## Pengaruh Pemberian Asam Humat pada Media Tanam terhadap Pertumbuhan dan Kandungan Polifenol Daun
Binahong ( Anredera cordifolia )

## Riyandi, Elly Proklamasiningsih, Rochmatino
Fakultas Biologi, Universitas Jenderal Soedirman Jalan dr. Suparno 63 Purwokerto 53122 Email: Riyandi.sr@gmail.com
Rekam Jejak Artikel:
Diterima  :  26/08/2019
Disetujui  :  31/01/2020

## Abstract
Binahong ( Anredera cordifolia ) is one of medicinal plants that is useful as an antioxidant. The main  active  compounds  in  Binahong  leaves  is  flavonoids,  which  are  one  of  the  polyphenol compounds. The type of flavonoids contained in Binahong leaves is flavonol. The use of humic acid  can  improve  the  quality  of  planting  media  so  that  plant’s  growth  can  increase.  The purpose of this study was to determine the effect of humic acid on the growth and polyphenol contents  in  Binahong  leaves  and  determine  the  effective  concentration  of  humic  acid  to increase the growth and polyphenol contents in Binahong leaves. This research was conducted at the Greenhouse and Laboratory of Plant Physiology, Faculty of Biology, Jenderal Soedirman University.  The  method  used  in  this  study  is  an  experimental  method  using  a  Completely Randomized Design (CRD) consisting of four treatments of humic acid on sand media with a concentration  of  0  g.  kg -1 ;  4  g.  kg -1 ;  8  g.  kg -1 ;  12  g.  kg -1 and  repeated  three  times.  The parameters  observed  in  this  study  were  plant  growth  including  the  number  of  leaves,  wet weight and dry weight of plants, and the content of polyphenols in Binahong leaves. The data obtained were analyzed for variety or Analysis of Variance (ANOVA) with a test level of 1%, then  continued  with  Least  Significance  Different  (LSD)  with  a  test  level  of  5%.  The  results showed that the addition of humic acid in the growing media was able to increase growth and the polyphenol contents in Binahong leaves with a concentration of 12 g.kg -1 . Keywords : Binahong , F lavonoids, G rowth, H umic acid , P olyphenols,

## Abstrak
Tanaman Binahong ( Anredera cordifolia ) merupakan salah satu tanaman obat yang bermanfaat sebagai  antioksidan.  Kandungan  senyawa  aktif  utama  pada  daun  Binahong  yaitu  flavonoid yang merupakan salah satu senyawa golongan polifenol. Jenis flavonoid yang terkandung pada daun Binahong adalah flavonol. Penggunaan asam humat dapat  meningkatkan  kualitas  media tanam  sehingga  pertumbuhan  tanaman  dapat  meningkat.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah untuk mengetahui pengaruh asam humat terhadap pertumbuhan dan kandungan polifenol daun Binahong  dan  menentukan  konsentrasi  asam  humat  yang  efektif  untuk  meningkatkan pertumbuhan dan kandungan polifenol daun Binahong. Penelitian ini dilakukan di Greenhouse dan  Laboratorium  Fisiologi  Tumbuhan  Fakultas  Biologi  Universitas  Jenderal  Soedirman. Metode yang digunakan pada penelitian ini adalah metode eksperimental dengan menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  yang  terdiri  dari  empat  perlakuan  asam  humat  pada  media pasir dengan konsentrasi 0 g. kg -1 ; 4 g. kg -1 ; 8 g. kg -1 ; 12 g. kg -1 dan diulang sebanyak tiga kali. Parameter yang diamati pada penelitian ini adalah pertumbuhan tanaman meliputi jumlah daun, berat  basah  dan  berat  kering  tanaman,  serta  kandungan  polifenol  pada  daun  Binahong. Data yang  diperoleh  dianalisis  ragam  atau Analysis  of  variance (ANOVA)  dengan  taraf  uji  1%, kemudian  dilanjutkan  dengan  uji  Beda  Nyata  Terkecil  (BNT)  dengan  taraf  uji  5%.  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  pemberian  asam  humat  pada  media  tanam  mampu meningkatkan  pertumbuhan  dan  kandungan  polifenol  daun  Binahong  dengan  konsentrasi  12 g.kg -1 . Kata kunci : asam humat, Binahong, flavonoid, pertumbuhan, polifenol

## PENDAHULUAN
Tanaman  Binahong  merupakan  salah  satu tanaman  obat  yang  berpotensi  untuk  dikembangkan karena hampir semua bagian dari tanaman Binahong seperti  umbi,  batang  dan  daun  dapat  digunakan dalam  terapi  herbal.  Tanaman  Binahong  cepat tumbuh  di  daerah  lembab  sehingga  sangat berpotensi  untuk  dikembangkan  pada  daerah  iklim tropis  seperti  di  Indonesia  (Hasiib et  al .,  2015). Bagian  tanaman  yang  paling  sering  digunakan  atau
dimanfaatkan  untuk  kesehatan  adalah  bagian  daun. Berdasarkan  hasil  penelitian,  senyawa  metabolit sekunder  yang  terdapat  dalam  daun  Binahong adalah  flavonoid,  alkaloid,  terpenoid,  saponin,  dan asam  oleanolik  (Arifin et  al .,  2014).  Menurut Selawa et  al .  (2013)  daun  Binahong  diketahui bermanfaat sebagai antioksidan karena mengandung senyawa  polifenol  yaitu  flavonoid.  Jenis  flavonoid yang  diperoleh  dari  hasil  isolasi  dan  identifikasi

## BioEksakta: Jurnal Ilmiah Biologi Unsoed
Volume 2, Nomor 2 (2020):  243 - 247 E-ISSN: 2714-8564
serbuk  segar  dan  serbuk  kering  ekstrak  etanol  daun Binahong adalah flavonol.
Antioksidan  diperlukan  untuk  mencegah  stres oksidatif. Stres oksidatif adalah kondisi ketidakseimbangan  antara  jumlah  radikal  bebas yang ada dengan jumlah antioksidan di dalam tubuh. Radikal bebas merupakan senyawa yang mengandung  satu  atau  lebih  elektron  tidak berpasangan  dalam  orbitalnya,  sehingga  bersifat sangat reaktif dan  mampu  mengoksidasi  molekul di sekitarnya  (lipid,  protein,  DNA,  dan  karbohidrat). Antioksidan  bersifat  sangat  mudah  dioksidasi, sehingga radikal bebas akan mengoksidasi antioksidan  dan  melindungi  molekul  lain  dalam  sel dari  kerusakan  akibat  oksidasi  oleh  radikal  bebas atau  oksigen  reaktif  antara  lain  radikal  hidroksil (OH - ),  dan  anion  superoksida  (O 2 - )  (Werdhasari, 2014). Flavonoid merupakan senyawa yang memiliki  potensi  sebagai  antioksidan  karena memiliki  gugus  hidroksil  yang  terikat  pada  karbon cincin  aromatik  sehingga  dapat  menangkap  radikal bebas  yang  dihasilkan  dari  reaksi  peroksidasi  lipid (Dewi et  al .,  2014).  Selawa et  al .  (2013), menyatakan bahwa senyawa yang mampu menecegah  dan  menghilangkan  efek  radikal  bebas adalah antioksidan. Antioksidan menstabilkan radikal  bebas  dengan  melengkapi  kekurangan elektron  yang  ada  pada  radikal  bebas,  dan menghambat  terjadinya  reaksi  berantai  peroksidasi lipid.
Senyawa  polifenol  ditandai  dengan  adanya cincin  aromatik  yang  membawa  lebih  dari  satu  ion. Polifenol  dapat  dibagi  lebih  lanjut  menjadi  dua golongan:  flavonoid  (flavon,  flavonol,  flavanon, flavanol,  isoflavon,  antosianidin  dan  kalkon)  dan tanin (polimer asam fenolat, katekin atau isokatekin) (Luthria, 2006). Senyawa-senyawa tersebut merupakan  hasil  metabolit  sekunder  dari  tanaman yang berkontribusi dalam warna dan sifat organoleptik  lainnya  pada  tanaman.  Senyawa golongan polifenol seperti flavonoid dapat digunakan untuk mengobati antidiabetes antiarthritis,  antivirus,  antijamur,  antioksidan,  dan penyakit kardiovaskular (Keerthi et al ., 2014).
Senyawa-senyawa  kimia  pada  media  tanam yang mempunyai peranan penting bagi pertumbuhan adalah  bahan  organik.  Media  tanam  memerlukan bahan  organik  dalam  proses  pertumbuhan  tanaman. Salah  satu  bahan  organik  pada  media  tanam  adalah asam  humat.  Asam  humat  adalah  zat  organik  yang terdapat  di  dalam  tanah  dan  gambut.  Asam  humat merupakan  bahan  makromolekul  polielektrolit  yang memiliki  gugus  fungsional  seperti  –COOH,  –OH fenolat  maupun  –OH  alkoholat,  sehingga  asam humat memiliki peluang untuk berikatan dengan ion logam  karena gugus ini dapat mengalami pelepasan proton  pada  pH  yang  relatif  tinggi  (Setyowati  & Ulfin,  2007).  Asam  humat  adalah  komponen terpenting  dari  senyawa  humus  karena  dari  hasil penelitian  diketahui  bahwa,  asam  humat  membantu
menggemburkan  tanah,  membantu  transfer  nutrien dari  tanah  kedalam  tanaman,  serta  meningkatkan retensi  kandungan  air,  dan  membantu  pertumbuhan mikroba  di  dalam  tanah  (Suwahyono,  2011). Penelitian  yang  dilakukan  oleh  (Chen et  al .,  2001), bahwa  dengan  penambahan  asam  humat  ke  tanah termasuk tanah pasir dapat menstimulasi pertumbuhan yang lebih baik daripada hanya Penelitian ini memiliki tujuan untuk mengetahui pengaruh asam humat terhadap pertumbuhan  dan  kandungan  polifenol  daun Binahong dan  menentukan  konsentrasi  asam  humat yang  efektif  untuk  meningkatkan  pertumbuhan  dan kandungan polifenol daun Binahong. Hasil penelitian  ini  diharapkan  dapat  memberikan informasi ilmiah kandungan polifenol daun Binahong serta  memberikan  informasi  ilmiah tentang  pemakaian  asam  humat  sebagai  induktor peningkatan kandungan polifenol daun Binahong .

## MATERI DAN METODE
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah tanaman Binahong ( Anredera cordifolia) , asam  humat,  media  pasir,  dan  reagen Folin Ciocalteu . Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah
Vacum Rotary Evaporator
dan
spektrofotometer UV-Vis .
Penelitian  ini dilaksanakan di Greenhouse dan Laboratorium  Fisiologi  Tumbuhan  Fakultas  Biologi Universitas  Jenderal  Soedirman  Purwokerto  yaitu pada  bulan  Maret  hingga  Juni  2018.  Metode penelitian yang digunakan adalah metode eksperimental  dengan  menggunakan  Rancangan Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  4  perlakuan. Perlakuan  yang  digunakan  adalah  pemberian  4 konsentrasi asam humat  yaitu 0 g. kg -1 ; 4 g. kg -1 ; 8 g. kg -1 ; dan 12 g. kg -1 .Parameter utama yang diamati pada  penelitian  ini  adalah  pertumbuhan  dan kandungan polifenol pada daun Binahong. Parameter pertumbuhannya yaitu jumlah daun, berat basah tanaman dan berat kering tanaman.

## Pembuatan Media Tanam
Media  tanam  dibuat  dengan  mencampurkan pasir  dengan  asam  humat  sesuai  perlakuan,  dan penambahan  pupuk  AB-Mix  yang  telah  dilarutkan dengan aquades. Penyiraman  pupuk  AB-Mix sesuai dengan nilai kapasitas lapang.

## Penanaman Bibit dan Perawatan Binahong
Bibit  ditanam  ke  dalam polybag yang  sudah berisi  media.  Keseragaman  bibit  yang  diambil dilihat  dari  bentuk  dan  ukuran  umbi  Binahong. Perawatan  meliputi  penyiraman,  pengendalian gulma,  hama  dan  penyakit  sesuai  dengan  kondisi lingkungan.

## Pengamatan
Pengamatan  dilakukan  pada  akhir  penelitian  (10 MST), meliputi:
BioEksakta: Jurnal Ilmiah Biologi Unsoed Volume 2, Nomor 2 (2020):  243 - 247
a. Pertumbuhan Tanaman
Pengamatan dilakukan pada akhir penelitian (10 MST) yaitu :
1. Jumlah Daun Jumlah  daun  tanaman  dihitung  dengan  cara menghitung jumlah daun total pada tanaman.
2. Bobot Basah Tanaman (gram) Seluruh  bagian  tanaman  yaitu  akar,  batang dan daun ditimbang menggunakan timbangan analitik.
3. Bobot Kering Tanaman (gram) Seluruh  bagian  tanaman  yaitu  daun,  batang, dan  akar  dikeringkan  dalam  oven  dengan suhu  70 o C,  kemudian  didinginkan  dengan suhu ruang dan ditimbang hingga memperoleh berat dengan nilai yang konstan.
b. Pengukuran Larutan Standar Pengukuran  larutan  standar  dilakukan menggunakan asam galat dengan metode Folin Ciocalteu. Larutan  standar  diinkubasi  pada suhu  ruang  selama  1,5  jam  dan  diukur absorbansinya dengan spektrofotometer dengan panjang gelombang 760 nm.
c. Pengukuran Kandungan Polifenol
Pengambilan  data  dilakukan  pada  akhir penelitian  (10  MST).  Ekstrak  kentaldaun Binahong hasil maserasi dengan pelarut etanol diukur kadar polifenolnya dengan menggunakan metode Folin Ciocalteu. Sampel ekstrak  kental  sebanyak  50  mg  dilarutkan dengan 250 µl reagen Folin Ciocalteu ditunggu hingga  1  menit,  ditambahkan  750  µl  Na karbonat  20%,  dan  ditambahkan  akuades hingga  volume  10  ml.  Larutan  sampel diinkubasi  pada  suhu  ruang  selama  1,5  jam. kemudian, larutan sampel
diukur
absorbansinya dengan  spektofotometer dengan panjang gelombang 760 nm.
Data  yang  diperoleh  dianalisis  dengan analisis  ragam  atau Analysis  of  Variance (ANOVA)  kemudian  dilanjutkan  dengan  Uji Beda  Nyata  Terkecil  (BNT)  dengan  taraf  uji 5%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa penambahan  asam  humat  berpengaruh  sangat  nyata terhadap  pertumbuhan  tanaman.  Berdasarkan  uji BNT menunjukkan bahwa penambahan asam humat pada media tanam mampu meningkatkan pertumbuhan tanaman Binahong (Tabel 1). Perlakuan  pemberian  asam  humat  yang  paling efektif  untuk  meningkatkan  pertumbuhan  tanaman adalah perlakuan AH 3 (12 g.kg -1 ). Hal tersebut dapat terjadi karena asam humat pada konsentrasi tersebut mempunyai  nilai  kapastitas  tukar  kation  (KTK) yang  optimum  sehingga  kemampuan  tanaman  pada penyerapan  unsur  hara  oleh  akar  menjadi  optimum. Penambahan  asam  humat  ke  media  tanam  dapat meningkatkan KTK karena asam humat
mengandung  gugus  –COOH  (karboksil)  dan  –OH (fenolik).  Menurut  Tan  (1993)  semakin  tinggi konsentrasi  asam  humat  maka  sumbangan  gugus fungsional  dari  karboksil  (-COOH)  dan  fenolik  (- OH)  semakin  besar,  yang  berarti  pula  muatan negatif media tanam semakin meningkat.
Peningkatan  muatan  negatif  ini  terukur  sebagai peningkatan  KTK  tanah.  Suwahyono  (2011) menyatakan  bahwa  asam  humat  dapat  berperan merekondisikan  tanah  sebagai  medium  tanam menjadi lebih baik. Asam humat dapat mengikat air di  dalam  tanah,  kemampuan  tukar  ion  yang  tinggi, meningkatkan  kesuburan  tanah  dan  pertumbuhan tanaman.
Asam humat dapat meningkatkan pertumbuhan tanaman  Binahong  karena  KTK  yang  tinggi  juga karena  kandungan  unsur  hara  yang  terdapat  pada asam  humat.  Unsur  hara  yang  terdapat  pada  asam humat antara lain adalah karbon, hidrogen, oksigen, serta  sejumlah  kecil  nitrogen  dan  sulfur.  Menurut Tan  (1993)  kadar  nitrogen  dalam  asam  humat berkisar  antara  2-5%  sehingga  dapat  meningkatkan nilai  N-total.  Selain  N-total  dan  C-organik  yang meningkat, pemberian asam humat juga meningkatkan  P-  tersedia  dalam  tanah.  Hal  ini dikuatkan dengan pernyataan Hermanto et al . (2013) bahwa  fraksi  humat  dapat  menyediakan  unsur  hara seperti  N,  P,  K,  dan  S  ke  dalam  tanah  serta  C sebagai  sumber  energi  bagi  mikrobia  tanah, sehingga proses metabolisme primer tanaman baik.
Tabel 1. Uji  BNT  Pengaruh  Pemberian  Asam Humat  pada  Media  Tanam  terhadap  Pertumbuhan (Jumlah Daun, Berat Basah, dan Berat Kering)
Perlakuan Jumlah Daun Berat Kering (g) Berat Basah (g) AH 0 (Kontrol) 47,3 c 5,273 c 47,647 c AH 1 (4 g.kg -1 ) 58,0 b 6,277 c 57,200 c AH 2 (8 g.kg -1 ) 64,7 b 7,790 b 77,527 b AH 3 (12 g.kg -1 ) 86,3 a 10,277 a 101,770 a
Keterangan :  Angka  yang  diikuti  huruf  yang  sama  tidak berbeda nyata pada uji BNT 5%.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  asam humat mampu meningkatkan jumlah daun Binahong,  berat  basah  tanaman,  dan  berat  kering tanaman  semakin  meningkat  dengan  meningkatnya konsentrasi  asam  humat  yang  ditambahkan  pada media tanam. Hal tersebut dapat terjadi karena asam humat pada konsentrasi tersebut memiliki kemampuan  penyerepan  unsur  hara  yang  tinggi sehingga unsur hara yang diperlukan tanaman dalam pertumbuhan menjadi tersedia. Meningkatnya jumlah  daun  Binahong  sejalan  dengan  hasil penelitian  Darwati  dan  Rosita  (1998)  yang menyatakan  bahwa  pemberian  asam  humat  dapat meningkatkan  jumlah  daun  pada  stek  brotowali. Menurut  Gardner et  al. (1991)  perkembangan  daun dalam  jumlah  yang  mencukupi  dapat  mendukung
proses  fotosintesis.  Menurut  Restida et  al. (2014) asam humat berperan baik dalam proses pertumbuhan  dan  produksi  tanaman  dengan  cara meningkatkan  laju  fotosintesis.  Unsur  hara  yang terdapat  pada  asam  humat  dapat  meningkatkan kadar  protein  dalam  tanaman  dan  berperan  dalam pembentukan  klorofil.  Kandungan  klorofil  yang banyak  dalam  daun  dapat  meningkatkan  laju fotosintesis,  sehingga  mengakibatkan  pertumbuhan dan produksi tanaman menjadi optimal. Pertumbuhan  tanaman  yang  optimal  inilah  yang berakibat  pada  peningkatan  jumlah  daun,  tinggi tanaman, berat basah dan berat kering tanaman.
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa penambahan  asam  humat  berpengaruh  sangat  nyata terhadap  kandungan  polifenol  daun  Binahong. Berdasarkan uji BNT menunjukkan bahwa penambahan asam humat pada media tanam mampu meningkatkan  kandungan  polifenol  daun  Binahong (Tabel 2).
Tabel 2. Uji  BNT  Pengaruh  Pemberian  Asam Humat  pada  Media  Tanam  terhadap  Kandungan Polifenol
Perlakuan Kandungan Polifenol (ppm) AH 0 (Kontrol) 48,167 d AH 1 (4 g.kg -1 ) 69,797 c AH 2 (8 g.kg -1 ) 92,513 b AH 3 (12 g.kg -1 ) 106,910 a
Keterangan : Angka yang diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata pada uji BNT 5%
Berdasarkan  Tabel  2,  perlakuan  pemberian asam humat yang paling efektif untuk meningkatkan kandungan  polifenol  pada  daun  Binahong  adalah perlakuan  AH 3 .  Hal  tersebut  dapat  terjadi  karena pada  konsentrasi  tersebut  pertumbuhan  tanaman Binahong  optimum  sehingga  hasil  metabolit  primer menjadi  optimum.  Metabolit  sekunder  merupakan senyawa  turunan  dari  metabolit  primer  yang merupakan  prekursor  sintesis  metabolit  sekunder, sehingga  meningkatnya  metabolit  primer  dapat meningkatkan  metabolit  sekunder  seperti  polifenol (flavonoid).  Menurut  Saifudin  (2014)  metabolit sekunder  berasal  dari  metabolit  primer. Starting material dari  biosintesis  metabolit  sekunder  salah satunya  berasal  dari  hasil  metabolit  primer  yaitu glukosa.
Biosintesis  metabolit  sekunder  dibagi  menjadi dua  jalur.  Jalur  pertama  adalah  metabolisme  dasar seperti  glikolisis  dan  siklus  Krebs,  dan  jalur  kedua adalah  jalur  sikimat.  Jalur  sikimat  merupakan  jalur yang  paling  umum  pada  biosintesis  senyawa polifenol.    Menurut  Anttonen  dan  Karjalainen (2008)  jalur  senyawa  polifenol  yang  paling  umum yaitu  jalur  asam  sikimat  yang  bermula  dari kondensasi  antara phosphoenolpyruvate (PEP)  dan erythose  4-phospate dari  jalur  pentophosphat
membentuk  asam  amino  aromatik  fenilalanin  dan tirosin. Fenilalanin merupakan substrat untuk enzim phenylalanine ammonia-lyase (PAL), yang berfungsi  untuk  mengkatalisis  reaksi  pertama  pada jalur fenilpropanoid yang mengarah pada pembentukan sebagian besar senyawa polifenol.
Beberapa unsur hara yang dapat mempengaruhi  produksi  metabolit  sekunder  adalah Cu,  Mg,  dan  S.  Unsur  Cu  dapat  meningkatkan aktivitas enzim PAL sehingga mampu meningkatkan  produksi  senyawa  polifenol  terhadap tanaman  ginseng  asia  ( Panax  ginseng )  (Ali et  al ., 2006).  Unsur  Mg  dapat  membentuk  senyawa sianidin  yang  merupakan  salah  satu  aglikon antosianin. Unsur S dalam senyawa SO 4 2- merupakan  elemen  penting  dalam  sintesis  protein dan  produksi  senyawa  metabolit  sekunder  dalam tanaman seperti flavonoid (Tripatmasari, 2008).

## SIMPULAN
Pemberian  asam  humat  mampu  meningkatkan pertumbuhan  tanaman  dan  kandungan  polifenol daun Binahong. Konsentrasi asam humat sebesar 12 g.kg -1 efektif  meningkatkan  pertumbuhan  tanaman dan kandungan polifenol daun Binahong.

## DAFTAR REFERENSI
Ali, M.B., Singh, N., Shohael, A. M., Hanh E. J., & Paek  K.Y.  2006.  Phenolics  Metabolism  and Lignin Synthesis in Root Suspension Cultures of Panax  gingseng In  Response  to  Copper Stress. Plant Sciences , 171(1), pp.147-154.
Anttonen,  M.  J.  &  Karjalainen,  R.  O.  2008. Evaluation  of  Means  to  Increase  the  Content of  Bioactive  Phenolic  Compounds  in  Soft Fruits. I International Symposium on Biotechnology  of  Fruit  Species:  Biotechfruit, p. 839.
Arifin, H., Wijaya, R. J. & Rizal, Z. 2014. Pengaruh Ekstrak  Etanol  Daun  Binahong  ( Anredera cordifolia (Ten.)  Steenis  Terhadap  pH  dan Tukak  Lambung  pada  Tikus  Putih  Betina. Jurnal Farmasi Higea, 6(1), pp. 28-45.
Chen,  Y.,  Clapp,  C.  E.  &  Magen,  H.  2001.  Plant Growth  Stimulation  by  Humic  Substances and Their Complexes  with iron. Proceedings International Ferilizer Society Symposium
Darwati,  I.  &  Rosita,  S.  M.  D.  1998.  Penggunaan
Asam Humat Untuk Meningkatkan Pertumbuhan Setek Brotowali. Warta Tumbuhan Obat Indonesia, 4(2), pp. 7-8.
Dewi, N. W. O. A. C., Puspawati, N. M., Swantara, I. M. D., Asih. I. A.R.A., & Rita, W. S. 2014. Aktivitas  Antioksidan  Senyawa  Flavonoid Ekstrak Etanol Biji Terong Belanda ( Solanum betaceum ,  syn)  dalam  Menghambat  reaksi

## BioEksakta: Jurnal Ilmiah Biologi Unsoed
Volume 2, Nomor 2 (2020):  243 - 247
Peroksidasi Lemak pada Plasma Darah Tikus Wistar. Cakra Kimia, 2(1), pp. 7-16.
Gardner,  F.  P.,  Pearce,  B.  &  Mitchell,  R.  L.  1991. Physiology of Crop Plants (Fisiologi Tanaman  Budidaya,  Terjemahan  Herawati Susilo). Jakarta: UI Press.
Hasiib, E.A., Riyanti & Hartono, M. 2015. Pengaruh
Pemberian Ekstrak Daun Binahong ( Anredera  cordiifolia (Ten.)  Steenis)  dalam Air  Minum  Terhadap  Performa  Broiler. Jurnal  Ilmiah  Peternakan  Terpadu, 3(1),  pp. 14-22.
Hermanto, D., Dharmayani, N. K. T., Kurnianingsih,  R.  &  Kamali,  S.  R.  2013. Pengaruh  Asam  Humat  sebagai  Pelengkap Pupuk Terhadap Ketersediaan dan Pengambilan  Nutrien  pada  Tanaman  Jagung di  Lahan  Kering  Kecamatan  Bayan-NTB. Ilmu Pertanian (Agricultural Science), 16(2), pp. 28-41.
Keerthi, M., Prasanna, J. L., Aruna, M. S. & Rao, N. R.  2014.  Review  of  Polyphenol  as  Nature Gifts. World  Journal  of  Pharmacy  an Pharmaceutical Sciences, 3(4), pp. 445-455.
Luthria,  D.  L.  2006.  Influence  of  Sample Preparation  on  the  Assay  of  Phytochemicals. American Laboratory, 38(7) pp. 12-14.
Restida, M., Sarno & Ginting, Y. C. 2014. Pengaruh Pemberian  Asam  Humat  (Berasal  dari Batubara  Muda)  dan  Pupuk  N  terhadap
Pertumbuhan  dan  Produksi  Tanaman  Tomat (Lycopersicum  esculentum  Mill). Jurnal Agrotek Tropika, 2(3), pp. 482-486.
Saifudin,  A.  2014. Senyawa  Alam  Metabolit Sekunder:  Teori,  Konsep,  dan  Teknik Pemurnian. Yogyakarta: Deepublish.
Selawa,  W.,  Runtuwane,  M.  R.  J.  &  Citraningtyas,
G. 2013. Kandungan Flavonoid dan Kapasitas  Antioksidan  Total  Ekstrak  Daun Binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis). Pharmacon, 2(1), pp. 18-22
Setyowati,  D.  &  Ulfin,  I.  2007.  Optimasi  Kondisi Penyerapan  Ion  Aluminium  Oleh  Asam Humat. Akta  Kimia  Indonesia  Journal, 2(2), pp. 85-92
Suwahyono, U. 2011. Prospek Teknologi Remediasi Lahan  Kritis  dengan  Asam  Humat  (Humat Acid). Jurnal  Teknologi  Lingkungan, 12(1), pp. 55-65
Tan, K. H. 1993. Principles of Soil Chemistry. New York: CRC Press
Tripatmasari,  M.  2008.  Pengaruh  Pemupukan  dan Terhadap  Produksi  Antosianin  Daun  dan Kuersetin  Umbi  Tanaman  Daun  Dewa ( Gynura pseudochina (L) Dc). Tesis. Sekolah
Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor.
Werdhasari,  A.  2014.  Peran  Antioksidan  Bagi
Kesehatan. Jurnal Biotek Medisiana Indonesia, 3(2), pp. 59-68.