Uji Daya Hambat Dari Ekstrak Tanaman Pacar Air ( Impatiens balsamica L)
Terhadap Pertumbuhan Bakteri Aeromonas hydrophila
(The Inhibitory Power Extract Of Balsamica Plant ( Impatiens balsamica L)
On Aeromonas hydrophila Bacteria Growth)
Galih Arif Kusuma 1 , Sammy N.J. Longdong 2 , Reiny A. Tumbol 2
1 ) Mahasiswa Program Studi Budidaya Perairan FPIK UNSRAT Manado
2 ) Staf Pengajar Pada Program Studi Budidaya Perairan FPIK UNSRAT Manado Email: Galiharif_kusuma@yahoo.co.id
Abstract
This  research  aimed  to  assess  the  potential  use  of  extracts  of  leaves, flowers,  and  stems  of  the balsamica plant  increase  inhibitory  effect  on  the growth of Aeromonas hydrophila . The content of the plant contains a compound balsamica naphthoquinone,  coumarin  derivatives,  tannins,  flavonoids,  and steroids.  The  active  compounds  have  the  ability  as  an  antimicrobial. A hidrophyla bacteria, including  opportunistic pathogens are almost always found in  water  and  often  cause  disease  when  the  fish  in  adverse  conditions. Antibacterial  activity  test  in  this  research  using  the  spread  plate  method.  Data obtained  in  the  form  of  the  extract,  the  results  of  bacterial  inoculation,  and  the inhibition  test  results,  will  be  analyzed,  displayed  with  pictures  and  described descriptively.  The  result  of  the  process  of  maceration  extraction  using  ethanol 70% was obtained three extracts are concentrated leaf extract: 28.75 g, flower: 12.82 g, and rods: 29.48 g. The result of antibacterial extracts of leaves, stems, and  flowers balsamica plant  showed  inhibitory  activity  on  the A  hydrophila bacteria  that  seems  to  be  indicated  by  a  clear  zone  around  the  paper  disc. Based  on  the  classification  of  leaf  extract  and  extract  of  the  stem  can  be classified in the class of strong, because the inhibition zone formed by the leaf extract  is  equal  to  11.2  mm,  and  extract  stem  with  13.7  mm  inhibition  zone. Ability  flower  extract  in  inhibiting  the  growth  of A  hidrophila bacteria  with  21.4 mm inhibition zone showed that the extract was included in a very strong class.
Keywords: The  ethanol  extract balsamica , Impatiens balsamica L, Aeromonas hydrophila , antibacterial activity test.

## PENDAHULUAN
Dalam usaha budidaya perairan,  ikan  senantiasa  hidup  dalam lingkungan yang mengandung berbagai patogen  seperti  virus,  bakteri,  jamur, dan  parasit.  Pengembangan  usaha budidaya ikan yang dilaksanakan secara  intensif  berdampak  negatif apabila  tidak  ditangani  dengan  baik terhadap  usaha  budidaya  khususnya terhadap kesehatan ikan yang dipelihara.  Jika  tidak  diikuti  dengan penerapan  manajemen  budidaya  yang
baik,  maka  berbagai  permasalahan yang  dapat  menekan  kerugian  akan muncul.  Salah  satu  masalah  yang menjadi  pembatas  keberhasilan  usaha budidaya  adalah  penyakit  yang  dapat mengakibatkan kerugian berupa penurunan  pertumbuhan  atau  bahkan kematian,  sampai  kerugian  ekonomi. Indonesia  memiliki  keanekaragaman jenis  tanaman  yang  sangat  bermanfaat bagi kehidupan manusia, salah satunya dalam  hal  pengobatan.  Obat –  obatan alamiah  saat  ini  mulai  dilirik  karena obat –  obatan  kimia  terbukti  lama
kelamaan mengakibatkan efek samping yang negatif.
Hasil  alam  yang  berpotensi tinggi  dalam  pengobatan  penyakit, salah  satunya  yaitu  tanaman  pacar  air ( Impatiens  balsamica L).  Tanaman pacar  air  belum  begitu  populer  di masyarakat  umum,  padahal  tanaman ini  sudah  tumbuh  di  Indonesia  kurang lebih  satu  abad.  Seiring  berjalannya waktu,  tanaman  pacar  air  kini  sudah mulai  dikenal  luas  sebagai  tanaman berkhasiat obat. Berbagai usaha penanggulangan terhadap penyakit telah banyak dilakukan seperti penggunaan  obat –  obatan  termasuk antibiotik dan penggunaan vaksin sebagai  upaya  pencegahan  terhadap munculnya penyakit (Gaby, 2007).
Beberapa  tahun  belakangan  ini, telah terdapat peningkatan strain patogen yang resisten terhadap antibiotik.  Hal  tersebut  menyebabkan munculnya strain bakteri baru yang multi-resisten . Oleh karena itu, dibutuhkan  berbagai  usaha  untuk mencari dan menemukan bahan senyawa  baru  dari  sumber  alam yang  terbukti  secara  alamiah  bersifat sebagai antimikroba. Pemanfaatan
berbagai   tanaman  sebagai  sumber bahan  dan  senyawa  alami   dengan tujuan untuk menemukan senyawa aktif yang berpotensi sebagai sumber
antimikroba baru terus digalakkan.
Salah  satu  tanaman  yang  dapat dimanfaatkan    sebagai  antimikroba adalah  tanaman  pacar  air  ( I  balsamica L).  (Aibinu, et  al 2007 dalam Gaby
2007). Tanaman  pacar  air  ( I  balsamica L). mengandung senyawa naftoquinon,  turunan  kumarin,   tanin, flavanoid,  dan  steroid.  Hal  ini  juga didukung  oleh  penelitian  Adfa  (2007) dari uji pendahuluan metabolit sekunder  diketahui  bahwa  tanaman pacar  air  ( Impatiens  balsamica L).
mengandung kumarin, flavonoid, kuinon,  saponin  dan  steroid.  Senyawa aktif tersebut mempunyai kemampuan
Pacar   air  ( I  balsamica L), berasal  dari  Asia  Selatan    dan   Asia
Tenggara, ada juga yang menyebutkan dari  India.  Tanaman  ini  diperkenalkan di Amerika  pada abad ke-19. Tanaman ini  memiliki  bunga  dengan  beragam warna,  semisal  pink,  merah,  putih, oranye,  peach,  atau  salem.  Tinggi  dari tanaman  pacar  air  ini  mencapai  30-80 cm,  biasanya  bagian  yang  dijadikan ekstrak yaitu daun, batang, dan bunga. Habitat dari tanaman pacar air ini dapat hidup  pada  daerah  beriklim  semi tropical, namun tidak dapat hidup pada daerah  yang  kering  dan  gersang. Tanaman pacar air merupakan tumbuhan  yang  dapat  di  pelihara dengan gampang, tingginya 30 – 80 cm (Dalimartha, 2014). Tanaman ini sangat peka  terhadap  hama,  begitu  terkena hama,  tanaman  akan  langsung  busuk, biasanya tumbuh di pekarangan rumah pada ketinggian 1-900 m dengan hanya menebar  biji  dari  buah  tanaman  pacar air (Nuzul, 2012).
Antibakteri  adalah  senyawa  - senyawa  kimia  alami  kadar  rendah dapat menghambat pertumbuhan bakteri.  Salah  satu  bahan  anti  bakteri adalah  antibiotik.  Antibiotik  adalah golongan  senyawa,  yang  mempunyai efek  menekan  atau  menghentikan suatu proses biokimia dalam organisme khususnya  dalam  proses  infeksi  oleh bakteri. Antibakteri alamiah dapat dihasilkan  dengan  membuat  suatu senyawa  yang  sifatnya  mirip  dengan aslinya didapatkan langsung dari organisme yang menghasilkan senyawa  tersebut  dengan  melakukan proses  pengekstrakan  (Setyaningsih 2004 dalam Majid 2009). Berdasarkan mekanisme
kerjanya  antibiotik  dapat  menghambat proses  sintesis  dinding  sel.  Tekanan osmotik  dalam  sel  mikroba  lebih  tinggi dari  pada  di  luar  sel,  sehingga kerusakan  dinding  sel  mikroba  akan menyebabkan  terjadinya  lisis  yang merupakan  dasar  dari  efek  bakterisidal terhadap mikroba  yang peka  (Effionora 1990 dalam Majid 2009).
Bakteri  adalah  suatu  organisme yang  jumlahnya  paling  banyak  dan tersebar  luas  dibandingkan  dengan
organisme  lainnya  di  bumi.  Bakteri umumnya merupakan organisme uniseluler (bersel tunggal), prokariota/prokariot,  tidak  mengandung klorofil,  serta  berukuran  mikroskopik (sangat kecil). Dalam tumbuh kembang bakteri baik melalui peningkatan jumlah maupun penambahan jumlah sel
sangat  dipengaruhi  oleh  beberapa faktor, yakni seperti pH, suhu temperatur,  kandungan  garam,  sumber nutrisi, zat kimia dan zat sisa metabolisme (Godam, 2008). Ekstrak  adalah  sediaan  pekat yang  diperoleh  dengan  mengekstraksi zat  aktif  dari  simplisia  nabati  atau hewani  menggunakan  pelarut  yang sesuai. Tujuan ekstraksi adalah memisahkan  bahan  padat  dan  bahan cair  suatu  zat  dengan  bantuan  pelarut. Ekstraksi dapat memisahkan campuran senyawa  dengan  berbagai  sifat  kimia yang  berbeda.  Ekstraksi  bahan  alam umumnya  dilakukan  untuk  menarik komponen  kimia  yang  terdapat  pada bahan  alam.  Ekstraksi  ini  didasarkan pada prinsip perpindahan massa komponen  zat  ke  dalam  pelarut, dimana  perpindahan mulai  terjadi  pada lapisan  antar  muka  kemudian  berdifusi masuk  ke  dalam  pelarut.  DepKes  RI, (1995) dalam Kusumaningtyas  (2011). Proses  ekstraksi  terdiri  dari  beberapa tahap,  yaitu  penghancuran  bahan, penimbangan,  perendaman  dengan pelarut, penyaringan, dan tahap
pemisahan (Khopkar 2003 dalam Oktavianus 2013). Maserasi dilakukan sesuai
dengan  yang  tertera  pada  Farmakope Indonesia  dengan  patokan  sebagai berikut  :  Kecuali  dinyatakan  lain, masukan  10  bagian  simplisia  atau campuran  simplisia  dengan  derajat halus  yang  cocok  ke  dalam  sebuah bejana, tuangi dengan 75 bagian cairan penyari,  tutup  agar  terlindung  dari cahaya  sinar  matahari  sambil  diserkai, peras,  cuci  ampas  dengan  cairan penyari  secukupnya  hingga  diperoleh 100 bagian. Pindahkan kedalam bejana tertutup, biarkan ditempat sejuk terlindung dari cahaya, kemudian
saring.  (DepKes  RI,  1979 dalam Kusumaningtyas  2011).  Farmakope Indonesia menetapkan bahwa sebagian cairan penyari adalah air, etanol, etanol
– air atau eter. Etanol 70% dipertimbangkan sebagai penyari karena  lebih  selektif,  kapang  dan kuman  sulit  tumbuh  dalam  etanol  20% keatas, tidak beracun, netral, absorpsinya baik, etanol dapat bercampur  dengan  air  pada  segala perbandingan dan panas yang diperlukan  untuk  pemekatan  lebih sedikit.

## METODE PENELITIAN

## Jenis Penelitian
Jenis  penelitian  yang  dilakukan adalah  jenis  penelitian  eksperimen yang dilakukan di Laboratorium Patologi & Klinik Penyakit Ikan,
Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan UNSRAT.

## Variabel Penelitian
Variabel  yang  akan  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  daun, bunga,  batang  tanaman pacar  air  yang diperoleh dari Desa Lapangan lingkungan  1,  Kecamatan  Mapanget Barat,  Kota  Manado.  Tanaman  Pacar air  diperoleh  dengan  cara  batang tanaman pacar air di potong, kemudian bunga serta daunnya dipetik langsung.

## Prosedur Percobaan
Sampel  berupa  daun,  batang dan bunga tanaman pacar air dikumpulkan, dicuci dan diserkai. Kemudian  masing –  masing  sampel daun,  batang  dan  bunga  tanaman pacar  air    dibuat  menjadi  potongan kecil,  kemudian  timbang,  50  gram simplisia  daun,  batang  dan  bunga tanaman  pacar  air  dimaserasi  dengan cairan  penyari  (etanol  70%)  hingga mencapai  375  ml.  Simplisia  yang dimaserasi, dibiarkan selama 24 jam di tempat  sejuk  yang  terlindung  dari cahaya sinar matahari (disimpan dalam suhu kamar), diserkai, peras.
Dilakukan  2  kali  pengulangan.  Larutan ekstrak dipekatkan dengan rotary evoporator pada  suhu  35-40°C  sampai diperoleh  ekstrak  pekat  segar.  Ekstrak yang  diperoleh  kemudian  ditimbang untuk  kemudian  disimpan  di  freezer  (- 20°)  yang  nantinya  akan  digunakan untuk uji selanjutnya.
Untuk mencegah terjadinya kontaminasi  pada  saat  melakukan  uji difusi  dilakukan  sterilisasi.  Sterilisasi alat  menggunakan  sterilisasi  secara fisik, yaitu dengan menggunakan udara panas  atau  uap  air  panas  dengan tekanan tinggi, Proses sterilisasi
menggunakan  autoclave  pada  suhu 121°C  tekanan  2  atm  selama  15 –  20 menit.

## Pembuatan media agar
Media  TSA  sebanyak  4  gram dicampurkan dengan  aquadest  100 ml,
pada penelitian ini
dilakukan pemanasan  dengan  hotplate  atau  di atas  nyala  api  bunsen  yang  bertujuan untuk  mencampur  zat  sampai  menjadi homogen,  kemudian  masukan  dalam autoclave  selama  15-20  menit,  hal  ini dimaksudkan
untuk
mencegah terjadinya  kontaminan  yang  masuk. Setelah  diperoleh  media  yang  telah dipanaskan  tersebut  dibagi  kedalam beberapa  cawan  petri  yang  telah tersedia.  Proses  pemindahan  mikroba secara  aseptik  sangat  membutuhkan ketelitian  yang  tinggi.  Jika  tidak, kesalahan  dalam  teknik  sedikit  saja akan mempengaruhi semua hasil pengamatan.  Proses  inokulasi  bakteri membutuhkan ruangan yang bersih dan steril.

## Kultur bakteri
Biakan bakteri Aeromonas hydrophila diambil sebanyak 2 ose dari stok  petri  bakteri  diperoleh  dari  Balai Budidaya  Air  Tawar  Tatelu  Minahasa Utara, diinokulasi dengan metode gores zigzag  dengan  kawat  jarum  ose  steril yang telah dipijarkan dalam api bunsen dilakukan  pada  media  TSA  padat bentuk  lempeng  yang  telah  dibuat,
selanjutnya  diinkubasi  pada  incubator dengan  suhu  37°C  selama  24  jam. Bakteri  yang  telah  dikultur  dan  tumbuh berupa  koloni  kemudian  dibawa  di
Laboratorium untuk melewati Uji Bakteriologi di Dinas Kesehatan Provinsi Sulawesi Utara untuk diperiksa kembali  untuk  memastikan  bahwa bakteri ini adalah bakteri A hydrophila .

## Pengenceran bakteri
Sebanyak  2  ose  bakteri A hydrophila yang  sudah  diremajakan diambil  dari  media  agar  pada  cawan petri  lalu  dimasukkan  ke  dalam  tabung reaksi  steril  yang  berisi  NaCl  0.9% sebanyak  10  ml  kemudian  digoyang (shecker) hingga homogen dan menghasilkan kekeruhan.

## Uji Aktifitas Antibakteri
Uji  aktifitas  antibakteri  pada penelitian  ini  menggunakan  metode Difusi  Lempeng  Agar.  Biakan  bakteri A hydrophila yang  sudah  diremajakan terlebih  dahulu  dimasukan  kedalam tabung  reaksi  steril  yang  berisi  10  ml NaCl  0.9%.  Uji  aktifitas  antibakteri  ini menggunakan  metode  cawan  sebar ( Spread  plate )  dimana  teknik  di  dalam media  TSA  dengan  cara  menuangkan stok  kultur  bakteri  di  atas  media  TSA yang telah memadat kemudian diratakan  dengan  batang  L.  Sebanyak 0,1  ml  bakteri  dalam  tabung  reaksi dimasukan  ke  dalam  media  petri  TSA yang  telah  disterilkan  terlebih  dahulu, selanjutnya pijarkan pinset diatas lampu  bunsen,  dan  pinggiran  cawan petri  yang  berisi paper  disc (kertas cakram) Whatman no. 42 berdiameter 5 mm, ambil satu kertas cakram menggunakan pinset, kemudian
dicelupkan  kedalam    ekstrak  daun, bunga,  dan  batang  tanaman  pacar  air.
Cawan petri diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam. Respon adanya potensi antibakteri ditentukan
dengan
mengukur  zona  hambat  bakteri  di  atas permukaan  agar  yang kelihatan  bening kemudian  diukur  luas  diameter  daerah hambatannya.

## Pengambilan Data
Data  yang  akan  dikumpulkan yaitu  ukuran  diameter  pada  zona bening  dari  aktifitas  daya  hambat  dari ekstrak  daun,  bunga,  dan  batang tanaman  pacar  air.  Besarnya  zona bening  yang  terbentuk  diukur  dengan jangka  sorong  (vernier  kaliper)  dengan satuan mm.

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh  berupa hasil ekstrak berdasarkan pelarut, hasil inokulasi  bakteri,  dan  hasil  uji  daya hambat  diameter  zona  bening  dari masing-masing ekstrak, akan  dianalisis dan dijelaskan secara deskriptif.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  ekstraksi  daun,  bunga,  dan batang tanaman pacar air.
Ekstraksi  senyawa  metabolit sekunder daun, bunga,
batang
tanaman  pacar  air  dilakukan  dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol (Gaby, 2007). Dari hasil ekstraksi diperoleh ekstrak daun, bunga,  dan  batang  tanaman  pacar  air berdasarkan  pelarutnya.  Hasil  dari proses  maserasi  diperoleh  tiga  ekstrak segar  pekat  yaitu  ekstrak  daun,  bunga dan  batang.  Hasil  ekstrak  daun  yaitu  : 28.75 g, bunga : 12.82 g,  dan batang : 29.48  g.  Nilai  berat  ekstrak  diperoleh dari  hasil  penimbangan  cawan  dengan mengurangi bobot awal cawan.
Gambar 1. (a) Ekstrak daun (b) batang (c) bunga

## Hasil isolasi kultur bakteri.
Pembiakan murni bakteri Aeromonas hydrophila dilakukan dengan memindahkan isolate stok pada medium  TSA  dalam  cawan  petri dengan  cara  penggoresan  secara zigzag. Hasil pembiakan murni selanjutnya  diperiksa  di  Laboratorium Bakteriologi,  Dinas  Kesehatan  Provinsi Sulawesi  Utara.  Hasil  pemeriksaan menunjukkan  bahwa  bakteri  ini  benar adalah  bakteri A  hydrophila .  Stok bakteri  yang  telah  diuji  ini  selanjutnya disimpan dalam lemari pendingin untuk digunakan pada uji antibakteri.
Gambar 2. Hasil isolasi bakteri

## Aeromonas hydrophila

## Hasil uji aktifitas antibakteri
Berdasarkan  hasil  uji  daya hambat  ekstrak  daun,  batang,  dan bunga  tanaman  pacar  air  ( Impatiens balsamica L)  terhadap  pertumbuhan bakteri Aeromonas  hydrophila dengan metode difusi agar, menunjukkan adanya  daya  hambat  ekstrak  terhadap bakteri  uji.  Aktifitas  daya  hambat  yang dihasilkan diindikasikan dengan nampaknya  bulatan  zona  bening  pada sekitar    kertas  cakram ( paper  disc ). Zona  bening  di  sekitar  paper  disc menunjukkan adanya aktifitas antibakteri. C B
A
Gambar 3. (a) Daya hambat yang dihasilkan ekstrak daun (b) Daya hambat yang dihasilkan ekstrak batang
(c) Daya hambat yang dihasilkan ekstrak bunga Penilaian zona hambat digolongkan menjadi (1) tidak ada zona hambat,  (2)  lemah  yaitu  zona  hambat kurang  dari  5  mm,  (3)  sedang  yaitu zona  hambat  5-10  mm,  (4)  kuat  yaitu zona  hambat  11-20,  dan  (5)  sangat kuat  yaitu  zona  hambat  21-30  mm (Wangidjaja,  2004 dalam Kolopita, 2005). Berdasarkan penggolongan tersebut,  maka  ekstrak  daun  dapat digolongkan  dalam  golongan  kuat, karena  zona  hambat  yang  terbentuk yaitu  sebesar  11,2  mm,  sedangkan ekstrak  batang  dapat  digolongkan dalam  golongan  kuat,  karena  zona hambat  yang  terbentuk  yaitu  13,7  mm. Kemampuan  ekstrak  bunga  dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri A hidrophila dengan  zona  hambat  21,4 mm menunjukan bahwa ekstrak tersebut  termasuk  dalam  golongan sangat kuat.
A  hydrophila merupakan  bakteri gram  negatif,  bakteri  gram  negatif adalah bakteri yang tidak
mempertahankan  zat  warna  metil  ungu pada  metode  pewarnaan  Gram. A hydrophila berbentuk  batang  pendek  ( 1,3-2,0  x  0,8-1,3  µm  ),  motil  atau bergerak,  tidak  membentuk  spora, fakultatif  anaerob,  resisten  terhadap 0/129,  pertumbuhan  optimum  pada
suhu  22⁰C,  G+C  ratio  57-63%, memproduksi  brown  pigmen  yang diffusible  (untuk  strain typical ).  Koloni bakteri  ini  berwarna  putih,  kecil,  bulat, dan cembung (Nurfitrirahim (2013). Bakteri A  hidrophyla termasuk patogen oportunistik yang hampir selalu terdapat di air dan seringkali menimbulkan  penyakit  apabila  ikan dalam  kondisi  yang  kurang  baik.  Salah satu jenis penyakit yang sering dijumpai pada organisme budidaya adalah penyakit  bakterial  yang  disebabkan oleh  bakteri A  hydrophila ,  dimana merupakan  bakteri  patogen  penyebab penyakit “Motil Aeromonas Septicemia” (MAS), terutama untuk spesies ikan air tawar  di  perairan  tropis.  Penyakit  yang disebabkan  oleh A  hydrophila ditandai dengan  adanya  bercak  merah  pada ikan dan menimbulkan kerusakan pada kulit, insang dan organ dalam. Penyebaran  penyakit  bakterial  pada ikan  umumnya  sangat  cepat  serta dapat  menyebabkan  kematian  yang sangat  tinggi  pada  ikan-ikan  yang diserangnya.  Gejala  klinis  yang  timbul pada ikan yang terserang infeksi bakteri A  hidrophyla adalah  gerakan  ikan menjadi  lamban,  ikan  cenderung  diam di  dasar  akuarium;  luka/borok  pada daerah  yang  terinfeksi;  perdarahan pada bagian pangkal sirip ekor dan sirip punggung,  dan  pada  perut  bagian bawah  terlihat  buncit  dan  terjadi pembengkakan. Ikan sebelum mati naik ke permukaan air  dengan sikap berenang yang labil (Susantiheni,
2012).
Berdasarkan  hasil  pengujian aktifitas daya hambat dari ekstrak daun, batang,  dan  bunga  tanaman  pacar  air, penggunaan  tanaman  pacar  air  ini memiliki potensi antibakteri pada ekstrak  terhadap  bakteri A  hidrophila untuk digunakan sebagai obat pengganti antibiotik, sehingga penerapan ini mampu menekan
kerugian  yang  lebih  besar  apabila terjadi  penyakit,  dan  memiliki  kualitas yang  lebih  terjamain  karena  terbuat langsung  dari  bahan  alamiah  atau tanaman herbal. Pengembangan
A B

## C
penggunaan  ekstrak  dari  tanaman pacar  air  ini  masih  perlu  terus dilakukaan sehingga dapat diimplementasikan bagi usaha budidaya perikanan yang berkelanjutan dan menjaga pengamanan untuk melindungi  kesehatan  baik  ikan  atau organisme budidaya lain.
Kesimpulan Dari hasil penelitian yang dilakukan  didapati  sampel  ekstrak segar daun, batang, dan bunga tanaman pacar air ( Impatiens balsamica L)  melalui  hasil  maserasi dengan  menggunakan  pelarut  etanol. Hasil  pengujian  aktifitas  daya  hambat dari  ekstrak  segar  daun,  batang,  dan bunga  tanaman  pacar  air  ( I  balsamica
L) menunjukkan adanya potensi antibakteri pada ekstrak terhadap bakteri Aeromonas  hydrophila .  Potensi ini diindikasikan dengan besarnya zona bening di sekitar paper disc .

## DAFTAR PUSTAKA
Adfa,  2007.  Senyawa  Antibakteri  Dari
Daun Pacar air ( Impatiens Balsamica  Linn .)  Jurusan  Kimia,
Fakultas  Matematika  Dan  Ilmu
Pengetahuan  Alam.  Universitas
Bengkulu.  Indonesia . Vol.4  No.1 Januari 2008 : 318-322. Dalimartha,  2014.  Tanaman  Obat  Di Lingkungan Sekitar. Penerbit Puspa Swara. Jakarta Gaby, 2007. Bioaktifitas Ekstrak Metanol daun Pacar air (Impatiens Balsamica L) terhadap Pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus Dan Pseudomonas Aeruginosa Penyebab  Cantengan.  Skripsi. Fakultas  Matematika,  Dan  Ilmu Pengetahuan  Alam.  Universitas Hasanuddin. Makassar.Pengetahuan Alam. Universitas Hasanuddin. Makassar. Godam, 2008. Definisi/Pengertian Bakteri,  Ciri –  Ciri  Dan  Peranan
Bakteri  Bagi  Kehidupan  Manusia. http://Definisi_Pengertian- Bakteri,-Ciri-Ciri-Dan Peranan- Bakteri-Bagi-Kehidupan-Manusia- ILMU.htm. 25/08/2014. 16.05. Wita. Kolopita,  2005.  Thesis.  Potensi  Asap Cair Mangrove Sebagai Antibakterial Dalam Mengendalikan  Infeksi  Buatan Vibrio harveyi , Pada Udang Windu, Penaeus monodon . Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor. Kusumaningtyas, 2011. Skripsi. Penetapan Kadar Vitamin C Pada Ekstrak  Bunga  Rosella (Hibiscus Sabdariffa  L) Dengan  Metode Spektrofotometri. Skripsi. Program Studi Diploma III. Sekolah  Tinggi  Ilmu  Kesehatan Muhammadiyah. Manado. Majid,  2009.  Senyawa  Antibakteri  Dan Mekanisme  Kerjanya.  Universitas Diponegoro. Semarang. http://Majid-Undip-Senyawa- Antibakteri-Dan Mekanisme- Kerjanya.htm.  26/08/2014.  17.56. Wita. Nurfitrirahim,  2013.  Buku  Laporan Pembuatan  Media  Agar  Untuk Bakteri Dan Jamur. http://wordpress.com/2013/01/18/l aporan-pembuatan-media-agar- untuk-bakteri-dan-jamur.
13/10/2014. 22.11 Wita
Nuzul, 2012. Aktifitas Antibakteri Fraksi Saponin  Dari  Daun  Tumbuhan Pacar  air (Impatiens  Balsamica L.) Skripsi.  Fakultas  Tarbiyah Institut Agama Islam Negeri Walisongo. Semarang. Oktavianus  S,  2013.  Skripsi.  Uji  Daya Hambat  Ekstrak  Daun  Mangrove
Jenis Avicennia marina Terhadap Bakteri  Vibrio parahaemolyticus .
Jurusan  Ilmu  Kelautan.  Fakultas Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan. Universitas Hasanuddin. Makassar
Susantiheni,  2012.  Telaah  Penyakit Ikan Yang Disebabkan Aeromonashydrophila. http://susa ntiheni.wordp.com/2012/12/04/ae romonashydrpyla/htm. 17/10/2014. 02.37. Wita