PENGARUH PENAMBAHAN PUPUK BINTIL AKAR KACANG TANAH SEBAGAI SUMBER NITROGEN DAN FOSFOR TERHADAP POPULASI Chlorella sp.

## THE EFFECT OF ADDITION FERTILIZER ROOTS NODULE PEANUT AS A SOURCE OF
NITROGEN AND PHOSPHORUS TO THE POPULATION OF Chlorella SP.
Rr. Juni Triastuti, A. Shofy Mubarak dan Likanimasayu Prabandari
Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Kampus C Mulyorejo - Surabaya, 60115 Telp. 031-5911451

## Abstract
Chlorella sp. is  one  natural  food  that  widely  used  in  hatchery  fish,  shrimp  and  oyster. The availability of natural food is a factor that has an important role in farming activities. Culture of Chlorella sp. generally use technical fertilizer (Walne) where nitrogen and phosporus in Walne beginning chemist fertilizer the price expensive. One source of nitrogen and phosphorus naturally obtained from the roots of peanuts.  The  root  nodules  contained  peanut-containing  nodule  bacteria Rhizobium are  able  to  bind nitrogen from the air element. By doing immersion can be obtained nutrients to the roots of peanuts are nitrogen  and  phosphorus  that  is  soluble  in  water.  So  that the  root  nodules  of  peanuts  can  be  used  as  a source of nitrogen and phosphorus to increase the population of Chlorella sp.
The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the  effect  of  the  addition  of  fertilizer  and  the concentration  of  peanut  root  nodules  as  a  source  of  nitrogen  and  phosphorus  to  the  population  of Chlorella sp. The  research  was  conducted  in  June  until  July  in  the  Laboratory  of  Education  Faculty  of Fisheries and  Marine  Fisheries,  Airlangga University, Surabaya. The study design used was Completely Randomized Design (CRD).
Materials  tested  in  this  study  was Chlorella sp. whereas  fertilizer  used  is  the  root  nodules  of peanut  fertilizer  and  manure  Walne. The  concentration  of  the  addition  of  fertilizer  peanut  nodule  is  the treatment A (2.25 ppm), treatment B (4.5 ppm), treatment C (9 ppm) and treatment D (18 ppm). Control treatments  using  fertilizer  Walne  0.5  ml/l  (control  1)  and  1  ml/l  (control  2). The  main  parameter  is observed  population  density,  while  supporters  of  the  observed  parameter  is  the  measurement  of temperature, pH and salinity.
The  results  showed  that  the  addition  of  fertilizer  peanut  nodule  as  a  source  nitrogen  and phosporus  influence  population  of Chlorella sp.   The  addition  of  fertilizer  best  peanut  nodule  is  the treatment B of 1,43755x10 6 cells/ml on the third day. Water quality parameters during the study remained within  the  tolerance  limit  for  the  growth  of Chlorella sp. is  pH  7-8,  room  temperature  29-32 0 C  range, salinity range between 28-40 ppt and water temperature ranges between 28-30 0 C.
Keywords : Chlorella sp., root nodule peanut, nitrogen and phosphorus

## Pendahuluan
Chlorella sp. merupakan salah satu pakan alami  yang  banyak  digunakan  secara  luas terutama di panti-panti pembenihan ikan, udang dan  kekerangan  (Ukeles,  1971;  Ryther  & Goldman,  1975;  Fujita,  1979;  Kadowaki et  al ., 1980;  De  pauw  &  Persoone,  1988;  James  & Rezeq  1988 dalam Panggabean  dan  Sutomo, 1995).  Pemenuhan  ketersediaan Chlorella sp. sebagai  pakan  alami  perlu  ditingkatan  dengan cara  memenuhi  kebutuhan  makro  dan  mikro nutrien.
Isnansetyo dan Kurniastuty (1995) menyatakan bahwa kultur fitoplankton
membutuhkan  berbagai  macam unsur  hara  baik unsur  hara  makro  misalnya  N,  P,  K,  S,  Si,  Na,
Ca  maupun  unsur  hara  mikro  misalnya  Fe,  Zn, Mn,  Cu,  Mg,  Co,  Mo,  B.  Nutrien  yang dibutuhkan  untuk  pertumbuhan Chlorella sp. yaitu makro dan mikro nutrien. Nutrien tersebut meliputi  N,  P,  Mg,  S,  K,  Ca,  Fe,  Mn,  Zn,  dan Cu (Eyster, 1978).
Kultur Chlorella sp.  pada  umumnya menggunakan  pupuk  teknis  yaitu  pupuk  Walne dimana  konsentrasi  unsur  makro  nutrien  pupuk teknis belum mencukupi batas optimal kebutuhan Chlorella sp.  Kandungan  nitrogen dan  fosfor  pupuk  Walne  adalah  0,016  g/l  dan 0,004  g/l  sedangkan  kebutuhan  nitrogen  dan fosfor Chlorella sp.  adalah  0,7-0,14  g/l  dan 0,62-0,015 g/l (Eyster, 1978).
Nitrogen  dan  fosfor  merupakan  nutrien yang  dibutuhkan  fitoplankton  dalam  jumlah besar untuk pertumbuhan dan perkembangannya. Nitrogen merupakan komponen  pembentukan  klorofil  (Riyono, 2007).  Fosfor  merupakan  unsur  penting  untuk transformasi energi yang berperan dalam proses fotosintesis dan pembentukan klorofil (Sumarlinah, 2000). Salah satu sumber nitrogen dan  fosfor  alami  didapatkan  dari  akar  kacang tanah.  Pada  bagian  akar  terdapat  bintil-bintil akar yang mengandung bakteri Rhizobium yang mampu  mengikat  unsur  nitrogen  dari  udara (Rahmadi dkk., 1990).
Ndakidemi et  al .  (2011)  menyatakan bahwa akar tanaman Leguminosa yang bersimbiosis  dengan Rhizobium selain  dapat mengikat  nitrogen  dari  atmosfer  juga  terdapat unsur mikronutrien yaitu Fe, Mn, Cu, Zn dan B. Berdasarkan  uraian  di  atas  dimungkinkan penambahan  pupuk  bintil  akar  kacang  tanah sebagai  pupuk  komplemen  yang  kaya  akan sumber  nitrogen  dan  fosfor  yang  berpotensi digunakan dalam kultur populasi Chlorella sp. Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  pengaruh  penambahan  pupuk  bintil akar kacang tanah sebagai  sumber nitrogen dan fosfor  terhadap  populasi Chlorella sp.  Dan untuk  mengetahui  konsentrasi  penambahan pupuk  bintil  akar  kacang  tanah  sebagai  sumber nitrogen dan fosfor terhadap populasi Chlorella sp. Manfaat  penelitian  ini  adalah  untuk memberikan informasi ilmiah tentang
pemanfaatan  pupuk  bintil  akar  kacang  tanah sebagai sumber nitrogen dan fosfor dalam kultur Chlorella sp.  kepada  masyarakat  perikanan sebagai pengembangan ilmu pengetahuan terutama tentang produksi pakan alami

## Materi dan Metode
Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan  28
Juni sampai  dengan  19  Juli  2011  di Laboratorium  Pendidikan  Perikanan,  Fakultas Perikanan  dan  Kelautan,  Universitas  Airlangga Surabaya.
Materi  penelitian  yang  digunakan terdiri  atas  bahan  dan  alat  penelitian.  Bahan penelitian yang akan digunakan adalah Chlorella sp.,  rendaman  bintil  akar  kacang tanah,  pupuk  Walne,  akuades,  alkohol,  air tawar,  air  laut,  khlorin  dan  Na  Thiosulfat. Peralatan  yang  digunakan  adalah  toples  kaca, aerator, selang aerator, plastik, gelas ukur, pipet tetes, pipet volume, mikroskop, jerry can 2 liter (2  buah), haemocytometer , handtally  counter , autoclave , refraktometer, pH paper , termometer,  timbangan  digital,  lampu  TL,
kapas, corong air, erlenmeyer,  kasa, aluminium foil, dan kertas saring.
Rancangan  penelitian  yang  digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL), sebab dalam  penelitian  ini  semua  dikondisikan  sama kecuali perlakuan (Kusriningrum, 2008).
Konsentrasi  nitrogen  dan  fosfor  pada  pupuk Walne  yaitu  0,016  g/l  dan  0,004  g/l  sedangkan kebutuhan  nitrogen  dan  fosfor Chlorella sp. adalah  0,14-0,7  g/l  dan  0,0154-0,6194  g/l (Eyster,  1978).  Hasil  uji  Laboratorium  Kimia Analitik,  Universitas  Airlangga  menyatakan bahwa  nitrogen  dan  fosfor  pada  pupuk  bintil akar kacang tanah adalah nitrogen = 0,16 % dan fosfor = 0,02 %. Kandungan nitrogen dari 1 ml pupuk  Walne  sebanding  dengan  10  ml  pupuk bintil  akar  kacang  tanah  yang  mengandung nitrogen di dalamnya. Perlakuan yang digunakan  adalah  perlakuan  A  (2,25  ppm), perlakuan  B  (4,5  ppm),  perlakuan  C  (9  ppm), perlakuan  D  (18  ppm),  perlakuan  E  (pupuk Walne 0,5 ml/l) dan perlakuan F (pupuk Walne 1 ml/l).

## Persiapan penelitian
Air  laut  yang  digunakan  untuk  kultur disterilisasi  menggunakan  larutan  khlorin.  Air laut terlebih dahulu disaring dengan kapas yang diletakkan dalam corong air, kemudian disterilkan  dengan  menggunakan  khlorin  60 ppm  selama  24  jam  dan  diberi  aerasi.  Kadar khlorin  dinetralisir  dengan  ditambahkan  Na Thiosulfat  20  ppm.  Peralatan  kultur  yang  akan digunakan  dicuci  sampai  bersih  kemudian dibilas dengan air tawar  kemudian dikeringkan. Untuk  peralatan  yang  terbuat  dari  kaca  tahan panas  harus  ditutup  dengan  kapas  dan  kasa, kemudian  dibungkus  dengan  aluminium  foil. Sterilisasi  menggunakan autoclave pada  suhu 121 o C  selama  15  menit.  Peralatan  yang  tidak tahan  panas  disterilkan  dengan  larutan  khlorin 150  ppm  selama  24  jam.  Kemudian  dibilas dengan air tawar hingga  bersih dan  bau khlorin hilang (Sari, 2009).
Persiapan Pupuk Skala Laboratorium Pupuk  teknis  skala  laboratorium  yang digunakan  sebagai  media  kultur  dan  kontrol adalah pupuk  Walne. Larutan pupuk  yang telah siap  disimpan  dalam  wadah  yang  tidak  tembus cahaya. Larutan pupuk ini kemudian disterilkan dengan menggunakan autoclave .
Persiapan  Pembuatan  Pupuk  Bintil  Akar Kacang Tanah
Akar  kacang  tanah  terlebih  dahulu dicuci  agar  tanah  yang  melekat  pada  akar terbuang  kemudian  dilakukan  pengeringan  di
bawah  sinar  matahari  sampai  kering.  Akar kacang tanah yang telah kering diseleksi dengan cara memotong bagian yang terdapat binti akar. Menurut  Hutagulung  (2008),  pembuatan  pupuk khususnya pupuk cair dengan perbandingan 1:2 (1 kg bahan kering dilarutkan dalam 2  liter air) dengan  lama  perendaman  3-4  minggu.  Bintil akar  kacang  yang  telah  diseleksi  digiling  dan selanjutnya  dilarutkan  dalam  akuades  dengan perbandingan 1 : 2 yaitu 500 gram akar kacang tanah yang telah digiling dengan 2 liter akuades. Perendaman selama empat minggu dan dilakukan pengocokan setiap harinya.
Rendaman  akar  kacang  tanah  diperas  agar cairan di dalam akar kacang tanah dapat keluar. Setelah  itu  dilakukan  analisis  nitrogen  dan fosfor.
Lingkungan dan Media Kultur Chlorella sp.
Media  kultur  yang  digunakan  dalam penelitian adalah air laut sebanyak 500 ml yang dimasukkan  dalam  toples  kaca  di  dalamnya terdapat pupuk Walne 0,5 ml/l dan pupuk bintil akar  kacang  tanah  sesuai  dengan  konsentrasi yang ditentukan (2,25 ppm, 4,5 ppm, 9 ppm dan 18  ppm).  Selanjutnya,  media  kultur  diletakkan di  rak  kultur  diberi  aerasi  dan  siap  dimasukkan bibit Chlorella sp.  dengan  kepadatan  awal diperkirakan sekitar 3,3 x 10 5 sel/ml ( Brautovic, 2000 ) . Lingkungan  kultur Chlorella sp.  pada penelitian ini adalah suhu 28 o C (Sutomo, 2005), salinitas  30  ppt  (Sutomo,  2005)  dan  pH  7 (Prihantini  dkk.,  2005).  Intensitas  cahaya  yang digunakan adalah 3000  lux dengan  photoperiod 24 jam (Prabowo, 2009).
Penebaran Bibit Chlorella sp. Kepadatan awal pada penelitian ini 3 ,3 x 10 5 sel/ml ( Brautovic, 2000 ) . Menurut Satyantini  dan  Masithah  (2008),  penghitungan jumlah  bibit  plankton  yang  diperlukan  untuk kultur menggunakan rumus :
1 2 2 1 N V N V
Keterangan: V1   =   Volume  bibit  untuk  penebaran  awal (ml) N1   =   Kepadatan bibit plankton (unit/ ml) V2   =   Volume media kultur yang dikehendaki (ml) N2 = Kepadatan bibit plankton yang
dikehendaki (unit/ ml)
Perhitungan Populasi Chlorella sp.
Pengamatan  pertumbuhan Chlorella sp.  dilakukan  selama  tujuh  hari.  Penghitungan dilakukan dengan menggunakan haemocytometer dan untuk memudahkan penghitungan  digunakan handtally  counter .
Menurut  Aujero  (1982) dalam Satyantini  dan Masithah (2008) menyatakan bahwa penghitungan  menggunakan  metode  “ Small
Block ” sebagai berikut :
Keterangan :
nA, nB, nC, nD, nE  :  jumlah  sel  fitoplankton pada blok A, B, C, D dan E 5 :  jumlah blok yang dihitung 4 x 10 -6 :  luas kotak kecil (A, B, C, D atau E) Parameter Pengamatan
Parameter utama dalam penelitian adalah populasi Chlorella sp  sedangkan  parameter pendukung  dalam  penelitian  adalah  suhu,  pH dan salinitas. Pengukuran suhu, pH dan salinitas dilakukan setiap hari pada pagi hari agar kondisi lingkungan pemeliharaan terkontrol.
Analisis Data Data penelitian dianalisis secara statistik  dengan  menggunakan  ANAVA.  Bila terdapat pengaruh perlakuan dapat dilakukan uji lanjutan  yaitu  Uji  Jarak  Berganda  Duncan (Kusriningrum, 2008).

## Hasil dan Pembahasan
Populasi Chlorella sp.  menggunakan beberapa  konsentrasi  pupuk  bintil  akar  kacang tanah selama tujuh hari kultur ditampilkan pada Gambar 1.
Hasil  penelitian  penambahan  pupuk bintil  akar  kacang  tanah  menunjukkan  bahwa pertumbuhan populasi Chlorella sp.  mengalami empat  fase  pertumbuhan  yaitu  fase  adaptasi, eksponensial, stasioner dan penurunan (Gambar 1.). Fase adaptasi pada masing-masing perlakuan  setelah  penambahan  inokulan  ke dalam  media  kultur  tidak  terlihat  jelas  pada grafik  pertumbuhan Chlorella sp.  Hal  ini dikarenakan  fase  adaptasi Chlorella sp.  terjadi sangat singkat  yaitu sebelum 24  jam (Fogg dan Thake, 1987 dalam Prihantini dkk., 2005).
Kepadatan fitoplankton (sel/mL) = nA + nB + nC + nD+nE 5 x 4 x 10 -6
Fase  eksponensial  pada  umumnya ditandai dengan pembelahan sel yang cepat dan konstan. Pada kondisi kultur yang optimum laju pertumbuhan  pada  fase  ini  mencapai  maksimal (Isnansetyo dan Kurniastuty, 1995). Pertumbuhan Chlorella sp. pada fase eksponensial ditandai dengan adanya
peningkatan jumlah populasi Chlorella sp. yang dimulai  pada  hari  pertama  pengamatan  sampai puncak  populasi.  Pada  perlakuan  A,  B  dan  C fase  eksponensial  terjadi  selama  tiga  hari  yang dimulai  hari  pertama  sampai  hari  ketiga sedangkan  perlakuan  D  terjadi  selama  empat hari yang dimulai hari pertama sampai keempat.
Fase  eksponensial  pada  perlakuan  E dan F terjadi selama dua hari yang dimulai dari hari pertama sampai kedua. Hal ini dikarenakan nutrien  yang  terdapat  pada  semua  perlakuan baik kontrol ataupun perlakuan dengan penambahan  pupuk  bintil  akar  kacang  tanah dapat  memenuhi  kebutuhan  nutrien Chlorella sp.  terutama  N  dan  P.  Menurut  Riyono  (2007), nitrogen  merupakan  bagian  dari  pembentuk klorofil  dan  protein.  Fosfor  berperan  dalam dalam transfer energi di dalam sel dalam bentuk ATP  (Supono,  2009).  Kedua  unsur  tersebut merupakan  unsur  terpenting  yang  digunakakan dalam proses fotosintesis (Sumarlinah, 2000).
Fase  stasioner  merupakan  fase  dimana fase  kematian  sama  dengan  laju  reproduksi sehingga  populasi  menjadi  tetap  atau  konstan untuk sementara waktu (Isnansetyo dan Kurniastuty,  1995).  Fase  stasioner  terlihat  pada perlakuan  A  pada  hari  kelima  dan  E  pada  hari keempat,  sedangkan  perlakuan  yang  lainnya pada  hari  kelima  sudah  terjadi  penurunan populasi.  Hal  ini  dikarenakan  nutrien  pada perlakuan  A  dan  E  masih  dalam  keadaan optimal  sehingga  masih  dapat  dimanfaatkan Chlorella sp. untuk  mempertahankan hidupnya. Menurut  Schlegel  dan  Schmid  (1994) dalam Partawisastra  (1996),  selama  energi  yang dibutuhkan  untuk  mempertahankan  sel  masih dapat diperoleh dengan respirasi bahan simpanan  dan  protein,  mikroorganisme  masih mampu  mempertahankan  hidup  untuk  masa yang panjang.
Fase  penurunan Chlorella sp.  pada perlakuan A, B dan C dimulai pada hari kelima, perlakuan  D  dimulai  hari  keenam,  perlakuan  E dan  F  dimulai  pada  hari  keempat.  Fase penurunan  terjadi  karena  nutrien  yang  terdapat pada  media  kultur  sudah  tidak  optimal  dalam memenuhi  kebutuhan  nutrien Chlorella sp. Nutrien  tersebut  terutama  nitrogen  dan  fosfor yang merupakan nutrien yang paling dibutuhkan
Gambar 1.   Grafik populasi Chlorella sp. setelah penambahan pupuk bintil akar kacang tanah pada hari pertama sampai hari ketujuh.
Perlakuan A (2,25ppm) B (4,5 ppm) C (9 ppm) D (18 ppm) E (0,5 ml/l) F (1 ml/l) Hari ke-0 574,456 574,456 574,456 574,456 574,456 574,456 Hari ke-1 750 bcd 844,097 ab 680,073 cd 622,495 d 821,584 abc 901,388 a Hari ke-2 901,388 ab 968,245 ab 921,954 ab 758,288 b 901,388 ab 1089,725 a Hari ke-3 1024,695 bc 1198,958 b 1072,381 bc 968,245 c 1078,193 bc 1409,787 a Hari ke-4 1030,776 a 1318,143 a 1360,147 a 1234,909 a 1042,833 a 1206,234 a Hari ke-5 974,679 a 1156,503 a 1134,681 a 1279,648 a 974,679 a 1134,681 a Hari ke-6 928,709 a 1145,644 a 836,66 a 1095,445 a 887,412 a 1065,536 a Hari ke-7 806,226 a 1095,445 a 790,569 a 844,097 a 813,941 a 1060,66 a
Tabel 1.  Data hasil transformasi rata-rata populasi Chlorella sp. (sel/ml) dengan penambahan pupuk bintil Akar kacang tanah pada hari ke-1 sampai hari ke-7.
Chlorella sp.  untuk  melakukan  fotosintesis  dan metabolisme sel. Hasil ANAVA (Tabel 1.) menunjukkan
bahwa pada hari pertama dan ketiga penambahan  pupuk  bintil  akar  kacang  tanah memberikan  pengaruh  yang  berbeda  nyata (p<0,05)  terhadap  populasi Chlorella sp.  Pada hari kedua, keempat sampai ketujuh menunjukkan  penambahan  pupuk  bintil  akar kacang  tanah  memberikan  pengaruh  yang  tidak berbeda  nyata  (p>0,05)  terhadap  populasi Chlorella sp.
Hasil  uji  jarak  Duncan  pengaruh penambahan  pupuk  bintil  akar  kacang  tanah terhadap  puncak  populasi Chlorella sp.  yaitu pada  hari  ketiga  puncak  populasi  terjadi  pada perlakuan  E  dan  F.  Perlakuan  F  berbeda  nyata dengan  perlakuan  yang  lainnya  sedangkan perlakuan  E  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  F dan  B  tetapi  tidak  berbeda  nyata  dengan perlakuan  A,  C  dan  D.  Pada  hari  keempat puncak  populasi Chlorella sp.  terjadi  pada perlakuan  C  yang  tidak  berbeda  nyata  dengan perlakuan  lainnya.  Hari  kelima  populasi tertinggi  pada  perlakuan  D  yang  tidak  berbeda nyata dengan perlakuan lainnya.
Puncak  populasi Chlorella sp.  terjadi pada  hari  ketiga,  keempat  dan  kelima.  Puncak populasi  pada  hari  keempat  yaitu  pada perlakuan A, B dan C. Hal ini dikarenakan pada perlakuan  A,  B  dan  C  dengan  penambahan pupuk  bintil  akar  kacang  tanah  membutuhkan proses yang relatif lama mengubah nutrien yaitu nitrogen  dan  fosfor  agar  dapat  dimanfaatkan oleh Chlorella sp. Proses tersebut adalah proses nitrifikasi dan proses fosforilasi. Proses nitrifikasi  yaitu  mengubah  unsur  nitrogen  pada pupuk  bintil  akar  kacang  tanah  yang  semula berbentuk  NH 3 diubah  menjadi  NO 3 .  Proses fosforilasi  yaitu  mengubah  unsur  fosfat  dalam pupuk  bintil  akar  kacang  tanah  menjadi  bentuk ATP  ( Adenosin  Tri  Phospat ).  ATP  digunakan sebagai  energi  dalam  proses  metabolisme  sel untuk  melakukan  pembelahan  (Supono,  2009). Nutrien  hasil  dari  proses  nitrifikasi  dan fosforilasi tersebut dimanfaatkan oleh Chlorella sp.  untuk  melakukan  fotosintesis  sehingga pertumbuhan  populasi Chlorella sp.  dapat meningkat.
Puncak  populasi  perlakuan  D  terjadi pada hari kelima. Pada perlakuan D konsentrasi penambahan  pupuk  bintil  akar  kacang  tanah cenderung  lebih  banyak  yang  mengakibatkan puncak  populasi Chlorella sp.  cenderung berbeda dengan perlakuan yang lainnya. Hal ini dikarenakan  adanya  pengaruh  mikronutrien yang  berasal  dari  unsur  logam  yang  terdapat pada pupuk bintil akar kacang tanah yang dapat
menghambat pertumbuhan Chlorella sp. Menurut Prihantini dkk., (2005), apabila jumlah unsur  logam  semakin  meningkat  maka  akan mengakibatkan  unsur  logam  di  dalam  sel Chlorella sp.  akan  berubah  menjadi  toksik sehingga  pertumbuhan Chlorella sp.  cenderung lambat.
Puncak  populasi  perlakuan  E  dan  F terjadi  pada hari  ketiga.  Perlakuan ini menggunakan  pupuk  Walne  sebagai  kontrol. Komposisi yang dimiliki pupuk Walne menyebabkan  populasi Chlorella sp.  pada perlakuan  E  dan  F  cenderung  lebih  cepat mengalami  puncak  populasi  dibandingkan dengan  perlakuan  lainnya.  Hal  ini  dikarenakan pada pupuk Walne mempunyai komposisi unsur hara  yang  lengkap  bagi  pertumbuhan  plankton dan  dapat  dimanfaatkan  secara  langsung  oleh Chlorella sp.  Menurut  Widianingsih  dkk., (2008), unsur nitrogen pada pupuk Walne dalam bentuk nitrat (NaNO 3 ) dan  fosfor dalam  bentuk fosfat  (NaH 2 PO 4 .H 2 O).  Nitrat  dan  fosfat  yang bersifat  mudah  larut  dalam  air  menyebabkan plankton  mudah  memanfaatkan  sebagai  nutrien untuk  pertumbuhannya  (Agustiyani,  2002). Chilmawati  dan  Suminto  (2008)  menyatakan bahwa kelebihan pupuk Walne yaitu terdapatnya  unsur  Boron  yang  berfungsi  untuk mempertahankan  pigmen.  Hal  ini  terbukti dengan  lebih  hijaunya  media  kultur  pada perlakuan E dan F.
Penambahan  pupuk  bintil  akar  kacang tanah  yang  berpotensi  untuk  meningkatkan populasi Chlorella sp. pada penelitian ini adalah perlakuan  B  dengan  konsentrasi  penambahan pupuk  bintil  akar  kacang  tanah  4,5  ppm. Populasi Chlorella sp. pada perlakuan B sebesar 1,4735x10 6 sel/ml  pada  fase  eksponensial. Jumlah  tersebut  tidak  berbeda  nyata  dengan jumlah  populasi Chlorella sp.  yang  dihasilkan pada  perlakuan  E  (kontrol  pupuk  Walne  0,5 ml/l)  sebesar  1,1625x10 6 sel/ml  pada  fase eksponensial.  Hal  ini  dikarenakan  waktu  panen Chlorella sp.  pada  umumnya  dilakukan  pada fase eksponensial. Selain itu dilihat dari hasil uji jarak Duncan  yang  bertujuan untuk  mengetahui perbedaan  antara  perlakuan  satu  dengan perlakuan  yang  lain  menunjukkan  bahwa jumlah populasi Chlorella sp. pada perlakuan B mendekati  jumlah  populasi Chlorella sp.  pada perlakuan E sebagai kontrol.
Penelitian  ini  menunjukkan  bahwa pupuk  bintil  akar  kacang  tanah  dapat  dijadikan pupuk  komplemen  pada  media  pupuk  Walne dalam  kultur Chlorella sp.  Hal  ini  dikarenakan pupuk  bintil  akar  kacang  tanah  mengandung unsur  nitrogen  dan  fosfor  yang  tinggi  sehingga dapat  digunakan  untuk  mencukupi  kebutuhan
Chlorella sp.  Perlakuan  B  dengan  konsentrasi penambahan pupuk bintil akar kacang tanah 4,5 ppm  dan  pupuk  Walne  0,5  ml/l  merupakan perlakuan  yang  dapat  meningkatkan  populasi Chlorella sp.  pada  fase  eksponensial  dengan jumlah  populasi Chlorella sp.  yang  mendekati jumlah populasi Chlorella sp. pada perlakuan E sebagai kontrol.
Hasil  pengukuran  kualitas  air  selama penelitian  adalah  suhu  air  berkisar  antara  28- 30 o C  dan  suhu  ruangan  kultur  29-33 o C, salinitas  berkisar  antara  30-40  ppt,  pH  berkisar antara  7-8.  Kesimpulannya  bahwa  suhu  air, suhu  ruangan,  salinitas  dan  pH  selama pemeliharaan  masih  dalam  kondisi  optimal untuk pertumbuhan Chlorella sp .

## Kesimpulan
Penambahan  pupuk  bintil  akar  kacang tanah  sebagai  sumber  nitrogen  dan  fosfor berpengaruh  terhadap  populasi Chlorella sp. Penambahan  pupuk  bintil  akar  kacang  tanah dengan konsentrasi 4,5 ppm dapat menghasilkan populasi Chlorella sp.  yang  tertinggi  sebesar 1,4375x10 6 sel/ml pada hari ketiga.
Pupuk  bintil  akar  kacang  tanah  dapat digunakan  sebagai  komplemen  pada  media pupuk  Walne  dalam  kultur Chlorella sp  untuk mempercepat  pertumbuhan  dan  meningkatkan populasi Chlorella sp.

## Daftar Pustaka
Brautovic,  I.  2000.  The  Influence  of  Light Intensity  on  Growth  of  the  Marine Planktonic  Alga Chlorella    sp. Under Laboratory  Conditions.  Institute  of Oceanography and fisheries. Dubrovnik, Croatia. 2 p. Chilmawati, D. dan Suminto. 2008. Penggunaan
Media  Kultur  yang  Berbeda  terhadap Pertumbuhan Chlorella sp.  Jurnal Saintek  Perikanan  4  (1)  :  42-49. Program  Studi  Budidaya  Perairan. Fakultas Perikanan dan Ilmu  Kelautan.
Universitas Diponegoro. Semarang. Eyster,  C.  1978.  Nutrient  Concentration Requirements for Chlorella sorokiniana . Available from the author or the Mobile college  Library, Mobile,
Alabama 36613. p 78-81.
Hutagulung,  I.  2008.  Pembuatan  Pupuk  Cair.
Heifer International Indonesia. 2 hal. Isnansetyo,  A  dan  Kurniastuty.  1995.  Teknik Kultur Phytoplankton dan Zooplankton.  Kanisius.  Yogyakarta. hal. 34-85. Kusriningrum, R. 2008. Perancangan Percobaan. Universitas Airlangga. Surabaya. hal. 43-51. Ndakidemi, P. A. 2011. Micronutrient Uptake in Common Bean (Phaseolus  vulgaris L.)
as Affected by Rhizobium Inoculation, and  the  Supply  of  Molybdenum  and Lime.  Plant  Omics  Journal  4(1)  :  40-
52. Panggabean,  L.  dan  Sutomo.  1995.  Pengaruh Limbah Budidaya Ikan terhadap Pertumbuhan Chlorella sp.  Puslit Oseanografi. LIPI. Hal 183-188. Partawisastra,  A.  R.  1996.  Studi  Pendahuluan tentang  Zat  Pemacu  Pertumbuhan  dari Mikroalga Chlorella sp. Skripsi. Fakultas  Perikanan,  Institut  Pertanian Bogor. Bogor. 101 hal.
Prabowo, D. A. 2009. Optimasi  Pengembangan Media  untuk  Pertumbuhan Chlorella sp.  pada  Skala  Laboratorium.  Skripsi. Program  Studi  Ilmu  dan  Teknologi Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan,  Institut  Pertanian  Bogor. Bogor. 108 hal.
Prihantini, N. B., B. Putri dan R. Yuniati. 2005. Pertumbuhan Chlorella spp.  dalam Medium Ekstrak Tauge (MET) dengan Variasi pH Awal. Makara Sains IX (1)
: 1-6. Rahmadi,  M.,  N.  Hermiati,  A.  Baihaki  dan  R.
Setiamihardja,  1990.  Varian  Genetik dan  Heritabilitas  Komponen  Hasil  dan Galur  Harapan  Kedelai.  Zuriat  1  (1)  : 25-31.
Riyono,  S.  H.  2007  Beberapa  Sifat  Umum  dari Klorofil  Fitoplankton.  Oseana.  XXXII
(1) : 23-31.
Sari,  L.  A.  2009.  Pengaruh  Penambahan  FeCl 3 terhadap Pertumbuhan Spirulina platensis yang  Dikultur  pada  Media
Asal  Blotong  Kering.Skripsi.  Fakultas
Perikanan  dan  Kelautan.  Universitas
Airlangga. 56 hal.
Satyantini,  W.  H.  dan  E.  D.  Masithah.  2008. Diktat  Penuntun  Praktikum  Budidaya Pakan  Alami.  Fakultas  Perikanan  dan Kelautan Universitas Airlangga. Surabaya. hal. 28 – 49. Sumarlinah. 2000. Hubungan Komunitas Fitoplankton  dan  Unsur  Hara  N  dan  P di Danau Sunter Selatan, Jakarta Utara. Skripsi.  Program  Studi  Manajemen Sumberdaya Perairan, Fakultas Perikanan,  Institut  Pertanian  Bogor. Bogor. 62 hal. Supono. 2008. Analisis Diatom Epipelic sebagai Indikator Kualitas Lingkungan Tambak
untuk Budidaya Udang. Tesis. Program Studi Magister Manajemen Sumberdaya Pantai. Universitas
Diponegoro. Semarang. 85 hal. Sutomo.  2005.  Kultur  Tiga  Jenis  Mikroalga (Tetraselmis sp., Chlorella sp.  dan
Chaetoceros  gracilis) dan  Pengaruh Kepadatan Awal terhadap Pertumbuhan C. gracilis di Laboratorium. Oseanografi
dan Limnologi  di  lndonenesia.  No.  37  :  43 – 58.