PENAMBATAN MOLEKULER α, β, DAN γ-MANGOSTIN SEBAGAI INHIBITOR α- AMYLASE PANKREAS MANUSIA
Molecular Docking OF α, β, and γ-Mangostin As Human Pancreatic α-Amilase Inhibitor
Nelson Gaspersz*, Mario R. Sohilait
Chemistry Department, Faculty of Mathematics and Natural Sciences Pattimura University, Kampus Poka, Jl. Ir. M. Putuhena, Ambon 97134
*Corresponding author, e-mail: nelson@fmipa.unpatti.ac.id
Received: Nov. 2018 Published: Jan. 2019

## ABSTRACT
The  in  silico  studies  of  interactions  between  the  human  pancreatic  α-amylase  (HPA)  enzyme  to  α,  β,  and  γ- mangostin  ligands  has  been  carried  out  using  the  molecular  docking  method.  Ligands  α,  β,  and  γ-mangostin interacting  through the formation of  hydrogen  and van der  waals bonds to residues on the enzyme active side. The α-mangostin ligands resulting seven hydrogen and six van der waals bonds with the residues involved were Trp59,  Gln63,  Trp96,  Thr163,  Thr164,  Ala198,  His201,  Glu233,  and  Asp300.  β-mangostin  resulting  five hydrogen and eight  van der  waals bonds  with residues involved  were Gln63, Trp96, Thr163, Thr164, Arg195, Asp197, His201, Glu233, Asp300, and His305; while γ-mangostin forms nine hydrogen and five van der waals bonds  with  residues  involved  were  Trp59,  Gln63,  Trp96,  Thr163,  Asp197,  Ala198,  His201,  Glu233,  and Asp300. The  binding affinity of α, β, and γ-mangostin to the  HPA enzyme  obtained  were  -7.0;  -6.6; and  -7.4 kcal/mol with root mean square deviation (RMSD) value were 1,850; 1,956; and 1,811 Å respectively. Ligand γ- mangostin  has  potential  activity  as  an  inhibitor  of  HPA  enzyme  due  to  the  stabilization  of  the  complexes formation with lower binding affinity (validated with RMSD value) when compared to α and β-mangostin.
Keywords : Molecular docking, HPA enzyme, α, β, and γ-mangostin.

## PENDAHULUAN
Diabetes  Melitus  (DM)  merupakan  salah satu  penyakit  yang  menyumbang  tingginya angka  kematian  di  dunia.  Penyakit  metabolik kompleks ini dikelompokkan menjadi DM tipe I dan  tipe  II.  DM  tipe  I  terjadi  karena  kegagalan pankreas untuk memproduksi insulin, sedangkan DM tipe II merujuk pada kondisi ketidakmampuan  tubuh  untuk  menggunakan secara efektif insulin yang dihasilkan oleh tubuh. Hal  ini  menyebabkan  terjadi  peningkatan  kadar glukosa  dalam  darah  atau  sering  disebut hiperglikemia.  Organisasi  Kesehatan  Dunia ( World  Health  Organization, WHO)  mencatat, DM  mengakibatkan  kematian  1,6  juta  orang  di dunia pada tahun 2016, dimana jumlah penderita DM  diprediksi  meningkat  hingga  300  juta  pada tahun  2025  dengan  persentasi  90  %  adalah penderita  DM  tipe  II  (WHO,  2018).  Jumlah penderita  diabetes  di  Indonesia telah  menempati urutan  keenam  tertinggi  di  dunia  dengan jumlah penderita sebanyak 10,3 juta orang di tahun 2017 (IDF, 2018).
Pengobatan  penderita  DM  dapat  dilakukan dengan  cara  pemberian  suntik  insulin  secara langsung  atau  stimulasi  pelepasan  insulin, meningkatkan  jumlah  transporter  glukosa,  dan menghambat proses glukoneogenesis. Salah satu pengobatan  penting  untuk  penderita  DM  tipe  II adalah pengendalian kadar glukosa darah setelah makan  (hiperglikemia  postpradial)  (Kim  dkk., 2005).  Dengan  menjaga  konsentrasi  glukosa dalam  darah  setelah  makan  pada  pengobatan pasien  diabetes  dapat  mengurangi  resiko komplikasi penyakit. Pengendalian hiperglikemia postpradial untuk menekan konsentrasi glukosa dilakukan dengan menghambat  enzim  penghidrolisis  karbohidrat kompleks  seperti  α-amilase  pankreas  manusia. Enzim  α-amilase  pankreas  manusia  merupakan salah satu enzim endoglikosidase yang berfungsi memotong  ikatan  α-1,4-glikosida  pada  pati menghasilkan maltosa dan berbagai oligosakarida kecil (yang terikat α-1,4 dan α-1,6- glikosida)  yang  selanjutnya  dipecah  menjadi glukosa oleh enzim α-glukosidase di dalam usus. Penggunaan inhibitor α-amilase dapat membantu untuk  mengurangi  hiperglikemia  postpradial
dengan menghambat sebagian hidrolisis enzimatik  karbohidrat  kompleks  serta  menunda absorpsi glukosa di usus (Devalaraja dkk., 2011).
Penggunaan inhibitor sebagai obat antidiabetes  yang  bersumber  dari  bahan  alam dapat  menjadi  pendekatan  alternatif  untuk pengobatan  penderita  diabetes  melitus.  Inhibitor tersebut  memiliki  kelebihan  selain  harga  yang murah  dan  terjangkau  juga  tidak  memiliki  efek samping bila dibandingkan dengan berbagai jenis obat  komersil  yang  telah  beredar  saat  ini. Inhibitor yang bersumber dari bahan alam seperti akarbosa ( Acinoplanes sp.) (Schnell dkk., 2016),
voglibosa (modifikasi validamisin oleh Flavobacterium
saccarophilum ), miglitol (modifikasi glukosa oleh Gluconobacter oxydans )  (Vongsak  dkk.,  2015),  dan  metrofin ( Galega  officinalis )  (Kumar  dkk.,  2016)  telah digunakan  dalam  pengobatan  klinis  penderita diabetes  melitus  tipe  2.  Penelitian  lain  juga melaporkan  potensi  senyawa  xanton  yang terkandung di dalam ekstrak  kulit buah manggis ( Garcinia mangostana ) sebagai obat antidiabetes.  Senyawa  xanton  dari  kulit  buah manggis  yang  telah  teridentifikasi  sebanyak  50 senyawa, diantaranya α-mangostin, β-mangostin, γ-mangostin,  mangostinon,  garsinon  (A-E), garsimangoson (A-D), dan kudrasanton (Pedraza-Chaverri  dkk.,  2008).  Kumar  dkk., 2016  melaporkan  α-mangostin  dan  γ-mangostin dapat  menurunkan  kadar  glukosa  darah  tikus yang mengindikasikan adanya aktvitas penghambatan terhadap enzim α-amilase. Interaksi  antara  inhibitor  atau  ligan  α,  β,  dan  γ- mangostin dengan sisi katalitik dapat menghambat aktivitas enzim α-amilase.
Studi in silico dengan menggunakan metode penambatan  molekuler  ( molecular  docking ) dilakukan  untuk  memodelkan  interaksi  antara enzim  α-amilase  dengan  inhibitor  α,  β,  dan  γ- mangostin  yang  memiliki  potensi  aktivitas antidiabetes. Beberapa penelitian secara in silico telah  dilakukan  dengan  memodelkan  interaksi antara  enzim  α-amilase  dengan  inhibitor  seperti mirisetin  dan  etil  kafeat  (Williams  dkk.,  2012), betulin (Wulan dkk., 2014), asam 2-alil amino 4- metil  sulfanil  butirat  (Balan  dkk.,  2015). Sementara  itu,  Noviandri  dkk.,  2016  juga memodelkan  perbandingan  inhibisi  α,  β,  dan  γ- mangostin  terhadap  protein  akt-kinase  pada  sel kanker  pankreas.  Pada  penelitian  ini  akan dilakukan molecular  docking antara  senyawa  α,
β,  dan  γ-mangostin  dengan  enzim  α-amilase pankreas manusia untuk menunjukan perbandingan  energi  afinitas  pengikatan  dan menjelaskan interaksi yang mungkin terjadi pada pengikatan inhibitor oleh enzim.

## METODOLOGI
Perangkat keras ( Hardware )
Seperangkat  komputer  pribadi  dengan spesifikasi  prosesor    Intel ® Core TM i5-3317U CPU  @1,70  GHz,  RAM  4  GB  dan  hardisk  500 GB.
Perangkat lunak ( Software )
Perangkat lunak komputasi yang digunakan adalah  AutoDock-Vina  1.1.2  ( The  Scripps Research  Institute ), Python  Molecule  Viewer - 1.5.6  ( The  Scripps  Research  Institute ),  PyMol
Molecular Graphic System 1.1 ( DeLano Scientific LLC).

## Prosedur Kerja
Preparasi protein α-amilase dan senyawa α, β, dan γ-mangostin
Makromolekul  α-amilase  pankreas  manusia diunduh  dari  situs  Protein  Data  Bank  (PDB) yaitu  http://www.rcsb.org.  Untuk  penelitian  ini data  makromolekul  yang  diunduh  adalah  4GQR (kompleks  α-amilase  pankreas  manusia  dengan mirisetin)  dalam  bentuk  PDB  file  (.pdb).  Ligan yang  digunakan  yakni  senyawa  α,  β,  dan  γ- mangostin  diunduh  dalam  bentuk  PDB  file (.pdb).  Struktur  α,  β,  dan  γ-mangostin  serta mirisetin dapat dilihat pada Gambar 1.
O O OH 2 OH 1 CH 3 CH 3 HO H 3 CO H 3 C CH 3 1 2 (a) α-mangostin O O OH OCH 3 H 3 CO OH
H 3 C CH 3 CH 3 H 3 C 1 2
(b) β-mangostin
O O OH 2 OH 1 CH 3 CH 3 HO HO H 3 C CH 3 1 2 1 2 (c) γ-mangostin
Gambar 1. Struktur (a) α-mangostin, (b) β- mangostin, dan (c) γ-mangostin (digambar dengan ChemOffice 2008)
Penambatan  senyawa  α,  β,  dan  γ-mangostin pada enzim α-amilase
Senyawa  α,  β,  dan  γ-mangostin  selanjutnya ditambatkan  pada  protein  yang  telah  tersedia ruang  ( pocket / cavity ).  Penambatan  dilakukan dengan Autodock Tools 1.5.6 dengan format file .pdbqt.  Ukuran grid x,  y,  z  berturut-turut  adalah 13,065; 14,876; 39,866 dengan dimensi grid box - nya  adalah  25  x  25  x  25.  Hasil  analisis  akan menunjukkan  senyawa  dengan  energi  terendah yang merupakan konformasi yang baik.
Evaluasi penilaian ( Scoring) hasil penambatan Hasil penambatan divisualisasi
menggunakan  Python  Molecule  Viewer  dan PyMOL.  Parameter  hasil  penambatan  dianalisis terhadap  parameter  penambatan  yang  telah ditentukan  sebelumnya.  Energi  ikatan reseptor- ligand , residu asam amino yang terdekat dengan ligand (<  5  Ǻ)  dan  jarak  serta  jenis  ikatan reseptor-ligand dapat  diamati  melalui  program Python Molecule Viewer dan PyMOL .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Studi  in  vitro  dan  in  vivo  aktivitas mangostin menunjukan penurunan kadar glukosa darah  hewan  uji  yang  mengindikasikan  adanya aktivitas  penghambatan  terhadap  enzim  α- amilase (Pasaribu dkk., 2012; Taher  dkk,. 2016; & Kumar dkk., 2016). Berdasarkan hasil ini α, β, dan γ-mangostin dijadikan target studi molecular docking terhadap  enzim  α-amilase  pankreas manusia  (PDB  ID  :  4GQR).  Struktur  tiga dimensi  interaksi  α,  β,  dan  γ-mangostin  dengan enzim  α-amilase  pankreas  manusia  dapat  dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2. Interaksi protein α-amilase dengan ligan (stick structure) α-mangostin (kuning), β-mangostin (merah), dan γ-mangostin (hijau). Visualisasi 3D  menggunakan Python
Molecule Viewer.
Penambatan α, β, dan γ-mangostin pada sisi aktif  protein  α-amilase  menunjukan  beberapa interaksi  molekuler  yang  bertanggung  jawab terhadap afinitas senyawa yang diamati (Gambar 3).  Gugus  karbonil  pada  α,  β,  dan  γ-mangostin membentuk  ikatan  hidrogen  dengan  enzim (masing-masing  2,8;  3,6;  dan  2,8  Å)  melalui gugus  hidroksil  dari  residu  Thr163.  Interaksi ikatan  hidrogen  terjadi  antara  karbonil  (C=O) dari  α,  β,  dan  γ-mangostin  yang  bertindak sebagai  akseptor  ikatan  hidrogen  dengan  gugus hidroksil  (-OH)  pada  rantai  samping  residu Thr163  yang  bertindak  sebagai  donor  ikatan hidrogen.
Lebih  lanjut,  gugus  –OH  dari  cincin aromatik  1  pada  α  dan  γ-mangostin  (-OH 1 ) membentuk  dua  ikatan  hidrogen  dengan  dua residu yang sama yakni Ala198 (α- 3,0 Å; γ- 2,7 Å)  dan  Glu233  (α-  2,3  Å;  γ-  2,7  Å)  ditambah satu  ikatan  hidrogen  antara  gugus  –OH 1 γ- mangostin pada cincin  aromatik 1 dengan residu Asp197  (3,6  Å).  Gugus  hidroksil  membentuk ikatan hidrogen dengan gugus amino dari residu Ala198  dan  gugus  karboksil  dari  rantai samping residu  Glu233  dan  Asp197.  Hal  berbeda
ditemukan  pada  β-mangostin,  dimana  gugus hidroksil  berinteraksi  dengan  residu  Asp300 membentuk  dua  ikatan  hidrogen  dengan  jarak ikatan  berturut-turut  4,1  dan  4,6  Å.  Gugus metoksi  (-OCH 3 )  dari  cincin  aromatik  1  α- mangostin  membentuk  ikatan  van  der  waals dengan  residu  His201  (3,1  Å),  sedangkan  gugus metoksi  dari  cincin  aromatik  1  β-mangostin berinteraksi  dengan  residu  Arg195  dan  Asp197. Gugus  metoksi  berinteraksi  membentuk  ikatan hidrogen  dengan  gugus  amino  dari  rantai samping  residu  Arg195  (3,8  Å)  dan  ikatan  van der waals dihasilkan dari interaksi dengan residu Asp197  (2,7  Å).  Gugus  hidroksil  kedua  dari
cincin  aromatik  1,  γ-mangostin  membentuk  satu ikatan  hidrogen  dengan  residu  His201.  Gugus hidroksil  berinteraksi  dengan  gugus  amin  pada cincin  imidazol  dari  rantai  samping  residu His201  (3,5  Å).  Sementara  itu,  gugus  metil  (- CH 3 )  baik  pada  α,  β,  dan  γ-mangostin menyumbang masing-masing dua ikatan van der waals.  Pada  α  dan  γ-mangostin,  gugus  metil berinteraksi  dengan  residu  yang  sama  Asp300 serta  berinteraksi  dengan  residu  Glu233  dan His201 pada β-mangostin.
a b
c d
Gambar 3. Interaksi protein α-amilase dengan ligan α-mangostin (a), β-mangostin (b), γ-mangostin (c) dan mirisetin (ligan standar) (d). Visualisasi 3D  menggunakan PyMOL
Selanjutnya  dari  cincin  aromatik  2  pada  α dan  γ-mangostin,  gugus  hidroksil  pertama (-OH 1 )  membentuk  masing-masing  dua  ikatan hidrogen  dengan  gugus  hidroksil  dari  residu yang  sama  yakni  Thr163.  Gugus  hidroksil  pada ligan dan residu Thr163 dapat bertindak sebagai donor  dan  akseptor  ikatan  hidrogen  dan  atau sebaliknya.  Pada  β-mangostin,  gugus  hidroksil membentuk ikatan hidrogen dengan gugus amino dari  residu  Gln63  (3,6  Å)  dan  ikatan  van  der waals  dengan  residu  Trp96  (2,8  Å).    Gugus hidoksil  kedua  (-OH 2 )  dari  cincin  aromatik  2 pada  α  dan  γ-mangostin  membentuk  dua  ikatan hidrogen  dengan  residu  Gln63  dan  Trp59  serta satu  ikatan  van  der  waals  dengan  residu  Trp96. Ikatan  hidrogen  terjadi  antara  gugus  hidroksil
dari  senyawa  dengan  gugus  amino  dari  residu Gln63  (α-  2,7  Å;  γ-  3,5  Å)  dan  atom  nitrogen yang  ada  pada  cincin  indol  dari  residu  Trp59. Gugus  metoksi  dari  cincin  aromatik  2  pada  β- mangostin membentuk dua ikatan van der waals dengan  residu  Thr163  dan  Thr164.  Gugus  metil pada  α,  β,  dan  γ-mangostin  menyumbang masing-masing dua ikatan van der waals. Pada α dan  γ-mangostin,  gugus  metil  berinteraksi dengan  residu  Thr  163  dan  Thr164,  sedangkan pada  β-mangostin  gugus  metil  berinteraksi dengan residu Thr163 dan His305. Evaluasi hasil penambatan  α,  β,  dan  γ-mangostin  pada  protein α-amilase  yakni  ikatan  reseptor-ligan  berupa interaksi dengan residu asam amino, jenis ikatan serta jarak ikatan dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Interaksi α, β, dan γ-mangostin dengan residu asam amino pada protein α-amilase
Hasil  ini  dapat  dibandingkan  dengan penambatan  ligan  standar  mirisetin  pada  sisi aktif  enzim  α-amilase  (Gambar  3d).  Ligan mirisetin  dapat  membentuk  8  ikatan  hidrogen dengan  residu  asam  amino  ditambah  satu  ikatan hidrogen  melalui  perantara  molekul  air.  Residu yang  teribat  yakni  Asp197  dan  Gln63  yang membentuk masing-masing dua ikatan hidrogen; Glu233,  Trp59,  Thr62,  dan  Asp433  membentuk masing-masing  satu  ikatan  hidrogen  serta tambahan  Glu233  yang  terikat  ke  molekul  air yang  membentuk  satu  ikatan  hidrogen  dengan mirisetin.  Pada  sisi  aktif  enzim  α-amilase
pankreas  manusia  terdapat  tiga  residu  asam amino  penting  yakni  Asp197,  Glu233  dan Asp300  yang  mengkatalisis  hidrolisis  ikatan glikosida  yang  terdapat  pada  substrat  (Li  dkk., 2005).  Studi  tentang  kinetika  dan  struktural kompleks  intermediet  enzim  α-amilase  pankreas manusia dan substrat menunjukkan bahwa residu asam  amino  Asp197  bertindak  sebagai  nukleofil katalitik,  sedangkan  Glu233  berfungsi  sebagai katalis  asam/basa,  sedangkan  rantai  samping pada residu Asp300 berperan dalam mengoptimalkan  orientasi  substrat  yang  terikat
pada sisi aktif dan menstabilkan keadaan transisi. Terikatnya ligan pada sisi aktif terutama dengan residu  katalitik  (Asp197,  Glu233  dan  Asp300) dapat  mencegah  proses  pengikatan  substrat  dan menghambat  reaksi  katalisis  pemutusan  ikatan glikosida  oleh  enzim.  Aktivitas  penghambatan mirisetin  terhadap  enzim  α-amilase  pankreas manusia  terjadi  dengan  melibatkan  residu katalitik Asp197 dan Glu233 melalui pembentukan  ikatan  hidrogen,  sementara  residu Asp300  tidak  terlibat  akibat  adanya  halangan sterik  (Williams  dkk.,  2012).  Pada  α,  β,  dan  γ- mangostin, aktivitas penghambatan terjadi
melalui  pembentukan  ikatan  hidrogen  dan  van der  waals  dengan  melibatkan  residu  katalitik Asp197,  Glu233  dan  Asp300,  kecuali  α- mangostin  yang  hanya  melibatkan  Glu233  dan Asp300.
Jumlah  gugus  hidroksil  ditambah  dengan satu  gugus  karbonil  yang  terdapat  pada  setiap senyawa  mangostin  berperan  penting  dalam pembentukan  ikatan  hidrogen.  Hal  ini  juga berdampak  pada  afinitas  pengikatan  ligan  ke reseptor.  Berdasarkan  data  pada  Tabel  2, diketahui  energi  pengikatan  γ-mangostin  pada
Tabel 2. Hasil penambatan α, β, dan γ-mangostin pada protein  α- amilase
sisi  katalitik  enzim  α-amilase  sebesar  -7,4  kkal lebih  rendah  bila  dibandingkan  dengan  energi pengikatan  α  dan  β-mangostin  (-7,0  dan  -6,6 kkal).  Nilai  ini  mendekati  energi  afinitas  ikatan ligan standar mirisetin terhadap enzim α-amilase pankreas  manusia.  Energi  pengikatan  yang rendah  menunjukan  bahwa  ligan  γ-mangostin berinteraksi  dengan  baik  pada  reseptor  α- amilase,  sehingga  dapat  diprediksi  bahwa kompleks  antara  protein  dengan  γ-mangostin merupakan  kompleks  yang  lebih  stabil  dan memiliki  potensi  aktivitas  sebagai  inhibitor enzim  α-amilase  dibandingkan  α  dan  β- mangostin.
Energi  pengikatan  divalidasi  juga  dengan nilai  RMSD  masing-masing  ligan.  Nilai  RMSD didapatkan dari optimasi konformasi pada posisi terbaik  selama  proses redocking dan  cara pengikatan  ligan  yang  sebenarnya  ke  protein. Semakin kecil nilai RMSD menunjukkan bahwa posisi  ligan  yang  diperkirakan  semakin  baik karena  semakin  mendekati  konformasi  standar atau  pembanding  dalam  hal  ini  ligan  mirisetin. Hasil  validasi  antara  ligan  yaitu  γ-mangostin dengan enzim α-amilase didapatkan nilai RMSD sebesar 1.811 Å yang menandakan bahwa secara teori,  ligan  dan  protein  yang  divalidasi  telah memenuhi kriteria.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil tersebut dapat disimpulkan  bahwa  residu  protein  yang  paling sering  terlibat  berinteraksi  dengan  ligan  yakni residu  Asp197,  Glu233  dan  Asp300.  Ligan  γ- mangostin  memiliki  potensi  aktivitas  sebagai inhibitor enzim α-amilase dibandingkan α dan β- mangostin.  Ligan  γ-mangostin  membentuk kompleks  yang  lebih  stabil  dengan  enzim  α- amilase dengan nilai afinitas ikatan yang rendah sebesar  -7,4  kkal/mol,  sedangkan  ligan  α  dan β- mangostin masing-masing -6,6 dan -7,0 kkal/mol.  Hal  ini  didukung  dengan  nilai  RMSD yang  diperoleh  untuk  ligan  γ-mangostin  sebesar 1,811 Å.

## DAFTAR PUSTAKA
Balan,  K.,  Perumal,  P.,  Sundarabaalaji,  N., Palvannan,  T.,  2015,  Synthesis,  Molecular Docking  and  Biological  Evaluation  of Novel  2-Allyl  Amino  4-Methyl  Sulfanyl Butyric  Acid  as  α-Amylase  and  α-
Glucosidase Inhibitor, J. Mol. Struc. , 1081, 62-68.
Devalaraja,  S.,  Jain,  S.,  Yadav,  H.  2011.  Exotic Fruits  as  Therapeutic  Complements  for Diabetes, Obesity, and Metabolic
Syndrome, J. Food Res. Int. , 44,1856-1865. International  Diabetes  Federation  (IDF),  2018, https://www.idf.org/our-network /regions- members / western - pacific/ members /104- indonesia.html.  Diakses  tanggal  9  Oktober 2018.
Kim,  Y.-M.,  Jeong,  Y.-K.,  Wang,  M.-H.,  Lee, W.Y., Rhee, H.I., 2005, Inhibitory effect of pine  extract  on  α-glucosidase  activity  and postprandial hyperglycemia. Nutrition , 21(6), 756–761.
Kumar,  V.,  Bhatt,  P.  C.,  Kaithwas,  G.,  Rashid, M., Al-abbasi, F. A., Khan, J. A. J., Anwar, F., Verma, A., 2016, α-Mangostin Mediated Pharmacological  Modulation  of  Hepatic Carbohydrate  Metabolism  in  Diabetes Induced  Wistar  Rat. J.  Basic  and  Applied Sciences , 5(3), 255-276.
Noviardi,  H.,  Wulannawati,  A.,  Ibrohim,  M.  S. M., 2016, Perbandingan Inhibisi α- mangostin,  β-mangostin,  dan  γ-mangostin Terhadap  Protein  Akt-Kinase  pada  Sel Kanker Pankreas secara Molecular Docking, Jurnal Farmamedika , 1(1), 1-9.
Pasaribu,  F.,  Sitorus,  P.,  Bahri,  S.,  2012,  Uji Etanol  Kulit  Buah  Manggis  ( Garninia mangostan L)  terhadap  Penurunan  Kadar Glukosa  Darah, Journal  of  Pharmaceutics and Pharmacology , 1(1), 1-8.
Pedraza-Chaverri,  J.,  Cardenas-Rodriguez,  N., Orozco-Ibarra,  M.,  Perez-Rojas,  J.  M., 2008,  Medicinal  Properties  of  Mangosteen ( Garcinia mangostana ), J. Food and Chem.
Tox., 46, 3227-3239.
Schnell, O., Weng, J., Sheu, W. H.H., Watda, H., Kalra,  S.,  Soegondo,  S.,  Yamamoto,  N., Rathod,  R.,  Zhang,  C.,  Grzeszczak,  W., 2016,  Acarbose  Reduce  Body  Weight Irrespective of Glycemic Control in Patients with  Diabetes:  Results  of Worldwide,  Non- interventional,  Observational  Study  Data Pool, Journal of Diabetes and its Complications , 30(4), 628-637.
Taher, M., Zakaria, Tg. M. F. S. Tg., Susanti, D.,
Zakaria,  Z.  A.,  2016,  Hypoglycaemic activity  of  ethanolic  extract  of Garcinia mangostana Linn.  in  normoglycaemic  and
streptozotocin-induced  diabetic  rats, BMC Complementary  and  Alternative  Medicine , 16, 135.
Vongsak,  B.,  Kongkiatpaiboon,  S.,  Jaisamut,  S.,
Machana,  S.,  Pattarapanich,  C.,  2015,  In Vitro  Alpha  Glucosidase  Inhibition  and Free-radical Scavenging Activity of Propolis  from  Thai  Stingless  Bees  in
Mangosteen  Orchard, Journal  Revista Brasileira de Farmacognosia , 25, 445-450. World  Health  Organization  (WHO).  2018.
Diabetes Mellitus . http://www.who.int /mediacentre  /  factsheets  /  fs138  /  en  /. Diakses tanggal 26 Oktober 2018. Williams,  L.  K.,  Li,  C.,  Withers,  S.  G.,  Brayer, G. D., 2012, Order and Disorder: Differential Structural Impacts of Myricetin and  Ethyl  Caffeate  on  Human  Amylase,  an Antidiabetic  Target, Journal  of  Medicinal Chemistry , 55(22), 10177–10186.
Wulan,  D.  R.,  Utomo,  E.  P.,  Mahdi,  C.,  2014, Molecular  Docking  of Ruellia  tuberosa L Compounds  as  α-amylase  Inhibitor:  an  In Silico  Comparation  between  Human  and Rat Enzyme Model, J. Bio. Info, 10(4), 209- 215.