## Fotodegradasi, Uji pH dan Kandungan

## in Vivo Pigmen Klorofil Lamun Thalasia hemprichii
Lisiard Dimara 1 , Popy Ida Laila Ayer 1 dan Efray Wanimbo 1
1 Program Studi Ilmu Kelautan, Jurusan Ilmu Kelautan dan Perikanan, FMIPA – Universitas Cenderawasih *e-mail korespondensi: dimaralisiard@gmail.com
INFORMASI ARTIKEL

## A B S T R A K
Diterima Disetujui Terbit Online : 20 September 2018 : 11 November 2018 : 21 Desember 2018 Pigmen  klorofil  memiliki  peran  penting  dan  besar  terhadap  berbagai  sistem kehidupan di perairan laut, dan dalam aplikasinya telah banyak digunakan untuk berbagai produk makanan, minuman, farmasi, dan kosmetik, sehingga studi terkait stabilitasnya perlu dilakukan. Tujuan penelitian ini adalah mengetahui kandungan, pengaruh sinar, dan pengaruh pH terhadap pigmen klorofil Thalasia hemprichii . Metode  penelitian  yang  digunakan  adalah  (1)  pengukuran  kandungan  secara in vivo , (2) ekstraksi aseton, (3) iradiasi, dan (4) uji pH. Hasil penelitian menunjukkan bahwa purata kandungan klorofil Thalasia hemprichii pada kedalaman 1 m = 15,42 spad/cm 2 ,  kedalaman  2  m  =  17,82  spad/cm 2 ,  dan  kedalaman  3  m  =  19,01 spad/cm 2 . Pengaruh sinar merah selama 7 jam iradiasi menyebabkan degradasi pigmen di daerah Qx = 26,77% dan pada daerah Qy = 29,05% per jam, sedangkan iradiasi cahaya polikromatik selama 7 jam menyebabkan degradasi pada daerah Qx  =  52,81%  dan  pada  daerah  Qy  =  54,80%.  Hasil  uji  pH  menunjukkan  bahwa klorofil lamun Thalasia hemprichii bersifat stabil pada pH 7 (netral), mengalami degradasi pada pH bersifat asam dan basa. Konsentrasi pH bersifat basa memiliki serapan  tinggi,  yaitu  pH  9  (Qx  =  0,732798  dan  Qy  =  0,362952),  pH  11  (Qx  = 0,879036 dan Qy = 0,433446), dan pH 13 (Qx = 0,948732 dan Qy = 0,459035), sedangkan  pH  bersifat  asam  memiliki  serapan  yang  kecil,  yaitu  pH  5  (Qx  = 0,787641 dan Qy = 0,391379) dan pH 1 (Qx = 0,736968 dan Qy = 0,264192). Copyright © 2018 Universitas Cenderawasih Kata Kunci: Fotodegradasi
pH
Kandungan in vivo Klorofil Thalasia hemprichii

## PENDAHULUAN
Lamun ( Thalasia hemprichii ) adalah kelompok tumbuh-tumbuhan  berbunga  yang  hidup  di perairan laut, pada kisaran habitat yang mencapai kedalaman laut antara 1-15 meter (Tomascik et al., 1997).  Seperti  halnya  rumput  di  darat,  Lamun mempunyai tunas berdaun yang tegak dan tangkai tangkai yang merayap serta  efektif untuk berbiak. Berbeda  dengan  tumbuh  tumbuhan  laut  lainnya (alga  dan  rumput  laut),  lamun  memiliki  akar  dan sistem internal untuk mengangkut gas dan zat-zat hara.  Sebagai  sumberdaya  hayati,  lamun  banyak dimanfaatkan untuk berbagai keperluan (Anonim, 2005). Secara  tradisional  lamun  telah  dimanfaatkan untuk membuat keranjang anyaman, dibakar untuk garam,  soda  atau  penghangat,  bahan  isian  kasur, atap,  bahan  kemasan,  pupuk,  isolasi  suara  dan suhu.  Pada  era  modern  ini,  Lamun  dimanfaatkan sebagai  penyaring  limbah,  stabilisator  pantai, pupuk,  makanan  kesehatan  dan  obat  obatan (Anonim, 2005). Pada manfaat yang lainnya, Lamun bukan hanya berpotensi sebagai sumber makanan kesehatan  yang  mengandung  nutrisi  saja, melainkan  berpotensi  juga  sebagai  sumber  daya tahan  terhadap  penyakit  degeneratif  atau  infeksi (Purwati, 2006; Anonim, 2006).
Menurut  Purwati  (2006),  ada  kemungkinan lamun  dapat  dikembangkan  sebagai  makanan manusia, karena tumbuhan ini telah dimanfaatkan sebagai  sumber  makanan  dan  obat-obatan  secara tradisional.  Secara  fisiologis,  Lamun  memiliki kemampuan menghasilkan produk alam metabolit primer  dan  sekunder,  sehingga  sangat  potensial sebagai  sumber  obat-obatan  dan  makanan kesehatan.
Warna hijau pada lamun ( Thalasia hemprichii ) menunjukkan  bahwa  lamun  mengandung  pigmen berwarna  hijau  yang  disebut  klorofil.  Klorofil merupakan  pigmen  alami  yang  utama  terdapat pada  tumbuh-tumbuhan,  algae,  dan  bakteri berwarna  hijau.  Pigmen  hijau  pada  tumbuhan mempunyai  peranan  penting  dalam  proses fotosintesis,  yaitu  mengubah  energi  cahaya menjadi  energi  kimia.  Pada  saat  cahaya  mengenai klorofil,  maka  karbohidrat  dan  molekul  -  molekul organik lainnya akan diproduksi dari CO 2 dan H 2 O, serta akan melepaskan molekul O 2 (Gross, 1991). Menurut  Kimbal  (1992)  klorofil  merupakan molekul amfifilik, memiliki rantai fitol hidrokarbon yang  sangat  hidrofobik,  sedangkan  sebagian  dari cincin  porfirin  tempat  gugus-gugus  C=O  bersifat hidrofilik.  Bagian  fitol  dan  sebagian  dari  cincin porfirin terbenam di dalam dwilapis lipid (dwilapis membran) dengan sisa cincin porfirin mencuat ke
Jurnal Ilmu Kelautan dan Perikanan Papua E-ISSN: 2685-1865
Vol. 1, No. 2, Hal. 76-83 DOI: 10.31957/acr.v1i2.932 Desember 2018 http://ejournal.uncen.ac.id/index.php/ACR
permukaan  membran  dwilapis  tersebut.  Klorofil merupakan  senyawa  kimia  alami  yang  memiliki struktur  dengan  inti  atom  Magnesium  (Mg), sebagaimana ditunjukkan pada Gambar 1.
Hasil  ekstrak  klorofil  dapat  mengalami degradasi,  yang  diawali  dengan  hilangnya  unsur magnesium (Mg) pada pusat molekul klorofil atau kehilangan  bagian  ekor  (fitol).  Klorofil  yang kehilangan unsur magnesiumnya, disebut phaeophytin, sedangkan  yang  kehilangan  ekornya disebut chlorophyllide. Selanjutnya jika phaeophytin kehilangan ekor fitol atau chlorophyllide kehilangan magnesiumnya keduanya  disebut  phaeophorbide.  Rangkaian proses  degradasi  tersebut  digambarkan  pada bagan di atas (Gambar 2).
Gambar  1.  Struktur  senyawa  kimia  klorofil  dengan  inti atom Magnesium (Mg)

## Gambar  2.  Bagan  proses  degradasi  klorofil  menjadi turunannya
Pigmen memiliki sifat fisika kimia yang tidak stabil terhadap pengaruh lingkungan yang ekstrim, seperti  suhu,  oksigen,  pH,  cahaya,  pelarut,  asam askorbat,  ion  logam,  dan  keberadaan  sulfur dioksida  (Scotter  et  al.,  1994;  Scotter  et  al.,  1998; Montenegro  et  al.,  2004;  Bittencourt  et  al.,  2005; Silva et al., 2005; Laleh et al., 2006 dalam Suparmi et al., 2008; Gross, 1991).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui stabilitas  klorofil  Lamun  pada  berbagai  pH  dan cahaya. Stabilitas klorofil Lamun setelah perlakuan dengan  waktu  tertentu  diamati  berdasarkan  pola spektrum  absorbansi  yang  ditampilkan  pada spektrofotometer  berkas  rangkap  Varian  Cary  50, pada panjang gelombang 350 – 750 nm. Perubahan warna  pigmen  sebelum  dan  setelah  uji  pH  serta iradiasi  diamati  melalui  visualisasi  warna menggunakan kamera digital Nikon Coolpix 7600. Selain  itu,  penelitian  ini  juga  bertujuan  untuk
mengetahui  pengaruh  pH  dan  cahaya  terhadap stabilitas  klorofil  pada  ekstrak  kasar  daun  Lamun ( Thalasia  hemprichii ) pada  kedalaman  berbeda  di laut Bandengan, Jepara.

## BAHAN DAN METODE
Bahan
Sampel yang digunakan adalah hasil ekstraksi dari  daun  lamun  ( Thalasia  hemprichii )  yang diperoleh  dari  Laut  Bandengan,  Jepara.  Bahan kimia  yang  digunakan  adalah  metanol p.a.,  aseton p.a., petroleum eter, n-heksana, dietil eter, Na 2 SO 4 ,
NaOH,  HCl,  akuades,  gas  N 2 ,  kertas  saring,  NaCL, CaCO 3 , larutan buffer pH 4, 7, dan 10, serta silika gel 60.  Sedangkan  peralatan  yang  digunakan  ialah Klorofilmeter  Minolta  SPAD-502,  peralatan  gelas standar, magnetik stirer, elektrik stirer, pH meter, mortar,  timbangan  analitik,  lampu  warna  merah dan  polikromatik  merk  Philips  80  Watt,  kamera digital  Nikon  Coolpix  7600,  dan  spektrofotometer berkas rangkap UV-Vis Varian-Cary 50.

## Metode
Analisa kandungan klorofil Lamun secara in vivo Pengukuran  dilakukan  dengan  klorofilmeter Minolta  SPAD-502.  Setiap  sampel  daun  diukur  di tiga  titik,  yaitu  pada  bagian  pangkal,  tengah  dan ujung  daun  (Rahayu  et  al.,  2006).  Data  yang diperoleh dianalisa secara deskriptif dengan 10 kali ulangan  (Heriyanto  dan  Limantara,  2006;  Rahayu et al., 2006).
Ekstraksi pigmen Daun Lamun yang segar dipotong berukuran kecil kemudian ditimbang menggunakan timbangan  analitik  sebanyak  10  gr.  Sampel dihaluskan  menggunakan  mortar,  kemudian ditambahkan  CaCO 3 sebagai  agen  penetral  dan sodium-askorbat  sebagai  antioksidan.  Diekstraksi dengan menggunakan pelarut methanol:aseton 3:7.
Ekstrak disaring dengan kertas saring, residu diekstraksi ulang dengan pelarut yang sama sampai semua  pigmen  terangkat.  Selanjutnya  hasil ekstraksi  ditambahkan  Na 2 SO 4 anhidrat  untuk mengikat H 2 O kemudian disaring. Ekstrak  pigmen  dipartisi  menggunakan corong  pisah.  Apabila  belum  terjadi  pemisahan antara  pigmen  dan  pelarut,  maka  ditambahkan dietil  eter  atau  air.  Setelah  didapatkan  larutan pigmen, selanjutnya dipekatkan menggunakan gas nitrogen (N 2 ).

## Preparasi larutan uji pH
Untuk  mengetahui  pengaruh  pH  terhadap stabilitas pigmen klorofil daun Lamun, disediakan stok  pH  larutan  yang  diperoleh  dengan pencampuran  antara  aseton  p.a,  NaOH,  dan  HCL. Sambil  diaduk-aduk  campuran  larutan  tersebut, ditambahkan NaOH (bila ingin pH basa)  atau HCL
(bila  ingin  pH  asam)  dan  dikontrol  dengan  pH meter  hingga  mencapai  konsentrasi  pH  yang diinginkan, yaitu pH 1, 5, 7, 9, 11, dan 13. Sedangkan larutan uji diperoleh dengan pencampuran pigmen klorofil pekat dari ekstrak kasar daun Lamun yang diencerkan  menggunakan  aseton  p.a  sebanyak  10 ml.  Hasil  pengenceran  digunakan  untuk membuat stok larutan uji dengan pencampuran antara aseton p.a 50 ml dan 2 ml larutan klorofil.
Uji stabilitas pigmen klorofil ekstrak kasar daun lamun
Dalam  penelitian  ini  dilakukan  uji  stabilitas klorofil  daun  Lamun  dengan  dua  perlakuan, yaitu uji pH dan iradiasi. Untuk pengujian pH digunakan pH larutan untuk mengetahui pengaruh konsentrasi pH terhadap stabilitas pigmen klorofil daun Lamun. Sedangkan iradiasi dilakukan dengan cara  menyinari  pigmen  klorofil  daun  lamun menggunakan  sinar  merah  dan  polikromatik selama waktu tertentu.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Analisa Kandungan Klorofil
Berdasarkan  analisa  in  vivo  menggunakan Klorofilmeter  Minolta  SPAD-502,  diketahui kandungan  klorofil  daun  Lamun  ( Thalasia hemprichii )  adalah  17,45  spad/cm 2 luas  daun lamun. Nilai  kandungan  klorofil  pada  daun lamun ini  jauh  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan kandungan  klorofil  pada  daun  katuk,  yaitu  8,776 spad/mm 2 luas  daun  katuk  (Rahayu  et  al.,  2006).
Analisa ini dilakukan untuk mengetahui kandungan klorofil pada daun Lamun untuk tujuan pengujian stabilitas  klorofilnya  melalui  uji  pH  dan  iradiasi. Pengukuran  kandungan  klorofil  secara  in  vivo menggunakan  Klorofilmeter  Minolta  SPAD-502 disajikan pada Tabel 1.
Luas  permukaan  daun  Lamun  berbeda-beda menurut  kedalaman,  yaitu  pada  kedalaman  1  m luas  permukaan  daun  Lamun  sebesar  9,02  cm 2 , kedalaman 2 m = 11,22 cm 2 dan kedalaman 3 m = 14,81 cm 2 . Dalam  perspektif  klorofil,  penambahan  luas daun  Lamun  dipengaruhi  oleh  jumlah  antena klorofilnya,  namun  faktor  lingkungan  lainnya  pun ikut  mempengaruhi,  seperti  substrat  dan kecerahan  air.  Tumbuhan  hijau,  algae,  dan ganggang  hijau  yang  hidup  di  air  laut  apabila letaknya  makin  jauh  dari  sumber  cahaya,  ada kecenderungan  terjadi  rangsangan  fisiologis  pada struktur  anatominya,  yaitu  secara  khusus  pada struktur antena-antena klorofil yang kemungkinan mengalami penambahan.
Perubahan  struktur  fisiologis  seperti  ini merupakan  fenomena  adaptasi  makhluk  hidup terhadap  lingkungan,  dan  secara  khusus penambahan  antena  antena  klorofil  pada  daun lamun yang berfungsi menyerap cahaya  sebanyak mungkin untuk keberlangsungan proses fotosintesis. Tabel 1 menunjukkan hasil pengukuran kandungan klorofil pada daun Lamun ( Thalasia  hemprichii )  dengan  menggunakan Klorofilmeter Minolta SPAD-502.
Tabel  1.    Hasil  pengukuran  kandungan  klorofil  pada  daun  Lamun  ( Thalasia  hemprichii )  dengan  menggunakan Klorofilmeter Minolta SPAD-502 Sampel daun Lamun Bagian daun yang diukur Pengulangan (3 kali) Rata-rata Pengulangan Keterangan 1 Ujung daun Tengah daun Pangkal daun 19,9 19,8 19,9 24,7 24,8 24,8 13,7 13,5 13,5 19,8 24,8 13,6 Kandungan  klorofil pada ujung daun = 15,42 spad/cm 2 luas daun. Kandungan  klorofil pada tengah daun = 19,1 spad/cm 2 luas daun. Kandungan  klorofil pada pangkal daun = 17,82 spad/cm 2 luas daun.
Total = 17,45 spad/cm 2 luas daun.
2 Ujung daun Tengah daun Pangkal daun 13,2 13,2 13,4 15,4 15,6 15,6 18,5 18,7 18,9 13,3 15,5 18,7 3 Ujung daun Tengah daun Pangkal daun 13,2 13,3 13,3 18,2 18,2 18,2 21,8 21,8 21,9 13,2 18,2 21,8 4 Ujung daun Tengah daun Pangkal daun 15,4 15,4 15,4 19,2 19,2 19,3 21,7 21,8 21,7 15,4 19,2 21,7 5 Ujung daun Tengah daun Pangkal daun 15,4 15,4 15,4 17,7 17,8 17,8 13,3 13,2 13,4 15,4 17,8 13,3
Stabilitas Pigmen Klorofil Lamun Pada Uji pH Stabilitas  klorofil  ekstrak  kasar  daun  Lamun dipengaruhi oleh pH. Pola spektra absorbsi klorofil pada kisaran pH 13, 11, 9, dan 5 tampak  berbeda dibandingkan dengan pola spektra klorofil pada pH 7  dan  1,  sebagaimana  ditunjukkan  Gambar  3. Berdasarkan  Gambar  3,  diketahui  pada  kondisi
yang  semakin  asam  (pH  semakin  kecil)  serapan maksimum pigmen mengalami pergeseran ke arah panjang gelombang yang lebih pendek atau dikenal dengan  istilah  hipsokromik  pada  daerah  serapan Qx dan  Qy.  Kondisi  hipsokromik ini  ditemui  pada masing-masing pH sebagaimana ditampilkan pada Tabel  2.  Kondisi  ini  mengindikasikan  bahwa  pH
menyebabkan  degradasi  pigmen.  Limantara  et  al. (2006);  Suparmi  et  al.  (2007) melaporkan  bahwa pergeseran hipsokromik dan hipokromik menunjukkan terjadinya proses degradasi pigmen.
Tinggi serapan pada daerah Qx dan Qy untuk setiap  pH  mengalami  degradasi  pada  puncak- puncak  serapan  maksimumnya  ke  arah  panjang gelombang yang lebih pendek dan ke arah panjang gelombang  yang  lebih  panjang.  Hal  ini  pengaruhi oleh tingkat keasaman yang bersifat basa dan asam. Konsentrasi  pH  yang  bersifat  basa  memiliki serapan  makin  tinggi,  yaitu  pH  9  (Qx  =  0,732798 dan Qy = 0,362952), pH 11 (Qx = 0,879036 dan Qy = 0,433446), dan pH 13 (Qx = 0,948732 dan Qy = 0,459035) sedangkan pada pH yang bersifat asam memiliki serapan yang makin kecil, yaitu pH 5 (Qx =  0,787641  dan  Qy  =  0,391379)  dan  pH  1  (Qx  = 0,736968  dan  Qy  =  0,264192).  Pada  pH  7  yang sifatnya netral mempunyai serapan lebih tinggi (Qx = 0,921267 dan Qy = 0,475195) dari pH 9 dan 11 yang bersifat basa. Berdasarkan data pada Tabel 2, semakin  ke  arah  pH  yang  bersifat  basa  (9-13), makin  tinggi  serapan  pigmennya,  sedangkan semakin ke  arah pH yang bersifat  asam (5 dan 1) makin kecil serapan maksimumnya.
Pengamatan  visual  pada  warna  klorofil  yang diberikan larutan pH yang bervariasi menunjukkan
degradasi  warna  menurut  tingkat  konsentrasi keasaman. Warna klorofil yang dipengaruhi larutan pH  9  –  13  memperlihatkan  warna  pigmen  hijau pucat,  sedangkan  warna  klorofil  yang  diberikan larutan pH 5 dan 1 memperlihatkan warna bening kehijauan.  Warna  klorofil  pada  pH  7  relatif  lebih stabil dengan warna hijau yang masih dominan. Perubahan  warna  yang  terjadi  mengindikasikan bahwa  pigmen  klorofil  mengalami  degradasi menjadi  turunannya  (Dutton  et  al.,  1943;  Rahayu dan Limantara, 2005; Nurcahyanti dan Limantara, 2007).  pH  dengan  konsentrasi  tinggi  dapat mengakibatkan degradasi pigmen klorofil menjadi turunannya,  sehingga  pigmen  hijau  mengalami pumucatan  warna  yang  dikenal  dengan  blanching (Koca et al., 2003).

## Pengaruh Cahaya (Fotostabilitas) Fotostabilitas klorofil Lamun terhadap sinar merah
Pola  spekra  absorbsi  klorofil  ekstrak  kasar pada  daun  Lamun  cenderung  menurun  seiring bertambahnya  waktu  iradiasi,  sebagaimana ditunjukkan  pada  Gambar  4.  Penurunan  puncak absorbansi  pada  larutan  klorofil  ini  menunjukkan bahwa klorofil yang terlarut dalam pelarut aseton sudah  mengalami  degradasi  akibat  pengaruh iradiasi sinar merah.
Gambar 3. Pola spektra norbixin dalam aseton dengan berbagai pH: pH 13(merah), pH 11 (hijau), pH 9 (biru), pH 7 (orange), pH 5 (olive) dan pH 1 (wine)
Tabel 2.  Panjang gelombang serapan maksimum klorofil pada berbagai pH larutan di daerah serapan Qx dan Qy
pH Larutan (%) Serapan Pada Daerah Q x Serapan Pada Daerah Q y Pjg.gel maks (nm) Absorbansi (a.u) Pjg.gel maks (nm) Absorbansi (a.u) Marker 430,9882 1,224145 661,9327 0,604699 13 430,9882 0,948732 662,9518 0,459035 11 432,0643 0,879036 662,9518 0,433446 9 432,0643 0,732798 663,9707 0,362952 7 430,9882 0,921267 662,9518 0,475195 5 432,0643 0,787641 662,9518 0,391379 1 410,9673 0,736968 664,9893 0,264192
Hasil  regresi  linear  menunjukkan  hubungan yang  sangat  kuat  antara  waktu  iradiasi  dengan rasio  A-A0/A0,  dimana  penurunan  rasio  A-A0/A0 semakin  besar  seiring  bertambahnya  waktu iradiasi.  Iradiasi  sinar  merah  selama  8  jam menyebabkan  degradasi  klorofil  Lamun  dengan laju  degradasi  tiap  jam  pada  daerah  serapan  Qx sebesar  26,77%  dan  pada  daerah  serapan  Qy sebesar 29,05%. Klorofil memiliki sifat tidak stabil terhadap  cahaya  sehingga  akan  mengalami degradasi bila disinari. Indikasinya adalah pigmen akan  mengalami  penurunan  absorbansi,  sehingga peluang  terjadinya  produk  degradasi  yang  lebih kecil  dari  molekul  awalnya  bisa  terbentuk (Fennema,  1994;  Nurcahyanti  dan  Limantara, 2007).
Berdasarkan  Gambar  4,  iradiasi  sinar  merah menyebabkan  terjadi  pergeseran  pita  ke  panjang gelombang  yang  lebih  pendek  (hipsokromik) seiring  penambahan  waktu  iradiasi.  Limantara  et al.  (2006)  menyatakan  bahwa  mekanisme terjadinya pergeseran panjang gelombang hipsokromik  dan  batokromik  (pergeseran  pita  ke panjang gelombang yang lebih panjang)
mengindikasikan  bahwa  ada  interaksi  oksigen dengan logam pusatnya. Sajilata dan Singhal (2006) melaporkan  bahwa,  iradiasi  cahaya  dengan intensitas  tinggi  dalam  waktu  yang  lama  akan menyebabkan  degradasi  pigmen  yang  ditandai dengan  perubahan  warna  pigmen  yang  berbeda dari  warna  sebelum  diiradiasi.  Energi  foton  sinar merah  yang  diabsorbsi  menyebabkan  klorofil Lamun  terdegradasi  membentuk  molekul  baru dengan  struktur  kimia  yang  lebih  sederhana dibandingkan  molekul  klorofil  Lamun  pada awalnya,  dan  menyebabkan  perubahan  struktur serta sifat-sifat kimia klorofil.
Penurunan  puncak-puncak  serapan  pada daerah  Qx  dan  Qy  selama  iradiasi  sinar  merah ditampilkan pada Tabel 3. Dalam Tabel 3 tersebut terlihat  bahwa  proses  pergeseran  pita  ke  panjang gelombang yang lebih pendek (hipsokromik) hanya terjadi  di  daerah  serapa  Qx,  yaitu  dari  panjang gelombang maksimum 431,9448 (nm) bergeser ke panjang  gelombang  429,9468  (nm),  sedangkan pada  daerah  serapan  Qy  tidak  terjadi  pergeseran panjang gelombang.
Gambar 4.  Perubahan pola spektra absorbsi klorofil Lamun dalam pelarut aseton selama 8 jam iradiasi sinar merah (pengukuran setiap 1 jam)
Tabel  3.  Panjang  gelombang  serapan  maksimum  klorofil  pada  daerah  serapan  Qx  dan  Qy  selama  8  jam  iradiasi menggunakan sinar merah Waktu iradiasi (jam) Serapan Pada Daerah Q x Serapan Pada Daerah Q y Pjg.gel maks (nm) Absorbansi (a.u) Pjg.gel maks (nm) Absorbansi (a.u) 0 431,9448 1,031267 662,0427 0,532086 1 429,9468 0,955134 662,0427 0,505763 2 429,9468 0,881285 662,0427 0,466268 3 429,9468 0,814312 662,0427 0,432569 4 429,9468 0,750499 662,0427 0,399792 5 429,9468 0,686251 662,0427 0,367039 6 429,9468 0,63196 662,0427 0,338749 7 429,9468 0,59729 662,0427 0,32049 8 429,9468 0,537035 662,0427 0,286731
Fotostabilitas  klorofil  daun  Lamun  terhadap sinar polikromatik
Iradiasi  pigmen  klorofil  dengan  cahaya polikromatik menyebabkan degradasi klorofil yang lebih  cepat  dibandingkan  dengan  iradiasi menggunakan  sinar  merah,  seperti  terlihat  pada Gambar  5.  Laju  degradasi  pada  cahaya polikromatik  di  daerah  Qx  =  52,81%  dan  Qy  = 54,80% per jam, sedangkan pada sinar merah laju degradasi di daerah Qx = 26,77% dan Qy = 29,05%. Hasil ini menunjukkan bahwa klorofil Lamun lebih stabil pada sinar merah.
Wiles  dan  Carlsson  (1987)  melaporkan bahwa, panjang pendeknya gelombang cahaya yang
diterima oleh suatu molekul merupakan salah satu faktor yang mempengaruhi kecepatan fotodegradasi.  Fotodegradasi  ini  terjadi  sebagai akibat perubahan kimiawi dari suatu senyawa atau molekul menjadi senyawa atau molekul yang lebih kecil  atau  sederhana,  sebagai  efek  absorbsi  foton, baik dari  cahaya ultra violet, cahaya tampak,  atau pun sinar infra merah. Perubahan tersebut meliputi komposisi  molekul,  perubahan  warna,  pemutusan ikatan, dan pengaturan kembali atom-atom dalam suatu  molekul  (Wiles  dan  Carlsson,  1987; Lagowski, 1997).
Gambar 5.    Perubahan pola spektra absorbsi klorofil Lamun dalam pelarut aseton selama 8 dan 7 jam (pengukuran setiap 1 jam): (a) iradiasi sinar merah, (b) iradiasi sinar polikromatik
Degradasi  pigmen  yang  disebabkan  oleh cahaya  disebut  dengan  fotodegradasi.  Lampu polikromatik  yang  sering  digunakan  sebagai sumber  cahaya  di  rumah  ternyata  memberikan pengaruh  terhadap  degradasi  pigmen  klorofil, sehingga  yang  semula  berwarna  hijau  menjadi warna  pucat  atau  bening,  yang  dikenal  dengan fotoblanching pada sampel larutan klorofil Lamun.
Pengamatan  visual  warna  klorofil  pada ekstrak  kasar  daun  Lamun  selama  iradiasi dilakukan  (Gambar  6  dan  7)  memperlihatkan warna hijau yang berangsur-angsur hilang per satu jam  pengamatan,  sehingga  pada  jam  ke  7  larutan klorofil  tidak  terdapat  warna  hijau  lagi,  artinya pigmen  tersebut  telah  terdegradasi  habis  karena pengaruh sinar polikromatik, yang ditandai dengan penurunan serapan ke arah linier (Gambar 8). Proses  degradasi  pigmen  klorofil  Lamun  yang terjadi  pada  iradiasi  sinar  merah  cenderung  lebih stabil  dengan  penurunan  kinetika  reaksi  yang relatif  lambat  dibandingkan  dengan  iradiasi menggunakan  sinar  polikromatik  yang  kinetika reaksi degradasinya cenderung lebih cepat, seperti ditunjukkan pada Gambar 8.
Gambar  6.  Foto  warna  larutan  pigmen  klorofil  Lamun sebelum  iradiasi  sinar  merah  (kiri)  dan setelah iradiasi sinar merah (kanan) selama 8 jam
Gambar  7.  Foto  warna  larutan  pigmen  klorofil  Lamun sebelum iradiasi sinar polikromatik (kiri) dan setelah  iradiasi  sinar  polikromatik  (kanan) selama 7 jam
Gambar 8. Grafik kinetika degradasi klorofil daun Lamun dalam  pelarut  aseton  selama  7  dan  8  jam iradiasi  (pengukuran  setiap  1  jam):  ( ■ ) iradiasi dengan sinar merah, dan ( ● ) iradiasi dengan sinar polikromatik
Penurunan  puncak-puncak  serapan  klorofil pada daerah Qx dan Qy selama 7 jam iradiasi sinar polikromatik ditampilkan pada Tabel 4. Pada Tabel 4,  terlihat  tidak  ada  pergeseran  pita  absorbsi  ke panjang gelombang yang lebih pendek (hipsokromik)  atau  pun  ke  panjang  gelombang yang  lebih  panjang  (batokromik),  hanya  terjadi degradasi  atau  penurunan  puncak  serapan  pada waktu  t  =  0  jam  sampai  t  =  7  jam.  Panjang gelombang  maksimum  di  daerah  serapa  Qx  = 431,9448 (nm) dan panjang gelombang maksimum di  daerah  serapan  Qy  =  662,0427  (nm).  Artinya, proses  degradasi  pigmen  yang  terjadi  tidak memberikan  pengaruh  terhadap  pergeseran panjang  gelombang  maksimum  selama  iradiasi sinar polikromatik.
Tabel  4.  Panjang  gelombang  serapan  maksimum  klorofil  pada  daerah  serapan  Qx  dan  Qy  selama  7  jam  iradiasi menggunakan sinar polikromatik
Waktu iradiasi (jam) Serapan Pada Daerah Q x Serapan Pada Daerah Q y Pjg.gel maks (nm) Absorbansi (a.u) Pjg.gel maks (nm) Absorbansi (a.u) 0 431,9448 1,031267 662,0427 0,532086 1 431,9448 0,86099 662,0427 0,468741 2 431,9448 0,660279 662,0427 0,36602 3 431,9448 0,51625 662,0427 0,287289 4 431,9448 0,401391 662,0427 0,219206 5 431,9448 0,324202 662,0427 0,170774 6 431,9448 0,266651 662,0427 0,133457 7 431,9448 0,233774 662,0427 0,112227 KESIMPULAN
Hasil  uji  stabilitas  pigmen  menunjukkan bahwa  klorofil lamun Thalasia  hemprichii bersifat lebih  stabil  pada  pH  7  (netral),  sedangkan  relatif mengalami  degradasi  pada  pH  1  dan  5  (bersifat asam) serta pada pH 9, 11, dan 13 (bersifat basa). Pengamatan  visual  pada  warna  menunjukkan kestabilan  pigmen  pada  konsentrasi  pH  7 dibandingkan  dengan  pH  asam  dan  basa  yang mengakibatkan pemucatan blanching pada pigmen klorofil Lamun.
Klorofil Lamun relatif lebih stabil pada iradiasi sinar  merah  dari  pada  sinar  polikromatik. Pengaruh sinar polikromatik selama 7 jam iradiasi menyebabkan  degradasi  pigmen  di  daerah  Qx sebesar  26,77%  dan  pada  daerah  Qy  sebesar 29,05%  per  jam.  Iradiasi  cahaya  polikromatik selama 8 jam menyebabkan degradasi per jam pada daerah  Qx  sebesar  52,81%  dan  pada  daerah  Qy sebesar  54,80%.  Sinar  polikromatik  memberikan pengaruh  fotodegradasi  lebih  cepat  pada  pigmen klorofil Lamun dibandingkan dengan sinar merah.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima kasih kepada Departemen Pendidikan Nasional yang telah memberikan beasiswa melalui Program  Beasiswa  Unggulan  “Persemaian  Insan Indonesia  Cerdas  2007”  kepada  penulis  melalui
Program Pascasarjana Magister Biologi, Universitas Kristen  Satya  Wacana,  Salatiga.  Terima  kasih penulis  sampaikan  juga  kepada  Dinas  Pendidikan dan  Pengajaran  Provinsi  Papua  yang  telah memberikan bantuan biaya studi tahun 2008.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim, 2005. Menguak Misteri Lamun. http://duamata.blogspot.com/2005/12/men guak-misteri-lamun.html. Akses 14 Juli 2008. Anonim, 2006. Lamun Berpotensi Sebagai Makanan
Kesehatan. http://images.google.co.id/imgres?imgurl=ht tp://biogen.litbang.deptan.go.id/berita_artike l/images/tabel_lamun.Png&imgrefurl=http// biogen.litbang.deptan.go.id/berita_artikel/ser bi_2006_lamun.Php&h=159&w=421&sz=5&h l=id&start=7&tbnid=EbhgYc_rRC_6vM:&tbnh =47&tbnw=125&prev=/images%3Fq%3Djen isjenis%2Blamun%2Bdi%2Bindonesia%26gb v%3D2%26hl%3Did%26sa%3DG.  Akses  14 Juli 2008.
Bittencourt,  C.,  Marcella,  P.,  Felicissimo,  Jean- Jacques Pireaux, and Houssiau. 2005. Study of Annatto  from Bixa  orellana Seeds:  An
Application  of  Time-of-flight  Secondary  Ion Mass  Spectrometry.  Article  Spectroscopy Europe, Vol. 17 No. 2 (2005).
www.spectroscopyeurope.com.  Akses  14  Juli 2008.
Dutton,  H.J.,  Bayley,  G.F.,  and  Kohake,  E.,  1943.
Dehydrated  spinach  changes  in  color  and pigments  during  processingand  storage.  Ind. Eng. Chem., 35, 1173-1177.
Fennema, O.R., 1996. Food Chemistry: 3 rd ed.  New York: Marcel Dekker, Inc.
Gross, J., 1991. Pigment in Vegetables; Chlorophyll and  Carotenoids.    New  York:  Van  Nostrand Reinhold.
Heriyanto,  dan  Limantara,  L.  2006.  Kandungan Klorofil in  Vivo Daun  Cincau  Hitam,  Cincau Perdu,  Cincau  Hijau,  dan  Cincau  Minyak. Fakultas  Biologi  Universitas  Kristen  Satya Wacana. Salatiga.
Kimbal, J.W. 1992. Biologi Jilid I. Jakarta: Erlangga. Koca,  N.,  Karadeniz,  F.,  and  Burdurlu,  H.S.  2003.
Effect  of  pH  on  Chlorophyll  Degradation  and Colour Loss in Blanched Green Peas. Faculty of Engineering,  Food  Engineering  Departement, Ankara University. Turkey.
Lagowski,  J.J.  1997.  Macmillan  Encyclopedia  of Chemistry.  New  York:  Simon  &  Schuster  and Prentice Hall International.
Laleh,  G.H.,  Frydoonfar,  H.,  Heidary,  R.,  Jemeei,  R., and  Zare,  S.  2006.  The  effeect  of  light, temperature,  pH,  and  spesies  on  stability  of Anthocyanin  pigments  in  four  berberis species. Pakistan Journal of Nutrition, 5(1), 90- 92.
Limantara,  L.,  Koehler,  P.,  Wilhelm,  B.,  Porra,  R.J. and  Scheer,  H.  2006.  Photostability  of bacteriochlorophyll-a and derivatives: potential  sensitizer  for  photodinamic  tumor theraphy.  Photochemistry  and  Photobiology, 82, 770-780.
Montenegro, M.A., A. De O. Rios, A.Z. Mercadante, M. Nazareno, A., and Borsarelli, C.D. 2004. Model studies  on  the  photosensitized  isomerization of  bixin.  Journal  of  Agricultural  and  Food Chemistry, 52, 367-373.
Nurcahyanti A.D.R. Limantara, L. 2007. Fotodegradasi  Ekstrak  Kasar,  Klorofil  a,  dan Fucoxanthin Padina  australis dan Dictyota crenulata .    Prosiding  Seminar  Nasional Pigmen 2007 ‘Back to Nature dengan Pigmen Alami’.  Universitas  Kristen  Satya  Wacana. Salatiga.
Purwati,  A.  2006.  Lamun  Berpotensi  Sebagai Sumber Makanan Kesehatan. http://www.indobiogen.or.id/berita_artikel/ serbi_2006_lamun.php.  Akses 14 Juli 2008.
Rahayu, P., dan Limantara, L. 2005. Studi lapangan kandungan  klorofil  in  vivo  beberapa  spesies tumbuhan  hijau  di  Salatiga  dan  sekitarnya. Seminar  Nasional  MIPA  2005,  Universitas Indonesia.
Rahayu,  P.,  Notosoedarmo,  S.,  dan  Limatara,  L. 2006.  Studi  Lapangan  Kandungan  Klorofil in Vivo Daun Katuk dan Katuk Badak Di Salatiga dan Tawangmangu. Fakultas Biologi Universitas Kristen Satya Wacana. Salatiga. Sajilata,  dan  Singhal.  2006.  Isolation  and stabilisation  of  natural  pigments  for  food application.  Stewart  Postharvest  Review,  5, 11.
Scotter, M.J., Thorpe, S.A., Reynolds, S.L., Wilson, L., and  Strutt,  A.  1994.  Characterizations  of  the principal  colouring  components  of  annatto using high performance
liquid chromatography with photodiode-array detection.  Food  Additives  and  Contaminants, 11(3), 301-315.
Scotter, M.J., Wilson, L.A., Appleton, G.P., and Castle, L.  1998.  Analysis  of  annatto  ( Bixa  orellana ) food  coloring  formulations.  1.  determination of colouring components and colored thermal degradation  products  by  high  performance liquid chromatography with photodiode-array detection.  Journal  of  Agricultural  and  Food Chemistry, (46), 1031-1038.
Silva,  G.S.,  Souza,  A.G.,  Botelho,  J.R.,  Silva,  M.C.D., Silva, T.M.S. 2007. Kinetics study of norbixin’s first  stage  thermal  decomposition,  using dynamic method. Journal of Thermal Analysis and Calorimetry, 87(3), 871–874.
Suparmi,  Limantara,  L.,  dan  Prasetyo,  B.  2008. Karakterisasi  stabilitas  pigmen  norbixin  dari biji  kesumba  ( Bixa  orellana L.).  Prosiding Seminar  Nasional  2008  ‘Sains  dan  Teknologi Pigmen’,  Universitas  Kristen  Satya  Wacana, Salatiga.
Suparmi,  Prasetyo,  B.,  dan  Limantara,  L.  2007. Fotodegradasi Pigmen Bixin Dari Biji Kesumba ( Bixa  orellana L.):  Potensinya  Sebagai Pewarna  Alami  Makanan.  Prosiding  Seminar Nasional Pigmen 2007 ‘Back to Nature dengan Pigmen  Alami’,  UKSW  Salatiga,  B  (05):195- 204.
Tomascik, T., Mah, A.J., Nontji, A., and Moosa,  M.K. 1997.  The  Ecology  of  Indonesian  Seas:  Part Two. Periplus edition.
Wiles,  D.M.,  and  Carlsson, D.J.  1987.  Mc  Graw-Hill Encyclopedia  of  Science  &  Technology.  New York: Mc Graw-Hill Book Company 13(6): 337- 379.