Jurnal Agrotek  Tropika,  November  2023,  Vol  11,  No.  4,  pp.  591  -596 DOI  :http://dx.doi.org/10.23960/jat.v11i4.6469 ISSN:  2337-4993  (Print),  2620-3138  (Online)
SODIUM ALGINAT SEBAGAI BAHAN FORMULASI GRANULAR  NEMATODA  ENTOMOPATOGEN Steinernema sp.
SODIUM ALGINATE AS A  INGREDIENT  FOR FORMULATION  OF  GRANULAR  NEMATODE ENTOMOPATHOGENS  Steinernema  sp.
Irwanto Sucipto * , Hari Purnomo, dan Wildan Muhlison Fakultas Pertanian, Universitas Jember, Indonesia *Email: irwanto.sucipto@unej.ac.id
* Corresponding Author, Diterima:  11 Nov. 2022, Direvisi: 5 Des. 2022, Disetujui: 3 Jul. 2023

## ABSTRACT
One  alternative  that  has  the  potential  as  a  biological  agent  for  the  pest  Lepidiota  stigma  Fabr.  (Co- leoptera: Scarabaeidae)  is  an  entomopathogenic  nematode  because  it is  safe,  actively  looking  for hosts, has a wide host range and is environmentally friendly. Although juvenile infective entomopathogenic nema- todes  can  be  stored  for  several  months  in  refrigerated  water,  the  high  cost  and  difficulty  of  maintaining quality are barriers to this method. So, usually nematodes are formulated in solid or semi-solid form after being produced. One of the formulation methods that can be used is the alginate gel formulation. Observa- tions were made on three variables, namely the resistance of the alginate gel formulation, the viability and virulence of Steinernema sp. local isolate in alginate gel formulation. The durability of the formulation was determined by measuring the size of the formulation using a measuring device (ruler). Nematode viability was determined by comparing the number of live nematodes (per gram granule and per 10 gram granule) while nematode virulence was determined by calculating the percentage of deaths of L. stigma and Tenebrio molitor in  each treatment. Observations  of the formulation form  resistance, viability and  virulence were observed every week for 2 months after the formulation. The results showed that the alginate gel formula- tion would be more stable and durable when stored at 20 0 C. The combination of isolate type and storage temperature for the best alginate gel formulation was the use of Steinernema sp. Kediri isolates stored at 20 0 C because their viability is higher than other isolates.
Keywords : Entomopathogen, formulation, nematode, pathogen

## ABSTRAK
Salah  satu  alternatif  yang  berpotensi  sebagai  agen  hayati  untuk  hama  Lepidiota  stigma  Fabr.  (Coleoptera: Scarabaeidae) adalah nematoda entomopatogen karena aman, aktif mencari inang, memiliki kisaran inang yang luas dan ramah lingkungan. Meskipun juvenil infektif nematoda entomopatogen dapat disimpan selama beberapa bulan di air dalam refrigator, biaya yang mahal dan kesulitan mempertahankan kualitas menjadi penghalang pada metode ini. Biasanya nematoda diformulasikan dalam bentuk padat atau semi padat setelah diproduksi. Salah satu metode formulasi yang dapat digunakan adalah formulasi gel alginat. Pengamatan dilakukan terhadap tiga variabel yaitu ketahanan bentuk formulasi gel alginat, viabilitas dan virulensi Steinernema sp. isolat lokal pada formulasi gel alginat. Ketahanan bentuk formulasi ditentukan dengan mengukur ukuran formulasi menggunakan alat pengukur (penggaris). Viabilitas nematoda ditentukan dengan membandingkan jumlah nematoda hidup (per gram granul dan per 10 gram granul) sedangkan virulensi nematoda ditentukan dengan menghitung persentase kematian L. stigma dan Tenebrio  molitor  pada  setiap  perlakuan. Pengamatan  ketahanan bentuk  formulasi, viabilitas  dan  virulensi tersebut diamati setiap minggu selama 2 bulan setelah pembuatan formulasi.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa formulasi gel alginat akan lebih stabil dan tahan lama apabila disimpan pada suhu 20 0 C. Kombinasi jenis isolat dan suhu penyimpanan untuk formulasi gel alginat yang terbaik adalah penggunaan Steinernema sp. isolat Kediri yang disimpan pada suhu 20 0 C karena viabilitasnya lebih tinggi daripada isolat lainnya
Kata kunci : Entomopatogen, formulasi, nematoda, patogen

## 1.  PENDAHULUAN
Uret tebu, Lepidiota stigma Fabr. (Coleoptera: Scarabaeidae) merupakan salah satu hama penting pada  tanaman  tebu  dimana  kerusakan  serangan hama ini bisa mencapai 50% sampai puso (Hidayah et  al .,  2019,  Sunarto,  2020,  Sarjan et  al .,  2021,
Tiffani  &  Ramdan,  2020,  Rahayu et  al .,  2021). Pengendalian yang umumnya dilakukan oleh petani adalah  pengendalian  secara  mekanis  maupun kimiawi. Pengendalian secara mekanis dilakukan dengan cara menggunakan perangkap lampu dan penangkapan  serangga  dewasa  (ampal)  serta pemusnahan  uret  pada  saat  pengolahan  tanah (bongkar ratoon). Cara ini dapat menekan populasi sampai 60%. Pengendalian secara kimiawi pada umumnya akan menimbulkan masalah baru seperti resistensi, menurunkan kualitas tanah, mencemari lingkungan bila tidak dilakukan secara hati-hati dan sesuai dengan rekomendasi.
Pemanfaatan nematoda entomopatogen (NEP) telah banyak dilakukan untuk pengendalian hama (Labaude & Griffin, 2018), termasuk hama uret tebu (Indrayani et al ., 2018, Habriantono & Alfarisy, 2021).  NEP  mampu  mengendalikan  larva Spodoptera littoralis (Boisd.) and Agrotis ipsilon (H.) (Lepidoptera: Noctuidae) hingga 90% dengan mengaplikasikan 400 sampai 800 Ji/ml nematoda pada  uji  di  laboratorium.  Pengendalian  dengan menggunakan NEP masih banyak memiliki kendala diantaranya yaitu: penyediaan juvenil infektif secara banyak  sulit  dipenuhi  dan  kemasan  aplikasinya masih kurang praktis. Oleh karena itu, perlu suatu metode  perbanyakan  massal  yang  sederhana sehingga petani dapat memproduksinya sendiri dan pembuatan kemasan yang lebih praktis.
Meskipun  NEP  dapat  disimpan  selama beberapa bulan di air dalam refrigator, diperlukan biaya yang tinggi untuk penyimpanan dalam skala yang besar hal ini dikarenakan NEP memiliki umur simpan  yang  relatif pendek  dan  rentan  terhadap pengeringan dan sinar UV (Kim et al ., 2021). Oleh karena  itu,  NEP  biasanya  diformulasikan  dalam bentuk padat atau semi padat setelah diproduksi. Salah satu metode formulasi yang dapat digunakan adalah formulasi gel alginat.
Sodium  alginat  telah  banyak  dimanfaatkan karena bersifat koloid, membentuk gel dan hidrofilik (mengikat air dan mempertahankan kelembaban) (Kagimu & Malan, 2019). Pembentukan formulasi akan  mempermudah  penyimpanan,  pengiriman produk nematoda namun juga dapat mempengaruhi kualitas  dari  nematoda.  Oleh  karena  itu,  perlu
dilakukan penelitian tentang penggunaan sodium alginat sebagai bahan formulasi granular NEP guna mengetahui pengaruhnya terhadap viabilitas dan virulensi NEP dalam mengendalikan L. stigma .

## 2.  BAHAN  DAN  METODE
Penelitian  dilaksanakan  di  Laboratorium Agroteknologi  Fakultas  Pertanian  Universitas Jember,  pada  bulan  Juni  2022  sampai  dengan Oktober 2022.
Bahan  yang  digunakan  untuk  melaksanakan penelitian ini adalah Steinernema sp. isolat Kalisat, Kacangan dan Kediri, larva uret tebu L. stigma , larva ulat hongkong Tenebrio molitor , alkohol 70%, aquades, formalin 0,1%,  sodium alginat, CaCl 2 , Natriun  sitrat. Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian ini  adalah cawan  petri  plastik,  kertas saring, kantong plastik, wadah/box plastik ukuran kecil  (diameter  6  cm),  sedang  (17x12  cm)  dan besar (35x28 cm), erlenmeyer, gelas ukur, sprayer, pinset, kamera, hand counter, mikroskop, mikroskop Dino dan laptop, mikropipet, autoklaf, pipet titrasi/ infus.
Penelitian ini terdiri dari beberapa tahap yaitu: eksplorasi  nematoda  entomopatogen  di  lapang, perbanyakan massal Steinernema sp. isolat lokal secara In  Vivo dan  dilanjutkan  dengan  proses White  trap ,  pengambilan  larva L.  stigma dan membuat formulasi alginat dengan menggunakan sodium alginat serta melakukan pengamatan dalam beberapa  variabel  pengamatan  seperti  ukuran formulasi alginat dan viabilitas
Ekplorasi NEP dilakukan di daerah pertanaman tebu dengan cara mencari dan mengambil sample tanah pada lahan tebu. Tanah diambil dari lahan pertanaman  tebu  di  daerah  Kalisat,  PTPN  XII Jatirono (Afdeling Kacangan) dan Kediri. Metode sampling yang digunakan untuk pengambilan tanah pada setiap lahan pertanaman tebu tersebut adalah metode  diagonal.  Langkah  selanjutnya,  adalah melakukan metode baiting White Trap (Suwannaroj et  al .,  2020)  untuk  melihat  dan  mendapatkan nematoda  entomopatogen.  Isolasi  nematoda dilakukan sebanyak 5 ulangan dari tiap-tiap lokasi sampel tanah.
Pada tahap selanjutnya dilakukan perbanyakan massal Steinernema sp. isolat lokal yang dihasilkan sebelumnya dari proses baiting uret tebu dan White trap .  Inokulasi  dilakukan  dalam  box  plastik berukuran  17x12  cm,  kemudian  alas  bagian dalamnya  di  lapisi  kertas  saring.  Kertas  saring ditetesi dengan suspensi Steinernema sp. ± 5 ml
secara merata lalu diberi ulat hongkong ( T. molitor ) dan  disimpan  ditempat  gelap  selama  2  hari. T. molitor yang mati di White trap menggunakan T. molitor
Granulasi  merupakan  salah  satu  bentuk formulasi nematoda entomopatogen dalam bentuk butiran atau granul atau granuler. Dalam penelitian ini  formulasi Steinernema sp.  isolat  lokal menggunakan sodium alginat (Kagimu and Malan, 2019, Kim et al ., 2021). Untuk keperluan formulasi, suspensi Steinernema sp.  isolat  lokal  yang digunakan adalah suspensi pekat atau konsentrasi yang tinggi (± 9000 Ji/ml) yang dicampur dengan sodium alginat.
Formulasi  menggunakan  sodium  alginat dilakukan dengan cara: melarutkan 2 gram alginat ditambah 100 ml suspensi Steinernema sp. isolat lokal, kemudian dimasukkan kedalam pipet titrasi atau infus kemudian diaduk-aduk selama 4-5 menit (Umamaheswari et. al., 2005). Setelah itu, mengatur kecepatan tetesnya dan meletakkan larutan 100 mM CaCl 2. 2H 2 0 (larutan kompleks) yang telah dibuat (melarutkan 1,47 gr CaCl 2 dalam 100 ml aquades) dalam  gelas  kaca  atau  wadah  dibawah  tetesan infus.  Campuran  sodium  alginat  dan  suspensi Steinernema sp.  isolat  lokal  diteteskan  sambil diaduk-aduk terus menerus hingga selesai. Butiran- butiran granular yang terbentuk dibiarkan selama 20-30 menit lalu dipisahkan dari larutan komplek dengan  pengayakan,  dibilas  dengan  air  steril (aquades) sebanyak 3 kali dan ditempatkan pada box plastik kecil baru kemudian disimpan pada suhu 20 0 C dan 25-27 0 C.

## 3.  HASIL  DAN  PEMBAHASAN
Hasil  pengamatan  formulasi  granular menunjukkan  bahwa  terjadi  penyusutan  secara berkala ukuran dari granul pada semua perlakuan. Pada pembuatan awal, ukuran formulasi sebesar 4 mm dengan penyusutan akhir ± 1 mm yang dapat dilihat pada Gambar 1. Formulasi granular yang terbentuk  memiliki masa ketahanan bentuk yang semakin  lama  akan  mengalami  penyusutan  dan pemadatan bentuk. Pada Gambar 2 tampak bahwa adanya  perbedaan  waktu  penyusutan  untuk formulasi yang disimpan pada suhu 20 0 C dan suhu ruang (25-27 0 C). Formulasi yang disimpan pada suhu  20 0 C  lebih  tanah  lama  bila  dibandingkan dengan formulasi yang disimpan pada suhu 27 0 C. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa pemanfaatan  formulasi  gel  alginat  pada  3  jenis Steinernema sp. isolat lokal hasil eksplorasi dapat
digunakan. Formulasi yang dihasilkan mengalami penyusutan  dan  pemadatan  bentuk  setiap minggunya. Formulasi pada masing-masing suhu penyimpanan memiliki daya tahan yang berbeda dimana untuk suhu 20 0 C mampu bertahan lebih lama  (7  minggu)  dibandingkan  untuk  suhu penyimpanan 27 0 C (4-6 minggu) sesuai dengan yang diungkapkan oleh Jeong et al . (2020) dimana ketika ada penurunan suhu terhadap gelasi akan memperlambat  difusi  kalsium  sehingga menghasilkan struktur internal yang lebih stabil dan meningkatkan kekuatan dari alginat.
Produk formulasi dapat disimpan selama 6-12 bulan pada suhu penyimpanan 10 0 C dan selama 1-3  bulan  pada  suhu  ruangan.  Pada  suhu penyimpanan 20 0 C keadaan suhu lebih terkendali dan stabil (penyimpanan pada inkubator) sedangkan pada suhu 27 0 C yang merupakan suhu ruangan keadaannya  kurang  stabil  dimana  keadaannya dipengaruhi oleh kondisi ruangan. Pada kondisi ini, formulasi mengalami proses penguapan lebih besar dibandingkan  pada  suhu  penyimpanan  20 0 C sehingga terjadi  penyusutan bentuk  granul yang lebih  cepat.  Penyusutan  dan  pemadatan  bentuk formulasi  mempengaruhi  kelangsungan  hidup Steinernema sp. dalam formulasi. Steinernema sp. tidak  ditemukan  pada  formulasi  yang  telah mengalami pemadatan bentuk.
Steinernema sp. isolat lokal mampu bertahan setelah disimpan dalam bentuk formulasi granular. Jumlah Steinernema sp.  hidup  yang  ditemukan mengalami  penurunan  seiring  dengan  lama penyimpanan baik pada suhu 20 0 C maupun suhu 27 0 C. Berdasarkan hasil analisis ragam viabilitas Steinernema sp. isolat lokal, interaksi kedua faktor memberikan pengaruh yang sangat nyata terhadap jumlah Steinernema sp.  isolat  lokal  hidup  yang ditemukan (P-Value = < 0,0001).
Pada  pengamatan  7  hari  setelah  pembuatan formulasi, perlakuan isolat Kacangan-suhu 20 0 C ditemukan Steinernema sp.  hidup  yang  paling banyak yaitu 88% sedangkan jumlah Steinernema sp. hidup paling sedikit ditemukan pada perlakuan isolat Kalisat-suhu 27 0 C yaitu 63% (Gambar 3). Pada pengamatan minggu ke 2-6, Steinernema sp. hidup  paling  banyak  ditemukan  pada  perlakuan isolat Kediri-suhu 20 0 C dan yang paling sedikit pada perlakuan  isolat  Kalisat-suhu  27 0 C  tetapi  pada pengamatan minggu ke 7 perlakuan yang paling banyak ditemukan Steinernema sp. hidup adalah isolat Kalisat-suhu 20 0 C sebesar 11% dan yang paling sedikit adalah isolat Kalisat-suhu 27 0 C dan isolat Kacangan-suhu 27 0 C sebesar 0%.
.
Gambar 1. Perubahan Ukuran Formulasi Granu- lar  Sodium  Alginat  (A) Ukuran Awal (B) Penyusutan  dan  Pemadatan Formulasi
Gambar  2.  Perbedaan  terjadinya  Penyusutan Ukuran Formulasi Granular Sodium Alginat  pada  Kedua  Suhu Penyimpanan
Gambar  3.  Perbedaan  Jumlah  Steinernema  sp. Isolat Lokal Hidup yang Ditemukan (A) Pada Suhu Penyimpanan 20 0 C (B) Pada Suhu Penyimpanan 27 0 C
Uji Viabilitas pada Tabel 1 menunjukkan bahwa terjadi penurunan jumlah Steinernema sp. hidup yang ditemukan sehingga mortalitas dari T. molitor mengalami  penurunan  baik  pengamatan  24  jam maupun 48 jam. Pada Formulasi yang mengalami penyusutan  dan  pemadatan  bentuk  formulasi mempengaruhi kelangsungan hidup Steinernema sp.  dalam  formulasi. Steinernema sp.  sehingga tidak  ditemukan  pada  formulasi  yang  telah mengalami pemadatan bentuk.
Berdasarkan hasil penelitian diketahui bahwa adanya  interaksi  antara  jenis Steinernema sp. isolat lokal dengan suhu penyimpanan dengan hasil yang tertinggi adalah penggunaan Steinernema sp. Isolat lokal Kediri pada penyimpanan suhu 20 0 C. Masing-masing  isolat  lokal  yang  digunakan memiliki  kondisi  suhu  tersendiri  untuk  dapat bertahan. Hal ini dipengaruhi oleh kondisi asal dari tiap isolat karena berasal dari daerah berbeda yang kondisi  lingkungan  berbeda.  Dengan  begitu, toleransi Steinernema sp. tiap isolat terhadap suhu perlakuan menunjukkan hasil yang berbeda.Widiyaningrum & Fauziyah (2018) dalam penelitiannya menunjukkan pada suhu rendah  (15 0 C  dan  18 0 C)  dan  suhu  tertinggi  (30 0 C), menunjukkan viabilitas yang berbeda tidak nyata serta pada suhu  21 0 C, 24 0 C dan 27 0 C.
Penelitian  terhadap  isolat  lokal  NEP  pada beberapa negara seperti India memiliki kisaran suhu yang optimal 25 0 C diantara suhu 15 dan 30 0 C.  Fenomena ini memperkuat bukti bahwa Steinernema sp. mentolerir suhu yang bervariasi di daerah yang berbeda di antara negara-negara, tergantung  pada  karakteristik  ekologi  masing- masing  wilayah.  Gulzar et  al .  (2020)  dalam penelitiannya  menunjukkan  bahwa  nematoda yang  diinkubasi  dengan  suhu  40 0 C  akan mengalami kematian setelah 24 jam. Toleransi suhu tertinggi ada pada 37,5 0 C, sedangkan suhu optimum ada pada 30 0 C. Julia et al . (2020) juga menunjukkan  dalam  penelitiannya  bahwa virulensi S.  carpocapsae secara  signifikan menurun pada suhu 15 0 C jika dibandingkan pada suhu 25 0 C.
Efektivitas  perlakuan  formulasi  dapat di ke t a hu i   da r i   vi a bi l i t a s   da n  vi ru l e ns i Steinernema sp. isolat lokal. Viabilitas yang diharapkan  adalah  jumlah Steinernema sp. h i d u p  ya n g  b an yak  di t e mu ka n  s e t e l a h dilakukan pemecahan formulasi. Steinernema sp. hidup banyak ditemukan pada formulasi yang  disimpan  pada  suhu  20 0 C  dan  pada penggunaan Steinernema sp. isolat Kediri.

## 4.  KESIMPULAN
Nematoda  entomopatogen, Steinernema sp. isolat lokal Kalisat, Kacangan dan Kediri mampu bertahan  setelah  dilakukan  formulasi  selama  7 minggu (suhu 20 0 C) dan 4-6 minggu (suhu 27 0 C) baik  dalam  bentuk  gel  maupun  keberadaannya dalam formulasi (viabilitas). Suhu penyimpanan juga memiliki  pengaruh  penting  terhadap  viabilitas, ketahanan  bentuk  formulasi  dan  virulensi Steinernema sp. isolat lokal. Hal ini tampak pada hasil  ketahanan  bentuk,  viabilitas  dan  virulensi dimana suhu penyimpanan 20 0 C memberi hasil tertinggi.
Tabel 1. Hasil Pengamatan Pengaruh Perlakuan Formulasi Granular pada 2 Jenis Suhu Penyimpanan Terhadap Viabilitas Steinernema sp. Isolat Lokal.
Perlakuan Viabilitas Steinernema sp. pengamatan minggu ke- (dalam %) 1 2 3 3 4 5 6 7 Isolat Kediri – Suhu 20 0 C 84 a 73 a 51 a 38 a 26 a 18 a 8 b 0 ns Isolat Kalisat – Suhu 20 0 C 74 b 58 b 26 c 20 b 16 b 13 a 11 a 0 ns Isolat Kacangan – Suhu 20 0 C 88 a 70 a 39 b 27 b 19 b 13 b 6 c 0 ns Isolat Kediri – Suhu 27 0 C 81 c 71 c 32 c 26 b 20 b 13 c 6 c 0 ns Isolat Kacangan – Suhu 27 0 C 81 c 68 c 38 b 24 bc 16 c 9 d 0 d 0 ns Isolat Kalisat – Suhu 27 0 C 63 d 43 d 19 d 14 c 6 d 0 e 0 d 0 ns
Keterangan: angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama menunjukkan tidak berbeda menurut Uji Duncan Multiple Range Test pada taraf 5%

## 5. DAFTAR  PUSTAKA
Gulzar, S., M.  Usman, W. Wakil ,  B. Gulcu,  C.
Hazir, M. Karagoz, S. Hazir, & D. I. Shapiro- Ilan.  2020.  Environmental  Tolerance  of Entomopathogenic  Nematodes  Differs Among  Nematodes  Arising  from  Host Cadavers  Versus Aqueous  Suspension. Journal  Of  Invertebrate  Pathology.
175(107452):1-7.
Habriantono, B.  & F. 2021. Alfarisy. Biological Control of White Grubs (Lepidiota Stigma L;  Coleoptera;  Scarabaeidae)  with Entomopathogenic Nematodes and Fungus Metharizium Anisopliae  (Metsch). Iop
Conference Series: Earth And Environmental Science . 759(012023):1-5.
Hidayah, A. R., W.S. Harijani, W. Widajati, & D. Ernawati. 2019. Potensi Jamur Entomopatogen
Metarhizium  Anisopliae , Beauveria Bassiana dan Streptomyces Sp.  terhadap Mortalitas Lepidiota Stigma pada Tanaman Tebu. Plumula:  Berkala  Ilmiah Agroteknologi. 7(2):64-72.
Indrayani, I. G. A. A., S. Subiyakto, & C. Chaerani. 2018.  Pathogenicity  of  Entomopathogenic Nematode  on  Sugarcane  White  Grub Lepidiota Stigma (Coleoptera: Scarabaeidae).
Buletin Plasma Nutfah. 24(2): 83-88. Jeong, C., S. Kim, C. Lee, S. Cho, & S.B. Kim. 2020. Changes in The Physical Properties of  Calcium Alginate  Gel  Beads  Under  a Wide  Range  Of  Gelation  Temperature Conditions. Foods. 9(2): 1-15.
Julià, I., A. Morton, M. Roca, & F. Garcia-Del- Pino.  2020.  Evaluation  of  Three Entomopathogenic  Nematode  Species Against  Nymphs  and  Adults  of  The Sycamore Lace Bug, Corythucha Ciliata. Biocontrol. 65:623-633.
Kagimu, N. & A. P. Malan. 2019. Formulation of South African Entomopathogenic Nematodes using Alginate  Beads  and  Diatomaceous Earth. Biocontrol. 64:413-422.
Kim,  J.,  I.  Hiltpold,  G.  Jaffuel,  I.  Sbaiti,  B.  E. Hibbard, & T. C. Turlings. 2021. Calcium- Alginate Beads as A Formulation for The Application  of  Entomopathogenic Nematodes to Control Rootworms. Journal Of Pest Science. 94:1197-1208.
Labaude, S. & C. T. Griffin. 2018. Transmission Success of Entomopathogenic Nematodes used in Pest Control. Insects. 9(2):1-20.
Rahayu, S., A. Triyogo,  S. M. Widyastuti,  &  F.
Ardianyah.  2021.  Pests  and  Diseases  on Falcataria Moluccana Trees in Agroforestry Systems  with  Pineapple  in  East  Java, Indonesia. Biodiversitas  Journal  of Biological Diversity. 22(5):2779-2788. Sarjan, M., M. Muchlis, & I. Muthahanas. 2021.
The  Diversity  of  Major  Insect  Pests  at Sugarcane Development Center in Dompu Distrcit, West Nusa Tenggara. Journal Of Science  Science  Education. 2(1):38-46.
Sunarto,  D.  A.  2020.  Verification  of  The Implementation of Land Cover Technology with  Plastic  Mulch  for  Control  of  White Grubs  Lepidiota  Stigma  Fabricius  in Sugarcane.   International  Conference  and The 10th Congress of The Entomological Society of Indonesia (Iccesi 2019), Atlantis Press . 201-207.
Suwannaroj,  M.,  T. Yimthin,  C.  Fukruksa,  P. Muangpat, T. Yooyangket, S. Tandhavanant, A. Thanwisai, & A. Vitta. 2020. Survey of Entomopathogenic  Nematodes  and Associate  Bacteria  in  Thailand  and  Their Potential to Control Aedes Aegypti. Journal Of Applied Entomology. 144: 212-223. Tiffani, N. & H. Ramdan. 2020. The Characteristics of Acacia Mangium Stands at Site 23 B, Rph Maribaya, Bkph Parung Panjang, Kph Bogor Which is Attacked by Pests and Diseases. Iop  Conference  Series:  Earth  And Environmental Science, Iop Publishing . 1-10. Widiyaningrum, P. & L. Fauziyah. 2018. Biological Activity  of  Local  Entomopathogenic Nematodes  from  Two  Different  Origins Based  on Various Temperatures. Journal Pakistan  Journal  of  Biological  Sciences: Pjbs. 21:95-100.