## INDUKSI TUNAS UBI JALAR KUNING AKSESI ARNET SECARA IN VITRO DENGAN PEMBERIAN BAP

## Shoot Induction of Yellow Sweet Potato Accession Arnet In Vitro using BAP
Sulikah 1)* , Fitri Yulianti 1) , Tubagus Kiki Kawakibi Azmi 1)
1) Program Studi Agroteknologi, Fakultas Teknologi Industri, Universitas Gunadarma Diterima redaksi: 28 Oktober 2021/ Direvisi: 17 Agustus 2022/ Disetujui 31 Agustus 2022/Diterbitkan online: 04 November 2022 DOI: 10.21111/agrotech.v8i2.6814
Abstrak. Tanaman  ubi  jalar  ( Ipomoea  batatas L.)  sangat  potensial  dikembangan  di  Indonesia,  karena  memiliki keragaman plasma nutfah yang sangat tinggi. Namun, produksi ubi jalar semakin menurun dari tahun ke tahun dan  diikuti  penurunan  luasan  lahan  produksi  ubi  jalar  akibat  cekaman  biotik  dan  abiotik.  Hal  tersebut mengakibatkan hilangnya sumber genetik suatu spesies ubi jalar di lapangan. Tindakan pelestarian plasma nutfah penting  dilakukan  melalui  konservasi  tanaman  secara in  vitro .  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mempelajari pengaruh BAP ( Benzyl Amino Purin ) untuk induksi tunas ubi jalar kuning aksesi Arnet secara in vitro sebagai salah satu tahap konservasi plasma nutfah . Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Lanjut Agroteknologi Kampus F7  Universitas  Gunadarma  pada  bulan  Februari-Juli  2021.  Rancangan  penelitian  yang  digunakan  adalah Rancangan Kelompok Lengkap Teracak dengan satu faktor perlakuan BAP yaitu 0 ppm, 0,5 ppm, 1,5 ppm, 2 ppm, dan  2,5  ppm.  Variabel  yang  diamati  adalah  persentase  eksplan  terkontaminasi,  persentase  eksplan browning , persentase eksplan steril, waktu kemunculan tunas, jumlah akar, jumlah daun, dan tinggi tunas. Hasil penelitian menunjukkan bahwa penambahan BAP berpengaruh nyata terhadap pertumbuhan tinggi tunas, jumlah daun, dan waktu  muncul  tunas  namun  tidak  berbeda  nyata  pada  pertumbuhan  jumlah  akar.  Perlakuan  BAP  2  ppm menghasilkan pengaruh terbaik untuk induksi tunas ubi jalar kuning aksesi Arnet secara in vitro .
Kata kunci : Kultur jaringan, Kontaminasi, Sitokinin, Konservasi plasma nutfah.
Abstract. Sweet potato plant ( Ipomoea batatas L.) is very potential to be developed in Indonesia, because it has very high diversity of germplasm. However, sweet potato production is decreasing from year to year and is followed by a  decrease  in  the  area  of  sweet  potato  production  due  to  biotic  and  abiotic  stresses.  This  results  loss  of  genetic resources  a  sweet  potato  species  in  the  field.  It's  important  to  conserve  germplasm  through  in  vitro  plant conservation. This research aimed to study the effect of BAP ( Benzyl Amino Purine ) for induction of yellow sweet potato shoots by Arnet accession in vitro as a step in germplasm conservation. This research was carried out at the Advanced Laboratory of Agrotechnology Campus F7 Gunadarma University in February-July 2021. The research design used was a Completely Randomized Group Design with one BAP treatment factor, namely 0 ppm, 0.5 ppm, 1.5 ppm, 2 ppm, and 2.5 ppm. The variables observed were the percentage of contaminated explants, percentage of browning explants, percentage of sterile explants, time of shoot emergence, number of roots, number of leaves, and height of shoots. The results showed that the addition of BAP had a significant effect on the growth of shoot height, number of leaves, and time of shoot emergence but was not significantly different on the growth of the number of roots. The BAP treatment of 2 ppm gave the best effect for the induction of yellow sweet potato shoots from Arnet accession in vitro.
Keywords: Contamination, Cytokinins, Germplasm conservation, Tissue culture
* Korespondensi email: sulikahlika7@gmail.com
Alamat : Program Studi Agroteknologi, Fakultas Teknologi Industri, Universitas Gunadarma Jl. Margonda Raya No. 100 Depok 1642

## Gontor AGROTECH Science Journal
Vol. 8 No. 2, Desember 2022: 65-74 http://ejournal.unida.gontor.ac.id/index.php/agrotech

## PENDAHULUAN
Tanaman  ubi  jalar  ( Ipomoea  batatas L.) merupakan tanaman pangan yang potensial dikembangan di Indonesia, serta mengandung  karbohidrat,  serat  dan vitamin.  Ubi  jalar  memiliki  prospek pemanfaatan  dan  pengembangan  sebagai bahan makanan dan bahan baku industri. Namun, perkembangan produksi ubi jalar dari  tahun  ke  tahun  relatif  rendah. Berdasarkan  pada  data  BPS  (2017), produksi  ubi  jalar  dari  tahun  2011-2016 mengalami  penurunan  yaitu  sebesar 191.104 ton (2011), 186.583 ton, 116.670 ton, 146.622  ton,  122.362  ton,  dan  91.531,4  ton (2016).
Plasma  nutfah  ubi  jalar  memiliki keragaman  cukup  tinggi  di  Indonesia. Keragaman  ini  dapat  disebabkan  karena perbedaan  wilayah  topografi  tanah  dan keadaan  lingkungan  di  berbagai  daerah mengakibatkan  kayanya  berbagai  jenis sumber plasma nutfah. Varietas ubi jalar di dunia  diperkirakan  berjumlah  lebih  dari ribuan  jenis,  namun  pada  umumnya masyarakat  awam  mengenal  ubi  jalar berdasarkan  warna  ubinya  (ILO,  2013). Berbagai  jenis  keragaman  ubi  jalar berdasarkan  fenotipik  warna  ubi  seperti ubi  jalar  kuning,  ubi  jalar  ungu,  ubi  jalar merah  dan  ubi  jalar  putih.  Ubi  jalar memiliki  kandungan  yang  berbeda  pada setiap warnanya.
Langkah  pelestarian  plasma  nutfah sangat penting dilakukan untuk mencegah hilangnya  suatu  sumber  genetik  tanaman di  lapangan.  Balai  konservasi  tanaman pangan  di  Indonesia  yaitu  BB-Biogen (Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi  dan  Sumber  Daya  Genetik Pertanian) telah mengoleksi  sekitar 10.700 aksesi  sumber  daya  genetik  (SDG) tanaman  pangan  dan  diantara  itu  sekitar 1.650 aksesi adalah ubi jalar (Minantyorini dan  Setyowati,  2016).  Konservasi  dapat dilakukan dengan dua cara yaitu konservasi  di  lapangan  dan  konservasi
secara in  vitro .  Konservasi  lapang  adalah metode  konvensional  dengan  menanam aksesi  tanaman  secara  terus  menerus  di lapang,  sedangkan  konservasi  secara in vitro adalah penanaman aksesi pada media kultur  jaringan  (Balitkabi,  2017).  Pada umumnya,  konservasi  plasma  nutfah  ubi jalar  dilakukan  di  lapang.  namun, konservasi dengan cara tersebut memerlukan  perawatan  dan  lahan  yang cukup  luas  dan  tanaman  sangat  rentan terhadap  terjadinya  kehilangan  aksesi akibat  cekaman  biotik  dan  abiotik.  Oleh karena  itu,  konservasi  secara in  vitro menjadi cadangan apabila terjadi
kehilangan  aksesi  yang  dikoleksi  di lapang. Upaya konservasi in vitro ubi jalar kuning  aksesi  Arnet  dapat  dilakukan dengan  menginduksi  pertumbuhan  tunas melalui penambahan zat pengatur tumbuh BAP.  Konsentrasi  BAP  yang  sesuai  akan bekerja  dengan  optimal  pada  tanaman tertentu dalam hal induksi tunas (Harahap et al . 2014). Oleh karena itu, penelitian ini dilakukan  untuk  mempelajari  pengaruh BAP  secara  tunggal  untuk  induksi  tunas ubi jalar kuning aksesi Arnet secara in vitro sebagai salah satu tahap dalam konservasi plasma  nutfah  ubi  jalar  melalui  kultur jaringan.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Lanjut Agroteknologi,
Kampus  F7  Universitas  Gunadarma, Ciracas, Kelapa Dua Wetan, Jakarta Timur pada  bulan  Februari-Juli  2021.  Alat  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah botol kultur, cawan petri, gunting, spatula, pinset,  gelas  ukur,  timbangan  analitik, oven,  autoklaf, laminar  air  flow ,  plastik wrap, handsprayer ,  api  bunsen,  kompor, erlenmeyer,  pisau  scalpel,  pH  meter,  dan kertas label. Bahan yang digunakan adalah eksplan berupa tunas batang atas ubi jalar kuning aksesi Arnet, media MS (Murashige dan Skoog), sukrosa, agar, zat
pengatur tumbuh BAP, detergen, alkohol, klorox,  fungisida  benomil,  bakterisida streptomisin sulfate , dan aquades.
Rancangan percobaan pada penelitian  ini  menggunakan  Rancangan Kelompok  Lengkap  Teracak  (RKLT)  satu faktor  yang  terdiri  dari  5  taraf  perlakuan dan 15 ulangan sehingga terdapat 75 unit percobaan.  Perlakuan  konsentrasi  BAP terdiri  dari  kontrol/B0  (0  ppm),  B1  (0,5 ppm), B2 (1,5 ppm), B3 (2 ppm), dan B3 (2,5 ppm).  Penggunaan  RKLT  pada  penelitian ini  dikarenakan  waktu  penanaman  tidak dilakukan  secara  bersamaan  pada  setiap ulangan karena  keterbatasan waktu penelitian. Data pengamatan yang
diperoleh dianalisis menggunakan Analysis  of  Variance (ANOVA)  pada  taraf 5%, dan dilakukan uji lanjut Duncan’s New Multiple  Range  Test (DMRT).  Analisis dilakukan menggunakan software SAS 9.1.

## Sterilisasi Alat dan Media Tanam
Botol  kultur  dan  alat  tanam  seperti pinset, gunting, pisau scalpel, spatula, dan cawan  petri  yang  digunakan  dicuci terlebih  dahulu  menggunakan  detergen dan  dibilas  pada  air  mengalir.  Semua peralatan penanaman dilakukan sterilisasi menggunakan  oven  dengan  suhu  80°C selama 3 jam. Sedangkan media tanam dan aquades dilakukan sterilisasi menggunakan  autoklaf  bertekanan  15  psi dengan suhu 121°C selama 15 menit.

## Pembuatan Larutan Stok BAP
Pembuatan  larutan  stok  ZPT  BAP  100 ppm yaitu bahan BAP ditimbang sebanyak 10  mg,  kemudian  ditempatkan  pada erlenmeyer  100  ml  dan  ditambahkan beberapa  tetes  HCl  0,5  N  sebagai  pelarut. Bahan diaduk hingga serbuk BAP terlarut. Setelah  terlarut  ditambahkan  aquades hingga mencapai volume 100 ml. Kemudian  diaduk  hingga  homogen, larutan stok BAP siap digunakan.

## Pembuatan Media dan Perlakuan BAP
Pembuatan  media  dilakukan  dengan menyiapkan beaker  glass 1  L  yang  berisi aquades  500  ml,  lalu  dituangkan  media dasar  MS.  Larutan  media  ditambahkan BAP sesuai dengan perlakuan (MS0, MS + 0,5 ppm BAP, MS + 1,5 ppm BAP, MS + 2 ppm  BAP,  dan  MS  +  2,5  ppm  BAP). Kemudian ditambahkan gula sebanyak 30 g/L  dan  ditambahkan  aquades  hingga volumenya  mencapai  1  L,  kemudian diaduk  sampai  homogen.  pH  larutan diukur  dan  disesuaikan  menjadi  5,6-5,8 dengan  ditambahkan  beberapa  tetes larutan  HCl  0,1  N  (jika  terlalu  basa)  atau larutan  NaOH  0,1  N  (jika  terlalu  asam). Larutan media ditambahkan agar sebanyak  5  g/L  dan  dimasak  hingga mendidih.  Setelah  larutan  mendidih, dituangkan  ke  dalam  botol  kultur  dan ditutup rapat. Selanjutnya, dimasukkan ke dalam  autoklaf  dengan  suhu  121ºC tekanan 15 psi selama 15 menit.

## Sterilisasi dan Penanaman Eksplan
Eksplan yang digunakan adalah batang atas tanaman ubi jalar kuning aksesi Arnet yang  diambil  dari greenhouse  nursery . Eksplan  diambil  dari  tiap  buku  batang dengan  panjang  sekitar  1  cm.  Bahan eksplan  yang  telah  diambil  kemudian direndam dengan detergen sekitar 7 menit dan dibilas pada air mengalir. Perendaman fungisida dan bakterisida selama 30 menit (masing-masing  0,5  g/100  ml  aquades), kemudian dibilas dengan aquades sebanyak  2  kali.  Perendaman  klorox  30% selama 15 menit, kemudian dibilas dua kali dengan aquades steril dan dipindahkan ke botol  steril.  Sterilisasi  berikutnya  yaitu  di dalam  laminar  terdiri  atas  perendaman alkohol 75% selama 7 menit, perendaman klorox  20%  selama  10  menit  dan perendaman  klorox  10%  selama  3  menit. Setiap pergantian jenis larutan
perendaman dilakukan pembilasan
dengan aquades steril.
Eksplan yang sudah dilakukan sterilisasi ditanam pada media berdasarkan  perlakuan  konsentrasi  BAP yaitu 0 ppm, 0,5 ppm, 1,5 ppm, 2 ppm, dan 2,5  ppm.  Eksplan  ditanam  dalam  media pada posisi tunas bagian bawah dibenamkan pada media. Pelabelan dilakukan  dengan  menuliskan  tanggal penanaman, dan jenis perlakuan.

## Penyimpanan/Inkubasi
Ruang inkubasi atau tempat penyimpanan  eksplan  harus  selalu  steril. Kisaran  suhu  ruangan  yang  optimal adalah 23ºC. Pemeliharaan dapat dilakukan dengan membersihkan lingkungan sekitar kultur dan
penyemprotan  alkohol  70%.Inkubasi  di ruang kultur pada kondisi terang menggunakan  cahaya  lampu fluorescent selama 24 jam/hari.
Parameter Pengamatan Parameter yang diamati adalah persentase  eksplan  terkontaminasi  (%), persentase eksplan browning (%), persentase  eksplan  steril  (%),  tinggi tanaman  (cm),  jumlah  daun,  dan  jumlah akar. Data pengamatan dianalisis menggunakan analisis sidik ragam ANOVA  atau  uji  F  dengan  taraf  5%,  jika ada pengaruh variabel yang berbeda nyata dilanjutkan  dengan  Uji  Duncan’s  New Multiple Range Test (DMRT).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pertumbuhan  eksplan  diawali  dengan munculnya akar kemudian diikuti munculnya  tunas.  Tunas  ubi  jalar  mulai tumbuh  umumnya  pada  umur  1-2  MST diikuti dengan pertumbuhan daun. Pengamatan pada minggu pertama menemukan  adanya  kontaminasi  jamur. Kontaminasi jamur umumnya menemukan pada umur 1 minggu setelah
tanam,  namun  ada  juga  yang  muncul ketika umur  2  minggu  hingga  satu  bulan setelah  tanam.  Sedangkan  kontaminasi bakteri  umumnya  ditemukan  setelah beberapa  hari  hingga  satu  bulan  setelah tanam. Tingkat kontaminasi, browning, dan persentase  eksplan  steril  diamati  dari minggu pertama hingga akhir pengamatan. Tabel 1. Persentase eksplan terkontaminasi, browning , dan steril Variabel Pengamatan Jumlah Eksplan Persentase Kontaminasi Bakteri 16 10% Kontaminasi Jamur 100 62% Browning 10 6% Eksplan Steril 35 22% Total Eksplan 161 100%
Persentase  tumbuh  tanaman  ubi  jalar kuning  aksesi  Arnet  mengindikasikan bahwa  eksplan    mampu  tumbuh  dengan baik. Berdasarkan Tabel 1 dapat diketahui bahwa  persentase  tumbuh  eksplan  yaitu 22%,  sedangkan  persentase  kontaminasi masih  cukup  tinggi,  kontaminasi  yang paling  banyak  ditemui  pada  eksplan  ubi jalar kuning aksesi Arnet adalah kontaminasi jamur yaitu sebesar 62% dan sebagian kontaminasi bakteri sebesar 10%. Kontaminasi terjadi diakibatkan terbawanya  sumber  kontaminan  saat penanaman  eksplan.  Sumber  kontaminan dapat  berasal  dari  media  tanam  maupun eksplan  yang  kurang  steril  sehingga tumbuh  jamur  atau  bakteri  pada  planlet. Karakteristik  eksplan  ubi  jalar  yang menyebabkan mudah terkontaminasi adalah  terdapatnya  bulu  halus  pada permukaan  eksplan  yang  menyebabkan sulitnya  proses  sterilisasi.  Bahan  sterilan seperti  alkohol,  klorox,  dan  fungisida maupun  bakterisida  diduga  tidak  dapat
menyentuh  permukaan  eksplan  secara optimal pada saat proses sterilisasi.
Setiap  bahan  eksplan  yang  digunakan dalam  perbanyakan  secara in  vitro memiliki tingkat kontaminasi yang berbeda.  Hal  ini  bergantung  pada  jenis tanaman yang digunakan, bagian tanaman yang  digunakan,  morfologi  permukaan (misalnya  berbulu),  lingkungan  tumbuh ( greenhouse atau lapang), kondisi tanaman, dan  musim  waktu  pengambilan  bahan eksplan  (Handoyowati,  2016).  Beberapa kontaminasi yang ditemui pada pengamatan planlet ubi jalar kuning aksesi Arnet terjadi ketika umur 3-4 MST. Hal ini menunjukkan  adanya  kontaminasi  yang bersifat internal dimana tanda kontaminasi muncul  pada  saat  umur  beberapa  hari bahkan satu bulan (Santosa dan Nursandi, 2003). Pencoklatan  ( Browning )  merupakan salah satu penghambat pertumbuhan pada planlet selain kontaminasi, dimana planlet tidak  dapat  tumbuh  atau  mengalami kematian  pada  jaringan  dengan  ditandai pencoklatan  pada  tunas  eksplan.  Adapun persentase browning pada  penelitian  ini adalah 6%. Jenis tanaman yang digunakan dapat mempengaruhi besarnya persentasae browning .  Beberapa  macam tanaman yang diperbanyak dengan kultur jaringan    khususnya  tanaman  tropika mempunyai  kandungan  senyawa  fenol yang  tinggi  yang  teroksidasi  ketika  sel dilukai  atau  terjadi  senesens  (George  dan Sherrington, 1984).
Tanaman  ubi  jalar  merupakan  jenis tanaman  tropika  yang  mengandung senyawa  fenol  yang  dikeluarkan  melalui jaringan  tanaman  pada  saat  terjadi perlukaan. Menurut Pierik (1987), browning disebabkan karena adanya aktivitas enzim seperti  polifenol  oksidase  dari  dalam eksplan yang terbentuk pada saat eksplan dilukai.  Sel-sel  tersebut  dapat  juga browning karena pengaruh panas dari alat- alat yang digunakan pada waktu
pemotongan  atau  penanaman  eksplan (Fauzan et al ., 2021). Pencegahan browning dapat  dilakukan  dengan  perendaman eksplan dalam vitamin C steril, penggunaan  arang  aktif  pada  media,  dan perlakuan  subkultur  berulang.  Menurut Syamsir (2011) menyatakan bahwa perendaman  vitamin  C  100  ppm  dapat mengurangi reaksi antara enzim polifenolase, oksigen, dan senyawa polifenol  yang  bertanggung  jawab  dalam proses terjadinya browning .
Gambar 1. Penampakan kontaminasi jamur pada eksplan ubi jalar (a dan b)
Kontaminasi  jamur  ditandai  dengan adanya misellium berwarna  putih  pada media  atau  di  sekitar  eksplan. Misellium tersebut  semakin  menyebar  di  sekeliling media  dan  menutupi  seluruh  permukaan eksplan, hingga menghambat pertumbuhan dan menyebabkan kematian pada eksplan. Jenis jamur yang ditemukan pada  eksplan  ubi  jalar  diduga  adalah Aspergilus niger yang merupakan jamur dari  Filum Ascomycetes .  Jamur  ini kebanyakan  diisolasi  dari  tanah,  sisa tumbuhan,  dan  udara  di  dalam  ruangan (Madigan dan Martinko, 2006).
Kontaminasi di minggu pertama pengamatan  ditandai  dengan  adanya bercak  atau misellium berwarna  putih  di sekitar  perakaran  eksplan  (Gambar  1a).
Misellium.
Kontaminasi  yang  disebabkan  oleh bakteri  (Gambar  2a)  dengan  gejala  awal ditandai  dengan  pembentukan  selaput bening yang membayang pada media dan
berubah  menjadi  putih  kekuningan. Bercak  tersebut  semakin  lama  akan menyebar  hingga  menutupi  permukaan media  dan  menghambat  pertumbuhan eksplan.  Eksplan browning (Gambar  2b) ditandai dengan perubahan warna menjadi  kecoklatan  yang  menandakan kematian  jaringan  tanaman  sehingga eksplan tidak tumbuh dan berkembang.
Gambar 2. Eksplan terkontaminasi bakteri (a) dan eksplan browning (b)

## Rekapitulasi Sidik Ragam
Variabel  pertumbuhan  tunas  ubi  jalar kuning aksesi Arnet yang diamati meliputi waktu muncul tunas, tinggi tunas, jumlah daun,  dan  jumlah  akar.  Pengamatan dilakukan  seminggu  sekali  dari  1  MST hingga  5  MST.  Data  pengamatan  yang telah diperoleh dilakukan analisis menggunakan analisis sidik ragam (ANOVA) pada taraf P-value 5%. Variabel yang  menunjukan  nilai  berbeda  nyata berdasarkan  P-value  maka  dilakukan  uji lanjut menggunakan Uji Duncan.
Tabel  2. Rekapitulasi  sidik  ragam  pada akhir pengamatan Variabel Pengamatan P- value Koefisien Keragaman Waktu  muncul tunas 0,03 * 29,32% Tinggi tunas 0,02 * 29,03% Jumlah daun 0,03 * 19,32% Jumlah akar 0,20 tn 15,51%
Keterangan: (tn) tidak berbeda nyata pada uji F taraf  5%;  (*)  berbeda  nyata  pada uji F taraf 5%

## Waktu Muncul Tunas
Hasil  analisis  ragam  untuk  waktu muncul  tunas  eksplan  ubi  jalar  kuning aksesi  Arnet  setelah  dilakukan  analisis ragam  memperlihatkan  bahwa  adanya pengaruh nyata berdasarkan nilai P-value pada taraf 5% (Tabel 3).
Tabel 3. Rataan waktu muncul tunas eksplan ubi jalar kuning aksesi
Arnet Konsentrasi BAP HST (Hari Setelah Tanam) 0 ppm (B0) 8,75 a 0,5 ppm (B1) 10,00 ab 1,5 ppm (B2) 12,83 ab 2 ppm (B3) 9,33 a 2,5 ppm (B4) 13,86 b
Keterangan:  Angka-angka  yang  diikuti  oleh huruf  yang  sama  tidak  berbeda nyata  berdasarkan  uji  lanjut
Duncan pada taraf α=5%.
Waktu  muncul  tunas  tercepat  terdapat pada perlakuan BAP 0 ppm yaitu 8,75 HST, sedangkan  pada  perlakuan  BAP  2,5  ppm menunjukkan waktu muncul tunas terlama  yaitu  13,86  HST.  Waktu  muncul tunas  dapat  dipengaruhi  oleh konsentrasi pemberian BAP, semakin tinggi pemberian BAP  maka  waktu  muncul  tunas  semakin lama.  Pemberian  BAP  pada  konsentrasi optimal  memberikan  pengaruh  waktu muncul  tunas  lebih  cepat.  Berdasarkan Tabel  3  menunjukkansperlakuan  BAP  0 ppm merupakan konsentrasi BAP optimal untuk  pertumbuhan  eksplan  ubi  jalar kuning aksesi Arnet. Menurut Harahap et al .  (2014)  menyatakan  bahwa  konsentrasi BAP  yang  sesuai  akan  bekerja  dengan optimal  pada  tanaman  tertentu  dalam induksi tunas.
Kondisi eksplan yang digunakan dapat mempengaruhi  waktu  muncul  tunas dimana eksplan yang memiliki bakal tunas pada  buku  memberikan  waktu  muncul tunas lebih cepat. Menurut Kosmiatin et al .
(2005), menyatakan bahwa waktu muncul tunas tercepat diperoleh dari eksplan buku tanpa  daun.  Eksplan  yang  relatif  lebih mudah diinduksi tunasnya adalah eksplan yang  memiliki  jaringan  meristem  atau adanya bakal tunas pada buku.

## Tinggi Tunas
Hasil  analisis  ragam  pertumbuhan tinggi tunas eksplan ubi jalar kuning aksesi Arnet  memperlihatkan  adanya  pengaruh nyata pemberian BAP (Tabel 4).
Tabel  4. Pengaruh  konsentrasi  BAP

## terhadap tinggi tunas
Konsentrasi BAP Tinggi Tunas (cm) 3 MST 4 MST 5 MST 0 ppm (B0) 1,67 ab 2,80 ab 3,57 ab 0,5 ppm (B1) 2,30 a 3,30 a 3,62 ab 1,5 ppm (B2) 2,12 ab 2,62 ab 3,08 ab 2 ppm (B3) 2,60 a 3,64 a 4,04 a 2,5 ppm (B4) 1,19 b 1,79 b 2,49 b P-Value 0,01 ** 0,003 ** 0,02 *
Keterangan:    Angka  yang  diikuti  huruf  sama pada  kolom  yang  sama  tidak berbeda  nyata  berdasarkan  uji Duncan pada  taraf  α=5%;  (*)
berbeda nyata; (**) sangat berbeda nyata Berdasarkan pada Tabel 4
menunjukkan  tinggi  tunas  dengan  nilai tertinggi diperoleh pada perlakuan BAP 2 ppm berturut-turut yaitu 2,60 cm, 3,64 cm, dan  4,04  cm  pada  umur  3  sampai  5  MST. Tinggi tunas pada perlakuan BAP 0 ppm, 0,5 ppm, dan 1,5 ppm tidak berbeda nyata. Namun, berbeda nyata dengan perlakuan BAP 2,5 ppm dimana tinggi tunas terendah yaitu 1,19; 1,79; dan 2,49 cm pada umur 3 sampai  5  MST.  Nilai  pada  perlakuan mengindikasikan  bahwa  penambahan BAP  2  ppm  merupakan  konsentrasi  yang paling optimal untuk pertumbuhan tinggi tunas ubi jalar kuning  aksesi Arnet. Hasil yang  diperoleh  sesuai  dengan  penelitian Anindiyati  dan  Erawati  (2020),  bahwa
penambahan  BAP    2    ppm    merupakan konsentrasi  terbaik  dengan  rataan  tinggi tunas yaitu 10,42 mm. Menurut Maretta et al .  (2016),  bahwa  pengaruh  konsentrasi BAP  2  ppm  lebih  homogen  pada pertumbuhan
tinggi eksplan dibandingkan perlakuan BAP 1 dan 3 ppm.
Penambahan  konsentrasi  BAP  0,5  ppm dan 1,5 ppm merupakan konsentrasi yang cukup memacu pertumbuhan tinggi tunas ubi jalar kuning aksesi Arnet. Penambahan BAP  lebih  dari  2  ppm  dianggap  kurang optimal  karena  pertumbuhan  tunas  lebih lambat.  Menurut  Moncalean et  al .  (2001), pemberian  konsentrasi  BAP  yang  tinggi dapat menyebabkan pertumbuhan panjang  tanaman  menjadi  terhambat. Begitu  juga  dengan  pernyataan  George dan  Sherrington  (1984),  pemberian  ZPT pada  kultur in  vitro pada  batas  tertentu mampu merangsang pertumbuhan, namun dapat bersifat menghambat apabila digunakan melebihi konsentrasi optimum.

## Jumlah Daun
Hasil  analisis  ragam  untuk  jumlah daun eksplan ubi jalar kuning aksesi Arnet setelah dilakukan analisis ragam memperlihatkan bahwa adanya pengaruh nyata terhadap jumlah daun (Tabel 5).
Tabel  5. Pengaruh  konsentrasi  BAP terhadap jumlah daun
Konsentrasi BAP Jumlah Daun (helai) 3MST  4MST 5 MST 0 ppm (B0) 1,33 a 2,67 ab 4,67 a 0,5 ppm (B1) 1,80 a 3,60 a 4,40 ab 1,5 ppm (B2) 2,00 a 3,20 a 3,60 ab 2 ppm (B3) 2,00 a 4,20 a 4,80 a 2,5 ppm (B4) 1,14 a 1,43 b 2,14 b Nilai P-Value   0,12 tn 0,003 ** 0,03 *
Keterangan:  Angka-angka  yang  diikuti  huruf yang sama pada kolom yang sama tidak  berbeda  nyata  berdasarkan uji  Duncan  pada  taraf  α=5%;  (tn) tidak  berbeda  nyata;  (*)  berbeda nyata; (**) sangat berbeda nyata.

## Jumlah Akar Primer
Hasil analisis ragam untuk jumlah akar eksplan  ubi  jalar  kuning  aksesi  Arnet setelah dilakukan analisis ragam memperlihatkan  tidak  adanya  pengaruh nyata terhadap akar primer (Tabel 6).
Tabel 6 . Koefisien keragaman jumlah akar dari tiap minggu pengamatan Waktu Pengamatan P- Value Koefisien Keragaman (%) 1 MST 0,64 tn 34,73% 2 MST 0,38 tn 24,84% 3 MST 0,36 tn 15,99% 4 MST 0,20 tn 15,51%
Keterangan:  tn  (tidak  berpengaruh  nyata pada uji F taraf 5%)
Pertumbuhan  jumlah  akar  terbanyak terdapat  pada  perlakuan  BAP  2  ppm sebesar 5,83 helai pada 4 MST (Gambar 3). Jumlah  akar  terendah  terdapat  pada perlakuan  BAP  0  ppm  yaitu  sebesar  3,5
helai  diikuti  dengan  perlakuan  BAP  2,5 ppm yaitu sebesar 3,57 helai pada umur 4 MST.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa perlakuan  BAP  2  ppm  memberikan pengaruh pertumbuhan jumlah akar lebih banyak  dibandingkan  perlakuan  lainnya. Berdasarkan  penelitian  Khumaida  dan Fauzi  (2013),  penambahan  BAP  tidak berpengaruh  nyata  terhadap  jumlah  akar ubi  kayu.  Pertumbuhan  jumlah  akar tertinggi  terdapat  pada  perlakuan  media MS tanpa BAP dan perlakuan MS+ 0,2 ppm NAA. Berdasarkan pada penelitian Fauzan et al . (2021), ditemukan bahwa pemberian BAP  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap pertumbuhan
akar sedangkan
penambahan  NAA  sebagai  zat  pengatur tumbuh auksin lebih berpengaruh terhadap  pertumbuhan  akar.  Auksin berperan terhadap pembesaran dan diferensiasi akar, sedangkan penambahan BAP  berperan  terhadap  pertumbuhan tunas.
Gambar 3. Pengaruh perlakuan BAP terhadap pertumbuhan jumlah akar
1.5 3.25 3.5 3.5 1.57 4.86 5.14 5.14 1.00 3.33 4.50 4.71 1.67 3.83 5.33 5.83 1.86 2.71 3.57 3.57 0 1 2 3 4 5 6 7 8 M1 M2 M3 M4 H el ai Minggu setelah tanam (MST)
0 ppm 0,5 ppm 1,5 ppm 2 ppm 2,5 ppm

## KESIMPULAN
Berdasarkan  analisis  data  pengamatan yang  telah  dilakukan  pada  penelitian  ini dapat disimpulkan bahwa penambahan BAP berpengaruh  nyata  terhadap  pertumbuhan tinggi  tunas,  jumlah  daun,  dan  waktu muncul  tunas  tunas  ubi  jalar  kuning  aksesi Arnet  namun  tidak  berbeda  nyata  terhadap pertumbuhan jumlah akar.
Perlakuan  BAP  2  ppm  merupakan konsentrasi  yang  paling  baik  untuk  induksi tunas ubi jalar kuning aksesi Arnet secara in vitro dibandingkan dengan perlakuan 0 ppm, 0,5 ppm, 1,5 ppm, dan 2,5 ppm.

## REFERENSI
Alula,  K.,  Zelek,  H.,  &  Manikandan,  M.
(2018).  In  vitro  propagation  of  sweet potato  ( Ipomoea  batatas (L.)  Lam)
Through  apical  meristem  culture.
Journal of Pharmacognosy
and
Phytochemistry 7 (1), 2386-2392.
Anindiyati,  I.,  &  Erawati.,  D.N.  (2020). Induksi  tunas  tembakau  ( Nicotiana tabacum L)  varietas  kasturi  2  dengan variasi konsentrasi BAP secara in vitro. Journal of Applied Agricultural Sciences 1 (4), 18-25.
Arif,  N.,  Bahari,  &  Suaib.  (2017).  Induksi tunas ubi jalar ungu ( Ipomea batatas L.) secara  in  vitro. Prosiding  Seminar Nasional PERIPI 147 – 156.
Arif, N., Ansi, A., Wijayanto, T. 2014. Induksi tunas gadung ( Diocorea Hispida Dennst) secara  in  vitro  . Jurnal  Agroteknos 4(3), 202-207.
Armana, D.S., Slameto, D.P. Restanto. (2014).
Induksi tunas kentang ( Solanum Tuberosum L.)  menggunakan  BAP (Benzyl  Amino  Purine). Berkala  Ilmiah Pertanian 1 (1).
Balitkabi.  (2017).  Konservasi  plasma  nutfah ubi jalar menggunakan kultur in vitro. [Online}. Diambil dari http://balitkabi.litbang.pertanian.go.id/
infotek/konservasi-plasma- nutfahubijalar-menggunakan-kultur- in-vitro/ [21 Agustus 2020].
BPS.  (2017).  Luas  panen,  produksi  dan  rata- rata  produksi  ubi  jalar  2006 – 2016 [Online}. Diambil dari https://sumut.bps.go.id/statictable/201 7/11/20/772/luas-panen-produksidan- rata-rata-produksi-ubi-jalar-2006-
2016.html [11 November 2020].
Fauzan,  M.,  Nirmala,  R.,  Sunaryo,W.,  dan
Pujowati,W. 92021).
induksi multiplikasi  ubi  kayu  var.  gajah ( Manihot  esculenta crantz)  melalui kultur  jaringan  dengan  zat  pengatur tumbuh  BAP  dan  NAA. Jurnal Agroekoteknologi  Tropika  Lembab 2  (3)  :
79-85.
George,  E.F.,  and  P.D.  Sherrington.  1984.
Plant  Propagation  by  Tissue  Culture .
Exegetic  Ltd.  Eversley , Basingtoke, Hans, England. p. 709.
Handoyowati.  (2016).  Ketahanan  Kultur kencur ( Kaempferia galangal L.) secara in vitro pada  konsentrasi  Sterilan  dan Jenis  Eksplan  yang  Berbeda  [Skripsi]. Agroteknologi. Universitas
Muhammadiyah Purwokerto.
Harahap,  F.,  Poerwanto,  R.,  Suharsono,
Suriani, C., & Rahayu S. (2014). In vitro growth  and  rooting  of  mangosteen ( Garcinia  mangostana L.)  on  medium with  different  concentrations  of  plant growth  regulato r.  HAYATI  Journal  of Biosciences 21(4), 151- 158.
ILO.  2013.  Kajian  ubi  jalar  dengan pendekatan rantai nilai dan iklim usaha di Kabupaten Jayawijaya . Laporan Studi.
ILO – PCdP2 UNDP 1-81.
Khumaida  &  Fauzi.,  A.R.    (2013).  Induksi Tunas  Ubi  Kayu  ( Mannihot  esculenta Crantz .) var. Adira 2 Secara In Vitro. J.
Agron . Indonesia 41 (2) , 133 – 139.
Kosmiatin, M., A. Husni & I. Mariska. (2005).
Perkecambahan dan Perbanyakan
Gaharu Secara In Vitro. Jurnal
Agrobiogen 1 (2) : 62 - 67.
Madigan, MT., & Martinko, JM. (2006). Brock biology  of  microorganisms  11th  ed. New Jersey : Pearson Education 178-185.
Maretta, D., Handayani, D.P., Rosdayanti, H., dan  Tanjung,  A.  (2016).  Multiplikasi Tunas  dan  Induksi  Umbi  Mikro
Satoimo ( Colocasia esculenta (L.) Schott) pada  Beberapa  Konsentrasi  Sukrosa dan Benzylaminopurin. Jurnal Bioteknologi dan Biosains Indonesia 3 (2),
81-88.
Minantyorini dan M. Setyowati. 2016. Potensi hasil  aksesi  plasma  nutfah  ubi  jalar  di dataran tinggi. Bul. Plasma Nutfah (1) 22
(1) : 31-40.
Moncalean, P., Rodriguez, A., dan Fernandez, B.  2001.  In  vitro  response  of Actinidia Deliciosa to  different  BA  incubation periods .  Plant  Cell,  Tissue  and  Organ
Culture (3) 67, 257-266. Pierik, R.L.M. (1987). In vitro culture of higher plants .  Martinus  nijhoff.  Dodrecht.
Netherlands.
Santoso,  U.,  dan  Nursandi,  F.  (2003). Kultur
Jaringan Tanaman . UMM Press. Malang.
Syamsir,  E.  (2011).  Penuntun  Praktikum Teknologi Pengolahaan Pangan. Bogor
(ID):  Departemen  Ilmu  dan  Teknologi
Pangan,  Fakultas  Teknologi Pertanian,
Institut Pertanian Bogor