UJI EFEK ANALGESIK EKSTRAK ETANOL DAUN KUCAI ( Allium tuberosum ) PADA TIKUS PUTIH JANTAN ( Rattus norvegicus )
ANALGETIC EFFECT TEST FROM ETHANOL EXTRACT OF KUCAI LEAVES (Allium tuberosum) ON MALE WHITE RATS (Rattus norvegicus)
Dwilanda E. Turama 1) , Widdhi Bodhi 1) , Imam Jayanto 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115 *Dwilandat@gmail.com

## ABSTRACT
Kucai  (Allium  tuberosum)  leaves contain  metabolite compounds  such  as  alkaloids,  saponins, tannis  which are potential sources to be developed as medical plants. Flavonoid is a derivative pf a phenol that has an analgesic properties.  This  study  aims  to  determine  whether  there  is  an  analgesic  effect  on  the  ethanol  extract  of  kucai leaves.  This  study  uses  a  laboratory  experimental  research  design  using  wistar  strain  male  white  rats  as  an experiment  animal.  The  ethanol  extract  of  kucai  leaves  are  given  with  different  doses,  group  1  doses  3,6  mg, group 2 doses 7,2 mg and group 3 doses 14,4 mg. Stimulation method in rats was carried out by using a 55°C hot plate. Rats was observed before and after giving test material at 30, 60, 90 and 120 minutes respectively and observed their responses by the form of licking legs and jumping. From the result of data in the form of tables and charts show that the ethanol extract of kucai leaves with doses 3,6 mg, 7,2 mg, and 14,4 mg has analgesic effect. It can be concluded that the best analgesic effect of doses is doses 14,4 mg.

## Keyword : Analgesic, kucai, male white rats

## ABSTRAK
Daun  Kucai  ( Allium  tuberosum )  memiliki  kandungan  senyawa  metabolit  seperti  alkaloid,  saponin,  tanin,  dan flavonoid yang merupakan sumber potensial untuk dikembangkan sebagai tanaman obat. Flavonoid merupakan turunan  senyawa  fenol  yang  memiliki  sifat  analgetik.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  adanya  efek analgesik  dari  ekstrak  etanol  daun  kucai.  Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan  Penelitian  eksperimental laboratorium menggunakan tikus putih jantan galur wistar sebagai hewan percobaan. Ekstrak etanol daun kucai diberikan dengan dosis yang berbeda-beda yaitu kelompok perlakuan 1 dengan dosis 3,6 mg, perlakuan 2 dengan dosis 7,2 mg, perlakuan 3 dengan dosis 14,4 mg. Metode rangsangan pada tikus dilakukan dengan menggunakan hot plate dengan suhu 55 0 C. Tikus di amati sebelum dan setelah pemberian bahan uji, menit ke 30, 60, 90, dan 120. Respon tikus yang diamati berupa menjilat kaki dan melompat. Dari hasil analisis data dalam bentuk tabel, grafik dan diagram  menunjukkan bahwa ekstrak etanol  daun kucai dengan dosis 3,6 mg, 7,2  mg, dan 14,4  mg memiliki efek analgesik. Dapat disimpulkan bahwa dosis yang memiliki efek analgesik terbaik ialah dosis 14,4 mg.
Kata kunci: Analgesik, kucai, tikus putih jantan
PENDAHULUAN
Rasa nyeri merupakan mekanisme perlindungan  terhadap  kerusakan  jaringan  yang menyebabkan  individu  bereaksi  dengan  cara memindahkan  posisi  tubuhnya.  Rasa  nyeri  dapat ditimbulkan dengan rangsangan suhu (Guyton et al ., 2007).  Rasa  nyeri  yang  disebabkan  rangsangan mekanisme  atau  kimiawi,  kalor,  atau  listrik,  yang dapat menimbulkan kerusakan  jaringan dan melepaskan zat yang disebut mediator nyeri (Anief, 2000).
Analgesik  adalah  obat  yang  digunakan untuk  mengurangi  rasa  nyeri  tanpa  menghilangkan kesadaran.  Obat  analgesik  memperngaruhi  ambang kesadaran  akan  perasaaan  sakit.  Obat  penghalang nyeri  (analgesik)  mempengaruhi  proses  pertama dengan  mempertinggi  ambang  kesadaran  akan perasaan sakit, sedangkan narkotik menekan reaksi- reaksi psikis yang diakibatkan oleh rangsangan sakit (Anief, 2000).
Salah satu jenis tanaman dapat dimanfaatkan  sebagai  obat  adalah  kucai  ( Allium tuberosum ).  Daun  kucai  mengandung  zat  gizi seperti  kalori,  protein,  lemak,  karbohidrat,  kalsium, fosfor,  besi dan  vitamin  (Andarwulan et  al. , 2012).
Daun  kucai  juga  mengandung  berbagai  senyawa fitokimia  antara  lain  alkaloid,  flavonid,  glikosida, steroid dan tanin (Al-Snafi, 2013).
Flavonoid  merupakan  turunan  senyawa fenol  yang  umumnya  memiliki  sifat  analgetik, antiinflamasi, meningkatkan mortilitas usus, antimikroba, dan lainnya (Andawulan et al. , 2012). Flavonoid  menunjukkan  lebih  dari  seratus  macam bioaktivitas.  Bioaktivitas  yang  ditunjukkan  antara lain  efek  antipiretik,  analgesik,  dan  antiinflamasi (Wijayakusuma, 2001).

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  berlangsung  mulai  dari  bulan November  2019  -  Juni  2020.  Penelitian    dilakukan di    Laboratorium  Penelitian  dan  Laboratorium Farmakologi  Program  Studi  Farmasi  Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sam Ratulagi Manado.

## Rancangan Penelitian
Penelitian ini menggunakan rancangan eksperimental  dengan  menggunakan  tikus  putih jantan  sebagai  hewan  percobaan.  Ada  5  macam perlakuan terhadap hewan uji. Kelompok 1 sebagai
kontrol  negatif  diberi  CMC  1%.  Kelompok  2 sebagai kontrol positif diberi parasetamol. Kelompok 3-5 diberi perlakuan ekstrak etanol daun kucai dengan dosis yaitu 3,6 mg, 7,2 mg, 14,4 mg.

## Alat dan Bahan Alat
Alat yang akan digunakan dalam penelitian ini,  yaitu  kandang  pemeliharaan  hewan,  sarung tangan, tempat air minum dan makanan hewan, alat gelas,  timbangan  analitik,  timbangan  tepung, blender,  ayakan,  oven,  sarung  tangan,  masker, sudip, kertas saring, pot salep, pipet ukur, lumpang, alu, hot  plate,  stopwatch,  disposable  syringe 1  ml, dan sonde oral.

## Bahan
Bahan yang digunakan yaitu tikus putih jantan sejumlah  15  ekor,  ekstrak  daun  kucai,  aquades, etanol  96%,  pakan  tikus  putih,  parasetamol,  CMC 1%.

## Prosedur Penelitian Penyiapan dan Pengambilan Sampel
Daun kucai ( Allium tuberosum) diperoleh dari desa  Kakaskasen  Tiga,  kecamatan  Tomohon  Utara, kota Tomohon, provinsi Sulawesi Utara. Daun kucai dicuci  bersih  dengan  air  mengalir,  ditiriskandan  di timbang  berat  basahnya  kemudian  dikeringkan dengan menggunakan oven pada suhu 40 ℃ . Setelah kering  kemudian  dihaluskan  dengan  menggunakan blender dan diayak hingga diperoleh simplisia.

## Ekstraksi
Simplisia  yang  telah  ditimbang  sebanyak 200  gram  dimasukkan  kedalam  wadah,  kemudian ditambahkan pelarut etanol 96% sebanyak 1000  ml dengan  perbandingan  1:5  sampai  sampel  terendam secara  keseluruhan  kemudian  sampel  ditutup, perendaman dilakukan selama 5 hari dan terlindung dari cahaya. Selama perendaman dilakukan pengadukan  setiap  hari.  Setelah  5  hari,    dilakukan penyaringan menggunakan kertas saring menghasilkan  filtrat  dan  debris.  Selanjutnya dilakukan  proses  remaserasi  dengan  ekstrak  etanol 96%  sebanyak  600  ml    dengan  perbandingan  1:3 selama 3 hari. Filtrat yang peroleh digabungkan dan dipekatkan  menggunakan  oven  pada  suhu  40 0 C sampai diperoleh ekstrak kental.

## Pembuatan Larutan CMC 1%
CMC 1% sebanyak 1 gram ditaburkan dalam beaker glass yang sudah berisi 10 ml aquades yang dipanaskan,  aduk  sampai  megembang  hingga homogen.  Selanjutnya  dimasukkan  kedalam  labu ukur dan ditambahkan aquades sampai 100 ml.

## Penyiapan Suspensi Paracetamol
Dosis parasetamol untuk manusia adalah 500 mg,  maka  dosis  parasetamol  untuk  tikus  putih adalah  500  mg  x  0,018  =  9  mg  (0,018  merupakan faktor  konversi  dosis  manusia  ke  tikus  putih). Kemudian dilakukan uji keseragaman bobot. Tablet parasetamol  500  mg  ditimbang  sebanyak  20  tablet untuk uji keseragaman bobot, kemudian digerus dan ditimbang berat serbuk. Serbuk parasetamol diambil sebanyak 108 mg setelah dilakukan perhitungan uji keseragaman  bobot  kemudian  dimasukkan  dalam mortar dan ditambahkan dengan suspensi CMC 1% sedikit  demi  sedikit  sambil  digerus  hingga homogen,  lalu  dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur  10 ml. Kemudian volumenya dicukupkan hingga 10 ml dengan suspensi CMC 1%.

## Penyiapan Hewan Uji
Penelitian ini menggunakan tikus jantan sebagai hewan  uji  yang  terbagi  atas  5  kelompok.  Setiap kelompok  terdiri  atas  3  ekor  tikus  jantan  galur wistar  yang  dipelihara  dalam  kandang.  Hewan  uji diadaptasi  selama  kurang  lebih  2  minggu  sebelum perlakuan. Semua tikus mulai diadaptasikan dengan tempat  tinggal  yang  baru  serta  pemberian  makanan dan minuman yang teratur.

## Metode Nyeri Panas
Metode  ini  dilakukan  dengan  melihat respon tikus berupa melompat dan atau menjilat saat diberi  rangsangan  panas.  Respon  tikus  berupa lompatan  dan  atau  jilatan  merupakan  reaksi  nyeri
yang ditimbulkan oleh rangsangan panas (Mantiri et al , 2013).

## Pengujian
Langkah-langkah  pengujian  efek  analgetik pada hewan uji ialah sebagai berikut :
1. Beaker  glass diletakkan  di  atas  hot  plate, kemudian hot  plate dipanaskan  hingga  suhu 55 0 C.  Setelah  suhu  mencapai  55 0 C  tikus dimasukkan kedalam beaker glass tersebut. 2. Setelah  tikus  ada  didalam beaker  glass maka responnya  diamati,  yaitu  berupa  gerakan menjilat  kaki  atau  melompat.  Pengamatan dilakukan selamat 1 menit.
3. Pengujian  pada  tikus  jantan  putih  kelompok  1 diberi  CMC  1%  sebagai  kontrol  negatif  . Kelompok  2  sebagai  kontrol  positif  diberi parasetamol.  Kelompok  3-5  diberi  perlakuan ekstrak  daun  kucai  dengan  dosis  yaitu  3,6  mg; 7,2  mg;  14,4  mg.  Pengamatan  dilakukan  saat sebelum pemberian bahan uji, setelah pemberian bahan uji, pada menit ke 30, 60, 90, dan menit ke 120.

## Analisis Data
Data  hasil  pengamatan  dikumpulkan  dan disajikan  dalam  bentuk  tabel,  grafik,  dan  diagram untuk  mengetahui  pengaruh  efek  analgesik  ekstrak etanol daun kucai ( Allium tuberosum ) terhadap tikus putih jantan ( Rattus norvegicus ).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Data  hasil  penelitian  berikut  ialah  data  yang diperoleh  dari  ke  5  kelompok  perlakuan  hewan  uji yang  masing-masing  kelompok  terdiri  dari  3  ekor hewan  uji  tikus.  Hasil  rata-rata  penurunan  respon tikus  (geliat)  terhadap  kontrol  negatif,  kontrol positif  dan  ekstrak  etanol  daun  kucai  dapat  dilihat sebagai berikut :
Tabel 1. Hasil rata-rata penurunan respon tikus sebelum dan sesudah pemberian bahan uji
Keterangan : K(-) : Kelompok kontrol negatif K(+) : Kelompok kontrol positif KP1 : Kelompok perlakuan ekstrak daun kucai dosis 3,6 mg KP2 : Kelompok perlakuan ekstrak daun kucai dosis 7,2 mg KP3 : Kelompok perlakuan ekstrak daun kucai dosis 14,4 mg
Gambar 1. Grafik rata-rata penurunan respon tikus
Keterangan :
Sumbu x : waktu pengujian Sumbu y : rangka rata-rata
Penelitian ini menggunakan 15 ekor tikus yang dibagi  dalam  5  kelompok  perlakuan  yang  terdiri dari  kontrol  negatif,  kontrol  positif  dan  ekstrak etanol daun kucai dengan dosis 3,6 mg, 7,2 mg dan
14,4  mg  yang  bertujuan  untuk  mengetahui  ada tidaknya  efek  analgetik  dari  ekstrak  etanol  daun kucai  terhadap  hewan  uji  yang  menggunakan metode  rangsangan  panas.  Rangsangan  panas  yang
Kelompok
Perlakuan Sebelum Pemberian Bahan Uji Setelah Pemberian Bahan Uji Menit Ke-30 Menit Ke-60 Menit Ke-90 Menit Ke-120 K(-) 14,3 12,3 11,6 12,3 13,6 K(+) 11,6 4,6 2,6 0,6 0 KP1 12 12,3 9,6 4,6 1.6 KP2 13,3 8,3 6 3 1 KP3 11 6,3 3,6 1 0
dilakukan  terhadap  hewan  uji  untuk  memberi rangsangan  nyeri,  dengan  cara  tikus  dimasukkan kedalam  gelas beaker yang berada di atas hot plate pada  suhu  55 ℃ .  Pada  penelitian  ini  respon  hewan uji  yang  dinilai  berupa  gerakan  menjilat  kaki belakang  atau  melompat  sebagai  ketentuan  hewan uji mulai merasakan nyeri. Penelitian ini menggunakan  suhu  55 ℃ karena  suhu  diatas  45 ℃ mulai  terjadi  kerusakan  jaringan  akibat  panas  dan sensasinya  berubah  menjadi  nyeri  (Guyton,  2011). Penelitian ini menggunakan tikus sebagai hewan uji.
Kelompok  kontrol  negatif    yang  diberikan CMC 1% sebelum dan setelah pemberian bahan uji hingga  menit ke 120  menunjukkan rata-rata jumlah respon  tidak  mengalami  penurunan  yang  signifikan dari  menit  ke  30  hingga  menit  ke  120  respon  tikus semakin  tinggi.  Penurunan  rata-rata  jumlah  respon tikus  pada  kontrol  negatif  menunjukkan  penurunan rata-rata  jumlah  respon  tikus  yang  paling  kecil diantara  kelompok  kontrol  lainnya.  Hal  ini disebabkan  karena  pada  kontrol  negatif  CMC    1% tidak  terkandung  zat  aktif  yang  dapat  mengurangi rasa nyeri.
Pada  kelompok  perlakuan  kontrol  positif yang  diberi  parasetamol  menunjukkan  penurunan jumlah  rata-rata  respon  tikus  terhadap  rangsangan nyeri.  Efek  analgesik  dari kelompok  kontrol  positif mulai  terlihat  setelah  pemberian  bahan  uji  pada menit  ke  30  hingga  menit  ke  120.  Paracetamol diketahui  mencapai  kadar  puncak  dalam  plasma dalam waktu 30-60 menit dan memiliki waktu paruh 1-3 jam (Tjay et al. , 2002).
Hasil  pengujian  pada  kelompok  perlakuan ekstrak  daun  kucai  yang  diberi  dosis  yang  berbeda menunjukkan  adanya  efek  analgetik.  Dapat  dilihat pada  penurunan  rata-rata  jumlah  respon  nyeri  pada tikus dari sebelum pemberian bahan uji dan setelah pemberian  hingga  menit  ke  120.  Pengujian kelompok perlakuan satu ekstrak daun kucai dengan dosis  3,6  mg,  hasil  menunjukkan  respon  tikus terhadap  nyeri  pada  menit  ke  30  terus  terjadi penurunan  hingga  menit  ke  120.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  kucai  dosis  3,6 mg memiliki efek analgesik.
Pengujian  kelompok  perlakuan  dua  ekstrak daun kucai dosis 7,2 mg, hasil menunjukkan adanya respon  tikus  terhadap  nyeri  dilihat  dari  setelah pemberian  bahan  uji  pada  menit  ke  30  terjadi penurunan  hingga  menit  ke  120.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  kucai  dosis  7,2 mg memiliki efek analgesik.
Kelompok  perlakuan  tiga  ekstrak  daun kucai  dosis  14,4  mg,  hasil  menunjukkan  adanya respon nyeri dilihat dari setelah pemberian bahan uji pada  menit  ke  30  terjadi  penurunan  respon  tikus hingga  menit  ke  120.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa ekstrak  daun  kucai  dosis  14,4  mg  memiliki  efek analgesik.  Ini  dapat  disebabkan  oleh  faktor patologik  yang  menyebabkan  efek  obat  dalam  hal ini ekstrak daun kucai menurun (Setiawan, 2010).
Pada penelitian ini kelompok perlakuan tiga ekstrak  daun  kucai  dosis  14,4  mg  memiliki  efek analgetik  yang  paling  baik  dibandingkan  dengan kelompok  perlakuan  ekstrak  dosis  3,6  mg  dan  7,2 mg karena dari sebelum pemberian bahan uji hingga menit  ke  120  jumlah  rata-rata  respon  tikus mengalami  penurunan secara  bertahap  dapat  dilihat pada  tabel  1.  Bila  dibandingkan  dengan  kelompok kontrol  positif  yang  diberi  paracetamol,  efek analgetik  dari  ekstrak  daun  kucai  lebih  rendah  dari parasetamol.
Grafik  dan  diagram  rata-rata  penurunan respon  tikus  menunjukkan  bahwa  dosis  14,4  mg merupakan  dosis  yang  memiliki  efek  analgesik paling  tinggi  dari  ketiga  dosis  ekstrak  yang digunakan.  Jika  dibandingkan  dengan  kontrol positif,  pemberian  ekstrak  lebih  rendah.  Pada kelompok  kontrol  negatif yang  diberikan  CMC  1% tidak memiliki kemampuan dalam menurunkan rasa nyeri  karena  tidak  mengandung  zat  aktif  yang terbukti dari rata-rata penurunan respon tikus paling tinggi  dibandingkan  dengan  kelompok  perlakuan lainnya.
Dari  ketiga  kelompok  perlakuan  ekstrak etanol daun kucai dengan dosis yang berbeda-beda, hasil  penelitian  ini  membuktikan  bahwa  secara farmakologi  ekstrak  etanol  daun  kucai  memiliki efek  analgesik.  Ekstrak  daun  kucai  memiliki  efek analgesik  karena  adanya  kandungan  senyawa flavonoid (Al-Snafi, 2013). Menurut Christina et al., (2012),  senyawa  flavonoid  berperan  sebagai analgesik  dengan  cara  menghambat  kerja  enzim siklooksigenase dengan mengurangi produksi prostaglandin  oleh  asam  arakidonat  sehingga  dapat mengurangi rasa nyeri.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian, dapat disimpulkan bahwa    ekstrak  etanol  daun  kucai  ( Allium tuberosum ) memiliki efek analgesik pada tikus putih jantan  ( Rattus  norvegicus) pada  dosis  3,6  mg,  7,2 mg, dan 14,4 mg.

## SARAN
Dari  hasil  peneltian  ini  disarankan  kepada penelitian selanjutnya agar dapat dilakukan penelitian  lebih  lanjut  mengenai  penentuan  dosis minimum,  maksimum  dan  dosis  toksik  agar ditemukan dosis yang optimal.

## DAFTAR PUSTAKA
Al-Snafi, A. E. 2013. Review Articel : Pharmacological Effects Of Allium
Species  Grown  In  Iraq .  Int.  J.  Pharm.  & H. Care Res. 1(4) : 142-144.
Andarwulan, N., Faradilla, R. H. F. 2012 . Senyawa Fenolik Pada beberapa Sayuran Indigenius dari  Indonesia.  Bogor: Southeast  Asian Food  and  Agricultural  Science  nd Technology  (SEAFAST)  Center ,  IPB.
9 :57-60.
Anief,  M.  2000.  Prinsip  Umum  dan  Dasar Farmakologi. UGM Press. Yogyakarta.
Christiana,  I.,  Evacuasiany,  E.,  Hidayat,  M.  2012 .
The  Analgetic  Effect  Of  Kayu  Rapat  Bark Infusion  (Parameria  leavigata  (Juss) Moldenke)  On  Male  Mice  Treated  With Termal  Induction .  Jurnal  Medika  Planta.
2(1) : 107-109
Guyton,  A.C.  and  J.E.  Hall  2007.  Buku  Ajar Fisiologi Kedokteran. EGC, Jakarta.
Guyton,  A.C.  and  J.E.  Hall  2011.  Buku  Ajar Fisiologi Kedokteran. Elsevier, Singapore.
Mantiri,  N.C.,  Awaloei,  H.,  Posangi,  J.  2013. Perbandingan  Efek  Analgesik  Perasan Rimpang  Jahe  Merah (Zingiber  officinale var.  Rubrum  Thelaide) Dengan  Aspirin Dosis Terapi Pada Mencit (Mus musculus) [skripsi]. Bagian Farmakologi dan Terapi, Universitas Sam Ratulangi Manado.
Setiawan,  R.  2010 . Pengaruh  Pemberian  Ekstrak Kelopak Bunga Roela (Hibiscus sabdariffa  L.) Terhadap  Penurunan  kadar Gula Darah Tikus Putih (Rattus novergicus) yang  Diinduksi  Aloksan
[skripsi]. Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret, Surakarta.
Tjay,  T.  H.,  Rahardja,  K.  2002.  Obat-obat  Penting
Khasiat Penggunaan dan Efek-efek Sampingnya . PT Alex Komputindo. Jakarta.
Wijayakusuma,  H.  2001.  Penyembuhan  dengan Bawang  Putih  dan  Bawang  Merah. Penerbit Milenia Popular, Jakarta.