## Efek Hipoglikemik Ekstrak Etanol Daun Kelor (Moringa oleifera L.) pada Tikus Putih (Rattus norvegicus) Jantan

## Hypoglycemic Effect of Moringa Leaf Ethanol Extract (Moringa oleifera L.) in Male Rats (Rattus norvegicus)

## Rizqi Nur Azizah, Rachmat Kosman, Syarifah Khaerunnisa
Fakultas Farmasi Universitas Muslim Indonesia Jl. Urip Sumoharjo KM.5, Kec. Panakkukang, Kota Makassar
* Kontak : rizqi.azizah@umi.ac.id

## ABSTRAK
Daun Kelor ( Moringa oleifera L.) secara empiris digunakan oleh masyarakat sebagai antidiabetes. Penelitian ini  bertujuan  untuk  menentukan  pengaruh  pemberian  ekstrak  etanol  daun  kelor  terhadap  penurunan  kadar  glukosa darah  tikus  putih.  Penelitian  ini  menggunakan  15  ekor  tikus  jantan  yang  dibagi menjadi  5  kelompok.  Kelompok  I merupakan kontrol negatif yang diberikan larutan Na.CMC 1%. Kelompok II, III dan IV adalah kelompok perlakuan yang diberikan ekstrak etanol daun kelor, berurutan, 50, 100, dan 150 mg/Kg BB. Kelompok V merupakan kontrol positif  diberikan  suspensi  glibenklamid ® .  Sebelum  perlakuan  tikus  dipuasakan  selama  18  jam  kemudian  diinduksi dengan aloksan 150 mg/KgBB. Pengukuran kadar glukosa dilakukan pada hari ke 1, ke 3, ke 5, ke 7 dan ke 9. Hasil penelitian  yang  dilakukan  menunjukkan  ekstrak  etanol  daun  kelor  dapat  menurunkan  kadar  glukosa  darah.  Dosis 100  mg/Kg  BB  memberikan  efek  penurunan  kadar  glukosa  yang  optimal  dibandingkan  dengan  dosis  ekstrak lainnya.
Kata Kunci : Daun kelor ( Moringa oleifera L.), aloksan, hipoglikemik

## ABSTRACT
Moringa  leaves  (Moringa  oleifera  L.)  are  empirically  used  by  people  as  an  antidiabetic.  The  aim  of  the research is to determine effect of moringa leaves ethanol extract in decreasing the blood glucose levels in rats. The research  used  15  male  rats  and  divided  into  five  groups.  Group  I  is  negative  control  group  who  given  Na.  CMC suspension  1  %.  Group  II,  III  and IV  are  the  treatment  groups  who  administered  with  ethanol  extract  of  moringa leaves at  the treatment  groups administered with ethanol extract  of moringa leaves, respectively, 50, 100, and 150 mg/Kg BW respectively. Group V is positive control group who given glibenklamid® suspension. Before treatment, rats were maintained diet for 18 hours and then induced with alloxan 150 mg/Kg BW. The measurement of glucose levels was conducted on day 1, 3, 5, 7 and 9. The result of the research showed that the ethanol extract of moringa leaves reduced blood glucose levels. The dose of 100 mg/Kg BW had the most optimal effect in decreasing glucose levels compared to the other extract doses.
Keywords: Moringa Leaves (Moringa oleifera L.), alloxan, hypoglycemic.

## PENDAHULUAN
Obat  tradisional  telah  lama  dikenal  dan digunakan  oleh  semua  lapisan  masyarakat  di Indonesia  untuk  tujuan  pengobatan  maupun perawatan  kesehatan.  Jika  ada  anggota keluarga  atau  masyarakat  yang  sedang menderita suatu penyakit, sebagian masyarakat  berinisiatif  untuk  memanfaatkan
tanaman  obat  yang  terdapat  di  sekitar lingkungannya  untuk  mereka  gunakan  dalam pengobatan. Pemanfaatan tanaman berkhasiat obat  di  masyarakat  terus  berkembang  dan warisan ke generasi selanjutnya.
Perkembangan  obat  tradisional  ini  dimulai dari ramu-ramuan tradisional yang berkembangan  di  tengah  masyarakat,  yang
kemudian berkembang menjadi suatu ramuan yang  diyakini  memiliki  khasiat  tertentu  bagi tubuh manusia (Wasito, 2011).
Berdasarkan  hasil  identifikasi  pengobat tradisional di kota Makassar tahun 2012 yang dilakukan  oleh  Balai  Kesehatan  Tradisional Masyarakat  (BKTM)  Makassar,  didapatkan data  jumlah  pengobat  tradisional  yang memberikan pelayanan herbal adalah sebanyak  54,8%  dengan  kasus  yang  banyak ditangani  adalah  Hipertensi  (33,33%),  Asam Urat  (33,33%),  Diabetes  Mellitus  (30,3%), Rematik  (27,2%),  Kanker  (18,2%),  dan Hiperkolesterol (15,1%).
Kelor  (Moringa  oleifera)  adalah  tanaman dari  India  dan  luas  tersebar  di  Indonesia. Hampir  setiap  bagian  tanaman  kelor  bisa dikonsumsi  dan  berpotensi  sebagai  obat (Wang,  et  al.,  2016).  Satu  bagian  itu  yang bisa digunakan adalah daun kelor. Daun kelor dalam  bentuk  kering  dan  serbuk  memiliki kandungan  protein  27,1-28,44%  dan  serat kasar12,63-19,2%.  Daun  tanaman  kelor  telah dilaporkan  dapat  menurunkan  kadar  glukosa darah pada kasus DM. Selain daun, salah satu bagian  tanaman  kelor  yang  diduga  memiliki efek  hipoglikemia  adalah  kulit  batang  kelor (Aminah, Ramdhan, & Yanis, 2015).
Daun  kelor  telah  dilaporkan  sebagai sumber  senyawa  makro  dan  mikro,  kaya  β- karoten,  protein,  vitamin  C,  kalsium,  dan kalium  dan  bertindak  sebagai  sumber antioksidan  alami  yang  baik  (Siddhuraju  &
Becker,  2003) . Ekstrak  etanol  buah  kelor menunjukkan  kandungan  fenolik  tertinggi,
daya  pereduksi  dan  kapasitas  pembersihan radikal bebas yang kuat (Luqman, Srivastava, Kumar, Maurya, & Chanda, 2012). Buah dan daun  telah  digunakan  untuk  mengatasi malnutrisi,  terutama  di  antara  bayi  dan  ibu menyusui  untuk  meningkatkan  produksi  ASI (Estrella,  Mantaring,  David,  &  Taup,  2000) dan juga mengatur ketidakseimbangan hormon  tiroid  (Tahiliani  &  Kar,  2000). Kandungan senyawa glukosianat dan isotiosianat  dalam  tumbuhan  kelor  diketahui sebagai  hipotensif,  anti  kanker,  penghambat aktivitas  bakteri  dan  jamur  (Anwar,  Latif, Ashraf, & Gilani, 2007). Berdasarkan hasil uji fitokimia  daun  kelor  menunjukkan  adanya senyawa  alkoloid  dan  steroid/triterpenoid yang berperan aktif dalam menurunkan kadar gula darah (Trubus Edisi Agustus, 2011).
Berdasarkan  latar  belakang  di  atas,  maka penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui ekstrak  etanol  daun  kelor  dalam  memberikan efek hipoglikemik pada tikus ( Rattus norvegicus ) putih jantan.

## METODOLOGI

## Persiapan hewan uji
Tikus  putih  jantan  sebanyak  15  ekor,  usia 8-12  minggu  dengan  BB  200-250  gram diaklimatisasi  selama  satu  minggu  dengan tujuan  untuk  mengadaptasikan  hewan  uji dengan  makanan  dan  lingkungannya  yang baru.

## Penyiapan dan pengolahan sampel
Sampel yang digunakan adalah daun kelor sampel  dipanen  pada  pagi  hari  kemudian
dicuci dengan air mengalir untuk menghilangkan kotoran yang dapat mengganggu selama proses ekstraksi.
Kemudian daun dipotong-potong kecil (dirajang) yang selanjutnya dikering anginkan dibawah  terik  sinar  matahari  secara  tidak langsung.  Pengeringan  tersebut  bertujuan untuk  mengurangi  kadar  air  dalam  sampel, dan  mencegah  tumbuhnya  jamur.  Sampel daun  kelor  yang  telah  kering  kemudian dihaluskan  menjadi  serbuk,  bertujuan  untuk mendapatkan  luas  permukaan  yang  besar sehingga  memudahkan  kontak  antara  pelarut dan  sampel  pada  saat  melakukan  ekstraksi (Departemen Kesehatan RI, 2000).

## Penyiapan bahan penelitian
Sampel  daun  kelor  sebanyak  500  gram ditambahkan  dengan  pelarut  etanol  70%. Hasil  penyarian  yang  diperoleh  dipekatkan dengan menggunakan rotavapor hingga diperoleh  ekstrak  etanol  kental. Suspensi
Natrium  Carboxymethyl  Celulose (Na.CMC)
1%  b/v  dibuat  dengan  mengambil 1  g
Na.CMC  dicukupkan  volumenya  hingga  100 ml  dengan  air  suling  (Parrott,  1979). Bahan pembanding  larutan  glibenklamid ® 5  mg/70
KgBB  dibuat  dengan  menimbang  sebanyak 1,74 mg/KgBB serbuk glibenklamid ®
dilarutkan dengan Na.CMC 1% dan dicukupkan  hingga  10  ml. Larutan  aloksan dibuat  dengan  melarutkan  450  mg  aloksan dalam 100 ml NaCl.

## Pelaksanaan percobaan
Penelitian  ini  menggunakan  hewan  coba sebanyak  lima  belas  ekor  yang  dibagi  ke dalam  lima  kelompok.  Sebelum  perlakuan, tikus dipuasakan terlebih dahulu selama ± 18 jam  dan  diinduksi  aloksan  dengan  dosis  150 mg/Kg  BB  secara  intraperitonial.  Masing- masing  kelompok  mendapatkan  perlakuan yang  berbeda.    Kelompok  I  adalah  kontrol negatif  hanya  diberikan  Na-CMC.  Kelompok II,  III,  dan  IV  adalah  kelompok  perlakuan, masing-masing  diberikan ekstrak etanol daun kelor  sebanyak  50  mg/kgBB,  kelompok  III sebanyak  100  mg/kgBB,  kelompok  IV sebanyak 150 mg/kgBB. Kelompok V adalah kontrol positif diberikan glibenklamid ® dengan  dosis  1,74  mg/Kg  BB.  Pemberian terapi  dilakukan  selama  9  hari.  Pemberian perlakuan  dilakukan  sekali  sehari  dan  setelah 2 jam pemberian terapi dilakukan pengukuran kadar  glukosa  darah.  Pengukuran  kadar glukosa  darah  dilakukan  sebelum  induksi awal,  setelah  induksi,  dan  setelah  terapi (akhir).  Selanjutnya  dilakukan  pengumpulan data dan analisis data.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tabel  1  mengambarkan  hasil  rata-rata perubahan  kadar  glukosa  darah  terhadap perlakuan  hewan  coba  tikus.  Tabel  di  atas menunjukkan  setelah  dilakukan  induksi aloksan, kadar glukosa darah tikus mengalami peningkatan  dan  sudah  terjadi  diabetes mellitus. Hasil pengukuran pada hari terakhir pemberian  terapi  menunjukkan  penurunan
kadar  glukosa  darah  pada  tikus  dalam  setiap kelompok. Nilai rata-rata kadar glukosa darah awal, setelah induksi, dan setelah terapi dapat dilihat pada tabel 1.
Pemberian ekstrak etanol daun kelor dapat memberikan  penurunan  kadar  glukosa  darah pada tikus. Pada tabel 2 menunjukkan bahwa kelompok  kelompok  glibenklamid ® memiliki persen  penurunan  paling  besar  dibandingkan kelompok  uji  lain.  Kelompok  uji  ekstrak, dosis  paling  rendah  memberikan  efek penurunan  yang  lebih  besar  dari  kontrol  Na- CMC.  Hal  ini  berarti  kelompok  ekstrak memiliki  potensi  untuk  menurunkan  kadar glukosa  darah.  Tabel  2  juga  menunjukkan bahwa  dari  rata-rata  %  penurunan  glukosa darah,  yang  menunjukkan  penurunan  yang lebih  optimal  yaitu  pada  kelompok  kontrol positif.  Diantara  kelompok  ekstrak  yang memberikan  penurunan  yang  lebih  optimal yaitu pada dosis 100 mg/Kg BB.
Signifikansi  ekstrak  etanol  daun  kelor dalam menurunkan kadar glukosa darah dapat diuji  dengan  analisis  data  secara  statistik. Data  persen  penurunan  kadar  glukosa  darah dianalisis dengan menggunakan uji One Way Anova .  Hasil  analisis  yang  didapatkan menunjukkan  hasil  yang  berbeda  nyata (<0,05)  pada  semua  kelompok  dengan  nilai signifikan 0,000 yang berarti adanya perbedaan antara kelompok perlakuan.
Perbedaan  antar  kelompok  perlakuan  dapat dilihat  dengan  melakukan  uji  lanjutan Post Hoc  Test yaitu  uji LSD yang  dapat  dilihat pada tabel 3.
Hasil  analisa  statistik  berdasarkan  tabel  3 menunjukkan  bahwa  kontrol  negatif  berbeda dengan  kontrol  positif  dan  ekstrak  etanol daun  kelor.  Hal  ini  berarti  kontrol  negatif, kontrol  positif,  dan ekstrak etanol  daun  kelor memiliki  efek yang berbeda terhadap penurunan  kadar  glukosa  darah.  Hal  tersebut sejalan  dengan  penelitian  sebelumnya  yang membuktikan  senyawa  aktif  daun  kelor  lebih efektif  serta  jauh  lebih  aman  dalam penurunan  kadar  gula  darah  dibanding  obat kimia  glipizide  (obat  kencing  manis  yang biasa  diresepkan  dokter).  Penurunan  kadar gula  disebabkan  pengaruh  senyawa  terpenoid yang  menstimulasi  sel-sel  β  pankreas  untuk
Tabel 1. Rata-Rata Perubahan kadar glukosa darah terhadap perlakuan hewan coba tikus
Kelompok Awal Induksi Terapi Hari Ke- 1 3 5 7 9 I 80 ± 5 233 ± 13 227 ± 15 248 ± 8 229 ± 11 216 ± 9 215 ± 9 II 82 ± 8 241 ± 9 188 ± 22 172 ± 50 136 ± 65 108 ± 41 114 ± 16 III 83 ± 6 358 ± 17 331 ± 19 29 ± 77 267 ± 240 106 ± 68 105 ± 29 IV 82 ± 3 385 ± 6 356 ± 31 324 ± 42 189 ± 78 186 ± 58 175 ± 35 V 70 ± 1 312 ± 13 194 ± 20 151 ± 32 130 ± 20 98 ± 19 73 ± 56
Tabel   2.  Rata-rata  persentase  penurunan kadar glukosa darah tikus (mg/dL) pada hari ke-9 Kelompok Rata-rata persentase penurunan kadar glukosa darah (%) I 7,92 II 52,47 III 69,94 IV 54,56 V 79,89
mengeluarkan  insulin  (Jaiswal,  Rai,  Kumar,
Mehta,  &  Watal,  2009).  Didukung  pula dengan penelitian sebelumnya yang menyimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun kelor    secara  signifikan  menurunkan  glukosa darah  puasa  dan  menginduksi  peningkatan yang  signifikan  dalam  resistensi  insulin terhadap tikus diabetes yang diberi diet tinggi lemak dan diinduksi streptozotocin (Chinedu, Alani, & Olaide, 2015).

## KESIMPULAN
Hasil penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol daun kelor pada  dosis  50  mg/Kg  BB,  100  mg/Kg  BB, dan  150  mg/Kg  BB  dapat  menurunkan  kadar glukosa  darah  tikus  yang  diinduksi  aloksan. Dosis  100  mg/Kg  BB  memberikan  efek penurunan lebih optimal.

## DAFTAR PUSTAKA
Aminah,  S.,  Ramdhan,  T.,  &  Yanis,  M.
(2015).  Kandungan  Nutrisi  dan  Sifat Fungsional  Tanaman  Kelor  (Moringa Oleifera). Buletin  Pertanian  Perkotaan , vol 5, no 2, pp 38.
Anwar, F., Latif, S., Ashraf, M., & Gilani, A. H.  (2007).  Moringa  oleifera:  a  food  plant
with multiple medicinal uses.
Phytotherapy Research , 17-25.
Chinedu, A. A., Alani, S. O., & Olaide, A. O. (2015).  Effect  of  the  Ethanolic  Leaf Extract  of  Moringa  oleifera  on  Insulin Resistance  in  Streptozotocin  Induced Diabetic  Rats. Journal  of  Plant  Sciences , 5-12.
Departemen  Kesehatan  RI.  (2000). Buku Panduan  Teknologi  Ekstrak. Jakarta: Dirjen POM-Depkes RI.
Estrella,  M.  C.,  Mantaring,  J.  B.,  David,  G. Z., & Taup, M. A. (2000). A Double Blind Randomized  Controlled  Trial  on  The  Use of  Malunggay  (Moringa  Oleifera)  for Augmentation  of  The  Volume  of  Breast milk  Among  Non-Nursing  Mothers  of Preterm Infants. Philipp J Pediatr , 49: 3-6. Jaiswal, D., Rai, P. K., Kumar, A., Mehta, S.,
&  Watal,  G.  (2009).  Effect  of  moringa oleifera lam leaves aqueous extract therapy on hyperglycemic rats. Journal of Ethnopharmacology , 392-396.
Luqman,  S.,  Srivastava,  S.,  Kumar,  R., Maurya,  A.  K.,  &  Chanda,  D.  (2012). Experimental  Assesment  of  Moringa oleifera  Leaf  and  Fruit  for  Its  Antistress, Antioxidant,  Scavenging  Potential  Using In  Vitro  and  In  Vivo  Assays. Hindawi Publishing  Corporation  Evidence-Based Complementary  and  Alternative  Medicine ,
1-12. Parrott, E. (1979).
Pharmaceutical
Technology  Fundamental  Pharmaceutics.
Minnepolis: Burgess Publishing Company.
Siddhuraju,  P.,  &  Becker,  K.  (2003).
Antioxidant  properties  of  various  solvent
Tabel 3. Analisis statistik uji LSD Antar perlakuan Nilai signifikasi Keterangan I-II 0,000 Berbeda nyata I-III 0,000 Berbeda nyata I-IV 0,000 Berbeda nyata I-V 0,000 Berbeda nyata II-III 0,010 Berbeda nyata II-IV 0,711 Tidak berbeda nyata II-V 0,001 Berbeda nyata III-IV 0,018 Berbeda nyata III-V 0,099 Tidak berbeda nyata IV-V 0,001 Berbeda nyata Ket: p < 0,05 : Signifikan (berbeda nyata) p > 0,05 :
Tidak signifikan (tidak berbeda nyata)
extracts of total phenolic constituents from three  different  agroclimatic  origins  of drumstick  tree  (Moringa  oleifera  Lam.) leaves. Journal  of  Agricultural  and  Food Chemistry , 2144-2155.
Tahiliani,  P.,  &  Kar,  A.  (2000).  Role  of Moringa  oleifera  leaf  extract  in  the regulation  of  thyroid  hormone  status  in adult male and female rats,.
Pharmacological Research , 319-323.
Trubus  Edisi  Agustus.  (2011). Biology  and Medicine. 27-35.
Wang,  Y.,  Gao,  Y.,  Ding,  H.,  Liu,  S.,  Han, X.,  Gui,  J.,  &  Liu,  D.  (2016).  Subcritical ethanol  extraction  of  flavonoids  from Moringa  oleifera  leaf  and  evaluation  of antioxidant activity. Journal Food Chemistry , 152-158. Wasito, H. (2011). Obat Tradisional Kekayaan  Indonesia. Yogyakarta:  Graha Ilmu.