http://jurnal.farmasi.umi.ac.id/index.php/fitofarmakaindo/index

## Aktivitas Gastroprotektif Kombinasi Madu dan Virgin Coconut

## Oil (Cocos nucifera) pada Model Tikus Tukak Lambung
Lita Widyastuti 1* , Rina Herowati 1 , M. Wahyu Ariawan 2 , Ika Purwidyaningrum 1
1 Program Studi S2 Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi Surakarta
2 Program Studi S1 Farmasi, STIKES Adila
Article info Abstrak History Submission : 16-10-2023
Review : 10-02-2024 Accepted : 21-05-2024
* Email: litawidyastuti72@gmail.com
DOI: 10.33096/jffi.v11i1.1064
Kata Kunci: gastroprotektif; madu; VCO (Cocos nucifera); kombinasi
Tukak  lambung yakni sebuah  kerusakan yang terjadi terhadap  jaringan mukosa,  submukosa  hingga  lapisan  otot lambung,  kondisi  ini disebabkan  hipersekresi  asam  lambung.  Kandungan  Zat  VCO mempunyai efek berupa gastroprotektif dikarenakan mencakup senyawa flavonoid,  fenol,  katalase,  asam  askorbat,  serta  vitamin  E,  sementara pada VCO mencakup octanoic acid, δ-Octalactone, dodecanoic acid, δ- Decalactone,  asam  asetat.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  memahami aktivitas gastroprotektif akibat pemberian kombinasi madu dengan VCO terhadap  tikus  yang  diinduksi  aspirin.  Madu  dan  VCO  pada  pemberian tunggal mencakup satu dosis, yakni 14 ml/kgBB madu dan 10 ml/kgBB VCO,  sementara  dalam  perlakuan  kombinasi  diberi  tiga  dosis,  yakni 10,5;  7;  3,5  ml/kgBB  madu  dan  7,5;  5;  2,5  ml/kgBB  VCO.  Kemudian dalam  perlakuan  dikombinasi  diberi  5  variasi  dosis,  yakni  madu  dan VCO  (7:7,5);  (7:5);  (7:2,5);  (10,5:5);  (3,5:5)  ml/kgBB.  Kadar  TNFα sebelum  diinduksi  aspirin,  sesudah  diinduksi  aspirin,sesudah  terapi madu  dan  VCO,  dan  pengamatan  makroskopis  pada  perlakuan  tunggal memperlihatkan pemberian madu dan VCO dengan dosis 10,5 ml/kgBB dan  5  ml/kgBB  memperlihatkan  efek  gastroprotektif  dibanding  dosis lain.  Kemudian  dalam  pengujian  histopatologi  untuk  dosis  dengan  efek gastroprotektif  bisa  mengembalikan  kohesi  sel  mukosa  dimana  sudah rusak  sebelumnya  dikarenakan  erosi.  Kombinasi  dari  madu  dan  VCO menunjukkan hasil gastroprotektif pada dosis 10,5 ml/kgBB madu serta 5 ml/kgBB VCO
Abstract Keywords: gastroprotective; honey; VCO (Cocos nucifera); combination Gastric ulcers are damage that occurs to the mucosal tissue, submucosa and  the  muscle  layer  of  the  stomach,  this  condition  is  caused  by hypersecretion  of  stomach  acid.  The  substance  content  of  VCO  has  a gastroprotective  effect  because  it  includes  flavonoid  compounds, phenols,  catalase,  ascorbic  acid,  and  vitamin  E,  while  VCO  includes octanoic  acid,  δ-Octalactone,  dodecanoic  acid,  δ-Decalactone,  acetic acid.  The  aim  of  this  research  is  to  understand  the  gastroprotective activity  resulting  from  giving  a  combination  of  honey  and  VCO  to aspirin-induced  rats.  Honey  and  VCO  in  single  administration  include one  dose,  namely  14  ml/kgBW  honey  and  10  ml/kgBW  VCO,  while  in combination  treatment  three  doses  are  given,  namely  10.5;  7;  3.5 ml/kgBB  honey  and  7.5;  5;  2.5  ml/kgBB  VCO.  Then  in  the  combined treatment,  5  variations  of  doses  were  given,  namely  honey  and  VCO (7:7.5);  (7:5);  (7:2.5);  (10.5:5);  (3.5:5)  mL/kgBB.  TNFα  levels  before being induced by aspirin, after being induced by aspirin, after honey and VCO  therapy,  and  macroscopic  observations  on  a  single  treatment showed  that  administration  of  honey  and  VCO  at  doses  of  10.5 mL/kgBW and 5 mL/kgBW showed a gastroprotective effect compared to other  doses.  Then,  in  histopathological  testing,  doses  with gastroprotective  effects  can  restore  mucosal  cell  cohesion  which  has been previously damaged due to erosion. The combination of honey and VCO  showed  gastroprotective  results  at  a  dose  of  10.5  ml/kgBB  honey and 5 mL/kgBB VCO .

## I. Pendahuluan
Tukak  lambung  ataupun  ulkus  peptikum yakni  sebuah  kerusakan  yang  terjadi  terhadap jaringan dari mukosa, submukosa, hingga lapisannya  otot  lambung,  yang  terjadi  disebabkan hipersekresi asam lambung (Wells et al. , 2017).
Patogenesis timbulnya tukak lambung yakni ketidakseimbangan  antara  faktor  agresif  dapat mengakibatkan  kerusakan  untuk  mukosa  (asam lambung,  NSAID  ataupun  obat-obat  antiinflamasi non-steroid,  bakteri Helicobacter  pylori ,  alkohol). Besarnya kematian secara angka dikarenakan tukak lambung  secara  umum  adalah  pendarahan  serta perforasi  dikarenakan  konsumsi  etanol  berlebih (Selverajah et al. , 2016).
Obat yang sering digunakan untuk menyembuhkan  tukak  lambung  yaitu  Omeprazol. Omeprazol  menjalankan  kerjanya  dengan  selektif, yakni  melalui  penghambatan  karbonat  anhidrase mukosa  dan  berfungsi  sebagai  antioksidan  kuat untuk  mengais  radikal  bebas  oksigen  serta pencegah oksidatif kerusakan dengan meningkatkan  peroksidasi  lipid  serta  protein oksidasi,  dalam percobaan  diadakan  menggunakan tiga  berbeda  model  maag,  menekankan,  diinduksi indometasin  dan  pilorus  diinduksi  ligasi  model (Meng et al. , 2019).
Parameter  yang  digunakan  pada  penelitian ini  adalah  TNFα.  TNF-α  adalah  sitokin proinflamasi  yang  berperan  penting  dalam  respon baik  akut  maupun  kronis  pada  infeksi  virus, bakteri,  dan  parasit.  Semakin  tinggi  kadar  TNFα menandakan adanya inflamasi yang semakin parah. Pemilihan TNFα karena sel  T yang diaktifkan dan sel  mesotial  sehingga  merangsang  produksi  IL-6, IL-8,  dan  RANTES  ( Regulated  on  Activation, Normal T cell Expressed and Secreted ) (Bradley et al. , 2011).
Madu mempunyai efek terapi pada gangguan  serta  infeksi  saluran  pencernaan  yang bisa  membuat  pH  dari  lambung  naik  dikarenakan mempunyai  kandungan  mineral  selayaknya  K + , Mg + ,  Ca + ,  serta  Na + dengan  sifat  basa  serta mempunyai  fungsi  selaku  buffer.  Flavonoid memiliki  aktivitas  pembentukan  mukosa  lambung, menurunkan  lesi  ulerogenik,  inhibisi  produksi pepsinogen,  serta  menekan  sekresi  lambung (Molan, 2006).
Kandungan dalam minyak kelapa didominasi  asam  laurat  sebesar  48,40-52,84%  dari kandungannya  asam  lemak.  Kandungan  total fenolik serta antioksidan DPPH (IC 50 ) dari  minyak kelapa  masing-masing  didapatkan  1,16-12,54  mg asam  galat  setara  (GAE)/g  serta  7,49-104,52 mg/mL (Ghani et al. , 2018). VCO secara signifikan (p<0,05)
menghambat  akibat  stres  ulkus  dibandingkan dengan  omeprazole.  VCO  memiliki  kandungan flavonoid dan aktivitas meningkatkan lendir sekresi
dan  juga  berperan  dalam  menekan  pembentukan ROS (Meng et al. , 2019).
Efek  terapi  yang  dimiliki  madu  adalah pembentukan  mukosa  lambung,  menurunkan  lesi ulerogenik,  inhibisi  produksi  pepsinogen,  serta menekan  sekresi  lambung,  dan  sebagai  buffer (menetralkan  asam  lambung).  Efek  terapi  pada VCO  adalah  meningkatkan  sekresi  lendir  sehingga dapat  melindungi  mukosa  lambung  dan  juga berperan  dalam  menekan  pembentukan  ROS (Selverajah et al ., 2016). Dari efek terapi madu dan VCO diharapkan dapat memberikan efek kombinasi yang sinergis dalam penyembuhan tukak lambung  jika  dibandingkan  penggunaan  madu  dan VCO pada dosis tunggal.

## II. Metode Penelitian
II.1 Uji Fitokimia Madu dan VCO

## II.1.1 Uji Flavonoid
Sejumlah  1  mL  sampel  (madu  +  VCO) dimasukkan  ke  tabung  reaksi,  tambahkan  5  tetes etanol kocok sampai homogen. Kemudian tambahkan  serbuk  Mg,  lalu  tambahkan  5-6  tetes HCl.  Terbentuk  warna  orange  ataupun  merah positif flavonoid.

## II.1.2 Uji Fenolik
Sejumlah  1  mL  sampel  (madu  +  VCO) dimasukkan dalam tabung reaksi, tambahkan FeCl 3 3-4  tetes.  Positif  mengandung fenol  muncul  warna hitam kebiruan atau hitam pekat.

## II.2 Alat dan Bahan II.2.1 Alat
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini meliputi alat alat gelas laboratorium, jangka sorong, gunting  bedah,  kamera  digital  (Nikon),  kaca penutup,  mikroskop  elektrik,  neraca  listrik,  oral sonde,  spatula,  spuit  3cc,  pH  meter,  ELLISA  kit, dan timbangan hewan.

## II.2.2 Bahan
Sampel  yang  digunakan  pada  penelitian  ini adalah  madu  murni,  VCO,  omeprazol,  aspirin, tween80,  span80,  kloroform,  kapas,  NADPH, Sulfosalycylic  acid  5%,  alkohol, n -heksan,  air,  etil asetat,  larutan  Netral  Buffer  Formalin  10%  untuk fiksasi, haematoxylline-eosin, Na 2 HPO 4 ( Disodium Hidrogen  Phosphat  anhidrat )  dan  NaH 2 PO H 2 O ( Monosodium Phosphat ).

## II.3  Uji  Aktivitas  Gastroprotektif  Madu  dan Minyak Kelapa II.3.1 Pemberian Aspirin
Dosis  aspirin  yang  diberikan  yaitu  40  mg /200gBB  secara  oral.  Pemberian  aspirin  diberikan 12  hari  sebelum  pemberian  madu,  VCO,  dan kombinasinya.

## II.3.2 Pemberian Madu
Dosis pemberian madu ini diberikan dengan dosis  14  mL/kgBB  (Ariami  et  al.,  2015).  Dosis madu diberikan sehari sekali selama 14 hari.

## II.3.3 Pemberian VCO
Pemberian VCO pada penelitian ini diberikan  dengan  dosis  10  mL/kgBB (Deanne  et al ., 2016).

## II.3.4 Pemberian Kombinasi Madu dan VCO
Pemberian  dosis  kombinasi  madu  dengan VCO  dibuat  dalam  beberapa  perbandingan. Perbandingan  pemberian  dosis  kombinasi  bisa diperhatikan melalui Tabel 1.
Tabel 1. Dosis kombinasi madu dengan VCO
Madu (mL/kgBB) VCO (mL/kgBB) 7 7 7
10,5 3,5 7,5 5 2,5 5 5

## II.4 Pengukuran Kadar TNFα
Pengukuran  kadar  TNFα  dilakukan  pada hari  ke-0,  hari  ke-12  setelah  diinduksi  dengan aspirin,  dan  hari  ke-26  setelah  pemberian  terapi madu dan VCO. Sampel berupa darah vena diambil 1  mL  menggunakan  tabung  non  EDTA  dilakukan sentrifugasi  selama  10  menit  pada  1000x  g kemudian  sampel  dipisahkan  dan  serumnya disimpan  pada  suhu  <-20°C.  Sampel  yang  berupa serum darah menggunakan metode ELISA Sandwich.
II.5 Pengukuran pH Cairan Lambung pH  lambung  tikus  diukur  setelah  hari  ke  26 setelah  diterapi  dengan  madu  dan  VCO  melalui pembedahan  abdomen,  selanjutnya  pilorus  serta esophagus  diikat.  Keluarkan  lambung  melalui pemotongan  duodenum  sisi  atas  serta  esophagus. Injeksikan NaCl  0,2 mL pada lambung selanjutnya bedah  bagian  kuvatura  mayor,  keluarkan  cairan lambung,  ditampung  serta  tentukan  pH  dari  cairan lambung  tersebut  mempergunakan  pH  meter (Suhatri, Rusdi and Sugesti, 2015).

## II.6 Penilaian Jumlah Tukak
Lambung  dari  tikus  setelah  hari  ke  26  yang sudah  diukur  pH  dilakukan  pembedahan  lambung kemudian lambung dibentangkan serat diperhatikan jumlah tukaknya. Penilaian untuk banyaknya tukak dilaksanakan  dengan  berdasar  pada  kriteria  Tabel 2.
Tabel 2. Penilaian Jumlah Tukak (Gerhard, 2002)
Nilai Keterangan
1 Lambung normal
2 Bintik pendarahan ataupun tukak berjumlah 1
3 Tukak berjumlah 2-4
4 Tukak berjumlah 5-7
5 Tukak berjumlah 8-10
6 Tukak berjumlah > 10 ataupun perforasi

## II.7 Penilaian keparahan tukak
Penilaian  untuk  keparahan  lambung  ini dilaksanakan  melalui  pengukuran  diameter  dari tukak lambung tikus yang sudah melalui pembedahan mempergunakan jangka sorong setelah lambung dihitung jumlah tukak pada hari ke 26.  Gerhard  (2002)  menjelaskan,  penentuan seberapa  parah  pembentukan  tukak  dalam  mukosa lambung bisa diperhatikan melalui kriteria
Tabel 3. Penilaian keparahan tukak

## II.8 Uji Histopatologi
Pada  uji  histopatologi  dilakukan  hari  ke  26 setelah  dilakukan  pengukuran  pH,  jumlah  tukak, dan penilaian keparahan tukak. Lambung diawetkan pada larutan formalin.
III. Hasil dan Pembahasan
III.1 Karakterisasi Madu dan VCO Tabel 4. Hasil karakterisasi Karakterisasi Madu VCO Organoleptik Bentuk Cairan kental dan lengket Cairan agak kental Warna Kuning kecoklatan jernih Tidak berwarna (jernih) Rasa Manis Tidak berasa seperti minyak Bau Bau khas madu Bau khas VCO Kadar Air 16,55% 0,32% Kadar Abu Total 0,01% 0% Kadar Abu Tidak Larut Asam 0% -
Hasil  dari  kadar  air  pada  VCO  (Tabel  4) menunjukkan sesuai persyaratan Farmakope Herbal Indonesia  yaitu  tidak  lebih  dari  10%  tetapi  madu tidak  memenuhi  persyaratan.  Hasil  dari  kadar  abu total dan kadar abu tidak larut asam pada madu dan VCO  menunjukkan  sesuai  dengan  persyaratan Farmakope  Herbal  Indonesia  yaitu  tidak  lebih  dari 9,0% (Kementerian Kesehatan RI, 2017).

## III.2 Hasil Uji Fitokimia Madu dan VCO
Pada  penelitian  ini  dilakukan  uji  fitokimia pada  sampel  madu  dan  VCO  bertujuan  untuk

## Nilai  Keterangan
1 Lambung normal
2 Bintik pendarahan ataupun tukak berdiameter 0,5 mm
3 Tukak berdiameter 0,5-1,0 mm
4 Tukak berdiameter 1,0-1,5 mm
5 Tukak berdiameter 1,5-2,0 mm
6 Tukak berdiameter > 2,0 mm ataupun perforasi
mengetahui  kandungan  metabolit  sekunder  yang terkandung.  Uji  fitokimia  yang  dilakukan  pada penelitian  ini  meliputi  uji  flavonoid  dan  fenolik. Hasil  uji  fitokimia  dari  madu  dan  VCO  dapat dilihat pada Tabel 5.
Tabel 5. Hasil uji fitokimia Uji Senyawa Hasil Reaksi Sampel Madu VCO Flavonoid  Warna orange + + Fenolik Warna hitam kebiruan atau hitam pekat + +
Keterangan:  (+)  adanya  senyawa  metabolit  sekunder,  (-)  tidak ada senyawa metabolit sekunder

## II.2 Hasil Kadar TNF α
Pengukuran kadar TNFα dalam plasma tikus dilakukan  dengan  metode EIisa  sandwich .  H asil yang didapat dapat dilihat pada Tabel 6.
Pada H12 saat  dilakukan pengukukan kadar TNFα  setelah  penginduksian  aspirin  diperoleh kadar  TNFα  pada  kisaran  8  –  409  pg/mL.  Data yang  terkumpul  dilakukan  uji  statistik,  data menunjukkan  terdistribusi  normal  dan  homogen, kemudian  di  uji  ANOVA  test Tukey ,  terdapat perbedaan  antara  kelompok  normal  dengan  semua kelompok  (p  >0,05),  sehingga  Menurut  Popa (2007),  peningkatan  TNFα  dikarenakan  kondisi jaringan  yang  mengalami  luka  akan  memberikan respon  tubuh  berupa  radang  sehingga  akan mengaktivasi  fosfolipase  yang  akan  membebaskan asam  arakidonat  dan  fosfolipid  sel  sehingga  akan mengaktivasi makrofag untuk mengeluarkan sitokin  proinflamasi  seperti Tumor  Necrosis Factor-α (TNFα).

## Tabel 6. Hasil kadar TNFα
Kelompok Perlakuan Kadar TNFα (pg/mL) H0 H12 ∆H12 H26 ∆H26 Normal 25,50±10,37 31,50±12,04 b 6±4,47 b 36,50±12,04 bc 11±7,42 b Negatif 30,50±14,40  414,50±15,57 a 384±16,73 a 436,50±16,05 ac 406±18,51 ac Positif 40,50±9,75 422,50±18,51 a 382±17,89 a 81,50±16,05 ab 41±17,10 b Madu 14 mL/kgBB 54,50±11,94  418,50±30,21 a 364±34,89 a 88,50±7,91 ab 34±15,17 b VCO 10 mL/kgBB 46,50±14,40  410,50±26,38 a 364±33,05 a 202,50±14,32 abc 156±12,45 abc Madu : VCO (50:75) 68,50±7,91 420,50±13,51 a 352±15,25 a 120,50±10,37 abc 52±7,58 abc Madu : VCO (50:50) 21,50±9,08 430,50±24,90 a 409±28,59 a 154,50±25,37 abc 133±18,91 abc Madu : VCO (50:25) 38,50±14,58  416,50±20,19 a 378±30,94 a 157,50±23,02 abc 119±17,82 abc Madu : VCO (75:50) 36,50±10,37  422,50±16,36 a 386±8,94 a 81,50±11,51 ab 45±14,58 ab Madu : VCO (25:50) 31,50±12,04  413,50±25,74 a 382±35,46 a 188,50±14,58 abc 157±16,81 abc
Keterangan:  ∆H12=  H12-H0;  ∆H26:  H26-H0; a =  signifikan  berbeda  terhadap  kelompok  normal; b =  signifikan  berbeda  terhadap kelompok negatif; c = signifikan berbeda terhadap kelompok positif
Gambar 1. Grafik kadar TNFα H26
Hasil  pengukuran  kadar  TNFα  pada  H26 (Gambar 1) menunjukkan adanya penurunan kadar TNFα  pada  kelompok  hewan  uji  yang  diberikan sampel  madu,  VCO,  kombinasi  madu  dan  VCO, dan  kontrol  positif  (Omeprazol)  berpengaruh terhadap  penurunan  kadar  TNFα.  Data  hasil pengukuran kadar TNFα pada kelompok kombinasi madu  dan  VCO  (75:50)  dan  madu  14  ml/kgBB
sebanding  dengan  kelompok  kontrol  positif  karena letak  subsite  ke  3  kelompok  tersebut  sama. Kelompok  kombinasi  madu  dan  VCO  (50:75) sebanding  dengan  kelompok  madu  14  mL/kgBB karena letak subsitenya sama. Kelompok kombinasi madu  dan  VCO  (50:50)  sebanding  dengan kelompok  kombinasi  madu  dan  VCO  (50:25). Kelompok  kombinasi  madu  dan  VCO  (25:50)
0 50 100 150 200 T NF α Kelompok Perlakuan ∆H26
sebanding  dengan  kelompok  kombinasi  madu  dan VCO  (50:25).  Kelompok  VCO  10  ml/kgBB sebanding  dengan  kelompok  kombinasi  madu  dan VCO  (25:50)  dan  sebanding  dengan  kelompok kombinasi madu dan VCO (50:50).
Peningkatan kadar TNFα terjadi pada semua kelompok  dengan  berada  di  subsite  yang  sama kecuali  pada  kelompok  kontrol  normal.  Hasil statistik  dapat  dilihat  pada  Lampiran  20.  Hal tersebut  disebabkan  karena  adanya  inflamasi jaringan  akibat  luka  eksisi  tanpa  diberikan  terapi. Kelompok  kontrol  normal  digunakan  sebagai indikator  normal  pada  kadar  TNFα  dan  berfungsi sebagai  pembanding  dengan  kelompok  kontrol negatif,  kontrol  positif,  dan  kelompok  perlakuan dengan  pemberian  madu,  VCO,  dan  kombinasi madu dan VCO.
III.3  Hasil  Rata-Rata  pH  Lambung  Tikus  Pada Pemberian  Madu,  VCO,  dan  Kombinasi  Madu Dan VCO Tabel 7. Hasil rata-rata pH lambung tikus Kelompok Perlakuan Rata – rata Normal 4,91±0,07 bc Negatif 2,96±0,05 ac Positif 5,52±0,02 b Madu 14 mL/kgBB 5,22±0,03 abc VCO 10 mL/kgBB 5,20±0,01 abc Madu : VCO (50:75) 5,24±0,03 abc Madu : VCO (50:50) 5,21±0,02 abc Madu : VCO (50:25) 5,17±0,01 abc Madu : VCO (75:50) 5,40±0,05 ab Madu : VCO (25:50) 5,18±0,04 abc a signifikan berbeda terhadap kelompok normal b signifikan berbeda terhadap kelompok negatif
c signifikan berbeda terhadap kelompok positif
Kelompok  normal  menunjukkan  rata-rata pH  getah  lambung  sebesar  4,91  (Tabel  7).  Pada kelompok kontrol positif (omeprazol) menunjukkan rata-rata  pH  yang  paling  tinggi  yaitu  sebesar  5,52. Pada  kelompok  kontrol  negatif  memiliki  rata-rata pH  yang  paling  rendah  sebesar  2,96.  Pada
kelompok  perlakuan  yang  diberikan  madu  dan VCO  pemberian  tunggal  maupun  kombinasi hasilnya tidak jauh berbeda pada kelompok kontrol positif.  Pada  kelompok  kombinasi  madu  dan  VCO (75:50)  memberikan  hasil  yang  sebanding  dengan kontrol positif jika dibandingkan dengan kelompok perlakuan yang lain yaitu sebesar 5,40.

## III.4 Hasil uji efek gastroprotektif madu, VCO, dan kombinasi madu dan VCO terhadap jumlah tukak.
Pengamatan  jumlah  tukak  lambung  dilihat dengan kasat  mata pada lambung tikus yang sudah dibedah  pada  hari  ke  26  setelah  diberikan  terapi madu  dan  VCO  dan  setelah  dilakukan  pengukuran pH  lambung.  Hasil  pengamatan  jumlah  rata-rata tukak  lambung  untuk  masing-masing  kelompok dapat dilihat pada Tabel 8.
Tabel 8. Hasil rata-rata dari jumlah tukak lambung Kelompok Perlakuan Rata – rata Normal 1,0±0,00 bc Negatif 5,4±0,55 ac Positif 1,2±0,45 b Madu 14 mL/kgBB 1,6±0,55 b VCO 10 mL/kgBB 4,0±0,00 abc Madu : VCO (50:75) 2,8±0,45 abc Madu : VCO (50:50) 3,8±0,45 abc Madu : VCO (50:25) 3,8±0,45 abc Madu : VCO (75:50) 1,2±0,45 b Madu : VCO (25:50) 4,2±0,45 abc
a signifikan berbeda terhadap kelompok normal b signifikan berbeda terhadap kelompok negatif c signifikan berbeda terhadap kelompok positif
III.5  Hasil  Uji  Efek  Gastroprotektif  Madu, VCO, dan Kombinasi Madu dan VCO terhadap Keparahan Tukak.
Penilaian keparahan tukak lambung didaptakan  dari  hasil  pengukuran  diameter  tukak lambung  pada  lambung  tikus  yang  diukur menggunakan  jangka  sorong.  Hasil  rata-rata keparahan  tukak  lambung  tikus  dapat  dilihat  pada Tabel 9.
Tabel 9. Hasil rata-rata dari keparahan tukak lambung
Kelompok Perlakuan Rata – Rata Keparahan Tukak Indeks Tukak Normal 1,2±0,45 b 12,2 Negatif 5,8±0,45 ac 21,2 Positif 1,2±0,45 b 12,4 Madu 14 mL/kgBB 2,2±0,45 abc 13,8 VCO 10 mL/kgBB 3,8±0,45 abc 17,8 Madu: VCO (50:75) 3,2±0,45 abc 16,0 Madu: VCO (50:50) 3,2±0,45 abc 17,0 Madu: VCO (50:25) 3,2±0,45 abc 17,0 Madu: VCO (75:50) 1,6±0,55 b 12,8 Madu: VCO (25:50) 3,4±0,55 abc 17,6
a signifikan berbeda terhadap kelompok normal; b signifikan berbeda terhadap kelompok negatif;
c signifikan berbeda terhadap kelompok positif

## III.6 Hasil Pengamatan Secara Mikroskopis (Histopatologi)
Tabel 10. Hasil penilaian uji histopatologi lambung
Kelompok Perlakuan Hasil Rata-rata Skor Normal 1 hewan tidak ada perubahan patologi dan 2 hewan terlihat infiltrasi limfosit dalam kategori ringan (normal) di tunika sub mukosa. Kongesti 0,00 Negatif 3  hewan  oedema  di  tunika  submukosa  disertai  infiltrasi  limfosit  dalam kategori  berat.  Dan  2  hewan  adanya  nekrosis  sebagian  epithel  tunika submucosa 3,00 Positif 3  hewan  terlihat  infiltrasi  limfosit  dalam  kategori  ringan  (normal)  di  tunika sub mukosa. 1 hewan terdapat oedema ditunika submucosa. 0,67 Madu 14 mL/kgBB 1  hewan  ada  oedema  ditunika  submukosa  2  hewan  adanya  infiltrasi  limfosit dalam  kategori  ringan  (normal)  dan  1  hewan  kategori  sedang  di  tunika  sub mukosa. 1,00 VCO 10 mL/kgBB 3  hewan  oedema  di  tunika  submukosa  disertai  infiltrasi  limfosit  dalam kategori sedang 2 hewan kategori berat dan adanya nekrosis sebagian epithel tunika submucosa 2,67 Madu : VCO (50:75) 3  hewan  oedema  di  tunika  submukosa  disertai  infiltrasi  limfosit  dalam kategori sedang 2 hewan kategori berat dan adanya nekrosis sebagian epithel tunika submucosa 2,33 Madu : VCO (50:50) 2  hewan  oedema  di  tunika  submukosa    3  hewan  adanya  infiltrasi  limfosit  2 kategori  berat  1  kategori  sedang.  2  hewan  adanya  nekrosis  sebagian  epithel tunika submucosa 2,33 Madu : VCO (50:25) 2  hewan  oedema  di  tunika  submukosa    3  hewan  adanya  infiltrasi  limfosit  2 kategori  berat  1  kategori  sedang.  2  hewan  adanya  nekrosis  sebagian  epithel tunika submucosa 2,33 Madu : VCO (75:50) 2 hewan oedema dan 3 hewan terlihat infiltrasi limfosit dalam kategori ringan (normal) di tunika sub mukosa. 0,67 Madu : VCO (25:50) 3  hewan  oedema  di  tunika  submukosa  disertai  infiltrasi  limfosit  dalam  2 hewan  kategori  berat  1  hewan  kategori  sedang.  2  hewan  adanya  nekrosis sebagian epithel tunika submucosa 2,67 Tabel 11. Hasil rata-rata dari uji histopatologi Kelompok Perlakuan Rata – rata Normal 0,00±0,00 b Negatif 3,00±0,00 ac Positif 0,67±0,58 b Madu 14 mL/kgBB 1,00±0,82 b VCO 10 mL/kgBB 2,67±0,58 abc Madu : VCO (50:75) 2,33±0,58 abc Madu : VCO (50:50) 2,33±0,58 abc Madu : VCO (50:25) 2,33±0,58 abc Madu : VCO (75:50) 0,67±0,58 b Madu : VCO (25:50) 2,67±0,58 abc
a signifikan berbeda terhadap kelompok normal b signifikan berbeda terhadap kelompok negatif c signifikan berbeda terhadap kelompok positif
Berdasarkan hasil analisis statistik data tidak normal,  sehingga  dilanjutkan  statistik Kruskal Wallis ,  hasil  menunjukkan  perbedaan  signifikan  (p <0,05).  Hasil  dari  rata-rata  uji  histopatologi lambung  yang  memiliki  hasil  paling  tinggi  ialah pada  kelompok  kontrol  negatif  sebesar  3.  Hasil analisa statistik, kelompok kontrol positif (omeprazol),  madu  14  ml/kgBB,  kombinasi  madu dan  VCO  (75:50)  tersebut  tidak  ada  perbedaan signifikan  terhadap  kelompok  kontrol  normal. Ketiga  kelompok  tersebut  memiliki  hasil  yang sebanding dengan kelompok kontrol normal.
Omeprazol,  madu,  dan  VCO  memiliki kandungan  sebagai  antiinflamasi  dan  antioksidan
sehingga  membantu  regenerasi  sel  yaitu  sel  yang baru  akan  mengganti  sel  yang rusak/mati  sehingga dari  hasil  uji  histopatologi  memberikan  hasil  tidak ada perbedaan signifikan dengan kelompok kontrol normal. Sehingga histopatologi lambung dari ketiga kelompok  tersebut  sebanding  dengan  histopatologi kelompok  kontrol  normal.  Hasil  tersebut  dapat diketahui bahwa madu dan VCO dapat memberikan efek  gastroprotektif  dalam  mengurangi  kerusakan mukosa lambung.
Profil histopatologi lambung pada kelompok madu 14 mL/kgBB dan kombinasi madu dan VCO (75:50)  tidak  ada  perbedaan  signifikan  dengan profil  kelompok  kontrol  positif,  hal  ini  sejalan dengan  kemampuan  madu  dan  VCO  memberikan proteksi  ulcer  yang  lebih  tinggi  dibanding kelompok  lainnya.  Madu  dan  VCO  memiliki kandungan  sebagai  antiinflamasi  dan  senyawa fenol  sebagai  antioksidan  sehingga  membantu regenerasi  sel  yaitu  sel  yang  baru  akan  mengganti sel yang rusak/mati, regenerasi sel berlangsung 1-3 hari yang diperankan oleh sel epitel diregulasi oleh prostaglandin.  Namun  demikian  dapat  dikatakan bahwa  madu  dan  VCO  mampu  memberikan  efek perlindungan  pada  lambung  yang  diakibatkan  oleh aspirin.  Aktivitas  antiulcer  yang  ditunjukkan  oleh kelompok  madu  dan  VCO  pemberian  tunggal maupun  kombinasi,  diyakini  karena  aktivitas antioksidan  dan  antiinflamasi  dari  komponen fitokimia yang dikandungnya.
Pengaruh  gastroprotektor  dalam  kombinasi madu  dosis  10,5  ml/kgBB  dan  VCO  5  ml/kgBB (75:50) terbukti menaikkan pH lambung, menurunkan  jumlah  tukak  dan  indeks  tukak  serta adanya  perbaikan  histopatologi  lambung  yang rusak akibat induksi aspirin

## IV. Kesimpulan
Pemberian  madu  dan  VCO  memberikan efek perlindungan terhadap lambung pada kelompok  perlakuan  madu  dan  VCO  pemberian tunggal  terdapat  perbedaan  signifikansi  pada kelompok negatif. Serta kombinasi madu dan VCO (75:50)  paling  berpengaruh  dalam  menurunkan kadat  TNFα,  meningkatkan  pH  lambung, menurunkan  jumlah  tukak  dan  nilai  keparahan tukak lambung.

## Daftar Pustaka
Ariami,  P.,  Suliastiningsih,  H.  and  Diarti,  M.W.
(2015)  ‘Profil  Leukosit  Tikus  Putih  Yang
Diberi  Air  Seduhan  Kelopak  Bunga  Rosela Merah  (  Hibiscus  sabdariffa  )’, Jurnal
Kesehatan Prima , 9(2), pp. 1534–1545. Bradley,  J.S. et  al. (2011)  ‘The  Management  of Community-Acquired  Pneumonia  in  Infants and  Children  Older  than  3  Months  of  Age: Clinical Practice Guidelines by The Pediatric  Infectious  Diseases  Society  and The Infectious Diseases Society of
America’, Clinical  Infectious  Diseases ,
53(7).
Available
at: https://doi.org/10.1093/cid/cir531.
Gerhard,  V.H.  (2002) Drug  Discovery  and Evaluation . Germany: Springer Verlac . Ghani,  N.A.A. et  al. (2018)  ‘Physicochemical properties, antioxidant capacities, and metal contents  of  virgin  coconut  oil  produced  by wet  and  dry  processes’, Food  Science  and Nutrition ,  6(5),  pp.  1298–1306.  Available at: https://doi.org/10.1002/fsn3.671. Kementerian  Kesehatan  RI  (2017)  ‘Farmakope Herbal  Indonesia.  In  Pocket  Handbook  of Nonhuman  Primate  Clinical  Medicine  (II)’. Available
at:
https://doi.org/https://doi.org/10.1201/b1293 4-13. Meng, J. et al. (2019) ‘Study of The Mechanism of Anti-Ulcer Effects of Virgin Coconut Oil on Gastric Ulcer-Induced Rat Model’, Archives of  Medical  Science ,  15(5),  pp.  1329–1335.
Available at:
https://doi.org/10.5114/aoms.2018.76943. Molan,  P.C.  (2006)  ‘The  evidence  supporting  the use  of  honey  as  a  wound  dressing’, International  Journal  of  Lower  Extremity Wounds ,  5(1),  pp.  40–54.  Available  at: https://doi.org/10.1177/1534734605286014. Selverajah,  M. et  al. (2016)  ‘Anti-ulcerogenic activity  of  virgin  coconut  oil  contribute  to the  stomach  health  of  humankind’, Tang
[Humanitas  Medicine] ,  6(2),  pp.  11.1-11.7.
Available at:
https://doi.org/10.5667/tang.2015.0031.
Suhatri,  S.,  Rusdi,  R.  and  Sugesti,  E.  (2015) ‘Pengaruh  Pemberian  Sari  Wortel  (Daucus carota  L.)  terhadap  Tukak  Lambung  Pada Tikus  Putih  Jantan’, Jurnal  Sains  Farmasi
&  Klinis ,  2(1),  p.  99.  Available  at: https://doi.org/10.29208/jsfk.2015.2.1.56.
Wells,  B.G. et  al. (2017) Pharmacotherapy
Handbook,Tenth Edition , McGraw-Hill
Companies .