## Biosfera 29 (2) Mei 2012
Esteva, L.,  G. Rivas dan  H.M. Yang, 2007.
Assessing The Effects Of Parasitism
And  Predation  By  Water  Mites  On The  Mosquitoes. Tema  Tend.  Mat. Apl. Comput. , 8, No. 1, 63-72.
Gerecke  R.  2004.  The  water  mites  of
Madagascar (Acari, Hydrachnidia): a revised  list  completed  by  original material  conserved  at  the  Muséum national  d'Histoire  naturelle,  Paris.
Zoosystema 26 (3) : 393-418.
Mullen & R. Gary, 1975. Acarine Parasites Of Mosquitoes I.  A Critical Review Of All Known  Records  Of  Mosquitoes Parasitized  By  Mites. Journal  of Medical  Entomology ,  Volume  12,
Number  1,  30  April  1975  ,  pp.  27-
36(10)
Nildimar A.H., P.H Cabello, C.T Codeco dan R.L.  de  Oliveira.  2006.  Preliminary Data  on  the  Performance  of  Aedes aegypti  and  Aedes  albopictus Immatures Developing in Water-filled Tires  in  Rio  de  Janeiro.  Mem  Inst Oswaldo  Cruz,  Rio  de  Janeiro,  vol. 101(2): 225 – 228.
Pešić, V.M., 2003. Contribution To The Study Of  Some  Water  Mites  (Acari, Hydrachnidia)  From  Hungary. Folia
Historico Naturalia Musei Matraensis 27: 49–51
Smith, B.P., 1982. The Potential of Mites As Biological  Control  Agents  of Mosquitoes. In Biological  Control  of Pests by Mites. Edited by Hoy, M.A., G.L.  Cunningham  &  L.  Knutson. Proceedings  of  a  Conference held April  5-7,  1982,  at  the  University  of California, Berkeley.
Walter D. E. & H. C. Proctor (1999). Mites: Ecology,  Evolution  and  Behaviour. University  of  NSW  Press,  Sydney and  CABI,  Wallingford.  ISBN  0- 86840-529-

## Aktivitas Antifungi Ekstrak Etanol Daun Salam ( Syzygium polyanthum (Wight) Walp.) terhadap Pertumbuhan Jamur Candida albicans secara in vitro

## Any Fitriani, Yanti Hamdiyati, dan Ria Engriyani
Program Studi Biologi, Jurusan Pendidikan Biologi FPMIPA Universitas Pendidikan Indonesia Jl. Dr. Setiabudi No. 229, Bandung 40154 Email: anyfitriani@yahoo.com
Diterima April 2012 disetujui untuk diterbitkan Mei 2012

## Abstract
Antifungal activity of the ethanol extract of bay-leaf ( Syzygium  polyanthum (Wight) Walp.) against  growth  of  the  fungus Candida  albicans in  vitro  has  been  conducted.  Leaves  of S. polyanthum has been known to have potential as antifungal for skin fungal pathogen. This study aims  to  determine  antifungal  activity  of  the  ethanol  extract  of S.  polyanthum leaves  against growth of C. albicans .  Activity test was done by disc-diffusion  method and macro-dilution. This study used concentrations of ethanol leaf extract of S. polyanthum of 0.5%, 1%, 1.5%, 2%, and 2.5%  (w/v).  Negative  control  using  1%  DMSO  and  positive  controls  using  ketoconazole  30 mg/mL. The results shows that ethanol extract of leaves of S. polyanthum have activity as an antifungal. Ethanol extract of leaves of S. polyanthum based on the results of GCMS analysis of compounds containing chemical compounds such as terpenoids and fatty acids. Ethanol extract of leaves of S. polyanthum showed the highest inhibition zone diameter at a concentration of 1% (w/v) of 9.32 ± 0.21 mm. Value of Minimum inhibitory Concentration (MIC) for ethanol leaf extract of S. polyanthum present in a concentration of 0.5% (w/v) and the value of Minimum Fungicidal Concentration (MFC) present in a concentration of 1% (w/v).
Key Words : extract, Syzygium polyanthum , Candida albicans , antifungal

## Abstrak
Aktivitas  antijamur  ekstrak  etanol  daun  salam  ( Syzygium  polyanthum (Wight)  Walp.) Terhadap  pertumbuhan  jamur Candida  albicans secara  in  vitro  telah  dilakukan.  Daun  S. polyanthum  telah  diketahui  memiliki  potensi  sebagai  antijamur  untuk  patogen  jamur  kulit. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antijamur ekstrak etanol S. polyanthum daun terhadap pertumbuhan C. albicans . Uji aktivitas dilakukan dengan metode difusi cakram dan makro-dilusi.    Penelitian  ini  menggunakan  konsentrasi  ekstrak  etanol  daun S.  polyanthum sebesar 0,5%, 1%, 1,5%, 2%, dan 2,5% (b / v). Kontrol negatif menggunakan DMSO 1% dan kontrol  positif  menggunakan  ketoconazole  30  mg  /  mL.  Hasil  menunjukkan  bahwa  ekstrak etanol daun S. polyanthum memiliki aktivitas sebagai antijamur. Ekstrak etanol dari daun S. polyanthum berdasarkan  hasil  analisis  GCMS  senyawa  yang  mengandung  senyawa  kimia seperti  terpenoid  dan  asam  lemak.  Ekstrak  etanol  dari  daun  salam  menunjukkan  diameter daerah penghambatan tertinggi pada konsentrasi 1% (b / v) 9,32 ± 0,21 mm.  Nilai Konsentrasi penghambatan minimum (MIC) untuk ekstrak etanol daun salam dalam konsentrasi 0,5% (b / v) dan nilai Konsentrasi Minimum fungisida (MFC) hadir dalam konsentrasi 1% (b / v) .
Kata Kunci : ekstrak, Syzygium polyanthum , Candida albicans , anti jamur.

## Pendahuluan
Indonesia  dikenal  sebagai  negara yang  memiliki  keanekaragaman  hayati terbesar  kedua  setelah  Brazil.  Kondisi tersebut  tentu  sangat  potensial  bagi
Indonesia  dalam  mengembangkan  obat herbal  yang  berasal  dari  tanaman  obat  . Salah satu manfaat tanaman obat tradisional adalah  sebagai  antifungi.  Salah  satu tumbuhan  yang  dapat  dijadikan  sebagai
bahan  antifungi  alami  adalah  salam ( Syzygium polyanthum ( Wight) Walp.). Salam merupakan  daun  rempah dengan nama ilmiah Syzygium polyanthum .
Tumbuhan  ini  ditemukan  tumbuh  liar  di hutan-hutan di daerah pegunungan dengan ketinggian  1800  m  atau  di  pekarangan rumah.  Salam  merupakan  salah  satu tanaman  penghasil  minyak  esensial terutama  banyak  dihasilkan  pada  bagian daun (Musanif et al ., 2008).
Selain  digunakan  sebagai  bumbu, S. polyanthum dapat  dimanfaatkan  sebagai obat. S.  polyanthum berkhasiat  mengobati kencing  manis,  tekanan  darah  tinggi,  sakit maag,  diare  dan  asam  urat.  Kandungan minyak esensial daun salam terdiri dari sitral, eugenol,  tanin,  fenol  sederhana ,  dan senyawa flavonoid (Musanif et  al .,  2008).
Kandungan  kimia  lainnya  yaitu saponin, triterpenoid, polifenol, sesquiterpenoid, dan lakton . Daun salam diketahui mengandung vitamin  A,  vitamin  C,  dan  vitamin  E  yang berfungsi sebagai antioksidan. Minyak atsiri yang  terkandung  dalam  salam  dapat berfungsi sebagai antimikroba . Ekstrak  dari daun  salam  menunjukkan  efek  antijamur dan antibakteri ( Guzman, dan Siemonsma, 1999 ) .
Infeksi  serius  yang  disebabkan  oleh jamur Candida albicans , telah menunjukkan peningkatan  resistensi  terhadap  agen antifungi (Rukayadi et al ., 2006). Kandidiasis adalah  penyakit  pada  kulit,  kuku,  selaput lendir, dan alat dalam yang disebabkan oleh C.  albicans yang  sering  ditemukan  pada manusia  dan  hewan  sebagai  saprofit. Tingginya  tingkat  resistensi C.  albicans terhadap agen antifungi seperti amfoterisin- B  dan  flukonazol,  maka  sangat  diperlukan agen  antifungi  alternatif  berupa  senyawa aktif  dari  tumbuhan  yang  sangat  efektif terhadap C. albicans (Himratul-Aznita et al ., 2011).  Berdasarkan  permasalahan  di  atas, maka  perlu  dilakukan  dan  dikembangkan penelitian  lebih  lanjut  mengenai  aktivitas antifungi  dari  ekstrak  etanol  daun S. polyanthum (Wight)  Walp.  terhadap pertumbuhan  jamur C.  albicans penyebab penyakit kandidiasis secara in vitro .
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui kandungan senyawa kimia yang terdapat  dalam  ekstrak  etanol  daun S. polyanthum ,  konsentrasi  ekstrak  etanol daun S.  polyanthum yang  menunjukkan
d a y a   h a m b a t   t e r t i n g g i   t e r h a d a p pertumbuhan  jamur C.  albicans ,  nilai  MIC, dan  nilai  MFC  dari  ekstrak  etanol  daun S. polyanthum .

## Materi dan Metode

## Bahan Penelitian
Daun tanaman salam yang digunakan berasal dari daerah Sukabumi dan jamur C. albicans ATCC  10231yang  diujikan diperoleh  dari  Laboratorium  Mikrobiologi Sekolah Farmasi ITB.
Identifikasi Daun Syzygium polyanthum (Wight) Walp.
Tahap  awal  penelitian,  dilakukan identifikasi daun Syzygium polyanthum yang mengacu  pada  kunci  identifikasi  Becker  & Brink (1963)
.

## Ekstraksi Bahan
Ekstraksi  dilakukan  dengan  metode maserasi.  Daun  salam  dipanen  dan dibersihkan dengan air kran yang mengalir, kemudian  dikeringkan  pada  tempat  yang tidak langsung terkena matahari pada suhu ruang.  Daun  yang  telah  kering,  dihaluskan sehingga berbentuk serbuk yang siap untuk diekstraksi. Sebanyak 50 gram serbuk daun ditambahkan  pelarut  etanol  Absolut ( Analyst ) sebanyak 200 mL (1:4) (Doughari, 2006) , kemudian  diaduk  dan  dimaserasi selama  24  jam.  Simplisia  yang  telah d i r e n d a m   s e l a n j u t n y a   d i s a r i n g menggunakan kertas saring Whatman No.1. Ekstrak  etanol  daun  salam  selanjutnya dievaporasi  dengan  menggunakan Rotary o evaporator pada suhu 50 C. Ekstrak etanol daun  kemudian  diencekan  dengan  pelarut DMSO  1%  untuk  memperoleh  konsentrasi ekstrak 0,5%, 1%, 1,5%, 2%, dan 2,5% (b/v).
Penyediaan  Inokulum  Jamur Candida albicans
Tahapan  ini  dilakukan  dengan menginokulasikan satu ose biakan jamur C. albicans yang  telah  disubkultur  pada Medium PDA selama 2 x 24 jam ke dalam 50 mL  Medium Potato  Dextrose  broth (PDB) steril,  kemudian  diinkubasikan  pada  suhu o 37 C. Inokulum jamur diaktivasi hingga pada
jam ke-14, kemudian dipanen sebanyak 10 mL  dan  dimasukkan  ke  dalam  tabung Eppendorf steril,  kemudian  di  sentrifugasi dengan  kecepatan  3000  rpm  selama  15 menit.  Pelet  dicuci  dengan  larutan  NaCl 0,85%  steril  kemudian  di  sentrifugasi kembali.  Proses  pencucian  ini  dilakukan sebanyak  dua  kali.  Pelet  yang  dihasilkan disuspensikan kembali dengan larutan NaCl 0,85%  steril  dan  disesuaikan  turbiditasnya dengan  standar  turbiditas  0.5  McFarland
6 (10   CFU/mL)    (Nazemiyeh, et  al .,  2011).
Standar  McFarland  yang  umum  digunakan untuk  uji  aktivitas  antimikroba  adalah  0.5,
6 yang dianggap sesuai 1~5x10  CFU/mL.
Analisis Ekstrak dengan Gas Chromato- graphy Mass Spectrometry (GCMS )
Pada  sampel  ekstrak  etanol  daun  S. polyanthum  dilakukan  identifikasi  senyawa kimia dengan GCMS untuk mengetahui jenis senyawa  yang  terkandung  dalam  ekstrak tersebut.  Sampel  yang  akan  dianalisis disiapkan,  ekstrak  daun S.  polyanthum berupa pasta sebanyak 0,1 gram dilarutkan dalam  2  mL  etanol  Absolut  (Analyst) kemudian dimasukkan ke dalam botol gelap. Selanjutnya dianalisis dengan GCMS.
Pembuatan  Kurva  Tumbuh  dan  Kurva Baku Candida albicans
Pembuatan  kurva  tumbuh  bertujuan untuk menentukan fase pertumbuhan paling optimal  (fase  logaritmik)  dari  jamur C. albicans .  Kurva  tumbuh  dibuat  dengan menggunakan  metode  turbiditimetri.  Kurva baku  dilakukan  untuk  menentukan  usia inokulum pada fase logaritmik yang memiliki laju  pertumbuhan  tertinggi  berdasarkan jumlah sel jamur dan nilai absorbansi. Kurva baku  dibuat  dengan  menghitung  jumlah jamur pada fase logaritmik, yaitu pada jam ke-8, 10, 12, dan 14.
Pengujian  Aktivitas  Antifungi  dengan metode Disc-diffusion
Pengujian  aktivitas  antifungi  tahap awal dilakukan menggunakan metode disc- diffusion dengan  teknik spread  plate . Medium  PDA  yang  telah  dicairkan
dimasukkan ke dalam cawan Petri sebanyak 9  mL  dan  dibiarkan  hingga  memadat. Setelah  itu,  ditambahkan  200  µL  suspensi inokulum  jamur C.albicans yang  telah disesuaikan  dengan  standar  turbuditas  0.5 McFarland.  Inokulum  diratakan  di  atas p e r m u k a a n   M e d i u m   P D A  d e n g a n menggunakan batang L steril. Kertas cakram direndam  ke  dalam  setiap  konsentrasi ekstrak selama 1 menit dan diletakankan di atas  permukaan  medium  yang  telah b e r c a m p u r   b i a k a n   j a m u r   d e n g a n menggunakan pinset steril. Hal yang sama dilakukan  untuk  kontrol  positif  dan  negatif.
o Kultur diinkubasi pada suhu 37 C selama 24 jam. Setelah inkubasi, lempeng agar diamati inhibisi pertumbuhannya dengan mengukur diameter  daerah  bening  disekitar  cakram (Cappuccino  and  Sherman,  2005). Konsentrasi ekstrak etanol daun salam yang digunakan, yaitu 0,5%, 1%, 1,5%, 2%, dan 2,5%  (b/v)  (modifikasi  Noveriza  & Miftakhurohmah,  2010).  Kontrol  negatif menggunakan DMSO 1% dan kontrol positif m e n g g u n a k a n   k e t o k o n a z o l   d e n g a n konsentrasi 30 mg/mL.
Minimum Inhibitory Concentration (MIC)
P e n g u j i a n   i n i   d i l a k u k a n   d e n g a n menggunakan  metode macro-dilution . Konsentrasi ekstrak etanol daun salam yang digunakan pada uji ini, yaitu 0,5%, 1%, 1,5%, dan 2% (b/v). Kontrol negatif menggunakan DMSO 1% dan kontrol positif menggunakan ketokonazol  30  mg/mL.  Sebanyak  4  mL Medium Potato Dextrose Broth (PDB) steril dimasukkan  ke  dalam  tabung  steril. Kemudian  ditambahkan  suspensi  inokulum yang telah disesuaikan dengan standar 0.5 McFarland  sebanyak  900  µL.  Lalu dimasukkan  100  µL aliquot dari  masing- masing konsentrasi ekstrak ke dalam tabung tersebut.  Untuk  tabung  kontrol  positif  dan kontrol negatif dilakukan dengan cara yang sama.
o Kemudian  diinkubasi  pada  suhu  37 C selama  24  jam  dan  diamati  pertumbuhan dan nilai MIC. Penentuan nilai MIC dilakukan secara  kasat  mata  dengan  melihat kekeruhan  kultur  jamur  pada  setiap konsentrasi  ekstrak,  kultur  jamur  dengan
Fitriani, Any  dkk., Aktivitas Antifungsi Ekstrak Etanol  71 -  79
bahan  antifungi  alami  adalah  salam ( Syzygium polyanthum ( Wight) Walp.).
Salam merupakan  daun  rempah dengan nama ilmiah Syzygium polyanthum .
Tumbuhan  ini  ditemukan  tumbuh  liar  di hutan-hutan di daerah pegunungan dengan ketinggian  1800  m  atau  di  pekarangan rumah.  Salam  merupakan  salah  satu tanaman  penghasil  minyak  esensial terutama  banyak  dihasilkan  pada  bagian daun (Musanif et al ., 2008).
Selain  digunakan  sebagai  bumbu, S. polyanthum dapat  dimanfaatkan  sebagai obat. S.  polyanthum berkhasiat  mengobati kencing  manis,  tekanan  darah  tinggi,  sakit maag,  diare  dan  asam  urat.  Kandungan minyak esensial daun salam terdiri dari sitral, eugenol,  tanin,  fenol  sederhana ,  dan senyawa flavonoid (Musanif et  al .,  2008).
Kandungan  kimia  lainnya  yaitu saponin, triterpenoid, polifenol, sesquiterpenoid, dan lakton . Daun salam diketahui mengandung vitamin  A,  vitamin  C,  dan  vitamin  E  yang berfungsi sebagai antioksidan. Minyak atsiri yang  terkandung  dalam  salam  dapat berfungsi sebagai antimikroba . Ekstrak  dari daun  salam  menunjukkan  efek  antijamur dan antibakteri ( Guzman, dan Siemonsma, 1999 ) .
Infeksi  serius  yang  disebabkan  oleh jamur Candida albicans , telah menunjukkan peningkatan  resistensi  terhadap  agen antifungi (Rukayadi et al ., 2006). Kandidiasis adalah  penyakit  pada  kulit,  kuku,  selaput lendir, dan alat dalam yang disebabkan oleh C.  albicans yang  sering  ditemukan  pada manusia  dan  hewan  sebagai  saprofit. Tingginya  tingkat  resistensi C.  albicans terhadap agen antifungi seperti amfoterisin- B  dan  flukonazol,  maka  sangat  diperlukan agen  antifungi  alternatif  berupa  senyawa aktif  dari  tumbuhan  yang  sangat  efektif terhadap C. albicans (Himratul-Aznita et al ., 2011).  Berdasarkan  permasalahan  di  atas, maka  perlu  dilakukan  dan  dikembangkan penelitian  lebih  lanjut  mengenai  aktivitas antifungi  dari  ekstrak  etanol  daun S. polyanthum (Wight)  Walp.  terhadap pertumbuhan  jamur C.  albicans penyebab penyakit kandidiasis secara in vitro .
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui kandungan senyawa kimia yang terdapat  dalam  ekstrak  etanol  daun S. polyanthum ,  konsentrasi  ekstrak  etanol daun S.  polyanthum yang  menunjukkan
d a y a   h a m b a t   t e r t i n g g i   t e r h a d a p pertumbuhan  jamur C.  albicans ,  nilai  MIC, dan  nilai  MFC  dari  ekstrak  etanol  daun S. polyanthum .

## Materi dan Metode

## Bahan Penelitian
Daun tanaman salam yang digunakan berasal dari daerah Sukabumi dan jamur C. albicans ATCC  10231yang  diujikan diperoleh  dari  Laboratorium  Mikrobiologi Sekolah Farmasi ITB.
Identifikasi Daun Syzygium polyanthum
(Wight) Walp.
Tahap  awal  penelitian,  dilakukan identifikasi daun Syzygium polyanthum yang mengacu  pada  kunci  identifikasi  Becker  & Brink (1963)
.

## Ekstraksi Bahan
Ekstraksi  dilakukan  dengan  metode maserasi.  Daun  salam  dipanen  dan dibersihkan dengan air kran yang mengalir, kemudian  dikeringkan  pada  tempat  yang tidak langsung terkena matahari pada suhu ruang.  Daun  yang  telah  kering,  dihaluskan sehingga berbentuk serbuk yang siap untuk diekstraksi. Sebanyak 50 gram serbuk daun ditambahkan  pelarut  etanol  Absolut ( Analyst ) sebanyak 200 mL (1:4) (Doughari,
2006) , kemudian  diaduk  dan  dimaserasi selama  24  jam.  Simplisia  yang  telah d i r e n d a m   s e l a n j u t n y a   d i s a r i n g menggunakan kertas saring Whatman No.1. Ekstrak  etanol  daun  salam  selanjutnya dievaporasi  dengan  menggunakan Rotary o evaporator pada suhu 50 C. Ekstrak etanol daun  kemudian  diencekan  dengan  pelarut DMSO  1%  untuk  memperoleh  konsentrasi ekstrak 0,5%, 1%, 1,5%, 2%, dan 2,5% (b/v).
Penyediaan  Inokulum  Jamur Candida albicans
Tahapan  ini  dilakukan  dengan menginokulasikan satu ose biakan jamur C. albicans yang  telah  disubkultur  pada Medium PDA selama 2 x 24 jam ke dalam 50 mL  Medium Potato  Dextrose  broth (PDB) steril,  kemudian  diinkubasikan  pada  suhu
o 37 C. Inokulum jamur diaktivasi hingga pada
jam ke-14, kemudian dipanen sebanyak 10 mL  dan  dimasukkan  ke  dalam  tabung Eppendorf steril,  kemudian  di  sentrifugasi dengan  kecepatan  3000  rpm  selama  15 menit.  Pelet  dicuci  dengan  larutan  NaCl 0,85%  steril  kemudian  di  sentrifugasi kembali.  Proses  pencucian  ini  dilakukan sebanyak  dua  kali.  Pelet  yang  dihasilkan disuspensikan kembali dengan larutan NaCl 0,85%  steril  dan  disesuaikan  turbiditasnya dengan  standar  turbiditas  0.5  McFarland 6 (10   CFU/mL)    (Nazemiyeh, et  al .,  2011).
Standar  McFarland  yang  umum  digunakan untuk  uji  aktivitas  antimikroba  adalah  0.5,
6 yang dianggap sesuai 1~5x10  CFU/mL.
Analisis Ekstrak dengan Gas Chromato- graphy Mass Spectrometry (GCMS )
Pada  sampel  ekstrak  etanol  daun  S. polyanthum  dilakukan  identifikasi  senyawa kimia dengan GCMS untuk mengetahui jenis senyawa  yang  terkandung  dalam  ekstrak tersebut.  Sampel  yang  akan  dianalisis disiapkan,  ekstrak  daun S.  polyanthum berupa pasta sebanyak 0,1 gram dilarutkan dalam  2  mL  etanol  Absolut  (Analyst) kemudian dimasukkan ke dalam botol gelap. Selanjutnya dianalisis dengan GCMS.

## Pembuatan  Kurva  Tumbuh  dan  Kurva Baku Candida albicans
Pembuatan  kurva  tumbuh  bertujuan untuk menentukan fase pertumbuhan paling optimal  (fase  logaritmik)  dari  jamur C. albicans .  Kurva  tumbuh  dibuat  dengan menggunakan  metode  turbiditimetri.  Kurva baku  dilakukan  untuk  menentukan  usia inokulum pada fase logaritmik yang memiliki laju  pertumbuhan  tertinggi  berdasarkan jumlah sel jamur dan nilai absorbansi. Kurva baku  dibuat  dengan  menghitung  jumlah jamur pada fase logaritmik, yaitu pada jam ke-8, 10, 12, dan 14.
Pengujian  Aktivitas  Antifungi  dengan metode Disc-diffusion
Pengujian  aktivitas  antifungi  tahap awal dilakukan menggunakan metode disc- diffusion dengan  teknik spread  plate . Medium  PDA  yang  telah  dicairkan
dimasukkan ke dalam cawan Petri sebanyak 9  mL  dan  dibiarkan  hingga  memadat. Setelah  itu,  ditambahkan  200  µL  suspensi inokulum  jamur C.albicans yang  telah disesuaikan  dengan  standar  turbuditas  0.5 McFarland.  Inokulum  diratakan  di  atas p e r m u k a a n   M e d i u m   P D A  d e n g a n menggunakan batang L steril. Kertas cakram direndam  ke  dalam  setiap  konsentrasi ekstrak selama 1 menit dan diletakankan di atas  permukaan  medium  yang  telah b e r c a m p u r   b i a k a n   j a m u r   d e n g a n menggunakan pinset steril. Hal yang sama dilakukan  untuk  kontrol  positif  dan  negatif.
o Kultur diinkubasi pada suhu 37 C selama 24 jam. Setelah inkubasi, lempeng agar diamati inhibisi pertumbuhannya dengan mengukur diameter  daerah  bening  disekitar  cakram (Cappuccino  and  Sherman,  2005). Konsentrasi ekstrak etanol daun salam yang digunakan, yaitu 0,5%, 1%, 1,5%, 2%, dan 2,5%  (b/v)  (modifikasi  Noveriza  & Miftakhurohmah,  2010).  Kontrol  negatif menggunakan DMSO 1% dan kontrol positif m e n g g u n a k a n   k e t o k o n a z o l   d e n g a n konsentrasi 30 mg/mL.
Minimum Inhibitory Concentration (MIC)
P e n g u j i a n   i n i   d i l a k u k a n   d e n g a n menggunakan  metode macro-dilution . Konsentrasi ekstrak etanol daun salam yang digunakan pada uji ini, yaitu 0,5%, 1%, 1,5%, dan 2% (b/v). Kontrol negatif menggunakan DMSO 1% dan kontrol positif menggunakan ketokonazol  30  mg/mL.  Sebanyak  4  mL Medium Potato Dextrose Broth (PDB) steril dimasukkan  ke  dalam  tabung  steril. Kemudian  ditambahkan  suspensi  inokulum yang telah disesuaikan dengan standar 0.5 McFarland  sebanyak  900  µL.  Lalu dimasukkan  100  µL aliquot dari  masing- masing konsentrasi ekstrak ke dalam tabung tersebut.  Untuk  tabung  kontrol  positif  dan kontrol negatif dilakukan dengan cara yang sama.
o Kemudian  diinkubasi  pada  suhu  37 C selama  24  jam  dan  diamati  pertumbuhan dan nilai MIC. Penentuan nilai MIC dilakukan secara  kasat  mata  dengan  melihat kekeruhan  kultur  jamur  pada  setiap konsentrasi  ekstrak,  kultur  jamur  dengan
konsentrasi  ekstrak  terendah  yang menunjukkan  adanya  penghambatan pertumbuhan  jamur Candida dinyatakan sebagai  nilai  MIC  ( Himratul-Aznita et  al. , 2011 ).  Uji  ini  dilakukan  dengan  dua  kali pengulangan.

## Minimum  Fungicidal  Concentration
(MFC)
Penentuan  nilai  MFC  dilakukan dengan  metode  lempeng  agar . MFC ditentukan  dengan  mengambil  1  mL inokulum  dari  setiap  tabung  reaksi  pada penentuan  MIC.  Inokulum  diinokulasi dengan  cara  dimasukkan  ke  dalam  cawan Petri  dan  ditambahkan  9  mL  Medium  PDA yang telah mencair, kemudian diratakan dan dibiarkan hingga memadat. Plate diinkubasi o pada suhu 37 C selama 24 jam. Parameter pada uji ini yaitu dengan menghitung jumlah koloni  jamur  yang  tumbuh  pada  lempeng agar  (Doughari,  2006).  Nilai  MFC  adalah konsentrasi  ketika  tidak  ada  pertumbuhan atau kurang dari tiga koloni yang diperoleh untuk  memberikan  sekitar  99-99,5% aktivitas membunuh ( Himratul-Aznita et al , 2011 ).

## Analisis Data
Data  hasil  uji  aktivitas  daya  hambat ekstrak  dengan  metode disc-diffusion dianalisis dengan uji statistik menggunakan program SPSS versi 16.0 for window , yaitu uji  normalitas  ( Kolmogorov  smirnov ) , uji homogenitas ( Levene Test ), dan dilanjutkan dengan  uji  non  parametrik Kruskal-Wallis untuk menguji hipotesis.

## Hasil dan Pembahasan
Senyawa-Senyawa dalam Ekstrak Etanol Daun Syzygium polyanthum (Wight) Walp
Ekstrak  etanol  daun S.  polyanthum memiliki  kandungan  senyawa  kimia  yang cukup beragam. Berdasarkan kromatogram hasil  GCMS,  terdapat  83  senyawa  pada ekstrak  etanol  daun S.  polyanthum . B e b e r a p a   s e n y a w a   y a n g   d o m i n a n diantaranya seperti pada Tabel 1. Senyawa yang  dominan  tersebut  ditentukan berdasarkan  persentase  total  pada kromatogram hasil GCMS.
Tabel 1. Senyawa-Senyawa Dominan yang Terkandung dalam Ekstrak Etanol Daun Syzygium polyanthum
Table 1. The dominant compunds inside the ethanol extract of Syzygium polyanthum leaves
Berdasarkan  Tabel  1  senyawa  yang paling dominan pada ekstrak etanol daun S. p o l y a n t h u m a d a l a h M e t h y l   ( 8 e ) - 8 - octadecenoate (asam  oleat)  sebanyak 17,376 . Sedangkan  senyawa  yang menunjukkan  persentase  kandungan terendah  adalah Tetradecanoic  acid (asam miristat) sebesar 1,340 .
Uji  Aktivitas  Antifungi  Ekstrak  Etanol Daun Syzygium  polyanthum (Wigth) Walp. terhadap Jamur Candida albicans
Parameter  yang  digunakan  dalam  uji aktivitas  ini  adalah  diameter  zona  hambat yang berupa daerah bening di sekitar kertas cakram.  Hasil  pengukuran  diameter  zona hambat  yang  terbentuk  dari  ekstrak  etanol daun S.  polyanthum dapat  dilihat  pada Tabel 2.
Tabel 2 menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun S. polyanthum memiliki diameter zona hambat tertinggi pada konsentrasi 1% (b/v) dengan rata-rata sebesar 9,32 mm (SD ± 0,21). Akan  tetapi  terjadi  penurunan  diameter  zona  hambat  pada  saat  peningkatan  konsentrasi ekstrak etanol daun S. polyanthum , yaitu pada konsentrasi 1,5% hingga 2,5% (b/v) diameter zona hambat menurun hingga 7,52 ± 0,51 mm. Diameter zona hambat dari ekstrak etanol daun S. polyanthum terhadap jamur C. albicans dapat dilihat pada Gambar 1 berikut ini.
0,5%
Ketokonazol 30 mg/mL
DMSO
1%
No. Golongan Senyawa Nama Senyawa Total (%) 1 Terpenoid: Farnesol 3,961 2 Sesquiterpenoid Farnesyl acetate 2,810 3 Terpenoid: Diterpenoid Phytol ((2E)-3,7,11,15-Tetramethyl-2- Hexadecen-1-ol) 4,263 4 Tetradecanoic acid (Asam Miristat) 1,340 5 Hexadecanoic Acid (Asam palmitat) 12,087 6 Asam Lemak Methyl (8e)-8-octadecenoate (Asam oleat) 17,376 7 cis-Vaccenic Acid (Asam oleat) 10,936 8 Octadecanoic acid (Asam stearat) 2,977
Tabel 2. Diameter Zona Hambat (mm) Ekstrak Etanol Daun Syzygium polyanthum terhadap Pertumbuhan Jamur Candida albicans Table 2. Inhibitoion zone diameter (mm) of ethanol extract of Syzygium polyanthum leaves on the growth of Candida albicans Agen Konsentrasi Rerata SD Ekstrak Daun 0,5% (5 mg/mL) 8,60 8,60 ± 0,63 1% (10 mg/mL) 9,32 9,32 ± 0,21 1,5% (15 mg/mL) 8,02 8,02 ± 0,29 2% (20 mg/mL) 7,60 7,60 ± 0,33 2,5% (25 mg/mL) 7,52 7,52 ± 0,51 Ketokonazol 30 mg/mL 12,90 12,90 ± 0,36 DMSO 1% 1% - -
Gambar 1. Zona  hambat  ekstrak  etanol  daun Syzygium  polyanthum terhadap pertumbuhanjamur Candida albicans Figure 1. Inhibition zone of ethanol extract of Syzygium polyanthum leaves on the growth of
Candida albicans
Keterangan: Tanda panah menunjukkan adanya diameter zona hambat
74
Fitriani, Any  dkk., Aktivitas Antifungsi Ekstrak Etanol  71 -  79
1% 1,5% 2%
2,5%
konsentrasi  ekstrak  terendah  yang menunjukkan  adanya  penghambatan pertumbuhan  jamur Candida dinyatakan sebagai  nilai  MIC  ( Himratul-Aznita et  al. , 2011 ).  Uji  ini  dilakukan  dengan  dua  kali pengulangan.

## Minimum  Fungicidal  Concentration
(MFC)
Penentuan  nilai  MFC  dilakukan dengan  metode  lempeng  agar . MFC ditentukan  dengan  mengambil  1  mL inokulum  dari  setiap  tabung  reaksi  pada penentuan  MIC.  Inokulum  diinokulasi dengan  cara  dimasukkan  ke  dalam  cawan Petri  dan  ditambahkan  9  mL  Medium  PDA yang telah mencair, kemudian diratakan dan dibiarkan hingga memadat. Plate diinkubasi o pada suhu 37 C selama 24 jam. Parameter pada uji ini yaitu dengan menghitung jumlah koloni  jamur  yang  tumbuh  pada  lempeng agar  (Doughari,  2006).  Nilai  MFC  adalah konsentrasi  ketika  tidak  ada  pertumbuhan atau kurang dari tiga koloni yang diperoleh untuk  memberikan  sekitar  99-99,5% aktivitas membunuh ( Himratul-Aznita et al , 2011 ).

## Analisis Data
Data  hasil  uji  aktivitas  daya  hambat ekstrak  dengan  metode disc-diffusion dianalisis dengan uji statistik menggunakan program SPSS versi 16.0 for window , yaitu uji  normalitas  ( Kolmogorov  smirnov ) , uji homogenitas ( Levene Test ), dan dilanjutkan dengan  uji  non  parametrik Kruskal-Wallis untuk menguji hipotesis.

## Hasil dan Pembahasan
Senyawa-Senyawa dalam Ekstrak Etanol Daun Syzygium polyanthum (Wight) Walp
Ekstrak  etanol  daun S.  polyanthum memiliki  kandungan  senyawa  kimia  yang cukup beragam. Berdasarkan kromatogram hasil  GCMS,  terdapat  83  senyawa  pada ekstrak  etanol  daun S.  polyanthum . B e b e r a p a   s e n y a w a   y a n g   d o m i n a n diantaranya seperti pada Tabel 1. Senyawa yang  dominan  tersebut  ditentukan berdasarkan  persentase  total  pada kromatogram hasil GCMS.
Tabel 1. Senyawa-Senyawa Dominan yang Terkandung dalam Ekstrak Etanol Daun Syzygium polyanthum
Table 1. The dominant compunds inside the ethanol extract of Syzygium polyanthum leaves
Berdasarkan  Tabel  1  senyawa  yang paling dominan pada ekstrak etanol daun S. p o l y a n t h u m a d a l a h M e t h y l   ( 8 e ) - 8 - octadecenoate (asam  oleat)  sebanyak 17,376 . Sedangkan  senyawa  yang menunjukkan  persentase  kandungan terendah  adalah Tetradecanoic  acid (asam miristat) sebesar 1,340 .
Uji  Aktivitas  Antifungi  Ekstrak  Etanol Daun Syzygium  polyanthum (Wigth) Walp. terhadap Jamur Candida albicans
Parameter  yang  digunakan  dalam  uji aktivitas  ini  adalah  diameter  zona  hambat yang berupa daerah bening di sekitar kertas cakram.  Hasil  pengukuran  diameter  zona hambat  yang  terbentuk  dari  ekstrak  etanol daun S.  polyanthum dapat  dilihat  pada Tabel 2.
Tabel 2 menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun S. polyanthum memiliki diameter zona hambat tertinggi pada konsentrasi 1% (b/v) dengan rata-rata sebesar 9,32 mm (SD ± 0,21). Akan  tetapi  terjadi  penurunan  diameter  zona  hambat  pada  saat  peningkatan  konsentrasi ekstrak etanol daun S. polyanthum , yaitu pada konsentrasi 1,5% hingga 2,5% (b/v) diameter zona hambat menurun hingga 7,52 ± 0,51 mm. Diameter zona hambat dari ekstrak etanol daun S. polyanthum terhadap jamur C. albicans dapat dilihat pada Gambar 1 berikut ini.
0,5% Ketokonazol 30 mg/mL DMSO 1%
No. Golongan Senyawa Nama Senyawa Total (%) 1 Terpenoid: Farnesol 3,961 2 Sesquiterpenoid Farnesyl acetate 2,810 3 Terpenoid: Diterpenoid Phytol ((2E)-3,7,11,15-Tetramethyl-2- Hexadecen-1-ol) 4,263 4 Tetradecanoic acid (Asam Miristat) 1,340 5 Hexadecanoic Acid (Asam palmitat) 12,087 6 Asam Lemak Methyl (8e)-8-octadecenoate (Asam oleat) 17,376 7 cis-Vaccenic Acid (Asam oleat) 10,936 8 Octadecanoic acid (Asam stearat) 2,977
Tabel 2. Diameter Zona Hambat (mm) Ekstrak Etanol Daun Syzygium polyanthum terhadap Pertumbuhan Jamur Candida albicans Table 2. Inhibitoion zone diameter (mm) of ethanol extract of Syzygium polyanthum leaves on the growth of Candida albicans Agen Konsentrasi Rerata SD Ekstrak Daun 0,5% (5 mg/mL) 8,60 8,60 ± 0,63 1% (10 mg/mL) 9,32 9,32 ± 0,21 1,5% (15 mg/mL) 8,02 8,02 ± 0,29 2% (20 mg/mL) 7,60 7,60 ± 0,33 2,5% (25 mg/mL) 7,52 7,52 ± 0,51 Ketokonazol 30 mg/mL 12,90 12,90 ± 0,36 DMSO 1% 1% - -
Gambar 1. Zona  hambat  ekstrak  etanol  daun Syzygium  polyanthum terhadap pertumbuhanjamur Candida albicans Figure 1. Inhibition zone of ethanol extract of Syzygium polyanthum leaves on the growth of
Candida albicans
Keterangan: Tanda panah menunjukkan adanya diameter zona hambat
74
1% 1,5% 2% 2,5%
Pada  penelitian  ini,  penambahan konsentrasi  ekstrak  etanol  daun S. polyanthum tidak  selalu  memperbesar diameter zona hambat, yang artinya dengan bertambah  tingginya  konsentrasi  zat antifungi, tidak selalu mampu menghambat maupun  membunuh  pertumbuhan  jamur C.albicans . Terbentuknya molekul senyawa yang  berukuran  besar  pada  ekstrak menyebabkan  ekstrak  sulit  berdifusi sehingga  tidak  terjadi  kontak  langsung antara  senyawa  aktif  dengan  jamur  (Nimri dalam Maleki, 2008).
Adanya aktivitas antifungi dari ekstrak etanol daun S. polyanthum terhadap jamur C.  albicans diduga  berkaitan  erat  dengan senyawa  kimia  yang  terkandung  dalam tanaman  tersebut.  Pada  penelitian  ini digunakan  etanol  sebagai  pelarut  dalam proses  ekstraksi  dimana  dapat  melarutkan senyawa tanin,  polyphenol,  flavonoid, terpenoid,  alkaloid, dan sterol (Cowan, 1999).
Daun S.  polyanthum telah  diketahui terdapat  senyawa  golongan terpenoid dan asam lemak. Mekanisme terpenoid sebagai senyawa  antimikroba  dapat  menyebabkan gangguan pada membran sel oleh senyawa yang  bersifat  lipofilik  (Cowan,  1999). Sedangkan  senyawa  asam  lemak  memiliki sifat  antifungi  dengan  target  merusak struktur  dan  fungsi  dinding  sel  dan membran.  Ekstrak  etanol  daun S. polyanthum memiliki  kandungan  senyawa golongan terpenoid seperti  senyawa sesquiterpenoid dan diterpenoid .  Senyawa sesquiterpenoid yang  ditemukan  dalam ekstrak etanol daun S. polyanthum tersebut adalah farnesol yang  berperan  dalam penyembuhan  pada  pasien  dermatities. Sedangkan senyawa yang termasuk dalam
golongan terpenoid adalah senyawa phytol yang diketahui memiliki aktivitas antimikroba dengan  merusak  membran  sel  jamur sehingga terjadi kebocoran ion dari sel jamur (Musanif et al ., 2006).
Selain  dikarenakan  oleh  aktivitas senyawa terpenoid ,  adanya  daya  hambat dari ekstrak etanol daun S. polyanthum juga dapat  disebabkan  oleh  adanya  senyawa asam lemak yang terkandung dalam ekstrak daun tersebut. Senyawa asam lemak yang ditemukan  dalam  ekstrak  daun S. polyanthum diketahui  dapat  menghambat pertumbuhan  jamur,  seperti  senyawa hexadecanoic  acid,  Tetradecanoic  acid, Methyl  (8e)-8-octadecenoate,  cis-Vaccenic acid, dan Octadecanoic acid . Tetradecanoic acid mampu  merusak  permeabilitas membran sel jamur. Begitu pula asam lemak palmitat dan asam oleat dilaporkan memiliki aktivitas  sebagai  antifungi.  Senyawa- senyawa  asam  lemak  yang  terkandung dalam  ekstrak  etanol  daun S.  polyanthum kemungkinan dapat bekerja secara sinergis dengan  berbagai  senyawa  aktif  seperti terpenoid ,  sehingga  dapat  meningkatkan pengaruh aktivitas antifungi (Musanif et al ., 2008).
Minimum Inhibitory Concentration (MIC) E k s t r a k   E t a n o l   D a u n S y z y g i u m polyanthum (Wigth)  Walp.  terhadap Jamur Candida albicans
MIC merupakan  metode  yang digunakan  untuk  mengetahui  konsentrasi terendah suatu agen antimikroba yang dapat menghambat  pertumbuhan  organisme  uji. Nilai  MIC  digunakan  untuk  menentukan dosis  paling  kecil  dalam  pengobatan  yang berefek  terhadap  suatu  jamur.  Hasil  dari penentuan nilai MIC dari ekstrak etanol daun S. polyanthum dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2. Hasil Uji MIC Ekstrak Etanol Daun Syzygium polyanthum terhadap Pertumbuhan
Candida albicans
Figure 2. The result of MIC test of ethanol extract of Syzygium polyanthum leaves on the growth of Candida albicans
Hasil terlihat dari tabung kultur biakan jamur  24  jam  dengan  konsentrasi  ekstrak etanol  daun  1%  (b/v)  memiliki  kekeruhan lebih jernih (Gambar 5). Oleh karena itu, nilai MIC  ditentukan  berdasarkan  konsentrasi satu  tingkat  sebelum  konsentrasi  yang memiliki  kekeruhan  lebih  jernih,  dengan demikian nilai MIC untuk ekstrak etanol daun S. polyanthum terhadap pertumbuhan jamur C. albicans terdapat pada konsentrasi 0,5%. Minimum  Fungicidal  Concentration
(MFC)  Ekstrak  Etanol  Daun Syzygium
polyanthum (Wigth)  Walp.  terhadap Jamur Candida albicans Uji  MFC  dilakukan  untuk  mengetahui konsentrasi  antifungi  terendah  yang  dapat mencegah pertumbuhan jamur C. albicans . Nilai  MFC  adalah  konsentrasi  ekstrak terendah yang diperoleh untuk memberikan sekitar  99-99,5%  aktivitas  membunuh ( Himratul-Aznita et  al ,  2011 ).  Hasil perhitungan  jumlah  koloni  yang  tumbuh pada Medium PDA seperti yang terlihat pada
Gambar 3. (+) (–) (–) 0,5% 1% 1,5%
Gambar  3 Hasil Uji MFC Ekstrak Etanol Daun Syzygium polyanthum terhadap Pertumbuhan Candida albicans . Figure 3 The results of MFC test of ethanol extract of Syzygium polyanthum leaves on the growth of Candida albicans
Keterangan : (+) : Terdapat koloni jamur yang tumbuh; (–) : Tidak ada koloni jamur yang tumbuh
76 77
Fitriani, Any  dkk., Aktivitas Antifungsi Ekstrak Etanol  71 -  79
2%
Pada  penelitian  ini,  penambahan konsentrasi  ekstrak  etanol  daun S. polyanthum tidak  selalu  memperbesar diameter zona hambat, yang artinya dengan bertambah  tingginya  konsentrasi  zat antifungi, tidak selalu mampu menghambat maupun  membunuh  pertumbuhan  jamur C.albicans . Terbentuknya molekul senyawa yang  berukuran  besar  pada  ekstrak menyebabkan  ekstrak  sulit  berdifusi sehingga  tidak  terjadi  kontak  langsung antara  senyawa  aktif  dengan  jamur  (Nimri dalam Maleki, 2008).
Adanya aktivitas antifungi dari ekstrak etanol daun S. polyanthum terhadap jamur C.  albicans diduga  berkaitan  erat  dengan senyawa  kimia  yang  terkandung  dalam tanaman  tersebut.  Pada  penelitian  ini digunakan  etanol  sebagai  pelarut  dalam proses  ekstraksi  dimana  dapat  melarutkan senyawa tanin,  polyphenol,  flavonoid, terpenoid,  alkaloid, dan sterol (Cowan,
1999).
Daun S.  polyanthum telah  diketahui terdapat  senyawa  golongan terpenoid dan asam lemak. Mekanisme terpenoid sebagai senyawa  antimikroba  dapat  menyebabkan gangguan pada membran sel oleh senyawa yang  bersifat  lipofilik  (Cowan,  1999).
Sedangkan  senyawa  asam  lemak  memiliki sifat  antifungi  dengan  target  merusak struktur  dan  fungsi  dinding  sel  dan membran.  Ekstrak  etanol  daun S. polyanthum memiliki  kandungan  senyawa golongan terpenoid seperti  senyawa sesquiterpenoid dan diterpenoid .  Senyawa sesquiterpenoid yang  ditemukan  dalam ekstrak etanol daun S. polyanthum tersebut adalah farnesol yang  berperan  dalam penyembuhan  pada  pasien  dermatities.
Sedangkan senyawa yang termasuk dalam
golongan terpenoid adalah senyawa phytol yang diketahui memiliki aktivitas antimikroba dengan  merusak  membran  sel  jamur sehingga terjadi kebocoran ion dari sel jamur (Musanif et al ., 2006).
Selain  dikarenakan  oleh  aktivitas senyawa terpenoid ,  adanya  daya  hambat dari ekstrak etanol daun S. polyanthum juga dapat  disebabkan  oleh  adanya  senyawa asam lemak yang terkandung dalam ekstrak daun tersebut. Senyawa asam lemak yang ditemukan  dalam  ekstrak  daun S. polyanthum diketahui  dapat  menghambat pertumbuhan  jamur,  seperti  senyawa hexadecanoic  acid,  Tetradecanoic  acid, Methyl  (8e)-8-octadecenoate,  cis-Vaccenic acid, dan Octadecanoic acid . Tetradecanoic acid mampu  merusak  permeabilitas membran sel jamur. Begitu pula asam lemak palmitat dan asam oleat dilaporkan memiliki aktivitas  sebagai  antifungi.  Senyawa- senyawa  asam  lemak  yang  terkandung dalam  ekstrak  etanol  daun S.  polyanthum kemungkinan dapat bekerja secara sinergis dengan  berbagai  senyawa  aktif  seperti terpenoid ,  sehingga  dapat  meningkatkan pengaruh aktivitas antifungi (Musanif et al ., 2008).
Minimum Inhibitory Concentration (MIC) E k s t r a k   E t a n o l   D a u n S y z y g i u m polyanthum (Wigth)  Walp.  terhadap Jamur Candida albicans
MIC merupakan  metode  yang digunakan  untuk  mengetahui  konsentrasi terendah suatu agen antimikroba yang dapat menghambat  pertumbuhan  organisme  uji.
Nilai  MIC  digunakan  untuk  menentukan dosis  paling  kecil  dalam  pengobatan  yang berefek  terhadap  suatu  jamur.  Hasil  dari penentuan nilai MIC dari ekstrak etanol daun S. polyanthum dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2. Hasil Uji MIC Ekstrak Etanol Daun Syzygium polyanthum terhadap Pertumbuhan Candida albicans
Figure 2. The result of MIC test of ethanol extract of Syzygium polyanthum leaves on the growth of Candida albicans
Hasil terlihat dari tabung kultur biakan jamur  24  jam  dengan  konsentrasi  ekstrak etanol  daun  1%  (b/v)  memiliki  kekeruhan lebih jernih (Gambar 5). Oleh karena itu, nilai MIC  ditentukan  berdasarkan  konsentrasi satu  tingkat  sebelum  konsentrasi  yang memiliki  kekeruhan  lebih  jernih,  dengan demikian nilai MIC untuk ekstrak etanol daun S. polyanthum terhadap pertumbuhan jamur C. albicans terdapat pada konsentrasi 0,5%.
Minimum  Fungicidal  Concentration (MFC)  Ekstrak  Etanol  Daun Syzygium
polyanthum (Wigth)  Walp.  terhadap Jamur Candida albicans
Uji  MFC  dilakukan  untuk  mengetahui konsentrasi  antifungi  terendah  yang  dapat mencegah pertumbuhan jamur C. albicans . Nilai  MFC  adalah  konsentrasi  ekstrak terendah yang diperoleh untuk memberikan sekitar  99-99,5%  aktivitas  membunuh ( Himratul-Aznita et  al ,  2011 ).  Hasil perhitungan  jumlah  koloni  yang  tumbuh pada Medium PDA seperti yang terlihat pada Gambar 3.
(+) (–) (–)
0,5% 1% 1,5%
Gambar  3 Hasil Uji MFC Ekstrak Etanol Daun Syzygium polyanthum terhadap Pertumbuhan
Candida albicans .
Figure 3 The results of MFC test of ethanol extract of Syzygium polyanthum leaves on the growth of Candida albicans
Keterangan : (+) : Terdapat koloni jamur yang tumbuh; (–) : Tidak ada koloni jamur yang tumbuh
76
(–) 2%
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat diketahui  bahwa  nilai  MFC  untuk  ekstrak etanol  daun S.  polyanthum adalah konsentrasi  1%  (b/v).  Hal  tersebut  terlihat dari  tidak  adanya  koloni  jamur C.  albicans yang  tumbuh  pada  Medium  PDA  dengan konsentrasi  ekstrak  daun  1%  (b/v)  setelah o diinkubasi  selama  24  jam  pada  suhu  37 C (Gambar 8), sehingga konsentrasi minimum yang dapat mematikan pertumbuhan jamur C.  albicans berada  pada  konsentrasi  1% (b/v).  Dari  hasil  uji  tersebut  terlihat  pula bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak maka  tidak  ada  koloni  jamur C.  albicans yang  tumbuh.  Hal  ini  disebabkan  semakin tinggi  konsentrasi  ekstrak  maka  jumlah senyawa aktif yang terkandung di dalamnya semakin  besar  sehingga  pertumbuhan jamur akan semakin terhambat.

## Simpulan
Hasil  penelitian  ini  adalah  ekstrak etanol  daun Syzygium  polyanthum mengandung senyawa kimia terpenoid dan asam lemak. Aktivitas ekstrak etanol daun S. polyanthum terhadap  jamur C.  albicans pada  uji  aktivitas disc-diffusion memiliki diameter  zona  hambat  tertinggi  pada konsentrasi  1%  (b/v)  sebesar  9,32  ±  0,21 mm. Nilai MIC untuk ekstrak etanol daun S. polyanthum terdapat pada konsentrasi 0,5%
(b/v),  dan  nilai  MFC  terdapat  pada konsentrasi  1%  (b/v).  Berdasarkan  hasil analisis data bahwa ekstrak etanol daun S. polyanthum memiliki  pengaruh  yang signifikan dalam menghambat pertumbuhan jamur C. albicans .

## Daftar Pustaka
Backer, C.A. & Brink, R.C.B.V.D. 1963. Flora of Java (Spermatophytes Only). Vol I . Netherland:  N.V.P.  Noordhoof- Groningen.
Cappucino,  J.G.  &  Sherman,  N.  2005.
Microbiology:  a  Laboratory  Manual . S a n   F r a n s i s c o ,   C A :   P e a r s o n Education, Inc.
Cowan,  M.M.  1999.  Plant  Products  as A n t i m i c r o b i a l   A g e n t s . C l i n i c a l Microbiology Reviews [Online], Vol. 12
( 4 ) ,   5 6 4 – 5 8 2 .   T e r s e d i a : http://www.heartintl.net/HEART  /12 0104/PlantProductsasAntimicrobi.pdf.
Doughari, J.H. 2006. Antimicrobial Activity of Tamarindus  indica Linn. Tropical Journal  of  Pharmaceutical  Research [Online],  Vol  5  (2),  596-603. Tersedia www.tjpr.org . Guzman,  C.C.  &  J.S.  Siemonsma  (eds.). 1999. Plant Resources of South_East Asia  13:  Spices. Bogor: PROSEA [Online],  pp.  218-219.  Tersedia:
h t t p : / / p r o s e a n e t . o r g   / p r o s e a / e - p r o s e a p r e p h a s e . p h p ? t a =Syzygium%20polyanthum&at=  % 28Wight%29%20Walpers.
Himratul-Aznita, W.H., Mohd-Al-Faisal, N., & Fathilah, A.R.  2011.  Determination  of The Percentage Inhibition of Diameter Growth  (PIDG)  of Piper  betle Crude Aqueous Extract Against Oral Candida Species. Journal  of  Medicinal  Plants Research [Online], Vol. 5 (6), 878-884. Te r s e d i a :   h t t p : / / w w w. a c a d e m i c journals.org/JMPR.
Maleki, S.S.M., Seyyednejad, S.M., Damabi,
N . M . ,   &   M o t a m e d i ,   H .   2 0 0 8 . Antibacterial  Activity  of  the  Fruits  of Iranian Torilis  leptophylla Against Some  Clinical  Pathogens. Pakistan Journal  of  Biological  Sciences [Online], 11 (9), 1286-1289. Tersedia: http://docsdrive.com/  pdfs/ansinet /pjbs/2008/1286-1289.pdf.
Musanif, J., Darusman, L.K., & Bermawie, N. 2008. The Indonesian Heritage Jamu for  Health  and  Beauty .  Jakarta:
Agribisnis  Deptan [Online].  Tersedia: http://agribisnis.deptan.go.id/xplore/vi ew.php?file=PENGOLAHAN-HASIL/ P E N G O   L A H A N % 2 0   H A S I L / 7 - Jamu%20Brand% 20 Indonesia/Buku % 2 0 H e r i t a g e % 2 0 J a m u / B u k u % 20Heritage%20 Jamu.pdf .
Nazemiyeh,  H. et  al .  2011.  Chemical Composition,  and  Antibacterial  and Free-Radical-Scavenging Activities of the  Essential  Oils  of  a  Citronellol Producing New Chemotype of Thymus pubescens Boiss. & Kotschy ex celak. Academy  of  Chemistry  of  Globe Publications [Online],  5  (3),  184-192. Tersedia:  http://www.acgpubs.org/ RNP/2011/Volume%205/Issue%201/
24_RNP_1010-359.pdf .
Noveriza,  R.  &  Miftakhurohmah.  2010. Efektivitas  Ekstrak  Metanol  Daun Salam ( Eugenia polyantha ) dan Daun Jeruk  Purut  ( Cytrus  histrix )  Sebagai

## A n t i j a m u r   p a d a   P e r t u m b u h a n
Fusarium  oxysporum . Jurnal  Littri [Online]. 16, (1), 6-11. Tersedia: http:// perkebunan.litbang.deptan.go.id/uplo ad.files/File/publikasi/jurnal/Jurnal%2 02010/Jurnal-Vol-16%281%  292010/ perkebunan_jurnal_1_2_2010.pdf.
Ogunlesi,  M.,  Okiei,  W.,  &  Osibote,  E.A.
2010. Analysis of the Essential Oil from the  Leaves  of Sesamum  radiatum, a
Potential Medication for Male Infertility Factor, by Gas Chromatography-Mass Spectrometry. African  Journal  of
Biotechnology [Online],    Vol.  9  (7), 1060-1067.  Tersedia:  http://www. academicjournals.org/  AJB/PDF/ pdf2010/15Feb/Ogunlesi%20et% 20al.pdf.
Rukayadi, Y., Yong, D., & Hwang, J.K. 2006.
In  vitro  Anticandidal  Activity  of Xanthorrhizol  Isolated  from  curcuma xanthorrhiza  Roxb. Journal  of Antimicrobial  Chemotherapy [Online], 57,  1231-1234.  Tersedia:  http:// jac.oxford  journals.org/content/ 57/6/1231.full .pdf+html. 78 79
Fitriani, Any  dkk., Aktivitas Antifungsi Ekstrak Etanol  71 -  79
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat diketahui  bahwa  nilai  MFC  untuk  ekstrak etanol  daun S.  polyanthum adalah konsentrasi  1%  (b/v).  Hal  tersebut  terlihat dari  tidak  adanya  koloni  jamur C.  albicans yang  tumbuh  pada  Medium  PDA  dengan konsentrasi  ekstrak  daun  1%  (b/v)  setelah o diinkubasi  selama  24  jam  pada  suhu  37 C (Gambar 8), sehingga konsentrasi minimum yang dapat mematikan pertumbuhan jamur C.  albicans berada  pada  konsentrasi  1%
(b/v).  Dari  hasil  uji  tersebut  terlihat  pula bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak maka  tidak  ada  koloni  jamur C.  albicans yang  tumbuh.  Hal  ini  disebabkan  semakin tinggi  konsentrasi  ekstrak  maka  jumlah senyawa aktif yang terkandung di dalamnya semakin  besar  sehingga  pertumbuhan jamur akan semakin terhambat.

## Simpulan
Hasil  penelitian  ini  adalah  ekstrak etanol  daun Syzygium  polyanthum mengandung senyawa kimia terpenoid dan asam lemak. Aktivitas ekstrak etanol daun S. polyanthum terhadap  jamur C.  albicans pada  uji  aktivitas disc-diffusion memiliki diameter  zona  hambat  tertinggi  pada konsentrasi  1%  (b/v)  sebesar  9,32  ±  0,21 mm. Nilai MIC untuk ekstrak etanol daun S. polyanthum terdapat pada konsentrasi 0,5%
(b/v),  dan  nilai  MFC  terdapat  pada konsentrasi  1%  (b/v).  Berdasarkan  hasil analisis data bahwa ekstrak etanol daun S. polyanthum memiliki  pengaruh  yang signifikan dalam menghambat pertumbuhan jamur C. albicans .

## Daftar Pustaka
Backer, C.A. & Brink, R.C.B.V.D. 1963. Flora of Java (Spermatophytes Only). Vol I . Netherland:  N.V.P.  Noordhoof- Groningen.
Cappucino,  J.G.  &  Sherman,  N.  2005.
Microbiology:  a  Laboratory  Manual . S a n   F r a n s i s c o ,   C A :   P e a r s o n Education, Inc.
Cowan,  M.M.  1999.  Plant  Products  as A n t i m i c r o b i a l   A g e n t s . C l i n i c a l Microbiology Reviews [Online], Vol. 12 ( 4 ) ,   5 6 4 – 5 8 2 .   T e r s e d i a : http://www.heartintl.net/HEART  /12 0104/PlantProductsasAntimicrobi.pdf.
Doughari, J.H. 2006. Antimicrobial Activity of Tamarindus  indica Linn. Tropical Journal  of  Pharmaceutical  Research [Online],  Vol  5  (2),  596-603. Tersedia www.tjpr.org .
Guzman,  C.C.  &  J.S.  Siemonsma  (eds.). 1999. Plant Resources of South_East Asia  13:  Spices. Bogor: PROSEA [Online],  pp.  218-219.  Tersedia: h t t p : / / p r o s e a n e t . o r g   / p r o s e a / e - p r o s e a p r e p h a s e . p h p ? t a =Syzygium%20polyanthum&at=  % 28Wight%29%20Walpers. Himratul-Aznita, W.H., Mohd-Al-Faisal, N., &
Fathilah, A.R.  2011.  Determination  of The Percentage Inhibition of Diameter Growth  (PIDG)  of Piper  betle Crude Aqueous Extract Against Oral Candida Species. Journal  of  Medicinal  Plants Research [Online], Vol. 5 (6), 878-884. Te r s e d i a :   h t t p : / / w w w. a c a d e m i c journals.org/JMPR.
Maleki, S.S.M., Seyyednejad, S.M., Damabi, N . M . ,   &   M o t a m e d i ,   H .   2 0 0 8 . Antibacterial  Activity  of  the  Fruits  of Iranian Torilis  leptophylla Against Some  Clinical  Pathogens. Pakistan Journal  of  Biological  Sciences [Online], 11 (9), 1286-1289. Tersedia: http://docsdrive.com/  pdfs/ansinet /pjbs/2008/1286-1289.pdf. Musanif, J., Darusman, L.K., & Bermawie, N. 2008. The Indonesian Heritage Jamu for  Health  and  Beauty .  Jakarta: Agribisnis  Deptan [Online].  Tersedia: http://agribisnis.deptan.go.id/xplore/vi ew.php?file=PENGOLAHAN-HASIL/ P E N G O   L A H A N % 2 0   H A S I L / 7 - Jamu%20Brand% 20 Indonesia/Buku % 2 0 H e r i t a g e % 2 0 J a m u / B u k u % 20Heritage%20 Jamu.pdf . Nazemiyeh,  H. et  al .  2011.  Chemical Composition,  and  Antibacterial  and Free-Radical-Scavenging Activities of the  Essential  Oils  of  a  Citronellol Producing New Chemotype of Thymus pubescens Boiss. & Kotschy ex celak. Academy  of  Chemistry  of  Globe Publications [Online],  5  (3),  184-192. Tersedia:  http://www.acgpubs.org/ RNP/2011/Volume%205/Issue%201/ 24_RNP_1010-359.pdf . Noveriza,  R.  &  Miftakhurohmah.  2010. Efektivitas  Ekstrak  Metanol  Daun Salam ( Eugenia polyantha ) dan Daun Jeruk  Purut  ( Cytrus  histrix )  Sebagai

## A n t i j a m u r   p a d a   P e r t u m b u h a n
Fusarium  oxysporum . Jurnal  Littri [Online]. 16, (1), 6-11. Tersedia: http:// perkebunan.litbang.deptan.go.id/uplo ad.files/File/publikasi/jurnal/Jurnal%2 02010/Jurnal-Vol-16%281%  292010/ perkebunan_jurnal_1_2_2010.pdf. Ogunlesi,  M.,  Okiei,  W.,  &  Osibote,  E.A. 2010. Analysis of the Essential Oil from the  Leaves  of Sesamum  radiatum, a
Potential Medication for Male Infertility Factor, by Gas Chromatography-Mass Spectrometry. African  Journal  of
Biotechnology [Online],    Vol.  9  (7), 1060-1067.  Tersedia:  http://www. academicjournals.org/  AJB/PDF/ pdf2010/15Feb/Ogunlesi%20et% 20al.pdf.
Rukayadi, Y., Yong, D., & Hwang, J.K. 2006.
In  vitro  Anticandidal  Activity  of Xanthorrhizol  Isolated  from  curcuma xanthorrhiza  Roxb. Journal  of Antimicrobial  Chemotherapy [Online], 57,  1231-1234.  Tersedia:  http:// jac.oxford  journals.org/content/ 57/6/1231.full .pdf+html. 78
Biosfera 29 (2) Mei 2012