EFEK ANTIBAKTERIAL REBUSAN TEH HIJAU TERHADAP PERTUMBUHAN AGGREGATIBACTER ACTINOMYCETEMCOMITANS SEBAGAI PERIODONTOPATOGEN PERIODONTITIS AGRESIF
(ANTIBACTERIAL EFFECT OF BREWED GREEN TEA ON THE GROWTH OF AGGREGATIBACTER ACTINOMYCETEMCOMITANS AS PERIODONTOPATHOGEN OF AGGRESIVE PERIODONTITIS)
Ridha Andayani, Santi Chismirina, Amalia Dwi Habdani
Program Studi Kedokteran Gigi Fakultas Kedokteran, Universitas Syiah Kuala Jl. Kampus Universitas Syiah Kuala Darussalam Banda Aceh 23111 E-mail: ridhaandayahani@yahoo.com

## Abstract
Aggressive periodontitis is an inflamed condition in periodontium which caused the loss of attachment and rapidly bone resorptions. The  occurance of aggressive periodontitis  is  correlated to the excessive  accumulation of Aggregatibacter actinomycetemcomitans ( A. actinomycetemcomitans ) on the oral pellicle . Green tea ( Camellia sinensis ) is known as one of  the  herb  drinks  which  has  antibacterial  effects . The  purpose  of  this  experimental  laboratory  study  was  to  know antibacterial effect of brewed green tea on the growth of Aggregatibacter actinomycetemcomitans as periodontopathogen of aggressive periodontitis. Aggregatibacter actinomycetemcomitans which cultured in AaGM medium and incubated in 37 o C in anaerobic condition and examined for its turbidity  by spectrophotometric. The effect of brewed green tea on A. actinomycetemcomitans growth  was  tested  by  using  agar  diffusion  method.  The  result  of  study  showed  clear  zone forming around disc paper of A. actinomycetemcomitans by brewed green tea. The inhibition ability cathegory of brewed green  tea  was  moderate.  In  conclusion,  brewed  green  tea  can  affect  the  growth  of A.  actinomycetemcomitans as periodontopathogen of aggressive periodontitis with moderat inhibition ability.
Key words: aggresive periodontitis, Aggregatibacter actinomycetemcomitans , green tea

## Abstrak
Periodontitis  agresif  adalah  penyakit  inflamasi  pada  jaringan periodonsium  yang  mengakibatkan terjadinya kehilangan perlekatan dan resorpsi tulang dengan cepat. Terjadinya  periodontitis  agresif  dihubungkan dengan dominannya  bakteri Aggregatibacter  actinomycetemcomitans ( A.  actinomycetemcomitans )  dalam  plak  gigi.  Teh  hijau  ( Camellia  sinensis ) merupakan  minuman kesehatan  yang  memiliki  efek  antibakteri.  Penelitian  dengan  desain  eksperimental  laboratoris  ini bertujuan untuk mengetahui  efek antibakteri rebusan teh hijau terhadap pertumbuhan A. actinomycetemcomitans sebagai agen penyebab periodontitis agresif. Aggregatibacter actinomycetemcomitans yang telah dikultur di  media AaGM  dan diinkubasi pada suhu 37 o C dalam suasana anaerob dan penentuan kekeruhan bakteri dilakukan dengan spektrofotometri. Uji pengaruh rebusan teh hijau terhadap pertumbuhan A. actinomycetemcomitans dilakukan dengan metode difusi agar. Hasil  penelitian  menunjukkan  rebusan  teh  hijau  ( Camellia  sinensis var. sinensis )  membentuk  zona  hambat  terhadap pertumbuhan A.  Actinomycetemcomitans di  sekitar  kertas  cakram  dengan  kemampuan  daya  hambat  sedang.  Sebagai kesimpulan, rebusan teh hijau memiliki pengaruh antibakteri terhadap pertumbuhan A. actinomycetemcomitans sebagai agen penyebab periodontitis agresif.
Kata kunci: periodontitis agresif, Aggregatibacter actinomycetemcomitans , teh hijau

## PENDAHULUAN
Periodontitis agresif adalah penyakit yang ditandai
dengan  terjadinya  inflamasi  pada  jaringan  perio- donsium yang mengakibatkan terjadinya kehilangan perlekatan  dan  resorpsi  tulang  dengan  cepat. 1-3 Edisi Cetak Dentika Dental Journal, Desember 2012 (ISSN: 1693-671X)
Penyakit ini biasanya terjadi pada usia pubertas dan dewasa  muda  yang  secara  klinis  tampak  sehat. 1-3
Aggregatibacter  actinomycetemcomitans merupa- kan  bakteri  yang  berperan  penting  sebagai  faktor etiologi  periodontitis  agresif. 3 Bakteri  ini  juga  di- hubungkan  dengan  beberapa  penyakit  infeksius ekstraoral, seperti endokarditis dan abses otak. 4,5
Aggregatibacter  actinomycetemcomitans ( A.  ac- tionmycetemcomitans ) merupakan  bakteri  gram  ne- gatif,  nonmotil,  anaerob  fakultatif,  pendek  (0.4-1 μm),  berbentuk  basil  dengan  ujung  membulat. 4,6
Bakteri  ini  menggunakan  sel  epitelium  sebagai cadangan saat  perlekatan  awal  dan  pada  akhirnya berpindah ke permukaan gigi. 5,7 Faktor virulen yang dimiliki  oleh A.  actinomycetemcomitans adalah leukotoksin,  lipopolisakarida  kolagenase,  protease, dan Cytolethal  Distending  Toxin (CDT). 4,5,8
Leukotoksin memainkan peran yang signifikan pada patogenisitas  periodontitis  agresif  oleh A.  action- mycetemcomitans . 4,6,9
Periodontitis  agresif  dapat  diobati  dengan  meng- gunakan  obat-obat  antibakterial  untuk  meminimali- sasi A. actinomycetemcomitans. Antibiotik yang se- lama  ini  digunakan  untuk    mengobati  periodontitis agresif  adalah  tetrasiklin,  kombinasi  metronidazol dengan  amoksilin,  dan  kombinasi  metronidazol dengan  ciprofloxacin. 10 Meningkatnya  resistensi bakteri  terhadap  obat  antibiotik  sintetis  telah  me- micu para peneliti untuk melakukan penelitian yang mengarah  ke  penemuan  komponen  antibiotik  yang terdapat pada tumbuhan, contohnya teh hijau. 11-13
Konsumsi  teh  di  Indonesia  adalah  0,8  kg  per kapita per tahun masih jauh di bawah negara-negara lain  di  dunia,  padahal  Indonesia  merupakan  negara penghasil  teh  terbesar  nomor  lima  di  dunia  setelah India,  Cina,  Sri  Lanka,  dan  Kenya. 14,15 Rendahnya tingkat  konsumsi  teh  di  Indonesia  diduga  karena masyarakat  belum  banyak  mengetahui  manfaat  teh terhadap kesehatan. 14
Teh  hijau  merupakan  minuman  kesehatan  yang memiliki  efek  antibakteri. 11,12,14,16-20 Teh  hijau  juga memiliki  efek  antiviral,  antifungal,  antitoksin,  anti- karsinogenik, antidiabetik, dan dapat mereduksi pe- nyakit kardiovaskular dan beberapa kanker. 11,12,14,16- 20 Senyawa  kimia  yang  terkandung dalam daun  teh terdiri  atas  empat  kelompok  yaitu  substansi  fenol, substansi  bukan  fenol,  substansi  aromatik,  dan enzim-enzim. 14,21 Komponen  utama  pada  teh hijau yang bermanfaat bagi kesehatan adalah polifenol. 22
Efek  teh  hijau  terhadap  kesehatan  periodontal yang  diteliti  oleh  Hirasawa  menunjukkan  adanya aktifitas  bakterisidal  teh  hijau  melawan Prevotella sp dan Porphyromonas gingivalis . 17 Penelitian yang dilakukan  oleh  Becker  dkk.  membuktikan  bahwa teh hijau dengan konsentrasi 40 mg/ml yang direbus
pada  suhu  90 o C  selama  20  menit  dan  40  menit dapat  menghambat  pertumbuhan  Streptokokus  mu- tans dengan  zona  hambat  masing-masing  11  mm dan 13 mm. 16 Penelitian lain oleh Axelrod dan dkk. juga  menyebutkan  bahwa  teh  hijau  yang  direbus selama  20  menit  memiliki  efek  inhibitor  paling tinggi  pada  konsentrasi  80  mg/ml  terhadap  per- tumbuhan  dan  proliferasi  bakteri  oral  seperti Streptococcus  mutans , Porphyromonas  gingivalis dan Staphylococcus  epidermis . 15 Polifenol  spesifik pada  teh  hijau,  yaitu  katekin  yang  memainkan peranan  penting  sebagai  antibakteri. 11,16,17,19,20 Ber- dasarkan  uraian  tersebut,  maka  penelitian  ini  di- lakukan  untuk  mengetahui  efek  antibakterial  re- busan  teh  hijau  terhadap  pertumbuhan A.  action- mycetemcomitans sebagai periodontopatogen perio- dontitis agresif.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  eksperimental  laboratoris  ini  dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas  Syiah  Kuala  untuk  pengujian  aktivitas antibakteri  teh  hijau  terhadap  pertumbuhan Aggre- gatibacter  actinomycetemcomitans dan  di  Labora- torium  Biokimia  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan  Alam  (FMIPA)  untuk  uji  fitokimia kandungan rebusan teh  hijau  ( Camellia  sinensi var. sinensis ). Bahan uji berupa daun teh yang dikloning, dibudidayakan  dan  diproses  menjadi  teh  hijau  oleh PTPN XII Jawa Timur.
Tahapan pertama yang dilakukan dalam penelitian ini  adalah  pengkulturan A.  actinomycetemcomitans pada media selektif yaitu A. actinomycetemcomitans Growth  Medium (AaGM)  yang  terdiri  atas Tryp- ticase  Soy  Agar (TSA)  40  gram,  ekstrak  ragi 6 gram,  sodium  bi  karbonat  0,4  %,  dekstrosa  0,8  %. Proses kultur ini dilakukan selama 48 jam pada suhu 37 0 C  dalam anaerobic  jar yang  diinkubasi  dalam inkubator. Aggregatibacter  actinomycetemcomitans disuspensi dengan cara mengambil satu loop koloni dengan  menggunakan  jarum  ose,  kemudian  di- masukkan ke dalam tabung reaksi yang telah berisi NaCl, kemudian dihomogenkan dengan mengguna- kan vortex .  Kepadatan  sel  dihitung  menggunakan spektrofotomeri  dengan  panjang  gelombang  625 nm.
Tahap  selanjutnya  adalah  pembuatan  rebusan  teh hijau. Sebanyak 10 g daun teh hijau direbus dengan 100  ml  air  selama  20  menit  dengan  suhu  konstan yaitu  90 o C.  Selanjutnya  hasil  rebusan  diencerkan hingga mendapat konsentrasi 40, 60, dan 80 mg/ml dengan  menambahkan  akuades.  Masing-masing konsentrasi diambil sebanyak 2 ml lalu dimasukkan ke  dalam  cawan  petri  kemudian  diberi  label  sesuai
konsentrasinya. Sebelum rebusan teh hijau dipapar- kan A.  actinomycetemcomitans ,  terlebih  dahulu  di- lakukan uji fitokimia. Selanjutnya disiapkan 15 ker- tas cakram  steril  siap pakai dengan diameter 6  mm dan  1  cakram  antibiotik Ciprofloxacin 5  μg.  Se- banyak  12  kertas  cakram  dicelupkan  kedalam masing-masing cawan petri yang berisi 2 ml rebusan teh  hijau  dengan  konsentrasi  40,  60,  80  dan  100 mg/ml. 3 kertas cakram lainnya dicelup dalam akua- des sebagai kontrol negatif. Kertas cakram antibiotik digunakan  sebagai  kontrol  positif.  Kertas  cakram yang  telah  dicelupkan  ke  dalam  rebusan  daun  teh hijau  dibiarkan  terendam  selama  1  jam.  Kemudian kertas  cakram  dipindahkan  ke  tempat  yang  agak tinggi sampai bahan uji tidak menetes. 23
Tahap uji daya hambat rebusan teh hijau terhadap pertumbuhan A.  actinomycetemcomitans dilakukan dengan  menginokulasikan  bakteri  ke  media  MHA menggunakan metode spread (sebar) dengan teknik swab . Teknik ini dilakukan dengan cara cotton swab steril  dicelupkan  ke  dalam  suspensi  bakteri  lalu tekan  kapas  pada  dinding  bagian  dalam  tabung sampai  tidak  ada  cairan  yang  menetes.  Kemudian dioleskan  secara  merata  pada  permukaan  media MHA  dengan  teknik swab sebanyak  3  kali  pe- ngulangan  dengan  memutar  cawan  petri  (rotasi) kira-kira  60 o tiap  pengulangan.  Dibiarkan  selama  5 menit  hingga  mengering.  Selanjutnya  cakram  yang telah direndam ke dalam masing-masing konsentrasi rebusan teh hijau diletakkan pada permukaan media MHA  yang  telah  diolesi  suspensi  bakteri  lalu  di- inkubasi dalam inkubator pada suhu 37 o C selama 24 jam.  Setiap  perlakuan  dilakukan  pengulangan  se- banyak 3 kali. 23
Setelah  diinkubasi,  daerah  daya  hambat  per- tumbuhan  bakteri  pada  masing-masing  perlakuan diamati  berupa  zona  terang  ( clear  zone )  disekitar kertas  cakram  lalu  diukur  diameternya  mengguna- kan  jangka  sorong. 23 Selanjutnya,  hasil pengukuran zona  hambat  diinterpretasikan  berdasarkan  klasifi- kasi  zona  hambat  pertumbuhan  bakteri  menurut Morrales. 24 Analisis  data  hasil  penelitian  dilakukan dengan  metode  Kruskal  Wallis  untuk  mengetahui pengaruh  pada  tiap  kategori  perlakuan,  kemudian dilanjutkan  dengan  uji  Mann-Witney  untuk  me- ngetahui  kelompok  dengan  pengaruh  yang  signifi- kan.

## HASIL
Hasil  uji  daya  hambat  rebusan  teh  hijau  dengan konsentrasi  40,  60,  80,  dan  100  mg/ml  terhadap pertumbuhan A. actinomycetemcomitans menunjuk- kan bahwa rebusan teh  hijau dapat menghambat A. actinomycetemcomitans .  Hal  ini  ditandai  dengan
adanya  zona  hambat  ( halo/  clear  zone )  yang  ter- bentuk di sekitar kertas cakram (Gambar 1).
Gambar 1.  Zona  hambat  rebusan  teh  hijau  ( Camellia sinensis )  terhadap  pertumbuhan Aggregati- bacter  actinomycetemcomitans pada  media MHA
Tabel 2 menunjukkan bahwa rerata diameter zona hambat  yang  paling  besar  terlihat  pada  cakram kontrol  positif  ( Ciprofloxacin 5  μg)  sebesar  27,3 mm  dan  rerata  diameter  zona  hambat  terkecil  ter- lihat  pada  rebusan  teh  hijau  konsentrasi  40  mg/ml sebesar  14,3  mm.  Pada  akuades  (kontol  negatif) tidak terbentuk zona hambat. Hasil interpretasi daya hambat menurut Morales menunjukkan bahwa tidak ada  perbedaan  yang  signifikan  antara  kelompok konsentrasi  rebusan  teh  hijau  ( Camellia  sinensis ) terhadap  daya  hambat  pertumbuhan Aggregati- bacter actinomycetemcomitans .
Tabel 2.  Data  hasil  uji  daya  hambat  rebusan  teh  hijau ( Camellia  sinensis )  terhadap A.  Actinomy- cetemcomitans
Konsentrasi Rebusan Teh Hijau dan Bahan Kontrol Diameter Zona Hambat (mm) Uji I Uji II Uji III Rerata Kontrol (-) 0 0 0 0 40 mg/ml 14,5 14 14,5 14,3 60 mg/ml 15 15 15 15 80 mg/ml 16 16 16 16 100 mg/ml 16,5 16,5 16,5 16,5 Kontrol (+) 27 27,5 27 27,3 Kontrol (-): Akuades. Kontrol (+): Ciprofloxacin 5 μg

## PEMBAHASAN
Hasil  uji  menunjukkan  rebusan  teh  hijau  ( Ca- mellia  sinensis var. sinensis )  membentuk  zona hambat  terhadap  pertumbuhan A.  actinomycetem- comitans di  sekitar  kertas  cakram.  Terbentuknya zona  hambat  ini  disebabkan  oleh  adanya  beberapa
senyawa  kimia di dalam  kandungan  teh  hijau  yang bersifat  antibakteri,  yaitu  flavanoid  (katekin),  sa- ponin  dan  tanin. 10-13,25,26 Senyawa-senyawa  ini  be- kerja  dengan  mekanisme  yang  berbeda.  Katekin membuat  ikatan  dengan  struktur  membran  sel  bak- teri  melalui  rantai  OH-nya.  Ikatan  ini  akan  me- reduksi  integrasi  struktur  dinding  sel  sehingga bakteri  lebih  mudah  lisis  akibat  tekanan  ion  dan osmotik  yang  rendah. 10 Tanin  bekerja  dengan  cara mengkoagulasi  atau  menggumpalkan  protoplasma bakteri  dan  menghambat  sintesis  protein  oleh  bak- teri, serta menginaktivasi fungsi materi  genetik. Sa- ponin  bekerja  dengan  meningkatkan  permeabilitas membran sel  sehingga dapat menyebabkan  lisisnya mikroorganisme. 26
Tingkat  kemampuan  rebusan  teh  hijau  untuk semua  konsentrasi  menurut  Morales  adalah  se- dang. 27 Kemampuan  teh  hijau  dalam  menghambat pertumbuhan A.  actinomycetemcomitans tergolong sedang  karena  senyawa-senyawa  antibakterinya tidak cukup mampu untuk merusak dinding sel bak- teri dan berdifusi ke dalamnya. 20 Hal ini disebabkan karena A. actinomycetemcomitas merupakan bakteri Gram negatif yang dinding selnya tersusun dari tiga lapisan,  yaitu    membran  luar,  peptidoglikan,  dan membran  dalam. 6,28 Adanya  membran  luar  pada bakteri  Gram  negatif  menyebabkan  senyawa  anti- bakteri  sulit  masuk  ke  dalam  sel  dan  integritas dinding  sel  lebih  terjaga  dari  kerusakan  akibat paparan  senyawa  antibakteri. 28 Selain  itu,  pada  be- berapa bakteri Gram negatif ditemui suatu mekanis- me  transport  aktif  yang  dapat  mengeluarkan  agen antibakteri  dari  sitoplasma  ke  luar  sel  bakteri,  se- hingga lebih resisten terhadap senyawa antibakteri. 28
Hal  ini  turut  diperkuat  oleh  hasil  penelitian Hirasawa  dan  Axelrod  mengenai  aktivitas  anti- bakteri  teh  hijau  terhadap  bakteri  Gram  negatif seperti Prevotella  sp. dan P.  gingivalis yang  me- nyatakan  respons  hambat  pertumbuhan  yang  di- hasilkan adalah sedang. 13,19
Hasil penelitian  juga menunjukkan  tidak  ada  per- bedaan  pengaruh  yang  signifikan  antara  kelompok konsentrasi  rebusan  teh  hijau  ( Camellia  sinensis ) yaitu  40,  60,  80,  dan  100  mg/ml  terhadap pertumbuhan A.actinomycetemcomitans .  Masing- masing  konsentrasi  rebusan  teh  hijau  memiliki tingkat  kemampuan  hambatan  katagori  sedang menurut  klasifikasi  Morales.  Oleh  karena  itu,  ber- dasarkan  hasil  penelitian  ini  dapat  disimpulkan bahwa  rebusan  teh  hijau  ( Camellia  sinensis )  dapat menghambat  pertumbuhan A.  actinomycetemcomi- tans sebagai  periodontopatogen  periodontitis  agre- sif.

## Daftar Pustaka
1. Novak  MJ.  Classification  of  disease  and  condition affecting the periodontium. In: Newman MG, Takei HH,  Klokkevold  PR,  Carranza,  ed.  Carranza’s clinical  periodontology. 10th ed. St. Louis: Elsevier, 2006: 100-9.
2. Bäumer  A,  El  Sayed  N,  Ti-Sun  Kim,  Reitmeir  P, Eickholz  P,  Pretzl  B.  Patient-related  risk  factors  for tooth  loss  in  aggressive  periodontitis  after  active periodontal  therapy.  J  Clin  Periodontol  2011;  38: 347-54.
3. Fidary  H,  Lessang  R.  Periodontitis  agresif;  karak- teristik  dan  perawatannya.  Maj  Ked  Gigi  2008;  15: 187-90.
4. Kesić  L,  Petrović  M,  Obradović  R,  Pejčić  A.  The Importance  of  aggregatibacter  actinomycetemcomi- tans in etiology of periodontal disease-Mini Review. Acta Medica Medianae 2009;  48: 35-7.
5. Fine  DH,  Makowitz  K,  Furgang D,  Velliyagounder K.  Aggregatibacter  actinomycetemcomitans  as  an early  colonizer  of  oral  tissue:  epithelium  as  a resevoir? J Clin Microbiol 2010; 48: 4464-73.
6. Quirynen M, Teughels W, Haake SK, Newman MG. Microbiology  of  periodontal  disease.  In:  Newman MG, Takei HH, Klokkevold PR, Carranza FA, eds., Carranza’s  Clinical  Periodontology.  10th ed.  St. Louis: Elsevier, 2006: 134-69.
7. Taughels W, Haake SK, Sliepen I, Pauwels M, Van Eldere J, Cassiman JJ, et al. Bacteria interfere with A. actinomycetemcomitans  colonization.  J  Den  Res 2007;  86: 611-7.
8. Nakanishi FA, Avila-Campos MJ, Kamiji NH, Itano EN. Immunoglobulin G proteolytic activity of  Acti- nobacillus actinomycetemcomitans. Braz J Microbiol 2006; 37: 42-6.
9. Fine  DH,  Markowitz  K,  Furgang  D,  Fairlie  K, Ferrandiz  J,  Nasri  C,  et  al.  Aggregatibacter  action- mycetemcomitans and its relationship to initiation of localized aggresive periodontitis: longitudinal cohort study  of  initially  healthy  adolescents.  J  Clin  Micro- biol 2007;  45: 3859-69.
10. Jolkovsky DL, Ciancia S. Chemotherapeutic agents. In:  Newman  MG,  Takei  HH,  Klokkevold  PR, Carraza FA, eds. Carranza’s clinical periodontology. 10th ed., St. Louis: Elsevier, 2006: 798-812.
11. Barnum  T,  Castellano  S,  Annie  Chen,  Jariwala  N, Andrew  Jung,  Kelvin  Mei,  et  al.  The  antimicrobial activity  of  green  tea  (Camellia  sinensis)  on  Staphy- lococcus  aureus  in  combination  with  ascorbic  acid, acetic  acid,  and  sodium  chloride.  <www.drew.edu/ govschool/files/Team2.pdf> (29 Juli 2011).
12. Ogle N. Green tea (Camellia sinensis). Aust  J Med Herb 2009; 21: 44-8.
13. Cushnie TPT,  Andrew JL.  Antimicrobial  activity of flavanoid. Int J Microb Agents 2005: 343-56.
14. Soraya  N.  Sehat  dan  cantik  bersama  teh  hijau. Jakarta: Penebar Plus, 2007; 10: 15-21.
15. FAO. Agricultural  Commodities: Profiles  and Rele-
vant WTO Negotiating Issues, <http://www. fao. org /DOCREP/006/Y4343E/y4343e05.htm#To of Page> (2 Februari 2012).
16. Becker  R,  Hirsh  S,  Hu Emily,  Jamil  A,  Mathew  S, Newcomb  K,  et  al.  Inhibitory  effect  of  Camellia sinensis (Green Tea) on Streptococcus mutans. <http : //www.thebigteas.com/uploads/2009/0915/jasminea tibacteria.pdf> (29 Juli 2011).
17. Taylor,  Peter  W,    Jeremy  M.T.  Hamilton-Miller, Paul  D.S.  Antimicrobial  properties  of  green  tea catechins. Food Sci Techno Bull 2005; 2: 71-81.
18. Lee  SS,  Wu  Zhang,  Yiming  Li.  The  microbial potential of 14 natural herbal dentifrices: result of an in  vitro  diffusion  method  study.  JADA  2004;  135: 1133: 41.
19. Axelrod M, Berkowitz S, Dhir R, Gould V, Gupta A, Eric Li, et al. The inhibitory effects of green tea (Ca- mellia  sinensis)  on  growth  and  proliferation  of  oral bacteria. <www.drew.edu/govschool/files/Team3.pdf >(29 Juli 2011).
20. Friedman  M.  Review:  Overview  of  antibacterial, antitoxin,  antiviral,  and  antifungal  activities  of  tea flavonoids  and  teas.  Mol  Nutr  Food  Res  2007;  51: 116-34.
21. Syah  ANA.  Taklukan  penyakit  dengan   the   hijau. Jakarta: Argomedia Pustaka, 2006: 44-54.
22. Carbrera  C,  Artacho  R,  Giménez  R.  Beneficial effects of green tea-a review. J Am Coll Nutr 2006; 25: 79-99.
23. Lakio  L.  Evolutionary  lineages  of  Actinobacillus actinomycetemcomitans bear diverse traits to support roles as a member of normal flora and as a pathogen. Dissertation Finland: University of Helsinki, 2005.
24. Doss A, Mubarack HM, Dhanabalan R. Antibacterial activity  of  tannins  from  the  leaves  of  Solanum trilobatum  Linn.  Indian  J  Sci  and  Technol  2009;  2: 41-3.
25. Akiyama H, Fujii K, Yamasaki O, Iwatsuki K. Anti- bacterial  action  of  several  tannins  against  Staphylo- coccus  aureus.  J  Antimicrob  Chem  2001;  48: 487-91.
26. Sumono A,  Wulan A. Kemampuan air rebusan daun salam  (Eugenia  polyantha  W)  dalam  menurunkan jumlah  koloni  bakteri  Streptococcus  sp.  Majalah Farm Ind 2009; 20: 112-7.
27. Morales G, Sierra P, Mancilla A, Paredes A, Loyola LA,  Gallardo  O.  Secondary  metabolites  from  four medicinal   plants  from  northern  chile:  antimicrobial activity and biotoxicity against Artemia salina. J Chil Chem Soc 2003; 48
28. Rodrigues RMJ, Gonçalves C, Souto R, Filho-Feres EJ,  Uzeda  M,  Colombo  APV.  Antibiotic  resistance profile  of  the  subgingival  microbiota  following systemic  or  local  tetracycline  therapy.  J  Clin  Perio- dontol 2004; 31: 420-7.