## UJI AKTIVITAS ANTIDIABETES EKSTRAK ETANOL BROKOLI
( Brassica Oleracea Var. Italica) PADA TIKUS PUTIH JANTAN
Antidiabetic Activity Test of Ethanol Extract Brocoli (Brassica oleracea var. italica) in White Male Rats
NOVANDI PURBA 1 , DIAH TRI HANDAYANI 2 , KRISTIAN CAHAYANI ZEBUA 3
INSTITUT KESEHATAN MEDISTRA LUBUK PAKAM, JLN. SUDIRMAN NO.38 LUBUK PAKAM, KABUPATEN DELI SERDANG, SUMATERA UTARA – INDONESIA e-mail : gultomvandi6196@gmail.com

## Abstrak
Diabetes adalah penyakit kronis yang ditandai dengan kadar glukosa darah yang berlebihan yang disebabkan oleh kekurangan insulin secara absolut dan relatif. Tahapan  dalam  penelitian  ini  adalah  pengambilan  sampel,  identifikasi sampel/tanaman,  penyederhanaan,  penyaringan  penyederhanaan,  penyiapan ekstrak  dengan  cara  maserasi.  Metode  yang  digunakan  dalam  uji  aktivitas diabetes  menggunakan  glukometer  untuk  menginduksi  aloksan  pada  tikus dengan  dosis  150  mg/kg  berat  badan.  Hewan  uji  adalah  25  ekor  tikus  yang dibagi  menjadi  5  kelompok  perlakuan  yaitu  CMC  Na  0,5%  (kontrol  negatif), glibenclamide  (kontrol  positif)  0,45  mg/kg  berat  badan  dan  dosis  EEB  200 mg/kg berat badan, 400 mg/kg berat badan dan 600. mg/kg berat badan.kg B.W.  kg  bb  sebagai  bahan  uji  yang  diberikan  secara  oral.  Pengukuran  nilai glukosa darah menurut Allox dan pada hari ke 3, 5 dan 7 setelah pemberian zat uji yaitu EEB. Data hasil pengujian dianalisis secara statistik menggunakan one way  ANOVA  pada  tingkat  kepercayaan  95%  dilanjutkan  dengan  uji  post  hoc Tukey. Hasil skrining fitokimia menunjukkan bahwa EEB mengandung alkaloid, flavonoid, tanin, saponin dan glikosida. Hasil uji efikasi diabetes menunjukkan bahwa EEB dosis 200, 400 dan 600 mg/kgBB memiliki efek antidiabetes pada tikus putih jantan. Dosis EEB 600 mg/kg adalah dosis yang paling efektif. Hasil uji Post hoc Tukey menunjukkan bahwa EEB dosis 200 mg/kg, 400 mg/kg dan 600 mg/kg tidak berbeda nyata dengan kontrol positif glibenklamid 0,45 mg/kg (p>0,05) dan 200,400 ug dibedakan. dan 600 mg/kg BB berbeda nyata dengan kontrol negatif CMC Na 0,5% (p<0,05).
Kata kunci : Aloksan, antidiabetes, brokoli , tikus putih jantan

## Abstract
Diabetes is a chronic disease characterized by excessive  blood glucose levels caused by absolute and relative insulin deficiency. The stages in this study were sampling,  identification  of  samples/plants,  simplification,  simplification screening, and preparation of extracts by maceration. The method used in the diabetes activity test uses a glucometer to induce alloxan in rats at a dose of 150 mg/kg body weight. The test animals were 25 rats which were divided into 5  treatment  groups  namely  CMC  Na  0.5%  (negative  control),  glibenclamide
(positive  control)  0.45  mg/kg  body  weight  and  EEB  dose  200  mg/kg  body weight, 400 mg/kg body weight and 600. mg/kg body weight. kg B.W. kg body weight as a test material given orally. Measurement of blood glucose values according  to  Allox  and  on  days  3,  5,  and  7  after  administration  of  the  test substance, namely EEB. The test results data were analyzed statistically using one-way ANOVA at a 95% confidence level followed by Tukey's post hoc test. The results of the phytochemical screening showed that EEB contains alkaloids, flavonoids,  tannins,  saponins,  and  glycosides.  The  results  of  the  diabetes efficacy test showed that EEB doses of 200, 400, and 600 mg/kg BW had an anti-diabetic effect on male white rats. The EEB dose of 600 mg/kg is the most effective. Post hoc Tukey test results showed that EEB doses of 200 mg/kg, 400 mg/kg, and 600 mg/kg were not significantly different from the positive control glibenclamide 0.45 mg/kg (p>0.05) and 200,400 ug. and 600 mg/kg BW were significantly different from the negative control CMC Na 0.5% (p<0.05).
Keywords : Alloxan, antidiabetic, broccoli, white male rats

## 1. PENDAHULUAN
Pada tahun 2015, jumlah penderita  diabetes  di  seluruh  dunia adalah 415 juta orang, dan pada tahun 2040 diprediksi menjadi 642 juta orang. Indonesia menempati urutan ke-7 dunia dengan 10 juta penderita diabetes (IDF, 2015).  Data  menunjukkan  bahwa prevalensi diabetes di Indonesia meningkat  dari  1,1  persen  pada  tahun 2007  menjadi  2,1  persen  pada  tahun 2013.  Prevalensi  penderita  diabetes yang  terdiagnosis  adalah  1,5  persen atau 1.060.136.176.689.336 orang berusia  >  14  tahun  (Riskesdas,  2013). Pada  tahun  2013  di  Sumatera  Selatan, dari  5.479.724  penduduk  yang  berusia di  atas  14  tahun,  49.318  (0,9%) terdiagnosis diabetes, sedangkan 21.919 (1,3%) tidak terdiagnosis namun memiliki gejala diabetes (Kemenkes RI, 2013).  Diabetes  adalah  istilah  medis untuk  penyakit  yang  dikenal  dengan penyakit  kencing  manis  atau  kencing manis  di  Indonesia.  Penyakit  ini merupakan  kumpulan  gejala  pada manusia  yang  ditandai  dengan  gula darah  yang  lebih  tinggi  dari  normal
(hiperglikemia) akibat kekurangan insulin  secara  absolut  dan  relatif. Penyakit  ini  dapat  terjadi  pada  semua usia  dan  bersifat  menahun  atau menahun.  Masalahnya  adalah  bahwa lebih dari 50% dari mereka yang terkena dampak  tidak  mengetahui  bahwa mereka mengidap penyakit tersebut dan tidak  mencari  pertolongan  medis,  yang menyebabkan berbagai komplikasi kronis  yang  dapat  mengancam  jiwa (Khotimah, Khusnul, 2014)
Diabetes  dapat  diobati  dengan pemberian  obat  sintetik  berupa  insulin dan  obat  hipoglikemik  oral  (OHO). Insulin diberikan melalui injeksi sedangkan  pemberian  OHO  dapat berupa sulfonylurea, meglitinide, biguanide,  alpha-glucosidase  inhibitor, thiazolidinedione, vildagliptin,
dan
amylin. Suloniurea salah satunya adalah glibenklamid (Nugroho, S.A. dan Purwanti,  Okti,  S.,  2015).  Sementara obat  sintetik  ini  dapat  mengontrol  gula darah  pada  penderita  diabetes  melitus, penggunaan jangka panjang menyebabkan  efek  samping  seperti kerusakan  ginjal  dan  hati.  Fokusnya adalah  pada  pasien  dengan  diabetes
melitus.  Beberapa  penelitian  telah dilakukan mengenai keefektifan berbagai bahan alam dalam
menurunkan  gula  darah  dan  kadar  LDL darah (Setyoadi et al . 2014.)
Brokoli (Brassica  oleracea  var. italica) adalah  kelompok  sayuran  hijau yang berkhasiat sebagai antikanker dan antioksidan.  Vitamin  A  dan  C  mampu menurunkan gula darah dan kondisi DM dalam mengatasi komplikasi. Murashima et  al membuktikan  bahwa  kecambah brokoli  segar  yang  dikonsumsi  sekitar 100 gram per minggu mampu menurunkan  kadar  LDL  secara  efektif (Bora, C., 2015).
Uji
skrining fitokimia menunjukkan adanya alkaloid, saponin, tanin, flavonoid dan steroid pada brokoli (Lutfiyati  et  al,  2017).  Penelitian sebelumnya  dilakukan  di  Indonesia, dimana jus brokoli diberikan pada tikus dengan  dosis  2,52  g/kg  selama  dua minggu,  menghasilkan  penurunan  gula darah  yang  signifikan  sebesar  42%. Selain itu, penelitian sebelumnya menunjukkan  bahwa  glukosa  darah puasa  (FBP)  menurun  selama  empat minggu  setelah  pemberian  brokoli kukus,  dengan  rata-rata  penurunan glukosa  darah  puasa  sebesar  11,73 mg/dL  (Wulandari et  al ,  2014). Berdasarkan  paparan  di  atas,  peneliti tertarik  untuk  menguji  ekstrak  etanol brokoli  sebagai antidiabetes.

## 2. METODE Alat dan Bahan
Peralatan  yang  dipakai  adalah alat gelas laboratorium, aluminium foil, saringan, mixer, botol maserasi, bejana porselin, desikator, slide kaca, penutup (selimut), kertas saring, kandang tikus, tongkat kapas, oven pengering, mikroskop,  mortar,  kasar.  neraca, neraca  analitik,  neraca  hewan,  oven, probe  oral,  evaporator  vakum  putar, pipet, pinset, evaporator putar, tabung infus,  set  distilasi  untuk  penentuan
kadar  air,  stopwatch,  spatula,  jarum suntik,  oven,  vial.  Instrumen  yang digunakan  untuk  mengukur  glukosa darah  antara  lain  blood  glucose  meter, strip tes, jarum tabung, gunting, blood lancets,  timbangan  digital,  probe  oral, timbangan  Ohaus,  pipet  ukur,  gelas kimia,  tongkat  pencampur,  tabung, gelas ukur, kamera, dan pena.
Bahan  yang  dipakai  adalah asetat  glasial,  amil  alkohol,  asam klorida, asam sulfat, besi klorida, etanol 96%,  natrium  klorida,  isopropanol, natrium  karboksimetil  selulosa  (CMC Na),  kloroform,  serbuk.  Magnesium, sukrosa, tablet Glibenclamide®
(IndoFarma),  timbal(II)  asetat,  reagen Mayer,  reagen  Bouchardat,  reagen Dragendorff,  reagen  Molish,  metanol, natrium  sulfat  anhidrat,  toluena,  kira- kira larutan 0,9 µNaCl.

## Prosedur Kerja
Jenis  penelitian  yang  digunakan penulis  dengan  model  desain  metode eksperimen.  Tahapan  penelitian  adalah identifikasi  tumbuhan,  pengambilan sampel,
preparasi
simplisia, karakterisasi simplisia, skrining simplisia,  preparat  ekstrak  akibat maserasi, karakterisasi ekstrak, skrining fitokimia  ekstrak,  preparasi  hewan percobaan  dan  pengujian  aktivitas antidiabetes  dalam  percobaan.  hewan (tikus putih jantan) oleh aloksan. Bahan penelitian  dianalisis  dengan  metode ANOVA dan uji t berpasangan menggunakan SPSS. "Penelitian ini sudah  layak  etik  dengan  nomor  Surat Layak Etik (SLE) 021.D/KEP- MLP/I/2023."

## 3. HASIL Skrining Fitokimia
Simplisia  brokoli  dan  ekstrak  etanol merupakan  analisis  kualitatif  metabolit sekunder.  Ekstrak  yang  diperoleh  dari bahan  alam  terdiri  dari  berbagai
metabolit  sekunder  yang  berperan secara biologis.
Hasil  skrining  membuktikan  ada flavonoid,  alkaloid,  saponin,  tanin  dan glikosida  serta  diketahui  memiliki potensi  antidiabetes  (Cartea et  al , 2013). Hasil skrining fitokimia disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil Skrining Fitokimia No Senyawa Metabolit Sekunder Hasil 1 Alkaloid + 2 Saponin + 3 Tanin + 4 Glikosida + 5 Flavonoid +
Deskripsi hasil: +  =  Memberi  feedback  positif (mengandung senyawa)
– = Memberikan reaksi negatif (tidak mengandung senyawa)
Hasil pemeriksaan makroskopik
Hasil pemeriksaan makroskopis serbuk  simplisia  brokoli  berupa  serbuk halus,  berwarna  coklat  kehijauan  dan berbau khas.
Hasil studi karakterisasi Hasil  karakterisasi  serbuk  simplisia brokoli tercantum pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil Pemeriksaan Mutu
Simplisia
Metode distilasi azeotrop
menunjukkan  kadar  air  simplisia
adalah  5,80%.  Hasil  ini  menunjukkan bahwa  kesederhanaan  telah  mencapai tingkat yang dipersyaratkan.
Kadar abu Simplisia untuk mengetahui konsentrasi senyawa anorganik  tingkat  cemaran  logam. Kadar abu total diperoleh 12,70% dan kadar  abu  tidak  larut  dalam  asam adalah 8,65%.
Ekstrak  larut  air  sebesar  5,89% sedangkan ekstrak larut etanol sebesar 17,40%.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa jumlah atraktan pada pelarut air lebih besar  dibandingkan  pada  pelarut etanol.

## Pengukuran  Rerata  Kadar  Glukosa Darah Puasa pada Tikus
Hasil  rata-rata  pengukuran  KGD puasa  tikus  untuk  masing-masing kelompok  perlakuan  ditunjukkan  pada Tabel  3.  Terlihat  bahwa  tidak  ada perbedaan  yang  signifikan  antara kelompok  perlakuan  (p>0,05).  Hasil rata-rata  pengukuran  KGD  puasa  tikus sebelum  induksi  aloksan  ditunjukkan pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil pengukuran KGD
sebelum diinduksi Kelompok KGD puasa rata- rata tikus (mg/dl) CMC Na 0,5% 96.75 ± 1.92 Glibenklamid 0,45 mg/kg BB 96.00 ± 4.57 EEB 200 mg/kg BB 97.00 ± 2.00 EEB 400 mg/kg BB 97.21 ± 3.39 EEB 600 mg/kg BB 95.22 ± 1.85
Hasil  pengukuran  KGD  rata-rata puasa  pada  tikus  setelah  induksi aloksan
Hasil  pengukuran rata-rata  KGD puasa tikus setelah induksi aloksan pada
No Parameter Hasil (%) 1 Kadar sari larut air 3,48% 2 Kadar sari larut etanol 1,18% 3 Kadar abu total 12,70% 4 Kadar abu tidak larut asam 8,65% 5 Kadar air 5,80%
Jurnal Farmasi,  e-ISSN: 2655-0814 Vol. 5 No.2 Edisi November 2022-April 2023 http://ejournal.medistra.ac.id/index.php/JFM ============================================================================================ Received: 09 Maret 2023 :: Accepted: 30 April 2023 :: Published: 30 April 2023
masing-masing  kelompok  perlakuan ditunjukkan pada Tabel 4.
Table 4. Hasil pengukuran KGD setelah diinduksi Kelompok KGD puasa rata- rata tikus (mg/dl) CMC Na 0,5% 254.25 ± 4.86 Glibenklamid 0,45 mg/kg BB 247.40 ± 5.88 EEB 200 mg/kg BB 254.60 ± 4.47 EEB 400 mg/kg BB 246.00 ± 4.76 EEB 600 mg/kg BB 254.60 ± 1.85
Berdasarkan  Tabel  4,  pemberian larutan  aloksan  dengan  dosis  40 mg/kgBB  pada  semua  hewan  coba menghasilkan  nilai  KGD  rata-rata sebesar 251,37 mg/dl yang selanjutnya disebut tikus diabetik.
Tikus diabetes menerima pengobatan oral.  Kelompok  I  mendapat  suspensi CMC-Na  0,5%,  kelompok  II  mendapat glibenclamide  0,45  mg/kg,  masing- masing kelompok II,II dan IV mendapat suspensi  ekstrak  etanol  brokoli  dosis 200  mg/kg;  400  mg/kgBB;  600 mg/kgBB.  KGD  tikus  menurun  pada setiap kelompok seperti yang ada pada Tabel 5.
Tabel 5 Hasil KGD setelah perlakuan pada masing-masing kelompok Kelompok hewan KGD Puasa (mg/dl) KGD setelah induksi Aloksan KGD Setelah Perlakuan ± SEM H-3 H-5 H-7 CMC Na 0,5% 96.75 ±1.92 254.25 ± 4.86 207.00 ± 1.86 205.50 ± 2.15 210.00 ± 1.61 Glibenklamid 0,45 mg/kg BB 96.00 ± 4.57 247.40 ± 5.88 167,40 ± 3.82 134.60 ± 5.33 96,40 ± 4.77 EEB 200 mg/kg BB 97.00 ± 2.00 254.60 ± 4.47 188.80 ± 1.35 159.80 ± 1.85 128.00 ± 2.09 EEB 400 mg/kg BB 97.21 ± 3.39 246.00 ± 4.76 178.40 ± 2.71 144.00 ± 4.00 116.40 ± 1.60 EEB 600 mg/kg BB 95.22 ±1.85 254.60 ± 1.85 155.60 ± 4.53 129.40 ± 4.08 107.40 ± 5.00
Hasil  perhitungan  penurunan  KGD tikus hari ke-3, 5 dan 7
Dalam hal ini, setelah tikus mendapat pemberian  suspensi  CMC  Na  0,5% secara oral setelah perlakuan, kelompok II mendapat suspensi glibenklamid 0,45 mg/kg berat badan, dan masing-masing
kelompok  III,IV  dan  V  mendapat suspensi ekstrak etanol brokoli dengan dosis 200; 400 mg/kg; 600 mg/kg berat badan.  Berdasarkan  hasil  perbedaan kadar  glukosa  darah  pada  hari  ke  3,  5 dan  7  setelah  induksi  dan  perlakuan disajikan pada Tabel 6.
Tabel 6. Selisih Kadar Gula Darah Sesudah Induksi dengan Sesudah Perlakuan Kelompok hewan KGD setelah induksi Larutan ΔKGD Sesudah Induksi-Sesudah Perlakuan ± SEM Δ (Sesudah Δ (Sesudah Δ(Sesuda h -
Jurnal Farmasi,  e-ISSN: 2655-0814 Vol. 5 No.2 Edisi November 2022-April 2023 http://ejournal.medistra.ac.id/index.php/JFM ============================================================================================ Received: 09 Maret 2023 :: Accepted: 30 April 2023 :: Published: 30 April 2023
- H3) - H5) H7) CMC Na 0,5% 254.25 ± 4.86  47.25 ± 4.58 46.00 ± 6.04 42.40± 5.98 Glibenklamid 0,45 mg/kg BB 247.40 ± 5.88  80.00 ± 5.03 112.80 ±3.59 151.00 ±3.63 EEB  200  mg/kg BB 254.60 ± 4.47  65.80 ± 5.00 94.80 ± 5.00 126.60 ± 6.03 EEB  400  mg/kg BB 246.00 ± 4.76  67.60 ± 4.41 102.00  ± 4.41 129.60 ± 6.14 EEB  600  mg/kg BB 254.60 ± 1.85  99.00 ± 5.16 125.20  ± 5.16 147.20 ± 5.83 Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh, EEB pada dosis 200 mg/kg, 400 mg/kg dan 600 mg/kg memiliki efek antidiabetes  pada  tikus  putih  jantan dengan  dosis  0,45  mg/kg  aloksan. Penelitian  ini  menyatakan  bahwa senyawa flavonoid dalam EEB dicurigai. Flavonoid  memiliki  efek  antioksidan yang  sangat  baik  dan  dipercaya  dapat melindungi tubuh dari kerusakan akibat spesies  oksigen  reaktif,  sehingga mencegah timbulnya penyakit
degeneratif  seperti  diabetes  melitus. Dalam mekanisme
penyembuhan diabetes,  flavonoid  bekerja  dengan meningkatkan sensitivitas reseptor insulin (Adiyati, P.N., 2018.).
Senyawa  tannin  dapat  merangsang metabolisme glukosa, sehingga penimbunan glukosa dalam darah dapat dihindari,  meningkatkan  glikogenesis, berperan  sebagai  astringent  atau chelating agent,
yang dapat
mengecilkan  membran  epitel  usus halus, sehingga mengurangi penyerapan  sari  makanan,  mencegah gula cincin, sehingga laju kenaikan gula darah  tidak  terlalu  tinggi  (Prameswari dan  Simon,  2014).  Tanin  juga  dapat meningkatkan enzim antioksidan seperti superoksida  dismutase  (SOD)  dan katalase (CAT) yang melindungi jaringan dari radikal bebas (Anggraini et al, 2017).
Berdasarkan  studi  tentang  efek antidiabetes EEB yang diinduksi alloxan, ditemukan bahwa EEB pada dosis 200; 400;  600 mg/kg memiliki efek antidiabetes,  yang  tercermin  dalam penurunan gula darah. Tingkat Kelompok  suspensi  CMC  Na  0,5% berbeda  nyata  dengan  glibenclamide 0,45 mg/kg berat badan, dosis EEB 200, 400 dan 600 mg/kg berat badan. Dosis antidiabetes  yang  paling  efektif  pada tikus  jantan  yang  diinduksi  aloksan adalah 600 mg/kg dibandingkan dengan 400 dan 200 mg/kg.
Perbedaan bermakna (p<0,05) berdasarkan analisis statistik menggunakan uji T berpasangan kadar glukosa  darah  sebelum  perlakuan dengan kelompok ekstrak atau aloksan saja setelah perlakuan. Perbedaan pada masing-masing  kelompok  perlakuan juga dapat dilihat dengan menggunakan ANOVA.  Berdasarkan  hasil  analisis statistik  terdapat  perbedaan  bermakna pada  kelompok  pasca  perlakuan  yaitu antara kelompok kontrol negatif dengan kelompok positif, kelompok EEB dengan dosis 200; 400; 600 mg/kg.

## 5. KESIMPULAN
1. Ekstrak etanol
brokoli mengandung  glikosida,  alkaloid, flavonoid  tanin,  saponin  dan glikosida
dengan aktivitas
antidiabetes  pada  tikus  putih jantan.
2. Ekstrak  etanol  brokoli  dosis  200; 400; 600 mg/kg bb memiliki efek antidiabetes  pada  tikus  putih jantan  dengan  aloksan  0,45 mg/kg bb.
3. Dosis ekstrak etanol brokoli yang paling  efektif  untuk  menurunkan gula darah pada tikus putih jantan adalah 600 mg/kgBB.
4. Terdapat  perbedaan  penurunan kadar  gula  darah  yang  signifikan antara  kelompok  ekstrak  etanol brokoli  200;  400  mg/kg;  600 mg/kg.

## DAFTAR PUSTAKA
Adiyati,  P.N.,  2018.  Berbagai  Jenis Ektoparasit Pada Hewan Percobaan  Tikus  Putih  Sprague Dawley  (Rattus  norvegicus).
Disertasi.  Fakultas  Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor. Bogor. E-Revuo.uajy.ac.id Anggraini,  Dian  Isti  kaj  Mentari  Olivia Fatharanni. 2017. Khasiat brokoli (Brassica  oleracea  var.  italica) untuk  menurunkan  kolesterol total pada pasien obesitas. yang paling Vol. 6(1). Halaman 64-7 Bora,  C.,  2015.  Manfaat  Kesehatan Brokoli (rete) Unduh hammer 8,
2015
dari www.buzzle.com/articles brokoli-manfaat-kesehatan.html
Cartea , M. E. , Francisco M. , Soengas ,
P. dan Velasco , P. , 2013 "Fenol Metabolik dalam Sayuran Brassica", Molekul, Vol.16, hal.251-2 Erworben [04.
Nopember 2015].
Dheer R. dan Bhatnagar P., 2015, Studi Efek Antidiabetes Barleria Federasi  Diabetes  Internasional  (IDF),
(2015).  IDF  Diabetes  Atlas, diambil 10 November 2016, dari http://www.idf.org/atlasmap/atl asmap .
Kemenkes RI. 2013. Laporan Hasil Riset Kesehatan  Dasar  (Riskesdas) Indonesia tahun 2013. Jakarta : Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan Kemenkes RI. Khotimah,  Khusnul,  2014.  Sana  kaj Bongusta untuk Penderita Diabetes Mellitus Rapha Publishing, Yogyakarta,
Indonesia, S. 6-7.
Lutfiyati, H., F. Yuliastuti, I.W. Hidayat,
P.Staf  dan  M.P.K.  Komentar,
2017.  Skrining  Fitokimia  von Ethanolextrakt aus Brokkoli (Brasscica oleracea L.var italica). Jurnal, Universitas Muhammadiyah  Magelang,  S. 93-98. Nugroho,  S.A.  &  Purwanti,  Okti,  S. (2015). Hubungan Antara Tingkat  stress  dengan  Kadar Gula Darah Pada Pasien Diabetes Melitus di Wilayah Kerja Puskesmas Sukoharjo 1
Kabupaten.  Surakarta:  Naskah Publikasi UMS.
Perhimpunan  Endokrinologi  Indonesia (Parkeni),  2015.  "Penanganan Diabetes Mellitus"
Riset  Kesehatan  Dasar,  2013.  Jakarta:
Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan,
Kementerian Kesehatan Republik Indonesia.
Setyoadi, Yulian, W. U., Leli, Y., Lowita,
F. S. 2014. Jus Brokoli Menurunkan  Kadar  Low  Density Lipoprotein  Darah  Pada  Tikus Model Diabetes. Jurnal Kedokteran Brawijaya. Vol 28(1): 26-29 Wulandari,  Eshti  dan  Wirawani,  Yekti. 2014. Pengaruh Pemberian Brokoli Kukus (Brassica Oleracea) Terhadap Kadar Glukosa  Darah  Puasa  Wanita Prediabetes. Journal of Nutrition
College, Vol 3, No 4, Tahun 2014.