## Pertumbuhan Tanaman Nilam MV1 Varietas Lhokseumawe Akibat Konsentrasi dan Lama Perendaman Kolkisin

## The Growth of MV1 Patchouli Plants in Lhokseumawe Variety Due to Concentration and Immersion Time of Colchicine
Zuyasna ♥ , Ainun Marliah, Adinda Rahayu, Erita Hayati, Rika Husna Jurusan Agroteknologi Fakultas Pertanian, Universitas Syiah Kuala, Banda Aceh
♥ Email korespondensi: zuyasna@unsyiah.ac.id
Abstract. This study aims to determine the best colchicine concentration and immersion time in the colchicine induction  process  to  obtain  the  highest  level  of  diversity.  The  research  was  conducted  at  Sektor  Timur Experimental Garden 2, Faculty of Agriculture, Syiah Kuala University, Darussalam, Banda Aceh, which was conducted  from  June  to  August  2020.  This  research  used  a  factorial  Randomized  Complete  Block  Design (RCBD) with two factors. The first factor is the concentration of colchicine solution with 4 levels (0%, 1%, 2%,  3%)  and  the  second  factor  is  the  immersion  time  with  4  levels  (2,  4,  6,  and  8  hours).  There  were  16 treatment combinations with each treatment repeated 4 times, and therefore 64 experimental units obtained. Parameters observed included increase in plant height, increase in diameter, number of branches, number of shoots,  number  of  leaves,  length  of  branches  and  leaf  surface  area.  The  results  showed  that  the  colchicine concentration  had  a  significant  effect  on  the  surface  area  of  the  leaves  after  treatment  (90  HSP),  with  the highest  average  occurring  at  the  3%  colchicine  concentration  treatment.  The  duration  of  immersion  with colchicine did not significantly affect all the variables observed. The combination of colchicine concentration treatment with immersion time had a significant effect on the number of patchouli plant branches at the age of 30 HSP, where the highest number of branches was at 2% colchicine concentration with 6 hours of soaking time.
Keywords: colchicine concentration, diversity, immersion time, induction
Abstrak. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui konsentrasi kolkisin dan waktu perendaman terbaik dalam proses  induksi  kolkisin  untuk  mendapatkan  tingkat  keragaman  tertinggi.  Penelitian  dilaksanakan  di  Kebun Percobaan  2  Sektor  Timur,  Fakultas  Pertanian,  Universitas  Syiah  Kuala,  Darussalam,  Banda  Aceh  yang dilaksanakan  dari  bulan  Juni  sampai  Agustus  2020.  Penelitian  ini  dilaksanakan  dengan  menggunakan Rancangan  Acak  Kelompok  (RAK)  faktorial  dengan  dua  faktor.  Faktor  pertama  yaitu  konsentrasi  larutan kolkisin dengan 4 taraf (0%, 1%, 2%, 3%) dan faktor kedua yaitu lama perendaman dengan 4 taraf (2 jam, 4 jam, 6 jam, 8 jam). Terdapat 16 kombinasi perlakuan dengan masing-masing perlakuan diulang 4 kali, sehingga diperoleh 64 satuan percobaan. Parameter  yang diamati  meliputi pertambahan tinggi tanaman, pertambahan diameter,  jumlah  cabang,  jumlah  tunas,  jumlah  daun,  panjang  cabang  dan  luas  permukaan  daun.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa konsentrasi kolkisin berpengaruh nyata terhadap luas permukaan daun setelah perlakuan (90 HSP), dengan rataan tertinggi terjadi pada perlakuan konsentrasi kolkisin 3%. Lama perendaman dengan kolkisin tidak berpengaruh nyata pada semua peubah yang diamati. Kombinasi perlakuan konsentrasi kolkisin dengan lama perendaman berpengaruh nyata terhadap jumlah cabang tanaman nilam pada umur 30 HSP, dimana jumlah cabang terbanyak terdapat pada konsentrasi kolkisin 2% dengan lama perendaman 6 jam. Kata kunci : induksi, konsentrasi kolkisin, keragaman, lama perendaman

## PENDAHULUAN
Tanaman  nilam  ( Pogostemon  cablin Benth.)  merupakan  tanaman  perkebunan penghasil  minyak  atsiri  yang  mempunyai nilai ekonomi tinggi di dunia. Tanaman ini termasuk  salah  satu  penyumbang  devisa yang  tinggi  bagi  negara  (Hariyani et  al., 2015).  Minyak  atsiri  dari  tanaman  nilam dihasilkan melalui proses penyulingan daun serta cabang tanaman yang sudah dipanen.
Kurniasari  (2010)  menjelaskan  bahwa minyak  nilam  atau  yang  dikenal  dengan Patchouli  oil digunakan  sebagai  bahan pencampur  dalam  industri  parfum  dan kosmetik  karena  memiliki  sifat  fiksatif yang sampai saat ini belum bisa digantikan perannya.  Perkembangan  industri  saat  ini menyebabkan  kebutuhan  minyak  nilam semakin  meningkat  dan  sebagai  komoditi ekspor,  minyak  nilam  dibutuhkan  secara
Vol. 4 No. 1: 23-33, March 2021                                                              DOI: 10.37637/ab.v4i1.683
berkelanjutan.
Indonesia  umumnya  memiliki  tiga jenis nilam yang sudah dibudidayakan oleh para petani yaitu nilam Aceh ( Pogostemon cablin ), nilam Jawa ( Pogostemon heyneanus )  dan  nilam  sabun  ( Pogostemon hortensis ). Jenis nilam yang paling banyak dibudidayakan  ialah  nilam  Aceh  karena memiliki kualitas minyak yang lebih tinggi daripada lainnya (Anne, 2012). Nilam Aceh juga  dibedakan  menjadi  tiga  varietas berdasarkan  daerah  penghasil  utama  yaitu varietas Lhokseumawe, varietas Tapaktuan dan  varietas  Sidikalang.  Ketiga  varietas nilam ini memiliki kelebihan dan karakteristik yang berbeda satu sama lain.
Indonesia  dikenal  memiliki  mutu minyak  nilam  yang  paling  baik  di  dunia sehingga  menjadi  pemasok  minyak  nilam terbesar  di  dunia  dengan  kontribusi mencapai  90%  dari  kebutuhan  dunia. Walaupun demikian, produksi nilam setiap tahunnya  tidak  stabil  dan  cenderung menurun. Produksi nilam di Provinsi Aceh tahun 2015 adalah 645 ton, pada tahun 2016 mengalami  penurunan  produksi  menjadi 466 ton, lalu pada tahun 2017 hampir sama dengan  tahun  sebelumnya  yaitu  468  ton, selanjutnya  di  tahun  2018  mengalami penurunan  drastis  yaitu  menjadi  178  ton dan  pada  tahun  2019  kembali  mengalami kenaikan  produksi  menjadi  354  ton (Ditjenbun, 2020).
Produksi  nilam  di  Indonesia  sampai saat  ini  belum  optimal  dan  masih  banyak permasalahan  yang  dialami  petani  dalam budidaya  tanaman  nilam  yang  berakibat pada kualitas nilam yang dihasilkan. Hal ini besar  kaitannya  dengan  sumber  genetik tanaman  nilam  di  Indonesia  yang  masih terbatas  sehingga  perbaikan  tanaman dengan  teknik  hibridisasi  sulit  dilakukan. Tanaman  nilam  sulit  menghasilkan  bunga sehingga sulit untuk mendapatkan keragaman  genetik baru  dengan sifat  yang diharapkan (Afifah, 2015). Hal inilah yang menyebabkan  sampai  saat  ini  varietas unggul  nilam  yang  telah  dilepas  masih sangat  terbatas.  Salah  satu  upaya  yang
dapat dilakukan untuk meningkatkan mutu genetik tanaman adalah melalui pemuliaan tanaman yaitu dengan induksi mutasi.
Kolkisin  dipercaya  dapat  digunakan untuk  meningkatkan  keragaman  fenotipe maupun  keragaman  genotipe  dari  suatu tanaman.  Hasil  penelitian  Anggraeni et al., 2017)  menggunakan  kolkisin  pada tanaman  jagung  menunjukkan  adanya keragaman  pada  genotipe  jagung  mutan generasi  M 2 hasil  perlakuan  kolkisin. Tanaman  yang  diberi  perlakuan  kolkisin sangat  berbeda  dengan  tanaman  kontrol untuk  setiap  karakter  yang  diamati diantaranya  adalah  warna  biji,  tinggi tanaman,  jumlah  daun,  lebar  daun,  lebar stomata dan umur berbunga.
Konsentrasi kolkisin yang digunakan dan  lama  perendaman  yang  tepat  akan menghasilkan keanekaragaman yang tinggi, akan tetapi jika konsentrasi kolkisin yang  digunakan  terlalu  tinggi  maka  akan merusak  sel  tanaman  bahkan  dapat menyebabkan tanaman mati. Setiap tanaman  akan  memberikan  respon  yang berbeda  sehingga  dibutuhkan  penelitian- penelitian  untuk  melihat  konsentrasi  dan lama perendaman yang sesuai untuk setiap tanaman. Induksi poliploidi dapat memperbaiki  karakter  dan  ukuran  dari tanaman.    Salah  satu  fase  pertumbuhan cepat  pada tanaman dimana sel-sel  sedang aktif membelah adalah fase juvenil (bibit).
Jika  aplikasi  kolkisin  dilakukan  pada  fase tersebut diduga dapat memperbesar peluang diperolehnya sel-sel  diploid  Rahayu et  al., (2015).
Perubahan  yang  dihasilkan  melalui induksi  mutasi  menggunakan  kolkisin  ini dapat  menjadi  upaya  dalam  menghasilkan varietas  nilam  baru  yang  lebih  unggul. Salah  satu  varietas  nilam  Aceh  yang memiliki kadar minyak yang tinggi adalah varietas Lhokseumawe yaitu sekitar 3,21% sedangkan  kadar Patchouli  Alcohol (PA) nya  masih  rendah  dibandingkan  varietas Tapaktuan  (Kementerian Pertanian, 2018). Nilam  varietas  Lhokseumawe  memiliki sifat  daya  adaptasi  tinggi  dan  batangnya
Vol. 4 No. 1: 23-33, March 2021                                                              DOI: 10.37637/ab.v4i1.683
berwarna  ungu  kehijauan.  Hasil  penelitian Endra (2018) menunjukkan adanya pengaruh  terhadap  tinggi  tanaman,  luas daun  dan  jumlah  cabang  akibat  perlakuan konsentrasi  kolkisin  (0.25%,  0.50%  dan 0.75%)  dan  lama  perendaman  (2,  4,  6,  8 jam) pada stek nilam varietas Lhokseumawe.
Penelitian  kami  ini  bertujuan  untuk mengetahui  pengaruh  konsentrasi  kolkisin (0%,  1%,  2%  dan  3%)  dan  lama perendaman  yang  berbeda  (2,  4,  6,  dan  8 jam)  terhadap  pertumbuhan  bibit  nilam varietas Lhokseumawe.

## METODE
Penelitian ini dilaksanakan di Kebun Percobaan  Dua,  Sektor  Timur,  Fakultas Pertanian, Universitas Syiah Kuala, Darussalam, Banda Aceh yang berlangsung dari  bulan  Juni  2020  sampai  dengan September 2020.
Alat yang digunakan dalam penelitian ini  antara  lain  kertas  label,  pengait  label, polybag ukuran  17  cm  x  40  cm,  cangkul, paranet,  meteran,  jangka  sorong,  ember, timbangan analitik, masker, sarung tangan, sprayer ,  gelas  ukur,  kamera  dan  peralatan tulis.  Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  bibit  nilam  varietas Lhokseumawe  umur  2  bulan  sebanyak  64 batang,  bubuk  kolkisin,  aquades,  tanah sebanyak  200  kg,  dan  pupuk  kandang sebanyak 100 kg.
Penelitian ini menggunakan
Rancangan Acak Kelompok (RAK) faktorial dengan dua faktor. Faktor pertama adalah  konsentrasi  (K)  larutan  kolkisin yang terdiri dari 4 taraf (K0 = 0%; K1 = 1%; K2 = 2%; K3 = 3%). Faktor kedua adalah lama  perendaman  (W)  didalam  larutan kolkisin  yang  terdiri  dari  4  taraf  (W1  =  2 jam; W2 = 4 jam; W3 = 6 jam; W4 = 8 jam).
Berdasarkan  faktor  percobaan  yang digunakan terdapat 16 kombinasi perlakuan dan  masing-masing  perlakuan  diulang sebanyak 4 kali, sehingga secara keseluruhan  terdapat  64  satuan  unit percobaan.
Data hasil penelitian dianalisis menggunakan F (ANOVA), apabila menunjukkan  pengaruh  yang  nyata  (α= 5%),  maka  dilakukan  analisis  lanjut menggunakan  uji Duncan  Multiple  Range Test (DMRT) pada taraf 5%.
Lahan  yang  digunakan  sebagai tempat  pelaksanaan  penelitian  dibersihkan dari sampah dan gulma lalu diberikan alas berupa  terpal,  kemudian  di  sekeliling tempat  penelitian  dilakukan  pemasangan paranet.  Setiap  sisi  paranet  dikaitkan dengan  sisi  lainnya  sehingga  tidak  mudah terlepas dan rusak.
Bahan tanam  yang digunakan adalah bibit nilam varietas Lhokseumawe berumur sekitar  2  bulan  yang  diperoleh  dari  kebun pembibitan Atsiri Research Center (ARC). Bibit  tanaman  nilam  yang  digunakan sebanyak  64  batang,  dengan  ukuran tanaman  yang  seragam  dalam  hal  tinggi tanaman, jumlah daun dan jumlah cabangnya.  Setiap  batang  bibit  nilam langsung  diberikan  label  sesuai  perlakuan untuk memudahkan saat proses perendaman dan penanaman.
Bahan media yang digunakan adalah media  tanam  yang  terdiri  dari  komposisi campuran tanah dan pupuk kandang. Tanah yang  digunakan  adalah  tanah  lapisan  atas ( top soil ), sedangkan pupuk kandang  yang digunakan adalah pupuk kandang sapi yang telah  mengalami  dekomposisi,  diperoleh dari  kebun  pembibitan  tanaman  rakyat. Tanah dan pupuk kandang diayak menggunakan  ayakan  10  mesh  lalu dicampur dengan perbandingan berdasarkan  volume  2  tanah  :  1  pupuk kandang. Media tanam yang telah dicampur dimasukkan  ke  dalam polybag berukuran 17  cm  x  40  cm  dengan  volume  3  kg, selanjutnya  dilakukan  pelabelan  pada polybag . Polybag disusun acak berdasarkan kelompok  atau  ulangannya  dan  media tanam  didiamkan  selama±14  hari  sebelum ditanam.
Larutan kolkisin dibuat dalam ember dengan  melarutkan  bubuk  kolkisin  dalam air  sebanyak  2  liter.  Pembuatan  larutan
kolkisin
disesuaikan berdasarkan konsentrasi  kolkisin  yang  digunakan. Larutan  kolkisin  dengan  konsentrasi  1% digunakan bubuk kolkisin sebanyak 20 mg yang  dilarutkan  dalam  2-liter  air.  Untuk konsentrasi 2% dibutuhkan bubuk kolkisin sebanyak 40 mg dan untuk konsentrasi 3% dibutuhkan  bubuk  kolkisin  sebanyak  60 mg.  Proses  pembuatan  larutan  kolkisin diawali dengan mengisi air sebanyak 1-liter kedalam  gelas  ukur,  kemudian  bubuk kolkisin dicampurkan kedalam air tersebut lalu  dicukupkan  hingga  2  liter.  Masing- masing  larutan  kolkisin  dibuat  sesuai perlakuan  dan  diisi  ke  dalam  ember, kemudian  setiap  ember  diberikan  label sesuai perlakuan.
Bibit  nilam  diambil  satu-persatu  dan dibongkar  dengan  hati-hati  agar  tidak merusak  perakarannya,  kemudian  akarnya dicuci dan dibersihkan dari sisa tanah yang menempel.  Bibit  nilam  yang  telah  bersih dimasukkan  kedalam  ember  yang  berisi larutan  kolkisin  sesuai  dengan  konsentrasi dan  waktu  perendaman  yang  telah  dibuat. Tanaman  nilam  tersebut  direndam  secara bertahap  setiap  2  jam  sekali  diawali  dari perendaman untuk 8 jam, 6 jam, 4 jam dan 2  jam.  Perendaman  secara  bertahap  ini dilakukan  agar  proses  penanaman  dapat dilakukan  serentak  di  waktu  yang  sama. Setelah proses perendaman siap dilakukan, akar tanaman kembali dicuci menggunakan aquades.
Penanaman  bibit  nilam  diawali dengan  membuat  lubang  tanam  pada polybag dengan  cara  tugal  disesuaikan dengan  panjang  akarnya  agar  perakaran bibit  nilam  tidak  rusak.  Kemudian  bibit nilam  diletakkan  dalam  lubang  tanam  dan tanah dipadatkan kembali sampai menutupi perakaran agar tanaman tidak mudah rebah.
Pemeliharaan yang dilakukan setelah perlakuan meliputi penyiraman, penyiangan gulma serta pengendalian hama dan penyakit. Penyiraman dilakukan cukup sekali  dalam  sehari  yaitu  pagi  hari  dan disesuaikan  dengan  tingkat  kelembaban pada media tanam. Jika media tanam terlalu
basah  atau  lembab,  maka  tidak  perlu dilakukan  penyiraman.  Penyiangan  gulma dilakukan  secara  fisik  apabila  diperlukan dengan cara mencabut gulma yang tumbuh di  dalam polybag .  Penyiangan  gulma  juga dilakukan  pada  sekitar  tempat  penelitian agar terhindar dari hama dan penyakit yang menjadikan  gulma  sebagai  sarangnya. Pengendalian  hama  kutu  putih  dan  semut masih  menggunakan  pestisida  nabati (bawang  putih,  sereh  dan sunlight )  karena masih sedikit  dan masih dalam skala  yang kecil.
Semua parameter pengamatan dilakukan  sebelum  dan  sesudah  diberi perlakuan  kolkisin.  Pengamatan  sebelum perlakuan dilakukan sehari sebelum perlakuan,  sedangkan  pengamatan  setelah perlakuan  dilakukan  setiap  30  hari  sekali selama 90 hari. Parameter pengamatan yang dilakukan diantaranya adalah: 1)
Pertambahan  tinggi  tanaman  diukur  pada saat tanaman berumur 30, 60, 90 HSP (hari setelah  perlakuan).  Pengukuran  dilakukan mulai dari pangkal batang yang telah diberi tanda sampai titik tumbuh cabang tertinggi pada  setiap  tanaman,  untuk  mendapatkan data  pertambahan  tinggi  maka  tinggi tanaman setelah perlakuan dikurangi tinggi pengamatan sebelum perlakuan; 2)
Pertambahan  diameter  batang  diukur  pada saat  tanaman  berumur  30,  60,  90  HSP. Pengukuran dilakukan menggunakan jangka  sorong  dengan  cara  mengukur bagian pangkal batang dari setiap tanaman, untuk  mendapatkan  data  pertambahan diameter  maka  diameter  tanaman  setelah perlakuan dikurangi diameter pada pengamatan sebelum perlakuan; 3) Jumlah cabang diamati pada saat tanaman berumur 30, 60, 90 HSP. Pengamatan jumlah cabang dilakukan  dengan  menghitung  seluruh cabang  yang tumbuh pada setiap tanaman; 4) Jumlah tunas diamati pada saat tanaman berumur  30,  60,  90  HSP.  Pengamatan jumlah tunas dilakukan dengan menghitung seluruh tunas yang muncul pada setiap ruas batang  utama  juga  pada  setiap  ruas  daun dan  cabang;  5)  Jumlah  helai  daun  diamati
pada saat tanaman berumur 30, 60, 90 HSP. Daun yang dihitung adalah daun yang telah membuka  sempurna,  jika  daun  telah  layu dan  menguning  tidak  dihitung  lagi;  6) Panjang cabang diamati pada saat tanaman berumur  30,  60,  90  HSP.  Pengukuran panjang cabang dilakukan dengan menghitung  panjang  dari  masing-masing cabang  pada  setiap  tanaman  lalu  dirata- ratakan;  7)  Luas  permukaan  daun  hanya diamati  dua  kali  yaitu  sebelum  dilakukan perlakuan dan sesudah dilakukan perlakuan.  Pengukuran  luas  permukaan daun  dilakukan  menggunakan  software imageJ.  Setiap  tanaman  diambil  tiga  daun secara acak untuk mewakili setiap tanaman. Daun yang dipilih dalam keadaan baik dan diusahakan berada  pada  posisi  yang  sama. Ketiga  daun  tersebut  difoto  di  atas  kertas HVS  putih  dan  diberi  penggaris  pada  tepi kiri  HVS.  Daun  yang  telah  diletakkan  di atas  HVS  difoto  beserta  penggarisnya. Hasil  foto  dimasukkan  ke  software  dan dihitung  luas  per  helai  daun  tersebut  lalu dirata-ratakan;  8)  Nilai  LD 50 dibutuhkan untuk  mengetahui  konsentrasi  optimal dalam  menghasilkan  keragaman  genetik sehingga  dapat  menjadi  acuan  bagi penelitian  selanjutnya.  Keragaman  genetik tertinggi  didapatkan  pada  konsentrasi disekitar nilai LD 50 . Nilai LD 50
menunjukkan  besarnya  konsentrasi  dari induksi mutasi yang dapat mematikan 50% populasi tanaman.
LD 50
dihitung berdasarkan  persentase  daya  tumbuh  pada MV1 dari setiap konsentrasi yang digunakan  (1%,  2%,  3%).  Nilai  LD 50 ini dihitung pada saat tanaman berumur 30 hari setelah perlakuan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Secara umum penelitian ini membahas  tentang  respon  tanaman  nilam terhadap  faktor  konsentrasi  kolkisin  dan lama perendaman terhadap beberapa peubah pertumbuhan.
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan konsentrasi kolkisin 1%, 2% dan 3% tidak menyebabkan  kematian  populasi  tanaman
nilam  MV1  ini  dan  semua  tanaman  nilam yang  telah  diberi  perlakuan  kolkisin  dapat tumbuh  hingga  umur  90  HSP.  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  perlakuan konsentrasi kolkisin dan lama perendaman yang  digunakan  tidak  berpengaruh  yang nyata terhadap sebagian besar peubah yang diamati,  hal  ini  diduga  karena  setiap tanaman  memiliki  respon  yang  berbeda terhadap  pemberian  kolkisin.  Perubahan yang terjadi pada tanaman akibat perlakuan kolkisin  sangat  bervariasi  karena  kolkisin mempengaruhi hanya sebagian sel tanaman dan hanya efektif pada sel yang sedang aktif membelah (Aili et al., 2016).
Rata-rata pertambahan tinggi tanaman nilam akibat perlakuan konsentrasi kolkisin  dapat  dilihat  pada  Tabel  1. Pertambahan tinggi tanaman pada umur 60 HSP  cenderung  paling  banyak  dijumpai pada  perlakuan  konsentrasi  kolkisin  2%, tetapi  pada  umur  90  HSP  pertambahan tinggi  tanaman  paling  banyak  dijumpai pada  konsentrasi  kolkisin  1%.  Perlakuan kolkisin menyebabkan aktivitas metabolisme  tanaman  menjadi  terhambat. Maghfirah et al., (2018) menyatakan bahwa pemberian kolkisin dapat membuat ukuran sel menjadi lebih besar sehingga pembelahan  sel  berlangsung  lebih  lambat. Hal inilah yang menyebabkan pertumbuhan suatu tanaman  yang telah diberi  perlakuan kolkisin menjadi lambat. Perlakuan konsentrasi  3%  juga  menghasilkan  rerata panjang  cabang  tertinggi.  Hal  ini  sesuai dengan  pernyataan  Sartika  dan  Basuki (2017) yang menyatakan bahwa konsentrasi kolkisin  yang  tepat  akan  memberikan dampak positif pada jaringan tanaman dan tidak  menyebabkan  kemunduran  pada pertumbuhannya  karena  pengaruh  dari kolkisin  masih  dapat  ditoleransi  oleh jaringan tanaman.
Perlakuan kontrol menghasilkan diameter  batang,  jumlah  daun,  jumlah cabang dan jumlah tunas yang lebih banyak dibandingkan  tanaman  yang  mendapat perlakuan  kolkisin,  akan  tetapi  perlakuan konsentrasi  2%  juga  memiliki  potensi
jumlah  cabang,  jumlah  daun  dan  jumlah tunas  yang  tinggi,  akan  tetapi  laju pertumbuhannya  lebih  lambat  (Tabel  2). Hal  ini  sesuai  dengan  hasil  penelitian Sutrisno  dan  Kuswantoro  (2014)  pada tanaman kedelai dimana rata-rata pertumbuhan  jumlah  cabang  dan  tunas dengan  pemberian  kolkisin  lebih  lambat dibandingkan dengan tanaman tanpa pemberian kolkisin (kontrol). Hal ini analog bahwa pemberian kolkisin dapat menghambat  terjadinya  pertunasan  pada tanaman  nilam  yang  disebabkan  oleh gangguan  fisiologis  yang  menyebabkan tingkat  pembelahan  sel  menurun.  Afifah (2015)  berdasarkan  hasil  penelitiannya, menyatakan  bahwa  konsentrasi  kolkisin yang  terlalu  tinggi  dapat  menghambat proses proliferasi tunas sehingga menyebabkan
pertumbuhan tunas terhambat. Hal yang sama juga terjadi pada penelitian
Nugroho (2015) yang
menjelaskan  bahwa  pemberian  kolkisin pada tanaman dapat mengakibatkan pertumbuhan  tanaman  tertunda  akibat  dari rusaknya jaringan tanaman sehingga membutuhkan  waktu  yang  lama  untuk tumbuh.
Tabel  1. Rata-rata  pertambahan  tinggi tanaman  nilam  pada  umur  30,  60  dan  90 HSP akibat perlakuan konsentrasi kolkisin
Konsentrasi Kolkisin (%) Pertambahan tinggi tanaman (cm) 30 HSP 60 HSP 90 HSP K0 (0%) 7,69 20,13 29,00 K1 (1%) 6,50 21,50 32,13 K2 (2%) 7,19 22,19 31,50 K3 (3%) 5,31 20,44 31,38 Hasil  analisis  ragam  menunjukkan perlakuan konsentrasi kolkisin berpengaruh nyata terhadap luas permukaan daun nilam (Tabel 3). Perlakuan  konsentrasi  3%  memberikan pengaruh  terbaik  pada  luas  daun  tanaman nilam  setelah  perlakuan,  yang  berbeda nyata  dengan  perlakuan  konsentrasi  0% (kontrol).
Peningkatan  konsentrasi  kolkisin hingga  3%  dapat  membuat  permukaan daun  nilam  lebih  besar.  Hal  ini  sejalan dengan  penelitian  Widoretno  (2016)  pada tanaman nilam yang menghasilkan perubahan  morfologi  tanaman  tetraploid sangat  signifikan  dibandingkan  dengan tanaman  diploid  dalam  ukuran  daun  dan diameter batang. Pada konsentrasi kolkisin 60 mg L -1 , tanaman tetraploid menunjukkan  luas  permukaan  daun  dan diameter batang lebih  besar dibandingkan tanaman  diploid,  selain  itu  tanaman tetraploid yang dihasilkan memiliki warna hijau  lebih  gelap  dan  daun  lebih  tebal. Anne  dan  Wiendi  (2011)  menyatakan bahwa  pemberian  kolkisin  pada  tanaman dapat menyebabkan tingkat ploidi tanaman meningkat salah satunya dapat memperbesar  bagian  dari  tanaman  (akar, batang, daun, bunga dan buah).
Tabel  2. Rata-rata  pertambahan  diameter batang,  jumlah  daun  jumlah  cabang  dan jumlah tunas pada umur 30, 60 dan 90 HSP akibat perlakuan konsentrasi kolkisin
Konsentrasi kolkisin (%) 30 HSP 60 HSP 90 HSP Pertambahan diameter batang (mm) K0 (0%) 1,65 3,35 4,5 K1 (1%) 1,23 2,68 3.83 K2 (2%) 1,16 2,68 3,89 K3 (3%) 1,22 2,85 3,86 Rata-rata jumlah daun K0 (0%) 23,13 48.25 93,13 K1 (1%) 19,19 43,13 83,75 K2 (2%) 21,81 44,88 94,25 K3 (3%) 21,25 42,19 86,06 Rata-rata jumlah cabang K0 (0%) 2,19 4,81 9,88 K1 (1%) 2,06 4,06 8,56 K2 (2%) 2,25 4,69 9,50 K3 (3%) 2,25 3,75 9,00 Rata-rata jumlah Tunas K0 (0%) 11,0 15,63 13,50 K1 (1%) 4,94 11,56 10,56 K2 (2%) 8,81 15,44 13,38 K3 (3%) 5,63 12,06 10,75
Tabel  3. Rata-rata  luas  permukaan  daun tanaman  nilam  pada  umur  90  HSP  akibat perlakuan konsentrasi kolkisin
Konsentrasi Kolkisin (%) Rata-rata luas permukaan daun (cm2) K0 (0%) 48,59 a K1 (1%) 59,13 b K2 (2%) 54,56 ab K3 (3%) 60,15 b
Keterangan:  Angka  yang  diikuti  oleh  huruf yang sama pada kolom yang sama berbeda tidak nyata    pada taraf 5% (Uji DMRT 0,05 ).
Berdasarkan hasil penelitian tersebut dapat diduga bahwa kolkisin menyebabkan pertumbuhan tanaman melambat pada fase
awal  pertumbuhan  sehingga  pengaruh kolkisin  baru  akan  terlihat  pada  umur  60 dan 90 HSP. Hal  ini diduga terjadi karena pengaruh dari kolkisin yang diberikan dapat menurunkan laju pertumbuhan. Hal ini juga sejalan dengan hasil penelitian Sartika dan Basuki (2017) dimana pertumbuhan tanaman dengan perlakuan kolkisin tertinggi  (1%)  menghasilkan  pertumbuhan tanaman  yang  lebih  lambat  dibandingkan tanaman kontrol.
Secara  umum  hasil  penelitian  ini tidak  memiliki  perbedaan  antara  setiap perlakuan konsentrasi kolkisin karena tidak adanya  pengaruh  yang  nyata  pada  setiap parameter  kecuali  luas  permukaan  daun (Gambar 1).
Gambar 1. Perbandingan luas permukaan daun nilam  akibat  perlakuan  konsentrasi  kolkisin:  a) konsentrasi kolkisin 0% (kontrol), b) konsentrasi kolkisin  1%,  c)  konsentrasi kolkisin  2%,  dan d) konsentrasi kolkisin 3%
Hal  ini  dapat  terjadi  karena  banyak hal,  diantaranya  adalah  tidak  adanya kerusakan  yang  diakibatkan  oleh  mutagen kolkisin  karena  konsentrasi  kolkisin  yang kurang tepat sehingga pertumbuhan tanaman  cenderung  sama  atau  pengaruh kolkisin  bekerja  lambat  sehingga  belum terlihat dalam waktu pengamatan 90 HSP.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa lama  perendaman  dengan  kolkisin  secara statistik  berdasarkan  uji  F,  tidak  berbeda nyata  pada  taraf  5%.  Perlakuan  lama perendaman yang tepat untuk menghasilkan pertambahan  tinggi  dan  diameter  tanaman
nilam yang paling efektif adalah perendaman selama 2 jam dan 8 jam, seperti disajikan pada tabel  4.  Hasil  penelitian ini sedikit  berbeda  dengan  hasil  penelitian Pharmawati  dan  Suada  (2013)  pada tanaman  cabai  rawit  yang  menunjukkan bahwa perlakuan perendaman terbaik untuk menghasilkan  tanaman  tertinggi  adalah perendaman  6  jam  dimana  tinggi  tanaman terendah terdapat pada perendaman 12 jam. Perlakuan  lama  perendaman  2  jam memperlihatkan pertumbuhan jumlah cabang  dan  daun  tertinggi  dibandingkan perlakuan  lainnya.  Hal  ini  sejalan  dengan penelitian  Nursalmin et  al., (2019)  pada tanaman  krisan  yang  menunjukkan  bahwa jumlah  daun  dan  buku  tertinggi  dijumpai pada  perendaman  1  jam  dimana  rerata jumlah  daun  dan  buku  akan  menurun seiring dengan penambahan waktu perendaman.
Perlakuan perendaman selama 6 jam menghasilkan  pertumbuhan  jumlah  tunas yang paling tinggi pada penelitian ini. Hasil penelitian  Rahayu et  al., (2013)  yang menghasilkan jumlah anakan tertinggi pada perlakuan perendaman 9 jam dibandingkan dengan perendaman 3, 6 dan 12 jam. Lama perendaman  8  jam  menghasilkan  rerata panjang  cabang  dan  luas  permukaan  daun yang paling tinggi. Anne (2012)
menyatakan bahwa waktu perlakuan
A B C D
kolkisin yang semakin lama akan berdampak pada rendahnya massa sel yang dapat beregenerasi yang sesuai dengan hasil penelitiannya  yaitu  persentase  regenerasi tertinggi  terjadi  pada  perendaman  kolkisin 1 hari sedangkan yang paling rendah adalah dengan perendaman 7 hari. Perlakuan lama perendaman  tidak  berpengaruh  terhadap semua  parameter  yang  diamati,  hal  ini sejalan  dengan  hasil  penelitian  Endra (2018) terhadap stek nilam yang menyatakan  bahwa  lama  perendaman  2 jam, 4 jam, 6 jam dan 8 jam tidak memberi pengaruh  terhadap  tinggi  tanaman,  luas daun dan jumlah cabang. Lama perendaman tersebut  belum  sesuai  untuk  pertumbuhan tanaman  nilam  varietas  Lhokseumawe sehingga  diperlukan  waktu  perendaman lebih lama.
Kombinasi  perlakuan  konsentrasi kolkisin  dengan  lama  perendaman  pada umur 30 HSP menghasilkan jumlah cabang terbanyak  pada  konsentrasi  kolkisin  2% dengan  lama  perendaman  6  jam,  diikuti dengan  konsentrasi  kolkisin  3%  dengan perendaman  2  jam  (Tabel  5).  Peningkatan konsentrasi  kolkisin  hingga  3%  dan  lama perendaman  hingga  8  jam  masih  dapat menghasilkan  jumlah  cabang  yang  tinggi. Beberapa  hasil  penelitian  penggunaan kolkisin  terhadap  tanaman  lain  juga  dapat menghasilkan  pertumbuhan  yang  tidak sejalan, seperti pada penelitian Ermayanti et al., (2018)  pada  tanaman  talas  yang menyatakan bahwa semakin tinggi konsentrasi  dan  lama  perendaman  dalam kolkisin  akan  menghasilkan  jumlah  tunas anakan yang semakin
sedikit.
Terhambatnya  pertumbuhan  tunas  diduga karena perlakuan perendaman dan konsentrasi kolkisin mengakibatkan proses pembelahan sel menjadi abnormal.
Setiap  spesies  bahkan  setiap  bagian tanaman  memiliki  kepekaan  dan  respon yang  sangat  berbeda  terhadap  konsentrasi kolkisin  dan  waktu  perlakuan  tergantung jenis  dan  organ  tanaman  yang  diberi perlakuan.  Oleh  karena  itu  terdapat beragam hasil dari konsentrasi kolkisin dan
lama  perendaman  yang  digunakan  untuk menginduksi poliploidi secara optimal.
Tabel  4. Rata-rata  pertambahan  tinggi tanaman,  diameter  batang,  jumlah  daun, jumlah cabang dan jumlah tunas pada umur 30,  60  dan  90  HSP  akibat  perlakuan  lama perendaman
Lama perendaman 30 HSP 60 HSP 90 HSP Pertambahan tinggi tanaman (cm) W1 (2 jam) 7,13 22,31 31,94 W2 (4 jam) 5,44 19,44 30,13 W3 (6 jam) 7,38 21,25 30,69 W4 (8 jam) 6,75 21,25 31,25 Pertambahan diameter batang (mm) W1 (2 jam) 1,34 3,10 4,34 W2 (4 jam) 1.43 3,12 4.24 W3 (6 jam) 1,35 2,73 3,82 W4 (8 jam) 1.13 2,62 3,71 Rata-rata jumlah daun W1 (2 jam) 23,06 52,81  102,44 W2 (4 jam) 18,69 45,06 85,56 W3 (6 jam) 21,13 40,13 88,69 W4 (8 jam) 22,50 40,44 80,50 Rata-rata jumlah cabang W1 (2 jam) 2,69 5,25 10,56 W2 (4 jam) 1,94 4,19 8,81 W3 (6 jam) 2,38 3,25 9,13 W4 (8 jam) 2,63 4,63 8,44 Rata-rata jumlah tunas W1 (2 jam) 8,13 14,13 19,88 W2 (4 jam) 6,50 13,00 18,88 W3 (6 jam) 8,25 16,69 21,44 W4 (8 jam) 7,50 10,88 15,00
Kolkisin  diketahui  bersifat  toksik bagi tanaman sehingga penggunaan kolkisin  dapat  menurunkan  pertumbuhan vegetatif  tanaman  pasca  induksi  poliploid. Wolfe  (1983)  dalam  Ermayanti et  al.,
(2018)  menyatakan  bahwa  kolkisin  dapat menghambat  pembentukan  mikrotubula penyusun rangka sel dan merusak tata letak protein pada membran sel yang dikendalikan oleh mikrotubula dan mikrofilamen. Hal ini menyebabkan molekul-molekul  dalam  sitoplasma  tidak terdistribusi dengan baik dan
mengakibatkan pertumbuhan tanaman
menjadi lambat.
Tabel  5. Rata-rata  jumlah  cabang  tanaman  nilam  pada  umur  30  HSP  akibat  interaksi konsentrasi kolkisin dengan lama perendaman.
Konsentrasi (%) Lama Perendaman (jam) W1(2 jam) W2 (4 jam) W3 (6 jam) W4 (8 jam) K0 (0%) 2,00 Aab 3,00 Dd 1,75 Aa 2,25 Abc K1 (1%) 3,00 Cc 0,75 Aa 2,25 BCb 2,75 BCc K2 (2%) 2,50 Bb 1,75 Ba 3,50 Dc 2,50 ABb K3 (3%) 3,25 Cc 2,25 Cab 2,00 Ba 3,00 Cc
Keterangan: Angka yang Diikuti oleh Huruf yang Sama (Huruf Kapital dilihat secara vertikal dan Huruf Kecil dilihat secara Horizontal) Berbeda Tidak Nyata pada Taraf 5% (Uji DMRT 0,05 ).
Pendugaan  awal  dari  penggunaan kolkisin  yang  tidak  berpengaruh  adalah karakter  fisik  akibat  mutasi  belum  terlihat pada  populasi  MV1  dan  diduga  baru muncul  saat  generasi  selanjutnya  yaitu MV2 dan kelanjutannya. Pernyataan tersebut  juga diungkapkan oleh Aili et  al.,
(2016) pada penelitiannya terhadap tanaman jagung. Hal ini juga didukung oleh pernyataan  Kristina  dan  Syahid  (2015) yang menyatakan bahwa kerusakan fisiologis  akibat  perlakuan  kolkisin  hanya terjadi  pada  generasi  pertama,  sedangkan mutasi  kromosom  dan  mutasi  sitoplasma akan diturunkan pada generasi selanjutnya. Oleh  karena  itu,  pengamatan  karakter morfologi lanjutan hingga beberapa generasi  terhadap  tanaman  nilam  ini  perlu dilakukan  untuk  mengetahui  pertumbuhan fenotip dari tanaman nilam pasca diinduksi menggunakan kolkisin.

## SIMPULAN
Konsentrasi kolkisin 3% pada 90 HSP menghasilkan luas permukaan daun terbesar. Perlakuan lama perendaman tidak berpengaruh nyata terhadap semua peubah yang  diamati.  Konsentrasi  kolkisin  2% dengan lama perendaman 6 jam menghasilkan jumlah cabang tertinggi pada tanaman nilam umur 30 HSP.
Saran  untuk  penelitian  selanjutnya melakukan pengamatan lebih dari 90 HSP, karena efek dari kolkisin memiliki laju yang lambat.  Perlu  juga  dilakukan  penelitian
lebih  lanjut  pada  generasi  MV2  agar  efek dari  mutasi  lebih  terlihat  serta  melakukan analisis kromosom untuk generasi MV2.

## ACKNOWLEDGEMENT
Kami mengucapkan terima kasih banyak kepada  Universitas  Syiah  Kuala,  Kementerian Pendidikan  dan  Kebudayaan  yang  telah mendanai  penelitian  ini  sesuai  dengan  surat perjanjian  penugasan  pelaksanaan  penelitian lektor kepala Tahun Anggaran 2020 Nomor: 266/UN11/SPK/PNBP/2020  tanggal  17 Maret 2020.

## DAFTAR PUSTAKA
Afifah,  U.  A.  N.  2015.  Evaluasi  keragaan fenotipe  nilam  ( Pogostemon  cablin Benth.) hasil mutasi kromosom dengan kolkisin.  Skripsi. Departemen Agronomi  dan  Hortikultura.  Fakultas Pertanian  Institut  Pertanian  Bogor. Bogor.
Aili, E. N., Respatijarti dan Sugiharto, A. N.
2016.  Pengaruh  pemberian  kolkisin terhadap  penampilan  fenotipe  galur inbrida  jagung  pakan  ( Zea  mays L.) pada  fase  pertumbuhan  vegetatif. Jurnal  Produksi  Tanaman.  4(5):  370– 377.
Anggraeni,  M.,  Damanhuri  dan  Sugiharto, A.  N.  2017.  Keragaan  beberapa genotipe  jagung  pakan/yellow  corn ( Zea mays L.) mutan kolkisin generasi M2.  Jurnal  Produksi  Tanaman.  5(3):
500-505.
Anne,  Y.  P.  2012.  Induksi  mutasi  melalui
penggandaan kromosom nilam Varietas Sidikalang ( Pogostemon cablin Benth.) dengan kolkisin secara in vitro . Skripsi. Departemen Agronomi  dan  Hortikultura.  Fakultas Pertanian  Institut  Pertanian  Bogor. Bogor.
Anne,  Y.  P.  dan  Wiendi,  N.  M.  A.  2011. Induksi  mutasi  melalui  penggandaan kromosom  nilam  Varietas  Sidikalang ( Pogostemon  cablin Benth.)  dengan kolkisin.  Prosiding  Simposium  dan Seminar Bersama
PERAGI- PERHORTI-PERIPI-HIGI. Bogor. Direktorat  Jenderal  Perkebunan.  2020. Statistik Perkebunan Indonesia Komoditas  Nilam  Tahun  2018-2020. Jakarta. Endra. 2018. Upaya peningkatan keragaman  genetik  tanaman  nilam (Pogostemon  cablin  Benth.)  melalui mutasi  kromosom  dengan  induksi kolkisin.  Tesis. Pascasarjana Fakultas Pertanian.  Universitas  Syiah  Kuala. Banda Aceh.
Ermayanti,  T.  M.,  Wijayanta,  A.  N.  dan
Ratnadewi, D. 2018. Induksi
Poliploidi pada Tanaman Talas ( Colocasia  esculenta (L.)  Schott) Kultivar  Kaliurang  dengan  Perlakuan Kolkisin secara In Vitro .Jurnal Biologi Indonesia. 14(1): 91-102.
Hariyani,  Widaryanto,  E.  dan  Herlina,  N.
2015.  Pengaruh  umur  panen  terhadap rendemen  dan  kualitas  minyak  atsiri tanaman  nilam  ( Pogostemon  cablin Benth.).Jurnal  Produksi  Tanaman. 3(3):205-211. https://media.neliti.com Kristina,  N.  N.,  &  Syahid,  S.  F.  (2015).
Pengaruh kolkhisin terhadap penampilan  lada  ( Piper  nigrum L.) mutan  dan  analisis  ploidi.  Jurnal Penelitian  Tanaman  Rempah  dan Obat.  21(3): 125-130.
Kurniasari,  A.  M.,  Adisyahputra  dan
Rosman, R. 2010. Pengaruh
kekeringan pada tanah bergaram NaCl terhadap pertumbuhan tanaman nilam. Buletin  Penelitian  Tanaman  Rempah
dan Obat. 21(1): 18-27.
Maghfirah,  Roviq,  M.  dan  Nihayati,  E. 2018.  Pengaruh  pemberian  kolkisin terhadap keragaman pertumbuhan dua klon Temulawak ( Curcuma xanthorrhiza Roxb.)  secara in  vitro . Jurnal Produksi Tanaman. 6(6): 1000- 1004.
Nugroho,  Y.  A.  2015.  Induksi  poliploid dengan kolkisin pada tanaman anggrek Dendrobium  lasianthera (J.J  Smith) secara in  vitro .  Skripsi.  Departemen Agronomi  dan  Hortikultura.  Fakultas Pertanian  Institut  Pertanian  Bogor. Bogor.
Nursalmin, A., Komariah, A. dan Hidayat, O.  2019.  Pengaruh  lama  perendaman kolkisin terhadap pertumbuhan planlet ( Chrysanthemum morifolium R.) krisan Varietas Pasopati cara in vitro .
Jurnal Ilmiah Pertanian. 6(2): 124-133. Pharmawati,  M.  dan  Suada,  I.  K.  2013.
Peningkatan  kualitas  genetik  cabai rawit ( Capsicum frutescens L.) melalui teknologi mutasi untuk ketahanan  terhadap  Layu  Fusarium. Universitas Udayana. Denpasar.
Rahayu, E. M. D., Sukma, D., Syukur, M., Aziz, S. A. dan Irawati. 2015. Induksi poliploidi menggunakan kolkisin secara in vivo pada bibit anggrek bulan ( Phalaenopsis  amabilis (L.)  Blume). Buletin  Kebun  Raya  LIPI.  18(1):  41- 48.
Rahayu, Y. S., Prasetyo, I. K. dan Riada, A. U. 2013. Pengaruh penggunaan kolkisin terhadap pertumbuhan vegetatif tanaman sedap malam ( Polianthes  tuberosa L.)  di  dataran medium. Fakultas pertanian Universitas Wisnuwardhana. Malang.
Sartika,  T.  V.  dan  Basuki,  N.  2017.
Pengaruh konsentrasi kolkisin terhadap  perakitan  putative  mutan semangka  ( Citrullus  lanatus ).  Jurnal Produksi Tanaman. 5(10):1669-1677.
Sutrisno  dan  Kuswantoro,  H.  2014.
Keragaan  dua  varietas  kedelai  pada enam  konsentrasi  kolkisin.  Balai
Penelitian  Tanaman  Aneka  Kacang dan Umbi. 128–134. http://balitkabi.litbang.pertanian.go.id /wp-content/uploads/2015/05/128- 134_Sutrisno-1.pdf
Widoretno, W. 2016. In vitro induction and characterization of tetraploid
Patchouli ( Pogostemon cablin Benth.) plant.  Plant  Cell,  Tissue  and  Organ Culture.125(2):261-267. https://doi.org/10.1007/s11240-016- 0946-0