Produksi Bioetanol secara SHF dan SSF Menggunakan Aspergillus niger… Jurnal Agroteknologi Vol. 11 No. 01 (2017)

## PRODUKSI BIOETANOL SECARA SHF DAN SSF MENGGUNAKAN
Aspergillus niger, Trichoderma viride DAN New Aule Instant Dry Yeast

## PADA MEDIA KULIT UBI KAYU
Separated Hydrolysis and Simultaneous Saccharification for Production of Bioethanol from Aspergillus niger, Trichoderma viride and New Aule Instant Dry Yeast Using Cassava Peels as Substrate
Jay Jayus 1,2) * , Sony Suwasono 1) , Ike Wijayanti 1)
1) Jurusan Teknologi Hasil Pertanian - Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Jember
2) Centre for Development of Advance Science and Technology , Universitas Jember Jalan Kalimantan 37, Kampus Tegal Boto Jember 68121
* E-mail: jayus.ftp@unej.ac.id

## ABSTRACT
Effort to improve the yield of bioetanol production from cassava peels were be carried out by separated hydrolysis fermentation (SHF) and simultaneous saccharification fermentation (SSF) using Aspergillus niger, Trichoderma viride and New Aule Instant Dry Yeast. The purpose of this research is to measure bioetanol production from cassava peels  using three different culture methods i.e SHF1 (A. niger 24 hours +New Aule Instant Dry Yeast); SHF2 (T. viride 24 hours+New Aule Instant Dry Yeast);  and  SSF  (A.  niger+  T.  viride+New  Aule  Instant  Dry  Yeast).  The  research  results  showed SHF1  (2,58  g/l)  produced  higher  ethanol  than  that  of  SHF2  (2,15).  The  methods  of  SSF  eficiency produced ethanol (2,93 g/l) and faster (18 hours) compared the methods of SHF1 and SHF2  which need 48 hours incubation time to reach maximum level.
Keywords : Bioethanol, cassava peels, SHF, SSF, A.niger, T.viride, new Aule

## PENDAHULUAN
Bahan  bakar  fosil  merupakan  energi utama  yang  tidak  dapat  terbaharukan  dan setiap  tahunnya  konsumsi  bahan  bakar mengalami  peningkatan.  Berdasarkan  data total konsumsi energi didunia tahun 2005- 2014  mengalami  peningkatan  dari  995,1 juta  barel/hari  menjadi  1.186,2  juta barel/hari,  sedangkan  di  Indonesia  sendiri pada  tahun  2000  konsumsi  bahan  bakar sebesar 315 juta barel dan meningkat pada tahun  2013  menjadi  399  juta  barel (International  Annual  Energy  Outlook (2013);  BPTP  (2015)). Salah  satu  upaya untuk mengatasi hal tersebut yaitu mencari energi alternatif seperti  bioetanol.
Bioetanol adalah etanol yang dihasilkan  dari  fermentasi  glukosa  dengan bantuan Saccharomyces cerevisiae (Khaidir et  al .,  2012).  Bioetanol  dapat digunakan  sebagai  pengganti  bahan  bakar minyak tergantung dari tingkat
kemurniannya. Bioetanol dengan kadar 95- 99%  dapat  sebagai   bahan  substitusi premium  (bensin),  sedangkan  kadar  40% dapat  sebagai  bahan  substitusi  minyak tanah.  Bioetanol  dapat  diproduksi  dari beberapa  jenis  media  yang  mengandung gula,  pati,  selulosa,  dan  bahan  berserat (lignoselulosa).
Ubi  kayu  merupakan  salah  satu sumber  bahan  pangan  dengan  kandungan karbohidrat yang cukup tinggi setelah padi dan  jagung.  Menurut  data  BPS  (2015), produksi ubi kayu nasional telah mencapai 21.790.956  ton  dan  menghasilkan  limbah dengan  jumlah  yang  tinggi,  salah  satunya limbah  kulit  ubi  kayu.  Menurut  Grace (1977),  persentase  kulit  ubi  kayu  yang dihasilkan berkisar antara 8-15% dari berat umbi  yang  dikupas.  Kulit  ubi  kayu mengandung komponen selulosa 43,626%, hemiselulosa  36,58%,  dan  pati  10,384%
yang  berpotensi  sebagai  bahan  baku bioetanol (Artiyani dan Soedjono, 2011).
Tahapan produksi bioetanol berbahan  lignoselulosa  seperti  kulit  ubi kayu  terdiri  dari  tahapan  preatreatment (delignifikasi),  hidrolisis  dan  fermentasi. Proses  pretreatment  atau  delignifikasi biomassa berlignoselulosa bertujuan untuk menghilangkan  sisa  lignin  yang  dapat menghambat  kerja  enzim  (Fengel  dan Wegener,  1995).  Proses  hidrolisis  dapat dilakukan  secara  kimiawi  dan  enzimatik. Dalam  menghasilkan  glukosa,  hidrolisis secara kimiawi menggunakan larutan asam akan  memotong  ikatan  secara  acak. Hidrolisis  enzimatik  dilakukan  dengan menggunakan  enzim  α-amilase,  selulase, dan  xilanase  yang  dapat  disintesis  dari beberapa mikroorganisme seperti
Trichoderma  viride dan Aspergillus  niger (Nakasaki dan Adachi, 2003) . Berdasarkan hal  tersebut  kedua  jenis  mikroorganisme tersebut  dapat  digunakan  dalam  proses hidrolisis komponen kulit ubi kayu.
Fermentasi
bioetanol dapat dilakukan  dengan  menggunakan  metode separated  hydrolysis  fermentation (SHF)
dan simultaneous saccharification fermentation (SSF).  Penggunaan  metode fermentasi  SHF  dapat  dilakukan  pada masing-masing kondisi optimum, sedangkan  penggunaan  metode  SSF  dapat mencegah  terhambatnya  kerja  enzim  oleh produk glukosa dan selobiosa yang selama ini  menjadi  kelemahan  dari  metode pembuatan etanol secara SHF (Taherzadeh dan Karimi, 2007; Olofsson et al .,  2008). Berdasarkan hal tersebut produksi bioetanol  kulit  ubi  kayu  menggunakan A. niger,  T.  viride dan new  aule  instant  dry yeast secara  SHF  dan  SSF  perlu  diteliti sebagai  upaya  meningkatkan  produksi bioetanol.

## METODE PENELITIAN
Alat dan Bahan Alat-alat yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  alat  gelas,  oven,
blender,  ayakan  Tyler  100 mesh , Laminar
Air Flow (Microtech Model V3), fermentor, sentrifus, spektrofotometer (Genesys  10  UV),  autoklaf  Sturdy  (SA  – 3000VL),  inkubator  ( Scientific  Series 2000 ),  orbital  shaker  inkubator  ( Wise Cube ® ) , Haemacytometer , mikroskop,
hand pH meter dan cawan conway . Bahan  yang  digunakan  adalah  kulit ubi  kayu  (Pabrik  Pengolahan  Tape  Sari Madu  Gebang  Kab.  Jember)  dan  bahan kimia  yang  digunakan  adalah  NaOCl  1%, yeast  extract , NaOH, Asam  sitrat, mineral salt  solution ,  MEA,  (NH 4 ) 2 SO 4, glukosa, K 2 Cr 2 O 7 ,  H 2 SO 4 ,  fenol,  etanol  dan  DNS.
Mikroorganisme yang digunakan diantaranya A.  niger,  T.  viride dan New Aule Instant Dry Yeast.

## Tahapan Penelitian

## Pembuatan tepung kulit ubi kayu
Kulit  ubi  kayu  dibersihkan  kulit terluar  yang  berwarna  coklat  dan  dicuci bersih.  Kemudian  dilakukan  pengeringan dengan  metode  sundrying  selama  24  jam untuk  mengurangi  kadar  air.  Selanjutnya dilakukan pengecilan ukuran menggunakan blender dan diayak menggunakan  ayakan  100  mesh.  Tepung kulit yang dihasilkan didelignifikasi menggunakan  NaOCl  1%  selama  5  jam pada suhu 30 o C (Assadam, 2014).

## Pembuatan starter A.niger dan T.viride
Media  inokulum  yang  terdiri  dari 0,5g/L  tepung  ubi  kayu,  0,3g/L yeast extract , 0,6g/L(NH 4 ) 2 SO 4 , 50 ml/L mineral salt solution . Selanjutnya di sterilkan pada 121 o C  selama  15  menit,  setelah  itu inokulasi  kultur A.  niger dan T.  viride (masing-masing 3 tabung reaksi).
Selanjutnya inkubasi pada 150 rpm selama 24  jam  dengan  suhu  30 o C.  Selanjutnya dilakukan  pemisahan  sel  pada  suhu  10 o C selama  10  menit  dan  dilakukan  pencucian 2  kali  menggunakan  aquades  steril sehingga  di  hasilkan  sel.  Sel  dipindahkan ke  dalam  gelas  ukur  dan  di  tambah aquades steril hingga volume tertentu.
0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 4,5 5,0 0 6 12 18 24 m ass a se l (g /m l) to tal g u la t erlaru t (g /l ) g u la re d u k si (g /l ) waktu (jam)
total gula terlarut SHF1 (g/l) total gula terlarut SHF2 (g/l) gula reduksi SHF1 (g/l) gula reduksi SHF2 (g/l) massa sel SHF1 (g/ml) massa sel SHF2 (g/ml)
Pembuatan  starter  new  aule  instant  dry yeast
Starter  dari  ragi  roti  instan New  Aule Instant  Dry  Yeas t  1%  (w/v)  dari  jumlah media  yang  digunakan  dalam  fermentasi, kemudian  dicampur  dengan  2%  larutan glukosa steril  50 ml pada suhu  ±42 o C dan didiamkan  selama  3  jam  (Arindhani, 2015).

## Produksi Bioetanol
Media  kulit  ubi  kayu    yang  terdiri atas  kulit  ubi  kayu  10  g/l, yeast  extract 0,3g/L,  mineral salt  solution 50  ml/L  dan (NH 4 ) 2 SO 4 0,6g/L.  Selanjutnya  dilakukan pengaturan  pH  ±4,5  dan  sterilisasi  pada 121 o C  selama  15  menit.  Selanjutnya dilakukan inokulasi biakan A. niger atau T. viride selanjutnya  diinkubasi  selama  24 jam.  Setelah  24  jam  dilakukan  inokulasi New  Aule  Instant  Dry  Yeast diinkubasi hingga 48 jam untuk menghasilkan etanol. Pada  SSF  dilakukan  inokulasi A.  niger , T. viride dan New  Aule  Instant  Dry  Yeast secara  bersamaan diinkubasi  hingga  48 jam.

## Rancangan Percobaan
Penelitian  ini  dilakukan  dengan faktor  tunggal yaitu  metode kultur fermentasi  dengan  perlakuan  SHF1  ( A. niger+ New Aule Instant Dry Yeast), SHF2 ( T.  viride+  New  Aule  Instant  Dry  Yeast) dan  SSF  ( A.  niger+  T.  viride+  New  Aule Instant Dry Yeast) .

## Metode Analisis
Parameter yang diamati dalam penelitian  ini  meliputi: perhitungan  massa sel  metode  berat  kering,  populasi yeast metode Counting  Chamber (Lay,  1994), total  gula  terlarut  metode  fenol  sulfat (Dubois,  1956),  analisis  gula  reduksi metode dinitrosalisilic acid (DNS) (Miller, 1959), derajat pH, dan kadar etanol metode C hamber  Conway (Kartika et  al .,  1992).
Data  yang  diperoleh  disajikan  dalam bentuk  tabel,  grafik dan  histogram dengan
hasil  penyelesaian  berupa  rata-rata  dan standart deviasi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Profil  Hidrolisis  SHF1  dan  SHF2  pada Media Kulit Ubi Kayu
Massa  sel,  total  gula  terlarut  dan gula  reduksi  pada  proses  hidrolisis mengalami  peningkatan  hingga  24  jam ( Gambar 1 ) . Glukosa yang dihasilkan saat proses  hidrolisis  selanjutnya  di  fermentasi untuk menghasilkan etanol ( Gambar 2 ).
Gambar  1. Hubungan  antara  peningkatan  massa sel  (g/ml),  peningkatan  total  gula terlarut  (g/l)  dan  gula  reduksi  (g/l) selama  hidrrolisis  SHF1  dan  SHF2 pada media kulit ubi kayu
Hasil  massa  sel  SHF1  dan  SHF2 pada  0  jam  masing-masing  sebesar 0,041g/ml  dan  0,01g/ml.  Pada  24  jam hidrolisis  mengalami  fase  logaritmik  (fase pertumbuhan  sel  hingga  mencapai  jumlah maksimum)  pada  SHF1  sebesar  0,16  g/ml dan  pada  SHF2 sebesar  0,088  g/ml.
Peningkatan  massa  sel  dapat  dipengaruhi oleh  kondisi  media  hidrolisis  baik  nutrisi, pH,  suhu  dan  oksigen  (Gandjar et  al.,
2006).
0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 0 6 12  18  24  30  36  42  48 m ass a se l (g /m l) to tal g u la t erlaru t (g /l ) g u la re d u k si (g /l )
etan o l (g /l )
waktu (jam)
total gula terlarut SHF1 (g/l) total gula terlarut SHF2 (g/l) gula reduksi SHF1 (g/l) gula reduksi SHF2 (g/l) etanol SHF1 (g/l) etanol SHF2 (g/l)
Total  gula  terlarut  dan  gula  reduksi pada  0  jam  masing-masing  perlakuan secara  berurutan  pada  SHF1  sebesar  1,54 g/l  dan  0,12  g/l  sedangkan  pada  SHF2 sebesar  1,1  g/l  dan  0,05  g/l.  Pada  24  jam hidrolisis  total  gula  dan  gula  reduksi mengalami  peningkatan  masing-masing pada  SHF1  sebesar  4,490  g/l  dan  1,68  g/l sedangkan  SHF2  masing-masing  sebesar 4,08  g/l  dan  1,66  g/l.  Hasil  menunjukkan total  gula  terlarut  dan  gula  reduksi  pada sampel  SHF1  lebih  tinggi  dibandingkan dengan  sampel  yang  menggunakan  SHF2. Hal tersebut disebabkan A. niger mampu menghasilkan enzim selulase, xilanase dan α-amilase yang mampu memecah komponen  selulosa,  hemiselulosa  dan  pati dalam tepung kulit ubi kayu.
Profil  Fermentasi  Bioetanol  SHF1  dan SHF2 pada Media Kulit Ubi Kayu
Gula  yang  dihasilkan  saat  hidrolisis selanjutnya digunakan untuk proses fermentasi. Hasil disajikan dalam Gambar
2. Hasil  massa  sel  SHF1  pada  0  jam fermentasi  sebesar  0,271  g/ml  meningkat hingga  30  jam  fermentasi  sebesar  0,501 g/ml  dan  mulai  menurun  setelah  30  jam fermentasi  hingga  48  jam  fermentasi. Sedangkan  massa  sel  SHF2  pada  0  jam fermentasi  sebesar  0,256  g/ml  meningkat hingga  30  jam  fermentasi  sebesar  0,464 g/ml.
Etanol  yang  dihasilkan  SHF1  dan SHF2 maksimum selama 18 hingga 24 jam fermentasi. Pada sampel SHF1 etanol yang dihasilkan  pada  18  dan  24  jam  fermentasi secara  berurutan  sebesar  2,1  g/l  dan  2,58 g/l,  sedangkan pada sampel SHF2 sebesar 1,89  g/l  dan  2,15  g/l.  Hal  tersebut dikarenakan A.  niger dapat  menghasilkan enzim  selulase,  xilanase  dan  α-amilase yang dapat menghidrolisis selulosa, hemiselulosa dan pati sehingga menghasilkan  gula  yang  lebih  tinggi dibandingkan dengan T. viride yang hanya mampu  menghasilkan  enzim  selulase  dan xilanase  sehingga  komponen  yang  dapat
terhidrolisis hanya selulosa dan hemiselulosa.
Gambar  2. Hubungan  antara  peningkatan  massa sel  (g/ml),  peningkatan  etanol  (g/l), penurunan  jumlah  total  gula  terlarut (g/l)  dan  penurunan  gula  reduksi  (g/l) selama  proses  fermentasi  bioetanol SHF1  dan  SHF2  pada  media  kulit  ubi kayu.
Jumlah  etanol  pada  masing-masing sampel mulai megalami penurunan setelah 24 hingga 48 jam fermentasi. Hal  tersebut menunjukkan  dengan  semakin  lamanya fermentasi  akan  meningkatkan  jumlah alkohol  yang  dihasilkan,  namun  lamanya proses fermentasi memiliki batas maksimum  (Judoamidjojo et  al .,  1992). Menurut  Mayzuhroh  (2015),  penurunan kadar  alkohol  disebabkan  ketersediaan substrat  berupa  gula  mulai  menurun  dan telah  habis  digunakan,  selain  itu  yeast yang  digunakan  telah  memasuki  fase kematian  sehingga  kemampuan  yeast untuk  mengkonfersi  gula  menjadi  etanol menurun.
0,2 0,25 0,3 0,35 0,4 0,45 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 0 6 12  18  24  30  36  42  48 m ass a se l (g /m l)
to tal g u la t erlaru t (g /l su p ern atan ) g u la re d u k si (g /l su p ern atan ) eta n o l (g /l su p ern ata n ) waktu (jam) Total Gula Terlarut SSF Gula Pereduksi SSF Etanol SSF Massa sel SSF

## Profil Fermentasi Bioetanol Metode SSF Pada Media Kuli Ubi Kayu
Hasil menunjukkan
terjadi
peningkatan massa sel yang diikuti dengan meningkatnya  total  gula  terlarut,  gula reduksi dan etanol ( Gambar 3 ).
Gambar  3. Hubungan  antara  peningkatan  dan penurunan  massa  sel  (g/ml),  total gula  terlarut  (g/l),  gula  reduksi  (g/l) dan  etanol  (g/l)  selama  fermentasi bioetanol  secara  SSF  pada  media kulit ubi kayu
Massa  sel  dan  etanol  mengalami peningkatan  hingga  18  jam  fermentasi secara  berurutan  sebesar  0,401  g/ml  dan 2,93 g/l, sedangkan peningkatan total  gula terlarut  dan  gula reduksi terjadi hingga 12 jam  fermentasi  masing-masing  sebesar 3,41  g/l  dan  0,44  g/l.  Hal  tersebut menunjukkan bahwa A. niger dan T. viride mampu  tumbuh  dan  berkembang  biak secara bersamaan sehingga mampu mengkonversi komponen selulosa, hemiselulosa dan pati kulit ubi kayu untuk menghasilkan  gula  dan New  Aule  Instant Dry  Yeast langsung  menggunakan  gula untuk  menghasilkan  metabolisme  berupa etanol. Konsentrasi etanol meningkat dapat disebabkan karena dalam proses fermentasi terjadi proses pemecahan disakarida  dan  hidrolisa  polisakarida
menjadi  monosakarida  atau  gula-gula reduksi  yang  dapat  dimanfaatkan  oleh khamir (Wignyanto et al., 2001).
Pada Gambar  3 juga  menunjukkan bahwa  massa  sel,  total  gula  terlarut,  gula reduksi  dan  etanol  mengalami  penurunan hingga  48  jam  fermentasi.  Penurunan massa  sel  dan  etanol  pada  24  jam  hingga 48 jam disebabkan karena mikroorganisme mulai  memasuki  fase  kematian  sehingga kemampuan  untuk  menghasilkan  gula  dan etanol  menurun.  Menurut  Faiqoh  (2017), penurunan massa sel menyebabkan kemampuan A.  niger dan T.  viride dalam mengkonversi  selulosa,  hemiselulosa  dan pati semakin menurun sehingga  gula  yang dihasilkan mengalami penurunan.
Kinetika  Fermentasi  Bioetanol  Secara SHF  dan  SSF  pada  Media  Kulit  Ubi Kayu
Berdasarkan  data  pada Tabel  1 dan Tabel  2 dapat  diketahui  bahwa  nilai growth yield pada metode SSF lebih besar daripada  nilai growth  yield pada  metode SHF1  dan  SHF2.  Hal  tersebut  disebabkan karena  pada  metode  SSF  menggunakan  3 kultur  secara  langsung  sehingga  mampu meningkatkan populasi  yeast  secara  cepat, sehingga growth  yield pada  metode  SSF lebih  tinggi.  Selain  itu, growth  yield berkaitan  dengan  jumlah  konsumsi  gula oleh  yeast.  yeast  dengan  jumlah  konsumsi gula yang lebih kecil mampu menghasilkan growth  yield yang  lebih tinggi (Mayzuhroh, 2015).
Nilai  laju  konsumsi  gula  reduksi diperoleh dari perbandingan antara konsumsi  gula  reduksi  selama  fermentasi dengan lama fermentasi yang berlangsung. Laju  konsumsi  pada  metode  SHF1  dan SHF2 hingga akhir fermentasi lebih tinggi dibandingkan  dengan  metode  fermentasi SSF.  Ketersediaan  substrat  berupa  gula reduksi  pada  media  fermentasi  berkaitan dengan peningkatan populasi yeast.
Jumlah produktivitas etanol merupakan  hasil  perbandingan  antara konsentrasi  etanol  yang  dihasilkan  dengan
Produksi Bioetanol secara SHF dan SSF Menggunakan Aspergillus niger… Jurnal Agroteknologi Vol. 11 No. 01 (2017)
lama  waktu  fermentasi.  Produktivitas etanol  dapat  menunjukkan  laju  produksi etanol  oleh  mikroba  yang  dihasilkan  per satuan  waktu.  Penentuan  produktivitas etanol  pada  masing-masing  perlakuan dilakukan  pada  fase  logaritmik  atau eksponensial  fermentasi.  Pada Tabel  1 dapat  dilihat  bahwa  nilai  produktivitas etanol  maksimum  SHF1  dan  SHF2 tercapai saat fermentasi  24 jam sedangkan pada Tabel  2 menunjukkan  produktivitas etanol  maksimum  SSF  tercapai  saat fermentasi  18  jam  dan  masing-masing mengalami penurunan setelah lama fermentasi  tersebut.  Penurunan  tersebut dikarenakan  ketersediaan  gula  dalam substrat  menurun,  sehingga    kebutuhan nutrisi  yeast  dalam  memproduksi  etanol tidak dapat tercukupi secara optimal.
Produktivitas yang dihasilkan masing-masing metode menunjukkan produktivitas  SSF  lebih  tinggi  dibanding dengan produktivitas SHF1 dan SHF2. Hal
tersebut  diduga  karena  pada  metode  SSF menggunakan  3  kultur  campuran  secara simultan  yang  mampu  meningkatkan populasi pertumbuhan  yeast sehingga gula reduksi  yang  terkonversi  menjadi  etanol lebih  banyak.  Menurut  Mayzuhroh  (2015) semakin  banyak  jumlah  populasi  yeast maka  metabolit  berupa  enzim  alkohol dehidrogenase yang dihasilkan akan semakin  banyak,  sehingga  etanol  yang dihasilkan semakin tinggi.
Berdasarkan Tabel  1 dan Tabel  2 dapat  diketahui  bahwa  nilai  efisiensi fermentasi  SHF1  dan  SHF2  menghasilkan nilai  yang  berkisar  67%.  Sedangkan  pada SSH menghasilkan nilai efisiensi fermentasi berkisar 83%. Hal ini menunjukkan  bahwa  fermentasi  secara SSF  dilakukan  secara  optimal  karena menggunakan  3  kultur  campuran  secara simultan  yang  mampu  mengkonversi  gula mencadi  etanol  secara  optimal  dengan waktu yang lebih singkat.
Tabel 1. Kinetika fermentasi bioetanol SHF1 dan SHF2 pada media kulit ubi kayu
Lama Fementasi (Jam) Populasi Yeast (Log cfu/ml) Laju Konsumsi (g/l/jam) Growth rate (/jam) Growth yield (log cfu/ml/g/l) Produktivitas (g/l/jam) Y p/s (g etanol/g gula) Efisiensi (%) SHF1  SHF2  SHF1  SHF2  SHF1  SHF2  SHF1  SHF2  SHF1  SHF2  SHF1 SHF2  SHF1  SHF2 0 8,32 8,37 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 8,55 8,47  0,023 0,014 0,09 0,04  1,25  1,59  0,21  0,16 1,202 2,52 118,7 298,7 12 8,67 8,65  0,023 0,014 0,07 0,05  1,32  1,17  0,13  0,12 0,19 0,55 22,26 64,89 18 8,74 8,72  0,032 0,017 0,05 0,04  0,73  1,15  0,12 0,1 0,44 0,79 51,07 93,77 24 9,07 9,04  0,028 0,021 0,07 0,06  1,13  1,33  0,11  0,09 0,58 0,58 67,85 67,95
Tabel 2. Kinetika fermentasi bioetanol secara SSF pada kulit ubi kayu Waktu Populasi Yeast (Log cfu/ml) Laju Konsumsi (g/l/jam) Growth rate (/jam) Growth yield (log cfu/ml/g/l) Etanol (g/l) Produktivitas (g/l/jam) Y p/s (g etanol/g gula) Efisiensi (%) 0 8,38 0,000 0 0 0 0 0 0 6 8,65 0,000 0,1 0 1,28 0,21 0 0 12 8,77 0,000 0,08 0 1,9 0,16 0 0 18 9,1 0,006 0,09 6,44 2,93 0,16 1,45 83,54 24 9,01 0,009 0,06 3,25 2,59 0,11 1,4 80,71

## KESIMPULAN
Metode  fermentasi  secara  SHF1 mampu  menghasilkan  etanol  yang  lebih tinggi  dibandingkan  SHF2.  Penggunaan metode  SSF  mampu  menghasilkan  etanol lebih  tinggi  yaitu  sebesar  2,93  g/l  dengan waktu  fermentasi  lebih  singkat  yaitu  18 jam  dibandingkan  dengan  metode  SHF1 dan SHF2 yang hanya mampu menghasilkan etanol masing-masing sebesar 2,58 g/l dan 2,15 g/l dengan waktu yang dibutuhkan lebih lama yaitu 48 jam.

## DAFTAR PUSTAKA
Arindhani,  S.  2015.  “Produksi  Bioetanol Menggunakan Ragi Roti Instan Dengan  dan  Tanpa  Pemberian  Aerasi pada Media Molases”. Skripsi. Universitas Jember, Jember.
Artiyani, A., E. S. Soedjono. 2011.  Bioetanol dari  limbah  kulit  singkong  melalui proses hidrolisis dan fermentasi
dengan Saccharomyces  cerevisiae . Prosiding Seminar Nasional Manajemen  Teknologi  XIII. FTSP
Institut Teknologi Sepuluh Nopember,
Surabaya.
Assadam,  A.  2014.  “Delignifikasi  Secara Kimia  Kopi  Robusta  Hasil  Samping Pengolahan Kopi Metode Kering Sebagai Substrat  Bioetanol”.  Skripsi.  Universitas Jember, Jember.
Badan  Pusat  Statistik.  2015. Produksi  Ubi Kayu  Sektor  Pertanian  di  Indonesia Thun  2015. Badan  Pusat  Statistik, Jakarta.
BPTP.  2015. Outlook  Energi  Indonesia 2015. Pusat Teknologi Pengembangan Sumberdaya Energi, Jakarta. Batubara,  R.  2006.  “Teknologi  Pengawetan Kayu  Perumahan  dan  Gedung  dalam Upaya  Pelestarian  Hutan”.  Karya Tulis. Departemen Kehutanan, Fakultas Pertanian, Universitas Sumatera Utara, Medan.
Faiqoh, H. 2017.  “Efisiensi Hidrolisis Tepung Kulit  Ubi  Kayu  Menggunakan T. viride dan A. Niger ”.  Skripsi. Universitas Jember, Jember.
Fengel, D. & Wegener, G. 1995. Kimia Kayu, Reaksi Ultrastruktur : Terjemahan
Hardjono, S. UGM Press, Yogyakarta.
Gandjar, Indrawati, Wellyzar Sjamsuridzal dan Ariyanti Oetari, 2006 . Mikologi Dasar dan Terapan . Yayasan Obor
Indonesia, Jakarta.
International  Annual  Energy  Outlook.  2013. World  Total  Energy  Consumption  by Region  and  Fuel. Online.  DOE/EIA- 0383(2013).
Judoamidjojo , M., Said, E. G., dan Darwis, A. A. 1992. Teknologi Fermentasi . Rajawali Press, Jakarta.
Kadita,  F.D.  2016.  “Produksi  Bioetanol Menggunakan  Ragi  Komersial New Aule  Instant  Dry  Yeast pada  Media Molases  secara Fed-Batch ”.  Skripsi. Universitas Jember, Jember.
Khaidir, Setyaningsih, Haerudin. 2012.
Dehidrasi bioetanol menggunakan zeolit alam termodifikasi . IPB, Bogor.
Mayzuhroh,  A.  2015.  “Produksi  Bioetanol Menggunakan  Ragi  Alkohol  Instan (Angel  Alcohol  Active  Dry  Yeast  dan New  Aule  Alcohol  Yeast) dengan  dan Tanpa  Pemberian  Aerasi  dan  Agitasi
Pada Media Molasses”. Skripsi.
Universitas Jember, Jember.
Nakasaki, K., and Adachi, T. 2003.  Effects of intermittent  addition  of  cellulase  for production  of  L-lactic  acid  from wastewater  sludge  by  simultaneous saccharification and fermentation. Journal Biotechnology Bioengineering , pp: 263–270. Olofsson,  K.,  Rudolf,  A.,  Lidén,  G.  2008. Designing
simultaneous saccharification  and  fermentation  for improved  xylose  conversion  by  a recombinant  strain  of Saccharomyces cerevisiae . Jurnal Biotechno., 134:112-120.
Taherzadeh,  M.  J.,  dan  K.  Karimi.  2007. “Acid-Based Hydrolysis Prosesses For
Ethanol From Lignocellulosic Materials” . A Review. Isfahan University of Technology : Defartement of chemical engineering.
Wignyanto,  Suharjono,  dan  Novita.  2001. Pengaruh  konsentrasi  gula  reduksi  sari hati nanas dan inokulum Saccharomyces cerevisiae pada  fermentasi etanol.
Jurnal  Teknologi  Pertanian ,  2  (1):  68- 77.