## JAGROS Journal of Agrotechnonogy and  Science
Jurnal Agroteknologi dan sains Fakultas Pertanian, Universitas Garut P ISSN : 2775-0485 , E ISSN : 2548-7752
Determinasi Total Fenol dan Kadar Total Flavonoid Pada Ekstrak Batang Tanaman Kemuning ( Murraya paniculata (L.) Jack)
Determination of Total Phenol, Total Flavonoid Levels in the Methanol Extract Stem Kemuning (Murraya Paniculata (L.) Jack)
Noviyanti 1, 2* ; Farid Perdana 2, 3 ; Irfan Ahmad Rifansyah 2 ; Novriza Sativa 4
1 Biologi, Fakultas Sains, Universiti Putra Malaysia
2 Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Garut
3 Farmasi, Sekolah Farmasi, Institut Teknologi Bandung
4 Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Garut
Email: noviyanti@uniga.ac.id

## Abstrak
Tumbuhan kemuning ( Murraya paniculata (L.) Jack) merupakan salah satu spesies dari  genus  Murraya  yang  termasuk  ke  dalam  keluarga  Rustaceae.  Tanaman  ini dimanfaatkan  oleh  masyarakat  luas  sebagai tanaman  obat.   Tanaman  ini  memiliki beberapa  kelompok  senyawa  yang  terkandung  dalam  spesies Murraya  paniculata (L.) Jack yaitu alkaloid, fenol dan Beta-caryophyllene . Tujuan penelitian ini yaitu menentukan  kadar  total  fenol  dan  flavonoid  serta  karakteristik  untuk  standarisasi. Dari hasil penelitian fenol total tanaman kemuning yaitu sebesar 38,3219 mg GAE/g sampel  dan  flavonoid  total  yaitu  sebesar  22,0526  mg  QE/g  sampel.  Hasil pemeriksaan  karakteristik  simplisia  batang  kemuning  telah  sesuai  dengan persyaratan yang telah ditetapkan oleh MMI. Hasil penafisan fitokimia simplisia dan ekstrak yaitu mengandung senyawa alkaloid, flavonoid dan saponin.
Kata kunci : Kemuning; Mikroskopik; Asam Galat; Kadar Air

## Abstract
The Kemuning plant (Murraya paniculata (L.) Jack) belongs to the Murraya genus within  the  Rustaceae  family.  It  serves  as  a  medicinal  plant  widely  used  by  the community.  Within  the  species  Murraya  paniculata  (L.)  Jack,  this  plant  contains various groups of compounds, including alkaloids, phenols, and Beta-caryophyllene. The objective of this study is to determine the total levels of phenols and flavonoids, as  well  as  to  characterize  them  for  standardization.  The  study  yielded  results indicating that the total phenol content in the kemuning plant was 38.3219 mg GAE/g of samples, while the total flavonoid content was 22.0526 mg QE/g of samples. The examination  of  the  characteristics  of  the  kemuning  stem  simplisia  aligns  with  the standards  established  by  MMI.  Furthermore,  the  phytochemical  screening  results revealed the presence of alkaloid compounds, flavonoids, and saponins in both the simplisia and the extract.
Keywords :  Kemuning: Microscopic; Galat Acid; Water Content

## 1 Pendahuluan
Senyawa flavonoid atau polifenol merupakan salah satu kelompok senyawa terpenting yang terdapat pada tumbuhan. Polifenol merupakan suatu produk hasil dari metabolisme sekunder tumbuhan. Secara kimia, istilah “fenolik” atau ”polifenol” dapat diartikan sebagai suatu senyawa yang  memiliki  sebuah  cincin  aromatik  yang  mengandung  satu  atau  lebih  gugus  hidroksil  seta derivat fungsional (ester, metil ether, glikosid, dan lain-lain). Kebanyakan, fenolik mempunyai dua  atau  lebih  gugus  hidroksil  yang  merupakan  suatu  substansi  yang  bioaktif  terdapat  pada makanan yang berasal dari tumbuhan. Salah satu tanaman yang memiliki senyawa tersebut adalah tanaman kemuning (Gill, 2014).
Tanaman  kemuning  berupa  pohon,  tinggi  3-7  meter,  warna  kecoklatan  kotor.  Daun majemuk, anak daun 4-7 mm, permukaan licin, bentuk corong, ujung dan pangkal runcing, tepi rata, pertulangan menyirip, warna hijau. Bunga majemuk, bentuk tandan, panjang mahkota 6-27 mm, lebar 4-10 mm, warna putih. Buah buni, diameter lebih kurang 1 cm, buah muda berwarna hijau setelah tua menjadi warna merah, tumbuh liar di ladang pada daerah lembab dengan cahaya cukup di dataran dari 950 mdpl (Sayuti, 2015)
Di  wilayah  Asia  kemuning  banyak  dijadikan  sebagai tanaman  obat.  Berdasarkan  hasil penelitian tanaman kemuning atau Murraya paniculata (L) Jack dapat menghasilkan minyak yang diperoleh dari kulit batangnya serta dapat dimanfaatkan sebagai obat untuk menyembuhkan sakit gigi.  Daun  kemuning  digunakan  untuk  kencing  nanah,  obesitas  atau  lemak  tubuh  berlebihan, gangguan haid, keputihan, pengobatan radang buah zakar atau orchitis , radang saluran pernafasan atau bronchitis, antelmintik, dan herpes (Achmad, 2013).
Penelitian  lain  juga  menemukan  beraneka  ragam  senyawa  kimia turunan  kumarin, senyawa  flavon  dengan  tingkat  oksigenasi  yang  tinggi,  beserta  senyawa  alkaloid.  Senyawa kumarin yang dihasilkan oleh tumbuhan kemuning ( Murraya paniculata (L) Jack), dicirikan oleh adanya gugus metoksil pada atom karbon C-7 atau pada atom karbon C-5 dan C-7, bersama-sama dengan  substituen  isoprenil  pada  atom  karbon  C-8,  menghasilkan  turunan  7-metoksi-8- prenilkumarin dan 5, 7-dimetoksi-8-prenilkumarin (Achmad, 2013; Nirmala, 2022).
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  penetapan  kadar  fenol  total  dan flavonoid total pada batang dari tanaman kemuning ( Murraya paniculata (L) Jack). Penelitian ini diharapkan  dapat  memberikan  manfaat  bagi  perkembangan  ilmu  pengetahuan  khususnya  ilmu kefarmasian dan dapat dimanfaatkan oleh masyarakat secara umum.

## 2 Metode Penelitian
Metode  penelitian  ini  meliputi  penyiapan  bahan,  pemeriksaan  karakteristik  simplisia, penafisan  fitokimia,  ekstraksi,  penetapan  kadar  fenol  total,  penetapan  kadar  flavonoid  total. Penyiapan bahan tanaman batang kemuning ( Murraya paniculata (L.) Jack) yang diperoleh dari Kecamatan  Balubur  Limbangan,  Kabupaten  Garut  dan  dideterminasi  di  Sekolah  Ilmu  dan Teknologi Hayati Institut Teknologi Bandung. Pengolahan dari bahan menjadi simplisia meliputi sortasi basah, pencucian, perajangan, pengeringan, sortasi kering, pembuatan serbuk simplisia.
Pemeriksaan  karakteristik  simplisia  meliputi,  pemeriksaan  makroskopik,  penetapan  kadar  air, penetapan kadar abu total, penetapan kadar abu larut air, penetapan kadar abu tidak larut asam, penetapan kadar sari larut air, penetapan kadar sari larut etanol dan penetapan susut pengeringan (Depkes, 2017).
Penafisan fitokimia dilakukan untuk mengetahui komponen senyawa yang terkandung di dalam  batang  kemuning.  Penafisan  fitokimia  dimulai  dari  pemeriksaan  alkaloid,  flavonoid, steroid/  triterpenoid,  saponin,  tanin  dan  kuinon.  Metode  ekstraksi  yang  dilakukan  dengan maserasi  menggunakan  pelarut  metanol  dilakukan  selama  3  kali  dengan  penggantian  pelarut setiap 24 jam didalam wadah tertutup rapat dengan pengadukan beberapa kali, ekstrak kemudian dipekatkan dengan alat rotary evaporator sehingga diperoleh ekstrak kental. Setelah itu dilakukan penetapan  kadar  flavonoid  total  dan  penetapan  kadar  fenol  total  (Depkes,  1985;  Warsi,  2017; Achmad, 2013).

## 2.1 Hasil dan Pembahasan

## 2.1.1 Deskripsi Tanaman
Kemuning (Murraya paniculata (L.) Jack), juga dikenal sebagai Orange Jessamine, adalah tumbuhan yang tumbuh di daerah tropis dengan wujud seperti pohon dan rata-rata dapat tumbuh hingga tiga hingga tujuh meter tinggi. Batang berkayu, beralur, dan berwarna cokelat. Daunnya banyak  dengan  anak  daun  4-7  selebaran  dan  berwarna  hijau  sepanjang  musim.  Permukaan daunnya cukup licin, dengan ujung dan pangkal yang runcing, tepi rata, dan pertulangan menyirip. Tumbuhan indah ini memiliki bunga putih dan buah putih yang apabila matang menjadi berwarna merah dan berdiameter kurang lebih 1 cm. Genus tumbuhan berbunga Murraya paniculata (L.) Jack termasuk dalam keluarga Rutaceae dan memiliki hubungan dekat dengan citrus. Kemuning (Murraya  paniculata  (L)  Jack)  biasanya  hidup  di  daerah  khatulistiwa  atau  tropis  dan  sebagian kecil  di  daerah  subtropis  di  seluruh  dunia.  Indonesia  adalah  salah  satu  tempat  yang  dapat ditemukan. Selain digunakan sebagai tanaman obat, Murraya paniculata (L) Jack atau kemuning juga sering dibudidayakan sebagai pohon hias atau pagar tanaman di Indonesia (Permenkes, 2016; Dalimartha, 2014).
Pada penelitian ini tanaman yang digunakan adalah tanaman batang kemuning ( Murraya paniculata (L.)  Jack)  yang  diambil  dari  kecamatan  Balubur  Limbangan,  kabupaten  Garut. Tanaman kemuning dapat dilihat pada gambar 1.
Gambar 1 Dokumentasi Pribadi Tanaman kemuning ( Murraya paniculata (L.) Jack)
Vol. 7; No.  2 ; Tahun 2023 Halaman 78 - 92
Adapun  untuk  taksonomi  dari  tanaman  kemuning  menurut  Dalimartha  (2014)  adalah  sebagai berikut.
Kingdom : Plantae Divisi : Tracheophyta Kelas : Magnoliopsida Ordo : Sapindales Family : Rustaceae Genus : Murraya Species : Murraya paniculata (L.) Jack

## 2.1.2. Pemeriksaan Karakteristik Simplisia
Pemeriksaan  karakteristik  simplisia  meliputi,  pemeriksaan  makroskopik,  penetapan kadar  air,  penetapan  kadar  abu  total,  penetapan  kadar  abu  larut  air,  penetapan  kadar  abu  tidak larut asam, penetapan kadar sari larut air, penetapan kadar sari larut etanol dan penetapan susut pengeringan (Depkes, 2017).
Proses pertama untuk menentukan karakterisasi simplisia yang dilakukan untuk  adalah menentukan standar mutu dari simplisia sehingga layak untuk digunakan. Karakterisasi simplisia dimulai  dengan  pemeriksaan  makroskopik  batang  kemuning.  Pemeriksaan  organoleptik  yakni pengenalan secara fisik dengan menggunakan panca indera seperti bentuk, bau, rasa, warna, dan ukuran (Depkes, 2017). . Dari hasil pemeriksaan siimplisia batang tanaman kemuning ini memiliki bentuk bulat, warna putih, memiliki bau yang khas dan rasanya agak sepat. Sedangkan ukuran simplisia  batang  kemuning  memiliki    panjang  8,7  cm  dan  lebar  1  cm.  Pemeriksaan  hasil makroskopik simplisia batang kemuning dapat dilihat pada tabel 1 dan gambar 2.
Tabel 1

## Hasil Pemeriksaan Makroskopik Batang Kemuning
No Parameter Simplisia 1 Bentuk Bulat 2 Warna Putih 3 Bau Khas 4 Rasa Agak sepat 5 Ukuran P = 8,7 cm, L = 1cm, D = 2,8 cm

## Gambar 2 Dokumentasi pribadi makroskopik batang kemuning
Pemeriksaan selanjutnya yaitu pemeriksaan mikroskopik. Secara mikroskopik dilakukan dengan  melihat  anatomi  jaringan  serbuk  simplisia  batang  kemuning  ( Murraya  paniculata (L.) Jack)  dengan  mengamati  dibawah  mikroskop  yang  sebelumnya  serbuk  simplisia  telah  ditetesi dengan  larutan  kloralhidrat.    Hasil  pengamatan  serbuk  simplisia  batang  kemuning  ( Murraya paniculata (L.)  Jack),  memiliki  serabut  sklerenkim  yang  merupakan  jaringan  penguat  atau penyokong tumbuhan yang terdiri dari sel-sel yang mengalami penebalan sekunder pada dinding selnya, parenkim merupakan jaringan dasar dari sel-sel hidup adapun sebagian besar sel parenkim berbentuk segi banyak (polihedral) dan pada bagian tengah ruang selnya berisi zat-zat makanan cadangan,  berkas  pengangkut  merupakan  jaringan  yang  ada  pada  tumbuhan  yang  merupakan gabungan dari xilem dan floem, kristal kalsium oksalat bentuk roset merupakan hasil akhir dari pertukaran suatu zat yang terjadi disitoplasma (Depkes, 2017).
Epidermis bawah yang mengandung stomata untuk membantu mencegah kehilangan air dan mengatur pertukaran gas seperti oksigen dan karbon dioksida, epidermis atas sama dengan epidermis  pada  umumnya  sebagai  pelindung,  amilum  sebagai  penyimpanan  sementara  dari produk fotosintesis juga dapat tersimpan pada cadangan makanan, serabut xilem terbentuk dari dinding  sel  yang  tebal  serta  serabutnya  saling  melekat  dan  ujung  serabut  runcing  dan  dapat memasuki sel-sel lain saat memanjang (Depkes, 2017). Hasil uji mikroskopik dapat dilihat pada gambar 3.
Gambar 3 Mikroskopik batang kemuning
a b c d e f g h
Keterangan : a = serabut sklerenkim; b = parenkim; c= berkas pengangkut; d = kristal kalsium oksalat bentuk roset; e = epidermis bawah (stomata); f = epidermis atas; g = amilum; h = serabut xylem
Pemeriksaan  karakterisasi  simplisia  yang  selanjutnya  meliputi  penetapan  kadar  air, penetapan kadar abu total, penetapan kadar abu larut air, penetapan kadar abu tidak larut asam, penetapan kadar sari larut air, penetapan kadar sari larut etanol, dan penetapan susut pengeringan (Depkes, 2017).
Penetapan  kadar  air  dilakukan  untuk  mengetahui  kadar  air  yang  terkandung  di  dalam simplisia.  Susut  pengeringan  dilakukan  dengan  tujuan  untuk  memberikan  batasan  maksimal mengenai jumlah senyawa yang hilang pada suhu 105°C. Penetapan kadar abu total dilakukan dengan tujuan untuk memberikan gambaran kandungan mineral internal maupun eksternal yang berasal dari simplisia. Sedangkan kadar abu larut air dan kadar abu tidak larut asam bertujuan untuk mengetahui jumlah abu yang diperoleh dari mineral eksternal yang bersumber dari pengotor yang  berasal  dari  pasir  atau  tanah.  Penetapan  kadar  sari  larut  air  dan  kadar  sari  larut  etanol dilakukan untuk mengetahui jumlah senyawa yang dapat tersari dengan pelarut air dan pelarut etanol dari suatu simplisia (Depkes, 2017).
Hasil pemeriksaan karakteristik simplisia batang kemuning diperoleh kadar air 3,33%, kadar abu total 8,52%, kadar abu larut air 1,96%, kadar abu tidak larut asam 0,89%, kadar sari larut  air  2,2933%,  kadar  sari  larut  etanol  1,5733%,  dan  susut  pengeringan  4,1433%.  Dengan mengambil syarat standar dari daun kemuning yang tertera di Materia Medika Indonesia (MMI) untuk kadar air tidak lebih dari 10%, kadar abu total 15%, kadar abu yang tidak larut dalam asam 1,6%, kadar abu yang larut dalam air 225,5%, kadar sari yang larut dalam etanol 12%.
Untuk pemeriksaan kadar air simplisia sudah memiliki standar yang sesuai dengan MMI. Kadar  air  yang  diperoleh  yaitu  3,33%  yang  dibandingkan  dengan  melihat  data  standarisasi simplisia yaitu kurang dari 10%. Pemeriksaan ini sangat penting, karena jumlah air yang sangat tinggi  dapat  menyebabkan  tumbuhnya  bakteri  dan  jamur  yang  dapat  merusak  senyawa  yang terkandung di dalam simplisia (Putra, 2018).
Uji  yang  lainnya  yaitu  susut  pengeringan,  hasil  yang  diperoleh  dari  batang  kemuning yaitu  4,1433%.  Nilai  dari susut  pengeringan  akan  lebih  besar  dari  kadar  air  dikarenakan  fakta bahwa  saat  susut  pengeringan  terjadi,  kandungan-kandungan  dalam  oven  dapat  hilang  karena pemanasan.  Tidak  hanya  air,  tetapi  juga  kandungan  lain  seperti  minyak  atsiri,  yang  mudah menguap saat dipanaskan (Nirmala, 2022).
Parameter Selanjutnya yaitu kadar abu. Pentingnya penetapan pengujian ini adalah untuk mengetahui kandungan senyawa anorganik dalam simplisia batang kemuning (terutama analisis kandungan mineral) yang dapat diketahui dengan melakukan pemanasan pada suhu tinggi (sekitar 600°C) untuk menguapkan senyawa organik dalam simplisia batang kemuning. Mineral oksida dan senyawa anorganik yang tersisa, yang berarti pada simpisia. Selain itu, mengetahui berapa banyak logam transisi dan logam berat (seperti Pb, Hg, dan Cd) yang ada dalam simplisa daun suji adalah penting untuk menentukan kadar abu tidak larut asam.Logam berat dan transisi tidak larut  dengan  asam,  jadi  ketika  mereka  direaksikan  dengan  asam  kuat  HCl,  mereka  akan  tetap berbentuk  padatan  setelah  dipanaskan  (Nirmala,  2022).  Nilai  residu  0,89%  adalah  hasil  dari pembakaran abu HCl pekat yang lengkap dan kemudian dibakar atau dipanaskan kembali pada tanur.  Pengujian kadar abu tidak larut asam juga dapat digunakan untuk mengetahui kadar silikat, terutama  pasir  yang  menempel  pada  simplisia.  Hasilnya  menunjukkan  bahwa  kadar  abu  tidak larut asam pada simplisia daun suji sangat kecil, yang menunjukkan bahwa logam-logam tersebut tidak akan menurunkan kualitas simplisia.
Hasil pengujian karakteristik selanjutnya adalah kadar sari larut air dan larut etanol. Nilai dari  kadar  sari  larut  air  2,2933%,  kadar  sari  larut  etanol  1,5733%.  Tujuan    untuk  menetapkan parameter  kadar  sari,  atau jumlah  rendemen  ekstrak  yang  dihasilkan  berdasarkan  pelarut  yang digunakan.    Ini  menunjukkan  bahwa  jika  pelarut  yang  digunakan  adalah  air,  simplisia  batang
kemuning  memiliki  lebih  banyak  senyawa  yang  dapat  terlarut  atau  diekstraksi.  Ini  karena  air, sebagai pelarut yang bersifat polar, memiliki kemampuan yang sangat besar untuk  melarutkan senyawa-senyawa  polar  berdasarkan  prinsip  like  dissolve  like.  Dengan  demikian,  hasil  yang diperoleh  menunjukkan  bahwa  pada  simplisia  daun  suji  lebih  banyak  senyawa  polar  daripada senyawa semi polar.  Karena etanol dianggap sebagai pelarut universal yang dapat melarutkan selain dari senyawa polar (Nirmala, 2022), kadar sari larut etanol yang relatif kecil membuat hal ini lebih kuat. Hasil pemeriksaan karakteristik simplisia dapat dilihat pada tabel 2
Tabel 2

## Hasil Pemeriksaan Karakterisasi Simplisia Batang Kemuning
No Karakterisasi Kadar (%) MMI (%) 1 Kadar Air 3,33 < 10 2 Susut Pengeringan 4,1433 - 3 Kadar Abu Total 8,52 15 4 Kadar Abu Larut Air 1,96 - 5 Kadar Abu Tidak Larut Asam 0,89 1,6 6 Kadar Sari Larut Air 2,2933 25,5 7 Kadar Sari Larut Etanol 1,5733 12

## 2.1.2. Penapisan Fitokimia Simplisia
Penapisan fitokimia pada simplisia dan ekstrak dengan menggunakan pereaksi tertentu sebagai pengujian secara kualitatif. Analisis kualitatif ini bertujuan untuk mengetahui apakah ada analit dalam sampel.  Selain itu, untuk melakukan hipotesa pengidentifikasian kandungan kimia yang terdapat dalam bahan, baik itu simplisia maupun  ekstrak, proses pertama yang dilakukan adalah  penapisan  fitokimia.  Penapisan  fitokimia  dilakukan  untuk  mengetahui  apakah  ada flavonoid,  antrakuinon,  polifenol,  tanin,  dan  saponin.    Ada  tidaknya  metabolit  sekunder monoterpen atau seskuiterpen atau steroid atau triterpenoid untuk menentukan golongan senyawa terpenoid (Nirmala, 2022).
Hasil penapisan  dari simplisia  dan ekstrak  batang  kemuning  pada  tebel  3  menunjukan adanya golongan senyawa alkaloid, flavonoid, dan saponin. Dengan melihat senyawa yang ada pada daun kemuning yang sudah diteliti terdapat senyawa saponin, tanin, flavonoid, dan alkaloid. Dari  data  yang  ada  menunjukan  bahwa  dari  daun  dan  batang  kemuning  memiliki  senyawa metabolit  sekunder  yang  sama,  namun  pada  batang  kemuning  tidak  terdapat  senyawa  tannin (Roni, 2019). Dari hasil penapisan yang diperoleh terdapat adanya golongan senyawa alkaloid, flavonoid, dan saponin pada simplisia batang kemuning ( Murraya paniculata (L.) Jack).
Vol. 7; No.  2 ; Tahun 2023 Halaman 78 - 92

## Hasil Pemeriksaan Penapisan Simplisia dan Ekstrak Batang Kemuning
No Pemeriksaan Batang Kemuning Simplisia Ekstrak 1 Alkaloid + + 2 Flavonoid + + 3 Saponin + + 4 Tanin - - 5 Steroid/ Triterpenoid - - 6 Kuinon - -
Keterangan: (+) = terdeteksi
(-) = tidak terdeteksi
Hasil pengujian menunjukkan  adanya  alkaloid  pada simplisia batang kemuning dan ekstrak. Saat direaksikan dengan pereaksi Mayer dan Dragendorf, endapan terbentuk. Endapan  ini  terbentuk  ketika  kompleks  kalium-alkaloid  yang  akan  mengendap direaksikan dengan pereaksi  tertentu. Pereaksi  Mayer menghasilkan endapan berwarna putih,  sedangkan  pereaksi  Dragendorf  menghasilkan  endapan  berwarna  coklat kemerahan.Alkaloid  adalah  senyawa  basa  yang  berbentuk  garam  pada  tanaman  dan disintesis dari asam amino atau derivatnya (Nirmala, 2022).
Pengujian  selanjutnya  yaitu  senyawa  flavonoid,  bahan  uji  simplisia  batang kemuning  menhasilkan  warna  merah  dan  bahan  uji  ekstraknya  berwarna  kuning. Walaupun  warnanya  berbeda,  keduanya  menunjukkan  efek  flavonoid  yang  baik.  Ini karena  presentasi  senyawa  flavonoid  pada  simplisia  lebih  besar  daripada  pada  ekstrak yang telah diekstraksi  menggunakan  metanol,  yang kurang polar dibandingkan dengan air. Karena fakta bahwa flavonoid memiliki gugus hidroksil lebih dari satu, hubungannya dengan sifat kepolaran mereka menunjukkan bahwa ketika flavonoid dilarutkan dengan pelarut yang lebih polar, mereka akan menjadi lebih larut (Roni, 2019; Nirmala, 2022).
Pada  tabel  hasil  pengujian,  kemudian  diketahui  bahwa  simplisia  dan  ekstrak batang kemuning mengandung saponin. Metanol, pelarut pengekstraksi yang digunakan, berkontribusi  pada  hal  ini.    Metanol  memiliki  kapasitas  yang  lebih  rendah  untuk melarutkan saponin daripada air, pelarut dengan kepolaran tertinggi. Sifat larut saponin dalam  air  sehingga  dapat  membentuk  busa  koloidal.  Karena  konsentrasi  saponin  pada daun  suji  sangat  kecil,  serta  sifat  etanol  yang  kurang  polar  dibandingkan  dengan  air, mungkin tidak ditemukan saponin pada ekstrak (Roni, 2019).
Vol. 7; No.  2 ; Tahun 2023 Halaman 78 - 92
Hasil pengujian untuk  senyawa tanin,  simplisia  maupun ekstrak tidak memiliki warna hijau atau hijau gelap. Warna ini disebabkan oleh reaksi antara gugus fenol tanin dengan  ion  Fe3+  dari  FeCl3.  Tanin  dianggap  memiliki  gugus  fenol  karena  merupakan senyawa  golongan  polifenol.  Senyawa  monoterpen/seskuiterpen  tidak  terdapat  pada simplisia ataupun ekstrak batang kemuning.  Pengujian senyawa terpenoid ini dilakukan dengan  menambah  eter  ke  bahan  uji;  eter  bertindak  sebagai  pengekstraksi, memungkinkan senyawa terpenoid ditarik atau dilarutkan dari bahan uji.  Minyak atsiri biasanya  tidak  berwarna,  terdiri  dari  monoterpen  dan  seskuiterpen.    Hasilnya  tidak menunjukkan  warna  ungu..  Dari    hasil    pengujian  juga  diketahui    bahwa    baik    pada simplisia  maupun  pada  ekstrak  tidak  mengandung senyawa triterpen/steroid  dengan dihasilkannya  warna  selain biru.  Warna  tersebut tidak dapat  muncul  karena  tidak adanya  reaksi  dari  senyawa  yang  berhasil  terekstraksi  atau  terlarut  oleh petroleum eter    saat    direaksikan    dengan    pereaksi    khusus    pendeteksi    triterpen/steroid    yaitu pereaksi Liebermann Burchard (campuran asam asetat anhidrat dan kloroform)  (Aryani, 2022).

## 2.1.5 Total Flavonoid dan Fenol Tanaman Kemuning

## 2.1.5.1 Penetapan Kadar Fenol
Penentuan kadar fenol total dari ekstrak metanol batang kemuning dengan menggunakan prinsip  Folin  Ciocalteu  yang  didasarkan  pada  reaksi  oksidasi  reduksi.  Prinsip  pengukuran kandungan  fenol  dengan  reagen  Folin  Ciocalteu  adalah  terbentuknya  senyawa  kompleks berwarna  biru.  Warna  biru  yang  terbentuk  akan  semakin  pekat,  setara  dengan  konsentrasi  ion fenolat  yang  terbentuk.  Penambahan  folin-ciocalteu  menyebabkan  reaksi  redoks,  di  mana senyawa  fenolik  mereduksi  fosfomolibdat  dan  fosfotungstat  di  dalam  folin-ciocalteu, menghasilkan  molibdenum  yang  berwarna  biru.  Folin  yang  belum  tereduksi  berwarna  kuning, tetapi setelah tereduksi akan berwarna hijau atau biru. Warna biru yang lebih pekat menunjukkan bahwa  senyawa  fenolik  yang  lebih  banyak  memiliki  ion  fenolat  yang  lebih  banyak  yang  akan mereduksi  asam  heteropoli,  yang  menghasilkan  warna  biru  yang  lebih  pekat..  Asam  galat merupakan turunan dari asam hidroksibenzoat yang tergolong asam fenol sederhana (Wachidah, 2013).
Pada Tabel 3 dan Gambar 4 diketahui kandungan senyawa fenol dengan menggunakan persamaan kurva baku asam galat. Dari persamaan regresi linier standar asam galat y = 0,0088x + 0,0051, dimana (y) merupakan absorbansi sampel dengan koefisien korelasi (r) sebesar 0,9925. Nilai r yang mendekati satu menunjukkan persamaan tersebut linier dan dapat digunakan karena konsentrasi yang mempengaruhi absorbansi sebesar 99,25. Hasil pengujian kadar senyawa fenol total dari eksrak metanol batang kemuning didapatkan 38,3219 mg GAE/g ekstrak. Kurva dan hasil dapat dilihat di gambar 4 dan tabel 4.
Vol. 7; No.  2 ; Tahun 2023 Halaman 78 - 92
Gambar 4 Kurva kalibrasi Asam Galat
Tabel 4 Konsentrasi dan Kadar Fenol Total Sampel Absorban Konsentrasi (mg/L) Kadar Fenol Total (mgGAE/ g sampel) Rata-rata Kadar Fenol Total (mgGAE/ g sampel) Batang Kemuning 0,341 38,1704 38,1704 38,3219 0,342 38,3840 38,2840 0,344 38,5113 38,5113

## 2.1.5.1 Penetapan Kadar Flavonoid
Pemeriksaan  kandungan  flavonoid  dilakukan  dengan  penambahan  AlCl 3 yang  akan membentuk  ikatan  kompleks  dengan  gugus  hidroksil  dari  senyawa  flavonoid.  Kandungan flavonoid dihitung menggunakan persamaan regresi linier dari standar kuersetin yaitu y = 0,0107x – 0,1704, dimana (y) merupakan absorbansi sampel, dengan koefisien (r) sebesar 0,9976. Nilai r yang  mendekati  satu  menunjukkan  persamaan  tersebut  linier  dan  dapat  digunakan  karena konsentrasi yang mempengaruhi absorbansi sebesar 99,76%. Kuersetin adalah senyawa aglikon flavonoid yang termasuk dalam golongan flavonol, dan rutin adalah senyawa glikon flavonoid yang  termasuk  dalam  golongan  flavonol.  Oleh  karena  itu,  diketahui  bahwa  sediaan  ekstrak mengandung  senyawa  yang  diprediksikan  mengandung  senyawa  flavonoid  dengan  golongan flavonol,  dan  jumlah  equivalensi  senyawa  flavonol  dapat  dilihat  dari  perhitungan  jumlah quarcetin  dan  rutin  yang  diperoleh  (Apridamayanti,  2021).  Hasil  pengujian  dapat  dilihat  pada gambar 4 dan tabel 5
y = 0.0088x + 0.0051 R² = 0.9925 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0 20 40 60 80 Abs o rba n Konsentrasi (ppm)
Gambar 5 Kurva kalibrasi kuersetin
Tabel 5 Konsentrasi dan Kadar Flavonoid Total Sampel Absorban Konsentrasi (mg/L) Kadar Flavonoid Total (mg QE/ g sampel) Rata-rata Kadar Flavonoid Total (mg QE/ g sampel) Batang Kemuning 0,307 44,0168 22,0084 22,0526 0,301 44,0560 22,028 0,303 44,2429 22,1214
Hasil  pengujian  menunjukkan  kadar  senyawa  flavonoid  dari  ekstrak  metanol  batang kemuning  didapatkan  22,0526  mg  QE/g  ekstrak.  Jumlah  flavonoid  dalam  ekstrak  batang kemuning  dihitung  melalui  kolorimetri  dengan  metode  ordon.  Prinsip  penetapan  flavonoid dengan AlCl3 melalui metode kolorimetri adalah terbentuknya kompleks antara AlCl3 dengan gugus keto pada atom C-4 dan dengan gugus hidroksi pada atom C-3 atau C-4 yang bertetangga dengan flavon dan flavonol. Kompleks yang terbentuk antara AlCl3 dan gugus orto hidroksi, di sisi lain, memiliki sifat yang labil sementara kompleks yang terbentuk antara AlCl3 dan gugus orto hidroksi tidak stabil.   Dengan menggunakan spektrofotometri dengan panjang gelombang 420 nm, perubahan diidentifikasi melalui absorbansi sinar tempat (Apridamayanti, 2021).

## 3. Kesimpulan
Dari hasil penelitian yang dapat disimpulkan bahwa batang kemuning yang didapat dari Kampung Cigalumpit, Desa Neglasari, Kecamatan Balubur Limbangan, Kabupaten Garut setelah dilakukan pengujian memiliki kadar fenol total sebesar 38,321 mg GAE/g ekstrak, flavonoid total sebesar 22,0526 mg QE/g. Selain itu ekstrak dan simplisia batang kemuning memiliki senyawa metabolit
y = 0.0107x - 0.1704 R² = 0.9976 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0 20 40 60 80 100 A b sor b an
Konsentrasi (ppm)
sekunder  yang  bisa  dimanfaatkan  serta  sudah  memenuhi  standar  Materia  Medika  Indonesia (MMI) dan Farmakope Herbal Indonesia (FHI) dilihat dari hasil karakterisasi.

## Daftar Pustaka
Achmad SA, Hakim H, Makmur L, et al. 2013 . Ilmu Kimia dan Kegunaan Tumbuhan-tumbuhan Obat Indonesia Jilid II . Bandung: Institut Teknologi Bandung; 229-30p.
Apridamayanti, P., & Normagiat, S. (2021). Kandungan Fenol, Flavonoid Total, dan Aktivitas Antioksidan Sediaan Infusa dan Freeze-dried Infusa Tanaman Plocoglottis lowii Rchb.f. PHARMACY: Jurnal Farmasi Indonesia (Pharmaceutical Journal of Indonesia) , 18 (1), 122. https://doi.org/10.30595/pharmacy.v18i1.8777
Aryani, Avilia Dhiar., & Hilda Aprilia Wisnuwardhani. (2022). Studi Literatur Sintesis Nanopartikel Tembaga Menggunakan Bioreduktor Ekstrak Tumbuhan dengan Aktivitas Antioksidan. Jurnal Riset Farmasi , 39–45. https://doi.org/10.29313/jrf.v2i1.843
Dalimartha S. 2014. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia. Jilid I. Jakarta: Trubus Agriwidya: 73-4p.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1985. Cara Pembuatan Simplisia. Jakarta. 4-12p.
Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia.  2017. Farmakope  Herbal  Indonesia  Suplemen  1 Edisi 1. Jakarta. 134-36p.
Gill  NS,  Kaur  N,  Arora  R.  2014.  Murraya  Paniculata  Linn. International  Journal  of. Institutional Pharmacy and Life Sciences 4: 1-11
Nirmala, Ega, Umi Yuniarni, & Siti Hazar. (2022). Pemeriksaan Karakteristik Simplisia dan Penapisan Fitokimia Simplisia dan Ekstrak Etanol Daun Suji (Draceana angustifolia (Medik.) Roxb.). Bandung Conference Series: Pharmacy , 2 (2). https://doi.org/10.29313/bcsp.v2i2.4329
Permenkes RI. 2016. Formularium Obat Herbal Asli Indonesia. Biro Hukum dan Organisasi
Putra, G., Satriawati, D., Astuti, N., & Yadnya-Putra, A. (2018). STANDARISASI DAN SKRINING FITOKIMIA EKSTRAK ETANOL 70% DAUN JERUK LIMAU (Citrus amblycarpa (Hassk.) Osche). Jurnal Kimia (Journal Of Chemistry), , 187-194. doi:10.24843/JCHEM.2018.v12.i02.p15
Roni, A., Fitriani, L., & Marliani, L. (2019). Penetapan Kadar Total Flavonoid, Fenolat, dan Karotenoid, serta Uji Aktivitas Antioksidan dari Daun dan Kulit Batang Tanaman Kenitu (Chrysophyllum cainito L.). Jurnal Sains Dan Kesehatan , 2 (2), 83–88.
https://doi.org/10.25026/jsk.v2i2.114
Sayuti K, Yenrina R. 2015. Antioksidan Alami dan Sintetik . Padang: Andalas University Press: 7p, 9-10p, 47p, 49p, 75-9p.
Vol. 7; No.  2 ; Tahun 2023 Halaman 78 - 92
Wachidah  LN.  2013. Uji  Aktivitas  Antioksidan  Serta  Kandungan  Fenolat  dan  Flavonid  Total Dari Buah Parijoto (Medinilla speciosa Blume). Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Program Studi Famasi Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta; 42-43, 45-47.
Warsi, Erlila N. 2017. Skrining Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan Fraksi n-Heksan-Dietil Eter Paprika Merah ( Capsicum annuum L.) Dengan Metode DPPH. Jurnal Ilmu Kesehatan Bhakti Setya Medika. 2; 59-60