Vol 13. No 2. July 2020 Page 32 - 39
PENGARUH PENULARAN TRANSVENEREAL VIRUS DENGUE SEROTIPE-3  TERHADAP  VIABILITAS  TELUR  AEDES  AEGYPTI BERDASARKAN VARIASI LAMA PENYIMPANAN
The Effect of Transvenereal Transmission of Dengue Serotype-3 Virus on The Viability of Aedes Aegypti Eggs Based on Variation of Storage Time
Tusy Triwahyuni, Sri Maria Puji Lestari, Devita Febriani Putri. Fakultas Kedokteran, Universitas Malahayati
Email: devita@malahayati.ac.id
Abstract Infectious male Aedes aegypti mosquitoes can transmit dengue virus (DENV) to transvenereal non-infectious female mosquitoes. Infectious female mosquitoes will reduce DENV to the egg stage and propagate to the adult mosquito stage. Egg stage is a stage of viability / resistance of Dengue  Hemorrhagic  Fever  (DHF)  vector.  The  study  aims  to  determine  the  effect  of transvenereal  transmission  on  egg  viability  resulting  from  parental  Ae.  aegypti  female mosquitoe  with  DENV-3  infection,  with  variations  in  egg  storage  time.  This  type  of experimental  research  with  purposive  sampling.  Egg  samples  were  obtained  from  the  Ae. aegypti female parental mosquito detected positive DENV-3 by PCR testing. Egg samples were stored for 14, 30, 60 and 120 days. Analysis to determine differences in viability in eggs derived from infectious female mosquitoes compared to controls using an independent T-test. Analysis to determine the viability of eggs derived from parental infectious female mosquitoes based on variations  in  storage  time  using  ANOVA.  The  results  of  the  study  stated  that  there  was  no significant difference (P = 0.794) between the average eggs that succeeded in becoming imago (viable eggs) derived from parental infectious female mosquitoes compared to controls. The analysis  also  stated  that  there  was  no  significant  difference  (P  =  0.18)  between  the  average viable eggs derived from parental infectious female mosquitoes both storage duration for 14, 30, 60, or 90 days.
Keywords: Aedes aegypti, dengue serotype 3, storage time, transvenereal transmission, egg viability.
Abstrak Nyamuk Aedes aegypti jantan infeksius dapat menularkan virus dengue (DENV) ke nyamuk betina  non  infeksius  secara  transvenereal.  Nyamuk  betina  yang  infeksius  akan  menurunkan DENV  ke  stadium  telur  dan  berpropagasi  sampai  stadium  nyamuk  dewasa.  Stadium  telur merupakan  stadium  viabilitas/ketahanan  dari  vektor  Demam  Berdarah  Dengue  (DBD). Penelitian bertujuan mengetahui pengaruh penularan transvenereal pada viabilitas telur yang dihasilkan  dari  parental  nyamuk  Ae.  aegypti  betina  yang  infeksius  DENV-3,  dengan  variasi waktu  penyimpanan  telur.  Jenis  penelitian  eksperimental  dengan  pengambilan  sampel purposive  sampling.  Sampel  telur  didapatkan  dari  parental  nyamuk  Ae.  aegypti  betina  yang terdeteksi  positif  DENV-3  dengan  pengujian  PCR.  Sampel  telur  disimpan  dengan  lama penyimpanan selama 14, 30, 60 dan 120 hari. Analisis untuk menentukan perbedaan viabilitas pada  telur  yang  berasal  dari  parental  nyamuk  betina  infeksius  dibandingkan  kontrol, menggunakan T-test independent. Analisis untuk menentukan viabilitas telur yang berasal dari parental  nyamuk  betina  infeksius  berdasarkan  variasi  waktu  penyimpanan  menggunakan ANOVA. Hasil penelitian menyatakan tidak ada perbedaan bermakna (P = 0,794) antara rerata telur yang berhasil menjadi imago (telur yang viabel) yang berasal dari parental nyamuk betina infeksius dibandingkan kontrol. Analisis juga menyatakan tidak ada perbedaan bermakna (P = 0,18) antara rerata telur viabel yang berasal dari parental nyamuk betina infeksius baik lama penyimpanan selama 14, 30, 60, ataupun 90 hari Kata kunci : Aedes aegypti, dengue serotipe 3, lama penyimpanan, penularan transvenereal, viabilitas telur.

## PENDAHULUAN
Demam Berdarah Dengue (DBD)
merupakan penyakit tular vektor yang disebabkan  oleh  virus  dengue  (DENV)  genus Flavivirus,  dan  ditularkan  melalui  nyamuk Aedes (Ae)  subgenus  Stegomyia,  terutama Aedes  aegypti (Linnaeus)  (Kraemer  et  al., 2015). Agen penyebab demam dengue , DENV mempunyai  empat  serotipe  yaitu  DENV-1, DENV-2,  DENV-3,  dan  DENV-4.  Keempat tipe  virus  bersirkulasi  di  wilayah  endemik dengue  Asia  Tenggara  yaitu  Malaysia, Thailand,  dan  Indonesia,  namun  kasus-kasus Dengue  Shock  Syndrom (DSS)  di  Asia Tenggara lebih sering disebabkan DENV-2 dan DENV-3  dibandingkan  virus  DENV-1  dan DENV-4,  pada  negara  Indonesia  khususnya manifestasi  klinis  dengue  yang  berat  sebagian besar  disebabkan  oleh  DENV-3  (Andriyoko, Parwati,  Tjandrawati,  &  Lismayanti,  2011; Cucunawangsih  &  Lugito,  2017).  Program pencegahan  dan  pemberantasan  DBD  telah berlangsung lebih kurang 43 tahun dan berhasil menurunkan  angka  kematian  dari  41,3%  pada tahun  1968  menjadi  0,87  %  pada  tahun  2010, tetapi  belum  berhasil  menurunkan  angka kejadian DBD (Ditjen PPPL, 2015). Pengendalian DBD dari segi vektor khususnya nyamuk Ae.  aegypti merupakan  salah  satu metode  efektif  menghentikan  penularan  DBD dan mencegah perluasan daerah endemis DBD (Mardihusodo, 2011; Ditjen PPPL, 2015).
Penularan  vertikal  secara  transovarial pada nyamuk Ae. aegypti adalah salah satu cara DENV  mempertahankan  keberadaannya  di alam ketika kondisi iklim yang tidak kondusif (Angel  &  Joshi,  2009;  Arunachalam  et  al., 2008; Günther, Martínez-Muñoz, Pérez- Ishiwara, & Salas-Benito, 2007; Lee & Rohani,
2005; Thenmozhi, Tewari, Manavalan, Balasubramanian, & Gajanana, 2000). Penularan  transovarial  DENV  juga  menurun langsung  ke  progeni  (F1) nyamuk Ae.  aegypti jantan  di  alam,  yang  membuktikan  bahwa nyamuk Ae. aegypti jantan juga dapat terinfeksi DENV  walaupun  tidak  menghisap  darah langsung dari manusia yang viremia (Arunachalam  et  al.,  2008;  Kow  et  al.,  2001; Mulyatno, Yamanaka, Yotopranoto, & Konishi,  2012;  Thavara,  U.,  Siriyasatien,  P., Tawatsin, A., Asavadachanukorn, P., Anantapreecha,  S.,  Wongwanich,  R.,  Mulla., 2006; Vilela et al., 2010). Nyamuk Ae. aegypti
jantan  yang  infeksius  DENV  berpotensi menularkan ke nyamuk Ae. aegypti betina yang non  infeksius  secara  transvenereal  (perilaku seksual).  Hasil  penelitian  Putri  (2018), membuktikan  nyamuk Aedes  aegypti jantan infeksius  dapat  menularkan  DENV-3  ke nyamuk betina non infeksius secara transvenereal. Nyamuk jantan infeksius DENV dapat mengawini nyamuk betina non infeksius dan sebagai akibatnya nyamuk betina infeksius DENV akan menghasilkan F1 infeksius DENV 3. Tetapi dampak dari penularan transvenereal terhadap F1nya belum diketahui.
Stadium telur merupakan stadium ketahanan  nyamuk  dalam  kondisi  iklim  yang tidak  memungkinkan  untuk  berkembang  biak. Penelitian  pertama  kali  tentang viabilitas  telur Ae. aegypti dilakukan pada tahun 1900an, yang membuktikan telur Ae. aegypti dapat bertahan dalam kondisi kering selama 262 hari (Fay and Eliason, 1966). Penelitian terbaru oleh Soares- Pinheiro, Dasso-Pinheiro, Trindade-Bezerra, & Tadei  (2017),  mengindikasikan  bahwa  telur yang  berasal  dari  nyamuk Ae.  aegypti betina yang  dipelihara  di  laboratorium  memiliki viabilitas  tinggi  (lebih  dari  50%)  apabila  telur disimpan  dalam  waktu  maksimal  4  bulan. Namun penelitian tentang viabilitas telur yang berasal  dari  nyamuk Ae.  aegypti betina  yang infeksius DENV-3 secara transvenereal, belum pernah dilakukan. Berdasarkan pemaparan latar belakang ini, maka tujuan penelitian mengetahui  pengaruh  penularan  transvenereal pada  viabilitas  telur  yang  dihasilkan  dari parental  nyamuk Ae.  aegypti betina  yang infeksius  DENV-3,  dengan  variasi  waktu penyimpanan telur.

## METODE
Jenis  penelitian  merupakan  penelitian eksperimental dengan rancangan studi post test only control grup desain. Pengambilan sampel dengan cara purposive sampling yaitu pengambilan/pemilihan berdasarkan keperluan dan ketentuan penelitian.

## TELUR AEDES AEGYPTI
Parental nyamuk Ae. aegypti didapatkan dari hasil kolonisasi laboratorium yang terbebas dari infeksi penyakit di Departemen Parasitologi  Fakultas  Kedokteran  Kesehatan Masyarakat  dan  Keperawatan  Universitas Gadjah  Mada,  Yogyakarta.  Virus  didapatkan
dari  supernatan  kultur  sel  C6/36  yang diinfeksikan DENV-3, dan merupakan prototipe DENV-3 strain H87 yang berasal dari laboratorium Namru 2 di Jakarta.  Nyamuk Ae. aegypti jantan berumur  1  hari  disuntikkan secara  intratorakal  dengan  1,5  -  2  µl  suspensi DENV-3 (Rosen and Gubler, 1974). Selanjutnya  nyamuk  jantan  yang  terinfeksi dimasukkan dalam sangkar silindris (dibiarkan selama  masa  inkubasi  14  hari)  dan  dipelihara dengan memberikan larutan gula 10%.
Nyamuk Ae.  aegypti jantan  infeksius (nyamuk jantan yang terinfeksi DENV 3 secara intratorakal)  dimasukkan  ke  kandang  dengan nyamuk Ae.  aegypti betina  non  infeksius (nyamuk betina yang tidak terinfeksi DENV-3) berumur  1  hari  dan  dipelihara  dalam  satu kandang  selama  7  hari  dengan  tujuan  terjadi penularan  transvenereal  melalui  perkawinan semi alami. Nyamuk diberikan larutan gula 10 %, sebagai pakannya, dengan cara meresapkan gula  pada  kapas  dan  diganti  setiap  hari.  Pada hari  ke  7,  nyamuk  jantan  dikoleksi,  lalu disimpan di freezer -80˚C, sedangkan nyamuk betina  diberikan blood  feeding dengan menggunakan  darah  mencit.  Selanjutnya nyamuk  –  nyamuk  betina  tersebut  dikurung secara terpisah di gelas kertas (paper cup) yang ditutupi kasa untuk proses bertelur (individual rearing), kapas yang dibasahi larutan gula 10% diletakkan  diatas  kassa,  diganti  setiap  hari. Gelas kertas berisi kertas saring dengan ukuran diameter  5  cm  dan  dibasahi  dengan air.  Gelas kertas untuk proses individual rearing dimasukkan  ke  dalam  kotak  stereofoam  yang tertutup.    Pergantian  kertas  saring  dilakukan setiap  hari  setelah  oviposisi.  Kertas  saring dikeringkan  selama  2  jam,  lalu  disimpan. Nyamuk betina dipelihara selama 7 hari untuk bertelur dan telurnya diberi label.
Nyamuk  jantan  yang  telah  dikoleksi, dideteksi  dengan  menggunakan  metode One- Step RT-PCR  (Lanciotti et.  al., 1992)  untuk membuktikan bahwa DENV-3 yang disuntikkan berkembang selama masa inkubasi yang  ditentukan,  sehingga  berpotensi  untuk menularkan  DENV  3  ke  nyamuk  betina  non infeksius melalui transmisi  seksual (penularan transvenereal). Nyamuk jantan yang terdeteksi positif  DENV-3  ditelusuri  nyamuk  betinanya, lalu  nyamuk  betina  dideteksi  dengan  metode One-Step RT-PCR.  Telur  yang  berasal  dari
nyamuk betina yang positif DENV-3, akan diuji viabilitasnya.

## UJI VIABILITAS TELUR
Kertas  saring  (yang  berisi  telur) diletakkan  pada  gelas  kertas  dan  disimpan selama 14 hari, 30 hari, 60 hari, dan 120 hari di insektarium. Sebagai kontrol, telur Ae. aegypti yang berasal dari parental nyamuk Ae. aegypti betina non infeksius, disimpan selama 14 hari, 30  hari,  60  hari,  dan  120  hari.  Rearing  telur nyamuk  sampai  stadium  dewasa  dilakukan  di Laboratorium Parasitologi Universitas
Malahayati.  Telur  ditetaskan  dalam  nampan plastik  ukuran  24x36x6  cm  yang  berisi  air. Pemeliharaan larva untuk bertahan hidup diberi pakan hati ayam kering dan air diganti 2-3 kali dalam  1  minggu,  dipelihara  sampai  nyamuk dewasa  sesuai  dengan  masa  penyimpanannya. Semua  perlakuan  dilakukan  diinsektarium dengan kondisi suhu 27 ± 2 o C; kelembaban 88 ±  6%  dan  12  jam  cahaya:  12  jam gelap(Umniyati et al., 2008).

## ANALISIS DATA
Analisis  untuk  menentukan  perbedaan viabilitas pada telur yang berasal dari parental nyamuk  betina  infeksius  dengn  kontrol, menggunakan  analisis  T-  test  independent. Analisis untuk menentukan viabilitas telur yang berasal  dari  parental  nyamuk  betina  infeksius berdasarkan variasi waktu penyimpanan menggunakan analisis ANOVA.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  pengujian  PCR  pada  parental nyamuk,  nyamuk  jantan  yang  terinfeksi DENV-3  secara  intratorakal  dengan  masa inkubasi    14  hari  menunjukkan  hasil  positif DENV-3  dan  hal  yang  sama  terbukti  dengan pasangan  nyamuk  betinanya.  Telur  yang berasal dari nyamuk betina yang positif DENV- 3  disimpan  dengan  variasi  lama  penyimpanan 14 hari, 30 hari, 60 hari, dan 90 hari. Langkah selanjutnya  adalah  pengujian  viabilitas  telur nyamuk  hasil  transvenereal  DENV-3  dengan metode rearing. Telur perlakuan beserta kontrol ditetaskan sesuai dengan lama penyimpananya, dipelihara  sampai  menjadi  nyamuk  dewasa. Viabilitas telur nyamuk Ae. aegypti dilihat dari telur  yang  berhasil  menetas  dan  telur  yang berhasil  menjadi  imago  (nyamuk  dewasa). Tabel  berikut  ini  (Tabel  1)  adalah  viabilitas
telur  hasil  penularan  transvenereal  DENV-3 parental  nyamuk Ae.  aegypti telur  pada perlakuan  dan  kontrol,  berdasarkan  variasi
lama  penyimpanan  (14  hari,  30  hari,  60  hari, dan 90 hari).
Tabel 1. Viabilitas telur hasil penularan transvenereal DENV-3 pada parental nyamuk Ae. aegypti pada perlakuan dan kontrol, berdasarkan variasi lama penyimpanan telur.
Telur menetas Imago Kegagalan (%) Telur menetas Imago Kegagalan (%) 14 hari 39 23 41,03 63 35 44,44 30 hari 25 11 66,00 45 20 55,55 60 hari 5 5 0,00 44 19 56,82 90 hari 22 7 68,19 31 12 61,29 Variasi lama penyimpanan Kontrol
Perlakuan
Masa Inkubasi 14 hari Masa Inkubasi 14 hari
Hasil  analisis  univariat  (Tabel  1) menyatakan  kegagalan  telur  menjadi  imago tertinggi  pada  perlakuan  telur  hasil  penularan transvenereal  DENV-3  dengan  variasi  lama penyimpanan 90 hari, yaitu 68,19 %. kegagalan telur menjadi imago terendah yaitu 0 % terdapat pada perlakuan telur hasil penularan transvenereal  DENV-3  dengan  penyimpanan selama  60  hari.  Pada  kontrol,  kegagalan  telur menjadi  imago  tertinggi  dengan  penyimpanan selama 90 hari (61,29 %), dan kegagalan telur menjadi  imago  terendah  dengan  penyimpanan selama 30 hari (44,44 %).
Tahap selanjutnya untuk melihat perbedaan  rata  –  rata  jumlah  yang  berhasil
menjadi  imago  (telur  viabel)  pada  perlakuan dan  kontrol,  dilakukan  analisis  bivariat  T-test independent. Variabel numerik yang dianalisis adalah  jumlah  telur  yang  berhasil  menjadi nyamuk  dewasa  (imago)  yang  dihasilkan nyamuk Ae.  aegypti betina Ae.  aegypti positif DENV-3  hasil  kawin  dengan  nyamuk  jantan infeksius  DENV-3  dengan  inkubasi  14  hari (perlakuan)  dibandingkan  dengan  nyamuk betina Ae.  aegypti non  infeksius  (kontrol).
Berikut  ini  (Tabel  3)  adalah  perbedaan  antara rerata  telur  viabel  yang  berasal  dari  parental nyamuk Ae. aegypti betina infeksius
(perlakuan) ataupun kontrol.
Tabel 2.   Perbedaan antara rerata telur viabel yang berasal dari parental nyamuk Ae. aegypti betina infeksius (perlakuan) ataupun kontrol.
Perlakuan 11,50 + 8,06 Kontrol
21,50 + 9,68 Rerata telur viabel nyamuk betina (Mean + SD)
P
0,794
Hasil  analysis  T-test  independent  pada Tabel.  2  menyatakan  bahwa  tidak  ada perbedaan bermakna (P = 0,794 ) rerata jumlah telur  yang  berhasil  menjadi  imago,  yang dihasilkan    dari  parental  nyamuk  betina
infeksius  (perlakuan)  ataupun  kontrol.  Hal  ini mengindikasikan penularan transvenereal nyamuk Ae.  aegypti jantan  yang  infeksius DENV-3  memiliki  potensi  yang  sama  dengan nyamuk Ae. aegypti jantan yang non infeksius
dalam menghasilkan telur yang viabel. Fakta ini menyebabkan,  jika  nyamuk  jantan  infeksius DENV-3  mengawini  nyamuk  betina  yang  non infeksius,  sebagai  akibatnya  nyamuk  betina akan menjadi infeksius dan menghasilkan telur yang  kemungkinan  juga  infeksius.  Viabilitas telur  infeksius  sama  dengan  telur  hasil perkawinan  nyamuk  jantan  dan  betina  alami dalam menghasilkan vektor DBD.
Tahap selanjutnya
menentukan perbedaan  telur  yang  berhasil  berkembang
sampai  tahap  imago  (telur  viabel),  yang dihasilkan  nyamuk Ae.  aegypti betina  positif DENV-3  hasil  kawin  dengan  nyamuk  jantan infeksius  DENV-3  dengan  inkubasi  14  hari dengan  variasi  masa  penyimpanan,  dilakukan analisis  bivariat  ANOVA  karena  sebaran  data normal.  Perbedaan  rerata  telur  viabel  yang berasal dari parental nyamuk Ae. aegypti betina infeksius berdasarkan variasi lama penyimpanan telur dapat dilihat di Tabel 3.
Tabel 3.   Perbedaan rerata telur viabel yang berasal dari parental nyamuk  Ae. aegypti betina infeksius berdasarkan variasi lama penyimpanan telur.
Variasi lama penyimpanan Rerata telur viabel nyamuk betina (Mean + SD) P 14 hari 29,00 + 8,49 30 hari 15,50 + 6,36 60 hari 12,00 + 9,90 90 hari 9,50 + 3,53 0,18
Masa inkubasi
14 hari
Hasil  analisis  ANOVA  pada  Tabel  3. diperoleh nilai P = 0,18, dengan demikian dapat disimpulkan  tidak  ada  perbedaan  bermakna antara rerata telur yang berhasil menjadi imago, yang berasal dari parental nyamuk Ae. aegypti betina infeksius berdasarkan lama penyimpanan  telur.  Hasil  penelitian  sesuai dengan  penelitian  Brown,  Smith,  Lashway,  & Lysyk  (2018)  yang  menyatakan  hubungan negatif  yang  kuat  antara  umur  telur  dengan waktu penetasan telur,  artinya walaupun telur tidak  menetas  dalam  kurun  waktu  yang  lama, viabilitas telur  untuk menjadi  nyamuk  dewasa tetap tinggi.
Stadium telur mempertahankan viabilitasnya  dengan  diapause  (terhentinya masa  perkembangan  embrio)  atau  dalam kondisi kering. Telur akan mengalami diapause jika  dalam  kondisi  lingkungan  parah  seperti kekurangan  air,  suhu  yang  sangat  rendah bahkan pemanasan yang cukup tinggi (Forattini,  2002). Mourya  (2001)  berasumsi bahwa stadium telur nyamuk Ae. aegypti yang diapause  atau  telur  yang  kering,  dapat berpotensi  mempertahankan  DENV  selama kepadatan nyamuk rendah. Hasil penelitiannya membuktikan  bahwa Vertical  Transmission Rate (VTR)  DENV-2  tinggi  ketika  telur disimpan dalam kondisi kering selama 2 bulan. Hasil penelitian  menyatakan tidak  ada
perbedaan  viabilitas  telur  yang  berasal  dari nyamuk  betina  infeksius  ataupun  nyamuk betina non infeksius. Perlu dilakukan uji lanjut dengan  metode  PCR  dari  imago  yang dihasilkan  nyamuk  betina  infeksius,  untuk melihat  sejauh  mana  DENV-3  hasil  venereal nyamuk jantan infeksius menyebar.
Pada  kondisi  alam,  lama  penyimpanan telur  diasumsikan  sebagai  lama  waktu  telur bertahan dalam lingkungan ekstrim yang tidak memungkinkan  untuk  telur  menetas.  Menurut Christophers  (1960),  telur Ae.  aegypti dalam kondisi  kering  dapat  bertahan  hidup  selama beberapa bulan bahkan hingga satu tahun. Fay R.W.,  (1966)  meneliti  viabilitas  telur Ae. aegypti dengan variasi lama penyimpanan, dan berhasil  membuktikan  telur  dapat  bertahan dalam  kondisi  kering  maksimal  262  hari (sekitar hampir 9 bulan). Penelitian terbaru oleh Soares-Pinheiro et al. (2017), mengindikasikan bahwa  telur  yang  berasal  dari  nyamuk Ae. aegypti betina yang dipelihara di laboratorium memiliki  viabilitas  tinggi  (lebih  dari  50%) apabila telur disimpan dalam waktu maksimal 4 bulan.  Hasil  penelitian,  juga  membuktikan bahwa  telur  kering  dapat  bertahan  sampai waktu  maksimal  3  bulan,  dan  tidak  ada perbedaan bermakna antara viabilitas telur yang disimpan dalam kurun waktu 14, 30, 60, dan 90 hari.  Hal  ini  mengindikasikan  bahwa  telur
nyamuk Ae.  aegypti tetap  berpotensi  sama menjadi  vektor  DBD  walaupun  telur  tidak menetas dalam kurun waktu sampai 3 bulan.
Nyamuk Ae.  aegypti betina  oviposisi diatas  permukaan  air  di  tempat  perindukan nyamuk alami maupun buatan. Telur menempel dengan  kuat  di  bagian  dinding  bak  kamar mandi,  botol,  kaleng  dan  tempat  perindukan lainnya  yang  dapat  menampung  air  hingga tergenang pada saat musim hujan. Pada musim kemarau,  wadah  mengering  dan  telur  nyamuk dalam  kondisi  kering  atau  diapause  sehingga dapat  bertahan  selama  kurang  lebih  6  bulan hingga  memasuki  musim  hujan.  Saat  awal musim hujan tempat perindukan nyamuk akan tergenang dengan air dan telur nyamuk segera menetas  serta  berkembang  biak  menjadi dewasa.  Viabilitas  telur  pada  kondisi  kering dalam jangka waktu yang lama menjadi faktor utama  yang  memungkinkan  telur  nyamuk menyebar dengan mudah ke lokasi-lokasi baru, yang  menyebabkan  perluasan  kasus  DBD (Buchori D., Aryati, Hadi U.K., 2017). Hal ini menjadi perhatian khusus dalam hal pengendalian vektor DBD untuk memberantas sampai ke stadium telur Ae. aegypti .

## KESIMPULAN
Tidak  ada  perbedaan  bermakna  antara rerata telur yang berhasil menjadi imago (telur yang viabel) yang berasal dari parental nyamuk betina infeksius dibandingkan kontrol. Analisis juga menyatakan tidak ada perbedaan bermakna antara rerata telur viabel yang berasal dari parental nyamuk betina infeksius baik lama penyimpanan  selama  14,  30,  60,  ataupun  90 hari.  Hasil  penelitian  mengindikasikan  telur kering dapat bertahan sampai maksimal 3 bulan dalam  kondisi  lingkungan  ekstrim  baik  telur infeksius  virus  dengue  atau  tidak.  Perlu dilakukan pemberantasan sampai stadium telur dalam pengendalian vektor DBD.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada Kepala  Laboratorium  Parasitologi  FKKMK UGM  atas  kebaikannya  memberikan  izin penelitian  di  laboratorium.  Penulis  juga mengucapkan  terima  kasih  kepada  Staf Laboratorium,  laboran  dan  teknisi,  Pak  Pur, Mbak  Atin,  dan  Mbak  Rumbi  atas  dukungan dan  bantuannya  selama  berjalannya  proses penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Andriyoko, B., Parwati, I., Tjandrawati, A., &
Lismayanti, L. (2011). Penentuan
Serotipe  Virus  Dengue  dan  Gambaran Manifestasi Klinis serta Hematologi Rutin pada Infeksi Virus Dengue Dengue Virus Serotyping and Its Clinical Manifestation and  Routine  Haematology  in  Dengue Infections. Mkb , 44 (4), 253–260.
Angel, B., & Joshi, V. (2009). Distribution of dengue  virus  types  in  Aedes  aegypti  in dengue  endemic  districts  of  Rajasthan, India. Indian  Journal of Medical Research , 129 (6), 665–668.
Arunachalam,  N.,  Tewari,  S.  C.,  Thenmozhi, V.,  Rajendran,  R.,  Paramasivan,  R., Manavalan,  R.,  …  Tyagi,  B.  K.  (2008). Natural  vertical  transmission  of  dengue viruses  by  Aedes  aegypti  in  Chennai, Tamil  Nadu,  India. Indian  J  Med  Res , 127 (4), 395–397. Retrieved from http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/quer y.fcgi?cmd=Retrieve&db=PubMed&dopt
=Citation&list_uids=18577796
Brown, H. E., Smith, C., Lashway, S., & Lysyk, T.  (2018).  Influence  of  the  Length  of Storage  on  Aedes  aegypti  (Diptera: Culicidae)  Egg  Viability. Journal  of Medical  Entomology , 54 (2),  489–491. https://doi.org/10.1093/jme/tjw186
Buchori D., Aryati, Hadi U.K., J. H. K. 2017.
(2017). Kajian Resiko Terhadap Pelepasan Nyamuk Ber-Wolbachia. Kementrian Riset Teknologi dan Pendidikan Tinggi. Jakarta.
Cucunawangsih,  &  Lugito,  N.  P.  H.  (2017). Trends  of  dengue  disease  epidemiology. Virology:  Research  and  Treatment , 8 . https://doi.org/10.1177/1178122X176958 36
Christophers R.S., 1960. Aedes aegypti (L.) the yellow fever mosquito . London: Cambridge University Press. 739. Dalam:  Soares-Pinheiro  V.C.,  Dasso- Pinheiro  W.,  Trindade-Bezerra  J.M., Tadei  P.  2017.  Eggs  viability  of Aedes aegypti Linnaeus  (Diptera,  Culicidae) under  different  environmental  and storage conditions in Manaus, Amazonas, Brazil. Braz.J.Biol .
Fay  R.W.,  Eliason  D.A.    (1966).  A  Preferred
Oviposition  Site  as  a  Survaillance Method  For Aedes  aegypti .  Mosquito News. 26(4): 531-35.
Foratinni  O.P.,  2002. Culicidologia  médica . São  Paulo:  EDUSP.  2:  548.  Dalam: Soares-Pinheiro  V.C.,  Dasso-Pinheiro W.,  Trindade-Bezerra  J.M.,  Tadei  P. 2017.  Eggs  viability  of Aedes  aegypti Linnaeus  (Diptera,  Culicidae)  under different  environmental  and  storage conditions in Manaus, Amazonas, Brazil.

## Braz.J.Biol
Günther,  J.,  Martínez-Muñoz,  J.  P.,  Pérez- Ishiwara, D. G., & Salas-Benito, J. (2007). Evidence  of  vertical  transmission  of dengue virus in two endemic localities in the state of Oaxaca,
Mexico.
Intervirology , 50 (5), 347–352. https://doi.org/10.1159/000107272 Kementrian Republik Indonesia, 2016. Direktorat Jendral Pengendalian Penyakit  dan  Penyehatan  Lingkungan (Ditjen,  PP  dan  PL). Informasi  Umum Demam Berdarah Dengue 2016 . Jakarta.
Kow, C. Y., Koon, L. L., Yin, P. F., Bosio, C. F.,  Thomas,  R.  E.,  Grimstad,  P.  R.,  … Hou,  R.  F.  (2001).  Detection  of  dengue viruses in field caught male Aedes aegypti and Aedes albopictus (Diptera: Culicidae) in  Singapore  by  type-specific  PCR. Journal  of  Medical  Entomology , 38 (4),
475–479. https://doi.org/10.1603/0022- 2585-38.4.475
Kraemer, M. U. G., Sinka, M. E., Duda, K. A.,
Mylne, A. Q. N., Shearer, F. M., Barker, C.  M.,  …  Hay,  S.  I.  (2015).  The  global distribution  of  the  arbovirus  vectors Aedes aegypti and Ae. Albopictus. ELife ,
4 (JUNE2015), 1–18.
https://doi.org/10.7554/eLife.08347
Lee,  H.,  &  Rohani,  A.  (2005).  Transovarial
Transmission  of  Dengue  Virus  in  Aedes aegypti and Aedes albopictus in Relation to Dengue Outbreak in an Urban Area in Malaysia  Transovarial  Transmission  of Dengue Virus in Aedes aegypti and Aedes albopictus  in  Relation  to  Dengue Outbreak in a. Dengue Bulletin , 29 (DECEMBER 2005), 106–111.
Mardihusodo,  S.J.  2011.  Dengue  Virus Transovarial  Transmission  in Aedes
aegypti L:  Potential To DHF epidemics. Seminar  Nasional  Penyakit-Penyakit
Infeksi dan Vektor . Universitas Malahayati,  Lampung.  15-17  Desember
2011.
Mulyatno, K. C., Yamanaka, A., Yotopranoto, S.,  &  Konishi,  E.  (2012).  Vertical transmission  of  dengue  virus  in  Aedes aegypti collected in Surabaya, Indonesia, during  2008-2011. Japanese  Journal  of Infectious  Diseases , 65 (3),  274–276. https://doi.org/10.7883/yoken.65.274 Soares-Pinheiro,  V.  C.,  Dasso-Pinheiro,  W., Trindade-Bezerra,  J.  M.,  &  Tadei,  W.  P. (2017).  Eggs  viability  of  Aedes  aegypti Linnaeus  (Diptera,  Culicidae)  under different  environmental  and  storage conditions in Manaus, Amazonas, Brazil. Braz.  J.  Biol.  Braz.  J.  Biol , 77 (2),  396– 401. https://doi.org/10.1590/1519-
6984.19815
Thavara,  U.,  Siriyasatien,  P.,  Tawatsin,  A., Asavadachanukorn,  P.,  Anantapreecha, S., Wongwanich, R., Mulla., M. . (2006). Double  infection  of  heteroserotypes  of dengue  viruses  in  field  populations  of Aedes  aegypti  and  Aedes  albopictus (Diptera:  Culicidae)  and  serological features  of  dengue  viruses  found  in patients  in  southern  Thailand. Southeast Asian  Journal  of  Tropical  Medicine  and Public Health , 37 (3), 468–476. Retrieved from
http://ovidsp.ovid.com/ovidweb.cgi?T=J S&PAGE=reference&D=emed10&NEW S=N&AN=46003619 Thenmozhi, V., Tewari, S. C., Manavalan, R., Balasubramanian,  A.,  &  Gajanana,  A. (2000).  Natural  vertical  transmission  of dengue  viruses  in  Aedes  aegypt  in southern India. Transactions of the Royal Society  of  Tropical  Medicine  and
Hygiene , 94 (5), 507. https://doi.org/10.1016/S0035- 9203(00)90067-1 Umniyati,  S.  R.,  Sutaryo,  Wahyono,  D.,
Artama,  W.  T.,  Mardihusodo,  S.  J., Soeyoko, … Utoro, T. (2008).
Application  of  monoclonal  antibody DSSC7 for detecting dengue infection in Aedes
aegypti based on
immunocytochemical  streptavidin  biotin peroxidase  complex  assay  (ISBPC).
Dengue Bulletin , 32 (2008), 83–98. Vilela, A. P. P., Figueiredo, L. B., dos Santos,
J.  R.,  Eiras,  Á.  E.,  Bonjardim,  C.  A., Ferreira, P. C. P., & Kroon, E. G. (2010).
Dengue  virus  3  genotype  I  in  Aedes aegypti  mosquitoes  and  eggs,  Brazil, 2005-2006. Emerging Infectious Diseases , 16 (6), 989–992.
https://doi.org/10.3201/eid1606.091000