## AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN BINAHONG TERHADAP PROPIONIBACTERIUM ACNES
Indarto 1* , Windy Narulita 2 , Bambang Sri Anggoro 3 , Aulia Novitasari 4
1,2,3,4 Universitas Islam Negeri Raden Intan Lampung, Indonesia
* Email : indarto@radeniantan.ac.id
Received: Mey 11 th , 2019. Accepted : June 29 th , 2019. Published : June 30 th , 2019

## Abstract
The  purpose  of  this  study  was  to  determine  whether  binahong  leaf  extract  can  inhibit  the  growth  of Propionibacterium acnes bacteria. This study was a laboratory experimental study using a completely randomized  design  (CRD)  with  five  treatments.  The  treatment  was  repeated  3  times  with  various concentrations of 20%, 40%, 60%, 80%, and 100%, clindamycin as a comparison and aquadest as a control. The binahong leaf extract was obtained from maceration of binahong leaves with methanol and  partitioned  using  ethyl  acetate,  then  tested  the  antibacterial  activity  against  Propionibacterium acnes  bacteria.  The  parameters  observed  were  the  diameter  of  the  zone  inhibiting  the  growth  of Propionibacterium acnes bacteria. Data analysis using Analysis of Variance (ANOVA). The result is known  that  binahong  leaf  extract  has  the  ability  to  inhibit  the  growth  of  Propionibacterium  acnes bacteria seen by the presence of inhibitory zones formed. The most effective concentration to inhibit the growth of Propionibacterium acnes bacteria is at a concentration of 100% at 9.00 mm in 24 hours and 11.20 mm in 48 hours.
Keywords : Binahong ( Anredera cordifolia) ; antibacterial ; Propionibacterium acnes ; acne

## Abstrak
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  apakah  ekstrak  daun  binahong  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri  Propionibacterium  acnes.  Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental laboratorium  dengan  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  lima  perlakuan. Perlakuan  diulang  sebanyak  3  kali  dengan  berbagai  macam  konsentrasi  dari  20%,  40%,  60%,  80%, dan 100%, serta klindamisin sebagai pembanding dan aquades sebagai kontrol. Ektrak daun binahong diperoleh  dari  maserasi  daun  binahong  dengan  pelarut  metanol  dan  dipartisi  dengan  menggunakan pelarut  etil  asetat,  kemudian  dilakukan  uji  aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri  Propionibacterium acnes. Parameter yang diamati adalah diameter zona hambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes. Analisis data menggunakan ANOVA ( Analysis of Variance ). Hasilnya diketahui bahwa ekstrak daun  binahong  memiliki  kemampuan  menghambat  pertumbuhan  bakteri  Propionibacterium  acnes terlihat  dengan  adanya  zona  hambat  yang  terbentuk.  Konsentrasi  yang  paling  efektif  menghambat pertumbuhan  bakteri  Propionibacterium  acnes  adalah  pada  konsentrasi  100%  sebesar  9,00  mm  pada waktu 24 jam dan 11,20 mm pada waktu 48 jam.
Kata Kunci: Binahong ( Anredera cordifolia) ; Antibakteri; Propionibacterium acnes ; Jerawat.

## PENDAHULUAN
Penyakit  kulit  merupakan  suatu  penyakit  yang  menyerang  pada  permukaan  tubuh, dan disebabkan oleh berbagai macam penyebab yang paling umum dan menginfeksi segala macam  usia.  Sebagian  pengobatan  penyakit  kulit  membutuhkan  waktu  yang  lama  untuk menyebabkan  efek.  Beberapa  makhluk  hidup  dapat  menyebabkan  penyakit  kulit,  seperti bakteri,  virus,  maupun  jamur.  Bakteri,  virus  dan  jamur  menginfeksi  kulit  sangat  umum terjadi  dan  dapat  merusak  kulit  tetapi  tidak  pernah  sampai  mematikan.  Jerawat  atau Acne
vulgaris merupakan  salah  satu  penyakit  kulit  yang  banyak  dijumpai  secara  global  pada remaja dan dewasa muda.
Jerawat atau acne vulgaris adalah penyakit peradangan kronik kelenjar pilosebasea yang  ditandai  dengan  munculnya  komedo,  papula,  pustul,  dan  nodul.  Organisme  utama yang  pada  umumnya  memberi  kontribusi  terhadap  terjadinya  jerawat  adalah Propionibacterium  acnes . Propionibacterium  acnes merupakan  mikroorganisme  utama yang  ditemukan  di  daerah  infra  infundibulum  dan  bakteri  ini  dapat  mencapai  permukaan kulit dengan mengikuti aliran sebum. Meningkatnya jumlah trigliserida dalam sebum akan meningkatkan  jumlah Propionibacteriumacnes ,  karena  trigliserida  dalam  sebum merupakannutrisi bagi Propionibacterium acnes. Propionibacterium acnes diduga berperan penting menimbulkan inflamasi pada acne vulgaris dengan menghasilkan faktor kemotaktik dan  enzim  lipase  yang  akan  mengubah  trigliserida  menjadi  asam  lemak  bebas,  serta menstimulasi aktivasi jalur klasik dan alternatif komplemen (Bramono & Indriatmi, 2015)
Pengobatan  jerawat  dilakukan  dengan  cara  menurunkan  produksi  sebum, menurunkan  inflamasi  pada  kulit,  memperbaiki  abnormalitas  folikel  dan  menurunkan jumlah koloni Propionibacterium  acnes atau  hasil  metabolismenya.  Pemberian  suatu  zat antibakteri  seperti  tetrasiklin  eritromisin,  dan  klindamisin  dapat  menurunkan  populasi bakteri Propionibacterium  acnes (H,  Cahyanto,  Sujarwo,  &  Lestari,  2015) . Penggunaan suatu  antibiotik  yang  berlebihan,  dapat  menyebabkan  meningkatnya  resistensi  bakteri terhadap  suatu  antibiotik  tertentu  (Roslizawaty,  Ramadani,  Fakhrurrazi,  &  Herrialfian, 2013)  Pengobatan  penyakit  infeksi  yang  disebabkan  bakteri  yang  resisten  terhadap antibiotik  memerlukan  produk  baru  yang  memiliki  potensi  tinggi.  Penelitian  zat  yang berkhasiat  sebagai  antibakteri  perlu  dilakukan  untuk  menemukan  produk  antibakteri  baru yang  berpotensi  untuk  menghambat  atau  membunuh  bakteri  yang  resisten  terhadap antibiotik dengan harga yang terjangkau salah satunya adalah obat-obatan tradisional(Umar, Krihariyani, & Mutiarawati, 2012).
Salah  satu  alternatif  yang  dapat  ditempuh  yaitu  memanfaatkan  zat  aktif pembunuh bakteri  yang  terkandung  dalam  tanaman  obat  binahong  dengan  nama  ilmiah Anredera cordifolia dari  famili Basellaceae (Silalahi,  Sari,  Siregar,  Sinaga,  &  Matari,  2016). Binahong  ( Anredera  cordifolia )  adalah  tanaman  obat  potensial  yang  dapat  mengatasi berbagai  jenis  penyakit.  Tumbuhan  ini  berasal  dari  Amerika  Selatan  dan  sudah  dikenal sebagai  tanaman  obat  di  negara  asalnya  semenjak  ratusan  tahun  yang  lalu.  Di  Indonesia sendiri  binahong  masih  baru-baru  ini  saja  dijadikan  obat  alternatif  untuk  berbagai  macam penyakit, baik penyakit ringan maupun penyakit yang berat. Daun binahong dengan pelarut etil  asetat,  petroleum  eter,  dan  etanol  70%  menunjukkan  bahwa  pada  daun  binahong mengandung  senyawa  flavonoid,  alkaloid,  saponin  dan  polifenol.  Ekstrak  daun  binahong pernah diujikan pada bakteri gram negatif yaitu bakteri Escherichia coli dengan konsentrasi 0%,  25%,  50%,  75%  dan  100%.  Hasil  uji  menunjukkan  bahwa  perasan  daun  binahong memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap Escherichia  coli secara  in  vitro.  Hasil  uji  juga menunjukkan  bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi  maka  akan  semakin  besar  daya  hambat terhadap  pertumbuhan  bakteri  dan  konsentrasi  paling  optimal  yang  dapat  menghambat adalah konsentrasi 100% (Ainurrochmah, Ratnasari, & Lisdiana, 2013)
Berdasarkan beberapa penelitian yang telah dilakukan sebelumnya  telah dilakukan beberapa penelitian yang membahas mengenai manfaat daun binahong (Ainurrochmah et al., 2013; Divadi & Yuliani, 2016; Faustina & Yuliani, 2015; Jazilah, Fasya, Ningsih, & Abtokhi,  2014;  Rimporok,  Kepel,  &  Siagian,  2015;  Umar  et  al.,  2012)  serta  beberapa penlitian  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri Propionibacterium  acnes (Aida, Suswati,  &  Misnawi,  2016;  Alfath,  Yulina,  &  Sunnati,  2013) Namun,  belum  adanya
penelitian yang menjelaskan penggunaan ekstrak dari daun binahong (AnrederaCordifolia) untuk menghambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes secara In Vitro .
Berdasarkan  penelitian  terdahulu,  keterbaruan  penelitian  ini  terletak  pada penjelasan  penggunaan  ekstrak  dari  daun  binahong (AnrederaCordifolia) untuk menghambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes secara In Vitro .  Maka, tujuan penelitian ini  adalah  untuk mengetahui apakah ekstrak daun binahong dapat menghambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes.

## METODE PENELITIAN
Metode penelitian  yang  digunakan adalah penelitian eksperimental laboratorik. Uji aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak  etil  asetat  daun  binahong  terhadap  bakteri Propionibacterim  acnes dilakukan  secara in  vitro menggunakan  metode  difusi  sumur dengan  penentuan  diameter  zona  hambatan.  Pengujian  antibakteri  disusun  dalam Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  uji  pada  konsentrasi  ekstrak  etil  asetat  daun binahong 20%, 40%, 60%, 80%, dan 100% serta digunakan aquades sebagai kontrol negatif dan  klindamisin  sebagai  kontrol  positif.  Perlakuan  diulang  sebanyak  3  kali  ulangan. Penelitian meliputi preparasi sampel, ekstraksi sampel, uji skrining fitokimia, sterilisasi alat dan  bahan,  pembuatan  media,  inokulasi  bakteri  uji,  serta  uji  efektivitas  antibakteri. Parameter  yang  diamati  dalam  penelitian  ini  adalah  diameter  zona  hambat  bakteri Propionibacterium  acnes pada  media Nutrien  Agar (NA)  yang  diberi  perlakuan  dengan masing-masing  konsentrasi  ekstrak  daun  binahong.  Pengukuran  diameter  zona  hambat pertumbuhan  bakteri  menggunakan  jangka  sorong.  Data  dianalisis  dengan  menggunakan ANOVA ( Analysis of Variance ).
Alat-  alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah, rotary  evaporator, lesung, saringan, tabung reaksi, rak tabung, cawan petri, mikro pipet, pipet ukur, kawat ose, gelas ukur,  kertas  saring,  autoklaf,  inkubator,  timbangan,  jangka  sorong,  dan  kamera.  Bahan- bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun binahong yang diperoleh dari Desa Purwodadi  Kecamatan  Gisting  Kabupaten  Tanggamus,  biakan  murni  bakteri Propionibacterium acnes yang diperoleh dari Politeknik Negri Lampung, aquades, medium Nutrien  Broth (NB),  medium Nutrien  Agar (NA),metanol, etil  asetat ,  HCl,  FeCl 3 ,  HgCl 2 , Mg, betadin dan klindamisin.
Sampel  berupa  daun  binahong  diperoleh  dari  Desa  Purwodadi  Kecamatan  Gisting Kabupaten Tanggamus. Daun yang dipilih harus daun yang segar dan sehat. Daun binahong lalu  dibersihkan  dan  dipotong  kecil-kecil,  kemudian  dikeringkan  dengan  cara  diangin- anginkan. Hasil pengeringan ini disebut dengan simplisia.

## Pembuatan Ekstrak
Sebanyak  300  gram  daun  binahong  kering  dibuat  ekstrak  dengan  menggunakan metode  maserasi.  Proses  maserasi  dilakukan  menggunakan  metanol.  Maserasi  dilakukan sebanyak  tiga  kali.  Ekstrak  metanol  yang  diperoleh  disaring,  dan  diperoleh  ekstrak  kasar sebanyak  500  mL.  Kemudian  ekstrak  kasar  tersebut  dipekatkan  dengan  menggunakan rotaryevaporator sehingga  diperoleh  ekstrak  kental(ekstrak  metanol)  sebanyak  100  mL. Ekstrak  metanol  yang  diperoleh  dipartisi  dengan  menggunakan etil  asetat dalam  corong pisah  dengan  perbandingan  1:1.  Kemudian  dikocok,  lalu  didiamkan  beberapa  saat  hingga terbentuk  pemisahan  lalu  dipisahkan  dan  ditampung  hasil  partisisnya.  Ekstrak  etil  asetat berada di bagian bawah karena massa jenis etil asetat lebih besar dari massa jenis metanol. Selanjutnya  dari  hasil  partisi  diperoleh  ekstrak etil  asetat sebanyak  300  mL.  Kemudian
ekstrak  tersebut  dipekatkan  kembali  dengan  menggunakan rotary  evaporator .  Setelah didapatkan ekstrak pekat, lalu diencerkan dengan pengenceran 20%, 40%, 60%, 80%, dan 100%.
Persiapan Media Nutrient Broth ( NB) dan Nutrient Agar ( NA)
Pembuatan media NB dilakukan dengan cara menimbang sebanyak 3.25 gram NB. Kemudian  dimasukkan  ke  dalam  labu  erlenmeyer  lalu  ditambahkan  dengan  250  ml aquades. NB dan aquades dalam labu erlenmeyer dipanaskan dengan menggunkan hotplate selama ±10 menit hingga NB larut.
Pembuatan media NA dilakukan dengan cara menimbang sebanyak 7,25 gram NA. Kemudian  dimasukkan  ke  dalam  labu  erlenmeyer  lalu  ditambahkan  dengan  250  ml aquades. NA dan aquades dalam labu erlenmeyer dipanaskan dengan menggunkan hotplate selama  ±10  menit  hingga  NA  larut.  Media  yang  telah  homogen  disterilisasi  di  dalam autoklaf selama 15 menit pada suhu 121°C. Setelah itu media ditunggu hingga agak dingin sekitar suhu 40-45°C. Media NA yang telah dingin kemudian nantinya akan dituangkan ke cawan petri sebanyak 20 mL. Media NA yang telah dituang ke dalam cawan petri dibiarkan hingga memadat.

## Inokulasi Bakteri Uji
Bakteri yang digunakan dalam penelitian ini adalah bakteri P. acnes yang diperoleh dari Laboratorium Tekhnologi Hasil Pertanian Politeknik Negri Lampung. Inokulasi bakteri dilakukan  dengan  menggunakan  metode  tuang (poured  plate). Sebelum  dipakai  dalam ujiantibakteri, bakteri yang akan dipakai setiap kali harus diregenerasi terlebih dahulu dari medium yang lama ke medium yang baru. Biakan bakteri yang akan diuji ditanam satu ose pada  10  mL  media Nutrient  Broth  (NB) ,  kemudian  diinkubasi  selama  48  jam.  Setelah  itu dari biakan tersebut diambil 0,1 mL dan dituangkan pada 250 mL media NA. Selanjutnya NA dituangkan pada cawan petri yang masing-masing cawan berisi ± 20 mL media NA.

## Uji Aktivitas Antibakteri
Pengujian  aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun  binahong  menggunakan  metode  difusi agar dengan teknik sumur ( cup plate technique). Uji aktivitas antibakteri dilakukan dengan cara membuat sumuran pada media NA (diameter sumuran ± 6,7 mm) pada media Nutrient Agar yang sudah ditanam dengan bakteri uji. Setiap cawan dibuat 3 sumuran menggunakan tip mikro pipet, kemudian pada setiap sumuran dimasukkan ekstrak daun binahong dengan konsentrasi yang berbeda. Klindamisin digunakan sebagai uji kontrol positif sedangkan uji kontrol negatif menggunakan aquades steril. Media yang sumurannya telah ditetesi dengan larutan  uji  kemudian  diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama  2  kali  24  jam  dalam  kondisi anaerob.  Setelah  diinkubasi  maka  dilakukan  pengukuran  zona  hambat  dengan menggunakan jangka sorong.

## HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
Sebelum  sampel  diekstraksi,  sampel  dicuci  dahulu,  kemudian  dikeringkan  menjadi simplisa,  dibuat  menjadi  serbuk,  selanjutnya  diekstrak  dengan  menggunakan  pelarut metanol dan etil asetat. Sampel dicuci bertujuan untuk membersihkan sampel dari kotoran yang  melekat  pada  daun.  Kemudian  sampel  dikeringkan  dengan  cara  diangin-anginkan. Tujuan  dari  pengeringan  adalah  agar  untuk  menghindari  pembusukan  dan  pertumbuhan jamur  pada  sampel  yang  dapat  merubah  kandungan  senyawa  kimia  yang  ada  di  dalamya. Proses  penjemuran  tidak  boleh  di  bawah  sinar  matahari  langsung  karna  dapat
mengakibatkan  senyawa-senyawa  kimia  yang  terkandung  di  dalamnya  teroksidasi  dan mengubah  kandungan  dari  senyawa-senyawa  tersebut.  Setelah  kering  sampel  ditumbuk hingga  halus.  Serbuk  daun  binahong  yang  telah  halus  kemudian  ditimbang  sebanyak  300 gram, yang selanjutnya dibuat ekstrak dengan menggunakan metode maserasi. Serbuk daun binahong  kemudian  dipindahkan  ke  dalam  tabung.  Cara  pengolahan  tanaman  obat, termasuk binahong dapat dilakukan dengan metode ekstraksi. Ekstraksi  merupakan proses pemisahan  zat  dari  pelarutnya  sehingga  kita  memperoleh  suatu  zat  tertentu  yang  kita inginkan.  Dalam  proses  ekstraksi  tanaman  obat  ini  zat  yang  kita  peroleh  yaitu  zat  aktif dalam tanaman obat yang dapat digunakan sebagai obat untuk suatu penyakit.
Metode  yang  digunakan  dalam  proses  ekstraksi  ini  adalah  metode  maserasi  dan partisi  menggunakan  pelarut  organik. Penggunaanmetode  maserasi  didasarkan  pada praktisnya pengerjaan dan alat yang digunakan sederhana dan mudah. Tetapi kelemahannya adalah  waktu  pengerjaannya  yang  membutuhkan  waktu  lama.  Maserasi  dilakukan  dengan cara  merendam  serbuk  simpilisia  dalam  cairan  penyari.  Cairan  penyari  akan  menembus dinding  sel  dan  masuk  ke  dalam  rongga  sel  yang  mengandung  zat  aktif  akan  larut  dan karena  adanya  perbedaan  konsentrasi  antara  larutan  zat  aktif  di  dalam  sel  dengan  yang  di luar  sel,  maka  larutan  yang  pekat  akan  terdesak  keluar.  Peristiwa  tersebut  berulang sehingga terjadi keseimbangan antara larutan di luar sel dan di dalam sel.
Pelarut  yang digunakan adalah pelarut metanol dan etil asetat . Penggunaan pelarut yang sesuai dalam melakukan ekstraksi juga sangat penting dalam melakukan ekstraksi ini, karena  dengan  pelarut  yang  benar  dapat  mengikat  zat-zat  aktif  yang  terkandung  dalam tanaman  tersebut.  Pemilihan  metanol  dan etil  asetat sebagai  pelarut,  dikarenakan metanol merupakan  pelarut  polar  sedangkan etil  asetat adalah  pelarut  semipolar.  Dalam  partisi proses pemisahan  komponen-komponen  dalam  suatu  senyawa  berdasarkan  perbedaan kelarutan  dengan  prinsip,  yaitu  distribusi  zat  terlarut  dalam  dua  pelarut  yang  tidak  saling bercampur.
Pemilihan  pelarut  metanol  dan etil  asetat untuk  mendapatkan  metabolit  sekunder dari daun binahong karena pelarut metanol merupakan pelarut polar yang selektif, sehingga dengan menggunakan metanol diharapkan metabolit sekunder yang ada di dalam simplisia sebagian  besar  terambil,dan  juga  pelarut  metanol palingbanyak  digunakan  dalam  proses isolasi  senyawa  organik  bahan  alam.Sedangkan  pada  proses  partisi  menggunakan  pelarut etil asetat . Pemilihan etil asetat karena etil asetat sifatnya semipolar yang dapat melarutkan senyawa semipolar pada dinding sel seperti flavonoid. Di samping itu, etil asetat digunakan sebagai  pelarut  karena  etil  asetat  dapat  menyari  senyawa-senyawa  yang  memberikan aktivitas antibakteri , diantaranya flavonoid dan fenol .
Analisis  Fenolik  dan  Daya  Hambat  Daun  Binahong (Anredera  cordifolia (Ten.) steenis)  terhadap  bakteri Eschericia  coli dan Staphylococcus  aureus menunjukkan  hasil yang  terbaik  dibandingkan  ekstrak  etanol  terhadap  bakteri Eschericia  coli. Pemilihan etil asetat didasarkankarena etil asetat merupakan pelarut  yang bersifat semipolar. Sifat inilah yang  menyebabkan  ekstrak  etil  asetat  memiliki  dua  sifat  kelarutan  yaitu  hidrofilik  dan lipofilik. Diketahui pula bahwa suatu senyawa yang mempunyai polaritas optimum seperti etil asetat akan mempunyai aktivitas antimikroba maksimum, karena untuk interaksi suatu senyawa antibakteri dengan bakteri diperlukan keseimbangan hidrofilik-lipofilik.
Proses  maserasi  dengan  pelarut  metanol  dilakukan  selama  3  x  24  jam.  Hal  ini bertujuan  untuk  memaksimalkan  proses  pengambilan  senyawa-senyawa  kimia  yang terdapat  pada  sampel  daun.  Selama  proses  perendaman,  sampel  disimpan  dalam  wadah
yang  tertutup  dan  terlindung  dari  cahaya  langsung  yang  bertujuan  untuk  mencegah  reaksi katalisis cahaya ataupun perubahan warna.
Dilakukan  juga  penggantian  pelarut  setiap  hari  sehingga  kandungan  senyawa metabolit  sekunder  pada  sel  daun  binahong  dapat  terekstrak  secara  keseluruhan  hingga warna  maserat  mulai  memudar  dan  diperoleh  maserat  metanol  yang  maksimal.  Ekstrak metanol  yang  diperoleh  kemudian  disaring,  dan  diperoleh  ekstrak  kasar  etanol  kemudian ekstrak kasar dipekatkan menggunakan rotary evaporator sehingga diperoleh ekstrak kental (ekstrak metanol). Ekstrak metanol yang diperoleh selanjutnya dipartisi.
Partisi  dilakukan  dengan  menggunakan etilasetat dalam  corong  pisah,  tunggu beberapa saatkemudian dikocok, lalu didiamkan beberapa saat hingga terbentuk pemisahan berupa 2 lapisan. Ekstrak etil asetat berada di bagian bawah karena massa jenis etil asetat lebih  besar  dari  massa  jenis  metanol.  Kemudian  ekstrak  tersebut  dipekatkan  kembali dengan menggunakan rotary evaporator .
Pengujian  kandungan  fitokimia  pada  ekstrak  daun  binahong  dilakukan  untuk mengetahui golongan metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada  ekstrak.  Hasil  penapisan fitokimia  yang  dilakukan  pada  ekstrak  daun  binahong  diidentifikasi  adanya  tannin, flavonoid,  saponin  dan  fenol.  Efek  antibakteri  terhadap  ekstrak  adalah  karena  adanya senyawa-senyawa  tersebut,  senyawa  aktif  berupa,  tannin,  flavonoid,  saponin  dan  fenol adalah senyawa yang berperan utama dalam membunuh bakteri patogen.
Tabel 1. Hasil Uji Skrining Fitokimia Daun Binahong
Golongan Senyawa Hasil Alkaloid - Tanin + Flavonoid + Saponin + Fenol +
Hasil  menunjukan  bahwa  ekstrak  daun  binahong (Anredera  cordifolia) positif mengandung  senyawa  flavonoid,  fenol,  tannin,  dan  saponin.  Hasil  pengamatan  berupa perubahan  warna,  terbentuknya  buih  dan  endapan  yang  disebabkan  karena  adanya  reaksi antara senyawa metabolit pada ekstrak dan pereaksi.
Uji flavonoid dilakukan dengan cara menambahkan ekstrak daun binahong dengan magnesium  (Mg)  dan  asam  klorida  (HCl)  pekat  yang  kemudian  disebut  sebagai  pereaksi shinoda .  Sehingga  dalam  uji  flavonoid  menghasilkan  warna  merah.  Kemudian  pada  uji senyawa fenol menggunakan pereaksi FeCl 3 1% (Indarto, 2015). Uji fenol yang dilakukan pada  ekstrak  daun  binahong (Anrederacordifolia) memberikan  hasil  yang  positif  dengan hasil pengamatan terbentuknya warna hitam kecoklatan.
Selanjutnya pada uji senyawa tannin pereaksi yang digunakan sama dengan pereaksi yang  digunakan  untuk  uji  senyawa  fenol  yaitu  FeCl 3 namun  dengan  konsentrasi  yang berbeda yaitu 5%. Hasil pengamatan menunjukkan terbentuknya warna hitam pada ekstrak. Ini  menandakan  bahwa  ekstrak  daun  binahong (Anredera  cordifolia) positif  mengandung senyawa  tannin.  Uji  senyawa  saponin  memberikan  hasil  yang  positif  setelah  dilakukan pengocokan pada sampel  ekstrak daun binahong (Anrederacordifolia), menghasilkan busa setinggi 2 cm.
Hasil  uji  alkaloid  pada  ekstrak  daun  binahong (Anredera  cordifolia) menghasilkan hasil  yang  negatif,  karena  setelah  pereaksi  ditambahkan  pada  ekstrak  daun  binahong
(Anredera  cordifolia) tidak  menghasilkan  endapan  berwarna  putih.  Hasil  negatif  ini kemungkinan  disebabkan  karena  ekstrak  daun  binahong (Anredera  cordifolia) tidak mengandung  senyawa  alkaloid  dan  juga  dapat  disebabkan  karna  pada  pengujian  senyawa alkaloid  pereaksi  mayer  yang  dibuat  seharusnya  menggunakan  kalium  iodida  (KI)  bukan betadin.  Namun  karena  keterbatasan  bahan  KI  diganti  dengan  betadin.  Betadin  dipilih menjadi pengganti karena larutannya mengandung senyawa KI.
Metode  yang  digunakan  dalam  proses  ekstraksi  ini  adalah  metode  maserasi  dan partisi  menggunakan  pelarut  organik. Penggunaan  metode  maserasi  didasarkan  pada praktisnya pengerjaan dan alat yang digunakan sederhana dan mudah. Tetapi kelemahannya adalah  waktu pengerjaannya yang  membutuhkan  waktu  lama.  Maserasi  dilakukan  dengan cara  merendam  serbuk  simpilisia  dalam  cairan  penyari.  Cairan  penyari  akan  menembus dinding  sel  dan  masuk  ke  dalam  rongga  sel  yang  mengandung  zat  aktif  akan  larut  dan karena  adanya  perbedaan  konsentrasi  antara  larutan  zat  aktif  di  dalam  sel  dengan  yang  di luar  sel,  maka  larutan  yang  pekat  akan  terdesak  keluar.  Peristiwa  tersebut  berulang sehingga terjadi keseimbangan antara larutan di luar sel dan di dalam sel.
Pelarut  yang digunakan adalah pelarut metanol dan etil asetat . Penggunaan pelarut yang sesuai dalam melakukan ekstraksi juga sangat penting dalam melakukan ekstraksi ini, karena  dengan  pelarut  yang  benar  dapat  mengikat  zat-zat  aktif  yang  terkandung  dalam tanaman  tersebut.  Pemilihan  metanol  dan etil  asetat sebagai  pelarut,  dikarenakan metanol merupakan  pelarut  polar  sedangkan etil  asetat adalah  pelarut  semipolar.  Dalam  partisi proses  pemisahan  komponen-komponen  dalam  suatu  senyawa  berdasarkan  perbedaan kelarutan  dengan  prinsip,  yaitu  distribusi  zat  terlarut  dalam  dua  pelarut  yang  tidak  saling bercampur.
Pemilihan  pelarut  metanol  dan etil  asetat untuk  mendapatkan  metabolit  sekunder dari daun binahong karena pelarut metanol merupakan pelarut polar yang selektif, sehingga dengan menggunakan metanol diharapkan metabolit sekunder yang ada di dalam simplisia sebagian  besar  terambil.  Dan  juga  pelarut  metanol palingbanyak  digunakan  dalam  proses isolasi senyawa organik bahan alam.
Sedangkan pada proses partisi menggunakan pelarut etil asetat . Partisi adalah suatu proses  pemisahan  komponen-komponen  dalam  suatu  senyawa  berdasarkan  perbedaan kelarutan atau dalam dua macam pelarut yang tidak saling bercampur. Proses distribusi ini berdasarkan  prinsip like  dissolve  like, yaitu  senyawa  yang  polar  akan  lebih  mudah  larut dalam pelarut yang polar dan sebaliknya.
Pemilihan etil  asetat karena etil  asetat sifatnya  semipolar  yang  dapat  melarutkan senyawa  semipolar  pada  dinding  sel  seperti  flavonoid,.  Di  samping  itu, etil  asetat digunakan  sebagai  pelarut  karena  etil  asetat  dapat  menyari  senyawa-senyawa  yang memberikan aktivitas antibakteri, diantaranya flavonoid dan fenol .
Seperti  pada  penelitan  Hasri,  dkk  mengenai  Analisis  Fenolik  dan  Daya  Hambat Daun  Binahong (Anredera  cordifolia (Ten.)  steenis ) terhadap  bakteri Eschericia  coli dan Staphylococcus aureus. Berdasarkan hasilpengujian, aktivitas antibakteri ekstrak etil asetat daun  binahong  menunjukkan  hasil  yang  terbaik  dibandingkan  ekstrak  etanol  terhadap bakteri Eschericia coli. Pemilihan etil asetat didasarkankarena etil asetat merupakan pelarut yang  bersifat  semipolar.  Sifat  inilah  yang  menyebabkan  ekstrak  etil  asetat  memiliki  dua sifat  kelarutan  yaitu  hidrofilik  dan  lipofilik.  Diketahui  pula  bahwa  suatu  senyawa  yang mempunyai  polaritas  optimum  seperti etil  asetat akan  mempunyai  aktivitas  antimikroba maksimum,  karena  untuk  interaksi  suatu  senyawa  antibakteri  dengan  bakteri  diperlukan keseimbangan hidrofilik-lipofilik.
Proses  maserasi  dengan  pelarut  metanol  dilakukan  sebanyak  3  x  24  jam.  Hal  ini bertujuan  untuk  memaksimalkan  proses  pengambilan  senyawa-senyawa  kimia  yang terdapat  pada  sampel  daun.  Selama  proses  perendaman,  sampel  disimpan  dalam  wadah yang  tertutup  dan  terlindung  dari  cahaya  langsung  yang  bertujuan  untuk  mencegah  reaksi katalisis cahaya ataupun perubahan warna.
Dilakukan  juga  penggantian  pelarut  setiap  hari  sehingga  kandungan  senyawa metabolit  sekunder  pada  sel  daun  binahong  dapat  terekstrak  secara  keseluruhan  hingga warna  maserat  mulai  memudar  dan  diperoleh  maserat  metanol  yang  maksimal.  Ekstrak metanol  yang  diperoleh  kemudian  disaring,  dan  diperoleh  ekstrak  kasar  etanol  kemudian ekstrak kasar dipekatkan menggunakan rotary evaporator sehingga diperoleh ekstrak kental (ekstrak metanol). Ekstrak metanol yang diperoleh selanjutnya dipartisi.
Partisi  dilakukan  dengan  menggunakan etilasetat dalam  corong  pisah,  tunggu beberapa saatkemudian dikocok, lalu didiamkan beberapa saat hingga terbentuk pemisahan berupa 2 lapisan. Ekstrak etil asetat berada di bagian bawah karena massa jenis etil asetat lebih  besar  dari  massa  jenis  metanol.  Kemudian  ekstrak  tersebut  dipekatkan  kembali dengan menggunakan rotary evaporator .
Pengujian  kandungan  fitokimia  pada  ekstrak  daun  binahong  dilakukan  untuk mengetahui golongan metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada  ekstrak.  Hasil  penapisan fitokimia  yang  dilakukan  pada  ekstrak  daun  binahong  diidentifikasi  adanya  tannin, flavonoid,  saponin  dan  fenol.  Efek  antibakteri  terhadap  ekstrak  adalah  karena  adanya senyawa-senyawa  tersebut,  senyawa  aktif  berupa,  tannin,  flavonoid,  saponin  dan  fenol adalah senyawa yang berperan utama dalam membunuh bakteri patogen.
Gambar 1 . Zona Hambat Ektrak Daun Binahong
Tabel 2. Data Hasil Pengamatan Zona Hambat Ektrak Daun Binahong
Perlakuan Diameter Zona Hambat (mm) 24 Jam 48 Jam Kontrol + (klindamisin) 24.05 a ± 0.901 35,47 a ± 2,61 Kontrol - 0.00 b ± 0.00 0,00 b ± 0,00 Konsentrasi 20% 1.13 c ± 0.306 3.50 c ± 0.889 Konsentrasi 40% 3.63 d ± 1.041 4.90 d ± 1.735 Konsentrasi 60% 7.50 e ± 1.646 10.23 e ± 3.774 Konsentrasi 80% 8.17 f ± 1.55 10.83 f ± 0.85 Konsentrasi 100% 9.00 g ± 2.166 11.20 g ± 0.70
Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  daun  binahong  terbukti  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri Propionibacterium  acnes dengan  dibentuknya  zona  bening  di
sekeliling  lubang.  Zona  bening  yang  dibentuk  merupakan  zona  hambat  bagi  pertumbuhan bakteri. Hal ini terjadi karena adanya aktivitas antibakteri pada daun binahong.
Pemberian  konsentrasi  ekstrak  yang  berbeda  pada  daun  binahong  menimbulkan hasil  yang  berbeda  juga.  Pada  konsentrasi  20%  diameter  daerah  hambat  ekstrak  daun binahong  adalah  1,13  mm,  sedangkan  pada  konsentrasi  40%  diameter  daerah  hambat ekstrak  daun  binahong  adalah  3,63  mm,  pada  konsentrasi  60%  diameter  daya  hambat ekstrak  daun  binahong  memiliki  peningkatan  yang  sangat  terlihat  yaitu  7,50  mm, sedangkan  pada  konsentrasi  80%  dan  100%  ekstrak  daun  binahong  adalah  8,17  mm  dan 9,00 mm.
Pengamatan  hari  kedua  pada  waktu  48  jam  menunjukan  adanya  peningkatan Diameter Daerah Hambat terhadap pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes. Terlihat pada Tabel 2yang menunjukan Diameter Daerah Hambat (DDH) bakteri  semakin luas. Ini dapat  dilihat  dari  pemberian  konsentrasi  20%  pada  respon  hambat  pada  waktu  24  jam daerah  hambat  perkembangan  bakteri  sebesar  1,13  mm  sedangkan  pada  waktu  48  jam daerah hambat  perkembangan  bakteri meningkat  menjadi  3,50 mm. Perlakuan konsentrasi 40%  menghasilkan  respon  hambat  sebesar  3,63  mm  pada  waktu  24  jam,  kemudian meningkat menjadi 4,90 mm pada waktu 48 jam.
Pada  konsentrasi  60%  daerah  hambat  pertumbuhan  bakteri  pada  waktu  24  jam sebesar  7,50  mm  dan  meningkat  menjadi  10,23  mm  pada  waktu  48  jam.  Perlakuan konsentrasi 80% daerah hambat pertumbuhan bakteri pada waktu 24 jam sebesar 8,17 mm dan  meningkat  menjadi  10,23  pada  waktu  48  jam.  Konsentrasi  100%  daerah  hambat pertumbuhan  bakteri  pada  waktu  24  jam  sebesar  9,00  dan  meningkat  menjadi  10,20  pada waktu 48 jam.
Pembanding  (kontrol  positif)  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  dengan menggunakan klindamisin dan kontrol negative menggunakan aquades. Pada Tabel 2 dapat terlihat  bahwa  pada  klindamisin  zona  hambat  yang  terukur  lebih  besar  dibandingkan dengan  ekstrak  daun  binahong  dan  aquades.  Hal  tersebut  menunjukan  klindamisin mengandung antibakteri yang sangat kuat karena klindamisin sangat aktif terhadap bakteri gram  positif.  Klindamisin  memiliki  mekanisme  aksi  yang  sama  dengan  eritromisin. Mekanisme resistensinya pun sama dengan eritromisin tetapi tidak menimbulkan resistensi silang. Clostridium difficile resisten terhadap klindamisin.
Adanya zona hambat yang terbentuk karena adanya senyawa antibakteri pada daun binahong.  Berdasarkan  hasil  uji  fitokimia,  senyawa  metabolit  sekunder  yang  ada  pada ekstrak daun binahong (Anredera cordifolia) antara lain fenol, flavonoid, tanin dan saponin. Mekanisme penghambatan pertumbuhan bakteri oleh golongan senyawa fitokimia memiliki aktivitas yang berbeda-beda.
Senyawa  fenolik  bekerja  dengan  mengubah  permeabilitas  membran  sitoplasma, menyebabkan  kebocoran  bahan-bahan  intraseluler.  Senyawa  ini  juga  mendenaturasi  dan menginaktifkan protein seperti enzim. Flavonoid berfungsi sebagai zat antibiotik, misalnya antivirus  dan  antijamur,  peradangan  pembuluh  darah  dan  dapat  digunakan  sebagai  racun ikan.  Selain  itu,  flavonoid  juga  berperan  langsung  sebagai  antibiotik  dengan  mengganggu fungsi dari mikroorganisme, seperti bakteri atau virus.
Mekanisme  penghambatan  flavonoid  terhadap  pertumbuhan  bakteri  karena kemampuan  senyawa  tersebut  membentuk  kompleks  dengan  protein  ekstraseluler, mengaktivasi enzim, dan merusak membran sel. Pada umumnya, senyawa flavonoid dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri  Gram  positif  dan  Gram  negatif.  Flavonoid  dapat
berfungsi sebagai bahan antimikroba dengan membentuk ikatan kompleks dengan dinding sel dan merusak membran.
Senyawa  tanin  memiliki  mekanisme  mengkoagulasi  dan  mendenaturasi  protein. Tanin  berikatan  dengan  protein  membentuk  ion  H + dan  mengakibatkan  pH  menjadi  asam sehingga  protein  terdenaturasi.  Kondisi  asam  menginaktif  enzim  pada  bakteri  dan menyebabkan  metabolisme  terganggu  dan  kerusakan  sel  bahkan  kematian.  Tanin  dapat menghambat  enzim reverse  transcriptase dan  DNA topoisomerase ,  sehingga  sel  bakteri tidak dapatterbentuk.
Hasil  analisis  data  dengan  menggunakan  ANOVA (Analysis  Of  Variance) . Pengamatan dilakukan setiap 24 jam selama 2 hari. Pada pengamatan 24 jam pertama dan 24  jam  kedua,  terlihat  Diameter  Daerah  Hambat  (DDH)  yang  berbeda  nyata  dengan kelompok  kontrol.  Tabel  2  menunjukkan  bahwa  uji  efektivitas  ekstrak  etil  asetat  daun binahong (Anredera cordifolia) sebagai penghambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium  acnes secara in  vitro berbedanyata  dengan  nilai  signifikasi  0,000.  Hal ini  menyatakan  bahwa  H 0 ditolak  dan  H 1 diterima  sehingga  dapat  dikatakan  ekstrak  daun binahong (Anredera cordifolia) memiliki pengaruh dalammenghambat pertumbuhan bakteri P.  acnes .  Pembanding  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  dengan  menggunakan klindamisin dan kontrol menggunakan aquades.
Pada Tabel 2 pada DDH 24 jam menunjukan bahwa uji efektivitas ekstrak etilasetat daun  binahong (Anredera  cordifolia) secara in  vitro dengan  nilai  signifikasi  0,000. Perlakuanekstrak  yang  berbeda  pada  daun  binahong (Anredera  cordifolia) menimbulkan hasil yangberbeda juga. Perlakuan konsentrasi ekstrak daun binahong masing-masing 20%, 40%, 60%, 80% dan 100% yang menunjukan perbedaan yang mencolok.
Pada  Tabel  2  DDH  48  jam  menunjukan  bahwa  uji  efektivitas  ekstrak etil  asetat daun  binahong (Anredera  cordifolia) secara in  vitro dengan  nilai  signifikasi  0,000. Perlakuan  ekstrak  yang  berbeda  pada  daun  binahong (Anrederacordifolia) menimbulkan hasil yang berbeda juga.Perlakuan konsentrasi ekstrak daun binahong masing-masing 20%, 40%, 60%, 80% dan 100% yang menunjukan perbedaan yang mencolok. Akan tetapi pada konsentrasi 60% dan 80% tidak berbeda secara signifikan namun berbeda secara signifikan dengan perlakuan lainnya.
Perlakuan  kontrol  positif  menggunakan  klindamisin  memiliki  nilai  rata-rata  yang berbeda signifikan dengan perlakuan lainnya. Perlakuan kontrol negatif yaitu menggunakan aquades steril juga berbeda secara signifikan dengan perlakuan lainnya. Perlakuan kontrol positif  tidak  terbentuk  adanya  zona  hambat.  Karena  tidak  terdapat  zona  bening  disekitar lubang.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  aquades  tidak  mempunyai  sifat  antibakteri  karena tidak memberikan pengaruh terhadap pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes .
Berdasarkan uji statistik yang telah dilakukan, dapat dikatakan bahwa ekstrak daun binahong (Anredera corddifolia) dapat menghambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes secara in  vitro menunjukan peningkatan rata-rata daerah hambat pada  waktu  24  jam  dan  48  jam.  Rata-rata  terendah  perlakuan  pada  konsentrasi  20%. Sedangkan rata-rata tertinggi pada konsentrasi 100%.
Jika  dilihat  secara  keseluruhan  dari  pengamatan  hari  pertama  hingga  hari  kedua diameter  daerah  hambat  daun  binahong  semakin  bertambah.  Ini  menunjukan  bahwa  uji efektifitas  ekstrak  daun  binahong (Anredera  cordifolia) sangat  dipengaruhi  oleh  waktu, semakin  lama  waktunya  maka  daerah  hambat  perkembangan  bakteri  akan  semakin terhambat. Pemberian konsentrasi yang berbeda-beda menunjukkan pengaruh yang berbeda
pula terhadap zona hambatan yang dihasilkan. Semakin tinggi konsetrasi ekstrak maka akan semakin besar daya hambat antibakteri tersebut. Semakin luas daerah zona hambatan yang terbentuk  disekitar  sumur,  maka  semakin  besar  pula  daya  antibakteri  yang  terdapat  pada ekstrak daun binahong.
Aktivitas  antibakteri  juga  dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor  antara  lain  kandungan zat  antibakteri,  jenis  bakteri  yang dihambat,  waktu inkubasi, pelarut  yang digunakan pada saat pembuatan ekstrak, dan juga kemampuan suatu bahan antimikroba dalam meniadakan kemampuan hidup mikroorganisme tergantung pada besarnya konsentrasi ekstrak tersebut.

## SIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan  hasil  dan  pembahasan  maka  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak etil asetat daun  binahong (Anrederacordifolia) memiliki  aktivitas  anti  bakteri  dalam menghambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes secara in vitro .
Adapun  saran  dari  penelitian  yang  telah  dilakukan  yaitu  agar  peneliti  selajutnya dapat melakukan penelitian mengenai pemanfaatan ekstrak daun binahong dalam hal  yang lainnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Aida, A. N., Suswati, E., & Misnawi. (2016). Uji In Vitro Efek Ekstrak Etanol Biji Kakao (Theobroma cacao) sebagai Antibakteri terhadap Propionibacterium acnes. E-Jurnal Pustaka Kesehatan , 4 (4).
Ainurrochmah,  A.,  Ratnasari,  E.,  &  Lisdiana,  L.  (2013).  Efektivitas  Ekstrak  Daun Binahong  (Anredera  cordifolia)  terhadap  Penghambatan  Pertumbuhan  Bakteri Shigella flexneri dengan Metode Sumuran. Lentera Bio , 2 (3).
Alfath, C. R., Yulina, V., & Sunnati. (2013). Antibacterial Effect of Granati fructus Cortex Extract on Streptococcus mutans In Vitro. Journal of Dentistry Indonesia , 20 (1). Bramono,  S.  L.  S.  M.  K.,  &  Indriatmi,  W.  (2015). Ilmu  Penyakit  Kulit  dan  Kelamin . Jakarta: Fakultas KedokteranUniversitas Indonesia.
Divadi, A., & Yuliani, S. H. (2016). Pembuatan dan uji aktivitas sediaan gel scarless wound dengan  ekstrak  daun  binahong  dan  zat  aktif  piroxicam. Jurnal  Farmasi Sains  Dan Komunitas , 12 (2), 41–47.
Faustina,  M.,  &  Yuliani,  S.  H.  (2015).  Pembuatan  dan  Uji  Aktivitas  dengan  Unguenta Scarless  Wound  dengan  Ekstrak  Binahong  dan  Zat  Aktif  Aspirin. Jurnal  Farmasi Sains Dan Komunitas , 12 (2), 81–87.
H,  A.  R.,  Cahyanto,  T.,  Sujarwo,  T.,  &  Lestari,  R.  I.  (2015).  Uji  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak  Daun  Beluntas  (  Pluchea  Indica  (L.)  Less.  )  Terhadap  Propionibacterium Acnes PenyebabJerawat. Research Gate , 9 (1).
Indarto.  (2015).  Uji  Kualitatif  dan  Kuantitatif  Golongan  Senyawa  Organik  dari  Kulit  dan Kayu  Batang  Tumbuhan  Artocarpus. Al-Biruni :  Jurnal  Ilmiah  Pendidikan  Fisika , 4 (1).
Jazilah, N., Fasya, A. G., Ningsih, R., & Abtokhi, A. (2014). Uji Toksisitas Ekktrak Daun Binahong  Terhadap  Larva  Udang  Artemia  Salina  Leach  Dengan  Metode  Brine Shrimp Lethality Test. Alchemy: Journal Of Chemistry , 0 (1), 118–124.
Rimporok,  S.,  Kepel,  B.  J.,  &  Siagian,  K.  V.  (2015).  Uji  Efektivitas  Ekstrak  Daun
Binahong (Anredera Cordifolia Steenis) Terhadap Pertumbuhan
Streptococcusmutans Secara In Vitro. Pharmacon Jurnal Ilmiah Farmasi , 4 (4).
Roslizawaty, Ramadani,  N. Y., Fakhrurrazi, & Herrialfian. (2013). Aktivitas Antibakterial Ekstrak  Etanol  Dan  Rebusan  Sarang  Semut  (Myrmecodia  Sp.)TerhadapBakteri Escherichia coli. Jurnal Medika Veterinaria , 7 (2).
Silalahi,  Y.  C.  E.,  Sari,  I.,  Siregar,  S.,  Sinaga,  D.  R.,  &  Matari,  M.  (2016).  Pengujian Antibakteri  Bedak  Dingin  Herbal  Mahkota  Dewa  Terhadap  Bakteri  Penyebab Jerawat. Jurnal Farmanesia , 11 (11).
Umar, A., Krihariyani, D., & Mutiarawati, D. T. (2012). Pengaruh Pemberian EkstrakDaun Binahong  (Andredera  cordifolia(TEN)  steenis)  Terhadap  Kesembuhan  LukaInfeksi Staphylococcus aureus Pada Mencit. Analisis Kesehatan Sains , 1 (2).