## Effect of Drought-Stress Conditions in Chlorophyll Content of
Dendrobium sp. Planlets
Fesya Salma Putri, Endang Nurcahyani * , Yulianty, Bambang Irawan
Jurusan Biologi FMIPA Universitas Lampung Jl. Soemantri Brojonegoro, Gedung Meneng, Bandar Lampung, 35145, Lampung, Indonesia *Email :endang_nurcahyani@yahoo.com

## ABSTRACT
Dendrobium sp. was a popular ornamental plant and has high economic value. One of many difficulties in the growth of orchids in Indonesia is low humidity and lack of water availability. Regulatory  Substance  Growth  in  the  form  of  an  atonic  solution  can  increase  the  growth  of orchid  plants. The  purpose  of this  study  was  to  determine  the  effect  of atonic  solutions  on orchid  chlorophyll  content  in  drought  stress  conditions.  This  study  used  a  3x3  factorial design. Factor A is the atonic solution with 3 levels of concentration: 0 mL/L, 2 mL/L, and 3 mL/L. Factor B is PEG 6000 with 3 concentration levels: 0% b/v, 20% b/v and 25% b/v. The parameters  tested were chlorophyll a,  b and total Dendrobium  orchid plantlets. The results showed that atonic solution and PEG 6000 significantly affected the chlorophyll a, b and total content  of  chlorophyll.  The  higher concentration of  the  atonic  solution,  the  more content of chlorophyll a, b and total plantlets of decreased in drought stress conditions in vitro.
Keywords: Atonic, Drought stress, Dendrobium sp.,  In Vitro, Polyethylene Glycol

## PENDAHULUAN
Anggrek  merupakan  salah  satu  tanaman hias  yang  memiliki  nilai  ekonomis  tinggi sehingga  banyak  dibudidayakan  dalam skala tinggi. Banyak upaya yang dilakukan untuk  menghasilkan  bibit  anggrek  yang unggul.  Salah  satu  upaya  yang  dilakukan yaitu  dengan  dilakukannya  persilangan. Anggrek hibrida hasil persilangan biasanya  lebih  banyak  diminati  oleh masyarakat dibandingkan anggrek spesies  dikarenakan  anggrek  hibrida memiliki warna, bentuk dan ukuran bunga yang  lebih  beragam  dan  bervariasi (Clemants, 2004).
Dendrobium merupakan salah satu kekayaan  Indonesia  yang  jumlahnya diperkirakan
sekitar 275
jenis (Gandawidjaya  dan  Sastrapradja,  1980). Dendrobium memiliki  warna  yang  sangat
indah  dan  cantik    serta  warna  bunganya yang tidak mudah pudar dan tidak mudah layu.  Anggrek  ini  termasuk  anggrek  yang pertumbuhannya lebih cepat dibandingkan dengan  jenis-jenis  anggrek  lainnya  dan anggrek  ini  paling  banyak  ditanam  oleh masyarakat  karena  harganya  yang  relatif murah  dan  pemeliharaannya  tidak  terlalu sulit (Indarto, 2011).
Cekaman  kekeringan  merupakan  faktor utama penyebab kematian dalam budidaya anggrek. Kekeringan pada tanaman anggrek dapat disebabkan karena  kelembaban  yang  rendah  dan ketersediaan
air yang kurang
(Hendaryono,  2000).  Menurut  Haryati (2003), kekurangan air dapat mengganggu  aktivitas  fisiologis  maupun morfologis  sehingga  dapat  menghentikan pertumbuhan.  Cekaman  kekeringan  pada tanaman  dapat  disimulasikan  dengan
menginduksi  Polyethylene  Glycol  (PEG) dengan  berat  molekul  lebih  dari  4000 pada  medium in  vitro karena  tidak menyebabkan tanaman keracunan (Lawyer, 1970). PEG yang larut sempurna dalam air mempunyai kemampuan menurunkan potensial air, sehingga dapat mengetahui respon jaringan yang ditanam terhadap  cekaman  kekeringan,  serta mengisolasi  varian  sel  atau  jaringan  yang toleran  terhadap  cekaman  kekeringan sehingga dapat digunakan untuk menstimulasi besarnya potensial air tanah (Badami dan Amzeri, 2010).
Salah  satu  upaya  peningkatan  produksi tanaman anggrek Dendrobium yaitu dengan  pemberian    zat  pengatur  tumbuh (ZPT)  (Septiatin,  2008).  Salah  satu  ZPT yang  bisa  digunakan  yaitu  atonik.  Atonik merupakan  zat  perangsang  tumbuhnya akar,  mengaktifkan  penyerapan  unsur hara, meningkatkan keluarnya kuncup dan buah,  serta  dapat  memperbaiki  kualitas tanaman (Sumiati, 2001).
Sejauh  ini  belum  ada  penelitian  tentang kajian  efek  larutan  atonik  pada  planlet anggrek  Dendrobium  ( Dendrobium sp.) dalam kondisi cekaman kekeringan secara in  vitro, oleh  karena  itu  penelitian  ini dilakukan

## METODOLOGI PENELITIAN
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan November  2017  sampai  dengan  bulan Desember 2017 di ruang in vitro
Laboratorium  Botani,  Jurusan  Biologi,
Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan  Alam  Universitas  Lampung. Bahan-bahan yang digunakan yaitu planlet anggrek Dendrobium yang didapatkan dari pusat pembibitan anggrek Soerjanto  Orchids,  Batu  Jawa  Timur, bahan  dasar  medium Vacin  and  Went ,
Polyethylene  Glycol 6000,  larutan  atonik, etanol 96%, aquades.
Penelitian  ini  menggunakan  percobaan faktorial  3x3  dengan  Faktor  A  larutan atonik dengan 3 taraf konsentrasi: 0 mL/L, 2  mL/L,  3  mL/L  dan  faktor  B  PEG  6000 dengan  3  taraf  konsentrasi:  0%  b/v,  20% b/v  dan  25%  b/v.  Setiap  kombinasi perlakuan diulang sebanyak 3 kali ulangan sehingga jumlah satuan percobaan adalah 27. Parameter penelitian ini yaitu kandungan klorofil a, b dan total kandungan klorofil diukur dengan menimbang  berat  basah  daun  planlet anggrek Dendrobium yang seragam sebanyak  1  gram  dihilangkan  ibu  tulang daunnya, kemudian digerus 100% dengan mortar  (pestle)  dan  ditambahkan  5  ml ethanol  96%.  Larutan  disaring  dengan kertas Whatman No. 1 dan dimasukkan ke dalam  flakon  lalu  ditutup  rapat.  Larutan sampel dan larutan standar (ethanol 96%) diambil  sebanyak  1  mL,  dimasukkan dalam  kuvet. Setelah itu dilakukan pembacaan serapan dengan spektrofotometer UV pada panjang gelombang  (λ)  649  nm  dan  665  nm, dengan  tiga  kali  ulangan  setiap  sampel. Berdasarkan  Miazek (2002), kadar klorofil dapat  dihitung  dengan  menggunakan rumus sebagai berikut.
Chl a = 13.36 A 665 – 5.19 A 649 Chl b = 27.43 A 649 – 8.12 A 665
Chl total = 22.24 A 649 – 5.24 A 665
Homogenitas ragam ditentukan dengan uji Levene  pada  taraf  nyata  5%.    Analisis ragam  dilakukan  pada  taraf  nyata  5%. Jika  interaksi  faktor  A  dan  B  tidak nyata,maka  ditentukan main  effect dari faktor A dan B dengan  uji BNT pada taraf nyata  5%.  Jika  interaksi  nyata  maka ditentukan simple  effect larutan  atonik
pada  setiap  konsentrasi  PEG  600  pada taraf nyata 5 %.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Kandungan  Klorofil.  Rata-rata  kandungan klorofil  a  setelah  perlakuan  kombinasi larutan  atonik  dan  PEG  6000  disajikan pada  Tabel  1.  Analisis  ragam  pada  taraf nyata  5%  menunjukkan  bahwa  larutan atonik berpengaruh nyata terhadap kandungan  klorofil  a  planlet  anggrek Dendrobium (F hit = 140,79 > Fcrit = 3,555) dan  PEG  6000  berpengaruh  nyata
terhadap  kandungan  klorofil  a  planlet anggrek Dendrobium (Fhit =  27,03 >  Fcrit =  3,555).  Interaksi  antara  larutan  atonik dan  PEG  6000  terhadap  kandungan klorofil  a  planlet  anggrek Dendrobium adalah nyata (F hit = 61,35> Fcrit= 2,928).
Uji BNT pada taraf nyata 5% menunjukkan bahwa  PEG  20%  dan  atonik  2  ml/l  tidak berbeda  nyata  dengan  PEG  25%  dan atonik 3 ml/l tetapi berbeda nyata dengan kombinasi  perlakuan  lainnya  terhadap kandungan klorofil a.
Tabel 1.   Uji kandungan klorofil a planlet anggrek Dendrobium 3 minggu setelah perlakuan kombinasi atonik dan PEG 6000.
PEG (% b/v) Atonik (ml/l) (v/v Nilai Tengah 0                                   2                                3 0               0,142 ± 0,004266 b 0,152 ± 0,004833 bc 0,145 ± 0,002248 b 0,146 20             0,196 ± 0,004562 d 0,124 ± 0,002740 a 0,146 ± 0,002740 b 0,155
25             0,225 ± 0,005481 e 0,160 ± 0,003773 c 0,124 ± 0,003268 a 0,169 Nilai Tengah 0,187 0,145 0,138
Keterangan : µ= Ŷ±Sŷ    n=3     α=0,05.
Pada  PEG  0%  dan  atonik  0  ml/l  tidak berbeda  nyata  dengan  PEG  0%  dan atonik  2  ml/l  dan  3  ml/l  serta  PEG  20% dan  atonik  3  ml/l  tetapi  berbeda  nyata dengan  kombinasi  perlakuan  lainnya terhadap kandungan klorofil a.  Pada PEG 25% dan atonik 2 ml/l tidak berbeda nyata dengan  PEG  0%  dan  atonik  2  ml/l  tetapi berbeda nyata dengan kombinasi perlakuan  lainnya  terhadap  kandungan klorofil a. Pada PEG 20% dan atonik 0 ml/l berbeda nyata dengan kombinasi perlakuan  lainnya  terhadap  kandungan klorofil a. Pada PEG 25% dan atonik 0 ml/l berbeda nyata dengan kombinasi perlakuan  lainnya  terhadap  kandungan klorofil  a.  Kurva  Interaksi  antara  Larutan Atonik dan PEG 6000 terhadap Kandungan  Klorofil  a  Planlet  Anggrek Dendrobium disajikan pada Gambar 1.
Gambar 1. Kurva  Interaksi  antara  Larutan Atonik  dan  PEG  6000  terhadap Kandungan  Klorofil  a  Planlet Anggrek Dendrobium
Berdasarkan  Gambar  1,  dapat  dilihat bahwa  terdapat  interaksi  antara  larutan atonik dan PEG 6000 terhadap kandungan  klorofil  a.  Dapat  dilihat  bahwa interaksi antara atonik 0 ml/l dengan PEG 20%  dan  25%  dapat  meningkatkan
kandungan  klorofil  a  planlet  anggrek Dendrobium . Kandungan klorofil a tertinggi yaitu pada konsentrasi PEG 6000 25%  dengan  atonik  0  ml/l  sedangkan kandungan  klorofil  a  terendah  yaitu  pada konsentrasi PEG 6000 25% dengan atonik 3  ml/l.    Rata-rata  kandungan  klorofil  b setelah perlakuan kombinasi larutan atonik  dan  PEG  6000  disajikan  pada Tabel 2.
Analisis  ragam  pada  taraf  nyata  5% menunjukkan bahwa larutan atonik berpengaruh  nyata  terhadap  kandungan
klorofil b planlet  anggrek Dendrobium (F hit =  630,73  >  Fcrit  =  3,555)  dan  PEG  6000 berpengaruh  nyata  terhadap  kandungan klorofil b planlet  anggrek Dendrobium (F hit = 111, 95 > Fcrit = 3,555). Interaksi antara larutan  atonik  dan  PEG  6000  terhadap kandungan  klorofil  b  planlet  anggrek Dendrobium adalah nyata (F hit = 255,56 > Fcrit = 2,928).
Uji BNT pada taraf nyata 5% menunjukkan bahwa  pada  PEG  0%  dan  atonik  0  ml/l tidak  berbeda  nyata  dengan  PEG  0%
Tabel 2 .  Uji kandungan klorofil b planlet anggrek dendrobium 3 minggu setelah perlakuan kombinasi atonik dan PEG 6000.
PEG (% b/v) Atonik (ml/l) (v/v Nilai Tengah 0                                   2                                3 0               0,425 ± 0,007105 b 0,448±0,006089 c 0,436±0,003583 bc 0,436 20             0,603 ± 0,008068 e 0,364 ± 0,004643 a 0,426 ± 0,004643 b 0,464
25             0,695 ± 0,009286 f 0,480 ± 0,005599 d 0,360 ± 0,004849 a 0,512 Nilai Tengah 0,574 0,431 0,407
Keterangan : µ= Ŷ±Sŷ    n=3     α=0,05
atonik  3  ml/l  dan  PEG  20%  atonik  3  ml/l tetapi  berbeda  nyata  dengan  kombinasi perlakuan  lainnya  terhadap  kandungan klorofil b. Pada PEG 20% dan atonik 2 ml/l tidak  berbeda  nyata  dengan  PEG  25% dan  atonik  3  ml/l  tetapi  berbeda  nyata dengan  kombinasi  perlakuan  lainnya terhadap kandungan klorofil b.
Pada  PEG  0%  dan  atonik  2  ml/l  tidak berbeda  nyata  dengan  PEG  0%  dan atonik 3 ml/l tetapi berbeda nyata dengan kombinasi  perlakuan  lainnya  terhadap kandungan klorofil b. Pada PEG 20% dan atonik  0  ml/l  berbeda  nyata  dengan kombinasi  perlakuan  lainnya  terhadap kandungan klorofil b. Pada PEG 25% dan atonik  0  ml/l  berbeda  nyata  dengan kombinasi  perlakuan  lainnya  terhadap kandungan klorofil b. Pada PEG 25% dan
atonik  2  ml/l  berbeda  nyata  dengan kombinasi  perlakuan  lainnya  terhadap kandungan  klorofil  b.  Kurva  Interaksi antara  larutan  atonik  dan  PEG  6000 terhadap  kandungan  klorofil  b  planlet anggrek Dendrobium disajikan pada Gambar 2.
Berdasarkan  Gambar  2  dapat  dilihat adanya  interaksi  antara  larutan  atonik PEG  6000  pada  kurva.  Pada  konsentrasi PEG  20  dan  25%  dengan  atonik  0  ml/l dilihat efektif dalam meningkatkan kandungan  klorofil  b  planlet  anggrek Dendrobium . Sedangkan kandungan klorofil  b  paling  rendah  terdapat  pada konsentrasi  PEG  25%  dengan  atonik  3 ml/l.
Gambar  2.    Kurva  Interaksi  antara  larutan atonik  dan  PEG  6000  terhadap kandungan  klorofil  b  planlet anggrek Dendrobium .
Rata-rata  kandungan  klorofil  total  setelah perlakuan  kombinasi  larutan  atonik  dan PEG 6000 disajikan pada tabel 3.
Analisis  ragam  pada  taraf  nyata  5% menunjukkan bahwa larutan atonik memberikan  pengaruh  nyata  terhadap kandungan  klorofil  total  planlet  anggrek Dendrobium (F hit =  580,86 > Fcrit = 3,555)
dan PEG 6000 juga memberikan pengaruh  nyata  terhadap  kandungan klorofil  total  planlet  anggrek Dendrobium
Tabel  3 .  Uji  kandungan  klorofil  total  planlet  anggrek  dendrobium  3  minggu  setelah  perlakuan kombinasi atonik dan PEG 6000.
PEG (% b/v) Atonik Nilai Tengah 0 2 3 0 0,370± 0,00639 b 0,390± 0,00561 c 0,380±0,00324 bc 0,380 20 0,524 ± 0,00723 e 0,317 ± 0,00418 a 0,371 ± 0,00418 b 0,404 25 0,604 ±0,00835 f 0,418 ±0,00508 d 0,313 ±0,00440 a 0,445 Nilai Tengah 0,499 0,375 0,355
Keterangan : µ= Ŷ±Sŷ    n=3     α=0,05
(Fhit  =  103,41  >  Fcrit  =  3,555).  Terdapat interaksi  antara  atonik  dan  PEG  6000 yang berpengaruh nyata terhadap kandungan  klorofil  total  planlet  anggrek Dendrobium (Fhit  =  236,02  >  Fcrit  = 2,928).
Uji BNT pada taraf nyata 5% menunjukkan bahwa  pada  PEG  0%  dan  atonik  0  ml/l tidak  berbeda  nyata  dengan  PEG  0% atonik  3  ml/l  dan  PEG  20%  atonik  3  ml/l tetapi  berbeda  nyata  dengan  kombinasi perlakuan  lainnya  terhadap  kandungan klorofil  total.  Pada  PEG  0%  dan  atonik  2 ml/l tidak berbeda nyata dengan PEG 0% dan  atonik  3  ml/l  tetapi  berbeda  nyata dengan  kombinasi  perlakuan  lainnya terhadap  kandungan  klorofil  total.  Pada PEG 20% dan atonik 2 ml/l tidak berbeda nyata dengan PEG 25% dan atonik 3 ml/l tetapi  berbeda  nyata  dengan  kombinasi perlakuan  lainnya  terhadap  kandungan
klorofil total. Pada PEG 20% dan atonik 0 ml/l  berbeda  nyata  dengan  kombinasi perlakuan  lainnya  terhadap  kandungan klorofil total. Pada PEG 25% dan atonik 0 ml/l tidak berbeda nyata dengan kombinasi  perlakuan  lainnya  terhadap kandungan  klorofil  total.  Pada  PEG  25% dan  atonik  2  ml/l  berbeda  nyata  dengan kombinasi  perlakuan  lainnya  terhadap kandungan  klorofil  total.  Kurva  interksi antara  larutan  atonik  dan  PEG  6000 terhadap  kandungan  klorofil  total  planlet anggrek Dendrobium disajikan pada Gambar 3.
Berdasarkan Gambar 3, terdapat interaksi antara larutan atonik dan PEG 6000 pada kurva.  Terlihat  pada  kurva  bahwa  pada konsentrasi  PEG  25%  dengan  atonik  0 ml/l  efektif  meningkatkan  kandungan klorofil total sedangkan kandungan klorofil total  yang  paling  rendah  yaitu  pada
kosentrasi  PEG  25%    dengan  atonik  3 ml/l.
Berdasarkan hasil penelitian, dapat dilihat bahwa  kandungan  klorofil  a,  b  dan  total pada  planlet  anggrek Dendrobium yang diberi perlakuan PEG 6000 pada konsentrasi  20%  dan  25%  dengan  atonik 0ml/l  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan perlakuan  PEG  0%(kontrol).  Hal  ini didukung  oleh  penelitian  Banyo.,  dkk (2013) yang menyatakan bahwa konsentrasi  klorofil  a,  b  dan  total  pada tanaman  padi  dengan  konsentrasi  PEG  - 0,5  MPa  dan  -1  MPa  lebih  tinggi dibandingkan  pada  perlakuan  PEG  0 MPa.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa  pengukuran  konsentrasi  klorofil daun tanaman
yang
mengalami kekurangan  air  sebaiknya  menggunakan satuan luas jaringan daun bukan berdasarkan  berat  basah.  Hal  ini  juga didukung  oleh  penelitian  Agustina  dkk (2015)  yang  menyatakan  bahwa  terjadi peningkatan  klorofil  b  pada  padi  varietas Ciherang pada konsentrasi PEG 20%.Pada konsentrasi atonik 0 ml/l efektif meningkatkan kandungan klorofil a, b dan total.  Hal  ini  dapat  disebabkan  karena konsentrasi  atonik  yang  tidak  optimum sehingga menyebabkan kandungan klorofil menurun.
Jika pemberian konsentrasi  lebih  tinggi  dari  konsentrasi optimum maka akan
mendorong pertumbuhan  atau  dapat  mengganggu metabolisme dan perkembangan tumbuhan.  Hal  ini  disebabkan  karena pada  konsentrasi  auksin  yang  tinggi, proses  perbesaran  sel  dapat  berlangsung cepat  dan  sel  akan  menjadi  besar. Keadaan  seperti  ini  akan  menyebabkan reaksi turgor sel dalam sehingga permeabilitas  terganggu  dan  sel  akan mengalami kekeringan (Riyadi, 2014).

## KESIMPULAN
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa semakin  tinggi  konsentrasi  larutan  atonik maka  kandungan  klorofil  a,  b  dan  total planlet  anggrek Dendrobium semakin menurun dalam kondisi cekaman kekeringan secara in vitro .

## DAFTAR PUSTAKA
Agustina,  R.,  Zulkifli.,  Handayani,  T.  T. (2015).  Adaptasi  kecambah  padi sawah  ( Oryza sativa L.)  varietas Ciherang  dan  Ciliwung  terhadap defisit  air  yang  diinduksi  dengan polietilen  glikol  6000. Prosiding
Seminar Nasional Swasembada
Pangan Polinela 29 April 2015, 51.
Badami,  K.,  dan  Amzeri,  A.  (2010). Seleksi  i n  vitro untuk  toleransi terhadap  kekeringan  pada  jagung ( Zea mays L.)  dengan  Polyethylene Glycol (PEG). Agrovigor: 3( 1).
Banyo,  Y.  E.,  Song,  N.,  Siahaan,  P.,  dan Tangapo,  A.  M.  (2013).  Konsentrasi klorofil daun padi pada saat kekurangan air yang diinduksi dengan polietilen glikol. Jurnal Ilmiah Sains, 13(1), 1-8.
Clemants,  S.  (2004). The  Best  Orchid  for Indoors .  Brooklyn  Botanic  Garden, Inc. Washington.
Gandawidjaya,  D.  dan  S.  Sastrapradja. (1980).  Plasma  nutfah  dendrobium asal  indonesia. Bull.  Kebun  Raya 4(4), 113-125.
Haryati. (2003). Pengaruh Cekaman Kekeringan Air Terhadap Pertumbuhan  dan  Hasil  Tanaman . Medan: Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara. Hendaryono,  D.  P.  S.  (2000). Budidaya
Aggrek  Dalam  Botol .  Yogyakarta:
Kanisius.
Indarto,  Novo.  (2011). Pesona  Anggrek: Petunjuk  Praktis  Budi  Daya  dan Bisnis Anggrek. Yogyakarta: Cahaya Atma Pustaka.
Lawyer,  D.  W.  (1970).  Absorption  of polyethilene  glicol  by  plants  enther effect  on  plant  growth.  New  Phytol 69, 501 – 513.
Riyadi,  I.  (2014). Media  Tumbuh  :
Penggunaan  Zat  Pengatur  Tumbuh dan  Bahan  bahan  Lain .  Materi disampaikan  pada  Pelatihan  Kultur Jaringan Tanaman Perkebunan.
BPBPI Bogor 19 – 23 Mei 2014.
Septiatin,  A.  (2008). Apotik  Hidup  dan Rempah-Rempah,  Tanaman  Hias, dan Tanaman Liar. Bandung: Yrama Widya.
Sumiati,  E.  (2001).  Pengaruh  pemberian zat pengatur tumbuh terhadap hasil, kualitas  dan  umur  simpan  buah tomat kultivar gondol. Jurnal Hortikultura , 11, 30-39.