## UJI AKTIFITAS ANALGETIK KOMBINASI EKSTRAK BUAH BELIMBING
WULUH ( Averrhoa bilimbi L.) DAN DAUN SELEDRI ( Apium graveolens L.) TERHADAP MENCIT PUTIH JANTAN ( Mus musculus ) DENGAN METODE GELIAT
Rizki Febriyanti 1 , Anny Victor Purba 2 , Partomuan Simanjuntak 3 1.2) Program Magister Farmasi, Universitas Pancasila, Jl. Sreng-sreng sawah, Jagakarsa, JakSel, 12640
3) Puslit Bioteknologi – LIPI, Jl. Raya Bogor km 46 Cibinong, 16911 Email : rf_tegal@yahoo.co.id

## Abstrak
Rasa sakit merupakan gejala awal dari munculnya suatu penyakit sering terjadi di masyarakat dan pernah dialami oleh hampir semua orang. Adanya efek samping  berbahaya  yang  ditimbulkan oleh obat kimia,  akhir-akhir  ini  penggunaan  bahan  alam  sebagai  obat  cenderung  meningkat.  Seledri  ( Apium graveolens L.)  dan  Belimbing  wuluh  ( Averrhoa  bilimbi L.)  memiliki  kandungan  yang  sama  yaitu flavonoid yang memiliki aktifitas sebagai analgetik. Flavonoid  di dalam kedua tanaman tersebut diduga dapat berfungsi sebagai analgetik karena dapat menghambat sintesis prostaglandin yang mengakibatkan tidak  terjadinya  pelepasan  mediator-mediator  nyeri.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui aktivitas  analgetik  pada  ekstrak  buah  belimbing  wuluh,  ekstrak  daun  seledri,  dan  kombinasi  keduanya. Belimbing wuluh dan seledri dimaserasi  menggunakan etanol 70%. Pengujian aktivitas analgetik  kedua ekstrak dan kombinasinya menggunakan dosis 500 mg/kg BB. Jika berat mencit rata-rata 20 g BB maka variasi dosisnya 10 mg/20 g BB. Untuk kombinasi kedua ekstrak dibuat perbandingan ekstrak belimbing wuluh : ekstrak seledri 1:3, 2:2, dan 1:3. Kelompok pertama diberi CMC Na 0,5% sebagai kontrol negatif, kelompok kedua diberi parasetamol  1%  sebagai  kontrol positif, kelompok selanjutnya  diberi  larutan uji ekstrak  sebagai  kontrol  ekstrak.  Setelah  30  menit,  diberikan  larutan  penginduksi  asam  asetat  3% kemudian  mengamati  geliat  mencit.  Hasil  menunjukkan  bahwa  kombinasi  ekstrak  belimbing  wuluh  : ekstrak  seledri  1:3  memiliki  aktivitas  analgetik  yang  paling  baik  dibanding  aktivitas  ekstrak  tunggal maupun kombinasi yang lainnya.
Kata Kunci : ekstrak belimbing wuluh, Averrhoa bilimbi L., ekstrak daun seledri, Apium graveolens L., aktivitas analgetik .
1. Pendahuluan
Kita  sering  mendengar  tentang  ramuan tradisional, namun bisa jadi kita lebih sering menggunakan  obat  kimia.  Hal  ini  tidak mengherankan  karena  obat  kimia  telah sangat  umum  digunakan  dalam  proses penyembuhan  penyakit.  Berbeda  dengan ramuan tradisional yang merupakan ramuan bersifat  konstruktif,  sehingga  sangat  cocok untuk  penyembuhan  dalam  jangka  waktu panjang. [1] Dewasa ini, penelitian dan pengembangan  tumbuhan  obat  sangat berkembang  pesat.  Terutama  pada  segi farmakologi maupun
fitokimianya berdasarkan  indikasi  tumbuhan  obat  yang telah  digunakan  oleh  sebagian  masyarakat dengan khasiat yang teruji secara empiris. [2] Seledri  berasal  dari  daerah  subtropik Eropa  dan  Asia,  dan  merupakan  tanaman dataran tinggi pada ketinggian diatas 900 m
diatas  permukaan  laut.  Herba  seledri mengandung  flavonoid,  saponin,  tanin  1%, flavo-glukosida (apiin), apigenin. [2]
Belimbing wuluh merupakan salah satu buah  yang  cukup  terkenal  di  Indonesia. Selain  sebagai  bahan  masakan,  belimbing wuluh juga dapat membantu menyembuhkan  berbagai  macam  penyakit
[1]. Kandungan kimia buah belimbing wuluh mengandung  flavonoid,  steroid,  glikosida, vitamin A, B1 dan C. [3]
Analgesik  adalah  kelompok  obat  yang memiliki aktivitas menekan atau mengurangi  rasa  nyeri.  Efek  ini  dapat dicapai dengan berbagai cara yaitu menekan kepekaan reseptor nyeri terhadap
rangsangan  mekanik,  termik,  listrik  atau kimiawi  dipusat  atau  perifer  atau  dengan cara menghambat pembentukan prostaglandin  sebagai  mediator  sensasi nyeri. [4]

## 2. Metodologi Penelitian
Peralatan  yang  digunakan  adalah timbangan  analitik,  blender,  oven,  ayakan nomor  60  mesh,  mikroskop,  objek  glass, deck  glass,  seperangkat  alat  maserasi  / maserator,  batang  pengaduk,  beacker  glass, gelas ukur, corong kaca, tabung reaksi, pipet ukur,  cawan  porselin,  spuit  1  ml  dan stopwatch, labu takar.
Bahan yang digunakan
dalam penelitian ini adalah ekstrak buah belimbing wuluh,  ekstrak  daun  seledri,  etanol  70%, larutan  stok  (CMC  0,5%,  asam  asetat  3%, paracetamol  1%),  21  ekor  mencit  putih jantan,  H 2 SO 4 pekat,  asam  asetat,  NaOH 10%.
a. Persiapan Sampel Daun  seledri  segar  diperoleh  dari daerah  Bumijawa  Kabupaten  Tegal. Pengambilan  daun  seledri  dilakukan dengan  memilih  daun  seledri  yang berwarna  hijau  segar  dan  buah belimbing wuluh diperoleh dari pekarangan  rumah  di  Jalan  Martoloyo, dan  dipilih  buah  yang  berwarna  hijau matang  (tidak  benyek  dan  tidak mentah).  Sampel  dicuci  bersih  dan dirajang kemudian dilakukan pengeringan  buah  belimbing  wuluh dengan  dioven  drying  pada  suhu  ±
70ºC  sedangkan  daun  seledri  yaitu dengan cara diangin-angin. Selanjutnya diblender dan diayak.
b. Identifikasi flavonoid
1) Identifikasi  flavonoid  dengan  NaOH 10%  yaitu  mengambil  2  tetes  sampel ditambahkan  2-4  tetes  larutan  NaOH 10  %.  Perubahan  warna  yang  terjadi yaitu menjadi kuning muda.
2) Identifikasi flavonoid dengan H 2 SO 4 P yaitu  mengambil  2  tetes  sampel ditambahkan  2-4  tetes  larutan  asam sulfat  P  (H 2 SO 4 ).  Perubahan  warna yang terjadi yaitu menjadi merah tua.
c. Ekstraksi Serbuk  buah  belimbing  wuluh  dan daun  seledri  masing-masing  900  gram, direndam dengan etanol 70% sebanyak 9000 mL selama 6 jam pertama sambil sesekali  diaduk,  kemudian  diamkan selama  18  jam,  maserasi  dilakukan  3 kali.  Hasil  maserat  yang  didapat kemudian  dipisahkan  dengan  disaring.
Kumpulkan  semua  maserat,  kemudian uapkan  dengan  penguap  vakum  atau penguap  tekanan rendah  hingga diperoleh  ekstrak  kental  dengan rotavapor  pada  suhu  40ºC,  selanjutnya dilakukan uji bebas etanol pada ekstrak kental yang didapat.
d. Pembuatan Larutan Uji
1) Pembuatan  larutan  kontrol  negatif CMC Na 5 %
Larutan CMC Na sebagai kontrol (-) diberikan  secara  oral.CMC  Na  0,5% dibuat  larutan  sebanyak  20  mL. Menimbang serbuk CMC Na 0,1 g dan dilarutkan  aquades  panas  sedikit  demi sedikit  dan  diaduk  hingga  homogen. Kemudian dituangkan ke labu takar  20 mL  dan  ditambahkan  aquades  hangat sampai tanda batas.
2) Pembuatan  larutan  kontrol  positif Paracetamol 1 % b/v Larutan paracetamol sebagai kontrol
(+)  diberikan  secara  oral.  Larutan paracetamol 1% b/v dibuat sebanyak 10 mL  dengan  menimbang  paracetamol sebanyak 100 mg dan melarutkan ad 10 mL akuades sampai homogen.
3) Pembuatan larutan penginduksi Asam asetat 3% Asamasetat  glasial  mengandung tidak kurang dari 99,5% dan tidak lebih dari  100,5%  b/b.  Dari  asam  asetat glasial dibuat asam asetat 3% v/v.
e. Penetapan dosis ekstrak dan Pembuatan larutan ekstrak Berdasarkanpenelitian  sebelumnya,
dosis  ekstrak  etanol  belimbing  wuluh sebagai analgetik 500 mg/kg BB. [5]
Sedang  untuk  ekstrak etanol  seledri dosisnya 500mg/kgBB. Sehingga dipilih  dan  dibuat  dosisnya  500  mg/kg
BB begitu juga untuk dosis kombinasinya.  Jika  berat  mencit  rata- rata 20 g BB maka variasi dosisnya 10 mg/20  g  BB.  Volume  maksimum permberian per oral pada mencit adalah 1  mL,  dibuat  stok  sebanyak  20  mL (dalam  20  mL  terkadung  200  mg ekstrak).
Tabel 1. Variasi dosis ekstrak No Variasi Dosis 10 mg/ 20 g BB Perbandingan Belimbing wuluh (mg) Seledri (mg) 1 - 200 0 2 3 : 1 150 50 3 2 : 2 100 100 4 1 : 3 50 150 5 - 0 200
f. Pengujian aktifitas analgetik
Pemberian  ekstrak  buah  belimbing wuluh  dan  ekstrak  daun  seledri, pertama-tama  menyiapkan  21  ekor mencit putih jantan sehat yang berumur 2-3  bulan  dengan  berat  badan  20  –  30 gram  yang  sebelumnya  dipuasakan terlebih  dahulu,  lalu  membagi  menjadi 8  kelompok.  Setelah  itu  memberikan CMC Na 0,5% dengan dosis 1 mL BB per oral pada mencit  pertama  sebagai kontrol negatif. Selanjutnya, memberikan  paracetamol  1%  (1gram
/100mL) per oral tiap 1mL pada mencit kedua  sebagai  kontrol  positif.  Setelah itu  pada  mencit  ketiga,  keempat, kelima,  keenam,  dan  ketujuh  masing- masing  sebanyak  1mL  secara  oral larutan  stok  ekstrak  buah  belimbing wuluh  dan  daun  seledri.  Setelah  30 menit  seluruh  kelompok  hewan  uji mendapat perlakuan disuntikkan
intraperitonial  dengan  larutan  asam asetat  3%  v/v.    Beberapa  menit kemudian    mencit    akan    menggeliat (kedua  pasang  kaki  ke  depan dan ke belakang,  serta  perut  menekan  lantai kandang). Kemudian menghitung jumlah  geliat  selama  30  menit pengamatan  dengan  selang  waktu  5 menit.
3. Hasil Dan Pembahasan
a. Ekstraksi  buah  belimbing  wuluh  dan daun seledri Ekstrak  etanol  yang  dihasilkan  dari buah  Belimbing  Wuluh  adalah  ekstrak kental  warna  coklat  pekat,  dengan rendemen  15,89%  dan  daun  Seledri menghasilkan ekstrak kental warna hijau pekat dengan  rendemen 12,80%. Setelah
didapatkan ekstrak lalu diuapkan dan uji bebas  etanol  menggunakan  pereaksi H 2 SO 4 pekat  dan  asam  asetat  kemudian mengamati  bau  yang  timbul  yaitu  jika berbau  etil  asetat  (ester)  maka  masih belum  terbebas  dari  etanol.  Tetapi  jika baunya  khas  ekstrak  daun  seledri  dan buah  belimbing  wuluh  maka  ekstrak sudah  tidak  mengandung  etanol.  Uji bebas  etanol  terjadi  reaksi  esterfikasi, yang dapat dilihat pada reaksi berikut :
b. Identifikasi flavonoid
Buah  belimbing  wuluh  dan  daun seledri memiliki khasiat sebagai analgetik  karena  adanya  kandungan flavonoid.  Flavonoid  dapat  menghambat sintesis prostaglandin yang mengakibatkan tidak terjadinya pelepasan  mediator  nyeri.Untuk  itu dilakukan uji flavonoid untuk mengetahui kandungan zat aktif flavonoidnya.
Ekstrak daun seledri dan ekstrak buah belimbing  wuluh  ditambahkan  NaOH 10%  menghasilkan  warna  kuning  muda karena  senyawa  krisin  yang  merupakan turunan  dari  senyawa-senyawa  flavon pada  penambahan  NaOH  mengalami penguraian  oleh  basa  menjadi  molekul seperti  asetofenon  yang  berwarna kuning.  Identikasi  kedua,  ekstrak  daun seledri  dan  ekstrak  buah  belimbing wuluh ditambahkan H 2 SO 4 pekat menghasilkan  warna  merah  karena penambahan H 2 SO 4 pekat mengakibatkan terjadinya reaksi subtitusi elektrofilik sebagaimana
lazimnya  senyawa  aromatik,  flavon senantiasa  mengalami  reaksi  subtitusi elektrofilik.
c. Uji analgetik
Ekstrak  buah  belimbing  wuluh  dan ekstrak seledri yang diperoleh  kemudian diujikan pada mencit putih jantan dengan umur  2-3  bulan  dengan  berat  20-30
gram.  Dipilihnya  mencit  putih  jantan karena pada mencit putih jantan  kondisi tubuhnya stabil dan berat badannya tidak dipengaruhi  siklus  estrus  yaitu  siklus seksual  pada  mamalia  bukan  primata yang  tidak  menstruasi.  Selama  siklus estrus  terjadi  berbagai  perubahan  baik pada  organ  reproduksi  maupun  pada perubahan tingkah laku seksual. Sehingga  jika  digunakan  mencit  putih betina dikhawatirkan dapat
mempengaruhi efek obat yang diberikan.
[6]
Sebelum  pengujian,  hewan  uji dipuasakan  selama  12  jam  dengan  tetap diberikan  minum  untuk  menyamankan kondisi  dari  hewan  uji  serta  untuk menghindari  adanya  pengaruh  makanan terhadap absorbsi obat yang diberikan.
Uji  daya  analgetik  ekstrak  buah belimbing  wuluh,  ekstrak  daun  seledri dan kombinasi kedua ekstrak yang dibuat 20  mL  dilakukan  pada  mencit  putih jantan  dengan  perbandingan  (200  :  0), (150  :  50),  (100  :  100),  (50  :  150),  (0  : 200)  belimbing  wuluh  dan  seledri. Penggunaan  paracetamol  1  %  b/v sebagai  kontrol  positif  dan  larutan pembanding dengan pertimbangan bahwa  paracetamol  adalah  analgetik perifer  yang  digunakan  secara  luas  dan obat  ini  jarang  menyebabkan  iritasi lambung dan tidak menyebabkan penggumpalan  darah.  Kontrol  negatif adalah  kontrol  yang  bersifat  netral  atau tidak  menimbulkan  efek  analgetik. Kontrol  negatif  menggunakan  CMC  0,5 % b/v karena bersifat inert, selain itu ini digunakan  sebagai  pensuspensi  untuk membuat larutan ekstrak.
Uji  analgetik  ini  menggunakan metode  rangsang  kimia  yang  ditujukan untuk  melihat  respon  mencit  terhadap larutan penginduksi  asam asetat. Respon yang  ditimbulkan  adalah  geliat  dari mencit  ketika  menahan  nyeri  pada  perut dan  kaki  ditarik  ke  beakang.  Larutan asam  asetat  3%  diberikan  secara intraperitonial setelah 30 menit pemberian  larutan  uji  secara  oral.
Kemudian  mengamati  jumlah  geliat mencit  yang  ditimbulkan  selama  waktu 30  menit  pengamatan  dengan  interval
waktu  5  menit  sehingga  dapat  diperoleh rata  –  rata  jumlah  geliatnya.  Rata  –  rata jumlah  geliat  inilah  yang  digunakan untuk  mencari  nilai  persentase  daya analgetik  dari  masing  –  masing kelompok perlakuan.
Tabel  2. Hubungan  rata  –  rata  geliat  terhadap daya analgetik
No  Perlakuan Σ jumlah geliat selama 30‘ Daya analgetik (%) 1 K (-) 99,67 - 2 K (+) 14,67 85,29 3 BW 77,67 22,08 4 BW : Sd (3 : 1) 49,33 50,51 5 BW : Sd (2 : 2) 34,00 65,89 6 BW : Sd (1 : 3) 22,67 77,26 7 Sd 35,67 64,21 Data  di  atas,  menunjukkan  bahwa daya analgetik ekstrak daun seledri lebih besar  daripada  daya  analgetik  ekstrak buah  belimbing  wuluh. Hal  ini dimungkinan karena kandungan zat aktif flavonoid sebagai analgetik yang terkandung  pada  daun  seledri  lebih banyak  daripada  buah  belimbing  wuluh karena  pada  tanaman  seledri,  flavonoid terkandung pada herba seledri dibandingkan dengan kandungan
flavonoid  pada  buah  belimbing  wuluh yang  buahnya  sendiri  lebih  banyak mengandungan  air  sebanyak    90  gram. Dan  dari  proses  pengeringan  juga  dapat mempengaruhi  komponen  –  komponen senyawa  yang  terdapat  pada  simplisia yang  telah  di  keringkan.  Seperti  seledri yang proses pengeringannya dengan cara diangin-angin  untuk menghindari kontak langsung  antara  seledri  dengan  sinar matahari  sehingga  kerusakan  komponen –  komponen  yang  ada  dalam  seledri dapat  dikurangi.  Sedangkan  untuk  buah belimbing  wuluh  pengeringan  dilakukan dengan  dioven  pada  suhu  70°C  untuk mengeluarkan  kandungan  air,  namun pengeringan  pada  suhu  tinggi  dapat menimbulkan kerusakan  kandungan kimia.
Tabel 3. Data Statistik pengaruh daya analgetik ekstrak Sum of Squar es df Mean Square F Sig. Between Groups 845,48 9 4 211,37 2 12,42 2 ,00 0 Within Groups 1446,3 33 8 5 17,016 Total 2291,8 22 8 9
Tabel ANOVA didapat nilai F hitung adalah  12,422  sehingga  didapatkan  F hitung  >  F  tabel  (12,422  >  2,47)  maka Ho  ditolak,  sehingga  Ha  diterima  maka sesuai  hipotesis  yaitu  adanya  pengaruh aktifitas  analgetik  yang  signifikan  dari ekstrak  maserasi  daun  seledri,  ekstrak maserasi  buah  belimbing  wuluh  serta kombinasi kedua ekstrak terhadap mencit putih jantan.
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut dengan  metode  penyarian  dan  variasi dosis  yang  berbeda,  dan  dengan dibuatnya  sediaan  yang  kemudian diujikan lagi daya analgetiknya.

## 4. Kesimpulan
Semua kombinasi ekstrak buah
belimbing wuluh dan daun seledri memiliki aktivitas  yang  lebih  baik  sebagai  analgetik dibandingkan  dengan  ekstrak  tunggal, kombinasi  yang  paling  optimum  adalah ekstrak  buah  belimbing  wuluh  dan  daun seledri  dengan  perbandingan  1:3  dengan nilai  prosentase  daya  analgetik  sebesar 77,26%.
5. Daftar Pustaka
[1] Murti  T,  Krishna  dan  Poerba  A, Pratiwi.
2010. 101 Ramuan
Tradisional .  Jilid  1.  Hal  1-27. Yogyakarta : Insania.
[2] Dalimartha,  Setiawan.  2000. Atlas Tumbuhan  Obat  Indonesia .  Jilid  1.
Hal  171-173.  Jakarta  :  Trubus
Agriwidya.
[3] Manggung,  R.E.R.  2008.  Pengujian
Toksisitas  Akut  Lethal  Dose  50 (LD 50 ) Ekstrak Etanol Buah Belimbing  Wuluh  ( Averrhoa  bilimbi L.)  pada  Mencit  ( Mus  musculus albinus ). Skripsi .Bogor  :  Fakultas
Kedokteran  Hewan  Institut  Pertanian Bogor. [4] Darmono, Syamsudin. 2011. Farmakologi  Eksperimental .  Hal  3-
65.  Jakarta  :  Universitas  Indonesia Press.
[5] Lembaga  Penelitian  dan  Pengabdian Kepada  Masyarakat,  2012.Aktivitas Analgetika  Ekstrak  Buah  Belimbing
Wuluh  ( Averrhoa  blilimbi L)  pada Mencit  Jantan  Galur  Swiss  Webster dengan Metode Geliat.Oleh : Kurniawati.
http://lppm.stfb.ac.id/repository/Sarja na/Tahun- 2012/Farmakologi/Aktivitas- Analgetika-Ekstrak-Buah-Belimbing- Wuluh-(Averrhoa-blilimbi-L)-Pada- Mencit-Jantan-Galur-Swiss-Webster- Dengan-Metode-Geliat/  (29  Oktober 2015).
[6] Yunita,  Ria.  2014.  Uji  Efektivitas
Analgetik  Ekstrak  Etanol  Daun Wungu ( Graptophyllum Pictum )
terhadap  Mencit  Putih  Jantan  ( Mus musculus ). Karya Tulis Ilmiah . Tegal : Jurusan  D3  Farmasi  Politeknik Harapan Bersama.