Abstrak—Salah  satu  potensi  Pulau  Poteran  Sumenep  adalah bidang pertanian. Beberapa desa di Kecamatan Talango tanaman holtikultura  ditanam  di  lahan  kering  dan  kurang  subur.  Salah satu  penyebabnya  adalah  rendahnya  P-tersedia  padahal dilaporkan  P  total  tanah  Madura  adalah  sedang  hingga  tinggi. Penelitian ini bertujuan mengisolasi Bakteri Pelarut Fosfat (BPF) tanah di Desa Talango dan Poteran agar diketahui keanekaragaman  dan  efisiensi  pelarut  fosfat  bakteri  tersebut. Isolasi  bakteri  dilakukan  dengan  metode pengenceran  bertingkat dan  metode sebar  pada medium NA. Isolat murni diamati secara deskriptif  makroskopis  (bentuk,  tepi,  elevasi,  dan  warna  koloni), mikroskopis  (morfologi  sel  dan  pewarnaan)  dan  karakter biokimia berdasarkan panduan Bergey’s Manual of Determinative  serta  diukur  efisiensi  pelarut  fosfat  dengan medium  Pikovskaya.  Berdasarkan  hasil  isolasi  dan  karakterisasi didapatkan 2 isolat berbeda yang kecenderungan masuk ke dalam dua  genus  Edwardsiella  dan  Corynebacterium.  Efisiensi  pelarut fosfat  kedua  isolat  bakteri  tersebut  berturut-turut  sebesar  43.86 dan  45.63  sehingga  diasumsikan  bakteri-bakteri  tersebut berpotensi sebagai biofertilizer.
Kata  Kunci—  bakteri,  biofertilizer,  fosfat,  keanekaragaman, Pulau Poteran

## I. PENDAHULUAN
ABUPATEN  Sumenep  sebagai  Kabupaten  Kepulauan, memiliki sejumlah pulau kecil, yang salah satunya adalah Pulau  Poteran  [1].  Pulau  Poteran  memilki  beberapa  potensi yang dapat dikembangkan, salah satunya potensi pertanian. Di Kecamatan  Talango,  ada  empat  desa  (Desa  Poteran,  Palasa, Gapurana  dan  Talango)  yang  masyarakatnya  menanam tanaman  holtikultura  walaupun  lahan  di  kecamatan  tersebut dilaporkan kondisinya kering dan kurang subur [2].
Tanah-tanah  di  Madura  mempunyai  reaksi  tanah  netral hingga alkalis, kandungan bahan organik dan N total rendah, P total sedang hingga tinggi dan basa kalsium tinggi [3]. Reaksi tanah  yang  cenderung  alkalis  memunculkan  permasalahan secara  langsung  yaitu  kecocokan  untuk  tanaman  dan ketersediaan  unsur  hara,  yaitu  rendahnya  ketersediaan  unsur mikro  dan  juga  fosfat  karena  terikat  oleh  Ca 2+. Kandungan  C organik, N total, P tersedia dan K di Madura tergolong rendah [4].  Kondisi  ini  harus  menjadi  perhatian  utama  dalam pengelolaan tanah di Madura [3].
Unsur P berperan dalam menyimpan dan mentransfer energi serta  sebagai  komponen  protein  dan  asam  nukleat  [5].
Kekurangan  P  pada  tanaman  akan  mengakibatkan  berbagai hambatan  metabolisme,  diantaranya  dalam  proses  sintesis protein,  yang  menyebabkan  terjadinya  akumulasi  karbohidrat dan  ikatan-ikatan  nitrogen.  Kekurangan  P  tanaman  dapat diamati secara visual, yaitu daun-daun yang tua akan berwarna keunguan  atau  kemerahan  karena  terbentuknya  pigmen antosianin.  Pigmen  ini  terbentuk  karena  akumulasi  gula  di dalam  daun  sebagai  akibat  terhambatnya  sintesis  protein. Gejala  lain  adalah  nekrosis  (kematian  jaringan)  pada  pinggir atau  helai  dan  tangkai  daun,  diikuti  melemahnya  batang  dan akar tanaman [6].
Mikroorganisme yang dapat dikembangkan dalam mengatasi ketersediaan unsur P pada tanah diantaranya adalah Bakteri  Pelarut  Fosfat (BPF). Bakteri  telah  banyak  digunakan untuk  meningkatkan  hasil  pertanian  oleh  beberapa  negara, bahkan  telah  diperdagangkan  dan  digunakan  sampai  saat  ini. Salah  satunya  di  negara  Cuba,  beberapa  pupuk  hayati  yang sering  diproduksi  adalah  strain  Azotobacter,  Rhizobium, Azospirillium,  dan  Burkholderia  [7].  Hasil  penelitian sebelumnya  menyatakan  bahwa  bakteri  Pseudomonas  dan Bacillus  merupakan  bakteri  pelarut  fosfat  yang  memiliki kemampuan terbesar sebagai biofertilizer [8].
BPF  membantu  menyediakan  hara  bagi  tanaman  dengan melarutkan P-terjerap menjadi bentuk P-tersedia terutama pada tanah  yang  dipupuk  dengan  batuan  fosfat,  dengan  cara mengeluarkan  asam-asam  organik  seperti  asam  format,  asam asetat,  asam  propionate,  asam  laktat  dan  asam  fumarat  dari dalam  selnya.  Asam-asam  organik  yang  dihasilkan  BPF  akan bereaksi dengan ion-ion Ca 2+ , Fe 3+ , dan Al 3+ yang mengikat P selama  ini  menjadi  bentuk  yang  stabil  (khelat)  dan  unsur  P akan di bebaskan dan tersedia bagi tanaman [9].
Secara umum, unsur P dalam tanah terbagi menjadi 2, yaitu P-terjerap  dan  P-tersedia.  P-terjerap  dalam  bentuk  Ca-P [Ca 10 (PO 4 ) 6 (OH) 2 ], Al-P (AlPO 4 2H 2 O) dan Fe-P
(FePO 4 2H 2 O)  sedangkan  P-tersedia  dalam  bentuk  ion  fosfat (H 2 PO 4 - ,  HPO 4 2- ,  PO 4 3- )  [6].  Di  Pulau  Madura,  termasuk  di Desa  Talango  dan  Poteran,  memiliki  kandungan  P-tersedia dalam  tanah  yang  cenderung  rendah  dibandingkan  dengan  P- terjerap  [4].  Oleh  karena  itu,  dibutuhkan  BPF  tanah  untuk membantu mengubah P-terjerap menjadi P-tersedia. Meskipun dilaporkan memiliki kandungan P total yang sama, oleh karena itu,  dilakukan  isolasi,  karakterisasi  dan  uji  potensi  pelarut fosfat bakteri tanah Desa Talango dan Poteran.

## Potensi Isolat Bakteri Edwardsiella dan Corynebacterium dari Pulau Poteran Sumenep sebagai Pelarut Fosfat
Hefdiyah dan Maya Shovitri Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Teknologi Sepuluh Nopember (ITS) Jl. Arief Rahman Hakim, Surabaya 60111 Indonesia e-mail: maya@bio.its.ac.id
K
Penelitian  ini  bertujuan  memperoleh  data  keanekaragaman bakteri pelarut fosfat di Desa Talango dan Desa Poteran, Pulau Poteran  Sumenep,  Madura  serta  menguji  tingkat  efisiensi pelarut fosfat isolat bakteri tersebut.

## II. METODOLOGI PENELITIAN

## A. Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  dilakukan  pada  bulan  September  2013  hingga Mei  2014  di  Pulau  Poteran  Sumenep,  Madura  dan  di Laboratorium Mikrobiologi dan Bioteknologi Jurusan Biologi, Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  pengetahuan  Alam,  Institut Teknologi Sepuluh Nopember.

## B. Pengambilan Sampel Tanah Pulau Poteran
Sampling dilakukan dengan mengambil sampel tanah Pulau Poteran  Sumenep  Madura.  Pengambilan  sampel  tanah dilakukan  di  2  plot  berbeda  yaitu  di  Desa  Talango  (S: 07 o 03’48.0”  dan  E:  113 o 57’02.8”)  dan  Desa  Poteran  (S: 07 o 05’28.3”  dan  E:  114 o 03’10.6”).  Kedua  desa  tersebut memiliki  karakter  tanah  yang  berbeda,  yaitu  tanah  litosol  di Desa  Talango  dan  tanah  mediteran  merah  di  Desa  Poteran. Sampel  tanah  diambil  pada  luasan  lahan  tertentu  yang  dibagi menjadi 5 titik berbentuk diagonal secara terpisah.

## C. Isolasi Bakteri
Isolasi  dilakukan  dengan  cara  pengenceran  bertingkat kemudian  dilanjutkan  dengan  metode  sebar  (spread  plate) yang  dilakukan  secara  aseptis  dalam  Laminar  Air  Flow.  Dari pengenceran  10 -1 samapi  10 -6 diambil  100  µl  larutan  sampel dengan  menggunakan  mikropipet  dan  dipindahkan  ke permukaan  medium  Nutrient  Agar  (NA)  (Oxoid,  Inggris) (lampiran  3)  padat.  Kemudian  inokulum  diratan  dengan Drigalski  dan  diinkubasi  dalam  inkubator  pada  suhu  37°C selama 48 jam.

## D. Karakterisasi
Isolat  dimurnikan  dengan  metode  gores  16.  Karakterisasi isolat meliputi pengamatan makroskopis (karakterisasi bentuk, tepi,  elevasi  dan  warna  koloni),  pengamatan  mikroskopis (morfologi  sel  dan  pewarnaan)  dan  uji  biokimia  berdasarkan buku  panduan  Bergey’s  Manual  of  Determinative  Ninth Edition.
E. Uji Potensi Pelarut Fosfat
Penomoran uji fosfatase dilakukan untuk melihat kemampuan hidup bakteri pelarut fosfat dengan menggunakan media  selektif  Pikovskaya’s  Agar.  Isolat  bakteri  yang  akan diuji kemudian diambil sedikit dan digoreskan ke dalam media tersebut  lalu  diinkubasi  selama  10  hari  pada  suhu  30  ±  5°C. kemudian  diukur  diameter  zona  bening  untuk  menentukan efisiensi pelarut fosfat [10]. Kemampuan hidup bakteri pelarut fosfat  pada  media  ditandai  dengan  terbentuknya  zona  bening (halo) di sekitar koloni bakteri [11].
Efisiensi  pelarut  dari  masing-masing  isolat  dapat  dihitung berdasarkan hubungan antara diameter koloni dengan diameter zona bening (halozon) [12].

## III. PEMBAHASAN
Berdasarkan  hasil  isolasi  didapatkan  beberapa  koloni bakteri,  namun  pada  penelitian  hanya  diambil  dua  isolat dengan  karakter  koloni  berbeda  seperti  ditunjukkan  pada Tabel  1.  Kedua  isolat  tersebut  kemudian  diamati  karakter mikroskopis  melalui  pewarnaan  Gram  dan  diamati  dibawah mikroskop dengan perbesaran 1000 kali. Gram positif ditandai dengan  terbentuknya  warna  ungu  pada  sel  bakteri  sedangkan Gram  negatif  ditandai  dengan  warna  merah  muda  sampai merah  [13].  Hasil  yang  diperoleh  menunjukkan  bahwa  isolat PO8  termasuk  Gram  positif  basil.  Sedangkan  PO6  termasuk Gram negatif basil. Hasil ini ditujukkan pada Gambar 1.
Tabel 1. Karakter Makroskopis Koloni Bakteri PO6 dan PO8 Kode Bentuk Tepi Elevasi Warna PO6 Bulat Rata Menonjol Kuning kehijauan PO8 Tidak Beraturan Berombak Cekung Putih Tulang
Berdasarkan  hasil  karakterisasi  yang  telah  dilakukan, diketahui  bahwa  isolat  PO6  kecenderungan  masuk  ke  dalam genus  Edwardsiella,  sedangkan  isolat  PO8  kecenderungan masuk  dalam  genus  Corynebacterium  (Gambar  3  dan  4). Genus  Corynebacterium  memililki  karater  kunci  Gram positif basil,  tidak  membentuk  Endospora,  tidak  tahan  asam  dan menghasilkan  enzim  katalase  [14].  Genus  Corynebacterium merupakan  bakteri  tanah  Gram  positif  yang  secara  luas digunakan dalam industri pembuatan asam amino [15]. Genus Corynebacterium terdiri dari 88 spesies dan 11 subspesies. 53 diantaranya sangat jarang menyerang manusia atau menularkan pada  manusia  dengan  kontak  zoonosis  [16].  Karakter  kunci dari genus Edwardsiella adalah Gram negatif basil, tidak dapat menfermentasi  laktosa,  menghasilkan  indol,  H 2 S  dan  enzim urease  [14].  Anggota  dari  genus  ini  berasosiasi  di  lingkungan air  tawar  dan  hewan-hewan  yang  berada  di  lingkungan tersebut.  Oleh  karena  itu  bakteri  ini  pertumbuhannya  lamban pada  suhu  25°C  [17].  Salah  satu  anggota  jenus  ini,  yaitu  E. tarda dilaporkan bersifat patogen pada ikan [18].
Gambar  1.  Pewarnaan  Gram  isolat  PO6  (Gram  +  Basil)  dan  PO8  (Gram  - Basil)
Keterangan : A :  Diameter  total  (diameter  koloni  + diameter zona bening ) B :  Diameter koloni
A-B   :  Diameter zona bening
Kedua  isolat  ini  kemudian  diuji  potensinya  dalam melarutkan  fosfat  dalam  medium  pikovskaya  [10].  Medium Pikovskaya  merupakan  medium  selektif  yang  mengandung  P tidak terlarut. P tidak larut yang digunakan dalam penelitian ini adalah  trikalsium  difosfat  (Ca 3 (PO 4 ) 2 )  karena  menurut penelitian  sebelumnya  tanah  di  lahan  pertanian  pulau  Poteran Madura  kecenderungan  bersifat  alkalis.  Hal  ini  disebabkan masih tingginya kandungan unsur basa, terutama kalsium (Ca), karena  bahan  induknya  yang  berasal  dari  endapan  batu  kapur yang  kaya  akan  unsur  basa  dan  pencucian  basa-basa  tidak seintensif  sebagaimana  dengan  daerah  bercurah  hujan  tinggi, sehingga  tanah  masih  kaya  akan  unsur  basa  tersebut  [5]. Sementara  pada  pH  basa  P  tidak  terlarut  cenderung  berikatan dengan Ca membentuk komplek Ca-fosfat salah satunya dalam bentuk (Ca 3 (PO 4 ) 2 ) [19].
Kemampuan  isolat  bakteri  pelarut  fosfat  ditandai  dengan terbentuknya  zona  bening  (halozone)  di sekitar koloni bakteri [11].  Daerah  bening  di  sekitar  koloni  isolat  merupakan indikasi  adanya  aktivitas  bakteri  dalam  melarutkan  P  terikat. Bakteri-bakteri  pelarut  fosfat  tersebut  melarutkan  Ca 3 (PO 4 ) 2 yang  terdapat  dalam  media  Pikovskaya.  Luas  daerah  bening secara  kualitatif  menunjukkan  tingkat  kemampuan  bakteri pelarut  fosfat  dalam  melarutkan  P  dari  fosfat  tak  larut mengubahnya menjadi bentuk terlarut [20].

## Gambar 2. Uji Potensi Isolat PO8 pada Medium Agar Pikovskaya
Dari  hasil  pengukuran  diameter  zona  bening  kemudian didapatkan  tingkat  efisiensi  pelarut  fosfat  masing-masing isolat.  Efisiensi  pelarut  dari  masing-masing  isolat  dapat dihitung berdasarkan hubungan antara diameter koloni dengan diameter zona bening (halozon) [12].
43.86 45.63 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00 50.00 PO 6 PO 8 Efisiensi Pelarut Fosfat K o d e IS o la t
Gambar 3. Grafik Efisiensi Pelarut Fosfat Isolat Bakteri Genus Edwardsiella (PO6) dan Corynebacterium (PO8)
Berdasarkan  hasil  uji  potensi  terhadap  kedua  isolat Edwardsiella  dan  Corynebacterium  menunjukkan  hasil  yang tidak  berbeda  nyata  yaitu,  43,86  dan  45,63.  Hasil  ini menunjukkan  bahwa  kedua  bakteri  ini  berpotensi  sebagai biofertilizer sehingga dapat meningkatkan kesuburan tanah.
Spesies  bakteri  yang  berbeda  kemungkinan  memiliki  jalur metabolisme  yang  berbeda  [21].  Mekanisme  pelarutan  fosfat oleh  bakteri  dapat  dilakukan  dengan  dua  cara,  yaitu pengasaman  (acidifikasi)  dan  reaksi  enzimatis.  Pengasaman terjadi karena adanya asam-asam organik yang dihasilkan oleh bakteri  melalui  metabolisme  glukosa  sebagai  sumber  karbon.
Asam  organik  tersebut  antara  lain  asam  sitrat,  asam  glutamat, asam  suksinat,  asam  laktat,  asam  oksalat,  asam  glioksalat, asam malat, asam fumarat, asam tartrat dan asam α -ketobutirat. Asam  organik  tersebut  akan  mengkelat  kation  dalam  bentuk kompleks yang stabil dengan Ca 2+ , Mg 2+ , Fe 3+ dan Al 3+ [22].
Selain  dengan  asam  organik,  P  dapat  dilepas  dari  senyawa organik dalam tanah melalui tiga kelompok enzim:
1. Fosfatase  nonspesifik,  yang  melakukan  fosforilasi terhadap ikatan fosfoester bahan organik.
2. Fitase, yang secara spesifik  menyebabkan  P  terlepas dari asam fitat.
3. Fosfonatase  dan  lyase C-P,  enzim  yang  dapat melakukan pemecahan C-P pada organofosfat [7].
Fosfatase  asam  dan  fitase  merupakan  yang  paling  sering ditemukan  aktivitasnya  karena  substrat  kedua  enzim  tersebut dominan di dalam tanah. Setiap enzim memiliki reaksi spesifik terhadap  substrat.  Salah  satu  contonya  adalah  reaksi  fosfatase dalam  mengatalisis  hidrolisis  fosfomonoester  yang  dilakukan oleh  bakteri  genus  Corynebacterium  [23].  Fosfatase  termasuk dalam  enzim  ekstraseluler  yang  disekresikan  dan  diaktifkan melalui membran sitoplasma [24].
Tahapan reaksi fosfatase mengatalisis hidrolisis fosfomonoester adalah sebagai berikut:
1. Ikatan non-kovalen substrat dan enzim.
2. Pelepasan grup alkohol dari ikatan kompleks dan ortofosfat membentuk  ikatan  kovalen  dengan  enzim  membentuk senyawa enzim fosforil.
3. Pengikatan  air  oleh  senyawa  enzim  fosforil  membentuk ikatan non-kovalen.
4. Pelepasan ortofosfat dan regenerasi enzim bebas [24].
Meskipun  berbagai  mekanisme  pelarutan  fosfat  telah diketahui,  masih  terdapat  beberapa  kelompok  bakteri  yang belum  diketahui  secara  spesifik  mekanisme  yang  digunakan dalam  melarutkan  fosfat, salah satunya  Edwardsiella, Namun, bakteri ini telah dilaporkan dapat melarutkan fosfat [25].

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan hasil isolasi dan karakterisasi, dapat disimpulkan bahwa kedua isolat PO6 dan PO8 masing-masing kecenderungan  masuk  ke  dalam  genus  Edwardsiella  dan Corynebacterium.  Kedua  isolat  ini  memiliki  kemampuan dalam  melarutkan  fosfat  berdasarkan  hasil  perhitungan efisiensi  pelarut  fosfat  sehingga  dapat  dijadikan  sebagai biofertilizer untuk meningkatkan kesuburan tanah.

## LAMPIRAN
Gambar 3. Bagan Alir Karakterisasi Edwardsiella
Gambar 4. Bagan Alir Karakterisasi Corynebacterium

## UCAPAN TERIMA KASIH
“Penulis  H  mengucapkan  terima  kasih  kepada  Dr.  Nurul Jadid, M. Sc. dan Dra. Nurlita Abdulgani, M. Si. atas bantuan, kritik dan saran dalam pengerjaan penelitian ini.”

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Romadhon,  “Kajian  Indeks  Kepekaan  Lingkungan  Dalam  Sumenep (Studi  Kasus  Pulau  Sapudi,  Poteran  dan  Giliyang)”,  Embryo  Vol.  5 (2008) 1-13.
[2] Anonim.  (2013),  Potensi  Cabai  Sumenep.  Pemerintah  Kabupaten Sumenep,  [online],  http://humaspemkabsumenep.com/2013/12/potensi- cabai-sumenep/.
[3] S.  Supriyadi,  “Kandungan  Bahan  Organik  Sebagai  Dasar  Pengelolaan Tanah di Lahan Kering Madura,” Embryo Vol. 5(2008) 176-183.
[4] S.  Supriyadi,  “Kesuburan  Tanah  di  Lahan  Kering  Madura,”  Embryo Vol. 4 (2007) 124-131.
[5] P. Marschner, Mineral Nutrition of Higher Plants. Third Edition. USA: Elsevier ltd (2012).
[6] D.  Elfiati,  “Peranan  Mikroba  Pelarut  Fosfat  Terhadap  Pertumbuhan Tanaman”  e-USU  Repository.  Sumatera  Utara:  Jurusan  Kehutanan Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara (2005).
[7] H.  Rodrı´guez,  R.  Fraga,  T.  Gonzalez  dan  Y.  Bashan,  “Genetics  of Phosphate  Solubilization  and  Its  Potential  Applications  for  Improving Plant  Growth-Promoting  Bacteria,”  in  First  International  Meeting  on Microbial  Phosphate  Solubilization,  Salamanca.  Spain,  Jul.  16-19,
(2002),  Edited  by  E.  Vela´  zquez,  and  C.  R.  Barrueco,,  Netherlands: Springer.
[8] S.  Widawati,  dan  Suliasih.  “Populasi  Bakteri  Pelarut  Fosfat  (BPF)  di Cikaniki,  Gunung  Botol,  dan  Ciptarasa,  serta  Kemampuannya Melarutkan P Terikat di Media Pikovskaya Padat.” Biodiversitas Vol. 7 (2006) 109-113.
[9] E.M.  Premono.  “Jasad  Renik  Pelarut  Fosfat,  Pengaruhnya  Terhadap  P Tanah  dan  Efisiensi  Pemupukan  P  Tanaman  Tebu”  Disertasi.  Bogor: Program Pascasarjana IPB (1994).
[10] H.A. Alikhani, N. S. Rastin, and H. Antoun, “Phosphate Solubilization Activity of Rhizobia Native to Iranian Soils. First International Meeting on Microbial Phosphate Solubilization,” in First International Meeting on  Microbial  Phosphate  Solubilization,  Salamanca.  Spain,  Jul.  16-19, (2002),  Edited  by  E.  Vela´  zquez,  and  C.  R.  Barrueco,,  Netherlands: Springer.
[11] S.  Purwaningsih,  “Isolasi,  Populasi  dan  Karakterisasi  Bakteri  Pelarut Fosfat  pada  Tanah  dari  Taman  Nasional  Bogani  Nani  Wartabone, Sulawesi Utara,” Biologi Vol. 3 (2003) 22-31.
[12] K.  Ramachandra,  V.  Srinivasan,  S.  Hamza,  dan  M.  Anandaraj, “Phosphate  Solubilizing  Bacteria  Isolated  from  the  Rhizosphere  Soil and Its Growth Promotion on Black Pepper (Piper nigrum L.) Cuttings “ in  First  International  Meeting  on  Microbial Phosphate Solubilization, Salamanca. Spain, Jul. 16-19, (2002), Edited by E. Vela´ zquez, and C. R. Barrueco,, Netherlands: Springer.
[13] Harley  dan  Prescott,  Laboratory  Exercises  in  Microbiology.  Fifth Edition New York: McGraw-Hill Companies (2002).
[14] J.G. Holt, N.R. Krieg, P. Sneath, J. T. Staley and S.T. Williams, Bergeys Manual of Determinative Bacteriology. 9th Edition. USA: Williams and Wilkins Pub (1994).
[15] T.  Hermann,  “Industrial  Production  of  Amino  Acids  by  Coryneform Bacteria” Journal Biotechnology Vol. 104 (2003) 1-3.
[16] O.  Tsuzukibashi,  S.  Uchibori,  N.  Kuwahara,  T.  Kobayashi,  K.  Takada dan  M.  Hirasawa,  “A  Selective  Medium  for  The  Isolation  of Corynebacterium Species in Oral Cavities” Journal of Microbiological Methods Vol. xxx (2014) xxx–xxx.
[17] J.M.  Janda  dan  S.L.  Abbott,  “Infections  Associated  With  the  Genus Edwardsiella:  the  Role  of  Edwardsiella  tarda  in  Human  Disease,” Clinical Infectious Diseases Vol. 17 (1993) 742-8.
[18] L.C. Lima, A.A. Fernandes, A.A.P. Costa, F.O. Velasco, R.C. Leite dan J.L. Hacket, “Isolation and Characterizaton of Edwardsiella tarda from Pacu  Myleus  Micans”  Arquivo  Brasileiro  de  Medicina  Veterinária  e Zootecnia Vol. 60 (2008) 275-277.
[19] Y.P.  Chen,  P.D.  Rekha,  A.B.  Arun,  F.T.  Shen,  W.-A.  Lai  and  C.C. Young,  “Phosphate  Solubilizing  Bacteria  from  Subtropical  Soil  and Their  Tricalcium  Phosphate  Solubilizing  Abilities,”  Applied  Soil Ecology Vol. 34 (2002) 33–41.
[20] J.E. Cunningham and C. Kuiack, “Production of Citric and Oxalic Acid and Solubilization of Calsium Phosphate by Penicillium bilail,” Applied and Enviromental Microbiology Vol. 58 (1992) 1451-1458.
[21] S.K.  Barik,  C.S.  Pursuhothaman  dan  A.N.  Mohanty,  “Phosphatase Activity  with  Reference  to  Bacteria  and  Phosphorus  in  Tropical Freshwater  aquaculture  pond  systems,”  Aquaculture  Research  Vol.  32 (2001) 819-832.
[22] A.H.  Goldstein  dan  P.U.  Krishnaraj,  “Phosphate  solubilizing microorganisms  vs.  phosphate  mobilizing  microorganisms:  What separates a phenotype from a trait?,” in First International Meeting on Microbial  Phosphate  Solubilization,  Salamanca.  Spain,  Jul.  16-19,
(2002),  Edited  by  E.  Vela´  zquez,  and  C.  R.  Barrueco,,  Netherlands: Springer.
[23] Suciatmih, “Mikoflora Tnah Tanaman Pisang dan Ubi Kayu pada Lahan Gambut  dan  Tanah  Aluvial  di  Bengkulu,”  Biodiversitas  Vol.  7  (2006) 303-306.
[24] B.B.  Jana,  "Distribution  Pattern  and  Role  of  Phosphate  Solubilizing Bacteria  in  the  Enhancement  of  Fertilizer  Value  of  Rock  Phosphate  in Aquaculture Ponds: State-of-the-Art,” in First International Meeting on Microbial  Phosphate  Solubilization,  Salamanca.  Spain,  Jul.  16-19, (2002),  Edited  by  E.  Vela´  zquez,  and  C.  R.  Barrueco,,  Netherlands: Springer.
[25] P.  Ka¨mpfer,  “  Taxonomy  of  phosphate  solublizing  bacteria,”  in  First International  Meeting  on  Microbial  Phosphate  Solubilization, Salamanca. Spain, Jul. 16-19, (2002), Edited by E. Vela´ zquez, and C. R. Barrueco,, Netherlands: Springer.