Efektifitas  Gel  Ekstrak  Etanol  Daun  Asam  Jawa ( Tamarindus  indica L.)  Terhadap  Jumlah  Fibroblast  Pada Proses  Penyembuhan  Luka  Insisi  Tikus  Jantan  Galur Sprague Dawley
Effectiveness of Gel Extract Ethanolic of Tamarind Leaves (Tamarindus Indica L.) on the Number of Fibroblast in Wound Healing Incision on Sprague Dawley Rats
Agustina Susilowati * , Dian Ratna Rianti, Erma Yunita, Nanda Syta Nur’aini
Akademi Farmasi Indonesia, Yogyakarta Corresponding author: Agustina Susilowati: Email: agustinasusilowati@afi.ac.id Submitted: 11-12-2019 Revised: 30-12-2019 Accepted: 30-12-2019

## ABSTRAK
Obat  penyembuhan  luka  saat  ini  retalif  mahal  dan  memungkinkan  terjadinya  efek  samping  dalam penggunaannya,  sehingga  perlu  dikembangkan  obat  penyembuhan  luka  yang  berasal  dari  tanaman  herbal. Tanaman herbal yang dapat digunakan sebagai penyembuh luka yaitu tanaman asam jawa ( Tamarindus indica) . Asam jawa memiliki senyawa flavonoid, saponin, dan tanin yang berfungsi sebagai penyembuhan luka. Tujuan penelitian ini untuk dapat mengetahui efektifitas gel ekstrak etanol daun asam jawa terhadap jumlah fibroblast pada  proses  penyembuhan  luka  insisi  tikus  jantan  galur Sprague  Dawley .  Metode  dari  penelitian  ini  yaitu eksperimental dengan menggunakan 25 ekor tikus dan dibagi menjadi 5 kelompok perlakuan dengan masing- masing terdiri dari 5 ekor tikus. Kelompok I (kontrol negatif), kelompok II (kontrol positif, kelompok III, IV dan V diberikan sediaan gel ekstrak etanol daun asam jawa 0,5%, 1% dan 2%. Hasil dari penelitian diketahui bahwa gel ekstrak etanol daun asam jawa dengan konsentrasi 0,5%, 1% dan 2% tidak berbeda bermakna (p>0,05) dengan kelompok kontrol positif, sehingga dapat disimpulkan bahwa gel ekstrak etanol daun asam jawa konsentrasi 0,5%, 1% dan 2% dapat berperan sebagai penyembuh luka insisi dengan mekanisme meningkatkan jumlah fibroblast.
Kata kunci: Luka Insisi; Gel; Ekstrak Etanol; Daun Asam Jawa; Fibroblast
ABSTRACT
Nowadays wound healing medicines are expensive and allow side effects in their use, so it is necessary to develop wound healing medicines derived from herbal plants. Herbal plants that can be used as a wound healer, namely tamarind plants ( Tamarindus indica L.). Tamarind has flavonoid compounds, saponins, and tannins that function as wound healing. The purpose of this study was to determine the effectiveness of the ethanol extract gel of tamarind leaves on the number of fibroblasts in the wound healing process of the Sprague Dawley strain male rat incision. The method of this research is experimental using 25 rat mice and divided into 5 treatment groups with 5 mice each. Group I (negative control), group II (positive control), group III, IV and V were given 0.5%, 1% and 2% ethanolic extract gel of gel. The results of the study found that the ethanol extract gel of tamarind leaves with concentrations of 0.5%, 1%, and 2% were not significantly different (p> 0.05) from the positive control group, so it can be concluded that the ethanol extract gel of tamarind leaves concentration of 0.5%, 1%, and 2% could play a role as incision wound healing with a mechanism of increasing the number of fibroblasts in the although is still lower than the positive control group.
Keywords : Incision Wound; Gel; Ethanol Extract; Tamarind Leaves; Fibroblast
PENDAHULUAN Luka merupakan suatu keadaan terputusnya kontinuitas jaringan tubuh, yang dapat menyebabkan terganggunya fungsi tubuh sehingga dapat mengganggu aktivitas sehari-hari (Damayanti dkk., 2015). Luka dapat diklasifikasikan berdasarkan dua yaitu  berdasarkan  proses  terjadinya  luka  ( mechanism  of
injury) serta berdasarkan derajat terkontaminasi suatu luka oleh berbagai mikroorganisme ( degree of contamination) (Abdurrahmat,  2014).    Salah  satu  jenis  luka berdasarkan proses terjadinya luka yaitu luka insisi atau lebih sering dikenal dengan luka iris. Luka insisi atau luka iris merupakan luka yang diakibatkan oleh irisan  benda  tajam  yang  menimbulkan  kerusakan
pada  pembuluh  darah.  Penyembuhan  luka  terdiri dari 3 fase utama yang meliputi fase inflamasi, fase proliferasi  serta  fase  maturasi  (Velnar  dkk.,  2009). Saat kulit mengalami luka, terjadi salah satu proses penyembuhan  luka  yaitu  proses  pembentukan granulasi  yaitu  pembentukan  jaringan  ikat  baru yang  terdiri  dari  sel  leukosit,  sel  fibroblast dan  pembentukan  pembuluh  darah  baru  (Rubin, 2012).
Obat  penyembuhan  luka  saat  ini  retalif mahal dan memungkinkan terjadinya efek samping seperti  ruam  pada  kulit.  Pengobatan  dengan menggunakan  tanaman  herbal  merupakan pengobatan alternatif sebagai penyembuhan luka, karena  mudah  untuk  ditemukan  serta  tidak menimbulkan  adanya  efek  samping  (Suparni  dan Ari,  2012).  Salah  satu  tanaman  yang  termasuk dalam tanaman  herbal  yaitu  tanaman asam  jawa. Tanaman  asam  jawa  dapat  dimanfaatkan  sebagai terapi  diare,  disentri,  antimikroba,  ulkus  peptik, spaspolitik, dan penyembuhan luka (Kuru, 2014). Bhadoriya  dkk.  (2015)  meneliti  bahwa  ekstrak metanolik biji asam jawa memiliki aktivitas sebagai antiinflamasi  dan  analgetik.  Penelitian  Naik  dkk. (2017),  gabus  dan  biji  asam  jawa  menunjukkan adanya  aktivitas  penyembuhan  luka  eksisi  pada tikus Wistar Albino. Zat aktif yang berperan sebagai penyembuhan  luka  berupa  antiinflamasi  yaitu senyawa  tanin,  saponin  dan  flavonoid.  Senyawa tanin  berfungsi  sebagai  adstringen  pada  luka, senyawa saponin berperan sebagai meningkatkan kecepatan  dalam  epitelisasi,  serta  senyawa flavonoid  berperan  sebagai  penangkal  radikal bebas  dan  oksidasi  enzim  sebagai  antiinflamasi (Soni dan Akhles, 2012).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui efektifitas gel ekstrak etanol daun asam jawa terhadap jumlah  fibroblast  pada  proses  penyembuhan  luka insisi  tikus  jantan  galur Sprague  Dawley .  Ekstrak dibuat dalam bentuk sediaan gel karena memudahkan untuk pelepasan zat aktif dibandingkan dengan  sediaan  krim,  pasta,  dan  salep  (Mehta  dkk. , 2015).

## METODOLOGI
Bahan Daun asam jawa, n-heksan, alkohol 96%, HCl  pekat,  FeCl3,  serbuk  Mg,  propilenglikol, triatanolamin,  metil  paraben,  Karbopol  940, tikus  galur Sprague  Dawley, eter,  hematoksilin eosin, sekam, pakan tikus, dan kertas saring.
Alat Alat yang digunakan pada peneliatan ini adalah  oven,  seperangakat  alat  maserasi,  alat- alat  gelas,  alat-alat  bedah,  rotary  evaporator, kandang tikus, dan alat cukur rambut.

## Jalannya Penelitian
Penyiapan Simplisia Memanen  daun  asam  jawa  serta  dilakukan sortasi yang berguna untuk memisahkan daun dengan pengotor,  kemudian  dilakukan  pencucian  dengan  air mengalir.  Daun  asam  jawa  yang  telah  dicuci dikeringkan  dengan  diangin-anginkan  selama  3  hari. Daun yang telah kering dibuat serbuk dengan cara serbuk daun asam jawa diblender. Penyerbukan ini dilakukan untuk memperkecil ukuran partikel daun asam  jawa.  Serbuk  yang  telah  diperoleh  diayak dengan menggunakan
ayakan, kemudian dilanjutkan ke tahap ekstraksi  serbuk  daun  asam jawa (Rianti dkk., 2019).
Ekstraksi Ekstraksi  serbuk  daun  asam  jawa dilakukan  sebanyak  2  tahap.  Tahap  pertama yaitu  maserasi  serbuk  daun  asam  jawa menggunakan  n-heksan  selama  1x24  jam, kemudian  dilakukan  remaserasi  pada  residu penyaringan  dengan  pelarut  yang  sama sebanyak 2 kali.
Tahap  kedua  yaitu  melakuakan  maserasi terhadap residu tahap pertama dengan menggunakan  etanol  96%  selama  1x24  jam,  serta dilakukan remaserasi dengan etanol 96% sebanyak 8 kali. Maserat etanol diuapkan menggunakan rotary evaporator dan  dipekatkan  dengan  waterbath hingga  diperoleh  ekstrak  kental  daun  asam  jawa (Rianti dkk., 2019).

## Skrining Fitokimia
Uji Flavonoid Menambahkan 1 mL ekstrak etanol daun asam  jawa  dengan  beberapa  tetes  HCl  pekat, ditambah  sedikit  serbuk  Mg.  Adanya  flavonoid ditunjukkan  dengan  terjadinya  perubahan warna kuning jingga atau merah (Ikalinus dkk., 2015).
Uji Tanin Ekstrak  kental  daun  asam  jawa dididihkan dengan 20 mL air kemudian disaring serta    menambahkan    beberapa    tetes    FeCl 3 .
Adanya  senyawa  tanin  ditunjukkan  dengan terbentuknya warna hijau kehitaman atau biru tua (Ikalinus dkk., 2015).
Uji Saponin Ekstrak kental daun asam jawa dididihkan dengan 20 mL air. Filtrak dikocok serta didiamkan selama  15  menit.  Adanya  senyawa  saponin ditunjukkan dengan terbentuknya busa yang stabil (Ikalinus dkk. , 2015).
Pembuatan Gel Ekstrak Etanol Daun Asam Jawa Pembuatan gel ekstrak etanol daun asam jawa menggunakan formulasi (Tabel I).
Menimbang bahan sesuai dengan masing- masing formula.
Melarutkan karbopol, propilenglikol  serta  metil  paraben  sesuai dengan perhitungan formula ke dalam aquades (campuran  I),  gojog  hingga  larut.  Setelah  larut campuran  I  disimpan  selama  1x24  jam  pada suhu
ruang yang berguna untuk mengoptimalkan  proses swelling .  Setelah penyimpanan  1x24  jam,  campuran  diaduk dengan  menggunakan  stirer  disertai  dengan pemanasan.  Dari  hasil  pengadukan  dinetralisasi dengan trietanolamin guna untuk mencapai pH 5,0- 5,5,  kemudian  campuran  disimpan  kembali  pada suhu  ruang  dalam  wadah  tertutup  selama  satu minggu.  Melarutkan  sebanyak  0,5%,  1%  dan  2% ekstrak  kental  daun  asam  jawa  ke  dalam propilenglikol  sesuai  dengan  masing-masing formula  serta  memasukkan  larutan  ekstrak  ke dalam campuran I sambil diaduk hingga homogen. Adkan gel dengan aquadest hingga bobot mencapai 100 g sambil diaduk hingga homogen  (Susilowati dkk ., 2019).
Perlakuan Luka Insisi Pada Tikus Penelitian  ini  telah  mendapatkan persetujuan  etik  dari  komite  etik  penelitian Universitas  Ahmad  Dahlan  dengan  nomor 021907008. Dalam penelitian ini menggunakan
tikus jantan galur Sprague Dawley berjumlah 25 ekor  tikus  yang  dibagi  menjadi  5  kelompok perlakuan.  Masing-masing  kelompok  terdiri dari 5 tikus yaitu: Kelompok I : kontrol negatif (basis  gel);  Kelompok  II  :  kontrol  positif (bioplasenton gel); Kelompok III : gel ekstrak etanol daun asam jawa 0,5%;  Kelompok IV : gel ekstrak etanol  daun  asam  jawa  1%;  Kelompok  V  :  gel ekstrak etanol daun asam jawa 2%.
Sebelum  dilakukan  pembuatan  luka insisi, pada bagian punggung tikus dibersihkan terlebih  dahulu  menggunakan  desinfektan alkohol 70% dan tikus dianestesi secara inhalasi dengan eter. Bulu  tikus pada bagian punggung dicukur  menggunakan  alat  cukur  rambut kemudian  dibuat  luka  insisi  dengan  scalpel sepanjang  2  cm.  Luka  pada  bagian  punggung tikus  diolesi  gel  sesuai  dengan  perlakuan masing-masing  kelompok  3x  sehari  sebanyak 0,2  gram  selama  5  hari  berturut-turut (Susilowati dkk ., 2019). Setelah hari ke 5, tikus dinekropsi dengan cara tikus dimasukan ke dalam toples yang telah jenuh  oleh  eter  sehingga  terinhalasi  oleh  tikus sampai  kaki  dan  ekor  tikus  tidak  menunjukan refleksnya  saat  disentuh  atau  ditekan.  Setelah tikus  tidak  menunjukkan  adanya  respon, mengambil  bagian  kulit  yang  mengalami perlakuan. Jaringan kulit tersebut kemudian dibuat preparat  (HE)  dan  dilanjutkan  dengan  pembacaan serta perhitungan jumlah sel fibroblast (Aulia, 2014). Peoses pembacaan jaringan sel fibroblast dilakukan pada  jaringan  ikat  pada  area  penyembuhan  luka dengan  menggunakan  mikroskop  Olympus  cx33 dengan perbesaran 400x serta proses perhitungan jumlah sel fibroblast dilakukan dengan menggunakan cell  counter pada  aplikasi  image-J. Masing-masing  preparat  dilakukan  pembacaan setiap  lima  lapang  pandang  yang  berbeda  (Dewi, 2018).  Sel  fibroblast  memiliki  inti  berbentuk lonjong ketika dipotong dan berwarna ungu pucat (Aulia, 2014).

## Tabel I. Formulasi Gel Ekstrak Etanol Daun Asam Jawa
Bahan Jumlah Bahan (%) F1 F2 F3 Ekstrak asam jawa 0,5% 1% 2% Karbopol 940 1 1 1 Trietanolamin q.s q.s q.s Propilenglikol 7 7 7 Metil paraben 0,1 0,1 0,1 Aquades ad 100 100 100
Analisis Data Hasil  dari  perhitungan  jumlah  sel fibroblast  antar  masing-masing  kelompok dianalisis  menggunakan  bantuan  perangkat lunak spss versi  23  dengan  taraf  kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil dari ekstraksi diperoleh rendemen sebanyak 13,46% (Susilowati dkk ., 2019). Ekstrak ketal  yang  diperoleh  dilakukan  uji  skrining fitokimia yaitu uji flavonoid saponin, dan tanin. Hasil  dari  uji  skrining  fitokima  menunjukkan kesesuaian dengan penelitian dari Mun’im dkk. (2009),  bahwa  ekstrak  etanol  daun  asam  jawa mengandung senyawa flavonoid, saponin serta tanin.  Hasil  data  pengujian  skrining  fitokimia ekstrak etanol daun asam jawa disajikan dalam Tabel II.
Penelitian  ini  dilakukan  dengan  tujuan untuk mengetahui efektifitas gel ekstrak etanol daun  asam  jawa  terhadap  jumlah  fibroblast pada  proses  penyembuhan  luka  insisi  tikus jantan  galur Sprague  Dawley .  Rata-rata  hasil jumlah fibroblast dari masing-masing kelompok disajikan pada Tabel III.
Hasil dari perhitungan jumlah fibroblast dianalisis menggunakan software spss versi 23 yang  diuji  dengan  uji Anova dan  dilanjutkan dengan uji LSD. Tujuan dari penelitian ini yaitu untuk mengetahui efektifitas gel ekstrak etanol
daun  asam  jawa  terhadap  jumlah  fibroblast pada  proses  penyembuhan  luka  insisi  tikus jantan galur Sprague Dawley dengan parameter meningkatnya jumlah fibroblast.
Berdasarkan analisis data yang didapatkan, gel ekstrak etanol daun asam jawa mampu  meningkatkan  jumlah  fibroblast  tidak berbeda  bermakna  dengan  kelompok  kontrol positif.  Hal  tersebut  menunjukkan  bahwa  gel ekstrak etanol daun asam jawa dapat berperan sebagai penyembuh luka. Proses penyembuhan luka terdiri dari 3 fase, yaitu fase inflamasi, fase fibroplasi  atau  sering  disebut  fase  proliferasi serta  fase  maturasi  atau  fase  reabsorbsi.  Sel fibroblast  merupakan  sel  yang  mendominasi pada  fase  proliferasi  yang  muncul  pada  hari ketiga setelah terjadinya luka hingga 2 minggu setelah terjadinya luka. Fase proliferasi ditandai dengan adanya  pergantian  matriks  provisional yang  didominasi  oleh  platelet  serta  makrofag secara  bertahap  yang  akan  digantikan  oleh migrasi  sel  fibroblast  serta  deposisi  sintesis matriks  ekstraseluler  yang  bertindak  sebagai pengganti jaringan sementara berupa fibrin dan fibronektin (Velnar dkk., 2009).
Selain  berfungsi  sebagai  antiinflamasi, daun  asam  jawa  juga  dapat  berpengaruh  pada penyembuhan  luka.  Senyawa  flavonoid  yang terkandung  dalam  daun  asam  jawa  berperan sebagai  antiinflamasi  serta  berpengaruh  dalam proses proliferasi sel fibroblast. Flavonoid mampu
Tabel II. Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Daun Asam Jawa (Susilowati dkk., 2019)
Pengujian Hasil Keterangan Uji flavonoid ++ Terbentuk larutan merah magenta pucat dalam waktu 3 menit Uji saponin +++ Terbentuk busa stabil Uji tanin +++ Terbentuk endapan biru tua
Keterangan:  ++   = positif; +++ = positif kuat
Tabel III. Rata-Rata Jumlah Sel Fibroblast Kelompok Rata-Rata Jumlah Fibroblast Kel I     : kontrol negatif (basis gel) 569,33 Kel II    : kontrol positif  (gel Bioplacenton) 920,00 a Kel III : gel ekstrak etanol daun asam jawa 0,5% 890,00 abc Kel IV : gel ekstrak etanol daun asam jawa 1% 746,00 abc Kel V   : gel ekstrak etanol daun asam jawa 2% 908,67 abc a = berbeda bermakna dengan kontrol negatif (p<0,05); b = tidak berbeda bermakna dengan kontrol positif (P>0,05); c = tidak ada perbedaan bermakna antar kelompok perlakuan gel ekstrak etanol daun asam jawa (P>0,05)
mengatur  fungsi  sel  inflamasi  dengan  cara merangsang  produksi  TGF- β  sebagai  stimulasi makrofag  dan  bFGF  yang  dapat  menimbulkan pembentukan  pembuluh  darah  endotel  pada sekitar  area  luka  dan  menginduksi  VEGF.  VEGF berperan  dalam  proses  pembentukan  pembuluh darah  baru  dalam  proses  penyembuhan  luka (Nofikasari  dkk.,  2016).  Senyawa  tanin merupakan  polifenol  yang  dapat  menginduksi TGF- β serta berperan sebagai antioksidan yang dapat menginduksi TGF- β untuk proliferasi sel fibrolast (Khan dkk., 2012). Senyawa tanin juga berperan  sebagai    astringen  pada  luka  serta senyawa  saponin  berperan  sebagai  peningkat kecepatan epitelisasi pada luka (Soni dan Akhles, 2012).  Selain  berperan  sebagai  peningkat kecepatan epitelisasi, senyawa saponin berfungsi sebagai  immunomodulator,  sebagai  peningkat produksi  dan  migrasi  makrofag  ke  daerah  luka sehingga dapat meningkatkkan sekresi sitokin IL- 1β serta dapat meningkatkan proliferasi fibroblas. Senyawa saponin dapat meningkatkan TGF- β yang menstimulasi  migrasi  dan  proliferasi  fibroblast (Robin,  2007).  Oleh  sebab  itu,  senyawa  yang terkandung dalam ekstrak daun asam jawa dapat mempercepat  dalam  proses  inflamasi  menuju tahap  proliferasi  sehingga  dapat  mempercepat proses penyembuhan luka.

## KESIMPULAN
Kombinasi  minyak  biji  nyamplung  dan Gel  ekstrak  etanol  daun  asam  jawa  dengan konsentrasi  0,5%,  1%  dan  2%  dapat  diguEnakan sebagai penyembuh luka insisi dengan mekanisme meningkatkan jumlah fibroblast yang tidak berbeda bermakna  dengan  kelompok  kontrol  positif  (gel bioplacenton).

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis mengucapkan terimakasih kepada Kemenristek Dikti yang telah memberikan  bantuan  dana  melalui  Hibah Penelitian Dosen Pemula (PDP) tahun anggaran 2019.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdurrahmat,  A.  2014.  Luka,  Peradangan  dan Pemulihan. Jurnal Enteropi . 10(1): 721-840.
Aulia,  Audi  F.  2014.  Pengaruh  Pemberian  Salep Ekstrak Daun Binahong ( Anredera cordifolia (Tenore)  Steenis)  Terhadap  Pembentukan Jaringan  Granulasi  Pada  Luka  Bakar  Tikus Sprague   Dawley (Studi  Pendahuluan  Lama
Paparan Luka Bakar  10  Detik Dengan  Plat Besi).
Skripsi . Jakarta: UIN Syarif
Hidayatullah. Bhadoriya SS., Mishra V., Raut S., Ganeshpurkar A., Jain  SK.  2012.  Anti-Inflammatory  and Antinociceptive Activities of a Hydroethanolic  Extract  of  Tamarindus Indica  Leaves.
Scientia  Pharmaceutica . 80(3):685 – 700. Damayanti,  I.,  Risa  Pitriani,  &  Yulrina  Ardhiyanti.
2015. Panduan Lengkap Keterampilan Dasar Kebidanan  II. Yogyakarta:  Deepublish.  64- 66.
Dewi, Putu S. 2018. Efektifitas Ekstrak Lidah Buaya Terhadap Jumlah Sel Fibroblast Pada Proses Penyembuhan  Luka  Incisi  Marmut. Jurnal Intisari Sains Medis . 9(3): 51-54.
Ikalinus  R.,  Sri  K.W.,  Ni  Luh  E.S.  2015.  Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Kulit Batang Kelor (Moringa  oleifera), Indonesia  Medicus
Veterinus . 4(1) : 71-79.
Khan,  R.A.,  Muhammad  R.K.,  Sumaira  S.,  Naseer A.S.,  Jasia  B.,  Umbreen  R.,  and  Shumaila  J. 2012.  Phytotoxic  Characterization  Of Various  Fractions  Of Launaea  Nudicaulis . Journal of Medicinal Plants Research . 6(8):
1403-1406. Kuru P. 2014. Tamarindus indica and its health related  effects. Asian  Pacific  Journal  of Tropical Biomedicine . 4(9):676 – 681. Mehta, D.P., Rathod, H.J., Shah, D.P. & Shah, C.N. 2015. Review  on  Microemulsion  Based  Gel:  A Recent  Approach  for  Topical  Drug  Delivery System. Research  Journal  of  Pharmacy  and Technology. 8(2): 118-126. Mun’im, Abdul, Endang H., dan Rahmadiah. 2009. Karakterisasi  Ekstrak  Etanolik  Daun  Asam Jawa  ( Tamarindus  Indica L.). Majalah  Ilmu Kefarmasian . 6(1): 38 – 44. Naik,  Thejaswi  I.,  Shrikanth  P.,  Ravi  M.,  dan Shridara  B.T.  2017.  Wound  healing activity  of Tamarindus  indica Linn.  seed and cork ash. Journal of Ayurveda Medical Sciences . 2(1): 129-35. Nofikasari,  Icha,  Afifah  R.,  Chynintia  D.A.,
Failasofia, Annisa R.F., dan Juni H. 2016. Efek Aplikasi Topikal Gel Ekstrak Pandan Wangi  Terhadap  Penyembuhan  Luka Gingiva. Majalah Kedokteran Gigi
Indonesia . 2(2): 53-59. Rianti, D.R., Erma Y., Agitha D.P., Nanda S.N., Agustina S., 2019. Uji stabilitas gel ekstrak etanol daun asam  jawa  ( Tamarindus  indica L.). Jurnal Kefarmasian Akfarindo . 4 (2): 31-35.
Robbin.  2007.  Buku  Ajar  Patologi  Volume  1.
Jakarta: EGC. Rubin,  Rhyner  S.  2012. Clinicophatologic Foundations  of  Medicine  Sixth  Edition . Cina : Lippincott Williams and Wilkins. Soni,  H.,  &  Akhles  S.  2012.  A  Recent  Update  of
Botanicals  For  Wound  Healing  Activity. International Research Journal of Pharmacy .
3(7): 1-7.
Suparni,  Ibunda    dan    Wulandari,   Ari.   (2012).
Herbal  Nusantara:  1001  Ramuan  Asli Indonesia
. Yogyakarta: ANDI.
Susilowati, A., Dian Ratna R., Erma Y. 2019. Uji Efek  Antiinflamasi  Gel  Ekstrak  Etanol Daun  Asam  Jawa  Terhadap  Jumlah Neutrofil  Pada  Tikus  Jantan  Galur Sprague  Dawley, Prosiding  Seminar Nasional Kesehatan dalam Safe Cosmetics for  Your  Healthy Skin : 1-9.  Bengkulu,  30 November  2019,  Akademi  Farmasi  Al- Fatah Bengkulu