## UJI TOKSISITAS AKUT KAPSUL BAWANG PUTIH  LANANG ( Allium sativum Linn)
Submitted : 1 November 2016
Edited : 18 November 2016
Accepted : 30 November 2016
Lusia Murtisiwi, Novena Yety Lindawati
Program Studi S1 Farmasi STIKES Nasional Email: lusiasiwi@yahoo.co.id,novena_yl@yahoo.com

## ABSTRACT
Garlic (Allium  sativum  Linn) is  evidently  active against  Mycobacterium  tuberculosis. Garlic contains allicin that  is  able to inhibit  the  bacteria  causing tuberculosis. This  dried extract garlic is  also  qualified as content  of  capsules  of traditional  medicine, score  of  Total Plate Count is1.5 (required not over 10); figures of mold and yeast extract of garlic is 4.10 2 (required not over 10 4 ); does not contain microbial pathogens (uncontaminated with coliform bacteria,  Escherichia  coli,  Salmonella  sp,  and  Staphylococcus  aureus); and aflatoxin is  not detected (required not more than 30 CPM); the average of moisture content is 2% (required notmore  than 10%). Capsule  of  dried  extract  garlic (Allium  sativum  Linn)  meets pharmaceutical requirements for traditional medicine capsule dosage form, with9 minutes as disintegrating time (required not more than 15 minutes) and meets the uniformity of weight as required for capsule. Results of the research indicates that dried extract of garlic indose above 48.750 mg/ kg body weightto get LD 50 in garlic, belongs to 'relatively harmless'. Dried extract garlic in  4 doses variations  do  not affect  the  liver  functions  of  mice, so  significant  clinical toxicity symptoms that happen on entire animals test have not gained yet.
Keywords : Allium sativum Linn, dried extract garlic, toxicity test, phytopharmaca
PENDAHULUAN
Tuberkulosis (TB) merupakan penyakit  menular yang  disebabkan  oleh infeksi Mycobacterium tuberculosis ,  dan menyebar  melalui droplet orang  yang  telah terinfeksi  bakteri  tersebut (1) .  Jumlah  kasus TB  di  Indonesia  masih  tinggi,  pada  tahun 2014  ditemukan  jumlah  kasus  baru  BTA+ sebanyak  176.677  kasus. Hasil  Survei Kesehatan Rumah Tangga pada tahun 2013 menunjukkan jumlah kasus baru BTA+ yang ditemukan  pada  tahun  2013  sebanyak 196.310  kasus (2) . Sekitar 75%  pasien  TB adalah kelompok usia yang paling produktif secara ekonomis (15-50 tahun).
Diperkirakan  seorang  pasien  TB  dewasa akan kehilangan rata-rata waktu kerjanya 3-
4  bulan.  Hal  tersebut  berakibat  pada
kehilangan  rata-rata  waktu  kerjanya  3-4 bulan.  Hal  tersebut  berakibat  pada kehilangan  pendapatan  tahunan  rumah tangganya sekitar 20-30% (1) .
Kekebalan ganda kuman TB terhadap obat anti TB ( multi drug resistance = MDR) semakin menjadi masalah akibat kasus yang tidak  berhasil  disembuhkan (1) . Melihat perkembangan dan bahayanya penyakit TB, diperlukan  pengembangan bahan  alam dengan efek  samping relatif lebih  ringan sebagai  alternatif  dan  terapi  pendukung untuk  pengobatan TB.  Salah  satu bahan alam  yang  dapat  digunakan  untuk  terapi tuberkulosis adalah bawang  putih. Menurut sistem  ayurveda  dan  Yunani,  bawang  putih adalah  salah  satu  obat  untuk  tuberkulosis. Bawang  putih  telah terbukti  aktif  terhadap
Mycobacterium  tuberculosis secara  in vitro (3)(4) .  Senyawa  alisin  yang  terkandung dalam bawang putih lanang ( Allium sativum Linn)  berfungsi  sebagai  antimikroba spketrum  luas  yang  mampu  menghambat bakteri  penyebab  TB.  Alisin  memiliki mekanisme  molekuler  untuk  memblokade aktivitas  enzim  yang  menyebabkan  infeksi dan  gangguan  metabolisme,  yakni  enzim cysteine  proteinase dan  enzim  alkohol dehidrogenase.  Selain  itu  bawang  putih lanang  mengandung scornidin yang memiliki  kemampuan  meningkatkan  daya tahan  tubuh  dan  pertumbuhan  tubuh. Bawang  putih  lanang  dipercayai  lebih berkhasiat  sebagai  obat  daripada  bawang putih  biasa. Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa  ekstrak  bawang  putih  mampu menghambat isolat Mycobacterium tuberculosis MDR  maupun  non-MDR  pada konsentrasi 1,0-3,0 mg/ml (5) . Hasil penelitian  lain  juga  menunjukkan  bahwa ekstrak  kaya  alisin  dari  bawang  putih  aktif terhadap Mycobacterium tuberculosis dengan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC)  sebesar  0,97-1,95 µg/ml,  sebanding  dengan  obat  standar rifampicin (6) .
Bawang putih lanang memiliki aroma yang  menyengat sehingga dibutuhkan suatu bentuk  sediaan  obat  seperti  kapsul  untuk menutup aroma tersebut dan mempermudah bagi pasien penderita TB untuk mengosumsinya. Kapsul  bawang  putih lanang  ( Allium  sativum Linn)  yang memenuhi persyaratan mutu Obat
Tradisional yang  meliputi  waktu  hancur, keseragaman  bobot  kapsul,  kadar  air  isi kapsul,  uji  angka  lempeng  total,  uji  angka kapang dan khamir, bebas mikroba patogen dan  aflatoksin telah  berhasil  didapatkan (7) . Uji  pra-klinik  aktivitas  anti Mycobacterium tuberculosis dari ekstrak kering (ekstrak air) bawang putih lanang telah dilakukan secara in vitro terhadap Mycobacterium tuberculosis yang berasal dari sputum pasien
BTA  positif  dua  (+2)  resisten  rifampicin dengan potensi  penghambatan paling besar pada  dosis  240  µg/  ml  medium  (600  mg/ kapsul) (4) .  Ekstrak  kering  (ekstrak  air) bawang putih lanang ini mempunyai prospek positif  untuk  dikembangkan  menjadi fitofarmaka. Pengembangan ekstrak bawang putih  lanang  menjadi  fitofarmaka  dapat dilakukan dengan berbagai aspek penelitian secara  klinik (8) .  Fitofarmaka  merupakan sediaan  obat  yang  telah  dibuktikan keamanan  dan  khasiatnya secara  ilmiah dengan  uji  praklinik  dan  uji  klinik,  bahan baku dan produk jadinya telah distandarisasi (9) . Ekstrak kering (ekstrak air) bawang  putih  lanang  masih  perlu  diuji toksisitasnya terhadap  hewan  uji (uji pra- klinik) dan uji klinik untuk menjadi produk fitofarmaka.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui toksisitas  ekstrak  kering (ekstrak  air)  bawang  putih  lanang  dengan mencari  dosis  tunggal  dari  ekstrak  tersebut yang  dapat  menyebabkan  kematian  50% hewan  uji  ( lethal  dose  50% /  LD 50 )  serta melihat  pengaruhnya  terhadap  fungsi  hati mencit.

## METODE PENELITIAN Obyek Penelitian
Obyek yang diteliti  adalah  dosis tunggal ekstrak kering (ekstrak air) bawang putih  lanang  ( Allium  sativum Linn)  yang dapat  menyebabkan  kematian  50%  (LD 50 ) dan  pengaruh ekstrak  kering  bawang  putih lanang  ( Allium  sativum Linn) terhadap fungsi hati mencit.
Bahan dan Alat yang digunakan Bawang putih lanang ( Allium sativum Linn)  yang  dibeli  pasar  Harjodaksino, kecamatan Serengan, Surakarta yang dibuat menjadi ekstrak kering (ekstrak air), hewan uji mencit galur ddY berumur lebih kurang dua  bulan  dengan  berat  badan  20-30  gram sebanyak 50 ekor jantan dan 50 ekor betina, SGOT Dyasis, SGPT Dyasis, Formalin 10%,
spuit  (Terumo), alat-alat  gelas  untuk pembuatan  ekstrak  kering, spektrofometer UV Shimadzu 1241, rotary evaporator IKA, mikrohematokrit, pipet Eppendorf, sentrifugator,  timbangan  analitik,  fotometer clinicon.

## Prosedur Penelitian
Pembuatan  ekstrak  kering  (ekstrak  air) bawang putih lanang Lima  (5)  kilogram  bawang  putih lanang dicampur dengan air (1:2), diblender kemudian  disaring.  Filtrat  yang  diperoleh disentrifuse  dengan  kecepatan  3000  rpm selama  15  menit,  diambil  supernatannya selanjutnya  supernatan  diuapkan  dengan rotary  evaporator hingga  kental.  Ekstrak kental  yang  diperoleh  dikeringkan  dalam oven  dengan  suhu  50°C  hingga didapatkan ekstrak  kering  bawang  putih  lanang  yang mencapai bobot konstan.
Pengujian  terhadap  kualitas  ekstrak bawang putih lanang Ekstrak  kering  (ekstrak  air)  bawang putih lanang diuji sesuai pernyataan standar isi kapsul obat tradisional meliputi uji angka lempeng total, uji angka kapang dan khamir, uji  mikroba  patogen  (MPN Coliform, Eschericia  coli,  Salmonella, dan  uji Staphylococcus  aureus ),  uji  aflatoksin  serta uji  kadar  air (7) dengan  metode  destilasi toluena (11) .

## Penetapan dosis
Dosis penghambatan  ekstrak  kering (ekstrak  air)  bawang  putih  lanang  ( Allium sativum Linn)  terhadap Mycobacterium tuberculosis yang  paling  besar  adalah pada dosis 240 µg/ml medium atau setara dengan 600  mg/kapsul (4) .  Faktor  konversi  dari manusia  ke  mencit  yaitu 0,0026  dan  faktor farmakokinetika adalah 10,  maka  dosis sediaan uji untuk mencit adalah 0,0026 x 10 x 600 mg = 15,6 mg/g BB mencit atau sama dengan  78  mg/kg  BB.  Dosis  ini  ditetapkan
sebagai  dosis  terendah  yang  diberikan, sedangkan  penentuan  dosis  terbesar dilakukan  dengan  uji  pendahuluan  untuk mengetahui  dosis  terbesar  yang  dapat disondekan  kepada  mencit. Dosis  secara berturut-turut  mengikuti  progresi  geometris yaitu:
Y n = Y 1 x R n-1
Keterangan : Y 1 = Dosis pertama Y n = Dosis ke-n, R  =  Faktor  geometris ≠  0 atau  1 kelipatan dosis
Persiapan hewan uji Mencit  diaklimatisasi  selama  dua minggu dengan tujuan untuk mengadaptasikan terhadap lingkungan kandang  percobaan.  Pada  tahap  ini dilakukan  pengamatan  keadaan  umum hewan  uji.  Penelitian  ini  menggunakan 30 ekor  mencit  jantan  dan 30  ekor  mencit betina dibagi menjadi 5 kelompok perlakuan (perlakuan dengan aquadest, dosis 78 mg/kg BB, 1.950 mg/kg BB, 9.750 mg/kg BB, dan 48.750  mg/kg  BB).  Pengelompokan  hewan uji  dilakukan  secara  acak  lengkap  yaitu masing-masing terdiri dari 6 ekor.
Penentuan nilai LD 50 Digunakan  dosis  bertingkat  yang terdiri  dari  empat  variasi  dosis untuk penentuan  LD 50 .  Pemberian  ekstrak dilakukan dalam satu kali pemberian secara oral  menggunakan  sonde,  mencit  diamati selama  4  jam  untuk  melihat  apakah ada gejala  toksik  yang  muncul  atau  tidak. Pengamatan kembali dilakukan pada 24 jam setelah  pemberian  larutan  uji  dengan menghitung  jumlah  mencit  yang  mati  dari tiap  kelompok.  Nilai  LD 50 dihitung  dengan menggunakan rumus Well.

## Pengambilan sampel darah dan plasma
Mata  mencit  ditusuk dengan pipa kapiler pada bagian sinus orbital, digerakkan
sambil  diputar-putar.  Darah  yang  diperoleh ditampung  dalam  mikrotube  yang  telah diberi  heparin.  Sampel  darah  disentrifugasi dengan kecepatan 7000 rpm selama 5 menit agar diperoleh  supernatan  jernih.  Plasma kemudian  dimasukkan  ke  dalam  mikrotube dan disimpan dalam freezer .

## Pengukuran fungsi hati
Penimbangan berat hati Dilakukan pengambilan sampel organ hati pada akhir pengujian.  Organ  hati  yang telah diambil dengan  larutan NaCl0,9% dibersihkan.  Hati  yang  telah  bersih ditimbang,  diawetkan  dengan  larutan formalin 10%.

## Pengukuran SGPT
Disiapkan reagen 1 (komposisi: TRIS 140 mmol/l dengan pH 7,15, L-Alanine 700 mmol/l, dan LDH (Lactate Dehydrogenase ) ≥  2300  U/l)  dan  reagen  2  (komposisi:  2- Oxoglutarate  85  mmol/l dan  NADH  1 mmol/l). Dipipet dengan micropipette sebanyak  1000  µl reagen  1,  ditambahkan 100  µl sampel  serum,  dihomogenkan dan didiamkan selama  3  menit. Ditambahkan 250  µl reagen 2  setelah  3  menit, dihomogenkan  dan  didiamkan  selama  1 menit, dibaca absorbansinya pada fotometer clinicon .

## Pengukuran SGOT
Disiapkan reagen 3  (komposisi: TRIS 110  mmol/l dengan  pH  7,65,  L-Aspartate 320  mmol/l,  MDH  ( malate  dehydrogenase ) ≥  800  U/l,  dan LDH  ( Lactate
dehydrogenase ) ≥  1200  U/l)  dan  reagen  4
(komposisi:  2-Oxoglutarate  65  mmol/l,  dan NADH  1  mmol/l). Dipipet dengan micropipette sebanyak  1000  µl Reagen  3, ditambahkan  100  µl sampel  serum, dihomogenkan  dan  didiamkan  selama  3 menit. Ditambahkan 250 µl reagen 4 setelah 3  menit,  dihomogenkan dan didiamkan selama  1  menit,  dibaca  absorbansinya  pada
fotometer clinicon .  Proses  inkubasi pada suhu  37 o C  terjadi otomatis saat sampel masuk ke fotometer clinicon .
Uji histopatologi organ hati Preparasi slide organ hati
Mencit dikorbankan, dibuka abdomen dan torax. Diambil organ hati mencit, diberi label  dengan  benang.  Jaringan  difiksasi dalam  larutan  formalin  10%  dalam  PBS selama minimal 2 jam. Dilakukan dehidrasi dalam  alkohol  70%,  80%,  90%,  95%,  dan alkohol absolut  secara  bertahap  masing- masing  selama  15  menit. Dilakukan  proses clearing (dealkoholisasi)  menggunakan larutan  xylol  atau  toluol.  Dilakukan  proses infiltrasi  selama  10  menit.  Dilakukan embedding /  parafim blocking pada  jaringan ( tissue  paraffin-embedded  preparation ). Dilakukan tissue  section (pemotongan jaringan)  menggunakan  mikrotom  putar Leica  dengan  ketebalan  4-5  μm.  Dilakukan pembuatan slide sampel (setelah pemotongan jaringan, dilakukan pengapungan di dalam waterbath,
penempelan  jaringan  pada slide  dan pengeringan sampel). Melihat struktur  anatomi  sel  yang akan diamati. Dilakukan proses deparafinisasi  (berturut-turut  direndam dalam  xylol,  etanol  absolut,  etanol  90%, 80% dan 70%) setelah dilakukan pembuatan slide sampel dengan  irisan  melintang. Dilakukan pewarnaan menggunakan
hematoksilin  dan  eosin. Hasil  diamati  di bawah mikroskop.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pembuatan  Ekstrak  kering  (ekstrak  air) Bawang  Putih  Lanang  ( Allium  sativum
Linn) Simplisia yang dipilih untuk
pembuatan  ekstrak  kering  (ekstrak air) bawang putih lanang ( Allium sativum Linn) adalah bawang  yang  terdiri  dari  satu  siung
yaitu  bawang  putih  lanang  yang  dibeli  dari pasar  Harjodaksino,  kecamatan  Serengan, Surakarta. Rendemen ekstrak kering (ekstrak air) yang diperoleh sebesar 4% b/b. Ekstrak kering  (ekstrak  air)  yang  diperoleh berwarna  kuning  kecoklatan  dengan  bau khas bawang putih lanang.
Pengujian  terhadap  ekstrak  kering (ekstrak air) bawang putih lanang( Allium sativum Linn)
Uji  angka  lempeng  total  ekstrak  kering (ekstrak  air)  bawang  putih  lanang ( Allium sativum Linn)
Penetapan  angka  lempeng  total dilakukan  dengan  metode  dilusi  dengan menggunakan  media  agar  dan  pengencer larutan NaCl 0,9 %. Setelah media memadat, cawan  petri  diikubasi  pada  suhu  35-37°C selama  24-48  jam  dengan  posisi  terbalik. Jumlah  koloni  yang  tumbuh sebanyak  1-2 koloni  (<10), menunjukkan  bahwa  ekstrak bawang putih lanang kering yang dihasilkan memenuhi  persyaratan  angka  lempeng  total isi  kapsul  obat  tradisional  tidak  lebih  dari 10 (7) .
Uji  angka kapang  dan  khamir  ekstrak kering (ekstrak air) bawang putih lanang ( Allium sativum Linn) Penetapan  angka  kapang  dan  khamir dilakukan  dengan  menggunakan  metode dilusi dengan pengencer larutan NaCl 0,9% dengan  media  agar  pada  cawan  petri. Seluruh  cawan  petri diinkubasi  pada  suhu 20-25°C  selama  5-7  hari.  Sesudah  5  hari inkubasi,  dicatat  jumlah  koloni  jamur  yang tumbuh, pengamatan terakhir pada inkubasi 7  hari.  Koloni  ragi  dibedakan  karena bentuknya  bulat  kecil-kecil  putih  hampir menyerupai  bakteri. Angka  kapang  dan khamir  yang  diperoleh  sebesar  4.10 2 , memenuhi persyaratan  angka  kapang  dan khamir  isi  kapsul  obat  tradisional  yakni tidak lebih dari 10 4(7) .
Uji  mikroba  patogen  ekstrak  kering (ekstrak  air)  bawang  putih  lanang
( Allium sativum Linn) Hasil uji mikroba patogen menunjukkan bahwa ekstrak kering (ekstrak air)  bawang  putih  lanang  yang  diperoleh tidak  mengandung  bakteri Coliform, Eschericia coli, Salmonella, Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis . Hal ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  kering (ekstrak  air) bawang  putih  lanang  ( Allium sativum Linn)  yang  digunakan  sebagai bahan isi kapsul telah memenuhi persyaratan mutu Obat Tradisional (7) .
Uji aflatoksin ekstrak kering (ekstrak air) bawang  putih  lanang  ( Allium  sativum Linn) Penetapan adanya cemaran aflatoksin dilakukan  dengan  metode  KLT.  Hasil  uji diperoleh menunjukkan  bahwa dalam ekstrak  kering  (ekstrak  air)  bawang  putih lanang  ( Allium  sativum Linn)    tidak terdeteksi  adanya  aflatoksin  sehingga memenuhi persyaratan jumlah aflatoksin isi kapsul  obat  tradisional  tidak  lebih  dari  30 bpj (7) .
Uji kadar air ekstrak kering (ekstrak air) bawang  putih  lanang  ( Allium  sativum Linn)
Kadar air ekstrak kering (ekstrak air) bawang putih lanang ( Allium sativum Linn) yang diperoleh sebesar 2 %, nilai ini masih memenuhi  persyaratan  kadar  air  untuk  isi kapsul obat tradisional yaitu tidak lebih dari 10 % (7) .
Hasil Uji Toksisitas Akut Ekstrak kering (ekstrak air) Bawang Putih Lanang( Allium sativum Linn)
Uji  toksisitas  akut  dapat memberikan informasi awal tentang toksisitas dari bahan yang  tidak  ada  informasi  toksikologi  lain yang  tersedia (12) .  Uji  toksisitas  akut merupakan uji  keamanan  pendahuluan (uji
praklinik) terhadap  ekstrak  kering  (ekstrak air)  bawang  putih  yang  digunakan  sebagai obat alternatif pengobatan TB. Uji toksisitas akut dirancang untuk mengukur derajat efek toksik  suatu  senyawa  yang  terjadi  dalam waktu  singkat,  yaitu  24  jam  setelah pemberian dosis tunggal. Uji toksisitas akut dilakukan  dengan  menggunakan  variasi  4 dosis 78 mg/kg BB, 1.950 mg/kg BB, 9.750 mg/kg  BB,  dan  48.750  mg/kg  BB. Melalui uji  ini  diperoleh nilai LD 50 .  Gejala  toksik yang ditimbulkan pada dosis yang diberikan dilakukan dengan pengamatan  berat  organ hati  dan  nilai  SGPT  serta  SGOT  untuk melihat gejala toksik yang ditimbulkan.
Hewan uji yang sering digunakan untuk uji toksisitas akut adalah tikus, namun hewan  uji  lain  dapat  digunakan (12) . Hewan uji yang sering digunakan pada penelitian ini adalah  mencit  putih  karena  banyak  data toksikologi  yang  menyatakan  hewan  uji  ini sesuai  untuk  uji  toksisitas  akut  selain  itu
hewan uji ini juga dapat dikembangbiakkan secara  seragam dan mudah  dalam penanganannya.  Mencit sensitif  terhadap obat dengan dosis kecil. Penggunaan mencit jantan dan betina untuk melihat efek toksik dari  ekstrak  kering  (ekstrak  air)  bawang putih  terhadap  kedua  jenis  kelamin  karena hormon seksual dapat mempengaruhi respon toksik. Hasil  uji  toksisitas  akut  yang dilakukan  pada  kelompok  kontrol,  dosis  I, dosis  II,  dosis,  III,  sampai  dosis  IV  baik pada  kelompok  mencit  betina  maupun mencit  jantan  tidak  menimbulkan  respon kematian pada hewan (Tabel 1).
Semakin  kecil  nilai  LD 50 ,  semakin toksik  senyawa  tersebut  dan  sebaliknya semakin  besar  nilai  LD 50 ,  semakin  rendah toksisitasnya. Nilai  LD 50 dalam  mg/kg  BB dapat digolongkan sesuai potensi ketoksikannya. Klasifikasi toksisitas senyawa uji dapat dilihat pada tabel 2. Tabel 1. Data hasil uji toksisitas akut ekstrak kering (ekstrak air) bawang putih lanang
No. Kelompok Dosis N Jumlah Kematian Hewan Uji Betina Jantan Kontrol Aquadest 6 0 0 I 78 mg/kg BB 6 0 0 II 1.950 mg/kg BB 6 0 0 III 9.750 mg/kg BB 6 0 0 IV 48.750 mg/kg BB 6 0 0 Tabel 2. Klasifikasi toksisitas (13) No. Kelas LD 50 (mg/kg BB) 1. Luar biasa toksik 1 atau kurang 2. Sangat toksik 1-50 3. Cukup toksik 50-500 4. Sedikit toksik 500-5000 5. Praktis tidak toksik 5000-15000 6. Relatif kurang berbahaya Lebih dari 15000
Uji toksisitas akut  ekstrak  kering (ekstrak  air)  bawang  putih  lanang dimulai dari dosis kecil 78 mg/kg BB sampai dengan dosis  terbesar  48.750  mg/kg  BB.  Hasil  uji toksisitas  akut  pada  penelitian  ini belum menunjukkan  respon ketoksikan  atau kematian  pada  hewan  uji  sehingga  dapat dikategorikan  nilai  LD 50 -nya  relatif  kurang berbahaya (13) (lebih  dari 15000  mg/kg  BB). Bawang putih lanang yang lazim digunakan di masyarakat  baik  sebagai  bumbu  maupun sebagai  obat  tradisional,  zat  aktif  yang terkandung di dalamnya tidak memunculkan efek  toksik  maupun  kematian  pada  hewan uji.
Pada  penelitian  ini  juga  dilakukan pengamatan  terhadap  gejala  toksik  dengan melihat nilai SGPT, SGOT, perubahan atau berat  organ  hati  hewan  dan  histopatologi organ hati.  Organ  hati  memiliki  peran penting  dalam  proses  metabolisme.  Zat kimia akan terdetoksifikasi dan terinaktivasi dalam hati sehingga zat kimia menjadi tidak berbahaya  bagi  tubuh.  Zat  kimia  ini  dapat menimbulkan  kerusakan  hati  karena hilangnya  kemampuan regenerasi  sel  hati, sehingga  hati  akan  mengalami  kerusakan permanen yang bisa menimbulkan kematian.
a

## b
Gambar 1. Berat  organ  hati  pada  hewan uji; a. mencit  jantandan  b. mencit betina
Gambar 1 menunjukkan bahwa  berat organ  hati  setelah  diberi  perlakuan  baik kelompok  kontrol  maupun  yang  diberikan ekstrak  kering  (ekstrak  air)  bawang  putih lanang  hampir  sama  pada  jenis  kelamin jantan dan betina. Kondisi secara fisik pada kelompok  kontrol  juga  sama  dengan kelompok  perlakuan  baik  pada  kelompok mencit  jantan  ataupun  kelompok  mencit betina dimana warna organ hati yang masih merah  segar  dan  tidak  mengalami pembengkakan.
a
b
Gambar 2. Nilai SGOT pada hewan uji; a. mencit  jantan  dan  b. mencit betina
Gambar 2 menunjukkan  nilai  SGOT pada  kelompok  kontrol  dengan  kelompok yang  diberi  perlakuan  baik  pada  kelompok hewan  uji  jantan  dan  kelompok  hewan  uji betina.  Hasil  analisis one way  anova pada kedua kelompok tersebut menunjukkan tidak ada  perbedaan  bermakna  antara kelompok kontrol  dengan  kelompok  yang  diberikan ekstrak  kering  (ekstrak  air)  bawang  putih lanang (α>0,05).  Hal  ini  memperlihatkan sampai  dosis  terbesar  48.750  mg/kg  BB, belum  memberikan  pengaruh  ketoksikan pada hewan uji.
a
b
Gambar3. Nilai SGPT pada hewan uji; a.
Mencit  jantan  dan  b.  Mencit betina
Gambar 3 menunjukkan  nilai  SGPT pada  kelompok  kontrol  dengan  kelompok yang  diberi  perlakuan  baik  pada  kelompok hewan  uji  jantan  dan  kelompok  hewan  uji betina.  Hasil  analisis one way  anova pada kedua kelompok tersebut hampir
keseluruhan nilai SGPT menunjukkan tidak ada  perbedaan  bermakna (α>0,05) antara kelompok  kontrol  dengan  kelompok  yang diberikan  ekstrak  kering  (ekstrak  air) bawang  putih  lanang, tetapi  terdapat  data yang berbeda bermakna terutama pada dosis II (1.950 mg/kg BB) pada kelompok hewan uji mencit betina dengan kelompok kontrol. Data  ini  kemudian  diabaikan  karena  pada dua range dosis yang lebih besar yaitu Dosis III  dan  Dosis  IV  menunjukkan  kondisi berbeda tidak  bermakna  dengan  kondisi kontrol  negatif  yang  di  asumsikan mencit sehat.
Hasil  pengamatan  keseluruhan  pada organ hati menunjukkan pada range dosis 78
mg/kg  BB  hingga  dosis  terbesar  48.750 mg/kg  BB  belum  memberikan  ketoksikan akut pada  hewan  uji  melalui  pengamatan berat  organ  hati,  nilai  SGPT,  dan nilai SGOT.  Data  ini  juga  didukung  dengan  uji histopatologi terhadap kelompok kontrol dan kelompok  yang  diberikan  ekstrak  kering (ekstrak  air)  bawang  putih  lanang  pada
kelompok  hewan  uji  jantan  dan  betina  di mana anatomi sel hati pada kedua kelompok tersebut  sama  dan  belum  menunjukkan adanya kerusakan (gambar 4).
a b
Gambar4. Hasil uji histopatologi terhadap kelompok kontrol ( a ) dan kelompok yang diberikan ekstrak  kering  (ekstrak  air) bawang  putih  lanang dosis tertinggi 48.750 mg/kg BB ( b )

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian,  dapat disimpulkan  bahwa  pada  dosis  lebih  dari 48.750 mg/kg BB untuk mendapatkan LD 50 pada  ekstrak  kering  (ekstrak  air)  bawang putih  lanang  dan  pada  ekstrak  ini  masuk
dalam  kriteria  ‘relatif kurang  berbahaya’. Esktrak  kering  bawang  putih  lanang  yang diberikan  dalam  variasi  4  dosis  uji  belum mempengaruhi  fungsi  hati  mencit  sehingga belum  didapatkan  gejala  klinis  ketoksikan yang  signifikan  yang  terjadi  pada  seluruh hewan uji.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Kemenkes RI.  Pedoman  nasional pengendalian  tuberkulosis.  Jakarta: Kementrian Kesehatan Republik Indonesia;  2014.  Bab  I,  Pendahuluan: Hal.1-5. 2. Kemenkes  RI.  Profil  kesehatan Indonesia  tahun  2014.  Jakarta: Kementrian  Kesehatan  RI;  2015,  Bab VI,  Pengendalian  Penyakit  dan Kesehatan Lingkungan; Hal. 133-137 3. Rao  RR,  Rao  SS,  Natarajan  S, Venkarataraman  PR.  Inhibition  of Mycobacterium  tuberculosis  by  garlic extract. Nature. 1946; 157:441 4. Lindawati  NY,  Dhurhania  CE. Optimasi  kapsul  bawang  putih  lanang ( Allium  sativum Linn)  sebagai  terapi alternatif  pengobatan  TBC.  Jurnal Dinamika  Sosial  Ekonomi.  Mei  2009;
5(1): 94-110.
5. Hannan  A,  Ullah  MI,  Usman  M,
Hussain  S,  Absar  M,  Javed  K. Anti- mycobacterial activity of garlic ( Allium sativum )  against  multi-drug  resistant and non-multi-drug resistant
Mycobacterial  tuberculosis.  Pak  J Pharm Sci. 2011 January; 24(1): 81-85.
6. Viswanathan V, Phadatare AG, Mukne A.  Antimycobacterial  and  antibacterial activity  of  Allium  sativum  Bulbs. Indian  J  Pharm  Sci.  2014  May-June;
76(3): 256-261.
7. Kepala  BPOM  RI.  Peraturan  Kepala Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan Republik  Indonesia  Nomor  12  tahun 2014  tentang  Persyaratan  Mutu  Obat Tradisional. Jakarta: BPOM RI: 2014.
8. Dewoto  HR.  Pengembangan  obat tradisional Indonesia menjadi fitofarmaka.  Maj  Kedokt  Ind.  2007; Volume 57. 9. BPOM  RI.  Peraturan  kepala  badan pengawas obat dan makanan RI nomor: HK.00.05.41.1384  tentang  kriteria  dan tata laksana pendaftaran obat tradisional,  obat  herbal  terstandar  dan fitofarmaka. Jakarta: BPOM RI; 2005.
10. BPOM  RI.  Peraturan  kepala  badan pengawas obat dan makanan RI nomor 12 tahun 2014 tentang persyaratan mutu
obat  tradisional.  Jakarta:  BPOM  RI; 2014.
11. Kemenkes  RI.  Farmakope  Indonesia edisi  V. Jakarta:  Kemenkes  RI;  2014: 1560.
12. Auletta  CS.  General  toxicology.  In: Deleranko  MJ,  Auletta  CS,  editors. Handbook of Toxicology. 3rd ed. Boca Raton: CRC Press; 2014. p. 57-70 13. Deleranko  MJ.  Chemical  toxicology. In: Deleranko MJ, Auletta CS, editors. Handbook of Toxicology. 3rd ed. Boca Raton: CRC Press; 2014. p. 689.