Jurnal Akuakultur Sungai dan Danau Vol. 4 No. 1 Tahun 2019  Hal. 15 – 20
ISSN Print 2503-4766 ISSN Online 2597-8837
UJI INVITRO EKSTRAK BAWANG HUTAN ( Eleutherine palmifolia . (Mill) Urb) TERHADAP BAKTERI Vibrio harveyi

## PENYEBAB PENYAKIT VIBRIOSIS PADA BUDIDAYA IKAN
Safratilofa
Program Studi Budidaya Perairan, Fakultas Pertanian Universitas Batanghari Jl. Slamet Riyadi, Broni Jambi, 36122. Telp. +6074160103 Email korespondensi : osa.safra@yahoo.com

## Abstract
Bacterial  attack  is  a  major  abstacle  in  increasing  production  of  aquaculture activities such as Vibrio harveyi which can cause Vibriosis desease. This research focused  on  the  use  of  forest  extracted  onion  to  achid  and  remediate  the  fish diseases  caused  by  bacteria  of  extracted  onion.  There  was  obtained  by  doing  in vitro  test  using  inhibitory  test.  Concentration  of  forest  onion  extract  used  is  5 mg/ml. 10 mg/ml, 20 mg/ml, 40 mg/ml, negative control (K-) using steril aquades, and  positive  control  (K+)  using  antibiotic  Chloramphenicol  5  mg/ml  and  30 mg/ml. According to  inhibitory test, clear zone was acthieved at  1,3 cm with the concentration  of  40  mg/ml.  The  result  show  the  higher  extracted  onion  doses concentration, the highe inhibitory power.
Keywords : Eleutherine palmifolia .(Mill) Urb, Vibrio harveyi,in vitro

## Abstrak
Serangan  penyakit  bakterial  merupakan  satu  kendala  utama  dalam  peningkatan produksi kegiatan budidaya ikan seperti Vibrio harveyi yang dapat menyebabkan penyakit Vibriosis .  Tujuan  yang  ingin  dicapai  dalam  penelitian  ini  adalah  untuk mendapatkan dosis terbaik dari aplikasi pemanfaatan ekstrak bawang hutan secara invitro sebagai upaya pencegahan dan pengobatan pada bakteri penyebab penyakit dalam  budidaya  ikan.  Kosentrasi  ekstrak  bawang  hutan  yang  digunakan  yaitu5 mg/ml,  10  mg/ml,  20  mg/ml,  40  mg/ml,  kontrol  negatif  (K-)  dengan menggunakan  akuades  steril,  dan  kontrol  positif  (K+)  dengan  menggunakan antibiotik Chloramphenicol 5  mg/ml  dan  30  mg/ml.  Berdasarkan  zona  bening yang  diperoleh  pada  uji  daya  hambat  ekstrak  bawang  hutan  bahwakonsentrasi terbesar  yang  mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri V.  Harveyi sebesar  1.3 cm  pada  konsentrasi  40  mg/ml.  Semakin  tinggi  konsentrasi  daya  hambat  yang dihasilkan semakin besar.
Kata Kunci: Eleutherine palmifolia .(Mill) Urb, Vibrio harveyi,in vitro
Jurnal Akuakultur Sungai dan Danau Vol. 4 No. 1 Tahun 2019  Hal. 15 – 20
ISSN Print 2503-4766 ISSN Online 2597-8837

## PENDAHULUAN
Pengembangan teknologi budidaya ikan secara intensif untuk meningkatkan  hasil  produksi  dapat  berakibat  pada  penurunan  kualitas  perairan, sehingga  menyebabkan  stress  yang  dapat  berdampak  pada  serangan penyakit.Upaya  pencegahan  terhadap  serangan  penyakit  yang  dapat  dilakukan yaitu  dengan  penggunaan  fitofarmaka,  vaksin  dan  probiotik.  Fitofarmaka memiliki  beberapa  keunggulan  dibandingkan  kegiatan  pencegahan  lainnya,  yaitu dapat  dibuat  dengan  teknik  sederhana  serta  tidak  menimbulkan  kerusakan lingkungan untuk pemakaian dalam waktu yang lama  (BPPOM, 2005).
Bawang hutan ( Eleutherine palmifolia ) dapat digunakan sebagai salah satu jenis fitofarmaka. Tanaman ini digunakan sebagai obat oleh masyarakat Sulawesi Tenggara. Tanaman ini banyak ditemukan di daerah Kalimantan sehingga disebut juga bawang dayak. Selain itu, dibeberapa daerah di  Indonesia, tanaman ini juga dikenal  dengan  nama  bawang  mekah,  bawang  sabrang,  bawang  hantu,  dan bawang arab (Naafi’ah, 2014).
Potensi  ekstrak  bawang  hutan  ( E.  palmifolia )  sebagai  obat  herbal antimikroba telah dibuktikan pada beberapa penelitian seperti dapat menghambat beberapa jenis bakteri dan jamur seperti Staphylococcus aureus (Ifesan et al ., 2009; Puspadewi dkk .,  2013), Salmonella  typhi (Naafi’ah,  2014), Streptococcus pyogenes (Kamillah,  2014)  dan  kapang Trichophyton  rubrum (Puspadewi dkk ., 2013).
Beberapa  hasil  penelitian  lainnya  menunjukkan  bahwa  semakin  tinggi kosentrasi  ekstrak  bawang  dayak  ( E.  palmifolia )  maka  daya  hambat  terhadap bakteri  semakin  besar  (Puspadewi dkk .,  2013).  Kosentrasi  ekstrak  bawang hutan( E.  palmifolia )  40  mg/ml  memiliki  aktivitas  antibakteri  yang  paling  baik dibandingkan  dengan  kosentrasi  10  mg/ml  dan  20  mg/ml  dalam  menghambat bakteri Staphylococcus  aureus (Firdaus,  2014)  dan  bakteri Escherichia  coli (Amanda, 2014). Selain itu, perbedaan bakteri yang digunakan juga menunjukkan hasil  daya  hambat  yang  berbeda    (Kamillah,  2014).Berdasarkan  latar  belakang tersebut  maka  dilakukanlah  penelitian  mendapatkan  dosis  terbaik  dari  aplikasi pemanfaatan ekstrak bawang hutan secara invitro sebagai  upaya pencegahan dan pengobatan pada bakteri penyebab penyakit dalam budidaya ikan

## METODOLOGI PENELITIAN Pembuatan serbuk dan Ekstraksi etanol bawang hutan
Umbi  bawang  hutan  yang  telah  berbunga  atau  berumur  3-4  bulan dibersihkan  kemudian  diiris  tipis-tipis  dan  dikeringkan  di  oven  pada  suhu  60 o C selama  48  jam.  Selanjutnya  diblender  dan  diayak  hingga  menghasilkan  serbuk simplisia bawang hutan.
Serbuk  bawang  hutan  kemudian  diekstraksi  dengan  pelarut  etanol  96% dengan  perbandingan  1:4  (w/v).  Proses  maserasi  kinetik  dilakukan  pada  suhu ruang  selama  24  jam  dengan  menggunakan magnetic  stirrer dengan  tiga  kali pergantian etanol pada serbuk  yang sama  atau disebut  maserasi  bertingkat. Hasil maserasi pertama, kedua dan ketiga disaring menggunakan kertas saring Whatman no 42.
Tepung  sisa  saringan  dimaserasi  kembali  sebanyak  dua  kali  dengan metode  yang  sama  dengan  maserasi  pertama.  Hasil  maserasi  dipekatkan  dengan
Jurnal Akuakultur Sungai dan Danau Vol. 4 No. 1 Tahun 2019  Hal. 15 – 20
ISSN Print 2503-4766 ISSN Online 2597-8837
evaporatorvacum pada suhu  40 o C  sehingga menghasilkan ekstrak etanol bawang hutan .
Uji Daya HambatMetode Diffusi Agar Uji daya hambatpada penelitian menggunakan metode diffusi agar. Ekstrak bawang  hutan  dibuat  dengan  kosentrasi  berbeda  yaitu  5  mg/mL,  10  mg/mL,  20 mg/mL,  40  mg/mL,  kontrol  positif  (K+)  dengan  menggunakan  antibiotik Chloramphenicol 30  mg/mL  dan  kontrol  negatif  (K-)  hanya  menggunakan akuades steril. Biakan murni Aeromonas hydrophyla sebanyak 1 ose di kultur pada 25  ml  media  TSB  ( Tryptic  Soy  Broth )  kemudian  diinkubasi  dalam waterbath shaker selama  24  jam  pada  suhu  37 o C.  kemudian  dilakukan  pengenceran  berseri sehingga  diperoleh  kepadatan  bakteri  10 8 CFU/ml.  Sebanyak  50  µl  suspensi bakteri  disebar  pada  media Tryptic  Soy  Agar (TSA)  untuk  isolat A.  hydrophyla . Kertas  cakram  steril  dicelupkan  ke  stok  ekstrak  bawang  hutan  kemudian ditempelkan  pada  media  yang  telah  disebar  bakteri.  Ulangi  kembali  pada perlakuan  lainnya  dengan  metode  yang  sama.  Setiap  perlakuan  dosis  diberi penanda.  Setiap  perlakuan  dosis  dilakukan  pengulangan  sebanyak  tiga  kali. Selanjutnya  diinkubasi  selama  24  jam  pada  suhu  37 o C.  Setelah  diinkubasi dilakukan pengukuran diameter zona hambat.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  pengamatan  terhadap  zona  bening  dapat  dilihat  pada  (Gambar 1.)Berdasarkan zona bening yang diperoleh pada uji daya hambat ekstrak bawang hutan bahwakonsentrasi terbesar  yang mampu menghambat pertumbuhan  bakteri V. Harveyi pada konsentrasi 40 mg/ml sebesar 1.3 cm.
Gambar  1.  Uji  daya  hambat  ekstrak  bawang  hutan  terhadap V.  Harveyi dengan perlakuan : A (5 mg/mL), B (10 mg/mL), C (20 mg/mL), D (40 mg/mL), K+ (Kontrol positif dengan Chloramphenicol 30 mg/mL dan 5 mg/mL), K- (kontrol negatif dengan akuades).
Jurnal Akuakultur Sungai dan Danau Vol. 4 No. 1 Tahun 2019  Hal. 15 – 20
ISSN Print 2503-4766 ISSN Online 2597-8837
Gambar  8.  Diameter  zona  hambat  ekstrak  bawang  hutan  terhadap V. harveyi dengan  perlakuan  :  A  (5  mg/mL),  B  (10  mg/mL),  C  (20 mg/mL),  D  (40  mg/mL),  K+  (Kontrol  positif  dengan  menggunakan Chloramphenicol 30 mg/mL), K- (kontrol negatif dengan akuades).
Ujidaya  hambat  ekstrak  bawang  hutan  bertujuan  untuk  mengetahui  dosis ekstrak  bawang  hutan  yang  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri V.  harveyi. Pemberian  ekstrak  bawang  hutan  terlihat  memiliki  efek  anti  bakteri  terhadap bakteri V. harveyi yang ditandai dengan terbentuknya zona bening. Zona hambat yang terbentuk berhubungan dengan senyawa – senyawa  yang terkandung dalam ekstrak  ekstrak  bawang  hutan  yang  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri. Menurut  hasil  penelitian  Firdaus,  (2014);  Puspa  dewi dkk .,  (2013),  dari  hasil  uji fito  kimia  diketahui  bahwa  kandungan  kimia  dari  ekstrak  bawang  hutan  adalah alkaloid, flavonoid, saponin, tannin, glikosid, tripenoid, Diduga bahwa kandungan kimia  dari  ekstrak  bawang  hutan  inilah  yang  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri.    Senyawa  –  senyawa  tersebut  memiliki  sifat  anti  bakteri  dengan mekanisme yang berbeda – beda.
Menurut  hasil  penelitian  dari  Nuria dkk .  (2009),  flavonoid  dapat membentuk senyawa kompleks dengan protein ekstra seluler dan terlarut sehingga mampu  merusak  membran  sel  bakteri  yang  diikuti  dengan  keluarnya  senyawa intraseluler.
Senyawa  terpenoid  juga  aktif  melawan  bakteri,  tetapi  mekanisme  anti bacterial  triterpenoid  masih  belum  diketahui.  Aktifitas  anti  bakteri  dari  senyawa terpenoid diduga melibatkan pemecahan  membrane  oleh  komponen  – komponen lipofilik  (Bobbarala,  2012).  Mekanisme  kerja  saponin  sebagai  anti  bakteri  yaitu menurunkan tegangan permukaan sehingga mengakibatkan naiknya permeabilitas atau kebocoran sel dan mengakibatkan senyawa intraseluler akan keluar (Nuria et al .  2009).  Zat  yang  dapat  menghambat  atau  membunuh  bakteri  berupa  garam  – garam  logam,  fenol  atau  senyawa  lain  yang  sejenis,  formaldehida,  alcohol, yodium, kalor ataupersenyawaan, zat warna, detergen, sulfonamide, danantibiotik (Dwidjoseputro,1978).  Saponin mempunyai kerja merusak membran plasma dari bakteri  (Hopkins  1999).  Menurut  Robinson,  1995,  mekanisme  kerja  saponin
Jurnal Akuakultur Sungai dan Danau Vol. 4 No. 1 Tahun 2019  Hal. 15 – 20
ISSN Print 2503-4766 ISSN Online 2597-8837
sebagai  anti  bakteri  adalah  menurunkan  tegangan  permukaan  sehingga mengakibatkan  naiknya  permiabilitas  atau  kebocoran  sel  dan  mengakibatkan senyawa  intraseluler  akan  keluar. Hasil  penelitian Rosyidah et  al. 2010. Menyatakan  bahwa  ekstrak  saponin  dari  kulit  batang  tumbuhan  kasturi ( Mangiferacasturi )  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri S.  Aureus dan E. Coli.
Tanin  memiliki  aktivitas  anti  bakteri  yang  berhubungan  dengan kemampuannya untuk menginaktifkan adhesion sel mikroba juga menginaktifkan enzim  dan  menggangu  transpor  protein  pada  lapisan  dalam  sel  (Cowan  1999). Selanjutnya menurut Robinson, 1995, mekanisme kerja tannin sebagai anti bakteri adalah  menghambat  enzim reverse transcriptase  dan  DNA  topoisomerase sehingga  sel  bakteri  tidak  dapat  terbentuk.    Hasil  penelitian  Safratilofa  (2016), menyatakan  bahwa  ekstrak  daun  kayu  manis  mengandung  golongan  senyawa flavonoid,  saponin  dan  tanin  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri A.hydrophila .
Perbedaan  konsentrasi  ekstrak  bawang  hutan  dalam  menghambat pertumbuhan  bakteri A.  hydrophila dipengaruhi  oleh  beberapa  hal  diantaranya adalah  konsentrasi  ekstrak  yang  digunakan  yang  dapat  mempengaruhi kemampuan  dari  bakteri  dalam  melakukan  aktifitas  melawan  zat  atau  senyawa yang  terkandung  didalam  ekstrak.  Menurut  Khunaifi  (2010),  salah  satu  faktor yang dapat mempengaruhi diameter zona hambat dan pola resistensi oleh bakteri adalah  dengan  cara  menurunkan  permiabel  dinding  sel  bakteri  sehingga antibakteri sulit masuk ke dalam sel, selain itu juga membentuk jalan pintas untuk menghindari  tahap  yang  dihambat  oleh  antibakteri  dan  meningkatkan  produk enzim yang dihambat oleh antibakteri.

## KESIMPULAN
Ekstrak  bawang  hutan  mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri V. harveyi. Berdasarkan  zona  bening  yang  diperoleh  pada  uji  daya  hambat  ekstrak bawang hutan bahwakonsentrasi terbesar yang mampu menghambat pertumbuhan bakteri V.  Harveyi sebesar  1.3  cm  pada  konsentrasi  40  mg/ml.  Semakin  tinggi konsentrasi daya hambat yang dihasilkan semakin besar.

## DAFTAR PUSTAKA
Amanda  FR.  2014.  Efektivitas  Ekstrak  Bawang  Dayak  ( Eleutherine  palmifolia ) dalam  Menghambat  Pertumbuhan  Bakteri Escherichia  coli. Skripsi. Program  Studi  Pendidikan  Dokter,  Fakultas  Kedokteran  dan  Ilmu Kesehatan, Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah. Jakarta.
Bobbarala, V. 2012. Antimicrobial Agents . Intech, Croatia.
CowanMM.1999. Plantproductsasantimicrobialagents. ClinicalMicrobiollogy Review .12: 564–582.
Firdaus,  T.  2014.  Efektivitas  Ekstrak  Bawang  Dayak  ( Eleutherine  palmifolia ) dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus. Skripsi. Program  Studi  Pendidikan  Dokter,  Fakultas  Kedokteran  dan  Ilmu Kesehatan, Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah. Jakarta.
Hopkins WG.  1999. Introduction to Plant Physiology . Toronto: John Wiley and Sons, Inc.
Jurnal Akuakultur Sungai dan Danau Vol. 4 No. 1 Tahun 2019  Hal. 15 – 20
ISSN Print 2503-4766 ISSN Online 2597-8837
Ifesan  BOT,  Hamstain  C,  Mahabusarakam  W,  Voravuthikunchhai.  2009.
Inhibitory  Effect  of Eleutherine  americana Merr.  Extract  on Staphylococcus  aureus Isolated  from  Food.  Journal  of  Food  Science. 74(1):31-36.
Kamillah  SN.  2014.  Efektivitas  Ekstrak  Umbi  Bawang  Sabrang  ( Eleutherine palmifolia (L.)  Merr.)  terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Streptococcus pyogenes. Skripsi. Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran dan  Ilmu  Kesehatan,  Universitas  Islam  Negeri  Syarif  Hidayatullah. Jakarta.
Naafi’ah  FA,  2014.  Efektivitas  Ekstrak  Umbi  Bawang  Dayak  ( Eleutherine palmifolia (L.)  Merr.)  dalam  Menghambat  Pertumbuhan  Bakteri Streptococcus  pyogenes. Skripsi.  Program  Studi  Pendidikan  Dokter, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah. Jakarta.
Nuria MC, Faizatun A, Sumantri. 2009. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L)  terhadap  Bakteri Staphylococcus aureus ATCC  25923,  Escherichia  coli  ATCC  25922,    dan Salmonella typhi ATCC 1408. Mediagro. 5(2):26-37.
Puspadewi  R,  Putranti  A.,  Rizka  M.  2013.  Umbi  Bawang  Dayak  ( Eleutherine palmifolia (L.)  Merr.)  Sebagai  Herbal  Antimikroba  Kulit.  Kartika  Jurnal Imiah Farmasi. 1(1):31-37.
RobinsonT.  1995. KandunganOrganikTumbuhanTinggi .  Edisi  ke-6.Terjemahan: K. Padmawinata. ITB-Press, Bandung.
Safratilofa.  2016.  Uji  Daya  Hambat  Ekstrak  Daun  Kayu  Manis  ( Cinnamomum burmanni )  Terhadap  Bakteri Aeromonas  hydrophila .  Jurnal  Ilmiah Universitas  Batanghari Jambi. 16 : 98-103