Accepted : 06/01/2020

## JURNAL PENDIDIKAN MATEMATIKA DAN IPA

## Vol. 11, No. 1 (2020) h. 130-141
http://jurnal.untan.ac.id/index.php/PMP
EFEKTIVITAS IMUNOMODULATOR EKSTRAK DAUN MACANG (Mangifera Foetida L.) TERHADAP SEL MAKROFAG TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus)
Sri Nur Kholifah, Fitmawati
Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Riau, Kampus Binawidya E-mail: srnrkholifah@gmail.com
DOI: dx.doi.org/10.26418/jpmipa.v11i1.32763

## Abstract
Macang  (Mangifera  foetida L.) has potential as  an  effect herbal medicinal plant with antioxidant content, namely mangiferin. The aim of this study is to prove  empirically  study  that  macang  has  an  immunomodulatory  effect through preclinical testing. This study use white mice (Rattus norvegicus) as experimental animals and Staphylococcus aureus as test bacteria. Rats were give leaf extracts of 3 varieties of orally for 7 days using 3 prescribe doses in ppm . On the 8 th day, each rats was induce by an intraperitoneal section with 0,5  ml  of  the  bacterial  suspension  tested.  Observation  of  peritoneal  fluid through smear preparations includes 2 parameters, phagocytosis activity and capacity.  The  result  showed  that  the  immunomodulatory  effects  on  batu varieties were effective at dose 2 (10 ppm = 0,01 mg/g), limus varieties and manis varieties were effective at dose 1 (1 ppm = 0,001 mg/g). According to this research, it was concluded that leaf extracts  of three varieties macang could be used as immunomodulators.

## Keywords: macrophage phagocytosis, immunomodulatory, mangifera foetida

## Abstrak
Macang (Mangifera foetida  L.) mempunyai  potensi  sebagai  tumbuhan obat herbal dengan kandungan antioksidan yaitu mangiferin.  Tujuan penelitian ini adalah membuktikan efek imunomodulator pada tiga varietas macang (batu, limus  dan  manis)  melalui  uji  praklinik.    Penelitian  ini  menggunakan  tikus putih  (Rattus  norvegicus)  sebagai  hewan  uji  dan  Staphylococcus  aureus sebagai bakteri uji.  Tikus diberi ekstrak daun tiga varietas macang secara oral selama tujuh hari menggunakan tiga serial dosis dalam satuan ppm.  Pada hari ke-8,  setiap  tikus  putih  diinduksi  bagian  intraperitoneal  dengan  0,5  ml suspensi  bakteri  uji.  Pengamatan  cairan  peritoneal  melalui  preparat  apusan meliputi  2  parameter  yaitu  aktivitas  dan  kapasitas  fagositosis.    Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  efek  imunomodulator  pada  varietas  batu
Vol. 11, No. 1 (2020) h. 111-141
efektif  pada  dosis  2  (10  ppm=0,01  mg/g),  varietas  limus  dan  manis  efektif pada  dosis  1  (10  ppm=0,001mg/g).  Disimpulkan  bahwa  daun  macang (Mangifera foetida) berpotensi digunakan sebagai imunomodulator.
Kata kunci : fagositosis makrofag, imunomodulator, mangifera foetida
Penyakit  degeneratif  disebabkan oleh  menurunnya  fungsi  sel  pada  tubuh. Penyakit  ini  terus  meningkat  akibat perubahan gaya hidup masyarakat saat ini pola  makan,  serta  kurangnya  aktivitas fisik.    Hal  tersebut  dapat  menurunkan sistem kekebalan didalam tubuh. Menurunnya  sistem  imun  menyebabkan masuknya radikal bebas yang berdampak pada kerusakan sel,
sehingga menimbulkan  penyakit  (Limyati Essay,  2003).  Antioksidan  merupakan suatu senyawa yang mampu menekan dan mencegah terjadinya radikal bebas dalam proses  oksidasi  lipid  (Ahmad  et  al ., 2012).    Sebagai  agen imunostimulativ, antioksidan  menjaga  ketahanan  sistem imun dengan menguatkan kembali keseimbangan tubuh.
Tumbuhan berpotensi  sebagai  sumber  antioksidan dan  beberapa  jenis  memiliki  kandungan antioksidan  setara  dengan  vitamin  C (asam  askorbat),  salah  satunya  adalah mangga.
Macang  merupakan  salah  satu mangga  jenis  liar  dalam  anggota  genus Mangifera yang . Jenis  mangga  liar memiliki  ciri  buah  beraroma  khas,  serta memiliki  rasa  buah  yang  masam.  Rasa masam  pada  buah  ini  menjadi  petunjuk adanya senyawa potensial obat. Berdasarkan penelitian identifikasi senyawa oleh Purwaningsih, et al. (2011) menunjukkan bahwa infusa daun macang mengandung  metabolit  sekunder  berupa flavonoid,  saponin,  tanin  dan  xantonoid berupa  mangiferin  yang  dapat  bersifat sebagai antioksidan.
Macang  memiliki  potensi  sebagai tumbuhan  obat  herbal  imunomodulator
dengan  kandungan  antioksidan  yaitu mangiferin. Kandungan  mangiferin pada macang  lebih  tinggi  dibandingkan  pada Mangifera  indica ,  yaitu  sebesar  2,56% (Purwaningsih,  et  al ., 2011).  Hasil penelitian  Siswanty et  al.  (2017)
kandungan  antioksidan  ekstrak  metanol daun  macang  diperoleh  nilai  IC 50 9,653 ppm.  Antioksidan  dikatakan  sangat  kuat jika nilai IC 50 kecil dari 50 ppm.  Semakin kecil  nilai  IC 50, maka  semakin  tinggi aktivitas antioksidan
Penelitian tentang imunomodulator pada  mangga  sudah  pernah  dilaporkan, dan  terfokus  pada  mangga  budidadaya, diantaranya Mangifera indica (Savant, et al ., 2014; Grace, et al ., 2013; Wei, et al ., 2011).  Selain  itu,  juga  pada  jenis  liar endemik  Kalimantan  oleh  Rahim,  et  al .
(2017)  pada Mangifera  casturi dan  tiga jenis mangga liar  ( Mangifera magnifica,
Mangga Hutan dan Mangga Bukit Suligi) oleh  Fitmawati,  et  al . (2018).  Namun, belum ada informasi pembuktian empiris yang mendukung bahwa macang mempunyai  efek  imunomodulator.  Oleh karena  itu,  perlu  dilakukan  uji  praklinis terhadap efektivitas ekstrak daun macang sebagai  imunomodulator.  Tujuan  dari penelitian  ini  adalah  membuktikan  efek imunomodulator ekstrak daun tiga varietas  macang  dengan  mengetahui respon aktivitas dan kapasitas fagositosis sel makrofag cairan peritoneal tikus putih setelah  distimulasi  ekstrak  terhadap infeksi bakteri Staphylococcus aureus .

## METODE
Persiapan Hewan Uji
Vol. 11, No. 1 (2020) h. 111-141
Tikus  putih  jantan  galur  Wistar berumur  tiga  bulan  dengan  berat  badan 220-260  g  ditempatkan  di  kandang hewan. Selama pemeliharaan dan perlakuan,  hewan  uji  diberi  minum akuades  dan  pakan  standar  secara ad libitum.
Pembuatan Ekstrak Macang Sampel  serbuk  daun  macang dimaserasi  dengan  pelarut  metanol, kemudian  disaring  dengan  kertas  saring. Filtrat  diuapkan  atau  dipekatkan  dengan rotary  evaporator sampai  terbentuk ekstrak yang kental.
Penetapan Dosis Hewan Uji Pembuatan  larutan  stok  yaitu  100 mg ekstrak kental dalam 10 ml akuades. Penggunaan  dosis  ekstrak  daun  macang menggunakan  konsentrasi  1  ppm  (0,001 mg/g), 10 ppm (0,01 mg/g) dan 100 ppm (0,1 mg/g).
Persiapan Medium Medium dibuat dengan mensuspensikan  21  g  media Mueller
Hinton  Broth (MHB)  dalam  satu  liter akuades,  lalu  disterilisasi  menggunakan autoklaf 121˚C selama 15 menit.
Bakteri Uji
Bakteri dari biakan murni ditumbuhkan  dalam  medium  MHB  cair sebanyak 10 ml lalu diinkubasi menggunakan shaker  incubator pada suhu  37˚C  dengan  kecepatan  rotasi  150 rpm. Selanjutnya dilakukan pengenceran menggunakan  larutan  garam  fisiologis (NaCl) 0,85% untuk mendapatkan jumlah bakteri  10 8 cfu/ml  (Yulinery  dan Nurhidayat, 2012).
Pemberian Ekstrak Macang per Oral Hewan  uji  dikelompokkan  secara acak dengan dibagi menjadi 12 kelompok dan masing-masing kelompok terdiri dari tiga  ekor  tikus.    Pemberian  ekstrak
dilakukan  per  oral  selama  satu  minggu sesuai dengan dosis yang sudah ditetapkan.
Uji Fagositosis Pada  hari  kedelapan,  setiap  tikus putih  diinduksi  bagian  intraperitoneal dengan  0,5  ml  suspensi S.  aureus dan dibiarkan  selama  satu  jam.  Setelah  itu, tikus  dibedah  bagian  perut.  Kemudian cairan  peritoneal  diambil,  dipulas  pada gelas objek dan difiksasi dengan metanol selama  lima  menit,  diwarnai  dengan pewarnaan giemsa, didiamkan selama 20 menit,  dibilas  dengan  air  mengalir. Setelah  sediaan  kering,  dilihat  dibawah mikroskop  menggunakan  minyak  imersi dengan  perbesaran  1000x,  dihitung aktivitas dan kapasitas fagositosis makrofag (Fitmawati, et al ., 2017).
Analisis Data Penentuan  perbedaan  pengaruh ekstrak daun tiga varietas macang dengan variasi  dosis  terhadap  aktivitas  dan kapasitas fagositosis sel makrofag digunakan  uji  ANOVA  ( analysis  of variance ) satu arah ( one way ), dengan uji lanjut Duncant  Multiple  Range  Test (DMRT)  dengan  program SPSS  for Windows 23 .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengujian efektivitas imunomodulator  ekstrak  daun  macang dilakukan  melalui  pengamatan  dan perhitungan terhadap aktivitas dan kapasitas makrofag (sel darah putih) pada gambaran preparat apusan cairan peritoneal  (Gambar  1  sampai  dengan Gambar  4).  Makrofag  didalam  tubuh hewan  uji  berperan  dalam  fagositosis patogen-patogen di dalam tubuh. Patogen yang  diinfeksikan  melalui intraperitoneal tikus putih adalah bakteri
S. aureus .
Vol. 11, No. 1 (2020) h. 111-141
Gambar 1. Gambaran apusan cairan peritoneal. Keterangan A: Kontrol positif (stimuno), B: Kontrol nol (aquades), C: Kontrol negatif (CMC Na 1%). F: fagositosis, M: makrofag, S: bakteri S. aureus
Gambar 2. Gambaran apusan cairan peritoneal ekstrak daun macang varietas batu. Keterangan A: Dosis 1, B: Dosis 2, C: Dosis 3. F: Fagositosis, M: makrofag,
S: bakteri S. aureus
Gambar 3. Gambaran apusan cairan peritoneal ekstrak daun macang varietas limus.
Keterangan A: Dosis 1, B: Dosis 2, C: Dosis 3. F: Fagositosis, M: makrofag,
S: bakteri S. aureus
Sa Mf F g Sa F g Mf Sa F g Mf A B C fg Mf Sa Mf Fg Sa Fg Mf Sa A B C Fg Sa Mf Mf Sa Fg Sa Mf Fg C c B A
Vol. 11, No. 1 (2020) h. 111-141
Gambar 4. Gambaran apusan cairan peritoneal ekstrak daun macang varietas manis. Keterangan A: Dosis 1, B: Dosis 2, Ce: Dosis 3. F: Fagositosis,
M: makrofag, S: bakteri S. aureus Secara  umum  seluruh  perlakuan pemberian ekstrak daun macang menunjukkan  adanya  aktivitas  maupun kapasitas  fagositosis.    Sel  makrofag disebut aktif apabila mengalami pembesaran sitoplasma dengan tepi yang jelas.
Sebaliknya  makrofag  disebut inaktif jika  sitoplasma  kecil  dan  halus (Parawansah, et al ., 2018). Hal ini terlihat pada  pengamatan  gambaran  apusan cairan  peritoneal  keseluruhan  perlakuan sesuai  yang  ditunjukkan  pada  gambar  1 sampai  dengan  gambar  4.      Salah  satu penanda terjadinya peningkatan imunitas yaitu meningkatnya aktivitas dan kapasitas  fagositosis  sel  makrofag. Makrofag  adalah  sel  fagositik  yang berperan  penting  untuk  menangkal serangan  patogen  melalui  mekanisme fagositosis,  baik  oada  respon  imun bawaan  maupun  adaptif  (Handayani,  et al ., 2018).
Persentase makrofag yang memfagositosis bakteri uji dihitung setiap 100  sel  makrofag  dinyatakan  sebagai jumlah sel fagosit aktif (aktivitas).
Kemampuan fagositosis juga
ditunjukkan  oleh  kapasitas  sel  makrofag yaitu  banyaknya  bakteri  uji  yang difagositosis  oleh  setiap  sel  makrofag aktif.    Secara  umum  seluruh  perlakuan pemberian ekstrak daun macang menunjukkan  adanya  aktivitas  maupun kapasitas fagositosis.  Kelompok kontrol positif  menunjukkan  perbedaan  yang sangat  kontras  antara  kontrol  nol (aquades)  dan  kontrol  negatif  (CMC  Na 1%).    Nilai  aktivitas  dan  kapasitas  sel makrofag  oleh  ekstrak  daun  macang dalam  melakukan  fagositosis  dapat dianalisis dengan melakukan perhitungan sel  makrofag  aktif  (aktivitas  fagositosis) dan sel bakteri yang difagositosis oleh sel makrofag (kapasitas fagositosis).
Perbedaan  antar  kelompok  perlakuan terlihat melalui uji statistik ANOVA satu arah, dilanjutkan dengan uji DMRT. Data rerata  perhitungan  persentase  aktivitas dan fagositosis dapat dilihat pada (Tabel 1) dan (Gambar 5).
Sa Mf Fg Mf Fg Sa Fg Sa Mf A B C
Efektivitas Imunomodulator Ekstrak Daun Macang (Mangifera Foetida L.) Terhadap Sel Makrofag Tikus Putih (Rattus Norvegicus)
Tabel 1. Rerata Aktivitas Fagositosis Perlakuan Dosis 1  Dosis 2  Dosis 3 K + K 0 K - Batu 75 b 85 cd 89 cde Limus 83 c 95 ef 93 ef Manis 91 de 94 ef 98 f Stimuno 90 de Aquades 66 a CMC NA 1% 62 a
Gambar 5. Grafik persentase aktivitas fagositosis oleh ekstrak daun macang
Secara  umum  aktivitas  fagositosis dari  tiga  varietas  macang  menunjukkan nilai  yang  lebih  tinggi  dibandingkan dengan perlakuan kontrol, terutama pada varietas  manis  menunjukkan  nilai  yang sama  dengan  kontrol  positif  oleh penggunaan dosis rendah (dosis 1).
Hasil  uji  ANOVA  persentase aktivitas fagositosis sel makrofag dengan pemberian ekstrak daun macang diperoleh nilai P sebesar 0,000. Nilai P 0,05  artinya  terdapat  perbedaan  yang nyata  terhadap  kemampuan  aktivitas fagositosis sel makrofag tiap perlakuan.
Pemberian  ekstrak  varietas  batu pada dosis 1 menunjukkan berbeda nyata dengan kelompok kontrol positif dengan persentase  aktivitas  sebesar  74,67  ± 2,08%. Hal ini menunjukkan bahwa dosis 1 belum efektif sebagai imunomodulator, sedangkan  pada  dosis  sedang  (dosis  2) menunjukkan adanya kemampuan imunomodulator  dikarenakan  persentase aktivitas fagositosis sama dengan kontrol positif (stimuno) (85,00±7,81%). Penelitian  serupa  oleh  Fitmawati,  et  al. (2018) menguji aktivitas imunomodulator  dari  ekstrak  etanol Mangga  Hutan  pada  cairan  peritoneal
mencit  yang  diinjeksikan  bakteri S . aureus menggunakan  3  serial  dosis menunjukkan aktivitas  fagositosis  paling  tinggi pada  dosis  2  sebesar  84%,  lebih  efektif dibandingkan  dosis  1.  Penelitian  oleh Aldi, et al. (2014) menggunakan ekstrak meniran  pada  sel  limfosit  ayam  broiler, menunjukkan  bahwa  indeks  fagositosis (bobot  limfa)  terbesar  yaitu  dengan penggunaan dosis tinggi (300mg/kg BB) sebesar  0.2219  dan  rata-rata  indeks fagosit  sel  limfosist  sebesar  21.  Hal  ini menunjukkan  semakin  tinggi  dosis  yang diberikan
kemampuan aktivitas fagositosis  juga  semakin  meningkat, begitu  pula  dengan  penggunaan  varietas batu, peningkatan dosis
akan meningkatkan  aktivitas  fagositosis  sel makrofag.
Persentase  aktivitas  fagositosis pada  varietas  limus  dan  manis  dengan dosis rendah (dosis 1) memiliki nilai yang tidak  berbeda  nyata  dengan  kontrol positif dengan persentase masing-masing 83,33  ±  2,89%  dan  91,00  ±  3,00%. Rosnizar, et  al.  (2017)  menguji aktivitas imunomodulator dari ekstrak daun flamboyan (Delonix  regia) pada  cairan peritoneal  mencit  terhadap  peningkatan aktivitas dan kapasitas  makrofag dengan menggunakan 3 serial dosis yaitu dosis 1 (250 mg/kg bb), dosis 2 (500 mg/kg bb) dan dosis 3 (750 mg/kg bb).
Hasil menunjukkan bahwa dosis 3 memiliki  aktivitas  paling  kuat  yaitu 99,2%.  Namun, jumlah ini melampaui aktivitas fagositosis pada kontrol positif dengan persentase 95,2%.  Kemampuan aktivitas  fagositosis  yang  mendekati kontrol  positif  yaitu  dosis  2  sebesar 97,2%.
Fitmawati, et al. (2017) melaporkan tentang  aktivitas  imunomodulator  dari Ramuan Obat Pahit Lingga SP4 terhadap sel makrofag dengan 3 serial dosis yaitu dosis  1  (0,011g/200g  BB),  dosis  2 (0,023g/200g BB) dan dosis 3 (0,034g/200g  BB).    Hasil  menunjukkan bahwa  dosis  1  sebesar  94,00%  tidak berbeda nyata dengan kontrol positif serta menunjukkan  aktivitas  fagositosis  yang lebih  baik,  sehingga  dosis  rendah  efekif digunakan sebagai imunomodulator.
Nilai  kapasitas  fagositosis  ekstrak daun tiga varietas macang dapat diketahui dengan  melakukan  perhitungan  jumlah sel  bakteri  yang  difagositosis  oleh  sel makrofag.  Berdasarkan  aspek  kapasitas fagositosis, varietas macang Batu, Limus dan  Manis  pada  dosis  rendah  (dosis  1) menunjukkan  nilai  yang  tidak  berbeda nyata  dengan  kontrol  positif.  Perbedaan semua kelompok perlakuan dapat dilihat melalui uji ANOVA dan uji lanjut DMRT pada (Tabel 2) dan (Gambar 6) berikut.
Tabel 2. Rerata Kapasitas Fagositosis Perlakuan Dosis 1 Dosis 2 Dosis 3 K + K 0 K - Batu 330 b 462 cde 370 de Limus 532 bcde 581 e 531 de Manis 557 bc 561 cde 768 f Stimuno 404 bcd Aquades 122 a CMC NA 1% 82 a
Gambar 6. Grafik nilai kapasitas fagositosis makrofag oleh ekstrak daun macang
Berdasarkan Tabel 2 rerata
kapasitas fagositosis pada kontrol negatif menunjukkan  nilai  paling  rendah  yaitu 81,67  ±  2,08  dari  50  sel  makrofag  aktif dan  berbeda  nyata  dengan  seluruh perlakuan.  Pemberian  tiga  serial  dosis pada  tiga  varietas  macang  menunjukkan nilai  yang  tidak  berbeda  nyata  dengan kontrol  positif  (stimuno).  Kapasitas fagositosis  pada  dosis  terendah  sudah menunjukkan  nilai  yang  sama  dengan kontrol  positif  yaitu        varietas  Batu sebesar 330,00 ± 13,00%,  Limus 462,00 ±  29,00%  dan  Manis  sebesar  369,00  ± 44,06%.    Berdasarkan  rerata  nilai kapasitas  fagositosis  pada  ekstrak  tiga varietas macang, maka dosis terbaik yang dapat digunakan sebagai imunomodulator  adalah  dosis  1  (dosis rendah).
Penelitian  Fitmawati,  et  al . (2016) tentang  uji  efektivitas  imunomodulator dari  infusa  ramuan  obat  pahit  linau terhadap  kapasitas  fagositosis  cairan peritoneal  tikus  putih  dengan  3  serial
dosis,  menunjukkan  bahwa  konsentrasi optimal  untuk  meningkatkan  kapasitas fagositosis  adalah  pada  dosis  terkecil yaitu  0,009  g/200g  BB  dengan  nilai kapasitas  fagositosis  169  dari  50  sel makrofag  aktif.    Sedangkan  untuk  dosis 0,019  g/200g  BB  dan  0,028  g/200g  BB menurunkan kemampuan kapasitas fagositosis  dengan  nilai  masing-masing 141  dan  112  dari  50  sel  makrofag  aktif. Hal ini mungkin disebabkan penggunaan dosis tinggi ekstrak ramuan ini memiliki sifat  toksik  lebih  tinggi  daripada  sifat imunostimulannya  sehingga  terjadi  efek penurunan imuostimulan.
Imunostimulan  bertindak  untuk mengembalikan/memperkuat
sistem kekebalan tubuh yang fungsinya
terganggu  atau  lemah  dan  menekan fungsi  yang  berlebihan  (Patil,  et  al ., 2012).  Dalam  studi  ini  dilakukan pengujian imunomodulator melalui aspek aktivitas  dan  kapasitas  fagositosis  oleh sel  makrofag.  Suatu  bahan  atau  obat memiliki  kemampuan  imunomodulator
jika  terjadi  peningkatan  imunitas  yaitu meningkatnya  aktivitas  dan  kapasitas fagositosis sel makrofag.
Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa  pemberian  dosis  rendah  sudah menunjukkan kemampuan imunomodulator  pada  masing-masing varietas.  Kemampuan  ini  dikarenakan adanya kandungan fitokimia yang terdapat  pada  daun  macang.  Menurut Bouayed    Bohn  (2010),  senyawa  aktif yang  memiliki  kemampuan  antioksidan pada  suatu  ekstrak  dalam  dosis  kecil dapat digunakan sebagai obat dan apabila berlebihan  mengakibatkan  terganggunya fisiologi  sel,  sehingga  dapat  bersifat toksik.
Penggunaan pelarut
yang digunakan  dalam  proses  ekstraksi  juga mempengaruhi  senyawa  yang  telarut. Pelarut  polar  mampu  menarik  senyawa yang memiliki kelarutan yang cukup dan kemampuan  absorbsi  yang  optimal menembus  membran  sel  (Arifah,  et  al., 2014). Berdasarkan penelitian Fitmawati, et  al.  (2017)  ekstrak  ramuan  obat  pahit dengan pelarut metanol memiliki aktivitas antioksidan sangat kuat dibandingkan  ekstrak  ramuan  obat  pahit yang  menggunakan  pelarut  air.  Hal  ini dikarenakan  pelarut  metanol  mampu melarutkan senyawa bioaktif yang terdapat  dalam  ramuan  obat  pahit dibandingkan pelarut air aquades.
Mangiferin adalah senyawa bersifat farmakologis  yang  terdapat  pada  genus mangifera  (mangga)  (Matkowski,  et  al ., 2013). Mangiferin dalam daun Mangifera foetida merupakan  flavonoid  bersifat antioksidan  untuk  menangkal  radikal bebas,  serta  sifat  aktivitas  farmakologi dalam  beberapa  proses  pathogenesis, salah satunya sebagai agen imunomodulator  (Masibo    He,  2008). Penelitian  oleh  Ranjedran,  et  al.  (2013) menunjukkan  bahwa  mangiferin  dapat
meningkatkan  jumlah  leukosit,  limfosit, neutrofil,  IgG dan  IgM  ketika terinduksi senyawa karsinogenesis tetapi tidak pada keadaan normal.
Flavonoid  memiliki  antioksidan yang kuat, dan terbukti sebagai antiinflamasi,  antialergi  dan  antikanker (Torres-Leon, et al., 2016).  Berdasarkan kandungan  senyawa  tersebut  maka macang memiliki efek yang kuat sebagai imunomodulator.  Sehingga  diharapkan dapat memberikan informasi obat imunomodulator terbaru terhadap penyakit  infeksi  dan  dikembangkan menjadi bahan baku obat herbal (fitofarmaka).

## SIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan  dengan  menggunakan serial  dosis  berbeda  dapat  disimpulkan bahwa  pada  tiga  varietas  macang  (Batu, Limus dan Manis) terbukti efektif sebagai imunomodulator. Dosis 1 (1 ppm = 0,001 mg/g)  pada  macang  varietas  limus  dan manis  sudah  menunjukkan  kemampuan imunomodulator,  sehingga  tidak  perlu peningkatan dosis dengan masing-masing presentase aktivitas fagositosis 83,33±2,89% dan 91,00±3,00%. Sedangkan pada varietas batu dosis 2 (10 ppm  =  0,01  mg/g)  lebih  efektif  untuk digunakan. Adanya perbedaan persentase kemampuan  aktivitas  fagositosis  tiap perlakuan pemberian ekstrak daun macang dapat disebabkan oleh perbedaan dosis  maupun  komposisi  kandungan kimia  yang  terdapat  dalam  masing- masing varietas macang. Hasilnya diharapkan  memberikan  informasi  obat imunomodulator terbaru terhadap
penyakit  infeksi  dan  diharapkan  dapat dikembangkan  menjadi  bahan  baku fitofarmaka.  Perlu  dilakukan  penelitian lanjutan  untuk  menguji  ekstrak  daun macang dengan variasi dosis serta pelarut
yang  berbeda  dan  perlu  dilakukan  uji toksisitas, sehingga penggunaannya lebih aman dan efektif bagi manusia.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahmad,  R.  Munim,  A.  Elya,  B.  (2012). Study of Antioxidant Activity With Reduction  of  Free  Radical  and Xanthin  Oxidase  Inhibitor  of  The Extract of Ruellia tuberosa L. Leaf.
International  Research  Journal  of
Pharmacy
Aldi  Y,  Rasyadi  Y    Handayani  D. (2014). Aktivitas Imunomodulator  dari  Ekstrak Etanol Meniran ( Phyllanthus niruri Linn.)  terhadap  Ayam
Broiler. Jurnal Sains Farmasi dan Klinis, 1 (1):20-26.
Arifah, A. N. Nurkhasanah. (2014). Efek
Fraksi  Etil  Asetat  Ekstrak  Etanol Akar  Pasak  Bumi  ( Eurycoma longifolia, Jack) Terhadap Aktivitas  Fagositosis  Makrofag Secara  In  Vitro.  Journal  of Pharmaciana 4(1):14.
Bouayed,  J    Bohn,  T.  (2010). Exogenous  Antioxidants  Double-
Edged  Swords  in  Cellule  Redox State:  Helath  Beneficial  Effects  at Physiologic Doses Versus Deletrerious Effects at High Doses. Oxid  Med  Cell  Longev .  3(4):228-
237.
Fitmawati, Isnaini, Roza RM  Sofiyanti
N.  (2016).  Biosprospek  Ramuan Panjang  Umur  Warisan  Leluhur Masyarakat Melayu Lingga kepulauan Riau Sebagai Imunomodulator  dan  Antioksidan. Laporan  Penelitian Lanjutan  Riset Tanaman Obat dan Jamu. Universitas Riau , Pekanbaru. Fitmawati,  Roza  R.  M.,  Sofiyanti  N., Isnaini,  Fitri  F.  L.,  Paramita  D., Dewi A. P. K. (2017). Immunomodulatory  effectiveness of  Aqueous  Obat  Pahit Extract  of Lingga Malay Ethnic on White Rats ( Rattus  novergicus ). Biosaintifika : Journal  of  Biology  dan  Biology Education, 9(3):430-436.
Fitmawati, Juliantari E. Saputra A, sinaga
P, Roza R. M,  Isda, M. N. (2018). The  Potential  of  Wild  Mango Leaves  from  Sumatera  as  the Immunostimulant Agent. Biosantifika: Journal of Biology Biology Education , 10(3), 671-677.
Grace, U. Steve, O. Teddy, E. Shakirat, B. (2013). Imunostimulatory And Biochemical  Effects  Of  Ethanolic Extract  Of Mangifera indica Stem Bark  on  Dexamethasone-Induced Immunosupressed Male Rats. International  of  Pharmacy  and Pharmaceutical  Science. 5(2),569-
572.
Handayani, N. Wahyuono, S. Hertiani, T, Murwanti, R. (2018). Uji Aktivitas Fagositosis Makrofag Ekstrak Etanol Daun  Suji  ( Dracaena angustifolia  ( Medik  Roxb)  Secara
In vitro. Pharmacy Medical Journal. 1(1): 26-32. Limyati A. D  Y. S. Essay. (2003). Uji Antioksidan, Antiradikal Bebas dan Penentuan EC 50 Ekstrak Diklorometana Serta Ekstrak Metanol Herba Sambiloto ( Andrographis paniculata Burn. F.
Ness.). Jurnal  Obat  Bahan  Alam .
Vol.1 No 2.
Matkowski  A.,  Kus  P.,  Goralska  E., Wozniak  D.  (2013).  Mangiferin  -a bioactive xanthonoid, not only from mango  and  not  just  antioxidant.
Mini Rev Med Chem. 13(3):439-55.
Masibo  M,  and  He  Q.  (2008).  Major mango  polyphenols  and  their potential  significance  to  human health. Compr  Rev  Food  Sci  Food Saf . 7(4):309-19.
Parawansah, T. Nurtamin, S. A Mulyawati,  Nuralifah,  W.  O.  A Misnaeni. (2018). Immunomodulatory Effect of Momorcadia  charantia L.  Fruit Ethanol  Exract  on  Phagocityc Activity  and  Capacity  of  Mice
Peritoneal  Macrophages. Indones
Biomed J . 10(2):144-147.
Patil, U. S. Jaydeokar, A. V. Dandawane,
D.  D.  (2012).  Immunomodulators: A Pharmacological Review: International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Science.
4(1):30-36.
Purwaningsih,  Erie  H,  Endang,  Amalia, Pustika,  Krisnamurti,  Desak  G.  B.
(2011).  The  Chelating  Effect  of Mangifera foetida L. water Extract
On  serum  Thalassemic-Patients, J. Indonesian Medical Assoc 61(8):321-325. Rahim  A.  M,  Nyoman  Su,  Luh  M.  S. (2017). Efek Imunostimulator Ekstrak  Daun  Kasturi  ( Mangifera
Casturi )  Pada  Mencit. Indonesia Medicus Veterinus 6(1):10-19.
Ranjedran P, Jayakumar T, Sathisekaran D. (2013) Immunomodulatory effect of mangiferin in experimental animals with  benzo(a)pyrene-induced  lung carcinoge-nesis. Int  J  Biomed  Sci . 9(2);68-74
Rosnizar,  S.  Maulida,  K.  Eriani Suwarno.  (2017).  Potensi  ekstrak daun  flamboyan  [ Delonix  regia (Boj.  Ex  Hook.)  Raf.]  terhadap peningkatan aktivitas dan kapasitas makrofag. BIOLEUSER 1(3):104- 115.
Savant, C. Kulkarini, A. R. Mannasaheb,
B. A, Gajare, R. (2014).
Immunostimulant phytoconstituents  from Mangifera indica L.  bark  oil. The  Journal  of Phytopharmacology. 3(2):139-148
Siswanty,  P.  W,  Muhammad,  A.  W.,
Harlia. (2017).  Aktivitas Toksisitas
Antioksidan  Dan  Antiinflamasi
Secara In  Vitro Dari  Ekstrak Metanol  Daun  Mangga  Bacang (Mangifera  foetida  L.) .  JKK . 6(1):42-49.
Torres-Leon,  C.,  Rojas,  R.,  Contreras- Esquivel,  J.  C.,  Serna-Cock,  L., Belmares-Cerda,  R.  E.,  Anguilar,
C.  M.  (2016).  Mango  seed: Functional and Nutritional Properties. Trends in Food Science dan Technology 55: 109-117. Wei,  Z.  Q.  Deng,  J.  G,  Yan,  L.  (2011). Pharmacological Effects of Mangiferin. Chinese Herbal Medicines. 3(4): 266-271. Yulinery Nurhidayat. (2012). Penggunaan  Ekstrak  Fermentasi
Beras dari Beberapa Jenis Monoascus pupureus untuk Aktivitas  In  Vitro  Fagositosis  Sel Makrofag  dan  Polimorfonuklear Peritoneum Mencit sebagai Imunomodulator. Berita  Biologi
11(2):283-273.