## PENGEMBANGAN PROSES INAKTIVASI ENZIM POLIFENOL OKSIDASE UNTUK PRODUKSI TEH HIJAU BERKATEKIN TINGGI
Mohamad Endy Yulianto 1 , Fahmi Arifan 1 , Didik Ariwibowo 2 , Indah Hartati 3 dan, Dewi Mustikaningtyas 4
1 Jurusan Teknik Kimia PSD III Teknik, UNDIP Semarang 2 Jurusan Teknik Mesin PSD III Teknik, UNDIP Semarang 3 Jurusan Teknik Kimia Universitas Pandanaran Semarang
4 FMIPA Universitas Negeri Semarang E-mail: endy_y@yahoo.com

## ABSTRAK
Teh  merupakan  bahan  minuman  penyegar  alami  yang  menyehatkan  karena  di  dalamnya terkandung senyawa katekin yang merupakan senyawa bioaktif yang dapat menghambat pertumbuhan sel  kanker,  mengurangi  kemungkinan  timbulnya  penyakit  jantung,  darah  dan  pembuluh  darah, menyehatkan pencernaan makanan, mulut dan gigi serta beberapa penyakit infeksi lain. Oleh karena itu kadar katekin tinggi di dalam teh sangat diharapkan. Untuk memperoleh kadar katekin tinggi harus menghilangkan  proses  oksidasi  polifenol  secara  enzimatik  pada  saat  pengolahan  daun  teh.  Untuk keperluan  itu  dirancang  suatu  proses  dan  sistem  pemroses  yang  mendukung  kondisi  pengolahan tersebut.  Dasar  perancangan  yang  dipilih  adalah  inaktivasi  enzim  polifenol  oksidase  dengan  cara steaming. Teh yang dihasilkan diharapkan merupakan teh berkatekin tinggi yang selain dapat langsung dikonsumsi dapat pula dijadikan bahan baku bubuk katekin untuk preparat dietary food dan fungctional food  atau  obat.  Kajian  sistem  pemroses  ini  melibatkan  variabel-variabel  persen  uap  panas  yang digunakan, kapasitas daun teh dan spray uap air.  Parameter yang akan diamati adalah temperatur sistem, kadar katekin, kadar air, dan kelembaban sistem proses yang merupakan fungsi waktu. Hasil proses steaming daun teh menunjukkan bahwa pada temperatur 90 0 C, diperoleh katekin dengan kadar relatif tinggi. Hasil kajian juga menunjukkan bahwa kelembaban 70% didapatkan kadar katekin relatif tinggi dengan kadar air relatif rendah.
Kata Kunci: Steaming; teh hijau

## ABSTRACT
Tea is a natural healty beverage because of catechin content which is a bioactive matter that can retard cancel growth, heart desease, blood and nerves, making healthy for mouth, teeth and some other infection. Therefore, high catechin in tea would be needed. To Obtain high catechin content it must eliminate enzymatically oxidation process of polyphenol during tea manufacturing. Thus, it was created a  process  and  processing  system  which  sustain  the  process.  The  basic  design  was  inactivation  of polyphenol oxidase enzyme by steaming. It wishes a high catechin green tea product that can either be directly as a beverage or as a catechin powder for dietary food and functional food or medicine. The variables  of  this study  were  percentage  of  steam, tea  leaves feeding  and  humidity.  The investigated parameters were temperature, catechin content, moisture content, and humidity as time function. The result was that at 90 o C yielded high catechin. The study shows that at 70% humidity yielded higher catechin and lower moisture content.
Keywords: Green tea; Steaming

## PENDAHULUAN
Teh  sebagai  bahan  minuman  penyegar  dan menyehatkan  merupakan  salah  satu  komoditi unggulan  perkebunan  Indonesia.  Areal  teh Indonesia  seluas  157.000  ha  terdiri  atas  54%
perkebunan  rakyat,  24%  perkebunan  besar negara, dan 22% perkebunan besar swasta.
Pasar teh dunia yang dibayangi gejala kelebihan pasokan  dan  biaya  produksi  yang  cenderung meningkat,  mengharuskan  para  produsen  teh untuk  meningkatkan  daya  saing  dan  nilai
tambah.  Masalah  lingkungan  telah  ikut mendorong berkembangnya segmen pasar baru bagi  produk  teh  yaitu  konsumen  yang menghendaki  produk  ramah  lingkungan  dan menyehatkan. Aspek kesehatan teh disorot tajam beberapa  tahun  terakhir  ini  sejalan  dengan kecenderungan  masyarakat  mengkonsumsi makanan  atau  minuman  substitusi  sebagai imbangan  diet  kaya  lemak  dan  kolesterol (Ariwibowo, dkk 2005., Yulianto, dkk., 2006).
Katekin  (C 6 H 6 O 2 )  dalam  teh  merupakan komponen  utama  yang  mendominasi  sekitar 30% berat kering teh, ditunjukkan pada Tabel 1 (Bokuchava dan Skobeleva, 1969; Lunder, 1989; Graham,  1992;  Price  dan  Spitzer,  1993;  Wang dan  Helliwell,  2000).  Katekin  merupakan kerabat  tanin  terkondensasi  yang  juga  sering disebut polifenol karena banyaknya gugus fungsi hidroksil yang dimilikinya. Katekin merupakan senyawa utama yang menentukan mutu, baik cita rasa,  kenampakan,  maupun  warna  air  seduhan (Graham, 1992). Kandungan katekin pada pucuk tanaman  teh  ( Camellia  sinensis )  varietas assamica lebih  banyak  dibandingkan  varietas sinensis (Yamanashi,  1995).  Namun  demikian, varietas sinensis memiliki aroma yang lebih baik karena  memiliki  kandungan  asam  amino  lebih tinggi.  Tanaman  teh  yang  dibudidayakan  di Indonesia  hampir  100%  merupakan  varietas assamica . Pucuk teh yang dihasilkan 80% diolah menjadi  teh  hitam,  sedangkan  sisanya  diolah menjadi  teh  hijau.  Teh  hitam  lebih  sedikit mengandung  katekin  daripada  teh  hijau  karena dalam  proses  pengolahan  teh  hitam  dirancang agar  katekin  mengalami  oksidasi  untuk memperbaiki warna, rasa, dan aromanya.
Efek  menyehatkan  pada  teh  terletak  pada senyawa katekin yang dikandungnya (Copeland
et  al., 1998;  Wanasundara  dan  Shahidi,  1998; Zandi  dan  Gordon,  1999;  Nwuha et  al., 1999;
Wang  dan  Helliwell,  2000;  dan  Sava et  al., 2001).  Penelitian  dengan  teh  hijau  Jepang membuktikan bahwa katekin dapat mengurangi resiko  kejangkitan  berbagai  penyakit  seperti mengurangi  resiko  kanker,  menjaga  kesehatan jantung,  bersifat  anti  oksidan,  anti  mikroba, bahkan mampu memperpanjang masa menopouse  dan  lain-lain  (Oguni,  1993; Bruneman,  1991;  Chen,  1991;  Fujiki,  1991; Fung, 1991; Hayatsu, 1991). Menurut Bambang (1995,  1996)  katekin  pada  daun  teh  Indonesia lebih banyak daripada katekin daun teh Jepang, sebab  itu  potensi  menyehatkan  teh  Indonesia diduga  lebih  tinggi.  Keunggulan  ini  membuka peluang  bagi  industri  teh  Indonesia  untuk memproduksi teh hijau berkatekin tinggi sebagai bahan baku preparat katekin dan functional food yang mulai populer pemakaiannya saat ini.
Tabel 1. Komponen utama katekin daun teh segar
Komponen Kadar katekin (% bk) (+)-Katekin 1 – 2 (-)-Epikatekin 1 – 3 (-)-Epikatekin galat 3 – 6 (+)-Gallokatekin 1 – 3 (-)-Epigallokatekin 3 – 6 (-)-Epigallokatekin galat 7 – 13 Total 16 – 30
Sumber:  Bokuchava  dan  Skobeleva,  1969; Lunder,  1989;  Graham,  1992;  Price dan  Spitzer,  1993;  Wang  dan Helliwell, 2000
Produksi  teh  hijau  pada  prinsipnya  dilakukan dengan  menginaktivkan  enzim  polifenol oksidase yang berada dalam sitoplasma daun teh.
Yulianto dkk: Pengembangan Proses Inaktivasi Enzim Polifenol Oksidase untuk Produksi Teh Hijau
Selama  ini  cara  inaktivasi  enzim  polifenol oksidase  yang  digunakan  untuk  memproduksi teh  hijau  Indonesia  adalah  cara panning (penggarangan). Ditinjau dari segi ekonomi dan teknik, cara ini dinilai kurang efisien dan efektif dalam  mengginaktifkan  enzim  polifenol oksidase.  Proses  ini  memungkinkan  terjadinya reaksi  oksidasi  katekin  oleh  enzim  polifenol oksidase  karena  penetrasi  panas  tidak  mampu mengginaktifkan  enzim  polifenol  oksidase secara  keseluruhan.  Kerugian  lain  dari  cara  ini adalah kadar katekin teh hijau relatif rendah, dan dihasilkannya warna teh yang kehitaman. Warna teh yang demikian menunjukkan terdegradasinya klorofil menjadi feofitin .
Untuk mengatasi hal ini, maka perlu dikaji suatu cara lain yaitu proses steaming. Pemberian uap panas pada daun pucuk teh dapat menginaktivasi enzim  polifenol  oksidase  lebih  efektif dibandingkan  dengan  cara panning (yang dilakukan  selama  ini).  Hal  ini  terjadi  karena proses steaming memiliki  keunggulan,  yaitu: dapat  menghindari  kontak  dengan  oksigen karena sistem terlingkupi oleh steam , warna teh yang  dihasilkan  lebih  kehijauan  (kandungan klorofil  masih  tinggi),  warna  seduhan  air  teh lebih  terang  (hijau  kekuningan),  dapat menghindari  penurunan  suhu  dan  penetrasi panas ke dalam sitoplasma lebih efektif (inaktif enzim polifenol oksidase pada bagian sitoplasma dengan  senyawa  katekin  yang  berada  pada bagian  vakuola),  sehingga  kadar  katekin  teh hijau yang dihasilkan lebih tinggi.
Untuk  itu  perlu  ditelaah  sistem  pemroses inaktivasi  enzim  polifenol  oksidase  dengan menggunakan steaming ,  sehingga  diperoleh produk  teh  hijau  dengan  kadar  katekin  tinggi. Kajian sistem pemroses ini melibatkan variabel-
variabel  persen  uap  panas  yang  digunakan, kapasitas daun teh dan spray uap air. Parameter yang  akan  diamati  adalah  temperatur  sistem, kadar katekin, kadar air, dan kelembaban sistem proses yang merupakan fungsi waktu.

## METODE PENELITIAN
Bahan  Penelitian. Bahan  utama  untuk penelitian  berupa  daun teh  yang  diperoleh  dari Kebun  Teh  PT.  Rumpun  Sari  Medini- Limbangan  Kendal.  Bahan-bahan  kimia  untuk keperluan analisa diperoleh dari PT. Bratachem Semarang.
Peralatan Penelitian. Peralatan yang digunakan dalam penelitian adalah alat steam mini dengan mesin penggiling CTC. Alat tersebut dilengkapi dengan  termokopel  yang  dihubungkan  dengan sebuah pencatat ( multipoint recorder ) serta alat pencatat  waktu.  Alat  steam  mini  ditunjukkan pada  Gambar  1.  Prinsip  kerja  alat  steam  mini adalah  inaktivasi  enzim  polifenol  oksidase dengan  uap  panas  dalam  suatu  panel  vertikal dengan  bagian  pemasukan  dibagian  atas.  Daun jatuh  ke  bawah  karena  gaya  gravitasi  dan dorongan ulir. Sementara uap panas didistribusikan dalam panel dari sebuah boiler.
Peralatan yang digunakan untuk analisa kadar air adalah  oven.  Alat High  Performance  Liquid Chromatography (HPLC)  digunakan  untuk keperluan analisa katekin. Higrometer digunakan untuk mengukur kelembaban sistem. Peralatan  lain  yang  digunakan  adalah  cawan kecil, erlen meyer , pipet, buret, labu ukur, serta timbangan analitis.
Variabel  Proses. Variabel  penelitian  yang divariasikan  adalah  laju  alir  uap  panas, temperatur steaming dan spray uap air. Laju alir uap panas ditetapkan pada 40, 50, 60 dan 70%
bukaan  kran  uap  panas.  Sedangkan  temperatur steaming daun teh ditetapkan pada rentang 70 – 110 0 C. Spray uap  air  ditetapkan  berdasarkan kebutuhan  kelembaban  sistem  yaitu  50,  60,  70 dan 80%.
Prosedur  Penelitian. Pucuk  daun  teh  segar dimasukkan kedalam steam mini dan dipanaskan dengan uap panas dengan tujuan menginaktifkan enzim polifenol oksidase pada berbagai variabel. Proses  inaktivasi  berlangsung  selama  waktu tertentu.  Sampel  tiap  interval  2  menit  diambil, dan  diukur  kadar  katekin  serta  kadar  airnya. Selain  itu  sistem  pemroses  diukur  temperatur dan kelembabannya.
Gambar 1. Alat steam mini dan unit penghasil uap (boiler)
Keterangan gambar:
1. Corong pemasukan pucuk
2. Sumbu pemutar
3. Spiral pendorong pucuk
4. Pully penggerak
5. Motor penggerak
6. Tabung mesin
7. Tabung pucuk
8. Pipa pembagi/pemasukan
uap panas 9. Penggiling pucuk
10. Penggerak mesin CTC 11. Corong pengeluaran 12. Peluit pengontrol uap 13. Manometer
14. Termostat 15. Tabung uap 16. Input air 17. Output uap panas 18. Burner
19. Kran penguras

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Proses steaming pucuk daun teh bertujuan untuk menginaktifkan  enzim  polifenol  oksidase  yang berada  dalam  sitoplasma,  sehingga  dihasilkan produk  teh  hijau  berkatekin  tinggi.  Sebagai penghasil  uap  panas  untuk  proses steaming
menggunakan  boiler  bertujuan  agar  uap  panas berpenetrasi ke dalam daun teh. Untuk itu perlu dilakukan setting reaktor inaktivasi enzimatis ke boiler. Pemasangan dan setting alat steaming ke boiler  bertujuan  untuk  merangkai  alat  proses, sehingga dapat digunakan untuk mengukur data percobaan steaming daun  teh.  Uji  coba  alat proses  digunakan  untuk  menstabilkan  setting kondisi operasi, konsistensi proses dan stabilitas proses,  sehingga  dapat  digunakan  untuk mengukur data percobaan di laboratorium.
Modifikasi  alat steaming dimaksudkan  untuk mencapai  efisiensi  dan  efektifitas  proses, sehingga  dihasilkan  teh  hijau  dengan  kadar tinggi. Steaming menggunakan screw conveyor menyebabkan  pucuk  daun  teh  terpadatkan, akibatnya  penetrasi  panas  yang  terjadi  tidak merata.  Uji  coba  alat  proses  termodifikasi digunakan  untuk  menstabilkan  setting  kondisi operasi, konsistensi proses dan stabilitas proses dengan menggunakan chain conveyor , sehingga dapat  digunakan  untuk  mengukur  data percobaan di laboratorium.

## Pengaruh Temperatur
Studi  pendahuluan  dilakukan  dengan  tujuan untuk menentukan temperatur yang relatif baik pada proses steaming daun teh. Temperatur ini divariasikan  pada  rentang  70 – 110 0 C berdasarkan  jurnal-jurnal  atau  publikasi  yang sudah ada. Hasil telaah laboratorium tersaji pada Gambar  2.  Hasil  ini  menunjukkan  bahwa  pada temperatur  90 0 C,  diperoleh  katekin  dengan kadar  relatif  tinggi.  Hal  ini  terjadi  karena  uap panas akan berpenetrasi relatif cukup efektif ke dalam  sitoplasma  daun  teh,  sehingga  sebagian besar  enzim  polifenol  oksidase  diperkirakan mengalami  inaktivasi  dan  tidak  dapat
16 3 1 2 5 4 6 7 8 9 10 11 14 12 13 15 18 17 19 Alat steaming mini Unit penghasil uap (boiler)
Yulianto dkk: Pengembangan Proses Inaktivasi Enzim Polifenol Oksidase untuk Produksi Teh Hijau
mengkatalisa  oksidasi  aerob  katekin.  Oleh karenanya,  pada  saat  terjadi  kerusakan  sel, katekin  yang  berada  dalam  vokuola  tidak  akan teroksidasi menjadi theaflavin dan thearubigin .
Pernyataan ini sesuai dengan yang diungkapkan oleh Robert, 1961; Robert, 1962; Bokuchava dan Skobeleva,  1969;  Graham,  1992;  Yamanishi, 199;  bahwa  katekin  yang  teroksidasi  dapat mengalami kondensasi membentuk suatu variasi senyawa  kompleks,  salah  satu  yang  utama (dominan)  selanjutnya  disebut theaflavin dan thearubigin .
Gambar 2. Pengaruh Temperatur Steaming terhadap Kadar Katekin dan Kadar Air
Reaksi oksidasi enzim polifenol dengan katekin disajikan  pada  Gambar  3.  Lebih  lanjut  katekin teroksidasi  dengan  sendirinya  menjadi  unsur oksidasi  yang  sangat  kuat  yang  dapat menyebabkan  oksidasi  non  enzimatis  substansi pucuk. Secara kuantitatif dapat dikatakan bahwa pembentukan theaflavin dan thearubigin merupakan reaksi terpenting yang terjadi selama oksidasi enzimatik polifenol teh, tetapi oksidasi substansi  lain  oleh  katekin  yang  teroksidasi merupakan  kemungkinan  penting  yang  pokok dalam menentukan kualitas teh olahan (James et al. ,  1948;  Trautner  dan  Robert,  1950;  Popov, 1956; Graham, 1992; Yamanishi, 1995).
Hal tersebut sesuai dengan persamaan Arrhenius yang  menyatakan  hubungan  aktivitas  terhadap temperatur, yaitu:
) ( RT E o h e A A     1
Dalam  hubungan  ini,  A  adalah  aktivitas  enzim polifenol  pada  saat  temperatur  T,  A o adalah aktivitas enzim polifenol saat temperatur acuan,  E h adalah  energi  aktivasi  reaksi  oksidasi katekin, R adalah temperatur gas, dan T adalah temperatur  proses  penetrasi  uap  panas  dengan enzim  polifenol  ke  dalam  sitoplasma. Peningkatan  temperatur  akan  menyebabkan penurunan  aktivitas  katalitik  enzim  polifenol oksidase.  Pada  temperatur  80 o C,  enzim  mulai menunjukkan penurunan aktivitas dan menurun tajam  pada  temperatur  90 o C.  Hal  ini membuktikan  bahwa  persamaan  Arrhenius  ini dibatasi  oleh  peristiwa  denaturasi  enzim.  Suhu yang  terlalu  tinggi  dapat  menyebabkan terjadinya kerusakan struktur enzim. Akibatnya enzim  menjadi  inaktivasi  dan  proses  oksidasi katekin  menjadi  terhambat.  Akan  tetapi, kenaikan  temperatur  lebih  lanjut  akan menyebabkan  uap  panas  menembus  dinding membran  tonoplas,  akibatnya  katekin  yang berada dalam vakuola akan berpenetrasi dengan uap  panas,  sehingga  menyebabkan  degradasi termal  katekin  membentuk  senyawa theaflavin dan thearubigin .
OH OH C CHOH CH O H2 O H HO OH OH HO H O O O H2 O CHOH CH O H2O O O H2O + 1/2 O2 + ensim polifenol oksidase + 1/2 O2 + ensimpolifenol oksidase B A
Gambar 3. Diagram oksidasi (A) polifenol dan (B) katekin oleh enzim polifenol oxidase
Pengaruh Kelembaban Sistem
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 60 70 80 90 100 110 120 Temperatur Steaming ( o C) K ad ar K at ek in ( % ) 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 K ad ar A ir (% ) Kadar Katekin Kadar Air
Data  percobaan  ini  diukur  setelah  proses steaming dan  proses  pengeringan.  Proses Steaming dilakukan  pada  berbagai  variabel sesuai  rancangan  proses.  Sedangkan  proses pengeringan dilakukan pada temperatur 100 o C selama  3  jam.  Hasil  pengukuran  tersaji  pada Gambar 4 dan Gambar 5.
Gambar 4. Pengaruh Kelembaban Terhadap Kadar Katekin pada suhu 90 o C
Gambar 5. Pengaruh Kelembaban Terhadap Kadar Air pada suhu 90 o C
Gambar  4  dan  5  menunjukkan  bahwa kelembaban  70%  didapatkan  kadar  katekin relatif tinggi dengan kadar air relatif rendah. Hal ini  terjadi  karena  pada  kelembaban  terlalu rendah  menyebabkan  sebagian  enzim  polifenol mengkatalisis oksidasi aerobik katekin.
Akibatnya  katekin  akan  terkonversi  menjadi senyawa  theaflavin dan thearubigin.  Fenomena ini  dimungkinkan  karena  sistem  kurang
terlingkupi  oleh  uap  panas,  sehingga  oksigen akan  lebih  leluasa  kontak  fasa  dengan  enzim polifenol.  Meskipun  demikian,  jika  sistem terlalu banyak terlingkupi oleh uap panas, maka pada  saat  proses  pengeringan  menyebabkan beban  uap  air  yang  akan  dilepas  menjadi  lebih berat,  sehingga  kadar  air  teh  hijau  yang dihasilkan relatif tinggi.

## KESIMPULAN
Hasil  proses steaming daun  teh  menunjukkan bahwa pada temperatur 90 0 C, diperoleh katekin dengan  kadar  relatif  tinggi.  Hasil  kajian  juga menunjukkan bahwa kelembaban 70% didapatkan  kadar  katekin  relatif  tinggi  dengan kadar air relatif rendah.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Pada  kesempatan  ini,  penulis  mengucapkan syukur Alhamdulillah kepada Allah SWT serta terima  kasih  yang  sebesar-besarnya  kepada Kementrian  Negara  Riset  dan  Teknologi  atas dukungan dana penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Ariwibowo,  D.,  Yulianto,  M.E.,  &  Arifan,  F., 2005,”Kajian  perpindahan panas  proses steaming inaktivasi enzim dalam pengolahan  teh  hijau”,  Majalah  Teknik, tahun  ke  XXV,  Edisi  2,  hal  103-108, ISSN: 0852 – 1697.
Bailey,  J.E.,  &  Ollis,  D.F.  1986. Biochemical engineering  fundamentals .  McGraw-Hill Book  Company.  United  States  of America.
Bambang,  K.,  T.  Suhartika.,  Supria,  dan Tanjung, S. 1996. Katekin pucuk teh segar dan  perubahannya  selama  pengolahan. Hasil  Penelitian  dan  Pengembangan Teknik Produksi dan Pasca Panen Teh dan Kina. TA. 1995/1996.
Bambang,K.,  Abas,  T.,  Affandi,  A.,  Sumantri, S.,  dan  Suryatmo,  F.  A.  2000.  Rancang bangun proses teh hijau berkadar katekin tinggi. Laporan Akhir. Proyek Pengkajian
0 5 10 15 20 25 30 40 50 60 70 80 90 Kelembaban (%) K ad ar K at ek in ( % ) 0 detik 20 detik 40 detik 60 detik 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 40 50 60 70 80 90 Kelembaban (%) K ad ar A ir (% ) 0 det ik 20 det ik 40 det ik 60 det ik
Yulianto dkk: Pengembangan Proses Inaktivasi Enzim Polifenol Oksidase untuk Produksi Teh Hijau
Teknologi Pertanian Partisipatif. Gambung. Bhatia, I. S. 1963. Chemical aspect of green leaf processing . Two and a Bud. 10(2). 28-33.
Bhirud, P. R., & Sosulski, F. W. 1993. Thermal inactivation  kinetics  of  wheat  germ Lipoxygenase. Journal  of  Food  Science, 58. 1095-1098.
Campos, C. F., Souza, P. E. A., Coelho, V., & Gloria,  M.  B.  A.  1996. Chemical composition, enzyme activity and effect of enzyme  inactivation  on  flavor  quality  of green  coconut  water. Journal  of  Food Processing and Preservation, 20. 487-500.
Chen, J. 1991. The inhibitory effects of Chinese tea in the occurence of Esophageal Tumor on Rath Induced by NMN2 A . Ibid.
Daemen,  A.  L.  H.  1981. The  destruction  of enzymes and bacteria during spray drying of milk and whey. 1. The thermoresistance of some enzymes and bacteria in milk and whey  with  various  total  solids  contents . Neth. Milk Dairy J., 35. 133-44.
Erkmen,  O.  2000. Inactivation  kinetics  of
Listeria monocytogenes in Turkish White cheese during the ripening period . Journal of Food Engineering, 46. 127-131.
Fujiki, H. 1991. Anti carcinogenic effects of (-)- epigallocatechin gallate (EGCG) . Ibid.
Fung,  L.  C.  1991. The  effect  of  tea  and  its components  on  lung  tumorgenesis induced by tobacco-specific mitrosamine . Ibid.
Graham,  H.  N.  1992 .  Green  tea  composition, consumption,  and  polyphenol  chemistry. Preventative Medicine, 21. 334-350.
Gregory,  R.,  &  Bendall,  D.  1966. The purification  and  some  properties  of polyphenol oxidase from tea. Biochem. J. 101. 569-581..
Hayatsu,  H.  1991. Antimutagenic  effects of  tea polyphenols. Int. Symp. Phys and Pharm. Effects  of  C.  sinensis.  New  York.  3-5
March 1991.
Senen. Yulianto, M. E. & Ariwibowo, D. 2006. Model  Perpindahan  Panas  Teknologi Steaming Proses  Inaktivasi  Enzim
Polifenol  Oksidase  Dalam  Pengolahan Teh  Hijau  Berkatekin  Tinggi,  Laporan Sementara Penelitian
Fundamental
DIKTI.
www.freepatentsonline.com/4613672 . www.freepatentsonline.com/7012149
Yulianto,  M.E.,  Ariwibowo,  D.,  Arifan,  F., Kusumayanti,  H.,  Nugraheni,  F.S., Senen., 2006,“Model Perpindahan Massa Proses Steaming Inaktivasi  Enzim Polifenol  Oksadase  Dalam  Pengolahan
Teh  Hijau”,  Jurnal  Gema  Teknologi, Volume  15  Nomor  2,  September  2006, ISSN: 0852-0232.