## INDONESIA
Skrining Senyawa Metabolit Sekunder Ekstrak Metanol Biji Alpukat ( Persea Americana Mill.) Asal Pulau Timor
Aloisius M. Kopon; Anselmus B. Baunsele; Erly G. Boelan.
1 Pendidikan Kimia, Universitas Katolik Widya, Mandira, Kupang, NTT
*Corresponding author: earlygrizca@gmail.com

## Abstract
Avocados  (Persea  americana  Mill.)  have  many  benefits  for  traditional  medicine  especially  in  East  Nusa Tenggara.  The  purpose  of  this  study  was  to  analyze  the  secondary  metabolite  compounds  contained  in avocado seeds and to identify groups compounds in avocado seeds extract. The research method used was maceration of samples for 3 days and continued with phytochemical dan FT-IR test. The result showed that methanol extract of avocado seeds contains phytochemicals based on test result of secondary metabolites, the  alkaloids,  flavonoids,  steroids,  terpenoids,  saponins  and  tannins.  While  the  results  of  FT-IR  analysis showed the presences of OH, CH, C=C, and C-O groups.
Keywords: avocado seed ( Persea Americana Mill.), methanol extract, phytochemical screening, FT-IR.

## Abstrak
Alpukat  merupakan  salah  jenis  tanaman  yang  digunakan  oleh  masyarakat  Indonesia  khususnya  Nusa Tenggara  Timur  sebagai  obat  tradisional.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  metabolit  sekunder yang  terdapat  pada  biji  alpukat  dan  juga  mengetahui  gugus  dan  jenis  ikatan.  Metode  penelitian  yang dilakukan  adalah  maserasi  sampel  selama  3  hari  dan  dilajutkan  dengan  uji  fitokimia  dan  FT-IR.  Hasil skrining  fitokimia,  menunjukan  bahwa  ekstrak  metanol  biji  alpukat  mengandung  senyawa  metabolit sekunder diantaranya alkaloid, flavonoid, saponin, tanin, triterpenoid dan steroid. Sedangkan hasil analisis FT-IR yang menunjukan adanya gugus OH, CH, C=C, dan C-O.
Kata kunci: biji alpukat, ektrak metanol, skrining fitokimia, skrining fitokimia, FT-IR

## I. Pendahuluan
Indonesia  merupakan  negara  tropis yang  kaya  akan  keanekaragaman  hayati. Salah  satu  tanaman  yang  tumbuh  subur  dan tersebar  di  Indonesia  adalah  alpukat  (Persea
americana Mill.). Alpukat merupakan tanaman  yang  berasal  dari  Amerika  Tengah dan  dapat  tumbuh  pada  daerah  tropis  seperti di  daratan  pulau  Timor.  Daun,  kulit  batang, daging  buah,  biji  hingga  akar  tanaman  ini
memiliki  banyak  manfaat  dalam  kehidupan sehari-hari  salah  satunya  adalah  sebagai tanaman obat.
Penggunaan  alpukat  sebagai  tanaman obat telah digunakan secara luas. Masyarakat Nusa  Tenggara  Timur  (NTT)  biasanya menggunakan  biji  buah  alpukat  sebagai  obat tradisional  diantaranya  untuk  mengatasi sembelit,  menyembuhkan  radang,  menjaga daya  tahan  tubuh  dan  juga  untuk  mengobati penyakit  gula  darah/diabetes  melitus.  Cara menggunakan  biji  alpukat  untuk  pengobatan secara  tradisonal  adalah  dengan  merebus potongan  biji  alpukat  dengan  air  dan kemudian langsung dikonsumsi. Berdasarkan penelitian sebelumnya biji buah alpukat yang memiliki  berat  kurang  lebih  16%  dari  total berat  buah  ini  memiliki  banyak  manfaat dalam  bidang  kesehatan,  yaitu  diantaranya sebagai antikanker, antiinflamasi, antidiabetes,  penurun  tekanan  darah,  serta antimikroba [1].
Tanaman  obat  tradisional  yang  sering digunakan oleh masyrakat diketahui memiliki potensi  untuk  dikembangkan  lebih  lanjut pada  bidang  farmakologi.  Hal  ini  tentunya harus  dibuktikan  dengan  berbagai  pengujian serta  identifikasi  senyawa  kimia  yang terdapat pada tumbuhan tersebut.
Berdasarkan  hasil  penelitian  sebelumnya dilaporkan  bahwa  biji  alpukat  mengandung senyawa  metabolit  sekunder  diantaranya flavonoid,  steroid,  terpenoid,  saponin,  tanin,
glikosida kardiak serta alkaloid [2]. Selain itu pada  penelitian  lainnya  Abe,  dkk  [3] melaporkan  bahwa  dalam  ekstrak  metanol biji  alpukat  mengandung  2  senyawa  turunan 1,24-trihidroksi  nanodekana  dan  6  senyawa turunan 1,2,4-trihidroksi dekana yang memiliki  potensi  sebagai  antiinsektisida. Akan  tetapi  letak  geografis,  suhu,  iklim  dan kesuburan tanah suatu wilayah dapat menentukan  kandungan  kimia  dalam  suatu tanaman.  Pada  tanaman  yang  sama  jenisnya, kandungan  senyawa  kimia  dapat  berbeda antara  satu  daerah  dengan  daerah  lainnya. Oleh karena itu studi dan riset awal terhadap ekstrak  biji  alpukat  yang  berasal  dari  pulau Timor perlu dilakukan.
II. Metodologi

## Alat dan Bahan
Alat  dan  instrument  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  Erlenmeyer, corong, evaporator, batang pengaduk, tabung rekasi,  pipet  tetes,  gelas  kimia,  neraca analitik, plat tetes, dan FT-IR.
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah biji alpukat, Metanol PA 96%,  aquades,  HCL,  reagen  Mayer,  reagen Wagner, pita magnesium, FeCl 3 , asam asetat anhidrat  98%,  asam  sulfat  98%,  dan Kloroform 98%

## Ekstrak Biji Alpukat
Sebanyak  50  g  biji  alpukat  yang  telah dihaluskan  dimaserasi  dengan  menggunakan methanol  selama  3x24  jam.  Ekstrak  disaring
dan  disimpan  selama  14  hari  kemudian dievaporasi dan diperoleh ekstrak kental
Uji  Komponen  Fitokimia  Ekstrak  Biji Alpukat
Uji alkaloid dilakukan dengan menggunakan  reagen  Mayer  dan  Wagner. Sebanyak  0,01  mg  ekstrak  dimasukan  ke tabung  A  dan  B,  dan  ditambahkan  0,5  mL HCl  2%  pada  tabung  A  dan  dikocok  hingga homogen.  Kemudian  ditambahkan  2-3  tetes reagen Mayer ke dalam tabung A dan 2-3 tete reagen  Wagner  ke  dalam  tabung  B.  jika terbentuk  endapan  putih  pada  tabung  A  dan endapan  coklat  pada  tabung  B  maka  sampel tersebut mengandung alkaloid [4].
Uji  kandungan  Flavonoid  dilakukan dengan  cara  memasukan  0.01  mg  ekstrak  ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan dengan air  panas  secukupnya.  Filtrat  yang  ada diambil  sebanyak  5  mL  dan  ditambahkan  2 cm  pita  Mg  dan  1  mL  HCl  pekat  kemudian dikocok. Jika terbentuk warna merah, kuning atau  jingga,  menunjukkan  adanya  flavonoid [5].
Uji  saponin  pada  ekstrak  yang  ada dilakukan  metode  Forth.  0.01  mg  ekstrak dimasukan ke dalam tabung reaksi setelah itu ditambahkan  2  mL  air  panas.  Sampel  akan terbentuk  busa  kemudian  ditambahkan  1  mL HCl  2N.  Jika  busa  tersebut  tidak  hilang selama  30  detik  maka  ekstrak  positif mengandung saponin [4], [6].
Pengujian  adanya  Tanin  pada  esktrak dilakukan  dengan  menambahkan  beberapa tetes larutan besi (III)klorida 10% ke dalam 1 ml  ekstrak.  Apabila  terbentuk  endapan berwarna biru tua atau hitam kehijauan maka ekstrak positif mengandung tannin [5].
Pengujian  adanya  Triterpenoid  dan Steroid  pada  sampel  ekstrak  biji  alpukat didahului  dengan  mencampur  0.01  mg ekstrak  dengan  2  mL  kloroform  98%  di dalam  tabung  reaksi  kemudian  dikocok. Setelah  itu  lapisan  kloroform  yang  terbentuk diambil  dan  diteteskan  ke  plat  tetes  dan biarkan sampai kering, kemudian ditambahkan  5  tetes  asam  asetat  anhidrat 98%  dan  3  tetes  H 2 SO 4 98%.  Jika  terbentuk warna  merah,  orange,  kuning  maka  sampel mengandung  triterpenoid  dan  jika  terbentuk warna hijau sampel mengandung steroid [4].

## III. Hasil dan Pembahasan
Ekstraksi merupakan proses pemisahan suatu  zat  berdasarkan  perbedaan  kelarutan terhadap  dua  atau  lebih  zat  yang  tidak tercampur.  Ekstraksi  biji  alpukat  dilakukan dengan  metode  maserasi menggunakan pelarut  metanol  dan  menghasilkan  rendemen sebesar  10,03%  dengan  perbandingan  1:4 (200  g  sampel:800  mL  pelarut  metanol). Hasil rendemen suatu sampel sangat bergantung  pada  sifat  kelarutan  komponen bioaktif [7]. Pemecahan dinding dan membran  sel  oleh  metanol  menyebabkan
komponen  senyawa  polar  dalam  ekstrak  biji alpukat larut dalam metanol

## Uji Fitokimia
Hasil  pengujian  fitokimia  terhadap ekstrak  metanol  biji  alpukat  dilakukan  untuk mengetahui  senyawa  metabolit  sekunder yang  terdandung.  Hasil  uji  fitikomia  dapat dilihat  pada  Tabel  1.  Hasil  pengujian menunjukan  bahwa  ekstrak  metanol  biji alpukat  mengandung  golongan  senyawa alkaloid, flavonoid, saponin, tanin, triterpenoid  dan  steroid.  Hasil  ini  sesuai dengan penelitian yang dilakukan sebelumnya  ([2],  [8])  yang  melakukan identifikasi  metabolit  sekunder  pada  ekstrak metanol dan etil asetat biji alpukat.
Tabel  1.  Hasil  Uji  Fitokimia  pada  ekstrak methanol biji alpukat
Golongan Senyawa Hasil Uji Keterangan Alkaloid Reagen Mayer Reagen Wagner + + Terbentuk endapan putih Terbentuk endapan cokelat Flavonoid + Larutan berwarna coklat kemerahan Saponin + Busa stabil Tanin + Larutan berwarna biru tua Triterpenoid/ Steroid + Larutan berwarna kemerahan dan hijau
Pada  pengujian  alkaloid  hasil  positif ditunjukan dengan adanya endapan putih saat
direaksikan  dengan  reagen  Mayer  dan endapan  cokelat  saat  direaksikan  dengan reagen  Wagner.  Terbentuknya  endapan  ini disebabkan  karena  adanya  pergantian  ligan. Senyawa  alkaloid  bersifat  semi  polar  yang mengandung  atom  nitrogen  pada  bagian sikliknya serta mengandung beberapa subtituen  yang  bervariasi  seperti  gugus amnina,  amida  metoksi,  serta  fenol  [9]. Perkiraan  reaksi  yang  terjadi  pada  uji alkaloid  dengan  menggunakan  pereaksi Mayer  dapat  dilihat  pada  Gambar  1.  Pada saat  pembuatan  pereaksi  akan  terbentuk endapan  merah  HgI 2 sebagai  hasil  reaksi antara larutan HgCl 2 dan KI. Dan apabila KI yang  ditambahkan  berlebih  maka  akan menghasilkan  K 2 [HgI 4 ].  Sehingga  ketika direaksikan  pada  sampel,  senyawa  alkaloid yang  memiliki  atom  nitrogen  akan  beraksi dengan  ion  logam  K + dari  K 2 [HgI 4 ]  dan membentuk  endapan  kompleks  kalium- alkaloid.
Gambar  1.  Perkiraan  Reaksi  Uji  Alkaloid Pereaksi Mayer [15]
Sedangkan  untuk  reaksi  uji  alkaloid  dengan menggunakan  pereaksi  Wagner  dapat  dilihat pada Gambar 2. Pereaksi Wagner terdiri dari
Aloisius M. Kopon, dkk. Akta Kimia Indonesia 5(1), 2020, 43-52
KI dan I 2 yang dapat bereaksi membentuk I 3 - yang berwarna cokelat. Pada saat direaksikan ion  logam  K + membentuk  kompleks  kalium- alkaloid yang menghasilkan endapan.
Gambar  2.  Perkiraan  Reaksi  Uji  Alkaloid Pereaksi Wagner [15]
Pada  uji  flavonoid  digunakan  Mg  dan HCl.  Hasil  menunjukan  positif  ditandai dengan terbentuknya warna coklat kemerahan  yang  menandakan  terjadinya reduksi.    Perkiraan  reaksi  yang  terjadi  pada uji  flavonoid  dapat  dilihat  pada  Gambar  3. Adanya  gugus  hidroksi  pada  golongan senyawa flavonoid menunjukan bahwa golongan  senyawa  ini  cenderung  bersifat polar.
Gambar 3. Perikiraan Reaksi Uji Flavonoid [10]
Hal  yang  sama  juga  terjadi  pada golongan  senyawa  tanin.  Senyawa  ini cenderung  bersifat  polar  karena  memiliki gugus hidroksi. Identifikasi terhadap senyawa tanin dilakukakan melalui penambahan  FeCl 3 dan  Sampel  menunjukan perubahan  warna  menjadi  biru  kehitaman yang  menunjukan  bahwa  senyawa  tanin
mengalami hidrolisis. Reaksinya dapat dinyatakan sebagai berikut:
FeCl 3 (aq)  +  6ArOH(s)  →  6H + +  3Cl - +  [Fe (OAr) 6 ] 3- (aq) [10]
Saponin  merupakan  senyawa  aktif permukaan  yang  mudah  terdeksi  melalui kemampuannya  membentuk  busa.  Pengujian golongan  senyawa  saponin  pada  ekstrak  biji
alpukat  ditandai  dengan  adanya  busa  yang stabil. Golongan senyawa saponin mengandung  gugus  glikosil  yang  bersifat polar dan gugus steroid dan triterpenoid yang bersifat  non  polar.  Senyawa  yang  memiliiki gugus non polar dan polar akan bersifat aktif dipermukaan. Reaksi pembentukan busa pada uji  saponin  ditunjukkan  pada  Gambar  4. Timbulnya buih menunjukkan adanya glikosida yang memiliki kemampuan membentuk buih dalam air yang terhidrolisis menjadi glukosa dan senyawa lain.
Uji  triterpenoid/steroid  berdasar  pada kemampuan  senyawa  tersebut  membentuk warna  H2SO4  pekat  dalam  pelarut  asam asetat  anhidrida  [4],  [9].  Prinsip  dari  rekasi ini adalah pelepasan H 2 O dan penggabungan dengan karbokation. Hasil penelitian menunjukan  bahwa  ekstrak  biji  alpukat mengandung triterpenoid dengan terbentuknya  warna  merah  dan  positif
mengandung  steroid  dengan  terbentuknya warna hijau.
Idris,  dkk  [2]  juga  pernah  melakukan uji  fitokimia  terhadap  biji  alpukat  dengan menggunakan beberapa pelarut yaitu metanol, etil asetat, kloroform dan petroleum eter.  Ekstrak  metanol  dan  etil  asetat menunjukan  hasil  positif  terhadap  flavonoid, steroid,  terpenoid,  saponin,  tanin,  alkaloid dan  karbohidrat;  dan  negatif  terhadap antrakuinon  dan  glikosida  sianogen.  Ekstrak kloroform  menunjukan  hasil  positif  terhadap steroid,  terpenoid,  saponin  dan  alkaloid;  dan negatif terhadap flavonoid, tanin, antrakuinon, glikosida sianogen dan karbohidrat.  Sedangkan  ekstrak  petroleum eter  menunjukan  hasil  positif  terhadap steroid,  terpenoid  dan  saponin;  dan  negatif terhadap flavonoid, tanin, antrakuinon, alkaloid dan glikosida sianogen.
Gambar 4. Perkiraan Reaksi Uji Saponin [15]

## Analisis Spektriskopi Infra Merah (FTIR) Ekstrak Biji Metanol
Sampel  ekstrak  metanol  biji  alpukat selanjutnya diuji dengan menggunakan spektofotometer  FT-IR  dengan  tujuan  untuk
mengetahui gugus atau jenis ikatan dari suatu senyawa  berdasarkan  nilai  serapan  pada bilangan  gelombang  tertentu.  Data  hasil  uji FT-IR dapat dilihat pada Tabel 2.
Spektrum  IR  senyawa  yang  terdapat dalam  ekstrak  biji  alpukat  memberikan
Aloisius M. Kopon, dkk. Akta Kimia Indonesia 5(1), 2020, 43-52
infromasi  adanya  puncak  serapan  gugus hidroksil  pada  bilangan  gelombang  3419,24 cm -1 . Gugus hidroksil ini merupakan regang - OH  terikat,  yang  membentuk  pita  lebar dengan  intensitas  yang  kuat.  Puncak  lebar yang  terbentuk  pada  bilangan  gelombang 3419,24  cm -1 ini  terbentuk  sebagai  akibat adanya vibrasi antarmolekul hidrogen.
Serapan  pada  bilangan  gelombang 2926,35  cm -1 dan  2854,37  cm -1 dengan intensitas  medium  menunjukan  adanya  CH alifatik. Dugaan ini diperkuat dengan adanya serapan  pada  bilangan  gelombang  1441,43 cm -1 dan  1384,42  cm -1 yang  merupakan gugus CH alifatik.  Pada bilangan gelombang 1654,41  cm -1 dengan  bentuk  peak  lancip menunjukan  adanya  gugus  -C=C.  Ikatan  -C- O aromatik muncul pada bilangan gelombang 1059,40 cm -1
Pola lokasi bilangan gelombang, bentuk  dan intensitas  spektra pada penelitian ini  hampir  mirip  dengan  beberapa  penelitian yang  telah  dilakukan  sebelumnya.  Tabel  2 juga menunjukkan perbandingan hasil analisis  spektra  IR  biji  alpukat  dengan beberapa penelitian terdahulu. Retnosari, dkk [11]  melakukan  analisis  spektrum IR terhadap  isolat  ekstrak  metanol  biji  alpukat pada  komponen  K-1  yang  menunujkan bahwa  isolat  tersebut  mengandung  gugus OH,  C=O,  ikatan  C-H  dan  ikatan  C=C. Penelitian  lainnya  yang  dilakukan  oleh Abubakar  dkk  [12]  menunjukan  bahwa  pada
isolat ekstrak etanol biji alpukat mengandung gugus  OH,  CH,  C=O,  C=C,  C-C  dan  C-O. Feliana,  dkk  [13]  yang  menganalisis  isolat biji alpukat dari yang di ekstrak menggunakan pelarut etil asetat dimana isolat yang  dianalisis  dengan  FT-IR  menghasilkan gugus  OH,  C=O,  C-H  aromatik  dan  alifatik, C=C dan C-O.
Secara  umum  Pada  penelitian  ini  tidak terlihatnya  ada  gugus  C=O  dan  C-C  hal  ini diduga  karena  jenis  sampe  yang  digunakan untuk  analisis  masih  berupa  ekstrak  kasar, tanpa  melalui  fraksinasi  dan  purifikasi. Dalam  ekstrak  kasar  masih  terkandung beberapa senyawa yang mengakibatkan kadar senyawa  target  relatif  rendah  sehingga membuat  absorbsi  gugus  atom  terhadap inframera  sangat  rendah.  Akibatnya  puncak senyawa  target  tidak  muncul  dan  terjadi peaks overlapping dalam spektra tersebut.
Gugus  fungsional  hidroksil  (-OH),  eter (R-OR’)  dan  keton  (R-CO-R’)  merupakan gugus  fungsional  yang  banyak  terdapat  pada senyawa  golongan  alkaloid,  fenol/polifenol, flavonoid, saponin, dan terpenoid; dan alkana sebagai  karbon  alifatisnya. Hal ini  dikuatkan dengan  uji  fitokimia  yang  telah  dilakukan bahwa ekstrak biji alpukat positif mengandung  golongan  senyawa  alkaloid, flavonoid,  tanin,  saponin,  triterpenoid  dan steroid.
Dalam  bidang  kesehatan  kelompok senyawa alkaloid berperan sebagai
Aloisius M. Kopon, dkk. Akta Kimia Indonesia 5(1), 2020, 43-52
antihipertensi dan antidiabetes. Selain alkaloid,  kelompokk  senyawa  flavonoid  juga memiliki khasiat sebagai antihipertensi Kandungan  flavonoid  dan  tannin  yang terdapat pada sampel menunjukan bahwa biji alpukat memiliki potensi sebagai antioksidan. Selain  itu  penelitian  yang  dilakukan  oleh Retnosari  dkk  [11],  menujukan  bahwa ekstrak metanol biji alpukat pada fraksi 4 dan komponen  K-1  memiliki  aktivitas  sabagai antibakteri  ketika  diujikan  pada  Escherichia coli  dan  Staphylococcus  aureus  dimana
berdasarkan  hasil  anlisis  yang  dilakukan komponen K-1 merupakan golongan saponin. Dalam  struktur  senyawa  metabolit  sekunder, hampir  semua  senyawa  memliki  gugus hidroksi  (OH)  yang  berperan  terhadap aktivitas biologis makhluk hidup. Kemampuan  membentuk  ikatan  hidrogren oleh  suatu  senyawa  aktif  mengakibatkan senyawa tersebut mudah larut dalam air serta dengan  mudah  berinteraksi  dengan  protein target dalam suatu organisme [14].

## Tabel  2.  Perbandingan  Hasil  Analisis  Spektroskopi  IR  Biji  Alpukat  dengan  Beberapa  Penelitian Sebelumnya
Sampel Ekstrak Metanol Isolat Ekstrak Metanol [11] Isolat Ekstrak Etanol [12] Isolat Ekstrak n -hexan & Etanol [13] Isolat Ekstrak Etil Asetat [8] Bilangan Gelombang (cm -1 ) Interpre tasi Bilangan Gelombang (cm -1 ) Interpret asi Bilangan Gelombang (cm -1 ) Interpre tasi Bilangan Gelombang (cm -1 ) Interpre tasi Bilangan Gelombang (cm -1 ) Interpre tasi 3419,24 -OH 3313,17 -OH 3444,87 -OH 3314,54 -OH 3309,85 -OH 2926,35 C-H Alifatik 2920,23 C-H Alifatik 2926,01 C-H Alifatik 2926,24 C-H Alifatik 3080,32 C-H Aromati k 2854,37 C-H Alifatik 1722,43 C=O 2852,72 C-H Alifatik 2856,53 C-H Alifatik 2922,16 C-H Alifatik 1654 C=C 1650 C=C 1737,86 C=O (Ester) 1721,26 C=O (karbok silat atau keton) 2850,79 C-H Alifatik 1441,43 C-H pada CH 2 1645,28 C=C 1609,27 C=C 1739,79 C=O (Karbon il) 1384,42 C-H pada CH 3 1462,04 C-H pada CH 2 1236,26 C-O 1645,28 C=C 1059,40 C-O 1384,89 C-H pada CH 3 1066 C-O 1109,07 C-O 1165,00 C-C 846,75 C-H subtitusi 1107 C-O

## IV. Kesimpulan
Hasil  skrining  fitokimia,  menunjukan
bahwa ekstrak metanol biji alpukat mengandung  senyawa  metabolit  sekunder diantaranya  alkaloid,  flavonoid,  saponin, tanin,  triterpenoid  dan  steroid.  Data  ini  juga didukung  oleh  hasil  analisis  FT-IR  yang menunjukan  adanya  gugus  OH,  CH,  C=C, dan C-O.

## Ucapan Terima Kasih
Terima kasih kepada Universitas Katolik  Widya  Mandira  melalui  LPPM  yang telah mendukung penelitian ini.

## Daftar Pustaka
[1]  D.  Dabas,  R.  Shegog,  G.  Ziegler,  and  J. Lambert,  “Avocado  (Persea  americana) Seed as a Source of Bioactive Phytochemicals,” Curr.  Pharm.  Des. , vol.  19,  no.  34,  pp.  6133–6140,  2013, doi: 10.2174/1381612811319340007.
[2]  S. Idris, G. I. Ndukwe, and C. E. Gimba, “Preliminary  Phytochemical  Screening And  Antimicrobial  Activity  Of  Seed Extracts Of Persea Americana ( Avocado Pear ),” Bajopas., vol . 2, no. 1, pp. 173– 176, 2009.
[3]  P. Materials, “Trypanocidal Constituents in  Plants  5  .  1  )  Evaluation  of  Some Mexican  Plants  for  Their  Trypanocidal
Activity  and  Active  Constituents  in  the Seeds of Persea americana,”
Biol.Pharm.Bull., vol.  28,  no.  7,  pp. 1314–1317, 2005.
[4]  M. Sangi, M. R. J. Runtuwene, and H. E. I. Simbala, “Analisis Fitokimia
Tumbuhan Obat Di Kabupaten Minahasa
Utara,” Chem.Prog., vol.  1,  no.  1,  pp. 47–53, 2008.
[5]  G.  S.  Baud,  M.  S.  Sangi,  and  H.  S.  J. Koleangan, “Analisis Senyawa Metabolit Sekunder  Dan  Uji  Toksisitas  Ekstrak Etanol  Batang  Tanaman  Patah  Tulang ( Euphorbia  tirucalli L.)  Dengan  Metode Brine  Shrimp  Lethality  Test (BSLT).” Jurnal Ilmiah Sains ., vol 14, no. 2, 2014.
[6]  G.  R.  Ratu  Dwi,  N.  Noviany,  N.  Arif, and S. Ayu, “Skrining Fitokimia Dan Uji
Klt Ekstrak Metanol Beberapa Tumbuhan  Yang  Berpotensi  Sebagai Obat Tradisional Di Lampung,”
Prosding  Semin.  Nas.  Sains  Teknol.  VI , no. November, pp. 685–695, 2015.
[7]  M. Sayuti, “Pengaruh Perbedaan Metode Ekstraksi,  Bagian  dan  Jenis  Pelarut Terhadap Rendemen dan Aktifitas Antioksidan Bambu Laut ( Isis hippuris ),” Technol.  Sci.  Eng.  J. ,  vol.  1, no. 3, pp. 2549–1601, 2017.
[8]  M.  Musyarrifah,  A.  Ilyas,  and  M. Baharuddin, “Identifikasi Metabolit
Sekunder  Ekstrak  Etil  Asetat  Biji Alpukat  ( Persea  americana Mill.)  dan Uji  Toksisitas  Terhadap  Larva  Udang Artemia salina Leach,” Al-Kimia , vol. 2, no. 1, pp. 45–51, 2014, doi: 10.24252/al- kimia.v2i1.1637.
[9]  L. Puspitasari, D. a. Swastini, and C. I. . Arisanti,  “Skrining  Fitokimia  Ekstrak Etanol  95%  Kulit  Buah  Manggis ( Garcinia  mangostana L  .),” Garuda Portal , vol. 961, p. 5, 2013.
[10] R.  Nugrahani,  Y.  Andayani,  and  A. Hakim, "Skrining Fitokimia Dari Ekstrak Buah  Buncis  ( Phaseolus  vulgaris L) Dalam Sediaan Serbuk", J urnal penelitian  pendidikan  ipa ,  vol.  2,  no.  1, 2016.
[11] R.  Retnosari,  Sutrisno  and  K.  Handoyo, “Aktivitas Antibakteri
Metabolit
Sekunder  dari  Ekstrak  Metanol  Biji Alpukat  ( Persea  americana Mill),” Journal  Cis-Trans  (JC-T), vol.  1,  no.1, pp. 16–21, 2017.
[12]  Abubakar, A. Aisyah, and M. Baharuddin,  “Isolasi  Senyawa  Aktif Ekstrak  Etanol  Biji  Alpukat  ( Persea americana )  dan  Uji  Toksisitas  Terhadap Artemia salina Leach,” Al-Kimia , vol. 2, no. 1, pp. 25–32, 2014, doi: 10.24252/al- kimia.v2i1.1635.
[13] K.  Feliana,  S.  Mursiti,  and  Harjono, “Isolasi dan Elusidasi Senyawa
Flavonoid  dari  Biji  Alpukat  ( Persea
americana Mill.),” Indones.  J.  Chem.
Sci. , vol. 7, no. 2, pp. 153–159, 2018.
[14] A.  P.  Asmara,  “Uji  Fitokimia  Senyawa Metabolit  Sekunder  Dalam  Ekstrak Metanol  Bunga  Turi  Merah  ( Sesbania grandiflora L . Pers),” Al-Kimia, Vol. 5, no.1, 2017, doi: 10.24252/al- kimia.v5i1.2856.
[15] S.  D.  Marliana  and  V.  Suryanti,
“Skrining Fitokimia  dan Analisis Kromatografi  Lapis  Tipis  Komponen Kimia  Buah  Labu  Siam  ( Sechium  edule Jacq  .  Swartz.)  dalam  Ekstrak  Etanol,” Biofarmasi, vol.  3,  no.  1,  pp.  26–31,
2005.