Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)*
1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com

## Abstrak
Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3
Abstract Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020)

## PENGARUH PENANGANAN SAMPAH DENGAN SISTEM PENGOMPOSAN TERHADAP BEBAN TEMPAT PEMROSESAN AKHIR SAMPAH
Rahmawati Yustikarini 1 *, Prabang Setyono 2 , Wiryanto 3
1. Pascasarjana Ilmu Lingkungan, Universitas Sebelas Maret, Jl. Ir. Sutami 36 A Surakarta 57126, Jawa Tengah, Indonesia
2,3. Dosen Universitas Sebelas Maret, Jl. Ir. Sutami 36 A Surakarta 57126, Jawa Tengah, Indonesia *Email: ririen.yustika@gmail.com Paper Submit: 23 Austus 2017, Paper publish: September 2020
Abstrak - Keterbatasan lahan TPA merupakan masalah penting di Kabupaten Magetan yang harus diselesaikan mengingat semakin sulitnya mendapatkan lahan yang baru. Dengan semakin bertambahnya jumlah penduduk maka timbulan sampah yang masuk TPA Milangasri pun semakin bertambah sehingga akan semakin memperpendek umur TPA. Dengan ditetapkannya Peraturan Daerah No. 1 Tahun 2016 tentang Pengolahan Sampah Organik dengan Sistem Pengomposan maka apabila bisa diterapkan secara optimal akan mengurangi jumlah sampah yang masuk ke TPA. Komposisi sampah Kota Magetan 52,59 % terdiri dari sampah organik yang terbagi ke dalam sampah organik basah 34,73 % dan organik kering 17,86 %. Dengan tingginya jumlah sampah organik maka akan memberi peluang untuk dapat dilakukan pengomposan. Pada penelitian ini saat tidak dilakukan pengomposan maka pada Tahun 2025 volume sampah terkompaksi atau beban landfill sebesar 129.030,57 m 3 dan luas lahan TPA yang dibutuhkan sebesar 16.129 m 2 . Saat dilakukan pengomposan maka beban landfill berkurang menjadi 83.869.87 m 3 dan luas lahan TPA yang dibutuhkan adalah 10.484 m 2. Pengaruh sistem pengomposan bisa mengurangi beban TPA sehingga lahan yang dibutuhkan lebih sedikit dan dapat membuat umur TPA menjadi lebih lama.
Kata kunci : Sampah, Komposisi, Pengomposan, TPA.

## Pendahuluan
Kabupaten Magetan terdiri dari 18 Kecamatan dengan luas wilayah 688,85 Km 2 dan jumlah penduduknya adalah 677.703 orang. Area pelayanan persampahan masih sebatas wilayah perkotaan dengan jumlah penduduk 45.391 orang (Bappeda, 2016). Dengan semakin meningkatnya jumlah penduduk maka akan semakin meningkat timbulan sampah yang dihasilkan sehingga mengakibatkan laju timbulan sampah yang masuk ke TPA pun semakin meningkat. Saat pengelolaan persampahan masih menggunakan sistem end of pipe maka kebutuhan lahan TPA akan semakin meningkat. Dari area pelayanan persampahan, timbulan sampah yang masuk ke TPA Milangasri saat ini sebesar 125 m 3 /hari (Dinas Lingkungan Hidup, 2017).
Salah satu permasalahan di dalam pengelolaan persampahan di Kabupaten Magetan adalah keterbatasan lahan untuk Tempat Pemrosesan Akhir. Langkah yang dilakukan Pemerintah Daerah melalui pemberdayaan masyarakat dalam penanganan sampah secara umum belum mampu mengurangi timbulan sampah ke TPA. Permasalahan sampah menjadi lebih komplek  karena pemerintah belum mengoptimalkan proses pengolahan sampah di TPA dengan pemanfaatan teknologi persampahan  sehingga umur TPA menjadi lebih pendek. Seiring dengan perkembangan Kabupaten Magetan, keberadaan sampah harus ditangani secara serius karena apabila tidak dikelola dengan baik akan mengakibatkan terjadinya perubahan keseimbangan lingkungan dan pencemaran lingkungan yaitu tanah, air dan udara. Pengelolaan sampah menggunakan
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018). Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020)
metode pendekatan yang menitikberatkan pada pengelolaan sampah ketika sampah tersebut dihasilkan yaitu berupa pengumpulan, pengangkutan dan pembuangan ke Tempat Pemrosesan Akhir (TPA) akan semakin memberikan beban yang berat kepada TPA mengingat luas lahan yang semakin terbatas. Lahan TPA Milangasri yang dibangun tahun 1997 seluas 2,5 Ha sudah overload sehingga dibuka TPA baru seluas 1,6  Ha pada Tahun 2011 dan saat ini kondisi luas TPA tinggal 5500 m 2 yang diperkirakan akan habis pada tahun 2019 sementara lahan TPA lanjutan hingga saat ini belum juga diperoleh. Untuk itu diperlukan upaya optimalisasi penggunaan TPA dalam rangka mengamankan lingkungan dari pencemaran dan memperpanjang masa pakai TPA. Permasalahan perkotaan yang sangat masif adalah permasalahan sampah mengingat dampak dari sampah tersebut sangat kompleks mulai dari estetika, kesehatan, etika hingga kerugian ekonomi dan lingkungan yang berujung  pada bencana lingkungan (Setiyono, 2015). Hal ini yang menunjukkan bahwa pengelolaan sampah harus dilakukan perencanaan mulai dari sumber hingga pengelolaan akhir untuk mendukung upaya perlindungan dan pengelolaan lingkungan hidup. Dalam hal ini pengelolaan sampah menyangkut azas tanggung jawab pemerintah dalam melestarikan dan menciptakan keberlanjutan untuk mencapai keserasian dan kesimbangan ekosistem.
Menurut Tchobanoglous,et.al.(1993) sampah adalah bahan buangan padat atau semi padat yang dihasilkan dari aktivitas manusia atau hewan yang dibuang karena tidak diinginkan atau tidak digunakan kembali.  Sampah dapat menimbulkan pencemaran tanah, air dan udara. Sampah yang sukar membusuk akan mengakibatkan pencemaran tanah, sedangkan sampah yang dibakar akan menghasilkan gas-gas yang dapat mencemari udara dan air rembesan hasil pembusukan sampah akan menyebabkan pencemaran air. Salim (2010) mengatakan bahwa permasalahan sampah merupakan masalah umum yang dikarenakan pertambahan penduduk yang diikuti oleh proses urbanisasi
dan perubahan pola konsumsi dari bahan alami ke bahan buatan manusia dan teknologi. Seiring dengan perkembangan Kabupaten Magetan, keberadaan sampah harus ditangani secara serius karena apabila tidak dikelola dengan baik akan mengakibatkan terjadinya perubahan keseimbangan lingkungan dan pencemaran lingkungan yaitu tanah, air dan udara. Paradigma pengelolaan sampah yaitu kumpul- angkut-buang hanya akan menambah beban TPA. Untuk itu perlu dilakukan pengembangan teknologi pengelolaan sampah. Berdasarkan data dari Kementerian Lingkungan Hidup bahwa rata-rata komposisi sampah terbesar di Indonesia adalah sampah organik sebesar 60%. Sampah organik basah dapat dijadikan sumber daya sebagai pupuk kompos melalui teknologi pengomposan. Sedangkan organik kering seperti kertas, kayu dan anorganik  seperti plastik, kaca, besi dapat dimanfaatkan kembali melalui mekanisme 3R (Reuse, Reduce, Recycle) Undang-undang No. 18 Tahun 2009 tentang Pengelolaan Sampah mengamanahkan proses pengelolaan sampah tuntas dari sumbernya hingga Tempat Pemrosesan Akhir. Undang-undang tersebut didukung dengan turunnya Peraturan Pemerintah  No. 81 Tahun 2012 yang didalamnya mengatur aspek teknis pengelolaan sampah di TPA dan  implementasi pelaksanaannya diatur di dalam Peraturan Menteri. Pemerintah Kabupaten Magetan telah menerbitkan Peraturan Daerah Kabupaten Magetan Nomor 1 Tahun 2016 tentang Pengolahan Sampah Organik dengan sistem pengomposan. Dengan implementasi perda ini diharapkan penerapan teknologi pengomposan akan  mampu mereduksi sampah pada Tempat Pemrosesan Akhir serta mendorong pemerintah daerah dan segenap masyarakat dalam melakukan proses pengomposan, sehingga sampah organik dapat diubah menjadi sumber daya yang bernilai ekonomi.
Berdasarkan Hasil Inventarisasi Data Sampah Kabupaten Magetan Tahun 2016 oleh Badan Lingkungan Hidup Kabupaten Magetan bahwa komposisi sampah Kota Magetan terdiri dari sampah anorganik 47,4 % dan
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)* 1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com
Abstrak Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3
Abstract Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020)
sampah organik sebesar 52,59 %. Sampah organik terbagi ke dalam sampah organik basah 34,73 % dan organik kering 17,86 %. Dengan tingginya komposisi sampah organik basah menunjukkan pengurangan sampah dapat dilakukan dengan sistem pengomposan sebagai implementasi Peraturan Daerah yang sudah ditetapkan. Pengomposan merupakan langkah awal yang bisa dilakukan masyarakat untuk menangani sampah pada sumbernya.

## Metode Penelitian
Untuk mencapai tujuan dan sasaran dari penelitian diperlukan metode penelitian untuk mempermudah penulis dalam melakukan evaluasi beban landfill pada TPA Milangasri. Tahapan kegiatan dimulai dari persiapan dan perancangan studi yang akan dilakukan, pengenalan wilayah studi dan permasalahan yang akan diteliti, kebutuhan data yang diperlukan, referensi yang berkaitan dengan permasalahan penelitian, metoda analisis yang digunakan serta jadwal kegiatan yang relevan.

## 1.  Subjek Penelitian
Penelitian dilaksanakan di Tempat Pemrosesan Akhir (TPA) Sampah Milangasri yang berlokasi di Desa Milangasri Kecamatan Panekan Kabupaten Magetan. TPA Milangasri merupakan satu-satunya tempat pengelolaan akhir sampah yang berada di wilayah Kabupaten Magetan dengan area pelayanan wialayah perkotaan atau Kecamatan Magetan.

## 2.  Desain Penelitian
Penelitian dilakukan dengan cara deskriptif kualitatif dengan mengumpulkan dan mengkompilasi  data di lapangan serta melakukan analisa situasi yang sedang terjadi, hubungan antar variabel, perbedaan antar fakta dan pengaruh terhadap suatu kondisi. Penelitian ini juga mengacu pada studi kuantitatif dan studi komparatif yang meliputi pengumpulan data, menganalisis data, meginterprestasi data, dan diakhiri dengan sebuah kesimpulan yang mengacu pada penganalisisan data tersebut.

## 3.  Teknik Pengumpulan Data
Sumber data meliputi data primer dan data sekunder :
a.    Data Primer
Data Primer merupakan data yang diperoleh dari penelitian secara langsung dengan melakukan pengamatan lapangan maupun pengukuran - Survei dan pengamatan lapangan
-  Melakukan perhitungan volum sampah yang masuk ke TPA. Data ini dikumpulkan dengan cara melakukan pengamatan di lapangan terhadap truk atau angkutan sampah pada jembartan timbang selama 7 hari berturut-turut. Hal ini dilakukan untuk mengetahui rata-rata sampah yang masuk dan diproses di TPA.
- Data luas TPA dan Lahan TPA yang belum terisi, selain data dari Badan Lingkungan Hidup, peneliti akan melakukan pengukuran di lapangan.
b.    Data Sekunder Data sekunder adalah data yang diperoleh dari pihak lain yang telah melakukan penelitian sebelumnya yang diakui secara umum akan keakuratan datanya atau mewakili populasi yang diteliti. Data sekunder diperoleh dari berbagai sumber.
-  Data kependudukan  10 tahun terakhir untuk  jumlah penduduk 5 tahun ke depan pada daerah pelayanan sampah
-  Komposisi sampah diperoleh dari Badan Lingkungan Hidup -  Data penanganan sampah pada sumbernya melalui mekanisme 3R -  Data TPA Milangasri Kabupaten Magetan yang diperoleh dari Dinas Lingkungan Hidup yang meliputi luas lahan, rencana tinggi penimbunan serta peta lahan TPA Milangasri
-  Data yang berkaitan dengan aspek kelembagaan pengelola yang meliputi struktur organisasi, jumlah personil dan peralatan.
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018). Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020) ISSN 2460-1365

## 4.  Analisis Data
Analisis dilakukan terhadap data teknis, meliputi analisis terhadap data primer dan sekunder yang didapat, yaitu : a.    Analisis proyeksi jumlah penduduk Dalam menentukan metode proyeksi yang akan digunakan diperlukan data-data pertumbuhan jumlah penduduk 8 tahun ke depan sebagai dasar untuk menentukan timbulan sampah hingga prediksi 8 tahun pada area pelayanan. Rata-rata pertumbuhan penduduk diperoleh dari Data Dasar Kabupaten Magetan Tahun 2016.
b.    Analisis densitas sampah pengukuran densitas atau berat jenis sampah dengan melakukan sampling jenis kendaraan pengangkut sampah yang kemudian ditimbang pada jembatan timbang untuk mengetahui berat kosong kendaraan pengangkut sampah dan pada saat terisi sampah. Selanjutnya densitas sampah dihitung dengan membagi berat sampah dengan volume kendaraan pengangkut. Sampling dilakukan sebanyak 6 kali.
c.    Analisis proyeksi timbulan sampah Dengan memperhatikan prediksi jumlah penduduk pada area pelayanan ditunjang dengan data  laju timbulan sampah per kapita sebesar 2,5 liter/orang/hari sesuai SNI 19-3983-1995 dan perhitungan densitas sampah TPA Milangasri maka akan dapat dihitung prediksi timbulan sampah yang dihasilkan oleh penduduk hingga tahun 2025.
d.  Analisis timbulan sampah terkompaksi pada landfill Hasil komposisi sampah menjadi dasar analisis sampah terkompaksi pada landfill. Dilakukan perbandingan antara sampah yang masuk landfill dengan tanpa penanganan dan melalui sistem
pengomposan. Analisis ini menghasilkan volume landfill dan lahan yang dibutuhkan hingga Tahun 2025 sehingga akan diketahui efisiensi lahan TPA.

## Hasil dan Pembahasan

## 1. Timbulan Sampah Perkotaan
Area pelayanan persampahan Kabupaten Magetan adalah  wilayah perkotaan terdiri dari 14 Kelurahan dengan  jumlah penduduk sebesar 47.695 orang (Bappeda Kabupaten Magetan 2016). Namun demikian wilayah pelayanan persampahan baru mencangkup 9 (sembilan) kelurahan  yaitu Magetan, Selosari, Tawanganom, Kepolorejo, Kebonagung, Tambran, Mangkujayan, Bulukerto dan Sukowinangun. Berdasarkan kategori jumlah penduduk  Kabupaten Magetan berdasarkan SNI 19-3983-1995 merupakan kota kecil sehingga dengan kriteria pada tabel 1 dapat  diprediksi jumlah penduduk dan jumlah timbulan sampah hingga tahun 2025.

## Tabel 1. Besaran Timbulan Sampah Berdasarkan
Klasifikasi Kota Klasifikasi Kota Volume (L/Org/Hr) Berat (Kg/Org/Hr) Kota Sedang (100.000-500.000 jiwa) 2,75 - 3,25 0,7 – 0,8 Kota Kecil (20.000-100.000 jiwa) 2,5 – 2,75 0,625 – 0,70

## Sumber : SNI 19-3983-1995
Berdasarkan Bappeda Kabupaten Magetan Tahun 2016 maka dapat diketahui bahwa tingkat pertumbuhan penduduk Kota Magetan adalah sebesar 0,26%.  Dengan menggunakan metode geometri maka didapat hasil perhitungan prediksi jumlah penduduk dan volume sampah hingga tahun 2025.
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)* 1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com
Abstrak Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3

## Abstract
Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020)
Tabel 2. Prediksi Jumlah Penduduk dan volume sampah Tahun 2017 – 2025 Tahun Jumlah Penduduk (orang) Volume sampah (m 3 ) 2017 45.508 43.187 2018 45.626 43.299 2019 45.743 43.410 2020 45.861 43.522 2021 45.980 43.635 2022 46.098 43.747 2023 46.217 43.860 2024 46.336 43.973 2025 46.456 44.087 Sumber : Hasil perhitungan, 2017
Berdasarkan SNI 19-3964-1995 tentang metode pengambilan dan pengukuran contoh timbulan sampah dan komposisi sampah perkotaan maka penentuan timbulan sampah dilakukan dengan cara mengukur/mencatat secara langsung terhadap jumlah sampah
yang masuk ke TPA. Pencatatan dilakukan berdasarkan ritasi kendaraan pengangkut sampah yang masuk serta volume masing- masing kendaraan selama bulan Maret 2017. Data diperoleh dari jembatan timbang mulai tanggal 1 Maret 2017 sampai 23 Maret 2017. Dari hasil perhitungan rata-rata  data tersebut maka jumlah timbulan sampah setiap hari yang masuk ke TPA Milangasri adalah 21.309 Kg. Selanjutnya dilakukan pengukuran densitas atau berat jenis sampah dengan melakukan sampling jenis kendaraan pengangkut sampah yang kemudian ditimbang pada jembatan timbang untuk mengetahui berat kosong kendaraan pengangkut sampah dan pada saat terisi sampah.
Dari hasil pengukuran densitas sampah yang masuk ke TPA Milangasri, dapat diketahui bahwa rata-rata densitas sampah yang masuk ke TPA adalah 286 kg/m 3 seperti pada perhitungan pada tabel 3.
Tabel 3. Hasil Pengukuran Densitas/Berat Jenis Sampah yang Masuk ke TPA Milangasri
No Hari Tanggal No.Pol. Kendaraan Pengangkut Jenis Kendaraan Vol. (m 3 ) Berat di Jembatan Timbang (Kg) Berat Jenis (Kg/m 3 ) Berat Isi Kondisi Kosong Selisih 1 I 1/3/2017 AE 8005 NP Dump Truk 6 4.660 3.050 1.610 268,33 2 1/3/2017 AE8006 NP Arm Roll 8,5 5.820 3.210 2.610 307,06 3 II 3/3/2017 AE8005 PP Dump truck 6 5.000 3.160 1.840 306,67 4 3/3/2017 AE8006 NP Arm Roll 8,5 5.790 3.260 2.530 297,65 5 III 6/3/2017 AE8084 NP Dump Truck 6 4.760 2.950 1.820 303,33 6 6/3/207 AE8006NP Arm Roll 8,5 5.150 3.170 1.980 232,94 Jumlah 1.715,98 Densitas/ Berat Jenis rata-rata 286,00 Sumber : Hasil Perhitungan, 2017
Berdasarkan data tersebut maka dapat dihitung jumlah timbulan sampah Kota Magetan yang masuk ke TPA Milangasri. Jumlah volume sampah yang masuk ke TPA tiap hari:
21.309 Kg /  286 Kg/m 3 =  74,51 m 3
Jumlah timbulan sampah Perkotaan Magetan tiap hari berdasarkan Tabel 3 adalah : = 45.508 orang x 2,6 l/orang/hari
= 118.320,8 l/hari = 118,32 m 3 /hari
Sehingga prosentase pelayanan  dapat dihitung sebagai berikut :
74,51 m 3 x 100%   =   63 % 118,32 m 3
Berdasarkan perhitungan di atas, maka dapat diketahui pada kondisi eksisting pelayanan persampahan terhadap sampah yang akan
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018). Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020)
dilakukan pengolahan di TPA masih sebesar 63%. Hal ini masih di bawah target Rencana Strategis Dinas Lingkungan Hidup Kabupaten Magetan yang seharusnya pada Tahun 2017 sudah bisa mencapai 75%.  Dari hasil analisis kelembagaan, kondisi ini disebabkan karena keterbatasan sarana dan prasarana pengangkutan serta minimnya jumlah personil institusi yang bertanggungjawab di bidang pengelolaan persampahan. Sementara peran masyarakat dalam ikut berperan pada bank sampah juga masih minim. Selain itu upaya pengurangan sampah pada sumbernya juga belum optimal. Hal ini bisa dilihat hanya beberapa kelompok bank sampah yang aktif menangani sampahnya sehingga perlu mendapat perhatian pemerintah bahwa pemberdayaan masyarakat dalam menangani sampah pada sumbernya harus terus ditingkatkan.
Berdasarkan Rencana Strategi Badan Lingkungan Hidup Kabupaten Magetan Tahun 2014-2018 target peningkatan area pelayanan sebesar maksimal 5% setiap tahun.  Sejalan dengan Kebijakan dan Strategi Nasional Pengelolaan Sampah oleh Kementerian Lingkungan Hidup dan Kehutanan, dimana target kinerja pengelolaan sampah nasional disusun dalam rentang Tahun 2015 - 2025, sehingga pada penelitian ini juga akan dilakukan prediksi terhadap beban TPA hingga Tahun 2025.
Tabel 4. Volume Sampah  TPA Tahun 2017-2025
Thn Volume Sampah (m 3 ) Prosen Pelayanan (%) Volume Sampah TPA Volume (m 3 ) Berat (Kg) 2017 43.187 63 27.207,93 7.781.469 2018 43.299 65 28.144,10 8.049.213 2019 43.410 70 30.387,23 8.690.748 2020 43.522 75 32.641,75 9.335.539 2021 43.635 80 34.907,69 9.983.600 2022 43.747 85 37.185,11 10.634.942 2023 43.860 90 39.474,05 11.289.579 2024 43.973 95 41.774,56 11.947.524 2025 44.087 100 44.086,67 12.608.788 Sumber : Hasil Perhitungan, 2017
Berdasarkan hasil perhitungan pada Tabel 4 bahwa seiring dengan bertambahnya jumlah timbulan sampah yang masuk ke TPA dan meningkatnya area pelayanan pada perkotaan, maka volume sampah yang masuk ke TPA pun semakin meningkat. Pada Tahun 2017 volume yang masuk ke TPA sebesar 27.207,93 m 3 dan terus meningkat setiap tahun sehingga pada Tahun 2025 menjadi sebesar 44.086,67 m 3 . Untuk mengetahui beban landfill pada TPA maka dilakukan perhitungan terhadap volume sampah dikali densitas/berat jenis sampah hasil perhitungan pada tabel 3.

## 2.  Komposisi Sampah Perkotaan
Berdasarkan Hasil Inventarisasi Data Sampah Kabupaten Magetan Tahun 2016 oleh Badan Lingkungan Hidup Kabupaten Magetan maka komposisi sampah di kabupaten Magetan khususnya perkotaan didominasi oleh sampah organik.
Tabel 5. Komposisi Sampah Produksi Sampah dalam 1 hari Perkotaan Magetan Berat Sampah (Kg) Prosentase Sampah (%) Sampah Organik Basah 44,12 34,73 Sampah Organik Kering 22,69 17,86 Sampah Plastik 11,56 9,10 Sampah Anorganik Non Plastik 48,65 38,3 Total Berat/Jumlah 127,02 100,00
Sumber : Laporan Akhir Inventarisasi Data Sampah
Kabupaten Magetan (2016)
Dari Tabel 5 dapat diketahui bahwa dari area pelayanan sampah yang meliputi 9 (sembilan) kelurahan di Kecamatan Magetan memiliki komposisi sampah organik basah sebesar 34,73 % dan organik kering sebesar 17,86 % dimana mempunyai peluang untuk dilakukan proses pengomposan sebelum sampah diolah di TPA. Hal ini menunjukkan bahwa komposisi terbesar sampah Perkotaan Magetan adalah sampah organik yang dapat diubah menjadi kompos.
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)* 1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com

## Abstrak
Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3

## Abstract
Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020)

## 3.  Beban TPA dengan pengolahan Sampah Eksisting (Tanpa Pengomposan)
Sampah yang masuk ke TPA Milangasri berasal dari TPS yang berada di pemukiman maupun prasarana umum di wilayah perkotaan. Prosentase pengelolaan sampah dengan pengurangan pada sumbernya (mekanisme 3R)  belum memiliki andil dalam mengurangi sampah di TPA Milangasri. Pengelolaan sampah di Kabupaten Magetan masih menggunakan pendekatan end of pipe, dimana sistem pengelolaan sampah meliputi pengumpulan, pengangkutan dan pembuangan sampah ke TPA. Pada akhirnya TPA menjadi tumpuan tempat pengolahan  sampah  sehingga beban TPA semakin bertambah.
Luas TPA yang semula 1,6 Ha dan kini tersisa 5.500 M 2 menjadi fokus dari penelitian ini. Seberapa jauh sisa lahan tersebut bisa dioptimalkan karena diprediksi Tahun 2018 akan habis dan lahan lanjutan belum tersedia. Dari hasil pengukuran di lapangan bahwa volume lahan untuk landfill di TPA Milangasri yang masih tersisa adalah sebagai berikut:
Luas Lahan penimbunan =  5.500 m 2 Tinggi timbunan dari dasar =  8 m Volume yang belum terisi =  44.000 m 3
Volume tanah penutup (10%) = 4.400 m 3
Volume total yang belum terisi = 39.600 m 3
Menurut Damanhuri (1995) bahwa densitas sampah terkompaksi di TPA adalah 600 kg/m 3 – 800 kg/m 3 .
Pada perhitungan volume sampah terkompaksi pada landfill TPA Milangasri diasumsikan 700 Kg/m 3 . Maka dapat dihitung volume sampah terkompaksi dari Tahun 2017 - 2025 serta akan diketahui masa pakai TPA saat sampah tidak dilakukan penanganan sebelum masuk TPA.  Bila diketahui:
- Timbulan sampah = 2,6 l/org/hari - Densitas sampah lepas = 286 Kg/m 3
- Densitas sampah terkompaksi = 700 Kg/ m 3 maka :
- Volume sampah yang diangkut ke TPA : Jumlah penduduk x Timbulan Sampah x Tingkat Pelayanan x Densitas sampah lepas
Dimana:
- Berat sampah yang diangkut ke TPA = Volume sampah x 286 Kg/m 3 - Volume sampah terkompaksi =
Berat sampah 700 Kg/m 3
Tabel 6 merupakan volume landfill saat sampah tidak dilakukan penanganan sebelum masuk TPA. Dengan meningkatnya timbulan sampah yang masuk dari tahun ke tahun maka volume landfill meningkat secara signifikan dan tentu saja lahan yang dibutuhkan menjadi besar. Untuk menjawab permasalahan pengelolaan sampah di TPA Milangasri maka peneliti mencoba membuat skenario berdasarkan target pengurangan sampah hingga Tahun 2025. Berikut prediksi  beban TPA dengan pendekatan end of pipe atau volume landfill saat tidak dilakukan penanganan terlebih dahulu terhadap sampah yang masuk ke TPA.
Tabel 6. Prediksi volume landfill TPA tanpa pengomposan Tahun 2017- 2025
Tahun Sampah yang diangkut ke TPA Volume sampah terkompaksi (m 3 ) Volume sampah terkompaksi Komulatif (m 3 ) Volume (m 3 ) Berat (Kg) 2017 27.207,93 7.781.468,84 11.116,38 11.116,38 2018 28.144,10 8.049.213,12 11.498,88 22.615,26 2019 30.387,23 8.690.747,79 12.415,35 35.030,61 2020 32.641,75 9.335.539,20 13.336,48 48.367,10 2021 34.907,69 9.983.599,89 14.262,29 62.629,38 2022 37.185,11 10.634.942,42 15.192,77 77.822,16 2023 39.474,05 11.289.579,43 16.127,97 93.950,13 2024 41.774,56 11.947.523,58 17.067,89 111.018,02 2025 44.086,67 12.608.787,56 18.012,55 129.030,57 Sumber: Hasil Perhitungan, 2017
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018). Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020) ISSN 2460-1365

## 4.  Beban TPA dengan Sistem Pengomposan
Dengan ditetapkannya Peraturan Daerah Kabupaten Magetan Nomor 1 Tahun 2016 Tentang Pengolahan Sampah Organik dengan Sistem Pengomposan, maka mendorong Pemerintah Daerah dan segenap masyarakat dalam melakukan proses pengomposan, sehingga sampah organik dapat diubah menjadi sumber daya yang bernilai ekonomi. Penerapan prinsip 3R dalam peluang pengelolaan sampah juga dapat memberikan manfaat ekonomi bagi masyarakat, salah satunya adalah melalui usaha pengomposan (Subandrio,et.al, 2012). Menurut Damanhuri (1995) bahwa usaha pengomposan sampah organik sangat potensial untuk dikembangkan karena komposisi sampah organik di beberapa kota di Indonesia sangat besar. Keberhasilan sistem pengomposan akan sangat membantu upaya pengurangan sampah di TPA Milangasri dan membantu meningkatkan kualitas lingkungan dan melindungi sumber daya air, tanah dan udara.
Dengan semakin terbatasnya lahan TPA maka permasalahan semakin rumit karena sulit mencari lahan baru sebagai kelanjutan saat masa pakai TPA habis. Pencarian lahan TPA sering menimbulkan konflik sosial akibat resistensi masyarakat terhadap keberadaan TPA. Hal ini ditambah dengan biaya pengelolaan sampah
yang akan semakin meningkat seiring dengan semakin meningkatnya timbulan sampah.
Melihat kenyataan ini maka pengurangan sampah harus dapat dilaksankan. Prosentase sampah organik basah di Kota Magetan sebesar 35% menjadi perhatian untuk dilakukan pengomposan.
Sesuai Laporan Agenda 21 Indonesia, Strategi Nasional Untuk Pembangunan Berkelanjutan bahwa pengelolaan sampah untuk pengomposan 30 – 40% dan daur ulang sampah (anorganik) mencapai 15 – 25%. Pengomposan dapat dilakukan pada sumbernya oleh masyarakat, pada TPS maupun TPA dimana sudah terdapat peralatan komposting. Sesuai kebijakan pada Kementerian Lingkungan Hidup  diharapkan hingga Tahun 2025 sampah organik basah bisa terolah mejadi kompos. Pengomposan dapat dilakukan pada sumbernya oleh masyarakat, pada TPS maupun TPA dimana sudah terdapat peralatan komposting. Diharapkan hingga Tahun 2019 sampah organik basah bisa terolah mejadi kompos. Sejalan dengan implementasi Perda tersebut dengan prinsip membuang sekaligus memanfaatkannya, sehingga dapat diartikan bahwa mengelola sampah sekaligus mendapatkan manfaat ekonomi dari pengelolaan sampah tersebut (Soma, 2010).
Tabel 7.  Prediksi volume Landfill dengan Pengomposan Tahun 2017-2025
Tahun Sampah yang diangkut ke TPA Pengomposan (Reduksi 35%) Volume sampah masuk TPA Volume sampah terkompaksi (m 3 ) Volume sampah terkompaksi Komulatif (m 3 ) Volume (m 3 ) Berat (kg) 2017 27.207,93 7.781.468,84 2.723.514,09 5.057.954,74 7.225,65 7.225,65 2018 28.144,10 8.049.213,12 2.817.224,59 5.231.988,53 7.474,27 14.699,92 2019 30.387,23 8.690.747,79 3.041.761,73 5.648.986,06 8.069,98 22.769,90 2020 32.641,75 9.335.539,20 3.267.438,72 6.068.100,48 8.668,71 31.438,61 2021 34.907,69 9.983.599,89 3.494.259,96 6.489.339,93 9.270,49 40.709,10 2022 37.185,11 10.634.942,42 3.722.229,85 6.912.712,57 9.875,30 50.584,40 2023 39.474,05 11.289.579,43 3.951.352,80 7.338.226,63 10.483,18 61.067,58 2024 41.774,56 11.947.523,58 4.181.633,25 7.765.890,32 11.094,13 72.161,71 2025 44.086,67 12.608.787,56 4.413.075,65 8.195.711,92 11.708,16 83.869,87 Sumber : Hasil perhitungan, 2017
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)* 1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com

## Abstrak
Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3

## Abstract
Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020)
Berdasarkan komposisi sampah dan kajian penelitian sebelumnya dalam rangka mengurangi timbulan sampah di TPA Milangasri, maka peneliti mencoba melakukan skenario pelaksanaan system pemgomposan sebagaimana pada Tabel 7. Di dalam penelitian ini selanjutnya akan dikaitkan antara rencana target Pemerintah Daerah terhadap pengomposan dalam rangka mengurangi timbulan sampah di TPA untuk mengurangi beban TPA yang lahannya semakin sulit didapat.
Gambar 1. Perbandingan volume sampah pada landfill tanpa penanganan dan dengan system pengomposan.
Gambar tersebut diperoleh dari perhitungan sesuai Tabel 7 bahwa dengan sistem pengomposan sebesar 35% dari tahun 2017 hingga 2025 terhadap sampah organik maka  mampu mengurangi beban TPA.  Pada
Tahun 2017 terjadi penurunan volume landfill dari 11.116,38 m 3 menjadi 7.225,65 m 3 . Pada Tahun 2025 terdapat penurunaan kebutuhan lahan dari 16.129 m 2 menjadi 10.484 m 2 . Dengan demikian mekanisme pengomposan mampu mengurangi kebutuhan lahan di TPA dan meningkatkan efisiensi pengolahan sampah pada landfill sehingga kebutuhan lahan TPA menjadi lebih sedikit pada tahun 2025. Hal ini memberi dukungan bahwa pengurangan sampah melalui system pengomposan menjadi prioritas utama dalam pengelolaan sampah di Kabupaten Magetan sebagai tindak lanjut pelaksanaan Perda No. 1 Tahun 2016 tentang Pengelolaan Sampah Organik dengan Sistem Pengomposan.

## Simpulan
Keterbatasan lahan pada TPA Milangasri maka penerapan sistem pengomposan perlu dilakukan untuk mengurangi beban TPA dan dapat  memberikan solusi terhadap sulitnya mendapatkan lahan TPA lanjutan. Pada penelitian ini penanganan sampah organik melalui sistem pengomposan pada pengelolaan sampah di perkotaan Magetan mampu mengurangi beban TPA sehingga lahan yang dibutuhkan lebih sedikit dan dapat membuat umur TPA menjadi lebih lama.

## Daftar Pustaka
Badan Perencanaan Pembangunan Daerah Kabupaten Magetan. (2016). Data Dasar Kabupaten Magetan.
Badan Lingkungan Hidup. (2016). Laporan Akhir Inventarisasi Data Sampah Kabupaten Magetan.
Badan Standarisasi Nasional. (1994). Tata Cara Pemilihan Lokasi Tempat Pembuangan Akhir Sampah. SNI 19-3241-1994. LPMB. Bandung.
Badan Standarisasi Nasional. (1994). Metode Pengambilan dan Pengukuran Contoh Timbulan dan Komposisi Sampah Perkotaan. SNI 19-3964-1995. LPMB. Bandung.
Badan Standarisasi Nasional. (1994). Spesifikasi Timbulan Sampah Untuk Kota Kecil dan Kota Sedang di Indonesia. SNI 19-3983-1995. LPMB. Bandung.
Damanhuri, E. (1995). Teknik Pembuangan Akhir. Jurusan Teknik Lingkungan ITB. Bandung.
Delfianto. (2006). Evaluasi dan Optimalisasi Masa Pakai TPA Sungai Andok Kota Padang Panjang. Tesis, Institut Teknologi Sepuluh Nopember.
Davami, A., Moharamnejad, N. Monavari, S.M. 2014. An Urban Solid Waste Landfill Site
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018).
Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 2 (September 2020)
Evaluation Process Incorporating GIS in Local Scale Environment: A Case of Ahvaz City, Iran. Int. J. Environ. Res., 8(4):1011-1018, Autumn 2014 ISSN: 1735-6865
Departemen Pemukiman dan Prasarana wilayah, 2003. National Action Plan Bidang Persampahan. PT. Binatama Wirawredha Konsultan Gajah Mada Universitay Press, Yogyakarta.
Geng,Y., Tsuyoshi. F.,Chen. X.,  2009. Evaluation of innovative municipal solid waste management through urban symbiosis: a case study of Kawasaki . Journal homepage: www.elsevier.com/ locate/jclepro. Journal of Cleaner Production 18 (2010) 993-1000
Hadiwiyoto, S., 1993. Penanganan dan Pengelolaan Sampah. Yayasan Idayu. Jakarta.
Hanik,S.U, (2010). Evaluasi Pengelolaan Sampah di TPA Gunung Panggung Kabupaten Tuban Menuju Sistem Sanitary Landfill. Tesis, Institut Teknologi Sepuluh Nopember.
Ismeidi, Angreni, E., Titah, H. 2006, Evaluasi Sistem Pembuangan Akhir Sampah di TPA Ngadirejo Kota Wonogiri. Tesis, Prodi Pascasarjana Teknik Lingkungan. ITS. Surabaya.
Peraturan Pemerintah No. 81 Tahun 2012 tentang Pengelolaan Sampah Rumah Tangga dan Sampah Sejenis Sampah Rumah Tangga.
Peraturan Menteri Negara Lingkungan Hidup Nomor 13 Tahun 2012 tentang Pedoman Pelaksanaan Reduce, Reuse dan Recycle melalui Bank Sampah.
Peraturan Daerah No. 1 Tahun 2016 tentang Pengolahan Sampah Organik dengan Sistem Pengomposan.
Salim,E. (2010). Ratusan Bangsa Merusak Satu Bumi. Jakarta: Kompas Penerbit Buku.
Setyono,P. (2015). Cakrawala Memahami Lingkungan. Surakarta, Indonesia: Sebelas Maret University Press
Soma, Soekmana. (2010). Pengantar Ilmu Teknik Lingkungan Seri : Pengelolaan Sampah Perkotaan. Bogor, Indonesia : IPB Press.
Subandriyo, Anggoro,D., Hadiyanto (2012). Optimasi Pengomposan Sampah Organik Rumah Tangga Menggunakan Kombinasi Aktivator Em4 Dan Mol Terhadap Rasio C/N. Jurnal Ilmu Lingkungan UNDIP, Volume 10 issue 2:70-75.
Tchobanoglous,G.,Theisen,H.,Vigil,S., (1993). Integrated Solid Waste Management, Engineering Principles and management Issues. Mc. Graw Hill: Kogakusha, Ltd.
Undang-undang No. 18 Tahun 2008 tentang Pengelolaan Sampah.