## Skrening Resistensi Antibiotik Pada Bakteri Asam Laktat yang Diisolasi dari Usus Ayam Pedaging
Screening of Antibiotic Resistance on Lactic Acid Bacteria Isolated from Broiler’s Intestine
Muhamad Ali 1)* , Nurbaiti 2) , Anwar Rosyidi 1) , dan Muhamad Ichsan 3)
1) Laboratorium Mikrobiologi dan Bioteknologi Fakultas Peternakan Universitas Mataram Jl. Majapahit No. 62  Mataram, Indonesia, 83125.
2)Program Magister Manajemen Sumberdaya Peternakan Universitas Mataram Jl.
Majapahit No. 62, Mataram, Indonesia, 83125;
3)Laboratorium Ternak Unggas Fakultas Peternakan Universitas Mataram Jl. Majapahit
No. 62, Mataram, Indonesia, 83125;
* Penulis korespondensi, email: ali.molbiotech@gmail.com

## ABSTRACT
Antibiotic  use  in  poultry  production  is  commonly  performed  as  the  feed  additive  for promoting the health and growth of the chicken. However, excessive use of antibiotics may lead  to  the  emergence  of  antibiotic  resistance  in  Escherichia  coli,  lactic  acid  bacteria,  and pathogenic bacteria. In this research, screening of antibiotic resistance was assayed on lactic acid  bacteria  obtained  from  broiler  intestine.  Among  the  14  lactic  acid  isolates,  2  (14%) isolates  were  found  to  be  resistant  to  chloramphenicol.  Resistance  was  also  observed  to ampicillin  and  kanamycin  (7%).    The  result  of  this  research  indicated  that  the  overuse  and misuse of antibiotics in broiler farm tend to generate antibiotic resistance in broiler’s intestine lactic  acid  bacteria.  Therefore,  some  advice  for  safety  measure  of  antibiotic  application  in poultry farmer is strongly necessary.
Keywords : antibiotic resistant microbe, broiler’s intestine, lactic acid bacteria, poultry.

## PENDAHULUAN
Penggunaan antibiotik untuk mengatasi aneka penyakit yang disebabkan oleh mikroorganisme telah dilakukan sejak lebih  dari  50  tahun  yang  lalu.  Di  bidang peternakan, antibiotik bahkan dipergunakan secara rutin sebagai “growth promoter”  dalam  bentuk feed  additive bersama  vitamin, mineral,  dan  komponen- komponen  mikro  lainnya.  Namun,  tingkat pengetahuan peternak yang belum memadai menyebabkan penggunaan antibiotik  saat  ini  tidak  teratur  bahkan cenderung  berlebihan  sehingga  dapat berperanan  menimbulkan  berkembangnya bakteri  patogen  yang  kebal  (resisten) terhadap antibiotik (Obeng et al ., 2011).
Resistensi  antibiotik  merupakan suatu  kemampuan  bakteri  atau  mikroba lainnya untuk menahan efek suatu antibiotik.  Resistensi  antibiotik  dapat terjadi  karena  penggunaan  antibiotik  yang tidak  tepat  dan  terus  menerus  sehingga mendorong  berkembangnya  bakteri  yang kebal  terhadap  antibiotik.  Madden  (2009) melaporkan  bahwa  resistensi  antibiotik meningkat  secara  nyata  akibat  kesalahan maupun  kelebihan  penggunaan  antibiotik. Lebih  lanjut  dijelaskan  bahwa  kesalahan dan  kelebihan  penggunaan  antibiotik tersebut  dapat  menimbulkan  2  (dua)  hal, yaitu  tekanan  seleksi  terhadap  bakteri penerima  antibiotik  guna  menghasilkan senyawa-senyawa yang dapat dipergunakan untuk bertahan hidup melawan  antibiotik.  Selain  itu,  adaptasi alami  akan  terjadi  pada  bakteri  penerima yang  akhirnya  membuat  bakteri  tersebut
kebal  serta  menurunkan  sifat  kebal terhadap antibiotik tertentu kepada keturunannya. Scott (2002) melaporkan munculnya gen resisten terhadap antibiotik pada  bakteri  yang  diisolasi  dari  berbagai sumber. Penemuan
ini sangat mengkhawatirkan  karena  Schjorring  dan Krogfelt  (2011)  menemukan  bahwa  gen resisten  tersebut  dapat  ditransfer  secara in vivo dari  bakteri  patogen  yang  resisten antibiotik  ke  flora  normal  yang  hidup  dan berkembang  di  saluran  pencernaan.  Jika hal  tersebut  terjadi,  maka  munculnya mikroba resisten antibiotik akan berkembang  dan  meluas  sehingga  dapat menjadi ancaman serius terhadap kesehatan manusia terutama ketika kondisi kesehatan  menurun  dan  sistem  imun  yang tidak berfungsi dengan baik.
Di  sisi  lain,  penggunaan  beberapa bakteri asam  laktat akhir-akhir  ini  sebagai probiotik  pada  manusia  maupun  hewan cenderung  meningkat  (Fuller,  1992;  Lee dan  Salminen,  1995).  Beberapa  hasil penelitian  melaporkan  bahwa  penggunaan probiotik  telah  memberikan  keuntungan pada aneka ternak baik ayam broiler (Thah et  al .,  2009;  Loh et  al .,  2010),  ayam petelur  (Choe et  al .,  2012),  maupun  babi (Thu et  al .,  2011).  Menurut  Fuller  (1992) maupun  Lee  dan  Salminen  (1995), probiotik  ini  terdiri  dari  bakteri  asam laktat,  gram  positif,  an  aerob,  dan umumnya  terdapat  secara  alami  di  dalam usus.
Penggunaan  antibiotik  yang  tidak teratur  dan  berlebihan  di  satu  sisi  serta meningkatnya animo penggunaan probiotik  di  lain  sisi  dapat  menimbulkan permasalahan  serius  jika  tidak  diatasi secara  tepat.  Hal  ini  disebabkan  karena probiotik  dapat  berperanan  sebagai  inang untuk menyebarkan gen resistensi antibiotik  kepada  mikroflora  lainnya. Egervarn et  al .  (2009)  menemukan munculnya  resistensi  antibiotik  pada Lactobacillus  reuteri dan Lactobacillus plantarum .  Selain  itu,  resistensi  pada antibiotik  jenis  vancomycin  dilaporkan
terjadi  pada Lactobacilli , Pediococci ,  dan Leuconostoc spp.  Resistensi  terhadap strepromisin,  sulphadiazine,  teicoplanin, bacitracin,  cefoxitin,  ciprofloxacin,  asam fusudic,  maupun  vancomycin  telah  terjadi pada Lactobacillus (Danielsen  dan  Wind, 2003).
Semakin  banyaknya  bakteri  asam laktat  yang  resisten  terhadap  aneka antibiotik akan dapat menimbulkan permasalahan  serius.  Untuk  itu,  negara- negara maju telah mulai melarang penggunaan antibiotik di bidang peternakan. Mengingat penggunaan antibiotik terutama pada ayam pedaging di Indonesia  masih  tinggi,  maka  pada penelitian  ini  akan  dilakukan  skrening adanya  bakteri  asam  laktat  yang  resisten terhadap antibiotik.

## MATERI DAN METODE

## Isolasi  dan  konfirmasi  bakteri  asam laktat
Bakteri  asam  laktat  telah  diisolasi menurut Rahayu dan Margino (1997) serta Nurbaiti et  al .  (2016).  Isolasi  tersebut dilakukan  dari  usus  halus  ayam  pedaging (broiler) strain Arbor Acres yang diperoleh dari  pedagang  ayam  potong  di  Pasar Narmada Kabupaten Lombok Barat dengan  umur  35  hari  sebanyak  6  ekor. Penggunaan media de Man Rogosa Sharpe (MRS)  dan Mueller  Hinton  Agar (MHA) dimaksudkan untuk menumbuhkan bakteri asam  laktat  secara  selektif.  Selain  melalui penggunaan  media  selektif  di  atas,  untuk memastikan  bahwa  bakteri-bakteri  yang tumbuh  adalah  bakteri  asam  laktat,  maka dilakukan beberapa uji lanjutan, diantaranya  pengecatan  Gram  dan  uji katalase  menurut  Nurbaiti et  al .  (2016).
Bakteri-bakteri  asam  laktat  murni  yang telah diperoleh selanjutnya diuji resistensinya terhadap antibiotik.
Deteksi Resistensi terhadap Antibiotik Untuk  mengetahui  ada  tidaknya bakteri  asam  laktat  yang  resisten  terhadap antibiotik, maka dilakukan uji pertumbuhan  bakteri-bakteri  tersebut  pada
media  yang  diteteskan  dengan  beberapa macam  antibiotik.  Adapun  jenis  antibiotik yang  digunakan  diantaranya  ampisilin, kanamisin,  dan  klorampenikol.  Uji  ini dilakukan  dengan  menggunakan  difusi sumuran, yaitu dengan cara 100 µl bakteri asam  laktat  (0,5  Mc  Farland)  diinokulasi secara  merata  pada  media  MRS  agar dengan  menggunakan  sprider.  Setelah  itu, pada  media  yang  telah  diinokulasi  dengan bakteri  asam  laktat  tersebut dibuat sumuran  menggunakan  ujung  tip  bagian besar.  Antibiotik  kemudian  dimasukkan pada  sumuran  tersebut  masing-masing dengan konsentrasi 50 µg ampisilin, 25 µg kanamisin,  dan  30  µg  klorampenikol. Kultur  tersebut  kemudian  diinkubasi  pada suhu  37 o C  selama  24  jam  dengan  kondisi anaerob  menggunakan  an  aerobic  jar. Setelah  waktu  kultur  tercapai,  maka dilakukan pengamatan terhadap pertumbuhan bakteri di sekitar sumuran.

## Analisis data
Data  yang  diperoleh  dari  hasil penelitian  ini  dianalisis  secara  deskriptif kualitatif, yaitu dengan cara memvisualisasikan hasil penelitian
menggunakan  gambar  dan  tabel.  Hasil visualisasi tersebut kemudian dibandingkan  dan  diamati  perbedaan secara  kualitatif.  Adanya  bakteri  resisten terhadap  antibiotik  tertentu  diketahu  dari tumbuhnya  bakteri  secara  merata  pada media,  termasuk  di  sekitar  sumuran  yang telah diteteskan dengan antibiotik.
Sebaliknya,  bakteri-bakteri  yang  tidak resisten  ditunjukkan  oleh  terbentuknya clearing  zone di  sekitar  sumuran  berisi antibiotik,  yang  menunjukkan  bahwa bakteri  tersebut  tidak  dapat  tumbuh  di sekitar area sumuran.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Bakteri  Asam  Laktat  yang  Diperoleh dari Usus Ayam Pedaging
Isolasi  merupakan  suatu  metode untuk  memisahkan  mikroba  tertentu  dari populasi  campuran,  dilanjutkan  dengan menumbuhkan  mikroba  tersebut  pada media,  sehingga  memudahkan  proses identifikasi  selanjutnya  terhadap  mikroba yang  telah  diperoleh  (Dwidjoseputro, 1998).  Isolasi  ini  dilakukan  dengan pengenceran  isi  usus  ayam  pedaging menggunakan bufer PBS dengan konsentrasi  sampai  10 -10 .  Koloni-koloni yang  tumbuh  secara  terpisah  (koloni) tunggal  selanjutnya  dikultur  ulang  pada media  MRS-A  baru  hingga  mendapatkan koloni  yang  homogen  dalam  semua  sifat penotif.  Setelah  berhasil  mendapatkan koloni  tersebut  kemudian  dilanjutkan dengan  karakterisasi  resistensi  terhadap beberapa  jenis  antibiotik.  Gambar  1 menampilkan  contoh  hasil  isolasi  bakteri asam laktat dari usus ayam pedaging.
Gambar 1. Proses dan hasil isolasi bakteri asam laktat. A = aerobic jar yang digunakan untuk menumbuhkan bakteri asam laktat, B = hasil isolasi bakteri, C = hasil pemurnian bakteri asam laktat.
Shazali et  al .  (2014)  menyatakan bahwa  bakteri  asam  laktat  merupakan kelompok  bakteri  anaerob  dan  Gram negatif  yang  menghasilkan  asam  laktat dalam  proses  fermenti  karbohidrat.  Untuk itu,  bioreaktor  yang  digunakan  untuk menumbuhkan  bakteri  tersebut  adalah anaerobic  jar yang  dilengkapi  dengan anaerobic  sussets .  Keberadaan anaerobic sussets tersebut  berfungsi  untuk  mengikat O 2 selama  proses  kultur  sehingga  keadaan anaerob  terjaga.  Seperti  yang  ditampilkan pada  gambar  1A, anaerobic  jar yang dilengkapi  dengan anaerobic  sussets berhasil menumbuhkan bacteria sam laktat dalam  jumlah  banyak  (Gambar  1B  dan IC).  Karena anaerobic  sussets berharga mahal,  kondisi  anaerob  dapat  juga diperoleh melalui inkubasi kultur menggunakan anaerobic jar yang dilengkapi lilin yang dinyalakan pada awal waktu kultur guna mencegah adanya O 2 di lokasi kultur.
Proses  isolasi  terhadap  bakteri asam laktat berhasil mendapatkan 14 strain koloni  yang  masing-masing  memiliki penotif  yang  seragam  (Gambar  1C).  Pada uji sifat morfologi bakteri diperoleh bentuk koloni yang bulat, bentuk penonjolan yang timbul,  bentuk  pinggir  yang  halus,  warna koloni  ada  yang  putih  dan  juga  kuning telur. Uji sifat morfologi ini sangat penting untuk  dilakukan  sesuai  dengan  yang diungkapkan  oleh  Prabaningtyas  (2003) yang  diperkuat  oleh  Lay  dan  Hastowo (1992),  uji  sifat  morfologi  menyangkut sifat-sifat  koloni  seperti  bentuk,  ukuran, warna  dan  sebagainya  yang  memberi  nilai diagnostik. Uji morfologi bakteri bermanfaat  untuk  menentukan  ciri-ciri utama  dari  mikroorganisme  yang  perlu diketahui
dalam
mengkarakterisasi mikroba.
Pada  pewarnaan  Gram  diperoleh hasil  warna  ungu,  sehingga  disimpulkan bahwa semua bakteri tersebut adalah Gram positif. Menurut Pelczar dan Chan (2008), bakteri  Gram  positif  terlihat  berwarna ungu  karena  dinding  selnya  mengikat kristal  violet  yang  lebih  kuat,  sedangkan sel  Gram  negatif  mengandung  lebih banyak  lipid  sehingga  pori-pori  mudah membesar  dan  kristal  violet  mudah  larut saat dicuci dengan alkohol.
Lebih lanjut, uji katalase digunakan untuk  mengetahui  aktivitas  katalase  pada sampel  bakteri.  Adanya  enzim  katalase pada  bakteri  asam  laktat  berperan  untuk memecah  H 2 O 2 (hidrogen  peroksida) menjadi  H 2 O  dan  O 2 .  Hasil  uji  katalase menunjukkan  bahwa  semua  bakteri  asam laktat  yang  diperoleh  tidak  menunjukkan adanya  gelembung  oksigen  yang  menajdi indikasi  bahwa  bakteri-bakteri  tersebut adalah  katalase  negatif.  Menurut  Surono (2004),  bakteri  asam  laktat  merupakan bakteri  Gram  positif  dengan  katalase negatif, tidak membentuk spora, anaerobik hingga aerofilik, dan membutuhkan nutrisi yang  kompleks.  Untuk  menunjukkan bahwa  proses  dan  tahapan  uji  katalase berlangsung  sesuai  dengan  prosedur,  telah digunakan bakteri Escherichia coli sebagai kontrol.  Hasil  uji  katalase  pada  bakteri tersebut  menunjukkan  uji  katalase  positif yang  ditandai  dengan  adanya  gelembung- gelembung oksigen. Sesuai dengan pendapat  Prasetyo et  al .,  (2011),  uji katalase  positif  yang  ditandai  dengan terbentuknya banyak gelembung-
gelembung oksigen.
Gambar 2
menampilkan  contoh  hasil  uji  katalase negatif dan positif.
Gambar 2. Hasil Uji katalase (A) positif sebagai kontrol dan (b) negative pada bakteri asam laktat hasil isolasi.
Selain  katalase  negatif,  isolat bakteri  yang  diperoleh  juga  tumbuh  pada pH  asam,  kondisi  anaerob,  dan  pada  suhu 37 0 C sehingga semakin menguatkan dugaan  bahwa  bakteri  yang  diperoleh adalah  bakteri  asam  laktat.  Surono  (2004) menjelaskan  bahwa  bakteri  asam  laktat merupakan spesies bakteri yang mempunyai kemampuan untuk membentuk  asam  laktat  dari  metabolisme karbohidrat dan tumbuh pada pH rendah.
Resistensi Bakteri Asam
Laktat
Terhadap Antibiotik
Penggunan  antibiotik  di  bidang peternakan saat ini sudah umum dilakukan,  terutama  pada  ternak  ayam broiler yang dipelihara dalam jumlah besar dan  dengan  cara  intensif.    Antibiotik tersebut  digunakan  sebagai  obat  dari penyakit yang disebabkan oleh mikroorganisme patogen. Penggunaan antibiotik  yang  dilakukan  secara  terus menerus  pada  ternak  dapat  menyebabkan berkembangnya mikroorganisme yang kebal terhadap antibiotik.
Pada  penelitian  ini,  uji  resistensi yang  digunakan  adalah  dengan  cara  difusi
agar  yaitu dengan membuat sumuran pada media  agar.  Apabila  terbentuk  suatu  zona bening  di  sekitar  sumuran  yang  telah diberikan  antibiotik  berarti  pertumbuhan bakteri  terhambat  atau  bakteri  tidak  kebal terhadap  antibiotik  tersebut.  Akan  tetapi apabila  tidak  ada  zona  hambat  yang terbentuk  (bakteri  dapat  tumbuh  di  sekitar sumuran)  berarti  bakteri  tersebut  resisten atau  kebal  terhadap  antibiotik  yang diberikan. Wattimena
(1981),
mengungkapkan  bakteri  akan  terhambat pertumbuhannya dengan pengamatan berupa  lingkaran  atau  zona  di  sekeliling pencadang.
Hasil  pengamatan  menunjukkan bahwa,  dari  14  isolat  bakteri  asam  laktat yang  berhasil  diisolasi,  terdapat  2  isolat yang resisten terhadap antibiotik. Diantara kedua  isolate  tersebut.  Terdapat  1  isolat resisten terhadap klorampenikol, sedangkan  1  isolat  resisten  terhadap ampisilin,  kanamisin,  dan  klorampenikol. Untuk  itu,  kedua  isolat  tersebut  diduga memiliki spesies yang berbeda akan tetapi dari  genus  yang  sama  yaitu Lactobacillus. Surono  (2004)  mengungkapkan  bahwa resistensi probiotik spesifik terhadap strain atau  spesies  tertentu.  Hasil  uj  resistensi antibiotik ditampilkan pada Tabel 1.
Tabel 1. Uji resistensi bakteri asam laktat terhadap antibiotik
Dugaan Genus Resisten Terhadap Antibiotik Ampisilin Kanamisin Klorampenikol Lactobaccilus Tidak Resisten Tidak Resisten Tidak Resisten Lactobaccilus Tidak Resisten Tidak Resisten Tidak Resisten
Lactobaccilus Tidak Resisten Tidak Resisten Tidak Resisten Lactobaccilus Tidak Resisten Tidak Resisten Tidak Resisten Lactobaccilus Tidak Resisten Tidak Resisten Tidak Resisten Lactobaccilus Tidak Resisten Tidak Resisten Tidak Resisten Lactobaccilus Tidak Resisten Tidak Resisten Tidak Resisten Lactobaccilus Tidak Resisten Tidak Resisten Resisten Lactobaccilus Resisten Resisten Resisten Lactobaccilus Tidak Resisten Tidak Resisten Tidak Resisten Lactobaccilus Tidak Resisten Tidak Resisten Tidak Resisten Leuconostoc Tidak Resisten Tidak Resisten Tidak Resisten Leuconostoc Tidak Resisten Tidak Resisten Tidak Resisten Lactobaccilus Tidak Resisten Tidak Resisten Tidak Resisten Resistensi tersebut dapat
disebabkan  oleh  suatu  faktor  yang  sudah ada  pada  mikroorganisme  itu  sebelumnya atau  mungkin  juga  faktor  itu  diperoleh kemudian.  Sebagai  contoh,  resistensi terhadap  penisilin  pada  suatu  organisme dapat disebabkan oleh produksi penisilinase, suatu enzim yang menginaktifkan penisilin.

## SIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian diperoleh kesimpulan sebagai berikut :
1. Sebanyak 14 isolat bakteri asam laktat berhasil  diisolasi  dari  6  usus  ayam broiler yang diperjual belikan di pasar Narmada.
2. Bentuk-bentuk  dari  bakteri  asam laktat  tersebut  adalah  12  isolat berbentuk Lactobacillus dan  2  isolat berbentuk Leuconostoc.
3. Hasil  penelitian  ini  menemukan  2 bakteri  asam  laktat  yang  resisten terhadap antibiotik.  Satu  bakteri  asam laktat resisten terhadap klorampenikol dan  1  bakteri  asam  laktat  resisten terhadap  ampisilin,  kanamisin,  dan klorampenikol.

## DAFTAR PUSTAKA
Choe  DW.,  Loh  TC.,  Foo  HL.,  Hair-Bejo M., Awis QS. 2012. Egg production, faecal  pH  and  microbial  population, small  intenstine  morphology,  and plasma  and  yolk  cholesterol  in
laying  hens  given  liquid  metabolites produced by Lactobacillus plantarum strains.  British  Poultry  Science.  53: 106-115.
Danielsen  M.,  and  A.  Wind.  2003. Susceptibility  of  Lactobacillsu  spp. to antimicrobial agents. International Journal of Food Microbiology.82: 1-
11. Dwidjoseputro. 1998. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Djambatan. Surabaya. Egervarn  M.,  S.  Roos  and  H.  Lindmark. 2009. Identification and characterization of antibiotic resistance  genes  in Lactobacillus reuteri and Lactobacillus plantarum .
Journal
Applied
Microbiology.17:1658-1668.
Fuller, R. 1992 . History and development of  probiotics.  In:  Probiotics,  The Scientific Basis. Ed. London Pp 1-7.
Lay  BW,  and  S.  Hastowo.  1992.
Mikrobiologi. Rajawali Press. Jakarta.
Lee,  Y.  K.,  and  S.Salminen.1995.  The coming  age  of  probiotics.  Trends  in Food  Science  and  Technology  6:241 – 245.
Loh  TC.,  NT.Thanh,  HL.  Foo,  M.  Hair- Bejo,  and  BK.  Azhar.  2010.  Feeding of  different  levels  of  metabolite combinations
produced
by Lactobacillus  plantarum  on  growth performance, faecal microflora, volatile fatty acids and villi height in broiler.  Animal  Science  Journal.  81: 205-214.
Madden  D.  2009.  Antibiotic  resistance  in Escherichia coli A practical investigation  of  bacteria  conjugation.
National  center  for  Biotechnology Education (NCBE): the University of Reading.
Nurbaiti,  A.  Rosyidi  dan  M.  Ali.  2016.
Skrening  bakteri  asam  laktat  yang diisolasi  dari  usus  ayam  broiler sebagai  kandidat  probiotik  untuk unggas. JITPI, 2:144-149.
Obeng  AS.,  H.Rickard,  O.  Ndi  O,  M. Sexton,  and  M.  Barton.  2011. Antibiotic  resistance,  phylogenetic grouping  and  virulence  potential  of Escherichia  coli  isolated  from  the feces  of  intensively  farmed  and  free range poultry. Veterinary
.
Microbiology. 6: 21.
Pelczar,  M.J.,  Chan,  E.C.S.  2008.  Dasar- dasar Mikrobiologi. Universitas
Indonesia Press. Jakarta. Prabaningtyas  S.  2003.  Karakteristik
Bakteri Koleksi Laboratorium Mikrobiologi Universitas Negeri Malang, 8.
Prasetyo  J,  K.  Naruse,  T.  Kato,  C.
Boonchird,  S.  Harashima,  and  E. Park.  2011.  Bio-conversion  paper scudge  to  biofuel  by  simultaneous saccharification  and fermentation using  a  cellulase  of  paper  sludge origin
and thermotolerant saccharomycer  cerevisiae  TJ  14. Biotechnol Biofuels 4 (1):35. Rahayu,  E.S.  dan  Margino.  1997.  Bakteri
Asam  Laktat  Isolasi  dan  Identifikasi.
PAU  Pangan  dan  Gizi  UGM. Yogyakarta.
Schjorring  S.,  and  KA    Krogfelt.  2011. Assessment  of  bacterial  antibiotic resistance  transfers  in  the  gut.
International Journal of Microbiology. Doi:10.1155/2011/3/312956.
Scott  KP.  2002.  The  role  of  conjugative transposons  in  spreading  antibiotic resistance  between  bacteria  that inhabit  the  gastrointestinal  tract  Cell Mol. Life Science. 59:2071-2082.
Shazali N.,  HL.  Foo, TC.  Loh,  DW Choe, and  RA  Rahim.  2014.  Prevalence  of antibiotic  resistance  in  lactic  acid
bacteria  isolated  from  the  feces  of broiler  chicken  in  Malaysia.  Gut Pathogen, 6: 1.
Surono,  I.  S.  2004.  Probiotik  Susu Fermentasi  dan  Kesehatan.  Yayasan
Pengusaha  Makanan  dan  Minuman
Seluruh Indonesia (YAPMMI).
TRICK. Jakarta.
Thanh  NT.,  TC.  Loh,  HL.  Foo,  M.  Hair- Bejo,  and  BK.  Azhar.  2009.  Effects of  feeding  metabolit  combinations produced  by  Lactobacillus  plantarum on growth performance, faecal microbial  population,  small  intestine villus  height  and  faecal  volatile  fatty acids  in  broilers.  British  Poultry Science. 50: 298-306.
Thu  TV.,  TC.  Loh,  HL.  Foo,  H.  Yaakub, and  M.  Hair-Bejo.  2011.  Effects  of liquid metabolite combination produced  by  lactobacillus  plantarum on growth performance, feces characteristics, intestinal  morphology and diarrhea incidence
in postweaning piglets. Tropical Animal Health Production. 43:69-75.
Wattimena, J.R. 1981. Farmakodinami dan Terapi  Antibiotik.  Universitas  Gajah Mada. Yogyakarta.