## BIOEDUSAINS: Jurnal Pendidikan Biologi dan Sains

## SKRINING DAN IDENTIFIKASI BAKTERI SELULOLITIK TEMPAT PEMAKAMAN UMUM
Siti Nur Syarifah 1 , Erma Musbita Tyastuti 2 , Yasir Sidiq 3 , Triastuti Rahayu 4
Universitas Muhammadiyah Surakarta 1,2,3,4
tr124@ums.ac.id 1

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  potensi  bakteri  selulolitik  dan mengidentifikasi isolat bakteri yang berasal dari TPU. Sebanyak 36 isolat bakteri yang  akan  diuji  potensi  selulolitiknya  sudah    diisolasi  dari  TPU  Pracimaloyo Kartasura,  Sukoharjo.  Seleksi  bakteri  selulolitik  menggunakan  media  selektif Carboxymethyl  Cellulose  (CMC)  yang  ditetesi  Congo  red  0,1%  sedangkan identifikasinya  berdasar  morfologi  koloni  dan  pewarnaan  Gram.  Hasil  penelitian diperoleh 8 isolat bakteri (22,22%) menunjukkan aktivitas selulolitik positif, yaitu P5,  P8,  P10,  P14,  P22,  P25,  P27,  dan  P31,  dengan  nilai  indeks  selulitik  7.5;  5; 6.25; 7; 7, 5, 25; 7, 25; dan 6.5.  Isolat  yang positif selulolitik mempunyai warna koloni  putih  mengkilap,  bertepi  entire,  elevasi  raised,  dan  termasuk  ke  dalam Gram  negative  berbentuk  kokus.  Simpulan  pada  penelitian  ini  adalah  tempat pemakaman umum TPU menyimpan bakteri selulolitik potensial.
Kata Kunci : Bakteri Selulolitik, Tempat Pemakaman Umum (TPU), Pracimaloyo

## ABSTRACT
This research aims to determine the potential of cellulolytic bacteria and identify bacterial isolates originating from TPU . A total of 36 bacterial isolates that will be  tested  for  their  cellulolytic  potential  have  been  isolated  from  Pracimaloyo Kartasura  TPU,  Sukoharjo.  Selection  of  cellulolytic  bacteria  used  selective Carboxymethyl  Cellulose  (CMC)  media  dripping  with  0.1%  Congo  red  while identification was based on colony morphology and Gram staining. The research results  showed  that  8  bacterial  isolates  (22.22%)  showed  positive  cellulolytic activity,  namely  P5,  P8,  P10,  P14,  P22,  P25,  P27,  and  P31,  with  a  cellulolytic index  value  of  7.5;  5;  6.25;  7;  7,  5,  25;  7,  25;  and  6.5.  Cellulolytic  positive isolates  have  shiny  white  colonies,  entire  edges,  raised  elevations,  and  are classified  as  Gram  negative  cocci.  The  conclusion  of  this  research  is  that TPU public burial places harbor potential cellulolytic bacteria.
Keywords : Cellulolytic Bacteria, Public Cemetery ( TPU ), Pracimaloyo

## PENDAHULUAN
Tanah Pemakaman Umum (TPU) merupakan areal tanah yang disediakan untuk keperluan pemakaman jenzah bagi setiap orang tanpa membedakan agama dan golongan,  yang dikelola oleh Pemerintah Daerah Tingkat  II atau Pemerintah Desa (Diputra & Syaodih, 2016). Proses penguburan dilakukan dikedalaman 200 cm  agar  terhindar  dari  binatang  buas.  Proses  penguraian  jasad  yang  sangat  aktif terjadi  kurang  lebih  30  hari  setelah  kematian  (Afni  et  al.,  2022),  menghasilkan mineral-mineral  tanah  yang  diperlukan  untuk  pertumbuhan  mikroorganisme termasuk  bakteri.  Hal  ini  dibuktikan  bahwa  di  area  TPU  terdeteksi  bakteri  tanah
yang melimpah (Putra et al., 2023). Selain penguraian jasad, di TPU juga terjadi penguraian  bahan-bahan  yang  mengandung  selulosa  seperti  kain  kafan,  kayu penutup,  peti  jenazah,  dan  pakaian.  Bahan  tersebut  menjadi  substrat  bagi  jasad pengurai  selulosa  termasuk  bakteri  selulolitik  (Agustriono,  2016).  Substrat selulosa  tersebut  menjadi  sumber  yang  dimanfaatkan  mikroorganisme  selulolitik untuk  pertumbuhannya  dengan  memproduksi  enzim  selulase.  Beberapa  jasad selulolitik  yang sudah teridentifikasi  dari kelompok jamur adalah Phanerochaete chrysosporium (Rahayu  et  al.,  2017).  Sedangkan  dari  kelompok  bakteri  ada beberapa genus antara lain Achromobacter, Angiococcus, Cytophaga, Cellivibrio, Flavobacterium, Pseudomonas, Poliangium, Sorangium, Sporocytophaga, Vibrio, Cellfalcicula, Micrococcus, Bacillus, Thermomonospora, Ruminoccus, Bacteroides,  Acetivibrio,  Misrobispora, dan Streptomyces (Rao,  1994;  Saratale, 2012).
Enzim  selulase  merupakan  enzim  ekstraseluler  yang  diproduksi  di  dalam sel  kemudian  dikeluarkan  ke  medium  pertumbuhannya  (Anuar,  2014). Pemanfaatan  enzim  tersebut  diberbagai  bidang  dengan  produk-produk  yang beragam.  Sebagai  contoh  pada  bidang  industri  kertas,  farmasi,  detergen,  dan makanan. Industri berbasis enzim semakin penting dibandingkan industri berbasis kimia  karena  keamanan  proses,  biaya  penyulingan  rendah,  hasil  tinggi,  kontrol proses  yang  efesien,  dan  sifat  ramah  lingkungan.  Aplikasi  enzim  selulase  yang menjanjikan  saat  ini  adalah  di  industri  minuman  (anggur),  pakan  dan  makanan (Ejaz et al., 2021).
Penelitian Puspitasari & Ibrahim (2020) menyatakan bahwa enzim selulase banyak  digunakan  dalam  aplikasi  industri  dan  permintaan  pasar  yang  cukup tinggi.  Hal  ini  sejalan  dengan  penelitian  yang  dilakukan  Akmala  &  Supriyo (2020)  yang  menggunakan  enzim  selulase  untuk  membuat biodegradable  foam pengganti Strofoam berbahan  baku  utama  tepung  tapioka.  Enzim  ini  sangat penting  dalam  mengandung  proses  pendegradasi  selulosa  menjadi  glukosa  serta bahan-bahan  yang  mengandung  substrat  selulosa  didalam  tanah  dalam  proses penguburan jenazah seperti serat tekstil pada kain kafan dan baju jenazah.
Isolasi  dan  skrining  bakteri  selulolitik  sudah  dilakukan  dari  beberapa sumber,  antara  lain  penelitian  Yusnia  et  al.,  (2019)  yang  mengisolasi  dan menyeleksi  bakteri  selulolitik  yang  berasal  dari  beberapa  tanah  hutan  di  Bali. Hasil  penelitian  diperoleh  21  isolat  berpotensi  mendegradasi  selulosa  dengan indeks selulolitik terbesar 5,41 dan tingkat pendegradasi selulosa tertinggi 8,32%. Penelitian Murtiniyaningsih & Hazmi (2017) tentang isolasi dan uji ativitas enzim selulose  pada  bakteri  selulolitik  asal  tanah  sampah  diperoleh  4  isolat  yang berpotensi  mendegradasi  selulosa  dengan  indeks  aktivitas  selulolitik  0.875. Penelitian  Fauziah  &  Ibrahim  (2020)  tentang  isolasi  dan  karakteristik  bakteri selulolitik  pada  tanah  gambut  diperoleh  24  isolat  dengan  IS  termasuk  kategori tinggi  sebanyak  6  isolat.  Di  Indonesia,  penelitian  serupa  yang  berlokasi  di  TPU belum  pernah  dilaporkan.  Pada  penelitiam  ini  akan  dilakukan  seleksi  dan identifikasi isolat TPU.
Pada  penelitian  sebelumnya,  sudah  dikoleksi  bakteri  tanah  dari  TPU Pracimaloyo dan diperoleh sebanyak 36 isolat tetapi belum dilakukan karakteristik lebih  lanjut.  TPU  Pracimaloyo  merupakan  salah  satu  makam  terbesar  yang dikelola  pemerintah  Kota  Surakarta  (DKP  Surakarta)  dengan  luas  14,5  Ha  yang terdiri dari 19 blok pemakaman. Dengan banyaknya makam yang terdapat disana,
maka  substrat  selulosa  pun  juga  melimpah  sehingga  diperkirakan  sampel  tanah dari  TPU  mengandung  bakteri  selulolitik.  Pada  penelitian  ini  diharapkan ditemukan  jenis-jenis  bakteri  selulolitik  yang  memiliki  kemampuan  dalam mendegradasi  selulosa.  Bakteri  selulolitik  sangat  potensial  sebagai  mikroba pendegradasi  dibandingkan  mikroba  lainnya,  sehingga  produksi  enzim  selulose lebih singkat (Yusnia et al., 2019). Oleh karena itu, penelitian ini bertujuan untuk mengetahui  potensi  bakteri  selulolitik  yang  berasal  dari  TPU  dan mengientifikasinya.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  non  eksperimental  yang  dilakukan untuk  mengetahui  potensi  bakteri  dan  karakteristik  dari  morfologi  bakteri selulolitik  pada  TPU  Pracimaloyo.  Penelitian  ini  dilakukan  pada  Januari  sampai April 2023.

## Alat dan Bahan Penelitian
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah Laminar Air Flow (LAF), autoklaf (GEA LS35LJ), erlenmeyer ( Pyrex ) 500 ml, petridish ( Iwaki ), inkubator (Memmert N55), gelas ukur ( Pyrex ) 100 ml, tabung reaksi ( Iwaki ), spatula, oven ( Maspion ), hot plate magnetic stirrer , vortex , mikropipet ( Socorex ), alat tulis, dan alat dokumentasi.
Sampel  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  koleksi  dari laboratorium  Biologi  FKIP  UMS  sebanyak  36  isolat.  Bahan  yang  digunakan berupa media nutrient Agar (NA), carboxymethyl cellulose (CMC), aquades steril, alumunium  foil,  kertas  saring,  pewarna congo  red ,  tissue,  kapas,  kasa,  kertas payung, karet gelang, NaCl, alcohol 70%, plastik wrab, dan sarung tangan.

## Peremajaan Isolat
Koleksi  isolat  bakteri  disubkultur  ke nutrient  agar (NA)  miring  dengan menggunakan ose  kemudian  diinkubasi  pada  suhu  37℃  selama  48  jam.  Kultur bakteri siap untuk digunakan untuk uji aktivitas selulolitik.

## Skrining Kemampuan Selulolitik
Media  yang  digunakan  untuk  skrining  bakteri  selulolitik  adalah  medium selektif CMC yang tersusun atas: 2 g , 0,5 g , 0,02 g , 0,02 g , 5 g dan ditambahkan 0,5% CMC. Semua bahan dilarutkan dalam 1 L aquades. Media selektif yang sudah siap, selanjutnya diinokulasi isolat bakteri dengan cara menotolkan di permukaan media. Inkubasi dilakukan pada suhu 37℃ selama 48 jam. Setelah koloni tumbuh, dilakukan pengukuran koloni zona bening yang  muncul  dan  dilanjutkan  skrining  bakteri  dengan  pewarnaan congo red. Selanjutnya,  tuang  larutan  pewarna Congo  red 0,1%  kedalam  cawan  petri  yang telah diinkubasi 48 jam kemudian didiamkan selama 20 menit dan dibilas dengan NaCl  1  M.  Munculnya  zona  bening  artinya  bernilai  positif  (+)  mampu  dalam mendegradasi  selulosa  disekeliling  koloni  bakteri.  Zona  bening  dapat  terlihat dengan pencucian dengan larutan NaCl 1 M. Congo red adalah gram natrium dari benzidinedazo-bis-1-naphthylamine-4  asam  sulfat  (
)  sehingga
pewarna  ini  akan  larut  dan  tercuci  oleh  NaCl,  dan  terbentuk  yampak  jelas  zona bening.  Warna  merah  diluar  zona  bening  menunjukan  sisa  selulosa  yang  tidak
terdegradasi  sehingga  membentuk  selulosa congo  red .  Zona  bening  yang terbentuk  kemudian  diukur  dengan  menghitung  nilai  indeks  selulolitik  (IS)  dan membandingkan  nilai  diameter  zona  bening  dengan  diameter  koloni  bakteri. Perhitungan zona bening dengan rumus sebagai berikut:

## Identifikasi Bakteri berdasar Morfologi Koloni dan Pearnaan Gram
Identifikasi  bakteri  dapat  dilakukan  dengan  mengamati  ciri  makroskopis dan mikroskopis. Ciri makroskopis meliputi bentuk koloni yaitu bulat, titik, tidak teratur, seperti akar, dan filamen atau berbenang, serta kumparan. Tepi koloninya dapat  berbentuk  berombak,  berbelah,  bergerigi,  benang,  dan  keriting.  Warna koloni  terdiri  dari  putih,  kekuningan,  kemerahan,  coklat,  jingga,  orange,  pink, hijau,  dan  ungu.  Elevasi  koloni  meliputi  rata,  timbul  datarr,  melengkung,  dan cembung.  Tekstur  koloni  halus  mengkilat,  kasar,  berkerut,  atau  kering  seperti bubuk.  Selain  itu,  ukurannya  bervariasi,  dapat  dilakukan  dengan  mengukur diameter  koloni  bakteri  yang  tumbuh.  Karakteristik  makroskopis  koloni  bakteri bervariasai dari bentuk sel, ukuran sel, dan pewarnaan. Bentuk sel bakteri seperti bulat (kokus) dengan masing-masing kombinasinya, pengukuran sel bakteri secara mikroskopis dapat dilakukan dengan micrometer. Serta pewarnaan yang dilakukan meliputi pewarnaan gram.
Pewarnaan  Gram  dilakukan  dengan  membuat  apusan  bakteri  pada  objek glass  steril.  Bakteri  diambil  dari  koloni  biakan  murni  pada nutrient  agar (NA) miring.  Setelah  difiksasi,  apusan  digenangi  dengan  Kristal  Violet  dan  dibiarkan selama  1  menit,  kemudian  bilas  dengan  air  mengalir.  Setelah  bersih  digenangi dengan lugol selama 1 menit, kemudian dibilas dengan air mengalir.  Selanjutnya tetesi  dengan alcohol 96% biarkan selama 20-30 detik, cuci  dengan air  mengalir dan  tambahkan  safranin  selama  1  menit  dan  bilas  menggunakan  air  mengalir. Keringkan diatas api dan amati dibawah mikroskop. Bila hasil pewarnaan tersebut diperoleh  warna  merah  maka  bakteri  gram  negative,  sedangkan  bila  diperoleh warna ungu maka bakteri tersebut adalah gram positif.

## HASIL PENELITIAN Skrining Kemampuan Selulolitik
Seleksi  bakteri  dari  tanah  TPU  Pracimaloyo,  Surakarta  menggunakan media selektif CMC agar dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil Skrining Bakteri Selulolitik
Isolat Indeks Zona Bening Katagori P1 1,05 Sedang P2 2 Sedang P3 1,65 Sedang P4 0,5 Rendah P5 7,5 Tinggi P6 1 Rendah P7 1,75 Sedang P8 5 Tinggi
P9 1 Sedang P10 6,25 Tinggi P11 2 Sedang P12 1 Rendah P13 1,25 Sedang P14 7 Tinggi P15 1,75 Sedang P16 1,05 Sedang P17 1 Sedang P18 1,25 Sedang P19 1 Sedang P20 1,9 Sedang P21 1,75 Sedang P22 7 Tinggi P23 1,05 Sedang P24 2 Sedang P25 5,25 Tinggi P26 1,25 Sedang P27 7,25 Tinggi P28 1 Sedang P29 1,05 Sedang P30 1 Sedang P31 6,5 Tinggi P32 1,25 Sedang P33 1,05 Sedang P34 1 Sedang P35 1 Sedang P36 0,25 Rendah
Tabel  1  menunjukkan  22,22%  isolat  mempunyai  indeks  selulolitik  (IS) dengan  kategori  “tinggi”  yaitu  isolat  P5,  P8,  P10,  P14,  P22,  P25,  P27,  dan  P31. Sebanyak  4  isolat  dengan  kategori  “rendah”  P4,  P12,P6,  dan  P36  dan  isolat dengan kategori “sedang” sebanyak 24 isolat  yaitu P1, P2, P3, P7, P9, P11, P13, P15, P16, P17, P19, P20, P21, P23, P24, P26, P28, P29, P30, P32, P33, P34, P35, dan P35. Zona bening yang dihasilkan oleh bakteri selulolitik dengan diameter di atas  4  termasuk  ke  dalam  tingkat  degradasi  yang  tinggi  sedangkan  degradasi rendah  berkisar  0,5-1,9  dan  sedang  2,0-3,9  (Dar  et  al.,  2015).  Berdasarkan  hasil uji skrining bakteri selulolitik dari 6 isolat terpilih dikategorikan tingkat degradasi yang tinggi.
A B A
B
Gambar 1. Zona bening yang terbentuk karena penguraian CMC sebagai substrat  selulosa. A. Koloni sebelum ditetesi congo red 1%; B. Koloni bakteri setelah ditetesi congo red 1%
Indeks selulolitik ditunjukkan dengan terbentuknya zona bening di sekitar koloni  bakteri  setelah  ditetesi congo  red 1%  (Gambar  1).  Hasil  skrining menunjukkan nilai IS yang beragam diantara isolat bakteri yang diuji.

## Identifikasi Bakteri berdasar Morfologi Koloni dan Pewarnaan Gram
Isolasi  bakteri  yang  mempunyai  kemampuan  mendegradasi  selulosa selanjutnya  dilakukan  identifikasi  secara  sederhana  yaitu  identifikasi  morfologi koloni  dan  pewarnaan  Gram.  Hasil  morfologi  koloni  dengan  mengamati karakteristik  bentuk  koloni,  warna  koloni,  elevasi,  tepian,  karakteristik  optic, karakteristik permukaan dan bentuk sel dan uji biokimia berupa pewarnaan gram yang  dapat  dilihat  pada  Tabel  2.  Dari  delapan  isolat  yang  potensial  tersebut kemudian  dikuantitatifkan  menjadi  6  isolat  berdasarkan  hasil  skrining  akhir
sehingga  data  potensial  isolat  menjadi  16,7%.  Sebanyak  6  isolat  menunjukan tingkat  degradasi  selulosa  dan  menghasilkan  indeks  bakteri  selulolitik  dengan nilai terbesar 7,5 (Tabel 1). Selanjutnya 6 isolat tersebut dilakukan uji pewarnaan Gram.
Gambar 2. Hasil Pewarnaan Gram isolat P5, P8, P14, P22, P25, dan P31.
Pewarnaan  Gram  dari  enam  isolat  bakteri  tanah  yang  indeks  selulosa tinggi  adalah  gram  negatif  karena  berwarna  kemerahan  dan  berbentuk coccus (Gambar  2).  Bakteri  Gram  negatif  memiliki  lapisan  peptidoglikan  tipis  tetapi mengandung banyak lipid, sehingga kehilangan kompleks kristal violet-lugol dan sel  tampak  tidak  berwarna.  Pewarnaan  sel  dengan  larutan  safranin  merah membuat sel menjadi berwarna merah (Hidayat, 2011).
Tabel 2. Karakteristik morfologi bakteri pendegradasi selulosa pada tanah Tempat
Pemakaman Umum (TPU) Isolat Karakteristik Morfologi koloni Bentuk Warna Elevasi Tepi Size Karakteristik permukaan Bentuk sel Pewarnaan Gram P5 Circular Putih Raised Entire Small Halus Coccus Negatif P8 Circular Putih Raised Entire Small Halus mengkilap Coccus Negatif P14 Circular Putih susu Raised Entire Small Halus Coccus Negatif P22 Circular Putih Raised Entire Small Halus Coccus Negatif P25 Circular Putih Raised Entire Small Halus mengkilap Coccus Negatif
P8 P14 P22 P25 P31 P5
P31 Circular Putih susu raised Entire Small Halus mengkilap Coccus Negatif

## PEMBAHASAN
Hasil  skrining  bakteri  selulolitik  dari  TPU  Pracimaloyo  menunjukkan potensi  yang  besar.  Dari  36  isolat  yang  diujikan  22,22%  positif  selulolitik (Gambar 1), bahkan nilai indeks selulolitik (IS) terbesar mencapai 7,5. Nilai IS ini lebih  besar  dibandingkan  isolat  yang  berasal  dari  tanah  hutan  di  Bali  yaitu  5,41 (Yusnia  et  al.,  2019).  Dengan  hasil  ini  terbukti  bahwa  TPU  menyimpan  potensi untuk  mendapatkan  mikroorganisme  pendegradasi  selulosa  termasuk  bakteri maupun  jamur.  Hal  tersebut  dikarenakan  di  TPU  terdapat  bahan-bahan  yang mengandung selulosa seperti kain kafan, pakaian, kayu penutup dan peti jenazah yang  disertakan  dalam  proses  penguburan  jenazah.  Proses  penguraian  jenazah juga  menambah  mineral  tanah  yang  akan  mendukung  pertumbuhan mikroorganisme lain sehingga jumlahnya melimpah (Putra et al., 2023). Di TPU, secara  terus-menerus  terjadi  pergantian  substrat  dengan  adanya  penguburan jenazah baru. Dengan demikian, mikroorganisme pengurai akan mempertahankan aktivitasnya.
Aktivitas  selulolitik  ditunjukkan  dengan  terbentuknya  zona  bening  di media  selektif  CMC  (Gambar  2)  oleh  enzim  ekstraseluler  selulase  yang dieskresikan oleh isolat-isolat bakteri dengan diameter tertentu (Murtiyaningsih & Hazmi,  2017).  Produk  pemecahan  selulosa  tersebut  berupa  gula  sederhana monosakarida dan tidak terjadi ikatan kompleks dengan Congo red . Warna merah di sekitar zona bening menunjukkan adanya sisa selulosa yang tidak terhidrolisis. Zona  bening  dapat  terbentuk  sempurna  setelah  melalui  pembilasan  NaCl  1M. Semakin  tinggi  aktivitas  indeks  selulolitik  dihasilkan  oleh  masing-masing  isolat, maka  semakin  besar  kemampuan  isolat  tersebut  untuk  mendegradasi  selulosa (Andriani  et  al.,  2023).  Hasil  skrining  menunjukkan  bahwa  tidak  semua  isolat yang  diperoleh  mampu  menghidrolisis  selulosa  yang  terkandung  dalam  media agar CMC.
Hasil  identifikasi  dari  keenam  isolat  bisa  dilihat  pada  Tabel  2  yang menunjukkan  kemiripan  koloni  pada  seluruh  isolat  yang  potensial.  Kesamaan ditunjukkan  dari  bentuk  bakteri  yaitu  bulat  ( circular )  berwarna  putih,  elevasi koloni raised ,  tepi  koloni entire dengan  karakteristik  permukaan  bakteri  halus mengkilap  dan  sel  berbentuk coccus .  Hal  ini  sejalan  dengan  penelitian  yang dilakukan Satwika et al., (2021) dan Fauziah & Ibrahim (2020) yang menunjukan karakteristik  bakteri  selulolitik  masing-masing  dari  tanah  sampah  dapur  dan kotoran  ternak,  serta  tanah  gambut.  Hasil  pewarnaan  Gram  teridentifikasi  enam isolat merupakan kelompok Gram negative dan memiliki bentuk Coccus (Gambar 2).
Potensi selulolitik dari isolat bakteri di TPU menambah informasi bahwa lokasi  tersebut  perlu  diekplorasi  dengan  memvariasikan  jenis  TPU.  Cara pemakaman  yang  berbeda  pasti  akan  menyediakan  substrat  yang  berbeda  bagi jasad  pengurai.  Hal  ini  juga  pasti  akan  berpengaruh  terhadap  keragaman  dan potensi sebagai jasad pengurai.

## SIMPULAN
Tempat Peamkaman Umum (TPU) Pracimaloyo menyimpan isolat bakteri yang  mempunyai  kemampuan  selulolitik  potensial  yaitu  P5  dengan  indeks selulolitik  mencapai  7,5.  Hasil  pengamatan  morfologi  koloni  dan  pewarnaan Gram,  isolat  tersebut  mempunyai  bentuk  koloni  circular  berwarna  putih,  elevasi koloni  raised,  tepi  koloni  entire  dengan  karakteristik  permukaan  yang  halus mengkilap  dan  hasil  pewarnaan  Gram  merupakan  Gram  negative  berbentuk kokus.

## DAFTAR PUSTAKA
Afni, A. N., Salendra, K., & Haddade, A. W. (2022). Penggunaan Mayat Sebagai Pupuk  Perspektif  Maqasid  Al-Syari’ah. Nukhbatul  Ulum,  8 (2),  211-234. https://doi.org/10.36701/nukhbah.v8i2.568
Akmala, A & Supriyo, E. (2020). Optimasi Konsentrasi Selulosa pada Pembuatan Biodegradable  Foam  dari  Selulosa  dan  Tepung  Singkong. Pentana , 1 (1), 27-40. https://ejournal2.undip.ac.id/index.php/pentana/article/view/11597
Andriani,  A.  A.  S.  P.  R.,  Dewi,  W.  S.,  Nazir,  N.,  Setianingsih,  N.  L.  P.  P., Indrayatie,  E.  R.,  &  Kalimutu,  P.  K.  (2023).  Characteristics  of  Indigenous Bacterial  Isolates  from  Cocoa  Plantations  in  Meko  Village,  Central Sulawesi,  with  Ability  to  Degrade  Cellulose. Ajarcde , 7 (2),  17-19. https://repo-dosen.ulm.ac.id/bitstream/handle/123456789/29574
Dar,  M.  A.,  Pawar,  K.  D.,  Jadhav,  J.  P.,  &  Pandit,  R.  S.  (2015).  Isolation  of Cellulolytic  Bacteria  from  the  Gastro-intestinal  Tract  of Achatina  Fulica (Gastropoda: Pulmonata ) and their Evaluation for Cellulose Biodegradation. International Biodeterioration & Biodegradation , 98 , 73-80. http://dx.doi.org/10.1016%2Fj.ibiod.2014.11.016
Diputra,  M.,  &  Syaodih,  E.  (2016).  Identifikasi  Permasalahan  Tempat Pemakaman  Umum  di  Kota  Bandar  Lampung. In  Prosiding  Perencanaan Wilayah dan Kota , 3 (2), 283-291. 10.22236/jbes/11745
Ejaz,  U.,  Sohail,  M.,  &  Ghanemi,  A.  (2021).  Cellulases:  From  Bioactivity  to  a
Variety of Industrial Applications. Biomimetics , 6 (44), 2-11.
https://doi.org/10.3390%2Fbiomimetics6030044 Fauziah, S. I., & Ibrahim, M. (2020). Isolasi dan Karakteristik Bakteri Selulolitik pada Tanah Gambut di Desa Tegagagiri Tama Jaya, Kecamatan Pelangiran, Kabupaten Inhil, Riau. LenteraBio, 9 (3), 194-203.
https://doi.org/10.26740/lenterabio.v9n3.p194-203
Murtiyaningsih,  H.,  &  Hazmi,  M.  (2017).  Isolasi  dan  Uji  Aktivitas  Enzim Selulase pada Bakteri Selulolitik Asal Tanah Sampah. Agritrop, 15 (2), 293- 308. https://doi.org/10.32528/agr.v15i2.1185
Puspitasari,  D.,  &  Ibrahim,  M.  (2020).  Optimasi  Ativitas  Selulase  Ekstraseluler Isolat  Bakter  EG  2  Isolasi  dari  Bangkil  Kelapa  Sawit  ( Elaesis  guineesis jaca ). LenteraBio , 9 (1), 42-50.
https://doi.org/10.26740/lenterabio.v9n1.p42-50
Putra, S. S., Rahayu, T., & Tyastuti, E. M. (2023). Isolation and Characterization of  Camboodian  Tree  Rhizosphere  Bacteria  ( Plumeria  acuminate )  at  TPU Pracimaloyo  as  a  producer  of  IAA. Bioeduscience , 7 (1),  15-23 . https://doi.org/10.22236/jbes/7111375
Rahayu, T., Asngad, A., & Suparti, S. (2017). Biopulping Pelepah Tanaman Salak Menggunakan  Jamur  Pelapuk  Putih Phanerochaete  chrysosporium . Bioeksperimen, 3 (1), 59-63. https://badge.dimensions.ai/details/doi/10.23917/bioeksperimen.v3i1.3671? domain=https://journals.ums.ac.id Rao,  S.  N.  S.  (1994). Mikroba  Tanah  dan  Pertumbuhan  Tanaman ,  (2 nd ed.). Jakarta: Universitas Indonesia Press
Saratale,  G.  D.  (2012).  Production  and  Characterization  of  Multiple  Cellulolytic Enzymes by Isolatted Streptomyces sp. Biomass and Bioenergy . 47 (6), 302- 315. https://doi.org/10.1016/j.biombioe.2012.09.030
Satwika, T. D., Yulianti, D. M., & Hikam. A. R. (2021). Karakteristik dan Potensi Enzimatis  Bakteri  Asal  Tanah  Sampah  Dapur  dan  Kotoran  Ternak  sebagai Kandidat  Agen  Biodegradasi  Sampah  Organik. Journal  of  Biology  and Applied Biology, 4 (1), 11-18. https://doi.org/10.21580/ah.v4i1.7013 Yusnia,  E.  D.,  Gunam,  I.  B.  W.,  &  Antara.  N.  S.  (2019).  Isolasi  dan  Skrining Bakteri  Selulolitik  Dari  Beberapa  Tanah  Hutan  Di  Bali. Jurnal  Rekayasa dan Manajemen Agroindustri , 7(1), 11-20. http://dx.doi.org/10.24843/JRMA.2019.v07.i01.p02