## Oil Extraction from Rice Bran with Various Solvents and Concentration of Crude Extract to Antioxidant Activity

## Arief Suryadinata
Jurusan Kimia, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahm Malang

## Abstract
Rice  bran  contains  components  such as  oryzanol  antioxidants,  tocopherols,  tocotrienols,  phytosterols, polyphenols, and squalene. Oryzanol is a very powerful antioxidant and oryzanol is only found in rice bran oil. This research aims to know the antioxidant activity of the  extract chloroform:methanol in the bran and find the endurance of antioxidant against a wide variety of pH and temperature. The method used is descriptive research through experimental tests in the laboratory. Samples taken from the side of rice mills in the form of bran and then macerated with chloroform: methanol. After that tested the antioxidant activity of the compounds made by the method of DPPH with various concentration 10, 20, 30, 40 and 50 ppm. Furthermore, the endurance test of antioxidant compounds at various pH and temperature using the best  concentration of antioxidant compounds. Based  on the results, rice bran oil extract concentration of  50 ppm has antioxidant activity  of 4.69%. Average yield the highest antioxidant activity shown in heating conditions with a temperature of 30oC for 30 minutes is equal to 32.25%. As well as the highest antioxidant activity was also shown at pH 5 in the amount of 25.1%.
Keywords: DPPH, Oryzanol, Rice bran

## Abstrak
Bekatul  mengandung  komponen-komponen  antioksidan  seperti  oryzanol,  tokoferol,  tokotrienol, phytosterol,  polifenol,  dan  squalene.  Oryzanol  merupakan  antioksidan  yang  sangat  kuat  dan  hanya  ditemukan pada minyak bekatul. Penelitian ini bertujuan untuk mengatahui aktivitas antioksidan ekstrak kloroform: metanol dalam  bekatul  dan  mengetahui  ketahanan  senyawa  antioksidan  ekstrak  kloroform:  metanol    bekatul  terhadap berbagai  variasi  pH  dan  suhu.  Metode  penelitian  yang  digunakan  adalah  penelitian  secara  deskriptif  melalui pengujian  eksperimental  di    laboratorium.    Sampel    diambil    dari      hasil  samping  penggilingan  padi  yang berbentuk bekatul kemudian dimaserasi dengan pelarut kloroform : metanol. Setelah itu dilakukan uji aktivitas senyawa  antioksidan  dilakukan  dengan  metode  DPPH  dengan  variasi  konsentrasi  10,  20,  30,  40  dan  50  ppm. Selanjutnya dilakukan uji ketahanan senyawa antioksidan pada berbagai pH dan suhu menggunakan konsentrasi terbaik  sebagai  senyawa  antioksidan.  Berdasarkan  hasil  penelitian  didapatkan  Ekstrak  minyak  bekatul konsentrasi  50  ppm  memiliki  aktivitas  antioksidan  sebesar  4,69%.  Hasil  rata-rata  aktivitas  antioksidan  paling tinggi  ditunjukkan  pada  kondisi  pemanasan  dengan  suhu  30 o C  selama  30  menit  yaitu  sebesar  32,25  %.  Serta aktivitas antioksidan paling tinggi juga  ditunjukkan  pada kondisi pH 5 yaitu sebesar 25,1%.
Kata kunci :  Bekatul,  DPPH, Oryzanol

## I. PENDAHULUAN
Bekatul merupakan produk samping penggilingan gabah menjadi beras. Penggilingan  satu  ton  gabah  menghasilkan bekatul sebanyak 60-80 kg (Goffman et al ., 2003).  Cahyanine  (2008)  menyebutkan bahwa  dalam  proses  penggilingan  padi menjadi  beras  giling  diperoleh  hasil samping  sebagai  berikut:  (1)  sekam  (15- 20%),  yaitu  bagian  pembungkus  atau  kulit luar; (2) bekatul  (8-12%),  yang merupakan kulit ari, dihasilkan dari proses  penyosohan dan  (3)  menir  (3%),  merupakan  bagian beras yang hancur.
Bekatul  mengandung  komponen- komponen  antioksidan  seperti  oryzanol, tokoferol, tokotrienol, phytosterol, polifenol,  dan  squalene  (Goffman et  al. , 2003;  Ozgul  and  Türkay,  1993).  Menurut hasil  penelitian  dari  Balai  Besar  Penelitian dan  Pengembangan  Pascapanen  Pertanian (2007), minyak bekatul mengandung antioksidan alami tokoferol, tokotrienol dan oryzanol  yang  bermanfaat  melawan radikal bebas  dalam  tubuh  terutama  sel  kanker, serta membantu menurunkan kadar kolesterol dalam darah. Orizanol merupakan  antioksidan  yang  sangat  kuat
dan hanya ditemukan pada minyak bekatul. Damayanthi  (2003)  menjelaskan  tentang terdapatnya  komponen-komponen  bioaktif pada bekatul yaitu zat yang didalam tubuh  bekerja  di  luar  fungsi  karbohidrat, lemak,  protein  dan  mineral.  Komponen tersebut diantaranya adalah tokoferol (Vitamin E), tokotrienol, oryzanol dan asam pangamat.
Antioksidan    bekerja    dengan  cara mendonorkan  satu  elektronnya  kepada senyawa  yang  bersifat  oksidan  sehingga aktivitas  senyawa  oksidan  tersebut  bisa dihambat.  Keseimbangan  oksidan  dan antioksidan sangat penting karena berkaitan dengan berfungsinya sistem imunitas tubuh. Kondisi  tersebut  terutama  untuk  menjaga integritas  dan  berfungsinya  membran  lipid, protein  sel    dan    asam    nukleat  serta mengontrol  transduksi  signal  dan  ekspresi gen dalam  sel imun (Meydani et al ., 1995). Ekstraksi senyawa antioksidan dalam bekatul dengan menggunakan perbandingan  pelarut  non  polar  dan  polar. Terdapat  banyak  senyawa  antioksidan dalam  minyak  bekatul  sehingga  perbedaan pelarut akan  mempengaruhi  hasil  ekstraksi. Pelarut  yang  dapat  digunakan  adalah kloroform  :  metanol  dengan  metode maserasi  yang  bertujuan  untuk  mencegah rusaknya kandungan antioksidan dan mendapatkan  minyak  bekatul  kasar  dalam kadar  maksimal dengan kualitas  yang  baik. Azizah (2008), menyatakan bahwa kloroform
dan metanol dengan
perbandingan 3:2 untuk mengekstrak minyak  bekatul  menghasilkan    rendemen minyak  sebesar  16,5  %  dan  terdapat senyawa antioksidan oryzanol .
Sebagai
metode pengujian
antioksidan pada pangan digunakan  larutan DPPH  sebagai  indikator  dimana  semakin berkurangnya  warna  DPPH  menandakan presentase  aktivitas  penangkapan  radikal bebas.  Keuntungan  menggunakan  metode DPPH  adalah  metode  yang  sederhana, mudah  dan  menggunakan  sampel  dalam jumlah  yang  sedikit.  Selain  menggunakan
DPPH dalam menentukan aktivitas antioksidan, digunakan larutan BHT
sebagai  pembanding.  Penggunaan  metode DPPH  ini  sudah  banyak  digunakan  untuk mengidentifikasi senyawa antioksidan contohnya  penelitian  yang  dilakukan  oleh Hayati (2009) menggunakan metode DPPH dalam  menentukan  aktivitas  antioksidan dalam  buah  pepino  kemudian  Ping  (2012) juga melaporkan tentang penggunaan metode DPPH dalam menentukan komponen  antioksidan  dalam  buah  tunjuk langit (sky fruit).
Tujuan  dari  penelitian  ini  yaitu mengatahui  aktivitas  antioksidan  ekstrak kloroform:  metanol  dalam  bekatul  dan mengetahui ketahanan senyawa antioksidan ekstrak  kloroform:  metanol    bekatul terhadap berbagai variasi pH dan suhu.

## II. METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah beaker  glass 500  mL dan  1000  mL,  pipet  ukur  1  mL,  5  mL  dan 10 mL, gelas ukur 25 mL, 100 mL, 500 mL, erlenmeyer 250 mL, 500 mL dan 1000 mL, gelas  arloji,  corong  gelas,  labu  takar,  bola hisap, spatula, pengayak, rotary evaporator vacum ,  kuvet,  pipet  tetes,  aluminium  foil, neraca  analitik,  pemanas  air,  seperangkat ekstraktor maserasi ,  spektrofotometer  UV- Vis, magnetic  stirrer ,  tabung  reaksi, instrumen FT-IR.
Bahan yang  digunakan  adalah sebagai  berikut:  bekatul  beras,  larutan kloroform  p.a,  larutan  metanol  p.a,  KOH 12%, gas nitrogen, H 2 SO 4 1 M, H 2 SO 4 1 %, MgSO 4 anhidrous  larutan  DPPH,  larutan BHT,  asam  askorbat,  kertas  saring  dan aquades.

## Tahapan Penelitian
Metode  penelitian  yang  digunakan adalah  penelitian  secara  deskriptif  melalui pengujian  eksperimental  di    laboratorium. Sampel    diambil    dari      hasil  samping penggilingan  padi  yang  berbentuk  bekatul

## ALCHEMY , Vol. 4 No. 1 Maret 2015, hal 25-31
kemudian dimaserasi dengan pelarut kloroform  :  metanol.  Setelah  itu  dilakukan uji aktivitas senyawa antioksidan dilakukan dengan  metode  DPPH  dengan  variasi konsentrasi  10,  20,  30,  40  dan  50  ppm. Selanjutnya dilakukan uji ketahanan senyawa antioksidan pada  berbagai pH dan suhu  menggunakan  konsentrasi  terbaik sebagai senyawa antioksidan.
Bekatul  dipanaskan  dengan  cara pengukusan  selama  60  menit  kemudian dikeringanginkan dan diayak dengan ukuran 60 mesh. Sebanyak 60 gram bekatul direndam  menggunakan 300 mL kloroform :  metanol  (3:2)  selama  24  jam  kemudian di shaker selama  3  jam  dan  dilanjutkan remaserasi  dengan  cara  maserasi  berulang terhadap ampas dari hasil maserasi pertama menggunakan  cara  dan  pelarut  yang  sama. Filtrat  yang  diperoleh,  dipekatkan  dengan rotary  evaporator sampai  ekstrak  tidak menetes  lagi,  sehingga  diperoleh  ekstrak pekat.  Ekstrak  pekat  kemudian  dialiri dengan  gas  N 2 untuk  menghilangkan pelarut yang masih tersisa pada filtrat.
Penentuan panjang gelombang maksimum  dilakukan  dengan  cara  etanol sebanyak  6,75  mL  dimasukkan  ke  dalam kuvet,  kemudian  ditambahkan  larutan DPPH  0,5  mM  sebanyak  2,25  mL  dan dimasukkan  dalam  kuvet  hingga  penuh. Selanjutnya  dicari  λ maks larutan  pada rentangan panjang gelombang 500-600.
Penentuan waktu kestabilan antioksidan  dilakukan  dengan  menyiapkan larutan  ekstrak  30  ppm  sebanyak  250  mL, kemudian  diambil  sebanyak  6,75  mL  dan dimasukkan dalam tabung reaksi. Ditambahkan  0,5  mM  larutan  DPPH sebanyak  2,25  mL,  kemudian  dicari  waktu kestabilan  tanpa  inkubasi  dan  setelah inkubasi  pada  suhu  37  ºC  pada  rentangan waktu  5  –  100  menit  dengan  interval  5 menit. Sampel diukur menggunakan spektrofotometer  Uv-Vis  pada  λ maks yang telah diketahui pada tahap sebelumnya.
Aktivitas antioksidan diukur dengan menggunakan Sampel ekstrak kasar dilarutkan  dalam  kloroform  :  metanol dengan  konsentrasi  10,  20,  30,  40  dan  50 ppm.  Kemudian  disiapkan  tiga  tabung reaksi  untuk  masing-masing  konsentrasi, kemudian  tiap-tiap  tabung  reaksi  untuk masing-masing  konsentrasi  diisi  dengan 6,75  mL  ekstrak  dan  ditambahkan  DPPH 0,5  mM  sebanyak  2,25  mL  (perbandingan larutan  DPPH  :  ekstrak  yang  dilarutkan dengan konsentrasi tertentu 1:3). Setelah itu larutan ditutup dengan tisue  dan diinkubasi dengan  suhu  37 o C  pada  waktu  kestabilan yang  diperoleh  pada  proses  sebelumnya, kemudian  dimasukkan  ke  dalam  kuvet hingga  penuh  dan  diukur  absorbansinya menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis pada λ maks yang telah didapatkan sebelumnya.  Data  absorbansinya  yang diperoleh  dari  tiap  konsentrasi  masing- masing  ekstrak  dihitung  nilai  persen  (%) aktivitas antioksidannya.
Uji  ketahanan  aktivitas  antioksidan terhadap panas menggunakan sampel ekstrak  kasar  dilarutkan  dalam  propilen glikol dengan konsentrasi 50 ppm sebanyak 1  mL  ditempatkan  pada  tabung  reaksi  dan dipansakan  pada  suhu  100  oC,  125  C,  150 C dan 175 C masing-masing selama 30, 60, 90 dan 120 menit dalam Oil bath . Aktivitas antioksidan diukur dengan metode DPPH.
Uji  ketahanan  aktivitas  antioksidan terhadap  pH  menggunakan  sampel  ekstrak kasar  dilarutkan  dalam  10  ml  minyak kedelai dengan konsentrasi 50 ppm ditempatkan  pada  botol  gelas  gelap  dan tertutup. Selanjutnya dibuat emulsi (o/w) 10 % dengan buffer phosphat pH 3, 4, 5, 6 dan 7. Sampel tersebut dioksidasi pada suhu 37 C selama 12  hari pada  inkubator. Aktivitas antioksidan  diukur  menggunakan  metode DPPH.
Secara  ringkas,  penjabaran  diatas dapat dituliskan sebagai berikut : 1.  Preparasi sampel
2.  Ekstraksi komponen aktif 3   Uji aktivitas senyawa antioksidan 4.  Uji ketahanan antioksidan pada berbagai pH dan suhu

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  pengukuran  pada  ekstrak bekatul dengan kloroform:metanol didapatkan  panjang gelombang maksimum larutan  DPPH  0,2  mM  sebesar  516,9  nm dengan  nilai  absorbansi  0,736  dengan waktu kestabilan antara 40-70 menit.
Ekstrak  minyak  bekatul  konsentrasi 50  ppm  memiliki  aktivitas  antioksidan sebesar  4,69%.  Secara  kualitatif  aktivitas antioksidan  sampel  dapat  dilihat  dari perubahan  warnanya  dari  ungu  menjadi kuning. Pada penelitian ini hasil pengukuran  masing-masing  ekstrak  ketika ditambahkan larutan DPPH tidak mengalami  perubahan  warna  dari  ungu menjadi  kuning,  melainkan  hanya  terjadi pemudaran  warna  dari  ungu  menjadi  pink keunguan  pada  konsentrasi  50  mg/L.  Hal ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  minyak Bekatul  beras  tergolong  dalam  senyawa antioksidan  yang  lemah  jika  dibandingkan dengan  antioksidan  pembanding  yaitu vitamin C dan BHT.
Perubahan warna dari ungu menjadi kuning  pada  sampel  vitamin  C  dan  BHT dikarenakan  radikal  DPPH  memiliki  warna ungu  dan  berubah  menjadi  kuning  setelah radikal DPPH berpasangan (Yuliani, 2011). Vitamin  C  mengalami  perubahan  warna pada  konsentrasi  10  ppm  dan  BHT  juga mengalami perubahan warna pada konsentrasi 10 ppm. Pengurangan intensitas warna mengindikasikan peningkatan kemampuan  antioksidan  dalam  menangkap radikal  bebas  (Prakash,  2001).  Perubahan warna  yang  terjadi  pada  vitamin  C  dan BHT  menunjukkan  tingginya  kemampuan kedua antioksidan tersebut dalam menangkap radikal bebas DPPH.
Tabel 1. Hasil Persentase Aktivitas Antioksidan No. Konsentrasi Sampel (ppm) % Aktivitas antioksidan Vitamin C BHT Ekstrak Kloroform : Metanol 1. 10 95,55 50,15 1,35 2. 20 96,15 61,65 1,48 3. 30 96,23 76,77 2,59 4. 40 96,29 82,39 3,41 5. 50 95,91 85,63 4,69
Berdasarkan  mekanisme  kerjanya, Vitamin  C  atau  asam  askorbat  termasuk dalam  antioksidan  sekunder.  Antioksidan ini  berfungsi  sebagai  sistem  pertahanan preventif yaitu dengan cara memotong atau memutuskan  reaksi  oksidasi  berantai  dari radikal  bebas.  Asam  askorbat  memberikan 2  atom  H  kepada  senyawa  radikal  nitrogen pada  DPPH.  Meskipun  telah  mendonorkan atom  H-nya,  asam  askorbat  tetap  stabil dengan mengubah dirinya menjadi dehidro- L-asam  askorbat.  asam  askorbat  mampu mereduksi  radikal  bebas  DPPH  dengan mendonorkan  1  atom  hidrogen  sehingga menghasilkan produk radikal L-asam askorbat.  Radikal  L-asam  askorbat  akan segera  berubah  menjadi  radikal  L-askorbil, radikal-radikal  yang  terbentuk  bersifat stabil. Hal tersebut disebabkan kemampuan radikal untuk menstabilkan diri dengan cara beresonansi (Arindah, 2010).
Sedangkan senyawa  antioksidan BHT ( Butylated
hydroxytoluene ) merupakan  antioksidan  sintetik  yang  juga memiliki  kemampuan  untuk  meredam radikal bebas. Antioksidan BHT merupakan senyawa  aromatik  yang  memiliki  satu gugus  hidroksil.  Antioksidan  BHT  ini mendonorkan  1  atom  hidrogennya  pada gugus  hidroksil  kepada  DPPH  sehingga radikal  DPPH  tereduksi  menjadi  DPPH-H. BHT  yang  menjadi  radikal  fenoksi  lebih stabil.  Kestabilan  radikal  fenoksi  ini disebabkan  karena  radikal  fenoksi  dapat mendelokasikan elektronnya (Husnah, 2004).

## ALCHEMY , Vol. 4 No. 1 Maret 2015, hal 25-31
Tabel  2. Aktivitas antioksidan  akibat  pengaruh suhu dan waktu pemanasan Menit Ke Aktivitas antioksidan (%)
30 o C 60 o C 100 o C 125 o C 30 32,25 26,7 12,6 7,36 60 28,3 23,3 12,75 3,005 90 28,8 20 10 1,55 120 31,6 23,7 10 1,55 Hasil rata-rata aktivitas
antioksidan  akibat  pengaruh  suhu  dan waktu pemanasan paling tinggi ditunjukkan pada kondisi pemanasan dengan suhu 30 o C selama  30  menit.  Pada  kondisi  ini didapatkan nilai aktivitas antioksidan sebesar  32,25  %.  Pada  suhu  30 o C  setelah pemanasan  setelah  120  menit  kadar aktivitas  antioksidan  hanya  mengalami penurunan sebesar 2%. Hal ini menunjukkan  bahwa  pada  pemanasan  suhu 30 o C, lama waktu pemanasan tidak berpengaruh  banyak  pada  daya  aktivitas antioksidan.  Aktivitas  antioksidan  paling rendah  ditunjukkan  pada  pemanasan  suhu 125 o C  selama  90  dan  120  menit,  pada kondisi  ini  didapatkan  nilai  aktivitas antioksidan  sebesar  1,55%.  Hal  ini  jika dibandingkan  dengan  kadar  maksimum aktivitas  antioksidan  pada  suhu  30 o C  maka pada  kondisi  suhu  125 o C  telah  terjadi penurunan  aktivitas  antioksidan  sebesar 95,2 %.
Hasil  uji  aktivitas  antioksidan menunjukkan bahwa lama waktu pemanasan  pada  suhu  pemanasan  yang sama tidak memberikan hasil nilai aktivitas antioksidan  yang  berbeda  secara  nyata. Pada  kondisi  suhu  30 o C  terjadi  penurunan aktivitas antioksidan sebesar 2%, pada suhu 60 o C terjadi penurunan sebesar 11,2 % dan pada suhu 100 o C terjadi penurunan aktivitas antioksidan sebesar 20,6 % sedangkan pada suhu 125 o C terjadi penurunan secara drastis yaitu sebesar 78,9%.
Peningkatan suhu pemanasan memberikan  pengaruh  yang  cukup  besar terhadap aktivitas antioksidan  pada kondisi
waktu  pemanasan  yang  sama.  Aktivitas antioksidan  terlihat  memiliki  tren  yang terus  menurun  seiring  dengan  peningkatan suhu  pemanasan.  Pada  keadaan  pemanasan suhu 100 o C menyebabkan terjadi penurunan  aktivitas  antioksidan  dengan interval  sebesar  55-68%  demikian  juga pada  kondisi  peningkatan  suhu  hingga 125%  telah  terjadi  penurunan  aktivitas antioksidan  hingga  95%.  Pada  kondisi pemanasan  suhu  60 o C  terjadi  penurunan aktivitas  antioksidan  dengan  interval  17- 30%.
Hasil  analisis  ketahanan  panas aktivitas antioksidan dalam ekstrak  minyak bekatul  dapat  disimpulkan  bahwa  jenis antioksidan  tersebut  relatif  tidak  tahan terhadap pemanasan. Pemanasan pada suhu 125 o C  selama  2  jam  dapat  menurunkan aktivitas  antioksidan  sebesar  95,2%.  Jika dibandingkan dengan hasil penelitian Hamama  dan  Nawar    yang  diacu  Yen  dan Duh  (1993)  bahwa  aktivitas  antioksidan BHA  mengalami  penurunan  sebesar  50% setelah dipanaskan pada suhu 185 o C selama 45 menit maka ketahanan panas antioksidan ekstrak minyak bekatul dianggap masih kurang baik. Merujuk pada kondisi  tersebut  maka  dapat  disimpulkan bahwa  antioksidan  ekstrak    bekatul    tidak stabil terhadap pemanasan.
Aktivitas antioksidan paling tinggi ditunjukkan    pada  kondisi  pH  5  yaitu sebesar  25,1%  sedangkan  nilai  aktivitas antioksidan  paling  rendah  terjadi  pada kondisi pH 3 sebesar 2,15%. Nilai aktivitas antioksidan  ini  relatif  stabil  hingga  pH  7, pada keadaan ini terjadi penurunan aktivitas antioksidan yang relatif kecil  yaitu sebesar 17,3  %.  Sedangkan  pada  kondisi  pH  3 terjadi penurunan nilai aktivitas antioksidan  yang  signifikan  yaitu  sebesar 91,4%.
Tabel 3 Aktivitas antioksidan terhadap pH
Aktivitas antioksidan pada pH 3 4 5 6 7 2,15 %  13.7 % 25,1% 19,6% 20,75%
Antioksidan  kelompok  senyawa fenolik  berperan  sebagai  donor  hidrogen yang  bertugas untuk menstabilkan senyawa radikal  bebas  (Shahidi  dan  Naczk,  1995). Pada  kondisi  pH  yang  rendah  densitas  ion hidrogen dalam medium meningkat sehingga  menekan  pelepasan  ion  hidrogen dari  senyawa  fenolik.  Pada  kondisi    pH rendah memiliki konsentrasi ion fosfat yang tinggi,  pada  keadaan  ini  asam  fosfat memiliki  fungsi  sebagai  pengkelat  logam yang  dapat  menginisiasi  reaksi  oksidasi (Kikugawa  et  al,  1990;  Chen  et  al,  1996). Hal  ini  menyebabkan tingkat oksidasi pada pH  rendah  dapat  ditekan.  Hal  ini  sesuai dengan  hasil  penelitian  Huang  et  al  (1996) yang  meyatakan  bahwa  tingkat  oksidasi emulsi  dengan  buffer  fosfat  lebih  rendah dibandingkan  dengan  emulsi  tanpa  buffer pada kondisi pH yang sama.
Dengan  meningkatnya  pH  maka konsentrasi  ion  hidrogen  dalam  medium menurun  sehingga  akan  terjadi  pelepasan ion hidrogen dari senyawa fenolik (antioksidan).  Dari  analisis  ketahanan aktivitas antioksidan dalam ekstrak  minyak bekatul  terhadap  pH  dapat  disimpulkan bahwa  jenis  antioksidan  tersebut  relatif tidak  tahan  terhadap  pH  yang  asam sedangkan  pada  pH  netral  antioksidan tersebut relatif stabil.

## IV. KESIMPULAN
Panjang gelombang maksimum larutan  DPPH  0,2  mM  sebesar  516,9  nm dengan  nilai  absorbansi  0,736.  Waktu kestabilan ekstrak kloroform:metanol adalah  40-70  menit.  Ekstrak  minyak Bekatul beras memiliki aktivitas antioksidan  walaupun  memiliki  tingkat antioksidan  yang  lemah.  Ekstrak  minyak bekatul  konsentrasi  50  ppm  memiliki aktivitas antioksidan sebesar 4,69%.
Pemanasan pada suhu 125 o C selama 2 jam dapat menurunkan aktivitas antioksidan  sebesar  95,2%.  Merujuk  pada kondisi  tersebut  maka  dapat  disimpulkan bahwa  antioksidan  ekstrak    bekatul    tidak stabil terhadap pemanasan. Pada kondisi pH 3 terjadi penurunan nilai aktivitas antioksidan  yang  signifikan  yaitu  sebesar 91,4%. Antioksidan ekstrak minyak bekatul dapat disimpulkan bahwa relatif tidak tahan terhadap pH yang asam sedangkan pada pH netral antioksidan tersebut relatif stabil.

## V. DAFTAR PUSTAKA
Balai  Besar  Penelitian  dan  Pengembangan Pascapanen Pertanian.
2007.
Mengolah  Dedak menjadi Minyak ( Rice  Bran  Oil  ) .  Warta  Penelitian dan  Pengembangan  Pertanian  Vol. 29 No. 4.
Cahyaninne, et al.  2008.  Fraksi  Kaya Tokoferol  dari  Bekatul  Beras  ( Oryza sativa)  dengan  Tekhnik Rekristalisasi  Pelarut  Suhu  Rendah. Jurnal  Tekhnologi  Pertanian Vol.  9 No. 3 165-172.
Damayanthi  E,  Tjing  LT  dan  Arbianto  L.
2007. Rice  Bran .  Depok:  Panebar Swadaya. Hal. 28.
Gordon,  M.H  1990. The  Mechanism  of Antioxidants  Action  in  Vitro. Di dalam: B.J.F. Hudson, editor. Food Antioxidants . London: Elsivier Applied Science.
Huang  ,  S.W.,  E.N.  Frankel,  K.  Schwarz, and J.B. German. 1996. Effect of pH on  Antioxidant  Activity  of  Alfa Tocophenrol  and  Trolox  in  Oil-in- Water  Emulsions. J.  Agric.  Food Chem. 44: 2951-2956.
Kikugawa,  Ak.  A.  Kurechi,  T.  Kunugi. 1990. Chemistry  and  Implication  of Degradation of Phenolic
Antioxidant.  Di  dalam  :  Hudson B.J.F.  (ed).  Food  Antioxidant. Hal 65-98.  Elsevier  Applied  Science, New York.

## ALCHEMY , Vol. 4 No. 1 Maret 2015, hal 25-31
Molyneux, P.. 2003. The Use of The Stable Free Radical Diphenylpicrylhydrazyl (DPPH), for Estimating Antioxidant Activity .
Science and Technology, XXVI (2) :
211-219
Prakash, A., Freg, R and Eugene, M. 2001.
Antioxidant Activity. Medallion Laboratories-Analytical Progress. Volume 19. Number 2 Schwarz,  K.  2001.  Investigation  of  Plant
Extracts  for  the  Protection  of Processed  Foods  Againts  Lipid Oxidation. Comparison of Antioxidant Assays Based on Radical Scavenging, Lipid
Oxidation  and  Analysis  of  the Principal  Antioxidant  Compunds.
Eur.  Food  Res  Technol.  212(3)  :
319-328.
Shu  Jing  Wu  dan  Lean  Teik  Ng.  2007.
Antioxidant and Free Radical Scavenging  Activities  of  Wilod Bitter Melon  (Momordica charantia Linn.  Var. abbreviata Ser.) in Taiwan. Taiwan:  Universityu  of Pharmacy  and  Technology.  Pages 323-330.
Yen,
G.C. and P.D.Duh. 1993. Antioxidative Properties of Methanolic  Extracts  from  Peanut Hulls . JA.OCS. 70:598-601