## Borneo Journal Of Medical Laboratory Technology
Pembuatan Sediaan Gel Arang Tempurung Kelapa Dan Uji Daya Hambat Terhadap Bakteri Klebsiella pneumoniae
Preparation of Coconut Shell Charcoal Gel and Inhibitory Test Against Klebsiella pneumoniae Bacteria
Siti Rahmah Kamalah 1
Kurniawan 2*
Arif Mulyanto 3
Kurnia Ritma Dhanti 4
1 Universitas Muhammadiyah Purwokerto, Indonesia
2* Universitas Muhammadiyah Purwokerto, Indonesia
3 Universitas Muhammadiyah Purwokerto, Indonesia
4 Universitas Muhammadiyah Purwokerto, Indonesia
*email: kurniawan@ump.ac.id

## Abstrak
Klebsiella  pneumoniae merupakan  bakteri  berbentuk  batang  Gram  negatif, anggota  dari  kelompok  bakteri Enterobacteriaceae yang  bersifat  patogen  dan dapat  menginfeksi  manusia.  Saat  ini,  bakteri K.  pneumoniae banyak  yang mengalami resistensi terhadap antibiotik sehingga memunculkan masalah baru di  bidang  kesehatan  dan  harus  segera  ditangani  dengan  memanfaatkan keanekaragaman hayati berupa tumbuhan obat seperti pohon kelapa yang dapat menghasilkan  tempurung  kelapa  dan  dibuat  menjadi  arang.  Hasil  analisis fitokimia  menunjukkan  bahwa  arang  tempurung  kelapa  mengandung  banyak senyawa  aktif  yang  telah  dimanfaatkan  di  industri  kosmetik  dan  kesehatan. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mendapatkan formula gel ekstrak arang tempurung kelapa yang optimal dan efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri K. pneumoniae . Penelitian ini termasuk true experimental post only control group dengan perlakuan kelompok konsentrasi gel yang berbeda, yaitu 3%, 6%, dan  9%.  Formulasi  gel ekstrak  arang  tempurung kelapa  yang  optimal  dimiliki oleh  gel  dengan  konsentrasi  9%  dan  hasil  analisis  statistik One  Way  ANOVA menunjukkan bahwa perlakuan uji daya hambat terhadap bakteri K. pneumoniae dari  gel  dengan  konsentrasi  berbeda  menunjukkan  adanya  perbedaan  rerata terhadap luas zona hambat dengan nilai signifikan 0,033 (p<0,05). Hasil uji Post Hoc LSD menunjukkan beberapa kelompok perlakuan memiliki nilai siginifikan (p<0,05).  Berdasarkan  hasil  penelitian,  maka  dapat  disimpulkan  bahwa, formulasi  gel  ekstrak  arang  tempurung  yang  optimal  dimiliki  oleh  gel  dengan konsentrasi  9%,  sedangkan  gel  yang  paling  efektif  dalam  menghambat pertumbuhan bakteri K. pneumoniae adalah gel dengan konsentrasi 3%.

## Kata Kunci:
Arang tempurung kelapa, formulasi, gel, Klebsiella pneumoniae
Keywords : Coconut shell charcoal, formulation, gel,
Klebsiella pneumoniae

## Abstract
Klebsiella pneumoniae is a gram-negative rod-shaped bacterium that is a member of the Enterobacteriaceae group of bacteria and is pathogenic and can infect humans. Currently, many K. pneumoniae bacteria are resistant to antibiotics, giving rise to new problems  in  the  health  sector  that  must  be  addressed  immediately  by  utilizing biodiversity in the form of medicinal plants such as coconut trees, which can produce coconut  shells  that  can  be  made  into  charcoal.  The  results  of  the  phytochemical analysis show that coconut shell charcoal contains many active compounds that have been used in the cosmetic and health industries. The purpose of this study was to obtain  an  optimal  and  effective  coconut  shell  charcoal  extract  gel  formula  for inhibiting  the  growth  of  K.  pneumoniae  bacteria.  This  study  included  a  true experimental post-only control group with different gel concentration groups, namely 3%, 6%, and 9%. The optimal formulation of coconut shell charcoal extract gel is a gel  with  a  concentration  of  9%,  and the  results  of  the  one-way  ANOVA  statistical analysis show that the treatment of the inhibition test on K. pneumoniae bacteria from gels with different concentrations shows that there is a mean difference in the area of the inhibition zone with a significant value of 0.033 (p<0.05). The results of the LSD post-hoc test showed that several treatment groups had significant values (p <0.05).  Based  on  the  results  of  the  study,  it  can  be  concluded  that  the  optimal formulation of shell charcoal extract gel is a gel with a concentration of 9%, while the most effective gel for inhibiting the growth of K. pneumoniae bacteria is a gel with a concentration of 3%.

## PENDAHULUAN
Klebsiella pneumoniae merupakan bakteri Gram negatif berbentuk  batang  yang  tidak  menghasilkan  spora, memiliki ukuran 2 µm × 0,5 µm yang termasuk ke dalam anggota kelompok Enterobacteriaceae . Bakteri ini banyak ditemukan  di  alam,  termasuk  pada  tumbuhan,  hewan, dan  manusia. K.  pneumoniae adalah  salah  satu  agen penyebab  terjadinya  beberapa  jenis  infeksi  pada manusia,  seperti  infeksi  saluran  pernafasan,  infeksi saluran  kemih  (ISK),  dan  infeksi  pada  aliran  darah (Paczosa & Mecsas 2016).
Beberapa  tahun  terakhir  ditemukan  generasi K. pneumoniae yang  memiliki  jenis  enzim β -lactamase dengan  jumlah  yang  banyak  sehingga  mampu menghancurkan  struktur  antibiotik β -lactam seperti karbapenem,  penisilin,  dan  sefalosporin.  Antibiotik karbapenem diidentifikasi sebagai antibiotik yang banyak digunakan  dalam  terapi  infeksi  yang  disebabkan  oleh bakteri  Gram  negatif  sehingga  memunculkan carbapenemase-mediated multidrug resistant (MDR) yaitu kondisi  ketika  antibiotik  dari  golongan  ini  tidak  dapat menghambat pertumbuhan bakteri K. pneumoniae . Oleh karena  itu,  saat  ini  dibutuhkan  adanya  terapi  empirik yang  lebih  optimal  terhadap  bakteri K.  pneumoniae (Salukanan et al ., 2018).
Infectious  Disease  Society  of  America (IDSA)  membuat suatu istilah “ESKAPE” untuk menamai bakteri-bakteri yang  mempunyai  tingkat  MDR  tinggi  dan  merupakan singkatan  dari Enterococcus  faecium , Staphylococcus aureus , K.  pneumoniae , Acinetobacter  baumannii , Pseudomonas  aeruginosa dan Enterobacter spp.  Semua jenis bakteri tersebut merupakan bakteri patogen yang dapat mengancam jiwa pasien-pasien penyakit kritis dan immunocompromised karena kemampuannya yang sudah resisten dan sulit diobati dengan banyak antibiotik. Saat  ini,  banyak  hasil  penelitian  yang  menunjukkan adanya  resistensi  bakteri K.  pneumoniae terhadap antibiotik.  Soleha et  al. (2019)  melakukan  penelitian mengenai  pola  resistensi K.  pneumoniae terhadap antibiotik  yang  menemukan  adanya  resistensi K.
pneumoniae dengan tingkat sensitifitas tertinggi terhadap antibiotik meropenem (ME) sebesar 95,6%, cefadroksil (CFR)  sebesar  91,4%,  cephazolin  (KZ)  sebesar  85,5%, dan  terendah  pada  ceftazidime  (CAZ)  sebesar  55,4%. Hasil  penelitian  lainnya  menjelaskan  bahwa  bakteri K. pneumoniae menempati urutan ketiga sebagai penyebab infeksi pneumonia di ruang ICU RSUP Dr. Hasan Sadikin Bandung  pada  periode  Januari-Desember  2017 (Salukanan et al ., 2018).
Meningkatnya  resistensi  antibiotik  bakteri K. pneumoniae dapat  menjadi  masalah  besar  di  bidang kesehatan, karena infeksi yang disebabkan oleh bakteri yang  resisten  dapat  membahayakan  nyawa  pasien. Sulitnya menemukan antibiotik yang ampuh dan efektif dalam  mengendalikan  bakteri  tersebut  mengakibatkan biaya  pelayanan  kesehatan  menjadi  mahal  dan dibutuhkan  alternatif  lain  seperti  penemuan  dan penggunaan obat berbahan alam.
Keanekaragaman  hayati  berupa  tumbuh-tumbuhan memiliki potensi yang tinggi dan mampu dikembangkan sebagai obat alami yang dapat menjadi alternatif untuk mengobati berbagai jenis penyakit infeksi. Banyak orang percaya bahwa obat yang berasal dari tumbuhan relatif lebih  aman  untuk  dikonsumsi  dalam  jangka  panjang dibandingkan dengan obat kimia (Puasa et al ., 2019).
Salah satu bahan alam yang banyak  dijumpai di sekitar kita adalah tempurung kelapa. Bahan ini umumnya hanya digunakan sebagai bahan bakar dan kerajinan tangan saja. Namun,  beberapa  hasil  penelitian  (analisis  fitokimia) tentang  arang  tempurung  kelapa  menunjukkan  bahwa arang  tempurung  kelapa  mengandung  banyak  senyawa antibakteri. Atas dasar hal tersebut, maka saat ini arang tempurung kelapa telah banyak dimanfaatkan di industri kosmetik dan kesehatan untuk dijadikan sebagai masker kecantikan,  pembersih  wajah,  dan  juga  sabun  mandi (Lestari et al ., 2021).
Tempurung  kelapa  merupakan  pelindung  bagi  daging kelapa  ( Cocos  nucifera L.)  yang  keras  di  bagian  dalam dengan ketebalan 3-5 mm di bawah lapisan sabut kelapa. Meskipun  awalnya  hanya  dianggap  sebagai  limbah,
ternyata  tempurung  kelapa  ini  dapat  diolah  menjadi arang  aktif  yang  memiliki  nilai  ekonomi  yang  tinggi dengan berbagai manfaat. Di negara Cina dan Amerika Utara,  arang  aktif  dari  tempurung  kelapa  ini  telah digunakan sebagai obat tradisional yang berfungsi untuk mengatasi  permasalahan  pada  kulit  seperti  dermatitis atopik, tumit kering disertai pecah-pecah, dan jerawat. Selain itu, senyawa yang terkandung di dalam arang aktif ini juga dapat digunakan sebagai kandidat obat-obatan, makanan dan minuman (Sandoro et al ., 2021).
Berdasarkan  latar  belakang  di  atas  maka  peneliti bermaksud melakukan penelitian mengenai pembuatan sediaan gel arang tempurung kelapa dan uji daya hambat terhadap  bakteri K.  pneumoniae .  Tujuan  yang  ingin dicapai  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mendapatkan formula  gel  ekstrak  arang  tempurung  kelapa  yang optimal  dan  efektif  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri K. pneumoniae .

## METODE PENELITIAN
Desain, Tempat dan Waktu Desain  penelitian  ini  menggunakan true  exsperimental post  only  control  group yang  terdiri  dari  5  kelompok, dengan dua kelompok sebagai kontrol positif (antibiotik ciprofloxacin )  dan  kontrol  negatif  (DMSO),  serta  tiga kelompok lainnya sebagai perlakuan dengan konsentrasi ekstrak arang tempurung kelapa yang berbeda, yaitu F1 (3%), F2 (6%), dan F3 (9%). Penelitian ini dilakukan pada bulan September 2021 hingga Februari 2022 di empat laboratorium yang berbeda, yaitu Laboratorium Biologi Farmasi, Laboratorium
Teknologi Farmasi, Laboratorium  Kimia  Analisis  Farmasi  Fakultas  Farmasi dan  Laboratorium  Mikrobiologi  dan  Biokimia  Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas
Muhammadiyah Purwokerto.

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian ini meliputi cawan petri, tabung reaksi, rak tabung, botol kaca, jarum ose, lampu  bunsen,  korek  api,  pinset,  gelas  beaker,  gelas ukur,  erlenmeyer,  mikropipet, white  tip , blue  tip ,
autoklaf, inkubator, laminar air flow, vorteks, hot plate stirer ,  blender,  spektrofotometer,  kompor  gas,  batang pengaduk,  timbangan  analitik,  cawan  porselen, waterbath , rotary  evaporator ,  GCMS-QP2010  SE  merk Shimadzu  Europa,  ayakan,  kain  saring, vakum  pump , corong Buchner ,  erlenmeyer  bercucuk,  martil,  spatula, stoples kaca, botol sampel (botol plastik), dan kamera. Bahan yang digunakan dalam penelitian ini meliputi isolat bakteri K.  pneumoniae ,  arang  tempurung  kelapa, akuades,  larutan  etanol  96%,  gliserin,  larutan  DMSO, antibiotik ciprofloxacin ,  medium Mueller  Hinton  Agar (MHA),  medium Tryptone  Soy  Broth (TSB),  Na-CMC, paper  disk  blank ,  propilen  glikol,  alumnium  foil,  dan wrapping plastic .

## Ekstraksi Arang Tempurung Kelapa
Arang tempurung kelapa sebanyak 10 kg ditumbuk dan dihaluskan  dengan  blender,  kemudian  diayak  dengan pengayak  hingga  menjadi  serbuk  halus  dan  diperoleh hasil  sebanyak  6  kg.  Selanjutnya  dilakukan  ekstraksi mengggunakan  metode  maserasi  dengan  cara merendam  serbuk  arang  tempurung  kelapa  di  dalam pelarut etanol 96% dengan perbandingan 1 kg : 1 liter. Semua stoples kaca tersebut disimpan pada suhu ruang selama 5 hari dengan setiap hari dibuka untuk dilakukan pengadukan  dan  penambahan  etanol  apabila  volume etanol  96%  berkurang.  Setelah  itu,  dilakukan  proses pemisahan dengan cara menyaring pelarut menggunakan erlenmeyer bercucuk, corong Buchner , kertas saring dan pompa  vakum.  Hasil  penyaringan  selanjutnya diekstraksi,  dimurnikan  dan  dipekatkan  menggunakan rotary evaporator dan setelah itu diuapkan menggunakan waterbath sehingga  diperoleh  ekstrak  kental  arang tempurung kelapa. Selanjutnya hasil ekstraksi ditimbang guna  mengetahui  jumlah  ekstrak  yang  diperoleh  dan dilakukan juga analisis rendemen. Rendemen merupakan perbandingan  berat  ekstrak  yang  dihasilkan  dengan berat bahan baku yang digunakan (Sari et al ., 2021). Nilai rendemen  ini  dapat  dihitung  dengan  menggunakan rumus sebagai berikut:

## Rendemen = Berat Ekstrak Kental × 100% Berat Serbuk Arang

## Analisis  Kandungan  Senyawa  Aktif  Secara GCMS
Senyawa aktif yang terkandung dalam ekstrak arang tempurung  kelapa  diidentifikasi  menggunakan  alat GCMS-QP2010  SE  (Shimadzu).  Proses  identifikasi  ini diawali  dengan  preparasi  sampel  yaitu  ekstrak  arang tempurung kelapa sebanyak 3 g dilarutkan ke dalam 3 mL etanol 96%. Kemudian dikocok dalam corong pisah selama  5  menit  dan  didiamkan  beberapa  saat.  Hasil fraksi atas (etanol 96%) dipisahkan dari fraksi bawah dan hasil  pemisahan  (fraksi  atas)  ditampung  dalam  botol kaca, sedangkan fraksi bawah ditambahkan lagi dengan 3 mL  larutan  96  %  larutan  etanol,  dikocok  lagi  dalam corong pisah seperti semula. Fraksi atas yang dihasilkan pada ekstraksi kedua ditampung dalam botol kaca yang sama,  kemudian  dipekatkan  dengan  meniupkan  gas nitrogen  hingga  tersisa  volume  sekitar  1  mL.  Hasil  ini kemudian  dianalisis  secara  GCMS  hingga  didapatkan nama-nama senyawa kimia yang terkandung didalamnya. Pembuatan  Sediaan  dan  Formulasi  Gel  Arang Tempurung Kelapa
Sediaan gel ekstrak dibuat dari ekstrak arang tempurung kelapa dan zat tambahan. Formulasi gel dilakukan secara trial-error yang  mengacu  pada  data  dan  informasi  dari literatur peneliti lain. Tahap pembuatan basis gel ekstrak arang  tempurung  kelapa  dilakukan  dengan  cara melarutkan  2%  Na-CMC  dalam  80  ml  akuades  panas, kemudian dihomogenkan hingga larut dan diaduk secara terus  menerus  hingga  mendidih.  Ditambahkan  10% gliserin,  5%  propilenglikol  dan  3%  ekstrak  arang tempurung kelapa ke dalam campuran tadi dengan posisi diaduk terus-menerus hingga tidak terdapat gumpalan. Setelah itu, campuran dihaluskan kembali menggunakan mortal  guna  memperoleh  sediaan  gel  yang  baik  dan terjamin homogenitasnya. Berkenaan dengan sediaan gel yang  telah  memenuhi  standar  parameter  penelitian menunjukkan  penampilan  fisik  yang  baik  serta memberikan  rasa  nyaman  dan  tidak  lengket  dikulit,
maka  disusunlah  3  formulasi  gel  ekstrak  arang tempurung kelapa dengan konsentrasi 3%, 6%, dan 9% (Krongrawa et al ., 2018).

## Uji  Stabilitas  Sediaan  Gel  Ekstrak  Arang Tempurung Kelapa
Hasil formulasi gel ekstrak arang tempurung kelapa perlu  dilakukan  uji  stabilitas  gel  yang  meliputi  uji  daya sebar,  uji  homogenitas,  uji  viskositas,  dan  pH.  Uji stabilitas  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  ada  tidaknya perubahan  pada  kondisi  gel  ekstrak  selama  masa penyimpanan.
Uji daya sebar bertujuan untuk mengetahui kemampuan penyebaran gel pada kulit saat dioleskan. Gel ditimbang sebanyak  1  gram  diletakkan  pada  kaca  transparan berdiameter  15  cm,  kemudian  ditutup  dengan  kaca lainnya  diatasnya  dan  ditambah  pemberat  150  gram, dibiarkan  selama  1  menit  lalu  diukur  diameter penyebarannya.
Uji  homogenitas  bertujuan  untuk  mengetahui  ada tidaknya butiran kasar yang terbentuk di dalam sediaan gel. Sediaan gel dioleskan pada kaca, kemudian diamati bagian yang tidak homogen atau tidak tercampur. Uji  nilai  pH  dilakukan  dengan  cara  mencelupkan  pH meter  ke  dalam  sediaan  gel  ekstrak  arang  tempurung kelapa. Nilai pH yang sesuai dengan nilai pH kulit yaitu berkisar 4,5–6,5 (Sukartiningsih et al ., 2019).
Uji  visikositas  bertujuan  untuk  mengetahui kekentalan  sediaan  gel,  dilakukan  dengan  cara menempatkan bagian spindel alat ke dalam sediaan gel hingga terendam sempurna dengan kecepatan 50 rpm. Uji  Daya  Hambat  Sediaan  Gel  Ekstrak  Arang Tempurung Kelapa terhadap K. pneumoniae Proses  kultur  bakteri K.  pneumoniae dilakukan menggunakan  metode Standar  Plate  Count (SPC). Diambil  satu  ose  kultur  bakteri  untuk  dimasukkan  ke dalam Erlenmeyer berisi 25 ml medium TSB steril lalu diinkubasi  di dalam shaker dengan kecepatan 100 rpm selama 24 jam pada suhu 37 °C. Medium Trypticase Soy Broth (TSB)  yang  menunjukkan  adanya  pertumbuhan bakteri K.  pneumoniae (ditandai  terbentuknya
kekeruhan)  dilakukan  pengenceran  10 5 .  Kemudian dilakukan  perhitungan  jumlah  sel  dengan  metode turbidimetri menggunakan alat spektrofotometer pada panjang  gelombang  600  nm.  Nilai  absorbansi  yang diperoleh dikonversi menjadi jumlah sel/ml menggunakan  software  berbasis  web  yaitu OD600
Calculator ( https://www.agilent.com ).
Uji  daya  hambat  gel  ekstrak  arang  temprurung  kelapa terhadap  bakteri K.  pneumoniae dilakukan  dengan metode difusi agar. Dari hasil pengenceran 10 4 dilakukan plating pada medium Mueller Hinton Agar (MHA) secara spread  plate .  Kemudian  permukaan  agar  diberi  kertas cakram  steril  berdiameter  6  mm  sebanyak  5  buah dengan  masing-masing  diolesi  sediaan  gel  antibiotik ciprofloxacin (sebagai kontrol positif), sediaan gel DMSO (sebagai kontrol negatif), serta sediaan gel ekstrak arang tempurung  kelapa  konsentrasi  3%,  6%,  dan  9%. Selanjutnya diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 °C. Setelah masa inkubasi selesai, dilakukan pengamatan dan pengukuran zona hambat menggunakan jangka sorong.
Adanya  perbedaan  diameter  zona  hambat  yang terbentuk  pada  saat  pengukuran  menggunakan  jangka sorong dan diameter kertas cakram, maka selanjutnya dilakukan perhitungan diameter zona hambat tersebut dengan rumus perhitungan dari Kurniawan & Yulistiani (2020) sebagai berikut:
Keterangan: ra : Jari-jari zona hambat (mm) rb : Jari-jari kertas cakram (mm) Lzhaw  : Luas zona hambat awal (mm 2 )
Lkc : Luas kertas cakram (mm 2 )
Lzhak   : Luas zona hambat akhir (mm 2 ) π : 3,14

## Analisis Data
Data yang diperoleh dianalisis secara statistik dengan uji One Way ANOVA . Apabila data terdistribusi normal dan homogen,  maka  dilanjutkan  dengan  uji Post  Hoc LSD ( Least Significant Difference ).

## HASIL DAN PEMBAHASAN HASIL

## Hasil Perhitungan Rendemen Ekstrak
Analisis  rendemen  ini  bertujuan  untuk  mengetahui jumlah atau kadar metabolit sekunder yang terkandung di dalam ekstrak, tanpa mengetahui jenis senyawa yang terkandung didalamnya (Sari et al ., 2021).
Tabel 1. Rendemen Ekstrak Arang Tempurung Kelapa
Bahan Berat Bahan Pelarut Berat Ekstra k % Rendeme n Arang Tempuru ng Kelapa 6 kg Etanol 96% 11,23 gram 0,18%
Berdasarkan  data  pada  tabel  1  dapat  dilihat  bahwa jumlah ekstrak yang diperoleh  melalui metode maserasi menggunakan  pelarut  etanol  96%  ini  berkisar  11,23 dengan nilai rendemen sebesar 0,18%. Rendahnya nilai rendemen yang diperoleh menunjukkan bahwa proses ekstraksi  dengan  metode  maserasi  yang  menggunakan jenis pelarut etanol 96% tidak bekerja secara maksimal. Hal  ini  berbeda  dengan  hasil  penelitian  sebelumnya Verdiana et  al .  (2018)  yang  menunjukkan  bahwa  jenis pelarut  etanol  mampu  menghasilkan  nilai  rendemen lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  pelarut  jenis  lainnya yang  mencapai  52,72%.  Tinggi  rendahnya  suatu rendemen  ekstrak  dapat  dipengaruhi  oleh  adanya perbedaan konsentrasi antara jenis pelarut dan senyawa yang terkandung didalamnya.

## Senyawa Aktif Arang Tempurung Kelapa
Melalui  proses  analisis  senyawa  kimia  menggunakan metode  GC-MS,  dapat  diketahui  bahwa  pada  ekstrak arang  tempurung  kelapa  terdapat  lebih  dari  500  jenis senyawa  aktif  dengan  tiga  diantaranya  adalah  jenis
L zhaw : π.r a 2 L kc : π.r b 2
L zhak : L zhaw - L kc
senyawa yang paling dominan seperti dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel  II. Jenis  Senyawa  Aktif  pada  Ekstrak  arang Tempurung Kelapa Peak Senyawa Height A/H Mark 1 Alpha- Santalol (CAS) 25,53 21,35 3,82 2 Eicosane (CAS) 19,93 17,01 3,75 3 Santalol (CAS) 15,94 11,61 4,4
Senyawa  Santalol  ( alpha-Santalol )  merupakan kandungan utama di dalam minyak atsiri yang diperoleh dari tanaman cendana. Kandungan senyawa santalol ini juga  dianggap  sebagai  indikator  dalam  menentukan kualitas minyak cendana. Selain digunakan sebagai bahan aroma terapi, kandungan dari minyak cendana ini juga sering  dimanfaatkan  dalam  bidang  kosmetik  dan  obat- obatan  salah  satunya  sebagai  senyawa  antibakteri (Ariyanti & Asbur, 2018). Senyawa Eicosane merupakan senyawa  hidrokarbon  alfatik  yang  termasuk  dalam kelompok alkana dan sering dijumpai pada bunga mekar dan  tumbuhan  seperti  brokoli  hijau,  wortel,  apel,  dan pokcoy .  Dalam  bidang  kesehatan,  senyawa Eicosane memiliki  manfaat  yakni  sebagai  bahan  antibakteri, antijamur, dan antitumor (Hana et al ., 2020).

## Formulasi  Gel  Ekstrak  Arang  Tempurung Kelapa
Berdasarkan formula sediaan basis gel yang telah dibuat, kemudian  dirancang  formula  gel  ekstrak  arang tempurung  kelapa  yang  dibagi  menjadi  3  formulasi dengan  kententuan  konsentrasi  ekstrak  arang tempurung kelapa F1 (3%), F2 (6%), F3 (9%). Formulasi sediaan  gel  dalam  bentuk  variasi  yang  berbeda  dapat dilihat pada tabel 3.
Tabel  III. Formulasi  Sediaan  Gel  Ekstrak  Arang Tempurung Kelapa Bahan Konsentrasi Bahan (%) F1 (3%) F2 (6%)  F3 (9%) Na-CMC 0,5 g 0,5 g 0,5 g Gliserin 2,5 g 2,5 g 2,5 g Propilenglikol 1,25 g 1,25 g 1,25 g Ekstrak Arang 0,75 g 1,5 g 2,25 g
Tempurung Kelapa Akuades 20 ml 19,25 ml 18,5 ml Total 25 ml 25 ml 25 ml

## Uji Stabilitas Gel
Adanya  perlakuan  uji  stabilitas  gel  ini  bertujuan untuk  mengetahui  kondisi  serta  kualitas  gel  ekstrak arang  tempurung  kelapa  dalam  masa  penyimpanan. Berdasarkan  uji  yang  telah  dilakukan  yakni  uji  daya sebar, homogenitas, uji pH dan viskositas menunjukkan bahwa  gel  ekstrak  arang  tempurung  kelapa  ini  dengan konsentrasi 3%, 6%, dan 9% ini memiliki sifat dan kualitas yang dapat dilihat pada tabel 4.
Tabel  IV. Hasil  Uji  Stabilitas  Gel  Ekstrak  Arang
Tempurung Kelapa Uji Stabilitas Konsentrasi (%) F1 (3%) F2 (6%) F3 (9%) Daya Sebar (cm) 4,35 3,95 4,1 Homogenita s Homoge n Homoge n Homoge n pH 6,53 6,92 6,94 Viskositas (CPs) 2,424 5,064 5,904
Gel  adalah  sediaan  setengah  padat  yang  jernih, transparan dan juga berisi zat aktif. Sediaan gel biasanya mengandung air yang bisa menimbulkan rasa dingin dan melembabkan  saat  digunakan.  Kelebihan  sediaan  gel dapat  meningkatkan  efisiensi  dan  kenyamanan  bagi penggunaannya,  dan  juga  menyerap  lebih  cepat  pada kulit dibandingkan dengan krim.
Sediaan gel sering digunakan di dunia industri kosmetik dan  kesehatan  dengan  tujuan  sebagai  pembawa  dalam pemberian obat pada bagian mukosa atau kulit (Rosari et al ., 2021). Untuk menghasilkan sediaan gel dibutuhkan suatu  fomulasi  gel  yang  mengandung  senyawa gelling agent sebagai bahan utama dalam pembuatan sediaan ini. Jika  formulasi  gel  telah  didapatkan,  maka  tahap selanjutnya  yaitu  melakukan  uji  stabilitas  gel  untuk mengetahui kualitas sediaan gel yang terdiri dari uji daya sebar,  homogenitas,  kadar  pH,  viskositasnya  serta kemampuan  uji  daya  hambat  gel  dalam  menekan pertumbuhan suatu bakteri (Sayuti, 2015).
Hasil data uji daya sebar berdasarkan pada tabel 4, menunjukkan  bahwa  formula  sediaan  gel  ektrak  arang tempurung  kelapa  dengan  konsentrasi  yang  berbeda menghasilkan  luas  penyebaran  yang  kurang  dari  5  cm. Uji  ini  menunjukkan  kemampuan  sediaan  gel  dalam menyebar  pada  permukaan  kulit.  Hasil  daya  sebar sediaan gel yang baik adalah 5-7 cm atau 5,54-6,08 cm (berdasarkan  standar  SNI).  Sediaan  gel  yang  sulit menyebar  akan  mengurangi  kenyamanan  penggunaan dan efektivitas penggunaan sediaan gel ( Sukartiningsih et al ., 2019).
Pada pengukuran homogenitas pada ketiga gel ekstrak tersebut  menunjukkan  bahwa  sediaan  gel  memiliki homogenitas  yang  baik,  yang  dibuktikan  dengan  tidak terbentuknya butiran kasar yang terbentuk pada sediaan gel ekstrak.
Data hasil uji kadar pH menunjukkan bahwa dari ketiga gel  ekstrak  memiliki  kadar  pH  yang  lebih  tinggi
dibandingkan dengan rentang kadar pH untuk kulit yakni di atas nilai kadar 6,5. Nilai pH gel yang sesuai dengan nilai pH kulit yaitu berkisar 4,5 – 6,5 (Sukartiningsih et al ., 2019).
Menurut Rosari et al . (2021), nilai viskositas yang baik pada sediaan gel berada pada rentang nilai 2.000-50.000 CPs.  dari hasil uji viskositas yang telah dilakukan  pada ketiga konsentrasi gel ekstrak menunjukkan bahwa gel ekstrak memiliki nilai viskositas yang baik yang berkisar antara 2.424 cps sampai dengan 5.904 cps.
Uji daya Hambat Sediaan Gel terhadap Bakteri

## Klebsiella pneumoniae
Hasil pengamatan dan pengukuran uji daya hambat gel ekstrak  arang  tempurung  kelapa  terhadap  bakteri K. pneumoniae dengan metode difusi cawan setelah  masa inkubasi 1×24 jam dapat dilihat pada tabel 5.
Tabel  V. Hasil  Pengukuran  Rerata  Luas  Zona  Hambat  Gel  Ekstrak  Arang  Tempurung  Kelapa  terhadap  Bakteri K. pneumoniae No Perlakuan Luas Zona Hambat (mm 2 ) Jumlah Rerata (mm 2 ) U 1 U 2 U 3 1. K (+) 394,25 44 476,21 914,46 304,82 2. K (-) 0 0 0 0 0 3. F1 148,36 28,45 78,55 255,36 85,12 4. F2 41,1 10,2 0 51,3 17,1 5. F3 0 77,36 14,72 92,08 30,69 Keterangan: U 1 : Ulangan ke-1, U 2 : Ulangan ke-2, U 3 : Ulangan ke-3
Cara kerja difusi cakram ini adalah senyawa antibakteri yang  terkandung  di  dalam  gel  akan  diserap  masuk  ke dalam kertas cakram yang kemudian ditempelkan di atas permukaan  media  MHA  yang  telah  diinokulasikan dengan  bakteri  uji.  Setelah  diinkubasi  beberapa  lama, maka  hasil  uji  positif  akan  ditunjukkan  dengan  adanya zona  hambat  (zona  bening)  di  sekitar  kertas  cakram (Novita, 2016).

## PEMBAHASAN
Data hasil uji daya hambat gel ekstrak arang tempurung kelapa  terhadap  bakteri K.  pneumoniae pada  tabel  5 menunjukkan  bahwa  gel  ekstrak  arang  tempurung
kelapa efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri K. pneumoniae yang ditandai dengan terbentuknya zona hambat di sekitar kertas cakram. Hasil uji daya hambat diperoleh bahwa perlakuan gel ekstrak konsentrasi 3% mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri K. pneumoniae pada  tiga  kali  ulangan,  sedangkan  daya hambat pada perlakuan gel ekstrak konsentrasi 6% dan 9% hanya terdapat pada dua ulangan.
Dari  data  tabel  5  terbukti  bahwa  gel  ekstrak  arang tempurung kelapa ini memiliki kemampuan daya hambat yang sangat kuat dibuktikan dengan nilai luas rerata >20 mm 2 . Aktivitas zona hambat antibakteri dikelompokkan dalam empat kategori, yakni: aktivitas lemah (<5 mm),
sedang (5-10 mm), kuat (>10-20 mm), sangat kuat (>20- 30  mm)  (Widiani  &  Pinatih,  2020).  Aktivitas  daya hambat antibakteri ini dinyatakan berdasarkan luas zona bening  yang  dihasilkan  di  sekitar  kertas  cakram. Diameter  zona  hambat  yang  terbentuk  diukur  dalam satuan mm (Rastina et al ., 2015).
Besar kecilnya hasil pengukuran rerata luas zona hambat dipengaruhi  oleh  konsentrasi  ekstrak  yang  tidak berdifusi dengan baik ke dalam media, sehingga proses penghambatan  gel  ekstrak  arang  tempurung  kelapa terhadap  bakteri K.  pneumoniae tidak  bekerja  secara maksimal.  Seperti  pada  perlakuan  uji  daya  hambat kelompok  konsentrasi  6%  dan  9%  yang  tidak menunjukan  adanya  zona  hambat.  Hal  ini  berkaitan dengan prosedur kerja yang telah dilakukan, pada tahap uji  daya  hambat  yakni  pemberian  ekstrak  arang tempurung  kelapa  pada  kertas  cakram  yang  tidak menetapkan  jumlah  volume  yang  digunakan,  hanya diolesi  pada  sisi  bagian  kertas  cakram  yang  akan ditempel di permukaan media.
Dari semua perlakuan uji daya hambat terhadap bakteri K.  pneumoniae ,  nilai  rerata  luas  zona  hambat  terbesar terdapat  pada  kontrol  positif  ciprofloxacin  sebesar 304,82 mm 2 dan nilai rerata luas zona hambat terendah terdapat  pada  kelompok  perlakuan  konsentrasi  6% sebesar  17,1  mm 2 .  Kontrol  negatif  DMSO  tidak menunjukan  adanya  zona  hambat  di  sekitar  kertas cakram. Hasil pengujian daya hambat gel ekstrak arang tempurung kelapa terhadap bakteri K. pneumoniae dapat dilihat pada gambar 1.
Gambar 1. Hasil Uji Daya Hambat Gel Ekstrak Arang Tempurung Kelapa terhadap bakteri K. pneumonia e U 1 : Ulangan 1, U 2 : Ulangan 2, U 3 : Ulangan 3 K(+): Ciproloxacin, K(-): DMSO, F1: 3%, F2: 6%, F3: 9%

## Analisis Data
Analisis  data  pada  penelitian  ini  menggunakan  uji normalitas Shapiro-Wilk dan  mendapatkan  hasil  yakni data  terdistribusi  normal  dengan  nilai  signifikan (p>0,05).  Selanjutnya,  dilakukan  uji One  Way  ANOVA , hasil  uji  yang  diperoleh  bahwa  nilai  signifikan  0,033 (p<0,05) menunjukkan bahwa terdapat perbedaan nilai zona hambat pada bakteri K. pneumoniae .
Tabel VI. Perbedaan Uji Daya Hambat Gel Ekstrak Arang Tempurung Kelapa terhadap Bakteri K. pneumoniae No Perlakuan Rerata ± SD (mm 2 ) Cl 95% P.value 1. K+ (Ciprofolxacin) 304.82 ± 229.56 -265,44 ± 875,08 0,033 2. K- (DMSO) 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 3. F1 85,12 ± 60,22 -64,48 ± 234,71 4. F2 17,10 ± 21,40 -36,06 ± 70,26 5. F3 30,54 ± 41, 07 -71,35 ± 132,73
Keterangan: F1: Perlakuan ekstrak 3%, F2: Perlakuan ekstrak 6%, F3: Perlakuan ekstrak 9%
Tabel VII. Hasil UJi Post Hoc LSD Gel Ekstrak Arang Tempurung Kelapa terhadap Bakteri K.pneumoniae No Perlakuan Mean Difference Std. Error Sig P.value 1 K + vs K- 304.82 88.29 0.006* <0,05 2 K+ vs F1 219.70 88.29 0.032* 3 K+ vs F2 287.72 88.29 0.009* 4 K+ vs F3 274.12 88.29 0.011* 5 K- vs F1 -85.12 88.29 0.358* 6 K- vs F2 -17.10 88.29 0.850 7 K- vs F3 -30.69 88.29 0.735 8 F1 vs F2 68.02 88.29 0.459 9 F1 vs F3 54.42 88.29 0.551 10 F2 vs F3 -13,59 88,29 0,881 Keterangan: (*) = Terdapat beda nyata signifikan
Berdasarkan  hasil  analisis  statistik One  Way  ANOVA , diperoleh  data  (tabel  6)  bahwa  perlakuan  uji  daya hambat  yang  diberikan  pada  beberapa  konsentrasi ekstrak  arang  tempurung  kelapa  menunjukkan  adanya perbedaan rerata terhadap luas zona hambat bakteri K. pneumoniae yang diketahui dengan nilai signifikan 0,033 (p<0,05).  Setelah  diperoleh  hasil  yang  signifikan, dilanjutkan  dengan  uji Post  Hoc LSD  bertujuan  untuk mengetahui ada atau tidaknya perbedaan signifikan antar kelompok perlakuan. Hasil uji Post Hoc LSD (Tabel 7) menunjukkan bahwa kelompok perlakuan yang berbeda nyata siginfikan ditandai notasi (*) dengan nilai signifikan (p<0,05).  Kelompok  perlakuan  kontrol  positif menunjukkan  beda  nyata  signifikan  dengan  kelompok perlakuan  kontrol  negative  dan  kelompok  perlakuan konsentrasi 3%, 6%, dan 9%. Kelompok kontrol negatif menunjukkan  beda  nyata  signifikan  hanya  dengan kelompok  perlakuan  konsentrasi  3%.  Namun,  antar kelompok perlakuan konsentrasi 3%, 6%, dan 9% tidak menunjukkan adanya perbedaan.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan  dapat disimpulkan  bahwa,  formulasi  gel  ekstrak  arang tempurung  yang  optimal  dimiliki  oleh  gel  dengan konsentrasi 9%, sedangkan gel yang paling efektif dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri K.  pneumoniae adalah gel dengan konsentrasi 3%.

## DAFTAR PUSTAKA
Ariyanti,  M.,  and  Asbur,  Y.  2018.  “Cendana ( Santalum  Album L.)  Sebagai  Tanaman  Penghasil Minyak Atsiri.” Jurnal Kultivasi 17(1):558–67.
Hana,  P.N.,  Nurchayati,  Y.,  dan  Budihastuti,  R. 2020.  “Efek  Naungan  Dan  Umur  Tanaman Terhadap  Pertumbuhan  Dan  Profil  Metabolit Bunga  Krisan  ( Chrysanthemum Sp.).” Buletin Anatomi Dan Fisiologi 5(1):8–17. Krongrawa, W., Limmatvapirat, S., Pongnimitprasert, N., Meetam, P. and Limmatvapirat,  C.  2018.  “Formulation  and Evaluation  of  Gels  Containing  Coconut  Kernel Extract  for  Topical  Application.” Asian  Journal  of Pharmaceutical Sciences 13(5):415–24. doi: 10.1016/j.ajps.2018.01.005.
Kurniawan,  K.  and  Yulistiani,  M.  2020.  “A Production  and  Activity  Test  of  Anti-Bacterial Compounds of Endophytic Fungi BR-S1 (a) Isolate Extract  in  Different  General  Growth  Media.” Current  Trends  in  Biotechnology  and  Pharmacy 14(5):206–12. doi: 10.5530/ctbp.2020.4s.25.
Lestari, D.F., Fatimatuzzahra, F. and Dominica, D. 2021.  “Uji  Daya  Hambat  Bakteri Staphylococcus aureus Sabun  Cuci  Tangan  Cair  Berbahan  Arang Aktif  Batok  Kelapa.” Jurnal  Sains  Dan  Kesehatan 3(2):242–47. doi: 10.25026/jsk.v3i2.384.
Novita, W. 2016. “Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Daun Sirih ( Piper Betle L) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Streptococcus Mutans Secara In Vitro .” JMJ 4(2):140–55.
Paczosa,  M.K.  and  Mecsas,  J.  2016.  “ Klebsiella Pneumoniae : Going on the Offense with a Strong Defense.” Microbiology  and  Molecular  Biology Reviews 80(3):629–61.  doi:  10.1128/mmbr.00078- 15.
Puasa, N.S., Fatimawali, F. and Wiyono, W. 2019. “Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Rimpang Lengkuas  Merah  ( Alpinia  Purpurata K.  Schum) Terhadap Bakteri Klebsiella pneumoniae Isolat Urin Pada Penderita Infeksi Saluran Kemih.” Pharmacon 8(4):982. doi: 10.35799/pha.8.2019.29379.
Rastina, Sudarwanto, M. and Wientarsih, I. 2015. “Antibacterial Activity of Ethanol Extract of Curry Leaf  ( Murraya  Koenigii )  on Staphylococcus  aureus , Escherichia  coli ,  and Pseudomonas sp.” Jurnal Kedokteran Hewan 9(2):185–88.
Rosari,  V.,  Fitriani,  N.  and  Prasetya,  F.  2021. “Optimasi Basis Gel Dan Evaluasi Sediaan Gel Anti Jerawat Ekstrak Daun Sirih Hitam ( Piper Betle L. Var Nigra ).” Proceeding of Mulawarman Pharmaceuticals Conferences Vol 13: 204–12.
Salukanan,  R.T.,  Zulfariansyah,  A.  and  Sitanggang, R.H. 2018. “Pola Pneumonia Nosokomial Di Unit Perawatan Intensif Rumah Sakit Umum Pusat Dr. Hasan Sadikin Bandung Periode Januari-Desember 2017.” Jurnal Anestesi Perioperatif 6(2):126–36. doi: 10.24036/perspektif.v4i4.466.
Sandoro, S.P.S., Suprianto, S. and Sumardi, S. 2021. “Formulasi  Sediaan Eyebrow  Cream Arang  Batok Kelapa.” Jurnal  Indah  Sains  Dan  Klinis 2(2):12–17. doi: 10.52622/jisk.v2i2.26.
Sari,  Y.,  Syahrul,  S.  and  Iriani,  D.  2021.  “Skrining Fitokimia  Dan  Aktivitas  Antioksidan  Pada  Kijing ( Pilsbryoconcha sp.)  Dengan  Pelarut  Berbeda.” Jurnal  Teknologi  Dan  Industri  Pertanian  Indonesia 13(01):16–20.
Sayuti,  N.A.  2015.  “Formulasi  Dan  Uji  Stabilitas Fisik  Sediaan  Gel  Ekstrak  Daun  Ketepeng  Cina ( Cassia  Alata L.).” Jurnal  Kefarmasian  Indonesia 5(2):74–82. doi: 10.22435/jki.v5i2.4401.74-82.
Soleha,  T.U.  and  Edwin,  G.W.P.  2019.  Pola Resistensi  Cephalosporin  Generasi  III  Dan Merofenem Pada Bakteri Klebsiella pneumoniae Di Laboratorium Kesehatan Daerah Lampung Tahun 2017.” JK Unila 3(1):141–46.
Sukartiningsih, Y.N.N.T., Edi, H.J. and Siampa, J.P. 2019. “Formulasi Sediaan Gel Ekstrak Etanol Daun Kaliandra  ( Calliandra  surinamensis Benth)  Sebagai Antibakteri.” Pharmacon 8(4):801. doi: 10.35799/pha.8.2019.29356. Verdiana,  M.,  Widarta,  I.W.R.  and  Permana,
I.D.G.M.  2018.  Pengaruh  Jenis  Pelarut  Pada Ekstraksi  Menggunakan  Gelombang  Ultrasonik Terhadap Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kulit Buah Lemon ( Citrus limon (Linn.) Burm F.).” Jurnal Ilmu Dan  Teknologi  Pangan  (ITEPA) 7(4):213.  doi: 10.24843/itepa.2018.v07.i04.p08.
Widiani,  P.I.,  and  Pinatih,  K.J.P.  2020.  “Uji  Daya Hambat  Ekstrak  Etanol  Daun  Kelor  ( Moringa oleifera ) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Methicillin- Resistant  Staphylococcus  aureus (MRSA).” Medika Udayana 9(3):22–28.