## IDENTIFIKASI DAN PENETAPAN KADAR SENYAWA
SAPONIN EKSTRAK ETANOL BUNGA SENGGANI ( Melastoma malabathricum L) METODE GRAVIMETRI
Yuska Noviyanty 1 , Hepiyansori 2 , Berliana Rosita Dewi 1
1 Akademi Farmasi Yayasan Al-Fatah Bengkulu 2 Akademi Analis Harapan Bangsa Bengkulu
Email : yuskanoviyanty@gmail.com

## ABSTRAK
Obat tradisional merupakan warisan budaya nenek moyang yang berasal dari bahan alam  dan  sampai  saat  ini  tetap  digunakan  oleh  masyarakat  secara  luas.  Salah  satu tanaman  yang  dapat  digunakan  sebagai  obat  tradisional  adalah  tanaman  senggani ( Melastoma  malabathricum  L ).  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui senyawa  saponin  yang  terkandung    dari  ekstrak  bunga  senggani  ( Melastoma malabathricum  L )  dan  persen  kadar  saponin  dari  ekstrak  bunga  senggani  ( Melastoma malabathricum L ).
Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol 96% selama 5  hari.  Ekstraksi  yang  diperoleh  kemudian  dipekatkan  dengan  alat rotary  evaporator . Kemudian dilakukan uji kualitatif yaitu identifikasi pada uji busa dan uji warna dan uji kuantitatif dengan metode gravimetri.
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan  ekstrak  etanol  bunga  senggani ( Melastoma  malabathricum  L) mengandung  saponin  jenis  triterpenoid  dilihat  dari adanya  cincin  yang  berwarna  merah  kecoklatan  dan  didapat  kadar  rata-rata  saponin bunga senggani ( Melastoma malabathricum L ) yaitu 11,46 %.
Kata Kunci     : Bunga Senggani, Saponin, Gravimetri

## ABSTRACT
Traditional medicine is an ancestral cultural heritage derived from natural materials and to this day continue to be used by the general public. One of the plants that can be used  as  a  traditional  medicine  is  a  plant  Senggani  (Melastoma  malabathricum  L).  The purpose  of  this  study  was  to  determine  the  saponins  contained  from  flower  extracts Senggani (Melastoma malabathricum L) and percent saponin levels of Senggani flower extract (Melastoma malabathricum L).
Extraction is done by maceration using ethanol 96% for 5 days. Extraction obtained is  then  concentrated  by  means  of  a  rotary  evaporator.  The  results  were  qualitative identification  of  the  foam  test  and  color  test  and  quantitative  assay  with  gravimetric method.
Based  on  research  conducted  Senggani  ethanol  extracts  of  flowers  (Melastoma malabathricum L) contains saponins types of triterpenoids seen from the ring in maroon and obtained the average level of interest saponin Senggani (Melastoma malabathricum L) is 11.46%.
Keywords: Flowers Senggani, saponin, Gravimetry

## PENDAHULUAN
Penggunaan bahan  alam sebagai obat  tradisional  di  Indonesia telah dilakukan oleh nenek  moyang  kita  sejak  berabad-abad  yang  lalu .  Indonesia  dengan  jumlah  penduduk lebih dari 200 juta jiwa, memiliki lebih kurang 30.000 spesies tumbuhan dan 940 spesies diantaranya termasuk tumbuhan berkhasiat (Budi et al., 2013).
Salah satu  tanaman  yang dapat  digunakan sebagai  obat  tradisional  adalah  tanaman senggani  ( Melastoma  malabathricum  L ).  Tanaman  senggani  termasuk  ke  dalam  famili Melastomataceae yang  tumbuh  liar  pada  tempat-tempat  yang  mendapat  cukup  sinar matahari, seperti di lereng gunung, semak belukar, lapangan yang tidak terlalu gersang, atau  di  daerah  objek  wisata  sebagai  tanaman  hias.  Banyak  sekali  penyakit  yang  dapat diobati oleh tanaman ini, diantaranya gangguan pencernaan makanan (dispepsi), disentri basiler,  diare,  hepatitis,  keputihan  (leukorea),  sariawan,  busung  air  dan  bisul.  Bagian tumbuhan yang dapat dimanfaatkan sebagai pengobatan adalah bunga,daun, akar, buah, dan biji (Suryaningsi et al ., 2010).
Tanaman  bunga  senggani  ini  mengandung  senyawa  flavonoid,  tanin,  saponin. Saponin    sebagai  detergen  alami  yang  merupakan  glikosida  non  nitrogen,  glikosida kompleks  atau  metabolit  sekunder  (Wahyuni et  al. ,  2014).  Saponin  memiliki  aktifitas sebagai  anti  mikroba/anti  bakteri,  anti  fungi,  anti  peradangan  sehingga  dapat menyembuhkan  penyakit  diare,  disentri,  sariawan,  keputihan,  serta  bisul  (Arif et  al ., 2008).
Maka  dari  itu  peneliti  tertarik  dan  ingin  melanjutkan  penelitian  terdahulu  untuk menetapkan  kadar  senyawa  saponin  yang  ada  di  dalam  bunga  senggani (Melastoma malabathricum L) dengan menggunakan metode gravimetri.

## METODE PENELITIAN

## Tempat dan waktu penelitian
Penelitian ini akan dilakukan dilaboratorium fitokimia dan kimia dari bulan januari sampai bulan juli 2019.

## Verifikasi Tanaman
Verifikasi  dilakukan  di  fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Laboratorium Biologi Universitas Bengkulu.

## Alat
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  yaitu,seperangkat  alat  refluks,  buret, timbangan  analitik, rotary  evaporator, botol  gelap,  gelas  ukur,  kertas  saring,  tabung reaksi, hot plate, krus, pipet tetes, corong pisah, erlemeyer,batang pengaduk.

## Bahan
Bahan yang digunakan yaitu bunga senggani ( Melastoma malabathricum L ) , etanol 96%,  aquades,  dietil  eter,  etil  asetat,  HCl  2  N,  Matanol,  N-butanol,  Petroleum  eter, kloroform, reaksi LB.

## Prosedur Kerja Penelitian

## Penyiapan Simplisia
Pada umumnya simplisia melewati proses pengumpulan bahan baku, sortasi basah, pencucian, perajangan, pengeringan, sortasi kering dan penyimpanan.

## Proses Ekstraksi
Proses  ekstraksi  dilakukan  dengan  metode  maserasi.  Sebanyak  500  gr  simplisia  bunga senggani ( Melastoma  malabathricum  L.) direndam  dalam  pelarut  etano  96%  didalam botol  gelap  selama  5-7  hari  sesekali  dikocok,  kemudianj  ekstrak  cair  di rotary evaporator agar mendapatkan ekstrak kental.

## Evaluasi Ekstrak Bunga Senggani (Melastoma malabatricum L.)
a. Organoleptis
b. Pemeriksaan makroskopis dan mikroskopis
c. Rendemen
d. Kelarutan
e. Kadar abu
Identifikasi Senyawa Saponin
a. Uji Busa
Simplisia  sebanyak  0,5  gram  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  yang  telah berisikan air panas 10 ml, dikocok dan ditambahkan satu tetes larutan asam klorida 2 N.  Tabung  reaksi  tersebut  didiamkan  dan  diperhatikan  ada  atau  tidak  adanya  busa stabil. Sampel mengandung saponin jika terbentuk busa stabil dengan ketinggian 1-3 cm selama 30 detik ( Suharto et al ., 2014).
b. Uji Warna
Simplisia  sebanyak  0,5  gram  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  yang  telah berisikan  kloroform  10  ml,  dipanaskan  selama  5  menit  dengan  penangas  air  sambil dikocok.  Kemudian  ditambahkan  beberapa  tetes  pereaksi  LB.  Jika  terbentuk  cincin coklat  atau  violet  maka  menunjukkan  adanya  saponin  triterpen,  sedangkan  warna hijau atau biru menunjukkan adanya saponin steroid (Suharto et al ., 2014).

## Penetapan Kadar Saponin Metode Gravimetri
Ditimbang 1,25 g ekstrak kemudian di refluks dengan 50 ml Petroleum Eter pada suhu 60º-80ºC selama 30 menit Setelah dingin larutan petroleum eter dibuang dan residu yang tertinggal dilarutkan dalam 50 ml etil asetat. Larutan dipindahkan ke corong pisah kemudian  dipisahkan  larutan  etil  asetat.  Residu  yang  tertinggal  dilarutkan  dengan  n- butanol  sebanyak  3  kali  masing-masing  dengan  50  ml.  Seluruh  larutan  butanolik dicampur  dan  diuapkan  dengan  rotavapor.  Sisa  penguapan  dilarutkan  dengan  methanol 10 ml kemudian larutan ini diteteskan ke dalam 50 ml dietil eter sambil diaduk. Endapan yang  terbentuk  dalam  campuran  dituang  pada  kertas  saring  yang  telah  diketahui bobotnya. Endapan di atas kertas saring kemudian ditimbang sampai bobot tetap. Selisih
bobot kertas sa ring sebelum dan sesudah penyaringan ditetapkan sebagai bobot saponin (Astrid et al ., 2017).
Analisa  data  dilakukan  secara  univariat  dimana  kadar  saponin  yang  dihitung menggunakan rumus :

## Gambar 1 Penetapan Kadar Senyawa Saponin
Keterangan : X1 = bobot kertas saring (g) X2 = bobot kertas saring + endapan saponin (g) A   = bobot ekstrak etanol Melastoma malabathricum L

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada  penelitian  penetapan  kadar  senyawa  saponin  ekstrak  etanol  bunga  senggani ( Melastoma  malabathricum  L )  yang  telah  dilakukan  dimana  sampel  yang  digunakan diambil  dari  daerah  Kota  Bengkulu.  Kemudian  sampel  uji  yang  digunakan  pada penelitian  ini  dilakukan verifikasi  di  Laboratorium  Universitas  Bengkulu,  verifikasi  ini bertujuan  agar  tidak  terjadi  kesalahan  dalam  pengambilan  bahan  baku,  hasil  verifikasi menyatakan  bahwa    sampel  uji  yang  digunakan  adalah  benar  bunga  senggani ( Melastoma malabathricum L ).
Setelah  melakukan  verifikasi    selanjutnya  dilakukan  uji  makroskopis  dan  uji mikroskopis yaitu pemeriksaan warna bunga ,bentuk bunga ,pangkal bunga, tepi bunga, serta melihat fragmen-fragmen yang ada sesuai buku literatur MMI setelah itu tanaman bunga  senggani  yang  sudah  dikumpulkan  di  sortasi  tujuannya  memisahkan  bunga  dari ranting-ranting  maupun  kotoran  lainnya.  Sampel  yang  sudah  di  sortasi  dicuci  bersih dengan air mengalir dan kemudian dirajang. Tujuan perajangan yaitu untuk memperkecil bentuk  sampel  agar  pada  proses  pengeringannya  lebih  cepat.  Pengeringan  dilakukan dibawah  sinar  matahari.  Hasil  pengeringan  yang  didapatkan  sebanyak  500  gr  yang
kemudian  dilakukan  proses  maserasi  agar  mendapatkan  ekstrak  cair.  Metode  maserasi ini  merupakan  metode  yang  paling  aman,  mudah  dan  sederhana  dilakukan  dengan merendam simplisia kering kedalam larutan etanol perendaman dilakukan selama 7 hari sambil  dikocok.  Didapatkanlah  hasil  ekstrak  cair.  Setelah  itu  dimasukan  kedalam  alat rotary evavorator didaptkanlah ekstrak kental.
Ekstrak kental yang sudah jadi dilakukan evaluasi yang meliputi yang pertama uji organoleptis pemeriksaan warna, warna dari  ekstrak yaitu hitam kemerahan, bau ekstrak khas,  konsistensi  dari  ekstrak  yaitu  cairan  kental.  Uji  rendemen  dilakukan  untuk mengetahui  perbandingan  antara  ekstrak  yang  diperoleh  dengan  simplisia  awal,  hasil simplisia awal seberat 500 gram setelah di ekstrak bobotnya menjadi 105,6 gram dengan nilai  rendemen  21,12%  tujuan  dari  rendemen  yaitu  untuk  melihat  perbandingan  antara simplisia  awal  sampai  menjadi  ekstrak,  semakin  tinggi  hasil  rendemen  maka  semakin banyak  ektrak  yang  tertarik.  Selanjutnya  uji  kelarutan  dengan  air  dan  etanol,  kelarutan ekstrak pada air yaitu 4,25 ml mudah larut dalam air, kelarutan ekstrak pada etanol yaitu 22,9 ml larut  dalam etanol.  Hasil menunjukan ternyata  kelarutan ekstrak  etanol bunga senggani  lebih mudah larut dengan air dari pada  etanol. Kemudian dilakukan uji kadar abu, tujuan dari penetapan kadar abu yaitu untuk melihat atau menggambarkan mineral yang berasal dari proses awal sampai terbentuknya simplisia, hasil uji kadar abu 4,45%, kadar  abu  yang  baik    menurut  MMI  tidak  lebih  dari  8  %  sehingga  kadar  abu  yang terkandung dalam ekstrak bunga senggani memenuhi persyaratan.
Selanjutnya mengidentifikasi  senyawa saponin,  uji busa   Sampel ditarmbahkan air panas    dikocok beberapa menit  kemudian tambahkan satu  tetes HCl 2 N menghasilkan busa  stabil  1-3  cm  hasil  penelitian  menunjukan  busa  tinggi  yang  stabil.  Setelah  itu menguji  uji  warna  Sampel  tambah  kloroform,  dipanaskan  5  menit  sambil  dikocok teteskan  preaksi  LB    akan  terbentuk  cincin  coklat/violet  menunjukan  saponin  triterpen sedang warna hijau atau biru adanya  saponin steroid. Pada penelitian ini terbentuk cicin berwarna  merah  kecoklatan  terlihat  pada  gambar  2.  yang  berarti  saponin  terkandung dalam bunga senggani ini yaitu saponin jenis triterpenoid.
Gambar  2  Hasil  Identifikasi  Uji  Busa  dan  Uji  Warna  Saponin  Ekstrak  Bunga Senggani ( Melastoma malabathricum L)
Busa dapat terbentuk karena saponin mempunyai sifat dapat menurunkan tegangan permukaan  air.  Seperti  sabun,  saponin  mempunyai  molekul  besar  yang  mengandung hidrofilik  dan  lipofilik  dalam  air.  Adsorpsi  molekul  saponin  pada  permukaan  air  dapat menurunkan  tegangan  permukaan  air  yang  dapat  menimbulkan  buih.  Buih    merupakan suatu  struktur  yang  relatif  stabil  yang  terdiri  dari  kantong  udara  terbungkus  dalam lapisan  tipis  cairan,  dispersi  gas  dalam  cairan  yang  distabilkan  oleh  suatu  zat  penurun tegagangan permukaan, dalam hal ini ialah molekul saponin (yustina,2007).
Saponin jenis triterpenoid ini biasa terdapat di tumbuhan dikoti, bunga senggani sendiri termasuk kedalam tumbuhan dikotil. Berikut gambar reaksi saponin triterpenoid dengan preaksi liberman burcard
Gambar 3 Reaksi saponin triterpenoid dengan preaksi lieberman burcard
Substitusi H pada gugus hidroksi dari glikosida saponin triterpenoid dengan gugus CH 3 COO - (preaksi LB) tersebut menyebabkan energi yang dibutuhkan untuk melakukan transisi  elektron  ke  tingkat  eksitasi  menjadi  lebih  kecil.  Oleh  karena  itu,  panjang gelombang menjadi lebih panjang dan intensitas warna lebih meningkat (yustina,2007).
Setelah itu barulah menentukan kadar saponin dengan cara ekstrak bunga senggani di  refluks  dengan  Petroleum  Eter  pada  suhu  60º-80ºC  selama  30  menit  Setelah  dingin larutan  petroleum  eter  dibuang  dan  residu  yang  tertinggal  dilarutkan  dalam  etil  asetat. Larutan  dipindahkan  ke  corong  pisah  kemudian  dipisahkan  larutan  etil  asetat.  Residu yang  tertinggal  dilarutkan  dengan  n-butanol  sebanyak  3  kali.  seluruh  larutan  butanolik dicampur  dan  diuapkan  dengan rotari  evaporator. Sisa  penguapan  dilarutkan  dengan methanol  kemudian  larutan  ini  diteteskan  ke  dalam  dietil  eter  sambil  diaduk.  Endapan yang  terbentuk  dalam  campuran  dituang  pada  kertas  saring  yang  telah  diketahui bobotnya.  Endapan  di  atas  kertas  saring  kemudian  ditimbang  sampai  bobot  tetap. Perlakuan dilakukan sebanyak 3 kali  replikasi  Selisih bobot kertas saring sebelum dan sesudah penyaringan ditetapkan sebagai bobot saponin (Astrid et al ., 2017).
Tabel I Hasil Penetapan Kadar Senyawa Saponin Pada Ekstrak Bunga Senggani
Percobaan penetapan kadar Kadar saponin Replikasi 1 7,2 % Replikasi 2 12% Replikasi 3 15,2% Rata-rata 11,46%
Hasil  yang  dilakukan  dari  tiap  replikasi  didapatkan  hasil  pada  tabel  I,  perbedaan replikasi disebabkan karena faktor pemanasan, mengunakan kompor yang suhunya tidak stabil. Didalam tumbuhan ada banyak manfaat saponin, saponin paling banyak terdapat pada tumbuhan hijau (kusmartono,2008).
Khasiat dari saponin yaitu memiliki aktifitas sebagai anti mikroba/anti bakteri, anti fungi, anti peradangan sehingga dapat menyembuhkan penyakit diare, disentri, sariawan, keputihan,  serta  bisul  (Arif et  al .,  2008).  saponin  triterpenoid  banyak  dimanfaatkan sebagai  ekspektoran  selain  itu  saponin  triterpenoid  mempunyai  aktifitas  antiinflamasi, larvasida, serta dapat meningkatkan reaksi kolestrol (anonim,2006).

## DAFTAR PUSTAKA
Arif,  A.,  Sri,  W.,  Weandarlina,  I.  Y.,  2008,  Isolasi  Dan  Identifikasi  Senyawa  Saponin Ekstrak Metanol Daun, E-journal 3–8.
Asri.,M.,  2018  Identifikasi  metabolid  sekunder  ekstrak  bunga  senduduk  ( Melasthoma malabathricum L.)., Akademi Farmasi Alfatah : Bengkulu Astrid,  N.A.,  Syariful,  A.,  Jamaludin,  2017,  Analisis  Kadar  Metabolit  Ekstrak  Etanol Daun  TAMOENJU  (  Hibiscus  surattensis  L.)  Telah  diuji  secara  kualitatif  ,( Analyze  Total  Level  of  Secondary  Metabolites  from  Ethanol  Extracts  of  Drug Hibiscus), kovalen 3 (3), 258–268.
Budi,  M.  T.,  Fachriyah,  E.,  &  Kusrini,  D.  2013,  Isolasi,Identifikasi  dan  Uji  Aktifitas Senyawa  Alkaloid  Daun  Binahong  (Anredera  cordifolia  (Tenore)  Steenis). Chem Info Journal , 1(1), 196–201. Departemen Kesehatan RI. (1995., Farmakope Indonesia Edisi IV . Jakarta : Departemen Kesehatan RI. Hal.1033.
Departemen  Kesehatan  RI.2000., Parameter  Standar  Umum  Ekstrak  Tumbuhan  Obat, Jakarta.
Ditjen POM. 1989, Materi Medika Indonesia Jilid V , Cetakan V, Jakarta : Departemen Kesehatan Republik Kesehatan halaman 534-541.
Suryaningsih,  A.  E.,  Mulyani,  S.,  &  Retnaningtyas,  E.,  2010,  Aktivitas  Antibakteri Senyawa  Aktif  Daun  Senggani  (Melastoma  candidum  D.Don)  Terhadap  Bacillus Licheniformis. Seminar Nasional Pendidikan Biologi FKIP UNS , 129–136.
Yustina,S,  (2007),.  Isolasi  dan  identifikas  saponin  pada  kecambah  kedelai,  “skripsi”, fakultas farmasi universitas sanata dharma, yogyakarta