EISSN: 2407-7690 https://ejournal3.undip.ac.id/index.php/jmr

## Isolasi dan Identifikasi Bakteri Pengurai Mikroplastik Polyethylene Terephthalate dari Sedimen Ekosistem Mangrove Pasir Putih
Alifia Rizky Novitasari 1 , Woro Hastuti Satyantini 2 , Sapto Andriyono 3 , Nor Sa’adah 4 1 Program Studi Bioteknologi Perikanan dan Kelautan, Fakultas Perikanan dan Kelautan, Universitas Airlangga
2 Departemen Akuakultur, Fakultas Perikanan dan Kelautan, Universitas Airlangga
3 Departemen Kelautan, Fakultas Perikanan dan Kelautan, Universitas Airlangga Jl. Dr. Ir. H. Soekarno, Mulyorejo, Kec. Mulyorejo, Kota Surabaya, Jawa Timur 60115 Indonesia
4 Departemen Teknologi Rekaya Operasi Kapal, Politeknik Bumi AKPELNI Jl. Pawiyatan Luhur II/17, Bendan Duwur, Semarang, Jawa Tengah 50235 Indonesia *Corresponding author, Email : Woro_hs@fpk.unair.ac.id
ABSTRAK: Polyethylene terephthalate (PET) adalah salah satu polimer termoplastik paling banyak tersedia  di  pasar.  PET  digunakan  untuk  produksi  botol  atau  wadah  untuk  minuman,  seperti  air, minuman  ringan  berkarbonasi,  minuman  jus,  dan  industri  makanan. Polyethylene  terephthalate ( PET) ditemukan melimpah pada sedimen ekosistem mangrove di Pasir Putih Wonorejo pada musim hujan  sebanyak  59%.  Studi  terbaru  telah  menunjukkan  bahwa  bakteri  indigenous  sedimen mangrove mampu mendegradasi mikroplastik. Sehingga, tujuan penelitian ini adalah menemukan potensi  agen  biodegradasi  mikroplastik  dari  bakteri  indigenous  sedimen  ekosistem  mangrove  di Pasir Putih Wonorejo. Bakteri diisolasi pada April 2022 dari sedimen ekosistem mangrove. Metode yang  digunakan  diawali  dengan  isolasi  bakteri  dari  sedimen  ekosistem  mangrove  Pasir  Putih Wonorejo,  kemudian  digunakan  untuk  uji  degradasi  mikroplastik polyethylene  terephthalate dan mengetahui jenis bakteri yang memiliki kemampuan mendegradasi mikroplastik. Hasil isolat bakteri yang  didapat  sebanyak  16  bakteri.  Potensi  bakteri  yang  menjadi  agen  biodegradasi  dengan penurunan berat mikroplastik isolat bakteri SPP.1.1.3. sebesar 8,73%. Identifikasi molekuler dengan cara ekstraksi DNA 16S rRNA menunjukkan jenis Pseudoaltoromonas caenipelagi dengan homologi 99%  pada  database National  Center  Biotechnology  Information .  Hasil  ini  membuktikan  bahwa bakteri indigenous memiliki kemampuan sebagai agen biodegradasi mikroplastik.
Kata kunci: polyethylene terephthalate, bakteri indigenous, biodegradasi, Pasir Putih Wonorejo

## Biodegradation of Polyethylene Terephthalate using Indigenous Bacteria in Mangrove Ecosystem Sediment
ABSTRACT: Polyethylene  terephthalate  (PET)  is  one  of  the  most  widely  available  thermoplastic polymers on the market. PET is used for the production of bottles or containers for beverages, such as water, carbonated soft drinks, juices, and the food industry. Polyethylene terephthalate (PET) is found  abundantly  in  mangrove  ecosystem  sediments  in  Pasir  Putih  Wonorejo  during  the  rainy season as much as 59%. Recent studies have shown that indigenous mangrove sediment bacteria are  able  to degrade microplastics. Thus, the purpose of this study was to find potential agents for biodegradation of microplastics from indigenous bacteria in mangrove ecosystem sediments Pasir Putih  Wonorejo. Bacteria  were  isolated  in  April  2022  from  mangrove  ecosystem  sediments.  The method used begins with The isolation of bacteria from mangrove ecosystems sediments from Pasir Putih  Wonorejo,  then  were  used  to  assay  biodegradation  of  polyethylene  terephthalate microplastics and to determine the types  of  bacteria that  has  ability  to  degrade microplastics.  The results of isolated bacterial obtained were 16 bacterias. The potential bacteria that becoming agents of biodegradation by decreasing the weight of microplastic isolate SPP.1.1.3. by 8,73%. Molecular identification  by  extraction  of DNA  16S rRNA  showed the type  of Pseudoaltoromonas  caenipelagi with 99% homology in the National Center Biotechnology Information database. These results prove that indigenous bacteria have the ability as microplastic biodegradation agents.
Keyword: polyethylene terephthalate, indigenous bacteria, biodegradation, Pasir Putih Wonorejo

## PENDAHULUAN
Pencemaran  plastik  di  laut  adalah  masalah  yang  meningkat  di  seluruh  dunia,  300  juta  ton plastik  diproduksi  setiap  tahun  dan  diperkirakan  sekitar  150  juta  ton  plastik  saat  ini  telah mencemari  lautan.  Diperkirakan  1-2.5  juta  ton  plastik  setiap  tahun  dibuang  ke  lautan  (Tyllianakis dan  Ferrini,  2021).  Hampir  semua  sektor  ekonomi  menghasilkan  limbah  padat.  Beberapa  faktor yang mempengaruhi tingginya limbah padat adalah pertumbuhan penduduk, ekonomi, pendidikan, pekerjaan,  pola  konsumsi  (Lestari  dan  Trihadiningrum,  2019). Polyethylene  terephthalate biasa disingkat dengan PET, PETE atau dengan kode identifikasi resin daur ulang #1 adalah salah satu polimer  termoplastik  paling  banyak  tersedia  di  pasar.  PET  digunakan  untuk  produksi  botol  atau wadah  untuk  minuman,  seperti  air,  minuman  ringan  berkarbonasi,  minuman  jus,  dalam  bentuk lembaran atau film dan industri makanan ( Nisticò, 2020). Polyethylene  terephthalate (PET)  ditemukan  melimpah  pada  sedimen  ekosistem  mangrove di Pasir Putih Wonorejo pada musim hujan sebanyak 59%. Produk PET cenderung terendapkan di sepanjang  aliran  sungai  Wonorejo,  limpasan  air  hujan  membawa semua  material  terapung, termasuk PET hingga ke Muara Sungai dan Pasir Putih Wonorejo (Kurniawan dan Imron, 2019b). Plastik  sebagai  polimer  organik  sintetik  memiliki  sifat  tahan  lama,  ringan,  kuat,  mudah  dibentuk dan persisten. Tanpa penggunaan plastik yang efektif dan pengelolaan sampah yang baik, polusi plastik  akan  meningkat  di  lingkungan.  Selanjutnya,  plastik  berukuran  besar  dapat  didegradasi menjadi ukuran kecil (Firdaus et al ., 2020) dengan cara fisika, biologi maupun mekanis (Corcoran, 2020).
Fragmen-fragmen plastik yang berukuran kecil dan memiliki ukuran 5 mm disebut dengan mikroplastik  (Yuan et  al .,  2020).  Mikroplastik  sangat  berbahaya  bagi  organisme  hidup  dan ditemukan  di  dalam  organisme  hidup,  terutama  biota  laut.  Mikroplastik  ada  di  dalam  tubuh organisme  terjadi  karena  tidak  bisa  membedakan  antara  makanan  dan  plastik  (Kurniawan  dan Imron, 2019a) dan mengakibatkan kematian pada biota laut (Auta et al ., 2017a). Mikroplastik tidak secara  langsung  berada  di  dalam  air,  karena  kolonisasi  biofilm  pada  mikroplastik  dan heteropolimerisasi  mikroplastik  dengan  pengotor  lainnya,  yang  akan  mendorong  tenggelamnya mikroplastik (Niu et al ., 2021). Mikroorganisme yang mengkolonisasi pada permukaan polimer dan membentuk biofilm. Mikroorganisme ini terkadang mengeluarkan enzim ekstraseluler yang bekerja pada bahan polimer. Biofilm tersebut terlibat dalam biodegradasi permukaan plastik dan mungkin memainkan  peran  penting  dalam  biodegradasi  mikroplastik  (Auta et  al .,  2018).  Mikroplastik  juga dapat menjadi sumber karbon potensial untuk beberapa mikroorganisme pengurai plastik tertentu (Niu et al ., 2021).
Penelitian  sebelumnya  mendapatkan  bakteri  pada  sedimen  ekosistem  mangrove  di Peninsular  Malaysia,  antara  lain Bacillus sp.  dan Rhodococcus sp.  sebagai  pendegradasi mikroplastik  yang  dilakukan  oleh  Auta et  al .,  (2018).  Curren  dan  Leong  (2019)  mendapatkan bakteri Erythrobacter , Vibrio dan Pseudomonas yang  dapat  mendegradasi  mikroplastik  dari sampel  sedimen  ekosistem  mangrove  di  Singapore.  Penelitian  Widyananto et  al .,  (2021) mendapatkan  bakteri Bacillus  paramycoides dari  sampel Isopora  palifera yang dapat mendegradasi mikroplastik selama 7 hari.
Penelitian mengenai bakteri pendegradasi mikroplastik sangat penting untuk menanggulangi permasalahan  pencemaran  mikroplastik  di  lingkungan  perairan.  Ekosistem  mangrove  Pasir  Putih Wonorejo  tercemar  oleh polyethylene  terephthalate ,  sehingga  perlu  adanya  penelitian  untuk mengetahui  bakteri  yang  memiliki  kemampuan  mendegradasi  mikroplastik  PET.  Kelimpahan bakteri  indigenous  atau  bakteri  yang  hidup  berasosiasi  di  ekosistem  laut  terutama  di  sedimen dapat  menjadi  salah  satu  solusi  dalam  mendegradasi  mikroplastik  yang  ramah  lingkungan,  cara alami dan tidak mencemari lingkungan. Tujuan dari penelitian ini adalah menemukan potensi agen biodegradasi  mikroplastik  dari  bakteri  indigenous  sedimen  ekosistem  mangrove  di  Pasir  Putih Wonorejo  dan  mengetahui  jenis  bakteri  yang  memiliki  kemampuan  mendegradasi  mikroplastik Polyethylene terephthalate .

## MATERI DAN METODE
Penelitian  dilaksanakan  pada  Januari  hingga  Agustus  2022  di  Kawasan  Pasir  Putih, Kelurahan  Wonorejo,  Kecamatan  Rungkut,  Kota  Surabaya.  Pengambilan  sampel  sedimen
Journal of Marine Research Vol 12, No. 1 Februari 2023, pp. 52-60
dilakukan  dengan  metode purposive  random  sampling yaitu  suatu  metode  pengambilan  sampel yang  dilakukan  dengan  mengambil  subjek  bukan  berdasarkan  strata,  random  atau  daerah  tetapi berdasarkan atas adanya tujuan tertentu (Hanifah, 2016 dalam Pratiwi et al ., 2019). Sedimen yang diperoleh  dimasukkan  kedalam  plastik ziplock dan  diberi  label  sesuai  lokasi,  waktu  dan  tanggal pengambilan  dan  disimpan  pada cool  box dan  dibawa  menuju  laboratorium  Prof.  Nidom Foundation.
Sampel  sedimen  sebanyak  1  gram  dimasukkan kedalam  tabung reaksi  yang  berisi  9 ml  air laut  steril  dan  didapatkan  pengenceran  10 -1 ,  kemudian  di  ambil  1  ml  dan  dimasukkan  ke  dalam tabung reaksi yang berisi selanjutnya untuk mendapatkan pengenceran 10 -2 , demikian selanjutnya hingga  mendapat  pengenceran  sampel  10 -3 ,  10 -4 dan  10 -5 .  Dari  pengenceran  10 -1 ,  10 -3 dan  10 -5 diambil  50 μL  disebar  kedalam  cawan  petri  yang  mengandung  media  zobell  dan  diratakan menggunakan spreader .  Kemudian,  diinkubasi  pada  suhu  27 o C-30 o C  selama  2x24  jam.  Koloni bakteri yang tumbuh diamati atau diidentifikasi bentuk koloni, warna dan tekstur koloninya dengan acuan buku mikrobiologi umum (Waluyo, 2007).
Bakteri hasil identifikasi ditumbuhkan kembali sebagai kultur murni pada media Zobell yang baru  dan  diinokulasi  dalam shaker pada  suhu  29 o C  hingga  mencapai  fase  log  (absorbansi  1.-0 pada 600 nm). Kepadatan sel inokulum disesuaikan menjadi 3.8x10 8 CFU/ ml. 10% dari kultur fase log  diinokulasi  ke  dalam  labu  erlenmeyer  yang  mengandung  100  ml  media  Zobell  dan  0.5  g mikroplastik polyethylene  terephthalate (PET)  yang  disterilkan  (diameter  ±2.4  mm)  untuk  uji degradasi  mikroplastik.  Optikal  density  (OD)  dan  pH  dipantau  setiap  10  hari  selama  40  hari. Semua  percobaan  dilakukan  dalam  3  kali  ulangan  (Auta et  al .,  2017b).  Mikroplastik  diambil  dan dibersihkan  menggunakan  dengan  etanol  70%  dan  kemudian  dikeringkan.  Berat  mikroplastik diukur  menggunakan  neraca  analitik.  Berikut  rumus  penurunan  berat  mikroplastik polyethylene terephthalate (Auta et al ., 2017b).
Gambar 1. Lokasi pengambilan sampel sedimen
Journal of Marine Research Vol 12, No. 1 Februari 2023, pp. 52-60
Proses  perbanyakan  sel  bakteri  yang  menghasilkan  degradasi  tertinggi  dilakukan  dengan menumbuhkan  bakteri  pada  media Luria-Bertani cair.  Kultur  bakteri  di- shaker dengan  kecepatan 150  rpm  selama  18  jam  pada  suhu  37 o C.  Ekstraksi  DNA  dilakukuan  dengan  metode  chelex (Widyananto et  al .,  2021).  Identifikasi  secara  molekuler  dilakukan  dengan  menggunakan Polimerase  Chain  Reaction (PCR)  16S  rRNA.  Primer  yang  digunakan  untuk  PCR  16S  rRNA adalah  primer  universal  untuk  bakteri, forward  primer 27f  (5’-  AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3’) (Weisburg  et  al.,  1991)  dan reverse  primer 1492r (5’-  TACGGHTACCTTGTTACGACTT-3’) (Reysenbach  et  al.,  1992).  Perlakuan  temperatur  yang  digunakan  pada  PCR  adalah:  denaturasi pada  suhu  95 o C  selama  3  menit,  kemudian  30  siklus  anneling  pada  suhu  48 o C  selama  1  menit, extension  pada  suhu  72 o C  selama  1  menit  dan  denaturasi  kembali  pada  suhu  95 o C  selama  1 menit,  72 o C  selama  7  menit.  Volume  reaksi  yang  digunakan  dalam  amplifikasi  yaitu  50 μL (Widyananto et al ., 2021).
Visualisasi  produk  PCR  16S  rRNA  ini  dilakukan  melalui  elektroforesis  dengan  cara memasukkan  5  µl  produk  PCR  menggunakan  mikropipet  dan  dimasukkan  ke  dalam  sumur  gel agarose.  Alat  kemudian  dijalankan  dengan  voltase  100  V  selama  ±  30  menit  atau  hingga  warna biru produk PCR berada pada setengah bagian gel. Terakhir, pita hasil PCR dapat dilihat dengan menggunakan alat gel-doc . Analisis sekuens menggunakan program MEGA 11.0.11  (Kumar et al ., 2018).  dan  analisis  similaritas  atau  kesamaan  urutan  sekuens  dianalisis  menggunakan  internet melalui  program database  Basic  Local  Alignment  Search  Tool (BLAST)  pada National  Center for Biotechnology Information (NCBI).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil penelitian didapatkan isolat bakteri yang hidup pada sedimen di Pasir Putih Wonorejo sebanyak  16  isolat  bakteri.  Isolat  bakteri  yang  teridentifikasi  secara  morfologi  koloni  memiliki karakteristik berbeda, yang ditunjukkan pada Tabel 1.
Kelimpahan  bakteri  di  ekosistem  mangrove  Pamurbaya  dapat dipengaruhi oleh antropogenik,  rumah  bagi  burung  yang  bermigrasi  dan  berbagai  macam  organisme  akuatik. Ekosistem mangrove juga merupakan zona untuk organisme akuatik maupun ikan untuk mencari makan yang dapat mempengaruhi kelimpahan bakteri. Penelitian yang sama Nathan et al ., (2019) menjelaskan  bahwa  daerah  ekosistem  mangrove  yang  dipengaruhi  oleh  pasang  surut  air  laut dengan  vegetasi  mangrove  yang  lebat  akan  mengakibatkan  salinitas  lebih  tinggi.  Perubahan kandungan  karbon,  nitrogen,  sulfat,  pH  dan  salinitas  dapat  dikaitkan  dengan  variasi  struktur kelimpahan bakteri di ekosistem mangrove. Faktor utama yang mempengaruhi kelimpahan bakteri didorong oleh salinitas dan ketersediaan senyawa organik dan anorganik di ekosistem mangrove. Sedimen  yang  ditanam  mangrove  memiliki  keanekaragaman  bakteri  yang  lebih  tinggi  daripada sedimen  yang  tidak  terdapat  tanaman  mangrove.  Penelitian  Tong et  al .,  (2019)  menyatakan bahwa penanaman mangrove  memiliki efek  positif  pada  keanekaragaman  bakteri  di lahan  basah mangrove.
Potensi  degradasi  mikroplastik  menggunakan  isolat  bakteri  pada  media  Zobell  yang mengandung polyethylene  terephthalate (PET)  selama  40  hari  berpengaruh  terhadap  berat mikroplastik dengan menghitung persentase penurunan berat (%) dan laju konstanta (K). Setelah 40 hari, persentase penurunan berat PET terbesar  dengan kode isolat SPP.1.1.3 sebesar 8,73% dengan laju konstanta penurunan berat  (K) 0,0023 g/hari dan waktu paruh (t) 303 hari. Penelitian ini  menunjukkan  bahwa  isolat  bakteri  mengeluarkan  enzim  spesifik  yang  mampu  menurunkan berat mikroplastik PET. Isolat bakteri mampu mengkatalisis reaksi metabolisme yang berkontribusi pada  pemecahan  mikroplastik  PET.  Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Auta et  al .,  (2018)  degradasi polypropylene yang  dilakukan  menggunakan  bakteri Bacillus sp.  strain  27  dan Rhodococcus sp. strain  36  mendapatkan  penurunan  berat  sebesar  6,4%  dan  4%  selama  40  hari.  Bakteri Rhodococcus sp. strain 36 menunjukkan laju konstanta mikroplastik polyprophylene sebesar 0,002 g/hari  dengan  waktu  paruh  346  hari.  Tingkat  serapan  yang  lebih  tinggi  diduga  karena  susunan genetik  mikroorganisme  dan  ukurannya  yang  lebih  besar.  Isolat  bakteri Bacillus sp.  strain  27 menunjukkan laju konstanta sebesar 0,001 g/hari dan waktu paruh yang lebih lama sekitar 693 hari.
Journal of Marine Research Vol 12, No. 1 Februari 2023, pp. 52-60
Tabel 1. Hasil isolasi bakteri yang diperoleh
Kode Isolat No. Warna Ukuran Bentuk Elevasi Margin SPP.1.1. 1 Kuning Sedang Circular Flat Entire 2 Kuning Sedang Circular Flat Entire 3 Hijau Kecil Circular Flat Entire 4 Kuning Sedang Circular Flat Entire 5 Kuning Sedang Circular Flat Entire SPP.1.2. 1 Kuning Sedang Circular Flat Entire 2 Kuning Kecil Circular Flat Entire 3 Kuning Kecil Circular Flat Entire 4 Kuning Sedang Circular Flat Entire SPP.1.3. 1 Putih Sedang Circular Flat Entire 2 Kuning Sedang Circular Flat Entire 3 Kuning Kecil Circular Flat Entire 4 Kuning Kecil Circular Flat Entire SPP.3.1. 1 Putih Kecil Circular Flat Entire SPP.3.2. 1 Putih Kecil Circular Flat Entire SPP.3.3. 1 Putih Kecil Circular Flat Entire
Keterangan: SPP: sedimen pasir putih, angka pertama: pengenceran, angka kedua: ulangan.
Tabel 2 . Analisis penurunan berat mikroplastik
Kode Isolat No. Berat Awal Berat Akhir % K t (Half-life) day SPP.1.1. 1 0,5055 0,4931 2,45 0,0006 1116,36 SPP.1.1. 3 0,5358 0,4890 8,73 0,0023 303,66 SPP.1.2 2 0,5038 0,5000 0,75 0,0002 3661,99 SPP.1.3 2 0,5230 0,5130 1,40 0,0004 1962,24
Fase pertumbuhan isolat bakteri diikuti oleh fase lag, eksponensial, stasioner dan kematian dapat  dilihat  pada  Gambar  2.  Respon  pertumbuhan  menunjukkan  pola  pertumbuhan  yang  sama pada isolat bakteri merespon mikroplastik secara eksponensial diamati pada hari ke-0 hingga hari ke-10 laju pertumbuhan pada isolat bakteri SPP.1.1.3. 0.110 absorbansi (ABS) dibandingkan pada hari  ke-0.  Peningkatan  laju  pertumbuhan  yang  diamati  melalui optical  density (OD)  yang  diukur pada  hari  ke-10  menunjukkan  respon  yang  tinggi  dari  isolat  bakteri  pada  paparan  mikroplastik PET.  Pertumbuhan  bakteri  pada  hari  ke-20  meningkat  yang  menunjukkan  adanya  pertumbuhan isolat  yang  tinggi  menjadi  0.130  ABS.  Peningkatan  pertumbuhan  isolat  bakteri  disebabkan  oleh pemanfaatan  dari  media  dalam  uji  degradasi  mikroplastik,  yang  mengakibatkan  biodegradasi mikroplastik PET. Penurunan tajam pertumbuhan isolat terjadi setelah hari ke-20 hingga hari ke-40 pada uji degradasi mikroplastik PET. Penurunan fase yang dicapai oleh isolat diakibatkan oleh lisis sel, penipisan nutrisi atau adanya produk penghambat dalam kultur media.
pH merupakan faktor kunci untuk kelangsungan hidup dan aktivitas mikroorganisme karena memiliki pengaruh penting pada populasi mikroba, aktivitas enzim dan laju degradasi (Auta et al ., 2018).  Gambar  3.  mengilustrasikan  perubahan  pH  pada  media  Zobell  cair  dengan  mikroplastik PET selama 40 hari uji degradasi dengan isolat bakteri SPP.1.1.3. Variasi pH serupa diamati untuk isolat bakteri SPP.1.1.3. pH meningkat mulai dari hari ke-0 hingga ke-10 dari 6 menjadi 7 dan pada hari ke-20 hingga hari ke-40 pH terus meningkat dari 7 menjadi 8. Hasil menunjukkan bahwa nilai pH tersebut merupakan pH optimum untuk pertumbuhan isolat. Pada penelitian yang sama Auta et al (2018)  menyatakan  bahwa  pH  memiliki  peran  penting  bagi  pertumbuhan  mikroorganisme.
Peningkatan  pH  menuju  kisaran  pH  basa  seiring  waktu  dapat  dikaitkan  dengan  produksi  dan akumulasi  senyawa  aromatik  dasar  dan/  atau  metabolit  lain  dalam  media  yang  ditambahkan mikroplastik PP.
Berdasarkan  dari  proses  amplifikasi  DNA  dengan  metode  PCR  yang  telah  dilakukan diperoleh  hasil  visualisasi  dengan  elektroforesis  seperti  pada  Gambar  4.  yang  menunjukkan bahwa  terdapat  satu  pita  DNA  hasil  ekstraksi  DNA.  Pita-pita  DNA  amplikon  terlihat  terang  di ukuran 1500 bp. Jenis bakteri yang mampu mendegradasi mikroplastik yaitu Pseudoalteromonas caenipelagi yang menunjukkan homologi 99% similaritas dengan BLAST pada National Center for Biotechnology  Information .  Pengurain  PET  yang  diisolasi  dari  sedimen  adalah  hasil  inokulasi dalam  media  cair  dan  ditambah  mikroplastik  PET  selama  40  hari.  Terbukti  bahwa Pseudoalteromonas caenipelagi mampu mendegradasi PET sebesar 8,73%. Penelitian Dong et al (2021) menjelaskan bahwa bakteri Pseudoalteromonas mampu mendegradasi berbagai jenis polimer,
Gambar 2. Kurva Pertumbuhan Isolat Bakteri SPP.1.3.3.
0 0,02 0,04 0,06 0,08 0,1 0,12 0,14 0 10 20 30 40 O prica l D en si ty ( O D ) at 60 0 nm Waktu (Hari) 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 10 20 30 40 pH
Waktu (Hari)
Journal of Marine Research Vol 12, No. 1 Februari 2023, pp. 52-60
Gambar 4. Hasil amplifikasi panjang untai DNA
termasuk polyethylene (PE), low  density  polyethylene (LDPE), high  density  polyethylene (HDPE) dan  polypropylene  (Dong et  al .,  2021).  Du et  al (2022)  menjelaskan  bahwa  bakteri Pseudoalteromonas sp.  berperan  dalam  mendegradasi  mikroplastik.  Park  dan  Kim  (2019) menyatakan  bahwa  penurunan  berat  mikroplastik  disebabkan  oleh  metabolisme  bakteri  dan penguraian mikroplastik polyethylene . Nathan et al ., (2019) mendapatkan bakteri Pseudoalteromonas spp.  di  ekosistem  mangrove  Puthuvypeen,  India.  Puthuvypeen  merupakan ekosistem pesisir yang dipengaruhi langsung oleh pasang surut air laut. Komponen nutrisi dalam sedimen mempengaruhi adanya mikroorganisme bakteri pada ekosistem tersebut.

## KESIMPULAN
Dari penelitian ini didapatkan isolat bakteri yang hidup pada sedimen di Pasir Putih Wonorejo sebanyak 16 isolat bakteri. Potensi degradasi mikroplastik menggunakan isolat bakteri pada media Zobell yang mengandung polyethylene terephthalate (PET) selama 40 hari berpengaruh terhadap berat mikroplastik dengan persentase penurunan berat PET dengan kode isolat SPP.1.1.3 sebesar 8,73%  dengan  laju  konstanta  penurunan  berat  (K)  0,0023  g/hari  dan  waktu  paruh  (t)  303  hari. Jenis bakteri yang mampu mendegradasi mikroplastik yaitu Pseudoalteromonas caenipelagi yang menunjukkan  homologi  99%  similaritas  dengan  BLAST  pada National  Center  for  Biotechnology Information .

## DAFTAR PUSTAKA
Auta, H.S., Emenike, C.U.,  Fauziah, S.H. 2017a. Distribuiton and Importance of Microplastics in the  Marine  Environment:  A  Review  of  the  Sources,  Fate,  Effects,  and  Potential  Solutions. Environment International , 102: 165-176. DOI: 10.1016/j.envint.2017.02.013 Auta,  H.S.  Emenike,  C.U.,    Fauziah,  S.H.  2017b.  Screening  of Bacillus Strains  Isolated  from Mangrove  Ecosystems  in  Peninsular  Malaysia  for  Microplastic  Degradation. Environmental Pollution . 231: 1552-1559. DOI: 10.1016/j.envpol.2017.09.043 Auta,  H.S.  Emenike,  C.U.,  Jayanthi,  B.,    Fauziah,  S.H.  2018.  Growth  Kinetics  and Biodeterioration of Polypropylene Microplastics by Bacillus sp. and Rhodococcus sp. Isolated from Mangrove Sediment. Marine Pollution Bulletin, 127: 15-21. DOI:
10.1016/j.marpolbul.2017.11.036
Corcoran,  P.L.  2020.  Degradationn  of  Microplastics  in  the  Environment.  Handbook  of Microplastics in the Environment. DOI: 10.1007/978-3-030-10618-8_10-1 Curren, E.,  Leong, S.C.Y. 2019. Profiles of Bacterial Assemblages from Microplastic of Tropical
1 M 1500 bp
Journal of Marine Research Vol 12, No. 1 Februari 2023, pp. 52-60
Coastal  Environments. Science  of  the  Total  Environment, 655:  313-320.  DOI: 10.1016/j.scitotenv.2018.11.250 Dong, H., Chen, Y., Wang, J., Zhang, Y., Zhang, P., Li, X., Zou, J  Zhou, A. 2021. Interaction of Microplastics  and  Antibiotic  Resistance  Genes  and  Their  Effects  on  the  Aquaculture Environment.
Journal
of Hazardous
Materials, 403: p.123961. DOI:
10.1016/j.jhazmat.2020.123961
Du, Y., Liu, Z., Dong, X.,  Yin, Z. 2022. A Review on Marine Platisphere: Biodiversity, Formation, and Role in Degradation. Computational and Structural Biotechnology Journal , 20: p.975:988. DOI: 10.1016/j.csbj.2022.02.008.
Firdaus, M., Trihadiningrum, Y.,  Lestari, P. 2020. Microplastic Pollution in the Sediment of Jagir Estuary, Surabaya City, Indonesia. Marine Pollution Bulletin , 150: p.110790.
Kumar,  A.,  Stetcher,  G.,  Li,  M.,  Knyaz,  C.,    Tamura,  K.  2018.  Mega  X:  Molecular  Evolutionary Genetics  Analysis  Across  Computing  Platforms. Molecular  Biology  and  Evolution .  DOI: 10.1016/j.marpolbul.2019.110790
Kurniawan,  S.B.,    Imron,  M.F.  2019a.  The  Effect  of  Tidal  Fluctuation  on  the  Accumulation  of Plastic  Debris  in  The  Wonorejo  River  Estuary,  Surabaya,  Indonesia. Environmental Technology and Innovation , 15: 100420. DOI: 10.1016/j.eti.2019.100420
Kurniawan, S.B.,  Imron, M.F.. 2019b. Seasonal Variation of Plastic Debris Accumulation in The Estuary  of  Wonorejo  River,  Surabaya,  Indonesia. Environmental  Technology  and  Innovation , 16: p.100490. DOI: 10.1016/j.eti.2019.100490
Lestari,  P.,  dan  Trihadiningrum,  Y.  2019.  The  Impact  of  Improper  Solid  Waste  Management  to Plastic  Pollution  in  Indonesia  Coast  and  Marine  Environment. Marine  Pollution  Bulletin ,  149: p.110505. DOI: 10.1016/j.marpolbul.2019.110505 Nathan,  V.K.,  Vijayan,  J.,    Ammini,  P.  2019.  Comparison  of  Bacterial  Diversity  from  Two Mangrove  Ecosystems  from  India  Through  Metagenomic  Sequencing. Regional  Studies  in Marine Science , 35: p.101184. DOI: 10.1016/j.rsma.2020.101184
Nisticò, R. 2020. Polyethylene terephthalate (PET) in the packaging industry. Polymer Testing . 90: p.106707. DOI: 10.1016/j.polymertesting.2020.106707
Niu, L., Li. Y., Li. Y., Hu, Q., Wang, C., Hu, J., Zhang, W., Wang, L., Zhang, C.,  Zhang, H. 2021.
New Insights into The Vertical Distrbution and Microbial Degradation of Microplastics  in Urban River Sediment. Water Research, 188: p.116449.  DOI: 10.1016/j.watres.2020.116449
Park,  S.Y.,    Kim,  C.G.  2019.  Biodegradation  of  Mirco-Polyethylene  Particles  by  Bacterial Colonization of a Mixed Microbial Consortium Isolated from a Landfill Site. Chemosphere, 222: 527-533. DOI: 10.1016/j.chemosphere.2019.01.159
Pratiwi,  A.D.,  Widyorini,  N.,    Rahman,  A.  2019.  Analisis  Kualitas  Perairan  Berdasarkan  Total Bakteri  Coliform  Di  Sungai  Plumbon,  Semarang. Journal  of  Maquares, 8(3):211-220.  DOI: 10.14710/marj.v8i3.24258
Reysenbach  AL,  Giver  LG,  Wichkham  GS,    Pace  NR.  1992.  Differential  Amplification  of  rRNA genes  by  Polymerase  Chain  Reaction. Applied  and  Environmental  Microbiology ,  58:3417- 3418. DOI: 10.1128/aem.58.10.3417-3418.1992
Tong,  T.,  Li,  R.,  Wu,  S.,    Xie,  S.  2019.  The  distribution  of  sediment  bacterial  community  in mangroves  across  China  was  governed  by  geographic  location  and  eutrophication. Marine pollution bulletin , 140:198-203. DOI: 10.1016/j.marpolbul.2019.01.046
Tyllianakis,  E.,    Ferrini,  S.  2021.  Personal  Attitudes  and  Belieds  and  Willingness  to  Pay  to Reduce  Marine  Pollution  in  Indonesia. Marine  Pollution  Bulletin .  173:  113120.  DOI: 10.1016/j.marpolbul.2021.113120
Waluyo, Lud. 2007. Mikrobiologi Umum. Penerbit Universitas Muhammadiyah Malang.
Weisburg, W.G., Barns, S.M., Pelletier, D.A.,  Lane, D.J. 1991. 16S Ribosomal DNA Amplification for  Phylogenetic  Study. Journal  of  Bacteriology, 173:  698-703.  DOI:  10.1128/jb.173.2.697- 703.1991
Widyananto, P.A., Muchlissin,  S.I, Sabdono, A., Yulianto,  B., Hamki, F.S.,  Radjasa, O.K. 2021. Biodegradation  of  Polyethylene  Microplastic  using  Culturable  Coral  Associated  Bacteria Isolated  from  Corals  of  Karimunjawa  National  Park. Indonedian  Journal  of  Marine  Science .
26(4): 237- 246. DOI: 10.14710/ik.ijms.26.4.237-246 Yuan,  J.,  Ma,  J.,  Sun,  Y.,  Zhou,  T.,  Zhao,  Y.,    Yu,  F.  2020.  Microbial  Degradation  and  Other Environmental  Aspects  of  Microplastics/  Plastics. Science  of  The  Total  Environment .  715: p.136968. DOI: 10.14710/ik.ijms.26.4.237-246