## Penentuan Kadar Flavonoid Daun Sembung (Blumea balsamifer) menggunakan Metode Spektrofotometri UV-Vis
Mohamad Adam Mustapa 1 , Muhammad Taupik 2* , A. Mu'thi Andy Suryadi 3 , Andi Makkulawu 4 , Mohamad Aprianto Paneo 5
1,2,3,4,5 Jurusan  Farmasi,  Fakultas  Olahraga  dan  Kesehatan,  Universitas  Negeri  Gorontalo,  Kota  Gorontalo, Indonesia.
*E-mail: muhtaupik@ung.ac.id
Article Info: Received: 06 Februari 2024 in revised form: 21 April 2024 Accepted: 30 Mei 2024
Available Online: 1 Juni 2024

## ABSTRACT
Indonesian  people  use  herbal  medicines  for  the  prevention and treatment of disease Data collected in 2010 show that the use  of  herbal  medicine  in  Indonesia  reaches  59.12%.  This shows  that  the  us  of  herbal  medicines  in  Indonesia  has increased.One of the medicinal plantsused by the community is Sembung leaves ( Blumea balsmifer ). People in Gorontalo used to  call  this  plant  Tapulapunga.  Sembung  leaves  ( Blumea balsmifer ) is one of the biopharmaceutical plants that has many benefits.  Indonesia  people  use  Sembung  leaves  to  treat influenza, rheumatism, menstrualpain, irregular menstruation,  fever,  asthma,  cough,  bronchitis,  flatulence, diarrhea,  and  diabetes.  This  study  aims  to  indetify  the flavonoid  compounds  in  Sembung  leaves  ( Blumea  balsmifer ). The results of the study showed that the three samples, namely n-hexane  extract,  ethyl  acetate,  and  ethanol  96%  with  the results  of  qualitative  analysis  with  a  cycling  test  showing positive  that  they  contained  flavonoids.  Meanwhile,  in  the thin-layer  chromotographic  test,  the  Rf  value  for  flavonoid compounds ranges from 0.2 -0.8 with other states can be seen from  the  fluorescence  results  formed.  Based  on  color,  it appears  spots  of  light  green,  green,  red,  yellow  fluorescent colors.  The  results  of  the  quantitative  analysis  with  a wavelength of 400 nm of ethanol extraction of 96% showed y 0.030x + 0.342 with a value of R² = 0.961. The flavonoid content was 1.8521% for ethanol extract 96%, 1.6032% for ethyl acetate extract and 0.1253% for n-hexane extract.  This study showed the presence of flavonoid compounds in Sembung leaves by looking at the wavelength produced from each of the extracts.
Keywords : Sembung Leaves; Flavonoids; Uv-VIS Spectrophotometry

## Corresponding Author:
Muhammad Taupik Jurusan Farmasi Fakultas Olahraga dan Kesehatan Universitas Negeri Gorontalo E-mail: E-mail: muh.taupik@ung.ac.id
This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0 International license.
How to cite (APA 6 th Style):
Indonesian Journal of Pharmaceutical Education (e-Journal) 2024; 4(2): 255-261 ISSN : 2775- 3670 (electronic) Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/ijpe/index DOI: 10.37311/ijpe.v4i2.11284
Mustapa, M.A., Taupik,M., Suryadi, A.M., Makkulawu,A., Paneo,M.A (2024). Penentuan Kadar Flavonoid Daun Sembung (Blumea balsamifer) menggunakan Metode Spektrofotometri UV-Vis . Indonesian Journal of Pharmaceutical  (e-Journal), 4 (2), 255-261.

## 1. Pendahuluan
Indonesia merupakan negara tropisyang dikenal memilikikeanekaragaman hayati kedua terbesarsetelah brasil. Diperkirakan ada sekitar 25.000-30.000 tanaman ditemukan di Indonesia. Data  yang  berhasil  dikumpulkan  pada  tahun  2010  menunjukkan  penggunaan  obat  herbal  di Indonesia mencapai 59,12% [1]. Salah satu tumbuhan yang berkhasiat obat yang digunakan oleh masyarakat adalah daun sembung( Blumea balsamifer ) atau yang bisa didengar pada masyarakat Gorontalo  biasa  menyebut    tanaman  sembung  dengan  sebutan  Tapulapunga.  Konsumsi  obat tradisional yang berefek bagi kesehatan telah dilakukan secara turun temurun pada masyarakat Gorontalo.
Daun  sembung  ( Blumea  balsmifer )  merupakan  salah  satu  tanaman  biofarmaka  yang memiliki banyak khasiat.  Masyarakat  Indonesia memanfaatkan daun sembung untuk mengatasi influenza,  rematik,  nyeri  haid,  haid  tidak  teratur,  demam,  asma,  batuk,  bronchitis,perut kembung,  diare,  dan  diabetes  [2,7].  Flavonoid  adalah  suatu  kelompok  senyawa  fenol  yang terbesar ditemukan di alam. Senyawa-senyawa ini merupakan zat warna merah, ungu, dan biru, dan  sebagian  zat  warna  kuning  yang  ditemukan  dalam  tumbuh-tumbuhan.  Obat  tradisional adalah  bahan  atau  ramuan  bahan  mineral,  sediaan  galenik  atau  campuran  dari  bahan  turun temurun. Salah satu obat tradisional yang masih sering kita jumpai adalah jamu.
Berdasarkan uraian tersebut akan dilakukanlah penelitian terhadap tanaman sembung ( Blumea  balsmifer ) dimana  dalam  penelitian ini  akan dilakukan identifikasi  senyawa  flavonoid pada  daun  sembung  ( Blumea  balsmifer )  dengan  metode  Spektrofotometri  Uv-Vis  sehingga diharapkan hasil penelitian ini menambah data ilmiah mengenai kandungan kimia dari daun sembung khususnya di bidang kesehatan.

## ABSTRAK
Masyarakat Indonesia menggunakan obat herbal untuk pencegahan dan pengobatan penyakit. Data yang berhasil dikumpulkan pada tahun 2010 menunjukkan penggunaan obat herbal di Indonesia  mencapai  59,12%.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  penggunaan  obat  herbal  di Indonesia mengalami peningkatan Salah satu tumbuhan yang berkhasiat obat yang digunakan oleh  masyarakat    adalah  daun  sembung  ( Blumea  balsamifer )  masyarakat  gorontalo  biasa menyebut tanaman sembung dengan sebutan tapulapunga daun sembung ( Blumea balsmifer ) merupakan  salah  satu  tanaman  biofarmaka  yang  memiliki  banyak  khasiat  masyarakat Indonesia memanfaatkan daun sembung untuk mengatasi influenza, rematik, nyeri haid, haid tidak  teratur,  demam,  asma,  batuk,  bronchitis,perut  kembung,  diare,  dan  diabetes.Tujuan penelitian yaitu Untuk mengidentifikasi senyawa flavonoid yang ada dalam daun sembung ( Blumea balsmifer ). Hasil penelitian menujukan pada ketiga sampel yaitu ekstrak n-heksan, etil asetat, dan etanol 96% dengan hasil analisis kualitatif dengan uji sikring menunjukan  positif mengandung flavonoid. Sedangkan pada uji kromotografi lapis tipis nilai Rf untuk senyawa flavonoid berkisar antara 0,2 -0,8 dengan dinyatakan lain dapat dilihat dari hasil fluoresensi yang terbentuk. Berdasarkan warna menampakan bercak warna fluoresensi hijau muda, hijau, merah,  kuning.  Hasil  Analisis  kuantitatif  dengan  pada  panjang  gelombang  400  nm  eksrak etanol 96% menunjukan y 0,030x + 0,342  dengan nilai R² =  0,961.  Kadar flavonoid sebesar 1,8521%  untuk  ekstrak  etanol  96%,  1,6032%  untuk  ekstrak  etil  asetat  dan  0,1253  %  untuk ekstrak n-heksan.  Penelitian ini menjukan  adanya senyawa flavonoid pada daun sembung dengan melihat panjang gelombang yang di hasilkan dari masing-masing ekstak tersebut.
Kata Kunci: Daun Sembung; Flavonoid; Spetrofotometri UV-Vis
2.  Metode
Jenis  penelitian  ini  adalah  jenis  penilitian  eksperimental  di  lakukan  di  laboratorium bahan alam jurusan farmasi. Fakultas Olahraga Dan Kesehatan. Untuk mengidentifikasi senyawa flavonoid pada daun sembung ( Blumea balsamifer ). Dengan metode Spektrofotometri UV-VIS.

## Alat dan Bahan
Alat yang akan di gunakan dalam penelitian ini yaitu batang pengaduk, bejana maserasi, gelas  kimia  (pyrex),  gelas  ukur  (pyrex),  timbangan  ohaus  (Triple  beam  balance),  pipet  tetes, cawan porselin, corong (pyrex), corong pisah (pyrex), pipet mikro, pipet tetes, kuvet, gelas ukur (pirex), mista, pensil, lempeng KLT, spektrofometer UV-VIS (HITACHI U-2810). Aluminium foil, lampu  ultraviolet  254nm dan  366nm. Bahan yang  akan  digunakan  pada  penelitian ini  adalah sampel  dau  sembung        ( Blumea  balsamifer) yang  di  ambil  dari  Desa  Dambalo  Kabupaten Pohuwato dalam keadaan segar. Bahan kimia yang akan digunakan dalam penelitian ini adalah n-heksan, etil asetat, etanol 96%, serbuk magnesium, HCl, alkohol 70% , HCl pekat dan aquades.

## Pengambilan dan Pengolahan Sampel
Pengambilan sampel daun sembung ( Blumea balsamifer ) diambil adalah daun ke ketiga dari pucuknya di Desa Dambalo didekat perkebunan warga pada pagi hari pukul 08.00-11.00 WITA. Pengolahan sampel daun sembung ( Blumea balsamifer ) yang telah di ambil di sortasi kering terlebih dahulu kemudian setelah di sortasi kering di cuci mengunakan air yang mengalir sampai bersih  setalah  di  cuci  selanjutnya  sampel  di  rajang  dan  di  keringkan  dengan  cara  diangin- anginkan di tempat yang tidak terpapar lansung sinar mata hari. Setelah itu disortasi kembali untuk  memisahkan  sampel  yang  rusak    pada  pengiringan  dan  di  masukan  kedalam  wadah tertutup rapat. Sampel siap di gunakan.

## Pembuatan Ekstrak
Ekstraksi dilakukan menggunakan metode  maserasi bertingkat dengan sampel serbuk simplisia sembung, pelarut yang digunakan adalah pelarut dengan kepolaran makin meningkat yaitu n-heksan, etil asetat, dan etanol 96% masing-masing pelarut. Serbuk simplisia ditimbang 300 gram dimasukkan ke dalam wadah maserasi. Maserasi pertama simplisia direndam dengan 2  L  n-heksan  selama  3  x  24  jam  sambil  sesekali  diaduk  (setiap  6  jam),  setelah  24  jam  residu dipisahkan  dari  filtrat.  Simplisia  dikeringkan  dengan  cara  di  angin-anginkan.  Setelah  residu kering dimaserasi kembali selama 24 jam dengan etil asetat 1 L sambil sesekali diaduk (setiap 6 jam),  setelah  24  jam  residu  dipisahkan  dari  filtrat,  setelah  maserasi  dengan  etil  asetat  selesai, residu  dikeringkan  kemudian  dimaserasi  dengan  pelarut  etanol  96%  sambil  sesekali  diaduk (setiap  6  jam),  setelah  24  jam  residu  dipisahkan  dari  filtrat,  setelah  maserasi  dan  dilanjutkan dengan proses evaporator

## Analisis Kualitatif Flavonoid
Proses  analisi  kualitatif  diawali  dengan  skrining  fitokimia  dan  di  lanjutkan  dengan melakukan  pengujian    menggunakan  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KTL).  Pada  proses  skrining fitokimia,  ekstrak  daun  sembung  dilarutkan dengan    masing-masing  pelarut  yang digunakan untuk  maserasi.  Dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi.  Setelah  itu  dimasuka  HCl  dikocok  dan biarkan memisah sejenak. Setalah terjadi pemisahan, ditambakan serbuk magnesium (mg). Uji positif ditujukkan dengan terbentuknya warna mera,kuning atau jingga.
Setelah proses skrining fitokimia selesai dilajutkan pengujian Kromatografis Lapis Tipis (KLT)  Fase gerak (eluen) yang digunakan adalah N-neksan dan etil asetat dengan perbandingan 7:3, 6:4, v/v. Sedangkan untuk fase diam digunakan plat  KLT Kresgol 60 F 254 dengan  panjang lempeng 5 cm, lebar 1cm, batas atas 0,5 dan batas bawa 0,5 cm.

## Identifikasi senyawa flavonoid
Ditimbang  sebanyak  25  mg  ekstrak  kental  etil  asetat,  n-heksan,  etanol  96%  daun sembung ( Blumea balsamifer ) dan dilarutkan dalam 25 ml etanol 96% larutan sampel sebayak 1 ml
dan dicukupkan volumenya sampai 10 mL dengan sehingga diperoleh konsentrasi 100 ppm. Dari larutan standar kuersetin 100 ppm, kemudian dibuat beberapa konsentrasi yaitu 5 ppm, 10 ppm, 15  ppm,  20  ppm,  25  ppm,  30  ppm,  35  ppm,  dan  40  ppm.  Selanjutnya  dilakukan  pengujian menggunakan spektrofotometri UV-Vis

## 3.  Hasil dan Pembahasan
Tanaman  merupakan  salah  satu  sumber  berbagai  jenis  senyawa-senyawa  kimia  yang memiliki  khasiat  sebagai  obat.  Kandungan  senyawa  kimia  yang  ada  dalam  tanaman  disebut dengan  fitokimia.  Untuk  mengetahui  kandungan  senyawa  kimia  dalam  tanaman  dilakukan analisis fitokimia [10].
Sampel daun yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun yang segar untuk dipanen yang jika di lihat dengan kasat mata duan yang di ambil yaitu daun yang tidak terlalu tuan dan tidak juga terlalu muda pengambilan sampel sampel daun ini di lakukan pada pagi hari yaitu pada pukul 08.00-11.00 WITA pengambilan sampel daun sembung ini dilakukan dalam satu hari. Pengolahan sampel meliputi beberapa tahap yaitu yang pertma sortasi basa di lakukanya sortasi basa ini agar kita dapat memisakan mana sampel yang layak kita gunakan untuk penelitian dan mana yang tidak layak (rusak) selanjutnya sampel daun sembung ( Blumea balsamifer ) telah selesai di  sortasi  basa  akan  di  lakukan  pencucian  dengan  air  yang  mengalir  bertujuan  untuk membersikan sampel dari kotoran yang masi menempel pada sampel [1].
Tabel 1. Hasil perhitungan berat ekstrak daun sembung ( Blumea balsamifer ) Berat sampel (gr) Pelarut (ml) Berat Ekstrak (gr) Rendamen (%) 300 1500  ml N-heksan 11,6 3,87  % 272 1000 ml etil asetat 8,5 3,12 % 200 1000 ml etanol 96% 9,6 4,8%
Simplisia  yang  telah  dibuat  terlebih  dahulu  dilakukan  standarisasi  agar  simplisia memenuhi standar pada Farmakope Herbal [6]. Sebanyak 300 gram sampel halus duan sembung ( Blumea balsamifer ) dimaserasi dengan mengunakan metode maserasi bertingkat dimulai dengan pelarut n-heksan, etil asetat dan etanol 96 % sebanyak 2000 mL berturut-turut  selama 3 x 24 jam [6].
Filtrat  yang  di  hasilkan  dari  masing  -  masing  pelarut  kemudian  diuapkan  dengan  alat penguap vakum pada suhu 50 ℃ dan menghasilkan ekstrak kental n-heksan sebanyak 3,8 % dan etil  asetat  sebanyak  3,13%  dan  untuk  etanol  96%  4,8%  (Tabel  1).  Menurut  Amalia dkk, (2019) kecilnya nilai rendamen yang diperoleh diduga karena kurangnya waktu yang digunakan saat proses  ekstraksi,  proses  pengadukan  kurang  baik,  dan  pelarut  yang  digunakan  tidak  diganti pada saat pelarut sudah jenuh Proses pemekatan menggunakan rotaru vacum evaporator dengan suhu  50 ℃ untuk  menjaga  agar  kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  dalam  ekstrak  tidak mengalami kerusakan [5].
Tabel 2. Hasil skrining fitokimia ekstrak daun sembung ( Blumea balsamifer ) No Senyawa Ektrak Pereaksi Hasil 1 Flavonoid Ektrak n-heksan - 2 Flavonoid Ektrak etil asetat HCl pekat + Logam Magnesium + 3 Flavonoid Ektrak etanol 96% +
Uji kandungan kimia dilakukan untuk tujuan memberikan gambaran awal jenis senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam suatau ekstrak [3]. Hasil uji kualitatif menggunakan metode skrining fitokimia dapat dilihat pada tabel 2. Hasil tersebut menunjukan bahwa ektrak
etanol  96%,  ekstrak  etil  asetat  dan  ekstrak  n-heksan  positif  mengandung  senyawa  flafanoid. Senyawa  yang  akan  di  uji  dalam  penelitian  ini  yaitu  senyawa  flavonoid  dalam  pengujian senyawa  flavanoid  ekstrak  etil  asetatdan  etanol  96%  daun  sembung (Blumea  balsamifera) menggunakan HCL pekat ditambah serbuk logam magnesium, Hasil positif flavonoid  ditandai dengan adanya perubahan warna merah, kuning, atau jingga [9].
(A) (B) (A) (B)
Eluen n-heksan: etil asetat 7:3Eluen n-heksan: etil asetat 6:4 Keterangan:                                                            Keterangan:
(A) = UV 254 nm
(B) = UV 366 nm
K = Kuarsetin
S = Sampel
Nilai Rf  Ekstrak     Nilai Rf Kuarsetin Rf 1 = 0,47 Rf 1 = 0,47 Rf 2 = 0,62 Rf2 = 0,62 Rf 3 = 0,7
Rf 4 = 0,72
Gambar 1. Hasil Kromatografi Lapis Tipis Ektrak etanol 96%
Berdasarkan  proses  pemisahan  dari  kromatografi  lapis  tipis  (KLT),  diperoleh  hasil kombinasi dari dua eluen  yang berbeda kepolaran ini yaitu dengan kombinasi pelarut n-heksan: etil  asetat  dengan  perbandingan  7:3  dan  6:4  (gambar  1).  Digunakannya  kombinasi  pelarut tersebut karena adanya perbedaan kepolaran antara keduanya pelarut di harapkan dari kedua perbandingan  tersebut  agar  mandapatkan  noda  terbaik  yang  dihasilkan  dari  eluen  tersebut. Metode kromatografi lapis tipis merupakan salah satu metode pemisahan salah satu senyawa berdasarkan  distribusi  dua  fase  yaitu  fasediam  dan  fasegerak  [14].  Ekstak  etanol  96%  dan perbandingan 7:3 dan 6:4 yang harus dijenuhkan terlebih dahulu dengan menggunakan kertas saring.  Tujuan  dari  penjenuhan  eluen  dimaksudkan  untuk  mempercepat  proses  elusi. Selanjutnya ekstak kental etanol 96% ditotolkan pada lempeng dan di masukan ke dalam gelas yang  berisi  beberapa  perbandingan  pelarut.  Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh  menunjukan bahwa estrak tersebut mengandung senyawa flavonoid karena dilihat dari nilai Rf dan warna fluoresensi yang di peroleh untuk setiap noda. Dimana menurut Gita Resiskawat (2016), nilai Rf untuk senyawa flavonoid berkisar antara 0,2 -0,8 dengan dinyatakan lain dapat dilihat dari hasil fluoresensi yang terbentuk. Berdasarkan warna yang di hasilkan oleh ekstrak etanol 96% daun sembung pada penampakan UV 254 dan 366. Berdasrkan hasil KLT dalam peneltian ini lakukan pada ekstak etanol 96% menampakan bercak warnafluoresensi hijau muda, hijau, merah, kuning dengan nilai Rf ekstrak etil asetat perbandingan pelarut 7:3 yaitu noda pertama nilai Rf 0,47, noda kedua  nilai  Rf  0,62,  noda  ketiga  nilai  Rf  0,7 dan  noda  yang ke  empat  nilai  Rf  0,72  dan  untuk perbandingan 6:4 noda pertama nilai Rf 0,47, noda kedua nilai Rf 0,57, noda ketiga nilai Rf 0,57 dan untuk noda kempat nilai Rf 0,97 [11].
K S K S S K S K (A) = UV 254 nm (B) = UV 366 nm
K = Kuarsetin S = Sampel Nilai Rf  Ekstrak   Nilai Rf Kuarsetin Rf 1 = 0,47 Rf 1 = 0,47 Rf 2 = 0,57 Rf2 = 0,62 Rf 3 = 0,87
Rf 4 = 0,97
Tabel 3. penentuan panjang gelombang maksimum dengan baku kuarsetin
Panjang gelombang Absorbansi 400 1,301 420 1,205 440 1,025 460 1,290 480 1,119 500 1,194
Penentuan  kadar  flavanoid  didahului  dengan  menentukan  panjang  gelombang  baku standar kuarsetin. Berdasarkan dari hasil pada tabel 3 diperoleh panjang gelombang maksimum larutan kuarsetin adalah 400 nm. Hal ini dilihat dari nilai absorbansi tertinggi yang di peroleh dari hasil raning senyawa kuarsetin dari panjang gelombang 400 -500 nm.

## Gambar 2. Kurva Standar kuarsetin
Berdasarkan  hasil  uji  penentuan  panjang  gelombang  flavonoid  yang  di  hasilkan  oleh ekstak  n-heksan  pada  panjang  gelombang  maksimum  yaitu  400  nm  hal  ini  dilihat  dari  nilai absorbansi  tertinggi  larutan  kuarsetin.  Panjang  gelombang  flavonoid  ditentukan  melalui persaman regresi kurva standar dengan konsentrasi larutan kuarsetin adalah 5 ppm, 10 ppm, 15 ppm, 20 ppm, 25 ppm, 30 ppm, 35 ppm dan 40 ppm hasil absorbansi dapat dilihat pada gambar 2.  Dapat  dilihat  pada  kurva  semakin  tinggi  konsentrasi  zat  maka  semakin  tinggi  pula  nilai absorbansi yang diperoleh. Sehingga menunjukan hubungan lurus antara konsentrasi dan nilai absorbansi[12].
Berdasrkan hasil penentuan kadar flavonoid sebesar 1,8521% untuk ekstrak etanol 96%, 1,6032% untuk ekstrak etil asetat dan 0,1253 % untuk ekstrak n-heksan. Berdasarkan hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa kadar flavanoid tertinggi diperoleh pada ekstrak etanol 96%. Hal ini  menunjukan  adanya  senyawa  flavonoid  pada  daun  sembung  dengan  melihat  panjang gelombang yang di hasilkan dari masing-masing ekstak tersebut.  Menurut Tomayahu, (2018), senyawa flavonoid dapat memberikan aktifitas seperti anti radang, anti kangker, antioksidan, anti virus, antibakteri, dan anti alergi.[15]

## 4.  Kesimpulan
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  di  lakukan  maka  dapat  disimpulkan  bahwa  hasil identifikasi  senyawaflavonoid  pada  daun  sembung (Blumea  balsamifer) menunjukan  terdapat senyawa  flavonoid.  Hal ini  berdasrkan  uji  skrining  fitokimia  yang  dilakukan,  serta  pengujian lebih  lanjut  menggunakan  kromatografi  lapis  tipis.  Pada  penentuan  kadar  senyawa menggunakan metode spektrofotometri UV-Vis diperoleh masing-masing ekstrak n-heksan, etil
y = 0,0131x + 0,0605 R² = 0,9886 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0 10 20 30 40 50 abso rba nsi konsentrasi
asetat  dan  enatnol  96%  mengndung  flavanoid,  dengan  persen  kadar  tertinggi  terdapat  pada ekstrak etanol 96%.

## Referensi
[1] Amalia, A., Sari, I. and Nursanty, R. (2017) . Aktivitas Aantibakteri Ekstrak Etil  Asetat Daun  Sembung  (Blumea  balsamifera  (L.)  DC.) Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA)’, pp. 387– 391.
[2] Amalia dkk, 2019. Faktoe-faktor  yang  mempengaruhi  hasil  rendamen  dengan menggunakan  metode  analisis  of  variance. Jurnal  fakultas  teknik  unoversitas Malikussaleh Aceh-Indonesia.
[3] Departemen  Kesehatan Republik  Indonesia.  2000. Parameter  standar  umum  ekstrak tumbuhan obat . Derektorat jendral pengawasan obat dan makanan : Jakarta.
[4] Hakim Aliefman. 2017. Perbedaan Pola Okasidasi Flavonoid Pada Genus Artocarpus dan Intsia . Jurnal program studi pendidikan kimia Universitas Mataram [5] Harborne, J.B.  1987. Metode  Fitokimia  Penuntun  Cara  Menganalisis  Tumbuhan,  Terjemahan Padmawina. Bandung: ITB press.
[5] Khoirani, N. 2013. Karakteristik Simplisia dan Standarisasi Ekstraketanol Herbal Kemangi (Ocimum americanum.). Skripsi. Jurusan Farmasi. Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan. Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta. Jakarta.
[6] Lenny,  S.,  (2006),  Senyawa  Flavonoida,  Fenil  Propanoida  dan  Alkaloida,  Karya Ilmiah, FMIPA, USU, Medan.
[7] Marzouk, M. M. 2016. Flavonoid Constituents And Cytotoxic Activiy Of Erucaria Hispanica (L.) Druce Growing Wild In Egypt. Arabian Journal Of Chemistry, 9, 411 – 415.
[8] Marjoni  R. Dasar-Dasar  Fitokimia  Untuk  Diploma  III  Farmasi .  Jakarta:  Trans  Info Media; 2016.
[9] Mulyani, A. dan Agus, F, Hairiah, K 2011. Panduan Metode Pengukuran Karbon Tersimpan  di  Lahan  Gambut.  Balai  Besar  Litbang  Sumberdaya  Lahan  Pertanian. Badan Litbang  Pertanian.  Kementrian  Pertanian  dan  World  Agroforestry  Center, SEA. Bogor. 58 hal.
[10] Pradhan D., Suri K. a, Pradhan D.K. and Biswasroy P., 2013, Golden Heart of the Nature: Piper betleL., Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry, 1 (6), 147 – 167.
[11] Rijke,  E.  2005. Trace-level  Determination  of  Flavonoids  and  Their  Conjugates . https://dare.ubvu.vu.nl/bitstream/1871/9048/1/Dissertation_E_de_Rijke.pdf  14 Maret 2006.
[12] Salmia,  2016. Analisis  kadar  flavonoid  total  ekstrak  kulit  batang  kedondong  Bangkok (Spondias  dulcis)  dengan  metode  spektrofotometri  Uv-Vis .  Skripsi  Jurusan  Farmasi. Universitas Negeri Alaudin Makassar.
[13] Sutrisna, E. M., & Sujono, T. A. (2015). The combination of belimbing wuluh fruit ( Averrhoa bilimbi L .) and leaves of tapak dara ( Catharanthus roseus G .) from Indonesia as  a  candidate  hypoglycemic  agents  and  thin  layer  chromatography  profiles. Biomedical and Pharmacology Journal, 8(1), 39 – 46.
https://doi.org/10.13005/bpj/580.
[14] Sastrohamidjojo. (2007). Spektroskopi . Edisi Ketiga. Yogyakarta: Liberty.
[15] Tomayahu dkk, 2018. Penetapan  kadar  flavonoid  total  ekstrak  etanol  kulit  buah  apokat (Persea  Americana  mill).  Dengan  metode  spektofotometri  Uv-Via. Jurnal  Fitofarmaka Indonesia Vol 4 No 2.