## AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK METANOL DARI DAUN SOYOGIK ( Saurauia Bracteosa DC.)
Marfel G. D. Muaja 1) , Max R. J. Runtuwene 1) , Vanda S. Kamu 1)
Program Studi Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sam Ratulangi, Manado muajaglen@gmail.com , max_runtuwene@yahoo.com , vandakamu05@gmail.com

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mempelajari  akivitas  antioksidan  dari  ekstrak  metanol  daun Soyogik  ( Saurauia  Bracteosa DC .).  Daun  Soyogik  diekstraksi  dengan  metode  maserasi menggunakan pelarut metanol. Ekstrak pekat kemudian dilakukan pengujian aktivitas antioksidan dengan  metode  DPPH.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  metanol  daun  Soyogik memiliki nilai IC 50 sebesar 0,16 ppm.
Kata Kunci : Saurauia Bracteosa DC ., Ekstrak Metanol, Antioksidan, Nilai IC 50 .

## ANTIOXIDANT ACTIVITY OF METHANOL EXTRACT
FROM SOYOGIK ( Saurauia Bracteosa DC.) LEAVES

## ABSTRACT
This  research  aims  to  study  on  the  antioxidant  activity  of  methanol  extract  from  Soyogik (Saurauia Bracteosa DC .) leaves. Soyogik leaves extracted by maceration method using methanol. Concentrated  extract  then  testing  the  antioxidant  activity  by  DPPH  method.  The  results  showed that the methanol extract of leaves Soyogik have IC 50 value of 0.16 ppm.
Keywords : Saurauia Bracteosa DC ., methanol extract, Antioxidant, IC 50 value.

## PENDAHULUAN
Radikal  bebas  merupakan  molekul yang kehilangan elektron, sehingga molekul tersebut  menjadi  tidak  stabil  dan  selalu berusaha  mengambil  elektron  dari  molekul atau  sel  lain.  Untuk  mencapai  kestabilan molekul,  radikal  bebas  akan  bereaksi dengan molekul disekitarnya untuk memperoleh pasangan elektron disekelilingnya. Dampak reaktivitas senyawa  radikal  bebas  dapat  menyebabkan kerusakan  sel  atau  jaringan,  penyakit autoimun,  penyakit  degeneratif,  hingga kanker  (Sadikin,  2001).  Oleh  karena  itu, tubuh  memerlukan  substansi  penting,  yakni antioksidan yang dapat membantu melindungi  tubuh  dari  serangan  radikal bebas.
Antioksidan merupakan senyawa atau molekul  yang  dapat  mencegah  terjadinya proses  oksidasi  yang  disebabkan  oleh radikal  bebas.  Antioksidan  dikelompokan dalam  bentuk  yaitu:  sintetik  dan  alami. Sekarang  ini,  antioksidan  sintetik  dibatasi
penggunaannya akibat adanya kekhawatiran terhadap efek samping yang mungkin dapat terjadi (Winarsi, 2007). Kekurangan antioksidan sintetik menjadikan antioksidan alami sebagai pilihan utama dalam menangkal radikal bebas.
Salah satu tumbuhan yang berpotensi sebagai sumber antioksidan adalah Soyogik. Soyogik  (Saurauia  bracteosa  DC)  adalah tanaman  dalam  Famili Actinidiaceae yang merupakan  endemik  Indonesia, kebanyakan tanaman ini tersebar di Pulau Jawa dan Bali. Kadji et  al .,  (2013)  menyatakan  daun Soyogik  memiliki  aktivitas  antioksidan yang  sangat  kuat.  Nilai  IC 50 dari  ekstrak maserasi  dengan  etanol  70%  sebesar  38,01 ppm. Hasil ini didukung dengan kandungan senyawa yang terdapat dalam daun Soyogik yaitu:  senyawa  fenolik,  steroid,  flavonoid, dan  saponin.  Pada  penelitian  kali  ini, peneliti ingin meneliti ekstrak daun Soyogik dengan  menggunakan  pelarut  yang  lain. Oleh  karena  itu,  peneliti  tertarik  meneliti lebih lanjut mengenai aktivitas  antioksidan pada daun Soyogik.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Kimia Organik dan Laboratorium Biokimia Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Universitas  Sam  Ratulangi,  Manado,  serta di Laboratorium Penelitian Kimia
Universitas  Padjajaran,  Bandung,  selama empat  bulan  dari  bulan  Agustus  sampai November tahun 2016.

## Alat
Peralatan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  oven,  neraca  analitik, Alumunium  foil ,  alat  penggiling,  ayakan  65 mesh,  desikator,  labu  pemisah,  pemanas, satu  set stirrer ,  satu  set  alat vacum  rotary evaporator , mikropipet
Eppendorff
Research 1000  µL,  alat-alat  gelas pyrex , dan  spektrofotometer  UV-Vis  (Shimadzu 1800 series).

## Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  daun  Soyogik  yang diperoleh  dari  Desa  Silian,  Kecamatan Silian Raya, Kabupaten Minahasa Tenggara.
Bahan  kimia  yang  digunakan  dalam peneitian  ini  adalah  kertas  saring,  akuades, dan  bahan  kimia  berkualifikasi  teknis  yang didestilasi  kembali,  seperti:  metanol,  serta bahan  kimia  lainnya  seperti: 1,1-difenil-2- pikrihidrazil (DPPH).

## Peparasi Sampel
Sampel dikeringkan selama 1 minggu.  Setelah  itu,  dimasukkan  ke  dalam oven  bersuhu  40 0 C  hingga  benar-benar kering. Setelah dikeringkan sampel diblender  hingga  berbentuk  serbuk  lalu diayak dengan ayakan 65 mesh .

## Uji Kadar Air
Wadah kosong sebagai media sampel ditimbang  dan  dicatat  beratnya  sebagai  A. Kemudian  sampel  yang  telah  dipreparasi ditimbang  sebanyak  2  gram  (B),  dan dipanaskan dalam oven dengan temperature pemanasan  105 0 C  selama  tiga  jam.  Setelah tiga  jam,  sampel  dimasukkan  ke  dalam desikator selama 30 menit. Kemudian, berat
akhir  sampel  wadah  ditimbang  dan  dicatat beratnya  sebagai  C.  Perhitungan  kadar  air menggunakan rumus sebagai berikut:
𝐾𝑎𝑑𝑎𝑟 𝑎𝑖𝑟 = (𝐴 + 𝐵) − 𝐶 𝐵 𝑥 100%
Keterangan: A= Berat wadah B = Berat sampel sebelum dipanaskan C  =  Berat  sampel  +  wadah  setelah dipanaskan

## Ekstraksi
Sebanyak  4  kg  serbuk  Soyogik dimasukkan  ke  dalam  wadah,  kemudian dimaserasi  dengan  pelarut  metanol  selama 3 x 24 jam. Setelah itu, sampel disaring dan filtrat yang diperoleh ditampung. Sementara itu, residu hasil penyaringan diekstraksi lagi sebanyak  dua  kali  seperti  cara  sebelumnya. Filtrat yang diperoleh dievaporasi menggunakan rotary  evaporator pada  suhu 40 0 C sampai diperoleh ekstrak pekat.

## Uji Aktivitas Antioksidan
Larutan  sampel  dan  DPPH  dibuat terlebih  dahulu.  Ekstrak  sampel  dilarutkan dalam  metanol  dengan  konsentrasi  5  mg ekstrak/50  mL  metanol  (100  µg/mL)  dan larutan  DPPH  dibuat  konsentrasi  0,4  mM (4  mg  DPPH/  25  mL  metanol).  Larutan sampel yang telah dibuat diencerkan dengan berbagai  variasi  konsentrasi  dengan  total volume  5  mL  dan  dimasukkan  ke  dalam tabung reaksi sebagai larutan uji dan dibuat juga  untuk  blanko.  Selanjutnya,  ke  dalam tabung reaksi larutan uji ditambahkan 1 mL larutan  DPPH  dengan  selang waktu penambahan 30 detik dan diinkubasi selama 30  menit  dalam  kondisi  gelap.  Setelah  30 menit,  blanko  dan  larutan  uji  diukur absorbansinya dengan menggunakan spektrofotometer  UV-Vis  pada  panjang gelombang  517  nm.  Nilai  absorbansi  dari setiap  variasi  konsentrasi  dicatat  dan dihitung % inhibisi dan nilai IC 50 . Pengujian dilakukan  sebanyak  dua  kali.  Perhitungan nilai  IC 50 dinyatakan  dengan  persamaan regresi  linear  dan  perhitungan  %  inhibisi menggunakan rumus sebagai berikut:
% Inhibisi = Akontrol−𝐴𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝐴𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 × 100 %
Keterangan: A kontrol = Absorbansi  DPPH A sampel = Absorbansi DPPH + sampel

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Uji Kadar Air
Pengujian  kadar  air,  bertujuan  untuk menentukan kadar air dari sampel.
Kandungan  kadar  air  dari  sampel yang  baik  yaitu  dibawah  10%,  karena  akan tahan  lama  dalam  penyimpanan.  Apabila sampel  memiliki  kadar  air  yang  besar, ditakutkan  sampel  akan  menghasilkan mikroorganisme  yang  dapat  mengubah konformasi senyawa kimia yang terkandung pada  sampel  tersebut.  Pengujian  kadar  air pada  daun  soyogik  dilakukan  tiga  kali pengulangan, dengan hasil yang ditunjukkan pada Tabel 1. Tabel 1. Kadar Air Daun Soyogik Pengujian ke- Kadar Air (%) I 7,83 II 7,68 III 7,57 Rata-rata 7,69
Dari  tabel  1  diperoleh  hasil  yang menunjukkan  bahwa  kadar  air  pada  daun soyogik memiliki rata-rata 7,69%.

## Ekstraksi Daun Soyogik
Serbuk kering daun soyogik
sebanyak  4  kg  yang  telah  disaring  dengan ayakan 65 mesh dimaserasi dengan menggunakan  pelarut  metanol  sebanyak  20 L  secara  berulang-ulang,  yaitu  3  x  24  jam.
Pengulangan  yang  dilakukan  ini  bertujuan untuk  mengoptimalisasi  proses  ektraksi maserasi  dalam  mengikat  senyawa  yang terkadung dalam sampel. Dalam
pengulangan  proses  ini  dilihat  apakah pelarut  metanol  tidak  lagi  berwarna  jika dicampurkan dengan sampel, maka senyawa dalam  sampel  telah  terlarut  dalam  pelarut. Metode  ekstraksi  maserasi  dipilih  karena metode  ini  tidak  menggunakan  pemanasan dalam  prosesnya  sehingga    mencegah terjadinya  kerusakan  pada  senyawa  yang tidak  tahan  panas  dan  dikarenakan  belum diketahuinya  karakter  senyawa.  Dalam
penggunaan metanol sebagai pelarut dikarenakan  pelarut  ini  dapat  melarutkan senyawa  polar  maupun  non-polar  sehingga sangat baik mengekstrak senyawa metabolit sekunder  yang  terkandung  pada  sampel yang digunakan (Cordell, 1981).

## Aktivitas Antioksidan
Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan  untuk  mengetahui  nilai  IC 50 dari sampel.IC 50 adalah konsentrasi
penghambatan antioksidan setengah
maksimal  pada  radikal  bebas.  Pengujian dilakukan  terhadap  ekstrak  metanol  sampel dan fraksi-fraksi hasil partisi. Pada pengukuran antioksidan ekstrak methanol di didapatkan hasil seperti pada gambar 1.
Gambar  1.  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak metanol Daun Soyogik
Gambar  1  menunjukkan  %  inhibisi meningkat  seiring  dengan  peningkatan konsentrasi.  Untuk  melihat  nilai  IC 50 esktrak  metanol  dibuat  persamaan  regresi seperti pada gambar 2.
Gambar 2. Kurva Persamaan Regresi Linier Ekstrak Metanol Daun Soyogik
0 20 40 60 80 100 0 1 2 3 4 % in ib is i Konsentrasi (µg/mL) y = 11.623x + 48.102 R² = 0.8247 0 20 40 60 80 100 0 1 2 3 4 5 % In h ib isi Konsentrasi (µg/mL) Pengujian Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol
Dari  hasil  yang  diperoleh,  pengujian aktivitas antioksidan ekstrak metanol memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  baik dengan  nilai  IC 50 sebesar  0,16  µg/mL. Pehitungan  nila  IC 50 dihitung menggunakan rumus  persamaan  regersi.      Dari  nilai  IC 50 yang diperoleh ekstrak metanol mempunyai aktivitas  antioksidan  yang  sangat  baik. Pernyataan  ini  didukung  oleh  Brand- William  (1995)  yang  menyatakan  zat  yang mempunyai  aktivitas  antioksidan  tinggi, akan mempunyai nilai IC 50 yang tinggi. Hasil  perhitungan  nilai  IC 50 ekstrak metanol  ini  juga  lebih  baik  dibandingkan dengan nilai IC 50 yang diperoleh menggunakan  pelarut  etanol  70%  sebesar
38,01  ppm  pada  penelitian  yang  dilakukan oleh Kadji (2013).
Hasil  nilai  IC 50 ekstrak metanol yang tinggi  didukung  dengan  penelitian  yang dilakukan  oleh  Maukar et  al., (2013) menyatakan  kandungan  fenolik,  flavonoid dan  tanin  ekstrak  metanol  berturut-turut adalah  43,06  mg/kg,  6,52  mg/kg  dan  17,91 mg/kg.
Berdasarkan  hasil  kandungan  fenolik yang  diperoleh,  diduga  bila  kandungan senyawa  fenolik  didalam  sampel  tinggi aktivitas  antioksidannya  juga  akan  tinggi. Hal ini didukung oleh Sudjadi dan Rohman dalam Ukieyanna (2012) yang mengungkapkan  adanya  inti  aromatis  pada senyawa fenolik dapat mereduksi fosfomolibdat fosfotungstat menjadi molibdenum yang ditandai dengan terbentuknya  warna  biru.  Hasil  kandungan flavonoid  berbanding  terbalik  dengan  hasil kandungan  fenolik.  Hasil  ini  menunjukkan bahwa  kandungan  fenolik  dari  setiap ekstrak  tidak  selalu  bersumber  pada golongan  senyawanya.  Ukieyanna  (2012) menyatakan  beberapa  senyawa  metabolit sekunder  maupun  metabolit  primer  yang dihasilkan  oleh  tumbuhan  dapat  menjadi senyawa  antioksidan  ataupun  senyawa pengganggu  aktivitas  antioksidan.  Pada hasil  kandungan  tanin  menunjukan  bahwa hasil  yang  diperoleh  memiliki  nilai  yang kecil,  hal  ini  disebabkan  pelarut  yang digunakan  bersifat  pelarut  polar  yaitu metanol sedangkan senyawa tanin termasuk dalam  golongan  polifenol  yang  pada umumnya larut pada pelarut non-polar.

## KESIMPULAN
E kstrak  metanol  memiliki  nilai  IC 50 0,16 ppm. Hasil nilai IC 50 ini didukung hasil penelitian  yang  dilakukan  oleh  Maukar (2013)  yang  menyatakan  bahwa  kandungan flavonoid,  fenolik,  dan  tanin  ekstrak metanol  berturut-turut  adalah  43,06  mg/kg, 6,52 mg/kg dan 17,91 mg/kg.

## DAFTAR PUSTAKA
Andarwulan,  N.,  H.  Wijaya.,  dan  D.  T. Cahyono.1996.Aktivitas  Antioksidan dari  Daun  Sirih  ( Piper  betle L.). Teknologi  dan  Industri  Pangan . 7:
29-30.
Apak,  R.,  K.  Guclu  ,  B.  Demirata.,  M. Ozyurek, S. E. Celik., B. Bektasoglu., K.  I.  Beker.,  and  D.  Ozyurt.  2007. Comparative  Evaluation  of  Various Total  Antioxidant  Capacity  Assays Applied to Phenolic Compounds with CUPRAC  Assay. Molecules . 12:
1496-1547.
Basset,  J., R.C.  Denny.,  G.  H. Jeffrey.,  dan
J. Mendham. 1994. Buku Ajar Vogel: Kimia Analisis Kuantitatif Anorganik. Edisi keempat. Terjemahan  A.  Handayana  P.  dan  L.
Setyono.  Buku  Kedokteran  EGC, Jakarta.
Brand-William, W., M. E. Cuvelier., and C. Berset.  1995.  Use  of  a  Free  Radical Method  to  Evaluated  Antioxidant Activity. Lebensmittel-wissenchaft
und Technologie . 28: 25-30.
Cordell,  A.  F.  1981. Introduction  to Alkaloids . John Wiley  And Sons  Inc, New York.
Day,  R.  A.,  dan  A.  L.  Underwood.  2002.
Analisis  Kimia  Kuantitatif.  Edisi keenam.  Terjemahan  Iis  Sopyan. Erlangga, Jakarta.
Fessenden,  R.  J.,  dan  J.  S.  Fessenden.
1986a.  Kimia  Organik.  Edisi  ketiga. Jilid  1.  Terjemahan  A.  Handayana  P. Erlangga, Jakarta.
Fessenden,  R.  J.,  dan  J.  S.  Fessenden.
1986b.  Kimia  Organik.  Edisi  ketiga. Jilid  2.  Terjemahan  A.  Handayana  P. Erlangga, Jakarta.
Handa, S.  S., S. P. S. Khanuja., G.  Longo.,
and D. D. Rakesh. 2008 Technologies  for  Medichal  and Aromatic  Plants. United  Nations Industrial Development Organization and  the  International  Centre  for Science and High Technology. 5: 21- 54.
Harborne,  J.B.  1996.  Metode  Fitokimia. Terbitan Kedua. Terjemahan Kokasih Padmawinata  dan  Iwang  Soediro. ITB, Bandung.
Jadhav.  S.  S.,  A.  D.  Nimbalkar.,  Kulkarni., and  D.  L.  Mandhavi.  1996. Food Antioxidants:
Technological,
Toxological,  and  Health  Perspective .
Edition  D.  L.  Mandhavi,  S.  S. Deshpande  and  D.  K.  Salunkhe. Marcel Dekker, New York.
Kadji  M.  H.,  M.  R.J.  Runtuwene.,  dan  G. Citraningtyas.  2013.  Uji  Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan dari Ekstrak Etanol Daun Soyogik ( Saurauia  bracteosa  DC ). Jurnal Pharmacon . 3: 13-17.
Karyadi, E. 1997. Antioksidan: Resep Awet Mudat  dan  Umur  Panjang  From  Uji Aktivitas Antiradikal Dengan Metode DPPH  dan  Penetapan  Kadar  Fenol Total  Ekstrak  Daun  Keladi  Tikus (Thyponium divaricatum (Linn) Decne). Pharmacon . 6: 51-56.
Maukar M. A., M. R. J. Runtuwene., dan J. Pontoh.  2013.  Analisis  Kandungan Fitokimia Dari Uji Toksisitas Ekstrak Metanol  Daun  Soyogik  ( Sauraula Bracteosa Dc) Dengan Menggunakan Metode  Maserasi. Jurnal  Ilmiah Sains . 13: 98-101.
Mojo,  T.,  J.  Abidjulu.,  dan  M.  R.  J. Runtwene.  2016.  Kajian  Toksisitas Dari  Fraksi  Heksana,  Etil  Asetat  dan Etanol  Daun  Soyogik  ( Saurauia bracteosa DC). Jurnal  Mipa  Unsrat Online . 5: 40-43.
Mokoginta, E. P., M. R. J. Runtuwene., dan F.  Wehantouw.  2013.  Pengaruh Metode Ekstraksi  Terhadap  Aktivitas
Penangkal  Radikal  Bebas  Ekstraak Metanol  Kulit  Biji  Pinang  Yaki ( Areca Vestiaria Giseke ). Pharmacon . 2: 109-113.
Prayoga  G.  2013.  Fraksinasi,  Uji  Aktivitas Antioksidan  dengan  Metode  DPPH dan  Identifikasi  Golongan  Senyawa Kimia  dari  Ekstrak  Teraktif  Daun Sambang Darah ( Excoecaria cochinchinensis Lour). Pharmacon . 5: 41-48.
Sadikin,  M.  2001.  Pelacakan  Dampak Radikal Bebas terhadap Makromolekul.  Kumpulan  Makalah Pelatihan: Radikal Bebas dan Antioksidan dalam Kesehatan. Fakultas Kedokteran UI. Jakarta.
Silalahi, R. M. 2010. Karakterisasi Simplisia,  Skrining  Fitokimia  Dan Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak Etanol Daun Fraksi Bunga Tumbuhan Brokoli (Brassicaoleracea L .  var.  botrytis L .) .    [skripsi].  Fakultas  Farmasi Universitas Sumatera Utara, Medan.
Suryanto,  E.  2012.  Fitokimia  Antioksidan. Putra Media Nusantara, Surabaya.
Tamat,  S.  R.,  T.  Wikanta.,  dan  L.  S. Maulina. 2007. Aktivitas Antioksidan dan Toksisitas Senyawa Bioaktif dari Ekstrak  Rumput  Laut  Hijau Ulva reticulata Forsskal. Jurnal  Ilmu Kefarmasian Indonesia . 5: 31-36.
Ukieyanna, E. 2012. Aktivitas Antioksidan, Kadar  Fenolik,  dan  Flavonoid  Total
Tumbuhan Suruhan ( Peperomia Pellucida L. Kunth) [skripsi]. FMIPA Institut Pertanian, Bogor.
Wungkana,  I.,  E.  Suryanto.,  dan  L. Momuat. 2013. Aktivitas Antioksidan dan  Tabir  Surya  Fraksi  Fenolik  dari Limbah  Tongkol  Jagung  ( Zea  mays L.). Pharmacon . 2: 149-155.
Zuhra,  C.  F.,  J.  B.  Tarigan.,  dan  H.
Sitohang. 2008. Aktivitas
Antioksidan  Senyawa  Flavonoid  dari Daun  Katuk  ( Saurapus  androgunus (L)  Merr.). Jurnal  Biologi  Sumatera . 3: 7-10.