## DAYA HAMBAT VIRGIN COCONUT OIL TERHADAP PERTUMBUHAN JAMUR Candida albicans ISOLAT VAGINA
Burhannuddin 1 , I W. Karta 2 , B.Tresnanda 3 , I G. N. D. Putra 4 , I P. A. Darmada 5 , I. I D. A. Pradnyadhita 6 , I W. B. A. Gunawan 7 , I M. B. Ariawan 8
1,2,3,4,5,6,7,8 Jurusan Analis Kesehatan, Politeknik Kesehatan Denpasar Denpasar, Indonesia
E-mail: boerhan28@gmail.com, dwijaputra07@gmail.com , adidarmada@gmail.com

## Abstrak
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  daya  hambat  VCO  terhadap  pertumbuhan Candida albicans isolat vagina. Uji daya hambat VCO terhadap C. albicans isolat vagina dilakukan  dengan  metode  difusi  cakram. C.  albicans yang  diisolasi  memiliki  ciri-ciri koloni yeast, membentuk blastospora,  pseudohifa,  klamidospora, dan germ  tube .  VCO mampu menghambat pertumbuhan C. albicans isolat vagina. VCO pada konsentrasi 90% memiliki  daya  hambat  tertinggi,  dengan  nilai  zona  hambat  minimum    24,0  mm,  lebih besar  dibandingkan  konsentrasi  75%  (20  mm),  50%  (9,7  mm),    25%  (1,9  mm),  dan kontrol  negatif  (0,0  mm).  Namun  nilai  Zona  Hambat  tersebut  lebih  rendah  secara bermakna dengan kontrol positif (Ketokenazol 2%) (p< 0,05). VCO mengandung berbagai zat  aktif  yang  dapat  bekerja  sebagai  anti  fungi,  seperti  asam  laurat,  asam  kaprilat,  dan asam  kaprat.  Zat  monolaurin  dan  monokaprin  yang  dihasilkan  VCO  dapat  merusak membran sel jamur. Berdasarkan hasil tersebut VCO berpotensi digunakan sebagai obat alternatif untuk infeksi C. albicans
Kata kunci: Daya hambat, VCO, Candida albicans , isolate vagina

## Abstratc
The  purpose  of  this  study  to  determine  the  resistivity  of  VCO  against  the  growth  of vaginal isolates of Candida albicans . The VCO resistivity test against vaginal isolates of C.  albicans is  performed  by  the  disc  diffusion  method. C.  albicans was  successfully isolated  from  the  vaginal  swab  which  is  characterized  by  the  yeast  colonies,  forming blastospores,  pseudohifa,  chlamydospora,  and  germ  tube.  Disc  diffusion  test  results showed that VCO can inhibit the growth of C. albicans fungus. VCO at a concentration of 90%  had  the  highest  resistivity,  with  a  minimum  inhibit  zone  value  of  24.0  mm,  greater than  VCO  at  concentrations  of  75%  (20  mm),  50%  (9.7  mm),  25%  (1.9  mm),  and negative  control  (0.0  mm).  However,  the  value  of  the  Inhibitory  Zone  was  significantly lower  with  positive  control  (Ketokenazol  2%)  (p  <0.05).  VCO  contains  various  active substances that can be working as anti-fungi, such as lauric acid, caprylic acid, and acid kaprat.  Substances  monolaurin  and  monokaprin  which  VCO  produce  can  damage  the structure of cell membrane fungus. Based on these results,  the VCO is potentially used as an alternative medicine for infection of C. albicans
Keywords : resistivity, VCO, Candida albicans , vaginal isolates

## PENDAHULUAN
Kasus  infeksi  karena  jamur  Candida mengalami  peningkatan  secara  global. Peningkatan tersebut seiring dengan meningkatnya jumlah populasi yang beresiko terinfeksi Candida seperti penerima  transplantasi  organ,  penderita kanker dan pasien dengan terapi imunosupresan  (Sanguinetti  &  Posteraro,
2015;  Arendrup,  2010).  Berbagai  fakor pendukung  lainnya  juga  menjadi  penyebab meningkatnya infeksi Candida seperti infeksi  HIV,  diabetes  melitus,  konsumsi antibiotik,  dan  usia  (Salehei et  al., 2012). Hasil  analisis  restropektif  pada  suatu  studi melaporkan  prevalensi  kandidemia  secara
global  mencapai  6,9  %  dalam  1000  pasien (Kett et al ., 2011).
Genus  Candida  memiliki  17  spesies yang diketahui menjadi agen etiologi infeksi pada  manusia.  Lebih  dari  90  %  infeksi invasif  disebabkan  oleh C.  albicans,  C. glabrata,  C.  parapsilosis,  C.  tropicalis, dan C.  krusei (Sardi et  al .,  2013;  Pfaller et  al ., 2007). Infeksi oleh jamur Candida menyebabkan  kandidiasis,  suatu  infeksi jamur  akut  atau  sub  akut  pada  berbagai bagian  tubuh  seperti  vagina,  rongga  mulut, atau menimbulkan sistemik yang disebarkan  melalui  aliran  darah.  Jamur Candida  pada  dasarnya  merupakan  flora normal  yang  berkolonisasi  pada  usus, rongga  mulut,  dan  saluran  vagina.  Namun pada  kondisi  tertentu  pertumbuhan  dari jamur-jamur  tersebut  dapat  berlebih  dan menimbulkan  infeksi  oportunistik  (Lass- Flörl, 2009).
C. albicans dilaporkan menjadi spesies utama penyebab kandidiasis dengan  berbagai  bentuk  klinis,  mulai  dari kandidiasis  orofaringeal  atau  vulvovaginal sampai  kandidiasis  sistemik  terutama  pada pasien  imunokompromais  (Pfaller et  al ., 2011). Hasil suatu studi menunjukkan 50-70 %  kandidiasis  sistemik  disebabkan  oleh C. albicans (Arendrup,  2010).  Pada  penderita HIV,  kandidiasis  orofaringeal  merupakan bentuk  infeksi  oportunistik  paling  tinggi yang mencapai 80-90 % kasus (Deorukhkar, 2016). Sedangkan kandidiasis vulvovaginal merupakan bentuk yang paling sering  ditemukan  bahkan  pada  perempuan yang sehat (Salehei et al ., 2012).
Perubahan  epidemologi  infeksi  oleh jamur  Candida  salah  satunya  disebabkan karena  menurunnya  sensitifitas  Candida terhadap  agen anti  fungi.  Berbagai  spesies Candida diketahui memiliki sensitifitas yang bervariasi terhadap agen anti fungi. Beberapa  jenis  dilaporkan  telah  resisten terhadap fluconazole yang umumnya digunakan sebagai  antifungi  profilaksis  dan terapitik  untuk  infeksi  Candida  (Sanguinetti & Posteraro, 2015).
Penelitian yang dilakukan oleh Salehei et a l. (2012) menunjukkan 43 isolat C.  albicans yang  diisolasi  dari  sampel
vagina resisten terhadap anti fungi flukonazole  dan  econazole.  Sedangkan pada  penelitian  Cernicka  &  Subik  (2006) dari  22  isolat C.  albicans yang  resisten terhadap fluconazole, 12 isolat menunjukkan  resistensi  silang  terhadap itraconazole dan 15 terhadap  voriconazole.
Resistensi  Candida  terhadap  agen anti  fungi  tersebut  didapatkan  selama proses  pengobatan.    Hal  ini  menimbulkan masalah  yang  serius  dalam  tata  laksana infeksi  Candida  (Sanguinetti  &  Posteraro, 2015).  Oleh  karena  itu  diperlukan  strategi lain  dalam  pengobatan  infeksi  Candida seperti  penggunaan  obat  berbahan  alam yang efektif untuk infeksi Candida.
Salah satu derivat dari tanaman yang diketahui  memiliki  efek  anti  fungi  adalah Virgin  Coconut  Oil atau  VCO.  VCO diproduksi tanpa melalui proses pengilangan,  pemutihan,  penghilangan  bau dan  tanpa  pemanasan.  Proses  produksi tersebut  menyebabkan  VCO  mengandung banyak  substansi  aktif  yang  secara  alami ada pada minyak kelapa (Maidin & Ahmad, 2015).  Sejumlah  asam  lemak  ditemukan pada  VCO  seperti  asam  kaproat,  kaprilat, kaprat,  mirustat,  palmitat,  stearate,  olerat, linoleat,  dan  asam  laurat  yang  memiliki persentase  kadar  paling  tinggi,  sebesar  47 %.  Senyawa  monolaurin  dari  asam  laurat tersebut  menyebabkan  VCO  memiliki  efek anti  mikroba,  baik  untuk  bakteri  atau  jamur dengan  cara  merusak  komponen  lipid membran sel (Marina et al., 2009).
Berdasarkan  hal  tersebut  maka  VCO dalam  penelitian  ini  diuji  kemampuannya dalam menghambat pertumbuhan C. albicans isolat vagina yang dapat menimbulkan kandidiasis vulvovaginal. Potensi  anti  fungi  dari  VCO  diuji  dengan metode  difusi  cakram.  Penelitian  tentang potensi  VCO  sebagai  anti  fungi  belum banyak dilakukan. Penelitian ini diharapkan menjadi  uji  pendahuluan  tentang  potensi anti  Candida  dari  VCO  sehingga  dapat membuka  penelitian  lanjutan  dalam  rangka pengembangan  VCO  sebagai  anti  fungi, khususnya untuk mengontrol infeksi Candida.

## METODE Jenis Penelitian
Jenis  penelitian  yang  digunakan adalah  penelitian  eksperimental  dengan mengobservasi  dan  menganalisis  daya hambat  VCO  terhadap  pertumbuhan C. albicans isolat vagina dengan metode difusi cakram.

## Waktu dan tempat
Penelitian  ini  dilakukan  selama  bulan Agustus s/d Desember 2016 di Laboratorium  Bakteriologi  Jurusan  Analis Kesehatan Poltekkes Denpasar.

## Sampel Penelitian
Sampel  VCO  diperoleh  dari  produk yang  dihasilkan  oleh  industri  rumah  tangga Balicocos, Tabanan. Sampel kemudian diuji dalam  berbagai  konsentrasi  yang  dibuat dengan mengencerkan stok sampel sehingga  didapatkan  konsentrasi  VCO  25, 50, 75 dan 90 %.

## Isolat Kuman
Jamur C.  albicans yang  diuji  adalah hasil  isolasi  dari  sampel  swab  vagina. Sampel diperoleh dari Laboratorium Puskesmas  Kuta  Selatan  Badung,  berasal dari  25  pasien  Pekerja  Seks  Komersil (PSK)  yang  rutin  melakukan  pemeriksaan kesehatan reproduksi.

## Alat dan Bahan
Peralatan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  antara  lain  : Biological  Safety Cabinet (BSC) level II, Inkubator, Mikroskop Binokuler, Mc Farland Densitometer, standar  Mc  Farland  0,5,  api  bunsen, petridish,  jangka sorong dan ose.
Sedangkan  bahan  yang  digunakan antara  lain  :  NaCl  0,9  %,  media  Potato Dextro  Agar  (PDA),  alkohol  70  %,  objek glass, LCB, lidi swab stril dan tisu.

## Prosedur Kerja
C. albicans diisolasi dari sampel klinis swab vagina. Sampel diambil dengan swab menggunakan  lidi  kapas  steril,  dimasukkan ke  dalam  media stuart ,  kemudian  di  bawa ke Laboratorium Bakteriologi Jurusan Analis  Kesehatan  Poltekkes  Denpasar. Jamur C.  albicans kemudian  ditumbuhkan
pada media PDA dengan  suhu inkubasi 37 o C  selama  24-72  jam.  Koloni  yang  tumbuh diidentifikasi secara makroskopis, mikroskopis  (Jasim et  al .,  2016),  dan  uji biokimia.    Isolat  jamur  yang  terisolasi disimpan  pada  suhu  4 0 C  kemudian diremajakan  sebelum  digunakan  untuk pengujian daya hambat VCO.
Uji  daya  hambat  VCO  terhadap pertumbuhan C.  albicans isolat  vagina dilakukan  dengan  metode  difusi  cakram. Metode  ini  dilakukan  dengan  merendam cakram  kosong  terlebih  dahulu  selama  30- 60  menit  pada  masing-masing  konsentrasi larutan  VCO  dengan  kloroform  sebagai pelarut.  Selanjutnya  dibuat  suspensi C. albicans dengan  nilai  Mc  Farland  0.5 menggunakan densitometer. Suspensi yang berisi C.  albicans selanjutnya  disebarkan secara merata pada permukaan media PDA menggunakan  lidi  kapas  steril.    Setelah permukaan media mengering, cakram yang telah direndam ditempelkan masing-masing pada permukaan media PDA, diinkubasi 37 o C, selama 24-72 jam, diamati zona hambat yang  terbentuk.  Kontrol  positif  dibuat dengan menggunakan cakram yang mengandung  ketokenazol  2  %.  Sedangkan kontrol negatif menggunakan cakram kosong yang mengandung klorofom sebagai  pelarut.  Setiap  perlakuan  diuji dalam  tiga  kali  ulangan  dengan  dua replikasi.

## Metode Pengumpulan Data
Metode  pengumpulan  data  melalui observasi dari zona hambat yang dihasilkan VCO  pada  pertumbuhan C.  albicans isolat vagina. Data berupa zona hambat minimum yang  diperoleh  dengan  uji  difusi  cakram pada  media  PDA  dan  diukur  dengan menggunakan jangka sorong.

## Analisis Data
Data yang didapatkan dianalisis statistika  dengan  uji  T  berpasangan  bila data  berdistribusi  normal,  dengan  uji  non parametrik  Wilcoxon  bila  data  distribusi tidak  normal,  dan  analisi  dengan  two  ways anova  untuk  mengetahui  perbedaan  yang bermakna

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Isolasi Jamur Candida albicans Jamur C.  albicans diisolasi  dari pasien  yang  melakukan  pemeriksaan  rutin kesehatan  reproduksi  di  Puskesmas  Kuta Selatan,  Badung.  Sampel  diambil  dengan teknik  swab  menggunakan  lidi  kapas  steril, dan ditransport ke laboratorium Bakteriologi menggunakan media Stuart. Sampel tersebut  kemudian  ditanam  pada  media PDA,  diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama 24 – 72 jam.
Koloni  jamur  yang  tumbuh  pada media PDA diidentifikasi secara makroskopis  dan  mikroskopis.  Pada  media PDA  didapatkan  koloni  yeast  dengan  ciri- ciri  berukuran  sedang,  berwarna  krem, dengan  tepi  koloni  halus  (Gambar  1).  Uji lebih  lanjut  dilakukan  dengan  pemeriksaan mikroskopis  menggunakan  pewarna  LCB. Hasil  pengamatan  di  bawah  mikroskop ditemukan blastospora, pseudohifa, klamidospora , dan germ tube (Gambar 2)
Gambar 1. Koloni yeast pada media PDA dengan suhu inkubasi 37 o C
A B C
Gambar 2. Hasil identifikasi mikroskopis jamur Candida albicans pada perbesaran 40x
Keterangan: A (blastospora) ; B (pseudohifa, klamidospora) ; C (germ tube)
Blastospora dari C. albicans membentuk  tunas  yang  muncul  dari  sel yeast  (Gambar  2  A). C.  albicans dicirikan dengan  kemampuannya  membentuk  hifa semu  ( pseudohifa )  dan  hifa  membulat dengan dinding  yang  tebal  ( klamidospora ) (Gambar 2 B). Ciri khas lain dari jamur ini adalah  menghasilkan germ  tube ,  berupa tabung hifa bertunas yang dapat
berkembang menjadi pseudohifa (Gambar 2 C).
Koloni  yang  menunjukkan  ciri-ciri seperti  di  atas  selanjutnya  disubkultur  ke media  PDA,  diinkubasi  pada  suhu  37 o C selama  24-72  jam.  Koloni  yang  tumbuh pada  media  hasil  subkultur  selanjutnya diuji  gula-gula  untuk  melengkapi  hasil identifikasi  makroskopis  dan  mikroskopis.
Adapun  hasil  uji  gula-gula  pada  koloni
tersebut terlihat pada Tabel 1.
Tabel 1 Hasil uji gula-gula koloni Candida albicans Sampel Uji Gula-gula Hasil Koloni Candida Glukosa Positif Lactosa Negatif Maltosa Negatif Sukrosa Negatif Mannitol Negatif
Berdasarkan hasil uji yang dilakukan (suhu  inkubasi, makroskopis, mikroskopis, dan  gula-gula)  maka  isolat  Candida  yang berhasil diisolasi adalah jenis C. albicans. Pada penelitian ini, isolat C. albicans didapatkan  dari  pasien  yang  beresiko terkena  infeksi  kandidiasis  vulvovaginal. Dengan melakukan swab pada vagina dan ditransport  pada  media Stuart diharapkan jamur  dapat  tumbuh  pada  media  PDA sehingga  dapat  diidentifikasi  lebih  lanjut. Identifikasi jamur Candida dilakukan dengan  membuat  sediaan  jamur  untuk melihat struktur-struktur khas yang dihasilkan dalam proses pertumbuhannya.
Penelitian yang dilakukan oleh Salehi et  al .  (2016)  menunjukkan  bahwa C.  albicans merupakan  isolat  dominan yang ditemukan pada pasien vulvovaginitis  dan  Infeksi  Saluran  Kemih (ISK). C.  albicans secara  signifikan ditemukan  lebih  banyak  pada  perempuan dibandingkan  pada  laki-laki.  Pada  media Corn  Meal  Agar , C.  albicans memiliki  tipe koloni  yang  khas  dan  memproduksi germ tube . C. albicans merupakan jenis Candida  yang  menjadi  penyebab  utama kandidiasis  (Sanguinetti  &  Posteraro, 2015).  Jamur  ini  merupakan  flora  normal yang  dapat  diisolasi  terutama  dari  lapisan mukosa  tubuh  seperti  saluran  vagina  dan rongga  mulut  (Jasim et  al .,  2016). Meskipun sebagai flora normal, C. albicans merupakan agen infeksi oportunistik  terutama  pada  individu  yang mengalami  gangguan  imunitas.  Pada penderita HIV, C. albicans dapat menyebabkan  kandidiasis  orofaringeal, vulvovaginal,  dan  dapat  meluas  menjadi kandidiasis sistemik (Salehei et al ., 2012).
Infeksi  oportunistik  yang  ditimbulkan oleh C. albicans menyebabkan kandidiasis dengan  derajat  patogenitas  bervariasi mulai  dari  akut,  sub-akut,  dan  kronik. Infeksi terlokalisasi pada mulut, tenggorokan,  kulit,  vagina,  paru,  saluran pencernaan, atau sistemik menjadi kandidemia,  endokarditis,  dan  meningitis (Khan et al ., 2010).
Pada saluran pencernaan, C. albicans merupakan  penyusun  mikroflora usus.  Bentuknya  pleomorfik  dan  dapat mengalami  transisi  morfogenik  mulai  dari bentuk yeast,  pseudohifa ,  dan  hifa  sejati (Vediyappan et  al .,  2013).  Pada  individu sehat  umumnya  menyebabkan  infeksi superfisial sampai intermediat, tetapi pada individu imunokompromais dapat menimbulkan  infeksi  yang  invasif.  Sekitar 70  %  perempuan  dapat  mengalami kandidiasis  vulvovaginal  sekali  dalam hidupnya  dan  20  %  diantaranya  dapat mengalami  kekambuhan  (Khan et  al ., 2010).
Manusia  terpapar  pertama  kali  oleh jamur  Candida  melalui  saluran  vagina ketika lahir. Jamur kemudian berkolonisasi pada  berbagai  bagian  tubuh  terutama pada  rongga  mulut,  usus,  vagina  dan menjadi  komensal  (Miranda  et  al.  2009). Hasil  indetifikasi  molekuler  menunjukkan C. albicans merupakan jenis yang ditemukan  paling  banyak  pada  tubuh manusia  (73  %),  diikuti C.  tropicalis (15.0%),  C.  glabrata,  (3.6%), dan C. parapsilosis (5.4% (Guerrero et al ., 2016) Jamur Candida memiliki faktor adhesi  yang  membantu  kolonisasi  pada berbagai  bagian  tubuh  tersebut  dan  juga berperan dalam patogenesis jamur. Berbagai molekul protein dapat disekresikan  ke  permukaan  sel  dan
membantu  pelekatan  Candida  para  sel mukosa  seperti  protein  famili Als,  Hwp1, dan Eap1 .  Protein  adhesin  seperti Als3 dan Hwp1 dominan  diekspresikan  selama pembentukan  hifa  dan  membantu  struktur tersebut melekat pada sel hospes (Zordan,  2012).  Transisi  morfologi  dari yeast ke hifa memiliki peran penting dalam patogenesis C.  albicans (Vautier et  al ., 2015)
Struktur  hifa  tersebut  kemudian dapat  berinvasi  ke  sel  fagositik  melalui mekanisme  endositosis  terinduksi  atau berpenetrasi  secara  aktif.  Endositosis terinduksi  dimediasi  oleh  protein  invasin Als3 yang  melekat  pada  reseptor  sel epithelial  atau  endothelial.  Pelekatan  ini akan  mentrigger  masuknya  hifa  jamur secara  endositosis  (Liu  &  Filler,  2011). Sedangkan penetrasi secara aktif dilakukan  baik  secara  langsung  ke  dalam sel  hospes  atau  antar  sel  hospes. Mekanisme  ini  membutuhkan  tekanan turgor  dari  jamur,  vakuola  yang  normal, perpanjangan  hifa,  dan  faktor  fisik  lainnya (Dalle et al ., 2010).
Diagnosis  infeksi  jamur  Candida  di laboratrorium dilakukan dengan pemeriksaan mikroskopis dan kultur jamur. C.  albicans dalam  kultur  di laboratorium  menghasilkan  koloni yeast . Jamur  ini  berkembang  secara  aseksual dan termasuk dalam kelompok Ascomycetes.  Secara  genetik  bersifat
diploid dengan kromosom berjumlah delapan.  Pada  tubuh  manusia  dapat memiliki  bentuk  dimorfik,  yaitu  antara bentuk  yeast  dan  filamen  (Pfaller  & Diekema, 2002).
Tidak  seperti  jamur  pada  umumnya, C.  albicans di  laboratorium  dapat  tumbuh pada  suhu  37 o C  dengan  menggunakan media  yang  sesuai.  Pada  suhu  tersebut, C.  albicans dapat  membentuk  struktur tambahan seperti pseudohifa, klamidospora dan germ  tube .  Struktur- struktur  tersebut  khas  pada C.  albicans sehingga membantu identifikasi dan diferensiasi  dengan  jenis  Candida  yang lainnya (Jasim et al ., 2016)
Uji Daya Hambat VCO terhadap
Pertumbuhan C. albicans Daya hambat VCO terhadap pertumbuhan C.  albicans diuji  dengan metode  difusi  cakram.  Penghambatan pada pertumbuhan C. albicans ditunjukkan oleh  zona  bening  yang  terbentuk disekitar cakram (Gambar 3).
Zona  hambat  minimun  ditentukan dengan  mengukur  diameter  zona  bening yang  terbentuk  menggunakan  jangka sorong.  Semakin  lebar  diameter  yang dihasilkan menandakan aktivitas penghambatan  yang semakin  besar. Hasil pengukuran  zona  hambat minimum dalam uji ini ditunjukkan pada grafik Gambar 4.
Gambar 3. Zona hambat minimum VCO terhadap pertumbuhan C. albicans isolat vagina (Konsentrasi VCO 90 %, 75 %, 50 %, 25%, K+ (Kontrol positif), dan K-(Kontrol negatif) Keterangan : A (ulangan 1) ; B (ulangan 2) ; C (ulangan 3)
Gambar 4. Rata-rata diameter zona hambat minimum VCO dalam berbagai konsentrasi terhadap pertumbuhan jamur Candida albicans isolate vagina
Berdasarkan Gambar 4 di atas, VCO mampu  menghambat  pertumbuhan  jamur C.  albicans .  VCO  pada  konsentrasi  90  % memiliki  daya  hambat  tertinggi,  dengan nilai  zona  hambat  minimum    24,0  mm, lebih  besar  dibandingkan  VCO  pada konsentrasi  75  %  (20  mm),  50  %  (9,7 mm),    25  %  (1,9  mm),  dan  kontrol  negatif (0,0  mm),  namum  lebih  kecil  dari  kontrol positif  (ketokenazol  2  %)  yang  memiliki zona hambat 34,2 mm.   Analisa statistika dengan  independent  samples  test (t-test) menunjukkan bahwa VCO pada konsentrasi  90  %  dan  75  %  berbeda bermakna  dibandingkan  kontrol  positif, dengan  nilai  p  <  0,05.  Konsentrasi  VCO 50  %  dan  25  %  juga  menunjukkan perbedaan yang bermakna dengan kontrol positif,  berdasarkan  analisa  statistika menggunakan  Mann-Whitney  test  dengan nilai p< 0,05.
Zona hambat minimum yang dihasilkan  oleh  VCO  menunjukkan  bahwa zat  aktif  VCO  pada  cakram  mampu berdifusi  ke  dalam  media.  Zat  tersebut kemudian  menghambat  pertumbuhan C. albicans yang  ditandai  dengan    adanya zona bening di sekitar cakram. Zona bening terbentuk  karena  koloni  jamur  pada  bagian tersebut tidak dapat tumbuh sebagai akibat dari  zat  VCO  yang  telah  berdifusi  dan menghambat  pertumbuhannya.  Semakin
tinggi  konsentrasi  VCO  maka  semakin besar diameter zona hambat yang terbentuk (Gambar 4).
Hasil  uji  statistika  menunjukkan  nilai zona  hambat  VCO  pada  konsentrasi  90  % berbeda secara bermakna dengan ketokenazol  2  %  sebagai  kontrol  positif. Hal ini menggambarkan bahwa penghambatan  oleh  VCO  terhadap C. albicans secara  bermakna  lebih  rendah dibandingkan  kontrol  positif.  Ketokenazole merupakan salah satu agen anti fungi yang direkomendasikan untuk pengobatan infeksi C.  albicans .  Meskipun  zona  hambat  yang dihasilkan  VCO  secara  bermakna  lebih rendah dibandingkan ketokenazol, terbentuknya  zona  hambat  menunjukkan bahwa  VCO  memiliki  potensi  sebagai  anti fungi.
VCO  mengandung  berbagai  macam zat  yang  memiliki  efek  kerja  baik  sebagai anti  bakteri,  anti  fungi,  atau  anti  virus. VCO mengandung  tiga  asam  lemak  rantai menengah,  yaitu  asam  laurat    (50-53%), asam  kaprilat,  dan  asam  kaprat,  yang semuanya memiliki efek anti fungi. Kelompok  asam  lemak  rantai  menengah tersebut  memiliki  aktivitas  mikrobisida spektrum  luas.    Hasil  studi  menggunakan mikroskop  elektron  menunjukkan  bahwa zat-zat  tersebut  bekerja  dengan  cara
merusak    membran  sel  jamur (Ogbolu  et al ., 2007)
Asam laurat VCO terikat pada tulang punggung gliserol yang membentuk trilgliserida.
Pada
saluran gastroinstestinal, trigliserida tersebut dapat  diubah  menjadi  asam  laurat  dan monolaurin.  Selain  itu,  asam  lemak  rantai sedang  pada  VCO  mudah  diabsorpsi, meningkatkan  metabolisme,  dan  kerja  sel menjadi  lebih  efisien  dalam  membentuk sel  baru  untuk  menggantikan  sel-sel  yang telah rusak (Marina et al ., 2009).
Berbagai  studi  lain  yang  telah dilakukan  menunjukkan  adanya  aktivitas anti  fungi  dari  VCO  terhadap C.  albicans. Penelitian  oleh    Ogbolu et  al .  (2007) menunjukkan  bahwa  isolat  Candida  yang diuji  memiliki  sensitifitas  terhadap  VCO. VCO  pada  konsentrasi  100  %  dilaporkan lebih efektif terhadap C. albicans dibandingkan flukonazole.
Sebelumnya,
penelitian oleh Bergsson et  al. (2001)  menunjukkan adanya  aktivitas  fungisidal  dari  asam laurat  dan  asam  kaprat  terhadap C. albicans. Asam  kaprat  di  dalam  sel-sel tubuh akan dimetabolisme menjadi monokaprin  yang  bersifat  anti  fungi. Penggunaan  monokaprin  dalam  bentuk hydrogen  gel  telah  diuji  oleh  Thormar et al . (1999) pada mukosa vagina mencit dan kelinci.  Hasil  uji  menunjukkan  bahwa  zat tersebut  mampu  mencegah  terjadinya iritasi  pada  mukosa  hewan  coba.  Oleh karena  itu,  kandungan  monokaprin  pada VCO  dapat  digunakan  sebagai  agen  anti fungi  salah  satunya  terhadap C.  albicans yang  sering  menginfeksi  pada  bagian mukosa.
Penelitian yang dilakukan oleh Bergsson et  al .  (2001)  menunjukkan monokaprin  pada  konsentasi  1,25  mM dalam  10  menit  dan  konsentrasi  0,6  mM dalam  30  menit    menyebabkan  lisis  total dari membran sel. Sedangkan asam laurat dengan  konsentrasi  terendah  2,5  mM menyebabkan  lisis  membrane  sel  dalam 10 –  30  menit.    Senyawa  lemak  tersebut juga  tidak  menunjukkan  toksik  pada  kulit dan mukosa meskipun diuji pada konsentrasi yang lebih tinggi.
Selain  monokaprin,  VCO  di  dalam tubuh juga dapat diubah menjadi monolaurin yang berasal dari asam laurat. Monolaurin  dapat  melarutkan  envelope lipid  yang  terdapat  pada  virus,  bakteri, atau jamur dan diketahui memiliki  aktifitas anti  mikroba  yang  kuat  terhadap  berbagai mikroorganisme penyebab infeksi (Chomchalow, 2011).
Monolaurin  merupakan  monogliserol dari  asam  laurat  yang  terdapat  pada hewan dan tumbuhan. Monolaurin memiliki  aktivitas  spektrum  luas  terhadap bakteri,  fungi,  dan virus  (Lieberman et al ., 2006). Pada bakteri Staphylococcus aureus monolaurin mampu memblok produksi  berbagai  eksoenzim  dan  faktor virulensi seperti protein-A, alpha- hemolysin, β-lactamase dan shock syndrome  toxin  1 yang  dihasilkan S. aureus (Tangwatcharin et al ., 2012)
Asam  laurat  dan  monolaurin  pada VCO  sebelumnya  telah  diketahui  memiliki aktivitas anti mikroba tertinggi. Aktivitas ini diduga disebabkan oleh tingginya hidropobisitas  dari  asam  laurat  dan terakumulasi  pada  membran  lipid  bilayer mikroorganisme.  Hal  ini  menyebabkan perubahan  pada  ikatan  hydrogen  dan interaksi  dipol  antara  rantai  asil.  Pada konsentrasi  asam  laurat  tinggi,  inaktivasi sel terjadi karena distrupsi struktur glikoserol phospholipid di dalam membran (Bergsson et al ., 2001).
Sedangkan monolaurin diduga bekerja  dengan  cara  membentuk  pori pada  membran  sel  akibat  interaksi  antara bagian  ampifilik  rantai  lemak  dengan membran  sel.  Dalam  konsentrasi  yang tinggi, asam lemak bebas tersebut bekerja seperti deterjen yang melarutkan membran sel dan menimbulkan kerusakan yang  lebih  besar.  Asam  lemak  bebas tersebut juga dapat mempengaruhi produksi  energi  di  dalam  membran  sel dengan  cara  merusak  rantai  transfer elekron dan fosporilasi oksidatif (Silalahi et al .,  2014;  Van  Delden  &  Iglewski,  1998). Monolaurin  juga  diduga  bekerja  dengan cara  milisiskan  sel,  mengganggu  kerja enzim,  menghambat  penyerapan  nutrisi, dan mendenaturasi protein DNA (Skrivanova et al ., 2006).
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini, VCO berpotensi digunakan sebagai bahan alternatif  untuk  pengobatan  infeksi C. albicans .  VCO  dapat  dikonsumsi  atau dioleskan  langsung  pada  daerah  infeksi yang mudah dijangkau. Penggunaan VCO dapat  melengkapi  pengobatan  kandidiasis dengan anti fungi yang telah direkomendasikan  atau  secara  bertahap mengurangi penggunaan anti fungi.
Penggunaan anti fungi yang meluas dapat menimbulkan  resistensi  jamur  dan  resiko munculnya  efek  samping  seperti  toksik terhadap berbagai jaringan tubuh.
Meskipun  demikian  potensi  anti  fungi  dari VCO  perlu  diuji  lebih  lanjut  sebelum diaplikasikan  secara  luas  terutama  untuk pengobatan infeksi  invasif.

## SIMPULAN Kesimpulan
Hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan menunjukkan bahwa VCO mampu menghambat pertumbuhan C. albicans yang diisolasi  dari  sampel  swab  vagina.  VCO pada  konsentrasi  90  %  menunjukkan  daya hambat paling tinggi dibandingkan konsentrasi lain, yaitu sebesar 24 mm.

## Saran
Efektivitas VCO terhadap jamur Candida perlu diuji secara invivo menggunakan  hewan  coba  seperti  mencit atau tikus untuk mendukung hasil uji invitro yang telah dilakukan dan untuk melihat ada tidaknya toksisitas dari VCO.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Kami mengucapkan terimakasih
kepada  Poltekkes  Kemenkes  Denpasar yang  mendanai  penelitian  ini  dengan  surat kontrak penelitian
No.
HK.00.06/P.01/3427.1/2016  dan  atas  izin menggunakan fasilitas penelitian di laboratorium  Bakteriologi  Jurusan  Analis Kesehatan. Kami juga mengucapkan terimakasih kepada Dinas Kesehatan Kabupaten Badung, khususnya pihak
Puskesmas Kuta Selatan atas izin pengambilan sampel penelitian.
DAFTAR PUSTAKA
Arendrup,  M.C.  2010.  Epidemiology  of invasive  candidiasis. Curr  Opin  Crit Care .16. 445 –452.
Bergsson, G., Arnfinnsson, J. &
Arnfinnsson, H. 2001. In Vitro Killing of Candida  albicans  by  Fatty  Acids  and Monoglycerides  In  Vitro  Killing  of Candida  albicans  by  Fatty  Acids  and Monoglycerides. Antimicrobial  agents and  chemotherapy .  45(11).  3209 – 3212.
Cernicka,  J.  &  Subik,  J.  2006.  Resistance mechanisms  in  fluconazole-resistant Candida albicans isolates from vaginal candidiasis. International  journal  of antimicrobial agents . 27(5). 403 –408. Chomchalow, N. 2011. Health and
Economic  Benefits  of  Coconut  Oil Production  Development  in  Thailand.
AU J.T. 14(3). 181 –187.
Dalle, F. et al. 2010. Cellular interactions of Candida  albicans with  human  oral epithelial cells and enterocytes.
Cellular Microbiology . 12(2). 248 –271. Van Delden, C. & Iglewski, B.H. 1998. Cell- to-cell  signaling  and Pseudomonas aeruginosa infections.
Emerging Infectious Diseases . 4(4).551 –560. Deorukhkar, S.C. 2016. Changing Trends in Epidemiology  of  Candidiasis  and  Role of  Non-Albicans. iMedPub  Journal . 1(1). 3 –4.
Guerrero,  H.T.  et  al.  2016.  Distribution  of
Candida Species and Molecular
Typing  of C  .  albicans Isolates  in  a Mexico  City  Tertiary  Care  Hospital from  2011  to  2013. Open  Journal  of Medical Microbiology. 6 .66 –79.
Jasim,  S.T.,  Flayyih,  M.T.  &  Hassan,  A.A.
2016.  Isolation  and  identification  of Candida  spp .  From  different  clinical specimens  and  study  the  virulence. World  journal  of  pharmacy  and pharmaceutical  sciences .  5(7).121 – 137.
Kett, D.H. et al. 2011. Candida bloodstream infections  in  intensive  care  units: analysis of the extended prevalence of infection  in  intensive  care  unit  study. Critical care medicine . 39(4).665 –670. Khan,  M.S.A.  et  al.  2010.  Virulence  and Pathogenicity  of  Fungal  Pathogens with  Special  Reference  to Candida
albicans . In Combating Fungal
Infections .  Aligarh:  Springer-Verlag
Berlin Heidelberg 2010. 21 –45.
Lass-Flörl,  C.  2009.  The  changing  face  of epidemiology of invasive fungal
disease in Europe. Mycoses .
52(3).197 –205.
Lieberman,  S.,  Enig,  M.G.  &  Preuss,  H.G.
2006.  A  review  of  monolaurin  and lauric  acid:  natural  virucidal  and bactericidal  agents. Alternative  &
complementary alternatives .310 –314.
Liu, Y. & Filler, S.G. 2011. Candida albicans Als3,  a  multifunctional  adhesin  and invasin. Eukaryotic  Cell .    10(2).  168 – 173.
Maidin,  N.Q.H.  &  Ahmad,  N.  2015. Protective  and  antidiabetic  effects  of virgin  coconut  oil  (VCO)  on  blood glucose  concentrations  in  alloxan induced  diabetic  rats. International Journal
of Pharmacy and Pharmaceutical  Sciences .  7(10).  57 – 60.
Marina,  A.  M.,  Cheman,  Y.B.,  Nazimah, S.A.H.  &  Amin,  I.  2009.  Chemical Properties  of  Virgin  Coconut  Oil. Journal  of  the  American  Oil  Chemists’ Society . 86(4). 301 –307.
Marina,  A.M.,  Che  Man,  Y.B.  &  Amin,  I. 2009.  Virgin  coconut  oil:  emerging functional  food  oil. Trends  in  Food Science  and  Technology .  20(10).481 – 487.
Miranda,  L.N.  et  al.  2009.  Candida colonisation as a source for candidaemia. Journal of Hospital
Infection . 72(1). 9 –16.
Ogbolu,  D.O.  et  al.  2007.  In  vitro antimicrobial  properties  of  coconut  oil on Candida species in Ibadan, Nigeria.
J Med Food . 10(2). 384 –387.
Pfaller, M.A. et al. 2011. Candida bloodstream infections: Comparison of species  distributions  and  antifungal resistance  patterns  in  community- onset  and  nosocomial  isolates  in  the SENTRY  Antimicrobial  Surveillance Program, 2008-2009. Antimicrobial Agents  and  Chemotherapy .  55(2) .561 –566.
Pfaller,  M.A.  et  al.  2007.  Multicenter comparison  of  the  VITEK  2  antifungal
susceptibility  test  with  the  CLSI  broth microdilution  reference  method  for testing  amphotericin  B,  flucytosine, and voriconazole against Candida spp. Journal of Clinical Microbiology . 45(11). 3522 –3528.
Pfaller, M.A. & Diekema, D.J. 2002. Role of Sentinel  Surveillance  of  Candidemia: Trends  in  Species  Distribution  and Antifungal Susceptibility. J. Clin. Microbiol. 40(10). 3551 –3557. Salehei, Z., Seifi, Z. & Mahmoudabadi, A.Z. 2012.  Sensitivity  of  vaginal  isolates  of Candida  to  eight  antifungal  drugs isolated from Ahvaz, Iran. Jundishapur Journal of Microbiology . 5(4).574 –577. Salehi, M. et al. 2016. The Epidemiology of
Candida Species Isolated From Urinary  Tract  Infections. Arch  Clin Infect Dis . 11(4).
Sanguinetti,  M.  &  Posteraro,  B.  2015. Antifungal  drug  resistance  among Candida  species:  mechanisms  and clinical impact . Mycoses . 58. 2 –13.
Sardi,  J.C.O.  et  al.  2013.  Candida  species:
Current  epidemiology,  pathogenicity, biofilm  formation,  natural  antifungal products  and  new  therapeutic  options. Journal of Medical Microbiology . 62(1).10 –24.
Silalahi,  J.,  Permata,  Y.M.  &  Putra,  E.D.L.
2014. Antibacterial Activity of Hydrolyzed  Virgin  Coconut  Oil. Asian
Journal of Pharmaceutical and Clinical Research . 7(2). 90 –94.
Skrivanova,  E.  et  al.  2006.  Susceptibility  of Escherichia  coli,  Salmonella  sp.  and Clostridium  perfringens  to  organic acids  and  monolaurin. Veterinarni Medicina . 51(3). 81 –88.
Tangwatcharin,  P.,  et  al.  2012.  Activity  of Virgin  Coconut  Oil  ,  Lauric  Acid  or Monolaurin in Combination With Lactic. Southeast  Asian  J  Trop  Med  Public Health . 43(4). 969 –985.
Thormar,  H.  et  al.  1999.  Hydrogels containing  monocaprin  have  potent microbicidal  activities  against  sexually transmitted  viruses  and  bacteria  in vitro. Sexually  transmitted  infections , 75(3).181 –185.
Vautier,  S.  et  al.  2015. Candida  albicans colonization  and  dissemination  from
the  murine  gastrointestinal  tract:  The influence  of  morphology  and  Th17 immunity. Cellular  Microbiology .  17(4). 445 –450.
Vediyappan,  G.  et  al.  2013.  Gymnemic acids  inhibit  hyphal  growth  and
virulence  in  Candida  albicans. PloS one . 8(9).
Zordan,  R.  &  Cormack,  B.  2012.  Adhesins in  Opportunistic  Fungal  Pathogens. Washington, DC: ASM Press.