Uji Kualitas Air Sumur Dengan Menggunakan Metode MPN ( Most Probable Numbers )

## Riri Novita Sunarti
Dosen Biologi , Fakultas Sains dan Teknologi, UIN Raden Fatah Palembang, Jl. Prof. K.H. Zainal Abidin Fikri No1A KM 3.5, Palembang 30126, Indonesia
* E-mail: vita_77@yaho.com (Riri Novita Sunarti),

## ABSTRACT
Water used for drinking is healthy water that must meet the requirements of Bacteriology, based Kepmenkes RI No: 907 / Menkes / SK / VII / 2002 concerning the terms and monitoring the quality of drinking water, where for the value of the Most Probable Number (MPN) is 0 / 100 ml water samples were analyzed. In the method of testing  microbiological  quality  of  drinking  water  is  used  as  an  indicator Coliform group.  The  purpose  of  this study was to detect the presence of Coliform bacteria in water samples tested wells. Samples were tested in the form of water wells located in the Village RT.V Padang Jati. Research Well Water Quality Test Method Using MPN  (Most  Probable  Numbers)  was  conducted  in  March  2014.  This  study  uses  observation  deskription  is through  direct  observation  to  determine  the  possibility  of Coliform bacteria  and  fecal Coli .  Data  based  on observations  or  surveys  taken  directly  to  the  location  you  made  to  sample,  as  well  as  the  examination  of samples directly in the laboratory to obtain primary data. Results or Coliform MPN index and fecal Coli were compared  using  the  formula  555  Thomas  MPN  table.  The  results  showed  that  all  samples  test  positive  for Coliform bacteria, so it is not fit for use as drinking water.
Keywords: MPN  (Most  Probable  Numbers); Coliform and  fecal Coli ;  LB  (lactose  broth);  BGLB  (Brilliant Green Lactose Broth).

## PENDAHULUAN
Air  adalah  materi  esensial di dalam kehidupan.  Air  sangat  dibutuhkan  oleh  makhluk hidup khususnya sebagai air minum, namun air juga menimbulkan berbagai gangguan kesehatan terhadap  si  pemakai  khususnya  diare.  Oleh  karena itu, air harus bebas dari pencemaran dan memenuhi tingkat  kualitas  tertentu  sesuai  dengan  kebutuhan kadar di dalam tubuh manusia (Sutrisno, 1996).
Menurut  ilmu  kesehatan,  setiap  orang memerlukan air minum sebanyak 2,5 – 3 liter setiap hari termasuk air yang berada dalam makanan. Dan banyaknya  air  yang  diperlukan  tubuh  tergantung pada situasi  dan kondisinya setiap hari dipengaruhi oleh  suhu  udara,  intensitas  gerak  (Rismunandar, 1994).
Air yang harus diminum adalah air yang sehat yang  harus  memenuhi  persyaratan  Bakteriologi, kimia radioaktif dan fisik  berdasarkan KepMenKes RI  No  :  907/MenKes/SK/VII/2002  tentang  syarat- syarat  dan pengawasan  kualitas air minum,  dimana untuk nilai Most probable Number (MPN) yaitu 0 / 100 ml contoh air yang dianalisis (Depkes, 2002).
Pemeriksaan MPN dilakukan untuk pemeriksaan  kualitas  air  minum,  air  bersih,  air badan,  air  permadian  umum,  air  kolam  renang  dan pemriksaan angka kuman pada air PDAM.
Ada 3 macam ragam yang digunakan dalam metode MPN yaitu :
1. Ragam I : 5 x 10 ml, 1 x 1 ml, 1 x 0,1 ml. Untuk  spesimen  yang  sudah  diolah  atau  angka kumannya diperkirakan rendah.
2. Ragam II : 5 x 10 ml, 5 x 1ml, 5 x 0,1 ml. Untuk  spesimen  yang  belum  diolah  atau  yang angka  kumannya  diperkirakan  tinggi.  Kalau perlu penanaman dapat  dilanjutkan dengan 5 x 0,01 ml dan seterusnya.
3. Ragam III : 5 x 10 ml, 1 x 1 ml x 0,1 ml. Adalah ragam alternatif untuk ragam II, apabila jumlah  tabung  terbatas  begitu  pula  persedian media  juga  terbatas,  cara  pelaksanaannya seperti ragam II (Soemarno, 2002).
Dalam  metode  MPN  untuk  air  minum  ada dua tahap pemeriksaan yaitu :
a. Tes Pendahuluan (Presumtive Test) Pemeriksaan  pada  tes  pendahuluan  dengan menginokulasi pada  media Lactose  Broth dilihat  ada  tidaknya  pembentukan  gas  dalam tabung durham setelah di inkubasi selama 24 – 48  jam  pada  suhu  35 o C  –  37 o C.  Bila  terdapat pembentukan  gas  tabung  durham  maka  tes  air minum  menurut  KepMenKes  RI  No.  : 907/MenKes/SK/VII/2002.  bila  setelah  48  jam
tidak  terbentuk  gas,  hasil  dinyatakan  negatif dan tidak perlu melakukan penegasan.
b. Tes Penegasan (Confirmatif Tes)
Pemeriksaan  pada  tes  penegasan  dengan penanaman pada media Brillian Green Lactosa Bile  Broth, dilihat  ada  tidaknya  pembentukan gas  dalam  tabung  durham  setelah  diinkubasi selama  48  jam.  Bila  terbentuk  gas  dalam tabung durham maka tes dinyatakan positif.
Coliform merupakan  suatu  kelompok  bakteri yang  digunakan  sebagai  indikator  adanya  polusi kotoran  dan  kondisi  yang  tidak  baik  terhadap  air, susu  dan  produk  susu.  Adanya  bakteri Coliform di dalam makanan dan minuman. Menunjukan adanya mikroba  yang  bersifat enteropatogenik atau toksigenik yang berbahaya bagi kesehatan (Suriawiria, 1996).
Bakteri Coliform dapat  dibedakan  menjadi  2 kelompok :
1. Coliform  fekal, contoh  : Escherichia  coli, merupakan  bakteri  yang  berasal  dari  kotoran hewan dan manusia. Adanya Escherichia coli dalam air minum, hal ini menunjukkan bahwa air minum yang dikomsumsi telah terkontaminasi  oleh  feses  manusia,  oleh karena  itu  standar  air  minum  mensyaratkan Escherichia coli harus 0/100 ml.
2. Coliform  non  fekal misalnya  : Enterobakter aerogenes
Bagi  manusia  air  minum  ialah  salah  satu kebutuhan utama mengingat air sebagai faktor utama  dalam  penularan  penyakit  khususnya dalam  masyarakat,  maka  tujuan  utama penyedian  air  bersih  atau  air  minum  adalah untuk  mencegah  penyakit  yang  dibawa  oleh air (Suriawira, 1996).
Dalam  metode  uji  kualitas  mikrobiologi  air minum  digunakan  kelompok Coliform sebagai indikator. Coliform sebagai  suatu  kelompok dicirikan  sebagai  bakteri  bentuk  batang,  gram negatif,  tidak  membentuk spora,  aerobik dan anaerobik  fakultatif yang  mengfermentasi  laktosa dengan menghasilkan asam dan gas dalam waktu 48 jam pada suhu 35 o C (Widiyanti, 2004).
Sebagian besar kebutuhan air minum dipenuhi dengan berbagai cara diantaranya dengan menggunakan  air  sumur  gali.  Untuk  keperluan masyarakat  terhadap  air  minum  yang  bermutu  dan aman  untuk  dikomsumsi  serta  memenuhi  syarat sesuai  dengan  ketentuan  dan  peraturan  yang  ada, maka  air  sumur  gali  harus  memiliki  jarak  minimal 10  meter  dari  jamban  (Haryanto,  2002).  Salah  satu wilayah  dimana  masyarakatnya  masih  dominan menggunakan  air  sumur  gali  sebagai  sumber  air
minum  adalah  RT.V  Kelurahan  Padang  Jati Kecamatan Ratu Agung Kota Bengkulu. Dari survei awal  peneliti,  diperoleh  informasi  bahwa  pada setiap  musim  penghujan  masyarkat  RT.V  sering terjangkit  diare,  hal  itu  kemungkinan  dikarenakan jarak  antara  sumur  dengan  jamban  yang  dimiliki masyarakat  tidak  sesuai  dengan  ketentuan  yang berlaku,  sehingga  pada  musim  penghujan  sangat besar  kemungkinan  terjadi  resapan  air  dari  jamban kesumur.  Selain  itu  secara  geografis  lokasi  RT.V berada  pada  wilayah  yang  sangat  berdekatan dengan  selokan,  yang  selain  digunakan  sebagai tempat  pembuangan  sampah  juga  sebagai  saluran akhir  pembuangan  air  limbah  rumah  tangga sehingga  kondisi  selokan  tersebut  sangat  kotor, berbau, airnya berwarna dan mampet.
Berdasarkan  latar  belakang  tersebut  diatas maka  penulis  merasa  tertarik  untuk  meneliti  nilai MPN  pada  air  sumur  dengan  judul  :  Uji  Kualitas Air  Sumur  Dengan  Menggunakan  Metode  MPN (Most Probable Numbers)

## METODOLOGI
Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium  IPA Pendidikan  Biologi  IAIN  Raden  Fatah  Palembang. Waktu  penelitian  dilaksanakan  pada  bulan  Maret 2014.    Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  inkubator,  botol  sampel,  pipet  1  ml  dan  10 ml,    lmpu  spritus,  tabung  reaksi,  16x160  mm  yang didalamnya  berisi  tabung  durham  dengan  posisi terbalik,  rak  tabung,  jarum  ose,  pipet  tetes,  kertas pembungkus botol, autoclave. Bahan yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  air  yang berasal dari sumur gali RT.V Kelurahan Padang Jati dan  media Lactosa  Broth , Brilian  Green  Lactosa Bile  Broth ,  Nacl  fisiologis  0,9%,aquades.    Sampel yang  digunakan  adalah  12  unit  sumur  gali    yang masih aktif digunakan yang berjarak kurang dari 10 m  dari  jamban  penduduk  RT.V  Kelurahan  Padang Jati.  Teknik  pengambilan  sampel  yang  digunakan adalah Purposive sampling.
Penelitian ini menggunakan metode deskripai observasi yaitu melalui pengamatan langsung untuk menentukan  adanya  kemungkinan  bakteri Coliform dan Colitinja.
Data  diambil  berdasarkan  observasi  atau survei  langsung  ke  lokasi  tempat  yang  dijadikan untuk  sampel,  serta  pemeriksaan  terhadap  sampel secara langsung di laboratorium untuk mendapatkan data primer.
Hasil  atau  indeks  MPN Coliform dan Colitinja yang  dibandingkan  dengan  menggunakan tabel MPN 555 formula Thomas.

## Pelaksanaan Penelitian
1. Pembuatan media (Soemarno, 2002)
a. Pembuatan media Lactosa Broth Strength Komposisi :
1) Beefextract 3.0 gram
2) Lactosa 5,0 gram
3) Pepton 5,0 gram
Cara Pembuatan :
Ditimbang  13  gram  serbuk  Lactosa  Broth  dan dilarutkan  dalam  1  L  aquades,  kemudian  di masukkan  sebanyak  10  ml    kedalam  tabung pembiakan  yang  berisi  tabung  durham  dalam posisi  terbalik,  ditutup  kapas,  disterilisasi dalam  autoclave  pada  suhu  121 o C  selama  15 menit.
b. Pembuatan  media  Brilian  Green  Lactosa Broth
Komposisi :
1) Peptone form meat 10 gram
2) Oxbile drief 20 gram
3) Lactose 10 gram
4) Brilian b Green 0,0133 gram
Cara pembuatan :
Ditimbang  40  gram  serbuk Brilian  Green Lactose Broth (BGLB) dan dilarutkan dalam 1 L aquadest kemudian dimasukkan sebanyak 10 ml  kedalam tabung pembiakan yang  berisi  tabung  durham  dalam  posisi terbalik,  ditutup  kapas,  disterilisasi  dalam autoclave pada suhu 121 o C selama 15 menit. 2. Pengambilan Sampel
Sebelum  pengambilan  sampel  perlu dilakukan  persiapan  wadah,  wadah  yang digunakan  adalah  botol  yang  diberi  pemberat yang diikat dengan kawat. Sebelum disterilisasi,  semua  botol  beserta  tali  dan pemberat  dibungkus  dengan  kertas  coklat  dan diikat  dengan  benang  kemudian  distrerilisasi dalam  autoclave  selama  30  menit  dalam  suhu 121 o C dengan tekanan 1 atm.
Sebelum  pengambilan  sampel  tangan dibersihkan  dengan  alkohol  begitu  pula  tali yang diikatkan dengan kedalaman lebih kurang 20  cm  dari  permukaan  air  sumur  dan  biarkan sampai  botol  itu  terisi  penuh.  Setelah  botol penuh  berisi  air  kemudian  ditarik  perlahan- lahan  tanpa  menyentuh  dinding  sumur  setelah itu air dibuang ¼ baian dari air yang ada dalam botol tersebut dan tutup kembali botol tersebut, bungkus  dengan  kertas  steril,  ikat  dengan  tali pada  bagian  leher  botol  kemudian  diberi  label pada botol tersebut.
3. Pemeriksaan Sampel (Soemarno, 2002) Cara pemeriksaan meliputi :
a. Disiapkan semua peralatan kerja
b. Dibersihkan  semua  tempat  kerja  dan desinfektan
c. Dibuka pembungkus botol sampel
d. Dengan  keadaan  tertutup  kocok  botol  25 kali putaran
e. Dilakukan  pemeriksaan  tabung  ganda regam (5 x 10 ml, 5 x 1 ml, 5 x 0,1 ml).
untuk  spesimen  yang  belum  diolah  /  angka kumannya diperkirakan tinggi terdiri dari beberapa tes pendahuluan yaitu :
1) Tes pendahuluan (presumtif tes)
a). Disiapkan  5  tabung  masing-masing  berisi laktose  Broth  Double  Strenght  sebanyak 10 ml (1a. s.d 5a).
b). Disiapkan  5  tabung  masing-masing  berisi Laktose  Broth  Single  Strength  sebanyak 10 ml (1b s.d 5b).
c). Disiapkan 5 tabung masing-masing berisi 10 ml Laktose Broth single strength (1c s.d 5c).
d). Kedalam  tabung  1a  s.d  5a  diinokulasi masing-masing 10 ml sampel air.
e). Kedalam  tabung  1b  s.d  5b  diinokulasi masing-masing 1 ml sampel air.
f). Kedalam  tabun  1c.  s.d  5c  diinokulasi masing-masing 0,1 ml sampel air.
g). Kocok  tabung  perlahan  agar  sampel  air merata menyebar keseluruh bagian media.
h). Inokulasi pada suhu 35 o C selama 24-48 jam.
i). Amati  masing-masing  tabung  untuk  melihat ada atau tidaknya gas, ada gas menunjukkan presumtif positif.
Tes  pendahuluan  yang  positif  ditandai dengan  terbentuknya  gas,  tetapi  hal  ini  belum memastikan  adanya Coliform di  dalam  air,  karena Laktose Broth dapat juga difermentasi oleh bakteri lain  selain Coliform. Oleh  karena  itu,  tes pendahuluannya yang positif dilanjutkan dengan tes penegasan (Confirmatif Tes).
2) Tes Penegasan (Confirmatif Tes)
a). Dari  tiap  uji  pendahuluan  yang  posifit, dipindahkan  1-2  ose  ke  dalam  tabung  uji penegasan  yang  berisi  10  ml  BGLB.  Dari masing-masing  tabung  uji  pendahuluan diinokulasi kedalam 2 tabung BGLB.
b). Satu  seri  tabung  BGLB  diinkubasi  pada suhu  24-48  jam  (untuk  memastikan  adanya Coliform ), dan satu seri yang lain diinkubasi pada  suhu  44 o C  selama  24  jam  (untuk memastikan adanya Colitinja).
c). Pembacaan  dilakukan  selama  24-48  jam dengan  melihat  jumlah  tabungan  BGLB yang menunjukkan positif gas.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil
Karakteristik  populasi  dan  sampel  yang diteliti  adalah  sumur  gali  yang  masih  aktif digunakan  dengan  jarak  kurang  dari  10  meter  dari jamban,  dan  sumur  gali  yang  menjadi  sasaran
adalah  sumur  gali  yang  berada  di  RT.V  Kelurahan Padang Jati.
Dari penelitian yang telah dilakukan terhadap air  sumur  gali  di  RT.  V  Kelurahan  Padang  Jati  di dapatkan hasil MPN pada tabel II.

## Tabel I. Hasil MPN Air Sumur Gali di Rt.V Kelurahan Padang Jati
Kode Sampel Tes Pendahuluan LB 37 0 C Tes Penegasan MPN/100 ml Coliform dan
Coli tinja
Coliform BGLB Suhu 37 o C
Coli tinja BGLB Suhu 44 o C 10 ml 1 ml 0.1 ml  10 ml 1 ml 0,1 ml 10 ml 1 ml 0,1 ml Kontrol 1
2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 0 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 0 5 5 5 4 5 5 5 0 5 5 5 5 0 5 1 2 1 5 5 4 0 5 5 5 5 0 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 0 5 5 5 4 5 5 5 0 5 5 5 5 0 4 0 2 1 4 4 4 0 4 4 4 4 0 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 0 5 5 5 4 5 5 5 0 5 5 5 5 0 4 0 2 1 4 4 4 0 4 4 4
4 0 1600 240 540 170 1600 1600 1600 23 1600 1600 1600 1600 Keterangan : LB : Laktosa Broth                          BGLB
:  Brilian Green Lactosa Bile Broth
MPN :

## Most Probable Number
Dari tabel II dapat di lihat bahwa ke-12 sumur gali  yang  jaraknya  kurang  dari  10  meter  dari jamban  di  wilayah  RT.V  Kelurahan  Padang  Jati ternyata  ditemukan  100%  mengandung Coliform dan Colitinja ,  sehingga  air  tersebut  tidak  layak untuk  di  konsumsi  sebagai  bahan  baku  air  minum oleh masyarakat.

## Pembahasan
Menurut  Widiyanti  (2002)  sampel  yang menunjukkan hasil yang Positif dikarenakan bakteri tersebut memfermentasikan laktosa yang menghasilkan  asam  dan  gas  pada  tabung  BGLB. Dari  hasil  penelitian  penulis  terhadap  nilai  MPN pada  air  sumur  gali  di  Rt.V  Kelurahan  Padang  Jati ternyata  secara  bakteriologis  air  di  daerah  tersebut tidak  memenuhi  persyaratan  yang  dianjurkan menurut
Kep Menkes RI No. 907/menkes/SK/VII/2002. Sedangkan
kadar maksimum Escherichia  coli diperbolehkan  untuk air  minum  menurut  KepMenKes  Ri  No  : 907/MenKes/Sk/VII/2002 adalah 0 atau harus bebas dari mikroorganisme patogen yang biasanya berasal dari  tinja,  sedangkan  100%  sampel  air  di  Rt.V Kelurahan  Padang  Jati  mengandung Coliform dan Coli  tinja. Bakteri Coliform dalam  jumlah  yang banyak bersama-sama dengan tinja akan mencemari lingkungan.  Menurut  Widiyanti  (2002)  Bukti keberadaan Coliform dalam sampel air menunjukkan  bahwa  air  tercemar  oleh  bakteri Escherichia  coli dapat  menyebabkan  penyakit khususnya  diare,  sehingga  bakteri Coliform dijadikan  sebagai  indikator  pencemaran  makanan dan air .
Menurut  Suriawiria  (1996)  jenis  pencemar yang banyak memasuki badan air berasal dari: a. Sumber domestik (rumah tangga, perkampungan, kota pasar dan jalan)
b. Sumber non domestik (pabrik, industri, pertanian, peternakan dan perikanan)
Banyaknya  jumlah  atau  kandungan  bakteri yang  terdapat  pada  sampel  air  sumur  gali  yang berasal dari Rt.V Kelurahan
Padang Jati kemungkinan  besar  disebabkan  oleh  jarak  antara sumur  dengan  jamban  kurang  dari  10  meter. Kondisi  saluran  pembuangan  air  limbah  mampet dan  kurang  memadai,  mengingat  bahwa  berbagai penyakit dibawa oleh air kepada manusia pada saat memanfaatkannya, maka kehati-hatian dalam pengolahan  dan  pemanfaatan  air  untuk  kehidupan sehari-hari sangat diperlukan.
Menurut  Sahar  Haryanto  (2002)  untuk keperluan  masyarakat  terhadap  air  minum  yang aman  untuk  dikonsumsi  serta  memenuhi  syarat sesuai  dengan  ketentuan  dan  peraturan  yang  ada, maka  air  sumur  gali  harus  memiliki  jarak  minimal 10 meter dari jamban.
Hal  ini  sesuai  dengan  pendapat  Lay  (1994) yang menyatakan bahwa  berbagai mikroba patogen sering  kali  ditularkan  melalui  air  yang  tercemar sehingga  dapat  menimbulkan  penyakit  pada manusia  dan  hewan,  mikroba  ini  biasanya  terdapat pada  saluran  pencernaan    dan  mencemari  air melalui tinja
Kegiatan  pengawasan  kualitas  air  minum yang  dilakukan  oleh  pihak  yang  berwenang  secara teratur dan berkesinambungan merupakan salah satu upaya  kontroling  yang  sangat  penting  untuk dilakukan,  khususnya  pada  air  sumur  gali  Rt.V Kelurahan  Padang  Jati  karena  air  merupakan  salah satu kebutuhan pokok masyarakat. Air minum yang memenuhi  syarat  baik  kuantitas  maupun  kualitas sangat  membantu  menurunkan  angka  kesakitan penyakit  perut  terutama  penyakit  diare  pada masyarakat.

## KESIMPULAN
Dari hasil penelitian didapatkan nilai MPN 12 air sumur gali di RT.V Kelurahan Padang Jati tidak
memenuhi  persyaratan  sesuai  dengan  Keputusan Menteri Kesehatan Nomor : 907/MenKes/SK/VII/202 tentang persyaratan
kualitas air minum khususnya keberadaan Coliform dalam air minum. Sehingga air minum yang berasal dari  12    sumur  gali  tersebut  tidak  layak  untuk dikonsumsi  oleh  masyarakat  karena  mengandung Coliform sehingga mempunyai efek yang tidak baik untuk kesehatan.

## DAFTAR PUSTAKA
[1]    Haryanto. S. 1991. Air dan Sanitasi . (online).
(http://www.tempo  .co.id  /medika/  arsip/ 032001 /war-1. htm, diakses 1 maret 2007).
[2] Himalaya.  2006. Air  Sehat  Menyegarkan (online). (http://www himalaya-airsehat. Tripot.com/. Diakses 20 Februari 2007). [3] KepMenkes. 2002. Syarat-syarat dan Pengawasan Kualitas Air Minum . Jakarta. [4] Merteniasih  Ni  Made,  dkk.  2003. Bahaya Cemara Air Minum . (oneline). (http://www.lubuklinggau.go.id/eng/detail.asp ?id= 174. diakses 23 Februari 2007).
[5] Rismunandar.  1994.  Fungsi Air  Dalam Kehidupan Dan Kegunaanya Bagi Pertanian. Bandung: Sinar Baru
[6] Soemarno.  2002. Isolasi  dan  Identifikasi Bakteri  Klinik  Akademi  Analis  Kesehatan Yogyakarta . Departemen Kesehatan RI.
[7] Suriawira.  U.  1996. Air  Dalam  Kehidupan Dan Lingkungan yang Sehat . Penerbit Alumni Bandung.
[8] Suriawira.  U.  1995. Mikrobiologi  Air  dan Dasar-Dasar  Pengolahan  Buangan  Secara Mokrobiologi . Penerbit Alumni Bandung [9] Sutrisno.T,  dkk.1996.  Teknologi  Penyediaan Air Bersih. Jakarta: Rineka Cipta
[10]  Widianti  ni  luh  Putu  Manik,  dkk.  2004. Analisis  Kualitatif  Bakteri  Coliform  Pada Depot Air Minum Isi Ulang di Kota Singaraja Bali . (oneline).
(http:www//group.google .co.id/group/komunitas-Unsri/browse_tread.
Diakses 14  Ferbruari 2007).