## UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN DAN
KULIT BATANG KALANGKALA ( Litsea angulata ) ASAL

## KALIMANTAN SELATAN
Eka Fitri Susiani * , Revita Saputri Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Borneo Lestari
*Email: ekavit.apt@gmail.com
Artikel diterima: 26 November 2019; Disetujui: 10 Maret 2020 DOI: https://doi.org/10.36387/jiis.v5i1.406

## ABSTRAK
Antioksidan  memiliki  peranan  penting  dalam  menghambat  radikal  bebas pemicu  terjadinya  stress  oksidatif  sel  penyebab  berbagai  penyakit  degeneratif. Kalangkala (Litsea  angulata )  merupakan  salah  satu  tumbuhan  khas  Kalimantan yang  diduga  berpotensi  sebagai  antioksidan  alami  pencegah  stress  oksidatif. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol daun dan kulit batang kalangkala ( L.angulata ) asal Kalimantan Selatan. Pengujian aktivitas  antioksidan  dilakukan  secara  kualitatif  dan  kuantitatif  menggunakan metode DPPH. Secara kualitatif, hasil uji aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun dan  kulit  batang  kalangkala (L.angulata )  menunjukkan  adanya  bercak  kuning berlatar  ungu  pada  plat  KLT.  Hasil  kuantitatif  ekstrak  etanol  daun  kalangkala ( L.angulata )  diperoleh  nilai  IC 50 sebesar  152,39  ppm,  sedangkan  ekstrak  etanol kulit  batang  kalangkala  ( L.angulata )  diperoleh  nilai  IC 50 sebesar  85,33  ppm.
Berdasarkan  hal  tersebut  maka  dapat  disimpulkan  bahwa  daun  dan  kulit  batang tumbuhan kalangkala ( L.angulata ) memiliki aktivitas antioksidan.
Kata kunci : Kalangkala, Litsea angulata , daun, kulit batang, antioksidan

## ABSTRACT
Antioxidants have an important role in inhibiting free radicals that trigger oxidative  stress  cells  that  cause  degenerative  diseases.  Kalangkala  (Litsea angulata)  is  a  typical  plant  of  Borneo  which  may  have  antioxidant  activity.  This study  aims  to  determine  the  antioxidant  activity  of  ethanol  extract  of  leaves  and stem  bark  of  Kalangkala  (L.angulata)  from  South  Borneo.  Extracts  were investigated  for  antioxidant  activity  qualitatively  and  quantitatively  using  2,2- diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH). Qualitatively, the results of antioxidant assays from ethanol extract of leaves and stem bark showed that there were yellow spots with a purple background on the TLC plate. Quantitatively, the ethanol extract of Kalangkala leaves obtained IC 50 values of 152.39 ppm, while the ethanol extract of  Kalangkala  stem  bark  obtained  IC 50 values  of  85.33  ppm.  Thus,  it  can  be concluded  that  the  leaves  and  stem  bark  of  Kalangkala  (L.angulata)  have antioxidant activity.
Keyword: Kalangkala, Litsea angulata, leaf, stem bark, antioxidant

## PENDAHULUAN
Antioksidan  memiliki  peranan penting  dalam  menghambat  radikal bebas  di  dalam  tubuh  pemicu terjadinya stress oksidatif sel
penyebab berbagai
penyakit degeneratif.  Hal  ini  dikarenakan kemampuan  senyawa  antioksidan yang  dapat  memberikan  satu  atau lebih  atom  hidrogen  atau  elektron bebas  sehingga  dapat  menghambat reaksi  oksidasi  oleh  senyawa  radikal bebas (Lee et al., 2004). Antioksidan terdiri atas dua jenis yaitu antioksidan  alami  (antioksidan  hasil ekstraksi bahan alam) dan antioksidan sintetik (antioksidan
hasil sintesa reaksi kimia).
Antioksidan  alami  umumnya  berasal dari  tumbuh-tumbuhan  dan  tersebar di beberapa bagian tumbuhan seperti akar, kayu, kulit, daun, batang, buah, bunga, dan biji (Palupi dan Martosupono, 2009).
Kalangkala ( L.angulata )
dikenal  sebagai  tumbuhan  khas Kalimantan  dan  merupakan  salah satu  spesies  dari  genus Litsea yang diduga berpotensi sebagai antioksidan alami. Beberapa penelitian  telah  dilakukan  terhadap
genus Litsea terkait potensi antioksidan yang dimilikinya, diantaranya  penelitian  Choudhury et al. (2013)  menunjukkan  bahwa ekstrak  metanol  daun  dan  kulit  kayu dari L.  monopetala,  L.  glutinosa,  L. assamica dan L.  laeta memiliki aktivitas sebagai antioksidan.
Penelitian  lain  juga  dilakukan  oleh Hassan et al (2013) terhadap ekstrak metanol  buah L.  garciae Vidal, penelitian  ekstrak  metanol  daun L. garciae Vidal  (Andrie  dan  Idiawati,
2014)  dan  kulit  batang L.  cubeba yang  dinyatakan  memiliki  aktivitas sebagai  antioksidan  (Damanik et  al., 2016).
Penelitian  aktivitas  antioksidan ekstrak tumbuhan kalangkala ( L.angulata) belum pernah dilakukan sebelumnya, oleh sebab itu penelitian ini  dilakukan  untuk  mengetahui aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol pada  bagian  daun  dan  kulit  batang kalangkala ( L.angulata) yang berasal dari  Kalimantan  Selatan  berdasarkan aktivitas  penangkap  radikal  bebas 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl
(DPPH).  Penelitian  ini  diharapkan dapat menjadi salah satu bukti ilmiah manfaat kalangkala sebagai
antioksidan  yang  dapat  menghambat efek  negatif  dari  senyawa  radikal bebas.

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Peralatan: seperangkat alat Soxhlet, Rotary Evaporator (IKA25), lampu UV (CAMAG), Spektrofotometer UV-VIS (OPTIMA SP-3000  Nano).  Bahan:  daun  dan kulit batang kalangkala ( L.
angulata) ,  aquadest,  etanol,  metanol p.a,  etil  asetat  p.a,  DPPH  (Sigma), kuersetin  p.a,  Folin-Ciocalteu,  plat KLT silika gel 60 GF 254

## Determinasi
Determinasi tumbuhan kalangkala dilakukan di
Laboratorium  Dasar  Fakultas  MIPA Universitas Lambung Mangkurat.
Pembuatan  Ekstrak  Etanol  Daun dan  Kulit  Batang  Kalangkala  ( L.
Angulata)
Simplisia daun dan kulit batang kalangkala  ( L.angulata )  diekstraksi secara soxhletasi menggunakan
etanol  96%.  Ekstrak  yang  diperoleh
diuapkan menggunakan rotary
evaporator hingga  diperoleh  ekstrak kental.
Uji Kualitatif Aktivitas

## Antioksidan
Sebanyak  10  µl  ekstrak  etanol daun  dan  kulit  batang  kalangkala (konsentrasi 1%) ditotolkan pada plat KLT  silika  gel  60  GF 254 dan dikembangkan  dengan  fase  gerak yang  sesuai.  Penampak  bercak  yang digunakan adalah DPPH 0,2% dalam metanol.  Hasil  positif  jika  tampak zona kuning berlatar belakang ungu. Uji Kuantitatif Aktivitas

## Antioksidan
Sampel  ditambahkan  reagen DPPH  (1:1)  dalam  berbagai  varian konsentrasi,  diinkubasi  selama  30 menit  dan  dilakukan  pengukuran absorbansi  pada  panjang  gelombang 515  nm  dengan  spektrofotometer UV-VIS.  Pembanding  menggunakan Kuersetin p.a (Sigma).

## Analisis Data
Aktivitas  antioksidan  diukur sebagai persentase peredaman radikal bebas DPPH pada sampel uji. Dihitung dengan menggunakan rumus berikut:
Q  =  Persentase  peredaman  radikal bebas DPPH (%)
Ao  =  Absorbansi  larutan  DPPHAs =  Absorbansi  larutan  DPPH setelah  penambahan  Sampel uji/pembanding Data yang diperoleh dibuat persamaan  regresi  linier  dimana konsentrasi  sampel  sebagai  x  dan nilai Q sebagai y.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Determinasi
Determinasi tumbuhan kalangkala dilakukan untuk memastikan kebenaran identitas tumbuhan yang akan digunakan pada penelitian guna menghindari kesalahan pengambilan sampel. Hasil determinasi menunjukkan bahwa sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah Litsea angulata.
Pembuatan  Ekstrak  Etanol  Daun dan  Kulit  Batang  Kalangkala  ( L.
Angulata)
Tabel 1. Rendemen Ekstrak Etanol
Daun dan Kulit Batang Kalangkala Sampel Bobot Simplisia (g) Bobot Ekstrak (g) Rendemen (%) Daun 100 5,6 5,6 Kulit Batang 150 3,63 2,42
Uji Kualitatif Aktivitas Antioksidan Uji kualitatif aktivitas
antioksidan  ekstrak  etanol  daun  dan kulit  batang  kalangkala  dilakukan secara  kromatografi  lapis  tipis.  Fase gerak  yang  digunakan  sebagai  eluen untuk ekstrak etanol daun kalangkala yaitu  n-hexane:etil  asetat  (6:4), sedangkan ekstrak etanol kulit batang kalangkala menggunakan n- hexane:etil  asetat  (7:3).  Hasil  KLT dari  ekstrak  etanol  daun  dan  kulit batang  kalangkala  dapat  dilihat  pada Gambar 1.
Gambar 1. Hasil KLT Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH
Pada  uji  KLT  tersebut  tampak bercak  kuning  yang  terlihat  jelas pada  titik  penotolan  sampel  dengan latar  ungu  yang  mengindikasikan hasil  positif  untuk  uji  kualitatif antioksidan.  Penampak  bercak  yang
Daun Kulit Batang
digunakan  adalah  larutan  DPPH 0,2%  dalam  metanol.  Larutan  DPPH ini  merupakan  bentuk  DPPH  radikal yang  mempunyai  warna  ungu  yang intens.  Apabila  senyawa  ini  bereaksi dengan  antioksidan,  maka  DPPH akan  tereduksi  membentuk  DPPH-H yang lebih stabil dikarenakan adanya donor  hidrogen  dari  sampel.  Hal  ini ditandai  dengan  memudarnya  warna ungu dari DPPH menjadi ungu pudar yang  semakin  lama  menjadi  kuning atau  tidak  berwarna.  (Pratiwi et  al .,
2016). Uji Kuantitatif Aktivitas Antioksidan Uji kuantitatif aktivitas
antioksidan  ekstrak  etanol  daun  dan kulit  batang  kalangkala  dilakukan secara  spetrofotometri  UV-Vis  pada panjang  gelombang  515  nm  dan waktu  inkubasi  30  menit.  Parameter yang  digunakan  untuk  pengukuran ini yaitu nilai IC 50 . Berikut nilai IC 50 untuk  ekstrak  etanol  daun  dan  kulit batang kalangkala.
Molyneux (2003) menyebutkan bahwa  suatu  senyawa  dikatakan mempunyai aktivitas antioksidan sangat  kuat  apabila  nilai  IC 50 <  50 ppm,  kuat  apabila  IC 50 50-100  ppm,
sedang  apabila  nilai  IC 50 100-150 ppm,  lemah  apabila  nilai  IC 50 150- 200  ppm,  dan  sangat  lemah  apabila nilai  IC 50 >  200  ppm.  Berdasarkan tabel  di  atas,  aktivitas  antioksidan ekstrak  etanol  daun  kalangkala termasuk dalam kategori lemah (IC 50 152,39  ppm),  sedangkan  ekstrak etanol kulit batang kalangkala termasuk  dalam  kategori  aktivitas antioksidan  kuat  dengan  nilai  IC 50
85,33  ppm.  Semakin  kecil  nilai  IC 50 maka kemampuan antioksidan semakin  besar.  Jika  dibandingkan dengan kuersetin, aktivitas antioksidan  ekstrak  etanol  daun  dan kulit  batang  kalangkala  masih  jauh lebih kecil.
Tabel 2. Nilai IC 50 Peredaman Radikal Bebas DPPH Ekstrak Etanol
Daun dan Kulit Batang Kalangkala Sampel Nilai IC 50 (ppm) Daun 152,39 Kulit Batang 85,33 Kuersetin 5,08 Pada  skirining  fitokimia  yang
dilakukan, ekstrak etanol daun kalangkala  mengandung  senyawa tanin, flavonoid, dan saponin. Sedangkan  pada  ekstrak  etanol  kulit
batang kalangkala mengandung golongan  senyawa  saponin  dan flavonoid.  Senyawa-senyawa  inilah yang  memiliki  aktivitas  antioksidan dan  menyebabkan  penurunan  nilai absorbansi  DPPH.  Degradasi  warna DPPH  dari  warna  ungu  menjadi
warna kuning menunjukkan terjadinya penurunan absorbansi DPPH (Ikhlas, 2013).

## KESIMPULAN
Tumbuhan kalangkala ( Litsea
angulata) yang merupakan tumbuhan khas Kalimantan mempunyai
aktivitas  antioksidan.  Berdasarkan data penelitian yang diperoleh,
ekstrak etanol kulit batang kalangkala memiliki aktivitas antioksidan  kuat  jika  dibandingkan dengan ekstrak etanol daun kalangkala.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih kepada Kemenristek Dikti yang telah memberikan dukungan finansial terhadap  penelitian  ini  dalam  skema Penelitian Dosen Pemula (PDP).

## DAFTAR PUSTAKA
Andrie  R  &  Idiawati,  N.  2014. Aktivitas Antioksidan Dan
Sitotoksisitas  Ekstrak  Daun Malek  ( Litsea  garciae Vidal). Jurnal  Kimia  Khatulistiwa. 3 (4).
Choudhury,  D.,  Ghosal,  M.,  Prasad Das,  A.  dan  Mandal,  P.  2013. In  Vitro Antioxidant  Activity of  Methanolic  Leaves  and Barks  Extracts  of  Four Litsea Plants. Asian J. Plant Sci. Res.
3 (1): 99-107. Damanik,  A.W.M.,  Yuliasmi,  S.  & Nainggolan, M. 2016. Karakterisasi  dan  Uji  Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Etanol Kulit Batang Landoyung ( Litsea  cubeba (Lour.)  Pers.) dengan  Metode  DPPH  Serta Analisis Kandungan Kimianya. Skripsi. Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara. Hassan,  S.H.A.,  Fry,  J.R.  &  Bakar, M.F.A.  2013.  Antioxidant  and Phytochemical Study on Pengolaban  ( Litsea  garciae ), an  Edible  Underutilized  Fruit Endemic  to  Borneo. Food
Science  and  Biotechnology .  22
(5): 1197-1203. Ikhlas,  N.  2013.  Uji  Aktivitas Antioksidan  Ekstrak Herba Kemangi ( Ocimum americanum Linn) dengan Metode  DPPH  (2,2-Difenil-1- Pikrilhidrazil). Skripsi. Fakultas  Kedokteran  dan  Ilmu Kesehatan Program Studi Farmasi. Jakarta. Lee,  J.,  Koo,  N.,  dan  Min,  D.B. 2004. Reactive Oxigen Spesies,
Aging, and Antioxidative
Nutreceuticals. Comprehensive
Reviews  in  Food  Science  and Food Safety. 3 (1): 21-33. Molyneux,  P.  2003.  The  Use  of  The Stable Free Radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity. Songklanakarin J. Sci. Technol . 26 (02). Palupi,  I.A.,  dan  Martosupono,  M.
2009.  Buah  Merah  :  Potensi dan Manfaatnya sebagai
Antioksidan. Jurnal Tumbuhan Obat Indonesia . 2 (1).
Pratiwi,  L.,  A.  Fudholi,  R.  Martien,
&  S.  Pramono.  2016  Ekstrak
Etanol,  Ekstrak  Etil  Asetat,
Fraksi  Etil  Asetat,  dan  Fraksi n-heksana Kulit Manggis ( Garcinia mangostana L.) sebagai  Sumber  Zat  Bioaktif Penangkal Radikal Bebas. Journal of Pharmaceutical Science and Clinical Research .
1: 71-82.