## UJI EFEKTIVITAS ANTIBAKTERI DARI EKSTRAK DAUN KIPAIT (Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray) TERHADAP BAKTERI PROPIONIBACTERIUM ACNES
Neneng Sri Purwaningsih * , Sheila Meitania Utami, Widia Apriandini STIKes Kharisma Persada, Tangerang Selatan, 15417, Indonesia

## A RTICLE I NFORMATION

## A B S T R A C T

## *Corresponding Author
Neneng Sri Purwaningsih E-mail : neneng@masda.ac.id
There are 40-80% of acne cases in Southeast Asia while the prevalence of acne in Indonesia  is quite high, which ranges  from 85-100% of people.
Acne  is  caused  by  the  bacterium  Propionibacterium  acnes  or  abbreviated P. acnes.  Indonesia is very rich in biological natural resources in the form of  medicinal  plants.  Kipait  leaves  contain  alkaloids,  saponins,  tannins, phenolics,  flavonoids,  triterpenoids,  steroids,  glycosides.  One  of  the important phytochemical  compounds and has potential  as an antibacterial is flavonoids. The purpose of this study was to  determine the antibacterial effectiveness of kipait leaf extract with a concentration of 20%, 40%, 60%, and  80%  against  Propionibacterium  acnes.  The  effectiveness  of antibacterial  testing  is  done  using  the  well  method.The  test  results  of antibacterial  effectiveness  against  Propionibacterium  acnes  bacteria obtained consecutively clear zone of  8.71 mm; 13.36 mm; 20.86 mm; 24.4 mm each  was measured at  a concentration of 20%; 40%; 60%; 80%. The results showed that the concentration of 60% and 80% of kipait leaf extract was very effective in inhibiting the growth of Propionibacterium acnes.
Keywords:
▪ Antibacterial effectivity test
▪ Inhibition zone
▪ Kipahit leaves extract
▪ Propionibacterium acnes
▪ Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray
Kata Kunci:
▪ Uji efektivitas antibakteri
▪ Daya hambat
▪ Ekstrak Daun Kipahit
▪ Propionibacterium acnes
▪ Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray
Terdapat  40-80%  kasus  jerawat,  di  Asia  Tenggara  sedangkan prevalensi jerawat di Indonesia cukup tinggi, yaitu berkisar antara 85-100% orang.  Jerawat  disebabkan  oleh  bakteri Propionibacterium  acnes atau disingkat P. acnes.  Indonesia sangat kaya dengan sumber daya alam hayati berupa  tanaman  obat.  Daun  kipait  mengandung  alkaloid,  saponin,  tanin, fenolik,  flavonoid,  triterpenoid,  steroid,  glikosida.  Salah  satu  senyawa fitokimia  yang  penting  dan  memiliki  potensi  sebagai  antibakteri  adalah flavonoid.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  efektivitas antibakteri  ekstrak  daun  kipait  dengan  konsentrasi  20%,  40%,  60%,  dan 80%  terhadap  bakteri Propionibacterium  acnes .  Pengujian  efektivitas antibakteri  dilakukan  dengan  menggunakan  metode  sumuran. Hasil  uji efektivitas  antibakteri  terhadap  bakteri Propionibacterium  acnes diperoleh zona  bening  berturut-turut  8,71  mm;  13,36  mm;  20,86  mm;  24,4  mm masing-masing  diukur  pada  konsentrasi  20%  ;  40%  ;  60%  ;  80%.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa konsentrasi 60% dan 80% dari ekstrak daun kipait sangat efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes .
Available online at : http://openjournal.masda.ac.id/index.php/edumasda

## Edu Masda Journal
ISSN ( Print )  2597-4572     ISSN ( Online )  2715-5269

## PENDAHULUAN
Jerawat  merupakan  peradangan yang disertai dengan penyumbatan saluran kelenjar  minyak  kulit  dan  rambut  (saluran pilosebasea). Jika pada saluran pilosebasea tersumbat,  maka  minyak  kulit  (sebum) tidak  dapat  keluar  dan  mengumpul  di dalam saluran, saluran menjadi membengkak  sehingga  terjadi  komedo. Komedo  itu  sendiri  adalah  permulaan terbentuknya jerawat, baik komedo terbuka  ( blackhead )  atau  komedo  tertutup ( whitehead ).  Jerawat  disebabkan  oleh bakteri Propionibacterium  acnes atau disingkat P. acnes . Bakteri
Propionibacterium
Acnes adalah organisme utama yang memberi kontribusi  terhadap  terjadinya  jerawat.dan termasuk  dalam  kelompok  bakteri  gram positif  yang  berbentuk  batang  dan  tidak berspora (Jawetz dkk, 2012).
Dari  survei  di  kawasan  Asia Tenggara,  terdapat  40-80%  kasus  jerawat, dimana  prevalensi  jerawat  di  Indonesia cukup  tinggi,  yaitu  berkisar  antara  85- 100%  orang,  sedangkan  menurut  catatan kelompok  studi  dermatologi  kosmetika Indonesia,  menunjukkan  terdapat  60% penderita  jerawat  pada  tahun  2006  dan 80% pada tahun 2007. Menurut Departemen  Ilmu  Kesehatan  Kulit  dan
Kelamin FKUI/RSUPN
dr.Cipto Mangunkusumo-Jakarta pada waktu
remaja  jerawat  adalah  salah  satu  problem, prevalensi jerawat pada perempuan dewasa  sekitar  12%  dan  pada  laki-laki dewasa  3%.  Prevalensi  akan  bertambah besar jika tidak ada upaya pengobatan dan pencegahan.  Di  zaman  modern  ini  telah dikembangkan  obat-obatan  dari  zat  kimia yang banyak digunakan untuk pengobatan, tetapi  terdapat  banyak  efek  samping  dan harga  obat-obatan  tersebut  mahal  (Aziz, 2010).
Negara  Indonesia  sangat  kaya dengan  sumber  daya  alam  hayati  berupa tanaman  obat.  Banyak  diantara  tanaman tersebut digunakan sebagai obat tradisional oleh  masyarakat  secara  turun  temurun, baik  untuk  menjaga  kesehatan,  mencegah dan  atau  mengobati  penyakit.  Namun, penggunaan  tanaman  obat  ini  dalam pengobatan  belum  didasarkan  pada  bukti- bukti  yang  dapat  dipertanggungjawabkan secara  ilmiah.  Supaya  obat  tradisional  ini lebih  berdaya  guna  dan  dapat  dimasukkan ke  dalam  pelayanan  kesehatan  formal, maka  perlu  dilakukan  penelitian  yang dapat dipertanggungjawabkan secara ilmiah (Amanatie, 2015).
Tanaman Kipait (Tithonia diversifolia  (Hemsley)  A.  Gray  lebih dikenal  masyarakat  sebagai  tanaman insulin.  Tanaman  ini  tersebar  luas  di Indonesia  dan  merupakan  tanaman  semak yang mudah tumbuh. Bagian dari tanaman
kembang  bulan  yang  dapat  digunakan sebagai obat adalah daun, akar dan bunga. Daun kembang bulan mengandung senyawa alkaloid, tanin, flavonoid, terpenoid  dan  saponin  sedangkan  pada bunga hanya mengandung senyawa saponin,  flavonoid  dan  diterpenes,  dan pada  bagian  akar  hanya  mengandung senyawa alkaloid dan flavonoid (Odeyemi, 2014).
Tanaman  Kipait  juga  menunjukkan aktivitas sebagai anti bakteri, anti protozoa dan telah dicoba secara tradisional sebagai bahan  pestisida  alami  untuk  mengusir hama pertanian, belalang, dan kutu dengan hasil  yang  cukup  efektif  (Sulistijowati  & Gunawan 2001).
Daun  kipait  mengandung  senyawa flavonoid  yang  bisa  digunakan  sebagai antibakteri,  maka  sebaiknya  dilakukan penelitian  mengenai  aktivitas  antibakteri dari  tanaman  tersebut.  Karena  itulah peneliti  tertarik  untuk  melakukan  uji antibakteri  ekstrak  daun  kipait  terhadap bakteri  penyebab  jerawat    yaitu  bakteri Propionibacterium acnes .

## METODE
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium  STIKes  Kharisma  Persada dan  di  Laboratorium  BALITRO  LIPI. Bahan  yang  digunakan  adalah    ekstrak
daun kipait dengan konsentrasi 20%, 40%, 60% dan 80%, kontrol positif (clindamycin), kontrol negatif (aquadestilata  steril),  etanol  70%,  Media Nutrient  Agar  (NA),  Media  NB  ( Nutrient Broth ),  Air  fisiologis  (NaCl  0,9%)  dan bakteri Propionibacterium acnes .
Alat yang digunakan dalam penelitian  yaitu  wadah  simplisia,  gunting, alat  penghalus  ( blender ),  wadah  maserasi (toples)  wadah  penyimpanan  maserat (botol), aluminium foil, waterbath , timbangan analitik, cawan penguap, wadah peyimpanan  ekstrak,  gelas  ukur,  autoklaf, beaker  glass , Laminar  Air  Flow (LAF), oven,  kulkas, Hotplate  and  magnetic stirrer ,  mikropipet  dan  tip,  pipet  tetes, erlenmayer, batang pengaduk, cawan petri, corong, pinset, bunsen, ose, jangka sorong, GasPak,  batang  L, colony  counter ,  kertas saring, plastic  wrap ,  kain  flannel,  APD
( Handscoon , masker, jas lab).

## a. Proses Ekstraksi
Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi  dan menggunakan pelarut etanol  70%  selama  3x24  jam sambil dilakukan pengadukan setiap  24  jam.    Maserat  yang diperoleh kemudian dilakukan penyaringan, kemudian dikentalkan dengan  menggunakan waterbath . Selanjutnya dilakukan uji
organoleptis dan skrining fitokimia.
Ekstrak kental selanjutnya dilakukan pengenceran dengan masing-masing  konsentrasi  yaitu 20%,  40%,  60%,  dan  80%  sebagai bahan uji.
b. Proses Pembuatan Media
Nutrient Agar (NA) dan Nutrient Broth (NB)
Media NA ditimbang sebanyak 0,5 gram  dan  dimasukkan  ke  dalam Erlenmeyer  dan  dilarutkan  dengan aquadest sebanyak 25 mL.
Kemudian dipanaskan dengan menggunakan hot plate , lalu disterilkan  dalam  autoklaf  pada suhu  121°C  selama  15  menit (sebagai media peremajaan bakteri).
Media  NB  ditimbang  sebanyak  1,3 gram  dan  dimasukkan  ke  dalam Erlenmeyer 100 mL lalu dilarutkan dengan  aquadest  sampai  batas  100 mL.  Kemudian  dipanaskan  dengan menggunakan hot  plate kemudian disterilkan  dalam  autoklaf  pada suhu  121°C  selama  15  menit (sebagai suspensi bakteri). Media  NA  ditimbang  sebanyak  5 gram  dan  dimasukkan  ke  dalam Erlenmeyer 250 mL lalu dilarutkan dengan  aquadest  sampai  batas  250
mL.  Kemudian  dipanaskan  dengan menggunakan hot  plate kemudian disterilkan  dalam  autoklaf  pada suhu  121°C  selama  15  menit (sebagai media uji).

## c. Penyiapan Bakteri Uji
Bakteri  uji  yang  digunakan  adalah Propionibacterium  acnes dari  stok murni  diambil  sebanyak  2  ose  dan diinokulasi dengan cara digoreskan secara  steril  ke  dalam  media  agar miring  kemudian  diinkubasi  pada suhu  36-37°C  selama  ≥2  hari  dan menghasilkan fresh culture . Setelah mendapatkan fresh  culture maka selanjutnya  melakukan  peremajaan dengan  menginokulasi  2  ose  dari media fresh  culture ke  media  NB (suspensi bakteri). Sebelum dilakukan pengujian  efektivitas antibakteri  ekstrak  daun  kipait maka dilakukan pengenceran bertingkat  untuk  mengendalikan populasi  bakteri.  Hasil  peremajaan bakteri sebanyak 1 mL dipindahkan menggunakan pipet steril ke dalam tabung  reaksi  berisikan  9  mL larutan fisiologis NaCl 0,9% (untuk mendapatkan  pengenceran  10 -1 ).
Suspensi  dari  pengenceran  10 -1 dipindahkan sebanyak 1 mL dengan pipet steril ke dalam tabung
reaksi  berisikan  9  mL  larutan fisiologis NaCl 0,9% (untuk mendapatkan  pengenceran  10 -2 ).
Dibuat pengenceran 10 -3 , 10 -4 , 10 -5 ,
10 -6 ,  10 -7 ,  10 -8 ,  10 -9 ,  10 -10 dengan cara  yang  sama.  Diinkubasi  dalam oven  selama  24  jam  dengan  suhu 37 0 C.

## d. Pengujian Efektivitas

## Antibakteri Ekstrak Daun Kipait
Disiapkan medium NA dan dituang secara  aseptik  ke  dalam  cawan petri steril sebanyak 20 mL, tunggu hingga  media  memadat.  Kemudian teteskan  1  mL  biakan  suspensi bakteri  diatas  permukaan  media lalu ratakan menggunakan batang L dengan baik supaya bakteri
terdistribusi  secara  merata.  Buat lubang  sumuran,  kemudian  tetesi lubang dengan masing-masing larutan  sampel  uji  sediaan  ekstrak daun  kipait  20%,  40%,  60%,  80%, kontrol  positif  dan  kontrol  negatif secara aseptik dengan jarak 2-3 cm dari pinggir cawan petri, diinkubasi pada  suhu  37°C  selama  1x24  jam. Pengujian dilakukan 2 kali pengulangan  (duplo).  Pengamatan dan  pengukuran  zona  hambat dilakukan  setelah  24  jam  inkubasi. Zona bening mengindikasikan adanya hambatan pertumbuhan bakteri  sehingga  diameter  zona hambat dapat diukur menggunakan jangka sorong (Dyah, 2013).
Tabel 1. Parameter Efektivitas Antibakteri Diameter Zona Terang Respon Hambatan Pertumbuhan ≤5 mm Lemah 5 - 10 mm Sedang 10 - 20 mm Kuat ≥20 mm Sangat Kuat
Sumber : Zahro dan Agustini, 2013

## HASIL

## 1. Determinasi Tanaman Kipait
Hasil  dari  identifikasi  yaitu  benar bahwa  tanaman  tersebut  dari  jenis Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray,
suku  Composite/Asteraceae,  kembang bulan, kiriyu, kipait.Sampel di dapatkan    dari  daerah  Tangerang Selatan.

## 2. Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Daun

## Kipait
Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia No. Uji Fitokimia Hasil Metode Pengujian 1. Alkaloid + Kualitatif 2. Saponin + 3. Tannin + 4. Steroid + 5. Flavonoid + 6. Triterpenoid +

## 3. Uji Efektivitas Antibakteri Ekstrak Daun Kipait
Tabel 3. Hasil Rata-Rata Zona Hambat Uji Ke-1 dan Uji Ke-2
No. Uji Kontrol Positif (Clindamycin) (10% Kontrol Negatif (Aquadest Steril) Ekstrak 20% Ekstrak 40% Ekstrak 60% Ekstrak 80% 1. Uji Ke-1 29,96 mm - 4,95 mm 11,5 mm 22,78 mm  28,22 mm 2. Uji Ke-2 21,35 mm - 12,47 mm  15,23 mm  18,94 mm  20,59 mm Rata-Rata ± SD 25,65 mm ± 6,08 - 8,71 mm ± 5,31 13,36 mm ± 2,63 20,86 mm ± 2,71 24,4 mm ± 5,39
Berdasarkan  Tabel  3  hasil  uji  ke-1 dan  ke-2  didapatkan  bahwa  diameter  rata- rata  pada  kontrol  positif  sebesar  25,65 mm, ekstrak konsentrasi 20% sebesar 8,71 mm,  ekstrak  konsentrasi  40%  sebesar
13,36  mm,  ekstrak  konsentrasi  60% sebesar  20,86  mm,  ekstrak  konsentrasi 80%  sebesar  24,4  mm,  sedangkan  pada kontrol  negatif  (aquadest  steril)  tidak terbentuk zona bening.
Gambar 1. Hasil Zona Hambat Pada Uji Ke-1
Gambar 2. Hasil Zona Hambat Pada Uji Ke-2

## DISKUSI
Pada penelitian ini, peneliti menggunakan  ekstrak  yang  berasal  dari daun  tanaman  kipait  ( Tithonia  diversifolia ( Hemsl. ) A.  Gray ).  Bagian  tanaman  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah daun  kipait  yang  masih  segar  yang diperoleh  dari  Komplek  Purna  Bhakti Sitanala  Tangerang  kemudian  dilakukan identifikasi  tanaman  di  pusat  konservasi tumbuhan Kebun Raya-LIPI Bogor.
Identifikasi  ini  dilakukan  untuk  mencegah terjadinya  kesalahan  dalam  pengambilan bahan  utama  yang  akan  digunakan  untuk uji  efektivitas  antibakteri.  Hasil  dari identifikasi  yaitu  benar  bahwa  tanaman tersebut  dari  jenis Tithonia  diversifolia ( Hemsl. )
A.
Gray , suku Composite / Asteraceae ,  kembang  bulan, kiriyu, kipait.
Proses ekstrasi dalam penelitian ini menggunakan metode maserasi dikarenakan  metode  tersebut    proses pengerjaannya    mudah  dan  menggunakan peralatan  yang  cukup  sederhana.  Proses maserasi menggunakan pelarut etanol 70% dikarenakan  lebih  mudah  ditemukan, ramah  lingkungan,  harga  murah,  dan tingkat kepolarannya lebih tinggi sehingga mudah  untuk  menarik  senyawa  yang bersifat  polar.  Etanol  lebih  efisien  dalam degradasi  dinding  sel  sehingga  polifenol
akan  tersari  lebih  banyak.  Selain  itu, flavonoid  ditemukan  lebih  tinggi  pada penggunaan  etanol  70%  dalam  proses ekstraksi  (Azis,  dkk,  2014).  Proses maserasi  dilakukan  sebanyak  3  kali pengulangan  selama  3  hari  dengan  pelarut total  sebanyak  12  L  dan  menghasilkan maserat  sebanyak  9  L.  Kemudian  di evaporasi  menggunakan waterbath selama 7  hari  sehingga  mendapatkan  ekstrak kental  sebanyak  87,37  gram.  Kualitas ekstrak  dapat  dilihat  dari  sifat  fisik  dan kandungan  kimianya.  Parameter  yang diperiksa  dalam  penelitian  ini  yaitu organoleptis  dan  rendemen  ekstrak.  Pada pemeriksaan organoleptis didapatkan bahwa  bentuk  ekstrak  yang  terbentuk adalah    kental  dengan  warna  coklat kehitaman, berbau khas, dan rasanya pahit. Setelah  terbentuk  ekstark  maka  dilakukan uji  rendemen  ekstrak,  Rendemen  adalah perbandingan  jumlah  (kuantitas)  ekstrak yang  dihasilkan  dari  ekstraksi  tanaman. Jika nilai rendemen yang dihasilkan adalah tinggi  menandakan  nilai  ekstrak  yang dihasilkan  semakin  banyak.  Kualitas ekstrak yang dihasilkan berbanding terbalik  dengan  jumlah  rendemen  yang dihasilkan  yaitu  semakin  tinggi  nilai rendemen  maka  semakin  rendah  mutu yang didapatkan. Hasil rendemen penelitian  ini  dari  perhitungan  rendemen ekstrak yaitu 8,737%.
Uji skrining fitokimia pada penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui kandungan  senyawa  aktif  yang  terdapat pada  daun  kipait.  Penelitian  ini  dilakukan di  Laboratorium  Balai  Balai  Penelitian Tanaman  Rempah  dan  Obat  (Balittro), Bogor,  Jawa  Barat.  Hasil  skrining  ekstrak daun kipait ( Tithonia diversifolia ( Hemsl. )
A. Gray ) yaitu ekstrak tersebut mengandung senyawa kimia yaitu alkaloid, saponin, tannin, fenolik, flavonoid, triterpenoid, steroid, dan glikosida.
Pada  penelitian  ini,  uji  efektivitas antibakteri  bertujuan  untuk  mengetahui efektivitas  dari  ekstrak  daun  kipait  dan mengukur  besarnya  potensi  yang  terdapat dalam  ekstrak  daun  kipait  yang  dapat memberikan  efek  antibakteri  terhadap bakteri Propionibacterium acnes .
Bakteri Propionibacterium  acnes adalah  bakteri yang tumbuh relatif lambat. Bakteri  ini  adalah  bakteri  anaerob  gram positif  yang  toleran  terhadap  udara. Permasalahan  khusus  mengenai  inkubasi terhadap  bakteri  anaerob  adalah  akan terbunuh  jika  terpapar  dengan  oksigen, maka  untuk  inkubasi  bakteri  anaerob dilakukan pada alat khusus yang mencegah kondisi  lingkungan  yang  kaya  oksigen, yaitu alat yang disebut anaerobic jar . Pada penelitian  ini anaerob  jar yang  dipakai yaitu GasPak system . Adapun prinsip kerja
dari alat anaerobic jar yang menggunakan teknik GasPak  system ini adalah  dengan mengeluarkan  oksigen  dari  wadah  yang tertutup dengan bantuan GasPak generator dan  katalis.  Sistem  tersebut  menggunakan bungkus  kimia  ( GasPak  generator )  yang terdiri  dari  sodium  bikarbonat  dan  sodium borohidrat,  yang  nantinya  akan  bereaksi dengan  air  sehingga  menghasilkan  karbon dioksida dan hidrogen. Akhirnya, kandungan oksigen semakin berkurang dan kandungan  karbon  dioksida  semakin meningkat,  sehingga  menciptakan  kondisi lingkungan yang kondusif untuk pertumbuhan  bakteri  anaerob  (Tortora et al ,  2010).  Sehingga  dalam  penelitian  ini untuk menumbuhkan bakteri Propionibacterium acnes memerlukan alat khusus yaitu GasPak lalu diinkubasi dalam suhu  37°C  dan  memerlukan  waktu  >2hari untuk menumbuhkannya. Dalam pengujiannya menggunakan metode sumuran dan dilakukan 2 kali uji/pengulangan (duplo) dan membutuhkan 8 cawan petri.
Dalam  pengerjaannya,  tiap  uji menggunakan 4 cawan petri. Petri pertama berisikan  kontrol  positif  (clindamycin), kontrol  negatif  (aquadest  steril),  ekstrak 20%.  Petri  kedua  berisikan  kontrol  positif (clindamycin),  kontrol  negatif  (aquadest steril),  ekstrak  40%.  Petri  ketiga  berisikan kontrol  positif  (clindamycin),  kontrol
negatif (aquadest steril), ekstrak 60%. Petri keempat berisikan kontrol positif (clindamycin),  kontrol  negatif  (aquadest steril), ekstrak 80%. Hal ini dilakukan agar ketika  tiap  sampel  menghasilkan  zona bening, maka zona tersebut tidak menyatu satu  sama  lain  sehingga  zona  hambatnya tidak bisa dihitung dengan akurat.
Menurut Zahro dan Agustini (2013)  menyatakan  bahwa  dari  diameter zona  hambat  yang  terbentuk  maka efektivitas  antibakteri  dapat  digolongkan menjadi  beberapa  golongan  berdasarkan respon  daya  hambatnya  yakni  lemah  (≤  5 mm), sedang (5-10 mm), kuat (10-20 mm), dan sangat kuat (≥ 20 mm).
Berdasarkan  Tabel  3  hasil  uji  ke-1 dan  ke-2  didapatkan  bahwa  diameter  rata- rata pada kontrol positif sebesar 25,65 mm, ekstrak    daun  kipait      20%  sebesar  8,71 mm,  ekstrak  daun    kipait    40%  sebesar 13,36  mm,  ekstrak    daun  kipait    60% sebesar  20,86  mm,  ekstrak    daun  kipait 80%  sebesar  24,4  mm,  sedangkan  pada kontrol  negatif  (aquadest  steril)  tidak terbentuk zona bening.
Ekstrak daun kipait dengan konsentrasi  20%  tergolong  sedang  dalam menghambat  bakteri Propionibacterium acnes karena  nilai  tersebut  masuk  dalam range 5-10  mm.  Ekstrak  daun  kipait dengan  konsentrasi  40%  tergolong  kuat dalam menghambat bakteri
Propionibacterium  acnes karena  nilai tersebut  masuk  dalam range 10-20  mm. Ekstrak  daun  kipait  dengan  konsentrasi 60%, 80%, serta kontrol positif (clindamycin) tergolong sangat kuat dalam menghambat  bakteri Propionibacterium acnes karena  nilai  tersebut  masuk  dalam range ≥20 mm.
Zona  hambat  berbanding  lurus dengan konsentrasi antibakteri yang diberikan  yaitu  semakin  besar  konsentrasi antibakteri  yang  diberikan,  maka  semakin besar  zona  hambat  yang  terbentuk  (Putri dan Milanda, 2013).
Dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  daun kipait  dengan  konsentrasi  60%  dan  80% sangat efektif dalam menghambat pertumbuhan  bakteri Propionibacterium acnes .

## SIMPULAN
Dari hasil penelitian dan pembahasan  maka  dapat  disimpulkan bahwa  ekstrak  daun  kipait  efektif  dalam menghambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes penyebab jerawat  dan  daya  hambat  ekstrak  daun kipait konsentrasi 60% dan 80% terhadap bakteri Propionibacterium acnes tergolong  sangat  kuat,  karena  rata-rata diameter  zona  hambat  yang  dihasilkan sebesar  20,86  mm  dan  24,4  mm,  dimana nilai  tersebut  termasuk  ke  dalam range (≥20  mm)  sehingga  sangat  efektif  dalam
menghambat
pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes penyebab jerawat.

## DAFTAR PUSTAKA
Agoes,  Azwar.  Tanaman  obat  Indonesia. Palembang : Salemba Medika ; 2010 Amanatie,  E.  S.  Structure  elucidation  of the  leaf  of  tithonia  Diversifolia (Hemsley) A. Gray. Jurnal Sains dan Matematika ; 2015. Vol.23(4) :  101-
106
Astika, Glycine. Sterilisasi alat dan bahan.
Bandar Lampung : Fakultas
Pertanian  Universitas  Lampung  ;
2012
Azis,  T.,  Febrizky,  S.,  Mario,  A.D.
Pengaruh  jenis  pelarut  terhadap persen  Yield  alkaloid  dari  daun salam  India  (Murraya  koenigii).
Palembang  :  Universitas  Sriwijaya  ; 2014
Aziz,  N.A.  Pengaruh  cara  dan  kebiasaan membersihkan wajah terhadap pertumbuhan  jerawat  di  kalangan siswa siswi SMA Harapan 1 Medan. Medan  : Universitas Sumatera Utara
; 2010
Choma dan Edyta. Bioautography detection in thin-layer chromatography. Journal of
cromatography ; 2010. hal.1-8
Dyah,  Ayu.  Uji  efektifitas  sabun  cair  dari ekstrak  daun  pepaya  (carica  papaya l.)  terhadap  staphylococcus  aureus. Makassar : Fakultas Farmasi, Universitas Indonesia Timur Makassar ; 2013 Farmakope Indonesia Edisi V. Ekstrak dan ekstrak  cair.  Jakarta  :  Kementerian
Kesehatan RI ; 2014. hal.47
Harborne,
J.B.1967.Comparative
BioChemistry  of  the  Flavonoids, London  and  New  York;  Academic Press.
Hidayat,  Syamsul  dan  Napitupulu,  R.  M. Kitab  tumbuhan  obat.  Jakarta  :
Penerbit AGRIFLO ; 2015. hal.201
Jawetz,  M.  &  Adelberg.  Mikrobiologi kedokteran edisi 25. Jakarta : EGC ; 2012 Jiang,  L.  Comparison  of  disc  diffusion, agar dilution, and broth microdilution for antimicrobial suspectibility testing of five chitosans. China : A Thesis Agricultural  and  Forestry  University China ; 2011
Kulsum,  Umi.  Uji  efek  antihiperglikemia ekstrak  etanol  95%  daun  kembang bulan  (tithonia  diversifolia  (hemsl.) a.  gray)  terhadap  tikus  sprague- dawley jantan dengan metode induksi  aloksan  secara  in  vivo. Jakarta  :  Fakultas  Kedokteran  dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif
Hidayatullah ; 2016
Kumar, R., Shrivastava, S.K., Chakraborti, A. Comparison of broth dilution and disc  diffusion  method  for  the antifungal  suspectibility  testing  of aspergillus  flavus.  American  journal of biomedical sciences ; 2010. vol.2, No.3 : 206-207
Luc,  M.  A  comparison  of  disc  diffusion and  microbroth  methods  for  the detection  of  antibiotic  resistant subpopulations  in  gram  negative bacilli. Thesis Master Science University of Washington ; 2015
Maradona,  Doni.  Uji  aktivitas  antibakteri ekstrak  etanol  daun  durian  ( Durio zibethinus L), daun lengkeng ( Dimocarpus  longan  Lour ),  dan daun
rambutan ( Nephelium lappaceum L)  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25925 dan Escherichia  coli ATCC  25922. Jakarta  :  UIN  Syarif  Hidayatullah  ; 2013
Mira,  W.,  Chairul,  S.,  Rudi,  K.  Uji toksisitas  ( Brine  shrimp  lethality test )  dan  uji  aktivitas  antibakteri daun  kipait  ( Tithonia  diversifolia
(hemsl.)  a.  gray )  terhadap  bakteri S taphylococcus aureus dan
E scherichia coli . Samarinda :
Universitas Mulawarman ; 2015
Mukhriani. Ekstraksi, pemisahan senyawa,
dan identifikasi senyawa aktif. Jurnal
Kesehatan ; 2014. hal.7(2) : 361-367 Nugroho, R.A. Terapi topikal clindamycin
dibandingkan dengan niacinamide+zinc pada acne vulgaris.  Semarang  :  Universitas Diponegoro ; 2013 Odeyemi,  A.  T.  2014.  Antibacterial Activities  of  Crude  Extracts  of Tithonia diversifolia Against
Common  Environmental  Pathogenic
Bacteria.  Inter  J  Scient  Tech. 20(4):1421-1426.
Sarah  &  Ratna.  Ekstraksi  dan  identifikasi senyawa  flavonoid  dari  simplisia daun insulin (smallanthus
sonchifolius, poepp). Jakarta : Fakultas Farmasi Universitas Pancasila ; 2014