PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## THE TEST OF ANALGETIC EFFECTS OF ETHANOL EXTRACTS OF KUMIS KUCING
LEAVES (Ortosiphon aristatus (Blume) Miq.) ON Rattus novergicus
UJI EFEK ANALGETIK EKSTRAK ETANOL DAUN KUMIS KUCING ( Ortosiphon aristatus (Blume) Miq.) TERHADAP TIKUS PUTIH JANTAN
Mayang Marsina Nurfitri 1)* , Edwin de Queljoe 1) , Olvie S. Datu 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA Unsrat Manado, 95115 *mygmrsn12@gmail.com

## ABSTRACT
Kumis kucing leaves ( Ortosiphon aristatus (Blume) Miq) contain flavonoid compounds, namely sinensetin, eupatorine, 3'-hydroxy-5,6,7,4'-tetramethoxyflavone and rosmarinic acid which have analgetic effects. This study aims to determine the analgetic effect of the ethanol extract of kumis kucing leaves at different doses, such as at doses of 5 mg/200gBW rats, 10 mg/200gBW rats and 20 mg/200gBW rats. This study employed a laboratory experimental research design using Rattus norvegicus. Analgetic effect was tested using the heat stimulation method which utilized a hot plate with a temperature of 55 ℃ . The response observed was in the form of licking the hind legs or jumping from before giving the test material to after giving the test material for 30, 60, 90 and 120 minutes, respectively. The results demonstrated that the ethanol extract of the kumis kucing  leaves  had  better  analgetic  activity  than  the  negative  control  at  doses  of  5  mg/200gBW  rats,  10 mg/200gBW rats, and 20 mg/200gBW rats. According to the results of statistical data analysis with One Way Anova and followed by the LSD test with a 95% confidence level, it showed that the ethanol extract of the cat's whisker  leaves  had  an  analgetic  effect.  Where  the  best  dose  among  the  three  doses  was  doses  of  4.125 mg/165gBW rats.
Keywords : Analgetic , Kumis Kucing Leaves ( Ortosiphon aristatus (Blume) Miq ), Rattus norvegicus

## ABSTRAK
Daun  kumis  kucing  ( Ortosiphon aristatus (Blume)  Miq.)  mengandung  senyawa flavonoid  yaitu  sinensetin, eupatorine,  3’-hydroxy-5,6,7,4’-tetramethoxyflavone  dan  asam  rosmarinik  yang  memiliki  efek  analgetik. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  adanya  efek  analgetik  pada  ekstrak  etanol  daun  kumis  kucing dengan dosis berbeda-beda yaitu dengan dosis 5 mg/200gBB tikus, 10 mg/200gBB tikus dan 20 mg/200gBB tikus.  Penelitian  ini  menggunakan  rancangan  penelitian  eksperimental  laboratorium  dengan  menggunakan hewan  uji  tikus  putih  jantan.  Pengujian  efek  analgetik  dilakukan  dengan  metode  rangsangan  panas menggunakan hot plate dengan suhu 55 ℃ . Respon yang diamati berupa gerakan menjilat kaki belakang atau melompat dari sebelum pemberian bahan uji hingga sesudah pemberian bahan uji dengan waktu berturut-turut 30, 60, 90 dan 120 menit. Hasil penelitian menunjukan bahwa ekstrak etanol daun kumis kucing dengan dosis 5 mg/200gBB tikus, 10 mg/200gBB tikus dan 20 mg/200gBB tikus menunjukkan aktivitas analgetik lebih baik dibandingkan kontrol negatif. Dari hasil analisis data secara statistika dengan One Way Anova dan dilanjutkan dengan  uji  LSD  dengan  taraf  kepercayaan  95%  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  kumis  kucing memiliki efek analgetik. Dimana dosis terbaik diantara ketiga dosis tersebut ialah dosis 5 mg/200gBB tikus.
Kata kunci : Analgetik, Daun Kumis Kucing ( Ortosiphon aristatus (Blume) Miq), Rattus norvegicus )
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## PENDAHULUAN
Nyeri merupakan rasa yang tidak menyenangkan yang menjadi alasan paling umum bagi  pasien  untuk  mendatangi  tempat  perawatan kesehatan.  Nyeri dapat dianggap sebagai racun di dalam  tubuh  karena  terjadi  akibat  adanya kerusakan  jaringan  atau  saraf  yang  akan mengeluarkan  mediator  seperti  H+,  K+,  ATP, prostaglandin, bradikinin, serotonin, substansia P, histamin dan sitokain yang menyebabkan rasa tidak nyaman  di  dalam  tubuh.  Mediator-mediator  ini disebut  mediator  nyeri  (Suwondo  dkk,  2017; Arisetijono dkk, 2015).
Berdasarkan  studi  epidemiologi  prevalensi nyeri umumnya lebih tinggi pada anak perempuan dan  meningkat  pada  usia  lanjut.  Nyeri  juga  akan lebih  meningkat  pada  kelompok  dengan  status sosial ekonomi  yang  lebih rendah  terutama  untuk sakit  kepala  (King  dkk,  2011).  Berdasarkan penelitian  (Amalia  dkk,  2016),  mayoritas  kasus nyeri  ialah  kelompok  dengan  rentang  usia  55-64 tahun,  perempuan,  pekerjaan  sebagai  ibu  rumah tangga,  dan  Pendidikan  terakhir  ialah  tingkat pendidikan SMA.
Penggunaan obat dari bahan alam sangat sering digunakan  di  Indonesia  yang  didukung  dengan kekayaan  alam  Indonesia  yang  sangat  melimpah sehingga  sering  dimanfaatkan  sebagai  obat tradisional (Ramya dkk, 2012). Salah satu tanaman yang  dijadikan  obat  tradisional  adalah  kumis kucing  ( Orthosiphon  aristatus (Blume)  Miq.).  Di Indonesia, daun kumis kucing dimanfaatkan untuk pengobatan  diuretik,  pencegahan  dan  pengobatan pada  rematik,  diabetes  melitus,  hipertensi, tonsilitis, epilepsi, gangguan menstruasi, gonorea, sifilis, renal calculi, batu empedu akut dan nefritis, gout  arthritis,  analgetik  dan  antipiretik  (Adyana dkk,  2013).  Kumis  kucing  mengandung  senyawa flavonoid,  triterpenoid  dan  turunan  asam  kafeat seperti eupatorine, sinensetin, tetramethoxyflavone (TMF), asam khiramin dan asam roemarinate yang tinggi  dan  juga  memiliki  sifat  antioksidan (Akowuah dkk, 2004; Amzad dan Zhari, 2003).

## METODOLOGI PENELITIAN
Jenis, Waktu dan Tempat Penelitian Penelitian ini merupakan penelitian
eksperimental. Penelitian ini dilakukan pada bulan Januari  2021  –  April  2021  di  Laboratorium Program  Studi  Farmasi  Fakultas  Matematika  dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sam Ratulangi, Manado.
Alat Alat-alat  yang  digunakan  adalah  alat-alat gelas  ( pryex ),  oven,  blender  ( philips ),  ayakan, batang pengaduk, sudip, disposable syringe 1 ml, timbangan analitik, timbangan tepung, aluminium foil, lumpang dan alu, kandang dan tempat hewan uji, stopwatch , sarung tangan, pipet ukur, pengukur suhu, hotplate , toples, sonde oral.

## Bahan
Paracetamol, daun kumis kucing ( Orthosiphon aristatus (Blume)  Miq.),  etanol  96%,  Na  CMC, aquadest steril, makanan hewan uji.

## Preparasi Sampel
Daun  kumis  kucing  diambil  secukupnya  dan dibersihkan  dengan  air  mengalir  lalu  ditiriskan. Sampel dikeringkan dengan cara diangin-anginkan hingga  daunnya  mengering.  Simplisia  yang  telah kering  dihaluskan  dengan  cara  diblender  lalu diayak dan disimpan di dalam wadah tertutup pada suhu kamar.

## Ekstraksi Senyawa Bioaktif
Serbuk  simplisia  kering  daun  kumis  kucing ditimbang sebanyak 350 gram dan dimasukkan ke dalam  wadah.  Pembuatan  ekstrak  dilakukan dengan  cara  maserasi  yaitu  dengan  merendam serbuk  simplisia  daun  kumis  kucing  dengan menggunakan  pelarut  etanol  96%  sebanyak  1400 ml  dengan  perbandingan  1:4.  Perendaman  ini dilakukan selama 3 hari dan dilakukan pengadukan sekali  sehari.  Maserat  lalu  disaring  menggunakan kertas saring. Maserat dipisahkan dan diremaserasi dengan  jenis  pelarut  yang  sama.  Semua  filtrat kemudian  diuapkan  dengan  menggunakan  oven pada suhu 40 ℃ sampai diperoleh ekstrak kental.

## Pembuatan Larutan Na CMC 0,5%
Larutan  Na  CMC  0,5%  dibuat  dengan memasukkan  0,5  gram  Na  CMC  kemudian dilarutkan kedalam 50 mL aquadest panas sambil diaduk  hingga  semuanya  terlarut  dan  terbentuk massa  yang  kental.  Larutan  lalu  dituang  kedalam labu  ukur  100  mL  dan  ditambahkan  air  hingga volume  100  mL  sehingga  didapatkan  Na  CMC konsentrasi 0,5%.

## Penentuan Dosis Bahan Uji
Dosis  yang  dipakai  yaitu  25  mg/kgBB,  50 mg/kgBB  dan  100  mg/kgBB.  Pemberian  ekstrak menggunakan dosis 25 mg/kgBB, 50 mg/kgBB dan 100  mg/kgBB  disesuaikan  dengan  berat  badan tikus, perhitungannya sebagai berikut:
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Dosis I (25 mg/kgBB) BB tikus 1000 × dosis 200 1000 × 25 mg kgBB ⁄ = 5 mg/kgBB tikus Dosis II (50 mg/kgBB) BB tikus 1000 × dosis 200 1000 × 50 mg kgBB ⁄ = 10 mg/kgBB tikus Dosis III (100 mg/kgBB) BB tikus 1000 × dosis 200 1000 × 100 mg kgBB
⁄ = 20 mg/kgBB tikus

## Pembuatan Suspensi Paracetamol
Dosis  paracetamol  pada  manusia  adalah  500 mg. Faktor konversi dosis manusia (70 kg) ke dosis tikus  (200  g)  adalah  0,018.  Maka  perhitungannya sebagai berikut : 500 mg × 0,018 = 9 mg/200 g BB tikus.  Pembuatan  paracetamol  dilakukan  dengan menghitung  keseragaman  bobot  paracetamol. Paracetamol ditimbang sesuai dengan perhitungan, lalu ditambahkan larutan suspensi Na CMC 0,5% sebanyak 1 ml kemudian diaduk hingga homogen.

## Perlakuan Hewan Uji
Hewan uji yang digunakan adalah tikus putih jantan sebanyak 15 ekor tikus yang dibagi menjadi 5 kelompok. Masing-masing kelompok terdiri dari 3 ekor tikus. Semua hewan uji diadaptasi selama 7 hari  (makan  dan  minum  tetap  diberikan)  agar hewan  uji  dapat  beradaptasi  dengan  lingkungan sekitar.  Sebelum  dilakukan  pengujian,  hewan  uji dipuasakan  terlebih  dahulu  selama  8  jam  namun tetap  diberikan  minum.  Pembagian  kelompok perlakuan sebagai berikut:
Kelompok I (kontrol negatif) : tikus diberi larutan suspense Na CMC 0,5 % secara oral Kelompok II (kontrol positif) : tikus diberi suspense  paracetamol  9  mg/200gBB  tikus  secara oral.
Kelompok III (dosis I)  :  tikus  diberi  suspensi ekstrak  etanol  daun  kumis  kucing  dosis  5 mg/200gBB tikus secara oral.
Kelompok IV (dosis II)  :  tikus  diberi  suspensi ekstrak  etanol  daun  kumis  kucing  dosis  10 mg/200gBB tikus secara oral.
Kelompok V (dosis III)  :  tikus  diberi  suspensi ekstrak  etanol  daun  kumis  kucing  dosis  20 mg/200gBB tikus secara oral.

## Pengujian Efek Analgetik
Langkah-langkah  pengujian  efek  analgetik pada hewan uji yaitu sebagai berikut: Gelas beker diletakkan di atas hot plate , kemudian dipanaskan hingga  suhu  55 ℃ .  Setelah  suhu  mencapai  55 ℃ tikus  lalu  dimasukkan  kedalam beaker  glass . Setelah  itu  diamati  respon  tikus,  yaitu  berupa gerakan  menjilat  kaki  dan  atau  melompat. Pengamatan dilakukan selama 1 menit. Kelompok kontrol negatif diberikan Na CMC 0,5%, kelompok kontrol positif diberikan parasetamol dan kelompok perlakuan diberikan ekstrak etanol daun kumis  kucing.  Tikus  lalu  diistrahatkan  untuk diamati  kembali  pada  menit  ke-30.  Pengamatan dilakukan  dengan  interval  waktu  30  menit  untuk setiap pengamatan hingga menit ke-120. Pengamatan  dilakukan  sebanyak  5  kali  yaitu sebelum pemberian bahan uji, menit ke-30, menit ke-60,  menit  ke-90  dan  menit  ke-120  setelah pemberian bahan uji.

## Analisis Data
Data  hasil  penngamatan  dikumpulkan  dan disajikan  dalam  bentuk  tabel,  grafik  dan  analisis statistik  uji One-Way ANOVA  ( Analysis  Of Variance ).  Jika  hasil  uji One  Way ANOVA menunjukan  perbedaan  yang  signifikan  maka dilanjutkan  dengan  menggunakan  uji LSD ( Least Significant Difference ) untuk mengetahui signifikan  perbedaan  rata-rata  dari  kelompok perlakuan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil
Data  berikut  merupakan  data  yang  diperoleh dari  5  kelompok  perlakuan  hewan  uji.  Masing- masing  kelompok    terdiri  dari  3  ekor  hewan  uji. Hasil rata-rata penurunan respon tikus (jilatan dan lompatan) terhadap kontrol positif, kontrol negatif dan ekstrak etanol daun kumis kucing dapat dilihat sebagai berikut:
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Tabel 1. Hasil rata-rata penurunan respon tikus sebelum dan sesudah pemberian bahan uji
Kelompok perlakuan Sebelum pemberian bahan uji Setelah pemberian bahan uji Menit ke-30 Menit ke-60 Menit ke-90 Menit ke- 120 Kontrol negatif Na CMC 0,5% 21,67 20,33 17,33 14 19,67 Kontrol positif Parasetamol 16 10,33 5,67 0,33 0 KP1 20 9,67 7 6 4 KP2 19,33 9 5 4,33 1,67 KP3 19,33 8 1,67 0,33 0 Keterangan :
KP1 : Kelompok perlakuan ekstrak daun kumis kucing dosis 5 mg/200gBB tikus KP2 : Kelompok perlakuan ekstrak daun kumis kucing dosis 10 mg/200gBB tikus KP3 : Kelompok perlakuan ekstrak daun kumis kucing dosis 20 mg/200gBB tikus

## PEMBAHASAN
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui efek analgetik  ekstrak  etanol  daun  kumis  kucing terhadap hewan uji tikus putih jantan. Daun kumis kucing  yang  telah  diambil  dan  dibersihkan  lalu dikeringkan  dengan  cara  diangin-anginkan  dan tidak  di  bawah  panas  matahari  langsung.  Tujuan pengeringan  agar  simplisia  tidak  mudah  rusak karena adanya pertumbuhan jamur sehingga dapat bertahan lama. Daun kumis kucing lalu diblender untuk  mendapatkan  hasil  yang  halus.  Tujuannya agar  ukuran  sampel  menjadi  lebih  kecil  sehingga mempermudah proses penyari senyawa aktif.
Ekstrak etanol daun kumis kucing didapatkan dengan melakukan ekstraksi menggunakan metode maserasi. Pemilihan metode ini karena metode ini pelaksanaannya sederhana, biasa digunakan untuk sampel yang banyak, tidak memerlukan perlakuan khusus dan kemungkinan terjadinya penguraian zat aktif  dapat  dihindari  karena  tidak  ada  proses pemanasan  (Dharma,  2013).  Ekstrak  etanol  daun kumis kucing dan kontrol positif yaitu parasetamol dalam  pengujian  efek  analgetik  pada  hewan  uji menggunakan suspensi Na CMC untuk mensuspensikan  ekstrak  daun  kumis  kucing  dan parasetamol. Hal ini bertujuan agar mempermudah pemberian ekstrak pada hewan uji agar konsentrasi sesuai  dengan  dosis  yang  diberikan  (Ishak  dkk, 2017).  Na  CMC  juga  digunakan  sebagai  kontrol negatif  untuk  membandingkan  ada  tidaknya  daya analgetik terhadap kontrol positif dan sampel daun kumis kucing.
Hewan uji yang digunakan yaitu 15 ekor tikus putih jantan dengan berat 200 g dan dibagi menjadi 5  kelompok  perlakuan.  Kelompok  1  yaitu kelompok  kontrol  negatif,  kelompok  2  yaitu kelompok kontrol positif dan kelompok 3, 4 dan 5 merupakan  kelompok  ekstrak    dengan  dosis
bertingkat. Tikus putih memiliki kemiripan dengan manusia  baik  dalam  segi  fisiologi,  anatomi, patologi dan metabolisme sehingga dipilih sebagai hewan  uji  pada  penelitian  ini.  Tikus  putih  jantan juga  memiliki  kecepatan  metabolisme  yang  tidak terpengaruh oleh perubahan hormonal dibandingkan  tikus  betina.  Hal  ini  disebabkan karena tikus betina mengalami siklus uterus masa kehamilan dan menyusui (Hakim, 2002).
Sebelum  dilakukan  perlakuan,  hewan  uji diadaptasi  dan  dipuasakan  terlebih  dahulu. Adaptasi dilakukan selama 7 hari dan dipuasakan selama  8  jam.  Adaptasi  bertujuan  agar  hewan  uji tidak merasakan lingkungan yang asing dan tidak mengalami  stres  ataupun  depresi  yang  dapat mempengaruhi hasil dari pengujian (Cahyaningsih dkk,  2017).  Hewan  uji  dipuasakan  selama  8  jam bertujuan  agar  kondisi  pada  hewan  uji  sama  dan makanan yang masuk tidak mempengaruhi ekstrak yang diberikan (Ishak dkk, 2017).
Selanjutnya  dilakukan  pengujian  dengan menggunakan  metode  induksi  nyeri  cara  termik yaitu  rangsangan  panas.  Metode  ini  dilakukan dengan  cara  meletakkan  beker  gelas  diatas hot plate dengan  suhu  55 ℃ .    Parameter  yang  diamati berupa  jilatan  kaki  belakang  dan  loncatan  yang dilakukan  oleh  tikus.  Nyeri  terjadi  jika  terdapat rangsangan  yang  melampaui  ambang  nyeri  dan menyebabkan jaringan dengan pembebasan mediator  nyeri  (Sariana,  2011).  Penelitian  ini menggunakan  suhu  55 ℃ karena  suhu  kritis  rata- rata  nyeri  sebesar  45 ℃ .  Seseorang  akan  mulai merasakan  sakit  dan  reseptor  panas  mempunyai respon  terhadap  suhu  30-45 ℃ .  Pada  suhu  diatas 45 ℃ mulai terjadi kerusakan jaringan akibat panas dan  sensasinya  akan  berubah  menjadi  nyeri (Guyton, 1994).
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Dari tabel 1 dapat diketahui bahwa penurunan respon  tikus  yang  paling  kecil  yaitu  terlihat  pada kelompok kontrol negatif yang diberi suspense Na CMC  0,5%.  Sedangkan  kelompok  kontrol  positif yang  diberi  suspensi  parasetamol  dan  kelompok ekstrak  etanol  daun  kumis  kucing  dengan  dosis berturut-turut 5 mg/200gBB tikus, 10 mg/200gBB tikus  dan  20  mg/200gBB  tikus  memiliki  respon tikus  yang  hampir  sama.  Hal  ini  menunjukan bahwa  suspensi  parasetamol  dan  ekstrak  etanol daun kumis kucing mempunyai efek analgetik.
Pada  kelompok  kontrol  negatif  yang  diberi suspensi  Na  CMC  0,5%  hasil  yang  didapatkan sebelum  dan  setelah  pemberian  bahan  uji  hingga menit  ke-120  respon  tikus  tidak  mengalami penurunan respon tikus. Dapat dilihat pada tabel. 1, pada  menit  ke-30  hingga  menit  ke-120  rata-rata respon  yang  diberikan  tikus  naik  turun.  Hal  ini disebabkan  karena faktor metabolisme  tikus  yang berbeda-beda  dan  menunjukan  bahwa  kontrol negatif  tidak  mengandung  zat  aktif  yang  dapat mengurangi rasa nyeri. Pada kelompok positif yang diberi  suspensi  parasetamol  hasil  yang  didapat sebelum dan sesudah pemberian pada menit ke-30 hingga  menit  ke-120  rata-rata  respon  tikus mengalami  penurunan.  Hal  ini  dikarenakan parasetamol sudah terbukti memiliki efek analgetik yang  sudah  sering  digunakan  dimasyarakat. Parasetamol  sudah  terbukti  secara  teoritis  dapat menghambat sintesis prostaglandin. Kontrol positif berfungsi  untuk  membandingkan  seberapa  besar daya  analgetik  dengan  sampel  yang  diteliti,  juga digunakan  untuk  membuktikan  kevalidan  dari metode yang akan digunakan (Tuhu, 2008).
Pada kelompok perlakuan ekstrak daun kumis kucing yang diberi dosis berbeda-beda menunjukan adanya efek analgetik pada hewan uji. Hal  ini  dapat  dilihat  dari  penurunan  rata-rata respon hewan uji dari sebelum pemberian bahan uji dan  setelah  pemberian  bahan  uji.  Pada  kelompok perlakuan  satu  yang  diberi  ekstrak  etanol  daun kumis  kucing  dengan  dosis  5  mg/200gBB  tikus, hasil  menunjukan  pada  menit  ke-30  sudah  mulai terjadi penurunan respon tikus terhadap nyeri dan semakin  menurun  hingga  menit  ke-120.  Hal  ini menunjukan    bahwa  ekstrak  etanol  daun  kumis kucing dengan dosis 5 mg/200gBB tikus memiliki efek analgetik.
Kelompok  perlakuan  dua  ekstrak  daun  kumis kucing  dengan  dosis  10  mg/200gBB  tikus menunjukan  adanya  respon  nyeri  dilihat  dari adanya  penurunan  respon  tikus  terhadap  panas mulai dari menit ke-30 dan terus menurun hingga menit ke 120. Hal ini menunjukan bahwa ekstrak
daun  kumis  kucing  dengan  dosis  10  mg/200gBB tikus memiliki efek analgetik.
Pada  kelompok  perlakuan  tiga  ekstrak  daun kumis kucing dengan dosis 20  mg/200gBB tikus menunjukan  adanya  respon  nyeri.  Hal  ini  dapat dilihat  dari  terjadi  penurunan  respon  hewan  uji pada menit ke-30 hingga menit ke-120. Pada menit ke-120 hewan uji sudah tidak memberikan respon apapun. Hal ini membuktikan bahwa ekstrak daun kumis  kucing  dengan  dosis  20  mg/200gBB  tikus memiliki efek analgetik.
Dapat  dilihat  dari  tabel.  1,  tanpa  melihat  dari perbedaan dosis ekstrak etanol daun kumis kucing yang  diberikan  kepada  hewan  uji,  membuktikan bahwa secara farmakologi tumbuhan kumis kucing memiliki efek farmakologi yaitu sebagai analgetik. Daun kumis mengandung senyawa flavonoid yaitu sinensetin, eupatorine, 3’-hydroxy-5,6,7,4’- tetramethoxyflavone dan asam rosmarinic merupakan senyawa aktif yang bertanggung jawab atas  efek  penghilang  rasa  sakit  (Chai  dkk,  2014). Secara umum, mekanisme kerja flavonoid sebagai analgetik  yaitu  dengan  menghambat  kerja  enzim siklooksigenase  sehingga  mengurangi  produksi prostaglandin  oleh  asam  arakidonat  sehingga mengurangi rasa nyeri. Flavonoid juga menghambat  degranulasi  neutrophil  sehingga menghambat  pengeluaran  sitokin,  radikal  bebas dan enzim yang berperan dalam peradangan (Ishak, 2017).  Berdasarkan  hasil  penelitian  ini,  ekstrak etanol  daun  kumis  kucing  dosis  tiga  yaitu  20 mg/200gBB tikus memiliki kemampuan analgetik yang  lebih  besar  dibandingkan  dengan  dosis ekstrak  lainnya,  karena  pada  dosis  tiga  respon hewan uji sudah tidak terlihat  pada menit ke-120. Pada  dosis  20  mg/200gBB  tikus  juga  memiliki kemampuan  yang  hampir  sama  dengan  kontrol positif yaitu parasetamol. Hal ini dapat dilihat pada tabel 1. bahwa respon hewan uji pada menit ke-90 dan menit ke-120 hampir sama.
Pada hasil penelitian ini dilakukan uji statistik untuk memperoleh data yang lebih spesifik dengan menggunakan aplikasi SPSS versi 24. Uji statistik yang  dilakukan  menggunakan  metode One  Way ANOVA lalu  dilanjutkan  dengan  uji LSD ( Least Significant  Difference ).  Hasil  yang  diperoleh  dari uji One  Way  ANOVA dari  lima  kelompok perlakuan  dapat  dilihat  pada  tabel  3.  Nilai signifikan  yang  diperoleh  dari  uji One  Way ANOVA adalah  0,035  (sig<0,05)  yang  berarti  ada perbedaan yang bermakna antara kelima kelompok perlakuan  tersebut.  Artinya  ada  pengaruh  efek analgetik  pada  ekstrak  etanol  daun  kumis  kucing
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
( Ortosiphon  aristatus (Blume)  Miq.)  terhadap tikus putih jantan.
Selanjutnya dilakukan Test of homogeneity of variance yang bertujuan untuk mengetahui apakah dari  beberapa  kelompok  perlakuan  berasal  dari populasi atau varian yg sama atau tidak. Hasil yang didapatkan  dari  pengujian  ini  dapat  dilihat  pada tabel  4.    Dari  data  yang  diperoleh  terdapat  nilai signifikan  0,512  (sig>0,05)  yang  berarti  H 0 diterima dan H 1 ditolak. Hal ini menjelaskan bahwa tidak ada perbedaan yang bermakna antara kelima kelompok tersebut.
Dilanjutkan  dengan  uji LSD untuk  melihat perbedaan nilai rata-rata penurunan respon hewan uji sebelum perlakuan dan sesudah perlakuan pada menit  30,  60,  90  dan  120,  antara  lima  kelompok perlakuan yang berbeda-beda yaitu kontrol negatif Na CMC, kontrol positif parasetamol dosis 9 mg, kelompok  ekstrak  etanol  daun  kumis  kucing dengan dosis bertingkat yaitu dosis 5 mg/200gBB tikus,  10  mg/200gBB  tikus  dan  20  mg/200gBB tikus.  Hasil  pengujian LSD menunjukkan  bahwa terdapat  perbedaan  antara  kontrol  negatif, kelompok  positif  dan  kelompok  ekstrak  etanol daun  kumis  kucing,  hal  ini  mendukung  hipotesis dengan  menerima  H 1 .  Sedangkan  pada  kelompok perlakuan  ekstrak  etanol  daun  kumis  kucing  dan kelompok  kontrol  positif  tidak  mengalami perbedaan. Hal ini menunjukkan bahwa pemberian ekstrak  etanol  daun  kumis  kucing  memiliki  efek analgetik,  hal  tersebut  mendukung  hipotesis dengan menerima H 0 .

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  kumis kucing  dengan  dosis  5  mg/200gBB  tikus,  10 mg/200gBB  tikus  dan  20  mg/200gBB  tikus memiliki  efek  analgetik  pada  tikus  putih  jantan dapat dilihat dari menurunnya jumlah respon tikus (jilatan  dan  lompatan)    setelah  diberikan  ekstrak etanol daun kumis kucing. Dosis yang memberikan  efek  analgetik  yang  terbaik  yaitu dosis 1 yaitu dosis 5 mg/200gBB tikus.

## SARAN
Disarankan kepada peneliti selanjutnya dapat melakukan penelitian lebih lanjut mengenai dosis minimum, dosis maksimum, dan juga dosis toksik dari ekstrak etanol daun kumis kucing ( Ortosiphon aristatus (Blume) Miq.).

## DAFTAR PUSTAKA
Adyana,  I.  K.,  Setiawan,  F.  &  Insanu,  M.,  2013.
From Ethnopharmacology to Clinical Study of Orthosiphon  stamineus Benth. International Journal  of  Pharmacy  and  Pharmaceutical Sciences . 5(3) :  66-73.
Akowuah,  G.A.,  Zhari,  I.,  Norhayati,  I.,  Sadikun, A.,  Khamsah,  S.M.,  2004.  Sinensetin,
Eupatorin, 3-Hydroxy-5,6,7,4- Tetramethoxyflavone  and  Rosmarinic  Acid Contents And Antioxidant Effect of Orthosiphon  Stamineus  from  Mlaysia. Food Chemistry. 87 : 559-566.
Amalia,  Anisa  F.,  Runtuwene,  Theresia.,  dan Kembuan, Mieke A. H. N. 2016. Profil Nyeri di  Poliklinik  Saraf  RSUP  Prof.  Dr.  R.  D. Kandou  Manado  Periode  1  Januari  2014-31 Desember 2014. Jurnal e-Clinic . Vol 4 No 2.
Amzad,  H.M.,  and  Zhari,  I.,  2003.  Hydroxy Betulinic  Acid  From  The  Leaves  of Orthosiphon  stamineus . Asian  Coordinating Group for Chemistry . 16 : 69-73.
Arisetijono,  Eko.,  Husna,  Machlusil.,  Munir,
Badrul.,  dan  Rahmawati,  Dessika.  2015. Continuing Beurological Education 4: Vertigo & Nyeri. UB Press, Malang.
Cahyaningsih, Erna., Suwarni, Elis. 2017. Uji Efek Analgesik Infusa Daun Kayu Putih ( Melaleuca trichostachya Lindl.) Pada Mencit Jantan  ( Mus  musculus L.). Medicamento .
3(1) : 7-11.
Chai, Tsun-Thai., Wong, Fai-Chu., Manan, Fazilah Abd.,  Ooh,  Keng-Fei.,  Ismail,  Nor  Ismaliza Mohd. 2014. Ortosiphon aristatus: A Review of  Traditional  Uses,  Phytochemical  Profile, and  Pharmacological  Properties . Traditional and Folk Herbal Medicine . 2 : 153-187.
Dharma,  Surya.,  Adirman.,  Elisma.  2013.  Efek Analgetik Ekstrak Etanol Daun Tapak Liman ( Elephantopus scaber L.) Pada  Mencit  Putih Jantan. Jurnal Farmasi Higea . 5(1) : 82-90.
Guyton,  A.C.  1994.  Fisiologi  Manusia  dan Mekanisme Penyakit Edisi 7. EGC, Jakarta.
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Hakim, L. 2002. Uji farmakologi dan Toksikologi Obat  Alam  Pada  Hewan  Coba.  Univesitas Muhammadiyah, Purwokerto.
Ishak,  Megawati.,  Bodhi,  Widdhi.,  Citraningtyas,
Gayatri.  2017.  Uji  Efek  Analgetik  Ekstrak Etanol Daun Lamtoro ( Leucaena leucocephala (LAM)  de  Wit)  Pada  Mencit Putih  Jantan  ( Mus  musculus ). Pharmacon Jurnal Ilmiah Farmasi . 6(4) : 130-138.
King,  Sara.,  Chambers,  Christine  T.,  Huguet, Anna.,  Macnevin,  Rebecca  C.,  McGrath, Patrick  J.,  Parker,  Louise.,  and  MacDonald, Amanda  J.  2011.  The  Epidemiology  of Chronic  Pain  in  Children  and  Adolescents Revisited: A Systematic Review. J.pain . 152 :
2729-2738.
Ramya, S., Neethirajan, K., dan Jayakumararaj, R.
2012.  Profile  of  Bioactive  Compounds  in Syzygium  cumini –  A  Review. Journal  of Pharmacy Research . 5(8) : 4548-4553.
Sariana. 2011. Uji Efek Analgetik dari Infusa Daun Asam  Jawa  ( Tamarindus  indica Linn)  pada Mencit  ( Mus  muskulus )  [skripsi].  Fakultas Ilmu  Kesehatan  UIN  Alauddin  Makassar, Makassar.
Suwondo,  Bambang  Suryono.,  Meliala,  Sudadi., dan  Sudadi.  2017.  Buku  Ajar  Nyeri  2017. Perkumpulan Nyeri Indonesia, Yogyakarta.
Tuhu,  P.  F.  S.,  Purwantiningsih,  Wahyuni,  A.  S. 2007.  Efek  Analgetika  Ekstrak  Etanol  Daun Kayu  Putih  ( Melaleuca  Leucadendron  L. ) Pada Mencit Putih Jantan. Jurnal Pharmacon . 8(2) : 40-43