# Korespondensi:  Balai  Riset  Budidaya  Ikan  Hias. Jl.  Perikanan  No.  13,  Pancoran  Mas,  Depok  16436,  Indonesia. Tel.  +  62  21  7520482 E-mail:  yaminpaada@gmail.com
Tersedia  online  di:  http://ejournal-balitbang.kkp.go.id/index.php/jra

## PERBANYAKAN TANAMAN  HIAS AIR  Microsorum  pteropus MELALUI KULTUR KANTONG SPORA  PADA BERBAGAI SUBSTRAT
Muhamad  Yamin* )# ,  Tutik  Kadarini* ) ,  dan  Lili  Sholichah* )
*) Balai Riset Budidaya Ikan Hias Jl. Perikanan No. 13, Pancoran Mas, Depok 16436
(Naskah diterima: 24 Oktober 2018; Revisi final: 11 November 2019; Disetujui publikasi: 12 November 2019)

## ABSTRAK
Produksi massal tanaman hias air pakis jawa Microsorium pteropus melalui pemotongan rhizoma terlihat kurang efisien sedangkan melalui kultur in vitro spora masih sulit dilakukan masyarakat. Salah satu pendekatan baru  dalam  perbanyakan  tanaman  M.  Pteropus  melalui  kultur  kantong  spora  telah  berhasil  dilakukan. Tujuan penelitian adalah untuk menentukan media dalam perbanyakan tanaman M. pteropus melalui kultur kantong  spora.  Potongan  daun  yang  mengandung  satu  kantong  spora  diletakkan  di  atas  media  tanam, ditutup dengan plastik transparan, dan ditaruh pada lingkungan di luar ruangan (outdoor). Media tanam yang digunakan yaitu: A) cacahan akar pakis; B) serutan kayu; C) cacahan akar pakis + serutan kayu; D) cacahan akar pakis + serutan kayu + kompos; E) pasir gunung berapi (pasir malang); F) abu sekam padi; G) pasir; dan H) tanah. Hasil penelitian menunjukkan bahwa perkembangan sporofit muda (young sporophye) sudah mulai terlihat pada bulan pertama sampai ketiga setelah tanam. Sporofit muda yang berkembang dari kantong spora yang dipelihara pada media pasir, media tanah dan media campuran serutan kayu + akar  pakis  +  kompos  menunjukkan  rata-rata  persentase  tanaman  hidup  yang  paling  tinggi  yaitu  48%. Sebaliknya sporofit muda paling sedikit berkembang pada media akar pakis, media abu sekam padi dan media  campuran  akar  pakis,  dan  serutan  kayu.  Berdasarkan  hasil  tersebut  maka  media  terbaik  untuk perbanyakan  M.  pteropus  di  luar  ruangan  melalui  kultur  kantong  spora  adalah  media  tanah  dan  media campuran akar pakis + serutan kayu + kompos.
KATA KUNCI: media tanam; Microsorum pteropus; kantong spora; sporofit muda
ABSTRACT: Propagation of ornamental aquatic plant of Microsorum pteropus through sori culture using different substrates. By: Muhamad Yamin, Tutik Kadarini, and Lili Sholichah
Mass production of Microsorum pteropus through rhizome cuttings has been deemed not efficient while the application of in vitro culture of its spores is still technically difficult to be performed by farmers. A novel approach to mass-produce M. pteropus trough sori culture has been developed and is relatively easy to perform. This study was aimed to determine a suitable propagation media for sori culture of M. pteropus. Small cut fronds containing one sorus were laid on the culture media and covered with a transparent plastic sheet and left on outdoor conditions. The culture media used were: A) fern-root; B) wood shavings; C) fern-root + wood shavings; D) fern-root + wood shavings + compost; E) volcanic sand; F) rice husk ash; G) sand; and H) soil. The results showed that young sporophytes developed in the 1 st to 3 rd month after culture. The young sporophytes developed in the sand, soil and mixture of wood shavings + fern-root + compost medium showed higher numbers of live plants (48%). In contrast, the lower numbers of live young sporophyte were found in the fern-root, rice husk ash, and mixture of fern-root + wood shavings medium.  Based on these results, the best alternative media for propagation of M. pteropus through sori culture on the outdoor conditions are soil media and the mixture of fern roots + wood shavings + compost media.
KEYWORDS: culture medium; Microsorum pteropus; sori; young sporophyte

## PENDAHULUAN
Microsorum  pteropus  atau  pakis  Jawa  (Java  fern) adalah salah satu jenis tanaman hias air yang cukup
populer  dan  banyak  dipasarkan  di  berbagai  negara (Johnburom  et  al.,  2016;  USDA,  2013).  Tanaman  ini dapat tumbuh di bawah air dan menjadi favorit untuk aquascaping karena bentuknya yang bagus dan mudah tumbuh dalam kondisi akuarium. M. pteropus memiliki daun berwarna hijau pekat dengan bentuk memanjang dan  tumbuh  dari  rimpang.  Selain  digunakan  untuk
akuascape, M. pteropus juga dilaporkan dapat berfungsi sebagai  antibakteri  (Nath  et  al.,  2016)  dan bioacumulator untuk cadmium (Lan et al., 2018). Hal ini  diduga  disebabkan  karena  tanaman  ini  memiliki kandungan alkaloid (Djorongaa et al., 2014) yaitu zat yang  mempunyai  efek  berupa  pemicu  sistem  saraf, menaikkan  tekanan  darah,  mengurangi  rasa  sakit, antimikroba,  obat  penenang,  dan  obat  penyakit jantung (Simbala, 2008).
Microsorum  pteropus,  adalah  anggota  dari  ordo Polypodiales  dan  keluarga  Polypodiaceae.  Tanaman pakis ini berasal dari dari kawasan Asia Tenggara, Cina, Jepang, Nepal, dan India (USDA, 2013). Namun saat ini tanaman ini sudah tersebar di berbagai negara di Benua  Eropa,  Amerika  Serikat,  dan  Australia (Johnburom  et  al.,  2016;  USDA,  2013).  Di  alam,  M. pteropus menyebar pada daerah dengan ketinggian 0- 800 m dari permukaan air (MDPL) yang terlindung dari cahaya  matahari.  M.  pteropus  biasanya  tumbuh  di bebatuan berlumpur dekat tepi sungai atau air terjun yang  memiliki  kelembaban  yang  relatif  tinggi  dan intensitas cahaya rendah (Kowalski, 2004; Lansdown, 2011; USDA, 2013). Tanaman M. pteropus terdiri atas beberapa varietas yang berbeda baik dalam ukuran dan bentuk daun. Di akuarium, tanaman ini tumbuh relatif lambat dan membutuhkan cahaya dan CO 2 yang relatif rendah.
Perbanyakan M. pteropus dapat dilakukan dengan cara  generatif  atau  vegetatif.  Perbanyakan  secara generatif adalah perbanyakan tanaman menggunakan spora seperti tanaman pakis lainnya. Organ reproduksi M. pteropus adalah spora yang terdapat dalam sporan- gia berkelompok membentuk kantong spora atau sori (tunggal:  sorus).  Kantong  spora  ini  terlihat  seperti bintik hitam atau coklat di bagian bawah daun dewasa (frond).  Jumlah  kantong  spora  pada  tanaman  pakis cukup  banyak,  sebagai  gambaran  pada  satu  daun Polypodium  scouleri  dapat  mengandung  sampai mendekati 700-an kantong spora (Cody, 2006). Pada kondisi  yang  memungkinkan,  sporangia  akan menghasilkan  spora  yang  berkembang  menjadi gametofit.  Selanjutnya  gametofit  akan  berkembang menjadi  zigot,  sporofit,  dan  tanaman  pakis  muda sampai menjadi pakis dewasa. Selain itu, perbanyakan dapat  dilakukan  secara  vegetatif  yaitu  dengan menggunakan  potongan  rimpang  (rhizome)  dan diletakkan pada media tanam. Namun metode vegetatif ini kurang efisien untuk produksi M. pteropus secara massal. Hal ini disebabkan karena dalam satu rimpang hanya  menghasilkan  beberapa  tanaman  sementara pertumbuhan tanaman ini relatif lambat.
Untuk mengatasi lambatnya perbanyakan tanaman M.  pteropus  melalui  potongan  rimpang,  maka  salah satu upaya yang dapat dilakukan adalah perbanyakan
tanaman  melalui  spora.  Pradissan  et  al.  (2010) melaporkan bahwa perbanyakan M. pteropus melalui spora dengan teknik in vitro telah berhasil dilakukan. Namun  sampai  saat  ini  aplikasi  perbanyakan  M. pteropus  melalui  spora  belum  banyak  dilakukan masyarakat atau dunia industri karena teknologi ini membutuhkan keterampilan khusus, biaya yang besar, dan peralatan yang mahal. Untuk mengatasi masalah tersebut,  maka  perlu  adanya  teknik  perbanyakan tanaman  M.  pteropus  melalui  spora  namun  dengan teknik yang lebih sederhana. Salah satu pendekatan yang dapat dilakukan adalah melalui kultur kantong spora.
Seperti  perbanyakan  tanaman  pakis  lainnya, perbanyakan  M.  pteropus  melalui  kantong  spora membutuhkan media dan lingkungan yang cocok dapat berkembang  menjadi  sporofit  muda.  Beberapa komponen media tumbuh yang selama ini digunakan dalam aklimatisasi dan kultur sporofit tanaman pakis di antaranya pasir kasar, kerikil, arang, lumut gambut (peat moss), gambut humus (peat humus), serasah daun (leaf mold), lumut (moss), dan pupuk kandang (Thomas & Garber, 2009; Fernández et al., 2011). Penggunaan pasir  dan  tanah  karena  merupakan  habitat  tumbuh alami  tanaman  ini  di  alam  (Lansdown,  2011). Penambahan  pupuk  bertujuan  untuk  meningkatkan nutrisi  di  media  dan  penambahan  arang  untuk meningkatkan drainase. Tidak jarang juga digunakan media  campuran  dari  bahan-bahan  tersebut  untuk mendapatkan media yang cukup subur dengan drainase yang baik (Thomas & Garber, 2009). Sebagai langkah awal  untuk  mendapatkan  media  yang  sesuai  bagi perbanyakan M. pteropus melalui kantong spora dapat dilakukan dengan mencoba beberapa komponen me- dia  yang  biasa  digunakan  sebagai  media  tumbuh tanaman pakis di atas. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan  media  terbaik  untuk  perbanyakan tanaman M. pteropus melalui kultur kantong spora.

## BAHAN DAN METODE
Kantong  spora  diperoleh  dari  daun-daun  tua tanaman air pakis Jawa M. pteropus var. Kadaka yang terdapat pada  kebun koleksi  tanaman hias  air Balai Riset Budidaya Ikan Hias (BRBIH), Depok, Jawa Barat, Indonesia  (Gambar  1).  Penelitian  dilakukan  di Laboratorium  Kultur  Tanaman  BRBIH.  Lokasi  kultur kantong spora berada di luar ruangan (out door) berada di bawah atap dan paranet 90% sehingga kantong spora tidak terkena sinar matahari langsung khususnya dari siang  sampai  sore  hari.  Percobaan  didesain  dalam rancang acak lengkap (RAL) dengan delapan perlakuan media  tanam  dan  dua  ulangan.  Masing-masing perlakuan media tanam tersebut adalah: A) cacahan akar pakis; B) cacahan serutan kayu; C) cacahan akar pakis + cacahan serutan kayu; D) cacahan akar pakis
+ cacahan serutan kayu + kompos; E) pasir gunung berapi (pasir malang); F) abu sekam padi; G) pasir; dan H) tanah.
Daun-daun dengan kantong spora yang sudah tua (matured) dipilih dari bak pemeliharaan tanaman dan dimasukkan  ke  dalam  kantong  plastik  hitam. Selanjutnya di laboratorium daun dipotong kecil-kecil (sekitar  0,5  cm  x  0,5  cm)  sehingga  masing-masing potongan  berisi  satu  buah  kantong  spora  utuh. Potongan-potongan  daun  diletakkan  di  atas  media sesuai perlakuan yang terdapat di baki plastik (lebar 10 cm x panjang 20 cm) dengan posisi kantong spora menghadap  ke  atas.  Kemudian  ditambahkan  air secukupnya namun tidak menyebabkan potongan daun tergenang  air.  Selanjutnya  wadah  ditutupi  dengan plastik transparan (plastic wrap) sehingga kedap dan air tidak mudah menguap  (Gambar 2). Pada kondisi ini kelembaban dalam wadah dapat bertahan pada 95% atau lebih. Selanjutnya wadah tersebut diletakkan di lingkungan pemeliharaan yang berada ruangan terbuka (outdoor)  di  mana  pada  bagian  atas  tempat pemeliharaan  tersebut  terlindungi  oleh  atap  dan paranet  90%.  Hal  ini  menyebabkan  kantong  spora tersebut hanya terkena sinar matahari langsung dari pagi sampai  siang sebelum pukul  12.00. Sementara pada  siang  sampai  sore  hari  wadah  akan  ternaungi dari  sinar  matahari  langsung.  Penelitian  dilakukan selama tiga bulan dan penambahan air dilakukan hanya ada media terlihat kekuarangan air. Sampling dilakukan setiap  bulan  sekali  dengan  parameter  yang  diamati adalah jumlah sporofit muda yang berkembang dari kantong  spora.  Analisis  data  jumlah  sporofit  yang berkembang menggunakan ANOVA faktor tunggal (one way anova), dan dilanjutkan Uji Tukey menggunakan software  MINITAB.
Kondisi pemeliharaan yang berada di luar ruangan menyebabkan adanya fluktuasi suhu, kelembaban, dan intensitas cahaya harian seperti pada siang dan malam atau akibat perubahan cuaca seperti cerah, mendung atau hujan. Secara umum suhu dan intensitas cahaya mengalami  peningkatan  dari  pagi  hingga  mencapai puncak pada siang hari dan kemudian menurun sampai sore  dan  malam  hari.  Untuk  menghindari  fluktuasi tersebut maka wadah kultur kantong spora M. pteropus ditutup dengan plastik wrap hingga cukup kedap dan diletakkan  pada  tempat  yang  terlindung  dari  sinar matahari langsung. Pada kondisi ini, kondisi lingkungan di sekitar kantong spora dapat lebih terkontrol. Untuk mendapat  gambaran  kondisi  ruangan  pemeliharaan dilakukan  pengukuran  suhu,  kelembaban,  dan intensitas cahaya di lokasi pemeliharaan pada siang hari.  Gambaran  kondisi  lingkungan  pemeliharaan kantong spora kadaka ditampilkan pada Tabel 1. Dari Tabel  1  terlihat  kisaran  suhu  udara  di  lingkungan pemeliharaaan adalah 24,0°C-35,9°C; dengan kadar air berkisar  adalah  52%-99%,  dan  intensitas  cahaya mencapai 8.500 lux pada siang hari di bawah naungan paranet.

## HASIL DAN BAHASAN

## Pembentukan  Sporofit
Persentase sporofit muda yang berkembang dari kantong spora pada berbagai media setelah tiga bulan pemeliharaan ditampilkan pada Gambar 3. Dari Gambar 3, terlihat bahwa perkembangan sporofit muda dari kantong spora mulai terjadi pada bulan pertama namun dengan persentase yang berbeda antara media. Pada umumnya  perkembangan sporofit  muda  mengalami peningkatan  seiring  dengan  bertambahnya  waktu
Gambar 1. Tanaman  air  pakis  Jawa,  Microsorum  pteropus  var.  Kadaka;  tanaman  koleksi  M.  pteropus di BRBIH (a); daun M. pteropus yang mengandung kantong spora (b).
Figure 1. Aquatic Java fern, Microsorium pteropus var.  Kadaka; M. pteropus collection plant  at BRBIH (a); a leave of M. pteropus containing sori (b).
(a)                                                   (b)
pemeliharaan  (sampai  bulan  ke-3)  khususnya  pada media serutan kayu + pakis + pupuk, media tanah, media pasir malang, dan media pasir biasa. Sebaliknya perkembangan sporofit mengalami  penurunan yang berarti pada media abu sekam padi di mana pada bulan pertama mencapai 25% namun terus berkurang pada bulan kedua dan ketiga hingga tinggal tersisa 5%.
Pada  akhir  pengamatan  diperoleh  bahwa perkembangan  sporofit  paling  besar  terdapat  pada perlakuan media serutan kayu + pakis + kompos (48%) dan  media  tanah  (48%),  disusul  media  pasir  malang (43%), dan pasir biasa (35%). Sebaliknya paling sedikit sporofit yang berkembang dari perlakuan abu sekam padi (5%), serutan kayu +  akar pakis (5%), dan akar pakis  (8%).  Namun  demikian  hasil  uji  lanjut menunjukkan tidak adanya perbedaan yang signifikan (P>0,05) dari masing-masing perlakuan (Gambar 4).
Secara  umum,  sporofit  muda  M.  pteropus  mulai berkembang  dari  kantong  spora  setelah  satu  bulan setelah pemeliharaan. Setidaknya ditemukan satu atau dua sporofit tumbuh di sebagian besar media setelah satu bulan pemeliharaan. Bila dibandingkan dengan kultur spora, perkembangan sporofit muda M. pteropus dari kultur kantong spora terlihat lebih cepat. Goller & Rybczynski (2007) melaporkan bahwa rata-rata lama waktu pembentuan sporofit muda dari spora dari tiga jenis pakis yang dicobakan adalah germination selama 4-16 minggu, gametophye selama 14-20 minggu, dan sporofit  selama  4-14  bulan.  Sementara  Luna  et  al. (2016) melaporkan bahwa untuk germination tanaman pakis  Anogramma  chaerophylla  dari  spora membutuhkan waktu selama dua minggu.
Persentase  terbentuknya  sporofit  muda  dari kantong  spora  yang  terdapat  di  potongan  daun
Gambar 2. Metode perbanyakan pakis Jawa M. pteropus var. Kadaka melalui kultur kantong spora.
Figure 2. Propagation  method  of  aquatic  Java  fern,  M.  pteropus  var.  Kadaka,  through  sori culture.
Parameter (Parameters )
Nilai
Value Suhu/Temperature  (°C) 24.0-35.9 Kadar air/Moisture content  (%) 52-99 Intensitas cahaya/Light intensity  (lux) 2,700-8,500
Tabel 1. Suhu, kadar air, intensitas cahaya di lokasi pemeliharaan Table 1. Temperature, moisture content, light intensity in culture location
ditentukan  oleh  kondisi  lingkungan  dan  media pemeliharaan  (Gambar  5).  Lebih  lanjut  Goller  & Rybczyñski (2007) menyatakan bahwa faktor pembatas dalam kultur tanaman pakis adalah intensitas cahaya, lama penyinaran (photoperiod), kelembaban udara, dan
media tanam. Hasil uji coba perbanyakan tanaman M. pterpous melalui kultur kantong spora menunjukkan bahwa sporofit yang berkembang dari kantong spora pada  kondisi  pemeliharaan  di  luar  ruangan  baru mencapai 48%. Masih rendahnya persentase sporofit
Keterangan (Note): FR= pakis (fern root); Sa= pasir biasa (sand); VS= pasir malang (vulcano sand); WS= serutan kayu (wood shaving); C= kompos (compost); So= tanah (soil); RHA= sekam (rice husk ash)
Gambar 3. Kecenderungan perkembangan sporofit muda M. pteropus pada berbagai media tanam selama penelitian.
Figure 3. Growth trend of young sporophyte of M. pteropus in treated media during the experiment.
Gambar 4. Persentase  sporofit  muda  M.  pteropus  yang  berkembang  pada  berbagai  media tanam setelah tiga bulan pemeliharaan.
Figure 4. Percentage of young sporophyte of M. pteropus gown in treated media after three months culture.
Keterangan (Note): FR= pakis (fern root); Sa= pasir biasa (sand); VS= pasir malang
(vulcano sand); WS= serutan kayu (wood shaving); C= kompos (compost); So= tanah (soil); RHA= sekam (rice husk ash)
0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 1 2 3 Pe rs en ta se s po ro fi t m u da Pe rc en ta ge o f yo un g s po ro ph yt e Bulan (Months) FR Sa VS WS WS + FR WS + FR + C So RHA a a a a a a a a 0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% Sa So VS WS WS+FR FR RHA WS+FR+C Pr es en ta se s p o rp fi t m u d a Pe rc en ta ge o f yo un g sp or op hy te
Media tanam (Culture medium)
yang  berkembang  dari  kantong  spora  ini  diduga dipengaruhi oleh tinggi dan berfluktuasinya intensitas cahaya dan suhu selama pemeliharaan. Setiap tanaman memiliki  respons  terhadap  cahaya  yang  berbeda  di mana  ada  membutuhkan  kondisi  cahaya  minim, sedang, dan berlebih. Demikian pula tanaman pakis membutuhkan  cahaya  mulai  dari  proses perkecambahan sampai tanaman dewasa baik dalam dalam proses metabolisme maupun fotosintesis. Pada penelitian ini, kantong spora terpapar cahaya matahari langsung  dari  pagi  sampai  menjelang  tengah  hari dengan intensitas yang cukup tinggi (sampai dengan
8.500 lux). Intensitas cahaya yang berlebihan dari yang dibutuhkan  dapat  menjadi  faktor  pembatas  pada tanaman. Bahkan pada cahaya yang kuat dapat merusak enzim  akibat  foto-oksidasi  sehingga  menganggu proses  metabolisme  seperti  dalam  sintesis  protein (Linda,  2007).  Adanya  pengaruh  cahaya  pada perkembangan  sporofit  pakis  juga  telah  dilaporkan pada  beberapa  studi  sebelumnya.  Wada  (2007) menyatakan bahwa cahaya memiliki peran penting pada perkecambahan (germination) spora pakis dan dormansi kebanyakan tanaman pakis. Sementara pembentukan sporofit dari spora Pteridium esculentum dan Adiantum
Gambar 5. Sporofit muda M. pterupus pada tiga bulan pemeliharaan pada media yang berbeda; A= media pasir; B= media pasir gunung berapi; C= media tanah;
D=  media  campuran  akar  pakis  +  serutan  kayu  +  kompos;  E=  media serutan kayu. Figure 5. Young sporophyte of M. pterupus after three months culture in different media;
A= sand medium; B= vulcano sand medium; C= soil medium; D= mixture of fern root + wood shaving + compost medium; E= wood shaving medium.
A

## B                                                                                 C
D                                                                                E
reniforme  var.  Sinense  dipengaruhi  oleh  fase  gelap, intensitas cahaya, dan  fluktuasi cahaya (Willyams  & Daws, 2014; Hua et al., 2010).
Di  samping  cahaya,  perkembangan  sporofit  dari kantong  spora  ini  mungkin  juga  dipengaruhi  oleh fluktuasi dan tingginya suhu lingkungan pemeliharaan (24°C-36°C).  Adanya  pengaruh  suhu  pada  germinasi tanaman pakis juga telah dilaporkan. Fluktuasi suhu (20°C-30°C) dilaporkan dapat menghambat germinasi tanaman  pakis  Tectaria  heracleifolia,  T.  incisa,  T. mexicana, dan T. transiens (Pe’rez-Garcý´a et al., 2007). Suhu  sendiri  berperanan  penting  dalam mempertahankan viabilitas spora (Whittier, 1990).
Selain kondisi lingkungan, media tanam berperanan penting pada pembentukan sporofit tanaman pakis di mana media berperanan penting dalam memasok air dan nutrisi yang diperlukan untuk germinasi spora dan perkembangan  sporofit  (Camloh,  1999;  Dyer,  1979; Fernández et al., 1997; Higuchi et al., 1987; Khoo & Thomas,  1980;  Mohr,  1963).  Dari  hasil  analisis didapatkan bahwa respons pembentukan sporofit M. pteropus terlihat berbeda antar media yang diujikan. Dari  semua  media  yang  diujikan,  media  tanah,  dan media campuran akar pakis + serutan kayu + kompos terlihat memberikan hasil yang paling baik. Sebaliknya media abu sekam padi, media akar pakis, dan media campuran  serutan  kayu  dan akar  pakis  adalah  yang paling  sedikit  menghasilkan  pembentukan  sporofit muda  M.  pteropus.  Rendahnya  sporofit  muda  yang berkembang pada media akar pakis, media abu sekam padi, dan media campuran serutan kayu dan akar pakis diduga  karena  media  ini  kurang  baik  dalam menyediakan air dan nutrisi bagi sporofit muda. Hal ini terlihat pada permukaan dari ketiga media ini yang terlihat  lebih  kering  dibandingkan  media  lain. Sebaliknya tingginya sporofit yang berkembang pada media tanah dan media campuran akar pakis + serutan kayu + kompos diduga karena media ini lebih baik dalam  menyediakan  air untuk  menjaga  kelembaban kantong spora dan menyediakan nutrisi bagi sporofit muda untuk berkembang. Lebih baiknya perkembangan sporofit  pada  media  tanah  diduga  karena  tanah merupakan  habitat  asli  di  mana  tanaman  ini  biasa tumbuh.  Menurut  Lansdown  (2011),  bahwa  habitat alami tanaman M. pteropus yaitu gundukan tanah di pinggiran  sungai  kecil  atau  di  batuan  basah  yang tergenang air atau terkena percikan air yang terlindung dari sinar matahari langsung. Hasil ini sesuai dengan Hua et al. (2010) yang melaporkan bahwa media tanah dan  pasir  baik  dalam  sporofit  pakis  karena  dapat menyediakan air untuk pembentukan sporofit untuk tumbuh.  Sementara  tingginya  presentase  sporofit muda pada media campuran akar pakis + serutan kayu +  kompos  diduga  karena  media  ini  memiliki
kemampuan  yang  baik  dalam  menyediakan  air  dan nutrisi  bagi  sporofit  di  samping  drainase  yang  baik. Nampaknya tanaman M. pteropus seperti tanaman pakis pada  umumnya  menyukai  kelembaban  udara  yang tinggi (Thomas & Garber, 2009) di mana kelembaban merupakan  salah  satu  faktor  penting  untuk perkembangan sporofit (Mikula et al., 2015).

## KESIMPULAN
Media  terbaik  untuk  perbanyakan  M.  pteropus melalui kultur kantong spora adalah media tanah, dan media  campuran  akar  pakis  +  serutan  kayu  + kompos.  Sebaliknya  media  akar  pakis,  media  arang sekam padi dan media campuran serutan kayu + akar pakis kurang baik untuk mengembangkan sporofit dari kantong spora. Melalui kultur kantong spora, sporofit muda M. pteropus mulai berkembang setelah satu bulan pemeliharaan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Para  penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada Bapak  Nian  untuk  membantu  selama  pelaksanaan penelitian. Penelitian ini dibiayai oleh APBN.

## DAFTAR  ACUAN
Camloh, M. (1999). Spore age and sterilization affects germination and early gametophytedev elopment of  Platycerium  bifurcatum.  Am.  Fern.  J.,  89, 124-132.
Cody,  M.L.  (2006).  Plants  on  islands:  Diversity  and dynamics on a continental archipelago. California: University of California Press, 259 pp.
Djorongaa, M.I.,  Pandiangana, D.,  Kandoua, F.E.F.,  & Tangapoa,  A.M.  (2014).  Penapisan  alkaloid  pada tumbuhan paku dari Halmahera Utara. Jurnal Mipa Unsrat Online, 3(2), 102-107.
Dyer,  A.F. (1979).  The  culture  of fern  gametophytes for experimental investigation. In Dyer, A.F. (Ed.). The experimental biology of ferns. London: Academic Press.
Fernández,  H.,  Bertrand,  A.M.,  &  Sáchez-Tamés,  R. (1997).  Gemmation  in  Osmunda  regalis  L.  game- tophyte  cultured  in  vitro.  Plant  Cell  Rep.,  16, 358-362.
Fernández,  H.,  Kumar,  A.,  &  Revilla,  M.A.  (2011). Working with ferns. New York, Dordrecht, Heidel- berg, London: Springer.
Goller & Rybczyñski. (2007). Gametophyte and sporo- phyte of tree ferns in vitro culture. Acta Societatis Botanicorum Poloniae, 76(3), 193-199.
Higuchi,  H.,  Amaki,  W.,  &  Suzuki,  S.  (1987).  In  vitro propagation of Nephrolepis cordifolia. Prsel.  Sci. Hortic., 32, 105-113.
Hua,  W.,  Qun,  L.X.,  Hua,  J.,  &  Qing,  C.L.  (2010).
Effects of light, macronutrients, and sucrose on germination and development of the endangered fern Adiantum reniforme var. sinense (Adiantaceae). Scientia Horticulturae, 125, 417-421.
Johnburom, A., Thenahom, A.A., & Jaruwattanaphan,
T.  (2016).  A  survey  of  pteridophytes  use  for aquatic  ornamental  plants  in  Thailand. Songklanakarin  Journal  of  Plant  Science,  3(II), M01/1-9.
Khoo,  S.I.  &  Thomas,  M.B.  (1980).  Studies  on  the germination of fern spores. Plant Propagator, 26(2), 11-15.
Kowalski, E. (2004). Husbandry and breeding of the narrow-striped  dwarf  siren  (Pseudobranchus axanthus).  Caudata.  Org.  Magazine,  Issue  1, Autumn 2004.
Lansdown, R.V. (2011). Microsorum pteropus. The IUCN Red  List  of  Threatened  species  2011: e.T199682A9116734.  http://dx.doi.org/10.2305/ IUCN.UK. 2011-2.RLTS.T199682A9116734.en.
Lan, X.Y., Yang, B., Yan, Y.Y., Li, X.Y., & Xu, F.L. (2018).
Resistance  mechanisms  and  their  difference between the root and leaf of Microsorum pteropus: A  novel potential  aquatic  cadmium hyperaccumulator. Science of the Total Environment, 616-617, 480-490.
Linda,  R.  (2007).  Pengaruh  cahaya  terhadap perkembangan tumbuhan. Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universi- tas Tanjungpura, Pontianak.
Luna,  M.L.,  Yañez,  A.,  Giacosa,  J.P  R.,  Gorrer,  D., Berrueta, P.C., & Gabriela, E. (2016). In vitro spore culture and reproductive aspects of the annual fern Anogramma  chaerophylla  (Pteridaceae).  Boletin  de la Sociedad Argentina de Botanica, 51(4), 675-682.
MikuLa, A., Tomiczak, K., Makowski, D., Niedzielski, M., & Rybczyñski, J.J. (2015). The effect of mois- ture content and temperature on spore aging in Osmunda  regalis.  Acta  Physiologiae  Plantarum, 37, 229.
Mohr, H. (1963). The influence of visible radiation on the germination of archegoniate spores and the growth  of  the fern  protonema.  Botanical  Journal of the Linnean Society, 58, 287-296.
Nath,  K.,  Bhattacharya,  M.K., &  Kar,  S.  (2016).  Anti- bacterial activity of rhizome extracts of four pteri- dophytes  from  Southern  Assam,  North  East  In- dia. Asian Journal of Phytomedicine and Clinical Re- search, 4(1), 1-5.
Pe´rez-Garcý´a,  B.,  Mendoza-Ruiza,  A.,  Sa´nchez- Coronado,  M.E.,  &  Orozco-Segovia,  A.  (2007). Effect  of  light  and  temperature  on  germination of  spores  of  four  tropical  fern  species. Actaoecologica, 32, 172-179.
Pradissan,  R.,  Pongchawee,  K.,  &  Pipatcharoenchai,
W.  (2010).  In  vitro  multiplication  of  Microsorium pteropus  (Blume)  Ching,  1933.  Inland  Fisheries Research and Development  Bureau. Department of  Fisheries.  Ministry  of  Agriculture  and  Coo- peratives. Thailand. Technical Paper No. 27/2010.
Simbala,  H.E.I.  (2008).  Analisis  senyawa  alkaloid beberapa jenis tumbuhan obat sebagai bahan aktif fitofarmaka. Jurnal Pacific, 1(1), 489-494.
Thomas,  P.A.  &  Garber,  M.P.  (2009).  Growing  ferns, Bulletin 737, Learning for Live. The University of Georgia and Ft. Valley State University, The United State. Department of Agriculture and counties of the state cooperating. p. 1-14.
USDA.  (2013).  Weed  risk  assessment  for  Leptochilus pteropus (Blume) Fraser-Jenk. (Polypodiaceae)-Java fern.  http://www.aphis.usda.gov/plant_health/ p l a n t _ p e s t _ i n f o / w e e d s / d o w n l o a d s / w r a / Leptochilus_pteropus_WRA.pdf.
Wada, M. (2007). The fern as a model system to study photomorphogenesis.  Journal  of  Plant  Research, 120, 3-16.
Whittier,  P.  (1990).  Factors  affecting  the  viability  of Psilotum  spores.  American  Fern  Journal,  80(3), 90-96.
Willyams, D. & Daws, M.I. (2014). Mass propagation of austral bracken fern (Pteridium esculentum) sporo- phytes from in vitro gametophyte cultures. South African  Journal.