## Karakteristik dan Stabilitas Fisik NLC-Koenzim Q10 dalam Sleeping Mask dengan Minyak Nilam
Characteristics and Physical Stability of NLC-Coenzyme Q10 in Sleeping Mask with Patchouli Oil
Fransisca Dita Mayangsari 1 , Tristiana Erawati 2 *, Widji Soeratri 2 , Noorma Rosita 2
1 Program Studi Magister Ilmu Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Airlangga, Surabaya, Indonesia
2 Departemen Ilmu Kefarmasian, Fakultas Farmasi, Universitas Airlangga, Surabaya, Indonesia
*Corresponding author: era_ffua@yahoo.co.id
Submitted: 29 Januari 2021 Accepted: 2 Maret 2021 Published: 29 Agustus 2021

## Abstract
Introduction: patchouli oil has an antioxidant and penetration-enhancing effect. The oil potentially increased the effectiveness of sleeping mask with Coenzyme Q10 (CoQ10) in Nanostructured Lipid Carriers (NLC) as an anti- aging cosmetic. Objective: To observed the physical characteristics and stability of NLC-CoQ10 in sleeping masks compared to NLC-CoQ10 in sleeping masks with 1% patchouli oil. Methods: The preparation of NLC-CoQ10 was using the High Shear Homogenization method. NLC-CoQ10 was mix with hydrogel and patchouli oil for F2. While for F1 without patchouli oil. After that, physical characteristics and stability were observed, included organoleptic, pH,  and  viscosity.  Physical  stability  test  observed  at  room  temperature  for  90  days.  Results:  The  physical characteristics test showed that F1 had an odor like oleum cacao, while F2 had a specific odor of patchouli oil and a slight odor like oleum cacao. F1 had 6.036 ± 0.011 for pH value, while F2 had 6.062 ± 0.020. There is no significant  difference. However, F1 and F2 have different  viscosity values. F1 had 199.2 ± 0.7 cp for viscosity value, while F2 had 175.6 ± 7.9 cp. The physical stability test showed that F1 and F2 had pH value scale ranges from 6.055 - 6.336 and viscosity 175.6 - 239.7 cp. The viscosity value of F1 had increased after the 60th day, while F2 on the 90th day. Conclusion: Based on characteristic and physical stability tests can be concluded that F1 and F2 have different odor and viscosity, and F2 is more stable than F1.
Keywords: sleeping mask, nanostructured lipid carriers (NLC), coenzyme Q10, patchouli oil

## Abstrak
Pendahuluan: Minyak  nilam  memiliki  efek  antioksidan  dan  peningkat  penetrasi.  Minyak  tersebut  berpotensi meningkatkan  efektivitas  produk sleeping  mask dengan  Koenzim  Q10  (KoQ10)  yang  dimuat  dalam Nanostructured Lipid Carriers (NLC) sebagai kosmetik anti-penuaan. Tujuan: Membandingkan karakteristik dan stabilitas  fisik  dari  NLC-KoQ10  yang  dimuat  dalam sleeping  mask dengan  dan  tanpa  minyak  nilam. Metode: Preparasi  NLC-KoQ10  menggunakan  metode High  Shear  Homogenization .  NLC-KoQ10  dicampur  dengan hydrogel dan minyak nilam, untuk F2. Sedangkan untuk F1 tanpa minyak nilam. Setelah itu diamati karakteristik dan stabilitas fisiknya yang meliputi organoleptik, pH, dan viskositas. Uji stabilitas fisik diamati pada suhu ruang selama 90 hari. Hasil: Uji karakteristik fisik menunjukkan bahwa F1 memiliki bau seperti oleum cacao , sedangkan F2 memiliki bau khas minyak nilam  dan sedikit bau seperti oleum cacao . F1 memiliki nilai  pH 6,036 ± 0,011, sedangkan F2 memiliki nilai pH 6,062 ± 0,020. Tidak ada perbedaan yang signifikan. Namun, F1 dan F2 memiliki nilai viskositas yang berbeda. F1 memiliki nilai viskositas 199,2 ± 0,7 cp, sedangkan F2 memiliki nilai viskositas 175,6 ± 7,9 cp. Uji stabilitas fisik menunjukkan bahwa F1 dan F2 memiliki skala nilai pH berkisar 6,055 - 6,336 dan viskositas 175,6 - 239,7 cp. Nilai viskositas F1 mengalami peningkatan setelah hari ke-60, sedangkan F2 pada hari  ke-90. Kesimpulan: Berdasarkan  uji  karakteristik  dan  stabilitas fisik  dapat  disimpulkan  bahwa  F1  dan  F2 memiliki bau dan viskositas yang berbeda, dan F2 lebih stabil daripada F1.
Kata kunci : sleeping mask, Nanostructured Lipid Carriers (NLC), Koenzim Q10, minyak nilam

## PENDAHULUAN
Kulit adalah jaringan terluar dan organ terbesar dari tubuh manusia, luas permukaanya sekitar 1 – 2 m 2 atau sekitar 12 – 15 % dari total berat tubuh (Science, 2009). Sama seperti organ yang lain, kulit juga akan mengalami penuaan  seiring  berjalannya  waktu.  Penuaan  kulit, ditandai  dengan  perubahan  penampilan  pada  kulit, seperti kulit yang kering,  timbulnya kerutan, berkurangnya  elastisitas  dan  munculnya  binik-bintik hitam  (Campa  &  Baron,  2018;  Mitsui,  1998).  Untuk memperlambat  proses  penuaan  kulit,  maka  kulit  harus dirawat.  Salah  satu  cara  untuk  merawat  kulit  adalah dengan  memakai  serangkaian  produk  perawatan  kulit. Salah  satu  jenis  produk  perawatan  kulit  yang  sedang banyak  dikembangkan  oleh  industri  kosmetik  saat  ini adalah sleeping mask.
Sleeping mask adalah salah satu produk perawatan kulit  yang  digunakan  pada  malam  hari  (saat  waktu tidur). Produk ini diaplikasikan ke seluruh wajah kecuali kedua mata dan mulut, kemudian dibilas dengan air pada keesokan  harinya.  Produk  ini  biasanya  memiliki konsistensi  semipadat  seperti  gel  dan  dikemas  dalam wadah pot (Yang dkk., 2019). Sleeping mask merupakan salah  satu  contoh  masker  wajah  yang  mengandung moisturizer dan  berfungsi  untuk  melembabkan  kulit (Nilforoushzadeh  dkk.,  2018).  Selain  mengandung moisturizer, sleeping mask juga dapat ditambah dengan bahan  aktif  lain,  seperti  agen  anti-pigmentasi  ataupun agen anti-penuaan kulit.
Pada  penelitian  ini,  akan  dikembangkan  produk sleeping  mask dengan  basis hydrogel .  Basis hydrogel dipilih  karena  dapat  memberi  efek  menyegarkan  dan melembutkan pada kulit (Nilforoushzadeh dkk., 2018). Bahan  aktif  yang  digunakan  untuk  produk sleeping mask ini adalah Koenzime Q10.
Koenzime  Q10  (KoQ10)  atau  Ubikuinon adalah suatu  material  larut  lemak  yang  dapat  mencegah terjadinya per-oksidasi lipid, sehingga dapat mencegah kerusakan  kolagen  dan  elastine  dan  membantu menghindari  kerut  pada  kulit  (Bank  dkk.,  2010; Korkmaz  dkk,  2013).  KoQ10  adalah  agen  potensial dalam  mencegah  kerusakan  kulit  akibat photo-aging (Yue  dkk.,  2010).  Namun,  KoQ10  memiliki  beberapa kekurangan,  diantaranya  kelarutan  dalam  air  yang rendah  (0,193  µg/mL  dalam  air),  berat  molekul  yang besar  (863,36  g/mol),  dan  memiliki  lipofilisitas  tinggi (log  P  >  10)  (Lucangioli  &  Tripodi,  2012).  Sehingga penetrasinya  melalui  kulit  menjadi  rendah.  Selain  itu, KoQ10 juga mudah terdegradasi oleh cahaya dan suhu tinggi  (Bao  dkk.,  2019).  Untuk  mengatasi  hal-hal tersebut,  maka  diperlukan  suatu  strategi  formulasi.
Salah satu contohnya adalah dengan memformulasikan KoQ10 dalam sistem NLC.
NLC (Nanostructured Lipid Carriers) adalah suatu sistem  penghantar  obat  berukuran  nano  yang  pada umumnya  tersusun  oleh  lipid  padat,  lipid  cair  dan emulsifier (Kaur dkk., 2015). NLC merupakan generasi kedua  dari  SLN  (Solid  Lipid  Nanopartikel).  Beberapa keunggulan  NLC  yang  tidak  dimiliki  oleh  SLN  antara lain  tingginya  daya  penjebakan  bahan  aktif  dan rendahnya  pengusiran  bahan  aktif  dari  matriks  lipid selama  penyimpanan.  Hal  ini  dikarenakan  adanya tambahan  lipid  cair  pada  NLC.  Lipid  cair  dapat menurunkan kristalinitas dan meningkatkan ketidakteraturan  pada  struktur  matriks  NLC,  sehingga memberi banyak ruang untuk menampung bahan aktif. Hal ini sangat berbeda dengan SLN yang hanya tersusun dari  lipid  padat.  Matriks  lipid  yang  terbuat  dari  lipid padat cenderung membentuk kisi kristal yang sempurna, sehingga  hanya  menyisakan  sedikit  ruang  untuk menampung  bahan  aktif  (Fang  dkk.,  2013).  NLC mampu  melindungi  bahan  aktif  dalam  matriks  lipid. Sehingga  stabilitas  bahan  aktif  menjadi  meningkat (Muller  dkk.,  2014).  Selain  itu,  NLC  juga  dapat meningkatkan  kelarutan  bahan  aktif  yang  sukar  larut dalam  air.  Sanad  dkk  (2010)  mengatakan  bahwa Oksibenzon yang bersifat lipofilik dapat dengan mudah bercampur  dengan  gel  setelah  dijebak  dalam  sistem NLC  yang  tersusun  dari  gliseril  monostearat  (lipid padat), Miglyol  812 dan  asam  oleat  (lipid  cair)  dan polivinil alkohol (stabilizer).
Secara teori, formulasi  KoQ10 dalam sistem NLC akan  menghasilkan  sediaan  yang  stabil,  memiliki penetrasi melalui kulit yang tinggi dan efektivitas anti- penuaan  kulit  yang  tinggi.  Namun,  menurut  penelitian yang  telah  dilakukan  oleh  Shoviantari  (2017),  KoQ10 dalam sistem NLC yang terbuat dari minyak zaitun, setil palmitate, tween 80, span 80, etanol 96 dan dapar asetat pH  4,2  ±  0,2  memiliki  penetrasi  yang  lebih  rendah dibandingkan  dengan  penetrasi  KoQ10  dalam  sistem nanoemulsi (NE) dengan bahan yang sama tetapi tanpa lipid padat (setil palmitat). Guna mengatasi permasalahan ini, maka perlu ditambahkan suatu bahan untuk  meningkatkan  penetrasi.  Salah  satu  contohnya adalah minyak nilam.
Minyak  minyak  nilam (patchouli  oil) adalah minyak  atsiri  yang  berasal  dari  hasil  destilasi  daun tanaman  nilam (Pagostemon  cablin). Minyak  ini merupakan  salah  satu  bahan  yang  cukup  menjanjikan dalam  meningkatkan  penetrasi  obat  melalui  kulit. Pernyataan  ini  didukung  oleh  penelitian  yang  pernah dilakukan oleh Das & Ahmed (2017). Kedua peneliti ini
pernah melakukan pengamatan terhadap spektrum FTIR (Fourier  Transform  Infrared  Spectroscopy) epidermis tikus yang telah di treatment dengan transdermal patch indometasin  yang  ditambah  dengan  minyak  nilam sebagai  peningkat  penetrasi  dibandingkan  dengan transdermal  patch indometasin  tanpa  peningkat penetrasi.  Hasilnya,  terlihat  bahwa  minyak  nilam mempengaruhi  lipid  pada  stratum  korneum  dan  juga mengubah  konformasi  protein  pada  epidermis.  Das  & Ahmed  (2017)  juga  membandingkan transdermal  flux dari transdermal patch indometasin dengan penambahan berbagai konsetrasi minyak nilam (0,05%; 0,25%;  0,5%;  0,75%  dan  1%),  dengan  penambahan 0,05%  DMSO  (standar  peningkat  penetrasi)  dan  tanpa penambahan peningkat penetrasi. Hasilnya, transdermal patch indometasin  yang  ditambah  1%  minyak  nilam memiliki transdermal  flux yang  sama  dengan transdermal  patch indometasin  yang  ditambah DMSO

## Dimethyl Sulfoxide).
Minyak  nilam  memiliki  efek  antioksidan  dan berpotensi  untuk  dapat  mengatasi  tanda-tanda penuaan kulit.  Komponen  utama  dari  minyak  nilam  adalah patchouli  alcohol  (PA) .  Feng  dkk.  (2014)  pernah melakukan penelitian terhadap efek PA pada perbaikan lesi kulit yang dibuat menua dengan paparan sinar UV. Pada  penelitian  tersebut,  PA  dilarutkan  dalam  suatu pembawa,  kemudian  dioleskan  pada  kulit  mencit yang dipapar dengan sinar ultra violet (UV) selama 9 minggu berturut-turut. Hasilnya, PA memiliki kemampuan yang baik  dalam  memulihkan  lesi  kulit  yang  rusak  akibat paparan sinar UV. Feng dkk menyatakan bahwa hal ini dikarenakan  PA  memiliki  efek  anti  oksidan  dan  anti inflamasi,  serta  dapat  menurunkan  ekspresi MMP-1 (Matrix  metalloproteinase-1) dan MMP-3  (Matrix metalloproteinase-3) .
PA  mampu  menekan  kelebihan  produksi  MMP-1 dan  MMP-3  yang  diinduksi  sinar  UV  melalui peningkatan aktivitas enzim antioksidan dan penghambatan  produksi  penanda  inflamasi.  Hal  inilah yang  menyebabkan  PA  dapat  memulihkan  kerusakan kolagen  yang  disebabkan  oleh  paparan  sinar  UV. Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Feng dkk, dapat disimpulkan bahwa PA (kandungan terbesar dari
minyak  nilam)  sangat  berpotensi  sebagai  bahan  aktif untuk  produk  kosmetik  anti-penuaan  kulit,  walaupun mekanisme  kerjanya  masih  harus  diteliti  lebih  dalam lagi.
Penambahan  minyak  nilam  ke  dalam  produk sleeping  mask dengan  bahan  aktif  NLC-KoQ10 berpotensi  untuk  meningkatkan  efikasi  dari  produk tersebut  dalam  mengatasi  tanda-tanda  penuaan  kulit. Hal  ini  dikarenakan  minyak  nilam  dapat  membantu meningkatkan  penetrasi  KoQ10  menembus  kulit  dan dapat menambah efek antioksidan pada produk tersebut.
Sebagai  langkah  awal  pengembangan  produk, dilakukanlah  uji  karakteristik  fisik  dan  stabilitas  fisik terhadap sleeping mask yang mengandung NLC-KoQ10 (F1) dan sleeping mask yang mengandung NLC-KoQ10 dengan penambahan 1% minyak nilam (F2).

## BAHAN DAN METODE

## Bahan
Koenzim  Q10  (Kangcare  Bioindustry,  Nanjing, Cina), Beeswax (Xiamen Fengston Company, Xiamen, Cina), Oleum Cacao (Balai Penelitian Kopi dan Kakao, Jember,  Indonesia),  VCO  (Biocosmethic,  Bonnelles, Perancis), Tween 80 (KAO Corporation, Tokyo, Japan), Span  80  (Sigma  Aldrich,  Selangor,  Malaysia), Propilenglikol  (Dow  Chemical  Pacific,  Singapura), Gliserin  (Ecogreen  Oleochemicals,  Batam,  Indonesia), Disodium  EDTA  (Loba  Chemie,  Mumbai,  India), Carbopol 940 (Anhui Newman Fine Chemicals, Anhui, Cina),  Trietanolamin  (PETRONAS  Chemicals  Group Berhad,  Kuala  Lumpur,  Malaysia), Nipaguard  EHP (Clariant,  Muttenz,  Swiss), Akuademineral ,  minyak nilam  (Lansida  Group,  Yogyakarta,  Indonesia), NaH 2 PO 4 .H 2 O  (Merck,  Gernsheim,  Jerman)  dan Na 2 HPO 4 .2H 2 O (Merck, Gernsheim, Jerman).

## Metode

## Pembuatan sediaan uji
Sediaan  uji  akan  dibuat  dengan  3  tahap:  tahap pertama yaitu  pembuatan NLC-KoQ10  yang  berfungsi sebagai bahan aktif; tahap kedua yaitu pembuatan basis sleeping mask dan tahap ketiga yaitu pembuatan sediaan uji  F1  dan  F2.  Formula  sediaan  uji  dapat  dilihat  pada Tabel 1.
Tabel 1. Formula Uji Bahan Fungsi Jumlah yang digunakan (%) F1 F2 NLC- KoQ10 (1) Bahan aktif 50 50 Basis sleeping mask (2) Pembawa 50 49 Minyak nilam Peningkat penetrasi KoQ10 - 1
Keterangan:
(1) NLC-KoQ10  terdiri  dari:  KoQ10  (2%)  sebagai bahan  aktif, beeswax (0,990%)  dan oleum  cacao
(2,970%)  sebagai  lipid  padat,  VCO  (2,640%) sebagai  lipid  cair,  Tween  80  (13,604%)  dan  Span 80 (6,896%) sebagai surfaktan/ emulsifier , propilenglikol  (3,5%)  sebagai  kosurfaktan  dan dapar  fosfat  pH  6,0  ±  0,2 (ad  100%)  sebagai  fase air.
(2) Basis sleeping  mask terdiri  dari:  gliserin  (10%) sebagai emollient dan humectant , disodium EDTA (0,3%)  sebagai chelating  agent ,  carbopol  940 (1,5%) sebagai gelling agent , trietanolamin (2,5%) sebagai alkalizing  agent , Nipaguard  EHP (0,5%) sebagai  pengawet  dan  aquademineral  bebas  CO 2 (ad 100%) sebagai fase air.

## Pembuatan NLC-KoQ10
NLC-KoQ10  dibuat  dengan  cara  mencampur  fase air dan fase minyak dengan alat pengaduk berkecepatan tinggi.  Pada  penelitian  ini  digunakan Ultra  Turrax IKA®T25 Digital High Shear Homogenizer.
Fase  minyak  disiapkan  dengan  cara  melelehkan beeswax pada  suhu  sekitar  70°C  di hotplate  stirrer . Memanaskan  tween  80  dan  span  80.  Setelah beeswax leleh, oleum  cacao dimasukkan  ke  dalam  lelehan beeswax .  Setelah oleum  cacao melebur,  campuran tween 80 dan span 80 dimasukkan ke dalam campuran beeswax dan oleum  cacao .  KoQ10  didispersikan  ke dalam VCO yang telah dipanaskan di suhu 70°C, diaduk sampai  KoQ10  terdispersi  homogen.  Selanjutnya, campuran  VCO  dan  KoQ10  dimasukkan  ke  dalam campuran beeswax, oleum cacao , tween 80 dan span 80. Fase air terdiri dari propilenglikol dan dapar fosfat. Keduanya  dimasukkan  ke  dalam beaker  glass yang sama,  kemudian  diaduk  hingga  homogen  dan dipanaskan pada suhu 70°C.
Setelah  fase  minyak  siap,  fase  air  dimasukkan  ke dalam  fase  minyak  tetes  demi  tetes  sambil  diaduk menggunakan Ultra  Turrax  IKA®T25  Digital  High Shear Homogenizer dengan kecepatan 5000 rpm selama 10  menit.  Setelah  itu,  kecepatan  dinaikkan  menjadi 16000 rpm dan diaduk selama 2 menit. Setelah selesai, pengadukan  dilanjutkan  menggunakan hotplate  stirrer
dengan  kecepatan  500  rpm  hingga  mencapai  suhu hotplate stirrer sekitar 25°C.
Pembuatan basis sleeping mask
Akuademineral bebas CO 2 dan Gliserin dimasukkan dalam beaker glass . Kemudian ditambahkan  Disodium  EDTA,  lalu  diaduk  hingga Disodium  EDTA  larut. Nipaguard  EHP dimasukkan lalu diaduk hingga homogen. Setelah itu Carbopol 940 ditaburkan  di  atasnya.  Dibiarkan  selama  24  jam  agar seluruh  Carbopol  940  terbasahi  dengan  sempurna. Setelah  itu,  ditambahkan  trietanolamin  (TEA)  sedikit demi  sedikit  sambil  diaduk  menggunakan IKA  Werke Eurostar  Power-B  Overhead  Stirrer (tipe  pengaduk: anchor ) dengan kecepatan 300 rpm selama 10 menit. pH sediaan akhir dicek menggunakan pH meter.

## Pembuatan sediaan uji F1, dan F2
Sediaan Uji F1 dibuat dari 50% NLC-KoQ10 yang dicampur dengan 50% basis sleeping  mask dan diaduk selama  10  menit  dengan  kecepatan  300  rpm menggunakan IKA Werke Eurostar Power-B Overhead Stirrer dengan tipe pengaduk anchor .
Sediaan Uji F2 dibuat dari 50% NLC-KoQ10, 49% basis sleeping  mask dan  1%  minyak  nilam.  Cara pencampurannya: NLC-KoQ10 dicampur dengan basis sleeping  mask menggunakan IKA  Werke  Eurostar Power-B  Overhead  Stirrer dengan  tipe  pengaduk anchor . Diaduk selama 8  menit  dengan kecepatan 300 rpm. Kemudian memasukkan minyak nilam. Setelah itu, sediaan diaduk kembali selama 2 menit.
Pengujian karakteristik fisik

## Pengamatan organoleptis
Pemeriksaan  organoleptis  dilakukan  dengan  cara visual, meliputi pemeriksaan warna, bau, dan pemisahan fase yang mungkin terjadi.

## Pengukuran nilai pH
Sebelum  melakukan  pengujian  nilai  pH  sampel, terlebih  dahulu  dilakukan  kalibrasi  terhadap  pH  meter menggunakan  larutan  standar  pH  7,0.  Setelah  itu, elektroda  dibersihkan  dan  dikeringkan.  Langkah selanjutnya  adalah  mengencerkan  sampel  dengan akuademineral  bebas  CO 2 dengan  perbandingan  1  :  9. Kemudian dicek pHnya menggunakan alat SI Analytics - pH Meter Lab 855.
Pengukuran nilai viskositas
Nilai viskositas ditentukan menggunakan Brookfield  Digital  Viscometer  DV-I+ (LV  and  RV series) dengan cone spindle CP-41, kecepatan 100 rpm. Caranya, memasukkan 2 mL sampel yang akan diuji ke dalam cup . Kemudian dibiarkan 15 menit supaya dapat mencapai  suhu  yang  sudah  diatur.  Lalu  dilakukan pengukuran.  Setelah  proses  pengukuran  selesai  maka
akan  muncul  nilai  nilai  viskositas  dalam  satuan centipoise (cp) dan % torque.

## Ukuran partikel dan indeks polidispersitas (IP)
Tahap  pertama  yaitu  pengenceran  sediaan. Sebanyak  50  mg  sampel  ditimbang  dengan  neraca analitik lalu ditambahkan akuademineral hingga volume 50,0 mL. Diaduk menggunakan magnetic stirrer dengan kecepatan 500 rpm selama 10 menit. Kemudian larutan diambil  sebanyak  2,0  ml  lalu  ditambah  8  mL aquademineral.  Diaduk  kembali  dengan  keceptan  100 rpm selama 10 menit.
Tahap  kedua  yaitu  penentuan  ukuran  partikel  dan indeks  polidispersitas  menggunakan Delsa TM nano submicron particle size analyzer . Jumlah tembakan dan replikasi pengamatan pada alat harus ditentukan terlebih dahulu.  Setelah  itu  memasukkan  sampel  yang  sudah diencerkan  ke  dalam  kuvet.  Kemudian  dimasukkan  ke dalam sample  holder .  Mengamati intensity  bar yang tertera  pada  monitor,  jika  sudah  berwarna  kuning  atau biru,  klik start pada menu  bar .  Alat  akan  mulai melakukan  pengecekan  ukuran  partikel  dan  indeks polidisperistas. Setelah selesai maka akan ada bunyi bip . Setelah  itu  akan  muncul  data  ukuran  partikel  dalam satuan nanometer (nm) dan indeks polidispersitas pada layar monitor.

## Pengukuran zeta potensial
Tahap  pertama  yaitu  pengenceran  sediaan. Sebanyak  50  mg  sampel  ditimbang  dengan  neraca analitik lalu ditambahkan akuademineral hingga volume 50,0 mL. Diaduk menggunakan magnetic stirrer dengan kecepatan 500 rpm selama 10 menit. Kemudian larutan diambil  sebanyak  2,0  mL  lalu  ditambah  8  ml aquademineral.  Diaduk  kembali  dengan  keceptan  100 rpm selama 10 menit.
Tahap  kedua  yaitu  menentukan  zeta  potensial sampel  menggunakan Zetasizer  Nano  (Malvern Instrument) .  Melakukan setting alat  untuk  pengukuran zeta  potensial.  Kemudian  memasukkan  sampel  yang sudah  diencerkan  ke  dalam  kuvet  lalu  dimasukkan  ke dalam sample  holder .  Klik start .  Setelah  alat  selesai melakukan  pengukuran,  akan  muncul  nilai  zeta potensial  sediaan  dengan  satuan  milivolt  (mV)  pada layar monitor.

## Pengamatan Morfologi
Tahap pertama yaitu pengenceran sediaan : 50 mg sampel  ditimbang  dengan  neraca  analitik  lalu ditambahkan  aquademineral  hingga  volume  50,0  mL. Diaduk menggunakan magnetic stirrer dengan kecepatan 500 rpm selama 10 menit. Kemudian larutan diambil  sebanyak  2,0  mL  lalu  ditambah  8  mL
akuademineral.  Diaduk  kembali  dengan  keceptan  100 rpm selama 10 menit.
Sampel  yang  sudah  diencerkan  diteteskan  pada grid . Ditunggu  beberapa saat  hingga kering  setelah itu diwarnai  dengan  uranil  asetat.  Kemudian  ditunggu hingga kering setelah itu diamati dengan alat Jeol JEM- 1400  Transmission  Electron  Microscope dengan perbesaran 40.000 kali.

## Pengujian stabilitas fisik
Pada penelitian ini dilakukan uji stabilitas fisik real time terhadap F1 dan F2 yang disimpan dalam ruangan yang  dilengkapi AC  (Air  Conditioner) dengan  suhu 20°C ± 1°C, Relative Humidity (RH) 65% dan terhindar dari  cahaya  matahari.  Pengujian  dilakukan  selama 3 bulan (90 hari). Aspek yang dinilai pada uji stabilitas yang  dilakukan  adalah  organoleptis  (aroma,  warna, pemisahan),  nilai  pH  dan  nilai  viskositas.  Pengujian dilakukan pada hari ke-0, 14, 30, 60 dan 90.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil uji karakteristik fisik
Pada  NLC-KoQ10,  Perbandingan beeswax dan oleum cacao yang digunakan adalah 25 : 75. Pemilihan ini didasarkan pada penelitian yang telah dilakukan oleh Erawati  dkk.  (2019)  yang  menyatakan  bahwa  NLC minyak  kemiri  yang  dibuat  dengan  kombinasi  lipid padat beeswax dan oleum  cacao dengan  rasio  25  :  75 memiliki real time stability yang paling baik dibanding dengan penggunaan beeswax tunggal atau oleum cacao tunggal.
Hasil  uji  karakteristik  fisik  menunjukkan  bahwa NLC-KoQ10  memiliki  karakteristik  fisik  yang  baik. Sediaan ini terlihat homogen secara visual (dapat dilihat pada Gambar 1). Nilai pH dari sedian ini adalah 6,066 ± 0,006. Nilai ini masuk dalam rentang pH kulit, yaitu 4,5 -  6,8  (Lambers  dkk.,  2006).  Partikel  dari  sediaan  ini berbentuk sferis (dapat dilihat pada Gambar 2); ukuran partikelnya 153,7 ± 7,4 nm. Nilai ini memenuhi syarat ukuran partikel  NLC, yaitu di bawah 1000 nm (Khosa dkk., 2018). Nilai indeks polidispersitasnya yaitu 0,279 ±  0,062.  Menurut  Soeratri  dkk.  (2019),  nilai polidispersitas yang kurang dari 0,3 menandakan bahwa ukuran partikel sistem NLC homogen.
Gambar 2. Hasil pengamatan morfologi partikel NLC-KoQ10 menggunakan TEM pada Skala 100 nm dan Perbesaran 40.000 Kali
Berdasarkan uji karakteristik fisik, diketahui bahwa hydrogel memiliki warna jernih, homogen, tidak berbau dan  memiliki  konsistensi  yang  kental. Hydrogel yang
dibuat, diharapkan memiliki pH 6,0 ± 0,5. Spesifikasi ini mengacu  pada  pH  optimal Carbopol  940 untuk membentuk  konsistensi  gel  yang  baik. Carbopol  940 adalah gelling  agent yang  akan  membentuk  masa  gel dengan viskositas yang kental jika berada pada suasana pH 6  -  11 (Barry, 1983). Carbopol  940 pada  dasarnya memiliki sifat asam. Oleh karena itu, perlu ditambahkan suatu  bahan  yang  dapat  meningkatkan  pH,  seperti kalium  hidroksida,  natrium  hidroksida  ataupun trietanolamin.  Pada  penelitian  ini  dipilih  trietanolamin (TEA)  karena  bahan  ini  bukan  merupakan  elektrolit seperti  kalium  hidroksida  dan  natrium  hidroksida sehingga  tidak  mempengaruhi  zeta  potensial  NLC (Doktorovova  &  Souto,  2009).  Dari  uji  pH,  diketahui bahwa hydrogel memiliki pH 6,080 ± 0,044.
Tabel 2. Hasil pengamatan karakteristik fisik F1 dan F2 Pengamatan F1
F2
Organoleptis Warna Warna kuning muda opaque Warna kuning muda opaque Aroma beraroma oleum cacao (lemak coklat) beraroma spesifik minyak nilam (seperti aroma kayu) dan ada sedikit aroma oleum cacao (lemak coklat) Konsistensi seperti lotion seperti lotion pH 6,036 ± 0,011 6,062 ± 0,020 Viskositas (cp) 199,2 ± 0,7 175,6 ± 7,9
Data uji karakteristik fisik F1 dan F2 dapat dilihat pada  Tabel  2.  Perbedaan  aroma  dari  F1  dan  F2 dikarenakan  pada  F2  ditambahkan  minyak  nilam sedangkan pada F1 tidak. Pada F2, aroma oleum cacao (lemak  coklat)  tidak  dapat  ditutupi  dengan  sempurna oleh  minyak  nilam  karena  minyak  nilam  termasuk minyak  atsiri  kelompok base  note .  Minyak  atsiri yang termasuk  dalam  kelompok  ini  memiliki  aroma  yang cenderung  lembut  dan  aromanya  baru  akan  tercium setelah beberapa detik dihirup (Totilo, 2013).
Uji  karakteristik  nilai  pH  menunjukkan  bahwa  F1 memiliki nilai pH 6,036 ± 0,011 sedangkan F2 memiliki pH  6,062  ±  0,020.  Kedua  formula  memiliki  nilai  pH yang  masuk  dalam  pH  spesifikasi  sediaan  akhir,  yaitu 6,0  ±  0,5  dan  masuk  dalam  rentang  pH  kulit  4,5  -  6,8 (Lambers dkk., 2006). Nilai pH yang terlalu asam atau terlalu basa dapat menyebabkan iritasi pada kulit.
Uji  karakteristik  nilai  viskositas,  menunjukkan bahwa  F1  memiliki  viskositas  199,2  ±  0,7  cP  dan  F2 memiliki viskositas 175,6 ± 7,9 cP. Setelah diuji secara statistik  menggunakan Independent  Sample  t  Test
dengan  α  =  0,05,  disimpulkan  bahwa  ada  perbedaan bermakna  antara  nilai  viskositas  F1  dengan  F2.  F2 memiliki nilai viskositas yang lebih rendah daripada F1 kemungkinan  dikarenakan  F2  mengandung hydrogel 49% sedangkan F1 mengandung hydrogel 50%. Pada F2 ada  penambahan  1%  minyak  nilam  sehingga mengurangi persentase pembawa ( hydrogel ). Hal inilah yang  kemungkinan  membuat  keduanya  memiliki perbedaan nilai viskositas.

## Hasil uji stabilitas fisik
Pada  penelitian  ini  dilakukan  uji  stabilitas  fisik secara real  time pada  suhu  20  ±  1°C  dan  RH  65%. Sampel  disimpan  pada vial yang  tertutup  rapat  dan terlindung  dari  cahaya.  Pengujian  dilakukan  pada  hari ke-0,  14,  30,  60  dan  90.  Aspek  yang  dinilai  pada  uji stabilitas  adalah  organoleptis,  ada  atau  tidaknya pemisahan, pH dan viskositas.
Berdasarkan pengamatan organoleptis pada hari ke- 0, 14, 30, 60 dan 90 diketahui  bahwa F1 dan  F2 tidak mengalami  perubahan.  Kedua  formula  tetap  memiliki warna kuning muda opaque (Gambar 3), dan memiliki
konsistensi  seperti lotion .  Aroma  kedua  formula  juga tetap.  F1  tetap  memiliki  aroma oleum  cacao (lemak coklat), F2 tetap memiliki aroma minyak nilam (aroma
kayu) dengan sedikit aroma oleum cacao (lemak coklat). Tidak didapati adanya  pemisahan pada kedua formula, sediaan tetap homogen sampai penyimpanan 90 hari.
Gambar 3. F1 dan F2 pada pengamatan di hari ke-0, 14, 30, 60 dan 90
Pengamatan nilai pH pada hari ke-0, 14, 30, 60 dan 90  memberikan  informasi  bahwa  nilai  pH  F1  dan  F2 relatif  stabil.  Hasil  pengamatan  dapat  dilihat  pada Gambar 4. Nilai pH pada semua formula dan semua titik
pengamatan masih dalam rentang pH spesifikasi sediaan akhir, yaitu 6,0 ± 0,5. Nilai pH hasil pengamatan juga masih dalam rentang pH kulit 4,5 - 6,8 (Lambers dkk., 2006). Sehingga sediaan aman untuk digunakan.
Gambar 4. Histogram hasil pengukuran nilai pH F1 dan F2 pada hari ke-0, 14, 30, 60 dan 90
Gambar 5. Grafik hasil pengukuran nilai viskositas F1 dan F2 pada hari ke-0, 14, 30, 60 dan 90
Hasil  pengamatan  nilai  viskositas  pada  hari  ke-0, 14,  30,  60  dan  90  untuk  F1  dan F2  dapat  dilihat  pada Gambar  5.  Hasil  pengamatan  dianalisa  secara  statistik menggunakan Anova  One  Way dengan  α  =  0,05  dan dilanjutkan  dengan  uji Post  Hock  Tukey  HSD untuk mengetahui kelompok apa saja yang berbeda bermakna.
Dari  uji  tersebut,  diketahui  bahwa  nilai  viskositas  F1 mengalami  peningkatan  pada  hari  ke-60.  Sedangkan untuk  F2,  peningkatan  viskositas  secara  bermakna terjadi pada hari ke-90
Kenaikan  nilai  viskositas  pada  sediaan  selama penyimpanan  kemungkinan  dikarenakan  persentase
5.500 6.000 6.500 7.000 0 14 30 60 90 N il a i pH Lama penyimpanan (hari) F1 F2 100 150 200 250 0 14 30 60 90 V is k o si ta s (c p s) Lama Penyimpanan (hari) F1 F2 * *
humektan dalam sediaan yang cukup kecil sehingga air dari  sediaan  banyak  yang  menguap.  Hal  ini menyebabkan  sediaan  menjadi  lebih  kental  dan  nilai viskositasnya  meningkat.  Penambahan  humektan  pada suatu sediaan topikal dapat memberi keuntungan ganda. Ketika  sediaan  topikal  diaplikasikan  pada  kulit, humektan  yang  ada  di  dalam  sediaan  tersebut  akan menahan penguapan air dari kulit dan mengikat air yang ada di udara, sehingga kadar air pada kulit tetap terjaga (Mitsui, 1998). Sebelum sediaan diaplikasikan ke kulit, humektan  dapat  menjaga  kadar  air  pada  sediaan sehingga  kadar  air  dalam  sediaan  tetap  terjaga (Larranaga,  2016;  Mitsui,  1998).  Pada  sediaan  akhir, baik  itu  F1  ataupun  F2,  persentase  gliserin  sekitar  5% dan persentase propilenglikol 1,75%. Persentase kedua humektan  ini  kemungkinan  masih  kurang  untuk mempertahankan  kadar  air  pada  sediaan  selama penyimpanan.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  uji  karakteristik  fisik,  disimpulkan bahwa  F1  (tanpa  minyak  nilam)  dan  F2  (dengan  1% minyak  nilam)  memiliki  perbedaan  aroma  dan viskositas. Berdasarkan uji stabilitas fisik, disimpulkan bahwa F2 lebih stabil daripada F1.

## DAFTAR PUSTAKA
Bao, K., Zhang, C., Xie, S., Feng, G., Liao, S., Cai, L.,
He, J., Guo, Y. & Jiang, C. (2019). A Simple and Accurate Method for the Determination of Related Substances  in  Coenzyme  Q10  Soft  Capsules.
Molecules ; 24 ; 1-14.
Barry, B. W. (1983). Dermatological Formulation. New York: Marcel Dekker Inc.
Campa,  M.  &  Baron, E.  (2018).  Anti-aging  Effects  of
Select Botanicals: Scientiﬁc Evidence and Current
Trends. Cosmetics ; 5 ; 1-15.
Das,  A.  &  Ahmed,  A.  B.  (2017).  Formulation  and Evaluation of Transdermal Patch of Indomethacin Containing  Nilam  Oil  as  Natural  Penetration Enhancer. Asian  Journal  of  Pharmaceutics  and Clinical Research ; 10 ; 320-325.
Doktorovova, S. & Souto, E. B. (2009). Nanostructured Lipid  Carrier-Based  Hydrogel  Formulations  for Drug Delivery: a Comprehensive Review. Expert Opinion Drug Delivery ; 6 ; 165-176.
Erawati, T., Putri, D. A., Maharani, A. S., Rosita, N. & Soeratri, W. (2019). Characteristics and Stability of Nanostructured Lipid Carrier (NLC) Aleurites Moluccana  Seed  Oil  (AMS  oil)  Using  Various Combinations  of  Beeswax  and  Oleum  Cacao.
International Journal of Drug Delivery
Technology ; 9 ; 94-97
Fang, C. (2013). Nanostructured Lipid Carriers (NLCs) for Drug Delivery and Targeting. Recent Patents on Nanotechnology ; 7 ; 41-55.
Feng, X., Yu, X., Li, W., Kong, S., Liu, Y., Zhang, X.
& Lin, Z. (2014). Effect of Topical Application of Patchouli  Alcohol  on  the  UV-induced  Skin Photoaging  in  Mice. European  Journal  of Pharmaceutical Sciences ; 63 ; 113–123.
Kaur, S., Nautyal, U., Singh, R., Singh, S. &  Devi, A. (2015).  Nanostructure  Lipid  Carrier  (NLC):  the New  Generation  of  Lipid  Nanoparticle. Asian Pacific Journal of Health Sciences ; 2 ; 76-93. Khosa,  A.,  Reddi,  S.  &  Saha,  R.  N.  (2018). Nanostructured  Lipid  Carriers  for  Site-specific Drug Delivery. Biomedicine & Pharmacotherapy ; 103 ; 598–613.
Lambers,  H.,  Piessens,  S.,  Bloem,  A.,  Pronk,  H.,  & Finkel, P. (2006). Natural  Skin Surface  pH is on Average  Below  5,  Which  is  Beneficial  for  Its Resident Flora . International Journal of Cosmetic
Science ; 28 ; 359–370.
Larranaga,  M.  D.,  Lewis,  SR.,  R.  J.  &  Lewis,  R.  A.
(2016). Hawley's: Condensed Chemical Dictionary. Hokoben: John Wiley & Sons, Inc.
Lucangioli, S. & Tripodi, V. (2012). The Importance of the Formulation in the Effectiveness of Coenzyme Q10  Supplementation  in  Mitochondrial  Disease Therapy. Der Pharmacia Sinica ; 3 ; 406–407.
Mitsui, T. (1998). New Cosmetic Science. Amsterdam: Elsevier Science B.V.
Muller,  R.  H.,  Staufenbiel,  S.  &  Keck,  C.  M.  (2014). Lipid  Nanoparticles  (SLN,  NLC)  for  Innovative Consumer Care & Household Products.
Household and Personal Care Today ; 9 ; 18-24. Nilforoushzadeh,  M.  A.,  Amirkhani,  M.  A.,  Zarrintaj, P.,  Moghaddam,  A.  S.,  Mehrabi, T.,  Alavi,  S.  & Sisakht,  M.  M.  (2018).  Skin  Care  and Rejuvination  by  Cosmeceutical  Facial  Mask. Journal of Cosmetic Dermatologi ; 17; 693-702.
Sanad,  R.  A,  Abdelmalak,  N.  S.,  Elbayoomy,  T.  S.  &
Badawi,  A.  A.  (2010).  Formulation  of  a  Novel Oxybenzone-Loaded Nanostructured Lipid Carriers  (NLCs). The  American  Association  of Pharmaceutical  Scientists  Journal;  11 ;  1684– 1694.
Science,  P.  (2009).  Skin  and  Nail:  Barrier  Function, Structure, and Anatomy Considerations for Drug Delivery. Cleveland: Lubrizol Life Science.
Soeratri, W., Hidayah, R. & Rosita, N. (2019). Effect of
Combination  Soy  Bean  Oil  and  Oleic  Acid  to Characteristic,  Penetration,  Physical  Stability  of Nanostructure  Lipid  Carrier  Resveratrol. Folia Medica Indonesiana ; 55 ; 213-222.
Totilo,  R.  P.  (2013).  Therapeutic  Blending  with Essential  Oil.  Petersburg:  Rebeca  at  the  Well Foundation.
Yang, L., Ganse, L., & Jimenez, S. (2019). The Korean
Skin  Care  Bibble.  London:  Octopus  Publishing Group.
Yue, Y., Zhou, H., Liu, G., Li, Y., Yan, Z. & Duan, M.
(2010).  The  Advantages  of  A  Novel  CoQ10 Delivery  System  in  Skin  Photo-protection.
International Journal of Pharmaceutics ; 392 ; 57- 63.