## Medical Laboratory Technology Journal

## Medical Laboratory Technology Journal
Available online at : http://ejurnal-analiskesehatan.web.id
SERUM LIPEMIK DENGAN FLOKULAN GAMMA-SIKLODEKSTRIN PADA PEMERIKSAAN GLUKOSA
Alde Fajar Pambudi, Subrata Tri Widada, Budi Setiawan Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Yogyakarta Jl Ngadinegaran  MJ III/ 62 Yogyakarta e-mail : budisetiawantropmed@gmail.com
Abstract : Lipemic  serum  caused  by  lipoprotein  particles  such  as  chylomicrons,  VLDL  (Very Low-Density  Lipoprotein)  and  triglycerides.  This  situation  causes  interference  chromophoric photometric analysis, interference on the wavelength and light scattering caused by the pres- ence of lipid particles. This study  aims to determine and differences glucose levels in lipemic serum with and without the addition of gamma-cyclodextrin incubation temperature 23 o C. The study's pre-experimental use research design static group comparison. The samples were all lipemic serum many as 20 samples. The research findings were the glucose levels without add- ing the flocculant Gamma-cyclodextrin incubation temperature 23 o C was 267,19 mg/dl. Where- as  the  glucose  levels  with  adding  the  flocculant  Gamma-cyclodextrin  incubation  temperature 23oC was 169,23 mg/dl. The difference of glucose levels with or without adding the flocculant Gamma-cyclodextrin incubation temperature 23oC was 97,96 mg/dl(35,23%).
Keywords :  glucose levels; lipemic serum; gamma-cyclodextrin flocculant
Abstrak : Serum lipemik disebabkan partikel lipoprotein seperti cylomicrons, VLDL ( Verry Low Density  Lipoprotein )  maupun  trigliserida.  Keadaan  ini  menyebabkan  gangguan  kromoforik dalam  analisis  fotometri,  gangguan  pada  panjang  gelombang  dan  hamburan  cahaya  yang disebabkan  oleh  adanya  partikel  lipid.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  perbedaan dan  selisih  rata-rata  kadar  glukosa  dalam  serum  lipemik  dengan  dan  tanpa  penambahan gamma-siklodekstrin inkubasi suhu 23 o C. Penelitian pre eksperimen ini menggunakan design penelitian static group comparison . Sampel penelitian adalah semua serum lipemik sebanyak 20 sampel. Hasil penelitian yang telah dilakukan didapatkan rerata kadar glukosa pada serum lipemik  tanpa  penambahan  flokulan  Gamma-siklodekstrin  inkubasi  suhu  23 o C  adalah  267,19 mg/dl, rerata kadar glukosa serum lipemik dengan penambahan flokulan Gamma-siklodekstrin inkubasi suhu 23 o C adalah 169,23 mg/dl.  Perbedaan hasil pemeriksaan kadar glukosa dengan dan tanpa penambahan flokulan Gamma-siklodekstrin inkubasi suhu 23 o Cadalah 97,96 mg/dl (35,23%).
Kata kunci : flokulan gamma-siklodekstrin; kadar glukosa; serum lipemik
Received 2017-11-27; Received in revised form 2017-12-27; Accepted 2017-12-29

## PENDAHULUAN
Serum lipemik menyebabkan gangguan kromoforik  dalam  analisis  seperti  fotometri karena  pembacaan  latar  belakang  yang tinggi,  gangguan  pada  pengukuran  panjang gelombang dan pembenturan cahaya disebabkan substansi – substansi
pengganggu (Anderson,  2015)  Serum  lipemik pada  prinsipnya  disebabkan  oleh  adanya partikel besar lipoprotein seperti chylomicrons atau  Very  Low  Density  Lipoprotein  (VLDL) dan  komponen  lipid  utama  yaitu  trigliserida (Piyophirapong, 2010.,Usha A 2016).
Lipemik  dapat  mengganggu  dalam setiap  uji  yang  menggunakan  transmisi cahaya.  Faktor  yang  mengganggu  adalah kekeruhan  yang  terdapat  pada  sampel lipemik.  Kekeruhan  dalam  sampel  lipemik dapat  mengganggu  pemeriksaan  secara spektrofotometer, turbidimetri, maupun nephelometri karena menghamburkan cahaya dan penyerapan cahaya (Sacher, R. 2004).
Serum  lipemik  dapat  ditangani  dengan beberapa  cara,  salah  satunya  melalui pendinginan  selama  12  sampai  16  jam  yang akan  memberikan  informasi  yang  cepat mengenai  kadar  kilomikron  dan  VLDL  serum dengan  kadar  trigliserida  berlebihan,  namun cara  pendiaman  yang  dilakukan  terhadap serum  lipemik  tidak  dianjurkan  karena  akan menunda waktu pemeriksaan (Piyophirapong, 2010).  Penanganan  serum  lipemik  secara konvensional  menggunakan  ultrasentrifugasi. Metode  ultrasentrifugasi  ini  efektif,    akan tetapi  membutuhkan  alat  tambahan  yang cukup  mahal  bagi  laboratorium  kecil  dan laboratorium  satelit  (Cynthia  M.  Roberts  and S.W. Cotton, 2013).
Metode  lain  yang  dapat  dilakukan adalah  metode  ekstraksi  dengan  pelarut organik  seperti  eter  dan  kloroform  untuk menghilangkan  lipid  pada  serum  manusia, namun  penggunaan  pelarut  organik  seperti kloroform  dan  eter  sudah  jarang  dipakai karena  bahan  ini  bersifat  karsinogenik  yang membahayakan  teknisi  laboratorium  dan lingkungan (Castro, A.R. 2000).
Penelitian  Cynthia,  Roberts,  Cotton (2013)  menunjukkan  bahwa    78%  sampel dengan penambahan siklodekstrin menunjukkan  tingkat  lipemik  yang    lebih rendah
dibanding dengan
metode ultrasentrifugasi  karena  penghilang    lipid pengganggu lebih maksimal.
Menurut Caligur (2008), Gamma-siklodekstrin memiliki  kelarutan  dan  rongga  yang  lebih besar dibandingkan dengan Alfa-siklodekstrin dan Beta-siklodekstrin sehingga dapat menerima banyak molekul. Gamma- siklodekstrin  memiliki  kemampuan  untuk membentuk kompleks inklusi dengan molekul yang    ditahan  dalam  rongga  molekul siklodekstrin. Rongga lipofilik molekul siklodekstrin  menyediakan  lingkungan  mikro yang  sesuai  ukuran  gugus  non-polar sehingga  dapat  masuk  untuk  membentuk kompleks inklusi (Putri, D.K. 2016).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menge- tahui  perbedaan  kadar  glukosa  pada  serum lipemik  dengan  dan  tanpa  penambahan flokulan  gamma-siklodekstrin  pada  inkubasi suhu 23 o C.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini merupakan penelitian  Pra Eksperimen (pre-experimental design) dengan menggunakan Static Group Comparison . Penelitian dilakukan di Laboratorium Klinik Jurusan Analis
Kesehatan  Yogyakarta  pada  bulan  Maret- April  2017.  Serum  yang  digunakan  untuk penelitian  sebanyak  20  sampel  dengan  krite- ria  kadar  trigliserida  >300  mg/dl    yang didapatkan dari Laboratorium Klinik RSUP Dr. Sardjito,  sampel  serum  lipemik  untuk  perla- kukan dan kontrol berasal dari sampel serum yang sama. Serum lipemik yang dipilih adalah serum  lipemik  yang  tidak  ikterik  dan  tidak hemolisis.  Sampel  langsung  diperiksa  kadar glukosa  untuk  kontrol,  kemudian  sampel serum dengan penambahan Gamma- siklodekstrin  konsentrasi  20%  dengan  per- bandingan  2  :  1  atau  0.5  ml  serum  dan  0.25 ml  larutan  Gamma-siklodekstrin  untuk  perla- kukan.  Serum  kemudian  di  inkubasi  pada suhu  23 o C  selama  5  menit  lalu  dilakukan sentifugasi  dengan  kecepatan  3000  rpm selama  5  menit.  Supernatan  yang  jernih diambil  dan  dilakukan  pemeriksaan  kadar glukosa.    Pemeriksaan  kadar  glukosa dilakukan  dengan  metode glukosa  oksidase/ peroksidase (GOD/POD).
Data yang diperoleh dianalisis secara deskriptif yang dis- ertai penyajian dalam bentuk diagram batang.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  terhadap 20  sampel  yang  lipemik  didapatkan  hasil  se- bagai berikut:
Tabel  1.  Distribusi  Frekuensi  Jumlah Sampel Berdasarkan Kadar Trigliserida
Data  rerata  selisih  hasil  pemeriksaan kadar  glukosa  serum  lipemik  dengan  dan tanpa penambahan gamma-siklodekstrin yang diinkubasi suhu 23 o C dapat dilihat pada gambar 1.
Gambar  1.  Rerata  Hasil  Pemeriksaan Kadar Glukosa dengan dan tanpa penambahan Gamma-Siklodekstrin pada
inkubasi suhu 23 o C
Pemeriksaan  kadar  glukosa  dengan penambahan  flokulan  gamma-siklodesktrin yang diinkubasi suhu 23 o C  lebih rendah  dari kadar  glukosa  tanpa  penambahan  flokulan Gamma-siklodekstrin  yang  diinkubasi    suhu 23 o C dengan rerata selisih 97,97 mg/dl, dilihat pada gambar 1 diagram rerata kadar glukosa, hal  ini  disebabkan  oleh  flokulan  gamma- siklodekstrin yang dapat menjernihkan serum lipemik dengan mengikat molekul lipoprotein.
Tabel  2.Rerata  Selisih  Kadar  Glukosa Dengan  dan  Tanpa  Penambahan  Gamma- Siklodekstrin Inkubasi
Suhu 23 o C
Berdasarkan Tingkat Lipemik.
Pada  tabel  2.  rerata  selisih  hasil pemeriksaan  kadar  glukosa  dengan  tingkat lipemik ringan sebesar 94,90 (35%),
sedangkan    tingkat  lipemik  sedang  sebesar 145,38  (48%)  dan  tingkat  lipemik  berat sebesar  88,28  (32%).  Hasil  pemeriksaan kadar albumin dengan tingkat lipemik sedang memiliki rerata selisih yang paling kecil, hal ini diakibatkan  bahan  pemeriksaannya  hanya berjumlah dua, dibandingkan hasil pemeriksaan    kadar  glukosa  dengan  tingkat lipemik  lain  yang  memiliki  rerata  selisih  yang hampir sama dengan jumlah sampel masing- masing sembilan.
Hasil  penelitian  serum  lipemik  dengan penambahan  flokulan  gamma-siklodekstrin yang  diinkubasi  suhu  23 o C  secara  visual  ter- lihat  lebih  jernih  setelah  dilakukan  pemus- ingan  dengan  kecepatan  3000  rpm selama  5 menit.  Pemeriksaan  kadar  glukosa  dengan penambahan  flokulan  gamma-siklodesktrin yang  diinkubasi  suhu  23 o C  lebih  rendah  dari kadar  glukosa    tanpa  penambahan  flokulan Gamma-siklodekstrin  yang  diinkubasi  suhu 23 o C dengan rerata selisih 97,97 mg/dl, hal ini disebabkan oleh flokulan gamma-siklodekstrin yang  dapat  menjernihkan  serum  lipemik dengan mengikat molekul lipoprotein. Penam- bahan  flokulan  gamma-siklodekstrin  pada sampel serum lipemik akan mengikat molekul lipoprotein,  sehingga  lipoprotein  akan  ter- endapkan setelah  dilakukan pemusingan dan serum menjadi jernih. Supernatan jernih yang dihasilkan  diperiksa  kadar  glukosa    sehingga didapatkan hasil yang akurat.
Penanganan  serum  lipemik  yang populer dilakukan di lapangan adalah dengan metode  ultrasentrifugasi,  ekstraksi,  dan flokulasi.  Pada  penelitian  ini  menggunakan gamma-siklodekstrin. Goal  Standard untuk penanganan  serum  lipemik  di  laboratorium adalah menggunakan ultrasentrifugasi
(Calmarza P, Cordero J,2011) .
Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan Sharma  pada  tahun  1990,  membandingkan penggunaan flokulan alfa-siklodekstrin dengan metode ultrasentrifugasi
menunjukkan hasil tidak ada perbedaan yang signifikan diantara keduanya.
Hasil  yang  sama  juga  didapatkan  pada penelitian  Robert  pada  tahun  2013,  yaitu menunjukkan  bahwa  78%  sampel  yang dilakukan  penanganan  dengan  siklodektrin menunjukkan  tingkat  lipemik  yang  lebih rendah daripada menggunakan ultrasentrifugasi  (Roberts,  C.M.  2013),  selain itu  penelitian  menggunakan  flokulan  juga dilakukan  oleh  Dewanti    Kurnia  Putri  pada tahun 2016. Hasil yang didapatkan menunjukkan  rerata  selisih  41,46  mg/dl dengan persentase selisih 20,95%. Tidak ada perbedaan  secara  signifikan  penggunaan flokulan  alfa-siklodekstrin  dengan  gamma- siklodekstrin (Putri,  D.K.  2016).  Penggunaan gamma-siklodekstrin  juga  dapat  diterapkan pada  sampel  lipemik  dengan  parameter penggunaan  yang  berbeda,  seperti  untuk pemeriksaan  protein  total  dan  ureum,  ber- dasarkan  hasil  penelitian  terdapat  perbedaan yang  signifikan  antara  sebelum  dan  sesudah diberikan  gamma-siklodekstrin  (Sujono,  S. 2016).
Serum  lipemik  yang  langsung  diperiksa mengakibatkan hasil tinggi palsu. Penambahan gamma-siklodekstrin yang diinkubasi  23 o C  akan  mengikat  molekul lipoprotein  yang  ada  dalam  serum  lipemik secara  maksimal  sehingga  lipoprotein  akan terendapkan  dan  serum  menjadi  jernih. Supernatan  jernih  yang  dihasilkan  diperiksa kadar  glukosanya  sehingga  didapatkan  hasil yang akurat.
Kelemahan  dari  penelitian  ini  adalah tingkat kekeruhan dari serum yang digunakan berbeda-beda,    serta  tidak  diketahuinya  latar belakang  penyakit  pasien.  Serum  lipemik yang digunakan dalam penelitian ini didapatkan  dari  laboratorium  klinik  RSUP  Dr. Sardjito  Yogyakarta  kemudian  dilakukan penyimpanan  pada freezer .  Sampel  yang didapatkan  dalam  waktu  yang  berbeda-beda, maka  lama  penyimpanan  setiap  sampel  juga berbeda satu sama lain.  Konsentrasigamma- siklodekstrin yang digunakan dalam penelitian ini  juga  belum  diketahui  keefektifitasannya apakah  sudah  maksimal  atau  belum, sehingga  perlu  diadakan  penelitian  lebih
lanjut  dengan  membandingkan  berbagai macam  variasi  konsentrasi.    Inkubasi  suhu 23 o C  tidak  menggunakan  waterbath,  karena suhu  23 o C  termasuk  suhu  dingin,  sehingga inkubasi  suhu  23 o C  menggunakan  kulkas dengan suhu 23 o C. Penelitian  ini  menunjukkan  serum lipemik  tanpa  perlakuan  menyebabkan  hasil pemeriksaan  kadar  glukosa  tinggi  palsu sehingga  penggunaan  metode  flokulasi dengan    penambahan  gamma-siklodekstrin yang  diinkubasi  suhu  23 o C  terbukti  dapat digunakan  untuk  mengurangi  kekeruhan. Metode ini cukup sederhana, tidak berbahaya, lebih efektif dan efisien, sehingga penggunakan gamma-siklodekstrin yang diinkubasi  suhu  23 o C  dapat  diaplikasikan dengan mudah oleh  laboratorium  klinis untuk menangani  serum  lipemik,  sehingga  hasil pemeriksaan kadar glukosa lebih akurat.

## KESIMPULAN
Ada  perbedaan  rerata  kadar  glukosa pada  serum  lipemik  dengan  dan  tanpa penambahan  flokulan  gamma-siklodekstrin pada  inkubasi  suhu  23 o C.  Rerata  hasil pemeriksaan kadar glukosa dengan penambahan  flokulan  Gamma-siklodekstrin yang  diinkubasi  suhu  23 o C  adalah    169,23 mg/dl dan tanpa penambahan  adalah 267,20 mg/dl.  Rerata  selisih  kadar  glukosa  serum lipemik  dengan  dan  tanpa  penambahan gamma-siklodekstrin  yang  diinkubasi  suhu 23 o C  adalah  97,97  mg/dl  dengan  persentase selisih (35,23%).

## SARAN
Penggunaan  gamma-siklodekstrin  yang diinkubasi  suhu  23 o C  dapat  diterapkan  bagi pengelola  manajemen  laboratorium  klinis sebagai  salah  satu  cara  menangani  serum lipemik,  khususnya  kadar  glukosa.  Perlunya dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  tentang penambahan gamma-siklodekstrin yang diinkubasi  suhu  23 o C  pada  serum  lipemik dengan variasi konsentrasi gamma- siklodekstrin  maupun  variasi  pH.  Perlunya dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  dengan kriteria  serum  lipemik  yang  mempunyai kekeruhan seragam.

## DAFTAR PUSTAKA
Anderson, N.R Slim, Gama, S., & R. Holland, M.  .  (2003).  Lipemia:  An  Overrated  In- terference?  Continuing  Education  Top- ics  and  Issues. British  Journal  of  Bio- medical Science . Calmarza P, & Cordero J. (2011). Lipemia in- terferences  in  routine  clinical  biochemi- cal tests. Biochem Med , 21 , 160 – 6.
Castro  AR,  Morrill WE,  &  Pope  V.  (2000).  Li- pid  Removal  from  Human  Serum Sam- ples. Clin Diagn Lab Immunol , 7 (2), 197 – 9.
Cynthia  M,  Roberts,  &  Steven,  W.  C.  (2013). Cyclodextrin  Removal  of  Lipemic  Inter- ference:  An  Attractive  Alternative  to  Ul- tracentrifugation  for  Satellite  Laborato- ries. Archives of Pathology & Laborato- ry Medicine , 137 (8), 1027 – 1028. Piyophirapong,  S.,  Wontiraporn,  W.,  & Sribhen,  K.  (2010).  Factitious  Resultin Clinical  Chemistry  Tests  Caused  by
Common Endogenous
Interferents. Siriraj Medical Journal , 62 (4). Putri  DK.  (2016). Perbedaan  Kadar  Glukosa pada  Serum  Lipemik  dengan  dan Tanpa  Penambahan  Flokulan  Gamma- Siklodekstrin . Poltekkes Kemenkes
Yogyakarta.
Sacher  R,  &  McPherson.  (2004). Tinjauan
Klinis  Hasil  Pemeriksaan  Laboratorium . Jakarta: EGC. Sharma  A,  Anderson  K,  &  Baker  JW. (1990). Flocculation  of  serum  lipoproteins  with cyclodextrins:  application  to  assay  of hyperlipidemic  serum. Clin  Chem , 36 , 529 – 32.
Sujono, S., Maulida, Y., & Sari, M. (2016). Ka- dar  Protein  Total  dan  Ureum  Dengan dan  Tanpa  Penambahan γ -cyclodextrin Pada  Serum  Lipemik. Jurnal  Teknologi Laboratorium , 5 (1),  16 – 19. Retrieved from http://www.teknolabjournal.com/
index.php/Jtl/article/view/71
Usha A, & B N Malawadi. (2016). Lipemic in- dex  a  tool  to  measure  lipemia. Interna- tional Journal of Medical Research and Review , 4 (4), 613 – 617.