## EFEK APLIKASI GEL MADU RAMBUTAN PADA MUKOSA LABIAL INFERIOR TERHADAP KADAR MALONDIALDEHID (MDA) SALIVA

## EFFECTS OF APPLICATION OF RAMBUTAN HONEY GEL IN LABIAL INFERIOR MUCOSA ON SALIVA MALONDIALDEHYDE (MDA) LEVELS
Euis Reni Yuslianti 1 , Afifah B. Sutjiatmo 2 , Florence Meliawaty 1 , Mega Zhafarina 1
1 Prodi Kedokteran Gigi, Fakultas Kedokteran Universitas Jenderal Achmad Yani
2 Fakultas Farmasi, Universitas Jenderal Achmad Yani Corresponding Author: ery.unjani@yahoo.co.id

## Abstrak
Saliva  dapat  digunakan  sebagai  alternatif  dalam  penegakan  diagnosis,  prognosis,  dan  rencana perawatan.  Variasi  konsentrasi  saliva  dapat  digunakan  sebagai  biomarker  stres  oksidatif.  Radikal bebas  adalah  suatu  senyawa  atau  molekul  dengan  elektron  tunggal  atau  tidak  berpasangan. Ketidakseimbangan kadar radikal bebas dan antioksidan sel akan menyebabkan stres oksidatif, untuk meredam  radikal  bebas  dibutuhkan  antioksidan.  Stres  oksidatif  dapat  dilihat  dengan  mengukur perubahan  kadar  MDA (Malondialdehyde). Gel  madu  rambutan  merupakan  bahan  alami  yang  sudah banyak digunakan, karena memiliki banyak manfaat dan kandungan. Flavonoid merupakan salah satu kandungan  madu  rambutan,  fungsi  flavonoid  sebagai  antioksidan  peredam  radikal  bebas  MDAs. Penelitian  ini  bertujuan  melihat  efek  aplikasi  gel  madu  rambutan  terhadap  kadar malondialdehyde (MDA) saliva. Metode penelitian  ini  merupakan quasi eksperimental pre-post design dengan  jumlah responden  30  orang.  Teknik  pengambilan  sampel  penelitian  menggunakan consecutive  sampling . Responden  diminta  mengumpulkan  saliva  sebelum  dan  setelah  pengaplikasian  gel  madu  rambutan pada mukosa  mulut bagian labial inferior. MDA saliva diukur dengan  menggunakan TBARs metode spektrofotometri. Data dianalisis menggunakan uji Wilcoxon (p <0,05). Hasil penelitian menunjukkan terdapat  efek  pengaplikasian  gel  madu  rambutan  terhadap  kadar malondialdehyde (MDA)  saliva. Kesimpulan  penelitian  ini  bahwa  gel  madu  rambutan  mengandung  antioksidan  yang  dapat menurunkan kadar MDA.
Kata Kunci: Madu, Antioksidan, MDA Saliva

## Abstract
Saliva  can  be  used  as  an  alternative  in  establishing  the  diagnosis,  prognosis,  and  treatment  plan. Variations in salivary concentrations can be used as biomarkers of  oxidative  stress. Free radicals are molecules  or  compounds  which  have  unpaired  electrons.  Furthermore,  unbalanced  levels  of  free radicals and antioxidants can cause oxidative stress. In order to reduce free radicals, antioxidants are needed.  Rambutan  honey  gel  is  a  natural  ingredient  that  has  been  widely  used  since  it  has  many benefits  and  ingredients.  Flavonoid  is  one  of  rambutan  honey  contents.  Flavonoids  have  function  as donors of hydrogen groups. The aim of this study is to see the effect of application of rambutan honey gel  against  malondialdehyde  (MDA)  saliva  levels.  The  method  used  was  a  quasi-experimental  pre- post  design  with  30  respondents.  In  addition,  the  sampling  technique  used  consecutive  sampling. Respondents  would be asked to collect saliva before and after the application of rambutan honey gel in  the  inferior  labial  oral  mucosa.  Salivary  MDA  would  be  calculated  using  TBARs spectrophotometric method. Data were analyzed using the Wilcoxon test (p <0.05). The results show that  there  is  effect  of  application  of  rambutan  honey  gel  against  malondialdehyde  (MDA)  saliva levels.  The  conclusion  is  that  rambutan  honey  gel  contains  antioxidants  which  can  reduce  MDA contents.
Keywords: Honey, Antioxidants, Saliva MDA

## PENDAHULUAN
Saliva merupakan salah satu dari kelenjar eksokrin  yang  berasal  dari  glandula  salivarius. Kandungan  dalam  saliva  yaitu  imunoglobulin A  ( secretory  IgA ),  mineral,  elektrolit, buffer , enzim,  dan  zat-zat  pembuangan  metabolik. Saliva  dapat  mencerminkan  kondisi  fisiologi tubuh  saat  ini,  oleh  karena  itu  saliva  disebut sebagai ‘cermin kesehatan organisme’. 1,2 Saliva memiliki  keunggulan  salah  satunya  dapat digunakan  dalam  alternatif  untuk  menegakkan diagnosis,  prognosis  dan  terapeutik.  Variasi konsentrasi  saliva  dapat  digunakan  sebagai biomarker  stres  oksidatif.  MDA  saliva  berasal dari  sumber  sistemik  dan  produksi  di  rongga mulut. 3 Radikal  bebas  sangat  reaktif  dan memiliki waktu paruh pendek, sehingga produk yang  terbentuk  dari  reaksi  ROS/RNS  dengan makromolekul seluler digunakan sebagai penanda biologis dari stres oksidatif. 4
Radikal  bebas  yang  sangat  reaktif  akan menyerang  molekul  stabil  terdekat.  Molekul radikal  bebas  akan mengambil elektron senyawa  lain  karena  molekul  atau  senyawa radikal  bebas  tidak  stabil  dengan  kandungan satu  atau  lebih  elektron  tidak  berpasangan. Molekul  radikal  bebas  dengan  elektron  tidak berpasangan  menimbulkan  tertariknya  secara kuat  pada  medan  magnet.  Kondisi  molekul radikal  bebas  tersebut  menyebabkan  molekul sangat  reaktif. 5,6 Stres  oksidatif  akan  terjadi ketika kadar radikal bebas dan kadar antioksidan  tidak  seimbang.  Peristiwa  stres oksidatif  dapat  menimbulkan  gangguan  fungsi biologis  seperti  kerusakan  fungsi,  bahkan kematian sel. Perubahan kadar Malondialdehyde (MDA)  dapat  memberikan gambaran kondisi stres oksidatif. 5,6 Antioksidan merupakan  peredam  untuk  radikal  bebas. Peredam  radikal  bebas  terdiri  atas  dua  jenis berdasarkan  sumbernya  yaitu  antioksidan enzimatik  (dalam  tubuh)  dan  nonenzimatik. Antioksidan  enzimatik  dapat  diperoleh  dari bahan  alam  sekitar  dan  dari  reaksi  kimia  yang disintesis  manusia.  Antioksidan  dari  bahan alam contohnya adalah madu. 6
Madu  telah  digunakan  sejak  peradaban Mesir  kuno,  Yunani,  Cina,  peradaban  Yahudi, Nasrani,  Islam,  hingga  masa  perang  Dunia  I. Madu  digunakan  dalam  berbagai  terapi  seperti pada  pembalutan  kasus-kasus  bedah  dalam membantu  penyembuhan  luka. 7-9. Madu  dapat dihasilkan  oleh  lebah  madu.  Lebah  madu menghisap  sari  bunga  tanaman  berupa  flora nektar  atau  bagian  lain  dari  tanaman  ekstra
flora  nektar.  Madu  merupakan  hasil  ekskresi dari  serangga.  Madu  merupakan  cairan  alami dengan  rasa  manis  yang  menyegarkan.  Setiap produk  madu  memiliki  karakteristik  yang berbeda-beda.  Sumber  nektar  yang  berbeda akan  mempengaruhi  sifat  fisik  madu.  Madu memiliki  berbagai  macam  senyawa  yang  dapat bermanfaat  bagi  tubuh.  Madu  mengandung antioksidan  seperti  flavonoid  dan  polifenol. Madu mengandung mineral diantaranya kalium, kalsium, natrium, magnesium, aluminium, besi, dan fosfor. Madu mengandung  vitamin  diantaranya    vitamin  B1, riboplavin  (B2),  vitamin  C,  Niasin,  vitamin  K, dan  asam  folat.  Madu  mengandung  enzim penting  yaitu  glukosa  oksidase,  peroksidase, lipase  dan  diastase  invertase.  Kandungan  yang terdapat  dalam  madu  tersebut  di  atas  dapat berfungsi  sebagai  antibakteri,  antiinflamasi, antioksidan, dan imunostimulan. 7-9 Madu rambutan  merupakan  madu  yang  diproduksi dari  nektar  bunga  rambutan  yang  termasuk  ke dalam  jenis  madu  monoflora  serta  digunakan untuk  obat  topikal  pada  luka  di  rongga  mulut karena  memiliki  aroma  dan  rasa  yang  baik. Madu rambutan memiliki kandungan antioksidan yaitu flavonoid. Flavonoid memiliki  aktivitas  biologis  seperti  antialergi, antiviral,  antiinflamasi,  dan  aksi  vasodilatasi. Flavonoid  adalah  salah  satu  senyawa  dari antioksidan  yang  mampu  dalam  mengurangi kadar  radikal  bebas.  Flavonoid  dikenal  sebagai aktivitas ekstender vitamin C melalui peningkatan  penyerapan  dan  perlindungan  dari stres oksidatif. Aktivitas antiinflamasi memiliki hubungan  dengan  kandungan  antioksidan  yang berada  di  dalam  madu  rambutan  yang  dapat melepaskan  ROS (Reactive  Oxygen  Species) yang  dapat  mengurangi  proses  inflmasi. 10-12
Madu rambutan telah melalui uji preklinik pada hewan  coba  dan  sudah  terbukti  keamanannya. Madu  rambutan  sudah  distandardisasi  dan dipatenkan dengan nomor hak paten P00201608676.  Namun  belum  ada  penelitian tentang  efek  aplikasi  gel  madu  rambutan terhadap kadar malondialdehyde (MDA) saliva, sehingga  peneliti  tertarik  untuk  melakukan penelitian  efek  aplikasi  gel  madu  rambutan terhadap kadar malondialdehyde (MDA) saliva. Pembaruan  dalam penelitian ini, belum ada uji keamanan  bahan  alam  menggunakan  madu rambutan  dalam  bentuk  sediaan  gel  pada manusia pada mukosa labial inferior dan dilihat efeknya pada kadar radikal bebas malondialdehid saliva.
Gel  atau  jeli  adalah  pembawa  yang digunakan  dengan  tujuan  pemberian  obat  pada bagian  mukosa,  salah  satunya  adalah  mukosa mulut.  Gel  mengandung  basis  air,  baik  yang bersifat hidrofilik maupun hidrofobik. Basis gel hidrofilik  menimbulkan  efek  pendinginan  pada kulit  saat  digunakan,  mempunyai  daya  lekat yang  tinggi,  mudah  dicuci  dengan  air  dan pelepasan  obatnya  baik. 13 Mukosa  bukal  dan labial dengan epitel nonkeratin mengalami turn over cell atau pergantian sel selama 14 hari. 14

## BAHAN DAN METODE Subjek Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  Maret 2020  di  RSGM  Universitas  Jenderal  Achmad Yani  (Unjani)  dan  Laboratorium  Biokimia Unjani.  Usia  responden  sekitar  20-23  tahun dengan  jumlah  wanita  27  orang  dan  laki-laki  3 orang.  Kriteria  inklusi  dalam  penelitian  yaitu responden  dengan  mukosa  mulut  bagian  labial inferior  sehat  tanpa  tanda-tanda  inflamasi, responden  sehat  tidak  ada  penyakit  sistemik diantaranya  diabetes  melitus  dan  hipertensi yang  diketahui  dari  rekam  medik  pasien, responden  dengan  umur  18-55  tahun  dan kompeten menurut  WHO,  dan  bersedia menandatangani  lembar  persetujuan  setelah penjelasan (informed consent) . Kriteria eksklusi adalah  responden  yang  memiliki oral  hygiene yang  buruk,    responden  yang  tidak  kooperatif (tidak  mengikuti  intruksi  yang  diberikan  oleh peneliti),  dan  mengundurkan  diri  selama penelitian.  Penelitian  ini  sudah  mengikuti protokol  etik  dari World  Medical  Association Deklarasi  Helsinki  tahun  2002  dan  CIOMS tahun  2016.    Penelitian  ini  telah  mendapatkan persetujuan  dari  Komite  Etik  Penelitian Kesehatan (KEPK) Fakultas Kedokteran Universitas Jenderal Achmad Yani (FK Unjani) Cimahi  Indonesia  dengan  nomor  persetujuan etik 017/UMI.03/2020. 15,16

## Metode Penelitian
Penelitian  ini  merupakan  penelitian quasi  eksperimental  pre-post  design sehingga tidak  perlu  menggunakan  kontrol  karena kelompok  responden yang  sama  diukur sebelum dan sesudah perlakuan. Fokus penelitian  melihat  efek  gel  madu  rambutan standar  farmasitikal  terhadap  kadar  MDA saliva pada mukosa labial inferior responden.

## Prosedur Pembuatan Gel Madu Rambutan
Alat  yang  digunakan  terdiri  dari  batang pengaduk,  beaker  glass  100  ml,  kaca,  arloji, gelas  ukur  100  ml,  kaca,  stemper  dan  mortar, sendok  stainless  stell,  viskometer,  timbangan, kaca,  wadah,  sediaan,  dan  pH  meter.  Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah gel madu rambutan dengan madu yang berasal dari Pusat  Perlebahan  Nasional  (Pusbahnas)  Perum Pehutani yang sudah distandardisasi di Laboratorium  Teknologi  Farmasi  Fakultas Farmasi  Universitas  Jenderal  Achmad  yani, Carbopol  940,  Na  CMC,  propil  paraben (C 10 H 12 O 3 ),  trietanolamin  (TEA),  dan  akuades (H 2 O).
Pembuatan  formulasi  sediaan  obat  gel madu  rambutan  dengan  menimbang  bahan- bahan  yang  akan  digunakan.  Sediaan  madu dibuat  dalam  bentuk  gel  agar  didapatkan  suatu sediaan obat yang stabil dan praktis diaplikasikan  ke  mukosa  mulut.  Carbopol dilarutkan  dalam  aquades  panas  sampai  larut ditambah  dengan  Na  CMC  yang  sudah dilarutkan  dengan  akuades  panas  dan  larutkan madu  rambutan  setelah  itu  campurkan  larutan propil  paraben.  Trietanolamin  ditambahkan sedikit demi sedikit dengan kecepatan pengadukan yang lebih tinggi sampai terbentuk gel  yang  homogen.  Gel  madu  rambutan  diuji stabilitas  sediaannya  dan  disimpan  dalam  tube steril 10ml sebanyak 30 buah tube gel madu.

## Pemeriksaan Intra Oral
Pemeriksaan  intra  oral  harus  dilakukan secara  berurutan  atau  sistematik  dalam  proses screening pasien.  Melakukan  pemeriksaan kebersihan  mulut  menggunakan Oral  Hygiene Index  Simplified (OHI-S)  dari  Green  dan Vermillion yang diperoleh dari hasil penjumlahan  antara  debris  indeks  dan  kalkulus indeks.  Pemeriksaan  bagian  mukosa  bukal, mukosa  labial,  palatum  durum,  dasar  mulut dapat  dilihat  secara  langsung  dan  tidak langsung.  Pemeriksaan  palatum  mole  berupa pemeriksaan  inpeksi  tanpa  palpasi.  Uvula dilihat dengan cara dicatat panjang atau pendek atau  uvula  yang  terlihat  asimetris  pada  saat istirahat.  Lidah  dapat  dilihat  secara  langsung maupun  tidak  langsung.  Pegang  ujung  lidah dengan  menggunakan  kasa  dan  gerakkan  jari dan ibu jari tangan yang sama di satu sisi untuk mengamati batas lateral kemudian ulangi untuk sisi lain. Gunakan kaca mulut untuk memeriksa bagian batas lateral posterior lidah. 17

## Metode Pengumpulan Saliva
Metode  pengumpulan  saliva,  terdiri saliva  sebelum  aplikasi  gel  madu  rambutan yaitu  saliva  dikumpulkan  pada  pagi  hari  dan saliva  setelah  aplikasi  gel  madu  pada  mukosa labial  inferior.    Prosedur  pengumpulan  saliva sebelum  diawali  responden  diminta  berpuasa selama  8  jam  untuk  tidak  mengonsumsi apapun,  kecuali  air  mineral.  Responden diberikan air minum untuk berkumur, kemudian setelah 5 menit berkumur, responden diminta  untuk  mengeluarkan  saliva.  Subjek mulai dengan membilas mulut mereka beberapa kali  dengan  air  mineral  dan  kemudian beristirahat  dengan  tenang  selama  3  menit. Saliva  utuh  yang  tidak  distimulasi  (4  ml) dikumpulkan.  Uji  coba  pengumpulan  dimulai dengan  instruksi  untuk  membersihkan  mulut dari  saliva  dengan  menelan.  Subjek  kemudian meludahkan saliva yang terakumulasi ke dalam tabung  reaksi  yang  disterilkan  setiap  satu menit.  Air  liur  dikumpulkan  selama  5  menit. Simpan  tabung  di  suhu  -10°C.  Kemudian dilakukan prosedur aplikasi gel madu rambutan pada  mukosa  labial  inferior. 18 Melakukan isolasi saliva dibagian labial inferior menggunakan  kassa,  aplikasikan  gel  madu sekitar  sebesar  biji  beras  (1,285  gram)  ke mukosa  labial  inferior  menggunakan  tangan yang telah memakai handscoon selama 5 menit sesuai yang prosedur akan dilakukan ketika tata laksana  pengobatan  nantinya.  Aplikasi  gel madu rambutan hanya dilakukan satu kali pada responden.    Saliva  didiamkan  mengumpul  di dasar  mulut  selama  3  menit  sebanyak  4  ml. Responden diminta untuk meludah tabung yang telah disiapkan.

## Prosedur Pemeriksaan Kadar MDA
Pemeriksaan kadar
MDA saliva menggunakan sebelum dan setelah aplikasi gel madu  rambutan  adalah  metode  TBARs  dengan spektrofotometri. Metode TBARs
menggunakan bahan larutan asam asetat (20 ml asam  asetat  96%  dalam  76  ml  H 2 O,  tentukan pH  3,6),  Larutan  asam  tiobarbiturat  (larutkan 0,8 asam 2-tiobarbiturat dengan 7 ml NaOH 1N tambahkan  H 2 O  sampai  100  ml,  tentukan  pH 3,6),  Larutan butylated  hydroxytoluene (BHT) (44  mg butylated  hidroxytoluene dalam  5  ml etanol  absolut),  larutan  EDTA  (1,488  g  EDTA dalam  50  ml  H 2 O  selalu  dibuat  baru),  dan larutan  standar.  Prosedur  dimulai  dengan memasukkan 400 μl saliva sebelum diaplikasikan  gel  madu  rambutan  ke  dalam
tabung  reaksi  1  dan  diberi  label  (Snormal), saliva setelah  diaplikasikan gel  madu rambutan ke  dalam  tabung  reaksi  2  dan  diberi  label (Smadu)  kemudian  kedua  tabung  ditambah akuades  300μl,  larutan  SDS  200  μl,  larutan BHT  50 μl,  larutan  EDTA  50  μl,  larutan asam asetat 1,5 ml, dan larutan TBA 1,5 ml.  Peneliti kemudian  menginkubasi  semua  tabung  dalam waterbath suhu  100 °C  selama  30  menit  dan menutup  setiap  tabung  dengan  kelereng. Selanjutnya  setiap  tabung  direndam  dalam  bak air es. Melakukan sentrifugasi dengan kecepatan  3000  rpm  selama  10  menit.
Mengambil  supernatan  dari  setiap  tabung  dan membaca absorbansinya dengan spektrofotometer pada λ 532 nm. 19

## Analisis Data
Analisis  data  uji  statistika  menggunakan Shapiro  Wilk  Test karena  data ≤ 50  untuk  uji normalitas  data  penelitian.  Analisis  statistik untuk  data  kategorik  berpasangan  diuji  dengan Mc Nemar . Uji
Wilcoxon
untuk membandingkan  variabel  data  numerik  antara sebelum  dan  sesudah  perlakuan  karena  data penelitian tidak berdistribusi normal. Kemaknaan  hasil  uji  statistik  ditentukan berdasarkan nilai p <0,05. Data hasil penelitian kemudian diolah dan dianalisis dengan program SPSS versi 24.0 forWindows.

## HASIL
Hasil  penelitian  yang  dilakukan  di RSGMP  Unjani  Cimahi  didapatkan  bahwa responden  berusia  20-23  tahun  dengan  jumlah 30 responden. Jumlah perempuan 27 orang  dan jumlah laki-laki 3 orang (Tabel 1).
Tabel  1.  Distribusi  Responden  Berdasarkan  Jenis Kelamin Jenis Kelamin n (%) Perempuan 27 (90) Laki-laki 3 (10)
Berdasarkan kategori usia, diketahui usia responden  terdiri  dari  20  tahun  sebanyak  5 orang,  21  tahun  sebanyak  14  orang,  22  tahun sebanyak10  orang,  dan  23  tahun  sebanyak  1 orang.
Perbandingan  Kadar  MDA  Saliva  Sebelum dan  Sesudah  Pengaplikasian  Gel  Madu Rambutan
Kadar
MDA
saliva sebelum
diaplikasikan gel madu rambutan yang tertinggi
adalah  1,82  μM  dan  terendah  adalah  0,3  μM. Kadar  MDA  saliva  setelah  diaplikasikan  gel madu  rambutan  yang  tertinggi  adalah  1,06  μM dan  terendah  adalah  0,04  μM.  Hasil  kadar rerata  MDA  (Tabel  3)  pada  saliva  sebelum adalah 0,565 μM dan sesudah adalah 0,362 μM.

## Tabel  2.  Kadar  MDA  Sebelum  dan  Sesudah Aplikasi Gel Madu Rambutan
Kadar MDA (μM) Rerata Standar Deviasi Nilai p N Sebelum 0,565 0,413 0,001* 30 Sesudah 0,362 0,234 0,002* 30 Keterangan: Uji Wilcoxon , *p < 0,05 bermakna
Berdasarkan  Tabel  3  dapat  diketahui bahwa  hasil  uji  statistika  dengan  uji Wilcoxon didapatkan  nilai  sebelum  perlakuan  p=0,001 dan  nilai  setelah  perlakuan  p=0,002.  Menurut ahli  statistik  hasil  ini  menunjukkan  bahwa terdapat perbedaan bermakna nilai kadar MDA saliva  sebelum  dan  setelah  diaplikasikan  gel madu  rambutan  secara  topikal  karena  nilai  p lebih  kecil  dari  0,05  (nilai  p<0,5).  Dengan demikian  dapat  dijelaskan  bahwa  terdapat perbedaan rerata yang signifikan secara statistik antara  kadar  MDA  pada  saliva  sebelum  dan sesudah  pengaplikasian  gel  madu  rambutan pada  bagian  mukosa  labial  inferior  sehat responden.

## PEMBAHASAN
Saliva  berfungsi  sebagai self  cleansing , penerima  ion,  lubrikasi,  dan  buffer  saliva. Saliva  memiliki  sistem  antioksidan  dengan berbagai  macam  variasi.  Saliva  mempunyai kandungan  enzim  dan  asam  urik  yang merupakan molekul antioksidan paling penting. Kadar  enzim  dan  asam  urik  terdiri  dari  70% total  antioksidan  pada  saliva. 20,21 Penelitian  ini merupakan  penelitian  awal  uji  keamanan sediaan  gel  madu  rambutan  yang  sudah distandardisasi farmasitikal pada mukosa mulut.  Mukosa  mulut  labial  inferior  dipilih karena  pertimbangan  kemudahan  pengamatan reaksi  yang  muncul  setelah  aplikasi  gel  madu rambutan.  Gel  madu  rambutan  merupakan suatu  sediaan  gel  dengan  isi  madu  rambutan yang  tinggi  antioksidan  untuk  menangkap radikal bebas.
Madu  rambutan  dalam  sediaan  gel kemungkinan  memiliki  aktivitas  antioksidan karena  mengandung  flavonoid  yang  dapat
menyintesis superoksida dismutase yang perannya  sama  seperti  enzim  katalase  dan vitamin  C.  Enzim  katalase  yang  terdapat  pada madu  rambutan  berfungsi  menetralkan  dan mempercepat  degradasi  senyawa  radikal  bebas untuk mencegah kerusakan komponen makromolekul  sel  termasuk  dalam  saliva. Saliva  pada  kondisi  fisiologis  menghasilkan radikal  bebas  MDA  karena  reaksi  reduksi- oksidasi  dalam  saliva  terus  berlangsung. Aplikasi  gel  madu  rambutan  diduga  dapat bersifat  antioksidan  pada  saliva  karena  ketika aplikasi  gel  madu  rambutan  selain  secara topikal  terabsorpsi  juga  dapat  larut  ke  saliva. 3 Enzim-enzim antioksidan saliva dapat mengalami  penurunan  aktivitas  akibat  kondisi stres  oksidatif.  Katalase  adalah  enzim  yang mengandung heme  yang  mengkatalis dismutasi hidrogen  peroksida  menjadi  air  dan  oksigen. Enzim ini ditemukan pada semua jenis eukariot aerob,  yang  penting  untuk  memusnahkan  H 2 O 2 yang  terbentuk  dalam  peroksisom  melalui reaksi  oksidasi,  seperti  oksidasi  asam  lemak, siklus  glikosilat  (dalam  fotorespirasi),  dan katabolisme  purin. 4 Hal  ini  dapat  terlihat adanya  perbedaan  kadar  MDA  saliva  sebelum aplikasi  dibandingkan  dengan  kadar  MDA saliva setelah aplikasi gel madu.
Antioksidan  apabila  tidak  mencukupi dalam  tubuh  atau  saliva  dapat  diperoleh  dari asupan  antioksidan  luar.  Antioksidan  tersebut diperlukan  untuk  meredam  radikal  bebas dengan  sifat  reaktivitas  sangat  tinggi.  Reaksi akibat  reaktivitas  radikal  bebas  pada  fase awal/fase  inisiasi  akan  menghasilkan  reaksi berantai dengan berlangsungnya fase propagasi dan  berakhir  di  fase  terminasi.  Salah  satu  jenis radikal bebas yang menimbulkan stres oksidatif adalah hydroxyl  radical (HO*).  Radikal  bebas ini  penyebab  putusnya  membran  lipid  sel  dan menghasilkan  suatu  zat  toksik  malodialdehid (MDA).  Radikal  bebas  MDA  dapat  diredam dengan antioksidan enzimatis dan nonenzimatis. 6,21,23
Kondisi  ketidakseimbangan  antara  kadar radikal bebas dalam tubuh dan antioksidan akan menyebabkan  stres  oksidatif.  Stres  oksidatif terjadi  apabila  radikal  bebas  yang  dihasilkan lebih  besar  dari  yang  diredam  oleh  mekanisme pertahanan  sel  tubuh.  Peristiwa  stres  oksidatif dapat  menimbulkan  gangguan  fungsi  biologis seperti  aktivitas  enzim,  integrasi  membran, hemostasis,  fungsi  sel  bahkan  kematian  sel. Stres  oksidatif  yang  menghasilkan  radikal bebas  MDA  dapat  menyebabkan  kerusakan
membran  sel,  menginaktivasi  fungsi  protein dalam  sel,  dan  merusak  DNA  secara  tidak langsung.  Kerusakan  DNA  sel  akibat  stres oksidatif  disebut  oksidasi  DNA.  Stres  oksidatif yang  berkepanjangan  dapat  menyebabkan radikal  bebas  merusak  membran  lipid  dari komponen  fosfolipid bilayer dari  dinding  sel, sehingga menyebabkan  kerusakan sel dan akan menyebar  ke  kerusakan  jaringan.  Hal  ini merupakan awal mulai dari proses etiopatogenesis  penyakit  kronik,  penyakit degeneratif, dan keganasan 6,21,23
Pemantauan kadar Malondialdehyde (MDA)  dapat  digunakan  sebagai  indikator penting  proses  peroksidasi  lipid  secara  in  vitro dan  in  vivo  dalam  berbagai  gangguan kesehatan.  Pembentukan  MDA  secara  endogen selama  proses  stres  oksidatif  intraseluler  dan reaksinya  dengan  DNA  membentuk  adisi MDA-DNA yang menjadikan biomarker penting  dari  kerusakan  DNA  endogen. 22 Molekul MDA dapat diturunkan oleh peroksidasi  lipid,  tetapi  juga  bisa  dihasilkan dari  metabolisme  fisiologis  dan  merupakan produk  yang  sangat  mutagen.  MDA  lebih  dari penanda  sederhana,  tetapi  sebagai  alarm  yang berisiko  tinggi  adanya  mutasi. 26 Antioksidan dalam  sel  memiliki  konsentrasi  rendah  dan secara  signifikan  mengurangi  atau  mencegah oksidasi  substrat  teroksidasi.  Antioksidan dalam  sel  mempunyai  konsentrasi  rendah  dan secara signifikan menurunkan atau menghambat  oksidasi  substrat  teroksidasi. Sumber  antioksidan  dapat  dibagi  menjadi  dua macam  yaitu  antioksidan  enzimatik  dan  non enzimatik yang bekerja sinergis untuk mencegah  sel  dan  organ  sistem  tubuh  terhadap kehancuran  yang  ditimbulkan  oleh  radikal bebas. 27
Madu  merupakan  produk  alam  yang memiliki  nutrisi  serta  sifat  terapeutik  karena adanya bahan bioaktif fitokimia. Madu mempunyai  sifat  antibakteri  dan  antioksidan. Antioksidan  pada  madu  terdiri  dari  komponen polipenol (asam fenolik dan flavonoid), vitamin C,  vitamin  E,  dan  enzim. 28 Madu  dapat berperan  sebagai  antioksidan,  antiinflamasi, antibakteri, antivirus, dan antijamur.
Kandungan  antioksidan  dalam  madu  dapat berperan  sebagai  penyumbang  atom  hidrogen, meningkatkan beta karoten, vitamin C, reduktasi  glutation  dan  asam  urik,  mengurangi radikal  bebas  dan  metalik  ion  kelasi  yang berperan sebagai substrat untuk radikal.
Keempat  hal  yang  terkandung  dalam madu  rambutan  tersebut  bertujuan  untuk menstimulasi  sel  melalui  struktur  molekul karbohidrat,  protein,  dan  asam  nukleat  untuk mengurangi  stres  oksidatif. 29 Madu  rambutan memiliki kandungan flavonoid terutama flavonoid  rutin  tinggi  yang  berfungsi  sebagai antioksidan  sekunder  nonenzimatik.  Struktur senyawa  fenolik  flavonoid  dalam madu rambutan  memiliki  dampak  penting  pada aktivitas  pembersihan  radikal  bebas.  Madu rambutan  juga  mengandung  kadar  vitamin  C cukup tinggi. Vitamin C merupakan antioksidan  sekunder  yang  berfungsi  meredam radikal  bebas  dengan  cara  mendonorkan elektron  bebasnya.  Senyawa  fenolik  dan vitamin  C  membantu  menjaga  membran  sel dalam  keadaan  normal  dengan  mengurangi kadar  MDA  hasil  dari  reaksi  peroksidasi  lipid. Apabila reaksi peroksidasi lipid berkurang oleh antioksidan  dalam  madu  rambutan  maka  kadar MDA  sel  akan  menurun.  Hal  ini  terbukti  dari hasil penelitian  diatas yaitu setelah aplikasi  gel madu  rambutan  maka  kadar  MDA  saliva responden menurun. 30

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian,  penurunan kadar  MDA  berhubungan  terhadap  pemberian aplikasi gel madu rambutan, yang ditandai oleh adanya  penurunan  rerata  sebelum  dan  sesudah pemberian  madu.  Hal  ini  menandakan  adanya penurunan  kadar  radikal  bebas  yang  diredam oleh  antioksidan madu  rambutan.  Perlu dilakukan  penelitian  tentang  uji  invivo  dan  uji klinik  untuk  gel  madu  rambutan  sebagai antioksidan obat luka.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian  ini  dibantu  oleh  staf  RSGMP Unjani  Cimahi  dan  Analis  Laboratorium Biokimia  Fakultas  Kedokteran  Universitas Jenderal Achmad Yani, Cimahi.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Balogh  MB,  Fehrenbach  MJ. Illustrated
Dental Embryology, Histology, and Anatomy .  3 rd ed.  Killney:  Elsevier;  2012: 132
2. SJ  Farnaud,  O  Kosti,  S.J  Getting,  and  D Renshaw. Saliva: physiology and diagnostic potential in health and disease. Scientific World Journal 2010; 10:
434–56.
3. Khoubnasbjafari  M,  Ansarin  K,  Jouyban A.  Salivary  malondialdehydes  as  an oxidatives  stress  biomarker  in  oral  and systemic  diseases. J  Dent  Clin  Dent Prospects 2016; 10 (2): 71-4.
4. Palmieri B, Sblendorio V. Oxidative stress tests:  overview  on  reliability  and  use.  Part II. Eur.  Rev.  Med.  Pharmacol.  Sci 2007; 11: 383–99.
5. Phaniendra  A,  Jestadi  DB,  Periyasamy. Free  radicals:  Properties,  sources,  targets, and  their  implication  in  various  diseases. Indian J Clin Biochem 2015; 30(1): 11-26. 6. Yuslianti ER. Radikal Bebas dan Antioksidan .  1 st .  Yogyakarta:  Deepublish; 2017
7. Marlina  N,  Yuslianti  ER,  Adiantoro  S. Pengaruh madu rambutan terhadap penyembuhan  luka  eksisi  mukosa  mulut tikus galur wistar dilihat dari luas luka dan vaskularisasi. Bionatura  Jurnal  Ilmu-ilmu Hayati dan Fisik 2014; 16: 172-75
8. Wulandari DD. Kualitas madu (keasaman, kadar  air,  dan  kadar  gula  pereduksi) berdasarkan perbedaan suhu penyimpanan. Jurnal Kimia Riset 2017; 2(1): 16-17.
9. Sumardhika  D.  Pengaruh  madu  topikal terhadap  tingkat  kecepatan  perbaikan kerusakan  kulit  leher  pascaradioterapi karsinoma  nasofaring.  Bandung:  Fakultas Kedokteran Universitas Padjadjaran 2013.
10. Yuslianti  ER,  Bachtiar  BM,  Suniarti  DF, Sutjiatmo  AB,  Mozef  T.  Effect  of rambutan-honey  and  its  flavonoid  on  tgf- β1  induce  fibroplasia  oral  wound  healing. Research  Journal  of  Medicinal  Plants 2016; 10(8): 439
11. Chayati I. Sifat fisiokimia madu monoflora dari  Daerah  Istimewa  Yogyakarta  dan Jawa  Tengah. Agritecth 2008;  28(1):  10- 11.
12. Yuslianti ER et al. Effect of topical honey pharmaceutical  grade  on  oral  mucosa wound  healing  based  on  tissue  wound closure and fibroblast proliferation in vivo. International  Journal  of  Pharmacology 2015; 11(7): 865-69
13. Ansel,  H.C. Pengantar  Bentuk  Sediaan Farmas i. IV. Jakarta: Universitas Indonesia Press; 1989.
14. Balogh  MB,  Fehrenbach  MJ. Illustrated
Dental Embryology, Histology, and Anatomy .  3 rd ed.  Killney:  Elsevier;  2012: 105.
15. Bandewar  SV. Cioms  2016. Indian  J  Med
Ethics 2 2017; 138-40. 16. Nicolaides, Angelo. Bioethical
considerations, the common good approach  and  some  shortfalls  of  the Belmont  Report. Medical  Technology  SA 2016; 30: 15-24.
17. Faculty  of  Medicine,  Jenderal  Achamd
Yani University. Buku praktikum keterampilan  medik  kedokteran  klinik  dan manifestasi oral. Cimahi 2018.
18. Baliga  S,  Muglikar  S,  Kale  R.  Salivary pH:  a  diagnostic  biomarker. J  Indian  Soc Periodontal 2013; 17(04): 461-65.
19. Fakultas  Kedokteran  Universitas  Jenderal Achmad  Yani.  Buku  pedoman  praktikum biomedik dasar 1. Cimahi. 2019.
20. Khalili  J,  Biloklytska  HF.  Salivary malondialdehyde levels in clinically healthy and periodontal diseased individuals. Oral  Diseases 2008;  14:  754- 60.
21. Deminice  R,  Sicchieri  T,  Payao  PO, Jordao  AA.  Blood  and  salivary  oxidative stress  biomarkers  following  and  acute session  of  resistance  exercise  in  humans.
Int J Sports Med 2010; 31(9): 599-603. 22. Banjarnahor  SDS,  Artanti  N.  Antioxidant properties  of  flavonoids. Med  J  Idones 2014; 23: (4): 239-44.
23. Fogarasi E, Crotoru MD, Fulop I, Nagy E, Tripon R, Szabo Z, dkk. Malondialdehyde levels can be measured in serum and saliva by using a fast HPLC method  with  visible detetion. Revista  romana  de  medicina  de laborator 2016; 24(3): 319-26.
24. Budi  AR,  Kadri  H,  Asri  A.  Perbedaan kadar  malondialdehid  pada  dewasa  muda obes dan non obes di Fakultas Kedokteran Universitas  Andalas. Jurnal  Kesehatan Andalas 2019; 8: 21-25.
25. Singh  Z,  Karthigesu  IP,  Singh  P,  Kaur  R. Use  of  malondialdehyde  as  a  biomarker for  assessing  oxidative  stress  in  different disease pathologies: a riview. Irian J Publ Health 2014; 43(3): 7-11.
26. Rio  DD,  Stewart  AJ,  Pollegrini  N.  A review of recent studies on malondialdehyde  as  toxic  molecule  and biological  marker of  oxidative stress. Nurt Metab  Cardiovasc  Dis 2015;  15(4):  316- 28.
27. Kurutas EB. The importance of antioxidants which play the role in cellular response against oxidative/nitrosative
stress:  current  state. Kurutas  Nutrition Journal 2016; 15(71): 1-22.
28. Dzugan  M,  Tomczyk  M,  Sowa  P,  Lejko DG.  Antioxidant  activity  as  biomarker  of honey variety. MDPI 2018; 23(8).
29. Ahmed  S,  Sulaiman  SA,  Baig  AA, Ibrahim  M,  Liaqat  S,  Fatima  S,  dkk. Honey  as  a  potential  natural  antioxidant medicine:  an  insight  into  its  molecular mechanisms  of  action.  Hindawi  Oxidative Medicine and Cellular Longevity 2018; 1- 19.
30. Yuslianti  ER,  Bachtiar  BM,  Suniarti  DF, Sutjiatmo  AB.  Antioxidant  activity  of rambutan honey: the free radical- scavenging  activity  in  vitro  dan  lipid peroxidation  inhibition  of  oral  mucosa wound tissue in vivo. Research Journal Of Medicinal Plants 2015; 9(5): 284-9.