Uji Aktivitas Antioksidan Gummy Candy Ekstrak Daun Sirih Cina ( Peperomia pellucida L. Kunth) dengan Metode DPPH
Ni Putu Putri Cahya Anggreni 1 , Ni Putu Refina Dharma Yanti 2 , Kadek Ayu Puspa Pratiwi 3 , Ni Nyoman Wahyu Udayani 4*
1,2,3,4 Prodi Sarjana Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Mahasaraswati Denpasar, Indonesia * E-mail: udayani.wahyu@unmas.ac.id Article Info: Received: 23  Juni 2023 in revised form: 19 Agustus 2023 Accepted: 2 September 2023 Available Online: 15  September 2023

## ABSTRACT
The body's defense that functions to neutralize free radicals is antioxidants. The Peperomia pellucida is a medicinal plant that has  secondary  metabolite  compounds  such  as  alkaloids, flavonoids,  saponins,  tannins  and  steroids.  Antioxidants  in Chinese  betel  plants  are  associated  with  the  prevention  and treatment of several diseases. The aim of this research was to determine  the  antioxidant  activity  contained  in Peperomia pellucida and Peperomia  pellucida gummy  candy  preparations. This  research  uses  the  main  ingredient  of peperomia  pellucida obtained  from  the  Jembrana  district,  Bali  province.  The  total weight of the extract obtained was 30 grams. Then the materials used  are peperomia  pellucida extract  gummy  candy,  DPPH powder,  96%  ethanol,  chloroform,  ammonia,  H2SO4, Dragendorf  reagent,  concentrated  HCL,  magnesium  powder, CH3COOH,  iron  (III)  chloride,  distilled  water.  This  research uses  the  DPPH  method  in  antioxidant  testing  and phytochemical  screening  testing  in  testing peperomia  pellucida extract.  The  results  of  the  phytochemical  screening  test  for peperomia  pellucida extract  showed  positive  results  in  the alkaloid,  flavonoid,  steroid,  saponin  and  tannin  tests.  In  the results of the antioxidant activity test using the DPPH method, the antioxidant activity results of Chinese betel extract showed an  IC50  value  of  564,062  ppm.  Gummy  candy peperomia pellucida extract 100mg/kgBB showed an IC50 value of 904,342 ppm. In gummy candy, peperomia pellucida extract 200mg/kgBB showed  an  IC50  value  of  381.205  ppm.  And  gummy  candy peperomia pellucida extract 400mg/kgBB showed an IC50 value of 347,227 ppm. Based on the research results obtained, it can be said that the IC50 value is very weak. This can be seen from the IC50 value> 200 ppm. Based on the results of research, from Chinese  betel  extract,  gummy  candy  Chinese  betel  extract doses of 100mg/kgBB, 200mg/kgBB, and 400mg/kgBB which contain  the  best  antioxidants,  which  are  found  in  gummy candy formula 200 mg/kgBB with results of 347,227 ppm. Keywords :
Peperomia pellucida; Antioxidant; DPPH; Gummy candy
Corresponding Author: Ni Nyoman Wahyu Udayani Fakultas Farmasi Universitas Mahasaraswati Denpasar Kota Denpasar
Indonesia E-mail: udayani.wahyu@unmas.ac.id
Indonesian Journal of Pharmaceutical Education (e-Journal) 2023; 3 (3): 436 – 446
ISSN : 2775- 3670 (electronic) Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/ijpe/index DOI: 10.37311/ijpe.v3i3.22117
Anggreini et al., 2023; Indonesian Journal of Pharmaceutical Education (e-Journal); 3(3): 436-446

## ABSTRAK
Pertahanan  tubuh  yang  berfungsi  untuk  menetralisir  radikal  bebas  adalah  antioksidan. Tanaman  sirih  cina  merupakan  tanaman  obat  yang  memiliki  senyawa  metabolit  sekunder seperti alkaloid, flavonoid, saponin, tannin, dan steroid.  Antioksidan pada tanaman sirih cina berhubungan dengan pencegahan dan pengobatan beberapa penyakit. Tujuan riset ini adalah untuk  mengetahui  aktivitas  antioksidan  yang  terkandung  dalam  ekstrak  sirih  cina  serta sediaan gummy candy ekstrak sirih cina.  Riset ini menggunakan bahan utama ekstrak daun sirih cina ( peperomia pellucida ) yang didapatkan dari daerah kabupaten Jembrana provinsi Bali. Berat  total  ekstrak  yang  didapat  yaitu  30  gram.  Kemudian  bahan  yang  digunakan  yaitu gummy  candy  ekstrak  sirih  cina,  serbuk  DPPH,  etanol  96%,  kloroform,  ammonia,  H2SO4, reagen dragendorf, HCL pekat, serbuk magnesium, CH3COOH, besi (III) klorida, aquadest. Riset ini menggunakan metode DPPH dalam pengujian antioksidan dan pengujian skrining fitokimia dalam pengujian ekstrak daun sirih cina. Hasil uji skrining fitokimia ekstrak daun sirih cina mendapatkan hasil positif pada uji alkaloid, flavonoid, steroid, saponin dan tanin. Pada  hasil  uji  aktivitas  antioksidan  dengan  metode  DPPH  didapatkan  hasil  aktivitas antioksidan  ekstrak  sirih  cina  menunjukkan  nilai  IC50  sebesar  564,062  ppm.  Pada  gummy candy  ekstrak  sirih  cina  100mg/kgBB  menunjukkan  nilai  IC50  sebesar  904,342  ppm.  Pada gummy candy ekstrak sirih cina 200mg/kgBB menunjukkan nilai IC50 sebesar 381,205 ppm. Serta  pada  gummy  candy  ekstrak  sirih  cina  400mg/kgBB  menunjukkan  nilai  IC50  sebesar 347,227  ppm.  Berdasarkan  hasil  riset  yang  telah  didapat,  bisa  dikatakan  bahwa  nilai  IC50 sangat  lemah.  Hal  itu  dapat  dilihat  dari  nilai  IC50>200  ppm.  Berdasarkan  hasil  riset,  dari ekstrak  sirih  cina, gummy  candy ekstrak  sirih  cina  dosis  100mg/kgBB,  200mg/kgBB,  serta 400mg/kgBB  yang  mengandung  antioksidan  terbaik  yaitu  terdapat  pada gummy  candy formula 200 mg/kgBB dengan hasil sebesar 347,227 ppm.
Kata Kunci: Peperomia pellucida ; Antioksidan, DPPH; Gummy candy
1. Pendahuluan
Keanekaragaman hayati di Indonesia mencapai 30.000-40.000 spesies tumbuhan, 2.500-7.500  di antaranya  bersifat  obat,  baik  spesies  asli,  liar,  ataupun  hasil  budidaya. Tidak hanya itu, manfaatnya telah diakui oleh dunia sebagai obat dan kosmetik, dan dapat digunakan secara modern ataupun tradisional [1]. Masyarakat meyakini dengan mengonsumsi  obat-obatan  daunl  yang  mengndung  suatu  zat  aktif  yang  bersifat antibakteri, antivirus, antiinflamasi, dan dapat bersifat sebagai imunomodulator [2].
Pertahanan  tubuh  yang  berfungsi  untuk  menetralisir  radikal  bebas  adalah antioksidan.  Antioksidan  merupakan  inhibitor  proses  oksidasi,  bahkan  pada konsentrasi yang relatif kecil. Adanya infeksi bakteri, virus, atau inflamasi kronik dalam proses  penuaan  merupakan  beberapa  faktor  yang  dapat  menyebabkan  menurunnya produksi antioksidan dalam tubuh [3]. Pembentukan radikal bebas dapat terjadi melalui proses metabolisme sel normal, peradangan, kekurangan gizi, dan akibat respon dari luar tubuh, seperti polusi lingkungan, ultraviolet, dan asap rokok, radikal bebas bersifat
This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0 International license.
How to cite (APA 6 th Style): Anggreni,N.P.PC., Yanti,N.P.R.D., Kadek Ayu Puspa Pratiwi,K.A.P.,Udayani,N.N.W. (2023). Uji Aktivitas Antioksidan Gummy Candy Ekstrak Daun Sirih Cina (Peperomia pellucida L. Kunth) dengan Metode DPPH . Indonesian Journal of Pharmaceutical  (e-Journal), 3(3), 436-446.
reaktif dan sangat mudah berikatan dengan unsur lain. Radikal bebas jika berlebih dapat menimbuklan berbagai penyakit seperti diabetes millitus, kanker dan aterosklerosis [4].
Sirih cina ( Peperomia pellucida ) terbukti memiliki beberapa aktivitas farmakologis [5].  Tanaman  sirih  cina  merupakan  tanaman  obat  yang  memiliki  senyawa  metabolit sekunder seperti alkaloid, flavonoid, saponin, tannin, dan steroid [6]. Antioksidan pada tanaman  sirih  cina  berhubungan  dengan  pencegahan  dan  pengobatan  beberapa penyakit. Faktor penyebab tingginya total antioksidan dalam ekstrak sirih cina kering adalah kadar airnya yang sedikit. Banyaknya air yang terkandung dalam suruhan akan berpengaruh  terhadap  faktor  pengenceran  senyawa  antioksidan  dalam  suruhan tersebut. Semakin rendah kadar air yang terkandung dalam tumbuhan suruhan, maka semakin tinggi pula total antioksidan yang akan terukur [7].
Sediaan  daun  biasanya  dibuat  dalam  bentuk  sediaan  kapsul  atau  tablet suplemen,  kini  muncul  sediaan  berupa nutraceutical yang  berasal  dari  kata nutra (natural) dan ceutical (fungsi  obat).  Jadi,  secara  spesifik nutraceutical memiliki  arti pemberian nutrisi untuk mengatur fungsi biolofis tubuh [8]. Pada riset ini menggunakan bentuk  sediaan  permen  kenyal  ( gummy  candy) ,  dimana  sediaan  ini  masuk  kedalam kategori tablet kunyah ( chew ). Pada kondisi tertentu, bentuk sediaan gummy candy relatif memiliki keunggulan jika dibandingkan dengan bentuk sediaan lainnya. Hal tersebut dikarenakan gummy candy memiliki rasa, bau, warna serta bentuk yang menarik. Tujuan riset ini adalah untuk mengetahui aktivitas antioksidan yang terkandung dalam ekstrak sirih cina serta sediaan gummy candy ekstrak sirih cina. Manfaat riset ini sebagai penambah informasi bagi kalangan farmasi khususnya farmasi bahan alam dan farmasi industri dalam mengembangkan bentuk sediaan baru berupa gummy candy yang mengandung antioksidan.

## 2.  Metode
Riset  ini  merupakan  riset  eksperimental  laboratorium  yang  bertujuan  untuk mengetahui  aktivitas  antioksidan  ekstrak  daun  sirih  cina  dan  gummy  candy  ekstrak sirih  cina  menggunakan  metode  penangkapan  radikal  bebas  ( 1,1-  diphenyl-2- picrylhydrazyl ) (DPPH) dan skrining fitokimia dari ekstrak daun sirih cina yang sudah didapat [9].

## Bahan
Riset ini menggunakan bahan utama ekstrak daun sirih cina ( peperomia pellucida ) yang didapatkan dari daerah kabupaten Jembrana provinsi Bali. Berat total ekstrak yang didapat yaitu 30 gram. Kemudian bahan yang digunakan yaitu gummy candy ekstrak sirih cina, serbuk DPPH, etanol 96%, kloroform, ammonia, H2SO4, reagen dragendorf, HCL pekat, serbuk magnesium, CH3COOH, besi (III) klorida, aquadest.

## Ekstraksi
Pembuatan  ekstrak  daun  sirih  cina  dilakukan  dengan  metode  maserasi, didapatkan  serbuk  simplisia  sebanyak  570  gram,  kemudian  dilakukan  maserasi menggunakan etanol 96% dengan perbandingan 1:10 [10]. Maserasi dilakukan selama 3 x  24  jam  dan  dikocok  setiap  8  jam,  kemudian  disaring.  Filtrat  yang  didapat  lalu  di evaporasi pada suhu 60°C hingga didapat ekstrak yang kental ± 30 gram [11].

## Formula gummy candy
Pada riset ini menggunakan 3 formula  dengan perbedaan konsentrasi ekstrak disetiap  formula.  Formula  yang  digunakan  dalam  riset  ini  yaitu  100  mg/kgBB,  200
mg/kgBB dan 400mg/kgBB. Bobot 1 permen yang akan dibuat yaitu 2 gram. Formula di tabel ini merupakan formula untuk pembuatan 60 permen [12].
Tabel 1. Formulasi Gummy Candy Bahan F1 F2 F3 Ekstrak sirih cina 1,5 3 6 Gelatin 20 20 20 Propilenglikol 10 10 10 Gula 40 40 40 Asam sitrat 0,1 0,1 0,1 Kalium sorbat 0,1 0,1 0,1 Essens 2-3 tetes 2-3 tetes 2-3 tetes Aquadest 100 mL 100 mL 100 mL Pembuatan Gummy Candy
Cara pembuatan sediaan gummy candy mengacu pada riset Firdaus (2014) dan dilakukan modifikasi pada basis yang digunakan. Pembuatan dilakukan dengan cara dikembangkan gelatin  dalam  aquadest,  didiamkan  selama  ±  10  menit  hingga  gelatin mengembang membentuk gel. Kemudian dilarutkan ekstrak daun sirih cina ke dalam propilen glikol (larutan A). Dilarutkan gula jagung, asam sitrat dan kalium sorbat ke dalam aquadest (larutan B). Setelah itu dicampurkan larutan A dan B, diaduk hingga homogen  (larutan  C). Dipanaskan  gelatin  diatas  penangas  air dalam  cawan  penguap dengan  suhu  ±  40 – 50°C  selama  5 menit  hingga mencair. Dimasukkan  larutan C  ke dalam  cawan  penguap,  terakhir  tambahkan essens jeruk  sambil  terus  diaduk  hingga homogen. Formula diangkat dari penangas air dan dituang ke dalam cetakan gummy candy dengan  ukuran  cetakan  ±  2  gram  untuk  satu gummy .  Kemudian  didiamkan formula pada suhu ruang (15-30°C) hingga formula membeku dan dapat dikeluarkan dari cetakan.

## Pengujian Antioksidan dengan Metode DPPH

## Pembuatan Larutan Uji DPPH 0,4 mM
Ditimbang  serbuk  DPPH  (BM 394,32  g/mol)  4  mg, kemudian dimasukkan  ke dalam  labu  ukur  25  mL,  lalu  dicukupkan  volumenya  sampai  tanda  batas  dengan metanol p.a dan dihomogenkan [13].

## Penentuan Panjang Gelombang Maksimum DPPH 0,4 Mm
Pipet  2  mL  larutan  DPPH  0,4  mM,  dimasukkan  dalam  labu  ukur  10  mL, ditambahkan  dengan  etanol  96%  sampai  tanda  batas,  kemudian  dihomogenkan  dan didiamkan  selama  30  menit  pada  suhu  ruang.  Diukur  serapannya  pada  panjang gelombang  400-800  nm  dengan  menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis  (sekitar  516 nm).
Penentuan Nilai IC 50
Hasil absorbansi yang nantinya diperoleh yang diuji didapatkan nilai persentase perendaman dengan rumus:
%perendaman = absorbansi DPPH − absorbansi sampel absorbansi DPPH 𝑥 100%
Nilai  IC50 (Inhibitory  Concentration )  yaitu  konsentrasi  sampel  yang  memiliki penghabatan absorbansi DPPH sebesar 50%. Semakin rendah nilai IC50 menunjukkan aktivitas antioksidan yang semakin tinggi.

## Pembuatan Larutan Uji Sampel Ekstrak Daun Sirih Cina
Ditimbang 25 mg sampel dilarutkan dengan sedikit etanol 96%, lalu dimasukkan ke dalam labu ukur 25 mL, volume dicukupkan sampai tanda batas dan dihomogenkan (1000 µg/mL). Larutan induk dipipet masing-masing 1; 2; 3; 4; 5; dan 6 mL, dimasukkan dalam labu ukur 10 mL. Kemudian ditambahkan 2 mL larutan DPPH 0,4 mM ke dalam labu ukur tersebut, dicukupkan volumenya sampai tanda batas dengan etanol 96% dan dihomogenkan. Diperoleh larutan uji dengan konsentrasi 100; 200; 300; 400; 500; dan 600 µg/ml. Larutan uji dari masing-masing konsentrasi didiamkan selama selama 30 menit pada  suhu  ruang  dan  tempat  gelap  kemudian  diukur  serapannya  pada  panjang gelombang maksimum menggunakan spektrofotometer UV-Vis.

## Gummy Candy Sirih Cina 100 mg/kgBB
Ditimbang 25 mg sampel dilarutkan dengan sedikit etanol 96%, lalu dimasukkan ke dalam labu ukur 25 mL, volume dicukupkan sampai tanda batas dan dihomogenkan (1000 µg/mL). Larutan induk dipipet masing-masing 2; 4; 6; 8; dan 10 mL, dimasukkan dalam labu ukur 10 mL. Kemudian ditambahkan 2 mL larutan DPPH 0,4 mM ke dalam labu ukur tersebut, dicukupkan volumenya sampai tanda batas dengan etanol 96% dan dihomogenkan. Diperoleh larutan uji dengan konsentrasi 200; 400; 600; 800; dan 1000 µg/ml. Larutan uji dari masing-masing konsentrasi didiamkan selama selama 30 menit pada  suhu  ruang  dan  tempat  gelap  kemudian  diukur  serapannya  pada  panjang gelombang maksimum menggunakan spektrofotometer UV-Vis.

## Gummy Candy Sirih Cina 200 mg/kgBB dan 400 mg/kgBB
Ditimbang 25 mg sampel dilarutkan dengan sedikit etanol 96%, lalu dimasukkan ke dalam labu ukur 25 mL, volume dicukupkan sampai tanda batas dan dihomogenkan (1000 µg/mL). Larutan induk dipipet masing-masing 1; 2; 3; 4; dan 5 mL, dimasukkan dalam labu ukur 10 mL. Kemudian ditambahkan 2 mL larutan DPPH 0,4 mM ke dalam labu ukur tersebut, dicukupkan volumenya sampai tanda batas dengan etanol 96% dan dihomogenkan.  Diperoleh  larutan  uji  dengan  konsentrasi  100;  200;  300;  400;  dan  500 µg/ml. Larutan uji dari masing-masing konsentrasi didiamkan selama selama 30 menit pada  suhu  ruang  dan  tempat  gelap  kemudian  diukur  serapannya  pada  panjang gelombang maksimum menggunakan spektrofotometer UV-Vis.

## Skrining Fitokimia

## Uji Alkaloid
Diambil 0,5 gram ekstrak dimasukkan ke dalam tabung reaksi, ditambahkan 2 ml kloroform, ditambahkan 10 ml ammonia, ditambahkan 10 tetes H2SO4, kemudian dikocok dan dibiarkan hingga membentuk 2 lapisan, lalu lapisan H2SO4 dipisahkan ke
dalam tabung rekasi lain dengan volume 2,5 ml, setelah itu larutan diji dengan reagen dragendorf, berubahnya warna larutan menjadi merah jingga menandakan positif [14].

## Uji Flavonoid
Diambil 0,5gram ekstrak dimasukkan ke dalam tabung reaksi, ditambahkan 5 ml etanol 96% dan dipanaskan selama 5 menit dalam tabung reaksi, ditambahkan 10 tetes HCL pekat, kemudian ditambahkan 0,2 gram serbuk magnesium, adanya warna merah coklat menandakan positif mengandung flavonoid [14].
Uji Steroid/Triterpenoid
Diambil 0,5gram ekstrak dimasukkan ke dalam tabung reaksi, ditambahkan 10 tetes CH3COOH, ditambahkan 2 tetes H2SO4 pekat dikocok dan dibiarkan beberapa menit. Larutan menjadi positif pada triterpenoid jika larutan berubah  menjadi warna merah atau ungu, dan larutan positif pada steroid jika larutan berubah menjadi warna biru atau hijau [14].

## Uji Saponin
Diambil 0,5 gram ekstrak dimasukkan ke dalam tabung reaksi, ditambahkan 10 mL aquadest lalu dikocok kurang lebih selama 1 menit, kemudian didiamkan selama 10 menit  dan   busa  yang  terbentuk,  adanya  senyawa  saponin  yaitu  ditandai  dengan terbentuknya busa yang stabil selama 10 menit dengan ketinggian 1-3 cm [14].

## Uji Tanin
Diambil 0,5 gram ekstrak dimasukkan ke dalam tabung reaksi, ditambahkan 10 mL  air  panas,  lalu  ditetesi  besi  (III)  klorida,  ditandai  dengan  adanya  warna  hijau kehitaman merupakan hasil positif dari tannin [14].

## 3.  Hasil dan Pembahasan
Pengujian  aktivitas  antioksidan  pada  daun  ekstrak  sirih  cina  menggunakan metode  DPPH  yang  merupakan  salah  satu  metode  pengujian  antioksidan  secara kuantitatif. Selain uji DPPH pada riset ini juga dilakukan skrining fitokima pada ekstrak daun sirih cina untuk mengidentifikasi kandungan senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam daun sirih cina [15]. Pada riset ini, menggunakan 3 sampel gummy candy dengan perbedaan dosis ekstrak sirih cina yaitu 100mg/kgBB, 200mg/kgBB, dan 400mg/kgBB. Tujuan menggunakan beberapa sampel gummy candy untuk mengetahui kandungan antioksidan dalam bebepa dosis ekstrak.
Sebelum dilakukannya uji antioksidan metode Dpph IC50 pada sampel gummy candy ,  terlebih  dahulu  diperlukan  uji  skrining  fitokimia  yang  bertujuan  untuk mengetahui kandungan  metabolit  sekunder  dari gummy  candy ekstrak  sirih  cina [16]. Hasil  uji dapat dilihat  pada  Tabel  2. Terdapat  endapan  berwarna  merah  jingga pada pereaksi dagendorff yang menandakan bahwa ekstrak sirih cina positif mengandung senyawa  alkaloid.  Pengendapan  merah  jingga  dinilai  dapat  menandakan  adanya senyawa  alkaloid  karena  dengan  penambahan  pereaksi  dagendorff  dapat mengendapkan  alkaloid  karena  terdapat  gugus  nitrogen  yang  memiliki  satu  pasang elektron  bebas  yang  menyebabkan  senyawa  alkaloid  bersifat  basa.  Sehingga terbentuknya endapan merah jingga disebabkan oleh alkaloid yang mampu mengikat ion logam berat dimana ion logam berat pada riset ini adalah pereaksi dagendorff yang mempunyai muatan positif [17].
Tabel 2. Hasil skrining fitokimia
Uji Fitokimia Pereaksi Hasil Indikator Alkaloid Drafendroff Positif (+) Terjadi perubahan warna merah jingga Flavonoid HCl pekat + serbuk Mg Positif (+) Terjadi perubahan warna merah coklat Steroid CH3COOH + H2SO4 pekat Positif (+) Terjadi perubahan warna hijau Saponin Aquadest Positif (+) Terbentuknya buih yang stabil selama 10 menit dengan tinggi 1 cm Tannin Air panas + FeCl 3 Positif (+) Terbentuk perubahan warna hijau kehitaman
Hasil  positif  ditunjukkan  dengan  perubahan  warna  larutan  ekstrak  menjadi warna  merah  kecoklatan.  Flavonoid  merupajan  senyawa  polar  yang  mempunyai beberapa  gugus  hidroksil.  Semua  golongan  flavonoid  yang  mempunyai  gugus  fenol mempunyai efek antioksidan [18]. Terdapat perubahan warna larutan menjadi merah menunjukkan  positif  senyawa  steroid  dan  perubahan  warna  menjadi  biru  atau  hijau menunjukkan positif senyawa triterpenoid. Penyebab perubahan warna menjadi merah karena penambahan 2 tetes H 2 SO 4. Pengujian saponin dilakukan dengan diamati busa yang terdapat pada ekstrak yang  sudah  dikocok  dengan  penambahan  aquadest.  Adanya  busa  pada  uji  saponin menunjukkan  bahwa adanya glikosida  yang  memiliki  kemampuan  membentuk  busa dalam air yang terhidrolisis menjadi glukosa dan senyawa lainnya. Skrining fitokimia terhadap  ekstrak  sirih  cina  menandakan  positif  mengandung  senyawa  saponin  [19]. Pengujian  tanin  dilakukan  dengan  penambahan  FeCl3  atau  besi  (III)  klorida.  Pada penambahan ini golongan tanin terhidrolisis akan dihasilkan warna biru kehitaman dan tanin terkondensasi akan menghasilkan warna hijau kehitaman. Berubahnya warna ini didapatkan ketika ditambahkan FeCl3 yang bereaksi dengan salah satu gugus hidroksil yang terdapat pada senyawa tanin. Hasil skrining fitokimia terhadap ekstrak sirih cina menandakan positif mengandung senyawa tannin.
Tabel 3. Hasil uji aktivitas antioksidan ekstrak sirih cina Ekstrak etanol sirih cina Konsentrasi (C) Absorbansi %Inhibisi 0 0,975 0,000 100 0,872 10,564 200 0,796 18,359 300 0,678 30,462 400 0,598 38,667 500 0,542 44,410 600 0,475 51,282 y = 0,0828x + 3,2957
R2 = 0,9863
Anggreini et al., 2023; Indonesian Journal of Pharmaceutical Education (e-Journal); 3(3): 436-446

## IC50 = 564,062 ppm
Antioksidan  dalam  suatu  ektrak  dapat  diketahui  keberadannya  dengan melakukan  uji  aktivitas  antioksidan.  Metode  yang  digunakan  pada  uji  aktivitas antioksidan ekstrak sirih cina serta gummy candy sirih cina yaitu metode uji DPPH (1,1- difenil-2-pikrilhidrazil)  IC50.  Metode  DPPH  dipilih  untuk  mengukur  aktivitas antioksidan  karena  mempunyai  kelebihan  yaitu  mudah,  cepat,  sederhana, reprodusibilitas  yang  baik,  kesesuaian  untuk  sampel  dengan  polaritas  tertentu, sensitivitas tinggi, dan membutuhkan sedikit sampel [20].
Tabel 4. Hasil uji aktivitas antioksidan gummy candy ekstrak sirih cina 100mg/kgBB
Gummy candy ekstrak sirih cina 100mg/kgBB Konsentrasi (C) Absorbansi %Inhibisi 0 0,969 0,000 200 0,745 23,117 400 0,681 29,721 600 0,584 39,732 800 0,510 47,368 1000 0,462 52,322 y = 0,038x + 15,635
R 2 = 0,989 IC50 = 904,342 ppm
Uji  aktivitas  antioksidan  dilakukan  dengan  menambahkan  larutan  DPPH  ke dalam  larutan  sampel  kemudian  didiamkan  selama  60  menit.  Pada  proses  ini  terjadi reaksi yang menyebabkan adanya perubahan warna larutan DPPH menjadi warna ungu pudar.  Perubahan  warna  inilah  yang  kemudian  diukur  menggunakan  alat spektrofotometri Uv-Vis dengan Panjang gelombang 516 nm. Perolehan nilai absorbansi dari masing-masing konsentrasi sampel akan digunakan untuk menghitung %inhibisi aktivitas antiradikal.
Tabel 5. Hasil uji aktivitas antioksidan gummy candy ekstrak sirih cina 200mg/kgBB
Gummy candy ekstrak sirih cina 200mg/kgBB Konsentrasi (C) Absorbansi %Inhibisi 0 0,969 0,000 100 0,662 31,682 200 0,589 39,216 300 0,515 46,852 400 0,478 50,671 500 0,420 56,656
y = 0,0614x + 26,594 R 2 = 0,9863
IC50 = 381,205 ppm
Hasil  aktivitas  antioksidan  ekstrak  sirih  cina  menunjukkan  nilai  IC50  sebesar 564,062 ppm (tabel 3). Pada gummy candy ekstrak sirih cina 100mg/kgBB menunjukkan nilai  IC50  sebesar  904,342  ppm  (tabel  4).  Pada gummy  candy ekstrak  sirih  cina 200mg/kgBB menunjukkan nilai IC50 sebesar 381,205 ppm (tabel 5). Serta pada gummy candy ekstrak sirih cina 400mg/kgBB menunjukkan nilai IC50 sebesar 347,227 ppm (tabel
6.  Nilai  antioksidan  dikatakan  sangat  kuat  jika  nilai  IC50  <  50  ppm,  kuat 50<IC50<100ppm, sedang 100<IC50<150 ppm, lemah 150<IC50<200, dan sangat lemah IC50>200ppm.[21]  Berdasarkan  hasil  riset  yang  telah  didapat,  bisa  dikatakan  bahwa nilai IC50 sangat lemah. Hal itu dapat dilihat dari nilai IC50>200 ppm.
Tabel 6. Hasil uji aktivitas antioksidan gummy candy ekstrak sirih cina 400mg/kgBB
Gummy candy ekstrak sirih cina 400mg/kgBB Konsentrasi (C) Absorbansi %Inhibisi 0 0,969 0,000 100 0,597 38,390 200 0,539 44,376 300 0,516 46,749 400 0,461 52,425 500 0,414 57,276 y = 0,0458x + 34,097
R 2 = 0,9878 IC50 = 347,227 ppm
Hasil pengukuran menunjukkan bahwa semakin besar konsentrasi maka nilai serapan yang dihasilkan semakin menurun. Hal ini disebabkan karena semakin besar konsentrasi  larutan  maka  semakin  banyak  pula  senyawa  antioksidan  yang  menjadi donor  hidrogen  atau  elektron  pada  DPPH  sehingga  menyebabkan  warna  DPPH berubah.  Dengan  bertambahnya  konsentrasi  maka  warna  ungu  DPPH  akan  berubah menjadi kuning sehingga menyebabkan serapannya semakin kecil [22].
Rendahnya nilai IC50 dapat disebabkan karena simplisia yang dihasilkan belum kering  merata  atau  masih  terdapat  kandungan  air.  Banyaknya  air  yang  terkandung dalam  sirih  cina  sangat  berpengaruh  pada  faktor  pengenceran  senyawa  antioksidan didalam sirih cina. Semakin rendah kadar air yang terkandung, maka semakin tinggi total antioksidan yang dapat terukur [7].  Selain itu, rendahnya kadar antioksidan dapat disebabkan karena pemilihan pelarut yang kurang tepat atau terlalu polar.

## 4.  Kesimpulan
Pada pengujian DPPH ekstrak daun sirih cina didapatkan hasil IC50 = 564,062 ppm. Pada pengujian gummy candy 100mg/kgBB didapatkan hasil IC50 = 904,342 ppm. Pada pengujian gummy candy 200mg/kgBB didapatkan hasil IC50 = 381,205 ppm. Pada pengujian gummy  candy 400mg/kgBB  didapatkan  hasil  IC50  =  347,227  ppm. Berdasarkan  hasil  riset,  dari  ekstrak  sirih  cina, gummy  candy ekstrak  sirih  cina  dosis 100mg/kgBB, 200mg/kgBB, serta 400mg/kgBB yang mengandung antioksidan terbaik yaitu terdapat pada gummy candy formula 200 mg/kgBB dengan hasil sebesar 347,227 ppm.  Riset  selanjutnya  disarankan  agar  melakukan  ekstraksi  dengan  menggunakan pelarut lain selain etanol 96%.

## Ucapan Terima Kasih
Ucapan  terima  kasih  kepada  pihak  Belmawa  yang  telah  membiayai  penelitian  ini melalui Program Kreativitas Mahasiswa tahun 2023 dan laboratorium Fakultas Farmasi yang sudah menyediakan tempat untuk melakukan riset ini.
Anggreini et al., 2023; Indonesian Journal of Pharmaceutical Education (e-Journal); 3(3): 436-446

## Referensi
[1] Adrian, R. A. Syahputra, N. A. Juwita, R. Astyka, and M. F. Lubis, “Andaliman (Zanthoxylum  acanthopodium  DC.)  a  herbal  medicine  from  North  Sumatera, Indonesia: Phytochemical and pharmacological review,” Heliyon , vol. 9, no. 5, p. e16159, 2023, doi: 10.1016/j.heliyon.2023.e16159.
[2] H. Kristianto, B. A. Pramesona, Y. S. Rosyad, L. Andriani, T. A. R. K. Putri, and Y. A. Rias, “The effects of beliefs, knowledge, and attitude on herbal medicine use  during  the  COVID-19  pandemic:  A  cross- sectional  survey  in  Indonesia,”
F1000Research , vol. 11, p. 483, 2022, doi: 10.12688/f1000research.116496.1.
[3] R. Andarina and T. Djauhari, “Antioksidan Dalam Dermatologi,” J. Kedokt. dan Kesehat. , vol. 4, no. 1, pp. 39 – 48, 2017.
[4] A.  N.  Sari,  “POTENSI  ANTIOKSIDAN  ALAMI  PADA  EKSTRAK  DAUN JAMBLANG (Syzigium cumini (L.) Skeels),” EKSAKTA Berk. Ilm. Bid. MIPA , vol. 18, no. 02, pp. 107 – 112, 2017, doi: 10.24036/eksakta/vol18-iss02/61.
[5] I. G. A. A. Kartika, C. Riani, M. Insanu, and I. K. Adnyana, “Peperomia pellucida extracts stimulates bone healing in alveolar socket following tooth extraction,” J. Tradit.  Complement.  Med. ,  vol.  12,  no.  3,  pp.  302 – 307,  2022,  doi:
10.1016/j.jtcme.2021.08.010.
[6] H.  Busman,  N.  Nurcahyani,  Y.  Dwi  Saputra,  S.  Farisi,  and  Q.  Salsabila, “MORTALITAS DAN RESORPSI FETUS MENCIT (Mus musculus L.) SETELAH PEMBERIAN  EKSTRAK  ETANOL  TANAMAN  SURUHAN  (Peperomia pellucida (L.,) Kunth.),” J. Kesehat. Kusuma Husada , vol. 12, no. 2, pp. 194 – 202,
2021, doi: 10.34035/jk.v12i2.715.
[7] E.  Sitorus,  L.  I.  Momuat,  and  D.  G.  Katja,  “AKTIVITAS  ANTIOKSIDAN TUMBUHAN SURUHAN (Peperomia pellucida [L.] Kunth),” J. Ilm. Sains , vol. 13, no. 1, p. 80, 2013, doi: 10.35799/jis.13.1.2013.2116.
[8] Y. Juliantoni, D. G. Wirasisya, and R. Hasina, “Formulasi Nutraseutikal Sediaan Gummy Candies Sari Buah Duwet (Syzygium cumini),” Unram Med. J. , vol. 7, no. 2, p. 9, 2018, doi: 10.29303/jku.v7i2.177.
[9] I.  B.  Wicaksono  and  M.  Ulfah,  “Uji  Aktivitas  Antioksidan  Kombinasi  Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona muricata L.) dan Daun Jambu Biji (Psidium guajava L.) dengan Metode DPPH (2,2-difenil-1- pikrihidrazil),” Inov. Tek. Kim. , vol. 2, no. 1, pp. 44 – 48, 2017.
[10] F. Putrajaya, N. Hasanah, and A. Kurlya, “Daya Hambat Ekstrak Etanol Daun Suruhan  (Peperomia  pellucida  l.)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri  Penyebab Jerawat (Propionibacterium acnes) Dengan Metode Sumur Agar,” Edu Masda J. , vol. 3, no. 2, p. 123, 2019, doi: 10.52118/edumasda.v3i2.34.
[11] A.  Mawarda,  E.  Samsul,  and  Y.  Sastyarina,  “Pengaruh  Berbagai  Metode Ekstraksi dari Ekstrak Etanol Umbi Bawang Tiwai (Eleutherine americana Merr) terhadap  Rendemen  Ekstrak  dan  Profil  Kromatografi  Lapis  Tipis,” Proceeding Mulawarman Pharm. Conf. , vol. 11, pp. 1 – 4, 2020, doi: 10.25026/mpc.v11i1.384.
[12] BPOM, “Peraturan Badan Pengawas Obat Dan Makanan Nomor 18 Tahun 2021 Tentang  Pedoman  Uji  Farmakodinamik  Praklinik  Obat  Tradisional,” Badan Pengawas Obat dan Makanan RI , no. 1, pp. 15 – 24, 2021.
[13] D.  Andriani and  L.  Murtisiwi,  “Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol 70% Bunga Telang (Clitoria ternatea L) dari Daerah Sleman dengan Metode DPPH Antioxidant  Activity  Test  of  70%  Ethanol  Extract  of  Telang  Flower  (Clitoria
ternatea L) from Sleman Area with DPPH Method,” J. Farm. Indones. , vol. 17, no. 1, pp. 70 – 76, 2020, [Online]. Available: http://journals.ums.ac.id/index.php/pharmacon
[14] L. Vanny Leono and L. Yulia Budiarti, “PERBANDINGAN AKTIVITAS DAYA
HAMBAT  SEDIAAN  TUNGGAL  DENGAN  KOMBINASI  INFUS  Phyllanthus niruri DAN Peperomia pellucida TERHADAP Staphylococcus aureus,” pp. 75– 82.
[15] R.  L.  Vifta  and  Y.  D.  Advistasari,  “Skrining  Fitokimia,  Karakterisasi,  dan Penentuan  Kadar  Flavonoid  Total  Ekstrak  dan  Fraksi-Fraksi  Buah  Parijoto (Medinilla  speciosa  B.)  Pytochemical  Screening,  Characterization,  and Determination  of  Total  Flavonoids  Extracts  and  Fractions  of  Parijoto  Fruit (Medinilla speciosa B.),” Pros. Semin. Nas. Unimus , vol. 1, pp. 8 – 14, 2018, [Online]. Available:
https://prosiding.unimus.ac.id/index.php/semnas/article/view/19/116
[16] S.  Chairunnisa, N.  M.  Wartini, and  L.  Suhendra, “Pengaruh  Suhu  dan  Waktu Maserasi terhadap Karakteristik Ekstrak Daun Bidara (Ziziphus mauritiana L.) sebagai Sumber Saponin,” J. Rekayasa Dan Manaj. Agroindustri , vol. 7, no. 4, p. 551, 2019, doi: 10.24843/jrma.2019.v07.i04.p07.
[17] P.  Y.  Pratiwi,  N.  Atikah,  F.  Nurhaeni,  and  U.  nurul  Salamah,  “Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Herba Suruhan ( Peperomia pellucida ( L .) H . B . K ) dengan Metode DPPH,” Univ. Res. Colloqium , pp. 447 – 454, 2021.
[18] S. CHOPIPAH and S. S. SOLIHAT, “Aktivitas Antioksidan Senyawa Flavonoid pada Daun Benalu, Katuk, Johar, dan Kajajahi: Review,” Trop. Biosci. J. Biol. Sci. , vol. 1, no. 2, pp. 19 – 26, 2021, doi: 10.32678/tropicalbiosci.v1i2.5247.
[19] R. D. Pangesti, E. Cahyono, and E. Kusumo, “Indonesian Journal of Chemical Science  Perbandingan  Daya  Antibakteri  Ekstrak  dan  Minyak  Piper  betle  L  . terhadap Bakteri Streptococcus mutans,” Indones. J. Chem. Sci. , vol. 6, no. 3, pp. 291 – 299, 2017.
[20] O. Pramiastuti, D. I. K. Solikhati, and A. Suryani, “Aktivitas antioksidan Fraksi Umbi Bawang Dayak (Eleutherine bulbosa (Mill.) Urb) Dengan Metode DPPH (1,1-difenil-  2- pikrilhidrazil)  Antiokxidant,” J.  Wiyata ,  vol.  8,  no.  1,  pp.  55 – 66,
2021.
[21] A.  R.  Affandi,  A.  S.  Nugroho,  U.  Hafidz,  A.  Hasbullah,  and  D.  D.  Lestari, “Karakterisasi nilai IC 50 dan kadar kurkumin pada tablet effercvescent ekstrak kunyit  yang  diperkaya  Vitamin  C,”  vol.  17,  no.  2,  pp.  250– 256,  2023,  doi: 10.21107/agrointek.v17i2.13040.
[22] K.  Nastiti,  Noval,  and  D.  Kurniawati,  “Uji  Aktivitas  Antioksidan  Kombinasi Infusa  (Actinuscirpus  Grossus)  dan  Kulit  Jeruk  nipis  (Citrus  Aurantifolia),” J. Surya Med. , vol. 7, pp. 115 – 122, 2021.