## RESEARCH ARTICLE
Antibacterial Activities of Seaweed ( Eucheuma cottonii ) Extract Against Escherichia coli Bacteria (Aktivitas Antibakteri Ekstrak Rumput Laut ( Eucheuma cottonii )
Terhadap Bakteri Escherichia Coli )
Sukmawati *)
Fakultas Perikanan, Universitas Muhammadiyah Sorong, Papua Barat Jl. Pendidikan, No. 27, Remu Utara, Malaingkedi, Sorong Utara, Kota Sorong, Papua 98416

## ABSTRACT
Indonesia is a maritime country that has more than 70% of its territory dominated by oceans and is a marine area that has abundant natural resources, one of which is Eucheuma cottonii . The content of compounds by E. cottonii has many benefits, the compound content  of E.cottonii is  a  phenolic  compound  (flavonoids).  Flavonoids  found  in  seaweed E.  cottonii are  secondary  metabolite compounds that can produce antibacterial activity. The purpose of this study was to determine the antibacterial activity of seaweed extract ( E. cottonii ) against Escherichia coli bacteria. The method that has been used in this research is descriptive method, including extraction, maceration, antibacterial activity test. The results of this study stated that the antibacterial activity of E. cottonii seaweed extract was able to inhibit the growth of E. coli bacteria. The highest antibacterial activity was found at a concentration of 50% ppm dry extract solution with a methanol solvent of 3.3 mm while the lowest antibacterial activity was found at a concentration of 5% ppm wet extract solution with a methanol solvent whose inhibitory activity value was 0.1 mm. Furthermore, the antibacterial activity test for positive control showed a strong inhibitory value of 7.8 mm, while the negative control did not indicate any inhibitory value against E. coli bacteria .
Indonesia adalah negara maritim yang memiliki lebih dari 70% wilayahnya didominasi oleh lautan dan merupakan kawasan bahari yang memiliki sumber daya alam yang melimpah, salah satunya adalah Eucheuma cottonii . Kandungan senyawa yang dimiliki oleh E. cottonii memiliki banyak manfaat, kandungan senyawa pada E. cottonii adalah senyawa fenolik (flavonoid). Flavonoid yang ditemukan dalam rumput laut E. cottonii adalah senyawa metabolit sekunder yang dapat menghasilkan aktivitas antibakteri. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui aktivitas antibakteri dari ekstrak rumput laut ( E. cottonii ) terhadap bakteri Escherichia coli. Metode yang telah  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  metode  deskriptif,  termasuk  ekstraksi,  maserasi,  tes  aktivitas  antibakteri.  Hasil dari penelitian ini dinyatakan bahwa aktivitas antibakteri ekstrak rumput laut E. cottonii mampu menghambat pertumbuhan bakteri E. coli . Aktivitas  antibakteri  tertinggi  ditemukan  pada  konsentrasi  larutan  ekstrak  kering  50%  ppm  dengan  pelarut  metanol  3,3  mm sedangkan aktivitas antibakteri terendah ditemukan pada konsentrasi larutan ekstrak basah 5% ppm dengan pelarut metanol yang nilai aktivitas penghambatannya 0,1 mm. Selanjutnya pada uji aktivitas antibakteri untuk kontrol positif menunjukkan nilai daya hambat yang kuat sebesar 7.8 mm, sedangkan pada kontrol negatif tidak menunjukkan adanya nilai daya hambat terhadap bakteri E.coli.
Keywords: Antibacterial, Eucheuma cottonii extract, Escherichia coli .

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan negara maritim dengan lebih dari 70% permukaan buminya didominasi oleh lautan. Bahan alam bahari banyak dimanfaatkan dalam bidang pertanian  (pangan),  industri,  kesehatan,  dan
lingkungan yang umumnya bersumber dari organisme hayati. Banyak senyawa aktif yang diisolasi dari bahan alam  bahari  seringkali  dapat  menimbulkan  efek signifikan terhadap organisme lain dalam masyarakat organisme  bahari.  Senyawa  aktif  tersebut  dapat berupa bioaktif atau pun biotoksin [1].
*)Corresponding author: Sukmawati E-mail: sukmawati.sw91@gmail.com
Kandungan  senyawa  yang  dimiliki  Eucheuma cottonii antara lain adalah senyawa fenolik (flavonoid) dan  senyawa  steroid/triterpenoid.  Flavonoid  ialah senyawa yang mengandung inti aromatic khusus dan secara luas tersebar pada tanaman [2]. Flavonoid yang terdapat  pada  rumput  laut E.  cottonii merupakan senyawa  metabolit  sekunder  yang  memiliki kemampuan dalam menghambat aktivitas antibakteri [3].  Antibakteri  merupakan  zat  yang  berfungsi membunuh  atau  menekan  pertumbuhan  dan reproduksi  bakteri    [4].  Berdasarkan  aktivitas  zat antibakteri  dapat bersifat  bakterisidal  (membunuh bakteri), dan bakteriostatik (menghambat pertumbuhan bakteri).
Senyawa  flavonoid  tersebut  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri  patogen  penyebab  keracunan dan penyakit pada manusia, seperti bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus . Beberapa  bakteri  seperti Escherichia  coli , Vibrio cholera,  Salmonella  typhosa ,  dan Staphylococcus  aureus merupakan bakteri indikator pencemaran di laut yang dapat  menimbulkan  berbagai  macam  penyakit  bagi makhluk  hidup.  Bakteri Escherichia coli merupakan bakteri normal yang terdapat pada usus yang seringkali menyebabkan infeksi [5].
E. coli merupakan salah-satu bakeri indikator yang sering  digunakan  dalam  uji  mikroba.  Aktivitas antibakteri  dapat  diketahui    dengan  melakukan  uji zona  hambat  melalui  proses  ekstraksi.  Ekstraksi merupakan  proses  yang  secara  selektif  memisahkan beberapa  senyawa  bioaktif  dengan  bantuan  pelarut. Salah  satu  faktor  penting  yang  menentukan keberhasilan  ekstraksi  dalam  menggunakan  pelarut ialah penggunaan jenis pelarut yang digunakan. Jenis pelarut  akan  mempengaruhi  jenis  senyawa  bioaktif yang  diekstrak  sebab  setiap  jenis  pelarut  memiliki efisiensi  dan  selektifitas  yang  berbeda  dalam melarutkan  komponen  bioaktif.  Selain  itu  perlu memperhatikan  titik  didih,  sifat  toksik, mudah tidaknya terbakar dan sifat korosif terhadap peralatan ekstraksi. Proses perpindahan komponen bioaktif dari bahan yang diekstrak ke pelarut melalui tahap difusi.
Proses difusi merupakan perubahan secara spontan dan tidak dapat kembali lagi dari fase yang memiliki konsentrasi  lebih  tinggi  menuju  konsentrasi  lebih rendah [6]. Menurut Sartika & Purwiyanto [7] jika zona hambat  yang  terbentuk  pada  uji  difusi  berukuran kurang dari 5 mm, maka aktivitas penghambatannya dikategorikan  lemah,  zona  hambat  berukuran  5-10
mm  dikategorikan  sedang,  10-19  mm  dikategorikan kuat dan 20 mm atau lebih dikategorikan sangat kuat. Berdasarkan  dari  hasil  studi  pustaka  maka  perlu dilakukan pengujian ekstrak rumput laut yang berasal dari  perairan  kepulauan  Sorong,  dengan  tujuan penelitian ialah untuk mengetahui aktivitas anti bakteri ekstrak rumput laut ( E.cottonii ) terhadap bakteri E. coli .

## METODE PENELITIAN
Metode  penelitian  yang  digunakan  merupakan penelitian deskriptif dengan melihat daya aktivitas anti bakteri  ekstrak  rumput laut  dengan  mengukur  zona hambat  yang  terbentuk  pada  cawan  sampel. Pengambilan  sampel  rumput  laut  dilakukan  dengan menggunakan metode sampling purposive.
Rumput  laut  yang  diperoleh  dari  perairan  kota Sorong  dikumpulkan  dalam  plastik  sampel.  Rumput laut dibersihkan dari pengotor yang melekat kemudian dicuci dengan air mengalir. Rumput laut dikeringkan dengan  cara  diangin–anginkan  namun  tidak  boleh langsung  terkena  cahaya  matahari  karena  akan mempengaruhi  kandungan  senyawa  yang  terdapat dalam rumput laut.
Ekstraksi  senyawa  metabolit  sekunder  dilakukan dengan  cara  ekstraksi  maserasi  dengan  pelarut methanol  dan  akuades.  Prosedur  ekstraksi  mengacu pada  metode  Deshusses, et  al .,  [8].  Larutan  ekstrak rumput  laut  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini digunakan    konsentrasi  50%  ppm,  45%  ppm,  40% ppm, 35% ppm, 30% ppm, 25% ppm, 20% ppm, 15% ppm,  10%  ppm  dan  5%  ppm.  Jenis  pelarut  yang digunakan ialah metanol 90%.
Perlakuan dalam penelitian uji aktivitas antibakteri antara lain uji kontrol positif, uji kontrol negatif dan uji aktivitas antibakteri eksrak rumput laut E. cottonii . Uji  kontrol  positif   dilakukan  dengan  menggunakan antibiotik  ampisilin.  Uji  kontrol  negatif  dilakukan dengan  menggunakan  pelarut  akuades.  Uji  ekstrak rumput  laut  kering  dan  ekstrak  rumput  laut  basah masing-masing menggunakan pelarut methanol 90%. Metode yang digunakan pada uji ini  adalah metode sumuran.
Analisis  data  dihitung,  dengan  pengukuran  zona bening yang terbentuk pada media isolate bakteri uji yang  telah  didifusikan  dengan  antibakteri ekstrak rumput laut E. cottonii, dengan menggunakan rumus berikut:

## Indeks Zona hambat :
Keterangan : a: Diameter Zona bening b: Diameter sumuran               [9].

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil penggunaan ekstrak E. cottonii pada metode sumuran  dengan  menggunakan  methanol  sebagai pelarut  menunjukkan  adanya  aktivitas  antibakteri terhadap E. coli (Tabel 1 dan Gambar 1-Gambar 10). Tabel 1. Hasil pengamatan aktivitas antibakteri ekstrak rumput laut E. cottonii terhadap bakteri E. coli  dengan  penggunaan  konsentrasi  yang berbeda
Jenis Ekstrak* (mm) Kont rol + Kon trol - Konsentrasi (%) ppm EKM EBM EKA EBA 50 3.3 3.0 0 0 7.8 0 45 2.5 2.5 0 0 40 2.5 2.0 0 0 35 2.5 2.0 0 0 30 1.4 1.2 0 0 25 1.4 1.2 0 0 20 1.4 1.2 0 0 15 1.4 1.0 0 0 10 1.0 0.6 0 0 5 0.8 0.1 0 0
*Keterangan: EKM : Ekstrak kering Eucheuma cottonii +methanol 90 % EBM : Ekstrak  Basah Eucheuma cottonii +metanol 90 % EKA : Ekstrak  Kering Eucheuma cottonii +Akuades EBA :Ekstrak basah Eucheuma cottonii +Akuades K+ : Ampisilin K- : Akuades
Gambar  1.  (Aktivitas  antibakteri Eucheuma  cottonii terhadap bakteri E. coli pada konsentrasi 50%  ppm  (1).  EKM;  (2).  EBM;  (3). EKA; (4). EBA)
Gambar  2.  (Aktivitas  antibakteri Eucheuma  cottonii terhadap bakteri E. coli pada konsentrasi 45%  ppm  (1).  EKM;  (2).  EBM;  (3). EKA; (4). EBA)
Gambar  3.  (Aktivitas  antibakteri Eucheuma  cottonii terhadap bakteri E. coli pada konsentrasi 40%  ppm  (1).  EKM;  (2).  EBM;  (3). EKA; (4). EBA
Gambar  4.  (Aktivitas  antibakteri Eucheuma  cottonii terhadap bakteri E. coli pada konsentrasi
35%  ppm  (1).  EKM;  (2).  EBM;  (3). EKA; (4). EBA 1 2 3 4
1 2 3 4 1 3 2 4 1 2 3 4
Gambar  5. (Aktivitas  antibakteri  Eucheuma  cottonii terhadap bakteri E. coli pada konsentrasi 30%  ppm  (1).  EKM;  (2).  EBM;  (3). EKA; (4). EBA
Gambar  6.  (Aktivitas  antibakteri Eucheuma  cottonii terhadap bakteri E. coli pada konsentrasi 25%  ppm (1).  EKM;  (2).  EBM;  (3). EKA; (4). EBA
Gambar  7.  (Aktivitas  antibakteri Eucheuma  cottonii terhadap bakteri E. coli pada konsentrasi 20%  ppm  (1).  EKM;  (2).  EBM;  (3). EKA; (4). EBA
Gambar  8.  (Aktivitas  antibakteri Eucheuma  cottonii terhadap bakteri E. coli pada konsentrasi 15%  ppm  (1).  EKM;  (2).  EBM;  (3). EKA; (4). EBA
Gambar  9.  (Aktivitas  antibakteri  Eucheuma  cottonii terhadap  bakteri  E.  coli  pada konsentrasi 15%  ppm  (1).  EKM;  (2). EBM; (3). EKA; (4). EBA
Hasil ekstrak dari ke 10 konsentrasi ekstrak sampel berbeda  yang  diuji terhadap  bakteri E.  coli menunjukkan  bahwa  terdapat  aktivitas  antibakteri dengan  kisaran  nilai  untuk  ekstrak  kering  methanol antara 3.3 mm – 0,8 mm. Nilai tertinggi terdapat pada sampel dengan konsentrasi 50% ppm larutan ekstrak Eucheuma  cottonii dengan nilai  daya  hambat  hambat sebesar  3.3  mm  dan  terendah  pada konsentrasi  5% ppm  larutan  ekstrak Eucheuma  cottonii dengan  nilai hambat 0.8 mm. Sedangkan nilai hambat ekstrak basah rumput laut terhadap E. coli pada konsentrasi larutan ekstrak 50% ppm dengan nilai hambat paling tinggi sebesar 3.0 mm dan nilai hambat terendah 0.1 mm.
1 3 4 2 4 1 3 2 2 3 1 4 3 2 1 4 1 4 2 3
Sukmawati et al, Antibacterial Activities of Seaweed …
Gambar 10. (Aktivitas antibakteri terhadap bakteri E. coli (1). Kontrol positif  (Ampisilin); (2). Kontrol negative (Akuades)
Penggunaan ekstrak, baik larutan ekstrak kering E. cottonii maupun  larutan  ekstrak  basah E.  cottonii menunjukkan  bahwa  nilai  hambat  terhadap E.  coli berbanding  lurus  dengan  jumlah  konsentrasi  larutan ekstrak  yang  digunakan,  yang  mana  semakin  tinggi nilai  konsentrasi  maka  nilai  hambat  terhadap E.  coli juga semakin besar. Dalam penelitian ini nilai hambat larutan ekstrak E.cottonii masih tergolong lemah karena nilai  hambatnya  masih  di  bawah  5  mm  [7].  Selain daripada itu untuk menentukan nilai hambat yang baik dan efektif, maka nilai hambat dan konsentrasi larutan ekstrak  yang  digunakan  harus  berbanding  terbalik, yang artinya semakin tinggi nilai daya hambat terhadap bakteri  uji  maka  yang  diperlukan  semakin  kecil  nilai konsentrasi larutan ekstrak yang digunakan.
Sedangkan nilai hambat ekstrak E. cottonii dengan penggunaan  pelarut  akuades  tidak  menunjukkan adanya kemampuan dalam menghambat bakteri E. coli . Berbanding terbalik dengan larutan ekstrak rumput laut  yang  menggunakan  pelarut  metanol.  Menurut Septiani  &  Asnani  [10]  pelarut  metanol  merupakan pelarut  yang  memiliki  sifat  polar,  pelarut  methanol tersebut berfungsi  untuk  mereduksi  senyawa – senyawa fitokimia yang bersifat polar seperti terpenoid yang  memiliki  kemampuan  sebagai  antibakteri. Menurut Dolorossa [3], E. cottonii memiliki kandungan senyawa metabolit sekunder berupa senyawa flavonoid yang  memiliki  kemampuan  dalam  membentuk senyawa kompleks dengan protein sel bakteri melalui ikatan  hidrogen,  sehingga  struktur  dinding  sel  dan membran  sitoplasma  bakteri  yang  mengandung protein  menjadi  tidak  stabil.  Selanjutnya  protein  sel bakteri  menjadi  kehilangan  keseimbangan  dalam proses  metabolismenya.  Sehingga  mengakibatkan fungsi  permeabilitas  sel  pada  bakteri  terganggu kemudian  sel  bakteri  akan  mengalami  lisis  yang mengakibatkan pada kematian sel bakteri [11].
Aktivitas  antibakteri E.  cottonii tergolong  masih rendah, baik ekstrak kering maupun ekstrak basah dari E.  cottonii ,  hal  tersebut  dapat  dipengaruhi  karena penggunaan  ekstrak  masih  berupa  ekstrak  kasar, teknik pembuatan ekstrak, maupun bakteri uji.

## KESIMPULAN
Aktivitas antibakteri ekstrak rumput laut E. cottonii terhadap  bakteri E.  coli ,  dapat  disimpulkan  bahwa aktivitas  antibakteri  ekstrak  rumput  laut E.  cottonii mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri E.  coli . aktivitas  antibakteri  yang  tertinggi  terdapat  pada konsentrasi 50% ppm larutan Ekstrak kering dengan pelarut  metanol  yaitu  sebesar 3.3  mm  sedangkan aktivitas  antibakteri  yang  terendah  terdapat  pada konsentrasi  5%  ppm  larutan  ekstrak    basah  dengan pelarut  methanol  yang  nilai  aktivitas  hambatnya  0.1 mm.  Selanjutnya  pada  uji  aktivitas  antibakteri  untuk kontrol positif menunjukkan nilai daya hambat yang kuat sebesar 7.8 mm, sedangkan pada kontrol negatif nilai daya hambatnya 0 mm terhadap bakteri E.coli .

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Duan, F., Yu, Y., Liu, Z., Tian, L., & Mou, H. (2016). An  effective  method  for  the  preparation  of carrageenan oligosaccharides directly from Eucheuma cottonii  using  cellulase  and  recombinant κ- carrageenase. Algal research , 15 , 93-99.
[2] Patel,  V.  R.,  Patel,  P.  R.,  &  Kajal,  S.  S.  (2010). Antioxidant activity of  some selected medicinal plants in  western  region  of   India. Advances  in  Biological research , 4 (1), 23-26.
[3] Dolorosa,  T.  M.,  Nurjanah,  P.  S.,  Effionora,  A.,  & Taufik, H. (2017). Kandungan senyawa bioaktif bubur rumput laut Sargassum plagyophyllum dan Eucheuma cottonii sebagai bahan baku krim pencerah kulit. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia , 20 (3), 633-644.
[4] Angraini, E., Angraeni, D. N., Umami, S. S., Sumiati, E.,  &  Taufiqurokhman,  T.  (2019,  February). Antagonism  of   Lentinus  Cladopus  Lc4  Extract, Trichoderma  sp.  Jpa  Extract  on  Bacillus  sp., Xanthomonas  sp.  and  E.  Coli.  In Journal  of   Physics: Conference  Series (Vol.  1155,  No.  1,  p.  012057).  IOP Publishing.
[5] Endriani,  R.,  Andrini,  F.,  &  Alfina,  D.  (2010).  Pola resistensi  bakteri  penyebab  infeksi  saluran  kemih (ISK) terhadap antibakteri di pekanbaru. Jurnal Natur Indonesia , 12(02), 130-135.
1 4 2 3
Sukmawati et al, Antibacterial Activities of Seaweed …
[6] Nurainy,  F.,  Rizal,  S.,  &  Yudiantoro,  Y.  (2012). Pengaruh  Konsentrasi  Kitosan  Terhadap  Aktivitas Antibakteri  Dengan  Metode  Difusi  Agar (Sumur. Jurnal  Teknologi  &  Industri  Hasil Pertanian , 13(2), 117-125.
[7] Sartika,  R.,  &  Purwiyanto,  A.  I.  (2013).  Aktivitas antibakteri  ekstrak  rumput  laut  Eucheuma  cottoni terhadap  bakteri  Escherichia  coli,  Staphylococcus aureus, Vibrio cholera dan Salmonella typhosa. Maspari Journal , 5 (2), 98-103.
[8] Deshusses, J. M., Burgess, J. A., Scherl, A., Wenger, Y., Walter,  N.,  Converset,  V.,  &  Sanchez,  J.  C.  (2003). Exploitation of  specific properties of  trifluoroethanol for  extraction  and  separation  of   membrane proteins. Proteomics:  International  Edition , 3 (8),  1418- 1424.
[9] Sukmawati,  S.  (2018).  Isolasi  Bakteri  Selulolitik  dari Limbah Kulit Pisang. Biotropic: The Journal of  Tropical Biology , 2 (1), 46-52.
[10] Septiana,  A.  T.,  &  Asnani,  A.  (2012).  Kajian  sifat fisikokimia  ekstrak  rumput  laut  coklat  Sargassum duplicatum  menggunakan  berbagai  pelarut  dan metode  ekstraksi. Agrointek:  Jurnal  Teknologi  Industri Pertanian , 6 (1), 22-28.
[11] Martini, N. D., Katerere, D. R. P., & Eloff, J. N. (2004). Biological activity of  five antibacterial flavonoids from Combretum  erythrophyllum  (Combretaceae). Journal of  ethnopharmacology , 93 (2-3), 207-212.