## UJI AKTIVITAS TABIR SURYA EKSTRAK DAN FRAKSI DAUN KITOLOD ( Isotoma longiflora L.)
Alan Krisna Ardiansyah 1 , Septiana Laksmi Ramayani 2*
1 Politeknik Katolik Mangunwijaya
2 Politeknik Kesehatan Kementerian Kesehatan Surakarta Email: septianaLR@gmail.com

## ABSTRAK
Sinar matahari mengandung sinar ultraviolet yang menyebabkan radiasi. Pencegahan efek buruk radiasi sinar  UV  pada  kulit  dapat  dicegah  dengan  penggunaan  tabir  surya.  Senyawa  flavonoid  merupakan senyawa bahan alam yang  berpotensi digunakan sebagai tabir surya. Kitolod ( Isotoma longiflora L.) merupakan salah satu bahan alam yang mengandung senyawa flavonoid. Fraksinasi merupakan teknik pemisahan dan pengelompokan kandungan kimia ekstrak berdasarkan kepolaran. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui aktivitas tabir surya dari ekstrak daun kitolod. Ekstrak daun kitolod diekstraksi dengan  metode  maserasi  dengan  pelarut  methanol.  Fraksinasi  dilakukan  dengan  ekstraksi  cair-cair menggunakan  pealrut  n-hexane,  kloroform  dan  methanol.  Ekstrak  dan  fraksi  dilakukan  identifikasi senyawa flavonoid dan aktivitas tabir surya dengan pengukuran absorbansi pada panjang gelombang 290-320 nm dengan interval 5nm. Hasil dari penelitian menunjukkan ekstrak dan fraksi daun kitolod positif mengandung flavonoid. Ekstrak dan fraksinasi berpengaruh signifikan terhadap aktivitas tabir surya. Ekstrak dan fraksi daun kitolod memiliki aktivitas tabir surya kategori minimal. Aktivitas tabir surya  tertinggi  ditunjukkan  oleh  ekstrak  daun  kitolod  diikuti  fraksi  methanol,  fraksi  kloroform  dan fraksi n-hexane.
Kata Kunci : Daun kitolod, ekstrak, fraksinasi, aktivitas tabir surya

## ABSTRACT
The use of sunscreen prevents UV radiation effect from the sunlight. Flavonoids are natural substance which has potential as sunscreen. Kitolod (Isotoma longiflora L.) contains flavonoid. Fractionation is a technique to separate chemical compounds in extract based on  its polarity. This research aims to determine sunscreen activity of kitolod leaf extract obtained using maceration method and methanol as solvent. Fractionating process done by liquid-liquid extraction method using n-hexane, chloroform, and methanol  as  solvents.  The  extract  and  fraction  were  being  identified  its  flavonoids  and  sunscreen activity  by  measuring  its  absorbance  between  290-320nm  wavelength  with  5nm  interval.  The  result showed  that  both  extract  and  fraction  of  kitolod  leaves  were  flavonoid  positive.  Both  extract  and fraction of kitolod leaves has significant suncreen activity but still be classified in minimal category. The  highest  sunscreen  activity  was  shown  by  kitolod  leaf  extract  followed  by  methanol  fraction, chloroform fraction, and n-hexane fraction.
Keywords: Kitolod Leaf, extract, fractionation, sunscreen activity
Cendekia Journal of Pharmacy
ITEKES Cendekia Utama Kudus P-ISSN 2559 – 2163           E-ISSN 2599 – 2155 Vol. 6, No. 2, November 2022 http://cjp.jurnal.stikescendekiautamakudus.ac.id

## LATAR BELAKANG
Indonesia merupakan negara yang dilewati garis kathulistiwa sehingga hampir setiap waktu  dilimpahi  sinar  matahari.  Sinar  matahari  dapat  memancarkan  sinar  ultraviolet  yang menyebabkan radiasi. Sinar ultraviolet (UV) dibedakan menjadi UV A (320-400 nm), UV B (290 – 320 nm), dan UV C (200-290 nm). Radiasi UV A dan UV B merupakan sinar UV yang memiliki  dampak  buruk  bagi  kulit  karena  dapat  mencapai  lapisan  yang  lebih  dalam  dari epidermis dan dermis. Radiasi sinar UV dapat memberikan efek merugikan seperti pengkerutan kulit,  penuaan  dini,  pigmentasi    hingga  perubahan  pada  jaringan  pengikat  dalam  lapisan stratum korneum (Pramiastuti et al., 2019).
Pencegahan efek buruk radiasi sinar UV pada kulit dapat dicegah dengan penggunaan tabir surya. Tabir surya adalah zat yang dapat menyebarkan, memantulkan atau menyerap sinar matahri secara efektif, terutama di bidang radiasi UV. Sebagian besar bahan aktif tabir surya adalah bahan sintesis yang sering memiliki efek toksik dan iritasi pada kulit. Komponen alami dianggap lebih aman digunakan karena tidak berbahaya dan tidak menyebabkan iritasi ketika diterapkan pada kulit (Wasule et al., 2018).
Senyawa flavonoid merupakan senyawa bahan alam yang berpotensi digunakan sebagai tabir surya. Senyawa flavonoid mengandung gugus kromofor  yang memberikan warna pada tanaman.  Gugus  kromofor  merupakan  sistem  aromatik  terkonjugasi  yang  menyebabkan kemampuan untuk menyerap kuat sinar pada kisaran panjang gelombang sinar UV (Savira & Iskandar, 2020).
Kitolod ( Isotoma longiflora L.) merupakan salah satu bahan alam yang mengandung senyawa  flavonoid.  Daun  kitolod  diketahui  mengandung  flavonoid  tertinggi  dibandingkan bagian tanaman lain seperti akar, batang, bunga dan buah. Ekstrak daun kitolod memiliki kadar flavonoid  total  10,48  ±  0,10  ppm  (Egarani  et  al.,  2020).  Fraksinasi  merupakan  teknik pemisahan  dan  pengelompokan  kandungan  kimia  ekstrak  berdasarkan  kepolaran.  Proses fraksinasi  menggunakan  dua  pelarut  yang  tidak  tercampur  dan  memiliki  tingkat  kepolaran berbeda sehingga senyawa dalam esktrak akan terpisah menurut kepolarannya. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas tabir surya ekstrak dan fraksi daun kitolod.

## METODE PENELITIAN

## a. Pembuatan serbuk simplisia daun kitolod
Daun  kitolod  yang  digunakan  diperoleh  dari  Desa  Losari,  Kecamatan  Sumowono, Kabupaten  Semarang.  Daun  kitolod  dilakukan  sortasi  basah  dengan  memilah  daun  yang berwarna hijau tua untuk selanjutnya dilakukan pencucian dengan air mengalir dan dikeringkan dengan oven pada suhu 40°C hingga diperoleh simplisia yang bila diremas bergemerisik dan berubah menjadi serpihan. Simplisia daun kitolod dilakukan sortasi kering untuk selanjutnya dilakukan penyerbukan. Serbuk simplisia daun kitolod diayak dengan ayakan mesh 100 dan selanjutnya dilakukan kontrol kualitas yaitu meliputi uji organoleptis, perhitungan rendemen dan susut pengeringan.
b. Ekstraksi dan fraksinasi daun kitolod
Sebanyak 50 gram serbuk simplisia direndam dengan 250 mL etanol 96% dalam bejana maserasi.  Perendaman  dilakukan  selama  6  jam  dengan  sesekali  dilakukan  pengadukan,  lalu didiamkan selama 18 jam. Selanjutnya dilakukan penyaringan untuk memisahkan ampas dan filtrat. Ampas direndam kembali dengan 250 mL etanol 96% dan dilakukan proses ekstraksi kembali dan setelah 24 jam  dilakukan penyaringan. Filtrat  yang diperoleh digabungkan dan dilakukan penguapan untuk menghilangkan pelarut hingga diperoleh ekstrak kental. Ekstrak selanjutnya dilakukan kontrol kualitas dan fraksinasi.
Fraksinasi  ekstrak  daun  kitolod  dilakukan  dengan  melarutkan  10  gram  ekstrak  daun kitolod dengan 100 mL methanol, kemudian dimasukkan dalam corong pisah dan ditambahkan dengan  100  mL  n-hexane.  Larutan  dalam  corong  pisah  selanjutnya  dikocok  dan  didiamkan
hingga  terbentuk  2  lapisan.  Lapisan  h-hexane  ditampung  dan  diuapkan  dan  disebut  sebagai fraksi n-hexane. Lapisan methanol dimasukkan kembali dalam corong pisah dan ditambahkan dengan 100 mL kloroform, selanjutnya dikocok dan didiamkan hingga terbentuk dua lapisan. Lapisan kloroform ditampung dan diuapkan dan disebut sebagai  ekstrak kloroform. Lapisan methanol  diuapkan  dan  disebut  sebagai  fraksi  methanol.  Masing-masing  fraksi  dilakukan kontrol kualitas.
c. Identifikasi senyawa flavonoid
Ekstrak  dan  fraksi  ekstrak  daun  kitolod  dilakukan  identifikasi  senyawa  flavonoid dengan  menggunakan  test  Shinoda.  Terbentuknya  warna  kuning  jingga  hingga  merah menunjukkan hasil positif mengandung flavonoid (Hanani, 2016).
d. Uji SPF ekstrak dan fraksi daun kitolod
Ekstrak  dan  fraksi  ekstrak  daun  kitolod  (100  ppm)  diukur  absorbansinya  dengan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 290 – 320 nm dengan interval 5 nm. Nilai SPF dihitung dengan persamaan 1.
𝐴 =   − log 10 1
𝑆𝑃𝐹 = log 10 𝑆𝑃𝐹       (1)

## e. Analisa hasil
Nilai  SPF  yang  diperoleh  dianalisis  secara  statistik  dengan  uji  Anova  dengan  taraf kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Daun  kitolod  yang  digunakan  adalah  daun  yang  berwarna  hijau  tua.  Daun  yang berwarna hijau tua memiliki kadar flavonoid yang secara signifikan lebih tinggi dibandingkan daun yang berwarna hijau muda (Felicia et al., 2017). Daun kitolod dikeringkan menggunakan oven  pada  suhu  40°C.  Simplisia  yang  dikeringkan  dengan  menggunakan  oven  dapat menghasilkan  kadar  flavonoid  yang  secara  signifikan  lebih  tinggi  dibandingkan  yang dikeringkan  dengan  sinar  matahari  yang  ditutup  kain  hitam  (Ariani  et  al.,  2022).  Suhu pengeringan 40°C diketahui dapat menghasilkan kadar flavonoid yang lebih tinggi dari suhu pengeringan 50°C (Syafrida et al., 2018).

## Tabel 1 Simplisia Serbuk Daun Kitolod
Serbuk daun kitolod diekstrkasi dengan metode maserasi.  Metode ekstraksi maserasi secara signifikan dapat menghasilkan kadar flavonoid yang lebih tinggi dari metode sokletasi (Sa’adah et al., 2017). Flavonoid merupakan senyawa yang tidak tahan panas, dan maserasi merupakan salah satu metode ekstraksi dingin, sehingga senyawa flavonoid cocok diekstraksi dengan  metode  maserasi  dibandingkan  metode  sokletasi  yang  merupakan  metode  ekstraksi panas. Pelarut yang digunakan adalah methanol yang merupakan pelarut polar, sehingga sesuai untuk  mengekstraksi  senyawa flavonoid  yang juga merupakan senyawa polar sesuai  dengan prinsip like dissolved like . Serbuk daun kitolod yang diekstraksi dengan pelarut methanol dapat
Parameter Hasil
Organoleptis Bentuk Serbuk Bau Khas Warna Hijau Rasa Pahit Rendemen (%) 28,91 Susut pengeringan (%) 8,21
menghasilkan kadar total flavonoid yang lebih tinggi daripada pelarut etanol (Ramayani et al., 2021).
Tabel 2 Ekstrak Daun Kitolod Parameter Hasil Ekstrak Daun Kitolod (EDK) Organoleptis Bentuk Ekstrak kental Bau menyengat Warna Hijau kehitaman Rasa Pahit Rendemen (%) 10,3 Susut pengeringan (%) 4,88
Ekstrak  kental  daun  kitolod  selanjutnya  dilakukan  fraksinasi  dengan  menggunakan pelarut n-hexane, kloroform dan methanol. Ketiga pelarut tersebut memiliki tingkat polaritas yang berbeda,  yaitu n-hexane pelarut  non polar,  kloroform pelarut  semi  polar dan methanol pelarut polar.
Tabel 3 Fraksi Ekstrak Daun Kitolod Parameter Fraksi n-hexane (FHDK) Fraksi kloroform (FKDK) Fraksi methanol (FMDK) Organoleptis Bentuk Kering kering Kental Warna Hijau kehitaman Hijau kehitaman Hijau kehitaman Rendemen (%) 18,5 26,9 29,9
Ekstrak dan fraksi ekstrak daun kitolod dilakukan uji identifikasi senyawa flavonoid. Hasil  identifikasi  menunjukkan  ekstrak  dan  fraksi-fraksi  ekstrak  daun  kitolod  positif mengandung  senyawa  flavonoid.  Hasil  positif  ditunjukkan  dengan  terjadi  perubahan  warna pada  ekstrak  dan  fraksi  yang  semula  berwarna  hijau  kehitaman  menjadi  merah  jingga. Perubahan  warna  terjadi  karena  terbentuknya  garam  flavilium  sebagai  hasil  reaksi  antara senyawa flavonoid, serbuk Mg dan HCl pekat (Hanani, 2016).

## Gambar 1 Hasil Pengukuran Absorbasi Ekstrak dan Fraksi Daun Kitolod
Pengukuran  absorbansi  ekstrak  dan  fraksi  daun  kitolod  dilakukan  pada  panjang gelombang  290-320  nm  yang  merupakan  daerah  sinar  UV-B.  Hasil  pengukuran  absorbansi menunjukkan  bahwa  semakin  besar  panjang  gelombang  yang  digunakan  semakin  kecil absorbansi  yang  dihasilkan.  Data  absorbansi  yang  dihasilkan  selanjutnya  digunakan  untuk menentukan nilai SPF sebagai parameter tabir surya. Nilai SPF merupakan nilai perbandingan antara waktu yang diperlukan untuk terjadinya efek sengatan matahari tanpa penggunaan tabir surya. Semakin tinggi nilai SPF, maka semakin efektif untuk mencegah kulit terbakar.
Tabel 4 Hasil Uji Tabir Surya Ekstrak dan Fraksi Daun Kitolod Sampel Nilai SPF Kategori proteksi EDK 3,2782 ± 0,02 a Minimal FHDK 1,840 ± 0,00 b Minimal FKDK 2,4101 ± 0,02 c Minimal FMDK 2,7595 ± 0,01 d Minimal
Uji aktivitas tabir surya menunjukkan bahwa ekstrak daun kitolod memiliki nilai SPF yang paling tinggi dibandingkan fraksi daun kitolod. Pada ekstrak daun kitolod belum terjadi pemisahan  senyawa  sehingga  senyawa-senyawa  dalam  ekstrak  daun  kitolod  menunjukkan adanya aktivitas sinergisme dari berbagai senyawa tersebut. Pada fraksi aktivitas tabir surya ditunjukkan pada fraksi methanol, yang memiliki rendemen paling besar juga diantara fraksi lainnya. Hal ini menunjukkan bahwa rendemen yang semakin besar, semakin banyak senyawa yang  terkandung  maka  semakin  tinggi  pula  aktivitas  yang  dihasilkan.  Fraksinasi  secara signifikan  menunjukkan  perbedaan  aktivitas  tabir  surya  dari  ekstrak  daun  kitolod  walaupun semuanya masuk dalam kategori minimal karena memiliki nilai SPF kurang dari 4.

## SIMPULAN DAN SARAN

## Simpulan
Fraksinasi berpengaruh signiikan terhadap aktivitas tabir surya daun kitolod. Aktivitas tabir  surya  tertinggi  pada  ekstrak  daun  kitolod  diikuti  fraksi  methanol,  fraksi  klorofom  dan fraksi hexane. Ekstrak dan fraksi daun kitolod masuk dalam kategori minimal.

## Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  aktivitas  tabir  surya  ekstrak  dan  fraksinasi  daun  kitolod dengan kadar konsentrasi yang lebih tinggi.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Politeknik  Katolik  Mangunwijaya  yang  telah  mengijinkan    melakukan  penelitian  di laboratorium yang dimiliki

## DAFTAR PUSTAKA
Ariani,  N.,  Musiam,  S.,  Niah,  R.,  Rizki  Febrianti  Sekolah  Tinggi  Ilmu  Kesehatan  ISFI Banjarmasin, D., & Selatan, K. (2022). Pengaruh Metode Pengeringan Terhadap Kadar Flavonoid  Ekstrak  Etanolik  Kulit  Buah  Alpukat  (Persea  americana  Mill.)  dengan Spektrofotometri UV-VIS. Jurnal
Pharmascience , 9 (1), 40–47. https://doi.org/10.20527/JPS.V9I1.10864
Egarani,  G.,  Egarani,  G.  R.,  Kasmiyati,  S.,  &  Kristiani,  E.  B.  E.  (2020).  The  Antioxidant Content  and  Activity  of  Various  Plant  Organs  of  Kitolod  (Isotoma  longiflora). Biosaintifika:  Journal  of  Biology  &  Biology  Education , 12 (3),  297–303. https://doi.org/10.15294/biosaintifika.v12i3.23888
Felicia,  N.,  Widarta,  I.  W.  R.,  &  Yusasrini,  N.  L.  A.  (2017).  Pengaruh  Ketuaan  Daun  Dan Metode  Pengolahan  Terhadap  Aktivitas  Antioksidan  Dan  Karakteristik  Sensoris  Teh Herbal  Bubuk  Daun  Alpukat (Persea  americana  Mill.) . Jurnal  Ilmu  Dan  Teknologi Pangan . https://onesearch.id/Record/IOS1501.article-27503
Hanani, E. (2016). Analisis Fitokimia . EGC.
Pramiastuti, O., S1, P., Stikes, F., Mandala, B., & Slawi, H. (2019). Penentuan Nilai Spf ( Sun Protection  Factor)  Ekstrak  Dan  Fraksi  Daun  Kecombrang  (Etlingera  Elatior)  Secara  In Vitro  Menggunakan  Metode  Spektrofotometri. Parapemikir :  Jurnal  Ilmiah  Farmasi ,
8 (1), 14–18. https://doi.org/10.30591/PJIF.V8I1.1281
Ramayani, S. L., Nugraheni, D. H., Robertin, A., & Wicaksono, E. (2021). Pengaruh Metode Ekstraksi  Terhadap  Kadar  Total  Fenolik  dan  Kadar  Total  Flavonoid  Daun  Talas ( Colocasia esculenta L.). Journal of Pharmacy , 10 (1), 11–16.
Sa’adah,  H.,  Nurhasnawati,  H.,  &  Permatasari,  V.  (2017).  Pengaruh  Metode  Ekstraksi Terhadap  Kadar  Flavonoid  Ekstrak  Etanol  Umbi  Bawang  Dayak  (Eleutherine Palmifolia(L.)Merr) Dengan Metode Spektrofotometri. Borneo Journal of Pharmascientech .Bohttp://jurnalstikesborneolestari.ac.id/index.php/borneo/article/view/ 46
Savira, D., & Iskandar, D. (2020). Pemanfaatan Ekstrak Daun Kitolod (Hippobroma Longiflora (L)  G.Don)  Sebagai  Bahan  Aktif  Sediaan  Tabir  Surya. Jurnal  Kimia  Riset , 5 (1),  44. https://doi.org/10.20473/jkr.v5i1.19680
Syafrida, M., Darmanti, S., & Izzati, M. (2018). Pengaruh Suhu Pengeringan Terhadap Kadar Air, Kadar Flavonoid dan Aktivitas Antioksidan Daun dan Umbi Rumput Teki (Cyperus rotundus L.).
Bioma :
Berkala Ilmiah Biologi , 20 (1), 44–50. https://doi.org/10.14710/BIOMA.20.1.44-50
Wasule,  D.,  Kawale,  A.,  &  Pandey,  D.  (2018).  Issue  12  |  ISSN:  2456-3315  IJRTI1812014 International Journal for Research Trends and Innovation (www. © 2018 IJRTI | , 3 , 75. www.ijrti.org