## Uji Aktivitas Antibateri Ekstrak Etanol Daun Kenikir (Cosmos caudatus kunth.) Terhadap Staphylococcus aureus
Maulana Tegar Adityanugraha 1* , Kiki Siti Fatimah 2 , Dwi Larasati 2 , Ferli Eko Kurniantoro 2 1 Universitas Tidar, Magelang, Indonesia
2 STIKes Madani Yogyakarta, Yogyakarta, Indonesia
Article info Abstract History
Submission : 09-01-2021
Review : 28-07-202 Accepted : 18-05-2021
* Email: nugrahamaulana07@gmail.com
DOI: 10.33096/jffi.v9i2.861
Keywords: kenikir leaves; disk diffusion; Staphylococcus aureus
Bacterial infections can occur in humans and attack various organ systems in the body, including respiratory tract infections, skin infections, digestive tract  infections,  and  urinary  tract  infections.  Bacteria  that  cause  skin infections include Staphylococcus aureus.  One  of  the  plants  that  have antibacterial  properties  is  kenikir  leaves  (Cosmos  caudatus Kunth .) because  they  contain  active  compounds  in  the  form  of  essential  oils, steroids, tannins, flavonoids, and alkaloids. This study aimed to determine the antibacterial activity and the minimum concentration of ethanol extract of  kenikir  (Cosmos  caudatus Kunth .)  leaves  which  showed  antibacterial activity  against  Staphylococcus  aureus.  This  type  of  research  is  an experimental study, using the method of well diffusion and diameter of the inhibition zone. The different concentrations of kenikir leaf ethanol extract were  used  20%,  30%,  and 40%.  The  test  was  carried  out  to  observe  the presence or absence of the inhibition zone of kenikir leaf extract (Cosmos caudatus Kunth. )  against  Staphylococcus  aureus,  after  24  hours  of incubation. The analysis used is descriptive  analysis.  The  results showed that the  ethanol extract  of kenikir (Cosmos caudatus Kunth .) leaves with concentrations  of  20%,  30%,  and  40%  could  inhibit  the  growth  of Staphylococcus aureus bacteria with an average of 14.11mm, 14.86mm, and 16.05mm, respectively from the results of the study, 40% concentration of kenikir leaf ethanol extract had the best activity in inhibiting the growth of Staphylococcus aureus bacteria. Ethanol extract of kenikir leaves (Cosmos caudatus Kunth .) has antibacterial activity .
I. Pendahuluan
Indonesia
kaya akan berbagai keanekaragaman  hayati  yang  berpotensi  untuk dikembangkan  sebagai  obat  atau  bahan  baku  obat (Fajriah et  al. ,  2007).  bagian  tanaman  yang  dapat digunakan sebagai tumbuhan obat bisa berasal dari biji,  daun,  batang,  dll.  Masyarakat  menggunakan bahan  alami  tersebut  secara  turun  temurun  untuk pengobatan  (Efdi,  Syafrizayanti  and  Sari,  2016). Dibandingkan  dengan  obat  kimia,  obat  herbal dikenal  memiliki  efek  samping  yang  lebih  kecil, salah satu bahan alam yang masih berpotensi untuk diteliti  sebagai  pengobatan  adalah  daun  kenikir (Pebriana, Lukitaningsih and Khasanah, 2017).
Daun  kenikir  merupakan  simplisia  yang sudah banyak digunakan dalam berbagai  penilitan. Salah  satu  diantaranya  adalah  daun  kenikir digunakan  sebagai  penurun  kadar  gula  darah (Tengo, Bialangi and Suleman, 2013), tetapi belum ditemukan  daun  kenikir  aktivitasnya  sebagai antibakteri  sehingga  penelitian  ini  memiliki kebaharuan  penelitian  yag  dapat  bermanfaat  bagi masyarakat luas. Dalam penelitian lain daun kenikir
juga  dignakan  sebagai  penghambat  pertumbuhan jamur atau sebagai antifungi (Lim and Widyarman, 2018),  sehingga  bisa  dikatakan  bahwa  penelitian daun kenikir sudah banyak diteliti sehingga sangat tepat  daun  kenikir  digunakan  sebagai  sampel penelitian  Perbedaan  penelitian  dari  ekstrak  daun kenikir  digunakan  sebagai  antibakteri  adalah, penelitian ini menggunakan bakteri Staphylococcus aureus sedangkan penelitian yang lain menggunakan bakteri E. coli atau bakteri yang lain sehingga penelitian ini masih memiliki novelty yang tinggi.
Etanol  merupakan  pelarut  polar  yang sangat  mudah  melarutkan  senyawa  seperti flavonoid.  Mekanisme  senyawa  flavonoid  sebagai antibakteri adalah dengan merusak dinding sel dari bakteri  yang  terdiri  atas  lipid  dan  asam  amino sehingga dinding sel akan rusak (Hasnirwan, Arifin and Putra, 2015). Tanin diduga dapat mengkerutkan dinding sel atau membran sel sehingga mengganggu permeabilitas  sel,  melambatnya  pertumbuhan dinding  sela  tau  membrane  sel  tidak  dapat
melakukan  aktivitas  hidup  (Muljono,  Fatimawali and Manampiring, 2016).
Antibiotik adalah pengobatan untuk infeksi bakteri  mekanisme  nya  yaitu mampu  menghambat maupun membunuh (bakteriosidal) bakteri. Peningkatan  penggunaan  antibiotik  yang  kurang tepat  dapat  mengakibatkan  resistensi  terhadap antibiotik  (Rosdiana et  al. ,  2018)  bakteri  yang sangat sering dijumpai adalah bakteri Staphylococcus  aureus .  penemuan  obat  antibakteri atau  sumber  obat  obatan  antibakteri  mampu mengatasi permasalahan kesehatan, dan diharapkan sumber obat obatan tersebut memiliki efek samping yang  rendah  (Aryantini,  Erlina  and  Ria,  2020) tumbuhan yang memiliki potensi sebagai antibakteri adalah daun kenikir

## II. Metode Penelitian II.1 Jenis Penelitian
Jenis  penelitian  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  penelitian  eksperimental, karena dilakukan percobaan atau perlakuan terhadap variabel  bebas  kemudian  mengukur  pengaruh percobaan  tersebut  pada  variabel  terikat,  yaitu pemberian  ekstrak  etanol  daun  Kenikir  dengan konsentrasi  yang  berbeda  dan  dilihat  daya hambatnya terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus.
II.2 Alat dan Bahan Waterbath , timbangan analitik, mikropipet, jangka  sorong,  dan  Bunsen.  Bahan  Bakteri Staphylococcus  aureus, etanol  96%,  etanol  70%, aquadest , tablet Clindamycin , media N utrient Agar (NA) , NaCl  0,9%,  kertas  saring,  daun  Kenikir ( Cosmos  caudatus Kunth . )  yang  didapatkan  dari Kab.  Bantul  Yogyakarta,  kertas  label,  alumunium foil.

## II.3 Preparasi Sampel
Pembuatan  ekstrak  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  dengan  metode  maserasi. Sebelumnya  daun  kenikir  yang  sudah  halus ditimbang sebanyak 250 gram kemudian dimaserasi dengan  2000  mL  etanol  96%  dengan perbandingan 1:4.  Maserasi  dilakukan  sampai  semua  senyawa tertarik  sempurna  (3  x  24  jam),  di  wadah  tertutup, terlindung dari sinar matahari langsung, dan berada pada suhu ruang dengan beberapa kali pengadukan. Setelah  3  hari,  disaring  dengan  kertas  saring.  Sari yang  didapat  diuapkan  di  atas  waterbath  dengan suhu 80 o C (Sa’adah and Nurhasnawati, 2015).

## II.4 Pembuatan Kontrol Negatif Dan Positif
Kontrol negatif dibuat dari CarboxyMethyl Cellulose (CMC)  1%  dengan  cara:  1  gram  serbuk CMC  dilarutkan  dalam  100  mL  akuabiodestilat steril. Kemudian dikocok sampai larutan homogen.
Kontrol  positif  dibuat  dari  sediaan  obat  tablet Clindamycin 300  mg.  Satu  tablet Clindamycin digerus, lalu ditimbang dan disetarakan dengan 300 mg.  Kemudian  serbuk Clindamycin dilarutkan dalam larutan CMC 1% untuk memperoleh larutan Clindamycin 50µg/50µl.  Membuat  larutan  uji dengan konsentrasi 20%, 30%, dan 40% b/v dengan cara  menimbang  konsentrasi  20%  ditimbang sebanyak  1  gram  konsentrasi  30%  ditimbang sebanyak  1,5  gram  ,konsentrasi  40%  ditimbang sebanyak  2  gram  ekstrak  kental  daun  kenikir, kemudian masing-masing dilarutkan dalam  10 mL larutan CMC 1%.

## II.5 Uji Aktivitas Antibakteri
Bakteri  uji  yang  telah  diinokulasi  diambil dengan kawat ose steril lalu disuspensikan ke dalam tabung  reaksi  yang  berisi  2  mL  NaCl  0,9%  dan digojog hingga diperoleh kekeruhan standar nilai 0,5 (Bali, Raif and Tarigan, 2019). Sterilkan semua alat yang  akan  digunakan,  Media  NA  yang  sudah  siap dioleskan dengan collection swab steril yang sudah dimasukkan  dalam  suspensi  bakteri  secara  merata dengan  metode  usap.  Dibuat  sumuran  sebanyak yang  dibutuhkan  dengan  ukuran  6  mm  sumuran. Setelah  itu  ekstrak  daun  kenikir  dengan  beberapa konsentrasi  beserta  kontrol  positif  dan  kontrol negatif  masing-  masing  dipipet  menggunakan mikropipet sebanyak 50 µl. Kemudian cawan petri diinkubasi  dalam  suhu  37 o C  selama  1x24  jam. Diukur  diameter  daerah  hambat  menggunakan jangka sorong/mistar (Handayani, Warnida and Nur, 2016). Data yang diperoleh dianalis secara deskriptif kuantitatif.  Analisis  metode  deskriptif  untuk menjelaskan  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol daun kenikir terhadap Staphylococcus aureus .

## III. Hasil Dan Pembahasan
Simplisia yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun kenikir berupa serbuk, Serbuk daun kenikir  sebanyak  250  gram  diekstraksi  dengan metode  maserasi  menggunakan  etanol  96% sebanyak  2  Liter  selama  3  hari  dengan  sesekali digojog yang bertujuan untuk mempercepat  proses interaksi  antara  senyawa  yang  terdapat  dalam serbuk  dengan  pelarut.  Pemilihan  etanol  96% sebagai  pelarut  adalah  karena  pada  uji  antibakteri, air sangat berpengaruh pada sensitivitas uji aktivitas antibakteri sebab air merupakan media pertumbuhan yang  baik  bagi  mikroorganisme,  sehingga penggunakan etanol 96% yang hanya mengandung 4% air dapat mengurangi kontaminasi pada ekstrak (Muljono, Fatimawali and Manampiring, 2016).
Tabel 1 . Persentase rendemen ekstrak Percobaan Nama Ekstrak Bobot (g) Pelarut Jumlah Pelarut (L) Hasil Rendemen (%) 1 Ekstrak Daun Kenikir 20,75 Etanol 96% 2 8,3 2 Ekstrak Daun Kenikir 20,25 Etanol 96% 2 8,1 3 Ekstrak Daun Kenikir 20,50 Etanol 96% 2 8,2 Rata – Rata 8,2 Uji aktivitas antibakteri bertujuan menentukan  kemampuan  ekstrak  etanol  daun kenikir  ( Cosmos  caudatus Kunth.)  dalam menghambat pertumbuhan bakteri. Penelitian ini dilakukan  dengan  menggunakan  metode  Difusi sumuran,  yaitu  sebuah  metode  uji  aktivitas antibakteri  dengan  cara  membuat  lubang  pada agar padat yang telah diinokulasi dengan bakteri, Penyarian  daun  kenikir  dilakukan  dengan  cara maserasi  etanol  96%.  Dari  penyarian  maserasi 250  gram  simplisia  daun  kenikir  ( Cosmos caudatus Kunth.). Diperoleh ekstrak kental daun kenikir  sebanyak  20,55  gram  atau  sebesar  8,2% (Tabel  1).  Ekstraksi  dilakukan  sebanyak  2  kali replikasi atau tiga kali percobaan untuk validitas data.
Alat dan bahan disterilkan terlebih dahulu dengan autoklaf pada suhu 121 o C selama 30 menit. Hal ini bertujuan menghindari adanya mikroorganisme  yang  hidup  agar  tetap  steril  atau bebas kontaminasi. Beberapa alat seperti ose, batang L,  dan  pinset  disterilkan  dengan  metode Flamber (membakar dengan spiritus atau alkohol 96%). Alat- alat tersebut direndam dengan etanol 70% selama 5 menit kemudian dipijar dengan api bunsen. Bakteri Staphylococcus  aureus yang  digunakan  pada penelitian  ini  diperoleh  dari  Laboratorium Mikrobiologi,  Pusat  Studi  Pangan  dan  Gizi Univesitas Gadjah Mada Yogyakarta .
Hasil  pemeriksaan  kandungan  kimia ekstrak daun keniki dapat dilihat pada Tabel 2. Hasil menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  kenikir mengandung senyawa golongan alkaloid, flavonoid, saponin, tanin, triterpenoid, dan minyak atsiri.
Tabel 2 . Hasil pengujian kandungan kimia dengan penapisan fitokimia
No Golongan Senyawa Hasil Penapisan 1 Alkaloid + 2 Flavonoid + 3 Saponin + 4 Tanin + 5 Triterpenoid + 6 Minyak atsiri +
Media yang digunakan dalam penelitian ini adalah media Nutrient Agar (NA). Media NA dipilih  karena  memiliki  kandungan  nutrisi  yang lengkap  bagi  pertumbuhan  bakteri  dan  dapat digunakan untuk berbagai jenis mikroorganisme.
Pembuatan  media  NA  untuk  uji  aktivitas antibakteri dilakukan dengan cara mencampurkan 1 gram serbuk media NA dengan 50 mL aquadest. Media  agar  dan  aquadest  dihomogenkan  di  atas hotplate. Pengadukan dilakukan dengan magnetic stirer untuk  memastikan media  telah  tersuspensi secara  sempurna.  Media  yang  sudah  tersuspensi sempurna, disterilkan dengan autoklaf pada suhu 121 o C selama 30 menit.
Proses  pembuatan  media  uji  aktivitas antibakteri  dilakukan  secara  steril  dan  aseptis. Media NA dituangkan ke cawan petri dan biarkan memadat.  Setelah  media  padat,  usap  bakteri secara  merata  pada  permukaan  media  NA menggunakan collection  swab steril  dan  dibuat sumuran  yang  diisi  dengan  sampel  kontrol  yang akan  diuji.  Tahap  terakhir  yaitu  cawan  petri dibungkus dengan menggunakan plastik wrap dan kertas coklat, dan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 o C yang bertujuan untuk memaksimalkan pertumbuhan bakteri.
Konsentrasi  ekstrak  etanol  daun  kenikir yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  20%, 30%, dan 40%, Kontrol positif pada penelitian ini menggunakan Clyndamicin tablet  dan  kontrol negatif  menggunakan  CMC  1%  Cara  kerja antibiotik
Clyndamicin
tablet ialah memperlambat  dan  menghentikan  pertumbuhan bakteri  pada  kulit  berjerawat  (Aryantini,  Erlina and  Ria,  2020).  Dengan  kemampuan  ini
Clyndamicin dapat  mengatasi  infeksi  pada  kulit. CMC 1% sebagai kontrol negatif yang diketahui tidak  memiliki  aktivitas  antibakteri  sehingga digunakan untuk melihat apakah respon kematian bakteri  benar-benar  berasal  dari  sampel  bukan disebabkan  oleh  faktor  teknis  perlakuan  (Mpila, Fatimawali and Wiyono, 2012).
Uji  aktivitas  antibakteri  yang  dilakukan dengan  metode  difusi  sumuran  dengan  melihat daerah  jernih  sekitar  zona  hambat  .Hasil  yang diperoleh  dari  penelitian  menunjukkan  bahwa ekstrak etanol daun kenikir pada 20%, 30%, dan 40%  memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap Staphylococcus aureus.
Aktivitas  antibakteri  ditunjukkan  dengan adanya  wilayah  terang  (zona  hambat)  di  sekitar daerah  sumuran.  Terdapat  juga  zona  hambat terhadap  kontrol  positif  yaitu Clyndamicin. Sedangkan  pada  kontrol  negatif  yaitu  CMC  1% tidak menunjukkan adanya zona hambat. Diameter zona  hambat  hasil  uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak etanol  daun  kenikir  dengan  adanya  zona  wilayah
terang  (zona  hambat)  disekitar  daerah  sumuran disajikan pada Tabel 3.
Tabel 3 . Diameter zona hambat ekstrak daun kenikir ( Cosmos caudatus kunth .) terhadap Staphylococcus aureus
Bakteri Uji Larutan Uji Zona hambat ulang ke- Rata- Rata I II III Staphylococcus Aureus Ekstrak Kenikir 20% 2 2,5 1,8 2,1 Ekstrak Kenikir 30% 3,2 2,8 3,5 3,16 Ekstrak Kenikir 40% 4,4 4,8 5 4,7 Clyndamicin ( + ) 3,1 CMC 1 % ( - ) 0
Pada Tabel 3 dapat dilihat bahwa dari hasil penelitian  juga  terlihat  bahwa  perbandingan  zona hambat  yang  dihasilkan  oleh  ekstrak  etanol  daun kenikir ( Cosmos caudatus Kunth.) berbanding lurus dengan  konsentrasinya,  semakin  tinggi  konsentrasi ekstrak  etanol  daun  kenikir  semakin  besar  zona hambatnya. Karena konsentrasinya yang lebih besar mengandung lebih banyak zat aktif yang berkhasiat sebagai antibkateri. Zat uji dari ekstrak etanol daun
Kenikir  yang  terbagi  menjadi  tiga  konsentrasi menunjukkan  adanya  zona  hambat  yang  terbentuk dengan  nilai  yang  berbeda-beda,  yaitu  pada Staphylococcus aureus sebesar 2,1 cm (20%), 3,16 cm  (30%),  4,7  cm  (40%).  Terbentuknya  hambatan pada  ekstrak  daun  kenikir  diduga  karena  adanya kandungan  flavonoid,  tanin,  dan  steroid  yang mampu  menghambat  aktivitas  antibakteri  terhadap Staphylococcus aureus (Setiawati, 2015) .
Gambar 1 . Larutan kontrol positif G ambar 2 .  Zona hambat bakteri
Untuk  Keterangan  Gambar  1  dan  2, Gambar 1 berisi 3 daya hambat yang masing masing adalah  bagian  a  merupakan  zona  hambat  ekstrak daun kenikir 20% (replikasi 1), bagian b merupakan zona hambat ekstrak daun kenikir 30% (replikasi 1), dan bagian c merupakan zona hambat ekstrak daun kenikir 40% (replikasi 1) serta nomor 5 adalah zona hambat Clyndamicin .  Untuk  keterangan  gambar  2 bagian  a  mrupakan  zona  hambat  ekstrak  daun kenikir 20% (replikasi 2), bagian b merupakan zona hambat ekstrak daun kenikir 30% (replikasi 2), dan c merupakan zona hambat ekstrak daun kenikir 40% (replikasi  2),  serta  gambar  4  adalah  zona  hambat CMC 1%.
Dapat  dilihat  juga  pada  Gambar  1  dan  2 bahwa pada larutan kontrol positif yaitu Clyndamicin menunjukkan  adanya  zona  hambat yang terbentuk pada Staphylococcus aureus sebesar 3,1  cm.  Lebar  diameter  zona  hambat  pada  kontrol positif  ini  sangat  menonjol  besarnya.  Sedangkan pada kontrol negatif yaitu CMC 1% tidak memiliki
daya hambat terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus , yang ditunjukkan dengan tidak adanya zona hambat  pada  daerah  sekitar  daerah  sumuran  berisi CMC 1% tersebut. Hal ini mengindikasikan bahwa kontrol yang digunakan tidak berpengaruh pada uji antibakteri.
Tabel  4 .  Rataan  Zona  Hambat  Ekstrak  Etanol Daun  Kenikir  ( Cosmos  caudatus Kunth.) Terhadap Staphylococcus aureus
Rataan Diameter Zona Hambat (mm) Larutan Uji (%)  Staphylococcus aureus 1.  Ekstrak 20 % 2,1 2.  Ekstrak 30 % 3,16 3.  Ekstrak 40 % 4,7 4.  Clyndamicin ( + ) 3,1 5.  CMC ( - )
0 IV. Kesimpulan 2b 2c 2a 4 5 1 a 1b 1c
Ekstrak  etanol  daun  kenikir  ( Cosmos caudatus Kunth.)  memiliki  kemampuan  aktivitas antibakteri paling baik pada konsentrasi 40% dengan daya  hambat  seluas  4,7  mm.  Larutan  uji  ekstrak etanol  daun  kenikir  mempunyai  kemampuan antibakteri  terhadap  pertumbuhan Staphylococcus aureus. Konsentrasi 20% memiliki luas daya hambat sebesar 2,1 mm, untuk konsentrasi 30 memiliki daya hambat  seluas  3,16mm  dan  pada  konsentrasi  40% memiliki daya hambat optimal yaitu seluas 4,7 mm. Ekstrak  etanol  daun  kenikir  ( Cosmos  caudatus Kunth.) menunjukkan aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus .

## Daftar Pustaka
Aryantini,  D.,  Erlina,  D.V.  and  Ria,  N.  (2020) ‘Skrining  Senyawa  Antibakteri  Ekstrak Daun Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L.)  Terhadap  Staphyllococcus  aureus Secara  Klt  Bioautografi’, Jurnal  Dunia Farmasi , 4(3), pp. 126–136.
Bali, P.N.C., Raif, A. and Tarigan, S.B. (2019) ‘Uji Efektivitas Daun Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius ROXB .) Sebagai Antibakteri  Terhadap  Salmonella  typhi’, Biolink:  Jurnal  Biologi  Lingkungan, Industri,  Kesehatan ,  6(1),  pp.  65–72. Available at: https://doi.org/10.31289/biolink.v6i1.2218 Efdi,  M.,  Syafrizayanti,  S.  and  Sari,  D.K.  (2016)
‘Isolasi Dan Karakterisasi Terpenoid Serta Uji Antioksidan Dari Ekstrak Kulit Batang Shorea singkawang’, Chempublish Journa , 1(2), pp. 61–72. Fajriah,  S. et  al. (2007)  ‘Isolasi  Senyawa Antioksidan dari Ekstrak Etil Asetat Daun Benalu  Dendrophthoe  pentandra  L.  Miq yang  Tumbuh  pada  Inang  Lobi-Lobi’, Jurnal Kimia Indonesia , 2(1), pp. 17–20. Handayani,  F.,  Warnida,  H.  and  Nur,  S.J.  (2016)
‘Formulasi  Dan  Uji  Aktivitas  Antibakteri Streptococcus  mutans  Dari  Sediaan Mouthwash Ekstrak Daun Salam (Syzygium  polyanthum  (Wight)  Walp.)’,
Media Sains , 9(1), pp. 74–84. Hasnirwan,  H.,  Arifin,  B.  and  Putra,  F.N.  (2015) ‘Isolasi  Dan  Karakterisasi  Senyawa Flavonoid  Dari  Daun  Kolesom  (Talinum triangulare  (Jacq).  W)’,  in Prosiding SEMIRATA  2015  bidang  MIPA  BKS-PTN Barat . Pontianak: Universitas Tanjungpura, pp. 304–311.
Lim,  K.  and  Widyarman,  A.S.  (2018)  ‘The
Comparison of Metronidazole
, Clindamycin  ,  and  Amoxicillin  Againts Streptococcus  sanguinis’, Journal  of
Indonesian  Dental  Association ,  1(1),  pp.
29–33.
Mpila,  D.,  Fatimawali,  F.  and  Wiyono,  W.  (2012) ‘Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol Daun  Mayana  (Coleus  atropurpureus  [L]
Benth)  Terhadap  Staphylococcus  aureus, Escherichia  coli  Dan  Pseudomonas aeruginosa  Secara  In-Vitro’, Pharmacon , 1(1).
Muljono, P., Fatimawali, F. and Manampiring, A.E.
(2016)  ‘Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Daun Mayana Jantan (Coleus antropurpureus Benth ) Terhadap
Pertumbuhan  Bakteri  Streptococcus  Sp. dan Pseudomonas Sp.’, Jurnal e-Biomedik , 4(1), pp. 164–172.
Pebriana,  R.B.,  Lukitaningsih,  E.  and  Khasanah, S.M.  (2017)  ‘Deklorofilasi  Ekstrak Metanolik daun Kenikir ( Cosmos caudatus Kunth  .),  Daun  Mengkudu  (  Morinda citrifolia ), dan daun Mangga ( Mangifera indica L .) dengan Teknik Elektrokoagulasi’, Traditional  Medicine
Journal , 22(3), pp. 190–198. Rosdiana, D. et al. (2018) ‘Peningkatan Rasionalitas Penggunaan Antibiotik Pasca Implementasi Kebijakan Penggunaan
Antimikroba  di  RSUD  Arifin  Achmad Pekanbaru’, Jurnal Kedokteran Brawijaya , 30(1), pp. 36–40.
Sa’adah,  H.  and  Nurhasnawati,  H.  (2015) ‘Perbandingan Pelarut Etanol Dan Air Pada Pembuatan  Ekstrak  Umbi  Bawang  Tiwai (Eleutherine americana Merr ) Menggunakan  Metode  Maserasi’, Jurnal Ilmiah Manuntung , 1(2), pp. 149–153. Setiawati, A. (2015) ‘Peningkatan Resistensi Kultur Bakteri  Staphylococcus  aureus  terhadap Amoxicillin Menggunakan Metode Adaptif Gradual’, Jurnal Farmasi Indonesia , 7(3), pp. 190–194.
Tengo, N.A., Bialangi, N. and Suleman, N. (2013) ‘Isolasi  Dan  Karakterisasi  Senyawa Alkaloid  Dari  Daun  Alpukat  (Persea americana Mill)’, Jurnal Sainstek , 7(1).