## UNPAD

## CARAGEENAN BASED POLYELECTROLYTE FILM FOR HEALING BURNS USING SAP OF Jatropha curcas
Nur A. Thomas 1 , Mohamad R. Zakaria 1* , Muhammad A. Mustapa 1 , Irvan Maulana 2
1Farmasi, Fakultas Olahraga dan Kesehatan, Universitas Negeri Gorontalo, Gorontalo, Indonesia
2Fakultas Farmasi, Universitas Indonesia, Jawa Barat, Indonesia
Submitted 09 June 2022; Revised 14 June 2022; Accepted 27 October 2022; Published 07 June 2024 *Corresponding author: rahmatullahzakaria@gmail.com

## Abstract
Second-degree burn injuries have high mortality which occur due to accidents event. This study aims to form primary burns dressing as polyelectrolyte film as controlling release of active substances. The effectiveness of this film can be enhanced by the addition of sap from Jatropha curcas plant which is proven to have metabolites such as Flavonoids, Saponin, and Tannin for healing burns. Polyelectrolyte has a good ability when formed from biodegradable, biocompatible and non-toxic biopolymer such as  carrageenan.  Carrageenan  is  extracted  from  Red  Algae  ( Eucheuma spinossum )  by  maceration method which combined with chitosan as co-polymer; evaluated through organoleptic test, swelling ratio test and gel fraction Test. Prospective formula was tested for the irritation for 3 x 24 hours thus the  effectiveness  test  was  performed  on  5  subgroups  of  mice  ( Mus musculus )  with  treatment:  JS0 (polyelectrolyte film only); JS5 (sap 5%); JS10 (sap 10%); PE/JS5 (polyelectrolyte film with sap 5%); PE/JS10 (polyelectrolyte film with sap 10%). Wound decrement was evaluated statistically by using One Way - Anova method (α = 0.05). The results show that the formula of PE/JS10 has burn healing activity of 100% for 14 day.
Keywords: Carrageenan, Jatropha curcas sap, Polyelectrolyte film

## FILM POLIELEKTROLIT BERBASIS KARAGENAN UNTUK LUKA BAKAR MENGGUNAKAN GETAH Jatropha curcas

## Abstrak
Luka  bakar  derajat  dua  merupakan  luka  yang  sering  terjadi  akibat  kecelakaan  dan  memiliki  nilai mortalitas yang tinggi. Pengembangan pembalut luka bakar primer seperti “film polielektrolit” dapat dilakukan untuk mengontrol pelepasan zat aktif dan menjaga kelembaban luka. Efektivitas film ini dapat  ditingkatkan  dengan  penambahan  getah  dari  tanaman  Jarak  Pagar  ( Jatropha curcas )  yang memiliki aktivitas dalam penyembuhan luka seperti Flavonoid, Saponin, dan Tanin. Matriks dari Film Polielektrolit memiliki kemampuan yang baik apabila dibentuk dari biopolimer yang biodegredibel, biokompatibel, dan nontoksik seperti Karagenan dan Kitosan. Karagenan diekstrak dari Alga Merah ( Eucheuma spinossum ) dengan metode maserasi. Karagenan dikombinasikan dengan Kitosan sebagai polimer penyusun film polielektrolit dievaluasi meliputi Uji Organoleptik, Uji Ratio Swelling , dan Uji Fraksi Gel. Formula terbaik diuji iritasi selama 3 x 24 jam, kemudian diuji efektivitas terhadap 5 kelompok hewan uji mencit dengan perlakuan berbeda yakni PE/JS0 (film polielektrolit); JS5 (getah 5%); JS10 (getah 10%); PE/JS5 (film polielektrolit dengan getah 5%); dan PE/JS10 (film polielektrolit dengan getah 10%). Dimana pengukuran penurunan dievaluasi secara statistik menggunakan metode One Way – Anova (α=0,05). Hasil menunjukan formula PE/JS10 memiliki aktivitas penyembuhan luka sebesar 100% selama 14 hari.
Kata Kunci: Karagenan, Getah Jatropha curcas , Film polielektrolit

## 1.  Pendahuluan
Luka  bakar  merupakan  luka  yang terjadi  akibat  dari  adanya  gradien  suhu tinggi  yang  terpapar  pada  permukaan  kulit dalam  durasi  tertentu.  Makin  tinggi  gradien suhu  serta  makin  lama  waktu  kontak  dapat mempengaruhi  tingkat  keparahan  serta  luas permukaan  dari  luka  bakar. 1 Menderita luka  bakar  seringkali  berdapampak  hingga kematian,  gangguan  emosional,  dan penurunan  kualitas  hidup. 2 Selama  periode tahun 2018, prevalensi kejadian luka bakar di Indonesia telah terjadi sebanyak 92.635 kasus dimana rentang usia 25-34 tahun lebih rentan dengan  skala  proporsi  cedera  luka  bakar sebesar 1.8/10, diikuti rentang usia 1-4 tahun dan 35-44 tahun dengan skala 1.4/103.
Film hidrogel adalah salah satu sediaan yang  dapat  digunakan  sebagai  wound  dress yang dapat mempercepat penyembuhan luka dengan  karakteristik  dapat  menyerap  air sangat  baik.  Film  polielektrolit  adalah  film yang  strukturnya  terbentuk  secara  spontan pada  kombinasi  makromolekul  bermuatan negatif  dan  positif  dalam  larutan. 4 Film hidrogel dalam bentuk polielektrolit memiliki sifat yang unik karena kemampuan basisnya untuk  terionisasi  yang  umumnya  tersusun atas  dua  atau  lebih  polimer  larut  air  yang memiliki  muatan  pada  unit  monomernya masing-masing. 5 Apabila  polimer  utamanya memiliki muatan negatif, maka dapat disebut sebagai  polielektrolit  anionik,  sebaliknya apabila  memiliki  muatan  positif  maka disebut  polielektrolit  kationik. 4,6 Kombinasi polimer karagenan dan kitosan terbukti dapat membentuk  satu  film  polielektrolit  yang baik  karena  interaksi  silang  ( crosslinked ) yang  terjadi  akibat  muatan  negatif  gugus sulfat dari karagenan yang mampu mengikat gugus  positif  amino  pada  kitosan  sehingga membentuk massa gel yang baik. 7 Karagenan merupakan polimer yang  biodegradabel  dan  biokompatibel yang  tergolong  poliglaktan  sulfat  yang mengandung  15-40%  ester  sulfat  dengan rerata  berat  molekul  lebih  dari  100  kDa. 8 Umumnya  dapat  ditemukan  pada  rumput laut jenis alga merah ( Eucheuma spinossum ) dengan  cara  diekstrak  menggunakan
teknik  sederhana  seperti  ekstraksi  maserasi menggunakan  air  panas  atau  larutan  alkali pada  suhu  tinggi,  serta  dapat  menghasilkan rendemen  karagenan  murni  sebear  40-50% dari sampel rumput laut. 9 Strukturnya terdiri dari rantai linear dari 3-linked-β-D-galactose (unit  G)  dan  4-linked-α-D-galactose  (unit D). 10 Kemampuan  pembentukan  gel  dari karagenan bergantung pada jumlah dari gugus sulfat yang terkandung didalamnya, semakin sedikit  gugus  sulfat  maka  menyebabkan terjadinya proses fase gel diakibatkan adanya proses crosslinking yang menyebabkan gelasi yang mampu meningkatkan viskositas. 11
Polimer  alami  yang  dapat  ditemukan pada  biota  laut  lainnya  adalah  kitosan  yang terdiri  atas  D-glukosamin  dan  N-asetil-D- glukosamin yang umumnya dapat ditemukan pada  cangkang  kepiting,  udang,  maupun lobster  yang  melimpah  di  Indonesia. 12 Sifat kelarutan, degradasi, reaktivitas, dan adsorpsi nya dipengaruhi oleh jumlah protonasi gugus amino  pada  monomer  D-glukosamin  yang terasetilasi. 13 Teknik  sintesis  kitosan  sangat kompleks yaitu dengan melakukan derivatisasi kitin melibatkan proses penghilangan protein yang  kemudian  dilakukan  demineralisasi untuk  menghilangkan  kandungan  karbon dan garam lainnya sebelum dilakukan proses akhir deasetilasi kitin. 14 Tanaman  Jarak  Pagar  ( Jatropha curcas ) dapat mudah didapatkan di Indonesia khususnya daerah Gorontalo dimana sebagian besar masyarakat menggunakan tanaman ini sebagai  tanda  pembatas  makam/kuburan. Terjadi  pertumbuhan  signifikan  terhadap penanaman  tanaman  in  dimana  sejak  awal tahun  2007  sebanyak  1.128  hektar  tanaman jarak  pagar  tumbugh  di  Gorontalo  dengan target  pemerintah  setempat  sebesar  10.000 hektar. 15 Berdasarkan data empiris, masyarakat daerah Gorontalo sering menggunakan getah jarak  pagar  (bahasa  gorontalo: balacae ) dalam bentuk rebusan sebagai penyembuhan bengkak,  sariawan  maupun  luka  terbuka. Tanaman ini mengandung metabolit sekunder berupa  Flavonoid,  Saponin  dan  Tanin  yang mampu memberikan efek dalam mempercepat proses penyembuhan luka. 16,17
.

## 2.  Metode
2.1.  Alat Neraca  analitik  (Kern  ABJ,  Jerman),
Centrifuge ( Scientific Centurion, UK), lemari pendingin  (Panasonic,  Indonesia), Blender (Philips, Belanda), Hot Plate (Biosan, Latvia), Oven  ( Shel Lab ,  USA),  cawan  porselen, thermometer ( OneMed ,  Indonesia),  gelas ukur, gelas baker, cawan petri.
2.2.  Bahan Aquades,  Alga  merah  ( Eucheuma spinossum ),  Asam  asetat  glasial  (Merck,
Jerman),  Asam  askorbat  ( Brataco chem , Indonesia)  Kalsium  klorida,  DMDM Hydantoin,  Getah  jarak  pagar  ( Eucheuma spinossum ), Gliserin, Asam klorida, Kitosan, PEG 4000.
2.3.  Prosedur
2.3.1. Preparasi Getah Jarak Pagar Penyadapan  dilakukan  dengan  cara dipetik  daun  jarak  pagar  dengan  melukai tangkai  tanaman  jarak  pagar,  maka  jarak pagar tersebut akan mengeluarkan getah agak keputih-putihan.  Setelah  cairan  getah  jarak menetes  masukkan  getah  dan  ditambahkan dengan Asam Askorbat sebagai antioksidan.
2.3.2. Skrining Fitokimia Getah Jarak Pagar
Skrining  fitokimia  getah  Jarak  Pagar ( Eucheuma spinossum )  dilakukan  dengan metode konvensional seperti berikut: 18
a. Identifikasi Flavonoid Identifikasi senyawa flavonoid dilakukan  dengan  melarutkan  getah  jarak pagar  dalam  methanol  panas  (50-55℃)  dan menambahkan  0,1  gram  serbuk  Magnesium dan 5 tetes HCl pekat.
b.  Identifikasi Tanin Identifikasi  senyawa  tanin  dilakukan dengan  melarutkan  getah  dalam  10  mL aquades  kemudian  disaring  dan  filtrat ditambah dengan 3 tetes FeCl3 1%.
c. Identifikasi Saponin
Identifikasi senyawa saponin dilakukan dengan melarutkan getah jarak pagar kedalam
10 mL air panas kemudian dikocok kuat-kuat selama 10 detik.
2.3.3. Ekstraksi Karagenan Karagenan di ekstraksi dengan larutan NaOH 0,9 N dengan perbandingan 1:20 (b/v) selama ±30 menit pada suhu 80-90℃. Ekstrak kental  dinetralisir  pHnya  menggunakan larutan HCl 1 N sampai pH 7-8. Ekstrak kental karagenan di presipitasi menggunakan CaCl3 1.5%  (b/v)  dan  dikeringkan  menggunakan oven  selama  3  x  60  menit  sampai  menjadi ekstrak kering berbentuk serbuk. 19
2.3.4. Karakterisasi Karagenan Dibuat  larutan  uji  standar  karagenan 0,05  gram  dalam  5  ml  ultrawater  menjadi 10.000  ppm.  Kemudian  diencerkan  menjadi konsentrasi  10  ppm  dalam  15  ml.  Sampel kemudian  dikarakterisasi  menggunakan Liquid Chromatography-Mass Spectroscopy yang dibandingkan dengan standar.
2.3.5. Pembuatan Kitosan yang dikembangkan Sebanyak 2 gram kitosan di keringkan kedalam  oven  pada  suhu  50℃  selama  ±  30 menit  sampai  berat  konstan.  Selanjutnya dilarutkan  kedalam  100  mL  larutan  asam asetat 2% (v/v). Diaduk hingga larutan kuning dan membentuk massa larutan kental. 20
2.3.6. Optimasi Basis Film Polielektrolit Variasi  konsentrasi  ekstrak  kering karagenan 2%, 3%, 4% (F1, F2, F3) dilarutkan kedalam aquades pada suhu 70-80℃ sambil diaduk  hingga  larutan  homogen.    Setelah itu  ditambahkan  dengan  kitosan  yang  telah dikembangkan  bersama  dengan  gliserin  dan PEG 400. Campuran diaduk dengan bantuan pemanasan  sampai  semua  bahan  terlarut. Kemudian dipanaskan pada suhu 50℃ sampai terbentuk massa film. 21
2.3.7. Evaluasi Basis Film Polielektrolit Evaluasi  sifat  fisik  dari  film  hidrogel polielektrolit dilakukan dengan beberapa uji seperti berikut: 22
a. Uji Organoleptik
Dilakukan  dengan  mengamati  dengan
saksama secara visual bentuk, warna, dan bau sediaan film polielektrolit seluruh formula uji.
b.  Uji Ratio Swelling Basis  dengan  ukuran  2  cm  x  2  cm dikeringkan  pada  suhu  60℃  ±  24  jam  dan ditimbang (Wd). Selanjutnya basis yang telah kering direndam dalam aquades 100 ml pada suhu ruang selama 24 jam. Ditimbang hasil pengembangan  dan  dihitung  rasio  dengan cara: 23
c. Fraksi Gel Potongan basis dengan ukuran 2 cm x 2 cm dikeringkan pada suhu 60℃ ± 24 jam dan ditimbang (W0). F kering dibungkus dengan kain kasa dan direndam dalam aquades sampai terendam sempurna selama 24 jam. Hidrogel yang tersisa di kain kasa dikeringkan kembali dalam oven pada suhu 60℃. Ditimbang hasil pengembangan (W1) dengan cara: 24
d.  Formulasi  Basis  Film  Polielektrolit Getah Jarak Pagar Formulasi  film  polielektrolit  getah jarak  pagar  dilakukan  dengan  menyiapkan basis  yang  terpilih  dari  hasil  optimasi, kemudian  dimasukkan  serbuk  getah  jarak pagar,  lalu  diaduk  lagi  hingga  homogen. Kemudian  ditambahkan  DMDM  Hydantoin ke  dalam  campuran  lalu  diaduk.  Setelah  itu campuran dimasukkan ke dalam cawan petri dan didiamkan pada suhu ruang. Larutan di panaskan pada suhu 50℃ sampai membentuk massa film.
e. Uji Iritasi Uji  iritasi  dilakukan  pada  punggung mencit  yang  sebelumnya  telah  dibersihkan dengan  alat  pencukur,  kemudian  sebelum perlakuan,  mencit  dibiarkan  selama  24  jam. Kemudian sediaan film polielektrolit dengan luas 2 x 2 cm dibalut pada mencit dan dibiarkan selama  24  jam.  Setelah  24  jam  pembalut luka dilepaskan dan dibiarkan selama 1 jam lalu  diamati.  Perlakuan  ini  dilakukan  juga pada kulit setelah 48 dan 72 jam. 25 Uji iritasi dihitung  dengan  cara  menghitung  indeks scoring  kejadian  iritasi  yang  terjadi  akibat pemaparan sediaan pada 3 kelompok mencit selama periode uji.
f. Uji  Efektivitas  Film  Polielektrolit Getah Jarak Pagar Uji  efektivitas  dilakukan  pada  5 kelompok  mencit  dengan  yang  dipaparkan film  polielektrolit  getah  jarak  pagar  dengan basis  polimer  karagenan.  Kelompok  uji dibagi kedalam 5 kategori pemaparan dengan PE/JS0 (film polielektrolit tanpa getah), JS5 (getah  jarak  pagar  5%),  JS10  (getah  jarak pagar  10%),  PE/JS5  (film  polielektrolit getah  jarak  pagar  5%),  dan  PE/JS10  (film polielektrolit  getah  jarak  pagar  10%),  yang kemudian  diukur  persentase  penurunan  dan penutupan  luka  selama  waktu  pengamatan yang  dilakukan. 26 Seluruh  kelompok  hewan uji telah didaftarkan dan disetujui oleh Komite Etik  Poltekkes  Kemenkes  Tasikmalaya  (No Reg: 3278012P).
g. Analisis  Statistik  Efektivitas  Film Polielektrolit Getah Jarak Pagar
Data  yang  diperoleh  dari  pengujian evaluasi  dan  efektivitas  sediaan  diuji normalitas data dengan metode Kolmogorov-
Smirnov  dengan  null  hipotesa  data  normal
Uji Fitokimia Pereaksi Perubahan Visual Interpretasi Hasil Flavonoid Mg + HCl Warna menjadi merah gelap + Saponin Aquades panas Terbentuk busa selama ±15 menit + Tanin FeCl3 Warna menjadi biru tua +
Tabel 1. Skrining kualitatif kandungan metabolit sekunder yang berpotensi mempercepat penyembuhan luka pada getah jarak pagar ( Jatropha curcas )
(p>0,05).  Data  kemudian  diuji  signfikansi percepatan  penyembuhan  lukanya  dengan One Way Anova dengan  asumsi  data non equal variance pada data uji.
3.  Hasil
3.1.  Skrining Fitokimia Getah Jarak Pagar Tabel  1  menunjukkan  hasil  skrining fitokimia  flavonoid  yang  bereaksi  positif karena  adanya  perubahan  warna  dengan
reagen  Mg  dan  HCl;  reaksi  akuades  panas menunjukkan  buih  pada  permukaan  yang menandakan  positif  adanya  saponin;  dan rekasi  tannin  dengan  FeCl3  menunjukkan warna biru indikasi positif adanya metabolit tersebut.
3.2.  Karakterisasi Karagenan
Hasil karakterisasi karagenan dengan  menggunakan instrument Liquid
Gambar 1. Kromatogram dan fragmentasi identifikasi Karagenan menggunakan LC-MS
Evaluasi F1
F2 F3 Organoleptik Warna Kuning Kuning Kuning gelap Kejernihan Jernih Jernih Keruh Aroma Tidak berbau Tidak berbau Tidak berbau Ratio swelling 2,11 3,62 4,33 Fraksi gel 59,00% 70,20% 75,02%
Tabel 2. Evaluasi fisik basis polielektrolit karagenan
Chromatography-Mass Spectroscopy (LC- MS)  Gambar  1,  didapatkan  bahwa  dalam kurva  fragmentasi  LC-MS  terdapat  6 peak yang  sama  persis  antara  preparat  ekstrak karagenan  dari  Alga  merah  ( Eucheuma spinossum )  dibandingkan  dengan  preparat karagenan murni PA dimana 6 peak muncul di daerah berat molukel terendah hingga terbesar yakni pada 157.1; 309.2; 425.2; 507.3; 639.3; dan 803.4.
3.3.  Evaluasi Basis Polielektrolit Karagenan dan Kitosan Tabel  2  menunjukkan  hasil  evaluasi basis  polielektrolit  berbasis  kitosan  dan karagenan  dengan  beberapa  parameter diantaranya yaitu organoleptik, ratio swelling, dan fraksi gel. Dari hasil evaluasi diperoleh basis  optimal  terdapat  pada  formula  2  (F2) dengan visualisasi kuning bening, jernih dan tidak berbau. Memiliki ratio swelling sebesar 3.62 dan persen fraksi gel sebesar 70.2%.
3.4.  Uji  Iritasi  Film  Polielektrolit  Berbasis Karagenan dengan Ekstrak Jarak Pagar Tabel 3 menunjukkan hasil uji iritasi dari 3  formula  basis  terhadap  kelompok  mencit dimana pengukuran dilakukan setiap 24 jam
selama 3 hari yang kemudian di ukur indeks iritasi  primer  yang  ditandai  dengan  adanya eritema maupun udema menggunakan metode penomoran skala Draize dan didapatkan nilai uji iritasi yaitu 0.00 yang menunjukkan tidak adanya tanda iritasi.
3.5.  Uji Efektivitas Film Polielektrolit Tabel  4  menggambarkan  bahwa  pada kelompok hewan uji PE/JS10 yang diberikan pemaparan  dengan  basis  polielektrolit  getah jarak  pagar  10%  memiliki  aktivitas  dalam percepatan  penyembuhan  luka  dengan persentase sebesar 100% pada hari ke 14 (2 minggu).

## 4.  Pembahasan
4.1.  Evaluasi  Basis  Film  Polielektrolit Karagenan dan Kitosan Pada Gambar 2 menunjukkan formula dengan  konsentrasi  karagenan  tertinggi memiliki  karakteristik  hidrogel  yang lebih  baik  apabila  dikombinasikan  dengan kitosan  sebagai  kopolimer  karena  adanya ikatan  elektrostatik  yang  terjadi  dari  dua muatan  berbeda  dari  kedua  polimer  mampu membentuk  ikatan  crosslink  yang  baik. 7 Namun semakin tinggi konsentrasi karagenan
Kelompok Hewan Uji 24 Jam 48 Jam 72 Jam Eritema Udema Eritema Udema Eritema Udema PE/JS0 0 0 0 0 0 0 PE/JS5 0 0 0 0 0 0 PE/JS10 0 0 0 0 0 0 Total 0 0 0 0 0 0 Indeks Iritasi Primer 0.00 Klasifikasi Tidak Mengiritasi Tabel 3. Hasil uji iritasi hewan uji dengan paparan film polielektrolit
Kelompok Hewan Uji Rerata Luas Luka Bakar Hari Ke (cm) Rerata Penurunan Luas Luka Selama 14 hari (cm) Rerata Persentase Penyembuhan Luka Selama 14 hari (%) 1 14 Kontrol 1,50 1,10 0,40 ± 0,38 26,67% PE/JS0 1,50 0,70 0,80 ± 0,46 53,33% JS5 1,50 0,60 0,90 ± 0,44 60,00% JS10 1,50 0,50 1,00 ± 0,46 66,67% PE/JS5 1,50 0,30 1,20 ± 0,45 80,00% PE/JS10 1,50 0,00 1,50 ± 0,47 100%
Tabel 4. Hasil uji efektivitas pada hewan uji dengan paparan film polielektrolit
juga menunjukkan makin keruhnya pemerian dari massa hidrogel, hal ini diasumsikan karena adanya saturasi solut terhadap pembawa yang menyebabkan terjadinya peristiwa presipitasi serat yang heterogen. 27,28 Sehingga dari hasil ini  formula  F2  dipilih  untuk  dilakukan  uji efektivitas.
4.2.  Evaluasi  Basis  Film  Polielektrolit Karagenan  dan  Kitosan  dengan  Getah
Jarak Pagar Hasil  pengamatan  selama  14  hari menunjukkan  bahwa  formula  film  hidrogel polielektrolit PE/JS10 mempunyai kecepatan penyembuhan luka yang lebih cepat dengan persentase  penurunan  luka  bakar  sebesar 100%  selama  14  hari.  Ini  menunjukkan percepatan  penutupan  luka  bakar  sebesar hampir  4  kali  dari  kelompok  uji  kontrol. Hal  ini  disebabkan  karena  adanya  senyawa

## A

## B
Control PE/JS0 JS5 JS10 PE/JS5 PE/JS10 Hari 1 Hari 6 Hari 10 Hari 14
Gambar 2. (A) Nilai evaluasi fisik hidrogel polielektrolit karagenan dan kitosan, (B) Grafik evaluasi dan efektivitas hidrogel polielektrolit terhadap penyembuhan luka bakar
senyawa flavonoid, saponin, dan tannin pada getah  Jarak  Pagar  yang  dapat  membantu mempercepat penyembuhan luka. 16
Hasil  pengamatan  pada  PE/JS0  (film polielektrolit  tanpa  getah  jarak  pagar)  juga mampu  mempercepat  penyembuhan  luka sebesar  2  kali  lebih  cepat  dari  kelompok kontrol.  Adanya  kopolimer  kitosan  pada pembentukan  massa  film  polielektrolit bersama dengan karagenan dipercaya mampu membantu  mempercepat  penyembuhan  luka karena  kandungan  N-asetil-β-D-glukosamin pada kitosan efektif secara ilmiah menginisiasi proliferasi  fibroblas  untuk  memproduksi kolagen yang dapat mempercepat penutupan luka. 29
4.3.  Analisa  Statistik  Film  Polielektrolit dengan Getah Jarak Pagar Hasil di uji statistik dengan metode One Way - Anova yang menunjukkan signifikansi pada  kelompok  uji  dengan  pemaparan  PE/ JS10  adalah  formula  yang  efektif  yang ditandai  dengan  persentase  penurunan/ penyembuhan  luas  luka  sebesar  100%  pada hari ke 14 dengan nilai P 0,008 (P<0,05).
5.  Kesimpulan Percepatan  penyembuhan  luka  dengan menggunakan  sediaan  film  polielektrolit dengan  bahan  aktif  getah  jarak  pagar ( Jatropha curcas )  meunjukkan  bahwa kombinasi  karagenan  dan  kitosan  memiliki nilai  rasio swelling sampai  4,33  dan  fraksi gel sebesar 75%. Kemampuan mempercepat penyembuhan  luka  dengan  PE/JS10  mampu memberikan  persentase  penurunan  luka sebesar 100% selama 14 hari (p<0,05).
Referensi
1.  Johnson C. Management of burns. Journal of  the  International  Society  for  Burn Injuries. 2018;36:435-440.
2.  Smolle  C,  Cambiaso-Daniel  J,  Forbes AA, Wurzer P, Hundeshagen G, Branski L,  Huss  F  et  al.  Recent  trends  in  burn epidemiology  worldwide:  A  systematic review.  Journal  of  the  International Society for Burn Injuries. 2016;5032:1-9.
3.  Kementrian  Kesehatan  RI.  Laporan
Nasional Riskesdas. Badan Penelitian dan Pengembangan  Kesehatan.  2018:259- 260.
4.  Folchman-Wagner  Z,  Zaro  J,  Shen  W. Characterization  of  Polyelectrolyte Complex  Formation  Between  Anionic and Cationic Poly(amino acids) and Their Potential  Application  pH-Dependent Drug Delivery. Molecules. 2017;22:1089.
5.  Wang Y. Soft Polyelectrolyte Hydrogel as Versatile Material in Different Application (thesis).  Ohio:  Case  Western  Reserve University; 2016.
6.  Shamsudeen R, Jayakumari V, Rajeswari R, Mukundan T. Polyelectrolyte hydrogels of  chitosan  and  polyacrylamide: A comparison of electroactive characteristics.  Indian  Journal  of Engineering  &  Materials  Sciences. 2012;19:331-337.
7.  Li  C,  Hein  S,  Wang  K.  Chitosan- Carageenan  Polyelectrolyte  Complex for the Delivery of Protein Drugs. ISRN Biomaterials. 2013;ID 629807.
8.  Necas  J,  Bartosikova  L.  Carageenan: a review. Veterinarni Medicina 2013;58(4):187-205.
9.  Siregar  R,  Santoso  J,  Uju.  Karakteristik Fisiko  Kimia  Kappa  Karaginan  Hasil Degradasi  Menggunakan  Hidrogen Peroksida.  Jurnal  Pengolahan  Hasil Perikanan Indonesia. 2016;19(3).
10. Sun Y, Yang B, Wu Y, Liu Y, Gu X, Zhang H,  et  al.  Structural  characterization  and antioxidant  activities  of  κ-carrageenan oligosaccharides  degraded  by  different methods. Food Chemistry. 2015;178:311- 318.
11. Campo V, Kawano D, Junior S, Carvalho I.  Carrageeenans:  Biological  Properties, Chemical  Modifications  and  Structural Analysis. Carbohydrate
Polymers. 2009;77:(167-180).
12. Kusuma H, Al-Sa’bani A, Darmokoesoemo H. N2O-Carboxymethil Chitosan: An Innovation in New Natural Preservative  from  Shrimp  Shell  Waste with  a  Nutritional  Value  and  Health Orientation.  Procedia  Food  Science.
2015;35-31
13.  de  Alvarenga  E.  Characterization  and Properties of Chitosan. Biotechnology of Biopolymers. 2010;(80):1155-1160.
14. Puvvada  Y,  Vankayalapati  S,  Sukhavasi S. Extraction of chitin from chitosan from exoskeleton of shrimp for application in the  pharmaceutical  industry.  Int  Current Pharmaceutical  Journal.  2012;1(9):258- 263.
15. Tahir M. Konferensi Nasional Pemanfaatan  Hasil  Samping  Industri Biodiesel  dari  Industri  Etanol;  2007 Maret 13; Jakarta, Indonesia. Indonesia: Universitas Negeri Gorontalo: 2007.
16. Susilowati A.  Pengaruh  Getah  Tanaman Jarak Pagar (Jatropha curcas L) Terhadap Daya  Hambat  Bakteri  Staphylococcus aureus Secara In Vitro (thesis). Makassar: Universitas Hasanudin; 2014.
17. Kesumasari  N,  Napitupulu  M,  Jura  M. Analisis  Kadar  Flavonoid  pada  Batang Jarak  Pagar  (Jatropha  curcas  L.),  Jarak Merah  (Jatropha  gossypifolia  L.),  dan Jarak  Kepyar  (Ricinus  communis  L.) Pengembangan  Tanaman  Jarak  Pagar (Jatropha  curcas  Linn)  Sebagai  Sumber Bio-Energi di Provinsi Gorontalo. Jurnal Akademika Kimia. 2018;7(1):28-31 18. Setyowati W, Ariani S, Ashadi, Mulyani B, Rahmawati C. Skrining Fitokimia dan Identifikasi  Komponen  Utama  Ekstrak Metanol  Kulit  Durian  (Durio  zibhetinys Murr.) Varietas Petruk. Seminar Nasional Kimia  dan  Pendidikan  Kimia  VI;  2014 Juni 21; Surakarta, Indonesia. Indonesia: Universitas Negeri Surakarta; 2014.
19. Distantina  S,  Fadilah,  Rochmadi, Fahrurrozi  M,  Wiratni.  Proses  Ekstraksi Karagenan  dari  Eucheuma  cottonii. Seminar  Rekayasa  Kimia  dan  Proses. 2010 Agustus 4-5; Semarang, Indonesia. Indonesia:  Universitas  Sebelas  Maret: 2010.
20. Silva  P,  Guedes  D,  Pecora  J,  Cruz- Filho  A.  Time-Dependent  Effects  of Chitosan  on  Dentin  Structures.  Dent  J. 2012;23(4):357-361.
21. Sanchez  MP,  Martin-Illana  A,  Ruiz- Caro  R,  Bermejo  P, Abad  MJ,  Carro  R, et  al.  Chitosan  and  Kappa-Carrageenan
Vaginal  Acyclovir  Formulations  for Prevention  of  Genital  Herpes.  In  Vitro and  Ex Vivo  Evaluation.  Marine  Drugs. 2015;13:5976-5992.
22. Tapia  C,  Escobar  Z,  Costa  E,  Sapag- Hagar J, Valenzuela F, Basualto C. et al. Comparative  studies  on  polyelectrolyte complexes  and  mixtures  of  chitosan- alginate and chitosan-carrageenan as  prolonged  diltiazem  clorhydrate release  systems.  European  Journal  of Pharmaceutics  and  Biopharmaceutics. 2004;57:65-75.
23. Rumyanstev  A,  Pan  A,  Roy  S,  De  P, Yu  E,  Kramarenko.  Polyelectrolyte Gel  Swelling  and  Condictuvity  vs Counterion Type, Cross-Linking Density, and  Solvent  Polarity.  Macromolecules. 2016;(49):6630-6643.
24. Alcantara,  Silva  M,  Varca,  Costa  G, Amaral,  Hage  R,  et  al.  Synthesis  and Characterization of Hydrogels Composed by Different Types of Poly(vinyl alcohol). The  6th  Latin  American  Congress  of Artificial  Organs  and  Biomaterials. Brasil: Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares IPEN-CNEN/SP: 2012.
25. de  Nobrega  A,  Alves  E,  Presgrave  R, Costa  N,  Delgado  I.  Determination  of eye  Irritation  Potential  of  Low-irritant Products: Comparison of in vitro Results with  the  in  vivo  Draize  Rabbit Test.  Int J  Brazilian  Archives  of  Biology  and Technology. 2012;(55):381-388.
26. Akhoondinasab  M,  Akhoondinasab  M, Saberi M. Comparison of Healing Effect of Aloe Vera Extract and Silver Sulfadiazine in  Burn  Injuries  in  Experimental  Rat Model. WJPS. 2014;5(1).
27. Al-Zebari N. Production and Characterisation  of  Self-Crosslinked Chitosan-Carrageenan  Polyelectrolyte Complexes  (dissertation).  Cambridge: University of Cambridge; 2017.
28. Al-Zebari N, Best S, Cameron R. Effects of  reaction  pH  on  self-crosslinked chitosan-carrageenan polyelectrolyte complex  gels  and  sponges.  Jphys Materials. 2019;015003.
29. Singh  R,  Shitiz  K,  Singh  A.  Chitin
and  chitosan:  biopolymers  for  wound management.  Int  Wound  Journal.  2017; 14, 1276-1289.