Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup
https://journal.unpak.ac.id/index.php/ekologia

## UJI AKTIVITAS TITER ANTIBODI AYAM PETELUR DAN PASCA VAKSINASI NEWCASTLE DISEASE INAKTIF
Ikhfina Dhea Faramitha 1* , Oom Komala 1 , Syamsidar 2
1 Program Studi Biologi, FMIPA, Universitas Pakuan, Bogor Jl. Pakuan Kelurahan Tegallega, Kecamatan Bogor Tengah, Bogor, Indonesia
2 PT Sanbio Laboratories Jl. Melati RT 02/09 Gunung Putri, Kabupaten Bogor, Indonesia *e-mail: ikhfinadhea@gmail.com
diterima: 28 April 20234 direvisi: 8 Mei 2024; disetujui: 20 Mei 2024

## ABSTRAK
Ayam  petelur  di  Indonesia  merupakan  komoditas  unggulan  dan  potensial.  Namun Newcastle Disease (ND) atau penyakit tetelo menjadi salah satu resiko yang harus dihadapi. Kini vaksinasi dipilih menjadi salah satu strategi untuk mencegah penyakit ND. Penelitian ini bertujuan untuk melihat pengaruh vaksinasi ND inaktif strain Lentogenik dan Velogenik terhadap kenaikan titer antibodi  ayam  petelur.  Untuk  mencari  nilai  titer  antibodi  digunakan  metode  pengujian Hemaglutinasi  Inhibisi  (HI)  dengan  waktu  pengambilan  sampel  serum  sebelum  vaksinasi, minggu  ke-4,  minggu  ke-6,  minggu  ke-8,  dan  minggu  ke-10  pasca-vaksinasi.  Adapun  untuk melihat signifikansi perbedaan titer di masing-masing waktu dilakukan uji menggunakan analisis statistik Paired  Sample  T-test .  Dari  analisis  tersebut  diketahui  bahwa  untuk  strain  Lentogenik memiliki  signifikansi  paling  tinggi  pada  minggu  ke-8  pasca  vaksinasi  dengan  nilai  1779.20 dibanding  380.80  sebelum  vaksinasi.  Sementara  untuk  strain  Velogenik  memiliki  signifikansi paling  tinggi  pada  minggu  ke-4  pasca  vaksinasi  yakni  dengan  nilai  1753.60  dibanding  143.60 sebelum vaksinasi. Dengan demikian dapat disimpulkan bahwa vaksin ND Inaktif efektif dalam merangsang pembentukan antibodi protektif untuk melawan serangan virus ND.
Kata Kunci: Ayam petelur, kenaikan titer antibodi, Newcastle Disease

## ANTIBODY TITER ACTIVITY TEST FOR LAYING HENS AND POST INACTIVE NEWCASTLE DISEASE VACCINATION

## ABSTRACT
Laying  hens  in  Indonesia  are  outstanding  and  potential  commodities.  However,  Newcastle Disease  (ND)  is  one  of  the  risks  that  must  be  faced.  Now  vaccination  is  chosen  as  one  of  the strategies to prevent ND. This paper aims to examine the effect of inactivated ND vaccine from Lentogenic and Velogenic strains on the increase in antibody titers of laying hens.  To find the antibody  titer  value,  the  Hemagglutination  Inhibition  (HI)  test  method  is  used  with  serum sampling time before vaccination, 4th week, 6th week, 8th week, and 10th week post-vaccination. Meanwhile, to see the significance of the difference in titers at each time, a statistical analysis was carried out using the Paired Sample T-test. From this analysis, it is known that the Lentogenic strain has the highest significance at week 8 post-vaccination with a value of 1779.20 compared to  380.80  before  vaccination.  Meanwhile,  the  Velogenic  strain  had  the  highest  significance  at week 4 post-vaccination with a value of 1753.60 compared to 143.60 before vaccination. So it can  be  concluded  that  the  Inactivated  ND  vaccine  is  effective  in  stimulating  the  formation  of protective antibodies to fight against the ND virus attack.
Keywords: Increase in antibody titer, laying hens, Newcastle Disease

## PENDAHULUAN
Ayam  petelur  merupakan  salah  satu komoditas unggulan yang banyak dibudidayakan  di  Indonesia  khususnya  di Jawa  Timur.  Di  balik  perkembangan peternakan ayam petelur terdapat resiko yang harus  dialami  oleh  peternak-peternak  di antaranya  adalah  penyakit  yang  disebabkan oleh  virus Newcastle  Disease (ND). Newcastle Disease merupakan penyakit viral yang  menyerang  unggas  dan  menyebabkan penurunan produksi telur bahkan menimbulkan  kematian  hingga  100%  pada ayam yang belum pernah dilakukan vaksinasi ( Ganar , et al ., 2014).
Penyakit  ND  disebabkan  oleh Avian Paramyxovirus type-1  (APMV-1),  genus Avulavirus famili Paramyxoviridae (OIE, 2013).  Penyakit  ND  menular  melalui  alat transportasi, pekerja di peternakan, hewan di kandang,  makanan,  serta  alat  makan  yang digunakan. (Dirjen PKH, 2014).
Salah  satu  pencegahan  penyakit  ND dapat  dilakukan  dengan  vaksinasi.  Vaksin ND dibedakan menjadi dua tipe yaitu vaksin aktif ( live ) dan vaksin inaktif ( killed ). Vaksin aktif  adalah  vaksin  yang  mengandung  virus hidup  yang  sudah  dilemahkan,  sedangkan vaksin inaktif merupakan vaksin yang sudah tidak  mempunyai  kemampuan  berkembang biak  di  dalam  tubuh  ayam  yang  sudah divaksinasi namun masih mampu merangsang  kenaikan  titer  antibodi  pada ayam tersebut (Sianita, dkk. 2011).
Vaksin  inaktif  banyak  diberikan  ke ayam  petelur  di  Indonesia  karena  mampu menginduksi  titer  antibodi  yang  tinggi dengan  jangka  waktu  yang  cukup  lama (Darrel  et  al.,  2017).  Titer  antibodi  yang bertahan lama akan membantu ayam petelur untuk mempertahankan tubuhnya dari gangguan  penyakit Newcastle  Disease . Antibodi  yang  dihasilkan  setelah  vaksinasi inaktif tersebut akan mempertahankan tubuh ayam  petelur  terhadap  antigen  penyebab penyakit dengan cara langsung menginaktivasikan antigen penyebab penyakit. Sistem pertahanan tubuh yang telah aktif  kemudian  akan  menghancurkan  agen penyakit tersebut (Rusmiyanto dkk., 2016).
Pemantauan  titer  antibodi  pasca- vaksinasi merupakan hal yang sangat penting guna mengevaluasi hasil vaksinasi, menentukan  jadwal  vaksinasi  selanjutnya, mendiagnosa  kasus  penyakit  atau  membuat pemetaan kekebalan kandang ayam terhadap penyakit tertentu di dalam suatu peternakan. Pemantauan  titer  antibodi  dapat  dilakukan dengan pengujian serologi.
Pemeriksaan serologi merupakan pengujian untuk mendeteksi reaksi pengikatan antibodi dengan antigen. Pemeriksaan  serologi  yang  sering  dipakai adalah uji hemaglutinasi inhibisi (HI) untuk mengetahui adanya antibodi terhadap hemaglutinin (H) (OIE, 2012). Pengujian HI merupakan  metode  yang  relatif  murah  dan sederhana untuk mengukur antibodi hemaglutinin spesifik pada serum yang sudah divaksinasi  atau  terinfeksi  virus  dan mengetahui titer antibodi pada unggas (Noah et al., 2009).
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui aktivitas titer antibodi ND pasca- vaksinasi Newcastle  Disease pada  ayam petelur  di  Malang,  Jawa  Timur  pada  saat sebelum  dilakukannya  vaksinasi  hingga setelah dilakukannya vaksinasi pada minggu ke-10.

## BAHAN DAN METODE Waktu dan Lokasi Penelitian
Penelitian dilaksanakan selama 3 bulan di peternakan  Malang dan datanya diolah di PT.  Sanbio  Laboratories,  Jl.  Melati,  Desa Wanaherang,  RT  01  RW  09  Kecamatan Gunung Putri, Kabupaten Bogor, Jawa Barat, 16965, Indonesia.

## Metode Penelitian
(1) Vaksinasi
Penelitian ini menggunakan vaksin Newcastle Disease Inaktif strain Lentogenik dan Velogenik pada ayam layer petelur umur 10 minggu. Vaksinasi dilakukan dengan cara injeksi  intramuskuler  (i.m)  pada  otot  paha atau  dada  dengan  satu  dosis  vaksin  (0,5 ml/ekor).

## (2) Pengambilan Sampel Serum
Pengambilan  sampel  dilakukan  secara random  pada  kandang  ayam  petelur  yang sudah pernah vaksinasi ND di Malang, Jawa Timur. Pada masing-masing kandang diambil  sebanyak  20  sampel  darah  ayam pada  pengambilan  waktu  sebelum  (sebagai kontrol)  dan  setelah  vaksinasi  (4,  6,  8,  10 pasca-vaksinasi),  sehingga  diperoleh  total 100 sampel darah ayam. Sampel darah yang diambil oleh peternak yang ingin memonitor hasil vaksinasinya di PT Sanbio Laboratories. Pengambilan darah ayam yaitu melalui vena brachialis di  kiri  atau  kanan  bawah  sayap menggunakan syringe .  Darah  ayam  yang sudah  diambil  kemudian  di  kirimkan  ke laboratorium PT Sanbio Laboratories, sampel  darah  ayam  kemudian  dipisahkan antara serum dan bekuan darahnya. Selanjutnya  sampel  serum  dapat  diuji menggunakan  metode  HI  untuk  melihat reaksi  dari  hasil  vaksinasi  ND  pada  ayam petelur tersebut.
(3) Penyiapan RBC
Pertama,  masukkan  larutan  alsever  ke dalam 2 buah syringe 5 ml sebanyak 2,5 ml. Ambil  darah  ayam  sebanyak  2,5  ml menggunakan  syringe  yang  telah  berisi alsever 2,5 ml melalui pembuluh darah sayap ayam. Lalu tuang darah ayam tersebut dalam tabung sentrifus 15 ml, lakukan penambahan larutan PBS ke dalam tabung tersebut dengan perbandingan 1:1.
Selanjutnya  lakukan  sentrifus  pada kecepatan 3000 RPM pada suhu 4°C selama 15  menit.  Kemudian  supernatan  dibuang. Lakukan  pencucian  dengan  menambahkan PBS  hingga  mencapai  volume  awal  dan campur menggunakan pipet 10 ml, kemudian sentrifus kembali kecepatan 3000 RPM pada suhu  4°C  selama  15  menit.  Setelah  selesai lakukan  sentrifus,  dan  buang  supernatan. Lakukan  pencucian  pencucian  sebanyak  3 kali seperti langkah sebelumnya.
Adapun  langkah  selanjutnya  membuat larutan  RBC  1%  dengan  cara  mengambil endapan  RBC  (100%)  sebanyak  1  ml kemudian ditambahkan PBS sebanyak 99 ml.

## (4) Uji Hemaglutinasi (HA)
Metode  uji  HA  digunakan  untuk mengetahui  titer  antigen  dan  juga  dapat digunakan untuk retitrasi antigen, yaitu untuk mengecek  apakah  antigen  yangdikehendaki memiliki titer 4 HAU.
Pertama, well microplate tipe V bottom diisi dengan PBS sebanyak 25 𝜇𝑙 di nomor 1 sampai 12 menggunakan mikropipet. Kemudian  dilakukan  pengisian  suspensi antigen  25 𝜇𝑙 pada  lubang  nomor  1  dan dicampur hingga homogen.
Selanjutnya pada well nomor 2 dilakukan pengenceran dengan memindahkan  25 𝜇𝑙 campuran  antigen, pengenceran  dilakukan  dengan  cara  yang sama  hingga  well  nomor  11,  ambil  25 𝜇𝑙 suspensi  dari  well  nomor  11  kemudian dibuang.
Kemudian  well  nomor  1  sampai  12 diberi  PBS  sebanyak  25 𝜇𝑙 per  well. Tambahkan  suspensi  eritrosit  1%  kedalam well nomor 1 sampai 12 sebanyak 25 𝜇𝑙 per well.  Lalu  campur  larutan  hingga  homogen dengan  menggunakan  shaker  kemudian inkubasi selama 30 menit pada suhu ruang.
Pembacaan hasil HA dilakukan dengan cara  memiringkan  microplate  tipe  V  pada posisi  45o.  HA  dinyatakan  positif  jika  pada well  tampak  terlihat  seperti  butiran  pasir halus  di  dasar  well  plat  mikro.  Aglutinasi terjadi  karena  adanya  reaksi  hemaglutinin menggunakan RBC 1%. Selanjutnya penentuan titer antigen 4 HAU menjadi nilai virus optimal yang akan dipakai pada uji HI. Untuk  meyakinkan  bahwa  yang  digunakan antigen 4 HAU, lakukan back-titrasi antigen yang  telah  diencerkan  tersebut  dengan  cara uji HA test.
Adapun  cara  penentuan  titer  Antigen  4 HAU  adalah  dengan  membaca  pada pengenceran  antigen  tertinggi  yang  masih mampu  menghemaglutinasi  RBC.  Cara penentuan titer HAU sebagai berikut: 1. Sebagai contoh: Titer HA yang terbentuk pada well nomor 6 maka suspensi antigen 4 HAU akan dibuat dari pengenceran 26.
2. Maka: 2 6 2 2 = 2 4 =  16.  Jadi  perbandingan antara antigen dan PBS yaitu 1:15, maka 1 bagian antigen dan 15 bagian PBS.
3. Semisal dengan
menggunakan perbandingan 1:15, maka 10 μl antigen + 150 μl PBS = 160 μl (Indriani dkk. 2006).
(5) Uji Hemaglutinasi Inhibisi (HI)
Pertama  well  microplate  tipe  V  diisi dengan PBS sebanyak 25 µl pada well nomor 1 sampai 12 dengan menggunakan mikropipet. Lalu tambahkan suspensi serum 25  µl  pada  lubang  nomor  1  dan  campur hingga homogen.
Lakukan  pengenceran  dengan  cara memindahkan  25µl  campuran  serum  ke dalam  well  nomor  2,  kemudian  lakukan pengenceran  ini  dengan  cara  yang  sama hingga  well  nomor  10,  ambil  25µl  suspensi dari nomor 10 kemudian dibuang.
Selanjutnya  lakukan  penambahan  pada well  nomor  1  sampai  11  dengan  antigen sebanyak 25 µl per well. Inkubasi pada suhu ruang selama 15 menit. Kemudian tambahkan eritrosit 1% ke dalam well nomor 1 sampai 12 sebanyak 25 µl per well. Setelah itu  campurkan  hingga  homogen  dengan menggunakan  shaker  kemudian  inkubasi selama 30 menit pada suhu ruang.
Pembacaan  hasil  uji  dilakukan  bila lubang  nomor  11  sudah  tampak  adanya aglutinasi  eritrosit  dan  pada  well  nomor  12 tampak  terlihat  endapan  eritrosit.  Titer antibodi dapat dilihat pada tingkat pengenceran  antibodi  dalam  serum  yang masih mampu menghambat  aglutinasi eritrosit oleh virus.
(6) Perubahan Titer antibodi yang diamati
Pengujian titer antibodi yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah pengujian Hemaglutinasi Inhibisi. Pengujian ini digunakan untuk mengukur titer antibodi yang terkandung dalam serum yang berhubungan dengan tingkat kekebalan ayam terhadap  virus  ND  strain  Lentogenik  dan Velogenik.  Pengujian  HI  dapat  dilihat  dari reaksi ikatan antara antibodi dengan antigen menggunakan  indikator  sel  darah  merah. Untuk  antigen  yang  tidak  terikat  antibodi akan  mengikat  sel  darah  merah  sehingga ketika  microplate  dimiringkan  endapan  sel darah merah tidak akan bisa turun bersamaan dengan sel darah merah kontrol di microplate.

## ANALISIS DATA
Penelitian ini menggunakan pengolahan  data  dengan  metode  non- parametrik  menggunakan  alat  pengolahan data  SPSS  (Statistical  Product  and  Service Solutions)  versi  11.5,    sedangkan  metode analisis yang digunakan dalam penelitian ini adalah  One  Way  Analyze  of  Variant (ANOVA)  untuk  membandingkan  rata-rata dari  dua  kelompok  atau  lebih,  jika  terdapat perbedaan  pada  tiap  kelompok  maka dilanjutkan menggunakan uji Paired Sample T-Test untuk melihat korelasi dan perbedaan rata-rata  dari  dua  sampel.  Analisis  data dilakukan untuk melihat pengaruh waktu pre- vaksinasi  (X)  sebagai  variabel  independen terhadap  kenaikan  titer  antibodi  pasca- vaksinasi (Y) sebagai variabel dependen.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Industri  perunggasan  memiliki  nilai strategis terutama dalam penyediaan protein hewani  untuk  memenuhi  kebutuhan  dalam negeri. Industri perunggasan memiliki peran penting  dalam  penyediaan  protein  hewani untuk  masyarakat  baik  menengah  bawah maupun menengah atas, industri perunggasan  tersebut  adalah  peternakan ayam  ras  petelur  yang  menghasilkan  telur konsumsi.  Peternakan  ayam  ras  petelur  ini dikembangkan  karena  memiliki  peluang yang  menjanjikan  dan  dikatakan  bahwa usaha peternakan petelur mengalami perkembangan  yang  pesat  dan  umumnya bersifat  komersial  (Pelafu,  dkk.  2018). Dibalik perkembangan ayam petelur terdapat resiko yang harus dialami peternak diantaranya  adalah  penyakit  unggas  yang diakibatkan  oleh  virus,  penyakit  tersebut diantaranya adalah Newcastle Disease (ND). Penyakit  ND  mampu  ditangani dengan  beberapa  perlakuan  diantaranya adalah  vaksinasi.  Vaksin  ND  inaktif  ini banyak  beredar  di  pasaran  Indonesia  dan telah  lama  digunakan  secara  luas  di peternakan-peternakan ayam petelur. Namun kasus  penurunan  produksi  yang  diakibatkan oleh  penyakit  ND  masih  banyak  dilaporkan pada  waktu-waktu  tertentu.  Penyebaran
penyakit  ND  di  lapangan  sangat  cepat,  bisa dikarenakan  perubahan  cuaca  ekstrem  yang menyebabkan ayam menjadi stres dan mudah terserang  penyakit.  Tingginya  kasus  ND yang  terjadi  perlu  adanya  pencegahan  dan pengendalian  penyebaran  penyakit  ND  ini menggunakan vaksinasi (Susanti, dkk. 2021). Pemberian  vaksinasi  ND  secara  berulang menggunakan vaksin aktif dan inaktif dengan diinjeksikan  ke  bagian  tubuh  ayam  mampu memberikan  proteksi  yang  cukup  baik (Wibowo,  dkk.  2013).  Berdasarkan  hal tersebut  pengujian  serologi  menggunakan antigen  strain  Lentogenik  dan  strain Velogenik dilakukan untuk memastikan titer antibodi  mampu  memproteksi  ayam  dari serangan  virus  ND  sehingga  ayam  mampu bertahan  hidup  dari  infeksi  ND  yang  ada  di lapangan.
Pada penelitian ini vaksinasi dilakukan pada ayam umur 10 minggu secara intramuscular (i.m)  menggunakan  vaksin ND  Inaktif  strain  Lentogenik  dan  strain Velogenik dalam adjuvant minyak dengan 1 dosis vaksin sebanyak 0,5 ml. Vaksinasi ini merupakan vaksin ulangan ( booster ), sehingga ayam sudah memiliki titer sebelumnya.  Vaksinasi  ulangan  ( booster ) dilakukan  berdasarkan  program  vaksinasi yang  sudah  di  tetapkan  oleh  peternak. Kesuksesan dari vaksinasi ulangan ( booster ) dapat  dilihat  dari  pengujian  Hemaglutinasi Inhibisi  (HI).  Pengujian  menggunakan sampel darah ayam yang diambil di GS Farm, Malang  dengan  populasi  5000  ekor, pengambilan  sampel  darah  ayam  dilakukan pada  umur  10  minggu  (pre-vaksinasi),  14 minggu  (4  minggu  pasca-vaksinasi),  16 minggu  (6  minggu  pasca-vaksinasi),  18 minggu  (8  minggu  pasca-vaksinasi)  dan  20 minggu (10 minggu pasca-vaksinasi). Pengambilan sampel hanya mencapai minggu  ke-10  pasca-vaksinasi  dikarenakan minggu  selanjutnya  ayam  sudah  dilakukan vaksinasi  berikutnya  dengan  mengikuti program vaksinasi dari peternakan tersebut. Hasil  penelitian  didapatkan  hasil  rata-rata titer  antibodi  ND  strain  Lentogenik  pre- vaksinasi  adalah  8,1  HI  Log  2  (Gambar  1), mengalami  kenaikan  pada  minggu  ke-4
pasca-vaksinasi  yaitu  10,7  HI  log  2. Kemudian  titer  antibodi  pada  minggu  ke-6 pasca-vaksinasi  yaitu  10,5  HI  Log  2, kemudian pada minggu ke-8 pasca-vaksinasi adalah  10,7  HI  Log  2,  selanjutnya  pada minggu  ke-10  pasca-vaksinasi  yaitu  9,0  HI Log 2.
s
Gambar 1. Rata-rata Titer antibodi terhadap strain Lentogenik dan  strain Velogenik
Hasil penelitian untuk  rata-rata titer antibodi  ND  strain  Velogenik  pre-vaksinasi adalah  6,4  HI  Log  2,  mengalami  kenaikan pada minggu ke-4 pasca-vaksinasi yaitu 10,7 HI  log  2.  Kemudian  titer  antibodi  pada minggu  ke-6  pasca-vaksinasi  yaitu  10,6  HI Log  2,  kemudian  pada  minggu  ke-8  pasca- vaksinasi adalah 10.6 HI Log 2, selanjutnya pada minggu ke-10 pasca-vaksinasi yaitu 8,5 HI Log 2.
Gambar 2. Perbandingan kenaikan titer Strain Lentogenik dengan Velogenik Laju  peningkatan  titer antibodi  yang terlihat  mulai  menurun  diakibatkan  oleh
degradasi  antigen  yang  lebih  intensif  di dalam  tubuh  ayam  (Gambar  2).  Menurut Hewajuli  dan  Dharmayanti  (2015)  yang menyatakan  bahwa  respon  imun  yang diperantarai  sel  mulai  memuncak  selama minggu  ke-2  atau  ke-3  atau  lebih  setelah dilakukan vaksinasi ND.
Secara umum penggunaan vaksin ND Inaktif yang diaplikasikan secara intramuskuler  pada  ayam  petelur  umur  10 minggu  berpengaruh  nyata  terhadap  respon imun primer terhadap ND strain Lentogenik dan  Velogenik.  Menurut  Wibowo,  dkk. (2010)  aplikasi  vaksinasi  melalui  metode suntik ( intramuscular dan subkutan) memiliki hasil yang baik. Titer antibodi ND masih bertahan hingga minggu ke-10 pasca- vaksinasi bahkan lebih, semua titer antibodi pasca-vaksinasi protektif ≥ 6 HI Log 2. Hal ini  sesuai  dengan  penelitian  (Andika,  dkk. 2011),  bahwa  titer  antibodi  6  HI  Log  2 mampu  melindungi  ayam  petelur  hingga 100%.
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini, bahwa  titer  antibodi  ayam  petelur  pada minggu ke-4 pasca-vaksinasi mulai mengalami  kenaikan  yang  cukup  signifikan dibandingkan dengan pre-vaksinasi. Pembentukan  titer  antibodi  pada  saat vaksinasi  ulangan  ( booster )  lebih  cepat dibandingkan  pada  saat  vaksinasi  pertama, hal  ini  disebabkan  karena  terbentuknya  sel memori  pasca-vaksinasi  pertama  yang mampu  mempercepat  respons  antibodi  di vaksinasi  ulangan  (Kencana,  dkk.  2016). Imunitas yang didapat oleh individu sesudah pertama kali terpapar antigen atau vaksinasi pertama  akan  menghasilkan  Limfosit  B  dan limfosit T yg nantinya akan berperan dalam imunitas  spesifik,  dimana  Limfosit  T berperan dalam sistem imun spesifik selular yang mengaktifasi fagosit untuk menghancurkan mikroba yang sudah tercerna,  sedangkan  limfosit  B  yang teraktivasi  oleh  antigen  akan  terdiferensiasi sebagai sel plasma menghasilkan immunoglobulin seperti IgG, IgM, IgA, IgE serta  IgD  (Sudiono,  2014;  Rahmawati  dkk., 2018).  Setelah  dilakukan  vaksinasi  ulangan ( booster )  Sel  T  memori  segera  mengenali
antigen  yang  pernah  terpapar  sebelumnya serta  membantu  sel  B  untuk  berproliferasi dan menghasilkan sel plasma, yang kemudian segera akan membentuk antibodi. Pada  penelitian  ini  respon  imun  yang terbentuk  kemungkinan  ditimbulkan  karena 2 hal, diantaranya: (1) akibat pernah terpapar virus  ND  pada  infeksi  alami  yang  sifatnya subklinis,  (2)  kemungkinan  ke  berikutnya adalah  akibat  vaksinasi  ND  ulangan ( booster ).
Adanya  perbedaan  respon  imun pasca-vaksinasi  ditentukan  oleh  beberapa faktor  antara  lain:  kemungkinan  perbedaan sifat  antigenik  antara  virus  yang  terdapat pada  vaksin,  kualitas  dari  antigen,  serta kandungan  dari adjuvant yang  terdapat dalam vaksin (Indriani dan Damayanti, 2013). Selain itu faktor waktu pasca-vaksinasi juga berpengaruh  terhadap  tingkat  titer  antibodi yang dicapai.
Pada  penelitian  ini  juga  dilakukan analisis statistik One Way Analyze of Variant (ANOVA)  untuk  melihat  signifikansi  dari titer antibodi yang dicapai oleh waktu pasca- vaksinasi yang berbeda-beda. Hasil penelitian menunjukkan bahwa waktu pasca- vaksinasi memiliki pengaruh yang signifikan terhadap  hasil  titer  antibodi  yang  dicapai. Pada  penelitian  ini  titer  antibodi  meningkat sampai  minggu  ke-8  pasca-vaksinasi  dan mulai  turun  pada  minggu  ke-10  pasca- vaksinasi. Titer antibodi ayam yang terdapat di  lapangan  disarankan  jangan  sampai  0 dikarenakan  ayam  sangat  rentan  tertular penyakit  infeksius.  Begitupula  titer  antibodi yang  terlalu  tinggi  tidak  disarankan  sebab dapat  menyebabkan  vaksin  yang  diberikan tidak efektif karena dianggap sebagai infeksi (Kencana dkk., 2017).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa:
1. Vaksinasi Newcastle  Disease Inaktif dapat  meningkatkan  titer  antibodi  ayam petelur  pasca-vaksinasi  terhadap  antigen ND strain Lentogenik dan strain Velogenik.
2. Faktor waktu pengambilan sampel pasca- vaksinasi memberikan pengaruh
signifikan terhadap kenaikan titer antibodi pasca vaksin. 3. Pemberian vaksin ND mampu meningkatkan  titer  antibodi  pada  ayam petelur.

## DAFTAR PUSTAKA
Andika,  B.  K.  (2011).  Respons  Antibodi Sekunder  Terhadap  Penyakit  Tetelo pada  Ayam  Petelur  Pascavaksinasi Ulangan  Dengan  Vaksin  Tetelo Aktif. Jurnal Veteriner , 331-336.
Damayanti,  E.  N.  (2019). Praktikum
Statistika Induktif.
Yogyakarta:
Departemen  Ekonomika  dan  Bisnis Sekolah  Vokasi  Universitas  Gadjah Mada.
Ganar, K.,  Das, M., Sinha, S.  and Kumar, S.(2014). Newcastle disease virus: Current status and our understanding. Virus Res, 184: 71–81. doi: 10.1016/j.virusres.2014.02.016 Hewajuli,  D.  d.  (2015).  Peran  Sistem Kekebalan Non-spesifik dan Spesifik pada  Unggas  terhadap  Newcastle Disease. Wartazoa 25(3) , 135-146.
Indriani, R. &. (2013). Studi Efikasi Vaksin
Bivalen  AI  Isolat  Lokal  terhadap Beberapa Karakter Genetik Virus AI subtipe H5N1. Jurnal Biologi Indonesia, 9(1) , 21-30. Indriani,  R.  N.  (2006). Kajian  Vaksinasi Avian  Influenza  Subtipe  H5N1  Pada Burung Puter (Stretopeliabitorquata) dan Merpati (Columba livia). Bogor: Balai Penelitian Veteriner. Kencana,  G.  S.  (2016).  Vaksin  Kombinasi Newcastle  Disease  dengan  Avian Influenza Memicu Imunitas Protektif pada Ayam Petelur terhadapPenyakit Tetelo dan Flu Burung. Laboratorium Virologi Veteriner, FKH Universitas Udayana, Bali, Indonesia .
Kencana, G. S. (2017). Respons Imun Ayam Petelur  Pasca  vaksinasi  Newcastle Disease  dan  Egg  Drop  Syndrome. Laboratorium  Virologi,  Fakultas
Kedokteran Hewan, Universitas
Udayana, Denpasar Bali . Kurnianto,  A.  K.  (2016).  Respons  Antibodi Sekunder Terhadap Penyakit Tetelopada  Ayam  Petelur  Pasca vaksinasi  Ulangan  dengan  Vaksin Tetelo  Aktif. Laboratorium  Virologi Veteriner, FKH Universitas Udayana, Bali, Indonesia .
Noah,  D.  H.  (2009).  Qualification  of  the Hemagglutination Inhibition Assay in Support  of  Pandemic  Influenza Vaccine  Licensure. Clinical  and Vaccine  Immunology  16  (4) ,  558-
566.
Pelafu, F. N. (2018). Potensi Pengembangan Peternakan  Ayam  Ras  Petelur  Di Kabupaten Halmahera Barat. Program  Pascasarjanam.  Fakultas Peternakan. Universitas Sam Ratulangi Manado .
PT  Sanbio  Laboratories.  (2021). Perbedaan Antara  Vaksin  Live  dan  Kill . Retrieved from Sanbio Laboratories: http://www.sanbiolabs.com/article/b erita/perbedaan-antara-vaksin-live- dan-kill Rahmawati, A. W. (2018). Pengaruh Ekstrak Kulit  dan  Jus  Buah  Delima  Putih (Punica granatum L.) Terhadap Titer Antibodi  Ayam  Kampung  Super yang  Divaksin  Newcastle  Disease. Jurnal Medik Veteriner, 1(3) , 68-73. Rusmiyanto.,  S.  P.  (2016).  Pengaruh  dosis vaksin  Newcastle  Disease  (ND) Inaktif  terhadap  titer  antibodi  pada itik  jantan. Departement  of  Animal Husbandry,  Faculty  of  Agriculture Lampung University .
Sianita,  N.  H.  (2011).  Respon  Antibodi  dan Protektivitas  pada  Ayam  Pasca vaksinasi  Menggunakan  Vaksin  ND Aktif  Lv12. Fakultas  Kedokteran Hewan Unair 2 PPDH .
Sudiono, J. (2014). Sistem Kekebalan Tubuh.
Jakarta: Buku Kedokteran ECG.
Susanti,  W.  W.  (2021).  Kejadian  Kasus Penyakit  Newcastle  di  Peternakan Ayam  Buras  di  Kabupaten  Barru.
Jurnal  Ilmu  Pertanian  Indonesia (JIPI). Vol. 26 (3) , 379-385. Wibowo,  M.  A.  (2010).  Perbandingan
Beberapa Program Vaksinasi Penyakit  Newcastle  Disease  pada Ayam  Buras. Bagian  Mikrobiologi. Fakultas Kedokteran Hewan. Universitan Gadjah Mada. Yogyakarta . Wibowo, S. A. (2013). Perbandingan Tingkat Proteksi Program Vaksinasi Newcastle  Disease  pada  Broiler. Bagian Mikrobiologi, Bagian Patologi, Fakultas Kedokteran Hewan,  Universitas  Gadjah  Mada,
Yogyakarta .