## UJI RESISTENSI TERHADAP VIRUS VNN PADA BEBERAPA SPESIES IKAN EKONOMIS

## Test of VNN Virus Resistance  In Several Economic Fish Species

## Betutu Senggagau
Loka Pemeriksaan Penyakit Ikan dan Lingkungan Serang Jl. Raya Carita, Desa Umbul Tanjung, Kec. Cinangka, PO Box 123 Anyer Lor, Kab. Serang, Banten Email: bsenggagau@yahoo.com

## ABSTRACT
VNN or Viral Nervous Necrosis is one of dangerous pathogen which might could infects  some  marine  fishes.This  virus  has    various  type  of  resistance  level  to  different marine fish. An attempt to test the fishes which have highest level of resistance for VNN virus  have  been  conducted.  About  0.1  ml  of  VNN  virus  extract  were  injected  to  seven economic  fish  species.        Prior  the  treatment,  all  fishes  were  tested  using  the  PCR technique. The data were analysed by variance of randomized block design consisted  of treatments and control. The results showed that the VNN virus injection to the fish group have  significant  impact  at  1%    level.  Results  of  challenge  test  showed  that  Silver Pompanos have the strongest resistance against VNN virus compared to the other species with  90%  of  survival  rate  ,  while  the  PCR  test    showed  no  esophageal  VNN.  While  the Humpback groupers have the weakest resistance with 20% of survival rate with PCR test showed that VNN infection have severe stages.
Keywords : VNN, Virus, Resistance

## PENDAHULUAN
Salah  satu  penyakit  berbahaya  dan  merugikan  dalam  budidaya  ikan  adalah yang  disebabkan  oleh  virus  (APEC/SEAFDEC,  2001,  Kusharyani  et  al.,  2001). Umumnya  ikan  laut  budidaya  seperti    Kerapu  Bebek,  Kerapu  Macan  dan  Kakap Putih  sangat  rentan  terhadap  penyakit  VNN  atau Viral  Nervous  Necrosis (Nagazawa, et al., 2004, Johny dan Zafran, 2005).
Hingga  saat  ini  belum  ada  pengobatan  yang  tepat  untuk  menanggulangi penyakit  virus,  kecuali  pencegahan  melalui  vaksinasi  atau  memperbaiki  sistem manajemen  pemeliharaan  (Lio  et  al,.  2001;  Zafran  et  al.,  1998;  2005).  Dalam upaya  menekan  kerugian  akibat  penyakit  virus,  perlu  dikaji    resistensi  beberapa jenis ikan laut ekonomis terhadap virus VNN.

## BAHAN DAN METODE
Hewan  uji  terdiri  dari  ikan  Kerapu  Macan,  Kerapu  Bebek,  Kerapu  Sunu, Kerapu Lumpur, Kakap Putih, Bawal Bintang, dan Kakap Mata Kucing ukuran 7- 9  cm.  Mereka  dipelihara  dalam  wadah    plastik  transparan  volume  15  liter dilengkapi  aerasi.    Ikan  dalam  keadaan  sehat,  normal  dan  tidak  cacat.  kemudian dilakukan  uji  deteksi  virus  VNN.  Jika  negatif,  lalu  ikan  dipelihara  ke  dalam  14 unit wadah  masing-masing 10 ekor per wadah.  Tahapan perlakuan selengkapnya adalah sebagai berikut.

## Tahap I : Pembuatan Ekstrak Virus VNN
Organ yang diperiksa ditambahkan PBS, dengan perbandingan  organ : PBS =1:9. Kemudian    organ  digerus  dan  disentrifus  (15  menit/  12000  rpm).  Supernatant difilter  (0,4 µm) dan filtrat virus siap untuk digunakan (Kusharyani et al., 1998).

## Tahap II : Metode Kegiatan
Tiap 10 ekor ikan  dari 7 spesies ikan yang digunakan dibagi menjadi 2 wadah A (kontrol =5 ekor) dan B (perlakuan= 5 ekor). Pengamatan dalam 2 period, masing- masing 10 hari. Uji invitro dilakukan dengan menginjeksikan virus VNN kepada 7 spesies  ikan uji  sebanyak 0,1 ml.  Kemudian diinkubasikan selama 10  hari dan diamati  tingkat  kelulusan  hidupnya.  Setelah  itu  ikan-ikan  tersebut  kembali  diuji virus  VNN  dengan  metode  PCR  (Zafran  et  al.,  2005).  Hasilnya  akan  diketahui spesies    mana  yang  memiliki  daya  tahan  paling  kuat  atau  lemah  terhadap  virus VNN.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Data  menunjukkan    bahwa  ikan  Bawal  Bintang  memiliki  resistensi  paling kuat,  sedangkan  ikan  Kerapu  Bebek  resistensinya  paling  lemah  terhadap  virus VNN.  Ini  terlihat  dari  cepatnya  kematian  dan  tingginya  mortalitas  ikan  Kerapu Bebek  dibandingkan  spesies  lainnya  setelah  diinjeksi  virus  10  hari  pertama  dan kedua dengan total angka kematian sebanyak 8 ekor (Gambar 1 dan 2).
Tabel 1.  Mortalitas  dan  nilai  SR  dari  tiap  ikan  uji  yang  diberi  perlakuan  dan
kontrol Jenis Ikan Kerapu Bebek Kerapu Macan Kerapu Sunu Kerapu Lumpur Bawal Bintang Kakap Mata Kucing Kakap Putih Perlakuan K U K U K U K U K U K U K U Mortalitas 0 8 0 6 0 7 0 7 0 1 0 7 0 5
SR 10 2 10 4 10 3 10 3 10 9 10 3 10 5

## Keterangan: K = kontrol, U = uji
Injeksi  virus  VNN  pada  ketujuh  ikan  uji  pada  10  hari  pertama  dan  kedua menunjukkan  respon  berbeda-beda  terhadap  mortalitas  dan  kelulushidupan  ikan uji.  Hasil  analisis  ragam  dari  Rancangan  Acak  Kelompok  (RAK)  terhadap  nilai kelulusan  hidupikan  uji  menunjukkan  hasil  beda  sangat  nyata  (F  hit  >  F  0,01) seperti disajikan pada Tabel 2.
Tabel 2.Hasil analisis ragam RAK nilai SR dari ikan uji SK DB JK KT F hit F 5% F 1% Kelompok 6 16,43 2,74 1,00 4,28 8,47 Perlakuan 1 120,07 120,07 43,85** 5,99 13,75 Galat 6 16,43 2,74 Total 13 152,93
Keterangan: *) berbeda nyata, **) berbeda sangat nyata
Gambar 1. Nilai mortalitas (ekor) ikan uji terhadap virus VNN pada 10 hari pertama Gambar 2. Nilai mortalitas (ekor) ikan uji terhadap virus VNN pada 10 hari kedua 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Hari ke- J u m la h m o rt a li ta s ( e k o r) Kerapu Bebek Kerapu Macan Kerapu Sunu Kerapu Lumpur Baw al Bintang Kakap Mata Kucing Kakap Putih 0 0.5 1 1.5 2 2.5 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Hari ke- J u m la h m o rt a li ta s ( e k o r) Kerapu Bebek Kerapu Macan Kerapu Sunu Kerapu Lumpur Baw al Bintang Kakap Mata Kucing Kakap Putih
Hasil uji PCR ikan Kerapu Bebek menunjukkan infeksi VNN stadium berat, sedangkan  untuk  6  spesies  lainnya  stadium  ringan.  Ikan  kontrol  semuanya  tetap hidup  dan    uji  PCR  nya  negatif.    Hasil  PCR  pada  ikan  uji  sebelum  dan  setelah injeksi pada 10 hari pertama dan kedua.  disajikan pada Gambar 3, 4, 5 dan 6). Ikan  Kerapu  Sunu,  Kerapu  Lumpur  dan  Kakap  Mata  Kucing  menempati urutan kedua dalam 10 hari pertama dengan  kematian  masing-masing 3, 4 dan 4 ekor. Kematian awal terjadi pada hari kelima setelah injeksi virus VNN. Pada 10 hari  kedua,  kematian  ikan  Kerapu  Lumpur  terjadi  pada  hari  ke  empat  dengan jumlah kematian 3 ekor, lebih cepat satu hari dibandingkan ikan Kerapu Sunu dan Kakap  Mata  Kucing  yang  terjadi  pada  hari  kelima,  dengan  jumlah  kematian masing-masing  4 dan 3 ekor.
Gambar 3. Hasil uji PCR sebelum diberi perlakuan injeksi virus pada10 hari
pertama
Gambar 4. Hasil uji PCR sebelum diberi perlakuan injeksi virus pada 10 hari
kedua
Gambar 5. Hasil uji PCR setelah diberi perlakuan injeksi virus pada 10 hari pertama
Gambar 6. Hasil uji PCR setelah diberi perlakuan injeksi virus pada 10 hari kedua Ikan Kerapu Macan pada urutan ketiga angka kematiannya 6 ekor.  Hal ini menunjukkan  bahwa  ikan  Kerapu  Macan  juga    rentan  terhadap  virus  VNN. Ikan  Kakap  Putih  pada  urutan  ke  empat  angka  kematian  5  ekor  setelah  20  hari perlakuan  dan  keempat,  kematian  pada  10  hari  pertama  dan  kedua  berselang waktu  5  hari.    Pada  ikan  Bawal  Bintang  mortalitasnya  terendah  yaitu  satu  ekor, terjadi pada hari ke 9 setelah injeksi virus. Ini menunjukkan  ikan Bawal Bintang sangat  resisten  terhadap  virus  VNN,  terbukti  kematiannya  lambat,  tidak  seperti ikan lainnya yang mengalami kematian dalam waktu singkat.

## KESIMPULAN
1) Spesies ikan Bawal Bintang ( Trachinotus blochii ) memiliki resistensi terkuat dan  ikan  Kerapu  Bebek  ( Cromileptes  altivelis )  memiliki  resistensi  terlemah terhadap  virus  VNN,  dengan  rerata  tingkat  kelulusan  hidup  masing-masing 90% dan 20%.
2) Hasil  uji  PCR  pada    ikan  Kerapu  Bebek  menunjukkan  status  stadium  berat, menunjukkan sering terjadinya kematian massal pada ikan tersebut.

## SARAN
Perlu  dilihat  aspek  resistensi  beberapa  ikan  laut  ekonomis  terhadap  jenis patogen lainnya seperti bakteri dan parasit.

## DAFTAR PUSTAKA
APEC/SEAFDEC.2001.  Pembudidayaan  dan  Management  Kesehatan  Ikan Kerapu. APEC, Singapore dan SEAFDEC, Iloilo, Philiphpines. 95 p.
Johnny  F,  Roza  dan  Zafran.  2005.  Penyakit  Infeksi  Bakterial  pada  Ikan  Laut Budidaya  dan  Upaya  Pengendaliannya.Dipresentasikan  sebagai  bahan Diseminasi Budidaya Laut Berkelanjutan I. 10 - 30 April . BBRBL Gondol Bali.11 hal.
Koesharyani I, Zafran, Des Roza, , Fris Johnny, Ketut Mahardika and Kei Yuasa, 2001.  Manual  for  Fish  Diseases  Diagnosis  II.  Marine  and  Crustacean diseases in Indonesia. Gondol Research Station and JICA. 55p
Lio  Po  Gilda  D,  Celia  R  Lavilla  and  Erlinda  R  Cruz  Lacierda.  2001.  Health Management  in  Aquaculture.  South  East  Asian  Fisheries  Development Center. Aquaculture Department. Iloilo. Philipphines. 181 p.
Nagazawa, K and E.R Cruz- Lacierda (eds) 2004. Diseases of Cultured Grouper.
South  East  Asian  Fisheries  Development  Center.  Aquaculture  Department. Iloilo. Philipphines. 81p.
Zafran,  D  Roza,  dan  F  Johnny.  2005.  Penyakit  Bakterial  pada  Ikan  Laut.
Dipresentasikan sebagai  Bahan Diseminasi Budidaya Laut Berkelanjutan I.
10 - 30 April 2005. BBRBL Gondol Bali. 10 hal.