(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2018, 1 (1), 1-4

## UJI AKTIVITAS ANTIDIABETES EKSTRAK ETANOL DAUN KEJI BELING
Stobilanthes crispa (L.) Blume PADA TIKUS PUTIH Rattus norvegicus YANG DIINDUKSI ALOKSAN
Ferdinand Palit 1* , Gideon Tiwow 1 , Wilmar Maarisit 1 , Einstein Karundeng 3 , Ferdy Karauwan 2
1 Program Studi Farmasi, Fakultas MIPA, Universitas Kristen Indonesia Tomohon
2 Program Studi Biologi, Fakultas MIPA, Universitas Kristen Indonesia Tomohon
3 Program Studi Statistika, Fakultas MIPA, Universitas Kristen Indonesia Tomohon
* Penulis Korespondensi; Email: georgepalit@gmail.com Diterima: 10 September 2018; Disetujui : 20 September 2018

## ABSTRAK
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental yang terdiri dari lima perlakuan, masing-masing perlakuan  terdiri  dari  tiga  ekor  hewan  uji  sebagai  ulangan.  Perlakuan  I  kontrol  negatif  aquadest, Perlakuan  II  kontrol  positif  metformin,  Perlakuan  III  ekstrak  etanol  daun  keji  beling  75mg/kgBB, Perlakuan  IV  ekstrak  etanol  daun  keji  beling  150mg/kgBB,  Perlakuan  V  ekstrak  etanol  daun  keji beling  300mg/kgBB.  Hasil  penelitian  menunjukkan  pemberian  ekstrak  etanol  daun  keji  beling mampu menurunkan kadar gula darah, yaitu dosis 75mg/kgBB dengan nilai rata-rata penurunan 14%, dosis  150mg/kgBB  dengan  nilai  19.33%  dan  dosis  300mg/kgBB  dengan  nilai  31.66%. Kesimpulannya adalah ekstrak etanol daun keji beling memiliki aktivitas antidiabetes.
Kata Kunci : Strobilanthes crispa (L.) Blume, antidiabetes, aloksan

## ABSTRACT
This research was an experimental research consist of five treatments, each treatment consisted of three test animals as replications. First treatment was aquadest as negative control, second treatment was  metformin  as  positive  control,  third  treatment  was  ethanol  extract  of  keji  beling  leaves 75mg/kgBB,  fourth  treatment  was  ethanol  extract  of  keji  beling  leaves  150mg/kgBB,  and  fifth treatment  was  ethanol  extract  of  keji  beling  leaves  300mg/kgBB. The  results  showed  that  ethanol extract  of  keji  beling  leaves  was  able  to  reduce  blood  sugar  levels,  in  dose  of  75mg/kgBB  with reduction average value is 14% , a dose of 150mg/kgBB and 19.33% of reduction average value and a dose of 300mg/kgBB had a reduction average value in 31.66%. The conclusion was that ethanol extract of keji beling leaves had antidiabetic activity.
Keywords : Strobilanthes crispa (L.) Blume, antidiabetic, alloxa

## PENDAHULUAN
Beberapa tanaman secara tradisional telah  digunakan  di  seluruh  dunia  untuk terapi  diabetes  mellitus.  Pengobatan  dan pencegahan diabetes mellitus sudah difokuskan pada mekanisme stres oksidatif, seperti halnya pencegahan dengan menggunakan antioksidan untuk mengantisipasi efek radikal bebas.
Flavonoid merupakan senyawa fenolik yang dapat melindungi sel β pankreas dari radikal bebas  yang  bersifat  sebagai  antioksidan (Lukacinova et  al .,  2008).  Selain  itu flavonoid  berfungsi  untuk  menghambat enzim alfa glikosidase yang berfungsi untuk pemecahan karbohidrat. Penghambatan enzim  alfa  glikosidase  ini  menyebabkan penundaan  penyerapan  glukosa  yang  pada
akhirnya  juga  akan  menurunkan  kadar glukosa darah (Fitranto et al ., 2010).
Salah  satu  tanaman  yang  dapat dimanfaatkan  untuk  mengobati  diabetes melitus adalah tanaman keji beling khususnya pada bagian daun. Tanaman keji beling  S.  crispa  merupakan  salah  satu tanaman yang tumbuh di Indonesia khususnya  di  Minahasa  Sulawesi  Utara. Sebagian  masyarakat menganggap tanaman ini  sebagai  tanaman  liar  yang  tumbuh dengan sendirinya dihalaman rumah, namun sebagiannya lagi memanfaatkan tanaman ini sebagai obat. Masyarakat yang memanfaatkan  tanaman  keji  beling  sebagai obat  dengan  cara  minum  air  rebusan  dari daun  tanaman  tersebut.  Hasil  uji  fitokima ekstrak daun keji beling positif mengandung senyawa  aktif  flavonoid,  alkaloid,  saponin, triterpenoid,  steroid  dan  tanin  (Natanael et al ., 2017).

## METODE PENELITIAN
Alat dan Bahan Alat yang digunakan yaitu  termometer,  gelas  kimia,  gelas  ukur, batang  pengaduk,  kertas  saring,  rotary evaporator, timbangan analitik, alat  injeksi, sonde  oral,  mortal,  alu,  strip  gula  darah, glucometer.  Daun  keji  beling,  CMC ( Carboxylmetyl  celulose) ,  etanol  90%, metformin  500mg,  aloksan  monohidrat, NaCl  fisiologis,  dan  aquadest  Ekstrasi Simplisia  Daun  Keji  Beling  Sampel  di maserasi  dengan  menggunakan  pelarut etanol  selama  3  hari  dan  disaring.  Filtrat yang  dihasilkan  kemudian  dievaporasi menggunakan  rotary  evaporator  sampai diperoleh ekstrak kental.

## Perlakuan Hewan Uji
Pengambilan darah dilakukan secara intravena  melalui  ujung  ekor  hewan  uji dengan  cara  membersihkan  ujung  ekor dengan  menggunakan  alkohol,  dilakukan pemijatan  terhadap  ekor  tikus  agar  darah keluar. Kadar glukosa darah diukur dengan alat  glukometer  menggunakan  strip  gula darah.  Layar  monitor  akan  hidup  ketika dimasukkan  strip  gula  darah  dan  akan
muncul  tanda  siap  untuk  diteteskan  darah, caranya  dengan  menyentuh  ujung  strip  ke tetesan  darah  maka  darah  akan  masuk kedalam area uji. Ketika darah sudah terisi, pengukuran diperoleh selama 11 detik (Otari et al ., 2013). Induksi diabetes menggunakan aloksan  secara  intraperitoneal  dengan  dosis 90mg/kgBB.
Induksi  aloksan  bertujuan  untuk meningkatkan  kadar  gula  darah.  Setelah pemberian  aloksan  dilakukan  pemeriksaan kembali  kadar  gula  darah  pada  hari  ke  3 hingga  diketahui  bahwa  hewan  uji  berada pada  kondisi  diabetes  Hewan  uji  diberikan perlakuan selama 7 hari Perlakuan I : kontrol negatif  aquadest.  Perlakuan  II  :  kontrol positif  metformin.  Perlakuan  III  :  ekstrak etanol  daun  keji  beling  75mg/kgBB. Perlakuan  IV  :  ekstrak  etanol  daun  keji beling 150mg/kgBB. Perlakuan V :  ekstrak etanol  daun  keji  beling  300mg/kgBB.  uji diberikan peroral dengan sonde oral. Semua data pengukuran kadar gula hewan uji yang diperoleh didata dan dianalisis menggunakan  uji  statistik.  Pengamatan kadar  Gula  Darah  Kadar  gula  darah  tikus normal  yaitu  70-90  mg/dl  dan  tikus dikatakan  diabetes  ketika  kadar  gula  darah tikus  melebihi  115  mg/dl  (Panjuatiningrum et al . 2009)
Pengamatan  pertama  kadar  gula darah dilakukan setelah hewan uji dipuasakan  selama  12  jam  atau  sebelum diberikan  aloksan,  dan  pengamatan  kedua dilakukan  setelah  penyuntikan  aloksan, Analisis  Data  Analisis  data  secara  statistik yaitu menggunakan uji ANOVA (Analysis of variant) dengan  tingkat  kepercayaan  95% (α=0,05).  Jika  ada  perbedaan  yang signifikan maka dilanjutkan dengan uji LSD (Least  Significant  Different) untuk  melihat perlakuan mana yang memberikan efek efek yang berbeda.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Uji  aktivitas  antidiabetes  dari  daun keji  beling  S.  crispa  pada  tikus  putih  yang diinduksi  aloksan  ini  dilakukan  selama  10 hari.  Selama  waktu  10  hari  tersebut  semua
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2018, 1 (1), 1-4
hewan  uji  memperoleh  perlakuan  sesuai dengan perlakuan uji masing-masing. Hewan uji yang digunakan yaitu tikus putih dengan  berat badan 190  - 210 g dan dalam keadaan  sehat  (tidak  diabetes).  Semua hewan  uji  yang  digunakan,  ditempatkan dalam  kandang  secara  individual  dengan kondisi  temperatur  ruangan,  dan  selama penelitian  kebutuhan  pakan  dan  air  minum hewan uji dijaga dalam  jumlah  yang cukup dengan  jumlah  yang  sama,  serta  dijaga kebersihannya. Untuk mendapatkan kondisi diabetes semua hewan uji diinduksi dengan aloksan  monohidrat,  semua  hewan  uji dipuasakan  terlebih  dahulu  selama  12  jam dengan  tetap  diberikan  minum.  Larutan aloksan  dibuat  dalam  keadaan  baru  ketika akan  menginduksi  dikarenkan  aloksan monohidrat  hanya  stabil  selama  1,5  menit ketika  berada  dalam  air  pada  suhu  37˚c.
Kadar  gula  darah  diperiksa  setelah  3  hari proses  induksi  (Lenzen,  2008).  Aloksan monohidrat diinjeksikan secara intraperitonial  pada  tikus  dengan  dosis  90 mg/kg  BB.  Kadar  gula  darah  diperiksa setelah  3  hari  proses  induksi.  Kadar  gula darah  diatas  115  mg/dL  adalah  yang digunakan  dalam  penelitian.  Kadar  gula darah normal tikus 70-90 mg/dL (Panjuantiningrum, 2009).
Kadar gula darah diperiksa menggunakan glukometer (GlucoDR) dengan cara melukai atau memotong sedikit ujung ekor tikus, kemudian darah diteteskan pada  alat  glukometer  kemudian  hasil  akan diperoleh  selama  11  detik.  Pengukuran kadar  gula  darah  dilakukan  pada  interval hari ke 0 (GDP1), hari ke 3 (GDP2), dan hari ke 7 (GDP3). Ekstrak daun keji beling yang diberikan  dalam  bentuk  larutan  dengan
pelarut aquades sebanyak 1 mL. Larutan uji diberikan  secara  oral  dengan  alat  bantu sonde oral. Pengamatan gula darah dilakukan selama 10 hari. Hari ke-0 sebagai kadar  gula  darah  puasa  (GDP1),  Hari  ke-3 setelah diinduksi aloksan (GDP2), dan Hari ke-7 setelah pemberian sediaan uji (GDP3). Kadar gula darah hari ke-3 setelah diinduksi aloksan  dijadikan  sebagai  kadar  gula  darah awal dalam penelitian.
Dari hasil pengamatan dan perlakuan yang  diberikan  pada  hewan  uji  selama  10 hari,  didapatkan  hasil  berupa  penurunan kadar  gula  darah  tikus  putih  akibat pemberian  perlakuan  sediian  uji.  Perlakuan kontrol  negatif  yang  diberikan  aquadest mengalami  kenaikan  kadar  gula  darah. Kadar  gula  darah  hingga  -18%  rata-  rata penurunan.  Berikutnya  adalah  perlakuan kontrol  positif  yang  mendapatkan  suspensi Metformin  dengan  dosis  9  mg/kg  BB mengalami  penurunan  kadar  gula  darah dengan  nilai  rata-  rata  sebesar  37%. Selanjutnya  perlakuan  dosis  I  yakni  75 mg/kg BB mengalami penurunan kadar gula darah dengan nilai rata-rata 14%. Perlakuan dosis  II  yakni  150  mg/kg  BB  mengalami penurunan  kadar  gula  darah  dengan  nilai rata- rata sebesar 19.3%. Perlakuan dosis III yakni  dosis  300  mg/kg  BB  mengalami penurunan  kadar  gula  darah  dengan  nilai rata-rata  sebesar  31.7%  penurunan  yang hampir memberikan efek yang sama dengan kontrol  positif.  Diantara  ketiga  perlakuan dosis, dosis 300 mg/kg BB merupakan dosis yang  paling  signifikan  dalam  penurunan kadar  gula  darah.  Untuk  menguji  aktivitas antidiabetes  data  pada  Tabel  1  dianalisa dengan uji statistik.
Tabel 1. Persentase Penurunan Kadar Gula Darah Ulangan (%Penurunan) Perlakuan Kontrol
Ulangan Perlakuan (%Penurunan) Kontrol (-) Kontrol (+) 75 mg/kg BB 150 mg/kg BB 300 mg/kg BB 1 -7 % 33 % 20 % 8 % 34 % 2 -23 % 35 % 12 % 22 % 23 % 3 -26 % 43 % 10 % 28 % 38 % Rata-rata (%) -18 % 37 % 14 % 19.3 % 31.7 %
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2018, 1 (1), 1-4
Data persetase penurunan gula darah tikus dari masing-masing perlakuan dihitung menggunakan  rumus  :  kadar  gula  darah setelah diinduksi aloksan (GDP2) dikurangi kadar  gula  setelah  pemberian  sediian  uji (GDP3), dan dibagi dengan kadar gula darah setelah diinduksi aloksan (GDP2) dan di kali 100%. Kemudian dilakukan analisis statistik menggunakan  analisis  varians  dengan tingkat  kepercayaan  95%  yang  kemudian dilanjutkan  dengan  uji  Tuckey.  Dari  hasil analisis  varians  terlihat  bahwa  nilai  sig  = 0,000  <  α  =  0,05.  Ini  menyatakan  bahwa pemberian  perlakuan  memiliki  aktivitas untuk  penurunan  gula  darah  tikus  putih. Karena  nilai  signifikan  maka  dilanjutkan dengan  uji  perbandingan  untuk  melihat perbedaan  efek  antar  perlakuan  terhadap penurunan gula darah tikus putih. Dari hasil uji  perbandingan  dapat  dikatakan  bahwa semakin  besar  Dosis  dari  Ekstrak  Etanol Daun Keji Beling persentase penurunan gula darah tikus putih makin baik, dan dari ketiga dosis  yang  paling  efektif  adalah  300 mg/kgBB  karena memiliki  presentase penurunan  31,7%  mendekati  presentase penurunan kontrol (+) sebesar 37%.

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  daun  keji  beling Strobilanthes  crispa  (L.)  Blume  memiliki aktivitas antidibates pada tikus putih (Rattus norvegicus)  yang  diinduksi  aloksan.  Dosis 300 mg/kgBB memiliki aktivitas antidiabetes  tertinggi  dengan  persentase penurunan kadar gula darah 31.7%.

## DAFTAR PUSTAKA
Lukacinova,  A.,  J.  Mojziz.,  R.  Benacka.,  J.
Keller.,  T.  Maguth.,  P.  Kurila.,  L. Vasko., O. Racz & F. Nistiar. 2008. Preventive Effects of Flavonoids on Alloxan-Induced Diabetes Mellitus in Rats. Actavet Brno. 77: 175-182. Fitranto, A., Priyo, S. 2010. Regenerasi Sel Pulau Langerhans Pada Tikus Putih (Rattus  norvegicus)  Diabetes  yang Diberi  Rebusan  Daging  Mahkota
Dewa (Phaleria macrocarp (scheff.)Boerl.). Medical Faculty of Jendral Soedirman University.
Purwokerto.
Natanael  R,  Aditya  Y,  widya  A.  L.  2017. Standarisasi  Parameter  Spesifik dan  Uji  Aktivitas  Antikanker terhadap  Sel  Kanker  Payudara T47D  dari  Ekstrak  Etanol  Daun Keji  Beling  (Strobilanthes  crispa (L.) Blume). Pharmacon. 6: 181 Kealey,  K.S.,  M.  Rodney,  J.F.Leo,  F.John,
Margaret,  and  Giovani.  2004. Cocoa extract prepared from cocoa solids having high cocoa polyphenol  content.  United  States
Patent. hal 1-7. Otari, A., 2013. Uji Efek Antihiperglikimia Ekstrak  n-heksan  dari  Lumut  Hati
(Mastighora dicladus) dengan Metode  Induksi  Aloksan.  Skripsi. Jakarta  :  Fakultas  Kedokteran  dan Ilmu  Kesehatan  Universitas  Islam Negeri Syarif Hidayatullah.
Panjuatiningrum, F., 2009. Pengaruh Pemberian  Buah  Naga  Merah (Hylocereus  polyrhizus)  Terhadap Kadar  Glukosa  Darah  Tikus  Putih yang  Diinduksi  Aloksan,  Fakultas Kedokteran,  Universitas  Sebelas Maret, Surakarta