## Pengaruh Suplementasi Mineral Seng Zn dalam Pakan Berbasis Tepung Darah Terhadap Gambaran Darah Ikan Kerapu Bebek Cromileptes altivelis

## Wahyuni Fanggi Tasik 1
1 Program Studi Teknologi Budidaya Perikanan, Jurusan Perikanan dan Kelautan, Politeknik Pertanian Negeri Kupang,  Jl.  Prof.  Herman  Yohanes,  Kupang,  Kode  Pos  85011.  *Email  Korespondensi: wahyunifanggitasik@gmail.com
Abstrak. Fungsi esensial Fe dalam tubuh antara lain sebagai bagian dari heme. Tanpa Fe dapat menyebabkan pengikatan  dan  transport  oksigen  dalam  tubuh  tidak  dapat  dilakukan. . Tepung  darah  selain  dapat  dijadikan sebagai sumber protein dapat juga dijadikan sebagai sumber zat besi (Fe) organik dengan konsentrasi mencapai 2769 mg/kg. Kandungan Fe yang sangat tinggi dapat menyebabkan terjadinya kompetisi penyerapan Zn dalam tubuh  ikan  sehingga  berpengaruh  terhadap  sistem  ketahanan  tubuh.  Oleh  sebab  itu  diperlukan  suatu pengetahuan  tentang  rasio  yang  tepat  antara  jumlah  tepung  darah  terhadap  Zn  untuk  diterapkan  dalam pembuatan pakan sehingga dapat memberikan ketahanan tubuh yang lebih baik untuk ikan kerapu bebek. Ikan uji yang digunakan adalah ikan kerapu bebek C. altivelis dengan bobot rata-rata individu awal 97.11  7.72 g. Ikan uji  dibagi  ke  dalam  4  perlakuan  dengan  masing-masing  perlakuan  3  ulangan.  Jumlah  ikan  yang  diperlihara sebanyak 10 ekor per akuarium. Untuk penelitian ini digunakan 4 jenis pakan dengan komposisi Zn anorganik berbeda yaitu pakan A dengan penambahan Zn 0 ppm, B (75 ppm), C (150 ppm) dan D (225 ppm). Secara keseluruhan dari hasil yang didapat terlihat bahwa pemberian pakan uji dengan rasio 150 ppm Zn : 9% tepung darah sebagai sumber Fe organic dalam pakan kerapu bebek memberikan hasil yang lebih baik terhadap kinerja pertumbuhan  dan  ketahanan  tubuh  ikan  dibandingkan  dengan  perlakuan  yang  lain  yaitu  laju  pertumbuhan harian sebesar 1.27  0.13%; kadar hematocrit 31.52  5.43%, dan kadar hemoglobin 4.87  0.90 g %.
Kata kunci : kerapu bebek, suplementasi Zn, pakan berbasis tepung darah, perlakuan stress, gambaran darah
Pendahuluan
Fungsi  esensial  Fe  dalam  tubuh  antara  lain  sebagai  bagian  dari  heme.  Atom  Fe  merupakan  inti  dari molekul  heme  yang  berperan  dalam  transport  oksigen  ke  dalam  jaringan  tubuh  (hemoglobin),  penyimpanan oksigen dalam jaringan otot (myoglobin), dan transport elektron melalui respirasi sel-sel (cytochromes). Dalam materi tersebut Fe terdapat dalam cincin forfirin (Groof dan Gropper, 2000). Tanpa Fe sebagai ini dari molekul heme  (hemoglobin)  menyebabkan  pengikatan  dan  transport  oksigen  dalam  tubuh  tidak  dapat  dilakukan. Oksigen  merupakan  elemen  yang  sangat  penting  bagi  semua  makhluk  hidup,  kekurangan  oksigen  dapat menyebabkan  penurunan  kinerja  semua  sistem  yang  ada  dalam  tubuh.  Zn  merupakan  mineral  esensial  yang lebih  dominan  berperan  dalam  sistem  metabolisme,  namun  Calder et  al .  (2002)  menyatakan  bahwa  Zn  juga memiliki peranan dalam sistem imun (ketahanan tubuh). Zn berperan dalam meningkatkan respon neutropin dan monosit (fungsi makrofag) yang ada dalam darah. Sehingga defisiensi Zn dapat menyebabkan penurunan ketahanan tubuh terhadap serangan penyakit.
Tepung darah merupakan salah satu sumber bahan baku protein yang sudah sering dimanfaatkan dalam pakan  ternak  (DeRouchey, 2002)  dengan  kadar  protein  berkisar  antara  89-92%.  Selain  protein,  tepung  darah juga  mengandung  Fe  yang  sangat  tinggi  sampai  pada  level  2769  mg/kg,  dibanding  dengan  tepung  ikan  yang berkisar antara 114-544 mg/kg (herring 114 mg/kg, menhaden 544 mg/kg dan white fish 181 mg/kg) dan tepung kedelai  140  mg/kg  (NRC, 1993).  Kandungan  Fe  yang sangat  tinggi  dapat  menyebabkan  terjadinya  kompetisi penyerapan Zn dalam tubuh ikan (Linder, 1992) sehingga berpengaruh terhadap sistem ketahanan tubuh. Oleh sebab  itu  diperlukan  suatu  pengetahuan  tentang  rasio  yang  tepat  antara  jumlah  tepung  darah  terhadap  Zn (tepung  darah  :  Zn)  untuk diterapkan  dalam pembuatan  pakan  sehingga  dapat memberikan  ketahanan  tubuh yang lebih baik untuk ikan kerapu bebek.

## Bahan dan Metode
Pakan uji Pakan  yang  digunakan  berupa  pakan  buatan  berbentuk  pelet  kering.  Sebelum  pembuatan  pakan, seluruh  bahan  penyusun  dianalisis  proksimat  dengan  metode  Takeuchi  (1989).  Telah  diketahui  bahwa penambahan Zn dalam pakan ikan berbasis tepung darah memberikan pengaruh yang berbeda nyata terhadap kinerja  pertumbuhan  (Tasik,  2021).  Dari  hasil  tersebut,  dirancang  suatu  percobaan  lanjutan  dengan menggunakan pakan yang sama untuk mengetahui gambaran darah ikan kerapu bebek yang diberi suplementasi mineral Zn sebagai penyeimbang penggunaan tepung darah dalam pakan. Pakan dibuat dengan target protein 50% dengan penggunaan tepung darah sebesar 9%.
Untuk penelitian ini digunakan 4 jenis pakan dengan komposisi Zn anorganik berbeda yaitu pakan A dengan penambahan Zn 0 ppm, B (75 ppm), C (150 ppm) dan D (225 ppm). Kandungan nutrient kempat jenis pakan  perlakuan  tersebut  dibuat  seimbang  antara  protein  dan  energi.  Komposisi  lengkap  dan  hasil  analisa proksimat pakan uji dapat dilihat pada Tabel 1 berikut.
Tabel 1. Komposisi bahan pakan dan komposisi proksimat pakan uji (100 g berat kering)
Bahan pakan Pakan perlakuan (suplementasi Zn) A (Zn 0 ppm) B (Zn 75 ppm) C (Zn 150 ppm) D (Zn 225 ppm) Tepung darah a) 9.00 9.00 9.00 9.00 Tepung ikan 43.00 43.00 43.00 43.00 Tepung bungkil kedelai 6.35 6.35 6.35 6.35 Tepung rebon 12.70 12.70 12.70 12.70 Pollard 8.85 8.85 8.85 8.85 Minyak cumi 4.50 4.50 4.50 4.50 Minyak ikan 7.00 7.00 7.00 7.00 Vitamin mix b) 1.50 1.50 1.50 1.50 Mineral mix c) 3.00 3.00 3.00 3.00 Vit. C 0.10 0.10 0.10 0.10 CMC 3.00 3.00 3.00 3.00 Cholin 0.50 0.50 0.50 0.50 ZnSO 4 .7H 2 O 0 0.0330 0.0659 0.0989 Selulosa 0.50 0.467 0.4341 0.4011 Komposisi proksimat (%) Protein 50.41 50.78 50.08 79.70 Lemak 15.49 14.25 14.73 15.71 Abu 13.97 13.79 14.51 14.60 Serat kasar 3.66 3.46 3.47 3.61 BETN 16.47 17.54 17.20 16.92 Energi (kal/kg) 3430.66 3370.00 3376.51 3391.29 Kandungan mineral (%) Zn 0.008 0.017 0.026 0.029 Fe 0.070 0.077 0.072 0.070
Ket: Pakan yang digunakan adalah pakan yang sama dengan penelitian Wahyuni (2021); a) Tepung darah dengan metode spray-dried ; b) Vitamin mix lengkap Roche;
c) Mineral mix tanpa Fe dam Zn (digantikan oleh penambahan selulosa dengan bobot yang sama)

## Pemeliharaan ikan dan pengumpulan data
Ikan  uji  yang  digunakan  adalah  ikan  kerapu  bebek C.  altivelis dengan  bobot  rata-rata  individu  awal 97.11  7.72  g.  Ikan  uji  dibagi  ke  dalam  4  perlakuan  dengan  masing-masing  perlakuan  3  ulangan.  Jumlah  ikan yang diperlihara sebanyak 10 ekor per akuarium. Ikan  diberi pakan uji dengan frekuensi pemberian sebanyak 3 kali/hari. Pada tahap awal, ikan uji diberi perlakuan stress pertama berupa perendaman dalam air tawar selama 15 menit tanpa aerasi dan dipelihara selama 30 hari. Pada akhir pemeliharaan ikan diberi perlakuan stress kedua ( stressor yang  sama).  Perlakuan stress berupa  perendaman  dalam  air  tawar  tanpa  aerasi  selama  15  menit  dipilih
karena  pada  umumnya  perlakuan  yang  diberikana  para  pembudidaya  di  karamba  jarring  apung  (KJA)  untuk mengendalikan  parasit  kutu  kulit  ( Benedenia sp.  dan Neobenedenia sp.)  pada  ikan  kerapu  adalah  dengan perendaman dalam air tawar (BBRPBL, 2002).
Parameter  yang  diamati  adalah  laju  pertumbuhan  harian  serta  gambaran  darah  (total  eritrosit,  total leukosit, kadar hematokrit, dan kadar hemoglobin) pada saat sebelum dan sesudah perlakuan stress .

## Analisis data
Rancangan penelitian yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 4 perlakuan dan 3 ulangan. Untuk mengetahui pengaruh perlakuan terhadap laju pertumbuhan harian, total eritrosit, total leukosit, kadar  hematokrit,  dan  kadar  hemoglobin  digunakan  analisis  sidik  ragam  pada  tingkat  kepercayaan  90%  dan dilanjutkan dengan uji Duncan.

## Hasil dan Pembahasan
Laju pertumbuhan ikan 30 hari setelah perlakuan stress pertama Laju  pertumbuhan  harian  ikan  30  hari  setelah  perlakuan stress memberikan  hasil  yang  berbeda  nyata, dimana  perlakuan  C  dengan  suplementasi  Zn  sebesar  150  ppm  memberikan  hasil  yang  tertinggi  yaitu 1.27  0.13%. Sedangkan untuk perlakuan suplementasi Zn 0 ppm, 75 ppm dan 225 ppm tidak berbeda dengan hasil berturut-turut 1.01  0.24%, 1.20  0.13% dan 0.81  0.16% (Tabel 2).
Tabel 2. Data laju pertumbuhan harian 30 hari setelah perlakuan stress pertama Ulangan Perlakuan (Suplementasi Zn) A (Zn 0 ppm) B (Zn 75 ppm) C (Zn 150 ppm) D (Zn 225 ppm) 1 0.95 1.18 1.39 0.89 2 0.80 1.35 1.13 0.62 3 1.27 1.09 1.28 0.93 Rata-rata 1.01  0.24 ab 1.20  0.13 ab 1.27  0.13 b 0.81  0.16 a Ket: huruf superscript di belakang nilai standar deviasi pada baris yang sama menunjukkan pengaruh perlakuan yang tidak berbeda nyata (P>0.1) dengan selang kepercayaan 90%
Hasil penelitian juga (Tabel 3) memperlihatkan bahwa perlakuan suplementasi Zn dengan dosis yang berbeda dalam pakan ikan kerapu bebek memberikan hasil yang berbeda nyata pada kadar hematokrit dan kadar hemoglobin  setelah  perlakuan stress kedua.  Dimana  pada  perlakuan  suplementasi  Zn  sebesar  150  ppm memberikan nilai ada kadar hematokrit dan hemoglobin tertinggi. Sedangkan untuk parameter gambaran darah lainnya tidak memberikan hasil yang berbeda (P>0.1).
Tabel 3. Nilai rataan total eritrosit, total leukosit, kadar hematokrit dan kadar hemoglobin sebelum dan sesudah
perlakuan stress kedua Gambaran darah Perlakuan (Suplementasi Zn) A (Zn 0 ppm) B (Zn 75 ppm) C (Zn 150 ppm) D (Zn 225 ppm) Total eritrosit (10 6 sel/mm 3 ) Sebelum 0.90  0.18 a 1.20  0.64 a 1.31  0.18 a 1.06  0.44 a Setelah 1.14  0.15 a 0.90  0.38 a 1.44  0.47 a 1.10  0.51 a Total leukosit (10 5 sel/mm 3 ) Sebelum 4.42  0.30 a 4.47  0.66 a 4.68  1.17 a 3.83  0.28 a Setelah 4.00  0.94 a 4.82  0.41 a 4.85  0.88 a 3.86  0.10 a Kadar hematokrit (%) Sebelum 13.84  3.97 a 17.05  8.60 a 31.52  5.43 b 13.14  4.93 a Setelah 10.17  2.25 a 10.89  5.30 a 18.69  9.64 a 11.01  9.95 a Kadar hemoglobin (g )% Sebelum 3.27  0.50 a 3.80  0.92 ab 4.87  0.90 b 3.90  1.21 ab Setelah 3.27  1.17 a 3.73  1.00 a 4.20  1.59 a 3.20  1.56 a Ket: huruf superscript di belakang nilai standar deviasi pada baris yang sama menunjukkan pengaruh perlakuan yang tidak berbeda nyata (P>0.1) dengan selang kepercayaan 90%
Nilai  rataan  total  total  eritrosit,  total  leukosit,  kadar  hematokrit  dan  kadar  hemoglobin  sebelum  dan setelah perlakuan stress kedua dapat dilihat pada gambar di bawah (Gambar 1). Pada gambar tersebut terlihat adanya peningkatan nilai rataan total eritrosit dan leukosit, sedangkan kadar hematokrit dan kadar hemoglobin cenderung menurun. Hal ini menunjukkan bahwa ikan mengalami stress .
a c b d
Gambar 1. Nilai rataan total eritrosit (a), total leukosit (b), kadar hematocrit (c) dan kadar hemoglobin (d) pada saat sebelum dan setelah perlakuan stress kedua
Hasil penelitian terdahulu (Wahyuni, 2021) memperlihatkan bahwa ikan uji yang dipelihara selama 40 hari  dengan  pakan  perlakuan  suplementasi  Zn  mengalami  pertumbuhan  yang  normal  dimana  perlakuan penambahan Zn sebesar 150 ppm memberikan hasil yang lebih baik pada kinerja pertumbuhan, antara lain laju pertumbuhan  yang  tertinggi  yaitu  sebesar  2.12  0.28%  demikian  juga  halnya  dengan  efisiensi  pakan,  retensi protein  dan  retensi  lemak  yang  juga  memiliki  nilai  tertinggi  berturut-turut  67.06±9.31%,  7.47±1.20  dan 11.50±1.43%. Diketahui bahwa Zn adalah mikromineral yang terdapat dalam jaringan tubuh hewan (termasuk ikan) dan terlibat dalam fungsi berbagai enzim dalam proses metabolism (Linder, 1992), sehingga pertumbuhan yang  optimal  dapat  dicapai  apabila  kadar  Zn  dalam  pakan  memenuhi  jumlah  normal  yang  dibutuhkan  untuk menjalankan proses metabolisme tersebut (Storebakken et al ., 2000). Hal ini sesuai dengan hasil yang didapat pada  perlakuan  C  yang  selain  memiliki  laju  pertumbuhan  lebih  baik  juga  memberikan  nilai  efisiensi  pakan, retensi  protein  dan  retensi  lemak  yang  lebih  baik  jika  dibandingkan  dengan  perlakuan  lainnya.  Ini mengindikasikan bahwa suplementasi Zn sebesar 150 ppm dapat mengimbangi kadar Fe yang tinggi pada pakan yang mengandung tepung darah sebesar 9% sebagai sumber Fe organik sehingga tidak terjadi kompetisi antara mineral  Zn  dan  Fe  yang  daapt  menyebabkan  terhambatnya  penyerapan  Zn  dalam  pakan  oleh  tubuh  ikan (Linder, 1992).
Berdasarkan  Tabel  2  dapat  dilihat  bahwa  suplementasi  Zn  sebesar  150  ppm  juga  memberikan  laju pertumbuhan yang lebih baik  yaitu sebesar 1.27  0.13% pada 30 hari setelah perlakuan stress pertama. Hal ini menunjukkan  bahwa  selain  meningkatkan  kinerja  pertumbuhan,  substitusi  Zn  sebesar  150  ppm  dapat membantu tubuh ikan untuk memulihkan sistem metabolisme yang terganggu akibat perlakuan stress lebih cepat
dibandingkan  dengan  perlakuan  yang  lainnya  sehingga  energy  pakan  yang  terserap  oleh  tubuh  ikan  dapat digunakan untuk pertumbuhan.
Lebih lanjut, pada parameter gambaran darah (Tabel 3) dapat dilihat bahwa suplementasi Zn 150 ppm memberikan  nilai  tertinggi  pada  kadar  hematokrit  sebelum  perlakuan stress kedua  yaitu  sebesar  31.52  5.43% yang berarti ikan tidak mengalami defisiensi eritrosit dan anemia (Nabib dan Pasaribu, 1989 dalam Indriastuti, 2008). Demikian juga halnya dengan kadar hemoglobin pada perlakuan suplementas Zn 150 ppm memiliki nilai yang  tertinggi  yaitu  4.87  0.90  g  %.  Kadar  hematokrit  dan  hemoglobin  yang  tinggi  menunjukkan  bahwa suplementasi  Zn  150  pm  dapat  meningkatkan  kinerja  Fe-organik  (dalam  tepung  darah),  sehingga  sintesis hemoglobin    (Fe  sebagai  inti  molekul  Hb)  dalam  sel  darah  merah  yang  juga  mempengaruhi  nilai  kadar hematokrit berlangsung dengan lebih baik. Yang pada kelanjutannya mengindikasikan bahwa transport oksigen yang  berkaitan  dengan  katabolisme  energy  dalam  tubuh  ikan  berjalan  dengan  baik  yang  pada  akhirnya berpengaruh terhadap kinerja pertumbuhan. Diketahui bahwa apabila katabolisme energy berjalan dengan baik akan memberikan pertumbuhan yang lebih baik.
Pada  Gambar  1  terlihat  bahwa  adanya  kecendrungan  peningkatan  rataan  total  eritrosit  dan  leukosit setelah  perlakuan stressi kedua,  hal  ini  menandakan  ikan  berada  dalam  kondisi stress (Lagler at  al .,  1977). Sedangkan pada kadar hematokrit dan hemoglobin cenderung menurun yang mengindikasikan ikan mengalami kekurangan  oksigen  (Affonso et  al .,  2002 dalam Setiawati,  2006)  yang  disebabkan  oleh stress yang  diberikan berupa perendaman dalam air tawar tanpa aerasi.
Secara keseluruhan dari hasil yang didapat terlihat bahwa pemberian pakan uji dengan rasio 150 ppm Zn : 9% tepung darah sebagai sumber Fe organic dalam pakan kerapu bebek memberikan hasil yang lebih baik terhadap  kinerja  pertumbuhan  dan  ketahanan  tubuh  ikan  dibandingkan  dengan  perlakuan  yang  lain.  Hal  ini menunjukkan bahwa rasio 150 ppm Zn : 9% tepung darah merupakan rasio yang optimal dalam pakan, dimana penambahan  Zn sebesar  150  ppm  dapat mengimbangai  Fe  yang terdapat dalam  tepung  darah  sehingga  tidak terjadi  kompetisi  dalam  penyerapan  kedua  mineral  tersebut  (Linder,  2002).  Dengan  rasio  yang  optimal  maka kinerja enzim-enzim pencernaan yang bergantung pada ketersediaan Zn (metaloenzim) dapat berjalan dengan baik.  Demikian  juga  halnya  dengan  ketahanan  tubuh  ikan  yang  dapat  dilihat  dari  gambaran  darah,  dimana suplementasi  Zn  150  ppm memberikan  nilai  hematokrit  dan  hemoglobin  tertinggi yang  menunjukkan  bahwa suplementasi  Zn  sebesar  150  ppm  dapat  meningkatkan  kinerja  Fe  organic  dalam  tepung  darah  sebesar  9%, sehingga hemoglobin yang berperan dalam transor oksigen dan nutrient makanan yang digunakan dalam proses katabolisme  untuk  menghasilkan  energy  dapat  disintesis  secara  optimal  (Lagler et  al .,  1977)  sehingga  ikan memiliki energy yang cukup untuk memulihkan diri dari perlakuan stress yang diberikan.

## Kesimpulan
Berdasarkan parameter kinerja pertumbuhan dan gambaran darah, disimpulkan bahwa penambahan Zn sebesar 150 ppm dapat mengimbangi penggunaan tepung darah sebesar 9% sebagai sumber Fe organik dalam pakan kerapu bebek C. altivelis .

## Daftar Pustaka
Balai Besar Riset Perikanan Budidaya laut (BBRPBL) Gondol, Bali. 2003. Budidaya kerapu di keramba jaring apung (KJA). Brosur. Bali.
Calder, P. C., C. J. Field, H. S. Gill. 2002. Nutrition and immune function. CAB International. London. UK. DeRouchey,  J.  M.  2002.  Comparison  of  spray-dried  blood  meal  and  blood  cells  in  diets  for  nursery  pigs.
American Society of Animal Science. Journal of animal science, 80:2879-2886.
Groofe,  J.  L.,  S.  S.  Gropper.  2000.  Advanced  nutrition  and  human  metabolism  (3 rd editon).
Wadsworth/Thomson Learning.
Indriastuti,  L.  2008.  Pengaruh  penambahan  bahan-bahan  imunostimulan  dalam  formulasi  pakan  buatan terhadap respon imunitas dan pertumbuhan ikan kerapu bebek Cromileptes altivelis . Skripsi. Departemen Budidaya Perairan. Institut Pertanian Bogor.
Lagler, K. F., J. E. Bardach, R. R. Mider, D. R. M. Passino. 1977. Ichtyology. John Wiley and Son Inc. New York.
Linder, M. C. 1992. Biokimia nutrisi dan metabolism.
National Research Council. 1993. Nutrient requirements of fish. National Academic Press. Washington D. C.
115 p.
Setiawati,  M.  2006.  Suplementasi  Fe  optimal  sebagai  peningkat  vitalitas  ikan  kerapu  ( Cromileptes  altivelis )  saat kondisi stress hipoksia. Laporan Penelitian Dosen Muda IPB. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan.
Storebakken, T. 2000. Altantic Salmon, Salmo salar , p. 79-102. Di dalam: C. D. Webster dan C. E. Lim (eds). 2002. Nutrient Requirements and Feeding of Finfish for Aquaculture. CAB International. London, UK.
Tasik,  W.  F.  2021.  Kinerja  pertumbuhan  ikan  kerapu  bebek Cromileptes  altivelis yang  diberi  suplemen  mineral seng Zn sebagai penyeimbang dalam pakan berbasis tepung darah. Jurnal Vokasi Ilmu-Ilmu Perikanan. Vol 1, No 2 (2021).
Tekeuchi, T. 1988. Laboratory work chemical evaluation of dietary nutrients, p. 179-225. Di dalam T. Watanabe (ed). Fish nutrition and mariculture. Kanagawa International Fisheries Training Centre. JICA.