KARAKTERISASI FISIOLOGIS ISOLAT BAKTERI HALOFILIK DARI KOLAM PEMINIHAN TAMBAK GARAM RAKYAT DI KABUPATEN PAMEKASAN

## PHYSIOLOGICAL CHARACTERISTICS OF HALOPHILIC ISOLATES FROM PURIFICATION WATER OF
TRADITIONAL SALT POND, PAMEKASAN REGENCY
Kartika Dewi*, Eka Nurrahema Ning Asih, Dewi Anugrah Fitri, Sri Astutik
Program Studi Ilmu Kelautan, Fakultas Pertanian, Universitas Trunojoyo Madura Jl. Raya Telang-Kamal, Bangkalan, Jawa Timur 69162 Indonesia
*Corresponding author, e-mail: kartika.dewi@trunojoyo.ac.id
Submitted: 04 October 2022 / Revised: 04 November 2022 / Accepted: 04 November 2022
http://doi.org/10.21107/juvenil.v3i3.17074

## ABSTRAK
Kelompok  bakteri  slight  halofilik  dapat  ditemukan  di  air  laut  pada  kolam  peminihan  yang  menjadi bahan  baku  utama  dalam  pembuatan  garam  di  Pamekasan-Madura.  Tujuan  penelitian  ini  adalah untuk  mengetahui  karakteristik  biokimia  isolat  bakteri  halofilik  yang  di  isolasi  dari  kolam  peminihan pada tambak garam rakyat di Pamekasan-Madura. Metode yang digunakan dalam penelitian ini yaitu pengujian  biokimia  bakteri  halofilik  meliputi  pewarnaan  Gram,  uji  indol,  katalase,  dan  oksidase,  uji metil red, uji Voges Proskauer, asimilasi citrat, dan uji pemanfaatan sumber karbon. 3 isolat berhasil ditumbuhkan  dalam  media  padat  halophile  menggunakan  kadar  garam  sebesar  1%  dengan  kode P.P.1, P.P.2 dan P.P.3. Hasil uji indol ketiga isolat bakteri halofilik P.1, P.2 dan P3 menunjukkan hasil uji indol negatif.  Sumber karbon yang digunakan bakteri tersebut diantaranya glukosa, sukrosa dan mallosa  dengan  uji  O/F,  fermentative  untuk  isolat  P.P.1  dan  P.P.3  sedangkan  non  fermentatif  untuk isolate P.P.2. Uji MR-VP menunjukkan hasil negatif untuk ke tiga isolat tersebut. Uji katalase dan uji oksidasi  masing-masing  isolat  menunjukkan  hasil  positif,  sehingga  isolat  P.P.1,  P.P.2  dan  P.P.3 termasuk bakteri aerob.

## Kata kunci: slight halofilik, kolam peminihan, uji biokimia

## ABSTRACT
A diverse group of slight halophilic bacteria can be found in saline enviroment such purification water of  traditional  salt  production  Pamekasan-Madura.  The  aim  of  this  study  was  biochemical characterization of the halophilic bacteria isolated from traditional salt pond Pamekasan- Madura. The biochemical characterization were done using standart methodes which included indole test, catalase and  oxidase  activities,  methyl  red  test,  Voges-Proskauer  (VP) test,  citrate  utilization  test  and carbohydrates  utilisation  .  3  isolates,  P.P.1,  P.P.2  and  P.P.3  were  successfully  grown  in  halophile agar  plates  containing  1%  of  total  salt.  All  of  these  isolates  were  negative for  indole  production  and MR-VP test, but were positive for catalase and oxidase activities.  The carbon sources used by these isolates included glucose, sucrose and mallose with the O/F test was fermentative for P.P.1 and P.P.3 while non-fermentative for P.P.2. All of these isolates were identified as aerob bacteria.
Keyword: slight halophilic, purification water, biochemical characterization

## PENDAHULUAN
Luas wilayah laut Indonesia mencapai 3.257.357  km²  (Saksono,  2013)  memiliki sumberdaya  hayati  berupa  air  laut  dan keanekaragaman  mikroba  yang  melimpah salah  satunya  bakteri  halofilik.  Air  laut mengandung 3,5% mineral garam diantaranya klorida,  natrium,  sulfat,  magnesium  dan kalsium  (Burhan et  al., 2021).  Bakteri  halofilik
merupakan bakteri yang membutuhkan mineral garam yang terkandung dalam air laut untuk hidup secara optimal (Davis, 2006).Bakteri  halofilik  merupakan  kelompok bakteri unik yang hidup pada perairan dengan salinitas  tertentu.  Bakteri  ini  yang  tergolong dalam mikroorganisme domain archaebacteria merupakan mikroorganisme
yang membutuhkan kondisi salin untuk hidup (Pooja dan Gopal, 2011). Bakteri halofilik
diklasifikasikan  tiga  kelompok  meliputi  halofil rendah, halofil sedang dan halofil ekstrim (Das Sarma, 2001). Pengelompokan bakteri halofilik berdasarkan  kemampuan  untuk  beradaptasi dalam  air  laut  khususnya  pada  kadar  NaCl tertentu  diantaranya  kelompok  halofil  rendah dengan  1-3%  kadar  garam,  halofil  sedang  3- 15%  kadar  garam  dan  halofil  ekstrim  dengan kadar  garam  15-30%  (Gaffney et  al .,  2021). Kemampuan  bakteri  halofilik  yang  mampu bertahan  hidup  di  kondisi  perairan saline diprediksi bahwa kelompok bakteri ini memiliki karakter  dan  sifat  biokimia  yang  unik dibandingkan kelompok bakteri lainnya.
Sumberdaya  air  laut  yang  melimpah  di Indonesia khususnya di Kabupaten Pamekasan-Madura  menjadi  peluang  besar untuk  mendapatkan  sediaan  bakteri  halofilik. Beberapa hasil penelitian menunjukkan bahwa bakteri  ini  memiliki  potensi  besar  untuk dimanfaatkan  di  bidang  bioteknologi  dan peningkatan kualitas pangan khususnya garam.  Keberadaan bakteri halofilik di tambak garam  dapat  membantu  mempercepat  proses pembentukan  kristal  garam  (Javor,  2002). Bakteri ini juga mampu dijadikan sebagai agen biokatalisator  untuk  meningkatkan  kualitas dengan  kandungan  NaCl  98,116%  dan produktivitas  lahan  84  ton  garam/Ha/musim (Marihati et  al .,  2014).  Pigmen  merah  yang dihasilkan bakteri ini juga mampu memproduksi  senyawa  NaCl  pada  garam dengan  tingkat  kemurnian  tinggi  >94%  (Oren, 2010).  Pemanfaatan  bakteri  halofilik  di  bidang bioteknologi dapat digunakan untuk meningkatkan  produksi  biosurfaktan  skala laboratorium  (Yuliana et  al .,  2019).  Bakteri  ini juga memiliki kemampuan untuk mendegradasi  limbah  industri  pemindangan ikan  yang  optimal  selama  6  hari  (Nilawati et al ., 2015).
Pemanfaatan  dan  pengujian  bakteri  halofilik sebagai  agen  biologis  di  beberapa  bidang telah dilakukan di beberapa lokasi di Indonesia, namun pemanfaatan bakteri halofilik  dari  perairan  Pamekasan  Madura belum  pernah  dilakukan  khususnya  bakteri halofilik rendah. Kabupaten Pamekasan merupakan  salah  satu  kabupaten  penghasil garam  di  pulau  Madura  yang  terpusat  di Kecamatan  Galis,  Pademawu  dan  Tlanakan (Efendy et  al .,  2014).  Air  laut  sebagai  bahan produksi garam umumnya memiliki biodiversitas  bakteri  halofilik  rendah  cukup tinggi  dan  bersifat  unik.  Hasil  penelitian
Agustina et al ., (2022) menunjukkan bahwa air baku  dan  air  bouzem  untuk  produksi  garam memiliki  kelompok  bakteri  halofilik  rendah yang mudah untuk di isolasi dan menghasilkan pigmen  putih  tulang.  Secara  umum  bakteri halofilik rendah yang diamati dan di teliti belum dilakukan  proses  karakterisasi  dan  pengujian biokimia  bakteri.  Pengujian  karakterisasi  dan uji  biokimia  bakteri  halofilik  rendah  perlu dilakukan untuk mendapatkan informasi tentang  sifat-sifat  fisiologis  koloni  bakteri halofilik rendah hasil isolasi tersebut. Informasi sifat  fisiologi  ini  merupakan  informasi  awal yang  dapat  digunakan  sebagai  rujukan  dan dasar  jenis  bakteri  halofilik  rendah indigenous khususnya  dari  perairan  Pamekasan.  Tujuan penelitian  ini  adalah  mengidentifikasi  karakter dan  sifat-sifat  fisiologis  koloni  bakteri  halofilik rendah ( slight halophilic ) dari perairan kabupaten  Pamekasan.  Data  hasil  penelitian diharapkan  dapat  dijadikan  rujukan  dan informasi  awal  terkait  karakter  dan  sifat fisiologis bakteri halofilik rendah yang kedepannya dapat dimanfaatkan dan dikembangkan  untuk  keperluan  bioteknologi lanjutan.

## MATERI DAN METODE
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  Bulan  April Tahun  2022.  Pengambilan  data  dilakukan dengan metode eksperimental di Laboratorium Bioteknologi Laut, Fakultas Pertanian, Universitas Trunojoyo Madura. Sampel air laut dari kolam peminihan tambak garam sebanyak 10  ml  diperoleh  dari  Tambak  Garam  Rakyat, Desa Tanjung, kecamatan Pademawu, Pamekasan (Gambar 1) dengan titik koordinat -7,230603, 113,537369 Air Peminihan. Sampel air  peminihan  (kode  isolat  P)  dimasukkan  ke dalam  tabung  ulir  dan  disimpan  di  dalam  cool box yang  berisi  es.  Sampel  kemudian  dibawa ke  laboratorium  untuk  penelitian  lebih  lanjut. Bahan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini adalah,  bahan  pembuatan  media  isolasi bakteri  halofilik  yang  terdiri  dari  TSB  agar, NaCl, MgSO4, KCl, MgCl 2 , air suling Aquades dan  bahan-bahan  untuk  uji  biokimia  yaitu alkohol  70%  ,  senyawa  kovacks,  pereaksi oksidasi,  reagen  H 2 O2  medium  MR,  medium VP, medium urea, medium acid, medium sitrat, medium  glukosa,  laktosa,  sukrosa,  maltose. Alat  yang  digunakan  adalah  autoclave,  cawan petri,  jarum  ose,  bunsen,  erlenmeyer  tabung reaksi,  tabung  durham,  spreader,  vortex, mikropipet dan microtip.
Gambar 1 . Peta Lokasi Penelitian

## Karakterisasi Bakteri Halofilik
Air  laut  dari  kolam  peminihan  diambil sebanyak  1  ml  untuk  dijadikan  sampel  seri pengeceran  10 -1 hingga  10- 5 ,  kemudian ditanam dalam media slight halophiles dengan kadar  garam  sebesar  1%.  Media  diinkubasi selama  48  jam,  kemudian  setelah  48  jam cawan  petri  dipantau  pertumbuhan  koloninya. Koloni  yang  tumbuh  pada  media slight halophile dipilih berdasarkan perbedaan morfologi  dan  warna  kemudian  diinokulasikan ke  dalam  media  baru  dengan  metode  streak quadran, selanjutnya dilakukan purifikasi hingga  didapatkan  koloni  tunggal  bakteri halofilik untuk dipelajari karakteristik biokimianya. Karakterisasi biokimia dari bakteri meliputi  pewarnaan  Gram,  uji  indol,  katalase, dan  oksidase,  uji  metil  red,  uji  Voges Proskauer, asimilasi citrat, dan uji
pemanfaatan sumber karbon dengan mengikuti metode standar (Colome, 2001).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Isolat bakteri halofilik
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  lanjutan dari  karakterisasi  morfologi  bakteri  halofilik pada  air  produksi  garam  tradisional  (Dewi, et al ., 2022) , pada kolam peminihan didapatkan 3 isolat  bakteri  halofilik dari  seri  pengeceran  ke- 5  dan  6  dari  sampel  air  laut  kolam  peminihan tambak  garam  yaitu  P.P.1,  P.P2  dan  P.P.3. Hasil  pengeceran  disebarkan  pada  media padat slight  halophiles dan  diinkubasi  selama 48  jam  pada  suhu  28-30 0 .  Hasil  karakteristik morfologi  dari  isolat  P.P.1,  P.P2  dan  P.P.3 berdasarkan  Dewi et  al., (2022)  tersaji  pada Tabel 1 .
Tabel 1. Karakteristik Morfologi Isolat Bakteri Halofilik Air Peminihan Karakteristik Isolat Bakteri Halofilik P.P.1 P.P.2 P.P.3 Warna dan Opacity Putih tulang, tidak transparan Putih tulang, transparan Putih kekuningan, tidak transparan Bentuk Circular Filamentous Irregular Margin Entire Filiform Undulate Elevasi Raised Flat Raised Permukaan Halus Halus Halus
Keterangan: P= Air Peminihan (Sumber: Dewi et al ., 2022)
Bakteri  yang  tumbuh  di  media  halofilik  berisi 1%  kadar  garam  membuktikan  bahwa  bakteri tersebut  merupakan  kelompok  bakteri  halofilik rendah.    Bakteri  halofilik  merupakan  bakteri yang membutuhkan garam untuk hidup secara optimal  (Davis,  2006).    Bakteri  halofilik diklasifikasikan menjadi tiga kelompok berdasarkan  tingkat  kebutuhan  kadar  garam, yaitu  halofil  rendah  dengan  1-3%,  halofil sedang  3-15%  dan  halofil  ekstrim  dengan kadar  garam  15-30%  (Gaffney et  al .,  2021). Berdasarkan konsentrasi garam yang digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  berkisar 1% maka, isolat  bakteri  P.P1.  P.P2,  dan  P.P3 termasuk  kedalam  kelompok  bakteri  halofilik rendah ( slight halophiles ).
Identifikasi  bakteri  meliputi  deskripsi  sifat morfologi dan sifat fisiologis bakteri (Liempepas,  2019).  Bakteri  halofilik  rendah sebagai  bakteri  unik  memiliki  kemampuan mempertahankan  konsistensi  dinding  sel terhadap  tekanan  senyawa  mineral  garam pada  air  laut.  Karakter  unik  ini  perlu  diuji  dan diamati  dengan  menggukan  uji  biokimia bakteri  halofilik.  Uji  biokimia  merupakan  uji yang  dilakukan  untuk  melihat  sifat-sifat fisiologis  koloni  bakteri  hasil  isolasi.  Biokimia bakteri berhubungan dengan proses metabolisme  sel  bakteri  (Gobbetti,  2005). Informasi sifat fisiologis ini merupakan informasi  awal  yang  dapat  digunakan  sebagai rujukan  dan  dasar  jenis  bakteri  halofilik indigenous
khususnya dari perairan
Pamekasan.
Tabel 2 . Karakteristik biokimia bakteri halofilik air peminihan tambak garam Karakterisasi Biokimia Hasil Isolat P.P.1 Isolat P.P.2 Isolat P.P.3 Gram Gram Negatif Gram Positif Gram Positif TSI Agar A/A K/A K/A Katalase + + + Oksidasi + + + O/F F N F Glukosa + + + Laktosa - - - Sukrosa + + + Mallosa + + + Manitol + + + Salicin + + + Inositol - - - Sorbitol - - - arabinosa + + + Dulcitol - - - trehalosa + + + Xylosa - + - Gelatin + + + Motility + - + Indol - - - Simmons Citrate - - - Methyl Red (MR) - - - VP - - - Lysine Decarboxylase - - - ornithine decarboxylase - - -
Bakteri  halofilik  dapat  dibedakan  menjadi Gram  Negatif  atau  Gram  Positif,  berbeda dengan  bakteri  halofilik  ekstrim  yang  hanya terdiri  atas  bakteri  Gram  Positif  saja  (Ventosa et  al .,  1998).  Isolat  P.P.1  merupakan  bakteri Gram  Negatif  sedangkan  isolat  P.P.2  dan P.P.3  adalah  kelompok  bakteri  Gram  Positif. Hasil  uji  indol  ketiga  isolat  bakteri  halofilik  air peminihan, isolat P.1, P.2 dan P3 menunjukkan  hasil  uji  indol  negatif  artinya bahwa  bakteri  ketiga  isolat  halofilik  ini  tidak
membentuk  indol  dari  asam  amino  triptofan sebagai  sumber  karbon.    Berdasarkan  uji biokimia  fermentasi  polisakarida,  sumber karbon  yang  digunakan  oleh  isolat-isolat tersebut  adalah  glukosa,  sukrosa  dan mallosa dengan uji O/F fermentative untuk isolat P.P.1 dan  P.P.3  sedangkan  non  fermentatif  untuk isolat  P.P.2.  Bakteri  Halofilik  berwarna  merah ekstrim mampu mengimbangi tekanan osmotik ekstraseluler yang lebih  tinggi, dengan memanfaatkan  sifat  biokimia  yang  dimiliki
bakteri tersebut dalam mengakumulasi polisakarida,  peptida,  protein  dan  senyawa- senyawa  organik  lain  seperti  gliserol,  glisin, betain  (Roberts,  2005).  Sehingga  bakteri halofilik mampu menjaga tekanan osmotik dari garam dengan sifat biokimia dari sel mereka.
Uji  MR  negatif  artinya  isolat  P.P.1,  P.P.2  dan P.P.3  tidak  menghasilkan  asam  campuran (metilen glikon) dari proses fermentasi glukosa yang terkandung dalam MR-VP. Uji VP negatif menunjukkan  bahwa  hasil  akhir  fermentasi dari isolat-isolat bakteri halofilik ini bukan asetil metil  karbinol  (asetolin).  Katalase  positif menunjukkan  bakteri  ini  memiliki  enzim katalase (Colome, 2001). Uji katalase masing- masing  isolat  P.P.1,  P.P.2  dan  P.P.3 menunjukkan hasil positif, begitu juga untuk uji oksidasi.  Enzim  katalase  digunakan  oleh bakteri untuk memecah H 2 O 2 . H 2 O 2 merupakan  hasil  respirasi  aerobik  yang bersifat  racun  bagi  bakteri,  oleh  sebab  itu bakteri  akan  mengkatalis  senyawa  tersebut dengan  enzim  katalase  tersebut  (Volk  dan Wheeler,  1993).  Hasil  uji  katalase  dan oksidase  dari  isolat  P.P.1,  P.P.2  dan  P.P.3 dapat  disimpulkan  bahwa  isolat  tersebut merupakan bakteri aerob. Menurut Ventosa et al ., 1998, respirasi bakteri halofilik non ekstrim adalah aerob atau anaerob fakultatif.
Karakterisasi  kemampuan  bakteri  halofilik rendah  dalam  uji  biokimia  dilakukan  untuk mengetahui sifat-sifat fisiologis bakteri.
Informasi  ini  dibutuhkan  sebagai  informasi awal untuk pemanfaatan bakteri halofilik dalam memperbaiki  mutu  dan  kuantitas  garam  yang dihasilkan dari tambak garam rakyat Pamekasan-Madura. Beberapa penelitian menunjukkan  bahwa  Halofilik  memegang peranan  penting  dalam  proses  pembentukan inti  kristal  NaCl.    Kemampuan  tersebut membantu  pembentukan  kristal  NaCl  akan terbentuk  lebih  cepat  daripada  endapan  atau pembentukan senyawa lain, sehingga meminimalkan  kopresipitasi.  Pembentukan dan  perkembangan  kristal  garam  sangat dipengaruhi oleh proses nukleasi kristal garam (Lopez-cortes  dan  Ochoa,  1998).  Peran bakteri  halofilik  merah  ekstrim  dalam  proses pembentukan  garam  memberikan  kontribusi yang  signifikan  yaitu  menghasilkan  garam NaCl  dengan  kemurnian  tinggi  sebesar  lebih dari  94%  (Oren,  2010).  Sehingga,  penelitian tentang  bakteri  halofilik  memegang  peranan penting  dalam  pemanfaatan  bakteri  halofilik dibidang  bioteknologi  terutama  peningkatan kualitas  garam  tambak  rakyat  yang  ada  di Indonesia.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Bakteri  halofilik  isolat  P.P.1,  P.P.2  dan  P.P.3 merupakan  bakteri  halofilik  rendah  atau slight halophiles yang  mampu  hidup  di  media  padat halophile dengan  kadar  garam  total  sebesar 1%. Hasil uji indol ketiga isolat bakteri halofilik P.1,  P.2  dan  P3  menunjukkan  hasil  uji  indol negatif.  Sumber  karbon  yang  digunakan bakteri  tersebut  diantaranya  glukosa,  sukrosa dan  mallosa  dengan  uji  O/F, fermentative untuk  isolat  P.P.1  dan  P.P.3  sedangkan  non fermentatif  untuk  isolat  P.P.2.  Uji  MR-VP menunjukkan  hasil  negatif  untuk  ke  tiga  isolat tersebut.  Uji  katalase  dan  uji  oksidasi masing- masing  isolat  menunjukkan  hasil  positif, sehingga  bakteri  halofilik  isolat  P.P.1,  P.P.2 dan P.P.3 merupakan bakteri aerob.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terima  kasih kepada  Lembaga Penelitian  dan Pengabdian Masyarakat Universitas Trunojoyo Madura  melalui  Program  Hibah  Penelitian Mandiri  UTM  2021  dengan  nomor  kontrak penelitian: 3217/UN46.4.1/PT.01.03/2021.

## DAFTAR PUSTAKA
A.Volk, W., & F.Wheeler, M. (1988). Mikrobiologi  Dasar .  (S.  Adisoemarto, Ed.) (Edisi 5). Jakarta: Erlangga.
Budiharjo,  R.,  Purbowatiningrum,  S.  R.,  dan Mukhammad,  A.  (2017).  Pengaruh Konsentrasi  NaCl  Terhadap  Aktivitas Spesifik  Protease  Ekstraseluler  dan Pertumbuhan  Bakteri  Halofilik  Isolat Bittern  Tambak Garam  Madura. Jurnal Kimia  Sains  dan  Aplikasi,  20 (3),  142- 145.
Burhan.,  Suherman.,  dan  P,H.  Abram  (2021). Penentuan  Kadar  Natrium  (Na)  dan Kalsium(Ca)  Pada  Air  Laut  Desa Posona. Media Eksakta, 17 (1), 57 –61. Colome  JS.  2001. Laboratory  Exercises  in Microbiology .  New  York  (USA):  West Publishing Company.
Das  Sarma,  S.  dan  Arora,  P.  (2001). Halophiles . Encyclopedia of life science. pp 1-9.
Efendy,  M.,  Sidik  R.F.,  Muhsoni  F.F.  (2014).
Pemetaan Potensi Pengembangan Lahan Tambak Garam di Pesisir Utara Kabupaten Pamekasan. Jurnal
Kelautan , 7 (1), 1-11.
Gobbetti, M., De Angelis, M., Corsetti, A., & Di Cagno,  R.  (2005).  Biochemistry  and physiology  of  sourdough  lactic  acid bacteria. Trends  in  Food  Science  & Technology, 16 (1-3), 57-69.
Fitri,  D.  A.,  Asih.  E.N.N.,  Kartika.  A.G.D.,
Agustina. N., Fadholi. B., Dewi. K., dan Efendy.  M.  (2022).  Morphological characteristics  of  halophilic  bacteria  in traditional  salt  production. Journal  of Marine Resources and Coastal Management , 3 (1), 1 –7.
Gaffney,  E.M.,  Simoska,  O.,  Minteer,  S.D. 2021. The Use of Electroactive Halophilic  Bacteria  for  Improvements and  Advancements  in  Environmental High  Saline  Biosensing. Biosensors, 11 (1), 48-55.
Javor,  B.J.  (2002).  Industrial  microbiology  of solar  salt  production. Journal  of industrial microbiology & biotechnology , 28 , 42-47.
Joseph,  S.,  Davis.  (2006).  Biological  and Physical  Management  Information  for Commercial Solar Saltworks. Proceedings  of  the1st  International Conference on
the Ecological Importance of Solar Saltworks
(CIESSA06)  Santorini  Island  Greece, 5-14. Liempepas,  A.,  Lolo,  W.  A.,  &  Yamlean,  P.  V. 2019.  Isolasi  Dan  Uji  Antibakteri  Dari
Isolat Bakteri Yang Berasosiasi
Dengan  Spons  Callyspongia  aerizusa Serta  Identifikasi  Secara  Biokimia. Pharmacon, 8 (2), 380- 387. Lopez-Cortes,  L.A.,  Ochoa,  L.J.  (1998).  The Biological  Significance  of  Halobacteria on  Nucleation  and  Sodium  Chloride Crystal  Growth.  Elsevier  science  B.V. Studies  in  Surface  Science  and Catalysis, 120 , 903-922. Marihati,  Harihastuti,  N.,  Muryati,  Nilawati, Syarifudin E., dan Danny W. H. (2014). Penggunaan  Bakteri  Halofilik  Sebagai Biokatalisator Untuk Meningkatkan Kualitas  Dan  Produktifitas  Garam  Nacl Di  Meja  Kristalisasi. Jurnal  Riset Industri, 8 (3), 191 – 196.
Nilawati,
Marihati,
Susdawanita dan Setianingsih.  N.I.  (2015).  Kemampuan
Bakteri  Halofilik  untuk  Pengolahan Limbah  Industri  Pemindangan  Ikan. Jurnal  Riset  Teknologi  Pencegahan Pencemaran Industri, 5 (2), 23 – 28.
Oren, A.  (2010).  Thoughts  on  the  “Missing Link”  Between  Saltworks  Biology  and Solar  Salt  Quality. Global  NEST Journal, 2 (4), 417-425. Pooja,  S.  dan  Gupta,  M.  (2011).  Halophilic bacteria  and  their  compatible  solutes osmoregulation and potential aplication. Current  science , 100 (10), 1516-1521. Roberts,  M.F.  (2005).  Organic  compatible solutes  of  halotolerant  and  halophilic
microorganism. Saline  systems,  1 (5), 1-30.
Saksono,  H.  (2013).    Ekonomi  Biru:  Solusi
Pembangunan Daerah Berciri Kepulauan  Studi  Kasus  Kabupaten Kepulauan  Anambas .  Jurnal  Bina Praja, 5 (1), 1 – 12.
Ventosa,  A.,  Nieto,  J.J.  dan  Oren,  A.  1998.
Biology of Moderately Halophilic Aerobic  Bacteria. Microbiol.Mol.  Biol.
Rev. 62 , 504-544
Yuliana,  C.,  Hertadi,  R.,  Wahyuningrum,  D.
(2019). Produksi dan Optimasi Biosurfaktan dari Bakteri Halofilik
Chromohalobacter japonicus . Chemical Engineering  Research  Articles,  2 (2),
56-65.