Website : jurnal.umj.ac.id/index.php/konversi
Email :  jurnalkonversi@umj.ac.id

## U  N  I  V  E  R  S  I  T  A  S   M  U  H  A  M  M  A  D  I  Y  A  H   J  A  K  A  R  T  A

## METODE EKSTRAKSI UNTUK PEROLEHAN KANDUNGAN FLAVONOID TERTINGGI DARI EKSTRAK DAUN KELOR
( Moringa oleifera Lam ).
Susanty 1 , Sri Anastasia Yudistirani 1 , M. Bahrul Islam 1
1 Prodi Teknik Kimia, Fakutas Teknik Universitas Muhammadiyah Jakarta Email: susanty@umj.ac.id
ABSTRAK. Kelor (Moringa oliefera) merupakan tanaman perdu yang mengandung senyawa antioksidan flavonoid, saponin, sitokinin, asam-caffeolylquinat dan mengandung asam lemak tak  jenuh  seperti  linoleat  (omega  6)  dan  alfalinolenat  (omega  3).  Tujuan  penelitian  yaitu menentukan  kandungan  total  fenolik  dari  ekstrak  daun  kelor  Moringa  oliefera.  Metode ekstraksi  yang  dilakukan  antara  lain  maserasi,  perkolasi,  sokletasi,  rebusan,  dan  ekstraksi ultrasonik.  Ekstrak  kasar  yang  diperoleh  kemudian  diuapkan  menggunakan  evaporator vakum  putar.  Uji  fitokimia  dilakukan  secara  kualitatif  dan  kuantitatif  untuk  mengetahui kandungan  flavonoid  total  dalam  ekstrak  daun  kelor.  Kandungan  total  flavonoid  terbesar diperoleh dari metode rebusan sebesar 245,771 mg/kg.

## Kata Kunci : daun kelor, flavonoid, ekstraksi, Moringa oliefera
ABSTRACT.  Moringa  oliefera  is  a  shrub  that  contains  antioxidant  compounds  of flavonoids,  saponins,  cytokines,  caffeolylquinates  and  contains  unsaturated  fatty acids such as linoleic (omega 6) and alfalinolene (omega 3). The research objective was  to  determine  the  total  phenolic  content  of  Moringa  oliefera  leaf  extract. Extraction  methods  carried  out  include  maceration,  percolation,  socletation, decoction,  and  ultrasonic  extraction.  The  crude  extract  obtained  was  then evaporated using a rotary vacuum evaporator. Phytochemical tests were carried out qualitatively  and  quantitatively  to  determine  total  flavonoid  content  in  Moringa  leaf extract. The largest total flavonoid content was obtained from the decoction method of 245.777 mg / kg.
Keywords: Moringa leaf, flavonoid, extraction, Moringa oliefera

## PENDAHULUAN
Radikal  bebas  merupakan    salah satu  bentuk  senyawa  reaktif,  yang secara umum diketahui sebagai senyawa  yang  memiliki  elektron  yang tidak  berpasangan  di  kulit  terluarnya (Winarsi, 2007). Radikal bebas terbentuk  pada  saat  molekul  yang kehilangan  elektron  menjadi  tidak
stabil.  Radikal  bebas  juga  merupakan produk alamiah hasil metabolisme sel. Tubuh memiliki sistem pertahanan alami  untuk  menetralisir  radikal  bebas agar  tidak  berkembang  dan  menjadi berbahaya  bagi  tubuh.  Pengaruh lingkungan dan kebiasaan buruk seperti radiasi ultraviolet, polusi, kebiasaan  mengonsumsi  “junk  food” dan  merokok,  dapat  membuat  sistem
pertahanan tubuh tidak mampu menghadapi radikal bebas yang berjumlah besar. Adanya radikal bebas didalam tubuh manusia berperan  dalam  patologi  dari  berbagai penyakit  degeneratif  yakni  kanker, aterosklerosis, rematik, jantung koroner, katarak, dan penyakit degenerasi  saraf  seperti  perkinson (Silalahi,  2006).  Radikal  bebas  dapat ditangkal atau diredam dengan pemberian  antioksidan  atau  dengan mengkonsumsi  antioksidan  (Halliwel, 2007).
Menurut  Cockell  dan  Knowland (1999)  Efek  radikal  bebas  dapat menyebabkan peradangan
dan penuaan serta memacu zat karsinogenik yang menyebabkan kanker.  Untuk  menetralisir  radikal bebas, tubuh membutuhkan antioksidan  yang  dapat  membantu melindungi tubuh dari serangan radikal bebas dan meredam dampak negatifnya.  Antioksidan  merupakan suatu  senyawa  yang  sangat  berguna bagi  kesehatan  manusia.  Senyawa antioksidan dapat menginaktifasi bekembangnya reaksi oksidasi sehingga  sering  digunakan  sebagai radikal bebas (Winarsi,2007).
Ada  banyak  bahan  pangan  yang dapat  menjadi  sumber  antioksidan alami,  misalnya  rempah-  rempah,  teh, coklat,  biji-biji  serelia,  sayur-  sayuran, enzim dan protein. Kebanyakan sumber antioksidan alami ialah tumbuhan  dan  umumnya  merupakan senyawa  fenolik  yang  tersebar  di seluruh  bagian  tumbuhan  (Sarastani dkk.,  2002).  Senyawa  fenolik  atau polifenolik  antara  lain  dapat  berupa golongan flavonoid. Kemampuan flavonoid  sebagai  antioksidan  telah
banyak  diteliti  belakangan  tahun  ini, dimana flavonoid memiliki kemampuan untuk merubah atau mereduksi radikal bebas  dan  juga  sebagai  anti  radikal bebas (Giorgio, 2000).
Salah satu tumbuhan yang berpotensi  sebagai  tumbuhan    obat ialah  kelor,  Tanaman  kelor  ( Moringa oleifera Lam)  telah  dikenal  selama berabad-abad sebagai tanaman multiguna  padat  nutrisi  dan  berkhasiat obat.  Kelor  dikenal  sebagai The Miracle  Tree atau  pohon  ajaib  karena terbukti  secara  alamiah  merupakan sumber  gizi  berkhasiat  obat  yang kandungannya di luar kebiasaan kandungan tanaman pada umumnya. Kelor diketahui mengandung lebih dari  90  jenis  nutrisi  berupa  vitamin esensial, mineral, asam amino, antipenuaan,  dan  antiinflamasi.  Kelor mangandung 539 senyawa yang dikenal  dalam  pengobatan  tradisional afrika  dan  india  serta  telah  digunakan dalam  pengobatan  tradisional  untuk mencagah  lebih  dari  300  penyakit, berbagai  bagian  dari  tanaman  kelor bertindak  sebagai  stimulan  jantung dan peredaran darah, memiliki antitumor, antipiretik, antiepilepsi, antiinflamasi, antiulcer, diuretik, antihipertensi,  menurunkan  kolesterol, antioksidan,  antidiabetik,  antibakteri dan antijamur.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Alat
Alat  yang  digunakan  yaitu  sudip, blender,  timbangan  analitik,  kertas saring Whatman
No. 42,
spektrofotometer    UV-Vis  Shimadzu 1800,  spatula,  tabung  reaksi  ( pyrex ),
erlenmeyer ( pyrex ), labu ukur, mikropipet,  corong  pisah,  pipet  tetes, evaporator,  waterbath,  vortex,  beaker glass, hot plate, rak tabung.

## Bahan
Sampel  yang  digunakan  pada penelitian  yaitu  daun  kelor  yang berasal  disekitar  kota  Manado.  Bahan kimia  yang  digunakan  yaitu  Metanol, Kloroform,  Etil  asetat,  larutan  natrium karbonat  2%,  reagen  Folin-Ciocalteu 50%,  1,1-difenil-2-pikrilhidrazil  (DPPH) yang  diperoleh  dari  Merck  Darnstad Germany.

## Prosedur Kerja
1.  Persiapan Sampel
Daun  dibersihkan  dari  kotoran yang  menempel  dengan  air  yang mengalir  sampai  benar-benar  bersih. Kemudian  daun  dikeringkan  dengan cara  diangin-anginkan    dalam  suhu kamar  sampai  benar-benar  kering. Setelah  kering  daun  kelor  dihaluskan menjadi  serbuk  dengan  menggunakan blender,  dan  kemudian  di  ayak,  agar sampel dapat  dipastikan sudah benar- benar halus.

## 2. Ekstraksi
2.1.Tahap proses ekstraksi 1. Maserasi Serbuk daun kelor
dimaserasi  dengan  etanol  96% (1:20,  w/v)  pada  suhu  kamar selama  4  hari  dan  disaring melalui  kertas  saring  Whatman No.1.  Bagian  lain  dari  pelarut ditambahkan dan ekstraksi diulang  sampai  ekstrak  terakhir tidak berwarna. Ekstrak
digabungkan dan terkonsentrasi diuapkan  di  bawah  tekanan  75
mbar  pada  temperatur  40 o C menggunakan evaporator
vakum putar merk Buchi.
Ekstrak kental kemudian diuapkan pada bak air mendidih sampai diperolah berat konstan.

## 2. Perkolasi
Serbuk  daun  kelor  per- dilapisi  dengan  etanol  96% (1:20,  w/v)  pada  suhu  kamar (laju alir 1 ml/menit). Bagian lain dari pelarut itu ditambahkan dan ekstraksi diulang sampai ekstrak  terakhir  tidak  berwarna Ekstrak  gabungan  disaring  dan filtrat terkonsentrasi diuapkan  di bawah  tekanan  75  mbar  pada temperatur  40 o C  menggunakan evaporator  vakum  putar  merk Buchi.  Ekstrak  kental  kemudian diuapkan pada bak air mendidih sampai diperoleh berat konstan.

## 3. Sokletasi
Serbuk
daun kelor diekstraksi  dengan  etanol  96% menggunakan  alat  soxhlet  (60- 80 o C) 1:50, w/v) sampai ekstrak terakhir  tidak  berwarna.  Ekstrak disaring dan filtratnya
terkonsentrasi diuapkan di bawah  tekanan  75  mbar  pada 40 o C  menggunakan  evaporator vakum putar merk Buchi.
Ekstrak kental kemudian diuapkan pada bak air mendidih sampai diperoleh berat konstan.

## 4. Ekstraksi ultrasonik (EU)
Serbuk daun kelor diekstraksi secara terpisah melalui  sonikasi  dengan  etanol 96%  dan  air  suling  (1:20,  w/v) selama 30 menit masing- masing  dan  kemudian  disaring. Bagian lain dari pelarut ditambahkan  di  bagian  yang sama  dan  ekstraksi  diulang
sampai  ekstrak  terakhir  tidak berwarna.  Ekstrak  gabungan disaring dan filtrat terkonsentrasi diuapkan di
bawah  tekanan  75  mbar  pada temperatur  40 o C  menggunakan evaporator  vakum  putar  merk Buchi.  Ekstrak  kental  kemudian diuapkan pada bak air mendidih sampai diperoleh berat konstan.

## 5. Rebusan
Serbuk daun kelor diekstraksi dengan direbus dengan  air  suling  (1:20,  w  /  v) selama  6  jam  lalu  disaring.
Bagian  lain  dari  air  suling ditambahkan dan ekstraksi diulang  sampai  ekstrak  terakhir tidak
berwarna. Ekstrak gabungan disaring dan filtratnya diuapkan pada bak air mendidih sampai  diperoleh  berat  konstan ekstrak rebusan.
3.Penentuan Kandungan Total Flavonoid Lima mililiter 2% aluminium klorida (AlCl 3 ) dalam metanol dicampur dengan  volume  larutan  sampel  yang sama.  Pembacaan  absorpsi  pada panjang  gelombang  415  nm  pada spektrofotometer uv-vis diambil setelah 10 menit dengan blanko terdiri dari  5  ml  larutan  sampel  dan  5  ml metanol tanpa AlCl 3 . Kandungan flavonoid  total  ditentukan  dengan menggunakan standar kurva rutin (10- 100  mg/ml).  Rata-rata  tiga  bacaan digunakan dan dinyatakan sebagai mg dari rutin equivalents (RE) / 100 g dari ekstrak.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi  daun  kelor  dilakukan dengan  beberapa  metode  diantara rebusan, maserasi, perkolasi, sokletasi, dan sonifikasi. Hasil masing-
masing  ekstraksi,  kecuali  kemudian disaring  untuk  diambil  filtratnya  dan dipisahkan  dari  pelarutnya  dengan cara  evaporasi  menggunakan  alat rotary  vacuum  evaporator dengan temperatur  40 o C  pada  tekanan  175 mbar dan laju putaran 120 rpm hingga diperoleh  ekstrak  kental,  kemudian dihitung  rendemen,  kadar  flavonoid total,  daan  nilai  IC 50. Hasil  rendemen dari  berbagai  metode  ekstraksi  daun kelor disajikan pada tabel 1 berikut ini :
Tabel 1 Hasil rendemen dari berbagai

## metode ekstraksi daun kelor
NO Jenis Ekstraksi Metode Ekstraksi Daun Kelor Bobot Sampel (gr) Bobot Ekstrak (gr) Rendemen (%) 1 Dingin Maserasi 40 3,42 8,55 2 Perkolasi 40 1,41 3,525 3 Sonifikasi 40 2,57 6,425 4 Panas Rebusan 40 10,49 26,225 5 Sokletasi 40 0,75 1,875 Perhitungan rendemen
dilakukan  dengan  cara  bobot  ekstrak dibagi dengan bobot bahan baku dikali 100%.
Ekstrak  kental  yang  didapat dimasukkan  ke  dalam  labu  takar ukuran  100  ml  dan  dilarutkan  dengan pelarut  etanol  sampai  tanda  batas. Sampel yang sudah dilarutkan selajutnya  dipipetkan  ke  dalam  kuvet hingga  tanda  batas  dan  diuji  dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 415 nm untuk menentukan banyaknya  kadar  flavonoid  terdapat pada tabel 3,  dimana pada penentuan kadar senyawa flavonoid total digunakan  quercetin  sebagai  larutan standar dengan menggunakan persamaan  regresi  yang  didapat  dari pengukuran quercetin dengan penambahan  senyawa  AlCl 3 pada panjang  gelombang  415  nm  dengan spektrofotometer  UV-Vis  yang  secara lengkap terdapat pada tabel 2.
Tabel 2. Hasil Pengukuran absorban larutan standar quercetin dengan spektrofotometer UV-Vis
No. Konsentrasi (ppm) Absorbansi 1 10 0,289 2 30 0,457 3 50 0,517 4 70 0.640 5 100 0.903 Dari  Tabel  2  di  atas  didapatkan hasil  pengukuran  quercetin  sebagai larutan standar untuk penentuan kadar senyawa  flavonoid  total.  Sebelum dilakukan pemeriksaan kadar flavonoid total,  terlebih  dahulu  dibuat  kurva kalibrasi  larutan  standar  quercetin dengan  konsentrasi  10,  30,  50,  70, 100  ppm.  Untuk  kurva  kalibrasi quercetin  dapat  dilihat  pada  gambar  1 berikut ini :
Gambar 1 Kurva kalibrasi larutan standar quercetin
Pembuatan  kurva  kalibrasi  ini berguna untuk membantu menentukan kandungan  flavonoid  dalam  sampel melalui  persamaan  regresi  dari  kurva kalibrasi.  Dari  pemeriksaan  larutan standar quercetin didapat kurva kalibrasi  dengan  persamaan  regresi  y =  0,0065  x  +  0,2241  dan  harga koefisien  determinasi  (R 2 )  =  0,977.
Nilai
R 2
yang mendekati 1
membuktikan bahwa persamaan regresi tersebut adalah linear.
Tabel 3  Hasil perhitungan kandungan flavonoid total dari berbagai ekstraksi daun kelor dapat dengan data
pembacaan spektrofotometer pada panjang gelombang 415 nm
No Metode Ekstraksi Daun Kelor Absorbansi Kadar Total Flavonoid (mg/kg) 1 Maserasi 0,102 19,716 2 Perkolasi 0,201 47,959 3 Sonifikasi 0,021 26,198 4 Rebusan 0,364 7,049 5 Sokletasi 0,257 98,308

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian
kandungan  total  flavonoid  dan  uji aktivitas  antioksidan  ekstrak  daun kelor Moringa  oleifera Lam  maka dapat disimpulkan bahwa hasil ekstrak daun  kelor  dari  metode  sokletasi memiliki kandungan flavonoid  terbesar yaitu 245,771 mg/L.

## DAFTAR ISI
Giorgio.  P.,  2000,  Flavonoid  an Antioxidant. Journal National
Product . 63. 1035-1045.
Halliwel  B.  2007. Dietary  polyphenols:
good,  bad,  or  indifferent  for  your health.
J. Cardiovascular Research 73:341-347.
Harbone, J. B. 1987. Metode
Fitokimia . ITB, Bandung
Jadhav, S.J., Nimbalkar, S.S., dkk 1996. Lipid Oxidation in Biological and Food System. Dalam D.L Madhavi, S.S. Deshpandeand D.K Salunkhe (eds.) Food Antioksidan
Technological, Toxicological
y = 0.0065x + 0.2241 R² = 0.977 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1 0 50 100 150 Absor ba n Konsentrasi (ppm)
Stevi  G.  Dungira.,  Dewa  G.  Katja.,
Vanda  S.  Kamu.  2012.  Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Fenolik  Dari Buah Manggis ( Garcinia mongostana  L).  Jurnal  MIPA
ONLINE 1 (1) 11 – 15 . UNSRAT
Manado.
Suryanto, E. 2012. Fitokimia Antioksidan. Putra Media Nusantara. Surabaya
Winarsi  H.M.S.  2007. Antioksidan Alami
dan Radikal
Bebas.
Kansius : Yogyakarta