PENGARUH BAKTERI ENDOFITIK DAN Azolla pinnata TERHADAP POPULASI BAKTERI ENDOFITIK, KANDUNGAN N, DAN BOBOT
KERING P PADI ( Oryza sativa L.) PADA TANAH BERSALINITAS
(The Effect of Endophytic Bacteria and Azolla pinnata to the Population of Endophytic Bacteria, N Content, and Dry Weight of Rice (Oryza sativa L .) on Soil with Salinity)
Melani 1 , Daud Siliwangi Saribun 2 , Mieke Rochimi Setiawati 2
1 Mahasiswa Fakultas Pertanian Universitas Padjadjaran
2 Staf Pengajar Fakultas Pertanian Universitas Padjadjaran Jl. Raya Bandung-Sumedang Km 21, Jatinangor, Sumedang 45363, Telp. 022-7796316, Fax. 022-7796316, e-mail: melaniagnes@gmail.com

## ABSTRACT
Nitrogen  deficiency  is  the  main  problem  of  rice  growth  in  salt  stress  condition. Endophytic bacteria has an ability to enhance the number of available N in plant tissue  by  fixing  N  from  the  atmosphere,  meanwhile Azolla  pinnata has  high content of N that can increase the available N in soil. The aim of this research was to know the limit of salinity stress tolerance in rice with application of endophytic bacteria  and A.  pinnata to  enhancing  the  population  of  endophytic  bacteria,  N content, and dry weight of rice on soil with salinity. The research was conducted on  March  2016  until  March  2017  at  the  Green  House  of  Ciparanje  Universitas Padjadjaran.  Samples  were  analized  at  the  Laboratory  of  Soil  Biology  and Laboratory of Soil Fertility and Plant Nutrion, Faculty of Agriculture, Universitas Padjadjaran. The design experiment used was single factor randomized block of 8 treatments  and  4  repetitions.  The  treatments  consisted  of  with  and  without  the application of endophytic bacteria and A. pinnata on soil with salinity of  0, 2, 4, and 6 mmhos cm -1 . The results showed that the application of endophytic bacteria and A.  pinnata gave  the  significant  difference  on  the  population  of  endophytic bacteria, N content, and dry weight of rice up to 4 mmhos cm -1 .
Keywords: Azolla pinnata , endophytic bacteria, rice, salinity

## PENDAHULUAN
Lahan  mengandung  garam semakin meningkat jumlahnya seiring  dengan  terjadinya  banjir  rob yaitu naiknya air laut yang menggenangi  daratan.  Hal  tersebut berkaitan  dengan  perubahan  iklim global yang berakibat pada
penurunan produktivitas lahan (Subowo,  2014).  Daerah  lumbung padi  nasional  seperti  Pantai  Utara Jawa  (Pantura)  tidak  luput  dari cekaman salinitas tanah, terbukti dari penurunan  produksi  padi  di  Jawa Barat  dari  tahun  2013  sampai  2015 yaitu berurut-turut 12.083.162, 11.644.899,  dan    11.373.234  ton
(Badan Pusat Statistik, 2016). Kondisi  tersebut  berbanding  terbalik dengan permintaan beras yang selalu meningkat  yaitu  sebesar  4,14%  per tahun  dalam  kurun  waktu  5  tahun dari  2008  sampai  2012  (Kementrian
Perdagangan, 2013).
Masuknya air laut pada lahan pertanaman padi menyebabkan permasalahan  yaitu  terakumulasinya garam-garam  yang  didominasi  oleh natrium  klorida  (NaCl)  pada  tanah (Djukri,  2009).  Penyerapan  unsur penyusun  garam  yang  berlebihan menyebabkan penurunan penyerapan air  dan  unsur  hara  bagi  tanaman, salah satunya N yang sangat dibutuhkan pada fase vegetatif sebagai unsur pendukung fotosintesis (Torres-Olivar et al ., 2014).
Bakteri  endofit  merupakan bakteri yang hidup di dalam jaringan tanaman  pada  periode  tertentu  dan mampu  hidup  dengan  membentuk koloni  di  dalam  jaringan  tanaman tanpa membahayakan inangnya (Radji, 2005). Setiap tanaman tingkat tinggi  dapat  mengandung  beberapa spesies  bakteri  endofit  yang  mampu menghasilkan  metabolit  sekunder. Pada  umumnya,  bakteri  endofit masuk  ke  dalam  jaringan  tanaman melalui  akar,  stomata,  atau  bagian tanaman  yang  luka  (Pranoto et  al .,
2014).  Bakteri  endofit  penambat  N 2 yang  diisolasi  dari  berbagai  spesies tanaman  dapat  berkontribusi  hingga 47%  dalam  penambatan  N 2 dari udara (Gupta et al ., 2012). Pemanfaatan  bakteri  endofit  dapat diaplikasikan  dalam  bentuk  pupuk hayati  cair  agar  lebih  efektif  diserap tanaman  karena carrier - free dan lebih steril atau kontaminasi minimal (Pindi dan Satyanarayana, 2012).
Azolla pinnata dapat dimanfaatkan sebagai amelioran organik untuk meningkatkan ketersediaan  unsur  N  di  dalam  tanah (Rosiana et  al. ,  2013).  Menurut Aksan et  al .  (2014), Azolla  pinnata memiliki  kandungan  N  yang  cukup tinggi  yaitu  2,55-3,95%. Azolla pinnata segar  dapat  dibenamkan  ke dalam  tanah  sehingga  nitrogen  yang terkandung pada tubuh Azolla termineralisasi dan dirilis ke tanaman padi (Adhikary, 2014).

## BAHAN DAN METODE
Percobaan  dilaksanakan  di rumah kaca lahan percobaan Ciparanje Fakultas Pertanian Universitas Padjadjaran, Desa Cikeruh, Kecamatan Jatinangor, Kabupaten  Sumedang,  Jawa  Barat yang  berada  pada  754  m  di  atas permukaan  laut  (dpl).  Penelitian dilaksanakan mulai dari bulan Februari  2017  sampai  dengan  bulan Maret 2017. Bahan yang digunakan
diantaranya  adalah  benih  tanaman padi  varietas  Inpari  34, A.  pinnata segar,  pupuk  Urea,  SP-36,  dan  KCl, tanah  sawah  Inceptisol  Jatinangor yang  dikondisikan  salin  dengan pemberian  kadar  0  (tanpa  diberi NaCl  pro  analisis),  2  mmhos  cm -1 ( 2,9 g NaCl pro analisis), 4 mmhos m - 1 (  26,4  g  NaCl  pro  analisis),  6 mmhos  m -1 (  49,9  g  NaCl  pro analisis)  dan  pupuk  hayati  bakteri endofit penambat N 2 dengan kepadatan  10 7 cfu  ml -1 hasil  isolasi dari tanaman padi yang tumbuh pada tanah  salin  asal  Cirebon  yang merupakan  koleksi  Laboratorium Biologi Tanah Unpad.
Rancangan  percobaan  yang digunakan  adalah  Rancangan  Acak Kelompok  (RAK).  Percobaan    ini terdiri  dari  8  perlakuan  dengan  4 ulangan. Pupuk hayati cair 10 ml L -1 bakteri  endofitik  dengan  kepadatan 1x10 7 cfu ml -1 dikombinasikan dengan Azolla  pinnata segar  dengan dosis 7 ton ha -1 setara 35 g pot -1 yang diaplikasikan  pada  tanah  sawah dengan salinitas 0, 2, 4, dan 6 mmhos cm -1 .  Rancangan  perlakuan  yang dilakukan pada percobaan ini adalah, A=Tanah  bersalinitas  0  mmhos  cm -1 (kontrol);  B=Tanah  bersalinitas  0 mmhos  cm -1 + pupuk  hayati  bakteri endofitik + Azolla pinnata ; C=Tanah bersalinitas 2 mmhos cm -1 ; D=Tanah bersalinitas  2  mmhos  cm -1 + pupuk hayati  bakteri  endofitik + Azolla pinnata ;  E=Tanah  bersalinitas  4 mmhos  cm -1 ;  F=Tanah  bersalinitas  4 mmhos  cm -1 + pupuk  hayati  bakteri endofitik + Azolla pinnata ; G=Tanah bersalinitas 6 mmhos cm -1 ; H=Tanah
bersalinitas  6  mmhos  cm -1 + pupuk hayati  bakteri  endofitik + Azolla pinnata .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengaruh  Bakteri  Endofitik  dan Azolla  pinnata terhadap  Populasi
Bakteri Endofitik Perlakuan pupuk hayati bakteri  endofitik  dan Azolla  pinnata berpengaruh  nyata  terhadap  populasi bakteri endofitik tanaman padi hingga salinitas tanah 4 mmhos cm -1 . Hal  ini  diduga  akibat  kemampuan multiplikasi  diri  yang  sangat  cepat dari  bakteri  endofitik.  Rolfe  dan Weinman  (2001)  melaporkan  bahwa kolonisasi  bakteri  endofitik  pada jaringan  epidermis  akar  padi  sudah terdeteksi  pada  3  HSP.  Bakteri endoftik  juga  memiliki  kemampuan bermultiplikasi  yang  sangat  tinggi yaitu  8-10  generasi  dalam  waktu  10 hingga 15 HSP (Rolfe dan Weinman, 2001).
Tabel  1.  Pengaruh  Pupuk  Hayati  Endofit  dan Azolla  pinnata terhadap  populasi
bakteri endofitik.
Keterangan: Angka-angka  yang  berhuruf  sama  berbeda  tidak  nyata  menurut  Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf nyata 5% Perlakuan Populasi Bakteri Endofitik (10 3 CFU ml -1 ) A = Tanah bersalinitas 0 mmhos cm -1 (kontrol) 6,4 ab B = Tanah  bersalinitas  0  mmhos  cm -1 + pupuk  hayati bakteri endofitik + Azolla pinnata 19,1 c C = Tanah bersalinitas 2 mmhos cm -1 5,9 ab D = Tanah  bersalinitas  2  mmhos  cm -1 + pupuk  hayati bakteri endofitik + Azolla pinnata 16,7 c E = Tanah bersalinitas 4 mmhos cm -1 4,1 a F = Tanah  bersalinitas  4  mmhos  cm -1 + pupuk  hayati bakteri endofitik + Azolla pinnata 12,4 bc G = Tanah bersalinitas 6 mmhos cm -1 2,1 a H = Tanah  bersalinitas  6  mmhos  cm -1 + pupuk  hayati bakteri endofitik + Azolla pinnata 3,5 a
Pupuk hayati bakteri endofitik  dan Azolla  pinnata belum memberikan pengaruh nyata terhadap  populasi  bakteri  endofitik dalam  tanaman  padi  pada  salinitas  6 mmhos  cm -1 .  Diduga  perlakuan
pupuk hayati bakteri endofitik dengan  dosis  10  ml  L -1 belum mampu  meningkatkan  toleransi  padi pada  salinitas    6  mmhos  cm -1 . Menurut  Setiawati et  al. (2008),
peningkatan konsentrasi pupuk hayati  cair  bakteri  endofitik  yang diberikan secara nyata dapat meningkatkan populasi bakteri endofitik  pada  batang  padi  karena berkaitan dengan peningkatan kepadatan bakteri. Kepadatan inokulan  bakteri  endofitik  sangat berpengaruh  terhadap  keberhasilan kolonisasi  bakteri  di  tanaman  inang padi  (Setiawati et  al .,  2002 dalam Setiawati et  al .,  2008).  Populasi bakteri  endofit  di  batang  padi meningkat  7-30  %  seiring  dengan peningkatan
konsentrasi pupuk
hayati cair setiap 25 ml L -1 (Setiawati et al ., 2008).

## Pengaruh  Bakteri  Endofitik  dan
Azolla pinnata terhadap Kandungan N Tanaman Perlakuan pupuk hayati bakteri  endofitik  dan Azolla  pinnata bengaruh  nyata  terhadap  kandungan N  tanaman  padi  hingga  salinitas  4 mmhos cm -1 . Bakteri endofitik mampu  menambat  N 2 langsung  dari udara,  kemudian  melalui  enzim nitrogenase  N 2 diubah  menjadi  NO 3 - di  dalam  jaringan  tanaman  sehinnga dapat  meningkatkan  kandungan  N tanaman  (Miliute et  al .,  2015). Sejalan  dengan  penelitian  Setiawati et al . (2015) yang menyatakan bahwa semua  isolat  bakteri  endofitik  yang diisolasi  dari  akar  dan  batang  padi mampu  meningkatkan  kandungan  N lebih tinggi dari pada isolat Azotobacter sp . dan Azospirillum sp . pada 21 HSP.
Tabel 2. Pengaruh pupuk hayati endofit dan Azolla pinnata terhadap kandungan N tanaman padi.
Perlakuan Kandungan N Tanaman (%) A = Tanah bersalinitas 0 mmhos cm -1 (kontrol) 3,8287 c B = Tanah  bersalinitas  0  mmhos  cm -1 + pupuk  hayati bakteri endofitik + Azolla pinnata 4,0430 d C = Tanah bersalinitas 2 mmhos cm -1 3,3649 b D = Tanah  bersalinitas  2  mmhos  cm -1 + pupuk  hayati bakteri endofitik + Azolla pinnata 3,7257 c E = Tanah bersalinitas 4 mmhos cm -1 3,2205 ab F = Tanah  bersalinitas  4  mmhos  cm -1 + pupuk  hayati bakteri endofitik + Azolla pinnata 3,7041 c G = Tanah bersalinitas 6 mmhos cm -1 3,0400 a H = Tanah  bersalinitas  6  mmhos  cm -1 + pupuk  hayati bakteri endofitik + Azolla pinnata 3,4039 b
Keterangan:  Angka-angka yang berhuruf sama tidak berbeda nyata menurut Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf nyata 5%
Tanaman  padi  pada  tanah salinitas  2  dan  4  mmhos  cm -1 memiliki  persentase  kandungan  N yang  tidak  berbeda  nyata  dengan kontrol,  diduga  akibat  penyerapan NaCl yang ditekan melalui pemberian Azolla  pinnata .  Hal  ini dikarenakan Azolla pinnata mengandung  kalsium  sebagai  unsur ke  tiga  terbanyak  yaitu  0,45-1,70%
(Wardhana,  2006).  Menurut  Rusd
(2011), Ca 2+ mampu memutus ikatan NaCl  dengan  cara  menggantikan kedudukan Na + sehingga penyerapan Na + oleh  tanaman  dapat  dikurangi. Hal  ini  membantu  tanaman  dalam penyerapan  air  dan    unsur  hara terutama N dari dalam tanah.

## Pengaruh  Bakteri  Endofitik  dan
Azolla  pinnata terhadap  Bobot
Kering Tanaman Pada perlakuan tanah bersalinitas  2  dan  4  mmhos  cm -1
dengan  penambahan  pupuk  hayati bakteri  endofitik  dan Azolla  pinnata dihasilkan bobot kering tanaman padi
yang  tidak  berbeda  dengan  kontrol. Hal tersebut menunjukkan pemberian pupuk  hayati  dan Azolla  pinnata mampu    memberikan    pengaruh meningkatkan  bobot  kering  tanaman sampai salinitas 4 mmhos cm -1 . Peranan bakteri endofitik dalam menurunkan efek buruk salinitas terhadap bobot kering tanaman telah dilaporkan oleh Jha et al .  (2011)  yang  menginokulasikan bakteri endofitik Pseudomonas
pseudoalcaligenes pada tanaman padi,  yaitu  menghasilkan  bobot kering yang lebih tinggi
dibandingkan    kontrol  pada  semua perlakuan salinitas berbeda (0,5; 1,0; 1,5;  2,0;  dan  2,5  g  NaCl  kg -1 tanah) setelah  40  HSP.  Bakteri  endofitik mengubah  N 2 menjadi  NO 3 - dan digunakan  untuk  membentuk  asam amino yang berperan dalam pembentuk biomassa tanaman. Semakin  banyak  asam  amino  yang terbentuk  maka  semakin  besar  bobot kering tanaman yang dihasilkan.
Tabel 3. Pengaruh pupuk hayati endofit dan Azolla pinnata terhadap bobot kering tanaman.
Perlakuan Bobot Kering Tanaman (g) A = Tanah bersalinitas 0 mmhos cm -1 (kontrol) 0,1711 c B = Tanah  bersalinitas  0  mmhos  cm -1 +  pupuk  hayati bakteri endofitik + Azolla pinnata 0,2035 d C = Tanah bersalinitas 2 mmhos cm -1 0,1279 b D = Tanah  bersalinitas  2  mmhos  cm -1 +  pupuk  hayati bakteri endofitik + Azolla pinnata 0,1693 c E = Tanah bersalinitas 4 mmhos cm -1 0,1199 ab F = Tanah  bersalinitas  4  mmhos  cm -1 +  pupuk  hayati bakteri endofitik + Azolla pinnata 0,1564 c G = Tanah bersalinitas 6 mmhos cm -1 0,1006 a H = Tanah  bersalinitas  6  mmhos  cm -1 +  pupuk  hayati bakteri endofitik + Azolla pinnata 0,1128 ab Keterangan : Angka-angka  yang  berhuruf  sama  berbeda  tidak  nyata  menurut  Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf nyata 5%
Peranan Azolla pinnata
erhadap  bobot  kering    tanaman  padi dilaporkan  oleh  Putri et  al .  (2013) yaitu dalam 15 HST perlakuan pupuk anorganik 100% + azolla 1,5 ton ha -1 menghasilkan  BK  30%  lebih  tinggi dari  pada  bobot  kering  tanaman perlakuan  pupuk  anorganik  100%. Hal  ini menunjukkan   bahwa hara N yang  berasal  dari Azolla  pinnata dapat  meningkatkan  bobot  kering tanaman  padi.  Menurut  Gunawan dan  Kartika  (2012),  Pemberian Azolla  meningkatkan  bobot  kering padi hingga 14,97%.

## SIMPULAN
1. Pemberian  pupuk  hayati  dan amelioran A.  pinnata terbukti
berpengaruh terhadap peningkatan populasi bakteri endofitik, kandungan N tanaman, dan bobot kering tanaman  padi  ( Oryza  sativa L.) varietas Inpari-34.
2. Pemberian  pupuk  hayati  bakteri endofitik dan amelioran A. pinnata meningkatkan  populasi
bakteri    endofitik,  kandungan  N
tanaman, dan bobot kering tanaman  padi  ( Oryza  sativa L.) sampai  kadar  salinitas  4  mmhos cm -1 .

## DAFTAR PUSTAKA
Adhikary, B.H. 2014. Green- Manuring  for  Increased  Crop Production. Nepal Agriculture Research Council (NARC)  Publication  Serial No. 0042/14. Khumatar,
Lalitpur.
Aksan, Budiyanto, M.G., dan Isnawan,  B.H.  2014.  Kajian Pemanfaatan  Kompos Azolla pinnata Guna Mereduksi Dosis Pupuk Nitrogen Anorganik  pada  Budidaya Sawi  ( Brassica  juncea L.).
Yogyakarta: Universitas Muhammadiyah Yogyakarta. Badan Pusat Statistik. 2016. Produksi Padi  Menurut  Provinsi  (ton), 1993-2015. [online]. Tersedia di  https://www.bps.go.id/link TableDinamis/view/id/865 (diakses pada 8 Juni 2016). Cramer, G.R. 2002. Sodium- Calciumm  Interactions Under Salinity  Stress.  University  of Nevada, USA: 207-209. Djukri.  2009.  Cekaman  Salinitas terhadap  Pertumbuhan  Tana- man. Prosiding Seminar Nasional  Penelitian,  Pendi- dikan  dan  Penerapan  MIPA. Yogyakarta: Universitas Negeri Yogyakarta. Gupta,  G.,  Panwar,  J.,  Akhtar,  M.S., and Jha, P.N. 2012. Endophytic  Nitrogen-Fixing Bacteria as Biofertilizer. Sustainable Agriculture Revi-
ew  11.  Springer  Dordrecht, The Netherlands: 183-221.
Jha,  Y.,  R.B.  Subramanian,  and
Suchita P. 2011. Combination of  Endophytic  and  Rhiz- ospheric Plant Growth Promoting  Rhizobacteria  in Oryza  sativa Shows  Higher Accumulation Ofosmopro-
tectant  Against  Saline  Stress.
Acta Physiol Plant (2011) 33: 789-200. Kementerian  Perdagangan.  2013. Kajian Peran Kebijakan Perdagangan  dalam  Rangka Percepatan Swasembada Pangan.  [online].  Tersedia  di http://www.Kemendag .go.id/files/pdf/2015/02/27/ka jian-peran- kebijakan.1425035964.pdf (diakses pada 19 Maret 2016).
Miliute,  Odeta,  B.,  Danas,  B.,  and
Vimantas  S.  2015.  Bacterial Endophytes  in  Agricultural
Crops  and  Their  Role  in Stress  Tolerance:  A  Review. Zemdirbyste-Agriculture,
Vol. 102(4): 465-478.
Pattanagul,  Wattana,  and  Maysaya, T.  2008.  Effect  of  Salinity Stress on Growth and Carbohydrate  Metabolism  in Three Rice ( Oriyza sativa L.)
Cultivars Differing in Salinity Tolerance.  Indian  Journal  of Experimental  Biology  Vol.
46: 736-742. Pindi,  K.P.,  and  Satyanarayana,
S.D.V. Liquid Microbial Consortium-A  Potential  Tool for  Sustainable  Soil  Health. 2012. ISSN: 2155-6202 JBFBP,  vol.  3:  1.  [online].
Tersedia  di  http://dx.doi.org
/10.4172/2155-6202.1000124
(diakses 23 Februari 2017).
Pranoto,  E.,  Gilang,  F.,  dan  Hingdri.
2014.  Isolasi  dan  Karak-
terisasi  Bakteri  Endofit  pada
Tanaman Teh ( Camellia sinensis L. O. Kuntze) Produktif dan Belum Menghasilkan  Klon  GMB  7 Dataran  Tinggi.  Biospecies Vol. 7 No.1, Januari 2014: 1.
Putri,  F.P.,  Sebayang,  H.T.,  dan Sumarni,  T.  2013.  Pengaruh Pupuk  N,  P,  K,  Azolla ( Azolla  pinnata )  dan  Kayu Apu  ( Pistia  stratiotes )  pada Pertumbuhan  dan  Hasil  Padi Sawah  ( Oryza  sativa ).  Jurnal Produksi Tanaman, Vol.1(3). Radji, M. 2005. Peranan Bioteknologi  dan  Mikroba Endofit dalam Pengembangan Obat  Herbal.  ISSN:  1693- 9883 Majalah Ilmu Kefarmasian,  Vol.  II,  No.  3, Desember 2005: 118. Rolfe,  B.G.,  and  Weinmann,  J.J. 2001.  Rice  Cultivars  and Endophytic Bacteria Towards the  Development  of  More Effective Nitrogen-Fixing Associations.  RIRDC  Publi- cation  No.  01/175  ISSN 1440-6845: 1-16.
Rosiana,  T.F.T.,  Yuwariah,  Y.,
Arifin, M., dan Simarmata, T. 2013.  Aplikasi  Kombinasi Kompos Jerami, Kompos Azolla  dan  Pupuk  Hayati untuk Mengingkatkan Jumlah Populasi  Bakteri  Penambat Nitrogen  dan  Produktivitas Tanaman Padi Berbasis IPAT-BO.  Agrovigor  Volu- me 6(1): 16-22.
Rusd, A.M.I. 2011. Pengujian Toleransi  Padi  ( Oryza sativa ) terhadap  Salinitas  pada  Fase Perkecambahan. Bogor: Institut Pertanian Bogor. Setiawati, M.R., Arif, D.H., Suryatman, A.P., dan Hudaya, R. 2008. Peningkatan  Populasi  Bakteri Endofitik, Bobot Kering Tanaman,  Serapan  N,  Bobot Gabah Kering Panen Tanaman Padi Akibat Aplikasi  Pupuk  Cair  Hayati Bakteri  Endofitik  Penambat N 2 pada  Tanaman  Padi. Jurnal Agrikultura Vol.19 (3): 10-11.
Setiawati, M.R., Suryatmana, P., and Herdiyantoro, D. 2015. Isolation and Bioassay Screening of Biofertilizer Diazotroph  Bacteria  from Paddy Field. Academic Journal  Science  ISSN:  2165- 6282 :04(03): 39.
Subowo,  Y.,  B.  2014.  Penambahan
Pupuk  Hayati  Jamur  sebagai Pendukung Pertumbuhan Tanaman  Padi  ( Oryza  sativa )
pada tanah salin. PROS SEM NAS  BIODIV  INDON  Vol. 1( 1): 150-154.
Torres-Olivar,  V.,  Oscar,  G.  V., Martha,  L.  D.,  Héctor,  S., Antonio,  R.,  Rosa,  M.M.,
Luis,  A. V. 4 and  Irán.  2014. Role of nitrogen and nutrients
in  crop  nutrition.  Journal  of Agricultural Science and Technology  B  4  (2014),  p. 30, 29-37. Wardhana,  E.M.  2006.  Azolla  Parik Mini  Nitrogen.  ATOMOS Media Informasi Ilmu Pengetahuan  dan  Teknologi Nuklir.  Badan  Tenaga  Nuklir Nasional. Tersedia di http://drive.batan.go.id/kip/do cuments/Azzola.PDF (diakses pada 1 Juni 2017).