January – March, 2023
Aceh Nutrition Journal Original Article Pages:  129 - 138 p-issn 2527-3310; e-issn 2548-5741
Pengaruh pemberian ekstrak bekatul beras hitam (Oryza sativa L. indica) terhadap kadar MDA, SOD dan trigliserida pada tikus diabetes mellitus tipe 2 Effect of black rice bran extract (Oryza sativa L. indica) on MDA, SOD, and triglyceride levels in mice with type 2 diabetes mellitus
Monikasari 1* , Nyoman Suci Widyastiti 2 , Endang Mahati 3 , Ahmad Syauqy 4 , Ahmad Ni’Matullah Al -Baarri 5
1 Departemen Ilmu Gizi, Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia.
E-mail: monikasari2104@gmail.com 2 Patologi Klinik, Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia. E-mail: nyoman.suci@gmail.com 3 Farmasi, Fakultas Kedokteran,
Universitas Diponegoro, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia.
E-mail: endang.mahati@gmail.com 4 Program Studi Ilmu Gizi, Departemen Ilmu Gizi, Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia. E-mail: syauqy@lecturer.undip.ac.id 5 Teknologi Pangan, Fakultas Peternakan dan Pertanian, Universitas Diponegoro, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia. E-mail: albari@lecturer.undip.ac.id
*Correspondence Author: Departemen Ilmu Gizi, Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro.  Jalan Prof.  H.  Soedarto,  SH,  Tembalang,  Kota
Semarang, Jawa Tengah 50275, Indonesia. E-mail: monikasari2104@gmail.com
© The Author(s). 2023 Open Access This article has been distributed under the terms of the License Internasional Creative Commons Attribution 4.0

## Abstract
In type 2 diabetes mellitus, the pancreas can produce the hormone insulin, but the body has difficulty using it. The study aimed to prove the effect of black rice  bran extract on MDA, SOD,  and triglyceride in type 2 Diabetic Mellitus  rats.  The  method  is  quasi-experimental  with  a  pre-posttest randomized control group design in 2021. The intervention was given for 21 days to 42 male Wistar rats. MDA examination using the TBARs method, SOD  examination  using  a  UV-Visible  spectrophotometer.  Triglyceride examination using a spectrophotometer. Statistical analysis used Paired T- Test  or  Wilcoxon  test  and  One-Way  ANOVA  or  Kruskal  Wallis  test. Descriptive research findings show that the intervention of black rice bran extract at a dose of 60 mg/200g reduced MDA in rats to 2,21 mmol/ml and triglycerides  to  85,17  mg/dL.  In  addition,  it  can  increase  SOD  to  69,67 units/ml. Almost the same as the intervention of metformin 9 mg/200 g body weight. However, statistically, no significant difference exists in the interventions  carried  out  (p>  0,05).  The  study  concluded  a  decrease  in MDA,  SOD,  and  triglyceride  in  rats,  given  the  black  rice  bran  extract intervention.
Keywords: Black rice bran extract, MDA, SOD, triglyceride

## Abstrak
Diabetes mellitus tipe 2 organ pankreas dapat memproduksi hormon insulin, namun  tubuh  mengalami  kesulitan  untuk  menggunakannya.  Penelitian bertujuan  untuk  mengukur  pengaruh  pemberian  ekstrak  bekatul  beras hitam  mengandung  banyak  antosianin  yang  berpengaruh  terhadap  MDA, SOD, dan trigliserida pada tikus diabetes mellitus tipe 2. Metode penelitian quasi  experimental dengan pre-post  test  randomixed  control  group  design . Intervensi  dilakukan  di  Laboratorium  Pusat  Studi  Pangan  dan  Gizi Universitas  Gadjah  Mada,  pada  bulan  Maret-Mei  2021  selama  21  hari terhadap 42 ekor tikus wistar. MDA diuji menggunakan metode TBARs, SOD menggunakan  spektrofotometer  UV-Visible  dan  trigliserida  menggunakan spektofotometer.  Analisis  statistik  menggunakan  uji Paired  T-Test atau Wilcoxon, dan uji One-Way  ANOVA atau Kruskal Wallis pada CI:95%.  Hasil penelitian telah menunjukkan intervensi ekstrak bekatul beras hitam dosis 60  mg/200  g  berat  badan  (BB)  dapat  menurukan  MDA  tikus  dari  9,82 mmol/ml menjadi 2,21 mmol/ml, menigkatkan SOD tikus dari 23,49 unit/ml menjadi  69,67  unit/ml  (p=  1,000)  dan  menurukan  trigliserida  tikus  dari 147,16  mg/dL  menjadi  85,17  mg/dL,  hampir  sama  dengan  intervensi metformin  9  mg/200  g  (p>0,05).  Kesimpulan,  terdapat  penurunan  MDA, peningkatan  SOD  dan  penurunan  trigliserida  pada  tikus  yang  diberikan intervensi ekstrak bekatul beras hitam.
Kata Kunci: Beras hitam, ekstrak bekatul, MDA, SOD, trigliserida
Article History: Received:  November  15,  2021;  Revised: September  16  through  October  06,  2022; Accepted:  October  24,  2022;  Published: March 2 5 , 2023.
Publisher:

## 130 Pengaruh pemberian ekstrak bekatul beras hitam … Monikasari et al.

## Pendahuluan
Diabetes mellitus merupakan salah satu penyakit kronis yang terjadi karena organ pankreas tidak dapat menghasilkan hormon insulin yang cukup atau  ketika  tubuh  tidak  dapat  secara  efektif menggunakan  hormon  insulin  yang  diproduksi. Pada  diabetes  mellitus  tipe  2  organ  pankreas dapat  memproduksi  hormon  insulin,  namun tubuh mengalami kesulitan untuk menggunakannya  (Okur  et  al,  2017).  Diabetes mellitus tipe 2 ditandai dengan resistensi insulin dan  kadar  glukosa  darah  diatas  normal  atau hiperglikemia.  Kondisi  hiperglikemia  yang terjadi pada diabetes mellitus tipe 2 berpengaruh terhadap  endotel  pembuluh  darah  akibat  dari adanya  proses  auto  oksidasi  glukosa  dalam bentuk radikal bebas (Deepthi B et al, 2018).
Akumulasi radikal bebas yang terjadi dapat mengakibatkan  stres  oksidatif  yang  kemudian akan  mempengaruhi  kadar  malondialdehid (MDA),  hal  ini  dikarenakan  MDA  merupakan salah satu biomarker stres oksidatif (Verma et al., 2019).  Meningkatnya  stres  oksidatif  pada individu yang mengalami diabetes mellitus tipe 2 menghasilkan reactive oxygen species ( ROS ) yang berlebihan  seperti  superoksida,  hidroksil  dan hidrogen  peroksida.  Adanya  stres  oksidatif mengakibatkan penurunan superokside dismutase  (SOD)  yang  merupakan  enzim detokfikasi pertama dan antioksidan paling kuat dalam sel. Penurunan SOD terjadi karena banyak digunakan  untuk  menanggulangi  tingginya  ROS (Ighodaro & Akinloye, 2018). Pada individu yang mengalami  diabetes  mellitus  tipe  2  terjadi kelainan  lipid  darah.  Kelainan  lipid  ini  terjadi karena  resistensi  insulin  mengganggu  lipolisis trigliserida  yang  dilakukan  oleh  enzim  lipase. Efek  dari  terganggunya  lipolisis  trigliserida mengakibatkan naiknya kadar lipid dalam darah (Nurhidajah et al., 2019).
Pemberian  antioksidan  merupakan  salah satu  cara  untuk  menekan  produksi  ROS  dan meningkatkan  kemampuan  enzim  pertahanan terhadap  radikal  bebas  untuk  mencegah terjadinya stres oksidatif. Flavonoid merupakan jenis  antioksidan  eksogen  yang  memperkuat pertahanan  antioksidan  tubuh  dengan  cara membentuk komponen komplementer. Flavonoid  banyak  terkandung  dalam  berbagai jenis  bahan  makanan  memberikan  efek  yang dapat  bekerja  sama  dengan  tubuh  ataupun sebagai  tambahan  untuk  menurunkan  risiko
penyakit  yang  berkaitan  dengan  stres  oksidatif seperti diabetes mellitus tipe 2 (Fang et al., 2019).
Antosianin  merupakan  pigmen  larut  air yang  paling  penting  dari  kelompok  flavonoid. Antosianin yang terdapat dalam makanan dapat mengurangi  komplikasi  yang  terjadi  pada diabetes  mellitus  tipe  2  melalui  penangkalan radikal bebas. Antosianin terutama jenis sianidin 3 – glukosida  menunjukkan  aktivitas  antioksidan yang  dapat  mengambil  radikal  bebas  sehingga menurunkan  stres  oksidatif  (Tan  et  al.,  2019). Beras  hitam  merupakan  sumber  pangan  yang banyak  dikonsumsi  oleh  masyarakat  dapat membantu  memperbaiki  komplikasi  dari penyakit diabetes mellitus tipe 2 karena banyak mengandung antosianin (Cruz et al., 2021).
Pada penelitian sebelumnya menunjukkan pengaruh pemberian antioksidan yang terkandung  dalam  beras  hitam,  kacang  merah dan  daun  kelor  (betamelor)  pada  hewan  coba selama 28 hari dapat menurunkan kadar glukosa darah dari 122,69 mg/dL menjadi 97,70  mg/dL dan  123,91  mg/dL  menjadi  113,28  mg/dL dengan  pemberian  pakan  betamelor  sebanyak 80%  dari  5%  berat  badan  (Utama  et  al.,  2021). Penelitian lainnya yang menggunakan Caralluma europaea ,  yang  merupakan  tanaman  obat tradisional untuk mengobati diabetes mellitus di Maroko. Pemberian Caralluma europaea sebanyak 60 mg/kg BB dapat menurunkan kadar glukosa darah pada tikus yang diinduksi aloksan.
Caralluma europaea memiliki efek antihiperglikemik  dari  kandungan  senyawa flavonoid  yang  dapat  bereaksi  sendiri  atau sinergis untuk menghilangkan radikal bebas dari efek  pemberian  aloksan  (Ouassou  et  al.,  2021). Penelitian  lain  yang  juga  menggunakan  tikus diabetes mellitus tipe 2 dilakukan selama 17 hari yang  diberi  perlakuan  bekatul  beras  hitam, mendapatkan  hasil  menurunkan  glukosa  darah (Chaiyasut et al., 2017).
Bekatul  merupakan  produk  sampingan dari proses penggilingan sereal, yang terdiri dari perikap, aleuron dan sub aleuron. Bekatul banyak mengandung  zat  gizi  seperti  protein,  lemak, vitamin, mineral dan kaya akan sumber senyawa fitokimia.  Bekatul  beras  hitam  paling  banyak mengandung  antosianin  jenis  sianidin  3- glukosida.  Antosianin  pada  bekatul  beras hitam lebih  tinggi  dibandingkan  pada  bekatul  beras putih.  Sianidin  3-glukosida  memiliki  aktivitas antioksidan  sehingga  dapat  mengambil  radikal bebas  pada  kondisi  stres  oksidatif  yang
Aceh. Nutri. J. Vol: 8, No: 1, 2023
kemudian akan menurunkan kadar MDA. Selain dapat  menurunkan  kadar  MDA,  aktivitas antioksidan  juga  dapat  meningkatkan  mediator antiinflamasi  seperti  SOD  (Mingyai  et  al.,  2017; Tantipaiboonwong et al., 2017). Antosianin juga memiliki kemampuan untuk dapat mempengaruhi  laju  aktivitas  enzim  lipase  yang berperan dalam metabolisme lemak
(Tantipaiboonwong  et  al.,  2017).  Tujuan penelitian  ini  adalah  untuk  menganalisis pengaruh pemberian ekstrak bekatul beras hitam berpengaruh  terhadap  kadar  MDA,  SOD  dan trigliserida pada tikus diabetes mellitus tipe 2.

## Metode
Jenis  penelitian  yang  digunakan  adalah quasi exsperimental dengan rancangan pre - post tes randomixed  control  group  design. Penelitian dan  pengumpulan  data  mulai  dilakukan Maret-Mei  2021  di  Laboratorium  Pusat  Studi Pangan  dan  Gizi  (PSPG)  Universitas  Gadjah Mada (UGM), Yogyakarta.
Pembuatan  ekstrak  bekatul  beras  hitam dilakukan  di  Laboratorium  Chemix-Pratama, Daerah Istimewa Yogyakarta, pengentalan ekstrak dilakukan  di  Laboratorium  Kimia,  Pusat  Studi Pangan  dan  Gizi  (PSPG),  Pusat  Antar  Universitas (PAU), Universitas Gadjah Mada (UGM) Yogyakarta dan  analisis  kadar  MDA,  SOD,  dan  trigliserida dilakukan  di  Laboratorium  PSPG,  PAU,  UGM, Yogyakarta.  Subjek  yang  digunakan  penelitian adalah  tikus  Wistar  dengan  jenis  kelamin  jantan berumur 8 minggu, kondisi sehat, berat badan tikus 150-200  g,  kadar  glukosa  darah  puasa  setelah diinduksi Streptozotin (STZ)+Nikotinamide  (NA) >250 mg/dL, kriteria eksklusi tikus yaitu tikus mati, berat  badan  mengalami  penurunan  >10%  saat penelitian, tikus tidak mau makan atau lemas saat penelitian.  Penentuan  besar  sampel  disesuaikan dengan kriteria Wold Health Organization, dimana setiap  kelompok  perlakuan  terdapat  minimal empat  ekor  tikus.  Untuk  mengantisipasi  adanya drop  out ,  maka  jumlah  sampel  yang  digunakan menggunakan  rumus  sebagai  berikut  (Arifin  & Zahiruddin, 2017):
n’ = n/(1 -f)
Keterangan: n’ : Jumlah sampel yang direncanakan n   : Jumlah sampel yang dihitung f : Perkiraan proporsi drop out (40%)
Jumlah sampel yang dihitung berdasarkan kriteria  WHO  adalah  4,  dengan  perkiraan proporsi drop out (40%), maka:
n’ : n/(1-f)
n’ : 4/(1-40%)
n’ : 4/0,6 n’ : 6,67 ≈ 7
Hasil  perhitungan  menunjukkan  jumlah sampel  yang  digunakan  pada  setiap  kelompok sebanyak  7  sampel.  Terdapat  6  kelompok perlakuan,  maka  jumlah  total  sampel  yang digunakan adalah 42 ekor tikus, dengan kriteria inklusi yaitu tikus putih Wistar jantan, berumur 8 minggu,  berat  tikus  150-200  g,  kadar  glukosa darah  puasa  setelah  diinduksi  STZ+NA  >250 mg/dL,  kemudian  dikelompokkan  menjadi  6 kelompok  yang  dijelaskan  melalui  Tabel  1. Variabel  bebas  penelitian  yaitu  pemberian ekstrak  bekatul  beras  hitam,  variabel  terikat yaitu kadar MDA, SOD dan trigliserida. Variabel terkontrol yaitu galur tikus, umur, jenis kelamin, kandang, pakan, dan berat badan hewan coba.
Tabel 1. Kelompok tikus perlakuan
Kelompok Tikus Perlakuan Normal (N) Pakan  standar  +  minum ad libithum Kontrol Negatif
(K - ) Pakan tinggi lemak + minum ad libithum Kontrol Positif
(K + ) Pakan tinggi lemak + minim ad libithum + metformin 9 mg/kg
BB Perlakuan 1 (P1) Pakan tinggi lemak + minum ad libithum +  ekstrak  bekatul beras hitam 15 mg/200 gr BB Perlakuan (P2) Pakan tinggi lemak + minum ad libithum +  ekstrak  bekatul beras hitam 30 mg/200 gr BB
Perlakuan (P3) Pakan tinggi lemak + minum ad libithum +  ekstrak  bekatul beras hitam 60 mg/200 kg BB
Dosis intervensi berdasarkan hasil penelitian  sebelumnya  yaiitu  15,  30  dan  60 mg/200  g  BB/hari,  dimana  pemberian  ekstrak bekatul  beras  hitam  sebanyak  200  mg/kg  BB signifikan menurunkan kadar glukosa darah dan kadar  insulin  pada  tikus  diabetes  mellitus  tipe (Sari & Wahyuni, 2018).
Saat  perlakuan,  tikus  kelompok  N diberikan pakan standar, kelompok K - (Kontrol Negatif)  diberikan  pakan  tinggi  lemak,  K + (Kontrol  Positif)  diberikan  pakan  tinggi  lemak
132 Pengaruh pemberian ekstrak bekatul beras hitam … Monikasari et al. dan metformin 9 mg/200 g BB, P1 (Perlakuan 1) diberikan pakan tinggi lemak dan ekstrak bekatul beras  hitam  15  mg/200  g  BB,  P2  (Perlakuan  2) diberikan pakan tinggi lemak dan ekstrak bekatul beras hitam 30 mg/200 g BB, dan P3 (Perlakuan 3)  diberikan  pakan  tinggi  lemak  dan  ekstrak bekatul beras hitam 60 mg/200 g BB.
Penelitian  dimulai  dengan  pembuatan ekstrak bekatul beras hitam. Bubuk bekatul beras hitam  dimaserasi  sebanyak  dua  kali  dengan menggunakan  pelarut  (Etanol:DCl  =  85:15) dengan  rasio  10:1  (v:w)  selama  48  jam  dan sesekali  dikocok.  Dilanjutkan  dengan  proses penguapan filtrat dengan menggunakan vaccum rotary  evaporator pada  suhu  70 0 C  untuk mendapatkan ekstrak kental.
Tikus  42  ekor  dilakukan  aklimatisasi selama  7  hari  dengan  diberikan  pakan  standar dan  minum ad  libithum agar  tikus  beradaptasi dengan  kondisi  lingkungan  selama  penelitian. Setelah dilakukan aklimatisasi tikus dirandomisasi  menjadi  6  kelompok.  Setelah dirandomisasi tikus kelompok diabetes mellitus tipe 2 diberikan High Fat Diet (HFD) selama 14 hari, kemudian tikus diinjeksi STZ 45 mg/kg BB dan NA 110 mg/kg BB. Kemudian setelah 3 hari tikus dipuaskaan  selama  8-10 jam dan diambil darah sebanyak 2 cc melalui plexus retroorbitalis untuk  pengukuran  kadar  glukosa  darah  puasa, MDA,  SOD  dan  trigliserida pretest. Tikus dinyatakan mengalami diabetes mellitus tipe  2 pasca  induksi  apabila  memiliki  kadar  glukosa darah  puasa  >250  mg/dL.  Setelah  tikus dinyatakan mengalami diabetes mellitus tipe 2, kemudian diberikan perlakuan ekstrak  bekatul beras  hitam  selama  28  hari  sebanyak  21  ekor tikus (P1, P2 dan P3) tikus diberikan perlakuan sesuai dosis yaitu masing-masing 15 mg/200 gr BB, 30 mg/200 gr BB, 60 mg/gr BB. Penggunaan ekstrak bekatul beras hitam sebagai intervensi. Ekstrak bekatul beras hitam digunakan sebagai intervensi  karena  memiliki  kadar  antosianin tinggi  dan  merupakan  bahan  makanan  yang mudah didapatkan di Indonesia yang termasuk dalam  lima  negara  produsen  beras  terbesar. Intervensi  akan  dilakukan  untuk  mengetahui dosis  yang  paling  efektif  terhadap  kadar  MDA, SOD dan trigliserida pada tikus diabetes mellitus tipe  2  akibat  dari  pemberian  diet  tinggi  lemak dan  induksi  STZ+NA.  Penelitian  dilakukan terhadap  tikus  karena  memiliki  sifat-sifat genetik yang mirip dengan manusia (Diaz et al., 2019).
Data  yang  dikumpulkan  meliputi  berat badan yang diukur setiap 7 hari sekali dari awal penelitian  hingga  akhir  penelitian.  Setelah  28 hari intervensi dilakukan analisis MDA, SOD dan trigliserida post-test. MDA diukur menggunakan metode  TBA,  SOD  diukur  menggunakan spektrofotometer,  dan  trigliserida  diukur menggunakan metode GPO-PAP.
Analisis  data  yang  dilakukan  melalui  tiga tahap  yaitu  dari  data  normalitas  data menggunakan Shapiro Wilk. Kadar MDA, SOD dan trigliserida  diuji  menggunakan dependent  t-test apabila  data  berdistribusi  normal  dan wilcoxon apabila  data  berdistribusi  tidak  normal. Perbedaan kadar MDA, SOD dan trigliserida pre- test dan post-test diuji  menggunakan Paired  T- Test. Kadar  MDA,  SOD  dan  trigliserida  antar kelompok  perlakuan  uji  menggunakan One-way ANOVA dilanjutkan dengan uji Kruskal-Wallis . Penelitian  telah  memperoleh ethical clearance dari Komisi Etik Penelitian Kesehatan (KEPK) Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro Semarang dengan nomor 17/EC/H/FK-UNDIP/II/2021.

## Hasil dan Pembahasan
Hasil penelitian (Tabel 2), menunjukkan perubahan berat badan tikus pada keenam kelompok. Terdapat perbedaan  yang  signifikan  antara  berat  badan sebelum  dan  sesudah  intervensi  pada  semua kelompok (p<0,05). Penurunan berat badan sebesar 21,00  g  terjadi  pada  kelompok  K - .  Terdapat perbedaan  perbahan  berat  badan  yang  signifikan pada  kelompok  K + ,  P1,  P2  dan  P3  dibandingan dengan  kelompok  K - .  Terdapat  perbedaan  berat badan  antar  kelompok  sesudah  intervensi.  Berat badan setelah intervensi pada kelompok K + , P1, P2 dan P3 lebih tinggi dan berbeda signifikan dengan kelompok  K - (p<0,05).  Perbaikan  berat  bada  pada kelompok  intervensi  ekstrak  bekaul  beras  hitam (P1,  P2,  dan  P3)  berbeda  signifkan  dibadingan dengan kelompok K + (p<0,05). Komposisi HFD yang diberikan terdiri dari pakan standar Comfeed II 80%, lemak minyak babi 20%, dan kolesterol 1,5% dari keseluruhan berat pakan.  Pakan  tinggi  lemak  mengandung  kalori yang  tinggi  berasal  dari  tingginya  komposisi lemak  dibandingkan  zat  gizi  lainnya.  Konsumsi pakan tinggi lemak yang tidak diimbangi dengan aktivitas  fisik  dapat  mengakibatkan  peningkatan berat badan tikus. Pemberian pakan tinggi lemak
Aceh. Nutri. J. Vol: 8, No: 1, 2023
pada tikus dapat menyebabkan peningkatan berat badan yang juga akan mengakibatkan peningkatan lemak pada tubuh, selain  itu terjadi juga  peningkatan  risiko  diabetes  mellitus  tipe  2. Resistensi  insulin  yang  merupakan  ciri  penting
dari penyakit diabetes mellitus tipe 2. Induksi STZ dapat  menyebabkan  masalah  kesehatan  seperti gangguan  sekresi  insulin  yang  dikemudian  hari dapat  menjadi  penyakit  diabetes  mellitus  tipe  2 (Cruz et al., 2021).

## Tabel 2. Berat badan tikus sebelum dan sesudah intervensi ekstrak bekatul beras hitam
Berat Badan (BB) Kelompok Tikus (Mean±SD) Normal Kontrol- Kontrol + Perlakuan 1  Perlakuan 2  Perlakuan 3  Nilai p 2 BB Sebelum Intervensi (g) 187,0±2,76 192,0±4,00 192,9±3,67 191,1±5,34 191,3±4,39 193,8±3,06 0,060 BB Setelah Intervensi (g) 205,4±3,74 171,0±4,00 211,0±3,56 201,4±5,59 207,3±4,86 209,8±3,49 0,000* Selisih BB (g) 18,4±1,27 -21,0±0,82 18,1±0,69 10,3±0,76 16,0±0,82 16,0±0,89 0,000* Nilai p 1 0,000* 0,000* 0,000* 0,000* 0,000* 0,000* p 1 = Paired T-Test; p 2 = One-Way ANOVA; *= p <0,05 (bermakna)
Pengembangan  hewan  coba  tikus  yang diberikan  pakan  tinggi  lemak  dan  diinduksi  STZ sangat mirip dengan riwayat alami dari kejadian penyakit  diabetes  mellitus  tipe  2,  mulai  dari resistensi  insulin  sampai  dengan  disfungsi  sel  β. Pengkondisian  hewan  coba  dengan  metode  ini memiliki  keunggulan seperti  lebih murah,  bahan dan alat yang mudah diakses, serta praktis apabila akan  dilakukan  pengujian  berbagai  senyawa untuk pengobatan dari penyakit diabetes mellitus tipe 2 (Ghasemzadeh et al., 2018).

## Kadar Malondialdehide (MDA)
Kadar  MDA  darah  dianalisis  sebanyak  dua  kali yaitu setelah pemberian HFD , injeksi STZ-NA dan
setelah  intervensi.  Terdapat  perbedaan  yang signifikan  pada  rerata  kadar  MDA  sebelum  dan sesudah intervensi pada masing-masing kelompok  (p<0,05).  Peningkatan  kadar  MDA terjadi  pada  kelompok  N  dan  kelompok  K - yang diberikan  diet  standar  dan  tidak  diberikan intervensi  apapun.  Terdapat  hubungan  yang signifikan kadar MDA setelah intervensi ekstrak bekatul  beras  hitam  pada  kelompok  K + ,  P1,  P2 dan  P3  dibandingkan  dengan  kelompok  K - . Intervensi ekstrak bekatul beras hitam dosis 60 mg/200  g  berat  badan  yang  diberikan  dapat menurunkan kadar MDA tikus hampir menyamai apabila dibandingkan dengan intervensi dengan intervensi 9 mg/200 gr BB (p<0,05).

## Tabel 3. Kadar MDA sebelum dan sesudah intervensi ekstrak bekatul beras hitam
Kelompok Tikus Intervensi Kadar MDA (mmol/ml) Sebelum (Mean ± SD) Setelah (Mean ± SD) Nilai p Selisih Rata-rata (Lower – Upper) Normal 1,63 ± 0,08 1,72 ± 0,07 0,000* 0,09 (0,06 – 0,14) Kontrol - 9,89 ± 0,09 9,96 ± 0,08 0,000* 0,07 (0,03 – 0,10) Kontrol + 9,80 ± 0,14 1,97 ± 0,04 0,000* 7,81 (7,65 – 8,07) Perlakuan1 9,84 ± 0,20 3,81 ± 0,17 0,000* 5,90 (5,74 – 6,52) Perlakuan2 9,86 ± 0,12 3,02 ± 0,86 0,000* 6,83 (6,67 – 7,03) Perlakuan3 9,82 ± 0,18 2,21 ± 0,15 0,000* 7,63 (7,18 – 7,91)
*= p <0,05 (bermakna)
Penelitian  lainnya  juga  membuktikan bahwa  pemberian  ekstrak  jagung  ungu  yang mengandung  antosianin  mengurangi  kerusakan membran melalui proses penurunan peroksidasi lipid.  Efek  dari  pemberian  ekstrak  jagung  ungu secara bersamaan dengan pemberian HFD dapat menurunkan produksi MDA plasma sebesar 33- 39%. Perubahan yang mencolok juga terjadi pada hasil  uji  jaringan  hati. HFD menyebabkan peningkatan  produksi  MDA  hati  sebesar  300%,
namun  keadaan  ini  dapat  diperbaiki  dengan pemberian ekstrak jagung ungu, dengan terbukti dapat  menurunkan  MDA  sebesar  12-65%  Putri, Lestari,  &  Gofur,  2020).  Pada  penelitian  lainnya yang  menggunakan  jeli  ubi  ungu  A3  terjadi penurunan kadar MDA setelah pemberian selama 14 hari terjadi penurunan kadar MDA sebanyak - 136,78  ±  3,94  mg/dL.  Ubi  ungu  mengandung tingkat  antioksidan  yang  tinggi  dan  dapat menurunkan kadar  glukosa darah,  menurunkan
134 Pengaruh pemberian ekstrak bekatul beras hitam …
Monikasari et al.
MDA,  dan  meningkatkan  oksidan  total  darah secara keseluruhan yang dapat memperbaiki sel β  pankreas.  Antosianin  yang  terkandung  dalam ubi  ungu  dapat  berperan  sebagai  antioksidan dengan  cara  mengurangi  kadar  MDA  sebagai salah satu indikator stres oksidatif, meningkatkan  SOD,  dapat  bertindak  sebagai katalase  dan  enzim  antioksidan  pada  keadaan diabetes mellitus (Guo et al., 2018).

## Kadar Superokside Dismutase (SOD)
Kadar  SOD  diukur  sebelum  dan  sesudah intervensi ekstrak bekatul beras hitam. Terdapat
perbedaan  yang  bermakna  pada  rerata  kadar SOD  sebelum  dan  sesudah  perlakuan  pada masing-masing  kelompok  (p<0,05).  Tidak terdapat  perbedaan  yang  signifikan  perubahan kadar  SOD  kelompok  P3  dengan  kelompok  K + dengan nilai p= 0,94, yang menunjukkan bahwa kenaikan kadar SOD yang terjadi pada kelompok tikus  diabetes  mellitus  tipe  2  yang  diberikan intervensi ekstrak bekatul beras hitam sebanyak 60  mg/200  g  berat  badan  hampir  menyamai kenaikan kadar SOD tikus diabetes mellitus tipe 2 yang diberikan intervensi metformin 9 mg/200 g berat badan (Tabel 4).
Tabel 4. Kadar SOD sebelum dan sesudah intervensi ekstrak bekatul beras hitam
Kelompok Tikus Intervensi Kadar SOD (unit/ml) Sebelum (Mean ± SD) Setelah (Mean ± SD) Nilai p Selisih Rata-rata (Lower – Upper) Normal 81,97 ± 3,54 78,69 ± 3,54 0,020* 3,28 (1,64 – 6,56) Kontrol - 26,69 ± 4,61 23,41 ± 4,98 0,040* 3,28 (1,64 – 6,56) Kontrol + 21,07 ± 4,77 67,21 ± 3,54 0,000* 47,54 (34,43 – 52,46) Perlakuan1 22,95 ± 6,34 47,77 ± 3,95 0,000* 22,95 (18,03 – 39,34) Perlakuan2 24,12 ± 5,33 61,82 ± 4,40 0,000* 39,34 (22,95 – 45,91) Perlakuan3 23,49 ± 4,59 69,67 ± 3,06 0,000* 48,36 (37,70 – 54,10)
*= p <0,05 (bermakna)
Peningkatan kadar  SOD  yang  terjadi  pada penelitian  ini  sama  dengan  hasil  penelitian sebelumnya  yang  memberikan  perlakuan  STZ sebanyak  25  mg/kg  dan HFD ,  membuktikan bahwa  konsumsi  makanan  tinggi  lemak  dapat meningkatkan kadar trigliserida darah dan stres oksidatif yang ditandai dengan penurunan enzim antioksidan  dan  peningkatan  produk  oksidasi. Asam lemak secara langsung dapat mempengaruhi  peningkatan  ROS  melalui  reaksi peroksidasi dan melalui produksi di mitokondria. HFD menyebabkan  penurunan  SOD  dan meningkatkan  peroksidasi  lipid,  dimana  hal  ini menunjukkan  bahwa  adanya  kondisi  stres oksidatif. Stres oksidatif terlibat dalam penyakit diabetes mellitus tipe 2.
Konsumsi lemak yang tinggi menyebabkan peningkatan  kadar  asam  lemak  bebas  dalam plasma  dan  meningkatkan  radikal  bebas  dalam plasma yang merupakan tanda bahwa terjadinya stres  oksidatif.  Peningkatan  asam  lemak  bebas menginduksi produksi ROS dan ROS menyebabkan stres oksidatif yang
mempengaruhi  produksi  sitokin  proinflamasi dari  jaringan  adiposa  dan  menghasilkan resistensi  insulin. HFD menginduksi  disfungsi mitokondria dan selanjutnya dapat menginduksi pembentukan radikal bebas. HFD menyebabkan
kerusakan  pada  sel  dan  tingkat  molekuler, dimana  hal  ini  memicu  stres  oksidatif  dan kemudian  menyebabkan  peroksidasi  lipid. HFD dapat  bertindak  sebagai  penginduksi  stres oksidatif,  karena  secara  signifikan  melemahkan sistem antioksidan enzim hati dan meningkatkan tingkat peroksidasi lipid yang merupakan produk dari  hati  dan  plasma  hati  dan  meningkatkan tingkat peroksidasi lipid yang merupakan produk dari  hati  dan  plasma  (Gofur  et  al.,  2019). Penelitian  lainnya  yang  menggunakan  jagung ungu sebagai intervensinya membuktikan bahwa pemberian  12,5  mg  sianidin  3-glukosida/kg berat  badan  dapat  meningkatkan  SOD, sebagaimana  dibuktikan  dengan  peningkatan yang  tertinggi  pada  aktivitas  SOD  hati,  apabila dibandingkan  dengan  dosis  pemberian  6,25  mg sianidin  3-glukosida  atau  25  mg  sianidin  3- glukosida (Putri et al., 2020).
Selain  itu  terdapat  penelitian  sebelumnya yang menggunakan kedelai hitam dan ubi ungu, kandungan antosianin yang terdapat didalamnya dapat  meningkatkan  enzim  antioksidan  seperti SOD  melalui  proses  kompleks  Nrf2-Keap1. Antosianin  meningkatkan  SOD  dalam  kondisi diabetes  mellitus  tipe  2.  Kedelai  hitam  dan  ubi ungu bertindak secara sinergis dalam menanggapi  kerusakan  intraseluler  yang
Aceh. Nutri. J. Vol: 8, No: 1, 2023
disebabkan oleh ROS melalui peningkatan sinyal Nrf-2 untuk menghasilkan antioksidan (Gofur et al., 2019).

## Kadar Trigliserida
Kadar  trigliserida  darah  diukur  sebelum  dan sesudah intervensi ekstrak bekatul beras hitam. Terdapat  perbedaan  yang  signifikan  kadar trigliserida sebelum dan sesudah intervensi pada masing-masing  kelompok  (p<  0,05).  Penurunan
kadar trigliserida terjadi pada kelompok K + , P1, P2  dan  P3  (p=  0,00).  Sebaliknya,  terdapat peningkatan kadar trigliserida pada kelompok N dan K - . Tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara  kelompok  K + apabila  dibandingkan dengan  kelompok  P3.  Hal  ini  menunjukkan bahwa intervensi ekstrak bekatul beras hitam 60 mg/200  gram  berat  badan  hampir  menyamai intervensi  metformin  9  mg/200  gram  berat badan (p= 0,670).
Tabel 5. Kadar trigliserida sebelum dan sesudah intervensi bekatul beras hitam Kelompok Tikus Intervensi Kadar Trigliserida (mg/dL) Sebelum (Mean ± SD) Setelah (Mean ± SD) Nilai p Selisih Rata-rata (Lower – Upper) Normal 63,24 ± 2,28 65,27 ± 2,16 0,000* 1,76 (1,37 – 3,27) Kontrol - 142,63 ± 3,25 144,58 ± 3,05 0,000* 1,80 (1,33 – 3,14) Kontrol + 144,43 ± 3,18 78,29 ± 1,53 0,000* 65,34 (60,92 – 72,54) Perlakuan1 143,08 ± 2,50 120,48 ± 2,52 0,000* 24,38 (16,71 – 26,04) Perlakuan2 144,66 ± 6,59 93,54 ± 1,87 0,000* 49,36 (42,10 – 61,55) Perlakuan3 147,16 ± 3,44 85,17 ± 2,53 0,000* 62,10 (56,80 – 68,35) *= p <0,05 (bermakna) Penurunan kadar trigliserida pada penelitian ini sama dengan penelitian sebelumnya  yang  menggunakan  ekstrak  air murbei.  Ekstrak  air  murbei  mengandung antosianin  sebanyak  0,5-20%  per  100  g  dapat menurunkan  berat  badan,  massa  lemak  viseral, menurunkan  trigliserida,  kolesterol  total  dan rasio  LDL/HDL.  Ekstrak  air  murbei  mengatur lipogenesis dan lipolisis dalam penelitian hewan coba  yang  diberikan  perlakuan HFD ,  sehingga ekstrak air murbei dianggap sebagai agen terapu tambahan untuk mengelola obesitas.
Pada penelitian yang lainnya suplementasi bubuk blueberry yang  mengandung  antosianin sebanyak 2% per 100 g pada tikus jantan Zucker yang  diberikan  perlakuan HFD selama  90  hari terbukti  dapat  menurunkan  trigliserida,  kadar insulin puasa, HOMA-IR dan massa lemak viseral. Suplementasi blueberry menunjukkan peningkatan PPAR yang terkait dengan jaringan adiposa dan otot rangka, peran pengaturan PPAR terkait  dengan  oksidasi  lemak  dan  penyerapan glukosa.  Penelitian  lainnya  yang  menggunakan jus blueberry dan  murbei  sebagai  intervensi sebanyak 40 mg/kg berat badan atau antosianin murbei  200  mg/kg  selama  12  minggu  secara signifikan  menekan  kenaikan  berat  badan  dan mengurangi  resistensi  insulin  dan  akumulasi lipid  pada  hewan  coba  tikus  yang  diberikan pakan  tinggi  lemak.  Penelitian  lainnya suplementasi  antosianin  murni  sianidin  3-
glukosida  sebanyak  1  g/kg  berat  badan  selama 12  minggu  terbukti  dapat  mencegah  kejadian obesitas  pada  tikus  jenis  KK-Ay.  Tikus  KK-Ay merupakan strain KK diabetes yang dibuat oleh Profesor  Kyoji  Kondo  pada  tahun  1957, persilangan  antara  KK  diabetes  dengan  Ay ( Agouti  Yellow ).  Pemberian  suplementasi antosianin  menunjukkan  penekanan  berat badan,  penurunan  berat  hati  dan  penurunan berat jaringan adiposa viseral. Kadar trigliserida dalam  plasma  dan  hati  berkurang  pada  hewan coba  yang  diberikan  intervensi  sianidin  3- glukosida.  Antosianin  meningkatkan  aktivitas pAMPK dan pACC (Acetyl-coenzyme A carboxylase phosphorylation) dan menekan protein pengikat elemen  pengatur  sterol  1  yang  terkait  dengan sintesis  asam  lemak.  Antosianin  meningkatkan metabolisme  lipid  dan  mengurangi  reaksi inflamasi  pada  tikus  yang  diinduksi HFD (Sivamaruthi et al., 2020) .
Penurunan  kadar  MDA  yang  terjadi  pada penelitian  ini  sama  dengan  hasil  penelitian sebelumnya,  seperti  ekstrak  antosianin  yang diperoleh dari tempe kedelai hitam dan ubi ungu dengan  perbandingan  1:3  terbukti  dapat menurunkan  kadar  MDA  pada  tikus  yang diinduksi STZ dan pemberian HFD (Ghasemzadeh et al., 2018). Hiperglikemia merupakan penanda dari kelainan metabolisme karbohidrat, lipid dan protein. Keadaan hiperglikemia dapat meningkatkan radikal bebas dalam sel dan akan
136 Pengaruh pemberian ekstrak bekatul beras hitam …
Monikasari et al.
mengakibatkan  stres  oksidatif.  Keadaan  stres oksidatif meningkatkan oksidasi glukosa, asam amino dan lipid yang mempengaruhi produksi MDA.  MDA  merupakan  salah  satu  penanda adanya  kerusakan  sel.  Senyawa  antioksidan dapat  mencegah  radikal  bebas.  Salah  satu bahan  makanan  yang  banyak  mengandung antioksidan  adalah  bekatul  beras  hitam. Ekstrak bekatul beras hitam terbuat dari bubuk bekatul  beras  hitam  yang  diekstraksi  menjadi cairan  kental.  Kandungan  antosianin  yang terdapat  pada  ekstrak  bekatul  beras  hitam bekerja  dengan  cara  meningkatkan  kerja reseptor insulin, meningkatkan status antioksidan  dengan  menekan  produksi  MDA. Senyawa  flavonoid  bekerja  dalam  berbagai sistem  seperti  sistem  reproduksi,  antikanker dan mengurangi Age-Rage yang dapat memicu pembentukan ROS. Antosianin dapat mengurangi  aktivitas  ROS  dengan  cara mendonorkan  elektron  ke  radikal  bebas  dari gugus  hidroksil  (-OH)  yang  terikat  dengan cincin fenolik. Elektron akan menstabilkan dan menonaktifkan radikal bebas. Dalam proses ini agen  pereduksi  polifenol  berubah  menjadi aroksil radikal, yang memiliki sifat lebih stabil karena  resonasi  radikal  bebas  yang  telah berkurang,  dimana  hasil  keseluruhannya adalah  penghentian  dari  reaksi  oksidatif  yang berantai (Chayati et al., 2019).
Keterbatasan  pada  penelitian  ini  adalah belum  diketahui  efek  jangka  panjang  dari pemberian  ekstrak  bekatul  beras  hitam  ( Oryza sativa L. indica ) terhadap hipoglikemia.

## Kesimpulan
Bekatul  beras  hitam  yang  diekstrakkan terbukti
menurunkan kadar
MDA,
meningkatkan  kadar  SOD  dan  menurunkan kadar trigliserida pada tikus diabetes mellitus tipe  2.  Intervensi  ekstrak  bekatul  beras hitam dapat menurunkan prevalensi nasional penyakit  tidak  menular  seperti  dislipidemia dan diabetes mellitus tipe 2.
Penelitian ini masih diperlukan penelitian lebih lanjut dengan menggunakan berbagai jenis bekatul beras hitam yang ada di Indonesia. Perlu dilakukan perkembangan uji kandungan zat gizi lain  yang  banyak  terkandung  dalam  ekstrak bekatul  beras  hitam  yang  bermanfaat  untuk kesehatan.

## Ucapan Terima Kasih
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada Bapak/Ibu  dosen  pembimbing  dan  penguji Magister  Ilmu  Gizi,  Universitas  Diponegoro, rekan  tim  penelitian,  tenaga  laboratorium  CV. Chem-Mix  Pratama,  tenaga  laboratorium  PSPG UGM Yogyakarta.

## Daftar Rujukan
Arifin, W. N., & Zahiruddin, W. M. (2017). Sample size calculation  in  animal  studies  using  resource equation approach. The Malaysian Journal of Medical  Sciences :  MJMS , 24 (5),  101 – 105. https://doi.org/10.21315/mjms2017.24.5
.11
Chaiyasut, C., Sivamaruthi, B. S., Pengkumsri, N., Keapai, W., Kesika, P., Saelee, M., Tojing, P., Sirilun,  S.,  Chaiyasut,  K.,  Peerajan,  S.,  &
Lailerd,  N.  (2017).  Germinated  Thai  black rice extract protects experimental diabetic rats  from  oxidative  stress  and  other diabetes-related consequences. Pharmaceuticals , 10 (1), 3. https://doi.org/10.3390/ph10010003 Chayati,  I.,  Marsono,  Y.,  &  Astuti,  M.  (2019). Purple Corn Anthocyanin Extract Improves Oxidative Stress of Rats Fed High Fat Diet via  Superoxide  Dismutase  Mechanism.
International  Journal  of  Science  and Research (IJSR) , 8 (8), 1057 – 1065. https://doi.org/10.21275/ART2020413 Cruz, P. L., Moraes-Silva, I. C., Ribeiro, A. A., Machi, J.  F.,  de  Melo,  M.  D.  T.,  dos  Santos,  F.,  da Silva, M. B., Strunz, C. M. C., Caldini, E. G., & Irigoyen,  M.  C.  (2021).  Nicotinamide attenuates streptozotocin-induced
diabetes  complications  and  increases survival  rate  in  rats:  role  of  autonomic nervous system. BMC Endocrine Disorders ,
21 (1), 1 – 18. https://doi.org/10.1186/s12902-021- 00795-6 Deepthi, B., Sowjanya, K., Lidiya, B., Bhargavi, R. S., & Babu, P. S. (2018). A modern review of diabetes mellitus: An annihilatory metabolic disorder. Journal of In Silico & In Vitro Pharmacology , 3 (1), 1 – 5. https://doi.org/10.21767/2469-
6692.100014
Fang, J. Y., Lin, C. H., Huang, T. H., & Chuang, S. Y.
Aceh. Nutri. J. Vol: 8, No: 1, 2023
(2019).  In  vivo  rodent  models  of  type  2 diabetes  and  their  usefulness  for evaluating flavonoid bioactivity. Nutrients ,
11 (3), 530. https://doi.org/10.3390/nu11030530
Ghasemzadeh, A., Karbalaii, M. T., Jaafar, H. Z. E., &  Rahmat,  A.  (2018).  Phytochemical constituents,  antioxidant  activity,  and antiproliferative  properties  of  black,  red, and  brown  rice  bran. Chemistry  Central Journal , 12 (1), 1 – 13. https://doi.org/10.1186/s13065-018-
0382-9
Gofur, A., Witjoro, A., Ningtiyas, E. W., Setyowati, E., Mukharromah, S. A., Atho’illah, M. F., &
Lestari,  S.  R.  (2019).  The  evaluation  of dietary  black  soybean  and  purple  sweet potato on insulin sensitivity in streptozotocin  -  Induced  diabetic  rats. Pharmacognosy  Journal , 11 (4),  639 – 646. https://doi.org/10.5530/pj.2019.11.102 Guo,  X.  xuan,  Wang,  Y.,  Wang,  K.,  Ji,  B.  ping,  & Zhou,  F.  (2018).  Stability  of  a  type  2 diabetes rat model induced by high-fat diet feeding  with  low-dose  streptozotocin injection. Journal  of  Zhejiang  University: Science B , 19 (7), 559 – 569. https://doi.org/10.1631/jzus.B1700254 Ighodaro, O. M., & Akinloye, O. A. (2018). First line defence antioxidants-superoxide
dismutase  (SOD),  catalase  (CAT)  and glutathione  peroxidase  (GPX):  Their fundamental role in the entire antioxidant defence  grid. Alexandria  Journal  of Medicine , 54 (4), 287 – 293. https://doi.org/10.1016/j.ajme.2017.09.0 01
Mingyai,  S.,  Kettawan,  A.,  Srikaeo,  K.,  & Singanusong,  R.  (2017).  Physicochemical and antioxidant properties of rice bran oils produced from colored rice using different extraction methods. Journal of Oleo Science ,
66 (6), 565 – 572. https://doi.org/10.5650/jos.ess17014
Nurhidajah,  Astuti,  R.,  &  Nurrahman.  (2019). Black rice potential in HDL and LDL profile in sprague dawley rat with high cholesterol diet. IOP  Conference  Series:  Earth  and Environmental  Science , 292 (1),  012019.
https://doi.org/10.1088/1755- 1315/292/1/012019 Okur, M. E., Karantas, I. D., & Siafaka, P. I. (2017). Diabetes mellitus: A review on
pathophysiology,  current  status  of  oral medications and future perspectives. Acta Pharmaceutica  Sciencia , 55 (1),  61 – 82. https://doi.org/10.23893/1307- 2080.APS.0555
Ouassou, H., Bouhrim, M., Bencheikh, N., Addi, M., Hano, C., Mekhfi, H., Ziyyat, A., Legssyer, A., Aziz,  M.,  &  Bnouham,  M.  (2021).  In  vitro antioxidant  properties,  glucose-diffusion effects,  α -amylase  inhibitory  activity,  and antidiabetogenic  effects  of  C.  Europaea extracts in experimental animals. Antioxidants , 10 (11), 1747. https://doi.org/10.3390/antiox10111747 Putri, E. P., Lestari, S. R., & Gofur, A. (2020). The combination of black soybean tempeh and purple sweet potato affect reactive oxygen species  and  malondialdehyde  level  in streptozotocin-induced diabetic rats. Majalah  Obat  Tradisional , 25 (2),  76. https://doi.org/10.22146/mot.51544 Sari, N., & Wahyuni, A. S. (2018). Effect of black rice  bran  extract  (Black  rice  bran)  to decrease  decrease  of  glucose  level  in diabetic  rats. Pharmacon:  Jurnal  Farmasi
Indonesia , 14 (1), 8 – 13. https://doi.org/10.23917/pharmacon.v14 i1.539
Sivamaruthi,  B.  S.,  Kesika,  P.,  &  Chaiyasut,  C. (2020).  The  influence  of  supplementation of  anthocyanins  on  obesity-associated comorbidities:  A  concise  review. Foods ,
9 (6),
1 – 25. https://doi.org/10.3390/foods9060687 Tan,  J.,  Li,  Y.,  Hou,  D.  X.,  &  Wu,  S.  (2019).  The effects  and  mechanisms  of  cyanidin-3- glucoside  and  its  phenolic  metabolites  in maintaining intestinal integrity. Antioxidants , 8 (10), 1 – 16. https://doi.org/10.3390/antiox8100479 Tantipaiboonwong,  P.,  Pintha,  K.,  Chaiwangyen, W., Chewonarin, T., Pangjit, K., Chumphukam,  O.,  Kangwan,  N.,  &  Suttajit,
M.  (2017).  Anti-hyperglycaemic  and  anti- hyperlipidaemic  effects  of  black  and  red rice  in  streptozotocin-induced  diabetic rats. ScienceAsia , 43 (5), 281 – 288. https://doi.org/10.2306/scienceasia1513
-1874.2017.43.281
Utama, L. J., Suryana, S., & Sembiring, A. C. (2021). Effects  of  mixture  powder  of  black  rice (Oryza  sativa  L  indica),  red  beans (Phaseolus vulgaris L), and moringa leaves
138 Pengaruh pemberian ekstrak bekatul beras hitam … Monikasari et al.
(Moringa  oleifera  L)  on  blood  glucose concentration  in  hyperglycemic  Rats. Jurnal  Gizi  Indonesia , 9 (2),  136 – 143. https://doi.org/10.14710/jgi.9.2.136-143
Verma, M. K., Jaiswal, A., Sharma, P., Kumar, P., &
Singh,  A.  N.  (2019).  Oxidative  stress  and biomarker  of  TNF- α,  MDA  and  FRAP  in hypertension. Journal of Medicine and Life , 12 (3), 253 – 259. https://doi.org/10.25122/jml-2019-0031