Potensi Bakteri Agens Hayati untuk Menekan infeksi Cucumber mosaic virus (CMV) pada Melon (Cucumis melo L.)
(The Potential of Bacterial Biological Agents to Suppress Cucumber mosaic virus (CMV ) Infection on Melon (Cucumis melo L.))
Iis Purnamawati 1 , Tri Asmira Damayanti 1 , dan Giyanto 1*
1 Departemen Proteksi Tanaman, Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor Jl. Kamper, Kampus IPB Dramaga, Bogor 16680 Telepon/Faks: 0251-8629364/0251-8629362 *Email korespondensi: giyanto@apps.ipb.ac.id
Diterima 11 Agustus  2019 / Disetujui 03 September 2019

## ABSTRACT
Cucumber mosaic virus (CMV) is an important pathogen of Cucurbitaceae, including melons. Virus management in the field is difficult to do. One of effort way to reduce viral infections is through improve plant health by using bacterial biological agents.  This  research  was  done  to  test  the  potential  of  bacterial  isolates  of  Bacillus  cereus  (BC),  Chromobacterium haemolyticum  (CH),  Ralstonia  pickettii  (RP),  and  Pseudomonas  flourescen  (PF)  in  suppressing  CMV  infections  on  melon plants. Bacteria effect testing through the performance of  seedling was done by soaking the seeds in the bacterial suspension dan  growing  on  test  in  laboratory.  While  efficacy  of  bacteria  in  suppressing  CMV  infection  was  conducted  by  soaking  the seeds and spraying the plant with bacterial suspension in a greenhouse trial. Observations were measured on the disease and agronomic parameter, and peroxidase enzyme activity. The result showed that  the treatment of BC bacteria showed the best germination  performance  among  other  bacteria  treatment.  Bacterial  treatment  did  not  affect  the  incubation  period  and  the incidence  of  the  disease,  but  it  significantly  decreases  the  severity  of  the  disease  and  viral  accumulation  in  compared  with control.  Peroxidase  enzyme  activity  was  higher  after  bacterial  treatment  and  CMV  inoculation  in  compared  to  treatment before inoculation. RP bacteria are the best bacteria in suppressing CMV infection through antiviral activity and induction of plant defense by increased peroxidase activity.

## Keywords: biological control, cucurbitaceae, ISR, mosaic, peroxidase

## ABSTRAK
Cucumber  mosaic  virus  (CMV)  merupakan  patogen  penting  pada  Cucurbitaceae,  diantaranya  melon.  Pengelolaan virus  di  lapangan  cukup  sulit  dilakukan.  Salah  satu  upaya  untuk  menekan  infeksi  virus  yaitu  melalui  penyehatan  tanaman menggunakan  bakteri  agens  hayati.  Penelitian  ini  bertujuan  menguji  potensi  isolat  bakteri  Bacillus  cereus  (BC), Chromobacterium  haemolyticum  (CH),  Ralstonia  pickettii  (RP),  dan  Pseudomonas  flourescens  (PF)  dalam  menekan  infeksi CMV  pada  tanaman  melon.  Pengujian  pengaruh  bakteri  terhadap  performa  kecambah  dilakukan  melalui  perlakuan perendaman  benih  dalam  suspense  bakteri  di  laboratorium.    Efikasi  bakteri  dalam  menekan  infeksi  CMV  dilakukan  dengan cara perendaman benih dan penyemprotan  tanaman dengan suspense bakteri dalam percobaan di rumah kaca.  Pengamatan dilakukan terhadap peubah penyakit dan agronomi, dan aktivitas enzim peroksidase. Hasil penelitian menunjukkan perlakuan bakteri  BC  menunjukkan  performa  kecambah  terbaik  di  antara  perlakuan  bakteri  lainnya.  Perlakuan  bakteri  tidak berpengaruh  terhadap  masa  inkubasi  dan  insidensi  penyakit,  namun  secara  nyata  menurunkan  keparahan  penyakit  dan akumulasi virus dibandingkan kontrol. Aktivitas enzim peroksidase lebih tinggi setelah perlakuan bakteri dan inokulasi CMV dibandingkan  perlakuan  sebelum  inokulasi.  Bakteri  RP  merupakan  bakteri  terbaik  dalam  menekan  infeksi  CMV  melalui aktivitas antivirus dan induksi ketahanan dengan peningkatan aktivitas peroksidase.
Kata kunci: biokontrol, cucurbitaceae, ISR, mosaik, peroksidase

## PENDAHULUAN
Melon  merupakan  salah  satu  buah-buahan  yang banyak  dikonsumsi  oleh  masyarakat  Indonesia  karena rasanya  yang  enak,  aroma  yang  harum,  dan  mengandung
nutrisi  penting  bagi  tubuh  manusia  (Daryono et  al. 2016). Produksi  melon  pada  tahun  2015  hingga  2017  terus mengalami  penurunan  yaitu  dari  jumlah  produksi  137  887 menjadi 92 434 ton (BPS 2019). Penurunan produksi melon dapat  disebabkan  oleh  berbagai  hal  di  antaranya  penurunan
luas  lahan produksi,  kualitas  benih dan  serangan  hama  juga patogen  tanaman  termasuk  di  dalamnya  bakteri,  cendawan, dan virus (Bezirganoglu 2018) .
Salah  satu  virus  penting  pada  melon  adalah Cucumber  mosaic  virus  (CMV)  (Bezirganoglu  2018). Infeksi  CMV  pada  melon  di  Spanyol  dilaporkan  telah menyebabkan  kehilangan  total  produksi  mencapai  60% (Alonso-Prados et  al. 1997).  Infeksi  CMV  pada  melon  di Indonesia  di  antaranya  telah  terjadi  di  wilayah  Kabupaten Karanganyar  dengan  persentase  kejadian  penyakit  0.6%- 64% (Supyani et al. 2017). CMV merupakan salah satu dari tiga  virus  utama  yang  ditemukan  menginfeksi  mentimun  di kabupaten  Bogor,  Subang,  dan  Karawang  (Laili  dan Damayanti  2019)  dan  pertanaman  mentimun  di  Jawa (Listihani 2018).
CMV  menyebabkan  banyak  kerugian  hasil  produksi tanaman karena kisaran inangnya yang luas serta keragaman karakter  biologi  dan  molekulernya  yang  sangat  banyak (Jacquemond  2012).  Upaya  pengelolaan  virus  tanaman secara  umum  yaitu  seleksi  benih,  sanitasi  lahan,  penataan tanaman  berkala,  rotasi  tanaman,  dan  penanaman  tanaman pembatas (Reddy 2010).
Upaya  lain  pengelolaan  CMV  adalah  menggunakan mikroba  agens  hayati.  Beberapa  isolat Streptomyces diketahui  berpotensi  menekan  infeksi  CMV  sebesar  70.2- 82.6%  (El  Dougdoug  2012).  Sementara  itu, Pseudomonas putida Pf-20  mampu  menekan  keparahan  penyakit  mosaik oleh  CMV  pada  mentimun  sebesar  11.58% (Wahyuni et  al. 2006).  Bakteri  agens  hayati  banyak  dimanfaatkan  dalam upaya pengelolaan virus patogen tanaman karena berpotensi mengontrol perkembangan penyakit tanaman, meningkatkan toleransi  tanaman  terhadap  stres,  memfasilitasi  dan menginisiasi serapan unsur hara tanaman, serta meningkatkan hasil produksi (Hokeberg 2018).
Isolat  bakteri  GG6- Bacillus  cereus (BC),  NB9- Chromobacterium  haemolyticum (CH),  TT47- Ralstonia picketii (RP),  dan  P12- Pseudomonas  fluorescens (PF) dilaporkan  efektif  menekan  infeksi  bakteri  dan  cendawan patogen.  BC  dilaporkan  mampu  menghambat  infeksi Dickeya dadantii pada daun anggrek sebesar 55.2% (Khoiri et al. 2017). CH memiliki indeks kitinolitik (IK) yang tinggi dan dilaporkan mampu menghambat pertumbuhan Pyricularia  oryzae serta Sclerotium  rolfsii (Fitriani  2016). RP  mampu  menekan  penyakit  hawar  pelepah  padi  yang disebabkan  oleh Rizoctonia  solani hingga  79.7%  (Rustam 2012).  Mekanisme  umum  agens  hayati  dalam  menekan patogen tanaman meliputi antibiosis, kompetisi, mikoparasitisme,  enzim  pendegradasi  dinding  sel,  dan induksi ketahanan tanaman (Ahanger et al. 2014)
Potensi  isolat  bakteri  tersebut  di  atas  perlu  diperluas kemampuannya  dalam  menekan  patogen  lainnya  seperti virus.  Oleh  karena  itu,  penelitian  ini  bertujuan  menguji potensi  empat  isolat  bakteri  untuk  menekan  infeksi  CMV pada tanaman melon.

## BAHAN DAN METODE
Pengaruh Aplikasi Bakteri Agens Hayati terhadap Vigor Benih dan Pertumbuhan Melon
Isolat  bakteri  yang  diuji  adalah  milik  laboratorium Bakteriologi  Tumbuhan  IPB,  yaitu  isolat  BC,  CH,  RP,  dan PF. BC dan CH diperbanyak pada media NB ( nutrient broth ), sedangkan RP pada TSB ( Tryptic soya broth ), dan PF pada KB  (King’s  B)  cair  (Schaad et  al. 2001).  Benih  melon disterilisasi  permukaan  menggunakan  larutan  NaOCl  1% dan  air  steril  (Schaad et  al. 2001),  kemudian  direndam selama 5-6 jam dalam suspensi bakteri dengan kerapatan sel 10 7 -10 9 cfu/mL.  Kontrol  hanya  diberi  perlakuan  direndam dalam air steril.
Peubah  yang  diamati  meliputi  daya  berkecambah, indeks  vigor,  tinggi  kecambah,  panjang  akar,  bobot  basah, dan  bobot  kering  saat  hari  kedelapan  setelah  semai.  Bobot kering  ditimbang  ketika  kecambah  sudah  dikeringkan selama  3x24  jam  pada  suhu  60 o C  (Prawira  1999). Rancangan  percobaan  yang  digunakan  adalah  rancangan acak lengkap (RAL) terdiri atas lima perlakuan (K; BC; CH; RP;  PF)  dan  empat  ulangan,  masing-masing  ulangan  terdiri dari sepuluh benih.

## Efikasi  Bakteri  Agens  Hayati  dalam  Menekan  infeksi Cucumber mosaic virus
Penyiapan  Inokulum  CMV. Inokulum CMV diperoleh  dari  koleksi  Laboratorium  Virologi  Tumbuhan asal melon dan diperbanyak melalui inokulasi mekanis pada tanaman  dengan  metode  seperti  yang  dilakukan  oleh Winarsih (2015).
Penyiapan  media  tanam  dan  benih  melon. Media tanam  terdiri  atas  tanah  steril  dan  pupuk  kandang  (2:1) disiapkan  pada polybag (d:  35  cm).  Benih  melon  yang ditanam  adalah  jenis rockmelon varietas  Gracia  F1.  Setiap polybag ditanami  2-3  benih  melon.  Tanaman  dengan pertumbuhan  terbaik  dipilih  sebagai  tanaman  utama  yang akan diamati.
Perlakuan. Benih melon disterilisasi permukaan dan diberi  perlakuan  bakteri  seperti  telah  dijelaskan  di  atas, kemudian  benih  ditanam  dalam polybag. Tiga  hari  sebelum penularan  CMV,  seluruh  bagian  tanaman  uji  disemprot dengan  suspensi  bakteri,  Bakteri  juga  disemprotkan  pada saat  tanaman  berumur  empat  minggu  setelah  tanam  (MST). Tanaman  kontrol  tanpa  bakteri,  diinokulasi  CMV  (K). Tanaman  kontrol  sehat  tidak  diberi  perlakuan  apapun. Percobaan dilakukan di rumah kaca Cikabayan, Kampus IPB Dramaga, Bogor.
Peubah Pengamatan. Peubah yang diamati meliputi peubah  penyakit  yaitu  masa  inkubasi,  insidensi  penyakit, keparahan penyakit, tipe gejala, akumulasi virus pada empat minggu  setelah  inokulasi  (MSI),  dan  aktivitas  enzim peroksidase  yang  dianalisis  sebanyak  dua  kali  yaitu  saat sebelum dan setelah inokulasi CMV.
Masa  inkubasi  dihitung  sejak  dilakukan  inokulasi mekanis  hingga  waktu  pertama  kali  munculnya  gejala. Insidensi  penyakit  (IP)  dihitung  menggunakan  rumus  yang digunakan Townsend dan Heuberger (1943) sebagai berikut: IP = [Jumlah tanaman sakit / Jumlah tanaman yang diamati] x 100%
Penilaian  keparahan  gejala  penyakit  dilakukan mengikuti  skor  keparahan  penyakit  oleh  Ntui et  al. (2014),
yaitu  skor  0  -tidak  bergejala-,  skor  1-  <25%  dari  luas  daun mosaik  ringan,  skor  2-  26%-50%  dari  luas  daun  -mosaik kuning  dan  malformasi,  skor  3-  50%-75%  dari  luas  daun mosaik berat, dan skor 4 - ˃76% mosaik sangat berat. Hasil penilaian menggunakan skor tersebut selanjutnya diterapkan pada  formula  berikut  untuk  mendapatkan  nilai  keparahan penyakit secara keseluruhan pada setiap perlakuan:

## x 100%
Keterangan:  KP  =  Keparahan  penyakit  (%);  n  =  Jumlah tanaman  bergejala  skor  ke-v;  v  =  Skor  gejala;  N  =  Jumlah tanaman yang diamati; V = Skor tertinggi.
Pengamatan  tipe  gejala  yang  muncul  dilakukan setelah  perlakuan. Titer  virus  dianalisis  melalui  uji  serologi ELISA  ( Enzyme  Linked  Immunosorbent  Assay )  sesuai dengan  metode  yang  digunakan  Winarsih  (2015)  dan produsen  antiserum  (DSMZ,  Jerman).  Setelah  reaksi pewarnaan  dengan  PNP  (p-nitrophenyl  phosphate),  hasil ELISA  dikuantifikasi  menggunakan  ELISA reader pada panjang  gelombang  405  nm . Tingkat  hambatan  relatif  titer virus dihitung menggunakan rumus sebagai berikut:
Analisis  aktivitas  enzim  peroksidase  dilakukan  di Laboratorium  Pusat  Antar  Universitas  (PAU)  IPB  dengan metode  yang  digunakan  oleh  Kar  dan  Mishra  (1976). Analisis  dilakukan  sebanyak  dua  kali  yaitu  saat  sehari sebelum  dan  tiga  hari  setelah  inokulasi  CMV.  Daun  yang dianalisis merupakan sampel komposit dari seluruh tanaman pada setiap perlakuan.
Adapun  peubah  agronomi  yang  diamati  meliputi tinggi  tanaman,  jumlah  daun,  lebar  daun  ketiga,  waktu berbunga,  jumlah  tanaman  berbunga,  jumlah  bunga,  dan jumlah buah.
Percobaan dirancang dengan rancangan acak kelompok  (RAK)  yang  terdiri  dari  lima  perlakuan  (empat perlakuan  bakteri,  satu  kontrol  tanpa  bakteri)  dan  tiga ulangan.  Tiap  ulangan  terdiri  dari  sepuluh  tanaman.  Data yang diperoleh dari seluruh kegiatan pengamatan ditabulasikan  dalam  perangkat  lunak  MS  Excel  2016  dan dianalisis  sidik  ragam  ( analysis  of  variance -ANOVA) menggunakan  program  SPSS  Statistics  25.  Uji  lanjut  beda nyata  menggunakan  uji  lanjut  Tukey  dengan  taraf kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Vigor enih dan Pertumbuhan Kecambah Melon
Berdasarkan  hasil  pengujian  menunjukkan  bahwa bakteri  BC  cenderung  memiliki  pengaruh  yang  baik terhadap  vigor  dan  performa  kecambah  melon.  Perlakuan bakteri  BC  nyata  meningkatkan  daya  berkecambah  jika dibandingkan  dengan  kontrol.  Semantara  itu,  perlakuan bakteri  RP  dan  PF  berpengaruh  sebaliknya,  menurunkan
daya  berkecambah  jika  dibandingkan  dengan  kontrol. Perlakuan  bakteri  CH  tidak  berpengaruh  terhadap  daya berkecambah  jika  dibandingkan  dengan  kontrol  (Tabel  1). Bacillus merupakan  salah  satu  bakteri  yang  memproduksi hormon  auksin  (Ahmad et  al. 2006).  Pengaruh  auksin terhadap  pertumbuhan  awal  tanaman  adalah  merangsang perkecambahan biji dan umbi (Spaepen et al. 2006).
Indeks vigor benih melon pada perlakuan bakteri RP dan PF nyata lebih rendah dibandingkan dengan control dan tidak  berbeda  nyata  dengan  kontrol  pada  perlakuan  BC  dan CH.  Pengaruh  perlakuan  keempat  bakteri  tidak  berbeda nyata  dengan  kontrol  pada  peubah  pengamatan  tinggi kecambah,  panjang  akar,  dan  bobot  basah  kecambah. Sementara  itu,  bobot  kering  kecambah  nyata  lebih  rendah dari  kontrol  pada  perlakuan  bakteri  BC.  Sedangkan  pada perlakuan CH, RP, dan PF, bobot kering tidak berbeda nyata dengan kontrol (Tabel 1).
Berdasarkan  hasil  di  atas,  perlakuan  BC  lebih  baik dalam  meningkatkan  vigor  benih  melon  dibandingkan dengan  ketiga  bakteri  lainnya  yang  diujikan.  Aplikasi B. cereus UW85  dilaporkan  secara  signifikan  meningkatkan hasil  dari  kedelai  kultivar  resisten  atau  toleran  di  lapangan (Osburn et  al. 1995). B.  cereus juga  dilaporkan  berpotensi dalam  memicu  pertumbuhan  dan inducing  systemic resistance (ISR)  tanaman  cabai  ( Capsicum  annuum L.  var. TM  999)  terhadap  infeksi Tobacco  mosaic  tobamovirus (TMV) (Damayanti et al. 2007), dan TMV serta Chili veinal mottle  virus (ChiVMV)  (Damayanti  dan  Katerina  2008). Selain  itu,  banyak  spesies Bacillus lainnya  diketahui berperan  sebagai  endofit  atau  agens  hayati  bagi  patogen tanaman  (Schaad et  al. 2001).  Aktivitas  antagonis Bacillus terhadap  patogen  tanaman  melalui  produksi  siderofor, sekresi  enzim,  produksi  antibiotik,  dan  ISR  (Aboutorabi 2018).

## Pengaruh  bakteri  agens  hayati  terhadap  infeksi  CMV pada melon
Keempat  perlakuan  bakteri  agens  hayati  tidak berpengaruh  nyata  terhadap  masa  inkubasi  dan  insidensi penyakit  dibandingkan  dengan  kontrol.  Namun,  perlakuan bakteri  BC,  CH,  RP,  dan  PF  nyata  dapat  menurunkan persentase keparahan penyakit dibandingkan dengan kontrol (Tabel  2). P.  flourescens dilaporkan  mampu  menginduksi ketahanan  sistemik  tanaman  melon  terhadap  CMV  dan menghambat multiplikasi CMV hingga 86.55% (Al-Ani dan Adhab 2012).
Nilai  absorbansi  ELISA  (NAE)  hasil  ELISA  pada perlakuan CH, RP, dan PF nyata lebih rendah dibandingkan dengan  kontrol.  Sedangkan  nilai  NAE  pada  perlakuan  BC tidak  berbeda  nyata  dengan  kontrol.  Hasil  ELISA  pada semua  perlakuan  bakteri  menunjukkan  positif  pada  semua perlakuan  (Tabel  2).  Kemampuan  bakteri  yang  diuji menunjukkan  mampu  menekan  titer  virus  berkisar  19.19- 31.95%.  Namun,  baik  tanaman  kontrol  maupun  perlakuan bakteri  menunjukkan  NAE  relatif  rendah  dan  tidak berkorelasi dengan keparahan penyakit yang cukup tinggi.
Tabel 1.  Pengaruh aplikasi bakteri agens hayati terhadap perkecambahan benih melon
Perlakuan a Daya berkecambah b (%) Indeks vigor b (%) Tinggi kecambah b (cm) Panjang akar b (cm) Bobot basah b (gram) Bobot kering b (gram) K 92.50±2.04b 95.00±4.08ab 7.00±0.222ab 4.80±0.184ab 1.293±0.313ab 0.030±0.001ab BC 98.33±2.36a 96.67±4.71a 7.46±0.155a 5.16±0.340a 1.650±0.135a 0.021±0.007c CH 90.00±0.00b 90.00±0.00b 6.11±0.142b 4.71±0.292ab 0.983±0.180b 0.030±0.001ab RP 82.50±2.04c 80.00±0.00c 6.31±0.766b 4.87±0.214ab 0.963±0.119b 0.022±0.003bc PF 85.00±0.00c 80.00±0.00c 6.30±0.416b 4.26±0.406b 1.257±0.189ab 0.036±0.003a
a) K= Kontrol (tanpa bakteri), BC= B. cereus , CH= C.haemolyticum , RP= R. pickettii , PF= P. flourescens ;
b) Angka pada lajur yang sama yang diikuti dengan huruf yang sama tidak berbeda nyata berdasarkan uji Tukey pada taraf nyata 5%.
Tabel 2.  Pengaruh aplikasi bakteri agens hayati terhadap penyakit mosaik oleh CMV pada tanaman melon Perlakuan a Masa inkubasi b (hari) Insidensi penyakit (%) Keparahan penyakit b (%) NAE b THR (%) c K 6.9±0.10a 100 60.0±2.50a 0.482±0.068a BC 9.9±3.45a 100 47.4±0.15bc 0.390±0.024ab 19.19 CH 7.2±0.10a 100 51.4±1.40b 0.328±0.025b 31.95 RP 7.6±1.00a 100 41.3±1.25d 0.335±0.001b 30.60 PF 7.4±0.35a 100 42.5±2.50cd 0.345±0.005b 28.48 a) K= Kontrol (tanpa bakteri), BC= B. cereus , CH= C.haemolyticum , RP= R. pickettii , PF= P. flourescens ;
b) Angka  pada  lajur  yang  sama  yang  diikuti  dengan  huruf  yang  sama  tidak  berbeda  nyata  berdasarkan  uji  Tukey  pada  taraf  nyata  5%.  Uji dinyatakan positif jika NAE sampel ≥ 0.310. c THR. Tingkat hambatan relative
Tabel 3. Pengaruh aplikasi bakteri agens hayati terhadap pertumbuhan dan perkembangan tanaman melon
Perlakuan a Tinggi tanaman b (cm) Jumlah daun b (helai) Lebar daun b (cm) Waktu berbunga b (hari) ∑ tanaman berbunga b (tanaman) ∑ bunga b (tangkai) K 116.84±5.27ab 16.30±0.80b  10.32±0.46a  34.42±0.09ab  10.00±0.00a 14.95±1.05ab BC 126.15±2.54a 19.61±0.51a    9.20±0.78a  34.68±0.99ab    9.50±0.50a 18.91±0.69ab CH 100.79±2.46c 19.32±1.12a    9.53±0.48a  35.16±0.05a 10.00±0.00a 20.15±2.85a RP 116.02±8.26abc  17.75±1.15ab    9.36±0.20a  32.97±0.47b 9.50±0.50a 17.45±4.05ab PF 108.06±7.06bc 19.65±1.15a    9.45±0.28a  33.50±1.00ab  10.00±0.00a 14.50±0.40b
a K= Kontrol (tanpa bakteri); BC= B. cereus ; CH= C.haemolyticum ; RP= R. pickettii ; PF= P. flourescens ; b Angka pada lajur yang sama yang diikuti dengan huruf yang sama tidak berbeda nyata berdasarkan uji Tukey pada taraf nyata 5%.
Gambar 1. Gejala infeksi CMV pada tanaman melon. (a) Mosaik, (b) Rugos, (c) Penebalan tulang daun, (d) Pemucatan tulang daun, (e) Malformasi daun, (f) Kerdil.
a b c d e f
Gambar  2.    Aktivitas  enzim  peroksidase  tanaman  melon  sebelum  (a),  setelah  (b)    inokulasi  CMV  dan  total  aktivitas  enzim peroksidase (c).
Ada  kemungkinan  terjadi  infeksi  ganda  di  rumah kaca  yang  ditularkan  kutu  daun  dari  sekitar  rumah  kaca. Selama  penelitian,  populasi  kutu  daun  cukup  tinggi. Interaksi  dua  virus  dapat  menyebabkan  gejala  lebih  parah dibandingkan infeksi tunggal virus. Hal ini telah dilaporkan terjadi antara African cassava mosaic virus (ACMV) dengan East African cassava mosaic virus (EACMV) pada tanaman singkong  di  Ghana  (Oteng-frimpong et  al. 2012;  Mascia et al. 2010).  Interaksi  dua  virus  juga  dapat  menyebabkan konsentrasi  salah  satu  virus  menurun.  Infeksi  CMV  dengan potyvirus menyebabkan infeksi yang sinergi terhadap gejala
dan konsentrasi virus. Namun, jika infeksi potyvirus dengan CMV  yang  mengandung  satelit  RNA,  akan  menyebabkan konsentrasi CMV menurun (Wang et al. 2002).
Hasil  penelitian  ini  selaras  dengan  laporan  Erlika (2016)  bahwa  CMV  strain Soybean yang  diberi  perlakuan filtrat bakteri menunjukkan kemampuan menekan akumulasi CMV-S pada kedelai. Filtrat bakteri dilaporkan berpengaruh terhadap penyebaran dan replikasi virus (Thapa et al. 2009). Gejala  infeksi  CMV  pada  tanaman  melon  yang diamati  bervariasi.  Gejala  mosaik  merupakan  gejala  yang dominan  dan  muncul  pada  semua  perlakuan.  Gejala  lain
yang  ditemukan  yaitu  rugos,  penebalan  tulang  daun, pemucatan  tulang  daun,  malformasi  daun,  dan  kerdil (Gambar 1). Perubahan bentuk daun dan pengerdilan ukuran tanaman merupakan gejala lanjutan dari infeksi CMV (Zitter dan Murphy 2009).

## Aktivitas enzim peroksidase tanaman
Aktivitas  peroksidase  lebih  tinggi  setelah  inokulasi CMV.  Peningkatan  aktivitas  enzim  peroksidase  juga  lebih tinggi  pada  tanaman  yang  diberi  perlakuan  bakteri, dibandingkan  dengan  kontrol  (Gambar  2a  dan  2b). Peningkatan  aktivitas  PO  tertinggi  ditunjukkan  oleh perlakuan  RP,  sedangkan  paling  rendah  pada  perlakuan kontrol  (Gambar  2c).  Menurut  Prasannath  (2017)  aktivitas enzim peroksidase diinduksi di dalam jaringan tanaman oleh adanya infeksi patogen. Aktivitas peroksidase pada tanaman bunga  matahari  genotipe  resisten  lebih  tinggi  dibandingkan dengan  tanaman  bunga  matahari  genotipe  rentan.  Hal tersebut  memberikan  bukti  yang  kuat  bahwa  peroksidase merupakan enzim penting dalam sistem pertahanan tanaman bunga  matahari  terhadap  infeksi Alternaria  helianthin (Anjana et  al. 2008). Beberapa  proses  yang  terlibat  dalam induksi  ketahanan  tanaman  yang  dipicu  oleh  peroksidase adalah  reaksi  hipersensitif,  lignifikasi,  sintesis  fenol, glikoprotein, suberisasi, dan produksi fitoaleksin (Wojtaszek 1997).

## Pengaruh  perlakuan  bakteri  agens  hayati  terhadap pertumbuhan dan perkembangan tanaman melon
Perlakuan  bakteri  pada  tanaman  yang  diinokulasi CMV  tidak  nyata  berpengaruh  terhadap  tinggi  tanaman, lebar  daun,  waktu  berbunga,  jumlah  bunga  dan  buah dibandingkan  kontrol.  Namun,  perlakuan  bakteri  agens hayati  nyata  meningkatkan  jumlah  daun  dibandingkan kontrol kecuali perlakuan RP (Tabel 3).
Pseudomonas merupakan bakteri selain Bacillus yang berpotensi dalam memicu pertumbuhan tanaman diantaranya karena  mampu  memproduksi  hormon  auksin  (Ahmad et  al. 2005).  Pengaruh  auksin  terhadap  pertumbuhan  vegetatif tanaman  yaitu  mempengaruhi  pembelahan  sel  tanaman, meningkatkan  laju  perkembangan  xilem  dan  akar, memediasi  respon  tanamn  terhadap  rangsangan,  dan mempengaruhi fotosintesis (Spaepen et al. 2006).

## KESIMPULAN
Perlakuan bakteri BC, CH, RP, dan PF nyata mampu menurunkan  keparahan  penyakit  dan  akumulasi  virus dibandingkan  dengan  kontrol.  Keempat  isolat  berpotensi dalam  menekan  infeksi  TMV  dengan  menginduksi ketahanan  tanaman  melon  melalui  peningkatan  aktivitas peroksidase.  Perlu dilakukan pengujian lebih lanjut aplikasi bakteri  berulang  dan  kombinasi  bakteri  agens  hayati  ini untuk  meningkatkan  efektivitasnya  dalam  menekan  infeksi CMV.
DAFTAR PUSTAKA
Aboutorabi, M. 2018. A review on the biological control of plant  diseases  using  various  microorganisms. J  Res Med Sci. 6(4):30-35.
Ahanger,  R.A.,  H.A.  Bhatand  dan  N.A.  Dar.  2014. Biocontrol  agents  and  their  mechanism  in  plant disease management. Sci Acta Xaveriana. 5(1):47-58.
Ahmad,  F.,  I.  Ahmad  dan  M.S.  Khan.  2008.  Screening  of free-living  rhizospheric  bacteria  for  their  multiple plant  growth  promoting  activities.  Microb  Res. 163:173-181.
Al-Ani,  R.A.  dan  M.A.  Adhab.  2012.  Protection  of  melon plants against Cucumber mosaic virus infection using Pseudomonas flourescens biofertilizer. Afr J Biotechnol. 11(100):16579-16585.
Alonso-Prados,  J.L.,  A.  Fraile,  F.  dan  Garcia-Arenal.  1997. Impact  of Cucumber  mosaic  virus and Watermelon mosaic  virus 2  infection  on  melon  production  in Central Spain. Plant Pathol J. 79 (2):131-134.
Anjana, G., K.R. Kini, H.S. Shetty dan H.S. Prakash. 2008. Changes  in  peroxidase  activity  in  sunflower  during infection  by  necrotrophic  pathogen Alternaria helianthi . Arc  Phytopathol  Plant  Protect. 41(8):586- 596.
Bezirganoglu, I. 2018. Botany of Cucumis melo . Hort Int J. 2(3).
[BPS]  Badan  Pusat  Statistik.  2019.  Produksi  Tanaman Buah-Buahan: Melon. https://www.bps.go.id/site/resultTab [26 Maret 2019].
Damayanti, T.A., H. Pardede dan N.R. Mubarik. Utilization of  root-coloning  bacteria  to  protect  hot-pepper against Tobacco  Mosaic  Tobamovirus . Hayati . 14(3):105-109.
Daryono,  B.S.,  S.D.  Maryanto,  S.  Nissa  dan  G.R.  Aristya. 2016.  Analisis  kandungan  vitamin  pada  melon ( Cucumis melo L.) kultivar melodi gama 1 dan melon komersial. Biogenesis. 4(1):1-9.
Damayanti,  T.A.  dan  T.  Katerina.  2008.  Protection  of  hot pepper  against  multiple  infection  of  viruses  by utilizing root colonizing bacteria. J Int Soc Southeast Asian Agric Sci. 14(1): 92-100.
Dhillon, M.K., R. Singh, J.S. Naresh dan H.C. Sharma. 2005. The melon fruit fly, Bactrocera cucurbitae : A review of its biology and management. J of Insect Sci. 5(40).
El-Dougdoug,  K.A.,  M.F.  Ghaly,  M.A.  Taha.  2012.
Biological  control  of Cucumber  mosaic virus  by Certain  Local  Sreptomyces  Isolates:  Inhibitory
Effects  of  Selected  Five  Egyptian  Isolates .  Intl  J Virol. 8(2):151-164.
Erlika, L. 2016. Pemanfaatan filtrat bakteri endofit dan plant growth  promoting  rhizobacteria untuk  menekan infeksi Cucumber  mosaic  virus strain Soybean (CMV-S) pada tanaman kedelai. Skripsi. Bogor (ID): Departemen  Proteksi  Tanaman.  Institut  Pertanian Bogor.
Fitriani,  D.  2016.  Isolasi,  seleksi,  dan  identifikasi  bakteri kitinolitik  pada  cairan  tanaman  kantong  semar ( Nepenthes spp.)  sebagai  agens  biokontrol.  Skripsi. Bogor  (ID):  Departemen  Proteksi  Tanaman.  Institut Pertanian Bogor.
Hokeberg,  M.  2018.  Bacteria  in  biological  control.  Uppsala (Sweden): Centre for Biological Control, CBC.
Jacquemond,  M.  2012. Cucumber  mosaic  virus .  Adv  Virus Res. 84: 439-504.
Kar,  M.  dan  D.  Mishra.  1976.  Catalase,  peroxidase,  and polyphenoloxidase activities during rice leaf senescence. J Plant Physiol. 57(2):315-9.
Khoiri, S. Giyanto dan T.A. Damayanti. 2017. Identification of  quorum  quenching  bacteria  and  its  biocontrol potential  against  soft  rot  disease  bacteria, Dickeya dadantii . AGRIVITA . 39(1):45-55.
Laili,  N.U.  dan  T.A.  Damayanti.  2019.  Deteksi  virus  pada tanaman  mentimun  di  Jawa  Barat.  Agrovigor. 12(1):8-15.
Listihani. 2018. Distribusi dan identifikasi virus utama pada mentimun  di  Jawa.  Tesis.  Sekolah  Pascasarjana. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Mascia, T., F. Chillo, V. Fanelli, M.M. Finetti-Sialer, A. De Stradis,  P.  Palukaitis  dan  D.  Gallitelli.  2010. Characterization of the interactions between Cucumber mosaic virus and Potato virus Y in mixed infection  in  tomato .  J  Mol Plant-Microbe Int. 23(11):1514-1524.
Ntui,  V.O.,  K.  Kong,  P.  Azadi,  R.S.  Khan,  D.P.  Chin,  T.
Igawa,  M.  Mii  dan  I.  Nakamura.  2014.  RNAi- mediated  resistance  to Cucumber  mosaic  virus (CMV) in genetically engineered tomato. Am J Plant Sci. 5:554-572.
Osburn, R.M., J.L. Milner, E.S. Oplinger, R.S.  Smith dan J. Handelsman.  1995.  Effect  of Bacillus  cereus UW85 on  the  yield  of  soybean  at  two  field  sites  in Wisconsin. Plant Dis. 79:551-556.
Oteng-Frimpong,  R., Y.  Levy, S.K. Torkpo, E.Y. Danquah, S.K.  Offei  dan  Y.  Gafni.  2012.  Complete  genome
sequencing  of  two  causative  viruses  of  cassava mosaic disease in Ghana. Acta Virol. 56(4):305-314.
Prasannath,  K.  2017.  Plant  defense-related  enzymes  against pathogens:  A  Review.  Department  of  Agricultural Biology.  Faculty  of  Agriculture,  Eastern  University Sri Lanka. Chenkalady.
Prawira, J. 1999. Studi Pematahan Dormansi dan Perlakuan Air  Kelapa  untuk  Meningkatkan  Perkecambahan Benih Gmelina  arborea. Skripsi.  Jurusan  Budidaya Pertanian,  Fakultas  Pertanian.  Institut  Pertanian Bogor. Bogor.
Reddy,  P.P.  2010.  Bacterial  Viral  Disease  and  Their Management  in  Horticultural Crops.  Scientific
Publishers, Bangalore, IN.
Rustam.  2012.  Potensi  bakteri  penghasil  senyawa  bioaktif anticendawan  untuk  pengendalian  penyakit  hawar pelepah padi. Disertasi. Sekolah Pascasarjana. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Schaad,  N.W.,  J.B.  Jones  dan  W.  Chun.  2001. Laboratory Guide for Identification of Plant Pathogenic Bacteria Third Edition . The American Phytopathology Society. Minnesota.
Spaepen, S., J. Vanderleyden dan R. Remans. 2006. Indole-3 acetic  acid  in  microbial  and  microorganism-plant signaling. FEMS Microbiol Rev. 31: 425-448.
Supyani, S.A. Chandra, F. Rochman, D.N. Septariani dan S.
Widadi.  2017.  Occurrence  and  distribution  of Cucumber mosaic virus in cucurbits in Karanganyar, Central  Java,  Indonesia.  Afr  J  Agric  Res.  12(18): 1593-1601.
Thapa,  S.P.,  H.J.  Lee,  D.H.  Park,  S.K.  Kim,  J.M.  Cho,  S. Cho, J.H.  Hur dan C.K. Lim. 2009. Antiviral effects of  the  culture  filtrate  from Serratia  marcescens Gsm01 against Cucumber mosaic virus (CMV). Plant Pathol J. 25(4):369-375.
Townsend,  G.R.  dan  J.W.  Heuberger.  1943.  Methods  for estimating  losses  caused  by  diseases  in  fungicides experiments. Plant Dis Rep. 27: 340-343.
Wahyuni,  W.S.,  H.S.  Addy,  B.  Arman  dan  T.C.  Setyowati.
2006.  Sinergisme Lumbricus  rubellus dengan Pseudomonas  putida Pf-20  dalam  Menginduksi Ketahanan  Mentimun  terhadap Cucumber  Mosaic Virus . Hayati . 13(3):95-100.
Wang,  Y.,  V.  Gaba,  J.  Yang,  P.  Palukaitis  dan  A.  Gal-On.
2002. Characterization of synergy between Cucumber mosaic  virus and potyvirus in  cucurbits  host. Phytopathology . 92(1):51-58.
Winarsih.  2015.  Respons  ketahanan  sepuluh  kultivar mentimun  ( Cucumis  sativus L.)    terhadap  infeksi
Cucumber  mosaic  viru s.  Bogor  (ID):  Departemen
Proteksi Tanaman. Institut Pertanian Bogor.
Wojtaszek,  P.  1997.  The  oxidative  burst  plants  early response against infection. Biochem J. 322: 681-692.
Zitter,  T.A.  dan  J.F.  Murphy.  2009. Cucumber  mosaic virus . The  Plant  Health  Instructor.    DOI:  10.1094.