## TOXICITY TEST OF THE COMBINATION Eleutherine americana Merr. AND Areca vestiaria EXTRACTS AGAINST THE INTESTINAL ORGANS OF Rattus norvegicus
UJI TOKSISITAS KOMBINASI EKSTRAK Eleutherine americana Merr. DAN Areca vestiaria TERHADAP ORGAN USUS Rattus norvegicus
Sarai Korban 1)* , Herny E. I. Simbala 2) , Meilani Jayanti 3)
1) Program Studi Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sam Ratulangi *saraikorban@gmail.com

## ABSTRACT
D ayak  onions  ( Eleutherine  americana Merr. )  and  Pinang  Yaki  ( Areca  vestiaria )  have  been  used  by  the community as traditional medicine. The purpose of this study was to determine the safety level of extracts of Dayak onion and Pinang Yaki against the macroscopic appearance of the intestinal organs of Wistar male white rats. This study used an experimental  method with 18 male white rats of the Wistar strain who were given ethanol extract of Dayak onion and Pinang Yaki orally at a dose of 10,8mg, 14,4mg, and 21,6mg for 14 days. The results showed that there was a decrease in body weight, in each treatment group but the largest weight loss occurred in the dose group V from 199gram to 182gram while the smallest weight loss occurred in the dose group I from 199gram to 198gram and for the macroscopic picture of the intestinal organs there was no significant difference between the test group with the control group. In conclusion, the administration of extracts of Dayak onion and Pinang Yaki does not affect the macroscopic picture of the intestinal organs.
Keywords: Toxicity, Dayak Onion, Pinang Yaki, Intestinal macroscopic

## ABSTRAK
Bawang  Dayak  ( Eleutherine  americana Merr.)  dan  Pinang  Yaki  ( Areca  vestiaria )  telah  di  gunakan  oleh masyarakat  sebagai  obat  tradisional.  Tujuan  penelitian  untuk  mengetahui  tingkat  keamanan  dari  ekstrak bawang dayak dan pinang yaki terhadap gambaran makroskopis organ usus tikus putih jantan galur Wistar. Penelitian  ini  menggunakan  metode  eksperimen  dengan  hewan  percobaan  tikus  putih  jantan  galur  Wistar berjumlah 18 ekor yang diberi ekstrak etanol bawang dayak dan pinang yaki secara oral dengan dosis 10,8mg, 14,4mg dan 21,6mg selama 14 hari. Hasil penelitian menunjukan bahwa terjadi penurunan berat badan, pada masing - masing kelompok perlakuan tetapi penurunan berat badan terbesar terjadi pada kelompok dosis V dari 199gram menjadi 182gram sedangkan penurunan berat badan terkecil terjadi pada kelompok dosis I dari 199gram menjadi 198gram dan untuk gambaran makroskopis organ usus tidak ada perbedaan bermakna antara kelompok uji dengan kelompok kontrol. Kesimpulannya pemberian ekstrak bawang dayak dan pinang yaki tidak berpengaruh terhadap gambaran makroskopis organ usus.
Kata kunci : Toksisitas, Bawang Dayak, Pinang Yaki, Makroskopis usus

## PENDAHULUAN
Bawang dayak ( Eleutherine americana Merr.) merupakan  suatu  tanaman  yang  sering  digunakan oleh masyarakat sebagai obat tradisional. Beberapa penelitian  mengatakan  bahwa  Bawang  dayak memiliki  manfaat  dalam  mengatasi  radang  usus, disentri, bisul, diabetes mellitus, hipertensi, kanker payudara,  kolestrol  dan  stroke  (Prayitno et  al ., 2018). Areca  vestiaria atau  yang  lebih  dikenal dengan  pinang  yaki  merupakan  jenis  palem endemik  Sulawesi  dan  telah  digunakan  oleh masyarakat  setempat  sebagai  obat  tradisional untuk menyembuhkan beberapa penyakit (Simbala, 2007).
Berdasarkan ketentuan BPOM RI 2014, dalam pengembangan  suatu  sediaan  obat  atau  obat tradisional, selain memiliki bukti khasiat, dipersyaratkan  juga  pengujian  toksisitas  pada hewan  percobaan  guna  menjamin  keamanan  saat penggunaan  obat  pada  manusia,  baik  pengujian secara  akut  maupun  jangka  pendek  (subkronis). Pengujian  toksisitas  pada  hewan  berguna  untuk melihat  adanya  reaksi  biokimia,  fisiologik  dan patologik  yang  mungkin  akan  muncul  sebelum penggunaan pada manusia.
Penelitian  toksisitas  terhadap  ekstrak  bawang dayak  dan  pinang  yaki  secara  tunggal  telah dilakukan  sebelumnya.  Ekstrak  bawang  dayak  di uji menggunakan metode BSLT dengan menggunakan konsentrasi sampai dengan 100mg/mL  menunjukan  bahwa  ekstrak  bawang dayak  sudah  menunjukan  sifat  toksis  pada konsentrasi  10mg/mL  dengan  menyebabkan kematian  pada  larva  udang  yaitu  mendekati  20% (Khairunnisa, 2018). Uji Toksisitas ekstrak pinang yaki  juga  menggunakan  metode  BSLT  dengan konsentrasi ekstrak yang digunakan yaitu 400, 600, 800  dan  1000  ppm  hasilnya  menunjukan  ekstrak buah pinang yaki memiliki resiko toksisitas, dalam hal  ini  sebesar  334.99  ppm,  berarti  pada konsentrasi  tersebut  menyebabkan  kematian  50% terhadap  larva  udang.  Nilai  tersebut  menunjukan bahwa  secara  farm  akologis  bersifat  toksik terhadap hewan uji (Simbala, 2007).
Sebelum dikembangkan menjadi obat tradisional  yang  terstandar  perlu  dipastikan terlebih  dahulu  keamanannya  bagi  tubuh  karena selain didapatkan efek farmakologi, kemungkinan juga  dapat  terjadi  efek  toksik  pada  organ-organ tubuh  vital  manusia  dan  kadar  toksiknya  pun berbeda sesuai konsentrasi senyawa yang
diberikan  (Sutomo,  2019).  Pengujian  keamanan dari  kombinasi  kedua  ekstrak  tersebut  belum pernah  dilakukan.  Oleh  karena  itu,  penelitian  ini dilakukan  dengan  tujuan  melakukan  pembuktian keamanan  dari  kombinasi  ekstrak  bawang  dayak dan pinang yaki.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium Farmasi  Lanjut,  Program  Studi  Farmasi,  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam, Universitas  Sam  Ratulangi  Manado  yang  dimulai pada September 2021 – Januari 2022.

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan: alat-alat gelas (Iwaki ST Pyrex®),  timbangan  digital  ( Electronic  Kitchen scale SF-400),  timbangan  analitik  (AE  Adam®), blender (Miyako®), aluminium foil, kertas saring, toples, oven ( Heating Drying Oven DHG) , ayakan 100  mesh,  batang  pengaduk,  sonikator  ( Likited ultra 8060D-H),  dan hot  plate  magnetic  stirrer (Nesco®Lab),  sarung  tangan  lateks,  masker (SENSI  Mask),  kandang.  Bahan  yang  digunakan: ekstrak  buah  Pinang  Yaki (Areca  vestiaria ), ekstrak  umbi  Bawang  Dayak (Eleutherine americana Merr ) ,  makanan  (pelet  ayam),  air mineral,  tikus  putih  jantan  Galur  Witstar  ( Rattus norvegicus ),  Eter,  CMC  ( Carboxyl  Methyl Cellulose ), aquades dan etanol 96%.

## Prosedur Penelitian

## Pembuatan Ekstrak
Ekstrak  dilakukan  dengan  metode  maserasi menggunakan  pelarut  etanol  96%.  Umbi  bawang dayak  dan  buah  pinang  yaki  yang  telah  menjadi serbuk  simplisia  ditimbang  dan  dimasukkan  ke dalam Beaker  glass kemudian  diekstraksi  dengan cara  serbuk  simplisia  direndam  dalam  pelarut etanol 96% dan dibiarkan selama 3 hari untuk umbi bawang  dayak  dan dibiarkan  selama  5  hari  untuk buah pinang yaki kemudian disaring menggunakan kertas  saring.  Filtrat  yang  diperoleh  kemudian dikumpulkan  dan  diuapkan  menggunakan  oven pada suhu 40 o C sampai diperoleh ekstrak kental.

## Pembuatan Larutan CMC 1%
Larutan  stok  CMC  1%  dibuat  dibuat  dengan menimbang  serbuk  CMC  sebanyak  1  gram kemudian  dicampurkan  dengan  100mL  aquades
dan  dipanaskan  sambil  diaduk  sampai  homogen kemudian  didinginkan.  Perbandingan  aquades dengan CMC adalah 100:1 artinya didalam 100 mL aquades terdapat 1 gram.

## Pembuatan Larutan Ekstrak Bawang Dayak
Pembuatan  larutan  ekstrak  diawali  dengan menimbang  ekstrak  kental  umbi  bawang  dayak ( Eleutherine americana Merr.) sesuai dengan dosis yaitu 10,8 mg dan 14,4 mg, kemudian dimasukkan dalam  labu  ukur  50  mL  dan  ditambahkan  larutan CMC 1% lalu disonikasi hingga homogen. Setelah itu dimasukkan ke dalam botol sampel dan diberi label.

## Pembuatan Larutan Ekstrak Pinang Yaki
Pembuatan larutan ekstrak pinang yaki diawali dengan  menimbang  ekstrak  kental  buah  pinang yaki  ( Areca  vestiaria )  sesuai  dengan  dosis  yaitu 10,8  mg  dan  14,4  mg,  kemudian  dimasukkan dalam  labu  ukur  50  mL  dan  ditambahkan  larutan CMC 1% lalu disonikasi hingga homogen. Setelah itu dimasukkan ke dalam botol sampel dan diberi label.

## Pembuatan Larutan Kombinasi Ekstrak
Pembuatan  larutan  kombinasi  ekstrak  ini diawali  dengan  menimbang  ekstrak  kental  umbi bawang dayak ( Eleutherine americana Merr.) dan buah  pinang  yaki  ( Areca  vestiaria )  sesuai  dosis 21,6 mg dimana dosis umbi bawang dayak 10,8 mg dicampurkan dengan dosis buah pinang yaki 10,8 mg (1:1). Kemudian dimasukkan dalam labu ukur 50  mL  dan  ditambahkan  larutan  CMC  1%  lalu disonikasi hingga homogen. Setelah itu dimasukakan dalam botol sampel dan diberi label.

## Pemberian Perlakuan
Pemberian  perlakuan  untuk  penelitian  ini masing  –  masing  menggunakan  6  kelompok  uji dengan  total  18  ekor  tikus  jantan  galur  wistar. Ekstrak  umbi  bawang  dayak  dan  ekstrak  buah pinang  yaki  diberikan  sesuai  dosis  perlakuan secara  oral  sebanyak  1mL/hari  menggunakan  alat penyekok oral (Sonde) dengan dispo .

## Pembedahan
Pembedahan dilakukan  pada  hari  ke-15. Tikus  yang  akan  dibedah  dimatikan  dengan  cara memasukkan  tikus  ke  dalam  toples  yang  sudah berisi  kapas  yang  ditetesi  larutan  eter.  Kemudian setelah  beberapa  saat  tikus  dipindahkan  diatas papan  bedah  lalu  diotopsi,  pembedahan  diawali dengan membelah bagian perut bawah tikus hingga
bagian  dada,  kemudian  organ  diambil  keluar  dari dalam tubuh, organ yang diambil ialah organ usus.

## Pengamatan Makroskopis
Hewan  yang  mati  segera  dibedah  dan dilakukan  pengamatan  secara  makroskopis  untuk organ usus. Organ usus diamati secara visual yaitu mengamati  warna,  bentuk  permukaan  dan konsistensi organ.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Preparasi  Sampel  Umbi  Bawang  Dayak (Eleutherine  americana  Merr.)  dan  Buah Pinang Yaki (Areca vestiaria)
Umbi  bawang  dayak  ( Eleutherine  americana Merr.)  ini  diambil  dari  Desa  Passi  Kabupaten Bolaang  Mongondow  Sulawesi  Utara  dan  pinang yaki ( Areca vestiaria ) diambil dari lereng gunung Mahawu,  Tomohon.  Sampel  umbi  bawang  dayak dan  buah  pinang  yaki  diambil  sebanyak  5  kg selanjutnya  kedua  sampel  dibersihkan  dan  dicuci terlebih dahulu hal ini bertujuan untuk membersihkan  kotoran-kotoran  atau  benda  asing yang  menempel  pada  sampel  kemudian  sampel dirajang  dan  dikeringkan  dalam  suhu  ruangan, proses  pengeringan  bertujuan  untuk  menurunkan kadar  air  sehingga  bahan  tidak  mudah  ditumbuhi oleh  bakteri.  Selanjutnya  sampel  dihaluskan  atau diserbukkan  dengan  menggunakan blender dan diayak  menggunakan  ayakan  mesh  100  sehingga menghasilkan  serbuk  simplisia  dari  sampel bawang  dayak  dan  sampel  pinang  yaki.  Proses pengayakan  ini  bertujuan  untuk  menyeragamkan ukuran serbuk dari sampel sehingga partikel yang didapatkan  tidak  mempengaruhi  hasil  tahapan selanjutnya (Mokoginta et al ., 2020).
Ekstraksi  Umbi  Bawang  Dayak  (Eleutherine americana Merr.) dan Buah Pinang Yaki (Areca vestiaria)
Proses  ekstraksi  menggunakan  pelarut  etanol 96%  dengan  metode  maserasi.  Pemilihan  metode maserasi  yaitu  agar  dapat  menghindari  terjadinya kerusakan kandungan kimia yang tidak tahan panas atau  bersifat  termolabil. Sampel  umbi  bawang dayak  dimaserasi  selama  3  hari  menggunakan pelarut etanol 96% sebanyak 2500 mL sedangkan buah  pinang  yaki  dimaserasi  selama  5  hari menggunakan  pelarut  etanol  96%  sebanyak  2500 mL  dan  kedua  sampel  tersebut  diremaserasi sebanyak  2  kali.  Filtrat  yang  dihasilkan  untuk sampel  umbi  bawang  dayak  berwarna  merah  ke hitaman  hal  ini  sesuai  dengan  penelitian  yang dilakukan  oleh  Greifen  (2021)  dan  filtrat  yang
dihasilkan  untuk  sampel  buah  pinang  yaki  yaitu merah  kecoklatan.  Selanjutnya  filtrat  dievaporasi menggunakan oven dengan suhu 40 o C selama 1x24 jam,  proses  evaporasi  merupakan  suatu  proses penguapan  sebagian  dari  pelarut  sehingga didapatkan larutan zat cair pekat yang berkonsentrasi  tinggi  (Mokoginta et  al .,  2020). Setelah  filtrat  dievaporasi  didapatkan  ekstrak kental  dari  umbi  bawang  dayak  dan  buah  pinang yaki.
Pembuatan  Larutan  Ekstrak  Umbi  Bawang Dayak (Eleutherine americana Merr.) dan Buah Pinang Yaki (Areca vestiaria)
Ekstrak  kental  tersebut  kemudian  dilarutkan dengan  larutan  CMC  ( Carboxy  Methyl  Cellulose ) masing-masing  sebanyak  75  mL  dengan  dibagi menjadi  3  kelompok  konsentrasi  yaitu  10,8  mg, 14,4 mg dan 21,6 mg. Penggunaan larutan CMC ini berfungsi mempertahankan kestabilan agar partikel padatannya  tetap  terdispersi  merata  ke  seluruh bagian sehingga tidak mengalami pengendapan.

## Gambaran  Makroskopis  Organ  Usus  Tikus Putih Jantan Galur Wistar (Rattus norvegicus)
Gambaran makroskopis organ usus tikus putih jantan  galur  wistar  ( Rattus  norvegicus )  dapat dilihat pada tabel 1.

## Tabel 1. Gambaran makroskopis usus tikus putih jantan Galur Wistar (Rattus norvegicus)
Kelompok Hewan Uji Warna Konsistensi Berat Tikus Berat Organ Usus Kontrol Kemerahan Kenyal, tidak mengeras 208 gram 7,78 gram Dosis I (10,8mg BD) Kemerahan Kenyal, tidak mengeras 198 gram 7,79 gram Dosis II (14,4mg BD) Kemerahan Kenyal, tidak mengeras 194 gram 6,98 gram Dosis III (10,8mg PY) Kemerahan Kenyal, tidak mengeras 182 gram 6,77 gram Dosis IV (14,4mg PY) Kemerahan Kenyal, tidak mengeras 177 gram 5,67 gram Dosis V (21,6mg) Kombinasi Kemerahan Kenyal, tidak mengeras 183 gram 7,38 gram * BD = Bawang Dayak
* PY = Pinang Yaki
Pada  tabel  1  memperlihatkan  gambaran makroskopis  setiap  kelompok  uji  yang  diberikan perlakuan, hasilnya memperlihatkan adanya warna kemerahan  yang  sama  dengan  kelompok  kontrol. Pada  semua  kelompok  perlakuan  memiliki konsistensi organ usus yang sama yatu
kenyal  dan  tidak  mengeras  dan  juga  memiliki warna organ yang sama yaitu berwarna kemerahan tapi agak pucat, sedangkan pada berat organ usus sendiri  bervariasi  dari  satu  kelompok  perlakuan dengan kelompok perlakuan lainnya.
Gambar 1. Kontrol
Gambar 3. Dosis II
Gambar 2. Dosis I
Gambar 4. Dosis III
Pada  kelompok  perlakuan  dosis  I  (10,8mg Bawang  Dayak),  dosis  II  (10,8mg  Pinang  Yaki), dosis  III  (14,4mg  Bawang  Dayak),  dosis  IV (14,4mg Pinang Yaki) dan dosis V (21,6 kombinasi Bawang  Dayak  dan  Pinang  Yaki)  gambaran makroskopis  organ  usus  tikus  putih  jantan  galur wistar  ( Rattus  norvegicus )  tidak  menunjukan perubahan  ataupun  kelainan  yang  bermakna. Organ usus tidak mengalami pengerasan, permukaannya  halus  dan  warnanya  terlihat  pucat kemerahan.
Dari  hasil  pengamatan  pada  kelompok perlakuan dosis I, dosis II, dosis III, dosis IV dan dosis  V  gambaran  makroskopis  organ  usus  tikus putih  jantan  galur  wistar  ( Rattus  norvegicus ) menunjukan  bahwa  permukaan  organ  usus  halus dan  berwarna  pucat  kemerahan  serta  tidak menunjukan perubahan ataupun kelainan. Kelompok  perlakuan  dosis  I,  dosis  II,  dosis  III, dosis  IV  dan  dosis  V  dengan  pemberian  ekstrak etanol  96%  tidak  menunjukan  perubahan  yang signifikan  dan  tampak  normal  jika  dibandingkan dengan kelompok kontrol.
Sebagian  besar  proses  pencernaan  dan penyerapan  dalam  sistem  pencernaan  terjadi  di usus  halus.  Usus  mempunyai  dua  fungsi  utama yaitu pencernaan dan penyerapan atau absorbsi.
Usus terbagi atas dua bagian, usus kecil dan usus besar.  Menurut  penelitian  yang  dilakukan  oleh Katarina  (2016)  hasil  pengamatan  terhadap anatomi  organ usus  tikus menunjukan  organ usus memiliki warna pucat kemerahan.
Pada  pemberian  ekstrak  etanol  umbi  bawang dayak  ( Eleutherine  americana Merr.),  ekstrak etanol  buah  pinang  yaki  ( Areca  vestiaria )  dan ekstrak  etanol  kombinasi  selama  14  hari berdasarkan hasil yang diperoleh dari penelitian ini organ  usus  tidak  mengalami  perubahan  yang signifikan, gambaran makroskopis dan konsistensi pada organ usus kontrol tidak jauh berbeda dengan kelompok  perlakuan  dosis  lainnya.  Hal  ini menunjukan  bahwa  ekstrak  etanol  umbi  bawang hutan   ( Eleutherine   americana Merr.),   ekstrak etanol  buah  pinang  yaki  ( Areca  vestiaria )  dan ekstrak  kombinasi  dari  kedua  sampel  tidak memberikan pengaruh terhadap gambaran makroskopis organ usus tikus.

## Hasil  Penimbangan  Berat  Badan  Tikus  Putih Jantan Galur Wistar (Rattus norvegicus)
Data rata – rata hasil penimbangan berat badan tikus putih jantan galur wistar ( Rattus norvegicus ) sebelum dan sesudah perlakuan dapat di lihat pada gambar 7.
Gambar 5. Dosis IV
Gambar 6. Dosis V
Penimbangan  berat  organ  dilakukan  setelah tikus  dibedah.  Dari  hasil  pengamatan  data  grafik penimbangan berat organ usus tikus pada gambar 7 dapat  dilihat  bahwa  kelompok  dengan  perlakuan dosis  I  (10,8mg  Bawang  Dayak)  yang  paling tinggi,  sedangkan  berat  organ  usus  tikus  yang paling  rendah  dapat  dilihat  pada  kelompok perlakuan dengan dosis IV (14,4mg Pinang Yaki). Penimbangan  berat  badan  tikus  dan  berat  organ usus tikus adalah salah satu data pendukung guna melihat  pengaruh  ekstrak  kombinasi  pada  hewan uji.
Berdasarkan  dari  hasil  penelitian  yang dilakukan  oleh  Yosiati  (2012),  terdapat  beberapa faktor yang menunjukan memiliki korelasi dengan berat organ seperti korelasi panjang badan dengan berat  organ  pada  penelitiannya  menunjukkan terdapat  korelasi  yang  signifikan  (p  <0,05)  dan korelasi  antara  berat  badan  dengan  berat  organ pada  penelitiannya  menunjukan  terdapat  korelasi yang signifikan (p <0,05). Jadi untuk variasi berat organ  usus  tikus  putih  jantan  yang  terdapat  pada grafik  dipengaruhi  oleh  panjang  badan  dan  berat badan dari tikus seperti berat organ pada kelompok kontrol  dengan  berat  badan  207  gram  yaitu  7.78 gram sedangkan untuk kelompok dosis IV dengan berat  badan  177  gram  yaitu  5.67  gram.  Terdapat perbedaan berat badan antara tikus dari kelompok kontrol dan kelompok dosis IV.
Berdasarkan  dari  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan oleh Ersawati (2018), rasio berat organ usus  tidak  terjadi  perubahan  yang  begitu  nyata yang  artinya  hewan  yang  diberi  variasi  dosis memiliki rasio berat organ hati yang sama dengan kelompok  yang  tidak  diberi  dosis  (kelompok kontrol)  sehingga  pemberian  tepung  daun  kelor pada pakan tikus tidak menyebabkan perubahan
sistem  pencernaan  khususnya  terhadap  berat  usus halus dan usus besar. Hal ini diduga karena adanya kesamaan manajemen pemeliharaan, waktu pemeliharaan,  jenis  kelamin,  dan  umur  yang seragam.
Pemberian  ekstrak  etanol  bawang  dayak ( Eleutherine  americana Merr.)  dan  pinang  yaki ( Areca vestiaria ) pada kelompok perlakuan masih dapat  direspon  baik  oleh  tikus,  dimana  setelah masuk ke sistem pencernaan ekstrak etanol bawang dayak  ( Eleutherine  americana Merr.)  dan  pinang yaki ( Areca vestiaria ) mengalami proses  absorbsi yang  terjadi  didalam  organ  usus.  Pemberian ekstrak  etanol  bawang  dayak  ( Eleutherine americana Merr.)  dan  pinang  yaki  ( Areca vestiaria ) tidak memberikan efek untuk organ usus sehingga tidak mempengaruhi berat dari organ.
Hasil  Penimbangan  Berat  Badan  Tikus  Putih Jantan Galur Wistar (Rattus norvegicus)
Parameter  yang  merupakan  indikator  sensitif untuk  mengetahui  toksisitas  yaitu  salah  satunya perubahan pada berat badan (Gupta dan Bhardwaj, 2012).  Penimbangan  berat  badan  tikus  ini dilakukan setiap hari selama tikus diberi perlakuan. Penimbangan  berat  badan  dan  berat  organ  ini bertujuan  untuk  memantau  kondisi  tikus  maupun organ  tikus  setelah  dilakukan  perlakuan  dan mengetahui kesehatan hewan uji setelah perlakuan serta memantau berat badan tikus dan berat badan organ  usus  tikus  antar  kelompok  kontrol  dengan kelompok  perlakuan.  Data  rata  –  rata  hasil penimbangan  berat  badan  tikus  sebelum  dan setelah perlakuan dapat dilihat pada gambar 8.
160 170 180 190 200 210 Berat Badan Tikus Series 1
Sesuai dengan grafik hasil penimbangan berat badan  tikus,  rata  –  rata  hasil  penimbangan  tikus kontrol  memiliki  ukuran  normal  yang  menjadi patokan sebagai kontrol negatif. Dari data yang ada dapat  dilihat  bahwa  berat  badan  tikus  selama  14 hari  mengalami  peningkatan  pada  kelompok kontrol  sedangkan  pada  kelompok  perlakuan dengan  masing  –  masing  dosis  mengalami penurunan berat badan.
Perubahan  berat  badan  tikus  yang  mendapat perlakuan  tidak  terlalu  berbeda  sebelum  dan setelah  mendapatkan  perlakuan.  Penurunan  berat badan  tikus  juga  tidak  mencapai  10%.  Menurut OECD  (2008),  dikatakan  toksik  apabila  terjadi perubahan  berat  badan  sampai  10%.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak  etanol bawang  dayak  ( Eleutherine  americana Merr.), ekstrak  etanol  pinang  yaki  ( Areca  vestiaria )  dan kombinasi ekstrak etanol bawang dayak ( Eleutherine  americana Merr.)  dan  pinang  yaki ( Areca  vestiaria )  tidak  berpengaruh  terhadap perkembangan berat badan tikus.
Dari  hasil  pengamatan  dapat  disimpulkan bahwa pengamatan makroskopis setiap organ usus tikus  kelompok  kontrol  dan  kelompok  uji  tidak memiliki  perbedaan  warna  dan  konsistensi  organ sedangkan  untuk  berat  organ  memiliki  variasi antara satu dengan yang lain hal ini diduga karena berat  organ  dapat  dipengaruhi  oleh  panjang  tikus dan berat  badan  tikus.  Hasil  penelitian  ini  sejalan dengan  hasil  studi  yang  dilakukan  oleh  Muh. Rifain  (2021)  yang  melakukan uji in  vivo ekstrak umbi bawang hutan terhadap gambaran makroskopis  organ  usus  tikus  putih  jantan  galur wistar.
Terjadinya penurunan berat badan secara nyata merupakan salah satu indikator yang paling mudah terlihat  dan  menjadi  indicator  awal  adanya  efek toksik dari sampel uji yang diberikan pada hewan uji. Pada uji toksisitas, berat badan hewan uji yang mendapat dosis tinggi umumnya kehilangan berat badan  yang  disebabkan  oleh  penurunan  nafsu makan  (Magfirah  dan  Christin,  2020).  Penurunan berat badan pada tikus juga dapat terjadi karena di dalam  ekstrak  bawang  dayak  dan  ekstrak  pinang yaki  memliki  efek  antiobesitas  yang  dapat menurunkan  berat  badan  pada  masing  –  masing kelompok  perlakuan  yang  diberikan  dosis. Senyawa  yang  berpotensi  sebagai  antiobesitas yaitu flavonoid. Flavanoid merupakan antioksidan dapat bekerja sebagai inhibitor lipase pankreas dan menurunkan nafsu makan (Dzomba dan Musekiwa, 2014). Flavanoid juga diketahui dapat menurunkan  akumulasi  lipid  dihati,  mengurangi
penyerapan  glukosa,  menghambat  polisakarida menjadi  monosakarida.  Hal  ini  menyebabkan absorbsi  lemak  berkurang  sehingga  menurunkan berat badan (Fauzi et al ., 2019).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  didapatkan bahwa  pemberian  ekstrak  kombinasi  bawang dayak  ( Eleutherine  americana Merr.)  dan  pinang yaki ( Areca vestiaria ) tidak berpengaruh terhadap gambaran makroskopis pada organ usus tikus putih jantan Galur Wistar ( Rattus norvegicus ).

## SARAN
Disarankan  untuk  dilakukan  penelitian  lebih lanjut  untuk  mengetahui  apakah  ada  pengaruh kombinasi  ekstrak  bawang  dayak  ( Eleutherine americana Merr.)  dan  pinang  yaki  ( Areca vestiaria )  secara  mikroskopis  terhadap  gambaran organ usus agar pembaca mendapat informasi yang lebih luas.

## DAFTAR PUSTAKA
BPOM  RI.  2014.  Peraturan  Kepala  Badan Pengawas  Obat  Dan  Makanan  Republik Indonesia  Nomor  7  Tahun  2014  Tentang Pedoman Uji Toksisitas Nonklinik Secara In Vivo.  Badan  Pengawasan  Obat  dan Makanan RI, Jakarta.
Dzomba, P., and C. Musekiwa. 2014. Anti-obesity and  Antioxidant  Activity  Of  Dietary Flavonoid From Dioscorea Steriscus Tubers. Journal  of  Coastal  Life  Medicine 2(6): 465-470.
Ersawati, N., N.N.W. Susari., dan N.L.E. Setiasih. 2018. Berat Organ Usus Tikus Putih ( Rattus Norvegicus )  Pasca  Penambahan  Tepung Daun Kelor ( Moringa Oleifera ) pada Pakan. Indonesia  Medicus  Veterinus. 7(3): 278- 284. Gupta, D., dan S. Bhardwaj. 2012. Study of Acute, Subacute  and  Chronic  Toxicity  Test .
Internasional Journal of Advanced Research in  Pharmaceutical  and  Bio  Sciences (IJARPB). 1(2): 103-110.
Khairunnisa.,  M.Y.  Ichrom.,  dan  S.  Diana.  2018.
Toxicity Test Of Dayak Onion Bulbs Extract (Eleuthherine  palmifolia  (L)  Merr)  On Artemia  salina  Leach  Using  Bslt  Method .
Jurnal Kedokteran Gigi. 3(1): 91-95.
Magfirah.,  dan  V.  Christin.  2020.  Analisis  Profil Bobot Badan Tikus dan Gejala Toksis pada Pemberian  Ekstrak  Etanol  Daun  Parang Romang  ( Boehmeria  virgate )  Terhadap
Tikus  Putih  ( Rattus  norvegicus ).  Jurnal Farmasi  Galenika  ( Galenika  Journal  of Pharmacy ). 6(1): 1-6.
Mokoginta,  V.R.,  H.E.I  Simbala  &  K.L.R Mansauda. 2020. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak  Etanol  Bulbus  Bawang  Dayak ( Eleutherine  americana Merr.)  Dengan Metode DPPH ( 1,1-Diphenyl-2- Picrylhydrazyl ).  Jurnal  Pharmacon. 9(3): 451-457.
OECD.  2008. Organization  for  Economic Cooperation and Develompment Guidelines for  the  Testing  of  Chemicals . TG  407. Environment Directorate, Paris. Pandaleke,  S.S.,  Queljoe,  ED.,  Abdullah,  S.S., (2022). Uji Efektivitas Ekstrak Etanol Daun Sirsak  ( Annona  muricata  L. )  Untuk Menurunkan Kadar Gula Darah Tikus Putih Jantan  ( Rattus  norvegicus )  Yang  Diinduksi Aloksan, Pharmacon , 11(1) , 1321–1324. Prayitno,  B.,  B.H.  Mukti  &  Lagiono.  2018.
Optimasi potensi
bawang dayak ( Eleutherine  sp. )  sebagai  bahan  obat alternatif.  Jurnal  Pendidikan  Hayati. 4(3): 149-158. Rifain, M. 2021. Uji Invivo Ekstrak Umbi Bawang Hutan  ( Eleutherine  americana Merr.) Terhadap  Gambaran  Makroskopis  Organ Usus  Tikus  Putih  Jantan  Galur  Wistar ( Rattus norvegicus )  [skripsi].  FMIPA Universitas Sam Ratulangi, Sulawesi Utara. Rondonuwu,  G.  T.,  H.  Simbala,  E.  Rumondor. 2021.  Uji  Invivo  Ekstrak  Umbi  Bawang Hutan  ( Eleutherine  americana Merr.) Terhadap  Gambaran  Makroskopis  Organ Jantung  Tikus  Putih  Jantan  Galur  Wistar ( Rattus  norvegicus ).  Pharmacon,  Jurnal Ilmiah Farmasi. 10(2): 912-918. Simbala,  H.E.I.  2007.  Keanekaragaman  Floristik dan  Pemanfaatannya  Sebagai  Tumbuhan Obat  di  Kawasan  Konservasi  II  Tanaman
Nasional Bogani Nani Wartabone (Kabupaten Bolaang Mongondow Sulawesi
Utara) Provinsi Sulawesi Utara [ Disertasi ]. FMIPA IPB, Bogor.
Simbala,  H.E.I.  2007.  Uji  Toksisitas  dan  Uji
Preklinik Areca  vestiaria /Pinang  Yaki
Sebagai Antifertilitas.
Sutomo.,  M.  Rafi.,  dan  Arnida.  2019.  Pengaruh Pemberian  Fraksi  Etil  Asetat  Buah  Kasturi ( Mangifera  casturi Kosterm.)  Terhadap
Gambaran Makroskopis-Mikroskopis Organ Hati Tikus Putih Jantan. Jurnal Pharmascience. 6(1): 106-113.
Vdoviaková, K., E. Petrovová., M. Malove šká., L. Krešáková., J. Taleky., M.Z.J. Elias., dan D. Petrásová.  2016. Surgical  Anatomy  of  the Gastrointestinal  Tract  and  Its  Vasculature in the Laboratory Rat . http://dx.doi.org/10.1155/2016/2632368 [26
Mei 2022].
Yosiati,  N.,  B.I.  Fitrasanti.,  dan  Y.F.  Syukriani.
2012. Hubungan Antara Profil Berat Organ Manusia  Indonesia  Dengan  Umur,  Jenis Kelamin,  Panjang  Badan,  dan  Berat  Badan (Studi di RSUP Dr. Hasan Sadikin Bandung Tahun  2008-2012). Indonesian  Journal  of Legal and Forensic Sciences . 2(3): 54-60.