KELIMPAHAN BAKTERI Vibrio sp. PADA SAMPEL AIR TAMBAK DI UPT LABORATORIUM KESEHATAN IKAN DAN LINGKUNGAN PASURUAN JAWA TIMUR
ABUNDANCE OF Vibrio sp. IN POND WATER SAMPLE AT THE UPT LABORATORY OF FISH HEALTH AND THE ENVIRONMENT OF PASURUAN, EAST JAVA
Kristin Natalia Ambat 1 , Indah Wahyuni Abida 1* , Rena Maherlina 2
1 Program Studi Manajemen Sumberdaya Perairan, Jurusan Kelautan dan Perikanan Fakultas Pertanian, Universitas Trunojoyo Madura
2 Analis Kesehatan Ikan dan Lingkungan (Mikrobiologi) UPT Laboratorium Kesehatan Ikan dan Lingkungan, Pasuruan, Jawa Timur
*Corresponding author email: indahwahyuniabida@trunojoyo.ac.id
Submitted: 16 August 2022 / Revised: 01 November 2022 / Accepted: 01 November 2022
http://doi.org/10.21107/juvenil.v3i3.16461

## ABSTRAK
Vibrio  sp.  adalah  bakteri  patogen  yang  menjadi  penyebab  utama  dari  gagalnya  budidaya  atau pertambakan.  Vibriosis  merupakan  salah  satu  penyakit  yang  timbul  akibat  adanya  bakteri  Vibrio  sp. yang berpotensi menjadi penyebab kematian organisme air khususnya udang. Metode yang digunakan dalam menghitung kelimpahan bakteri Vibrio sp. dapat dilakukan dengan cara melihat koloni bakteri di cawan petri yaitu TVC (Total Vibrio Count). Sampel yang diambil dari air tambak budidaya atau kolam pemeliharaan udang dan organisme yang lainnya dikultur di media agar TCBS (Thiosulfate Citrate Bile Salt Sucrose Agar). Penelitian ini dilaksanakan di UPT Laboratorium Kesehatan Ikan dan Lingkungan, Pasuruan,  Jawa Timur  dari  tanggal  17  Januari  sampai  17  Februari  2022  dengan tujuan  mengetahui nilai  Total  Vibrio  Count  (TVC)  pada  sampel  air  tambak  di  Unit  Pelaksana  Teknis  Laboratorium Kesehatan  Ikan  dan  Lingkungan,  Pasuruan,  Jawa  Timur.  Hasil Total  Vibrio  pada  sampel  air tambak yang  telah  dianalisis  di  UPT  Laboratorium  Kesehatan  Ikan  dan  Lingkungan  dengan  no.sampel  041, 061, 063, 064, dan 065 berturut turut sebesar 0 CFU/ml; 1,0 × 10 1 CFU/ml; 0 CFU/ml; 3,0 × 10 1 CFU/ml dan  0  CFU/ml,  dimana  nilai  ini  berbeda  dengan  air  tambak  dengan  no.sampel  075  mendapati  hasil sebesar 4,8 × 10 3 CFU/ml (koloni warna kuning) dan sebesar 1,1 × 10 3 CFU/ml (koloni warna hijau), sampel no.080 sebesar 7,6 × 10 3 CFU/ml (koloni kuning saja), dan sampel no.082 yakni sebesar 9,6 × 10 3 CFU/ml (koloni kuning saja).
Kata Kunci: Bakteri Vibrio sp., Total Vibrio Count (TVC), Vibriosis

## ABSTRACT
Vibrio  sp.  are  pathogenic  bacteria  that  are  the  main  cause  of  failure  of  cultivation  or  aquaculture. Vibriosis is a disease caused by the bacteria Vibrio sp. which can potentially cause the death of aquatic organisms, especially shrimp. The method used to calculate the abundance of Vibrio sp. This can be done  by  looking  at  the  bacterial  colonies  in  a  petri  dish,  namely  TVC  (Total  Vibrio  Count).  Samples taken from aquaculture pond water or shrimp rearing ponds and other organisms are cultured on TCBS (Thiosulfate  Citrate  Bile  Salt  Sucrose  Agar)  agar.  This  research  was  conducted  at  UPT  Fish  and Environmental Health Laboratory, Pasuruan, East Java from 17 January to 17 February 2022 with the aim  of  knowing  the  Total  Vibrio  Count  (TVC)  value  in  pond  water  samples  at  the  Technical Implementation  Unit  of  the  Fish  and  Environmental  Health  Laboratory,  Pasuruan,  East  Java.  Total Vibrio results in pond water samples that have been analyzed at UPT Fish and Environmental Health Laboratory with sample no. 041, 061, 063, 064, and 065, respectively, are 0 CFU/ml; 1.0 × 10 1 CFU /ml; 0 CFU/ml; 3.0 × 10 1 CFU/ml and 0 CFU/ml are still in different ranges with water ponds with sample no.  075 found  results  of  4.8 ×  10 3 CFU/ml  (yellow colonies)  and  1.1  ×  10 3 CFU/ml  (green  colonies), sample  no.080  of  7.6  ×  10 3 CFU/  ml  (yellow  colonies  only),  and  sample  no.  082  which  is  9.6  ×  10 3 CFU/ml (yellow colonies only).
Keywords: Vibrio sp. Bacteria, Total Vibrio Count (TVC), Vibriosis

## PENDAHULUAN
Kegiatan  budidaya  tentu  tidak  selalu  berjalan dengan  lancar,  ada  beberapa  pemicu  atau penyebab adanya kegagalan maupun kendala dalam budidaya tersebut. Salah satu penyebab kegagalan budidaya adalah serangan penyakit ikan atau organisme yang dibudidaya. Rahmaningsih  (2018) mendefinisikan  penyakit ikan  sebagai  suatu  penyebab  dari  keadaan yang  tidak  normal  pada  ikan  atau  organisme budidaya  dan  merupakan  hewan  inang  yang dapat  disebabkan  oleh  organisme,  virus maupun  keadaan  lingkungan  yang  berkaitan dengan  nutrisi  yang  terkandung  di  dalamnya. Secara  garis  besar,  penyakit  atau  gangguan pada  ikan  disebabkan  oleh  dua  faktor  utama, yaitu  faktor  biotik  dan  abiotik.  Faktor  biotik meliputi segala makhluk hidup seperti, tumbuhan,  hewan,  mikroorganisme  yang  di dalamnya  terdapat  jamur,  alga,  dan  juga bakteri.  Kemudian faktor  abiotiknya  atau  yang disebut dengan faktor lingkungan yakni seperti, suhu, pH, DO, faktor pakan atau nutrisi.
Permasalahan  paling  serius  yang  kini menjadi kendala dalam kegiatan budidaya ikan air tawar adalah  serangan  patogen.  Virus,  bakteri, protozoa,  jamur  ataupun  parasit  merupakan golongan  penyakit  infeksi.  Berbeda  dengan penyakit  non  infeksi  seperti  penyakit  yang disebabkan  oleh  pakan,  lingkungan,  genetik serta  tumor  (Aryani et  al. ,  2004).  Terjadinya penularan  penyakit  ataupun  parasit  tertentu dapat  melalui  beberapa  cara  yaitu,  adanya kontak  langsung  antar  organisme  yang  sakit terhadap  yang  sehat,  kemudian  bangkai  dari ikan  yang  sakit  ataupun  melalui  air  juga. Penularan  tersebut  umumnya  terjadi  dalam satu  kolam  budidaya  (Jasmanindar,  2011). Selain  itu,  penularan  yang  lain  dapat  melalui peralatan  dan  juga  pemindahan  organisme budidaya dari kolam yang telah terkontaminasi penyakit ke kolam yang masih baik kondisinya dan  belum  terkontaminasi  oleh  penyakit apapun.
Kaitannya  dengan  permasalahan  penyakit patogenik  pada  kegiatan  budidaya,  bakteri menjadi salah satu sumber penyakit yang dapat menyebabkan  kematian  bagi  organisme  yang dibudidaya  jika  konsentrasinya  melebihi  batas normal.  Bakteri  merupakan  salah  satu  dari banyaknya organisme mikroskopis yang bersifat merugikan  dan  ada  juga  yang  bersifat menguntungkan. Bakteri Vibrio sp. merupakan satu  dari  banyaknya  jenis  bakteri  yang merugikan kegiatan budidaya sebab bakteri ini masuk  dalam  jenis  patogen  yang  menginfeksi
serta  menimbulkan  penyakit  pada  hewan budidaya  khususnya  udang  yang  sedang dalam keadaan lemah dan tidak didukung oleh kondisi  lingkungan  yang  baik  (Feliatra et  al ., 2014).  Idami  dan  Rizki  (2020)  melaporkan bahwa  bakteri Vibrio  sp. dikatakan  bersifat patogen jika dalam air pemeliharaan kelimpahan  hingga  mencapai  8,35  x  10 4 CFU/ml atau lebih.
Terjadinya  kegagalan  panen  pada  tambak- tambak  di  Indonesia  khususnya  budidaya udang menjadi suatu kejadian yang merugikan banyak pihak terutama petani tambak. Penyakit yang ditimbulkan oleh bakteri Vibrio sp. dikenal dengan penyakit vibriosis. Vibrio sp. menyebabkan  tingkat  kematian  hingga  90% pada larva udang windu, kemudian untuk jenis Vibrio  harveyi dapat  membunuh  larva  udang windu ( Penaeus monodon ) di hatchery hingga mencapai 100% (Feliatra et al ., 2014). Adapun jenis-jenis  bakteri Vibrio yang  berpotensi menyebabkan  penyakit  vibriosis  yakni Vibrio harveyi , Vibrio parahaemoliticus , Vibrio alginoliticus , Vibrio anguilarum (Effendi, 2002). Salah  satu  jenis  komoditas  budidaya  yang rentan  terjangkit  penyakit  vibriosis  adalah udang  yang  memiliki  gejala  klinis  seperti adanya  bercak  putih,  bagian  telson,  dan ekornya  berwarna  merah  serta  terdapat melanosis  pada  tubuhnya  (Sardjito et  al .,
2012).  Keberadaan bakteri Vibrio sp. sebagai agen  penyakit  vibriosis  dalam  lingkungan budidaya  ini  jika  tidak  dapat  lagi  dicegah ataupun  dikendalikan  akan  dapat memberikan dampak  yang  fatal  sampai  kepada  kematian massal  pada  organisme  yang  dibudidaya (Kurniawan,  2012).  Penelitian  ini  bertujuan untuk  mengetahui  nilai Total  Vibrio  Count (TVC)  pada  sampel  air  tambak  di  Unit Pelaksana  Teknis  Laboratorium  Kesehatan Ikan dan Lingkungan, Pasuruan, Jawa Timur.

## MATERI DAN METODE
Penelitian  ini  telah  dilaksanakan  pada  17 Januari  hingga  17  Februari  2022.  Sampel  air tambak  berasal  dari  tambak  klien  yang  ingin diidentifikasi kelimpahan bakteri Vibrio sp. nya. Penelitian  dilakukan  di  UPT  Laboratorium Kesehatan  Ikan  dan  Lingkungan  Pasuruan, Jawa Timur.

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah autoklaf,  timbangan  analitik,  erlenmeyer, hot plate , magnetic  stirrer ,  cawan  petri, vortex , mikropipet,  stand  mikropipet,  tabung  reaksi , triangle spreader , laminar air flow , inkubator,
rak  tabung  reaksi,  bunsen,  kertas  label, spatula, yellow  tip , blue  tip ,  lampu  atau  sinar UV, botol sprayer, box yellow tip, box blue tip, lemari  penyimpanan  media  dan  botol  kaca. Adapun  bahan  yang  digunakan  diantaranya, TCBS  ( Thiosulfate  Citrate  Bile  Salt  Sucrose Agar ), aquadest , aluminium  foil ,  sampel  air, KCl, MgSO 4 , dan NaCl.

## Prosedur Penelitian
Analisis mikrobiologi yang dilakukan yaitu Total Vibrio  Count (TVC)  pada  bakteri Vibrio  sp. dalam  sampel  air  tambak.  Perhitungan Total Vibrio  Count (TVC)  yang  dilakukan  pada sampel  menggunakan  metode  hitung  cawan. Tahapan  prosedur  analisis Total  Vibrio  Count (TVC) terdiri atas beberapa tahap diantaranya adalah:

## Sterilisasi Alat dan Bahan
Sterilisasi  alat  dan  bahan  diawali  dengan mempersiapkan peralatan yang akan digunakan serta larutan Trisalt untuk uji total Vibrio yang dimasukkan ke dalam autoklaf. Peralatan  seperti  triangle  spreader  dan erlenmeyer  dilapisi  dengan aluminium  foil , sedangkan  untuk  tabung  reaksi  dilapisi dengan  kertas  buram.  Setelah  alat  dan bahan dimasukkan ke dalam autoklaf maka langkah selanjutnya yakni menutup, kemudian mensetting autoklaf dengan suhu 121⁰C  dengan  kurun  waktu  selama  15 menit.  Setelah  itu  menekan  tombol start untuk memulai proses sterilisasinya. Setelah alarm autoklaf berbunyi, maka buka ( on ) exhaust untuk  mengeluarkan  uapnya hingga  suhunya  turun  mencapai  0⁰C. Setelah  itu,  penutup  autoklaf  dapat  dibuka dan  alat-alat  maupun  bahan  yang  sudah disterilisasi dikeluarkan.

## Pembuatan Media Agar TCBS
Pembuatan  media  Agar  TCBS  diawali dengan  mempersiapkan  alat  dan  bahan yang  digunakan,  bahan  yang  digunakan ditimbang  terlebih  dahulu  menggunakan timbangan  analitik.  Bahan-bahan  yang digunakan  terdiri  dari  NaCl  18,4  g,  MgSO 4 6,94 g, KCl 1,5 g, TCBS 88 g, dan aquadest steril  1000  ml.  Proses  selanjutnya  yaitu memasukkan  semua  bahan  ke  dalam erlenmeyer  dan  ditutup  menggunakan aluminium  foil agar  tidak  terkontaminasi dengan  bahan-bahan  atau  zat  lainnya. Setelah  itu,  memananaskan erlenmeyer yang sudah berisi bahan-bahan tersebut di atas hot  plate yang  telah  berisi magnetic
stirrer ,  gunanya  agar  semua  bahan  dapat homogen  atau  mencampur  dengan  rata. Setelah  mendidih,  mengangkat erlenmyer lalu meletakkan  pada meja  dan menunggu hingga suhunya menurun. Langkah berikutnya menuangkan larutan media agar TCBS ke masing-masing  cawan  petri  yang telah  disiapkan  secara  aseptik  di  atas  api bunsen  untuk  menjaga  kondisi  agar  tetap steril.

## Pembuatan Larutan Trisalt
Pembuatan  larutan  Trisalt  diawali  dengan mempersiapkan  alat  dan  bahan  yang digunakan, bahan yang digunakan ditimbang  terlebih  dahulu  menggunakan timbangan  analitik.  Bahan-bahan  yang digunakan  terdiri  dari  NaCl  23,4  g,  MgSO 4 6,99 g, KCl 1,5 g, dan aquadest steril 1000 ml.  Proses  selanjutnya  yaitu  memasukkan semua  bahan  ke  dalam erlenmeyer dan ditutup menggunakan aluminium foil . Setelah itu, memanaskan  erlenmeyer  yang sudah  berisi  bahan-bahan  tersebut  di  atas hot  plate yang  telah  berisi magnetic  stirrer .
Setelah mendidih, mengangkat erlenmeyer lalu  meletakkan  ke  dalam  keranjang  untuk disterilisasi  bersih  menggunakan  autoklaf. Langkah  selanjutnya  setelah  disterilisasi yakni  mengeluarkan  keranjang  yang  berisi erlenmeyer dari autoklaf, kemudian menuangkan  larutan  ke  dalam  botol  gelas bertutup.

## Tahap Pengujian Sampel Air
Tahap  pengujian  total Vibrio pada  sampel air  diawali  dengan  menyiapkan  tabung reaksi yang akan digunakan sesuai dengan jumlah  pengenceran  dengan  9ml  larutan Trisalt yang sudah dituang di dalamnya dan juga  media  agar  TCBS  (cawan  petri)  yang jumlahnya  juga  menyesuaikan  dengan jumlah  pengencerannya.  Sampel  air  yang telah  disiapkan  terlebih  dahulu  dikocok, kemudian memipet 1ml sampel air tersebut ke  dalam tabung  reaksi  pengenceran  yang ke-1  lalu  dihomogenkan  menggunakan vortex. Langkah selanjutnya yaitu mengambil 1ml dari tabung reaksi pengenceran yang ke-1 kemudian dituangkan  ke  dalam  tabung  reaksi  untuk pengenceran  ke-2  lalu  dihomogenkan  juga menggunakan vortex begitu  juga  dengan pengenceran selanjutnya, kemuadian diambil dari 1ml pengenceran sebelumnya. Tahap  yang  selanjutnya  dalam  pengujian sampel air yakni melakukan penanaman
pada  media  TCBS  sebanyak  0,1  ml  dari setiap  pengenceran  menggunakan  metode sebar  ( spread  plate )  kemudian  diratakan menggunakan triangle spreader lalu posisinya  dibalik  dan  diberi  label.  Setelah proses  tersebut,  tahap  selanjutnya  yaitu memasukkan  media  TCBS  yang  telah ditanam  ke  dalam  inkubator  untuk  proses inkubasi selama 24 jam dengan suhu 35⁰C.

## Perhitungan Total Vibrio Count (TVC)
Proses  inkubasi  yang  telah  dilakukan terhadap  media TCBS  selama  24jam telah menumbuhkan bakteri
Vibrio yang
kemudian  dilakukan  perhitungan  dengan cara  manual  dan  dikelompokkan  menjadi satu  koloni Vibrio yang  sejenis  sesuai dengan warnanya. Adapun sebagai catatan bahwasanya  apabila  koloni  bakteri  yang tumbuh  <25  koloni  maka  dinyatakan  tidak ada  bakterinya,  sedangkan  jika  koloni
bakteri yang tumbuh >250 maka dinyatakan tidak  bisa  untuk  dihitung  (TBUD).  Berikut adalah rumus dari Total Vibrio .
𝑁 = Σ C [(1 × 𝑛 1 ) + (0,1 × 𝑛 2 )] × (𝑑)
Keterangan:  N=  Jumlah  koloni  produk, dinyatakan dalam koloni/ml atau koloni/gram; C= Jumlah koloni pada semua cawan  yang  dihitung;  n1=  Jumlah  cawan pada  pengenceran  pertama  yang  dihitung; n2=  Jumlah  cawan  pada  pengenceran kedua  yang  dihitung;  d=  Pengenceran pertama yang dihitung

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  analisis  mikrobiologi Total  Vibrio  Count (TVC)  pada  sampel  air  tambak  dapat  dilihat pada tabel 1. sebagai berikut.

## Tabel 1 . Hasil pengamatan TVB sampel
No. Sampel Pengenceran Hasil 10 0 10 -1 10 -2 10 -3 10 -4 K
H K H K H K H K H 041 0 0 0 0 - - - - - - 0 CFU/ml 061 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1,0 × 10 1 CFU/ml 063 0 0 0 0 0 0 - - - - 0 CFU/ml 064 3 0 0 0 0 0 - - - - 3,0 × 10 1 CFU/ml 065 0 0 0 0 0 0 - - - - 0 CFU/ml 075 TBUD 35 48 11 17 3 0 0 - - K= 4,8 × 10 3 CFU/ml H= 1,1 × 10 3 CFU/ml 076 0 0 0 0 - - - - - - 0 CFU/ml 077 0 0 0 0 - - - - - - 0 CFU/ml 078 0 0 0 0 - - - - - - 0 CFU/ml 080 TBUD 0 76 0 2 0 - - - - 7,6 × 10 3 CFU/ml 081 60 76 0 0 0 0 - - - - K= 6,0 × 10 2 CFU/ml H= 7,6 × 10 2 CFU/ml 082 TBUD 0 96 0 0 0 - - - - K= 9,6 × 10 3 CFU/ml *(K= Kuning, H= Hijau)
Gambar 1. Kelimpahan Total Vibrio Count (TVC) pada masing-masing sampel air tambak (Data Primer, 2022)
0 2000 4000 6000 8000 10000 12000 41 61 63 64 65 75 76 77 78 80 81 82
Ke li m p a h a n (C F U /m l) Nomor Sampel Koloni Hijau Koloni Kuning
......(1)
Hasil  perhitungan  Total Vibrio dari  sampel  air tambak yang telah dianalisis di UPT Laboratorium Kesehatan Ikan, Pasuruan, Jawa Timur menunjukkan bahwa kelimpahan bakteri Vibrio memiliki  kelimpahan  yang  cukup beragam  dikarenakan  sampel  yang  datang diambil dari daerah atau tambak yang berbeda- beda  yang  tentu  memiliki  karakteristik  dan kandungan  bakteri  yang  berbeda  juga.  Total sampel  yang  telah  dianalisis  total  vibrionya yakni  sebanyak  12  sampel  dengan  kode sampel 041, 061, 063, 064, 065, 075, 076, 077, 078,  080,  081  dan  082.    Kelimpahan  bakteri Vibrio menjadi penentu kualitas perairan dalam budidaya baik udang maupun ikan. Berdasarkan  perhitungan  Total Vibrio didapati hasil berturut-turut sebesar 0 CFU/ml untuk no. sampel 041, 1,0 × 10 1 CFU/ml untuk no. sampel 061, 0 CFU/ml untuk no. sampel 063, 3,0 × 10 1 CFU/ml untuk no. sampel 064, 0 CFU/ml untuk no.  sampel  065,  0  CFU/ml  untuk  no.  sampel 076,077,078  dan  selanjutnya  sampel  no.080 sebesar 7,6 × 10 3 CFU/ml (koloni kuning saja), dan  sampel  no.082  yakni  sebesar  9,6  ×  10 3 CFU/ml (koloni kuning saja).  Berbeda dengan sampel  yang  lainnya,  sampel  dengan  nomor 075 memiliki 2 (dua) warna koloni bakteri Vibrio dalam satu media, warna koloninya yakni koloni Vibrio berwarna  kuning  dan  koloni Vibrio berwarna  hijau.  Hasil  perhitungan  pada  koloni kuning  mendapati  hasil  sebesar  1,28  ×  10 3 CFU/ml  dan  untuk  koloni  berwarna  hijau sebesar  4,18  ×  10 2 CFU/ml.  Adapun  untuk sampel  no.081  mendapati  koloni  kuning sebesar  6,0  ×  10 2 CFU/ml  dan  untuk  koloni berwarna hijau sebesar 7,6 × 10 2 CFU/ml. Hal ini  menunjukkan  bahwasannya  koloni  dari bakteri Vibrio yang  ditumbuhkan  pada  media agar  TCBS  memiliki  karakteristik  koloni berwarna  hijau  dan  kuning.  Perbedaan  warna tersebut  dikarenakan  perbedaan  jenis  bakteri Vibrio . Hal ini sesuai dengan pernyataan Mailoa dan  Setha  (2011)  bahwa  koloni  bakteri  yang berwarna  hijau  dari  jenis  bakteri Vibrio disebabkan  karena  sifat  bakteri  yang  tidak mampu  memfermentasi  sukrosa,  sedangkan koloni  bakteri  yang  berwarna  kuning  mampu memfermentasi  sukrosa  pada  media  agar TCBS  dan juga mampu menurunkan  pH  pada media agar TCBS.
Oleh  karena  dalam  analisa  ini  tidak  dilakukan lanjutan  untuk  mengetahui  jenis  bakterinya, maka  dapat  diduga  berdasarkan  penelitian Sarida  dan  Esti  (2010)  bahwa  beberapa spesies  bakteri  koloni  hijau  yang  berpotensi tumbuh  di  media  TCBS  yaitu  bakteri Vibrio fischeri,  Vibrio  mimicus dan Vibrio  harveyii . Kemudian  untuk  bakteri  dengan  warna  koloni
kuning  yaitu Vibrio  vuinivicus dan Vibrio fluvialis .  Koloni  bakteri  yang  berwarna  hijau lebih  berbahaya  bagi  komoditas  udang dibandingkan  koloni  bakteri  berwarna  kuning dikarenakan  bakteri  yang  banyak  menjadi penyebab  penyakit  vibriosis  atau  penyakit kunang-kunang  pada  udang  yakni  bakteri dengan warna koloni hijau terkhusus bakteri V. harveyii (Sarida  dan  Esti,  2010).  Sebagai bakteri  yang  menjadi  penyebab  penyakit vibriosis  yang  seringkali  disebut  juga  dengan penyakit  kunang-kunang  pada  udang,  bakteri V. harveyii menyebabkan  tubuh udang bercahaya  oleh  karena  adanya  pengaruh  pH yang  memicu  bakteri  ini  memanfaatkan  salah satu  jenis  sukrosa  untuk  menghasilkan perpendaran  atau  cahaya  tersebut  (Ashofa et al .,  2014).  Komoditas  udang  yang  terjangkit penyakit  memiliki  gejala  klinis  seperti  adanya bercak  putih  bagian  telson,  dan  ekornya berwarna merah serta terdapat melanosis pada tubuhnya (Sardjito et al., 2012).
Berdasarkan  hasil  analisis  serta  perhitungan terkait total bakteri Vibrio menunjukkan bahwa kelimpahan bakteri Vibrio sp. yang terkandung dalam  sampel  yang  bernomor  041,  061,  063, 064, 065, 076, 077, 078, dan 081 masih berada pada  kisaran  10 1 –  10 2 CFU/ml.  Kelimpahan bakteri  yang  demikian  masih  berada  pada kisaran yang aman dan belum membahayakan baik bagi lingkungan maupun bagi udang atau komoditas budidaya yang lainnya. Kelimpahan Vibrio yang  membahayakan  bagi  lingkungan dan udang budidaya adalah jika kelimpahannya mencapai  10 3 CFU/ml  yang  menjadi  ambang batas maksimal atau baku mutunya (No.75/PERMEN-KP/2016).
Berbeda jika kelimpahan bakteri Vibrio melebihi ambang  batas  yang  telah  ditentukan  maka tidak  menutup  kemungkinan  bahwasannya akan  terjadi  kematian  massal  pada  hewan budidaya  (Anjasmara et  al .,  2018).  Pada sampel no.075 mendapati hasil sebesar 1,28 × 10 3 CFU/ml  untuk  koloni  warna  kuning  dan untuk koloni berwarna hijau sebesar 4,18 × 10 2 CFU/ml  kemudian  sampel  no.080  sebesar  7,6 × 10 3 CFU/ml (koloni kuning saja), dan sampel no.082 yakni sebesar 9,6 × 10 3 CFU/ml (koloni kuning  saja).    Dari  nilai  tersebut,  sampel  air budidaya  ini  telah  melebihi  ambang  batas maksimal  dari  kelimpahan  bakteri Vibrio di perairan tambak, sehingga besar kemungkinan hewan  budidaya  yang  ada  pada  tambak tersebut akan terserang penyakit vibriosis dan dapat  membunuh  hewan  budidaya  secara perlahan  atau  bahkan  dalam  waktu  yang singkat.
Seperti  yang  diketahui,  bakteri Vibrio menjadi penyebab utama penyakit vibriosis, hal ini juga dikarenakan  kelimpahannya  yang  melebihi ambang batas dan terus bertambah dari waktu ke  waktu.  Bakteri Vibrio atau  bakteri  patogen yang  menimbulkan  penyakit  vibriosis  pada hewan  budidaya  menurut  Sukenda et  al ., (2005) yakni bakteri Vibrio vulnificus dan Vibrio parahaemoliticus .  Pemberian    pakan    yang kurang terkontrol menjadi salah satu penyebab kondisi  lingkungan  menjadi  buruk  dalam  segi kualitas airnya sebab mengakibatkan akumulasi    limbah    organik  yang  berlebihan dan  kemudian  membentuk    lapisan  anaerob yang    mana  menghasilkan  senyawa  H 2 S (Anderson et  al .,  1988  dalam  Muliani,    2002). Adanya    akumulasi  zat    H 2 S tersebutlah  yang membuat parasit, bakteri patogen oportunistik,    virus,    dan    jamur    mudah berkembang  sehingga besar kemungkinannya menimbulkan  penyakit  pada hewan budidaya khususnya  udang  (Tompo et  al ., 1993  dalam Muliani,  2002).
Menurut penelitian (Pariakan dan Rahim, 2021) menyatakan  bahwa  salinitas  >20  ppt  dapat menyebabkan  peningkatan  jumlah  bakteri Vibrio  sp. di  suatu  perairan.  Selain  itu,  suhu juga menjadi salah satu faktor tingginya jumlah bakteri Vibrio  sp. dalam  suatu  tambak,  sebab kenaikan  suhu  dapat  memberikan  peluang waktu generasi bakteri Vibrio sp. Penyebab lain dari  tingginya  kelimpahan Vibrio  sp. yakni karena adanya sisa-sisa makanan yang sudah tidak  termanfaatkan  lagi  oleh  biota  budidaya sehingga  menyebabkan  adanya  peningkatan bahan  organik  dan  jika  air  tambak  tersebut tidak  dilakukan  pergantian  air  segera  maka akan  memicu  perkembangan Vibrio  sp. di tambak (Mangampa, 2015).
Media agar TCBS dikhususkan untuk digunakan  sebagai  media  isolasi  bakteri dengan  genus Vibrio  sp. yang  mana  identik dengan  kemunculan  warna  koloni  bakterinya kuning dan hijau seperti penjelasan sebelumnya. Hal ini sesuai dengan pernyataan Sethi  (2014)  bahwa  media  TCBS  merupakan media  selektif  yang  mampu  membedakan bakteri Vibrio menjadi dua jenis atau dua koloni dengan  warna  yang  berbeda  yakni  koloni berwarna  kuning  dan  berwarna  hijau.  Media TCBS  dikatakan  selektif  karena  media  TCBS mampu  menghambat  bakteri  yang  tidak diinginkan selain bakteri Vibrio karena mengandung tiosulfat (Ihsan dan Retnaningrum,  2017).  Selain itu, media  TCBS juga memiliki keunikannya sendiri sebab media ini  tidak  membutuhkan  tahap  sterilisasi
menggunakan  autoklaf  seperti  media  yang lainnya  misalnya  PCA  dan  NA.  Hal  ini disebabkan  karena  proses  sterilisasi  tersebut akan menghilangkan kandungan tiosulfat pada media  TCBS  yang  menjadi  karakteristik  atau sifatnya yang selektif.
Kelimpahan  bakteri Vibrio yang  lebih  banyak, apabila  dibandingkan  dengan  kelimpahan bakteri  yang  lainnya  dalam  perairan  tambak budidaya udang akan berpotensi menyebabkan adanya penurunan kelulushidupan pada udang ketika periode pembenihan maupun pembesaran (Hameed, 1993). Berbeda dengan ambang  batas  maksimal  dari  kelimpahan bakteri Vibrio yang mana  sebesar  10 3 CFU/ml (No.75/PERMEN-KP/2016),  maka  ambang batas maksimal bagi bakteri umum di perairan menurut  (Taslihan et  al .,  2004)  yakni  sebesar
10 6 CFU/ml  sehingga  apabila  kelimpahan bakteri  keduanya  melebihi  ambang  batas maksimalnya sudah dapat dipastikan bahwasannya  akan  terjadi  kematian  massal pada hewan budidaya khususnya dalam hal ini komoditas  udang.  Adapun  salah  satu  anjuran dalam  menekan  kelimpahan  bakteri  patogen salah  satunya Vibrio pada  budidaya  udang yakni dengan menambahkan
atau memanfaatkan probiotik dalam kegiatan budidaya  (Anjasmara et  al .,  2018).  Hal  ini sejalan  dengan  pernyataan  Gunarto et  al .,
(2006)  yang  melaporkan  bahwa  penggunaan probiotik  pada  pemeliharaan  udang  windu mampu menekan  populasi Vibrio  sp. dan juga mencegah adanya infeksi White Spot Syndrome Virus (WSSV).

## KESIMPULAN DAN SARAN
Hasil Total Vibrio pada sampel air tambak yang telah dianalisis di UPT Laboratorium Kesehatan Ikan  dan  Lingkungan  dengan  no.sampel  041, 061, 063, 064, dan 065 berturut turut sebesar 0 CFU/ml; 1,0 × 10 1 CFU/ml; 061, 0 CFU/ml; 3,0 ×  10 1 CFU/ml  dan  0  CFU/ml  dan  kelimpahan bakteri Vibrio  sp. tersebut  masih  berada  pada kisaran    yang    aman    dan    belum membahayakan    bagi    lingkungan    maupun bagi  komoditas budidaya. Berbeda dengan air tambak dengan no.sampel 075 mendapati hasil sebesar  4,8  ×  10 3 CFU/ml  (koloni  warna kuning) dan sebesar 1,1 × 10 3 CFU/ml (koloni warna hijau), sampel no.080 sebesar 7,6 × 10 3 CFU/ml  (koloni  kuning  saja),  dan  sampel no.082 yakni sebesar 9,6 × 10 3 CFU/ml (koloni kuning saja) maka sampel air budidaya ini telah melebihi  ambang  batas  maksimal  kelimpahan bakteri Vibrio di tambak, kemungkinan terserang penyakit vibriosis bagi hewan yang
dibudidaya cukup tinggi dan dapat menyebabkan kematian massal.

## DAFTAR PUSTAKA
Anjasmara,  B.,  Julyantoro,  P.  G.  S.,  &
Suryaningtyas,  E.  W.  (2018).  Total Bakteri  dan  Kelimpahan  Vibrio  pada Budidaya Udang Vannamei (Litopenaeus vannamei) Sistem Resirkulasi  Tertutup  dengan  Padat Tebar Berbeda. Current Trends in Aquatic Science , 1 (1), 1-7. Aryani N., Henny S., Iesje L., Morina R. (2004). Parasit  dan  Penyakit  Ikan .  UNAI  Press. Pekanbaru.
Ashofa,  E.  A.,  &  Prayitno,  S.  B.  (2014).
Identifikasi bakteri Vibrio yang berasosiasi  dengan  penyakit  bakterial pada  kepiting  bakau  (Scylla  serrata) yang  berasal  dari  Rembang. Journal  of Aquaculture management and Technology , 3 (2), 118-125. Yoswaty, D. (2014). Pathogenitas bakteri Vibrio sp  terhadap  udang  Windu  (Penaeus monodon). Jurnal Sungkai , 2 (1), 23-36. Gunarto, A.M. Tangko, B.R. Tampangallo, dan Muliani.  (2006).  Budidaya  udang  windu ( Penaeus  monodon )  di  tambak  dengan penambahan probiotik hasil
perbanyakan. J. Pen. Per. Indonesia. (In Press). 12 pp.
Hameed,  A.  S.  (1993).  A  study  of  the  aerobic heterotrophic bacterial flora of hatchery- reared  eggs,  larvae  and  post-larvae  of Penaeus  indicus. Aquaculture , 117 (3-4), 195-204.
Ihsan,  B.,  &  Retnaningrum,  E.  (2017).  Isolasi dan  identifikasi  bakteri  Vibrio  sp.  pada kerang  kapah  (Meretrix  meretrix)  di Kabupaten Trenggalek. Jurnal Harpodon Borneo , 10 (1), 23-27.
Jasmanindar, Y. (2011). Prevalensi Parasit dan
Penyakit Ikan Air Tawar yang Dibudidayakan  Di  Kota/  Kabupaten
Kupang. Jurnal  Ilmu-ilmu  Hayati  dan Fisik, 13 (1), 25-30. Kurniawan,  A.  (2012). Penyakit  Akuatik .  UBB Press. Pangkal Pinang. Hal. 48
Mailoa, M.C dan Setha. B. (2011). Karakteristik
Patogenitas Vibrio  sp. Diisolasi  dari Lendir  Sidat  ( Anguilla  Sp. ). Jurnal Kedokteran  Dan  Kesehatan  Program Studi  Pendidikan  Dokter  Universitas Pattimura . ISSN: 1979-6358. Mangampa,  M.  (2015).  Dinamika  Populasi Bakteri dalam Air dan Sedimen Tambak pada  Pemantapan  Budidaya  Udang Vaname Ekstensif Plus Melalui Pergiliran
Pakan. Berkala Perikanan Terubuk , 43 (2), 25-35.
Muliani.  (2002).  Isolasi  dan  Karakterisasi Bakteri  Asal  Laut  Sulawesi  untuk  Bio kontrol  Penyakit  Vibriosis  pada  Udang Windu.  Tesis.  Institut  Pertanian  Bogor. Bogor.
Pariakan, A., & Rahim, M. (2021). Karakteristik Kualitas  Air  Dan  Keberadaan  Bakteri Vibrio sp. Pada Wilayah Tambak Udang Tradisional  Di  Pesisir  Wundulako  Dan
Pomalaa Kolaka. Jfmr (Journal of Fisheries  and  Marine  Research) , 5 (3),
547-556.
Peraturan  Menteri  Kelautan  dan  Perikanan Republik  Indonesia  Nomor  75/Permen- Kp/2016  Tentang  Pedoman  Umum Pembesaran  Udang  Windu  ( Penaeus Monodon ) dan Udang Vaname ( Litopenaeus Vannamei ).
Rahmaningsih,  S.  (2018). Hama  dan Penyakit Ikan . Deepublish: Yogyakarta.
Sardjito et  al .  (2012). Aplication  of  Repetitive Sequience –Based PCR on the richness of  Vibrio  on  Tiger  shrimp ( Panaeus monodon Fa ) , 15 (3), 303-309
Sarida, M., & Harpeni, E. (2010). Screening of potential  probiotic  Vibrio  sp.  against vibriosis
in the Litopenaeus vannamei. Majalah Ilmiah Biologi BIOSFERA:  A  Scientific  Journal , 27 (2),
88-94.
Sethi, L. (2014). Pathogenicity, genetic aspects and  characterization  of  Virio  species Isolated  from  Marine  Environment . Thesis.  Department  of  Life  Science National Institue of Technology Rourkela, Odisha. Sukenda, A.J. Sihombing, F. Novianti, Widanarni.  2005.  “Penapisan  Bakteri
Probiotik  dan  Peranannya  terhadap Infeksi  Buatan
Vibrio  harveyi pada Udang Vanname ( Litopenaeus vannamei )”. Jurnal Akuakultur
Indonesia, 4 (2), 181-187.
Taslihan,  A.,  Ani,  W.,  Retna,  H.  S.  M.,  dan Astuti.  (2004). Pengendalian  Penyakit pada Budidaya Ikan Air Payau . Direktorat  Jenderal  Perikanan  Balai Besar Budidaya Air Payau Jepara.