FORMULATION OF KERSON LEAVES ( Muntingia calabura Linn.)
ETHANOL EXTRACT AND EVALUATION OF ITS ACTIVITY AS ANTIACNE AGAINST Propionibacterium acnes
Hanina Liddini Hanifa, Evelin Diaz, Retty Handayani
Fakultas MIPA Universitas Garut, Jl. Jati no 42B, Tarogong Kaler, Garut
Corresponding author: Retty Handayani (rettyhandayani@gmail.com)

## ARTICLE HISTORY
Received:  13 Mei 2019 Revised: 10 Juni 2019                    Accepted: 15 Juli 2019

## Abstract
The  use  of  herbal  medicines  as  preference  therapy  against P.  acnes is increasing. Kerson leaves ( Muntingia calabura Linn.) are potential as antiacne due to its reported antiinflammation and antibacterial activity. The aims of this study were to  optimize  formulation  of  emulgel  of  Kerson  leaves  ethanol  extract  and  to  test  its antiacne  activity  against P.  acnes .  MIC  of  Kerson  leaves  ethanol  extract  was determined  using  disc  diffusion  method.  Optimization  of  emulgel  formulation  was developed using three various Carbopol 940 concentration (0,5; 1,0; dan 1,5%) as gelling  agent  and  using  various  Kerson  leaves  concentration  (3;  4,5;  dan  6%). Evaluation  of  emulgels  prepared  were  organoleptic  appearances  examination, homogeneity  test,  pH  determination,  viscosity  test,  centrifugation  test,  freeze-thaw test, spreadability test, and irritation test. Antiacne activity of emulgel was evaluated using agar diffusion method. Average value of inhibition zone of emulgel with various formulas obtained was compared with inhibition zone of Clindamycin gel. The result showed  emulgel  containing  1,5%  Carbopol  940  and  6%  Kerson  leaves  ethanol extract had the best stability among others formulation of emulgel. Antiacne activity Kerson  leaves ethanol  extract  with  3;  4,5;  dan  6%  concentration  resulted  inhibition zone diameters of 16,12 ± 0,13; 18,20 ± 0,35; and 19,35 ± 0,28 mm.
Keywords: Muntingia calabura Linn., Antiacne, Emulgel

## FORMULASI EMULGEL EKSTRAK ETANOL DAUN KERSEN
( Muntingia calabura Linn.) DAN EVALUASI AKTIVITASNYA

## SEBAGAI ANTIACNE TERHADAP Propionibacterium acnes

## Abstrak
Preferensi  penggunaan  obat  herbal  meningkat  sebagai antiacne untuk melengkapi terapi yang ada. Daun kersen ( Muntingia calabura Linn.) berpotensi sebagai antiacne karena  memiliki  aktivitas  antiinflamasi  dan  antibakteri.
Vol. 10 ; No. 2 ; Tahun 2019 Halaman 146-159
Penelitian  ini bertujuan untuk optimasi formulasi emulgel ekstrak daun kersen dan  pengujian  aktivitasnya  sebagai antiacne terhadap P.  acnes .  KHM  dari ekstrak  etanol  daun  kersen  ditentukan  dengan  metode  difusi  padat.  KHM digunakan  untuk  menentukan  kekuatan  sediaan  emulgel.  Optimasi  formulasi emulgel  dilakukan  pada  variasi  penggunaan  Carbopol  940  (0,5;  1,0;  dan 1,5%)  sebagai gelling  agent dan  variasi  penggunaan  konsentrasi  ekstrak etanol  daun  kersen  (3;  4,5;  dan  6%).  Evaluasi  sediaan  emulgel  yang  dilakukan meliputi  pengamatan  organoleptic,  uji  homogenitas,  pengukuran  pH,  penentuan viskositas,  uji  sentrifugasi,  uji freeze-thaw ,  uji  daya  sebar,  dan  uji  iritasi.  Pengujian aktivitas antiacne emulgel  dilakukan  menggunakan  metode  difusi  agar.  Nilai  rata- rata  zona  hambat  pertumbuhan  bakteri  dari  sampel  uji  dibandingkan  dengan  zona hambat  dari  gel  klindamisin  sebagai  pembanding.  Hasil  optimasi  menunjukkan formula  emulgel  F3  dengan  penggunaan  Carbopol  940  1,5%  dan  kandungan ekstrak  etanol  daun  kersen  6%.  Hasil  uji  aktivitas antiacne emulgel  yang mengandung  ekstrak  etanol  daun  kersen  dengan  konsentrasi  3;  4,5;  dan  6% menghasilkan  zona  hambat  pertumbuhan P.  acnes dengan diameter  16,12  ±  0,13; 18,20 ± 0,35; dan 19,35 ± 0,28 mm.
Kata kunci: Muntingia calabura Linn., Antiacne, Emulgel

## Pendahuluan
Acne  vulgaris merupakan  penyakit  paling  umum  ke-8  di  dunia  yang diderita  oleh  hampir  650  juta  orang  di  seluruh  dunia. [9] Acne merupakan kelainan  pada  kulit  yang  disebabkan  adanya  inflamasi  kronis.  Faktor  terkait munculnya acne secara umum yaitu adanya kelebihan minyak, ketidakseimbangan  hormon,  dan  adanya  infeksi  bakteri  penyebab  jerawat seperti Propionibacterium acnes . [8] Pengobatan  terkini  untuk  acne  yang  dapat digunakan  yaitu  retinoid,  benzoil  peroksida,  sabun  keratolitik,  asam  salisilat, antiandrogen,  antiseborrheic  dan  antibiotik  yang  melawan  infeksi  bakteri penyebab  acne.  Namun,  penggunaan  senyawa-senyawa  tersebut  dapat menyebabkan  efek  samping  terhadap  kulit. [9] Selain  itu,  resistensi P.  acnes dilaporkan  meningkat  terhadap  antibiotik  yang  biasa  digunakan  untuk antiacne [6] , sehingga diperlukan penelitian untuk mencari obat yang potensial sebagai antiacne untuk menggantikan antibiotic tersebut.
Beberapa penyebab tersebut mengakibatkan preferensi penggunaan obat herbal  sebagai antiacne untuk  mengganti  terapi  yang  ada  meningkat. Tanaman  herbal  sebagai  obat  memiliki  kelebihan,  seperti  menghasilkan toleransi  pasien  yang  lebih  baik,  relatif  lebih  murah,  dan  memiliki  efek samping  yang  lebih  rendah. [6][9][11] Obat  dari  tanaman  herbal  juga  dapat digunakan  menjadi  bahan  dalam  penelitian  untuk  menemukan  senyawa  baru yang  memiliki  potensi  sebagai antiacne yang  efektif.  Tanaman  herbal  yang memiliki  potensi  sebagai antiacne yaitu  tanaman  yang  memiliki  aktivitas antiinflamasi  dan  antibakteri.  Senyawa  fitokimia  yang  dilaporkan  memiliki aktivitas  antibakteri  adalah  senyawa  turunan  fenolik,  sehingga  potensi penelitian  untuk  mencari antiacne terbaru  mengarah  pada  tanaman-tanaman yang memiliki senyawa fitokimia turunan fenolik. [10] Salah satu tanaman herbal
Vol. 10 ; No. 2 ; Tahun 2019 Halaman 146-159
yang  memiliki  aktivitas  antiinflamasi,  antibakteri,  dan  memiliki  senyawa fitokimia  turunan  fenolik  adalah  kersen  ( Muntingia  calabura Linn.) [12] ,  sehingga perlu  diteliti  lebih  lanjut  potensi  kersen  terhadap  infeksi  bakteri  penyebab  acne. Selain  kedua  aktivitas  tersebut,  kersen  dilaporkan  memiliki  beberapa  aktivitas  lain seperti antipiretik [16] , anti hipertensi [16] , antioksidan [11] , dan sitoksik [13]
Tanaman  obat  herbal  biasanya  dibuat  ekstrak  atau  fraksi  dan  diformulasi menjadi  sediaan  topikal  agar  lebih  efektif  sebagai  obat antiacne .  Bentuk  sediaan topikal  yang  dapat  dibuat  dalam  penghantaran  obat antiacne adalah  salep,  krim, atau  gel,  namun  ketiga  bentuk  sediaan  ini  memiliki  banyak  kekurangan.  Bentuk sediaan  topikal  salep  dan  krim  biasanya  memiliki  sifat  yang  lengket  dan  memiliki koefisien penyebaran yang lebih rendah sehingga pasien lebih sulit mengaplikasikannya  pada  kulit.  Preferensi  penggunaan  gel  lebih  tinggi  karena  gel lebih  mudah  diaplikasikan,  bersifat  emollient,  dan  tidak  lengket  sehingga memberikan  kenyamanan  yang  lebih  pada  kulit  pasien. [14] Namun,  gel  memiliki keterbatasan  dalam  penghantaran  obat  yang  bersifat  hidrofobik.  Keterbatasan tersebut diatasi oleh bentuk sediaan topikal baru yaitu emulgel. Emulgel merupakan sediaan  emulsi  yang  dicampurkan  dengan gelling  agent .  Emulgel  dapat mengantarkan  obat  hidrofobik  yang  tercampur  pada  fase  minyak  emulsi,  namun memiliki  sifat  seperti  gel  dengan  adanya gelling  agent .  Emulgel  juga  memiliki kemampuan  yang  lebih  tinggi  untuk  berpenetrasi  pada  kulit.  Emulgel  sebagai pengantaran  obat  dermatologi  memiliki  beberapa  sifat  yang  diinginkan  seperti mudah  tersebar,  tidak  lengket  dan  terasa  berminyak,  bersifat  emollient,  mudah dicuci, bio-friendly, bentuk transparan dan memiliki penampilan yang baik. [14]
Dengan  adanya  beberapa  latar  belakang  yang  telah  dijelaskan  diatas, penelitian  ini  bertujuan  untuk mengoptimasi  formulasi  sediaan emulgel  dari  ekstrak etanol daun kersen, dan menguji aktivitasnya terhadap P. acnes , bakteri penyebab jerawat, untuk mengetahui potensinya untuk menjadi obat antiacne yang baru.

## Metode

## Alat
Alat yang digunakan pada penelitian ini antara lain timbangan analitik, spatula, cawan penguap, desikator, oven, pembakar bunsen, evaporator, gelas kimia, gelas ukur,  magnetic  stirer,  mikroskop,  pH  meter Beckman ,  kaca  objek,  termometer, viscometer Brookfield  Helipath  Stand ,  autoklaf,  cawan  petri,  kawat  ose,  inkubator, vorteks, pipet tetes, dan tabung reaksi.

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  daun  kersen  ( Muntingia calabura Linn.), paraffin cair, tween 80, span 80, Carbopol 940, TEA, propilenglikol, metil paraben, propil paraben, aquadest, etanol 96%, toluen, gelatin, gel klindamisin, serbuk  Mg,  HCl  pekat,  pereaksi Mayer ,  pereaksi Dragendorff, FeCl 3 1%,  eter, Mueller Hinton Agar (MHA), dan NaCl 0,9%.
Vol. 10 ; No. 2 ; Tahun 2019 Halaman 146-159

## Bakteri uji
Bakteri uji yang digunakan adalah Propionibacterium acnes yang diperoleh dari Laboratorium Mikrobiologi Universitas Padjadjaran.

## Pembuatan dan karakterisasi simplisia
Daun  Kersen  ( Muntingia  calabura Linn.)  diperoleh  dari  daerah  Cilawu Kabupaten  Garut  dan  dideterminasi  di  Herbarium  Bandungense  Sekolah  Ilmu  dan Teknologi  Hayati  Institut  Teknologi  Bandung.  Daun  kersen  disortasi,  dibersihkan, dikeringkan kemudian digiling menjadi simplisia. Simplisia kemudian dikarakterisasi meliputi  pemeriksaan  kadar  abu  total,  kadar  abu  larut  air,  kadar  abu  tidak  larut asam, kadar sari larut air, kadar sari larut etanol, kadar air dan susut pengeringan. Prosedur  karakterisasi  yang  dilakukan  mengacu  pada  prosedur  dalam  Materia Medika Indonesia.

## Penapisan fitokimia
Penapisan fitokimia simplisia daun kersen yang dilakukan meliputi pemeriksaan alkaloid, flavonoid, saponin, tanin, kuinon, dan triterpenoid/steroid. [4]

## Pembuatan ekstrak etanol daun kersen
Simplisia daun kersen sebanyak 300gram dimaserasi pada suhu kamar dengan pelarut etanol sebanyak 1000 mL selama 24 jam dan diulangi sebanyak 3 kali. Hasil maserasi dipekatkan dengan menggunakan rotary evaporator.

## Penentuan konsentrasi hambat minimum (KHM) ekstrak
Penentuan  KHM  dilakukan  dengan  metode  dilusi  padat.  Sebanyak  1000  µL ekstrak  etanol  daun  kersen  yang  telah  dilarutkan  dalam  pelarut  DMSO  dengan berbagai konsentrasi, ditambahkan ke dalam 19 mL media agar yang telah dicairkan dalam cawan petri steril. Campuran dihomogenkan dan didinginkan sampai menjadi padat.  Satu  Öse  suspensi  bakteri  diambil  dan  digoreskan  di  atas  permukaan  agar padat  kemudian  diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama  18-24  jam.  Konsentrasi minimum  ekstrak  yang  masih  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri  ditentukan dari hasil pengamatan setelah masa inkubasi.

## Formulasi dan evaluasi basis emulgel
Optimasi  basis  emulgel  dilakukan  pada variasi  konsentrasi  Carbopol  940  (0,5; 1,0; 1,5%) sebagai gelling agent . Formula basis yang dibuat ditunjukkan pada Tabel 1. Emulsi dibuat terlebih dahulu dengan menyiapkan fase minyak (paraffin cair, span 80) dan fase air (propilenglikol, tween 80, propil paraben, dan metil paraben) secara terpisah  lalu  masing-masing  fase  dipanaskan  hingga  suhu  ±  70°C.  Kedua  fase dicampur menggunakan ultra turax 300 rpm selama 15 menit.
Basis  gel  dibuat  dengan  mengembangkan  Carbopol  940  dengan  air  panas menggunakan magnetic  stirrer hingga  terbentu  gel  yang  homogen.  TEA ditambahkan sedikit demi sedikit untuk menetralisasi pH basis gel hingga mencapai pH 6 – 6,5. Basis gel dicampurkan dengan emulsi menggunakan ultra turax 400 rpm
Vol. 10 ; No. 2 ; Tahun 2019 Halaman 146-159
selama 20 menit sehingga terbentuk menjadi  basis emulgel. Basis emulgel diamati selama 28 hari penyimpanan meliputi organoleptik, homogenitas, viskositas dan pH. Basis  yang  paling  baik  dan  stabil  digunakan  dalam  formulasi  sediaan  emulgel ekstrak etanol daun kersen.
Tabel 1. Formulasi basis emulgel dengan berbagai konsentrasi Carbopol 940
No Bahan Formula (%) B1 B2 B3 1 Carbopol 940 0,5 1 1,5 2 Paraffin Cair 5 5 5 3 Span 80 15 15 15 4 Tween 80 40 40 40 5 Propilenglikol 5 5 5 6 Metil paraben 0,18 0,18 0,18 7 Propil paraben 0,02 0,02 0,02 8 Etanol 96% 6 6 6 9 TEA Qs Qs Qs 10 Aquadest Add 100 Add 100 Add 100

## Formulasi sediaan emulgel ekstrak etanol daun kersen
Optimasi  formula  sediaan  emulgel  dilakukan  pada  variasi  konsentrasi  ekstrak etanol  daun  kersen  (0;  3;  4,5;  6%)  yang  dicampurkan  dengan  basis  emulgel. Formula basis emulgel untuk sediaan dibuat berdasarkan formula yang paling stabil dari data evaluasi basis emulgel sebelumnya. Prosedur pembuatan sediaan emulgel ekstrak  daun  kersen  sama  dengan  prosedur  pembuatan  basis  emulgel  yang dijelaskan sebelumnya dengan ekstrak etanol daun kersen ditambahkan pada fase air dari emulsi.

## Evaluasi sediaan emulgel ekstrak etanol daun kersen
Evaluasi  sediaan  emulgel  meliputi  pengamatan  organoleptic,  homogenitas, pengukuran pH, pengukuran viskositas, uji daya sebar, uji sentrifugasi, uji Freeze & Thaw , dan uji iritasi.

## Pengamatan organoleptic
Pengamatan  organoleptic,  meliputi  pengamatan  warna  dan  konsistensi, dilakukan selama 28 hari penyimpanan pada hari ke 0, 7, 14, 21, dan 28. Sediaan emulgel  dinyatakan  stabil  bila  tidak  terdapat  perubahan  yang  signifikan  selama waktu penyimpanan.

## Uji homogenitas
Sebanyak  0,1gram  emulgel  diletakan  dan  diratakan  diatas  kaca  objek  lalu diamati  homogenitasnya.  Uji  ini  dilakukan  selama  28  hari  penyimpanan  yaitu  pada
Vol. 10 ; No. 2 ; Tahun 2019 Halaman 146-159
hari  ke  0,  7,  14,  21,  dan  28.  Sediaan  emulgel  dinyatakan  stabil  bila  tidak  terdapat perubahan homogenitas yang signifikan selama waktu penyimpanan.

## Pengukuran pH
Pengukuran pH dilakukan pada 1gram sampel sediaan menggunakan pH meter Beckman. Pengukuran pH dilakukan selama 28 hari penyimpanan yaitu pada hari ke 0,  7,  14,  21,  dan  28.  Sediaan  emulgel  dinyatakan  stabil  bila  tidak  terdapat perubahan pH yang signifikan selama waktu penyimpanan.

## Penentuan viskositas
Penentuan  viskositas  dilakukan  menggunakan Viscometer  Brookfield dengan spindle  no.  6  pada  kecepatan  10  rpm . Nilai  viskositas  diketahui  dengan  cara membaca  skala  kemudian  dikalikan  dengan  faktor  koreksi.  Pengukuran  viskositas dilakukan  selama  28  hari  penyimpanan  yaitu  pada  hari  ke  0,  7,  14,  21,  dan  28. Sediaan emulgel dinyatakan stabil apabila tidak terdapat perubahan yang signifikan selama waktu penyimpanan. [3]

## Uji sentrifugasi
Sampel sediaan  disentrifugasi  dengan  kecepatan  3750  rpm  selama  5  jam. Pengamatan  dilakukan  setiap  interval  waktu  1  jam.  Sediaan  emulgel  dinyatakan stabil apabila tidak ada pemisahan fase saat waktu pengamatan. [5]

## Uji freeze-thaw
Pengujian stabilitas emulgel dilakukan dengan menyimpan sediaan pada suhu beku (±-4°C) selama 24 jam, lalu ditempatkan di suhu yang lebih tinggi yaitu (±45°C) selama 24 jam. Perlakuan tersebut adalah satu siklus. Penentuan stabilitas diulang sebanyak 5 siklus. [5]

## Uji daya sebar
Sebanyak 0,5gram sediaan emulgel diletakkan  pada kertas grafik yang dilapisi plastik  transparan,  kemudian  ditutup  lagi  dengan  plastik  transparan  dan  didiamkan selama1  menit,  diukur  diameter  sebar  emulgel.  Kemudian  ditambahkan  150gram beban  tambahan  diatas  sediaan  emulgel  dan  biarkan  selama  1  menit,  lalu  diukur diameternya.

## Uji iritasi
Hewan uji yang digunakan yaitu kelinci jantan, ras New Zealand White dengan usia 5 bulan sebanyak 3 ekor dengan bobot kelinci ± 3 kg dengan waktu percobaan selama 72 jam. Bagian punggung setiap kelinci dicukur dan dibersihkan dengan air suling 24 jam sebelum diberi perlakuan. Sebanyak 0,5gram formula emulgel ekstrak etanol  daun  kersen  (F3)  dan  kontrol  negative  yaitu  basis  (F0)  diaplikasikan  pada punggung kelinci dengan luas area 2x2 cm, kemudian ditutup dengan menggunakan kasa.  Pengamatan  eritema  dan  edema  yang  terjadi  dilakukan  selama  3  hari  yaitu pada jam ke-24, 48 dan 72.
Vol. 10 ; No. 2 ; Tahun 2019 Halaman 146-159
Uji  Aktivitas Antiacne Emulgel  Ekstrak  Etanol  Daun  Kersen (Muntingia calabura Linn . )
Metode yang digunakan untuk pengujian antiacne adalah metode difusi agar dengan teknik perforasi. Sampel uji dilarutkan dalam Dimetil Sulfoksida (DMSO). Sebanyak 200  µL  suspensi  bakteri  uji P.  acnes dimasukkan  ke  dalam  cawan  petri  steril, kemudian ditambahkan 20 mL medium Mueller Hinton Agar (MHA) yang masih cair lalu dihomogenkan. Setelah medium memadat, medium dilubangi dengan perforator kemudian  sebanyak 50 µL sampel uji  dan pembanding gel klindamisin  dimasukkan ke  dalam  masing-masing  lubang.  Cawan  petri  diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama 18-24  jam.  Diameter  zona  hambat  pertumbuhan  bakteri  uji  diukur  menggunakan jangka  sorong.  Zona  hambat  bakteri  ditunjukkan  sebagai  zona  bening  di  sekitar sumuran.  Pengujian  dilakukan  3  kali  untuk  setiap  formula,  kemudian  dihitung  nilai rata-rata efek antiacne untuk masing-masing formula.

## Hasil
Karakterisasi  dan  penapisan  fitokimia  simplisia  daun  kersen  ( Muntingia calabura Linn.)
Bahan  daun  kersen ( Muntingia  calabura Linn.) dikumpulkan  dari  Cilawu, Kabupaten  Garut.  Daun  kersen  kemudian  diolah  menjadi  simplisia  dan dikarakterisasi  meliputi  beberapa  parameter  mutu.  Hasil  karakterisasi  ditunjukkan pada tabel 2.
Tabel 2. Karakterisasi simplisia daun kersen ( Muntingia calabura Linn.)
Selain  karakterisasi  parameter  mutu,  penapisan  fitokimia  simplisia  daun kersen dilakukan untuk mengetahui kemungkinan senyawa kimia yang terkandung di dalam simplisia tersebut. Hasil penapisan ditunjukkan pada tabel 3.
Parameter Hasil (%) Kadar abu total 8,43 Kadar abu larut air 4,75 Kadar abu tidak larut asam 2,33 Kadar sari larut air 19,24 Kadar sari larut etanol 15,57 Kadar air 9,5 Susut pengeringan 13
Vol. 10 ; No. 2 ; Tahun 2019 Halaman 146-159
Tabel 3. Penapisan fitokimia simplisia daun kersen ( Muntingia calabura Linn.) Senyawa Kimia Hasil Alkaloid + Flavonoid + Saponin + Tanin + Kuinon + Steroid/Triterpenoid +

## Penentuan Konsentrasi Hambat Minimum Ekstrak Etanol Daun Kersen
Penentuan  konsentrasi  hambat  minimum  dilakukan  menggunakan  metode dilusi padat. Penentuan konsentrasi hambat minimum bertujuan untuk menentukan kepekaan  bakteri P.  acnes terhadap  ekstrak  etanol  daun  kersen  dengan menghitung  konsentrasi  minimum  yang dapat menghambat  pertumbuhan mikroba tersebut
Gambar 1. Penentuan konsentrasi hambat minimum (KHM) ekstrak etanol daun kersen ( Muntingia calabura Linn.) berbagai konsentrasi, A = 2,625%; B = 2,750%; C = 2,875%; D = 3,000%; E = 3,125%
A B C D E + Pertumbuhan Bakteri + Pertumbuhan Bakteri + Pertumbuhan Bakteri - Pertumbuhan Bakteri - Pertumbuhan Bakteri
Vol. 10 ; No. 2 ; Tahun 2019 Halaman 146-159

## Parameter fisik basis emulgel
Evaluasi  parameter  fisik  meliputi  pemeriksaan  organoleptis,  homogenitas basis,  pengukuran  pH  menggunakan  pH  indikator,  dan  penentuan  viskositas dengan Brookfield pada kecepatan 20 rpm.
Tabel 4. Hasil evaluasi parameter fisik basis emulgel
Formulasi Warna Konsistensi  Homogenitas  pH Viskositas rata-rata (Cps) B1 Kekuningan, transparan Agak kental Homogen 6 5160 B2 Kekuningan, transparan Agak kental Homogen 6 5620 B3 Kekuningan, transparan Agak kental Homogen 6 6720

## Formulasi Sediaan Emulgel Ekstrak Etanol Daun Kersen
Tabel 5. Formulasi sediaan  emulgel dengan berbagai konsentrasi ekstrak etanol daun kersen ( Muntingia calabura Linn.)

## Parameter fisik sediaan emulgel
Evaluasi  parameter  fisik  dari  formulasi  emulgel  ekstrak  etanol  daun  kersen ( Muntingia  calabura Linn.)  dilakukan  pada  hari  ke  0,  7,  14,  21,  28.  Tidak  ada perubahan signifikan pada parameter fisik selama 28 hari tersebut.
No Bahan Formula (%) F0 F1 F2 F3 1 Ekstrak - 3 4,5 6 2 Carbopol 940 1,5 1,5 1,5 1,5 3 Paraffin Cair 5 5 5 5 4 Span 80 15 15 15 15 5 Tween 80 40 40 40 40 6 Propilenglikol 5 5 5 5 7 Metil paraben 0,18 0,18 0,18 0,18 8 Propil paraben 0,02 0,02 0,02 0,02 9 Etanol 96% 6 6 6 6 10 TEA Qs Qs Qs Qs 11 Aquadest Add 100 Add 100 Add 100 Add 100
Vol. 10 ; No. 2 ; Tahun 2019 Halaman 146-159
Tabel 6. Hasil evaluasi parameter fisik sediaan emulgel ekstrak

## Uji Daya Sebar
Gambar 2. Perubahan daya sebar emulgel ekstrak etanol daun kersen pada pengamatan hari ke- 0,7,14,21,28.
Uji sentrifugasi dan uji freeze-thaw
Evaluasi  stabilitas  dipercepat  yang  dilakukan  pada  emulgel  ekstrak  etanol daun kersen yaitu uji sentrifugasi dan uji freeze-thaw .
Tabel 7. Hasil evaluasi stabilitas dipercepat emulgel ekstrak
Formula Uji Sentrifuga Uji Freeze-Thaw F0 Tidak Memisah Tidak Memisah F1 Tidak Memisah Tidak Memisah F2 Tidak Memisah Tidak Memisah F3 Tidak Memisah Tidak Memisah
Formula Warna Konsistensi Homogenitas pH rata- rata Viskositas rata-rata (Cps) F0 Kekuningan, transparan Agak kental Homogen 6,34 6870 F1 Coklat tua Agak kental Homogen 5,32 4820 F2 Coklat tua Agak kental Homogen 5,72 7420 F3 Coklat tua Agak kental Homogen 5,98 9610
Vol. 10 ; No. 2 ; Tahun 2019 Halaman 146-159

## Uji Iritasi
Gambar 3. Uji iritasi emulgel ekstrak etanol daun kersen pada kelinci
Tabel 8. Uji iritasi emulgel ekstrak etanol daun kersen pada 3 ekor kelinci
selama 72 jam Formula Kelinci Jam ke- 24 48 72 F0 A 0 0 0 B 0 0 0 C 0 0 0 F3 A 0 0 0 B 0 0 0 C 0 0 0 Skor: 0  tidak ada eritema; 1  sedikit eritema (ringan); 2  eritema sedang;
3  eritema berat dengan ada atau tidaknya edema

## Uji Aktivitas Antiacne
Tabel 9. Uji aktivitas antiacne emulgel ekstrak etanol daun kersen Formula Zona Hambat (mm) Rata-Rata ± SD (mm) Cawan 1 Cawan 2 Cawan 3 F0 0 0 0 0 F1 16,00 16,25 16,05 16,12 ± 0,13 F2 17,85 18,55 18,20 18,20 ± 0,35 F3 19,65 19,10 19,35 19,35 ± 0,28 Gel klindamisin 29,95 29,35 29,75 29,67 ± 0,31 F0-a F0-b
F0-c F3-a
F3-b F3-c Keterangan: F0-a, b, c = Emulgel tanpa ekstrak etanol daun kersen ( Muntingia calabura Linn.)
F3-a, b, c = Emulgel dengan  ekstrak etanol daun kersen ( Muntingia calabura Linn.) 6%
Vol. 10 ; No. 2 ; Tahun 2019 Halaman 146-159

## Pembahasan
Kebenaran  tanaman  daun  kersen  ( Muntingia  calabura Linn.)  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  telah  dikonfirmasi  dari  hasil  determinasi.  Dari  3000gram  bobot basah  daun  kersen,  persentase  bobot  kering  yang  didapatkan  adalah  12%.  Acuan mutu  hasil  karakterisasi  simplisia  daun  kersen  tidak  terdapat  dalam  MMI,  sehingga acuan mutu yang digunakan adalah acuan mutu karakterisasi simplisia secara umum. Berdasarkan  acuan  tersebut,  simplisia  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  memenuhi syarat  mutu  karakteristik  simplisia  sehingga  layak  untuk  digunakan.  Hasil  penapisan fitokimia  menunjukkan  bahwa  simplisia  daun  kersen  ( Muntingia  calabura Linn.) mengandung  alkaloid,  flavonoid,  saponin,  tanin,  kuinon  dan  steroid/triterpenoid. Metode ekstraksi yang digunakan pada penelitian ini adalah metode maserasi dengan pelarut  etanol,  karena  belum  diketahui  secara  pasti  stabilitas  terhadap  panas  dari konstituen  simplisia  yang  memberikan  aktivitas  anti  acne,  sehingga  penggunaan metode  ekstraksi  dingin  (maserasi)  mencegah  kerusakan  konstituen  tersebut.  Hasil rendemen ekstrak kental yang diperolah adalah 12,67%.
Hasil penentuan KHM dengan metode dilusi padat pada 5 konsentrasi ekstrak yang  berbeda  menunjukkan  bahwa  konsentrasi  3%  adalah  konsentrasi  ekstrak  daun kersen minimum yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri P. acnes , ditunjukkan dengan  tidak  adanya  koloni  bakteri  yang  tumbuh pada media  pertumbuhan.  Sebelum ekstrak  daun  kersen  diformulasikan  menjadi  sediaan  emulgel,  dilakukan  terlebih dahulu  optimasi  basis.  Optimasi  basis  emulgel  dilakukan  pada  tiga  konsentrasi Carbopol  940  yang  berbeda.  Hasil  evaluasi  organoleptis,  konsistensi,  homogenitas, dan  uji  pH  selama  28  hari  penyimpanan  dari  ketiga  formula  basis  menunjukkan  hasil evaluasi yang sama, yaitu basis berwarna kuning transparan, konsistensi agak kental, homogenitas  yang  baik  dalam  penyimpanan,  dan  pH  6.  Hasil  tersebut  menunjukkan ketiga  formula  basis  memiliki  stabilitas  yang  baik  dan  pH  yang  memenuhi  syarat  pH ideal  sediaan  topikal  (4,5 –  6)  yang  mendekati  pH  fisiologis  kulit. [12] Perbedaan  hasil evaluasi ketiga basis ditunjukkan oleh hasil uji viskositasnya. Viskositas basis emulgel paling  baik  yaitu  viskositas  basis  B3  (6720  Cps)  dengan  konsentrasi  Carbopol  940 1,5% dibanding viskositas dua basis lainnya (5160 dn 5620 Cps), sehingga formula B3 yang dipilih sebagai basis sediaan emulgel ekstrak daun kersen.
Optimasi formulasi emulgel ekstrak daun kersen dilakukan pada 3 konsentrasi ekstrak  yang  berbeda  yang  dicampurkan  dengan  basis  B3.  Penentuan  konsentrasi ekstrak  dilakukan  menggunakan  data  KHM  yaitu  1x  KHM  (3%)  sebagai  formula  F1, 1,5x  KHM  (4,5%)  sebagai  formula  F2,  dan  2x  KHM  (6%)  sebagai  formula  F3.  Hasil evaluasi organoleptis, konsistensi, dan homogenitas ketiga formula menunjukkan hasil yang sama yaitu berwarna coklat tua, konsistensi agak kental, dan homogenitas yang baik  dalam  28  hari  penyimpanan.  Hasil  pengujian  pH  menunjukkan  F1  menghasilkan pH  rata-rata  5,32,  F2  menghasilkan  pH  rata-rata  5,72  dan  F3  menghasilkan  pH  rata- rata  5,98.  Penggunaan  ekstrak  dengan  konsentrasi  yang  lebih  tinggi  menyebabkan kenaikan rata-rata pH sediaan, namun pH rata-rata ketiga formula yang diuji selama 28 hari memenuhi syarat pH sediaan topikal (4,5 – 6). Hasil uji viskositas menunjukkan F1 memiliki  viskositas  yang  lebih  rendah  dibanding  basis  sehingga  F1  kurang  optimal sebagai  formula  emulgel.  Perbandingan  hasil  uji  viskositas  ketiga  formula menunjukkan  kandungan  ekstrak  yang  lebih  tinggi  menghasilkan  kenaikan  viskositas
Vol. 10 ; No. 2 ; Tahun 2019 Halaman 146-159
rata-rata dalam 28 hari penyimpanan. Dari ketiga formula, viskositas yang paling baik yaitu F3 (9610 Cps).
Pengukuran  daya  sebar  dilakukan  untuk  mengetahui  kemudahan  aplikasi sediaan  emulgel  pada  kulit  dengan  melihat  kemampuan  sediaan  emulgel  ekstrak etanol  daun  kersen  tersebut  menyebar. [1] Dari  hasil  pengujian  daya  sebar,  ketiga formula  memiliki  diameter  penyebaran  yang  diinginkan  (>50  mm,  <70  mm)  dan dikategorikan  sebagai  semifluid  emulgel. [2] Untuk  mengevaluasi  stabilitas  sediaan terhadap gaya mekanik dan suhu selama penyimpanan, dilakukan  pengujian stabilitas dipercepat  yaitu  uji  sentrifuga  dan  uji freeze-thaw .  Hasil  dari  kedua  uji  stabilitas  ini menunjukkan  tidak  adanya  perubahan  fasa  dan  homogenitas  dari  emulgel.  Hal  ini menunjukkan  ketiga  formula  memiliki  stabilitas  yang  baik  selama  penyimpanan. Pengujian lainnya yaitu uji iritasi primer kualitatif pada kulit punggung kelinci. Pengujian dilakukan  triplo.  Formula  yang  digunakan  pada  pengujian  ini  adalah  F3  dengan konsentrasi  ekstrak  paling  tinggi,  dibandingkan  dengan  basis.  Hasil  dari  pengamatan uji iritasi, eritema dan edema tidak muncul baik pada kulit kelinci yang dioleskan basis maupun  emulgel  F3.  Hal  ini  menunjukkan  formula  F3  tidak  bersifat  iritan  dan  aman digunakan pada kulit.
Pengujian  aktivitas antiacne sediaan  emulgel  terhadap P.  acnes dilakukan dengan  pembanding  gel  klindamisin.  Hasil  uji  aktivitas antiacne pada  Tabel  9 menunjukkan  ketiga  formula  emulgel  memiliki  efek  aktivitas antiacne dengan  adanya zona hambat yang terlihat. Efektivitas emulgel F3 sebagai antiacne paling baik diantara ketiga  formula  emulgel  yang  diujikan,  namun  efektivitas  F3  sebagai antiacne masih dibawah  efektivitas  gel  klindamisin  sebagai  pembanding.  Hipotesis  dari  hasil  uji  ini, aktivitas  daun  kersen  lebih  rendah  dari  pembanding  karena  pada  penelitian  ini simplisia daun kersen hanya dibuat ekstrak. Perlu dilakukan penelitian lanjutan seperti pengujian aktivitas fraksi dari ekstrak daun kersen, hingga isolasi senyawa bioaktifnya untuk mengetahui efektivitas dari aktivitas antiacne daun kersen secara menyeluruh.

## Kesimpulan
Konsentrasi  minimum  ekstrak  etanol  daun  kersen  yang  dapat  menghambat pertumbuhan P.  acnes yaitu  konsentrasi  ekstrak  3%.  Hasil  optimasi  dan  evaluasi formulasi  emulgel  dengan  3  formula  yang  berbeda  (F1,  F2,  dan  F3)  menunjukkan formula emulgel F3 dengan penggunaan Carbopol 940 1,5% dan kandungan ekstrak etanol daun kersen 6% memiliki stabilitas yang paling baik. Hasil uji aktivitas antiacne emulgel  yang  mengandung  ekstrak  etanol  daun  kersen  dengan  konsentrasi  3;  4,5; dan  6%  menghasilkan  zona  hambat  pertumbuhan P.  acnes dengan  diameter  16,12; 18,20; dan 19,45 mm. Zona hambat yang dihasilkan dari ekstrak daun kersen masih kurang  efektif  dibandingkan  gel  klindamisin  yang  menghasilkan  zona  hambat  29,67 mm.  Perlu  dilakukan  penelitian  lanjutan  untuk  menguji  aktivitas  fraksi  dari  ekstrak daun  kersen  hingga  menemukan  konstituen  senyawa  fitokimia  daun  kersen  yang potensial sebagai obat antiacne.
Vol. 10 ; No. 2 ; Tahun 2019 Halaman 146-159

## Daftar Pustaka
1.  Gandhi  SV,  Nilgar  NM,  Bhalekar  MR.  Formulation  and  evaluation  of phytoconstituents  emulgel  for  the  treatment  of  varicose  veins.  Ejpmr,  2018,5(7), 432-439
2.  Garg  A.,  et  al.  Spreading  of  Semisolid  Formulations:  An  Update.  Pharm.  Tech. 2002
3.  Haneefa  M, et  al., Formulation  and  Evaluation  of  Herbal  Emulgel  of  Pothos scandens  Linn  for  Burn  Wound  Healing  Activity.  J.  Pharm.  Sci.  &  Res.  Vol.  6(2), 2014, 63-67
4.  Harbone  JB.  Phytochemical  methods:  A  guide  to  modern  techniques  of  plant analysis. Chapman and Hall Ltd., London, 1973, p. 279
5.  Jufri  M, et  al., Formulation,  Stability  Test  and  in  vitro  Penetration  Test  of  Emulgel from Tobacco Leaves Extract. J Young Pharm, 2018; 10(2) Suppl: s69-s72
6.  Kapoor  S,  Saraf  S.  Topical  Herbal  Therapies  an  Alternative  and  Complementary Choice to Combat Acne. Research Journal of Medicinal Plants, 2011, 5: 650-669.
7.  Kopaei,  R.  Medicinal  plants  and  the  human  needs.  J  Herb  Med  Pharmacol. 2013;1(1):1 –2.
8.  Mahmood ND, et al. , 14. Muntingia  calabura :  A  review  of  its  traditional  uses, chemical properties, and pharmacological observations. Pharm. Biol., 2014, 52(12)
9.  Nasri H, et al. 8. Medicinal Plants for the Treatment of Acne Vulgaris: A Review of Recent Evidences. J Microbiol. 2015 Nov; 8(11): e25580. DOI: 10.5812/jjm.25580
10. Peck  GL,  Olsen  TG,  Yoder  FW,  Strauss  JS,  Downing  DT,  Pandya  M,  et  al. Prolonged  remissions  of  cystic  and  conglobate  acne  with  13-cis-retinoic  acid.  N Engl J Med. 1979;300(7):329 –33. DOI: 10.1056/NEJM197902153000701.
11. Preethi K, Vijayalakshmi N, Shamna R, Sasikumar JM. In Vitro Antioxidant Activity of  Extracts  from  Fruits  of  Muntingia  calabura  Linn.  from  India.  Pharmacognosy Journal, 2010, 2(14), 11-18. DOI: https://doi.org/10.1016/S0975-3575(10)80065-3
12. Proksch E. pH in nature, humans and skin. J Dermatol. 2018 Sep;45(9):1044-1052. doi: 10.1111/1346-8138.14489
13. Sufian  AS, et  al.,  13. Isolation  and  identification  of  antibacterial  and  cytotoxic compounds  from  the  leaves  of Muntingia  calabura L. J .  Ethnopharmacol,  2013, 146(1), 198-204
14. Yadav SK, Mishra MK, Tiwari A, Shukla A. Emulgel: A New Approach for Enhanced Topical Drug Delivery. Int J Curr Pharm Res, 2016, 9(1), 15-19. DOI:   http://dx.doi.org/10.22159/ijcpr.2017v9i1.16628
15. Yapar EA, Inal O, Erdal MS. Design and in vivo evaluation of emulgel formulations including  green  tea  extract  and  rose  oil.  Acta  Pharm.  63  (2013)  531 –543.  DOI: 102478/acph-2013-0037
16. Zakaria ZA, et al., The In Vitro Antibacterial Activity of Muntingia calabura Extract. Int J Pharmacol., 2016, 2(4), 439-442