## Jurnal Pendidikan Biologi Undiksha
p-ISSN : 2599-1450 e-ISSN : 2599-1485 Volume 9 Nomor 1 Tahun 2022 Open Acces : https://ejournal.undiksha.ac.id/index.php/JJPB/index

## Analisis Molekuler dan Morfologi P. amabilis Transgenik dengan Gen Pembungaan PaFT

## Ida Ayu Purnama Bestari*
Jurusan  Biologi  dan  Perikanan  Kelautan,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Universitas  Pendidikan Ganesha, , Singaraja, 81116 *purnama.bestari@undiksha.ac.id

## Abstract
Phalaenopsis  amabilis (L.)  Blume  or  moon  orchid  is  a  type  of  orchid  that  has  high  economic  and aesthetic  value,  but  the  flowering  time  is  relatively  long.  Induction  of  flowering  was  carried  out  by inserting the PaFT gene with the ubiquitin promoter in the plant to obtain transgenic candidate plants (transformants).  Transformant  plants  were  grown  in  New  Phalaenopsis  (NP)  medium  for  40  weeks. Molecular  analysis  on  transformant  plants  obtained P.  amabilis transgenic.  Amplification  with ubiquitin  (forward)  and  T-Nos  (reverse)  and  deg  PaFT  primers  in  transgenic  plants  obtained  DNA sequences  of  1137  bp  and  533  bp,  while  for  non-transformant  plants  with  deg  PaFT  primers,  DNA bands  of  1500  bp  were  obtained.  The  development  of  transgenic  and  non-transformant  plants  were then compared at 10, 20, 30, and 40 weeks of age. The results showed that transgenic plants produced multiple  shoots/multishoots  and  longer  roots  compared  to  the  roots  of  non-transformant  plants. According  to  the  literature  study,  there  are  morphological  differences  in  some  plants  that  carry  the flowering locus T gene compared to nontransforman/ wildtype plants.
Keyword: Phalaenopsis amabilis , multishoot, PaFT gene, transgenic, flowering locus T

## Abstrak
Phalaenopsis  amabilis  (L.)  Blume atau  anggrek  bulan merupakan  jenis  anggrek  yang  memiliki  nilai ekonomis dan estetika tinggi, namun waktu pembungaan relatif lama. Induksi pembungaan dilakukan dengan menginsersikan gen PaFT bersama promoter Ubikuitin sehingga diperoleh tanaman kandidat transgenik  (transforman).  Tanaman  transforman  ditumbuhkan  di  medium New  Phalaenopsis (NP) selama  40  minggu.  Analisis  molekuler  pada  tanaman  transforman  diperoleh P.  amabilis transgenik. Amplifikasi  dengan  primer  Ubi  ( forward )  dan  T-Nos  ( reverse )  dan  deg PaFT pada  tanaman transgenik  diperoleh  sekuens  DNA  1137  bp  dan  533  bp,  sedangkan  untuk  tanaman  nontransforman dengan primer deg PaFT diperoleh pita DNA sepanjang 1500 bp. Perkembangan tanaman transgenik dan non transforman kemudian dibandingkan pada umur 10, 20, 30, dan 40 minggu. Diperoleh hasil tanaman  transgenik  menghasilkan  multitunas/ multishoo t  dan  akar  yang  lebih  panjang  dibandingkan dengan  akar  tanaman wildtype .  Menurut  studi  literatur  terdapat  perbedaan  morfologi  pada  beberapa tanaman yang membawa gen flowering locus T dibandingkan dengan tanaman wildtype/nontransforman
Kata kunci: Phalaenopsis amabilis, multitunas, gen PaFT, transgenik, flowering locus T

## Pendahuluan
Pembungaan  pada  tanaman  dibagi  menjadi  2  tahapan  yaitu  tahap  transisi  ( floral transition )  dan  perkembangan  organ  bunga  ( floral  development ).  Tahap  transisi  merupakan tahap  akhir  masa  vegetatif  menuju  tahap  awal  masa  generatif.  Tahap  inisiasi  diatur  oleh faktor  lingkungan  (fotoperiodesitas  dan  suhu)  dan  faktor  genetik  (gen  pembungaan)  (Xu  et al.,  2012).  Pada  tanaman Phalaenopsis  amabilis penyinaran  hari  pendek  dan  suhu  dingin akan mengaktivasi  kerja gen pada tahap transisi  seperti gen CO, GI, FD, FE, FHA, FT, dan FWA.  Gen  tersebut  akan  menonaktifkan  kerja  floral  repressor  sehingga  terjadi  perubahan meristem  vegetatif menjadi  meristem infloresens (Howell, 1998).). Flowering  Locus T (FT) adalah salah satu gen penting dalam pengaturan pembungaan, gen lainnya adalah Flowering Locus  D (FD)  yang  menjadi  perantara  gen FT dan Terminal  Flower 1  (TFL1).  Ketiga  gen tersebut  memainkan  peran  penting  dalam  transisi  bunga  dan  perkembangan  perbungaan (Cheng et al., 2020)
Pada  tanaman Arabidopsis  thaliana, cahaya  akan  mengaktivasi  kerja  gen  pada  tahap transisi seperti gen CO, FD, dan FT . Gen tersebut akan menonaktifkan kerja floral repressor sehingga  terjadi  perubahan  meristem  vegetatif  menjadi  meristem  infloresens  (Bouche  et  al., 2016).  Pada tanaman padi ditemukan gen Heading date 3 ( Hd3a ) dan Rice Flowering Locus T ( RFLT ) ortholog dari gen FT . Aktivitas gen Hd3a yang diaktivasi oleh OsTrx1, Ehd1 , SIP1 menyebabkan  padi  memasuki  fase  pembungaan  (Tamaki  et  al.,  2007;  Komiya,  Yokoi  & Shimamoto,  2009;  Jiang  et  al.,  2018).  Pada  tanaman Brachypodium, barley  ( Hordeum vulgare )  dan  gandum  ditemukan Flowering  Locus  T (FT)  yang  menjadi  gen  penting  dalam pembungaan  (Lv  B et  al. ,  2014;  Li et  al. ,  2015).  Penelitian  dengan  menggunakan  tanaman legume ditemukan  gen FT yang  menginduksi  pembungaan  yaitu FTa , FTb ,  dan FTc (Książkiewicz et al. , 2016).
Phalaenopsis  amabilis  (L) Blume  atau  anggrek  bulan  merupakan  salah  satu  tanaman anggrek  asli  Indonesia  yang  memiliki  nilai  ekonomis  dan  estetika  tinggi.  Pembungaan menjadi faktor penting dalam budidaya tanaman, sedangkan tanaman ini memerlukan waktu lebih  dari  3  tahun  untuk  berbunga  (Bercu et  al. , 2011).  Percepatan  pembungaan  adalah  hal yang  penting  dilakukan  untuk  meningkatkan  produksi  tanaman  dan  mempersingkat  waktu pembungaan.  Gen  pembungaan  tanaman P.  amabilis tberhasil  diisolasi  oleh  Dr.  Seonghoe Jang  dari Academia  Sinica,  Biotechnology  Center  in  Southern .  Gen PaFT merupakan ortholog dari gen FT yang dimilik P. amabilis.
Gen PaFT disisipkan  pada  T-DNA  dengan  promoter  ubikuitin  dan terminaton  T-Nos. Analisis  molekuler  dan  morfologi  dilakukan  untuk  memperoleh  tanaman  transgenik  yang membawa  gen PaFT dan  membedakan  dengan  tanaman wildtype/ nontransforman.  Analisis molekular  dilakukan  dengan  deteksi  T-DNA Ubipro::PaFT pada  tanaman  transforman sehingga  diperoleh  tanaman  transgenik.  Identifikasi  morfologi  dengan  mengamati  jumlah tunas, jumlah daun, jumlah akar dan panjang akar. Melalui studi literatur kemudian dilakukan perbandingan  fenotip  dengan  beberapa  tanaman  transgenik  yang  membawa gen  Floweing locus T .

## Metode

## a. Alat dan Bahan
Bahan tanaman adalah 45 protokorm hasil transformasi genetik dengan Agrovacterium tumefaciens .  Medium  kultur  adalah New  Phalaenopsis (NP).  Isolasi  DNA  dengan  metode modifikasi  Murray  &  Thompson  (1989)  CTAB  3%.  Deteksi  T-DNA  pada  tanaman transforman dengan PCR (Takara).
Primer  T-DNA PaFT yaitu Ubi (5’-TTGTCGATGCTCACCCTG-3’)  dan Tnos (5’ GATCTAGTAACATAGATGACACCGCG-3’),  amplifikasi  gen PaFT yaitu  deg  PaFT-F1: (5’-TTGTCGATGCTCACCCTG-3’), deg PaFT-R1:  (5’-GATCTAGTAACATAGATGACA CCGCG-3’). Sebagai kontrol digunakan primer Trnl-F untuk DNA.

## b. Prosedur Penelitian

## 1. Subkultur
Subkultur  dilakukan  pada  45  protokorm  transforman P.  amabilis setiap  2-4  minggu pada medium NP0. Protokorm ditanam dengan pencahayaan fotoperiodesitas hari pendek (8 jam  terang  dan  16  jam  gelap)  suhu  25°C.  Analisis  TDNA PaFT dilakukan  pada  saat protokorm tumbuh menjadi tanaman yang lengkap di umur 30 – 40 minggu.

## 2. Amplifikasi T-DNA Ubi::PaFT pada P. amabilis transforman
Genom  tanaman  kandidat  dan  tanaman wildtype diisolasi  dengan  metode  CTAB. Deteksi T-DNA PaFT pada genom P. amabilis dengan metode Semiarti et al. (2011). Bahan 10  ng  DNA  genom  tanaman  transforman,  dNTP  mixture,  ddH2O,  Taq  Polymerase,  taq buffer,  primer  T-DNA  yaitu Ubi  (forward) dan TNos  (reverse) ,  primer  gen PaFT yaitu  deg PaFT-F1 (forward) dandeg  PaFT-R1 (reverse) ,  primer  Trnl-F.  Siklus  PCR  35  siklus; predenaturasi  94ºC  5 menit,  denaturasi  94ºC 1 menit,  annealing  primer T-DNA PaFT  57°C; primer PaFT 54°C; Trnl-F: 58°C, masing-masing selama 30 detik, elongasi 72ºC 1 menit 30 detik, post elongasi 72ºC 5 menit, dan cooling 4°C 10 menit.

## 3. Identifikasi Morfologi
Identifikasi  morfologi  dilakukan  dengan  mengamati  dan  menghitung  jumlah  tunas, jumlah  daun,  panjang  daun,  jumlah  akar,  panjang  akar  dan  perkembangan  tanaman  anaman P. amabilis transgenik dan nontransforman/ wildtype . Analisis morfologi tanaman transgenik pembawa gen pembungaan dilakukan studi literatur  pada beberapa jurnal  untuk  mengetahui karakter morfologi tanaman transgenik.

## Hasil dan Pembahasan

## a.    Analisis Molekuler Tanaman Transgenik P. amabilis
Amplifikasi DNA genom dengan primer Ubi dan T-Nos dihasilkan pita DNA 1137 bp, menunjukkan  T-DNA  terintegrasi  pada  genom  tanaman  transgenik.  Sekuen  DNA  hasil amplifikasi  berdasarkan  konstruksi  plasmid  pGAS102  (Gambar  1a).  Amplifikasi  pGAS102 dan  vektor  dengan  primer  universal  trnl-F  tidak  menghasilkan  sekuen  DNA.  Amplifikasi primer Ubi  dan T-Nos pada pGAS102  menghasilkan  DNA  1137  bp,  pada vektor dihasilkan pita  DNA  300  bp.  Vektor  tidak  mengandung  fragment PaFT hanya  bagian  promoter  (Ubi) dan  terminator  (T-Nos).  Amplifikasi  pGAS102  dengan  deg  PaFT  menghasilkan  pita  DNA 533 bp. Amplifikasi dengan primer trnl-F pada DNA genom tanaman wildtype dan transgenik dihasilkan DNA sepanjang 1200 bp (Gambar 1b).
Primer PGAS102  Vektor NT T1 T2 Trnlf - - + + + Ubi-TNos + + - + + HPT + + - + + Deg PaFT + - + + +
Gambar  1  a) Konstruksi  Plasmid  pGAS102. Gambar  b) (P)  Amplifikasi  plasmid  pGAS102,  (V) vektor,  tanaman  nontransforman  (NT),  tanaman  transgenik  (T1  dan  T2)  masing-masing  berurutan primer  Trnlf,  Ubi  ( forward )  dan  T-Nos  ( reverse ),  Higromisin-F  ( forward )  dan  Higromisin-R ( reverse ), deg PaFT-F1 ( forward ) dan deg PaFT-R1 ( reverse ). Tanda (+) menghasilkan pita DNA, (-) tidak menghasilkan pita DNA.
a
b
Amplifikasi dengan primer Ubi dan T-Nos pada DNA genom tanaman nontransforman/ wildtype tidak  menghasilkan  pita  DNA,  sedangkan  pada  genom P.  amabilis transgenik menghasilkan pita sepanjang 1137 bp. Tanaman positif transgenik apabila amplifikasi dengan primer ubi dan T-nos menghasilkan DNA sepanjang 1137 bp. Amplifikasi dengan primer deg PaFT-F1  dan  deg  PaFT-R1  pada  genom  tanaman wildtype menghasilkan  DNA  sepanjang 1500 bp, sedangkan pada tanaman transgenik  dihasilkan pita DNA sepanjang 533 bp. Hasil amplifikasi  DNA  sepanjang  1500  bp  merupakan  gen PaFT endogen  tanaman P.  amabilis . Perbedaan  panjang  gen PaFT endogen  dan  transgen PaFT karena  gen PaFT endogen memiliki intron berbeda dengan transgen PaFT yang sudah dihilangkan bagian intronnya.

## b.  Kajian  Morfologi  Tanaman  Transgenik  P.  amabilis  dan  Beberapa  Tanaman Transgenik Pembawa Gen Flowering Locus T
Perbandingan rata-rata jumlah tunas dan panjang akar tanaman P. amabilis transgenik dibandingkan  dengan wildtype ,  jumlah  tunas  pada  tanaman  transgenik  lebih  banyak  dan panjang  akar  yang  lebih  panjang  dibandingkan wildtype .  Jumlah  daun  tanaman P.  amabilis transgenik  dan  nontransforman  diperoleh  rata-rata  jumlah  daun P.  amabilis nontransforman lebih banyak dibandingkan P. amabilis transgenik. Hasil pengukuran panjang daun di minggu ke  30  diperoleh  hasil  panjang  daun  nontransforman  lebih  panjang  dibandingkan  daun tanaman  transgenik.  Jumlah  akar  tanaman  transgenik  pada  umur  40  minggu  lebih  banyak dibandingkan tanaman non transforman (Tabel 1).
Tabel 1. Identifikasi Morfologi Tanaman nontransforman dibandingkan transgenik
Rerata Pertumbuhan Tanaman
JT JD JA  PA  JT

## JD
JA  PA  JT
JD JA  PA  JD  PD  JA  PA N T 1 1 0 0 1 2 2 0,8 cm 1 2 2 2 cm 6 5 cm 2 6 cm
T >10 0
0 0 >10 1 0 0 >10 2 2 1 cm 4 2 cm 4 11 cm 10 minggu 20 minggu 30 minggu 40 minggu
Keterangan: JT:  Jumlah  Tunas, JD:  Jumlah  Daun,  JA:  Jumlah  Akar,  PD:  Panjang  Daun,  PA: Panjang Akar
Pengamatan  perkembangan  pada  tanaman wildtype dan  tanaman  transgenik  mulai umur  10  minggu  sampai  umur  40  minggu.  Diperoleh  perbedaan  pertumbuhan  tanaman wildtype dengan  perkembangan singleshoot ,  sedangkan  tanaman  transgenik  dengan perkembangan multishoot (Gambar  2).  Secara  umum  perkembangan  tanaman  transgenik lebih  pendek  dibandingkan  tanaman  transgenik,  sedangkan  untuk  akar  tanaman  transgenik memiliki akar yang lebih panjang dan lebih banyak dibandingkan nontransforman.
Umur 10 Minggu 20 Minggu 30 Minggu 40 Minggu NT T1
Gambar 2 . Perkembangan tanaman nontransforman dan tanaman transgenik umur 10, 20, 30 dan 40 minggu.  Keterangan:  10  minggu,  NT: memiliki  1  tunas/ singleshoot ,  T 1 :  memiliki banyak tunas/ multishoot ; 20 minggu, NT tumbuh menjadi tanaman utuh, T1 : masing-masing bagian apikal tunas multishoot meruncing menunjukkan perkembangan shoot apical meristem ; 30 minggu, NT dan T1 tumbuh  menjadi  tanaman  utuh;  40  minggu,  tanaman wildtype dan  transgenik  menjadi  tanaman utuh.
Perbedaan  morfologi P.  amabilis wildtype dan P.  amabilis transgenik  terletak  pada jumlah  tunas,  jumlah  daun,  jumlah  akar,  panjang  akar,  dan  panjang  daun  didukung  oleh penelitian  yang  berhubungan  dengan  berbagai  tanaman  transgenik  pembawa  gen Flowering Locus T . Tanaman Arabidopsis thaliana transgenik yang disisipi gen GmFT2a dan GmFT5a dari  tanaman Glycin  max memiliki  ukuran  daun  yang  lebih  kecil  dan  jumlah  daun  lebih sedikit  dibandingkan  tanaman wildtype (Kong et al. , 2010).  Padi transgenik  yang disisipkan gen HvFT1 , HvFT2 ,  dan HvFT3 dari  tanaman barley ( Hordeum  vulgare )  memiliki  ukuran tanaman  yang  lebih  pendek,  daun  yang  lebih  kecil  dan  jumlah  daun  lebih  sedikit dibandingkan dengan tanaman wildtype (Kikuchi et al. , 2009).
Penyisipan  gen  pengatur  pembungaan PtAGL24 dari  tanaman Poncirus  trifolia ke dalam Arabidopsis  thaliana selain  menyebabkan  percepatan  pembungaan  juga  mengubah bentuk morfologi tanaman, yaitu munculnya daun pada perbungaan Arabidopsi thaliana (Sun et  al.,  2016).  Penyisipan  gen  FT  dari Citrus  clementina yaitu  gen CcFT3 ke  cangkokan Carrizo citrange ( Citrus sinensis Osb. × Poncirus trifoliata L. Raf.)  menghasilkan tanaman transgenik  yang  memiliki  duri  yang  lebih  kecil  dibandingkan  tanaman wild  type (Soares  et al.,  2020). Penelitian  gen  pembungaan FLOWERING  LOCUS  T-like  gene yaitu MeFT1 gen endogenous dari tanaman cassava. Gen MeFT1 dengan promoter e Cassava vein mosaic virus (CsVMV) sehingga gen MeFT1 mengalami overekspresi. Selain terjadi early flowering juga mengalami  peningkatan  pembentukan  cabang  pada  tanaman  transgenik  cassava  (Odipio  et al., 2020).
Leaf primordium Absorbing hair
Penyisipan  gen Flowering  Locus  T tanaman  kapas  yaitu GhFT 1  ke  dalam  tanaman tembakau,  menghasilkan  tembakau  transgenik  dengan  internodus  yang  lebih  panjang dibandingkan  tanaman  tembakau wildtype ,  selain  itu  tanaman  transgenik  memiliki pertumbuhan  tunas  lateral  yang  lebih  banyak  dibandingkan wildtype (Li  et  al.,  2015).  Pada tanaman  apel  yang  disisipi  gen  pembungaan  dari  tanaman A.  thaliana mengalami pertumbuhan  internodus  perbungaan  yang  lebih  panjang  dibandingkan  dengan  tanaman wildtype (Tanaka  et  al.,  2014). Platycodon  grandiflorus memiliki  gen  pembungaan FlgFT yang  merupakan  ortholog  dari  gen FT  A.  thaliana .  Penyisipan  gen FlgFT pada Platycodon grandiflorus dengan  promoter  35S  menyebabkan  pertumbuhan  dwarfisme  pada  tanaman transgenik tetapi waktu perbungaan yang lebih pendek (Kim et al., 2022).
Gen PISTILLATA (PI) pada tembakau merupakan MADS-box genes dari Phalaenopsis . Tembakau transgenik dengan gen PI memiliki morfologi lebih pendek dibandingkan tanaman wildtype (Guo et  al. ,  2007).  Tanaman  padi  transgenik  yang  disisipi  gen  pembungaan  CO memiliki  karakter  agronomi  lebih  baik  dibandingkan  tanaman  padi  kontrol,  namun  tidak menunjukkan  waktu  pembungaan  lebih  cepat  (Irshanty  et  al.,  2014). Penyisipan  gen menyebabkan  perubahan  fungsional  pada  suatu  tanaman  transgenik  jika  gen  disisipkan  dari tanaman  yang  berbeda  ( heterologous  plants) (Hsiao et  al. ,  2011).    Overekspresi  gen TERMINAL  FLOWER  1  (TFL1) pada Arabidopsis  thaliana selain  mempengaruhi  proses pembungaan  juga  mempengaruhi  arsitektur  tanaman.  Terjadi  peningkatan  jumlah  daun tanaman dan cabang dari perbungaan, sedangkan overekspresi  gen FT menyebabkan jumlah daun dan cabang perbungaan yang lebih sedikit (Liu et al., 2021).

## Penutup
Tanaman transgenik yang mengandung transgen Ubipro::PaFT memiliki jumlah tunah yang  lebih  banyak  dan  akar  yang  lebih  panjang  dibandingkan  dengan  tanaman  non transforman.  Tanaman  transgenik  memiliki  pita  DNA  1137  bp  yang  merupakan  T-DNA pembawa  gen PaFT .  Amplifikasi  dengan  primer  deg  PaFT  menghasilkan  DNA  sepanjang 1500 bp pada tanaman wildtype yang merupakan gen PaFT asli tanaman.

## Ucapan Terima Kasih
Terima  kasih  kepada  Prof.  Dr.  Endang  Semiarti,  MS,  M.Sc  dan  Dr.  Ixora  Sartika Mercuriani, M.Si. yang telah membimbing penelitian ini.

## Daftar Pustaka
Bercu, R., A. Bavaru.,  and L. Broasca. 2011.  Anatomical  Aspects of Phalaenopsis amabilis (l.) Blume. Annals of RSCB, 16 (2).
Bouché, F., D’Aloia, M., Tocquin, P. et  al. Integrating roots into a whole plant network of flowering  time  genes  in Arabidopsis  thaliana .  Sci  Rep  6,  29042  (2016). https://doi.org/10.1038/srep29042
Cheng,  X.,  Guifen,  L.,  Nick,  K.,  Yuhong,  T.,  Jiangqi,  W.  2020.  Genetic  regulation  of flowering time and inflorescence architecture by MtFDa and MtFTa1 in Medicago truncatula. Journal Plant Physiology 185 (1): 161-178.
Guo,  B.,  Hexige,  S.,  Zhang,  T.,  Pittman,  J.  K.,  Chen,  D.,  Ming,  F.  2007.  Cloning  and Characterization of a PI-like MADS-Box Gene in Phalaenopsis Orchid. Journal of Biochemistry and Molecular Biology , 40 : 845-852.
Howell, S. H. 1998. Molecular of Plant Development. Cambridge University Press.
Hsiao, Y-Y., Pan, Z-J., Hsu, C-C., Yang, Y-P., Hsu, C-Y, Chuang, Y-C, Shih, H-H., Chen, W-H., Tsai, W-C., Chen, H-H. 2011. Plant Cell Physiol ,. 52 (9): 1467-1486.
Irshanty,  F.  M.,  Andi,  S.,  Santoso,  T.  J.  2014.  Morphological  and  Molecular  Analysis  and Flowering  Time  of  T2  Generation  Transgenic  Rice  cv.  Nipponbare  Carrying CONSTANS (CO) Gene. Makara J . Sci 18 (1) : 7-12
Jiang, P., Shiliang, W., Han, Z., Hao, L., Fei, Z., Yanhua, S., Zuntao, X., Haiyan, L., Qian, Q.,  Yong,  D.  2018.  SIP1  participates  in  regulation  of  flowering  time  in  rice  by recruiting OsTrx1 to Ehd1. New Phytologist 219 (1) : 422 – 435.
Kikuchi,  R.,  Kawahigashi,  H.,  Ando,  T.,  Toonoka,  T.,  Handa,  H.  2009.  Molecular  and Functional Characterization of PEBP Genes in Barley Reveal the Diversification of Their Roles in Flowering. Plant Physiology , 149 : 1341–1353.
Kim, G.; Rim, Y.; Cho, H.; Hyun, T.K. 2022. Identification and Functional Characterization of  FLOWERING  LOCUS  T  in  Platycodon  grandiflorus. Plants  2022,  11,  325. https://doi.org/10.3390/ plants11030325
Komiya R., Yokoi S. & Shimamoto K. 2009. A gene network forlong-day flowering activates RFT1 encoding a mobile floweringsignal in rice. Development , 136 : 3443–3450.
Kong,  F.,  B.  Liu., Z.  Xia.,  S.  Sato.,  B.  M.  Kim., S.  Watanabe., T.  Yamada., S. Tabata.,  A. Kanazawa., K. Harada., and J. Abe. 2010. Two Coordinately Regulated Homologs of Flowering  Locus T are Involved in The Control  of Photoperiodic Flowering in Soybean. Plant Physiology , 154 ; 1220–1231
Książkiewicz, M., Rychel, S., Nelson, M. N., Wyrwa, K., Naganowska, B., Wolko, B.  2016. Expansion  of  the  phosphatidylethanolamine  binding  protein  family  in  legumes:  a case  study  of Lupinus  angustifolius L. FLOWERING  LOCUS  T homologs, LanFTc1 and LanFTc2. BMC Genomics (2016) 17:820
Li, C., Lin, H., Dubcovsky, J. 2015. Factorial combinations of protein interactions generate a multiplicity  of  florigen  activation  complexes  in  wheat  and  barley. The  Plant Journal 2015 (84) : 70 – 82.
Li C, Zhang Y, Zhang K, Guo D, Cui B, Wang X and Huang X . 2015. Promoting flowering, lateral shoot outgrowth, leaf development, and flower abscission in tobacco plants overexpressing  cotton FLOWERING  LOCUS  T  (FT)-like  gene  GhFT1.  Front. Plant Sci. 6:454. doi: 10.3389/fpls.2015.00454
Liu, L., Lijie, X., Yupeng, J.  &  Hao, Y. 2021.  Regulation  by FLOWERING LOCUS  T and TERMINAL FLOWER 1 in Flowering Time and Plant Architecture. Small Struct , 2, https://doi.org/10.1002/sstr.202000125
Lv  B,  Nitcher  R,  Han  X,  Wang  S,  Ni  F,  et  al.  (2014)  Characterization  of  FLOWERING LOCUS  T1  (FT1)  Gene  in  Brachypodium  and  Wheat.  PLoS  ONE  9(4):  e94171. doi:10.1371/journal.pone.0094171.
Odipio  J,  Getu  B,  Chauhan  RD,  Alicai  T,  Bart  R,  Nusinow  DA,  et  al.  (2020)  Transgenic overexpression  of  endogenous  FLOWERING  LOCUS  T-like  gene  MeFT1 produces  early  flowering  in  cassava.  PLoS  ONE  15(1):  e0227199. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0227199Soares ,
J. M., Kyle, C. W., Wenming, Q., Daniel, S., Lamiaa, M. M., Mahmoud, Hao, W., Patrick, H., Janice, Z., Kawther, A. J., Jude, W. G., Manjul, D. 2020. The vascular targeted citrus FLOWERING  LOCUS  T3 gene  promotes  non-inductive  early  fowering  in transgenic  Carrizo  rootstocks  and  grafted  juvenile  scions.  Nature  research 10:21404 https://doi.org/10.1038/s41598-020-78417-9
Tamaki S., Matsuo S., Wong H.L., Yokoi S. & Shimamoto K. 2007. Hd3a protein is a mobile flowering signal in rice. Science , 316 : 1033–1036.
Tanaka,  N.,  Ayano,  U.,  Narumi, S.,  Naozumi,  M.,  Sadao,  K.,  Sae,  T.,  Yuki,  T-M.,  Masato, W.  2014.  Overexpression  of Arabidopsis  FT  gene in  apple  leads  to  perpetual flowering. Plant Biotechnology , 31 : 11–20.
Semiarti, E., Indrianto, A., Purwantoro, A., Machida, Y., Machida, C. 2011. Agrobacterium- Mediated  Transformation  of  Indonesian  Orchids  for  Micropropagation. In: Genetic Transformation. InTech, Croatia : 215-240. ISBN 978-953-307-364-4 2.
Sun  L-M,  Zhang  J-Z  and  Hu  C-G  (2016)  Characterization  and  Expression  Analysis  of PtAGL24, a SHORT VEGETATIVE PHASE/AGAMOUS-LIKE 24 (SVP/AGL24)-Type MADS-Box Gene from Trifoliate Orange (Poncirus trifoliata L. Raf.). Front. Plant Sci, 7 : 823. doi: 10.3389/fpls.2016.00823
Xu, F., Xiaofeng, R., Xiaohua, H., Shuiyuan, C. 2012. Recent Advances of Flowering Locus T  Gene  in  Higher  Plants. Int.  J.  Mol.  Sci . 2012  (13 ):  3773-378, doi:10.3390/ijms13033773