Tebal Dinding dan Diameter Lumen Arteria Koronaria Tikus Putih Setelah Pemberian Teh Kombucha Kadar 75% Waktu Fermentasi 6, 9 dan 12 Hari
The Thickness Of Wall and Lumen Diameter of Coronary Artery of  Rats After Consumption of  Fermented Kombucha Tea By  6, 9 and 12 Days on 75% Level

## Sri Isdadiyanto
Departemen Biologi Fakultas Sains dan Matematika Universitas Diponegoro Email: isdadiyanto@yahoo.com
Diterima 1 Agustus 2018 / Disetujui 18 Oktober 2018

## ABSTRAK
Tujuan penelitian ini untuk mengetahui pengaruh pemberian teh kombucha kadar 75% sebagai drinking water dengan  variasi  waktu  fermentasi.  Penelitian  ini  menggunakan  Tikus  putih  ( Rattus  norvegicus )  jantan sebanyak 16 ekor umur 2 bulan, dengan perlakuan Teh kombucha yang difermentasi selama 6, 9 dan 12 hari pada suhu 25 o C per oral . Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap dengan 4 perlakuan (selama 28  hari)  dan  4  ulangan,  yaitu  :  P0  =  kontrol,  tanpa  tambahan  teh  kombucha,  P1  =  air  minum  +  1,8  ml  teh kombucha pagi dan sore fermentasi 6 hari, P2 = air minum + 1,8 ml teh kombucha pagi dan sore fermentasi 9 hari, P3 = air minum + 1,8 ml teh kombucha pagi dan sore fermentasi 12 hari.  Variabel yang diukur adalah kadar  kolesterol,  HDL  dan  LDL.  Data  yang  diperoleh  dianalisis  menggunakan  ANOVA  yang  dilanjutkan dengan  Uji  Duncan  dengan  taraf  kepercayaan 95%  dengan  menggunakan  perangkat  lunak  SPSS  10,0.  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  pemberian  teh  kombucha  tidak  mempengaruhi  tebal  dinding  dan  diameter lumen arteria koronaria tikus putih ( Rattus norvegicus ).
Kata kunci: Rattus norvegicus, teh kombucha kadar 75%, tebal dinding, diameter lumen, arteri koronaria

## ABSTRACT
The objective of this study was to analyze the influences of 75% kombucha tea level on wall thickness and lumen diameter of coronary artery in rats. Sixteen male Rattus norvegicus rats, 2 months of age were used as experimental  animals,  with  treatment  kombucha  tea  that  has  been  fermented  for  6,  9  and  12  days  at  the temperature  of  25 o C  per oral.  The research  design  used  to  a  completely  randomized  with  4  treatment  (for 4 weeks) and 4 replications, i.e., P0 = control, without of kombucha tea, P1 = water + 1,8 ml kombucha tea that has been fermented for 6 days in the morning and afternoon, P2 = water + 1,8 ml kombucha tea that has been fermented for 9 days in morning and afternoon, P3 = water + 1,8 ml kombucha tea that has been fermented for 12 days in morning and afternoon. Variables measured were wall thickness and lumen diameter of coronary artery. Data were analyzed with ANOVA followed by Duncan test at 95% confidence level were performed using  SPSS  version  10,0.  The  result  showed  that  kombucha  tea  did  not  influences  the  wall  thickness  and lumen diameter of coronary artery in rats.
Keywords: Rattus norvegicus, 75% kombucha tea level, wall thickness, lumen diameter, coronary artery

## PENDAHULUAN
Teh  kombucha  mengandung  senyawa- senyawa  kimia  yaitu  vitamin  B  (tiamin  /  B1, riboflavin  /  B2,  niasin  /  B3,  piridoksin  /  B6, sianokobalanin  /  B12),  vitamin  C  dan  polifenol. Teh kombucha diduga berperan dalam metabolisme  lemak  sehingga  mempunyai  potensi
untuk  menurunkan  kadar  kolesterol  LDL  dan trigliserida,  serta  meningkatkan  kadar  HDL, hingga  bisa  mengurangi  risiko  terhadap  penyakit pembuluh  darah  dan  jantung  koroner  .  Teh kombucha  adalah  minuman  yang  murah  dan mudah  dibuat  oleh  masyarakat  di  Indonesia  yang memiliki  beberapa  khasiat  bagi  tubuh  antara  lain dapat  mempengaruhi  tubuh  secara  menyeluruh
dengan  menstabilkan  metabolisme  tubuh.  Melalui peningkatan  metabolisme,  penimbunan  lemak  di dalam  tubuh  yang  terlalu  banyak  dapat  dihindari. Katekin merupakan salah satu unsur dari polifenol dapat mencegah tekanan darah tinggi, mengurangi penimbunan kolesterol dalam darah, mempercepat pembuangan  kolesterol  melalui  feses,  menangkal radikal  bebas,  serta  dapat  mengurangi  risiko penyakit kardiovaskuler (Naland, 2008).
Hasil penelitian yang telah dilakukan oleh Purwaning (2010) dan Rahayu (2005) menggunakan  teh  kombucha  terhadap  tikus  putih menunjukkan  penurunan  kadar  kolesterol.  Hal  ini didukung  pula  oleh  Adriani et  al. (2011)  yang menggunakan  itik  sebagai  hewan  percobaan menyatakan bahwa teh kombucha dapat menurunkan kadar kolesterol total darah, selain itu juga  mengurangi  kolesterol  LDL  dan  menaikkan kolesterol    HDL  sesudah  mengkonsumsi  teh kombucha  selama  4  minggu.  Hasil  penelitian Pratiwi et  al. (2012)  menyatakan  pembuatan  teh kombucha mempunyai kandungan alkohol tertinggi  pada  fermentasi  hari  ke-12  dan  menurun pada  hari  ke-16,  kandungan  vitamin  C  menurun pada hari ke-4 dan meningkat kembali hingga hari ke-16. Asam total terus meningkat sampai hari ke- 16, nilai pH dan gula total semakin menurun pada hari ke-16.
Kolesterol  di  dalam  darah  beredar  tidak dalam  keadaan  bebas,  akan  tetapi  berada  dalam partikel  –  partikel  lipoprotein.  Lipoprotein merupakan  senyawa  kompleks  antara  lemak  dan protein.  Lipoprotein  terdiri  atas  4  jenis  yaitu kilomikron, VLDL, low density lipoprotein (LDL), dan high density lipoprotein (HDL) (Devlin, 2002; Mayes  &  Botham,  2003 a ).  Satu  atau  lebih apoprotein  (protein  dan  polipeptida)  ditemukan pada  setiap  lipoprotein.  Apoprotein  utama  HDL adalah  apoprotein  A,  apoprotein  utama  LDL adalah  apoprotein  B,  yang  juga  ditemukan  pada VLDL  dan  kilomikron.  Fungsi    apoprotein  A sebagai  reseptor  HDL  dan  apoprotein  B  sebagai reseptor  LDL.  Aterosklerosis  berkaitan  dengan rasio  yang  tinggi  LDL:HDL  atau  rasio  tinggi apoprotein  B:A  dalam  plasma  (Mayes  &  Botham, 2003 b ).  Apoprotein  B  merupakan  protein  utama dalam    partikel  lipoprotein  aterogenik  dan terutama  terdapat  dalam  partikel  LDL.  Setiap
partikel  LDL  mengandung  satu  molekul  apo  B, dengan  demikian  konsentrasi  apoprotein  B mencerminkan  jumlah  partikel  LDL  dalam  tubuh (Haksa, 2010).
Aterosklerosis berhubungan dengan peningkatan  LDL.  Pengaruh  peningkatan  kadar LDL akan diikuti akumulasi ester kolesterol dalam makrofag  sehingga  kemudian  makrofag  disebut sebagai  sel  busa.  Kadar  LDL  yang  tinggi menyebabkan  tingginya  kadar  LDL  intimal.  LDL intimal  akan  mengalami  oksidasi  dan  menarik monosit  dari  sirkulasi  darah  serta  berubah  secara fenotipik  menjadi  makrofag.  Peningkatan  LDL teroksidasi  pada  dinding  arteri  disertai  dengan terbentuknya  sel  busa,  akan  berkembang  menjadi lempeng lemak (Yanuartono, 2007).
Berdasarkan  latar  belakang  di  atas,  perlu dilakukan penelitian untuk mendapatkan bukti dan informasi  tentang tebal  dinding  dan  diameter lumen  arteria  koronaria tikus  putih setelah pemberian  teh  kombucha  kadar  75%  sebagai drinking water dengan variasi waktu fermentasi.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium Biologi    Struktur  dan  Fungsi  Hewan  Departemen Biologi Fakultas Sains dan Matematika Universitas Diponegoro Semarang. Hewan percobaan  menggunakan  tikus  putih  ( Rattus norvegicus ) jantan  sebanyak 16 ekor umur 2 bulan (dewasa),  sedang  untuk  bahan  perlakuan  yaitu  teh kombucha kadar 75% yang difermentasi selama 6, 9  dan  12  hari  pada  suhu  25 o C per  oral dengan spuit injeksi ujung berkanul. Adapun alat-alat yang digunakan  yaitu  16  kandang  individu  yang dilengkapi  dengan    tempat  minum  dan  pakan, gelas ukur, timbangan digital, disetting set.
Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan Acak  Lengkap  dengan  4  perlakuan  dan  4  ulangan yaitu  :    P0  =  kontrol,  tanpa  tambahan  teh kombucha, P1 = air minum + 1,8 ml teh kombucha kadar  75%  pagi  dan  sore  fermentasi  6  hari,  P2  = air minum + 1,8 ml teh kombucha kadar 75%  pagi dan  sore  fermentasi  9  hari,  P3  =  air  minum  +  1,8 ml  teh  kombucha  kadar  75%    pagi  dan  sore fermentasi  12  hari.  Pakan  dan  minum  diberikan secara ad libitum .
Tebal Dinding dan Diameter Lumen Arteria Koronaria Tikus Putih Setelah Pemberian Teh Kombucha Kadar 75% Waktu Fermentasi 6, 9 dan 12 Hari
Preparat  histopatologi  arteri  koronaria dibuat  dengan  metode  parafin  dan  fiksatif  yang digunakan  adalah  larutan  10% neutral  buffered formalin .  Tahapan  yang  dilakukan  setelah  proses fiksasi  adalah  melakukan  pemotongan  tipis jaringan  setebal  kurang  lebih  4  mm  dengan orientasi sesuai  dengan  organ  yang  akan  dipotong ( trimming ).  Pisau  yang  digunakan  untuk trimming adalah  pisau  skalpel  No.  22-24.  Jumlah  potongan jaringan  yang  dapat  dimuat  dalam embedding cassette berkisar  antara  1-5  buah  disesuaikan dengan ukuran organ. Dehidrasi jaringan dilakukan  setelah trimming menggunakan tissue processor (Leica,  Germany),  ini  dimaksudkan untuk  mengeluarkan  air  yang  terkandung  dalam jaringan  dengan  menggunakan  cairan  dehidran seperti  etanol  atau  iso  propyl  alkohol.  Cairan dehidran  kemudian  dibersihkan  dari  dalam jaringan  dengan  menggunakan  reagen  pembersih (clearing agent) yaitu xylol. Reagen pembersih ini akan  diganti  dengan  parafin  dengan  cara dimasukkan  dalam  larutan  parafin  cair  sehingga parafin  terpenetrasi  ke  dalam  jaringan;  proses  ini
disebut  impregnasi.  Parafin  yang  digunakan mempunyai  titik  cair  56-58˚C.  Pengaturan  waktu dehidrasi  pada tissue  processor diberikan  pada pada  Tabel  1.  Setelah  melalui  proses  dehidrasi, jaringan yang berada di dalam embedding cassette dipindahkan  ke  dalam base  mold, kemudian  diisi dengan parafin cair dan dilekatkan pada embedding  cassette yang  disebut  blok.  Jaringan dalam blok yang telah dingin, selanjutnya dipotong pada  ketebalan  irisan  4  µ  dengan rotary microtome .  Irisan  tersebut  ditempel  pada  gelas objek  yang  sebelumnya  diolesi Mayer’s  egg albumin dan  ditetesi  aquades  kemudian  dibiarkan kering pada suhu kamar. Untuk selanjutnya setelah preparat mikroanotomi kering dilakukan pewarnaan dengan metode pewarnaan Hematoxylin  Ehrlich-Eosin,  kemudian  dilakukan mounting dengan  meneteskan  entelan  secukupnya dan  ditutup  dengan coverglass .  Pengamatan preparat  pada  setiap  perlakuan  dilakukan  dengan mikroskop cahaya untuk menentukan tebal dinding dan diameter lumen arteri koroner antar kelompok perlakuan.

## Tabel 1.  Pengaturan waktu dehidrasi pada tissue processor
Proses Cairan Waktu Dehidrasi Alkohol 80% 2 jam Alkohol 95% 2 jam Alkohol 95% 1 jam Alkohol absolut 1 jam Alkohol absolut 1 jam Alkohol absolut 1 jam Clearing Xylol 1 jam Xylol 1 jam Xylol 1 jam Impregnasi Parafin 2 jam Parafin 2 jam
Variabel  yang  diukur  adalah tebal dinding  dan  diameter  lumen  arteri  koronaria . Data  yang  diperoleh  dianalisis  dengan  Anova, berdasarkan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL) pada  taraf  kepercayaan  95%  (α  =  0,05)  (Mattjik dan  Sumertajaya,  2006).  Analisis  keseluruhan menggunakan  perangkat  lunak  software  SPSS 10,0.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Data hasil analisis penelitian terhadap rata- rata tebal  dinding  dan  diameter  lumen  arteri koronaria pada  tikus  putih  ( Rattus  norvegicus ) jantan    setelah  pemberian  teh  kombucha  kadar 75%  yang  difermentasi  selama  6,  9  dan  12  hari disajikan pada Tabel 2.
Hasil  analisis  pemberian  teh  kombucha kadar  75%  yang  difermentasi  menunjukkan  hasil yang tidak berbeda nyata (P<0.05) baik pada tebal dinding  arteri  koronaria  maupun  diameter  lumen arteri koronaria. Fermentasi teh kombucha 6,9 dan 12 hari yang diberikan, tidak mempengaruhi tebal dinding  dan  diameter  lumen  arteri  koronaria pada  tikus  putih    ( Rattus  norvegicus )  pada  semua
perlakuan  seperti  tampak  pada  Tabel  1.  Gambar histologis  arteria  koronaria  terlihat  jelas  struktur pada masing-masing perlakuan yaitu adanya lumen aorta,  dinding  arteri  koronaria,  tunika  intima, tunika  media  maupun  tunika  adventisia  seperti terlihat pada  Gambar 1, Gambar 2, Gambar 3 dan Gambar 4.
Tabel 2.  Hasil analisis rata-rata tebal dinding dan diameter lumen arteri koronaria (µm) pada Tikus putih ( Rattus norvegicus ) jantan  setelah pemberian teh kombucha kadar 75%  yang difermentasi  selama 6, 9 dan 12 hari
Variabel P0 P1 P2 P3 Tebal dinding 18.74 a ± 2.16 18.31 a ± 1.28 18.55 a ± 3.00 18.36 a ± 2.00
Diameter lumen            88.57 a ± 4.85 83.18 a ± 6.11 86.22 a ± 1.34 87.25 a ± 4.23
Keterangan :   Angka dengan superskrip yang berbeda pada baris yang sama menunjukkan perbedaan yang nyata antar perlakuan pada taraf 95%. P0 = kontrol, tanpa tambahan teh kombucha kadar 75%, P1 = air minum + 1,8 ml teh kombucha kadar 75% pagi dan sore fermentasi 6 hari, P2 = air minum + 1,8 ml teh kombucha kadar 75%  pagi  dan  sore  fermentasi  9  hari,  P3  =  air  minum  1,8  ml  teh  kombucha  kadar  75%    pagi  dan  sore fermentasi 12 hari.
Hasil  penelitian  Isdadiyanto  dan  Tana (2016)  menyatakan  bahwa  tikus  putih  yang  diberi teh  kombucha    menunjukkan  terjadinya  hubungan LDL  dengan  kolesterol  total  yang  berbanding lurus.  Hal  tersebut  terjadi  karena  45%  kolesterol berada  dalam  bentuk  LDL  (Mathews  &  Van Holde,  2012).  Artinya  jika  kolesterol  total  turun maka  LDL  juga  turun.  Hal  ini  terjadi  karena terhambatnya  atau  terganggunya  proses  absorbsi kolesterol di usus halus dan meningkatnya ekskresi asam  empedu  melalui  feses.  Asam  empedu merupakan hasil metabolisme akhir dari kolesterol. Dengan  tingginya  ekskresi  asam  empedu  maka akan  semakin  banyak  kolesterol  yang  diubah menjadi  asam  empedu  untuk  mengelmusikan lemak,  sehingga  kolesterol  total  dan  LDL  serum menurun.  Lebih  lanjut  Isdadiyanto  dan  Tana (2016)  menjelaskan  bahwa  mekanisme  naiknya kadar  HDL  karena  pengaruh  pemberian  Teh kombucha kemungkinan disebabkan oleh pengikatan  asam  empedu  oleh  metabolit  (yang terkandung  dalam  teh  kombucha)  di  dalam  usus halus  yang  menyebabkan  meningkatnya  ekskresi asam  empedu  fekal,  sehingga  terjadi  penurunan absorbsi lemak dan kolesterol, hal ini mengakibatkan  kolesterol  dalam  hati  rendah sehingga  kolesterol  untuk  memproduksi  asam
empedu kurang. Kondisi ini merangsang terjadinya sintesis  HDL  dalam  hati  untuk  memenuhi kekurangan  kolesterol  tersebut.    Akibatnya  LDL serum lebih rendah daripada HDL serum.
Salah  satu  penyakit  arteri  koroner adalah  aterosklerosis.  Aterosklerosis  terjadi bila  arteri  koroner  tersumbat  dan  menyempit, sehingga  menghambat  aliran  darah  ke  otot jantung.  Tanpa  darah  yang  mencukupi, jantung  akan  kekurangan  oksigen  dan  nutrien vital  yang  dibutuhkan  jantung  untuk  bekerja sebagaimana  mestinya.  Bila  satu  pembuluh atau  lebih  arteri  koroner  tertutup  total,  dapat menyebabkan  serangan  jantung  dan  akhirnya terjadi kematian (Lewis et al., 2004). Dinding arteri terdiri dari tiga tunika berturut-turut dari bagian dalam ke arah luar yaitu tunika intima, tunika  media  dan  tunika  adventisia.  Tunika intima  terdiri  atas  satu  lapis  sel  endotelium, tunika  media    terdiri  dari  lapisan  sel-sel  otot polos  dan  jaringan  elastin,  tunika  adventisia terdiri  atas  jaringan  ikat  (Junqueira  dan Carneiro, 2003).
Penyakit  pada  arteria dapat  terjadi  dengan peningkatan  kadar  kolesterol  LDL  dan  VLDL
Tebal Dinding dan Diameter Lumen Arteria Koronaria Tikus Putih Setelah Pemberian Teh Kombucha Kadar 75% Waktu Fermentasi 6, 9 dan 12 Hari
dalam  darah  (hiperkolesterol).  Kenaikan  kadar kolesterol  ini  dapat  terjadi  bila  ada  gangguan pembentukan  kolesterol  dalam  hepar  atau  usus halus  (Sherwood,  2001).  Kadar  kolesterol  LDL yang  tinggi  akan  memicu  penimbunan  kolesterol di  sel  pembuluh  darah,  yang  menyebabkan munculnya aterosklerosis dan terbentuknya plak di dinding pembuluh darah (Libby & Theroux, 2005). Aterosklerosis  berhubungan  dengan  peningkatan LDL.  Pengaruh  peningkatan  kadar  LDL  akan
diikuti akumulasi ester kolesterol dalam  makrofag sehingga  kemudian  makrofag  disebut  sebagai  sel busa.  Kadar  LDL  yang  tinggi  menyebabkan tingginya  kadar  LDL  intimal.  Selanjutnya  LDL intimal  akan  mengalami  oksidasi  dan  menarik monosit  dari  sirkulasi  darah  serta  berubah  secara fenotipik  menjadi  makrofag.  Peningkatan  LDL teroksidasi  pada  dinding  arteri  disertai  dengan terbentuknya  sel  busa,  akan  berkembang  menjadi lempeng lemak (Yanuartono , 2007).
Gambar 1.Arteri koroner tikus putih P0 = kontrol, tanpa tambahan teh kombucha kadar 75% . A. Lumen arteri koroner dan B. Dinding arteri koroner (H&E, 40x10)
Gambar 2.   Arteri koroner tikus putih P1 = diberi air minum  + 1,8 ml teh kombucha kadar 75%   pagi dan sore fermentasi  6 hari . A. Lumen arteri koroner B. Dinding arteri koroner C Tunika intima D. Tunika media dan E. Tunika adventisia (H&E, 40x10)
Gambar 3.  Arteri koroner tikus putih P2 = diberi air minum 1,8 ml teh kombucha kadar 75%  pagi dan sore  fermentasi    9  hari .  A.  Lumen  arteri  koroner  dan  B.  Dinding  arteri  koroner  (H&E, 40x10)
Gambar 4.  Arteri koroner tikus putih P3 = diberi air minum 1,8 ml teh kombucha  kadar 75%  pagi dan sore  fermentasi  12  hari. A.  Lumen  arteri  koroner  B.  Dinding  arteri  koroner  C.  Tunika intima D. Tunika media dan E. Tunika adventisia (H&E, 40x10)
Hasil penelitian Isdadiyanto (2018) bahwa Teh  kombucha  kadar  100%  yang  difermentasi selama  6,  9  dan  12  hari  berpotensi  digunakan sebagai  suplemen  untuk  pencegahan  risiko terhadap  penyakit  pembuluh  darah  dan  jantung koroner. Hasil  tersebut  sesuai  dengan  hasil
penelitian  ini  bahwa  pemberian  teh  kombucha kadar  75%  tidak  menyebabkan  terbentuknya  plak pada  dinding  arteri  koronaria  hal  ini  dibuktikan dengan  hasil  analisis  yang  tidak  berbeda  pada diameter  lumen  arteria  koronaria  seperti  terlihat pada  Tabel  1,  bahkan  diduga  dapat  mencegah
Tebal Dinding dan Diameter Lumen Arteria Koronaria Tikus Putih Setelah Pemberian Teh Kombucha Kadar 75% Waktu Fermentasi 6, 9 dan 12 Hari
terbentuknya    plak  yang  akan  terbentuk  pada arteria koronaria. Hal ini dapat dijelaskan menurut Rahayu  (2005)  bahwa  kandungan  teh  kombucha mengandung  niasin  yang    berperan  dalam merangsang pembentukan hormon prostaglandin I 2 yaitu  hormon  yang  mencegah  penggumpalan (agregasi)  trombosit  sehingga  dapat  memperkecil risiko aterosklerosis.

## KESIMPULAN
Teh kombucha kadar 75% yang difermentasi  selama  6,  9  dan  12  hari  berpotensi digunakan  sebagai  suplemen  untuk  pencegahan risiko  terhadap  penyakit  pembuluh  darah  dan jantung koroner.

## DAFTAR PUSTAKA
Adriani, L., Mayasari, N., Angga and Kartasudjana,  R.  2011.  The  effect  of fermented        Kombucha  tea  on  HDL,LDL and  Total  Cholesterol  levels  in  the  duck bloods.  Faculty  of  Animal  Husbandry, Padjadjaran University, Bandung. Indonesia. Biotechnology in Animal Husbandry, Volume 27, No. 4. 1749-1755.
1 maret 2012.
Devlin,  M.  2002. Textbook  of  Biochemistry,  with Clinical  Corelations .  Willeyliss.  New York.
Haksa,  K.  2010. Kadar  kolesterol  normal  bukan jaminan  terbebas  dari  risiko  penyakit jantung  koroner. 17  September  2010. Kompas.com. All rights reserved.
Isdadiyanto, S. dan Tana, S 2016. Pengaruh waktu fermentasi  the  Kombucha  kadar  75% terhadap     profil lipid tikus putih. Buletin Anatomi  dan  Fisiologi .  Vol.  1.  No.1:  30- 35.
Isdadiyanto,S.  2018.  Tebal  dinding  dan  diameter lumen arteria koronaria tikus putih setelah pemberian  teh  kombucha  kadar  100% waktu fermentasi 6, 9 dan 12 hari. Buletin Anatomi   dan  Fisiologi . Vol.  3.  No.1:  97-
104.
Junquiera LC,  Carneiro  J. 2003. Basic Histology: Text  &  Atlas. 10  Edition.  London.  The
McGraw-Hill  Companies.  Inc.  Pp.  203- 218.
Lewis    R,  Gaffin    D,    Hoefnagels    M,  Parker    B.
2004. Life fifth edition . London. McGraw Hill Book Company. Inc.699-703.
Libby,  P.  and  P.  Theroux.  2005.  Pathophysiology of  coronary  artery  disease. Circulation . 111:3481-3488.
Linder,  M.C.  2010. Biokimia  Nutrisi  dan Metabolisme ,  dengan  Pemakaian  secara klinis.  Penerjemah  Aminuddin  Parakkasi. Cetakan  ke  1.  Penerbit  Universitas Indonesia (UI-Press). Jakarta.
Mathews,  K.C.  and  K.  E.  Van  Holde.  2012. Biochemistry .  The  Benjamin/Cummings
Co.Inc. New York.
Mattjik, A.A. danI.M. Sumertajaya. 2006.
Perancangan  Percobaan  dengan  Aplikasi SAS  dan    Minitab .  Ed.  Ke-3.  IPB-Press.
Bogor.
Mayes,  P.A.  and  K.M.  Botham.  2003 a . Lipid Storage & Transport. Harper’s Illustrated Biochemistry,  26 nd edition .  Mc.Graw  Hill, 205-217.
Mayes, P.A. and K.M. Botham. 2003 b . Cholesterol Synthesis,  Transport,  and  Excretion. Harper’s  Illustrated  Biochemistry,  26 nd edition . Mc.Graw Hill, 219-227.
Naland,  H.  2008. Kombucha;  Teh  dengan  seribu khasiat . Agromedia Pustaka, Jakarta.
Poedjiadi,  A.  2009. Dasar-dasar  Biokimia .  UI Press. Jakarta.
Pratiwi,  A.  Elfira,  Aryawati,  R.  2012.  Pengaruh Waktu  Fermentasi  terhadap  sifat  fisik  dan kimia pada pembuatan minuman
kombucha  dari  Rumput  Laut  Sargassum sp. Maspari Journal. 2012. 4(1). 131-136.
Purwaning,  A.  2010.  Pengaruh  kombucha  Teh ( Acetobacter  xylinum )  terhadap  kadar kolesterol  tikus  putih  jantan  ( Rattus norvegicus ). Jurnal Department of Biology Universitas Muhammadiyah, Malang.Studentresearch.umn.ac.id/print/st udent_research_4178.html 4 Maret 2012
Rahayu,  T.  2005.  Kadar  kolesterol  darah  tikus putih  setelah  pemberian  cairan  kombucha per oral  Jurusan  Pendidikan  Biologi, FKIP Universitas
Muhammadiyah,
Surakarta. Jurnal  Penelitian  Sains  dan
Teknologi , Volume 6, No.2.
Sherwood,  L.  2001. Human  Phisiology:  From Cells to Systems . A Division of Internasional Thomson Publishing Inc. All
Right Reserved.
Yanuartono.  2007.  Role  of  high  cholesterol and  high  fat  diet  on  lipid  profiles  in
Sprague  Dawley rats. Jurnal  Sain  Vet . 25: 25-33.