AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL SABUT KELAPA ( Cocos nucifera Linn)

## PADA BERBAGAI TINGKAT KETUAAN
[Antibacterial Activity of Ethanol Extract of Coconut Coir ( Cocos nucifera Linn) at Various Levels of Aging]
Ayu Wulandari 1* , Syaiful Bahri 1 , Mappiratu 1
1) Jurusan Kimia, Fakultas MIPA, Universitas Tadulako, Palu Jl. Soekarno Hatta Km.9, Kampus Bumi Tadulako Tondo Palu, Telp. 0451- 422611
*)Coresponding author: Ayuw4247@gmail.com
Diterima  28 Agustus 2018, Disetujui 30 Oktober 2018

## ABSTRACT
Research  about  the  inhibition  of  ethanol  extract  of  coconut  coir  ( Cocos  nucifera Linn)  against Staphylococcus  aureus  and  Escherichia  coli has  been  done.  The  aims  are  to  determine  the  best ethanol concentration  which produce coconut coir extracts (from diffirent age)  with high antibacterial activity. The used ethanol concentration were 75%, 80%, 85%, 90% and 95% while the antibacterial activity  was  tested  using  the  well  diffusion  method  and  the  observed  parameters  were  diameter  of inhibition  zone.  The  best  inhibition  of  extract  against Staphylococcus  aureus and Escherichia  coli were  22.59  mm  and  27.13  mm,  respectively,  which  were  reached  at  95%  of  ethanol.  The  positive control ,chloramphenicol, inhibited the growth of Staphylococcus aureus and Escherichia coli of 28.66 mm and 34.60 mm,respectively whereas the negative control using ethanol exhibited zero inhibition.
Keywords: Ethanol  extract of coconut  coir , Staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli,  The  Diameter Of Inhibition Zone, Antibacterial Activity.

## ABSTRAK
Telah  dilakukan  penelitian  tentang  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  sabut  kelapa  ( Cocos  nucifera Linn)  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli ,  bertujuan  untuk  menentukan konsentrasi  etanol  terbaik  yang  dapat  menghasilkan  ekstrak  sabut  kelapa  muda,  setengah  tua,  dan sabut  kelapa  tua  dengan  aktivitas  antibakteri  yang  tinggi.  Konsentrasi  etanol  yang  diterapkan  untuk mengekstrak sabut kelapa antara lain 75%, 80%, 85%, 90% dan 95% sedangkan Pengujian aktivitas antibakteri  dilakukan  dengan  menerapkan  metode  sumur  difusi  dan  parameter  yang  diamati  adalah diameter zona hambat. Hasil penelitian menunjukan bahwa daya hambat terbaik ekstrak sabut kelapa terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli adalah  95%  dengan  diameter  zona hambat  masing-masing  22,59  mm  dan  27,13  mm.  Kontrol  positif  yang  digunakan  adalah kloramfenikol  dan  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli dengan  diameter  zona  hambat masing-masing  28,66 mm  dan  34,60  mm, sedangkan  kontrol  negatif menggunakan etanol dan zona hambat keduanya nol.
Kata  kunci : Ekstrak  Etanol  Sabut kelapa, Staphylococcus aureus,  Escherichia  coli, Diameter Zona Hambat, Aktivitas Antibakteri.

## LATAR BELAKANG
Kelapa ( Cocos nucifera Linn) merupakan  komoditas  strategis  dalam perekonomian  Indonesia.  Hal  tersebut tidak  lepas  dari  perannya  yang  sangat besar  sebagai  sumber  pendapatan  dan bahan baku industri.
Perkembangan  sektor  pertanian  di Sulawesi Tengah sangat dominan.
Komoditas  pertanian  yang  diunggulkan adalah  kelapa  dengan  luas  areal  tanam sebesar  461  Ha  menghasilkan  produksi sebanyak  379.144  Ton  pertahun  (BPS, 2013). Menurut sumber data Badan Statistik Provinsi Sulawesi Tengah pada tahun 2013, wilayah  potensi  pengembangan  komoditi kelapa  di  kota  Palu  yang  telah  digunakan untuk  perkebunan  kelapa  seluas  284  Ha dan  menghasilkan  produksi  189.572  ton setara dengan kopra pertahun.
Berdasarkan  data  AISKI  (Asosiasi Industri  Sabut  Kelapa  Indonesia)  pada tahun  2014,  jumlah  sabut  kelapa  pada tahun  tersebut  sebesar  104  juta  ton. Jumlah  limbah  sabut  kelapa  yang  sangat besar  tersebut  dapat  dimanfaatkan  untuk tujuan  yang  lebih  bermanfaat.  Senyawa metabolit  sekunder  yang  terkandung dalam  sabut  kelapa  dapat  dimanfaatkan sebagai  antibakteri.  Golongan  senyawa metabolit sekunder adalah tannin, flavonoid, dan polifenol  (Harborne, 1987). Dalam  ekstrak  air  sabut  kelapa  terdapat beberapa  senyawa,  antara  lain  asam elagat,  asam  galat,  tannin  dan  katekin. Dua  dari  beberapa  senyawa  kandungan sabut kelapat memiliki kemampuan
menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus, yaitu  asam  galat dan  tannin  (polimer  procianidin.  Daya hambat  asam  galat  relatif  lebih  tinggi (konsentrasi  minimum  yang  menghambat 39  µg/ml)  dibandingkan  dengan  tannin sebesar 156 µg/ml. Ekstrak air memberikan daya hambat minimum terhadap Staphylococcus  aureus sebesar 156  µg/ml  yang  sama  dengan  daya hambat minimum tannin, sedangkan fraksi etil  asetat  memberikan  daya  hambat minimum  pada  konsentrasi  78  µg/ml  atau 50  %  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan ekstrak  air.  Dengan  demikian  asam  galat dalam  sabut  kelapa  memiliki  aktivitas antibakteri yang kuat (Silva et al., 2013).
Penggunaan  pelarut  etil  asetat dalam  proses  fraksinasi  ekstrak  air  sabut kelapa  yang  menghasilkan  daya  hambat lebih  kuat  dibandingkan  dengan  fase  air memberikan  petunjuk  bahwa  asam  galat lebih  larut  dalam  pelarut  yang  lebih  non polar.  Berdasarkan  hal  itu,  terdapat dugaan konsentrasi etanol sebagai pengekstrak  akan  berpengaruh  terhadap aktivitas antibakteri ekstrak yang dihasilkan. Hal tersebut disebabkan karena  makin  tinggi  kandungan  air  etanol makin tinggi pula sifat polaritasnya.
Tanin  sebagai  senyawa  kimia  yang bersifat antibakteri telah berhasil diekstrak dari bagian tanaman menggunakan pelarut  etanol.  Suseno et  al. (2014), menemukan rendemen tannin sebesar 22- 48%  dari  kayu  pinus  pada  penggunaan pengekstrak  etanol  90%  dengan  waktu
perendaman 12-60 jam, sedangkan Lestari  (2008),  menemukan  rendemen tannin  52,57%-76,2%  dari  daun  alpukat pada  penggunaan  pengekstrak  etanol 90%  dengan  waktu  ekstraksi  150 –  180 menit.  Dalimunthe  dan Nainggolan  (2006) melaporkan  bahwa  ekstrak  sabut  kelapa dalam fraksi etanol 80% memiliki aktivitas antibakteri  terhadap  bakteri Escherichia coli dan Shigella  dysenteriae dengan rataan  diameter  zona  hambat,  masing- masing 7,2 mm dan 7,0 mm. Hingga saat ini  belum  ditemukan  publikasi  yang melaporkan  aktivitas  antibakteri  ekstrak etanol  dari  sabut  kelapa  muda,  setengah tua  dan  sabut  kelapa  tua  pada  satu  sisi, dan  pada  sisi  lain  terdapat  peluang adanya  perbedaan  kandungan  senyawa dan  aktivitas  antibakteri.  Ekstrak  etanol sabut  kelapa  setengah  tua  memberikan daya  hambat  terhadap  bakteri  gram negatif  yang  lebih  tinggi  dibandingkan bakteri gram positif (Shettigar et al., 2014).
Daya  hambat  tersebut  tentunya  berbeda dengan berbedanya tingkat ketuaan
kelapa dan dengan berbedanya konsentrasi etanol sebagai pengekstrak.

## BAHAN DAN METODE

## Bahan dan Peralatan
Bahan dasar yang digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  sabut  kelapa  muda, sabut  setengah  tua,  sabut  kelapa  tua (jenis  kelapa  hijau),  etanol  96%,  reagen dragendroff,  NaCl  10%,  FeCl 3 ,  H 2 SO 4 Pekat,  HCl  pekat,  CH 3 COOH  glasial, akuades,  Nutrien  Agar  (NA),    Mueller
Hinton  Broth  (MHB),  Kloramfenikol    250 µL/  50  µL,  aluminium  foil,  plastik  wrap, kertas saring whatman no.1, dan tissue.
Peralatan  yang  digunakan  meliputi neraca analitik ( Ohaus Corp. Pine Brook ), blender,  ayakan  60  mesh,  oven,  autoklaf ( Hirayama ), incubator ( POL-EKO Aparatura ), laminar air flow (Esco Class II BSC) , rotary  vakum  evaporator ,  jangka sorong, dan jarum ose.

## Prosedur Penelitian

## Ekstraksi Sabut Kelapa
Ekstraksi sabut kelapa menggunakan
modifikasi metode Dalimunthe dan Nainggolan (2006). Ketiga sampel  sabut  kelapa  kering  ditimbang sebanyak  50  gram  dan  direndam  dalam 1000  mL  pelarut  etanol  sesuai  perlakuan (75%,  80%,  85%,  90%,  95%)  selama  72 jam. Ekstrak disaring menggunakan kertas saring whatman No.1. Filtrat yang diperoleh  diuapkan  menggunakan  rotary vakum evaporator hingga diperoleh cairan kental, dan digunakan pada uji antibakteri.

## Persiapan Bahan Uji Antibakteri
Sebanyak  28  gram    nutrien  agar (NA)  dilarutkan  dalam  1000  ml  akuades, kemudian  disterilkan  ke  dalam  autoklaf pada  suhu  121°C  dengan  tekanan  1  atm selama  15  menit.  Kemudian  didinginkan dan disimpan dalam kulkas untuk selanjutnya  digunakan  dalam  uji  aktivitas antibakteri.

## Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Satu  mata  ose  bakteri  diambil  dari biakan agar miring baru dan
diinokulasikan  ke  dalam  media  cair  steril MHB, kemudian diinkubasi selama 24 jam pada  suhu  37˚C.  Kultur  bakteri  siap digunakan untuk pengujian aktivitas antibakteri.

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Pengujian aktivitas antibakteri menggunakan  metode  sumur  difusi,  pada penelitian  merupakan  modifikasi  dari Darmawati  (2009).  Media  Nutrien  Agar (NA) sebanyak 25 ml dicampur dengan 25 μL  suspensi  bakteri  uji  sesuai  perlakuan ( Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli ),  dihomogenkan  lalu  dituang  dalam cawan  petri  steril  dan  dibiarkan  sampai memadat.  Setelah  itu  dibuat  sumur  yang berdiameter  ±9  mm  menggunakan  alat pelubang.Cawan  pertama  berisi  3  lubang atau sumur (lubang pertama untuk ekstrak sabut  kelapa  muda,  lubang  kedua  untuk ekstrak  sabut  kelapa  setengah  tua  dan lubang  ketiga  untuk  ekstrak  sabut  kelapa tua).  Cawan  kedua  berisi  2  lubang  atau sumur  (lubang  pertama  untuk  control negatif  dan  lubang  kedua  untuk  kontrol positif  berupa  Kloramfenikol  250  µL/50 µL), setiap sumur diisi ekstrak dan kontrol sebanyak  50  µL,  kemudian  diinkubasi selama  24  pada  suhu  37˚C,  selanjutnya diamati  dan  diukur  diameter  zona  hambat dengan jangka sorong.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Ekstrak Etanol Sabut Kelapa
Ekstraksi  sabut  kelapa  dilakukan menggunakan  pelarut  etanol  dengan konsentrasi  sesuai  perlakuan  (75%,  80%,
85%, 90%, 95%). Hasil ekstraksi menunjukkan  ekstrak  yang  dihasilkan berwarna merah dengan kepekatan warna yang  relatif  berbeda  antara  ekstrak  sabut kelapa  tua,  setengah  tua  dan  ekstrak sabut  kelapa  muda.  Ekstrak  sabut  kelapa tua  dan  setengah  tua  lebih  pekat  warna merahnya  dibandingkan  ekstrak  sabut kelapa  muda.  Adanya  perbedaan  warna antara warna pengekstrak (etanol) dengan warna hasil ekstraksi (ekstrak) menunjukkan  adanya  metabolit  sekunder dalam sabut kelapa yang terekstrak dalam etanol.Metabolit sekunder jumlahnya relatif  banyak  dan  dapat  dikelompokkan ke  dalam  beberapa  kelompok,  yakni kelompok flavonoid, fenolik (polifenol), dan tannin.
Untuk mengetahui kelompok senyawa apa  yang  ada  dalam  ekstrak  etanol  sabut kelapa,  dilakukan  uji  fitokimia.  Hasil  yang diperoleh  (Tabel  1)  menunjukkan  dalam ekstrak  etanol  sabut  kelapa  muda, setengah  tua  dan  tua  mengandung kelompok  senyawa  tanin,  fenol  dan flavonoid, tetapi tidak mengandung kelompok senyawa alkaloid dan steroid.
Tabel 1.  Hasil analisis senyawa dalam ekstrak  etanol  sabut  kelapa  tua,
setengah tua, dan muda.
Golongan Senyawa Jenis Sabut Tua Setengah Tua Muda Tanin +++ ++ + Fenol +++ ++ + Flavonoid +++ ++ + Alkaloid - - - Steroid - - - Keterangan: (+): Terdeteksi adanya senyawa (-): Tidak terdeteksi adanya senyawa
Lisan  (2015)  menemukan  adanya tannin  dalam  ekstrak  air  sabut  kelapa muda  dan  kelapa  tua  dengan  kadar  yang lebih  tinggi  pada  sabut  kelapa  muda. Serat  sabut  kelapa  tua  mengandung tannin  4,28  %  dan  serat  sabut  kelapa muda  mengandung  tannin  5,62  %. Menurut  Lisan  (2015)  jenis  tannin  yang ada  pada  serat  sabut  kelapa  muda  dan tua  adalah  jenis  tannin  terkondensasi. Tannin terkondensasi juga ditemukan oleh Silva et  al., (2013),  tannin  terkondensasi dibentuk  dari  flavonoid  jenis  flavon,  yakni katekin.  Struktur  molekul  tannin  dan katekin  disajikan  pada  Gambar  1.  Tannin juga termasuk kelompok polifenol, sehingga keberadaan tannin selalu disertai dengan adanya polifenol, sedangkan keberadaan tannin terkondensasi  selalu  disertai  dengan flavonoid  sebagai  molekul  pembentuk tanin terkondensasi.
Gambar 1. Struktur  Katekin  (A)  dan  Tannin Terkondensasi (B)
Pada  penelitian  ini,  ekstrak  etanol sabut kelapa  tua,  setengah tua  dan  sabut kelapa  muda  tidak  ditemukan  adanya steroid  dan  alkaloid.  Hal  yang  sama ditemukan  oleh  Shettigar et  al., (2014), yang  menyatakan  ekstrak  etanol  serat sabut  kelapa  setengah  tua  mengandung
tannin dan polifenol tetapi tidak mengandung alkaloid, saponin dan steroid. Dalimunthe dan Nainggolan (2006) dan Oktaviani  (2015),  menemukan dalam ekstrak etanol sabut  kelapa mengandung senyawa polifenol dan tannin.

## Aktivitas  Antibakteri  Ekstrat  Etanol Sabut Kelapa
Peneliti sebelumnya melaporkan bahwa  ekstrak  air  serat  sabut  kelapa berperan  sebagai  antibakteri  (Silva et  al.,
2013;  Cyriac et  al., 2013;  Bhandarkar et al., 2015),  demikian  pula  ekstrak  etanol serat  sabut  kelapa  berperan  sebagai antibakteri (Shettiger et al., 2014). Ekstrak etanol/air  (1:1)  serat  sabut  kelapa  relatif lebih  kuat  terhadap  bakteri Pneumonia vulgaris dibandingkan  ekstrak  etanol terhadap bakteri uji Staphylococcus aureus yaitu  12  mm  dan  7  mm  (Shettiger et  al., 2014).  Temuan-temuan  tersebut menjadi  dasar  penggunaan  pengekstrak etanol  dengan  5  tingkatan  konsentrasi, masing-masing  75  %,  80  %,  85  %,  90% dan  95%.  Hasil  yang  diperoleh  (Tabel  2) menunjukkan diameter zona hambat untuk bakteri  uji Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli meningkat  sejalan dengan peningkatan penggunaan konsentrasi  etanol.  Daya  hambat  ekstrak etanol sabut kelapa untuk semua konsentrasi  dan  tingkat  ketuaan  sabut kelapa  relatif  lebih  tinggi  terhadap  bakteri uji Escherichia  coli dibandingkan  dengan bakteri uji Staphylococcus aureus.
A B
Escherichia  coli termasuk  bakteri  gram negatif, sedangkan Staphylococcus aureus termasuk  bakteri  gram  positif (Dalimunthe dan Nainggolan, 2006). Dengan  demikian  ekstrak  etanol  sabut kelapa  relatif  lebih  kuat  daya  hambatnya terhadap bakteri gram negatif dibandingkan dengan bakteri gram positif. Hal  yang  sama  ditemukan  oleh  Shettigar et al., (2014) pada penggunaan bakteri uji Staphylococcus  aureus sebagai  bakteri gram  positif  dengan  zona  hambat  7  mm dan Pneumonia  vulgaris sebagai  bakteri gram negatif dengan zona hambat 12 mm pada konsentrasi ekstrak yang sama.
Tabel 2.  Hasil  Pengukuran  Zona  Hambat Bakteri Gram positif ( Staphylococcus aureus )  dan  Bakteri  Gram  Negatif ( Escherichia  coli )  pada  penggunaan ekstrak  etanol  sabut  kelapa  muda, setengah tua, dan tua pada berbagai konsentrasi.
Menurut  Radji  (2011)  dalam  Rastina et  al,. (2015),  perbedaan  daya  hambat suatu senyawa antibakteri terhadap bakteri  gram  positif  dengan  gram  negatif disebabkan  karena  struktur  dinding  sel kedua  jenis  bakteri  tersebut  berbeda. Bakteri  gram  positif  memiliki  dinding  sel yang  tersusun  atas  lapisan  peptidoglikan yang  tebal  dan  kaku  serta  mengandung senyawa  asam  teikoat.  Lain  halnya dengan bakteri gram negatif yang memiliki dinding  sel  dengan  lapisan  peptidoglikan yang  tipis.  Oleh  karena  itu,  dinding  sel bakteri  gram  negatif  lebih  mudah  rusak oleh  antibiotik  ataupun  bahan  antibakteri lainnya.  Selain  itu,  perbedaan  struktur dinding  sel  inilah  yang  menyebabkan kedua  jenis  bakteri  tersebut  memberikan respons terhadap pewarnaan Gram.
Tabel  2  juga  memperlihatkan  daya hambat ekstrak etanol sabut kelapa muda untuk  semua  konsentrasi  etanol  relatif lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  ekstrak etanol  sabut  kelapa  setengah  tua  dan sabut  kelapa  tua.  Hal  tersebut  dapat dilihat  pada  kurva  daya  hambat  ekstrak terhadap Staphylococcus aureus (Gambar 2) dan terhadap Escherichia coli (Gambar  3).  Dalimunthe  dan  Nainggolan (2006), menyatakan bahwa ekstrak etanol 80%  sabut  kelapa  pada  konsentrasi  500 mg/ml  dapat  menghambat  pertumbuhan Escherichia coli 13,3 mm. Hasil penelitian Silva et al., (2013) menunjukkan konsentrasi  minimum  yang  menghambat ekstrak  air  sabut  kelapa  terhadap S. aureus 150  ug/ml  dan  asam  galat  39
Bakteri Konsentrasi Etanol Diameter Zona Hambat (mm) Sabut Kelapa Muda Setengah Tua Tua S. aureus 75% 15,29 10,23 8,58 80% 17,75 12,73 9,08 85% 18,65 13,28 9,13 90% 20,72 16,18 13,34 95% 22,59 19,71 15,83 E.coli 75% 19,9 17,73 15,2 80% 23,18 19,42 15,24 85% 23,94 19,44 16,67 90% 25,55 21,69 17,71 95% 27,13 23,13 19,35 Kontrol (+) S.aureus 28,66 E.coli 34,6 Kontrol (-) S.aureus 0 E.coli 0
ug/ml,  yang  berarti  daya  hambat  asam galat  relatif  lebih  tinggi  dibandingkan dengan  ekstrak  air  yang  di  dalamnya terdapat  tannin  dan  asam  galat.  Asam galat termasuk senyawa prekursor polifenol  termasuk  tannin  (Silva et  al., 2013).  Pada  sabut  kelapa  muda  diduga mengandung asam galat yang relatif lebih tinggi  dibandingkan  dengan  sabut  kelapa setengah  tua  dan  sabut  kelapa  tua, sehingga  aktivitas  atau  daya  hambatnya relatif tinggi terhadap bakteri uji.
Gambar 2. Hasil  pengukuran  zona  hambat ekstrak sabut kelapa muda, setengah  tua  dan  sabut  kelapa  tua terhadap bakteri uji S. aureus pada berbagai konsentrasi etanol
Gambar 3. Hasil  pengukuran  zona  hambat ekstrak sabut kelapa muda, setengah  tua  dan  sabut  kelapa  tua terhadap  bakteri  uji E.  coli pada berbagai konsentrasi etanol
Menurut  Davis  dan  Stout  (1971), kriteria  kekuatan  daya  antibakteri  sebagai berikut:  diameter  zona  hambat  <5  mm dikategorikan  lemah,  zona  hambat  5-10 mm  dikategorikan  sedang,  zona  hambat 10-20  mm  dikategorikan  kuat  dan  zona hambat  >20  mm  dikategorikan  sangat kuat.  Berdasarkan  kriteria  tersebut,  maka daya  antibakteri  ekstrak  etanol  sabut kelapa muda pada bakteri Staphylococcus aureus dengan konsentrasi 75%, 80% dan 85% termasuk kuat dan konsentrasi 90% , 95% termasuk sangat kuat. Daya antibakteri  ekstrak  etanol  sabut  kelapa setengah tua pada bakteri Staphylococcus aureus dengan  konsentrasi  75%,  80%, 85%,  90%  dan  95%  termasuk  kuat.  Daya antibakteri ekstrak etanol sabut kelapa tua pada bakteri Staphylococcus aureus dengan  konsentrasi  75%,  80%  dan  85% termasuk  sedang  dan  konsentrasi  90% dan  95%  termasuk  kuat.  Daya  antibakteri ekstrak  etanol  sabut  kelapa  muda  pada bakteri Escherichia coli dengan konsentrasi  75%  termasuk  kuat  dan konsentrasi  ekstrak  80%,  85%,  90%  dan 95% termasuk sangat kuat. Daya antibakteri  ekstrak  etanol  sabut  kelapa setengah tua pada bakteri Escherichia coli dengan  konsentrasi  75%,  80%,  85% termasuk  kuat  dan  konsentrasi  90%  dan 95% termasuk sangat kuat. Daya antibakteri ekstrak etanol sabut kelapa tua pada  bakteri Escherichia  coli dengan konsentrasi  75%,  80%,  85%,  90%  dan 95%  termasuk  kuat.  Dengan  demikian, diketahui  bahwa  konsentrasi  ekstrak  95%
0 5 10 15 20 25 70% 80% 90% Dia m e te r Zo na Ham ba t (m m ) Konsentrasi Etanol Sabut Muda Sabut S.Tua Sabut Tua 0 5 10 15 20 25 30 70% 80% 90% Dia m e te r Zo na Ham ba t (m m ) Konsentrasi Etanol Sabut Muda Sabut S.Tua Sabut Tua 0
merupakan  konsentrasi  terbaik  untuk menghambat bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia  coli .Hal  ini disebabkan karena semakin tinggi konsentrasi  etanol  yang  digunakan  untuk mengekstrak, semakin tinggi pula kandungan  senyawa  yang  dihasilkan. Konsentrasi  tersebut  daya  antibakterinya dikategorikan sangat kuat.
Hasil analisis sidik ragam menunjukan perlakuan  variasi  bakteri,  sabut  kelapa dan konsentrasi etanol berpengaruh sangat nyata terhadap aktivitas atau zona hambat antibakteri yang terbentuk.
Analisis  lanjut  dengan  uji  BNJ  taraf  1% menunjukan  bahwa  aktivitas  antibakteri sabut  kelapa  muda  dan  sabut  kelapa setengah  tua  terhadap Staphylococcus aureus berbeda  nyata  pada  konsentrasi 90%  dan  95%,  tetapi  aktivitas  antibakteri sabut kelapa tua terhadap Staphylococcus aureus tidak berbeda nyata pada konsentrasi  75%,  80%,  dan  85.  Uji  BNJ taraf  1%  menunjukan  bahwa  aktivitas antibakteri  sabut  kelapa  muda  dan  sabut kelapa  tua  terhadap Escherichia  coli berbeda nyata pada konsentrasi 75% dan 95%,  tetapi  aktivitas  antibakteri  sabut kelapa setengah tua terhadap Escherichia coli tidak berbeda nyata pada konsentrasi 80%, 85% dan 90%.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan, dapat  disimpulkan  bahwa onsentrasi  etanol  yang  menghasilkan ekstrak  sabut  kelapa  muda,  setengah  tua
dan  sabut  kelapa  tua  yang  memberikan daya  hambat tertinggi terhadap  bakteri  uji bakteri  gram  negatif  ( E.  coli )    dan  gram positif  ( S.  aureus )  adalah  konsentrasi
95%.  Pada  konsentrasi  tersebut  diameter zona  hambat  terhadap S.  aureus ekstrak kelapa  muda,  setengah  tua  dan  tua masing-masing 22,59 mm, 19,72 mm dan 15,83  mm,  sedangkan  untuk E.  coli . Masing-masing 27,13 mm, 25,55 mm dan 19,35  mm.  Aktivitas  antibakteri  ekstrak etanol  sabut  kelapa  yang  diperoleh  yaitu (sabut  kelapa  muda  >  sabut  kelapa setengah tua > sabut kelapa tua).
Ekstrak  etanol  sabut  kelapa  muda, setengah  tua  dan  tua  memiliki  daya hambat  terhadap  bakteri  gram  negatif yang  lebih  tinggi  dibandingkan  bakteri gram  positif.  Ekstrak  etanol  sabut  kelapa muda,  sabut  kelapa  setengah  tua  dan sabut  kelapa  tua  mengandung  tannin, polifenol dan flavonoid.

## DAFTAR PUSTAKA
AISKI. 2014. Kembangkang Industri Sabut kelapa  Ke  Kaltim  dan  Sulteng. ( http://Trimbunnews.com ). Diakses 15 Februari 2017.
Bhandarkar,  S,  A.  Shukla,  dan  A.P.  Jain. 2015.    Herbal  formulation  of  cocos nucifera L. for treatmen of eczematic infections  :  an  in  vitro  study .  Asian
Journal of Pharmacy and
Pharmacology. 1 (1) : 16 - 20
BPS.  2013. Potensi  tanaman  kelapa  di sulawesi  tengah .  Palu:  Data  Badan Pusat Statistik Sulawesi Tengah.
Cyriac, M.B, Pai V, Shantaram M, Jose M. 2013.  Antimicrobial  properties  of coconut. AM&HS, 1(2):126-130.
Dalimunthe dan Nainggolan. 2006.
Pengujian  ekstrak  etanol  sabut kelapa ( Cocos nucifera Linn)
terhadap  bakteri  Escherichia  coli dan  Shigella  dysenteriae . Jurnal komunikasi penelitian, 18 (3).
Darmawati,  S.  2009.  Keanekaragaman genetik  Salmonella  typhi. Jurnal Kesehatan. 2 (1): 28-32.
Harborne,  J.B.  1987. Metode  fitokimia, edisi ke-2 . Bandung: ITB.
Lestari.  2008.  Uji  aktivitas  antibakteri akstrak etanol daun alpukat terhadap  Escherichia  coli  dan Staphylococcus  mutans. Jurnal, 5 (3) 231-239 .
Lisan,  R.F.  2015.  Penentuan  jenis  tanin secara  kualitatif  dan  penetapan kadar  tannin  dari  rerabut  kelapa ( Coccos nucifera L) secara permanganometri. Surabaya: Jurnal Ilmiah Mahasiswa Universitas Surabaya, 4 (1). Oktaviani,  M.  2015.  Kajian  perbedaan konsentrasi  pelarut  etil  asetat terhadap  karakteristik  ekstrak  zat warna  dari  sabut  kelapa  ( Cocos nucifera L).  [ Skripsi ].  Bandung: Artikel  Progam  Studi  Teknologi Pangan, Fakultas Teknik Universitas Pasundan.
Rastina.  Sudarwanto,  M.  Wientarsih,  I. 2015.  Aktivitas  antibakteri  ekstrak etanol  daun  kari  ( Murraya  koenigii ) terhadap Staphylococcus  aureus , Escherichia  coli ,  dan Pseudomonas sp . Jurnal fakultas kedokteran hewan, 9(2): 245-249 .
Shettigar, R, R. Lala, dan N.Y. Nandvikar.
2014.    Evaluation  of  antimicrobial activity  of  coconut  husk  extract. Annals  of  Applied  Bio-Sciences, 1
(4): 23 – 27.
Silva,  D.O,  G.R.  Martins,  A.J.R.  Da  Silva,
D.S.  Alviano,  R.P.  Nascimento,
M.A.C.  Kaplan  dan  C.S.  Alviano.
2013.    Chemical  and  antimicrobial analysis  of  husk  fiber  aqueous extract Cocos  nucifera L. Afr.  J. Biotechnol, 12(18): 2478 – 2483.
Suseno,  N.  Adiarto,  T.  Dalton,  A.  dan Tendean,  P.  2014.  Isolasi  tannin dari kayu pinus. SEMINAR REKAYASA  KIMIA  DAN  PROSES 2014. September  2014  Bandung: ITB.