Journal Syifa Sciences and Clinical Research Volume 3 Nomor 1, Maret 2021
Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/jsscr , E-ISSN: 2656-9612 P-ISSN:2656-8187

## EFEK WAKTU HENTI PENDARAHAN ( BLEEDING
TIME) DAUN BANDOTAN ( Ageratum conyzoides L.) PADA MENCIT ( Mus musculus )
M. Sidrotullah 1*
1 Program Studi Farmasi DIII, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Nahdlatul Wathan Mataram, Jl. Merdeka Raya, Karang Pule, Mataram
* Penulis Korespondensi. Email: sidrotullah85@gmail.com

## ABSTRAK
Bandotan  ( Ageratum  conyzoides L)  merupakan  tanaman  yang  berfungsi  sebagai  agen hemostatik eksternal Bleeding time merupakan waktu saat mulai terjadinya perdarahan hingga terbentuk  sumbat  trombosit  dan  vasokontriksi  pembuluh  darah  sehingga  darah  berhenti mengalir. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efektivitas dan konsentrasi ekstrak etanol daun bandotan ( Ageratum conyzoides L.) dalam menghentikan pendarahan pada mencit jantan dengan menggunakan penelitian eksperimental. Metode yang digunakan adalah Metode Duke . Ekstraksi daun bandotan dilakukan dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol 96% kemudian diuji skrining fitokimia. Hasil skrining menyatakan positif mengandung flavonoid dan tannin. Hewan uji yang digunakan sebanyak 25 ekor mencit, dibagi dalam 5 kelompok. Kelompok  1  diberi  Aquadest,  Kelompok  2  diberi  obat Epinefrin 1mg/1ml,  Kelompok  3 diberikan  ekstrak  etanol  daun  bandotan  10%,  Kelompok  4  diberikan  ekstrak  etanol  daun bandotan  20%,  dan  kelompok  5  diberikan  ekstrak  etanol  daun  bandotan  40%.  %.  Data dianalisis dengan uji statistik ANNOVA (p<0,01) Hasil analisis menunjukkan perbedaan yang signifikan waktu henti pendarahan dari setiap kelompok perlakuan dan dilanjutkan dengan uji  LSD  ( Least  Significant  Different ).  Konsentrasi  ekstrak  daun  bandotan  yang  memiliki efektivitas dalam menghentikan pendarahan terbaik adalah konsentrasi 40%.
Kata Kunci: Ageratum conyzoides L, Waktu Henti Pendarahan
Diterima: 9-02-2021 Disetujui: 1-03-2021 Online: 5-03-2021

## ABSTRACT
Ageratum conyzoides L is a plant that functions as an external hemostatic agent. Bleeding time is the time when bleeding begins to form a platelet plug and vasoconstriction of blood vessels so that blood stops flowing. This study aims to determine the effectiveness and concentration of  the  ethanol  extract  of  Ageratum  conyzoides L  leaves in  stopping  bleeding  on  male  mice through an experimental research. The method employed was the Duke Method. Ageratum conyzoides L leaf extraction was carried out by  maceration using 96% ethanol solvent then tested by phytochemical screening. The screening result was tested positive for flavonoids and tannins. The tested animals used were 25 mice which were divided into five groups. Group 1 was given aquadest, group 2, 1 mg / 1 ml of epinephrine drug, group 3, 10% ethanol extract of Ageratum  conyzoides  leaves,  group  4,  20%  Ageratum  conyzoides  leaf  ethanol  extract,  and group  5  was  given  40%  ethanol  extract.  Then  the  data  were  analyzed  using  the  ANNOVA statistical  test  (p  <0.01).  The  results  of  the  analysis  showed  a  significant  difference  in  the
bleeding  stop  time  of  each  treatment  group  and  continued  with  the  LSD  (Least  Significant Different) test. The best concentration of Ageratum conyzoides leaf extract that has the best effectiveness in stopping bleeding was a concentration of 40%.
Copyright © 2021Jsscr. All rights reserved Keywords: Ageratum conyzoides L. ; Bleeding Stop Time
Received:
2021-02-9 Accepted: 2021-03-1 Online: 2021-03-5

## 1. Pendahuluan
Ramuan obat yang berasal  dari tumbuh-tumbuhan sudah sejak lama diciptakan oleh nenek  moyang  kita  guna  meningkatkan  kesehatan  hidup  dan  mengobati  penyakit. Naskah  kuno  yang  tersebar  diseluruh  Indonesia  menulis  tradisi-tradisi  tersebut. Diantaranya terdapat beberapa jenis ramuan untuk menyembuhkan berbagi penyakit yang menyerang masyarakat.
Pengobatan  herbal  masih  menjadi  pilihan  utama  baik  dinegara  maju  dan  dinegara berkembang,  menurut World  Health  Organization (WHO)  sebanyak  80%  penduduk dinegara berkembang dan 65% penduduk dinegara maju memilih menggunakan obat tradisional [1]. Sebanyak 40% penduduk indonesia menggunakan obat tradisional dan sebanyak 70% berada didaerah pedesaan [2}. Salah satu pemanfaatan obat herbal yaitu dalam menghentikan perdarahan.
Kehidupan  organisme  dipengaruhi  oleh  berfungsi  normalnya  sistem  penghentian darah, karena luka dengan ukuran yang kecil pun akan mudah mengalami pendarahan yang parah apabila sistem penghentian darah mengalami gangguan atau terganggu [3]. Ketika permukaan tubuh mengalami luka, tubuh akan mengeluarkan darah, tubuh yang normal  ketika  mengalami  luka  setelah  beberapa  saat  darah  akan  berhenti  mengalir, sedangkan  pada  luka  yang  besar  dapat  menyebabkan  pendarahan  yang    banyak sehingga  mengakibatkan  kekurangan  darah  bahkan  sampai  menyebabkan  kematian, maka  harus  sesegera  mungkin  melakukan  penghentian  pendarahan.  Tubuh mempunyai sistem untuk menyumbat dan memperbaiki sistem sirkulasi, salah satunya adalah  melalui  hemostatis.  Hemostatis  merupakan  proses  penghentian  pendarahan pada pembuluh darah yang cedera [4].
Pada lingkungan pertanian, tanaman bandotan ( Ageratum conyzoides L.)  disebut sebagai gulma pembawa virus yang sulit dikendalikan perkembangannya. Tanaman bandotan sering  dibuang  bahkan  dibakan  karena  dianggap  dapat  menyebabkan  tanaman  lain pada suatu daerah itu berkurang. Tetapi tanaman bandotan yang sering disebut sebagai tanaman  gulma  ini  menyimpan  berbagai  manfaat,  salah  satunya  tanaman  ini  dapat dijadikan sebagai obat untuk luka dengan menghambat pendarahan atau menghentikan pendarahan.  Bandotan  merupakan  tanaman  yang  berfungsi  sebagi  agen  hemostatik eksternal [5].
Berdasarkan  hasil  skrining  fitokimia,  daun  bandotan  memiliki  senyawa  metabolit sekunder yaitu flavonoid dan tannin [6]. Tanin bekerja melalui efek astringennya [7]. Selain  tanin,  flavonoid  juga  terkandung  dalam  tanaman  bandotan  yang  dapat memberikan efek sebagai agen hemostasis. Flavonoid berefek dengan cara vasokontriksi dalam  menghentikan  pendarahan  dan  Flavonoid  yang  dinyatakan  sebagai  quersetin
dapat  meningkatkan  jumlah  trombosit  yang  fungsinya  sangat  penting  dalam  tubuh yaitu menghentikan perdarahan akibat pecahnya pembuluh darah [8].
Berdasarkan uraian tentang efektifitas daun bandotan dalam menghentikan perdarahan tersebut  serta  didukung  dengan  pengalaman  empiris  dari  masyarakat,  Peneliti bermaksud  untuk  melihat  efektivitas  daun  bandotan  ( Ageratum  conyzoides L.)  dalam menghentikan  pendarahan  ( Bleeding  time )  yang  diujikan  pada  mencit  jantan  ( Mus musculus ) yang dijadikan sebagai hewan uji.
2. Metode
Metode  penelitian  yang  digunakan  adalah  metode  experimental  yang  merupakan penelitian  laboratorium  untuk  melihat  efektivitas  dari  ekstrak  Daun  Bandotan ( Ageratum conyzoides L.) dalam menghentikan pendarahan ( Bleeding Time ) yang diujikan pada mencit jantan (Mus muscullus).
2.1.  Parameter Penelitian Parameter  penelitian  ini  dilakukan  dengan  menggunakan Metode  Duke . Metode  Duke merupakan metode perhitungan waktu perdarahan dengan membuat luka pada ekor hewan  uji.  Prinsip  kerja  dari  metode  ini  yaitu  menghitung  waktu  perdarahan  sejak darah mulai keluar sampai darah tidak dapat terserap dikertas serap. Setiap 30 detik darah  yang  keluar  diserap  dengan  kertas  serap  dengan  catatan  jangan  sampai menyentuh luka. Nilai rujukan Metode Duke yaitu 1-3 menit [9].

## 2.2   Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini yaitu alat maserasi,  batang pengaduk, gelas kimia, gelas ukur, tabung reaksi, rak tabung reaksi, neraca analitik,  stopwatch, Surgical Scissors.
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu aquadest, etanol 96%, sampel daun  bandotan  ( Ageratum  conyzoides L.),  kertas  saring,  kertas  serap,  epinefrin  1:1000, makanan dan minuman hewan uji (pelet, jagung, mentimun dan air putih).
2.3   Prosedur Penelitian a. Pengolahan Sampel Sampel daun bandotan ( Ageratum conyzoides L.) dipanen pada pagi hari saat tumbuhan masih  segar,  kemudian  dilakukan  sortasi  basah  dan  pencucian  menggunakan  air mengalir  untuk  menghilangkan  kotoran-kotoran  yang  masih  menempel  pada  daun bandotan,  kemudian  sampel  dikeringkan  tetapi  tidak  terpapar  langsung  oleh  sinar matahari. Selanjutnya dilakukan sortasi kering untuk memisahkan dari daun yang rusak selama pengeringan. Langkah terakhir yaitu daun bandotan yang telah disortasi kering kemudian dibuat dalam bentuk serbuk.

## b. Pembuatan Ekstrak
Simplisia  daun  bandotan  dilakukan  dengan  cara  maserasi.  Bahan  yang  telah  kering kemudian  dihaluskan  menggunakan  blender  hingga  berbentuk  serbuk.  Simplisia ekstrak daun Bandotan( Ageratum conyzoides L. ), yang telah dihaluskan, ditimbang 500 gram kemudian diekstraksi menggunakan etanol 96%. Serbuk simplisia daun bandotan sebanyak  500  gram  dimasukkan  kedalam  toples  kaca  kemudian  direndam  dengan pelarut  etanol  96%  sebanyak  3750  ml  ditutup  menggunakan  aluminium  foil  dan dibiarkan  selama  lima  hari  sambil  sesekali  diaduk.    Setelah  lima  hari,  sampel  yang
direndam tersebut disaring dengan menggunakan kertas saring sehingga menghasilkan filtrat  kemudian  dipekatkan  dengan  menggunakan rotary  vacuum  evaporator hingga diperoleh ekstrak kental dan dihitung persen rendamennya.

## 2.4 Uji Skrining Fitokimia
Hasil  ekstrak  etanol  daun  bandotan  kemudian  diuji  skrining  fitokimia  untuk mengidentifikasi  adanya  kandungan  senyawa  flavonoid  dan  tannin  pada  sampel tersebut
a. Uji Flavonoid
Sebanyak 1 gram ekstrak daun bandotan dilarutkan kedalam 2 ml etanol, kemudian ditambahkan  serbuk  Mg  dan  HCl  pekat  sebanyak  5  tetes.  Adanya  senyawa flavonoid ditunjukkan dengan terbentuknya warna merah atau jingga .
b. Uji Tannin
Sebanyak  1  gram  ekstrak  daun  bandotan  dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi, kemudian ditambahkan FeCL3 1% sebanyak 2-3 tetes. Sampel positif mengandung tannin bila mengalami perubahan warna menjadi hijau kehitaman.

## 2..4 Pengujian Bleeding Time
Hewan uji yang digunakan adalah Mencit berumur 2-3 bulan, dengan berat badan 20- 30 gram. Penentuan jumlah sampel ditentukan berdasarkan rumus Federer yaitu (n-1) (t-1) ≥ 15. Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah 25 ekor mencit jantan ( Mus musculus ). Hewan uji dikelompokkan menjadi 5 kelompok, setiap kelompok terdiri dari 5 ekor mencit yaitu kelompok 1 (kontrol negatif diberikan aquadest), kelompok 2 sebagai kontrol positif diberikan epinefrin 1:1000 (1mg/1ml ), kelompok 3 (perlakuan 1 ekstrak dengan konsentrasi 10%), kelompok 4 (perlakuan 2 ekstrak dengan konsentrasi 20%) dan kelompok 5 (perlakuan 3 ekstrak dengan konsentrasi 40%) .
Selanjutnya  ekor  mencit  diberi  tanda  sepanjang  2  cm  dari  ujung  ekor.  Ekor  mencit dianastesi secara topikal menggunakan ethyl chlorida disekitar ekor yang akan dilukai. Selanjutnya ekor mencit dipotong sepanjang 3 mm menggunakan surgical scissor . Setelah dipotong, ekor mencit dicelupkan kedalam masing-masing kelompok perlakuan selama 5  detik,  Setiap  darah  yang  keluar  dari  ekor  mencit  diteteskan  dikertas  serap  (tanpa menyentuh  luka)  setiap  30  detik  sampai  darah  berhenti.  Waktu  mulai  diukur menggunakan  stopwatch  ketika  darah  terserap  pertama  kali  sampai  darah  berhenti dengan ditunjukan tidak ada lagi darah yang terserap pada kertas saring. Interval waktu saat darah keluar pertama kali hingga darah berhenti keluar adalah waktu perdarahan ( bleeding time ) [10].

## 3.   Hasil dan Pembahasan .

## 3.1 Ekstaksi dan Penelusuran senyawa Fitokimia
Proses ekstraksi daun Bandotan ( Ageratum conyzoides L. ) sebesar 11,01% presentase ini menunjukan  bahwa  proses  penyarian  berlangsung  baik,  presentase  rendamen  dapat dikatakan sempurna jika hasilnya berkisar 10-15% [11].
Senyawa Pereaksi Hasil Uji Keterangan Flavonoid Mg + HCl Pekat Merah Positif Flavonoid (+) Tannin FeCl 3 Hijau Kehitaman Positif Tanin(+)
Berdasarkan  hasil  skiring  fitokimia menunjukkan  sampel  daun  bandotan  ( Ageratum conyzoides L.) positif mengandung senyawa Flavonoid (tabel 1). Hal ini sesuai dengan
penelitian  lain yang melaporkan bahwa dalam daun bandotan mengandung zat akif berupa flavonoid dan tannin [6].

## 3.2 Pengukuran Bleeding Time
Bleeding time menunjukkan hasil  pengukuran rata-rata lama waktu henti pendarahan pada mencit jantan yang dibagi menjadi lima kelompok. Penelitian ini menggunakan parameter metode duke dengan nilai rujukan yaitu 1-3 menit. Trombosit adalah faktor besar dalam proses hemostatis. Dibutuhkan sekitar 60 detik hingga helai fibrin  mulai seling  diantara  luka,  sehingga  setelah  beberapa  menit  (sesuai  standarnya)  sumbat trombosit sepenuhnya terbentuk, sedangkan tingkat keparahan perdarahan tergantung pada jumlah faktor pembekuan dalam darah. Semakin sedikit jumlah faktor pembekuan darah,  perdarahan  akan  semakin  sulit  untuk  berhenti  atau  sebaliknya  terjadi pembekuan  darah  terlalu  banyak  sehingga  yang  dapat  menganggu  sirkulasi  darah, kondisi  ini  disebut  dengan  darah  kental.  Salah  satu  pemeriksaan  masa  perdarahan adalah dengan proses bleeding time [12]. Adapun hasil pengukuran ditampilkan pada tabel 2.
Tabel 2. Hasil Pengukuran Waktu Henti Pendarahan Pada Luka Ekor Mencit
Keterangan :
Kelompok 1  : Diberikan aquadest (kontrol negatif) v/v Kelompok 2  : Diberikan Epinefrin 1ml/1mg (kontrol positif) v/v Kelompok 3  : Diberikan ekstrak etanol daun bandotan 10% v/v. Kelompok 4  : Diberikan ekstrak etanol daun bandotan 20% v/v. Kelompok 5  : Diberikan ekstrak etanol daunbandotan 40% v/v ∑ : Jumlah
Hasil pengukuran didapatkan yaitu kelompok 2 (kontrol positif) memiliki kemampuan menghentikan  pendarahan  lebih  cepat  dibandingkan  dengan  kelompok  perlakuan lainnya. Pemberian Epinefrin berfungsi sebagai zat hemostatik. Berdasarkan golongan obat  hemostatik,  epinefrin  merupakan  golongan  obat  hemostatik  lokal  kelompok vasokonstriktor  dan  dapat  digunakan  untuk  menghentikan  pendarahan  perdarahan kapiler pada suatu permukaan dengan dosis 1:1000 (1mg/1ml) [13]. Epinefrin ini bekerja pada reseptor adrenergic α 1 untuk menimbulkan efek vasokonstriktor pembuluh darah kapiler  kulit  dengan  cara  mengurangi  ukuran  kapiler  darah  sehingga  suplai  darah terbatas dan akibatnya akan mengurangi perdarahan dan rembesan cairan [14].
Kelompok Perlakuan Waktu Henti Pendarahan ( Bleeding time ) (Detik) ∑ (detik) Rata-Rata (detik) 1 2 3 4 5 Kelompok 1 207 220 198 194 236 1.055 210 Kelompok 2 68 73 78 77 89 385 77 Kelompok 3 150 140 146 178 154 768 153 Kelompok 4 120 120 115 112 123 590 118 Kelompok 5 90 96 93 90 98 467 93
Berdasarkan data hasil pengukuran yang ditunjukkan pada tabel 2, ketiga konsentrasi ekstrak  etanol  daun  bandotan  memberikan  efek  dalam  menghentikan  pendarahan karena masuk dalam range nilai rujukan metode duke yaitu 1-3 menit. Hal ini karena pada  daun  bandotan  mengandung  senyawa  flavonoid  dan  tannin  yang  berperan penting  dalam  proses  hemostatis.  Senyawa  utama  yang  dapat  berefek  sebagai hemostatis adalah tannin dan flavonoid [15].
Tannin bersifat astringen yang memiliki kemampuan untuk membentuk makromolekul, terutama  protein,  kemampuan  tersebut  dapat  mempercepat  proses  hemostatis,  dan melalui  efek  astringentnya  tannin  bersifat  sebagai  vasokonstriktor.  Tannin mempercepat  keluarnya  protein  dari  sel  dan  mengendapkan  protein  tersebut  pada permukaan  sel,  juga  mengurangi  sekresi  dan  permeabilitas  kapiler,  kontraksi  ruang antar sel, pengerasan endothelium kapiler dan kemudian membentuk lapisan pelindung kulit  sehingga  lapisan  superfisial  sel  mengencang  dan  menyusut.  Keadaan  ini  akan menghasilkan  vasokonstriktor  lokal  dan  kapiler  [16,17,18,19].  Selain  itu,  tannin  juga akan  mempercepat  keluarnya  protein  dari  sel  dan  mengendapkan  protein  darah sehingga  dapat  menginduksi  sintesis  tromboksan  A 2 (Tromboksan  A 2 merupakan vasokonstriktor)  yang  dapat  meningkatan  agregasi  platelet,  sehingga  mempercepat pembentukan sumbat platelet sementara pada pembuluh darah yang cedera.
Semakin  banyak  protein  darah  yang  diendapkan  oleh  tannin,  menyebabkan meningkatnya  sintesis  tromboksan  A 2 (meningkatnya  proses  vasokonstriktor)  dan memudahkan trombosit mengeluarkan Adenosin Difosfat (ADP). ADP dan Tromboksan A 2 mengaktifkan  trombosit  yang  berdekatan  dan  menyebabkannya  melekat  pada trombosit  semula  yang  sudah  aktif.  Hal  ini  menyebabkan  meningkatnya  agregasi trombosit, sehingga membentuk sumbat trombosit [20,21]. Selain tannin, senyawa yang berfungsi  dalam  proses  penghentian  pendarahan  adalah  flavonoid.  Mekanisme  dari flavonoid dalam penghentian pendarahan adalah dengan vasokontriksi. Vasokontriksi dapat  memacu  agergasi  trombosit  sehingga  sumbat  trombosit  dapat  terbentuk  dan terjadi penyumbatan luka melalui peran bekuan darah, setelah darah tersumbat, maka darah akan berhenti [22].
Hasil uji One Way Annova pada penelitian ini menunjukkan hasil sig=0.000 yang berarti ada perbedaan signifikan karena Probabilitas yang dihasilkan kurang dari 0,01 (P<0,01). Dari hasil uji One Way Annova dapat ditentukan bahwa hipotesis H1 peneliti diterima. Hal  ini  menunjukan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  bandotan  ( Ageratum  conyzoides L.) mampu  mempengaruhi  waktu  penghentian  pendarahan  ( Bleeding  time )  pada  mencit jantan.    Pada  hasil  uji  dengan  menggunakan  Uji Least  Significant  Difference (LSD) didapatkan  hasil  bahwa  konsentrasi  40%  memiliki  efektivitas  terbaik  dalam menghentikan  pendarahan. Berdasarkan  hasil  analisis  data,  konsentrasi  ekstrak  daun bandotan  40%  dengan  kelompok  kontrol  positif  yang  diberikan  obat  epinefrin mempunyai  efek  yang  sebanding  dalam  menghentikan  pendarahan,  meskipun  rata-rata waktu menghentikan pendarahan oleh kelompok kontrol positif  lebih cepat dari rata-rata waktu kelompok ekstrak 40%.
4. Kesimpulan Pemberian ekstrak  daun bandotan ( Ageratum conyzoides L.) memiliki efektivitas dalam menghentikan  pendarahan  pada  mencit  jantan  ( Mus  musculus )  yang  diamati  dari penurunan waktu  pendarahan  setelah  perlakuan.  Ekstrak    daun  bandotan  ( Ageratum
conyzoides L.) memiliki efektivitas dalam menghentikan pendarahan pada mencit jantan dengan konsentrasi terbaik adalah 40%.

## Referensi
[1]  Ismail,  2015. Faktor  Yang  Mempengaruhi  Keputusan  Masyarakat  Memilih  Obat Tradisional Di Gampong Lam Ujong . Idea Noursing Journal.
[2]  Menteri  Kesehatan  Republik  Indonesia,  2016. Formularium  Obat  Herbal  Asli Indonesia . Jakarta: Menteri Kesehatan Republik Indonesia
[3]   Mutschler, E., 1991. Dinamika Obat, Buku Ajar Farmakologi dan Toksikologi Edisi 5 . Diterjemahkan oleh Widiarto, M.B., dan Ranti, A. S., 177. Bandung: ITB
[4]   Pitojo, S. 2002. Ceplukan (Herba Berkhasiat Obat) . Yogyakarta: Kanisius
[5]   Dash, GK & Murthy, PN. 2011. W ound Healing Effects of Ageratum conyzoides Linn . India: Int Journal Pharma Bio Sci, 2(2)
[6]   Amadi, B.A., Duru, M.K.C. dan Agomuo, E.N. 2012. Chemical profiles of leaf,  stem, root, and flower of  Ageratum conyzoides . Asian Jurnal of Plant Science and Research
[7]   Klatoe, J.R. Dougnon T.V., Sacramento T.I., Dandjesso C., Edorh A.P., Koudokpon H., et  al .  2012. Hemostatic  Potential  Of  The  Sap  Of  Musa  Sapientum  L.  (Musaceae) . Journal of Applied Pharmaceutical Science Vol 02 (06).
[8] Soegijanto, Sugeng 2006. Demam Berdarah Dengue . Airlangga: University
[9]    Gandasoebrata, R. 2001. Penuntun Laboratorium Klinik . Jakarta: Dian Rakyat.
[10]   Sutopo,  Tri.  2016. Uji  Ekstrrak  Etanol  70%  (piper  betle)  terhadap  bleeding timepada mencit jantan galur swis Webster . Surakarta: UMS
[11]   Putri, Zulia Ika. 2017. Efek Diuretik Ekstrak Metanol Daun Salam (Eugenia polyantha) Pada  Kelinci  Jantan  (Oryctolagus  cuniculus ).  Gorontalo:  Universitas  Negeri Gorontalo
[12]   Durachim,  Adang  &  Dewi  Astuti,  2018. Hemostatis : Bahan  Ajar  Teknologi Laboratorium Medik (TLM) . Pusat Pendidikan Sumber Daya Manusia Kesehatan: Kementrian Kesehatan Republik Indonesia
[13]    Gunawan, S.G., Setiabudy R. 2011. Farmakologi dan Terapi . Jakarta: Balai Penerbit FKUI
[14]   Finkel R., Clark M.A., Cubeddu L.X., Harrey R.A., Champe P.C., 2009, Lippincott’s Illustrated Review Pharmacology 4thEd . Pliladelphia: Williams & Wilkins
[15]   Hassanpour, S. N. Maheri-Sis. B Eksshratkhah, dan F. B. Mehmandar. 2011. Plants and Secondary Metanolites (Tannins) .  A Review Int. J. Forest, Soil and Erosion
[16]   Choong, S.K.S., Walkden, M., Kirby, R. 2000. Review : The Management of Intractable Haematuria . BJU International
[17]    Davis, S.C., Perez, R. 2009. Cosmeceuticals and natural products: wound healing. Clinics in Dermatology.
[18]   Libster,  M.  2002.  Delmar’s  Integrative  Herb  Guide  for  Nurse.  USA:  Thomson Learning Inc
[19]   Mohaan, M., Gupta, A., Shenoy, V. 2011. Pharmacological Agents in Dentistry : A Review. British Journal of Pharmaceutichal Research
[20]   Odokuyo,  O.A.,  Sofidiya,  M.O.,  Ilori,  O.O.,  Gbededo,  M.O.,  Ajadotuigwe,  J.O., Olaleye,  O.O.  2009. Hemorrhoid  Therapy  With  Medicinal  Plants.  Astringency  and Inhibition  of  Lipid  Peroxidation  as  Key  Factors .  International  Journal  of  Biological Chemistry
[21]  Purnamasari, O. R. I., Arudina., dan T.I Budhy. 2012. Efek Hemostatis Ekstrak Etanol Daun Teratai (Nymphae rubra Roxb.) Pada Luka Potong Ekor Mencit (Mus musculus)