UJI FITOKIMIA, ANTIOKSIDAN, DAN TOKSISITAS DARI EKSTRAK DAUN KENTANG ( Solanum tuberosum ) DENGAN METODE 1.1-diphenyl-2- picrylhydrazyl (DPPH) dan Brine Shrimp Lethality Test (BSLT)
Steven A. Pamolango 1) , Widdi Bodhi 1) , A. C. Wullur 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95116

## ABSTRACT
Potatoes (Solanum tuberosum) is only used for it’s tuber, otherwise it’s leaves and the other parts just  be  a  waste,  whereas  the  potato  plants  in  previous  research  is  having  potential  use  as  antioxidants that  contain  high  anthocyanin,  makes  potatos  have  strong  antioxidants  activity,  so  the  other  parts  of potatoes  which  is  the  leaves  also  potentially  have  similar  content.  This  research  aims  to  determine  the potential of the leaves of potato based on it’s phytochemical content,  the ability of antioxidant activity, and toxicity, so that later the leaves of potato is not only to be a waste but can be processed and used. Result of this research showed that ethanol extract of the potatoes leaves contains flavonoids and tanins which potentially as an antioxidant, despite it’s low value of Concetration Inhibition 50 (IC 50 ) was 266,69 µg/mL  based  on tested by the  method  of  1.1-diphenyl-2-picrylhydrazyl  (DPPH),  potatoes leaves have a high toxicity values, the value of Lethality Concentration 50 (LC 50 ) was 44,46 µg/mL tested using Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) methods.
Keywords : Potatoes leaves, Phytochemical, Antioxidant, Toxicity, DPPH, BSLT, IC 50 , LC 50 .

## ABSTRAK
Pengolahan  kentang  ( Solanum  tuberosum )  terbatas  pada  umbinya  saja,  bagian  lainnya  seperti daun hanya menjadi limbah, padahal tanaman kentang merupakan tanaman yang memiliki potensi sebagai bahan antioksidan dengan kandungan antosianin yang tinggi yang membuat kentang mempunyai aktivitas antioksidan kuat pada penelitian sebelumnya, sehingga bagian dari tanaman kentang lainnya yakni bagian daun juga  berpotensi memiliki kandungan serupa. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui potensi dari daun kentang berdasarkan kandungan fitokimia, kemampuan aktivitas antioksidan, dan toksisitasnya, agar nantinya  daun  kentang  tidak  hanya  menjadi  limbah  melainkan  dapat  diolah  dan  dimanfaatkan.  Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun kentang memiliki kandungan flavonoid dan tanin yang berpotensi sebagai antioksidan walaupun hanya memiliki nilai Inhibisi Concetration 50 (IC 50 ) yang rendah  yakni,  266,69  µg/mL  berdasarkan  pengujian  dengan  metode 1.1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH),  daun  kentang  mempunyai  nilai  toksisitas  yang  tinggi,  yakni  nilai Lethality  Concetration 50 (LC 50 )  sebesar  44,46  µg/mL  yang  dilakukan  dengan  metode  pengujian Brine  Shrimp  Lethality  Test (BSLT).
Kata kunci : Daun Kentang, Fitokimia, Antioksidan, Toksisitas, DPPH, BSLT, IC 50 , LC 50 .

## PENDAHULUAN
Indonesia  sebagai  salah  satu  negara yang  memiliki  sumber  daya  alam  hayati terbanyak dengan perkiraan mencapai 40.000 jenis tumbuhan, menempatkan Indonesia berada pada posisi kedua di dunia setelah  Brazil.  Tumbuhan  –  tumbuhan tersebut  dapat  berpotensi  sebagai  bahan pangan  serta  bahan  baku  obat  –  obatan. Senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat pada  bahan  pangan  dapat  dijadikan  sebagai bahan baku dalam pembuatan obat tradisional  serta  dapat  berfungsi  sebagai makanan  kesehatan  (Suryanto,  2012).  Obat tradisional  berbahan  baku  tumbuhan  alami telah  menjadi  pilihan  alternatif  turun  - temurun  dengan  manfaat  kesembuhan  yang efektif  menciptakan  kondisi  pengembangan obat tradisional semakin berkembang (Hendrawati, 2009).
Penyakit  kanker  merupakan  salah satu  penyebab  kematian  utama  di  seluruh dunia.  Pada  tahun  2012,  sekitar  8,2  juta kematian disebabkan oleh kanker (Kemenkes RI, 2015). Penyembuhan kanker telah dilakukan melalui berbagai cara seperti pembedahan,  penyinaran,  dan  kemoterapi. Penyembuhan  tersebut  memiliki  kelemahan sehingga  pengobaan  kanker  hingga  saat  ini belumlah mempunyai hasil yang memuaskan  (Padmi,  2008),  sehingga  perlu adanya  senyawa  anti  kanker  yang  dapat mengobati  penyakit  kanker,  namun  dengan hasil  yang  maksimal.  Pencegahan  penyakit kanker  dapat  berawal  dari  mengkonsumsi bahan  pangan  yang  mengandung  senyawa antioksidan  sebagai  senyawa  yang  dapat mencegah penyakit kanker (Suryanto, 2012).
Antioksidan  berperan  penting  dalam pencegahan  penyakit  kanker  dan  penyakit
degenerasi.  Secara  alami  antioksidan  dapat diperoleh dari daun sayuran dan biji – bijian, seperti  asam  askrobat,  vitamin  E,  dan senyawa  fenolik.  Antioksidan  memiliki kemampuan mengurangi efek buruk oksidatif  yang  berkaitan  dengan  berbagai penyakit, seperti kanker, penyakit kardiovascular, katarak, atherosclerosis, diabetes,  arthritis,  penyakit  defisiensi  imun, dan  penuaan  (Amielia,  2014).  Oleh  karena itu  peneliti  tertarik  untuk  menemukan sumber senyawa antioksidan baru.
Kentang  telah  menjadi  salah  satu komoditas hortikultura di Indonesia, berdasarkan  data  dari  Badan  Pusat  Statistik produksi  tanaman  sayuran  kentang  di Sulawesi  Utara  pada  tahun  2014  terdapat produksi  sebanyak  2.300  ton  serta  untuk produksi  di  seluruh  Indonesia  mencapai 136.514  ton.  Kentang  merupakan  sayuran umbi yang kaya akan vitamin C, karbohidrat,  dan  protein  (Samadi,  2007). Diantara  senyawa  kimia  yang  terkandung dalam  kentang  yang  memiliki  aktivitas antioksidan  yakni  vitamin  C  dan  flavonoid. Senyawa antioksidan dapat berfungsi sebagai oxygen  scavenger dengan  jalan mentransfer  atom  hidrogen  ke  oksigen sehingga oksigen tidak tersedia untuk reaksi berikutnya  (Giese,  1995).  Berdasarkan penelitian  yang  dilakukan  oleh  Brown (2010), kentang memiliki kandungan antosianin  yang  merupakan  turunan  dari flavonoid berkisar antara 15 mg – 40 mg per 100  g.  Umbi  kentang  adalah  satu  –  satunya bagian yang umum digunakan oleh masyarakat, bagian lain dari kentang seperti daun  hanya  dijadikan  limbah,  hal  ini membuat peneliti berkeinginan untuk
mengolah  bagian  yang  tidak  terpakai  dari kentang  mempertimbangkan  bahwa  kentang memiliki  potensi  sebagai  sumber  senyawa antioksidan.
Untuk mengidentifikasi senyawa antioksidan  dapat  menggunakan  senyawa 1.1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH)  atau lebih  dikenal  dengan  nama  metode  DPPH. Senyawa  radikal  kromogen  seperti  DPPH dapat  secara  langsung  bereaksi  dengan antioksidan. DPPH digunakan untuk mengevaluasi  kemampuan  antioksidan  dari komponen  dengan  mengukur  perubahan absorbansi, absorbansi DPPH akan menurun apabila  elektron  ganjil  dari  atom  hidrogen dalam  DPPH  direduksi  dengan  penerimaan sebuah  atom  hidrogen  dari  antioksidan. Pengukuran  aktivitas  antioksidan  dapat diketahui berdasarkan nilai Inhibisi Concetration (IC) 50, di mana menunjukkan kemampuan  senyawa  menghambat  proses oksidasi sebesar 50% (Molyneux, 2004).
Pengujian  toksisitas  dapat  dilakukan dengan  menggunakan  metode Brine  Shrimp Lethality  Test (BSLT).  BSLT  merupakan metode  untuk  mengetahui  tingkat  toksisitas suatu  senyawa  aktif  terhadap  larva  udang Artemia salina . Senyawa aktif yang memiliki  daya  toksisitas  tinggi  diketahui berdasarkan  nilai Lethal  Concetration 50% (LC 50 ),  yaitu  suatu  nilai  yang  menunjukkan konsentrasi  zat  toksik  yang  menyebabkan kematian  hewan  uji  sebesar  50%.  Hasil  uji toksisitas  dapat  dijadikan  tolak  ukur penggunaan  konsentrasi  senyawa  aktif  yang aman untuk digunakan (Meyer et al ,. 1982).

## METODOLOGI PENELITIAN
Alat yang digunakan dalam penelitian  yakni  Ayakan  200  mesh,  Kertas
saring  whatman  42,  Cawan  Petri,  Tabung reaksi, Rak tabung, Pipet tetes, Baker glass,
Timbangan analitik, Gelas ukur,
Erlenmeyer,  Incubator,  Batang  Pengaduk, Alumunium foil, Rotary evaporator,
Blender, Spatula, Corong. Bahan yang digunakan dalam penelitian ini ialah Daun Solanum tuberosum,  Etanol  95%,  Metanol  Pro Analisis,  Vitamin  C,  Air  laut,  Naupilus Artemia  salina,  Aquadest,  DPPH,  HCl pekat, NaOH, FeCl3, Serbuk Magnesium.

## PENGAMBILAN DAN PERSIAPAN SAMPEL
Sampel  yang  digunakan  ialah  daun kentang  ( Solanum  tuberosum L.)  var. Super John yang diambil pada pertanian hortikultura  di  desa  Modoinding,  Minahasa Selatan, Sulawesi Utara. Selanjutnya sampel dibersihkan  dan  dikering  anginkan  hingga sampel  kering.  Setelah  kering  sampel diblender  hingga  sampel  menjadi  halus  lalu diayak dengan ayakan mesh 200.

## IDENTIFIKASI TANAMAN
Identifikasi  tanaman  dilakukan  di Bagian  Taksonomi  Tumbuhan  Program Studi Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sam Ratulangi.

## EKSTRAKSI DAUN SOLANUM TUBEROSUM
Ekstraksi  bahan  aktif  dilakukan dengan  metode  maserasi  dengan  pelarut etanol  95%.  Serbuk  Solanum  tuberosum ditimbang sebanyak 200 gram dan dimasukkan ke dalam baker glass, kemudian ditambahkan  pelarut  hingga  volume  akhir
mencapai 800 ml dengan perbandingan 1 : 4 (w/v).  Hasil  maserasi  kemudian  disaring dengan  kertas  saring  Whatman  42  sehingga dihasilkan  filtrat  dan  residu.  Perendaman dilakukan  1  kali  remaserasi.  Filtrat  yang diperoleh  kemudian  dipekatkan  dengan vacuum  rotary  evaporator  pada  suhu  400C hingga  diperoleh  ekstrak  kental  berupa pasta.

## UJI FITOKIMIA
Uji fitokimia merupakan uji kualitatif  yang  dilakukan  untuk  mengetahui komponen  bioaktif  yang  terkandung  dalam ekstrak etanol 95% daun Solanum tuberosum. Analisis fitokimia yang dilakukan  meliputi  uji  alkaloid,  flavonoid, fenol,  tanin,  saponin,  dan  steroid.  Metode analisis  yang  digunakan  berdasarkan  pada Harborne (1987).

## UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DENGAN METODE DPPH
Pengujian aktivitas antioksidan ekstrak  daun  solanum  ini  menggunakan radikal bebas 1.1-diphenyl-2- picrylhydrazyl (DPPH) seperti yang dilakukan oleh Molyneux (2004).
Konsentrasi ekstrak sampel daun S. tuberosum yang digunakan adalah l0 µg/ml, 20  µg/ml,  30  µg/ml,  40  µg/ml,  dan  50 µg/ml.  Untuk  pembuatan  larutan  stok diambil  10  mg  ekstrak  dan  dimasukkan  ke dalam  10  mL  aquadest  hingga  diperoleh konsentrasi larutan stok 1000 µg/ml. a.  Untuk  konsentrasi  50  µg/ml  dibuat dengan  cara  diambil  0,5  mL  larutan  stok dan  dimasukkan  ke  dalam  9,5  mL aquadest.
b. untuk konsentrasi 40 µg/ml dibuat dengan cara  diambil  0,4  mL  larutan  stok  dan dimasukkan ke dalam 9,6 mL aquadest.
c. untuk konsentrasi 30 µg/ml dibuat dengan cara  diambil  0,3  mL  larutan  stok  dan dimasukkan ke dalam 9,7 mL aquadest.
d. untuk konsentrasi 20 µg/ml dibuat dengan cara  diambil  0,2  mL  larutan  stok  dan dimasukkan ke dalam 9,8 mL aquadest.
e. untuk konsentrasi 10 µg/ml dibuat dengan cara  diambil  0,1  mL  larutan  stok  dan dimasukkan ke dalam 9,9 mL aquadest.
Larutan  DPPH  0,4  mM  dibuat dengan cara ditimbang 7,88 mg DPPH (BM 394,32  g/mol)  dilarutkan  dengan  metanol proanalisis hingga 50,0 mL dalam labu takar 50 mL di tempat gelap. Kedalam tiap tabung reaksi ditambahkan 1 mL larutan DPPH 0,4 mM dalam metanol. Masing-masing konsentrasi  sampel  dimasukkan  kedalam tabung reaksi, volume dicukupkan sampai 5 mL,  kemudian  diinkubasi  pada  suhu  27°C selama  30  menit  selanjutnya  serapan  diukur dengan  spektrofotometer  UV-Vis  pada panjang  gerombang  517  nm.  vitamin  C digunakan  sebagai  pembanding  dengan konsentrasi  2  mg/L,  4  mg/L,  6  mg/L,  8 mg/L, 10 mg/L.

## UJI TOKSISITAS DENGAN METODE BSLT
Pengujian  tuksisitas  ekstrak  daun Solanum tuberosum menggunakan    metode Brine
Shrimp Lethality Test (BSLT) yang mengacu  pada  Meyer et  al .  (1982)  dan Krishnaraju  et  al.  (2005)  dengan  cara mengujikan  senyawa  yang  diduga  toksik terhadap larva A. salina .
PENYIAPAN LARVA Artemia salina L. Penetasan  telur A.  salina dilakukan dengan  cara  merendam  sebanyak  50  mg telur A.  salina dalam  wadah  yang  berisi  air laur dibawah cahaya lampu 25 watt. Telur A. salina akan  menetas  dan  menjadi  larva setelah  24  jam  (Mudjiman,  1988).  Larva A. salina yang baik digunakan untuk uji BSLT yaitu  yang berumur 48 jam  sebab jika lebih dari  48  jam  dikhawatirkan  kematian A. salina bukan disebabkan toksisitas melainkan  oleh  terbatasnya  persediaan makanan (Meyer et al ., 1982).

## PEMBUATAN KONSENTRASI SAMPEL UJI
Konsentrasi  larutan  uji  untuk BSLT  adarah  1000  µg/mL,  100  µg/mL,  l0 µg/mL,  1  µg/ml,  dan  0  µg/mL  (sebagai kontrol  negatif).  Untuk  pembuatan  larutan stok  ekstrak  kental  etanol  95%  ditimbang sebanyak  40  mg,  kemudian  dilarutkan dengan  kedalam  air  laut  sebanyak  40  mL, hingga  diperoleh  konsentrasi  larutan  stok 1000 µg/ml.
a. Larutan konsentrasi 1000 µg/mL dibuat dengan cara diambil 30 mL larutan dari larutan stok.
b. Larutan  konsentrasi  100  µg/mL  dibuat dengan  cara  diambil  4  mL  larutan  stok dan  dimasukkan  ke  dalam  36  mL  air laut.
c. Lartutan  konsentrasi  10  µg/mL  dibuat dengan cara diambil 0,4 mL larutan stok dan  dimasukkan  ke  dalam  39,6  mL  air laut
d. Larutan  konsentrasi  1  µg/mL  dibuat dengan  cara  diambil  4  mL  larutan  10 µg/mL  dan  dimasukkan  ke  dalam  36 mL air laut.
e. Larutan  konsentrasi  0  µg/mL  dibuat dengan mengambil 10 mL air laut.

## PEAKSANAAN UJI TOKSISITAS
Pada  uji  toksisitas  masing  - masing  konsentrasi  dilakukan  2  replikasi dengan  tiap  kelompok  sebanyak  l0  ekor larva A.  salina .  Disiapkan  wadah  untuk pengujian, untuk masing - masing konsentrasi  ekstrak  sampel  membutuhkan  3 wadah  dan  1  wadah  sebagai  control  untuk masing – masing replikasi. Selanjutnya pada tiap  konsentrasi  larutan  dimasukan  10  ekor larva A.  salina .  pengamatan  dilakukan selama  24  iam  terhadap  kematian  larva A. salina dimana setiap konsentrasi dilakukan 2 replikasi  dan  dibandingkan  dengan  kontrol. Kriteria  standar  untuk  menilai  kematian larva A.  salina yaitu  bila  larva A.  salina tidak  menunjukkan  pergerakkan  selama beberapa detik observasi.

## ANALISIS DATA
Data hasil penelitian akan diolah dan disajikan  dalam  bentuk  tabel  dan  grafik. Data dari uji antioksidan dan toksisitas akan dianalisis  dengan  analisis  regresi  linier menggunakan  Microsoft  Excel  2013  untuk menentukan nilai IC 50 dan LC 50 .

## HASIL DAN PEMBAHASAN PENYIAPAN SIMPLISIA
Bagian  tanaman  yang  digunakan yakni  daun  kentang  yang  diperoleh  dari pertanian
hortikultura masyarakat
Modoinding,  Kabupaten  Minahasa  Selatan,
Sulawesi Utara. Pada penelitian ini digunakan simplisia  berupa  daun  kentang  yang  dipetik pada  usia  3  bulan  yang  merupakan  waktu
panen,  hal  ini  dimaksudkan  agar  daun  yang digunakan tidak mengganggu hasil pertanian dan  sesuai  dengan  maksud  peneliti  untuk pengolahan daun kentang dari bahan limbah pertanian  hortikultura.  Daun  yang  diperoleh kemudian dilakukan sortasi, pencucian, serta pengeringan. Sortasi dan Pencucian bertujuan  untuk  memisahkan  kotoran  – kotoran  atau  bahan  –  bahan  asing  lainnya yang  menempel  pada  tanaman  dengan menggunakan air bersih. Pengeringan bertujuan  dilakukan  agar  mengurangi  kadar air  sehingga  simplisia  yang  diperoleh  tidak mudah  rusak  oleh  adanya  pertumbuhan jamur dan dapat disimpan dalam waktu yang lama.  Pengeringan  dilakukan  pada  suhu kamar dengan diangin – anginkan.
Setelah daun kentang kering, dilanjutkan  dengan  proses  penyerbukkan dan penghalusan yang dilakukan dengan alat blender lalu diayak dengan ayakan 200 mesh agar  didapatkan  serbuk  yang  homogen dalam  ukuran  partikel,  dimana  homogenitas partikel  ini  merupakan  parameter  utama karena  akan  mempengaruhi  keseragaman tahapan ekstraksi bahan aktif, yang tergantung  pada  kecepatan  difusi  zat  aktif serbuk  menuju  pelarut,  waktu  kontak,  dan kecepatan  pelarut  melewati  bahan  serbuk tanaman obat (Saifuddin et al , 2011).

## EKSTRAKSI
Serbuk kering daun kentang diekstraksi dengan metode maserasi. Serbuk
daun kentang yang digunakan sebesar 200 g dan di ekstraksi dengan pelarut etanaol 95% selama  3  hari  dan  dilakukan  remaserasi  1 kali  selama  2  hari.  Pemilihan  metode maserasi  dikarenakan  maserasi  ialah  salah satu  metode  pemisahan  senyawa  dengan cara  perendaman  menggunakan  pelarut organik  pada  temperature  ruangan.  Proses ekstraksi ini tidak dilakukan dengan metode ekstraksi  panas  karena  dikhwatirkan  ada golongan  senyawa  yang  tidak  tahan  panas. Proses  maserasi  sangat  menguntungkan dalam  isolasi  senyawa  bahan  alam  karena selain  murah  dan  mudah  dilakukan,  dengan perendaman  sampel  tumbuhan  akan  terjadi pemecahan dinding dan membran sel akibat perbedaan  tekanan  antara  di  dalam  dan  di luar  sel,  sehingga  metabolit  sekunder  yang ada di dalam sitoplasma akan terlarut dalam pelarut (Harbone, 1987).
Ekstrak  yang  diperoleh  dari  proses ekstraksi  maserasi  sebesar  14,3  g  ekstrak kental  dari  200  g  sampel  serbuk  yang berasal dari 2,5 Kg daun kentang segar.

## UJI FITOKIMIA
Pengujian fitokimia dilakukan menggunakan metode Harbone (1987), pada pengujian  3  (tiga)  senyawa  kimia  yang berpotensi  sebagai  senyawa  antioksidan yakni  flavonoid,  fenol,  dan  tanin.  Hasil pengujian  dapat  dilihat  pada  Tabel  1.
Tabel 1 . Skrining Kandungan Kimia
Senyawa Metabolit Penambahan Perubahan Positif Perubahan Warna Hasil Pengujian Flavonoid 1 g Mg + 10 tetes warna hitam warna hitam +
HCL 5 M kemerahan kemerahan Fenol etanol 95% + 2 tetes FeCl3 5 % warna hijau atau hijau biru kuning kecoklatan - Tanin 5 mL air panas + FeCL3 warna hijau kehitaman warna hijau kehitaman + Pengujian fitokimia tersebut menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  kentang memiliki senyawa metabolit yang berpotensi sebagai senyawa antioksidan yakni, Flavonoid dan Tanin.

## Pengujian Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH
Pengujian  aktivitas  antioksidan  pada ekstrak  etanol  daun  kentang  dilakukan dengan  menggunakan  metode  DPPH.  Hasil pengujian DPPH dapat dilihat pada Gambar. 1.
Gambar 1. Grafik Aktivitas Penangkal Radikal Bebas
Pada  pengujian  DPPH  diperoleh  %  Inhibisi atau  aktivitas  penangkal  radikal  bebas  yang dimiliki oleh ekstrak daun kentang tertinggi pada konsentrasi 50 µg/mL yakni 17,24%.
Berdasarkan  perubahan  warna  yang terjadi  dapat  diketahui  bahwa  ekstrak  daun kentang memiliki aktivitas antioksidan yang sangat  lemah,  hal  ini  ditunjukkan  dengan warna  yang  berubah  pada  larutan  uji  terjadi secara perlahan dan tidak mencapai perubahan  warna  ungu  ke  warna  kuning, melainkan hanya memudar pada konsentrasi 50  µg/mL.  Kemampuan  aktivitas  penangkal radikal  bebas  eksrtrak  daun  kentang  juga dibuktikan  dengan  nilai  IC 50 yang  sebesar 266,69  µg/mL,  Nilai  ini  didapat  dengan
menghitung  persamaan  linear  dari  Gambar 1.
Larutan  DPPH  yang  berwarna  ungu akan  bereaksi  dengan  antioksidan  alami dengan  membentuk  warna  kuning.  Semakin tinggi kandungan antioksidan akan membuat perubahan  warna  semakin  cepat  terbentuk. Pemudaran  warna  akan  mengakibatkan penurunan nilai absorbansi sinar tampak dari spektrofotometer  (Molyneux,  2004).  Pada prinsipnya  pengujian  aktivitas  antioksidan dengan metode DPPH dilakukan berdasarkan  kemampuan  antioksidan  untuk menghambat radikal bebas dengan mendonorkan atom hidrogen kepada DPPH, sehingga  DPPH  yang  telah  berpasangan
0 20 40 60 0 20 40 60 % In h ib is i Konsentrasi µg/mL Aktivitas Antioksidan S. tuberosum Vitamin C
dengan  atom  hidrogen  tersebut  akan menghasilkan  DPPH  Tereduksi  (DPPH-H) (Hardiana, 2012).

## PERBANDINGAN NILAI IC 50 DAUN KENTANG DAN VITAMIN C
Antioksidan yang digunakan sebagai  pembanding  dalam  pengujian  ini menggunakan  Vitamin  C.  Konsentrasi Vitamin  C  yang  digunakan  yakni  2  µg/mL, 4  µg/mL,  6  µg/mL,  8  µg/mL,  10  µg/mL. Nilai  IC 50 dari  Vitamin  C  didapat  sebesar 10,11  µg/mL,  nilai  ini  menunjukkan  bahwa kemampuan  penangkal  radikal  bebas  dari Vitamin  C  termasuk  kuat,  dibandingkan dengan  nilai  IC 50 ekstrak  daun  kentang. Vitamin  C memiliki 2 gugus  hidroksil  yang
membuat  Vitamin  C  lebih  mudah  dalam pendonoran hydrogen (Blois, 1958).

## PENGUJIAN TOKSISITAS DENGAN METODE BSLT
Pengujian  aktivitas  toksisitas  yang dilakukan  dengan  metode  BSLT  ( Brine Shrimp  Lethality  Test )  menggunakan  larva udang Artemia salina . Kemampuan toksisitas  ekstrak  etanol  dari  daun  kentang dalam  mematikan  larva  udang  yang  telah diberi  perlakuan  dengan  konsentrasi  1,  10, 100  dan  1000  mg/L  dapat  dilihat  dalam Tabel 2.
Tabel 2 . Presentase Jumlah Kematian Larva Udang Pengujian Kontrol(-) 0 µg/mL Jumlah Kematian Setiap Konsentrasi 1 µg/mL 10 µg/mL 100 µg/mL 1000 µg/mL 1 0 1 2 3 9 2 0 1 2 3 10 3 0 3 3 3 10 Total Kematian Larva 0 5 7 9 29 Rata - rata 0 1.6 2.3 3 9.6 Presentase Kematian 0% 16% 23% 30% 96%
Berdasarkan  Tabel  2  dapat  dilihat bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi  maka semakin  besar  juga  tingkat  kematian  larva udang,  dimana  tingkat  kematian  tertinggi terdapat  pada  konsentrasi  1000  µg/mL  dan
kematian  terendah  pada  konsentrasi  1 µg/mL.
Hasil pengujian tersebut memberikan nilai LC 50 sebesar 44,46 µg/mL yang  dihitung  menggunakan  analisis  probit.
0 5 10 0 1 2 3 4 N ilai P ro b it Log konsentrasi Analisis Probit Tabel 2. Nilai Probit
Gambar 2. Grafik Analisis Probit Ekstrak  dapat  disebut  bersifat  toksik apabila memiliki nilai LC 50 dengan konsentrasi  kurang  dari  1000  µg/mL, sehingga  ekstrak  daun  kentang  yang memiliki  nilai  LC 50 sebesar  44,46  µg/mL menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  kentang bersifat toksik (Meyer et al ., 1982).
Menurut  Meyer et  al .  (1982), kematian  larva A.  salina disebabkan keberadaan  senyawa  metabolit  sekunder yang bersifat toksik, ketika senyawa tersebut tertelan oleh larva, maka akan menyebabkan efek  antifeedant  yang  membuat  larva A. salina tidak bisa makan, sehingga menyebabkan larva A. salina akan mati.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan  dapat  disimpulkan  bahwa Ekstrak  etanol  95%  daun  kentang  ( S. tuberosum )  memiliki  senyawa  metabolit sekunder yang berpotensi sebagai antioksidan  yakni,  Flavonoid  dan  Tanin, Ekstrak  etanol  95%  daun  kentang  ( S. tuberosum )  memiliki  aktivitas  antioksidan dengan  nilai  IC 50 sebesar  266,69  µg/mL., dan  Ekstrak  etanol  95%  daun  kentang  ( S.
tuberosum )  memiliki  sifat  toksik  dengan nilai LC 50 sebesar 44,46 µg/mL.

## SARAN
Dengan  hasil  penelitian  ini  perlu dilakukannya penelitian lebih lanjut mengenai  khasiat  daun  kentang,  walaupun kemampuan  antioksidannya  rendah,  namun pemanfaatan  limbah  daun  kentang  dapat dilakukan  mengingat  daun  kentang  bersifat toksik yang berpotensi sebagai bahan obat.

## DAFTAR PUSTAKA
Amielia, S. Devi. 2014. Aktivitas
Antioksidan  Bolu  Kuhts  Dengan Penambahan  Tepung  Biji  Kiwi (Artocapus  communis)  dan  Ekstrak Bunga  Rosella  (Hibiscus  sabdariffa) Pada Konsentrasi Berbeda . [Skripsi]. Fakultas Farmasi UNMUH. Surakarta.
Anonim.  2014. Data  Produksi  Sayuran Kentang . Jakarta Blois, M. S. 1958. Antioxidont
Determinations  by  The  Use  of  a
Konsentrasi (µg/mL) Log Konsentrasi Total Larva % Mortalitas Terkoreksi Nilai Probit 0 10 0 1 0 10 16 4.01 10 1 10 23 4.26 100 2 10 30 4.48 1000 3 10 96 6.75
Stable  Free  Radical .  Nature.  181  :  I 199-1200.
Brown,  C.  R.  2010. Anthocyanins  and
Caratenoid  Contains  in  Potato .
Market Foods.
Giese,  l.  1995. Vitamin  ond  Mircral Fortification  of  Foods .  Food  Tech.
49 (5): ll0-122.
Harborne,  J.  B.  1987. Metode  Fitokimia . Edisi ke-2. ITB. Bandung. Hendrawati,  A.  R.  S.  2009. Uji  Toksisitas Akut  Ekstrak  Etanol  Daun  Kemangi (Ocinumsanctum  Linn.)  Teerhadap
Artemia salina Leach Dengan Metode  Brine  Shrimp  Letholity  Test (BSLT) . [Skripsi]. Fakultas
Kedokteran, Universitas Diponegoro.
Semarang.
Kemenkes  RI.  2015. INFODATIN .  Pusat Data  dan  Informasi  Kementrian
Kesehatan RI. Jakarta.
Meyer,  B.  N.  Ferrigni,  Putnam,  J.  E.
Jacobsen,  L.  B.  Nichols,  Mclaughin. 1982. Brine  Shrimp:  A  Cowenient
General  Bioassay  for  Active  Plant
Constituenls .  Planta  Medica.  45:31-
34.
Molyneux,  Philip.  2004. The  Use  of  The Stable Free Radical diphenylpicrylrydrazyl  (DPPH)  for Estimating Antioxidant Activity . Songklanaklarin Journal Science
Technology. 26(2):211-219.
Mudjiman,  A.  1988. Udang  Renik  Air  Asin (Artemia  salina) .  Bhatara  Karya
Aksara. Jakarta.
Padmi A. 2008. Uji sitotoksik ekstrak etanol 70%  buah  kemukus  (Piper  cubeba
L.) terhadap  sel  Hela. Universitas
Muhamadiyah Surakarta. Surakarta.
Samadi,  Budi.  2007. Kentang  dan  Analisis Usaha Tani . Kanisas. Yoryakarta.