## Pengaruh Pengusangan Cepat Secara Fisik
Terhadap Penurunan Viabilitas Tetua Benih Padi Hibrida ( Oryza sativa L.)
Effect of Physical Rapid Aging Method for Decreasing of Seed Viability on Parental Lines of Hybrid Rice Seed ( Oryza sativa L.)

## Nelly Fridayanti
Program Studi Agroekoteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Malikussaleh Kampus Cot Teungku Nie, Reuleut, Muara Batu, Aceh Utara 24355, Indonesia Email:
Diterima 5 Juli 2014; Dipublikasi 1 September 2014

## Abstrak
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  metode  pengsangan  cepat  dalam  penurunan  viabilitas benih.  Penurunan  viabilitas  benih  termasuk  persentase  perkecambahan,  indeks  vigor,  potensi  per- tumbuhan  maksimum  dan  daya  simpan  benih.  Viabilitas  benih  diuji  dengan  metode  Antara  Paper  (BP) sedangkan daya simpan benih dilakukan setelah Rapid agent Metode (RAM) pada suhu  410C dan RH> 90% selama 72 jam. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pengusangan cepat secara fisik dapat menurun- kan vaibilitas benih.
Kata kunci: pengusangan cepat, viabilitas, IR58025A,  IR62829A

## Abstract
This  research  aims  to  study  the  rapid  aging  method  on  decreasing  of  seed  viability.  Decreasing  seed viability including germination percentage, vigor index, maximum growth potential and seed storability. Seed viability was tested using Between Paper (BP) method whereas seed storability was done following Rapid Aging Method (RAM) with 410C and RH > 90% treatments for 72 hours. The results showed that the rapid aging physically will decrease seed viability.
Keywords : rapid aging, viability, IR58025A,  IR62829A

## Pendahuluan
Daya  simpan  benih  adalah  kemampuan benih  untuk  mempertahankan  viabilitasnya selama  di  penyimpanan  yang  dinyatakan  dalam satuan  waktu.    Pendugaan  daya  simpan  benih dapat dideteksi secara simulatif dengan pengusangan  cepat  secara  fisik  yaitu  dengan suhu dan kelembaban tinggi.
Faktor-faktor  yang  dapat  mempengaruhi daya  simpan  benih  adalah faktor  genetik  (innate factor),  faktor  lapangan  mulai  dari  pertumbuhan tanaman induk, pembentukan benih, pemanenan, pengolahan, sampai benih  siap disimpan (induced  factor)  dan  kondisi  penyimpanan (enforced  factor)  (Sadjad  et  al.  1984).  Faktor innate  sangat  ditentukan  oleh  gen  yang  diwaris- kan  oleh  tetuanya.  Sebagai  contoh  pengaruh faktor genetik menyebabkan perbedaan
komposisi  kimia  benih  antar  varietas  berbeda ukuran, ketebalan kulit dan warna kulit.
Faktor  induced  meliputi  keadaan  tanaman induk  sewaktu  di  lapang,  pembentukan  benih, cara  panen,  cara  pengolahan  dan  lamanya periode konservasi yang dilewati benih tersebut. Kondisi  tanaman  induk  di  lapang  dipengaruhi oleh  tingkat  kesuburan  lahan  produksi,  keadaan curah  hujan  dan  pengaruh  serangan  hama  dan penyakit.
Faktor enforced adalah  faktor  lingkungan simpan  yang  mencakup  suhu,  kelembaban  nisbi dan biosfir ruang simpan. Pada kelembaban yang tinggi benih akan mengalami kemunduran secara cepat, begitu juga pada suhu ruang simpan yang tinggi.    Kemunduran  benih  dalam  ruang  simpan dapat  diperlambat  jika  suhu  dan  kelembaban ruang  simpan  diturunkan,  bahkan  pada  suhu  di bawah  0 0 C  benih  masih  dapat  hidup  asalkan
kadar  air  benih  yang  disimpan  dalam  keadaan optimum.
Pengusangan  cepat  adalah  metode  yang dapat  digunakan  untuk  memperoleh  beberapa tingkat  viabilitas  benih.  Metode  ini  ditemukan pertama  kali  oleh  Delouche  (1971)  dengan menggunakan  perlakuan  fisik  yaitu  suhu  41  oC dan  RH  sekitar  100%  selama  tiga  sampai  empat hari  dan  dikembangkan  oleh  Baskin  dan McDonald  (Copeland  dan  McDonald,  2001). Metode  tersebut  digunakan  sebagai  metode standar  untuk  pengujian  vigor  benih  kedelai (ISTA,  2007).  Sadjad  (1994)  menemukan metode pengusangan cepat menggunakan senyawa  kimiawi  yaitu  etanol.  Pengusangan cepat mengakibatkan rusaknya dinding sel benih kacang polong yang menjadikan banyak elektrolit  yang  keluar  sehingga  daya  hantar listrik  (DHL)  meningkat  dan  terjadinya  aberasi kromosom oleh reduksi bebas.
Menurut  (Sadjad,  1980)  ada  dua  metode untuk  menduga  daya  simpan  benih  secara  tepat yaitu  secara  fisik  dan  kimiawi.  Metode  peng- usangan baik secara  fisik dan kimiawi merupakan  salah  satu  produk  teknologi  modern yang  telah  digunakan  dalam  bidang  perbenihan, terutama  untuk  menduga  daya  simpan  benih dalam waktu relatif singkat.
Di  dalam  pengusangan  cepat  secara  fisik benih  diberi  perlakuan  temperatur  tinggi    (40  - 50 0 C)  dan  kelembaban  tinggi  (>  90%)  yang memberikan  gambaran  kemampuan  benih  untuk disimpan dalam kurun waktu tertentu.  Lot benih yang  bervigor  tinggi  akan  mengalami  sedikit kemunduran  setelah  diberi  perlakuan  peng- usangan,  sedangkan  lot  benih  yang  bervigor rendah  akan  mengalami  kemunduran  yang sangat  nyata  setelah  pengusangan  (Blance  & Elam, 1989).     Periode pengusangan yang digunakan untuk benih padi adalah dengan suhu 41  0C    dengan  kelembaban  nisbi  >  90% selama 72 jam (Rice Seed Testing Services. http://www.mwseed.com/rice.htm on line 30 Juli 2014).
Umumnya pengusangan ditujukan sebagai metode  untuk  menguji  daya  simpan  benih, namun  menurut (Copeland & McDonald, 1995), pengusangan  dapat  pula  digunakan  sebagai metode uji vigor.
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  seberapa  besar  pengaruh  peng- usangan  cepat  secara  fisik  terhadap  penurunan viabilitas tetua benih padi hibrida.

## Metode Penelitian
Penelitian  dilaksanakan  di  Laboratorium Ilmu  dan  Teknologi  Benih  Fakultas  Pertanian, Institut  Pertanian  Bogor.  Bahan-bahan  yang digunakan  adalah  varietas  tetua  padi  hibrida yang terdiri dari restorer/tetua jantan MTU9992, IR65515,  kertas  merang,  kantong  plastik,  kertas alumunium,  kertas  tissu  dan  kertas  label.  Alat- alat  yang  digunakan  adalah  alat  pengepres substrat  kertas  merang  IPB  75,  germinator  IPB 73-2B,  timbangan  digital,  oven,  inkubator, desikator dan alat-alat tulis.
Viabilitas  benih  diuji  dengan  mengguna- kan  metode  UKDdp  (Uji  Kertas  Digulung didirikan  dalam  plastik).    Peubah  yang  diamati terdiri  dari  :  daya  berkecambah,  indeks  vigor, dan potensi tumbuh maksimum. Pendugaan daya simpan  benih  dilakukan  secara  simulatif  dengan metode  pengusangan  cepat  pada  suhu  tinggi  (± 41 0 C) dan kelembaban tinggi (> 90%) selama 72 jam.

## Indeks Vigor (IV, %)
Indeks  vigor  adalah  vigor  kecepatan tumbuh  yang  dinyatakan  dalam  persen.    Indeks vigor dihitung berdasarkan persentase kecambah normal terhadap total benih yang dikecambahkan pada hitungan pertama (Copeland & McDonald, 1995).
IV=  kecambah normal hitungan I x 100%

##  benih yang ditanam

## Daya Berkecambah (DB, %)
Daya  berkecambah  dihitung  berdasarkan persentase kecambah normal pada akhir pengamatan terhadap total benih yang dikecambahkan.    Pengamatan  dilakukan  pada hari  ke-5  (hitungan  1)  dan  ke-7  (hitungan  2) (Sadjad 1993) dengan rumus :
DB=  kecambah normal hitungan I & 2 x 100%
 benih yang ditanam

## Potensi Tumbuh Maksimum (PTM,  %)
Viabilitas  total  adalah  semua  benih  yang hidup  termasuk  yang  dorman.  Parameter viabilitas  total  diukur  berdasarkan  persentase benih  yang  hidup  dengan  tolok  ukur  potensi tumbuh  maksimum.  Potensi  tumbuh  maksimum dihitung  berdasarkan  persentase  benih  yang
mampu  menjadi  kecambah  normal  maupun abnormal pada pengamatan hari terakhir (hari ke 7) dibagi dengan jumlah benih yang ditanam.

## PTM=
 benih yang mampu berkecambah x 100%  benih yang ditanam

## Daya Simpan Benih
Devigorasi  secara  fisik  digunakan  untuk menganalisis  vigor  absolut  yang  menstimulasi daya  simpan  benih.  Benih  yang  tahan  terhadap kondisi  deraan  lingkungan  simpan  suboptimum dan  tahan  untuk  disimpan  dalam  kondisi  yang tidak  ideal.  Daya  simpan  benih  diamati  secara simulatif  melalui  perlakuan  pengusangan  cepat secara fisik dengan menggunakan inkubator pada suhu 41 0 C dan kelembaban tinggi > 90% selama 72  jam.  Setelah  dilakukan  pengusangan  benih dikecambahkan pada media kertas stensil lembab dengan  metode  UKDdp.    Kertas  stensil  yang digunakan  sebanyak  tiga  lembar.    Jumlah  benih dikecambahkan sebanyak 50 butir tiap gulungan kertas  dengan  tiga  ulangan.  Benih  dikecambah- kan dalam APB IPB 73-2B. Tolok ukur terhadap daya  simpan  adalah  daya  berkecambah,  indeks vigor dan potensi tumbuh maksimum.

## Analisis Data
Untuk  mengetahui  pengaruh  faktor  yang diuji  dilakukan  analisis  ragam.    Apabila  dalam analisis  ragam  terdapat  pengaruh  yang  nyata pada  taraf  5%,  maka  dilakukan  uji  lanjut terhadap nilai rata-rata perlakuan untuk mengetahui  perbedaan  antar  perlakuan  dengan menggunakan DMRT (Stell & Torrie, 1993).

## Hasil dan Pembahasan

## Viabilitas  Benih pada Saat Panen
Vigor  awal  benih  dipengaruhi  oleh  faktor innate  dan  induced  (Sadjad  1984,  diacu  dalam Ilyas  1986).  Faktor  innate  disebabkan  oleh perbedaan  spesies/varietas  (genetik)  sedangkan faktor induced dipengaruhi oleh kondisi tanaman induk  selama  di  lapang,  proses  pemanenan  dan pasca  panen.  Indeks  vigor  adalah  tolok  ukur vigor kekuatan tumbuh benih, daya berkecambah adalah tolok ukur viabilitas potensial dan potensi tumbuh  maksimum  merupakan  tolok  ukur viabilitas total.
Tabel  1.  Mutu  Fisiologis  Varietas  Tetua  Padi Hibrida pada Saat Panen Perlakuan IV (%) DB (%) PTM (%) Varietas MTU9992 IR65515 IR58025A IR62829A 28,3b 24,4b 39,5a 44,1a 85,2b 86,4b 89,4a 89,3a 96,4b 96,4b 97,7a 97,8a Respon ** ** **
Keterangan:  Angka-angka  yang  diikuti  oleh  huruf yang sama pada kolom yang sama dan pada perlakuan yang sama tidak berbeda nyata pada  DMRT 5%. ** = berbeda  sangat  nyata;  tn  =  tidak  berbeda  nyata; IV = Indeks Vigor; DB = Daya Berkecambah; PTM = Potensi Tumbuh Maksimum.
Hasil uji statistik terhadap viabilitas benih pada  saat  panen  menunjukkan  bahwa  varietas tetua  padi  hibrida  berpengaruh  sangat  nyata terhadap  viabilitas  benih.      Hal  tersebut  diduga bahwa  setiap  varietas  mempunyai    kemampuan yang berbeda terhadap pengaruh lingkungan.
Selain  itu  pada Tabel  di  atas  dapat  dilihat bahwa  rata-  rata  IV,  DB  dan  PTM  varietas IR58025A  dan  IR62829A  lebih  tinggi  dari  pada MTU9992  dan  IR65515.  Hal  ini  mengindikasi- kan  bahwa  viabilitas  padi  hibrida  yang didapatkan  lebih  tinggi  dari  restorer.    Menurut (Justice  &  Bass  1990,  Sadjad  1993)  semakin tinggi  viabilitas  benih  maka  semakin  panjang daya simpannya.
Menurut  (Heydecker  1972,  diacu  dalam Sadjad  1972)  menyatakan  bahwa  ciri  dari  benih vigor adalah tahan disimpan, dapat berkecambah cepat  dan  merata,  bebas  dari  penyakit  benih, tahan  terhadap  gangguan  mikroorganisme,  bibit dapat  tumbuh  dengan  baik  di  tanah  basah maupun  kering,  bibit  secara  maksimum  dapat memanfaatkan persediaan bahan makanan dalam benih,  sehingga  tumbuh  jaringan-jaringan  baru, laju  pertumbuhan  tinggi,  dan  menghasilkan produk yang tinggi dalam waktu tertentu.

## Daya Simpan Benih
Daya  simpan  benih  dipengaruhi  oleh  sifat benih,  kondisi  lingkungan  simpan  (faktor enforced)  dan  perlakuan  manusia.  Sedangkan daya  simpan  individu  benih  dipengaruhi  oleh sepuluh  faktor  sifat  dan  kondisi  yaitu  pengaruh genetik (variasi antar spesies dan antar kultivar), pengaruh  kondisi  sebelum  panen  (tempat  asal
benih  diproduksi  dan  iklim),  pengaruh  struktur dan  komposisi  benih,  benih  keras,  kemasakan benih,  ukuran  benih,  dormansi  benih,  kadar  air benih,  kerusakan  mekanik  dan  vigor  (Justice  & Bass 1990). Pendugaan daya simpan benih hanya dilakukan  terhadap  restorer  yaitu  varietas MTU9992  dan  IR65515  karena  benih  padi hibrida  yang  dihasilkan  tidak  banyak  sehingga tidak mencukupi untuk dilakukan analisis.
Hasil uji statistik pada Tabel 2 menunjukkan  bahwa  varietas  tetua  padi  hibrida tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  pendugaan daya  simpan  benih  melalui  uji  pengusangan cepat  secara  fisik  terhadap  sumua  tolok  ukur yang  diamati.  Hasil  uji  statistik  terhadap  daya simpan  benih  menunjukkan  bahwa  varietas MTU9992 dan IR65515 tidak berpengaruh nyata terhadap  daya  simpan  benih  berdasarkan  semua tolok  ukur  yang  diamati.    Hal  ini  diduga  karena faktor  lingkungan  tanam  khususnya  unsur  hara Nitrogen,  Fosfor  dan  Kalium  sudah  cukup  bagi pertumbuhan  tanaman  sehingga  benih  yang dihasilkan memiliki vigor maksimum.
Daya  berkecambah  benih  setelah  peng- usangan  merupakan  peubah  yang  dapat  meng- gambarkan  status  viabilitas  benih  selama penyimpanan.  Viabilitas benih yang diusangkan akan  berangsur-angsur  menurun  karena  proses kemunduran benih yang dicirikan oleh penurunan  kecepatan  perkecambahan,  keserem- pakan perkecambahan dan daya berkecambah.
Menurunnya  daya  berkecambah  disebab- kan kadar air yang semakin meningkat dan suhu yang  tinggi  bahkan  dapat  menjurus  pada respirasi  anerob,  kadar  air  yang  cukup  tinggi akan  meningkatkan  aktivitas  biologi  dan produksi  panas  sehingga  dapat  merusak  benih. Kalpana  dan  Rao  (1996)  menyatakan  bahwa benih  yang  diusangkan  dapat  menurunkan kandungan  total  lipid  dan  fospolipid  sehingga menyebabkan kerusakan membran dan menurun- kan  nilai  perkecambahan.    Penurunan  lipid  dan fospolipid dapat menyebabkan kerusakan membran yang mempengaruhi vigor benih.
Selain itu Menurut Saenong (1986) selama pengusangan  cepat  terjadi  penurunan  fosfolipid pada  benih  kedelai  yang  berdampak  pada rusaknya  integritas  membran,  sehingga  semakin lama  perlakuan  penderaan semakin  tinggi  DHL- nya.  Tilebeni  dan  Golpayageni  menjelaskan bawa  proses  pengusangan  cepat  berkorelasi dengan penurunan aktivitas peroksidase. Semakin lama pengusangan akan mengakibatkan aktivitas enzim semakin menurun.
Tabel 2.    Pengaruh  Daya  Simpan  Benih  melalui Uji  Pengusangan  Cepat  Secara  Fisik  (Indeks Vigor,  Daya  berkecambah  dan  Potensi  Tumbuh
Maksimum. Perlakuan IV (%)  DB (%) PTM (%) Varietas MTU9992 IR65515 17,6 17,5 62,4 61,7 83,5 83,3 Respons tn tn tn
Keterangan:      Angka-angka  yang  diikuti  oleh  huruf yang  sama  pada  kolom  yang  sama  dan  pada perlakuan  yang  sama  tidak  berbeda  nyata  pada DMRT  5%.  tn  =  tidak  berbeda  nyata;  IV  =  Indeks Vigor;  DB=  Daya  Berkecambah;  PTM  =  Potensi Tumbuh Maksimum.
Dengan  adanya  pengusangan,  zat  pati yang  ada  dalam  benih  secara  berangsur-angsur mengalami penurunan, sedangkan asam amino N mengalami  peningkatan.    Dengan  meningkatnya laju  metabolisme  selama  pengusangan  akan mengakibatkan  penurunan  cadangan  makanan dan    viabilitas  benih  serta  benih  yang  abnormal meningkat.
Blance dan Elam (1989). Selanjutnya  (Copelandc  &  Mdonald,  1995) mengemukakan bahwa kemunduran benih merupakan  proses  mundurnya  viabilitas  benih yang  menimbulkan  perubahan  menyeluruh dalam  benih,  baik  fisik,  fisiologi  maupun biokimia  yang  berakibat  menurunnya  viabilitas benih.    Sedangkan  (Byrd,  1983)  mengartikan kemunduran  benih  sebagai  semua  perubahan yang  terjadi  di  dalam  benih  yang  berakhir  pada kematian.
Ketahanan terhadap deraan (pengusangan) juga  berhubungan  dengan  faktor  fisik  benih, seperti  ketebalan  dan  permeabilitas  kulit  benih. Kondisi  udara  yang  lembab  dan  panas,  selain mengakibatkan  proses  metabolisme  benih  yang berjalan  cepat  dan  berkurangnya  energi,  juga mendorong  pertumbuhan  cendawan.  Beberapa penelitian  tentang  pengusangan  menjelaskan antara  lain  Navamaniraj  (2008)  menjelaskan bahwa  penderaan  dengan  suhu  41 0 C  pada  benih Bixa orrelana L.  yang  diskarifikasi  meng- akibatkan  viabilitas  menjadi  lebih  rendah  50% dibandingkan  benih  yang  tidak  diskarifikasi. Penurunan  viabilitas  benih  yang  didera  secara fisik  dapat  disebabkan  oleh  berbagai  faktor, misalnya  karena  terjadinya  peningkatan  asam lemak  bebas  pada  benih  kapas  ( Gossypium hirsutum L.) (Iqbal et al., 2002).
Menurut Mavi dan Demir (2010)
kerusakan  tersebut  karena  benih  adalah  mahluk hidup  yang  apabila  disimpan  pada  kondisi suboptimum (suhu dan RH tinggi) terjadi proses katabolisme yaitu peroksidasi  lipid yang mengakibatkan  kerusakan  membran  serta  meng- hasilkan  produk  sampingan  yang  beracun sehingga menyebabkan benih mengalami penurunan  vigor.  Pada  kondisi  tersebut  benih akan  melakukan  respirasi  yang  mengakibatkan berkurangnya energi benih untuk tumbuh. Benih yang  telah  diusangkan  tetapi  masih  mempunyai daya  berkecambah  tinggi  mengindikasi  benih tersebut mempunyai vigor tinggi.

## Kesimpulan
Dengan  pengusangan  cepat  secara  fisik (suhu 41 0 C dan kelembaban tinggi  90%) selama 72  jam  dapat  menurunkan  viabilitas  tetua  benih padi  hibrida.  Selama  pengusangan  proses metabolisme  benih  berjalan  dengan  cepat sehingga viabilitas benih semakin menurun.

## Daftar Pustaka
Blance,  C.  A.,  Elam,  W.  W.  1989.    Accelerated Aging  :  A  Potential  Vigor  Test  for Multipurpose    Tree  Seeds.    Proceeding Seed Conference.  Mississipi State.  USA. Byrd,  H.  W.  1983.  Pedoman  Teknologi  Benih (Terjemahan). Jakarta:  Pembimbing Masa. 78 hlm.
Copeland,  L.  O.  1976.  Principles  of  Seeds Science  and  Technology.  Burgess  Pub. Com.  Minneapolis.  Minnesota. 369 p.
____________., McDonald, M. B. 1995.
Principles  of    Seeds  Science  and Technology  3rd  ed.    New York.  Chapman
& Hall.  . 408 p.
____________, McDonald, M. B. 2001. Principles  of    Seeds  Science  and Technology  4rd  4th  editions.    Kluwer Academic publishers London.
Heydecker,  W.  1972.  Vigour.  P.  253-300.    In E.H.  Robert (ed) Viability of Seeds.  New Fetterlane London. Chapman and Hall Ltd. Ilyas,  S.  1986.  Pengaruh  Faktor  Induced  dan
Enforced  Terhadap  Vigor  Benih  Kedelai (Glycine max (L.) Merril) dan Pengaruhnya Terhadap Produksi Per Hektar [Tesis]. Bogor: Program Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor. hlm 81.
Iqbal    and  shaazad,  A.  M.,  Basyra.,  Pur-rehman Khalil 2002.  Evaluations of Vigor and Oil Quality in Cutten Seed during Accelerated agen. J. Agric. Biol. 48: 318-322.
ISTA. 2007. International Rules for Seed Testing, 2007  Edition.  International  Seed  Testing Association, Zurich.
Justice,  O.  L.,  Bass,  L.  N.  1990.  Prinsip  dan Praktek  Peyimpanan  Benih.  Terjemahan Jakarta.Rajawali Pers. 446 hlm.
Kalpana, R., Rao, K. V. M. 1996. Lipid Changes During  Accelerated  Aging  of  Seeds  of Pigeonpea  ( Cajanus cajan (L.)  Millsp.)
Cultivars.  Seed  Sci.  &  Technol  24:  475- 483. Mavi, K., I. Demir. 2007. Controlled deterioration  and  accelerated  aging  tests predict relative seedling emergence potential  of  melon  seed  lots.  Hort.  Sci. 42:1431-1435.
Navaniratg,  N.  K.  2008.    Performance  of Scarisied  and  non  scarisied.  Of  bixa orellana  two  Accelerated  agents  for  the Prediction  of  Seed  Science  Accelerated  J. Agric Biol. Sci. 4 : 591-595
Sadjad,  S.    1980.  Panduan  Pembinaan  Mutu Benih  Tanaman  Hutan.  Kerjasama  Proyek Pusat  Perbenihan  Kehutanan  Direktorat Reboisasi  dan  Rehabilitasi  Direktorat Jenderal  Kehutanan  dengan  Kelembagaan Afiliasi IPB.300 hlm.
________.  1984.  Seed  Storage  and  Storability. FAO/Austria Workshop 11 on Seed Testis for the Tropics. Tegalgondo. 24 p.
________.  1993.  Dari  Benih  kepada  Benih. Jakarta. PT. Gramedia Widiasarana Indonesia. 144 hlm.
________.  1994.  Kuantifikasi  Metabolisme Benih. Jakarta. PT. Gramedia Widiasarana Indonesia. 145 hlm.
Saenong.  1986.  Pendugaan  daya  simpan  benih kedelai  (Glycine  max  L.).  Tesis.  Program Pascasarjana.  Institut  Pertanian  Bogor. Bogor.
Steel,  R.  G.  D.,  Torrie,  J.  H.  1993.  Prinsip  dan Prosedur  Statistika.  Terjemahan  Sumantri B. Gramedia. Jakarta.
Tilabeni,  G.  H.,  Golpayegani,  A.  2011.  Effec  of Seed Agant and phyciolocal and Bichemical Sanges Schanges in Rice Seed Oriza sativa ) int. J. Agric. Sci. Iran 1:138- 143.