## Isolasi Kapang Pendegradasi Hidrocarbon Dari Limbah Minyak Bumi PT. Ollop Bula

## Muhammad Rijal
Pendidikan Biologi, IAIN Ambon * Corresponding authors: rijal_rijal82@yahoo.co.id Manuscript received: 02-02-2017 Revision accepted: 09-04-2017

## Abstrak
Tingginya aktivitas penambangan minyak lepas pantai mengakibatkan terjadinya pencemaran air oleh tumpahan  minyak  bumi  mentah,  sehingga  berdampah  terhadap  kerusakan  ekosistem.  Secara  alami tumpahan minya dilepas pantai dapat hilang oleh aktivitas mikroorganisme. Kapang merupakan salah satu  mikroorganisme  yang  memiliki  kemapuan  dalam  mendegradasi  hydrocarbon.  Hasil  penelitian diperoleh  6  isolat  kapang  yang  memiliki  kemampuan  dalam  mendegradasi  hydrocarbon.  Isolat  V memiliki  kemauan  yang  lebih  kuat  dan  isolat  I  memiliki  kemampuan  yang  paling  lemah  dalam mendegradasi hydrocarbon.
Kata kunci : kapang, isolat, hydrocarbon

## Abstract
The high activity of offshore mining cause water pollution by crude petroleum spill thus impacts the ecosystem damage. Naturally, offshore oil spills can be lost by microorganism activities. Kapang (mold) is one of microorganisms having an ability to degrade hydrocarbon. The research result found 6 isolates of kapang having the ability to degrade hydrocarbon. Isolate V had stronger ability,  whereas isolate I was the weaker in degrading hydrocarbon.
Keywords : molds, isolates, hydrocarbon

## PENDAHULUAN
Minyak bumi merupakan sumber energi utama yang dibutuhkan penduduk dunia.  Sumber energi lain belum dapat menggantikan peran minyak bumi sepenuhya sebagai sumber energi utama. Hal ini mendorong perkembangan industri pengilangan minyak untuk meningkatkan kegiatan  eksplorasi,  transportasi  dan  proses  pengolahan  minyak  (Sinta  Silvia,  2009).  Selain sebagai sember energi, minyak bumi merupakan sumber devisa bagi negara. Sebagai sumber energi,  minyak  bumi  memiliki  banyak  sekali  manfaatnya  seperti  untuk  kegiatan  industri, transportasi  dan rumah tangga (Karwati, 2009). Tetapi  keberadaan minyak bumi juga dapat mencemari lingkungan darat, air, dan udara selama kegiatan industri minyak bumi berjalan. Pencemaran  minyak  bumi  dapat  berasal  dari  tumpahan  selama  kegiatan  pengeboran, kebocoran  sistem  penyimpanan,  produksi,  pembuangan  limbah  dari  kegiatan  industri, rembesan  dari  sumbernya,  pengilangan,  dan  transportasi  (Sailubhai,  1986).  Pencemaran minyak bumi dapat menimbulkan masalah cukup serius terhadap ekosistem pantai,  sungai, darat  dan  lingkungan  dekat  eksplorasi  minyak.  Hal  ini  disebabkan  karena  minyak  bumi mengadung  salah  satu  kontaminan  yang  sulit  diurai  yaitu  senyawa  hidrokarbon  (Karwati,
E-ISSN-2580-7129 Print- ISSN-1978-610X
TECHNO: JURNAL PENELITIAN
Jurnal homepage : http://ejournal.unkhair.ac.id/index.php/Techno Volume 06 Nomor 01 Mei 2017
2009).  Ketika  senyawa  tersebut  mencemari  permukaan  tanah,  maka  zat  tersebut  dapat menguap,  tersapu  air  hujan,  atau  masuk  kedalam  tanah  kemudian  terendap  menjadi  zat beracun yang menyebabkan keracunan pada mahluk hidup, mengganggu penyerapan cahaya untuk fotosintesis tumbuhan air dan mempengaruhi keseimbangan ekosistem sekitar (Jusfan, 1995).  Hal  ini  selajan  dengan  pendapat  Alexander dalam Karwati  yang  menyatakan  bahwa keberadaan  kontaminan  yang  sukar  diuraikan  dan  bersifat  toksik  pada  tanah  akan mengganggu pertumbuhan tanaman dan organisme lain yang hidup di dalamnya. Akibatnya, kualitas dan daya dukung lingkungan terhadap mahluk hidup menjadi berkurang sehingga perlu penanganan yang serius. Untuk itu perlu dicari suatu cara penanggulangan yang tepat, cepat, efektif dan tidak menganggu lingkungan.
Banyak cara yang dapat dilakukan untuk menanggulangi pencemaran minyak bumi. Secara garis besar dapat dilakukan dengan cara fisika, kimia dan biologi (udiharto, 1992). Menurut Doeffer dalam Shinta Sivia, penanggulangan secara fisika, biasanya digunakan pada langkah awal  penganan  untuk  mengisolasi  secara  cepat  sebelum  minyak  tersebut  menyebar. Penanggulangan  secara  kimia  dapat  dilakukan  dengan  menggunakan  dispersan,  sehingga minyak  tersebut  dapat  terdispensi  (Sinta  Silvia,  2009).  Kedua  cara  ini  masih  memiliki kelemahan  yaitu  mahal  pengoperasianya,  dapat  mengganggu  kehidupan  di  lingkungan tersebut dan sifatnya tidak mendaur.
Penanggulangan  secara biologi  merupakan  alternatif  untuk  mengatasi  limbah  minyak  bumi tanpa  merusak  lingkungan  dengan  memanfaatkan  mikoorganisme  pendegradasi  (Udiharto, 1992). Penguraian suatu bahan organik kompleks menjadi bentuk lain yang lebih sederhana berupa  CO 2 ,  H 2 O,  dan  logam  dengan  aktifitas  mikroorganisme  sehingga  tidak  mencemari lingkungan  disebut  biodegradasi  (Thomas,  1992).  Menurut  Udiharto,  keuntungan menggunakan metode tersebut diantaranya ekonomis, cukup efektif, efisien, dan lebih ramah lingkungan.  Melalui  kegiatan  ini  diharapkan  lahan  atau  lingkungan  yang  tercemar  minyak bumi akan menjadi normal kembali (Udiharto, 1992).
Biodegradasi  oleh  mikroorganisme  dapat  terjadi  karena  mikroorganisme  tersebut memanfaatkan  komponen  penyusun  minyak  bumi.  Adapun  komponen  penyusun  minyak bumi adalah karbon sekitar 85% dan hidrogen 12% (Hidrokarbon), serta 1-5% unsur nitrogen, fosfor, sulfur, oksigen, serta unsur logam (Koesmadinata, 1980). Senyawa  hidrokarbon yang memiliki  komponen  terbesar  pembentuk  minyak  bumi  digunakan  sebagai  sumber  karbon oleh  beberapa  mikroorganisme  tertentu,  sedangkan  senyawa  non-hidrokarbon  merupakan nutrisi pelengkap bagi pertumbuhannya, sehingga dapat melakukan metabolisme secara baik. Sebagai  hasil  proses  tersebut  terhadap  minyak  bumi  adalah  terjadinya  degradasi  atau pemutusan  rantai  hidrokarbon  yang  biasa  disebut  biodegradasi  hidrokarbon  minyak  bumi (Udiharto, 1999).

## METODE PENELITIAN
Jenis  penelitain  ini  adalah  deskriptif  dengan  pendekatan  eksperimen  laboratorium yang  bertujan  untuk  mengetahui  isolat  kapang  dari  limbah  minyak  bumi  yang mampu mendegradasi hidrokarbon minyak bumi dan untuk mengetahui kemampuan isolat kapang dalam mendegradasi minyak bumi.
TECHNO: Vol. 06 ( 01): 01-10, Mei 2017

## Tahap Persiapan
a. Mempersiapkan kapang yang telah diisolasi dari limbah minyak bumi.
b. Mempersiapkan semua alat dan bahan yang akan digunakan dalam penelitian.
c. Melakukan  sterilisasi  pada  alat-alat  yang  tahan  pada  suhu  panas  dengan menggunakan oven.

## Tahap Pelaksanaan
a. Timbang media PDA sebanyak 21 gram tambahkan aquades sebanyak 500 ml.
b. Melarutkan media tersebut hingga homogen.
c. Media yang sudah homogen di panaskan di atas hot plate , jika sudah panas angkat media tersebut.
d. Sterilisasikan media dengan menggunakan autoclave.
e. Setelah itu tuangkan kedalam cawan petri +15-20 ml.

## Pembuatan Slide Kulture
Pembuatan slide kulture yang dilakukan adalah dengan menggunakan metode isolasi pada cawan agar; dengan langkah-langkah sebagai berikut:
a. Mengukur  limbah  minyak  bumi  dengan  volume  tertentu  yang  telah  di  tumbuhi  kapang sebanyak + 10 ml.
b. Kemudian sampel tersebut diencerkan dengan pengenceran 10 -1 , 10 -2 , dan 10 -3 .
c. Kemudian  masing-masing  pengenceran  diambil  sebanyak  kurang  lebih  1  ml  dan dimasukkan ke dalam media PDA yang telah diberi minyak bumi dengan menggunakan metode sperael plate.
d. Setelah itu dimasukkan kedalam inkubator selama + 5 x 24 jam.
e. Media yang telah ditumbuhi kapang dibuat dalam slide kulture.

## Tahap Pengujian
a. Melakukan pengukuran awal pada sampel minyak bumi yang meliputi suhu, pH, Kadar Oksigen dan kadar hidrokarbon pada minyak bumi.
b. Melakukan pengukuran akhir pada sampel minyak bumi yang meliputi suhu, pH, Kadar Oksigen dan kadar hidrokarbon pada minyak bumi setelah 1 minggu pengamatan.
c. Hasil dari semua data penelitian ditabulasi pada lembar pengamatan.
Data yang dikumpulkan dalam penelitian ini adalah suhu, pH, DO dan Kadar Hidrokarbon. Suhu  diukur  dengan  menggunakan  termometer,  pH  diukur  dengan  pH  digital,  DO  diukur dengan  DO  meter,  dan  kadar  hidrokarbon  diukur  dengan  Spektrofotometri  serapan  atom. Data  yang  dianalisi  adalah  data  awal  dan  data  akhir  penelitian.  Teknik  pengumpulan  data yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  deskriptif.  Menurut  Dwi  Astuti  untuk menghitung persentase degradasi minyak bumi digunakan rumus sebagai berikut:
%B = Keterangan: %B = persen degradasi (%) BMo  = berat minyak awal (g) BMn  = berat minyak akhir (g)
RIJAL. KAPANG, ISOLAT, HYDROCARBON.

## HASIL PENELITIAN
Limbah  minyak  bumi  mentah  yang  diperoleh  dari  bak  penampungan  PT  Ollof  di  bawa  ke laborartorium MIPA IAIN Ambon dan dilakukan proses reparasi dan menumbuhkan kapang pada  medium  PDA  +  amoxylin.  Hasil  pengujian  diperoleh  6  jenis  kapang  dengan  ciri morfologi sebagai berikut
Tabel 1. Isolat Kapang dari Limbah Minyak Bumi PT Ollop
Kode Pengujian Gambar Kapang Ciri Khas I Koloni putih menyerupai kapas II Koloni bagian tepi berwarna putih menyerupai kapas dan bagian tengah berwarna hitam III Koloni berwarna krem menyerupai bukit dengan tepi rata TECHNO: Vol. 06 ( 01): 01-10, Mei 2017
IV Koloni berwarna
hitam dengan tepi berwarna krem V Koloni bulat, tepi bergerigi dan membentuk bukit VI Warna koloni coklat menyerupai serbuk
Berdasarkan  Tabel  1  ditemukan  6  jenis  kapang  yang  tumbuh  pada  media  PDA  +  amoxylin dengan bentuk dan warna koloni yang bervariasi. Setiap koloni yang ditemukan kemudian di uji  aktivitasnya  dalam  mendegradasi  hydrocarbon  dan  hasilnya  dapat  dilihat  pada  Tabel  2 berikut.
RIJAL. KAPANG, ISOLAT, HYDROCARBON.
Tabel 2. Uji Aktivitas Degradsi Hidrocarbon Isolat Kapang Kode Kapang Berat Awal Limbah Minyak (g) Berat Akhir Limbah Minyak (g) Persentase Degradasi (%) I 0,27 0,13 51,85 II 0,41 0,13 68,29 III 0,58 0,16 72,41 IV 0,71 0,16 77,46 V 0,80 0,13 83,75 VI 0,91 0,16 82,42
Berdasarkan  Tabel  2  tersebut  diperoleh  data  bahwa  kemapuan  mendegradsi  hydrocarbon isolat  kapang  berbeda-beda.  Kapang  yang  paling  kuat  mendegradasi  hydrocarbon  adalah isolat dengan kode V dan yang paling lemah dalam mendegradasi hydrocarbon adalah isolat dengan kode I.

## PEMBAHASAN
Minyak  bumi  adalah  suatu  campuran  yang  sangat  kompleks  yang  mengandung  50-98% komponen  hidrokarbon  dan  non  hidrokarbon.  Kandungannya  bervariasi  tergantung  pada sumber minyak. Minyak bumi mengandung senyawa karbon 83,9-86,8%, hidrogen 11,4-14%, belerang  0,06-8,0%,  nitrogen  0,11-1,7%  dan  oksigen  0,5%  dan  logam  (Fe,  Cu,  Ni),  0,03%. Terdapat empat seri hidrokarbon minimal yang terkandung di dalam minyak bumi, yaitu seri n-paraffin  (n-alkana)  yang  terdiri  atas  metana  (CH 4 ),  aspal  yang  memiliki  atom  karbon  (C) lebih dari 25 pada rantainya, seri iso-paraffin (isoalkana) yang terdapat hanya sedikit dalam minyak bumi, seri neptena (sikloalkana) yang merupakan komponen kedua terbanyak setelah n-alkana,  dan  seri  aromatik.  Komposisi  senyawa  hidrokarbon  pada  minyak  bumi  berbeda bergantung pada sumber penghasil minyak bumi tersebut (Udiharto, 1999).
Leahy  dan  Rita,  menyatakan  bahwa  kemampuan  tumbuh  dari  mikroorganisme  yang mendegradasi  minyak  bumi  berbeda-beda  tergantung  adaptasi  mikroorganisme  tersebut terhadap  lingkungannya  (Leahli,  1990).  Menurut  Higgins  dan  Gilbert,  bahwa  pada lingkungan yang tercemar oleh minyak bumi, tingkat pertumbuhannya akan lebih cepat dan jurnlahnya  akan  lebih  banyak  bila  dibandingkan  dengan  lingkungan  yang  tidak  tercemar (Higgins,  1978).  Hal  ini  sejalan  dengan  pendapat  Atlas,  bahwa  syarat  mikroba  yang ditambahkan  kedalam  tumpahan  minyak  bumi  adalah  memiliki  kemampuan  dalam mendegradasi  komponen  minyak  bumi,  memiliki  gen  yang  stabil,  viabilitas  yang  tinggi, pertubuhan  yang  cepat,  aktifitas  enzimatik  yang  tinggi,  mampu  berkompetisi  dengan mikroorganisme indigenos, bersifat non-patogen dan tidak menghasilkan senyawa metabolit yang bersifat toksik (Atlas, 1981).
Kemampuan  mikroorganisme  mendegradasi  minyak  bumi  dan  produk-produknya tergantung  pada  adaptasi  dan  fisiologis  mikroorganisme  tersebut  dengan  lingkungannya. Disamping  itu,  faktor  lingkungan  juga  akan  menentukan  kecepatan  biodegradasi.  Faktor- faktor lingkungan yang mempengaruhi biodegradasi minyak bumi adalah:
TECHNO: Vol. 06 ( 01): 01-10, Mei 2017

## Komposisi Minyak (Struktur Kimia)
Biodegradasi  suatu  senyawa  berkaitan  dengan  struktur  senyawa  hidrokarbon  maupun konsentrasi  minyak.  Biodegradasi  hidrokarbon  minyak  bumi  oleh  mikroba  terjadi  pada hidrokarbon  jenuh  terlebih  dahulu  dan  diikuti  dengan  hidrokarbon  aromatik.  Konsentrasi hidrokarbon  minyak  yang  tinggi  memiliki  tingkat  toksik  yang  tinggi  pula  sehingga  dapat menyebabkan laju biodegradasi hidrokarbon minyak bumi menurun.

## Komunitas Mikroba
Komposisi  suatu  mikroba  dapat  sangat  mempengaruhi  suatu  proses  degradasi  hidrokarbon minyak  bumi  (Udiharto,  1999).  Beberapa  karakteristik  penting  yang  harus  dimiliki  mikroba hidrokarbonoklastik  diantaranya  memiliki  enzim  oksegenase  dan  mengikat  hidrokarbon, menghasilkan  emulsifer,  mengoptimalkan  kontak  antara  mikroorganisme  dengan hidrokarbon  (Rosenberg,  1996).  Selain  itu  proses  bidegradasi  hidrokarbon  minyak  bumi dipengaruhi  oleh  jumlah  mikroba  hidrokarbonaklastik  karena  jumlah  mikroba  yang  cukup akan  menghasilkan  banyak  produk  enzim  tertentu  yang  dapat  mendegradasi  hidrokarbon minyak bumi (Nugroho, 2007).

## Temperatur
Temperatur  merupakan  faktor  lingkungan  yang  mempengaruhi  biodegradasi  senyawa hidrokarbon.  Terutama  terhadap  proses  metabolisme  dan  laju  pertumbuhan  bakteri.  Secara umum, peningkatan suhu berpengaruh terhadap aktivitas enzim. Diluar temperatur optimum pertumbuhan bakteri menjadi lambat atau tidak ada pertumbuhan (Lay, 1999).

## Oksigen
Menurut  Jordan  dan  Payne dalam Sinta  Silvia,  mikroorganisme  membutuhkan  oksigen  baik dalam bentuk oksigen bebas yang diperoleh dari udara maupun oksigen yang terlarut dalam air. Oksigen mempunyai arti penting dalam biodegradasi minyak bumi. Oksigen digunakan untuk proses reaksi oksidasi dan respirasi  mikroorganisme. Sebagian besar mikroorganisme pendegradasi  minyak  bumi  tergolong  dalam  mikroorganisme  aerob  (Sinta  Silvia,  2009). Oksigen  merupakan  komponen  penting  yang  mempengaruhi  pertumbuhan  bakteri  pada lingkungan  hidrokarbon.  Oksigen  digunakan  untuk  mengaktiflcan  enzim  oksigenese  dalam mendegradasi  senyawa  hidrokarbon  (Sharpley.  1966).  Pertumbuhan  bakteri  akan  terhambat pada kondisi oksigen yang terbatas. Kebutuhan oksigen dapat dipenuhi dengan aerasi yaitu dengan cara pengocokan dengan shaker (Alpetri, 1999).

## pH
Kemampuan mikroorganime mendegradasi senyawa hidrokarbon juga dipengaruhi oleh pH, karena pH menentukan optimalnya aktivitas enzim. Bakteri secara umum memiliki pH sekitar 7 (Lay, 1994).

## Nutrisi
Unsur  karbon  yang  terdapat  pada  minyak  bumi  digunakan  mikroorganisme  untuk pertumbuhannya.  Selain  nutrisi  dari  swnber  karbon,  mikroorganisme  juga  membutuhkan nutrisi  tambahan.  Nutrisi  tambahan  berupa  nitrogen  dan  phosfor  dapat  menstimulasi biodegradasi  minyak  bumi  (Sinta  Silvia,  2009).  Penambahan  amonium  sulfat  [(NH 4 )ZS0 4 ] sebagai  sumber nitrogen  dan  kaliwn  dihidrofosfat  (KHZP0 4 )  sebagai  sumber  phosfor  sering dipakai  dalam  percobaan  pengulangan  pencemaran  minyak  mentah  oleh  mikroorganisme. Nitrogen  berperan  dalam  pembentukan  asam  amino,  enzim,  pembentukan  sel  dan  phosfor berperan  untuk  pembentukan  asam  amino,  transport  energi  dan  pembentukan  senyawa antara dalam reaksi metabolisme dalam sel mikroorganisme tersebut (Yojana, 1995).

## RIJAL. KAPANG, ISOLAT, HYDROCARBON.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  6  isolat  kapang  memiliki  kemampuan  dalam mendegradasi hydrocarbon  dalam lim  bah  minytak  bumi.  Umumnya mikroorganisme  yang hidup  di  lingkungan  minyak  bumi  adalah  bakteri  dan  ragi.  Beberapa  bakteri  yang  mampu menggukan  hidrokarbon  adalah Acrhomobacter,  Acinetobacter,  Alcaligenes,  Bacillus dan Pseuononas .  Beberapa  ragi  yang  mampu  menggunakan  hidrokarbon  diantaranya Candida, Deboromyces, Hansenula, Saccharomyces, dan Torulopsis (Alpetri, 1999) . Selain bakteri dan ragi, kapang juga diketahui mampu mendegradasi minyak bumi. Hal ini sesuai dengan pendapat yang  dikemukakan  oleh  Leahly dalam Dadang  Sudrajat  dkk,  bahwa  isolat  kapang  yaitu Penicillium dan Aspergillus yang  diisolasi  dari  laut  dan  tanah  menunjukkan  bahwa  kedua mikroba  ternyata  juga  berperan  dalam  proses  degradasi  minyak  bumi  (Dadang  Sudrajat, 2015). Pendapat yang senada juga dikemukakan oleh Syah yang menyatakan bahwa diantara isolat  kapang  yaitu Penicillium dan Aspergillus dengan  karakteristik  yang  berbeda,  ternyata kapang dengan jenis Aspergillus sp. lebih baik dalam mendegradasi hidrokarbon minyak bumi yaitu sebanyak 40% selama masa inkubasi (Syah Rayan, 2013).

## SIMPULAN
Ditemukan  6  isolat  kapang  yang  diperoleh  dari  limbah  minytak  bumi  dari  PT  Ollop  dan setiap  isolat  memiliki  kemampuan  dalam  mendegradasi  hydrocarbon  pada  minyak  bumi yang berbeda. Isolat yang paling kuat dalam mendegradi hydrocarbon adalah isolat kode V dan yang paling lemah dalam mendegradasi adalah isolat dengan kode I

## SARAN
Diharapkan  untuk  melakukan  pengembangan  penelitian,  yaitu  menganalisis  jenis  kapang yang  diperoleh  dan  meningkatkan  penelitian  sampai  level  uji  molekuler  dari  isolat  V,  serta melakukan isolasi dan aktivitas jenis bakteri dari limbah minyak.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahmad,  R.Z.  2009.  Cemaran Kapang Pada  Pakan  Dan  Pengendaliannya. Jurnal  Litbang Pertanian . hal 15- 22.
Alpentri. 1999. Evaluasi Kemampuan isolat jamur Dan Salah Satu Sumur Minyak Bumi Minas Dalam  Mendegradasi  Minyak  Bumi. Tesis  magister ITB.  Bandung  (diakses  pada  26  juli 2016)
Alpetri,  dkk,  2001.  Evaluasi  Kemampuan  Isolat  Jamur  Dari  Salah  Satu  Sumur  Minyak  Di Minas Dalam Mendegradasi Minyak Bumi. Proseding Simposium Nasional IATMI . Jurusan Teknik Permiyakan, Institut Teknologi Bandung.(diakses pada 26 juli 2016)
Astuti,  Dwi,  2012.  Pengaruh  Variasi  Jumlah  Inokulum  Konsorsium  Bakteri  Terhadap Degradasi  Hidrokarbon  Minyak  Bumi. Skripsi .  Fakultas  Matematika  Dan  Ilmu Pengetahuan Alam, Program Studi Biologi. Universitas  indonesia.(diakses pada 26 juli 2016)
Atlas,  R.M.  1981.  Microbial  Degradation  Of  Petroleum  Hydrocarbons:  an  Environmental Perspective. Microbiological Review 45 (1): 180-209.
Crawford dkk, 1996. Bioremediation: Principle And Aplications . Cambrige University Press. New york.
Doerffer, J.W. 1992. Oil Spill Response in the Marine Environment. First Ed. Pergamon Press. Tokyo.
Dwidjoseputro, 1990. Dasar-dasar Microbiologi . Penerbit Djambatan. Jakarta.
Fardiaz,  Srikandi.  1992.  Mikrobiologi  Pangan  1.  Penerbit:  PT  Gramedia  Pustaka  Utama. Jakarta.(diakses pada 28 juli 2016)
TECHNO: Vol. 06 ( 01): 01-10, Mei 2017
Handayani, DKK. Penuntun Praktikum Mikrobiologi . (Jakarta: Universitas Negeri Jakarta, 2011)., hal 23. (diakses pada 28 juli 2016)
Gunalan.  1993.  Penerapan  Bioremediasi  Untuk  melenyapkan  Polutan  Organik  Dan'
Lingkungan. Proceding Kongres Nasional VI Perhimpunan Microbiologi Indonesia . Surabaya. Higgins, I. J. dan P.D.Gilbert, 1978. Biodegradation of Hydrocarbon in The Oil Industry and Microbial Ecosystem. Hayden and Sons Limited . London.
Indrawati, Gandjar . 1995. Pengenalan Kapang Tropik Umum. Bandung: Angkasa Bandung . Irawan, B. 2004. Isolasi Bertahap dan Identifikasi Isolat Bakteri Pedegradasi Hidrokarbon pada Cairan  Minyak Mentah Sumur  Minyak  Kawengan  Pertamina  Cepu .  Skripsi .  Surakarta: Jurusan Biologi FMIPA UNS.
Jusfan,  J.  1995.  Peranan  Mikroorganisme  Dalam  Mengelolah  Limbah  Untuk  Mengatasi Pencemaran Lingkungan. Pidato Pengukuhan Sebagai Guru Besar Tetap Dalam Ilmu Biologi FMIPA Universitas Andalas, Padang.
Karwati,  2009.  Degradasi  Hidrokarbon  Pada  Tanah  Tercemari  Minyak  Bumi  Dengan  Isolat A10  dan  D8 .  Skripsi .  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam.  Institut Pertanian Bogor.
Koesoemadinata,  R.P.  1980. Geologi  Minyak  dan  Gas  Bumi .  Edisi  III.  Jilid  I.  Penertbit  ITB, Bandung
Lay, B. 1994. Analisis Mikroba Di Laboratorium . Jakarta.
Leahly dan Colwell, 1990. Hydrocarbon Mineralization In Sediments Adn Plasmid Incidence In Cediment  Bacteria From The Campeche Bank. Aplied And Environment Microbiology 56 (6): 1565-1570.
Leahly, J.G. dan Rita, 1990. Degradation of Hydrocarbon Environmental Microbiology Review. Vol. 54.
Lemigas.  1994.  Aktivitas  Mikroba  Dalam  Transformasi  Substansi.  Pertamina. Research  Grant Team Studi Lemigas . PPPTMGB "Lemigas". Jakarta.
Listiandiani,  Kirana.  2011.  Identifikasi  Kapang  Endofit  ES1,  ES2,  ES3  Dan  ES4  Dari Broussonetia papyri Vent. Dan Pengujian Aktivitas Mikroba. Skripsi . Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam. Universitas Indonesia.
Nugroho,  A.  2006.  Biodegradasi sludge minyak  bumi  dalam  skala  mikrokosmos . Makara Teknologi . 10(2): 82-89. Rosenberg dan Ron, 1996. Bioremediation Of Petroleum Contamination. Dalam :
Sailubhai,  K.  1986.  Tretment  Of  Petroleum  Industry  Oil  Sluge  In  Soil. Elsevier  Science Publishing . Amsterdam. Sharpley, J.M. 1966. Elementary Petroleum Microbiology . Gulf Publishing Co. Houston. Texas. Silvia, Sinta. 2009. Biodegradasi Hidrokarbon Minyak Bumi Menggunakan Isolat Bakteri Dari Limbah Minyak bumi PT. Cevron Pacivic Indonesia. Skripsi . Jurusan Biologi. Universitas Andalas, Padang.
Sudrajat, Dadang dkk. 2015. Isolasi dan Aplikasi Mikroba Indigen Pendegradasi Hidrokarbon Dari  Tanah  Tercemar  Minyak  Bumi. Prosiding  Pertemuan  Dan  Presentasi  Ilmiah .  ISSN: 0216-3128. Hlm101-102.
Syah F R. Dkk. 2013. Eksplorasi Kapang pendegradasi Minyak Solar Pada Rizosfer Magrove Cilacap . Vol.2 No 1.
Thomas,  J.  dkk,  1992.  Bioremediation.  Encyclopedia  of  Microbiology.  Volume  1.  Academic Press. Austin.
Udiharto,  1992.  Aktivitas  Mikroba  Dalam  Degradasi  Crude  Oil. Diskusi  Ilmiah  VII  Hasil Penelitian PPPTMGB”LEMIGAS ”. Jakarta. Udiharto, 1999. Penaganan Minyak Buangan Secara Bioteknologi. Makalah Sehari Minyak Dan Gas Bumi . LEMIGAS. Jakarta.
RIJAL. KAPANG, ISOLAT, HYDROCARBON.
Yojana,  R.  N.  1995.  Aktivitas  Hasil  Isolasi  Dari  Tumpahan  Minyak  Di  Pelabuhan  Dumai Dalam  Biodegradasi  Hidrokarbon  Minyak  Bumi. Skripsi Sarjana  Biologi.  FMIPA. Universitas Andalas. Padang.