Biospecies Vol 14. No 1. January 2021 Page 36 - 45

## PENGARUH PEMBERIAN CAMPURAN MADU DAN KUNING TELUR TERHADAP KUALITAS SPERMTOZOA, FERTILITAS DAN DAYATETAS AYAM SENTUL
The  Effect  of  Giving  Honay  End  Egg  Yolk  Mixture  to  the  Quality  of Spermatozoa,Fertility and Hatchability of Sentul Chicken
A.Yustiti, Husmaini, Jaswandi. Fakultas Peternakan, Universitas Andalas, Padang
Email: husmaini@ansci.unand.ac.id
Abstract Honey end egg yolk are one of the food supplements that contain antioxidants very high.This study aims to determine the quality of sentul male spermatozoa fed honey and egg yolk before artificial insemination on the quality of spermatozoa fertility hacchability of hacching eggs.This research  was  conducted  by  an  experimental  method  with  4  levels  0  ml  honey  (control),3  ml honey,5 ml honey and 7 ml honey, Factor B giving egg yolk to sentul roosters with 4 levels 0 ml egg  yolk  (control),3  ml  egg  yolk,5  ml  egg  yolk,  end  7  ml  egg  yolk.The  results  of  the  study showed  that  based  on  statistical  analysis  it  was  a  very  significant  interaction  between  the combination  of  treatment  levels  of  honey  and  egg  yolk  administraton  on  semen volume(0,85%),spermatozoa  motility  concentration(3,92x109),motility  Spermatozoa(90,00%) spermatozoa abnormalities(5,00%) ,spermatozoa fertility eggs(91,67%),embryo mortality(7%),and egg hatchability(93%).From the results of the study it can be conluded that the administration of 5 ml honey and 5 ml egg yolk significantly gives the best results.
Keywords : Honey, Egg Yolk, Spermatozoa Quality, Sentul Roosters
Abstrak Madu  dan  kuning  telur  merupakan  salah  satu  feed  suplement  yang  mengandung  antioksidan sangat  tinggi.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  Kualitas  Spermatozoa  ayam  jantan Sentul  yang  diberi  madu  dan  kuning  telur  sebelum  Inseminasi  Buatan  terhadap  kualitas spermatozoa,fertilitas,dan  daya  tetas  telur.Penelitian  ini  dilakukan  menggunakan  metode Rancangan  Acak  Lengkap  Pola  Faktorial  dengan  3  kali  ulangan.Faktor  A  pemberian  madu padaayam  jantan  Sentul  dengan  4  level  yaitu  0  ml  (kontrol),3  ml  madu,5  ml  madu,  dan 7  ml madu.Faktor B pemberian kuning telur pada ayam jantan Sentul dengan 4 level yaitu 0 ml kuning telur  (kontrol),3  ml  kuning  telur,5  ml  kuning  telur,dan  7  ml  kuning  telur.Hasil  penelitian menunjukkan  analisis  statistik  terdapat  interaksi  sangat  nyata  (P<  0,01)  antara  kombinasi perlakuan yaitu pemberian madu dan kuning telur terhadap volume semen (0,85ml),konsentrasi spermatozoa  (3,92 x  109),motilitas  spermatozoa  (90,00%),  abnormalitas  spermatozoa(5,00%), fertilitas telur (91,67%),mortalitas embrio(7%),dan daya tetas telur(93%). Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa pemberian 5 ml madu dan 5 ml kuning telur yang terbaik.
Kata kunci: Madu, Kuning Telur, Kualitas Spermatozoa, Ayam Jantan Sentul.

## PENDAHULUAN
Ayam  Sentul    adalah  ayam  lokal Indonesia  yang  berkembang    didaerah  Ciamis Jawa Barat. Ayam Sentul mempunyai keunggulan  salah  satunya  pertumbuhan  yang cepat  produksi  telur  yang  tinggi.Dengan keunggulan tersebut ayam Sentul
memungkinkan
dijadikannya
komoditas industri kerakyatan atau dikembangkan menjadi ayam lokal unggul.Untuk mengembangkan  ayam  Sentul  perlu  digali potensinya disamping populasinya yang semakin  berkurang  dan  merupakan  plasma nutfah ayam lokal Indonesia.Efisiensi pemeliharaan    dapat  dilakukan  dengan penggunaan Inseminasi Buatan (IB).
Teknologi Inseminasi
Buatan dipengaruhi oleh beberapa faktor salah satunya kualitas spermatozoa dari seekor pejantan yang nantinya  akan  mempengaruhi  fertilitas  dan daya  tetas  telur.Kualitas  semen  yang  baik dipengaruhi  oleh  pakan  yang  dikonsumsi pejantan,  untuk  meningkatkan  kualitas  pakan dapat  ditambahakan  dengan  pemberian  feed supplement (Anggorodi,1985).
Menurut Cheah and Yang (2011) dalam proses  pembentukan  spermatogenesis  yang baik membutuhkan asam amino methionine,sistin,arginine,asam lemak linoleat,vitamin  A,C,  dan  E  serta  mineral  Se dan Zn dan semua ini terdapat pada madu dan kuning  telur.Tujuan  penelitian  ini  untuk mengetahui  pengaruh  pemberian  campuran madu dan kuning telur pada ayam jantan Sentul sebelum  perkawinan  atau  Inseminasi  Buatan (IB) untuk menngkatkan kualitas spermatozoa, fertilitas dan daya tetas telur ayam Sentul

## METODE

## Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian selama  9 minggu yaitu mulai tanggal 13  Maret  sampai  11  Mei  2020  yang dilaksanakan di UPT Unggas Simpang Empat.

## Bahan dan Alat
Adapun bahan yang digunakan pada penelitian ini  yaitu  1)  madu  hutan  2)  kuning  telur  ayam kampung,3)  ayam  jantan  Sentul  sebanyak  16 ekor  umur  ±2  tahun  dan  ayam  betina  periode bertelur  sebanyak  96  ekor  umur  ±1  tahun.4) perbandingan bagian konsentrat 124PT. CharoenPhophand,jagung,Dedak  yaitu  1:2:1 (adlibitum),5) air minum 6) eosin 2% 7) NaCl fisiologis0,9%  8)  desinfektan.  Sedangkan  alat yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu
kandang  baterai  50  cm  x  50  cm  x  60  cm sebanyak 16 baterai setiap baterai terdiri dari 6 ekor betina,spuit, mikroskop objek glass, gelas ukur,tabung reaksi berskala,mesin tetas otomatis,gunting,  tissu,  penampung  semen unggas,candling, dan kamar hitung Neubauer

## Metode Penelitian
Metode  penelitian  yang  digunakan  adalah metode  eksperimen  dengan  memnggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  pola  Faktorial (RALF)  dengan  perlakukan  pemberian  madu dan kuning telur pada ayam janatan Sentul.Penelitian  ini  terdiri  dari    faktor  A dengan 4 level yaitu 0 ml madu,3 ml madu,5 ml madu,7 ml madu.Faktor B dengan 4 level yaitu 0 ml kuning telur,3 ml kuning telur,5 ml kuning telur,7 ml kuning telur. Penelitian ini terdiri dari 16  perlakuan  dengan3  kali  ulangan  sehingga terdapat 48 perlakukan.

## Parameter yang Diamati
1. Volume Semen Volume semen ditampung dengan menggunakan  tabung reaksi berskala dalam souit 3 ml setiap ejakulasi. 2. Konsentrasi Spermatozoa (%) Konsentrasi spermatozoa dihitung
menggunakan  kamar    hitung  Neubaur. Semen  diencerkan  dengan  NaCl  fisiologis 500 kali semen dalam (2 µL semen dalam (2 µL  semen  dalam  998  µl  NaCl  fisiologis) Penghitungan konsentrasi berdasarkan rumus:  Konsentrasi  spermatozoa  per  ml semen = jumlah spermatozoa terhitung x 25 x 10 9.
3. Motilitas  Spermatozoa (%) Pengamatan  motilitas  sperma  dengan  cara mengambil  0,05  ml  sperma  dengan menggunakan  pipet  dari  setiap  perlakuan dan diletakan pada obyek glass . Selanjutnya dilakukan pengamatan menggunakan
mikroskop dengan pembesaran 400x . 4. Abnormalitas Spermatozoa (%) Abnormalitas spermatozoa diperoleh dengan  cara  meneteskan    satu  tetes  semen diteteskan  8  –10  tetes  eosin  (eosin  2%) dengan  jumlah  sel  >  200  sel    dan  dimati dibawah mikroskop dengan pembesaran 10 x  40.  Menurut  Khaeruddin et  al .,  (2015) spermatozoa  hidup  ditandai  warna  terang dibagian  kepala  dan  spermatozoa  mati ditandai  warna  merah  ungu  setelah  diberi pewarna eosin. Cara penghitungan abnormalitas spermatozoa diperoleh dengan

## A.YUSTITI, HUSMAINI, JASWANDI
menghitung  jumlah  spermatozoa  yang abnormal dibagi jumlah spermatozoa  yang dilihat    dikalikan  seratus  persen.Menurut Ridwan  (2002)  abnomalitas  spermatozoa diperoleh menggunakan rumus:
𝐴𝑏𝑛𝑜𝑟𝑚𝑎𝑙𝑖𝑡𝑎𝑠 = 𝑆𝑝𝑒𝑟𝑚𝑎𝑡𝑜𝑧𝑜𝑎 𝑎𝑏𝑛𝑜𝑟𝑚𝑎𝑙
𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑠𝑝𝑒𝑟𝑚𝑎𝑡𝑜𝑧𝑜𝑎 𝑑𝑖𝑎𝑚𝑎𝑡𝑖 𝑋100%
5. FertilitasTelur (%) Untuk  melihat  telur  yang  fertil  masing- masing  telur  dari  induk  setiap  perlakuan dilakukan  peneropongan  telur  sebelum penetasan    4  hari  penetasan,  14  hari penetasan  dan  18  hari  penetasan  dengan menggunakan peneropong telur.    Fertilitas dapat dihitung dengan menggunakan rumus:
𝐹𝑒𝑟𝑡𝑖𝑙𝑖𝑡𝑎𝑠  = ∑ 𝑓𝑒𝑟𝑡𝑖𝑙𝑒 ∑ 𝑑𝑖𝑡𝑒𝑡𝑎𝑠𝑘𝑎𝑛 𝑋100%
6. Mortalitas Embrio
Mortalitas  embrio  diperoleh  dari  embrio yang  mati  sebelum  menetas  dibagi  telur inkubasi dikali seratus persen.Penghitungan mortalitas embrio dilakukan dengan menggunakan rumus sebagai berikut :
𝑀𝑜𝑟𝑡𝑎𝑙𝑖𝑡𝑎𝑠 𝐸𝑚𝑏𝑟𝑖𝑜  = 𝐽𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑒𝑚𝑏𝑟𝑖𝑜 𝑚𝑎𝑡𝑖 𝐽𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑡𝑒𝑙𝑢𝑟 𝑖𝑛𝑘𝑢𝑏𝑎𝑠𝑖 𝑋100%

## Prosedur Percobaan
1. Kandang Sebelum kandang digunakan terlebih dahulu dibersihkan dengan melakukan pengapuran, penyemprotan dengan desinfektan (formades).  Persiapan  paralon  sebagai tempat  pakan  dan  minum  sebelum  ayam masuk.
2. Persiapan ayam Sentul didalam kandang
Dalam penelitian ini digunakan ayam jantan Sentul  (sudah  pernah  kawin)  sebanyak  16 ekor umur ±2 tahun dengan berat badan ±2 kg.Ayam  betina  Sentul  (periode  bertelur) sebanyak  96  ekor  umur  ±  1  tahun  dengan berat ±1,8 kg. Unit kandang yang digunakan sebanyak  16  unit  untuk  pejantan  masing- masing  unit  1  ekor  pejantan  dan  16  unit untuk  betina  masing-masing    unit  6  ekor betina.
3. Pemberian madu dan kuningtelur Sebelum  diberi  perlakuan  ayam  jantan  dan betina sudah dpisah selama 2 minggu. Madu dan  kuning  telur  diberikan  dua  kali seminggu    pada  masing  –masing  ayam
jantan sesuai dengan level perlakuan selama 4 minggu.
4. Penampungan Semen Unggas Setelah  4  minggu  pemberian  madu  dan kuning telur , kemudian dilakukan
Penampungan  semen  unggas  dengan menggunakan  metode  pemancing  atau  betina pemancing (teaser famale).Langkah – langkahnya adalah sebagai berikut:
1) membersihkan kloaka ,mencukur bulu yang ada  disekitar  kloaka  ,  membersihkan kotoran yang menenpel pada kloaka dengan tissu yang dibasahi alkohol 70%.
2) Pemasangan  tabung  penampung  (artificial cloaca) pada  pejantan dengan mengikatkan tali kebagian punggung dan ekor
3) Pejantan  didekatkan  ke  betina  dalam beberapa detik  ejakulasi akan terjadi
4) Untuk  mengetahui  volume  semen    tali dilepas  dan  semen  yang  tertampung dimasukkan kedalam spuit 3 ml
5) Pengenceran  semen  unggas  dengan  NaCl fisiologis  0.9%.  Semen  yang  diperoleh diencerkan  dengan  NaCl  fisiologis  0.9%. Penambahan pengencer disesuaikan dengan dosis  dosis  bahan  pengencer    sperma disesuaikan dengan volume sperma dengan menggunakan rumus:

## 𝑉𝑡 = 𝑉0 𝑥 𝑀 𝑥 𝐾
0.1
𝑉𝑝 = 𝑉𝑡 − 𝑉0

## Keterangan:
Vt  = volume total pengencer (ml) V0   = Volume sperma awal (ml) M  = motilitas spermatozoa
K = konsentrasi spermatozoa
0.1  = dosis IB yang diinginkan
6. Inseminasi Buatan Pada Ayam
Ayam  betina  diinseminasikan  dengan menggunakan semen yang telah diencerkan.
Inseminasi Buatan dilakukan dengan interval  3  hari  dan  4  hari dengan  dosis  0.1 ml  per  ekor  .  Ayam  betina  diinseminasi dengan metode intravagina dengan mendeposisiskan  semen  3-4  cm  kedalam vagina. Inseminasi Buatan sebaiknya dilakukan sore pukul 16.00 WIB, ini sesuai dengan pendapat Dononghue and
Wishart:2000 Gethachew,2016).
7. Pengumpulan telur tetas hasil IB Pengumpulan  telur  tetas  dilkukan  hari  ke dua  sampai  hari  ke  enam  setelah  IB.  Telur yang  terkumpul  difumigasi  diberi  kode sesuai  perlakukan.  Sebelum  dilakukan penetasan mesin tetas difumigasi
menggunakan desinfektan , upeneropongan telur  untuk  menentukan  fertilitas  telur  dan mortalitas  embrio  dilakukan  candling (peneropongan telur).
8. Daya Tetas Telur (%) Setelah  21  hari  dilihat  berapa  telur  yang menetas.

## Analisis Data
Data  diolah  secara  statistik  menggunakan analisis ragam Rancangan Acak Lengkap Pola Faktorial (RALF) .Untuk mengetahui pengaruh perlakukan  yang  diamati,  data  yang  diperoleh dilakukan uji lanjut DMRT.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Volume Semen (ml)
Volume  semen  merupakan  parameter  yang menunjukkan  jumlah  spermatozoa  setiap ejakulasi.Hasil  perhitungan  diperoleh  bahwa rataantertinggi pada interaksi L5K5 dan rataan terendah  pada  interaksi  L0K0  (Kontrol),untuk lebih jelasnya dapa tdilihat pada Tabel 1.

## Tabel 1.Rataan volume semen (ml)ayam jantan sentul yang diberi madu dan kuning telur
Madu KuningTelur Rataan K0 K3 K5 K7 L0 0.31 a 0.33 ab 0.37 abc 0.40 abcd 0.35 A L3 0.33 ab 0.43 bcd 0.67 f 0.67 f 0.53 B L5 0.37 abc 0.67 f 0.85 g 0.77 fg 0.66 C L7 0.37 abc 0.67 f 0.77 fg 0.77 fg 0.64 C Rataan 0.34 A 0.53 B 0.66 C 0.65 C SE 0.032 0.016
Keterangan: 1.Superskrip yang diikuti huruf yang  berbeda menunjukkan pengaruh yang sangat nyata (P> 0.01)   SE = Standar Error
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan bahwa pemberian madu dan kuning telur serta interaksi  keduanya  berpengaruh  yang  sangat nyata (P< 0.01) terhadap volume semen ayam Sentul.  Berdasarkan  hasil    DMRT  (Duncan’s Multiple  Range  Test)  diketahui  bahwa  ayam jantan  Sentul  yang  diberi  madu  menunjukkan rata -rata volume semen  tertinggi terdapat pada perlakuan  L5  (0.66  ml)  dan  terendah  pada perlakuan L0 /tidak diberi madu (kontrol) (0.35 ml). Perlakuan L5 berbeda sangat nyata dengan perlakuan L3,L0 (P<0.01).Perlakuan L5 menunjukkan  tidak  berbeda  nyata  dengan perlakuan L7 (P >0.05).
Ayam  jantan  Sentul  yang  diberi  kuning telur  menunjukkan  rata-rata  volume  semen tertinggi  pada  perlakukan  K5  (0,66  ml)  dan terendah pada perlakukan K0 (0,34 ml).Tabel 1 Perlakuan  K5  berbeda  sangat  nyata  dengan perlakukan K3,k0 (P< 0,01).Perlakuan K5 tidak berbeda  nyata  dengan  perlakuan  K7  (P> 0,05).Interraksi  pemberian  madu  dan  kuning telur  memberikan  volume  semen  tertinggi (0,85ml)  dan  terendah  L0K0  (kontrol)  yaitu
0,31  ml.Interaksi  L5K5  berbeda  sangat  nyata
dengan L3K0,L5K0,L7K0,L0K3,L0k5,L0K7,L3K3,L 3K7,L5K3  dan  L7K3  (P<0,01)  tetapi  tidak berbeda berbeda nyata dengan L7K5,L5K7 dan L7K7 (P>0,05).
Berdasarkan  hasil  penelitian  pemberian madu  campur  kuning  telur  dan  interaksi keduanya  memberikan  pengaruh  yang  sangat nyata  (P<0,01)  terhadap  jumlah  spermatozoa ayam  Sentul.Peningkatan  jumlah  spermatozoa Disebabkan  karena    peningkatan  nilai  ransum yang telah diberi madu dan kuning telur sebagai feed  supplement,  disamping  itu  kelengkapan zat zat makanan yang dibutuhkan ayam sudah terpenuhi  dan  membantu  berlangsungnya proses  spermatogenesis  sehingga  diperoleh hasil yang maksimum.
Menurut  Salisbury  and  Van  Denmark (1985)  ransum  yang  mempunyai  energi ,protein,mineral dan vitamin yang cukup sangat penting untuk pertumbuhan dan perkembangan ternak jantan muda.

## A.YUSTITI, HUSMAINI, JASWANDI

## Konsentrasi Spermatozoa (%)
Untuk menentukan konsentrasi spermatozoa  dengan  menggunakan  kamar hitung Neubaur chamber dengan cara
menghitung jumlah spermatozoa pada 5 kotak dan diulangi 5 kali dari setiap lapang pandang yang  berbeda.  Hasil  pengamatan  terdapat rataan tertinggi   dan rataan terendah (kontrol).
Tabel  2 Rataan konsentrasi spermatozoa ( x10 9 ) ayam jantan Sentul yang diberi madu dan kuning telur
Madu KuningTelur Rataan K0 K3 K5 K7 L0 2.84 a 2.88 ab 2.96 abc 3.00 abcd 2.92 A L3 2.88 ab 3.17 cde 3.58 f 3.58 f 3.30 B L5 2.96 abc 3.58 f 3.92 g 3.83 fg 3.57 C L7 2.96 abc 3.58 f 3.83 fg 3.83 fg 3.55 C Rataan 2.91 A 3.30 B 3.57 C 3.56 C SE 0.082 0.041
Keterangan: 1.Superskrip yang diikuti huruf yang berbeda menunjukkan pengaruh yang sangat nyata (P> 0.01)   SE = Standar Error
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan bahwa pemberian madu dan kuning telur serta interaksi  keduanya  berpengaruh  sangat  nyata (P<0.01)  terhadap  konsentrasi  spermatozoa ayam  Sentul.  Berdasarkan  hasil  DMRT (Duncan’s  Multiple  Range  Test)  diketahui bahwa  ayam  jantan  Sentul  yang  diberi  madu menunjukkan rata-rata konsentrasi spermatozoa  tertinggi pada perlakuan L5 (3.57 x  10 9 )  dan  terendah  pada  perlakuan  L0/tidak diber  imadu  (kontrol)  (2.92  x  10 9 ).  Perlakuan L5  berbeda  sangat  nyata  dengan  perlakuan L0,L3  (P<0.01).  Perlakuan  L5  tidak  berbeda nyata dengan perlakuan L7 (P >0.05).
Ayam  jantan  Sentul  yang  diberi  kuning telur merupakan rata-rata konsentrasi spermatozoa  tertinggi  terdapat  pada  perlakuan K5(3,57x 10 9 ) dan terendah pada perlakuan K0 (2,91 x 10 9 ) (Tabel 2 ). Perlakuan K5 berbeda sangat  nyata  dengan  perlakuan  L0,L3  (P< 0,01).Perlakuan L5 tidak berbeda nyata dengan perlakuan L7 (P> 0,05).
Berdasarkan  hasil  penelitian  pemberian madu  dicampur  kuning  telur  dan  interaksinya memberikan  pengaruh  sangat  nyata  (P<0,01) terhadap konsentrasi spermatozoa ayam jantan Sentul.Peningkatan  konsentrasi  spermatozoa ayam  jantan  Sentul  dengan  pemberian  madu dan  kuning  telur,  disebabkan  kandungan mikronutrien  seng  (Zn)  yang  terdapat  yang mempunyai fungsi dalam pematangan sperma.
Menurut Hidiroglou knipfel (1984) seng (Zn)  berfungsi  dalam  pengembangan  anatomi dan reproduksi jantan dan dapat meningkatkan spermatogenesis dan pematangan spermatozoa.
Selain  itu  peningkatan  konsentrasi spermatozoa disebabkan karena vitamin C,vitamin  A,vitamin  E,  dan  selenium  yang terdapat pada madu  dan kuning telur bertindak sebagai  antioksidan  mampu  melawan  dan melindungi spermatozoa dari radikal bebas.Hal ini  terjadi  karena  antioksidan  melindungi kerusakan spermatozoa yang disebabkan  stres oksidatif  karena  adanya  reaktive  oxygen species  (ROS).  Menurut  Begum et  al. ,  (2009) asam  askorbat  yang  terdapat  dalam  vitamin  C meningkatkan kesuburan karena adanya cairan epididymis  dan  plasma  seminalis.  Pemberian vitamin C dapat meningkatkan volume semen

## Motilitas Spermatozoa (%)
Motilitas merupakan kualitas semen yang dapat dilihat dari pergerakan spermatozoa yang motil progresif dengan pembesaran mikroskop 400 x.
Tabel 3.Rataan motilitas spermatozoa (%) ayam jantan Sentul
yang diberi madu dan Kuning telur Madu KuningTelur Rataan K0 K3 K5 K7 L0 53.33 a 56.67 ab 60.00 abc 63.33 abcd 58.33 A L3 56.67 ab 70.00 de 80.00 f 80.00 f 71.67 B L5 60.00 abc 80.00 f 90.00 g 86.67 fg 79.17 C L7 60.00 abc 80.00 f 86.67 fg 86.67 fg 78.33 C Rataan 57.50 A 71.67 B 79.17 C 79.17 C SE 2.357 1.102
Keterangan: 1.Superskrip yang diikuti huruf yang berbeda menunjukkan pengaruh yang sangat nyata (P> 0.01)   SE = Standar Error
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan pemberian  madu  dan  kuning  telur  serta interaksi  keduanya  berpengaruh  sangat  nyata (P<0,01) terhadap motilitas spermatozoa ayam Sentul.Hasil DMRT (Duncan’s Multiple Range Test) diketahui bahwa ayam jantan Sentul yang diberi  madu  menunjukkan  rata  -rata  motilitas spermatozoa    tertinggi  pada  perlakuan  L5 (79.17  %)  dan  terendah  p(control)  (58.33%). Perlakuan  L5  berbeda  sangat  nyata  dengan perlakuan L0,L3 (P< 0.01). Perlakuan L5 tidak berbeda nyata dengan perlakuan L7 (P >0.05).
Ayam  jantan  Sentul  yang  diberi  kuning telur menunjukan rata-rata motilitas spermatozoa  tertinggi  terdapat  pada  perlakuan K5  (79,17%)  dan  terendah  perlakuan  K0 (57,50%).  Perlakuan  K5  berbeda  sangat  nyata terhadap perlakuan K0,K3 (P< 0,01). Perlakuan K0  berbeda  tidak  nyata  dengan  K7  (P>0,05) (Tabel  3)  Interaksi  L5K5  memiliki  motilitas spermatozoa  tertinggi  yaitu  90%  dan  terendah pada interaksi L0K0 (kontrol) yaitu
53,33%.Interaksi    L5K5  berbeda  sangat  nyata dengan L3K0,L5K0,L7K0,L0K3,
L0K5,L0K7,L3K3,L3K5,L3K7,L5K3,dan L7K3  (P<0,01)  tetapi  tidak    berbeda  nyata dengan L7K5,L5K7,dan L7K7 (P>0,05).
Berdasarkan  hasil  penelitian  pemberian madu dan kuning telur serta interaksi keduanya berpengaruh sangata nyata (P<0,01).
Peningkatan motilitas spermatozoa ayam jantan Sentul    yang  diberi  madu  dan  kuning  telur
disebabkan karena adanya glikosa danfruktosa sebagai sumber  energi bagi spermatozoa.
Menurut  Soeparna  (1980)  spermatozoa bergerak  memerlukan  energi  sama  halnya dengan  sel  sel  hidup  yang  lain.  Energi spermatozoa  diperoleh  dari  gula  sederhana seperti  fruktosa  dan  glukosa.  Menurut  Sexton and  Fewlass (1978)  plasma  semen merupakan pergerakan  spermatozoa  dalam  melakukan aktivitasnya ,kekurangan energi akan mengakibatkan
berkurangnya motilitas spermatozoa.
Peningkatan motilitas spermatozoa ayam Sentul  kareana  kandungan  antioksidan  dalam madu  dan  kuning  telur  dapat  melindungi sitoplasma  yang  ada  di  kepala  sehingga  dapat mempertahankan  gerakan  sitoplasma  menjadi progresif  (Nugraheni  et  al.,  2013)  kandungan oksidan  pada  madu  dan  kuning  telur  juga diduga mampu memperlambat reaksi peroksidasi  lipid  mampu  menangkap  radikal bebas dan memutus  rantai peroksidasi didalam sel  sehingga  proses  peroksidasi  lipid  yang merusak dapat dihentikan (Almatsier, 2002).

## Abnormalitas Spermatozoa (%)
Abnormal pada spermatozoa merupakan indikator kualitas spermatozoa dan menyebabkan  gangguan  dan  hambatan  saat fertilisasi.

## Tabel 4. Rataan abnormalitas  spermatozoa (%) ayam jantan sentul yang diberi madu dan kuning telur
Madu Kuning Telur Rataan K0 K3 K5 K7 L0 9.00 f 8.67 ef 8.00 e 7.67 d 8.33 C L3 8.67 ef 7.00 de 5.67 abc 5.67 abc 6.75 B

## A.YUSTITI, HUSMAINI, JASWANDI
L5 8.00 e 5.67 abc 5.00 a 5.33 ab 6.00 A L7 8.00 e 5.67 abc 5.33 ab 5.33 ab 6.08 A Rataan 8.42 C 6.75 B 6.00 A 6.00 A SE 0.265 0.132
Keterangan: 1.Superskrip yang diikuti huruf yang  berbeda menunjukkan pengaruh yang sangat nyata (P> 0.01) SE = Standar Error
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan pemberian  madu  dan  kuning  telur  serta interaksi  keduanya    berpengaruh  sangat  nyata (P<0,01)  terhadap  abnormalitas    uji  lanjut DMRT  (Duncan’s  Multiple  Range  Test) diketahui bahwa ayam jantan Sentul yang diberi madu  menunjukkan  rata-rata  abnormalitas spermatozoa tertinggi pada perlakuan L0/tidak diberi  madu  (kontrol)  (8,33%)  dan  tererndah pada  perlakuan  L5  (6,00%).Perlakuan  L0 berbeda sangat nyata terhadap L5,L7 (P<0,01).Perlakuan  L0  berbeda  tidak  nyata dengan L3 (P>0,05).
Ayam janatan Sentul yang diberi kuning telur  menunjukkan  rata-rata  abnormalitas spermatozoa  tertinggi  pada  perlakuan  K0 (8,42%) dan terendah pada K5
(6,00%).Perlakuan  K0  berbeda  nyata  dengan K5  dan  K7  (P<0,01).Perlakuan  L0  berbeda tidak  nyata  dengan  perlakuan  K3  (P> 0,05).Interaksi L0K0 (kontrol) memiliki abnormalitas  spermatozoa  tetinggi  yaitu  9% dan  terendah  pada  interaksi  L5K5  yaitu 5%.Interaksi  L5K5  berbeda  sangat  nyata dengan L3K0,L5K0,L7K0,L0K3, L0K5,L0K7,L3K3,L3K5,L3K7,L5K3,danL7K 3  (P<0,01)  tetapi  tidak  berbeda  nyata  dengan L7K5,L5K7,dan L7K7 (P>0,05).
Berdasarkan  hasil  penelitian  pemberian madu dan kuning telur serta interaksi keduanya berpengaruh sangat nyata(P<0,01).Penurunkan abnormalitas  spermatozoa  ayam  jantan  Sentul yang  diberi  madu  dan  kuning  telurdisebabkan
proses spermatogenesis yang sempurna mampu menghasilkan  ±  90%  normal.Menurut  Faradis (2010)  jika  terjadi  kelainan  kelainan  ditubuli seminiferi, maka spermatozoa akan mengalami abnormalitas  primer,  bila  terkontaminasi dengan  air  ,urine,dan  antiseptik  spermatozoa mengalami abnormalitas sekunder.
Penurunan  abnormalitas  spermatozoa ayam  jantan  Sentul  dengan  pemberian    madu dan  kuning  telur  disebabkan  karena  adanya kandungan  vitamin  B9  dan  B12  yang  dapat memperbaiki  sel  spermatozoa.Menurut  Abdu (2008) bahwa vitamin B9 dapat meningkatkan spermatozoa dan perkembangan tubulus seminiferus pada proses spermatogenesis serta vitamin  B12  dapat  melibatkan  RNA  dan sintesis DNA.
Abnormalitas sprematozoa dapat diturunkan  dengan  tekoferol  dan  fenol  yang berfungsi  sebagai  antioksidan  yang  mampu memperbaiki  spermatogenesisi  saat  ejakulasi. Menurut  Harahap  (2017)  antioksidan  dapat mencegah radikal bebas sehingga spermatozoa menjadi  normal.Tokoferol,  β  karoten  ,asam askorbat  memberikan  perlindungan  terhadap spermatozoa.

## Fertilitas Telur (%)
Fertilitas  telur  dihitung  telur    fertile dibagi  telur  inkubasi  dikali  100%.(Madupe, at al , 2013).
Tabel 5. Rataan fertilitas  telur (%)
Madu Kuning Telur Rataan K0 K3 K5 K7 L0 66.67 a 68.33 ab 70.00 abc 71.67 abcd 69.17 A L3 68.33 ab 75.00 de 85.00 f 85.00 f 78.33 B L5 70.00 abc 85.00 f 91.67 g 88.33 fg 83.75 C L7 70.00 abc 85.00 f 88.33 fg 88.33 fg 82.92 C Rataan 68.75 A 78.33 B 83.75 C 83.33 C SE 1.103 0.59
Keterangan: 1.Superskrip yang diikuti huruf yang  berbeda menunjukkan pengaruh yang sangat nyata (P> 0.01)   SE = Standar Error
Analisis ragam menunjukkan pemberian madu dan kuning telur serta interaksi keduanya berpengaruh nyata (P< 0,01) terhadap fertilitas ayam  sentul.Hasil  DMRT(  Duncan’s  Multiple Range  Test)  diketahuibahwa  ayam  jantan Sentul  diberi  madu  menunjukkan  rata-rata fertilitas  telur  tertinggi  pada  perlakuanL5 (83,75%) dan terendah pada perlakuan L0/tidak diberi  madu  (kontrol)(  69,17%).Perlakuan  L5 berbeda sangat nyata terhadap perlakuan L0,L3 (P<0,01).Perlakuan  L5  berbeda  tidak  nyata dengan perlakuan L7 (P>0,05).
Ayam  jantan  Sentul  yang  diberi  kuning telur  menunjukkan  rata-rata  fertilitas  telur tertinggi  pada  perlakuan  K5(83,75%)  dan terendah perlakuan K0 (68,75%).Perlakuan K5 berbeda  sangat  nyata  dengan  K3,K0(P<0,01). Perlakukan  K5  berbeda  tidak  nyata  dengan K7(P>  0,05)  (Tabel  5).  Interaksi  L5K5 memiliki fertilisasi telur tertinggi yaitu 91,67% dan  terendah  pada  interaksi  L0K0  (kontrol) yaitu  66,67%.Interaksi  L5K5  berbeda  sangat nyata dengan L3K0,L5K0,L7K0,L0K3, L0K5,L0K7,L3K3,L3K5,L3K7,L5K3 dan L7K3(P<0,01)  tetapi  tidak  berbeda  nyata dengan L7K5,L5K7dan L7K7 (P>0,01).
Berdasarkan  hasil  penelitian  pemberian madu  dan  kuning  telur  dan  intraksinya memberikan pengaruh sangat nyata (P<0,01).Peningkatan  fertilitas  telur  dengan pemberian  madu  dan  kuning  telur  pada  ayam jantan sentul disebabkan karena didalam madu dan kuning telur dan interaksinya memberikan pengaruh  sangat  nyata  (P<0,01).  Peningkatan fertilitas  telur  dengan  pemberian  madu  dan kuning  telur  pada  ayam  jantan  Sentul disebabkan  karena  didalam  madu  dan  kuning telur  terkandung  Vitamin  E  dan  mineral bersamaan meningkatkan fertilitas telur.Menurut  Suharyati  (2006)  menyatakan pemberian  vitamin  E  dan  mineral  Zn menghasilkan  fertilitas  telur    dan  daya  tetas telur kalkun  lokal yang tinggi.

## Mortalitas Embrio (%)
Motilitas  merupakan  salah  satu  kriteria penentuan  kualitas  semen  yang  dilihat  dari banyaknya  spermatozoa  yang  motil  progresif dibandingkan  dengan  seluruh  spermatozoa yang ada dalam satu pandang mikroskop.
Tabel 6. Rerata Mortalitas Embrio Ayam (%)
Madu Kuning Telur Rataan K0 K3 K5 K7 L0 37 f 34 ef 31 def 30 de 33 C L3 34 ef 25 d 18 bc 18 bc 24 B L5 31 def 18 bc 7 a 13 b 18 A L7 31 def 18 bc 13 b 13 b 19 A rataan 34 C 24 B 18 A 19 A SE 1.977 0.989
Keterangan: 1.Superskrip yang diikuti huruf yang  berbeda menunjukkan pengaruh yang sangat nyata (P> 0.01)   SE = Standar Error
Berdasarkan analisis ragam pemberian madu  dan  kuning  telur  berpengaruh  sangat nyata  (P<  0,01)  serta  interaksi  keduanya berpengaruh nyata (P<0,05) terhadap mortalitas embrio Sentul.Hasil  DMRT (Duncan’s Multiple  Range  Test)  diketahui  bahwa  ayam jantan  Sentul  yang  diberi  madu  menunjukkan rata-rata  mortalitas    embrio  tertinggi  pada perlakuan L0/tidak diberi madu (kontrol) (33%) dan terendah pada perlakuan
L5
(18%).Perlakuan  L0  berbeda  sangat  nyata dengan L5,L7 (P<0,01). Perlakuan L0 berbeda tidak nyata dengan L3 (P>0,05).
Ayam  jantan  Sentul  yang  diberi  kuning telur  menunjukkan rata-rata mortalitas embrio
tertinggi  pada  perlekuan  K0  (34%)  dan terendah  pada  perlakukan  K5(18%).Perlakuan K0  berbeda  sangat  nyata    dengan  K5,K7 (P<0,01).Perlakuan  K0  berbeda  tidak  nyata dengan K3(P>0,05) (Tabel 6) .Interaksi  L0K0 memiliki mortalitas  embrio tertinggi yaitu 37% dan  terendah  pada  interaksi  L5K5  yaitu7 %.Interaksi L5K5 berbeda sangat nyata dengan L3K0,L5K0,L7K0,L0K3,L0K5,L0K7,L3K3,L 3K5,L3K7,L5K3,L7K3,L7K5,L5K7 dan L7K7 (P>0,01).
Berdasarkan hasil pengamatan pemberian  madu  dan  kuning  telur  dan interaksinya    berpengaruh  sangat  nyata (P<0,01).Penurunan mortalitas embrio,

## A.YUSTITI, HUSMAINI, JASWANDI
disebabkan  karena  didalam  madu  dan  kuning telur terdapat vitamin A dan E yang berfungsi melindungi  embrio  dalam  proses  penetasan. Menurut  Sulistyaningrum  et  al,.  (2019) mortalitas  embrio  terjadi  karena  ketidak mampuan dalam  penyerapan albumin dan yolk
(kuning telur). Ditambahakan oleh Kusumasari et al,. (2013) pemberian vitamin A dan vitamin E bersaamaan dapatberfungsi sebagai antioksidan  untuk  menangkal  radikal  bebas yang  berfungsi  melindungi  embrio  sampai akhir penetasan.
Tabel. 7 Rataan  daya tetas  telur (%)
Madu Kuning Telur Rataan K0 K3 K5 K7 L0 65 a 66 ab 69 abc 70 abcd 67 A L3 66 ab 75 cde 82 f 82 f 76 B L5 69 abc 82 f 93 g 87 fg 83 C L7 69 abc 82 f 87 fg 87 fg 81 C Rataan 67 A 76 B 83 C 81 C SE 2.038 1.019 Keterangan: 1.Superskrip yang diikuti huruf yang  berbeda menunjukkan pengaruh yang sangat nyata (P> 0.01)   SE = Standar Error Daya Tetas Telur (%) Berdasarkan
analisis keragaman menunjukkan pemberian madu dan kuning telur serta  interaksi  keduanya  berpengaruh  sangat nyata  (P<0,01)  terhadap  daya  tetas  telur. Berdasarkan  uji  lanjut  DMRT  (Duncan’s Multiple  Ranga  Test)  diketahui  bahwa  ayam jantan  Sentul  yang  diberi  madu  menunjukkan daya  tetas  telur  tertinggi  pada  L5  (83%)  dan terendah  L0/tidak diberi madu (kontrol) (67%). Perlakuan    L5  berbeda  sangat  nyata  dengan L3,L0  (P<0,01).Perlakuan  L5  berbeda  tidak nyata dengan L7 (P>0,05).
Ayam  jantan  Sentul  yang  diberi  kuning telur menunjukkan rata-rata daya tetas tertinggi pada  K5  (83%).  Dan  terendah  pada  K0 (67%)..Perlakuan  K5  berbeda  sangat  nyata dengan  K7(P>0,05)  (Tabel  7)  Interaksi  L5K5 memiliki  daya    tetas  telur  tertinggi  yaitu  93% dan  terendah  pada  interaksi  L0K0  (kontrol) yaitu  65%..Interaksi  L5K5  berbeda  sangat nyata  dengan  L3K0,  L5K0,  L7K0,  L0K3, L0K5,  L0K7,  L3K3,  L3K5,  L3K7,  L5K3  dan L7K3  (P<0,01)  tetapi  tidak  berbeda  nyata dengan L7K5, L5K7 dan L7K7 (P>0,05).
Berdasarkan  hasil  penelitian  pemberian madu  dan  kuning  telur  serta    interaksi pemberian madu dan kuning telur berpengaruh sangat  nyata  (  P<  0,01)    terhadap  interaksi pemberian madu dan kuning telur berpengaruh sangat nyata ( P< 0,01) .Peningkatan daya tetas telur dengan pemberian madu dan kuning telur pada ayam jantan disebabkan karenaVitamin A dan  E  yang  masih  ada  dalam  cadangan
makanan  berfungsi  sebagai  antioksidan    yang nantinya membantu daya hidup DOC.Menurut Pattison  (1993)  bahwa  kandungan  nutrisi berfungsi menjaga anak ayam setelah menetas.

## KESIMPULAN
Dari hasil penelitian diambil kesimpulan bahwa pemberian madu dicampur kuning telur pada ayam jantan Sentul memberikan pengaruh yang  sangat  nyata  (P<0,01)  terhadap  volume semen,  konsentrasi  spermatozoa  ,motilitas spermatozoa,abnormalitas spermatozoa, fertilitas  spermatozoa,mortalitas  embrio,dan daya    tetas  telur.Pemberian  madu  dan  kuning telur yang terbaik pada penelitian ini adalah 5 ml madu + 5 ml kuning telur.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdu, S.B. 2008.Effect of Vitamins Deficiencies on the Histological Structure ofthe Test of Albino  MiceMus Musculus.SaudiJournal  of  Biological Sciences, 15, 269-  278.
Anggorodi,  R,  1985.  Kemajuan  Mutakhir dalam  Ilmu  Makanan  Ternak  Unggas.
PT. Gramedia, Jakarta.
Almatsier  S,  2002.  Prinsip  Dasar  Ilmu Gizi.Jakarta.PT.Gramedia
Pustaka Utama.
Begum, H., A.B.M. Moniruddin dan K. Nahar. 2009.  Environmental  and  Nutritional
AspecinMale  Infertility. Journal  of Medicine , 10, 16-19.
Cheah,  Y  and  W.  Yang.  2011.  Functions  of essential    nutrition  for  high  quality Spermatogenesis. Advances in Bioscience  and  Biotechnology (2):182-
197DOI:10.423 /abb. 2011. 24029
Donoghue.  A.M.,  and  G.J.  Wishart  2016. Storage  of  poultry  semen. Animal Reproductive Science , 62: 213-232.
Feradis.  2010.  Bioteknologi  Reproduksi  pada Ternak. Alfabeta. Bandung.
Harahap, E.W.S Normalinadan Winarto 2017.Pengaruh  Pemberian  Antioksidan Vitamin C Dan E Terhadap Konsentrasi Spermatozoa  Mencit  (MusMusculus) Yang Dipapar https://www.researchgate.net/publicatio n/323117716_Pengaruh_Pemberian_An tioksidanVitamin_C_Dan_E_Terhadap_
Konsentrasi_Spermatozoa_Mencit_Mus _Musculus_Yang_Dipapar_Asap_Roko k. (Diunduh 05 Juli 2018).
Hidiroglou, M dan J. E Knipfel. 1984. Zinc in Mammalian  Sperm. Journal  Dairy Science , 67 (6): 1147-56.
Khaeruddin,  Sumantri  C,  S  Darwati,  R.I Arifiantinin.  2015.  Penggunaan  minyak zaitun  ekstra  virgin  ke  dalam  bahan pengencer  semen  terhadap  kualitas spermatozoa  ayam  lokal.  Jurnal  Ilmu Produksi dan Teknologi Hasil Peternakan 3(1): 46-51.
Kusumasari, D.P., I. Mangisah, dan I. Estiningdriati.  2013.  Pengaruh  penambahan vitamin A dan E dalam ransum terhadap bobot  telur  dan  mortalitas  embrio  ayam kedu  hitam  Anim. Agric.  J .  2(1):  191-
200.
Modupe,O,  A.  C  Livinus  and  N.B.Ifeany.
2013.SemenQuality  Characteristic  and
Effect of Mating Ratio on Reproductive
Performance        of  Hubbarrd  Broiller Bredders. Journal of Agriculture Science. 5(1) 154-159.
Nugraheni.T,P.AOkid.danW.Tetri 2013. PengaruhVitamin C Terhadap Perbaikan Spermatogenesis dan Kualitas Spermatozoa Mencit (Mus musculus L.) Setelah PemberianEkstrakTembakau. Biofarmasi 1 (1) : 13-19.
Pattison,  M.1993.  The  Health  of  Poultry. Longman  Scientific  and  Technical.
Philadelphia.
Ridwan.2002.  Fertil  Life  dan  Periode  fertil Spermatozoa Ayam Buras Pasca Inseminasi  Buatan.  Tesis.  Program pascasarjana Universitas Padjajaran.Bandung. Salisbury, G.W. dan N.I Van Denmark, 1985. Fisiologi  Reproduksi  dan  Inseminasi Buatan  pada  Sapi.  Gadjah  Mada University Press. Yogyakarta. (Diterjemahkan oleh R.Djanuar).
Sexton,  T.J.,  and  T.A.  Fewlass.  1978.A  New
Poultry  Semen  Extenders:  2.  Effectof
Diluent  Component  on  the  Fertilizing Capacity on the Chicken Semen Storage at 5o C. Poultry Science 57 : 277 – 284.
Suharyati,  S.2006.  Pengaruh  penambahan vitamin  e  dan  mineral  zn  terhadap kualitas  semen  serta  fertilitas  dan  daya tetas  telur  kalkun  local.  J.  Indo.  Trop.
Anim. Agric. 31 (3).
Sulistyaningrum,  A.D,  Mudawamah  dan
Sunaryo. 2019.EvaluasiPerformans Penetasan  Berdasarkan  Umur  Indukdi Hatchery PT. Intertama TrikencanaBersinar Deli Serdang Sumatra Utara. J. Rekasatwa Peternakan 1(1): 59-63. Soeparna.1980. Pengantar Spermatologi, Masalah Khusus.Fakultas Perikanan IPB.Bogor.