## KAJIAN PATOGENITAS BAKTERI SALURAN PENCERNAAN
IKAN PAPUYU  (Anabas testudineus BLOCH) SEBAGAI KANDIDAT PROBIOTIK  SISTEM BIOFLOK
STUDY OF DIGESTIVE TRACT BACTERIAL PATHOGENICITY PAPUYU FISH (Anabas testudineus BLOCH) AS PROBIOTIC CANDIDATE FOR BIOFLOC SYSTEM
Agussyarif Hanafie 1 , Akhmad Murjani 2 , Hida Zakiah 3 , Ismi Khoeriah 4
1,2,3,4) Program Studi Akuakultur, Fakultas Perikanan dan Kelautan, Universitas Lambung Mangkurat Banjarbaru, Kalimantan Selatan.
Email Author : agus.shanafie@ulm.ac.id

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk mengkaji patogenitas bakteri pada saluran pencernaan ikan papuyu    sebagai  kandidat  probiotik  sistem  bioflok.    Penelitian    dimulai  dengan mengisolasi,  menyeleksi,  mengidentifikasi  bakteri  yang  didapatkan  dari  saluran pencernan,  diawali  dengan  menggerus  saluran  pencernaan  ikan  papuyu  dan  diencerkan, kemudian  dikultur.  Koloni  yang  didapat  dimurnikan  dan  diseleksi  dengan  uji metabolisme, uji antagonis dan diidentifikasi secara biokimiawi serta diuji tahan suhu dan tahan  asam  (pH),  kemudian  dilanjutkan uji  patogenitas,  LD50.  dengan  10    pengenceran (perlakuan)  dan  4  ulangan  dengan  ikan  papuyu  20  ekor  per  akuarium    sebagai  ikan uji. Hasil  penelitian  menunjukkan    Hasil  penelitian  dari  3  lokasi  berbeda  pada  lokasi  A1 Guntung Payung, lokasi  A2 Loktabat  dan  lokasi A3  martapura.  Bakteri  yang ditemukan terdapat 47 isolat yang terdiri dari pada lokasi A1 15 isolat, lokasi A2 15 isolat dan lokasi A3  17  isolat. Hasil pengamatan makroskopik  diperoleh 5  isolat morfologi yang  berbeda berdasarkan  bentuk,  warna,  tepian  dan  elevasi  permukaan  koloni.  Pengamatan mikroskopik  dengan  uji  KOH diperoleh 3  Gram  positif dan  2  Gram  negatif.  Identifikasi bakteri  yang  ditemukan  terdiri  dari  bakteri  genus  Bacillus  sp.,  Plesiomonas  sp., Staphylococcus  sp.,  Flavobacterium  sp.,  dan  Micrococcus  sp.    Hasil  uji patogenitas  dan LD50 menunjukkan  semua perlakuan kelulusanhidupnya 100 %, dengan demikian uji ini bakteri dari usus ikan papuyu lulus – dapat digunakan  sebagai kandidat probiotik.
Kata Kunci : identifikasi, patogenitas, kadidat probiotik, papuyu, bioflok

## ABSTRACT
This study aims to examine the pathogenicity  of bacteria in the digestive  tract  of  papuyu fish  as  a  candidate  for  probiotics  in  the  biofloc  system.  The  study  began  by  isolating, selecting, identifying bacteria obtained from the digestive tract, starting with grinding the digestive tract of papuyu fish and diluted, then cultured. Colonies obtained were purified and selected by metabolic test, antagonist test and identified biochemically and tested for temperature  resistance  and acid resistance  (pH), then  continued  with  pathogenicity  test, LD50. with 10 dilutions (treatment) and 4 replications with 20 papuyu fish per aquarium as  test  fish.  The  results  showed  the  results  of  the  study  from  3  different  locations  at
location  A1  Guntung  Payung,  location  A2  Loktabat  and  location  A3  martapura.  The bacteria found  were 47  isolates  consisting  of 15  isolates at  location  A1, location  A2  15 isolates and location  A3 17 isolates. The results  of macroscopic observations  obtained 5 different morphological isolates based on  the  shape, color, edge and surface elevation of the colony. Microscopic observation with KOH test obtained 3 Gram positive and 2 Gram negative. Identification of  bacteria  found  consisted  of  bacteria  of the  genus Bacillus  sp., Plesiomonas  sp.,  Staphylococcus  sp.,  Flavobacterium  sp.,  and  Micrococcus  sp.  The results of the pathogenicity test and LD50 showed that all treatments had a 100% survival rate,  thus  this  test  passed  bacteria  from  the  intestines  of  papuyu  fish  –  which  could  be used as probiotic candidates.
Keywords: identification, pathogenicity, candidate probiotics, papuyu, biofloc
PENDAHULUAN Ikan Papuyu adalah ikan
yang pertumbuhannya  sangat  lambat.  Ikan  papuyu memiliki  nilai  ekonomi  yang  tinggi  dan banyak  diminati  serta  menjadi  makanan favorit  masyarakat.  Menurut  Hanafie  (2019), papuyu  merupakan  spesies  endemik  di perairan  rawa  gambut  Kalimantan  Selatan, harga  4-6  ekor  per  kilogram  mencapai (Rp60.000  –  140.000/kg),  rasa  daging  asin dan  gurih  dan  dapat  diolah  menjadi  berbagai masakan.  Menurut  Irwandi  dan  Fahri  (2000) dari  Rukmini  (2014),  ikan  papuyu  dipelihara di  kolam  dengan  masa  pemeliharaan  ±  5 bulan,  dimana  bobot  tebar  awal  ikan  10-15 g/ekor,  ikan  papuyu  diberi  pakan  pelet sebanyak  3-5%  dari  bobot  tubuhnya  dan diberi pakan  2-3  kali  sehari. Kemudian bobot ikan papuyu saat panen hanya 60-65 g/ekor. Ikan  papuyu  memiliki  kelemahan  seperti pertumbuhan  yang  lambat,  rentan  terhadap cedera  dan penyakit, serta  perlu menjaga ikan agar  tetap  sehat,  merangsang  pertumbuhan, dan  menjaga  kualitas induk  dan benih. Selain
itu,  perlu  memahami  sifat,  kebiasaan  hidup, dan kondisi kehidupan petani untuk meminimalkan  risiko  kegagalan  pemuliaan. Untuk membantu pertumbuhannya dan meningkatkan kualitas  lingkungan hidup ikan papuyu  maka  perlu  dilakukan  pemilihan wadah  dan  jenis  pakan  yang  sesuai  sebagai induksi  pertumbuhan  benih  ikan  papuyu. Menurut Avnimelech (2007), terdapat metode baru untuk meningkatkan produktivitas budidaya dengan meningkatkan kelangsungan hidup,  efisiensi  pakan dan pertumbuhan  ikan, serta mengurangi limbah yang dihasilkan oleh kegiatan budidaya, yaitu teknologi bioflokulasi  (BFT-Bioflocs  technology).  . Bioflok  adalah  sejenis  zat  tersuspensi  yang tersuspensi dalam air, tersusun atas fitoplankton,  bakteri,  agregat  hidup,  bahan organik, dan bakteri pemakan bakteri (Hargreaves, 2006; Avnimelech, 2007). Bioflok merupakan teknologi yang memanfaatkan bakteri (organisme
heterotrofik  dan  autotrofik)  yang  tumbuh  di dalam  air  dengan  memanfaatkan  sumber karbon  eksternal  dan  kadar  oksigen  yang
tinggi  sehingga  dapat  mengkonsentrasikan sampah organik menjadi kumpulan mikroorganisme  flokulan  (Avnimelech, 2012; Putra et  al .,  2017).  Ma'in et  al .,  (2013) mengemukakan  bahwa  prinsip  penerapan teknologi  bioflok  adalah  mengubah  limbah amonia  dan  nitrit  di  kolam  budidaya  menjadi bahan  pakan  alami  dengan  bantuan  bakteri heterotrofik.Hanya  bakteri  yang  menyerap anorganik  Proses  nitrogen  terjadi  ketika  rasio C/N  lebih  tinggi  dari  10.  Teknologi  bioflok dapat  dicapai  dengan  menambahkan  sumber karbon  organik  ke  dalam  media  kultur  untuk meningkatkan  rasio  C/N  (Crab et  al .,  2007;
Emerenciano et  al .,  2012).Beberapa  sumber
karbon yang dapat digunakan untuk membentuk bioflok antara lain molase, tepung singkong,  dan  gula  pasir  (Purnomo,  2012). Bakteri  heterotrof  adalah  komponen  utama flok  biologis.  Di  alam,  bakteri  heterotrof mendominasi ketersediaan berbagai mikroorganisme.  Namun,  bakteri  heterotrofik yang  terbentuk  sebagai  bioflok  juga  dapat diperoleh  dari  kultur  murni  atau  sebagai produk komersial (probiotik) (Putri, 2015).
Isolasi  bakteri  usus  ikan  dipisahkan  oleh bakteri  untuk  mengetahui  apakah  bakteri menguntungkan  dalam  media  flok  biologis tersebut benar-benar dimakan oleh ikan.Dengan  terbentuknya  flok-flok  yang terbentuk,  selain  sebagai  pakan  buatan,  ikan juga  memanfaatkannya  sebagai  pakan  alami. Dari  bakteri  dan  beberapa  organisme  lain yang  mengandung  protein  tinggi.  Beberapa
bakteri yang terdapat dalam saluran pencernaan  hewan  berperan  penting  dalam meningkatkan  pemanfaatan  pakan,  kesehatan ikan,  dan  memperbaiki  lingkungan  dan kualitas mikroba (Watson et al. , 2008). Selain itu,  beberapa  bakteri  di  saluran  pencernaan berperan  penting  dan  menghasilkan  beberapa enzim  di  saluran  pencernaan  yang  mungkin berperan dalam metabolisme.
Keberhasilan  pemberian  probiotik  dalam media  bioflok  selama  ini  hanya  dilihat  dari keberhasilan  berdasarkan  jumlah  ikan  dan berat  ikan  tetapi  banyak  akuakultur  bioflok yang  kurang  berhasil,  kemungkinan  bakteri telah  tidak  aktif  sehingga  perlu  dilakukan  uji terhadap  bakteri  yang  ada  dalam  media  air bioflok  dan  usus  ikan  papuyu,  maka  dari  itu dilakukannya  penelitian  dengan  mengisolasi, karakterisasidan mengidentifikasi bakteri pada  media  bioflok  dan  dari  usus  ikan papuyu.

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat
Pelaksanaan penelitian ini di Laboratorium  Nutrisi  Ikan,  Laboratorium Hama  Penyakit  Ikan,  Lab  Basah  Fakultas Perikanan  dan  Kelautan  dan  di  Balai  KIPM Banjarmasin. Sampel yang diambil ada 3 titik tempat  yaitu  Guntung Payung  (A1),  Loktabat (A2) dan Martapura (A3).

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  meliputi  serok, cawan petri,  tabung  reaksi, rak  tabung  reaksi, Erlenmeyer,  mikropipet,  gelas  ukur  100  ml, Bunsen,  pipet  tetes,  alat  bedah,  sprayer, timbangan,  batang  pengaduk,  ose  lengkung, hot  plate,  mikroskop,  objek  glass,  autoclave, panci,  kompor, nampan, blue  tip,spuit,  cawan porselen,  beaker  glass,  gunting.  Bahan  yang digunakan  yaitu  ikan  papuyu,  media  bioflok, TSA,  pewarnaan  Gram,  larutan  KOH  3%, kapas,  tissue,  spritus,  alcohol,  NaCl  fisiologi, akuades, kertas burem, karet gelang, aluminium  foil,  plastik  tahan  panas,  plastik wrapping dan kasa.
Tahapan  penelitian  terdiri  dari  preparasi  alat dan  bahan,  pengambilan  sampel,  isolasi bakteri,  tahapan  pemurnian  kultur  bakteri, pembuatan stok bakteri, pengamatan makroskopik,  pengamatan  mikroskopik,  uji biokimia terdiri dari uji katalase, uji oksidase, pewarnaan  Gram,  uji  TSIA, uji LIA, uji O/F, uji MIO, uji citrate dan uji urea.

## Analisis Data
Analisis
data menggunakan metode kualitatif sebagai  prosedur  penelitian yang  menghasilkan data  deskriptif.  Data-data yang diperoleh pada tahapan karakterisasi dan diidentifikasi menurut
Bergey’s
of Determinative  Bacteriology  8 th Edition oleh Holt et  al .,  1994,  dianalisis  dengan  membuat tabulasi,  dan  deskripsi,  serta  gambaran  secara sistematis dan akurat secara ilmiah.
Tahapan penelitian Kedua :
Tahapan  penelitian  kedua  terdiri  dari persiapan  awal,  peningkatan  virulensi  bakteri melalui  reinfeksi  pada  ikan,  uji  patogenisitas (LD50),  pengamatan  gejala  klinis,  rerata waktu kematian,
mortalitas dan histopatologis.    Persiapan  awal  terdiri  dari persiapan wadah pemeliharaan yaitu akuarium,  sterilisasi  alat-alat  dan  bahan  yang akan  digunakan.  Wadah    diisi  dengan  air sebanyak ¾  wadah. Kemudian persiapan ikan uji,  yaitu  ikan  papuyu  sehat  yang  berukuran 11-12  cm  sebanyak  440  ekor  yang  diperoleh dari  pembudidaya  ikan  di  daerah    Kampung Iwak Mentoas Kota Banjarbaru
Uji patogenisitas bakteri menggunakan perlakuan  dengan  teknik pengenceran dari 10 1¬  sampai  10-10  dan  K  (Kontrol)  dengan4 ulangan,  sehingga  terdapat  40  unit  percobaan dalam  penelitian.  Masing-masing  wadah berisi 10 ekor ikan papuyu. Bakteri kemudian diinjeksikan  pada  400  ekor  ikan  dengan teknik  intramuskular  dengan  dosis  0,1 ml/ikan. Ikan  papuyu dipelihara selama 7 hari pada  wadah  dan  diberikan  pakan  pelet  dua kali  sehari  selama  masa  pemeliharaan. Parameter  yang  diamati  selama  masa  uji patogenisitas,  yaitu  LD50,  gejala  klinis  yang ditimbulkan  pada  ikan  papuyu  pasca  injeksi bakteri  dan  pengamatan  pada  rerata  waktu kematian,  mortalitas  ikan  papuyu.  Parameter yang  diamati  dalam  penelitian  ini  adalah sebagai berikut:
Lethal Dosis 50 (LD50)
LD50  (Lethal  Dose  50),  yaitu  dosis bakteri  yang  dapat  mematikan  hewan  uji sebanyak  50%  pada  waktu  yang  ditentukan. LD50  dihitung  dengan  metode  Reed  & Muench  (1938  dalam  Anderson,  1974  dalam Olga, 2012), dengan rumus sebagai berikut:
LogLD50 = - "(b-50)" /"(b-c)"
Keterangan: a : Log ∑ bakteri di atas LD50
b : % mortalitas di atas 50 % c : % mortalitas di bawah 50 %
Gejala Klinis
Gejala  klinis  pada  ikan  papuyu  diamati  pada uji  patogenisitas  yang  dilakukan  selama  7 hari.  Pengamatan  dilakukan  secara  periodik setiap  24  jam  sekali  selama  7  hari pemeliharaan.  Ikan  yang  menunjukkan  gejala sakit kemudian diamati gejala klinisnya. Mortalitas  dan  Rerata  Waktu  Kematian (RWK)
Mortalitas  adalah  perbandingan  jumlah  ikan yang  hidup  di  awal  dan  akhir  penelitian. Mortalitas dapat  dihitung  menggunakan rumus  sebagai  berikut  (Effendie,  1997  dalam Putra et al., 2017):
M = (No-Nt)/No x 100 % Keterangan: M :  Mortalitas No : Jumlah ikan awal (ekor) Nt : Jumlah ikan akhir (ekor)
Rerata Waktu Kematian (Mean Time to Death =  MTD),  dihitung  menggunakan  rumus sebagai berikut (Nitimulyo et al., 2005):
MTD  =  ( ∑_(i=1)^n a_(i  )  b_(i  ) )/( ∑_(i=1)^n b_i )
Keterangan: a : Waktu kematian (hari) b : Jumlah ikan yang mati (ekor)
Tabel 3.1 Pengkodean Bakteri
Sumber: data primer (2021).
Ketengan:  (GMB)  Guntung  Payung  Media Bioflok, (GUBM) Guntung Payung Usus Ikan Sebelum  makan,  (GUSM)  Guntung  Payung Usus  Ikan  Sesudah  Makan,  (LMB)  Loktabat Media  Bioflok,  (LUBM)  Loktabat  Usus  Ikan Sebelum Makan, (LUSM) Loktabat Usus Ikan Sesudah  Makan,  (MMB)  Martapura  Media Bioflok,  (MUBM)  Martapura  Usus  Ikan Sebelum  Makan,  (MUSM)  Martapura  Usus Ikan Sesudah Makan.
Isolasi  pada  penelitian  dilakukan  untuk mengambil,  memisahkan  atau  mendapatkan bakteri  yang  terdapat  pada  media  bioflok, usus ikan  papuyu  baik  yang  sebelum maupun pada  usus  ikan  sesudah  makan  sesuai perspektif Singleton dalam Sabbathini, (2020)
yang  menyatakan  bahwa  partisi  bakteri diharapkan dapat menentukan
jenis, mempelajari  cara  hidup,  morfologi,  fisiologi dan  kualitas.  Strategi  pembagian  disebut isolasi.Isolat bakteri yang  telah murni diberikan  pengkodean  untuk  memudahkan dalam pengamatan selanjutnya.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Isolasi Bakteri
Isolasi  bakteri  yang  diambil  dari  media bioflok  dan  dari  usus  ikan  papuyu  sebelum dan  sesudah  diberi  makan  yang  dipelihara dalam  akuakultur  sistem  bioflok.  Isolasi bakteri dengan ditumbuhkan pada media TSA dengan  metode  tuang  dan  diinkubasi  18-24 jam.
Berdasarkan  Tabel  3.1  isolasi  bakteri  dari  3 lokasi didapatkan 47 isolat bakteri yaitu:
1) Sampel A1  terdapat 15 isolat  yang diberi kode  GMB1,  GMB2,  GMB3,  GMB4,
GUBM1,  GUBM2,  GUBM3,  GUBM4, GUBM5,  GUSM1,  GUSM2,  GUSM3, GUSM4, GUSM5, dan GUSM6.
2) Sampel  A2  terdapat  jumlah  15  isolat yang  diberi  kode  LMB1,  LMB2,  LMB3, LMB4,  LUBM1,  LUBM2,  LUBM3, LUBM4,  LUBM5,  LUSM1,  LUSM2,
LUSM3, LUSM4, LUSM5, dan LUSM6.
3) Sampel A3  terdapat 17 isolat  yang diberi
kode  MMB1,  MMB2,  MMB3,  MMB4,
MMB5,  MUBM1,  MUBM2,  MUBM3,
MUBM4,  MUBM5,  MUBM6,  MUSM1, MUSM2,  MUSM3,  MUSM4,  MUSM5, dan MUSM6.
Isolasi  bakteri  yang  telah  murni  perlunya pengkodeaan  agar  memudahkan  mengingat untuk melakukan pengujian lainnya
(Sabdaningsih, et al., 2013).

## 1.1 Karakterisasi dan Identifikasi Bakteri
1) Morfologi Bakteri
a. Morfologi Bakteri Lokasi A1 (GP)
Hasil  penelitian  pengamatan  bakteri  pada lokasi  A1  terdiri  dari  uji  morfologi  bakteri pada  media  bioflok,  pada  usus  ikan  sebelum makan dan sesudah makan, seperti pada Tabel 3.2, 3.3, dan 3.4.
Tabel  3.2  Morfologi  Bakteri  Sampel  A1 Media Bioflok
Dari  Tabel  3.2  menunjukan  bakteri  pada sampel  A1  media  bioflok  terdapat  4  isolat yang  berbeda,  perbedaan  yang  sangat  terlihat yaitu  pada  warna,  terdapat  warna  kuning pekat,  putih  dan  cream  serta  bentuk  koloni pada  bakteri  berbentuk  bulat  dan  ada  yang menyebar.
Tabel  3.3 Morfologi Bakteri  Sampel A1 Usus Ikan Sebelum Makan
Sumber: data primer (2021)
Berdasarkan  pada  Tabel  3.3bakteri  yang terdapat  pada  sampel  A1  usus  ikan  sebelum diberi  makan  ada  5  isolat  bakteri  yang memiliki  warna  yang  berbeda-beda  terdiri dari  yang  berwarna  cream  dengan  bentuk bundar,  cream  dengan  bentuk  menyebar  tak beraturan,  kuning  pekat  dengan  bentuk bundar,  kuning  dengan  bentuk  bundar  serta yang berwarna putih dengan bentuk bundar.
Tabel  3.4  Morfologi Bakteri Sampel A1 Usus Ikan Sesudah Makan
Sumber: data primer (2021).
Berdasarkan  pada  Tabel  3.4  menunjukan bakteri  yang  terdapat  pada  usus  ikan  yang sudah  diberi  makan  terdapat  6  jenis  bakteri. Perbedaan  dilihat dari  morfologi  nya  terdapat yang  berwarna  putih  dengan  bentuk  bundar, cream  dengan  bentuk  yang  menyebar,  cream yang berbentuk keriput, cream dengan bentuk bundar  kecil-kecil,  kuning  dengan  bentuk
bundar  dan  ada  yang  berwarna  kuning  pekat dengan bentuk bundar.
b. Morfologi Bakteri Lokasi A2 (LT)
Hasil  penelitian  pengamatan  bakteri  pada lokasi  A2  terdiri  dari  uji  morfologi  bakteri pada  media  bioflok,  pada  usus  ikan  sebelum makan dan sesudah makan, seperti pada Tabel 3.5, 3.6, dan 3.7.
Tabel  3.5  Morfologi  Bakteri  Sampel  A2 Media Bioflok
Sumber: data primer (2021).
Berdasarkan  pada  Tabel  3.5  bakteri yang  terdapat  pada  sampel  A2  media  bioflok ada 4 isolat bakteri yang memiliki warna yang berbeda-beda terdiri dari yang berwarna  putih dengan  bentuk  bundar, kuning dengan  bentuk bundar,  cream  dengan  bentuk  menyebar  tak beraturan  serta  yang  berwarna  kuning  pekat dengan bentuk bundar.
Tabel 3.6 Morfologi Bakteri  Sampel A2 Usus Ikan Sebelum Makan
Sumber: data primer (2021).
Berdasarkan  pada  Tabel  3.6bakteri yang  terdapat  pada  sampel  A2  usus  ikan
sebelum  makan  ada  5  isolat  bakteri  yang memiliki  warna  yang  berbeda-beda  terdiri dari  yang  berwarna  cream  dengan  bentuk bundar, kuning  dengan  bentuk  bundar,  cream dengan  bentuk  menyebar,  kuning  pekat dengan  bentuk  bundar  dan  putih  dengan bentuk koloni bundar.
Tabel 3.7  Morfologi Bakteri  Sampel A2 Usus Ikan Sesudah Makan
Sumber: data primer (2021).
Berdasarkan  pada  Tabel  3.7  bakteri yang  terdapat  pada  sampel  A2  usus  ikan sesudah  makan  ada  6  isolat  bakteri  yang memiliki warna  cream dengan bentuk bundar, cream dengan bentuk menyebar, kuning pekat dengan  bentuk  bundar,  putih  dengan  bentuk bundar,  cream  dengan  bentuk  keriput,  dan warna kuning dengan bentuk koloni bundar.

## c. Morfologi Bakteri Lokasi A3 (MT)
Hasil  penelitian  pengamatan  bakteri  pada lokasi  A3  terdiri  dari  uji  morfologi  bakteri pada  media  bioflok,  pada  usus  ikan  sebelum makan dan sesudah makan, seperti pada Tabel 3.8, 3.9, dan 3.10.
Tabel  3.8  Morfologi  Bakteri  Sampel  A3 Media Bioflok
Sumber: data primer (2021).
Berdasarkan  pada  Tabel  3.8bakteri yang  terdapat  pada  sampel  A3  media  bioflok ada 5 isolat bakteri yang memiliki warna yang berbeda-beda  terdiri  dari  yang  berwarna cream  dengan  bentuk  keriput,  kunig  pekat dengan  bentuk  bundar,  putih  dengan  bentuk bundar,  cream  dengan  bentuk  menyebar, kuning dengan bentuk bundar.
Tabel  3.9  Morfologi  bakteri  sampel  A3  usus ikan sebelum makan
Sumber: data primer (2021).
Berdasarkan  pada  Tabel  3.9bakteri yang  terdapat  pada  sampel  A3  usus  ikan sebelum  makan  ada  6  isolat  bakteri  yang memiliki  warna  yang  berbeda-beda  terdiri dari  yang  berwarna  putih  dengan  bentuk bundar, kuning dengan bentuk bundar, kuning pekat  dengan  bentuk  bundar,  cream  dengan bentuk  menyebar,  cream  dengan  bentuk bundar dan cream dengan bentuk keriput.
Tabel  3.10  Morfologi  Bakteri  Sampel  A3 Usus Ikan Sesudah Makan
Sumber: data primer (2021).
Berdasarkan  pada  Tabel  3.10  bakteri yang  terdapat  pada  sampel  A3  usus  ikan sesudah  makan  ada  6  isolat  bakteri  yang memiliki  warna  yang  berbeda-beda  terdiri dari  yang  berwarna  cream  dengan  bentuk menyebar,  kuning  pekat  dengan  bentuk bundar,  kuning  dengan  bentuk  bundar,  cream dengan  bentuk  keriput,  putih  dengan  bentuk bundar dan cream dengan bentuk bundar.

## 2) Uji KOH 3%
Kultur  murni  isolat  bakteri  yang  didapat, dibuat  dalam  stok  bakteri  dalam  agar  miring untuk  persiapan  uji-uji  yang  akan  dilakukan. Pengamatan  morfologi bakteri dilaukan dengan  uji  KOH  untuk  mengetahui  jenis bakteri termasuk dalam golongan gram positif atau gram negatif. Hasil uji KOH dapat dilihat pada Tabel 3.11.
Tabel 3.10 Hasil Uji KOH 3%
Sumber: data primer (2021).
Hasil  dari  uji  KOH  (3%)  pada  isolat bakteri  diketahui  dengan  adanya  lendir menandakan  bahwa  bakteri  tersebut  termasuk golongan  bakteri  Gram  negatif  sedangkan bakteri  yang  di  uji  dengan  KOH  (3%)  tidak menghasilkan  lendir  maka  bakteri  tersebut tergolong  bakteri  Gram  positif.  Hal  ini sesuai dengan  Chandra  dan  Mani  (2011)  yang menyatakan  bahwa  bakteri  Gram  positif memiliki  dinding  sel  yang  tebal  dan  lemak yang  tipis  sedangkan  Gram  negatif  memiliki lemak  tebal  dan  berdinding  sel  tipis  yang berada  di  ruang  periplasma.  KOH  akan menyerang lemak ( bilayer lipid ) dan
membuat  sel  bakteri  Gram  negatif  pecah sedangkan  bakteri  yang  termasuk  kelompok Gram  positif  tidak  terpengaruh,  sehingga bakteri  tidak  berlendir. Hal  ini  didukung oleh pendapat  Lestari  (2016)  menyatakan  apabila terdapat benang (lendir) berarti  Gram  negatif,
jika  tidak  terdapat  benang  (lendir)  berarti Gram positif.

## 3) Uji Biokimia
Uji  biokimia  dilakukan  untuk  mengetahui sifat-sifat  fisiologi  dari  isolat  bakteri  yang diperoleh.  Fisiologi  ini  berhubungan  dengan proses  metabolisme  yang  terjadi  di  dalam  sel suatu  bakteri.  Setiap  bakteri  mempunyai aktivitas biokimia yang berbeda-beda sehingga uji  biokimia digunakan juga sebagai alat  untuk  identifikasi  spesies  bakteri.  Hasil uji Biokimia bakteri diperoleh dan diidentifikasi  menurut Bergey’s  Manual  of Determinative  Bacteriology  8 th Edition oleh
Holt et al ., 1994.

## a. Uji Biokimia Bakteri Lokasi A1 (GP)
Hasil  penelitian  uji  biokimia  pada  lokasi  A1 (GP) isolat yang terdapat pada media bioflok, usus ikan sebelum makan dan sesudah makan, seperti pada Tabel 3.12, 3.13, dan 3.14. Tabel  3.12  Hasil  uji  biokimia  A1  media bioflok
Sumber: data primer (2021).
Keterangan  :  (+)  Positif,  (-)  Negatif,  (NR) Not reaction , (P) Plesiomonas sp., (B) Bacillus sp., (D) determinan,  bisa  positif/negatif,  (UM)  umumnya negatif.
Berdasarkan  Tabel  3.12  menunjukan  kode GMB1,  GMB2  dan  GMB3  setelah  dilakukan uji-uji  didapatkan  bakteri  bergenus Bacillus sp. Kode GMB4 setelah dilakukan ujididapatkan bakteri genus Plesiomonas sp.
Tabel  3.13  Hasil  Uji  Biokimia  A1  Usus  Ikan

## Sebelum Makan
Sumber: data primer (2021). Keterangan  :  (+)  Positif,  (-)  Negatif,  (NR) Not reaction , (S) Staphylococcus sp., (P) Plesiomonas sp.,  (B) Bacillus sp.,  (D)  determinan,  bisa positif/negatif, (UM) umumnya negatif.
Berdasarkan  Tabel  3.13  menunjukan kode  GUBM1  setelah  dilakukan  uji-uji didapatkan  bakteri  genus Staphylococcus sp.Kode  GUBM2  setelah  dilakukan  uji-uji didapatkan bakteri genus Plesiomonas
sp.Kode  GUBM3,  GUBM4  dan  GUBM5 setelah  dilakukan  uji-uji  didapatkan  bakteri bergenus Bacillus sp.
Tabel  3.14  Hasil  uji  biokimia  A1  usus  ikan sesudah makan
Sumber: data primer (2021). Keterangan  :  (+)  Positif,  (-)  Negatif,  (NR) Not reaction , (B) Bacillus sp., (P) Plesiomonas sp., (F) Flavobacterium sp.,  (S) Staphylococcus sp.,  (D) determinan,  bisa  positif/negatif,  (UM)  umumnya negatif.
Berdasarkan  Tabel  3.14  menunjukan pada  kode  GUSM1,  GUSM5  dan  GUSM6 dilakukan  uji-uji  didapatkan  bakteri  bergenus Bacillus sp.  Kode  GUSM2  setelah  dilakukan uji-ujididapatkan  bakteri  genus Plesiomonas
sp.  Kode  GUSM3  setelah  dilakukan  uji- ujididapatkan  bakteri  genus Flavobacterium sp.  Kode  GUSM4  setelah  dilakukan  uji-uji didapatkan bakteri genus Staphylococcus sp.

## b. Uji Biokimia Bakteri Lokasi A2 (LT)
Hasil  penelitian  uji  biokimia  pada lokasi  A2  (LT)  isolat  yang  terdapat  pada media  bioflok,  usus  ikan  sebelum  makan  dan sesudah  makan, seperti pada Tabel 3.15, 3.16, dan 3.17.
Tabel  3.15  Hasil  Uji  Biokimia  A2  Media Bioflok
Sumber: data primer (2021). Keterangan  :  (+)  Positif,  (-)  Negatif,  (NR) Not reaction , (P) Plesiomonas sp., (B) Bacillus sp., (D) determinan,  bisa  positif/negatif,  (UM)  umumnya negatif.
Berdasarkan  Tabel  3.15  kode  LMB1, LMB2  dan  LMB4  setelah  dilakukan  uji-uji didapatkan bakteri bergenus Bacillus sp. Kode LMB3  setelah  dilakukan  uji-uji  didapatkan bakteri genus Plesiomonas sp.
Tabel  3.16  Hasil  uji  biokimia  A2  usus  ikan sebelum makan
Sumber: data primer (2021). Keterangan  :  (+)  Positif,  (-)  Negatif,  (NR) Not reaction (F) Flavobacterium sp.,  (P) Plesiomonas sp.,  (B) Bacillus sp.,  (D)  determinan,  bisa positif/negatif, (UM) umumnya negatif.
Berdasarkan  Tabel  3.16  pada  kode LUBM1  setelah  dilakukan  uji-uji  didapatkan bakteri  genus Flavobacterium sp.  Kode LUBM2  dan  LUBM4  setelah  dilakukan  uji-
uji  didapatkan  bakteri  bergenus Bacillus sp.
Kode  LUBM3  setelah  dilakukan  uji-uji didapatkan bakteri genus Plesiomonas sp.
Tabel  3.17  Hasil  uji  biokimia  A2  usus  ikan sesudah makan
Sumber: data primer (2021).
Keterangan  :  (+)  Positif,  (-)  Negatif,  (NR) Not reaction , (F) Flavobacterium sp., (P) Plesiomonas sp.,  (B) Bacillus sp.,  (D)  determinan,  bisa positif/negatif, (UM) umumnya negatif.
Berdasarkan  Tabel  3.17  Kode  LUSM1 setelah  dilakukan  uji-uji  didapatkan  bakteri genus Flavobacterium sp.  Kode  LUSM2 setelah  dilakukan  uji-uji  didapatkan  bakteri genus Plesiomonas sp.Kode LUSM3,
LUSM6, dan LUSM4setelah dilakukan uji-uji didapatkan bakteri bergenus Bacillus sp.

## c. Uji Biokimia Bakteri Lokasi A3 (MT)
Hasil  penelitian  uji  biokimia  pada  lokasi  A3 (MT) isolat yang terdapat pada media bioflok, usus ikan sebelum makan dan sesudah makan, seperti pada Tabel 3.18, 3.19 dan 3.20.
Tabel  3.18  Hasil  uji  biokimia  A3  media bioflok
Sumber: data primer (2021). Keterangan  :  (+)  Positif,  (-)  Negatif,  (NR) Not reaction , (F) Flavobacterium sp., (B) Bacillus sp.,
(M) Micrococcus sp.,  (D)  determinan,  bisa positif/negatif, (UM) umumnya negatif. Berdasarkan  Tabel  3.18kode  MMB1 dan MMB4 setelah dilakukan uji-uji didapatkan  bakteri  genus Flavobacterium sp.
Kode  MMB2dan  MMB5  setelah  dilakukan uji-uji  didapatkan  bakteri  bergenus Bacillus sp.Kode MMB3setelah dilakukan uji- ujididapatkan bakteri genus Micrococcus sp.
Tabel  3.19  Hasil  uji  biokimia  A3  usus  ikan sebelum makan
Sumber: data primer (2021). Keterangan  :  (+)  Positif,  (-)  Negatif,  (NR) Not reaction ,  (M) Micrococcus sp.,  (B) Bacillus sp., (F) Flavobacterium sp.,  (S) Staphylococcus sp., (D)  determinan,  bisa  positif/negatif, (UM) umumnya negatif.
Berdasarkan  Tabel  3.19  pada  kode MUBM1  setelah dilakukan  uji-uji  didapatkan bakteri  genus Micrococcus sp.Kode  MUBM2
dan  MUBM3  setelah  dilakukan  uji-uji didapatkan bakteri bergenus Bacillus sp. Kode MUBM4  dan  MUBM6  setelah  dilakukan  uji- uji  didapatkan  bakteri  genus Flavobacterium
sp.  Kode  MUBM5  setelah  dilakukan  uji-uji didapatkan bakteri genus Staphylococcus sp.
Tabel  3.20  Hasil  uji  biokimia  A3  usus  ikan sesudah makan
Sumber: data primer (2021). Keterangan  :  (+)  Positif,  (-)  Negatif,  (NR) Not reaction , (F) Flavobacterium sp., (B) Bacillus sp.,
(M) Micrococcus sp., (M) Staphylococcus sp., (D) determinan,  bisa  positif/negatif,  (UM)  umumnya negatif.
Berdasarkan  Tabel  4.20  kode  MUSM1 dan  MUSM4  setelah  dilakukan  uji-uji didapatkan  bakteri  genus Flavobacterium sp.
Kode MUSM2 dan MUSM3 setelah dilakukan  uji-uji  didapatkan  bakteri  bergenus Bacillus sp.  Kode  MUSM5  setelah  dilakukan uji-uji  didapatkan  bakteri  genus Micrococcus sp.  Kode  MUSM6  setelah  dilakukan  uji-uji didapatkan bakteri genus Staphylococcus sp.
1.2 Perbandingan  Hasil  Isolat,  Karakteri-sasi dan  Identifikasi  pada  3  Lokasi  Berbeda Media  Bioflok,  Usus  Ikan  Sebelum  dan Sesudah Makan.
Tabel. 3.21  Perbandingan  hasil isolat, karakterisasi dan  identifikasi 3 lokasi  berbeda media bioflok
Tabel. 3.22 Perbandingan  hasil  isolat, karakterisasi dan  identifikasi 3 lokasi  berbeda usus ikan sebelum makan Tabel. 3.23  Perbandingan  hasil isolat, karakterisasi dan  identifikasi 3 lokasi  berbeda usus ikan sesudah makan Sumber: data primer (2021).
Keterangan  :  (BKP)=  Bundar  Kuning  Pekat, (BK)=  Bundar  Kuning,  (BP)=  Bundar  Putih, (MC)=  Menyebar  Cream,  (KC)=  Keriput  Cream, (BC)=  Bundar  Cream,  (+)=  positif,  (-)=  negatif,
(B)= Bacillus sp.,  (P)= Plesiomonas sp.,    (F)= Flavobacterium sp.,  (M)= Microccus sp.,  (S)= Staphylococcus sp.
Berdasarkan Tabel 3.21 menunjukan bahwa  bakteri  yang  terdapat  pada  media bioflok  3  lokasi  berbeda  dimana  lokasi  A1 dan  A2  memiliki  kesamaan  yaitu  terdapat  4 isolat  bakteri  dan  jenis  bakteri  yang  terdapat sama,  sedangkan  pada  lokasi  A3  terdapat  5 isolat  bakteri  adanya  perbedaan  yaitu  pada MMB5 tidak terdapat pada lokasi sebelumnya,  perbedaan  selanjutnya  pada lokasi  A3  dari  lokasi  sebelumnya  yaitu terdapat  pada MMB3,  MMB4  dengan memiliki ciri-ciri morfologi yang sama namun pada  uji  KOH  dan  uji  Biokimia  memiliki perbedaan  dalam  hasil  pengamatan  yang didapatkan. Berdasarkan Tabel 3.22 menunjukkan  bahwa  bakteri  yang  terdapat
pada  usus  ikan  sebelum  makan  pada  3  lokasi berbeda  dimana  pada  lokasi  A1  dan  A2 memiliki  persamaan  terdapat  5  isolat  bakteri dan  morfologi  bakteri  yang  ditemukan  sama namun  ada  perbedaan  pada  uji  KOH  dan  uji biokimia  terhadap  hasil  pengamatan  yang didapatkan  pada  GUBM1  terhadap  LUBM1 sedangkan pada lokasi A3 memiliki perbedaan  dari  hasil  lokasi  sebelumnya dimana  pada  lokasi  A3  terdapat  6  isolat bakteri  yang  memiliki  perbedaan  yang  jelas yaitu  pada  kode  isolat  MUBM6,  adapun persamaan  dari  hasil  pengamatan  morfologi pada  kode  isolat  MUBM1,  terhadap  GUBM5 dan LUBM5 namun setelah diuji KOH dan uji Biokimia terdapat perbedaan hasil pengamatan yang didapatkan. Berdasarkan Tabel 3.23
menunjukkan  bahwa  bakteri  yang  terdapat pada  usus  ikan  sesudah  makan  pada  3  lokasi berbeda  dimana  pada  lokasi  A1,  A2  dan  A3 memiliki  persamaan  terdapat  6  isolat  bakteri dengan  hasil  morfologi  yang  sama  namun terdapat  perbedaan  pada  uji  KOH  dan  uji biokimia  pada  kode  isolat  MUSM5  terhadap GUSM1  dan  LUSM4,MUSM1  terhadap GUSM2 dan LUSM2, serta MUSM6 terhadap LUSM1.
Media bioflok dan usus ikan papuyu yang  dipelihara  pada  akuakultur  sistem bioflok setelah
dilakukan penelitian ditemukan  bakteri  bergenus Bacillus sp.,
Plesiomonas sp., Flavobacterium sp.,
Micrococcus sp.,  dan Staphylococcus sp.
Berdasarkan  dari  Rezkyani,  (2021)  bakteri yang  ditemukan  pada  ikan  papuyu  dari  alam yaitu  bakteri  genus Bacillus sp.,  dan Plesiomonas sp.  dari  Aslamsyah,  (2009)
dalam Bakri,  (2016)  menyatakan  pada ikanGurame ( Osprhonemus gourami ) menemukan Stapylococcus sp., Bacillus sp.,
Moraxella sp., Nitrococcus sp., Aeromonas sp., Lactobacillus sp., Mycobacterium sp., Carnobacterium sp., Cytobacter sp., Streptococcus sp.,  dan Clostrodium sp. Sedangkan  Jimoh,  (2014) dalam Bakri,  (2016) menyatakan pada ikan Lele ( Clarias gariepinues ) menemukan Pseudomonas fluorescens, Bacillus alvei, Aeromonas hydrophilia, Bacillus megaterium, Flavobacterium  rigense dan Enterobacter aerogenes . Bacillus sp. salah satu mikroorganisme yang berperan sebagai biokontrol  terhadap berbagai  organisme mikroskopis  yang  menyebabkan  infeksi  pada ikan dan selanjutnya mengembangkan makanan pada ikan. Sesuai penilaian
Verschuere et al. (2000) dalam Lestari, (2016) yang menyatakan bahwa organisme
mikroskopis Bacillus sp.  menghitung  salah satu  probiotik  yang  berjalan  sebagai  spesialis biokontrol  di  hidroponik,  baik  sebagai biokontrol terhadap penyakit dan pengembangan  lebih  lanjut  nutrisi  pada  ikan. Didukung  oleh  penilaian  Jusadi et  al., (2004) menjelaskan  organisme  mikroskopis Bacillus sp.  Selain  itu  untuk  menjaga  dapat  lebih
mengembangkan perubahan pakan dan meningkatkan laju perkembangan ikan.
Staphylococcus sp.  disadari  bahwa bakteri  yang  menggunakan  sisa  pakan  yang membusuk  sehingga  organisme  mikroskopis ini  dapat  mengurangi  terjadinya  kontaminasi pada sisa pakan yang tidak dimakan oleh ikan karena digunakan untuk makanan.
Sebagaimana  ditunjukkan  oleh  penilaian Supardi  dan  Sukamto,  (1999)  menyatakan bahwa  mikroorganisme Staphylococcus sp. menggunakan  sisa  pakan  yang  telah  hancur sebagai suplemen hidupnya.
Flavobacterium sp. Mikroorganisme gram negatif namun tidak berbahaya bagi ikan yang  dipelihara  dalam  kerangka  bioflok karena  organisme  mikroskopis  ini  dianggap sebagai  mikroba  pembentuk  flok  di  perairan yang  dapat  dimanfaatkan  oleh  ikan  sebagai suplemen  tambahan  menurut  Salehizadeh et al . (2001) menyatakan bahwa Flavobacterium sp.  merupakan  organisme  mikroskopis  yang menghasilkan  senyawa  bioflokulan,  menjadi senyawa  pembentuk  flok  yang  spesifik  di perairan dan didukung oleh penilaian
Aiyushirota,  (2009)  yang  menyatakan  bahwa salah satu mikroorganisme yang
diperlengkapi  untuk  membentuk  bioflok adalah Flavobacterium sp.  Selanjutnya, bakteri  ini  dapat  menjadi  antibakteri  untuk
Vibrio  harveyi .,  sedangkan  seperti  yang ditunjukkan oleh Jumria (2017), Flavobacterium  columnare adalah  bakteri penyebab penyakit Columnaris, yang
dikenang  untuk  keluarga  Flavobacteriaceae dan  mungkin  merupakan  infeksi  bakteri utama  pada  spesies  ikan  air  tawar.  . Organisme  mikroskopis  ini  dapat  tersedia  di semua kondisi amfibi, yang dapat mempengaruhi  ikan  di  alam  dan  hidroponik seperti halnya ikan yang rumit di akuarium.
Plesiomonas sp.  mikroba  pencemar namun  tidak  berbahaya  bagi  ikan  yang dilanjutkan  penilaian  Arfianto  dan  Liviawaty, (1992)  menyatakan  bahwa  perkembangan Plesiomonas sp.  dalam  air  bergantung  pada suhu,  aksesibilitas  suplemen  dan  tingkat pencemaran  limbah.  Mengurangi  keberadaan Plesiomonas sp.  pada  media  bioflok  harus dimungkinkan dengan air yang dapat  diterima para  eksekutif  dan  memberi  makan  dewan. Avnimelekh, (2009); Ekasari, (2009)
menyatakan  bahwa  administrasi  kualitas  air dalam inovasi bioflok, media  air hanya sekali diingat untuk daerah pendukung dan digunakan  sampai  terkumpul,  namun  pada saat  yang  sama  air  ditambahkan  untuk menggantikan  penghilangan  dan  mengontrol ketebalan  bioflok.  Dijunjung  tinggi  oleh pengurus pakan yang baik dengan mengontrol terulangnya  perawatan  dan  menyadari  bahwa pakan  yang  diberikan  kepada  ikan  harus dalam kualitas, jumlah dan cara yang nyaman (Ahda et al., 2014).
Micrococcus sp.  non-patogen  dan menguntungkan  ikan.  Sifat  menguntungkan dari mikroba  Micrococcus  sp. probiotik  dapat dimanfaatkan  untuk  mencegah  penyakit  pada
ikan  (Verschere et  al .,  2000  dalam  Febryana, 2017).

## 2. Uji Patogenitas
Berdasarkan  pengujian  dan  pengamatan  uji patogenitas  dan  LD50  menunjukkan  semua perlakuan  kelulusanhidupnya  100  %,  dan tidak  ada  perbedaan  tingkahlaku  dari  ikan uji yang  yang  normal.    Gejala  klinis  pada  ikan papuyu  diamati  pada  uji  patogenisitas  yang dilakukan selama 7 hari. Pengamatan dilakukan secara periodik setiap 24 jam sekali selama 7 hari pemeliharaan semua menunjukkan kondisi normal. Dengan
demikian uji ini bakteri dari usus ikan papuyu lulus  –  dapat  digunakan    sebagai  kandidat probiotik.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Hasil  penelitian  menunjukkan    Hasil penelitian  dari  3  lokasi  berbeda  pada  lokasi A1  Guntung  Payung,  lokasi  A2  Loktabat  dan lokasi  A3  martapura.  Bakteri  yang  ditemukan terdapat 47 isolat yang terdiri dari pada lokasi A1  15  isolat,  lokasi  A2  15  isolat  dan  lokasi A3  17  isolat.  Hasil  pengamatan  makroskopik diperoleh  5  isolat  morfologi  yang  berbeda berdasarkan bentuk, warna, tepian dan  elevasi permukaan  koloni.  Pengamatan  mikroskopik dengan uji KOH diperoleh 3 Gram positif dan 2  Gram  negatif.  Identifikasi  bakteri  yang ditemukan  terdiri  dari  bakteri  genus  Bacillus sp., Plesiomonas sp., Staphylococcus sp.,
Flavobacterium sp.,  dan Micrococcus sp.
Hasil  uji  patogenitas  dan  LD50  menunjukkan semua  perlakuan  kelulusanhidupnya  100  %, dengan demikian uji ini bakteri dari usus ikan papuyu  lulus  –  dapat  digunakan    sebagai kandidat probiotik.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahda  M.,  R.,  Subandiyono,  dan  Pinandoyo  2014.  Pengaruh  frekuensi  pemberian  pakan terhadap  pertumbuhan  dan  kelulushidupan  benih  tawes  ( Puntius  javanicus ).  J.
Aquaculture management and technology vol. 3. No. 4. Hal 67-74.
Aiyushirota.  2009.  Konsep  Budidaya  Udang  Sistem  Bakteri  Heterotrof  dengan  Bioflocs. Dikutif dari www.aiyushirota.com di akses pada 23 Juni 2021.
Arfianto E, Liviawaty. 1992. Pengendalian hama dan penyakit ikan. Kanisius. Yogyakarta.
Aslamsyah,  S.  Hasni  Y.,  Azis,  Sriwulan,  Komang  G.,  dan  Wiryawan.  2009.  Mikroflora Saluran  Pencernaan  Ikan  Gurame  ( Osphronemus  gouramy ).  J.  Ilmu  Kelautan  dan Perikanan UNHAS vol.19 (1).
Avnimcleeh,  Y. 2007. Feeding with microbial flocs by tilapia in minimal discharge bio-flocs technology ponds. J. Aquaculture 264,140-147.
Bakri,  A.  M.  2016.  Isolasi  dan  Identifikasi  Mikroflora  pada  Saluran  Pencernaan  Ikan  Sepat Siam ( Trichogaster  Pectoralis ) di Perairan Danau Tempe Sulawesi Selatan. Fakultas Sains dan Teknologi . (Makassar: Uin Alauddin).
Chandra, T. J dan  Mani, S. 2011. A study of 2 rapid tests to differentiate Gram positive and
Gram negative aerobic bacteria. Journal Medicine Allied Science , 1(2), 84-85.
Ekasari,  J.  2009.  Teknologi  Bioflok:  Teori  dan  Aplikasi  dalam  Perikanan  udidaya  Sistem Intensif. J. Akuakultur Indonesia, 8(2): 9-19 (2009)
Emerenciano M, Ballester E, Cavalli R, Wasielesky W. 2012. Biofloc technology application as  a  food  source  in  a  limited  water  exchange  nursery  system  for  pink  shrimp Ferfantepanaeus brasiliensis (Latreille, 1817). Aquaculture Research 43(3):447-457 Febryana,  M.  2017.  Isolasi  Dan  Identifikasi  Bakteri  Potensial  Probiotik  Pada  Saluran Pencernaan  Ikan  Mas  ( Cyprinus  carpio ).  (Manado:  Program  Studi  Manajemen Sumberdaya Perairan. Fakultas Pertanian. UNSTRAT).
Hanafie, A., 2019. Biologi Reproduksi dan Teknik Pembenihan Ikan. (Banjarmasin: Lambung Mangkurat University Press). 301 halaman.
Jimoh,  W.A.  2014. Microbial  flora  of the gastro-intestinal  tract  of Clarias  gariepinus  caught from river Dandaru  Ibadan,  Nigeria.  J. Sokoto  of Veterinary  Sciences. Vol. 12  (No. 2).
Jumria,  A.,  Christia,  N.,  Alfiyah  2017.  Identifikasi  dan  Histopologi Flavobacterium columnare pada Ikan Nila ( Oreochromis niloticus ). J. Semakia Vol 8, No 2.
Jusadi, D. Gandara,  E dan Mokoginta, I. 2004. Pengaruh Penambahan Probiotik Bacillus sp. pada  Pakan  Komersil  Terhadap  Konversi  Pakan  dan  Pertumbuhan  Ikan  Patin Pangasius hypophthalmus . Jurnal Akuakultur Indonesia , 3(1): 15-18 (2004).
Lestari.  P.  2016.  Isolasi  dan  Identifikasi  Bakteri  pada  Saluran  Pencernaan  Ikan  Sidat ( Anguilla Bicolor ) Yang Berpotensi Sebagai Kandidat Probiotik. (Surabaya: Fakultas Perikanan dan Kelautan. Universitas Airlangga).
Ma’in, Suttrisno A., Setia B.S. 2013. Kajian dampak lingkungan penerapan teknologi bioflok pada  kegiatan  budidaya  udang  vaname  dengan  metode  life  cycle  assessment.  J.
IKA15(1829-5282):1-20
Olga,  2012.  Patogenisitas  Bakteri Aeromonas  Hydrophila Asb01  Pada  Ikan  Gabus ( Ophicephalus Striatus) . Sains Akuatik 14 (1): 33 – 39.
Putra, I, Rusliadi, Fauzi M. 2017. Growth performance and feed utilization of African catfish Clarias  gariepinus fed  a  commercial  diet  and  reared  in  the  biofloc  system  enhanced with probiotic. J. F1000Res6:15-45.
Putri.  B.  Wardiyanto  &  Supono.  2015.  Efektivitas  Penggunaan  Beberapa  Sumber  Bakteri Dalam  Sistem  Bioflok  Terhadap  Keragaan  Ikan  Nila  (Oreochromis  niloticus). e- Jurnal Rekayasa dan Teknologi Budidaya Perairan . IV No 1.1-7.
Purnomo,  P.D.  2012.  Pengaruh  penambahan  karbohidrat  pada  media  pemeliharaan  terhadap produksi budidaya intensif
nila  ( Oreochromis  niloticus ).  J.  of  Aquaculture Management and Technology161-179
Rezkyani,  E.,  2021.  Isolasi  dan  identifikasi  bakteri  pada  saluran  pencernaan  ikan  papuyu ( Anabas testudineus bloch) sebagai  kandidat probiotik. Skripsi. (Banjarbaru: Fakultas Perikanan dan Kelautan. Universitas Lambung Mangkurat).
Rukmini, Slamat,  dan  Aisiah,  S.  2014. Bio-Ekologi  Larva  Ikan  Betok  (Anabas  Testudineus Bloch)  di  Berbagai  Perairan  Rawa  Kalimantan  Selatan  dan  Upaya  Untuk Pemeliharaan. (Banjarbaru: Fakultas Perikanan dan Kelautan UNLAM).
Watson,  K,  A.,  Kaspar,  H.,  Lategan,  M.J.,  Gibson,  L.  2008.  Probiotics  in  aquaculture:  The need,  principles  and  mechanisms  of  action  and  screening  processes.  J.  Aquaculture, Vol. 274. No.1, pp.1-1