## UJI DAYA HAMBAT EKSTRAK ETANOL DAUN KACAPIRING
( Gardenia augusta ) TERHADAP BAKTERI Staphylococcus aureus , Escherichia coli DAN Salmonella thypi

## THE INHIBITION TEST OF ETHANOL EXTRACT IN GARDENIA
(Gardenia augusta) LEAVES AGAINSTS Staphylococcus aureus,
Escherichia coli AND Salmonella thypi Bacteria
Serly D. S. Toding 1) , Herny E. I. Simbala 1) , Deby A. Mpila 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
One of the potential medicinal plants as traditional medicine is gardenia plant (Gardenia augusta). Gardenia  leaf  extract  contains  alkaloid  compounds,  flavonoids,  tannins,  saponins  and triterpenoids,  which  are  known  to  have  antibacterial  abilities .. The  aim  of  this  research  was  to determine  the  antibacterial  activity  of  gardenia  leaf  extract  on  the  growth  of  Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Salmonella thypi. The examination on the inhibitory power using the Kirby-Bauer method. The Kirby-Bauer method is referring to the diffusion method using paper disc with five treatments, namely the extract of gardenia leaves with a substance concentration of 20%, 40%,  and  60%  as  well  positive  control  (Ciprofloxacin)  and  negative  control  (aquades).  Based  on the research results obtained, it can be concluded that gardenia leaf extract can inhibit growth of Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Salmonella thypi at a concentration of 20%, 40% and 60% and classified as strong and medium category.
Keywords : Gardenia  augusta , antibacterial,  of  Staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli,
Salmonella thypi

## ABSTRAK
Salah  satu  tanaman  obat  dengan  potensi  sebagai  obat  tradisional  adalah  tanaman  kacapiring ( Garddenia augusta). Daun kacapiring mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, tanin, saponin dan triterpenoid, yang berpotensi sebagai antibakteri sehingga digunakan dalam penelitian ini.Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak daun kacapiring terhadap pertumbuhan Staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli dan Salmonella  thypi. Pengujian  daya  hambat menggunakan metode Kirby-Bauer , yaitu metode difusi dengan cakram kertas dengan 5 perlakuan yaitu  ekstrak  daun  kacapiring  dengan  konsentrasi  20%,  40%,  dan  60%  serta  kontrol  positif ( ciprofloxacin )  dan  kontrol  negatif  (akuades).  Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  diperoleh,  dapat disimpulkan  bahwa  ekstrak  daun  kacapiring  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus aureus, Escherichia coli dan Salmonella thypi pada konsentrasi 20%, 40% dan 60% dan tergolong dalam kategori kuat dan sedang.
Kata Kunci  : Kacapiring, Antibakteri, Staphylococcus aureus, Escherichia coli , Salmonella thypi

## PENDAHULUAN
Kekayaan  keanekaragaman  spesies yang  dimiliki  Indonesia  merupakan  potensi kandungan  bahan-bahan  kimia  dan  sumber daya genetika.  Potensi ini  merupakan keunggulan  komparatif,  karena  pada  saat  ini terjadi peningkatan industri  terhadap sumber- sumber  bahan  kimia  untuk  memproduksi obat-obatan, agrokimia, kosmetika, zat pewarna  dan  lain-lain  (Simbala,  2007).  Salah satu  tanaman  obat  yang  memiliki  potensi sebagai  obat  tradisional  adalah  tanaman kacapiring  ( Gardenia  augusta ).  Uji  fitokimia daun  kacapiring  menunjukkan  bahwa  daun mengandung  senyawa  flavonoid,  saponin, tanin, steroid dan terpenoid. Saponin merupakan  zat  alkaloid  yang  dapat  merusak asam (DNA dan RNA) bakteri. Tanin sebagai antibakteri  bekerja  dengan  menginaktivasi adhesin sehingga bakteri tidak dapat menempel  pada  sel  epitel  hospes.  Daun kacapiring  mengandung  flavonoid  yang  akan mengakibatkan  lisis  dan  menghambat  proses pembentukan  dinding  sel.  Mekanisme  diatas menyebabkan daun kacapiring dapat membunuh ataupun menghambat pembentukan bakteri (Yoga et al , 2007).
Penyakit infeksi merupakan salah satu masalah dalam bidang kesehatan yang banyak diderita  oleh  masyarakat  Indonesia  sejak dahulu  yang  dari  waktu  ke  waktu  terus berkembang  (Dehgani et  al ,  2012).  Banyak usaha  yang  telah  dilakukan  untuk  melawan bakteri-bakteri  patogen,  antara  lain  dengan upaya  penemuan  senyawa  yang  mampu membunuh dan menghambat bakteri tersebut. Zat-zat  seperti  ini  kemudian  dikenal  dengan istilah  zat  antibakteri.  Perkembangan  obat antibakteri merupakan suatu kemajuan terpenting  dalam  bidang  pengobatan,  karena pengobatan  efektif  terhadap  infeksi  serius telah  memperbaiki  kualitas  hidup  dan memberi  banyak  kemajuan  dalam  bidang kedokteran  maupun  di  bidang  industri  obat (Kumala et al , 2006).
Salah  satu  obat  antibiotik  yang digunakan untuk menghambat dan membunuh pertumbuhan  bakteri  yaitu Ciprofloxacin . Ciprofloxacin merupakan  antibiotik  yang
termasuk  dalam  golongan  fluorokuinolon yang  merupakan  generasi  ke  2.  Obat  ini bekerja  dengan  melakukan  penghambatan terhadap dua jenis enzim topoisomerase yaitu enzim  DNA  girase  dan  enzim  topoisomerase IV.  Kedua  enzim  tersebut  berperan  dalam pembentukan  DNA  sel  bakteri.  Dengan mekanisme  kerja  tersebut, Ciprofloxacin dapat  membunuh  bakteri  sehingga  obat  ini digolongkan  sebagai  bakterisidal.  Antibiotik ini  merupakan  antibiotik  spektrum  luas  yang aktif mematikan bakteri gram negatif maupun gram positif (Setiabudy, 2007).

## METODOLOGI PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan November 2019 – Juni 2020, di Laboratorium Mikrobiologi Program Studi Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam.

## Bentuk Penelitian
Penelitian  ini  menggunakan  metode eksperimental  laboratorium,  dimana  dibuat  5 perlakuan  dan  setiap  perlakuan  terdiri  atas  3 pengulangan.  Perlakuan  dalam  penelitian  ini adalah  pemberian  konsentrasi  20%,  40%  dan 60% pada ekstrak daun  kacapiring ( Gardenia augusta ),  kontrol  positif Ciprofloxacin dan kontrol  negatif  akuades.  Metode  yang digunakan  adalah  metode disc  diffusion ( test Kirby  and  Bauer )  terhadap  bakteri  uji Staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli dan Salmonella thypi .

## Alat dan Bahan

## Alat
Alat  yang  digunakan dalam penelitian ini  yaitu,  Erlenmeyer,  gelas  ukur,  tabung reaksi, cawan petri, aluminium foil , hot plate , Laminar  Air  Flow (LAF),  timbangan  digital, stirer ,  lampu  bunsen,  jarum  inokulasi, autoklaf, lemari pendingin, mortar and pestle , rak  tabung,  korek  api,  kapas,  ayakan,  kertas label, oven, cakram kertas jenis Whatman no. 42 dengan diameter 6 mm.

## Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan  yaitu ekstrak  daun  kacapiring  ( Gardenia  augusta ), bakteri uji
Staphylococcus
aureus,
Escherichia coli dan Salmonella thypi , etanol 96%, nutrient  agar ,  akuades, Ciprofloxacin 500  mg,  H 2 SO 4 0,36  N,  BaCl 2 2H 2 O  1,175% dan NaCl 0.9%.

## Prosedur Penelitian

## Pengambilan Sampel
Sampel yang digunakan pada penelitian ini yaitu daun kacapiring ( Gardenia augusta ) yang diambil di Kelurahan Kakaskasen Kota Tomohon, Sulawesi Utara.

## Persiapan Sampel
Daun  kacapiring  yang  digunakan sebanyak 300 gram dibersihkan dari pengotor, selanjutnya  dicuci  dengan  air  sampai  bersih, ditiriskan,  lalu  dikeringkan  dengan  cara diangin-anginkan.  Sampel  yang  telah  kering diserbukkan  dengan  menggunakan  blender, serbuk  yang  dihasilkan  diayak  menggunakan ayakan hingga diperoleh serbuk yang halus.

## Pembuatan Ekstrak
Daun  Kacapiring  diekstrak  dengan menggunakan metode maserasi dengan
pelarut etanol 96%. Proses maserasi dilakukan selama 5 hari hingga didapat filtrat 1 dan ampas 1. Ampas 1 kemudian dilakukan remaserasi selama 2 hari hingga didapat filtrat 2  dan  ampas  2.  Filtrat  1  dan  filtrat  2 dicampurkan  dan  diuapkan  menggunakan oven hingga diperoleh ekstrak kental (Anonim, 1986 dalam Pinta, et al , 2017).

## Pembuatan Media Pengujian
Nutrient Agar (NA) ditimbang sebanyak 2,8 g, lalu dilarutkan dalam 100 mL akuades  menggunakan  erlenmeyer.  Media dihomogenkan  dengan stirer diatas  penangas air  sampai  mendidih.  Media  yang  sudah homogen  ini  disterilkan  dalam  autoklaf  pada
suhu  121˚C  selama  15  menit,  kemudian didinginkan  sampai  suhu  ±  45-50  ˚C.  Media dibuat  untuk  masing-masing  jenis  bakteri  uji (Lay, 1994).
Pembuatan Larutan Standar Mc. Farland
Larutan H 2 SO 4 1% sebanyak 9,95 mL dicampurkan  dengan  larutan  BaCl 2 2H 2 O 1,175%  sebanyak  0,5  mL  dalam  Erlenmeyer. Kemudian  dikocok  sampai  terbentuk  larutan yang  keruh.  Kekeruhan  ini  dipakai  sebagai standar  kekeruhan  suspensi  bakteri  uji (Ngajow, 2013).

## Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Bakteri  uji  yang  telah  diinokulasi dengan jarum ose steril lalu disuspensikan ke dalam tabung berisi 3 mL larutan NaCl 0,9% hingga  diperoleh  kekeruhan  yang  sama dengan  standar  kekeruhan Mc.  Farland . Perlakuan  yang  sama  dilakukan  pada  setiap jenis bakteri uji (Ngajow, 2013).

## Pembuatan Larutan Kontrol Positif
Satu  tablet ciprofloxacin digerus  lalu ditimbang 0,05 g, kemudian dilarutkan dalam 50  ml  akuades.  Diambil  1  mL  dari  larutan tersebut  dan  ditambahkan  akuades  sampai  10 mL,  sehingga  diperoleh  larutan ciprofloxaci n dengan  konsentrasi  50μg/50μl  (Rahmadani, 2015).

## Pembuatan Larutan Kontrol Negatif
Sebanyak  5  mL  akuades dimasukkan kedalam  wadah  kemudian  ditutup  dengan kertas aluminium foil (Rahmadani, 2015).

## Pembuatan Larutan Uji
Dibuat larutan uji 20%, 40% dan 60% dengan cara ditimbang 0,2 g; 0,4 g dan 0,6 g ekstrak  daun  kacapiring  kemudian  dilarutkan dalam  1  mL  larutan  akuades (Rahmadani, 2015).

## Pengujian Aktivitas Antibakteri

## Masing-  masing  suspensi  bakteri
Staphylococcus  aures,  Escherichia  coli  dan
Salmonella  thypi ,  dituangkan  ke  cawan  petri steril  yang  berisi  media  NA  yang  masih  cair, kemudian cawan petri diaduk untuk menyebarkan  biakan  bakteri  secara  merata dan  didiamkan  hingga  media  memadat. Cakram  kertas  steril  dipindahkan  secara aseptik  menggunakan  pinset  steril  ke  dalam ekstrak  etanol  daun  kacapiring  dengan konsentrasi  20%,  40%,  dan  60%  dan  juga dalam  larutan  kontrol  positif  ( ciprofloxacin ) dan  larutan  kontrol  negatif  (akuades)  selama ± 1 menit. Cakram kertas yang telah direndam dengan  ekstrak  etanol  daun  Kacapring, larutan  kontrol  positif  ( ciprofloxacin )  dan lartutan kontrol negatif (akuades), dipindahkan  dengan  pinset  steril  di  atas permukaan  medium  NA  yang  berisi  bakteri Staphylococcus  aures,  Escherichia  coli  dan Salmonella  thypi secara  aseptik,  kemudian diinkubasi  pada  suhu  37˚C  selama  1x24  jam. Pengujian dilakukan sebanyak 3 kali pengulangan  untuk  setiap  konsentrasi  yang diuji (Tangapo, 2005).

## Analisis Data
Zona  bening  atau  daya  hambat  dari diameter  ekstrak  etanol  daun  kacapiring disajikan  dalam  bentuk  tabel  dan  gambar. Penggolongan  kekuatan  antibakteri  dari  daya hambat  yang  diperoleh  ekstrak  etanol  daun
kacapiring  digolongkan  menurut  Davis and Stout (2009).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Ekstraksi Daun Kacapiring
Simplisia  daun  kacapiring  diesktrak menggunakan metode maserasi dengan pelarut etanol 96% dan diuapkan menggunakan  oven  hingga  menghasilkan ekstrak kental sebanyak 27 gram. Hasil persen rendemen sebesar 9.00 % dengan warna hijau kehitaman.

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Kategori  kekuatan  daya  antibakteri digolongkan      menurut  Davis and Stout (2009), dimana daerah  hambatan 20 mm atau lebih tergolong sangat kuat,  daerah hambatan 10-20 mm tergolong kuat, daerah hambatan 5- 10 mm tergolong sedang dan daerah hambatan 5 mm atau kurang tergolong lemah. Konsentrasi  ekstrak  daun  kacapiring  yang digunakan  dalam  penelitian  yaitu  20%,  40% dan  60%  dengan  kontrol  positif ciprofloxacin dan kontrol negatif akuades.
Hasil  pengukuran  diameter  zona hambat  ekstrak  etanol  daun  kacapiring ( Gardenia augusta ) terhadap bakteri Staphylococcus  aureus dapat  dilihat  pada tabel 1.
Tabel  1.  Hasil  Pengukuran  Diameter  Zona  Hambat  Ekstrak  Etanol  Daun  Kacapiring  ( Gardenia augusta ) terhadap bakteri Staphylococcus aureus
Perlakuan Diameter Zona Hambat (mm) Rata-rata Kategori Kekuatan Daya Antibakteri I                    II                   III Kontrol + 0 0 0 0 Lemah Kontrol - 22,6 23 24,4 23,3 Sangat Kuat 20% 10,8 11,1 10,5 10,8 Kuat 40% 12.5 11,1 12,2 11,93 Kuat 60% 14,4 12,5 12,6 13,16 Kuat
Berdasarkan tabel 1. Hasil pengukuran diameter  zona  hambat  ekstrak  etanol  daun kacapiring  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus, terlihat  memiliki  zona  hambat  di konsentrasi  20%,  40%  dan  60%  masing- masing    sebesar  10,8  mm,  11,93  mm  dan 13,16 mm dan termasuk dalam kategori kuat. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun
kacapiring  memiliki  akivitas  antibakteri  dan mampu  menghambat  bakteri Staphylococcus aureus.
Hasil  pengukuran  diameter  zona hambat  ekstrak  etanol  daun  kacapiring ( Gardenia augusta ) terhadap bakteri Escherichia coli dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel  2 . Hasil  Pengukuran  Diameter  Zona  Hambat  Ekstrak  Etanol  Daun  Kacapiring  ( Gardenia augusta ) terhadap bakteri Escherichia coli
Perlakuan Diameter Zona Hambat (mm) Rata-rata Kategori Kekuatan Daya Antibakteri I            II         III Kontrol + 0 0 0 0 Lemah Kontrol - 27 25 26 26 Sangat Kuat 20% 11,1 9,8 11,1 10,67 Kuat 40% 13,7 12 13 12,9 Kuat 60% 14,4 12,2 13 13,2 Kuat
Berdasarkan tabel 2. Hasil pengukuran diameter  zona  hambat    ekstrak  etanol  daun kacapiring  terhadap  bakteri Escherichia  coli, terlihat  memiliki  zona  hambat  di  konsentrasi 20%,  40%  dan  60%  masing-masing  sebesar 10,67  mm,  12,9  mm,  dan  13,2  mm  dan termasuk  dalam  kategori  kuat.  Hal  ini
menunjukkan bahwa semakin kecil konsentrasi  yang  digunakan  maka  semakin kecil zona hambat yang terbentuk.
Hasil  pengukuran  diameter  zona hambat  ekstrak  etanol  daun  kacapiring ( Gardenia augusta ) terhadap bakteri Salmonella thypi dapat dilihat pada tabel 3.
Tabel  3.  Hasil  Pengukuran  Diameter  Zona  Hambat  Ekstrak  Etanol  Daun  Kacapiring  ( Gardenia augusta) Terhadap bakteri Salmonella thypi Perlakuan Diameter Zona Hambat (mm) Rata-rata Kategori Kekuatan Daya Antibakteri I            II         III Kontrol + 0 0 0 0 Lemah Kontrol - 27 26 26,5 26,16 Sangat Kuat 20% 9 8,3 8 8,43 Sedang 40% 9 11,1 12 10,7 Kuat 60% 12,2 12 11 11,73 Kuat
Dari  hasil  pengukuran  diameter  zona hambat    ekstrak  etanol  daun  kacapiring terhadap  bakteri Salmonella  thypi, terlihat memiliki  zona  hambat  pada  konsentrasi  20% sebesar  8,43  mm  termasuk  dalam  kategori sedang, 20% dan 40% masing-masing sebesar 10,7 mm, dan 11,73 mm dan termasuk dalam kategori kuat.
Walaupun terdapat hasil yang berbeda-beda  dari  penelitian  ini,  tetapi  dapat dilihat bahwa konsentrasi 20%, 40% dan 60% dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli, dan Salmonella  thypi. Berdasarkan  hasil  tersebut dapat  diketahui  bahwa  bakteri  bakteri Staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli, dan Salmonella  thypi pada  konsentrasi  ekstrak memiliki sifat  dan karakteristik  yang berbeda dalam merespon bahan antibakteri. Salah satu faktor yang paling berpengaruh adalah adanya perbedaan  struktur  dinding  sel  antara  bakteri Gram  positif  dan  Gram  negatif  (Suriawiria, 2005).
Kontrol  negatif  yang  digunakan  pada pengujian  tidak  menunjukkan  adanya  zona hambat  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus,  Escherichia  coli, dan Salmonella thypi. Hal  tersebut  menunjukkan  bahwa kontrol  yang  digunakan  tidak  berpengaruh pada  pengujian  yang  dilakukan.  Tujuan penggunaan  kontrol  negatif  agar  dapat mengetahui  ada  tidaknya  pengaruh  pelarut terhadap  pertumbuhan  bakteri  uji,  sehingga dapat  dipastikan  bahwa  aktivitas  yang ditunjukkan  oleh  ekstrak  daun  kacapiring ialah  dari  senyawa  yang  terkandung  dalam sampel  bukan  berasal  dari  pelarut  (Djakatara et al, 2019).
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa diameter  zona  hambat  yang  dibentuk  oleh kontrol positif  yaitu ciprofloxacin lebih besar pada  bakteri  Gram  negatif Escherichia  coli (26  mm) , dan Salmonella  thypi (26,16  mm) dibandingkan bakteri gram positif Staphylococcus  aureus (23,33  mm).    Hal  ini disebabkan  karena  kedua  bakteri  berasal  dari golongan  bakteri  yang  berbeda.  Sesuai dengan literatur dalam buku Basic Pharmacology and Drug Notes (2017), bahwa
antibiotik Ciprofloxacin memiliki daya antibakteri  yang lebih kuat pada bakteri gram negatif seperti Escherichia coli dan Salmonella thypi .

## KESIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan  maka  dapat  disimpulkan  bahwa ekstrak  daun  kacapiring  ( Gardenia  augusta ) dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli dan Salmonella thypi pada konsentrasi  20%, 40% dan  60%.  Konsentrasi  ekstrak  etanol  daun kacapiring  ( Gardenia augusta)  yang  paling efektif  dalam  menghmabat  pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus,  Escherichia coli dan Salmonella  thypi yaitu  pada konsentrasi  60%  dengan  rata-rata  diameter zona  hambat  yang  terbentuk  masing-masing sebesar 13,16 mm, 13,2 mm, dan 11,73 mm.

## SARAN
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut dalam mengembangkan kacapiring ( Gardenia augusta )  sebagai  senyawa  atau  bahan  aktif obat dengan mengidentifikasi, mengekstraksi, dan fermentasi terhadap zat-zat yang memiliki efek  antibakteri.  Juga  diperlukan  penelitian lebih lanjut dari ekstrak kacapiring ( Gardenia augusta ) terhadap bakteri lainnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim. 1986. Sediaan Galenik. Departemen Kesehatan RI, Jakarta.
Davis,  W.W.  And  Stoud,  T.  R.  2009.  Disc
Plate  Methods  Of  Microbiological Antibiotic Assay. Journal of
Microbiology . 22 (4) : 666-670.
Dehghani,  F.,  Heshmatpour,  A.,  Panjeshahin, M.R.  and  Khozani,  T.T.  2012.  Toxic effects  of  water/  alcoholic  extract  of Syzygium aromticum on sperm quality, sex hormones and reproductive  tissues  in  male  mouse.
Journal Biology IUFS 71 (2) :95-102.
Dwijendra, I. M. 2014. Aktivitas Antimikroba dan  Karakterisasi  Senyawa  Fraksi Spos  Lamellodysidea  herbacea  yang Diperoleh dari Teluk Manado [skripsi]. Fakultas Perikanan dan Ilmu
Kelautan  Universitas  Sam  Ratulangi,
Manado.
Kumala, S., Tambunan R. M. & Mochtar, D.,
2006, Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak  Etil  Asetat  Kembang  Pukul  4 (Miribilis  jalapa  L.)  Dengan  Metode Bioautografi, Jurnal  Pharmaceutical Science, 8 (2) , 335-339.
Lay,  B.W.  1994.  Analisis  Mikroba  di Laboratorium.  Edisi  1.  Raja  Grafindo Persada, Jakarta.
Ngajow,  F.  2013.  Pengaruh  Antibakteri Ekstrak Kulit Batang Matoa ( Pometian  pinnata) terhadap  bakteri Stahpylococus  aureus secara  in  vitro.
Jurnal MIPA Unsrat 2 (2) :128-132.
Rahmadani, F. 2015. Uji Aktivitas
Antibakteri  Dari  Ekstrak  Etanol  96% Kulit  Batang  Kayu  Jawa  ( Lannea  o romandelica) Terhadap Bakteri Stahpylococus  aureus,  Escherichia coli, Helicobacter pylori, Pseudomonas  aeruginosa [skripsi]. Fakultas Kedokteran
dan Ilmu
Kesehatan  UIN  Syarif  Hidayatullah,
Jakarta.
Setia  Budy,  R.  Gan,  V.  H.  2007. Pengantar
Antimikroba. Dalam  Famakologi  Dan
Terapi  Edisi  ke-5.  Balai  Penerbit
FKUI, Jakarta.
Simbala,  H.  E.  I.  2007.  Keanekaragaman Floristik dan Pemanfaatannya Sebagai
Tumbuhan Obat di Kawasan Konservasi II Taman Nasional Bogani Nani  Wartabone  (Kabupaten  Bolaang Mongondow Sulawesi Utara)
[disertasi].  Institut  Pertanian  Bogor, Bogor.
Suriawiria,  Unus.  2005.  Mikrobiologi  Dasar. Papas Sinar Sinarti : Jakarta
Tangapo, A. M. 2005. Efektivitas Antibakteri Ekstrak  Tumbuhan  Daun  Sendok ( Plantago major ) Terhadap Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aerugiosa [skripsi]. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan  Alam  Universitas  Sam Ratulangi, Manado.
Team  Medical  Mini  Notes.  2017. Basic Pharmacology  &  Drug  Notes .  MMN Publishing. Makassar.
Yoga,  IB  K.W,  Nuri.  A  &  Endang  P.  2007.
Potensi  Antioksidan  Gel  Dan  Daun Kacapiring ( Gardenia augusta) [skripsi].  Fakultas  Matematika  dan Ilmu  Pengetahuan  Alam  :  Universitas Udayana, Bali.