## UJI EKSTRAK ETANOL DAUN PEGAGAN
( Centellaasiatica L. Urban) TERHADAP FERTILITAS TIKUS PUTIH ( Rattus norvegicus L.) BETINA PADA TAHAP PRAIMPLANTASI

## Yassir Dzulfiqor*, Budhi Akbar, Susilo
Program Studi Pendidikan Biologi, Universitas Muhammadiyah Prof. Dr. Hamka.
*Corresponding author : aru_palaca@yahoo.com

## Abstract
This  study  aims  to  test  extract  ethanol  of  leaves  Pennywort  (Centellaasiatica  L.  Urban)  toward fertilitation of  female white mice Sprague Dawley strain  at  the praimplantation.  Parameters used implantation  (IM),  loss  of  gestation  (KGE)  and  death  of  pasca-implantation  (KPI)  after  15  days pregnant.This  research  conducted  from  April  2014  in  the  biology  laboratory  of  UHAMKA,  East Jakarta.  The  sample  used  24  rat  that  divided  into  four  treatment,  namely:  control(D0),  125(D1), 150(D2  and  175  mgkg -1 bw(D3)with  Complete  Random  Design.The  results  of  data  by  paired samples  test  analysis  obtained  significant  differences  (p<0,05)  between  the  control  group  (  D0  ) with the doses 150 mgkg -1 bb (D2) on the decline IM and an increase KGE.On the percentage the average  KPI  obtained  influence  is  no  real  different  (  p>0.05  )  in  all  treatment,  but  a  tendency increased  the  KPI  average  percentage  in  the  doses  175  mgkg -1 bw  (D3).The  conclution  of  this researchis  the  ethanol  extract  of  leaves  Pennywort  can  reduce  the  percentage  of  the  average number on implantation (IM) and increase the loss of gestation (KGE) with an effective dose of 150 mgkg -1 bw. Then, the tendency to raise the post-death implantation (KPI) early stage at a dose of 175 mgkg -1 bw.
Keywords : Pennywort, fertility, white female rats, preimplantation

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  negara  yang  kaya akan  keanekaragaman  hayati.  Keanekara- gaman  hayati  tersebut  dapat  digolongkan menjadi  beberapa  jenis,  diantaranya  tum- buhan perdu, pohon, tanaman obat atau herbal dan  rempah.  Beberapa  dari  tanaman  herbal sudah  banyak  dikenal  oleh  masyarakat  untuk dikonsumsi,  salah  satunya  adalah  pegagan. Pegagan  dengan  nama  latin Centella  asiatica (L.)  Urban  termasuk  ke  dalam  famili  Apia- ceae  (Tjitrosoepomo,  2009).  Seluruh  bagian dari pegagan dapat digunakan sebagai pengo- batan  herbal,  salah  satunya  dapat  digunakan untuk  pengobatan  rematik  dan  tekanan  darah tinggi  serta  dikonsumsi  sebagai  lalapan. Penelitian  Kishida et  al., (2009)  dari University  of  Japan yang  bekerja  sama dengan  Univer-sitas  Brawijaya  menyatakan dalam  peneli-tiannya  bahwa  senyawa  aktif CeA yang  dihasilkan  dari  ekstrak  daun
pegagan  dapat  digunakan  sebagai  alternatif agen  antiin-flamasi  untuk  mencegah  dan mengobati penyakit neurodegenerative , melindungi  kehi-langan  memori  dan  fungsi kognitif.  Pegagan  pun  dipercaya  dapat berkhasiat  untuk  me-nyembuhkan  penyakit lepra,  menambah  nafsu  makan,  mengurangi kelelahan,  meningkatkan  ketahanan  tubuh, obat  demam,  darah  tinggi,  wasir,  dan memperlancar  pembuangan  air  seni  (Suriana & Shobariani, 2013).
Pegagan  memiliki  dampak  negatif  bila dikonsumsi berlebih atau tidak sesuai takaran, yakni  dapat  menurunkan  fertilitas  baik  pada jantan dan betina. Penelitian Masrianih et al., (2013) menyatakan bahwa pemberian ekstrak daun  pegagan  pada  konsentrasi  4%  menun- jukkan  terjadi  peningkatan  motilitas  dari spermatozoa,  sementara  pada  konsentrasi 16% menunjukkan terjadi penurunan motilitas spermatozoa.
Hal ini diduga karena pegagan memiliki sifat  narkotis  sehingga  dalam  pemakaiannya harus  sangat  berhati-hati.  Dugaan  ini  diper- kuat  oleh  penelitian  Kristanti  (2009)  dimana pemberian  ekstrak  daun  pegagan  dosis tertinggi  275  mgkg -1 bb  paling  efektif  dalam menurunkan  jumlah  folikel  primer,  sekunder, tertier,  dan de  graff .  Pada  penelitian  Fitriyah (2009),  dalam  penelitian  yang  serupa  dengan menggunakan  dosis  lebih  rendah  (75  mgkg -1 bb)  pegagan  efektif  dalam  mening-katkan jumlah  folikel  primer,  sekunder,  dan  tertier. Sedangkan  dosis  100  mgkg -1 bb  dan  125 mgkg -1 bb  cenderung  menurunkan  jumlah folikel primer, sekunder, tertier, dan de Graff . Berdasarkan  uraian  tersebut,  konsumsi pegagan  dapat  menurunkan  fertilitas  dan mengganggu  kehamilan.  Untuk  menguji  hal tersebut,  maka  dilakukan  penelitian  untuk melihat sejauh mana pengaruh pemberian eks- trak  etanol  daun  pagagan  ( Centella  asiatica (L.) Urban) pada tahap praimplantasi terhadap fertilitas  tikus  putih  ( Rattus  norvegicus L.) betina galur Sprague Dawley.

## MATERIAL DAN METODE
Penelitian ini merupakan jenis penelitian  eksperimental  ( Experimental  Re- search )  menggunakan  desain  Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan empat kelompok  perlakuan  yaitu,  satu  kelompok kontrol  dan  tiga  kelompok  perlakuan  yang diberi intervensi ekstrak etanol daun pegagan.
Pada  penelitian  ini  dilakukan  dua tahapan,  yaitu  tahap  persiapan  dan  tahap intervensi/perlakuan.  Pada  tahap  persiapan, menyiapkan  hewan  uji  (tikus  putih  betina) dengan  usia  2-3  bulan  dan  berat  200-250  g sebanyak  24  ekor.  Kemudian,  dilakukan aklimatisasi selama 1 minggu sebelum dilaku- kan  pencampuran  tikus  untuk  mendapatkan tikus  betina  bunting.  Setelah  mendapatkan tikus  betina  yang  bunting,  maka  siap  dilaku-
kannya  tahap  intervensi.  Kemudian,  melaku- kan  pembuatan  ekstrak  etanol  pegagan dengan dosis yang digunakan antara lain: 125 mgkg -1 bb,  150  mgkg -1 bb,  dan  175  mgkg -1 bb.
Pada  tahap  intervensi/perlakuan,  tikus betina  yang  bunting  diberikan  perlakuan ekstrak  etanol  daun  pegagan  dengan  cara pencekokkan pada kebuntingan tikus hari  ke- 1 hingga hari ke-4 dilakukan secara berulang. Penimbangan  berat  badan  tikus  dilakukan setiap  akan  diberi  pencekokan.  Setelah  perla- kuan selama 4 hari awal kebuntingan, setelah 15  hari  kebuntingan  dilakukan  pembedahan dengan  mengambil  ovari  dan  uterus  tikus untuk  mengamati  efeknya  terhadap  beberapa parameter,  antara  lain  jumlah  implantasi, kehilangan  gestasi,  dan  kematian  pascaimp- lantasi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Jumlah Implantasi.
Data  rata-rata  jumlah  implantasi  setelah pemberian  ekstrak  etanol  daun  pegagan  pada tahap  praimplantasi  (hari  ke-1  hingga  ke-4) terhadap  fertilitas  tikus  betina,  dapat  dilihat pada gambar 1.
Dari  gambar  1  di  atas,  terlihat  bahwa persentase rata-rata implantasi pada kelompok perlakuan  mengalami  penurunan  diban- dingkan  kelompok  kontrol  (D0)  100%, dengan  persentase  rata-rata  implantasi  (D1) 94,78%,  (D2)  44,44%,  dan  (D3)  81,82%. Persentase  rata-rata  jumlah  implantasi  pada kelompok  D2  (44,44%)  lebih  rendah  diban- ding  pada  kelompok  D3  (81,82%),  D1 (94,78%),  dan  kontrol  D0  (100%).  Berda- sarkan uji statistik dengan Paired samples test terhadap  parameter  IM  menun-jukkan  nilai sig. antar pasangan kelompok perlakuandapat dilihat pada Tabel 1.
Gambar 1. Persentase rata-rata jumlah implantasi setelah pemberian ekstrak etanol daun pegagan. (D0:  tanpa  perlakuan  dan  D1,  D2,  D3:  pencekokkan  ekstrak  etanol  daun  pegagan berturut-turut dengan dosis 125 mgkg -1 bb, 150 mgkg -1 bb, 175 mgkg -1 bb. Superscript dengan huruf yang sama menunjukkan tidak berbeda nyata pada taraf signifikansi 5%).
Tabel 1. Nilai sig. antar pasangan kelompok perlakuan pada parameter IM
No.                      Pasangan Sig. (2-tailed) 1. D0 – D1 0,218 2. D0 – D2 0,040 3. D0 – D3 0,319 4. D1 – D2 0,038 5. D1 – D3 0,370 6. D2 – D3 0,120
Dari  tabel  1  di  atas,  memperlihatkan beda  yang  sangat  signifikan  ( sig. 5%)  pada pasangan no. 2 dan no. 4. Pada pasangan no. 2 (D0-D2)  memiliki  nilai  sig.  0,040  (p<0,05), yang  artinya  D0  dengan  D2  sangat  berbeda nyata.  Begitupun  pada  pasangan  no.  4  (D1- D2)  memiliki  nilai  sig.  0,038  (p<0,05). Analisis  statistik  menunjukkan  pemberian ekstrak etanol pegagan dengan dosis D2 (150 mg/kg  bb)  memberikan  pengaruh  yang  signi- fikan  terhadap  persentase  rata-rata  jumlah implantasi dibanding pemberian ekstrak dosis D1 dan D0.
Hasil  pengujian  statistik  parametrik dengan  Uji  t  sepasang  menunjukkan  bahwa data  persentase  IM  pada  tikus  betina  yang dicekok  ekstrak  etanol  daun  pegagan  pada tahap praimplantasi dosis (D2) 150 mgkg -1 bb
dan (D3) 175 mgkg -1 bb sangat berbeda nyata dengan  kelompok  kontrol  (D0)  dan  (D1)  125 mg/kg  bb.  Hal  ini  kemungkinan  disebabkan pengaruh  senyawa  aktif  yang  terkandung dalam  tanaman  pegagan  seperti  triterpenoid, saponin  dan  flavonoid  yang  dapat  mempe- ngaruhi  keberhasilan  proses  implantasi  em- brio  pada  uterus.  Penjelasan  pengaruh  dari senyawa  aktif  dalam  pegagan  secara  rinci sebagai berikut.
Senyawa  glikosida  triterpenoid,  yaitu: asiatikosida  dan  madekosida,  kedua  senyawa tersebut  berperan  dalam  memperbaiki  sel-sel granulosa  pada  ovarium  sehingga  mengha- silkan  inhibidin,  dimana  inhibidin  ini  dapat menghambat  sekresi  FSH  dan  LH  (Triyanti 2006 dalam Kristanti  2010).  Pada  saat kehamilan sekresi dari FSH dan LH dihambat
maka  akan  menghambat  pula  pembentukan dari  progesteron  dan  estrogen,  sehingga dinding uterus akan luruh dan mempengaruhi proses implantasi. Penurunan jumlah implant- tasi  dikarenakan  konsentrasi  estrogen  dan progesteron  menurun  pada  saat  praimplantasi sehingga  lingkungan  steroidal  tidak  cocok untuk implantasi.
Senyawa  aktif  saponin  dan  flavonoid yang dihasilkan oleh ekstrak daun pegagan ini berperan  dalam  mempengaruhi  implantasi. Kedua  senyawa  aktif  tersebut  bersifat  anti- estrogen, karena menurut Sa’roni  2001 dalam Akbar  (2010)  flavonoid  yang  bersifat  anties- trogen  dapat  menyebabkan  ovarium  menjadi inaktif  dan  mengganggu  sekresi  estrogen endogen.
Pada  hasil  penelitian  menunjukkan dosis  150  mgkg -1 bb  lebih  efektif  dalam menurunkan  jumlah  implantasi.  Hal  ini karena penyerapan ekstrak khususnya di usus penyerapan  memiliki  keefektifan  yang  opti- mum.  Semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak maka  akan  semakin  lama  penyerapan  ekstrak di dalam tubuh.

## Kehilangan Gestasi.
Data rata-rata kehilangan gestasi setelah pemberian  ekstrak  etanol  daun  pegagan  pada tahap  praimplantasi  (hari  ke-1  hingga  ke-4) terhadap  fertilitas  tikus  betina,  dapat  dilihat pada gambar 2.
Gambar 2. Persentase rata-rata kehilangan gestasi setelah pemberian ekstrak etanol daun pegagan
Dari  Gambar  2.  di  atas,  terlihat  bahwa persentase  rata-rata  kehilangan  gestasi  pada kelompok  perlakuan  mengalami  peningkatan dibandingkan  kelompok  kontrol  (D0),  yaitu 0%  dengan  persentase  rata-rata  kehilangan gestasi  (D1)  5,22%,  (D2)  55.56%,  dan  (D3) 18.18%.  Persentase  rata-rata  kehilangan gestasi  pada  kelompok  D2  (55,56%)  lebih tinggi dibanding pada kelompok D3 (18,18%),  D1  (5,21%),  dan  D0  (0%).  Berda- sarkan  uji  statistik  dengan Paired  samples test terhadap  parameter  KGE  menunjukkan nilai sig. antar pasangan kelompok perlakuan dapat dilihat pada tabel 2.
Dari  tabel  2  di  bawah  ini  memperli- hatkan  beda  yang  sangat  signifikan  ( sig. 5%) pada pasangan no. 2 dan no. 4. Pada pasangan no.  2  (D0-D2)  memiliki  nilai  sig.  0,040 (p<0,05),  yang  artinya  D0  dengan  D2  sangat berbeda  nyata.  Begitupun  pada  pasangan  no. 4 (D1-D2) memiliki nilai sig. 0,038 (p<0,05). Analisis  statistik  menun-jukkan  pemberian ekstrak etanol daun pegagan dengan dosis D2 (150  mg/kg  bb)  memberikan  pengaruh  yang signifikan  terhadap  persentase  kehilangan gestasi dibanding pemberian ekstrak dosis D1 dan D0.
Tabel 2. Nilai sig. antar pasangan kelompok perlakuan pada parameter KGE
No.                        Pasangan Sig. (2-tailed ) 1. D0 – D1 0,219 2. D0 – D2 0,040 3. D0 – D3 0,319 4. D1 – D2 0,038 5. D1 – D3 0,370 6. D2 – D3 0,120
Hasil  pengujian  statistik  parametrik dengan  Uji  t  sepasang  menunjukkan  bahwa data  persentase  KGE  pada  tikus  betina  yang dicekok  ekstrak  etanol  daun  pegagan  pada tahap praimplantasi dosis (D2) 150 mgkg -1 bb dan (D3) 175 mgkg -1 bb sangat berbeda nyata dengan  kelompok  kontrol  (D0)  dan  (D1)  125 mgkg -1 bb.  Hal  ini  disebabkan  oleh  ketidak- mampuan  induk  tikus  untuk  mentolerir senyawa  aktif  yang  terkandung  di  dalam pegagan  sehingga  senyawa  tersebut  dapat langsung menyerang embrio dan menyebakan sel-sel  tersebut  mati  sebelum  terimplantasi (Mutschler, 1991).
Senyawa aktif triterpenoid dan flavonoid  dapat  mengganggu  proses  proli- ferasi  sel-sel  embrional  yang  terjadi  pada tahap cleavage dari embryogenesis (Frandson et  al., 1996).  Karena  hal  itu,  dimungkinkan dari  pemberian  ekstrak  pegagan  pada  tahap praimplantasi  akan  menyebabkan  perkem- bangan  embrio  terganggu  sehingga  tidak mencapai  tahap  blastosis  dengan  sempurna dengan demikian embrio tidak dapat terimplantasi.  Hal  tersebut  sesuai  dengan penjelasan  Sabri  (2007),  senyawa-senyawa tersebut  masuk  ke  dalam  aliran  pembuluh darah  sehingga  embrio  berada  ditahap cleavage tidak  mampu  untuk  berkembang mencapai  tahap  blastosis  dengan  sempurna sehingga embrio tidak dapat terimplantasi.
Pada  hasil  penelitian  menunjukkan dosis  150  mgkg -1 bb  lebih  efektif  dalam menaikkan jumlah kehilangan gestasi. Hal ini karena  dalam  penyerapan  ekstrak  khususnya di usus penyerapan memiliki keefektifan yang optimum.  Semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak
maka  akan  semakin  lama  penyerapan  ekstrak di dalam tubuh, sehingga dosis 150 mgkg -1 bb akan  lebih  cepat  berpengaruh  dalam  jumlah kenaikan  KGE  dikarenakan  penyerapannya lebih  cepat  terserap  oleh  tubuh  dibandingkan dosis 175 mgkg -1 bb.
Kematian Pasca Implantasi.
Data rata-rata kematian pasca implantasi setelah  pemberian  ekstrak  etanol  daun pegagan  pada  tahap  praimplantasi  (hari  ke-1 hingga  ke-4)  terhadap  fertilitas  tikus  betina, dapat  dilihat  pada  gambar  3.  Kematian pascaimplantasi adalah jumlah fetus mati dan embrio resorb ,  namun  pada  penelitian  ini tidak  menampilkan  fetus  mati  sehingga  nilai persentase  rata-rata  KPI  di  atas  adalah  nilai dari  persentase  rata-rata  embrio resorb (Hardjopranjoto, 1995).
Dari  gambar  3  di  atas,  terlihat  bahwa persentase rata-rata kematian pasca implantasi mengalami  peningkatan  pada  dosis  (D1)  125 mgkg -1 bb dan dosis (D3) 175 mgkg -1 bb yaitu 1.52%  dan  44.51%.  Sementara,  dosis  (D2) 150  mgkg -1 bb  tidak  mengalami  peningkatan sama  dengan  kontrol  (D0),  yaitu  0%. Berdasarkan  uji  statistik  dengan Paired samples  test terhadap  parameter  KPI  menun- jukkan  nilai sig. antar  pasangan  kelompok perlakuan dapat dilihat pada tabel 3.
Dari  tabel  3  di  atas,  tidak  memperli- hatkan  beda  yang  sangat  signifikan  ( sig. 5%) pada  pasangan  manapun.  Hasil  perhitungan statistik untuk kematian pascaimplantasi tidak menunjukkan  nilai  signifikansi  pada  dosis tertentu, namun  dari Gambar 10 dapat  dilihat kecenderungan kenaikan KPI pada dosis (D3) 175 mgkg -1 bb.
Gambar  3. Persentase  rata-rata  kematian  pasca  implantasi  setelah  pemberian  ekstrak  etanol  daun pegagan
Tabel 3. Nilai sig. antar pasangan kelompok perlakuan pada parameter KPI
No.                       Pasangan Sig. (2-tailed) 1. D0 – D1 0,363 2. D0 – D2 * 3. D0 – D3 0,058 4. D1 – D2 0,363 5. D1 – D3 0,056 6. D2 – D3 0,058
Keterangan, * = hasil uji statistik tidak teridentifikasi
Kematian  pascaimplantasi  pada  peneli- tian ini ditandai dengan ditemukannya embrio resorb .  Hal  itu  dikarenakan  ekstrak  pegagan ini  secara  aktif  cepat  dalam  mempengaruhi embrio resorb, dimana  embrio  berhasil implan  namun  gagal  dalam  pembentukan organogenesis  sehingga  embrio  tersebut diserap kembali oleh tubuh .
Nilai KPI adalah sama dengan nilai dari persentase  rata-rata  embrio resorb hasil  dari pengujian  statistik  dengan  Uji  t  sepasang tidak  menunjukkan  signifikansi.  Namun, cenderung  mengalami  kenaikan  pada  dosis (D3) 175 mgkg -1 bb, yaitu 44.51% menaikkan jumlah  embrio resorb .  Hal  ini  disebabkan oleh  adanya  siklooksigenase  yang  mengham- bat interleukin-1 menginduksi produksi COX- 2  sehingga  tidak  menghasilkan  prostaglandin I2 (Harkness  & Wagner’s,  2010). Sementara, prostaglandin  I2  merupakan  ligan  untuk reseptor  teraktivasi-proliferator-peroksisom,
karena kekurangan reseptor terkait maka akan menyebabkan kematian  fetus  pascaimplantasi akibat  dari  terganggunya  plasentasi  (Nalban- dov,  1990).  Temuan  tersebut  sesuai  dengan pendapat  Sabri  (2007),  senyawa  saponin  dan flavonoid  dapat  menghambat  jalur  dehidro- genase & sintesis prostaglandin.
Senyawa triterpenoid dapat menurunkan kadar  progesteron  yang  dibutuhkan  oleh embrio  untuk  kelangsungan  hidupnya  selama kehamilan.  Hal  tersebut  sesuai  dengan penjelasan  (Sarah,  2013)  golongan  terpenoid, yaitu  triterpenoid  dapat  menurunkan  kadar progesteron  sehingga  dapat  meningkatkan kejadian  embrio resorb .  Menurut  Widyastuti et  al., .  (2006),  seluruh  zat  yang  bersifat teratogen  jika  diberikan  pada  awal  perkem- bangan  embrio  dapat  menyebabkan  embrio resorb pada tikus.
Pada  hasil  penelitian  menunjukkan dosis  175  mgkg -1 bb  lebih  efektif  dalam
menaikkan  jumlah  kematian  pascaimplantasi, berbeda  hasil  dengan  jumlah  implantasi  dan kehilangan  gestasi  yang  mennjukkan  dosis efektif  pada  dosis  150  mgkg -1 bb.  Hal  ini karena  dalam  penyerapan  ekstrak  khususnya di usus penyerapan memiliki keefektifan yang optimum. Seperti halnya dosis 175 mgkg -1 bb dengan  tingkat  konsentrasi  yang  lebih  tinggi maka  diduga  memerlukan  waktu  yang  lebih lama  untuk  penyerapan.  Pada  kematian pascaimplantasi,  dosis  175  mgkg -1 bb  ini sedikitnya  ekstrak  yang  sudah  terserap  mem- pengaruhi cleavage konseptus  namun  belum optimal,  karena  biasanya  penyerapan  ekstrak pada  dosis  konsentrasi  lebih  tinggi  memer- lukan  waktu  lebih  lama.  Waktu  yang  lebih lama  untuk  penyerapan  ini  ternyata  berhu- bungan  dengan  kenaikan  dalam  jumlah kematian  pascaimplantasi,  karena  pengaruh efek  dari  ekstrak  tersebut  akan  dilanjutkan kembali  setelah  embrio  terimplantasi  sehing- ga  mempengaruhi  kenaikan  jumlah  kematian pascaimplantasi, khususnya embrio resorb .

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  pengaruh pemberian  ekstrak  etanol  daun  pegagan ( Centella  asiatica (L.)  Urban)  pada  tahap praimplantasi  dapat  mempengaruhi  fertilitas tikus putih ( Rattus norvegicus L.) betina galur Sprague Dawley. Dosis 150 mgkg -1 bb adalah dosis yang sangat efektif dan optimum menu- runkan  implantasi  dan  menaikkan  kehilangan gestasi.  Dosis  175  mgkg -1 bb  cenderung menaikkan  kematian  pasca  implantasi  pada tahap awal.

## DAFTAR PUSTAKA
Afiah & Mawar. (2012). Pengaruh Pemberian Ekstrak  Polong  Kedawung  ( Parkia rosburghii G.  Don.)  terhadap  Siklus Estrus  dan  Kinerja  Reproduksi  Tikus Putih  ( Rattus  Norvegicus L.)  Betina Galur Sprague Dawley . Skripsi
Program  Studi  Pendidikan  Biologi UHAMKA . Jakarta.
Akbar,  B.  (2010). Tumbuhan  dengan  Kan- dungan  Senyawa  Aktif  yang  Berpotensi Sebagai  Bahan  Antifer-tilitas. Adabia Press . Jakarta.
Al-Ahwani,  F.  (2012).  Pengaruh  Pemberian Ekstrak Polong Kedaung ( Parkia roxburghii G.  Don.)  pada  Tahap  Pas- caimplantasi  Lanjut  terhadap  Fertilitas Tikus  Putih  ( Rattus  norvegicus L.) Betina  Galur  Sprague  Dawley. Skripsi Program  Studi  Pendidikan  Biologi UHAMKA . Jakarta. Aranta,  A.  (2010). Pengobatan  Herbal  & Pijat  Refleksi  Cara  Mudah  Hidup Sehat. Pustaka Sandro Jaya. Jakarta. Fitriyah. (2009). Pengaruh Pemberian Ekstrak Daun  Pegagan  ( Centella  asiatica (L.) Urban)  terhadap  Perkembangan  Folikel Ovarium Mencit ( Mus musculus ). Skripsi  UIN  Maulana  Malik  Ibrahim .
Malang.
Frandson,  R.  D.  (1992). Anatomi  dan Fisiologi Ternak Edisi ke-4.
(Terjemahan  B.  Srigandono  &  Koen Praseni). UGM Press. Yogyakarta.
Guyton, A. C. (1995). Fisiologi Manusia Dan Mekanisme  Penyakit  (Human  Physio- logy  an  Mechanisms  of  Disease) . (Terjemahan  Petrus  Andrianto).  Pener- bit Buku Kedokteran EGC. Jakarta.
Harkness,  Wagner’s.  (2010). Biology  and Medicine  of  Rabbits  and  Rodents  Fiith Edition. Wiley-Blackwell,  A  John Wiley & Sons, Inc., Publication. USA.
Kishida, N. N, Kusumah,  E.  D, &  Lailani, P. K.  (2009).  Analisis  Fitokimia  dan Penampilan  Polapita  Protein  Tanaman Pegagan ( Centella asiatica ) Hasil Konservasi  In  Vitro. Bul.  Littro.  20(1), 11-20.
Kristanti, &  Ari Nur. (2009). Potensi Ekstrak
Daun  Pagagan  ( Centella  asiatica (L.) Urban) Dosis Tinggi Sebagai
Antifertilitas  pada  Mencit  ( Mus  mus- culus )  Betina. Skripsi .  UIN  Maulana Malik Ibrahim. Malang.
Masrianih  Dhafir,  F.,  &  Lusiana.  (2013)  . Pengaruh  Pemberian  Ekstrak  Daun Pegagan  ( Centella  asiatica )  Terhadap Motilitas  Spermatozoa  Mencit  ( Mus musculus ) Galur Ddy. e-Jipbiol 2, 24-29 Mutschler, E. (1991). Dinamika Obat Farma- kologi  dan  Tosikologi  Edisi  ke-5.
(Terjemahan  Mathilda  B.  Widianto  &
Anna  Setiadi  Ranti).  Penerbit  ITB. Bandung.
Nalbandov, A. V. (1990). Fisiologi
Reproduksi Pada Mamalia Dan Unggas .  Univer-sitas  Indonesia  Press.
Jakarta.
Sabri,  E.  (2007).  Efek  Perlakuan  Ekstrak Anda-liman  ( Zanthoxyllum  acantho- podium )  Pada  Tahap  Praimplantasi Terhadap  Fertilitas  dan  Perkembangan Embrio  Mencit  ( Mus  musculus ). Jurnal Biologi Sumatera . 28-32
Sirait  M.  (2007). Penuntun  Fitokimia  dalam Farmasi. Bantung: Penerbit ITB Tjitrosoepomo,  G.  (2009). Morfologi  Tum- buhan. Yogyakarta:  Gadjah  Mada University Press.
Widyastuti, N., Widiyani, T., & Listyawati, S. (2008).  Efek  Teratogenik  Ekstrak  Buah Mahkota  Dewa  ( Phaleria  macrocarpa (Scheff.)  Boerl.)  pada  Tikus  Putih ( Rattus  norvegicus L.)  Galur  Winstar.
Jurnal Bioteknologi 3 (2), 56-62.