Journal Syifa Sciences and Clinical Research (JSSCR)
Volume 5 Nomor 1, 2023
Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/jsscr , E-ISSN: 2656-9612 P-ISSN:2656-8187 DOI : https://doi.org/10.37311/jsscr.v5i1.18170
Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri Kulit Jeruk Pontianak ( Citrus nobilis Lour. var. microcarpa) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus mutans
Meri Ropiqa 1* , Ika Ristia Rahman 2 , Hadi Kurniawan 3 , Erwan kurnianto 4
1,3 Program Studi Farmasi, Fakultas Kedokteran, Universitas Tanjungpura, Jl. Jl. Prof.Dr.H.Hadari Nawawi / Jendral Ahmad Yani, Pontianak - Kalimantan Barat (78124), Indonesia
2,4 Akademi Farmasi Yarsi Pontianak Jl. Panglima Aim No.2, Kota Pontianak, Kalimantan Barat 78232, Indonesia
* Penulis Korespondensi. Email: meriropiqa@pharm.untan.ac.id

## ABSTRAK
Agen  antibakteri  merupakan  senyawa  yang  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri  dan membunuh  bakteri  penyebab  infeksi.  Saat  ini  peningkatan  resistensi  antibiotik  membuka peluang  untuk  memanfaatkan  senyawa  bioaktif  dari  berbagai  tumbuhan  Indonesia,  salah satunya  melalui  pemanfaatan  kulit  jeruk  pontianak.  Berdasarkan  beberapa  literature  telah diklaim bahwa minyak atsiri kulit jeruk pontianak dapat menghambat pertumbuhan berbagai jenis  bakteri. Pada penelitian ini dilakukan  uji antibakteri terhadap bakteri S. aureus dan S. mutans . Minyak atsiri kulit jeruk Pontianak terlebih dahulu dilakukan uji skrining fitokimia kemudian dilakukan uji antibakteri pada konsentrasi yang berbeda yaitu 5%, 10%, 25% dan 50%,  uji  aktivitas  antibakteri  dilakukan  dengan  metode  difusi  cakram.  Hasil  uji  skrining fitokimia  menunjukkan  bahwa  minyak  atsiri  kulit  jeruk  pontianak  mengandung  flavonoid, saponin dan terpenoid. Selain itu, saat diuji terhadap bakteri S. aerues , minyak atsiri kulit jeruk memiliki  zona  hambat  9-11  mm  yang  termasuk  golongan  antibakteri  kuat,  sedangkan S. mutans digolongkan  pada  kategori  sedang  yaitu  pada  kisaran  7-10  mm.  Uji  statistik menunjukkan tidak adanya perbedaan yang signifikan pada daya hambat terhadap bakteri S. mutans dan S. aereus yang ditunjukkan dengan adanya diameter zona hambat pada kelompok perlakuan yang berbeda-beda sesuai konsentrasi minyak atsiri kulit jeruk.

## Kata Kunci:
Minyak atisiri ; kulit jeruk Pontianak ; antibakteri
Diterima: 07-12-2022 Disetujui: 14-01-2023 Online: 20-01-2023

## ABSTRACT
Antibacterial  is  a  substance  that  can  inhibit  the  growth  of  bacteria  and  can  kill  bacteria  that  cause infection. Currently increasing resistance to antibiotics is an opportunity to utilize bioactive compounds from the diversity of plants in Indonesia, one of which is by utilizing Pontianak orange peels. Based on some literature, it is stated that essential oils from Pontianak orange peels can inhibit the growth of several types of bacteria. In this study, antibacterial tests were carried out on S.aureus and S.mutans bacteria. The essential oil of Pontianak orange peel was first tested for phytochemical screening and then an  antibacterial  test  was  carried  out  with  several  concentrations  of  5%,  10%,  25%,  and  50%,  the antibacterial  activity  test  was  carried  out  using  the  disc  diffusion  method.  The  results  of  the phytochemical screening test showed that the essential oil of Pontianak orange peel contains flavonoids, saponins, and terpenoids. Furthermore, in testing the S.aerues bacteria, the essential oil of orange peel can  have  an  inhibition  zone  with  a  range  of  9-11  mm  which  is  included  in  the  strong  antibacterial category, while in testing the inhibition of S. mutans bacteria, it is included in the moderate category, namely  in  the  range  of  7-10  mm.  In  the  statistical  test,  there  was  no  significant  difference  in  the inhibition of S. mutans and S.aereus bacteria in inhibiting the growth of the orange peel essential oil as indicated  by  the  diameter  of  the  inhibition  zone  in  the  different  treatment  groups  according  to  the concentration of orange peel essential oil
Copyright © 2023 Jsscr. All rights reserved.
Keywords:
Essential oil ; Pontianak orange peel; antibacterial
Received: 2022 -12-07 Accepted: 2023-01-14 Online: 2023 -01-20

## 1. Pendahuluan
Salah  satu  tumbuhan  khas  yang  tumbuh  di  Kalimantan  Barat  adalah  jeruk. Bagian  tumbuhan  yang  dapat  dimakan  atau  diolah  langsung  adalah  buahnya.  Buah jeruk  adalah  salah  satu  bisnis  terbesar  Kalimantan  Barat,  namun  limbah  kulit  jeruk Pontianak belum dimanfaatkan secara optimal. Kandungan yang dominan pada kulit jeruk adalah minyak atsiri. Minyak atsiri merupakan metabolit sekunder dengan bau khas yang terdapat pada beberapa tanaman yang mudah menguap jika dibiarkan pada suhu kamar [1]. Minyak atsiri kulit jeruk sering digunakan sebagai pereda sakit kepala, meredakan mual dan meredakan gejala flu. Selain itu kulit jeruk dapat dimanfaatkan sebagai  aromaterapi  yang  bekerja  dalam  memberikan  sensasi  menenangkan,  dapat meningkatkan nafsu makan dan menyembuhkan berbagai penyakit, serta bermanfaat bagi  kulit  [2].  Minyak  atsiri  adalah  zat  alami  yang  banyak  diteliti  dan memiliki  efek antibakteri [3]. Selain minyak atsiri, kulit jeruk pontianak juga mengandung flavonoid, saponin dan triterpenoid [4].
Antibakteri  adalah  zat  yang  dapat  membunuh  bakteri  atau  mencegah pertumbuhan  bakteri  penyebab  infeksi.  Infeksi  adalah  invasi  jaringan  tubuh  oleh mikroorganisme atau parasit  yang bersifat simptomatik atau asimptomatik dan lokal atau  sistemik  [5].  Ada  beberapa  bakteri  berbeda  yang  dapat  menyebabkan  infeksi termasuk Streptococcus mutans , Staphylococcus aureus . Streptococcus mutans adalah bakteri gram  positif  yang  menyebabkan  karang  gigi  atau  plak. Streptococcus  mutans adalah kelompok besar bakteri karies, yang sebagai zat pembentuk polisakarida ekstraseluler yang stabil, memiliki kemampuan untuk berkolonisasi pada keasaman (pH) permukaan gigi yang relatif rendah, dan karenanya memainkan peran penting dalam pembentukan karies gigi [6]. Staphylococcus aureus adalah bakteri gram positif dengan bakteri coliform yang  bersifat  patogen  bagi  manusia. Staphylococcus  aureus menyebabkan  70%  infeksi rumah sakit. Staphylococcus aureus adalah bakteri yang menyebabkan infeksi kulit dan jaringan lunak  invasif  seperti  pneumonia,  osteomyelitis,  meningitis  dan  endokarditis
[7]. Staphylococcus aureus merupakan bakteri yang resisten terhadap beberapa antibiotik, antara  lain  antibiotik  golongan  β -laktamase,  methicillin,  nafcillin,  oxacillin,  dan vancomycin [8].
Meningkatnya  resistensi  antibiotik  pada  bakteri  merupakan  peluang  yang sangat  baik  untuk  memanfaatkan  senyawa  bioaktif  yang  terdapat  pada keanekaragaman  tumbuhan  Indonesia,  salah  satunya  pemanfaatan  kulit  jeruk Pontianak. Berdasarkan beberapa literatur telah diklaim bahwa minyak atsiri kulit jeruk Pontianak  dapat  menghambat  pertumbuhan  berbagai  jenis  bakteri  seperti Propionibacterium  acnes,  Escherichia  coli,  Stapylococcus  epidermidis .  Berdasarkan  hal tersebut,  perlu  dilakukan  penelitian  aktivitas  antibakteri  minyak  atsiri  kulit  jeruk Pontianak terhadap Stapylococcus mutans dan Stapylococcus aureus .

## 2.  Metode Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian ini antara lain: alat destilasi minyak atsiri, cawan petri,neraca analitik, tabung reaksi, inkubator, autoklaf, Laminar Air ,Flow (LAF), oven  pembakar bunsen, rak tabung reaksi.  Kulit buah jeruk Pontianak (Citrus nobilis Lour.  var.  microcarpa)  segar,  Mc.  Farland  (E  Merck®),  paperdisk,  pereaksi  besi  (III) klorida 10 % (Merck®), H 2 SO 4 pekat, Mueller-Hinton Agar (MHA), CH ₃ COOH, DMSO, Aquades.
Pembuatan Simplisia Minyak Atsiri
Simplisia yang digunakan pada penelitian adalah kulit jeruk Pontianak ( Citrus nobilis Lour. var. microcarpa) yang telah dikering anginkan. Pembuatan minyak atsiri menggunakan metode destilasi uap.

## Uji Skrining Fitokimia Uji Flavonoid
Minyak atsiri kulit jeruk pontianak dimasukkan ke dalam tabung reaksi 3-7 tetes, kemudian  ditambahkan  beberapa  tetes  larutan  asam  sulfat  pekat  (H 2 SO 4 ).  Diamati perubahan  warna  yang  terjadi,  jika  larutan  berubah  warna  menjadi  merah  tua  atau kuning menandakan adanya senyawa flavonoid [1].

## Uji Saponin
Minyak atsiri dimasukkan ke dalam tabung reaksi, kemudian ditambahkan 5 mL air (H 2 O). Larutan dikocok selama 30 detik, busa yang terbentuk menunjukkan adanya saponin. Larutan didiamkan beberapa menit, apabila busa masih stabil antara 1-10 cm menujukkan adanya senyawa saponin [1].

## Uji Steroid dan Terpenoid
Minyak atsiri kulit jeruk Pontianak pala sebanyak 3-7 tetes dimasukkan ke dalam tabung reaksi. Kemudian 1-2 tetes larutan asam asetat glasial dan 1-2 tetes larutan asam sulfat pekat (H 2 SO 4 ) ditambahkan dalam tabung reaksi tersebut. Warna larutan yang berubah biru atau ungu menunjukkan adanya senyawa steroid, sedangkan perubahan warna larutan menjadi merah atau jingga menandakan adanya senyawa terpenoid [1].

## Pembuatan dan Sterilisasi Media
Sebanyak 38 gram MHA dilarutkan dalam 1 L akuades kemudian dipanaskan dan  diaduk  dengan  menggunakan  magnetik  stirer  sampai  homogen,  dan  disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121 o C selama 15 menit [9].

## Pembuatan Suspensi Bakteri
Diambil  masing-masing  1  ml  hasil  peremajaan  bakteri  biakan  bakteri  murni Streptococus mutan , Staphylococcus aureus (SA), dimasukan kedalam tabung reaksi yang berisi  5  ml  NaCl  fisiologis,  homogenkan.  Suspensi  bakteri  dibandingkan  dengan standart Mc. Farland dengan kepadatan bakteri 10 8 sel/ml [10].
Penyiapan Sampel Uji
Dibuat dengan masing-masing konsentrasi 5%, 10%, 25%, dan 50% b/v dengan pelarur DMSO. Setelah seri konsentrasi dibuat paperdisk direndamkan didalam masing masing konsentrasi selama 15 menit [11].

## Uji In Vitro Antibakteri
Pengujian daya hambat dilakukan dengan metode difusi menggunakan kertas cakram. Kertas cakram direndam dalam larutan uji pada konsentrasi 5%, 10%, 25%, dan 50%    b/v.  Disiapkan  medium  MHA  ( Mueller  hinton  agar )  sebanyak  15  ml  masukkan kedalam  cawan  petri  biarkan  hingga  memadat.  Masukkan  0,1  ml  suspensi  biakan bakteri  kedalam  cawan petri  menggunakan  mikropipet,  masukkan  kedalam  medium dan  ratakan  menggunakan  batang  L  dan  dibiarkan  sampai  menyerap.  Kemudian letakkan paper  disk yang  sudah  direndam  dalam  sampel  diatas  medium  padat  dan diinkubasi didalam inkubator pada suhu 37 o C selama 24 jam dengan posisi terbalik [10].

## Pengamatan
Penentuan daya hambat pertumbuhan bakteri uji dilakukan dengan mengukur diameter  zona  bening  disekeliling  kertas  saring.  Pengamatan  dilakukan  setelah diinkubasi didalam inkubator selama 24 jam dengan menggunakan alat jangka sorong [10].

## Analisis data
Data yang diperoleh berupa diameter zona hambat dari tiap konsentrasi minyak atsiri kulit jeruk . Data diolah dengan One Way ANOVA menggunakan program SPSS. Sebelum dilakukan uji ANOVA maka akan dilakukan uji normalitas dan homogentitas.

## 3.  Hasil dan Pembahasan Uji Skrining Fitokimia
Uji  fitokimia  dilakukan  untuk  mengidentifikasi  senyawa  secara  kualitatif berdasarkan perubahan warna sampel. Hasil uji fitokimia tercantum pada Tabel 1. Hal ini menunjukkan bahwa minyak atsiri Kulit Jeruk Pontianak mengandung flavonoid, saponin dan terpenoid yang bermanfaat.
Uji  skrining  fitokimia  flavonoid  menunjukkan  hasil  positif  yang  ditunjukkan dengan  adanya  perubahan  warna  menjadi  jingga  pada  larutan, hal  ini menunjukkan bahwa minyak atsiri kulit jeruk Pontianak mengandung flavonoid. Pada uji flavonoid ini terdapat proses dimana asam sulfat pekat ditambahkan untuk membentuk senyawa flavonoid (pembentukan garam flavilium) [12].
Tabel 1. Hasil uji fitokimia minyak atsiri kulit jeruk pontianak
Uji fitokimia Sampel Minyak atsiri kulit jeruk pontianak Flavonoid + Saponin + Terpenoid + Steroid - Keterangan : (-)  = tidak terdeteksi
(+) = terdeteksi
Uji saponin memberikan hasil positif yang ditunjukkan terbentuknya buih yang stabil  setelah  dikocok  selama  beberapa  detik.  Busa  yang  terbentuk  pada  uji  saponin menunjukkan  adanya  glikosida  yang  dapat  membentuk  busa  dalam  air  yang terhidrolisis  menjadi  glukosa  [13].  Sedangkan  minyak  atsiri  kulit  jeruk  Pontianak menambahkan  asam  asetat  glasial  pada  uji  kandungan  terpenoid,  adapun  tujuan penambahan  asam  asetat  glasial  adalah  untuk  memutuskan  hubungan  steroid- terpenoid dengan golongan lain. Selain itu tujuan penambahan asam asetat ini adalah supaya Ikatan gula pada senyawa tersebut putus, sehingga gugus gula terpenoid steroid terlepas. Berdasarkan hasil pengujian diketahui minyak atsiri kulit jeruk mengandung senyawa terpenoid yang ditandai dengan terbentuknya warna jingga dan terbentuknya cincin berwarna merah [1], dalam hal ini uji steroid memberikan hasil negatif karena. tidak ada perubahan warna menjadi biru

## Uji Aktivitas Antibakteri
Pengujian  aktivitas  antibakteri  minyak  atsiri  kulit  jeruk  Pontianak  dengan metode disk difussion pada media MHA. Bakteri yang diuji dalam pengujian ini adalah Staphylococcus aureus dan Staphlococcus mutans . Berdasarkan hasil uji aktivitas antibakteri minyak atsiri kulit jeruk Pontianak menunjukkan adanya efek penghambatan terhadap pertumbuhan S.  aureus dan S.  mutans dengan  membentuk  zona  hambat  di  sekitar lempeng. Hasil Uji Antibakteri Minyak Kulit Jeruk Pontianak ( Citrus nobilis Lour.Var microcarpa) terhadap S. aureus dan S. mutans pada konsentrasi berbeda 50%, 25%, 10%, dan 5% yang dilakukan sebanyak tiga kali pengulangan menunjukkan adanya aktivitas antibakteri terhadap pertumbuhan S. aereus dan S. mutans .
Gambar 1. Aktivitas antibakteri minyak atsiri kulit jeruk Pontianak
Dari  hasil  Tabel  2  terlihat  bahwa  minyak  atsiri  kulit  jeruk  Pontianak menghasilkan  diameter  zona  hambat  pada  uji  antibakteri  terhadap S.  aureus dan S. mutans . Hasil penelitian memberikan kisaran diameter daya hambat sebesar 7-11 mm. Menurut  Davis  dan  Stout  [14]  daya  hambat  suatu  zat  antibakteri  diklasifikasikan menjadi  beberapa  kategori,  pada  pengujian  terhadap  bakteri S.aerues kategori antibakteri  yang  dihasilkan  digolongkan  pada  ketegori  kuat  yaitu  pada  kisaran  9-11 mm, sedangkan pada uji daya hambat pada bakteri S. mutans termasuk dalam kategori sedang yaitu pada kisaran 7-10 mm. Berdasarkan kelompok kriteria potensi antibakteri yang  terlihat  pada  Tabel  3,  minyak  atsiri  kulit  jeruk  Pontianak  memiliki  potensi antibakteri yang lebih kuat terhadap bakteri S. aureus dibandingkan dengan S. mutans .
Tabel 2 . Hasil diameter zona hambat Bakteri Uji Konsentrasi (%) Zona hambat (mm) Rata-rata (mm) SD I II III Staphlococcus mutans 5 8,05 7,01 8,00 7,69 0,59 10 9,00 9,00 9,00 9,01 0,01 25 9,84 9,01 9,06 9,30 0,47 50 8,01 9,01 8,00 8,34 0,58 Staphylocpccus aureus 5 9,00 10,00 9,00 9,33 0,57 10 10,00 11,01 10,00 10,34 0,58 25 11,00 11,01 11,01 11,00 0,57 50 10,00 10,00 10,80 10,27 0,46
Selanjutnya  dilakukan  uji  normalitas  data  dengan  uji  Shapiro-Wilk,  pada konsentrasi 5% - 50% pada bakteri S. aureus dan S.mutans menunjukkan nilai  p<0,05 sehingga data tidak berdistribusi normal. Oleh karena itu, uji hipotesis selanjutnya tidak dapat dilakukan dengan uji parametrik One-Way Anova melainkan menggunakan uji alternatif  yaitu  uji  nonparametrik  KruskalWallis.  Pada  uji  statistik  Kruskal-Wallis diperoleh nilai (p>0,05) sehingga dapat disimpulkan bahwa tidak terdapat perbedaan bermakna minyak atsiri kulit jeruk dalam menghambat pertumbuhan bakteri S.mutans dan S.aereus yang ditunjukkan dengan adanya diameter zona hambat pada kelompok perlakuan yang berbeda-beda berdasarkan konsentrasi minyak atsiri kulit jeruk.
Tabel 3 . Kriteria pengelompokan potensi antibiotik Zona hambat Kriteria >20mm Sangat Kuat 10-20 mm Kuat 5-10 mm Sedang <5mm Lemah
Kemampuan  minyak  atsiri  kulit  jeruk  dalam  menghambat  aktivitas bakteri  S.
mutans dan S.  aureus dihubungkan  dengan  senyawa  bioaktif  yang  dikandungnya. Dalam minyak atsiri kulit jeruk mengandung senyawa seperti  flavonoid, saponin, dan terpenoid.  Senyawa  flavonoid  yang  terdapat  dalam  minyak  atsiri  kulit  jeruk  dapat bertindak sebagai antibakteri dengan mekanisme kerja membentuk suatu senyawa yang kompleks  terhadap  protein  ekstraseluler  sehingga  dapat  mengganggu  membran  sel bakteri, atau dengan kata lain senyawa flavonoid akan mendenaturasi atau memecah protein pada sel bakteri [15] . Sedangkan Saponin memiliki mekanisme aksi antibakteri yang  meningkatkan  permeabilitas  membran  sel.  Peningkatan  permeabilitas  sel  dapat terjadi  karena  adanya  struktur  bipolar  yang  dimiliki  oleh  saponin  yang  memiliki kemampuan untuk berinteraksi dengan komponen membran sel dan kemudian dapat menyebabkan kebocoran protein dan enzim dari dalam sel [16] [17]. Senyawa terpenoid yang terdapat dalam minyak atsiri kulit jeruk juga dapat berperan sebagai antibakteri dengan  cara  menurunkan  permeabilitas  membran  sel  bakteri  sehingga  senyawa triterpenoid akan bereaksi dengan protein transmembran (porin) pada membran luar dinding  sel  bakteri  dan  membentuk  ikatan  polimer  yang  kuat  dan  menyebabkan kerusakan porin [18].

## 4.  Kesimpulan
Pada  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  minyak  atsiri  kulit  jeruk  Pontianak mengndung  senyawa  flavoonoid,  saponin,  dan  terpenoid  yang  bersifat  sebagai antibakteri.  Pengujian  terhadap S.aerues kategori  antibakteri  kuat  dengan  range  9-11 mm,  sedangkan  pada  pengujian  daya  hambat  terhadap  bakteri S.  mutans termasuk dalam kategori sedang yaitu pada range 7-10 mm.

## Referensi
[1] J. B. Harborne, Metode  Fitokimia:  Penuntun  Cara  Modern  MenganalisisTumbuhan ,
2nd ed. Bandung: Penerbit ITB, 1987.
[2] R. F. Eza, A. Rizqi, and T. Hidayah, “Uji Aktivitas A ntioksidan Pada Kulit Jeruk Manis  (Citrus  Sinensis)  sebagai  Alternatif  Bahan  Pembuatan  Masker  Wajah,” Jurnal Penelitian Mahasiswa UNY , vol. VI, no. 2, 2011.
[3] Depkes  RI, Farmakope  Indonesia ,  III.  Jakarta:  Departemen  Kesehatan  Republik Indonesia, 1979.
[4] R. Sari, F. N. A. Mustari, and S. Wahdaningsih, “Antibacterial Activity Essentials Oil Pontianak Orange PEELS AGAINST Staphylococcus aureus and Escherichia coli,” 2013.
[5] W. A. N. Dorland, Kamus Kedokteran Dorland. ed. 31 , 31st ed. Jakarta: EGC2, 2010.
[6] A. P. Wardani and N. Kusumasari, “Pengaruh Larutan Ekstrak Siwak (Salvadora persica)  Terhadap  Streptococcus  mutans:  Studi  In  Vitro  dan  In  Vivo,” Media Medika Indonesiana , vol. 46, 2012.
[7] A. H. Bartlett and K. G. Hulten, “Staphylococcus aureus Path ogenesis: Secretion
Systems, Adhesins, and Invasins,” Pediatric Infectious Disease Journal , vol. 29, no. 9, pp. 860 – 861, Sep. 2010, doi: 10.1097/INF.0b013e3181ef2477.
[8] Jawetz,  Melnick,  and  Adelberg’s, MIkrobiologi  Kedokteran ,  23rd  ed.  Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC, 2004.
[9] A.  Hudaya,  N.  Radiastuti,  D.  Sukandar,  and  I.  Djajanegara,  “TERHADAP BAKTERI E. coli DAN S. aureus SEBAGAI”.
[10] E. Kurnianto, I. R. Rahman, Hairunnisa, and D. K. Sari, “Aktivitas Antibakteri Etanol Buah Tampoi (Baccaurea ma crocarpa),” Jurnal Ilmiah Pharmacy , vol. 8, no. 2, 2021.
[11] H.  Sujono,  S.  Rizal,  S.  Purbaya,  and  Jasmansyah,  “Uji  Aktivitas  Antibakteri Minyak Atsiri Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) Terhadap Bakteri Streptococcus pyogenes  dan  Staphylococcus  aureus,” Jurnal  Kartika  Kimia ,  vol.  2,  pp.  30 – 36,
2019.
[12] O.  E.  Puspa,  I.  Syahbanu,  and  M.  A.  Wibowo,  “UJI  FITOKIMIA  DAN TOKSISITAS MINYAK ATSIRI DAUN PALA (Myristica fragans Houtt) DARI PULAU LEMUKUTAN,” JKK , vol. 6, pp. 1 – 6, 2017.
[13] R. Djamal, Prinsip-Prinsip Dasar Bekerja Dalam Bidang Kimia Bahan Alam . Padang: universitas Andalas, 1990.
[14] W. W. Davis and T. R. Stout, “Disc Plate Method of Microbiological Antibiotic Assay: I. Factors Influencing Variability and Error,” Appl Microbiol , vol. 22, no. 4, pp. 659 – 665, Oct. 1971, doi: 10.1128/am.22.4.659-665.1971.
[15] Y.  Xie,  W.  Yang,  F.  Tang,  X.  Chen,  and  L.  Ren,  “Antibacterial  Activities  of Flavonoids: Structure- Activity Relationship and Mechanism,” CMC , vol. 22, no. 1, pp. 132 – 149, Nov. 2014, doi: 10.2174/0929867321666140916113443.
[16] S.  Madduluri,  K.  B.  Rao,  and  B.  Sitaram,  “IN  VITRO  EVALUATION  OF ANTIBACTERIAL  ACTIVITY  OF  FIVE  INDIGENOUS  PLANTS  EXTRACT AGAINST FIVE BACTERIAL PATHOGENS OF HUMAN,” vol. 5.
[17] M. J. Pelczar and E. C. S. Chan, Dasar-Dasar Mikrobiologi . Jakarta: UI-Press, 1986.
[18] M. Ngajow, J. Abidjulu, and V. S. Kamu, “Pengaruh Antibakteri Ekstrak Kulit Batang Matoa (Pometia pinnata) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus secara In vitro,” JM , vol. 2, no. 2, p. 128, Jul. 2013, doi: 10.35799/jm.2.2.2013.3121.