## Jurnal Ilmu Farmasi dan Farmasi Klinik (JIFFK)
Vol. 15, No. 2, DESEMBER 2018, Hal. 13 – 17 ISSN: 1693 -7899

## PENGARUH KOMBINASI BASIS PEG 400 DAN BASIS PEG 4000
DALAM FORMULASI SALEP EKSTRAK DAUN SUKUN ( Artocarpus altilis ) TERHADAP AKTIVITAS ANTIBAKTERINYA
Sella Arbi Nur Ullya Dewi 1), Dewi Andini Kunti Mulangsri 2), Mufrod 3)
1,2 Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang
3 Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta Jalan Menoreh Tengah X/22 Semarang Email: andini@unwahas.ac.id

## INTISARI
Daun  sukun  mengandung  senyawa  golongan  flavonoid  yang  memiliki  potensi  antibakteri terhadap Staphylococcus  aureus . Ekstrak  daun  sukun  akan  lebih  praktis  dan  efektif  jika diformulasikan  dalam  sediaan  salep.  Kombinasi  basis  PEG  400  dan  PEG  4000  menurunkan  titik lebur  PEG  4000,  sehingga  didapat  sediaan  yang  kompatibel  dan  mampu  meningkatkan  penetrasi obat di dalam kulit. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh kombinasi basis PEG 400 dan  PEG  4000  dalam  salep  ekstrak  daun  sukun  terhadap  aktivitas  antibakteri  pada  bakteri Staphylococcus aureus .
Ekstrak  daun  sukun  (EDS)  diperoleh  secara  maserasi  dengan  pelarut  etanol  70%.  Tiga formula salep dengan perbandingan konsentrasi basis PEG 400 : PEG 4000 yaitu (F1) 75% : 25%, (F2)  50%  :  50%,  (F3)  25%  :  75%,  menggunakan  metode  peleburan.  Uji  aktivitas  antibakteri menggunakan metode difusi agar sumuran. Uji Kruskal Wallis dan Mann Whitney digunakan untuk menganalisis hasil data.
Salep  ekstrak  daun  sukun    memiliki  warna  coklat,  bentuk  semi  padat,  aroma  khas  daun sukun.  Ketiga  formula  salep  memiliki  aktivitas  antibakteri  ditunjukkan  dengan  terbentuknya  zona hambat  di  sekitar  sumuran.  Ketiga  formula  memiliki  perbedaan  yang  bermakna  yang  diartikan perbandingan  konsentrasi  antara  PEG  400  :  PEG  4000  dapat  mempengaruhi  aktivitas  antibakteri salep EDS. Semakin tinggi konsentrasi PEG 4000 dibandingkan PEG 400 maka akan semakin kecil nilai  diameter  daerah  hambatnya  (DDH)  artinya  potensi  antibakterinya  menurun.  Formula  yang memiliki aktivitas antibakteri paling besar ditunjukkan dengan DDH paling besar pada FI  sebesar 8,02mm.
Kata kunci : Daun sukun, Salep, PEG 400 dan PEG 4000, Antibakteri

## ABSTRACT
Breadfruit leaves contain flavonoid compounds that can inhibit the growth of Staphylococcus aureus bacteria.  Breadfruit  leaf  extract  is  practical  and  effective  formulated  in  ointment  preparations.  The  base combination of  PEG 400 and PEG 4000 decreases the melting point of PEG 4000, so that it is compatible and can increase the penetration of drugs in the skin. The objective of this study to determine the breadfruit leaf extract ointment  with a  combination of PEG 400 and PEG 4000  bases as well  as  antibacterial activity against Staphylococcus aureus bacteria.
Breadfruit  leaf  extract  (BLE)  was  obtained  by  maceration  with  70%  ethanol.  Salve  preparations were made into III formulas with variations in base concentrations of PEG 400 and PEG 4000, namely (F1) 75%:  25%, (F2)  50%:  50%,  (F3)  25%:  75%,  using  the  fusion  method.  Antibacterial  activity  test used  agar well diffusion method. Kruskal Wallis test and Mann Whitney test used for analyzed data from antibacterial activity test.
The  ointment  of  Breadfruit  leaves  extract  showed  the  color  of  brown  ointment,  semi-solid  form, distinctive aroma of breadfruit leave. All of three ointment formulas have antibacterial activity indicated by the formation of inhibitory zones around the well. All of three ointment formulas have significant differences which means the combination of PEG 400 and PEG 4000 can affect antibacterial activity of BLE ointment. The  higher  of  the  concentration  PEG  4000  compared  PEG  400  caused  inhibiton  zone  become  smaller  that means the potency of antibacterial decreased. The formula has the greatest antibacterial activity in the FI is 8,02mm.
Keywords: breadfruit leaves, ointment, PEG 400 and PEG 4000, antibacterial
Corresponding author: Dewi Andini Kunti Mulangsri Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang Jalan Menoreh Tengah X/22 Semarang Email: andini@unwahas.ac.id

## PENDAHULUAN
Penggunaan obat tradisional ini lebih aman dan tidak menghasilkan efek samping. Tanaman yang dapat digunakan sebagai antibakteri adalah tanaman sukun ( Artocarpus altilis ) dengan bagian tanaman  berupa  daun  yang  sering  dimanfaatkan.  Daun  sukun  memiliki  banyak  kandungan  kimia yang  bermanfaat  diantaranya  adalah  saponin,  polifenol,  flavonoid  dan  asam  fenolat,  tannin, asetilkolin,  dan  riboflavin  (Sulistiyaningsih  dkk,  2009).  Ekstrak  etanol  daun  sukun  ( Artocarpus altilis )  memiliki  kemampuan  menghambat  pertumbuhan S.  aureus pada  konsentrasi  30%,  40%, 50% dan 60% dengan diameter masing-masing secara berurutan 14,5 mm; 18,1 mm; 22  mm dan 27 mm (Djamil, 2017).
Aplikasi  dari  ekstrak  daun  sukun  dalam  sediaan  topikal  berupa  salep  akan  menjadi  mudah dalam  penggunaannya.  Salep  memerlukan  basis  pembawa  dalam  formulanya.  Penggunaan  basis salep  PEG  mempunyai  banyak  keuntungan  antara  lain  mudah  dicuci  dengan  air  sehingga  dapat dioleskan pada permukaan kulit (Depkes RI, 1979). Kombinasi antara basis PEG 400 dengan basis PEG  4000  bertujuan  menurunkan  titik  lebur  PEG  4000  sehingga  didapatkan  sediaan  yang kompatibel  (Norvisari,  2008).  Basis  PEG  memiliki  sifat  yang  tidak  merangsang,  memiliki  daya lekat  dan  didistribusi  yang  baik  pada  kulit,  dan  tidak  menghambat  pertukaran  gas  dan  produksi keringat (Voigt, 1984). Formula salep dapat dirubah lagi dengan menggunakan bagian yang sama antara kedua bahan, agar diperolehh salep yang lebih baik lagi (Ansel, 2005). Maka perlu diadakan penelitian  tentang  pengaruh  kombinasi  antara  basis  PEG  400  dan  basis  PEG  4000  dalam  salep ekstrak daun sukun ( Artocarpus altilis ) terhadap aktivitas antibakteri.

## METODE PENELITIAN Bahan Penelitian
Bahan  yang  digunakan  ialah  daun  sukun  yang  diperoleh  dari  Sekaran,  Gunung  Pati Kabupaten  Semarang,  etanol  70%,  PEG  400,  PEG  4000,  propilenglikol,  menthol,  metil  paraben, propil paraben, bakteri Staphylococcus aureus (Biakan Murni), nutrien agar, nutrien broth, DMSO, Mc Farland, biakan bakteri  yang disimpan dalam inkubator dengan  suhu 37º C. Gentamisin salep (kontrol positif), salep tanpa ekstrak (kontrol negatif).

## Alat Penelitian
Seperangkat  alat  gelas,  neraca  analitik  (OHAUS).  toples,  sendok  pengaduk,  kertas  saring, alumunium  foil,  alat  saring,  corong Buchner, kertas  coklat,  oven,  blender, rotary  evaporator (HELDOLIPH), moisture  balance (OHAUS), stopwatch ,  autoklave,  lampu  bunsen,  inkubator, Laminar Air Flow (LAF), timbangan elektronik, sengkelit ose, piring petri, mortar, pot salep, dan cawan.

## JALANNYA PENELITIAN

## 1. Determinasi tanaman
Keaslian  tanaman  sukun  perlu  dipastikan  lagi  melalui  determinasi  tanaman.  Laboratorium Ekologi dan Biosistematika Jurusan Biologi Fakultas MIPA UnDip Semarang adalah tempat untuk
melakukan  determinasi  tanaman.  Tanaman  dideterminasi  dengan  mencocokkan  sampel  daun, batang,  akar,  bunga  dan  buah  sukun  yang  masih  dalam  keadaan  segar  dengan  ciri-ciri  morfologi tanaman yang terdapat pada buku standar.
2. Pembuatan Simplisia dan Ekstrak Daun Sukun
Daun yang digunakan berupa daun yang masih segar, tunggal, berwarna hijau tua, utuh dan tebal. Daun yang diperoleh disortasi yang memiliki kualitas baik, dicuci dengan air yang mengalir. Penimbangan daun sukun  yang di dapat 10,920 kg. Daun  sukun diangin-anginkan terlebih dahulu pada  tempat  yang  tidak  terpapar  langsung  oleh  sinar  matahari.  Pengeringan  dilanjutkan  dengan oven  pada  suhu  45°C.  Daun  sukun  yang  sudah  kering  di  sortasi  kering  untuk  menghasilkan simplisia  kering  yang  diharapkan.  Simplisia  daun  sukun  diblender  untuk  memperoleh  serbuk simplisia yang memenuhi persyaratan untuk di maserasi.
Serbuk daun sukun disari oleh pelarut etanol 70% dengan perbandingan 1:10 menggunakan teknik  maserasi.  Serbuk  ditimbang  4500  gram  dimasukkan  kedalam  bejana  maserasi  dan ditambahkan 33,750 L etanol 70%, bejana maserasi dilapisi kertas coklat agar terhindar dari cahaya matahari langsung dan ditutup aluminium foil. Remaserasi dilakukan terhadp ampas dari maserasi pertama ditambahkan pelarut etanol 70% sebanyak 11,250 L.
3. Pembuatan Salep Ekstrak Daun Sukun (EDS)
Metode peleburan digunakan untuk membuat salep. PEG 4000 dalam cawan porselen dilebur di  atas  penangas  air.  Lelehan  PEG  4000  tadi  dituang  ke  dalam  mortir  hangat  dan  diaduk  sampai homogen.  Ekstrak  daun  sukun  ditambahkan  sebagian  PEG  400  dicampurkan  dengan  basis  PEG 4000 lalu sisa PEG 400 diaduk hingga homogen, ditmbahkan menthol yang telah dilarutkan etanol 96% lalu propilen glikol ditambahkan terakhir yang dituangkan sedikit demi sedikit dan diaduk rata sampai konsistensinya menjadi kental.
4. Uji Aktivitas Antibakteri Salep Ekstrak Daun Sukun
Metode well  diffusion agar berupa  sumuran  di  media  agar  yang  digunakan  untuk  menguji aktivitas antibakteri salep EDS. Langkah pertama yaitu penyiapan media Nutrien Agar (NA) untuk pertumbuhan bakteri.
Media  yang  telah  disterilkan  kemudian  didinginkan  dalam  keadaan  tertutup  pada  LAF. Suspensi  bakteri  uji  diinokulasikan  kedalam  media  tersebut  hingga  homogen.  Media  yang  telah terisi bakteri uji dituangkan ke dalam beberapa cawan petri dan dibiarkan hingga memadat. Media yang telah memadat dibuat lima sumuran secara aseptis. Salep EDS masing-masing sebanyak 100 mg dimasukan  ke sumuran dan dieramkan di inkubator  suhu 37°C. Lama pengeraman selama 18- 24 jam.
Zona  hambat  diukur  diameter  daerah  hambat  (DDH)  yang  berupa  daerah  bening  di  sekitar sumuran. Jangka sorong digunakan untuk mengukur diameter dari tepi sumuran ke batas lingkaran zona hambat lalu dirata-ratakan.

## ANALISIS DATA
Data  hasil  pengujian  aktivitas  antibakteri  salep  EDS  berupa  DDH.  Nilai  DDH  tiap  formula salep  EDS  dianalisis  menggunakan  uji Kruskal  Wallis kemudian  jika  ada  perbedaan  bermakna maka analisis lebih lanjut dengan uji Mann Whitney .

## HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

## 1. Pembuatan Simplisia dan Ekstrak Daun Sukun (EDS)
Berat serbuk daun sukun yang diperoleh adalah 5,210 kg dari 10,920 kg berat segar setelah di  sortasi  basah  dengan  kadar  air  4,0%.  Rendemen  simplisia  daun  sukun  47,71%  yang  dapat diartikan 1 gram daun sukun segar setara dengan 477,1 mg serbuk simplisia daun sukun.
Pada pembuatan  ekstrak dengan metode maserasi, maserat yang diperoleh  sebanyak 31,100 L diuapkan menggunakan rotary evaporator . Suhu penguapan 45º C  sehingga menguap di bawah titik  didih  pelarut  etanol  yaitu  78ºC.  Setelah  itu  ekstrak  kental  ditimbang  dan  dihitung  rendemen ekstraknya.
Ekstrak  etanol  daun  sukun  yang  diperoleh  679,9  gram  dengan  rendemen  sebesar  6,235%. Dalam 1 gram serbuk  simplisia  setara dengan 62,35 mg ekstrak. Ekstrak daun sukun berbau khas sukun dan berwarna hitam.
2. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Salep EDS Terhadap Staphylococcus aureus .
Hasil  pengujian  aktivitas  antibakteri  salep  EDS  menunjukkan  bahwa  semua  formula terbentuk  zona  hambat  yang  menandakan  adanya  kemampuan  antibakteri  pada  bakteri Staphylococcus aureus . Gambar 1 menyajikan hasil pengujian aktivitas antibakteri.
Gambar 1. Hasil Pengujian Salep EDS dengan kombinasi basis PEG 400 (a) dan basis PEG 4000 (b) Terhadap Bakteri S. aureus , diameter sumuran 6 mm
Keterangan :
FI = a : b (75% : 25%) FII = a : b (50% : 50%) FIII = a : b (25% : 75%)
Tanda +  = kontrol positif Tanda -  = kontrol negatif
Karakteristik  basis  salep  pembawa  dapat  juga  mempengaruhi  pelepasan  obat  dari  sediaan salep (Ansel, 1989). Kemampuan menghambat terbesar dari basis larut air dibandingkan basis salep lain. Basis salep air tidak mengandung lemak dan mudah larut dalam air. Basis PEG 400 dan basis PEG 4000 merupakan basis salep  bukan lemak yang dapat homogen dengan media NA dan dapat berdifusi  dengan  baik  (Dewi,  2013).  Tabel  I  menyajikan  nilai  DDH  hasil  pengujian  aktivitas antibakteri.
Tabel I. Hasil Pengujian Antibakteri Salep EDS dengan Basis PEG 400 (a) dan Basis PEG 4000 (b)
Formula DDH (mm) Rata±rata SD Replikasi I Replikasi II Replikasi III Kontrol positif 11,80 11,92 11,76 11,82±0,08 Kontrol negative 0 0 0 0 Formula I 7,96 8,03 8,07 8,02±0,05 Formula II 7,46 7,50 6,92 7,29±0,32 Formula III 6,52 6,40 6,28 6,40±0,12 Keterangan : FI = a : b (75% : 25%) FII = a : b (50% : 50%)
FIII = a : b (25% : 75%) Pengujian tiap formula dilakukan tiga kali replikasi
Hasil uji normalitas data pengujian aktivitas antibakteri salep EDS memberikan hasil berupa tidak  terdistribusi  normal  dan  homogen;  kesimpulannya  analisis  yang  digunakan  analisis nonparametrik yaitu uji Kruskal Wallis dan  jika ada perbedaan bermakna diujikan lagi dengan  uji Mann Whitney . Tabel II menyajikan hasil analisa statistik pengujian aktivitas antibakteri. Hasil  yang  berbeda  bermakna  antara  kontrol  positif  dengan  FI,  FII  dan  FIII  pada  uji Mann Whitney yang diartikan bahwa daya hambat pada formula salep memiliki perbedaan dengan kontrol positif.  Berbeda  bermakna  artinya  antara  formula  perlakuan  dan  kontrol  positif  bahwa  kontrol positif  memiliki  aktivitas  antibakteri  lebih  tinggi  atau  lebih  poten  dibandingkan  dengan  ketiga formula.  Kontrol  negatif  tidak  memiliki  aktivitas  antibakteri  karena  tidak  ada  zat  aktif  yang
terkandung  didalam  kontrol  negatif.  Pada  ketiga  formula  tersebut  memiliki  perbedaan  pada  daya hambat karena pada formula I, II, dan III ada kenaikan konsentrasi dari PEG 4000.
Kombinasi basis pada FI, FII, dan FIII memiliki konsentrasi basis PEG 4000 yang semakin tinggi. Basis PEG 4000 memiliki massa yang padat, sehingga dengan variasi konsentrasi PEG 4000 pada  formula  salep  menyebabkan  konsistensi  menjadi  semakin  kental  dan  dimungkinkan menyebabkan    difusi  obat  menurun  sehingga  berakibat  pada  penurunan  daya  hambat  pada  uji aktivitas  antibakteri  SEDS  terhadap Staphylococcus  aureus .  Pada  Formula  III  mengandung  PEG 4000 sebesar 75% lebih banyak dibandingkan PEG 400 maka nilai DDH yang dihasilkan semakin kecil. Sehingga semakin tinggi konsentrasi PEG 4000 dibandingkan PEG 400 akan mempengaruhi aktivitas antibakteri SEDS yang ditandai dengan semakin kecil nilai DDHnya.
Tabel II. Hasil Uji Mann Whitney Daya Hambat Formula Salep Ekstrak Daun Sukun dengan Basis
PEG 400 (a) dan Basis PEG 4000 (b) Formula uji Nilai signifikansi Keterangan Kontrol (+) dan FI 0,000 Berbeda bermakna Kontrol (+) dan FII 0,000 Berbeda bermakna Kontrol (+) dan FIII 0,000 Berbeda bermakna F I dan F II 0,005 Berbeda bermakna F I dan F III 0,000 Berbeda bermakna F II dan F III 0,001 Berbeda bermakna Keterangan : FI = a : b (75% : 25%) FII = a : b (50% : 50%)
FIII      = a : b (25% : 75%) Pengujian tiap formula dilakukan tiga kali replikasi

## KESIMPULAN
Kombinasi  basis  PEG  400  dan  basis  PEG  4000  dapat  mempengaruhi  aktivitas  antibakteri sediaan  salep  ekstrak  daun  sukun.  Pengaruh  tersebut  ditunjukkan  dengan  menurunnya  diameter daerah hambat ketika konsentrasi PEG 4000 semakin tinggi yang diartikan juga adanya penurunan aktivitas  antibakteri.  Formula  I  memiliki  aktivitas  antibakteri  yang  paling  besar  ditandai  dengan nilai DDH sebesar 8,02mm dibandingkan formula II dan III.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim,  1979,  Farmakope  Indonesia,  Edisi  III,  Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia, Jakarta, 33, 504, 506, 534 Ansel,  H.  C.,  1989, Pengantar  Bentuk  Sediaan  Farmasi ,  Edisi  IV  diterjemahkan  oleh  Farida Ibrahim,Penerbit Universitas Indonesia, Jakarta, 490-492, 502-508
Djamil,  M.  I.,  2017,  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun  Sukun  ( Artocarpus  altilis ) Terhadap  Pertumbuhan Staphylococcus  aureus Secara  In  Vitro, Skripsi ,  Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Hasanuddin, Makassar
Dewi, A, L., 2013, Formulasi Salep Ekstrak Herba Pegagan ( Centella asiatica (L.) Urban) dengan Basis  Polietilengikol  dan  Uji  Aktivitas  Antibakteri  terhadap Staphylococcus  aureus , Naskah Publikasi , Universitas Muhammadiyah Surakarta
Norvisari,  M.,  2008,  Pengaruh  Kombinasi  Basis  Polietilenglikol  400  dan  Polietilenglikol  6000
Terhadap Sifat  Fisik dan Pelepasan  Asam Mefenamat Pada Sediaan  Suppositoria, Skripsi , Universitas Muhammadiyah Surakarta
Sulistyaningsih,  Firmansyah,  Ami,  T.,  2014,  Uji  Aktivitas  Ekstrak  Etanol  Bayam  Duri ( Amaranthus  Spinosus  L .)  Terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas aeruginosa Dengan Metode Difusi Agar, Farmaka , 14 , 1 Voigt.,  R.,  1984, Buku  Pelajaran  Teknologi  Farmasi ,  diterjemahkan  oleh  Soendani  Noerono Soewandhi, Edisi V, Gadjah Mada University Press, Jogjakarta, 566-567