support the antioxidant activity of the extract.
Keywords : antioxidant; awar-awar leaf; DPPH; ethanol
Abstrak:  Radikal    bebas    adalah  molekul  dengan  elektron  tak  berpasangan  yang  dapat  bereaksi  dengan molekul sel tubuh. Akibatnya, terjadi kerusakan atau kematian sel karena senyawa radikal bebas mengoksidasi dan  menyerang  komponen  lipid  membran  sel,  protein  dan  DNA.  Tujuan  dari  penelitian  ini  menguji  kadar polifenol  total  uji  aktivitas  antioksidan  daun  awar-awar  (Ficus  septica  Burm.F).  Ekstrak  etanol  diskrining fitokimia  dengan  metode  KLT,  selanjutnya  dilakukan  penetapan  kadar  total  polifenol,  dan  uji  aktivitas antioksidan  dengan  DPPH.  Hasil  uji  skrining  fitokimia  dari  ekstrak  etanol  daun  awar-awar  menunjukkan bahwa  sampel  mengandung  senyawa  flavonoid  dan  polifenol.  Kadar  senyawa  total  polifenol  sebesar 8,11±0,364%  EAG.  Potensi  antioksidan  dengan  parameter  nilai  ES 50 standar  kuersetin  (4,542±0,077)  µg/mL, ekstrak  etanol  daun  awar-awar  (21,190±0,565)  µg/ml.  Kandungan  total  polifenol  mempengaruhi  besarnya
potensi  antioksidan  ekstrak  daun  awar-awar.  Potensi  antioksidan  ekstrak  etanol  daun  awar-awar  termasuk sangat kuat yaitu nilai ES 50 ˂ 50 μg/mL.
Kata kunci : antioksidan; daun awar-awar; DPPH; etanol

## 1. PENDAHULUAN
Penyakit-penyakit degeneratif dan penuaan dini merupakan penyakit tidak menular yang berlangsung    kronis yang disebabkan oleh kerusakan jaringan. Proses oksidasi dapat menyebabkan terbentuknya suatu oksidan atau radikal bebas yang    berbahaya bagi tubuh [1]. Kerusakan jaringan tersebut    menyebabkan    timbulnya  berbagai    macam    penyakit  degeneratif    seperti  kanker, aterosklerosis, diabetes    mellitus, dan    jantung    koroner [2].
Antioksidan  alami  adalah  antioksidan  yang  berasal  dari  hasil  ekstraksi  bahan  alam  pada tumbuhan. Salah satu tanaman yang dimanfaatkan sebagai sumber antioksidan    adalah daun Awar awar.  Daun  awar-awar  (Ficus  septica  Burm.F)  mengandung  senyawa  flavonoid    genistin    dan kaempferitrin, kumarin, senyawa fenolik, pirimidin dan alkaloid antofin, 10S, 13aR-antofin N-oxide, dehydrotylophorine, ficuseptin A, tylophorine, 2-Demetoksitylophorine, 14α-Hydroksiisotyloprebin N-oxide, saponin triterpenoid, sterol [3-5].
Berdasarkan penelitian, alkaloid tylophorine dalam daun awar-awar memiliki efek sitotoksik terhadap  sel  kanker  [6].  Selain  itu,  penelitian  Yang  et  al.,  (2005)  menyebutkan  daun  tanaman  ini memiliki  efek  antiinflamasi    melalui    penghambatan  inducible  nitric  oxidesynthase  (iNOS)  yang terkait erat dengan mekanisme penghambatan siklooksigenase-2 (COX-2) [7]. Selain itu, COX-2 juga mensintesis  prostaglandin  E2  (PGE2)  untuk  menstimulasi  Bcl-2  dan  menghambat  apoptosis  [8]. COX-2  menghambat  pro-apoptosis    yaitu  protein  p53  sehingga  tidak  terjadi  apoptosis  [9].  Oleh karena itu, peneliti ingin mengembangkan kandungan polifenol dan uji aktivitas antioksidan dalam daun awar-awar.

## 2. BAHAN DAN METODE

## 2.1. Bahan
Sampel yang digunakan adalah herbal awar-awar yang diperoleh dari Merapi Farma herbal, Kaliurang pada bulan Februari tahun 2018.

## 2.2. Pengambilan sampel
Daun awar-awar diambil dari Merapi Farma herbal, Kaliurang, difenilpikril hidrazil hidrat (DPPH),  etanol  p.a  (Sigma-Aldrich),  aquadest,  amoniak,  Toluen  jenuh  air,  FeCl3,    reagen  Folin- ciocalteau (Merck), Na2CO3 (Merck), kuersetin (Sigma-Aldrich), dan etanol 70 % (Sigma-Aldrich).

## 2.3. Pengeringan dan pembuatan serbuk
Daun yang dipanen dicuci dengan air untuk menghilangkan kotoran, dikeringkan dengan oven  pada  suhu  C.  Bahan  yang  telah  kering  diserbuk  dan  diayak  berukuran  50/60  mesh.  Hasil penyerbukan  yang  berupa  serbuk  kering  dan  tertutup  rapat  yang  selanjutnya  digunakan  untuk penelitian [10].

## 2.4. Pembuatan ekstrak
Metode  ekstraksi  dengan  maserasi  sederhana  menggunakan  pelarut  etanol  70%,  tanpa pengaduk  otomatis  atau  tanpa    pengaturan  suhu.  Sebanyak  200  gram  serbuk  daun  awar-awar
ditimbang kemudian dimaserasi dengan 1,5 L etanol 70% pada suhu kamar selama 5 hari. Ekstrak etanol yang diperoleh kemudian ditimbang bobotnya.

## 2.5. Penetapan kadar air
Penetapan kadar air mengacu pada Farmakope Indonesia [11].

## 2.6. Skrining fitokimia
2.6.1. Uji kandungan senyawa alkaloid
Ekstrak etanol dibuat konsentrasi 1 mg/ml dimasukkan kedalam tabung reaksi sebanyak 3 ml kemudian  ditambahkan  dengan  dua  tetes  larutan  pereaksi  Mayer.  Hasil  positif  apabila  terbentuk endapan putih atau kuning. Kemudian sebanyak 3 ml dimasukkan dalam tabung reaksi ditambah dengan pereaksi Dragendorff, apabila positif terbentuk endapan merah atau jingga [12].
2.6.2. Uji kandungan senyawa flavonoid
Sebanyak 1,0 ml sampel dengan konsentrasi 1 mg/ml diteteskan pada kertas saring kemudian dikeringkan. Kertas saring yang telah kering diuapi menggunakan uap amoniak [13].

## 2.6.3. Uji kandungan senyawa polifenol
Sebanyak 1,0 ml sampel ditambah dengan pereaksi FeCl3 sebanyak 3 tetes [14].

## 2.7. Uji penetapan kadar polifenol total
Analisis  Kuantitatif  polifenol  total  diawali  dengan  penentuan  operating  time,  panjang gelombang serapan maksimum, kurba baku, dan penetapan kadar. Pereaksi yang digunakan adalah reagen Folin-Ciocalteau (1:10), larutan Na2CO3 7,5 % [15].

## 2.8. Uji antioksidan
2.8.1. Uji daya antioksidan dengan kromatografi lapis tipis
Fase diam silika gel F- 254 dengan optimasi fase gerak TBA (Toluen : Butanol : Asam Asetat) hingga  didapat  fase  gerak  yang  menghasilkan  pemisahan    terbaik  [16].  Kromatogram  yang dihasilkan dideteksi aktivitas    antioksidan dengan cara disemprotkan DPPH 0,15 mM.
2.8.2. Uji aktivitas antioksidan
Pembanding  yang  digunakan  adalah  kuersetin,  diawali  dengan  penentuan  operating  time larutan DPPH 0,1 Mm, panjang Gelombang Serapan    maksimal Larutan DPPH 0,1 mM [17].

## 2.8.3. Uji aktivitas antioksidan dengan metode DPPH
Masing-masing  1,0  mL  ekstrak  etanol  daun  awar-awar  dan  larutan  pembanding  kuersetin dengan berbagai konsentrasi dikocok kuat dengan 1,0 mL larutan DPPH 0,15 mM. Campuran larutan tersebut  disimpan  ditempat  gelap  selama  operating  time.  Kemudian  absorbansinya  diukur  pada operating  time  dan  panjang  gelombang  serapan  maksimal  yang  diperoleh  DPPH  dengan spektrofotometer UV-Vis [17].

## 2.8.4. Analisis data
Data yang diperoleh adalah data absorbansi larutan DPPH sisa yang tidak bereaksi dengan sampel. Aktivitas antioksidan sampel ditentukan oleh besarnya hambatan serapan radikal DPPH melalui perhitungan persentase (%) Penangkapan radikal bebas dengan menggunakan rumus [17] :
% Penangkapan radikal bebas = (Absorban blanko – Absorban sampel)
Absorban blanko
× 100 %
Harga persen penangkapan radikal bebas yang diperoleh kemudian    digunakan untuk menentukan nilai ES 50 (Effective scavenging).

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1. Penetapan kadar air dan skrining kimia
Penetapan kadar air ekstrak etanol daun awar-awar dilakukan    dengan destilasi toluen. Hasil penetapan    kadar air rata-rata ekstrak diperoleh (5,89±0,89)%, hal ini sesuai dengan kadar air yang  dipersyaratkan  yaitu  <  10%.  Serbuk  simplisia  dianggap  memenuhi  syarat  simplisia  standar untuk meminimalisir tumbuhnya jamur dan    kapang.
Skrining fitokimia Alkaloid dengan pereaksi Mayer dan Dragendorf, hasil uji positif alkaloid dengan  pereaksi  Mayer,  terbentuk  endapan  putih/kekuningan.  Hal  ini  karena  nitrogen  alkaloid bereaksi dengan anion tetraiodomerkurat dari kalium tetratiodomerkurat (II) membentuk kompleks alkaloid-tetraiodomerkurat.  Pereaksi  Dragendorff  dihasilkan  endapan  jingga  karena  nitrogen bereaksi  dengan  anion  tetraiodobismutat.  Hasil  identifikasi  polifenol  dengan  pereaksi FeCl 3 diperoleh  warna  hitam  kebiruan  menunjukkan  bahwa  sampel  tersebut  positif  mengandung polifenol.
Hasil  identifikasi  Flavonoid  dengan  Uap  amoniak diperoleh  warna  kuning  intensif  yang timbul  menunjukkan  adanya  senyawa  flavonoid.  Warna  kuning  tersebut  disebabkan  karena pembentukan  struktur  kinoid  yang  mengandung  ikatan  rangkap  terkonjugasi  yang  lebih  panjang dan planar sehingga dapat berfluorosensi [18] . Hasil uji skrining fitokimia dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil uji skrining fitokimia ektrak etanol 70% daun awar-awar
Pereaksi Sebelum Sesudah Keterangan Meyer Positif terbentuk endapan putih
kekuningan
Dragendorff
Positif terbentuk warna jingga
FeCl3 Positif
terbentuk warna hitam kebiruaan
Lanjutan Tabel 1...
Uap Amoniak Positif terbentuk warna kuning

## 3.2. Uji senyawa antioksidan
Uji ada senyawa antioksidan dengan  menggunakan KLT. Fase gerak yang digunakan di dalam  KLT  diperoleh  dari hasil  orientasi,  sehingga  diperoleh  fase  gerak  yang  sesuai  untuk  dapat memisahkan  komponen  yang  terkandung  di  dalam  ekstrak  etanol  etanol,  yaitu  TBA  (Toluen: Butanol: Asam asetat) dengan perbandingan (3:8:3). Fase diam yang digunakan adalah silika gel F254 [19].
Spot  yang  menunjukkan  perubahan  warna  kuning  cerah  dengan  latar  ungu  pada  sinar tampak  menunjukkan  aktivitas  antioksidan  [16].  Hasil  KLT  uji  aktivitas  antioksidan  setelah penyemprotan pereaksi DPPH 0,15 mM dapat dilihat di Gambar 1.
Gambar 1. Profil KLT Hasil Uji Antioksidan ekstrak etanol    dengan    pereaksi DPPH 0,15 mM, FD (Silika gel F 254) dan FG (Toluen: Butanol: Asam Asetat= 3:8:3). A.pada UV 254 Sebelum disemprot), (B pada. UV 254 Setelah disemprot)
Hasil  uji  aktivitas  antioksidan  dengan  pereaksi  semprot  DPPH  0,15  mM  pada  visual menunjukkan bahwa hasil spot positif memiliki aktivitas antioksidan yang dilihat dari perubahan warna  menjadi  kuning  cerah  pada  Rf  sampel  =  0,90  dan  Rf standar  =  0,925.  Skrining  antioksidan ekstrak etanol daun awar-awar mampu meredam radikal DPPH atau memiliki aktivitas antioksidan yaitu senyawa flavonoid.

## 3.3. Analisis kuantitatif kadar fenolik
Kadar  senyawa  fenolik  menggunakan  pereaksi  Folin  Ciocalteau  (1:10).  Pereaksi  ini mengoksidasi  fenolat  (garam  alkali)  atau  gugus  fenolik  hidroksi  mereduksi  asam  heteropoli (fosfomolibdat-fosfotungsat) yang terdapat dalam pereaksi Folin Ciocalteau menjadi suatu kompleks molibdenum-tungsten.  Reaksi  berlangsung  sempurna  dalam  suasana  basa.  Produk  reaksi membentuk  kompleks  molibdenum-tungsten  berwarna  biru.  Warna  biru  yang  terbentuk  akan semakin  pekat,  setara  dengan  konsentrasi  ion  fenolat  yang  terbentuk  [20].  Gambar  2  menyajikan reaksi dengan pereaksi Folin-Ciucalteu.
Gambar 2. Reaksi reagen Folin Ciocalteau dengan polifenol Tabel 2. Kadar fenolik total ekstrak etanol 70% daun awar-awar
Replikasi  Bobot (mg) Abs X (µg/mL)  Vol (mL)  Fp Kadar (% b/b EAG) 1 25,2 0,348 16,66 25 5 8,21 2 24,8 0,334 15,02 25 5 7,57 3 25,0 0,353 17,09 25 5 8,54 4 25,1 0,350 16,77 25 5 8,35 5 24,8 0,340 15,67 25 5 7,90 (Rata-rata) 8,11 SD (standart deviasi) 0,383 CV (Coevisien Variasi) 4,72% LE (Limit of error) 0,364
Dari data    pada Tabel 1, kadar fenolik total ekstrak etanol daun awar-awar yaitu 8,11 ± 0,364 % b/b Ekivalen Asam Galat. Hasil statistik nilai CV kurang dari 5% sehingga homogenitas data memenuhi syarat karena kurang dari 5% [21].

## 3.4. Uji aktivitas antioksidan
Metode  untuk  antioksidan  dengan  DPPH.  Parameter  yang  digunakan  adalah  nilai  ES 50 (Effective scavenging). Aktivitas penangkapan radikal bebas dan nilai ES 50 oleh sampel dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol dengan Metode DPPH
Replikasi ES50 ( µg/mL) ekstrak etanol  ES50 Kuersetin (µg/mL) 1 22,10 4,49 2 21,53 4,47 3 20,33 4,51 4 21,14 4,49 5 20,93 4,68 6 21,11 4,59 Rerata ± LE 21,19 ±0,56 4,54±0,08 CV (%) 2,79 1,81 x
Menurut    Molyneux (2004) sampel yang  memiliki    nilai ES 50 ˂ 50 μg/ml memiliki tingkat kekuatan  antioksidan  kategori  sangat  kuat,  50-100  μg/ml  antioksidan  kuat,  100-150  μg/ml antioksidan  sedang,  150-200  μg/ml  antioksidan  lemah  dan ˃ 200  μg/ml  antioksidan  sangat  lemah [22]. Berdasarkan Tabel 3, kuersetin memiliki ES 50 sebesar 4,54 μg/ml, sedangkan nilai ES 50 ekstrak etanol daun awar-awar sebesar 21,19 μg/mL, termasuk memiliki potensi antioksidan kategori sangat kuat.

## 4. KESIMPULAN
Kadar fenolik total ekstrak etanol 70% daun awar-awar sebesar 8,11% Ekivalen Asam Galat. Nilai ES 50 ekstrak etanol daun awar-awar    adalah    21,19 μg/mL, dan standar kuersetin adalah 4,542 μg/mL, sehingga mempunyai aktivitas antioksidan sangat kuat.
Ucapan  terimakasih:  Penulis  juga  mengucapkan  terima  kasih  yang  sebesar-besarnya  kepada Fakultas  Farmasi  Universitas  Ahmad  Dahlan  atas  fasilitas  laboratorium  Kimia  Farmasi  selama penelitian ini dilaksanakan.

## Reference
1. Russo, Leopoldini MN and Toscano M. The Molecular Basis of Working Mechanism of Natural Polyphenolic Antioxidants. Food Chemistry. 2011, 125: 288-306
2. Bawa AAP, Bogoriani NW and Diantariani NP. Ekstraksi Zat Warna Alam dari Bonggol Tanaman Pisang (Musa paradiasciaca ) dengan Metode Maserasi, Refluks dan Sokletasi. Jurnal Kimia Universitas Udatyana. 2014, 8(1): 113-119
3. Zhou C, Sun C, Chen K, and Li X. Flavonoids, Phenolics and Antioxidant Capacity in the Flower of Eriobotrya japonica Lind L. International Journal of Molecular Sciences. 2011, 12(5): 2935-2945
4. Lansky  EP,  Paavilainen  HM,  Pawlus  AD  and  Newman  RA.  Ficus  spp  :  Ethnobotany  and  Potential  as Anticancer and Anti-Inflammatory Agents. Journal of Ethnopharmacology. 2008, 119: 195-213
5. Singh SBK and RP. Genesis and Development of DPPH Method of Antioxidant assay. Journal of Food Science and Technology. 2011, 48(4): 412-422
6. Damu  AGK,  Ping-Chung  S,  Lian  Shi  L,  Chia-Ying  K,  Chang-Seng  W,  Pei-Lin  W  and  Tian  Shung. Phenantroindolizidine: Alkaloids from the Stems of Ficus septica. Journal of Natural Product. 2005, 68: 1071- 1075
7. Yang  JY,  Walicki  J,  Michod  D,  Dubuis  G  and  Widmann  C.  Impaired  Akt  Activity  Down-Modulation, Caspase-3 Activation, and Apoptosis in Cells Expressing a Caspase-resistant Mutant of RasGAP at Position 157. Molecular Biology of the Cell. 2005, 16(8): 3511-3520
8. Magalhaes LM, Segundo MA, Reis S, Lima and Jose LFC. Methodological Aspects about In Vitro Evaluation of Antioxidant Properties. Analytica Chimica Acta. 2008, 613: 1-19
9. Choi EM, Ji H, Oh JY, Kim YM, Ha KS, Ha J, Kim JA, Han. COX-2 Regulates PD53 Activity and Inhibits DNA Damage-Induced Apoptosis. Cancer Research. 2005, 328(4): 1107-1112
10. Taha MR, Muhammad A, Mohammad A, Madi A, Khalil E, Juan A, Bayan A, Ali A and Wade Y. Effect of Drying Process on Total Phenolics, Antioxidant Activity and Flavonoid Contents of Common Mediterranean Herbs. International Journal of Agricultural and Biological Engineering. 2015, 8(2): 145
11. Anonim. Farmakope Herbal Indonesia (Edisi I). Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, 2008
12. Dehpour AA, Ebrahimzadeh MA, Fazel NS and Mohammad NS. Antioxidant Activity of Methanol Extract of Ferula assafoetida and Its Essential Oil Composition. Grasas Aceites. 2009, 60(4): 405-412
13. Salamah N and Farahana L. Antioxidant Activity Assay of Ethanolic Extract of Centella asiatica (L) Urb Herb using Phosphomolybdate Method. Pharmaciana. 2014, 5(1): 24-25
14. Renee  LB,  Kubola  J,  Siriamompun  S,  Herald  TJ  and  Shi  YC.  Wheat  Bran  Particles  Size  Influence  on Phytochemical Extracbility and Antioxidant Properties. Journal of Food Chemistry. 2014, 152: 483-490
15. Alfian  R  and  Susanti  H.  Penetapan  Kadar  Fenolik  Total  Ekstrak  Metanol  Kelopak  Bunga  Rosella  Merah (Hibiscus  sabdariffa  Linn)  dengan  Variasi  Tempat  Tumbuh  secara  Spektrofotometri.  Jurnal  Ilmiah Kefarmasian. 2012, 2(1): 73-80
16. Faskalia  and  Muhammad  AW.  Skrining  Fitokimia,  Uji  Aktivitas  Antioksidan  dan  Uji  Sitotoksik  Ekstrak Metanol pada Akar dan Kulit Batang Soma (Ploiarium alternifolium). JKK. 2014, 3(3): 1-6
17. Salamah N and Widyasari E. Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol Daun Kelengkeng (Euphoria longan (L) Steud) dengan Metode Penangkapan Radikal 2-2’-Difenil-1-Pikrilhidrazil. Pharmaciana. 2015, 5(1): 25-34
18. Warsi  and  Guntarti  A.  Aktivitas  Penangkapan  Radikal  2-2’-Difenil-1-Pikrilhidrazil  (DPPH)  oleh  Ekstrak Metanol Paprika Merah (Capsicum annuum L). Media Farmasi. 2016, 13(1): 23-34
19. Cheng SH, Khoo HE, Ismail A, Abdul-Hamid A and Barakatun-Nisak MY. Influence of Extraction Solvents on Cosmos caudatus Leaf Antioxidant Properties. Iranian Journal of Science and Technology. 2016, 40: 51-58
20. Apsari PD and Susanti H. Penetapan Kadar Fenolik Total Ekstrak Metanol Kelopak Bunga Rosella Merah (Hibiscus sabdariffa L) dengan Variasi Tempat Tumbuh secara Spektrofotometri. Jurnal Ilmiah Kefarmasian. 2011, 2(1): 73-80
21. Bunawan H, Syarul NB and Siti NB. Cosmos caudatus Kunth: A Traditional Medicinal Herb. Global Journal of Pharmacology. 2014, 8(3): 420-426
22. Molynuex P. The Use of the Stable Free Radical Diphenylpicrylhidrazyl (DPPH) for Estimating Antioxidant Activity. Journal Science of Technology. 2004, 26(2): 211-219
© 2019 by the authors. Submitted for possible open access publication under the terms and  conditions  of  the  Creative  Commons  Attribution  (CC  BY)  license (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).