Pengaruh Pemberian Ekstrak Fusarium equiseti terhadap Hewan Mus musculus dengan Pendedahan Akut Melalui Subkutan
Silvia Rachmy *) , Jenny Anna Margaretha Tambunan
Program Studi Pengolahan Limbah Industri, Politeknik AKA Bogor Jl. Pangeran Sogiri No.283, Tanah Baru, Bogor Utara, Kota Bogor, Jawa Barat 16154
*) Email: silviarachmy@gmail.com (Received : 15 November 2021; Accepted: 20 Desember 2021; Published: 21 Desember 2021)

## Abstrak
Fungi  dari  genus Fusarium menghasilkan  termasuk  tricothecene  yang  merupakan  jenis  mycotoxin berbahaya karena sifatnya yang mampu menembus kulit hewan dan masuk ke dalam sistem tubuh (Miller, 2003). Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak Fusarium equiseti yang diberikan secara akut  melalui  subkutan  pada  hewan  mencit  selama  48  jam  pertama.  Dalam  percobaan  ini  digunakan  dua  puluh ekor  mencit  jantan  strain  SW  sebagai  hewan  model  dari  toksisitas  suatu  senyawa  pada  manusia.  Ekstrak Fusarium didedahkan kepada mencit secara subkutan. Setiap mencit diamati pada 1 jam, 2 jam, 4 jam, 8 jam, 12 jam,  24  jam,  dan  48  jam  setelah  perlakuan.  Pada  setiap  jam  tersebut,  diamati  parameter  dan  kematian  yang terjadi.  Parameter  yang  diamati  antara  lain  adalah  diam,  kejang-kejang,  kehilangan  koordinasi,  menjulurkan lidah, dan  feses  yang cair.  Setiap  mencit  yang  mati selanjutnya ditimbang berat badannya dan dibedah dengan menggunakan  alat  bedah  untuk  ditimbang  berat  organ  hati  dan  limfanya.Pemberian  ekstrak  Fusarium  pada mencit  yang  diberikan  secara  akut  melalui  subkutan  menyebabkan  munculnya  ketidakaktifan,  kejang-kejang, kehilangan  koordinasi,  menjulurkan  lidah,  dan  feses  cair  yang  frekuensi  terjadinya  meningkat  sesuai  dengan konsentrasi  perlakuan  yang  diberikan,  hingga  kematian.  Selain  itu,  massa  organ  hati  dan  limfa  relatif  terhadap berat badan meningkat sesuai dengan konsentrasi perlakuan yang diberikan.

## Kata kunci: Fusarium equiseti; tricothecene; mycotoxin

## Abstract
Fungi  of  the  genus  Fusarium  containing  trichotocene,  which  is  a  dangerous  mycotoxin  due  to  its ability to penetrate animal skin and enter the body system (Miller, 2003). This study was conducted to determine the  effect  of  Fusarium  equiseti  extract  administered  subcutaneously  to  mice  for  the  first  48  hours.  In  this experiment, twenty male SW strain mice were used as animal models of the toxicity of a compound in humans. Fusarium extract was exposed to mice subcutaneously. Each mouse was observed at 1 hour, 2 hours, 4 hours, 8 hours, 12 hours, 24 hours, and 48 hours after treatment. At each of these hours, observed parameters and deaths that occur. The parameters observed were silence, convulsions, loss of coordination, sticking out the tongue, and liquid stools. Each dead mouse was then weighed and dissected using surgical instruments to weigh the liver and spleen. The administration of Fusarium extract in mice that was given acutely through the subcutaneous route caused inactivity, convulsions, loss of coordination, sticking out the tongue, and liquid feces which increased in frequency according to the concentration of the treatment given, until death. In addition, the mass of liver and spleen relative to body weight increased according to the concentration of the given treatment.
Keywords: Fusarium equiseti; tricothecene;  mycotoxin

## PENDAHULUAN
Fungi  adalah  jenis  organisme  yang  sangat banyak  ditemui  di  alam  bebas,  dan  tidak  jarang dimanfaatkan oleh manusia untuk berbagai keperluan.  Penggunaan  fungi  di  dunia  sangat bervariasi,  di  antaranya  adalah  sebagai  makanan, untuk melakukan fermentasi, dan saat ini digunakan untuk  beberapa  macam  obat-obatan.  (Robbins et al., 2000).  Mycotoxin  adalah  sebutan  untuk senyawa  metabolit  sekunder  yang  dihasilkan  oleh
organisme  fungi  yang  memiliki  sifat  toksik,  walau biasanya  lebih  umum  digunakan  untuk  senyawa toksik  yang  dihasilkan  oleh  fungi  yang  dapat berkoloni  pada  tumbuhan  budidaya.  (Turner et  al., 2009).  Satu  spesies  fungi  bisa  saja  menghasilkan berbagai  mycotoxin  yang  sama  dan  /  atau  berbeda dengan spesies fungi lainnya (Robbins et al., 2000). Fusarium  equiseti seperti  halnya  sebagian besar spesies yang termasuk dalam genus Fusarium
merupakan  saprofit.  Spesies  ini  secara  khusus memiliki  sifat  phytotoksik  yang  tinggi  karena memproduksi  senyawa  kristal  tanpa  warna  yaitu diacetoxyscirpenol dengan rumusan kimia C 19 H 26 O 7 (Brian et al., 1960). Senyawa ini diketahui memiliki efek  toksik  yang  sangat  tinggi  terhadap  tikus  dan mencit  meskipun  hanya  menghambat  pertumbuhan mikroorganisme  lain  secara  tidak  signifikan  (Brian et al., 1960).
Secara  umum  fungi  dari  genus Fusarium menghasilkan  beberapa  jenis  mycotoxin  yang terbagi dalam berbagai golongan dan berbeda-beda produksinya  pada  setiap  spesies Fusarium .  Di antara  jenis-jenis  tersebut, Fusarium  equiseti diketahui  hanya  memproduksi  mycotoxin  dari beberapa golongan tertentu saja, termasuk Tricothecene.
Trichothecene  adalah  keluarga  senyawa mycotoxin  dengan  struktur  kimia  yang  mirip dengan sangat banyak kemungkinan senyawa untuk berikatan  pada  posisi  R  pada  strukturnya  (Gambar 1). Secara umum senyawa dari golongan trichothecene  berperan  sebagai  inhibitor  dalam sintesis  protein  dengan  cara  bereaksi  dengan komponen ribosom yaitu T-2 toxin (Miller, 2003).
Kelompok  trichothecene  ini  merupakan jenis mycotoxin yang lebih berbahaya secara umum karena  sifatnya  yang  mampu  menembus  kulit hewan  dan  masuk  ke  dalam  sistem  tubuh  melalui jalur  subkutan  (Miller,  2003).  Trichothecene  juga tidak memerlukan adanya aktivasi oleh biotransformasi untuk memunculkan efek toksiknya (Miller,  2003).  Dalam  uji  coba  dalam  medium tanpa sel, mycotoxin dalam kelompok trichothecene tetap  mampu  menginhibisi  sintesis  protein.  Hal  ini mengindikasikan bahwa trichothecene bisa bereaksi langsung  dengan  komponen  seluler,  bukan  hanya biologis (Miller, 2003).
Gambar 1. Struktur kimia Trichothecene
Tingginya  frekuensi  penggunaan  fungi oleh  manusia  memunculkan  keperluan  untuk mengetahui  keberadaan  dan  toksistas  mycotoxin dari  spesies-spesies  fungi  yang  banyak  digunakan. Pengetahuan mengenai mycotoxin dapat meningkatkan  keamanan  bekerja  dan  mencegah penggunaan  fungi  yang  salah.  (Fox  dan  Howlett, 2008).
Selain  itu,  infeksi  tricothecene  pada tumbuhan  pakan,  baik  untuk  hewan  maupun  untuk manusia,  dapat  memunculkan  efek  toksik  pada konsumennya. Secara umum, gejala awal keracunan
trichothecene  termasuk  nausea  parah,  muntah- muntah,  iritasi  kulit,  lethargy,  rasa  lemas,  pusing ( dizziness ), dan kehilangan koordinasi. (Marrs et al,
1986).  Fungi  dari  genus Fusarium yang  juga menghasilkan  mycotoxin sering ditemukan di alam bebas menginfeksi  tumbuhan  budidaya  dan mengakibatkan  banyak  kerugian  baik  secara ekonomi  maupun  kesehatan.  Beberapa  jenis tumbuhan  yang  rentan  terinfeksi  oleh  fungi  dari genus Fusarium adalah Zea mays, Triticum sp., dan Musa sp. . (Fox dan Howlett, 2008).
Umumnya dalam
rantai makanan mycotoxin  dapat  menimbulkan  gangguan  dengan menginfeksi  tumbuhan  baik  yang  dibudidaya maupun tidak. Mycotoxin cenderung tahan terhadap dekomposisi  ataupun  degradasi  oleh sistem pencernaan. Hal ini menyebabkan mycotoxin dapat terus  terbawa  dalam  daging  atau  susu  hewan  yang memakan tumbuhan terinfeksi. Apabila daging atau susu  tersebut  dikonsumsi  oleh  manusia,  maka konsumen tersebut akan terkena pengaruh mycotoxin juga (Fox dan Howlett, 2008).
Meskipun  pengaruh  konsumsi  mycotoxin dalam  jumlah  kecil  tidak  menunjukkan  respon toksik  akut,  sifat  mycotoxin  yang  tahan  terhadap dekomposisi  dan  degradasi  dapat  menjadikan senyawa  tersebut  terakumulasi  dalam  tubuh konsumen.  Karena  itu  hewan  dan  manusia  yang menempati  tingkat  trofik  tertinggi  merupakan golongan  yang  paling  rentan  terhadap  bahaya mycotoxin (Fox dan Howlett, 2008).
Iritasi cutaneous yang sama telah diobservasi  pada  beberapa  kasus,  baik  itu kecelakaan maupun eksperimen:
 Individu  yang  terekspos  pada  jerami  atau  debu jerami  yang  terkontaminasi  oleh  jamur  yang memproduksi  trichothecene  mengalami  iritasi cutaneous yang parah.
 Pada  pekerjaan  skala  besar  dimana  terdapat organisme kultur yang memproduksi trichothecene, staf laboratorium menderita inflamasi kulit yang diikuti oleh deskuamasi kulit dan iritasi local (Forgacs, 1972). Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh  pemberian  ekstrak Fusarium  equiseti yang  diberikan  secara  akut  melalui  subkutan  pada hewan mencit selama 48 jam pertama.

## BAHAN DAN METODE
Pembuatan Ekstrak Fusarium Pembuatan  ekstrak Fusarium dilakukan dengan cara destilasi sederhana. Fusarium ditumbuk halus dengan menggunakan mortar steril, kemudian  diekstrak  dengan  larutan  acetonitrile  : akuabidestilata  (21  :  4  v/v)  yang  sesuai  untuk mengekstraksi  senyawa  yang  dianggap  toksik  aktif yaitu  trichothecene  (Javier et  al., 2009).  Ekstrak Fusarium yang  diperoleh  dari  metode  ekstraksi  ini dijadikan  larutan  stock  yang  selanjutnya  disimpan semalam di dalam kulkas.
Keesokan harinya, dilakukan pencampuran larutan  ekstrak  dengan  larutan  acetonitrile  :
akuabidestilata  (21  :  4  v/v)  hingga  mencapai konsentrasi  yang  sesuai  dengan  konsentrasi  yang
akan didedahkan pada kelompok perlakuan.
Tabel 1. Gejala Tiap Jam Terhadap Kelompok Perlakuan
Waktu Parameter yang diamati Kelompok Perlakuan 100% 54.80% 30% 0% 1 Jam Diam 100% 80% 60% 0% Kejang-kejang 80% 60% 60% 0% Kehilangan koordinasi 60% 60% 40% 0% Menjulurkan lidah 80% 60% 60% 0% Feses cair 80% 60% 60% 20% 2 Jam Diam *100% 100% 80% 40% Kejang-kejang *100% 80% 40% 0% Kehilangan koordinasi *0% 0% 40% 20% Menjulurkan lidah *100% 80% 80% 0% Feses cair *100% 60% 80% 20% 4 Jam Diam Mati **100% ***100% 40% Kejang-kejang **100% ***33.3% 20% Kehilangan koordinasi **0% ***0% 40% Menjulurkan lidah **100% ***66.6% 20% Feses cair **100% ***0% 20%
8 Jam
Diam Mati Mati *100% 80% Kejang-kejang *100% 20% Kehilangan koordinasi *0% 40% Menjulurkan lidah *100% 20% Feses cair *100% 0% 12 Jam Diam Mati Mati Mati ***100% Kejang-kejang ***33.3% Kehilangan koordinasi ***33.3% Menjulurkan lidah ***33.3% Feses cair ***33.3% 24 Jam Diam Mati Mati Mati *100% Kejang-kejang *0% Kehilangan koordinasi *0% Menjulurkan lidah *0% Feses cair *0% Keterangan : *1 hidup dari 5 ekor **2 hidup dari 5 ekor ***3 hidup dari 5 ekor Jumlah mencit tiap perlakuan: 5 ekor
Pendedahan Ekstrak Fusarium pada Mencit Dalam percobaan ini digunakan dua puluh ekor mencit jantan strain SW sebagai hewan model dari toksisitas suatu senyawa pada manusia. Ekstrak Fusarium didedahkan  kepada  mencit  secara subkutan  di  bagian  interscapular  dengan  syringe  1 ml  berukuran  gauge  di  bawah  26  (Fox,  2007). Volume  pendedahan  maksimum  yaitu  0.1  ml/10
gram  berat  badan  (Ross,  2005)  dan  didedahkan secara akut hanya satu kali pada setiap mencit yang diberi perlakuan. Konsentrasi ekstrak yang didedahkan  untuk  setiap  kelompok  perlakuan  yaitu sebagai berikut:
 Kelompok 1 = 100%  Kelompok 2 = 54.8%  Kelompok 3 = 30%
 Kontrol =  Acetonitrile  :  Akuabidestilata
(21 : 4 v/v)

## Pengamatan Hasil
Setiap mencit diamati pada 1 jam, 2 jam, 4 jam,  8  jam,  12  jam,  24  jam,  dan  48  jam  setelah
perlakuan.  Pada  setiap  jam  tersebut,  dilakukan pengamatan  parameter  dan  kematian  yang  terjadi. Parameter  yang  diamati  antara  lain  adalah  diam, kejang-kejang,  kehilangan  koordinasi,  menjulurkan lidah, dan feses yang cair. Setiap mencit yang mati selanjutnya  ditimbang  berat  badannya  dan  dibedah dengan  menggunakan  alat  bedah  untuk  ditimbang berat organ hati dan limfanya.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada  penelitian  ini,  dilakukan  pengamatan parameter yang muncul pada 1, 2, 4, 8, 12, 24, dan 48  jam  setelah  perlakuan.  Terdapat  empat parameter  yang  digunakan  dalam  mengamati pengaruh  pemberian  trichothecene  melalui  jalur subkutan  pada  mencit,  yaitu  diam,  kejang-kejang, kehilangan koordinasi, menjulurkan lidah, dan feses yang  cair.  Gejala  awal  keracunan  mycotoxin tricothecene  adalah  rasa  mual  yang  parah,  muntah- muntah,  iritasi  pada  kulit,  rasa  lemas  dan  lemah, pusing, serta kehilangan koordinasi.
Tabel 2. Massa organ relatif terhadap berat badan
Organ 100% 54.80% 30% 0% Hati 0.06796 0.06315 0.0552 0.055398 Limfa 0.009349 0.005718 0.00683 0.00688 Tabel 3. Persentase Kematian Waktu Kelompok Perlakuan 100% 54.80% 30% 0% 1 Jam 80% 0% 0% 0% 2 Jam 100% 60% 40% 0% 4 Jam 100% 100% 80% 0% 8 Jam 100% 100% 100% 40% 12 Jam 100% 100% 100% 60% 24 Jam 100% 100% 100% 80% 48 Jam 100% 100% 100% 100%
Efek  toksik  dari  trichothecene  dapat berpengaruh  pada  sistem  saraf  pusat  sehingga menyebabkan kelesuan, rasa lemas dan nausea. Hal ini dapat dilihat dari tingginya parameter kehilangan  koordinasi  dan  ketidakaktifan  yang cukup  parah  pada  setiap  kelompok  perlakuan. (Marrs  et  al,  1986).  Kehilangan  koordinasi  dan ketidakaktifan  pada  mencit  perlakuan  disebabkan oleh  terjadinya  penghambatan  sintesis  protein  di otak,  Efek  trichothecene  yang  didedahkan  secara akut  sangat  bervariasi.  Salah  satu  dari  efek  yang dihasilkan  adalah  menurunnya  tekanan  darah dibawah  normal,  yang  disebut  juga  hipotensi.  Hal ini  berkaitan  dengan  kemampuan  trichothecene dalam penghambatan sintesis protein, yang diakhiri dengan  terjadinya  kematian  sel.  Kehilangan koordinasi  (dizziness)  dan  ketidakaktifan,  yang diakibatkan  rasa  lemas,  terjadi  kemungkinan diakibatkan  terjadinya  penurunan  tekanan  darah
secara  drastis  yang  disebabkan  oleh  trichothecene, dimana  penurunan  jumlah  sel  darah  akibat trichothecene dapat disebabkan terjadinya kekurangan  cairan  akibat  pengeluaran  air  yang berlebihan  pada  feses  maupun  kematian  sel  darah. (Wannenmacher & Wiener, 1997).
Kejang-kejang merupakan pertanda semakin  parahnya  pengaruh  trichothecene  dalam tubuh  mencit  tersebut.  Kejang-kejang  tersebut muncul setelah beberapa lama perlakuan, tergantung  dari  kelompok  dosis  yang  didedahkan. Munculnya  kejang-kejang  pada  setiap  perlakuan umumnya  diikuti  oleh  kematian.  Hal  ini  sesuai dengan literatur yang menyebutkan bahwa kematian dapat  terjadi  dalam  hitungan  menit,  jam,  atau  hari, dan seringkali diawali dengan tremor, seizures, dan koma  (Marrs  et  al,  1986).  Kejang-kejang  yang terjadi  disebabkan  adanya  kelainan  pada  bagian otak yang dipengaruhi oleh efek toksik trichothecene.  Efek  utama  yang  disebabkan  oleh trichothecene  adalah  menghambat  sintesis  protein sel,  dalam  hal  ini  sel  otak.  Penghambatan  tersebut akan  memicu  berbagai  kelainan  seperti  gangguan homeostasis  ion  hingga  berubahnya  metabolism energi sel. Otak merupakan pusat system saraf yang sangat  rentan  terhadap  efek  toksik.  Kelainan tersebut dapat menyebabkan terjadinya depolarisasi abnormal  yang  selanjutnya  menyebabkan  ledakan potensial  aksi  pada  system  saraf  sehingga  terjadi peristiwa  kejang-kejang  pada  mencit.    (Bromfield, 2006)
Menjulurkan  lidah  merupakan  salah  satu mekanisme yang dilakukan oleh mencit untuk dapat bernafas  dengan  normal  kembali,  sedangkan  feses yang  cair  menunjukkan  adanya  gangguan  pada gastrointestinal tract mencit perlakuan. Tricothecene  dapat  dengan  sangat  cepat  melewati pulmonary dan mukosa usus, dan memasuki sistem sirkulasi  untuk  menyebabkan efek  keracunan. Pada literatur  disebutkan  bahwa,  tanpa  melihat  rute pendedahan;  apabila  trichothecene  telah  memasuki peredaran  darah,  trichothecene  akan  dengan  cepat diabsorbsi  oleh  organ-organ  di  dalam  tubuh sehingga  dapat  menyebabkan  kelainan  yang beragam.  (Ciegler,  1975).Hal  ini  disebabkan  sifat trichothecene  yang  liphophilik  dan  kemampuan trichothecene  untuk  melewati  barrier  membran plasma sel. Kemampuan trichothecene untuk masuk ke  system  peredaran  darah  relaif  cepat,  dengan puncak  konsentrasi  di  darah  tidak  lebih  dalam kurun  waktu  1  jam.  Cepatnya  kemunculan  efek toksisitas  pada  tubuh  mencit  perlakuan  disebabkan kemampuan  trichothecene  yang  dapat  langsung aktif  tanpa  diperlukan  adanya  biotransformasi  dari trichothecene  tersebut.(Miller,  2003).  Absorpsi trichothecene  pada gastrointestinal  tract dapat mengubah feses menjadi berupa cairan coklat, yang kemudian  akan  berubah  menjadi  diare  yang berdarah.  Hal  ini  dapat  juga  merupakan  hasil  dari proses detoksifikasi akibat adanya aktifitas radioaktif dari trichothecene yang berhasil melewati
mukosa  usus,  dimana  usus  memiliki  kemampuan untuk  mengalterasi  metabolisme  trichothecene. (Ciegler, 1975).
Gambar 2. Persentase Kematian Toksisitas  sistemik  dan  letalitas  dapat terjadi  oleh  pendedahan  dermal  oleh  konsentrasi trichothecene  yang  lebih  tinggi,  apalagi  jika mycotoxin  ini  didedahkan  dalam  kondisi  terlarut. (Godtfredsen  et  al.,  1967).  Dari  Gambar  2  dapat dilihat  bahwa  kematian  yang  terjadi  sesuai  dengan besarnya  konsentrasi  perlakuan.  Kematian  pada mencit perlakuan konsentrasi 100% terjadi sebanyak 80% pada 1 jam pertama dan dilanjutkan kematian  100%  mencit  pada  jam  kedua.  Kematian pada mencit perlakuan konsentrasi 54.8% mengalami  kematian  pada  jam  kedua  sebanyak 60%  dan  dilanjutkan  kematian  100%  mencit  pada jam  keempat.  Sedangkan  pada  perlakuan  30%, kematian  terjadi  pada  jam  kedua  sebanyak  40%, dilanjutkan  kematian  sebanyak  80%  pada  jam keempat, dan kematian 100% pada jam ke-8. Selain itu,  kelompok  kontrol  juga  mengalami  kematian, dimulai  dengan  kematian  sebanyak  40%  pada  jam ke-8 dan diakhiri  kematian seluruh  mencit pada 48 jam.
Acetonitrile yang digunakan sebagai pelarut hanya memiliki efek toksik yang kecil pada dosis  rendah  (Wexler,  2005).  Setelah  memasuki tubuh, acetonitrile akan mengalami biotransformasi di  mikrosom  hati  yang  mengoksidasi  acetonitrile menjadi  glikonitrile.  Glikonitrile  secara  spontan mengalami dekondensasi menjadi hidrogen sianida. Zat  inilah  yang  dapat  menyebabkan  efek  toksik. Kematian  karena efek toksik  acetonitrile  umumnya membutuhkan waktu relatif lama karena memerlukan  biotransformasi  menjadi  hidrogen sianida  lebih  dulu.  Sementara  biotransformasi berlangsung,  sejumlah  besar  acetonitrile  dapat diekskresikan,  dan  dalam  waktu  yang  sama  zat hidrogen  sianida  akan  didetoksifikasi  menjadi thiosianat.  Oleh  karena  itu,  toksisitas  acetonitrile relatif rendah.
LD50  acetonitrile  yang  diberikan  secara  subkutan pada  mencit  yaitu  4480mg/kg,  sedangkan  jumlah acetonitrile  yang  digunakan  sebagai  pelarut  hanya sekitar  1000mg/kg  berat  badan.  (Izmerov et  al., 1982). Walaupun  kontrol  mengalami  kematian, waktu  kematian  yang  lebih  cepat  pada  kelompok- kelompok perlakuan menunjukkan bahwa kematian bukan disebabkan oleh acetonitrile yang
memerlukan  waktu  lama  (sekitar  12  jam)  untuk biotransofmrasi. Oleh karena itu, dapat disimpulkan bahwa pada kelompok perlakuan kematian memang benar disebabkan oleh efek toksik yang muncul dari ekstrak Fusarium. (Izmerov et al., 1982). Organ  yang  diukur  beratnya  dalam penelitian  ini  adalah  organ  hati  dan  limpa.  Hati merupakan  organ  tempat  agensia  toksik  diarahkan oleh aliran darah untuk kemudian dilakukan proses biotransformasi  (Liston et  al., 2008).  Oleh  sebab itu, hati merupakan organ yang secara umum paling mudah  rusak  karena  pengaruh  dari  agensia  toksik yang  masuk  ke  dalamnya.  Studi  distribusi  jaringan menunjukkan bahwa hati adalah organ metabolisme utama  dari  trichothecene.  Saluran  empedu  dan gastrointestinal  mengandung  radioaktivitas  dalam jumlah  besar  setelah  pendedahan  trichothecene secara  intravascular,  intramuscular,  oral,  maupun dermal.  Walaupun  hati  merupakan  organ  utama untuk  metabolisme  trichothecene,  jaringan  lain seperti usus memiliki kemampuan untuk mengalterasi  metabolsime  trichothecene.  Selain melalui  proses  biotransformasi,  sebanyak  95%  dari total  radioaktivitas  dikeluarkan  melalui  urin  dan feses.
Mayoritas produk yang dikeluarkan merupakan
metabolit maupun konjugasi glucoronide  dari  metabolit.  Trichothecene  yang spesifik  pada  aktivitas  karboksilase  juga  dideteksi pada  otak,  ginjal,  limpa,  usus,  sel  darah  putih,  dan eritrosit.  Penemuan  ini  menekankan  pentingnya karboksilesterase dalam mendetoksifikasi trichothecene  (Ciegler,  1975).  Salah  satu  indikasi adanya  efek  toksik  dari  suatu  agensia  adalah peningkatan massa hati relatif terhadap berat badan individu  yang  diamati  (Inderbitzin et  al., 2005). Peningkatan  massa  ini  terjadi  karena  hati  harus bekerja  lebih  berat  dalam  melakukan  detoksifikasi, sementara mungkin hati juga mengalami kerusakan. Hal  ini  ditunjukkan  dengan  meningkatnya  massa hati  relatif  terhadap  berat  badan  dari  kelompok perlakuan  dosis  paling  rendah  hingga  dosis  paling tinggi. (Ciegler, 1975).
Pada  Gambar  3  dapat  dilihat  bahwa peningkatan  massa  relatif  hati  yang  besar  pada kelompok perlakuan 100% dan 54.80%
dibandingkan  dengan  kontrol  menunjukkan  adanya efek toksik dari ekstrak Fusarium yang mengakibatkan hati harus bekerja lebih berat.
Gambar 3. Massa organ relatif terhadap berat badan
Trichothecene  yang  diperkirakan  merupakan  zat aktif  dari  ekstrak Fusarium dapat  dimetabolisme
oleh hati dengan proses alkalisasi, oksidasi, reduksi, hidrolisis,  hidrasi,  dan  konjugasi  (He et  al., 2009). Namun  demikian,  walau  sebagian  besar  reaksi  ini mengubah struktur mycotoxin, banyak di antaranya yang  tidak  mengurangi  toksisitasnya  sama  sekali (He et  al, 2009).  Fakta  ini  kemungkinan  adalah penyebab hati terus-menerus bekerja untuk biotransformasi sehingga meningkatkan massa hati. Pada  kelompok  perlakuan  30%  tidak  terdapat perbedaan  besar  disbanding  kontrol,  kemungkinan pada kasus ini ekstrak Fusarium tidak menyebabkan  adanya  peningkatan  biotransformasi oleh hati.
Limpa  adalah  organ  yang  mengeluarkan sel darah merah yang telah mengalami penuaan dari sistem  peredaran  darah,  melakukan  metabolsime pada  hemoglobin  dari  sel-sel  darah  tersebut,  dan mendaur  ulang  zat  besi  (Mebius  and  Kraal,  2005). Khususnya  pada  mencit,  limpa  merupakan  organ penyimpanan  hampir  setengah  dari  monosit  di seluruh  tubuh,  yang  akan  dimanfaatkan  untuk menjadi  makrofag  ketika  terjadi  luka  (Swirski et al., 2009).
Massa  relatif  limpa  pada  kelompok perlakuan
100%
yang sangat tinggi mengindikasikan  adanya  kerusakan  pada  limpa. Umumnya  peningkatan  massa  limpa  adalah  hasil dari  6  sebab  utama  (Draper,  2009),  namun diperkirakan  pada  kasus  ini  peningkatan  massa terjadi  karena  meningkatnya  kebutuhan  sistem immune untuk melawan efek toksik. Salah satu efek toksik  trichothecene  adalah  menyebabkan  efek immunosuppressive,  sehingga  kerja  limpa  yang berperan  terhadap  sistem  immune  menjadi  lebih berat. Penimbangan organ dilakukan segera setelah terjadi  kematian,  dan  semua  mencit  kelompok perlakuan 100% mati sebelum 4 jam. Diperkirakan pada  rentang  waktu  ini  terjadi  peningkatan  kerja limpa  karena  perlu  mensekresikan  monosit  yang tersimpan  dalam  jumlah  yang  sangat  banyak. Sedangkan  pada  kelompok  perlakuan  54.80% dengan kematian sebelum 8 jam, massa limpa lebih rendah dibandingkan kontrol. Hal ini mengindikasikan  monosit  yang  tersimpan  dalam limpa  telah  banyak  diambil  sehingga  saat  itu jumlahnya  lebih  sedikit  daripada  mencit  kontrol. Kondisi  limpa  pada  waktu  kematian  kelompok perlakuan  30%  dan  kontrol  diperkirakan  mencapai titik  stabil  dengan  produksi  monosit  dalam  tubuh kurang  lebih  sama  dengan  yang  dikeluarkan  untuk melawan  efek  toksik,  atau  kemungkinan  lain monosit  tidak  lagi  dipakai  karena  efek  toksik  tidak bisa dikurangi oleh  makrofag atau sel dendrit  yang terbentuk dari monosit. (Draper, 2009).

## KESIMPULAN
Pemberian  ekstrak  Fusarium  pada  mencit yang  diberikan  secara  akut  melalui  subkutan menyebabkan  munculnya  ketidakaktifan,  kejang- kejang,  kehilangan  koordinasi,  menjulurkan  lidah, dan  feses  cair  yang  frekuensi  terjadinya  meningkat
sesuai dengan konsentrasi perlakuan yang diberikan.  Selain  itu,  massa  organ  hati  dan  limfa relatif  terhadap  berat  badan  meningkat  sesuai dengan  konsentrasi  perlakuan  yang  diberikan. Kematian pada mencit perlakuan konsentrasi 100% terjadi  sebanyak  80%  pada  1  jam  pertama  dan dilanjutkan kematian 100% mencit pada jam kedua. Kematian pada mencit perlakuan konsentrasi 54.8% mengalami  kematian  pada  jam  kedua  sebanyak 60%  dan  dilanjutkan  kematian  100%  mencit  pada jam  keempat.  Sedangkan  pada  perlakuan  30%, kematian  terjadi  pada  jam  kedua  sebanyak  40%, dilanjutkan  kematian  sebanyak  80%  pada  jam keempat, dan kematian 100% pada jam ke-8. Selain itu,  kelompok  kontrol  juga  mengalami  kematian, dimulai  dengan  kematian  sebanyak  40%  pada  jam ke-8 dan diakhiri  kematian seluruh  mencit pada 48 jam.

## DAFTAR PUSTAKA
Brian,  P.W.,  Dawkins,  A.W.,  Grove,  J.F., Hemming,  H.G.,  Lowe,  D.,  dan  Norris, G.L.F.  (1961).  “Phytotoxic  compounds produced  by Fusarium  equiseti ”. Journal of Experimental Botany 12 (1) pp. 1 – 12.
Bucci  T.J.,  Howard  P.C.,  Tolleson  W.H.,  Laborde J.B., and Hansen D.K. (1998).
”Renal effects of fumonisin mycotoxins in animals”. Toxicol. Pathol. 26 (1):160-4
Burmeister,  H.R.  (1976).  “Antibiotic  equisetin  and method  of  production”. United  States Patent 3959468. International Class Busby WF Jr, Wogan GN. (1981). Trichothecenes. In:  Shank  RC,  ed.  Mycotoxins  and  N- Nitroso Compounds: Environmental Risks. Vol  2.  Boca  Raton,  Fla:  CRC  Press; Ciegler A. Mycotoxins: Occurrence, chemistry,  biological  activity.  Lloydia. 1975; 38(1): 21–35
Cornely  OA.  (2008).  " Aspergillus to  Zygomycetes: causes,  risk  factors,  prevention,  and treatment
of invasive fungal infections". Infection 36 (4): 296–313.
Daniel Candinas, Daniel Inderbitzin, Daniel Sidler, Peter Studer, Beat Gloor, Valentin Djonov.
(2006). Mouse  Liver  Anatomy  From  a Microsurgical  Point  of  View .  University Hospital Bern, Switzerland.
Delgado  J.A.,  Schwarz  P.B.,  Gillespie  J.,  Rivena- Varas  V.V.,  and  Secor  G.A.  (2009). “Trichothecene  mycotoxins  associated with  potato  dry  rot  caused  by Fusarium graminearum ”. Phytopathology 100: 290 – 296 .
Draper,  David  J.  (2009).  “Splenomegaly”
http://medicine.medscape.com/article/2062
08-overview#a0104
Fox EM, Howlett BJ (2008).  "Secondary metabolism:  regulation  and  role  in  fungal biology". Curr.  Opin.  Microbiol. 11 (6): 481–7.
Fox,  J.G.  (2007). The  Mouse  in  Biomedical
Research. Academic Press. Godtfredsen WO, Grove JF, Tamm Ch. Trichothecenes.  Hev  Chim  Acta.  (1967). 50: 1666–1668
Greenberg,  Mark  (1999), Toxicological  Review  of Acetonitrile , Washington, D.C.:U.S. Environmental Protection Agency
Izmerov,  N.F. et  al.  ( 1982).  “Toxicometric Parameters  of  Industrial  Toxic  Chemicals Under Single  Exposure”. Moscow, Centre of International Projects.
Jianwei He, Ting Zhou, J. Christopher Young, Greg J.  Boland and Peter  M.  Scott.  (2006). Chemical  and  biological  transformations for detoxification of trichothecene mycotoxins  in  human  and  animal  food chains: a review
Keller  NP,  Turner  G,  Bennett  JW  (2005).  "Fungal secondary metabolism - from biochemistry to  genomics". Nat.  Rev.  Microbiol. 3 (12): 937–47.
Liston,  H.;  Markowitz,  J.;  Devane,  C.  (2001). "Drug glucuronidation in clinical psychopharmacology". Journal  of  clinical psychopharmacology 21 (5): 500–515. Luongo  D,  Severino  L,  Bergamo  P,  De  Luna  R,
Lucisano
A, Rossi M. (2006).
”Interactive  effects  of  fumonisin  B1  and alpha-zearalenol  on  proliferation  and cytokine  expression  in  Jurkat  T  cells.”
Toxicol. In Vitro . Marrs  TC,  Edginton  JA,  Price  PN,  Upshall  DG. (1986). Acute toxicity of T2 mycotoxin to the guinea-pig by inhalation and subcutaneous routes. Br J Exp Path; 67(2): 259–268. Mebius RE, Kraal G. (2005). Structure and function of  the  spleen.  Nat  Rev  Immunol.  5(8): 606-16. Miller,  J.  D.  (2003).  “Aspects  of  the  eology  of fusarium toxins in cereals”. In: Mycotoxins and  Food  Safety. Vries,  J.  W.  de,  M.  W. Trucksess,  L.  S.  Jakson  (eds.).  Kluwer Aademic/Plenum  Publishers,  New  York. pp. 19-27. Philip Wexler, ed. (2005). Encyclopedia of Toxicology , Vol.  1 (2nd  ed.),  Elsevier, pp. 28–30. Robbins  CA,  Swenson  LJ,  Nealley  ML,  Gots  RE, Kelman  BJ  (2000).  "Health  effects  of mycotoxins  in  indoor  air:  a  critical review".
Appl.
Occup.
Environ.
Hyg. 15 (10): 773–84. Ross,  I.A.  (2005).  “Medicinal  Plants  of  the  World: Chemical  Constituents,  Traditional  and Modern Medicinal Uses” . Humana Press. Schaafsma  AW,  Hooker  DC.  (2007).  "Climatic models  to  predict  occurrence  of  Fusarium toxins  in  wheat  and  maize". Int.  J.  Food
Microbiol. 119 (1-2): 116–25.
Tessari EN, Oliveira CA, Cardoso AL, Ledoux DR, Rottinghaus GE. (2006). ”Effects of aflatoxin B1 and fumonisin B1 on  body  weight,  antibody  titres  and histology  of  broiler  chicks”. Br.  Poult. Sci. 47 (3):357-64.
Thompson  WL,  Wannemacher  RW  Jr.  (1984).
Detection and quantitation of T-2 mycotoxin  with  a  simplified  protein synthesis  inhibition  assay.  Appl  Environ Microbiol; 48(6): 1176–1180 Turner NW, Subrahmanyam S, Piletsky SA (2009). "Analytical  methods  for  determination  of mycotoxins: a review". Anal. Chim. Acta. 632 (2): 168–80.
Ueno  Y.  (1984)  Trichothecene  mycotoxins: Mycology, chemistry, and toxicology. Adv Nutr Res.; 3: 301–353
Wannenmacher RW, Wiener SL (1997). Trichothecene  Mycotoxins.  In:  Medical Aspects  of  Chemical  and  Biological
Warfare. Sidell FR, Takafuji ET, Franz