ISSN 2085-2916  e-ISSN 2337-3652 Tersedia daring http://jai.ipb.ac.id J. Agron. Indonesia, Desember 2017, 45(3):235-242 DOI: https://dx.doi.org/10.24831/jai.v45i3.13811

## Aplikasi Agens Hayati untuk Mengendalikan Hawar Daun Bakteri pada Produksi Benih Padi

## Biological Agents Applications to Control Bacterial Leaf Blight in Rice Seed Production
Rahayu Nurkartika 1 , Satriyas Ilyas 2* , dan Muhammad Machmud 3
1 Program Studi Ilmu dan Teknologi Benih, Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor 2 Departemen Agronomi dan Hortikultura, Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor (Bogor Agricultural University), Jl. Meranti, Kampus IPB Darmaga, Bogor 16680, Indonesia 3 Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan Sumberdaya Genetik Pertanian Jl. Tentara Pelajar No. 3 A Bogor, Indonesia
Diterima 4 November 2016/Disetujui 31 Januari 2017

## ABSTRACT
This  experiment  is  a  further  development  of  several  previous  studies  on  the  potential  of  Bacillus  subtilis  5/B  and Pseudomonas diminuta A6 (rhizobacteria), and Aeromonas sp. F112 (phyllobacteria) as biological agents. Research aimed to evaluate the application of biological agents to promote plant growth and to control bacterial leaf blight (BLB) disease in rice seed production. This research consisted of two experiments, the first was in the nursery while the second was in the field. The first experiment conducted in a completely randomized  design with one factor (seed treatments) and three levels, i.e., control (untreated), matriconditioning + streptomycin sulphate 0.2% (BsM), biomatriconditioning + B. subtilis 5/B + P. diminuta A6 (BM). The second experiment was conducted in a randomized complete block design with one factor (biological agent aplication methods) and nine levels, i.e., control (untreated), matriconditioning +  streptomycin sulphate 0.2% (BsM), biomatriconditioning + B. subtilis 5/B + P. diminuta A6 (BM), soaking of seedlings root with  B. subtilis 5/B + P. diminuta A6 (RA), foliar spraying with Aeromonas sp. F112 (SD), BM + RA, BM + SD, RA + SD, BM + RA+ SD. The result showed that seed treatments significantly increased field emergence. Eventhough all treatments did not significantly affect plant growth, incidency and severity level of BLB disease, and yield components, biomatriconditioning showed a better improvement in yield components. The seeds produced from plants treated with the biological agents showed significantly higher vigor index than untreated and matriconditioning + streptomycin sulphate 0.2%.
Keywords: Aeromonas sp., Bacillus subtilis, biomatriconditioning, seed quality, Pseudomonas diminuta

## ABSTRAK
Penelitian  ini  adalah  pengembangan  beberapa  penelitian  sebelumnya  mengenai  potensi  Bacillus  subtilis  5/B  dan Pseudomonas  diminuta  A6  (rhizobacteria),  dan  Aeromonas  sp.  F112  (phyllobacteria)  sebagai  agens  hayati.  Penelitian bertujuan untuk mengevaluasi efektivitas metode aplikasi agens hayati dalam memacu pertumbuhan tanaman, mengendalikan penyakit hawar daun bakteri (HDB), dan meningkatkan produksi benih padi. Penelitian ini terdiri atas dua percobaan, percobaan  pertama  dilaksanakan  di  persemaian  dan  percobaan  kedua  di  lapangan.  Percobaan  pertama  dilaksanakan dengan  rancangan    acak  lengkap  satu  faktor  (perlakuan  benih),  terdiri  atas  tiga  taraf  yaitu  kontrol  (tanpa  perlakuan), matriconditioning + streptomisin sulfat 0.2% (BsM), biomatriconditioning + B. subtilis 5/B + P. diminuta A6 (BM). Percobaan kedua menggunakan rancangan kelompok lengkap teracak satu faktor (metode aplikasi agens hayati), terdiri atas sembilan taraf  yaitu  kontrol (tanpa perlakuan), matriconditioning + streptomisin sulfat 0.2% (BsM), biomatriconditioning + B. subtilis 5/B + P. diminuta A6 (BM), perendaman akar bibit dengan B. subtilis 5/B + P. diminuta A6 (RA), penyemprotan daun dengan Aeromonas sp. F112 (SD), BM + RA, BM + SD, RA + SD, BM + RA+ SD. Percobaan pertama menunjukkan perlakuan  benih  melalui  matriconditioning    +  streptomisin  sulfat  0.2%  dan  biomatriconditioning  +  B.  subtilis  5/B  dan P. diminuta A6 nyata meningkatkan daya tumbuh. Percobaan kedua menunjukkan semua perlakuan tidak mempengaruhi pertumbuhan tanaman, tingkat kejadian dan keparahan HDB, serta komponen hasil. Biomatriconditioning  + B. subtilis 5/B + P. diminuta A6 cukup efektif meningkatkan produksi gabah bernas dibandingkan perlakuan lain. Benih yang dihasilkan dari  tanaman  dengan  aplikasi  agens  hayati  menunjukkan  peningkatan  indeks  vigor  secara  nyata  dibandingkan  dengan kontrol atau matriconditioning  +  streptomisin sulfat 0.2%.
Kata kunci: Aeromonas sp., Bacillus subtilis, biomatriconditioning, mutu benih, Pseudomonas diminuta

## PENDAHULUAN
Penggunaan benih bermutu dalam kegiatan budidaya pertanian merupakan salah satu faktor penentu keberhasilan peningkatan  produksi.  Ilyas  (2012)  menjelaskan  bahwa benih  bermutu  tinggi  dicirikan  oleh  tingkat  kemurnian, daya berkecambah, dan vigor yang tinggi, serta bebas dari penyakit terbawa benih.
Hawar  daun  bakteri  (HDB)  merupakan  salah  satu penyakit  utama  pada  tanaman  padi  yang  disebabkan  oleh bakteri Xanthomonas  oryzae pv. oryzae ( Xoo ) . Gejala penyakit yang ditimbulkan pada fase bibit dinamakan kresek, ditandai dengan daun yang berwarna hijau keabu-abuan dan menggulung. Penyakit HDB pada tanaman dewasa ditandai dengan gejala hawar yang terlihat seperti akibat terendam air  panas,  berwarna  kuning-jingga  pada  tepi  daun,  ujung daun, atau bagian daun yang mengalami kerusakan mekanis, kemudian  meluas  dan  memanjang  menuju  pangkal  daun . Perkembangan  selanjutnya,  bagian  daun  yang  terinfeksi menjadi  berwarna  keabu-abuan  disertai  dengan  titik-titik hitam  yang  menandakan  tumbuhnya  cendawan  saprofit. Penyakit  HDB  dapat  mengakibatkan  kehilangan  hasil sampai 70% (IRRI, 2009). Bakteri Xoo ditemukan dalam struktur  endosperm  dan  sekam  benih  padi  (Agarwal  dan Sinclair,  1996).  Penggunaan  benih  sehat  perlu  dilakukan dalam pengendalian penyakit HDB secara terpadu (Sudir et al. , 2012). Aplikasi agens hayati merupakan salah satu alternatif yang  dikembangkan  dalam  rangka  peningkatan  produksi. Bakteri agens hayati dapat memacu pertumbuhan tanaman dengan  mekanisme  langsung  atau  tidak  langsung  melalui pengendalian penyakit. Mekanisme langsung terjadi melalui fiksasi nitrogen, pelarutan fosfat, serta produksi siderofor, fitohormon,  dan 1-aminocyclopropane-1-carboxylate deaminase , sedangkan mekanisme tidak langsung melalui produksi antibiotik, hidrogen sianida (HCN), dan siderofor, kompetisi ekologi niche (lingkungan tumbuh), dan induksi ketahanan sistemik (Choudhary dan Johri, 2009; Martinez- Viveros et  al., 2010;  Glick,  2012;  Ahemat  dan  Kibret, 2014). Bakteri Bacillus subtilis 5/B, Pseudomonas diminuta A6,  dan Aeromonas sp.  F112  telah  diteliti  dalam  rangka peningkatan pertumbuhan, produksi benih dan pengendalian penyakit HDB tanaman padi melalui biomatriconditioning , perendaman  akar  bibit,  dan  penyemprotan  daun (Agustiansyah et  al. ,  2013a,  2013b;  Lizansari,  2013; Zamzami et  al. ,  2014;  Khodar et  al. ,  2016).  Rangkaian penelitian  yang  telah  dilakukan  menghasilkan  beberapa metode  aplikasi  yang  potensial  untuk  dikembangkan. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengevaluasi  efektivitas aplikasi agens hayati dalam  memacu pertumbuhan tanaman, mengendalikan  penyakit  hawar  daun  bakteri  (HDB),  dan akhirnya meningkatkan produksi benih padi.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  dilakukan  pada  bulan  Oktober  2014 sampai Juni 2015 di Laboratorium Fisiologi dan Kesehatan Benih Departemen Agronomi dan Hortikultura IPB, Balai
Besar  Padi  Instalasi  Kebun  Percobaan  Muara,  Bogor, yang  merupakan  daerah  endemik  HDB,  dan  Balai  Besar Pengembangan  Pengujian  Mutu  Benih  Tanaman  Pangan dan Hortikultura, Depok.

## Sumber Isolat dan Pembuatan Suspensi Bakteri
Bakteri  yang  digunakan  adalah B.  subtilis 5/B , P. diminuta A6, dan Aeromonas sp. F112 sebagai agens hayati dan  bakteri  Xoo  sebagai  patogen.  Semua  isolat  bakteri tersebut  merupakan  koleksi  Lab.  Fisiologi  dan  Kesehatan Benih  Dept.  AGH  IPB  yang  digunakan  pada  penelitian sebelumnya  (Agustiansyah et  al .,  2010,  2013a,  2013b; Lizansari, 2013; Zamzami et al ., 2014, Khodar et al ., 2016). Isolat Xoo sebagai  patogen  berasal  dari  daun  tanaman terinfeksi yang diperoleh dari lingkungan tempat percobaan dilakukan.  Isolat  bakteri  diuji  kelayakannya  sebelum dipergunakan. Hasil yang diperoleh adalah isolat Xoo dapat menyebabkan gejala HDB  pada  tanaman padi,  sedangkan isolat  agens  hayati  bersifat  antagonis  terhadap  Xoo,  tidak patogenik,  dan  memiliki  kompatibilitas  antar  rhizobakteri ( B. subtilis 5/B dan P. diminuta A6). Bakteri diperbanyak pada media nutrient agar (untuk B. subtilis 5/B dan Aeromonas sp. F112), King’s B (untuk P. diminuta A6) dan yeast dextrose carbonate agar (untuk Xoo). Suspensi agens hayati dibuat dengan cara melarutkan isolat bakteri berumur 48 jam dengan akuades steril hingga diperoleh kerapatan 10 8 -10 9 cfu mL -1 .

## Penyediaan Benih Sumber Terinfeksi Xoo
Benih padi yang digunakan adalah varietas IR64 kelas Benih  Dasar,  diperoleh  dari  BB  Padi,  Sukamandi.  Daya berkecambah, indeks vigor, dan populasi Xoo terbawa benih awal masing-masing adalah 91%, 86%, dan 2.3 x 10 5 cfu g -1 . Inokulasi  benih  dalam  penyediaan benih padi terinfeksi Xoo dilakukan menurut metode Agustiansyah et al. (2010) yang dalam penelitiannya dilaporkan mampu meningkatkan jumlah  koloni  Xoo  pada  benih  padi.  Inokulasi  benih dilakukan  dengan  cara  merendam  benih  dalam  suspensi Xoo  (10 8 -10 9 cfu mL -1 )  selama  24  jam  pada  suhu  25 o C lalu dikeringanginkan selama 12 jam pada kondisi ruangan laboratorium.

## Aplikasi  Agens  Hayati  untuk  Memacu  Pertumbuhan Tanaman di Persemaian
Rancangan acak lengkap (RAL) satu faktor (perlakuan benih) digunakan untuk mengetahui pengaruh aplikasi agens hayati  sampai  pada  fase  bibit  sebelum  dipindah  tanam. Benih sumber yang telah diinokulasi bakteri Xoo diberikan perlakuan. Percobaan terdiri atas tiga taraf, yaitu 1) kontrol (tanpa perlakuan), 2) matriconditioning + streptomisin sulfat 0.2% (BsM), dan 3) biomatriconditioning + B. subtilis 5/B  + P. diminuta A6 (BM).  Percobaan terdiri atas empat ulangan, setiap unit percobaan menggunakan 100 butir benih.
Benih  disemai  pada  lahan  persemaian  yang  relatif homogen  pada  tanah  terbuka,  gembur,  datar,  dan  tidak tergenang air. Pindah tanam bibit dilakukan pada umur 19
HSS (hari setelah semai). Pengamatan dilakukan terhadap daya tumbuh (14 HSS) serta tinggi bibit, panjang akar bibit dan bobot kering bibit saat pindah tanam (19 HSS). Data hasil pengamatan dianalisis ragam dengan taraf kepercayaan 95%,  dan  jika  terdapat  pengaruh  perlakuan  dilakukan  uji lanjut secara DMRT ( Duncans Multiple Range Test ).
Aplikasi  Agens  Hayati  untuk  Memacu  Pertumbuhan tanaman,  Mengendalikan  Hawar  Daun  Bakteri  dan Meningkatkan Produksi Benih Padi
Rancangan  kelompok  lengkap  teracak  (RKLT)  satu faktor  (metode  aplikasi  agens  hayati)  digunakan  untuk mengetahui  pengaruh  perlakuan  agens  hayati  terhadap pertumbuhan  tanaman  setelah  pindah  tanam  ke  sawah, komponen  produksi,  sampai  mutu  benih  hasil  produksi. Percobaan  terdiri  atas  sembilan  taraf  yaitu  1)  kontrol,  2) matriconditioning +  streptomisin  sulfat  0.2%  (BsM),  3) biomatriconditioning + B. subtilis 5/B + P. diminuta A6 (BM), 4) perendaman akar bibit dalam suspensi B. subtilis 5/B + P. diminuta A6 (RA), 5) penyemprotan daun dengan suspensi Aeromonas sp. F112 (SD), 6) BM + RA, 7) BM + SD, 8) RA + SD, dan 9)  BM + RA + SD. Percobaan terdiri atas  3  ulangan  sebagai  kelompok,  setiap  unit  percobaan terdiri atas 30 rumpun.
Bibit  ditanam    pada  unit  percobaan  di  lahan  sawah berukuran 6 m x 5 m dengan jarak tanam 25 cm x 25 cm, sebanyak dua bibit per lubang tanam. Pemeliharaan meliputi penyulaman pada 2 MSP (minggu setelah pindah tanam), penyiangan gulma, pengairan (mulai pindah tanam sampai 8  MSP  secara  berselang,  fase  berbunga  sampai  pengisian benih lahan diairi 2-5 cm, 2 minggu sebelum panen sampai panen lahan dikeringkan), pemupukan (150 kg TSP ha -1 + 150 kg NPK Phonska ha -1 pada 1 MSP, 150 kg NPK Phonska ha -1 + 100 kg Urea ha -1 pada 4 MSP, 100 kg Urea ha -1 pada 8 MSP), dan pengendalian hama  dengan  pestisida (bahan aktif saponin dengan dosis 20 kg ha -1 pada 1 MSP dan bahan aktif fipronil  dengan dosis 500 mL ha -1 pada 3, 6, dan 8 MSP). Panen dilakukan pada 15 MSP, hasil panen dijemur di bawah sinar matahari selama tiga hari mulai pukul 08.00 sampai 12.00 hingga diperoleh gabah kering giling.
Pengamatan dilakukan terhadap tinggi dan bobot kering tanaman  (8  MSP),  tingkat  kejadian  dan  indeks  keparahan penyakit HDB (12 MSP), bobot total gabah, bobot gabah bernas,  persentase  bobot  gabah  bernas,  serta  mutu  benih hasil produksi meliputi bobot 1,000 butir, indeks vigor, daya berkecambah, dan populasi Xoo terbawa benih. Data hasil pengamatan  dianalisis  ragam  dengan  taraf  kepercayaan 95%,  dan  jika  terdapat  pengaruh  perlakuan  dilakukan  uji lanjut secara DMRT ( Duncans Multiple Range Test ).
Perlakuan Aplikasi Agens Hayati
Matriconditioning adalah  pengendalian  hidrasi benih  melalui  penggunaan carrier berupa  media  padat lembab  dengan  potensial  matriks  rendah  (Khan et  al. , 1992). Matriconditioning menggunakan arang sekam steril halus  (lolos  saringan  0.5  mm)  sebagai  media  ( carrier ).
Biomatriconditioning adalah matriconditioning yang diintegrasikan dengan agens hayati.  Komposisi bahan untuk matriconditioning adalah  benih  :  arang  sekam  :  larutan pelembab yaitu 1 : 0.8 : 1.2 (g : g : mL) (Agustiansyah et al .,  2010). Matriconditioning +  streptomisin  sulfat  0.2% menggunakan larutan pelembab bakterisida berbahan aktif streptomisin sulfat dengan konsentrasi 0.2% dan inkubasi dilakukan selama 6 jam. Biomatriconditioning + B. subtilis B/5  +  P.  diminuta  A6 menggunakan  larutan  pelembab campuran  suspensi B.  subtilis 5/B  dan P.  diminuta A6 dengan  perbandingan  1:1  kemudian  diinkubasi  selama  30 jam. Inkubasi dilakukan pada suhu 25 o C (Zamzami et al. , 2014). Perendaman  akar  bibit  dilakukan  pada  bibit  padi berumur 19 HSS. Bibit dicabut dari persemaian kemudian akar bibit direndam dalam campuran suspensi B. subtilis 5/B dan P. diminuta A6 dengan perbandingan 1:1. Perendaman akar  bibit  dilakukan  selama  60  menit  sebelum  dipindah tanam ke sawah (Lizansari, 2013).
Penyemprotan daun dilakukan saat tanaman berumur 60 HSS dan 80 HSS. Penyemprotan menggunakan suspensi bakteri Aeromonas sp. F112 dengan dosis 300 L ha -1 (Khodar et al. , 2016).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Aplikasi  Agens  Hayati  untuk  Memacu  Pertumbuhan Tanaman di Persemaian
Matriconditioning +  streptomisin  sulfat  0.2%  dan biomatriconditioning + B.  subtilis 5/B  + P.  diminuta A6 (selanjutnya  disebut biomatriconditioning )  meningkatkan daya  tumbuh  benih,  namun  tidak  meningkatkan  tinggi, panjang akar dan bobot kering benih dibandingkan kontrol (Tabel 1).
Peningkatan daya tumbuh di persemaian mengindikasikan peningkatan vigor benih, yaitu kemampuan benih untuk berkecambah dan tumbuh normal pada kondisi sub  optimum.  Hidrasi  secara  terkendali  membuat  benih lebih  siap  untuk  berkecambah. Matriconditioning yang diintegrasikan  dengan  hormon,  pestisida,  biopestisida atau  mikroba  bermanfaat  meningkatkan  perkecambahan, mengurangi  patogen  terbawa  benih,  meningkatkan pertumbuhan dan hasil tanaman (Ilyas, 2006). Peningkatan daya  tumbuh  dan  performa  bibit  padi  melalui  aplikasi matriconditioning dengan  penambahan  bakterisida steptomisin  sulfat  0.2%  atau  agens  hayati B.  subtilis 5/B dan P. diminuta A6 telah dilaporkan (Agustiansyah et al ., 2013b; Lizansari, 2013; Zamzami et al ., 2014; Khodar et al. , 2016). Menurut  Agustiansyah et  al. (2013a), B.  subtilis 5/B  dan P.  diminuta A6  merupakan  rhizobakteri  yang yang  memproduksi  fitohormon Indole  acetic  acid (IAA), melarutkan fosfat dan menghasilkan siderofor, P. diminuta A6  juga  menghasilkan  HCN  yang  bersifat  anti  mikroba. Kemampuan  agens  hayati  pada  penelitian  ini  untuk menghasilkan  fitohormon,  menambah  nutrisi  P  tersedia di  area  rhizosfer,  serta  mengendalikan  infeksi  Xoo  pada
benih mampu membuat benih tumbuh lebih cepat dan kuat sehingga lebih mampu bertahan hingga fase bibit di lahan persemaian.
Aplikasi  Agens  Hayati  untuk  Memacu  Pertumbuhan Tanaman Padi serta Mengendalikan HDB di Lapangan
Menurut  Ahemad  dan  Kibret  (2014),  IAA mempengaruhi pembelahan, pemanjangan, dan diferensiasi sel  tanaman,  menstimulasi  perkecambahan  benih, meningkatkan perkembangan xilem dan akar, menginisiasi pembentukan  akar  lateral  dan  adventif,  mediator  respon terhadap cahaya, mempengaruhi fotosintesis, pembentukan beragam metabolit, serta resistansi terhadap kondisi stres. Pemanfaatan  IAA B.  subtilis 5/B, P.  diminuta A6,  dan Aeromonas sp.  F112  diharapkan  dapat  meningkatkan pertumbuhan tajuk tanaman. Namun aplikasi ketiga agens
hayati tersebut dalam penelitiaan ini kurang efektif karena semua  perlakuan  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  tinggi dan  bobot  kering  tanaman  (Tabel  2).  Kondisi  lapangan dengan  pemupukan,  pencahayaan  dan  pengairan  yang memadai  diduga  memberi  pengaruh  lebih  besar  terhadap pertumbuhan tanaman dibandingkan dengan aktivitas agens hayati yang diaplikasikan.
Pengendalian    patogen  merupakan  salah  satu mekanisme  agens  hayati  untuk  mendukung  pertumbuhan tanaman  (Singh et  al. ,  2011;  Ahemad  dan  Kibret,  2014; Kerkeni et  al. ,  2008).  Pengujian  pada  media  agar  di laboratorium  menunjukkan  bahwa B.  subtilis 5/B, P. diminuta A6 dan Aeromonas sp. F112 dapat menghambat pertumbuhan Xoo  (Agustiansyah, 2013a; Zamzami et al. , 2014). Namun, a plikasi B. subtilis 5/B, P. diminuta A6 dan Aeromonas sp. F112 sebagai agens hayati di lapangan tidak nyata  menurunkan  tingkat  kejadian  dan  indeks  keparahan
Perlakuan Daya tumbuh (%) Tinggi bibit (cm) Panjang akar (cm) Bobot kering (g) Kontrol 88b 22.60 7.33 0.14 BsM 96a 20.73 8.49 0.13 BM 95a 21.80 8.95 0.14 Koefisien keragaman (%) 2.6 7.47 14.58 19.50 Tabel 1. Daya tumbuh benih 14 HSS dan pertumbuhan bibit padi saat pindah tanam 19 HSS
Keterangan:  Angka yang diikuti huruf yang berbeda menunjukkan perbedaan nyata berdasarkan DMRT pada α = 5%. HSS = hari setelah semai. BsM = matriconditioning + streptomisin sulfat 0.2%, BM = biomatriconditioning + B. subtilis 5B + P.diminuta A6 . Percobaan terdiri dari 4 kelompok. Pengamatan daya tumbuh berdasarkan 100 butir, sedangkan tinggi, panjang akar dan bobot kering tanaman merupakan rata-rata dari 5 bibit pada setiap unit percobaan
Perlakuan agens hayati Tinggi tanaman (cm) Bobot kering tanaman (g per rumpun) Kejadian penyakit (%) Indeks keparahan penyakit (%) Kontrol 76.6 22.3 100 31.1 BsM 77.1 26.4 100 24.7 BM 77.3 31.6 100 27.9 RA 75.6 24.2 100 21.0 SD 77.0 35.6 100 26.2 BM + RA 77.1 23.6 100 27.7 BM + SD 78.8 35.1 100 27.9 RA + SD 76.2 27.7 100 26.7 BM + RA + SD 80.3 30.5 100 24.0 Koefisien keragaman (%) 4.7 28.6 0 17.1
Tabel 2. Pengaruh aplikasi agens hayati terhadap pertumbuhan tanaman padi 8 MSP serta kejadian dan keparahan penyakit hawar daun bakteri 12 MSP
Keterangan:  MSP  =  minggu  setelah  pindah  tanam,  BsM  = matriconditioning +  bakterisida  streptomisin  sulfat  0.2%,  BM  = biomatriconditioning + B. subtilis 5/B + P. diminuta , RA = perendaman akar bibit sebelum pindah tanam dengan B. subtilis 5/B + P. diminuta , SD = penyemprotan daun di lapangan dengan Aeromonas sp. F112. Percobaan dilaksanakan dengan 3 kelompok. Tinggi tanaman, kejadian dan keparahan penyakit berdasarkan pengamatan 30 rumpun contoh per unit percobaan (1 rumpun = 2 tanaman), bobot  tanaman berdasarkan 5 rumpun per unit percobaan. Kejadian penyakit = n / N x 100%, n = jumlah tanaman yang terserang dan N = jumlah tanaman yang diamati. Indeks keparahan penyakit  = (∑ n x v) / (N x Z) x 100%, dimana n = jumlah tanaman dari tiap kategori serangan, v = kategori serangan, N = jumlah tanaman yang diamati, Z = nilai kategori tertinggi, kategori serangan = 0: tidak ada serangan, 1: skala kerusakan 1-5%, 3: 6-12%, 5: 13-25%, 7: 26- 50%, 9: > 50%
penyakit  HDB  (Tabel  2).  Kondisi  cuaca  dengan  curah hujan,  jumlah  hari  hujan,  dan  kelembaban  udara  yang tinggi  di  lapangan  selama  penelitian  sangat  mendukung perkembangan Xoo (Tabel 3). Aktivitas agens hayati yang diaplikasikan  tidak  cukup  optimal  untuk  mengendalikan Xoo sehingga penyakit HDB meluas.
Komponen  produksi  bobot  total  gabah  dan  bobot gabah bernas dengan kadar air gabah 13.8% (gabah kering giling)  tidak  berbeda  nyata  pada  semua  perlakuan  (Tabel 4).  Produksi  gabah  bernas  setara  dengan  produksi  benih. Pengisian  benih  padi  dipengaruhi  oleh  tingkat  keparahan penyakit  HDB  (Rajarajeswari  dan  Muralidharan,  2006), dan apabila penularan terjadi pada saat tanaman berbunga maka gabah tidak terisi penuh bahkan hampa (Sudir et al. ,
2012). Biomatriconditioning meningkatkan produksi gabah bernas paling tinggi terhadap kontrol (17.8%). Pemanfaatan rhizobakteri Bacillus dan Pseudomonas sebagai  agens hayati telah dikenal dapat meningkatkan produksi  karena mampu  meningkatkan  nutrisi  tersedia  dalam  tanah  serta mengendalikan  penyakit  tanaman  (Egamberdiyeva,  2007; Khan et al ., 2009; Zhang et al. , 2010). Semua  perlakuan  agens  hayati  tidak  nyata meningkatkan  bobot  1,000  butir  dan  daya  berkecambah benih, namun nyata meningkatkan indeks vigor benih hasil produksi  dibandingkan  kontrol  atau matriconditioning + streptomisin sulfat 0.2% (Tabel 5). Vigor benih dipengaruhi oleh  berbagai  faktor,  salah  satunya  saat  masih  berada di  tanaman  induk  (Ilyas,  2012).  Indeks  vigor  benih
Parameter Bulan November 2014 Desember 2014 Januari 2015 Februari 2015 Maret 2015 Suhu ( o C) Pukul 07.00 24.1 24.2 23.3 22.9 23.2 Pukul 13.00 31.5 30.4 28.6 28.3 29.8 Pukul 18.00 25.5 26.4 25.9 25.9 26.2 Rata-rata 26.3 26.3 25.2 25.0 25.6 Minimal 22.9 23.5 22.8 22.0 22.3 Maksimal 32.6 31.6 30.2 29.8 31.4 Jumlah hari hujan 25.0 20.0 30.0 26.0 28.0 Curah hujan (mm) 698.0 161.0 361.0 411.0 494.0 Kelembaban relatif (%) 83.0 82.0 87.0 85.0 85.0
Tabel 3.  Rata-rata suhu harian, kelembapan udara relatif, curah hujan, dan jumlah hari hujan di Kebun Percobaan Muara Balai Besar Padi, Bogor, periode November 2014-Maret 2015 a a Sumber: BMKG Stasiun Klimatologi Darmaga, Bogor
Perlakuan Bobot total gabah (g per rumpun) Bobot gabah bernas (g per rumpun) Persentase bobot gabah bernas (%) Peningkatan gabah bernas terhadap kontrol (%) 1) Kontrol 33.9 30.1 88.6abc 0.0 BsM 36.6 31.5 85.9c 4.9 BM 38.9 35.4 91.1a 17.8 RA 35.0 30.4 86.7bc 1.1 SD 35.0 31.7 90.3a 5.4 BM + RA 34.2 30.2 88.2abc 0.3 BM + SD 37.7 33.1 87.9abc 10.1 RA + SD 35.6 32.0 90.0a 6.6 BM + RA + SD 38.5 34.3 89.2ab 14.2 Koefisien keragaman (%) 11.5 12.1 1.87
Tabel 4. Pengaruh aplikasi agens hayati terhadap komponen produksi tanaman padi
Keterangan:  BsM = matriconditioning + bakterisida streptomisin sulfat 0.2%, BM = biomatriconditioning + B. subtilis 5/B + P. diminuta , RA  =  perendaman  akar  bibit  sebelum  pindah  tanam  dengan B.  subtilis 5/B  + P.  diminuta ,  SD  =  penyemprotan  daun  di lapangan dengan Aeromonas sp. F112. Angka yang diikuti huruf yang berbeda menunjukkan perbedaan nyata berdasarkan DMRT pada α = 5%. Peningkatan gabah bernas terhadap kontrol = (produksi gabah bernas perlakuan-produksi gabah bernas kontrol)/produksi gabah bernas kontrol x 100%. 1) = tidak dilakukan uji F
menunjukkan kemampuan benih untuk tumbuh lebih cepat. Menurut  Marcos-Filho  (2015),  kemampuan  benih  untuk berkecambah  dengan  cepat  merupakan  informasi  vigor benih  yang  dapat  diketahui  lebih  awal  dan  merupakan indikator penting kualitas fisiologi benih yang lebih sensitif dibandingkan  daya  berkecambah.  Penelitian  Santorum et al . (2013) dan Bajpai et al. (2015) pada benih kedelai dan kacang  tanah  menunjukkan  bahwa  indeks  vigor  memiliki korelasi  yang  tinggi  dengan  daya  tumbuh  di  lapangan. Perlakuan agens hayati B. subtilis 5/B, P. diminuta A6 dan Aeromonas sp.  F112  dalam  proses  produksi  di  lapangan diduga dapat meningkatkan vigor benih hasil produksi.
Populasi Xoo terbawa benih pada perlakuan kontrol, matriconditioning +  bakterisida,  serta  semua  metode aplikasi agens hayati tidak berbeda nyata (Tabel 5). Hal ini disebabkan karena tingkat kejadian dan keparahan penyakit HDB tanaman tidak berbeda nyata pada semua perlakuan karena  Xoo  dapat  menginfeksi  benih  secara  sistemik (Agarwal  dan  Sinclair,  1996).  Bakteri  Xoo  ditemukan pada benih yang dipanen dari tanaman padi terserang HDB (Zamzami et al. , 2014).
Keberhasilan aplikasi agens hayati di lapangan dibatasi oleh  faktor  ekologi  yang  mempengaruhi  kemampuan bertahan dan aktivitas agens hayati tersebut. Permasalahan umum  penelitian  PGPR  ( plant  growth  promoting rhizobacteria ) adalah kesulitan dalam memonitor kerapatan sel  bakteri  yang  diintroduksi  untuk  mengkonfirmasi efektivitas  inokulasi  yang  dilakukan    (Martínez-Viveros et  al. ,  2010;  Saini et  al., 2015).  Sementara  itu,  paparan sinar  ultra  violet  dan  dinamika  tingkat  kelembaban  area filosfer  merupakan  permasalahan  aplikasi  agens  hayati melalui daun (Efri et al. , 2009). Menurut Cummings (2009)
serta Ahemad  dan  Kibret  (2014),  aplikasi  agens  hayati  di lapangan seringkali memberikan hasil yang tidak konsisten dibandingkan  pengujian  skala  laboratorium  atau  rumah kaca.  Hal  ini  disebabkan  karena  lingkungan  biotik  dan abiotik sangat berpengaruh terhadap aktivitas agens hayati. Penelitian di lapangan adalah tahap yang harus dilakukan untuk  menguji  efektivitas  agens  hayati  pada  kondisi lingkungan sebenarnya.

## KESIMPULAN
Biomatriconditioning + B. subtilis 5/B  + P. diminuta A6 memberikan hasil yang setara dengan matriconditioning +  steptomisin  sulfat  0.2%  dan  efektif  meningkatkan  daya tumbuh benih. Aplikasi biomatriconditioning + B. subtilis 5/B  + P. diminuta A6 memberikan peningkatan produksi benih paling tinggi dibandingkan perlakuan lainnya. Semua metode  aplikasi  agens  hayati  belum  mampu  memacu pertumbuhan tanaman, mengendalikan hawar daun bakteri dan  meningkatkan  produksi  benih  secara  optimal,  namun meningkatkan indeks vigor benih hasil produksi.

## DAFTAR PUSTAKA
Agarwal,  V.K.,  J.B.  Sinclair.  1996.  Principles  of  Seed Pathology 2 nd . CRC Press. Florida. US.
Agustiansyah,  S.  Ilyas,  Sudarsono,  M.  Machmud.  2010. Pengaruh perlakuan benih secara hayati pada benih padi  terinfeksi Xanthomonas  oryzae pv. oryzae terhadap  mutu  benih  dan  pertumbuhan  bibit.  J.
Agron. Indonesia 38:185-191. Perlakuan Bobot 1,000 butir (g) Indeks vigor (%) Daya    berkecambah (%) Populasi Xoo terbawa benih ( cfu g -1 ) Kontrol 28.8 72.7b 84.3 4.6 x 10 6 BsM 28.9 75.7b 84.3 1.9 x 10 6 BM 29.5 81.7a 87.7 2.3 x 10 6 RA 29.0 81.0a 87.0 1.5 x 10 6 SD 29.3 80.7a 86.7 1.5 x 10 6 BM + RA 29.1 81.7a 85.3 1.8 x 10 6 BM + SD 29.0 81.7a 90.7 2.1 x 10 6 RA + SD 28.9 82.0a 88.7 2.2 x 10 6 BM + RA + SD 29.5 84.0a 89.7 2.0 x 10 6 Koefisien keragaman (%) 1.8 3.5 3.5 3.42 2) Tabel 5. Pengaruh aplikasi agens hayati terhadap mutu benih padi hasil produksi di lapangan
Keterangan:  BsM = matriconditioning + bakterisida streptomisin sulfat 0.2%, BM = biomatriconditioning + B. subtilis 5/B + P. diminuta , RA  =  perendaman  akar  bibit  sebelum  pindah  tanam  dengan B.  subtilis 5/B  + P.  diminuta ,  SD  =  penyemprotan  daun  di lapangan dengan Aeromonas sp. F112. Angka yang diikuti huruf yang berbeda menunjukkan perbedaan nyata berdasarkan DMRT pada α = 5%. Benih merupakan campuran gabah bernas dari 30 rumpun contoh pada masing-masing unit percobaan. Analisis bobot 1,000 butir berdasarkan 8 x 100 butir, indeks vigor dan daya berkecambah berdasarkan 4 x 100 butir, dan Xoo terbawa benih 10 g benih per unit percobaan. 2) = hasil transformasi log x
Agustiansyah,  S.  Ilyas,  Sudarsono,  M.  Machmud. 2013a.  Karakterisasi  rizobakteri  yang  berpotensi mengendalikan  bakteri Xanthomonas  oryzae  pv. oryzae dan  meningkatkan  pertumbuhan  tanaman padi. J. HPT Tropika . 13:42-51.
Agustiansyah,  S.  Ilyas,  Sudarsono,  M.  Machmud.  2013b. Perlakuan benih dengan agen hayati dan pemupukan P untuk meningkatkan pertumbuhan tanaman, hasil, dan mutu benih padi. J. Agron. Indonesia 41:98-104.
Ahemad, M., M. Kibret. 2014. Mechanisms and applications of  plant  growth  promoting  rhizobacteria:  Current perspective. J. King Saud Univ – Sci. 26:1-20.
Bajpai, R., P. Singh, P.D. Singh. 2015. Study on seed vigour and their correlation to field emergence in groundnut ( Arachis  hypogaea L.)  genotypes.  Indian  J.  Res. 4:455-457.
Choudhary, D.K., B.N. Johri. 2009. Interactions of Bacillus spp. and  plants  with  special  reference  to  induced systemic resistance (ISR). Microbiological Research. 164:493-51.
Cummings,  S.P.  2009.  The  application  of  plant  growth promoting  rhizobacteria  (PGPR)  in  low  input  and organic cultivation of graminaceous crops: potential and problems. Environ. Biotechnol. 5:43-50.
Efri,  J.  Prasetyo,  R.  Suharjo.  2009.  Skrining  dan  uji antagonisme  jamur Trichoderma  harzianum yang mampu bertahan di filosfer tanaman jagung. J. HPT Tropika. 9:121-129.
Egamberdiyeva,  D.  2007.  The  effect  of  plant  growth promoting bacteria on growth and nutrient uptake of maize in two different soils. Appl. Soil Ecol . 36:184- 189.
Glick,  B.  2012. Plant  growth-promoting  bacteria: mechanisms and applications. [review]. Scientifica. 2012:1-15.
Ilyas, S. 2006. Seed treatments using matriconditioning to improve vegetable seed quality [review] . Bul. Agron. 34:124-132.
Ilyas, S. 2012. Ilmu dan Teknologi Benih: Teori dan hasil- hasil penelitian. Penerbit IPB Press. Bogor.
[IRRI] International Rice Research Institute. 2009. Bacterial Blight  [Internet].  26  Juni  2009;  [diunduh  tanggal 26  Februari  2014].  Tersedia  pada:  http://www. knowledgebank.irri.orgericeproductionPDF_&_ Docsfs_bacterial_blight.
Kerkeni, A., M. Daarni-Remadi, N. Tarchoun, M. B. Khedher. 2008.  Effect  of  bacterial  isolates  obtained  from animal manure compost extracts on development of Fusarium oxysporum f. sp. radicis-lycopersici . Asian J. Plant Pathol. 2:15-23.
Khan,  A.A.,  G.  Jilani,  M.S.  Akhtar,  S.M.S.  Naqvi,  M. Rasheed.  2009.  Phosphorus  solubilizing  bacteria: occurence,  mechanisms  and  their  role  in  crop production. J. Agric. Biol. Sci . 1:48-58.
Khan,  A.A.,  J.D.  Maguire,  G.S.  Abawi,  S.  Ilyas.  1992. Matriconditioning  of  vegetable  seeds  to  improve stand establishment in early field plantings. J. Amer. Soc. Hort. Sci. 117:4147.
Khodar,  S.A.,  S.  Ilyas,  C.  Budiman.  2016.  Efektivitas penyemprotan  daun  dengan  agens  hayati  untuk meningkatkan  pertumbuhan  tanaman  dan  produksi benih  padi  bermutu.  J.  Agron.  Indonesia  44:141- 146.
Lizansari,  K.N.  2013.  Perlakuan  benih  dan  perendaman akar bibit dengan agens hayati untuk mengendalikan serangan Xanthomonas  oryzae pv. oryzae serta meningkatkan pertumbuhan tanaman padi di rumah kaca. Skripsi. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Marcos-Filho, J. 2015. Seed vigor testing: An overview of the past, present and future perspective. Sci. Agric. 72:363-374.
Martínez-Viveros,  O.,  M.A.  Jorquera,  D.E.  Crowley,  G. Gajardo, M.L. Mora. 2010. Mechanisms and practical considerations  involved  in  plant  growth  promotion by rhizobacteria. J. Soil Sci. Plant Nutr. 10:293-319.
Rajarajeswari, N.V.L., K. Muralidharan. 2006. Assessments of  farm  yield  and  district  production  loss  from bacterial leaf blight epidemics in rice. Crop Protection 25:244-252.
Saini,  P.,  V.  Khanna,  M.  Gangwar . 2015.  Mechanisms  of plant  growth  promotion  by  Rhizobacteria.  J.  Pure Appl. Microbiol. 9:1163-1177.
Santorum,  M.,  L.H.P.  Nobrega,  E.G.  de  Souza,  D.  dos Santos, W.  Boller,  M.M.  Mauli.  2013.  Comparison of test for analysis of vigor and viability in soubean seeds and their relationship to field emergence. Acta Scientiarum. 35:83-92.
Singh,  J.S.,  V.C.  Pandey,  D.P.  Singh.  2011.  Efficient  soil microorganisms:  A  new  dimension  for  sustainable agriculture  and  environmental  development. Agric. Ecosyst. Environ. 140:339-353.
Sudir,  B.,  Nuryanto,  T.S.  Kadir.  2012.  Epidemiologi,
patotipe,  dan  strategi  pengendalian  penyakit  hawar daun  bakteri  pada  tanaman  padi.  Iptek  Tanaman Pangan 4:79-87.
Zamzami, A., S. Ilyas, M. Machmud. 2014. Perlakuan agens hayati untuk mengendalikan hawar daun bakteri dan
meningkatkan  produksi  benih  padi  sehat.  J. Agron.
Indonesia 42:1-8. Zhang,  S.,  T.L.  White,  M.C.  Martinez,  J.A.  McInroy,
J.W.  Kloepper,  W.  Klassen.  2010.  Evaluation  of plant  growth-promoting  rhizobakteri  for  control  of Phytophthora  blight  on  squash  under  greenhouse conditions. Biol. Control 53:129-135.