## TINGKAT KONTAMINASI Vibrio cholerae RESISTEN MERKURI DIISOLASI DARI IKAN KUWE
( Caranx sexfasciatus )

## Inri ND Wagey, Frans G Ijong dan Joyce CV Palenewen
Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Sam Ratulangi, Manado, Sulawesi Utara.

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menganalisa  tingkat  kontaminasi  dan  resistensi  bakteri Vibrio cholerae terhadap  merkuri  yang  diisolasi  dari  ikan  Kuwe  ( Caranx  sexfasciatus )  yang  diambil  di  Teluk Manado.  Metode  penelitian  yang  digunakan  adalah  metode  eksploratif,  yaitu  suatu  penelitian  yang dilakukan  untuk  mengetahui  atau  mengungkapkan  keterangan  suatu  fakta  secara  terperinci  dan sistematis.  Hasil  penelitian  diperoleh  nilai  presumptif V.  cholerae pada  insang  sebesar  2,4x10 5 (MPN/100 g), pada daging berkisar antara 1,8x10 4 –2,4x10 5 (MPN/100 g), sedangkan pada perut berkisar antara  3,3x104–2,4x105  (MPN/100  g).  Total  Vibrio  pada  insang  berkisar  antara  2,4x10 4 –6,2x10 4
(MPN/100  g),  pada  daging  ikan  berkisar  antara  1,2x10 4 –1,3x10 4 (MPN/100  g),  sedangkan  pada  perut berkisar  antara  1,2x10 4 –2,4x10 4 (MPN/100  g).  Hasil  uji  resistensi V.  cholerae terhadap  merkuri menunjukkan bahwa bakteri dapat tumbuh pada larutan  HgCl 2 konsentrasi 0,07  %. Bakteri dengan  kode galur  V7  adalah  bakteri  paling  resisten  terhadap  merkuri  yang  ditunjukkan  dengan  nilai  absorban tertinggi  pada  panjang  gelombang  660  nm,  disamping  itu  galur  ini  mampu  hidup  sampai  batas  toleran ketahanan panas 60ºC.
Kata kunci: Vibrio cholerae, Merkuri, Ikan Kuwe.

## PENDAHULUAN
Ikan Kuwe termasuk salah satu  diantara spesies  ikan  yang  memiliki  harga  pasar  yang cenderung stabil. Ikan Kuwe ( Caranx sexfasciatus )  dalam  dialek  Manado  dikenal dengan  nama Bobara ,  dan  termasuk  salah  satu jenis  ikan  bernilai  tinggi,  biasanya  dipasarkan dalam  bentuk  segar.  Ketersediaan  ikan  tersebut di  pasar  masih  mengandalkan  pasokan  hasil tangkapan nelayan dari Teluk Manado.
Perairan  Teluk  Manado  sejak  dahulu digunakan  sebagai  daerah  penangkapan  ikan oleh  nelayan  setempat.  Kini  terdapat  kawasan bisnis  di  sepanjang  pantai  Teluk  Manado  yang kita  ketahui  sekarang  daerah Business  On Boulevard (BOB).  Menurut  Dien  (1999)  bahwa aktivitas  domestik  di  kawasan  tersebut  dapat memicu atau merangsang terjadinya pertumbuhan bakteri-bakteri patogen yang tidak diinginkan  dan  mencemarkan  hasil  perikanan, sehingga  akan  memberikan  dampak  negatif terhadap kemajuan pariwisata daerah ini.
Salah satu bakteri patogen yang diketahui  telah  mencemari  daerah  Teluk Manado  berdasarkan  hasil  uji  di  laboratorium yang  berkenaan adalah  bakteri Vibrio  cholerae . Bakteri  ini  memiliki  habitat  alami  di  perairan asin,  akibatnya  bakteri  ini  paling  sering dikaitkan dengan makanan laut sebagai
kontaminan  alami  (Food  and  Environmental Hygiene  Dept,  2005 dalam Candrawati,  2011). Beberapa  galur  yang  penting  yaitu V.  cholerae dan V.  parahaemolyticus karena  menyebabkan penyakit  infeksi  pada  manusia.  Bakteri  ini sangat berbahaya apabila ditemukan mengkontaminasi  ikan  atau  produk  perikanan lainnya  karena  dapat  menyebabkan  penyakit kolera  yang  berakibat  fatal  jika  tidak  ditangani dengan  antibiotik  yang  benar.  Keberadaan bakteri  pathogen  Vibrio  di  perairan  laut berhubungan  dengan  buangan  limbah  industri dan  rumah  tangga  seperti  tinja  manusia  atau sisa bahan makanan lainnya, dimana bakteri ini secara  langsung  akan  tumbuh  dan  berkembang bila kondisi perairan memungkinkan (Hashimoto, 1999 dalam Hikmah, 2011).
Berdasarkan  hal-hal  tersebut  di  atas maka  peneliti  terdorong  untuk  melakukan penelitian  tentang  tingkat  kontaminasi V. cholerae pada  ikan  Kuwe  dan  resistensinya terhadap merkuri yang dapat digunakan sebagai acuan untuk membandingkan tingkat resistensinya terhadap antibiotik. Hasil penelitian  ini  diharapkan  dapat  memberikan informasi  ilmiah  tentang  tingkat  kontaminasi serta  resistensi  bakteri V.  cholerae yang diisolasi  dari  ikan  Kuwe,  sehingga  dapat diambil  langkah  lebih  lanjut  dalam  rangka
mengatasi  pencemaran  laut  akibat  bakteri tersebut  serta  peningkatan  mutu  mikrobiologis ikan Kuwe yang akan dipasarkan.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Bahan dan Alat Penelitian
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah sampel ikan Kuwe, sampel air  laut, Alkaline  Peptone  Water (APW), Thiosulphate  Citrate  Bile  Salt (TCBS)  Agar, akuades,  alkohol  70%  dan  95%,  ekstrak  ragi, pepton,  tepung  agar-agar,  Kristal  violet,  lugol, safranin, minyak imersi, Motility Test Medium, fenol  merah,  kaldu  karbohidrat  (glukosa, fruktosa,  laktosa  dan  sukrosa),  bromcresol purple,  Simmon’s  Citrate  Agar,  medium  MR- VP, reagen tetrametyl-P-phemlyenediamine dihydrochloride,  Kovac’s  Reagan,  methyl  red larutan  H 2 O 2 3%,  Nutrien  Broth  (NB),  Nutrien Agar (NA) dan HgCl 2 .
Alat-alat  yang  digunakan  adalah cool box ,  plastik,  talenan,  pisau,  spritus,  Bunsen, timbangan  analitik,  gelas  ukur,  labu  ukur, Erlenmeyer,  baker  glass,  spatula,  stirer  dan magnetik  stirer,  pH  meter,  autoclave,  tabung Hach,  tabung  Durham,  pipet  tetes,  pipet, preparat,  kompor  listrik,  blender,  jarum  Ose, pinset,  mikroskop,  Laminar  Air  Flow  (LAF), oven, inkubator, alumunium foil, dan spektrofotometer.

## Tata Laksana Penelitian
Pengambilan  sampel  pada  nelayan  di Teluk  Manado  dilakukan  sebanyak  3  kali dengan jarak waktu antara pengambilan pertama  dan  pengambilan  berikutnya  yaitu  2 minggu.  Sampel  yang  digunakan  setiap  kali pengambilan  sebanyak  4  ekor  sampel  dengan berat  berkisar  120–130  g/ekor  dan  panjang berkisar  antara  15–20  cm.  Selanjutnya  sampel ikan  dimasukkan  dalam  kantong  plastik  dan cool  box untuk  dibawa  ke  laboratorium
Mikrobiologi
Hasil
Perikanan, Fakultas
Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan  Universitas  Sam Ratulangi  untuk  dianalisa.  Jarak  tempuh  dari tempat pengambilan sampel sampai ke laboratorium membutuhkan waktu ± 15 menit.
Setelah  tiba  di  laboratorium,  sampel ikan  Kuwe  langsung  dipisahkan  menjadi  3 bagian  yaitu  bagian  insang,  perut  dan  daging dengan  menggunakan  alat-alat  yang  sudah disterilkan  terlebih  dahulu.  Kemudian  masing- masing  bagian  tersebut  dihomogenkan  dengan menggunakan  blender  kemudian  dilanjutkan
dengan  uji  yang  akan  dilakukan  agar  dapat diperoleh  gambaran  yang  lebih  nyata  terhadap kondisi sampel. Dengan demikian akan diperoleh  suatu  perbandingan  antara  bagian- bagian ikan sebagai sampel dan sampel air yang digunakan.
Bagian  insang,  daging  dan  perut  serta air  laut  kemudian  dianalisa  dengan  tahapan  uji presumptif,  uji  konfirmatif  dan  uji  biokimia (Cappuccino  &  Sherman,  1992).  Setelah dilakukan  identifikasi  (Baumann  &  Schubert, 1984),  galur  yang  terdeteksi  sebagai  bakteri V. cholerae selanjutnya diuji resistensinya terhadap  HgCl 2 dengan  konsentrasi  masing- masing 0,01, 0,05, 0,07 dan 0,08 %.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada  awal  penelitian  dilakukan  uji Presumptif dan uji  konfirmatif  yang  didapatkan hasil untuk nilai Presumptif Vibrio pada insang berkisar  2,4x10 5 (MPN/100  g),  pada  daging berkisar  antara  1,8x10 4 –2,4x10 5 (MPN/100  g), sedangkan  pada  perut  berkisar  antara  5,6x10 4 – 2.4  x  105  (MPN/100  g).  Total  Vibrio  pada insang berkisar antara 2,4x10 4 –6,2x10 4
(MPN/100  g),  pada  daging  ikan  berkisar  antara 1,2x10 4 –1,3x10 4 (MPN/100  g),  sedangkan  pada perut berkisar antara 1,2x10 4 –2,4x10 4 (MPN/100  g).  Hasil  penelitian  terhadap  sampel ikan  Kuwe  yang  ditangkap  di  perairan  Teluk Manado  menunjukkan jumlah total Vibrio  yang cukup  tinggi.  Hal  ini  dapat  berhubungan  erat dengan  tingkat  kontaminasi  di  daerah  pesisir dan pantai. Pencemaran lingkungan yang terjadi akibat dari  masih  kurang pahamnya  masyarakat terhadap  dampak  pencemaran  lingkungan.  Jika tidak  ditanggulangi  maka  akan  berakibat  pada penyakit  yang  akan  ditimbulkan  sehubungan dengan  jumlah  kontaminasi  bakteri  ini  yang tinggi.
Dari  penelitian  untuk  uji  morfologi didapatkan  hasil  pada  85  isolat  bakteri  yang diuji, 76 diantaranya menunjukkan sel berwarna merah yang berarti adalah bakteri Gram-negatif, 84  isolat  berbentuk  batang  dengan  1  isolat berbentuk  coccus  dan  kesemua  isolat  bersifat motil yang berarti semua isolat bakteri memiliki flagella.  Pada  uji  biokimia,  hasil  uji  oksidase menunjukkan  63  galur  bersifat  positif,  yang berarti  galur  uji  ini  memiliki  enzim  sitokrom oksidase yang berperan dalam respirasi aerobik. Dalam  uji  ini Vibrio sp.  akan  menunjukkan respon  positif  (Ijong,  2009).  Pada  uji  katalase semua  galur  menunjukkan  respon  positif,  yang
berarti semua galur memiliki kemampuan untuk mendegradasi H 2 O 2 yang bersifat racun menjadi molekul-molekul  non-toksik  yaitu  H 2 O  dan  O 2 dengan  memproduksi  enzim  katalase  saat melakukan  respirasi  secara  aerobik.  Dalam Cappuccino  and  Sherman  (1992)  dinyatakan bahwa reaksi tampak positif melalui pembentukan  gas  O 2 setelah  ke  dalam  media diberikan  beberapa  tetes  H 2 O 2 3%.  Hasil  uji indol  diperoleh  43  galur  positif  dan  42  galur lainnya  negatif.  Jika  hasil  positif  maka  reagen yang  diberikan  dalam  media  biakan  bakteri akan  bereaksi  dengan  indol  menghasilkan senyawa  yang  tidak  larut  dalam  air  dan berwarna  merah  pada  permukaan  medium. V. cholerae memberikan reaksi positif pada uji ini, yang  berarti  bakteri  ini  dapat  menghasilkan enzim  triptofanase  sebagai  katalis  pengurai triptofan  menjadi  gugus  indol.  Dari  hasil pengujian  dengan  menambahkan  indikator methyl red pada 85 galur uji, diperoleh 63 galur mampu  melakukan  fermentasi  campuran  (hasil positif),  sedangkan  22  galur  uji  lainnya memberikan reaksi negatif. Galur yang menunjukkan  hasil  positif  berarti  mampu mengoksidasi  glukosa  dengan  produksi  asam sebagai  produk  akhir.  Sedangkan  untuk  galur uji yang bersifat negatif warna media akan tetap kuning,  karena  asam  yang  terbentuk  akan dipecah  lagi  menjadi  produk  yang  lain  yaitu etanol atau asetilmetilkarbinol dengan pH akhir media mendekati basa (Saman, 2009). Ditambahkan  juga V.  cholerae umumnya merupakan  bakteri  yang  dapat  memfermentasi glukosa  dan  menghasilkan  produk  bersifat asam.  Hasil  uji  Voges-Proskeuer  didapat  80 galur  uji  menunjukkan  respon  positif  dan  5 galur  lainnya  menunjukkan  respon  negatif.  Hal ini  berarti  ke  80  galur  uji  bakteri  ini  dapat menghasilkan asetoin atau diasetil yang ditandai  dengan  perubahan  warna  merah  pada permukaan  media. V.  cholerae memberikan respon  positif  pada  uji  ini.  Dari  hasil  uji  sitrat diperoleh  82  galur  menunjukkan  respon  negatif dan 3 galur menunjukkan respon positif. Hal ini menunjukkan  bahwa  ke  3  galur  uji  tersebut memiliki kemampuan menggunakan sitrat sebagai  sumber  karbon  untuk  energi  selnya. Adanya  enzim  sitrat  permease  atau  sitrase memungkinkan sitrat dipecah menjadi komponen asam sederhana, mula-mula asamoxalasetat yang selanjutnya dirombak terus menjadi  asam  asetat,  asam  piruvat  dan  CO 2 (Cappuccino  and  Sherman,  1992).  Selanjutnya
kelebihan  CO 2 yang  dihasilkan  akan  bereaksi dengan  Na  yang  terkandung  dalam  media  dan membentuk  sodiumkarbonat  yang  bersifat  basa (alkalin), dengan demikian akan terjadi perubahan warna pada media dari hijau menjadi biru,  yang  artinya  uji  bersifat  positif. V. cholerae memberikan  respon  negatif  pada  uji ini.  Dari  hasil  uji  fermentasi  karbohidrat  yang terdiri  dari  glukosa,  fruktosa,  laktosa  dan sukrosa  diperoleh  hasil  sebagai  berikut:  Pada hasil  uji  glukosa  diperoleh  79  galur  uji  bersifat asam,  1  galur  uji  positif  asam  dan  gas,  5  galur uji  lainnya  bersifat  negatif.  Untuk  hasil  uji fruktosa  diperoleh  3  galur  uji  bersifat  negatif, 79  galur  uji  bersifat  asam,  3  galur  lainnya bersifat  asam  dan  gas.  Hasil  uji  laktosa diperoleh  75  galur  bersifat  negatif,  9  galur  uji bersifat  asam  dan  1  galur  uji  bersifat  asam  dan gas. Dari hasil uji sukrosa diperoleh 84 galur uji bersifat  asam  dan  1  galur  lainnya  bersifat negatif.  Hasil  uji  morfologi  dan  biokimia  dapat dilihat pada Tabel 1.
Bakteri V. cholerae yang terdeteksi dari uji morfologi dan biokimia sebelumnya dilanjutkan  dengan  menginjeksikan  HgCl 2 dengan  konsentrasi  berbeda  untuk  dilihat sampai  dimana  tingkat  resistensinya.  Untuk analisa  ini,  40  galur V.  cholerae ditumbuhkan pada  Nutrien  Broth  (NB)  yang  telah  diberi konsentrasi  HgCl 2 masing-masing  0,01,  0,05, 0,07  dan  0,08  %,  diinkubasi  selama  24  jam kemudian ditotol pada NA yang dibagi menjadi 8  bidang  permukaan  yang  berbeda  dan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37ºC.
Dari hasil uji resistensi merkuri menunjukkan  bakteri V.  cholerae resisten sampai  pada  HgCl 2 0,07  %.  Hasil  ini  sesuai dengan penelitian Noviani (2004), yang menyatakan  bahwa  bakteri  resisten  merkuri memiliki  karakteristik  morfologi  Gram-negatif berbentuk  batang  dan  bersifat  motil. V. cholerae memiliki  karakteristik  morfologi  yang sama.  Pada  konsentrasi  0,01  %,  seluruh  galur uji  bakteri V.  cholerae tumbuh,  selanjutnya pada  konsentrasi  0,05  %  berkurang  menjadi  22 galur  uji  yang  positif.  Saat  konsentrasi dinaikkan  menjadi  0,07  %,  tersisa  13  galur  uji yang  tumbuh,  kemudian  pada  konsentrasi  0,08 %  semua  galur  uji  tidak  lagi  tumbuh.  Menurut Smit et  al ,  (1998) dalam Nofiani,  (2004) menyatakan  bahwa  perbedaan  resistensi  ini berhubungan dengan mekanisme respon populasi  bakteri  terhadap  merkuri.  Dalam penelitian  ini  dikatakan,  ada  3  mekanisme
Tabel 1.  Karakteristik Morfologis dan Biokimia galur uji V. cholerae yang diisolasi dari ikan Kuwe. Kode Galur Uji Morfologis Uji Biokimia pewarnaan gram Motility Kat Oks Indol MR VP Sitrat Fermentasi Karbohidrat Gram Bentuk Glu Fruk Lak Suk I. A1a - Batang + + + + + + - A A - A I. A1b - Batang + + + + + + - A A - A I. A1c - Batang + + + + + + - A A - A I. A2a - Batang + + + + + + - A A - A I. A2b - Batang + + + + + + - A A - A I. B1a - Batang + + + + + + - A A - A I. C2a - Batang + + + + + + - A A - A I. C2b - Batang + + + + + + - A A - A I. C3c - Batang + + + + + + - A A - A II. A1b - Batang + + + + + + - A A - A II. A1c - Batang + + + + + + - A A - A II. A1d - Batang + + + + + + - A A - A II. A2a - Batang + + + + + + - A A - A II. A3b - Batang + + + + + + - A A - A II. B1a - Batang + + + + + + - A A - A II. B2a - Batang + + + + + + - A A - A II. C1a - Batang + + + + + + - A A - A II. C1b - Batang + + + + + + - A A - A II. C1d - Batang + + + + + + - A A - A II. C1e - Batang + + + + + + - A A - A II. C1f - Batang + + + + + + - A A - A II. C1g - Batang + + + + + + - A A - A II. C2b - Batang + + + + + + - A A - A II. C3a - Batang + + + + + + - - A - A III. A2a - Batang + + + + + + - A A - A III. A2b - Batang + + + + + + - A A - A III. A2c - Batang + + + + + + - A A - A III. A2d - Batang + + + + + + - A A - A III. A2e - Batang + + + + + + - A A - A III. A2f - Batang + + + + + + - A A - A III. A2g - Batang + + + + + + - A A - A III. A3b - Batang + + + + + + - A A - A III. B1a - Batang + + + + + + - A A - A III. B2a - Batang + + + + + + - A A - A III. B2b - Batang + + + + + + - A A - A III. C1a - Batang + + + + + + - A A - A III. C2a - Batang + + + + + + - A A - A III. C2b - Batang + + + + + + - A A - A III. C2c - Batang + + + + + + - A A - A III. C3b - Batang + + + + + + - A A - A
Ket:  Oks (Oksidase), Kat (Katalase), MR (Methyl Red), VP (Voges Proskeuer), Glu (Glukosa), Fruk (Fruktosa), Lak (Laktosa), Suk (Sukrosa).
Tabel 2.  Uji Resistensi Merkuri 40 Galur V. cholerae (%). Kode Galur 0,01  0,05  0,07  0,08 Kode Galur 0,01  0,05  0,07  0,08 Kode
Galur 0,01  0,05  0,07  0,08 Kode Galur 0,01  0,05  0,07  0,08 V1 + - - - V11 + - - - V21 + + + - V31 + - - - V2 + + - - V12 + - - - V22 + - - - V32 + + - - V3 + - - - V13 + - - - V23 + - - - V33 + - - - V4 + + - - V14 + - - - V24 + - - - V34 + - - - V5 + + + - V15 + + + - V25 + + - - V35 + - - - V6 + + - - V16 + + + - V26 + + - - V36 + + + - V7 + + + - V17 + + + - V27 + + - - V37 + + + - V8 + + + - V18 + + + - V28 + + - - V38 + - - - V9 + + - - V19 + + + - V29 + - - - V39 + - - - V10 + + + - V20 + + + - V30 + - - - V40 + - - -
respon  terhadap  stress  merkuri:  Pertama, dengan  cara  menghambat  metabolisme  sel sehingga pertumbuhan sel lambat atau sel mati. Kedua,  menginduksi  sistem  operon  resisten merkuri  untuk  bekerja  sehingga  sel  tetap  hidup dalam  kondisi  stres.  Ketiga,  adanya  plasmid yang  mengandung  gen  resisten  merkuri  yang masuk ke dalam sel. Hasil uji resistensi merkuri dapat dilihat pada Tabel 2.
Selanjutnya dihitung absorbans pertumbuhan bakteri pada spektrofotometer dengan menggunakan panjang gelombang 660 nm. Dari  hasil  uji  yang  didapat,  pertumbuhan  tertinggi bakteri V.  cholerae resisten  merkuri  adalah  1.386 pada  konsentrasi  HgCl2  0.01  %.  Kode  galur  uji yang menunjukkan resistensi tertinggi pada HgCl2 0.07  %  ada  13  galur  bakteri  yaitu  V5,  V7,  V8, V15,  V16,  V17,  V18,  V19,  V20,  V21,  V36  dan V37.  Hasil  perhitungan  indeks  pertumbuhan
bakteri  pada  spektrofotometer  dapat  dilihat  pada Tabel 5.
Tabel 5.  Indeks  pertumbuhan  pada  konsentrasi HgCl 2 berbeda. Kode Galur Resistensi HgCl 2 0,01 0,05 0,07 V5 1,358 0,795 0,511 V7 1,226 1,008 0,550 V8 0,773 0,656 0,047 V10 0,990 0,623 0,236 V15 0,778 0,707 0,121 V16 0,863 0,630 0,111 V17 0,737 0,444 0,185 V18 0,790 0,727 0,181 V19 1,137 0,768 0,321 V20 0,846 0,799 0,196 V21 0,863 0,697 0,271 V36 1,018 0,698 0,466 V37 1,203 0,898 0,541
Hasil  uji  menunjukkan  semakin  tinggi konsentrasi  yang  diberikan  maka  bakteri V. cholerae akan  mati.  Hal  ini  berhubungan  dengan respon  masing-masing  bakteri  yang  berbeda-beda. Pertumbuhan  mikro  organisme  selain  dipengaruhi oleh  faktor  yang  berasal  dari  dalam  tubuh  mikro organisme  tersebut  juga  berasal  dari  luar  atau faktor lingkungan. Salah satunya adalah pertumbuhan  berdasarkan  suhu.  Pada  pengujian ini, dilakukan pengujian pada 4 suhu yang berbeda terhadap  bakteri  yang  paling  resisten  merkuri. Metode  yang  digunakan  dalam  uji  ini  dipakai berdasarkan metode Physical Factors : Temperature (Cappuccino and Sherman, 1992) dan dimodifikasikan  oleh  Ijong  (2006)  yaitu  pada media  Broth  ditambahkan  konsentrasi  merkuri yang  berbeda.  Hasil  analisa  resistensi  terhadap merkuri  sebelumnya  diperoleh  isolat  bakteri dengan  nomor  galur V.  cholerae V7  yang  paling resisten, yaitu absorbansi pertumbuhannya sebesar 0,550.  Isolat  bakteri  ini  kemudian  ditumbuhkan pada  media  NB  lalu  digores  pada  permukaan media  NA  dengan  suhu  yang  berbeda  yaitu  40º, 50º,  60º  dan  70ºC  dan  diinkubasi  selama  24  jam. Hasil  analisa  menunjukkan  bahwa  isolat V. cholerae V7  mampu  tumbuh  pada  suhu  60ºC, namun  pada suhu  70ºC  tidak  terjadi  pertumbuhan. Bakteri  ini  merupakan  bakteri  yang  sensitif terhadap  suhu  tinggi,  dengan  suhu  pertumbuhan berkisar  antara  18–37ºC.  Akan  tetapi  bakteri  ini yang  juga  telah  diketahui  resisten  terhadap merkuri,  mempengaruhi  ketahanan  panasnya sehingga dapat tumbuh sampai pada suhu 60ºC.

## KESIMPULAN
Ikan kuwe ( C. sexfasciatus ) yang ditangkap  di  perairan  teluk  Manado  telah terkontaminasi  bakteri V.  cholerae dengan  angka tertinggi  2,4x10 5 MPN/100  g  pada  insang.  Hal  ini berarti ikan Kuwe segar tidak memenuhi SNI yang mengharuskan  kontaminasi  negatif/25  g.  Hasil  uji resistensi V. cholerae terhadap merkuri menunjukkan  bahwa  bakteri  ini  resisten  HgCl 2 sampai  pada  konsentrasi  0,07  %.  Bakteri  dengan kode  galur  V7  adalah  bakteri  paling  resisten terhadap  merkuri  yang  nilai  absorbansnya  yaitu 0,550  juga  adalah  bakteri  dengan  batas  toleran ketahanan panas pada suhu 60ºC.

## DAFTAR PUSTAKA
Baumann,  P.,  Schubert,  L.R.H.W.,  1984.  Family  II. Vibrionaceae  Veron  1965.  Bergey’s  Manual  of Systematic  Bacteriology,  Vol.  1.  The  Williams  and Walkins Co., Baltimore.
Candrawati,  N.,  2011.  Deteksi  Bakteri  Vibrio  cholerae Pada Kepiting Bakau ( Scylla serrata ) Dari Tambak Di Kabupaten  Sidoarjo.  Skripsi.  Fakultas  Kedokteran Hewan. Universitas Airlangga. Surabaya.
Cappuccino.  J.  G,  Sherman.  N.,  1992.  Microbiology  :  A
Laboratory Manual. 3rd Edition. The
Benjamin/Cummings Publishing, Inc. California.
Dien.  H.A.,  1999.  Keberadaan Vibrio  sp .  Dan E.  coli di Sepanjang  Pantai  Teluk  Manado.  Tesis.  Program PascaSarjana. UNSRAT. Manado.
Hikmah.  A., 2011.  Isolasi dan Identifikasi Bakteri Vibrio cholerae  Pada  Kerang  Di  Tempat  Pelelangan  Ikan (TPI)  Wilayah  Sidoarjo.  Artikel  Ilmiah.  Fakultas Kedokteran Hewan. Universitas Airlangga. Surabaya.
Ijong,  F.  G.,  2006.  Karakteristik  Bakteri  Pengoksidasi Merkuri  ( Thiobacillus  sp .)  Diisolasi  Dari  Perairan Pantai  Teluk  Manado.  Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu Kelautan.  Laboratorium  Mikrobiologi  dan  Hasil Perikanan. UNSRAT.
,  2009.  Mikrobiologi  Dasar.  Laboratorium Mikrobiologi Hasil Perikanan. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan. UNSRAT.
Noviani,  R.,  Gusrizal.,  2004.  Bakteri  Resisten  Merkuri Spektrum  Sempit  dari  Daerah  Bekas  Penambangan Emas  Tanpa  Izin  (PETI)  Mandor,  Kalimantan  Barat. Jurusan  Kimia.  Fakultas  MIPA.  Universitas  Tanjung Pura, Pontianak. Jurnal Natur Indonesia.
Saman,  R.  U.,  2009.  Keberadaan Vibrio  cholerae Pada
Lobster ( Planurius sp .) Segar Di Tempat penampungan  UD.  Napu  Tuminting  Manado.  Skripsi. Dalam Bidang Teknologi Hasil Perikanan. Universitas Sam Ratulangi, FPIK. Manado.
Seto,  S.,  2001.  Pangan  dan  Gizi.  Jurusan  Teknologi Pangan  dan  Gizi.  Fakultas  Teknologi  Pertanian. Institut Pertanian Bogor.