Volume 13, Nomor 2 (2021)

## JURNAL ENVIROTEK
Jurnal Ilmiah Teknik Lingkungan
PENENTUAN LAJU PEMBENTUKAN GULA REDUKSI ECENG GONDOK PADA PROSES HIDROLISIS KOMBINASI DENGAN BAKTERI SELULOLITIK
Rizka Novembrianto 1 , Muslikha Nourma Rhomadhoni 2
1 Program Studi Teknik Lingkungan, Universitas Pembangunan Nasional Veteran Jawa Timur
2 Program Studi DIV-K3, Universitas Nahdlatul Ulama Surabaya Email: rizka.tl@upnjatim.ac.id

## ABSTRAK
Kehadiran  eceng  gondok  dalam  jumlah  yang  massif  akan  menjadi  masalah  untuk  air permukaan.  Namun  eceng  gondok  juga  memiliki  kandungan  selulosa  yang  bisa  dikonversi menjadi gula reduksi sebagai bahan untuk pembuatan bioethanol. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan  hasil  gula  reduksi  tahap  hidrolisis  kombinasi  dengan  bakteri  selulolitik  dan  laju reaksi  maksimumnya.  Kebutuhan  eceng  gondok  yang  digunakan  adalah  substrat  pada  variasi 0,025;  0,057;  0,100;  0,161  dan  0,232  %  (b/v).  Segmen pretreatment menggunakan  kapang Phanerochaete chrysosporium dan dilanjutkan  hidrolisis secara kimia dengan perlakuan 0,25 % dan  2  %  H 2 SO 4 dan  variasi  tetap  panas  100  +  3 o C  dan  kombinasi  menggunakan Cellvibrio selama  24,  48,  72,  96  dan  120  jam . Penelitian  dilakukan  pada  suhu  ruang.  Metode  untuk pengukuran  gula  reduksi  menggunakan  Nelson-Somogyi.  Gula  reduksi  yang  telah  dihasilkan pada  proses pretreatment adalah  dengan  variasi  jamur P.  chrysosporium, hidrolisa  0,25  % H 2 SO 4 dan pemanasan (didih) 100 + 3 o C selama 30 menit dan Cellvibrio dengan hasil terbanyak pada substrat eceng gondok 20 g dan waktu 96 jam. Laju pembentukan gula reduksi maksimum (V maks ) sebesar 0,762 mg/g.jam dan K m senilai 0,03 %.
Kata Kunci: Eceng gondok, Bakteri Selulolitik, Gula reduksi, Hidrolisis dan Laju reaksi

## ABSTRACT
The  presence  of  water  hyacinth  in  massive  numbers  will  be  a  problem  for  surface  water. However, water hyacinth also contains cellulose which can be converted into reducing sugar as an ingredient for making bioethanol. This study aims to determine the yield of reducing sugar in the combined hydrolysis stage with cellulolytic bacteria and its  maximum reaction rate. Water hyacinth needs that are used are the substrate at a variation of 0.025; 0.057; 0.100; 0.161 and 0.232% (w / v). Pretreatment segment used Phanerochaete chrysosporium mold and continued chemical hydrolysis with treatment of 0.25% and 2% H2SO4 and hot variations of 100 + 3 o C and  the  combination  using  Cellvibrio  for  24,  48,  72,  96  and  120  hours.  The  research  was carried  out  at  room  temperature.  The  method  for  measuring  reducing  sugar  using  Nelson- Somogyi. Reduction sugar that has been produced in the pretreatment process is a variety of P. chrysosporium  fungi,  hydrolysis  of  0.25%  H 2 SO 4 and  heating  (boiling)  100  +  3 o C  for  30 minutes  and  Cellvibrio  with  the  highest  yields  on  water  hyacinth  substrate  20  g  and  time  96 hours.  The  maximum  reducing  sugar  formation  rate  (V max )  was  0.762  mg/g/hour  and  K m was 0.03%.
Keywords: water hyacinth, cellulolytic bacteria, reducing sugar, hydrolysis and reaction rate

## PEMBENTUKAN GULA REDUKSI DARI ECENG GONDOK … (RIZKA NOVEMBRIANTO DAN MUSLIKHA NOURMA RHOMADHONI)

## PENDAHULUAN
Dalam  permasalahan pada perairan  yang berada  di  sungai,  kolam  danau  salah  satunya disebabkan  adanya  kehadiran  eceng  gondok (Gunnarsson et  al .,  2007).  Sedangkan  eceng gondok  mempunyai  kandungan lignoselulosa yang  terdiri  dari  lignin,  hemiselulosa  dan selulosa (Ganguly et al ., 2012).
Produksi etanol  dari  bahan lignoselulosa melalui proses membuka ikatan terlebih dahulu menjadi  polimer  selulosa  dan  hemiselulosa. Tahapan  proses  tersebut  dinamakan  sebagai pretreatment . Hasil dari proses tersebut melalui proses  hidrolisis  polimer  diubah  menjadi glukosa. Selanjutnya mengubah glukosa menjadi etanol yang dilakukan oleh mikroorganisme  serta  proses  distilasi  dan dehidrasi  (Taherzadeh  dan  Karimi,  2007). Skema  secara  umum  dapat  dilihat  pada Gambar-1 dibawah ini :
Gambar-1 : Produksi etanol dari bahan lignoselulosa (Taherzadeh dan Karimi, 2007).
Proses  penelitian  ini  dimulai  dari lignoselulosa sampai  terbentuknya  hasil  gula reduksi hasil proses hidrolisis.
Bakteri selulolitik yang digunakan adalah  bakteri  yang  mampu  mendegradasi selulosa  seperti Cellvibrio  sp (Ekawati,  2012). Cellvibrio sp dapat mendegradasi selulosa pada serat  tanaman  dalam  keadaan  in  vitro  dengan cepat,  dari  77  isolat  bakteri  diantaranya  34 strain  mendeskripsikan  fenotipik  dari  genus Cellvibrio sp (Mergaert et al ., 2003). Cellvibrio merupakan  bakteri  selulolitik  yang  berada  di
rumen  (Lamid et  al. ,  2011).  Bakteri  yang berada  di  rumen  merupakan  bakteri  selulolitik yang  baik  dalam  mendegradasi  tanaman (Wilson, 2011). Selain itu juga bakteri ini juga terdapat  di  pengolahan  air  limbah  dengan pertumbuhan secara atthached system (Cordero, 2012).
Penelitian dilakukan pada proses hidrolisis  untuk  menentukan  laju  reaksi.  Gula reduksi  tiap-tiap  proses  akan  diukur  dengan membandingkan kemampuan variasi pretreatment penambahan asam.

## METODE PENELITIAN Persiapan
Pengambilan  enceng  gondok  disekitar sungai  ITS  Sukolilo  Surabaya.  Bahan  baku enceng  gondok  dilakukan  pemisahan  antara batang,  daun  dan  akarnya.  Selanjutnya  batang dicuci sampai bersih dan dipotong pada ukuran 2-2,5  mm  (Ganguly et  al .,  2012),  selanjutnya direndam  dalam  air  selama  6  jam  kemudian sampel  dikeringkan  dengan  oven  60+30 o C selama  2  –  3  hari  hingga  kering  (Harun et  al., 2011). Bahan yang telah menjadi bubuk dibuat variasi  substrat  (1;  2,5;  5;  10  dan  20  g) ditambahkan  12  mL  air  suling  steril  dengan pada substrat 5 g (Ma et al. , (2010); Handayani, 2014)  sebagai  acuan  (12:5)  dimasukkan  dalam reaktor  steril  berukuran  140  mL  (substrat  1; 2,5;  dan  5  g)  dan  250  mL  (substrat  10  dan  20 g).

## Pretreatment
Substrat diinkubasi inokulan P.
chrysosporium selama  10  hari  suhu  ruang dengan perbandingan 1 mL inokulan untuk 1 g substrat.

## Hidrolisis
Hidrolisis dengan menggunakan 3 kombinasi  secara  kimia  0,25  %  H 2 SO 4 (Ma et al., 2010)  dan  2%  H 2 SO 4 (Mood et  al., 2013; Singh et  al., 2013;  Stavrinides et  al., 2010  dan Corredor, 2008 dan), secara fisik/ panas 100 o C selama  30  menit  (Harun et  al .,  2011),  dan secara  biologi  menggunakan  mikroorganisme cellvibrio (Saropah et  al .,  2012;  Schafer  dan King,  1965;  Kitaoka et  al., 1992).  Pengecekan hasil  gula  reduksi  dilakukan  setiap  24  jam selama 5 hari.
Purifikasi Pretreatment Hidrolisis Fermentasi Polimer lepas Glukosa Etanol Lignoselulosa

## PEMBENTUKAN GULA REDUKSI DARI ECENG GONDOK … (RIZKA NOVEMBRIANTO DAN MUSLIKHA NOURMA RHOMADHONI)

## Analisa Pengujian
Kandungan  lignoseluslosa  menggunakan metode  Chesson  (Datta,  1981).  Pengukuran gula  reduksi  menggunakan  metode  Nelson Somogy.  Semua  pengujian  dilakukan  secara duplo.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Pertumbuhan Biakan Bakteri Selulolitik
Pada laporan Sanito dkk., 2015
menyebutkan  bahwa  jumlah Cellvibrio dengan pertumbuhan  tanpa shaker untuk  mencapai pertumbuhan  maksimum  memerlukan  waktu inkubasi  hingga  144  jam  dan  waktu  setengah laju  pertumbuhan  antara  72  hingga  96  jam. Pertumbuhan Cellvibrio dengan shaker memerlukan  waktu  hingga  36  jam  dan  waktu setengah laju pertumbuhan (1/2 v maks ) adalah 10 jam.  Kedua  perlakuan  tersebut  didapatkan bahwa  pertumbuhan  yang  cepat  menggunakan shaker. Pada  penelitian  ini  menggunakan pertumbuhan  bakteri Cellvibrio menggunakan shaker. Hal ini dimaksudkan untuk mempercepat  waktu seeding sehingga  dapat digunakan  untuk  proses  enzimatik  hidrolisis lebih  cepat  dari  pertumbuhan  yang  tanpa menggunakan shaker .

## Komponen Lignoselulosa
Sebelum melangkah melakukan penelitian pada tahap pretreatment dan hidrolisis, dilakukan dengan uji awal kandungan lignoselulosa terlebih dahulu dengan hasil seperti Tabel-1 dibawah ini
Tabel-1 : Perbandingan kandungan lignoselulosa eceng gondok terhadap penelitian lainnya
Kandungan lignoselulosa (%) Literatur Hemiselulosa Selulosa Lignin 33,40 19,50 9,27 Gunnarson, 2007 33,95 12,38 8,76 Hasil penelitian
Pada Tabel-1 hasil  penelitian  dengan kandungan  hemiselulosa,  selulosa  dan  lignin berturut-turut adalah 33,95%, 12,38 dan 8,76 % jika dibandingkan dengan penelitian Gunnarson,  2007  ada  sedikit  perbedaan. Kandungan umumnya hemiselulosa lebih tinggi dari  pada  kandungan  lignin  dan  selulosa  hal demikian  juga  disampaikan  oleh Ma et  al . (2010).  Dinding  sel  tersusun  rangka  molekul selulosa  dan  lignin.  Bagian  tersebut  yang
menyebabkan  ikatan  menjadi  kuat.  Hasil Analisa  awal  ini  terjadi  perbedaan  karena likasi  dan  perlakuan  terhadap  sampel  juga berbeda.  Selain  itu  juga  mempengaruhi  hasil gula  reduksi  yang  telah  dihasilkan  yang ditampilkan pada Tabel-2 .
Tabel-2 : Perlakuan pada substrat 5 g (0,1% b/v) setelah 5 hari dalam menguji Kandungan lignoselulosa
Perlakuan lignoselulosa dari berbagai treatment dan hasil  gula reduksi (dalam mg/g) Kandungan Awal Setelah oven JPP 10 hari Hidrolisa 0,25 % H 2 SO 4,
Panas dan Cellvibrio Hidrolisa
2 %
H 2 SO 4, panas dan Cellvibrio Hemiselulosa 33,95 24,15 8,22 6,17 Selulosa 12,38   9,72 3,84 3,15 Lignin 8,76   6,55 4,26 3,45 Gula Reduksi 12,29  21,20 51,60 56,36 pH 7,43  6,89 7,52 7,12
Tabel-2 juga menunjukkan bahwa proses hidrolisa  mampu  menghasilkan  gula  reduksi hingga  mencapai  lebih  dari  2  kali  lipat.  Pada proses  awal  setelah  oven  hingga  JPP  10  hari pernah  dilakukan  oleh  Novembrianto,  (2014) sebagai pretreatment .  Proses  pengeringan menggunakan  oven  dengan  temperatur  60 o C selama dua hari. Saat analisa awal yakni setelah melalui  proses  oven  60 o C  selama  dua  hari, eceng  gondok  didapatkan  hasil  gula  reduksi sebesar  12,29  mg/g.  Penelitian  Harun et  al . (2011)  dengan  cara  pemanasan  (oven  kering) mampu  menghasilkan  gula  reduksi  sebesar 111,45  mg/g  dan  dengan  menggunakan pemanasan  100+3 o C  (mendidih)  sebesar  33,55 mg/g. Perbedaan nilai gula reduksi dipengaruhi oleh  perlakuan  saat  proses  persiapan  bahan baku substrat. Nilai holoselulosa (hemiselulosa dan selulosa).
Laju  pembentukan  gula  reduksi  pada variasi 0,25 % H 2 SO4 dan Cellvibrio Pembentukan  gula  reduksi  pada  dengan kombinasi  0,25  %  H 2 SO 4 dan Cellvibrio menghasilkan  0,155  mg/g.jam  sampai  dengan 0,744  mg/g.jam.  Gula  reduksi  yang  dihasilkan memiliki  laju  pembentukan  dibuat  variasi waktu 24, 48, 72, 96 dan 120 jam serta variasi substrat  0,025;  0,057;  0,1;  0,161  dan  0,232  % (b/v).

## DAN MUSLIKHA NOURMA RHOMADHONI)
Gambar-2 : Laju pembentukan gula reduksi saat pretreatment 0,25 % H 2 SO 4 dan hidrolisis dengan Cellvibrio
Gambar-2 memperlihatkan Cellvibrio dalam pembentukan gula reduksi menunjukkan peningkatan  sampai  mencapai  optimum  secara keseluruhan  pada  96  jam  dengan  perolehan substrat 0,232 % (b/v) sebesar 0,744 mg/g.jam.
Pada  jam  ke-120  pembentukan  gula reduksi  terlihat  mulai  mengalami  penurunan. Hal ini dapat dianalogikan karakter pertumbuhan mikroorganisme seperti penelitian Sanito  dkk,  (2015) Cellvibrio dalam  media broth tanpa shaker yakni  pada  hari  keempat laju  pertumbuhan  mulai  tidak  mengalami kenaikan  signifikan.  Selain  itu  juga  menurut Fontes et  al .  (2000)  pertumbuhan Cellvibrio pada  fase  eksponensial  terjadi  antara  30  jam dan  60  jam, Cellvibrio  mixtus melokalisir xilanase dengan kehadiran protein periplasmik.
pH  yang  diukur  saat  setelah  proses hidrolisis  berkisar  antara  7-7,98.  Pada  kisaran pH  tersebut  masih  dapat  hidup,  karena  pH Cellvibrio untuk  hidup  berkisar  antara  6,4 hingga 8,2 (Kitaoka et al ., 1992). Pertumbuhan Cellvibrio ditandai dengan adanya pembentukan  biofilm.  Menurut  Khairiah et  al . (2013)  genus Cellvibrio menghasilkan  enzim katalase  yang  mampu  mendegradasi  selulosa dan  mengubah  menjadi  glukosa.  Kemampuan bakteri  pendegradasi  selulosa  diindikasikan terbentuknya  daerah  bening  disekitar  koloni (Perez et al ., 2002).
Laju  pembentukan  gula  reduksi  pada variasi 2 % H 2 SO 4 dan Cellvibrio Hasil penelitian menerangkan bahwa laju pembentukan  gula  reduksi  dengan  variasi  2  % H 2 SO 4 Cellvibrio berselang antara 0,125 hingga
0,469  mg/g.jam.  Hasil  tersebut  lebih  rendah daripada variasi 0,25 % H2SO4 Cellvibrio.
Gambar-3 : Peningkatan gula reduksi saat pretreatment 2 % H 2 SO 4 dan hidrolisis dengan Cellvibrio
Gambar-3
menjelaskan laju pembentukan  gula  reduksi  yang  tinggi  berada pada  substrat  0,232  %  (b/v)  untuk  waktu  24 jam  menghasilkan  laju  0,312  mg/g.jam  dan meningkat  sedikit  pada  48  jam  dengan  laju 0,350  mg/g.jam  dan  terus  meningkat  pada  jam ke  72  yakni  0,469  mg/g.jam.  Laju  menjadi menurun  pada  jam  ke  96  menjadi  0,415 mg/g.jam. Laju meningkat kembali pada jam ke 120  jam  dengan  laju  0,418  mg/g.jam.  Pada  72 jam  terjadi  peningkatan  yang  paling  besar  dari perubahan  waktu  lainnya  dari  0,350  mg/g.jam ke  0,469  mg/g.jam.  Hal itu juga  sesuai  dengan karakter  pertumbuhan  mikroorganisme  dengan ½  V maks Cellvibrio yakni  72  jam  seperti  yang pernah dilaporkan oleh Sanito, dkk., (2015).
Hasil laju pembentukan gula reduksi oleh Cellvibrio seperti  yang  ditunjukkan  pada Gambar-3  menjelaskan  peningkatan  sangat kecil  sekali  dibandingkan  dengan  variasi sebelumnya. Kecenderungan peningkatan terbesar  pada  waktu  96  jam.  Peningkatan  laju pembentukan gula reduksi yang kecil dikarenakan  suasana  asam  yang  pada  layer bagian tengah reaktor (ketinggiannya), kemungkinan  masih  terjadi  pembentukan  gula reduksi  dikarenakan  masih  terdapat  substrat dengan  suasana  netral  antara  6,87  hingga  7,81 sedangkan  menurut  Kitaoka et  al .  (1992) cellvibrio dapat  hidup  pada  pH  6,4  hingga  8,2 sehingga  bakteri  masih  hidup.  Hal  ini  dapat dibuktikan  dengan  terbentuknya  biofilm  pada layer bagian atas pada substrat eceng gondok.

## PEMBENTUKAN GULA REDUKSI DARI ECENG GONDOK … (RIZKA NOVEMBRIANTO DAN MUSLIKHA NOURMA RHOMADHONI)

## Perbandingan Laju Pembentukan Optimum dari berbagai variasi
Laju  pembentukan  gula  reduksi  dari berbagai  variasi  dapat  diambil  yang  paling optimum.  Selanjutnya  membandingkan  untuk mengetahui  laju  yang  optimum  seperti  pada Tabel 3.
Tabel-3 : Perbandingan laju pembentukan gula reduksi dari berbagai variasi optimum Substrat % (b/v) 0,25 % H 2 SO 4, Cellvibrio (mg/g.jam) 2 % H 2 SO 4, Cellvibrio (mg/g.jam) 0,025 0,331 0,220 0,057 0,645 0,299 0,100 0,487 0,320 0,161 0,584 0,387 0,232 0,744 0,469
Tabel-3 Perbandingan laju pembentukan gula reduksi dari berbagai variasi menunjukkan bahwa substrat 0,232 % (b/v) dan untuk variasi 0,25  %  H 2 SO 4, Cellvibrio memiliki  0,744 mg/g.jam. Untuk variasi 2 % H 2 SO 4 , Cellvibrio yakni 0,469 mg/g.jam.
Laju Pembentukan Gula Reduksi
Gambar-4 : Perbandingan laju pembentukan gula reduksi pada masing – masing variasi optimum.
Gambar-4 dapat  dilihat  perbandingan laju  pembentukan  gula  reduksi  pada  dari berbagai variasi yang optimum didapatkan hasil yang  terbaik  adalah  kombinasi  dengan  0,25  % H 2 SO 4 Cellvibrio dengan  substrat  0,232  % (b/v).  Hal  ini  disebabkan  bakteri  mempunyai ukuran  lebih  kecil  sehingga  dapat  melakukan penetrasi atau berdifusi lebih mudah ke substrat
yang  mengandung  selulosa  (Li  dan  Gao  dalam Saropah et al ., 2012).

## Laju Reaksi pada hidrolisis 96 jam
Nilai V maks untuk mengetahui kecenderungan  laju  pembentukan  gula  reduksi terbesar.  Nilai  K m berfungsi  untuk  mengetahui afinitas  enzim  terhadap  substrat.  Semakin  nilai K m rendah  maka  afinitas  enzim  terhadap substrat semakin baik (Putra, 2009). Untuk plot grafik  antara  substrat  [S]  dan  aktivitas  enzim (V)  diubah  menjadi  berbanding  terbalik terhadap  (1/[S])  dan  (1/V).  Nilai  Vmaks  dan Km dapat ditetapkan melalui Kurva Lineweaver-Burk dengan cara : 1/V = 1/V maks + K m /V maks .1/[S]  ,  bila  1/V  =  Y  dan  1/S  =  X, sehingga  rumusnya  menjadi  :  Y  =  a  +  bX sehingga a = 1/ V maks dan b = K m /V maks .
Gambar-3 : Grafik hubungan antara 1/[S] dan 1/V
Kurva  pada  Gambar  3,  menjelaskan hubungan  antara  1/[S]  dan  1/V  berdasarkan persamaan  regresi  linier  Y=  0,04x  +  1,3116 untuk  0,25  %  H 2 SO 4 Cellvibrio, didapatkan V maks dan  K m sebesar  0,762  mg/g.jam  dan 0,03%;  serta  V maks dan  K m berdasarkan persamaan  regresi  linier  Y=  0,057x  +  2,3117 untuk 2 % H 2 SO 4 sebesar Vmaks sebesar 0,432 mg/g.jam dan K m senilai 0,025 %.

## KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian diatas,
kesimpulan  yang  didapatkan  laju  pembentukan gula  reduksi  tertinggi  pada  substrat  eceng gondok  20  gram  menggunakan  kombinasi pretreatment jamur P.  chrysosporium, dan hidrolisis kombinasi 0,25 % H 2 SO 4 ; pemanasan (didih)  100  +  3 o C  selama  30  menit  Serta penambahan Cellvibrio dan  hidrolisis  selama 96  jam.  Laju  pembentukan  gula  reduksi maksimum  dalam  hidrolisis  (V maks )  adalah
0,762 mg/g.jam dan K m senilai 0,03%.
0,25 % H 2 SO 4 , Cellvibrio

## PEMBENTUKAN GULA REDUKSI DARI ECENG GONDOK … (RIZKA NOVEMBRIANTO DAN MUSLIKHA NOURMA RHOMADHONI)

## DAFTAR PUSTAKA
Cordero,  O.  X.,  2012.  Enriching  spatially structured  communities  of  cellulose degraders.  Massachusetts  Institute  of Technology.
Ekawati, E. R., Matuzahroh, N. dan
Supriyanto.,  A.,  2012.  Eksplorasi  dan Identifikasi  Bakteri  Selulolitik  pada Limbah Daduk Tebu (Saccharum Officinarum  L).  Fakultas  Sains  dan Teknologi Universitas Airlangga Surabaya.Berk.Penel. Hayati 18 : 31–34. Fontes, C. M. G. A., Gilbert, H. J., Hazlewood
G.  P.  dan  Clarke,  J.  H.,  2000.  A  novel Cellvibrio mixtus family 10 xylanase that is  both  intracellular  and  expressed  under non-inducing  conditions.  Microbiology
146 : 1959–1967
Ganguly,  A.,  Chatterjee  P.K.,  Dey  A.,  (2012)
Studies on ethanol production from water hyacinth—A  review.  Renewable  and Sustainable  Energy  Reviews  16  :  966– 972.
Gunnarsson,  C.  C.,  Petersen,  C.  M.    (2007).
Water  hyacinths  as  a  resource  in agriculture  and  energy  production:  A literature  review.  Waste  Management  27 : 117–129
Handayani, A. G. dan Pandebesie, E. S. (2014).
Hidrolisis
Eichhornia crassipes menggunakan  proses  fisika,  kimia,  dan biologis.  Prosiding  Seminar  Nasional
Waste  Management  II.  ISBN  978-602- 95595-7-6
Harun,  M.  Y.,  Radiah  A.  B.,  Abidin  Z.  Z.  dan
Yunus,  R.  (2011).  Effect  of  physical pretreatment on dilute acid hydrolysis of water  hyacinth  (Eichhornia  crassipes). Bioresource  Technology  102  :  5193– 5199
Khairiah  E.,  Khotimah  S.,  Mulyadi  A.,  2013. Karakterisasi  dan  Kepadatan  Bakteri Pendegradasi Selulosa pada Tanah Gambut  di  Desa  Parit  Banjar  Kabupaten Pontianak.  Jurnal  Protobiont  vol.  2  (2)  : 87- 92
Kitaoka,  M.,  Sasaki,  T.,  Taniguchi,  H.,  1992. Phosphorolytic  Reaction  of  Cellvibrio gilvus  cellobiose  phoshorylase.  Biosci. Biotech. Biochem., 56 (4) : 652-655.
Ma,  F.,  Yang,  N.,  Xu,  C., Yu,  H.,  Wu,  Y.  dan
Zhang. (2010).
Combination of biological pretreatment or  enzimatic hydrolysis  and  ethanol  production  from
water  hyacinth.  Bioresource  Technology 101 : 9600-9604
Mergaert, J., Lednicka D., Goris J.,1 Cnockaert M.  C,  Vos  P.  D.  and  Swings  J.,  2003. Taxonomic  study  of  Cellvibrio  strains and description of Cellvibrio ostraviensis sp.  nov.,  Cellvibrio  fibrivorans  sp.  nov. and  Cellvibrio  gandavensis  sp.  nov. International  Journal  of  Systematic  and Evolutionary Microbiology 53 : 465–471.
Mood,  S.  H.,  Golfeshan  A.  H.,  Tabatabaei  M., Jouzani G. S., Najafi G. H., Gholami M., Ardjman  M.  (2013).    Lignocellulosic biomass  to  bioethanol,  a  comprehensive review  with  a  focus  on pretreatment . Renewable  and  Sustainable  Energy Reviews 27 : 77–93.
Putra, G. P. G. 2009. Determination of enzyme kinetics of endogenous polygalacturonase (pg) from cocoa pulp. Jurnal Biologi XIII (1) : 21 -24
Perez,  J.,  Dorado,  J.  M.,  Rubia,  T.  R.  dan Martinez,  J.,  2002.  Biodegradation  and biological treatments of cellulos, hemicellulose  and  lignin  :  an  overview. Int. microbial 5 : 53-63.
Schafer,  M.  L  dan  King.  K.,  1965.  Ulitization of cellulose oligosaccharides by Cellvibri gilvus. Bacteriology, vol. 89 No 1.
Sanito R. C., Novembrianto, R.,  Pandebesie, E. S.,  (2015).  Kajian  Penentuan  Fase Pertumbuhan Kapang dan Bakteri Selulolitik    pada  Media  Pertumbuhan, Prosiding  Seminar  Nasional  Manajemen Teknologi XII.
Saropah,  D.  A.,  Jannah  A.,  dan  Maunatin  A.
(2012). Kinetika reaksi enzimatis ekstrak kasar  enzim  selulase  bakteri  selulolitik hasil  isolasi  dari  bekatul.  Alchemy,  Vol. 2 No. 1. hal 34-45.
Singh,  A.  dan  Bishnoi,  N.  R.  (2013). Comparative study of various pretreatment techniques  for  ethanol production from water hyacinth
Industrial  Crops  and  Products  44  (2013) 283– 289.
Taherzadeh,  M.  dan  Karimi  K.  (2007). Enzyme-Based  Hydrolysis  Processes  for Ethanol From Lignocellulosic Materials : Review. Bioresources 2(4), 707-738.