## Formulasi Dan Uji Aktivitas Antiradikal Bebas Granul  Effervescent  Sari  Buah  Duwet (Syzygium cumini L.) Dengan Metode DPPH
Formulation  And  Free  Antiradical  Activity  Test  Of  Effervescent Granules Of Java Plum Juice (Syzygium cumini L.) By DPPH Method
Afrah  Baitunnisyah,  Windah  Anugrah  Subaidah*,  Dyke  Gita  Wirasisya, Wahida Hajrin, Yohanes Juliantoni
Laboratorium  Penelitian  dan  Laboratorium  Formulasi  dan  Teknologi  Sediaan,  Jurusan Farmasi, Fakultas Kedokteran, Universitas Mataram,  Jl Majapahit  No.62, Mataram 83125, Indonesia *E-mail: windahanugrah@unram.ac.id

## Abstrak
Buah  duwet  diketahui  memiliki  aktivitas  antioksidan  namun  pengunaan  di masyarakat belum optimal sehingga perlu diformulasikan ke dalam sediaan farmasi  yang  lebih  efektif.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  menguji  aktivitas antiradikal  bebas  sari  buah  duwet  kemudian  diformulasi  dalam  bentuk sediaan  granul  effervescent  dan  menguji  aktivitas  antiradikal  bebasnya. Metode  pengujian  aktivitas  penghambat  radikal  bebas  DPPH  sari  buah duwet  menggunakan  instrumen  spektrofotometri  UV-Vis.  Formulasi  granul effervescent  sari  buah  duwet  dibuat  dengan  metode  granulasi  basah, kemudian  dilakukan  pengujian  aktivitas  antiradikal  bebas  menggunakan metode  DPPH.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  sari  buah  duwet memiliki  nilai  IC 50 sebesar  168,266  µg/ml.  Hasil  evaluasi  sifat  fisik  granul effervescent  yang  didapat  yakni  kadar  air  5,46  ±  102%,  waktu  alir  33,02  ± 0,474 detik, sudut diam sebesar 30,95°, waktu larut 1 menit 35 detik ± 0,01 detik,  dan  pH  7.  Berdasarkan  penelitian  ini  disimpulkan  bahwa  sari  buah duwet  memiliki  aktivitas  antiradikal  bebas  yang  sedang  dan  dapat diformulasi  menjadi  granul  effervescent  dengan  hasil  evaluasi  sifat  fisik yang  baik,  namun  tidak  memiliki  aktivitas  antiradikal  bebas  setelah diformulasi.
Kata kunci: Buah duwet, DPPH, antioksidan, granul effervescent

## Abstract
Java  plum’s  is  known  have  antioxidant  activity  but  unfortunately,  the utilization of this fruit is not optimal. For this reason, that java plum needs to be  formulated  into  more  effective  pharmaceutical  preparations.  The objective  of  our  research  was  to  test  free  antiradical  activity  of  java  plum juice,  formulated  and  tested  the  activity  of  antiradical  of  effervescent granules Java plum.The research method used included making java plum juice, phytochemical screening, and testing for DPPH free radical inhibiting

## Artikel Penelitian
activity  using  UV-Vis  spectrophotometry.  The  effervescent  granule formulation  of  java  plum  juice  was  made  by  wet  granulation  method,  then tested for free antiradical activity using the DPPH method. The results were showed that java plum juice had free radical inhibitory activity with 168,266 µg/ml. The results of evaluation granule effervescent were moisture content of 5.46 ± 102%, flow time of 33.02 ± 0.474 seconds, angle of rest of 30.95, dissolution time of 1 minute 35 seconds ± 0.01 seconds, and pH  7. Based on  this  study,  it  was  concluded  that  java  plum  juice  had  moderate  free antiradical  activity  and  could  be  formulated  into  effervescent  granules  with good physical properties evaluation results, but did not have free antiradical activity after it was formulated.
Keywords:  Java  plum,  free  radicals  prevention  DPPH,  antioxidant, effervescent granules

## PENDAHULUAN
Radikal  bebas  merupakan  suatu  atom  atau  molekul  yang  mempunyai  satu elektron atau lebih yang tidak berpasangan sehingga secara kimiawi bersifat reaktif  (Winarsi,  2007).  Radikal  bebas  berinteraksi  melalui  reaksi  oksidasi dengan bagian tubuh yang tersusun atas lemak, protein, karbohidrat, DNA, dan  RNA  sehingga  dapat  menimbulkan  penyakit  (Khaira,  2010). Antioksidan  dapat  menghambat  molekul  radikal  bebas  dengan  cara mendonorkan  satu  elektronnya  pada  radikal  bebas  sehingga  tidak  lagi mengganggu  metabolisme  tubuh  (Rahmi,  2017).  Senyawa  antioksidan sintetik dapat  menyebabkan  efek  samping  berbahaya yang  mungkin  terjadi ketika  penggunaannya  berlebihan  atau  dalam  jangka  waktu  yang  lama (Gharavi  et  al.,  2007).  Kekhawatiran  adanya  kemungkinan  efek  samping dari antioksidan sintetik ini menyebabkan antioksidan alami dari bahan alam terus dieksplorasi.
Beberapa  golongan  senyawa  dari  bahan  alam  yang  berpotensi  sebagai antioksidan  alami  adalah  flavonoid,  tanin,  polifenol,  vitamin  C,  vitamin  E dan  karotenoid  (Prior,  2003).  Salah  satu  tumbuhan  yang  kaya  akan kandungan senyawa tersebut adalah buah duwet (Syzygium cumini L.). Buah duwet merupakan salah satu buah lokal Indonesia, memiliki rasa yang sepat asam  dan  berwarna  ungu  jika  telah  matang  (Dalimartha,  2003).  Proses pengolahan  buah  duwet  dimasyarakat  adalah  jus  dan  diminum  secara langsung (Silalahi, 2018).  Buah duwet digunakan sebagai terapi tambahan diabetes  tipe  2.  Hal  ini  disebabkan  oleh  kandungan  antosianin  didalamnya (Swami,  2012).  Selain  itu,  kandungan  flavonoid,  fenolik,  karatenoid  dan vitamin  dapat  menurunkan  resiko  penyakit  degeneratif  dengan  cara mereduksi  stress  oksidatif  dan  menghambat  oksidasi  makromolekuler (Kubola, 2011).
Berdasarkan  uraian  tersebut,  buah  duwet  memiliki  potensi  sebagai  sumber antioksidan  sayangnya  pemanfaatan  buah  masih  sangat  sedikit  dan  masih sederhana,  maka  diperlukan  dukungan  teknologi  untuk  pengembangannya. Bentuk  sediaan  granul  effervescent  merupakan  salah  satu  alternatif  baru dalam  meningkatkan  daya  konsumsi  masyarakat  (Anam  et  al.,  2013). Bentuk  sediaan  granul  effervescent  memiliki  keuntungan  yaitu  penyerapan cepat  dan  pelepasan  obat  di  luar  tubuh  yaitu  ketika  granul  effervescent dilarutkan dalam air (Siregar et al., 2010). Oleh karena itu, perlu pemilihan
formula  yang  tepat  agar  dapat  menghasilkan  granul  effervescent  yang memenuhi sifat fisik dan memiliki manfaat sebagai antioksidan.

## BAHAN DAN METODE

## Pembuatan sari buah duwet
Buah duwet yang matang dan segar sebanyak 2 kg dipisahkan dari bijinya. Daging buah serta kulit diblender lalu diambil sarinya. Sari yang diperoleh sebanyak 1,5 kg kemudian dilakukan proses liofilisasi.
Pembuatan larutan DPPH (0,4 mM)
Sejumlah  15,8  mg  DPPH  (Sigma-Aldrich)  (BM  394,32)  ditimbang  dan dilarutkan dalam 100 mL metanol p.a (Merck) dalam labu ukur.

## Penentuan panjang gelombang maksimum DPPH
Larutan  stok  DPPH  0,4  mM  diambil  sebanyak  1  mL,  2  mL,  dan  3  mL kemudian  ditambahkan  metanol  p.a  sampai  10  mL,  dilakukan  scanning serapan  maksimum  dengan  spektrofotometer  UV-Vis  (Analytic  Jena Specord ® 200 plus) pada panjang gelombang 400-600 nm.

## Penentuan operating time
Vitamin C (Merck) konsentrasi 6 μ g/mL diambil sebanyak 1 mL ditambah 1  mL  larutan  DPPH  0,4  mM  dan  ditambahkan  metanol  p.a  sampai  tanda batas labu ukur 10 mL. Larutan di vortex (VM-200 mixer gemmy) selama 1  menit dan diukur  absorbansinya pada menit  ke 0, 5,  10, 15, 20, 25, 30, 35,  40,  45,  dan  50  menit  pada  panjang  gelombang  maksimum  yang didapatkan.

## Pengujian antioksidan sari buah duwet
Sejumlah  200  mg  sari  buah  duwet  dilarutkan  dalam  200  mL  akuades sebagai  larutan  induk.  Kemudian  dibuat  berbagai  konsentrasi  40;  60;  80; 100 μ g/ml. Selanjutnya kedalam labu  ukur 10 mL, dimasukkan 1 mL sari buah  duwet  berbagai  konsentrasi  dan  ditambahkan  1  mL  DPPH  0,4  mM lalu  ditambahkan  metanol  p.a  (Merck)  sampai  tanda  batas.  Larutan  di vortex 1 menit dan diinkubasi selama operating time. Serapan diukur pada panjang  gelombang  maksimum  yang  diperoleh.  Sebagai  pembanding digunakan vitamin C konsentrasi 2; 4; 6; 8 μ g/ml.
Perhitungan nilai IC 50
Nilai  IC 50 dihitung  berdasarkan  %  inhibisi  terhadap  radikal  DPPH  dari masing-masing  konsentrasi  larutan  dan  didapatkan  dari  persamaan  garis regresi  linier  y=  a  +  bx.  Nilai  y  diganti  dengan  angka  50,  sehingga didapatkan nilai x yang menunjukkan nilai IC 50 .
Formula granul effervescent
Tabel 1. Formula Granul Effervescent Sari Buah Duwet Bahan Formula Sari buah duwet 5 % Asam sitrat 6,95 % Asam tartrat 13,9 % Natrium bikarbonat 23,65 % Aspartam 1 % PVP 1,5 % Laktosa ad 100 % Etanol 96% q.s
Formula  granul  effervescent  sari  buah  duwet  dapat  dilihat  pada  Tabel  1. Metode  yang  digunakan  yaitu  granulasi  basah.  Komponen  asam  yang terdiri  atas  sari  buah  duwet  yang  sudah  dikeringkan  dengan  sebagian laktosa (Grande), asam sitrat (Suntran chemical), asam tartrat (Guangzhou ZIO  Chemical),  sebagian  aspartame  (Sinosweet),  serta  sebagaian  PVP (Nanhang  Industrial)  yang  dibasahi  dengan  etanol  96%  (Merck)  hingga massa  dapat  dikepal.  Komponen  basa  yaitu  natrium  bikarbonat,  sisa laktosa,  sisa  aspartam,  serta  sisa  PVP  yang  dibasahi  dengan  etanol  96% hingga  masa  dapat  dikepal.  Masing-masing  komponen  diayak  dengan ayakan No. 16, lalu dikeringkan dalam oven 40℃ selama 24 jam. Setelah kering komponen asam dan komponen basa dicampur hingga homogen.
Evaluasi sifat fisik granul effervescent
Evaluasi  granul  effervescent  meliputi  organoleptis,  kadar  air,  waktu  alir dan sudut diam, waktu larut, dan pemeriksaan pH (Ohaus Starter 300).
Pengujian antioksidan granul effervescent sari buah duwet
Granul  effervescent  sari  buah  duwet  sebanyak  3,4  gr  (setara  200  mg  sari buah  duwet)  ditimbang  kemudian  dilarutkan  dalam  200  mL  akuades sebagai  larutan  induk.  Kemudian  dibuat  berbagai  konsentrasi  40;  60;  80; 100 μ g/ml.  Selanjutnya  kedalam  labu  ukur  10  mL,  dimasukkan  1  mL masing-masing  konsentrasi sari buah duwet  kemudian  ditambahkan 1 mL DPPH 0,4 mM lalu ditambahkan metanol p.a sampai tanda batas. Serapan diukur pada panjang gelombang maksimum yang diperoleh.

## HASIL
Pembuatan Sari Buah duwet
Proses  liofilisasi  1,5  kg  sari  buah  duwet  menghasilkan  sari  buah  duwet kental sebanyak 306,7137 gr. Nilai rendemen sari buah duwet kental yang diperoleh sebesar 20,45%.

## Pengujian antioksidan sari buah duwet
Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan pada sari buah duwet kental dan vitamin C dengan hasil pengujian dapat dilihat pada Tabel 2 dan Tabel 3, kemudian  dilakukan  pembuatan  granul  effervesvent  sari  buah  duwet dengan hasil evaluasi  sifat fisik granul  seperti yang terlihat  pada Tabel 4. Selanjutnya  granul  granul  effervesvent  sari  buah  duwet  dilakukan pengujian  aktivitas  antioksidan  dengan  metode  DPPH  yang  dapat  dilihat pada Tabel 5.
Tabel 2.  Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Sari Buah Duwet dengan Metode DPPH Konsentrasi (µg/ml) Rata-rata Absorbansi ± SD Blanko % Inhibisi 40 0,4764 ± 0,0009073 0,5085 6,306 60 0,4125 ± 0,001868 18,87 80 0,3956 ± 0,0009290 22,19 100 0,3733 ± 0,0008540 26,58
T abel 3.  Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Vitamin C dengan Metode DPPH
Gambar 1. Grafik rerata persen inhibisi sari buah duwet
Gambar 2. Grafik rerata persen inhibisi vitamin C
y = 0,3207x - 3,9632 R² = 0,9033 0 10 20 30 0 20 40 60 80 100 % I nhibis i Konsentrasi (µg/ml) Rerata % Inhibisi Sari Buah Duwet y = 7,9155x - 2,755 R² = 0,9584 0 20 40 60 80 0 2 4 6
8 10 % I nhibis i Konsentrasi (µg/ml) Rerata % Inhibisi Vitamin C Konsentrasi (µg/ml)
Rata-rata Absorbansi ± SD Blanko % Inhibisi 2 0,4343 ± 0,002051 0,4903 11,42 4 0,3512 ± 0,0009500 28,37 6 0,2413 ± 0,001124 50,78 8 0,2122 ± 0,001039 56,72
Tabel 4. Hasil Evaluasi Sifat Fisik Granul Effervescent Sari Buah Duwet Parameter Hasil Bentuk Granulat Warna Ungu Aroma Buah duwet Rasa Manis sedikit asam Kadar air (%) 5,46 ± 0,102 Waktu alir (detik) 32,02 ± 0,475 Sudut diam 30,95 ° Waktu larut (menit) 1,35 ± 0,01 pH 7 Tabel  5.    Hasil  Uji  Aktivitas  Antioksidan  Granul  Effervescent  Sari  Buah  Duwet dengan Metode DPPH Konsentrasi (µg/ml) Rata-rata Absorbansi ± SD Blanko % Inhibisi 40 0,5724 ± 0,0001530 0,4319 - 60 0,5649 ± 0 - 80 0,5638 ± 0,0001150 - 100 0,5622 ± 0,0003460 -

## PEMBAHASAN
Uji aktivitas antioksidan dilakukan dengan metode DPPH menggunakan alat spektrofotometer UV-Vis. Pada metode ini, DPPH berperan sebagai radikal bebas  yang  direndam  oleh  senyawa  antioksidan  dari  ekstrak  yang  diuji. Reaksi  ini  menyebabkan  terjadinya  perubahan  warna  yang  dapat  diukur dengan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 517 nm (Sunarni, 2007).  Sehingga  aktivitas  antioksidan  oleh  bahan  uji  dapat  diukur.  Tahap awal  dalam  pengujian  ini  adalah  pengukuran  panjang  gelombang maksimum  larutan  DPPH  0,4  mM.  Dari  pengukuran  tersebut  didapatkan panjang gelombang maksimum sebesar 516 nm. Pada pengukuran operating time (OT) diperoleh pada waktu 30 menit. Menurut Patria dan Soegihardjo (2013),  tujuan  penentuan  OT  adalah  untuk  mengetahui  waktu  yang dibutuhkan  untuk  sampel  dan  DPPH  bereaksi  secara  optimum.  Penentuan OT  didasarkan dari waktu dimana absorbansi  mulai stabil atau selisih nilai absorbansi tiap selang waktu mulai kecil. Semakin besar konsentrasi sampel maka  semakin  banyak  elektron  yang  didonorkan  untuk  merendam  radikal bebas DPPH, sehingga serapan yang diberikan semakin menurun tergantung dalam  jumlah  elektron  yang  diambil  (Wulandari  &  Yumita.,  2015). Aktivitas  penangkapan  radikal  bebas  dinyatakan  dengan  Inhibition concentration  50%  (IC 50 )  yaitu  konsentrasi  sampel  yang  dapat  merendam radikal  bebas  DPPH  sebanyak  50  %.  Nilai  IC 50 dihitung  berdasarkan persentase  inhibisi  terhadap  radikal  bebas  DPPH  dari  masing-masing konsentrasi  larutan  sampel.  Hasil  menunjukkan  bahwa  sari  buah  duwet kental  pada konsentrasi  100  µg/mL  menghasilkan %  inhibisi  sebesar  26%. Hasil  ekstrapolasi  menggunakan  persamaan  kurva  baku  yang  diperoleh yaitu y = 0,3207x – 3,9632 (gambar 1), maka dapat dihitung nilai IC 50 sari buah  duwet  kental  sebesar  168,018  µg/mL,  sehingga  sari  buah  duwet tergolong  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  sedang.  Hasil  yang didapatkan  ini  sedikit  berbeda  dari  penelitian  sebelumnya  yang  dilakukan Aprianti (2019) yang menyebutkan bahwa buah duwet segar memiliki nilai IC 50 sebesar 158,018 μg/ml. Perbedaan hasil tersebut dapat disebabkan oleh beberapa faktor, salah satunya yaitu proses ekstraksi buah duwet segar yang
dilakukan Aprianti (2019) menggunakan pelarut etanol 96% dan asam sitrat 3%  (85:15).  Penggunaan  pelarut  etanol  dapat  melarutkan  senyawa  yang bersifat  semi  polar  hingga  polar,  sehingga  diharapkan  senyawa  metabolit sekunder  yang  terdapat  pada  buah  duwet  bisa  terekstrak.  Selain  itu penggunaan  asam  sitrat  3%  untuk  memberikan  suasana  asam  karena kandungan antosianin yang ada dalam sampel buah duwet lebih stabil dalam suasana sedikit asam (Kristiana et al.., 2012)
Sumber  antioksidan  terbesar  yang  terdapat  pada  buah  duwet  berasal  dari antosianin.  Antosianin  merupakan  pigmen  yang  memberikan  warna  biru, ungu, dan merah pada tumbuhan. Warna ungu pada buah duwet merupakan pengaruh  dari  pigmen  ini.  Berdasarkan  penelitian  Safitri  (2012), menunjukan  bahwa  antosianin  berpengaruh  signifikan  (p<0,05)  pada aktivitas antioksidan yang dimiliki minuman sari buah duwet. Hal ini sesuai dengan  pendapat  yang  dikemukakan  Prior  (2003)  bahwa  antosianin merupakan senyawa yang memberikan kontribusi terbesar terhadap aktivitas antioksidan berbagai jenis buah.
(a)                           (b)                              (c)
Gambar  3.      Granul  dan  Larutan  Effervescent  (a)  Granul  effervescent  sari  buah duwet (b) Buih dan Larutan effervescent (c) Larutan effervescent sari buah duwet
Secara visual, granul dan larutan effervescent sari buah duwet terlihat seperti Gambar  3  yaitu  granul  yang  dihasilkan  berbentuk  granulat  dengan  warna ungu kemerahan yang cukup seragam. Larutan effervescent sari buah duwet berwarna ungu karena berasal dari kandungan antosianin yang terdapat pada buah duwet.
Pengujian  kadar  air  granul  dilakukan  menggunakan  alat  moisture  analyzer pada suhu 150 ℃ selama 7 menit dengan cuplikan sampel sebanyak 5 gram. Nilai kadar air yang didapatkan sebesar 5,46% dimana nilai tersebut sesuai dengan  peraturan BPOM RI  (2015)  yang  menyatakan  persyaraan  kadar air untuk  sediaan  effervescent  yaitu  ≤  10%.  Tinggi  atau  rendahnya  kadar  air pada  granul  effervescent  dipengaruhi  oleh  kelembaban  ruangan. Kelembaban  ruangan  yang  tinggi  akan  menyebabkan  granul  menyerap lembab  dari  lingkungan  sehingga  granul  effervescent  yang  dihasilkan memiliki  kandungan  lembab  sangat  tinggi.  Menurut  Ipci  et  al.  (2016) sebaiknya  effervescent  dibuat  pada  kelembaban  relatif  kurang  dari  10%. Selain  itu  tingginya  kandungan  lembab  granul  diduga  disebabkan  oleh adanya  asam  sitrat  yang  merupakan  salah  satu  komponen  dari  granul effervescent  masih  berbentuk  senyawa  hidrat  (memiliki  air  kristal).  Asam sitrat monohidrat dapat berubah menjadi anhidrat dengan pemanasan 74℃. Pengujian  kandungan  lembab  dilakukan  pada  suhu  105℃,  oleh  karena  itu air  kristal  dari  asam  sitrat  ikut  menguap  sehingga  ikut  tercatat  dan
menyebabkan  kandungan  lembab  dari  granul  effervescent  sari  buah  duwet meningkat (Anam et al.., 2013).
Hasil uji waktu alir rata-rata yaitu 33,02 ± 0,474 detik. Nilai tersebut tidak sesuai  dengan  persyaratan  uji  waktu  alir  yaitu  <10  detik  untuk  100  gram granul. Sifat alir dipengaruhi oleh bentuk partikel, ukuran partikel dan kohesivitas  antarpartikel.  Penggunaan  konsentrasi  bahan  pengikat yakni  PVP  yang  sedikit  dapat  menyebabkan  ukuran  dan  massa  jenis granul  yang  kecil  sehingga  meningkatkan  gaya  kohesi  antar  partikel granul.  Gaya  kohesi  yang  kecil  ini  akan  menyebabkan  granul  sulit untuk  mengalir  dengan  bebas.  Massa  jenis  yang  kecil  juga  dapat menyebabkan  granul  memiliki  bobot  yang  kecil  sehingga  gaya gravitasi  yang  mempengaruhinya  akana  semakin  kecil  juga.  Gaya kohesivitas yang lebih tinggi dari gaya gravitasi sehingga granul tidak dapat  mengalir  bebas  (Elisabeth  et  al.,,  2018). Sedangkan  pada pengujian  sudut  diam  nilai  yang  didapat  yaitu  30,95 ° .  Nilai  tersebut berdasarkan persyaratan uji menunjukkan bahwa sifat alir  granul  tergolong cukup baik (USP, 2015).
Hasil uji waktu larut granul effervescent sari buah duwet dapat dilihat pada tabel 4. dengan rata-rata waktu larut  sediaan yaitu 1 menit  35 detik ±  0,01 detik.  Waktu  larut  adalah  sifat  khas  yang  penting  untuk  diamati  pada sediaan effervescent, dimana sediaan yang baik memiliki persyaratan waktu larut  <  5  menit.  Hasil  uji  pH  larutan  sebesar  7,  nilai  ini  memenuhi persyaratan uji, dimana persyaratan pH larutan effervescent yang baik untuk dikonsumsi berkisar antara 6-7 (Rahmawati et al., 2016).
Uji aktivitas antioksidan dalam granul dilakukan untuk mengetahui aktivitas antioksidan  dari  sari  buah  duwet  sesudah  diformulasi.  Hasil  menunjukkan bahwa  granul  effervescent  sari  buah  duwet  tidak  mampu  menghambat radikal  bebas  DPPH.  Hal  ini  kemungkinan  terjadi  karena  faktor  suhu  dan cahaya  pada  saat  proses  pembuatan  granul  effervescent  sari  buah  duwet yang  dapat  merusak  kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  yang  sensitif terhadap suhu dan cahaya.
Salah  satu  metabolit  sekunder  yakni  antosianin.  Adanya  peningkatan  suhu menyebabkan  kerusakan  antosianin  semakin  besar  (Laleh  et  al.,  2006). Menurut  Safitri  (2012)  pada  penyimpanan  suhu  refrigerator,  kadar antosianin menurun sebanyak 22,6% dari 24 mg/L menjadi 18,3 mg/L pada minggu  ke-8.  Persamaan  linier  menunjukkan  bahwa  kadar  antosianin  pada minuman  sari  buah  duwet  yang  disimpan  pada  suhu  refrigerator diperkirakan  akan  rusak  sepenuhnya  setelah  40  minggu  penyimpanan.  Hal ini  pula  yang  menjadi  penyebab  menurunnya  aktivitas  penghambatan radikal  bebas  pada  sari  buah  duwet,  dimana  sari  buah  duwet  sebelum dilakukan pengukuran aktivitas antiradikal bebas telah disimpan pada suhu refrigerator selama 28 minggu.
Kerusakan  antosianin  selama  penyimpanan  dapat  terjadi  pula  akibat pengaruh  oksidasi  dan  akibat  paparan  cahaya  yang  berlebihan.  Stabilitas antosianin  selama  penyimpanan  juga  dapat  dipengaruhi  oleh  struktur molekul  antosianin.  Dalam  buah  duwet,  menurut  Sari  et  al.,  (2009),  sub kelas  antosianin  yang  utama  adalah  delphinine  (41,29%).  Delphinine
bersifat  kurang  stabil  dibandingkan  dengan  malvidin  yang  merupakan  sub kelas antosianin utama pada anggur merah (Laleh et al., 2006).

## SIMPULAN
Sari  buah  duwet  dengan  konsentrasi  40;  60;  80;  100  µg/mL  hanya memiliki  persentase  penghambatan  radikal  bebas  DPPH  sebesar  26%. Granul effervescent  sari  buah  duwet  memenuhi  syarat  uji  sifat  fisik kecuali  waktu  alir.  Sari  buah  duwet  setelah  diformulasi  menjadi g ranul effervescent  tidak  memiliki  aktivitas penghambatan  radikal bebas DPPH.

## REFERENSI
Anam, C., Kawiji., & Setiawan, R., 2013. Kajian karakteristik fisik dan sensori serta aktivitas antioksidan  dari  granul  effervescent  buah  beet  (Beta  vulgaris)  dengan  perbedaan metode granulasi dan kombinasi sumber asam. Jurnal Teknosains Pangan, 2(2):21-8. Aprianti, Y., 2019. Pengaruh variasi pengeringan buah duwet (Syzygium Cumini (L.) Skeels) terhadap aktivitas penghambatan radikal bebas dengan metode DPPH (1,1 Difenil 2- Pikrilhidrazil), Skripsi, Mataram: Universitas Mataram.
Aprianti, Y., 2019. Pengaruh variasi pengeringan buah duwet (Syzygium cumini (L.) Skeels) terhadap aktivitas penghambatan radikal bebas dengan metode DPPH (1,1 difenil 2- pikrilhidrazil), skripsi, Mataram: Universitas Mataram.
BPOM RI., 2015. Surat Edaran No. HK. 04.4.42.11.15.1490. Jakarta: Badan POM RI. Dalimartha, S., 2003. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia Jilid 3. Jakarta: Puspa Swara
Elisabeth,  V.,  TamLean,  P.V.Y.,  &  Supriati,  H.S.,  2018.  Formulasi  sediaan  granul  dengan bahan pengikat pati kulit pisang goroho (Musa acuminafe L.) dan pengaruhnya pada sifar  fisik  granul.  PHARMACON  Jurnal  Ilmiah  Farmasi-UNSRAT,  7  (4).
https://doi.org/10.35799/pha.7.2018.21416
Gharavi,  N.,  Haggarty,  S.,  dan  El-KAdi,  A.O.S.,  2007.  Chemoprotective  and  carcinogenic effects of ter-butylhydroquinone and its metabolites. Current Drug Metabolism, 8: 1-
7.
Ipci,  K.,  Öktemer,  T.,  Birane,  L.,  Altintoprak,  N.,  Muluk,  N.B.,  Passali,  D.,  Lopatin,  A.,
Bellusi, L., Mladina, R., Pawankar, R., & Cinngi, C., 2016. Effervescent tablet: a safe and practical delivery system for drug administration. ENT updates, 6 (1) : 46-50
Khaira, K., 2010. Menangkal radikal bebas dengan anti-oksidan. Jurnal Sainstek, 2 (2): 183- 187.
Kristiana,  H.D.,  Ariviani,  S.,  &  Khasanah,  L.U.  2012.  Ekstraksi  pigmen  antosianin  buah senggani  (Melastoma  malabathricum  Auct.  non  Linn)  dengan  variasi  jenis  pelarut. Jurnal Teknosains Pangan., 1(1):105-109.
Kubola,  J.,  Siriamornpun,  S.,  &  Meeso.,  N.,  2011.  Phytochemi-cals,  vitamin  C  and  sugar content of thai wild fruits. Food Chemistry, 126 (3): 972-981.
doi:10.1016/j.foodchem.2010.11.104
Laleh,  G.H.,  Frydoonfar,  H.,  Heidary,  R.,  Jameei,  R.,  &  Zare,  S.,  2006.  The effect  of light, temperature,  pH,  and  species  on  stability  of  anthocyanin  pigment  in  four  berberies species. Pakistan J Nutrition, 5 (1): 90-92.
Patria, W.P., & Soegihardjo,  C.J., 2013. Uji aktivitas antioksidan menggunakan radikal 1,1- difenil-2-pikrilhidrazil  (DPPH)  dan  penetapan  kandungan  fenolik  total  fraksi  etil asetat ekstrak etanolik daun benalu (Dendrophthoe pentandra L. Miq.) yang tumbuh di  pohon  kepel  (Stelechocarpus  burahol  (BI.)  Hook.  F.).  Jurnal Farmasi  Sains  dan Komunitas, 10 (1): 51-60
Prior, R.L., 2003. fruits and vegetables in the prevention of cellular oxidative damage. Am J Clin Nutr, 78: 570.
Rahmawati,  I.F.,  Prasojo,  P.,  &  Imron,  W.H.,  2016.  Formulasi  dan  evaluasi  granul effervescent  ekstrak  daun  binahong  (Anredera  cordifolia  (Tonore)  Steem.). Pharmaciana, 6 (2): 139-148.
Rahmi,  H.,  2017.  Review  :  Aktivitas  antioksidan  dari  berbagai  sumber  buah-buahan  di Indonesia. Jurnal Agrotek Indonesia, 2 (1): 34-38.
Safitri,  D.E.,  2012.  Stabilitas  antosianin  dan  aktivitas  antioksidan  pada  minuman  sari  buah duwet (Syzygium cumini), Skripsi, Bogor: Institut Pertanian Bogor.
Sari,  P.,  Wijaya,  C.H.,  Sajuthi,  D.,  &  Supratman,  U.,  2009.  Identifikasi  antosianin  buah duwet  (Syzygium  cumini)  menggunakan  kromatografi  cair  kinerja  tinggi.  Jurnal Teknologi dan Industri Pangan, Vol. 20 No. 2.
Silalahi,  M.,  2018.  Jamblang  (Syzygium  cumini  (L.)  dan  bioaktivitasnya.  Jurnal  Ilmu Kesehatan, 7(2): 101-187.
Siregar,  Charles,  J.P.,  Wikarsa  &  Saleh.,  2010.  Teknologi  Farmasi  Sediaan  Tablet  Dasar Dasar Praktis. Jakarta: EGC.
Sunarni,  T.,  2005.  Aktivitas  antioksidan  penangkap  radikal  bebas  beberapa  kecambah  dari biji tanaman familia papilionaceae. Jurnal Farmasi Indonesia, 2 (2): 53-61.
Swami, S.B., Thakor, N.S.J., Patil, M.M., & Haldankar, P.M., 2012. Jamun (Syzygium cumini (L.)):  A  review  of  its  food  and  medicinal  uses.  Food  and  Nutrition  Sciences,  3(8), 1100-1117.
U.S.  Pharmacopeia.  2015.  USP  38/The  National  Formulary,  NF  33.  2007.  Rockville,  MD: U.S. Pharmacopeial Convention, Inc.
Winarsi, H., 2007. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. Yogyakarta: Kanisius. Wulandari,  P.,  Herdini,  &  Yumita,  A.,  2015.  Uji  aktivitas  antioksidan  dpph  dan  aktivitas terhadap  Artemia  SalinaI  leach  ekstrak  etanol  daun  seledri  (Apium  graveolens  L.). Sainstech Farma, 8 (2): 6-13.

## KONTRIBUSI PENULIS
AB berperan dalam mengumpulkan data, membuat naskah dan analisis data. WAS  dan  DGW  berperan  dalam  mengarahkan  pembuatan  konsep  dan rancangan. YJ dan WH berperan dalam editing naskah akhir. Semua penulis berkontribusi dalam merancang penelitian, interpretasi dan menyetujui versi akhir naskah.
Akses Terbuka Artikel ini dilisensikan di bawah Creative Commons  Lisensi  Internasional  Attribution  4.0,  yang  memungkinkan penggunaan, berbagi, adaptasi, distribusi, dan reproduksi dalam media atau format apa pun, selama Anda memberikan kredit yang sesuai kepada penulis asli  dan sumbernya,  memberikan  tautan  ke lisensi  Creative Commons,  dan menerangkan  jika  perubahan  telah  dilakukan.  Gambar  atau  materi  pihak ketiga lainnya  dalam  artikel ini termasuk  dalam  lisensi  Creative Commons artikel,  kecuali  dinyatakan  sebaliknya  dalam  batas  kredit  untuk  materi tersebut. Jika materi tidak termasuk dalam lisensi Creative Commons artikel dan  penggunaan  yang  Anda  maksudkan  tidak  diizinkan  oleh  peraturan perundang-undangan atau melebihi penggunaan yang diizinkan, Anda harus mendapatkan izin langsung dari pemegang hak cipta. Untuk melihat salinan lisensi ini, kunjungi https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/deed.id .
.