47 | J I P K   V o l . 9   N o . 1 ,   A p r i l 2 0 1 7 D i t e r i m a / s u b m i t t e d : 2 5   D e s e m b e r   2 0 1 6 D i s e t u j u i / a c c e p t e d : 9   M a r e t   2 0 1 7

## Gambaran Patologi Hepar Ikan Lele Dumbo (Clarias gariepinus) yang Diinfeksi Bakteri Edwardsiella tarda
Featuring Liver Pathology Of Clarias gariepinus That Were Infected

## By Edwardsiella tarda
Ratu Meidiza 1 , Arimbi 2 , Poedji Hastutiek 2
1) Student, 2) Veterinary Pathology Departement, 3) Veterinary Parasitology Departement Faculty of Veterinary Medicine, Airlangga University

## Abstract
This research aimed to know the changed damage of liver Clarias gariepinus were infected by Edwardsiella tarda . Twenty four of Clarias gariepinus with average weight of 20-25 gram, size 10-12 cm were randomly devided into four groups of treatment (P0, P1, P2, and P3). Six repetition each those are given with the dosage of Edwardsiella tarda 3x10 6 CFU/ml except P0 (control). At the macroscopic observed, show that liver become swollen and pale. The histopathological features of hepar were examined under light microscope in  400 times magnification. Scoring method were using Bernet Scoring Method to examined the presence of degeneration, necrotic, congestion and infiltration of leucosyt. Then, Kruskal-Wallis test followed with Mann-Whitney test of statistical analysis. The result showed change in liver of Clarias gariepinus . The most severe damage was occurred on P2. It cause in histopathology examination showed lesion such necrotic area with infiltration of inflamatory cells and there was an increased of erythrocyte infiltration in blood vessels compared with P1 and P3.
Keywords : Clarias gariepinus , Edwardsiella tarda , Pathology, Liver.

## Abstrak
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui perubahan kerusakan hepar dari Clarias gariepinus yang diinfeksi dengan Edwardsiella tarda . Dua puluh empat Clarias gariepinus dengan berat rata-rata 20-25 gram, ukuran 10-12 cm dibagi secara acak menjadi 4 kelompok perlakuan (P0, P1, P2, dan P3). Masing-masing perlakuan dilakukan enam kali pengulangan dengan dosis Edwarsiella tarda 3 x 10 6 CFU/ ml kecuali kontrol (P0). Pada pengamatan mikroskopis menunjukkan bahwa hepar telah mengalami pembengkakan  dan pucat. Pengamatan histopatologi menggunakan mikroskop cahaya dengan 400 kali pembesaran. Metode penilaian Bernet’s Scoring digunakan untuk menentukan adanya degenerasi, nekrosis, dan kongesti dan infiltrasi leukosit. Kruskal-Wallis digunakan untuk pengujian statistika diikuti dengan pengujian Mann-Whitney. Hasil penelitian menunjukkan bahwa terjadi perubahan pada hepar Clarias gariepinus . Kerusakan parah terjadi pada perlakuan P2. Hal ini disebabkan pada pengamatan histopatologi menunjukkan adanya lesi  seperti nekrosis dengan pembengkakan sel dan meningkatnya infiltrasi eritrosit pada pembuluh darah dibandingkan dengan P1 dan P3.
Kata kunci : Clarias gariepinus , Edwardsiella tarda , Patologi, Hepar
48 | J I P K   V o l . 9   N o . 1 ,   A p r i l 2 0 1 7 D i t e r i m a / s u b m i t t e d : 2 5   D e s e m b e r   2 0 1 6 D i s e t u j u i / a c c e p t e d : 9   M a r e t   2 0 1 7

## PENDAHULUAN
Kebutuhan ikan dari tahun ketahun mengalami peningkatan seiring dengan pertambahan penduduk. Salah satu jenis ikan yang sangat diminati masyarakat adalah ikan lele dumbo (Clarias gariepinus) karena memiliki berbagai kelebihan diantaranya pertumbuhan cepat dalam waktu yang relatif singkat dan memiliki kemampuan tinggi untuk beradaptasi terhadap lingkungan (Purnamasari, 2012). Teknologi budidaya ikan lele dumbo yang digunakan di Indonesia sama seperti sistem budidaya perikanan lainnya dengan padat tebar yang tinggi serta pemberian pakan tambahan yang optimal (Setiaji, 2009)
Sistem budidaya padat tebar tinggi menimbulkan banyak penyakit. Salah satu organisme yang paling mendominasi penyebab timbulnya penyakit ikan pada usaha budidaya adalah bakteri, diantaranya Edwardsiella tarda yang dilaporkan dapat menyerang ikan air tawar dan laut, salah satunya ikan budidaya jenis catfish di Amerika (Sari dkk., 2014). Edwardsiella tarda merupakan bakteri patogen penyebab
Edwardsiellosis , Emphisematous Putrefactive Disease of Catfish (EPDC) dan Red Pest
(Narwiyani  dan Kurniasih, 2011; Ikhsan, 2013; Ratnawati, 2013;).
Gejala klinis pasca infeksi bakteri E. tarda menunjukkan adanya perubahan tingkah laku dan morfologi pada tubuh ikan. Perubahan tingkah laku terjadi pada penurunan respon makan, berenang lambat dan pola berenang ikan mendekat ke  arah aerasi (Setyowati dkk., 2014). Bakteri Edwardsiella tarda juga menginfeksi organ internal dari ikan meliputi hepar, limfa  dan ginjal (Firma et al., 2012).
Organ yang dapat dijadikan indikator pengamatan saat terjadi infeksi bakteri salah satunya adalah hepar. Hepar merupakan organ yang berperan penting dalam proses metabolisme tubuh, sebagai alat sekresi dalam proses detoksifikasi dan berfungsi memfagosit benda asing yang masuk ke dalam organ hepar (Pramyrtha dkk., 2014). Hepar ikan adalah organ yang berfungsi untuk detoksifikasi sehingga rentan ter- hadap toksin yang dihasilkan bakteri (Keumalawati, 2016). Proses metabolisme tubuh akan terganggu jika hepar telah terpapar agen infeksi.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui perbedaan kerusakan organ hepar ikan lele dumbo (C. gariepinus) yang
49 | J I P K   V o l . 9   N o . 1 ,   A p r i l 2 0 1 7 D i t e r i m a / s u b m i t t e d : 2 5   D e s e m b e r   2 0 1 6 D i s e t u j u i / a c c e p t e d : 9   M a r e t   2 0 1 7
diinfeksi E. tarda dilihat dari lama paparan dengan pemeriksaan makroskopis dan mikroskopis.

## METODE PENELITIAN
Penelitian dilaksanakan pada bulan Desember 2016, di Laboratorium Departemen Patologi Veteriner, Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga. Identifikasi bakteri, pengenceran bakteri E. tarda dan pembuatan preparat dilakukan di Balai Karantina Ikan, Pengendalian Mutu dan Keamanan Hasil Perikanan Kelas I Surabaya.

## Bahan dan alat Penelitian
Penelitian ini menggunakan 24 ekor ikan lele dumbo (C. gariepinus) dengan ukuran 10-12 cm dengan berat badan 20-25 gram, umur 2 minggu yang di peroleh dari Balai Benih Ikan Kalen, Kecamatan Kedungpring, Kabupaten Lamongan, Jawa Timur. Bahan untuk penelitian adalah isolat bakteri E. tarda yang berasal dari isolasi sampel ikan lele dumbo yang sakit di Kabupaten Jombang, standar Mc. Farland no 1 air PDAM dan pakan ikan berbentuk pelet.
Bahan untuk pembuatan preparat histopatologi hepar yaitu larutan NBF
( Neutral Buffered Formalin) 10% untuk fiksasi, alkohol (kadar 70%, 80%, 85%, dan alkohol PA) untuk dehidrasi, xylol untuk clearing , paraffin untuk infiltrasi, gliserin untuk pembuatan blok paraffin, Hematoxylin Eosin (H&E) untuk pewarnaan dan  entellan untuk proses mounting .
Peralatan yang digunakan adalah satu buah ember volume 5 liter untuk kontrol dan satu buah drum volume 60 liter untuk kelompok perlakuan, jaring ikan kecil dan kawat penutup. Pengambilan suspensi  dan pengenceran bakteri E.  tarda menggunakan pipet 0.1 ml dengan skala 0.001 ml, ose, cawan petri, tabung reaksi dan bunsen. Koleksi organ dan pengamatan preparat menggunakan  scalpel steril, gunting  steril, pinset, tatakan gabus dan pot salep. Peralatan untuk  pembuatan  preparat  histopatologi hepar  antara lain tissue casset, tissue processor, freezer, water bath, object glass, cover glass, oven, hot plate ,  mikrotom, mikroskop dan optilab.

## Dosis Infeksi Edwardsiella tarda
Penentuan dosis infeksi E. tarda berdasarkan  LD50  pada beberapa penelitian yang pernah dilakukan, yaitu dengan konsentrasi kepadatan 3,0x10 6 sel/ml
50 | J I P K   V o l . 9   N o . 1 ,   A p r i l 2 0 1 7 D i t e r i m a / s u b m i t t e d : 2 5   D e s e m b e r   2 0 1 6 D i s e t u j u i / a c c e p t e d : 9   M a r e t   2 0 1 7
melalui injeksi intraperitoneal (Ikhsan, 2013).

## Perlakuan
Persiapan penelitian dilakukan satu hari sebelum ikan lele dumbo  datang, yaitu menyiapkan air di dalam ember dan drum, selanjutnya  dibiarkan  selama 24 jam sebelum ikan dimasukkan.  Ikan  lele dumbo dimasukkan  ke dalam tempat yang telah disiapkan  dan diadaptasi  selama  tiga  hari sebelum diberi perlakuan.
Ikan lele dumbo sebanyak 24 ekor akan diberi perlakuan sebagai berikut: P0 : Enam ekor ikan lele dumbo tanpa diinfeksi bakteri E. tarda dan dilakukan pembedahan pada hari ke-7 P1 : Enam ekor ikan lele dumbo diinfeksi bakteri E. tarda selama 3 hari dan dilakukan pembedahan pada hari ke-3 P2 : Enam ekor ikan lele dumbo diinfeksi bakteri E. tarda selama 5 hari dan dilakukan pembedahan pada hari ke-5 P3 : Enam ekor ikan lele dumbo diinfeksi bakteri E. tarda selama 7 hari dan dilakukan pembedahan pada hari ke-7
Pada kelompok perlakukan (P1, P2, P3), Ikan lele dumbo (C.  gariepinus) sebanyak 18 ekor dimasukkan ke dalam se- buah drum berwarna hitam dan diinfeksi
bakteri E. tarda sebanyak 0,1 ml secara injeksi intraperitoneal  dengan konsentrasi 3x10 6 sel/ml  untuk perlakuan tiap ekor ikan, sedangkan pada kelompok tanpa perlakuan (P0), enam ekor ikan dimasukkan ke dalam aquarium tanpa diinfeksi bakteri E. tarda . Kelompok perlakuan dan kontrol dalam drum serta ember diberi pakan yang sama sebanyak dua kali sehari setiap pagi dan sore.
Pada hari ke-  3, 5 dan 7 pasca infeksi bakteri, dilakukan pembedahan masing- masing sebanyak 6 ekor ikan perlakuan dan 6 ekor ikan kontrol  pada hari ke-7 untuk pemeriksaan perubahan patologi secara makroskopis dan pembuatan preparat histopatologi hepar (Andriyanto dkk., 2009).
Pemeriksaan perubahan morfologi secara makroskopis hepar dilakukan dengan mengamati perubahan patologi anatomi secara makroskopis dari organ hepar. Pada pemeriksaan ini, dilakukan pengamatan kondisi fisik hepar ikan kelompok perlakuan yang dibandingkan dengan hepar ikan kelompok kontrol. Pemeriksaan mikroskopis hepar  ikan  lele dumbo  dilakukan dengan pembuatan preparat histopatologi dan menggunakan mikroskop perbesaran 400 kali. Gambaran histopatologi hepar dinilai
51 | J I P K   V o l . 9   N o . 1 ,   A p r i l 2 0 1 7 D i t e r i m a / s u b m i t t e d : 2 5   D e s e m b e r   2 0 1 6 D i s e t u j u i / a c c e p t e d : 9   M a r e t   2 0 1 7
berdasarkan skoring derajat  kerusakan hepar menurut Bernet et  al. (1999) meliputi kongesti, degenerasi, nekrosis dan infiltrasi sel radang dengan  menggunakan skor mulai 0  –  6, tergantung pada derajat dan luasnya perubahan: (0) tidak terjadi perubahan; (2) ringan; (4) sedang; (6) parah.
Penelitian ini menggunakan ran- cangan penelitian acak lengkap (RAL) dengan ulangan yang sama pada tiap perlakuan. Masing-masing perlakuan de-
ngan 6 ulangan (Kusriningrum, 2008). Data diperoleh dari uji statistik non parametrik
yang  disusun dalam bentuk tabel kemudian dianalisis menggunakan perangkat lunak komputer SPSS 20 for windows . Perolehan data menggunakan uji Krusskal Wallis . Apabila terdapat perbedaan antar perlakuan dilanjutkan dengan uji Mann Whitney dengan taraf signifikan 0,05.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Gejala klinis mulai terlihat pada hari ke-3 pasca infeksi bakteri E. tarda hingga
akhir pengamatan (hari ke-7). Pada hari ke-3 terlihat depigmentasi pada kulit, ikan
Gambar 1 Gejala klinis hari ke-3 pasca infeksi bakteri E. tarda terjadi depigmentasi pada permukaan kulit ikan  lele dumbo ( → ). P1 P2 P3 Gambar  2  Gejala klinis hari ke-5 pasca infeksi bakteri E. tarda terjadi hemoragi pada bagian caudal ( → ).
Gambar  3  Gejala klinis hari ke-7  pasca infeksi bakteri E. tarda terjadi  ulser pada dorsal tubuh ikan ( →).
52 | J I P K   V o l . 9   N o . 1 ,   A p r i l 2 0 1 7 D i t e r i m a / s u b m i t t e d : 2 5   D e s e m b e r   2 0 1 6 D i s e t u j u i / a c c e p t e d : 9   M a r e t   2 0 1 7
berenang secara vertikal dan terdapat hemoragi pada bagian caudal ekor ikan lele dumbo.  Gejala klinis tampak semakin parah pada hari ke-5 pasca infeksi bakteri E. tarda terlihat hemoragi melebar ke permukaan tubuh ikan, ulcern  pada bagian dorsal maupun abdominal ikan lele dumbo dan sirip geripis.  Pada akhir pengamatan yaitu hari ke-7 pasca infeksi bakteri E. tarda gejala klinis yang terlihat tidak jauh berbeda dibandingkan hari ke-5 yaitu adanya ulcern di permukaan tubuh dan hemoragi.
Pengamatan organ hepar dilakukan dengan prosedur bedah bangkai pada hari ke 3, 5 dan 7 pasca infeksi. Hepar normal
terlihat pada P0 dengan warna kecoklatan dan tidak terjadi pembengkakan, sedangkan pada P1, P2, P3 terlihat perubahan pada
ukuran yang terlihat lebih besar dibandingkan P0 serta warna hepar menjadi pucat.
Hasil analisis statistik dengan uji Kruskall Wallis dapat dilihat pada Tabel 1 berikut ini:
Berdasarkan hasil analisis pada Tabel 1 menunjukkan adanya perbedaan nyata (P<0,05) antara tiap kelompok P0, P1, P2, dan P3. Tahap berikutnya dilakukan dengan uji Mann-Whitney . Skor kerusakan hepar terendah (2.20 ± 1,00) terlihat pada kelompok P0 yang berbeda nyata dengan kelompok P1, P2, dan P3. Kelompok P1 menunjukkan hasil berbeda nyata dengan
kelompok P2 dan P3. Sedangkan kelompok P2 tidak berbeda nyata dengan kelompok P3. Perhitungan kerusakan hepar tertinggi (10,0
Tabel 1 Hasil skoring hepar ikan lele dumbo menggunakan uji Kruskall Wallis PERLAKUAN KETERANGAN Mean ± SD P0 Tanpa diinfeksi bakteri E. tarda 2.20 a ± 1,00 P1 Diinfeksi bakteri E. tarda selama 3 hari dan dilakukan pembedahan pada hari ke-3 5,40 b ± 2,46 P2 Diinfeksi bakteri E. tarda selama 5 hari dan dilakukan pembedahan pada hari ke-5 10,0 c ± 0,80 P3 Diinfeksi bakteri E. tarda selama 7 hari dan dilakukan pembedahan pada hari ke-7 9,53 c ± 1,50
Keterangan: a,b,c: Superskrip yang berbeda pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang nyata (P<0,05). SD: Standar Deviasi.
53 | J I P K   V o l . 9   N o . 1 ,   A p r i l 2 0 1 7 D i t e r i m a / s u b m i t t e d : 2 5   D e s e m b e r   2 0 1 6 D i s e t u j u i / a c c e p t e d : 9   M a r e t   2 0 1 7
± 0,80) akibat infeksi bakteri E. tarda terlihat pada kelompok P2.
Kelompok P0 menunjukkan tidak adanya perubahan dari gejala klinis, lesi makroskopis maupun mikroskopis. Pada kelompok perlakuan P1, P2, P3 terdapat lesi makroskopis ikan lele dumbo yang diinfeksi bakteri E. tarda yaitu terjadi depigmentasi kulit, ulcera, hemoragi pada permukaan tubuh ikan, serta pembengkakan dan perubahan warna pada organ hepar. Lesi tersebut disebabkan oleh toksin yang telah masuk ke dalam tubuh ikan.
Hemolisin yang dihasilkan oleh E.
tarda mampu memecah sel darah merah,
sehingga sel darah keluar dari pembuluh dan menimbulkan warna kemerahan pada permukaan kulit  (Keumalawati, 2016). Lesi makroskopis lain yaitu berupa depigmentasi kulit. Lesi ini disebabkan oleh E.  tarda menyerang bagian epidermis kulit ikan yang di dalamnya terdapat sel pigmen chromatophore dan kolagen yang dapat memperkuat struktur kulit,  selanjutnya berkembang hingga ke bagian dermis dan otot sehingga menyebabkan kulit kehilangan pigmen warna (Ratnawati dkk., 2013).
Gambar 4 Lesi makroskopis organ hepar akibat infeksi E. tarda dengan adanya pembengkakan dan perubahan warna pada organ ( →).
54 | J I P K   V o l . 9   N o . 1 ,   A p r i l 2 0 1 7 D i t e r i m a / s u b m i t t e d : 2 5   D e s e m b e r   2 0 1 6 D i s e t u j u i / a c c e p t e d : 9   M a r e t   2 0 1 7
Pembengkakan dan perubahan warna pada organ hepar yang terinfeksi E. tarda disebabkan oleh meningkatnya kerja hati untuk mengumpulkan, menetralkan serta menghilangkan zat-zat toksin yang masuk melalui peredaran darah (Aryanto, 2011). Infeksi E. tarda menunjukkan gejala klinis
ikan berenang secara vertikal. Ikan lele dumbo yang terinfeksi akan mengeluarkan mucus (lendir) sebagai perlindungan terhadap serangan bakteri. Akan tetapi mukus tersebut menutup permukaan lamela insang sehingga pertukaran O 2 dengan CO 2 terhambat, sehingga transportasi oksigen ke
Gambar  5  Gambaran mikroskopis hepar kelompok P0 menunjukkan vena sentralis tampak normal ( →). Gambar  6  Gambaran mikroskopis hepar kelompok P1 menunjukkan sinusoid melebar ( →) dan inti sel hepar piknosis ( → ).
Gambar  7  Gambaran mikroskopis hepar kelompok P2 menunjukkan infiltrasi sel radang pada jaringan hepar ( →) dan jaringan yang mengalami degenerasi hidropik ( → ).
Gambar  8  Gambaran mikroskopis hepar kelompok P3 menunjukkan reaksi fagosit dari sel radang pada jaringan hepar ( →). P0 P1 P2 P3
55 | J I P K   V o l . 9   N o . 1 ,   A p r i l 2 0 1 7 D i t e r i m a / s u b m i t t e d : 2 5   D e s e m b e r   2 0 1 6 D i s e t u j u i / a c c e p t e d : 9   M a r e t   2 0 1 7
seluruh tubuh tidak lancar dan menyebabkan inkoordinasi saat berenang (Mashelly, 2015).
Pada gambaran makroskopis kelompok P0, P1 dan P3 terlihat adanya degenerasi hidropik, kongesti, infiltrasi sel radang dan nekrosis.  Degenerasi merupakan reaksi sel terhadap jejas yang masih reversible ,  tetapi bila penyebabnya tidak segera dihilangkan maka dapat berlanjut pada kematian sel. Nekrosis ditandai dengan adanya piknosis dan karyolisis. Piknotis ditandai dengan pengerutan inti sel, kariolisis ditandai dengan inti sel memudar atau lisis.
Infiltrasi sel radang merupakan respon tubuh akibat adanya rangsangan berbahaya, seperti agen patogen  bakteri berfungsi sebagai pertahanan non-spesifik yang akan melokalisasi patogen melalui fagositosis (Lukistyowati, 2012). Pada kelompok P3 (hari ke-7 pasca infeksi bakteri) terjadi penurunan kerusakan walaupun tidak signifikan dimana P3 (9,53 ± 1,50) dan P2 (10,0 ± 0,80). Hal ini  terjadi karena adanya reaksi fagosit oleh sel radang dan  terjadi regenerasi sel yang baru. Sel radang yang berasal dari pembuluh darah dan  pertama kali masuk ke jaringan infeksi adalah neutrofil. Neutrofil telah masuk ke
dalam jaringan sekitar 2-3 hari dari terjadinya infeksi sebagai respon perlindungan (Arimbi dkk., 2015). Hepar masih sanggup melakukan regenerasi bahkan hingga sembuh, jika penyebab kerusakan berkurang atau hilang (Ratnawati dkk., 2013).

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian, diambil kesimpulan bahwa terdapat perbedaan  yang signifikan kerusakan organ hepar ikan lele dumbo (Clarias gariepinus) yang diinfeksi bakteri Edwardsiella tarda meliputi kongesti, degenerasi, nekrosis dan infiltrasi sel radang berdasarkan lama paparannya.

## DAFTAR PUSTAKA
Arimbi, A. Azmijah, H. Plumeriastuti, T.V. Widiyatno, dan D. Legowo. 2015. Patologi Umum Veteriner Edisi 2 [Buku]. Airlangga Univ. Press. Surabaya. 188hlm.
Bernet, D., H. Schmidt, W. Meier, P. Burkhardt, and T. Wahli. 1999. Histopathology in Fish: Proposal for Protocol to Assess Auatic Pollution. J. of Fish Dis. 22(1): 25-34
Andriyanto, S., Haririah, Y.Yulianti, S.I. Purnomo, S.T Astuti, Nurlaila, T. Samudro dan B.P Priosoeryanto. 2009. Deteksi Edwardsiella tarda secara Immunohistokimia pada Ikan Patin (Pangius pangius ). J. of Vet. Sci. and Med. 1(1): 7-12
56 | J I P K   V o l . 9   N o . 1 ,   A p r i l 2 0 1 7 D i t e r i m a / s u b m i t t e d : 2 5   D e s e m b e r   2 0 1 6 D i s e t u j u i / a c c e p t e d : 9   M a r e t   2 0 1 7

## Firma, R.R Amalia, U. Sari, C. Chusbul, A.
Amri, and Siregar. 2012. Detection of Edwarsiella tarda in Catfish (Clarias sp.) by Fluorescent Antibody technique (FAT). J. Akuakultur Indo.
11(1) : 96-102.
Ikhsan, M.N. 2013. Upaya Pengendalian Infeksi Bakteri Edwardsiella tarda pada Ikan Lele (Clarias sp.) Menggunakan Ekstrak Kunyit (Curcuma longa) [Skripsi]. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Keumalawati, L.T. 2016. Efek Perendaman Ekstrak Spirulina platensis terhadap Hepatopankreas Ikan Gurame (Osphronemus gouramy) yang
Diinfeksi Aeromonas hydrophilla [Skripsi]. Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga. Surabaya.
Lukistyowati, I. 2012. Studi Efektifitas Sambiloto (Andrographis paniculata Ness ) untuk Mencegah Penyakit
Edwardsiellosis pada Ikan Patin (Pangius hypopthalmus). J. Berkala Perikanan. 40(2): 56-74 Marshelly, EVD. 2015. Gambaran Histopatologi Insang Ikan Lele Dumbo (Clarias gariepinus ) yang
Diinfeksi Bakteri Aeromonas hidrophila [Skripsi]. Fakultas
Kedokteran Hewan Universitas Airlangga. Surabaya
Narwiyani, S., dan Kurniasih. 2011. Phylogenetic Tree dari Empat isolat Edwardsiella tarda di Indonesia. Universitas Gajah Mada. Yogyakarta. J. Biota. 16(2): 348-353 Pramyrtha, E., Anwar, C., Kuncorojakti, S., dan Yustinasari, L.R. 2014. Buku Ajar Histologi Veteriner Jilid 2. Departemen Anatomi Veteriner. Fakultas Kedokteran Hewan
Universitas Airlangga. Surabaya. 146 hlm.
Purnamasari. 2012. Tingkat Infeksi
Ektoparasit pada Benih Ikan Lele Dumbo (Clarias gariepinus) [Skripsi]. Fakultas Ilmu Kelautan dan Perikanan Universitas Hasanuddin Makassar.
Sari, D.R., Prayitno, S.B., Sarjito. 2014. Pengaruh Perendaman Ekstrak Bawang Putih (Allium sativum) terhadap Kelulushidupan dan Histologi Ginjal Ikan Lele (Clarias gariepinus) yang Diinfeksi Bakteri Edwardsiella tarda . J. of Aquac. and Tech. 3(4): 126-133.
Setiaji, Agung. 2009. Efektifitas Ekstrak Daun Pepaya Carica Papaya untuk Pencegahan dan Pengobatan Ikan Lele Dumbo Clarias sp. Yang Diinifeksi Bakteri Aeromonas hydrophila [Skripsi]. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan  Institut Pertanian Bogor.
Setyowati, E., Prayitno, S.B., dan Sarjito. 2014. Pengaruh Perendaman Ekstrak Daun Jambu Biji (Psidum guajava) terhadap Kelulushidupan dan Histologi Hati Ikan Patin ( Pangius hypophtalamus ) yang Diinfeksi Bakteri Edwardsiella tarda. J. of Aquaculture Management and Tech.
Semarang. 3(4): 174-182.