2 Universitas Islam Negeri Alauddin Makassar

## ISOLASI  MIKROBA  PENGHASIL  ANTIBIOTIK  DARI  PASIR  PANTAI LEMO-LEMO KABUPATEN BULUKUMBA DALAM MENGHAMBAT BEBERAPA BAKTERI PATOGEN
1| Gemy Nastity Handayani, 2| Zulfiati Email Korespondensi : gemynastity75@gmail.com
ABSTRACT

## ARTICLE INFO

## Pendahuluan
Infeksi  merupakan  penyakit  yang  disebabkan  ketika  mikroorganisme  masuk  ke  dalam  tubuh yang  dapat  menyebabkan  orang  meninggal  bila  dibiarkan.  Penyakit  ini  menjadi  salah  satu masalah yang sering dihadapi dalam dunia kesehatan dan dari tahun ke tahun angka kejadian infeksi terus meningkat (1)
Pengobatan  yang  sering  digunakan  untuk  mengobati  penyakit  yang  disebabkan  oleh  mikroba adalah  penggunaan antimikrobia.  Namun, resistensi  bakteri  menyebabkan sebagian antibiotik tidak  efektif.  Agen  antimikroba  baru  sangat  dibutuhkan  untuk  menanggulangi  masalah  akibat peningkatan jumlah bakteri resisten antibiotik (2)
Bakteri  merupakan  sumber  senyawa  kimiawi  yang  tidak  habis-habisnya,  yang  menghasilkan berbagai macam metabolit sekunder aktif. Bakteri yang berasal dari laut biasanya merupakan target  untuk  bioteknologi  industri  karena  memiliki  sejumlah  besar  senyawa  bioaktif.  Aplikasi terapi  dari  metabolit  yang  dihasilkan  mikrobia  telah  memberikan  peluang  untuk  penemuan antibiotik.  Beberapa  antibiotik  diperoleh  dari  berbagai  mikroorganisme  yang  tumbuh  dalam lingkungan  yang  ekstrim,  seperti  daerah  suhu  tinggi,  suhu  rendah,  laut  bagian  dalam,  padang pasir, lapisan es, sumber air panas dan minyak (3).
Wilayah  pesisir  merupakan suatu  wilayah  peralihan  antara  daratan  dan  lautan,  ke  arah  darat mencakup  daerah  yang  masih  terkena  percikan  air  lautatau  pasang  surut,  dan  ke  arah  laut meliputi  daerah  paparan  benua  ( continentalself ).Dalam  suatu  wilayah  pesisir  pantai  terdapat satu atau lebih sistemlingkungan. Ekosistem pesisir bersifat alami maupun buatan, yang bersifat alami diantaranya adalah pantai berpasir (2)
Berdasarkan hasil penelitian Utami   (4) menemukan isolate-isolat bakteri penghasil antibiotic ( Rare actinomycetes ) pada pasir pantai gunung slamet yang mampu menghambat pertumbuhan
Research on the isolation of antibiotic-producing microbes from the sand of Lemo-lemo beach in Bulukumba Regency has been carried out in inhibiting several pathogenic bacteria. This study aims to obtain microbes from beach sand that can produce antibiotics. The first stage of microbial isolation was carried out by diluting 10-1  to  10-7  using  the  pour  method  on  Glucose  Nutrient  Agar  (GNA)  and  Potato  Dextrosa  Agar  (PDA) medium,  then  fermented  using  Maltose  Yeast  Broth  (MYB)  medium.  The  activity  was  tested  using  agar diffusion in Nutrient Agar (NA) medium against the test microbes. The results obtained 7 bacterial isolates and 3 fungal isolates showing the clear zone around them. The bacterial isolate that provides the best activity is  AB6  isolate  which  can  inhibit  many  pathogenic  microbes,  namely  Bacillus  subtilis,  Escherichia  coli, Pseudomonas  aeruginosa,  Salmonella  thypi,  Staphylococcus  aureus,  Sthapylococcus  epidermis  and  Vibrio colera. Meanwhile, all fungal isolates provided good activity against the tested microbes, namely isolates AJ1, AJ2, and AJ3. The next step was macroscopic morphological observations by looking at bacterial growth on the medium NA upright, NA slanted, NB while microscopically Gram staining was carried out, where isolates AB1  to  AB7  is  a  gram-positive  bacillus.  Furthermore,  the  biochemical  activity  test  was  carried  out  which included motility test, catalase test, citrate test, and temperature variation growth test. Based on the results of the  study,  it  was  found  that  AB1  to  AB7  isolates  belonged  to  the  genus  Bacillus  and  had  Bacillus  firmus species identified using the vitek2 compact tool. Meanwhile, the fungal isolates, namely AJ1 and AJ2, were included in the penicillium fungus and AJ3 included the Apergillus fungus.
Keywords: Antibiotics;
Pathogenic Bacteria;
Beach sand
DOI: 10.24252/kesehatan.v13i1.13740
bakteri Escherichia  coli dengan  potensi  sedang  dan Bacillus  subtilis dengan  potensi kuat.Penelitian  serupa  juga  dilakukan  oleh  (1),  menemukan  bahwa  pada  pasir  pantai  Baron Gunung  Kidul  Yogyakarta dapat  ditemukan  bakteri  penghasil  antibiotik.  Hal  ini  membuktikan bahwa  pada  pasir  pantai  juga  terdapat  bakteri  yang  mampu  menghasilkan  antibiotik.Hingga saat  ini  belum  semua  pasir  pantai  diketahui  mengandung  mikroorganisme  penghasil antibiotik.Pantai  lemo-lemo  merupakan  salah  satu  pantai  yang  terdapat  di  Kabupaten Bulukumba  Provinsi  Sulawesi  Selatan  tepatnya  di  Kecamatan  Bontobahari.  Pasir  pantai mengandung banyak mikroorganismewalaupun tidak sebanyak yang terdapat pada jenis tanah yang  lain,  karenapasir  pantai  memiliki  partikel  yang  kasar  sehingga  tidak  dapat  menahan airdengan  baik  dan  kemampuan  untuk  menyerap  bahan  organik  juga  rendah  serta  kurang mengandung unsur hara akan tetapipada daerah yang kurang mengandung unsur hara tersebut juga  terdapat  bakteri  yang  mampu  hidup  kuat.  Salah  satu  contoh  jenis  bakteri  yang  mampu hidup pada pasir pantai yakni Rare actinomycetes yang merupakan salah satu bakteri penghasil antibiotik yang dapat hidup ditempat-tempat yang ekstrim dan sedikit unsur hara seperti pasir

## Metode Penelitian

## Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian  ini  merupakan jenis penelitian Ekperimental  Laboratorium.Penelitian  ini dilakukan di  Laboratorium  mikrobiologi  Jurusan  Farmasi  Universitas  Islam  Negeri  Alauddin  Makassar, Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin Makassar dan di Balai Besar Laboratorium Kesehatan Makassar pada bulan Mei-Agustus 2017.

## Alat dan Bahan
Alat-alat  yang digunakan  pada  penelitian  ini  yakni  Autoklaf  ( Hirayama ),  botol  steril, cool  box , cawan petri, deck glass, erlenmeyer ( Pyrex ® Iwaki ) 250 ml dan 100 ml, gelas kimia ( Pyrex ® Iwaki ) 250  ml,  gelas  ukur  ( Pyrex ® Iwaki )  100  ml,  inkubator  ( Memmert ),  alat Vitek2  Compact ,  lampu spiritus,  laminar  air  flow  (LAF)  ( Esco ),  lemari  pendingin (Modena) ,  mikropipet  10-100  µl (Socorex), mikroskop  ( Olympus dan Nicon  Japan ),  neraca  O’Hauss,  objek  glass,  ose  bulat,  ose lurus,  oven  ( Memmert ),  penangas  air,  sendok  stainless  stell,  tabung  reaksi  ( Pyrex ® Iwaki ), timbangan analitik dan spoit 1 ml dan 10 ml.
Adapun  bahan  yang  digunakan  yakni  Aquadest,  aluminium  foil,  amonium  hidroksida,  asam asetat,  biakan  murni  ( Escherchia  coli,  Bacillus  subtilis,  Streptococcus  mutans,  Pseudomonas aeroginosa,  Vibrio  colera,  Salmonella  thypi,  Staphylococcus  aureus,  Staphylococcus  epidermidis, dan Candida albicans ,), cat A, B, C dan D, disk blank (oxoid), alkohol 70%, kapas, kertas timbang, kertas indikator pH, larutan HCl 0,1 %, larutan H 2 O 2 3%, medium Glukosa Nutrient Agar (GNA), medium Maltose Yeast Broth (MYB), medium Nutrient Agar (NA), medium Nutrient Broth (NB), medium  Potato  Dekstrosa  Agar  (PDA),  medium  Simon’s  Citrat  Agar  (S CA),  medium  Semisolid Indole Motility (SIM).

## Pengambilan dan pengolahan sampel
Sampel yang digunakan yakni sampel pasir yang diambil pada 4 titik pengambilan pada Pantai Lemo-Lemo  Kabupaten  Bulukumba.  Sampel  diambil  pada  kedalaman  15  cm  dari  permukaan, ditempatkan dalam botol coklat lalu dimasukkan dalam cool box .
Sampel  pasir  kemudian  ditimbang  sebanyak  1  gram  kemudian  dilakukan  pengenceran bertingkat yakni hingga pengenceran 10 -7 menggunakan aquadest.

## Isolasi dan Pemurnian Mikroba Pasir
Masing-masing  pengenceran  dipipet  1  ml  dan  dimasukkan  ke  botol  pengencer  bersama  9  ml medium  GNA  dan  9  ml  medium  PDA  lalu  dituang  ke  masing-masing  cawan  petri  kemudian dihomogenkan, Dibiarkan memadat lalu diinkubasi selama 1 × 24 jam pada suhu 37º C untuk medium GNA dan suhu kamar untuk medium PDA selama
3  ×  24  jam.  Dari  koloni  yang  memperlihatkan  adanya  zona  hambatan,  diambil  1  ose  lalu digoreskan  pada  medium  PDA  dan  medium  GNA  dengan  metode  kuadran  pada  cawan  petri yang  lain  lalu  diinkubasikan  selama  1-3  hari.  Selanjutnya  dipindahkan  1  ose  koloni  yang terpisah  baik  ke  dalam  medium  PDA  miring  dan  medium  GNA  miring  sebagai  stok  dan inkubasikan selama 1-3 hari. Selanjutnya dilakukan peremajaan dan pembenihan isolat mikroba dengan  menginokulasikan  1-2  ose  isolat  mikroba  pasir  ke  dalam  10  ml  medium  MYB  sambil dishaker selama 1x24 jam untuk selanjutnya dilakukan pengujian aktivitas antibiotika

## Pengujian Aktivitas Antibiotika
Pengujian aktivitas antibiotika dilakukan dengan caradifusi agar menggunakan medium NA dan PDA. Diinokulasi 20 µl suspensi mikroba uji ke dalam cawan petri, lalu dituang 10 ml medium NA  dan  PDA.  setelah  memadat,  piper  disc  blank  yang  telah  direndam  dengan  isolat  mikroba pasir kemudian dimasukkan dalam cawan petri yang telah berisi medium dan mikroba uji, lalu diinkubasi selama 1x24 jam pada suhu 37 o C untuk bakteridan 3x24 jam pada suhu kamar untuk jamur. Lalu diamati dan diukur zona hambatan yang terbentuk.

## Identifikasi Isolat Mikroba
Identifikasi isolat mikroba yang dilakukan meliputi Pengujian makroskopik,  mikroskopik. Dan uji  Biokimia.  Pengujian  makroskopik  pada  isolat  mikroba  pasir  untuk  melihat  bentuk  koloni, warna dan keadaan permukaannya, dilakukan  pada  berbagai  media  pertumbuhan yakni  pada medium NA, PDA tegak dan miring serta medium NB. Pengujian dilakukan yakni dengan cara Medium NA dipipet 10 ml dibiarkan memadat dalam tabung reaksi dengan posisi tegak. Setelah memadat  isolat  diinokulasikan  dengan  cara  tusukan,  selanjutnya  diinkubasi  pada  suhu  37º  C selama  1  x  24  jam.  Dilakukan  hal  yang  sama  pada  medium  PDA  tegak  dan  miring  serta  pada medium  NB.  Uji  Mikroskopik  dilakukan  dengan  pengecatan  gram  menggunakan  cat  A  (Kristal violet), B (lugol), C (alcohol asam) dan cat D (safranin) kemudian diamati di bawah mikroskop. Pengamatan  dilakukan  untuk  penentuan  jenis  bakteri  gram  positif  dan  gram  negative. Identifikasi  selanjutnya  yakni  Uji  Biokimia.  Uji  biokimia  dilakukan  dengan  menginokulasikan isolate  mikroba  pada  medium  biokimia  yang  telah  disiapkan,  diinkubasi  1x24  jam  dan dilakukan  pengamatan  terhadap  perubahan  yang  terjadi  pada  medium  biokimia.  Uji  biokimia meliputi:

## 1) Uji motilitas
Dilakukan menggunakan Medium SIM (Semisolid Indol Motility) yakni dimasukkan ke dalam 2 tabung reaksi masing-masing sebanyak 10 ml medium SIM, tabung pertama diisi dengan isolat biakan mikroba dengan cara ditusukkan dan tabung yang kedua sebagai kontrol, diinkubasikan selama 1 x 24 jam pada suhu 37ºC, bila terdapat pertumbuhan di sekitar daerah tusukan berarti motilitas positif, dan hasil yang diperoleh dibandingkan dengan control.

## 2) Uji katalase
Dilakukan dengan cara  dibersihkan objek glass, lalu diteteskan beberapa tetes larutan H 2 O 2 3% di atas gelas objek tersebut. Kemudian diambil sedikit biakan isolat mikroba dengan ose,
diletakkan dalam tetesan H 2 O 2 diamati adanya gelembung-gelembung O 2 di dalam tetesan H 2 O 2 di bawah mikroskop.

## 3) Uji sitrat
Dilakukan dengan cara dimasukkan  ke dalam 2 tabung reaksi masing-masing sebanyak 10 ml medium  SCA,  tabung  pertama  diisi  dengan  isolat  biakan  mikroba  dan  tabung  yang  kedua sebagai kontrol, diinkubasikan selama 1 x 24 jam pada suhu 37ºC, bila hasilnya positif medium berubah warna menjadi biru dan hasil yang diperoleh dibandingkan dengan control.

## Hasil dan Pembahasan
Uji variasi suhu dilakukan pada berbagai suhu pertumbuhan mikroba yakni pada suhu 4º C,25º C dan 37º C menggunakan medium NB kemudian diinkubasi selama 1 x 24 jam.
Pada  penelitian  ini,sampel  yang  digunakan  yakni  pasir  pantai  yang  diambil  dari  pantai  lemo- lemo kab. Bulukumba karena pada daerah ini lingkungannya masih begitu alami, belum begitu tercemar oleh kegiatan manusia.
Selanjutnya  dilakukan  pengenceran  bertingkat  yaitu  pengenceran  10 -1 sampai  10 -7 untuk menurunkan  jumlah  mikroorganisme  sehingga  pertumbuhan  koloni  tidak  terlalu  rapat  atau tidak  terjadi  penumpukan  agar  lebih  mudah  dalam  pengisolasian  serta  akan  memudahkan dalam  pengamatan.  Berdasarkan  hasil  penelitian  didapatkan  7  isolat  bakteri  yang  diperoleh pada  tiap  pengenceran  yakni  pengenceran  10 -1 – 10 -7 dan  3  isolat  jamur  yang  diambil  pada pengenceran  10 -1 berupa  2  koloni  besar  dan  10 -6 diperoleh  1  koloni  besar  masing-masing menunjukkan adanya zona hambatan.
Tabel 1. Hasil Pemurnian Isolat Mikroba Pasir
No. Tingkat Pengenceran Kode Bakteri dan Jamur Biakan Bakteri 1. Pengenceran AB 10 -1 (AB-1) Isolat Bakteri Ke-1 2. Pengenceran AB 10 -2 (AB-2) Isolat Bakteri Ke-2 3. Pengenceran AB 10 -3 (AB-3) Isolat Bakteri Ke-3 4. Pengenceran AB 10 -4 (AB-4) Isolat Bakteri Ke-4 5. Pengenceran AB 10 -5 (AB-5) Isolat Bakteri Ke-5 6. Pengenceran AB 10 -6 (AB-6) Isolat Bakteri Ke-6 7. Pengenceran AB 10 -7 (AB-7) Isolat Bakteri Ke-7 8. Pengenceran AJ 10 -1
(AJ-1) Isolat Jamur Ke-1
9. Pengenceran AJ 10 -1
(AJ-2)
Isolat Jamur Ke-2 10. Pengenceran AJ 10 -6 (AJ-3) Isolat Jamur Ke-3
Selanjutnya dilakukan uji aktivitas antibiotika menggunakan beberapa mikroba pathogen. Hasil yang  diperoleh  AB 6 merupakan  isolat  paling  aktif dimana mampu  menghambat  7  mikroba  uji yakni Escherchia coli , Bacillus subtilis, Staphylococcus  aureus, Pseudomonas  aeroginosa,  Vibrio colera,  Salmonella  thypi,  Staphylococcus  epidermidis, yang  rata-rata  memiliki  diameter  zona hambat  yang  kuat  dibandingkan  dengan  isolat  lainnya . Isolat  AB 7 mampu  menghambat pertumbuhan  3  mikroba  uji  yakni Escherchia  coli , Bacillus  subtilis , Salmonella  thypi dengan diameter  zona  hambat  yang  rata-rata  sedang . Isolat  AB 1, AB 3, AB 4, AB 5, dapat  menghambat
masing-masing 2 mikroba uji dan isolat AB 2 hanya dapat menghambat 1 mikroba uji. Sedangkan hasil pengujian aktivitas antibiotika terhadap isolat jamur yakni diketahui isolat AJ 1, AJ 2, dan AJ 3, masing-masing  dapat  menghambat  pertumbuhan  6  mikroba  uji  yakni Escherchia  coli , Salmonella  thypi,  Staphylococcus  aureus,  Staphylococcus  epidermidis , Streptococcus  mutans, Vibrio colera .
Selanjutnya dilakukan identifikasi isolate mikroba berupa uji makroskopik, mikroskopik dan uji biokimia.  Pengujian  makroskopik  dilakukan  pada  beberapa  bentuk  medium  pertumbuhan didapatkan  hasil  yakni  bahwa pada  media  pertumbuhan  NA  tegak  didapatkan  isolat  AB 1, AB 3, AB 4, AB 5, AB 6, dan AB 7 memiliki bentuk morforfogi yakni bentuknya sinambung atau continue ( Filiform ),  pertumbuhan  seperti  benang  dengan  tepian  yang  rata  mengikuti  pola  medium pertumbuhan, sedangkan untuk isolat AB 2, memiliki bentuk sinambung, pertumbuhannya tidak rata atau sedikit berakar ( Villous ). Pada NA miring didapatkan hasil untuk semua isolat bakteri yakni  memiliki  bentuk  pertumbuhan  menyebar  ( spreading )  mengikuti  pola  medium pertumbuhan  dan  pada  medium  NB  cair  yaitu  semua  isolat  bakteri  mengendap.  Dilakukan identifikasi isolat bakteri terhadap medium NA tegak, NA miring dan NB cair untuk melihat pola pertumbuhan  dari  masing-masing  isolat  bakteri  apabila  ditumbuhkan  pada  beberapa  bentuk medium yang berbeda dimana bakteri tumbuh mengikuti pola pertumbuhan dari medium yang digunakan.  Hasil  pengamatan  morfologi  pada  beberapa  bentuk  media  pertumbuhan  jamur didapatkan  semua    isolat  jamur  pada  PDA  tegak  memiliki  bentuk  morfologi  yakni  bentuknya sinambung  atau  continue  ( Filiform ),  pertumbuhan  seperti  benang  dengan  tepian  yang  rata , sedangkan  hasil  pada  media  PDA  miring  yaitu  memiliki  bentuk  pertumbuhan  menyebar ( spreading) dan  pada  media  NB  cair  semua  isolat  mengendap  dan  mengapung.  Adapun  hasil yang didapatkan untuk beberapa media pertumbuhan baik isolat bakteri maupun isolat jamur memiliki bentuk koloni yakni tidak beraturan, memiliki warna coklat kekuningan membuktikan bahwa  mikroorganisme  tersebut  mengeluarkan  pigmen  warna  yang  mampu  berdifusi  media, elevasi  koloni  datar dan  memiliki  kepekatan  pada  koloninya.  Pengujian  morfologi  pada  isolat bakteri  dan  jamur  ini  dilakukan  untuk  mengetahui  karakteristik  yang  nampak  dari  pola pertumbhan  isolat  tersebut  namun  belum  sepenuhnya  dapat  ditentukan  penggolongan  dari jenis  bakteri  dan  jamur  dari  semua  isolat  sehingga  perlu  dilanjutkan  untuk  pengujian mikroskopik (pengecatan gram) dan pengujian biokimia.
Pengecatan  gram  dilakukan  dengan  menggunakan  4  macam  cat  warna.  Adapun  hasil  yang didapatkan untuk identifikasi pada pengecatan gram yakni didapatkan untuk isolat bakteri AB 1 hingga  isolat  AB 7 menunjukkan  warna  ungu  berupa  gram  positif  dan  berbentuk  Basil  atau batang. Pengecatan bakteri merupakan dasar dari penentuan genus pada bakteri. Adapun genus dari  isolat  bakteri  yang  didapat  adalah  genus  ( Bacillus ).  Ciri-ciri  merupakan  genus  ( Bacillus ) yakni berbentuk batang, gram positif dimana pada waktu pewarnaan gram, bakteri gram positif akan mempertahankan zat pewarna Kristal violet sehingga tampak berwarna ungu serta bakteri gram positif memiliki peptidoglikan yang tebal sehingga berbeda dengan bakteri gram negative yang  memiliki  peptidoglikan  yang  tipis  sehingga  akan  kehilangan  zat  warna  ungunya  ketika dicuci.  Sifat  bakteri  terhadap  pewarnaan  gram  merupakan  sifat  penting  dalam  determinasi bakteri. Sedangkan untuk isolat AJ 1 dan AJ 2 yang ditanam pada medium PDA yang merupakan medium  pertumbuhan  untuk  jamur,  berdasarkan  ciri-cirinya  menurut  Fisher  (5)  termasuk kedalam jenis jamur penicillium sp dimana ciri-cirinya memiliki konidium, metula, konodiofor. dan  isolat  AJ 3 berdasarkan  ciri-ciri  menurut  Fisher  (5)  termasuk  kedalam  jamur Aspergillus dimana mimiliki konidiopora, vesikel, konidium.
Selanjutnya  dilakukan  pengujian  aktivitas  biokimia  untuk  mengidentifikasi  dan  karakterisasi bakteri  berdasarkan  kemampuan  mikroorganisme  dalam  menggunakan  dan  menguraikan molekul yang sederhana dan  kompleks seperti karbohidrat, lemak, protein, dan asam nukleat. Pengujian  aktivitas  biokimia  meliputi  uji  motilitas  yang  dilakukan  untuk  memeriksa kemampuan  bakteri  untuk  bergerak  yang  dipengaruhi  oleh  adanya  flagella.  Hasil  yang didapatkan  untuk  pengujian  motilitas  yakni  semua  isolat  menunjukkan  hasil  positif,  ditandai dengan terdapatnya rambatan di sekitar daerah tusukan medium pertumbuhan. Hal ini sesuai yang  dikemukakan  oleh  Irianto  (6),  bakteri  bersifat  motil  (bergerak)  jika  bakteri  tumbuh menyebar disepanjang garis tusukan inokulasi. Uji sitrat dilakukan untuk melihat kemampuan mikroorganisme  menggunakan  sitrat  sebagai  satu-satunya  sumber  karbon  dan  energi.  Bila mikroorganisme mampu menggunakan sitrat maka asam akan dihilangkan dari medium biakan sehingga menyebabkan peningkatan pH dan mengubah warna medium dari hijau menjadi biru. Hasil yang didapatkan pada pengujian sitrat menunjukkan hasil positif pada isolat AB 3, AB 4 , AB 5, AB 6, dimana  ditandai  dengan  terjadinya  perubahan  warna  keseluruhan  pada  medium pertumbuhan  yakni  terjadi  perubahan  warna  dari  hijau  menjadi  biru,  sedangkan  pada  isolat AB 1, AB 2 dan AB 7, tidak  terlalu  menunjukkan  adanya  perubahan  warna  keseluruhan  pada medium pertumbuhan. Dilakukan pengujian katalase untuk mengidentifikasi bakteri yang dapat menghasilkan enzim katalase. Untuk menjaga kelangsungan hidup bakteri, enzim katalase akan memecah  H 2 O 2 yang  bersifat  toksik menjadi  molekul  air dan  oksigen  sehingga  sifat toksiknya hilang . Hasil  yang  didapatkan  yakni  semua  isolat  menunjukkan  hasil  positif  hal  ini  ditandai dengan  terdapatnya  gelembung-gelembung  O 2 ketika  isolat  diteteskan  dalam  H 2 O 2. Dan  hasil yang  diperoleh  pada  pengujian  terhadap  beberapa  suhu  pertumbuhan  menunjukkan  semua isolat  baik  bakteri  dan  jamur  menunjukkan  hasil  yang  positif  pada  suhu  pertumbuhan  yakni
Gambar 1 Bentuk bakteri Bacillus Sp setelah pewarnaan gram
Gambar 2 Bentuk jamur Aspergillus (a)  dan jamur Penicillium (b) penampakan  pada  mikroskop
25 o C  dan  37 o C,  hal  ini  ditandai  dengan  terdapatnya  kekeruhan  pada  medium  pertumbuhan. Sedangkan pada suhu 4 o C, semua isolat baik bakteri dan jamur tidak menunjukkan kekeruhan pada medium pertumbuhan.
Berdasarkan  hasil  penelitian  di  atas  menurut  pustaka  (Bergey’s  Manual  of  Determinative Bacteriology) maka dapat ditarik kesimpulan bahwa semua isolat bakteri memiliki genus yakni Bacillus dan  termasuk  ke  dalam  spesies Bacillus  firmus berdasarkan  pada  identifikasi menggunakan  alat  Vitek2  compact.  sedangkan  untuk  isolat  jamur  yang  didapatkan  dari  hasil inokulasi pada medium PDA dan setelah diamati di bawah mikroskop didapatkan yakni isolat AJ 1 dan AJ 2 termasuk ke dalam jenis jamur penicillium dan isolat AJ 3 termasuk ke dalam jenis jamur Aspergillus hal ini sesuai dengan pustaka (Fundamentals Of Diagnostic Mycology).

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan maka dapat disimpulkan bahwa :
1. Pada  pasir  pantai  Lemo-lemo  Kabupaten  Bulukumba  dapat  diperoleh  isolat  mikroba penghasil antibiotika yaitu 7 isolat bakteri dan 3 isolat jamur
2. Isolat yang paling aktif adalah isolat AB 6 yang dapat menghambat banyak mikroba ( Bacillus subtilis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella thypi, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermis dan Vibrio colera ).
3. Jenis  genus  dari  isolat  bakteri  yakni  Bacillus  sp  dan  pada  isolat  jamur  yakni Penicillium , Aspergillus, sedangkan spesies yang didapatkan yakni Bacillus firmus

## Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut    untuk  karakterisasi  sifat  fisiologi  dan  struktur  dari antibiotika  yang  dihasilkan  sehingga  dapat  diproduksi  dalam  skala  besar  dan  digunakan  oleh masyarakat

## Daftar Pustaka
1. Al-Jaelani,  Muhammad  Zukruf.Potensi  Isolat  Actinomycetes  Dari  Pasir  Pantai  Barong Gunung  Kidul  Yogyakarta  Sebagai  Antibakteri  Terhadap  Bakteri  Escherichia coli.Skripsi.Surakarta. Universitas Muhammadiyah Surakarta, (2016): h. 5.
2. Fatoni,  Jauhar. Uji  Potensi  Isolat  Actinomycetes  Dari  Pasir  Pantai  Barong  Gunung  Kidul Yogyakarta  Sebagai  Antibakteri  Terhadap  Bakteri  Pseudomonas  aeruginosa. Skripsi. Surakarta. Universitas Muhammadiyah Surakarta, (2016): h. 5.
3. Yulianti, Evy dan Anna rakhmawati, dkk. Optimasi Produksi Senyawa Antimikroba Pada Cell Free  Extract  Hasil  Fermentasi  Bakteri  Termofilik  Pasca  Erupsi  Merapi. Yogyakarta:  FMIPA Vol. 4 no 2 (2015): h.
4. Utami,  Mifta  Rizki. Uji  Aktivitas  Isolat  Actinomycetes  Dari  Sampel  Pasir  Gunung  Slamet Terhadap  Bakteri  Escherichia  coli  dan  Bacillus  subtillis. Skripsi.  Surakarta.  Universitas Muhammadiyah Surakarta. (2016): h. 5.
5. Fisher, Cook. Fundamentals Of Diagnostic Mycology. USA: Elsevier’s  Health Sciences Rights Department in Philadelphia, (1998): h. 50
6. Irianto, Koes. Menguak Dunia Mikroorganisme. Bandung: Yrama Widya, (2006): h. 59-62