## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## ANTIBACTERIAL ACITVITY TEST OF ETHANOL EXTRACT OF MAYANA LEAF (Coleus atropurpureus Benth) ON Streptococcus mutans AND Salmonella typhimurium

## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN MAYANA JANTAN (Coleus
atropurpureus Benth) TERHADAP BAKTERI Streptococcus mutans DAN Salmonella typhimurium
Anjely J. Makatempuge 1)* , Fatimawali 1) ,  Julianri S. Lebang 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT *anjelymakatempuge15@gmail.com

## ABSTRACT
Male mayana leaves are used by the people of North Sulawesi to treat vomiting blood and are used for diarrhea and dysentery, kidney stones, skin pain, and wounds. The study aims to test the antibacterial activity of male mayana leaves (Coleus atropurpureus Benth) extract on Streptococcus mutans and Salmonella typhimurium. The extract was obtained by maceration using 96% ethanol. The antibacterial activity test was evaluated using the well diffusion method. The results were analyzed by One Way ANOVA using a Statistical Product Services Solution Program, followed by Duncan tests. The results showed that extract concentrations 5, 10, 20, 40, and 80% had Streptococcus mutans and Salmonella typhimurium inhibitory activity. Extract concentrations 5, 10, 20, 40, and 80% were effective concentrations to inhibit Streptococcus mutans, and extract concentrations 10, 20,  40,  and  80%  were  effective  concentrations  to  inhibit  Salmonella  typhimurium.  The  increased concentrations of mayana extract show high inhibition diameter of bacterial growth.
Keywords: Antibacterial activity, Coleus atropurpureus Benth, Streptococcus mutans, Salmonella typhimurium

## ABSTRAK
Daun mayana jantan digunakan oleh masyarakat Sulawesi Utara untuk mengobati penyakit muntah darah dan kegunaan  lainnya  untuk  diare  dan  disentri,  batu  ginjal,  sakit  kulit,  dan  luka.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk menguji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun  mayana  jantan  ( Coleus  atropurpureus Benth)  terhadap  bakteri Streptococcus  mutans dan Salmonella  typhimurium .  Ekstrak  diperoleh  dengan  cara  maserasi  menggunakan pelarut etanol 96%. Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan dengan metode difusi sumuran. Hasil uji aktivitas antibakteri dianalisis dengan menggunakan metode One Way Anova menggunakan program Statistical Product Services Solution , dilanjutkan dengan uji Duncan. Data Anova menunjukkan bahwa konsentrasi ekstrak 5%, 10%,  20%,  40%,  dan  80%  telah  memberikan  aktivitas  menghambat  pertumbuhan  bakteri Streptococcus mutans dan Salmonella  typhimurium .  Konsentrasi  ekstrak  5%,  10%,  20%,  40%,  dan  80%  merupakan konsentrasi  efektif  untuk  menghambat  bakteri Streptococcus  mutans dan  konsentrasi  10%,  20%,  40%,  dan 80%  merupakan  konsentrasi  efektif  untuk  menghambat  bakteri Salmonella  typhimurium .  Peningkatan konsentrasi  ekstrak  daun  mayana  jantan  menujukkan  semakin  besar  diameter  zona  hambat  pertumbuhan bakteri.
Kata kunci : Aktivitas antibakteri, Coleus atropurpureus Benth, Streptococcus mutans , Salmonella typhimurium

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## PENDAHULUAN
Indonesia  dikenal  sebagai  negeri  yang memiliki  kekayaan  alam  yang  melimpah.  Salah satu kekayaan alam yang dimiliki adalah tingginya keanekaragaman  hayati  termasuk  tanaman  obat- obatan sebagai bahan baku jamu. Dari 30.000 jenis tanaman khas Indonesia, sedikitnya ada 7.500 jenis yang sudah diketahui memiliki khasiat herbal atau tanaman  obat.  Dari  jumlah  tersebut  baru  1.200 jenis  tanaman  yang  sudah  dimanfaatkan  untuk bahan  baku  obat-obatan  herbal  atau  jamu  (Salim dan Munandi, 2017).
Salah  satu  tanaman  yang  berkhasiat  sebagai obat  adalah  tanaman  mayana  jantan  ( Coleus atropurpureus Benth).  Tanaman  mayana  jantan merupakan tanaman hias yang dapat dimanfaatkan sebagai obat tradisional untuk mengobati penyakit infeksi  yang  berasal  dari  Asia  Tenggara. (Dalimartha, 2007). Daun mayana jantan digunakan  oleh  masyarakat  Sulawesi  Utara  untuk mengobati  penyakit  muntah  darah  dan  kegunaan lainnya untuk diare dan disentri, batu ginjal, sakit kulit,  dan  luka  (Kinho  et  al.,  2011).  Berbagai aktivitas  farmakologis  yang  ditemukan  pada Mayana,  antara  lain  antimikroba,  antihermintik, antifungi, antiinflamasi, antibakterial, antioksidan, antidiabetes,  dan  antihistamin  (Wakhidah  dan Silalahi, 2018).
Penyakit  infeksi  adalah  penyakit  yang disebabkan  oleh  mikroba  patogen  dan  bersifat dinamis (Wikansari et al., 2012). Penyakit infeksi masih  merupakan  jenis  penyakit  yang  paling banyak  diderita  oleh  penduduk  di  negara berkembang,  termasuk  Indonesia.  Salah  satu penyebab penyakit  infeksi  adalah  bakteri.  Bakteri merupakan  mikroorganisme  yang  tidak  dapat dilihat  dengan  mata  telanjang,  tetapi  hanya  dapat dilihat dengan bantuan mikroskop (Radji M, 2011).
Streptococcus  mutans merupakan  bakteri gram positif golongan Streptococcus viridans yang dapat mengeluarkan toksin sehingga sel-sel pejamu rusak dan bersifat aerob serta relatif sering terdapat dalam  rongga  mulut  yaitu  pada  permukaan  gigi (Corwin,  2008).  Bakteri Streptococcus  mutans merupakan bakteri  dominan  yang berperan  dalam proses  terbentuknya  karies  gigi  (Mounika  et  al., 2015).  Karies  gigi  merupakan  penyakit  jaringan keras  gigi  yang  masih  banyak  ditemukan  di Indonesia  pada  usia  anak-anak  ataupun  usia dewasa dengan prevalensi berkisar antara 85-99%,
sehingga  perlu  dilakukan  pencegahan  untuk menghambat  pertumbuhan  bakteri Streptococcus mutans penyebab karies gigi (Sintawati, 2009).
Salmonella  typhimurium merupakan  bakteri patogen  penyebab  demam  tifoid,  yaitu  suatu penyakit infeksi sistemik dengan gambaran demam yang berlangsung lama, adanya bakteremia disertai inflamasi  yang  dapat  merusak  usus  dan  organ- organ  hati  (Cita,  2011).  Selain  itu Salmonella typhimurium dapat  menyebabkan  gastroenteritis (keracunan makanan) dan septikemia. Penyakit ini dianggap  serius  karena  dapat  disertai  berbagai penyakit, kejadian demam typoid telah diperburuk dengan  terjadinya  peningkatan  resistensi  bakteri terhadap  banyak  antibiotik,  meningkatnya  jumlah individu  yang  terinfeksi  HIV  serta  meningkatnya mobilitas  pekerja  migran  dari  daerah  dengan insiden yang tinggi (Thong et a1., 2000).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menguji aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun  mayana  jantan (Coleus  atropurpureus  Benth)  dengan  konsentrasi 5%,  10%,  20%,  dan  40%  terhadap  bakteri Streptococcus mutans dan Salmonella
typhimurium
menggunakan metode difusi sumuran.

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Peneliatian
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  Laboratorium Mikrobiologi  di  Program  Studi  Farmasi,  Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas  Sam  Ratulangi  Manado  pada  bulan Desember 2021 hingga Juni 2022.

## Alat dan Bahan Alat
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini, antara  lain  :  erlenmeyer,  gelas  ukur,  gelas  kimia, tabung  reaksi,  rak  tabung  reaksi,  pipet  tetes, penangas air, blender, ayakan mesh 65, kaca arloji, timbangan analitik, labu ekstraksi, batang pengaduk,  stirer,  cawan  petri,  rotary  evaporator, jarum  ose,  pinset,  inkubator,  laminair  air  flow, termometer,  pencadang,  autoklaf,  mikropipet, mistar berskala dan alat fotografi.
Bahan
Bahan-bahan yang digunakan pada penelitian ini,  antara  lain  :  daun  mayana  jantan  ( Coleus atropurpureus Benth),  bakteri  uji  ( Streptococcus mutans dan Salmonella  typhimurium), Carboxy Methyl  Cellulose (CMC),  aquades  steril,  etanol 96%,  tablet  Ciprofloxacin  500  mg, Nutrient  Agar

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
(NA),  NaCl  0,9%,  kertas  saring,  kertas  label  dan aluminium foil . Jenis Penelitian Penelitian ini dilakukan menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  7 perlakuan  dan  setiap  perlakuan  terdiri  atas  3 ulangan.

## Pengambilan Sampel
Sampel  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini ialah  daun  mayana  jantan  ( Coleus  atropurpureus Benth)  yang  diambil  dari  Kota  Kotamobagu, Sulawesi Utara.

## PROSEDUR PENELITIAN Penyiapan Sampel
Tahap  awal  dilakukan  dengan  pengumpulan bahan  baku  daun  mayana  jantan  ( Coleus atropurpureus Benth)  yang  diambil  di  Kota Kotamobagu.  Daun  mayana  jantan  dibersihkan terlebih  dahulu  dari  kotoran  yang  menempel, kemudian  dicuci  dengan  air  mengalir  sampai bersih,  ditiriskan,  lalu  dikeringkan  dengan  cara diangin-anginkan.  Setelah  kering  daun  mayana jantan  ditimbang  dan  selanjutnya  diserbukkan dengan cara di blender dan diayak dengan ayakan mesh  65  hingga  diperoleh  serbuk  yang  halus  dan seragam, kemudian ditimbang beratnya. Selanjutnya  dimasukkan  ke  dalam  wadah  gelas tertutup.

## Pembuatan Ekstrak
Sebanyak  200  gram  serbuk  simplisia  daun mayana  dimasukkan  ke  dalam  wadah  maserasi, ditambahkan  etanol  96%  sebanyak  1000  mL sambil  sesekali  diaduk.  Wadah  maserasi  ditutup kemudian  dibiarkan  5x24  jam  dengan  sesekali diaduk  kemudian  disaring  dengan  menggunakan kertas  saring  sehingga  menghasilkan  filtrat  I  dan residu. Residu  dimaserasi kembali dengan  60 mL etanol  96%    selama  2x24  jam.  Kemudian didapatkan filtrat II. Filtrat I dan filtrat II dicampur, lalu  diuapkan menggunakan  rotary  evaporator sehingga diperoleh ekstrak kental. Lalu dilakukan penimbangan  ekstrak  dan  dihitung  presentase rendemen  dengan  rumus  :  Rendemen  =    (Bobot ekstrak)/(Bobot simplisia)  ×100%.

## Strerilisasi Alat
Alat-alat  gelas  yang  digunakan  dalam penelitian ini disterilkan  dalam oven dengan suhu 170 0 C  selama ± 2  jam,  jarum  ose  dan  pinset dibakar  dengan  pembakaran  diatas  api  langsung dan  media  disterilkan  dalam  autoklaf  pada  suhu 121 0 C dengan tekanan 1 atm selama 15 menit.

## Pembuatan Larutan Kontrol Negatif
Larutan kontrol negatif dibuat dari CMC 1%. 1  gram  serbuk  CMC  dilarutkan  dalam  100  mL aquades  kemudian  dihomogenkan  sampai  larutan homogen.

## Pembuatan Larutan Kontrol Positif
Larutan  kontrol  positif  dibuat  dari  sediaan obat  tablet  Ciprofloxacin  500  mg.  Tahap  awal dilakukan dengan menggerus satu tablet Ciprofloxacin,  lalu  ditimbang  dan  disetarakan dengan  500  mg.  Kemudian  serbuk  Ciprofloxacin disuspensikan dalam larutan CMC untuk memperoleh larutan Ciprofloxacin 50 μg/50 μl.

## Pembuatan Larutan Uji
Dibuat  larutan  uji  80%  b/v  dengan  cara menimbang  8  g  ekstrak  etanol  daun  mayana  dan dilarutkan dalam 10 mL larutan CMC. Kemudian, dibuat variasi konsentrasi larutan uji 5%;10%;20% dan 40% b/v dengan cara mengencerkan larutan uji 80% b/v.

## Pembuatan Media
a. Media  agar  miring, Nutrient  Agar (NA) sebanyak  8,4  gram  dilarutkan  dalam  300  mL aquades menggunakan erlenmeyer. Setelah itu dihomogenkan.  Sebanyak  5  mL  dituangkan masing-masing pada 3 tabung reaksi steril dan ditutup dengan aluminium foil . Media tersebut disterilkan  dalam  autoklaf  pada  suhu  121 0 C dengan  tekanan  1  atm  selama  15  menit, kemudian dibiarkan pada suhu ruangan selama ±  30  menit  sampai  media  memadat  pada kemiringan  300.  Media  miring  digunakan untuk inokulasi bakteri.
b. Media  dasar  dan  media  pembenihan  dibuat dengan  cara  ditimbang Nutrient  Agar (NA) sebanyak 8,4 gram, lalu dilarutkan dalam 300 mL  aquades    menggunakan  erlenmeyer. Setelah itu, masing-masing media dihomogenkan.  Media-media  yang  sudah homogen  ini  distrerilkan  dalam  autoklaf  pada suhu 121 0 C dengan tekanan 1 atm selama 15 menit,  kemudian  didinginkan  sampai  suhu  ± 45-50 0 C . Media dasar dan media pembenihan digunakan dalam pembuatan media pengujian sebagai lapisan dasar dan lapisan kedua.

## Inokulasi Bakteri Pada Media Agar Miring
Bakteri  uji  diambil  dengan  jarum  ose  steril, lalu  ditanamkan  pada  media  agar  miring  dengan cara  menggores.  Selanjutnya  diinkubasi  dalam inkubator  pada  suhu  37 0 C  selama  24  jam.

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Perlakuan  yang  sama  dilakukan  pada  setiap  jenis bakteri uji.

## Pembuatan Media Pengujian
Lapisan  dasar  dibuat  dengan  menuangkan masing-masing  20  mL  NA  dari  media  dasar  ke dalam  6  cawan  petri,  lalu  dibiarkan  sampai memadat.  Setelah  memadat,  pada  permukaan lapisan  dasar  diletakkan  6  pencadang  baja  yang diatur  sedemikian  rupa  jaraknya  agar  daerah pengamatan  tidak  saling  bertumpuh.  Kemudian, suspensi  bakteri  dicampurkan  ke  dalam  media pembenihan  NA.  Setelah  itu,  dituangkan  20  mL campuran suspensi dan media pembenihan tersebut ke  dalam  tiap  cawan  petri  yang  diletakkan pencadang  sebagai  lapisan  kedua.  Selanjutnya, pencadang  diangkat  secara  aseptik  dari  cawan petri, sehingga akhirnya terbentuklah sumur-sumur yang akan digunakan dalam uji antibakteri.

## Uji Aktivitas Antibakteri secara In-vitro
Larutan  uji  ekstrak  etanol  daun  mayana dengan berbagai konsentrasi (5%, 10%, 20%, 40%, dan  80%);    larutan  CMC  1%  sebagai  kontrol negatif; larutan Ciprofloxacin 50 μg/50 μl sebagai kontrol  positif,  masing-masing  diteteskan  pada sumur  yang  berbeda  sebanyak  50  μl.  Kemudian cawan petri diinkubasi dalam inkubator pada suhu 37 0 C    selama  1x24  jam.  Setelah  1x24  jam dilakukan  pengamatan  dan  pengukuran  diameter zona hambat dengan menggunakan jangka sorong digital.  Diameter  zona  hambat  dihitung  dari  tepi ( breakpoint )  ke  tepi  yang  bersebrangan  melewati pusat lubang sumuran. Apabila tidak terdapat zona hambat disekitar lubang sumuran, maka dinyatakan diameter zona hambatnya adalah 0,00 mm.

## Analisis Data
Untuk  mengetahui  aktivitas  ekstrak  etanol  daun mayana  ( Coleus  atropurpureus Benth)  terhadap diameter  zona  hambat  pertumbuhan  bakteri Streptococcus mutans
dan
Salmonella typhimurium data  dianalisis  menggunakan  uji
statistik One way anova dengan program Statistical
Product Services Solution dengan taraf kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Ekstraksi Daun Mayana Jantan (Coleus

## atropurpureus Benth)
Ekstrak daun mayana jantan diperoleh melalui proses ekstraksi menggunakan pelarut etanol 96%. Daun  mayana  jantan  dikeringkan  kemudian diblender  sampai  menghasilkan  serbuk  simplisia sebanyak 200 gram lalu diekstraksi menggunakan metode  maserasi.    Dilakukan  maserasi  selama  5 hari  dengan  etanol  96%  sebanyak  1000  mL  dan dilakukan remaserasi selama 3 hari dengan etanol 96% sebanyak 600 mL. sehingga diperoleh ekstrak kental sebanyak 18,5 gram. Jumlah rendemen yang didapat yaitu 9,25%.
Semakin lama waktu ekstraksi, kuantitas bahan yang  terekstrak  juga  akan  semakin  meningkat dikarenakan kesempatan untuk bersentuhan antara bahan  dengan  pelarut  makin  besar  (Winata et  al. , 2015).  Waktu    maserasi  yang  melewati  waktu optimum  akan  menyebabkan  komponen  yang terekstrak  menurun.  Waktu  maserasi  yang melewati waktu optimum akan merusak zat terlarut yang  ada  di  dalam  bahan  dan  berpotensi meningkatkan proses hilangnya senyawa-senyawa pada  larutan  yang  terekstrak  karena  penguapan (Cikita et al. , 2016).

## Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Mayana Jantan (Coleus atropurpureus Benth)
Uji  aktivitas  antibakteri  ini  menggunakan metode  difusi  agar  dengan  cara  sumuran.  Difusi sumuran  dilakukan  dengan  membuat  lubang sumuran pada media agar padat. Hasil uji aktivitas dan  hasil  pengukuran  pengukuran  rata-rata diameter zona hambat ekstrak etanol daun mayana jantan  ( Coleus  atropurpureus Benth)  terhadap bakteri Streptococcus  mutans dan Salmonella typhimurium dilihat pada Gambar 2, Gambar 3 dan Table 3.

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Gambar 2 . Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Mayana Jantan ( Coleus atropurpureus Benth) Terhadap Bakteri Gram Positif ( Streptococcus mutans) Ket : (1) Konsentrasi Ekstrak 5%, (2) Konsentrasi Ekstrak 10%, (3) Konsentrasi Ekstrak 20%, (4) Konsentrasi Ekstrak 40%, (5) Konsentrasi Ekstrak 80%, (6) Kontrol Negatif (CMC 1%), (7) Kontrol Positif (Ciprofloxacin 50 μg/50 μl)
Gambar 3. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Mayana Jantan ( Coleus atropurpureus Benth) Terhadap Bakteri Gram Negatif ( Salmonella typhimurium) Ket : (1) Konsentrasi Ekstrak 5%, (2) Konsentrasi Ekstrak 10%, (3) Konsentrasi Ekstrak 20%, (4) Konsentrasi Ekstrak 40%, (5) Konsentrasi Ekstrak 80%, (6) Kontrol Negatif (CMC 1%), (7) Kontrol Positif (Ciprofloxacin 50 μg/50 μl)
Tabel 3. Rata-rata Diameter Zona Hambat Ekstrak Etanol Daun Mayana Jantan ( Coleus atropurpureus Benth) terhadap Pertumbuhan Bakteri Streptococcus mutans dan Salmonella typhimurium.
No. Perlakuan Rata-rata Diameter Zona Hambat (mm) Streptococcus mutans Salmonella typhimurium 1. Kontrol (-) 0 0 2. Kontrol (+) 28 24,167 3. 5% 12,167 9 4. 10% 15,83 10,167 5. 20% 18,167 12,67 6. 40% 20,3 16,167 7. 80% 26,67 22,5
1 1 1 2 2 2 3 3 3 4 4 4 5 5 5 6 5 6 6 7 7 7 1 1 2 2 2 3 3 3 4 4 4 5 5 5 6 5 6 6 5 7 7 7 1

## PEMBAHASAN
Pada  penelitian  ini,  penetesan  larutan  uji ekstrak  etanol  daun  mayana  jantan  ( Coleus atropurpureus Benth) masing-masing sebanyak 50μl ke dalam lubang sumur yang dibuat pada permukaan  lapisan  pembenihan bakteri  adalah untuk melihat apakah dapat terjadi penghambatan
pertumbuhan bakteri. Penghambatan  pertumbuhan  bakteri  ini  dapat dilihat  dengan  adanya  zona  bening  disekitar lubang sumur. Penggunaan beberapa konsentrasi  dari  larutan  uji  (5%,  10%,  20%, 40%,  dan  80%)  dimaksudkan  agar  dapat dibuktikan  ada  tidaknya  aktivitas  antibakteri terhadap bakteri yang diuji.
Menurut  Davis  and  Stout  (1971),  kriteria kekuatan  daya  antibakteri  adalah  sebagai berikut  :  diameter  zona  hambat  5  mm  atau kurang dikategorikan lemah, zona hambat 5-10 mm dikategorikan  sedang,  zona  hambat  10-20 mm  dikategorikan  kuat  dan  zona  hambat  20 mm  atau  lebih  dikategorikan  sangat  kuat. Berdasarkan  kriteria  tersebut,  maka  daya antibakteri  ekstrak  etanol  daun  mayana  jantan pada  bakteri Streptococcus  mutans dengan konsentrasi 5% (12,16 mm), 10% (15,83 mm), dan 20% (18,16 mm) termasuk kuat, 40% (20,3 mm)  dan  80%  (20,67  mm)  termasuk  sangat kuat. Daya antibakteri Salmonella typhimurium dengan  konsentrasi  5%  (9  mm)  termasuk sedang, 10% (10,16 mm), 20% (12,67 mm), dan 40% (16,16 mm) termasuk kuat, dan 80% (22,5 mm)  sangat  kuat. Dengan  demikian,  diketahui bahwa  konsentrasi  ekstrak  5%,  10%,  20%, 40%,  dan  80%  merupakan  konsentrasi  efektif untuk  menghambat  bakteri  Streptococcus mutans  dan  konsentrasi  ekstrak  10%,  20%, 40%,  dan  80%  merupakan  konsentrasi  efektif untuk bakteri Salmonella thypimurium. Sebab, konsentrasi-konsentrasi  tersebut  mempunyai daya antibakteri yang dikategorikan kuat untuk menimbulkan zona hambatan yang besar.
Efek antibakteri makin meningkat dengan peningkatan  konsentrasi  larutan  uji  berturut- turut  dari  5%,  10%,  20%,  40%,  dan  80%,  ini menunjukkan  bahwa  ada  hubungan  yang  kuat antara konsentrasi dan zona hambat (gambar 3) dan berarti larutan ekstrak daun mayana jantan ( Coleus atropurpureus Benth) dengan ekstraktor  etanol  memilki  efek  antibakteri terhadap bakteri Salmonella thyphimurium.
Penelitian  oleh  Rastina  et  al.  (2015), semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  yang
diberikan  maka  semakin  besar  pula  diameter zona hambat yang terbentuk. Salah satu faktor yang mempengaruhi aktivitas bahan antimikroba, yaitu konsentrasi bahan antimikroba  (Pelczar  dan  Chan,  1988).  Daya hambat yang dihasilkan oleh bahan antimikroba akan  semakin  tinggi  apabila  konsentrasi  juga tinggi (Amrie et al., 2014).
Kontrol  positif  meghasilkan  aktivitas antibakteri  yang  paling  besar  terhadap  bakteri uji  dibandingkan  kontrol  negatif  dan  berbagai konsentrasi  ekstrak.  Kontrol  positif  yang digunakan  adalah  antibiotik  Ciprofloxacin. Antibiotik  Ciprofloxacin  digunakan  sebagai kontrol  positif  sekaligus  kontrol  kerja  atau sebagai pembanding untuk menentukan tingkat kepekaan dari zat uji yang diteliti (Faradina et al.,  2019).  Pemilihan  Ciprofloxacin  sebagai kontrol positif dengan pertimbangan Ciprofloxacin  merupakan  antibiotik  spektrum luas  (broad  spectrum)  dan  termasuk  dalam golongan  florokuinon    yang  paling  umum digunakan dengan mekanisme kerja menghambat  DNA  girase  (topoisomerase  II) dan  topoisomerase  IV  yang  terdapat  dalam bakteri  (Faidiban,  2020;  Sorro  dan  Sorro, 2001).  Berdasarkan  hasil  penelitian,  didapat bahwa  ekstrak  etanol  daun  mayana  jantan (Coleus atropurpureus Benth) memiliki kemampuan antibakteri terhadap bakteri Streptococcus mutans dan Salmonella thyphimurium.  Hal  ini  disebabkan  adanya  zat aktif  yang  terkandung  dalam  daun  mayana jantan  yang  kemungkinan  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri.  Zat  aktif  tersebut  yaitu minyak  atsiri,  tanin,  flavonoid,  eugenol,  dan triterpenoid.
Minyak  atsiri  memiliki  potensi  besar sebagai  agen  antibakteri.  Minyak  atsiri  yang dipilih  dari  tanaman  obat  menunjukkan efektivitas  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri (Chand et al., 2017). Tanin adalah salah satu  senyawa  aktif  metabolit  sekunder  yang mempunyai beberapa khasiat seperti astringen, antidiare, antibakteri, dan antioksidan (Desmiaty  et  al.,  2008).  Flavonoid  sebagai salah  satu  kelompok  senyawa  fenolik  yang memiliki  sifat  antioksidatif  serta  berperan dalam mencegah kerusakam sel dan komponen selularnya  oleh  radikal  bebas  reaktif  (Redha, 2013).  Senyawa  eugenol  mempunyai  aktivitas farmakologi sebagai antibakteri (Pramod et al., 2010). Senyawa golongan triterpenoid
menunjukkan  aktivitas  farmakologi  yang signifikan seperti antiviral, antibakteri, antiinflamasi, sebagai inhibisi terhadap sintesis kolsetrol dan sebagai antikanker (Nassar et al., 2010).
Berdasarkan  hasil  penelitian,  ekstrak etanol daun mayana jantan memiliki kemampuan  antibakteri  namun  belum  berarti disebut sebagai zat antibiotik karena belum ada standar  resistensi  serta  penilaian  kepekaan bakteri.  Kemampuan  antibakteri  yang  terdapat pada  ekstrak  etanol  daun  mayana  jantan  tidak hanya  terbatas  pada  bakteri Streptococcus mutans dan Salmonella  thyphimurium yang dipakai  pada  penelitian  ini  tetapi  mungkin masih memiliki kemampuan antibakteri terhadap bakteri lain.
Pada penelitian ini, analisis data dilakukan menggunakan  uji  statistik One  way  ANOVA dengan  menggunakan program  Statistical Product  Services  Solution .  Syarat  dalam  uji One  way  ANOVA ,  data  yang  akan  diuji  harus terdistribusi normal. Berdasarkan uji normalitas,  data  zona  hambat  yang  diuji terdistribusi normal. Hal ini dibuktikan dengan nilai  signifikansi  yang  didapat  yaitu  0,200 untuk Streptococcus  mutans dan Salmonella thyphimurium ,  data  tersebut  terdistribusi normal  karena  nilai  p>0,05.  Uji  normalitas adalah  pengujian  data  untuk  melihat  apakah nilai  residual  terdistribusi  normal  atau  tidak (Ghozali,  2011).  Selanjutnya  dilakukan  uji homogenitas. Berdasarkan hasil uji homogenitas,  data  yang  diperoleh  memiliki varian yang sama (homogen) untuk Streptococcus mutans karena nilai signifikansi yang  diperoleh  0,476  (p>0,05)  dan  pada Salmonella  thyphimurium memiliki  varian yang sama (homogen) karena nilai signifikansi yang diperoleh 0,56 > 0,05.
Berdasarkan  hasil  uji One  way  ANOVA , diameter  zona  hambat  bakteri Streptococcus
mutans dan Salmonella thyphimurium memunjukkan nilai signifikansi 0,000.
Dikarenakan nilai signifikansinya <0,05 (p<0,05), maka berarti terdapat perbedaan yang nyata  (signifikan)  pengaruh  perlakuan  yang diberikan pada bakteri uji. Hal ini menunjukkan bahwa  kontrol  positif  dan  kelima  konsentrasi ekstrak  etanol  daun  mayana  jantan  telah memberikan  aktivitas  yang  menghambat pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans dan Salmonella thyphimurium .
Uji  lanjut  yang  digunakan  adalah  uji Duncan,  uji  ini  digunakan  melihat  kelompok perlakuan mana yang memiliki efek yang sama atau  berbeda  dan  efek  terkecil  sampai  dengan efek  yang  terbesar  antara  satu  dengan  yang lainnya  (Simanjuntak,  2008).  Uji  Duncan terhadap  diameter  zona  hambat  bakteri Streptococcus mutans dan Salmonella typhimurium untuk kontrol negatif
menunjukkan  perbedaan  yang  nyata  terhadap kontrol positif dan terhadap berbagai konsentrasi  ekstrak.  Kontrol  negatif  yang digunakan  adalah  larutan  CMC  1%  yang menunjukkan  tidak  adanya  zona  hambat.  Hal ini menunjukkan kontrol negatif yang digunkan tidak  berpengaruh  pada  uji  bakteri.  Kontrol positif yang digunakan adalah larutan Ciprofloxacin  50  μg/50  μl,  menunjukkan perbedaan nyata (signifikan) karena menghasilkan aktivitas antibakteri yang paling besar  terhadap  bakteri Streptococcus  mutans dan Salmonella  typhimurium dibandingkan kontrol  negatif  dan  berbagai  konsentrasi ekstrak.  Uji  Duncan  terhadap  diameter  zona hambat bakteri Streptococcus mutans menunjukkan perbedaan nyata pada konsentrasi  ekstrak  5%,  10%,  20%,  40%,  dan 80%.  Uji  Duncan  terhadap  diameter  zona hambat bakteri Salmonella typhimurium menujukkan perbedaan nyata pada konsentrasi ekstrak  10%,  20%, 40%, dan 80%,  sedangkan pada  konsentrasi  5%  tidak  menunjukkan perbedaan yang nyata.
Aktivitas  antibakteri  yang  paling  baik terlihat  pada  konsentrasi  ekstrak  80%  untuk bakteri Streptococcus  mutans dan Salmonella typhimurium .  Sedangkan  konsentrasi  terkecil yang  masih  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri Streptococcus  mutans dan Salmonella typhimurium terdapat pada konsentrasi ekstrak 5%.

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  daun  mayana  jantan ( Coleus atropurpureus Benth) memiliki aktivitas daya antibakteri terhadap pertumbuhan Streptococcus mutans dan Salmonella  typhimurium .  Konsentrasi  ekstrak 5%,  10%,  20%,  40%,  dan  80%  merupakan konsentrasi  efektif  untuk  menghambat  bakteri Streptococcus  mutans dan  konsentrasi  ekstrak 10%, 20%, 40%,dan 80% merupakan konsentrasi  efektif  untuk  menghambat  bakteri
Salmonella  typhimurium .  Semakin  tinggi konsentrasi ekstrak etanol daun mayana jantan yang  diberikan  menunjukkan  semakin  besar diameter  zona  hambat  yang  terbentuk  karena semakin  banyak  senyawa  aktif  atau  senyawa berkhasiat dalam ekstrak yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri.

## SARAN
1. Perlu  dilakukan  pengujian  Kadar Bunuh Minimum (KBM) untuk mengetahui  kemampuan  ekstrak  daun mayana  jantan  dalam  membunuh bakteri Streptococcus  mutans dan Salmonella typhimurium .
2. Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut dengan pengujian antibakteri menggunakan bagian lain dari tanaman mayana  jantan  (Coleus  atropurpureus
Benth)

## DAFTAR PUSTAKA
Allen,  L.  H  dan  Gillespie,  S.  R.  2001. What Works  ?  A  Review  of  The  Efficacy  and Effectiveness  of  Nutrition  Intervensions . Manila : ABD
Abdullah,  S.S.,  Djide,  N.,  Natsir,  S.  (2021).
KLT  Bioautografi  Hasil  Partisi  Ekstrak Etanol  Herba  Bandotan  ( Ageratum conyzoides L. ) Terhadap Shigella dysentriae . Chem. Prog. 14(1).15-17 Amrie, A. G. A., Ivan, Anam, S., Ramadhani.
2014. Uji Efektifitas Ekstrak Daun dan Akar Harrisonia perforata Merr. terhadap
Pertumbuhan  Bakteri Vibrio  cholerae . Online  Jurnal  of  Natural  Science . 3(3): 331-340.
Balqist,  S.  N.  F.,  dan  Saputri,  F.  A.  2019. Aktivitas  antibakteri  Beberapa  ekstrak tanaman terhadap
Staphylococcus aureus . Jurnal Farmaka . 17(2): 124-130. Chand, R. R., Jokhan, A. D., Gopalan, R. D., &
Osborne,  T.  2017.  Antibacterial  and antifungal activities of essential oils from medicinal plants found in the SouthPacific. The  South  Pasific  Journal of  Natural  and  Applied  Sciences , 35(1): 10-19.
Cita, Y. P. 2011. Bakteri Salmonella typhi dan
demam tifoid. Jurnal Kesehatan Masyarakat Andalas . 6(1): 42-46.
Corwin,  E.  2008.  Buku  Saku  Patofisiologi.
(Subekti,  N.  B.,  Terjemahan) Jakarta:
EGC.
Dalimartha,  S.  2007.  Atlas  Tumbuhan  Obat Indonesia.  Jilid  2.  Jakarta:  Trubus Agriwidya.
Dalimartha,  S.  2008.  Atlas  Tumbuhan  Obat Indonesia.  Jilid  5.  Jakarta  :  Trubus Agriwidya.
Desmiaty  Y,  Ratih  H,  Dewi  MA.  2008. Penentuan  Jumlah  Tanin  Total  pada Daun  Jati  Belanda  ( Guazuma  ulmifolia Lamk )  dan  Daun  Sambang  Darah ( Excoecaria  bicolor    Hassk )  Secara Kolorimetri dengan Pereaksi Biru Prusia. Ortocarpus . 8: 106-109.
Davis, W. W and Stout, T. R. 1971. Disc Plate Methods of Microbiological Antibiotic  Assay . Microbiology . 22: 659-665.
Departemen  Kesehatan  RI.  1995.  Farmakope Indonesia Edisi IV. Jakarta. Departemen Kesehatan  Republik  Indonesia.  2000.
Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan  Obat.  Jakarta  :  Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan.
Faidiban, A. N., Posangi, J., Wowor, P. M., &
Bara, R. A. 2020. Uji Efek Antibakteri Chromodoris annae terhadap  Bakteri Staphylacoccus  aureus dan Escherichia  coli . Medical  Scope Journal . 1(2) .
Faradina,  A.  S.,    Mastra,  N.,  &  Karta,  I.  W.
2019. Uji Aktivitas Antibakteri
Ekstrak Etanol Akar Encok ( Plumbago zeylanica L.)  terhadap  Pertumbuhan Pseudomonas  aeruginosa Secara In- vitro . Meditory . 7(2): 2338-1159.
Fatmawati, D. W. A. 2011.  Hubungan biofilm Streptococcus mutans terhadap resiko terjadinya karies gigi . Jurnal Kedokteran Gigi . 8(3): 127-130. Guilfoile, P. dan Alcamo, I.E., 2007. Antibiotic- Resistant Bacteria . InfobasePublishing.
Gunawan, D dan Mulyani, S. 2004. Farmakognosi. Jakarta : Swadaya.
Hardiyanti,  Y.,  Darwis.,  &  Santoni,  A.  2013.
Ekstraksi dan Uji Antioksi dan Senyawa Antosianin Dari Daun Miana ( Coleus scutellarioides L (Benth))
Serta  Aplikasi  Pada  Minuman. Jurnal  Kimia Unand . 2(2): 44-50.
Imam  Ghozali.  2011.  Aplikasi  Analisis Multivariate dengan Program IBM SPSS 19.  Semarang  :  Badan  Penerbit Universitas Diponegoro.
Jawetz, Melnick, Adelberg. 2013. Mirkobiologi Kedokteran. Edisi ke-25.  Terjemahan Aryandhito  Widhi  Nugroho.  Jakarta  :
Penerbit Buku Kedokteran EGC.
Kasim,  Vivien  Novarina  R.  2020.  Peran
Imunitas Pada Infeksi Salmonella Typhi . Gorontalo : C.V Athra Samudra.
Kinho, J., Arini,  D. I. D., Tabba, S., Kama, H., Kafiar,  Y.,  Shabri,  S.,  Karundeng,
M.2011.  Tumbuhan  obat  tradisional  di Sulawesi Utara .  Jilid  I.  Manado:  Balai Penelitian Kehutanan Manado.
Katrin,  D.,  Idiawati,  N.,  dan  Sitorus,  B.  2015.
Uji Aktivitas Antibakteri Dari Ekstrak  Daun  Malek  ( Litsea  graciae
Vidal )  Terhadap  Bakteri Stapylococcus aureus dan Escherichia  coli . Jurnal Kimia Khatulistiwa . 4(1): 7-12. Mounika,  S.,  Jagannathan,  N.,  Murali.  2015. Association of Streptococcus mutants  and  Streptococcus  Sanguis  in act  of  dental  caries. Journal  of Pharmaceutical Sciences and Research . 7(9): 764-766.
Mpila,  D.  A,  Fatimawali,  Weny  I.  Wiyono. 2012. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Mayana Terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia coli
dan Pseudomonas aeruginosa secara in- vitro. Jurnal Pharmacon . 1(1) .
Muljono P, Fatimawali, Aaltje
E.
Manampiring. 2016. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Mayana Jantan  ( Coleus  atropurpureus Benth )
Terhadap Pertumbuhan Bakteri Streptococcus Sp. dan Pseudomonas Sp. Jurnal Biomedik (eBm) . 4(1) .
Nassar, Z., Aisha, A., Abdul, M. A. 2010. The Pharmacological Properties of terpenoid  from  Sandoricum  Koetjape. Journal Medcentral . 1-11.
Pelczar,  Jr.  M.  J.  Dan  Chan,  E.  C.  S.,  1988.
Dasar-Dasar  Mikrobiologi.  Jilid  2.
( Hadioetomo, R. S., Terjemahan ) Jakarta : UI Press.
Pramod,  K.,  Ansari,  S.  H.,    Ali,  J.  2010.
Eugenol:  A  Natural  Compound  With Versatile  Pharmacological  Actions.
Natural Product Communications . 5(12): 1999-2006.
Pratiwi,  S.T.,  2008.  Mikrobiologi  Farmasi . Jakarta: Erlangga. Puspita, D., Tjahyono, Y.  D.,  Samalukang,  Y.,  Im  Toy,  B.  A., dan  Totoda,  N.  W.  2018.  Produksi Antosianin Dari Daun Miana ( Plectranthus Scutellarioides ) Sebagai Pewarna Alami. Jurnal Ilmu dan
Teknologi Pangan . 4(1): 298-303. Radji,  M.  2011.  Buku  Ajar  Mikrobiologi Panduan Mahaisiwa Farmasi & Kedokteran.  Jakarta.  Penerbit  Buku kedokteran EGC.
Redha,  A.  2010.  Flavonoid:  Struktur,  sifat antioksidatif dan perannya dalam sistem  biologis. Jurnal  Berlian . 9(2):
196-202.
Salas, G. P., Soto, M. A., Carretero, S. A., dan Gutierrez, F. A. 2010. Phenolic Compound  Extraction  Systems  for  Fruit and Vegetable Sampels . Journal Molecules . 15(12): 8813-8826.
Salim,  Z.,  dan  Munandi,  E.  2017.    Info
Komoditi Tanaman Obat. Badan Pengkajian dan Pengembangan Perdagangan  Kementrian  Perdagangan Republik Indonesia. Sarro,  A.  D.,  Sarro,  G.  D.,  2001. Adverse
Reactions to Fluorquinolones an Overeview  on  Mechanism  Aspects . Current Medicinal Chemistry . 8(4): 371- 384.
Simanjuntak,  M.  R.  Ekstraksi  dan  Fraksinasi Komponen  Ekstrak  Daun  Tumbuhan Senduduk ( Melastoma malabathricum L) serta  Pengujian  Efek  Sediaan  Krim terhadap  Penyembuhan  Luka  Bakar. [skripsi]. Fakultas Farmasi USU, Medan.
Sintawati, F. X., dan Tjahja, N. I. 2009. Faktor-
Faktor yang Memepengaruhi Kebersihan Gigi dan Mulut Masyarakat  DKI  Jakarta  Tahun  2007. Jurnal Ekologi Kesehatan . 8(1): 860-
873.
Wakhidah,  A.  Z.,  &  Silalahi,  M.  2018.
Etnofarmakologi Tumbuhan Miana ( Coleus  scutellariodes (L.)  Benth)
Pada  Masyarakat  Halmahera  Barat, Maluku  Utara. Jurnal  Pro-Life . 5(2):
567-578.
Whitman,  William.B.  2009. Bergey’s  Manual of  Determinative  Bacteriology .  2nd
edition.  New  York  :  Cambridge University Press. Wikansari,  N.,  Hestiningsih,  R.,  dan  Raharjo, B. 2012. Pemeriksaan total kuman udara dan Staphylococcus  aureus di  ruang rawat  inap  Rumah  Sakit  X  Kota
Semarang. Jurnal Kesehatan
Masyarakat  Universitas  Diponegoro . 1(2): 384-392.
Winata,  E  dan  Yunianta.  2015.  Ekstraksi Antosianin Buah Murbei ( Morus alba L) Metode Ultrasonic  Batch (Kajian Waktu dan Rasio Bahan
: Pelarut),
Jurnal Pangan dan Agroindustri . 3(2): 773-783.