PENGARUH  EKSTRAK DAUN SIRIH MERAH ( Piper cf . fragile Benth.)

## TERHADAP BAKTERI PENYEBAB SAKIT GIGI

## Moerfiah, Fira Diah Setiawaty Supomo FMIPA-UNPAK

## ABSTRAK
Sakit gigi merupakan efek yang dibawa oleh gigi busuk yang disebabkan oleh bakteri yang  memproduksi  asam  dalam  mulut.  Bakteri  ini  bertanggungjawab  dalam  pemecahan fermentasi  gula.  Bakteri  penghasil  asam  menyerang  email  yang  melindungi  gigi,  nyeri disebabkan  oleh  korosif  email  gigi  dan  terpaparnya  ujung  syaraf  gigi.  Berdasarkan  hasil kromatogram  kandungan  daun  sirih  merah  sama  dengan  sirih  biasa  seperti  alkaloid, flavonoid, tanin dan minyak atsiri. Senyawa-senyawa  inilah yang diduga berpotensi sebagai antibakteri.  Oleh  karena  itu,  dilakukan  pengujian  antibakteri  dengan  mengukur  LDH ekstrak  daun  sirih  merah.  Simplisia  daun  sirih  merah  memiliki  kadar  air  sebesar  1,0239% dan  rendemen  sebesar    14,4818%.  Pengujian  dilakukan  dengan  konsentrasi  2,5%;  5%; 7,5%  dan  10%.  Data  yang  dihasilkan  dianalisis  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap dengan  program  software  SAS  ( Statistic  Analyze  System ).  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  daun  sirih  merah  memiliki  kemampuan  menghambat  pertumbuhan bakteri  penyebab  sakit  gigi  dan  konsentrasi  yang paling  baik  adalah  10%  dengan  rata-rata LDH adalah 16,4166 mm. Hasil uji fitokimia menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun sirih merah mengandung senyawa flavonoid, saponin dan tanin.
Keyword : Ekstrak daun, Piper cf ftagile Benth ., sakit gigi

## PENDAHULUAN
Glukosa  merupakan  bagian  utama  menu diit penduduk Indonesia. Diantara kerugian yang paling banyak disorot dari pemakaian gula dalam makanan adalah kerusakan dan pengeroposan    gigi,  terutama  pada  anak- anak.  Hasil  Survei  Kesehatan  Nasional 2002 menunjukkan, prevalensi gigi berlubang  di  Indonesia  berkisar  60%. Melihat  kondisi  ini,  maka  dicarilah alternatif pengobatan dengan menggunakan obat  bahan  alam  karena  diyakini  tidak memiliki efek samping yang membahayakan  serta    harganya  lebih ekonomis.  Salah  satu  tanaman  obat  yang dimanfaatkan  untuk  mengatasi  masalah kesehatan  gigi  dan  mulut  adalah  tanaman sirih.
Umumnya masyarakat mengenal tanaman  sirih  berdaun  hijau.  Tetapi belakangan,  jenis  sirih  lain  yaitu  sirih merah  ( Piper cf. fragile Benth.)  selain sebagai  tanaman  hias  ternyata  sirih  merah juga  mampu  mengobati  berbagai  jenis
penyakit  dan  telah  terbukti  baik  secara empiris dan praklinis.
Secara umum daun sirih mengandung minyak  atsiri  1-4,2%,  hidroksikavikol, kavikol  7,2–16,7%,  kavibetol  2,7–6,2%, allilfikatekol  0–9,6%,  karvakrol  2,2–5,6%, eugenol 26,8-42,5%, eugenol metileter 4,2- 15,8%,  p-simen  1,2-2,5%,    sineol  2,4- 15,8%,  karyofilen  3-9,8%,  kadinen  2,4- 15,8%,  estragol,  terpen,  seskuiterpen,  fenil propana,  tanin,  diastase  0,8-1,8%,  gula, pati (Winarto, 2007).
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  pengaruh  ekstrak  daun  sirih merah  ( Piper cf .  fragile Benth.)  terhadap bakteri penyebab sakit gigi.

## BAHAN DAN METODE Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian ini meliputi : cawan petri, jarum ose, oven, tabung  reaksi,  rak  tabung  reaksi,  bunsen, timbangan,  kertas  cakram,  pinset,  otoklaf, inkubator,  kain  batis,  grinder,  batang
pengaduk, penjepit kayu, kulkas, penangas air,  spidol,  penggaris,  ayakan  mesh  16, laminar  air  flow ,  tabung  jar    dan  alat-alat gelas kimia lainnya.
Bahan  yang  digunakan  meliputi  : daun sirih merah ( Piper cf. fragile Benth.), biakan  murni bakteri  penyebab  sakit  gigi,
media Brain  Heart  Infusion ,  media  agar Mueller  Hinton , sheep  blood ,    amoksisilin 25  g  sebagai  kontrol  positif,  akuabides, etanol  96%,    NaCl  fisiologis  0,9%,  HCl 2N,  HCl  Pekat,  Pereaksi  Mayer,  Pereaksi Bouchardat,  serbuk  magnesium,  FeCl 3 , minyak kelapa.

## Metode Penelitian
Penelitian
dilaksanakan
di Laboratorium  Fakultas  Matematika  dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Pakuan  dan  Laboraturium  Bakteriologi Balai Besar Veteriner di Bogor.

## Pembuatan Simplisia
Daun  sirih  merah  dikumpulkan  dari perkebunan  di  daerah  Ciapus  di  Bogor. Daun  sirih  dibersihkan  dari  kotoran- kotoran  yang menempel, dicuci dengan air mengalir  sampai  bersih.  Daun  yang  telah bersih  dan  bebas  dari  sisa  air  cucian dikeringkan dalam oven dengan suhu 50 o C selama 24 jam, setelah itu simplisia kering dibersihkan  kembali  dari  kotoran  yang mungkin tidak hilang pada saat pencucian.
Tahap  selanjutnya  simplisia  kering digrinder  sehingga  menjadi  simplisia serbuk,  setelah  itu  serbuk  simplisia  diayak dengan  menggunakan  mesh  16,  kemudian disimpan  dalam  wadah  bersih  dan  tertutup rapat.

## Penetapan Kadar Air Simplisia
Penetapan kadar air dilakukan dengan  menggunakan  metoda  gravimetri dilakukan dengan cara : sebanyak ± 2 gram serbuk simplisia ditimbang dan dimasukkan  ke  dalam  krus  tertutup  yang sebelumnya  dipanaskan  pada  suhu  105 0 C selama  30  menit  dan  telah  ditara  lebih dahulu.  Kemudian  serbuk  simplisia  di
keringkan  dalam  oven  pada  suhu  105 0 C selama  3  jam  lalu  didinginkan  dalam desikator  lalu  ditimbang.  Pengeringan dilanjutkan dan ditimbang pada jarak 1 jam sampai perbedaan antara dua penimbangan berturut-turut  tidak  lebih  dari  0,25% (DepKes, 2000).

## Pembuatan Ekstrak Daun Sirih Merah
Sediaan ekstrak etanol dibuat dengan cara  maserasi,  yaitu  dengan  merendam simplisia  sebanyak  30  g  dalam  300  ml pelarut  etanol  96%  selama  24  jam  sambil sekali-sekali  diaduk.  Setelah  24  jam, ekstrak  disaring  melalui  kain  batis  dan ampasnya  diperas.  Ampas  ditambah  cairan pelarut  secukupnya,  diaduk  kemudian disaring sehingga diperoleh ekstrak sebanyak 300 ml. Setelah itu cairan ekstrak diuapkan  dengan  alat  penguap  ( Rotary evaporator )  sampai  berbentuk  cairan kental, kemudian dilanjutkan dengan menggunakan  penangas  air  dengan  suhu antara 40 0 C-50 0 C sampai diperoleh ekstrak kental  dan  hasilnya  ditimbang  (DepKes, 2000).  Rendeman  ekstrak  total  dihitung dengan membandingkan berat awal simplisia dan berat ekstrak yang dihasilkan.

## Pengujian Fitokimia
a. Pemeriksaan Kandungan Flavonoid
Sejumlah  0,5  g  ekstrak  etanol  daun sirih  merah  ditambah  100  ml  air  panas, kemudian  didihkan  selama  5  menit, disaring  sehingga  diperoleh  filtrat  yang digunakan  sebagai  larutan  percobaan.  Ke dalam 5 ml larutan percobaan ditambahkan serbuk  magnesium  dan  1  ml  HCl  pekat. Selanjutnya  ditambahkan  amil  alkohol dikocok  dengan  kuat  dan  dibiarkan memisah.  Terbentuknya  warna  merah, kuning,  atau  jingga  dalam  larutan  amil alkohol  menunjukkan  adanya  senyawa golongan flavonoid (Depkes, 1995). b. Pemeriksaan Kandungan Tanin
Ekstrak  etanol  daun  sirih  merah sebanyak 0,5 g ditambahkan 3 tetes  FeCl 3 , hasil positif ditunjukkan dengan terbentuknya  warna  biru  kehitaman  untuk
tanin  galat  dan  warna  hijau  kehitaman untuk tanin katekol (Depkes, 1977). c. Pemeriksaan Kandungan Saponin
Ekstrak  etanol  daun  sirih  merah sebanyak  0,5  g  dimasukkan  ke  dalam tabung  reaksi,  di  tambahkan  10  ml  air panas  dan  didinginkan,  kemudian  dikocok kuat-kuat selama 10 menit, hasilnya positif bila pada pada penambahan satu tetes asam klorida  2  N  buih  tidak  hilang  (DepKes, 1977).

## Isolasi Bakteri Uji
Bakteri  penyebab  sakit  gigi  diambil dari biakan murni yang berasal dari sampel orang  yang  memiliki  karies  pada  gigi  dan abses  pada  gusi.  Isolasi  dilakukan  dengan cara  memasukkan  kapas  yang  telah  steril ke dalam karies gigi selama 1 menit setelah itu  kapas  dipindahkan  ke  dalam  tabung reaksi yang berisi media BHI setelah itu di masukkan  ke  dalam  tabung  jar  lalu diinkubasi  dengan  suhu  37 o C  selama  24 jam.
Inokulasi  dan  Pengujian  untuk  Bakteri Penyebab Sakit Gigi
Inokulasi dan pengujian untuk bakteri dilakukan dengan cara:
1. Pembuatan stok dan inokulum bakteri
 Biakan  murni    diinokulasikan  pada media  cair  dalam  tabung  reaksi  yang berisi  10  ml  larutan  BHI  untuk pengujian digunakan biakan berumur 1 hari.
 Dibuat  pengenceran  serial  1:10,  1:100, 1:1000  dan  seterusnya  dengan  cara menyiapkan  beberapa  tabung  reaksi yang  berisi  9  ml  larutan  NaCl fisiologis.  Bakteri  yang  disuspensikan diambil  sebanyak  1  ml  kemudian dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi pertama  dan  dikocok  homogen  maka akan diperoleh larutan dengan konsentrasi 10 -1 .
 Larutan  pada  tabung  reaksi  pertama diambil  sebanyak  1  ml  kemudian dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi kedua  yang  berisi  9  ml  larutan  NaCl
fisiologis  0,9%  steril  dan  dikocok homogen, maka akan diperoleh dengan konsentrasi  10 -2 dan  seterusnya  sampai diperoleh  larutan  dengan  konsentrasi 10 -6 (Simmons & Craver, 1990).
2. Pembuatan ekstrak uji dengan konsentrasi 2,5% ; 5% ; 7,5% dan 10%.
3. Pengujian Lebar Daerah Hambat (LDH)
Pada pengujian ini digunakan metode difusi  kertas  cakram,  kertas  cakram dicelupkan  ke  dalam  ekstrak  daun  sirih merah  steril  selama  15  menit  kemudian dikeringkan selama 5 menit lalu diletakkan di  atas  lempeng  agar  darah  dengan menggunakan  pinset  steril,  cawan  petri diinkubasi  pada  suhu  37 0 C  selama  24  jam dalam  tabung  jar  di  dalam  inkubator,  lalu diamati  dan  diukur  dengan  menggunakan penggaris  lebar  daerah  hambat  (LDH) masing-masing  kertas  cakram  terhadap pertumbuhan  bakteri.  LDH  diukur  dari diameter  zona  bening  yang  terbentuk. Untuk kontrol positif menggunakan amoksisilin  yang  telah  jadi    yaitu  25  g sedangkan  kontrol  negatif  adalah  minyak kelapa.

## Parameter Penelitian
Parameter  utama  yang  diamati dalam  penelitian  ini  adalah  lebar  daerah hambat  yang  terbentuk  di  sekeliling  kertas cakram  pada  pengujian  antibakteri  dengan menggunakan metode difusi kertas cakram. Pengukuran menggunakan penggaris. Parameter  tambahan  penelitian  ini  adalah menguji  kandungan  senyawa  flavonoid, saponin  dan  tanin  dalam  ekstrak  etanol daun  sirih  merah  secara  kualitatif  melalui analisis fitokimia.

## Analisis Data
Data  hasil  pengukuran  lebar  daerah hambat  ekstrak  etanol  daun  sirih  merah dianalisis  menggunakan  Rancangan  Acak Lengkap  dengan  program  software  SAS ( Statistic Analyze System ).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Serbuk Simplisia Daun Sirih Merah
Tabel 1. Hasil penetapan kadar air dan rendemen ekstrak Kadar air simplisia Rendemen (%) 1,0239% 14,4818 Tabel  2. Hasil  analisis  kualitatif  ekstrak etanol daun sirih merah Senyawa Hasil Kesimpulan Flavonoid Warna kuning + Saponin Buih lama hilang (Stabil)  Tanin Warna hijau kehitaman +++
Keterangan: ± = Stabil       + = Sedikit pekat +++ = Sangat pekat

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Pengujian  aktivitas  antibakteri  dalam penelitian  ini  menggunakan  metode  difusi kertas  cakram  ( Paper  disc ),  dengan konsentrasi  larutan  ekstrak  10%;  7,5%; 5%; 2,5%. Sebagai kontrol positif digunakan  amoksisilin  25  g,  sedangkan kontrol  negatif    adalah  minyak  kelapa. Penggunaan  minyak  kelapa  bertujuan untuk melarutkan ekstrak daun sirih merah dan ternyata minyak kelapa sebagai pelarut tidak memiliki aktivitas antibakteri.
Gambar 1
Gambar 2
Keterangan gambar:
Berdasarkan tahapan pengujian yang  telah  dilakukan  terlihat  adanya perbedaan diameter hambatan dari masing- masing  konsentrasi  yang  disebabkan  oleh kecepatan konsentrasi ekstrak yang
berdifusi  ke  medium  agar  (Gambar  1  dan 2). Perbedaan lebar daerah hambat ini juga dipengaruhi oleh kesensitifan dari organisme  uji,  medium  kultur  dan  kondisi inkubasi,  kecepatan  difusi  antibakteri,  dan konsentrasi  senyawa  antibakteri  (Prescott, 2005)
Tabel  3. Rata-rata  LDH  (mm)  ekstrak etanol daun sirih merah Konsentrasi ekstrak 2,5% 5% 7,5% 10% Rata-rata 3,667 d 4,75 c 6,6833 b 16,416 6 a
Keterangan: Angka  yang diikuti oleh huruf  yang berbeda menunjukkan pengaruh sangat beda nyata
Dari  table  3  diatas  hasil  rata-rata LDH menunjukkan bahwa konsentrasi 10% mempunyai perbedaan sangat nyata efektifitas  antibakterinya  terhadap  bakteri penyebab  sakit  gigi  dibandingkan  semua deret konsentrasi yang dibuat. Lebar daerah hambat  ini  berupa  lebar  daerah  hambat yang  absolut,  artinya  bersifat  bakterisidal. Semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  yang digunakan  maka  semakin  besar  lebar daerah  hambat  yang  dihasilkan  (Gambar 3).
Gambar 3. Histogram Lebar Daerah Hambat pertumbuhan bakteri penyebab sakit gigi pada ekstrak etanol  yang dihasilkan pada masing-masing perlakuan.
Hasil pengukuran lebar daerah hambat dianalisis menggunakan
Rancangan Acak Lengkap dengan program software  SAS  ( Statistic  Analyze  System ) analisis data (Lampiran 5) diketahui bahwa konsentrasi ekstrak etanol daun sirih merah
A B C D A B 1. A. LDH ekstrak daun sirih merah konsentrasi 2,5%
B. LDH ekstrak daun sirih merah konsentrasi 5%
C. LDH ekstrak daun sirih merah konsentrasi 7,5% D. LDH ekstrak daun sirih merah konsentrasi 10% 2. A. LDH kontrol negatif B. LDH kontrol positif
berpengaruh  sangat  beda  nyata  terhadap daya hambat pertumbuhan bakteri penyebab  sakit  gigi  (P  0,01).  Setelah dilanjutkan  dengan  uji  Duncan  diketahui bahwa semua perlakuan sangat beda nyata. Konsentrasi 10% sangat beda nyata dengan konsentrasi 7,5%; 5% dan 2,5%. Penghambatan disekitar pertumbuhan ditunjukkan  oleh  luasnya  wilayah  jernih zona hambat kertas cakram (Brander et al., 1991).
Adanya zona hambat di sekitar kertas cakram karena ekstrak mengandung flavonoid,  saponin  dan  tanin  berdasarkan analisis  fitokimia  (Gambar  1)  dan  juga senyawa-senyawa  lainnya  yang  terdapat dalam daun sirih merah. Senyawa flavonoid  dan  tanin  merupakan  turunan fenol yang dapat mengakibatkan terjadinya denaturasi  dan  koagulasi  protein  sel bakteri. Menurut Siswandono dan Bambang (1995) turunan fenol berinteraksi dengan  sel  bakteri  melalui  proses  adsorpsi yang  melibatkan  ikatan  hidrogen.  Pada konsentrasi  tertentu  terbentuk  kompleks protein  fenol  dengan  ikatan  lemah  dan segera  menyebabkan  penguraian  diikuti penetrasi  fenol  ke  dalam  sel  bakteri  dan menyebabkan  koagulasi  protein  membran sehingga  membran  sel  bakteri  menjadi lisis,  selain  itu  dapat  juga  menyebabkan timbulnya  kebocoran  konstituen  sel  yang essensial sehingga  sel  bakteri  mengalami kematian.
Menurut  Robinson  (1995),  senyawa saponin  bersifat  sebagai surfactant  agent yang  kuat  seperti  sabun,  karena  dapat menurunkan tegangan permukaan antar sel. Saponin  yang  diadsorpsi  pada  permukaan sel  akan  menyebabkan  kerusakan  dengan meningkatnya permeabilitas membran, sehingga  bahan-bahan  esensial  tersebut yang  dibutuhkan  oleh  bakteri  untuk  hidup menjadi  hilang  dan  dapat  menyebabkan terjadinya kematian terhadap sel.
Lebar  daerah  hambat  absolut  yang terbentuk selain karena kandungan senyawa flavonoid,  saponin dan tanin juga karena khasiat kandungan senyawa
lainnya.  Heyne  (1987)  menyatakan  bahwa daun  sirih  mengandung  kavikol  yang mempunyai  daya  bakterisida  lima  kali lebih  kuat  dibanding  fenol.  Kemampuan daun  sirih  sebagai  antibakteri  plak  gigi yang  diteliti  oleh  Sundari  dkk.,  (1992) menunjukkan  bahwa  minyak  atsiri  daun sirih dengan konsentrasi 0,25% menunjukkan  daya  antibakteri  dan  dalam pasta  gigi  menunjukkan  daya  antiseptik dimulai  pada  konsentrasi  0,5%.    Menurut Suwondo  dkk.,  (1992)  perasan,  infus, ekstrak air-alkohol, ekstrak heksan, kloroform  maupun  etanol  daun  sirih mempunyai  aktivitas  antibakteri  terhadap bakteri  gingivitis  dan  bakteri  pembentuk plak ( Streptococcus mutans ). Minyak atsiri dan ekstrak daun sirih mempunyai aktivitas antibakteri terhadap beberapa bakteri gram positif  dan  negatif  serta  menunjukkan aktivitas  antifungi  terhadap  beberapa macam  kapang.  Daya  antibakteri  minyak atsiri disebabkan karena kandungan senyawa  fenol  dan  turunannya  yang  dapat mendenaturasi protein sel bakteri.
Kontrol positif menggunakan antibiotik  Amoksisilin  25  g  diperoleh hasil  LDH  17,55  mm,  tanpa  dilakukan pengulangan. Antibiotik Amoksisilin menghasilkan  lebar  daerah  hambat  yang absolut  terhadap  bakteri  penyebab  sakit gigi  karena  amoksisilin  merupakan  jenis antibiotik  yang  memiliki  spektrum  luas, yaitu  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri  Gram  positif  dan  Gram  negatif (Siswandono & Bambang, 1995).
Pengukuran adanya kekuatan antibiotik dan antibakteri menurut Suryawiria  (1978)  dipergunakan  metode Davis Stout dengan ketentuan :
1. Sangat  kuat  (daerah  hambat  20  mm atau lebih).
2. Kuat (daerah hambat 10-20 mm).
3. Sedang (daerah hambat 5-10 mm).
4. Lemah (daerah hambat  5 mm).
Dari ketentuan diatas dapat dikatakan amoksisilin  mempunyai  kekuatan  kuat karena lebar daerah hambat yang dihasilkan  sebesar  17,55  mm  dan  ekstrak
etanol  daun  sirih  merah  mempunyai kekuatan  yang  sama  karena  lebar  daerah hambatnya sebesar 16,4166 mm.

## KESIMPULAN Kesimpulan
1. Ekstrak etanol daun sirih merah ( Piper cf. fragile Benth.)  memiliki  aktivitas antibakteri  terhadap  bakteri  penyebab sakit gigi.
2. Ekstrak  etanol  daun  sirih  merah  pada konsentrasi  10%;  7,5%;  5%  dan  2,5% memberikan  pengaruh  sangat  nyata dalam menghambat pertumbuhan bakteri penyebab sakit gigi.
3. Konsentrasi  ekstrak  daun  sirih  merah yang  paling  efektif    menghambat pertumbuhan  bakteri  penyebab  sakit gigi yaitu konsentrasi 10%.
4. Berdasarkan  hasil  pengujian  fitokimia secara  kualitatif  ekstrak  etanol  daun sirih  merah  mengandung  flavonoid, saponin dan tanin.

## DAFTAR PUSTAKA
Brander, G. C., Pough, D. M, Bywater, R. J & Jenkins,  W.  L.  1991. Veterinary Applied Pharmacology and Therapeutics .  5 th Editions.  Brailler Tindal, London. 418-419 p. DepKes  RI.  1977. Materia  Medika  Indonesia , Jilid 1. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta. .1995. Materia Medika Indonesia, Jilid  VI.    Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta.
.2000. Parameter  Standar  Umum Ekstrak  Tumbuhan  Obat .  Direktorat
Jenderal Pengawasan Obat Dan Makanan. Jakarta.
Heyne,  K.  1987. Tumbuhan  Obat  dan
Khasiatnya .  Jilid  1.  Badan  Litbang Departemen Kehutanan. Jakarta.
Prescott  LM.  2005. Microbiology  2 nd Edition . New York : Mc. Grow-Hill. Robinson,  T.  1995. Kandungan  Organik Tumbuhan  Tingkat  Tinggi  Edisi  ke-IV (Diterjemahkan  oleh  Padmawina,  K). Institut Teknologi Bandung. Bandung. Simmons, G. S and J, Craver. 1990. Antibiotic Sencitivity  Tests  Using  The  Disc Method . Austrchian Bureau Of Animal Health. P. Appendix A.
Siswandono  &  Bambang  S.  1995. Kimia Medisinal . UNAIR Press. Surabaya. Sundari,  S.,  Koensoemardijah  dan  Nusratini. 1992. Minyak  Atsiri  Dalam  Pasta
Gigi;  Stabilitas  Fisis  dan  Daya Antibakteri . Warta Tumbuhan Indonesia Jakarta. Suryawiria,  U.  1978. Mikroba  lingkungan Edisi kedua . ITB. Bandung. Suwondo,  S.,  Sidik.,  Somadilaga  R.S,  dan Soelarko R.M. 1992. Aktivitas Antibakteri  Daun  Sirih  Terhadap Bakteri Gigivitis dan Baktrei Pembentuk Plak/karies Gigi (Streptococcus mutans) . Warta
Tumbuhan  Obat  Indonesia  1(1)  1-4. Jakarta.
Winarto, W. P. 2007. Tanaman Obat Indonesia untuk  Pengobat  Herbal Jilid  2 .  PT. Karyasari Herba Media. Jakarta.