## Laporan pertama infeksi virus gemini pada tanaman tomat di Sulawesi Tenggara

## First report of gemini virus on tomato in Southeast Sulawesi
Muhammad Taufik 1 *,  Gusnawaty HS 1 , Asmar Hasan 1 ,  La Ode Santiaji Bande 1 , Anima Hisein 1 , Hasdiana 1 , Nur Isnaini Ulfa 1 , Sedyo Hartono 2
1 Jurusan Proteksi Tanaman, Fakultas Pertanian, Universitas Halu Oleo, Kendari, Sulawesi Tenggara, 93231
2 Jurusan Hama dan Penyakit, Fakultas Pertanian, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta 55281 *Penulis Korespodensi: muhammad.taufik_faperta@uho.ac.id
Diterima Tanggal 13 November 2023, Disetujui Tanggal 31 Januari 2024 DOI: https://doi.org.10.51978/japp.v24i1.730

## Abstrak
Begomovirus  termasuk  genus  dari  famili Geminiviridae juga  dikenal  dengan  nama  Geminivirus. Geminivirus  adalah  penyebab  penyakit  pada  beberapa  komoditas  sayuran  termasuk  tomat.  Infeksi Geminivirus dapat menyebabkan  kerugian berkisar 85% bahkan  gagal panen, khususnya infeksi terjadi pada  tanaman  muda.  Penularan  Geminivirus  di  pertanaman  dimediasi  oleh  serangga  vektor  kutukebul Bemisia tabaci (Hemiptera:Aleyrodidae). Tujuan penelitian adalah mengidentifikasi infeksi Geminivirus dan serangga vektor pada pertanaman tomat. Lokasi pengamatan di Desa Wolasi dan Lamomea, Kecamatan Konda, Kabupaten Konawe Selatan. Sampel daun tomat yang bergejala Geminivirus dimasukkan ke dalam kantong plastik sampel ziplock  yang telah  diisi CaCl 2 , kemudian  dimasukkan  di  dalam kotak pendingin. Sampel  tomat  yang  bergejala  Geminivirus  dideteksi  dengan  teknik polymerase  chain  reaction (PCR)  di Laboratorium Virologi,  Faperta Universitas Gadjah Mada. Primer yang digunakan adalah primer universal Geminivirus    pAV494  dan  pAC1048.  Gejala  Geminivirus  yang  ditemukan  pada  tanaman  tomat  adalah mosaik ringan  atau menguning, daun mengecil, malformasi daun, daun  agak menggulung ke atas, dan tulang daun mengalami penebalan. Serangga vektor kutukebul ( Bemisia tabaci ) dan kelompok telur  hampir selalu  ditemukan  di  pertanaman  tomat.  Teknik  PCR  berhasil  mengamplifikasi  DNA  Geminivirus  yang berukuran  500bp.  Kejadian  penyakit  Geminivirus  pada  tanaman  tomat  di  Desa  Wolasi  dan  Lamomea adalah  40%  dan  34%,  secara  berturut  turut.  Penelitian  ini  telah  mengonfirmasi  keberadaan  infeksi Geminivirus yang pertama kali pada pertanaman tomat di Sulawesi Tenggara.
Kata Kunci: Bemisia tabaci , gejala, geminivirus, kejadian penyakit

## Abstract
Begomovirus is a genus of the Geminiviridae family, also known as Geminivirus. Geminivirus is the cause of disease in several vegetable commodities, including tomatoes. Geminivirus infection can cause losses ranging from 85% to crop failure, especially infections occurring in young plants. The whitefly vector insect Bemisia  tabaci  mediates  geminivirus  transmission  in  crops  (Hemiptera:  Aleyrodidae).  The  aim  of  the research is to identify geminivirus infections and insect vectors in tomato plants, observation locations in Wolasi and Lamomea Villages, and the Konda sub-district South Konawe Regency. Tomato leaf samples with Geminivirus symptoms were placed in a plastic ziplock sample bag filled with CaCl2. Tomato samples with Geminivirus symptoms were detected using the polymerase chain reaction (PCR) technique at the Virology Laboratory at Agric. Fac. of Gadjah Mada University. The primers used were Geminivirus pAV494 and pAC1048 universal primers. The symptoms of Geminivirus found on tomato plants are mild mosaicism, shrunken leaves, leaf malformation, slightly curled leaves, and thickened leaf veins. Whitefly vector insects (Bemisia tabaci) and egg clusters are almost always found in tomato plants. The PCR technique succeeded in  amplifying  Geminivirus  DNA,  measuring  500bp.  The  incidence  of  Geminivirus  disease  in  Wolasi  and Lamomea  Villages  was  40%  and  34%,  respectively.  This  research  has  confirmed  the  presence  of Geminivirus infection for the first time in tomato plantations in Southeast Sulawesi.
Keywords: Bemisia tabaci, disease incidence, geminivirus, symptoms

## PENDAHULUAN
Tanaman  tomat  adalah  sayuran  yang bernilai  ekonomis  tinggi,  sehingga  banyak dipilih oleh petani untuk dibudidayakan. Selain itu komoditas ini memiliki toleransi yang tinggi terhadap  level  lokasi  penanaman  tomat. Tanaman  tomat  dapat  ditanam  baik    daratan rendah maupun dataran tinggi. Rasanya yang masam dapat memberikan sensasi segar dan menambah  cita  rasa  pada  masakan.  Selain itu,  tomat  memiliki  beberapa  kandungan seperti  flavonoid,  vitamin  C,  dan  vitamin  E (Pujiastuti  &  Kristiani,  2019).  Tomat  juga mengandung likopen  yang  berfungsi  sebagai antioksidan  untuk  mencegah  radikal  bebas serta  dapat  menurunkan  kadar  gula  darah (Susanti et  al. ,  2021)    .  Likopen  berfungsi untuk  mengurangi  gula  darah  melalui penghambatan  terjadinya  resistensi  hormon insulin  yang  akhirnya  toleransi  sel  pada  gula darah menjadi naik dan dapat menanggulangi peningkatan kadar glukosa darah (Sudiarto & Rusmono, 2018).
Berbagai manfaat buat tomat dan nilai ekonominya  sehingga  luas  pertanaman  yang diiringi  produktivitas  yang  tinggi  penting ditingkatkan  dari  waktu  ke  waktu.  Namun berdasarkan data,  luas pertanaman tomat di Sulawesi  Tenggara  tahun  2020  adalah  1479 ha dan tahun 2021 menurun menjadi 1220 ha, sedangkan  produktivitasnya  masih  berkisar 3,2  ton/ha    (BPS  Sulawesi  Tenggara,  2022). Produktivitas  tersebut  masih  jauh  dari produktivitas tomat secara nasional yang telah mencapai  18  ton/ha  (Kementan,  2021). Sebagai  tambahan  produksi  tomat  di  Jawa Barat  yang  menjadi  sentra  produksi  tomat  di Indonesia  yaitu  292.309  ton,  Jawa  Tengah 77.297  ton,  Sulawesi  Utara  66.711  ton, Sulawesi  Selatan  dan  Nusa  Tenggara  Barat (NTB)  masing-masing  sebanyak  63.373  ton dan 30.868 ton .
Salah  satu  faktor  pembatas  di  dalam budidaya tanaman, termasuk budidaya tomat adalah  infeksi  penyakit  tanaman  seperti
Geminivirus.  Infeksi  Geminivirus  dapat menyebabkan kehilangan hasil yang signifikan pada  tanaman  tomat.    Moriones  &  Navas- Castillo,  (2000)  melaporkan  bahwa  infeksi virus  gemini Tomato  yellow  leaf  curl  virus (TYLCV)  dapat  menyebabkan  epidemi  dan gagal  panen  dimanapun  tanaman  tomat ditanam baik di daerah tropis dan subtropis di seluruh dunia. Di Indonesia, infeksi Geminivirus  atau  juga  dikenal  sebagai penyakit  daun  keriting  kuning  pada  tanaman cabai  atau  tomat  (Hidayat et  al. ,  1999  ; Sulandari et  al .,  2001).  Di  Sleman (Yogyakarta)  dan  Magelang  (Jawa  Tengah), tingkat  infeksi  TYLCV  diestimasi  berkisar antara  20  -100%.  Kerugian  yang  ditimbulkan oleh penyakit ini bervariasi dan tercatat dapat mencapai lebih dari 85% (Simanjuntak, 2010).
Penyebaran  Geminivirus  di  lapangan, dari  satu  tanaman  sakit    ke  tanaman  sehat dimediasi  oleh  serangga  vektor  kutukebul B. tabaci (Hemiptera:  Aleyrodidae).  Kutukebul bersifat  invasif  dan  polifagus  dengan  kisaran inang  yang  luas  termasuk  tanaman  tomat. Walaupun  demikian,  jenis  tanaman  inang menentukan  beberapa  sifat  kutukebul  di antaranya  siklus  hidup,  keperidian,  nisbah kelamin, dan juga variasi morfologi puparium (Hidayat et al ., 2020;  Rahayuwati et al. , 2016 ;  Rahayuwati et  al. ,  2020).  Belum  ada informasi  tentang  infeksi  Geminivirus  dan keberadaan  serangga  vektor  kutukebul  yang berasosiasi  dengan  penyakit  kuning  pada tanaman  tomat  di  Sulawesi  Tenggara.  Oleh karena itu penelitian bertujuan mengonfirmasi infeksi  Geminivirus  dan  serangga  vektor kutukebul yang berasosiasi pada pertanaman tomat.

## BAHAN DAN METODE

## Tempat dan Waktu
Penelitian dilaksanakan di lahan petani di Desa Wolasi, Kecamatan Wolasi, Kabupaten  Konawe  Selatan,    Provinsi Sulawesi Tenggara dan Laboratorium Virologi
Universitas  Gadjah  Mada,  dari    bulan September sampai November 2022.

## Peralatan dan bahan
Alat  yang  digunakan  diantaranya vortex,  mortar,  filter  column,  pipet  mikro, mesin  polymerase  chaun  reaction  (PCR), mesin elektroforesis, oven, UV transiluminator,  kotak  pendingin,  beberapa tabung, camera dan alat tulis menulis. Bahan yang  digunakan  diantaranya  adalah  daun tomat  yang  bergejala  virus  Gemini,  plastik ziplock,    CaCl2,  dan  bahan-bahan  untuk ektraksi DNA.
Prosedur Penelitian Pengambilan Sampel di lapangan Lokasi  pengamatan  kejadian  penyakit Geminivirus dan pengambilan sampel adalah lahan pertanaman tomat dengan luas minimal 25  ×  50  m  persegi.  Pertanaman  tomat  yang dipilih untuk menjadi lokasi pengamatan okasi pengambilan  sampel  pada  pertanaman ditetapkan  pada  lahan  Sampel  daun  tomat yang  bergejala  virus  Gemini  dipilih  secara purposive  yaitu  hanya  daun  tomat  yang bergejala terinfeksi Geminivirus. Sampel daun tomat  yang  telah  dipilih  dibungkus  dengan tissue kemudian  dimasukkan ke dalam plastik ziplock  yang  telah  diisi  dengan  CaCl 2 sebanyak  10  g.  Sebelum  dimasukkan  ke dalam  plastik  ziplock  terlebih  dahulu didokumentasi, dideskripsi jenis gejala infeksi Geminivirus  dan  diberi  label.  Plastik  sampel tersebut  dimasukkan  ke  dalam  kotak pendingin. Selanjutnya plastik sampel disimpan  di  dalam  kotak  pendingin  dan  siap dideteksi  di  laboratorium  Virologi  Tumbuhan, Universitas Gadjah Mada.
Deteksi  molekuler  Geminivirus  pada tanaman tomat
Metode  ekstraksi  Geminivirus  dan amplifikasi  DNA    yang  digunakan  mengikuti (Revill et al. , 2003). Sebanyak 0,05 g sampel daun  tomat  bergejala  Geminivirus,  kemudian ditambakan 400 μ l GP1 / GPX1 buffer dan 5 μ l RNase  A  lalu  digerus  kemudian  divorteks, inkubasi pada suhu 60°C selama 10 menit lalu
bolak balik tiap 5 menit, Pre-heat elution buffer 100 μ l  per  sampel  pada  suhu  60°C. Selanjutnya  ditambahkan  GP2  buffer  100 μ l kemudian  divorteks  dan  inkubasi  dalam  es selama  3  menit,  filter  column  ditempatkan pada 2 ml tube collection kemudian pindahkan mixture  (hasil  vorteks)  ke  filter  colomn kemudian sentrifuse selama 1 menit 1000× g, kemudian  filter  column  dibuang.  Ambil supernatan  (1,5  tube  (+)  1,5  volume  GP3 buffer)  kemudian  divorteks  selama  5  detik, tempatkan  GD  column  dalam  2  ml  collection tube,  transfer  mixture  kemudian  sentrifuse 14.000×g selama 2 menit lalu supernatannya dibuang dan ditempatkan kembali GD colomn ke 2 ml tube.
Pencucian dilakukan dengan menambahkan  400 μ l  buffer  W1  ke  GD column  lalu  sentrifuse  14.000×g  selama  30 detik, supernatan dibuang kemudian tambahkan 600 μ l wash buffer tahapan ini di ulang sebanyak 2 kali, setelah itu supernatant dibuang kemudian di dry sentrifuse 14.000×g selama  3  menit.  DNA  Elution  dilakukan dengan  GD  column  dipindahkan  ke  tube  1,5 ml lalu ditambahkan 100 μ l pre-heated elution buffer,  diamkan  selama  3-5  menit  kemudian sentrifuse 14.000 xg selama 30 detik, simpan DNA total pada suhu -20 °C.
Amplifikasi DNA hasil ekstraksi digunakan  untuk  amplifikasi  pita  DNA  yang spesifik.  Komposisi  bahan  yang  digunakan dalam reaksi PCR adalah red mix (6.25 µl × 6 =  37.5  µl),  dd  H2O  (4.25  µl  ×  6  =  25.5  µl) Primer  Forward  dan  Reverse  masing-masing sebanyak (0.5 µl × 6 = 3.0 µl), DNA template (12.5  µl).  Primer  universal  Gemini  virus digunakan  untuk  amplifikasi,  yaitu  pAV494 dan  pAC1048.  Program  amplifikasi  untuk pAV494/pAC1048 terdiri dari tahap predenaturasi  pada  suhu  95  ºC  selama  1 menit, dilanjutkan denaturasi untuk memisahkan  utas  ganda  DNA  pada  suhu  95 ºC selama 20 detik, kemudian annealing untuk penempelan  primer  pada  sikeun  DNA  target pada  suhu  53  ºC  selama  40  detik,  elongasi
untuk sintesis sikuen DNA baru pada suhu 72 ºC  selama  30  detik,  dilanjutkan  dengan tahapan  pasca  extension  pada  suhu  72  ºC selama 5 menit dan diakhiri dengan 4 ºC untuk suhu penyimpanan.
Visualisasi fragmen DNA hasil amplifikasi divisualisasi pada 1% gel agarosa dalam  0.5×  bufer  TBE  (Tris-borate  EDTA). Sebanyak 0.3 g agarosa dilarutkan dalam 30 ml  bufer  TBE  dan  dipanaskan  dalam microwave  selama  2  menit  agar  tercampur merata.  Larutan  agarosa  tersebut  didiamkan sampai  hangat,  kemudian  dituang  ke  dalam cetakan  dan  didiamkan  hingga  memadat kurang  lebih  selama  satu  jam.  Setelah memadat, gel agarosa dimasukkan ke dalam tangki (electrophoresis box) yang berisi bufer TBE  (0,5x).  Sumuran  pada  gel  agarosa  diisi dengan  sampel  DNA  yang  terdiri  dari campuran DNA produk amplifikasi dan loading dye dengan perbandingan 5:1 (v:v). Elektoforesis  dilakukan  dengan  tegangan 50volt  selama  15  menit.  Elektroforesis dimaksudkan  untuk  memisahkan  molekul DNA  dengan  menggunakan  arus  listrik  yang memanfaatkan  prinsip  perbedaan  berat  atau besar  molekul.  Migrasi  posisi  DNA  hasil elektroforesis dideteksi dengan sistem pengecatan  (staining)  dengan  perendaman DNA dalam larutan ethidium bromide selama 5  menit,  dilanjutkan  dengan  perendaman dalam  air  selama  3  menit.  DNA  kemudian divisualisasi di bawah UV transilluminator.

## Rancangan Penelitian
Penelitian  ini  menggunakan  metode observasi langung ke pertanaman tomat milik petani.  Untuk  deteksi  Geminivirus  dilakukan secara purvosif, sedangkan untuk pengamatan  kejadian  penyakit  dilakukan dengan menentukan tanaman sampel secara
acak diagonal. Pengamatan kejadian penyaki Geminivirus dilakukan selama tiga minggu.

## Variabel Pengamatan
Variabel yang diamati dalam penelitian ini  adalah  jenis  gejala  Geminivirus  yang dilanjukan dengan analisis molekuler dengan teknik  PCR,  keberadaan  kutukebul,    dan persentase  kejadian  penyakit  Geminivirus. Kejadian  penyakit  Geminivirus  dihitung dengan menggunakan persamaan rumus:
KP :  n/N × 100%
Keterangan: KP: Kejadian Penyakit n:    Jumlah  tanaman  tomat  yang  menunjukkan gejala infeksi Geminivirus N: Total jumlah tanaman yang diamati Pengamatan  keberadaan  kutukebul dilakukan  secara  langsung  pada  tanaman tomat  dengan  bantuan  kaca  pembesar. Kutukebul  yang  ditemukan  hanya  dideskripsi secara  sederhana  melalui  bentuk  morfologi kutukebul khususnya warna dan bentuk sayap (Hidayat, 2020).

## Analisis Data
Data dianalisis secara deskriptif untuk variabel jenis gejala dan hasil ekstraksi DNA, sedangkan  kejadian  penyakit  Geminivirus dianalisi dengan regresi linier sederhana.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Gejala Virus Gemini pada Tanaman Tomat
Gejala  Geminivirus  yang  ditemukan dipertanaman  tomat  di  Desa  Wolasi  dan  di Desa  Lamomea  seperti  gejala  mosaik, malformasi daun, tulang daun menebal, daun melengkung ke atas ( leaf cupping ), luas daun mengecil  (Gambar  1).  Daun  mosaik, penebalan  tulang daun, daun menguning dan kecil  menjadi  ciri  khas  infeksi  virus  gemini (Kusumaningrum et al. , 2017).
Gambar 1. Variasi gejala yang ditemukan di lapangan, a. mosaik pada daun muda b. malformasi daun dan luas daun mengecil c. daun melengkung ke atas d. e dan f mosaik, tulang dain menebal, dan tanaman tomat kerdil
Telah dilaporkan bahwa gejala TYLCV pada  tanaman  tomat  mulai  klorosis,  bentuk daun  berubah,  ukuran  daun  kecil,  dan tanaman  menjadi  kerdil  (Al-ani et  al .,  2011  ; Papayiannis et  al .,  2002).  Perubahan  warna daun  tanaman  menjadi  hijau  muda  atau kuning  cerah  juga  muncul  pada  beberapa tanaman  tomat  yang  diamati.  Bentuk  dan warna  daun  tanaman  tomat  tersebut  diduga sebagai gejala awal infeksi virus Gemini. Bila gejala berlanjut maka  pertumbuhan tanaman terhambat sehingga menyebabkan daun atau seluruh tanaman menjadi kerdil dan
penghambatan pertumbuhan tanaman (Sudiono, 2001).

## Kejadian Penyakit Virus Gemini
Laju kejadian penyakit virus Gemini di Desa  Wolasi    menunjukkan  peningkatan setiap  minggunya.  Kejadian  penyakit  virus Gemini  yang  tertinggi  terjadi  pada  minggu ketiga  yaitu  40%.  Laju  peningkatan  kejadian penyakit  setiap  minggunya  sebesar  7.64% (Gambar  2a).  Sementara  di  Desa  Lamomea rata-rata  kejadian  penyakit  Geminivirus  pada minggu  ke  tiga  adalah  34%,  sedangkan  laju peningkatan  kejadian  setiap  minggunya sebesar 3.9% (Gambar 2b).
a b
c
d e f
Gambar 2. Laju kejadian penyakit virus Gemini di Desa Wolasi (2a) dan Lamomea (2b), Konawe Selatan
Berdasarkan  pada  hasil  penelitian  ini maka  jenis  tomat  dapat  dikelompokkan  jenis yang agak rentan terhadap kejadian penyakit virus  gemini  dengan  kejadian  penyakit  yang terus meningkat selama 3 minggu pengamatan  (Gambar  2).  Peningkatan kejadian  penyakit  virus  gemini  diduga disebabkan  oleh  beberapa  tanaman  yang menjadi  inang  virus  gemini  seperti  famili Solanaceae  (cabai,    bayam,  terong  dan tembakau),  Leguminosae  (kacang  panjang), Cucurbitaceae (semangka) ditemukan ditanam  di  sekitar  pertanaman  tomat. Dilaporkan tanaman-tanaman tersebut adalah inang  virus  gemini  (Aidawati et  al. ,  2001; Sulandari,  2006)  (Shirazi et  al. ,  2014). Keberadaan  serangga  vektor  mempercepat kajadian penyakit dari waktu ke waktu. Observasi Serangga Vektor Kutukebul
Berdasarkan  hasil  pengamatan  di pertanaman  tomat  kedua  lokasi  tersebut berhasil  ditemukan  adanya  imago  kutu  kebul ( B.  tabaci )  dan  kelompok  telur.      Kutukebul yang ditemukan memiliki ciri morfologi seperti berwarna  putih,  sayapnya  ditutupi  dengan lapisan  lilin  yang  bertepung,  ukuran  tubuh kecil antara (1 - 1,5 mm), berwarna putih, dan sayapnya  jernih  ditutupi  lapisan  lilin  yang bertepung.  Telur  berbentuk  lonjong  agak lengkung, berwarna kuning terang, berukuran
panjang  antara  0,2  -  0,3  mm  dan  terletak  di permukaan  bawah  daun,  pada  daun  teratas (pucuk)  (Gambar  3).  Diduga  kuat  bahwa serangga  yang  ditemukan  adalah  kutukebul (Hidayat,  2020).  Namun  demikian  identifikasi lebih  lanjut  dibutuhkan.  Dilaporkan  oleh  (P. Hidayat & Sartiami, 2006) bahwa berdasarkan identifikasi  morfologi  pupa  yang  dikoleksi langsung  dari  tanaman  inang  cabai,  tomat, dan kedelai di Bogor, Cianjur, dan Sukabumi yaitu Sukabumi, i.e. Bemisia tabaci , Aleurodicus
dispersus , Trialeurodes vaporariorum , dan Dialeurodes sp.
Keberadaan kutukebul menjadi penting untuk menyebarkan virus gemini daru tanaman  sakit  ke  tanaman  sehat.  Ditambah lagi  kutu  kebul  memperoleh  virus  ketika mengambil  makanan  dari  tanaman  sakit secara  persisten.  Virus  yang  diambil  dari tanaman  sakit  masuk  melalui  saluran pencernaan, menembus dinding usus, bersirkulasi  dalam  cairan  tubuh  serangga ( haemolymph ) dan selanjutnya pada kelenjar saliva. Ketika kutukebul menghisap makanan dari tanaman sehat, virus yang telah berada di kelenjar saliva secara tidak langsung akan ikut masuk  ke  dalam  tubuh  tanaman  bersama dengan cairan dari mulut serangga (Agung et al ., 2014).
A B
a B
Gambar 3. Kutukebul dan kelompok telur yang ditemukan di lokasi pengambilan sampel, a. Desa Wolasi; b. Desa Lamomea Kabupaten Konawe Selatan
Deteksi Virus Gemini secara PCR ( Polymerase Chain Reaction )
Hasil visualisasi elektroforesis pada gel agarose  menunjukkan  bahwa  virus  Gemini berhasil  dideteksi  pada  tanaman  tomat  yang berasal  dari  Desa  Lamomea  (Sampel  1)  dan Desa  Wolasi  (sampel  5),  sedangkan  pada
sampel  2,3,4  dan  6  belum  berhasil teramplifikasi. Fragmen DNA hasil amplifikasi berukuran ≈ 500 base pair (bp) (Gambar 4.5). Hasil  tersebut  sesuai  dengan  ukuran  yang diharapkan  apabila  menggunakan  pasangan primer pAV494 dan pAC1048 (Rojas, 1993).
Gambar  4. Hasil amplifikasi DNA virus Gemini dari tanaman tomat dengan teknik PCR menggunakan pasangan primer pAV494 dan pAC1048. M. Marker; 1. Sampel daun tomat Desa Wolasi bergejala kuning dan kerdil; 2. Sampel daun tomat Desa Wolasi bergejala kuning; 3. Sampel daun tomat Desa Lamomea bergejala kerdil, kuning dan keriting; 4. Sampel daun tomat Desa Lamomea bergejala mosaik, kerdil, keriting dan kuning; 5. Sampel daun tomat Desa Lamomea bergejala kerdil, kuning dan tulang daun
menebal; 6. Sampel daun tomat Desa Lamomea
Infeksi virus gemini berhasil terdeteksi dari tanaman asal Desa Lamomea (sampel 1) dan  Desa  Wolasi  (sampel  5).  Pita  DNA
berukuran  500bp  pada  gel  agarose  setelah proses  amplifikasi  dengan  teknik  PCR menggunakan  primer  universal  virus  Gemini
M 6 5 4 3 2 1 M  1  2  3  4  5  6 500 bp 1.000 bp 1.500 bp 3.000 bp
pAV494 dan pAC1048. Fragmen DNA dengan ukuran tersebetu sesuai dengan ukuran yang diharapkan bila menggunakan primer tersebut.  Pengunaan  teknik  PCR  untuk memastikan  infeksi  virus  gemini  pada tanaman  telah  dilaporkan  oleh  beberapa peneliti (Hidayat et al. , 1999   Sulandari et al. , 2006 ; Kusumaningrum et al. , 2017 ;  Taufik et al. ,  2023;    Widodo et  al. ,  2023).  Temuan keberadaan virus gemini dan serangga vektor pada tanaman tomat mengonformasi keberadaan virus gemini pada tanaman tomat di  Sulawesi  Tenggara.  Informasi  dapat dijadikan  mitigasi  untuk  melakukan  strategi pengendalian  preventif  untuk  mencegah penyebaran  virus  gemini  secara  cepat  pada tanaman tomat. Ditambah lagi ditemukan juga keberadaan serangga vektor yaitu kutukebul.

## KESIMPULAN
Gejala  daun  tomat  yang  ditemukan seperti daun mengecil, daun malformasi daun, daun  menggulung ke  atas,  dan    tulang  daun adalah    gejala  khas  virus  gemini.  Serangga vektor  kutukebul  yang  hampir  selalu ditemukan pada pertanaman tomat. Kejadian penyakit  virus  gemini  di  Desa  Wolasi  dan Lamomea  adalah  40%  dan  34%,  secara berturut  turut.  Teknik polymerase  chain reaction (PCR) menggunakan primer pasangan  primer  pAV494  dan  pAC1048  dan berhasil  mengamplifikasi  DNA  berukuran 500bp.  Hasil  ini  mengonfirmasi  keberadaan virus  gemini  pada  tanaman  tomat  yang pertama kali di Sulawesi Tenggara.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  disampaikan  kepada Kemendikbudristek,
Direktorat Riset, Teknologi dan Pengabdian kepada Masyarakat (DRTPM)
atas dukungan pendanaan  TA  2022  dengan  skim  Penelitin Dasar Kompetitif Nasional, sesuai kontrak no 50/UN29.20/PG/2022,  tanggal  12  Mei  2022. Terima kasih juga disampaikan kepada Ketua
dan staf Lembaga Penelitian dan Pengabdian kepada Masyarakat (LPPM) Universitas Halu Oleo  atas  bantuan  administrasi  pelaksanaan penelitian, petani tomat, dan mahasiswa yang telah  membantu  pengumpulan  data  di lapangan.

## DAFTAR PUSTAKA
Agung, N. A. A. G., Agung, P. T., & Ayu, Y. K. (2014). Hubungan antara populasi kutu kebul  ( Bemisia  tabaci )  ( Gennadius ) ( Hemiptera: Aleyrodidae ) dengan insiden penyakit kuning pada tanaman tomat ( Solanum Lycopersicum Mill.) di Dusun  Marga  Tengah,  Desa  Kerta, Kecamatan  Payangan,  Bali. Jurnal Agroekoteknologi  Tropika , 6 (3),  339 –
348.
Aidawati, N., Yusriadi, & Hidayat, S. . (2001).
Kisaran  inang  virus  gemini  asal tanaman cabai dari Guntung Payung , Kalimantan Selatan. Prosiding Kongres  Nasional  XVI  Dan  Seminar Ilmiah Perhimpunan Fitopatologi Indonesia, Bogor, 23-24 Agustus 2001 ,
3.
Al-ani, R. A., Adhab, M. A., Hamad, S. A. H., & Diwan, S. N. H. (2011). Tomato yellow leaf  curl  virus  (TYLCV),  identification, virus  vector  relationship,  strains characterization  and  a  suggestion  for its  control  with  plant  extracts  in  Iraq. African Journal of Agricultural Research , 6 (22), 5149 – 5155. https://doi.org/10.5897/AJAR11.1107 BPS  Sulawesi  Tenggara.  (2022). Sulawesi Tenggara  dalam  Angka.  Badan  Pusat Statistik.
Hidayat,  P.  (2020). Kutukebul  (Aleyrodidae, Hemiptera) di Jawa Deskripsi Morfologi dan Kunci Identifikasi . IPB Press.
Hidayat,  P.,  Ludji,  R.,  &  Maryana,  N.  (2020). Kemampuan  reproduksi  dan  riwayat hidup  kutukebul Bemisia  tabaci
( Gennadius )  dengan  dan  tanpa kopulasi  pada  tanaman  cabai  merah dan tomat. Jurnal Entomologi Indonesia , 17 (3), 156 – 162. https://doi.org/10.5994/jei.17.3.156 Hidayat, P., & Sartiami, D. (2006). Identifikasi Kutukebul  ( Hemiptera:  Aleyrodidae )
dari  Beberapa  Tanaman  Inang  dan Perkembangan Populasinya. J. Entomol. Indonesia , 3 (1), 41 – 49.
Hidayat,  S.  H.,  Rusli,  E.,  &  Nooraidawati. (1999).  Penggunaan  primer  universal dalam polymerase chain reaction untuk mendeteksi  virus  gemini  pada  cabe. Prosiding Seminar Ilmiah dan Kongres Nasional PFI XV. Purwokerto.
Direktorat  Hortikultura  Kementan  (2021). Angka Tetap Hortikulturan Tahun 2020 (Issue 1).
Kusumaningrum,  F.,  Hartono,  S.,  Sulandari, S.,  &  Somowiyarjo,  S.  (2017).  Infeksi ganda  begomovirus  dan  crinivirus pada  tanaman  tomat  di  Kabupaten Magelang,  Jawa  Tengah. Jurnal
Perlindungan  Tanaman  Indonesia ,
19 (2),
60.
https://doi.org/10.22146/jpti.17542
Moriones,  E.,  &  Navas-Castillo,  J.  (2000). Tomato  yellow  leaf  curl  virus,  an emerging  virus  complex  causing epidemics worldwide. Virus Research , 71 (1 – 2), 123 – 134.
https://doi.org/10.1016/S0168- 1702(00)00193-3
Papayiannis,  L.  C.,  Box,  P.  O.,  &  Katis,  N. I. (2002).  News  &  products. Computer Graphics World , 25 (9),
10. https://doi.org/10.1097/00004045- 198407000-00018 Pujiastuti, A., & Kristiani, M. (2019). Formulasi dan  uji  stabilitas  mekanik  hand  and body lotion sari buah tomat ( Licopersicon esculentum Mill.) sebagai  antioksidan. Jurnal  Farmasi Indonesia , 16 (1), 42 – 55. https://doi.org/10.31001/jfi.v16i1.468
Rahayuwati, S., Hidayat, P., & Hidayat, S. H.
(2020).  Variasi  morfologi  puparium
Bemisa tabaci ( Gennadius ) ( Hemiptera:
Aleyrodidae )
pada berbagai inang dan ketinggian tempat dari  daerah  endemik  penyakit  kuning cabai  di  Wilayah  Sundaland. Jurnal Entomologi  Indonesia , 17 (2),  61. https://doi.org/10.5994/jei.17.2.61
Rahayuwati, S., Hidayat, S. H., & Hidayat, P.
(2016).  Identitas  genetik Bemisia tabaci ( Gennadius ) ( Hemiptera: Aleyrodidae )  dari  daerah  endemik penyakit  kuning  cabai  di  Indonesia
bagian  barat  berdasarkan  fragmen mitokondria  sitokrom  oksidase  I (mtCOI). Jurnal Entomologi Indonesia , 13 (3), 156 – 164.
https://doi.org/10.5994/jei.13.3.156 Revill, P. A., Ha, C. V., Porchun, S. C., Vu, M. T., & Dale, J. L. (2003). The complete nucleotide  sequence  of  two  distinct geminiviruses  infecting  cucurbits  in Vietnam. Archives of Virology , 148 (8),
1523 – 1541.
https://doi.org/10.1007/s00705-003- 0109-6
Rojas,  M.  R.  (1993).  Use  of  degenerate primers  in  the  polymerase  chain reaction  to  detect  whitefly-transmitted Geminiviruses. Plant  Disease , 77 (4),
340. https://doi.org/10.1094/pd-77-
0340
Shirazi, M., Mozafari, J., Rakhshandehroo, F., &  Shams-Bakhsh,  M.  (2014).  Genetic diversity, host range, and distribution of tomato  yellow  leaf  curl  virus  in  Iran. Acta  Virologica , 58 (2),  128 – 136. https://doi.org/10.4149/av_2014_02_1 28 Simanjuntak, D. (2010). Potensi tomato yellow leaf  curl  virus  (TYLCV)  isolat  lemah sebagai  agens  pengendali  penyakit daun  keriting  kuning  pada  tanaman tomat. International Journal of Heritage Studies , 16 (1), 1689 – 1699.
Sudiarto, S., & Rusmono, W. (2018). Potensi jus  tomat  menurunkan  kadar  gula darah  sewaktu  (GDS)  pada  pasien diabetes  militus. MNJ  (Mahakam Nursing Journal) , 2 (4),
176. https://doi.org/10.35963/mnj.v2i4.145 Sudiono.  (2001). Deteksi  dan  identifikasi geminivirus  pada  tanaman  tomat . Institut Pertanian Bogor. pp. 1-37. Sulandari,  S.  (2006).  Penyakit  daun  keriting kuning  cabai  di  Indonesia. Jurnal Perlindungan  Tanaman  Indonesia ,
12 (1), 1 – 12. https://doi.org/10.22146/jpti.11941
Sulandari, S., Suseno, R., Hendrastuti, S., K, H., & S, S. (2001). Deteksi virus Gemini pada  cabai  di  Daerah  Istimewa Yogyakarta. Prosiding
Kongres
Nasional XVI Dan Seminar Ilmiah PFI. Bogor. Indonesia.
Sulandari,  S.,  Suseno,  R.,  Hidayat,  H.,
Harjosudarmo, J., Sosromarsono, S., & Gadjah Mada, U. (2006). Detection and Host Range Study of Virus Associated with Pepper Yellow Leaf Curl Disease. HAYATI Journal of Biosciences , 13 (1),
1 – 6.
Susanti,  A.  M.,  Sari,  R.  P.,  &  Chasanah,  S. cholifah S. (2021). Pengaruh pemberian  jus  tomat  terhadap  kadar gula  darah  sewaktu  pada  pasien hiperglikemia. Nusantara Hasana
Journal , 1 (3), 96 – 102.
Taufik,  M.,  HS  G,  S.  S.,  Mallarangeng,  R., Khaeruni, A., Botek, M., Hartono, S., ...
& Hidayat, P. (2023). Sebaran penyakit daun keriting kuning pada pertanaman cabai  di  Sulawesi  Tenggara  dan identifikasi penyebabnya. Jurnal Fitopatologi Indonesia , 19 (3), 89-98.
Widodo,  C.  J.,  Taufik,  M.,  Khaeruni,  A.,  &
Mallarangeng, R. (2023).
Determination of Begomovirus on chili plants  (Capsicum  sp.)  in  Buton  and Muna  Islands,  Southeast  Sulawesi, Indonesia. Biodiversitas , 24 (2),  741 – 751. https://doi.org/10.13057/biodiv/d24020
9