## EKSTRAK DAUN MANGGA (Mangifera indica L.) SEBAGAI ANTIJAMUR TERHADAP JAMUR Candida albicans DAN IDENTIFIKASI GOLONGAN SENYAWANYA
Dian Riana Ningsih * , Zusfahair, Diyu Mantari

## Jurusan Kimia FMIPA
Universitas Jenderal Soedirman
* email: deeyan_bik@yahoo.com
Received 22 Pebuari 2017
Accepted 9 April 2017

## Abstrak
Candida  albicans adalah  salah  satu  jamur  yang  dapat  menyebabkan  infeksi  candidiasis. Salah satu bahan obat alami dari ekstrak tanaman yang berpotensi sebagai antijamur adalah ekstrak  daun  mangga (Mangifera  indica L.).  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui aktivitas  antijamur  daun  mangga  terhadap C.  albicans, penentuan  konsentrasi  hambat tumbuh  minimum  (KHTM)  dan  mengidentifikasi  golongan  senyawa  kimia  dari  ekstrak tersebut  yang  berpotensi  sebagai  antijamur.  Daun  mangga  diekstraksi  secara  maserasi menggunakan pelarut metanol. Ekstrak metanol daun mangga yang dihasilkan dilakukan uji aktivitas  antijamur  terhadap C.  albicans dengan  menggunakan  metode  difusi.  Setelah diketahui  aktivitasnya,  ekstrak  metanol  daun  mangga  kemudian  ditentukan  konsentrasi hambat tumbuh minimum (KHTM) dan diuji kandungan metabolit sekundernya dengan uji fitokimia.  Hasil  ekstraksi  daun  mangga  dengan  pelarut  metanol  menghasilkan  ekstrak metanol dengan rendemen 10,55% (b/b) dan menghasilkan aktivitas antijamur dengan zona hambat terbesar pada konsentrasi 1000 ppm dengan zona hambat 8,12 mm. KHTM ekstrak metanol  daun  mangga  terhadap C.  albicans yaitu  pada  konsentrasi  65  ppm  dengan  zona hambat  sebesar  0,64  mm.  Berdasarkan  hasil  uji  fitokimia  ekstrak  metanol  daun  mangga menunjukkan adanya senyawa golongan alkaloid, flavonoid, stereoid, polifenol, tanin, dan saponin.
Kata kunci : Antijamur, Candida albicans, KHTM, Mangifera indica L.

## Abstract
Candida  albicans  is  one  of  the  fungal  which  causes  infection.  The  treatment  of  fungal infection topical medicinesemi-synthetic can create resistance. Therefore, it is necessary to find natural medicine from potential herbal extract as antifungal to overcome the problem. Mango  leaves  is  one  of  the  potential  herbal.  The  research  was  aimed  to  determine antifungalsmango  leaves  activities  to  C.  albicans,  to  determine  the  minimum  inhibitory concentration  (MIC)  and  identifythe  active  chemical  compoundsgroupof  the  extract  as antifungal.Mango  leaves were extracted by  maceration using  methanol.  Methanol extract was  tested  for  its  antifungal  activity  toward  C.  albicans  showed  by  highest  antifungals activity  then  determined  Minimum  inhibitory  concentration  (MIC),  tested  secondary metabolite  compounds  content  using  phytochemical  test.The  extraction  result  of  mango leaves with methanol was resulted the methanol extract with a yield of 10,55% (w/w) and
the methanol extract showed an antifungals activities with the largest inhibition zone at a concentration  of  1000  ppmwith  inhibition  zone  of  8,12  mm.Minimum  inhibitory concentration  (MIC)  of the  mango’s  methanol  extract  toward  C.  albicanswas  on  65  ppm with inhibitory zone of 0.64 mm. Based on phytochemical test result analysis of it extract showed  alkaloid,  flavonoid,  stereoid,  polyphenol,  tannins  and  saponin  compound catagories.
Keywords : Antifungals, Candida albicans, Mangifera indica L., MIC

## Pendahuluan
Infeksi  merupakan  penyakit  yang mudah ditemukan di daerah tropis seperti Indonesia. Penyebab penyakit infeksi yang mudah  ditemukan  diantaranya  adalah infeksi  karena  jamur.  Jamur  yang  banyak menyebabkan infeksi adalah jamur Candida.  Infeksi  yang  disebabkan  oleh Candida  dikenal  dengan  Candidiasis. Candidiasis    adalah  suatu  penyakit  jamur yang bersifat akut dan sub akut yang dapat mengenai mulut, vagina, kulit, kuku, paru- paru dan saluran pencernaan dan disebabkan oleh spesies Candida, biasanya oleh Candida  albicans ( C.  albicans ). Jamur C.  albicans merupakan  salah  satu jamur patogen pada manusia. Penyakit ini ditemukan  di  seluruh  dunia  dan  dapat menyerang  semua  umur,  baik  laki-laki maupun perempuan (Jawetz et al ., 2005).
Obat topikal yang selama ini digunakan untuk mengobati candidiasis kulit meliputi nistatin, klotrimazol, mikonazol, ketokonazol  dan  azol-azol  lainnya.  Akan tetapi obat-obat antijamur tersebut memiliki keterbatasan, seperti efek samping  yang  berat,  spektrum  antijamur yang  sempit,  penetrasi  yang  buruk  pada jaringan  tertentu,  dan  munculnya  jamur yang resisten (Jawetz et al ., 2005). Untuk mengatasi  efek  negatif  yang  ditimbulkan oleh obat antijamur sintetis tersebut, maka perlu  dilakukan  eksplorasi  terhadap  obat antijamur  yang  bersifat  alami.  Salah  satu sumber yang dapat dijadikan sebagai obat antijamur alami adalah tanaman. Tanaman seringkali  digunakan  sebagai  obat  untuk penyembuhan suatu penyakit karena tidak memiliki efek samping. Senyawa antijamur  yang  berasal  dari  tanaman
sebagian  besar  diketahui  merupakan metabolit  sekunder  tanaman,  terutama golongan  fenolik  dan    terpen  dalam minyak atsiri (Nychas dan Tassou, 2000).
Salah  satu  tanaman  yang  berpotensi sebagai  tanaman  obat  adalah  tanaman mangga.  Tanaman  mangga  ( Mangifera indica L . )  merupakan  tanaman  yang berpotensi  sebagai  obat  herbal  karena mengandung senyawa metabolit sekunder. Penelitian-penelitian yang telah dilakukan terhadap  tanaman  mangga  yaitu  daun mangga sebagai antioksidan, antimikroba, dan  antitumor.  Selain  flavonoid  tanaman mangga  juga  mengandung  saponin,  tanin galat,  tanin  katekat,  kuinon  dan  steroid atau  tripenoid  (Widijanti  dan  Bernard, 2007). Pada penelitian ini ekstrak metanol daun mangga digunakan sebagai antijamur.  Mangga  merupakan  tanaman yang melimpah dan  bagian daun tanaman tersebut kurang dimanfaatkan oleh masyarakat.  Oleh  karena  itu,  penelitian tentang  daun  tanaman  mangga  ini  sangat menarik  untuk  dilakukan.  Kemampuan ekstrak    daun  mangga  ( Mangifera  indica L . ) sebagai  antijamur perlu untuk diteliti. Dalam    penelitian    ini,    akan  dilakukan ekstraksi  secara  maserasi  terhadap  daun mangga  dengan  pelarut  metanol.  Ekstrak metanol  yang  diperoleh  dilakukan  uji aktivitas  antijamurnya  terhadap  jamur C. albicans, penentuan  Konsentrasi  Hambat Tumbuh Minimum (KHTM) serta diidentifikasi.

## Metode Penelitian

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah blender ,  oven,  autoklaf,
timbangan analitik, waterbath, filler, pipet ukur, hot  plate ,  mikropipet, drugalsky , inkubator,  tabung  reaksi,  rak  tabung reaksi, cawan Petri, kapas, kassa, wrapping ,  sarung  tangan,  derigen,  botol semprot,  label,  gunting, cutter ,  kain  lap, lampu  spirtus,    jarum  ose,  lemari pendingin  dan  spektrofotometer Thermo Scientific Genesys 20.
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  daun  mangga  yang diambil  dari  Kampus  MIPA  Kelurahan
Karangwangkal Universitas Jenderal
Soedirman  Purwokerto,  metanol,  jamur Candida  albicans yang  diperoleh  dari koleksi Laboratorium Mikrobiologi
Fakultas  Biologi  Universitas  Jenderal Soedirman , alkohol 70%, pepton, glukosa, aquades,  media Potato  Dextrose  Agar (PDA) kertas saring, tissue, I 2 , KOH, HCl, HCl  pekat,  serbuk  Mg,  pereaksi Mayer , pereaksi FeCl 3 , pereaksi Liberman- Burchard , dan ketokonazol.

## Prosedur Penelitian Ekstraksi (Ningsih, et al., 2014)
Sebanyak  kurang  lebih  100  gram serbuk  daun  mangga  diekstraksi  secara maserasi  dengan  menggunakan  350  mL metanol  sampai  semua  serbuk  terendam dan  diaduk  lalu  ditutup  dan  disimpan selama  tiga  hari.  Pengadukan  dilakukan kurang  lebih  sebanyak  tiga  kali  sehari. Selanjutnya dilakukan penyaringan sehingga didapat filtrat dan residu. Residu yang  dihasilkan  kemudian  dimaserasi dengan  penambahan  50  mL  metanol selama  3  hari  dan  dilakukan  penyaringan setiap  hari.  Semua  filtrat  yang  dihasilkan disatukan  menjadi  satu dalam  satu wadah sebagai filtrat ekstrak metanol. Kemudian filtrat tersebut dipekatkan dengan vacuum rotary  evaporator hingga  didapatkan ekstrak yang kental kemudian ditimbang.

## Uji aktivitas antijamur (Sari, 2010)
Pengujian  aktivitas  dilakukan  dengan metode  difusi  agar . Pada  pengujian  ini semua bahan dan alat yang akan digunakan harus  dalam  keadaan  steril.  Prosedur
pengujian aktivitas adalah sebagai berikut: jamur C.  albicans ditumbuhkan  dalam medium Sabauraud Dextrose Broth (SDB) cair  selama  24  jam.  Suspensi  isolat  ini diukur  dengan  spektrofotometer  pada  λ 600  nm  hingga  diperoleh  nilai  transmitan 25%, bila belum mencapai 25% dilakukan pengenceran
bertingkat dengan menggunakan aquades.
Kemudian Sebanyak  50  μL  kultur C.  albicans cair disebarkan  secara  merata  di  atas  medium Potato  Dextrose  Agar (PDA)  padat. Setelah  media  PDA  memadat  dibuat  tiga lubang  dengan  menggunakan cork  borer dan  diberikan  ekstrak  daun  mangga sebanyak  50  µL  pada  tiap  lubang  dengan konsentrasi yang digunakan untuk pengujian daya hambat adalah 1000 ppm. Masing-masing  kultur  diinkubasi  selama 1x24  jam  pada  suhu  37 o C,  perlakuannya duplo.  Kemudian  diukur  daerah  hambat (daerah  bening  di  sekitar  lubang)  dari masing-masing C.  albicans untuk  setiap ekstrak  daun  mangga.  Kontrol  negatif adalah aquades dan kontrol positif adalah ketokonazol  dengan  konsentrasi  1000 ppm.  Adanya  daerah  bening  di  sekitar lubang  menunjukkan  bahwa  senyawa tersebut memiliki aktivitas anticandidiasis. Hasil  yang  menunjukkan  zona  hambat terbesar  dari  ekstrak  tersebut  akan digunakan pada uji selanjutnya.

## Penentuan  konsentrasi  hambat  tumbuh minimum (KHTM)
Setelah  diketahui  bahwa  ekstrak  daun mangga  mempunyai  aktivitas  antijamur, selanjutnya  ditentukan  uji  Konsentrasi Hambat Tumbuh Minimum (KHTM) pada ekstrak  daun  mangga  terhadap  jamur  uji. Metode  yang  digunakan  sama  seperti metode  yang  dipakai  dalam  pengujian aktivitas  antijamur    ekstrak  metanol  daun mangga dengan melakukan variasi konsentrasi  sampel.  Pengujian  ekstrak metanol  daun  mangga  menggunakan konsentrasi  1000;  500;  250;  125;  65;  30; 15;  10;  5;  dan  1  ppm.  Masing-masing konsentrasi  sebanyak  50  µL  diuji  dengan memasukkan ke  lubang  media PDA  yang
telah diinokulasi dengan jamur. Setelah itu diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  1x24 jam.  Kontrol  negatif  adalah  aquades  dan kontrol positif adalah ketokonazol dengan konsentrasi 1000 ppm. Konsentrasi Hambat  Tumbuh  Minimum  (KHTM) antijamurnya diperoleh dengan  mengukur daerah bening di sekeliling lubang sampel dengan  menggunakan  jangka  sorong  dari masing-masing ekstrak daun mangga.

## Identifikasi  senyawa  kimia  ekstrak  daun mangga (Harborne, 1987) Uji senyawa alkaloid
Sebanyak  2  mL  sampel  dilarutkan dalam 2 mL HCl 2%, dipanaskan 5 menit dan disaring. Filtrat yang diperoleh ditetesi dengan pereaksi Mayer sebanyak 2-3 tetes. Adanya  senyawa  alkaloid  ditujukkan dengan terbentuknya endapan putih.

## Uji senyawa flavonoid
Sebanyak  2  mL  sampel  dilarutkan dalam 2 mL metanol, kemudian ditambahkan  serbuk  Mg  dan  HCl  pekat sebanyak  5  tetes.  Adanya  senyawa flavanoid ditunjukkan dengan terbentuknya warna merah atau jingga.

## Uji senyawa saponin
Sebanyak  2  mL  sampel  dilarutkan dalam  aquades  pada  tabung  reaksi ditambah  10  tetes  KOH  dan  dipanaskan dalam penangas air 50 o C selama 5 menit, dikocok  selama  15  menit.  Jika  terbentuk busa mantap setinggi 1 cm dan tetap stabil selama  15  menit  menunjukkan  adanya senyawa saponin.

## Uji senyawa stereoid dan terpenoid
Sebanyak  2  mL  sampel  ditambah dengan  pereaksi Liberman-Burchard 1 mL. Adanya senyawa terpenoid ditujukkan dengan  terbentuknya  warna  biru  tua  atau hijau kehitaman.

## Uji senyawa polifenol
Sebanyak  2  mL  sampel  dilarutkan dalam aquades 10 mL, dipanaskan 5 menit dan  disaring.  Filtrat  yang  terbentuk
ditambahkan  dtambahkan  4-5  tetes  FeCl 3 5% (b/v). Adanya fenol ditujukkan dengan terbentuknya  warna  biru  tua  atau  hijau kehitaman.

## Uji senyawa tanin
Sebanyak  2  mL  sampel  ditambah dengan  pereaksi  FeCl 3 .  Adanya  senyawa tanin  ditunjukkan  dengan  terbentuknya warna biru tua atau hijau kehitaman.

## Hasil dan Pembahasan

## Uji Aktivitas Antijamur
Pekerjaan  pertama  yang  dilakukan dalam penelitian ini adalah mengeringkan sampel  daun  mangga  tanpa  terkena  sinar matahari  secara  langsung  selama  14  hari. Air  dalam  sampel  dapat  menyebabkan terjadinya reaksi enzimatis yang mengakibatkan  rusaknya  sampel  karena susunan  senyawa  yang  terdapat  dalam daun  tersebut  telah  berubah  (Ningsih et al., .,  2016).  Sampel  selanjutnya  dibuat serbuk dan dimaserasi. Menurut Nobre dan Moura  (2005)  membandingkan  kadar flavonoid Momordica charantia L. menggunakan metode maserasi dan perkolasi, hasilnya bahwa metode maserasi lebih baik.
Pelarut yang digunakan selama maserasi  adalah  metanol.  Metanol  dipilih sebagai pelarut karena memiliki kepolaran yang  tinggi  sehingga  mampu  melarutkan sebagian  besar  senyawa  yang  ada  dalam simplisia  sehingga  diharapkan  senyawa- senyawa  yang  bersifat  antijamur  dapat terekstrak  di  dalam  metanol.  Pelarut dengan  kepolaran  rendah,  lebih  sedikit menarik ekstrak aktif dibandingkan dengan campuran etanol dan metanol atau metanol  saja  (Ismail, et  al .,  2004).  Selain itu, karena diketahui  bahwa senyawa dari daun  mangga  adalah  mangiferin  yang bersifat polar. Berdasarkan konsep polarisasi,  semakin  polar  suatu  senyawa semakin  mudah  senyawa  itu  larut  dalam pelarut  yang  polar  juga.    (Pohan, et  al ., 2013).
Filtrat yang didapat kemudian dipisahkan dengan pelarutnya
menggunakan  alat vacuum  rotary evaporator. Suhu  yang  digunakan  adalah 65 0 C,  karena  disesuaikan  dengan  titik didih  metanol  yakni  sebesar  64,7 0 C dengan  laju putaran  sebesar 55 rpm. Dari ekstraksi maserasi dapat dihasilkan ekstrak metanol  kental  yang  berwarna  hijau kehitaman  sebanyak  10,55  g  dengan rendemen  10,55%  (b/b).    Filtrate  yang diperoleh diuji aktivitas antijamur.
Uji aktivitas antijamur ini menggunakan  konsentrasi  1000  ppm sebagai  uji  pendahuluan.  Uji  aktivitas antijamur  ini  juga  dilakukan  terhadap kontrol  positif  ketokonazol  dan  kotrol negatif  aquades.  Ketokonazol  digunakan
sebagai kontrol positif dikarenakan ketokonazol sudah terbukti bersifat antijamur  terhadap C.albicans .  Hasil  uji aktivitas  ekstrak  daun  mangga  dan ketokonazol dapat dilihat pada Gambar 1.
Berdasarkan hasil penelitian, menunjukkan bahwa ekstrak daun mangga memiliki  aktivitas  antijamur  terhadap C. albicans. Aktivitas antijamur pada konsentrasi  1000  ppm  yakni  sebesar  8,12 mm.  Kontrol  positif  ketokonazol  dengan konsentrasi  1000  ppm  memiliki  aktivitas sebesar  8,30  mm  dan  aquades  sebagai kontrol negatif menunjukkan nilai negatif,
yakni 0 mm.
(a) (b) (c)
Gambar 1 .  (a) Uji aktivitas antijamur ekstrak daun mangga (b) ketokonazol (c) aquades
Penentuan  Konsentrasi  Hambat  Tumbuh Minimum Ekstrak Metanol Daun Mangga
Konsentrasi Hambat Tumbuh Minimum  adalah  konsentrasi  terendah antijamur
yang masih mampu menghambat pertumbuhan jamur.
Penentuan  KHTM  ini  dilakukan  untuk mengetahui  konsentrasi  minimum  sampel yang  dapat  menghambat C.  albicans . Antijamur dikatakan mempunyai aktivitas yang tinggi bila KHTM terjadi pada kadar sampel  yang  rendah  tetapi  mempunyai daya hambat yang besar. Grafik penentuan KHTM dari ekstrak metanol daun mangga terhadap C.  albicans dapat  dilihat  pada Gambar  2.  Penentuan  KHTM  dilakukan dengan  menguji  sederetan  konsentrasi sampel yang dibuat dengan cara pengenceran. Konsentrasi ekstrak metanol daun  mangga  yang  digunakan  dalam
penentuan  KHTM  berkisar  antara  1-1000 ppm.
Berdasarkan  hasil  penelitian  seperti yang disajikan pada Gambar 2 menunjukkan  bahwa  aktivitas  antijamur ekstrak  metanol  daun  mangga  menurun seiring  dengan  menurunnya  konsentrasi. Hal  ini  sesuai  dengan  pernyataan  Pelchar dan  Chan  (1988),  bahwa  semakin  tinggi konsentrasi suatu bahan antimikroba maka aktivitas  antimikrobanya  semakin  besar pula.
Ekstrak  metanol    dengan    konsentrasi terkecil yaitu   konsentrasi   65 ppm masih dapat menghambat pertumbuhan jamur C. albicans yakni sebesar 0,64 mm sedangkan pada  konsentrasi  30  ppm  hingga  1  ppm sudah tidak dapat menghambat pertumbuhan jamur C. albicans .
Gambar 2 Grafik Konsentrasi Hambat Tumbuh Minimum (KHTM) Ekstrak Metanol Daun Mangga terhadap C. Albicans
Identifikasi Senyawa Kimia Ekstrak
Metanol Daun Mangga
Uji fitokimia digunakan untuk mengetahui  adanya  golongan  senyawa metabolit sekunder seperti alkaloid, flavonoid,  stereoid,  polifenol,  tanin  dan saponin  dalam  daun  mangga.  Hasil fiktokimia  ekstrak  metanol  daun  mangga dapat dilihat pada Tabel 1. Penghambatan ekstrak metanol daun mangga terhadap C. albicans disebabkan oleh adanya kandungan zat aktif yang diduga berperan sebagai  zat  antijamur.  Senyawa  alkaloid,
flavonoid,  stereoid,  polifenol  dan  tanin memiliki  aktivitas  sebagai  antijamur. Adegoke dan Bukola (2009) juga menyatakan bahwa ekstrak metanol dan air tumbuhan
Lasienthera africanum menghambat  aktivitas  Escherichia  coli, Salmonella  typhi,  Klebsiella  pneumonia dan Staphylococcus aureus. Menurut Sabir (2005),  senyawa  flavonoid  yang  terdapat pada propolis Trigona sp mampu menghambat  pertumbuhan Streptococcus mutans secara in vitro.
Tabel 1 . Hasil Identifikasi Senyawa Kimia Ekstrak Metanol Daun Mangga Senyawa Warna Hasil Flavonoid Alkaloid Steroid Terpenoid Polifenol Tanin Saponin Merah / jingga Endapan putih Hijau tua Hijau tua Hijau Kebiruan (+) Hijau kebiruan (+++) Busa yang stabil ±1,5 cm Positif (+) Positif (+) Positif (+) Negatif (-) Positif (+) Positif (+) Positif (+) Senyawa antijamur mempunyai berbagai mekanisme penghambatan terhadap  sel  jamur.  Djunaedy  (2008) menyatakan  bahwa  senyawa  antijamur memiliki  mekanisme  kerja  dengan  cara menetralisasi  enzim  yang  terkait  dalam invasi jamur, merusak membran sel jamur, menghambat sistem enzim jamur sehingga mengganggu terbentuknya ujung hifa dan mempengaruhi  sintesis  asam  nukleat  dan protein.  Mustikasari  dan  Ariyani  (2010)
menyatakan  bahwa  senyawa  alkaloid memiliki  aktivitas  sebagai  antimikroba dengan  merusak  dinding  sel  mikroba. Menurut Zhu, et al . (2000), steroid yang di isolasi  dari  daun  damar  dapat  beracun, toksik  bagi  mikroba  dan  memiliki  efek antijamur sehingga dapat digunakan dalam bidang pengobatan. Masing-masing senyawa metabolit sekunder memiliki cara kerja  yang  berbeda-beda  (Fitriani et  al ., 2012).
Series1, 1000, 8.12 Series1, 500,
6.7Series1, 250, 5.86 Series1, 125, 4.03
Series1, 65, 0.64 Series1, 30, 0 Series1, 15, 0 Series1, 10, 0 Series1, 5, 0 Series1, 1, 0 Series1, Aquades, 0 Series1, 1000 Ketokonazol, 8.3 Zo n a H am b at (m m ) Konsentrasi (ppm)

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian ini diperoleh  simpulan  sebagai  berikut  : Ekstrak  metanol  daun  mangga  terbukti dapat menghambat pertumbuhan C. albicans pada  konsentrasi  1000  ppm dengan  zona  hambat  sebesar  8,12  mm.
Konsentrasi  hambat  tumbuh  minimum
(KHTM)  ekstrak  metanol  daun  mangga terhadap C. albicans yaitu pada konsentrasi  65  ppm  dengan  zona  hambat 0,64  mm.  Golongan  senyawa  metabolit sekunder  yang  terdapat  dalam  ekstrak metanol  daun  mangga  berdasarkan  uji warna  yaitu  senyawa  alkaloid,  flavonoid, stereoid, polifenol, tanin, dan saponin

## Daftar Pustaka
Adegoke,  A.A.  dan  A.  Bukola.  (2009). Antibacterial activity and
phytochemical analysis of leaf extracts  of  Lasienthera  africanum. African Journal of Biotechnology , Vol 3, No 3 hal. 156.
Djunaedy,  A.  (2008).  Aplikasi  Fungisida Sistemik  dan  Pemanfaatan  Mikoriza dalam  Rangka  Pengendalian  Patogen Tular  Tanah  pada  Tanaman  Kedelai ( Glycine max L. ). Embryo , Vol. 5. No. 2, Hal. 1-9.
Fitriani,  A,  A.  Aryani,  H.  Yusuf  &  Y.
Permatasari.  (2012). The  Exploration of Ketosynthase Gene on Endophytic Bacterial Root
of Vetiveria zizanioides L . International Journal of Basic  &  Applied  Sciences ,  Vol.13,
No.04, Hal. 112-119.
Harborne, J.B. (1987). Metode Fitokimia :
Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan  Edisi  Kedua .  Bandung: ITB.
Ismail,  A.,  Marjan,  Z.,  Foong,  C.  (2004).
Total Antioxidant Activity and
Phenolic Content in Selected
Vegetables. Food  Chemistry .  Vol.87, No.1, Hal. 581-586.
Jawetz, Melnick, Adelberg. (2005). Mikrobiologi  Kedokteran .  Edisi  I: 352-358. Jakarta: Salemba Medika. Mustikasari,  K  &  Ariyani,  D.  (2010). Skrining  fitokimia  ekstrak  metanol biji  Kalangkala  ( Litsea  angulata ).
Sains  dan  Terapan  Kimia .  Vol.4,
No.2, Hal.131-136.
Ningsih,  Dian.  R,  Zusfahair,  Purwati. (2014). Potensi Ekstrak Daun
Kamboja ( Plumeria  Alba L. ) Sebagai Antibakteri Dan Identifikasi Golongan Senyawa Bioaktifnya. Jurnal  Molekul .  Vol.9,  No.2,  Hal.
101-109.
Ningsih,  D.  R.,  Zusfahair,  Kartika  D. (2016). Identifikasi Senyawa Metabolit Sekunder Serta Uji Aktivitas Ekstrak Daun Sirsak
Sebagai  Antibakteri.  Jurnal  Molekul.
Vol. 11 No. 1 Hal. 101-111. Nobre, C., Moura, F. (2005). Standardization  of  Extracts  from Momordica Charantia L. (Cucurbitaceae) by  Total  Flavonoids Content Determination. Actafarm Bonaerense. Vol. 24, No.1, Hal. 562- 566.
Nychas, G. J. E. dan  C. C. Tassou. (2000). Traditional  Preservatives-Oil  and Spices . London: Academic Press. Pelczar,  M.J.  dan  Chan,  E.C.S.  (1988). Dasar-dasar  Mikrobiologi .  Jilid  2. Penerjemah  Ratna  Siri  hadioetomo. Jakarta:  Universitas Indonesia Press. Pohan,  A.,  Purwaningsih,  E.,  Dwijayanti, A. (2013). Efek Kelasi Ekstrak Etanol Daun Mangifera  foetida pada  Feritin Serum  Penderita  Talesemia  di  RS Cipto  Mangunkusumo, J.I.    Med
Assoc ., Vol. 1, No.1, Hal. 45-52.
Sabir,  A.  (2005).  Aktivitas  antibakteri flavonoid propolis Trigona sp . terhadap bakteri
Streptococcus
mutans (in vitro). Jurnal Kedokteran Gigi . Vol.38, No.3, Hal. 135-141,
Sari,  N.  (2010).  Daya  Antibakteri  Estrak Tumbuhan  Majapahit  ( Crescentia cujete L.) terhadap Bakteri Aeromonas hydrophila. Laporan Penelitian . Surabaya: Institut Teknologi Sepuluh November. Widijanti,  A.,  dan  T.R  Bernard.  (2007). Pemeriksaan Laboratorium Penderita Diabetes Melitus . Laboratorium  Patologi  klinik  RSUD Dr. Saiful Anwar. http://www.tempo.co.id/medika/onlin e/tmp.online.old/pus-1.htm. diakses tanggal 08 Desember 2015.
Zhu  Y.,  Qi  X.Z.,  Zhong  J.J.  (2000). Epoxide  Sesquiterpenes  and  Steroid From  Cremathodium  discoideum, Australian  Journal  of  Chemistry , Vol.53, No.10, Hal. 831-834.