Volume 11, Nomor 1, Tahun 2022, Halaman 51-61
Submitted: 16 Juli 2021
Online di : http://ejournal3.undip.ac.id/index.php/jnc/ Accepted: 25 Januari 2021
PENGARUH PEMBERIAN SARI EDAMAME (Glycine max (L.) Merrill) TERHADAP KADAR ASAM URAT TIKUS WISTAR JANTAN DIABETES
Zahra Aulia Mardiana, Martha Ardiaria, Fitriyono Ayustaningwarno, Ayu Rahadiyanti*
Departemen Ilmu Gizi, Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Sudarto SH, Tembalang, Semarang, Jawa Tengah 50275, Indonesia
* Korespondensi : E-mail: ayurahadiyanti@live.undip.co.id

## ABSTRACT
Background: Several studies have shown an increased risk of hyperuricemia in patients with type 2 diabetes mellitus. The factor of hyperuricemia is reduced uric acid excretion and increased uric acid production.  Uric acid production is affected by antioxidant and purine intake. Edamame contains high isoflavones and very low purines potentially reducing risk of hyperuricemia.
Objective: The aim of this study was to find out the effect of edamame milk on uric acid levels in diabetic Wistar rats. Methods: This study  was an  experimental study  with pre-post  test control design. The  samples  are  twenty  four  male Wistar  rats were  divided into 4 groups  of 6 each [K(-); K(+); P1; P2]. The  K(+), P1, and P2 groups were  induced Streptozotocin 45 mg/kg BW and Nicotinamide 110 mg/kgBW. The P1 and P2 groups were administrated edamame milk at dosage 1.8 mL/day and 3.6 mL/day for 28 days. Blood samples were taken through the retro-orbital plexus. Uric acid levels  were  tested  using  the  FS  TBHBA  method.  The  differences  in  uric  acid  levels  in  the  pre-post  intervention  had analyzed using paired t-test. The differences between groups had analyzed using the Kruskal-Wallis test with a Mann- Whitney follow-up test.
Results: There was a significant difference of uric acid level (p <0.05) after administration of edamame milk for 28 days. The P1 and P2 groups showed significantly decreased uric acid levels to 4.62+0.28 mg/dL and 5.43+0.15 mg/dL. The P1 and P2 groups showed significant different in uric acid levels against the K (-) and K (+) groups.
Conclusion: Edamame milk intervention at dosage 1.8 mL/day and 3.6 mL/day effectively reduced uric acid levels in diabetic Wistar rats.
Keywords: Uric acid; Type 2 diabetes mellitus; Isoflavones; Edamame milk

## ABSTRAK
Latar  Belakang: Beberapa  penelitian  menunjukkan  terdapat  peningkatan  risiko  hiperurisemia  pada  pasien  diabetes melitus tipe 2. Faktor yang mempengaruhi hiperurismeia yaitu penurunan ekskresi asam urat dan peningkatan produksi asam urat. Asupan antioksidan dan purin merupakan faktor yang mempengaruhi produksi asam urat. Edamame berpotensi menurunkan risiko hiperurisemia karena mengandung isoflavon tinggi dan purin yang sangat rendah Tujuan: Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian sari edamame terhadap kadar asam urat tikus wistar diabetes.
Metode: Penelitian ini merupakan penelitian true experimental dengan pre-post test control design.  Sampel penelitian ini adalah 24 ekor tikus wistar jantan yang dibagi dalam 4 kelompok dan masing-masing terdiri atas 6 ekor tikus [K (-); K (+); P1; P2]. Kelompok K (+), P1, dan P2 diinduksi Streptozotocin 45 mg/kgBB dan Nicotinamide 110 mg/kgBB . Kelompok  P1  dan  P2  diberikan  intervensi  sari  edamame  dengan  dosis  1,8  ml/hari  dan  3,6  ml/hari  selama  28  hari. Pengambilan sampel darah melalui plexus retroorbitalis. Pemeriksaan kadar asam urat menggunakan metode FS TBHBA. Perbedaan  kadar  asam  urat  pre-post  intervensi  dianalisis  menggunakan  uji  paired  t  test.  Perbedaan  antar  kelompok dianalisis menggunakan uji Kruskal-Wallis dengan uji lanjut Mann-Whitney.
Hasil: Pemberian  sari  edamame  selama  28  hari  menunjukkan  perbedaan  kadar  asam  urat  yang  signifikan  (p<0,05). Kelompok P1 dan P2 mengalami penurunan kadar asam urat signifikan sebesar 4,62+0,28 mg/dl dan 5,43+0,15 mg/dl. Kelompok P1 dan P2 memiliki perbedaan kadar asam urat yang signifikan dibandingkan kelompok K(-) dan K(+). Simpulan: Pemberian sari edamame dosis 1,8 ml/hari dan 3,6 ml/hari secara efektif menurunkan kadar asam urat tikus wistar diabetes.
Kata Kunci : Asam urat, Diabetes melitus tipe 2, Isoflavon, Sari edamame

## PENDAHULUAN
Diabetes  melitus  tipe  2  (DM  tipe  2) adalah suatu penyakit gangguan metabolik yang disebabkan  oleh  resistensi  insulin  yang menyebabkan  pasien  mengalami  peningkatan kadar  glukosa  darah  (hiperglikemia). 1 Data Riskesdas 2018 menunjukkan prevalensi penderita  diabetes  melitus  tipe  2  di  Indonesia berdasarkan diagnosis dokter pada usia >15 tahun sebesar 2% sedangkan prevalensi penyakit sendi di  Indonesia  pada  tahun  2018  sebesar  7,3%. 2 Suatu  penelitian  di  China  pada  20.207  sampel pasien  diabetes  menunjukkan  bahwa  sebanyak 20,5% pasien mengalami hiperurisemia. 3 Hiperurisemia  pada  pasien  DM  tipe  2 berkaitan  dengan  kondisi  hiperinsulinemia sehingga  reabsorbsi  asam  urat  di  tubulus proksimat ginjal meningkat. 4,5 Resistensi insulin, hipoksia,  dan  kematian  sel  akan  memicu perubahan  xantin  pada  fase  reoksidasi  sehingga menghasilkan  asam  urat  dan  peroksida. 4,6,7 Peningkatan  kadar  asam  urat  disebabkan  oleh produksi asam urat yang berlebih atau penurunan ekskresi  asam  urat  oleh ginjal. 8 Asupan  zat  gizi merupakan salah satu faktor yang mempengaruhi produksi  asam  urat.  Asupan  tinggi  purin  dan fruktosa  akan  meningkatkan  sintesis  asam  urat oleh  tubuh  sedangkan  asupan  antioksidan  akan mengurangi hiperurisemia dan gout. 7 Pemberian diet  rendah  purin  (<150  mg/hari)  pada  pasien hiperurisemia  selama  6  minggu  secara  efektif menurunkan rerata kadar sama urat sebesar 1,73 mg/dl. 9 Edamame  atau  kedelai  sayur (Glycine max  (L)  Merrill) merupakan  salah  satu  jenis kedelai putih dan dikenal sebagai healthy food . 10 Edamame memiliki efek antihiperglikemik yang dapat memperbaiki sensitivitas insulin dan secara tidak  langsung  menghambat  peningkatan  kadar asam urat. 7 Hal ini dikaitan kandungan isoflavon edamame  yang tinggi yaitu  49 mg/80  gram  dan mengandung purin yang sangat rendah yaitu 47,9 mg/100 gram. 10,11,12 Edamame diketahui memiliki kandungan  isoflavon  yang  lebih  tinggi dibandingkan kedelai kuning (24 mg/80 gram). 13 Isoflavon  merupakan  jenis  antioksidan  dari golongan  flavonoid  yang  mampu  memperbaiki sensitivitas insulin dan menghambat sintesis asam urat  dalam  tubuh  melalui  mekanisme  inhibitor xantin  oksidase . Isoflavon  sebagai  inhibitor xantin oksidase diperlukan untuk mengkompensasi  radikal  bebas  yang  berlebih, yang  secara  tidak  langsung  akan  menghambat sintesis asam urat. 6,14,11
Sari edamame merupakan produk olahan edamame yang diadopsi dari produk sari kedelai. Pengolahan  edamame  menjadi  sari  edamame dapat meningkatkan daya cerna protein dan lebih mudah  diterima  oleh  masyarakat.  Hasil  studi literatur menunjukkan hasil yang tidak konsisten terkait  efek  konsumsi  produk  kedelai  terhadap kadar  asam  urat.  Penelitian  pada  pria  sehat  di Cina  menunjukkan  dampak  akut  konsumsi kedelai, susu kedelai, dan kedelai bubuk terhadap peningkatan asam  urat. 15 Penelitian  lain  di  Cina pada  wanita post-menopause dengan  kondisi prehipertensi atau prediabetes yang diberi produk kedelai dan isoflavon setiap hari dalam jangka 6 bulan  mampu  menurunkan  kadar  asam  urat. 16 Penelitian  terkait  suplementasi  daidzein-salah satu  jenis  isoflavon,  menunjukkan  bahwa suplementasi  daidzein  pada  populasi  dewasa hiperkolesterolemia  di  China  dengan  dosis  40 mg/hari  dan  80  mg/hari  mampu  menurunkan kadar  asam  urat  rerata  sebesar  0,39  mg/dl  dan 0,49  mg/dl. 17 Penelitian  lain  baru  memaparkan potensi susu edamame sebagai pangan fungsional antihiperkolesterol  yang  mampu  menurunkan total  kolesterol  dan  kadar  LDL  serta meningkatkan  kadar  HDL  pada  tikus  wistar jantan  putih (Rattus  norvegicus) yang  diberi makanan  diet  tinggi  lemak  (MDTL)  selama  35 hari intervensi. 18
Penelitian  ini  dilakukan  kepada  tikus putih  galur  wistar  ( Rattus  norvegicus) sebagai subjek  penelitian.  Tikus  wistar  yang  dipilih adalah  tikus  wistar  jantan  disebabkan  ketiadaan pengaruh hormon estrogen yang berperan dalam regulasi asam urat. 19 Tikus dikondisikan DM tipe 2  dengan  induksi Streptozotocin-Nicotinamide (STZ-NA) . Mekanisme STZ meningkatkan kadar glukosa  darah  meliputi  peningkatan  aktivitas xantin  oksidase  yang  bertanggungjawab  dalam sintesis  asam  urat  dalam  tubuh  sehingga meningkatkan produksi asam urat. 20 Berdasarkan paparan tersebut, edamame memiliki  potensi  dalam  menurunkan  risiko peningkatan kadar asam urat pada pasien DM tipe 2. Penelitian terkait efek pemberian sari edamame terhadap kadar asam urat tikus DM tipe 2 belum pernah  dilakukan  sebelumnya.  Oleh  karena  itu, peneliti  tertarik  untuk  meneliti  pengaruh  sari edamame  terhadap  kadar  asam  urat tikus  wistar jantan diabetes.

## METODE
Penelitian  yang  dilakukan  merupakan penelitian True Experimental
dengan
Randomized Pre  Post  Test  Group  Design.
Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan  September- Oktober  2020  di  Laboratorium  Gizi  Universitas Airlangga untuk pengujian kandungan isoflavon serta Laboratotium Pusat Studi Pangan dan Gizi Universitas Gadjah Mada untuk perlakuan hewan coba.  Penelitian  ini  telah  mendapatkan persetujuan  dari  Komisi  Etik  Penelitian Kesehatan  RSI  Sultan  Agung  dengan  terbitnya Ethical Clearence No. 74/EC/KEPK/2020. Sampel  penelitian ini  adalah  tikus  putih jantan  galur  Wistar  dengan  berat  150-200  gram dan  berusia  8  minggu.  Jumlah  sampel  yang digunakan dalam penelitian adalah 24 ekor tikus. Sampel  penelitian  terbagi  secara  acak  dalam  4 kelompok  sampel  penelitian  yang  terdiri  atas  6 ekor tikus tiap kelompok yaitu kelompok kontrol normal  [(K(-)],  kelompok kontrol  tikus  diabetes [K(+)],  kelompok  tikus  diabetes  dengan  sari edamame 1,8 mL/hari (P1), dan kelompok tikus diabetes dengan sari edamame 3,6 mL/hari (P2).
Seluruh  kelompok  sampel  diberikan pakan  standar AD  II  Comfeed dan  air  minum aquades.  Kelompok  tikus  K(+),  P1,  dan  P2 diinduksi Streptozotocin (STZ) 45 mg/kgBB dan Nicotinamide (NA)  110  mg/kgBB  secara intraperitoneal. Kelompok tikus P1 dan P2 diberi perlakuan  sari  edamame  dengan  perbandingan 1:1  dengan  dosis  1,8  ml/200grBB  dan  3,6 ml/200grBB.  Penentuan  dosis    berdasarkan konsumsi harian rata-rata yaitu ½ gelas (100 ml) dan 1 gelas (200 ml) lalu dihitung menggunakan konversi  Laurence  and  Bacharach  sehingga diperoleh  dosis  1,8  ml/200grBB/hari  dan  3,6 ml/200grBB/hari. 21 Seluruh sampel tikus diadaptasikan  selama  7  hari  lalu  dibagi  secara acak  dalam  4  kelompok.  Induksi  STZ-NA dilakukan  pada  hari  ke-8  selama  3  hari,  dan perlakuan sari edamame dilakukan pada hari ke- 11 selama 28 hari. Setiap 1x/minggu dilakukan pengukuran berat badan seluruh sample tikus
Gambar 1. Alur kerja penelitian
Kelompok P1 sari edamame Kelompok K+ pakan standar dan Kelompok K- pakan standar dan 6 ekor kelompok kontrol Tikus jantan galur wistar 24 ekor Aktimalisasi selama 7 hari Simple random sampling
6 ekor kelompok kontrol 6 ekor kelompok perlakuan 1 6 ekor kelompok perlakuan 2 Induksi STZ 45 mg/kgBB + NA 110 mg/kgBB. Setelah diinduksi diberi pakan standar dan minum ad libitum selama 3 hari Pengambilan darah I
Pemeriksaan kadar glukosa darah puasa dan kadar asam urat sebelum perlakuan
Kelompok P2 sari edamame Pengambilan darah II Pemeriksaan kadar asam urat sesudah perlakuan Hari 1 Hari 8
Hari 11
Hari 39
Sari  edamame  diolah  menggunakan mesin soybean  milk  maker merk  Sayodachi dengan perbandingan edamame dan air yaitu 1:1. Edamame  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah edamame segar merk Deluxe yang berasal dari  Mitratani  Jember,  Jawa  Timur.    Proses pembuatan  dimulai  dengan  memisahkan  biji edamame dari kulit bagian luar lalu mencuci biji edamame  serta  memisahkan  kulit  ari  dari  biji edamame. Biji edamame ditimbang sebanyak 100 gram  dan  dimasukan  ke  mesin soybean  milk maker. Air sebanyak 100 ml dimasukan ke mesin soybean  milk  maker lalu  menekan  tombol on untuk memulai proses pembuatan sari edamame. Mesin soybean  milk  maker bekerja  secara otomatis  untuk  menghaluskan,  menyaring,  dan memanaskan  sehingga  diperoleh  sari  edamame yang  siap  untuk  dikonsumsi.  Sari  edamame dipanaskan  mrnggunakan  mesin soybean  milk maker pada  suhu  80 0 C selama  15 menit.  Proses pemanasan sehingga mampu membunuh sebagian mikroba dan meminimalkan penurunan kandungan  antioksidan  seperti  isoflavon  dalam sari edamame.
Uji  kandungan  zat  gizi  sari  edamame meliputi  uji  kandungan  isoflavon  menggunakan
metode High Performance Liquid
Chromatography (HPLC).  HPLC  dilakukan dengan pengkondisian instrumen HPLC meliputi panjang  kolom  15  cm,  fase  gerak  campuran methanol  dan  asam  asetat  (0,02%  dalam  air aquabidest), volume injeksi 20 µl, detektor sinar UV pada panjang gelombang 265 nm, suhu oven. suhu  kamar.  Sampel  sari  edamame  diambil sebanyak 0,1 mg dan dimasukan ke dalam tabung reaksi  dengan  penambahan  etanol  sebanyak  10 ml.  Sampel  disentrifuge  lalu  diambil  20  µL menggunakan  alat  injeksi.  Selanjutnya  sampel diinjeksikan ke dalam HPLC setelah pengkondisian HPLC selesai. Analisis dilakukan dengan  membandingkan  waktu  retensi  daidzein dan  genistein  standar  dengan  waktu  retensi  dari masing-masing sampel. 22 Sedangkan, kandungan purin  dalam  sari  edamame  diperoleh  melalui pendekatasn  estimasi  karena  keterbatasan penelitian.
Pengambilan darah pada kelompok tikus dilakukan  sebanyak  2x  yaitu  pada  sebelum  dan sesudah  perlakuan  sari  edamame.  Pengambilan darah pertama yaitu untuk melihat kadar glukosa darah  puasa  dan  kadar  asam  urat  setelah  3  hari induksi  STZ-NA.  Pengukuran  kadar  asam  urat pada sebelum perlakuan bertujuan untuk melihat kadar asam urat setelah pemberian induksi STZ- NA menggunakan reagen uric acid FS TBHBA.
Pengambilan  darah  kedua  yaitu  untuk  melihat kadar asam urat setelah pemberian sari edamame selama  28  hari.  Tikus  dipuasakan  selama  8-10 jam  sebelum  dilakukan  pengambilan  darah. Sampel darah diambil melalui plexus retroorbitalis sebanyak  +  1%  dari  berat  badan tikus.  Sampel  darah  sebanyak  20 𝜇𝑙 dicampur reagen  uric  acid FS  TBHBA  sebanyak  1000 𝜇𝑙 lalu  dihomogenkan.  Sampel  darah  diinkubasi pada  suhu  37 0 C  selama  5  menit  kemudian disentrifus dengan kecepatan 3000 rpm selama 15 menit. Sampel dibaca absorbansinya menggunakan alat spektrofotometri merk Optima SP300 pada panjang gelombang 546 nm. 23 Analisis  data  menggunakan  program komputer dengan batas kemaknaan p<0,05. Data yang  sudah  diperoleh  lalu  dilakukan  uji normalitas menggunakan uji Shapiro-Wilk karena n<50.  Perbedaan kadar  asam  urat  pada  sebelum dan  sesudah  perlakuan  dianalisis  menggunakan uji Paired T test karena data berdistribusi normal. Perbedaan  pengaruh  antar  kelompok  perlakuan dianalisis  menggunakan  uji Kruskal  Wallis dan dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney karena data tidak bersifat homogen. 24

## HASIL Kandungan Zat Gizi Sari Edamame
Analisis  fitokimia  dalam  diperoleh  dari Laboratorium  Gizi  Universitas  Airlangga.  Uji fitokimia dilakukan untuk mengetahui kandungan isoflavon  dalam  sari  edamame  dengan perbandingan  1:1.  Kandungan  isoflavon  dalam sari edamame dengan perbandingan 1:1 memiliki kandungan  isoflavon  sebesar  87,35 𝜇 g/ml. Kandungan  total  purin  dalam  sari  edamame sebesar  35,5  mg/100  ml  dan  tergolong  sangat rendah. 12

## Karakteristik Subjek
Berat  badan  tikus  pada  pada  Tabel  1 menunjukkan  bahwa  berat  badan  tikus  pada sebelum  perlakuan  memenuhi  kriteria  inklusi penelitian yaitu 150-200 gram. Hasil uji statistik menujukan  berat  badan  tikus  antar  kelompok pada  sebelum  perlakuan  tidak  memiliki perbedaan dan bersifat homogen. Kelompok K(- ),  P1,  dan  P2  setelah  perlakuan  sari  edamame selama  28  hari  menunjukkan  peningkatan  berat badan yang signifikan (p<0,000) . Kelompok P2 mengalami kenaikan berat badan tertinggi sebesar 28,8+0,75  gram.  Kelompok  K(+)  mengalami penurunan berat badan yang signifikan ( p<0,000) dengan penurunan berat badan sebesar 19,8+2,32 gram.
Tabel 1. Berat Badan Tikus pada Sebelum dan Sesudah Perlakuan
Kelompok Berat Badan  (gram) p ∆ BB Sebelum perlakuan Sesudah perlakuan K(-) 188,8 + 3,67 a 217,2 + 3,82 b <0,001 28,3 + 0,82 K(+) 185,3 + 3,67 a 165,5 + 3,33 c <0,001 -19,8 + 2,32 P1 185,5 + 4,23 a 206,2 + 4,58 d <0,001 20,7 + 0,82 P2 185,2 + 2,93 a 214 + 3,03 b <0,001 28,8 + 0,75 Keterangan:
K(-) = kontrol normal, K(+) = kontrol tikus diabetes, P1 = tikus diabetes dengan sari edamame 1,8 mL/hari, P2 = tikus diabetes dengan sari edamame 3,6 mL/hari. Nilai disajikan dalam bentuk Mean+SD. Nilai p adalah hasil uji paired  t  test sebelum  dan  sesudah  perlakuan.  Huruf superscript yang  berbeda  menunjukkan  perbedaan signifikan (p<0,05) berdasarkan uji one way Anova dan uji lanjut Post Hoc LSD .
Hasil  uji one  way  Anova menunjukkan bahwa terdapat perbedaan rerata berat badan antar kelompok  sesudah  perlakuan  yang  signifikan. Hasil  uji  lanjutan Post  Hoc  LSD menunjukkan bahwa terdapat perbedaan berat badan signifikan antara  kelompok  K(-),  K(+),dan  P1.  Kelompok K(-) dan P2 secara statistik menujukan tidak ada perbedaan  berat  badan . Perubahan  berat  badan (∆ BB) selama perlakuan menunjukkan perbedaan yang signifikan.

## Kadar Asam Urat
Kadar  asam  urat  rerata  antar  kelompok sebelum  perlakuan  sari  edamame  pada  Tabel  2 menunjukkan terdapat perbedaan yang signifikan. Kelompok  K(-)  sebelum  dan  sesudah  perlakuan memiliki kadar asam urat yang tergolong normal. Kelompok K(+), P1, dan P2 yang diinduksi STZ- NA menunjukkan adanya perbedaan kadar asam urat yang signifikan dibandingkan kelompok K (- ),    namun  hanya  kelompok  K(+)  yang  dapat dikategorikan  sebagai  hiperurisemia  (>7,5 mg/dl). 25 Tabel 2. Kadar Asam Urat Sebelum dan Sesudah Perlakuan Kelompok Kadar Asam Urat (mg/dL) p ∆ AU Sebelum perlakuan Sesudah perlakuan K(-) 1,58 + 0,13 a 1,68 + 0,12 c 0,002 0,11 + 0,05 K(+) 7,52 + 0,23 b 7,80 + 0,12 d 0,003 0,28 + 0,13 P1 7,49 + 0,22 b 2,88 + 0,30 e <0,001 -4,62 + 0,28 P2 7,49 + 0,18 b 2,06 + 0,09 e <0,001 -5,43 + 0,15
Keterangan:
K(-) = kontrol normal, K(+) = kontrol tikus diabetes, P1 = tikus diabetes dengan sari edamame 1,8 mL/hari, P2 = tikus diabetes dengan sari edamame 3,6 mL/hari. Nilai disajikan dalam bentuk Mean + SD. Nilai p adalah hasil uji paired t test sebelum  dan  sesudah  perlakuan.  Huruf superscript yang  berbeda  menunjukkan  perbedaan  signifikan  (p<0,05) berdasarkan uji Kruskal-Wallis dan uji lanjut Mann-Whitney.
Kadar  asam  urat  rerata  antar  kelompok sesudah perlakuan sari edamame selama 28 hari menunjukkan  perbedaan  yang  signifikan. Kelompok K(-) dan K(+) mengalami peningkatan kadar  asam  urat.  Hasil  uji paired  t  test menunjukkan  bahwa  terjadi  penurunan  kadar asam urat yang signifikan pada kelompok P1 dan P2 (p<0,000) .  Kelompok  P2  mengalami penurunan  kadar  asam  urat  tertinggi  sebesar 5,43+0,15 mg/dl.
Hasil  uji Kruskal-Wallis menunjukkan bahwa terdapat perbedaan kadar asam urat yang signifikan  antar  kelompok.  Hasil  uji  lanjutan Mann-Whitney menunjukkan terdapat perbedaan kadar asam urat yang signifikan pada kelompok P1  dan  P2  sesudah  perlakuan  dibandingkan kelompok K(-) dan K(+). Perubahan kadar asam
urat (∆ AU)  selama  perlakuan  menunjukkan perbedaan yang signifikan .

## PEMBAHASAN Kandungan Zat Gizi Sari Edamame
Analisis  kandungan  zat  gizi  pada  sari edamame  sudah  pernah  dilakukan  sebelumnya. Penelitian sebelumnya menunjukkan formula sari edamame dengan perbandingan edamame dan air 1:6 memiliki kadar isoflavon 41,94 µg/g. 10 Hasil analisis zat gizi menunjukkan bahwa kandungan isoflavon  dalam  sari  edamame  dengan perbandingan 1:1 yaitu 87,35 𝜇 g/ml. Kandungan isoflavon  dalam  sari  edamame  1:1  lebih  tinggi dibandingkan  penelitian  sebelumnya  karena perbedaan  perbandingan  air  yang  digunakan. Edamame  diketahui  memiliki  kandungan  purin
yang  sangat  rendah  yaitu  35,5  mg/100  mL. 12 Kandungan  purin  dalam  sari  edamame  yang sangat  rendah  berisiko  rendah  terhadap peningkatan kadar asam urat. 26 Kandungan isoflavon, fenol, dan flavonoid  dalam  sari  edamame  memiliki mekanisne  antioksidan  yang  serupa  yaitu inhibitor xantin oksidase yang saling berkontribusi dalam menurunkan produksi asam urat. 27 Senyawa isoflavon merupakan antioksidan golongan  flavonoid  yang  memiliki  sifat  sensitif terhadap  pemanasan.  Proses  pemanasan  dalam pembuatan  sari  edamame  bertujuan  untuk menghilangkan  sebagian  mikroba  patogen  dan meningkatkan  daya  simpan  sari  edamame. 10 Proses pemanasan diketahui dapat mempengaruhi kandungan  isoflavon  tergantung  pada  suhu  dan waktu yang digunakan dalam proses pengolahan sari  edamame. 28 Suhu  pemanasan  sangat mempengaruhi  kandungan  zat  fitokimia  dalam sari  edamame  terutama  senyawa  isoflavon, fenolik  dan  flavonoid. 10,29 Peningkatan  suhu pemanasan  akan  meningkatkan  kandungan senyawa fenolik karena terjadi degradasi senyawa polifenol  menjadi  senyawa  fenol.  Apabila  suhu pemanasan melebihi 100 0 C akan terjadi degradasi fenol  dan  isoflavon  sehingga  menurunkan aktivitas  antioksidan. 10 Proses  pemanasan berkontribusi  meningkatkan  kualitas  produk melalui  inaktivasi  inhibitor  tripsin  sehingga meningkatkan  daya  cerna  protein. 28 Sari edamame  dalam  penelitian  ini  dipanaskan  pada suhu  80 0 C  selama  15  menit  sehingga  mampu mengurangi  sebagian  mikroba  patogen  dan meminimalkan  penurunan  kandungan  fitokimia seperti isoflavon, flavonoid, dan fenol. 10,28,29

## Berat Badan
Berdasarkan  hasil  penelitian  diperoleh hasil  perbedaan  berat  badan  yang  signifikan selama perlakuan. Peningkatan berat badan yang signifikan (p<0,000) pada  kelompok  K(-) dikaitkan  dengan  kondisi  tikus  yang  tidak mengalami  diabetes  sehingga  metabolisme glukosa berlangsung secara normal. Peningkatan berat badan pada kelompok K(-), P1, dan P2 dapat dipengaruhi  oleh  ketidakseimbangan  energi karena  aktivitas  tikus  yang  terbatas  dalam kandang. 30 Asupan  pakan  yaitu  AD  II  Comfeed dapat  mempengaruhi  peningkatan  berat  badan pada kelompok K(-), P1, dan P2.
Penurunan  berat  badan  yang  signifikan (p<0,000) sebesar  19,8+2,32  gram  pada kelompok  K(+)  dikaitkan  dengan  tikus mengalami  diabetes  karena  induksi  STZ-NA. 20 Hasil  tersebut  serupa  dengan  penelitian
sebelumnya  yang  menunjukkan  bahwa  berat badan tikus wistar yang diinduksi dengan STZ 45 mg/kgBB  dan  NA  110  mg/kgBB  lebih  rendah yaitu  200  g  dibandingkan  dengan  berat  badan tikus  kontrol  yaitu  300  g. 31 Induksi  STZ  45 mg/kgBB secara intraperitoneal mampu merusak sel 𝛽 pankreas  dengan  menghasilkan  radikal bebas  yang  sangat  reaktif  sehingga  merusak membran  sel,  protein  dan  DNA,  serta mengganggu  sekresi  insulin. 32 Penambahan  NA berfungsi  mencegah  kerusakan  sel 𝛽 pankreas lebih  lanjut  dengan  mencegah  apoptosis  serta memiliki efek protektif pada fase pertama insulin release .  Tikus  yang  dinduksi  STZ-NA menunjukkan  gejala  DM tipe  2  ditandai  dengan kerusakan  sebagian  sel 𝛽 pankreas  sehingga insulin masih diproduksi oleh tubuh. 33 Resistensi insulin menyebabkan gangguan uptake glukosa ke dalam sel sehingga terjadi hiperglikemia. Resistensi insulin menyebabkan glukosa tidak dapat dimetabolisme menjadi  energi  sehingga  terjadi  pemecahan glikogen di hati (glikogenolisis) serta pembentukan  energi  dari  lemak  dan  protein (glukoneogenesis).  Kondisi  yang  berkelanjutan menyebabkan  penurunan  jaringan  adiposa  dan masa  otot  dalam  tubuh  sehingga  tikus  yang diinduksi  STZ-NA  mengalami  penurunan  berat badan. 34
Pemberian  sari  edamame  selam  28  hari pada  kelompok  P1  dan  P2  menunjukkan peningkatan  berat  badan  yang  signifikan (p<0,000) .  Penelitian  sebelumnya  menunjukkan bahwa  peningkatan  berat  badan  tikus  sejalan dengan penurunan kadar glukosa darah tikus yang diinduksi  STZ. 35 Hal  ini  menunjukkan  bahwa pemberian  sari  edamame  mampu  mencegah penurunan berat badan pada tikus yang diinduksi STZ-NA. Sari edamame mengandung protein dan isoflavon  yang  tinggi  sehingga  mampu meningkatkan  proses  metabolisme    dalam tubuh. 36 Hasil  ini  sejalan  dengan  penelitian sebelumnya yang menunjukkan bahwa pemberian  genistein  dosis  20  mg/kgBB/hari mampu  meningkatkan  berat  badan  tikus  yang diinduksi STZ. 35 Peningkatan berat badan terjadi tikus  yang  diberi  kedelai  sebanyak  400 mg/kg/hari. 36
Genistein  dan  protein  kedelai  memiliki efek  hipoglikemik  dengan  menginduksi  sekresi insulin  di  sel 𝛽 pankreas  dan  meningkatkan metabolisme glukosa perifer. Insulin meningkatkan  glikolisis  hepatik  yang  dimediasi oleh  peningkatan  enzim  glukokinase  dan penurunan glukoneogenesis. Glukokinase
merupakan  enzim  yang  berperan  regulasi simpanan  glukosa  dan  berhubungan  dengan penurunan  kadar  glukosa  darah.  Insulin menurunkan glukoneogenesis melalui penurunan sekresi glucose-6-phosphate yang  berperan dalam homeostatis glukosa dan berkaitan dengan defisiensi  insulin.    Isoflavon  terbukti  memiliki regulasi  terhadap  kontrol  glikemik  dengan mempengaruhi reseptor GLUT4 sehingga insulin dapat  memasuki  membran  sel  di  otot  rangka. 37 Isoflavon  bentuk  aglikon,  terutama  genistein menunjukkan  aktivitas  antioksidan  paling tinggi. 38 Genistein  diketahui  memiliki  efek protektif terhadap kerusakan sel 𝛽 pankreas serta memperbaiki  sekresi  insulin  dan  kadar  glukosa darah pada tikus diabetes yang diinduksi STZ. 35 Genistein meningkatkan uptake glukosa melalui aktivasi adenosine  monophosphate-activated protein  kinase (AMPK)  yang  menginduksi translokasi  GLUT4.  GLUT4  adalah  transporter glukosa utama di otot rangka dan jaringan adipose yang berperan penting mempertahankan homeostatis glukosa. 39 Peningkatan berat badan kelompok K(-) dan  P2  berbeda  secara  signifikan  dibandingkan kelompok P1. Hal ini menujukan dosis pemberian sari  edamame  memiliki  pengaruh  terhadap peningkatan berat badan tikus. Peningkatan dosis sari  edamame  berkaitan  dengan  peningkatan metabolisme  glukosa  sehingga  mengurangi glukoneogensis  dan  mencegah  penurunan  berat badan pada tikus yang diinduksi STZ-NA.  Hasil ini  serupa  dengan  penelitian  sebelumnya menunjukkan  bahwa  tikus  diabetes  yang diberikan  genistein  20  mg/kgBB/hari  memiliki berat badan lebih tinggi dibandingkan tikus yang diberikan  genistein  10  mg/kgBB/hari  karena memiliki  tingkat  perbaikan  kadar  glukosa  darah dan  insulin  yang  lebih  tinggi.  Hal  tersebut ditandai oleh perbaikan histologis sel 𝛽 pankreas meliputi peningkatan jumlah dan diameter pulau Langerhans  pankreas,  peningkatan  jumlah  sel 𝛽 pankreas,  serta  peningkatan  sensitivitas  insulin. Peningkatan jumlah mitokondria dalam sitoplasama  sel 𝛽 pankreas  mencerminkan perbaikan  dalam  metabolisme  glukosa  untuk menghasilkan  energi. 35 Peningkatan  berat  badan pada tertinggi terjadi pada kelompok P2, sedikit lebih tinggi dibandingkan kelompok   K(-). Hasil penelitian  ini  menunjukkan  pemberian  sari edamame dosis 3,6 mL/hari mampu memperbaiki metabolisme  tubuh  paling  baik  dan  diikuti peningkatkan  berat  badan  yang  setara  pada kelompok tikus yang sehat.

## Pengaruh Sari Edamame terhadap Kadar Asam Urat
Kadar  asam  urat  pada  sebelum  dan sesudah  penelitian  memiliki  perbedaan  yang signifikan.  Kelompok  K(-)  sebelum  perlakuan dan sesudah perlakuan memiliki kadar asam urat yang tergolong normal (1,2-5,0 mg/dL). 40 Kadar asam  urat  sebelum  perlakuan  pada  kelompok K(+),  P1,  dan  P2  yang  diinduksi  STZ-NA menunjukkan peningkatan kadar asam urat yang signifikan,  tetapi  hanya  kelompok  K(+)  yang dapat dikategorikan sebagai hiperurisemia (>7,5 mg/dl). 25 Peningkatan  kadar  asam  urat  tersebut disebabkan  oleh  induksi  STZ.  Mekanisme  STZ meningkatkan  kadar  glukosa  darah  diikuti peningkatan aktivitas xantin oksidase (XO) yang bertanggung  jawab  dalam  sintesis  asam  urat dalam  tubuh  sehingga  meningkatkan  risiko hiperurisemia. 20 Tikus  yang  diinduksi  STZ menunjukkan  pengingkatan  aktivitas  xantin oksidase. 41 STZ  memasuki  sel 𝛽 pankreas melalui  transporter  GLUT2  lalu  menghasilkan radikal  bebas  yang  sangat  reaktif  dan menyebabkan  alkilasi  DNA.  Sintesis  ATP  oleh mitokondria  dibatasi  oleh  pembentukan  radikal bebas, peningkatan aktivitas xantin oksidase, dan penghambatan  siklus  krebs. 20 Penelitian  ini menujukan  bahwa  induksi  STZ-NA  mampu meningkatkan  kadar  asam  urat  tikus  hingga mengalami hiperurisemia.
Peningkatan  kadar  asam  urat  dalam penelitian  ini  sejalan  dengan  peningkatan  kadar glukosa darah puasa. Kelompok K(+), P1, dan P2 yang  diinduksi  STZ  45  mg/kgBB  dan  NA  110 mg/kgBB selama 3 hari menunjukkan peningkatan  kadar  asam  urat  >7  mg/dL. Penelitian  sebelumnya  menunjukkan  bahwa pemberian induksi STZ 45 mg/kgBB dan NA 110 mg/kgBB  selama  7  hari  meningkatkan  kadar glukosa  darah  puasa  secara  signifikan  hingga >300 mg/dL. 32 Hasil ini serupa dengan penelitian oleh Siregar yang menunjukkan adanya korelasi positif yang signifikan antara kadar asam urat dan kadar  glukosa  darah  puasa  pasien  DM  tipe  2. 4 Meta analisis studi kohort mengemukakan bahwa kadar  asam  urat  berasosiasi  positif  dengan gangguan kadar glukosa darah puasa dan DM tipe 2. 42 Resistensi  insulin  diketahui  berkorelasi positif  dengan  kadar  asam  urat  melalui  2 hubungan  yaitu  resistensi  insulin  menurunkan ekskresi  asam  urat  melalui  urin;  sedangkan produksi  asam  urat  meningkat  dan  atau hiperurisemia  memperburuk  resistensi  insulin dengan  membatasi  bioavaibilitas nitric  oxide
(NO) yang dibutuhkan dalam insulin-dependent- glucosa-uptake. 43 Asam urat  merupakan antioksidan alami berperan  dalam  60%  total  aktivitas  antioksidan dalam  tubuh. 7 Apabila  jumlah  asam  urat  dalam tubuh berlebih, asam urat justru berperan sebagai prooksidan. 6 Asam urat menujukan aktivitas pro- inflamasi  dengan  menginduksi  sintesis reactive oxygen species (ROS) / reactive nitrogen species (RNS)  dalam  sel.  Xantin  oksidase  merupakan katalisator  yang  mengkonversi  hipoxantin menjadi  xantin  dan  xantin  menjadi  asam  urat dalam  metabolisme  purin. 43 Xantin  oksidase menggunakan oksigen sebagai akseptor elektron untuk  oksidasi  purin  dan  menyebabkan terbentuknya  anion  superoksida  (O 2 - )  dan hidrogen  peroksida  (H 2 O 2 ).  Proses  tersebut menujukan  bahwa  peningkatan  aktivitas  xantin oksidase  menyebabkan  peningkatan  produksi asam urat dan sintesis ROS. 6 Produksi asam urat akan  menginduksi  sintesis reactive  oxygen species (ROS) yang menyebabkan bioavaibilitas nitric  oxide (NO)  menurun.  Kondisi  tersebut dapat  mengganggu  persinyalan  insulin  dan memicu disfungsi endotel yang berisiko terhadap komplikasi  kardiovaskular  seperti  hipertensi, aterosklerosis,  dan  stroke. 6,43 Kadar  asam  urat pada kelompok K(+) pada sebelum dan sesudah perlakuan memiliki peningkatan yang signifikan (p=0,002) . Hal ini menunjukkan bahwa semakin lama durasi induksi STZ akan meningkatkan efek kerusakan  dan  stress  metabolik  sehingga memperburuk resistensi insulin serta meningkatkan produksi xantin oksidase. 41 , 43
Pemberian sari edamame selama 28 hari menunjukkan  penurunan  kadar  asam  urat  yang signifikan (p<0,001) .  Kelompok  P2  mengalami penurunan  kadar  asam  urat  tertinggi  sebesar 5,43+0,15  mg/dl.  Sari  edamame  mengandung isoflavon, fenol, dan flavonoid sehingga mampu menurunkan kadar asam urat pada kelompok P1 dan  P2.  Kandungan  fitokimia  seperti  isoflavon, flavonoid, dan fenol berperan sebagai antioksidan. 6 Isoflavon  merupakan  antioksidan golongan  flavonoid  yang  paling  banyak terkandung  dalam  produk  kedelai. 44 Efek antioksidan isoflavon bekerja melalui mekanisme inhibitor  xantin  oksidase.  Peningkatan  aktivitas xantin  oksidase  menyebabkan  peningkatan produksi asam urat dan ROS serta memicu stress oksidatif. 6 Penurunan  aktivitas  xantin  oksidase berhubungan  dengan  penurunan  stress  oksidatif dan memperbaiki fungsi endothelial pada pasien sindrom  metabolik. 43 Fenol  dan  flavonoid diketahui  memiliki  mekanisme  inhibitor  xantin
oksidase . 27 Kandungan  saponin  dalam  sari edamame  ikut  berperan  mengurangi  aktivitas xantin  oksidase . 45 Mekanisme  antioksidan tersebut  mirip  dengan  Allopurinol  yaitu  obat penurun  kadar  asam  urat  yang  paling  umum digunakan. 6 Hal ini sejalan dengan penelitian Qin et al yang menunjukkan pemberian suplementasi daidzein  (salah  satu  jenis  isoflavon)  mampu menurunkan  kadar  asam  urat. 17 Kandungan fitokimia dalam sari edamame seperti isoflavon, fenol,  flavonoid,  dan  saponin  memiliki  peran menurunkan  aktivitas  xantin  oksidase  sehingga saling berkontribusi dalam penurunan kadar asam urat pada tikus yang diinduksi DM tipe 2.
Pemberian sari edamame 1,8 ml/hari dan 3,6  ml/hari  selama  28  hari  mampu  menurunkan kadar  asam  urat  tikus  yang  diinduksi  STZ-NA. Hal  ini  sejalan  dengan  penelitian  sebelumnya yang  menunjukkan  bahwa  pemberian  susu kedelai  pada  ibu-ibu  menopause  sebanyak  250 ml/hari selama 3 bulan mampu menurunkan kadar asam  urat  yang  signifikan  sebesar  0,46  mg/dl. 46 Penelitian  lain  menunjukkan  bahwa  pemberian kacang  kedelai  sebanyak  2,25  g/200gBB  tikus selama  8  hari  mampu  menurunkan  kadar  asam urat  paling  signifikan  dibandingkan  dosis  4,5 g/200gBB  tikus  dan  9  g/200gBB.  Hal  tersebut dikaitkan dengan pengaruh kandungan purin yang lebih  kuat  dibandingkan  efek  antioksidan isoflavon. 47 Hasil  penelitian  ini  berbeda  dengan penelitian sebelumnya yang menunjukkan bahwa pemberian dosis berganda mampu meningkatkan efektivitas  penurunan  kadar  asam  urat.  Hal  ini diketahui  bahwa  kelompok  P2  memiliki penurunan kadar asam urat tertinggi. Kondisi ini berhubungan dengan kandungan purin dalam sari edamame  yang  sangat  rendah  sehingga peningkatan dosis sari edamame berisiko rendah meningkatkan  kadar  asam  urat  pada  tikus  yang diinduksi  STZ-NA. 12 Pemberian  sari  edamame selama 28  hari  pada  kelompok  P1 dan  P2 tidak menunjukkan  perbedaan  kadar  asam  urat  yang signifikan  secara  statistik,  tetapi  secara  klinis hasil ini menunjukkan perbedaan yang signifikan. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa terdapat pemberian  sari  edamame  dengan  dosis  1,8 mL/hari  dan  3,6  mL/hari  secara  efektif menurunkan kadar asam urat tikus yang diinduksi DM tipe 2.

## SIMPULAN
Pemberian  sari  edamame  dosis  1,8 mL/hari  dan  3,6  mL/hari  selama  28  hari  secara efektif  menurunkan  kadar  asam  urat  tikus  yang diinduksi  diabetes  melitus  tipe  2.  Penelitian
selanjutnya  diperlukan  penelitian  serupa  terkait pengujian  kandungan zat  gizi  dan fitokimia sari edamame dan variasi dosis dan waktu penelitian yang  lebih  beragam.  Penelitian  pembanding diperlukan  untuk  melihat  efektivitas  sari edamame  dan  Allopurinol  dalam  menurunkan kadar  asam  urat.  Selain  itu,  diperlukan pengembangan  inovasi  produk  sari  edamame serta  uji  organoleptik  sehingga  produk  tersebut dapat diterima oleh masyarakat.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Peneliti  mengucapkan  terima  kasih kepada  Laboratorium  Pusat  Studi  Pangan  dan Gizi  Universitas  Gadjah  Mada,  Laboratorium Gizi Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Airlangga,  serta  pihak-pihak  yang  berkontribusi atas kelancaran penelitian ini .

## DAFTAR PUSTAKA
1. Li W, Ruan W, Peng Y, Wang D. Soy and the risk of type 2 diabetes mellitus: A systematic review and meta-analysis of observational studies. Diabetes Res Clin Pract 2018; 137: 190 – 199. https://doi.org/10.1016/j.diabres.2018.01.01 0
2. Kementerian Kesehatan Republik Indonesia. Riset kesehatan dasar 2018. 2018; 1 – 200.
3. Guo M, Niu JY, Li SR, Ye S, Fang H, Zhao Y,  et  al.  Gender  differences  in  the association  between  hyperuricemia  and diabetic  kidney  disease  in  community elderly patients. J Diabetes Complicat 2015; 29: 1042 – 1049. https://doi.org/10.3390/ijms22115808
4. Siregar  ML,  Nurkhalis.  Korelasi  antara kadar  gula  darah  dengan  kadar  asam  urat pasien diabetes mellitus tipe 2. Idea Nurs J 2017; VI: 27 – 33. https://doi.org/10.52199/inj.v6i3.6788
5. Pujiastuti DR, Karwur FF. Hubungan antara hiperurisemia  dengan  hiperglikemia  pada laki-laki  suku  jawa.  J  Ilmu  Gizi  J  Nutr  Sci 2017; 8: 160 – 168. https://doi.org/10.26553/jikm.2017.8.3.160-
168
6. Maruhashi T, Hisatome I, Kihara Y, Higashi Y. Hyperuricemia and endothelial function: From  molecular  background  to  clinical perspectives.  Atherosclerosis  2018;  278: 226 – 231.
https://doi.org/10.1016/j.atherosclerosis.201 8.10.007.
7. Ekpenyong CE, Daniel N. Roles of diets and dietary  factors  in  the  pathogenesis, management  and  prevention  of  abnormal serum  uric  acid  levels.  PharmaNutrition 2015; 3: 29 – 45.
https://doi.org/10.1016/j.phanu.2014.12.001
8. Lee  RD.  Gout :  Epidemology  and  etiology. In: Nelms MN, Sucher K, Lacey K, Roth SL (eds) Nutrition therapy and pathophysiology. California: Cengage Learning, 2015, p. 793.
9. Kusumayanti GAD, Ni ;, Dewantari M. The influence  of  low  purine  diet  and  physical activity  on  changing  of  uric  acid  levels  in hyperuricemia.  Int  J  Health  Sci  (Qassim) 2017; 1: 1 – 9.
10. Nur  R,  Lioe  HN,  Palupi  NS,  Nuratama  B. Optimasi  formula  sari  edamame  dengan proses pasteurisasi berdasarkan karakteristik kimia dan sensori. Mutu Pangan 2018; 5: 88 – 99.
11. Ningsih  TE,  Siswanto  S,  Winarsa  R. Aktivitas antioksidan kedelai edamame hasil fermentasi  kultur  campuran  oleh  Rhizopus oligosporus  dan  Bacillus  subtilis.  Berk Sainstek 2018; 6: 17. https://doi.org/10.19184/bst.v6i1.7556
12. Kaneko K, Aoyagi Y, Fukuuchi T, Inazawa K, Yamaoka N. Total purine and purine base content of common foodstuffs for facilitating nutritional therapy for gout and hyperuricemia.  Biol  Pharm  Bull  2014;  37: 709 – 721. https://doi.org/10.1248/bpb.b13-
00967
13. Soyfoods  Association  of  North  America. Whole  Soybean.  Soyfoods  Association  of North America. 2006.
14. Sari  DS,  Probosari  E.  Hubungan  asupan protein  nabati  dengan  kadar  asam  urat  di Puskesmas Banjarnegara, Kabupaten
Banjarnegara.  J  Nutr  Coll  2015;  4:  416 –
422. https://doi.org/10.14710/jnc.v4i4.1011
9
15. Zhang M, Lin L, Liu H. Acute effect of soy and  soy  products  on  serum  uric  acid concentration  among  healthy  Chinese  men. Asia Pac J Clin Nutr 2018; 27: 1239 – 1242. https://doi.org/10.6133/apjcn.201811_27(6).
0010
16. Liu ZM, Ho CS, Chen YM, Woo J. Can soy intake  affect  serum  uric  acid  level?  Pooled analysis  from  two  6-month  randomized controlled trials among Chinese postmenopausal women with prediabetes or
prehypertension. Eur J Nutr 2014; 54: 51 – 58. https://doi.org/10.1007/s00394-014-0684-1
17. Qin  Y,  Shu  F,  Zeng  Y,  Meng  X,  Wang  B, Diao  L,  et  al.  Daidzein  supplementation decreases  serum  triglyceride  and  uric  acid concentrations  in  hypercholesterolemic adults with the effect on triglycerides being greater in those with the GA compared with the GG genotype of ESR - b Rsa I 1 – 3. J Nutr 2014; 144: 49 – 54. https://doi.org/10.3945/jn.113.182725
18. Fitriyana  NI.  Potensi  pangan  fungsional berbasis edamame sebagai pangan antihiperkolesterol. J Rekapangan 2017; 11:
10 – 19.
19. Monteiro  NES,  Queirós  LD,  Lopes  DB, Pedro  AO,  Macedo  GA.  Impact  of microbiota  on  the  use  and  effects  of isoflavones  in  the  relief  of  climacteric symptoms  in  menopausal  women – A review.  J  Funct  Foods  2018;  41:  100 – 111. https://doi.org/10.1016/j.jff.2017.12.043
20. Saputra  N,  Suartha  N,  Dharmayudha  A. Agen  diabetagonik  streptozotocin  untuk membuat  tikus  putih  jantan  diabetes mellitus.  Bul  Vet  Udayana  2018;  10:  116 – 121.
https://doi.org/
10.24843/bulvet.2018.v10.i02.p02
21. Bacharach,  Laurence.  Evaluation  of  drug activities  pharmacometrics.  In:  Ngatidjan (ed)  Laboratorium  dalam  Toksikologi. Yogyakarta:  Pusat  Antar  Universitas Bioteknologi Universitas Gajah Mada, 1990.
22. Istiani  Y,  Handajani  SRI,  Pangastuti  A. Karakterisasi senyawa bioaktif isoflavon dan uji  aktivitas antioksidan  dari  ekstrak  etanol tempe  berbahan  baku  koro  pedang (Canavalia  ensiformis).  Biofarmasi  2015; 13: 50 – 58.
23. Martiningsih  M,  Otnel  D.  Gambaran  kadar asam  urat  darah  metode  basah  (Uricase- PAP)  pada  sampel  serum  dan  plasma.  J Teknol Lab 2016; 5: 20 – 26.
24. Dahlan  M.  Statistik  untuk  kedokteran  dan kesehatan. Edisi 5. Jakarta: Salemba Medika, 2011.
25. Mitruka B, Rawnsley H. Clinical biochemical  and  hematological  reference values  in  normal experimental  animals  and normal human. 2nd Ed. California: Masson Pu, 1981.
26. Wu  B,  Roseland  JM,  Haytowitz  DB, Pehrsson PR, Ershow AG. Availability and quality  of  published  data  on  the  purine content  of  foods,  alcoholic  beverages,  and
dietary  supplements.  J  Food  Compos  Anal
2019; 84: 1 – 8. https://doi.org/10.1016/j.jfca.2019.103281
27. Wibawa  H,  Fitriani  H,  Samara  R,  Meidi  I. Influence  of  giving  breadfruit  (Artocarpus altilis  (Park)  Fosberg.)  leaves  extract  to decrease  uric  acid  levels  in  wistar  rats hyperuricemic. In: Proceedings of International Conference on Applied Science and Health, pp. 160 – 165.
28. Rodríguez-roque MJ, Ancos B De, Sánchez- vega  R.  In  vitro  bioaccessibility  of isoflavones from a soymilk-based beverage as  affected  by  thermal  and  non-thermal processing. Innov Food Sci Emerg Technol 2020; 66: 1 – 8.
https://doi.org/10.1016/j.ifset.2020.102504
29. Baú  TR,  Ida  EI.  Soymilk  processing  with higher  isoflavone  aglycone  content.  Food Chem 2015; 183: 161 – 168. https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2015.03.
026
30. Djunaidi CS, Affandi DR, Praseptiangga D. Efek  hipoglikemik  tepung  komposit  (ubi jalar  ungu,  jagung  kuning,  dan  kacang tunggak)  pada  tikus  diabetes  induksi streptozotocin. J Gizi Klin Indones 2014; 10: 119 – 126. https://doi.org/10.22146/ijcn.18859
31. Wen  W,  Lin  Y,  Ti  Z.  Antidiabetic, antihyperlipidemic, antioxidant, anti- inflamatory  activities  of  ethanolic  seed extract  of  Annona  reticulata  L  .  in streptozotocin  induced  diabetic  rats.  Front Endocrinol  (Lausanne)  2019;  10:  1 – 15. https://doi.org/10.3389/fendo.2019.00716
32. Saravanan  KS,  Madhavan  V.  Antidiabetic activity  of  Bauhina  vahli  Wt  .  and  Arn  . (Caesalpiniaceae)  root – a  botanical  source for the ayurveda drug murva. Asian J Pharm Clin Res 2019; 12: 359 – 362.
https://doi.org/10.22159/ajpcr.2019.v12i5.3 1373
33. Birgani  GA,  Ahangarpour A,  Khorsandi  L, Moghaddam  HF.  Anti-diabetic  effect  of betulinic acid on streptozotocin- nicotinamide  induced  diabetic  male  mouse model. Brazilian J Pharm Sci 2018; 54: 1 – 7. https://doi.org/10.1590/s2175- 97902018000217171
34. Wang-fischer Y, Garyantes T. Improving the reliability  and  utility  of  streptozotocin- induced  rat  diabetic  model.  J  Diabetes  Res 2018;
1 – 14. https://doi.org/10.1155/2018/8054073
35. El-kordy  EA,  Mohammed  A.  Effect  of genistein  ,  a  natural  soy  isoflavone  ,  on pancreatic  beta  cells  of  streptozotocin- induced  diabetic  rats:  Histological  and immunohistochemical  study.  J  Microsc
Ultrastruct 2015; 3: 108 – 119.
https://doi.org/10.1016/j.jmau.2015.03.005
36. Aziz O. Effect of soybean seeds alone or in combination  with  insulin  or  glibenclamide on  serum  lipid  profiles  in  alloxan-induced diabetic rats. Iraqi J Vet Sci 2009; 23: 17 – 23. https://doi.org/10.33899/ijvs.2009.5682
37. Chen  X,  Wang  L,  Wu  Y,  Song  S,  Min  H, Yang  Y,  et  al.  Effect  of  puerarin  in promoting fatty acid oxidation by increasing mitochondrial  oxidative  capacity  and biogenesis in skeletal muscle in diabetic rats.
Nutr Diabetes 2018; 8: 1 – 13. https://doi.org/10.1038/s41387-017-0009-6
38. Fawwaz  M,  Natalisnawati  A,  Baits  M. Determination  of  isoflavon  aglicone  in extract of soymilk and tempeh. Ind J Teknol dan  Manaj  Agroindustri  2017;  6:  152 – 158. https://doi.org/10.21776/ub.industria.2017.0 06.03.6
39. Duru  KC,  Kovaleva  EG,  Danilova  IG,  van der  Bijl  P,  Belousova  A  V.  The  potential beneficial  role  of  isoflavones  in  type  2 diabetes mellitus. Nutr Res 2018; 59: 1 – 15. https://doi.org/10.1016/j.nutres.2018.06.005
40. Guyton  A,  Hall  J.  Buku  ajar  fisiologi kedokteran. Edisi 13. Jakarta: EGC, 2019.
41. Goharinia M, Zareei A, Rahimi M, Mirkhani H.  Can  allopurinol  improve  retinopathy  in diabetic  rats?  Oxidative  stress  or  uric  acid;
Which  one  is  the  culprit?  Res  Pharm  Sci 2017; 12: 401 – 408.
https://doi.org/10.4103/1735-5362.213985
42. Jia Z, Zhang X, Kang S, Wu Y. Serum uric acid levels and incidence of impaired fasting glucose  and  type  2  diabetes  mellitus :  A meta-analysis  of  cohort  studies.  Diabetes Res  Clin  Pract  2013;  101:  88 – 96. https://doi.org/10.1016/j.diabres.2013.03.02 6
43. Battelli  MG,  Bortolotti  M,  Polito  L, Bolognesi  A.  The  role  of  xanthine oxidoreductase  and  uric  acid  in  metabolic syndrome. BBA - Mol Basis Dis 2018; 1864: 2557 – 2565. https://doi.org/10.1016/j.bbadis.2018.05.00 3
44. Kim E, Lee O, Kwang J, Kim S, Lee J, Kim S,  et  al.  Isoflavones  and  anthocyanins analysis  in  soybean  (Glycine  max  (L.)
Merill)  from  three  different  planting locations  in  Korea.  F  Crop  Res  2014;  156: 76 – 83. https://doi.org/10.1038/s41598-020- 76985-4
45. Rakanita  Y,  L  H,  Tandi  J,  Mulyani  S. Efektivitas  antihiperurisemia  ekstrak  etanol daun  seledri  (EEDS)  pada  tikus  yang diinduksi  kalium  oksonat.  J  Trop  Pharm Chem 2017; 4: 1 – 6.
https://doi.org/10.25026/jtpc.v4i1.124
46. Fahlevi  RP,  Asfur  R.  Pengaruh  pemberian susu kedelai (Glicine max. L. Merr) terhadap kadar asam urat pada ibu-ibu menopause di Pengajian  Aisyiyah.  J  Ilm  Kohesi  2020;  4: 121 – 127.
47. Gustiansyah  R.  Efek  susu  kacang  kedelai (Glycine  max  (l.)  Merr.)  terhadap  kadar asam  urat  darah  tikus  putih  jantan  yang diinduksi  kalium  oksonat.  Universitas Indonesia, Skripsi. 2012.