Isolasi Dan Identifikasi Azotobacter Dari Rhizosfer Tanaman Jagung ( Zea mays L.) Di Desa Sei Mencirim Kecamatan Sunggal Kabupaten Deli Serdang
Lidya Angraeni (1) , Rasyidah (2) , Ulfayani Mayasari (3)
Program Studi Biologi, Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri Sumatera Utara Jln. Lapangan Golf Durian Jangak, Medan, Sumatera Utara, 20353
lidyaangraeni06@gmail.com (1), rasyidah@uinsu.ac.id (2), ulfayani.mayasari@uinsu.ac.id (3)

## ABSTRAK
Bakteri  penambat  nitrogen  hidup  bebas  di  tanah  yaitu Azotobacter .  Bakteri  penambat  nitrogen  memiliki enzim  nitrogenase  yang  berperan  mereduksi  gas  N 2 dari  udara  menjadi  amoniak  yang  dapat  dimanfaatkan oleh  sel  bakteri  dan  tumbuhan  dalam  metabolisme  nitrogen.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengisolasi bakteri  penambat  nitrogen Azotobacter sp.  yang  terdapat  disekitar  perakaran  tanaman  yang  berasal  dari rhizosfer tanaman jagung di Desa Sei Mencirim Kecamatan Sunggal Kabupaten Deli Serdang. Metode yang digunakan  pada  penelitian  ini  dimulai  dengan  isolasi  tanah  dari  sampel  ke  dalam  media Lacto  Glucose Infused (LGI)  yang  merupakan  media  untuk  pertumbuhan Azotobacter dengan  pengenceran  serial. Berdasarkan  hasil  isolasi  ditemukan  5  isolat Azotobacter memiliki  ciri  Gram  negatif  dengan  bentuk  coccus dan steptobasil Kelima Isolat memiliki warna yang  berbeda yaitu ada yang berwarna putih dan putih keruh. Hasil  uji  biokimia  pada  uji  katalase  positif,  bersifat  motil,  hasil  uji  indol  bereaksi  positif,  uji  hidrolisis  pati bereaksi positif, hasil gelatin menunjukkan negatif, uji sitrat bereaksi positif. Berdasarkan hasil uji biokimia ditemukan spesies Azotobacter Chroococcum dan spesies Azotobacter Agilis .
Kata Kunci: bakteri Azotobacter , rhizosfer, tanaman jagung ( Zea mays L.)

## ABSTRACT
Nitrogen fixing bacteria live freely in the soil namely Azotobacter. Nitrogen fixing bacteria have nitrogenase enzymes which play a role in reducing N2 gas from the air into ammonia which can be utilized by bacterial and  plant  cells  in  nitrogen  metabolism.  This  study  aims  to  isolate  nitrogen-fixing  bacteria  Azotobacter  sp. which are found around the roots of plants originating  from the rhizosphere of corn plants  in Sei Mencirim Village,  Sunggal  District,  Deli  Serdang  Regency.  The  method  used  in  this  study  began  with  soil  isolation from samples into Lacto Glucose Infused (LGI) media which is a medium for Azotobacter growth with serial dilutions.  Based  on  the  isolation  results,  it  was  found  that  5  Azotobacter  isolates  had  Gram  negative characteristics with coccus and steptobacil  forms. The  five  isolates had different colors, namely  some were white and some were cloudy white. The biochemical test results for the catalase test were positive, they were motile,  the  indole  test  results  were  positive,  the  starch  hydrolysis  test  was  positive,  the  gelatin  result  was negative,  and  the  citrate  test  was  positive.  Based  on  the  results  of  biochemical  tests,  it  was  found  that Azotobacter Chroococcum and Azotobacter Agilis species were found.
Keywords : Azotobacter bacteria, rhizosphere, maize (Zea mays L.)
Angraeni  Masyitah  L,  Rasyidah,  Mayasari  U  :  Isolasi  Dan  Identifikasi  Azotobacter  Dari Rhizosfer  Tanaman  Jagung  ( Zea  mays L.)  Di  Desa  Sei  Mencirim  Kecamatan  Sunggal Kabupaten Deli Serdang

## I. PENDAHULUAN

## 1. Latar Belakang
Akar tanaman merupakan habitat yang baik untuk pertumbuhan mikroba. Interaksi antara bakteri  dan  akar  tanaman  akan  meningkatkan  suplai  hara  bagi  keduanya.  Rizosfer  (akar tanaman)  merupakan  habitat  yang  sangat  baik  untuk  pertumbuhan  mikroba  karena  akar tanaman  menyediakan  berbagai  bahan  organik  yang  umumnya  menstimulir  pertumbuhan mikroba.  Populasi  mikroba  di  tanah  rizosfer  umumnya  lebih  banyak  dan  beragam dibandingkan dengan di tanah non-rizosfer. Aktivitas mikroba di rizosfer dipengaruhi oleh eksudat akar tanaman. Beberapa mikroba rizosfer berperan dalam siklus nutrisi dan proses pembentukan  tanah,  pertumbuhan  tanaman,  mempengaruhi  aktivitas  mikroba,  dan  agen kontrol biologis terhadap patogen akar (Wulandari et al ., 2020). Bakteri adalah prokariota sel  tunggal  dan  jumlah  kelompok  Paling  melimpah,  ditemukan  di  setiap  ekosistem terestrial. Meskipun ukurannya lebih kecil dari actinomycetes dan jamur, bakteri memiliki kemampuan  metabolisme  yang  lebih  beragam  dan  memainkan  peran  penting  dalam pembentukan  tanah,  dekomposisi  bahan  organik,  remediasi  tanah,  polusi,  transformasi nutrisi, integrasi simbiosis dengan tanaman, dan juga penyebab penyakit tanaman. Bakteri Penambat  Nitrogen  (BPN)  mampu  mengikat  nitrogen  di  udara  baik  secara  simbiosis (rhizobia)  maupun  non-simbiosis  (bakteri  rizosfer  penambat  nitrogen  yang  hidup  bebas). Bakteri  ini  hadir  di  hampir  setiap  relung  ekologi  tanah.  Bakteri  ini  biasanya  berasosiasi dengan  tumbuhan,  sistem  perairan,  dan  sedimen.  Bakteri  pengikat  nitrogen  yang  hidup bebas  dikenal  luas  dan  digunakan  sebagai  inokulan  Ini  adalah  genus  Azotobacter (Antralina et  al .,  2015).  Azotobacter  ini  termasuk  bakteri  non  simbiotik  yang  berasosiasi dengan  berbagai  tanaman.  Bakteri-bakteri  tersebut  mempunyai  kemampuan  menambat nitrogen bebas dari udara sehingga unsur N tersedia bagi tanaman, serta sebagai pemantap agregat tanah dan interaksinya akan berpengaruh kepada pertumbuhan tanaman dan fungsi penting  dalam  mendukung  terlaksananya  pertanian  ramah  lingkungan  melalui  berbagai proses  (Widiawati et al ., 2015).  Tanaman monokotil lebih banyak mengeluarkan eksudat dari pada tanaman dikotil. Contohnya adalah akar tanaman jagung.  Akar tanaman jagung dapat tumbuh sampai dengan kedalaman 2 m dan menyebar kearah horizontal lebih dari 1 meter, pada umumnya akar tanaman tersebut terpusat pada kedalaman kurang dari 20 cm (Niswati et  al .,  2008).  Jagung  menghendaki  tanah  yang  subur  untuk  dapat  berproduksi dengan  baik.  Hal  ini  dikarenakan  tanaman  jagung  membutuhkan  unsur  hara  terutama nitrogen (N), Fosfor (P) dan kalium (K) dalam jumlah yang banyak. Ketersediaan nitrogen bagi tanaman dapat ditingkatkan dengan bantuan bakteri penambat nitrogen (BPN), bakteri penambat  nitrogen  yang  digunakan  dan  memperlihatkan  asosiasi  pertumbuhan  yang  baik dengan  tanaman  jagung  adalah Azotobacter sp.  Yang  mampu  memacu  pertumbuhan jagung  (Hala et al ., 2021). Kemampuan bakteri rhizosfer ini memicu berbagai penelitian – penelitian  untuk  mendapatkan  isolat  bakteri  rhizosfer  dari  berbagai  lokasi.  Salah  satu lokasi yang menarik untuk diketahui bakteri rhizosfer adalah Desa Sei Mencirim. Desa  Sei Mencirim  merupakan  daerah  pertanian  tanaman  dan  hortikultura  yang  memiliki  nilai keanekaragaman  hayati  yang  tinggi,  terutama  keanekaragaman  tumbuhan.  Usaha penggalian  sumber  daya  hayati  tersebut  belum  banyak  dilakukan  baik  flora  maupun mikrobanya.  Untuk  itu  perlu  dilakukan  eksplorasi  mengenai  potensi  biota,  terutama  yang berhubungan  dengan  kesuburan  tanah  salah  satunya  adalah  mikroba  tanah  pada  rhizosfer tanaman.
Angraeni  Masyitah  L,  Rasyidah,  Mayasari  U  :  Isolasi  Dan  Identifikasi  Azotobacter  Dari Rhizosfer  Tanaman  Jagung  ( Zea  mays L.)  Di  Desa  Sei  Mencirim  Kecamatan  Sunggal Kabupaten Deli Serdang

## 2. Perumusan Masalah
Berdasarkan  uraian  latar  belakang  masalah  diatas,  yang  menjadi  rumusan  masalah penelitian ini adalah :
1. Apakah terdapat bakteri Azotobacter di rhizosfer tanaman jagung (Zea mays) ?
2. Bagaimana hasil identifikasi jenis Azotobacter di tanaman jagung (Zea mays) ?
3. Tujuan Penelitian
Penelitian ini bertujuan untuk :
1. Untuk mengetahui adakah bakteri Azotobacter di Rhizosfer tanaman jagung (Zea mays)
2. Untuk mengetahui karakteristik bakteri Azotobacter di Rhizosfer tanaman jagung (Zea mays)
4. Manfaat Penelitian
Manfaat penelitian ini adalah :
1. Manfaat penelitian ini bagi peneliti yaitu dapat memberikan pengalaman dan penelitian ini diharapkan dapat memberi kontribusi bagi pengembang teori utama untuk penelitian dimasa yang akan datang.
2. Manfaat penelitian ini bagi masyarakat yaitu sebagai sumber informasi dan pengetahuan mengenai potensi bakteri Azotobacter sebagai peningkatan pertumbuhan tanaman.

## II. METODE Tempat dan Waktu
Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan  Desember  2022  s/d  Januari  2023  di  La l bora l torium Mikrobiologi  Fa l kulta l s  Ma l tema l tika l da l n  Ilmu  Pengeta l hua l n  A l la l m  (FMIPA l )  Universita l s Suma l tera l Uta l ra l . Rancangan Penelitian atau Model Penelitia l n  ini  mengguna l ka l n  metode  a l na l lisis  da l ta l seca l ra l deskriftif,  kua l lita l tif  ya l ng  diliha l t berda l sa l rka l n  ciri morfologi  da l n  ciri  biokimia l ,  A l na l lisis  kua l lita l tif a l da l la l h  a l na l lisis  da l ta l ya l ng diguna l ka l n  untuk  mena l fsirka l n  informa l si da l ta l berda l sa l rka l n  ha l sil  penelitia l n  ya l ng  berbentuk penjela l sa l n.  Setia l p  bia l ka l n  murni  ya l ng  diperoleh  kemudia l n  diidentifika l si  mengguna l ka l n kunci determina l si da l ri litera l tur Bergey's Ma l nua l l of Determina l tive Ba l cteriology . Bahan dan Peralatan Ba l ha l n ya l ng diguna l ka l n da l la l m penelitia l n ini a l nta l ra l la l in ta l na l h da l ri rhizosfer ta l na l ma l n ja l gung ya l ng  diperoleh  da l ri  la l da l ng  Sei  Mencirim,  Keca l ma l ta l n  Sungga l l.  A l lkohol  70%,  medium LGI ,  a l qua l dest  steril,  La l ruta l n  Ga l ra l m  Fisiologis  (Na l cl  0,9  %),  ba l ha l n  pewa l rna l a l n  gra l m, media l untuk  uji  ka l ta l la l se,  media l untuk  uji  sitra l t,  media l untuk  uji  hidrolisis  pa l ti,  media l untuk uji hidrolisis gela l tin, media l untuk uji indol, media l untuk uji motilita l s, ka l pa l s, pla l stik ziplock,  cling  wa l rp,  a l luminium  foil.  A l la l t  ya l ng  diguna l ka l n  da l la l m  penelitia l n  ini  a l da l la l h inkuba l tor, a l utokla l f, timba l nga l n a l na l litik, lema l ri es, kompor listrik/pena l nga l s, bunsen, gela l s ukur,  erlenmeyer,  ca l wa l n  petri,  ta l bung  rea l ksi  (kecil  da l n  seda l ng),  ra l k  ta l bung,  spa l tula l , mikropipet, eppendorf, ja l rum ose, vortex, bea l ker gla l ss, mikroskop, gela l s objek, pipet tetes, L-gla l ss, roll meter, a l la l t tulis, ka l mera l ha l ndphone, ka l in hita l m.
Tahapan Penelitian
1) Pengambilan Sampel
Penga l mbila l n sa l mpel ta l na l h dia l mbil da l ri rhizosfer ta l na l ma l n ja l gung . Ta l na l h rhizosfer dia l mbil seba l nya l k  30  g  pa l da l keda l la l ma l n  20  cm  sa l mpa l i  denga l n  40  cm  denga l n  mengguna l ka l n ca l ngkul/sekop.  Sa l mpel  ta l na l h  dia l mbil  da l ri  3  titk  pa l da l da l era l h  perta l na l ma l n  ja l gung,  ya l ng dikomposit  da l n  disimpa l n  pa l da l wa l da l h  kerta l s  sa l mpel  ya l ng  sela l njutnya l a l ka l n  dia l na l lisis (Wisda l wa l ti et a l l ., 2019).
2) Pembuatan Media
Angraeni  Masyitah  L,  Rasyidah,  Mayasari  U  :  Isolasi  Dan  Identifikasi  Azotobacter  Dari Rhizosfer  Tanaman  Jagung  ( Zea  mays L.)  Di  Desa  Sei  Mencirim  Kecamatan  Sunggal Kabupaten Deli Serdang
Pembuatan media l LGI dibua l t denga l n menimba l ng sukrosa l 20 gr, K 2 HPO 4 0,05 gr, KH 2 PO 4 0,15  gr,  Ca l CL 2 0,01  gr,  MgSO 4. 7H 2 O  0,20  gr,  Na l 2 MoO 4. 2H 2 O  2  mg,  FeCl 2 0,01  gr, Bromtimol  biru  (0,5%  la l ruta l n  da l la l m  eta l nol)  2  ml,  Ca l CO 3 1  gr,  a l ga l r  15  gr  da l n  a l kua l des 1.000  ml,  la l lu  dipa l na l ska l n  dia l ta l s  hotpla l te  sa l mbil  dia l duk  hingga l la l rut.  Sela l njutnya l , disterilka l n  da l la l m  a l utokla l f  pa l da l suhu  121 o C  sela l ma l 15  menit  da l n  tunggu  hingga l media l mema l da l t (Krieg & Dobereiner, 1984).
Pembuatan  media  simmon  citrat  seba l nya l k  1,5  gr  kemudia l n  di  ma l sukka l n  keda l la l m  gela l s beker  ya l ng  suda l h  beisi  50  ml  a l qua l des,  La l lu  dipa l na l ska l n  mengguna l ka l n  hotpla l te  denga l n suhu  150 o C  sela l ma l 15  menit.  Sela l njutnya l ,  menua l ngka l n  seba l nya l k  4  ml  keda l la l m  ta l bung rea l ksi.  Disterilisa l sika l n  mengguna l ka l n  a l utokla l f  denga l n  suhu  121 o C.  Ta l bung  rea l ksi dimiringka l n 45 o C da l n ketika l suda l h dingin dima l sukka l n keda l la l m kulka l s bersuhu 3 o C. Pembuatan medium pa l ti terdiri da l ri pepton 5 gr, beef ekstra l ct 3 gr, a l milum 2 gr, da l n a l ga l r 15  gr.  Semua l ba l ha l n  dica l mpurka l n  sa l mpa l i  homogen  denga l n  dita l mba l hka l n  a l qua l des  da l n volumenya l menca l pa l i  1000  ml  da l la l m  pena l nga l s  a l ir  da l n  dibia l rka l n  hingga l mendidih. Sela l njutnya l dia l tur  pH  ya l ng  berkisa l r  a l nta l ra l 7-7,2  da l n  disterilka l n  pa l da l a l utokla l f  121 o C denga l n teka l na l n 1,5 a l tm.
Pembuatan  media l gela l tin  terdiri  da l ri  pepton  5  gr,  beef  ekstra l ct  3  gr,  da l n  gela l tin  120  gr. Semua l ba l ha l n  dica l mpurka l n  hingga l homogen  denga l n  dita l mba l hka l n  a l qua l des  sa l mpa l i volumenya l 1000 ml da l la l m pena l nga l s a l ir da l n dibia l rka l n hingga l mendidih. Sela l njutnya l dia l tur pH hingga l 6,8 da l n disterilka l n pa l da l a l utokla l f 121 o C pa l da l teka l na l n 1,5 a l tm. Pembuatan media l Sulfid  Indol  Motility (SIM) seba l nya l k  3  gr  dila l rutka l n  ke  da l la l m  100  ml a l qua l des  denga l n  pH  7,3  kemudia l n  dipa l na l ska l n  da l n  dia l duk  hingga l homogen.  La l lu,  mulut erlenmeyer  ditutup  mengguna l ka l n  a l luminium  foil  da l n  disterilisa l sika l n  denga l n  a l utokla l f denga l n suhu 121 o C da l n teka l na l n 1 a l tm sela l ma l 15 menit.
3) Isolasi Bakteri Azotobacter
Sa l mpel  ta l na l h  diisola l si  denga l n  mengguna l ka l n  media l selektif,  ya l itu:  media l LGI  untuk ba l kteri A l zotoba l cter .  Pembua l ta l n  media l dila l kuka l n  denga l n  menimba l ng  semua l ba l ha l n  ya l ng disedia l ka l n kemudia l n dila l rutka l n keda l la l m 500 ml a l ir denga l n mengguna l ka l n penga l duk a l ta l u ma l gnet stirer ya l ng disimpa l n dia l ta l s pema l na l s. Setela l h itu media l ya l ng suda l h ja l di diinkuba l si sela l ma l 20 menit. Ta l ha l p pengerja l a l n sa l mpel ya l itu 10 gra l m ta l na l h rhizosfer da l n a l ka l r ta l na l ma l n ja l gung  ya l ng  a l ka l n  diisola l si  ba l kteri  A l zotoba l cter  dila l rutka l n  da l la l m  90  ml  la l ruta l n  fisiologis (la l ruta l n Na l Cl 0,85%), sela l njutnya l diencerka l n seca l ra l seria l l sa l mpa l i tingka l t pengencera l n 10 - 5. Sa l tu ml suspensi da l ri pengencera l n 10 -2 , 10 -3 , 10 -4 da l n 10 -5 denga l n 3 ka l li pengula l nga l n da l n dima l sukka l n ke da l la l m media l LGI mengguna l ka l n metode seba l r (Sprea l d Pla l te) . Sa l mpel ya l ng tela l h diseba l r kemedia l , sela l njutnya l diinkuba l si sela l ma l 4-7 ha l ri pa l da l suhu 37 o C. Setela l h itu dila l kuka l n penga l ma l ta l n meliputi tepia l n koloni, bentuk koloni, permuka l a l n koloni, da l n wa l rna l koloni (Husen E et a l l ., 2022).

## III. HASIL PENELITIAN
Berda l sa l rka l n penelitia l n  ya l ng dila l kuka l n, diperoleh ba l hwa l ba l kteri  ya l ng diisola l si da l ri ta l na l h rhizosfer ja l gung (Zea l ma l ys L.) di Desa l Sei Mencirim Keca l ma l ta l n sungga l l Ka l bupa l ten Deli Serda l ng  da l pa l t  tumbuh  pa l da l media l selektif    LGI  (La l ctose  Glucose  Infused)  denga l n mengguna l ka l n metode seba l r (Sprea l d Pla l te) . Setela l h dila l kuka l n pengencera l n 10 -2 , 10 -3 , 10 -4 da l n 10 -5 denga l n 3 ka l li pengula l nga l n ditemuka l n  pa l da l sa l mpel ya l ng tela l h diinkuba l si sela l ma l 4-7 ha l ri di da l pa l tka l n 10 isola l t ba l kteri da l ri 3 titik ya l ng tela l h dikompositka l n denga l n di beri kode A l RJ 1, A l RJ 2, A l RJ 3, A l RJ 4, A l RJ 5, A l RJ 6, A l RJ 7, A l RJ 8, A l RJ 9, A l RJ 10. Karakterisasi Morfologi Bakteri Penga l ma l ta l n  ka l ra l kteristik  morfologi  ba l kteri  berda l sa l rka l n  ka l ra l kteristik  koloni  ba l kterinya l ya l itu bentuk koloni, wa l rna l koloni, eleva l si koloni da l n tepi koloni ba l kteri.
Angraeni  Masyitah  L,  Rasyidah,  Mayasari  U  :  Isolasi  Dan  Identifikasi  Azotobacter  Dari Rhizosfer  Tanaman  Jagung  ( Zea  mays L.)  Di  Desa  Sei  Mencirim  Kecamatan  Sunggal Kabupaten Deli Serdang
Ta l bel.1 Ka l ra l kteristik Morfologi Ba l kteri
No Kode Isola l t Ka l ra l kteristik Morfologi Ba l kteri
Bentuk
Koloni Tepia l n Eleva l si Wa l rna l
1 A l RJ 1 Circula l r Entire Fla l t Putih 2 A l RJ 2 Circula l r Entire Convex Putih 3 A l RJ 3 Iregula l r Undula l te Fla l t Putih 4 A l RJ 4 Circula l r Entire Fla l t Putih Keruh 5 A l RJ 5 Iregula l r Undula l te Fla l t Putih 6 A l RJ 6 Circula l r Loba l te Convex Putih 7 A l RJ 7 Circula l r Entire Convex Putih Keruh 8 A l RJ 8 Iregula l r Undula l te Fla l t Putih Keruh 9 A l RJ 9 Iregula l r Undula l te Fla l t Putih 10  A l RJ 10 Circula l r Curled Fla l t Putih
Berdasarkan  hasil  dari  pengamatan  pada morfologi  koloni  ba l kteri  ya l ng  tumbuh  di  media l LGI , pa l da l isola l t  Arj  1  memiliki  bentuk cilcula l r, ma l rgin  berbentuk Entire, eleva l si da l ta l r (fla l t), berwa l rna l putih, Pa l da l isola l t Arj 2 memiliki bentuk cilcula l r, ma l rgin berbentuk Entire, eleva l si convex,  berwa l rna l putih,  pa l da l isola l t  Arj  3  memiliki  bentuk Iregular, ma l rgin berbentuk Undulate, eleva l si da l ta l r (fla l t), berwa l rna l putih, Pa l da l isola l t Arj 4 memiliki bentuk cilcula l r, ma l rgin  berbentuk Entire, eleva l si da l ta l r  (fla l t),  berwa l rna l putih  keruh,  Pa l da l isola l t Arj 5 memiliki bentuk Iregular, ma l rgin berbentuk Undulate, eleva l si da l ta l r (fla l t), berwa l rna l putih, Pa l da l isola l t Arj 6 memiliki bentuk cilcula l r, ma l rgin berbentuk Lobate, eleva l si convex , berwa l rna l putih.  Isolat  Arj  7  memiliki  bentuk circular ,  tepian entire ,  elevasi convex , berwarna putih keruh. Isolat Arj 8 memiliki bentuk Iregular , tepian Undulate , elevasi flat , berwarna putih keruh. Isolat Arj 9 memiliki bentuk Iregular , tepian Undulate , elevasi flat , berwarna  putih.  Isolat  Arj  10  memiliki  bentuk circular ,  margin  berbentuk  curled, elevasi flat, berwarna putih.
Uji Pewarnaan Gram Hasil pengujia l n pewarnaan gram da l pa l t diliha l t pa l da l ta l bel berikut : Ta l bel.2. Ha l sil Pewa l rna l a l n Gra l m
No Kode Isola l t Pewa l rna l a l n Gra l m Ba l kteri Bentuk Koloni
Wa l rna l
Ketera l nga l n
1 A l RJ 1 Coccus Mera l h Nega l tif
2 A l RJ 2 Ba l sil Ungu Positif 3 A l RJ 3 Streptoba l sil
Mera l h Nega l tif
4 A l RJ 4 Streptoba l sil
Mera l h Nega l tif
5 A l RJ 5 Streptoba l sil Mera l h Nega l tif
6 A l RJ 6 Streptoba l sil Mera l h Nega l tif
7 A l RJ 7 Streptoba l sil Mera l h Nega l tif 8 A l RJ 8 Streptoba l sil Mera l h Nega l tif 9 A l RJ 9 Streptoba l sil Mera l h Nega l tif
10 A l RJ 10 Ba l sil Ungu Positif
Pa l da l penga l ma l ta l n  mikroskop  terha l da l p  10  isola l t  ba l kteri  ya l ng  ditemuka l n  pa l da l rhizosfer ta l na l ma l n ja l gung denga l n mengguna l ka l n mikroskop pa l da l pebesa l ra l n 100x ditemuka l n 8 isola l t
Angraeni  Masyitah  L,  Rasyidah,  Mayasari  U  :  Isolasi  Dan  Identifikasi  Azotobacter  Dari Rhizosfer  Tanaman  Jagung  ( Zea  mays L.)  Di  Desa  Sei  Mencirim  Kecamatan  Sunggal Kabupaten Deli Serdang
ba l kteri ya l ng mengha l silka l n wa l rna l mera l h a l ta l u memiliki sifa l t gra l m nega l tif berbentuk kokus, streptoba l sil  (ba l ta l ng  tersusun  mema l nja l ng  seperti  ra l nta l i)  da l n  2  isola l t  ba l kteri  ya l ng mengha l silka l n  wa l rna l ungu  a l ta l u  memiliki  sifa l t  gra l m  positif  denga l n  bentuk  ba l sil  (ba l ta l ng) seperti ya l ng ditunjukka l n pa l da l ta l bel 4.2.
Uji Biokimia Berda l sa l rka l n  ka l ra l kteristik  uji  biokimia l ya l ng  meliputi  uji  ka l ta l la l se,  uji  hidrolisis  pa l ti,  uji hidrolisis  gela l tin,  uji  sitra l t,  uji  indole  da l n  uji  motilita l s  ya l ng  dila l kuka l n  pa l da l 10  isola l t ba l kteri  denga l n  mengguna l ka l n  medium  ya l ng  berbeda l -beda l ,  dima l na l jika l terja l di  peruba l ha l n pa l da l medium  ya l ng  meliputi  wa l rna l a l ta l upun  indika l tor  la l innya l da l pa l t  dika l ta l ka l n  positif a l ta l upun nega l tif, seperti ya l ng ditunjukka l n pa l da l ta l bel 4.3.
Ta l bel 3 Ka l ra l kteristik Berda l sa l rka l n Uji Biokimia l
No Kode
Isola l t Ka l ra l kterisa l si  Berda l sa l rka l n Uji Biokimia l Uji ka l ta l la l se Uji Hidrolisis Pa l ti
Uji Hidrolisis Gela l tin
Uji Sitra l t Uji Indole Uji Motilita l s 1 A l RJ 1 + + - + + + 2 A l RJ 2 + + - + + + 3 A l RJ 3 + + - + + + 4 A l RJ 4 + + - + + + 5 A l RJ 5 + + - + + + 6 A l RJ 6 + + - + + + 7 A l RJ 7 + + - + + + 8 A l RJ 8 + + - + + + 9 A l RJ 9 + + - + + + 10 A l RJ 10 + + - + + +
Ketera l nga l n : - : rea l ksi nega l tif +   : rea l ksi positif
Berda l sa l rka l n ha l sil penga l ma l ta l n ka l ra l kterisa l si morfologi ba l kteri (Ta l bel 4.1), Uji pewa l rna l a l n gra l m  (Ta l bel  4.2),  da l n  Uji  biokimia l (Ta l bel  4.3)  dida l pa l tka l n  5  isola l t  ba l kteri  denga l n  genus A l zotoba l cter . Ta l bel 4 Ha l sil Penga l ma l ta l n Ba l kteri
No
Kode Isola l t Genus Ba l kteri
1 A l RJ 1 A l zotoba l cter 2
A l RJ 3 A l zotoba l cter 3
A l RJ 5 A l zotoba l cter 4
A l RJ 8 A l zotoba l cter 5
A l RJ 9 A l zotoba l cter
Ba l kteri A l zotoba l cter dicirika l n denga l n sel berbentuk ba l ta l ng, gra l m nega l tif, bersifa l t a l erobik obliga l t  da l n  mempunya l i  ukura l n  sel  ya l ng  lebih  pa l nja l ng  da l ri  proka l riot  la l innya l denga l n dia l meter sel 2-4 µm a l ta l u lebih. Bebera l pa l stra l in motil denga l n fla l gelperitrikha l . Pa l da l media l menga l ndung  ka l rbohidra l t,  ba l kteri  ini  membentuk  ka l psul  ya l ng  berfungsi  melindunginya l da l ri  lingkunga l n  lua l r.  Ba l kteri  ini  memiliki  struktur  khusus  ya l ng  disebut  kista l .  Kista l ini bersifa l t seperti endospora l ya l kni tubuh berdinding teba l l, sa l nga l t rea l ktif da l n resisten, ta l ha l n terha l da l p poses pengeringa l n pemeca l ha l n meka l nik, ultra l violet da l n ra l dia l si ionik (Erfin et a l l., 2015).
Angraeni  Masyitah  L,  Rasyidah,  Mayasari  U  :  Isolasi  Dan  Identifikasi  Azotobacter  Dari Rhizosfer  Tanaman  Jagung  ( Zea  mays L.)  Di  Desa  Sei  Mencirim  Kecamatan  Sunggal Kabupaten Deli Serdang

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini  disimpulkan  bahwa  kandungan  klorofil  pada  pemupukan sebelum  dan  sesudah  pemupukan  tidak  berbeda  nyata,  akan  tetapi  berdasarkan  angka rataan,  kandungan  klorofil  daun  pada  saat  sebelum  pemberian  pupuk  ZA  lebih  rendah dibandingkan  setelah  pemupukan.    Kandungan  nitrogen  daun  saat    sebelum  dan  sesudah pemupukan  berbeda  nyata.  Dan  kandungan  nitrogen  daun  meningkat  setelah  dilakukan pemupukan.  Kandungan  kadar  air  daun  tanaman  salak  sebelum  dan  sesudah  pemupukan juga berbeda nyata dan kadar air daun meningkat setelah dilakukan pemupukan.

## DAFTAR PUSTAKA
Akhter,  S.,  Hossain,  S.  J.,  &  Hossain  A,  Datta,  R.K.  2012.  Isolasi  dan  Karakterisasi Toleransi Salinitas Azotobacter sp. Jurnal Ilmu Biologi yang lebih hijau . 2(3). Antralina,  M.,  Kania,  D.,  &  Santoso,  J.  2015.  Pengaruh  Pupuk  Hayati  Terhadap Kelimpahan Bakteri Penambat Nitrogen dan Pertumbuhan Tanaman Kina (Cinchona ledgeriana Moens ) klon Cib . 5. Jurnal Penelitian Teh Dan Kina , 18(2), 177–185. Breed,  R.  S.,  E.G.D.  Murray,  and  N.R.  Smith.  1957. Bergey's  Manual  of  Determinative Bacteriology,  Seventh  Edition .  Baltimore.  The  William  and  Wilkins  Company. United Staties of Amerika.
Erfin,  E.,  Sandiah,  N.,  &  Malesi,  L.  2016.  Identifikasi  Bakteri  Azospirillum  Dan Azotobacter  Pada  Rhizosfer  Asal  Komba-Komba  (Chromolaena  odorata). Jurnal Ilmu Dan Teknologi Peternakan Tropis , 3(2), 30.
Hala, Y., Arifin, A. N. 2021. Kesesuaian Mikroba Penambat N2 Asal Rhizosfer Tanaman Mimba Dengan Pertumbuhan Tanaman Jagung. Seminar Nasional Hasil Penelitian. ISBN: 978-B623- 387- 014-6.
Holt.  J.G.,  et  al.  1994. Bergey's  Manual  of  Determinative  Bacteriology,  Ninth  Ed .  A Wolters Kluwer Company. Philadelphia. Hal 77.
Husen  E.,  Surono.,  Pratiwi  Etty.,  Ladiyanin  R.W.  2022. Metode  Analisis  Biologi  Tanah, Edisi 2 . Bogor: Balai Penelitian Tanah.
Istiqfarin, N. 2017. Isolasi, Identifikasi Secara Molekuler Menggunakan Gen 16 Rrna, Dan Uji  Aktivitas  Antibakteri  Bakteri  Simbion  Endofit  Yang  Diisolasi  Dari  Alga Halimeda Opuntia. Occupational Medicine . 53(4), 130.
Krieg,  N.R.  &  J.  Dobereiner.  1984.  Genus  Azospirillum.  p  94-104.  in  J.G.  Holt  &  N.R. Krieg  (Eds). Bergey's  Mannual  of  Systematic  Bacteriology ,  Vol  1.  Williams  and Wilkins. Baltimore.
Niswati, A.,Yusnaini, S.,  Arif  A.S. 2008. Populasi Mikroba Pelarut  Fosfat dan P-tersedia pada Rizosfir beberapa Umur dan Jarak dari pusat perakaran jagung (Zea mays  L.). J. Tanah Trop . 13 (2). 123-130.
Widiawati,  S.,  Suliasih,  Saefudin.  2015.  Isolasi  Dan  Uji  Efektivitas  Plant  Growth Promoting  Rhizobacteria  di  lahan  marginal  pada  pertumbuhan  tanaman  kedelai (Glycine max L. Merr.). Pros Sem Nas Masy Biodiv Indon .1(1), 59-65. Wisdawati,E., Tutik K., Rosmana A., Andi N. 2019. Keanekaragaman Cendawan Rizosfer Pada Tanaman Talas Saitomo. J AgroPlantae . vol 8 (2).
Wulandari,  N.,  Irfan,  M.,  &  Saragih,  R.  2020.  Isolasi  Dan  Karakterisasi  Plant  Growth Promoting  Rhizobacteria  Dari  Rizosfer  Kebun  Karet  Rakyat. Dinamika  Pertanian , 35(3), 57–64.
Accepted Date Revised Date Decided Date Accepted to Publish 25 Mei 2023 12 Juni 2023 05 Juli 2023 Ya