## Original Article
Journal of Science and Applicative Technology vol. 5 (1), 2021, pp. 202-207 | 202
e-ISSN: 2581-0545 - https://journal.itera.ac.id/index.php/jsat/
Copyright © 2021 Journal of Science and Applicative Technology. Content from this work may be used under the terms of the Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International Licence . Any  further distribution of this work must maintain attribution to  the author(s) and the  title of the work, journal  citation and DOI. Published under licence by Journal of Science and Aplicative Technology  (JSAT).
Received 7th February 2021 Accepted 30th March 2021 Published 27th May 2021
DOI: 10.35472/jsat.v5i1.415
Deteksi Golongan Senyawa Ekstrak Kasar Metabolit Ekstrasel Mikroalga Laut Spirulina sp. Sebagai Agen Antioksidan
Yulistia Anggraini *a dan Diah Astika Winahyu b
a Program Studi Kimia, Jurusan Sains, Institut Teknologi Sumatera, Lampung Selatan , Indonesia
b Program Studi D3 Analisis Farmasi dan Makanan, Fakultas Kedokteran, Universitas Malahayati, Bandar Lampung, Indonesia
* Corresponding E-mail: yulistia.anggraini@ki.itera.ac.id
Abstract : Microalgae excrete antioxidant compounds as a defense system to protect themselves from the danger of ultraviolet rays. These compounds also can be used as the organic materials of cosmetics or medicines. This study aimed to determine the antioxidant  activity  of  marine  microalgal  extracellular  metabolite  extract  of Spirulina sp..  Extracellular  metabolites  were extracted from the residual  media  filtrate from t he harvesting. The qualitative antioxidant  test’s results using the  thin-layer chromatography  technique  and  2,2-diphenylpycrilhydrazil  (DPPH)  reagent  showed  antioxidant  activity.  Moreover,  the component  identification  using  ninhydrin  and  Dragendorff  reagent  in  thin  layer  chromatography  test  showed  alkaloid  and peptide compounds. To support the results, the identification using infrared spectrum analysis showed the peaks at 1117 cm -1 (C-N and C-C stretching), 1458 cm -1 (C-H bending of methyl group), 1635 cm -1 (C=O stretching of amide group), and 3454 cm -1 (N-H stretching of amine and amide groups).
Keywords: microalgae, Spirulina sp., antioxidant, extracellular metabolite, DPPH
Abstrak: Mikroalga  melepaskan senyawa  antioksidan sebagai sistem  pertahaan diri terhadap sinar ultraviolet.  Senyawa ini juga dapat digunakan sebagai bahan kosmetik dan obat-obatan.  Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui aktivitas antioksidan serta  golongan  senyawa  yang  terkandung  pada  ekstrak  metabolit  ekstrasel  mikroalga  laut Spirulina sp..  Ekstrak  metabolit ekstrasel diperoleh dari residu filtrat media hasil pemanenan. Hasil uji kualitatif antioksidan menggunakan teknik kromatografi lapis  tipis  dan  pereaksi 2,2- diphenylpycrilhydrazil (DPPH)  menunjukkan  bahwa  ekstrak  kasar  tersebut  memiliki  aktivitas antioksidan.  Identifikasi  komponen  menggunakan  pereaksi  Dragendorff  dan  ninhidrin  pada  uji  kromatografi  lapis  tipis menunjukkan adanya senyawa alkaloid dan peptida. Hasil identifikasi tersebut didukung oleh analisis spektrum infra merah yang menunjukkan adanya puncak pada daerah 1117 cm -1 (uluran C-N dan C-C), daerah 1458 cm -1 (tekukan C-H gugus metil), daerah 1635 cm -1 (uluran C=O khas gugus amida atau karboksilat), dan daerah 3454 cm -1 (uluran N-H dari gugus amina dan amida).
Kata Kunci : mikroalga, Spirulina sp., antioksidan, metabolit ekstrasel, DPPH

## Pendahuluan
Sistem  antioksidan  secara  alami  diproduksi  oleh  tubuh manusia untuk menangkal radikal bebas. Namun, jumlah radikal  bebas  dalam  tubuh  akan  semakin  meningkat karena pengaruh dari lingkungan (udara yang tercemar), gaya  hidup  tidak  sehat,  stres,  dan  paparan  sinar  ultra violet  [1-3].  Hal  tersebut  menyebabkan  berkurangnya kemampuan  antioksidan  untuk  menangkal  radikal bebas. Radikal bebas yang berlebih menyebabkan stres oksidatif. Stres oksidatif dapat menyebabkan kerusakan penyakit  degeneratif  [1].  Oleh  karena  itu,  tubuh
memerlukan  asupan  antioksidan  dari  luar,  baik antioksidan alami maupun antioksidan sintetik.
Antioksidan  alami  banyak  dihasilkan  dari  berbagai  jenis tanaman.  Berbagai  jenis  buah-buahan,  sayuran,  dan tanaman  herbal  yang  dapat  dikonsumsi  telah  diketahui memiliki  banyak  kandungan  antioksidan  [4-7].  Akan  tetapi, saat ini penemuan senyawa antioksidan baru dari organisme terestrial  cenderung  menurun  karena  adanya  batasan eksplorasi  bahan  dari  tanaman  terrestrial.  Oleh  karena  itu diperlukan  sumber  baru  untuk  mendapatkan  senyawa antioksidan  alami  yang  sifatnya  dapat  terus  diperbaharui.

## Open Access
Copyright © 2021 Journal of Science and Applicative Technology
J. Sci. Appl. Tech. vol. 5 (1), 2021, pp. 202-207 | 203 Published by: Lembaga Penelitian, Pengabdian Masyarakat, dan Penjaminan Mutu Institut Teknologi Sumatera, Lampung Selatan, Indonesia
Salah  satu  kandidat  potensial  sumber  antioksidan  adalah mikroalga laut [8].
Mikroalga  merupakan  mikroorganisme  yang  memiliki potensi  sebagai  sumber  senyawa  metabolit  bioaktif. Berbagai senyawa seperti flavonoid, alkaloid, terpenoid, dan peptida  telah  berhasil  diisolasi  dari  mikroalga.  Senyawa- senyawa  tersebut  memiliki  ragam  bioaktivitas  antara  lain sebagai antibakteri, antiinflamasi, antikanker, dan sebagainya [8-11]. Bioaktivitas senyawa metabolit mikroalga sebagai  antioksidan  juga  telah  banyak  diteliti.  Mikroalga berpotensi  sebagai  sumber  antioksidan  alami  karena  kaya kandungan  vitamin,  karotenoid,  dan  polifenol  [12-14]. Umumnya  senyawa-senyawa  tersebut  diisolasi  dari biomassa,  sementara  informasi  mengenai  senyawa antioksidan mikroalga yang dieksresikan masih terbatas [15].
Antioksidan  memegang  peranan  penting  dalam  sistem pertahanan  diri Spirulina sp..  Sebagai  mikroorganisme fotoautotrof, Spirulina sp. dapat menyaring sinar ultra violet dengan cara melepaskan suatu senyawa metabolit sekunder ke lingkungannya untuk mencegah terjadinya kerusakan sel akibat reaksi radikal yang disebabkan sinar ultra violet [16]. Senyawa  yang  dapat  menangkal  radiasi  sinar  ultraviolet umumnya  merupakan  senyawa  yang  memiliki  potensi antioksidan tinggi.
Saat ini penelitian tentang senyawa antioksidan dari bahan alam masih terus dikembangkan [17]. Antioksidan digunakan secara  luas  di  bidang  industri  makanan,  kosmetik,  maupun kesehatan.  Selain  itu,  sebagian  besar  orang  beranggapan bahwa peran antioksidan alami tidak dapat digantikan oleh antioksidan  sintetik  mengingat  risiko  yang  mungkin  dapat ditimbulkan  oleh  antioksidan  sintetik  [17-19].  Oleh karenanya, penelitian ini menjadi langkah awal yang penting untuk  mendapatkan  informasi  mengenai  potensi  sumber penghasil  senyawa  antioksidan  yang  dieksresikan  oleh Spirulina sp.

## Metode
Material .  Isolat Spirulina sp.  yang  digunakan  diperoleh dari  Balai  Besar  Perikanan  Budidaya  Laut  (BBPBL) Lampung.  Limbah  POME  (Palm  Oil  Mill  Effluent)  yang digunakan  sebagai  nutrisi  tambahan  media  kultur diperoleh dari limbah PT. Perkebunan Nusantara VII Unit Bekri,  Lampung  Tengah.  Bahan-bahan  kimia  yang digunakan  antara  lain  etanol absolute (Merck), isopropanol p.a. (Merck),  asam  klorida  pekat  32  % (Merck), resin Amberlit XAD-16 (Sigma), asetonitril p.a. (Merck), 2,2-diphenylpycrilhydrazil (DPPH)  (Sigma
Aldrich), trifluoroacetic acid for synthesis (TFA) (Merck), Na 2 CO 3 teknis,  pupuk  (urea,  TA,  TSP),  plat  silika  gel  60 F254  (Merck),  Plat  kaca  RP-18  F254  (Merck),  pereaksi Dragendorff dan pereaksi ninhidrin.
Kultivasi dan Pemanenan . Metode kultivasi Spirulina sp mengikuti  metode  Sari  dkk.  [20]  dengan  modifikasi menggunakan  air  laut  dan  limbah  POME  5%  sebagai nutrisi  tambahan  alternatif.  Kultivasi  dilakukan  dalam skala  lebih  besar  (80  L)  menggunakan  sistem  terbuka dengan  pencahayaan  menggunakan  sinar  matahari. Setelah  dikultivasi  selama  dua  minggu,  Filtrat  dan biomassa dipisahkan  menggunakan membran filter 200 mesh [21].
Ekstraksi. Sebanyak  5  L  filtrat  hasil  panen  dilewatkan pada kolom yang berisi resin XAD-16. Resin yang sudah menjerap  ekstrak  metabolit  ekstrasel  tersebut  dibilas dengan etanol 30% kemudian dilanjutkan dengan  elusi secara gradien  menggunakan pelarut  isopropanol (IPA) 20%,  40%,  dan  70%,  pada  kondisi  asam  (dengan menambahkan beberapa tetes asam klorida sampai pH 2)  [22].  Ekstrak  yang  terkumpul  kemudian  dipekatkan menggunakan rotary evaporator .
Uji  Antioksidan .  Uji  antioksidan  dilakukan  secara kualitatif  menggunakan  teknik    kromatografi  lapis  tipis (KLT) [23]. Ekstrak pekat ditotolkan pada plat silika lalu dielusi dengan isopropanol-air 20%. Hasil elusi kemudian disemprot dengan pereaksi DPPH 0,01 M dan didiamkan selama  30  menit.  Fraksi  yang  menunjukkan  positif antioksidan kemudian dihitung nilai Rf nya.

## Rf = Jarak migrasi senyawa Jarak migrasi eluen
Uji  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT) .  Uji  ini  dilakukan untuk mengetahui komponen senyawa antioksidan yang terkandung  dalam  ekstrak  sampel.  Ekstrak  kasar  diuji secara KLT menggunakan pereaksi visualisasi Dragendorf,  ninhidrin,  dan  serium  sulfat.  Sampel ditotolkan  pada  plat  RP-18  dan  dielusi  menggunakan campuran asetonitril-air (7:3) + 1 tetes TFA 0,1%.
Analisis spektroskopi Infa Merah . Sekitar 1 mg sampel uji  digerus  dengan  garam  KBr  kemudian  dibuat  pelet menggunakan die 7  mm.  Pelet  kemudian  diukur serapannya  menggunakan  spektrofotometer Fourier Transform  Infra  Red (FTIR)  Shimadzu  Prestige-21  di daerah 4000-400 cm -1 .
e-ISSN: 2581-0545
Deteksi Golongan Senyawa Ekstrak Kasar Metabolit Ekstrasel Mikroalga Laut Spirulina sp. Sebagai Agen Antioksidan

## Hasil dan Pembahasan

## Kultivasi dan Pemanenan
Kajian  mengenai  pemanfaatan  limbah  POME  sebagai media  kultivasi Spirulina sp.  telah  banyak  dilakukan, terutama karena banyaknya industri sawit di Indonesia [20,24].  POME  mengandung  unsur  N,  P,  dan  K  yang dapat  dimanfaatkan  sebagai  media  pertumbuhan mikroalga.  Penggunaan  limbah  POME  sebagai  media kultivasi Spirulina sp.  dapat  mengurangi  emisi  karbon dioksida  dan  mereduksi  residu  organik  limbah  pabrik sawit yang dapat mencemari lingkungan.
Kajian mengenai pengaruh konsentrasi POME terhadap pertumbuhan  mikroalga  telah  dilakukan  oleh  Sari  dkk. dan  Hadiyanto  dkk.  [20,24].  Kultivasi  dilakukan  selama dua minggu karena sistem pencahayaan yang digunakan adalah  sinar  matahari  langsung,  di  mana  durasi pencahayaan  menjadi  kurang  dari  24  jam.  Akibatnya, pertumbuhan Spirulina sp.  dengan  pencahayaan matahari lebih lambat dibandingkan dengan pertumbuhan Spirulina sp. dengan pencahayaan 24 jam. Pemanenan  kultur  mikroalga  dengan  pencahayaan matahari  memerlukan  waktu  10-14  hari,  sedangkan pemanenan  kultur  mikroalga  dengan  pencahayaan  24 jam hanya membutuhkan waktu 7-10 hari [20].  Kultivasi Spirulina sp.  pada  media  POME  5%  menghasilkan biomassa basah sebanyak 0,98 g/L media kultur.
Identifikasi Spirulina sp.  hasil  kultivasi  diamati  secara mikroskopis menggunakan mikroskop cahaya (perbesaran  400  kali)  seperti  terlihat  pada Gambar  1 . Isolat memiliki diameter 8,8 µm. Ukuran tersebut cukup besar  dan  normal  seperti  ukuran Spirulina sp.  pada umumnya  (diameter  1-12  µm).  Karena  diameter Spirulina sp cukup besar, biomassa dr isolat Spirulina sp. dapat dipisahkan dengan metode penyaringan menggunakan membran  filter 200  mesh  [21].  Setelah biomassa  disaring,  filtrat  hasil  penyaringan  kultur selanjutnya  digunakan  untuk  proses  ekstraksi  senyawa antioksidan dari metabolit ekstrasel.
Gambar1 . Spirulina sp.  Pada  media  POME  5%  (pengamatan menggunakan mikroskop cahaya perbesaran 400x)

## Ekstraksi
Ekstraksi  filtrat  kultur Spirulina sp.  dilakukan  dengan menggunakan resin XAD-16. Resin XAD-16 digunakan untuk menargetkan  senyawa  polar  dengan  berat  molekul  rendah dan sedang, seperti senyawa metabolit sekunder kelompok peptida  atau  polifenol  [22,25].  Resin  XAD-16  adalah adsorben poliaromatik (momen dipol 0,3) dengan diameter pori  rata-rata  100 Å  yang  memungkinkan  resin  untuk mengadsorpsi  molekul  dengan  berat  molekul  kecil  hingga sedang  (kurang  dari  40.000).  Resin  ini  biasanya  digunakan untuk  mengadsorpsi  senyawa  organik  dalam  pelarut  polar atau sistem berair. Ekstrak yang terjerap dalam resin dielusi secara gradien menggunakan pelarut isopropanol-air, 20 %, 40%, dan 70% (pada pH 2, dengan menambahkan beberapa tetes  asam  klorida  dalam  eluen).  Senyawa  dalam  filtrat media  memiliki  sifat  asam  lemah,  sehingga  dalam  filtrat media  akan  muncul  sebagai  garam  yang  sukar  larut  dalam pelarut  organik.  Kondisi  asam  diperlukan  agar  senyawa mudah  terekstrak  dengan  pelarut  organik,  sehingga  pada penelitian ini meggunakan pH 2 seperti yang dilakukan Oleh Martin-Visscher et.al .  [22].  Pemisahan  secara  gradien tersebut menghasilkan 6 fraksi isolat, yaitu fraksi EY1 dan EY2 (hasil elusi IPA 20%), fraksi EY3 dan EY4 (hasil elusi IPA 40%), fraksi  EY5  dan  EY6  (hasil  elusi  IPA  70%).  Tiap  fraksi  yang diperoleh  kemudian  dipekatkan  menggunakan rotary evaporator .  Ekstrak  pekat  yang  diperoleh  kemudian digunakan untuk pengujian lebih lanjut.

## Uji Antioksidan
Uji  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT)  cukup  efektif  untuk mendeteksi sifat antioksidan suatu senyawa secara kualitatif [23].  Senyawa  yang  positif  mengandung  antioksidan  akan menghasilkan  bercak  berwarna  kuning  dengan  latar belakang berwarna ungu seperti terlihat pada Gambar 2 .
Keterangan Gambar: 1 : fraksi EY 1
2 : fraksi EY 2 3 : fraksi EY 3 4 : fraksi EY 4 5: fraksi EY 5 6: fraksi EY 6
Gambar 2. Uji kualitatif antioksidan fraksi EY1-6 dengan teknik KLT, fasa diam plat silika, eluen IPA-air (1:4), pereaksi DPPH 0,01M.
Dari  gambar  tersebut  terlihat  bahwa  fraksi  EY6  memiliki kandungan antioksidan. Hasil KLT tersebut juga menunjukkan bahwa ekstrak yang mengandung antioksidan
Copyright © 2021 Journal of Science and Applicative Technology
J. Sci. Appl. Tech. vol. 5 (1), 2021, pp. 202-207 | 205 Published by: Lembaga Penelitian, Pengabdian Masyarakat, dan Penjaminan Mutu Institut Teknologi Sumatera, Lampung Selatan, Indonesia
adalah senyawa yang sangat polar karena bercak berada di bawah  (Rf  0  dan  0,1).  Untuk  mempermudah  proses pemisahan,  maka  uji  kromatografi  selanjutnya  dilakukan menggunakan fasa diam non polar, yaitu plat RP-18.

## Uji Kromatografi Lapis Tipis
Fraksi  EY6  diuji  secara  KLT  menggunakan  pereaksi  spesifik untuk  mengetahui  komponen  yang  terkandung  dalam ekstrak. Uji KLT dilakukan menggunakan plat RP-18 dan eluen asetonitril-air  (7:3)    yang  ditambahkan  1  tetes  TFA  0,1%. Pereaksi  yang  digunakan  adalah  pereaksi  Dragendorff, ninhidrin, dan serium sulfat sebagai pereaksi visualisasi. Uji ini dilakukan untuk mengetahui komponen senyawa apa saja yang terkandung dalam metabolit ekstrasel Spirulina sp..
Sebelum direaksikan dengan pereaksi visualisasi,  hasil elusi EY6 terlebih dahulu divisualisasikan pada lampu UV 254 dan 366  nm.  Hal  ini  bertujuan  untuk  melihat  kemungkinan adanya senyawa aromatik, polifenol, atau flavonoid di dalam eksrak EY6. Spot senyawa yang mengandung gugus aromatik biasanya  akan  memberikan  warna  ungu  pada ʎ 254  nm, sedangkan  senyawa  flavonoid  dan  polifenol  akan memberikan warna kuning terang pada ʎ 366 nm.  Namun, hasil  pengamatan  menunjukkan  hasil  negatif  sehingga disimpulkan ekstrak EY6 tidak mengandung gugus aromatik, flavonoid maupun polifenol.
Selanjutnya  hasil  elusi  KLT  divisualisasi  menggunakan pereaksi spesifik seperti pereaksi Dragendorff, ninhidrin, dan serium  sulfat.  Hasil  uji  menggunakan  pereaksi  Dragendorff menunjukkan bahwa komponen ekstrak positif mengandung senyawa alkaloid. Hal ini terlihat dari adanya spot berwarna jingga  pada  Rf  0,69  seperti  pada Gambar  3a .  Komponen alkaloid yang mengandung gugus N-tersier akan memberikan reaksi  positif  dengan  pereaksi  Dragendorff  menghasilkan noda  berwarna  jingga.  Pereaksi  ninhidrin  digunakan  untuk mengidentifikasi senyawa amina atau peptida yang memiliki gugus  fungsi  amina  primer  atau  sekunder.  Uji  dengan ninhidrin menunjukkan hasil positif yang berarti ekstrak EY6 mengandung gugus amina primer atau sekunder. Kelompok senyawa  ini  memberikan  bercak  berwarna  ungu  seperti terlihat pada Gambar 3b .
(a)
(b)
Gambar 3. Uji fitokimia fraksi EY6, plat RP-18, eluen asetonitril-air (7:3) + 1 tetes TFA 0,1%. a) Pereaksi Dragendorff b) pereaksi ninhidrin.
Hasil uji KLT menggunakan pereaksi serium sulfat tidak menunjukkan  penampakkan  bercak.  Hal  ini  mungkin disebabkan oleh konsentrasi sampel yang kurang pekat atau ukuran molekul yang terkadung dalam sampel kecil sehingga tidak terdeteksi dengan pereaksi serium sulfat. Hasil  uji  KLT  menggunakan  peraksi  Dragendorff  dan ninhidrin  menunjukkan  bahwa  komponen  di  dalam ekstrak  tersebut  kemungkinan  mengandung  golongan senyawa  alkaloid,  amina,  atau  peptida.    Data  KLT tersebut didukung oleh data spektrum infra merah yang terlihat pada Gambar 4 .
Data  spektrum  infra  merah  menunjukkan  adanya serapan pada daerah 1116,7 cm -1 (uluran C-N dan C-C), daerah  1458  cm -1 (tekukan  C-H  gugus  metil),  daerah 1635 cm -1 (uluran C=O gugus amida), dan daerah 3454 cm -1 (uluran N-H dari gugus amina dan amida) [26].
Gambar 4. Spektrum FTIR fraksi EY6
Berdasarkan hasil uji KLT dan analisis spektroskopi infa merah,  fraksi  EY6  diduga  memilki  kandungan  peptida
e-ISSN: 2581-0545
Deteksi Golongan Senyawa Ekstrak Kasar Metabolit Ekstrasel Mikroalga Laut Spirulina sp. Sebagai Agen Antioksidan
seperti  microcystin  atau mycosporine-like  amino  acids ( MAA ).  Namun,  perlu  diuji  lebih  lanjut  dengan  isolasi senyawa  murni  dan  elusidasi  struktur.  Mikroalga kelompok  cyanobacteria  seperti Oscillatoria dan  sp. Microcystis sp. umumnya menghasilkan microcystin dan MAA [27-30].  Senyawa  microcystin  dikenal  sebagai senyawa  yang  bersifat  toksin.  Saat  sel  cyanobacteria mati,  sel  tersebut  akan  terurai  dan  melepaskan microcystin  ke  lingkungan.  Dalam  beberapa  kasus, kejadian ini bahkan menyebabkan fenomena cyanobacteria  blooming [31].  Sedangkan  kelompok senyawa MAA biasanya dihasilkan oleh mikroorganisme laut  fotoautotrof  sebagai  perlindungan  terhadap  sinar ultra  violet  atau  lebih  dikenal  sebagai  istilah fotoproteksi.  Kemampuan MAA ini  dimanfaatkan sebagai bahan kosmetik dan kesehatan karena memiliki kemampuan  menangkal  radikal  bebas  atau  bersifat antioksidan [27,29,30].
Penelitian  ini  memerlukan  kajian  lebih  lanjut  untuk mengetahui  karakteristik  dan  struktur  senyawa tersebut.  Fraksi  EY6  perlu  dilakukan  pemurnian  lebih lanjut  serta  elusidasi  struktur  dengan  analisis spektroskopi, seperti spektroskopi massa dan spektroskopi  NMR  ( Nuclear  Magnetic  Resonannce ). Selain itu, Perlu dilakukan uji aktifitas antioksidan secara kuantitatif  menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis untuk  mengetahui  seberapa  besar  kemampuan antioksidan dari senyawa metabolit ekstrasel tersebut.

## Kesimpulan
Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak metabolit ekstrasel Spirulina sp.  diduga  mengandung  golongan senyawa alkaloid atau peptida yang  berpotensi sebagai antioksidan.  Untuk  mengetahui  karakteristik  dan struktur  senyawa  tersebut,  Fraksi  EY6  perlu  dilakukan pemurnian  lebih  lanjut  serta  elusidasi  struktur.  Selain itu,  perlu  dilakukan  uji  aktifitas  antioksidan  secara kuantitatif untuk mengetahui seberapa besar kemampuan  antioksidan  dari  senyawa  metabolit ekstrasel tersebut.

## Konflik Kepentingan
Data  penelitian  ini  adalah  hasil  penelitian  penulis  dan penulis  menyatakan  tidak  ada  konflik  terhadap kepentingan tertentu.

## Ucapan Terima Kasih
Terimakasih  kepada  UPT  Laboratorium  Terpadu  dan Sentra  Inovasi  Teknologi  (LTSIT)    Universitas  Lampung yang  telah  banyak  memberikan  dukungan  terhadap penulis dalam menyelesaikan penelitian.

## Daftar Pustaka
[1] I. Romieu, F. Castro-Giner, N. Kunzli,and J. Sunyer , “ Air pollution, oxidative  stress  and  dietary  supplementation:  a  review ”, Eur Respir J, Vol. 31, pp. 179 – 196, 2008.
[2] B. Poljšak and R . Fink , “ The Protective Role of Antioxidants in the  Defence  against  ROS/RNS-Mediated  Environmental Pollution ”, Hindawi: Oxidative Medicine and Cellular Longevity Volume, 2014.
[3] J. F. Lesgards, P. Durand, M. Lassarre, P.  Stocker, G. Lesgards, A. Lanteaume,  M.  Prost,  and  M.  P.  L.  Michel, “ Assessment  of Lifestyle Effects on the Overall Antioxidant Capacity of Healthy Subjects ,” Environmental  Health  Perspectives,    Vol.  110,  No. 5,pp. 479-486, May 2002.
[4] J.  Harasym, R.  Oledzki , “ Effect  of  fruit  and  vegetable antioxidants  on  total  antioxidant  capacity  of  blood  plasma ”, Nutrition, Vol. 30, pp. 511-517, 2014.
[5] S. Arshiya , “ The Antioxidant Effect of Certain Fruits: - A Review
,” J. Pharm. Sci. & Res., Vol.5(12), pp. 265- 268, 2013.
[6] N. Ravimanan and A. Ninsasala, “ Study on antioxidant activity in fruits and vegetables – A Review ,” Int. J. Adv. Res. Biol. Sci.  Vol. 4, No. 3, pp. 93-101, 2017.
[7] G. A. Nayik and A. Gull, Ed., Antioxidants in Fruits: Properties and Health Benefits. Singapore: Springer, 2020.
[8] R. Singh, P. Parivar, M. Singh, A. Bajguz, J. Kumar, S. Singh, V. P. Singh, and S. M. Prasad, “ Uncovering Potential Applications of Cyanobacteria and Algal Metabolites in Biology, Agriculture and Medicine:  Current  Status  and  Future  Prospects”, Front. Microbiol., Vol. 8, No. 515, pp1-37, April 2017.
[9] E. Shannon and N. Abu-Ghannam , “ Antibacterial Derivatives of Marine Algae: An Overview of Pharmacological Mechanisms and Applications ”, Mar. Drugs, Vol. 14 No. 81, pp. 1-23, 2016.
[10] K.  A.  M.  Andrade,  C.  Lauritano,  G.  Romano  and  A.  Ianora, “ Marine  Microalgae  with  Anti-Cancer Properties ”, Mar.  Drugs, Vol. 16, 165, pp 1-17, 2018.
[11] M. C. Barbalace, M. Malaguti, L. Giusti , A. Lucacchini , S. Hrelia, and C. Angeloni , “ Anti-Inflammatory Activities of Marine Algae in  Neurodegenerative  Diseases, Int.  J.  Mol.  Sci.,  Vol.  20,  3061, pp. 1-20, 2019.
[12] A.  Hemalatha,  K.  Girija,  C.  Parthiban,  C.  Saranya,  and  P. Anantharaman ,  “ Antioxidant  properties  and  total  phenolic content  of  a  marine  diatom,  Navicula  clavata  and  green microalgae, Chlorella marina and Dunaliella salina ,” Adv. Appl. Sci. Res., Vol. 4(5), pp. 151-157, 2013.
[13] M.P.  Rajishamol,  S.  Lekshmi,  K.  C.  Vijayalakshmy,  and  A.V. Saramma, “Antioxidant activity of Cyanobacteria isolated from
Copyright © 2021 Journal of Science and Applicative Technology
J. Sci. Appl. Tech. vol. 5 (1), 2021, pp. 202-207 | 207 Published by: Lembaga Penelitian, Pengabdian Masyarakat, dan Penjaminan Mutu Institut Teknologi Sumatera, Lampung Selatan, Indonesia
Cochin  estuary,” Indian  Journal  of  Geo-Marine  Sciences,  vol.
45(8), pp.  974-977, 2016.
[14] C.  Sansone  and  C.  Brunet,  Marine  Algal  Antioxidants, Antioxidants, Vol. 9, No. 206, pp 1-4, 2020.
[15] L. Liu, G. Pohnert, and D. Wei , ” Extracellular Metabolites from Industrial  Microalgae  and  Their  Biotechnological  Potential ”, Mar. Drugs, Vol. 14, 191, 2016.
[16] A.  Latifi,  M.  Ruiz,  &  C.  C.  Zhang ,  “ Oxidative  stress  in cyanobacteria ”, FEMS  Microbiol  Rev.,  Vol.  33,  pp.  258 – 278, 2009.
[17] M. Mitterer-Daltoé, J. Bordim , C. Lise , L. Breda, M. Casagrande, V. Lima ,  “ Consumer  awareness  of  food antioxidants.  Synthetic  vs.  Natural ”, Food  Sci.  Technol,  2020,
(online). Available on https://doi.org/10.1590/fst.15120.
[18] C. Caleja, L. Barros, A. L. Antonio, M. Beatriz, P. P. Oliveira, and I.C.F.R.  Ferreira ,  “ A  comparative  study  between  natural  and synthetic  antioxidants:Evaluation  of  their  performance  after incorporation into biscuits, Food Chemistry, Vol. 216,  pp. 342 – 346, 2017.
[19] M. Carocho, M. F. Barreiro, P. Morales, and I. C. F. R. Ferreira,
“ Adding  Molecules  to  Food,  Pros  and  Cons:  A  Review  on Synthetic and Natural Food Additives ”, ComprehensiveReviews inFood Scienceand Food Safety, Vol.13, pp. 377-399, 2014.
[20] F.  Y.  A.  Sari,  I.  M.  A.  Suryajaya,  dan  Hadiyanto,  “ Kultivasi
Mikroalga Spirulina Platensis Dalam Media Pome Dengan Variasi Konsentrasi  Pome  Dan Komposisi  Jumlah  Nutrien ” ,  Jurnal Teknologi Kimia dan Industri, Vol. 1, hal. 487-494, 2012.
[21] A. Vonshak, Spirulina Platensis (Arthrospira) : Physiology, Cell- Biology and Biotechnology. Taylor and Francis e-library, 2002.
[22] L.  A.  Martin-Visscher,  M.  J.  V.  Belkum,  S.  G.  Tsodikova,  R.  M. Whittal, J. Zheng, L. M. McMullen, and J. C. Vederas, “ Isolation and  Characterization  of  Carnocyclin  A,  a  Novel  Circular Bacteriocin  Produced  by  Carnobacterium  maltaromaticum Ual30 ” , Applied  And Environmental Microbiology, Vol. 74,  No. 15, pp. 4756 – 4763, 2008.
[23] J.  Wang,  Y.  D.  Yue,  F.  Tang  and  J.  Sun ,  “ TLC  Screening  for Antioxidant  Activity  of  Extracts  from  Fifteen  Bamboo  Species and  Identification  of  Antioxidant  Flavone  Glycosides  from Leaves  of  Bambusa.  textilis  McClure ”, Molecules,  Vol.  17,  pp. 12297-12311, 2012.
[24] H.  Hadiyanto,  M.  Christwardana,  and  D.  Soetrisnanto,
“ Phytoremediation  of  Palm  Oil  Effluent  Mill  (POME)  by  Using Aquatic Plants and Microalgae for Biomass Production ”, J. Env. Science and Technology, Vol. 6 (2), pp. 79-90 , 2013.
[25] M. Silva, L. Castellanos, and M. Ottens , “ Capture and Purification of Polyphenols Using Functionalized Hydrophobic Resins ”, Ind. Eng. Chem. Res., Vol. 57, pp. 5359−5369 , 2018.
[26] R.M.  Silverstein,  F.X.  Webster,  and  D.J.  Kiemle,  Spectrometric Identification  Of  Organic  Compounds.  7 th edition.  New  York: John Wiley & Sons, Inc., 2005.
[27] S.  Bhatia,  A.  Garg,  K.  Sharma,  S.  Kumar,  A.  Sharma,  and  A.  P. Purohit,  “Mycosporine  and  mycosporine -like  amino  acids:  A
paramount  tool  against  ultra  violet  irradiation”,  Pharmacogn Rev., Vol. 5, pp. 138 – 146, December 2011.
[28] D. M. Hartnell, I. J. Chapman, N. G. H. Taylor, G. F. Esteban, A. D. Turner,  and  D.  l  J.  Franklin ,  “ Cyanobacterial  Abundance  and Microcystin  Profiles  in  Two  Southern  British  Lakes:  The Importance  of  Abiotic  and  Biotic  Interactions ”, Toxins,  Vol. 12:503, 2020.
[29] K. P. Lawrence, P. F. Long, and A. R. Young , “ Mycosporine-Like Amino  Acids  for  Skin  Photoprotection ”,  Current  Medicinal Chemistry, Vol. 24, pp. 1-16, 2017.
[30] E.  Chrapusta,  A.  Kaminski  ,  K.  Duchnik,  B.  Bober,  M.  Adamski, and J. Bialczyk , “Mycosporine -Like Amino Acids: Potential Health and Beauty Ingredients”, Mar. Dru gs, Vol. 15, 326, 2017.
[31] I. Syaichurrozi dan Jayanudin , “ potensi limbah cair tahu sebagai media tumbuh spirulina platensis ,” Jurnal Integrasi Proses, Vol. 6, hal. 64-68, Desember 2016.