## PENETAPAN KADAR FLAVONOID TOTAL DARI EKSTRAK ETANOLIK DAUN BENALU MANGGA
(Dendrophthoe pentandra L. Miq)
1 Rizki Yulianti R, Amaliah Dahlia, 2 Aktsar Roskiana Ahmad
1 Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Muslim Indonesia Email: 1 rizki_ratulangi@yahoo.com , dahliaamalia@yahoo.co.id ,
2 aktsar.roskiana@umi.ac.id ,

## ABSTRACT
Mistletoes  (Dendrophthoe  pentandra L.  Miq)  is  one  of  the  medicine  plant  which  used traditionally to remedy the various of disease. Empirically, communities used mistletoes leaves as cough, tonsillitis, measles, cancer, diuretic, and pain relievers. This research is aimed to determine total flavonoid content in extract of mistletoes leaves (Dendrophthoe pentandra L. Miq). Extraction has done with Thin Layer Cromathography (KLT) method to  determine  active  content  which  in  sample.  Analysis  of  chemistry  content  in  ethanolic extract  of  mistletoes  leaves  show  are  flavonoid  content.  Content  of  total  flavonoid  with Chang et al., 2002 method using UV-Vis spectrophotometry at a wavelength of 440 nm. From this research result 39.713 g ethanolic extract with percent of extract rendamen is 6.109%  from  650  g  dry  powder  of  mistletoes  leaves.  The  results  of  total  flavonoid  of ethanolic extract of mistletoes leaves is 2.48 % calculated as quercetin.
Keywords : Mistletoes leaves, Dendrophthoe pentandra L. Miq, Total Flavonoid, Quercetin

## I. PENDAHULUAN Latar Belakang
Penggunaan  obat  tradisional  telah lama  digunakan  sejak  zaman  dahulu  hingga sekarang, baik di negara maju maupun yang sedang berkembang. Menurut World Healthy Organization (WHO),  hampir  80  %  umat manusia,  menggantungkan  dirinya  pada tumbuh-tumbuhan sebagai bahan obat dalam memelihara kesehatannya (Choirul, 2003).
Pemakaian  bahan  herbal  alami untuk  menangani  penyakit  dipercaya  dapat membantu  memberikan  efek  kesembuhan dengan  memanfaatkan  metabolit  sekunder yang dihasilkan seperti, flavonoid.
Flavonoid merupakan senyawa polifenol yang mengandung 15 atom karbon dalam  inti  dasarnya  yang  tersusun  dalam konfigurasi  C6-C3-C6,  yaitu  dua  cincin aromatik yang dihubungkan oleh satuan tiga karbon yang dapat atau tak dapat membentuk cincin ketiga (Markham, 1988).
Menurut penelitian  Artanti et  al., (2006) menyatakan bahwa sejumlah tanaman obat  yang  mengandung  flavonoid  telah  di laporkan  memiliki  aktivitas  antioksidan,
antibakteri, antivirus,  antiradang,  antialergi dan antikanker, di antaranya benalu mangga. Benalu merupakan salah satu tumbuhan yang cukup menjanjikan dan masih membutuhkan eksplorasi lebih lanjut. Selain dapat digunakan dalam  sediaan tradisional (jamu), benalu  juga  berpeluang  dijadikan  sebagai fitofarmaka (Artanti et al., 2006).
Benalu  yang  merupakan  tumbuhan parasit, ternyata berpotensi sebagai antikanker.  Salah  satu  senyawa  yang terkandung  dalam  benalu  dan  beraktivitas antikanker  adalah  flavonoid  (Ikawati, et  al., 2008).
Pada penelitian sebelumnya, ekstrak etanolik daun benalu mangga (Dendrophthoe pentandra L.  Miq)  memiliki  aktivitas antiradikal bebas (Fajriah, et al., 2007).
Berdasarkan  uraian  tersebut,  maka perlu dilakukan penelitian yang lebih intensif mengenai  pengujian  kadar  flavonoid  total dari  ekstrak  etanolik  daun  benalu  mangga, sehingga potensi tumbuhan ini sebagai bahan baku  obat  untuk  pencegahan  maupun pengobatan  berbagai  penyakit  dapat  lebih dikembangkan dengan maksimal.
II. METODOLOGI PENELITIAN
1. Pengambilan Sampel
Sampel  daun  benalu  mangga (Dendrophthoe  pentandra L.  Miq)  diambil dari  inangnya,  dikumpulkan  kemudian dipisahkan  daunnya.  Setelah  itu  dilakukan sortasi basah untuk menghilangkan tanah dan pengotor lainnya yang masih menempel pada sampel.

## 2. Pengolahan Sampel
Daun benalu mangga (Dendrophthoe pentandra L. Miq) yang telah diambil dilakukan pengubahan bentuk dengan cara dipotong-potong kecil, selanjutnya dikeringkan dengan cara diangin- anginkan  selama  beberapa  hari  pada  udara terbuka  dengan  tidak  terkena  sinar matahari langsung. Setelah  kering sampel  ditimbang dan    dicatat  berat  keringnya  kemudian diserbukkan  setelah  itu  ditimbang  kembali berat  serbuk,  berat  sampel  serbuk  yang diperoleh yaitu 650 gram.

## 3. Ekstraksi Sampel
Sebanyak  650  gram  serbuk  daun benalu mangga (Dendrophthoe pentandra L. Miq) dimasukkan ke dalam wadah maserasi, ditambahkan  pelarut  etanol  96%  hingga serbuk  simplisia  terendam  dengan  volume etanol  2  liter,  dibiarkan  selama  3-4  hari. Setelah  proses  ekstraksi  selesai  diperoleh ekstrak kental sebanyak 800 mL  untuk hasil saringan pertama  kemudian  hasil remaserasi yaitu  600  mL.  Ekstrak  kental  yang  telah dikumpulkan lalu diuapkan dengan menggunakan alat water bath dan hair drayer hingga  diperoleh  ekstrak  etanolik  kering, hasil  ekstrak  etanolik  kering  yang  diperoleh sebanyak 39,713 gram.

## 4. Uji Kualitatif Flavonoid
Untuk  uji  kualitatif  flavonoid, dilakukan  analisis  KLT.  Ekstrak  etanolik daun  benalu  mangga  dilarutkan  dengan etanol  96%  kemudian  ditotolkan  pada lempeng  KLT.  Lempeng  dimasukkan  dalam chamber yang  berisi  eluen  n-heksan  :  etil asetat  (1  :  9).  Bercak  diamati  dibawah  sinar UV 366 nm.  Kemudian  disemprot  dengan reagen  atau  pereaksi  spesifik.  Pereaksi  yang sering digunakan untuk identifikasi flavonoid sebagai pereaksi semprot dalam KLT adalah AlCl 3 dan  sitroborat  yang  akan  memberikan warna kuning (Mabry et al., 1970).
5. Uji Kuantitatif Flavonoid
a. Pembuatan larutan standar kuersetin Ditimbang  sebanyak  25  mg  baku standar kuersetin dan dilarutkan dalam 25 mL etanol  96%.  Larutan  stok  dipipet  sebayak  1 mL  dan  dicukupkan  volumenya  sampai  10 mL  dengan  etanol 96%  untuk  1000  ppm. Dipipet kembali 5 mL kemudian dicukupkan volumenya  sampai  50  mL  dengan  etanol 96%. Dari larutan standar kuersetin 100 ppm, kemudian dibuat beberapa konsentrasi yaitu 2 ppm, 4 ppm, 6 ppm, 8 ppm, dan 10 ppm. Dari masing-masing  konsentrasi  larutan  standar kuersetin ditambahkan 3 mL etanol 96%, 0,2 mL AlCl 3 , 0,2 mL kalium asetat 1 M, dan 5,6 mL  aquabidestillata.  Setelah  itu  diinkubasi selama 30 menit pada suhu kamar dan diukur absorbansinya  pada  spektrofotometer UV- Visible dengan panjang gelombang 440 nm.

## b. Pembuatan larutan sampel
Kandungan flavonoid total merujuk pada  prosedur  Chang et  al.,  (2002)  dengan beberapa konsentrasi menggunakan kuersetin sebagai  standar.  Ditimbang  ekstrak  etanolik daun  benalu  mangga  sebanyak  25  mg  dan dilarutkan  dalam  25  mL  etanol  96%.  Dari larutan  stok  dipipet  sebayak  1  mL  dan dicukupkan  volumenya  sampai  10  mL dengan etanol 96%. Kemudian dipipet 1 mL dan  ditambahkan  3  mL  etanol  96%,  0,2  mL AlCl 3 , 0,2 mL kalium asetat 1 M, dan 5,6 mL aquabidestillata.  Setelah  itu  diinkubasi selama 30 menit pada suhu kamar dan diukur absorbansinya  pada  spektrofotometer  UV- Visible dengan panjang gelombang 440 nm. Larutan  sampel  dibuat  dalam  tiga  kali replikasi.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Sampel daunbenalu manga 650 gram diekstraksi secara maserasi yaitu menggunakan  pelarut  etanol  sebanyak  2  L, menghasilkan  ekstrak kental  etanol yaitu 39,713  gram  dengan  persen  rendamen sebesar 6,109%.
Identifikasi  golongan  senyawa  kimia menggunakan KLT F 254 dengan fase gerak n- heksan:etil asetat (1:9). Kemudian disemprot pereaksi  spesifik  sitroborat  dan  AlCl 3 , tampak 2 bercak berpendar kuning kehijauan dibawah UV 366 nm dengan  nilai Rf 1 0,9 dan Rf 2 0,6. Hasil skrining fitokimia pada ekstrak etanolik  daun  benalu  mangga,  menunjukkan
bahwa  sampel  positif  mengandung  senyawa flavonoid.
(a) (b) Gambar 1. Profil KLT ekstrak etanolik daun
benalu mangga Keterangan : Fase diam : Silika gel 60 F 254 Fase gerak : n-heksan-etil asetat (1:9) (a) Deteksi UV 366 dan pereaksi semprot AlCl 3 (b) Deteksi  UV 366 dan  pereaksi  semprot Sitroborat
Tabel  1.  Hasil  uji  kualitatif  senyawa flavonoid  ekstrak  etanolik  daun  benalu mangga Sampel AlCl 3 UV 366 nm Sitroborat UV 366 nm Hasil Pengamatan (Flavonoid) Ekstrak Etanolik Daun Benalu Mangga Warna Kuning Warna Kuning + Penentuan  kadar  flavonoid  dengan menggunakan  metode  Chang  pada  tahun 2002  dan  sebagai  pembanding  digunakan baku standar kuersetin. Kemudian dilakukan optimasi panjang gelombang untuk
menentukan  λ maksimum  yang  akan digunakan dalam pengukuran pada spektrofotometri  UV-Vis.  Hasil  pengukuran diperoleh  panjang  gelombang  maksimum yaitu 440 nm.
Hasil  pengukuran  absorbansi  larutan standar  kuersetin  pada  beberapa  konsentrasi (ppm)  yaitu  2,  4,  6,  8  dan  10  diperoleh hubungan  yang  linear  antara  absorbansi dengan  konsentrasi  yaitu  sebesar  0,9983. Dari  hasil  perhitungan,  diperoleh  nilai intersep sebesar  0,0065  dan  nilai slope sebesar  0,0532  sehingga  persamaan  kurva baku  adalah  y  =  0,0065x  +  0,0532. Persamaan  tersebut  digunakan sebagai
pembanding  dalam  analisis  kuantitatif  pada pengukuran  kandungan  senyawa  flavonoid kuersetin  terhadap  ekstrak  etanolik  daun benalu mangga.
Tabel  2.  Hasil  pengukuran  absorbansi standar kuersetin Konsentrasi (µg/mL) Absorbansi( λ ) 440 nm 2,0 0,067 4,0 0,078 6,0 0,092 8,0 0,106 10,0 0,118
Gambar  2.  Kurva  linier  konsentrasi kuersetin pada λ 440 nm
Tabel  3.  Hasil  pengukuran  absorbansi ekstrak etanolik daun benalu manga
Sampel Absorbansi Replikasi I Replikasi II Replikasi III Ekstrak Etanolik Daun  Benalu Mangga 0,0903 0,0946 0,0967 Tabel  4.  Hasil  pengukuran  kadar  flavonoid total ekstrak etanolik daun benalu manga Replikasi Kandungan flavonoid awal (mg/mL) Flavonoid total (g. QE/g. eks) %Kadar flavonoid 1 0,0057 0,0228 2,48 % 2 0,0063 0,0252 3 0,0066 0,0264 1
2
1
2
Flavonoid  total  pada  ekstrak  etanolik daun  benalu  mangga  diperoleh  dengan  cara memasukkan  nilai  absorbansi  pada  kurva standar  kuersetin  sehingga  hasil  dari  besar flavonoid  total  ekstrak  etanolik  daun  benalu mangga yaitu sebesar 2,48%.
Pada penelitian yang dilakukan Fajriah  tahun  2007  menunjukkan  adanya korelasi  linear  antara  flavonoid  dengan aktivitas  antioksidan.  Sehingga  tingginya kadar flavonoid ekstrak etanolik daun benalu mangga, sejalan dengan aktivitas antioksidan yang diperoleh nilai IC 50 yaitu 25,40 µg/mL.

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan,  maka  dapat  disimpulkan bahwa  daun  benalu  mangga  (Dendrophthoe pentandra L.  Miq)  mengandung  senyawa flavonoid  total  sebesar  2,48% dihitung terhadap atau sebagai kuersetin.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Artanti,  N.  M.,  Hanafi,  M.  Y.  2006. Isolation  and  identification  of  active antioxsidant  compound  from  star  fruit mistletoe Dendrophthoe pentandra (Ethanol  extract,  Journal  of  aplied sciences 6(8)  1659-1663)  (online), diakses 10 september 2013.
2. Chang, C. C., Yang, M. H., Wen, H. M., Chern,  J.  C.,  2002.  Estimation  of  total flavonoid  content  in  propolis  by  two complementary  colorimetric  methods. J Food Drug Ana. 10:178-182.
3. Choirul.  2003. Berita  Biologi  :  Jurnal Ilmiah Nasional. Pusat Penelitian Biologi, Vol. 6 No. 4.
4. Departemen Kesehatan Republik
Indonesia.  Direktorat  Pengawasan  Obat Tradisional.  2000. Parameter  standar umum  ekstrak  tumbuhan  obat. Jakarta: Depkes RI.
5. Ditjen POM. 1979. Farmakope indonesia. (Edisi  III).  Jakarta:  Depkes RI.
6. Ditjen  POM.  1986. Sediaan  galenik. Jakarta: Depkes RI.
7. Ditjen  POM.  2000. Parameter  standar umum  ekstrak  tumbuhan  obat.  Jakarta: Depkes RI.
8. Fajriah,  A.  D.,  Andini,  S.,  Artanti,  N. 2007.  Isolasi  senyawa  antioksidan dari ekstrak etil asetat daun benalu
(Dendrophthoe pentandra) yang tumbuh pada  inang  lobi-lobi. Pusat  Penelitian Kimia – Lembaga  Ilmu  Pengetahuan Indonesia Kawasan Pusitek. Serpong.
9. Harborne,  J.B.  1987.  Metode  fitokimia. (Edisi 2). Penerjemah: K. Padmaewinata dan I. Soediro. Bandung: Penerbit ITB.
10. Ikawati,  M.,  Wibowo,  A.E.,  Octa,  N.S. Adelina,  R.,  2008. Pemanfaatan  benalu sebagai  agen  antikanker.  Yogyakarta: Universitas Gadjah Mada.
11. Khopkar.  1990. Konsep dasar kimia analitik. Jakarta: UI Press.
12. Mabry,T.J., Markham, K.R.  & Thomas, M.B. 1970. The systematic identification of flavonoid. Berlin: Spinger-Verlag.
13. Markham, K.H., 1988. Cara
Mengidentifikasi  Flavonoid.  (Edisi  2).
Penerjemah:  K.  Padmaewinata  dan  I.
Soediro. Bandung: Penerbit ITB.