## Gynura procumbens (Lour.) Merr. Leaves Against Mice’s Antibody Titer
Rahimatul Uthia* 1 , Elin Resti Ananda 2 , Ifora 2 Poltekkes Kemenkes Riau 1 , Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi (STIFARM) Padang 2 *Email: rahimatul@pkr.ac.id

## Abstract
The  body's  defense  system  can  be  enhanced  by  certain  compounds  that  are immunostimulant. An antibody titer is a measure of the body's level of immunity to a disease. Titers are usually expressed in terms of the number of times they can thin  the  blood  until  they  cannot  find  any  more  antibodies.  This  study  aims  to determine the activity of the extracts of the leaves of Gynura Procumbens (Lour.)
Merr. against antibody titers, the number, and percentage of leukocyte cells of white  male  mice.  25  mice  were  divided  into  5  groups  consisting  of  negative control, positive control, group dose 75 mg/kg body weight, 150 mg/kg body weight, 300  mg/kg  body  weight.  The  extract  is  given  for  7  days  orally.  The results showed that administration of leaf extracts can increase antibody titers and increase with increasing doses, as well as increasing the total number of leukocytes and the percentage of leukocyte cells significantly (P <0.05) .
Keywords: Gynura Procumbens (Lour.) Merr.; Antibody titer; leukocyte cell

## Abstrak
Sistem pertahanan tubuh dapat ditingkatkan dengan senyawa tertentu yang bersifat  imunostimulan.  Titer antibodi  adalah  pengukuran  tingkat  kekebalan tubuh  terhadap  suatu  penyakit.  Titer  biasanya  dinyatakan  dalam  rasio berapa kali bisa mengencerkan darah sampai tidak bisa menemukan antibodi lagi.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  dari  ekstrak  daun sambung  nyawa  ( Gynura  Procumbens (Lour.)  Merr.)  terhadap  titer  antibodi, jumlah  dan persentase sel leukosit mencit putih  jantan.  Hewan sebanyak 25 ekor dibagi atas 5 kelompok yang terdiri dari kontrol negatif, kontrol positif, kelompok  dosis  75  mg/kg  BB,  150  mg/kg  BB,  300  mg/kg  BB.  Ekstrak diberikan selama 7 hari secara oral. Hasil penelitian menunjukkan pemberian ekstrak daun sambung nyawa dapat meningkatkan titer antibodi dan semakin meningkat dengan peningkatan dosis, serta meningkatkan jumlah total leukosit dan persentase sel leukosit secara signifikan (P<0,05). Kata Kunci
Titer antibody; daun sambung nyawa; sel leukosit.

## PENDAHULUAN
Sistem  imun  adalah  sistem  pertahanan  yang ada pada tubuh manusia yang berfungsi untuk menjaga  manusia  dari  benda-benda  asing bagi tubuh manusia. Pada sistem imun disebut dengan istilah imunitas. Imunitas sendiri adalah ketahanan tubuh kita atau resistensi tubuh kita terhadap suatu penyakit. Penyakit atau kuman ini  berupa  protein  asing  yang  berbeda  dari protein tubuh kita, dan sering disebut antigen. Antigen  dianggap  sesuatu  yang asing,  maka antigen ini harus disingkirkan, dinetralisir, atau dihancurkan [1].
Antibodi  adalah  bagian  pertahanan  tubuh yang  digunakan  untuk  menghilangkan  atau mengurangi  zat  asing  yang  masuk  ke  dalam tubuh. Mekanisme kerja antibodi dalam tubuh dimulai  dengan  diikatnya  epitope  (bagian antigen)  oleh  antibodi.  Titer  antibodi  adalah pengukuran tingkat kekebalan tubuh terhadap suatu penyakit yang beredar dalam darah.  Titer  biasanya  dinyatakan  dalam rasio,  yang  berapa  kali  bisa  mencairkan darah sampai tidak bisa menemukan antibodi lagi [2]. Mekanisme pertahanan tubuh dapat ditingkatkan  dengan  senyawa  tertentu  yang bersifat  imunostimulan.  Imunostimulan  secara

## Article Info
Article history Received date: 2019-11-05 Revised date: 2019-11-28 Accepted date: 2019-12-13
umum  didefenisikan  sebagai  senyawa  yang dapat  meningkatkan  mekanisme  pertahanan tubuh baik secara spesifik maupun non spesifik baik  mekanisme  pertahanan  seluler  maupun humoral [3].
Daun  sambung  nyawa  berkhasiat  sebagai antipiretik  dan  anti  bakteri  [4],  [5].  Ekstrak daun  sambung  nyawa  memiliki  khasiat sebagai  antikanker  [6],  [7].  Penelitian sebelumnya  juga  menunjukan  daun  sambung nyawa  ( Gynura  procumbens (Lour.)  Merr.) pada dosis 75 mg/kg BB, dosis 150 mg/kg BB dan  dosis  300  mg/kg  BB  memiliki  efek antiinflamasi  dan  mempengaruhi  jumlah  sel leukosit  tikus  putih  jantan  [8].  Kandungan senyawa  aktif  daun  sambung  nyawa  yang memiliki  khasiat  antara  lain  alkaloid,  minyak atsiri,  flavonoid,  polifenol,  tannin,  saponin, sterol tak jenuh, dan steroid [9], [10]

## METODE Alat
Alat  yang  digunakan  adalah  timbangan analitik  (Precisa®),  wadah  maserasi,  kain flanel,  rotary  evaporator  (Ika),  gelas  ukur (Pyrex®),  erlemeyer  (Pyrex®),  gunting, tabung reaksi (Pyrex®), lumpang dan stamfer (Pyrex®),  kaca  objek  (Slides),  pipet  tetes, spatel,  vial,  pinset,  kertas  saring,  botol timbang krus (Pyrex®), mikropipet (Eppendorf),  rak  tabung  reaksi,  blender (Miyako), plat tetes (Pyrex), timbangan hewan Triple  Beam  Balance  (Ohaus®),  sonde (Terumo®),  mikroskop  (Primo  Star),  plat  KLT Sillica  Gel  60  F254  (Merck),  waterbath (Memmert),  oven  (Memmert),  centrifuge, Lampu Sinar UV (Camag) dan hemocytometer (Qiujing).
Bahan Daun  Sambung  nyawa  ( Gynura Procumbens (Lour.) Merr.), ekstrak etanol daun sambung nyawa, kloroform (Merck), aquadest (PT. Brataco), natrium klorida (NaCl) fisiologis 0,9 %  (PT. Widarta Bhakti), darah  kambing, natrium  karboksi metil  selulosa  (NaCMC)  (PT. Brataco), etanol 70  %  (PT. Brataco), heparin (Fahrenheit),  metanol  (PT.  Brataco),  turk (Segara  Husada  Mandiri),  minyak  emersi,
asam  asetat  (PT.  Brataco),  pewarna  Giemsa (D6 100- Darmstadt).

## Cara Kerja
Pembuatan  Ekstrak  Eanol  Daun  Sambung Nyawa:  Serbuk  kering  simplisia  dimaserasi menggunakan pelarut yang sesuai (etanol 70 %).  Satu  bagian  serbuk  simplisia  kering dimasukan  kedalam  maserator,  tambahkan 10  bagian  pelarut,  rendam  selama  6  jam pertama sambil sekali–kali diaduk, kemudian diamkan selama 18 jam. Maserat dipisahkan dengan  cara  pengendapan,  sentrifugasi, dekantasi,  atau  filtrasi.  Ulangi  proses penyarigan  sekurang-kurangnya  dua  kali dengan  jenis dan  jumlah  pelarut  yang sama. Semua  maserat  dikumpulkan,  kemudian  di uapkan dengan vakum atau penguap tekanan rendah  hingga  diperoleh  ekstrak  kental. Setelah itu hitunglah rendemen yang diperoleh yaitu  persentase  bobot  (b/b)  antara rendemen  dengan  bobot  serbuk  simplisia yang digunakkan dengan penimbangan [11]. Persiapan  Hewan  Percobaan:  Hewan  yang digunakan adalah mencit putih jantan umur 2- 3  bulan  dengan  berat  antara  20-30  gram sebanyak  25  ekor,  dikelompokkan  secara acak menjadi 5 kelompok terdiri dari 5 ekor mencit.  Sebelum  diperlakukan  mencit  di aklimatisasi  selama  7  hari  dengan  diberi makan  dan  minum  yang  cukup.  Mencit  yang akan  digunakan  adalah  mencit  yang  sehat dan tidak menunjukan penurunan berat badan berarti (deviasi maksimal 10 %) serta secara visual  menunjukan  perlakuan  yang  normal [12].
Perencanaan  Dosis:  Dosis  ekstrak  daun sambung  nyawa  (Gynura  procumbens  (Lour.) Merr.) yang digunakan adalah 75 mg/kg BB, 150 mg/kg BB dan 300 mg/kg BB. Perlakuan  Pada  Hewan  Percobaan:  Hewan dibagi  atas  lima  kelompok  dengan  masing- masing kelompok terdiri dari lima ekor, yaitu:
 Kelompok  1  yaitu  kelompok  mencit kontrol  negatif  hanya  diberi  larutan NaCl fisiologis.
 Kelompok  II  yaitu  kelompok  kontrol positif,  mencit  diimunisasi  dengan eritrosit kambing dan pada hari ke 8 diberi larutan NaCl fisiologis
 Kelompok  III  yaitu  kelompok  mencit yang diberikan suspensi ekstrak daun sambung  nyawa  ( Gynura  procumbens (Lour.)  Merr.),  dosis  75  mg/kg  BB secara  oral  1  kali  sehari  selama  7 hari.
 Kelompok  IV  yaitu  kelompok  mencit yang diberikan suspensi ekstrak daun sambung  nyawa  ( Gynura  procumbens (Lour.)  Merr.),  dosis  150  mg/kg  BB secara  oral  1  kali  sehari  selama  7 hari.
 Kelompok  V  yaitu  kelompok  mencit yang diberikan suspensi ekstrak daun sambung  nyawa  ( Gynura  procumbens (Lour.)  Merr.),  dosis  300  mg/kg  BB secara  oral  1  kali  sehari  selama  7 hari.
Pembuatan  Larutan  Uji:  Suspensi  Na CMC  0,5%  dibuat  dengan  cara  Na  CMC ditimbang 500 mg dikembangkan dengan air panas  20  kalinya,  setelah  mengembang digerus kemudian ditambahkan ekstrak etanol daun  sambung  nyawa  ( Gynura  procumbens (Lour.) Merr.)  sesuai konsentrasi ekstrak yang telah direncanakan, kemudian digerus homogen  dan  dicukupkan  dengan  aquadest sampai  volume  100  mL.  Konsentrasi  ekstrak daun  sambung  nyawa  ( Gynura  procumbens (Lour.) Merr.)  yang dibuat adalah 0,75 %; 1,5 %; dan 3 %.
Pembuatan  Larutan  Antigen:  Darah  kambing diambil  dan  dicuci  dengan  NaCl  fisiologis (1:1)  masing-masing  sebanyak  5  mL  aduk homogen.  Kemudian  disentrifus  dengan kecepatan 2000 rpm selama 15 menit, buang supernatannya,  ulangi  3  kali  dengan menambahkan NaCl fisiologis setiap pengulangan.  Setelah  didapatkan  eritrosit kambing,  kemudian  buat  suspensi  5  %, caranya  ambil  0,2  mL  eritrosit  kambing  lalu tambahkan  dengan  NaCl  fisiologis  hingga volume 4 ml.
Sensitisasi  Hewan:  Mencit  diberi  imunogen dengan 0,2 mL suspensi eritrosit kambing 5 % pada hari pertama setelah aklimatisasi secara intra peritoneal, kemudian lakukan pembosteran dengan 0,1 mL suspensi eritrosit kambing 5 % secara subcutan pada hari ke 7. Suspensi dari ekstrak diberikan pada hari ke
8 sampai hari ke 14 secara oral dengan dosis 75, 150, 300 mg/kg BB.
Titer  Antibodi:  Pada  hari  ke-15  mencit dikorbankan, diambil  darah  dari  vena leher, biarkan  selama  30  menit,  lalu  disentrifus dengan kecepatan 2000 rpm selama 15 menit ambil bagian serumnya. Untuk serum dari satu ekor mencit disiapkan 10 tabung reaksi yang telah  berisi  larutan  NaCl  fisiologis  0,2  mL. Pada  tabung  pertama  ditambahkan  0,2  mL serum, kocok sampai homogen. Pindahkan 0,2 mL  larutan  tabung  pertama  kedalam  tabung kedua  kemudian  kocok  dan  pipet  0,2  mL larutan  tabung  kedua,  pindahkan  kedalam tabung  ketiga.  Lakukan  ini  sampai  tabung tabung  kesepuluh,  pada  tabung  kesepuluh buang  0,2  mL.  Sehingga  hasil  pengenceran dari serum yaitu 1/2, 1/4, 1/8, 1/16, 1/32, 1/64,  1/128,  1/256,  1/512,  1/1024. Masukkan 0,1 mL suspensi eritrosit kambing 5 %  kedalam  masing-masing  tabung  reaksi tersebut  lalu  diamkan  selama  10  menit. Sentrifus  selama  5  menit  dengan  kecepatan 2000  rpm,  amati  gumpalan  yang  terjadi. Angka  titer  ditentukan  dengan  pengenceran tertinggi  dari  serum  mencit  yang  masih mengalami aglutinasi dengan eritrosit kambing.
Perhitungan Jumlah Sel Leukosit: Darah segar yang  telah  diberi  heparin  dihisap  dengan pipet  thoma  leukosit  sampai  angka  0,5 tambahkan  larutan  Turk  sampai  angka  11 selanjutnya  dikocok  selama  3  menit.  Larutan dari dalam pipet 1-2 tetes pertama dibuang dan diteteskan satu tetes pada kamar hitung. Cairan dialirkan selama 2 menit agar leukosit mengendap.  Jumlah  sel  darah  putih  dihitung pada  4  kotak  besar  dan  64  kotak  sedang pada kamar hitung Hemocytometer.
Perhitungan  Presentase  Sel  Leukosit:  Darah segar diteteskan  pada  gelas  objek  (1 tetes), tipiskan, dan ratakan dengan gelas objek lain, sehingga  diperoleh  lapisan  darah  yang homogen  (hapusan  darah),  lalu  keringkan. Setelah  kering  ditetesi  dengan  metanol sehingga  menutupi  seluruh  hapusan  darah, biarkan  5  menit.  Tambahkan  satu  tetes Giemsa  yang  telah  diencerkan  dalam aquadest  (1:20),  biarkan  selama  20  menit. Cuci  dengan  aquadest,  setelah  kering  lihat
dibawah  mikroskop.  Hitung  jumlah  sel eusionofil,  netrofil  batang,  netrofil  segmen, limfosit, dan monosit pada perbesaran 1000x dengan menggunakan minyak emersi. Analisa  Data: Data  hasil  penelitian  diolah dengan statistik menggunkan uji ANOVA satu arah dan dilanjutkan dengan uji Duncan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Setelah  dilakukan  penelitian  tentang  uji aktivitas ekstrak etanol daun sambung nyawa ( Gynura  procumbens (Lour.)  Merr.)  terhadap titer  antibodi,  jumlah  dan  persentase  sel leukosit  mencit  putih  jantan  diperoleh  hasil sebagai berikut:
Hasil  pengamatan  organoleptis  menunjukan bahwa  ekstrak  berwarna  coklat,  rasa  agak pahit,  baunya  khas,  dan  konsistensi  berupa ekstrak kental. Dari maserasi sebanyak 298,9 g serbuk kering daun sambung nyawa ( Gynura Procumbens (Lour.) Merr.) dengan etanol 70% didapat  ekstrak  kental  sebanyak  36,04  g dengan rendemen 12,06%.
Berdasarkan  hasil  uji  susut  pengeringan  dari ekstrak  diperoleh  7,58%.  Ekstrak  daun sambung nyawa juga positif bereaksi dengan pereaksi  alkaloid,  saponin,  tanin,  flavonoid, steroid dan terpenoid.
Pengamatan  aktivitas  titer  antibodi  jumlah dan persentase sel leukosit setelah pemberian ekstrak etanol daun sambung nyawa selama 7 hari dan diimunisasi eritrosit kambing sebagai antigen:
1. Hasil  penentuan  titer  antibodi  dari  serum mencit  putih  jantan  setelah  diinduksi dengan  eritrosit  kambing  5  %  dan pemberian  ekstrak  daun  sambung  nyawa ( Gynura  procumbens (Lour.)  Merr.)    pada
dosis  75  mg/kg  BB,  150  mg/kg  BB,  300 mg/kg  BB  secara  berurutan  adalah:  4,0; 5,4;  dan  6,2.  Untuk  kontrol  negatif  dan kontrol positif adalah 1,8 dan 3,6.
2. Hasil  perhitungan  jumlah  total  sel  leukosit darah mencit putih jantan setelah diinduksi dengan  eritrosit  kambing  5  %  dan pemberian  ekstrak  daun  sambung  nyawa ( Gynura  procumbens (Lour.)  Merr.)    pada dosis  75  mg/kg  BB,  150  mg/kg  BB,  300 mg/kg  BB  secara  berurutan  adalah: 15.810;  16.960;  18.240.  Untuk  kontrol negatif dan kontrol positif adalah 14.050 dan 15.580.
3. Hasil  perhitungan  persentase  sel  leukosit darah mencit putih jantan setelah diinduksi dengan  eritrosit  kambing  5  %  dan pemberian  ekstrak  daun  sambung  nyawa ( Gynura procumbens (Lour.) Merr.)  untuk sel eusinofil, neutrofil batang, neutrofil segmen, limfosit  dan  monosit  secara  berurutan adalah: pada dosis 75 mg/kg BB 4,2; 8,6; 19,8; 57,6; 9,8 pada dosis 150 mg/kg BB 5,2; 9,2; 15,8; 58,8; 11 pada dosis 300 mg/kg BB, 5,6; 10,4; 11,4 ; 60,2 ; 12,4. Untuk kontrol negatif 2,0 ; 7,0 ;  28,02  ;  55,0  ;  7,8  dan  kontrol  positif adalah 3,6 ; 7,8 ; 23,2 ; 56,4 ; 9,0.
Hasil  pengamatan  terhadap  uji  aktivitas ekstrak  daun  sambung  nyawa (Gynura Procumbens (Lour.)  Merr.)  terhadap  titer antibodi,  jumlah  dan  persentase  sel  leukosit mencit putih jantan dengan perlakuan ekstrak etanol  daun  sambung  nyawa  dengan  variasi dosis telah dilakukan uji analisis statistik yang dapat dilihat pada gambar 1, 2 dan gambar 3.
Gambar 1. Diagram batang angka titer antibodi terhadap kelompok perlakuan setelah diinduksi dengan eritrosit kambing 5 % dan pemberian ekstrak daun sambung nyawa ( Gynura procumbens (Lour.) Merr.)
Gambar 2. Diagram batang jumlah sel leukosit terhadap kelompok perlakuan setelah diinduksi dengan eritrosit kambing 5 % dan pemberian ekstrak daun sambung nyawa ( Gynura procumbens (Lour.) Merr.)
Gambar 3. Diagram batang persentase sel leukosit terhadap kelompok perlakuan setelah diinduksi dengan eritrosit kambing 5 % dan pemberian ekstrak daun sambung nyawa ( Gynura procumbens (Lour.) Merr.)
Keterangan : I  : Kelompok kontrol negatif II  : Kelompok kontrol positif
III  : Dosis 75 mg/kg BB
IV : Dosis 150 mg/kg BB V  : Dosis 300 mg/kg BB
Mencit  dibagi  menjadi  lima  kelompok, masing-masing  kelompok  terdiri  dari  lima ekor mencit putih jantan. Kelompok pertama adalah  kelompok  kontrol  negatif  yang hanya  diberi  NaCl  fisiologis,  kelompok kedua adalah kelompok kontrol positif yang diimunisasi  dengan  eritrosit  kambing  dan pada hari ke 8 diberi larutan NaCl fisiologis, sedangkan  tiga  kelompok  lainnya  adalah tiga  variasi  dosis  yang  berbeda  yaitu 75mg/kg  BB,  150mg/kg  BB,  dan  300 mg/kg BB.
Penentuan  angka  titer  antibodi  dengan metoda  hemaaglutinasi.  Dasar  pemilihan metoda  ini  selain  murah,  waktu  yang dibutuhkan  untuk  mengetahui  angka  titer relatif singkat. Angka titer ditentukan pada pengenceran  tertinggi  dari  serum  mencit yang masih dapat beraglutinasi dengan sel
darah  merah  kambing,  angka  titer  dapat dicari  dengan  rumus  2log  pengenceran. Pada  kelompok  kontrol  negatif  aglutinasi masih terlihat jelas pada 2log 2 maka angka titernya  adalah  1,  aglutinasi  yang  terjadi dipengaruhi  oleh  komplemen,  komplemen yaitu  salah  satu  enzim  serum  yang  berasal dari  sistem  imun  non  spesifik  larut  dalam keadaan  tidak  aktif,  tapi  setiap  waktu dapat  diaktifkan  oleh  berbagai  bahan seperti  antigen,  kompleks  imun  dan sebagainya. Sedangkan pada kontrol positif aglutinasi terjadi pada 2log 16 maka angka titernya  adalah  4  antigen  yang  digunakan eritrosit  kambing  5  %  yang  diinjeksikan pertama kali secara intra peritonial dengan tujuan  agar  terbentuk  antibodi  spesifik terhadap antigen tersebut pada pemaparan berikutnya.  Pada  hari  ke  7  dilakukan pembosteran  dengan  antigen  secara subkutan,  sehingga  terjadi  sensitisasi  dari sistem imun.
Pemilihan  eritrosit  kambing  5  %  sebagai antigen terbukti dapat meningkatkan jumlah antibodi  dari  serum  mencit.  Setelah pemberian  ekstrak  etanol  daun  sambung
nyawa  dengan  dosis  75  mg/kg  BB,  150 mg/kg  BB,  300  mg/kg  BB  terjadi peningkatan angka titer yaitu 4,0; 5,4; dan 6,2.  Data  hasil  perhitungan  titer  antibodi dengan  anova  satu  arah  menunjukkan bahwa  dengan  pemberian  antigen  eritrosit kambing  5  %  dan  ekstrak  daun  sambung nyawa  dapat  meningkatkan  produksi antibodi (P < 0,05) dan berdasarkan angka titer  yang  didapatkan  cenderung  tinggi. Peningkatan  angka  titer  yang  sejalan dengan  peningkatan  dosis,  menunjukkan ekstrak  daun  sambung  nyawa  memiliki kemampuan  sebagai  imunostimulan  karena dapat  meningkatkan  produksi  antibodi. Analisa dengan uji lanjut Duncan menunjukkan  pemberian  ekstrak  daun sambung  nyawa  pada  dosis  300  mg/kg memberikan efek yang lebih baik terhadap peningkatan angka titer antibodinya. Selain  itu  juga  dilakukan  uji  jumlah  total leukosit menggunakan alat haemocytometer. Data  hasil  perhitungan  jumlah  total  leukosit diolah dengan anova satu arah didapatkan hasil  yang  signifikan  (P  <  0,05)  berarti bahwa  pemberian  ekstrak  daun  sambung nyawa dapat meningkatkan jumlah total sel leukosit.  Analisa  dengan  uji  lanjut  Duncan menunjukkan  pemberian  ekstrak  daun sambung  nyawa  pada  dosis  300  mg/kg memberikan efek yang lebih baik terhadap peningkatan jumlah sel leukositnya. Pada pemeriksaan hapuan darah, dilakukan perhitungan persetase jenis sel leukosit yaitu sel eusinofil, sel neutrofil batang, sel neutrofil segmen,  limfosit  dan  monosit  setelah dilakukan pewarnaan dengan giemsa. Pada pewarnaan  giemsa  ini  basofil  tidak ditemukan  kerena  sel  basofil  bersifat  basa sehingga  sel  tersebut  larut  dalam  pewarna giemsa  [13],  [14].  Dari  hasil  uji  statistik analisa  varian  satu  arah  dilihat  dari  tabel homogen  variabel  data  sel  eusinofil,  sel neutrofil batang, sel neutrofil segmen, limfosit dan  monosit  menunjukkan  hasil  yang homogeny  (P>  0,05)  sehingga  dapat diteruskan dengan uji anova satu arah. Pada hasil hitungan anova menunjukkan
pemberian  ekstrak  daun  sambung  nyawa berpengaruh  terhadap  angka  rata-rata persentase leukosit (P< 0,05).
Analisa statistik dilanjutkan dengan uji lanjut Duncan  menunjukkan  pemberian  ekstrak daun  sambung  nyawa  pada  dosis  300 mg/kg  memberikan  efek  yang  lebih  baik terhadap  peningkatan  jumlah  sel  eusinofil, neutrofil,  neutrofil  segmen,  limfosit,  dan monositnya.
Eusinofil  berfungsi  melawan  infeksi  parasit dan  juga  melawan  kompleks  antigen antibody [15]. Neutrofil merupakan sel yang pertama yang dikerahkan ketempat bakteri masuk  dan  berkembang  dalam  tubuh. Monosit  berfungsi  mengenal,  menyerang mikroba dan sel kanker, memproduksi sitokin dan  mengerahkan  pertahanan  sebagai respon  terhadap  infeksi  [16].  Peningkatan jumlah  sel  limfosit  ini  berarti  terjadi peningkatan pada respon imun spesifik. Sel limfosit  terdiri  dari  sel  limfosit  B  dan  sel limfosit  T.  Sel  limfosit  B  akan  mengalami proliferasi  dan  diferensiasi  membentuk  sel plasma  dan  sel  memori.  Sel  plasma  inilah yang  membentuk  antibodi  yang  terbentuk setelah  kontak  dengan  antigen.  Untuk membentuk  antibodi,  sel  plasma  perlu melakukan kerja sama dengan sel limfosit T [17], [18].

## SIMPULAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan tentang  Uji  Aktivitas  Ekstrak  Etanol  Daun Sambung Nyawa ( Gynura procumbens (Lour.) Merr.)  tehadap  Titer  Antibodi,  Jumlah  Dan Persentase  Sel Leukosit  Mencit  Putih  Jantan, maka dapat disimpulkan bahwa pemberian ekstrak  daun  sambung  nyawa  ( Gynura procumbens (Lour.)  Merr.)    selama  7  hari dapat meningkatkan titer antibodi, meningkatkan  jumlah  total  sel  leukosit  dan dapat meningkatkan persentase sel leukosit mencit putih jantan .

## DAFTAR PUSTAKA
[1] P. D. Hasdianah, Peristowati, S. Imam, Imunologi  diagnosa  dan  teknik  biologi molekuler,  Edisi 1,  Yogyakarta:  Nuha Medika, 2014.
[2] S.  Emantoko,  “Antibodi  rekombinan: perkembangan terbaru dalam
teknologi antibody,” Jurnal Unitas . 9, 2, 29-43, 2001.
[3] S.  B.  Kresno, Imunologi  Diagnosis  dan Prosedur  Laboratorium, Edisi  IV, Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, 2001.
[4] D.  N.  Nuraini, Aneka  daun  berkhasiat untuk  tanaman  obat. Yogyakarta: Gava Media, 2014.
[5] B. Mahendra, 13  Jenis  Tanaman  Obat Ampuh, Jakarta:  Penebar  Swadaya,
2005.
[6] I. P. Sari & N. Yuniarti, “Efek estrogenik dari  ekstrak  etanol  daun  sambung nyawa  ( Gynura  procumbens (Lour.) Merr.)  pada  tikus,” Majalah  Farmasi Indonesia , 5, 4, 158-162, 2004. [7] M.  Y.  Fadli,  “Benefits  of  sambung nyawa (Gynura procumbens) substance  as  anticancer”, Medical Journal  of  Lampung  University ,  4(5), 50-53, 2015.
[8] R.  Uthia,  W.  Kardela  dan  K.  B. Transida,  “Uji  efek  antiinflamasi ekstrak  etanol  daun  sambung  nyawa ( Gynura  procumbens (Lour.)  Merr.) terhadap  kaki  tikus  putih  jantan,”
Jurnal  Farmasi  Higea ,  10,  1,  25-32, 2018.
[9] P. Utami dan D. E. Puspaningtyas, “ The Miracle of Herbs,” Jakarta: AgroMedia Pustaka, 2013.
[10] N.  Kaewseejan,  V.  Sutthikhum,  &  S.
Siriamornpun,  “Potential  of  gynura procumbens  leaves  as  source  of flavonoid  enriched  fractions  with enhanced antioxidant capacity,”
Journal of functional foods , 12, 5, 120- 128, 2015.
[11] Kementrian Kesehatan Republik Indonesia, Farmakope Herbal Indonesia, Edisi 1, Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 2010.
[12] H.  Vogel, Drug  discovery  and evaluations pharmacological assays , 2 th
Edition,  Germany:  Springer-Verlag Berlin Heidelberg, 2002.
[13] Y. Aldi, N. Ogiana dan D. Handayani, “Uji Imunomodulator Beberapa Subfra ksi Ekstrak Etil AsetatMeniran (Phyllant hus niruri L.) pada Mencit Putih Jantan dengan Metoda Carbon Clearance,” dalam  Prosiding  Seminar  Nasional Perkembangan  Terkini  Sains  Farmasi dan Klinik III, 2013, 134-147
[14] Y.  Aldi,  Mahyudin  dan  D.  Handayani, “Uji  aktivitas  beberapa  subfraksi ekstrak etil asetat dari herba meniran ( phyllanthus  niruri Linn.)  terhadap reaksi  hipersensitivitas  kutan  aktif,”
Jurnal Sains dan Farmasi, 18, 1, 9-16, 2013.
[15] K. G. Baratawidjaja. Imunologi dasar , Edisi VIII, Jakarta: Penerbit Universitas Indonesia. 2009.
[16] T. J. Kindt, R. A. Goldsby, B. A. Osborn, Kuby  Imunnology ,  New  York:  WH Freeman and Company, 2007.
[17] G.  Pinchuk, Immunology ,  New  York USA:  The  Mecgraw  Hill  Companies,
2002.
[18] M. Radji, Imunologi dan Virologi, Edisi 2,  Jakarta  Barat:  PT.  ISFI  Penerbitan,
2015.