## Bulletin of Applied Animal Research
https://www.ejournal.unper.ac.id/index.php/BAAR Vol 5(1):1-11, September 2023
Penggunaan Ekstrak Tomat untuk Peremajaan L. acidophilus FNCC sebagai Media Alternatif pada Penyiapan Starter Fermentasi
Ari Surya Sukarno 1 , Widodo 1 , Satyaguna Rakhmatulloh 1 , Nurliyani 1 , Endang Wahyuni 1 1 Departemen Teknologi Hasil Ternak, Fakultas Peternakan, Universitas Gadjah Mada Jl Fauna No 3, Bulaksumur, Yogyakarta, 55281 *Corresponding E-mail : ari.surya.s@mail.ugm.ac.id

## ABSTRAK
Bakteri  Asam  Laktat  (BAL)  merupakan  starter  fermentasi  susu  yang  mengandalkan  media MRS  sebagai  sumber  nutrisi  untuk  perbanyakan  dan  perawatan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahuai  kurva  pertumbuhan  dan  viabilitas  L.  acidophillus  FNCC  pada  media  ekstrak  tomat sebagai media alternatif. Ekstrak tomat diperoleh dengan cara sterilisasi suhu 121°C, tekanan 15 Psi, selama 15 menit dan diambil cairan yang keluar dari tomat. Kultur L. acidophilus FNCC ditumbuhkan dalam media ekstrak tomat dibandingkan dengan MRS cair sebagai kontrol selama 12 jam, pada suhu 37°C.  Pertumbuhan  biomassa  diukur  pada  jam  ke  0,  2,  6,  8,  10,  dan  12  berdasarkan  peningkatan kekeruhan menggunakan absorbansi λ620. Viabilitas penyimpanan dihitung berdasarkan perubahan jumlah total bakteri asam laktat setiap minggu selama 28 hari. Pengujian kemampuan pertumbuhan dan viabilitas pada ekstrak tomat dilakukan tiga kali pengulangan dan data yang diperoleh selanjutnya dianalisis menggunakan rancangan acak pola searah. Penumbuhan L. acidophilus FNCC selama 12 jam menghasilkan nilai absorbansi sebesar 1,44 ± 0,02 pada media MRS yang lebih tinggi (P<0,01) dibanding menggunakan ekstrak tomat yang hanya mencapai 0,04 ± 0,02. Selanjutnya, hasil viabilitas penyimpanan L. acidophillus FNCC selama 28 hari pada media ekstrak tomat mampu dipertahankan dengan jumlah yang  sama  (P>0,05)  dengan  media  kontrol  MRS  yaitu  log  log  8,85  ±  0,58 cfu/mL cfu/mL.  Berdasarkan  penilitian  ini,  ekstrak  tomat  dapat  dijadikan  media  alternatif  pertumbuhan  L. acidophilus FNCC dan penyimpanan kultur hingga 28 hari.
Kata kunci : Kata kunci: L. acidophilus FNCC, media, pertumbuhan, dan viabilitas.

## ABSTRACT
Lactic acid bacteria are a milk fermentation starter that relies on MRS media as a source of nutrition  for  culture  refreshment.  This  study  aims  to  determine  the  growth  and  viability  of  L. acidophilus FNCC on tomato extract media as an alternative medium. Tomato extract was obtained by sterilization at 121°C with a pressure of 15 Psi for 15 minutes, and the liquid from the tomatoes was collected. L. acidophilus FNCC was grown in tomato extract medium and liquid MRS as a control for 12 hours at 37°C. The amount of biomass growth was measured  at 0, 2, 6, 8, 10, and 12 hours based on the increase in turbidity using an absorbance of λ620. Storage viability was observed for changes in the total number of lactic acid bacteria every week for 28 days. The analysis was repeated three  times,  and  data  analysis  was  carried  out  using  a  Randomized  Design  One  Way  Annova. Incubation L. acidophilus FNCC for 12 hours resulted in an absorbance value of 1.44 ± 0.02 on MRS media which was higher (P<0.01) than using tomato extract, which only reached 0.04 ± 0.02. The storage viability of L. acidophillus FNCC for 28 days in tomato extract media was maintained with the  same  amount  of  log  log  8.85  ±  0.58  cfu/mL  cfu/mL  (P>0.05)  with  the  MRS  control  medium. Therefore, tomato extract can be used as an alternative medium to grow and store L. acidophilus FNCC for 28 days.
Key words : L. acidophilus FNCC, medium, growth, and viability.

## PENDAHULUAN
Lactobacillus  acidophillus  merupakan bakteri  asam  laktat  yang  digunakan  sebagai starter dalam proses fermentasi pangan karena mampu  mencegah  pertumbuhan  bakteri pembusuk maupun patogen. Konsumsi pangan  mengandung  L.  acidophillus  juga memberikan  manfaat  kesehatan  dengan menjaga  kondisi  saluran  pencernaan  melalui mekanisme sebagai probiotik (Gilliland et al. 1985;  Lin  and  Chen  2000;  Sanders  dan Klaenhammer  2001;  Macouzet  et  al.  2009). Penelitian menunjukkan bahwa L. acidophillus  mampu  membentuk  kolonisasi pada  usus  sehingga  dapat  memberikan dampak  manfaat  dalam  jangka  lebih  lama dibanding  kultur  lain  (Alonso  et  al.  2003; Yadav et al. 2007). Oleh karena itu, kultur L. acidophillus banyak dimanfaatkan pada proses pengolahan  pangan  fermentasi  sekaligus memberikan  nilai  tambah  sebagai  produk pangan fungsional bagi kesehatan.
Pertumbuhan bakteri asam laktat memerlukan  media  yang  kaya  nutrient sehingga  umumya  ditumbuhkan  pada  media buatan seperti De Man Rogosa Sharpe (MRS), M17 broth, Micro Inoculum Broth, Rogosa SL Broth,  APT  broth,  Elliker  Broth,  dan Lactobacillus  selection  Broth  (Reuter  1985). Namun demikian, penggunaan media tersebut untuk  kepentingan  industri  dianggap  mahal karena  menggunakan  berbagai  suplementasi seperti  asam  amino,  mineral,  growth  factor, dan berbagai senyawa lain untuk meningkatkan pertumbuhan BAL dan menekan  bakteri  kontaminan.  Selain  itu, media  tersebut  memerlukan  perlengkapan preparasi  yang  memadai,  sehingga  lebih banyak digunakan untuk kepentingan penelitian seperti isolasi, pemurnian, karakterisasi,  dan  uji  potensi  (Hayek  et  al. 2019).    Oleh  karena  itu,  penting  untuk
dikembangkan  alternatif  media  dengan  biaya rendah untuk keperluan indsutri dalam peremajaan stok kultur dan produksi starter serta probiotik pada ranah aplikasi pangan.
Alternatif  media  pertumbuhan  BAL  dengan biaya rendah dapat diperoleh dari sumber bahan baku  lokal.  Beberapa  bahan  dengan  potensi untuk  digunakan  sebagai  media  alternatif peremajaan  BAL  antara  lain  jamur,  tomat, jagung,  kentang,  gandum,  barley,  dan  molases (Babu et al. 1992; Charalampopoulos et al. 2002; Yu et al. 2008; Krzywonos and Eberhard 2011; Bulatović et al. 2014; Zhao et al. 2016). Namun demikian,  penggunaan  media  alternatif  tersebut memberikan hasil dan karakteristik pertumbuhan yang  berbeda  untuk  setiap  spesies  atau  bahkan strain BAL. Setiap bakteri memiliki kemampuan berbeda-beda untuk beradaptasi dan memanfaatkan nutrient di dalam media, sehingga berdampak pada perbedaan kecepatan pertumbuhan dan viabilitas sel selama penyimpanan.
Ekstrak  buah  tomat  merah  (Solanum lycopersicum  L.)  merupakan  salah  satu  bahan baku  lokal  yang  memiliki  potensi  dijadikan media alternatif karena mengandung karbohidrat, protein,  vitamin  B  dan  mineral  serta  buah  ini mudah ditemukan, murah dan proses ekstraksinya  relatif  mudah.  Ali  et  al.  (2021) menyatakan bahwa buah tomat matang mengandung  karbohidrat  4,2%,  protein  1%  dan lemak 0,3%. Penelitian terdahulu juga menyebutkan  bahwa  jus  tomat  telah  digunakan sebagai  suplementasi  pada  media  susu  skim untuk menumbuhkan L. acidophillus (Babu et al. 1992).  Oleh  karena  itu,  penelitian  ini  bertujuan untuk mengetahui karakteristik pertumbuhan dan viabilitas  selama  penyimpanan  kultur  L. acidophillus  FNCC  yang  ditumbuhkan  pada media ekstrak tomat.

## MATERI DAN METODE

## Materi Penelitian
Kultur Lactobacillus acidophillus FNCC diperoleh  dari  Laboratorium  Mikrobiologi, Pusat  Antar  Universitas  (PAU),  Universitas Gadjah Mada.

## Penyiapan Kultur
Kultur  diambil  dari  stok  gliserol  yang kemudian  dikayakan  pada  MRS  Broth  steril yang  dinkubasi  suhu  37 o C  selama  24  jam. Kultur selanjutnya dimurnikan dengan teknik gores di media MRS agar sebanyak  dua kali. Kultur tunggal dipilih untuk diperbanyak pada media  MRS  Broth.  Kultur  hasil  pemurnian kemudian disimpan dalam refrigerator bersuhu  4 o C  dan  diremajakan  setiap  satu minggu sekali  (Widodo et al. 2016).

## Penyiapan ekstrak tomat
Tomat  segar  dipilih  berwarna  jingga kemerahan  (matang)  dan  dipotong  menjadi lembaran  tebal.  Potongan  tomat  dimasukkan ke  dalam  botol  kaca  dan  ditutup  rapat. Selanjutnya  tomat  disterilisasi  pada  suhu 121°C, tekanan 15 psi selama 15 menit. Hasil sterilisasi kemudian disimpan pada refrigerator  suhu  4°C  selama  semalam  (±  18 jam).  Cairan  tomat  berwarna  jernih  di  dalam botol merupakan ekstrak tomat yang selanjutnya  dipisahkan  dan  dimasukkan  ke dalam  tabung  steril.  Ekstrak  tomat  tersebut digunakan  sebagai  media  cair  bakteri  dan disimpan pada suhu 4°C sebelum digunakan.

## Kurva pertumbuhan kultur
Kultur L.  acidophillus ditumbuhkan dalam medium ekstrak tomat dan MRS steril
dengan  inokulasi  kultur  sebanyak  1%  (v/v). Penumbuhan  kultur  pada  kondisi  inkubasi  suhu 37°C  selama  12  jam  dan  diamati  pertumbuhan setiap  2  jam.  Pertumbuhan  bakteri  dihitung berdasarkan peningkatan kekeruhan media yang dihitung  dari  nilai  absorbansi  dengan  panjang gelombang 620 nm (Bevilacqua et al. 2016).

## Viabilitas penyimpanan
Viabilitas  kultur  selama  penyimpanan diukur dengan menumbuhkan kultur pada media cair  ekstrak  tomat  dan  MRS  steril.  Kultur  hasil peremajaan dicuci terlebih dahulu menggunakan larutan 0,18% NaCl sebanyak dua kali. Biomasa dalam media  cair  diperoleh  dengan  sentrifugasi kecepatan  3400  rpm  selama  10  menit.  Hasil biomasa kemudian dicuci dengan meresuspensikan  larutan  NaCl  sebanyak  5  mL. Proses  penucian  tersebut  diulang  sebanyak  dua kali  sebelum  digunakan  untuk  inokulasi  pada media  ekstrak  tomat  dan  MRS.    Selanjutnya, kultur  diinokulasikan  pada  media  cair  ekstrak tomat  dan  MRS  broth  steril  sebanyak  1%  (v/v) dan  diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama  18  jam. Kultur  disimpan  pada  suhu  refigerator  (4°C) selama 28 hari dengan perhitungan jumlah total bakteri  asam laktat  menggunakan  metode Total Plate Count (TPC) pada penyimpanan hari ke 0, 7, 14, dan 28 hari.

## Perhitungan total bakteri asam laktat
Perhitungan  total  bakteri  asam  laktat menggunakan  metode Total  Plate  Count (TPC) dengan  media  MRS  agar.  Pengenceran  sampel dilakukan  dengan  mencampur  1  ml  sampel dengan  9  ml  aquades  steril  untuk  pengenceran 10 -1 dan seterusnya hingga diperoleh
pengenceran
10 -9 . Pengenceran yang dikehendaki  diambil  sebanyak  0,1  ml  dan diinokulasikan ke cawan Petri berisi medium yang  telah  padat.  Sampel  yang  telah diinokulasikan, selanjutnya diratakan menggunakan  drigalski  yang  sebelumnya disterilisasi dengan lampu pijar. Cawan Petri diinkubasi  dalam  posisi  terbalik  pada  suhu 37°C selama 24 jam. Jumlah bakteri dihitung berdasarkan  jumlah  koloni  yang  tumbuh (Zhao et al. 2016).

## Analisis data
Setiap  perlakuan  dilakukan  ulangan sebanyak  tiga  kali  dan  data  yang  diperoleh dilakukan  analisis  statistik  menggunakan rancangan  acak  lengkap  pola  searah  untuk mengetahui  perbedaan    pertumbuhan  dan pengaruh penyimpanan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Kurva pertumbuhan L. acidophillus FNCC
Kurva pertumbuhan kultur L. acidophillus FNCC  pada  media  cair  ekstrak tomat dibanding kontrol pada MRS cair dapat dilihat pada Gambar 1. Berdasarkan penelitian ini, pertumbuhan L. acidophillus FNCC pada ekstrak tomat menunjukkan kurva pertumbuhan  yang  berbeda  dibandingkan dengan  media  MRS.  Kurva  pertumbuhan L. acidophillus FNCC pada  Inkubasi  jam  ke-4 menunjukkan bahwa pengunaan ekstrak tomat maupun  MRS  memasuki  fase  logaritmik. Perbedaan  pertumbuhan  akibat  perbedaan media  ditunjukkan  pada  jam  ke-6  yaitu pertumbuhan L. acidophillus FNCC
menggunakan  media  cair  MRS  mencapai  nilai absorbansi  0,28±0,02  lebih  tinggi  (P<0,01) dibandingkan  dengan  ekstrak  tomat  sebesar 0,17±0,01.  Selanjutnya,  inkubasi  kultur  selama 12  jam  menghasilkan  nilai  absorbansi  sebesar 1,44 ± 0,02 pada media MRS yang lebih tinggi (P<0,01) dibanding menggunakan ekstrak tomat yang  hanya  mencapai  0,04  ±  0,02.  Hasil  ini menunjukkan bahwa penumbuhan L. acidophillus FNCC  selama  12  jam  pada  media ekstrak  tomat  menghasilkan  pertumbuhan  yang lebih lambat dibanding media kontrol MRS.
Setiap tipe strain bakteri memiliki kemampuan  berbeda  untuk  beradaptasi  dengan lingkungan  dan  pemanfaatan  nutrien  untuk tumbuh.  Media  standar  atau  komersil  Bakteri Asam  Laktat  (BAL)  seperti  MRS  juga memberikan  kurva  pertumbuhan  berbeda  untuk setiap spesies bakteri (Yang et al. 2018). Secara umum,  De  Man  Rogosa  Sharpe  (MRS) merupakan media komersial untuk media bakteri asam  laktat  yang  tersusun  dari  meat  ekstrak, yeast  ekstrak,  D  (+)  glukosa,  dipotassium hidrogen  fosfat,  tween,  diamonium  idrogen sitrat,  sodium  asetat,  magnesium  sulfat,  dan magnesium  sulfat.  Prajapati  et  al.  (2017), menumbuhkan L.  helventicus MTCC  5463  dan Kusmiyati et al. (2022) menumbuhkan L. casei, L. paracasei , dan L. rhammnosus pada whey keju dan  MRS  media  selama  24  jam  menghasilkan total  bakteri  yang  tidak  berbeda  yaitu  sekitar  9 log  cfu/g.  Selain  itu,  media  MRS  tanpa  adanya ekstrak daging dan pepton memberikan penurunan  signifikan  terhadap  pertumbuhan L. brevis dan L.  confusus TISTR  1498.  Penelitian
lain  juga  menunjukkan  bahwa  penggunaan whey  2%  sebagai  pengganti  ekstrak  daging dan  pepton  tidak  memberikan  peningkatan pertumbuhan L. brevis (Pratiwi et al. 2020).
Kultur L. acidophillus memiliki karakter pertumbuhan  lambat  yang  disebabkan  oleh kebutuhan  nutrient  komplek  yang  harus tersedia  di  dalam  media.  Sehingga  berbagai senyawa bersifat sebagai growth factor seperti whey  protein,  sucrose,  dan  papaya  pulp  dan ion  mineral  diujikan  sebagai  suplementasi pada media (Marshall et al. 1982; Kumar et al. 1989; Huynh et al. 2022). Sementara itu, gula dan mineral berperan penting dalam menstimulasi  pertumbuhan L.  acidophillus . Jenis  gula  terutama  gula  sederhana  terutama glukosa dan fruktosa berperan penting dalam stimulasi  pertumbuhan,  sedangkan  untuk komponen mineral sebagai growth stimulator dapat berupa magnesium (Mg 2+ )  dan manganese  (Mn 2+ ).  Beberapa  strain L. acidphillus menunjukkan  waktu  regenerasi lebih  cepat  sekitar  86,3  sampai  107,0  menit pada media mengandung glukosa dibandingkan dengan sukrosa  (Srinivas et al. 1990). Huynh et al. (2022)
mendemonstrasikan bahwa kultur L. aacidophillus dapat tumbuh lebuh cepat pada fermentasi susu menggunakan dengan suplementasi  mangensium  atau  manganese sebesar (19,72 mg/L) atau (11,39 mg/L).
Penelitian terdahulu menyebutkan bahwa jus  tomat  mampu  menumbuhkan  berbagai strain Lactobacillus meskipun tidak memberikan hasil pertumbuhan yang
konsisten  serta  respon  kecepatan  tumbuh  yang berbeda  (Babu  et  al.  1992).  Jus  tomat  ekstrak tomat  mengandung  berbagai  komponen  yang dibutuhkan  untuk  bakteri  tumbuh  antara  lain karbohidrat  6,1%  (w/w),  lemak  4,96  (g/100g), total  protein  17,71  (g/100g),  mineral  8,75%, magnesium  (9,0  mg/100g)  dan  manganese (0,15mg/100g)  (Ali  et  al.  2021).  Ekstrak  tomat juga  memiliki  senyawa growth  factors yang bersifat stabil pada proses sterilisasi hingga suhu 121°C yaitu 4-0-( 𝛽 -D-glucopyranosyl)-D- pantothenic acid (Eto and Nakagawa 1975). Oleh karena itu, media dari ekstrak tomat memberikan potensi  media  alternatif  dengan  kandungan growth  factor yang  menstimulasi  spesies  BAL tertentu.  Penelitian  ini  menunjukkan  bahwa ekstrak tomat menyediakan kondisi pertumbuhan L. acidohphilus FNCC dengan fase adaptasi  awal  yang  sama  dengan  media  MRS. Meskipun  pertumbuhan  selanjutnya  pada  fase logaritmik  pada  media  MRS  lebih  cepat dibandingkan  pada  media  ekstrak  tomat. Media MRS mengandung berbagai senyawa suplementasi dan nutrisi yang lengkap sehingga memberikan  pertumbuhan L.  acidohphilus FNCC  yang  lebih  optimal.  Sumber  nitrogen media MRS berasal dari berbagai sumber antara lain  peptone,  yeast  ekstrak,  beef  ekstrak,  atau whey  protein  sehingga  mengandung  asam amino, peptida, asam nukleat, dan vitamin yang lengkap untuk mendukung  dengan cepat proses replikasi  sel  (Hayek  et  al.  2019).  Sedangkan, ekstrak  tomat  masih  tergolong  sebagai  media basal  yang  cukup  untuk  mempertahankan  dan
menumbuhkan
bakteri, meskipun
memerlukan waktu adaptasi lebih panjang. Viabilitas L. acidophillus selama penyimpanan
Viabilitas  kultur L.  acidophillus pada media  ekstrak  tomat  dan  MRS  broth  selama penyimpanan  28  hari  dapat  dilihat  pada Gambar 2. Berdasarkan analisis penyimpanan selama 28 hari menunjukkan bahwa penyimpanan L.  acidophillus FNCC  pada media  ekstrak  tomat  memiliki  total  bakteri yang  tidak  berbeda  (P>0,05)  dibandingkan media MRS. Namun demikian, lama penyimpanan berpengaruh (P<0,05) terhadap penurunan  viabilitas  bakteri  pada  media ekstrak  tomat  maupun  MRS.  Viabilitas L. acidophillus FNCC  dapat  dipertahankan selama penyimpanan 7 hari pada media MRS dan ekstrak tomat yaitu sebesar log 9.18 ± 0,21 cfu/mL. Viabilitas kultur mengalami penurunan  (P<0,05)  menjadi  log  8.57  ± 0,41cfu/mL pada penyimpanan hari ke-14 dan kemudian bertahan (P>0,05) hingga penyimpanan hari ke-21 dan ke-28.
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa jumlah L.  acidophillus FNCC  mampu dipertahankan dengan jumlah sekitar log 8,85 ±  0,58  cfu/mL  selama  28  hari  penyimpanan pada suhu 4°C di media ekstrak tomat maupun media MRS. bahwaPenelitian lain melaporkan bahwa penggunaan whey sebagai media  alternatif  pertumbuhan Lactobacillus johnsonii NRRL  B-2178  diperoleh  viabilitas kultur  yang  hanya  bertahan  hingga  hari  ke-5 dengan  jumlah  bakteri  sekitar  log  5  cfu/mL.
Selanjutnya,  suplementasi  media  dengan  inulin menghasilkan  viabilitas Lactobacillus  johnsonii NRRL B-2178 lebih  lama yaitu hingga hari ke- 20  dengan  total  bakteri  sekitar  log  6  cfu/mL (Bulatović  et  al.  2014).  Oleh  karena  itu, penggunaan ekstrak  tomat  untuk  sebagai media peremajaan L. acidophillus FNCC menghasilkan viabilitas  yang  tinggi  hingga  penyimpanan  28 hari.
Peningkatan  viabilitas  kultur  BAL  selama penyimpanan juga ditunjukkan dengan suplementasi prebiotik fructooligosakarida (FOS),  inulin,  sucrosa,  dan  laktosa  pada  media MRS.  Penambahan  berbagai  jenis  karbohidrat dapat  mempertahakan  viabilitas  kultur L. plantarum hingga  4  minggu  penyimpanan  pada suhu  4°C.  Adanya  penambahan  atau  kadar karbohidrat  yang  tinggi  bersifat  melindungi kondisi sel, terutama pada jenis prebiotik seperti FOS  dan  inulin.  Selama  pertumbuhan  bakteri dihasilkan  produk  metabolisme  seperti  asam organik dan metabolit sekunder serta berkuranganya karbohidrat sehingga menyebabkan stress yang menurunkan ketahanan  sel  bakteri  (Parhi  et  al.  2021). Livingston dan Henson (1998), juga melaporkan inulin dan FOS bersifat protektif melawan stress bakeri melalui mekanisme peningkatan stabilitas membran  sel.    Tomat  mengandung  karbohidrat yang  tersusun  dari  fruktosa  2,88%,  glukosa 2,45%,  sukrosa,  0,02%  dan  total  fiber  11,44 (g/100g) (Ali et al. 2021). Oleh karena itu, salah satu  faktor  tingginta  viabilitas L.  acidophilus FNCC selama 28 hari kemungkinan disebabkan oleh adanya komponen beberapa jenis
karbohidrat  di  dalam  ekstrak  tomat  yang menjaga sel bakteri tetap hidup.
Selama  penyimpanan  kultur,  aktivitas metabolisme bakteri tetap belangsung sehingga produk metabolit yang bersifat asam tetap  berlangsung  meskipun  berjalan  lambat. Menurut  (Parhi  et  al.  2021),  viabilitas L. plantarum pada media MRS dengan suplementasi inulin dan FOS terjadi penurunan  setelah  minggu  ke-4.  Demikian juga,  penurunan  total  BAL  juga  terjadi  pada penggunaan  media  lain  seperti  jus  pinapple, tomat,  wortel  dan  cherry  (Filannino  et  al.
2014).  Hasil  metabolisme  lambat  selama penyimpanan suhu refrigerator tetap menghasilkan  akumulasi  asam  organik  yang menurunkan pH media. Selain itu, asam laktat sebagai  hasil  utama  metabolisme  BAL berpengaruh pada perubahan kapasitas buffer media. Kultur L. plantarum memiliki toleransi terhadap  nilai  pH  hingga  3,4  hingga  8,8. Sehingga  nilai  pH  media  dibawah  3,4  dapat menyebabkan kematian sel yang menurunkan viabilitas  bakteri.  Charalampopoulos  et  al. (2002)  melaporkan  bahwa  pertumbuhan untuk L.  acidophilus minimal  terjadi  terjadi pada  pH  3,83,  sementara  Lonner  da  Preve- Akesson (1988), menyebutkan antara pH 3,4- 3,6  tergantung  dari  sumber  media.  Menurut Ali et al. (2021) jus tomat memiliki pH sekitar 3,83, sedangkan pada penelitian ini menggunakan ekstrak tomat yang menghasilkan  pH  lebih  tinggi  yaitu  4,56  ± 0,34. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa media  ekstrak  tomat  pada  pH  tersebut  tetap
memberikan  pertumbuhan L.  acidophillus FNCC dan mempertahankan viabilitas penyimpanan 28 hari.

## KESIMPULAN
Kultur L. acidophilus FNCC dapat tumbuh pada media ekstrak tomat meskipun pertumbuhan  lebih  lambat  dibandingkan  pada media kontrol menggunakan MRS. Selanjutnya, penyimpanan kultur L. acidophilus FNCC pada media  ekstrak  tomat  memiliki  viabilitas  yang sama  dengan  media  MRS  yang  dapat dipertahankan selama penyimpanan 28 hari.

## DAFTAR PUSTAKA
Ali,  M.  Y.,  A.  A.  I.  Sina,  S.  S.  Khandker,  L.
Neesa, E. M. Tanvir, A. Kabir, M. I. Khalil, and S.  H. Gan.  2021. Nutritional composition  and  bioactive  compounds  in tomatoes and their impact on human health and disease: A review. Foods. 10(1).
Alonso,  L.,  E.  P.  Cuesta,  and  S.  E.  Gilliland.
2003. Production of free conjugated linoleic acid  by  Lactobacillus  acidophilus  and Lactobacillus  casei  of  human  intestinal origin. J Dairy Sci. 86(6):1941–6.
Babu,  V.,  B.  K.  Mital,  and  S.  K.  Garg.  1992.
Effect of tomato juice addition on the growth and activity of Lactobacillus acidophilus. Int J Food Microbiol. 17:67–70.
Bevilacqua, A., M. Sinigaglia, B. Speranza, and C.  Altieri.  2016.  Effect  of  Prebiotic Compounds on the Growth and Survival of Bifidobacteria  in  a  Laboratory  Medium. Advance  Journal  of  Food  Science  and Technology. 11(12):770–774.
Bulatović,  M.  L.,  M.  B.  Rakin,  M.  S. Vukašinović-Sekulić, L. v. Mojović, and T. Ž.  Krunić.  2014.  Effect  of  nutrient supplements  on  growth  and  viability  of
Lactobacillus johnsonii NRRL B-2178 in whey. Int Dairy J. 34(1):109–115.
Charalampopoulos, D., S. S. Pandiella, and C.
Webb. 2002. Growth studies of potentially probiotic lactic acid bacteria in cereal-based substrates. J Appl Microbiol. 92(5):851–859.
Eto, M., and A. Nakagawa. 1975.
Identification  of  a  Growth  Factor  in Tomato Juice for a Newly Isolated Strain of Pediococcus cerevisiae. Journal of the Institute of Brewing. 81(3):232–236.
Filannino, P., G. Cardinali, C. G. Rizzello, S.
Buchin, M. de Angelis, M. Gobbetti, and R.  di  Cagno.  2014.  Metabolic  responses of Lactobacillus plantarum strains during fermentation and storage of vegetable and fruit  juices.  Appl  Environ  Microbiol. 80(7):2206–2215.
Gilliland, S. E., C. R. Nelson, and C. Maxwell.
1985.  Assimilation  of  Cholesterol  by Lactobacillus  acidophilus.  Appl  Environ Microbiol. 49(2):377–381.
Hayek, S. A., R. Gyawali, S. O. Aljaloud, A.
Krastanov,  and  S.  A.  Ibrahim.  2019. Cultivation media for lactic acid bacteria used  in  dairy  products.  Journal  of  Dairy Research. 86(4):490–502.
Huynh,  U.,  M.  Qiao,  J.  King,  B.  Trinh,  J.
Valdez,  M.  Haq,  and  M.  L.  Zastrow. 2022.  Differential  Effects  of  Transition Metals on Growth and Metal Uptake for Two  Distinct  Lactobacillus  Species.
Microbiol Spectr. 10(1)
Krzywonos, M., and T. Eberhard. 2011. High density process to cultivate Lactobacillus plantarum  biomass  using  wheat  stillage and  sugar  beet  molasses.  Electronic Journal of Biotechnology. 14(2).
Kumar, M., B. K. Mital, and S. K. Garg. 1989.
Effect  of  Papaya  Pulp  Addition  on  the Growth  of  Lactobacillus  acidophilus.  J
Food Saf. 10:63–73.
Kusmiyati, N., M. Massora, and S. T. Wicaksono.
2022. Potential Analysis of Cheese Whey as an Alternative Media Growth for
Lactobacillus casei Group. J Biol (Denpasar). 8(4):136–147
Lin,  M.,  and  T.  Chen.  2000.  Reduction  of Cholesterol by Lactobacillus acidophilus in Culture  Broth.  Lin,  Meei-Yn  Chen,  Tseng- Wei. 8(2):97–102.
Livingston,  D.  P.,  and  C.  A.  Henson.  1998. Apoplastic sugars, fructans, fructan exohydrolase,  and  invertase  in  winter  oat: Responses to  second-phase cold hardening. Plant Physiol. 116(1):403–408.
Lonner,  C.,  and  K.  Preve-Akesson.  1988.
Acidification  properties  of  lactic  acid bacteria in rye sour doughs. Food Microbiol. 5:43–58.
Macouzet,  M., B. H. Lee, and  N.  Robert.  2009. Production  of  conjugated  linoleic  acid  by probiotic  Lactobacillus  acidophilus  La-5. 106:1886–1891.
Marshall,  V.  M.,  W.  M.  Cole,  and  J.  R.  Vega. 1982.  A  yoghurt-like  product  made  by fermenting  ultrafiltered  milk  containing elevated  whey  proteins  with  Lactobacillus acidophilus.  Journal  of  Dairy  Research. 49:665–670.
Parhi,  P.,  K.  P.  Song,  and  W.  S.  Choo.  2021.
Viability,  storage  stabilityand  in  vitro gastrointestinal
tolerance of Lactiplantibacillus  plantarum  grown  in model  sugar  systems  with  inulin  and fructooligosaccharide supplementation.
Fermentation. 7(4).
Prajapati, S. J. B., S. Hati, and V. S. Jigar Trivedi. 2017. Deproteinated Cheese Whey Medium for  Biomass  Production  of  Probiotic Lactobacillus helveticus  MTCC  5463. Int  J Curr Microbiol Appl Sci. 6(3):174–187.
Pratiwi,  R.  D.,  S.  Zanjabila,  D.  Fairuza,  A.
Aminah,  S.  Praharyawan,  and  A.  M.  Fuad. 2020. Evaluation of Alternative Components
in Growth Media of Lactobacillus brevis for  Halal  Probiotic  Preparation.  Ann Bogor. 24(1):11.
Reuter, G. 1985. Elective and selective media for  lactic  acid  bacteria.  Int  J  Food Microbiol. 2(1–2):55–68.
Sanders, M. E., and T. R. Klaenhammer. 2001. Invited  Review :  The  Scientific  Basis  of
Lactobacillus acidophilus
NCFM
Functionality as a Probiotic. J Dairy Sci. 84(2):319–331
Srinivas, D., B. K. Mital, and S. K. Garg. 1990.
Utilization  of  sugars  by  Lactobacillus acidophilus strains. Int J Food Microbiol.
10:51–58.
Widodo, Indratiningsih, Nurliyani, E.
Wahyuni,  and  T.  T.  Taufiq.  2016.
Isolation and identification of goat milk- derived  Lactobacillus  paracasei  M104 and  Pediococcus  pentosaceus  M103  and their  potential  use  as  starter  culture  for fermentation.  Journal  of  Microbiology, Biotechnology  and  Food  Sciences.
05(04):374–377.
Yadav, H., M. Sc, S. Jain, M. Sc, P. R. Sinha, M. Sc, and D.  Ph. 2007.  Antidiabetic effect of probiotic  dahi  containing  Lactobacillus acidophilus and Lactobacillus casei in high fructose fed rats. Basic Nutrition Investigation. 23:62–68.
Yang, E., L. Fan, J. Yan, Y. Jiang, C. Doucette, S. Fillmore, and B. Walker. 2018. Influence of culture  media,  pH  and  temperature  on growth  and  bacteriocin  production  of bacteriocinogenic lactic acid bacteria. AMB Express. 8(1).
Yu, L., T. Lei, X. Ren, X. Pei, and Y. Feng. 2008.
Response  surface  optimization  of  L-(+)- lactic acid production using corn steep liquor as  an  alternative  nitrogen  source  by Lactobacillus  rhamnosus  CGMCC  1466.
Biochem Eng J. 39(3):496–502.
Zhao, Y., Y. Wang, Z. Song, C. Shan, R. Zhu, and F. Liu. 2016. Development of a simple, low- cost  and  eurytopic  medium  based  on Pleurotus  eryngii  for  lactic  acid  bacteria.
AMB Express. 6(1).

## LAMPIRAN
1. Gambar 0,00 0,20 0,40 0,60 0,80 1,00 1,20 1,40 1,60 0 2 4 6 8 10 12 A b so rb an si λ- 6 2 0 Jam Inkubasi Media MRS Ekstrak Tomat a c a b d f e * * * *
Gambar 1. Kurva pertumbuhan Lactobacillus acidophilus FNCC dengan media tomat dan MRS
Keterangan : a-f : Perbedaan siginifikan (P<0,01) pada pertumbuhan bakteri berdasarkan waktu inkubasi * : Perbendaan signifikan (P<0,01) pada pertumbuhan bakteri pada media berbeda

## Gambar 2. Viabilitas Lactobacillus acidophillus FNCC dengan media tomat dan MRS
Keterangan :
a, b : perbedaan nyata (P<0,05) terhadap lama penyimpanan
* : tidak ada perbedaan nyata (P>0,05) terhadap perbedaan media
0,00 2,00 4,00 6,00 8,00 10,00 12,00 0 7 14 21 28 L og c fu /m L Lama Simpan (hari) MRS Broth Ekstrak Tomat * a b a b b * * * *