J. Kartika Kimia , Mei 2021, 4, (1), 1-12 Journal homepage : http://jkk.unjani.ac.id/index.php/jkk P-ISSN: 2655-1322     E-ISSN: 2655-0938

## Formulasi Sediaan Gel Etosom Ekstrak Lamun (Enhalus acoroides) Sebagai Pencerah dan Pelembab Pada Kulit

## Formulation of Lamun Extract Gel Ethosomes (Enhalus acoroides) as Brightness and Moisturizing Agents on The Skin
Muhammad Arif * , Faizatun, Anny Victor Purba Magister Ilmu Kefarmasian Fakultas Farmasi Universitas Pancasila Jakarta *E-mail: aptarif@gmail.com
DOI: https://doi.org/10.26874/jkk.v4i1.75
Received : 23 March 2021, Revised : 30 May 2021, Accepted : 30 May 2021, O nline : 31 May 2021

## Abstrak
Lamun merupakan tanaman laut berbunga yang sering ditemukan di wilayah pesisir. Tanaman Lamun ( Enhalus  acoroides )  mengandung  senyawa  fenol  dan  flavonoid  yang  dapat  digunakan  sebagai  agen depigmentasi melalui penghambatan enzim tirosinase. Ekstrak etanol tanaman lamun diformulasikan ke dalam bentuk etosom untuk meningkatkan kemampuan penetrasi senyawa melalui stratum korneum. Penelitian ini bertujuan untuk memformulasi sediaan gel pelembab dari etosom ekstrak tanaman lamun ( E.  acoroides )  pada  kulit  serta  memiliki  aktivitas  menghambat  enzim  tirosinase  sehingga  dapat mencerahkan kulit. Etosom dibuat dengan menggunakan metode dingin sehingga dihasilkan formula yang  baik  dengan  hasil  karakterisasi  ukuran  partikel  sebesar  216,1  nm  yang  diukur  menggunakan Particle Size Analyzer (PSA). Etosom ekstrak lamun diformulasikan ke dalam bentuk gel dan dilakukan karakterisasi, indeks iritasi, dan uji aktivitas gel. Karakterisasi terdiri dari organoleptik, homogenitas, pH, viskositas, dan daya sebar.  Karakterisasi dilakukan terhadap gel yang disimpan pada suhu 4℃, 27℃, dan suhu 40℃ selama dua bulan. Uji iritasi dilakukan secara topikal pada kelinci putih jantan. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  semua  formula  memiliki  penampilan  homogen  yang  baik  dan berada  pada  rentang  pH  5,38  –  5,80.  Hasil  uji  aktivitas  menunjukkan  gel  etosom  ekstrak  lamun memiliki aktivitas  melembapkan  sebesar 17%  selama satu  bulan pemakaian sediaan, serta memiliki aktivitas menghambat enzim tirosinase dengan nilai IC 50 175,91 µg/mL. Kata kunci : Enhalus acoroides , etosom, enzim tirosinase, gel pelembab

## Abstract
Seagrass is a flowering plant that lives in the sea and is found in almost all coastal areas. Seagrass (Enhalus acoroides) contains phenolic and flavonoid compounds, which are suitable as pigmentation agents due to tyrosinase inhibition. The ethanol extract from the seagrass plant is formulated into an ethosomal form to increase the compound's ability to penetrate the stratum corneum. This study aims to formulate a moisturizing gel preparation from the ethosome of seagrass plant extract (E. acoroides) on the skin that inhibits the tyrosinase enzyme so it can lighten the skin. Ethosomes were made using the cold process so that a good formula was made with the results of the characterization of the particle size of 216.1 nm measured using PSA. The seagrass extract ethosome was formulated into a gel and the properties, irritation index and gel activity test performed. The test of properties includes organoleptic, homogeneity, pH, viscosity and dispersibility. The test was performed on gels that had been stored at 4°C, 27°C and 40°C for two months. The irritation test was performed topically on male white rabbits. The results showed that all formulas had a good homogeneous appearance and were in the pH range of 5.38 to 5.80. The results of the activity test showed that the etosome gel of the seagrass extract had a moisturizing activity of 17% for one month using the preparation and the tyrosinase enzyme had an IC 50 of 175.91µg / mL inhibited.
Keywords: Enhalus acoroides, ethosomes, tyrosinase enzyme, moisturizing gel
1 Pendahuluan
Lamun  adalah  tanaman  laut  berbunga  yang sering  ditemukan  di  wilayah  pesisir  [1].  Lamun merupakan  satu  dari  sekian  organisme  yang mengalami  evolusi  konvergen  dan  berevolusi secara  mandiri  di  waktu-waktu  tertentu  [2]. Lamun  ( E.  acoroides )  termasuk  jenis  terbanyak yang  ditemukan  di  Indonesia  dengan  ukuran morfologi  yang  besar.  Lamun  jenis  ini  tumbuh subur di substrat lumpur. Menurut Kannan, kadar antioksidan  total  dari  Lamun  tersebut  setara dengan  1  gram  asam  askorbat.  Di  negara  maju, Lamun  jenis  ini  sering  digunakan  dalam pencegahan  berbagai  penyakit  degeneratif  dan juga  sebagai  antioksidan  [3].  Sedangkan  di Maluku, Lamun ini daunnya dimanfaatkan untuk meningkatkan daya tahan tubuh terhadap penyakit degeneratif [4].
Qi  dkk.  berhasil  mengisolasi  11  senyawa murni  yang  tergolong  dalam  golongan  flavonoid dan  steroid  dari E.  acoroides .  Beberapa  dari senyawa flavonoidnya terbukti toksik bagi larva- larva  biota  penempel, Bugula  neritina [5]. Senyawa  metabolit  sekunder  golongan  flavonoid dapat  menghambat  aktivitas  tirosinase  seperti kaempferol, kuarsetin, kurarinon dan kushnol. E. acoroides juga  dilaporkan  mengandung  senyawa bioaktif golongan fenolik yang berpotensi sebagai antioksidan [3].
Potensi  ekstrak  tanaman  lamun  sebagai pencerah  dan  pelembab  kulit  dapat  diformulasi menjadi sediaan kosmetik. Stabilitas dan kemampuan  berpenetrasi  ke  dalam  lapisan  kulit merupakan  masalah  yang  sering  dihadapi  dalam sediaan kosmetik. Karena kulit merupakan lapisan penghalang  yang  efektif  dalam  penetrasi  obat. Lapisan  kulit  paling  luar,  stratum  korneum menjadi  penghalang  absorpsi  zat  aktif  terutama bagi  senyawa  polar  seperti  polifenol.  Salah  satu strategi yang dapat digunakan untuk meningkatkan penetrasi senyawa melalui stratum korneum  adalah  dengan  menggunakan  sistem pembawa ( carrier ) yang berukuran nano [6].
Etosom  dapat  digunakan  sebagai  metode nano  partikel  yang  mampu  meningkatkan penetrasi  senyawa  ke  dalam  kulit.  Etosom tersusun atas fosfolipid, alkohol konsentrasi tinggi dan  air  merupakan  pembawa  jenis  vesikel  halus dan  lunak  .  Pada  konsentrasi  yang  tepat  dapat mengantarkan  zat  aktif  secara  transport  pasif  ke dalam  lapisan  kulit.  Etosom  memiliki  manfaat mampu  meningkatkan  konsentrasi  zat  aktif  di kulit,  memungkinkan  untuk  molekul  berukuran besar,  secara  luas  diaplikasikan  dalam  kosmetik dan  teknologi  obat-obat  herbal,  dan  dapat
menjerap  semua  jenis  molekul  zat  aktif  seperti hidrofilik, lipofilik atau amfifilik. Selain itu biaya penyiapan etosom relatif lebih murah serta dapat dilakukan  tanpa  pemanasan  (metode  dingin) sehingga stabilitas bahan aktif lebih terjaga [7].
Kosmetik  pencerah  dan  pelembab  kulit umumnya  dibuat  dalam  bentuk  gel.  Gel merupakan  sediaan  yang  banyak  memiliki kelebihan  bila  dibandingkan  dengan  sediaan topikal lainnya. Gel bila diaplikasikan pada kulit akan  terasa  ringan  sehingga  meningkatkan kenyamanan  dalam  penggunaannya.  Sifat  gel yang  lunak,  lembut,  mudah  dioleskan  dan  tidak menyisakan  lapisan  berminyak  pada  permukaan kulit  menjadi  alasan  dalam  pemilihan  formulasi sediaan gel [7]. Beberapa keuntungan sediaan gel yaitu  penyebarannya  merata  pada  kulit,  mudah dibersihkan,  tidak  menyebabkan  lengket  di  kulit dan  zat  aktifnya  terlepas  dengan  optimal  [8]. Formulasi  sediaan  gel  menggunakan  etosom ekstrak lamun dapat memberikan hasil yang lebih baik.

## 2 Metode Penelitian

## Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini yaitu rotary vacum evaporator (Hanshin, China), pengaduk magnetik (Boeco MSH-300, Jerman), Particle  Size  Analyzer PSA  (Litesizer™ Series Particle Analyzers ), Timbangan Analitik dengan kepekaan  0,1  mg  (labPRO  DT224C),  pH  meter (OHAUS),  dan  alat  gelas  lainnya.  Adapun bahan-bahan  yang digunakan pada penelitian ini adalah  Lamun,  etanol  96%  (Brataco  Chemical, Indonesia), propilen glikol, aqua demineralisata (Brataco, Indonesia).

## Pengambilan,  Preparasi,  dan  Identifikasi Lamun
Pengambilan Tanaman lamun dilakukan di perairan Pantai Batam, di jembatan 6 Balerang. Tanaman  lamun  yang  telah  dikumpulkan, terlebih dahulu dibersihkan dengan menggunakan air laut, bertujuan untuk menghilangkan kotoran lumpur yang menempel pada  tanaman,  selanjutnya  dibersihkan  kembali menggunakan  air  bersih  untuk  menghilangkan garam yang masih menempel. Sampel segar  ini dimasukkan  dalam  wadah  dan  disimpan  pada suhu  18°C.  Determinasi  tanaman  lamun dilakukan  di  Laboratorium  Produktivitas  dan Lingkungan Perairan (ProLing) Fakultas Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan  Institut  Pertanian Bogor (IPB).

## Pembuatan ekstrak
Tanaman  Lamun  dikeringkan  di  bawah sinar  matahari  selama  7  jam,  mulai  dari  jam 08.00-15.00,  selama  4  hari  sehingga  diperoleh kadar  air  berkisar  antara  16,20%-18,76%, kemudian  dihaluskan  dan  diperoleh  bubuk sampel kering, dan ditimbang. Lamun yang telah dihaluskan  kemudian  ditimbang  dan  dilakukan proses  ekstraksi  dengan  metode  maserasi menggunakan  pelarut  etanol  96%,  diaduk  dan didiamkan  selama  1  kali  24  jam,  selanjutnya disaring.  Filtrat  dilakukan  penguapan  dengan menggunakan  alat vacum  rotary  evaporator . Ekstrak  cair  yang  dihasilkan,  selanjutnya dipanaskan di atas waterbath suhu 50°C sambil terus  diaduk  dan  menghasilkan  ekstrak  kental Lamun.

## Pemeriksaan Karakteristik Ekstrak a. Uji Organoleptis
Pengujian organoleptis ini dilakukan untuk mengetahui  bentuk  fisik  dari  ekstrak  (padat, serbuk,  kental,  cair),  warna  (hijau,  kuning, coklat) dan bau (aromatik, tidak berbau).

## b. Perhitungan Nilai Rendemen
Nilai  rendemen  ekstrak  didapatkan  dengan cara membagi bobot ekstrak kental dengan bobot awal  simplisia.  Dari  perhitungan  rendemen  ini dapat  diketahui  nilai  kesetaraan  tiap  gram ekstrak kental simplisia. Nilai rendemen dihitung dengan menggunakan persamaan 1.
𝑅𝑒𝑛𝑑𝑒𝑚𝑒𝑛 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘 (%) = 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘 𝑘𝑒𝑛𝑡𝑎𝑙 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑎𝑤𝑎𝑙 𝑠𝑖𝑚𝑝𝑙𝑖𝑠𝑖𝑎 𝑥 100%
(Persamaan 1)

## c. Skrining Fitokimia
Skrining  fitokimia  disebut  juga  dengan penapisan fitokimia. Penapisan fitokimia bertujuan  untuk  menguji  ada  atau  tidaknya kandungan  alkaloid,  saponin,  tanin,  flavonoid, gula pereduksi, triterpenoid dan steroid.

## d. Parameter Susut Pengeringan
Dilakukan  penimbangan  ekstrak  lamun sebanyak  1-2  gram  dan  dimasukkan  ke  dalam botol timbang yang sebelumnya telah dipanaskan  pada  suhu  105 o C  selama  30  menit. Sebelum  ditimbang,  terlebih  dahulu  ekstrak diratakan dalam botol timbang, hingga merupakan lapisan setebal 5-10 mm. Selanjutnya ekstrak lamun dimasukkan ke dalam Oven pada suhu 105 o C hingga bobot tetap.

## e. Penetapan Kadar Abu Total
Ekstrak  sebanyak  2  g  digerus,  kemudian dimasukkan  ke  dalam  krus  silikat  yang  telah dipijarkan pada suhu 550 o C dan ditara, diratakan. Pijarkan  secara  perlahan-lahan  hingga  arang habis,  dinginkan,  dan  ditimbang.  Jika  cara  ini arang  tidak  dapat  dihilangkan,  tambahkan  air panas,  saring  melalui  kertas  saring  bebas  abu. Pijarkan sisa kertas dan kertas saring dalam krus yang  sama.  Filtrat  dimasukkan  ke  dalam  krus, diuapkan,  pijarkan  hingga  bobot  tetap,  dan ditimbang. Batasan selisih penimbangan berikutnya hanya selisih sebanyak 5%. Selanjutnya  dihitung  kadar  abu  terhadap  bahan yang telah dikering anginkan.

## f. Penetapan Kadar Sari Larut Air
Ekstrak lamun yang telah dikering anginkan ditimbang sebanyak 5 g, maserasi selama 24 jam dengan  100  mL  air-kloroform  dibiarkan  hingga 18 jam, disaring, 20 mL filtrat diuapkan hingga kering  dalam  cawan  penguap  yang  telah  ditara, residu dipanaskan pada suhu 105 o C hingga bobot tetap.

## g. Penetapan Kandungan Total Fenol
Ekstrak lamun sebanyak 100 mg dilarutkan sampai  10  mL  dengan  aquades  sehingga diperoleh  konsentrasi  10  mg/mL.  Pada  larutan konsentrasi  10  mg/mL  dipipet  1  mL  dan diencerkan  dengan  aquades  hingga  10  mL  dan diperoleh konsentrasi ekstrak 1 mg/mL. Ekstrak sebanyak 0,2 mL dipipet, ditambahkan 15,8 mL aquades  dan  1  mL  reagen Folin-Ciocalteu lalu dikocok  dan  didiamkan  selama  8  menit kemudian  ditambahkan  3  mL  Na 2 CO 3 10%  ke dalam  campuran.  Selama  2  jam  larutan didiamkan pada suhu kamar. Diukur serapannya dengan menggunakan spektrofotometer UV-Vis pada  panjang  gelombang  maksimum  765  nm. Dilakukan  3  (tiga)  kali  pengulangan  sehingga diperoleh  kadar  fenol  di  mana  satuan  hasilnya didapat  sebagai  mg  ekuivalen  dalam  sampel segar [9].
h. Flavonoid Total
Pengukuran  flavonoid  total  menggunakan metode  kolorimetrik  dengan  aluminium  klorida (AlCl 3 ).  Metode  ini  menggunakan  kuersetin kemurnian 98% sebagai pembanding pada kurva kalibrasi.  10  mg  kuersetin  dilarutkan  dalam etanol  80%  dan  diencerkan  sampai  25,50  dan 100 mikrogram/mL. Larutan standar pengenceran  (0,5  ml)  dipisahkan  dan  dicampur dengan  1,5  ml  dari  etanol  95%,  0,1  mL  AlCl 3 , 0,10 mL dari Potasium asetat 1 M dan 2,80 mL
aquades. Kemudian diinkubasi selama 30 menit, serapan campuran diukur pada Panjang gelombang 415 nm.

## Pembuatan Etosom Ekstrak Lamun
Pembuatan  etosom  menggunakan  metode dingin.  Dalam  metode  ini  fosfatidilkolin dilarutkan  dengan  etanol  sebagai  campuran  1, ekstrak  dilarutkan  dengan  etanol  sebagai campuran  2.  Campuran  fosfatidilkolin  dan campuran  ekstrak  digabungkan  menjadi  satu kemudian di tambah dengan etanol sampai tanda batas  dalam  wadah  tertutup  pada  suhu  kamar, dilakukan  pengadukan  secara  terus-menerus menggunakan stirrer selama 10 menit. Selanjutnya, campuran ini dipanaskan pada suhu 30 o C  menggunakan  tangas  air.  Kemudian memanaskan air hingga suhu 30 o C dalam wadah terpisah,  ditambahkan  ke  dalam  campuran sebanyak 10 mL. Dilakukan pengadukan selama 5  menit  dalam  bejana  tertutup.  Ukuran  partikel dan  gelembung  dari  pembuatan  etosom  dapat diperkecil sesuai keinginan dengan penggunaan sonikasi bath [10].

## Optimasi Etosom Ekstrak Lamun
Pada penelitian ini dibuat formulasi etosom yang  mengandung  ekstrak  tanaman  lamun. Variabel  yang  akan  digunakan  pada  desain optimasi formula etosom ekstrak tanaman lamun adalah membandingkan pengaruh variasi konsentrasi lesitin (fosfatidikolin) yang digunakan.  Perbandingan  yang  akan  digunakan seperti pada Tabel 1.
Tabel  1 .  Optimasi  etosom  dari  ekstrak  tanaman lamun
Nama Bahan F1 F2 F3 F4 Ekstrak Tanaman Lamun (g) 2 2 2 2 Fosfatidikolin (g) 1 2 2,5 3 Etanol (mL) 20 20 20 20 Propilen glikol (mL) 1 1 1 1 Air (mL) 100 100 100 100

## Pembuatan Gel Pelembab
a. Pembuatan Basis Gel
Kembangkan Carboxy  Methyl  Cellulose (CMC)  dalam  aquadest  yang  telah  dipanaskan sebanyak  20  kalinya  didalam beaker  glass . Tambahkan phenoxyetanol dalam  mortir  dan ditambahkan  gliserin,  diaduk  sampai  homogen. Hasil  pengembangan  CMC  ditambahkan  dalam
campuran,  kemudian  dilakukan  pengadukan secara terus-menerus sehingga  diperoleh massa gel  yang  berbentuk  transparan.  Sisa aquadest ditambahkan  ke  dalam  campuran,  dan  diaduk sampai didapatkan sediaan gel yang homogen.

## b. Pengujian Stabilitas Fisik Sediaan Pelembab
Gel
• Uji  Organoleptis. Uji  organoleptis  gel meliputi uji warna, bau dan konsistensi gel untuk mengetahui secara fisik keadaan gel. Pemeriksaan  organoleptis  dilakukan  untuk mendeskripsikan warna, bau dan konsistensi  dari  sediaan  gel  yang  sudah bercampur  dengan  basis,  sediaan  yang dihasilkan  sebaiknya  memiliki  warna  yang menarik,  bau  yang  menyenangkan  dan kekentalan yang cukup agar nyaman dalam penggunaan.  Pengujian  dilakukan  setelah sediaan gel dibuat dalam satu hari [8].
• Uji Homogenitas Gel. Pengujian homogenitas  sediaan  gel  dengan  cara dioleskan  pada  kaca  arloji,  setelah  itu dilakukan pengamatan.
• Uji  Viskositas  Gel. Pengukuran  nilai viskositas  sediaan  gel  dilakukan  dengan menggunakan  alat  viscometer.  Langkah awal rotor dipasang pada viskoseter dengan cara menguncinya berlawanan arah dengan jarum  jam.  Wadah  (cup)  diisi  sampel  gel yang akan diuji, setelah itu tempatkan rotor tepat  berada  ditengah-tengah  wadah  yang berisi  gel,  kemudian  hidupkan  alat.  Rotor akan  berputar  dan  amati  jarum  penunjuk viskositas  yang  bergerak  menuju  kekanan, kemudian  setelah  stabil  viskositas  dibaca dan  diamati  pada  skala  dari  rotor  yang digunakan [11].
• Uji  Daya  Sebar  Gel. Pengujian  dilakukan dengan menggunakan sepasang cawan petri, anak timbang gram dan stopwatch kemudian dilakukan dengan cara menimbang  0,5  g  gel,  diletakkan  dengan kaca yang lainnya, diletakkan kaca tersebut di  atas  massa  gel  dan  dibiarkan  1  menit. Diameter  gel  yang  menyebar  (dengan mengambil  panjang  rata-rata  diameter  dari beberapa sisi) diukur, kemudian ditambahkan 200 g, sebagai bahan tambahan,  diamkan  selama  1  menit, kemudian  amati  dan  dicatat  diameter  gel
yang menyebar seperti sebelumnya.
Pengujian  dilakukan  setelah  sediaan  gel dibuat dalam satu hari [8].
• Uji  pH  Gel. Uji  ini  dilakukan  dengan menggunakan  alat  pH  meter.  Timbang  1 gram  sediaan  kemudian  encerkan  dengan aquadest hingga 10 mL. Sediaan uji diambil dan  ditempatkan  pada  tempat  sampel  pH meter,  amati  hasil  pH  yang  ditunjukkan dengan  indikator  pH  meter  stabil  dan menunjukkan nilai pH yang konstan [12].
• Uji  Iritasi. Pada  penelitian  ini  dilakukan pengujian  iritasi  primer.  Pengujian  iritasi dilakukan terhadap hewan uji kelinci jantan untuk mengetahui tingkat keamanan apakah gel  etosom  ekstrak  lamun  menyebabkan iritasi atau tidak.
Uji Aktivitas
Penghambatan
Enzim Tirosinase  Gel  Etosom  Ekstrak  Lamun Secara In Vitro
Gel etosom ekstrak lamun sejumlah 400 mg dilarutkan  dalam  5  mL  etanol  96%  sehingga diperoleh konsentrasi 20.000 μg/mL. Dilakukan sonikasi  terhadap  larutan  uji  selama  15  menit, dilakukan  penyaringan  untuk  memperoleh  hasil yang  optimal,  lalu  pipet  sebanyak  2,5  mL, masukkan ke dalam labu ukur 5 mL. Cukupkan volume  dengan  larutan  dapar  fosfat  pH  6,8 hingga  diperoleh  konsentrasi  larutan  ekstrak 10.000  μg/mL  demikian  seterusnya  sehingga diperoleh  konsentrasi  larutan  ekstrak  500,  400, 300, 200 dan 100 μg/mL.

## Uji efektivitas Pelembab
Masing-masing subyek penelitian diberikan 2  jenis  gel  yaitu  1  buah  gel  kontrol  (yang berkode:  A-kanan)  dan  1  buah  gel  uji  (yang berkode  B-kiri).  Selain  itu  masing-masing subyek  diberikan  2  buah  plat  plastik  berukuran 10 x 15 cm. Plat plastik berkode A untuk dipakai di  lengan  atas  sebelah  kanan  dan  berkode  B untuk  di  pakai  di  lengan  atas  sebelah  kiri. Masing-masing  plat  tersebut  sudah  diberikan tanda  batas    dan  dilubangi  untuk  area pengaplikasian gel seluas 6 x 6 cm. Pada subyek akan  diaplikasikan  gel  A  pada  lengan  atas sebelah kanan dan gel B pada lengan atas sebelah kiri  setiap  hari    pada  waktu/jam  yang  sama. Pengamatan  ini  dilakukan  pada  hari  ke  14  dan 28.

## 3 Hasil dan Diskusi
Pengambilan,  Preparasi,  dan  Identifikasi Lamun
Pengambilan  tanaman  lamun  dilakukan  di perairan  Pantai  Batam,  yang  berada  di  bawah jembatan 6 Balerang. Tanaman lamun yang telah dikumpulkan  terlebih  dahulu  dibersihkan  dengan menggunakan  air  laut  untuk  menghilangkan kotoran  lumur  yang  menempel  pada  tanaman lamun,  selanjutnya  dibersihkan kembali dengan menggunakan  air  mengalir  yang  bersih  untuk menghilangkan  garam  yang  masih  menempel. Tanaman  lamun  yang  merupakan  sampel  segar dimasukkan  dalam  kantung  plastik  kemudian disimpan pada suhu 18°C. Sampel segar sebanyak 10  kg  kemudian  dikering  dengan  sinar  matahari selama  7  jam,  mulai  dari  08.00-15.00  selama  4 hari,  kemudian  sampel  kering  tanaman  lamun dihaluskan  sehingga  diperoleh  bubuk  sampel kering sebanyak 780 gram. Determinasi tanaman lamun ini dilakukan di Laboratorium Produktivitas dan Lingkungan Perairan (ProLing) Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan  Institut Pertanian Bogor (IPB) dengan mengacu kepada El Shaffai A (2011) , Kuo & den Hartog (2001) dan Lanyon J, (1986). Hasil dari determinasi tanaman yang    dilakukan  yaitu  tanaman  lamun  yang diperoleh memiliki spesies Enhalus acoroides.

## Pembuatan ekstrak
Proses  Ekstraksi  senyawa  aktif  dari  sampel kering  tanaman  Lamun  ( E.  acoroides )  dilakukan secara maserasi, yaitu dengan cara perendaman di dalam  pelarut  etanol  96%  pada  suhu  ruang. Ekstrak lamun yang diperoleh dari hasil maserasi dipisahkan dari pelarut dengan menggunakan alat rotary evaporator, hingga diperoleh ekstrak kental sebanyak 142,33 gram.
Hasil  pemeriksaan  Karakterisasi  Ekstrak Etanol Tanaman Lamun

## a. Hasil Organoleptik
Hasil  organoleptik  terhadap  ekstrak  etanol tanaman  Lamun  diperlihatkan  dalam  Tabel  2. Berdasarkan hasil organoleptik, ekstrak memiliki viskositas  yang  cukup  tinggi  terlihat  dari kekentalannya, berwarna hijau, memiliki bau yang khas, dan berasa pahit.
Tabel  2 .  Hasil  pengujian  organoleptik  ekstrak etanol tanaman lamun Parameter uji Hasil Bentuk Ekstrak kental Warna Hijau Bau Khas Rasa Agak pahit b. Hasil Perhitungan Nilai Rendemen Ekstrak Perhitungan nilai rendemen dari ekstrak menggunakan  persamaan  2  dengan  rincian  data pada Tabel 3.
𝑅𝑒𝑛𝑑𝑒𝑚𝑒𝑛 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘 (%) = 142,33 663,3 𝑥 100%  = 21,45
(persamaan 2)
Nilai  rendemen  ekstrak  sebanyak  21,45  %. Nilai rendemen yang dihasilkan tidak bergantung terhadap  banyaknya  simplisia  yang  digunakan pada  saat  penelitian,  melainkan  kondisi  alamiah dari senyawa yang terkandung di dalam tanaman itu sendiri.
Tabel 3 .  Hasil ekstrak etanol tanaman lamun
Bobot Tanaman Lamun (g) Volume Etanol 96% (L) Bobot Ekstrak (g) Rendemen (%) DER Native 663,3 15 142,33 21,45 4,66

## c. Hasil Skrining Fitokimia
Pengujian  fitokimia  ini  dilakukan  untuk mengetahui  seberapa  banyak  senyawa  metabolit sekunder  yang  ada  di  dalam  ekstrak  etanol tanaman lamun.
Tabel  4. Hasil  skrining  fitokimia  ekstrak  etanol tanaman lamun
Parameter Uji Hasil Alkaloid - Saponin + Tannin - Fenolik + Flavonoid + Triterpenoid + Steroid +
Dari  hasil  pengujian  fitokimia  ekstrak  yang dilakukan, kandungan senyawa metabolit sekunder  yang  terdapat  di  dalam  ekstrak  etanol tanaman lamun berupa saponin, fenolik, flavonoid, triterpenoid dan steroid. Hasil metabolit sekunder ekstrak tanaman lamun dapat dilihat pada Tabel 4.

## d. Parameter Susut Pengeringan
Hasil  pengukuran  nilai  parameter  susut pengeringan  dari  ekstrak  etanol  tanaman  lamun sebesar  12,34%.  Pengukuran  susut  pengeringan ini  dilakukan  selain  untuk menghindari  cepatnya pertumbuhan  mikroba  dan  jamur  dalam  ekstrak juga untuk mempertahankan kualitas dari ekstrak yang digunakan [13].

## e. Kadar Abu Total
Penentuan  kadar  abu  ini  bertujuan  untuk memberikan  gambaran  kandungan  mineral  baik secara internal maupun eksternal yang berasal dari proses  awal  sampai  terbentuknya  ekstrak.  Yaitu dengan  cara  ekstrak  lamun  dipanaskan  hingga senyawa-senyawa  organik  yang  terkandung didalamnya  beserta  turunannya  terdestruksi  dan menguap  sampai  hanya  unsur  mineral  dan anorganik  saja.  Dari  hasil  penelitian  diperoleh kadar abu total ekstrak diperoleh sebesar 2,77%.

## f. Kadar Sari Larut Air
Pengujian  kadar senyawa terlarut dalam air dilakukan  untuk  mengetahui  tingkat  kepolaran dari  ekstrak  tanaman  lamun.  Ekstrak  etanol tanaman  lamun  memiliki  kecenderungan  bersifat polar.  Tingkat  kepolaran  hasil  dari  ekstraksi  ini dapat digunakan untuk mengidentifikasi senyawa- senyawa  spesifik  yang  terdapat  di  dalam  ekstrak tanaman lamun. Hasil pengukuran kadar sari larut air dari ekstrak tanaman lamun sebesar 21,73%.

## g. Penetapan Kandungan Fenol Total
Nilai  konsentrasi  dari  larutan  sampel  uji dapat  ditentukan  dengan  menggunakan  kurva kalibrasi  dengan  cara  mengukur  nilai  absorbansi sampel  kemudian  kadar  total  fenolik  dihitung dengan  menggunakan  persamaan  regresi  linier. Kandungan  total  fenolik  dalam  ekstrak  etanol tanaman  Lamun  sebesar    22,04  %.  Hasil pengukuran disajikan pada tabel 5.

## h. Penetapan Kandungan Flavonoid Total
Kandungan  flavonoid  total  dari  ekstrak  etanol Lamun diperlihatkan pada Tabel 6.
Tabel 5 . Kadar Total Fenol Ekstrak Etanol Tanaman Lamun
Kode Sampel Berat Ekstrak (mg) Absorbansi Kadar Fenol % mg/100 g A1 0,050 0,677 22,37 22366,67 A2 0,053 0,683 22,57 22566,67 A3 0,059 0,641 21,17 21166,67 Rata-rata kadar fenol 22,04 22033,37 Tabel 6 . Kadar Total Flavonoid Ekstrak Etanol Tanaman Lamun Kode sampel Berat ekstrak (mg) Absorbansi Kadar Flavonoid % mg/100g B1 0,318 0,216 5,78 5786,88 B2 0,318 0,213 5,72 5725,40 B3 0,318 0,216 5,78 5786,88 Rata-rata kadar flavonoid 5,76 5766,38

## Etosom Ekstrak Lamun
Etosom  ekstrak  lamun  telah  berhasil  dibuat dengan  metode  dingin.  Metode  ini  dilakukan dengan  cara  lesitin  (fosfatidikolin)  dilarutkan dalam  pelarut  etanol  pada    bejana  tertutup, kemudian  diwadah  terpisah  ekstrak  lamun dilarutkan  dengan  menggunakan  etanol,  ekstrak etanol  lamun  dan  fosfatidilkolin  dicampur kemudian dilakukan pengadukan dengan menggunakan magnetic  stirrer selama  15  menit
pada  kecepatan  750  rpm.  Campuran  dipanaskan dengan suhu 30℃ menggunakan magnetic stirrer dan ditambah  air  dengan  suhu  30℃.  Campuran tersebut  diaduk  dengan  menggunakan magnetic stirrer selama  10  menit,  sehingga  membentuk etosom  yang  baik.  Penelitian  ini  melakukan optimasi pada 4 formula dengan membandingkan kadar lesitin untuk tiap-tiap formula. Formula dan hasil optimasi disajikan pada Tabel 7.
Tabel 7. Rincian formula dan Hasil karakterisasi etosom ekstrak lamun
Bahan Jumlah (%) Formula I Formula II Formula III Formula IV Lesitin 1 2 2,5 3 Ekstrak Lamun 2 2 2 2 Alkohol 20 20 20 20 Propilen glikol 1 1 1 1 Air Ad 100 mL Ad 100 mL Ad 100 mL Ad 100 mL Karakterisasi Organoleptik Larutan berwarna Hijau Larutan berwarna Kuning kehijauan Larutan berwarna Kuning kehijauan Larutan berwarna Kuning Ukuran partikel (nm) 241,2 703,4 431,4 216,1
Formula IV dengan ukuran partikel 216,1 nm di pilih untuk dilakukan uji karakteristik lanjutan berupa  uji  zeta  potensial  dan  uji  TEM ( Transmission  Electron  Microscope ).  Nilai  zeta potensial etosom ekstrak tanaman lamun sebesar -
19.23 mV, nilai ini menunjukkan hasil yang cukup baik  dan  akan  menghasilkan  bentuk  koloid  yang lebih  stabil  karena  mampu  menolak  agregasi. Analisa  menggunakan  TEM  diperoleh  bentuk
morfologi  yang  baik  seperti  yang  ditampilkan pada Gambar 1.
Gambar 1. Citra TEM Etosom Ekstrak Lamun

## Pembuatan Gel Sediaan
Tahap  pertama  dari  formulasi  gel  adalah optimasi  jumlah  Na  CMC  yang  dibutuhkan. Penentuan  tingkat  rendah  dan  tinggi  dari konsentrasi Na CMC dengan mengamati respons sifat  fisik  yakni  viskositas  dan  daya  sebar  yang dihasilkan  dari  sediaan  gel  yang  diformulasi memenuhi  kriteria  penerimaan  atau  tidak.  Pada Tabel 8 ditunjukkan data viskositas dan daya sebar hasil dari pengamatan yang dilakukan.
Tabel 8. Hasil rata-rata viskositas dan daya sebar sediaan gel
Konsentrasi Na-CMC Viskositas (Pa.s) Daya sebar (cm) 7% 64,986 4,50 5% 53,945 4,90 2,5% 31,677 5,30 1% 25,832 7,30
Tabel  9. Formulasi  sediaan  gel  etosom  ekstrak tanaman lamun
Komposisi Jumlah (%) Formula Etosom ekstrak Tanaman Lamun 10 Na CMC 1 Gliserin 5 Phenoxyethanol 0,1 Propilenglikol 2,5 Parfum 2 tetes Aqua DM ad 100
Pada  Tabel  8  menunjukkan  bahwa  pada konsentrasi  Na-CMC  7%;  5%;  2,5%;  dan  1% respons  yang  diperoleh  masuk  dalam  kriteria penerimaan viskositas, namun pada penelitian ini peneliti memilih Na-CMC dengan konsentrasi 1% dengan nilai visikositas 25,832 Pa.s dengan daya sebar 7,30 cm.
Setelah  didapatkan  konsentrasi  CMC  yang terbaik dilanjutkan dengan memformulasi sediaan gel  etosom  ekstrak  lamun,  hasil  formulasi disajikan pada Tabel 9.
Pengujian  Stabilitas  Fisik  Sediaan  Pelembab Gel

## • Uji Organoleptik
Dari  hasil  evaluasi  bahwa  gel  etosom  ekstrak tanaman  lamun  memiliki  penampilan  dengan warna  putih  kuning  kehijauan  yang  jernih, berbentuk  gel semisolid dan  memiliki  aroma parfum jeruk nipis. Warna kuning kehijauan pada formula gel dikarenakan etosom ekstrak tanaman lamun  yang  memiliki  warna  dasar  kuning kehijauan.  Penambahan gelling  agent dengan konsentrasi  1%  membuat  sediaan  ini  cair  sedikit kental.

## • Uji Daya Sebar Gel
Uji  daya  sebar  pada  penelitian  ini  dilakukan untuk  memastikan  sediaan  gel  tersebar  merata diarea  kulit  yang  diaplikasikan  pada  saat penggunaan. Nilai daya sebar yang baik dan dapat diterima  pada  saat  pengaplikasian  yaitu  pada rentang  5-7  cm.  Semakin  besar  daya  sebar  yang diberikan, maka semakin besar kemampuan daya sebar  zat  aktif  dan  semakin  luas  kontak  antara sediaan dengan kulit. Sediaan gel etosom ekstrak tanaman  lamun  memiliki  nilai  daya  sebar  antara 6.5-7.0 cm.
• Uji Viskositas Gel
Pengukuran  viskositas  menggunakan  alat viskometer Lamy Rheology digital menggunakan spindle Nomor 5 yang memiliki kecepatan 50 rpm, hasil visikositas sediaan gel disajikan pada Tabel 10.

## • Uji pH Gel
Rentang persyaratan pH untuk kulit yaitu 4,5-
6,5. Dari Tabel 11 hasil pengukuran pH diketahui bahwa  sediaan  gel  yang  dihasilkan  memiliki rentang pH 5,80-5,38. pH sediaan ini masih dalam
rentang pH yang diperbolehkan penggunaannya di kulit.
Tabel  10. Evaluasi  Visikositas  Sediaan  Gel Etosom Ekstrak Tanaman Lamun
Suhu Penyimpanan (℃) Waktu Penyimpanan (Minggu) Rata-Rata Viskositas (cps) ± 4 0 2750,00 2 2750,00 4 2650,00 6 2550,00 8 2550,00 ± 27– 30 0 2693,00 2 2690,00 4 2648,00 6 2550,00 8 2548,00 ± 40 0 2690,00 2 2690,00 4 2642,00 6 2550,00 8 2548,00

## • Uji Iritasi
Pengamatan uji iritasi dilakukan pada hewan coba  kelinci  jantan  berdasarkan  dua  parameter, yaitu udema dan eritema. Kulit akan menunjukkan reaksi yang kecil atau bahkan tidak menunjukkan reaksi  sama  sekali  pada  saat  kontak  pertama dengan  bahan.  Namun  dapat  dilihat  setelahnya dengan bahan iritan dalam waktu pengamatan 24, 48 dan 72 jam. Untuk eritema akan terlihat warna kemerahan pada area kulit dan bentuk luka yang tampak (jika ada). Sedangkan udema akan terlihat apabila  ada  pembengkakan  jika  dibandingkan dengan kulit yang normal.
Pengujian  yang  dilakukan  pada  hewan  uji kelinci  menunjukkan  bahwa  semua  kelinci  yang
telah  diaplikasikan  sediaan  pada  area  punggung memberikan  hasil  negatif  terhadap  sediaan  gel etosom  ekstrak  lamun  yang  diaplikasikan.  Hasil uji iritasi disajikan pada Tabel 12.
Tabel  11. Hasil  Pengukuran  pH  Sediaan  Gel Etosom Ekstrak Lamun
Suhu Penyimpanan (℃) Minggu Nilai pH ±4 0 5,80 2 5,80 4 5,70 6 5,70 8 5,60 ± 27– 30 0 5,70 2 5,60 4 5,53 6 5,47 8 5,38 ±40 0 5,80 2 5,80 4 5,70 6 5,70 8 5,60
Uji  aktivitas  penghambatan  enzim  tirosinase Gel Etosom Ekstrak Lamun secara in vitro
Pada  pengujian  aktivitas  inhibisi  enzim,  uji penghambatan aktivitas enzim tirosinase dilakukan  terhadap  gel  etosom  ekstrak  tanaman lamun  ( E.  acoroides )  dan  asam  kojat  sebagai pembanding  secara in  vitro menggunakan konsentrasi  enzim  310  U/mL,  pH  6,8,  waktu inkubasi  30  menit,  konsentrasi  substrat  10  mM dan  suhu  37ºC.  Pengujian  secara in  vitro dipilih karena  bahan-bahan  yang  digunakan  pada pengujian ini mudah diperoleh, tidak membutuhkan  waktu  yang  lama  dan  sederhana. Hasil uji aktivitas penghambatan enzim tirosinase disajikan dalam Tabel 13.
Tabel 12. Hasil pengamatan uji iritasi pada hewan kelinci
Keterangan :
- kotak I    = satu kali pengolesan sediaan
- kotak II   = dua kali pengolesan sediaan - kotak III  = tiga kali pengolesan sediaan
- kotak IV  = pengolesan basis gel - A, B, dan C= waktu pengamatan (24,48,72 jam)
Tabel 13. Hasil uji aktivitas inhibisi enzim tirosinase terhadap gel etosom ekstrak lamun
Zat uji Konsentrasi (µg/mL) Aktivitas inhibisi (%) IC 50 (µg/mL) Rata- rata (µg/mL) Seri 1 Seri 2 Seri 3 Seri 1 Seri 2 Seri 3 Gel Etosom Ekstrak Tanaman Lamun 500 83,58 83,56 83,62 400 81,19 81,16 81,55 300 67,17 68,49 68,27 175,64 170,69 181,14 175,91 200 51,28 50,68 50,51 100 39,82 40,92 38,27
Gambar 2. Grafik Hasil uji aktivitas inhibisi enzim tirosinase terhadap gel etosom ekstrak lamun
Hasil  pengukuran  aktivitas  inhibisi  enzim tirosinase  dari  Gel  Etosom  Ekstrak  lamun menunjukkan  bahwa  sediaan  gel  memiliki aktivitas  inhibisi  dengan  IC 50 175,91  µg/mL, dibandingkan dengan asam kojat (11,318 µg/mL) yang  umumnya  digunakan  sebagai  inhibitor standar  untuk  uji  aktivitas  tirosinase.  Nilai  IC 50 dipengaruhi oleh ukuran partikel yang dihasilkan dari  formula  sediaan  yang  diuji,  ukuran  partikel yang  terkecil  menghasilkan  nilai  IC 50 yang
terkecil juga, hal ini menunjukkan bahwa semakin kecil  ukuran  partikel  maka  memiliki  penetrasi yang  semakin  baik  dan  dengan  konsentrasi  kecil sudah  dapat  menghambat  aktivitas  enzim tirosinase.

## Uji efektivitas Pelembab
Pengujian  kelembaban  pada  kulit  dilakukan selama satu bulan dengan menggunakan alat skin analyzer-moisture checker  mode (SK-8),  yang
y = 0,1183x + 29,178 R² = 0,9573 0 20 40 60 80 100 0 100 200 300 400 500 600 A kt ivit as in h ib is i ( % ) Konsentrasi (µg/mL)
Hewan coba Uji
Perlakuan pada hewan coba Indeks T er api Kotak I Kotak II Kotak III Kotak IV A B C A B C A B C A B C Kelinci Eritema 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Edema 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
mana  alat  ini  dapat  memberikan  informasi  nilai kadar  air  pada  kulit.  Sebelum  sediaan    gel digunakan pada area kulit, dilakukan pengukuran kelembaban  terlebih  dahulu  pada  area  lengan relawan. Hasil dari pengukuran kelembaban kulit terhadap relawan menunjukkan bahwa sediaan gel etosom ekstrak tanaman lamun memiliki kemampuan  dan  manfaat  untuk  meningkatkan kelembaban diarea kulit lengan dengan persentase yang  berbeda-beda.  Pengujian  juga  dilakukan pada sediaan blangko, yaitu basis gel tanpa etosom ekstrak  lamun.  Sediaan  blangko  menunjukkan hasil peningkatan kelembaban yaitu sebesar 0,3% selama  waktu  pengujian.  Sediaan  Gel  etosom ekstrak  tanaman  lamun  memiliki  kemampuan melembapkan  kulit  sebesar  1,7  %  selama pengujian.
Hasil  pengukuran  nilai  kelembaban  kulit yang  dilakukan  terhadap  18  sukarelawan  dapat dilihat  pada  Tabel  14  dan  15,  hasil  persentase peningkatan  kelembaban  kulit  dapat  dilihat  pada Tabel 16 dan 17.
Persentase  peningkatan  kelembaban  kulit selama  pemakaian  sediaan  gel  disajikan  pada Tabel 17  Semua sediaan gel yang dibuat memiliki persentase peningkatan kemampuan melembapkan  yang  berbeda-beda.  Sediaan    gel tanpa etosom ekstrak lamun memiliki kemampuan untuk meningkatkan kelembaban kulit yang lebih baik  yaitu  peningkatan  rata-rata  di  hari  ke-28 sebesar 0,3%. Sediaan gel etosom ekstrak tanaman lamun  memiliki  kemampuan  melembapkan  kulit sebesar  0,6%  pada  hari  ke-14  dan  meningkat sebesar 1,7% pada pengujian hari ke 28.
Tabel 14. Hasil pengukuran kelembaban pada sebelum dan setelah pemakaian Basis Gel hari 14 dan 28
Basis Gel
Relawan R a ta -r a ta 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 Awal (%) 35,7 36,2 35,5 35,4 35,7 39,6 38,4 35,5 34,8 38,6 38,2 37,0 35,0 35,7 36,2 39,0 35,7 38,6 36,3 Hari ke 14 35,8 36,5 35,8 36,0 36,0 40,3 38,7 35,5 34,8 38,5 38,5 37,0 35,2 35,7 36,3 38,7 35,9 39,0 36,5 Hari ke 28 36,0 36,7 36,0 36,0 36,0 40,5 39,0 35,5 34,8 38,5 38,5 37,3 35,5 35,7 36,3 38,7 35,9 39,4 36,7
Tabel 15. Hasil pengukuran kelembaban pada sebelum dan setelah pemakaian Gel Etosom Ekstrak Lamun hari 14 dan 28
Gel Etosom Ekstrak Lamun Relawan R a ta -r a ta 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 Awal (%) 35,7 36,2 35,5 35,4 35,7 39,6 38,4 35,5 34,8 38,6 38,2 37,0 35,0 35,7 36,2 39,0 35,7 38,6 36,3 Hari ke 14 36,4 37,5 36,3 36,4 36,2 40,6 38,8 35,9 35,0 38,8 39,0 37,5 35,6 35,9 36,8 38,8 36,5 39,8 36,8 Hari ke 28 37,0 38,7 38,0 37,0 36,8 41,2 40,0 37,5 36,8 39,6 39,5 38,4 36,5 36,9 38,3 39,8 38,2 41,4  38,06
Adapun analisa statistik menunjukkan bahwa gel  etosom  ekstrak  lamun  memiliki  nilai  yang tidak signifikan dalam hal meningkatkan kelembaban  kulit  jika  dibandingkan  dengan  gel tanpa  etosom  ekstrak  lamun,  Dengan  demikian dapat diartikan bahwa sediaan gel etosom ekstrak lamun  mampu  meningkatkan  kelembaban  kulit dan  membuat  kulit  kategori  kering  menjadi  kulit kategori normal.
Nilai  persentase  yang  dihasilkan  terhadap kemampuan mengurangi penguapan air dari kulit berbeda  untuk  setiap  panelis  dikarenakan berbedanya cuaca pada saat melakukan pengujian serta  banyaknya  keringat  yang  dihasilkan  oleh
masing-masing  panelis  tidak  sama,  Penyebab lainnya  adalah  kemungkinan  aktivitas  yang dilakukan oleh panelis juga berbeda-beda.

## 4 Kesimpulan
Tanaman  Lamun  yang  diperoleh  dari perairan Kepulauan Riau (Batam) dengan spesies Enhalus acoroides setelah dimaserasi didapatkan hasil  rendemen ekstrak sebanyak 21,45%, dengan kandungan total fenol 22,04% dan total flavonoid 5,76%,  Ekstrak  etanol  tanaman  lamun  dapat dibuat  menjadi  etosom  dengan  karakterisasi ukuran  partikel  216,1 nm dengan  nilai  indeks polidispersitas  yaitu  24,97%,  serta  nilai  zeta potensial  -19,23 mV, Gel  etosom  ekstrak  lamun
dapat menginhibisi enzim tyrosinase dengan nilai IC 50 175,91 µg/mL.

## Ucapan Terima Kasih
Terima  kasih  diucapkan  atas  dukungan  Dekan Fakultas  Farmasi  Universitas  Pancasila  beserta jajarannya  sehingga  penelitian  kami  ini  dapat terlaksana dengan lancar dan baik.

## Referensi
[1] Tangke  U,  Ekosistem  padang  lamun (Manfaat, Fungsi dan Rehabilitasi), Agrikan  J  Agribisnis  Perikan  [Internet], 2010;3(1):9, Available
from:
http://dx,doi,org/10,29239/j,agrikan,3,1,9-
29
[2] Riniatsih  I,  Setyati  WA,  Bioaktivitas Ekstrak  dan  Serbuk  Lamun  Enhalus acoroides  dan  Thalassia  hemprichii  pada Vibrio  alginolyticus  dan  Vibrio  harveyii,
Indones J Mar Sci, 2012;14(3):138–41. [3] Kannan RRR, Arumugam R, Anantharaman  P,  In  vitro  antioxidant activities  of  ethanol  extract  from  Enhalus acoroides  (L,F,)  Royle,  Asian  Pac  J  Trop Med [Internet], 2010;3(11):898–901, Available from: http://dx,doi,org/10,1016/s1995-
7645(10)60216-7
[4] Wakano  D,  Seagrass  Enhalus  acoroides Fruit  Utilization  as  Alternative  Food Sources Lomin Village Community East of Seram,  In:  Prosiding  FMIPA  Universitas Pattimura  2013,  Ambon:  Universitas Pattimura; 2013, p, 10–2.
[5] Qi  S-H,  Zhang  S,  Qian  P-Y,  Wang  B-G, Antifeedant,  antibacterial,  and  antilarval compounds  from  the  South  China  Sea
seagrass  Enhalus  acoroides,  Bot  Mar [Internet],  2008;51(5),  Available  from: http://dx,doi,org/10,1515/bot,2008,054
[6] Thassu  D,  Pathak  Y,  Deleers  M,
Nanoparticulate  Drug-Delivery  Systems: An  Overview  [Internet],  Nanoparticulate Drug Delivery Systems, CRC Press; 2007,
p, 1–31, Available from: http://dx,doi,org/10,1201/9781420008449- 1
[7] Berth-Jones  J,  Topical  Therapy  [Internet], Rook’s  Textbook  of  Dermatology,  Wiley- Blackwell; 2010, p, 1–52, Available from: http://dx,doi,org/10,1002/9781444317633, ch73
[8] R  V,  Buku  Pengantar  Teknologi  Farmasi, Yogyakarta, Univ Gadjah Mada Press, 1994
[9] Blainski  A,  Lopes  G,  de  Mello  J, Application  and  Analysis  of  the  Folin Ciocalteu Method for  the Determination of the Total Phenolic Content from Limonium Brasiliense L, Molecules [Internet],
2013;18(6):6852–65, Available from: http://dx,doi,org/10,3390/molecules180668
52
[10] Akiladevi  D,  Basak  S,  Ethosomes  --  a Noninvasive  Approach  for  Transdermal Drug  Delivery,  Int  J  Curr  Pharm  Res, 2010;2(4):2–5.
[11] Anief  M,  Ilmu  Meracik  Obat:  Teori  dan Praktik, Yogyakarta: Gadjah Mada University Press; 1997.
[12] Astuti DP, Husni P, Hartono K, Formulasi dan  Uji  Stabilitas  Fisik  Sediaan  Gel Antiseptik  Tangan  Minyak  Atsiri  Bunga Lavender  (Lavandula  angustifolia  Miller),
Farmaka, 2017;15(1):176–84.
[13] Ditjen POM DR, Parameter standar umum ekstrak tumbuhan obat, Jakarta: Departement Kesehatan Republik Indonesia, Ed IV, 2000.