http://jurnal.utu.ac.id/
P-ISSN: 2579-4752, E-ISSN: 2620-7397
1 Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Teuku Umar Korespondensi : Jurusan Akuakultur, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Teuku Umar, Kampus UTUMeulaboh, Alue Peunyareng 23615, Telp: +62 81281861746, email: erisafutrautu.ac.id

## KAJIAN POTENSI BIOAKTIF KANGKUNG LAUT ( Ipomea pescaprae) ASAL PESISIR ACEH BARAT SEBAGAI INHIBITOR TIROSINASE DAN ANTIOKSIDAN
THE STUDY OF BIOACTIVE COMPOUND POTENTIAL MARINE SPINACH (Ipomea pescaprae) FROM WEST OF ACEH COAST ORIGIN AS TYROSINASE INHIBITOR AND ANTIOXIDANT
Eri Safutra 1 , Zuriat 2 1 Jurusan Akuakultur, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Teuku Umar, Aceh Barat
2 Jurusan Perikanan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Teuku Umar, Aceh Barat Korespondensi : Erisafutra@utu.ac.id

## ABSTRAK
Dewasa  ini,  begitu  banyak  inhibitor  tirosinase  dan  antioksidan  sintetik  yang  beredar  dipasaran,  sehingga konsumen  kurang  hati-hati  dalam  melakukan  pemilihan  produk  kosmetik  yang  menyebabkan  terjadinya iritasi  kulit  dan  masalah  dermatitis.  Hal  ini  menjadi  perhatian  bagi  para  ilmuan  untuk  mencari  solusi alternatif. Tujuan jangka panjang dan terget khusus yang ingin dicapai dari penelitian ini adalah penemuan obat  baru  yang  berasal  dari  pesisir  barat  Aceh  yang  memiliki  potensi  sebagai  inhibitor  tirosinase  dan antioksidan. Hasil uji fitokimia pada ekstrak daun dan bunga kangkung laut (L pes-caprae) mengandung flavonoid, fenolik dan triterpenoid. Hasil mengenai penentuan aktivitas antioksidan dapat disimpulkan bahwa Ekstrak metanol daun kangkung laut (I. Pes-caprae) memiliki efektifitas sebagai antioksidan dengan nilai absorbansi sebesar 515 nm.

## Kata Kunci : Ipomea pescaprae, Inhibitor tirosinase, Antioksidan

## ABSTRACT
Nowdays, so many sinthetic tyrosinase and antioxidant inhibitors circulate in the market, so consumers are less careful in choosing cosmetic products that cause skin irritation and dermatitic problems. It is of concern to scientists to seek alternative solutions. The long term objectives and specific targets to be achiaved from this research are the discovery of new drugs originating from the west coast of Aceh which has potential as tyrosinase and antioxidant inhibitors. The results of phytochemical test on leaf watercress and leaf extract (L-caprae) contain flavonoids, phenolic and triterpenoids. Results on the determination of antioxidant activity can be concluded that the extract methanol leaf watercress (I. Pes-caprae) has the effectiveness as an antioxidant with absorbance value of 515 nm.

## Keywords : Ipomea pescaprae, inhibitor tyrosinase, antioxidant

## PENDAHULUAN Latar belakang
Ipomea  pescaprae merupakan  tumbuhan liar yang hidup berkembang di daerah pantai yang tanahnya  berbatu-batu  dan  mengandung  pasir. Tumbuhan  pantai  banyak  tersebar  di  daerah pesisir  Aceh  Barat.  Secara  umum  penggunaan obat  tradisional  yang  digunakan  di  Indonesia merupakan jamu-jamuan yang berasal dan tumbuh yang  hidup  dipesisir  laut  seperti  bakau,  dan
umbuhan  pesisir.  Salahsatu  contoh  tumbuhan pesisir adalah katang-katang (Ipomea pescaprae). Katang-katang  telah  di  kenal  secara  luas  oleh masyarakat  kita  sebagai  obat  reumatik  /  nyeri persendian,  myalgia  (sakit  otot/pegal-pegal), pendarahan  pada  wasi,  pembengkakan  gusi  dan sakit  gigi,  sedangkan  Bandaranayake  (2002) mengatakan  bahwa  tumbuhan  katang-katang merupakan  tumbuhan  obat  yamg  telah  digunakan
diberbagai  negara  untuk  mengobati penyakit seperti peradangan yang meliputi dermatitis akibat sengatan ubur-ubur. Katang-katang dikenal dengan  nama  lokal  yang  berbeda-beda  seperti tangkatang,  daun  katang  alere,  leleri,  dalere, batata  pantai,  tapak  kuda,  andah  arana,  daredai, watata,  ruruan,  dolodoi,  tilalade,  mari-mari, wador, tatiraui, ngamir, loloro, bulalingo, wedule, ma an teng (China) (BPPT, 2005).
T. Ramanathan et al ( 2012 ) melaporkan bahwa daun katang-katang dipesisir India berpotensi  sebagai  anti  oksidan  dan  penangkap radikal  bebas.  Hal  ini  melandasi  keingin  tahuan peneliti  untuk  mengkaji  lebih  lanjut  dalam ekslporasi  senyawa  bioaktif  daun  dan  bunga katang-katang (Ipomea pescaprae) yang memiliki potensi  inhibitor tirosinase  dan  antioksidan.
Kajian  tentang  aktifitas  antioksidan  penting dilakukan  untuk  membuktikan  secara  scintifik apakah tumbuhan katang-katang (Ipomea
pescaprae) mempunyai kemampuan dalam menangkap radikal bebas (free radical).

## METODE PENELITIAN Waktu dan tempat
Pelaksanaan  penelitian  ini  dilakukan mulai bulan Juni sampai dengan September 2017. Prosedur  penelitian  dimulai  dari  pengambilan sampel Ipomea  pescaprae dipesisir  laut  Aceh Barat,  sampel  kemudian  diidentifikasi  dan dideposit  untuk  memperoleh  voucher  number  di Fakultas  Pertanian  Universitas  Syiah  Kuala (UNSYIAH) dan sebagian pengujian dilakukan di Pusat Studi Biofarmaka IPB Bogor.

## Alat dan bahan
Alat  dan  bahan  yang  digunakan  pada penelitian ini disajikan pada Tabel 1 dan Tabel 2 Table  1  Alat  yang  digunakan  dalam
penelitian No Alat Fungsi 1 Rotary Evaporator Memisahkan bahan terlarut dengan bahan pelarut 2 Labu Erlemeyer Menyimpan bahan kangkung laut 3 Tabung Reaksi Menyimpan bahan
4 Gelas Ukur 100 ml Mengukur bahan
5 Pipet Tetes Menyemprotkan bahan 6 Rak Tabung Menempatkan tabung reaksi 7 Pisau Menghaluskan bahan 8 Kertas Saring Whatman No.42 Menyaring bahan kangkung laut 9 Timbangan Analitik 0,01 gr Menimbang bahan 10 Auto Clave 121 o C Mensterilkan alat 11 Hot Plate Memanaskan media Na dan kangkung laut 12 Pinset Mengambil bahan 13 Magnetic Strrier Mempercepat pemisahan bahan Tabel 2. Bahan yang digunakan dalam penelitian No Bahan Fungsi 1 Kangkung laut Bahan uji 2 Larutan FeCl 3 1% Mempercepat reaksi 3 HCl 0,5% Pengenceran 4 Asam klorida 5%
Menstandarisasi larutan natrium
5 Aquades Pelarut non polar 6 Etanol 70% Pelarut polar 7 NaCl 0,9% Mengganti cairan plasma isotonik 8 Tissue Untuk membersihkan

## Prosedur penelitian
Bagian  tanaman  lalu  dipisahkan  antara bagian  daun  dan  bunga.  Setelah  itu,  tiap  bagian dikeringkan  dan  dibuat  dalam  bentuk  serbuk  dan dilakukan  penentuan  kadar  air  dan  abu.  Serbuk diekstraksi secara bertingkat dengan cara maserasi dimulai  dengan  pelarut  non polar  (aseton) kemudian  di  ekstraksi  kembali  dengan  pelarut semipolar  (etilasetat),  dan  terakhir  di  ekstraksi dengan  pelarut  polar  (metanol).  Semua  ekstrak yang dihasilkan diuji fitokimia, aktifitas antioksidan,  penentuan  kandungan  total  fenol, flavonoid dan tanin dilakukan dengan menggunakan  spektrofotometer  UV-Visible  dan kemudian  di  analisis  korelasi  total  fenolik, flavonoid, tanin dengan antioksidan. Prosedur Preparasi dan Ekstraksi Sampel
Preparasi sampel ekstrak Ipomea pescaprae dilakukan dengan cara mengeringkan sample daun katang-katang,  kemudian  dibuat  serbuk.  Sampel kering  berupa  serbuk  kemudian  ditentukan  kadar air dan kadar abu, lalu dilakukan ekstraksi secara bertingkat  dengan  cara  maserasi  dimulai  dengan pelarut  non  polar  (kloroform)  dan  ampas yang diperoleh  kemudian  di  maserasi  kembali  dengan pelarut  semi  polar  (etilasetat)  dan  terakhir  ampas diekstraksi dengan pelarut polar (metanol). Semua ekstrak yang diperoleh disaring dengan menggunakan  kertas  saring  dan  dipekatkan dengan penguap putar pada suhu 30 0 C kemudian rendemen  tiap  ekstrak  dihitung  (Batubara et  al, 2010).
Bahan  yang  digunakan  adalah  daun  dan bunga Ipomea  pescaprae yang  diperoleh  dari pesisir laut Aceh Barat yang terdiri dari daun dan bunga.  Bahan  kimia  yang  digunakan  yaitu metanol p.a,  etanol  p.a,  etil  asetat,  HCl, kloroform, dietil eter, n-heksan, DMSO (dimetilsulfoksida), akuades, buffer fosfat pH 6.5, larutan  L-tirosin,  L-DOPA,  enzim  tirosinase (Sigma  333  unit/ml  dalam  buffer  fosfat),  larutan 2,2-difenil-l-pikrihidrasil  (DPPH). Asam  askorbat (vitamin  C).  Alat-alat  yang  digunakan  adalah
spektrofotometer  UV-VIS  (Brucker),  multiple well plate reader (ELISA), multiwell plates, oven, tanur,  eksikator,  hot  plate,  neraca  analitik (Sartorius)  rotavapor  putar,  sudip,  rak  tabung reaksi, vortex, sarung tangan, tabung reaksi, gelas piala,  pipet  mohr,  pipet  volumetrik,  pipet  mikro cawan  petri,  cawan  porselin  danlabu  takar  (5  ml dan 250 ml).
1. Uji Fitokimia
Uji  fitokimia  merupakan  uji  pendahuluan untuk  mengetahui  kandungan  senyawa spesifik alkaloid,  triterpenoid,  streroid, saponin,  flavonoid,  kuinon,  tanin  dan fenol secara kualitatif (Harbone, 1987). 2. Uji aktivitas antioksidan
Metode  Penangkapan  Radikan  Bebas DPPH
Metode  DPPH  yang  digunakan  pada tahap  ini  berdasarkan  dari  metode  yang telah  dilakukan  oleh  Batubara et  al (2009),  sampel  dilarutkan  dalam  etanol sehingga diperoleh konsentrasi akhir 1.67, 3.33,6.67,10.00,13.33, 16.67,33. 33,66.67,66.67,100.00,133.33, dan 166.67 µg/ml.  Pada  100  µl  sampel,  kemudian ditambahkan  100  µl  larutan  DPPH  (1.18 mg  DPPH  dalam  10  ml  etanol  (pada masing-masing lubang well plate. Setelah 30 menit absorbansi diukur pada 517 nm. Kontrol  positif  yang  digunakan  adalah asam  askorbat,  dan  etanol  sebagai blangko.  Setiap  konsentrasi  sampel  dan kontrol positif diuji dua kali pengulangan. Persentase  inhibisi  dihitung  berdasarkan persamaan : %  inhibisi  =  [1-(A  sampel – Akontrol)/A
Blangko-Akontrol)] x 100 % Keterangan : A sampel adalah absorvasi sampel A  kontrol  adalah  absorbansi  asam askorbat
A blangko adalah absorbansi etanol
Nilai  konsentrasi  hambat  50%  (IC50)  ditentukan
dengan menggunakan persamaan regresi linier yang menyatakan hubungan antara konsentrasi sampel uji (sebagai  sumbu  x)  dan persentase  inhibisi  (sebagai sumbu y).

## Analisis Data
Uji ANOVA (Steel dan Torrie 1993) Data  selanjutnya  dianalisis  menggunakan  model rancangan  ANOVA (Analysis  of  Variant) dengan formulasi  Steel    Torrie  (1993).  Rancangan  yang digunakan  adalah  Rancangan Acak  Lengkap (RAL).  Analisis  RAL  atau  ANOVA (One  Way Factor) menggunakan software  IBM  SPSS Statistic version 22. Model persamaan RAL adalah sebagai berikut:
Keterangan:
Yij = Nilai pengamatan pada taraf i ulangan ke-j p, = Nilai tengah atau rataan umum pengamatan Ti  =  Pengaruh  perbedaan  jenis  ekstrak  dan konsentrasi  ekstrak  metanol  pada  taraf  ke-i (i=1,2,3)
eij  =  Galat  percobaan  pada  konsentrasi  taraf  ke-i dengan ulangan ke-j
Hipotesa  rancangan  acak  Lengkap  (RAL) aktivitas antioksidan ekstrak sampel adalah sebagai berikut:
Ho  :  konsentrasi  yang  berbeda  tidak
berpengaruh nyata terhadap aktivitas antioksidan.
H 1 :  konsentrasi  yang  berbeda  berpengaruh nyata terhadap aktivitas antioksidan.

## Uji Duncan
Uji  Duncan  dilakukan  ketika  hasil  dari pengujian  ANOVA  menunjukkan  adanya pengaruh yang  berbeda  nyata  pada  selang  95%  (a=0,05).  Hasil yang  berbeda  nyata  tersebut dilakukan  uji  lanjut Duncan.

## Hasil dan Pembahasan
Ekstrak Daun Kangkung Laut (Ipomea pes- caprae)
Hasil  ekstraksi  daun  dan  bunga  kangkung  laut (Ipomea  pescaprae) dengan  menggunakan pelarut metanol  98%  diperoleh  ekstrak  cair  berwarna  coklat tua  dan  menggunakan  etil  asetat 96%  diperoleh ekstrak  cair  berwarna  hijau  muda  kemudian dievaporasi menggunakan rotary evaporator diperoleh ekstrak kasar berwarna hijau tua.
Gambar  1.  Ekstraksi  Daun  Kangkung  Laut (I.  Pes-caprae) dengan  dua pelarut (a) Metanol, (b) Etil asetat.
Hasil  maserasi  sebanyak  500  gram  daun kangkung  laut  dengan  pelarut  metanol  diperoleh ekstrak  cair  berwarna  coklat  pekat  dan  setelah dipekatkan  menjadi  coklat  tua, ekstrak  kasar  yang berwarna  hijau  muda  dengan  pelarut  etil  asetat diperoleh  ekstrak  cair berwarna  hijau  tua  bunga kangkung  laut  sebanyak  440  gram  dan  setelah dipekatkan  menjadi ekstrak  kasar  berwarna  coklat. Sementara maserasi diperoleh ekstrak cair berwarna coklat dan  setelah  dipekatkan  menjadi  ekstrak  cair
berwarna coklat tua. Rendemen ekstrak metanol daun kangkung  laut  sebesar  44,2  %.  Sementara, rendemen  ekstrak  etil  asetat  bunga kangkung  laut sebesar  22,6  %.  Rendemen  ekstrak  metanol mempunyai  polaritas yang  tinggi sehingga  mampu melarutkan  senyawa  aktif  dalam  daun  kangkung laut  lebih  banyak dibandingkan  jika  menggunakan pelarut lainnya. Selain itu, metanol mempunyai titik didih dan  cenderung  aman  apabila  digunakan sebagai  pelarut.  Hasil  filtrat  ekstrak  kental mengindikasikan bahwa ekstrak daun kangkung laut (L  pes-caprae) mengandung komponen senyawa aktif yang larut dalam pelarut polar.

## 82

## Uji Fitokimia
Analisis  fitokimia  merupakan  salah  satu cara  untuk  mengetahui  kandungan metabolit sekunder pada suatu sampel (Harborne, 1987). Analisis ini  sangat  berguna  untuk menentukan  golongan utama  senyawa  aktif  dari  ekstrak  daun  dan  bunga kangkung  laut (L pes-caprae)  memiliki potensi sebagai  inhibitor  tirosinase  dan  antioksidan.  Uji yang dilakukan  meliputi  uji  steroid,  flavonoid, fenolik, triterpenoid, dan alkaloid. Berdasarkan uji fitokimia  pada  ekstrak  daun  dan  bunga  kangkung laut (L  pes-caprae) mengandung flavonoid, fenolik  dan  triterpenoid. Adapun  hasil  pengujian fitokimia  ekstrak  daun kangkung  laut (I  pes- caprae) ditunjukkan pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil analisis fitokimia ekstrak kasar daun kangkung laut pes-caprae)
Identifikasi Flavonoid Fenolik Triterpenoid Senyawa Aseton +++ +++ Etil Asetat +++ +++ ++ Metanol +++ +++ ++
Keterangan : +: kurang pekat, ++: sedang dan +++ : pekat.
Berdasarkan Tabel 3, menunjukkan bahwa filtrat ekstrak  daun  kangkung  laut (I.  P  escaprae) dengan menggunakan  pereaksi  metanol  menunjukkan  adanya flavonoid  dan  fenolik dengan  kisaran  pekat, sedangkan  senyawa  triterpenoid  berada  pada kisaran sedang. Triterpenoid nampak jelas ketika ada warna  merah  pada  saat  filtrat  uji  Lieberman.  Untuk memperoleh hasil inhibitor tirosinase dan antioksidan penting sebagai zat penghamba(t reaksi oksidasi  akibat  radikal bebas.  Tanaman  daun kangkung  laut I.pescaprae) memiliki aktivitas tirosinase  dan  antioksidan,  yang  mengandung senyawa dan mampu menangkal radikal bebas yaitu flavonoid dan fenolik.

## Aktivitas Antioksidan Metode DPPH
Pengujian aktivitas antioksidan dalam daun dan bunga  kangkung  laut (I.pescaprae) dilakukan menggunakan  metode  DPPH  (1,1  diphenil-1- pikrilhidrazil)  yang  memiliki rumus  molekul C13H12N04  (Sletty,  2004 dalam Molyneux,  2006),
suatu radikal bebas stabil yang dapat bereaksi dengan radikal lain  membentuk senyawa  yang  lebih stabil. Radikal bebas DPPH merupakan radikal sintetik yang stabil  pada suhu  kamar  dan larut dalam  pelarut polar seperti  metanol  dan  etil  asetat  (Suratmo,  2009). Delokalisasi  ini  akan  memberikan warna  ungu gelap dengan absorbansi maksimum 515 nm dalam larutan  metanol  dan  etil  asetat  (Umiyah,  2005 dalam Rita, 2009) seperti Gambar 2 dibawah ini.
Gambar 2. Absorbansi daun kangkung laut (I. pes- caprae)
Konsentrasi ekstrak daun dan bunga kangkung laut yang digunakan pada metode DPPH ini adalah 24,28,32,36, dan 40 ppm. Konsentrasi tersebut diperoleh dari pengenceran stok ekstrak dengan konsentrasi 160 ppm, sepeti terlihat pada Gambar 3 dibawah ini.
Gambar 3. Konsentrasi daun 24,28,32,36, dan 40 ppm.
Aktivitas antioksidan dengan metode menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  dan  bunga kangkung  laut (I.  Pes-caprae) dengan  filtrat mempunyai  nilai  tertinggi  pada  pelarut  ekstrak etil asetat  daun  kangkung  laut  dengan  nilai  rerata sebesar  3,749,  kemudian  diikuti  oleh ekstrak metanol  bunga  kangkung  laut  memiliki  nilai  rerata sebesar 3,509. Hasil lengkapnya disajikan pada Tabel 4.
Tabel 4. Nilai absorbansi ekstrak metanol dan etil asetat, daun kangkung laut ( I. pes-caprae).
Sampel Konsentrasi (ppm)
Absorbansi
Rerata
Vit C/Asam
24
0,020 0,0118 28 0,014 32
0,011 36 0,008 40 0,006 Ekstrak metanol daun kangkung laut
24
0,769 3,435 28 0,719 32
0,705 36 0,628 40 0,614 Ekstrak etil asetat daun kangkung laut
24
0,843 3,749 28 0,741 32
0,733 36 0,724 40 0,708

## KESIMPULAN

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  mengenai penentuan  aktivitas  antioksidan  dapat  disimpulkan bahwa  Ekstrak  metanol  daun  kang,kung  laut (I. Pes-caprae) memiliki efektifitas sebagai antioksidan dengan nilai absorbansi sebesar 515 nm.

## DAFTAR PUSTAKA
Backer  dan  Van  Den  Brink  Jr.  RCB.  1963. Flora  of Java. Vol  1,  Netherlands:  Auspices  of  the
Rusksherbarium. NVP. Noordhoff- Gronigen. Bandaranayake WM. 2002.Bioactivities, bioactive  compounds  and  chemical  of mangrove plants. Wood  Ecosystem
Mangrove. 10:421-452.
Batubara  I,  Mitsunaga T,  Ohashi  H.  2009.  Screening anti-acne  potency  of  Indonesia  medicinal plants: Antibacterial, lipase inhibition and Antioxidant  activities. Journal  Wood Science. 55: 230-235.
Batubara  I,  Darusman  LK,  Mitsunaga  T,
Rahminiwati M, Djauhari E. 2010.Potency  of  indonesia  medicinal plants as tyrosinase inhibitors andantioxidant  agent. Journal Biological Science 10(2): 138-144.
BPPT.  Badan  Pusat  Penelitian  Tanaman,
Tanaman  Obat  Indonesia.  2005. Tapak Kuda (Ipomea pes caprae)
(L.J.Sweet). http://www.IPTEK.
Chakraborty AK, Funasaka Y, Komoto M, Ichihashi M. 1998.  Effect  of  arbutin  on  melanogenic proteins  in  human  melanocytes. Pigment. Cellular. Research. 11 : 206-212.

## Eri Safutra  Zuriat / Jurnal Akuakultura 2 (1), 79-85 (2018)
Chang  TS.  2009. An  updated  review  of  tyrosinase inhibitor. International  Journal  Molecule Science. 10: 2440-2475.
Devall  M.S.  1992.  The  biological  flora  of  coastal dunes and wetlands. Ipomea pes caprae (L) Roth. Journal  of  coastal  Research 8  (2)  : 442 — 456.
Dimitrios  B.  2006.  Sources  of  natural  fenolic antioxidants. Trends  in  Food  Science  and Technology. 17: 505-512.
Dorland,  Newman  W.A.  2000. Dorland's ilustrated Medical Dictionary. Philadelphia: pennsylvania.  W.B.
Saunders Company.
Edward F. 1999. Ipomea pes caprae. University of Florida.  Cooperative  Extension  Service. Institute  of  Food  and  Agricultural
Sciences.
Gilchrest. 1998. Turning back the clock: retinoic acid modifies intrinsic aging changes. Journal of Clinical. Investment. 94 : 1711-1712.
Harborne  JB.  1987. Metode fitokimia. penuntun cara  modern  menganalisis  tumbuhan. Bandung:  ITB  press.  Terjemahan  Kosasih
Padmawinata.
Hardjito  L,  Kingston  D.  2004.  Laporan  RUTI
2004. Bioactive Compounds from Indonesia marine  invertebrata  and  their sustainable Production Through Maricultured. Penelitian DIKTI. Kahn V Ben-Shalom N, Zakin V. 1997. Effect of Kojic  Acid  on  the  Oxidation  of  N- Acetyldopamine by mushroom. Journal of Agricultural  Food  Chemistry. .45  ;  4460- 4465.
Khazali  M,  Suryadiputra,  Yus  Rusila  Nur.  1999. Panduan Pengenalan Mangrove di Indonesia. Bogor : Ditjen PKA.