## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i1.3176

## Mekanisme Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Kemangi (Ocimum basilicum L.) terhadap Salmonella typhi
Nasri Nasri 1* , Vera Estefania Kaban 1 , Denny Satria 2 , Hariyadi Dharmawan Syahputra 1 , Zulmai Rani 3
1 Program Studi Sarjana Farmasi, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan (STIKes) Senior Medan, Sumatera Utara, Indonesia.
2 Departemen Biologi Farmasi, Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, Medan, Indonesia.
3 Program Studi Sarjana Farmasi, Fakultas Farmasi Universitas Muslim Nusantara Al-Washliyah, Medan, Indonesia. Email: 1* nasri32.xb@gmail.com, 2 erakaban20@gmail.com, 3 dennysatria@usu.ac.id, 4 dharmawanhariyadi@gmail.com,
5 zulmairani@umnaw.ac.id
Abstrak - Penyakit menular adalah kondisi yang dapat disebabkan oleh  berbagai organisme yang berbeda, termasuk bakteri, virus, jamur, dan parasit. Demam tifoid merupakan salah satu contoh penyakit infeksi yang sering menyebabkan pertahanan tubuh diserang. Demam yang terkait dengan tifus adalah penyebab utama kematian di seluruh dunia. Infeksi bakteri Salmonella typhi dianggap sebagai salah satu penyebab potensial demam tifoid. Ketika antibiotik digunakan untuk mengobati infeksi bakteri, ada risiko bakteri menjadi kebal  terhadap pengobatan.  Dalam  kehidupan  sehari-hari,  daun  kemangi  dimanfaatkan baik  sebagai  lalapan  maupun  lalapan.  Sifat antibakteri daun kemangi belum sepenuhnya terungkap. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menyelidiki berbagai mekanisme yang terlibat  dalam  aktivitas  antibakteri.  Mekanisme  ini  meliputi  kebocoran  sel,  konsentrasi  penghambatan  minimum,  konsentrasi pembunuhan  minimum,  dan  aktivitas  antibiofilm.  Konsentrasi  hambat  minimum  (MIC)  ditentukan  dengan  metode  difusi  agar, konsentrasi  pembentuk  biofilm  minimum  (MBC)  ditentukan  dengan  metode  pewarnaan,  dan  kebocoran  sel  ditentukan  dengan spektrofotometri  UV-VIS  pada  panjang  gelombang  260  nm  (DNA)  dan  280  nm  (protein).  Selain  itu,  pembentukan  anti-biofilm ditentukan  dengan  pelat  mikrotiter  dan  pewarnaan  gentian  violet.  Pada  kategori  sedang,  uji  nilai  MIC  menunjukkan  konsentrasi 0,3125% dengan nilai zona hambat 6,80 0,05 mm. Hasil ini diperoleh dari nilai MIC. Karena tidak ada pertumbuhan bakteri yang terdeteksi pada  media yang  digores, KBM  diperoleh  pada  konsentrasi  10%.  Pada  panjang gelombang 260  dan  280  nanometer,  sel kebocoran menunjukkan serapan absorbansi. Persentase aktivitas biofilm yang terukur saat konsentrasi dinaikkan menjadi 25% adalah 44,82%. Kesimpulannya, ekstrak etanol daun kemangi memiliki kemungkinan mekanisme antibakteri terhadap Salmonella typhi.
Kata Kunci: KHM; KBM; Kebocoran Sel; Antibiofilm; Salmonella typhi
Abstract - Infectious diseases are conditions that can be brought on by a variety of different organisms, including bacteria, viruses, fungi, and parasites. Typhoid fever is an example of an infectious disease that frequently causes the body's defenses to come under attack. The fever associated with typhoid is a leading cause of death around the world. Infection with the bacterium Salmonel la typhi is considered to be one of the potential causes of typhoid fever. When antibiotics are used to treat bacterial infections, there is a risk that the bacteria will become resistant to the medication. In day-to-day life, basil leaves are utilized both as a cooked vegetable and as a fresh vegetable. The antibacterial properties of kemangi leaves have yet to be fully uncovered. The purpose of this study was to investigate  the  various  mechanisms  that  are  involved  in  antibacterial  activity.  These  mechanisms  include  cell  leakage,  minimum inhibitory concentration, minimum killing concentration, and antibiofilm activity. The minimum inhibitory concentration (MIC) was determined  with  the  agar  diffusion  method, the  minimum  biofilm  forming concentration  (MBC)  was determined with the  staining method, and cell leakage was determined with UV-VIS spectrophotometry at wavelengths of 260 nm (DNA) and 280 nm (protein). Additionally, the formation of anti-biofilms was determined with microtiter plates and gentian violet staining. In the moderate category, the MIC value tests showed a concentration of 0.3125% with an inhibition zone value of 6.80 0.05 mm. These results were obtained from the MIC value. Because there was no detectable bacterial growth on the streaked medium, KBM was obtained at a concentration of 10%. At wavelengths of 260 and 280 nanometers, leakage cells show absorbance absorption. The percentage of biofilm activity that is measured when the concentration is increased to 25% is 44.82%. In conclusion, the ethanol extract of basil leaves possesses a possible antibacterial mechanism against Salmonella typhi. This was discovered through testing.
Keywords : MIC; MBC; Leakage Cell; Antibiofilm; Salmonella typhi

## 1. PENDAHULUAN
Penyakit menular merupakan tantangan paling signifikan yang dihadapi umat manusia. Pengobatan antibiotik seringkali berhasil menyembuhkan penyakit menular bila diberikan dengan dosis dan frekuensi yang tepat. Mikroorganisme, seperti bakteri, adalah akar penyebab salah satu penyakit menular yang paling tersebar luas di dunia (Press, 2022). Demam tifoid merupakan  salah  satu  penyakit  infeksi  yang  sering  menyerang  pertahanan  yang  dibangun  dalam  tubuh  manusia.  Ada sekitar 12,6 juta kasus demam tifoid dan diperkirakan 600.000 kematian di seluruh dunia setiap tahunnya. Demam tifoid merupakan salah satu penyebab utama kematian di dunia (I. E. Purba et al., 2016). Asia adalah salah satu populasi bagi hampir 80% dari semua kasus yang dilaporkan ini. Salmonella typhi merupakan bakteri gram negatif oportunistik yang diketahui menyebabkan demam tifoid. Bakteri ini bertanggung jawab atas penyakit ini. Endotoksin merupakan salah satu racun  yang  dapat  dihasilkan  oleh  bakteri Salmonella typhi (Nasri,  Kaban,  Syahputra,  et  al.,  2022).  Hal  ini  dapat menyebabkan gangguan pada eritrosit, leukosit, trombosit, hematokrit, dan hemoglobin (D. Purba & Aritonang, 2022). Gejala klinis penyakit demam tifoid ini adalah demam tinggi  pada Minggu  ke 2 dan ke 3 dengan disertai gejala yang timbul seperti anoreksia, malaise, nyeri otot, sakit kepala, batuk, bradikardia dan konstipasi (Imara, 2020).
Terapi antibiotik telah digunakan dalam pengobatan infeksi ini, namun metode pengobatan baru diperlukan untuk meminimalkan  jumlah  penggunaan  antibiotik  yang  diperlukan  untuk  mencegah  berkembangnya  resistensi  antibiotik. Dalam konteks perkembangan baru ini, diperlukan inovasi baru dalam pemanfaatan sumber tumbuhan yang berpotensi sebagai senyawa antibakteri baru dan memiliki potensi berkhasiat (Negara, 2014). Tanaman obat adalah salah satu jenis tumbuhan atau tanaman yang sebagian atau seluruh bagian tanaman berkhasiat menghilangkan atau menyembuhkan suatu

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i1.3176
penyakit dan keluhan rasa sakit pada bagian atau organ tubuh manusia  (Syam, 2022). Beberapa penelitian sebelumnya telah  memaparkan  beberapa  tumbuhan  yang  berpotensi  untuk  dimanfaatkan  sebagai  antibakteri.  Salah  satu  tumbuhan tersebut  adalah  kemangi  yang  dimanfaatkan  daunnya.  Minyak  atsiri  dapat  ditemukan  berlimpah  di tanaman  kemangi, yang termasuk dalam famili Lamiaceae . Menurut pengalaman pribadi saya di Indonesia, kemangi banyak tersedia baik di pasar tradisional maupun pasar modern (Sari et al., 2022).
Dalam kehidupan normal, kemangi digunakan baik sebagai  sayuran maupun sebagai  ramuan segar dan bumbu. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kemangi dapat digunakan sebagai antijamur terhadap Fusarium oxysporum Schlecht (Berlian  et  al.,  2016),  sebagai  antidiabetes  (Vijayakone,  2012),  dan  sebagai  antibakteri  terhadap Echerichia coli dan Pseudomonas aeruginosa (Lubis et al., 2022). Itulah beberapa manfaat daun kemangi. Menurut penelitian, senyawa yang terdapat pada daun kemangi antara lain minyak atsiri, alkaloid, saponin, flavonoid, steroid, tanin, dan fenol. Selain itu, daunnya  mengandung  tanin  (Larasati  &  Apriliana,  2016).  Dengan  adanya  penelitian  ini  akan  memberikan  informasi akademik dalam pemanfaatan daun kemangi yang sedari dulu telah digunakan oleh masyarakat serta membuktikan bahwa salah satu efek potensial Kesehatannya sebagai antibakteri.

## 2. METODOLOGI PENELITIAN

## 2.1 Desain Penelitian
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental  dilakukan  di  laboratorium  untuk  menentukan  konsentrasi  hambat minimum, konsentrasi bunuh minimum, kebocoran sel, dan pengujian anti-biofilm.

## 2.2. Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah alat gelas seperti cawan petri, gelas beaker, dan erlenmeyer; gelas ukur; tabung reaksi; oven; autoklaf; batang pengaduk; pinset; spatula; cakram kertas; dan spektrofotometri UV-Vis.

## 2.3 Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah media uji mikrobiologi ( Nutrient Agar , Muller Hinton Agar , dan Muller Hinton Broth ), Phospate buffer saline , dimetilsulfoksida, etanol 96%, dan daun kemangi.

## 2.4 Pengolahan Sampel

## 2.4.1 Persiapan Sampel
Daun kemangi diperoleh dari pasar di Jalan Jamin Ginting. Kemudian dibersihkan dan dilakukan pencucian. Daun yang telah dicuci bersih lalu ditiriskan dan dikeringkan dilemari pengering pada suhu 40ᵒC sampai diperoleh daun yang rapuh (Muhammad et al., 2022). Daun yang sudah kering dihaluskan dengan blender dan siap untuk di ekstraksi (Syahputra et al., 2022).

## 2.4.2 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Kemangi
Metode maserasi digunakan untuk proses ekstraksi. Cara ini dilakukan dengan merendam 500 g  serbuk daun kemangi dalam  75  bagian  etanol  96%  yang  setara  dengan  3500  mililiter  selama  lima  hari  sambil  sesekali  diaduk.  Setelah perendaman awal selesai kemudian disaring sebelum menjalani perendaman kedua dengan 25 bagian pelarut sebanyak 1500 mL untuk jangka waktu dua hari. Berikunya direndam dan disaring. Setelah penyaringan, kedua filtrat dicampur bersama  dan  dipekatkan  menggunakan  rotary  vacuum  evaporator  untuk  menghasilkan  ekstrak  kental  yang  kemudian disiapkan untuk digunakan dalam pengujian antibakteri (Dalimunthe et al., 2022).

## 2.5 Pembuatan Larutan Konsentrasi Uji
Larutan uji yang telah disiapkan memiliki konsentrasi yang bervariasi antara 50%, 25%, 10%, 5%, 2,5%, 1,25%, 0,625%, dan 0,3125%. Persiapan setiap larutan untuk konsentrasi uji didasarkan pada persen berat per volume. Setiap konsentrasi kemudian diteteskan ke cakram kertas, dan proses dibiarkan tidak terganggu selama lima belas menit sehingga larutan uji dapat diserap sepenuhnya (Nasri, Kaban, Gurning, et al., 2022).

## 2.6 Sterilisasi Alat dan Bahan
Bahan  yang  digunakan  disterilkan  dengan  metode  panas  basah  dalam  autoklaf  dengan  suhu  121ᵒC  selama  15  menit, sedangkan alat yang  digunakan disterilkan dengan metode panas kering dalam oven dengan suhu 170ᵒC selama  1 jam (Lay, 1994).

## 2.7 Persiapan Inokulum Bakteri Uji
Untuk mendapatkan jumlah bakteri uji sebesar 10 6 CFU/mL yang setara dengan pengukuran T 25% pada spektrofotometri UV-Vis bila dilakukan pada panjang gelombang 580 nm, inokulum bakteri uji diinkubasi selama 24 jam (Ditjen, 1979).

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i1.3176

## 2.8 Penentuan Kadar Hambat Minimum
Sebanyak 100 µL inokulum bakteri uji dipipet dan dimasukkan dalam cawan petri steril. Selanjutnya, 15 mL media MHA diukur, dituangkan ke dalam cawan petri, dan campuran dihomogenkan. Setelah dihomogenkan, sebaiknya didiamkan agar menjadi padat. Cakram kertas yang berisi larutan uji konsentrasi kemudian diletakkan di atas permukaan media dan dibiarkan menyerap. Setelah itu diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37ᵒC. Kaliper digital digunakan untuk mengamati zona bening yang terbentuk setelah proses inkubasi selesai (Rani et al., 2022).

## 2.9 Penentuan Kadar Bunuh Minimum
Kadar bunuh minimum ditentukan secara kualitatif dengan memeriksa ada tidaknya pertumbuhan bakteri pada swab di permukaan media baru. Hal ini dilakukan untuk memastikan bahwa hasilnya akurat. Diameter zona bening yang terbentuk diukur  dan  kemudian  di  cuplik  dengan  kapas swab  s teril,  kemudian  usap  diatas  permukaan  media  baru.  Kemudian diinkubasi di inkubator, dan pertumbuhan bakteri dipantau. Temuan ini digambarkan sebagai positif atau negatif untuk mengonfirmasi ada tidaknya pertumbuhan bakteri (Nasri et al., 2 021).

## 2.10 Pengukuran Aktivitas Kebocoran Sel (DNA dan Protein)
Setelah mengkultivasi  bakteri selama 24 jam dalam  10 mililiter media NB, inokulum bakteri disentrifugasi  pada 3500 rpm selama 20 menit. Setelah supernatan dibuang, pelet dicuci dua kali dengan phosphate buffer saline pH 7,0; kemudian disuspensikan  kembali  dalam  10  mL  buffer  yang  sama.  Selain  itu,  beberapa  sampel  ekstrak  daun  kemangi  dengan konsentrasi 1,25%; 2,5%; 5%; 10%; dan 25% ditambahkan ke dalam suspensi. Setelah itu dimasukkan ke dalam inkubator selama 24 jam dengan suhu 37ᵒC. setelah inkubasi dilakukan sentrifugasi kembali pada kecepatan 3500 rpm selama 20 menit.  Supernatan  dipisahkan  dari  pelet.  Untuk menentukan  absorbansi  supernatan  pada  panjang  gelombang  260  dan 280nm, digunakan spektrofotometer UV-VIS. Pengukuran kandungan nitrogen asam nukleat dilakukan dengan panjang gelombang 260 nm, sedangkan pengukuran kandungan nitrogen protein sel dilakukan dengan panjang gelombang 280 nm (Nasri et al., 2021; Satria et al., 2022).

## 2.11 Pengujian Antibiofilm
Pelat enam sumur digunakan untuk uji anti-biofilm yang dilakukan. Eksperimen dilakukan dengan menggunakan rentang konsentrasi, dimulai dengan 1,25%; 2,5%; 5%; 10%, dan 25%. Setelah penambahan 0,1 mL larutan suspensi bakteri, 5 mL media cair ( Nutrient Broth ), dan suspensi bakteri Salmonella typhi , well plate ditempatkan dalam inkubator selama 24 jam. Setelah diinkubasi, pelat sumur dicuci dengan air suling, larutan kristal violet ditambahkan ke dalam sumur. Ini dilakukan setelah piring dibersihkan. Setelah itu well plate dibersihkan dengan akuades, kemudian ditambahkan etanol 96%.  Dimungkinkan  untuk  mengukur  absorbansi  atau optical  density dengan  menggunakan  spektrofotometer  UV/Vis yang ditetapkan pada Panjang gelombang 600 nm (Satria et al., 2022).
Rumus yang digunakan untuk menghitung persentase penurunan pembentukan biofilm adalah sebagai berikut (1):
𝑂𝐷 𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 𝑛𝑒𝑔𝑎𝑡𝑖𝑓−𝑂𝐷 𝑡𝑟𝑒𝑎𝑡𝑚𝑒𝑛𝑡 𝑂𝐷 𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 𝑛𝑒𝑔𝑎𝑡𝑖𝑓
𝑥 100%
(1)

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1 Hasil Penentuan Kadar Hambat Minimum
Hasil  pembentukan  zona  hambat  di  sekitar  cakram  kertas  dinyatakan  dalam  pengujian  untuk  menentukan  konsentrasi hambat minimum  (Amalia et  al., 2018). Hasil percobaan yang mengukur diameter zona hambat diketahui bahwa nilai konsentrasi  hambat minimum  pada konsentrasi  0,3125%  dengan nilai  diameter zona hambat sebesar  6,80  ± 0,05 mm. Temuan ini berasal dari data yang dikumpulkan selama pengujian. Pada konsentrasi 50%, zona hambat terbesar memiliki diameter  sebesar 11.53  ±  0.02  mm. Tabel  1  menampilkan  temuan  yang  diperoleh  dari  penyelidikan  tingkat penghambatan minimum.
Tabel 1. Hasil penentuan kadar hambat minimum ekstrak etanol daun kemangi terhadap Salmonella typhi
No Konsentrasi (%b/v) Diameter Zona Hambat (X ± SD mm) Kategori Aktivitas Indeks 1 Kontrol Negatif 6.00 ± 0.00 Tidak ada respon 0.28 ± 0.03 2 0.3125 6.80 ± 0.05 Sedang 0.32 ± 0.05 3 0.625 7.21 ± 0.07 Sedang 0.34 ± 0.02 4 1.25 7.86 ± 0.09 Sedang 0.36 ± 0.07 5 2.5 8.42 ± 0.12 Sedang 0.39 ± 0.05 6 5 9.71 ± 0.11 Sedang 0.45 ± 0.02

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i1.3176
No Konsentrasi (%b/v) Diameter Zona Hambat (X ± SD mm) Kategori Aktivitas Indeks 7 10 10.28 ± 0.04 Kuat 0.47 ± 0.08 8 25 10.92 ± 0.03 Kuat 0.50 ± 0.03 9 50 11.53 ± 0.02 Kuat 0.53 ± 0.07 10 Kontrol Positif 21.42 ± 0.06 Sangat kuat 1.00 ± 0.00
Berdasarkan tabel 1, ekstrak etanol daun kemangi berpotensi untuk digunakan sebagai antibakteri dalam proses penghambatan pertumbuhan bakteri Salmonella typhi . Hasil pada konsentrasi uji juga ditunjukkan adanya peningkatan diameter  zona  hambat  seiring  dengan  peningkatan  konsentrasi  (Christoper  et  al.,  2018).  Hal  ini  dikarenakan  adanya perbedaan konsentrasi yang mempengaruhi jumlah atau konsentrasi larutan uji yang terkandung di dalam kertas cakram yang  sedang  dievaluasi.  Sesuai  dengan  temuan  penelitian  sebelumnya,  terdapat  korelasi  antara  peningkatan  variasi konsentrasi dengan peningkatan diameter zona hambat yang terbentuk (Siregar et al., 2012).
Menurut  (Davis  dan  Stout  (1971),  ada  tiga  klasifikasi  berbeda  yang  dapat  digunakan  untuk  mengkategorikan respon antibakteri. Salah satu klasifikasi tersebut menyatakan bahwa tidak ada respon jika diameter zona hambat kurang dari 6 milimeter. Jika zona hambat yang terbentuk memiliki diameter antara 6 sampai 10 milimeter, hal ini menunjukkan kategori sedang. Jika nilai zona hambat antara 10 sampai 20 milimeter, maka kategori tersebut dianggap kuat. Sebaliknya, jika diameter zona hambat lebih dari 20 milimeter, maka aktivitasnya dianggap sangat kuat. Berdasarkan hasil penelitian, konsentrasi  ekstrak etanol daun kemangi yang berkisar antara 0,3125% sampai 0,625%, 1,25% sampai  2,5%, dan 5% masuk  dalam  kategori  memiliki  tingkat  aktivitas  sedang.  Selain  itu,  ia  menunjukkan  sifat  kategori  yang  kuat  pada konsentrasi masing-masing 10%, 25%, dan 50%.
Nilai indeks aktivitas dapat dihitung dengan membandingkan zona hambat yang  terbentuk pada masing-masing konsentrasi dengan zona hambat yang terbentuk pada kontrol positif yang digunakan. Perbandingan ini akan memberikan data yang diperlukan untuk perhitungan. Perhitungan ini bertujuan untuk menentukan seberapa besar perbedaan antara masing-masing  konsentrasi  dan  kontrol  positif  dalam  persentase  aktivitas  indeks.  Apabila  nilai  aktivitas  indeks menunjukkan angka 1 maka dapat ditarik kesimpulan bahwa potensi konsentrasi uji sebanding dengan potensi kontrol positif (Kuspradini et al., 2019). Dalam contoh khusus ini, indeks aktivitas ditemukan 0,53 pada konsentrasi  tertinggi, yaitu  50%.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  aktivitas  ekstrak  etanol  daun  kemangi  sebesar  53%  mendekati  nilai  aktivitas kontrol positif.

## 3.2 Hasil Penentuan Konsentrasi Bunuh Minimum
Tingkat  konsentrasi  bunuh  minimum  ditentukan dengan  menggunakan  metode  penggoresan  pada media  pertumbuhan bakteri baru. Ini memungkinkan untuk hasil yang lebih akurat. Hasil konsentrasi bunuh minimum dapat ditentukan dengan diamati  ada  atau  tidaknya  pertumbuhan  bakteri  (Haqi,  2018).  Pada  percobaan  ini  ditemukan  bahwa  konsentrasi  10% menghasilkan nilai minimum untuk konsentrasi membunuh. Tidak terdapat pertumbuhan bakteri pada permukaan media yang  telah  digores  dan  diambil  sampel  zona  hambat  yang  terbentuk  pada  konsentrasi  10%.  Meskipun  fakta  bahwa konsentrasi yang lebih rendah menunjukkan adanya pertumbuhan bakteri. Tabel 2 menampilkan temuan dari pengujian yang dilakukan.
Tabel 2. Hasil penentuan kadar bunuh minimum ekstrak etanol daun kemangi terhadap Salmonella typhi
No  Konsentrasi (%b/v)  Hasil
1 Kontrol Negatif +++++ 2 0.3125 ++++ 3 0.625 ++++ 4 1.25 +++ 5 2.5 ++ 6 5 ++ 7 10 - 8 25 - 9 50 - 10 Kontrol Positif -
Keterangan: (++++/+): sangat banyak; (+++): banyak, (++): sedikit, dan (-): tidak ada pertumbuhan

## 3.3 Hasil Pengukuran Aktivitas Kebocoran Sel (DNA dan Protein)
Pengukuran  pada  spektrofotometri  UV-VIS,  kebocoran  sel  diukur  pada  panjang  gelombang  260  nm  dan  280  nm, menunjukkan peningkatan zat yang disekresikan oleh sel bakteri (Gambar 1) (Musdja, 2012). Hasil pada kasus kontrol negatif, dimana suspensi bakteri tidak diberi perlakuan dan hanya diuji dengan blanko DMSO, tidak menunjukkan adanya absorbansi dalam pengukuran yang dilakukan dengan spektrofotometri. Di sisi lain, kontrol positif memang menunjukkan absorbansi dalam pengukuran yang dilakukan pada 260 nm dan 280 nm pada konsentrasi mulai dari 1,25% hingga 25%. Nilai rasio pengukuran 260nm dibandingkan dengan rasio pengukuran 280nm ditunjukkan pada Gambar 2. Kemurnian

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i1.3176
DNA dan Protein yang teradsorpsi dapat ditentukan berdasarkan nilai rasio 260/280 (Widiarthi et al., 2014). Kebocoran ini merupakan tanda umum bahwa integritas membran sel telah terganggu. Secara khusus, ini menunjukkan bahwa sel mengeluarkan cairan. Dapat disimpulkan bahwa sel DNA dan protein yang diekstraksi memiliki tingkat kemurnian yang tinggi jika nilai rasio 260/280nm berada pada kisaran 1,8 hingga 2,0 (Sophian & Yustina, 2023). Karena hasil pengukuran masih berada pada nilai yang kurang dari 1,8 maka dapat ditarik kesimpulan bahwa masih terdapat kontaminan senyawa protein yang lebih dominan, namun tetap menunjukkan adanya cairan sel yang keluar akibat adanya kerusakan membran sel  bakteri  akibat  dari  terapi  ekstrak  etanol  daun  kemangi  (Regina,  2022).  Berikut  merupakan  gambar  grafik  hasil pengukuran absorbansi pada Panjang gelombang 260nm dan 280 nm (pada Gambar 1) dan kalkulasi nilai absorbansi rasio 260/280nm (pada Gambar 2).
Gambar 1. Nilai Absorbansi Kebocoran Sel
Gambar 2. Nilai Absorbansi Rasio 260nm/280nm

## 3.4 Hasil Pengujian Antibiofilm
Pengujian anti biofilm, konsentrasi 25% menunjukkan nilai persentase penurunan aktivitas biofilm tertinggi yaitu sebesar 44,82%.  Nilai  ini  terlihat  pada  konsentrasi  tertinggi.  Hasil  pengujian  pada  semua  sampel  menunjukkan  bahwa  ada perbedaan yang signifikan antara  kelompok perlakuan dengan  kontrol  negatif, seperti yang ditunjukkan pada  Tabel  3. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak yang diuji tergantung pada dosis dapat menghambat pembentukan biofilm pada bakteri yang diuji. Efek penghambatan meningkat dengan meningkatnya konsentrasi ekstrak yang diuji (Satria et al., 2022).
Tabel 3. Hasil Pengujian Antibiofilm setelah perhitungan persentase nilai aktivitas biofilm (%)
No Konsentrasi Aktivitas Biofilm (%) SD 1 K- 0,00% 0,00 2 1,25% 10,40% 1,09 3 2,5% 14,61% 0,66 4 5% 22,65% 0,27 5 10% 26,50% 0,68 6 25% 44,82% 0,39 7 K+ 80,26% 0,72

## 4. KESIMPULAN
Menurut  temuan,  ekstrak  dari  daun  kemangi  memiliki  aktivitas  antibakteri,  seperti  yang  ditunjukkan  oleh  konsentrasi penghambatan  minimum,  konsentrasi  pembunuhan  minimum,  mekanisme  kebocoran  sel  (DNA  dan  Protein),  dan penurunan persentase pembentukan antibiofilm.

## DAFTAR PUSTAKA
Amalia,  A.,  Sari,  I.,  &  Nursanty,  R.  (2018). Aktivitas antibakteri  ekstrak  etil asetat daun  sembung  (Blumea  balsamifera  (L.)  DC.) terhadap pertumbuhan bakteri Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Prosiding Seminar Nasional Biotik , 5 (1). Berlian, Z., Aini, F., & Lestari, W. (2016). Aktivitas antifungi ekstrak daun kemangi (Ocimum americanum L.) terhadap fungi Fusarium oxysporum Schlecht. Jurnal Biota , 2 (1), 99–105.
Christoper, W., Natalia, D., & Rahmayanti, S. (2018). Uji aktivitas antijamur ekstrak etanol umbi bawang dayak (eleutherine americana (aubl.) merr. Ex k. Heyne.) terhadap trichophyton mentagrophytes secara in vitro. Jurnal Kesehatan Andalas , 6 (3), 685–689.
K- 1,25% 2,5% 5% 10% 25% K+ 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 Ab so rb a n si Konsentrasi 260 nm 280 nm K- 1,25% 2,5% 5% 10% 25% K+ 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 Ab so rb a n si R a si o 2 6 0 /2 8 0 Konsentrasi

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i1.3176
Dalimunthe, A., Pertiwi, D., Muhmmad, M., Kaban, V. E., Nasri, N., & Satria, D. (2022). The effect of extraction methods towards antioxidant activity of ethanol extract of Picria fel-terrae Lour. Herbs. IOP Conference Series: Earth and Environmental Science , 1115 (1), 012040.
Davis, W. W., & Stout, T. R. (1971). Disc plate method of microbiological antibiotic assay: II. Novel procedure offering improved accuracy. Applied Microbiology , 22 (4), 666–670. Ditjen, P. O. M. (1979). Farmakope Indonesia Edisi III. DEPKES RI. Jakarta . Haqi,  H.  D.  (2018). AKTIVITAS  ANTIBAKTERI  EKSTRAK  METANOL  SERBUK  BIJI  KLUWIH  (Artocarpus  communis  JR  &  G) TERHADAP PERTUMBUHAN Methicillint Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) [PhD Thesis]. Universitas Muhammadiyah Semarang.
Imara, F. (2020). Salmonella typhi bakteri penyebab demam tifoid. Prosiding Seminar Nasional Biologi , 6 (1), 1–5.
Kuspradini, H., Putri, A. S., Egra, S., & YANTI, Y. (2019). In vitro antibacterial activity of essential oils from twelve aromatic plants from East Kalimantan, Indonesia. Biodiversitas Journal of Biological Diversity , 20 (7).
Larasati, D. A., & Apriliana, E. (2016). Efek Potensial Daun Kemangi (Ocimum basilicum L.) sebagai Pemanfaatan Hand Sanitizer. Jurnal Majority , 5 (5), Article 5.
Lay, W. B. (1994). Analisis mikroba di laboratorium (Jakarta: PT. Raja Grafindo Persada) . Lubis,  M.  F.,  Syahputra,  H.,  Illian,  D.  N.,  &  Kaban,  V.  E.  (2022). Antioxidant  activity  and  nephroprotective  effect  of  Lansium parasiticum leaves in doxorubicin-induced rats .
Muhammad, M., Nasri, N., Kaban, V. E., Satria, D., & Cintya, H. (2022). Antibacterial Potential Ethanol Extract of Papaya Leaves (Carica papaya Linn.) Towards Salmonella typhi. BEST Journal (Biology Education, Sains and Technology) , 5 (2), 265–270. Musdja,  M.  Y.  (2012). Efek  Imunomodulator,  Aktivitas  Antibakteri  Bahan  dan  Campuran  Bahan  Menyirih  serta  Perbandingan Komposisi Minyak Atsiri Daun Sirih dengan Campuran Bahan Menyirih .
Nasri, N., Harahap, U., Silalahi, J., & Satria, D. (2021). Antibacterial activity of lactic acid bacteria isolated from Dengke Naniura of Carp (Cyprinus carpio) against diarrhea-causing pathogenic bacteria. Biodiversitas Journal of Biological Diversity , 22 (8).
Nasri, N., Kaban, V. E., Gurning, K., Syahputra, H. D., & Satria, D. (2022). Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Pepaya (Carica papaya  Linn.)  Terhadap  Bakteri  Pseudomonas  aeruginosa. INSOLOGI:  Jurnal  Sains  Dan  Teknologi , 1 (3),  Article  3. https://doi.org/10.55123/insologi.v1i3.438
Nasri, N., Kaban, V. E., Syahputra, H. D., & Satria, D. (2022). Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Alpukat (Persea americana Mill) Terhadap Escherichia coli, Salmonella typhi, dan Pseudomonas aeruginosa. Herbal Medicine Journal , 5 (1), 13–19. Negara, K. S. (2014). Analisis implementasi kebijakan penggunaan antibiotika rasional untuk mencegah resistensi antibiotika di RSUP Sanglah Denpasar: Studi kasus infeksi methicillin resistant Staphylococcus aureus. Jurnal Administrasi Rumah Sakit Indonesia , 1 (1). Press, U. G. M. (2022). Membangun Inovasi di Era Pandemi . UGM PRESS.
Purba, D., & Aritonang, E. (2022). Pemeriksaan Hemoglobin Pada Penderita Demam Tifoid Di RS Islam Malahayati Medan Tahun 2022. JURNAL TEKNOLOGI KESEHATAN DAN ILMU SOSIAL (TEKESNOS) , 4 (1), 187–191.
Purba,  I.  E.,  Wandra,  T.,  Nugrahini,  N.,  Nawawi,  S.,  &  Kandun,  N.  (2016).  Program  pengendalian  demam  tifoid  di  Indonesia:
Tantangan dan peluang. Media Penelitian Dan Pengembangan Kesehatan , 26 (2), 99–108.
Rani,  Z.,  Nasution,  H.  M.,  Kaban,  V.  E.,  Nasri,  N.,  &  Karo,  N.  B.  (2022).  Antibacterial  activity  of  freshwater  lobster  (Cherax quadricarinatus)  shell  chitosan  gel  preparation  against  Escherichia  coli  and  Staphylococcus  aureus. Journal  of  Applied Pharmaceutical Science , Notice: Undefined offset: 3 in/home/japsonli/public_html/abstract. php on line 193 .
Regina,  F.  (2022). KUALITAS  DNA  MEMBRAN  CANGKANG  ℡UR  MALEO  (Macrocephalon  maleo)  BERDASAR  VARIASI METODE ISOLASI DNA [PhD Thesis]. Universitas Atma Jaya Yogyakarta. Sari,  N.  P.,  Rustandi,  Y.,  &  Warnaen,  A.  (2022). Inovasi  materi  penyuluhan  pembuatan  pupuk  organik  cair  (POC)  dengan meminimalisir bau amoniak [PhD Thesis]. Polbangtan Malang.
Satria,  D.,  Sofyanti,  E.,  Wulandari,  P.,  Pakpahan,  S.  D.,  &  Limbong,  S.  A.  (2022).  Antibacterial  activity  of  Medan  Butterfly  pea (Clitoria ternatea L.) corolla extract against Streptococcus mutans ATCC® 25175 TM and Staphylococcus aureus ATCC® 6538 TM . Pharmacia , 69 (1), 195–202.
Siregar, A. F., Sabdono, A., & Pringgenies, D. (2012). Potensi Antibakteri Ekstrak Rumput Laut Terhadap Bakteri Penyakit Kuli t Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus epidermidis, dan Micrococcus luteus. Journal of Marine Research , 1 (2), Article 2. Sophian, A., & Yustina, Y. (2023). Analisis Nilai Kemurnian DNA Menggunakan Nano Fotometer pada Rasio 260/230 yang Diisolasi dari Produk Nugget. Muhammadiyah Journal of Nutrition and Food Science (MJNF) , 3 (2), 82–86.
Syahputra, H. D., Nasri, N., & Kaban, V. E. (2022). Pengujian Potensi Aktivitas Antibakteri dari Daun Cep-cepan (Saurauia cauliflora DC.) dalam Formulasi Sediaan Gel Terhadap Propionibacterium acnes. Herbal Medicine Journal , 5 (1), 28–32.
Syam, S. (2022). Etnobotani Tumbuhan Hutan sebagai Obat Tradisional oleh Masyarakat Desa Ratte Kabupaten Polewali Mandar.
Pangale: Journal of Forestry and Environment , 2 (2), 21–32.
Vijayakone,  B.  (2012).  MANFAAT  PENATALAKSANAAN  DIABETES  MELLITUS  DENGAN  PENGGUNAAN  DAUN KEMANGI (Ocimum sanctum Linn.) DAN DAUN LIDAH BUAYA (Aloe barbadensis Mill.). Students e-Journal , 1 (1), Article 1.
Widiarthi, N. P. F. O., Ratnayani, K., & Wirajana, I. N. (2014). PENGARUH PENAMBAHAN SUSU SKIM TERHADAP HASIL DNA METAGENOMIK DIISOLASI DARI TANAH HUTAN MANGROVE .