Karakteristik dan Potensi Enzimatis Bakteri Asal Tanah Sampah Dapur dan Kotoran Ternak sebagai Kandidat Agen Biodegradasi Sampah Organik
Taruna Dwi Satwika 1  , Dwiana Muflihah Yulianti 2 , Arif Rahman Hikam 3
1,2,3 Fakultas Biologi Universitas Jenderal Soedirman Purwokerto

## Abstract
Composting  is  an  alternative  for  recycling  organic  waste.  Microorganisms  that  can  degrade  the components of organic waste are an essential part of composting. Isolation and selection of bacteria with the ability to degrade the elements of organic waste are the first steps to obtain an organic waste degrading  agent.  This  study  aimed  to  determine  the  characteristics  and  the  enzymatic  potential (cellulolytic, amylolytic, and proteolytic) of bacteria isolated from soil, cow dung and kitchen waste as candidates for organic waste degradation agents. The research begins with sampling and isolation of  bacteria.  The  isolates  obtained  were  tested  qualitatively  for  their  amylolytic,  cellulolytic  and proteolytic  activities.  Furthermore,  bacterial  isolates  were  characterized  morphologically  and biochemically. A total of 30 bacterial isolates were isolated from soil samples, cow dung and kitchen waste. The screening result showed that 6 isolates had amylolytic activity, 7 isolates had cellulolytic activity and 3 isolates had proteolytic activity. These bacterial isolates showed various morphological and  biochemical  characteristics.  In  general,  soil  samples,  kitchen  waste  and  cow  dung  contain potential bacteria as organic waste degrading agents
Keywords:   Amylolytic bacteria; Cellulolytic bacteria; Organic waste; Proteolytic bacteria

## Abstrak
Pengomposan merupakan suatu alternatif untuk mendaur ulang sampah organik. Mikroorganisme unggul  yang  mampu  mendegradasi  komponen-komponen  penyusun  sampah  organik  merupakan bagian  penting  dalam  pengomposan.  Isolasi  dan  seleksi  bakteri  dengan  kemampuan  degradasi komponen-komponen  penyusun  sampah  organik  merupakan  tahapan  awal  untuk  mendapatkan agen  pendegradasi sampah organik. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui karakteristik dan potensi selulolitik, amilolitik, dan proteolitik bakteri asal tanah, kotoran ternak sapi dan sampah dapur sebagai kandidat agen pendegradasi sampah organik. Penelitian diawali dengan pengambilan sampel dan isolasi bakteri. Isolat-isolat yang diperoleh diuji potensi enzimatisnya secara kualitatif, meliputi aktivitas amilolitik, selulolitik, dan proteolitik. Selanjutnya isolat bakteri dengan aktivitas enzimatis dikarakterisasi secara morfologi dan biokimia. Sebanyak 30 isolat bakteri berhasil diisolasi dari sampel tanah, kotoran ternak sapi dan sampah dapur. Hasil penapisan menunjukkan bahwa sebanyak  6  isolat  memiliki  aktivitas  amilolitik,  7  isolat  memiliki aktivitas  selulolitik  dan  3  isolat menunjukkan  aktivitas  proteolitik.  Isolat-isolat  bakteri  tersebut  menunjukkan  karakteristik morfologi dan biokimia yang beragam. Secara umum, sampel tanah, sampah dapur dan kotoran sapi mengandung bakteri potensial sebagai agen pendegradasi sampah organik.
Kata kunci:  Bakteri amilolitik; Bakteri proteolitik; Bakteri selulolitik; Sampah organik,
 Corresponding Author:  Taruna Dwi Satwita,  email  : tarunadwisatwika@unsoed.ac.id . Fakultas  Biologi Uviversitas  Jendral  Soedirman,  Jl.  dr.  Suparno  63  Grendeng  Purwokerto  Utara  Kabupaten  Banyumas  Jawa Tengah, 53122, Indonesia.
Copyright © 2021 Al-Hayat: Journal of Biology and Apllied Biology

## Pendahuluan
Pertambahan  populasi  penduduk  me- nyebabkan  produksi  sampah  organik  terus meningkat  dan  mengakibatkan  penumpukkan. Namun,  sampah  organik  umumnya  di- kumpulkan  di  tempat  pembuangan  akhir  dan dibiarkan terdekomposisi secara alami sehingga kehilangan  potensi  untuk  didaur  ulang (Chiarelotto  et  al.,  2018).  Pengomposan berpotensi  sebagai  alternatif  yang  dapat dilakukkan  untuk  mendaur  ulang  sampah organik. Mikroorganisme telah dikenal sebagai organisme  dekomposer  karena  mampu mendegradasi  bahan-bahan  organik  untuk kerberlangsungan siklus biogeokimia di alam.
Berbagai  bakteri  telah  terbukti  memiliki kemampuan  untuk  mendegradasi  komponen- komponen  penyusun  sampah  organik  dan mempercepat dekomposisi. Akhtar et al., (2013) melaporkan bahwa pemberian Bacillus sp. AS3 mampu menurunkan rasio C/N, residu selulosa, dan  kandungan  karbon  lebih  tinggi  dibanding kontrol  setelah  90  hari  dekomposisi  sampah dedaunan.
Kombinasi berbagai jenis
mikroorganisme  juga  dilaporkan  mampu mempercepat  permulaan  proses  dekomposisi, meningkatkan  laju  humifikasi,  memperpendek waktu pematangan kompos, dan meningkatkan detoksifikasi  material  awal  (Echeverria  et  al., 2011).
Isolasi  dan  seleksi  bakteri  dengan kemampuan  degradasi  komponen-komponen penyusun sampah organik merupakan tahapan awal  untuk  mendapatkan  isolat  bakteri  agen dekomposer  unggul.  Berbagai  isolat  bakteri potensial pendegradasi sampah telah dilaporkan berhasil  diisolasi  dari  berbagai  sampel,  antara lain sampah perkotaan (Maki et al., 2012), tanah hutan  tropis  (Woo  et  al.,  2014),  tanah  sekitar tempat pembuangan akhir (TPA) (Rashid et al., 2017),  dan  kotoran  sapi  (Akhtar  et  al.,  2013). Namun, penelitian yang telah dilaporkan masih terbatas pada potensi selulolitik sehingga hanya dapat  digunakan  untuk  dekomposisi  serasah daun, sisa hasil pertanian dan kertas bekas.
Isolat bakteri pendegradasi sampah organik harus  memiliki  kemampuan  dalam  men- degradasi komponen- komponen yang
terkandung dalam sampah organik. Komponen- komponen  penyusun  sampah  organik  yang menjadi  target  biodegradasi,  yaitu  selulosa (Akhtar et al., 2013; Jabir & Jabir, 2016), amilum (Krishna & Mohan, 2017), dan protein (Krishna &  Mohan,  2017;  Mazzucotelli  et  al.,  2013), sehingga penelitian ini dilakukan untuk menguji aktivitas  bakteri dalam  mendegradasi selulosa, amilosa dan protein. Tujuan dari penelitian ini adalah  untuk  mengetahui  karakteristik  dan potensi  selulolitik,  amilolitik,  dan  proteolitik bakteri  asal  tanah,  kotoran  ternak  sapi  dan sampah  dapur  sebagai  kandidat  agen  pen- degradasi sampah organik.

## Metode Penelitian

## Pengambilan Sampel dan Isolasi Bakteri
Isolat  bakteri  diperoleh  dari  sampel  tanah, sampah dapur dan kotoran sapi. Sampel tanah diperoleh dari halaman bagian selatan Fakultas Biologi Universitas Jenderal Soedirman, sampel sampah dapur diambil dari tempat pembuangan sampah  kantin  Fakultas  Biologi,  dan  sampel kotoran ternak diambil dari Experimental Farm Fakultas  Peternakan  Universitas  Jenderal Soedirman.
Sebanyak  10  gram  masing-masing  sampel dimasukkan ke dalam 90 mL akuades steril dan dishaker selama 1 jam pada kecepatan 150 rpm. Suspensi yang dihasilkan kemudian diencerkan secara  bertingkat  menggunakan  akuades  steril dan sebanyak 100 µl suspensi dari pengenceran 10 -5 ,  10 -6 dan  10 -7 diinokulasikan  secara duplo mengguakan  metode  spread  plate  pada  media Nutrient Agar (NA) (Oxoid) di cawan petri steril. Inkubasi  media  NA  dilakukan  selama  48  jam pada  suhu  ruangan.  Koloni  bakteri  yang menunjukkan  karakter  morfologi  berbeda dimurnikan dengan metode gores kuadran.

## Uji Potensi Enzimatis secara Kualitatif

## Uji Selulolitik
Isolat  bakteri  ditumbuhkan  pada  medium carboxymethyl  cellulose  (CMC)  Agar  (Islam  & Roy,  2018)  secara  goresan  spot.  Media  CMC diinkubasi  selama  24  jam  pada  suhu  ruang. Kemudian, Congo-red 0,1% (w/v) dituangkan ke medium  hingga  seluruh  permukaan  medium terendam. Perendaman dilakukan selama 20
menit.  Kemudian  medium  dibilas  dengan larutan  NaCl  1  M.  Diameter  (mm)  zona jernih dan diameter  koloni diukur. Aktivitas degradasi  selulosa  ditunjukkan  dengan  nilai indeks  selulolitik.  Indeks  selulolitik  diperoleh dari  rasio  antara  diameter zona  jernih dengan diameter koloni.

## Uji Amilolitik
Isolat  bakteri  ditumbuhkan  pada  medium starch agar (SA) (Lal & Cheeptham, 2012) secara goresan  spot.  Media  SA  diinkubasi  selama  24 jam pada suhu ruang.  Kemudian larutan Lugol’s iodine dituangkan ke medium. Diameter (mm) zona  jernih  dan  diameter  koloni  diukur. Aktivitas degradasi amilum ditunjukkan dengan nilai  indeks  amilolitik.  Indeks  amilolitik diperoleh dari rasio antara diameter zona jernih dengan diameter koloni.

## Uji Proteolitik
Isolat  bakteri  ditumbuhkan  pada  medium skim milk agar (SMA) (HiMedia) secara goresan spot.  Inkubasi  dilakukan  selama  24  jam  pada suhu  ruang.    Terbentuknya  zona  jernih disekitar  koloni  diamati.  Diameter  (mm) zona  jernih  dan  diameter  koloni  diukur. Aktivitas degradasi protein ditunjukkan dengan nilai  indeks  proteolitik.  Indeks  proteolitik diperoleh dari rasio antara diameter zona jernih dengan diameter koloni.

## Karakterisasi Isolat Bakteri

## Karakterisasi Morfologi
Isolat-isolat  yang  memiliki  potensi  untuk mendegradasi  sampah  organik  dikarakterisasi secara morfologis. Isolat bakteri murni diamati karakter  fenotipiknya,  yaitu  warna  koloni, bentuk  koloni,  tepi  koloni,  elevasi  koloni  dan karakteristik  optik.  Isolat  juga  dikarakterisasi secara  mikroskopis  menggunakan  teknik pewarnaan Gram untuk melihat bentuk sel dan sifat Gram.

## Uji Katalase
Sebanyak  1  ose  isolat  bakteri  diulaskan  di atas  object  glass  menggunakan  jarum  ose. Reagen H 2 O 2 kemudian diteteskan di atas ulasan isolat  bakteri.  Interpretasi  positif  ditandai
dengan  tidak  adanya  gelembung  gas  di  atas ulasan isolat.

## Uji Oksidase
Isolat  bakteri  diambil  sebanyak  1  ose  dan diulaskan  pada  kertas  saring.  Kertas  saring ditetesi dengan 1-2 tetes reagen (tetramethyl-D- phenylenediamine dihydrochloride). Interpretasi positif  ditandai  dengan  adanya  perubahan warna menjadi biru marun pada ulasan bakteri.

## Hasil Penelitian dan Pembahasan
Sebanyak 30 isolat bakteri dengan karakter morfologi koloni berbeda berhasil diisolasi dari sampel tanah, sampah dapur dan kotoran sapi. Seluruh  isolat  diskrining  pada  medium  CMC agar,  SA,  dan  SMA  untuk  menguji  aktivitas selulolitik,  amilolitik,  dan  proteolitik  secara kualitatif. Pengujian secara kualitatif merupakan tahapan  awal dalam  melihat  potensi  enzimatis isolat  bakteri  untuk  mendegradasi  komponen yang terkandung dalam sampah organik.
Sebanyak  6  dari  30  (20%)  isolat menunjukkan  aktivitas  amilolitik,  yaitu  Tn6, Tn8,  Tn9,  Tn11,  Tn13,  dan  SD10.  Hal  ini ditunjukkan dengan zona jernih disekitar koloni (Gambar 1a). Zona jernih / transparan di sekitar koloni  bakteri  dengan  latar  belakang  kebiruan mengindikasikan  aktivitas  hidrolisis  amilum oleh  bakteri  (Awan  et  al.,  2018).  Reagen  iodin yang  digunakan  sebagai  indikator  akan menghasilkan warna kebiruan apabila membentuk kompleks dengan polimer karbohidrat  yang  terdapat  pada  medium pertumbuhan bakteri. Terbentuknya zona jernih menunjukkan bahwa enzim amilase ekstraseluler  bakteri  telah  mendegradasi amilum menjadi gula sederhana.
Sebanyak  7  dari  30  (23%)  isolat menunjukkan  aktivitas  selulolitik,  yaitu  Tn6, Tn13,  SD1,  SD5,  KS1,  KS3,  dan  KS4.  Hal  ini ditunjukkan dengan zona jernih disekitar koloni (Gambar  1b).  Zona  jernih  terbentuk  karena kandungan  CMC  dalam  medium  telah didegradasi  oleh  enzim  selulase  ekstraseluler bakteri menjadi molekul yang lebih sederhana. Reagen  Congo-red  hanya  dapat  berinteraksi dengan  β-(1-4)-D-glukan  dalam  CMC  sehingga membentuk warna merah.
Taruna Dwi Satwika, Dwiana Muflihah Yulianti, Arif Rahman Hakim

## Gambar 1
Aktivitas Enzimatis Isolat Bakteri. A. Amilolitik; B. Selulolitik; C. Proteolitik.

## Tabel 1
Jumlah Isolat dan Hasil Skrining Aktivitas Amilolitik, Selulolitik, dan Proteolitik
Sampel Jumlah Isolat Penapisan Amilolitik  Selulolitik  Proteolitik Tanah 14 5 2 3 Kotoran Sapi 6 0 3 0 Sampah Dapur 10 1 2 0 Total 41 6 7 3
Bakteri  proteolitik  tidak  ditemukan pada sampel sampah dapur. Hal ini diduga karena  sampah  dapur  yang  kami  ambil didominasi oleh sisa makanan dari tanaman seperti  nasi  dan  sayuran.  Oleh  karena  itu, bakteri  yang  terpicu  pertumbuhannya adalah  bakteri  selulolitik  dan  amilolitik. Beberapa  penelitian  telah  melaporkan keberadaan bakteri selulolitik dan amilolitik pada  sampah  rumah  tangga  (Hasan  et  al., 2017;  Maki  et  al.,  2012).  Hal  menarik ditunjukkan  pada  sampel  kotoran  sapi. Hanya  bakteri  selulolitik  yang  terdeteksi pada  sampel  tersebut.  Dominasi  bakteri selulolitik  kemungkinan  terjadi  karena kandungan  selulosa  yang  masih  dominan pada  kotoran  sapi.  Keberadaan  bakteri selulolitik  pada  kotoran  sapi  telah  banyak dilaporkan  (Akhtar  et  al.,  2013;  Chahar  & Prakash, 2017).
Aktivitas  selulolitik,  amilolitik,  dan proteolitik ditunjukkan pada Tabel 2. Indeks selulolitik, amilolitik, dan proteolitik secara berurutan  berkisar  dari 1,14-2,35 ;  0,42- 2,72;  dan 1,26-1,99 (Tabel  2).  Indeks selulolitik,  amilolitik  dan  proteolitik  ter- tinggi  secara  berurutan  ditunjukkan  oleh isolat  KS4,  Tn13,  dan  Tn24.  Nilai  indeks selulolitik,  amilolitik,  dan  proteolitik  lebih dari 1 menunjukkan bahwa diameter zona jernih lebih besar dari diameter koloni. Hal ini  menunjukkan  bahwa  isolat  bakteri menghasilkan enzim ekstraseluler.
Sebanyak  2  isolat  menunjukkan aktivitas  selulolitik  dan  amilolitik,  yaitu isolat Tn6 dan Tn13. Kedua isolat tersebut diisolasi  dari  tanah.  Hasil  yang  sama ditunjukkan  oleh  penelitian  Sarkar  et  al., (2011)  yang  berhasil  memperoleh  isolat bakteri  asal  tanah  dengan  kemampuan selulolitik dan amilolitik.

## Tabel 1
Jumlah Isolat dan Hasil Skrining Aktivitas Amilolitik, Selulolitik, dan Proteolitik
Kode Isolat Asal Isolat Indeks Selulolitik  Indeks Amilolitik  Indeks Proteolitik Tn2 Tanah - - 1,26±0,07 Tn3 Tanah - - 1,52±0,15 Tn6 Tanah 2,30±0,26 2,12±0,11 - Tn8 Tanah - 1,35±0,08 - Tn9 Tanah - 1,92±0,56 - Tn11 Tanah - 0,42±0,72 - Tn13 Tanah 1,21±0,14 3,43±0,36 - Tn24 Tanah - - 1,99±0,34 SD1 Sampah Dapur 2,05±0,27 - - SD5 Sampah Dapur 1,14±0,03 - - SD10 Sampah Dapur - 2,53±0,09 - KS1 Kotoran Sapi 1,24±0,05 - - KS3 Kotoran Sapi 1,71±0,29 - - KS4 Kotoran Sapi 2,35±0,22 - - Tabel 2
Jumlah Isolat dan Hasil Skrining Aktivitas Amilolitik, Selulolitik, dan Proteolitik
Kode Isolat Morfologi Koloni Morfologi Sel Oksidase Katalase Bentuk Warna Elevasi Margin Karakter optik Bentuk Gram Tn2 Sirkuler Putih Raised Entire Opaque Coccus + - + Tn3 Sirkuler Kuning Raised Entire Opaque Coccus + + + Tn6 Sirkuler Krem Raised Entire Opaque Coccus + + + Tn8 Irregular Orange Raised Lobate Translucent Coccus + + + Tn9 Irregular Krem Flat Undulate Opaque Coccus + + + Tn11 Sirkuler Bening Raised Entire Translucent Coccus + + + Tn13 Sirkuler Putih Raised Entire Translucent Basil + + + Tn24 Sirkuler Kuning Raised Entire Opaque Coccus + + + SD1 Sirkuler Krem Flat Entire Opaque Basil - + + SD5 Irregular Putih Flat Undulate Translucent Basil + + + SD10 Sirkuler Krem Raised Entire Opaque Coccus + + + KS1 Sirkuler Krem Flat Entire Opaque Basil - + + KS3 Sirkuler Krem Flat Entire Translucent Basil + + + KS4 Irregular Krem Flat Lobate Opaque Basil - - +
Taruna Dwi Satwika, Dwiana Muflihah Yulianti, Arif Rahman Hakim
Isolat  bakteri  selulolitik,  amilolitik, dan proteolitik  yang  diperoleh  menunjukkan keragaman karakter baik dari segi morfologi koloni  maupun  morfologi  sel  (Tabel  3). Berdasarkan karakter morfologi sel, 8 isolat merupakan  bakteri  gram  positif  coccus,  3 isolat  gram  positif  basil  dan  3  isolat  gram negatif  basil.  Isolat-isolat  bakteri  dengan kemampuan  selulolitik,  proteolitik,  dan amilolitik  yang  diperoleh  didominasi  oleh bakteri  Gram  positif.  Beberapa  penelitian sebelumnya  mendukung  hasil  tersebut. Sebanyak  7  dari  8  isolat  bakteri  amilolitik yang  diisolasi  dari  tanah  dan  sampah merupakan bakteri Gram positif (Saha et al., 2019).
Sebanyak  12  isolat  menunjukkan  sifat oksidase  positif  dan  katalase  positif, sedangkan  2  isolat  menunjukkan  oksidase negatif dan katalase positif (Tabel 3). Bakteri aerob  dan  fakultatif  anaerob  umumnya mampu  menghasilkan  enzim  katalase (Madigan  et  al.,  2015).  Enzim  katalase berperan  dalam  mendegradasi  hidrogen peroksida  (H 2 O 2 )  yang  bersifat  toksik menjadi  air  dan  oksigen.  Uji  oksidase merupakan  uji biokimia  untuk  mendeteksi adanya  sitokrom  oksidase.  Sitokrom oksidase merupakan  enzim  yang berperan dalam  rantai  transport  elektron  pada respirasi  aerobik.  Hasil  uji  katalase  dan oksidase  menunjukkan  bahwa  12  isolat merupakan bakteri obligat aerob,
sedangkan  2  isolat  diduga  merupakan fakultatif  anaerob. Hasil  ini sejalan dengan Akhtar  et  al.  (2013)  yang  mendapatkan  3 isolat  dengan  aktivitas  katalase  dan oksidase.  Metode  isolasi  yang  digunakan mempengaruhi  karakteristik  isolat  yang diperoleh.  Inkubasi  medium  pertumbuhan pada  saat  isolasi  pada  penelitian  ini dilakukan dalam keadaan aerobik sehingga mendukung  pertumbuhan  bakteri  aerob
maupun  fakultatif  anaerob.  Sedangkan bakteri obligat anaerob akan terhambat.
Isolat-isolat  bakteri  dengan  aktivitas selulolitik,  amilolitik,  dan  proteolitik  yang diperoleh  membuktikan  bahwa  tanah, sampah dapur dan kotoran sapi merupakan sumber bakteri potensial sebagai
pendegradasi  sampah  organik.  Isolat-isolat bakteri  yang  diperoleh  masih  perlu  diuji lebih  lanjut  aktivitas  enzimatisnya  secara kuantitatif  dan  kemampuannya  dalam mendegradasi  sampah  organik.  Selain  itu, isolat  bakteri  yang  diperoleh  belum diketahui  identitas  spesiesnya  sehingga perlu dilakukan karakterisasi biokimia dan molekuler untuk mengetahui identitasnya.

## Simpulan dan Saran

## Simpulan
Sebanyak  30  isolat  bakteri  berhasil diisolasi  dari  tanah,  sampah  dapur  dan kotoran sapi. Dari 30 isolat tersebut, 7 isolat menunjukkan  aktivitas  selulolitik,  6  isolat menunjukkan  aktivitas  amilolitik,  dan  3 isolat  menunjukkan  aktivitas  proteolitik. Berdasarkan  sifat  morfologi  dan  biokimia, isolat-isolat bakteri yang memiliki aktivitas selulolitik,  amilolitik,  dan  proteolitik menunjukkan  karakteristik  yang  berbeda- beda.  Isolat-isolat  bakteri  dengan  aktivitas selulolitik,  amilolitik  dan  proteolitik berpotensi sebagai kandidat agen pendegradasi sampah organik.

## Ucapan Terima Kasih
Ucapan terima kasih penulis sampaikan kepada Lembaga Penelitian dan Pengabdian kepada  Masyarakat  Universitas  Jenderal Soedirman  atas  dukungan  berupa  dana penelitian  yang  bersumber  dari  DIPA UNSOED Tahun Anggaran 2020.

## Daftar Pustaka
Akhtar,  N.,  Sharma,  A.,  Deka,  D.,  Jawed, M., Goyal,  D.,  &  Goyal,  A.  (2013). Characterization of cellulase producing Bacillus sp. for effective degradation of leaf  litter  biomass.  Environmental Progress  and  Sustainable  Energy. https://doi.org/10.1002/ep.11726
Awan, K., Jabeen, F., Manzoor, M., & Qazi, J. I. (2018).  Potential  of  thermophilic amylolytic  bacteria  for  growth  in unconventional  media:  Potato  peels. Journal  of  Food  Process  Engineering, 41(1), 1–7. https://doi.org/10.1111/jfpe.12635 Chahar, P. J., & Prakash, A. (2017). Isolation and  Molecular  Characterization  of Cellulolytic  Microbes  From  Cow  Dung. 6(1), 1–4.
Chiarelotto, M.,  Bottin,  W. C.,  Spicker,  C.  E., Duarte, S. S., Chiarelotto, M., & Bortoli, M. M. (2018). Composting of household organic  waste:  effect  on  control parameters  and  final  compound quality. Revista Agro@Mbiente On-Line, 12(4), 272. https://doi.org/10.18227/1982- 8470ragro.v12i4.5126
Echeverria,  M.  C.,  Cardelli,  R.,  Bedini,  S., Agnolucci, M., Cristani, C., Saviozzi, A., & Nuti, M. (2011). Composting Wet Olive
Husks  with  a  Starter  Based  on  Oil- Depleted  Husks  Enhances  Compost Humification.  Compost  Science  and Utilization, 19(3), 182–188. https://doi.org/10.1080/1065657X.2 011.10736998
Hasan, M. M., Marzan, L. W., Hosna, A., Hakim, A., & Azad, A. K. (2017). Optimization of some  fermentation  conditions  for  the production  of  extracellular  amylases by  using  Chryseobacterium  and Bacillus isolates  from  organic  kitchen wastes. Journal of Genetic Engineering and  Biotechnology,  15(1),  59–68.
https://doi.org/10.1016/j.jgeb.2017.0 2.009
Islam,  F.,  &  Roy,  N.  (2018).  Screening, purification  and  characterization  of cellulase  from  cellulase  producing bacteria  in  molasses.  BMC  Research Notes. https://doi.org/10.1186/s13104- 018-3558-4
Jabir, D. M., & Jabir, M. M. (2016). A study of biodegradation  of  paper  wastes  by using  bacteria  isolated  from  the  soil.
Asian Journal of Microbiology, Biotechnology  and  Environmental Sciences, 18(3), 777–780. https://doi.org/10.13140/RG.2.2.336 01.97124
Jini, R.,  Swapna,  H.  C., Rai, A. K.,  Vrinda, R., Halami,  P.  M.,  Sachindra,  N.  M.,  & Bhaskar,  N.  (2011).  Isolation  and characterization of potential lactic acid bacteria  (LAB)  from  freshwater  fish processing  wastes  for  application  in fermentative  utilisation  of  fish processing waste.  Brazilian Journal  of Microbiology. https://doi.org/10.1590/S1517- 83822011000400039
Krishna,  M.  P.,  &  Mohan,  M.  (2017).  Litter decomposition in forest ecosystems: a review. Energy, Ecology and Environment, 2(4), 236–249. https://doi.org/10.1007/s40974- 017-0064-9 Lal, A., & Cheeptham, N. (2012). Starch agar protocol. American  Society for Microbiology.
Liang, Y. L., Zhang, Z., Wu, M., Wu, Y., & Feng, J.  X.  (2014).  Isolation,  screening,  and identification  of  cellulolytic  bacteria from  natural  reserves  in  the subtropical  region  of  China  and optimization of cellulase production by Paenibacillus  terrae  ME27-1.  BioMed
Research International. https://doi.org/10.1155/2014/5124
Taruna Dwi Satwika, Dwiana Muflihah Yulianti, Arif Rahman Hakim
97
Madigan,  M.,  Martinko,  J.  M.,  Bender,  K.  S., Buckley,  D.  H.,  &  Stahl,  D.  A.  (2015). Brock: Biology of the Microorganisms.
In Journal of Chemical Information and Modeling. Maki, M. L., Idrees, A., Leung, K. T., & Qin, W. (2012). Newly isolated and characterized  bacteria  with  great application potential for decomposition of lignocellulosic biomass. Journal of Molecular Microbiology and Biotechnology, 22(3),
156–166.
https://doi.org/10.1159/000341107
Mazzucotelli, C. A., Ponce, A. G., Kotlar, C. E., & Moreira, M. del R. (2013). Isolation and characterization  of  bacterial  strains with a hydrolytic profile with potential use  in  bioconversion  of  agroindustial by-products  and  waste.  Food  Science and  Technology,  33(2),  295–303. https://doi.org/10.1590/S0101- 20612013005000038
Mishra,  S.,  &  Behera,  N.  (2008).  Amylase activity of a starch degrading bacteria isolated  from  soil  receiving  kitchen wastes. African Journal of Biotechnology,  7(18),  3326–3331. https://doi.org/10.5897/AJB08.582
Rashid,  G.  M.  M.,  Durán-Peña,  M.  J., Rahmanpour, R., Sapsford, D., & Bugg, T.  D.  H.  (2017).  Delignification  and enhanced  gas  release  from  soil containing lignocellulose by treatment with bacterial lignin degraders. Journal of Applied Microbiology. https://doi.org/10.1111/jam.13470 Saha, M. L., Islam, K. N., Akter, T., Rahman, I. A., Islam, T., & Khan, T. (2019). Isolation
and  identification  of  amylolytic bacteria from garbage and garden soil.
Bangladesh Journal of Botany. https://doi.org/10.3329/BJB.V48I3.4 7915 Sarkar,  P.,  Meghvanshi,  M.,  &  Singh,  R.
(2011). Microbial Consortium: A New Approach  in  Effective  Degradation  of Organic Kitchen Wastes. International
Journal  of  Environmental  Science  and Development. https://doi.org/10.7763/ijesd.2011.v
2.118
Silaban, S., Marika, D. B., & Simorangkir, M. (2020). Isolation and characterization of  amylase-producing  amylolytic bacteria from rice soil samples. Journal of  Physics:  Conference  Series,  1485(1). https://doi.org/10.1088/1742- 6596/1485/1/012006
Soundra Josephine, F., S, R. V, Devi, N., Babu Ganapa, S., & G, S. K. (2012). Isolation, production  and  characterization  of protease from Bacillus Sp isolated from soil sample. Journal of Microbiology and Biotechnology Research Scholars Research  Library  J.  Microbiol.  Biotech. Res.
Utomo,  M.  A.  P.  and  S.  M.  (2014).  Bakteri Tanah  Pendegradasi  Bahan  Organik. 3(2), 80–83.
Woo,  H.  L.,  Hazen,  T.  C.,  Simmons,  B.  A.,  & DeAngelis,  K.  M.  (2014).  Enzyme activities  of  aerobic  lignocellulolytic bacteria  isolated  from  wet  tropical forest  soils.  Systematic  and  Applied Microbiology, 37(1), 60–67. https://doi.org/10.1016/j.syapm.201 3.10.001