## Journal of Pharmaceutical and Health Research
Vol 1, No 2, Juni 2020, pp. 27-31 ISSN 2721-0715 (media online)

## Formulasi Sediaan Krim Menggunakan Kolagen Tulang Ikan Patin
(Pangasius sp.) sebagai Anti Aging
Sudewi 1,* , Nilsya Febrika Zebua 2 , Shelva Filiana Sari 2
1 Fakultas Farmasi, Program Studi Apoteker, Universitas Tjut Nyak Dhien, Medan, Indonesia
2 Fakultas Farmasi, Program Studi Farmasi, Universitas Tjut Nyak Dhien, Medan, Indonesia Email: 1,* boetetsudewi.59@gmail.com, 2 nilsya.zebua@gmail.com, 3 Selvafiliana@gmail.com
Abstrak −Ikan  patin  ( Pangasius sp.)  merupakan  salah  satu  ikan  yang  telah  banyak  dibudidaya  masyarakat  karena  memiliki kandungan  omega  3  yang  tinggi.  Masyarakat  mengkonsumi  daging  ikan  patin  sebagai  sumber  protein  sedangkan  tulang  ikan patin  hanya  dibuang  sebagai  limbah.  Kolagen  merupakan  salah  satu  turunan  protein  yang  mempunyai  efek  untuk mempertahankan kekenyalan kulit. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui apakah tulang ikan patin mengandung kolagen dan adakah  pengaruh  penggunaan  krim  anti  aging  kolagen  tulang  ikan  patin  terhadap  hasil  perubahan  perawatan  kulit  wajah. Karakterisasi  kolagen  menggunakan  alat  spektrofotometri  inframerah  dan  di  formulasikan  kedalam  sediaan  krim  dengan konsentrasi 1%, 1,5%, 2,5%, 3,5% dan evaluasi sediaan meliputi uji homogenitas, pengukuran pH, uji penetapan tipe emulsi, uji stabilitas, uji  iritasi terhadap  kulit sukarelawan  serta  uji efektivitas  anti  aging.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  tulang ikan patin  mengandung  kolagen  pada  bilangan  gelombang  3250-3350  cm -1 dan  1260-1630  cm -1 yang  menunjukkan  adanya  gugus amina  dan  amida.  Penggunaan  krim  kolagen  tulang  ikan  patin  berpengaruh  terhadap  perubahan  tekstur,  kerutan,  kelembaban, noda dan pori menjadi lebih halus. Formulasi terbaik yaitu pada formula yang mengandung 3,5% kolagen tulang ikan patin.
Kata Kunci: Ikan Patin, Tulang, Kolagen, Krim, Anti Aging
Abstract −Patin fish ( Pangasius sp.) is a fish that has been cultivated by many people because it has a high content of omega 3. People consume patin fish meat as a source of protein, while patin fish bones are only disposed of as waste. Collagen is a protein derivative  that  has  the  effect  of  maintaining  skin  elasticity.  This  study  aims  to  determine  whether  the  patin  fish  bones  contain collagen and is there an influence of the use of anti-aging collagen patin fish bone cream on the results of changes in facial skin care. Collagen characterization using infrared spectrophotometry and formulated into cream preparations with concentrations of 1%, 1,5%, 2,5%, 3,5% and evaluation of preparations include homogeneity test, pH measurement, emulsion type determination test, stability test, skin irritation to volunteers and anti-aging effectiveness test. The results showed that patin fish bones contained collagen at wave numbers 3250-3350 cm -1 and 1260-1630 cm -1 which indicated the presence of amine and amide groups. The use of patin fish collagen cream affects the changes in texture, wrinkles, moisture, blemishes and pores become smoother. The best formulation is the formula that contains 3,5% of patin fish bone collagen.
Keywords : Patin Fish, Bone, Collagen, Cream, Anti Aging

## 1. PENDAHULUAN
Ikan  patin  dikenal  sebagai  hewan  yang  bersifat  nokturnal,  yakni melakukan aktivitas  atau  yang  aktif  pada  malam  hari.  Ikan ini suka bersembunyi di liang-liang tepi sungai. Benih ikan patin di alam biasanya bergerombol dan sesekali muncul di permukaan air  untuk  menghirup  oksigen  langsung  dari  udara  pada  menjelang  fajar.  Budidaya  ikan  patin,  media  atau  lingkungan  yang dibutuhkan tidaklah rumit, karena ikan patin termasuk golongan ikan yang mampu bertahan pada lingkungan perairan yang jelek. Walaupun  patin  dikenal  ikan  yang mampu  hidup  pada lingkungan perairan  yang jelek,  namun  ikan ini  lebih menyukai  perairan dengan kondisi perairan baik (Kordi, 2005).
Kolagen adalah salah satu dari jaringan ikat utama protein hewani dan telah banyak digunakan sebagai bahan biomedi s. Kolagen  adalah  protein  yang  paling  berlimpah  dalam  jaringan  hewan  dengan  proporsi  30%  dari  total  protein  tubuh  sebagai komponen utama dari jaringan ikat, otot, gusi dan kulit (Kittiphattanabawon, 2005).
Krim adalah bentuk sediaan setengah padat mengandung satu atau lebih bahan obat terlarut atau terdispersi dalam bahan dasar yang sesuai. Isilah ini secara tradisional telah digunakan untuk sediaan setengah padat yang mempunyai konsistensi relatif cair diformulasikan sebagai emulsi air dalam minyak atau minyak dalam air. Sekarang ini batasan tersebut lebih diarahkan untuk produk  yang  terdiri  dari  emulsi  minyak  dalam  air  atau  dispersi  mikrokristal  asam-asam  lemak  atau  alkohol  berantai  panjang dalam air yang dapat dicuci dengan air dan lebih ditujukan untuk penggunaan kosmetika dan estetika (Ditjen POM, 1995).
Kulit  merupakan  lapisan  terluar  tubuh  manusia  yang  bersentuhan  langsung  dengan  lingkungan  diluar  tubuh.  Dengan melakukan  segala  upaya  untuk  membuat  kulit  menjadi  sehat  dan  terawat,  salah  satunya  adalah  dengan  menggunakan  produk perawatan  kulit.  Segala  bentuk  produk    yang  menghambat  atau  yang  lebih  tepatnya  memperlambat  proses  penuaan  dapat dikategorikan sebagai anti-penuaan (Prianto, 2014).
Proses  menua  merupakan  akumulasi  semua  perubahan  yang  terjadi  dengan  berlalunya  waktu.  Menjadi  tua  merupakan proses  normal  yang  terjadi  pada  setiap  manusia,  namun  akan  menjadi  masalah  apabila  terjadi  lebih  cepat  dari  waktunya  atau umumnya yang disebut penuaan dini (Jaelani, 2009).
Anti-aging  merupakan  suatu  sediaan  atau  produk  yang  berguna  untuk  mencegah  atau  memperlambat  efek  penuaan sehingga terlihat segar, lebih cantik, dan awet muda. Terapi anti-aging akan lebih baik apabila dilakukan sedini  mungkin, yakni disaat  seluruh  fungsi  sel-sel  tubuh  masih  sehat  dan  berfungsi  dengan  baik.  Akhir-akhir  ini  banyak  produk  krim  mengandung bahan  anti-aging,  namun  kebenaran  dari  produk-produk  tersebut  untuk  mencegah  penuaan  dini  sering  menjadi  bahan  untuk diperbincangkan  dan  diteliti.  Menurut  hasil  penelitian  para  pakar,  krim  anti-aging  dirancang  secara  khusus  untuk  mencegah penuaan dini terutama jika diaplikasikan pada malam hari (Fauzi dan Nurmalina, 2015).

## Journal of Pharmaceutical and Health Research
Vol 1, No 2, Juni 2020, pp. 27-31 ISSN 2721-0715 (media online)

## 2.1 Alat
Peralatan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah skin  moisturizer  detector (SG-7D  ),  neraca  digital  (AND  HT-120  ), spektrofotometer    infrared (Agilent), blender (Philips), skin  analyzer (Aramo-SG), moisture  checker (Aramo-SG),  lemari pengering, penangas air, ayakan mesh 100, pisau, pH meter (ATC), termometer dan alat alat gelas laboratorium.

## 2.2 Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitiaan ini adalah tulang ikan patin, larutan dapar pH asam (pH 4,01), larutan dapar  pH netral (pH 7,01), NaOH 0,1 M, CH 3 COOH 0,5 M, asam stearat, setil alkohol, metil paraben, propil paraben, trietanolamin, metil biru, green tea essence, dan air suling.

## 2.3 Isolasi Kolagen dari Tulang Ikan Patin
Ikan  patin  yang masih segar  sebanyak 20  kg  dicuci,  kemudian  direbus selama  40 menit, lalu  dipisahkan tulang dari  dagingnya. Setelah  itu  ditimbang  dan  dicuci  dengan  air  suling  hingga  bersih  kemudian  dikeringkan.  Tulang  ikan  patin  direndam  dengan larutan NaOH 0,1 M dengan rasio 1:10 selama 6 jam, diletakkan pada pendingin. Tulang ikan direndam kembali dengan larutan NaOH  dengan  rasio yang  sama dan  diletakkan  pada  pendingin selama  6  jam.  Dinetralisasi  dengan  pencucian menggunakan air suling hingga pH 7. Kemudian direndam dengan larutan CH 3 COOH 0,5 M dengan rasio 1:10 selama 3 hari dan diletakkan pada pendingin. Lalu dicuci menggunakan air suling hingga pH 4,6. Setelah itu tulang ikan dikeringkan di lemari pengering pada suhu 36 o C sampai benar-benar kering. Setelah kering tulang ikan di blender dan didapat serbuk kolagen (Pringgandini, 2018; Sonave, 2018).

## 2.4 Formulasi Sediaan Krim Kolagen Tulang Ikan Patin
Formulasi  krim  mengikuti  formula  standart  krim  M/A  yang  dimodifikasi  dengan  kolagen  tulang  ikan  patin  yaitu  F1  (tanpa penambahan kolagen tulang ikan patin), F2 (1%), F3 (1,5%), F4 (2,5%), dan F5 (3,5%).
R/ Asam stearat 12 g Setil alkohol 0,5 g Nipagin 0,1 g Kolagen x Trietanolamin 1 g Air suling ad 100 ml Parfum greentea 3 tetes Pewarna qs
Cara pembuatan: Ditimbang semua bahan yang diperlukan, kemudian dipisahkan bahan menjadi dua kelompok yaitu fase minyak dan  fase  air.  Fase minyak terdiri dari  asam  stearat, setil  alkohol, dilebur di  atas penangas  air  dengan suhu 70  ºC. Fase air  yang terdiri dari sorbitol, propilen glikol, trietanolamin dan metil paraben dilarutkan di dalam air panas yang telah ditakar dengan suhu 70°C  (massa  II).  Direndam  lumpang  porselen  dan  alu  dalam  air  panas,  kemudian  dikeringkan  lumpang  dan  alu,  dimasukkan massa  I  ke  dalam  lumpang,  lalu  dimasukkan  massa  II,  digerus  konstan  sampai  terbentuk  massa  krim.  Setelah  terbentuk  massa krim,  ditambahkan  serbuk  kolagen  tulang  ikan  patin  sedikit  demi  sedikit,  digerus  sampai  terbentuk  krim  yang  homogen. Ditambahkan 3 tetes parfum, dan pewarna. Dihomogenkan sampai terbentuk massa krim. Pembuatan dilakukan dengan cara yang sama untuk semua formula dengan konsentrasi serbuk kolagen yang berbeda (Young, 1972; Rahim, et al., 2011).

## 2.5 Evaluasi Sediaan Krim Anti Aging
Evaluasi sediaan krim anti aging kolagen ikan patin meliputi uji homogenitas, pengukuran pH, penetapan tipe emulsi, stabilitas selama  12  minggu,  dan  iritasi  terhadap  10  sukarelawan.  Semua  sukarelawan  diukur  kondisi  kulit  awal  meliputi:  kadar  air ( moisture ),  kehalusan  ( evenness ),  besar  pori  ( pore ),  banyaknya  noda  ( spot )  dan  keriput  ( wrinkle ).  Setelah  pengukuran  kondisi kulit  awal,  perawatan  mulai  dilakukan  dengan  pengolesan  krim  sebutir  jagung  hingga  merata  seluas  area  yang  telah  ditandai, krim  dioleskan  berdasarkan  kelompok  yang  telah  ditetapkan  di  atas,  pengolesan  dilakukan  sebanyak  2  kali  sehari  selama  4 minggu.  Perubahan  kondisi  kulit  diukur  setiap  minggu  selama  4  minggu  dengan  menggunakan skin  analyzer dan moisture checker .

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1 Spektrum Infra Merah Kolagen Tulang Ikan Patin
Hasil isolasi diperoleh 570 gram serbuk kolagen dari 20000 gram ikan patin segar, jika dihitung maka rendemen hasilnya adalah sebesar 34,6%. Gambar 1 menunjukkan puncak serapan amina A, CH alifatis, amida I, amida II dan amina III. Wilayah puncak serapan amina secara umum berada pada bilangan gelombang 3400-3440 cm -1 merupakan streching dari gugus –NH (Veeruraj, et al., 2013). Wilayah puncak serapan amina A kolagen tulang ikan patin yaitu pada bilangan gelombang 3270 cm -1 . Gugus amina A dengan NH streching yang bebas biasanya terdeteksi pada bilangan gelombang 3400-3440 cm -1 , namun ketika grup –NH pada ikatan peptida, maka posisinya bergeser ke frekuensi yang lebih rendah (Li, et al., 2013). Oleh karena itu dapat disimpulkan kolagen tulang ikan patin terdapat gugus –NH terhubung pada ikatan peptida. CH alifatis kolagen tulang ikan patin terdapat pada panjang gelombang 2922 cm -1 . Serapan –CH alifatis berada pada kisaran 2800-3000 cm -1 merupakan gugus – CH  (Hashim,  et  al.,  2014).  Hasil  analisis  spektrum  infra  merah  kolagen  tulang  ikan  patin  seperti  yang  terlihat  pada  Tabel  1. Analisis gugus fungsi dari kolagen tulang ikan patin dengan spektrofotometer FTIR yang dapat dilihat pada Gambar 1

## Journal of Pharmaceutical and Health Research
Vol 1, No 2, Juni 2020, pp. 27-31 ISSN 2721-0715 (media online)
Gambar 1. Spektrum infra merah kolagen tulang ikan patin
Amida  I  kolagen  tulang  ikan  patin  yaitu  pada  panjang  gelombang  1630  cm -1 .  Gugus  amida  I  berada  pada  kisaran  panjang gelombang 1600-1700 cm -1 , hal tersebut terkait dengan  vibrasi streching   C-  atau  O- (ikatan  C=O) sepanjang  rantai polipeptida (Hashim,  et  al.,  2014).  Wilayah  puncak  serapan  1630,  1650,  dan  1675  cm -1 merupakan  karakteristik  dari  residu  asam  amino. Amida  I memiliki  4  komponen  struktur sekunder protein  yaitu  α-heliks,  β-sheet,  β-turn  dan random coil.  Hal ini menunjukkan bahwa kolagen tulang ikan patin memiliki struktur β-sheet belum terdenaturasi α-heliks yang merupakan ciri khas gelatin.
Tabel 1. Analisis spektrum infra merah kolagen tulang ikan patin
Gugus fungsi Bilangan gelombang (cm -1 ) Puncak serapan Keterangan Amina A 3400-3440 3270 Gugus NH CH alifatis 2800 – 3000 2922 Gugus CH 2 Amida I 1600-1700 1630 Gugus karbonil (ikatan C=O) Amida II 1480-1575 1545 CN stretching , NH bending Amina III 1229-1301 1260 CN stretching , NH bending
Wilayah  serapan  amida  II  dan  amina  III  kolagen  tulang  ikan  patin  berada  pada  panjang  gelombang  1545  cm -1 dan  1260  cm -1 . Puncak serapan  amida  II  dan  amina  III  berturut turut  berada  pada  kisaran  1480-1575 cm -1 dan 1229-1301 cm -1 (Kong  dan  Yu, 2007). Kolagen tulang ikan patin mempunyai struktur β-sheet dan triple helix yang merupakan karakteristik kolagen.

## 3.2 Hasil Evaluasi Sediaan Krim Anti Aging
Sediaan  krim  menggunakan  kolagen  ikan  patin  memberikan  hasil  yang  homogen,  pH  6,0  –  6,4,  tipe  emulsi  M/A,  stabil  pada penyimpanan  12  minggu,  dan  tidak  mengiritasi  kulit  10  sukarelawan.  Persen  pemulihan  krim  anti  aging  kolagen  ikan  patin terhadap kadar air, pori, kehalusan, noda dan keriput dapat dilihat pada Tabel 2 .
Tabel 2. Persen pemulihan krim antiaging kolagen ikan patin
Formula Pemulihan (%) Kadar air Pori Kehalusan Noda Keriput F1 (blanko) 14,81 2,38 7,31 2,56 4,76 10,71 4,65 2,56 2,56 2,32 12,72 3,52 5,00 2,56 3,52 F2 (1%) 34,61 15,00 12,50 11,36 12,06 33,33 17,50 14,63 12,19 25,00 33,96 16,25 13,58 11,76 18,42 F3 (1,5%) 38,46 21,95 15,78 26,19 18,64 42,30 17,50 17,50 20,00 26,22 40,38 19,75 16,67 27,05 22,50 F4 (2,5%) 60,00 30,76 25,64 39.02 36,17 48,14 30,00 27,50 46,51 30,23 53,84 30,37 26,58 42,85 33,33 F5 (3,5%) 57,14 56,09 35,89 50,00 54,34 76,00 57,50 30,76 46,34 55,31 66,03 56,70 33,33 48,23 54,83
Hasil  uji  efektifitas  anti  aging  krim  kolagen  ikan  patin  selama  4  minggu  menunjukkan  peningkatan  kadar  air  sampai  66,03%, penurunan  jumlah  pori  sampai  47,43%,  peningkatan  kehalusan  sampai  33,33%,  pengurangan  noda  sampai  48,23%  dan pengurangan keriput 54,83%. Hasil uji efektifitas anti aging krim menggunakan kolagen ikan patin dapat dilihat pada Gambar 2.
-NH -CH Amida C=O

## Journal of Pharmaceutical and Health Research
Vol 1, No 2, Juni 2020, pp. 27-31

## ISSN 2721-0715 (media online)
Gambar 2. Hasil uji efektifitas anti aging krim kolagen ikan patin
Efektifitas  anti  aging  krim  selama  pemakaian  sediaan  selama  4  minggu  dapat  diukur  dengan  menghitung  persen  peningkatan kadar air, penurunan jumlah pori, peningkatan kehalusan, pengurangan jumlah noda dan pengurangan keriput pada kulit (Aramo, 2012; Nazliniwaty, et al., 2006).

## 4. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  dari  penelitian  yang  dilakukan  dapat  disimpulkan  bahwa  tulang  ikan  patin  mengandung  kolagen  yang  diuji menggunakan  alat Fourier  Transform  Infared (FTIR)  dengan  panjang  gelombang  3250-3350  cm -1 dan  1260-1630  cm -1 yang menunjukkan  adanya  gugus amina  dan  amida. Kolagen  dapat diformulasikan  kedalam  sediaan  krim  dan  berkhasiat  sebagai anti aging. Krim yang mengandung kolagen tulang ikan patin sebanyak 3,5% merupakan krim yang paling baik memperbaiki kondisi kulit.

## DAFTAR PUSTAKA
Aramo.2012. Skin and Hair Diagnosis System . Sungna: Aram Huvis Korea Ltd. P : 1-10. Ditjen POM. 1995. Farmakope Indonesia . Edisi IV. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 311. Fauzi, A.R., dan Nurmalina, R. 2012. Merawat Kulit dan Wajah. Jakarta: PT Elex Media Komputindo. Halaman 60, 171-173. Hashim, P., Ridzwan M. S. M dan Bakar J. 2014. Isolation and Characterization of Collagen from Chicken Feet. Engineering and Technology International Journal of Bioengineering and Life Sciences . 8(3):250.
Jaelani. 2009. Ensiklopedi Kosmetika Nabati. Jakarta: Pustaka Populer Obor. Halaman 153-155.
Kittiphattanabawon,  P.,  Benjakul,  S.,  Visessanguan,  W.,  Nagai,  T  dan  Tanaka,  M.  2005.  Characterisation  of  Acid-Soluble Collagen from Skin and Bone of Bigeye Snapper ( Priacanthus tayenus ). Journal Food Chemistry . Thailand: 89(3): 363. Kong,  J  dan  Yu,  S.  2007.  Fourier  Transform  Infrared  Spectroscopic  Analysis  of  Protein  Secondary  Structures .  Journal  Acta Biochimica et Biophysica Sinica . Shanghai: 39(8): 549. Kordi,  M.  G.  H.  2005. Budidaya  Ikan  Patin  Biologi,  Pembenihan  dan  Pembesaran .  Yogyakarta:  Yayasan  Pustaka  Nusatama. Halaman 87.
Li,  Z.,  Wang,  B.,  Chi,  C.,  Zhang,  Q.,  Gong,  Y.,  Tang,  J.,  Luo,  H  dan  Ding,  G.  2013.  Isolation  and  Characterization  of  Acid Soluble  Collagens  and  Pepsin  Soluble  Collagens  from  The  Skin  and  Bone  of  Spanish  Mackerel  ( Scomberomorous niphonius ). Journal Food Hydrocolloids . Zhoushan:31(1): 103. Nazliniwaty,  Karsono,  Zebua,  N.F.  2016. Antioxidant  activity  and  antiaging  gel  formulation  grapefruit  peel  ( Citrus  maxima Merr.) ethanolic extract . Der Pharmacia Lettre . 8(20):84-94.
Prianto. J. 2014. Cantik Panduan Lengkap Merawat Kulit Wajah. Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama. Halaman 60, 118-145. Pringgandini, L. A., Indarti, G. Y., Melinda dan Sari, M. 2018. Efektifitas Spray Nanokolagen Limbah Sisik Ikan Mas ( Cyprinus carpio )  untuk  Mempercepat  Proses  Penyembuhan  Luka  Insisi. Laporan  Penelitian .  Departemen  Ilmu  Kesehatan  Gigi Masyarakat, Fakultas Kedokteran Gigi, Universitas Muhammadiyah Surakarta. Halaman 116.

## Journal of Pharmaceutical and Health Research
Vol 1, No 2, Juni 2020, pp. 27-31

## ISSN 2721-0715 (media online)
Rahim, F.,  Aria,  M.,  Aji,  N.P.  2011.  Formulasi Krim  Ekstrak  Etanol  Daun  Ubi  Jalar (Ipomoeaea  batatas  L.) untuk  Pengobatan Luka Bakar. Jurnal Scientia . 1(1):21-26.
Sonave,  A. E., Koli, J. M.,  Patange,  S.  B.,  Naik,  S.  D and  Mohite,  A.  S.  2018.  Isolation  of  Acid and  Pepsin  Soluble  Collagens from  The  Skin  of  Indian  Mackerel  (Rastrellinger  kanugarta)  (Cuvier,  1817).  Journal  of  Enromology  and  Zoologi  Studies. 6(2): 2509.
Veeruraj, A., Arumugam, M dan Balasubramanian, T. 2013. Isolation and Characterization of Thermostable Collagen from The Marine eel-fish (Evenchelys macrura ). Journal Process Biochemistry . India: 48(1): 1592. Young, A. 1972. Practical Cosmetic Science. London: Mills and Boon Limited. Halaman 51.