## Sensitivitas Kombinasi Antibakteri Amoksisilin dan Kotrimoksazol

## Sensitivity Of Antibacterial Combination Of Amoxicilin and Cotrimoxazol
Iis mira anggraini* 1 , Desi sagita 2 , Septa pratama 3
Iis Mira Anggraini, Jl. Bagan Pete , Jambi City and 36361, Indonesia
Desi Sagita, Jl. Tarmidzi Kadir Pakuan Baru, Jambi and 36129, Indonesia
Septa Pratama, Jl. Sersan Muslim, Jambi and 36122, Indonesia *Koresponding Penulis: 1 iisanggraini911@gmail.com; 2 daisyfarmasi@gmail.com; 3 septa.pratama@gmail.com

## Abstrak
Resistensi  antibiotik  sekarang  telah  menjadi  perhatian  global,  dimana  resistensi  ini  adalah masalah  yang dapat mengancam kesehatan masyarakat.  Dalam hal ini diujikan pada bakteri dengan tujuan apakah ada penurunan sensitivitas terhadap antibiotik kombinasi jika diberikan bersama  pada  bekteri  Staphylococcus  aureus  dan  Klebsiella  pneumoniae,  dengan  metode Kirby  bauer  dengan  menggunakan  media  MHA.  Dari  hasil  penelitian  uji  sensitivitas  dua antibiotik  pada  bakteri  Staphylococcus  aureus  kombinasi  lebih  efektiv  menghambat pertumbuhan bakteri, begitu pula jika diuji analisis data dengan menggunakan Kruskal wallis dan Mann whitney terdapat hasil signifikan.

## Kata kunci : Kombinasi; Staphylococcus aureus; Sensitivitas

## Abstract
Antibiotic resistance has now become a global concern, where resistance is a problem that can threaten public health. In this case tested on bacteria with the aim of whether there is a decrease  in  sensitivity to  combination  antibiotics  if  given  together  to  the  Staphylococcus aureus and Klebsiella pneumonia, with the Kirby Bauer method using MHA media. From the results  of  the  sensitivity  test  of  two  antibiotics  in  the  bacterium  Staphylococcus  aureus  the combination  is  more  effective  in  inhibiting  bacterial  growth,  so  also  if  tested  data  analysis using Kruskal Wallis and Mann Whitney there are significant results.
Keywords: Combination; Staphylococcus aureus; Sensitivity

## PENDAHULUAN
Banyaknya  antibiotik yang  akan  menyebabkan  resistensi  terhadap  bakteri  dikarenakan penggunaan antibiotik yang tidak tepat dan antibiotik didapatkan dengan mudah tanpa resep dokter,  diantaranya  antibiotik  yang  sering  kali  dijumpai  dikalangan  masyarakat  adalah amoksisilin  dan  kotrimoksazol (Virgiandhy, dkk., 2015). Antibiotik  amoksisilin  yang merupakan  suatu  antibakteri  dengan  spektum  luas  yang  digunakan  sebagai  pendorong pengobatan  infeksi  pernapasan,  meningitis,  infeksi  yang  diakibatkan  bakeri  salmonella  sp, seperti  penyakit  demam  tipoid.  Antibiotik  amoksisilin  ini  ampuh  melawan  bakteri  gram positif  yang  tidak  menghasilkan  -laktamase  dan  ampuh  juga  untuk  melawan  bakteri  gram negative  karena  antibiotik  ini  mampu  menembus  pori-pori  dalam  membrane  fosfolipid luarnya (Shukuri, N., et al., 2018).
Antibiotik  kotrimoksazol  juga  termasuk  sering  dijumpai  diresep  dokter  yang  mana antibiotik ini mengandung dua komposisi yaitu trimetoprim dan sulfametoxazol yang bekerja menghambat reaksi enzimatik obligat pada dua tahap yang berurutan pada mikroba, sehingga kombinasi  kedua  obat  ini  memberikan  efek  yang  sinergi (Setiabudy,  R., 2007). Dari penelitian  yang  diteliti  oleh  (Irani., 2019)  tentang  antibiotik  suspensi  oral  amoksisilin  dan kotrimoksazol  yang  melakukan  uji  stabilitas  fisik  dan  kimia  sediaan  ini  yang  didapat  hasil bahwa terjadi penurunan kadar terhadap racikan maupun tunggal tetapi masih dalam rentang yang diterima berdasarkan FI IV (kadar suspensi amoksisilin antara 90-120 %), kadar sampel lebih rendah jika dibandingkan dengan kadar tunggal, oleh kalena itu peneliti tertarik untuk meneliti sensitivitas kombinasi antibiotik tersebut terhadap bakteri, apakah terjadi penurunan sensitivitas kombinasi antibakteri jika direseokan bersama.

## METODE PENELITIAN
Berisi bagaimana data dikumpulkan. Alur kerja yang kompleks dapat dituangkan dalam bentuk skema. Cara kerja yang sudah umum tidak perlu dijelaskan detail. Langkah-Langkah penelitian  yang  panjang  dapat  dibuat  dalam  sub  sub-bab  tahapan  penelitian  dengan numbering angka arab.
1. Pembuatan media
NA (Nutrien Agar) ditimbang sebanyak 2,8 g, NB (Nutrien Broth) ditimbang sebanyak 14  g,  masing-masing  dilarutkan  dalam  100  ml  aquades,  MHA  (Muller  Hinton  Agar) ditimbang  sebanyak  3,8  g  larutkan  dalam  500  ml  aquadest,  setelah  itu  aduk  sambil dipanaskan hingga mendidih dan homogen.

## 2. Sterilisasi alat dan media
Alat  dan  media  disterilkan  mengunakan  alat  autoklaf  dengan  suhu  121 o C  selama  15 menit  dengan  tekanan  15  lbs.  Jarum  ose  dan  pinset  disterilisasikan  dengan  menggunakan lampu Bunsen ( Andriani, R. 2016).

## 3. Peremajaan bakteri
Peremajaan  ini  dilakukan  dengan  menggunakan  metode  gores  dengan  media Nutrient Agar (NA)  dengan  bakteri  uji E.  coli, Klebsiella, Salmonella dan S.  aureus lalu  diinkubasi pada suhu 37 o C-38 o C selama 8 jam.

## 4. Pembuatan suspensi uji
Bakteri  yang  telah  diremajakan  diambil  dengan  jarum  ose  steril  lalu  disuspensikan  ke dalam tabung  yang berisi larutan NB letakkan di inkubator 1x24 jam lalu dilakukan spektro UV-Vis,  setelah  itu  diperoleh  kekeruhan  yang  sama  dengan  standar  kekeruhan  larutan Mc. Farland,  perlakuan  ini  dilakukan  pada  setiap  bakteri  yang  diuji (Handayani, dkk 2017). Apabila  suspensi  terlalu  keruh  maka  dilakukan  pengenceran  dan  apabila  kurang  keruh tambahkan  lagi  koloni  mikrobanya  sampai  menghasilkan  transmitan  25%  sesuai  dengan standar 0,5 Mc.Farland (setara 1,5 x 10 8 cfu/mL).
5. Tes sensitivitas dengan metode Kirby-Bauer pada media agar Mueller Hinton
Lidi  kapas  steril  dicelupkan  kedalam  suspensi  bakteri,  setelah  meresap  pada  kapas diperas  dengan  menekan  kapas  pada  dinding  tabung  sehingga  tidak  menetes  pada  saat dikeluarkan dari tabung suspensi bakteri, kemudian swab merata pada media MHA diamkan selama 5 menit (Handayani, dkk., 2017). Tempel cakram yang sudah diberi antibiotik (20  L) masukkan  kedalam  media  MHA  yang  telah  ditanami  bakteri  dengan  menggunakan  pinset, satu  persatu  cakram  obat  ditekan  sedemikian  rupa sehingga  terjadi  kontak  yang  baik  antara cakram obat dan agar, kontrol yang dipakai adalah pelarut (DMSO), perlakuan ini dilakukan sebanyak 3 kali pengulangan setelah itu diinkubasi dengan suhu 37 o C selama 18-24 jam .

## Analisa Data
Data  yang  diperoleh  di  analisa  dengan  menggunakan Uji  Kruskal  Wallis untuk mengetahui apakah ada perbedaan dari berbagai perlakuan yang dilakukan dan uji Post Hoc Tukey pada taraf ini dengan kepercayaan 95%, jika data tidak normal dan tidak homogen uji lanjuannya dapat diganti dengan Uji Mann Whitney (Angelina dkk., 2015).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  sensitivitas  kombinasi  antibakteri  amoksisilin  dan  kotrimoksazol  pada  resep dokter  yang  telah  dilakukan  di  laboratorium  mikrobiologi  STIKES  Harapan  Ibu  Jambi. Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  metode Kirby  bauer difusi  cakram. Metode  ini  merupakan  tekhnik  yang  paling  sering  digunakan  dalam  menentukan  kepekaan bahan antimikroba. Metode ini juga memiliki kelebihan yaitu sederhana untuk dilakukan dan juga  dapat  digunakan  untuk  melihat  sensitivitas  berbagai  mikroba  terhadap  antimikroba dengan  konsentrasi  tertentu.  Dari  memiliki  kelebihan  metode  ini  juga  memiliki  kekurangan yaitu  senyawa  antimikroba  yang  akan  diujikan  harus  bersifat  hidrofilik  agar  dan  dapat berdifusi  dengan  baik (Mawaddah,  Rosliana.,  2011). Pelarut  yang  digunakan  untuk melarutkan antibiotik adalah DMSO  sebagai kontrol negatif. DMSO pada penelitian ini tidak menimbulkan  zona  hambat  pada  media  pertumbuhan  bakteri Klebsiella  pneumonia dan Staphylococcus aureus.  Yang artinya DMSO tidak mempunyai zat anti bakteri (Fadlila, W. N., dkk., 2015).
Antibiotik  yang  digunakan  adalah  amoksisilin  dan  kotrimoksazol  (sulfametoxazol  dan trimetoprim) tiga kali pengulangan dengan dosis yang sama. Dilakukan dengan media MHA untuk  uji  sensitivitas  antibakteri  menggunakan  kertas  cakram  yang  sudah  di  berikan antibiotik  lalu  ditempelkan  ke  media  MHA,  inkubasi  selama  1x24  jam  lalu  diukur  dengan jangka sorong.
Hasil  uji  daya  hambat  antibiotik  pada  bakteri Klebsiella  pneumoniae menunjukkan adanya  zona  bening  atau  adanya  aktivitas  perhentian  pertumbuhan  bakteri.  Hal  ini  dapat dilihat pada tabel 1 diameter zona hambat yang terbentuk yaitu berupa zona bening di sekitar cakram yang mengandung antibiotik dalam konsentrasi dosis yang sudah ditentukan.
Tabel 1. Hasil Pengujian Antibakteri Klebsiella pneumoniae Pada 1xpakai Perlakuan n Rerata (mm) ± SD Efek antibakteri Kontrol negatif (DMSO) 3 0 Tidak ada Sulfametoxazol 20  /ml 3 10.67 ± 0.52 *# Lemah Amoksisilin 20  /ml 3 7.17 ± 0.42 #$ Lemah Trimetoprim 20  /ml 3 3.05 ± 0.02 # Lemah Campuran
(Sulfameroxazol 20  /ml, Amoksisilin 20  /ml dan Trimetoprim
20  /ml) 3 9.77 ± 0.60 # Lemah
Keterangan : *: p  0.05 berbeda signifikan (Mann Whitney) dibandingkan Amoksisilin tunggal
#: p  0.05 berbeda signifikan (Mann Whitney) dibandingkan Trimetoprim tunggal $: p  0.05 berbeda signifikan (Mann Whitney) dibandingkan dibandingkan campuran
Journal of Healthcare Technology and Medicine Vol. 6 No. 1 April 2020 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
Perlakuan n Rerata (mm) ± SD Efek antibakteri  : efek antibakteri di standarkan dengan NCCLS
Tabel 2. Hasil Pengujian Antibakteri Staphilococcus aureus Pada 1xpakai
Perlakuan n Rerata (mm) ± SD Efek antibakteri Kontrol negatif (DMSO) 3 0 Tidak ada Sulfametoxazol 20  /ml 3 16.53 ± 0.05 *#$ Sedang Amoksisilin 20  /ml 3 7.05 ± 0.05 #$* Lemah Trimetoprim 20  /ml 3 7.98 ± 0.28 #$* Lemah Campuran
(Sulfameroxazol 20  /ml, Amoksisilin 20  /ml dan Trimetoprim
20  /ml) 3 17.85 ± 0.21 #$* Sedang
Keterangan : *: p  0.05 berbeda signifikan (Mann Whitney) dibandingkan Amoksisilin tunggal
#: p  0.05 berbeda signifikan (Mann Whitney) dibandingkan Trimetoprim tunggal $: p  0.05 berbeda signifikan (Mann Whitney) dibandingkan dibandingkan campuran  : efek antibakteri di standarkan dengan NCCLS
Hasil yang diperoleh dari tabel 1 Klebsiella pneumoniae diameter hambatan rata-rata antibiotik  sulfametoxazol  lebih  besar  dibandingkan  dengan  campuran,  amoksisilin  dan trimetoprim, pada hasil tabel 2 Staphylococcus aureus diameter hambatan rata-rata antibiotik campuran  lebih  besar  dibandingkan  dengan  sulfametoxazol,  amoksisilin,  dan  juga trimetoprim.  Namun  pada  zona  hambat  yang  dihasilkan  pada  setiap  bakteri  tidak  begitu berbeda  jauh  namun  berpengaruh  dalam  berpengaruh  dalam  memperlihatkan  perbedaan antara antibiotik dengan konsentrasi yang sama.
Kombinasi  antibiotik  mengalami  penurunan  zona  hambat  pada  bakteri Klebsiella pneumoniae sedangkan  pada  bakteri Staphylococcus  aureus mengalami  kenaikan  zona hambat,  hal  ini  dikarenakan  bakteri Klebsiella  pneumoniae termasuk  kedalam  bakteri  gram negatif  dimana  bakteri  ini  memiliki  tiga  lapisan  peptidoglikan  yang  terdiri  dari  fospolipid, protein,  dan  lipopolisakarida,  sedangkan  bakteri Staphylococcus  aureus merupakan  bakteri gram positif yang memiliki dua lapisan yaitu lipopolisakarida dan protein dengan kandungan lipid  1%-4% ( Jawets,  E., dkk., 2005). Dalam  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  antibiotik kombinasi lebih mampu menghambat bakteri gram positif  (Staphylococcus aureus), hal ini sama dengan pernyataan pada jurnal (Olusola, et al., 2014). Bahwa pada bakteri gram positif (Streptococcus pyogenes) menunjukkan antibiotik kombinasi (amoksisilin dan
kotrimoksazole)  sinergi  terhadap  bakteri Streptococcus  pyogenes bila  dibandingkan  dengan amoksisilin dan kotrimoksazol jika di berikan tunggal.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan  maka  dapat  disimpulkan  bahwa antibiotik  kombinasi  mengalami  penurunan  pada  bakteri Klebsiella  pneumoniae yang disebabkan bakteri ini termasuk bakteri gram negatif, sedangkan pada bakteri Staphylococcus aureus mengalami  kenaikan  hal  ini  dikarenakan  bakteri  ini  termasuk  bakteri  gram  positif. Dari pernyataan diatas menyatakan bahwa kombinasi antibiotik amoksisilin, trimetoprim dan sulfametoxazole lebih mampu menghambat bakteri gram positif.

## SARAN
Disarankan  pada  penelitian  selanjutnya  untuk  meneliti, Perlunya  dilakukan  penelitian lebih  lanjut  menggunakan  kombinasi  antibiotik  dengan  3xpakai  (tiga  kali  minum  obat), Menggunakan  metode  uji  antibakteri  yang  lain  sehingga  dapat  dibandingkan, Menguji kombinasi dengan bakteri gram negatif dan gram positif lainnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Andriani,  R.  (2016).  Pengenalan  Alat-Alat  Laboratorium  Mikrobiologi  Untuk  Mengatasi.
Jurnal Mikrobiologi, 1(1), 1 – 7.
Fadlila,  W.  N.,  Yuliawati,  K.  M.,  &  Syafnir,  L.  (2015).  Identifikasi  Senyawa  Aktif Antibakteri  dengan  Metode  Bioautografi  Klt  terhadap  Ekstrak  Etanol  Daun  Talas (Colocasia Esculenta(L.) Schott). Prosiding Penelitian SPeSIA Unisba , 586.
Handayani,  F.,  Sundu,  R.,  &  Sari,  R.  M.  (2017).  Formulasi  Dan  Uji  Aktivitas  Antibakteri Streptococcus  Mutans  Dari  Sediaan  Mouthwash  Ekstrak  Daun  Jambu  Biji  (Psidium guajava L.). Jurnal Sains Dan Kesehatan,
1(8), 422 – 433. https://doi.org/10.25026/jsk.v1i8.62
Jawets,  E.,  Melnick,  J.,  &  Adelberg,  E.  (2005). Mikrobiologi  Kedokteran.  jakarta:  Salemba Medika.
Mawaddah, Rosliana. Kajian Hasil Riset Potensi Antimikroba Alami dan Aplikasinya Dalam Bahan Pangan di Pusat Informasi Teknologi Pertanian FATETA IPB. (http://iirc.ipb.ac.id/jspui/bitstream/123456789/13778/2/F08sma.pdf,;diakes 2011)
Olusola,  O.  O.,  Oyedeji,  O.,  &  Adedayo,  O.  (2014).  Evaluasi  in-vitro  interaksi  amoksisilin dan  kotrimoksazol  antibiotik  terhadap  strain  bakteri  resisten. Journal  Of  Applied Farmasi Sains vol.4 , 094-100.
Setiabudy, R. (2007). Farmakologi dan Terapi. (Rianto Setiabudy & Nafrialdi, Eds.) (Sulistia G). jakarta: Departemen Farmakologi dan Terapeutik Fakultas Kedokteran - Universitas Indonesia.
Shukuri, N., & Dugassa, J. (2018). Review On Antibiotic Resistance and ITS Mechanism Of Development. Journal of Health, Health, Medicine and Nursing, 1(January 2017), 1 – 17.
Virgiandhy,  I.  G.  N.,  F,  L.  D., &  Nurmala.  (2015).  Resistensi  dan  Sensitivitas  Bakteri terhadap Antibiotik di RSU dr . Soedarso Pontianak Tahun 2011-2013. Jurnal Resistensi Dan Sensitivitas Bakteri, 3(1), 21 – 28.