## Efektivitas Ekstrak Daun Gelinggang (Cassia alata L.) terhadap Pertumbuhan Bakteri Gram Positif
Staphylococcus aureus
Effectiveness of Gelinggang Leaf Extract (Cassia alata L.) on Growth of Gram Positive Bacteria

## Staphylococcus aureus
Periskila Dina Kali Kulla 1* , Syamsul Qhamal 2 , Zulwanis 3 , Rulia Meilina 4 1,2,4 Program Studi S-1 Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Ubudiyah Indonesia, Aceh, Indonesia
3 Program Studi Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Syiah Kuala, Aceh, Indonesia *Korespondensi penulis: periskila@uui.ac.id* ; syamsulqhamal@gmail.com 2 ; zulwanis@usk.ac.id 3

## Abstrak
Daun gelinggang ( Cassia alata L.) sering digunakan masyarakat sebagai obat tradisional untuk penyembuhan penyakit kulit dan luka infeksi dengan adanya senyawa  fitokimia yang  terkandung      pada  daun  gelinggang  yaitu  senyawa  alkaloid,  flavonoid,  fenolik, saponin  dan  steroid.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  efektivitas  dan  daya hambat ekstrak daun gelinggang terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus. Penelitian  yang  dilakukan  bersifat  eksperimental.  Objek  yang  diteliti  adalah  daun gelinggang  yang  dibuat  dalam  bentuk  ekstrak  menggunakan  metode maserasi  dengan pelarut 96%. Konsentrasi ekstrak etanol daun gelinggang yang digunakan sebesar 10%, 20%, 30%, 40% dan 50% dengan kontrol positif eritromisin dan kontrol negatif DMSO. Uji  aktivitas  antibakteri  menggunakan  metode  difusi  cakram  dengan  melihat  zona hambat yang terbentuk disekitar kertas cakram. Berdasarkan hasil penelitian uji aktivitas antibakteri menunjukkan ekstrak etanol daun gelinggang memiliki aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus . Dengan  konsentrasi 10%, 20%, 30%, 40% dan 50% secara  berurutan  zona  hambat  yang  terbentuk  adalah  8,58  mm,  9,62  mm,  10,92  mm, 12,27  mm  dan  14,46  mm.  Pada  penelitian  ini  dapat  disimpulkan  ekstrak  etanol  daun gelinggang dengan pelarut etanol 96% efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus. Ekstrak  etanol  daun  gelinggang  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus pada  konsentrasi  10%  dan  20%  dengan kategori sedang, sedangkan pada konsentrasi 30%, 40%, dan 50% dengan kategori kuat.
Kata kunci : Antibakteri, Daya hambat, Gelinggang ( Cassia alata L.), Staphylococcus aureus

## Abstract
Gelinggang  leaves  (Cassia  alata  L.)  are  often  used  by  the  public  as  a  traditional medicine  for  healing  skin  diseases  and  infectious  wounds  in  the  presence  of phytochemical  compounds  contained  in  the  leaves,  namely  alkaloids,  flavonoids, phenolics,  saponins  and  steroids.  This  study  aims  to  determine  the  effectiveness  and inhibition  of  Gelinggang  leaf  extract  against  the  growth  of  Staphylococcus  aureus bacteria.  The  research  conducted  was  experimental.  The  object  studied  was  the Gelinggang leaf which was made in the form of an extract using the maceration method
with 96% solvent. The concentrations of ethanol extract of Gelinggang leaves used were 10%, 20%, 30%, 40% and 50% with Erythromycin positive control and DMSO negative control. The antibacterial activity test used the disc diffusion method by looking at the zone of inhibition that was formed around the disc paper. Based on the research results, the antibacterial activity test showed that the ethanol extract of the leaves of Ge;inggang had antibacterial activity against Staphylococcus aureus. With a concentration of 10%, 20%, 30%, 40% and 50% respectively the inhibition zone formed is 8.58 mm, 9.62 mm, 10.92 mm, 12.27 mm and 14.46 mm. In this study, it can be concluded that the ethanol extract  of  Gelinggang  leaves  with  96%  ethanol  solvent  is  effective  in  inhibiting  the growth of Staphylococcus aureus bacteria. Gelinggang leaf ethanol extract can inhibit the growth of Staphylococcus aureus bacteria at concentrations of 10% and 20% in the moderate  category,  while  at  concentrations  of  30%,  40%,  and  50%  in  the  strong category.
Keywords:  Antibacterial,  Inhibition,  Cassia  alata  L.  (Gelinggang),  Staphylococcus aureus.

## PENDAHULUAN
Indonesia terdiri dari berbagai suku bangsa yang memiliki keanekaragaman jenis tumbuhan obat. Salah satu tumbuhan yang dapat dijadikan sebagai tanaman obat adalah tumbuhan gelinggang ( Cassia alata L.). Gelinggang merupakan tumbuhan perdu yang tumbuh secara liar di tempat- tempat yang lembab dan merupakan kelompok tumbuhan yang  termasuk  dalam  divisi Magnoliophyta yang  mudah  ditemukan  di  daerah  tropis maupun subtropis (Egra, dkk, 2019).
Daun  gelinggang  ( Cassia  alata L.)  biasa  digunakan  oleh  masyarakat  sebagai obat tradisional untuk penyembuhan penyakit kulit, luka infeksi, influenza dan bronkitis (Nurlansi dan Jahidin, 2017). Pada penelitian yang dilakukan oleh Jayasree (2016) juga membuktikan bahwa  daun  gelinggang  mempunyai  beberapa aktivitas  biologis  seperti antitumor, antiinflamatori,  analgesik,  hipoglisemik  dan  antibakteri.  Aktivitas  tersebut tentu  dipengaruhi  oleh  kandungan  metabolit  sekunder.  Pada  penelitian  sebelumnya yang  dilakukan  oleh  Annas  (2014)  menunjukkan  adanya  senyawa  fitokimia  yang terkandung  pada  daun  gelinggang  mengandung  senyawa  alkaloid,  flavonoid,  fenolik, saponin  dan  steroid.  Selain  itu  terdapat  kandungan  antrakuinon,  tanin,  dan terpenoid (Sugita, 2014).
Senyawa saponin, flavonoid, dan tanin dapat bekerja sebagai antimikroba dan merangsang  pertumbuhan  sel  baru  pada  luka  (Fitri,  dkk,  2017).  Kurniasari  dalam Lumbessy  dkk  (2013)  menyatakan  bahwa  sejumlah  tanaman  obat  yang mengandung flavonoid telah dilaporkan memiliki aktivitas antibakteri. Zat antibakteri adalah zat yang dapat membunuh  atau  menghambat pertumbuhan  bakteri  sehingga  dapat  digunakan untuk mencegah atau mengatasi infeksi bakteri (Sulistyaningsih,  dkk, 2016).
Staphylococcus  aureus merupakan  bakteri  patogen  utama  pada  manusia  dan merupakan salah satu bakteri gram positif yang hidup sebagai saprofit di dalam saluran membran  tubuh  manusia,  permukaan  kulit,  kelenjar  keringat  dan  saluran  usus (Nurwahdaniati,  2014).  Penyakit  yang  biasanya  ditimbulkan  oleh Staphylococcus
aureus adalah radang, kematian sel dan pembentukan dari abses yang menyerang atau menginfeksi tiap-tiap jaringan tubuh dan menimbulkan penyakit  yang memiliki tanda- tanda  tertentu  (Sikumbang,  dkk,  2019).  Penyakit  infeksi  dapat  diobati  dengan menggunakan antibiotik  yang  sampai  saat  ini  masih menjadi  obat  andalan  dalam menangani  kasus-kasus  penyakit  infeksi  terhadap  bakteri  yang  bersifat  patogen  pada manusia,  namun  penggunaan  obat  antibiotik  secara  tidak  tepat  dapat  menimbulkan kerugian yang luas dari segi ekonomi dan kesehatan (Utami, 2012). Hal ini menimbulkan kekhawatiran  akan  munculnya  strain  bakteri  baru  yang resisten  terhadap  antibiotik (Akeel, dkk, 2017).
Peningkatan  pada  bakteri  yang  resisten  terhadap  sejumlah  agen  antibakteri menuntut  upaya  baru  untuk  mencari  agen  antibakteri  yang  efektif  melawan  bakteri patogen, sehingga penulis tertarik melakukan penelitian tentang uji daya hambat ekstrak daun gelinggang ( Cassia alata L.) terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus yang mempunyai senyawa sebagai antibakteri.

## METODELOGI PENELITIAN

## Aat dan Bahan
Alat yang digunakan adalah Water bath (pemanas air), Timbangan, panci infus, pisau,  gunting,  corong  pisah, beaker  glass ,  termometer,  petridish,  pinset,  pipet  tetes, masker, ose bulat, swab steril, lampu spiritus, gelas erlenmeyer , kertas ubi, kain flanel, mikroskop,  tabung  reaksi,  kertas tissue , handscoon ,  mistar,  neraca  analitik, blender, tabung steril, incubator, autoklaf , cawan petri, sarung tangan.
Bahan yang akan digunakan yaitu daun gelinggang, akuades, etanol 96%, Muller Hilton  Agar (MHA),  eritromisin  25  µg, Dimetil  Sulfoksida (DMSO),  bakteri Staphylococcus  aureus yang  diperoleh  dari laboratorium  Mikrobiologi  FKH  Unsyiah, Larutan Standar Mc Farland 0,5, NaCl 0,9 %, ammonium oxalate violet,  larutan lugol, alkohol, dan safranin.

## Penyiapan Bahan Pembuatan Simplisia
Bahan diambil dari perkebunan yang berada di kampung halaman daerah Aceh Barat  Daya  berupa  daun  Gelinggang  ( Cassia  alata L.)  yang  segar,  tidak  layu,  daun berwarna hijau tidak menguning dan tidak memiliki rusak fisik seperti berlubang. Daun Gelinggang  ( Cassia  alata L.)  yang  telah  dikumpulkan,  dibersihkan dari  pengotor  lain, dicuci dengan air mengalir sampai bersih. Daun gelinggang kemudian dirajang kecil- kecil  untuk  memudahkan  pada  saat  pengeringan  lalu ditimbang  berat  basahnya.  Daun gelinggang kemudian dikeringkan dengan cara dioven dengan suhu 50°C (Kemenkes RI, 2009). Setelah dikeringkan, daun gelinggang ditimbang dan diperoleh berat kering. Daun  gelinggang  yang  sudah  kering  dihaluskan  hingga  menjadi  serbuk  dengan menggunakan  blender.  Serbuk
kemudian  diayak  dengan  menggunakan  ayakan  berukuran  40  mesh  sehingga  menjadi serbuk simplisia halus (Kemenkes RI, 2009). Selanjutnya dilakukan proses standarisasi dan skrining fitokimia pada simplisia daun gelinggang.

## Pembuatan Ekstrak Daun Gelinggang (Cassia alata L.)
Proses  ekstraksi  menggunakan metode  maserasi  dengan  pelarut  etanol  70%. Serbuk  simplisia  dimaserasi  selama
5 hari, yang mana sebanyak 300  g simplisia dimasukkan ke dalam toples kaca kemudian direndam menggunakan pelarut etanol 96% ditutup dengan aluminium foil selama 3 hari (sesekali  diaduk)  lalu  disaring  menggunakan  kertas  saring  dan diperoleh  filtrat  1  dan ampas. Ampas direndam ulang dengan menggunakan pelarut etanol 96% selama 2 hari (sesekali diaduk) kemudian disaring menggunakan kertas saring dan diperoleh filtrat 2 dan ampas.  Selanjutnya  satukan  filtrat  1  dan  2  pekatkan  di rotary  evaporator sampai diperoleh ekstrak kental.

## Pembuatan Media
Pembuatan Mueller-Hilton Agar (MHA)
Ambil Mueller-Hilton  Agar (MHA)  sebanyak  2,04  gram,  tambahkan akudes sebanyak  60  ml  kemudian  dimasukkan  kedalam  erlenmayer,  aduk dengan  rata  dan dipanaskan  sampai mendidih  kemudian  sterilkan  dalam  autoclave  pada  suhu  121°C selama 25 menit, tunggu agak dingin (MHA didinginkan agar tidak terjadi kondensasi air pada saat penuangan). Lalu bagikan dalam tiga petridish,  masing-masing  20 ml.

## Pembuatan Suspensi Standar McFarland
Larutan  H 2 SO 4 0,36  N  sebanyak  99,5  ml  dicampurkan  dengan  larutan BaCl 2 .2H 2 O  1,175%  sebanyak  0,5  ml  dalam  erlenmeyer.  Kemudian  dikocok  sampai terbentuk larutan yang keruh. Kekeruhan ini dipakai sebagai standar kekeruhan suspensi bakteri uji.

## Aktivitas Antibakteri Sterilisasi Alat
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian  aktivitas  antibakteri  disterilkan terlebih  dahulu,  alat-alat  gelas  disterilkan  dalam  oven  pada  suhu  180˚C  selama  ±  30 menit dan jarum ose dibakar dengan pembakaran di atas api langsung (Muljono, dkk, 2016).

## Peremajaan Biakan Bakteri Murni

## Staphylococcus aureus
Masing-masing isolat Staphylococcus aureus yang berasal dari biakan murninya diambil sebanyak 1 ose kemudian ditumbuhkan atau diinokulasikan dengan cara digores pada medium Mueller  Hilton  Agar (MHA)  miring,  kutur  bakteri  pada  masing-masing agar miring diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam (Ngantung, dkk, 2016).

## Pembuatan Suspensi Bakteri
Diambil bakteri yang telah diremajakan dengan ose, dimasukkan kedalam 10 ml larutan  NaCl  0,9%  steril  dan  dikocok,  dibandingkan  dengan  larutan  McFarland pertumbuhan bakteri ditandai dengan adanya kekeruhan (Hafizah, dkk, 2015).

## Pengujian Aktivitas Ekstrak Daun Gelinggang (Cassia alata L.) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus
Uji  daya  hambat  menggunakan  metode  difusi  agar  yaitu  kertas  cakram. Disiapkan  cawan  petri  yang  telah disterilkan  dengan  autoclave.  Masukkan  0,1  ml masing-masing suspensi bakteri uji Staphylococcus aureus . Suspensi  bakteri uji diambil dengan  menggunakan  swap  steril,  oleskan  suspensi  ke  dalam  seluruh  permukaan Mueller-Hilton Agar (MHA) plat dengan arah pengusapan tegak lurus satu sama lain, dari  arah  perputaran  membentuk  sudut  90°C.  Tempelkan  kertas  cakram  yang  telah dibasahi ekstrak daun gelinggang pada permukaan MHA plat dan ditekan dengan pinset steril  agar  melekat,  atur  jarak  eritromisin  dan Dimetil  Sulfoksida (DMSO)  dengan sampel  agar tidak  terlalu  berdekatan.  Sebagai  kontrol positif  menggunakan  eritromisin yang  diletakkan  pada  permukaan  MHA  plat.  Sebagai  kontrol  negatif  menggunakan DMSO yang ditempelkan pada MHA plat dengan mengunakan kertas  cakram. Setelah selesai  maka  MHA  plat  tersebut diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama  24  jam  didalam incubator. Setelah 24 jam, amati daerah bening disekitar kertas cakram dan ukur zona yang terjadi untuk setiap sampel dengan menggunakan mistar dalam millimeter.

## Teknik Analisis Data
Data dapat diperoleh dari hasil pengujian zona hambatan ekstrak daun gelinggang ( Cassia alata L.). Data perhitungan hasil diameter zona hambat pada setiap bahan coba diukur  melalui nilai rerata. Data yang sudah diolah disajikan dalam bentuk tabel, tulisan dan gambar. Perhitungan dilakukan dengan menggunakan program  komputer Microsoft Excel 2010 (Kawengian, dkk, 2017).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Simplisia dan Ekstrak Daun Gelinggang (Cassia alata L.)
Hasil  serbuk  simplisia  halus  yang  diperoleh  sebanyak  327,43  gram.  Kemudian dilakukan  proses  ekstraksi dengan  metode  maserasi  menggunakan pelarut  etanol  96%. Metode maserasi dipilih karena proses pengerjaan yang mudah dan peralatan yang cukup sederhana,  metode  ini  tidak  menggunakan  pemanasan  sehingga  bahan  alam  tidak menjadi  terurai  (Nurhasnawati,  dkk,  2017).  Tahapan  selanjutnya  adalah  proses pemekatan  atau  evaporasi  dengan menggunakan  evaporator  pada  suhu  45-  50°C  agar sampel tidak rusak  dan diperoleh ekstrak kental. Berdasarkan hasil yang diperoleh bobot ekstrak  kental sebesar  10,052  gram  dengan  rendemen  ekstrak  sebesar  3,350%  (b/b). Ekstrak simplisia  daun  gelinggang  menghasilkan  ekstrak  yang  kental  dan  pekat, berwarna hijau pekat, bau aromatik, dan memiliki rasa yang pahit.

## Hasil Standarisasi Simplisia Daun Gelinggang (Cassia alata L.)
Standarisasi dilakukan agar dapat diperoleh bahan baku yang seragam yang dapat menjamin  aktivitas  farmakologi  tanaman  tersebut.  Standarisasi  merupakan  proses penjaminan  produk  akhir  (simplisia,  ekstrak,  produk  atau  produk  herbal)  agar mempunyai  nilai  parameter  tertentu  yang  konstan  (Putranti,  Dewi  and  Widiyastuti, 2018). Hasil standarisasi simplisia meliputi kadar air, kadar sari larut air, kadar sari larut etanol, kadar abu, dan kadar abu tidak larut asam, yang dapat dilihat pada Tabel 1 berikut:
Tabel 1. Hasil Standarisasi Daun                   Gelinggang No. Karakterisasi Kadar (%) Syarat MMI (%) Keterangan 1. Kadar Air 6,3424 <10 Memenuhi Syarat 2. Kadar Sari Larut Air 20,5886 >5 Memenuhi Syarat 3. Kadar Sari Larut Etanol 23,6356 >5 Memenuhi Syarat 4. Kadar Abu Total 3,941 <11 Memenuhi Syarat 5. Kadar Abu Tidak Larut Asam 0,3482 <1
Memenuhi Syarat

## Hasil Skrining Fitokimia  Simplisia Daun Gelinggang (Cassia alata L.)
Skrining fitokimia merupakan pemeriksaan kandungan senyawa kimia secara kualitatif  untuk  mengetahui  golongan  senyawa  yang  terkandung  suatu  tanaman. Pengujian  senyawa  metabolit  sekunder  tersebut  meliputi  uji  alkaloid,  flavonoid, saponin, tanin dan steroid. Hasil skrining fitokimia dapat dilihat pada Tabel 2 berikut ini:
Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia Simplisia Daun Gelinggang
Kandungan Metabolit Reagen Hasil Uji Hasil Pengamatan Flavonoid Hcl dan Logam Mg + Terbentuk Warna Kuning Alkaloid Mayer - Tidak Terbentuk Endapan Putih/Kuning Wagner + Terbentuk Endapan Coklat
Journal of Healthcare Technology and Medicine Vol. 9 No. 1 April 2023 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
Dragendorff + Terbentuk Endapan Merah Bata Steroid Uji Liebermann- Burchard + Terbentuk Warna Hijau Triterpenoid Uji Liebermann - Burchard - Tidak Terbentuk Warna Merah Fenolik FeCl3 + Terbentuk Warna Hijau Kehitaman Saponin Aquadest + Berbusa Tanin FeCl3 + Terbentuk Warna Hijau Kehitaman

## Hasil Pengujian Antibakteri
Ekstrak  daun  gelinggang  digunakan sebagai  larutan  uji  dengan  konsentrasi yang bertingkat yaitu 10%, 20%, 30%, 40%, dan 50%. Kontrol negatif yang digunakan berupa Dimethyl  Sufoxide (DMSO)  dan  kontrol  positif  berupa  Erytromicin  yang digunakan  sebagai  larutan  pembanding.  Uji daya  hambat  ekstrak  etanol  daun gelinggang terhadap bakteri Staphylococcus aureus dilakukan dengan menumbuhkan terlebih dahulu bakteri uji, bakteri ini ditumbuhkan pada media Mueller Hilton Agar (MHA)  yang memiliki nutrisi cukup untuk pertumbuhan bakteri. Aktivitas antibakteri pada penelitian  ini  diuji  dengan  menggunakan metode  difusi  cakram  dengan  prinsip kerjanya  yaitu  bahan  uji  dijenuhkan  ke  dalam  kertas  cakram.  Kertas  cakram diletakkan di atas media agar padat yang telah dicampurkan dengan bakteri yang diuji kemudian  diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama  24  jam.  Zona  bening  yang  terdapat disekitar  kertas  cakram  diamati  untuk  menunjukkan  adanya  pertumbuhan  bakteri. Penelitian  ini  menggunakan  Erytromicin  sebagai  kontrol  positif  yaitu  sebagai pembanding dan kontrol negatif digunakan Dimetil sulfoksida (DMSO).
Hasil uji aktivitas antibakteri daun gelinggang terhadap bakteri Staphylococcus aureus setelah masa inkubasi selama 24 jam disajikan pada Tabel 3 dibawah ini:
Tabel 3. Hasil Pengujian Aktivitas Antibakteri
Bakteri Konsentrasi (%) Zona Hambat (mm) U1 U2 U3 X S. aureus 10 8,46 8,67 8,59 8,58 20 9,36 9,88 9,61 9,62 30 10,69 11,09 10,97 10,92
Bakteri Konsentrasi (%) Zona Hambat (mm) U1 U2 U3 X 40 12,00 12,41 12,39 12,27 50 14,13 14,64 14,60 14,46 Erytromicin 23,29 23,75 23,44 23,46 DMSO 0 0 0 0 Keterangan : U 1 = Ulangan 1, U 2 = Ulangan 2, U 3 = Ulangan 3, X = Jumlah
Berdasarkan Tabel diatas dapat diketahui rerata zona hambat yang terbentuk pada setiap perlakuan konsentrasi  ekstrak  etanol  daun  gelinggang 10%  sebesar    8,58  mm, konsentrasi  20% sebesar  9,62  mm,  konsentrasi  30%  sebesar 10,92  mm,  konsentrasi 40% sebesar 12,27 mm, dan konsentrasi 50% sebesar 14,46 mm. Kontrol positif berupa Erytromicin  sebesar  23,46  mm  dan  kontrol  negatif  tidak  memiliki  zona  hambat antibakteri.  Berdasarkan  hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun gelinggang pada  tiap  konsentrasi  yaitu  10%,  20%, 30%, 40%, dan 50% memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus meskipun tidak sebanding dengan  kontrol  positif  yang  memiliki  zona  hambat  paling  besar  yang  dikarenakan antibiotik  tersebut  memiliki  sifat  bakteriostatik.  Namun  pada  ektrak  etanol  daun gelinggang dapat disimpulkan bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak maka semakin tinggi pula rerata zona hambat yang terbentuk. Hasil pengukuran diameter zona hambat dapat dilihat pada Gambar 4. berikut ini:
Gambar 4. Diagram rata-rata diameter zona hambat (mm)
Berdasarkan kategori zona hambat menurut Nazri, dkk (2011), dalam Hapsari (2015),  apabila  zona  hambat  yang  terbentuk  kurang  dari  5  mm  dikatakan
menghambat lemah, 5 mm sampai 10 mm dikatakan sedang, 10 mm sampai 20 mm dikatakan kuat dan jika lebih dari 20 mm dikatakan sangat kuat. Maka pada penelitian ini diketahui ekstrak etanol daun gelinggang pada konsentrasi 10% dan 20% memiliki daya  hambat  pada  bakteri Staphylococcus  aureus pada  kategori sedang,  sedangkan pada konsentrasi 30%, 40%, dan 50% memiliki daya hambat dengan kategori kuat terhadap bakteri Staphylococcus aureus . Kontrol positif dengan pemberian antibiotik Erytromicin memiliki  daya  hambat  pada  kategori  sangat  kuat,  sedangkan  kontrol negatif tidak menunjukkan adanya daya hambat pada bakteri Staphylococcus aureus. Zona bening  yang terbentuk dari ekstrak etanol daun gelinggang pada media  yang ditumbuhi bakteri Staphylococcus aureus dapat dilihat pada Gambar 5 berikut.
Gambar 5. Zona bening ekstrak daun gelinggang pada media yang ditumbuhi bakteri

## Staphylococcus aureus
Berdasarkan  gambar  diatas  terlihat  bahwa  konsentrasi  bertingkat  pada penelitian ini yaitu 10%, 20%, 30%, 40%, dan 50% terjadi peningkatan zona hambat, Sari dkk (2017) juga mengatakan bahwa zona hambat yang dihasilkan  semakin besar seiring  dengan  peningkatan kosentrasi  sehingga  dapat  diasumsikan  bahwa  adanya hubungan  berbanding  lurus antara konsentrasi dengan hasil zona hambat. Hal ini juga sesuai dengan pernyataan yang disebut oleh Hidayat dan kuvaini (2015) menunjukkan bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  yang  diberikan  maka  akan  menghasilkan daya hambat yang semakin baik pula.
Kontrol  negatif  dengan  pemberian  DMSO  tidak  menunjukkan  adanya  zona hambat  sehingga  dapat  dipastikan  zona  hambat  yang  dihasilkan  murni  berasal  dari ekstrak  etanol  daun  gelinggang  dan  tidak  dipengaruhi  oleh  pelarut  (Sari  dkk.,  2017). DMSO  merupakan  senyawa  organosulfur  dan  bersifat  tidak  toksik  sehingga  tidak memberikan  daya  hambat  dan  tidak mempengaruhi  pengujian  aktivitas  anti  bakteri. Tujuan digunakannya DMSO sebagai kontrol negatif adalah untuk mengetahui pelarut yang  digunakan sebagai larutan untuk membuat variasi konsentrasi tidak mempengaruhi pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus (Pratiwi, 2013).
Kontrol  positif  dengan  pemberian Eritromisin  menghasilkan  daya  hambat yang
Journal of Healthcare Technology and Medicine Vol. 9 No. 1 April 2023 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
terbesar yaitu 23,46 mm dengan kategori menghambat kuat pada bakteri Stapylococcus aureus ,  dimana  Erytromicin ini  digunakan  sebagai  pembanding  terhadap  aktivitas antibakteri  ekstrak etanol daun gelinggang. Eritromisin merupakan antibiotik golongan makrolida  memiliki  spectrum  antibakteri  yang  mirip  dengan  golongan  penicillin (Jawets, 2001). Mekanisme kerja Golongan makrolida yaitu dengan menghambat sintesis protein kuman dengan jalan berikatan secara reversibel dengan ribosom, dan umumnya bersifat bakteriostatik, walaupun terkadang dapat bersifat bakterisidal untuk kuman yang sangat peka (Departemen Farmakologi dan Terapeutik Fakultas Kedokteran  Universitas Indonesia, 2012).
Sampel  ekstrak  etanol  daun  gelinggang  yang  digunakan  mengandung senyawa yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri pada seperti alkaloid, saponin, tanin, dan flavonoid. Senyawa inilah yang diduga telah memberikan penghambatan  terhadap bakteri Staphyococcus  aureus. Mekanisme  penghambatan  senyawa  fenolat  pada mikroorganisme  seperti  bakteri  di karenakan  oleh  gangguan  pada  membran  sel  dan sintesis komponen struktural bakteri. Aktivitas antimikroba  dari senyawa fenolik terkait dengan inaktivasi enzim seluler atau disebabkan oleh perubahan permeabilitas membran yang  meningkat  merupakan  faktor  utama  dalam  mekanisme  antimikroba,  dimana senyawa  dapat  mengganggu  membran  dan  menyebabkan  kematian  sel  (Pratiwi,  dkk, 2013). Senyawa alkaloid pada daun gelinggang dapat mengganggu komponen penyusun peptidoglikan pada sel bakteri sehingga lapisan dinding sel  tidak terbentuk secara utuh dan  menyebabkan  kematian  sel  tersebut  (Rini  dkk.,  2017).  Flavonoid  disintesis  oleh tumbuhan  sebagai  sistem  pertahanan  dan  responya  terhadap  infeksi  oleh mikroorganisme, maka dari itu senyawa ini sangat efektif sebagai senyawa antimikroba terhadap  sejumlah  mikroorganisme.  Flavanoid  merupakan  senyawa  polifenol  yang memiliki efek pengobatan pada beberapa  kondisi  antara lain  seperti  efek antioksidan, anti tumor, anti radang, antibakteri dan antivirus (Paburaka, 2013). Senyawa flavanoid mengganggu  fungsi mitokondria  dan  juga  fungsi  membran (Suarni,dkk,  2017).  Tanin juga  merupakan  salah  satu  senyawa  metabolit  sekunder  yang  termasuk  ke  dalam golongan  polifenol  yang  diduga  dapat  mengikat salah  satu  protein  membran  yang dimiliki  oleh  bakteri  dan  apabila  hal  ini  terjadi  maka  dapat  merusak  ketersediaan reseptor  pada  permukaan  sel  bakteri  sehingga  mengganggu  proses  metabolisme  sel tersebut  (Pratiwi,  dkk,  2013).  Tanin memiliki  aktifitas  antibakteri  yang  berhubungan dengan  kemampuannya untuk menginaktifkan adhesin sel mikroba juga menginaktifkan enzim, dan menggangu transport protein pada lapisan dalam sel. Mekanisme kerja tanin sebagai  antibakteri  yaitu  dengan  menghambat enzim  reverse  transkriptase  dan  DNA topoisomerase sehingga sel bakteri tidak dapat terbentuk. Tanin mempunyai target pada polipeptida  dinding  sel  sehingga  pembentukan  dinding  sel  menjadi  kurang  sempurna, hal  ini  menyebabkan  sel  bakteri  menjadi  lisis  karena  tekanan  osmotik  maupun  fisik sehingga  sel  bakteri  akan  mati  (Ngajow,  dkk,  2013).  Saponin memiliki  molekul  yang dapat menarik air atau hidrofilik dan molekul yang dapat melarurkan lemak atau lipofilik sehingga dapat menurunkan tegangan permukaan sel yang akhirnya dapat menyebabkan hancurnya bakteri (Lestari, 2012)

## KESIMPULAN
Kesimpulan yang dapat diperoleh dari penelitian ini adalah sebagai berikut:
1. Ekstrak  daun  gelinggang  ( Cassia  alata L.)  dengan  pelarut  etanol  96%  efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus.
2. Ekstrak etanol daun gelinggang ( Cassia alata L.) dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus pada  konsentrasi  10%  dan  20%  dengan  kategori sedang, sedangkan pada konsentrasi 30%, 40%, dan 50% dengan kategori kuat.

## SARAN
1. Diharapkan  pada  masyarakat  dapat memanfaatkan  khasiat  dari  daun  gelinggang terhadap pertumbuhan infeksi bakteri Staphylococcus aureus.
2. Diharapkan  kepada  instusi  pendidikan  dapat  memberikan  pengetahuan  tentang daun gelinggang  yang mampu menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dengan adanya kandungan senyawa kimia.
3. Diharapkan  kepada  peneliti  selanjutnya  agar  melakukan  penelitian  tentang pengembangan  daun  gelinggang  kedalam  bentuk formulasi  gel  atau  salep antibakteri agar mudah diaplikasikan pada kulit.

## DAFTAR PUSTAKA
Departemen  Farmakologi  dan  Terapeutik.  (2012). Farmakologi  dan  Terapi,  Edisi  5 .
Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta.
Hafizah, Indria, dkk. (2015).  “Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Metanol Rumput Laut
( Eucheuma sp) pada Berbagai Tingkat Konsentrasi  Terhadap
Pertumbuhan
Bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus ”. FK UHO ; h.  65-66.
Hidayat Y dan Kuvaini A,. (2015). Keefektifan ekstrak daun belimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi L.))  dalam  pengendalian  larva  boktor  ( Xystrocera  festiva  Fascoe) . Agrikultura.
Hapsari,  Maria  Endah.  (2015).  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Herba  Meniran
( Phyllanthus  niruri ) coli.  Skripsi .  Universitas  Sanata  Dharma.  Yogyakarta. Hal:8.
Jayasree,  R.  (2016).  Immunomodulatory  effect  of Cassia  alata Petals  in  Garra  rufa ( Doctor  Fish ). Journal of Chemical and Pharmaceutical 9 (1) : 215-218.
Kawengian  S.A.F.,   Wuisan   J.,   Leman M.A. (2017). Uji daya hambat ekstrak daun serai  ( Cymbopogon  citratus L)  terhadap  pertumbuhan Streptococcus  mutans. Jurnal e- GiGi (eG), Volume 5 Nomor 1, Januari-Juni 2017. Lestari, N.D., Rinanda, T. Ji, Y.S.  (2012). “ Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol 30% dan 96% Kelopak Bunga Rosella  ( Hibiscus sabdariffa ) Terhadap Bakteri Streptococcus pyogenes secara in vitro”. Jurnal Kedokteran Syiah Kuala . 12(1): 31-36.
Muljono, Patrick, dkk. (2016). “Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak daun Mayana Jantan ( Coleus atropurpureus Benth) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Streptococcus Sp. dan Pseudomonas Sp.”. Jurnal e- Biomedik (eBm) 4, no. 1; h. 166.
Journal of Healthcare Technology and Medicine Vol. 9 No. 1 April 2023 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
Ngantung, Angeline E.C, dkk. (2016). Uji Aktivitas Antibakteri dari Spons Dictyonella funicularis dan Phyllospongia lamellosa yang Diambil pada Perairan Bunaken. Jurnal Pesisir Dan Laut Tropis 2, no. 1. Hal, 11-12.
Nurhasnawati,  H.,  Handayani,  F.  and  Samarinda,  A.  F.  (2017)  ‘Sokletasi  Terhadap Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Jambu Bol ( Syzygium malaccense L .)’, Jurnal Ilmiah  Manuntung ,  3(1),  pp.  91–95.
Nurlansi, Jahidin.(2017). Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Metanol dan Fraksi Etilasetat Daun  Ketepeng  Cina  ( Casia  alata L). Indonesia  Natural  Research Pharmaceutical Journal , 2(2);13-18.
Paburaka,  S.A.  (2013).  Senyawa  Flavonoid  yang  Bersifat Antibakteri  dari  Akway ( Drimy  becarina .  Gibbs). Jurnal  Chem  Prog Vol  6  (1).  Papua  :  Universitas Negeri Papua.
Pratiwi,  Donna,  dkk.  (2013).  “Efek  Anti  Bakteri  Ekstrak  Kulit  Jeruk  Nipis ( Citrus aurantifolia ) Terhadap Salmonella typhi Secara In Vitro ”. Jurnal 9, no. 2 h. 113.
Putranti, W., Dewi, N. A.  And Widiyastuti, L. (2018) . ‘Standardization Of Extract And Characterization  Of  Emulgel  Formula  Of  Lengkuas  ( Alpinia  Galanga (L.) Willd) Rhizome Extract’. Journal of Pharmaceutical  Sciences  and Community , 15(2),  pp.  81–91.  Sari,  R.,  Muhani,  M.,  Fajriaty.  I.  2017.  “  Uji  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun  Gaharu  ( Aquilaria  microcarpa Baill.) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Proteus mirabilis”. J. Pharm . Sci. 4(2): 143-154.
Suarni, Panggeso,J., & Rosmini. (2017). Uji Daya Hambat Daun Ketepeng Cina ( Cassia alata )  Terhadap  Jamur  Patogen Pytophthora  palmivora Penyebab  Penyakit Busuk  Buah Kakao Theobromae  cacaol.  Jurnal  Agroteknis Vol  5  (3).  Palu: Universitas Terbuka.
Utami,  Niken  Ardaningtyas.  (2017).  Uji  Daya  Hambat  Bakteriostatik  dari  Ekstrak Tomat  ( Lycopersicones  culentum Mill)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Staphylococcus epidermidis . Skripsi . Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.