Skrining aktifitas antibakteri dari ekstrak  Sisik Naga ( Pyyrosia piloselloides (L) M.G.Price)
Desi Sagita 1 , M.Nurul Ichwani 2 , Linuria 3 1.2.3 Program Studi Farmasi STIKES Harapan Ibu, Jambi, Indonesia
Abstrak
Latar Belakang : Tanaman sisik naga ( Pyyrosia piloselloides (L) M.G.Price) merupakan tanaman epifit dengan kandungan senyawa flavonoid dan tanin yang tinggi. Senyawa tersebut memberikan potensi antibakteri. Tanaman ini berkhasiat untuk luka, sariawan, konstipasi  dan  disentri.  Aktivitas  antibakteri  dari  tanaman  ini  berpotensi  untuk pengembangan  senyawa  tanaman  obat.  Peneltian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui aktivitas antibakteri dari ekstrak etanol herba sisik naga.
Metode : Proses penyarian tanaman sisik naga melalui proses maserasi selama 3 hari dengan 3  kali  pengulangan    dengan  pelarut  etanol.  Pengujian  aktifitas  antibakteri  dengan  metode diilusi.
Hasil : Dari 1 kg herba sisik naga diperoleh berat ekstrak  herba 4.95%. hasil penelitian menunjukkan  herba  sisik  naga  memberikan  nulai  KHM  256  μg/mL  dan  KBM  512 μg/mL  terhadap  bakteri Pseudomonas  aeruginosa dan Staphylococcus  aureus. Sebagai kontrol positif digunakan larutan kloramfenikol.
Kesimpulan :  ekstrak  herba  sisik  naga  memberikan  aktifitas  antibakteri  terhadap Pseudomonas aeruginosae dan Staphylococcus aureus
Kata kunci: Antibakteri, Sisik Naga, metode dilusi

## Abstract
Background : Sisik naga herbs (Pyyrosiapiloselloides (L) M.G. Price) is an epiphyte plants with compounds of flavonoids and tannins. The compound provides antibacterial potency. This plant is  effective  for  wounds,  canker  sores,  constipation  and  dysentery.  The  antibacterial  activity  of the  plant  is potentially for  development of medicinal  plant compounds. The extraction process by    maceration  for  3  days  with  three  repetitions.  From  1  kg  of  weight  of  Sisik  naga  obtained 4.95% extract. Antibacterial test using the dilution methods. The results showed the Sisik naga herbs provide antibacterial activity with MIC 256 μg/mL and MBC 512 μg/mL against bacteria Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus. As a positive control used a solution of chloramphenicol .( Objective ) This  research  is  aimed  to  knowing  the  antibacterial  activity  of ethanol extracts from Sisik naga hersb.
Method : The extraction process by  maceration for 3 days with three repetitions with ethanol. Antibacterial avtivity tes by dilution methods.
Results :. From 1 kg of Sisik naga obtained 4.95% extract.. The results showed the Sisik naga herbs provide antibacterial activity with MIC 256 μg/mL and MBC 512 μg/mL against bacteria Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus. As a positive control used a solution of chloramphenicol Conclusion : herb Sisik naga extracts showed antibacterial activity to Pseudomonas aeruginosae and Staphylococcus aureus
Key words: antibacterial, sisik naga , dilution methods

## PENDAHULUAN
Pengobatan  tradisional  merupakan pengobatan  menggunakan  bahan  yang berasal  dari  alam.  Pengobatan  secara
tradisional  telah  digunakan  secara  turun menurun dan menjadi bagian dari kebudayaan
bangsa Indonesia.
Pemanfaatan  bahan  alam  tersebut  untuk
pengobatan dapat dilakukan melalui penyeduhan  ataupun  dalam  bentuk  ekstrak kering.  Masih  banyaknya  warga  Indonesia yang  memanfaatkan  sumber  daya  alam untuk  pengobatan  dikarenakan  harga  yang murah, mudah didapat dan tidak menimbulkan resistensi.
Proses pencarian obat sebagai antibakteri  yang  berasal  dari  sumber  daya alam  terus  menerus  dikembangkan.  Hal  ini dikarenakan  penggunaan  antibiotic  untuk mengobati  infeksi  mengalami  permasalahan dalam  hal  resistensi.  Meningkatnya  jumlah bakteri  pathogen  yang  resisten  terhadap banyak  antibiotic  menyebabkan  kegagalan terapi sehingga meningkatnya angka kematian. Resistensi bakteri tehadap antibiotic  dikarenakan  bakteri  menghasilkan enzim yang dapat mengurai struktur molekul antibiotic  sehingga  menjadi  tidak  aktif. Contohnya  adalah  enzim  beta  laktamase. Selain  itu  bakteri  yang  mengalami  mutasi secara genetic kecendrungan bakteri tersebut akan resisten terhadap antibiotic.
Indonesia  kaya  akan  sumber  daya alam  baik  yang  ada  di  darat  atau  di  laut. Kandungan  dari  sumber  daya  bahan  alam tersebut  beragam  dan  memiliki  aktifitas secara farmakologi sehingga bisa digunakan baik  untuk  tujuan  preventif  ataupun  kuratif. Salah  satu  tanaman  yang  banyak  tumbuh didataran  Indonesia  adalah  Sisik  Naga ( Pyyrosiapiloselloides ). Tanaman ini memiliki sinonim  nama Drymoglossum  piloselloides (L.)  Presl.(1)  Tanaman  ini  merupakan tanaman  epifit  yang  tumbuh  dan  menempel di bebatuan atau pepohonan.  Tumbuhan ini tumbuh merambat di batang pohon. Kandungan  fenol,  tanin  dan  flavonoid  dari tanaman ini menjadi daya tarik peneliti untuk dibuktikan khasiat nya sebagai antibakteri.
Hasil  studi  literature  menunjukkan bahwa tanaman sisik naga memiliki kandungan  senyawa  yang  berpotensi  untuk antioksidan, antibakteri, antiinflamasi, gonore,  psoriasis,  demam,  disuria  (2). Penggunaan  tanaman  ini  adalah  bagian daunnya  dengan  cara  di  tumbuk  untuk pemakaian luar atau dapat juga direbus dzan diminum 1 gelas 2-3 kali sehari.(3) Beberapa penelitian  menunjukkan  ekstrak  daun  sisik
naga  memberikan  aktifitas  antibakteri terhadap bakteri S. viridians pada konsentrasi 0.001%.(4). Rian dkk melaporkan  bahwa  fraksi  methanol  dari daun  sisik  naga  memberikan  aktifitas antibakteri  Staphylococcus  aureus  pada konsentrasi  0.25  g/mL.  (5).  Berdasarkan hal  tersebut  maka  peneliti  berminat  untuk menguji  aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak etanol  herba  sisik  naga  ( Pyyrossia piloselloides (L) M.G.Price).

## METODE
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Farmasi STIKES  Harapan  Ibu  Jambi.  Sampel herba sisik diambil sebanyak 1 kg diambil di daerah Mandiangin, Kabupaten Sarolangun,  Provinsi  Jambi,  kemudian diidentifikasi di Universita Andalas. Proses ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi menggunakan pelarut  etanol  96 %.  Uji  fitokimia  dilakukan  pada  ekstrak herba  sisik  naga  terdiri  dari  uji  alkaloid, flavonoid,  tanin,  steroid  dan  saponin. Pengujian  antibakteri  dilakukan  dengan metode dilusi.

## Pengujian Antibakteri
Suspensi  bakteri  yang  setara  denga 0,5  standar  McFarland  sebanyak  5  µL untuk  10  mL  media  NB  kemudian  diaduk dengan  alat vortex selama  15  detik. Sebanyak  2  mL  campuran  tersebut dimasukan  kedalam  tabung  reaksi  pada tabung  kedua  sampai  kedua  belas.  Pada tabung  pertama  diisi  media  NB.  Pada tabung  kedua  belas  ditambahkan  2  mL larutan  kloramfenikol  dengan  konsentrasi 1024  µg/mL  sebagai  kontrol  positif  dan larutan  ekstrak  herba  sisik  naga  dengan konsentrasi  1024  µg/mL  sebagai  sampel kemudian  dihomogenkan.  Dari  tabung kedua  belas,  diambil  2  ml  kemudian dipindahkan ke tabung kesebelas. Pengenceran  terus  dilakukan  sampai pada  tabung  ketiga  yang  akan  memiliki konsentrasi terkecil. Sehingga pada tabung  ketiga  volumenya  menjadi  4  mL. Pada tabung kedua hanya berisi suspensi bakteri  sebagai  kontrol.  Tabung  inkubasi
pada suhu 37 o C selama 18-24 jam kemudian diamati  bagian  yang  jernih  (tidak  ada pertumbuhan  mikroba).  Konsentrasi  terkecil dimana  tidak  terlihat  pertumbuhan  bakteri ditetapkan  sebagai  konsentrasi  hambat minimum (KHM).
Sebanyak  100µL  dari  setiap  bagian yang  jernih  dipindahkan  kedalam  media  NA dan  diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  18- 24 jam kemudian diamati bagian yang jernih (tidak  ada  pertumbuhan  koloni  mikroba). Konsentrasi  terendah  dimana  tidak  terlihat adanya pertumbuhan bakteri pada media NA ditetapkan sebagai konsentrasi bunuh minimum (KBM). Pengujian antibakteri ekstrak  herba  sisik  naga  dilakukan  tiga  kali pengulangan

## HASIL
Hasil  maserasi  dari  herba  sisik  naga diperoleh  rendemen  4,955%.  Dilakukan pengujian fitokimia dari herba sisik naga dan hasilnya  menunjukkan  kandungan  flavonoid dan tannin.
Tabel  1. Pengujian  skrining  fitokimia ekstrak herba sisik naga Nama Uji Hasil Uji Alkaloid - Flavonoid + Steroid - Saponin - Tanin +
Pengujian  aktivitas  antibakteri  ekstrak herba  sisik  naga  menggunakan  metoda dilusi  dengan  berbagai  variasi  konsentrasi. Variasi  konsentrasi  yang  digunakan  dalam pengujian ekstrak herba sisik naga adalah 2 μg/mL,  4  μg/mL,  8  μg/mL,  16  μg/mL,  32 μg/mL,  64  μg/mL,  128  μg/mL,  256  μg/mL, 512  μg/mL  dan  1024  μg/mL.  Jenis  bakteri yang  diuji  adalah Pseudomonas  aeruginosa dan Staphylococcus aureus. Penentuan Nilai KHM      berdasarkan  kejernihan  dari  media yang  bisa  diukur  dengan  melihat  nilai transmitan atau jumlah OD bakteri dibandingkan  terhadap  kontrol  negative  dan kontrol positif.
Gambar  1.  Hasil  pengujian  ekstrak  sisik naga terhadap bakteri

## Pseudomonas aeruginosa
Dari  gambar  diatas  terlihat  tabung yang  menunjukkan  kejernihan  ada  pada konsentrasi    256 μg/mL  ,  512  μg/mL  dan 1024 μg/mL.    Konsentrasi  terkecil  yang menunjukkan  kejernihan  media  dan/atau media dengan penurunan jumlah OD 50% terhadap  kontrol  negative  dinyatakan sebagai  nilai  KHM.  Konsentrasi  terendah yang  menunjukkan  kejernihan  kemudian di sebar di media padat dan diinkubasi 37 C 24 jam. Jika konsentrasi tersebut tidak menunjukkan pertumbuhan maka dinyatakan sebagai nilai KBM.
Tabel 2 . Hasil Pengujian Zat Uji Bakteri Uji Kloramfenikol Ekstrak Herba Sisik Naga KHM (μg/m L) KBM (μg/m L) KHM (μg/m L) KBM (μg/m L) Pseudomona s aeruginosa 128 256 256 512 Staphylococc us aureus 128 256 256 512
Gambar 2. Ekstrak sisik naga konsentrasi 245 μg/mL.  (a), 512 μg/mL.  (b) dan  1024 μg/mL.    (c)  terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa
Tabel 2. Hasil Nilai Trasmitan Ekstrak Sisik naga dan Kloramfenikol
Konsentrasi µg/mL Ekstrak Herba Sisik Naga Kloramfenikol S. aureus P. aeruginosa S. aureus P. aeruginosa 256 74,0936 67,8039 94,4437 81,3140 512 89,3488 73,5392 96,1444 86,2771 1024 93,6968 86,9206 99,2395 95,4503

## PEMBAHASAN
Proses ekstraksi yang dilakukan adalah maserasi.  Alasannya  adalah  karena  proses maserasi  jauh  lebih  aman  disbanding metode  lain  karena  tidak  menggunakan panas,  lebih  praktis  dan  tidak  memerlukan alat  khusus.  Pelarut  yang  digunakan  adalah etanol 96%. Pemilihan pelarut etanol dikarenakan  merupakan  pelarut  universal dan  mampu  melarutkan  senyawa  baik  polar ataupun  non  polar.  Sampel  yang  digunakan merupakan  sampe  basah  yang  masih mengandung banyak air, sehingga digunakan  etanol  konsentrasi  pekat  96%. Untuk  mengidentifikasi  kandungan  senyawa yang  terdapat  di  dalam  ekstrak  herba  sisik naga maka dilakukan skrining fitokimia untuk metabolit  sekunder.  Dari  hasil  pengujian, ekstrak  positif  mengandung  flvonoid  dan tannin.  Dari  studi  literature  kedua  senyawa ini berpotensi sebagai antibakteri.
Pengujian antibakteri dilakukan menggunakan  metode  difusi.  Parameter yang  diamati  adalah  nilai  KHM  dan  KBM sehingga  bisa  diketahui  senyawa  tersebut bersifat bakterisid atau bakteriostatik. Ekstrak  herba  sisik  naga  memberikan aktifitas bakteriostatik pada bakteri Pseudomonas
aeruginosae
dan Staphylococcus  aureus dengan  nilai  KHM 256 µg/mL dan memberikan aktiftas bakterisid  pada  kedua  bakteri  yang  sama dengan  nilai  KBM  512  µg/mL  .  jika dibandingkan  dengan  kontrol  positif,  ekstrak herba  sisik  naga  belum  memiliki  kekuatan yang  sama  dengan  kontrol  positif.  Akan tetapi  ektrak  herba  sisik  naga  berpotensi untuk  dikembangkan  menjadi  obat  yang mampu menghambat dan membunuh pertumbuhan bakteri.
Pada  tabel  2  terlihat  peningkatan  nilai transmitan seiring meningkatnya
konsentrasi. Meningkatnya transmitan menunjukkan  semakin  jernihnya  media dimana  pertumbuhan  bakteri  semakin dihambat  oleh  ektrak  sisik  naga.    Hal  ini menunjukkan    bahwa  semakin  tinggi konsentrasi ekstrak maka aktifitas antibakterinya  semakin  besar.  Hal  ini  di dukung  oleh  penelitian  yang  dilakukan oleh  Sumitho  dkk  2016,  bahwa  ektrak methanol Sisik naga memberikan aktifitas antibakteri Staphylococcus  aureus pada konsentrasi  0,25  g/mL.  Meningkatnya konsentrasi  ekstrak  methanol    juga  dapat meningkatkan diameter zona hambat (5).
Menurut Wenti dkk, tanaman
Drymoglossum  piloselloides (L.)  Presl memberikan  aktifitas  antibakteri  pada konsentrasi 0.8% terhadap Propionybacterium acne dan o.6% terhadap Shigella dysentriae .(1)
Adanya aktifitas antibakteri dari ekstrak sisik naga ini dikarenakan kandungan  tannin  dan  flavonoid.  Hal  ini juga  diungkapkan  oleh  Anwar  sahid bahwa  tanaman  sisik  naga  memiliki senyawa falvonoid, tannin, steroid, triterpenoid,  minyak  atsiri.(6)  Adanya senyawa  Gosipentin  dalam  ekstrak  sisi naga  yang  merupakan  anggota  dari flavonoid yang memberikan aktifitas antibakteri.  Mekanisme  kerja  flavonoid sebagai  antibakteri  memlalui  denaturasi dan koagulasi protein.
Dilihat  dari  segi  aktivitas,  tampak bahwa  ekstrak  herba  sisik  naga ( Pyrrosia piloselloides (L.) M.G. Price) bisa dijadikan sebagai antibakteri. Dari hasil uji aktivitas dengan konsentrasi yang
berbeda menunjukkan bahwa semakin besar konsentrasi ekstrak, maka aktivitas antibakterinya semakin tinggi. . Hasil penelitian  ini  bisa  dijadikan  sebagai  dasar untuk  pengembangan  obat  antibakteri  yang baru.  Pengembangan  obat  baru  yang berasal  dari  bahan  alam  akan  memberikan efek  samping  yang  minimal  dibandingkan obat sintetis.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian bisa disimpulkan bahwa ekstrak herba sisik naga memberikan  aktifitas  antibakteri  terhadapa
Pseudomonas
aeruginosa
dan Staphylococcus  aureus dengan  nilai  KHM 256 µg/mL dan nilai KBM 512 µg/mL

## DAFTAR PUSTAKA
1.  Febriani  WD,  Wahyuni  D,  Asyiah  IN.
PERBEDAAN DAYA HAMBAT EKSTRAK DAUN  SISIK  NAGA  (Drymoglossum
piloselloides Linn.) TERHADAP BAKTERI Propionibacterium acne DENGAN Shigella dysentriae. Bioedukasi. 2015;XIII(2).
2.  Neamsuvan  O,  Singdam  P,  Yingcharoen
K,  Sengnon  N.  A  survey  of  medicinal plants  in  mangrove  and  beach  forests from  sating  Phra  Peninsula,  Songkhla
Province,  Thailand.  J  Med  Plants  Res. 2012;6(12):2421 –37.
3.  K.W.Lin. Ethnobotanical
Study of
Medicinal  Plants  Used  by  The  Jah  Hut
Peoples  in  Malaysia.  Indian  J  Med  Sci. 2005;59(4).
4.  Haninah,  P.  Lestari  MW.  (  Antibacterial Activity of Sisik Naga Leaf [ Drymoglossum  piloselloides  [  L  .]  Presl  .] Extract Towards Streptococcus viridans ). 2014;
5.  Sumito  RJ,  Khotimah  S,  Linda  R.  Uji Bioaktivitas Fraksi Metanol dan Etil Asetat
Tumbuhan Paku Sisik Naga ( Drymoglossum piloselloides ( L ) pressl .)  Terhadap  Bakteri  Staphylococcus aureus dan Salmonella typhi. 2016;5:30 –8. 6.  Sahid A, Pandiangan D, Siahaan P. Uji Sitotoksisitas  Ekstrak  Metanol  Daun Sisik Naga ( Drymoglossum
piloselloides  Presl  .)  terhadap  Sel Leukemia P388. J Mipa Unsrat Online.
2013;2(2):94 –9.