p-ISSN 2527-6751

## Aktivitas Antioksidan Berbagai Minyak Edible Menggunakan Metode DPPH

## Antioxidant Activities of Various Edible Oil Using DPPH Method
Enny Yusuf Wachidah Yuniwarti*, Tyas Rini Saraswati, Endang Kusdiyantini Departemen Biologi, Fakultas Sains dan Matematika, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH, Tembalang, Semarang
*Email : enny_yusuf@yahoo.co.id
Diterima 4 Januari 2018 / Disetujui 26 Januari 2018

## ABSTRAK
Natural  antioksidan  secara  tradisonal  sudah  digunakan  untuk  mencegah  terjadinya  penyakit  dan  juga digunakan  untuk  mengobati  berbagai  penyakit,  terutama  penyakit  degeneratif.  Indonesia  mempunyai  bahan alami yaitu berbagai minyak edible yang digunakan sebagai nutraceutical atau natural antioksidan. Penelitian ini bertujuan untuk mengkaji aktivitas antioksidan dari minyak buah merah, olive oil, vco dan minyak wijen, menggunakan metode 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), sehingga didapatkan jenis minyak edibel yang dapat  digunakan  sebagai  natural  antioksidan.  Radikal  bebas    1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl  (DPPH) digunakan  sebagai  salah  satu  metode  dalam  pengukuran  aktivitas  antioksidan.  Aktivitas scavenging DPPH melalui  delokalisasi  elektron  yang  akan  mengubah  larutan  dari  kuning  menjadi  ungu.  Metode  DPPH  ini merupakan metode yang sensitif untuk menguji aktivitas antioksidan Penelitian ini menggunakan empat jenis minyak  edible  dengan  lima  kali  ulangan  pengukuruan.  Berdasarkan  hasil  ANOVA  dan  uji  lanjut  BNT  pada taraf kepercayaan 95% maka didapatkan bahwa olive oil merupakan antioksidan yang paling kuat.

## Kata kunci : olive oil, vco, red fruit oil, natural antioksidan

## ABSTRACT
Natural antioxidants traditionally have been used to prevent the disease and was also used to treat a variety of diseases, especially degenerative diseases. Indonesia has natural ingredients that were various edible oils, used as nutraceutical or natural antioxidants.This study aims to assess the antioxidant activity of red fruit oil, olive oil, VCO and sesame oil, using DPPH, so we get edible oil types which can be used as natural antioxidants. This study used four different types of edible oils with five replications. Based on the results of ANOVA and LSD at  5% significant level then further found that olive oil contains the most antioxidant.
Keywords: olive oil, VCO, red fruit oil, sesame oil,  natural antioxidants

## PENDAHULUAN
Proses oksidasi didalam tubuh akan menghasilkan  radikal  bebas,  yang  dapat  memicu reaksi  berantai  sehingga  merusak  sel,  dan antioksidan  akan  menghambat  reaksi  berantai tersebut.  Antioksidan  merupakan  suatu  inhibitor proses  oksidasi,  dalam  konsentrasi  yang  relatif kecil  mampu  menghasilkan  peran  fisologis  yang beragam  didalam  tubuh.    Bahan  yang  terkandung dalam  antioksidan  akan  berperan  sebagai radical scavengers yang  mengubah radikal bebas menjadi less  reactive  spesies .  Antioksidan  alami  terdapat pada  semua  bagian  tanaman,  meliputi  carotenoid,
vitamin,  phenol,  flavonoid  dan endogenous metabolites ( Mandal et al ., 2009).
Tubuh  manusia  mempunyai  antioksidan yang  mencegah  kerusakan  pada  tubuh  akibat adanya radikal bebas. Komponen antioksidan juga terdapat  pada  makanan  yang  mampu  menangkap radikal  bebas  sehingga  antioksidan  berperan penting  sebagai  faktor  yang  mencegah  terjadinya penyakit  terutama  penyakit  degeneratif.    Proteksi terhadap  radikal  bebas  dapat  ditingkatkan  melalui pemberian makanan yang mengandung antioksidan.  Beberapa  penelitian  menunjukkan bahwa  makanan  yang  mengandung  antioksidan
terutama  nutrien  antioksidan  mampu  mencegah terjadinya  penyakit  (Alam et  al .,  2012).  Radikal bebas    1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl  (DPPH) digunakan  sebagai  salah  satu  metode  dalam pengukuran aktivitas antioksidan. Aktivitas scavenging DPPH  melalui  delokalisasi  elektron yang  akan  mengubah  larutan  dari  kuning  menjadi ungu.  Metode  DPPH  ini  merupakan  metode  yang sensitif  untuk  menguji  aktivitas  antioksidan (Shekar and Anju, 2012).
Virgin  coconut  oil  merupakan  obat  herbal yang  mampu  menunjukkan  peningkatan  aktivitas fagositosis  makrofag  (Yuniwarti et  al .,  2013)  dan juga  mampu  meningkatkan  jumlah  limfosit (Yuniwarti et  al ,  2012).  Virgin  Coconut  oil mengandung  fenol  dan  triacylglycerol  (Marina et al. ,  2009)  sehingga  mampu  berperan  sebagai antioksidan  (Nevin  dan  Rajamohan,  2006).  Olive oil  juga  mengandung  fenol  dan  squalent  yang berpotensi  sebagai  antioksidan  (Owen et  al ., 2000).
Minyak wijen juga berperan pada peningkatan  kesehatan  (Sudarmadji et  al .,  2007), minyak  pandan  merah  diduga  berperan  dalam menyembuhkan  berbagai  penyakit  (Hariyadi, 2010).  Kandungan  berbagai  minyak  tersebut mempunyai  potensi  antioksidan  yang  berbeda- beda,  sehingga  penelitian  ini  bertujuan  untuk menganalisis aktivitas antioksidan berbagai minyak edible tersebut.

## METODE PENELITIAN
Penentuan  aktivitas  antioksidan  dengan metode  DPPH  diawali  dengan  pengambilan sampel  sebanyak  0,1  mL  ditambah  3  mL  larutan DPPH radical 0,004% dalam etanol 95% kemudian larutan  tersebut  di  vortex  supaya  homogen. Larutan yang sudah homogen tersebut diinkubasikan  pada  ruang  gelap  dan  temperatur ruang,  selama  30  menit.  Absorbansi  diukur  pada panjang  gelombang  520  nm.  Ethanol  95%. digunakan  untuk  standart.  Aktivitas  antioksidan dihitung  melalui  pengurangan  absorbansi  kontrol dengan  absorbansi  sampel  dan  dibagi  (absorbansi kontrol x 100%) (Shekar and Anju, 2012).  Sampel menggunakan  lima  jenis  minyak  konsumsi  yaitu minyak VCO, olive oil, minyak wijen, dan minyak
pandan  merah  dengan  tiga  kali    ulangan. Rancangan  penelitian  menggunakan  Rancangan Acak  Lengkap  lima  perlakuan  dan  tiga  ulangan. Data yang didapat dianalisis dengan ANOVA pada taraf signifikansi 5%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  ini  diawali  dengan  menentukan panjang  gelombang  yang  akan  digunakan  untuk menentukan  absorbansi  maksimum  untuk  kontrol (Gambar  1.).  Berdasarkan  panjang  gelombang tersebut maka dapat ditentukan persentase aktivitas antioksidan  melalui  rumus  pengurangan  nilai absorbansi kontrol dengan nilai absorbansi sampel dibagi  nilai  absorbansi  kontrol  dikalikan  100% (Gambar 2.)
Hasil  uji  yang  didapat  melalui  metode DPPH,  kemudian  dianalisis  ANOVA  pada  taraf signifikasi  5%  dan  dilanjutkan  dengan  uji  BNT menunjukkan  bahwa  terdapat  beda  nyata  nilai persentase  aktivitas scavenging antara  minyak buah  merah,  minyak  zaitun  (olive  oil),  minyak kelapa murni (vco) dan minyak wijen.  Badarinath et  al .,  2010,    mengatakan  bahwa  nilai  aktivitas antioksidan  berbanding  terbalik  dengan  aktivitas scavenging  sehingga  suatu  senyawa  dikatakan sebagai  antioksidan  kuat  bila  mempunyai  nilai LC50  antara  50  sampai  100,  antioksidan  sedang bila  mempunyai  nilai  100  sampai  150  dan antioksidan lemah bila nilainya antara 151 sampai 200.  Berdasarkan  pendapat  tersebut  maka  dapat dikatakan  bahwa  aktivitas  antioksidan  dari  yang paling  kuat  ke  lemah,  berturut-turut  adalah  olve oil, vco, minyak wijen dan minyak buah merah.
Senyawa  fenol  yang  terkandung  dalam bahan  alami,  mempunyai  arti  penting  sebagai antioksidan  yang  berperan  menghambat  radikal bebas  sehingga  mampu  meningkatkan  kesehatan manusia.  Aktivitas  antioksidan  dari  senyawa phenol tergantung pada jumlah, struktur dan posisi kelompok  hidroksil  pada  cincin  aromatik  ( Balasundram et al ., 2006). Data yang didapat dari hasil  penelitian  ini,  setelah  dianalisis  dengan ANOVA  dan  uji  lanjut  dengan  BNT  pada  taraf signifikansi 5% menunjukkan bahwa terdapat beda nyata kandungan fenol  antara minyak buah merah, olive  oil,  vco  dan  minyak  wijen  (Gambar  3.)
Gambar 1. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum
Gambar 2. Nilai aktivitas scavenging (%) dari berbagai minyak edible.
Gambar 3. Persentase kandungan fenol pada berbagai minyak edible
Hasil  tersebut  menunjukkan  bahwa  minyak buah  merah  mempunyai  kandungan  fenol  dalam jumlah  terbanyak  diikuti  oleh  minyak  wijen,  vco
dan  olive  oil.  Hasil  tersebut  menunjukkan  bahwa hubungan  antara  aktivitas  antioksidan  dengan kandungan  fenol  tidak  bisa  dihubungkan  secara
sederhana,  tergantung  pada  sistem  uji  aktivitas antioksidan  apakah  menggunakan  substrat  yang memerlukan  sistem  lipid  dan  aqueous.  Kinetika proses  oksidasi  kompleks  menunjukkan  bahwa terdapat beberapa jalur yang harus dilibatkan pada konsentrasi  antioksidan  yang  berbeda  (McDonald et  al .,  2001).  Senyawa  phenol  yang  mampu mempengaruhi  aktivitas  antioksidan  bukan  hanya jumlah  tetapi  juga  struktur  dan  posisi  gugus hidroksilnya (Balasundram et al., 2006).

## KESIMPULAN
Minyak  edible  yang  mempunyai  aktivitas antioksidan  paling  tinggi  adalah  olive  oil,  VCO, minyak  wijen  dan  minyak  buah  merah.  Jumlah phenol dalam minyak edible tersebut menunjukkan besarnya  aktivitas  tetapi  tergantung  juga  pada strukur fenol dan posisi cincin hidroksilnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Alam  N.,  Nusrat  J.B.,  and  Rafiquzzaman.  2012. Review  on  in  vivo  and  in  vitro  methods evaluation  of  antioxidant  activity.  Saudi Pharmaceutical Journal. www.ksu.edu.sa
Balasundram    H.,.  Sundram  K,.  and  S.  Samman.
2006.  Phenolic  Compound  in  Plant  and Agri-Industrial  by  Product:  Antioxidant activity,  Occurence,  and  Potential  Uses Food Chemistry J. 99 (1):191-203
Badarinath  A.V.,  ,  Mallikarjuna  K.R.A.,.  Chetty M.S.C,  Ramkanth  S.,  Rajan  T.V.S,  and K.Gnanaprakash.  2010.  A  Review  on  In- vitro  Antioxidant  Methods:Comparisions, Correlations and Considerations. International Journal of PharmTech Research  Coden  (USA):  Ijprif  Issn  :  0974- 4304 2 (2): 1276-1285. Hariyadi  P.  2010.  Sepuluh  Karakter  Unggul Minyak Sawit. Info Sawit. seafast.ipb.ac.id/article/sepuluh_karakter_mi nyak_sawit.pdf.
Mandal,  S.,  Satish  Yadav,    Sunita  Yadav,  R.
K.Nema.  2009.  Antioxidants:  A  Review
Journal  of  Chemical  and  Pharmaceutical Research, 2009, 1 (1):102-104
McDonald S., P. D. Prenzler, M. Antolovich, and K.  Robards.  2001. Phenolic  Content  and Antioxidant  Activity  Of  Olive  Extracts. Food Chemistry Vol.7. Issue 1. Pp 73-84.
Marina A.M., CheMan Y.B., Nazimah S.A.H., and L.  Amin.  2009.  Chemical  Properties  of Virgin Coconut Oil Soc. 86: 301-307
Nevin  K.G.,  and  T.  Rajamohan.  2006,  Virgin Coconut  Oil  Supplemented  Diet  Increases the  Antioxidant  Status  in  Rats.  Food ChemistryVolume  99,  Issue  2,  2006,  Pages 260–266 doi:10.1016/j.foodchem.2005.06.056
Owen R.W , Attilio G.,William E H., Roswitha H., Gerd  W.,  Bertold  S.,  and  H.  Bartsch.  2000. Olive-Oil  Consumption  And  Health:  The Possible  Role  Of  Antioxidants.  The  Lancet Oncology. Vol.1(2}:107–112
Shekhar  T.C  and  G.  Anju.  2014.  Antioxidant Activity  by  DPPH  Radical  Scavenging Method  of Ageratum  conyzoides Linn. Leaves. American Journal of
Ethnomedicine,  2014,  Vol.  1,  No.  4,  244-
249. http://www.ajethno.com
Sudarmadji,  Mardjono  R.  dan  H.  Sudarmo.  2007. Variasi  Genetik,  Heritabilitas,  Dan  Korelasi Genotipik  Sifat-Sifat  Penting  Tanaman Wijen  ( Sesamum  Indicum L.).  Jurnal  Littri 13(3), September 2007. Hlm. 88 – 92 ISSN 0853-8212
Yuniwarti E.Y.W, W. Asmara, W.T. Artama, C.R.
Tabbu,  2012. The  Effect  of  Virgin  Coconut Oil  on  Lymphocyte  and  CD4  in  Chicken Vaccinated  Against Avian  Influenza Virus. Journal  of  Indonesian  Tropical  Animal Agriculture, Vol 37 No1.
Yuniwarti E.Y.W, W. Asmara, W.T. Artama, C.R.
Tabbu, 2013. Virgin Coconut Oil Meningkatkan Aktivitas Fagositosis Makrofag  Pascavaksinasi  Flu  Burung. Jurnal Veteriner Vol 14 No 2..