Jurnal Pharmascience, Vol. 08, No.01, Februari 2021, hal: 94-100 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460 – 9560 https://ppjp.ulm.ac.id/journal/index.php/pharmascience ResearchArticle

## Antioksidan Daun Kumpai Mahung ( Eupathorium inulifolium H.B&K)
Dwi Rizki Febrianti*, Novia Ariani, Rakhmadhan Niah
Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan ISFI Banjarmasin, Banjarmasin, Kalimantan Selatan, Indonesia
Email: dwirizkyfeby@gmail.com

## ABSTRAK
Daun  Kumpai  Mahung  ( Eupathorium  inulifolium H.B  &  K)  merupakan  salah satu tumbuhan endemik Kalimantan Selatan. Secara turun temurun digunakan sebagai obat tradisional Dayak Meratus sebagai obat diare, demam, dan malaria. Tanaman ini dicurigai  memiliki  nilai  antioksidan  tinggi  karena  mengandung  metabolit  skunder fenolik.  Tujuan penelitian ini untuk mengetahui  aktivitas antioksidan  ekstrak metanol daun E.  inulifolium serta  nilai  IC 50 -nya.  Penelitian  ini  menggunakan  metode  DPPH dengan  instrumen  spektofotometri  UV-vis  dengan  panjang  gelombang  517  nm.  Dari hasil perhitungan dan replikasi nilai IC 50 yang didapat sebesar 38,9 ppm. Ekstrak daun E. inulifolium memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat dalam meredam radikal bebas.
Kata Kunci: Daun, Potensi Antioksidan, Endemik, IC50, Ekstrak Etanol, Fenolik

## ABSTRACT
Kumpai  Mahung  (Eupathorium  inulifolium  H.B  &  K)  leaves  are  one  of  the endemic  plants  of  South  Kalimantan.  From  generation  to  generation  it  is  used  as  a traditional  medicine  for  Dayak  Meratus  as  a  medicine  for  diarrhea,  fever,  and  malaria. This  plant  is  suspected  of  having  high  antioxidant  value  because  it  contains  phenolic secondary metabolites. The purpose of this study was to determine the antioxidant activity of  the  methanol  extract  of  E.  inulifolium  leaves  and  its  IC50  value.  This  study  used  the DPPH  method  with  spectophotometer  UV-vis  instrument  at  wavelength  of  517 nm. From the  calculation  and  replication,  the  IC50  value  obtained  is  38.9  ppm.  E.  inulifolium  leaf extract has very strong antioxidant activity in reducing free radicals.
Keywords: Leaves, Antioxidant Potential, Endemic, IC50, Ethanol Extract, Phenolic

## I. PENDAHULUAN
Perkembangan
zaman dan teknologi  dewasa  ini  menjadi  penyebab sebagian  besar  masyarakat  mengalami perubahan  pola  hidup  seperti  lingkungan dan makanan yang kurang sehat. Kebanyakan masyarakat lebih suka mengkonsumsi  makanan  cepat  saji (fast food )  dan junk  food yang  banyak mengandung  lemak  serta  zat-zat  kimia yang  berbahaya  bagi  kesehatan  serta penggunaan rokok dan kendaraan bermotor  pun  ikut  serta  menyumbangkan polusi udara dilingkungan yang merupakan  salah  satu  sumber  radikal bebas  dan  banyak  masyarakat  masih kurang  mengetahui  dampak  negatif  dari radikal bebas (Febrianti 2 , 2019)
Radikal  bebas  merupakan  atom atau  molekul  yang  mengandung  satu  atau lebih  elektron  tidak  berpasangan  dan sangat  reaktif  sehingga  untuk  menjadi stabil cenderung akan mengambil elektron dari  molekul  lain  yang  menimbulkan ketidaknormalan molekul lain dan memulai  reaksi  berantai  yang  dapat merusak  jaringan.  Radikal  bebas  ini  dapat menyebabkan terjadinya penyakit degeneratif seperti kanker, diabetes melitus  dan  alzheimer  (Jami’ah.,  2018). Oleh  karena  itu,  diperlukan  senyawa  yang dapat  meredam  efek  negatif  dari  radikal bebas yaitu antioksidan.
Antioksidan  salah  satu  senyawa yang  mampu  menangkap  senyawa  radikal baik  didalam  maupu  diluar  tubuh.  potensi ini  banyak  ditemukan  pada  berbagai  jenis tanaman  dan  tumbuhan  (Yuhernita  dan Juniarti,  2011).  Salah  satu  tumbuhan endemik Kalimantan Selatan yang berkhasiat  sebagai  obat  yaitu  kumpai mahung.  Etnis  Dayak  Maratus  dan  Dayak Amandit biasanya menggunakan tumbuhan  kumpai  mahung  sebagai  obat demam berdarah. Kumpai mahung memiliki nama latin Eupathorium inulifolium H.B & K berasal dari keluarga Asteraceae.  Menurut  penelitian  Tran et  al
(2011)  ekstrak  dari  daun E.  odoratum dengan.  keluarga Asteraceae memiliki kandungan  flavonoid,  fenolik,  alkaloid, terpenoid dan minyak essential. Berdasarkan penjelasan tersebut. E. inulifolium diduga memiliki senyawa yang berpotensi  sebagai  antioksidan.  Tujuan penelitian  ini  adalah  untuk  mengukur potensi  antioksidan  dan  nilai  IC 50 ekstrak metanol  daun Eupathorium  inulifolium H.B & K.

## II. METODE

## A. Sampel
Sampel  didapatkan  dari  Kawasan Hutan  Dengan  Tujuan  Khusus  Samboja KalimantanTimur. dilakukan proses sortasi kering,  pencucian  terhadap  daun  sortasi basah  dan  pengeringan.  sebelum  proses
pengeringan  dilakukan  proses  pengecilan ukuran  daun  dengan  dipotong  agar  proses pengeringan  maksimal.  didapatkan  bobot konstan setelah proses pengeringan selesai (3x  penimbangan).  setelah  semua  proses selesai  maka  dibuat  serbuk  dengan memblender  daun  dan  disimpan  ditempat yang gelap dan kering (Febrianti, 2019).

## B. Pembuatan Ekstrak
Sebanyak 750 gram serbuk simplisia ditimbang dan diekstraksi dengan  cara  maserasi,  Serbuk  dilarutkan dengan pelarut metanol (1:8) diaduk setiap 6  jam  selama  3  x  24  jam  dan  dilakukan  2 kali  remaserasi.  Maserat  yang  sudah disaring, dipekatkan menggunakan evaporator  dan waterbath dengan  suhu 40º-50º C.

## C. AnalisisKualitatif Fenol
Sebanyak 1
mL ekstrak ditambahkan  dengan  FeCl 3 1%,  terbentuk warna  ungu,  biru  tua,  merah,  biru kehitaman,  hijau  atau  hitam  kehijauan menunjukkan  adanya  senyawa  fenol  (Aini dkk. 2013).

## D.  Penentuan  Panjang  Gelombang  dan

## Operating Time
Instrumen  yang  digunakan  adalah Spektrofotometer UV-vis Thermo Scientific GENESYS 10S. Sebanyak 2 mL larutan  DPPH  diamati  pada  panjang
gelombang 400- 750 nm. Serapan maksimal  terjadi  pada  λ  516  nm  dan dilakukan  pembacaan  hingga  serapan stabil (waktu dalam menit).
E.  Uji  aktivitas  antioksidan  ekstrak E. inulifolium H.B & K
Sebanyak 5 seri konsentrasi ekstrak dimasukkan dalam kuvet dengan konsentrasi (20 - 60 ppm) 2 ml dan larutan blangko.  Masing-masing  seri  konsentrasi ekstrak ditambahkan larutan DPPH dengan perbandingan  2:1  kemudian  dikocok  dan didiamkan selama 7 menit, replikasi 3 kali. Perhitungan  IC 50 ( Inhibitor  Concetration ) regenerasi  linear  dengan  rumus  sebagai berikut.
y = bx + a.
Koefisien  y  pada  persamaan  ini adalah  sebagai  %inhibisi,  b  merupakan slope  (kemiringan),  a  yaitu  intercept (perpotongan garis disumbu Y), sedangkan koefisien x adalah konsentrasi dari ekstrak yang akan dicari nilainya (Nurjannah dkk., 2013).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
A.  Ekstrak  Daun E.  inulifolium H.B  &

## K
Maserasi  dilakukan  selama  3  hari dengan pengadukan tiap 6 jam. Pengadukan bertujuan untuk lebih meningkatkan kontak antara cairan penyari dengan  sampel  sehingga  proses  penyarian
lebih  efektif.  Proses  remaserasi  dilakukan 2  kali  hingga  didapatkan  larutan  zat  aktif yang  tertarik  sempurna  ditandai  dengan warna  pelarut  yang  jernih  atau  berbeda dengan warna filtrat sebelumnya.
Remaserasi ditujukan untuk memaksimalkan proses penyarian terhadap senyawa-senyawa  yang  mungkin  belum tersari  karena  cairan  penyari  sudah  jenuh. Pelarut  metanol  pada  ekstraksi  dipilih karena  daya  penetrasi  metanol  ke  dalam sel-sel  tanaman  lebih  kuat  dibandingkan etanol  ataupun  pelarut  lain  (Depkes  RI, 2000)  serta  kepolaran  metanol  yang  lebih besar  daripada  etanol,  sehingga  lebih mudah untuk berinteraksi dengan senyawa fenolik  yang  menerapkan  prinsip like dissolve like . Hasil berupa filtrat dilanjutkan dengan vaccum rotary evaporator pada suhu 50°C. Menghasilkan ekstrak kental daun E. inulifolium sebanyak 206,5 gram, dengan % Rendemen ekstrak 27,53 %. Nilai tersebut menunjukkan  sebanyak  27,53%  senyawa zat  aktif  yang  bisa  tertarik  oleh  pelarut dengan  menggunakan  metode  maserasi. Persentase rendemen menunjukkan keoptimalan pelarut yang digunakan dalam menyari.  Semakin  tinggi  randemen  maka semakin  banyak  ekstrak  yang  dihasilkan. Ekstrak yang dihasilkan memiliki karakteristik  yaitu  ekstrak  berwarna  hijau pekat,  berbau  khas  dan  bentuk  ekstrak kental.

## B. Analisis Kualitatif Fenol
Tujuan  analisis  kualitatif  adalah untuk  mengetahui  adanya  kandungan senyawa  fenolik  dalam  ekstrak  metanol daun E. inulifolium yang diharapkan dapat berperan  sebagai  antioksidan.  Analisis yang  digunakan  yaitu  pengujian  tabung dengan  pereaksi  FeCl3.  FeCl3  adalah reagen  yang  digunakan  untuk  mendeteksi senyawa turunan dari polifenol yaitu tanin. Adanya  gugus  fenol  ditunjukkan  dengan warna  hijau  kehitaman  atau  biru  tua setelah  ditambahkan  dengan  FeCl 3 .  FeCl 3 reagen  yang  digunakan  untuk  mendeteksi senyawa  turunan  dari  polifenol  salah satunya tanin. gugus fungsi fenol ditunjukkan  pada  hasil  larutan  berwarna hijau  kehitaman  atau  biru  tua  (Sa’adah,
2010).  FeCl 3 sering  digunakan  untuk reaksi kompleksasi karena mudah membentuk senyawa kompleks. Perubahan warna  yang  terjadi  pada  penelitian  ini yaitu  dari  larutan  berwarna  kuning kecoklatan menjadi warna hijau kehitaman (Gambar 1).
Gambar  1 .  Hasil  Kualitatif  Identifikasi
Fenol

## C. Analisis Kuantitatif DPPH
Konsentrasi ekstrak dengan perbandingan  2:1  larutan  DPPH  20  ppm untuk  mengetahui  perendaman  radikal bebas dan persentase aktivitas antioksidannya.  senyawa  DPPH  adalah senyawa  oksidan  atau  radikal  bebas  yang mendonorkan  atom  hidrogen  kepada antioksidan  yaitu  sampel  ekstrak  daun E. inulifolium ,  ditunjukkan  dengan    warna ungu  dari  larutan  akan  berubah  mejadi kuning menunjukkan aktivitas antioksidan. Aktivitas  antioksidan  dinyatakan  dengan nilai  IC 50 .  Panjang  gelombang  DPPH diukur  dengan  spektrofotometer  pada panjang  gelombang  Visibel  yaitu  400-750 nm  dan  didapatkan  panjang  gelombang maksimal  larutan  DPPH  20  ppm  pada penelitian  ini  berada  pada  516  nm  dengan nilai absorbansi 0,692 A (Gambar 2).
Gambar 2. Panjang Gelombang Maksimal

## DPPH
Operating  time DPPH  ditentukan dengan  menggunakan  panjang  gelombang yang  sudah  didapat  yaitu  516  nm.  Tujuan operating  time adalah  untuk  mengetahui waktu  pengukuran  yang  stabil  yaitu  saat sampel  bereaksi  sempurna  dengan  reagen
warna  .  Waktu  kerja  ditentukan  dengan mengukur hubungan antara waktu pengukuran  dengan  absorbansi  larutan (cahyani,  2017). Operating  time yang dihasilkan  pada  penelitian  ini  adalah  pada menit  ke-7  sampai  menit  ke-9.  Hasil operating time dapat dilihat pada Tabel I.
Tabel I. Hasil operating time DPPH pada panjang gelombang 516nm
Waktu (menit) Absorbansi 0 0,693 1 0,693 2 0,693 3 0,694 4 0,694 5 0,695 6 0,695 7 0,696 8 0,696 9 0,696
Gambar  3 .  Kurva  hubungan  antara konsentrasi  Ekstrak  (+) DPPH dengan persen aktivitas antioksidan
Dari Gambar 3, didapat  persamaan garis lurus  y  = 1,1469x + 5,3466. Dengan nilai  a=  5,3466,  b=  1,1469  dan  r=  0,975. Koefisien korelasi  (r)  yang bernilai  positif tersebut menyatakan bahwa dengan meningkatnya konsentrasi ekstrak metanol daun E.  inulifolium maka  semakin  besar pula  persen  peredamannya.  Aktivitas
antioksidan  merupakan  kemampuan  suatu senyawa  atau  ekstrak  untuk  menghambat reaksi  oksidasi  yang  dapat  dinyatakan dengan  persen  penghambatan.  Parameter yang dipakai untuk menunjukkan aktivitas antioksidan  adalah  harga  konsentrasi efisien  atau efficient  concentration (EC 50 ) atau Inhibition  Concentration (IC 50 )  yaitu konsentrasi  suatu  zat  antioksidan  yang dapat menyebabkan 50% DPPH kehilangan karakter radikal atau konsentrasi  suatu  zat  antioksidan  yang memberikan % penghambatan 50%.
Konsentrasi  zat  antioksidan  yang  efektif untuk  menghambat  50%  aktivitas  radikal bebas  DPPH.    Semakin  kecil  nilai  IC 50 maka  semakin  tinggi  kekuatan  suatu senyawa  yang  bersifat  antioksidan  untuk menangkal  radikal  bebas.  Mekanisme kerja  Antioksidan  dalam  melawan  radikal bebas  yaitu  mencegah  atau  menghambat proses  oksidasi  sehingga  membentuk senyawa  yang  lebih  stabil  (Inggrid  dan Santoso,  2014).  Dari  hasil  perhitungan nilai  IC 50 didapat  nilai  sebesar  38,9  ppm.
Hasil tersebut menunjukkan bahwa ekstrak daun E.  inulifolium memiliki  aktivitas antioksidan  yang  sangat  kuat  dalam meredam  radikal  bebas.  Berdasarkan  hasil uji  pendahuluan  pada  penelitian  ekstrak daun E.  inulifolium secara  kualitatif mengandung  salah  satu  turunan  senyawa fenolik  yaitu  tanin.  Senyawa  fenolik berperan  sebagai  antioksidan  dengan
mekanisme  kerja  dimana  gugus  OH sebagai penangkap radikal menyumbangkan  satu  elektronnya  pada elektron  yang  tidak  berpasangan  dalam radikal  bebas  sehingga  banyak  radikal bebas menjadi berkurang.

## IV. KESIMPULAN
Ekstrak daun Eupathorium inulifolium memiliki  aktivitas  antioksidan yang  sangat  kuat  dalam  meredam  radikal bebas yaitu sebesar 38,9 ppm .

## DAFTAR PUSTAKA
Departemen Kesehatan Republik Indonesia.,  2000,  Parameter  Standar Umum  Ekstrak  Tumbuhan  Obat, Edisi I, Direktorat Jenderal Pengawasan  Obat  dan  Makanan,
Direktorat Jenderal Pengawasan
Obat Traditional, Jakarta.
Febrianti  Dwi  Rizki 1 ,  Mahrita,  Novia Ariani,  Aditya  Maulana  Perdana Putra,  Noorcahyati,  2019,  Uji  Kadar Sari Larut Air Dan Kadar Sari Larut Etanol Daun Kumpai Mahung ( Eupathorium  inulifolium H.B.&K), Jurnal  Pharmascience,  Vol.  06, No.02, Oktober 2019, hal: 19 – 24 Febrianti  Dwi  Rizki 2 ,  Novia  Ariani, Rakhmadhan Niah,
Rahmatul
Jannah,  2019,  Aktivitas  Antioksidan Ekstrak  Metanol  Kulit  Jeruk  Siam Banjar  ( Citrus  reticulata ), Jurnal Insan Farmasi Indonesia 2(1) hal 1- 6.
Inggrid,  H.M.,  dan  H  Santoso.,  2014,
Ekstraksi  Antioksidan  dan  Senyawa Aktif  Dari  Buah  Kiwi  ( Actinidia deliciosa ).  Lembaga  Penelitian  dan Pengabdian kepada Masyarakat. Universitas Khatolik Parahyangan.
Jami’ah, S. R., Mus, I., Jastria, P., Eny, N., 2018,  Uji  Aktivitas  Antioksidan Ekstrak  Metanol  Kulit  Pisang  Raja
(Musa Paradisiaca sapientum) Dengan  Metode  DPPH  (2,2-Difenil-
1-Pikrilhidrazil),  Jurnal Mandala
Pharmacon  Indonesia  Vol  4(1)  :  33- 38. Noorcahyati,  2012,  Tumbuhan  Berkhasiat Obat Etnis Asli Kalimantan. Balikpapan  Kalimantan  Timur:Balai Penelitian Teknologi Konservasi Sumber daya Alam.
Nurjanah, A., Abdulla, A., Apriand., 2011, Aktivitas Antioksidan dan Komponen  Bioaktif  pada  Keong Ipong-Ipong  ( Fasciolaria  salmo ),
Jurnal  Pengolahan  Hasil  Perikanan Indonesia. XIV(1):22-29.
Sa’adah,  L.,  2010,  Isolasi  dan  identifikasi senyawa  tanin  dari  daun  belimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi l.), Universitas  Islam  Negeri  (UIN)
Maulana Malik Ibrahim, Malang.
Tran,  M.H.,  To,  D.  C.,  Nguyen,  H.D.,
2011,  Flavonoid  Glycoside  from Chromolaena  odorata  Leaves  and their  in  Vitro  Cytotoxic  Activity, Journal of Chem Pharm . Bull. 59(1)
129-131.
Yuhernita  dan  Juniarti.,  2011,  Analisis Senyawa  Metabolit  Sekunder  dari
Ekstrak  Metanol  Daun  Surian  yang Berpotensi sebagai Antioksidan, Makara Sains 15(1):48-52.