Marine, Environment, and Fisheries
p-ISSN:
http://ejurnal.polnep.ac.id/index.php/manfish
Volume 1 Nomor 1 - Maret 2020 DOI:

## PENGARUH PERBEDAAN METODE SEX REVERSAL MENGGUNAKAN TEPUNG TESTIS SAPI TERHADAP MASKULINISASI IKAN NILA MERAH (Oreochromis niloticus)
Rizal Akbar Hutagalung 1
1 Program Studi Budidaya Perikanan, Jurusan Ilmu Kelautan dan Perikanan, Politeknik Negeri Pontianak Email: rizalakbarhutagalung.polnep@gmail.com

## ABSTRAK
Nila  jantan  terbukti  mempunyai  laju  pertumbuhan  lebih  tinggi  daripada ikan  nila  betina  sehingga budidaya ikan nila yang efektif adalah budidaya ikan nila monosex jantan dengan menerapkan sex reversal  pada  kegaitan  awal  pemeliharaan  larva.  Bahan  alami  yang  terbukti  mengadung  hormon metyl  testosterone alami  adalah  testis  sapi  yang  telah  diekstrak  menjadi  tepung.  Penelitian  ini bertujuan agar mengetahui metode yang paling efektif dalam aplikasi sex reversal pada larva nila. Metode  penelitian  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  dengan  metode  rancangan  acak lengkap menggunakan 3 perlakuan dan tiga ulangan. Perlakuan metode sex reversal pada penelitian ini adalah metoda oral (A) dengan dosis 9%/ kg pakan, dipping (B) 9 % / Liter air dan kontrol tanpa adanya  perlakuan,  yang  diaplikasikan  pada  100  ekor  larva  ikan  nila  berumur  7  hari.  Pengamatan berlangsung selama 50 hari setelah aplikasi dipping (30 Jam) dan 55 hari pemberian pakan selama pemeliharaan  larva  ikan.  Pengamatan  persentase  kelamin  jantan  dilakukan  secara  visual  dengan mengamati organ urogenital ikan ukuran 3-5 cm pada akhir pemeliharaan didapatkan bahwa rata rata hasil ikan jantan terbaik  pada perlakuan dipping yaitu 88,56 % diikuti perlakuan oral 77,3 % dan perlakuan kontrol mendapatkan persentase jantan 31%. Sedangkan SR terbaik pada perlakuan oral yaitu 95,5 % diikuti perlakuan perendaman 93,3% dan perlakuan kontrol 80%.
Kata kunci: sex reversal, oral, dipping, testis sapi, ikan nila.

## PENDAHULUAN
Kegemaran  masyarakat  akan  ikan  nila memotivasi  para  pembudidaya  ikan  untuk terus  meningkatkan  kapasitas  produksinya. Berbagai  metode  dan  sistem  pembesaran dilakukan agar produksi dapat terus ditingkatkan. Pemeliharaan Ikan Nila merupakan salah satu kegaitan budidaya ikan yang paling populer di Indonesia.
Produktifitas ikan nila yang semakin meningkat  seiring  dengan  meningkatnya permintaan  ikan  nila  sebagai  bahan  pangan. Ikan  Nila  relatif  mudah  dibudidayakan  dan mempunyai  laju  pertumbuhan  yang  cepat,
namun  kendala  saat  ini  yang  masih  banyak ditemukan  adalah  masih  tingginya  variasi ukuran pada proses pemeliharaan, hal tersebut disebabkan  masih  mengaplikasikan  pola budidaya  ikan heterosex (kelamin  jantan  dan betina  pada  satu  wadah  budidaya)  yang disinyalir  akan  menghambat  keseragaman pertumbuhan  dan  terjadinya  pemijahan  liar pada budidaya ikan nila.
Pada  umunya,  laju  pertumbuhan  ikan nila jantan tumbuh lebih cepat dibanding ikan betina  ,  baik  dalam  pemeliharaan  secara campuran  ( mix  sex )  maupun  secara  tunggal kelamin  ( monosex ).  Laju  pertumbuhan  nila
jantan  untuk  mencapai  ukuran  konsumsi sebesar  1,53-1,69  g  per  hari  lebih  cepat dibanding  dengan  ikan  nila  betina  yang pertumbuhannya  hanya  0,83-1,05  g  per  hari (Sucipto et al ., 2000). Budidaya monosex telah terbukti efisien dalam meningkatkan produksi ikan nila dan dapat memperbaiki pertumbuhan biomassa ikan nila (Phillay dan Kutty, 2005). Mengkaji  dari  hal  tersebut  maka  diharapkan para pembudidaya ikan dapat
membudidayakan ikan dengan tunggal kelamin ( monosex ) jantan dengan menurunkan kandungan  estrogen  dalam  tubuh  ikan, Penurunan  rasio  estrogen  terhadap  androgen mengakibatkan terjadinya perubahan penampakan  hormonal  dari  betina  menjadi menyerupai  jantan,  dengan  kata  lain  terjadi maskulinisasi  karakteristik  seksual  sekunder (Davis et al., 1999 dalam Sudrajat, dkk 2007).
Deferresiasi pembentukan kelamin larva ikan  nila  dapat  diarahkan  menjadi  tunggal kelamin  pada  awal  setelah  penetasan  telur. Oleh  sebab  itu,  maskulininasi  sebaiknya dilakukan  pada  umur  7-10  hari  setelah  telur menetas dan maksimal pada umur 17-19 hari (Suyanto,  1994;).  Teknik sex  reversal pada ikan  nila  yang  banyak  dilakukan  adalah dengan  penambahan  hormon  sintetik 17α- metiltestosterone
(17α- mt) . Namun berdasarkan Surat Keputusan Menteri
Kelautan  dan  Perikanan  nomor  KEP.20/ MEN/2003,  hormon 17α-mt termasuk  dalam klasifikasi  obat  keras  yang  berarti  bahwa peredaran  dan  pemanfaatannya  menjadi semakin  dibatasi  terkait  dengan  dampak negatif  yang  dapat  ditimbulkan.  Penggunaan bahan  alami  testis  sapi  diharapkan  menjadi hormon MT alami yang efektif pada kegiatan sex reversal , Muslim, dkk (2011) menyatakan bahwa testis sapi dapat menigkatkan rasio ikan jantan  pada  kegiatan sex  reversal .  Dengan penggunaan  bahan  alami  seperti  testis  sapi maka diharapkan dapat menjadi salah satu opsi pengganti  hormon  sistesis  menjadi  hormon
alami  yang  ramah  lingkungan  dan  tidak menimbulkan dampak negatif.
Penerapan sex  reversal pada  nila  dapat dilakukan dengan metode perendaman embrio,  perendaman  larva  dan  pemberian pakan (Supriyadi, 2005).  Metode pencapuran hormon  dengan    pakan  ( Oral )  dan  metode perendaman  ( Dipping )  menjadi  salah  satu metode yang aplikatif dapat mudah dilakukan oleh setiap pembudidaya ikan nila. Penelitian ini diharapakan dapat memberikan rekomendasi metode sex reversal yang paling efektif  dengan  menggunakan  bahan  alami seperti  tepung  testis  sapi  sebagai  sumber hormon metyl  testosteron yang  berdampak pada persentase jantan dan tingkat kelangsungan  hidup  larva  ikan  nila  selama proses pendederan.

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat
Penelitian  ini  dilakukan  di Workshop Budidaya  Ikan  Politeknik  Negeri  Pontianak, Larva Ikan Nila didapatkan dari sumber induk yang dipijahkan. Larva diseleksi sebanyak 300 ekor  (100  Ekor/  Perlakuan)  dengan  rata  rata panjang 0,8 cm  dan bobot  0,04 gr diletakkan dalam  akuarium  dan  diberi  pakan  benih dengan protein 40%. Dengan ukuran panjang, berat  dan  umur  tersebut  maka  diasumsikan larva  yang  digunakan  memiliki  umur  yang sama yaitu 5-7 hari.
Hormon yang digunakan adalah hormon metyl testosterone yang bersal dari testis sapi segar yang diekstrak menjadi tepung testis sapi yang telah dipersiapkan sebelumnya.
Penelitian  ini  menggunakan  metode rancangan acak lengkap dengan tiga perlakuan,  dan  tiga  kali  ulangan  pada  setiap perlakuan.  Dimana  setiap  perlakuan  dan ulangan  terdapat  100  ekor  larva    Perlakuan Metode Oral (A) dengan dosis 9% / Kg Pakan; Metode Perendaman (B) : 9% / Liter Air; (C)
Kontrol tanpa diberi hormon. Semua
perlakuan  diamati  selama  55  hari.  Pada metode oral diberikan  pakan  yang  dicampur dengan  hormon  selama  55  hari  sedangkan perlakuan  perendaman  dilakukan  dengan merendam larva ikan yang telah diberi hormon dan  diberi  aerasi  selama  30  jam  (Rosmaidar dkk,  214)  lalu  dilakukan  pengumpulan  data persentase jantan pada setiap perlakuan.

## Pengumpulan Data
Sebelum  ikan  diberi  perlakuan  hormon metyl  testosteeron ,  larva  disampling  terlebih dahulu  untuk  ditimbang  dan  diukur  panjang total.  Hal  tersebut  untu  menentukan  dosis pakan  dan  dosis  hormon  yang  diberikan selama pengamatan.
Persentase  jantan  diukur  dengan  cara mengamati  larva  Setelah  55  hari  waktu pemeliharaan dilakukan dengan cara mengambil sampel 50% dari populasi dengan ukuran  benih  sekitar  3-5  cm  dan  dilakukan pengamatan  jenis  kelamin.  Pengamatan Diamati  dari  ciri  kelamin  sekunder,  ikan  nila jantan dan betina dapat dibedakan berdasarkan jumlah  lubang  disekitar  anus.  Pada  ikan  nila jantan  terdapat  dua  lubang  yaitu  lubang  anus dan  lubang  urogenital,  sedangkan  pada  ikan nila  betina  terdapat  tiga  lubang  yaitu  lubang anus, lubang ureter, dan lubang genital.
Persentase jenis kelamin jantan didapatkan dengan rumurs (Zairin 2002) :
J (%) = 𝐴 𝑇 x 100 %
Dimana :
J = Persentase Jantan (%)
A = Jumlah Ikan Jantan T = Jumlah Ikan yang diamati Tingkat  kelangsungan  hidup  di  hihitung dengan  cara    menghitung  jumlah  ikan  yang hidup  pada  awal  penebaran  dan  akhir pemeliharaan,  dinyatakan  dalam  persen. Survival rate dapat dihitung dengan rumus :
SR = Nt No ×100%
Keterangan  :
- SR    =  Tingkat kelangsungan hidup
- Nt     =  Jumlah akhir (ekor)
- No    =  Jumlah awal (ekor)

## Analisis Data
Setiap perlakuan dengan 3 kali ulangan diuji  statistik  untuk  menentukan  perbedaan hasil  persentasi  jantan  dari  setiap  perlakuan. Penelitian  ini  mengunakan  software  SPSS Versi  23  dengan one  way anova  untuk mengetahui perbedaan yang signifikan dalam setiap perlakuan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  pengamatan  selama  55  hari menunjukan  adanya  perbedaan  antara  setiap perlakuan dengan perlakuan kontrol. Persentase  jantan  dan  tingkat  kelangsungan hidup  teramati  pada  setiap  perlakuan  tersaji pada Tabel 1 berikut :
Tabel 1. Persentase Jantan
Selanjutnya  berdasarkan  data  ukuran persentase  jantan  tersebut  menunjukkan sebaran data yang normal, yaitu dengan hasil P-value  0,178  yang  artinya  P>0.05  maka dilanjutkan dengan uji Anova untuk menentukan  adanya  perbedaan  rata-rata  dari setiap  perlakuan  terhadap  persentase  jantan. Uji  Anova  dari  data  persentase  jantan  dapat
Perlakuan Jantan (%) SR (%) A1 79 92 A2 82 98 A3 71 97 Rata Rata 77,3 95,6 B1 89 89 B2 82 94 B3 86 97 Rata Rata 85,6 93,3 C1 35 78 C2 26 82 C3 32 80 Rata Rata 31 80
diketahui bahwa P–Value sebesar 0.362 yang artinya P–Value >α (0.05). Hal tersebut dapat disimpulkan  bahwa  terdapat  perbedaan  rata- rata  metode  sex  reversal  terhadap  persentase jantan.  Untuk  mengetahui  perlakuan  dengan dosis  manakah  yang  berpengaruh  terhadap persentase  jantan,  makadilakukan  analisis lebih lanjut yaitu dengan Uji Tukey. Dari hasil pengujian  Tukey  (P-Value<0.05)  terlihat bahwa semuanya mempunyai pengaruh untuk masing  masing  rata-rata  dosis.  Jadi  dapat disimpulkan  bahwa  terdapat  perbedaan  yang signifikan  dalam  rata-rata  setiap  perlakuan metode sex reversal terhadap hasil persentase jantan benih ikan nila.
Berdasarkan  hasil  pengamatan  tersebut teamati bahwa terdapat perbedaan yang nyata ada  setiap  perlkuan  metode sex  reversal dimaan  perlakuan  terbaik  pada  perlakuan dengan  motode  perendaman  dengan  nilai persentase  jantan  rata  rata  85,%  sedangkan pada perlakuan denganmetode oral didaptkan rata rata persentase jantan 77,3 %. Sedangkan perlakuan  kontrol  tanpa  adanya  intervensi hormon metyl testosterone dapat menghasilkan 31% jantan. Hal tersebut dapat disimpulkan  bahwa  metode sex  reversal perendaman dengan tepung testis sapi terbukti efektif  dapat  meningkatkan  persentase  jantan jika dibandingkan metode oral maupun tanpa perlakuan.
Pengamatan persentase tingkat kelangusngan  hidup  pada  tiap  perlakuan dilakukan  dengan  mengamati  jumlah  ikan yang  mati  selama  pemeliharaan.  Pada perlakuan  dengan  motode  oral  didapatkan persentase  terbaik  dengan  persentase  SR sebesar  95,5%  sedangkan  pada  metode perendaman  mempunyai  nilai  persentase sedikit  dibawah  perlakuan  A  yaitu  dengan nilai  93,3  %  diikuti  oleh  perlakuan  kontrol tanpa perlakuan yaitu dengan nilai persentase SR sebesar 80%.
Persentase Jantan .
Pengamatan persentase jantan dilakukan diakhir  penelitian  selama  55  hari  dengan mengamati  organ  urogenital  ikan  nila,  maka didapatkan  pada  tiap  perlakuan  memepunyai nilai  yang  berbeda.  Dampak  testis  sapi  bagi pengalihan  pembentukan  kelamin  pada  saat fase  determinasi  kelamin  terbukti  efektif  dan dapat  dijadikan  salah  satu  bahan  almi pengganti banhan sintetis yang mulai dibatasi pengunaannya.
Pada perlakuan A dengan menggunakan metode oral yaitu dengan cara mencampurkan pakan dengan tepung testis sapi terbukti dapat meningkatkan persentase jantan bila dibandingkan dengan perlakuan kontrol tanpa adanya  hormon,  dimana  rata  rata  persentase jantan  pada  metode oral mencapai  77,3% sedangkan pada perlakuan kontrol hanya 31 % jantan,  sesuai  dengan  hasil  penelitian  dari Muslim  (2010)  yang  menyatakan  bahwa tepung testis sapi berpengaruh dalam maskulinisasi ikan nila sebesar 83,3% dengan menggunakan  metode  oral  namun  Hasil persentase jantan terlihat berbeda dengan hasil penelitain  ini,  dimana  pada  penelitian  ini didapatkan  persentase  jantan  menggunakn metode oral yaitu  77,3%.  Hal  tersebut mungkin disebabkan karena adanya perbedaan kualitas  air  yaitu  suhu  selama  penelitian diamana  faktor  lingkungan  yang  sangat berpengaruh  terhadap  pengarahan  kelamin adalah  suhu  (Smith et  al. ,  1994;  Phelps  dan Popma,  2000;  Dunham,  2004;  Strussmann et al., 2005 dalam Muslim,  2010).  Beberapa spesies ikan, phenotypic sex dapat dipengaruhi suhu air selama periode awal hidup. Fenomena ini dikenal sebagai thermolabile sex determination / TSD (Strussmann et al., 2005 dalam Muslim 2010).
Pada  perlakuan  menggunakan  metode perendaman  terbukti  sangat  efektif  bila dibandingkan  dengan  perlakuan  dengan meotode oral maupun perlakuan kontrol tanpa
perlakuan  dengan  didapatkan  rata  rata persentase jantan yaitu 85,6 %. Hasil tersebut tidak  berbeda  jauh  dengan  hasil  penelitian Bustaman,  dkk  (2009)  yang  menyatakan bahwa  perendaman  dengan  hormon  metyl testosteron  sintestis  pada  salinitas  berbeda menghasilkan prosentase jantan sebesar 85%. Efektifnya metode sex reversal pada perlakuan  perendeman  dibanding  perlakuan lain  ini  disebakan  karena  adanya  efektifitas masuknya  hormon  kedalam  tubuh  larva melalui proses osmosis, menurut Irmasari, dkk (2011) menyatakan bahwa konsentrasi hormon  dimedia  pemeliharaan  lebih  tinggi daripada  konsentrasi  hormon  didalam  tubuh ikan itu sendiri sehingga hormon dalam media masuk secara difusi kedalam tubuh larva. Hal lain  yang  diidikasikan  penyebab  metode perendaman  lebih  efektif  adalah  penyerapan hormon  yang  kurang  maksimal  pada  metode oral dimana metode ini dilakukan di perairan pemeliharaan yang mempunyai peluang dapat menghilangkan kandungan hormon pada testis sapi  yang  diberikan  melaului  pakan,  hal tersebut  dikarenakan  hormon  steroid  yang digunakan dalam sex reversal akan mengalami pencucian selama di dalam air (tan-fermin, et all . 1994 dalam Arfah, dkk 2002).
Pada  tiap  metode  sex  reversal  yang digunakan mempunyai nilai persentase jantan yang  berbeda  beda,  disamping  kualitas kandungan  hormon metyl  testosterone dalam tepung  testis  sapi  terdapat  faktor  lain  yang mempengaruhi  pembentukan  kelamin  pada ikan. Faktor yang mempengaruhi keberhasilan sex  reversal adalah  ukuran  dan  umur  ikan, lingkungan,  spesies  ikan,  genetik,  tipe hormon,  dosis  hormon,  waktu  pemberian hormon,  lama  pemberian  hormon  dan  cara pemberian hormon (Nagy et all., 1981; Hunter dan  Donaldson,  1983;  Phelps  dan  Popma, 2000; Dunham, 2004 dalam Muslim 2011).

## Kelangsungan Hidup
Pada  pengamatan  kelangsungan  hidup selama penelitian terlihat perbedaan pada tiap perlakuan hal tersebut dikarenakan penanganan  larva  yang  berbeda  pada  tiap perlakuan. Penangaanan selama pemeliharaan akan  memepengaruhi  daya  adaptasi  selama pemeliharaan  dimana  semakin  banyaknya tahapan  penanganan  maka  disinyalir  dapat meningkatkan angka mortalitas selama pemeliharaan larva.
Selama  penelitain  angka  kelangsungan hidup  relatif cukup baik  yaitu perlakuan oral dengan  angka  kelangsungan  hidup  sebesar 95,6%  selanjutnya  perlakuan  perendaman yaitu  dengan  angka  kelangsungan  hidup sebesar  93,3  %,  sedangkan  pada  perlkuan kontrol tanpa pengaruh hormon mendapatkan angka kematina yang  cukup tinggi  dibanding dengan  menggunakan  hromon  dengan  angka kelangsungan hidup sebesar 80%.
Perlakuan  A  dengan  metode  oral merupakan  perlakuan  terbaik  hal  tersebut dikarenakan penanganan pada saat penebaran larva  terbilang  lebih  efektif  sehingga  dapat menigkatkan  daya  adaptasi  larva  terhadap lingkungan  baru,  dimana  terlihat  selama penelitian  diamati  bahwa  kematian  tertinggi pada awal penebaran larva. Sedangakan pada perlakuaan  B  yaitu  perendaman  mempunyai satu  tahapan  yang  riskan  yaitu  perendaman larva  pada  wadah  baskom  selama  30  jam, walaupun  dengan  suplai  aerasi  kulitas  air selama 30 jam tanpa adanya pengadukan yang signifikan  selama  perlakuan  diidentifikasikan penyebab  kematian  yang  banyak  pada  tahap penebaran  awal  larva  dikolam  pemeliharaan. Hal  tersebut  selaras  dengan  hasil  penelitian Irmasari,  dkk  (2012)  dimana  kelangsungan hidup  ikan  dengan  metode  perendaman dengan  tepung  testis  sapi  berkisar  antara  16- 21% hal tersebut dikarenkan adanya kegiatan penyiponan sehingga ikan mengalami kematian.
Perlakuan  terbaik  untuk  meningkatkan efisiensi  kelangsungan  hidup  ikan  adalah metode sex reversal dengan minim penanganan  dimana  semakin  banyak  metode sex  reversal  ang  memerlukan  penanganan maka    semakin  tinggi  resiko  kematian  pda tahap proses tersebut. Perlakuan oral mempunyai  tingkat  penanganan  yang  rendah dibanding  dengan  perlakuan  perendaman sehingga  dapat  menigkatkan  kelangsungan hidup ikan selama penelitian.

## KESIMPULAN
Tepung  testis  sapi  berpengaruh  nyata terhadap  persentase  jantan  ikan  nila  dengan perlakuan  terbaik  yaitu  perendaman  dengan persentase jantan 85,6%, sedangkan persentase kelangsungan hidup terbaik didapatkan  dengan  perlakuan  oral  dengan nilai SR sebesar 95,6%.

## DAFTAR PUSTAKA
Arfah  H,  Alimuddin  K,  Sumantadinata  dan  J Ekasari.  2002.  Sex  Reversal  Pada  Ikan Tetra  Kongo  ( Micralestes  interruptus ) Stadia Larva. Jurnal Akuakultur Indonesia . (2) : 69-74.
Bustaman WJ, Apri Arisandi dan Indah WA,
2009.  Efektifitas  Hormon  17α Methyl Testosterone Untuk Memanipulasi Kelamin Ikan Nila ( Oreochromis Niloticus )  Pada  Pemeliharaan  Salinitas Yang  Berbeda. Jurnal  Kelautan .Vol  2 (1) : 57-65.
Irmasari,  Iskandar,  dan  Ujang  Subhan.  2012.
Pengaruh  Ekstrak  Tepung  Testis  Sapi Dengan  Konsentrasi  yang  Berbeda Terhadap  Keberhasilan  Maskulinisasi Ikan  Nila  Merah  ( Oreochromis  sp .).
Jurnal  Perikanan  dan  Kelautan .Vol  3 (4) : 115-121.
Muslim,  Muhammad  Zairin  Junior,  Nur
Bambang Priyo Utomo. 2011. Maskulinisasi  ikan  nila  ( Oreochromis niloticus). Jurnal Aquaculture Indonesia. Volume 10 (1) : 51-58.
Muslim.  2010.  Maskulinisasi  Ikan  Nila Oreochromis niloticus Dengan
Pemberian  tepung  Testis  Sapi.  Tesis.
Program Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor. Bogor. Phillay TVR and MN Kutty. 2005 . Aquaculture  Principles  and  Practices. Blackwell Publishing, London .
Rosmaidar,  Dwinna  Aliza,  dan  Jessica Ramadhanita.  2014.  Pengaruh  Lama
Perendaman  dalam  Hormon  Metil Testosteron Alami Terhadap Pembentukan  Kelamin  Jantan  Larva
Ikan  Nila  ( Oreochromis  niloticus ). Jurnal  Medika  Veterinaria .  Vol.8  (2)  :
152-155
Soedrajat  A.O.,  Astutik  I.  D.,  dan  Arfah  H.
2007.  Sex  Reversal  Ikan  Nila  Merah (Oreochromis  sp)  Melalui  Perendaman Larva Menggunakan Aromatase Inhibitor.  Jurnal  Akukultur  Indonesia. Vol 6 No 1. Hal 203-108 Sucipto  A,  S  Hanif,  C  Muharam,  dan  D
Nurlestiyoningrum.  2000.  Efektivitas Penggunaan Akriflavi n terhadap Perubahan  Nisbah  Kelamin  Ikan  nila.
http://naksara.net.
Supriyadi. 2005. Efektivitas Pemberian  HCG
dan 17-Metil testosteron yang
Dienkapsulasi di dalam Emulsi terhadap Perkembangan  Gonad  Ikan  Baung ( Hemibagrus  nemurus Blkr.).  Tesis.
Program Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Surat  Keputusan  Menteri  Kelautan  dan Perikanan  No.  Kep.20  /  Men  /  2003. Tentang Klasifikasi Obat Ikan.
Suyanto,  S.R.  1994. Nila .  PT  Penebar Swadaya, Jakarta.
Zairin, 2002. Sex Reversal . Penebar Swadaya.
Jakarta