## PENGARUH JENIS MEDIA KULTUR TERHADAP KONSENTRASI BIOMASSA Nannochloropsis sp.

## Nabila Marthia
Program Studi Teknologi Pangan Fakultas Teknik Universitas Pasundan, Jl. Dr. Setiabudhi No. 193, Bandung, 40153, Indonesia.
Email : nabilamarthia@unpas.ac.id

## Abstrak
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh jenis media terhadap konsentrasi biomassa dan kandungan klorofil pada Nannochloropsis sp . dan  menentukan jenis media terbaik untuk produksi klorofil tertinggi pada mikroalga tersebut. Variabel yang diamati antara lain pertumbuhan dan waktu panen optimum Nannochloropsis sp. dan konsentrasi biomassa Nannochloropsis sp. , dan kadar klorofil hasil ekstraksi biomassa. Hasil penelitian menunjukkan bahwa nilai konsentrasi biomassa  basah Nannochloropsis  sp. sebesar  10,98  g/L  untuk  media  Walne,  dan  5,10  g/L  untuk  media  Guillard. Kandungan klorofil hasil ekstraksi dari biomassa kering pada mikroalga Nannochloropsis sp. dengan media kultur Walne lebih tinggi dibandingkan dengan media Guillard dengan total klorofil senilai 353,045 µg/mL. Sehingga produksi klorofil terbaik adalah kultivasi menggunakan media kultur Walne.
Kata kunci : mikroalga, pigmen klorofil, kultur

## 1. Pendahuluan
Mikroalga  merupakan  organisme  mikroskopik uniseluler  atau  multiseluler  yang  hidup  dari  nutrien anorganik  dan  produksi  zat  organik  yang  berasal  dari proses  fotosintesis  (Isnansetyo  dan  Kurniastuty,  1995). Mikroalga  hidup  secara  berkoloni,  berfilamen,  atau helaian pada kondisi tunggal (Stanley, 2000). Mikroalga banyak  dijumpai  pada  perairan  yang  besar  seperti  pada laut,  danau, sungai, serta perairan payau.
Keragaman  mikroalga  di  dunia  diperikirakan berada  dalam  kisaran  jutaan  spesies,  sebagian  besar belum  dikenali  sehingga  belum  bisa  dikultivasi (Hadiyanto et al ., 2013). Biomassa dari proses kultivasi mikroalga  dapat  menghasilkan  produk  tertentu,  seperti pigmen  karotenoid,  pigmen  klorofil,  enzim,  protein, lipid, dan karbohidrat (Cardozo et al ., 2007).
Jika  dilihat  dari  segi  nutrisinya,  mikroalga  ini dapat  berpotensi  untuk  dimanfaatkan  biomassanya sebagai  sumber  nutrisi  pangan.  Namun,  kenyataannya respon  masyarakat  di  Indonesia  terhadap  mikroalga sebagai  sumber  pangan  alternatif  belum  terlalu berkembang,  padahal  nutrisi  mikroalga  cukup  tinggi dibandingkan  dengan  sumber  pangan  yang  selama  ini dikonsumsi.
Nannochloropsis  sp. merupakan  salah  satu  jenis mikroalga yang banyak mengandung nutrisi, antara lain : protein (52,11%), karbohidrat (16,00%), lemak (27,64%),  dan  pigmen  klorofil  (0,89%)  (Riedel,  2009). Dengan  demikian Nannochloropsis  sp. mempunyai potensi besar sebagai sumber nutrisi pangan.
Pemanfaatan  biomassa  mikroalga  untuk  menjadi sumber  nutrisi  pangan  bergantung  pada  proses pertumbuhan  mikroalga.  Biomassa  yang  diinginkan
adalah  biomassa  yang  dihasilkan  dalam  jumlah  banyak dan kandungan nutrisinya sesuai.
Adapun  faktor  nutrien  merupakan  salah  satu faktor  penting  yang  perlu  diperhatikan  dalam  proses pertumbuhan  mikroalga.  Nutrien  yang  dibutuhkan  oleh mikroalga  terdiri  dari  makronutrien  dan  mikronutrien. Makronutrien yang dibutuhkan antara lain : C, H, N, P, K,  S,  Mg,  dan  Ca.  Sedangkan  mikronutrien  yang dibutuhkan antara lain : Cu, Fe, Co, Mn, Zn, Mo, Vn, dan Si  (Kawaroe et  al .,  2010).  Aspek  nutrisi  ini  akan berpengaruh terhadap kuantitas biomassa yang dihasilkan.
Penelitian ini akan menggunakan dua jenis media kultur  sebagai  nutrisi  untuk  mikroalga,  antara  lain  : media Walne, dan media Guillard . Media Walne sendiri merupakan  media  yang  umum  digunakan  dalam proses pertumbuhan  mikroalga.  Media  Walne  dan  media Guillard  sama-sama  memiliki trace  element yang dibutuhkan untuk memproduksi pigmen klorofil.
Selain  protein, Nannochloropsis  sp. memiliki potensi  sebagai  sumber  klorofil.  Klorofil  merupakan pigmen  yang  memiliki  banyak manfaat. Selain  menjadi pewarna  alami,  klorofil  juga  merupakan  komponen fungsional  yang  dapat  berperan  sebagai  antioksidan, antikanker,  antihipertensi,  antiinflamasi,  dll.  Selama  ini penelitian  tentang  media  yang  tepat  untuk  konsentrasi biomassa dan kandungan klorofil pada Nannochloropsis sp. belum banyak dipublikasikan. Penelitian yang sudah dilakukan lebih terfokus kepada kandungan protein dan asam lemak.

## 2. Bahan dan Metode Penelitian
Bahan-  bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini meliputi starter mikroalga Nanncochloropsis sp . usia 60  jam  dengan  media  kultur  yang  digunakan  adalah media Walne dan media Guillard.

## Metode Penelitian

## Penelitian Pendahuluan
Penelitian  pendahuluan  yang  dilakukan  yaitu menentukan  kurva  pertumbuhan  dan  waktu  panen optimum.
Kultur  Starter Nannochloropsis  sp. dengan perbandingan air laut dan starter 70:30 dengan kepadatan awal starter 2,5 x 10 6 sel/mL. Salinitas air sebesar 28-30 ppt,  intensitas  cahaya  2500-2800  lux,  dan  suhu  yang digunakan 28-30 o C. Lakukan di dalam botol kaca steril 1 Liter. Berikan aerasi secara terus-menerus selama proses kultivasi.  Selama  proses  kultivasi  lakukan  pengamatan terhadap  pertumbuhan  setiap  hari  (1x24  jam)  dengan menggunakan haemacytometer .
Hasil  pengamatan  digunakan  sebagai  kurva pertumbuhan dan penentuan waktu pemanenan optimum. Waktu pemanenan optimum ditentukan pada saat kultur Nannochloropsis  sp. berada  pada  fase  eksponensial karena pada akhir fase eksponensial Nannochloropsis sp. mengalami  puncak  pertumbuhan  dan  kelimpahan biomassa atau kepadatan sel (Kawaroe et al ., 2010).

## Penelitian Utama
Penelitian  utama  dilakukan  untuk  produksi biomassa Nannochloropsis sp. pada berbagai jenis media. Kultivasi Nannochloropsis  sp. sebanyak  6  Liter dengan  menggunakan  aquarium  yang  sudah  steril. Perbandingan  air  laut  dan  starter Nannochloropsis  sp. adalah  70:30.  Kepadatan  awal  starter  yang  digunakan dalam  kultivasi  sebesar  2,8  x  10 6 sel/mL.  Salinitas  air yang  digunakan  sebesar  2500-2800  lux,  dan  suhu  yang digunakan  28-30 o C.  Masing-masing  aquarium  yang berisi  air  laut  dan  starter Nannochloropsis  sp. ditambahkan  media  kultur  sesuai  perlakuan.  Media Guillard  dan  media  Walne  ditambahkan  ke  dalam masing-masing aquarium sebanyak 1 mL/L. Pengamatan terhadap  biomassa  sel Nannochloropsis  sp. dilakukan pada hari ke-0 dan pada saat  panen sesuai  waktu panen optimum dengan menggunakan haemacytometer . Biomassa  dipisahkan  yang  mengendap  dengan  air  dan media  kulturnya.  Kemudian  cuci  hingga  salinitasnya  0 ppt.  Setelah  mendapatkan  biomassa  murni,  lalu keringkan dengan freeze dryer .
Sediaan  mikroalga  berupa  serbuk  ditimbang  dan dimaserasi  dengan  menggunakan  pelarut  etanol  (1:10, w/v).  Ekstraksi  dilakukan  sebanyak  tiga  kali.  Hasil ekstraksi  kemudian  disaring  dan  dipekatkan  dengan rotary evaporator pada suhu 40 o C (Pangestuti, 2017).
Rancangan  respon  yang  akan  diamati  terhadap biomassa  kering  mikroalga  adalah  pertumbuhan  dan waktu panen optimum Nannochloropsis sp. , konsentrasi biomassa Nannochloropsis sp .

## 3. Hasil dan Pembahasan

## Penelitian Pendahuluan
Mikroalga Nannochloropsis sp. dikultivasi dalam 900  mL  air  laut  steril  dan  salinitas  28  ppt  dengan kepadatan  1,2  x  10 6 sel/mL.  Kultivasi  mikroalga membutuhkan waktu 7-14 hari dalam laboratorium untuk memasuki  fase  eksponensial  hingga  fase  kematian dengan suhu 27-29 o C.
Media  kultivasi  yang  digunakan  pada  mikroalga Nannochloropsis sp. ini ada 2 jenis, yaitu media Walne dan media Guillard. Proses kultivasi hanya menggunakan nutrien awal yang diberikan dalam media masing-masing tanpa  adanya  penambahan  nutrien  selama  kultivasi berlangsung.
Berdasarkan  hasil  penelitian  mengenai  pengaruh penggunaan  media  yang  berbeda  terhadap  laju pertumbuhan mikrolaga Nannochloropsis sp. , menunjukan bahwa laju pertumbuhan Nannochloropsis sp. menggunakan  media  Walne  relatif  lebih  tinggi dibandingkan  dengan  media  Guillard.  Peningkatan  laju pertumbuhan  selama  pengamatan  dapat  dilihat  pada Gambar 1.
Gambar 1. Kurva Laju Pertumbuhan Nannochloropsis sp. dengan media Walne dan media Guillard.
Jika  dilihat  kurva  pada  Gambar  1,  fase  yang terjadi dapat dibagi menjadi lima fase yang meliputi fase lag,  fase  eksponensial,  fase  penurunan  kecepatan pertumbuhan,  fase  stasioner,  dan  fase  kematian.  Titik tertinggi  laju pertumbuhan Nannochloropsis sp. dengan media pertumbuhan Walne terjadi pada hari ketiga yaitu 3,70  x  10 6 sel/mL  dengan  persentase  laju  pertumbuhan 85%  yang  menandakan  bahwa Nannochloropsis  sp. berada  pada  fase  eksponensial.  Fase  stasioner  berada antara  hari  ke-4  hingga  hari  ke-7,  dan  fase  kematian terjadi  pada  hari  ke-8  yaitu  terjadi  penurunan  jumlah Nannochloropsis sp. dari hari ke-7 sebanyak 8,10 x 10 6 sel/mL menjadi 6,50 x 10 6 sel/mL.
Pada  penggunaan  media  Guillard,  fase  lag (adaptasi)  teramati  yaitu  pada  hari  ke-3.  Fase eksponensial  terjadi  pada  hari  ke-4  dengan  jumlah  sel yang dihasilkan 3,90 x 10 6 sel/mL dengan persentase laju pertumbuhan  sebesar  56%.  Fase  stasioner  terjadi  sejak hari  ke-5  hingga  hari  ke-6  dengan  persentase  laju pertumbuhan sekitar 21% dan 9%. Mikroalga Nannochloropsis sp. mengalami fase kematian pada hari
0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 1 2 3 4 5 6 7 8 Jum la h s el x 10 6 (s el /m L ) Waktu (Hari) Medium Walne Medium Guillard
ke-7  dengan  penurunan  persentase  laju  pertumbuhan sebanyak  22%  dari  hari  ke-5  dan  penurunan  kembali dialami Nannochloropsis  sp. pada  hari  ke-8  dengan penurunan persentase laju pertumbuhan sebesar 23%.

## Penelitian Utama
Pada proses kultivasi Nannochloropsis sp. dilakukan  menggunakan  media  Walne  dan  Guillard sebagai sumber nutriennya. Adapun kurva pertumbuhan yang dihasilkan dari kultivasi dapat dilihat pada Gambar 2 dan Gambar 3.
Gambar 2. Kurva Pertumbuhan Nannochloropsis sp. pada media Walne.
Kultivasi Nannochloropsis  sp. menggunakan media Walne memiliki umur 7 hari. Kurva pertumbuhan Nannochloropsis sp. menunjukkan kultur memasuki fase logaritmik  hingga  hari  ke-6  yang  ditunjukkan  pada Gambar  2,  dengan  peningkatan  log  kepadatan  sel  dari 1,50-4,60  sel/mL.  Hari  berikutnya  sel  tidak  mengalami peningkatan  yang  signifikan  dengan  log  kepadatan  sel berada pada kisaran 4,60-4,90 sel/mL hingga pengamatan hari ke-7.
Gambar 3. Kurva Pertumbuhan Nannochloropsis sp. pada media Guillard.
Pada  Gambar  3  dapat  dilihat  bahwa  kultivasi Nannochloropsis  sp. menggunakan  media  Guillard memiliki umur 7 hari. Kultur Nannochloropsis sp. pada media  Guillard  teramati  mengalami  fase  adaptasi  yang terjadi  pada  hari  ke-2  dengan  log  kepadatan  sel  0,70 sel/mL. Hal tersebut terjadi karena mikroalga Nannochloropsis  sp. mengalami  penyesuaian  dengan kondisi  lingkungan  pada  media  Guillard.  Menurut Prayitno  (2016),  pada  fase  adaptasi,  sel-sel  yang membelah  masih  sedikit  sehingga  jumlah  sel  tidak mengalami  peningkatan.  Kultur Nannochloropsis  sp. juga  mengalami  fase  logaritmik  hingga  hari  ke-7  yang
ditunjukkan  pada  Gambar  3  dengan  peningkatan  log kepadatan sel dari 1,40-4,40 sel/mL hingga hari ke-7.
Peran nutrien dalam siklus kultur Nannochloropsis  sp. sangat  penting  dimana  nutrien sangat  berpengaruh  dalam  pertumbuhan  sel.  Adanya kandungan  senyawa  Na 2 SiO 3 pada  media  Walne  dan Guillard  berperan  dalam  pembentukan  dinding  sel  dan cangkang mikroalga. Selain itu terdapat FeCl 3 yang akan mereduksi nitrat menjadi nitrit dan berhubungan dengan kandungan  protein  pada  mikroalga  tersebut.  Protein  ini berperan  dalam  proses  pertumbuhan  dan  regenerasi  sel dari mikroalga.
Derajat  keasaman  (pH)  air  laut  yang  digunakan merupakan faktor yang harus diperhatikan. Nannochloropsis sp . dapat tumbuh dengan baik pada pH berkisar  antara  5,5-8,5  dengan  pH  optimum  untuk fotosintesis adalah 6.
Selain  derajat  keasaman,  salah  satu  faktor lingkungan  yang  penting  dalam  kultivasi  mikroalga adalah  cahaya.  Cahaya  berperan  utama  dalam  proses fotosintesis. Adapun kultivasi Nannochloropsis sp . pada penelitian ini menggunakan intensitas cahaya 2400 lux. Intensitas  cahaya  ini  akan  berpengaruh  terhadap pertumbuhan  sel.  Pertumbuhan  sel  yang  optimum  akan menghasilkan  jumlah  sel  yang  optimum  dan  akan berpengaruh terhadap jumlah biomassa yang dihasilkan.
Proses  pemanenan  pada  penelitian  ini  diawali dengan proses pengendapan sebelum dilakukan sentrifugasi. Umumnya pemisahan biomassa Nannochloropsis  sp .  dilakukan  melalui  sentrifugasi untuk  mendapatkan  biomassa  dari  suatu  kultur,  namun tahap  pengendapan  dapar  dilakukan  agar  proses mendapatkan  biomassa  lebih  efisien.  Hal  ini  dilakukan agar  biomassa  dalam  cairan  yang  disentrifugasi  lebih banyak  terkonsentrasi  sehingga  mempermudah  proses pemanenan.
Adapun  proses  pengendapan  dilakukan  dalam lemari  pendingin  agar  kultur  tidak  mengalami pertumbuhan  lebih  lanjut  setelah  pemanenan.  Kultur dipanen pada fase stasioner, yaitu pada hari ke-7. Proses pengendapan  membentuk  2  lapisan,  yaitu  lapisan biomassa  di  bagian  bawah  dan  lapisan  cairan  media  di bagian atas.
Hasil  pengendapan  kemudian  dikumpulkan  dan disentrifugasi  menggunakan  sentrifuse  dingin  dengan suhu  4 o C  dan  kecepatan  4000  rpm  selama  30  menit. Proses sentrifugasi ini menyebabkan biomassa terkumpul sehingga  memudahkan  dalam  pemisahan  biomassa. Proses  pengeringan  dengan  cara freeze  dryer dilakukan untuk  mengeringkan  biomassa  basah Nannochloropsis sp . Proses ini dilakukan untuk mengurangi kadar air pada biomassa, dan dilakukan selama 8 jam.
Proses  pengeringan freeze  dryer ini  cocok diaplikasikan untuk biomassa mikroalga karena menggunakan suhu rendah dan tekanan yang terkendali, sehingga  komponen  pigmen  yang  diinginkan  dari biomassa Nannochloropsis  sp . ini  tidak  mengalami kerusakan akibat suhu tinggi.
0 2,000,000 4,000,000 6,000,000 0 2 4 6 8 Jum la h Sel ( se l/m L ) Hari ke- 0 2,000,000 4,000,000 6,000,000 0 2 4 6 8 Jum la h s el ( se l/m L ) Hari ke-
Jumlah biomassa basah dan biomassa kering yang didapat  dari  kultivasi Nannochloropsis  sp .  pada  media Walne dan Guillard dapat dilihat pada Tabel 1 berikut :
Tabel 1. Jumlah Biomassa Basah dan Biomassa Kering Nannochloropsis sp. pada Jenis Media yang Berbeda
Jenis Media Bobot Biomassa Basah (gram) per 15 L Konsentrasi Biomassa Basah (g/L) Bobot Biomassa Kering (gram) per 15 L Konsentrasi Biomassa Kering (g/L) Rendemen Biomassa Kering (%) Walne 50,4345 3,36 5,5402 0,37 10,98 Guillard 10,6270 0,71 0,8420 0,06 5,10
Komponen  pigmen  yang  ingin  dipisahkan  dari biomassa  mikroalga Nannochloropsis  sp. ini  diperoleh melalui  ekstraksi  bertingkat  menggunakan  pelarut dengan tingkat kepolaran berbeda. Pelarut yang berbeda digunakan untuk mendapatkan ekstrak yang lebih murni sehingga komponen pigmen terbebas dari komponen lain yang dapat mengganggu pengujian.
Proses ektraksi  dimulai dari  pemisahan pigmen-pigmen non  polar,  dimana  biomassa  kering  mikroalga Nannochloropsis  sp. diekstraksi  menggunakan  aseton dingin  dengan  perbandingan  3:1  (v/b). Proses  ekstraksi pigmen non polar dapat dilihat pada Gambar 4.
Gambar 4. Hasil Ekstraksi Pigmen Non Polar
Nannochloropsis sp. Setelah diekstraksi beberapa kali, proses berikutnya adalah sonikasi untuk memecah sel mikroalga dengan siklus sebanyak 10 kali (3 menit pengocokan dan 1 menit istirahat). Proses ini dilakukan di dalam penangas es.  Suspensi  hasil  sonikasi  kemudian  disentrifus  dan disaring  untuk  menghilangkan  debris.  Supernatan  atau ekstrak  kasar  aseton  yang  dihasilkan  akan  dimurnikan dengan  metode  kromatografi  kolom.  Proses  sonikasi dapat dilihat seperti pada Gambar 5.
Gambar 5. Proses Sonikasi Ekstrak Kasar Aseton

## Nannochloropsis sp.
Ekstrak  kasar  dari  pigmen-pigmen  non  polar diidentifikasi  terlebih  dahulu  sebelum  dilakukan pemisahan  dengan  kromatografi  kolom.  Identifikasi
ekstrak  kasar  aseton  dilakukan  dengan  metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT). Pelat KLT diberi tanda batas atas (0,5 cm) dan bawah (1,5 cm). Totolan ekstrak diberi jarak sekitar 1 cm. Proses elusi dilakukan di dalam sebuah wadah yang berisi eluen aseton : n-heksana = 3:7 (v/v) (Pavia, et al ., 1999).
Proses kerja KLT ini adalah silika gel sebagai fase diam dapat membentuk ikatan hidrogen pada permukaannya. Pada permukaan silika gel terdapat gugus hidroksil  dan  bersifat  sangat  polar  sehingga  dapat membentuk ikatan hidrogen. Fase gerak yang digunakan yaitu  eluen  yang  terdiri  dari  campuran  aseton  dan  n- heksana,  dimana  kedua  pelarut  tersebut  bersifat  non- polar.  Jika  pigmen  yang  ditotolkan  pada  permukaan silika  gel  dan  dimasukkan  ke  dalam  fase  gerak,  maka senyawa  yang  bersifat  polar  akan  bertahan  pada  fase diam.  Sedangkan  senyawa  yang  bersifat  sedikit  polar atau  non-polar  akan  terbawa  oleh  fase  gerak  dengan cepat.
Untuk mengidentifikasi pigmen yang terkandung dalam sampel ekstrak kasar aseton yang dianalisis maka digunakan  faktor  reterdasi  atau retardation  factor (Rf). Untuk menghitung nilai Rf pada hasil KLT diperoleh dari perbandingan jarak yang ditempuh pigmen dengan jarak yang ditempuh pelarut.
Tabel 2. Nilai Rf Pigmen pada Ekstrak Kasar Aseton
Spot Nilai Rf Warna Jenis Pigmen 1 0,60 Hijau Klorofil a 2 0,32 Hijau kuning Klorofil b Hasil  penelitian  menunjukkan  nilai  Rf  yang berbeda-beda,  dimana Rf karotenoid 0,98, Rf klorofil ɑ 0,60,  dan  Rf  klorofil b 0,32.  Kisaran  nilai  Rf  klorofil  a (hijau)  dan  klorofil  b  (hijau  kuning)  memiliki kecenderungan  sama  dengan  hasil  penelitian  lain  yang memiliki  nilai  Rf  klorofil ɑ 0,40-0,63,  dan  klorofil b 0,30-0,57.
Setelah  dilakukan  proses  Kromatografi  Lapis Tipis  (KLT),  pigmen  di  dalam  ekstrak  kasar  aseton dimurnikan  dengan  metode  Kromatografi  Kolom.  Fase diam  yang  digunakan  yaitu  silika  gel  7733,  sedangkan fase  geraknya  menggunakan  eluen  yang  sama  seperti proses KLT.
Untuk memperkuat hasil kromatografi Lapis Tipis (KLT),  selanjutnya  untuk  mengidentifikasi  pigmen menggunakan  metode  Spektrofotometri.  Metode  ini memiliki  hasil  yang  lebih  akurat  jika  dibandingkan dengan  metode  KLT.  Analisis  spektrofotometri  pada panjang  gelombang  300-600  nm  berhasil  mendeteksi beberapa  puncak  pada  ekstrak  aseton  dari  biomassa mikroalga Nannochloropsis sp. Hasil identifikasi pigmen dari ekstrak aseton tersebut yaitu dari golongan klorofil dan karotenoid.
Klorofil a ditemukan pada puncak di dalam grafik dengan panjang  gelombang  634  nm.  Panjang  gelombang  ini dapat  disesuaikan  dengan  referensi  dalam  Jeffrey et  al (1975), yaitu 430, 616, dan 662 nm.
Gambar 6. Hasil Spektrofotometer UV-Visibel klorofil ɑ hasil isolasi.
Pengukuran  kandungan  klorofil  dalam  biomassa dari  masing-masing  mikroalga  dilakukan  menggunakan alat spektrofotometer UV-Visibel pada panjang gelombang  645 nm dan 663 nm. Adapun kadar klorofil hasil ekstraksi biomassa mikroalga Nannochloropsis sp . dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel  3.  Kadar  klorofil  hasil  ekstraksi  dari  biomassa Nannochloropsis sp.
Jenis Media Biomassa kering (g) Jumlah klorofil a (µg/mL) Jumlah klorofil b (µg/mL) Total Klorofil (µg/mL) Guillard 0,8420 224,830 70,631 295,461 Walne 5,5402 266,404 86,641 353,045
Berdasarkan  jenis  media  yang  digunakan,  kultur yang  dikultivasi  dengan  media  Walne  lebih  banyak mengandung  pigmen  klorofil  dibandingkan  dengan media Guillard. Hal ini karena biomassa yang dihasilkan dari  kultivasi  media  Walne  lebih  banyak  sehingga pigmen  klorofil  yang  terkandung  dalam  biomassa tersebut juga lebih banyak.

## 4. Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  dapat  disimpulkan adalah  jenis  media  berpengaruh  terhadap  konsentrasi biomassa  pada  mikroalga Nannochloropsis  sp, nilai konsentrasi biomassa kering yang dihasilkan yaitu 10,98 g/L  untuk  media  Walne  dan  5,10  g/L  untuk  media
Guillard.  Kandungan  klorofil  hasil  ekstraksi  dari biomassa  kering  pada  mikroalga Nannochloropsis  sp. dengan  media  kultur  Walne  lebih  tinggi  dibandingkan dengan  media  Guillard  dengan  total  klorofil  senilai 353,045  µg/mL.  Sehingga  produksi  klorofil  terbaik adalah kultivasi menggunakan media kultur Walne.

## 5. Daftar Pustaka
1. Cardozo,  K.,  Guaratini,  T.,Barros,  M.,  Falcao,  V., (2007), Metabolites  from  Algae  with  Economical Impact ,  Article,  Comparative  Biochemistry  and Physiology,  Part  C,  Pharmacology,  Toxicology  & Endrocrinology, January 2007, Hal. 61.
2. Hadiyanto,  H,  S.,  Elmore,  T,  V.,  Gerven,  A., Stankiewicz.,  (2013), Hydrodynamic  Evaluation  in High  Rate  Alge  Pond  (HRAP)  Design ,  Chemical
Engineering Journal, 217(1): 231. 3. Isnansetyo, A dan Kurniastuty., (1995), Teknik Kultur Phytoplankton dan Zooplankton , Kanisius, Yogyakarta. 4. Jeffrey,  S.,  dan  Humphrey,  G.,  (1975),  New Spectrophotometric  Equations  for  Determining Chlorophylls a, b, c1, and c2 in Higher Plants, Algae, and  Natural  Phytoplankton. Biochem.  Physiol. Pflanzen 167 : 191-194.
5. Kawaroe, M., Pratono, T., Sunuddin, A., Sari D. W., dan  Agustine,  D.,  (2010), Mikroalga  :  Potensi  dan Pemanfaatannya  untuk  Produksi  Bio  Bahan  Bakar , IPB Press, Bogor.
6. Pangestuti, R, (2017), Mikroalgae Koleksi P2O LIPI untuk  Nutraseutikal  Masa  Depan ,  Laporan  Akhir Tahunan, Pusat Penelitian Oseanografi, LIPI, Jakarta.
7. Prayitno,  J.,  (2016),  Pola  Pertumbuhan  dan Pemanenan Biomassa dalam Fotobioreaktor
Mikroalga  untuk  Penangkapan  Karbon, Jurnal Teknologi Lingkungan 17 (1): 45-52.
8. Riedel, A., (2009), Read Mariculture-instan Rotifers , www.instan-alage.com,  Diakses  tanggal  10  Mei 2019.
9. Stanley, (2000), Enviromental Chemistry Seventh Edition , CRC Press LLC, USA :149-150.