## PENGARUH KONSENTRASI BAP PADA PERKECAMBAHAN BIJI PAMELO ASAL ACEH SECARA IN-VITRO

## DIFFERENT BAP CONCENTRATIONS ON IN-VITRO SEED GERMINATION OF ACEHNESE POMELO
Ira Handayani 1 , Laila Nazirah 2 , Ismadi 2 , Muhammad Rusdi 3 dan Rd. Selvy Handayani 2*)
1 Mahasiswa Program Studi Magister Agroekoteknologi Fakultas Pertanian Universitas Malikussaleh Kampus Reuleut, Aceh Utara, Aceh, Indonesia
2 Program Studi Magister Agroekoteknologi Fakultas Pertanian Universitas Malikussaleh Kampus Reuleut, Aceh Utara, Aceh, Indonesia
3 Fakultas Pertanian Universitas Syiah Kuala, Jl. Tgk. Hasan Krueng Kalee No. 3 Darussalam, Banda Aceh, 23111
*Corresponding author: selvy@unimal.ac.id

## ABSTRAK
Pamelo ( Citrus  maxima (Burm.)  Merr.)  besar merupakan salah satu jenis tanaman hortikultura yang mendapat perhatian dari pemerintah untuk dikembangkan dan ditingkatkan produksinya  karena  memiliki  prospek  pemasaran  yang  baik.  Permasalahan  utama pengembangan  tanaman  pamelo  Aceh  adalah  ketersediaan  biji  yang  sangat  sedikit  atau bahkan  sering  dijumpai  tanpa  biji  dan  juga  bijinya  sulit  sekali  dikecambahkan dikecambahkan secara konvensional. Oleh karena itu untuk mengatasi permasalahan tersebut dapat dilakukan secara in vitro . Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh BAP terhadap  keberhasilan  perkecambahan  biji  pamelo  lokal  Aceh  secara in  vitro .  Penelitian dilaksanakan  di  Laboratorium  Kultur  Jaringan  Tanaman  Fakultas  Pertanian  Universitas Malikussaleh  pada  bulan  Desember  2018  sampai  dengan  Februari  2019.  Percobaan  ini menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  faktor  tunggal.  Perlakukuannya  adalah konsentrasi  BAP  yaitu  0  dan  2  mg/L  dengan  30  ulangan,  sehingga  didapat  60  satuan percobaan.  Pada  percobaan  ini  setiap  eksplan  ditanam  pada  botol  kultur  dengan  jumlah  2 eksplan  per  botol.  Data  hasil  pengamatan  dianalisis  secara  statistik  dengan  menggunakan analisis  ragam.  Jika  hasil  uji  F  menunjukkan  adanya  pengaruh  yang  nyata antar  perlakuan, maka analisis dilanjutkan dengan Uji DMRT ( Duncan’s Multiple Range Test ) pada taraf 5%. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  pemberian  BAP  dapat  mempengaruhi  pertumbuhan eksplan  biji  pamelo  secara in  vitro .    Pemberian  BAP  2  mg/L  pada  awal  menyebabkan  biji lebih  lambat  membentuk  tunas  dan  akar,  namun  pada  akhir  pengamatan  didapatkan  biji menghasilkan tunas dan daun yang lebih banyak.
Kata kunci: pertumbuhan, eksplan, tunas akar, tunas daun

## ABSTRACT
Pamelo ( Citrus  maxima (Burm.)  Merr.) is a horticultural commodity prioritized by the government to be developed due to its promising prospect.  The scarce of available seeds resulted from seedless fruit production nowadays becomes a potential obstacle in developing pomelo conventionally. Therefore, the in-vitro assay was assigned to overcome this problem. The research was aimed at evaluating the effect of BAP application on seed germination of
Acehnese pomelo. The research was carried out in Plant Tissue Culture Laboratory, Faculty of  Agriculture,  Universitas  Malikussaleh  from  December  2018  to  February  2019,  using Randomized  Completely  Design  (CRD)  with  the  only  factor  observed  was  BAP concentrations:  0  and  2  mg/L.    This  experiment  was  replicated  30  times  resulted  in  60 experimental units in total. Two explants were planted in a culture jar.   The collected data were analyzed using ANOVA, and the significant means were performed using DMRT Test at  probability  level  5%.  The results  indicated  that  the  application  of  BAP  had  an  effect  on seed  germination.    The  application  of  BAP  2  mg/L  has  caused  slower  growth  of  buds  and roots.    However,  last  day's  observation  showed  that  this  application  had  triggered  seeds  to have more buds and leaves.
keywords: growth, explant, root bud, leaf bud

## PENDAHULUAN
Pamelo  ( Citrus    maxima (Burm.) Merr.) merupakan salah satu jenis tanaman hortikultura  yang  mendapat  perhatian  dari Pemerintah  untuk  dikembangkan  dan ditingkatkan produksinya. Pamelo memiliki prospek pemasaran yang baik dan dapat menjadi sumber pendapatan regional maupun nasional serta dapat meningkatkan gizi masyarakat.
Pamelo    potensial    dikembangkan karena    mempunyai    karakteristik    yang khas    ya i t u   buahnya  berukuran  besar, memiliki  rasa  segar  dan  daya  simpan lama  sampai  empat  bulan  (Susanto, 2004).  Selain  itu  Indonesia  memiliki banyak  plasma  nutfah  pamelo  dengan ukuran,  bentuk,  warna  dan  rasa  yang beraneka  ragam.  Sampai  saat  ini  ada  17 aksesi  pamelo yang   telah   diidentifikasi dan   dilepas   menjadi   varietas   unggulan nasional,  salah  satu  diantaranya  adalah pamelo  Giri  Matang  dari  Aceh.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa Aceh masih memiliki  sebaran  plasma  nutfah  pamelo lainnya selain Giri Matang (Rahayu, et al ., 2012).
Pamelo  lokal  Aceh  memiliki  sifat unik dan khas. Ada beberapa pamelo Aceh yang  sudah  mulai  sulit  ditemukan  karena masyarakat tidak
tertarik membudidayakannya.  Hal  ini  dapat mengancam  kelestarian  sumber  daya genetik.
Permasalahan utama pengembangan  tanaman  pamelo  Aceh adalah  ketersediaan  biji  yang  sangat
sedikit  atau  bahkan  sering  dijumpai  pamelo tanpa  biji. Selain itu biji pamelo lokal Aceh sulit  sekali  dikecambahkan  bahkan  tidak dapat  dikecambahkan  secara  konvensional. Oleh karena itu untuk mengatasi permasalahan  tersebut  perlu  dicari  suatu teknologi alternatif.
Perbanyakan  tanaman  menggunakan teknologi  kultur  jaringan  merupakan  salah satu  cara  untuk  memecahkan  masalah perbanyakan tanaman yang sulit dikembangkan  secara  konvensional,  seperti pamelo.  Kultur  jaringan  adalah  suatu  teknik mengisolasi  bagian-bagian  tanaman  (sel, sekelompok sel, jaringan, organ, protoplasma,  tepung  sari,  ovari  dan sebagainya)  lalu  dikulturkan  pada  medium buatan  yang  steril  sehingga  bagian-bagian tanaman  tersebut  mampu  beregenerasi  dan berdiferensiasi  menjadi  tanaman  yang lengkap.
Salah satu kunci keberhasilan perbanyakan kultur jaringan adalah penggunaan  zat  pengatur  tumbuh  sitokinin. Sitokinin  merupakan  fithohormon  yang berperan  dalam  pembelahan  sel  dan morfogenesis  tunas  dan  akar,  pertumbuhan tunas  lateral  dan  perkembangan  daun (Srivastava, 2002). Salah satu jenis sitokinin yang  paling  sering  digunakan  untuk perbanyakan in  vitro adalah  Benzyl  amino purin  (BAP).  Pemberian  BAP  ke  dalam medium  kultur  jaringan  penting  dilakukan untuk  menginduksi  perkembangan  dan pertumbuhan  eksplan.  Penelitian  tentang penggunaan BAP dalam media sudah banyak dilakukan,  diantaranya  pada  tanaman  jeruk
Jurnal Agrium 17(2), September 2020 P-ISSN 1829-9288 E-ISSN 2655-1837
siam  (Fatonah et  al .,  2018),  manggis (Agustina et  al .,  2020;  Handayani et  al , 2017; Handayani et al, 2013), jeruk keprok (Wijayanto,  2011),  jeruk  manis  (Almeida et  al .,  2008),  jeruk  siam  Pontianak (Agisimanto,  2005),  dan  pamelo  (Tyas et al ., 2012;  Handayani et al ., 2020).
Pada  penelitian  jeruk  manis  media yang  paling  efektif  untuk  menginduksi tunas  adalah  BA  0,5  ppm  +  kinetin  0,5 ppm  +  NAA  2.  Almeida et  al .,  (2008) berhasil  menginduksi  tunas  adventif  dari mata  tunas  tiga  kultivar  jeruk  manis dengan hasil terbaik diperoleh pada media MS  +  BAP  1  ppm.  Pada  jeruk  lemon “Rangpur”  yang terbaik adalah media MS +  2,5  ppm  BAP.  Penelitian  akan membahas  mengenai  perkecambahan  biji pamelo lokal Aceh secara in vitro .  Tujuan penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui pengaruh  BAP  terhadap  keberhasilan perkecambahan  biji  pamelo  lokal  Aceh secara in vitro .

## METODE PENELITIAN
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium  Kultur  Jaringan  Tanaman Fakultas Pertanian Universitas
Malikussaleh  pada  bulan  Desember  2018 sampai  dengan  Februari  2019.  Bahan- bahan  yang  akan  digunakan  dalam penelitian ini diantaranya adalah biji jeruk pamelo  lokal  Aceh,  alkohol  70  %,  BAP, dan  media  MS.  Alat-alat  yang  digunakan terdiri  dari Laminar  Air  Flow  Cabinet , oven, autoclaf, dan alat-alat tanam.
Percobaan ini menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  faktor tunggal.  Perlakukuan  adalah  konsentrasi BAP  yaitu  0  dan  2  mg/L  dengan  30 ulangan,  sehingga  didapat  60  satuan percobaan.  Pada  percobaan  ini  setiap eksplan  ditanam  pada botol  kultur  dengan jumlah 2 eksplan per botol.
Sebelum  ditanam,  Biji  pamelo dicuci lalu direndam dalam larutan Bayclin 20% selama 20 menit yang dilakukan tiga kali.  Kulit  biji  bagian  dalam  dikupas  lalu direndam  kembali  dalam  lautan    bayclin
20%  selama  20  menit  yang  dilakukan  dua kali.  Biji  dibilas  menggunakan  aqudes  steril dua  kali.  Biji  pamelo  steril  ditanam  pada media  yang  telah  disiapkan.  Penanaman  biji dilakukan dengan membelah biji menjadi dua bagian  kemudian  biji  ditanam  sebanyak  dua eksplan per botol kultur.
Pengamatan dilakukan selama delapan minggu. Peubah yang diamati adalah persentase  tumbuh  tunas,  waktu  tumbuh tunas, waktu tumbuh akar, jumlah tunas, dan jumlah  daun.  Data  hasil  pengamatan dianalisis secara statistik dengan menggunakan analisis ragam. Jika hasil uji F menunjukkan  adanya  pengaruh  yang  nyata antar  perlakuan,  maka  analisis  dilanjutkan dengan  Uji  DMRT  ( Duncan’s  Multiple Range Test )  pada  taraf  5%.  Analisis  data dilakukan  dengan  menggunakan  software SAS v9.13 portable.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa perlakuan BAP berpengaruh terhadap peubah persentase  tumbuh  tunas.  Hasil  uji  lanjut pengaruh  konsentrasi  BAP    terhadap persentase tumbuh tunas disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1 menunjukkan bahwa perlakuan  BAP  memberikan  pengaruh terhadap  peubah  persentase  tumbuh  tunas. Biji  pamelo  yang  ditanam  pada  media  MS+ BAP  2  mg/L  memiliki  persentase  tumbuh tunas  yang  lebih  besar  daripada  perlakuan tanpa BAP.
Tabel 1. Pengaruh konsentrasi BAP terhadap waktu tumbuh tunas perkecambahan biji pamelo secara in vitro
Konsentrasi BAP Persentase Tumbuh Tunas (%) 2 MST 4 MST  6 MST  8 MST 0 mg/L 1,18 a 1,36  b 1,44 b 1,49 b 2 mg/L 0,89 a 1,64  a 1,70 a 1,74 a
Keterangan: Angka yang diikuti oleh huruf yang sama pada kolom yang sama  tidak berbeda nyata berdasarkan  uji  DMRT  pada  taraf  0,05. MST = minggu setelah tanam.
Jurnal Agrium 17(2), September 2020 P-ISSN 1829-9288 E-ISSN 2655-1837
Perlakuan BAP berpengaruh
terhadap  perkecambahan  biji  pamelo secara in  vitro .    Hasil  uji  lanjut  pengaruh konsentrasi  BAP  terhadap  waktu  tumbuh tunas  dan  waktu  tumbuh  akar  terhadap perkecambahan biji pamelo secara in vitro disajikan pada      Tabel 2.
Tabel  2.  Pengaruh  konsentrasi  BAP
terhadap waktu tumbuh tunas dan waktu tumbuh akar perkecambahan biji pamelo secara in vitro Konsentrasi BAP Waktu Tumbuh Tunas (HST) Waktu Tumbuh Akar (HST) 0 mg/L 12,94 b 5,11 b 2 mg/L 15,76 a 6,50  a Keterangan:  Angka  yang  diikuti  oleh  huruf  yang sama  pada  kolom  yang  sama    tidak berbeda  nyata  berdasarkan  uji  DMRT pada taraf 0,05.  MST = minggu setelah tanam.
Tabel  2  menunjukkan  bahwa  biji pamelo  yang  ditanam  pada  media  yang tanpa  diberi  BAP  ternyata  lebih  cepat muncul  tunas  dan  akar.  Tunas  muncul pada umur 7 sampai 18 hari setelah tanam. Penampilan  tunas  pamelo in  vitro pada umur 7 HST disajikan pada Gambar 1.
Gambar  1  pamelo  secara in  vitro pada  umur  7  HST. a. Konsentrasi BAP 0 mg/L;   b. Konsentrasi BAP 2 mg/L.
Gambar  1  menunjukkan  bahwa pada  umur  7  MST  biji  pamelo  yang ditanam  pada  media  tanpa  BAP  tumbuh berkecambah lebih cepat.  Pada umur yang sama tunas pamelo pada media tanpa BAP tumbuh lebih besar daripada tunas pamelo yang  ditanam  pada  media  yang  diberi perlakuan BAP.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa  perlakuan  BAP  berpengaruh
terhadap  peubah  jumlah  tunas  4  sampai  8 minggu setelah tanam (MST). Hasil uji lanjut pengaruh  konsentrasi  BAP    terhadap  jumlah tunas disajikan pada Tabel 3.
Tabel 3. Pengaruh konsentrasi BAP terhadap jumlah  tunas      perkecambahan biji pamelo secara in vitro Konsentrasi BAP Jumlah Tunas 2 MST  4 MST  6 MST  8 MST 0 mg/l 2 mg/l 1,18 a 1,36  b  1,44 b  1,49 b 0,89 a 1,64  a  1,70 a  1,74 a Keterangan: Angka yang diikuti oleh huruf yang sama pada kolom yang sama  tidak berbeda nyata berdasarkan  uji  DMRT  pada  taraf  0,05. MST = minggu setelah tanam.
Tabel 3 menunjukkan bahwa perlakuan  konsentrasi  BAP  2  mg/l  memiliki jumlah  tunas  yang  lebih  banyak  dari  pada konsentrasi 0 mg/l. Hal ini disebabkan karena penggunaan  ZPT  seperti  BAP  sangat  efektif untuk merangsang pertumbuhan tunas.
Pada  peubah  jumlah  daun,  perlakuan BAP  memberi  pengaruh  pada  pertumbuhan biji  pamelo  secara in  vitro .    Hasil  uji  lanjut pengaruh  konsentrasi  BAP    terhadap  jumlah daun disajikan pada   Tabel 4.
Tabel 4. Pengaruh konsentrasi BAP terhadap jumlah  daun      perkecambahan  biji pamelo secara in vitro Konsentrasi BAP Jumlah Daun 2 MST  4 MST  6 MST 8 MST 0 mg/l 1,42 a  1,73 a  1,44 b 1,49 b 2 mg/l 0,89 a  1,64  a  1,70 a 1,74 a Keterangan: Angka yang diikuti oleh huruf yang sama pada kolom yang sama  tidak berbeda nyata berdasarkan  uji  DMRT  pada  taraf  0,05. MST = minggu setelah tanam.

## Pembahasan
Perlakuan  BAP  yang  diberikan  pada media  MS  sebagai  media  dasar,  ternyata berpengaruh  terhadap  perkecambahan  biji pamelo secara in vitro . Pemberian BAP pada awalnya tumbuh tunas dan akar lebih lambat, namun  ternyata  dapat  menyebabkan  biji
Jurnal Agrium 17(2), September 2020 P-ISSN 1829-9288 E-ISSN 2655-1837
menghasilkan  tunas  dan  daun  yang  lebih banyak (Tabel 1 sampai 4).
Sitokinin  adalah  jenis  fitohormon yang dapat merangsang terjadinya pembelahan  mitosis  pada  meristem internal.  Peningkatan  pembelahan  sel tersebut dapat meningkatkan pembentukan jaringan berpengangkut pada tunas samping.  Oleh  karena  itu tunas samping akan mendapatkan energi hasil metabolisme  (Taiz  &  Zeiger,  2002). Peningkatan  konsentrasi  BAP  cenderung meningkatkan  persentase  pembentukan tunas hingga konsentrasi 2 mg/L BAP, dan menurun  seiring  peningkatan  konsentrasi. Peningkatan  konsentrasi  BAP  yang  lebih tinggi kemungkinan akan menjadi penghambat  untuk  pembentukan  tunas, sedangkan  penurunan  konsentrasi    BAP yang  diberikan  menunjukkan  bahwa  BAP eksogen belum cukup memicu pembentukan  tunas  yang  lebih  banyak (Yuniati et al., 2018).
BAP  merupakan  zat  pengatur tumbuh yang mampu merangsang pertumbuhan  daun,  akan  tetapi  semakin tinggi  konsentrasi  BAP  yang  diberikan maka  jumlah  daun  yang  didapatkan semakin sedikit. Pemberian BAP berpengaruh  terhadap  jumlah  daun. Penelitian  Fithriyandini, et  al. (2015)  dan Yudhanto  dan  Wiendi  (2015)  pada tanaman  anggrek  bulan    dan  kantong semar didapati bahwa pemberian BAP 2,5 mg/l  memberikan  pengaruh  terhadap jumlah daun.
Pada  perkecambahan  biji  pamelo, eksplan  yang  dibelah  dua  sudah  dapat membentuk  tunas  bahkan  pada  media tanpa BAP. Hal ini dikarenakan kandungan  hormon  endogen  dan  nutrisi yang  terdapat  dalam  biji  cukup  tinggi sehingga  dapat  memacu  pembentukan tunas  hingga  tahapan  yang  paling sempurna walaupun tidak ditambahkan zat pengatur  tumbuh  dari  luar.  Media  MS umum  digunakan  untuk  induksi  tunas  dan mengandung  nutrisi  yang  sesuai  untuk menunjang  pertumbuhan  optimal  dari tanaman secara in vitro (Razdan, 2003).
Eksplan  biji  pamelo  tumbuh  dengan baik,  membentuk  tunas  dan  daun,  serta memiliki  panjang  tanaman  yang  normal. Memanjangnya ukuran eksplan menunjukkan terjadinya pertumbuhan pada eksplan tersebut  karena  nutrisi  dan  suplai  makanan terpenuhi.  Hal  yang  sama  juga  di  dapatkan pada  penelitian  Rahman et  al .,  (2008), dimana  ekspalan  kotiledon Citrus  maxima (Burm)  Merr.  cv  Cikoneng  di  semua perlakuan  mengalami  penambahan  ukuran atau  pemanjangan  eksplan  sampai  kotiledon bertunas.  Pemanjangan  juga  terjadi  pada eksplan pucuk jarak pagar, sebelum terbentuk kalus atau langsung membentuk tunas.
Perlakuan  biji  pamelo  dibelah  dua memiliki pertumbuhan tunas yang lebih baik di  hampir  semua  peubah  yang  diamati. Pemotongan biji menyebabkan terjadi kontak antara  permukaan  biji  dan  media  yang mengandung  hara  dan  zat  pengatur  tumbuh tanaman. Romeida (2007) menyatakan bahwa biji  manggis  dibelah  memiliki  jumlah  tunas yang tinggi. Biji pamelo yang dibelah dengan posisi telungkup dan bagian luka menghadap media  menyebabkan  terjadi  kontak  langsung antara  media  dengan  biji  pamelo  yang dilukai.  Oleh  karena  itu  biji  pamelo  yang ditanam pada media perlakuan BAP memiliki jumlah tunas yang lebih banyak.

## KESIMPULAN
Pemberian BAP dapat mempengaruhi pertumbuhan  eksplan  biji  pamelo  secara in vitro .    Pemberian  BAP  2  mg/L  pada  awal menyebabkan  biji  lebih  lambat  membentuk tunas  dan  akar,  namun  pada  akhir pengamatan didapati biji menghasilkan tunas dan daun yang lebih banyak

## DAFTAR PUSTAKA
Agisimanto D, Sutarto I, Supriyanto A. 2005. Induksi    embriogenesis    somatik jeruk    siam    Pontianak  ( Citrus suhuiensis L.)    dan    manis    pacitan ( Citrus  sinensis L.  Osbeck)  dari    biji abortus    dan    normal.  Prosiding
Jurnal Agrium 17(2), September 2020 P-ISSN 1829-9288 E-ISSN 2655-1837
Seminar  Nasional  Jeruk  Tropika Indonesia 2005: 122-130.
Agustina  M,  Maisura,  Handayani  RS.
2020.  The Effect of Different Seed Cutting Treatments and Concentrations    of  BAP  for  the Successful  In  Vitro  Micrografting of Mangosteen (Garcinia mangostana L.). Journal of Tropical  Horticult u re Vol.  3  (1)  :
38-42.
Almeida  RPP,  Nasciemento  FE,  Chau  J, Prado  SS,  Tsai  CW,  Lopes.  2008, Genetic  Structure  and  Biology  of Xylella  fastidiosa  Strain  Causing Disease  in  Citrus  and  Coffe  in Brazil ,  Appl  Environ  Microbiol 74(12):3690-3701
Fatonah  S,  Lestari  W,  Isda MN,  Purba  L. 2018. In vitro shoot regeneration of
Citrus  nobilis Lour.  from  intact seed  and  cotyledon  explants. SABRAO Journal of Breeding and Genetics 50 (2) 168-179.
Fithriyandini    A,  Maghfoer    M  D,
Wardiyati,  T.  2015.  Pengaruh Media Dasar dan 6- benzylaminopurine (BAP) Terhadap Pertumbuhan dan Perkembangan  Nodus  Tangkai Bunga Anggrek Bulan ( Phalaenopsis  amabilis )  Dalam Perbanyakan  Secara  in  Vitro. Jurnal  Produksi  Tanaman .  3  (1):
43-49. doi: 10.21176/protan.
v3i1.167 .
Handayani  I,  Nazirah  L,  Handayani  RS. 2020.  The Effect of BAP and IBA on  In  Vitro  Root  Cultures  of Acehnese  Pomelo  ( Citrus  maxima (Burm.) Merr.). Journal of Tropical Horticulture Vol. 3 (1) : 38-42 Handayani RS, Maisura, Risky DA. 2017. Pengaruh Letak Posisi Eksplan dan Sitokinin  Pada  Perkecambahan Biji Manggis (Garcinia mangostana L.)  Lokal  Aceh  Secara  in-Vitro. Jurnal Agrium Vol. 14(2) :1-8 Handayani  RS,  Poerwanto  R,  Sobir, Purwito  A,  Ermayanti  TM.  2013.
Pengaruh  Batang  Bawah  dan  Jenis Tunas  Pada  Mikrograftting  Manggis ( Garcinia mangostana L.)  Secara In Vitro . J.  Agron.  Indonesia .  41  (1)  : 47-53.
Rahman  IH,  Purwoko  B  S,  Dewi  IS.  2008. Perbanyakan  Jeruk  Besar Citrus maxima (Burm.)  Merr.  Kultivar
Cikoneng  dengan  Eksplan  Kotiledon dan  Epikotil.  Makalah  Seminar Departemen Agronomi dan Hortikultura, IPB, Bogor.
Rahayu  A,  Susanto  S,  Purwanto  BS,  Dewi IS.  2012. Karakter  Morfologi  dan Kimia  Kultivar  Pamelo  Berbiji  dan Tanpa Biji. J.Agron. Indonsia 40:48- 55.
Razdan,  M.  K.  2003.  Introduction  to  Plant Tissue Culture. 2nd Edition. Science Publisher , Inc. 377 hal.
Romeida  A.  2007.  Respon  berbagai  tipe eksplan  biji  manggis  ( Garcinia mangostana L.)  pada  berbagai konsentrasi  benzyl  amino  purin (BAP)  terhadap  pembentukan  dan regenerasi  polyembrioni  secara in vitro . Jurnal  Akta  Agrosia .  10  (2): 162-166.
Srivastava  LM.  2002.  Plant  Growth  and
Development Hormon and Envirotment.Accademic Press, London.772 p.
Susanto  S.  2004,  Perubahan  Kwalitas  Jeruk Besar  (  Citrus  grandis  (L)  osbeck) yang  disimpan  dan  dibiarkan  di pohon. Hayati 11 :25-29.
Taiz L, Zeiger E. 2002. Plant Physiology The Benyamin  /  Cummgs  Publishing  Co. Inc. New York. 672 p
Tyas KN, Susanto S, Dewi IS,      Khumaida N.  2013.  Konservasi  Invitro  Pamelo ( Citrus  maxima (Burm.)  Merr) Melalui  Pertumbuhan  Lambat.  Jurnal Agronomy. 41 (1) : 32-39
Yudhanto    A  S,  Wiendi  NMA.  2015. Pengaruh  Pemberian  Auksin  (NAA) dengan  Sitokinin  (BAP,  Kinetin  dan 2ip)  terhadap  Daya  Proliferasi Tanaman Kantong Semar (Nepenthes
Jurnal Agrium 17(2), September 2020 P-ISSN 1829-9288 E-ISSN 2655-1837
mirabilis)  Secara  In  Vitro.    Bul. Agrohorti 3 (3): 276–284. Yuniati F, Haryanti S, Prihastanti E. 2018. Pengaruh  Hormon  dan  Ukuran Eksplan  terhadap  Pertumbuhan Mata  Tunas  Tanaman  Pisang ( Musa  paradisiaca var.  Raja
Bulu)  Secara  In  Vitro.  Bul. Anatomi  dan  Fisiologi.  3(1):  20- 28.
Wijayanto  T.  2011.  Produksi  bibit  jeruk keprok  ( Citrus  reticulata )  dan  jeruk siam  ( Citrus  sinensis )  secara in-vitro yang  bebas  penyakit  CVPD  di Sulawesi  Tenggara.  Jurnal  Agriplus Volume  21: 136-142.