JIKSH: Jurnal Ilmiah Kesehatan Sandi Husada https://akper-sandikarsa.e-journal.id/JIKSH Volume 10| Nomor 1| Juni|2021 e-ISSN: 2654-4563 dan p-ISSN: 2354-6093 DOI: https:/doi.org/10.35816/jiskh.v10i1.578
Research article Pengaruh Efektivitas Antibakteri Ekstrak Daun Kumis Kucing Terhadap Bakteri Streptococcus Mutans
Rizky Mulyanti 1 , Member Reni Purba 2 , Dian Soraya Tanjung 3 , Shania Salsabila 4 1,234 Dapartemen Konsevasi Gigi, Universitas Prima Indonesia
Article Info Abstrak Article History: Received:28-01-2021
Reviewed: 20-02-2021
Revised: 06-03-2021
Accepted: 22-04-2021
Published: 30-06-2021
Key words : antibakteri;
streptococcus mutans; daun kumis kucing;
karies;
Pendahuluan;  streptococcus  mutans  adalah  bakteri  patogen  dan penyebab  utama  karies  gigi.  Maka  diperlukan  suatu  tindakan pencegahan  karies  gigi  dengan  bahan  antibakteri  alami  dengan kumis  kucing.  Tujuan;  mengetahui  pengaruh  efektivitas antibakteri  ekstrak  daun  kumis  kucing  terhadap  bakteri streptococcus  mutans.  Metode;  penelitian  menggunakan eksperimental  laboratoris  dengan  desain  posttest  only  control group  in  vitro.  Pengumpulan  data  dilakukan  dengan  mengukur diameter  zona  hambat  menggunakan  shear  caliper.  Kemudian, data dianalisis dengan uji statistik oneway ANOVA dan posthoc LSD.  Hasil;  bahwa  diameter  rata-rata  zona  hambat  antibakteri ekstrak  daun  kumis  kucing  (Orthosiphon  stamineus)  dengan konsentrasi  50%,  25%,  12,5%,  6,25%,  3,125%  terhadap Streptococcus mutans. bakteri adalah 11,50 ± 0,38 mm, 10,78 ± 0,22 mm, 9,90 ± 0,13 mm, 9,10 ± 0,08 mm dan 8,25 ± 0,25 mm, sedangkan kontrol negatif pada penelitian ini yaitu DMSO tidak memiliki diameter hambat (0 mm). Kesimpulan; bahwa terdapat efektivitas  antibakteri  ekstrak  daun  kumis  kucing  terhadap bakteri Streptococcus mutans.
Abstact. Introduction;  Streptococcus  mutans  is  a  pathogenic bacteria  and  the  main  cause  of  dental  caries.  Swe  need  a preventive  measure  for  dental  caries  with  natural  antibacterial ingredients  with  cat  whiskers.  Aim;  determine  the  effect  of antibacterial  effectiveness  of  cat  whiskers  leaf  extract  against streptococcus  mutans  bacteria.  Method;  The  study  used  a laboratory experimental design with posttest only control group in  vitro.  The  data  was  collected  by  measuring  the  diameter  of the zone of inhibition using a shear caliper. Then, the data were analyzed  using  one-way  ANOVA  and  posthoc  LSD  statistical tests. Result; that the average diameter of the inhibition zone of cat  whiskers  leaf  extract  (Orthosiphon  stamineus)  antibacterial with  a  concentration  of  50%,  25%,  12.5%,  6.25%,  3.125% against  Streptococcus  mutans.  bacteria  were  11.50  ±  0.38  mm, 10.78 ± 0.22 mm, 9.90 ± 0.13 mm, 9.10 ± 0.08 mm and 8.25 ± 0.25 mm, while the control was negative. In this study, DMSO does  not  have  an  inhibitory  diameter (0  mm).  Conclusion;  that there  is  antibacterial  effectiveness  of  cat  whiskers  leaf  extract against Streptococcus mutans bacteria. Corresponding author :  Rizky Mulyanti Email : rizkymlynt@gmail.com About CrossMark

## JIKSH: Jurnal Ilmiah Kesehatan Sandi Husada

## Pendahuluan
Karies  gigi  dan  penyakit  periodontal  merupakan  penyakit  gigi  dan  mulut  yang  paling banyak menyerang penduduk di seluruh dunia. Penyakit ini menjadi penyebab utama kehilangan gigi. Oleh sebab itu, sampai saat ini karies gigi dan penyakit periodontal masih menjadi masalah dunia (Haque et al., 2019). Sekitar 35% atau 2,43 milyar penduduk dunia mengalami karies gigi untuk  semua  usia  (Alhabdan  et  al.,  2018  dan  Kolay  &  Kumar,  2019).  Berdasarkan  data  The Global  Burden  of  Disease  Study  tahun  2017  diperkirakan  2,3  milyar  penduduk  dunia mengalami  karies  gigi  permanen  dan  530  juta  karies  gigi  sulung  (WHO,  2020).  Di  Amerika Serikat,  lebih  dari  90%  orang  dewasa  pernah  mengalami  karies  gigi  sebelum  usia  30  tahun (Young  et  al.,  2015).  Prevalensi  karies  gigi  di  Indonesia  terjadi  pada  usia  12  tahun  sebesar 43,9%, usia 15 tahun mencapai 37,4%, usia 18 tahun 51,1%, usia 35-44 tahun 80,1% dan  usia 65 tahun ke atas mencapai 96.7% (Rostinawati et al., 2018).
Karies gigi terbentuk dari adanya akumulasi plak pada permukaan gigi yang disebabkan oleh  bakteri  penghasil  asam.  Bakteri  ini  berinteraksi  dengan  karbohidrat  dalam  jangka  waktu yang panjang dan membentuk asam sehingga menurunkan pH dan menyebabkan demineralisasi (Takahashi  &  Nyvad,  2016).  Spesies  bakteri  yang  paling  sering  ditemukan  pada  karies  gigi adalah  Streptococcus  mutans  (Al-Shahrani,  2019).  Streptococcus  mutans  adalah  bakteri  gram positif dan juga sebagai faktor etiologi utama penyebab terjadinya karies gigi  (Krzyściak et al., 2017  dan  Lemos  et  al.,  2019).  Tanaman  obat  telah  banyak  digunakan  oleh  masyarakat  untuk beberapa  tujuan  antara  lain  sebagai  antibakteri,  antioksidan,  antiulcer,  antiinflamasi,  antivirus, antikanker,  dan  pencegahan  berbagai  jenis  penyakit  (Alshawsh  et  al.,  2012).  Orthosiphon stamineus  Benth  adalah  salah  satu  tanaman  obat  yang  termasuk  dalam  spesies  Lamiaceae (Kartini et al., 2020). Bagi masyarakat Indonesia, Orthosiphon stamineus Benth dikenal sebagai kumis  kucing.  Nama  kumis  kucing  berhubungan  dengan  struktur  bunganya  yang  memiliki struktur benang sari seperti kumis kucing (Stamineus Benth, 2019).
Banyak  studi  farmakologis  telah  menunjukkan  kemampuan  dari  daun  kumis  kucing antara lain antimikroba, antioksidan, hepatoproteksi, antigenotoksik, antiplasmodial, sitotoksik, kardioaktif,  antidiabetik,  dan  antiinflamasi(Ashraf  et  al.,  2018).  Daun  kumis  kucing mengandung  beberapa  senyawa  kimia  yang  bermanfaat  yaitu  alkaloid,  flavonoid,  tanin, polifenol,  minyak  esensial,  sterol,  saponin,  monoterpenes,  diterpenes,  triterpenes,  dan  asam organik.  Ada  enam  flavonoid  yang  terkandung  dalam  daun  kumis  kucing  yaitu  eupatorin, sinensetin,  5-  hydroxy  -  6,  7,  30,  40  -  tetrametoxiflavone,  salvigenin,  6-hydroxy-5,  7,  40- trimethoxyflavone  and  5,6,7,30-  tetramethoxy  -40-hydroxy-8-  Cprenylflavone  (Hossain  & Rahman,  2015).  Adanya  kecenderungan  kembali  ke  alam,  saat  ini  telah  terjadi  peningkatan minat  dalam  penelitian  tanaman  obat  untuk  penemuan  antibakteri  baru,  termasuk  penelitian daun  kumis  kucing  (Orthosiphon  stamineus  Benth)  sebagai  antibakteri  terhadap  bakteri penyebab penyakit gigi dan mulut. Salah satunya hasil penelitian dari (Nor & Yasin, 2018) yang menyatakan bahwa daun kumis kucing (Orthosiphon stamineus Benth) memiliki potensi sebagai antibakteri dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus.
Hasil penelitian lainnya yang dilakukan oleh (Zainal-Abidin et al., 2017) menunjukkan bahwa  daun  kumis  kucing  (Orthosiphon  stamineus)  memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap bakteri  Enterococcus  faecalis.  Penelitian  yang  dilakukan  oleh  (Ashraf  et  al.,  2020)  juga mengungkapkan  bahwa  ekstrak  daun  kumis  kucing  efektif  melawan  bakteri  Staphylococcus aureus  MRSA.  Aktivitas  antibakteri  terbaik  dari  ekstrak  daun  kumis  kucing  terhadap Staphylococcus  aureus.  Kekuatan  antibakteri  yang  dimiliki  oleh  minyak  esensial  dari  daun kumis  kucing  (Orthosiphon  stamineus)  adalah  kuat  (Azizan  et  al.,  2017).  Oleh  karena  itu, peneliti merasa tertarik untuk melakukan penelitian tentang “Uji Efektivitas Antibakteri Ekstrak Daun  Kumis.  Kucing  (Orthosiphon  stamineus)  terhadap  Bakteri  Streptococcus  mutans”. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  efektivitas  antibakteri  ekstrak  daun  kumis  kucing (Orthosiphon stamineus) terhadap bakteri Streptococcus mutans.

## Metode
Merupakan  penelitian  eksperimental  labotatories  dengan  posttest  only  control  group design secara in vitro. Populasi penelitian adalah bakteri Streptococcus mutans. Pada penelitian ini  terdiri  dari  6  kelompok  perlakuan.  Besar  sampel  ditentukan  dengan  menggunakan  rumus Federer dan didapatkan 4 kali pengulangan tiap kelompok. Variabel dependen dalam penelitian ini  adalah  efektivitas  antibakteri  dan  ekstrak  daun  kumis  kucing  sebagai  variabel  independen. Sebelum dilakukan uji efektivitas ekstrak daun kumis kucing diencerkan terlebih dahulu dengan larutan  DMSO  menjadi  lima  konsentrasi  yaitu  50%,  25%,  12,5%,  6,25%  dan  3,125%. Pengukuran  zona  hambat  diukur  dengan  Kaliper  geser  dan  besar  zona  hambatnya  dihitung dengan menggunakan metode Kilbey Bour. Data dikumpulkan, kemudian data dianalisis dengan uji statistik oneway ANOVA dan posthoc LSD.

## Hasil Dan Pembahasan
Hasil  uji  nilai  diameter  hambat  ekstrak  daun  kumis  kucing  (Orthosiphon  stamineus) konsentrasi  50%,  25%,  12,5%,  6,25%,  3,125%  terhadap  bakteri  Streptococcus  mutans  dapat dilihat pada tabel berikut;
Tabel 1.
Rerata Diameter Hambat Antibakteri Ekstrak Daun Kumis Kucing (Orthosiphon stamineus) terhadap Bakteri Streptococcus mutans K Diameter Hambat (mm) 1 2 3 4 Mean 50% 11,8 11,8 11,4 11,0 11,50±0,38 25% 10,9 11,0 10,5 10,7 10,78±0,22 12,5% 9,8 10,1 100 9,9 9,95±0,13 6,25% 9,2 9,1 9,1 9,0 9,10±0,08 3,125% 8,2 8,0 8,6 8,2 8,25±0,25 DMSO - - - - -
Sumber; Primer 2021 Keterangan: (-): Tidak ada hambatan
Berdasarkan  tabel  1  diatas  diperoleh  rerata  diameter  hambat  antibakteri  ekstrak  daun kumis kucing (Orthosiphon stamineus) konsentrasi 50%, 25%, 12,5%, 6,25%, 3,125% terhadap bakteri  Streptococcus  mutans  adalah  11,50±0,38  mm,  10,78±0,22  mm,  9,90±0,13  mm, 9,10±0,08  mm dan 8,25±0,25  mm,  sedangkan  kontrol negatif  yaitu  DMSO  tidak  ada diameter hambat (0 mm).
Tabel 2.
Efektivitas  antibakteri  ekstrak  daun  kumis  kucing  (Orthosiphon  stamineus)  konsentrasi  50%, 25%, 12,5%, 6,25%, 3,125% terhadap bakteri Streptococcus mutans
Kelompok Mean ±SD p value 50% 11,50±0,38 0,001 * 25% 10,78±0,22 12,5% 9,90±0,13 6,25% 9,10±0,08 3,125% 8,25±0,25
Keterangan: *Ada perbedaan yang signifikan
Berdasarkan  tabel  2  diatas,  hasil  penelitian  diperoleh  nilai  p=0,001  (p<0,05)  yang berarti  bahwa  ada  perbedaan  diameter  hambat  antibakteri  ekstrak  daun  kumis  kucing (Orthosiphon  stamineus)  konsentrasi  50%,  25%,  12,5%,  6,25%,  3,125%  terhadap  bakteri Streptococcus mutans. Dari hasil ini dapat dinyatakan bahwa ada efektifitas antibakteri ekstrak

## JIKSH: Jurnal Ilmiah Kesehatan Sandi Husada
Volume 10 Nomor 1 Juni 2021
daun kumis kucing (Orthosiphon stamineus) terhadap bakteri Streptococcus mutans.
Tabel 3.
Perbedaan efektivitas antibakteri ekstrak daun kumis kucing (Orthosiphon stamineus) terhadap
bakteri Streptococcus mutans Kelompok p value I – II 0,001 * I – III 0,001 * I – IV 0,001 * I – V 0,001 * II – III 0,001 * II – IV 0,001 * II – V 0,001 * III – IV 0,001 * III – V 0,001 * IV – V 0,001 *
Keterangan: *Ada perbedaan yang signifikan
Berdasarkan  tabel  3  diatas,  hasil  penelitian  diperoleh  seluruh  pengujian  LSD  dengan nilai  p=0,001  (p<0,05)  yang berarti  bahwa  ada  perbedaan  efektivitas  yang  signifikan  diameter hambat  antibakteri  ekstrak  daun  kumis  kucing  (Orthosiphon  stamineus)  terhadap  bakteri Streptococcus mutans.

## Pembahasan
Pengukuran  efektivitas  bakteri  terhadap  suatu  abahan  uji  dapat  dilakukan  dengan beberapa  cara  antara  lain  difusi  cakram,  dilusi,  antimicrobial  gradient  dan  short  automated instrumen  system.  Pada  penelitian  ini,  uji  efektivitas  antibakteri  s  dengan  cara  difusi dikarenakan  teknis  pemeriksaan  lebih  mudah  dilakukan  (Khusuma  et  al.,  2019).  Pada  metode difusi dilakukan pengenceran pada ekstrak daun kumis kucing dengan pelarut  DMSO sehingga diperoleh beberapa konsentrasi bahan uji yaitu konsentrasi 50%, 25%, 12,5%, 6,25%, 3,125%, sedangkan  DMSO  berperan  sebagai  kelompok  kontrol.  Masing-masing  bahan  tersebut diteteskan  ke  dalam  media  Nutrient  Agar  (NA)  yang  telah  dikultur  oleh  bakteri  Streptococcus mutans.  Tindakan  ini  diinkubasi  selama  24  jam  dan  perlakuan  tersebut  dilakukan  replikasi sebanyak  4  kali. Efektifitas  antibakteri  ekstrak daun  kumis  kucing dievaluasi  melalui  diameter hambat pada media agar dan diukur dengan menggunakan kaliper geser.
Pada penelitian ini, pengujian efektifitas antibakteri ekstrak daun kumis kucing dengan mengetahui  diameter  hambat  dan  kadar  hambat  minimum  (KHM)  terhadap  bakteri Streptococcus  mutans.  Berdasarkan  hasil  penelitian  diperoleh  diameter  hambat  yang  berbeda- beda  jumlahnya  tiap  konsentrasi.  Diameter  hambat  antibakteri  ekstrak  daun  kumis  kucing konsentrasi  50%,  25%,  12,5%,  6,25%,  3,125%  terhadap  bakteri  Streptococcus  mutans  adalah 11,50±0,38 mm, 10,78±0,22 mm, 9,90±0,13 mm, 9,10±0,08 mm dan 8,25±0,25 mm, sedangkan kontrol negatif yaitu DMSO dengan diameter hambat = 0 mm. Hal ini berarti bahwa penanaman bakteri  pada  media  NA  dan  diinkubasi  selama  24  jam  tidak  terlihat  adanya  zona  bening  di sekitar kertas cakram dalam cawan petri. Tidak terlihat zona bening tersebut menunjukkan tidak adanya zona hambat sehingga pertumbuhan bakteri masih tetap ada di sekitar kertas cakram.
Davis  dan  Stout  (1971)  dalam  Yulianti  dkk  (Yulianti  et  al.,  2015)  menyatakan  bahwa diameter  zona  hambatan  20  mm  atau  lebih  maka  aktivitas  penghambatannya  dikategorikan sangat  kuat,  10-20  mm  dikategorikan  kuat,  5-10  mm  dikategorikan  sedang  dan  5  mm  atau kurang dikategorikan lemah. Pada penelitian ini, ekstrak daun kumis  kucing konsentrasi 12,5% 6,25%,  dan  3,125%  memiliki  aktivitas  hambatan  yang  sedang,  sedangkan  ekstrak  daun  kumis kucing konsentrasi 50% dan 25% dikategorikan aktivitas hambatan yang kuat.
Pada  penelitian  ini,  penentuan  nilai  KHM  menggunakan  metode  difusi.  Perhitungan
Rizky Mulyanti, dkk. Pengaruh Efektivitas Antibakteri Ekstrak ……………..
nilai  KHM  dilihat  dari  konsentrasi  minimal  bahan  uji  yang  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri  setelah  diinkubasi  selama  24  jam.  Dari  hasil  penelitian  diperoleh  bahwa  KHM antibakteri  ekstrak  daun  kumis  kucing  terhadap  bakteri  Streptococcus  mutans  adalah  3,125%. Berbeda dengan penelitian (Rukmana & Mulyowati, 2015) yang mengungkapkan bahwa ekstrak etanolik  daun  kumis  kucing  kosentrasi  10%  merupakan  kosentrasi  ekstrak  paling  rendah  yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella thypi. Adanya  perbedaan nilai KHM pada kedua penelitian ini disebabkan perbedaan bakteri uji yang digunakan.
Berdasarkan  uji  statistik  oneway  ANOVA  diperoleh  hasil  bahwa  ada  efektivitas antibakteri  ekstrak  daun  kumis  kucing  terhadap  bakteri  Streptococcus  mutans.  Didukung  juga dengan  hasil  posthoc  LSD  dinyatakan  bahwa  ada  perbedaan  yang  signifikan  diameter  hambat antibakteri  ekstrak  daun  kumis  kucing  antar  dua  kelompok  perlakuan.  Hasil  penelitian  yang dilakukan  (Alshawsh  et  al.,  2012)  menyatakan  bahwa  ekstrak  daun  kumis  kucing  memiliki efektifitas  terutama  terhadap  bakteri  gram  positif.  Hasil  ini  juga  sejalan  dengan  penelitian (Rukmana & Mulyowati, 2015) bahwa ekstrak etanolik daun kumis kucing mampu menghambat pertumbuhan dan mampu membunuh bakteri Salmonella thypi.
Adanya efektivitas antibakteri dari ekstrak daun kucing terhadap bakteri Streptococcus mutans kemungkinan dapat disebabkan oleh senyawa aktif yang terkandung didalamnya. (Singh et  al.,  2015)  menyatakan  bahwa  daun  kumis  kucing  memiliki  banyak  mengandung  senyawa asam  rosmarinik.  Senyawa  tersebut  banyak  digunakan  sebagai  agen  antibakteri.  Menurut penelitian  (Adnyana  et  al.,  2013),  beberapa  bakteri  yang  dapat  dihambat  pertumbuhannya dengan senyawa asam rosmarinik yang diperoleh dari ekstrak daun kumis kucing adalah bakteri Bacillus  subtilis,  Bacillus  cereus,  Staphylococcus  aureus,  Litseria  monocytogenes,  Escherichia coli,  Vibrio  parahaemolyticus,  Salmonella  enteritidis,  Salmonella  typhimurium,  dan  Klebsiella pneumonia.  Ekstrak  etanolik  daun  kumis  kucing  mengandung  senyawa  fenolik  dan  flavonoid. Senyawa-senyawa  ini  diduga  yang  menghambat  pertumbuhan  bakteri  Streptococcus  mutans. Senyawa tersebut berikatan dengan protein pada bakteri melalui ikatan non spesifik. membentuk kompleks  protein-fenol.  Pada  konsentrasi  rendah,  terbentuk  kompleks  proteinfenol  dengan ikatan  yang  lemah  dan  segera  mengalami  peruraian,  kemudian  merusak  membran  sitoplasma dan menyebabkan kebocoran isi sel, sehingga pertumbuhan bakteri terhambat. Sedangkan pada konsentrasi  tinggi,  zat  tersebut  berkoagulasi  dengan  protein  seluler  dan  membran  sitoplasma mengalami lisis.
Senyawa  fenol  masuk  ke dalam  sel  bakteri  melewati  dinding  sel  bakteri  dan membran sitoplasma,  di  dalam  sel  bakteri  senyawa  fenol  menyebabkan  penggumpalan  (denaturasi) protein penyusun protoplasma  sehingga dalam keadaan demikian metabolisme menjadi inaktif, dan  pertumbuhan  bakteri  menjadi  terhambat  (Rukmana  &  Mulyowati,  2015). Streptococcus mutans  pada  konsentrasi  80%  dapat  menghambat  Hal  ini  disebabkan  adanya  peningkatan konsentrasi senyawa fitokimia (Tandra et al., 2020).

## Simpulan Dan Saran
Bahwa  ada  pengaruh  efektivitas  antibakteri  ekstrak  daun  kumis  kucing  (Orthosiphon stamineus) terhadap bakteri Streptococcus mutans.Aktivitas antibakteri terbaik dari ekstrak daun kumis kucing terhadap Staphylococcus aureus.

## Daftar Rujukan
Adnyana, I. K., Setiawan, F., & Insanu, M. (2013). From ethnopharmacology to clinical  study of Orthosiphon stamineus Benth. International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences , 5 (3), 66–73.
Al-Shahrani.  (2019).  Microbiology of  dental  caries. A  Literature  Review.  Ann  Med Health  Sci Res , 9 .
Alhabdan,  Y.  A.,  Albeshr,  A.  G.,  Yenugadhati,  N.,  &  Jradi,  H.  (2018).  Prevalence  of  dental caries  and  associated  factors  among  primary  school  children:  a  population-based  cross- sectional study in Riyadh, Saudi Arabia. Environmental Health and Preventive Medicine ,

## JIKSH: Jurnal Ilmiah Kesehatan Sandi Husada Volume 10 Nomor 1 Juni 2021
23 (1), 1–14.
Alshawsh,  M.  A.,  Abdulla,  M.  A.,  Ismail,  S.,  Amin,  Z.  A.,  Qader,  S.  W.,  Hadi,  H.  A.,  & Harmal,  N.  S.  (2012).  Free  radical  scavenging,  antimicrobial  and  immunomodulatory activities of Orthosiphon stamineus. Molecules , 17 (5), 5385–5395.
Ashraf,  K.,  Halim,  H.,  Lim,  S.  M.,  Ramasamy,  K.,  &  Sultan,  S.  (2020).  In  vitro  antioxidant, antimicrobial  and  antiproliferative  studies  of  four  different  extracts  of  Orthosiphon stamineus, Gynura procumbens and Ficus deltoidea. Saudi Journal of Biological Sciences , 27 (1), 417–432.
Ashraf,  K.,  Sultan,  S.,  &  Adam,  A.  (2018).  Orthosiphon  stamineus  Benth.  is  an  outstanding food  medicine:  Review  of  phytochemical  and  pharmacological  activities. Journal  of Pharmacy & Bioallied Sciences , 10 (3), 109.
Azizan, N., Mohd Said, S., Zainal Abidin, Z., & Jantan, I. (2017). Composition and antibacterial activity  of  the  essential  oils  of  Orthosiphon  stamineus  Benth  and  Ficus  deltoidea  Jack against pathogenic oral bacteria. Molecules , 22 (12), 2135.
Haque, M., Sartelli, M., & Haque, S. Z. (2019). Dental infection and resistance—global health consequences. Dentistry Journal , 7 (1), 22.
Hossain, M. A., & Rahman, S. M. M. (2015). Isolation and characterisation of flavonoids from the leaves of medicinal plant Orthosiphon stamineus. Arabian Journal of Chemistry , 8 (2), 218–221.
Kartini,  K.,  Dewi,  E.  R.,  Achmad,  F.,  Jayani,  N.  I.  E.,  Hadiyat,  M.  A.,  &  Avanti,  C.  (2020). Thin  Layer  Chromatography  Fingerprinting  and  Clustering  of  Orthosiphon  stamineus Benth. from Different Origins. Pharmacognosy Journal , 12 (1).
Khusuma,  A.,  Safitri,  Y.,  Yuniarni,  A.,  &  Rizki,  K.  (2019).  Uji  Teknik  Difusi  Menggunakan Kertas  Saring  Media  Tampung  Antibiotik  dengan  Escherichia  Coli  Sebagai  Bakteri  Uji. Jurnal Kesehatan Prima , 13 (2), 151–155.
Kolay,  S.  K.,  &  Kumar,  S.  (2019).  Prevalence  of  dental  caries:  Children  in  Darbhanga population. Group , 4068 , 27–35.
Krzyściak, W., Kościelniak, D., Papież, M., Jurczak, A., & Vyhouskaya, P. (2017). Methods of biotyping  of  Streptococcus  mutans  species  with  the  routine  test  as  a  prognostic  value  in early childhood caries. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine , 2017 . Lemos, J. A., Palmer, S. R., Zeng, L., Wen, Z. T., Kajfasz, J. K., Freires, I. A., Abranches, J., &
Brady, L. J. (2019). The biology of Streptococcus mutans. Gram‐Positive Pathogens , 435– 448.
Nor,  N.  S.  M.,  &  Yasin,  R.  A.  M.  (2018).  Antibacterial  activity  of  Orthosiphon  stamineus towards Staphylococcus aureus and methicilin resistant Stahpylococcus aureus (MRSA). J. Chem. Pharma. Sci. , 11.
Rostinawati,  T.,  Aryani,  H.,  &  Iskandar,  Y.  (2018).  Identification  of  bacteria  causing  dental caries through genetic testing and activity assay of toothpastes. Journal of Pharmaceutical Sciences and Research , 10 (3), 511–513.
Rukmana,  R.  M.,  &  Mulyowati,  T.  (2015).  Aktivitas  Antibakteri  dari  Ekstrak  Etanolik  Daun Kumis  Kucing  (Orthosiphon  stamineus)  pada  Bakteri  Streptococcus  pyogenes  dan Salmonella thypi. Biomedika , 8 (2), 15–18.
Singh, M. K., Gidwani, B., Gupta, A., Dhongade,  H., Kaur, C. D., Kashyap, P. P., & Tripathi,
D.  K.  (2015).  A  review  of  the  medicinal  plants  of  genus  Orthosiphon  (Lamiaceae). Int  J Biol Chem , 9 (6), 318–331. stamineus Benth, O. (2019). Indonesian  Journal of Science and Education. Indonesian Journal of Science and Education , 3 (1), 26–33.
Takahashi,  N.,  &  Nyvad,  B.  (2016).  Ecological  hypothesis  of  dentin  and  root  caries. Caries Research , 50 (4), 422–431.
Tandra, T. A., Khairunissa, S., Sim, M., & Florenly, F. (2020). Efek Penambahan Nanokitosan 1%  Kedalam  Berbagai  Konsentrasi  Ekstrak  Kulit  Kelengkeng  Streptococcus  Mutans. Jurnal Ilmiah Kesehatan Sandi Husada , 11 (1), 403–412. WHO.  (2020). Oral  health  conditions .  http://www.who.in/new-rooms/fact-sheets/detail/oral-
health Young, D. A., Nový, B. B., Zeller, G. G., Hale, R., Hart, T. C., Truelove, E. L., Ekstrand, K. R., Featherstone,  J.  D.  B.,  Fontana,  M.,  &  Ismail,  A.  (2015).  The  American  Dental Association  caries  classification  system  for  clinical  practice:  a  report  of  the  American Dental  Association  Council  on  Scientific  Affairs. The  Journal  of  the  American  Dental Association , 146 (2), 79–86.
Yulianti,  R.,  Nugraha,  D.  A.,  &  Nurdianti,  L.  (2015).  Formulasi  Sediaan  Sabun  Mandi  Cair Ekstrak  Daun  Kumis  Kucing  (Orthosiphon  Aristatus  (Bl)  Miq.). Kartika:  Jurnal  Ilmiah Farmasi , 3 (2), 1–11.
Zainal-Abidin, Z., Abdul-Wahab, N. A., Ghazi-Ahmad, M. K., & Mohd-Said, S. (2017). In vitro antibacterial  activity  of  Zingiber  officinale  and  Orthosiphon  stamineus  on  Enterococcus faecalis. Journal of Agricultural Science , 9 (13), 112–121.