## PENENTUAN KADAR LEMAK PADA FESES IKAN KERAPU MACAN (EPINEPHELUS FUSCOGUTTATUS) DENGAN METODE GRAVIMETRI MENGGUNAKAN PELARUT METANOL – KLOROFORM
I Made Gunamantha Universitas Pendidikan Ganesha Singaraja, Indonesia e-mail: Gunamantha@gmail.com

## Abstrak
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  (1)  menentukan  kadar  lemak  yang  terdapat  pada  feses ikan  kerapu  macan,  (2)  mengetahui  pengaruh  variasi  formulasi  pakan  terhadap  kadar  lemak pada feses ikan tersebut,  dan (3) mengetahui pengaruh kondisi lingkungan, terutama suhu  air terhadap kadar  lemak  pada feses  ikan bersangkutan. Subjek penelitian  ini adalah ikan kerapu macan ( Epinephelus fuscoguttatus ) yang diperoleh dari Balai  Besar  Riset Perikanan  Budidaya Laut Gondol-Bali dan objek penelitiannya adalah kadar lemak pada feses ikan tersebut. Kadar lemak ditentukan dengan metode gravimetri menggunakan pelarut campuran metanol-kloroform (1:1).  Hasil  penelitian  menunjukkan,  bahwa  (1)  kadar  lemak  dalam  feses  ikan  kerapu  macan berkisar antara 3,51 – 13,36 % pada pagi hari, dan 5,90 – 16,40 % pada siang hari, (2) variasi formulasi  pakan  yang  diberikan  sangat  menentukan  besar  kecilnya  kandungan  kadar  lemak dalam  feses  ikan  tersebut,  dan  (3)  perubahan  kondisi  lingkungan,  yaitu  peningkatan  suhu  air menyebabkan tingginya kandungan  kadar lemak dalam feses ikan bersangkutan.
Kata kunci: Kadar Lemak, Gravimetri, Pelarut Metanol - Kloroform

## 1.  Pendahuluan
Ikan  kerapu  macan  ( Epinephelus  fuscoguttatus )  merupakan  salah  satu  komoditas perikanan  yang  mempunyai  nilai  ekonomis  cukup  tinggi,  terutama  di  kawasan  Asia.  Harga kerapu  macan  dapat  mencapai  Rp  30.000,00  hingga  Rp  50.000,00  per  kilogram  berat  hidup (Slamet  dan  Tridjoko,  1997,  dalam  Sarida,  2005).  Ikan  kerapu  disebut  juga  dengan  nama goropa, sunu, atau kasai. Ikan kerapu memiliki spesies cukup banyak, diperkirakan lebih dari 46 spesies yang hidup di berbagi tipe habitat. Menurut Hemstra dan Randall (1993) dalam Triastini (2003), taksonomi ikan kerapu macan adalah sebagai berikut. a) Filum: Chordata , b) Subfilum: Vertebrata , c) Kelas: Osteichytes , d) Subkelas: Actinopterigi , e) Ordo: Percomorphi , f) Subordo: Percoidea ,  g)  Famili: Serranidae ,  h)  Genus: Ephinephelus ,  i)  Spesies: Ephinephelus fuscoguttatus.
Gambar 1. Morfologi Ikan Kerapu Macan
Kerapu  macan  termasuk  ikan  karnivora  yang  sifat  kanibalnya  muncul  apabila kekurangan  pakan,  terutama  pada  larva  ikan  kerapu  macan.  Ikan  kerapu  macan  mempunyai kebiasaan  makan  pada  pagi  hari  dan  menjelang  matahari  terbenam.  Pakan  yang  biasa diberikan  dapat  digolongkan  menjadi  dua  jenis  ,  yaitu  pakan  alami  berupa zooplankton dan pakan buatan.
Pakan buatan merupakan makanan ikan yang dibuat dari campuran bahan-bahan alami atau  bahan  olahan  yang  selanjutnya  dilakukan  proses  pengolahan  serta  dibuat  dalam  bentuk tertentu,  sehingga  tercipta  daya  tarik  yang  merangsang  ikan  untuk  memakannya  dengan mudah  dan  lahap.  Formulasi  pakan  buatan  merupakan  susunan  energi  dan  nutrisi  dalam jumlah  yang  seimbang  sesuai  dengan  kebutuhan  ikan  untuk  menunjang  kelangsungan  hidup dan pertumbuhannya. Formulasi pakan buatan yang disusun dari berbagai bahan baku memiliki kualitas  yang  lebih  baik  dibandingkan  dengan  pakan  buatan  yang  tersusun  hanya  dari  satu macam  bahan,  karena  kekurangan  nutrisi  dari  satu  bahan  baku  akan  dilengkapi  oleh  bahan baku lainnya (Abbas, 1995).
Agar  dapat  tumbuh  dengan  baik,  benih  kerapu  macan  membutuhkan  pakan  buatan dengan  kandungan  nutrisi  yang  tepat.  Lemak  merupakan  salah  satu  nutrien  penting  dalam pakan  buatan  yang  bermanfaat  sebagai  sumber  tenaga,  sumber  asam  lemak  esensial, fosfolipid,  sterol,  dan  pengantar  vitamin.  Dibandingkan  dengan  protein  dan  karbohidrat,  lemak dapat  menghasilkan  tenaga  yang  lebih  besar.  Penggunaan  lemak  pada  pakan  berpengaruh terhadap  rasa  dan  tekstur  pakan  yang  dibuat,  sehingga  lemak  juga  mempunyai  peran  dalam proses  metabolisme  dan  pertumbuhan  ikan  (Makatutu,  2001).  Kekurangan  lemak  pada  ikan kerapu macan dapat mengakibatkan timbulnya penyakit myopathy atau ceroidosis (Koesharyati et . al .,  2001).  Selain  itu,  kurangnya  konsumsi  lemak  juga  berpengaruh  terhadap  rendahnya tingkat pertumbuhan dan kelulushidupan ikan kerapu macan. Arifin (2002) menyatakan, bahwa ikan  kerapu  macan  yang  diberikan  pakan  buatan  mengandung  lemak  mempunyai  tingkat pertumbuhan  dan  kelulushidupan  lebih  tinggi  dibandingkan  pakan  buatan    tanpa  lemak. Kandungan lemak dalam pakan buatan juga harus disesuaikan dengan kebutuhan ikan karena kadar lemak yang terlalu tinggi dapat menyebabkan terjadinya oksidasi lemak. Oksidasi lemak mengakibatkan permeabilitas membran sel menjdi terganggu, sehingga aktivitas metabolismenya berkurang (Lanrida, 2002).
Banyaknya  lemak  yang  dikonsumsi  oleh  ikan  bergantung  pada  komposisi  bahan  yang terdapat  pada  pakan  tersebut  dan  juga  kondisi  lingkungannya.  Untuk  mengetahui  pengaruh kedua faktor tersebut perlu dilakukan penelitian penentuan kadar lemak pada feses ikan kerapu macan dengan variasi formulasi pakan dan kondisi lingkungan yang berbeda. Penentuan kadar lemak  tersebut  dilakukan  dengan  metode  gravimetri  menggunakan  pelarut  metanol-kloroform (1:1).  Pemilihan  metode  gravimetri  untuk  penentuan  kadar  lemak  didasarkan  pada  ketelitian yang dihasilkan dan hematnya biaya yang harus dikeluarkan. Metode gravimetri bisa mencapai ketelitian 0,1 % dengan kemampuan menentukan analit hingga konsentrasi  ± 10 -2 molar (Day dan  Underwood,  1996).  Penggunaan  pelarut  campuran  metanol-kloroform  karena  keduanya mempunyai  perbedaan  kepolaran  yang  cukup  besar.  Selain  itu  kedua  campuran  pelarut tersebut  memiliki  titik  didih  yang  rendah,  sehingga  mudah  diuapkan  pada  suhu  kamar  untuk mendapatkan  analit  (lemak)  dalam  keadaan  murni.  Dengan  demikian,  lemak  yang  diperoleh tidak akan mengalami perubahan struktur molekul akibat pemanasan.
Hasil penelitian ini diharapkan dapat menjadi bahan informasi tambahan bagi pembaca, khususnya dalam  menentukan  variasi formulasi pakan dan kondisi lingkungan yang tepat  bagi ikan kerapu macan, sehingga dapat menunjang pengembangan usaha budidaya ikan tersebut.

## 2. Metode
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  Balai  Besar  Riset  Perikanan  Budidaya  Laut  Gondol-Bali selama 62 hari, dimulai dari tanggal 2 Mei hingga 2 Juli 2015.
Sebelum  melakukan  penelitian,  terlebih  dahulu  dipersiapkan  segala  sesuatu  yang dibutuhkan  antara  lain  :  bak,  ikan  kerapu  macan,  dan  pakan  ikan. Formulasi  pakan  ikan  yang digunakan  dibuat  dalam  5  macam  variasi.  Masing-masing  variasi  formulasi  diatur  agar komposisi lemak dan protein dalam pakan sama, sedangkan komposisi lainnya dibuat berbeda- beda (Tabel 1).
Tabel 1. Formulasi Pakan Ikan Kerapu Macan ( Epinephelus fuscoguttatus )
Bahan Variasi Formulasi Pakan 1 2 3 4 5 Tepung Ikan (gr) 65,0 60,5 56,0 51,5 47,0 Tepung Rebon (gr) 10,0 10,0 10,0 10,0 10,0 Tepung Ampas Kecap (gr) 0,0 7,5 15,0 22,5 30,0 Dekstrin/ a -Starch (gr) 13,1 11,0 8,8 6,7 4,5
Bahan Variasi Formulasi Pakan 1 2 3 4 5 Minyak Ikan (gr) 2,0 1,9 1,9 1,9 1,7 Minyak Kedelai (gr) 3,1 2,3 1,5 0,6 0,0 Mineral Mix (gr) 2,5 2,5 2,5 2,5 2,5 Vitamin Mix (gr) 1,3 1,3 1,3 1,3 1,3 CMC (gr) 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 Metionin - - - - - Cr 2 O 3 (gr) 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 Total (gr) 100 100 100 100 100 Komposisi Proximat Protein (%) 46,8 46,8 46,8 46,8 46,8 Lemak (%) 12,0 12,0 12,0 12,0 12,0 Abu (%) 15,4 15,0 14,8 14,7 14,3 Serat (%) 0,6 1,5 2,1 3,0 2,9 Air (%) 5,32 5,1 4,5 4,0 3,7 NFE (%) 19,97 19,63 19,81 19,50 20,26 Energi (kkal/gr) 78,77 78,43 78,61 78,30 79,06
Pada  awal  penelitian  hanya  memberikan  pakan  pada  ikan  kerapu  macan  yang dilakukan  dua  kali  sehari,  yaitu  pagi  dan  siang  hari  masing-masing  sebanyak  2  gr  selama  42 hari.  Setelah  42  hari,  pemberian  pakan  dihentikan,  kemudian  dilanjutkan  dengan  penentuan kadar  lemak  pada  fesesnya.  Pengambilan  sampel  feses  ikan  kerapu  macan  dilakukan  secara acak dengan dua kali pengulangan.
Ditimbang sampel feses ikan kerapu macan yang diberi pakan dengan variasi formulasi 1  sebanyak  0,3  gram,  kemudian  dimasukkan  ke  dalam  cawan  pengaduk  dan  ditambah  air sebanyak  0,6  ml  sambil  diaduk  secara  manual  hingga  merata.  Selanjutnya  ke  dalam  cawan pengaduk  ditambahkan  pula  10  ml  metanol  dan  20  ml  kloroform  serta  diaduk-aduk  selama  5 menit. Setelah diaduk selama 5 menit, campuran sampel ditambah lagi dengan 10 ml metanol dan diaduk selama 1 menit. Campuran sampel selanjutnya disaring dengan top filter paper dan ditampung  dalam  corong  pemisah  serta  dicuci  dengan  pelarut  metanol-kloroform  dengan perbandingan 1:1. Hasil saringan ditambah larutan NaCl 0,9 % sebanyak 7,5 ml sambil dikocok, hingga  homogen  dan  didiamkan  selama  satu  malam  sampai  terbentuk  dua  lapisan.  Lapisan bagian  bawah  (lemak  dalam  pelarut  kloroform)  ditampung  dalam  botol  asah  evaporator  dan diuapkan  dengan  unit  evaporator  dalam  ruang  asam.  Lemak  yang  diperoleh  kemudian dipindahkan  ke  dalam  botol  lemak,  dikeringkan  dengan  oven  pengering  pada  suhu  40 0 C. Lemak  yang  sudah  kering  dimasukkan  ke  dalam  desikator  selama  30  menit  kemudian ditimbang beratnya. Dengan cara yang sama ditentukan pula berat lemak yang diperoleh pada sampel feses ikan kerapu macan yang diberikan pakan dengan variasi formulasi 2, 3, 4, dan 5.
Dari hasil penelitian akan diperoleh data berupa berat sampel feses ikan kerapu macan yang  diambil  pada  berbagai  variasi  formulasi  pakan  dan  berat  lemak  yang  diperoleh  dari masing-masing  sampel.  Berdasarkan  data  tersebut,  penentuan  kadar  lemak  pada  masing- masing  sampel  dapat  dilakukan  dengan  memasukkan  data  yang  diperoleh  pada  persamaan berikut.
Kadar lemak (%) =
100% x diambil yang ikan feses sampel Berat diperoleh yang lemak Berat
Analisis selanjutnya  dilakukan secara deskriptif mengenai pengaruh  perbedaan  variasi formulasi  pakan  dan  kondisi  lingkungan,  terutama  suhu  air  terhadap  kandungan  lemak  dalam feses ikan kerapu macan.

## 3.  Hasil dan Pembahasan
Berdasarkan  hasil  penelitian  dan  pengamatan  yang  dilakukan,  diperoleh  data  kadar lemak  pada  feses  ikan  kerapu  macan.  Nilai  kadar  lemak  ini  diambil  dari  dua  kali  pengukuran, yaitu pada pagi hari dan siang hari dengan selang waktu 7 hari. Hasil pengukuran kadar lemak feses ikan kerapu macan dapat dilihat pada Tabel 2 untuk pagi hari, dan Tabel  3 untuk siang hari.
Tabel 2. Nilai Kadar Lemak Feses Ikan Kerapu Macan ( Epinephelus fuscoguttatus ) Pagi Hari
Variasi Formulasi Pakan Kadar Lemak (%) Sampel 1 Sampel 2 Rata-Rata 1 4,02 3,00 3,51 2 4,30 4,28 4,29 3 5,67 6,10 5,88 4 11,92 11,91 11,91 5 13,52 13,20 13,36
Tabel 3. Nilai Kadar Lemak Feses Ikan Kerapu Macan ( Epinephelus fuscoguttatus ) Siang Hari
Variasi Formulasi Pakan Kadar Lemak (%) Sampel 1 Sampel 2 Rata-Rata 1 6,12 5,68 5,90 2 7,46 7,01 7,24 3 11,08 11,50 11,29 4 13,73 15,60 14,67 5 16,10 16,76 16,40
Dari  Tabel  2,  dapat  dilihat  bahwa  kadar  lemak  pada  feses  ikan  kerapu  macan menunjukkan  nilai  yang  berbeda  untuk  setiap  variasi  formulasi  pakan.  Nilai  kadar  lemak terendah terdapat pada feses ikan kerapu macan yang diberi pakan dengan variasi formulasi 1, kemudian semakin meningkat pada varaiasi formulasi 2, 3, 4, dan pada variasi formulasi 5 nilai kadar lemak diperoleh dalam jumlah yang paling tinggi. Sebagaimana halnya dengan Tabel 2, Tabel 3 juga memperlihatkan hasil yang sama, namun kadar lemaknya lebih tinggi.
Perbedaan kadar lemak yang terkandung  dalam feses ikan kerapu macan disebabkan oleh  adanya  perbedaan  komposisi  bahan  pada  masing-masing  variasi  formulasi  pakan.  Jika dilihat  kembali  komposisi  pakan  pada  Tabel  1,  variasi  formulasi  pakan  1-5  mengalami perubahan  komposisi  bahan  baku,  yaitu  penambahan  tepung  ampas  kecap,  pengurangan tepung  ikan,  dan  pengurangan  kandungan  minyak  kedelai.  Ketiga  bahan  baku  ini  merupakan sumber  lemak  bagi  ikan  kerapu  macan.  Pada  setiap  variasi  formulasi  pakan,  penambahan jumlah  tepung  ampas  kecap  diiringi  dengan  pengurangan  jumlah  tepung  ikan  dan  minyak kedelai,  sehingga  kadar  lemak  pada  setiap  variasi  pakan  tetap  sama,  yaitu  sekitar  12%. Meskipun  kandungan  kadar  lemak  pada  setiap  variasi  formulasi  pakan  sama,    namun  pada kenyataanya  kadar  lemak  pada  feses  ikan  kerapu  macan  terdapat  perbedaan.  Hal  ini dikarenakan  tingkat  pencernaan  masing-masing  bahan  baku  berbeda.  Untuk  mengetahui tingkat pencernaan suatu bahan dapat dilihat dari nilai ubahnya. Semakin tinggi nilai ubah suatu bahan  baku,  berarti  semakin  sulit  bahan  tersebut  dicerna  oleh  ikan.  Nilai  ubah  tepung  ikan, minyak kedelai, dan tepung ampas kecap dicantumkan pada Tabel 4 (Mudjiman, 1984).
Tabel 4. Nilai Ubah Tepung Ikan, Minyak Kedelai, dan Tepung Ampas Kecap
No Bahan Nilai Ubah 1 Tepung ikan 1,5 - 3 2 Minyak kedelai 3 - 5 3 Tepung ampas kecap 8
Berdasarkan  nilai  ubah  pada  Tabel  4  di  atas,  dapat  diketahui  bahwa  tepung  ampas kecap  lebih  sulit  dicerna  oleh  ikan  dibandingkan  tepung  ikan  maupun  minyak  kedelai. Akibatnya, kandungan lemak yang terdapat dalam tepung ampas kecap tidak sepenuhnya bias dicerna oleh ikan kerapu macan, melainkan dibuang dalam bentuk feses, sehingga kadar lemak pada feses menjadi meningkat.
Selain  faktor  variasi  formulasi  pakan,  perbedaan  kadar  lemak  pada  feses  juga dipengaruhi  oleh  waktu  pemberian  pakan.  Feses  ikan  kerapu  macan  yang  diberi  pakan  pada pagi  hari  (Tabel  2)  mempunyai  kadar  lemak  yang  lebih  rendah  daripada  siang  hari  (Tabel  3). Hal  ini  disebabkan  oleh  perbedaan  lingkungan,  terutama  suhu  air.  Perubahan  suhu  air  yang semakin meningkat pada siang hari, akan berpengaruh secara langsung terhadap nafsu makan ikan.  Rata-rata  kebutuhan  pakan  harian  ikan  kerapu  pada  siang  hari  meningkat  dua  kali  lipat dibandingkan  pada  pagi  hari  (Abbas,  1996).  Peningkatan  kebutuhan  pakan  pada  suhu  tinggi
tersebut disebabkan oleh meningkatnya agretivitas ikan untuk mendapatkan pakan. Pada suhu tinggi,  ikan  cenderung  lebih  agresif  untuk  mendapatkan  pakan,  sehingga  frekuensi  makannya menjadi lebih banyak.  Namun karena kemampuan pencernaan ikan kerapu macan pada pagi maupun siang hari tetap sama, maka pakan yang dikonsumsi secara berlebihan akan terbuang menjadi feses. Akibatnya, kandungan lemak dalam feses menjadi lebih tinggi. Dengan demikian kadar lemak pada feses ikan kerapu macan saat siang hari lebih tinggi dibandingkan pagi hari.

## 4.  Simpulan dan Saran
Berdasarkan rumusan masalah dan pembahasan di  depan, simpulan dalam  penelitian ini  dapat  dirumuskan  sebagai  berikut:  kadar  lemak  dalam  feses  ikan  kerapu  macan  berkisar antara  3,51 –  13,36  %  pada  pagi  hari,  dan  5,90  –  16,40  %  pada  siang  hari,  variasi  formulasi pakan yang diberikan sangat menentukan besar kecilnya kandungan kadar lemak dalam feses ikan  kerapu  macan,  perubahan  kondisi  lingkungan,  yaitu  peningkatan  suhu  air,  menyebabkan tingginya kandungan  kadar lemak dalam feses ikan kerapu macan.
Selain  kadar  lemak,  perlu  juga  ditentukan  kandungan  beberapa  nutrien  penting  bagi ikan  kerapu  macan,  seperti  karbohidrat,  protein,  vitamin,  dan  mineral.  Penentuan  nutrien tersebut  diperlukan  untuk  mengetahui  pengaruhnya  terhadap  variasi  formulasi  pakan  yang diberikan serta perbedaan kondisi lingkungan.

## Daftar Pustaka
Abbas, S. D. 1995. Pakan Ikan Alami .Cetakan pertama. Yogyakarta: Kanisius.
Arifin.  2002.  Pengaruh  Kadar  Asam  Lemak  N-3  HUFA  yang  Berbeda  pada  Pakan  Buatan Terhadap  Pertumbuhan  dan  Tingkat  Kelulushidupan  Juvenil  Ikan  Kerapu  Macan ( Epinephelus fuscoguttatus ). Skripsi . Universitas Diponegoro.
Day,  Jr.  R.  A.  and  Underwood,  A.  L.  1996.  Analisis  Kimia  Kuantitatif.  Terjemahan  A.  H. Pudjaatmaka. Quantitative Analysis . Cetakan ketiga. Jakarta: Erlangga.
Koesharyati, I. et . al . 2001. Penuntun Diagnosa Penyakit Ikan II . Balai Penelitian Laut Gondol.
Lanrida, M. 2002. Pengaruh  Pemberian Pakan Buatan dengan Kandungan N-3 HUFA Berbeda Terhadap Pertumbuhan Juvenil Kerapu Macan   ( Epinephelus  fuscoguttatus ). Laporan Kerja Praktik Lapangan . Sekolah  Tinggi Perikanan.
Makatutu , D. 2001. “ Pengaruh Sumber Lemak  Terhadap Pematangan Gonad dan  Pemijahan Ikan  Kerapu  Lumpur  ( Epinephelus  coiodes )”.  Makalah  disampaikan  dalam Lokakarya Teknologi  Budidaya  Laut  dan  Pengembangan  Sea  Farming  di  Indonesia ,  Puslitbang Eksplorasi Laut dan Perikanan, Jakarta 25 Januari 2001.
Mudjiman, A. 1984. Makanan Ikan . Jakarta: Swadaya.
Sarida, M. 2005. Pembenihan dan  Pembesaran  Kerapu  Macan ( Epinephelus fuscoguttatus ) di Balai  Besar  Riset  Perikanan  Budidaya  Laut  Gondol –  Bali. Laporan  Praktik  Kerja Lapang . Program Studi Teknologi dan Manejemen Akuakultur, Institut Teknologi Bogor.
Triastini,  Ni  G.  K.  2003.  Pengaruh  Kandungan  Vitamin  C  L-Ascorbyl-2-Phosphat  Magnesium (APM)  yang  Berbeda  pada  Pakan  Buatan  Terhadap  Pertumbuhan  dan  Kelangsungan Hidup  Benih  Ikan  Kerapu  Macan  ( Epinephelus  fuscoguttatus ). Skripsi .  Jurusan Perikanan, Universitas   Haluoleo Kendari.