## ANALISIS  HASIL FERMENTASI PEMBUATAN BIOETANOL DENGAN VARIASI WAKTU MENGGUNAKAN BAHAN (SINGKONG, BERAS KETAN HITAM DAN BERAS KETAN PUTIH)
Andrie Yeremia Marchelino Simanjuntak 1) , Rachmat Subagyo 2) 1,2 Program Studi Teknik Mesin Fakultas Teknik Universitas Lambung Mangkurat Jl. Akhmad Yani Km. 36 Banjarbaru, Kalimantan Selatan, 70714 e-mail: juntakandrie@gmail.com

## Abstract
This study aims to determine the levels of bioethanol from (cassava, black sticky rice,  and  white  sticky  rice)  with  the  addition  of  10  grams  of  yeast  mass,  with  a variation  of  fermentation  time  of  48  hours,  72  hours  and  96  hours  and  knowing the  ethanol  levels  in  accordance  with  National  Standards  Indonesia  (SNI).  This research  was  carried  out  by  hydrolysis  or  boiling  of  ingredients  (cassava,  black sticky rice, and white sticky rice) using 800 ml of distilled water with 30 minutes, then  fermentation  using  yeast  or  (saccharomyces  cereviseae)  and  distillation using  a  tool.  Complete  destilator  to  obtain  ethanol  from  fermentation  results which is then tested with a pen refractometer to determine whether or not ethanol is formed from the distillation process. The samples were then tested for ethanol content using the Gas Chromatography tool. The results of this study are known by conducting a test using the Gas Chromatography tool to determine the ethanol content contained in the distilled sample. The results of cassava ethanol content with 72 hours fermentation time with ethanol were 98.41%, black sticky rice with 96 hours fermentation time the ethanol content was 94.96%, and white sticky rice with 96 hours fermentation time the ethanol content was 96.67%.
Keywords: Cassava,  Black  Sticky  Rice,  White  Sticky  Rice,  Time  Fermentation, Ethanol

## PENDAHULUAN
Bahan bakar fosil (minyak bumi, gas dan batu bara) sebagai sumber energi yang tidak terbarukan memiliki banyak masalah, terutama kenaikan harga ( price escalation )  secara  global  setiap  terjadi  krisis  energi  akibat  dari  faktor-faktor seperti  cadangan  yang  berkurang  sesuai  dengan  umur  eksploitasinya. Permintaan  yang  meningkat,  jaminan  pasokan  ( supply  security )  yang  terbatas dan  pembatasan  produksi  pada  penilaian  dampak  lingkungan  yang  ketat terhadap pemanasan global ( global warming ), harus dikurangi ketergantungannya. Solusi dalam permaslahan ini adalah menggunakan sumber- sumber energi lainnya sebagai bahan bakar alternatif.
Bioetanol merupakan salah satu sumber bahan bakar alternatif yang diolah dari  tumbuhan,  dimana  memiliki  keunggulan  mampu  menurunkan  emisi  CO 2 hingga  18  %.  Menurut  Balai  Besar  Teknologi  Pati  (B2TP)  ada  3  kelompok tanaman  sumber  bioetanol  yaitu:  tanaman  yang  mengandung  pati  (seperti singkong,  kelapa  sawit,  tengkawang,  kelapa,  kapuk,  jarak  pagar,  rambutan, sirsak,  malapari,  dan  nyamplung),  bergula  (seperti  tetes  tebu  atau  molase,  nira aren,  nira  tebu,  dan  nira  surgum  manis)  dan  serat  selulosa  (seperti  batang sorgum, batang pisang, jerami, dan kayu).
Dalam  pembuatan  bioetanol  karbohidrat  merupakan  bahan  baku  yang menunjang  dalam  proses  fermentasi,  dimana  prinsip  dasar  fermentasi  adalah degradasi  komponen  pati  oleh  enzim  (Rustriningsih,  2007).  Fermentasi
mempunyai  pengertian  aplikasi  metabolisme  mikroba  untuk  mengubah  bahan baku  menjadi  produk  yang  bernilai  lebih  tinggi,  seperti  asam-asam  organik, protein sel tunggal, antibiotika dan biopolimer (Muhidin dkk., 2001).
Bioetanol  adalah  cairan  biokimia  dari  proses  fermentasi  gula  dari  sumber karbohidrat  menggunakan  bantuan  mikroorganisme.  Bioetanol  saat  ini  yang diproduksi  umumnya  berasal  dari  etanol  generasi  pertama,  yaitu  etanol  yang dibuat  dari  gula  (tebu,  molases)  atau  pati-patian  (jagung,  singkong,  dll).  Bahan- bahan tersebut adalah bahan pangan (Prastowo, 2007).
Pemutusan  rantai  polimer  tersebut  dapat  dilakukan  dengan  berbagai metode,  misalnya  secara  enzimatis,  kimiawi  ataupun  kombinasi  keduanya. Proses berikutnya adalah proses fermentasi untuk mengkonversi glukosa (gula) menjadi etanol dan CO 2 . Arah pengembangan bioetanol mulai berubah generasi kedua,  yaitu  limbah  pertanian  yang  mengandung  selulosa,  hemiselulosa,  dan lignin. Selulosa merupakan karbohidrat utama yang di sintesis oleh tanaman dan menempati hampir 60% komponen penyusun struktur tanaman.
Jumlah  selulosa  di  alam  sangat  melimpah  sebagai  sisa  tanaman  atau dalam bentuk limbah pertanian seperti jerami padi, tongkol jagung, gandum dan kedelai.  Nilai  ekonomi  senyawa  selulosa  pada  limbah  tersebut  sangat  rendah karena tidak dapat langsung dimanfaatkan oleh manusia. Sulitnya mendegradasi limbah tersebut menyebabkan petani lebih suka membakar limbah tersebut.
(Bio)Etanol  sering  ditulis  dengan  rumus  EtOH.  Rumus  molekul  etanol adalah C 2 H 5 OH atau rumus empiris C 2 H 6 O atau rumus bangunnya CH 3 -CH 2 -OH. (Bio)Etanol  merupakan  bagian  dari  kelompok  metil  (CH 3 -)  yang  terangkai  pada kelompok  metilen  (-CH 2 -)  dan  terangkai  dengan  kelompok  hidroksil  (-OH). Secara umum akronim dari (Bio)Etanol adalah EtOH (Ethyl-(OH).
Salah  satu  bahan  pokok  yang  baik  digunakan  untuk  menghasilkan bioetanol  adalah  singkong/ubi  kayu  dengan  jumlah  karbohidrat  sebesar  34,00 gram.  Namun  pada  saat  ini  Badan  Ketahanan  Pangan  Kementerian  Pertanian Indonesia  sedang  mengadakan  program  “Mengangkat  Gengsi  Singkong  untuk Memperkuat Ketahanan Pangan Alternatif” sehingga singkong lebih diutamakan untuk persediaan bahan pangan.
Kandungan  pati  yang  tinggi  pada  ubi  kayu  merupakan  substrat  yang  baik untuk menghasilkan glukosa  sebagai produk pembuatan etanol. Sebagai bahan baku,  bahan  baku  dapat  digunakan  dalam  bentuk  segar  dan  chips.  Pada dasarnya  proses  pengolahan  ubi  kayu  menjadi  etanol  meliputi  gelatinisasi  pati, diikuti  hidrolisis  pati  secara  enzimatis  menjadi  glukosa  dengan  menggunakan enzim ∝ -amilase dan glukoamilase yang selanjutnya difermantasi menjadi etanol dengan bantuan yeast atau bakteri (Anonimous, 2012).
Kemudian  ketan  hitam  juga  merupakan  salah  satu  komoditi  yang  sangat potensial  sebagai  sumber  karbohidrat,  antioksidan,  senyawa  bioaktif,  dan  serat yang  penting  bagi  kesehatan  (Yanuar,  2009).  Beras  ketan  hitam  merupakan varietas  beras  yang  patinya  mengandung  amilopektin  sebesar  92-98%  dan jumlah karbohidrat sebesar 74,5 gram. Hal ini mengakibatkan beras ketan hitam memiliki karakteristik lekat atau lengket setelah dikukus. Salah satu potensi lain beras ketan hitam adalah kandungan seratnya yang sangat tinggi karena dalam pengolahannya beras ketan hitam tidak mengalami proses penyosohan.
Selanjutnya ada beras ketan putih yang merupakan salah satu varietas dari padi  yang  merupakan  tumbuhan  semusim  dengan  jumlah  karbohidrat  yang sangat besar yaitu 79,4 gram. Helaian daun berbentuk garis dengan panjang 15- 50  cm.  Pada  waktu  masak,  buahnya  yang  berwarna  ada  yang  rontok  dan  ada yang  tidak.  Buah  yang  dihasilkan  dari  tanaman  ini  berbeda  ada  yang  kaya  pati dan  ini  disebut  beras,  sedangkan  buah  kaya  perekat  disebut  ketan  (Hasanah, 2008).
Di dalam penelitian ini juga menggunakan proses hidrolis yang merupakan reaksi  kimia  yang  memecah  molekul  menjadi  dua  bagian  dengan  penambahan molekul  air  (H 2 O),  dengan  tujuan  untuk  mengkonversi  polisakarida  menjadi monomer-monomer  sederhana.  Satu  bagian  dari  molekul  memiliki  ion  hidrogen (H + )  dan  bagian  lain  memiliki  ion  hidroksil  (OH - ).  Umumnya  hidrolisis  ini  terjadi saat garam dari asam lemah atau basa lemah (atau keduanya) terlarut di dalam air. Reaksi umumnya yakni sebagai berikut:
AB+H 2 O→AH + BOH                                                                                      (1)
Akan  tetapi,  dalam  kondisi  normal  hanya  beberapa  reaksi  yang  dapat terjadi  antara  air  dengan  komponen  organik.  Penambahan  asam,  basa,  atau enzim  umumnya  dilakukan  untuk  membuat  reaksi  hidrolisis  dapat  terjadi  pada kondisi  penambahan  air  tidak  memberikan  efek  hidrolisis.  Asam,  basa  maupun enzim  dalam  reaksi  hidrolisis  disebut  sebagai  katalis,  yakni  zat  yang  dapat mempercepat terjadinya reaksi (Lowry, 1951).
Fermentasi  arti  kata fermnetasi  selama  ini  berubah-ubah.  Kata fermentasi berasal dari Bahasa Latin “fervere” yang berarti merebus (to boil). Arti kata dari Bahasa Latin tersebut dapat dikaitkan dengan kondisi cairan bergelembung atau mendidih.  Keadaan  ini  disebabkan  adanya  aktivitas  ragi  pada  ekstraksi  buah- buahan  atau  biji-bijian  (Suprihatin,  2010).  Ragi  mengubah  gula  menjadi  etanol dan karbon dioksida sesuai rumus di bawah ini:
C 6 H 12 O 6 →2C 2 H 5 OH+2CO 2 (2)
Gelembung-gelembung karbondioksida dihasilkan dari katabolisme anaerobik  terhadap  kandungan  gula.  Fermentasi  mempunyai  arti  yang  berbeda bagi ahli biokimia dan mikrobiologi industri. Arti fermentasi pada bidang biokimia di  hubungkan  dengan  pembangkitan  energi  oleh  katabolisme  senyawa  organik. Pada  bidang  mikrobiologi  industri,  fermentasi  mempunyai  arti  yang  lebih  luas, yang mengGambarkan setiap proses untuk menghasilkan produk dari pembiakan mikroorganisme.
Setelah  selesai  fermentasi  kemudia  dilanjutkan  dengan  destilasi  yang merupakan  penguapan  cairan  dan  pengembunan  kembali  uap  tersebut  pada suhu  titik  didih.  Titik  didih  suatu  cairan  adalah  suhu  dimana  tekanan  uapnya sama  dengan  tekanan  atmosfer.  Cairan  yang  diembunkan  kembali  disebut destilat.  Tujuan  destilasi  adalah  pemurnian  zat  cair  pada  titik  didihnya,  dan memisahkan cairan tersebut dari zat padat yang terlarut atau dari zat cair lainnya yang  mempunyai  perbedaan  titik  didih  cairan  murni.  Pada  destilasi  biasa, tekanan  uap  di  atas  cairan  adalah  tekanan  atmosfer  (titik  didih  normal).  Untuk senyawa  murni,  suhu  yang  tercatat  pada  termometer  yang  ditempatkan  pada tempat  terjadinya  proses  destilasi  adalah  sama  dengan  titik  didih  destilat (Sahidin, 2008).
Destilasi  sederhana  atau  destilasi  biasa  adalah  teknik  pemisahan  kimia untuk memisahkan dua atau lebih komponen yang memiliki perbedaan titik didih yang  jauh.  Suatu  campuran  dapat  dipisahkan  dengan  destilasi  biasa  ini  untuk memperoleh  senyawa  murninya.  Senyawa-senyawa  yang  terdapat  dalam campuran akan menguap pada saat mencapai titik didih masing – masing.

## Gambar 1. Destilasi Sederhana
Dalam  pemanfaatan  bioetanol  diarahkan  untuk  memberikan  kontribusi yang  signifikan  terhadap  bauran  energi  nasional  ( national  energy  mix )  terutama sebagai  bahan  bakar  pencampur  ataupun  pensubstitusi  bensin.  Pemerintah melalui Dewan Standarisasi Nasional (DSI) telah menetapkan Standar Nasional Indonesia  (SNI)  untuk  bioetanol  dengan  tujuan  melindungi  konsumen  (dari  segi mutu),  produsen,  dan  mendukung  perkembangan  industri  bioetanol.  Di Indonesia kadar  etanol  minimum  yang  digunakan  sebagai  bahan  bakar  jenis bioetanol sebesar (94,0 - 99,5%).
Standar  Nasional  Indonesia  (SNI)  bioetanol  disusun  oleh  Panitia  Teknis Energi  Baru  dan  Terbarukan  (PTEB)  melalui  tahapan  -  tahapan  baku  tata  cara perumusan  standar  nasional.  Penyusunan  SNI  bioetanol  Terdenaturasi  untuk gasohol  ini  dilakukan  dengan  memperhatikan  standar  sejenis  yang  sudah berlaku  di  negara-negara  lain  yang  pemakaian  bioetanolnya  sudah  luas  dan mencapai  tahap  komersial.  Faktor  lain  yang  juga  diperhatikan  adalah keberagaman  bahan  baku  bioetanol  di  tanah  air  (Badan  Standar  Indonesia, 2012).
SNI ini disusun oleh Panitia Teknis Perumusan Standar Nasional Indonesia 27-04:  Bioenergi  melalui  proses/prosedur  perumusan  standar  dan  terakhir dibahas dalam Forum Konsensus Panitia Teknis Bioenergi di Bali pada tanggal 1 Desember  2011,  yang  dihadiri  oleh  anggota  panitia  teknis  dan  narasumber terkait.
SNI  bioetanol  ini  merupakan  revisi  dari  SNI  7390:2008,  bioetanol terdenaturasi untuk gasohol, yang disusun dengan memperhatikan masukan dari konsumen,  produsen  dan  penyalur  serta  standar  sejenis  yang  sudah  berlaku  di negara-negara  lain  yang  pemakaian  bioetanolnya  sudah  luas  dan  mencapai tahap  komersial.  Secara  substansial  perubahan  dari  SNI  7390:2008  adalah perubahan  syarat  kadar  metanol,  penambahan  denaturan  baru denatonium benzoat ,  perubahan  kadar  air,  perubahan  kadar klorin ,  dan  penghapusan parameter pH.

## METODE PENELITIAN
Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  metode  eksperimen. Singkong,  Beras  ketan  hitam,  dan  Beras  ketan  putih  di  fermentasi  dengan menggunakan ragi sebanyak 10 gram dan variasi waktu 48 jam, 72 jam, dan 96 jam, kemudian hasil fermentasi di destilasi dengan suhu 90º C. Selanjutnya hasil dari destilasi di uji di laboratorium untuk mengetahui kadar etanol nya.

## Alat dan Bahan Penelitian
Botol,  balon,  kompor,  timbangan  digital, gelas  ukur,  sepaket  alat  destilasi, mikroskop,panci,spatula,corong, pen refractometer , gas chromatograpy.
Singkong,  beras  ketan  hitam,  dan  beras  ketan  putih  merupakan  bahan baku utama dan ragi roti ( Saccharomeyces Cereviseae ) fermipan.

## Pengolahan Bahan
Singkong dikupas lalu dipotong-potong kemudian dikeringkan lalu ditumbuk hingga  halus,  untuk  beras  ketan  hitam  dan  beras  ketan  putih  digiling menggunakan mesin penggiling beras.

## Proses Hidrolisis
Timbang  masing-masing  tepung  dari  singkong,  beras  ketan  hitam  dan beras ketan putih sebanyak 100 gram. Kemudian dicampur dengan air aquades sebanyak 800ml, campuran direbus selama 30 menit dengan suhu 100 0 C sambil diaduk

## Proses Fermentasi
Siapkan  botol  untuk tempat fermentasi, hasil  hidrolisis  didinginkan  sampai suhu 30ºC, campurkan ragi 10 gram, tutup mulut botol dengan balon, variasikan waktu fermentasi 48, 72 dan 96 jam

## Proses Destilasi
Memanaskan  campuran  larutan  hasil  fermentasi  pada  suhu  90 0 C  setara titik  didih  etanol  selama  2  jam,  uap  etanol  mengalir  melalui  pipa  kondensor sehingga kembali menjadi etanol cair.

## Pengujian Sampel Etanol
Pengujian  dilakukan  dengan  menggunakan  alat pen  refractometer untuk mengetahui  kadar  etanol  yang  terbentuk,  kadar  etanol  tertinggi  dari  hasil  uji dengan pen refractometer dilakukan pengujian dengan alat gas chromatography untuk  mengetahui  kadar  etanol  sebenarnya  karena  alat gas  chromatography hasil lebih akurat.

## Diagram Alir Penelitian
Diagram alir penelitian ini dapat dilihat pada Gambar 2.

## Gambar 2. Diagram Alir Penelitian

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Dalam  analisa  variasi  waktu  fermentasi  terhadap  kadar  etanol  data  yang diambil  merupakan  kadar  etanol  dan  volume  etanol  di  Workshop  Teknik  Kimia Universitas  Lambung  Mangkurat  dan  Laboratorium  Energi  LPPM  Institut Teknologi  Sepuluh  Nopember  pada  bulan  Mei  2018  sampai  dengan  Juli  2018. Data penelitian ini dapat dilihat dalam Tabel 1.
Tabel 1. Hasil data pengujian dengan pen refractometer dan gas chromatography No Bahan Massa Ragi (Gram) Waktu Fermentasi (Jam) Volume Hasil Destilasi (ml) Kadar Etanol (%) 1. Singkong 10 48 36 3,0 2. Singkong 10 72 25 6,0 3. Singkong 10 96 23 2,0 4. Beras Ketan Hitam 10 48 20 8,0 5. Beras Ketan Hitam 10 72 25 2,0 6. Beras Ketan Hitam 10 96 19 17,50 7. Beras Ketan Putih 10 48 25 2,50 8. Beras Ketan Putih 10 72 25 2,0 9. Beras Ketan Putih 10 96 21 8,0

## Pengaruh Variasi Waktu Fermentasi Terhadap Kadar Etanol
Gambar 3.  Grafik Pengaruh Variasi Waktu Fermentasi Singkong Terhadap Kadar Etanol
Berdasarkan  Gambar  3  pengaruh  variasi  waktu  fermentasi  singkong terhadap kadar etanol menunjukan variasi dengan waktu fermentasi yang paling cepat  yaitu  48  jam  mengandung  kadar  etanol  3,0%,  waktu  fermentasi  72  jam mengandung  kadar  etanol  6,0%,    dan  waktu  fermentasi  96  jam  mengandung kadar etanol 2,0% dengan massa ragi yang sama yaitu 10 gram.
Dilihat pada bahan singkong dengan waktu fermentasi 96 jam kadar etanol yang dihasilkan sangat rendah. Disebabkan pertumbuhan jamur yang mengubah karbohidrat  menjadi  etanol  yang  mulai  habis  dan  mati  pada  saat  fermentasi berlangsung  yang  mengakibatkan  turun  nya  kadar  etanol,  seperti  yang ditunjukkan pada Gambar 7.
3,0% 6,0% 2,0% 0,0% 1,0% 2,0% 3,0% 4,0% 5,0% 6,0% 7,0% 48 jam 72 jam 96 jam Etan o l Waktu Fermentasi Singkong
Gambar 4.  Grafik Pengaruh Variasi Waktu Fermentasi Beras Ketan Hitam Terhadap Kadar Etanol
Berdasarkan  Gambar  4  pengaruh  variasi  waktu  fermentasi  beras  ketan hitam  dengan  kadar  etanol  menunjukan  variasi  dengan  waktu  fermentasi  yang paling cepat  yaitu 48 jam  mengandung kadar etanol 8,0%, waktu fermentasi 72 jam mengandung kadar etanol 2,0%, dan waktu fermentasi 96 jam mengandung kadar etanol 17,5% dengan massa ragi yang sama yaitu 10 gram.
Dilihat  pada  bahan  beras  ketan  hitam  dengan  waktu  fermentasi  72  jam kadar  etanol  yang  dihasilkan  sangat  rendah.  Disebabkan  pertumbuhan  jamur yang  merubah  karbohidrat  menjadi  etanol  yang  tidak  merata  pada  saat fermentasi  berlangsung  yang  mengakibatkan  turun  nya  kadar  etanol,  seperti yang ditunjukkan pada Gambar 8.
Gambar 5.  Grafik Pengaruh Variasi Waktu Fermentasi Beras Ketan Hitam Terhadap Kadar Etanol
Berdasarkan  Gambar  5    pengaruh  variasi  waktu  fermentasi  beras  ketan putih  dengan  kadar  etanol  menunjukan  variasi  dengan  waktu  fermentasi  yang paling cepat  yaitu 48 jam mengandung kadar etanol 2,5%, waktu fermentasi 72 jam mengandung kadar etanol 2,0%,  dan waktu fermentasi 96 jam mengandung kadar etanol 8,0% dengan massa ragi yang sama yaitu 10 gram.
Dilihat  pada  bahanberas  ketan  putih  dengan  waktu  fermentasi  72  jam kadar  etanol  yang  dihasilkan  sangat  rendah.  Disebabkan  pertumbuhan  jamur mengubah  karbohidrat  menjadi  etanol  tidak  merata  pada  saat  fermentasi
8,0% 2,0% 17,5% 0,0% 5,0% 10,0% 15,0% 20,0% 48 jam 72 jam 96 jam K A d ar E tan o l Waktu Fermentasi Beras Ketan Hitam
2,5% 2,0% 8,0% 0,0% 1,0% 2,0% 3,0% 4,0% 5,0% 6,0% 7,0% 8,0% 9,0% 48 jam 72 jam 96 jam K ad ar E tan o l Waktu Fermentasi Beras Ketan Putih
berlangsung  yang  mengakibatkan  turun  nya  kadar  etanol,  seperti  yang ditunjukkan pada Gambar 9.
Pengukuran kadar etanol dengan Gas Chromatography (GC9700) Berikut ini adalah hasil pengukuran kadar etanol dengan menggunakan alat Gas Chromatography.
Gambar 6. (a) Grafik Kadar Etanol Singkong Dengan Menggunakan GC
Gambar 6. (b) Grafik Kadar Etanol Beras Ketan Hitam Dengan Menggunakan GC
Gambar 6. (c) Grafik Kadar Etanol Beras Ketan Putih Dengan Menggunakan GC
Dari  Gambar  6  a,  b  dan  c  menunjukkan  hasil  pengukuran  etanol  dengan menggunakan  alat  Gas  Kromatografi.  Pada  Gambar  6(a)  Singkong  dengan waktu  fermentasi  72  jam  menunjukkan  hasil  kadar  etanol  sebesar  98,41%, sedangkan  pada  Gambar  6(b)  Beras  Ketan  Hitam  dengan  waktu  fermentasi  96 jam  menunjukkan  hasil  kadar  etanol  sebesar  94,96%  dan  pada  Gambar  6(c) Beras  Ketan  Putih  dengan  waktu  fermentasi  96  jam  menunjukkan  hasil  kadar etanol sebesar 96,67%.

## Pertumbuhan Jamur Pada Proses Fermentasi
Proses fermentasi tergantung pada pertumbuhan jamur. Jamur inilah yang berperan  aktif  dalam  proses  fermentasi  dengan  merombak  glukosa  menjadi alkohol.  Menurut  Widiyaningrum  (2009),  terjadinya  pertumbuhan  jamur berhubungan  dengan  aktifitas  enzim  amilase  yang  mengubah  pati  menjadi maltosa, dan dengan enzim maltase, maltosa akan dihidrolisis menjadi glukosa. Dengan adanya enzim-enzim ini Saccharomyces cerevisiae memiliki kemampuan untuk mengkonversi baik gula dari kelompok monosakarida maupun dari kelompok disakarida.
Jika  gula  yang  tersedia  dalam  substrat  merupakan  gula  disakarida  maka enzim  invertase  akan  bekerja  menghidrolisis  disakarida  menjadi  monosakarida. Setelah  itu,  enzim  zymase  akan  mengubah  monosakarida  tersebut  menjadi alkohol dan CO 2 .
(A) (B) (C)
Gambar 7.  Pertumbuhan Jamur Proses Fermentasi pada Singkong: (a) Waktu 48 jam, (b) Waktu 72 jam, dan (c) Waktu 96 jam
Pertumbuhan Jamur pada Singkong (48 Jam) dapat terlihat di Gambar 7(A) perkembangan  jamur  yang  mulai  bertumbuh  dan  berkembang  terlihat  pada bunga yang tumbuh ditunjukkan tanda lingkaran warna putih, dan pada Gambar
7(B)  perkembangan  jamur  berkembang  dengan  sangat  banyak  terlihat  pada serabut  yang  banyak  seperti  ditunjukkan  tanda  lingkaran  warna  kuning. Sementara  itu  pada  Gambar  7(C)  perkembangan  jamur  mulai  menurun  terlihat pada  serabut  yang  mulai  berkurang  seperti  ditunjukkan  tanda  lingkaran  warna biru.
(A)                                (B)
(C)
Gambar 8.  Pertumbuhan Jamur Proses Fermentasi Beras Ketan Hitam (A). Waktu Fermentasi 48 Jam, (B). Waktu Fermentasi 72 Jam Dan (C). Waktu Fermentasi 96 Jam
Pertumbuhan  Jamur  pada  Beras  ketan  hitam.  Gambar  8(A)  terlihat  jamur berkembang  seperti  yang  ditunjukkan  lingkaran  putih,  pada  Gambar  8(B) perkembangan  jamur  terlihat  serabut  bertumbuh  tetapi  tidak  terlalu  banyak seperti yang ditunjukkan Gambar kuning. Sementara itu pada Gambar 8(C) jamur berkembang  terlihat  dengan  banyaknya  serabut  seperti  yang  ditunjukkan Gambar biru.
(A) (B)
(C)
Gambar 9.  Pertumbuhan Jamur Fermentasi Beras Ketan Putih (A). Waktu
Fermentasi 48 Jam, (B). Waktu Fermentasi 72 Jam dan (C).
Waktu Fermentasi 96 Jam
Pertumbuhan  jamur  pada  beras  ketan  putih,  terlihat  pada  lingkaran  putih Gambar 9(A) perkembangan jamur yang mulai bertumbuh terlihat serabut  mulai keluar  dari  bunga,  dan  terlihat  pada  lingkaran  kuning  Gambar  9(B) perkembangan  jamur  yang  tidak  terlalu  banyak  tetapi  serabut  sudah  keluar semua  dari  bunganya.  Sementara  itu  terlihat  pada  lingkaran  biru  Gambar  9(C) perkembangan  jamur  berkembang  sangat  pesat  terlihat  serabut  yang  sangat banyak.
Pada  proses  pertumbuhan  jamur  diatas  dapat  dilihat  bahwa  pertumbuhan jamur  sangat  berpengaruh  dengan  tinggi  rendahnya  etanol  yang  dihasilkan setelah proses fermentasi.

## Kualitas Kadar Etanol Menurut Standar Nasional Indonesia
Berdasarkan  data  hasil  pengujian  di  atas,  kandungan  etanol  terbaik  dari bahan singkong dengan waktu fermentasi 72 jam dengan kadar  etanol 98,41%, beras ketan hitam dengan waktu fermentasi 96 jam kadar etanolnya 94,96%, dan beras ketan putih dengan waktu fermentasi 96 jam kadar etanolnya 96,67%. itu di dapat setelah dilakukan pengujian etanol menggunakan alat Gas Kromatografi guna mengetahui kadar kemurnian etanol sebenarnya.
Mengacu  pada  SNI  7390:  2012  yang  menyatakan  bahwa  kadar  etanol minimum  yang  digunakan  sebagai  bahan  bakar  jenis  bioetanol  sebesar  (94,0  - 99,5%) (Sumber: Badan Standarisasi Nasional, 2012). Etanol pada penelitian ini dapat di gunakan sebagai bahan baku pembuatan bioetanol.

## KESIMPULAN
Kesimpulan  yang  didapatkan  dari  penelitian  “Analisis  Hasil  Fermentasi Pembuatan  Bioetanol  Dengan  Variasi  Waktu  Menggunakan  Bahan  (Singkong, Beras Ketan Hitam Dan Beras Ketan Putih adalah:
1. Proses  fermentasi  dalam  penelitian  ini  dapat  berjalan  dan  menghasilkan etanol. Hasil kadar etanol pada singkong dengan waktu fermentasi 72 jam dengan  etanol  sebesar  98,41%,  beras  ketan  hitam  dengan  waktu fermentasi 96 jam kadar etanolnya 94,96%, dan beras ketan putih dengan waktu fermentasi 96 jam kadar etanolnya 96,67%.
2. Mengacu  pada  SNI  7390:  2012,  Etanol  hasil  fermentasi  dari  singkong, beras  ketan  hitam  dan  beras  ketan  putih  pada  penelitian  ini  termasuk kategori Standar Nasional Indonesia.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonimous, 2012. Singkong dapat memperkuat ketahanan pangan. http://www.ekon.go.id/news/2012/04/17/singkong-dapat-perkuat- ketahananpangan.
Badan  Standarisasi  Nasional  (BSN).  2012. Rancangan  Standar  Nasional Indonesia . Jakarta.
Hasanah,  H.,  2008. Pengaruh  Lama  Fermentasi  Terhadap  Kadar  Alkohol TapeHitam dan Tape Singkong. Skripsi. Jurusan Kimia Fakultas Sains dan Teknologi. Universitas Islam Negeri, Malang.
Lowry,  O.H.,  et  al.  (1951) Protein  measurement  with  folin  phenol reagent.  The Journal of Biological Chemistry, 193, 265-275.
Muhidin  N.H.,  N.  Juli,  dan  I.N.P.  Aryantha.  2001. Peningkatan  Kandungan Protein Kulit Umbi Ubi Kayu Melalui Proses Fermentasi. JMS. Vol. 6. Prastowo,  Bambang,  2007. Potensi  Sektor  Pertanian  sebagai  Penghasil  dan Pengguna Energi Terbarukan (The agriculture sector as source and user of the  renewable  energy). Indonesia  Center  for  Estate  Crops  Research  and Development. Perspektif: Review Penelitian Tanaman Industri 6(2): 85-93.
Sahidin. 2008. Penuntun Praktikum Kimia Organik I. Unhalu. Kendari. Suprihatin. 2010. Teknologi Fermentasi . UNESA University Press. Surabaya. Widiyaningrum,  C.  2009.  Pengaruh  Bahan  Penutup  Terhadap  Kadar  Alkohol pada  Proses  Bioetanol  Ubi  Kayu  Bahan  Bakar  Masa  Depan.  Jakarta:  PT. Agromedia Pustaka.
Yanuar W. 2009. Studi Aktivitas Antioksidan dan Imunomodulator Serealia Lokal Nonberas.