## VFA PARSIAL DAN RASIO ASETAT/PROPIONAT PAKAN KAMBING YANG DIBERI PENAMBAHAN TEPUNG DAUN SIRIH (Piper betle Linn)
Partial VFA and Acetate/Propionate Ratio Goat Feed WithThe Addition of Piper Betle Linn Flour
Miftahuddin Ahmad 1* , Rohmatul Anwar 1 , Diah Reni Asih 1
1 Program Studi Peternakan, Fakultas Perikanan, Pertanian dan Peternakan, Universitas Nahdlatul Ulama Lampung
* Penulis korespondensi. Email: miftahahmad77@gmail.com

## ABSTRAK
Penelitian bertujuan untuk mengkaji pengaruh penambahan tepung daun sirih pada pakan kambing secara in  vitro terhadap  produksi  VFA  parsial  dan  rasio  asetat/propionat.  Penelitian  dirancang sesuai dengan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan perlakuan yaitu penambahan tepung daun sirih 0%, 5% dan 10%. Materi penelitian menggunakan tepung daun sirih, pakan basal yang terdiri dari jerami padi amoniasi dan konsentrat dengan perbandingan 40% : 60%. Media yang digunakan untuk percobaan in vitro berupa cairan rumen yang diambil dari 3 ekor kambing segera setelah kambing dipotong. Parameter yang diamati yaitu produksi asam asetat, propionat dan butirat, serta rasio asam asetat dan propionat. Hasil penelitian menunjukan bahwa penambahan daun sirih pada taraf 0-10% dalam pakan berpengaruh sangat nyata (P<0,01) terhadap produksi asam asetat, dan propionat,  sedangkan  produksi  asam  butirat  serta  rasio  asam  asetat  dan  propionat  tidak berpengaruh nyata (P>0,05) antar perlakuan. Berdasarkan uji orthogonal polinomial peningkatan taraf  penambahan  tepung  daun  sirih  dalam  pakan  meningkatkan  produksi  asam  asetat  dan propionat  secara  quadrater  (P<0,01)  dengan  titik puncak  berturut  turut  pada  6,97%  dan  7,19%. Disimpulkan  bahwa  penambahan  tepung  daun  sirih  pada  pakan  kambing  berbasis  jerami  padi amoniasi  yang  diuji  secara in  vitro dapat  meningkatkan  produksi  VFA  parsial  namun  tidak mempengaruhi  rasio  asetat  dan  propionat  yang  terbentuk.  Penggunaan  daun  sirih  sebagai defaunator untuk peningkatan produksi VFA paling optimal pada taraf 7,19%.
Kata Kunci : Defaunasi, Daun Sirih, VFA Parsial, In Vitro, Kambing

## ABSTRACT
The research aims to examine the effect of adding betel leaf flour to goat feed in vitro on partial VFA production and the acetate/propionate ratio. The research material used betel leaf flour, basal feed consisting of ammoniated rice straw and concentrate in a ratio of 40%: 60%. The media used for  in  vitro  experiments  was  rumen  fluid  taken  from  3  goats  immediately  after  the  goats  were slaughtered. The research was  designed according to  a Completely Randomized Design  (CRD) with treatments namely the addition of 0%, 5% and 10% betel leaf flour. The parameters observed were the production of acetic, propionic and butiic acids, as well as the ratio of acetic and propionic acids. The results of the study showed that the addition of betel leaves at the level of 0-10% in the feed had a very significant effect (P<0.01) on the production of acetic and propionic acids, while the production of butyric acid and the ratio of acetic and propionic acids had no significant effect
(P>0.05)  between  treatments.  Based  on  the  orthogonal  polynomial  test,  increasing  the  dose  of adding betel leaf flour to the feed increased the production of acetic and propionic acids quadrater (P<0.01) with peak points at 6.97% and 7.19% respectively. It was concluded that the addition of betel leaf flour to goat feed based on ammoniated rice straw tested in vitro could increase partial VFA production but  did not  affect  the ratio of acetate and propionate formed. The use of betel leaves as a defaunator to increase VFA production is most optimal at a dose of 7.19%. Keywords : Defaunation, Betel Leaf, Partial VFA, In Vitro, Goat

## PENDAHULUAN
Pakan merupakan satu hal yang sangat berpengaruh dalam sektor peternakan. Fungsi utama pakan adalah sebagai pembangun dan pemelihara  tubuh,  sumber  energi,  produksi, dan  pengatur  proses-proses  dalam  tubuh. Ketersediaan  pakan  menjadi  salah  satu permasalahan  bagi  peternak  ruminansia, faktor klimatologis dimana Indonesia memiliki  2  musim  menjadi  faktor  yang mempengaruhi  fluktuasi  ketersediaan  pakan hijauan. Upaya yang banyak dilakukan yaitu penggunaan  limbah  pertanian  seperti  jerami padi,  namun  rendahnya  kandungan  protein dan daya guna energi pada jerami padi dapat menyebabkan  penurunan  populasi  mikroba rumen  (Lamid,  2010).  Penurunan  populasi mikroba  rumen  terjadi  karena  sifat  predator protozoa  terhadap  bakteri  (Wahyuni et  al ., 2014).  Hal  tersebut  menyebabkan  kerugian pada sistem pencernaan ruminansia, sedangkan  keberadaan  mikroba  di  dalam rumen  sangat  bermanfaat  karena  dapat mencerna  pakan  berserat,  memanfaatkan nitrogen  bukan  protein  dan  menghasilkan produk  fermentasi  untuk  ternak.  Produk fermentasi  yang  dihasilkan  diantaranya adalah Volatile Fatty Acid (VFA) yang terdiri dari asam asetat, propionat  dan butirat yang merupakan  sumber  energi  bagi  ternak ruminansia.
Upaya  yang  dapat  dilakukan  untuk memperbaiki  keadaan  tersebut  yaitu  dengan penambahan feed  additive sebagai  agen defaunasi.  Penambahan  agen  defaunasi
bertujuan  untuk  menekan  populasi  protozoa dalam  keadaan  kualitas  pakan  rendah, sehingga  diharapkan  terjadi  peningkatan mikroba  rumen  dalam  menghasilkan  VFA sebagai produk fermentasi. Berbagai penelitian  telah  dilakukan  dalam  menguji agen  defaunasi  terhadap  ternak  ruminansia, berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan Wahyuni et  al .  (2014)  efek  defaunasi  dan fermentabilitas yang optimal dengan suplementasi  kombinasi  saponin  dan  tanin. Daun  sirih  ( Piper  betle  Linn )  merupakan salah  satu  tanaman  yang  mengandung saponin dan tanin sehingga dapat dimanfaatkan
sebagai defaunator. Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan Yamin et al . (2013) penambahan tepung daun sirih  secara  nyata  menurunkan  populasi protozoa  dan  tidak  berpengaruh  nyata terhadap  total  bakteri,  penambahan  2% tepung  daun  sirih  juga  secara  nyata  mampu meningkatkan  produksi  VFA  total,  namun belum  diteliti  komponen  VFA  seperti  asam asetat, propionat dan butirat.
Penelitian ini bertujuan untuk mengkaji pengaruh penggunaan tepung daun sirih  sebagai feed  additive sumber  saponin dan  tanin  untuk  defaunasi  serta  melihat pengaruhnya terhadap VFA parsial dan rasio asetat  /  propionat.  Melalui  penelitian  ini, diharapkan dapat  menganalisis potensi  daun sirih sebagai feed additive pakan ruminansia serta memperluas kasanah ilmu pengetahuan, utamanya nutrisi ternak ruminansia.

## MATERI DAN METODE
Materi  penelitian  menggunakan  daun sirih  yang  diproses  sampai  menjadi  tepung, pakan  basal  dalam  penelitian  ini  terdiri  dari jerami padi amoniasi dan konsentrat dengan perbandingan  40%  :  60%.  Konsentrat tersusun dari dedak padi dan bungkil kelapa
dengan  perbandingan  2  :  1.  Media  yang digunakan  untuk  percobaan in  vitro berupa cairan  rumen  yang  diambil  dari  3  ekor kambing  segera  setelah  kambing  dipotong. Pakan  basal  yang  diuji  memiliki  kandungan nutrien seperti tertera pada Tabel 1.
Tabel 1. Kandungan nutrien pakan percobaan Komposisi Perlakuan P0 P1 P2 Jerami Padi Amoniasi (%) 40 40 40 Konsentrat (%) 60 60 60 Tepung Daun Sirih (%) 0 5 10 Kandungan Nutrien Daun Sirih Bahan Kering (%) 89,00 90,8 95,3 99,7 Bahan Abu (%) 14,38 15,6 16,4 17,1 Bahan Organik (%) 74,62 75,2 78,9 82,7 Protein Kasar (%) 18,13 8,3 9,2 10,1 Serat Kasar (%) 27,85 31,0 32,4 33,8 Lemak Kasar (%) 13,34 9,4 10,1 10,8
Sumber : Hasil analisis proksimat Laboratorium Ilmu Nutrisi dan Makanan Ternak, Fakultas Peternakan, Universitas Jenderal Soedirman tahun 2023.
Penelitian dilaksanakan dengan metode eksperimen secara in vitro . Percobaan in vitro dilakukan  berdasarkan  metode  Tilley  & Terry  (1963)  yang  telah  dimodifikasi  oleh Sutardi  (1979).  Rancangan  percobaan  yang digunakan  untuk  mengetahui  pengaruh perlakuan  terhadap  peubah  respon  yaitu rancangan  acak  lengkap  (RAL) one  way classification .  Perlakuan  yang  diuji  adalah penambahan  tiga  taraf  tepung  daun  sirih, yaitu :
P0  :  Jerami  Amoniasi  40%  + Konsentrat 60% + Tepung Daun Sirih 0%
P1  :  Jerami  Amoniasi  40%  + Konsentrat 60% + Tepung Daun Sirih 5% P2  :  Jerami  Amoniasi  40%  + Konsentrat 60% + Tepung Daun Sirih 10%
Setiap  perlakuan  diulang  6  kali sehingga  terdapat  18  unit  percobaan. Parameter  atau  peubah  respon  yang  diamati yaitu  produksi  VFA  parsial  meliputi  asam asetat, propionat dan butirat, serta rasio asam asetat dan propionat.

## Analisis Data
Data yang diperoleh dianalisis menggunakan analisis variansi. Berdasarkan analisis variansi apabila perlakuan berpengaruh  nyata  terhadap  variabel  yang diamati  maka  dilanjutkan  dengan  uji Orthogonal  Polinomial (Steel  &  Torrie, 1993).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Volatile Fatty Acid (VFA)
Volatile  Fatty  Acid (VFA)  merupakan produk  yang  dihasilkan  dari  fermentasi karbohidrat  di  dalam  rumen  dan  berfungsi sebagai  sumber  energi  bagi  ternak  serta sumber kerangka karbon dalam pembentukan protein mikroba (Dhia et al. , 2019). Menurut Subagyo (2006), produksi VFA dalam rumen dipengaruhi  oleh  kandungan  protein  dan
energi  yang  terkandung  dalam  pakan, kecepatan  penyerapan  oleh  dinding  rumen, laju  degradasi  protein  dan  energi,  serta pemanfaatan  oleh  mikroba  rumen.  Menurut Sukmawati et al . (2011), proporsi komposisi VFA bergantung dari ransum yang dikonsumsi. Hasil produksi VFA parsial dan rasio  asetat/propionat  pada  penelitian  ini disajikan pada Tabel 2.
Tabel 2. Rataan VFA parsial dan rasio asetat/propionat yang diberi pakan perlakuan.
Parameter Perlakuan Sig. P0 P1 P2 Asetat (mM) 60,42 ± 5,31 78,10 ± 4,74 76,01 ± 4,67 0,001 Propionat (mM) 23,21 ± 1,93 29,76 ± 1,88 29,33 ± 2,03 0,001 Butirat (mM) 15,43 ± 1,94 15,55 ± 1,60 13,30 ± 1,36 0,056 Asetat/propionat 2,59 ± 0,12 2,63 ± 0,14 2,59 ± 0,08 0,800
Keterangan :  P0 : Pakan Basal (Jerami Amoniasi 40% + Konsentrat 60%); P1 : P0 + Tepung Daun Sirih 5%; P2 : P0 + Tepung Daun Sirih 10%
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa penambahan  daun  sirih  dalam  pakan memberikan  pengaruh  secara  kuadrater (P<0,01)  terhadap  produksi  asetat  dengan persamaan y= -0,3953x 2 + 5,5117x + 60,423 dengan  koefisien  determinasi  (r 2 )  =  0,76 (Gambar  1).  Berdasarkan  nilai  koefisien determinasi  produksi  asam  asetat  76% dibengarungi oleh daun sirih yang diberikan
dan  24%  dipengaruhi  oleh  faktor  luar penelitian. Produksi asetat mengalami peningkatan dengan penambahan daun sirih, hal  tersebut  ditunjukkan  dengan  produksi asetat pakan kontrol lebih rendah dari pakan yang ditambahkan tepung daun sirih. Terlihat pada  Tabel  2  produksi  asam  asetat  kontrol sebesar  60,42  mM  sedangkan  dengan penambahan tepung daun sirih 5% diperoleh produksi asetat sebesar 78,10 mM.
Gambar 1. Hubungan penambahan tepung daun sirih terhadap produksi asam asetat
y = -0,3955x 2 + 5,5129x + 60,423 R² = 0,76 0.00 20.00 40.00 60.00 80.00 100.00 0 5 10 P ro du k si Aset a t (m M )
Taraf Penambahan Tepung Daun Sirih (%)
Berdasarkan  persamaan  garis  pada Gambar 1 diketahui bahwa titik tertinggi dari besaran  produksi  asetat  yaitu  pada  taraf penambahan daun sirih 6,97%. Besaran nilai asam  asetat  yang  dihasilkan  tidak  terlepas dari  peran  bakteri  selulolitik  atau  bakteri yang mencerna karbohidrat struktural. Dalam penelitian ini pakan yang digunakan berbasis jerami  padi  amoniasi  sehingga  kandungan serat  pada  pakan  tergolong  tinggi.  Menurut Wati  (2017),  proses  fermentasi  serat  yang
terkandung dalam ransum pakan menyebabkan terjadinya peningkatan produksi  asam  asetat.  Keadaan  tersebut sejalan dengan hasil penelitian produksi asam asetat  yang  tinggi  pada  pakan  percobaan. Hasil  yang  serupa  juga  ditunjukkan  pada produksi  asam  propionat  dengan  persamaan garis yaitu y = -0,1395x2 + 2,007x + 23,208 dengan koefisien determinasi (r 2 ) = 0,74 dan titik puncak pada taraf 7,19% (Gambar 2).
Gambar 2. Hubungan penambahan tepung daun sirih terhadap produksi asam propionat Penambahan  daun  sirih  dalam  pakan percobaan  menghasilkan  respon  adanya peningkatan produksi asam propionat sampai pada  taraf  penambahan  7,19%.  Hal  tersebut menandakan  adanya  peningkatan  aktivitas bakteri amilolitik yang mencerna karbohidrat non  struktural  memanfaatkan  glukosa, sukrosa,  dan  pati  menjadi  asam  propionat. Kondisi ini  diduga akibat dari pengaruh dan peran  daun  sirih  sebagai  defaunator  yang mengandung  saponin  dan  dapat  menjaga populasi protozoa. Akibatnya mikroba rumen khususnya bakteri penghasil propionat dapat tumbuh.  Menurut  Wang et  al .  (2012), permukaan  membran  protozoa  akan  lisis akibat  ikatan  kompleks  dengan  sterol  yang terbentuk dari pengaruh saponin. Lebih lanjut Kurihara et  al. (1968)  menyatakan  bahwa penekanan populasi protozoa akan meningkatkan  populasi  bakteri  amilolitik.
Hal tersebut disebabkan karena protozoa dan bakteri  amilolitik  merupakan  kompetitor dalam memanfaatkan pati menjadi propionat, sehingga dengan menurunya populasi protozoa dapat meningkatkan perkembangan bakteri amilolitik.
Hasil  yang  berbeda  ditunjukkan  pada produksi  asam  butirat.  Hasil  analisis  ragam menunjukkan  bahwa  penambahan  tepung daun sirih dalam pakan perlakuan memberikan  pengaruh  yang  tidak  nyata (P>0,05)  terhadap  produksi  asam  butirat (Tabel  2).  Produksi  asam  butirat  yang dihasilkan dari penelitian ini sebesar 13,30 - 5,55 mM. Dengan demikian pembahan daun sirih dengan taraf 5% menghasilkan produksi asam  butirat  yang  lebih  tinggi  yakni  15,55 mM bila dibandingkan dengan kontrol (0%) sebesar 15,43 dan penambahan 10% sebesar 13,30  mM.  Produksi  asam  butirat  secara statistik  mengalami  penurunan  namun  hasil
y = -0,1395x 2 + 2,0072x + 23,208 R² = 0,74 0.00 10.00 20.00 30.00 40.00 0 5 10 P ro duk si P ro pio na t (m M ) Taraf Penambahan Tepung Daun Sirih (%)
yang  diperoleh  masih  lebih  tinggi  dari  hasil penelitian yang telah dilakukan oleh Li et al ., (2008)  yang  memperoleh  produksi  asam butirat pada kambing dan domba yang diberi pakan konsentrat sebesar 12,6 mM.

## Rasio Asam Asetat dan Propionat
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa penambahan tepung daun sirih  dalam pakan perlakuan  memberikan  pengaruh  yang  tidak nyata (P>0,05) terhadap rasio asetat/propionat (Tabel 2). Rasio
asetat/propionat yang dihasilkan dari penelitian ini sebesar 2,59 - 2,63 dengan rasio tertinggi  diketahui  pada  penambahan  5% daun  sirih  yakni  sebesar  2,63.  Rasio asetat/propionat  yang  sama  diduga  karena kandungan  karbohidrat  yang  sama  antar pakan  perlakuan  (Wati,  2017).  Nilai  rasio asetat/propionat pada penetian ini lebih tinggi dibandingkan  dengan  hasil  penelitian  yang dilakukan oleh Sutrisno et al . (2021) sebesar 1,04  dengan  penggunaan  pakan  berserat tinggi  dan  suplementasi  bawang  putih  dan
rumput  laut.  Wati  (2017)  juga  melaporkan hasil penetian rasio asetat : popionat dengan penggunaan  pakan  berbasis  bagase  pada domba fistula sebesar 2,06.
Besaran  nilai  rasio  produksi  asam asetat dan propionat menunjukkan komposisi mikroba yang ada di dalam rumen baik yang diberi  perlakuan  maupun  tidak.  Tinggi rendahnya  produksi asam asetat  dan propionat berkaitan dengan indikator efisiensi  ternak  dalam  memanfaatkan  pakan yang  diberikan.  Hal  tersebut  disebabkan karena  dalam  proses  pembentukan  asam asetat  menghasilkan  H 2 dan  CO 2 yang  akan dimanfaatkan oleh mikroba penghasil metan menjadi  CH 4 .  Namun  demikian,  dalam pembentukan  asam  propionat  mikroba menggunakan H 2 sehingga dapat mengurangi produksi  CH 4 (Hidayah,  2016).  Nilai  rasio asetat dan propionat menggambarkan efisiensi  pemanfaatan  energi  serta  kualitas produk  yang  dihasilkan  (Hambakodu et  al ., 2019).

## KESIMPULAN
Penambahan  tepung  daun  sirih  pada pakan  kambing  yang  diuji  secara in  vitro dapat  meningkatkan  produksi  asam  asetat dan  propionat  namun  tidak  mempengaruhi produksi  asam  butirat  serta  rasio  asetat  dan
propionat  yang  terbentuk.  Penggunaan  daun sirih  sebagai  defaunator  untuk  peningkatan produksi  VFA  paling  optimal  pada  taraf 7,19%.

## DAFTAR PUSTAKA
Dhia,  K.  S.,  Kamil,  K.  A.,  &  Tanuwira,  H. 2019.  Kecernaan  dan  Fermentabilitas Substrat  Kombinasi  Mineral  Fungi Dalam Rumen. Jurnal Ilmiah Peternakan Terpadu , 7 (2), 217.
https://doi.org/10.23960/jipt.v7i2.p217 -222
Hambakodu, M., Pangestu, E., & Achmadi, J.
2019.  Substitusi  rumput  gajah  dengan rumput laut coklat ( Sargassum polycystum ) terhadap produk
metabolisme  rumen  dan  kecernaan nutrien  secara  in  vitro. Jurnal  Ilmu- Ilmu Peternakan , 29 (1), 37–45.
https://doi.org/10.21776/ub.jiip.2019.0 29.01.05
Hidayah,  N.  2016.  Pemanfaatan  Senyawa Metabolit  Sekunder  Tanaman  (Tanin dan Saponin) dalam Mengurangi Emisi Metan Ternak Ruminansia. Jurnal Sain
Peternakan  Indonesia , 11 (2),  89–98.
https://doi.org/10.31186/jspi.id.11.2.8 9-98
Kurihara, Y., Eadie, J. M., Hobson, P. N., &
Mann,  S.  O.  1968.  Relationship between bacteria and ciliate protozoa in the sheep rumen. J. Gen. Microbiol , 51 ,
267–288. https://www.microbiologyresearch.org /content/journal/micro/10.1099/00221 287-51-2-267
Lamid,  M.  2010.  Konsentrasi  VFA  dan Proporsi  Molar  Asetat,  Propionat, Butirat Rumen Sapi Peranakan Ongole yang  Diberi  Jerami  Padi  Amoniasi, Jerami  Kedelai  dan  Jerami  Padi.
Veterinaria Medika , 3 (3), 165–168. Li,  D.,  Hou,  X.,  Liu,  Y.,  &  Liu,  Y.  2008.
Effect of diet composition on digestion and  rumen  fermentation  parameters  in sheep  and  cashmere  goats. Animal Feed Science and Technology , 146 (3– 4), 337–344. https://doi.org/10.1016/j.anifeedsci.20 08.01.003
Steel,  R.  G.  D.  and  J.  H.  Torrie.  1993.
Principles and Procedures of Statistic : A  Biometrical  Approach.  2nd  Ed. Terjemahan  oleh  B.  Sumantri.  Prinsip dan  Prosedur  Statistika  :  Suatu Pendekatan  Biometrik .  PT.  Gramedia Pustaka Utama. Jakarta.
Subagyo,  Y.  2006. Effect  of  diets  containing different  levels  of  dried  calliandra calothyrsus leaves on ruminal NH3-N and VFA of lactating goats . Animal Production.
https://www.researchgate.net/publication/ 277859955_Effect_of_Diets_Containing_ Different_Levels_of_Dried_Calliandra_ca lothyrsus_Leaves_on_Ruminal_NH3- N_and_VFA_of_Lactating_Goats
Sukmawati,  N.  M.  S.,  Permana,  I.  G.,  & Kompiang, S. 2011. Pengaruh
Complete  Rumen  Modifier  (  CRM  ) dan  Calliandra  calothyrus  terhadap
Produktivitas  dan  Gas  Metan  Enterik pada  Kambing  Perah  PE. Jitv , 16 (3), 173–183.
Sutardi,  T.  1979. Ketahanan  Protein  Bahan Makanan Terhadap Degradasi Mikroba Rumen dan Manfaatnya bagi Peningkatan Produktivitas Ternak .  In: Prosiding  Seminar  Penelitian  dan Penunjangan  Peternakan.  LPP  Institut Pertanian Bogor. p 1 – 6.
Sutrisno, I., Prayitno, C. H., Widiyastuti, T.,
&  Munasik.  2021.  Rasio  asetat /propionat pada pakan domba berkromium organik yang
disuplementasi  bawang  putih  ( allium sativum )  dan  rumput  laut. Prosiding Seminar  Teknologi  Dan  Agribisnis Peternakan , 1995 , 252–258.
Tilley,  J.  M.  A.  and  R.  A.,  Terry.  1963.  A two-stage  technique  for  the  in  vitro digestion  of  forage  crops. Journal  of the  British  Grassland  society .  18 (2):104-111.
Wahyuni,  I.  M.  D.,  Muktiani,  A.,  & Chirtianto,  M.  2014.  Penentuan  Taraf Tanin  Dan  Saponin  Untuk  Defaunasi Dan Peningkatan Fermentabilitas Pakan. Agricultur , 53 (9),  1689–1699. https://core.ac.uk/download/pdf/23042 0360.pdf Wahyuni,  I.  M.  D.,  Muktiani,  A.,  & Christianto, M. 2014. Penentuan Taraf Tanin  dan  Saponin  untuk  Defaunasi dan Peningkatan Fermentabilitas
Pakan. Jitp , 3 (3), 133–140.
Wang, J. K., Ye, J. A., & Liu, J. X. 2012. Effects of  tea  saponins  on  rumen  microbiota, rumen  fermentation,  methane  production and growth performance-a review.
Tropical  Animal  Health  and  Production , 44 (4), 697–706. https://doi.org/10.1007/s11250-011-9960- 8
Wati,  N.  E.  2017.  Pengaruh  Indeks Sinkronisasi dalam Rumen pada Ransum  Berbasis  Bagase  terhadap

## Produksi  VFA  Rumen  pada  Domba.
Jurnal  Wahana  Peternakan , 1 (2),  36–
41.
https://doi.org/https://doi.org/10.37090
/jwputb.v1i2.45
Yamin,  A.  A.,  Sudarman,  A.,  &  Evvyernie, D.  2013.  In  Vitro  rumen  fermentation
and  anti  mastitis  bacterial  activity  of diet  containing  betel  leaf  meal  ( Piper betle L.). Media  Peternakan , 36 (2),
137–142.
https://doi.org/10.5398/medpet.2013.3 6.2.137