Zoochemical Analysis and Antibacterial Activity of Ethanolic Extract of Starfish, Linckia laevigata
(Analisis Zookimia dan Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Bintang Laut, Linckia laevigata)
Christian Mengko 1 , Rosita A.J. Lintang 2* , Fitje Losung 2 , Esther D. Angkouw 2 , Markus T. Lasut 2
1 Marine Science Study Program, Faculty of Fisheries and Marine Sciences, Sam Ratulangi University, Manado 95115 North Sulawesi, Indonesia
2 Teaching Staff of the Faculty of Fisheries and Marine Sciences, Sam Ratulangi University Jl. Unsrat Bahu Campus, Manado 95115 North Sulawesi, Indonesia
*Corresponding author: rositalintang@unsrat.ac.id
Manuscript received: 18 Sept 2023. Revision accepted: 23 Oct. 2023.

## Abstract
Starfish  is  one  of  the  marine  biota  that  produces  bioactive  compounds  and  has  biological activity. The aims of this study were to determine the content of bioactive compounds and to test  the  antibacterial  activity  of  the  extract  of  the  starfish Linckia  laevigata against Staphylococcus aureus and Escherichia coli bacteria. Determination of the content of bioactive compounds  was  carried  out  by  qualitative  zoochemical  analysis  while  the  antibacterial  test used the disc diffusion method. The results showed that the extract of the starfish L. laevigata has  bioactive  compounds  from  the  alkaloid,  triterpenoid,  tannin,  flavonoid,  phenolic,  and saponin  groups. Inhibitory  activity  against S. aureus and E.coli based on the  inhibition zone formed showed that L. laevigata starfish extract produced low antibacterial activity
Keywords : Starfish ( Linckia laevigata ), Zoochemistry, Antibacterial, Disc diffusion

## Abstrak
Bintang laut merupakan salah satu biota laut yang memproduksi senyawa bioaktif dan memiliki aktivitas  biologis.Tujuan  penelitian  ini  adalah  mengetahui  kandungan  senyawa  bioaktif  dan melakukan pengujian aktivitas antibakteri dari ekstrak bintang laut Linckia laevigata terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli . Penentuan kandungan senyawa bioaktif dilakukan dengan analisis zookimia kualitatif sedangkan pengujian antibakteri menggunakan metode difusi cakram. Hasil penelitian memperlihatkan bahwa ekstrak bintang laut L. laevigata memiliki  senyawa  bioaktif  dari  golongan  alkaloid,  triterpenoid,  tanin,  flavonoid,  fenolik,  dan saponin.  Aktivitas  penghambatan  terhadap S.  aureus dan E.coli berdasarkan  zona  hambat yang terbentuk menunjukkan bahwa ekstrak bintang laut L. laevigata menghasilkan aktivitas antibakteri yang rendah
Kata kunci :Bintang Laut Linckia laevigata, Zookimia, Antibakteri, Difusi cakram.

## PENDAHULUAN
Bintang  laut  merupakan  salah  satu spesies dari kelas Asteroidea dan merupakan  kelompok  dari  Echinodermata yang  memiliki  struktur  tubuh  berbentuk seperti  bintang  berlengan  5.  Bintang  laut yang  ada  di  dunia  diperkirakan  terdapat 1800  jenis,  dimana  di  perairan  Indonesia diperkirakan ada 400 species atau sebesar 22%  dari jumlah total  species  bintang  laut yang  ada  di  dunia  (Ernawati dkk ,  2019).
Bintang laut merupakan salah satu sumber
penghasil  senyawa  bioaktif  dan  diketahui memiliki komponen bioaktif yang terdiri dari alkaloid, steroid, flavonoid, saponin, ninhidrin.  Senyawa  aktif  dari  bintang  laut telah diketahui memiliki aktivitas antioksidan
(Lindongi dkk , 2021), antibakteri (Pieter dkk . 2017), antiinflamasi, antifungi (Rosdianti dkk , 2019 ; Seemaa & Shafreen, 2020).
Bintang  laut  merupakan  salah  satu spesies dari kelas Asteroidea dan merupakan  kelompok  dari  Echinodermata yang  memiliki  struktur  tubuh  berbentuk
seperti bintang. Diperkirakan terdapat 1800 jenis  bintang  laut  yang  ada  di  dunia, dimana  di  perairan  Indonesia  diperkirakan ada  400  species  atau  sebesar  22%  dari jumlah total species bintang laut yang ada di dunia (Ernawati dkk, 2019). Bintang laut merupakan  salah  satu  sumber  penghasil senyawa bioaktif seperti alkaloid, flavonoid,  saponin,  triterpenoid  (Walag, dkk.  2019  ;  Tunny  dkk.  2021).  Senyawa aktif  dari  bintang  laut  ini  telah  diketahui memiliki  aktivitas  antioksidan  (Lindongi dkk.  2022),  antimikroba  (Fitriana,  2010; Runtuwene,  dkk  2017;  Piter  dkk.  2018), antiinflamasi,  antifungi  (Rosdianti,  dkk.
2019;  Seema  &  Shafreen,  2020)  dan imunostimulator (Achmad dkk., 2014).

## METODE PENELITIAN

## Tempat dan Waktu Penelitian
Sampel  bintang  laut  berasal  dari Perairan  Pantai  Malalayang,  Kecamatan Malalayang,  Kota  Manado  Sulawesi  Utara (Gambar  1).  Penelitian  ini  dilakukan  di Laboratorium Bioteknologi dan Farmasitika Laut Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan,  Universitas  Sam  Ratulangi Manado,  selama  6  bulan  sejak  bulan November 2022 sampai bulan April 2023.
Gambar 1. Peta Lokasi pengambilan sampel

## Pengambilan dan Penanganan Sampel
Sampel  bintang  laut L.  laevigata diambil  menggunakan  tangan  lalu  dicuci bersih dengan air mengalir untuk mengeluarkan  kotoran  atau  pasir  yang menempel  selanjutnya  dipotong  kecil-kecil dan  dikeringkan  untuk  menghilangkan kadar air.

## Alat dan Bahan
Peralatan  yang  digunakan  dalam penelitian yaitu tabung reaksi, Erlenmeyer, corong  pisah,  cawan  petri,  kertas  cakram, mikropipet,  timbangan  analitik,  laminar  air
flow,  1  set  rotary  vacuum  evaporator, autoclave,  freeze  dryer,  botol  kaca  kecil, mistar,  oven,  pinset,  kertas  saring,  dan aluminium foil.
Bahan yang digunakan dalam penelitian  selain  sampel  bintang  laut L. laevigata , bakteri uji S. aureus dan E. coli juga pelarut Etanol 96%, akuades, nutrient agar  (NA),  nutrient  broth  (NB),  agar  dan kloramfenikol. Sedangkan reagen untuk uji fitokimia  yang  digunakan  adalah  pereaksi mayer,  pereaksi  dragendroff,  pereaksi wagner, pereaksi Lieberman burchard, HCl
pekat,  serbuk  magnesium,  H 2 SO 4, NaOH, Larutan FeCl 3 1% dan FeCl 3 5%.
Ekstraksi Proses  ekstraksi  dilakukan  dengan metode maserasi dingin dengan perbandingan  sampel:pelarut  adalah  1:3. Sebanyak  500  gram  sampel  ditempatkan dalam  toples  dan  ditambahkan  1500  ml etanol  95%.  Maserasi  dilakukan  selama 2x24  jam.  Hasil  dekantasi  selanjutnya disaring menggunakan kertas saring untuk mendapatkan  filtrat  dan  ditampung  dalam labu  erlenmeyer.  Filtrat  yang  sudah disaring dipekatkan dengan cara penguapan pada suhu 45 0 C menggunakan vacuum rotary  evaporator dan  dilanjutkan dengan freeze  dry untuk  mendapatkan ekstrak kasar.

## Analisis Zookimia
Analisis  zookimia  secara  kualitatif dilakukan  berdasarkan  Harborne  (1984) dan  Sangi dkk. (2008)  dengan  beberapa modifikasi.  Analisis  zookimia  dilakukan untuk mengetahui jenis senyawa metabolit sekunder  yang  terkandung  dalam  ekstrak etanol/alkohol  95%  bintang  laut  secara kualitatif. Uji zookimia ini meliputi pengujian alkaloid, flavonoid, fenolik, steroid, triterpenoid, saponin, dan tannin. a.  Pengujian Senyawa Alkoloid
Sebanyak 1 mg ekstrak dari masing- masing pelarut dilarutkan dalam beberapa tetes  asam  sulfat  2  N,    dan  dilakukan pengocokkan hingga terbentuk dua lapisan ;  lapisan  bagian  atas  diambil  dan dipindahkan  dalam  tiga  tabung  reaksi  dan ke dalam masing-masing tabung ditambahkan  pereaksi-pereaksi  Mayer, Dragendorff dan Wagner. Ekstrak
dinyatakan  positif  mengandung  senyawa alkaloid  apabila  terbentuk  endapan  putih kekuningan dengan pereaksi Mayer, endapan  merah  sampai  jingga  dengan pereaksi  Dragendorff  dan  endapan  coklat dengan pereaksi Wagner..
b.  Pengujian  Senyawa  Triterpenoid  dan Steroid
Sebanyak  1  ml  ekstrak  dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan 2 -  3  tetes  asam  asetat  anhidrat  dan  asam sulfat  pekat.  Ekstrak  dinyatakan  positif
mengandung senyawa triterpenoid apabila terjadi  perubahan  warna  menjadi  merah, jingga  atau  ungu.  Sementara  itu,  adanya kandungan  steroid  bila  terjadi  warna  biru dan hijau
c.  Pengujian Senyawa Tanin
Ekstrak  sebanyak  1  ml  diambil  dan dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  dan ditambahkan 2 - 3 tetes larutan FeCl3 1%. Ekstrak  dinyatakan  positif  mengandung senyawa tanin apabila terjadi warna hitam kebiruan atau hijau.
d.  Pengujian Senyawa Flavonoid Sebanyak  1  ml  ekstrak  dimasukkan ke  dalam  tabung  reaksi  dan  ditambahkan HCl  pekat.  Ditambahkan  juga  0,2  gram bubuk logam Mg. Ekstrak dinyatakan positif mengandung  senyawa  flavonoid  apabila terjadi  buih  dalam  intensitas  yang  banyak dan  warna  merah,  kuning,  atau  jingga dalam waktu 3 menit.
e.  Pengujian Senyawa Saponin
Ekstrak  diambil  sebanyak  1  ml  dan dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  dan ditambahkan  akuades.  Larutan  tersebut dididihkan selama beberapa waktu, kemudian  didinginkan.  Setelah  dingin, kocok  kuat-kuat  larutan,  apabila  terbentuk buih yang stabil selama 30 menit dan tidak hilang  jika  ditambahkan  1  tetes  HCl  2N menandakan adanya kandungan senyawa saponin.
f.  Pengujian Senyawa Fenolik Identifikasi senyawa fenolik dilakukan dengan  mengambil  1  ml  ekstrak  dari  stok yang  sudah  disediakan  sebelumnya  dan dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi. Ekstrak ditambahkan 2 - 3 tetes FeCl3 5% dan apabila terbentuk warna coklat orange menunjukkan kehadiran senyawa fenolik.

## Pengujian  Antibakteri  Ekstrak  Kasar
Bintang Laut
Sterilisasi Alat dan Bahan Alat-alat yang digunakan pada pengujian antibakteri, seperti tabung reaksi,  erlenmeyer,  cawan  petri  dan peralatan  gelas  lainnya  dicuci  terlebih dahulu  kemudian  dikeringkan.  Setelah kering alat-alat tersebut dibungkus dengan kertas  kemudian  dimasukkan  ke  dalam oven  pada  suhu  150º  C  selama  kurang
lebih  120  menit.  Sedangkan  untuk  media yang digunakan, disterilkan dengan autoclave pada suhu 120º C selama kurang lebih 20 menit.

## Pembuatan Media
Media  cair  yang  akan  digunakan dibuat  dengan  cara  melarutkan  nutrient broth sebanyak 1,3 gram ke dalam 100 ml air dalam erlenmeyer kemudian dipanaskan  sampai  benar-benar  larut. Setelah itu, larutan media dibagi ke dalam 10  tabung  dimana  masing-masing  tabung berisi  10  ml,  disterilkan  dengan  autoclave selama  20  menit  pada  suhu  120º  C. Setelah  disterilkan,  media  didinginkan sehingga  siap  untuk  digunakan  sebagai media  kultur  bakteri.  Pembuatan  media padat  dilakukan  dengan  cara  yang  sama dengan  media  cair  dengan  penambahan agar 2%.

## Kultur Bakteri Uji
Sebanyak 200 µL suspensi dari kultur segar  masing-masing  bakteri  yakni E.  coli dan S.  aureus diambil  menggunakan mikropipet kemudian dimasukkan ke dalam tabung  yang  berisi  media  cair  yang  telah disiapkan  sebelumnya  dan  diinkubasi selama  24  jam  untuk  digunakan  dalam pengujian.

## Pembuatan Kontrol Positif dan Negatif
Kontrol  positif  dibuat  sebagai  kontrol terhadap  metode  yang  bertujuan  untuk memastikan metode yang dilakukan sudah benar atau tidak yang ditunjukkan dengan adanya  zona  hambat.  Sedangkan  Kontrol negatif  dibuat  untuk  melihat  ada  atau tidaknya  aktivitas  pada  pelarut.  Kontrol positif  menggunakan  larutan  antibiotik Kloramfenikol  konsentrasi  (1  mg/ml  atau 1000  ppm)  sedangkan  kontrol  negatif menggunakan larutan etanol 40%.

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Pengujian  antibakteri  menggunakan metode  difusi  cakram  (metode  Kirby- Bauer).  Kertas  cakram  (paper  disk)  yang digunakan  berdiameter  6  mm  dengan banyaknya ekstrak pada tiap kertas cakram adalah  30  μl.  Kertas  cakram  yang  telah mengandung ekstrak uji kemudian diletakkan  pada  permukaan  media  padat yang  telah  disiapkan  sebelumnya  lalu diinkubasi  selama  1x24  jam.  Pengamatan dilakukan  terhadap  ada  tidaknya  zona bening  yang  terbentuk  disekitar  kertas cakram yang menunjukkan adanya penghambatan terhadap pertumbuhan bakteri  uji.  Diameter  zona  hambat  diukur dalam satuan milimeter (mm) menggunakan mistar berskala (Gambar 2).
Gambar 2. Cara mengukur Zona Hambat Bakteri

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Morfologi Linckia laevigata
Individu bintang laut L. laevigata yang ditemukan  di  perairan  pantai  Malalayang memiliki  ciri-ciri  warna  dasar  biru  cerah (Gambar 3), memiliki ukuran lengan sekitar 15-20 cm berukuran. Habitat L. laevigata ini berada pada daerah yang berkarang yang makanan  utama  berupa alga  dan  detritus.
L.  laevigata mempunyai  daya  regenerasi
lengan  yang  sudah  terpotong  dan  bagian tersebut akan menjadi individu baru.
Ekstraksi Senyawa Linckia laevigata Proses ekstraksi dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol 96% yang dilakukan selama 2x24 jam dilanjutkan  dengan  pemekatan  dengan evaporasi  dan  proses  kering-beku  ( freeze
dry ) sehingga menghasilkan ekstrak kasar pekat berwarna jingga (Gambar 4).
Perbandingan berat ekstrak dan berat sampel  menghasilkan  jumlah    rendemen yang  diperoleh  adalah  sebesar  4.92  % (Tabel 1). Rendemen adalah perbandingan
berat  kering  produk  yang  dihasilkan dengan  berat  bahan  baku.  Nurhayati  dkk, (2009) menyatakan bahwa nilai rendemen yang tinggi menunjukkan banyaknya komponen  bioaktif  yang  terkandung  di dalamnya.
Gambar 3. Linckia laevigata
Gambar 4. Preparasi dan Maserasi Sampel
Tabel 1. Rendemen dan ekstrak etanol L. laevigata
. Berat Sampel (gr) Berat Ekstrak (gr) Rendemen (%) 512 25,2 4,92 Ekstraksi  sampel  ini  menggunakan pelarut    etanol    96%    yang  termasuk golongan semipolar karena  pelarut  etanol dapat menyari hampir keseluruhan kandungan  dalam  sampel  (simplisia)  baik non  polar,  semi  polar  maupun  polar. Pelarut  ini  bersifat selektif, ekonomis, tidak beracun,  dan bersifat universal yang cocok untuk mengekstrak semua golongan
senyawa  metabolit  sekunder  (Kristanti et al .,2008).

## Analisis Zookimia Kualitatif
Skrining  zookimia  ekstrak  etanol L.laevigata menunjukkan adanya senyawa bioaktif dari golongan alkaloid, triterpenoid, tanin,  flavonoid,  fenolik,  dan  saponin sementara steroid tidak terdeteksi. Kandungan senyawa kimia ekstrak
L.laevigata secara kualitatif disajikan pada Tabel 2 ; Gambar 5.
Tabel 4. Penutupan lamun dalam kuadran
No. Jenis Senyawa Metode Uji Perubahan warna Hasil 1. Alkaloid Pereaksi Mayer (HgCl 2 + KI) Terbentuk Endapan putih/kuning + Pereaksi Dragendorff (KI + B 5 H 9 N 4 O 22 ) Terbentuk Endapan jingga + Pereaksi Wagner (I 2 + KI) Terbentuk endapan krem + 2. Triterpenoid Pereaksi Lieberman Burchard Warna menjadi merah, jingga atau ungu + 3. Steroid Tidak berubah - 4. Tanin Pereaksi FeCl 3 1% Warna agak kehijauan + 5. Flavonoid Pereaksi HCl pekat + Mg Buih dalam intensitas yang banyak dan warna merah, kuning, atau jingga + 6. Fenolik Pereaksi FeCl 3 5% Warna coklat orange + 7. Saponin Pereaksi HCl + Akuades Terbentuk buih yang stabil + Ket :
(+) Mengandung senyawa (-) Tidak mengandung senyawa
Alkaloid Mayer Alkaloid Dragendorff Alkaloid Wagner Triterpenoid Steroid Tanin
Gambar 5. Hasil Pengujian Zookimia Kualitatif ekstrak  L. laevigata
Hasil  yang  diperoleh  menunjukkan bahwa ekstrak L. laevigata mengandung senyawa  bioaktif  dari  golongan  alkaloid, triterpenoid,  tanin,  flavonoid,  fenolik,  dan saponin sedangkan steroid tidak terdeteksi padahal  streroidal  glikosid  merupakan metabolisme  utama  dari  bintang  laut (Tarman et  al ,  2012).  Walag et  al (2019) memperlihatkan keberadaan alkaloid, flavonoid,  saponin,  triterpenoid  sementara fenolik dan tannin tidak terdeteksi. Demikian  juga  yang  diperoleh  Tunny dkk (2021)  yang  mendeteksi  adanya  alkaloid, flavonoid  dan  saponin  namun  tidak terdeteksi adanya tanin. Alkaloid merupakan golongan senyawa yang mengandung  nitrogen,  memiliki  berat molekul  rendah  dan  ditemukan  pada jaringan  tumbuhan  dan  hewan  (Akerina dkk.,  2015).  Pada  pengujian  kandungan Tanin menghasilkan warna agak kehijauan menunjukkan  hasil  yang  positif.  Pengujian fitokimia ekstrak kasar  dari L. laevigata uji flavanoid mendapatkan hasil positif mengandung senyawa flavonoid.
Alkaloid, flavonoid dan saponin merupakan  senyawa  yang  umumnya terdeteksi  dimiliki  oleh L.  Laevigata . Alkaloid  merupakan  golongan  senyawa yang mengandung nitrogen, memiliki berat molekul  rendah  dan  ditemukan  pada jaringan tumbuhan dan hewan (Akerina et al .,  2015;  Ningrum  et  al.,  2016).  Alkaloid memiliki  efek  dalam  bidang  kesehatan berupa  antihipertensi  dan  antidiabetes melitus (Runtuwene, dkk 2017). Terbentuk
warna  cokelat  orange  pada  pengujian fenolik. Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak bintang  laut L.  laevigata mengandung senyawa golongan fenolik (Rosdianti et al. (2019). Saponin merupakan senyawa polar yang  bersifat  larut  dalam  air  dan  etanol (Akerina  et  al.,  2015).  Terbentuknya  buih yang stabil pada pengujian mengidentifikasikan adanya senyawa golongan  Saponin.  Saponin  yang  diisolasi dari bintang laut Anasterias minuta memiliki kemampuan  sebagai  sitotoksik,  hemolisis, antifungi, dan antiviral (Gama, 2015).

## Uji Antibakteri Ekstrak L. laevigata
Aktivitas  penghambatan  ekstrak L. laevigata terhadap bakteri uji S. aureus dan E.  coli ditampilkan  pada  Gambar  6  dan hasil  pengukuran  zona  hambat  yang terbentuk disajikan pada Tabel 4.
Besaran  nilai  rata-rata  zona  hambat diperoleh berkisar 6,5 mm – 6,6 mm untuk E.coli dan  6.3    mm  untuk S.  Aureus .
Berdasarkan pengamatan terhadap aktivitas  penghambatan  dan  zona  hambat yang terbentuk menunjukkan bahwa ekstrak  kasar L.  laevigata asal  perairan Malalayang  nyaris  tidak  menghasilkan aktivitas  antibakteri  yang  signifikan  atau tergolong memiliki aktivitas antibakteri yang rendah.  Runtuwene dkk. (2017)  juga mendapatkan  hasil  aktivitas  antibakteri yang  juga  rendah  yakni  2,25  mm  untuk bakteri E.  coli dan  0,75  mm  untuk S. aureus .  Hasil yang berbeda diperoleh Piter dkk .  (2019)  yang  menggunakan  metode difusi dengan teknik sumur memperlihatkan
Flavonoid Fenolik Saponin
zona  hambat  yang  lebih  besar  yaitu  nilai rata-rata  10,87  mm.  Adanya  perbedaan aktivitas antibakteri ini kemungkinan dapat
disebabkan oleh perbedaan lokasi darimana  organisme  tersebut  diambil  dan metode yang digunakan.
Gambar 6. Hasil Pengujian Antibakteri Ekstrak L.laevigat
Tabel 3. Hasil Pengukuran Diameter Zona Hambat
Perlakuan Bakteri Uji Escherichia coli Staphylococcus aureus Ulangan Ulangan 1 (mm) 2 (mm) 3 (mm) Rerata (mm) 1 (mm) 2 (mm) 3 (mm) Rerata (mm) P1 6,25 6,5 6,75 6,5 6,25 6,5 6,25 6,33 P2 6,5 7 6,5 6,66 6,25 6,5 6,25 6,33 K + 10,5 10 10,5 10,33 9 8,75 9 8,91 K - 0 0 0 0 0 0 0 0 Ket : P1  : Ekstrak 1 P2  : Ekstrak 2
K + : Kontrol positif ( Chloramphenicol 1.000 ppm) K -  : Kontrol negatif (larutan etanol 40%) Banyaknya ekstrak dalam kertas cakram: 30 µl Diameter kertas cakram: 6 mm

## KESIMPULAN
Dari  penelitian  ini  dapat  disimpulkan bahwa  ekstrak  etanol  bintang  laut  jenis L. laevigata memiliki  kandungan  senyawa metabolit dari golongan alkaloid, triterpenoid,  tanin,  flavonoid,  fenolik,  dan saponin  namun  aktivitas  penghambatan terhadap E.  coli dan S.  aureus terdeteksi sangat  lemah  sehingga  potensi  sebagai antibakteri sangat rendah.

## DAFTAR PUSTAKA
Akerina,  F.  O.,  Nurhayati,  T.,  &  Suwandy,
R. (2015). Isolation
and
Characterization of Antibacterial Compounds from Sea Urchin. JPHPI, 18(1), 61-73. Ernawati,  N.W.,  I.W.  Arthana.  dan  N.M. Ernawati. 2019. Kelimpahan keanekaragaman  dan  pertumbuhan alami bintang laut (Asteroidea)
Ulangan 1 Ulangan 2
Ulangan 3
Media Bakteri : Escherichia coli
Media Bakteri : Staphylococcus aureus
Keterangan : P1 : Ekstrak -1 ; P2 : Ekstrak -2 ; + : Kontrol positif ;-  : Kontrol negatif
diperairan  Pantai  Semawang  dan Pantai Samuh, Bali. Current Trends in Aquatic Science II (1), 46-53.
Fitriana,  N.  2010.  Inventarisasi  Bintang
Laut  (Echinodermata:  Asteroidea)  Di Pantai  Pulau  Pari,  Kabupaten  Adm. Kepulauan  Seribu.  Jurnal  Ilmiah Faktor Exacta. 3:167-174.
Gama, R. A. 2015. Potensi Ekstrak Bintang Laut (Culcita Sp.) sebagai Antibakteri terhadap Bakteri Patogen Staphylococcus  aureus .  J  Agromed Unila; 2 (2) :72-76 Harborne. (1987). Metode Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan (II ed.). (K. Padmawinata, & I. Soediro, Trans.) Bandung: ITB.. Kristanti, A. N., N.S. Aminah., M. Tanjung., B.        Kurniadi.        2008.  Buku        Ajar Fitokimia. Unair Press, Surabaya Lindongi  K.A,  Sinjal  C.A.L,  Kemer  K, Mangindaan  R.E.P,  Gerung  G,  & Longdong  S  (2022).  Uji  Aktivitas Antioksidan Pada Asteroidea ( Linckia laevigata )  Dari  Perairan  Tongkaina
Kecamatan Bunaken Kota Manado Mewengkang T.T, Lintang R.A.J, Losung F, Sumilat  D.A,  &  Lumingas  L.J.L. (2022).  Identifikasi  Senyawa  Bioaktif Dan  Pengujian  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak  Daging  Teripang Holothuria (Halodeima)  atra Jaeger  1833  Asal
Perairan  Pantai  Kalasey,  Minahasa. Jurnal Ilmiah Platax 10 (2): 355-363
Ningrum  R,  Purwanti,  E.,  &  Sukarsono.
(2016). Identifikasi Senyawa Alkaloid Dari Batang Karamunting ( Rhodomytrus  tomentosa )  Sebagai Bahan Ajar Biologi Untuk SMA Kelas
X. Jurnal Pendidikan Biologi
Indonesia, 2(3), 231-236
Nurhayati,  T,  D.  Aryanti,  dan  Nurjanah.
2009.  Kajian  Awal  Potensi  Ekstrak Spons  Sebagai  Antioksidan.  Jurnal Kelautan Nasional. 2(2):43-51.
Piter D, Angkouw E.D, & Losung F (2019).
Potensi Antibakteri Bintang Laut Dari Perairan Pantai Kelurahan Tongkaina Manado. Jurnal Pesisir Laut dan Laut
Tropis, Vol.7 No.3
Rompas  G,  Lintang  R.A.J,  Sumilat  D.A,
Rumengan  I.F.M,  Ginting  E.L,  & Pangkey H (2022) Aktivitas Antibakteri  dan  Analisis  Zookimia Ekstrak Bulu Babi Diadema setosum (Leske, 1778) Asal Perairan Aertembaga,  Kota  Bitung.  Jurnal Ilmiah Platax 10 (2): 372-379 Rosdianti S, Dimara L, Ayer P I L. 2019 . Uji Efektifitas  Antijamur  Ekstrak  Bintang Laut Linckia  laevigata (Linnaeus, 1758) Terhadap Pertumbuhan Jamur Trichophyton sp. Jurnal Ilmu Kelautan dan Perikanan Papua Acropora. Vol. 2 (2) : 55-62.
Runtuwene,  R.  K.,  Wewengkang,  D.  S., Citraningtyas,  G.  2017.  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Bintang  Laut Linckia laevigata yang Diperoleh dari Teluk Manado. Jurnal Ilmiah Farmasi
– UNSRAT Vol. 6 (4) : 67-77
Sangi, M., Runtunewe, M. R., Simbala, H. E.,  &  Makang,  V.  E.  (2008).  Analisis Fitokimia Tumbuhan Obat di
Kabupaten  Minahasa  Utara.  Chem. Prog., 1(1), 47-53.
Seemaa  S  &  Shafreen  R.B.  2020. Investigation  of  potential  antibiofilm properties  of  Antimicrobial  Peptide (AMP) from Linckia laevigata against Candida  albicans :  An in  vitro and in vivo study. Process Biochemistry 99 :
340 –347. Supono 2012. Kelimpahan Dan
Keragaman  Echinodermata  Di  Pulau Pari,  Kepulauan  Seribu.  Jurnal  dan Teknologi Kelautan Tropis, Vol.4 No.1
Tunny R, Pelu A.D & Salenussa D.A. 2021.
Uji Skrining Fitokimiadan Uji Aktivitas AntibakteriEkstrak  Etanol  Bintang Laut (Asteroidea) Jenis Linckia laevigata Terhadap Bakteri
Eschericia  coli .  Jurnal  Kesehatan Amanah Vol.5 (2) : 34-45.
Walag A.M. P. Del Rosario R.M, Canencia O.P. 2019.  Zoochemical Composition of Selected Sea Stars Collected from the  Coastal  Waters  of  Carmen, Agusan Del Norte, Philippines. Asian J of Biological and Life Sciences, Vol 8 (2): 53-62.