E-ISSN :2527-712x Vol.5 (no.1) Juni 2020

## Jurnal Analis Laboratorium Medik
Avalilable Online http://e-journal.sari-mutiara.ac.id/index.php/ALM

## STUDI PERBANDINGAN KADAR FOSFOR DARI FOSFOLIPID MEMBRAN ERITROSIT NORMAL DAN ERITROSIT PENDERITA HIPERTENSI
Maniur Arianto Siahaan 1
1 Fakultas Farmasi dan Ilmu Kesehatan, Universitas Sari Mutiara Indonesia Email:maniursiahaan12@gmail.com

## ABSTRAK
Penelitian  dilakukan  untuk  mengetahui  jenis  fosfolipid  dan  konsentrasi  fosfor  dalam  total  fosfolipid  yang diekstrak  dari  eritrosit  dari  pasien  tekanan  darah  normal  dan  pasien  hipertensi.  Sampel  darah  dari  pasien tekanan  darah  normal  dan  pasien  hipertensi  dipisahkan  dengan  alat  sentrifuse  untuk  mendapatkan  eritrosit yang dkemudian diekstraksi untuk mendapatkan lipid. Jenis fosfolipid ditentukan dengan chromatografi lapis tipis  dan  konsentrasi  fosfor  diukur  dengan  spektrofotometri.  Kedua  sampel  darah  tesebut  mengandung  jenis fosfolipid,  namun  konsentrasi  fosfor  total  fosfolipid  pada  eritrosit  penderita  hipertensi  lebih  tinggi dibandingan  dengan  penderita  tekanan  dara  normal,  atau  rata-rata  3.2376  mg/ml  dari  eritrosit  penderita hipertensi dan 1.6199 mg/ml dari penderita tekanan  darah  normal.

## Kata Kunci : Eritrosit,hipertensi

## ABSTRACT
Research  was  done  to  determine  the  phospholipid  types  and  the  phosphorus  concentration  in  the  total phospholipids  extracted  from  the  erythrocytes  from  patients  with  normal  blood  pressure  and  patients  with hypertention. Bloods samples from normal bloods pressure patients and hypertention patients were separated by centrifuge to obtain erythrocytes which were then extracted to obtain lipids. The phospholipids types were determined  by  thin  layer  hromatography  and  the  phosphorous  concentration  were  measure  by spectrophotometry.  Both  blood  samples  contained  the  phospholipid  types,  however  the  phosphorous concentration  of  total  phospholipid  was  highes  in  erythrocytes  of  the  hypertention  patient  than  the  normal blood  pressure  patien,  or  an  average  of  3,2376  mg/ml  from  erythrocytes  of  hypertention  patient  and  1,6199 mg/ml from normal blood pressure patien
Keywords : Erythrocytes,Hypertention

## PENDAHULUAN
M embran  sel  yang  sangat  tipis  hanya  dapat divisualisasikan  dengan  pembesaran  tinggi menggunakan mikrosop elektron.Setiap membran tebalnya 10 nm.Pemeriksaaan dengan alat ini memperlihatkan bahwa membran terdiri
dari 3 lapisan  yang tampak sebagai 2 garis gelap yang dipisahkan oleh ruang yang jernih.
Untuk mengamati membran sel dilakukan dengan cara mengisolasinya dari sel dan memerik molekul-molekul penyusun.Sel darah  merah atau eritrosit  merupakan  sumber  yang  baik  sebagai preparat membran murni.Analisi kimia
menunjukkan bahwa membran sel mengandung kira-kira 50% lipid dan 50% protein.
Lipid  yang  membentuk  membran  sel terdiri  atas  65%  fosfolipid,25%  kolesterol  dan 10%  senyawa  lain.  Fosfolipid  adalah  molekul- molekul  ampifilid  yang  setiap  molekulnya mengandung  bagian  yang  bersifat  hidrofilik atau  larut  dalam  air  yaitu  bagian  kepala,dan sebagian  beersifat  hidrofobik  yang  tidak  larut dalam air sebagai ekor.
Dalam  Jumlah  kecil  molekul-molekul fosfolipid  akan  menyebar  pada  permukaan  air membentuk lapisan tunggal dimana bagian ekor akan saling rapat menghadap keudara sedangkan  bagian  kepala  bersentuhan  dengan air.Pada struktur membran sel 2  lapisan seperti ini  (ekor  dengan  ekor)  membentuk  lapisan ganda fosfolipid.
Pada  penderita  hipertensi,lapisan  dari dinding pembuluh darah menebal sebagai usaha untuk melakukan kompensasi terhadap tekanan darah  yang  tinggi.Hal  ini  menyebabkan terjadinya aliran darah menjadi sempit sehingga sulit  mengalir  mengakibatkan  tekanan  darah meningkat.Penyempitan  ini  disebabkan  oleh peningkatan  sintesis  lipid  yang  juga  akan meningkatkan kadar lipid dalam darah.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Penelitian  ini  menggunakan  alat  berupa sentrifuse,spektrofotometer  1001,pelat  kaca 20x20 cm,chamber,microsyring,dan lampu UV. Bahan  yang  digunakan  adalah  darah  normal dan darahhipertensi,NaCl,Kloroform,Metanol,Asa m Asetat,Silika Gel G60,Sodium. Moliddat,Spingomielin,Fosfatidil kolin,fosfatidil etanolamin.

## Penyamplingan
Sampel  darah  dengan  tekanan  normal  diambil dari bank darah PMI RS Pirngadi
Medan,sedangkan  sampel  penderita  Hipertensi diambil  dari  pasien  yang  dirawat  di  RS Pirngadi  Medan  dengan  tekanan  darah  lebih
besar sama dengan 160 mmHg tanpa memperhatikan  waktu  pengambilan,usia  dan jenis kelamin,serta sebab terjadinya hipertensi.

## Ekstraksi Lipid Total dari Eritrosit
Dilakukan  dengan  metode  Bligh  dan  Dyer dimana  darah  sebanyak  1  ml  dalam  0,1  ml antikoagulan EDTA disentrifugasi.Endapan  yang diperoleh  dicampur  dengan  1  ml  NaCl  0,9% kemudian  disentrifugasi.Endapan  atau  eritrosit yang  diperoleh  dilarutkan  dalam  1  ml  NaCl 0,9%.1  ml  suspensi  eritrosit  diekstraksi  dengan menggunakan  3,75  ml  metanol  kloroform(2:1 v/v).Supernatan  dipindahkan  kedalam  tabung bertutup(ekstrak  1).Residu  diekstraksi  kembali dengan  4,75  ml  metanol:kloroform:air(2:1:0,8 v/v)(Ekstrak  2).Hasil  Ekstrak  1  dan  2  dilarutkan dalam  2,5  ml  campuran  kloroform:air(1:0,8  v/v) disentrifugasi  dimana  semua  lipid  akan  larut dalam  kloroform.Untuk  memperoleh  lipis  total larutan kloroform diuapkan kemudian ditimbang.

## Penentuan Kadar Fosfor dari Fosfoslipida
Ditimbang,4,393  gr  kalium  dihidrogenfosfat  dan diencerkan dengan aquadest hingga 100 ml.Diambil  sebanyak  2  ml  dan  diencerkan dengan  aquadest  sampai  100  ml.Kemudian  1  ml dari larutan tersebut ditambah 0,5 ml asam sulfat 10N  dan  ditambah  dengan  sodium  molibdad 2,5%.  Diukur  serapan  pada  panjang  gelombang 600-700 nm.

## Penentuan Absorbansi Sampel
Fraksi-fraksi fosfolipid diambil 1ml dan
ditambah  0,5  ml  asam  sulfat  10N,dipanaskan sampai bening kemudian didinginkan. Dimasukkan  2  ml  air  dan  dipanaskan  dalam  air mendidih  selama  10  menit,kemudian  ditambah  1 ml  sodium  molibdat  2,5%.Ditambahkan  larutan pereduksi  1  ml  dan  aquadest  hingga  10 ml.Diukur  absorbansi  pada  panjang  gelombang 600 nm.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil penelitian menunjukkan,jenis fosfolipid  yang  diperoleh  secara  kromatografi lapis  tipis  tidak  menunjukkan  perbedaan  jenis antara  eritrosit  dengan  tekanan  darah  normal dan  eritrosit  penderita  hipertensi.Ketiga  jenis fosfolipid  yang  ditentukan  yaitu  lesitin,sefalin dan  spingomielin  semuanya  terdapat  baik  pada eritrosit normal maupun penderita hipertensi.Hal ini menunjukkan bahwa fosfolipid  sebagai  salah  satu  komponen penyusun  membran  pada  eritrosit  normal  dan eritrosit penderita hipertensi adalah sama.Disamping  ketiga  jenis  fosfolipid  ini masih terdapat fosfolipid  yang  lain tetapi tidak dapat ditentukan berdasarkan standar dari jenis tersebut.
Dari  penentuan  kadar  fosfor  fosfolipid  total diperoleh  konsentrasi  fosfor  yang  lebih  tinggi pada eritrosit penderita hipertensi dibandingkan dengan kadar fosofr pada eritrosit normal.Kadar  fosfor  dalam  hal  ini  dapat  juga
menunjukkan kadar fosfolipid yang terdapat pada eritrosit  dimana  setiap  molekul  fosfor  sebagai gugus  ester  phospat  terikat  kepda  molekul  lipid dan  molekul  kecil  lain  seperti  kolin,etanolamin atau  yang  lain  membentuk  fosfolipid  sebagai komponen struktur membran.
Kadar  fosfor  yang  tinggi  pada  eritrosit penderita  hipertensi  disebabkan  tekanan  darah yang tinggi yang menyebabkan membran eritrosit makin  tebal  atau  memperbanyak  komponen- komponen  penyusun  membran.Fosfolipid  untuk menyusun  membran  bersumber  dari  serum darah,yang  juga  dapat  berarti  memperluas permukaan  sel  sehingga  dapat  mengimbangi tekanan  darah  karena  tekanan  darah  akan  relatif berkurang  terhdap  luas  permukaan  yang  makin besar.
Semakin tinggi tekanan darah maka kadar fosfor  dari  fosfolipid  total  akan  semakin  tinggi. Juga  dapat  diketahui  bahwa  tekanan  darah  yang sama besar akan sama menghasilkan kadar fosfor yang berbeda.

## SIMPULAN
Kadar  fosfor  dari  fosfolipid  total eritrosit  penderita  hipertensi  lebih  tinggi dibanding  kadar  fosfor  dari  fosfolipid  total eritrosit  dengan  tekanan  darah  normal  yaitu rata-rata  sebesar  3,2376  mg/ml  eritrosit penderita  hipertensi  dan  sebesar  1,6199  mg/ml eritrosit  normal.jenis  fosfolipid  yang  diperoleh secara  KLT  tidak  berbeda  antara  penderita hipertensi  dengan  normal  dimana  ketiga  jenis fosfolipid  yang  ditentukan  (lesitin,sefalin,dan spingomealin)  sama-sama  ada  pada  eritrosit normal dan pada penderita hipertensi.
.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terima kasih kepada Universitas Sari Mutiara  Indonesia  yang  telah  memberikan dukungan  dalam  menyelesaikan  penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Albert,B.,dkk, Biologi  Molekuler  Sel, alih bahasa  Alex  Trikantjono,  jilid  I,  edisi kelima,  PT.  Gramedia  Pustaka  Utama, Jakarta, 1994
2. Christie, W.W., Lipis analisys Isolation,Separation,Identification and Structural  Analisys  of  Lipids .2nd  edition,
Pengamon Press, Oxford, 2000
3. Culis,  P.R,  Hope,  M.J., Physical  Properties and  Functional  Roles  of  Lipids  in Membranes, In Vancce, D.E, The Benjamin/Cumming  Publishing  Company Inc, 1990 4. Dellman, H.D, and Brown, E.M., Buku Teks Histologi  Veteriner, Alih  Bahasa  Hartono,
R. Edisi ketiga, Universitas Indonesia Press, Jakarta, 1992
5. Gilvery,  R.W.,Goldstein, Biokimia  Suatu pendekatan Fungsional, Airlangga University Press, Surabaya, 1999. 6. Kimball,J.W., Biologi, Jilid I,Erlangga, Jakarta 2005 .
7. King,  B., Cell  Biology, Allen  and  Unwin, London, 1990.
8. Lehninger,  A.L, Dasar-Dasar  Biokimia , Alih  bahasa  Maggi  T,  Erlangga  Jakarta,
2006.
9. Martin,  D.W,.dkk, Biokimia  Harper, Erlangga, Jakarta 2010
10. Pearce, E.C., Anatomy dan Fisiologi Untuk Para medis, Gramedia Jakarta, 2000
11. Poedjiadi,A., Dasar-Dasar
Biokimia, Universitas Indonesia Press, Jakarta, 2000
12. Sastrohamidjojo,H., Kromatografi, Liberty, Yogyakarta, 1991.
13. Smith,T., Tekanan Darah Tinggi Mengapa Terjadi  Bagaimana  mengatasinya, Arcan,
Jakarta, 1991.
14. Susalit, E., Hipertensi,
Pendidikan Kedokteran Berkelanjutan Uji Diri, Penerbit IDI, Jakarta 15. Wirahadikusumah, M., Biokimia
Metabolisme  Energi  Karbohidrat  dan Lipid, Penerbit ITB Bandung, 1985.