Abstrak—Plastik  merupakan  polimer  sintetis  yang  paling banyak  digunakan  di  masyarakat.  Sifat  plastik  yang  sulit  untuk didegradasi menyebabkan plastik menjadi sumber pencemaran di lingkungan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  potensi mikroorganimse  air  sampah  dan  inokulum  campur  koleksi laboratorium,  serta  yeast  M  2.3  dalam  mendegradasi  plastik putih. Metode biodegradasi plastik yang digunakan adalah kolom Winogradsky.  Penelitian  ini  menggunakan    botol  berukuran  600 ml yang berisi 300 gram pasir steril, medium MSM, inokulum air sampah  (S)  ,  inokulum  campur  (X)  serta  yeast  M  2.3  (Y),  dan plastik  uji  warna  putih.  Parameter  yang  diukur  adalah  persen degradasi, Optical  Density (OD)  biofilm  dan  kolom  air  selama  3 bulan masa inkubasi dengan waktu panen 3 minggu sekali. Hasil yang  diperoleh  dari  penelitian  ini  adalah  Inokulum  X,  S  dan  Y memiliki  kemampuan  yang  sama  dalam  mendegradasi  plastik putih.  Degradasi  plastik  putih  paling  tinggi  terjadi  pada inokulum  X  setelah  9  minggu  masa  inkubasi  dengan  persentase degradasi  3,6%,  dimana  kerapatan  sel  pada  masa  inkubasi setelah 9 minggu untuk biofilm dengan λ 600nm adalah 0.036 dan λ 540nm adalah 0,039, serta kerapatan sel pada kolom air dengan λ 600nm adalah 0.034 dan λ 540nm adalah 0,055.
Kata Kunci — Air sampah, Biodegradasi, Mikroorganisme, dan Plastik Putih.

## I. PENDAHULUAN
LASTIK  merupakan  polimer  sintetis  yang  sulit  untuk terdegradasi,  hal  tersebut  disebabkan  karena  plastik mempunyai  kerapatan  massa  molekul  yang  tinggi,  dimana polietilen  memiliki  kerapatan  0,91  hingga  0,97  gram/cm3, sehingga  mengalami  penumpukan  di  lingkungan  rata-rata mencapai 25 miliar ton per tahun [1].
Banyaknya  masalah  yang  ditimbulkan  oleh  keberadaan sampah  plastik  di  lingkungan,  membuat  sampah  plastik menjadi  fokus  utama  dalam  bidang  penelitian.  salah  satunya yaitu  biodegradasi  plastik.  Biodegradasi  dapat  dilakukan  oleh mikroorganisme  seperti  bakteri,  jamur,  yeast  dan  alga. Biodegradasi bahan organik dapat terjadi secara aerob maupun anaerob. Proses biodegradasi terjadi melalui beberapa tahapan yaitu biodeteriorasi, biofragmentasi, asimilasi dan mineralisasi [2].  Proses  biodegradasi  akan  lebih  efektif  dengan menggunakan  jenis  mikroorganisme  yang  memiliki  karakter degradasi  yang  berbeda,  dimana  terdapat  mikroorganisme yang  berperan  dalam  pemecahan  polimer  dan  ada  yang berperan dalam pemanfaatan monomer [3].
Dari hasil penelitian tentang biodegradasi plastik yang telah dilakukan sebelumnya, didapatkan beberapa jenis bakteri yang
mampu  mendegradasi  polimer  plastik  dengan  enzim  yang diproduksinya, Pseudomonas spp. dapat mendegradasi plastik dengan  enzim  serin  hydrolase  dan  esterase  [4]. Brevibacillus borstelensis dapat  mengurangi  berat  molekul  polietilen  11- 30%  [5].  Selain  bakteri,  yeast  juga  mampu  melakukan degradasi  terhadap  polimer  plastik  dengan  enzim  yang dimilikinya.  Beberapa  yeast  mampu  mendegradasi  polimer plastik, contohnya yaitu Candida rugosa yang memiliki enzim esterase  dan urease sehingga mampu mendegradasi poliuretan [4].
Ainiyah  dan  Shovitri  [6]  telah  menunjukkan  bahwa konsorsium  bakteri  tanah  sampah  dalam  kolom  Winogradsky dapat  medegradasi  plastik berwarna hitam rata-rata lebih baik dari  plastik  berwarna  lainya.  Kolom  Winogradsky  merupakan ekosistem  mikrobia  buatan  yang  berfungsi  sebagai  sumber kultur  bakteri  jangka  panjang.  Kolom  ini  selain  berfungsi menyediakan sumber makanan untuk inokulum, kolom ini juga berfungsi  untuk  menguji  proses  degradasi.  Dalam  kolom Winogradsky lingkungan bakteri untuk proses degradasi dapat dikondisikan  secara  aerob  dan  anaerob  untuk  skala laboratorium [7]. Selain itu, pada penelitian ini juga digunakan air  sampah  TPA  sebagai  inokulum  baru  untuk  mendegradasi plastik.  Air  sampah  ini  mengandung  bahan-bahan  kimia  dan mikroorganisme[8].  Sehingga  dalam  penelitian  ini  akan dilakukan  pengujian  untuk  mencari  inokulum  yang  paling potensial  dengan  membandingkan  inokulum  air  sampah, inokulum campur koleksi laboratorium dan yeast M 2.3 dalam mendegradasi plastik dengan metode kolom Winogradsky.

## II. METODOLOGI

## A. Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Februari – Juni 2015 di  Laboratorium  Mikrobiologi  dan  Bioteknologi,  Jurusan Biologi FMIPA ITS Surabaya.

## B. Pengambilan Air Sampah
Air  sampah  yang  digunakan  merupakan  air  pada  tumpukan sampah  di  TPA  Benowo  Surabaya.  Air  sampah  disaring dengan saringan kasar untuk memisahkan air dengan serpihan sampah. Filtrat hasil penyaringan disaring ulang menggunakan kertas  saring  Whatman  grade  1  dengan  ukuran  pori-pori  11 µm.  Grade  kertas  saring  dipilih  berdasarkan  pada  ukuran bakteri yang memiliki diameter 0,2 – 2,0 µm dan panjang 2 – 8 µm [9].

## Biodegradasi Plastik Putih dalam Kolom Winogradsky
Laellatul Badriyah dan Maya Shovitri Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Teknologi Sepuluh Nopember (ITS) Jl. Arief Rahman Hakim, Surabaya 60111 Indonesia e-mail : maya@bio.its.ac.id
P
C. Pembuatan Starter inokulum campur (Inokulum X) dan Inokulum Yeast M 2.3( Inokulum Y)
Inokulum  campur  merupakan  inokulum  campur  dari  tanah sampah  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Ainiyah  dan Shovitri[6]. Pertama dilakukan pembuatan subkultur sebanyak 3  kali.  Subkultur-1  adalah  1  ml  inokulum  kultur  campuran tanah  sampah  dari  kolom  Winogradsky  dimasukkan  dalam  9 ml  medium Nutrient  Broth (NB)  dan  diinkubasi  selama  24 jam.  Subkultur-2  adalah  5  ml  subkultur-1  diinokulasikan dalam  medium  NB  50  ml  dan  diinkubasi  selama  24  jam. Subkultur-3  adalah  10  ml  subkultur-2  diinokulasikan  dalam medium NB 100 ml dan diinkubasi selama 24 jam. Subkultur- 3  sebanyak  100  ml  digunakan untuk membuat starter sebayak 500ml.  Starter  dimasukkan  dalam  medium Mineral  Salt Medium (MSM)  dengan  perbandingan  70%  medium  MSM  : 30%  starter.  Starter  dalam  medium  MSM  dilihat  kurva pertumbuhannya  menggunakan  Spektrofotometer  dengan panjang gelombang 600nm, dengan pengamatan setiap 24 jam. Starter  yang  digunakan  adalah  10%  dari  total  medium  dalam kolom Winogradsky.
Subkultur  Inokulum  yeast  M2.3  sama  halnya  dengan inokulum  campur,  hanya  saja  medium  untuk  subkultur menggunakan YMB dan waktu inkubasi 24 - 48 jam , dimana pada subkultur1 1 ose kultur murni inokulum Y diinokulasikan dengan  cara  digores  di  atas  medium Yeast  Malt  Extract  Agar (YMEA) miring dan diinkubasi selama 24 - 48 jam. Subkultur- 2  adalah  1  ose  subkultur-1  dimasukkan  dalam  10  ml  medium Yeast  Malt  Broth (YMB)  dan  diinkubasi  selama  24  -  48  jam. Subkultur  dilanjutkan  hingga  subkultur  4  dan  perlakuan selanjutnya  sama  dengan  pembuatan  starter  pada  inokulum campur.

## D. Persiapan Plastik Uji
Plastik  uji  yang  digunakan  adalah  kantong  plastik  belanja (tas  kresek)  warna  putih.  Plastik  uji  dipotong  dengan  ukuran 10  x  3  cm,  masing-masing  plastik  uji  disterilkan  dengan direndam  alkohol  70%  selama  kurang  lebih  30  menit  dan dikering anginkan sekaligus dengan UV pada LAF (Bio 60-M) selama  kurang  lebih  30  menit.  Selanjutnya  plastik  uji  dioven pada  suhu  80°C  selama  24  jam.  Plastik  uji  ditimbang menggunakan Analytical balance (Shimadzu) untuk mengetahui  berat  kering  awal  plastik.  Plastik  diberi  tanda supaya  mudah  untuk  dibedakan.  Plastik  di  UV  pada  LAF kembali untuk menyeterilkan plastik uji.

## E. Biodegradasi Plastik
Metode  biodegradasi  plastik  yang  digunakan  adalah  kolom Winogradsky sesuai  dengan  penelitin  yang  dilakukan  oleh Ainiyah  dan  Shovitri[6].  Inokulum  yang  digunakan  dalam tahap  biodegradasi  ini  adalah  inokulum  air  sampah  yang selanjutnya  disebut  dengan  inokulum  S,  inokulum  campur koleksi  laboratorium  yang  selanjutnya  disebut  dengan inokulum  X,  dan  inokulum  yeast  M  2.3  disebut  dengan inokulum  Y.  Kontrol  negatif  dibuat  tanpa  penambahan inokulum  mikroorganisme  pada  kolom  Winogradsky  dengan kode K dan kontrol air sampah steril dengan kode KS.  Proses biodegradasi ini menggunakan botol plastik berukuran 600 ml dan berisi 300 gram pasir steril. Inokulum X dan Y berisi 315
ml  medium  MSM  dan  35  ml  inokulum,  inokulum  S  berisi 350ml  air  sampah,  sedangkan  untuk  perlakuan  kontrol  K ditambakan 350  ml medium MSM steril dan kontrol KS berisi 350ml  air  sampah  steril.  untuk  inokulum  kode  K.  Botol Winogradsky  untuk  inokulum  kode  S  berisi  300  gram  pasir steril dan 350 ml filtrat air sampah. Kolom Winogradsky untuk masing-masing inokulum dibuat 3 kali ulangan.
Plastik  dimasukkan  ke  dalam  medium  yang  telah  berisi inokulum  mikroorganisme  uji  dengan  menggunakan  pinset steril hingga terendam dalam medium. Proses biodegradasi ini dilakukan  selama  3  bulan  dengan  metode  destruktif  untuk setiap  tiap  3  minggunya  dengan  pemanenan  sebanyak  4  kali. Biodegradasi  terjadi  apabila  terdapat  selisih  penurunan antara berat kering plastik setelah inkubasi dengan berat kering awal plastik.
F. Pengukuran Optical Density (OD) Mikroorganisme di Kolom Air dan Biofilm
Pengukuran  OD  dilakukan  setiap  3  minggu  sekali  pada waktu  pemanenan  plastik  selama  masa  inkubasi  dengan masing-masing 3 kali ulangan untuk setiap kolom Winogradsky.  Pengukuran  OD  biofilm dilakukan dengan cara memisahkan  potongan  plastik  dari  biofilm  mikroorganisme sesuai dengan metode modifikasi yang digunakan oleh Ainiyah dan Shovitri (2014). Potongan plastik hasil panen dimasukkan kedalam  botol  falcon  berisi  30 ml akuades steril dan divortex dengan  kecepatan  2000  rpm  selama  30  detik.  Proses  ini diulangi sebanyak 5 kali untuk membersihkan biofilm. Biofilm yang  telah  terpisah  dari  plastik  kemudian  diukur  densitasnya menggunakan  spektrofotometer.  Inokulum  S,  X,  K  dan  KS diukur  dengan  Spektrofotometer  dengan  panjang  gelombang 600  nm  dan  540  nm.  Sedangkan  inokulum  Y  diukur  dengan Spektrofotometer dengan panjang gelombang 540 nm. Pengukuran  OD  kolom  air  pada  Inokulum  S,  X  dan  Y diambil  menggunakan  pipet  steril  sebanyak  2  ml  dari  kolom Winogradsky  dan  dimasukkan  dalam  kuvet,  pengambilan dilakukan  secara  steril.  Inokulum  S  dan  X  diukur menggunakan  Spektrofotometer  dengan  panjang  gelombang 600 nm. Sedangkan inokulum Y diukur dengan Spektrofotometer dengan panjang gelombang 540 nm.

## G. Presentasi Kehilangan Berat Plastik
Pengukuran  kehilangan  berat  plastik  dilakukan  setiap  3 minggu,  dimana  3  potongan  plastik  uji  diambil  dari  kolom Winogradsky  dengan  menggunakan  pinset  secara  aseptis. Plastik  dipisahkan  dari  biofilm  seperti  pada  metode pengukuran  OD  biofilm.  Plastik  uji  kemudian  disterilisasi dengan  alkohol  70%  dan  dikeringanginkan.  Setelah  kering, plastik  uji  dimasukkan  kedalam  oven  pada  suhu  80°C  selama 24  jam  dan  ditimbang  berat  keringnya.  Berikut  rumus perhitungan persentase kehilangan berat plastik[10]:
Persentase Kehilangan Berat = Wi - Wf X 100 % Wi (1)
Keterangan:
Wi   = berat kering awal sebelum degradasi (gram); Wf = berat kering akhir setelah proses degradasi (gram).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Uji  biodegradasi  plastik  dalam  penelitian  ini  menggunakan metode kolom Winogradsky (Gambar 1) dengan menggunakan inokulum berupa mikroorganisme yang berasal dari air sampah TPA  Benowo  (Inokulum  S),  inokulum  campur  koleksi laboratorium (Inokulum X) yang sebelumnya sudah terdeteksi mampu  mendegradasi  plastik,  serta  inokulum  yeast  M  2.3 (Inokulum  Y)  yang  juga  merupakan  koleksi  laboratorium. Inokulum Y kedekatannya cenderung terhadap genus Candida [11]  dengan  nilai  indeks  lipolitik  1,73.  Kolom  Winogradsky merupakan  ekosistem  buatan  yang  memungkinkan  beragam mikroorganisme dapat berkembang dan membentuk stratifikasi sesuai  dengan  kebutuhan  elektron  donor  dan  aseptornya  [7]. Pada penelitian ini kolom Winogradsky diisi dengan pasir dan medium  mineral  untuk  inokulum  X  dan  inokulum  Y, sedangkan  untuk  inokulum  S  diisi  dengan  pasir  dan  substrat alami  berupa  air  sampah  sebagai  sumber  inokulum mikroorganisme. Potongan plastik yang ditanam pada substrat pasir  diukur  persentase  degradasi  plastiknya,  kerapatan  sel pada biofilm dan kolom air selama 12 minggu masa inkubasi, dengan interval pengukuran 3 minggu sekali.
Biodegradasi  plastik  adalah  proses  dimana  polimer  plastik akan  dipecah  oleh  mikroorganisme  menjadi  oligomer  dan monomer penyusunnya dengan menggeluarkan enzim ekstraseluler  dan  intraseluler  pada  proses  biodegradasi  ini [12]. Monomer plastik ditransfer ke dalam sel mikroorganisme melalui  membran  khusus.  Molekul  yang  diserap  oleh mikroorganisme  dapat  digunakan  sebagai  sumber  karbon  dan sumber energi. Produk akhir dari metabolisme mikoorganisme akan mengahasilkan biomassa, CO 2 , H 2 O dan CH 4 [2].
Berdasarkan rata-rata persentase degradasi plastik (Tabel 1), inokulum  X  memiliki  kemampuan  paling  tinggi  dalam mendegradasi  plastik  putih.  Setelah  3  minggu  masa  inkubasi persentase  degradasi  inokulum  X  mencapai  2,3%  sedangkan degradasi  optimum  terjadi  setelah  9  minggu  masa  inkubasi atau  panen  3  sebesar  3,6%.  Hal  tersebut  menunjukkan  bahwa inokulum X sudah teradaptasi dengan baik dalam mendegradasi plastik, sehingga hasil degradasinya menunjukkan pola yang stabil. Kerapatan sel semua inokulum uji  cenderung  stabil  dari  setelah  3  minggu  masa  inkubasi hingga  setelah  12  minggu  masa  inkubasi  (Gambar  2),  hal tersebut menunjukkan bahwa dengan kerapatan sel yang sama, masing-masing  inokulum  memiliki  kemampuan  yang  berbeda
dalam  mendegradasi  plastik.  Namun  berdasarkan  analisa statistika  ANOVA- One  way (Tabel  1)  jenis  inokulum  X,  S, dan  Y  menunjukkan  hasil  yang  tidak  berbeda  nyata  secara signifikan pada semua jenis inokulum uji dari setelah 3 minggu masa inkubasi hingga setelah 12 minggu masa inkubasi.
Berdasarkan presentase degradasi plastik putih, inokulum X dan  S  memiliki  kemampuan  degradasi  lebih  tinggi.  Hal  ini mungkin karena inokulum X sudah teradaptasi metabolismenya  untuk  mendegradasi  plastik  pada  penelitian sebelumnya,  dan  inokulum  S  yang  diambil  dari  tumpukan sampah  juga  teradaptasi  untuk  mendekomposisi  tumpukan sampah  segar  dimana  inokulum  tersebut  berasal.  Konsorsium adalah  kumpulan  2  atau  lebih  mikoorganisme  baik  bakteri maupun yeast, yang saling mengutungkan dalam sinergi proses metabolismenya  [13].  Inokulum  konsorsium  akan  lebih optimal  dalam  melakukan  suatu  proses  degradasi  karena adanya  perbedaan  proses  metabolisme  yang  bisa  saja merupakan proses metabolisme bertingkat, ada satu mikroorganisme  yang  bertugas  memecah  polimer  plastik menjadi  monomer  dan  mikroorganisme  yang  memanfaatkan monomer dan produk samping hasil degradasi sebagai sumber karbon  dan  energinya  [12].  Hal  ini  diduga  juga  terjadi  pada inokulum X dan S dalam proses degradasi plastik uji.
Inokulum  Y  merupakan  inokulum  tunggal  yeast  genus Candida. Yeast  merupakan  mikroorganisme  eukariotik.  Yeast dapat  mensekresikan  enzim  ekstraseluler  ke  lingkungan  dan memperoleh  nutrien  dengan  cara  absorpsi  [14].  Menurut  [4], genus Candida memiliki  enzim  esterase  yang  dapat  memecah gugus ester pada polimer plastik. Pada uji biodegradasi (Tabel 1)  terlihat  bahwa  kemampuan  inokulum  Y  berfluktuasi. Kemampuan  degradasi  plastik  turun  setelah  9  minggu  masa inkubasi,  dan  naik  kembali  setelah  12  minggu  masa  inkubasi. Ketidakstabilan  ini  mungkin  karena  inokulum  merupakan inokulum  tunggal.  Sedangkan  degradasi  plastik  memerlukan komplek  enzim  yang  mungkin  dihasilkan  oleh  lebih  dari  satu mikroorganisme [3].
Tabel 1. Persentase Kehilangan Berat Plastik Putih Inokulum Persen Kehilangan Berat Plastik (%) setiap Masa Inkubasi 3 minggu 6 Minggu 9 Minggu 12 Minggu Inokulum X 2.3 a 2.2 a 3.6 a 2.6 a Inokulum  S 1.9 a 1.7 ab 2.5 a 1.2 ab Inokulum Y 2.0 a 1.7 ab -1.2 b 1.2 ab K 0 b 0 c 0 b 0 b KS 0.1 b 0.8 bc 0 b 0 b
Keterangan  :  Angka  yang  diikuti  huruf  yang  sama  pada  kolom  yang  sama menunjukkan  tidak  berbeda  nyata  pada  analisa  Tukey  ANOVA  dengan tingkat kepercayaan 0,05.
X : Inokulum kultur campur koleksi laboratorium; S : Inokulum air sampah; Y : Inokulum yeast M 2.3; K : Kontrol MSM steril; KS  : Kontrol sampah steril.
a b

## c
Gambar 1. Kolom Winogradsky Biodegradasi Plastik Putih dengan Inokulum S.
Keterangan: a. Air sampah (350 ml), b. Potogan plastik putih ukuran 3×10 cm ( 3 lembar/ botol),  c. Pasir steril (300gram).
Pada  grafik  kerapatan  sel  (Gambar  2)  pertumbuhan inokulum  Y  sangat  tinggi  pada  kolom  air  setelah  12  minggu masa  inkubasi.  Ini  menunjukkan  bahwa  inokulum  Y  lebih banyak  hidup  pada  kolom  air  daripada  di  permukaan  plastik membentuk  biofilm.  Kondisi  ini  mungkin  merupakan  salah satu  penyebab  rendahnya  persentase  degradasi  plastik  oleh inokulum  Y  dibandingkan  dengan  inokulum  X  dan  inokulum S.

## IV. KESIMPULAN
Inokulum  X,  S  dan  Y  memiliki  kemampuan  yang  sama dalam  mendegradasi  plastik  putih.  Degradasi  plastik  putih paling  tinggi  terjadi  pada  inokulum  X  setelah  9  minggu  masa inkubasi dengan persentase degradasi 3,6%, dimana kerapatan sel pada masa inkubasi setelah 9 minggu untuk biofilm dengan λ  600nm  adalah  0.036  dan  λ  540nm  adalah  0,039,  serta kerapatan  sel  pada  kolom  air  dengan  λ  600nm  adalah  0.034 dan λ 540nm adalah 0,055.
UCAPAN TERIMA KASIH
L.  Badriyah  mengucapkan  terima  kasih  kepada  dosen pembimbing  Ibu  Dr.rer.nat.  Ir.  Maya  Shovitri,  M.Si,  para dosen penguji Bapak Dr.techn. Endry Nugroho P., S.Si, M.T. dan Ibu Kristanti Indah Purwani, S.Si, M.Si, atas kritik, saran dan  masukannya  demi  kesempurnaan  tugas  akhir  ini,  serta terima  kasih  kepada  LPPM  ITS  atas  Hibah  Penelitian Unggulan PT dengan nomor kontrak
003246.96/IT2.11/PN.08/2015.  Penulis  juga  mengucapkan terima  kasih  kepada  ayah,  ibu  serta  adek-  adek  atas  doa  dan kasih  sayangnya.  Penelitian  ini  juga  tidak  lepas  dari  bantuan dan  dukungan  teman-teman  seperjuangan  dan  seluruh  pihak yang tidak dapat saya sebutkan satu persatu.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] J. Arutchelvi, M. Sudhakar, A. Arkatkar, M. Doble, S. Bhaduri, and P. V.  Uppara  .  “Biodegradation  of  Polyethylene  and  Polypropylene”. Indian Journal of Biotechnology Vol. &, January. (2008).
[2] A.  Guzman,  N.  Gnutek  and  H.  Janik.  “Biodegradable  Polymers  For Food  Packaging  –  Factors  Influencing  Their  Degradation  And Certification  Types  –  A  Comprehensive  Review”. Chemical Technology . Vol. 5, No. 1. (2011).
[3] M.  K.  Sangale,  M.  Shahnawaz,  and  A.  B.  Ade.  “A  Review  on Biodegradation  of  Polythene:  The  Microbial  Approach”. J  Bioremed Biodeg 3:164 (2012).
[4] H.  Bhardwaj,  R.  Gupta,  and  A.  Tiwari.  „Microbial  Population Associated With Plastic Degradation. Open Access Scientific Reports”. Volume 1 . Issue 5.( 2012).
[5] D. Hadad, S. Geresh, and A. Sivan. “Biodegradation of Polyethylene by The  Thermophilic  Bacterium Brevibacillus  borstelensis ” J  Appl Microbiol 98: 1093-1100.( 2005).
[6] D.  N.  Ainiyah  dan  M.  Shovitri.  “Bakteri  Tanah  Sampah  Pendegradasi Plastik  dalam  Kolom  Winogradsky”. Jurnal  Sains  Dan  Seni  POMITS Vol. 3, No.2, (2014) 2337-3520 (2301-928X Print).
[7] M.  T.  Madigan,  J.  M.  Martinko,  D.  A.  Stahl  and  D.  P.  Clark.  “ Brock. Biology  of  Microorganisms ”  12 th Edition.  San  Fransisco:  Benjamin Cummings. (2012).
[8] D.  Rilawati.  “Kajian  Penggunaan  Boisca  untuk  Pemanfaatan  Air  Lindi (Leachate) Menjadi  Pupuk  Cair”. Tesis. Program  Studi  Ilmu Lingkungan  Minat  Utama  Pengelolaan  Sumber  Daya  Air.  Program Pasca Sarjana Universitas Sebelas Maret Surakarta. (2009)
Gambar 2. Optical Density Biofilm dan Kolom Air Selama Masa Inkubasi
[9] G.  J.  Tortora,  B.  R.  Funke  and  C.  L.  Case.  “ Microbiology  An Introduction 10 th Edition. USA: Benjamin Cummings ”. (2010).
[10] E.  Rohaeti.  ”Karakterisasi  Biodegradasi  Polimer.  Prosiding  Seminar Nasional Penelitian”. Pendidikan dan Penerapan MIPA, Fakultas MIPA, Universitas Negeri Yogyakarta (2009).
[11] S.  Zunaidah  dan  N.  H.  Alami,    “Isolasi  dan  Karakterisasi Yeast dari Rhizosphere Avicennia Marina Wonorejo”. JURNAL SAINS DAN SENI POMITS Vol. 3, No.1, (2014) 2337-3520 (2301-928X Print).
[12] A.  A.  Shah,  F.  Hasan,  A.  Hameed  and  S.  Ahmed.  “Biological Degradation  Of  Plastics:  A  Comprehensive  Review”. Biotechnology Advances 26 (2008) 246–265.
[13] J. M. Willey, L. M. Sherwood, and C. J. Woolverton. “ Prescott, Harley, and Klein’s Microbiology Seventh Edition ”. New York: The McGraw- Hill Companies. (2008).
[14] I.  Gandjar,  W.  Sjamsuridzal,  dan  A.  Oetari.  “ Mikologi  Dasar  dan
Terapan ”. Jakarta: Yayasan Obor Indonesia. (2006).