Jurnal Pharmascience, Vol. 11, No.1, Maret 2024, hal: 161-168 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 https://ppjp.ulm.ac.id/journal/index.php/pharmascience Research Article

## Inhibisi Enzim α-Glukosidase oleh Bacillus Megaterium ITU 9 Isolat Sumber Air Panas Sumatera Utara
Finna Piska 1 *, Chrismis Novalinda Ginting 2 , Harmileni 3 , Edy Fachrial 2
1 Program Studi Farmasi, Fakultas Kedokteran, Kedokteran Gigi, dan Ilmu Kesehatan, Universitas Prima Indonesia, Medan, Sumatra Utara, Indonesia
2 Fakultas Kedokteran, Universitas Prima Indonesia, Medan, Sumatra Utara, Indonesia
3 Program Studi Teknik Kimia, Fakultas Teknik, Politeknik Teknologi  Kimia Industri, Medan, Sumatra Utara, Indonesia Email: finnapiska@unprimdn.ac.id

## ABSTRAK
Diabetes adalah penyakit multifaktor yang insidensinya meningkat dengan pesat di negara berkembang. Diabetes mellitus (DM) tipe 2 adalah jenis diabetes yang paling umum  ditemui,  dimana  penyakit  ini  erat  kaitannya  dengan  kemajuan  industri  dan teknologi sehingga mempengaruhi gaya hidup seseorang. Penanggulangan penyakit ini dapat dilakukan dengan menghambat aktivitas α-glukosidase. Beberapa mikroorganisme terutama dari sumber air panas dapat dimanfaatkan sebagai penghasil senyawa inhibitor α-glukosidase. Pada penelitian sebelumnya isolat Bacillus megaterium ITU 9 merupakan isolat yang diisolasi dari sumber air panas. Pada penelitian ini diuji kemampuan isolat Bacillus megaterium ITU 9 sebagai penghasil inhibitor α-glukosidase dengan metode sumur. Daya persen inhibisi supernatan B. megaterium ITU 9 terhadap kerja  enzim  α-glukosidase  adalah  sebesar  46,67%,  sedangkan  daya  persen  inhibisi acarbose yaitu 70%. Dalam hal ini B. megaterium ITU 9 termofilik memiliki daya inhibisi terhadap enzim α-glukosidase.
Kata Kunci: Bakteri Termofilik, Inhibitor, Akarbose, Metode Sumur, Persen Inhibisi

## ABSTRACT
Diabetes  is  a  multifactorial  disease  whose  incidence  is  increasing  rapidly  in developing countries. Diabetes mellitus (DM) type 2 is the most common type of diabetes, where this disease is closely related to industrial and technological advances, thus affecting a  person's  lifestyle.  This  disease  can  be  controlled  by  inhibiting  α-glucosidase  activity. Several microorganisms, especially from hot springs, can be used to produce α-glucosidase inhibitor compounds. In previous research, the Bacillus megaterium ITU 9 isolate was an isolate isolated from hot springs. In this study, the ability of the Bacillus megaterium ITU 9
isolate to produce α-glucosidase inhibitors was tested using the well method. The percent inhibition power of B. megaterium ITU 9 supernatant on the action of the α-glucosidase enzyme was 46.67%, while the percent inhibition power of acarbose was 70%. In this case, the  thermophilic  B.  megaterium  ITU  9  has  inhibitory  power  against  the  α-glucosidase enzyme.
Keywords:  Inhibitor,  Thermophilic  Bacteria,  Acarbose,  The  Well  Method,  The  Percent Inhibition

## I. PENDAHULUAN
Bakteri termofilik merupakan bakteri  yang  hidup  di  lingkungan  dengan suhu 45-55°C, sudah memiliki kemampuan resisten  dan  adaptasi  terhadap  lingkungan bersuhu  tinggi.  Menurut  Octarya et  al .
(2022), mikroba yang memiliki kemampuan termofilik merupakan mikroba yang hidup  di  lingkungan dengan suhu 45 hingga  80°C  seperti  wilayah  sumber  air panas,  pedalaman  laut,  tanah,  dan  pupuk kompos.  Bakteri  merupakan  mikroba dengan  populasi  terbanyak  yang  hidup  di lingkungan  ekstrim  seperti  sumber  air panas.  Roy et  al .  (2020)  berhasil mengisolasi  bakteri  dari  sumber  air  panas Trans-Himalayas sebanyak 64 isolat dengan
family
Bacteroidetes,
Actinobacteria, Proteobacteria,
Spirochates,  Cyanobacteria,  Tenericutes,
dan Firmicutes .
Alrumman et al . (2018) menyatakan bahwa  bakteri  termofilik  mengeluarkan senyawa  metabolit  antimikroba  seperti cyclohexyl acrylate, imiloxan, tabtoxinine- β-lactam,  nicotinyl  alcohol,  mephenesin,
etomidate, L-menthyl lactate, (3-
aminopropyl)  dibutylborane,  filbertone, dan 1-dotriacontanol. Igarashi et al . (2019)
juga menyatakan tentang senyawa
metabolit dari
Thermosporothrix
hazakensis yaitu ktedonoketone dan sebuah
senyawa α-diketone:  2’-oxosattabacin .
Berdasarkan hal ini bakteri termofilik dapat dimanfaatkan  sebagai  penghasil  senyawa metabolit dengan aktivitas seperti antihipertensi, antidiabetes berupa inhibitor α-glukosidase, dan antibakteri.
Inhibitor  α-glukosidase  merupakan senyawa yang dapat menghambat hidrolisis karbohidrat yang dikonsumsi dari makanan dan  minuman,  dan  mencegah  penyerapan glukosa  di  usus  halus  sehingga  kadar glukosa  di  dalam  darah  dapat  terjaga. Inhibitor  α-glukosidase  merupakan  agen jenis  baru  sebagai  antidiabetes  (Simamora et  al., 2019).  Diabetes  adalah  penyakit multifaktor  yang  insidensi  nya  meningkat dengan  pesat  di  negara  berkembang. Diabetes mellitus (DM) tipe 2 adalah jenis diabetes  yang  paling  umum  ditemui, dimana penyakit ini erat kaitannya dengan kemajuan  industri  dan  teknologi  sehingga mempengaruhi gaya hidup seseorang. Gaya
hidup  yang  tidak  sehat  seperti  konsumsi makanan  kaya  gula  sederhana,  tidak berolahraga, dan tingkat stress yang tinggi adalah beberapa faktor pemicu diabetes tipe 2.  Diabetes  mellitus  tipe  2  merupakan penyakit  yang  mana  tubuh  tidak  sensitif dengan hormon insulin dan glukagon yang dihasilkan oleh sel β-pankreas. Pengobatan diabetes  telah  banyak  digunakan  oleh penderita  seperti acarbose dan  metformin yang dijual secara komersil.
Akan  tetapi  beberapa  laporan menyebutkan bahwa konsumsi obat tersebut  dapat  menimbulkan efek samping seperti  diare  dan  kembung  pada  perut (Kumar et al., 2018; Nyenwe et al., 2011).
Pencarian senyawa inhibitor α-glukosidase
dari  sumber  daya  alam  telah  meningkat dilakukan  oleh  para  peneliti  khususnya  di dalam  bidang  farmasi  dan  bioteknologi.
Inhibitor  α-glukosidase  sebagai  senyawa yang  paling  efektif  untuk  mengurangi dampak hiperglikemia pasca-prandial
(PPHG)  dari  semua  obat  antidiabetes (Sarjono et al ., 2020). Beberapa
mikroorganisme  menunjukkan  aktivitas alfa  glukosidase,  terutama  kelompok bakteri,  seperti Bacillus sp.  (Simon et  al .,
2023).
Isolat Bacillus  megaterium ITU  9 merupakan  bakteri  yang  diisolasi  oleh Ginting et al. (2023) dari sumber air panas yang  berjarak  50  km  dari  kota  Medan, Sumatra  Utara  dengan  titik  koordinat
3°13'24.97728  N"  dan  98°31'1.38792  E".
Pada penelitian ini isolat tersebut akan diuji sebagai  penghasil  inhibitor  α-glukosidase dengan metode sumur. Pemanfaatan bakteri sebagai  penghasil  inhibitor  α-glukosidase, baik  itu  bakteri  yang  diisolasi  dari makanan,  usus,  dll.  Kim et  al .  (2023) berhasil menguji aktivitas Bacillus coagulans sebagai inhibitor alfa glukosidase.  Gao et  al .  (2022)  juga  telah
menguji
aktivitas
Bacillus
amyloliquefaciens sebagai  inhibitor  α- glukosidase  dan  diketahui  senyawa  aktif tersebut merupakan 1-deoxynojirimycin .

## II. METODE

## A. Bahan dan Alat penelitian
Pada  penelitian  ini  menggunakan isolat Bacillus  megaterium ITU  9  yang diisolasi oleh Ginting et al . (2023) dimana isolat ini merupakan isolat termofilik suhu
45°C. Media Nutrient Agar (NA) ( Merck 
KGaA )  dan Nutrient  Broth (NB)  ( Merck 
KGaA ).  Pada  uji  inhibisi  α-glukosidase digunakan sukrosa sebagai substrat, enzim komersial  berupa  enzim  α-glukosidase kasar  ( crude  ),  larutan  dapar  pospat
( Merck  KGaA ) pH 7, aquadest. Alat yang
digunakan  adalah  cawan  petri,  tabung reaksi,  Beaker gelas ( Pyrex  ), Erlenmeyer
( Pyrex  ), timbangan analitik ( Shimadzu  ),
hotplate  & stirrer  ( IKA  ),  autoklaf
( Himaraya  ),  BIOBASE Biochemistry
Science  Cabinet II (BSC),  instrumen
Smartreader TM 96, mikroplate 96 sumur.

## B. Prosedur
Isolat Bacillus  megaterium ITU  9 ditumbuhkan dan diremajakan di media NA selama 24 jam dan kemudian diinokulasi ke media  NB  dengan  volume  25  ml.  Setelah diinokulasi  selama  24  jam  di  media  NB, media disonifikasi selama 5 menit. Setelah itu  media  disentrifugasi  selama  15  menit dengan  kecepatan  agitasi  4500  rpm. Supernatan  diambil  dengan  cara  dituang dan  disaring  menggunakan  mikro  filter steril.  Supernatan  ini  yang  akan  diuji
sebagai  inhibitor  α-glukosidase  dengan metode  sumur  menggunakan  instrumen Smartreader TM 96 pada panjang gelombang 405  nm  menggunakan  mikro  plate  (96 sumur).  Enzim  α-glukosidase  ( crude ) dibuat menjadi  larutan dengan konsentrasi 10 U/ml dalam dapar pospat pH 7. Substrat yang digunakan adalah sukrosa Ouassou et al .  (2018)  dibuat  dengan  konsentrasi  50
mM.  Berikut  Tabel  I  berupa  campuran komposisi  dan  rancangan  reaksi  dari  uji inhibitor  α-glukosidase  (Susilowati et  al .,
2019).  Perlakuan  yang  dilakukan  terhadap
kontrol positif yaitu acarbose .
Tabel I. Campuran komposisi dan rancangan reaksi pada uji inhibitor

## α-glukosidase
Campuran komposisi A 0 (µL) A 1 (µL) AI 0 (µL) AI 1 (µL) Supernatan - - 2 2 Media NA 2 2 - - Dapar pospat pH 7 48 48 48 48 Enzim - 25 - 25 Inkubasi pada suhu 37°C selama 15 menit Dapar pospat pH 7 25 - 25 - Substrat 25 25 25 25 Inkubasi pada suhu 37°C selama 15 menit Na 2 CO 3 100 100 100 100
Rumus menghitung persentase inhibisi menggunakan rumus Shai et al. (2010) with codes A 1 , A 0 , A1 0 , A1 1 :
Abs. sampel uji total = Abs. sampel uji – Abs. A1. % uji aktivitas = Abs. sampel uji total / Abs. kontrol positif x 100%.
Absorbansi sampel uji total = Absorbansi sampel uji + sukrosa + crude enzim. Absorbansi A1 = Absorbansi sampel uji + sukrosa.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  uji  inhibitor  α-glukosidase
diperoleh  dari  supernatan  isolat B.
megaterium ITU  9.  Supernatan  tersebut diuji  aktivitasnya  untuk  menghambat
aktivitas  enzim  α-glukosidase  untuk menghidrolisis  sukrosa.  Daya  persen inhibisi  supernatan B.  megaterium ITU  9 terhadap kerja enzim α-glukosidase adalah sebesar 46,67%. Nilai tersebut berbeda dari
daya  persen  inhibisi  acarbose  yang diperoleh dari penelitian ini yaitu 70%.
Pada  penelitian  ini  dilakukan  uji inhibitor  α-glukosidase  dari  isolat B. megaterium ITU  9,  dimana  isolat  tersebut merupakan  hasil  isolasi  dari  sedimen sumber  air  panas  yang  ada  di  Sumatra Utara,  Indonesia  (Ginting et  al., 2023).
Bacillus  megaterium ITU  9  memiliki bentuk sel basil, gram positif, dan berwarna opaque (Ginting et  al .,  2023).  Bersamaan dari hasil Wu et al. tersebut B. megaterium
ITU  9  diperoleh  dari  sedimen  sumber  air panas.
Bacillus  megaterium ITU  9  ini tumbuh  di  suhu  45°C  di  media Nutrient
Agar (NA). B. megaterium ITU 9 telah diuji dari uji pewarnaan gram, hingga kemampuannya dalam menghambat patogen E.coli dan S. aureus . Bakteri yang hidup  di  lingkungan  bersuhu  tinggi memiliki  penyusun  sel  dari  pembentuk DNA  hingga  protein  berbeda  dengan bakteri pada umumnya yang hidup di suhu 37°C.
Inhibitor  α-glukosidase  ( alpha glucosidase  inhibitor,  AGI )  adalah  salah
satu senyawa antidiabetes yang beraktivitas dengan  menghambat  kerja  enzim  α- glukosidase.  Struktur  dari  AGI  hampir serupa  dengan  substrat  enzim  glukosidase berupa disakarida atau oligosakarida, dapat terikat  pada  sisi  aktif  dari  enzim glukosidase  (Hossain et  al .,  2020).
Makanan  yang  diserap  usus  dilakukan pengurangan penyerapan karbohidrat, dimana hal ini merupakan sebuah pendekatan  terapeutik  bagi  hiperglikemia postpandrial.  Polisakarida  kompleks  dari makanan  akan  dihidrolisis  enzim  amylase menjadi  dekstrin.  Kemudian  selanjutnya dekstrin  dihidrolisis  oleh  enzim  α- glukosidase  menjadi  glukosa,  sebelum memasuki sirkulasi darah melewati penyerapan epitelium.
Enzim α-
glukosidase  mengkatalisis  pemotongan ikatan  glikosidik  pada  oligosakarida.
Jumlah enzim α-glukosidase yang beraktivitas  bergantung  pada  jumlah, konfigurasi,  dan  posisi  gugus  hidroksil  di dalam  molekul  glukosa.  Aktivitas  enzim glukosidase  adalah  aktivitas  yang  penting bagi beberapa reaksi biokimia. Oleh karena itu  hiperglikemia  yang  mana  konsentrasi glukosa pada darah tinggi melebihi keadaan normal  seperti yang terjadi  pada penderita diabetes,  menurunkan  aktivitas  enzim  α- glukosidase  dapat  mengatasi  kondisi hiperglikemia karena jumlah monosakarida yang dapat diserap usus menjadi berkurang (Febrinda et al ., 2013).
Pada  uji  inhibitor  α-glukosidase,
suhu inkubasi yang digunakan adalah 37°C, agar  sesuai  dengan  kondisi  aktivitas biologis sel tubuh manusia. Penyesuaian ini dilakukan untuk menguji keaktifan supernatan pada keadaan tersebut menghambat  kerja  enzim  α-glukosidase.
Enzim dari manusia aktif pada suhu tubuh
37°C,  dan  masih  dapat  mempertahankan strukturnya pada suhu 45°-55°C (Wahyuni, 2017). Dengan demikian senyawa inhibitor α-glukosidase  memang  optimal  diperoleh dari  bakteri  termofilik.  Pada  suhu  tinggi senyawa  inhibitor  α-glukosidase  masih bertahan  dan  mampu  bersaing  dengan enzim α-glukosidase.
Glukosa  pada  tubuh  terdapat  di dalam  darah,  dimana  darah  memiliki  pH 6,8-7. Penggunaan pH pada uji inhibitor α- glukosidase  ini  juga  menggunakan  pH  7. Hal ini untuk menyesuaikan keadaan pH di dalam mikroplate uji dengan keadaan pH di darah.  Perubahan  dari  pH  dari  nilai optimum  dapat  menurunkan  aktivitas karena  adanya  perubahan  ionisasi  gugus fungsi  dari  sisi  aktif  enzim  (Wahyuni, 2017).  pH  optimum  pada  sel  makhluk hidup  biasanya  adalah  6,8,  namun  setiap lingkungan  enzim  beraktivitas  memiliki perbedaan,  seperti  pH  lambung  adalah sekitar 2,0.
Proses  inhibisi  kerja  enzim  dapat berupa irreversibel dan reversibel.
Irreversibel  merupakan  aktivitas  inhibitor mengikat  dan  merusak  gugus  fungsi  pada sisi  aktif  enzim.  Reversibel  merupakan mengikatnya  inhibitor  ke  enzim  dimana struktur  inhibitor  memiliki  kesamaan dengan  substrat.  Ikatan  antara  inhibitor dengan  enzim  merupakan  nonkovalen, kedua  senyawa  tersebut  dapat  putus  dan
kembali  ke  bentuk  semula  (Ischak et  al .,
2017).
Tomasik et  al .  (2012)  menyatakan bahwa genus Bacillus sp. mampu menghasilkan  enzim  α-amilase  beserta turunannya.  Seiring  dengan  penelitian  ini, isolat  C3 yang merupakan isolat  dari kulit kayu  manis,  memberikan  daya  inhibisi  α- glukosidase sebesar 45,63% (Sarjono et al .,
2020).  Sarjono et  al .  (2020)  menyatakan bahwa konsentrasi inhibitor yang digunakan  pada  uji  inhibisi  enzim  sangat berpengaruh,  agar  dapat  bersaing  dengan jumlah  unit  enzim  yang  ada.    Jumlah molekul inhibitor yang kurang dari jumlah unit enzim tidak akan mampu membentuk kompleks  dengan  enzim  yang  akan diinhibisi. Dengan demikian proses inhibisi kompetitif  dari  supernatan B.  megaterium
ITU  9  pada  penelitian  ini  menjadi  rendah dan  diperoleh  daya  inhibisi  kurang  dari
50%.  Sarjono et  al .  (2020)  menyatakan
proses inhibisi kompetitif akan menghasilkan nilai optimum apabila konsentrasi inhibitor tinggi, dengan demikian dapat menutup sisi aktif dari pada enzim.  Di  sisi  lain  kemungkinan B.
megaterium IUT 9 menghasilkan enzim α- amilase  juga  ada,  sehingga  menjadi  faktor menurunkan daya inhibisi yang dihasilkan.
Pada  proses  fermentasi,  mikroba diberikan  sumber  nutrisi  yang  dapat menginduksi mikroba
tersebut mengeluarkan senyawa metabolit.
Metabolit tersebut dihasilkan dari
rangsangan membran terhadap lingkungan sehingga reseptor dapat merespon dan gen penghasil metabolit tersebut dapat berekspresi.  Ekspresi  gen  ini  tentunya diawali  dari  induser  pada  sumber  nutrisi mikroba, jika tidak ada kesesuaian dengan metabolit  yang diinginkan maka metabolit tersebut  tidak  akan  diekspresikan.  Jumlah molekul  inhibitor  α-glukosidase  sedikit dapat  dipengaruhi  karena  tidak  adanya induser  pada  media  nutrisi  mikroba (Nofiani et al ., 2009).

## IV. KESIMPULAN
Kesimpulan  dari  penelitian  ini adalah  bahwa  isolat B.  megaterium ITU  9 termofilik memiliki kemampuan
menghasilkan  senyawa  metabolit  sebagai inhibitor  enzim  α-glukosidase  dengan persentase inhibisi 46,67%.

## KONFLIK KEPENTINGAN
Seluruh  penulis  pada  artikel  ini menyatakan  bahwa  tidak  ada  konflik kepentingan dalam penelitian ini.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih kepada
Universitas  Prima  Indonesia  yang  telah menyediakan  fasilitas  dalam  pelaksanaan penelitian ini dan pihak-pihak terkait dalam penyelesaian penelitian artikel ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Alrumman, S. Yasser, S. M. M., Shekha, A. Q.,  &  Tarek,  H.  T.  T.  (2018). Hydrolytic  enzyme  production  by thermophilic  bacteria  isolated  from Saudi  hot  springs.  5(13):  470-480. doi: 10.1515/biol-2018-0056 Febrinda,  A.  E.,  Made,  A.,  Tutik,  W.,  & Nancy,  D.  Y.  (2013).  Kapasitas antioksidan dan inhibitor alfa glukosidase  ekstrak  umbi  bawang dayak. J.  Teknol.  Dan  Industri Pangan. 24(2): 161-167.
Gao,  Y. et  al .  (2022).  Glucosidase Inhibitory  Activity  of  Fermented Okara  Broth  Started  with  the  Strain Bacillus  amyloliquefaciens SY07.
Molecules.
27:1-11. https://doi.org/10.3390/molecules27 031127 Ginting, C. N., Finna, P., Harmileni, & Edy, F. (2023). Molecular identification of thermophilic bacteria
with antimicrobial  activity  isolated  from hot  springs  in  North  Sumatra, Indonesia. Biodiversitas. 24(2): 752- 758. DOI: 10.13057/biodiv/d240210
Hossain,  U.,  Abhishek,  K.D.,  Sumit,  G.,
Parames,  C.  Sill. (2020).  An overview on the role bioactive alpha glucosidase inhibitors in ameliorationg diabetic complications. Food  and  Chemical
Toxicology . https://doi.org/10.1016/j.fct.2020.11
1738
Igarashi,  Y. et  al .  (2019). Ktedonoketone and 2’-oxosattabacin,  benzenoid metabolites  from  a  thermophilic bacterium Thermosporothrix hazakensis in the phylum Chloroﬂexi. JARA.
https://doi.org/10.1038/s41429-019- 0195-7
Ischak, N. I., Yuszda K. S., & Deasy, N. B.
(2017). Buku  Ajar  Biokimia  Dasar. UNG Press
Kim,  H.  W.,  Choi,  S.  Y.,  Lee,  D.  C.,  & Rhee, H.I. (2023). Intestinal
Production  of  Alpha-Glucosidase
Inhibitor by Bacillus coagulans Spores. Microorganisms. 11(6). https://doi.org/10.3390/microorganis ms11061462
Noﬁani,  R.,  Nurbetty,  S.,  &  Sapar,  A.
(2009).  Antimicrobial  activities  of methanol  extract  from  unidentiﬁ  ed sponge associated bacteria in Lemukutan Island, Kalimantan Barat. Jurnal Ilmu dan Teknologi Kelautan
Tropis , 1(2), 33-41.
Octarya,  Z.,  Titania,  T.  N.,  Yuana,  N.,  &
Saryono. (2022). Molecular Identification,  GC-MS  Analysis  of Bioactive Compounds and Antimicrobial Activity of Thermophilic Bacteria Derived from West Sumatra Hot-Spring Indonesia. HAYATI  Journal  of  Biosciences.
29(4):
549-561.
DOI:10.4308/hjb.29.4.549-561 Ouassou, H., et al . (2018). Inhibition of α- glucosidase, intestinal glucose absorption, and antidiabetic properties  by Caralluma  europaea . Hindawi. https://doi.org/10.1155/2018/958947
2
Roy,  C. et  al .  (2020).  Microbiome  and ecology  of  a  hot  spring-microbialite system  on  the  Trans-Himalayan Plateau. Scientific Reports. Sarjono,  P.  R.,  Hendra,  D.  R.  M.,  Nies  S. M.  N.,  Nor,  B.  A.  P.,  &  Ismiyarto. (2020). Aktivitas antidiabetes
metabolit  sekunder  bakteri  endofit asal kulit kayu manis. Saintek. 25(2): 143-156.
Shai,  L.  J., et  al. (2010). Yeast  alpha glucosidase inhibitory and
antioxidant activities of six medicinal plants collected in Phalaborwa, South Africa. South  African  Journal  of
Botany.
76(3): 465-470.
https://doi.org/10.1016/j.sajb.2010.0
3.002 Simon,  A.,  Joan,  C.,  Shahneela,  M., Ekaterina, K., John, D., & Kieran, R. (2023). Bacillus megaterium Renuspore ® as  a  potential  probiotic for  gut  health  and  detoxiﬁcation  of unwanted dietary contaminants. Frontiers  in  Microbiology. DOI 10.3389/fmicb.2023.1125616
Susilowati, A., Citra, P. Y. D., & Siti, L. A. S. (2019). Isolation and identification of  endophytic  bacteria  from  Salak Pondoh  ( Salacca  edulis )  fruit  as  a- glycosidase inhibitor producer. Biosaintifika. 11(3):  352-359.  DOI: http://dx.doi.org/10.15294/biosaintifi ka.v11i3.21031 Wahyuni,  S.  (2017). Biokimia  Enzim  dan Karbohidrat. UNIMAL Press. Lhoukseumawe
Wu,  J., et  al .  (2019).  Endophytic Bacillus megaterium BM18-2  mutated  for cadmium accumulation and improving  plant  growth  in  Hybrid Pennisetum . Biotechnology  Reports . https://doi.org/10.1016/j.btre.2019.e
00374 Yao, J., Lili, W., Wenju, Z., Mengjian, L.,
& Junli, N. (2020). Effects of Bacillus  megaterium on  growth performance,  serum biochemical parameters, antioxidant capacity, and immune  function  in  suckling  calves. Open Life Sci. 15(1): 1033-1041. doi: 10.1515/biol-2020-0106
Younes,  N.  A., et  al .  (2023).  Effects  of microbial biostimulants
( Trichoderma  album and Bacillus megaterium )  on  growth,  quality attributes,  and  yield  of  onion  under field
conditions.
Heliyon.
https://doi.org/10.1016/j.heliyon.202 3.e14203