PENGARUH PEMBERIAN VITAMIN E TERHADAP GAMBARAN HISTOLOGIS TUBULUS PROKSIMAL GINJAL PADA MENCIT BETINA DEWASA ( Mus musculus L ) YANG MENDAPAT

## LATIHAN FISIK MAKSIMAL
The  Effect  Of  Α-Tocopherol  Administration  To  The  Histologist  Cell  Tubulus  Proximal  At Female Adult Mouse (Mus Musculus L.) Which Made To Obtain Maximum Physical Exercise.
Nina Olivia
Dosen Tetap Yayasan Akper Kesdam I/BB Medan email : nina_biomed@yahoo.co.id

## Abstrak
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  pemberian  Vitamin  E  terhadap gambaran histopatologi pada mencit betina dewasa ( Mus musculus L. ) yang mendapat latihan fisik maksimal. Penelitian ini memakai mencit betina dewasa ( Mus musculus .L ) sebanyak 25 ekor yang dibagi  dalam  1  kelompok  kontrol    dan  4  kelompok  perlakuan.  Kelompok  pertama  (P0)  sebagai kontrol yang tidak mendapat perlakuan apapun. Kelompok kedua (P1) mendapatkan  latihan fisik maksimal  setiap  hari  selama  30  hari,  kelompok  ketiga  (P2)  mendapatkan    latihan  fisik  maksimal dan  larutan  aquadest  0,5  ml/hari  per  oral  selama  30  hari,  kelompok  keempat  (P3)  mendapatkan latihan fisik maksimal setiap hari selama 15 hari pertama, kemudian 15 hari berikutnya diberikan latihan  fisik  maksimal  dan  vitamin  E  2mg/hari  per  oral  setiap  hari,  kelompok  kelima  (P4) mendapatkan  latihan  fisik  maksimal  dan  vitamin  E  2mg/hari  per  oral  setiap  hari  selama  30  hari. Hasil  yang  didapat  menunjukkan  pemberian  Vitamin  E  tidak  mempengaruhi  bobot  ginjal  mencit betina dewasa ( Mus musculus L. ) yang mendapat perlakuan latihan fisik maksimal (P>0,05), tetapi pemberian  Vitamin  E  mempengaruhi  rata-rata  gambaran  histologis  tubulus  proksimal  ginjal mencit  betina  dewasa  ( Mus  musculus  L. )  yang  mendapat  perlakuan  latihan  fisik maksimal(P<0,05).  Latihan  fisik  maksimal  menyebabkan  terjadinya  stres  oksidatif  yang mempengaruhi gambaran histologis tubulus proksimal ginjal, Vitamin E sebagai antioksidan dapat menekan  jumlah  luas  kerusakan  tubulus  proksimal  ginjal  dengan  dosis  2  mg/  hari  secara  oral selama 15 hari.
Kata kunci : vitamin E,latihan fisik maksimal, histologis tubulus proksimal ginjal , NTA
Abstract
This  research  is  intended  to  know  the  effect  of    α-  tocopherol  administration  to  the histologist cell tubulus proximal at female adult  mouse ( Mus musculus L .)  which  made to obtain maximum physical exercise. This research used 25 mice which divided into one control group and four treatment groups. The first group (P0) as the control group did not obtain any treatment. The second group (P1) obtained only maximum physical exercise everyday in 30 days, the third group (P2) obtained maximum physical exercise and 0,5 ml/day per oral aquadest in 30 days, the fourth group (P3) obtained only maximum physical exercise everyday in the first 15 days, and obtained maximum physical exercise and 2 mg/day per oral tocopherol in addition for the next 15 days, the last fifth group (P4) obtained maximum physical exercise and 2 mg/day per oral tocopherol in 30 days.  The  result  showed  that  tocopherol  administration  did  not  influence  the  average  of  weight renal  mice  ( Mus  musculus  L .)  which  obtained  maximum  physical  exercise  (P>0,005),  but  the tocopherol  administration  influence  the  average  the  histologist  cell  tubulus  proximal  of  female mature mice ( Mus musculus L .) which obtained maximum physical exercise (P<0,005). Maximum physical exercise did not lead the occurrence of oxidative stress which affected the weight of renal, tocopherol  as  antioxidant  could  depress  necrotic  histologist  cell  tubulus  proximal  renal  with  2 mg/day per oral dose in 15 days.
Key words: Tocopherol, Maximum Physical Exercise, Histologist Tubulus Proximal Renal,  NTA

## Pendahuluan
Latihan fisik merupakan pergerakan tubuh yang  dilakukan  oleh  otot  dengan  terencana  dan berulang yang menyebabkan peningkatan pemakaian energi dengan tujuan untuk memperbaiki  kebugaran  fisik  (Pedriatics,  1994, Laila,2007).  Latihan  fisik  maksimal  dapat  memicu ketidakseimbangan  antara  produksi  radikal  bebas dan  sistem  pertahanan  antioksidan  tubuh  yang  di kenal  dengan  stres  oksidatif    (Leeuwenburgh, 2001).  Latihan fisik  maksimal dapat menyebabkan terjadinya stres oksidatif pada tikus (Senturk et al., 2001)  dan  manusia  (Sonneborn  and  Barbee,  1998; Pedersen and Hoffman-Goetz; Senturk et al., 2005; Escobar et  al., 2009).  Selama  latihan  fisik maksimal,  konsumsi  oksigen  seluruh  tubuh meningkat  20  kali,  sedangkan  konsumsi  oksigen pada serabut otot di perkirakan meningkat 100 kali lipat.  Peningkatan  konsumsi  oksigen  ini  berakibat meningkatnya  produksi  radikal  bebas  yang  dapat menyebabkan  kerusakan  sel  (Ji,  1999).  Radikal bebas  merupakan  molekul  dimana  elektron  yang terletak pada lintasan paling luar tidak  mempunyai pasangan  (Gillendwater,  1991;  Halliwell,  1995). ROS ( Reactive Oxigen Species ) adalah bagian dari radikal  bebas  yang  merupakan  produksi  dari metabolisme  sel  normal.  Sebahagian  ROS  berasal dari  proses  fisiologis  (ROS  endogen)  dan  lainnya adalah  ROS  eksogen,  seperti  berbagai  polutan lingkungan (emisi kendaraan bermotor dan industri, asbes,  asap  rokok,  dan  lain-lain),  radiasi  ionisasi, infeksi  bakteri,  jamur  dan  virus,  serta  paparan  zat kimia  (termasuk  obat)  yang  bersifat  mengoksidasi. Berbagai  jenis  ROS  adalah  superoksida  (O2 - ), hidroksil  (OH-),  alkoksil  (RO-),  peroksil  (ROO-) dan hidroperoksil (ROOH). Di dalam tubuh, radikal bebas  yang  paling  banyak  terbentuk  adalah superokside.  Superokside  dapat  dirubah  menjadi hydrogen peroksida. Hidrogen peroksida kemudian diubah menjadi radikal hidroksil. Radikal hidroksil inilah  yang  dapat  menyebabkan  peroksidasi  lipid pada  membran  sel  sehingga  terjadi  kerusakan  sel (Cuzzocrea, et al.,2001).
Ginjal  adalah  organ  yang  merupakan gabungan  dari  unit  struktural  bernama  nefron. Nefron  sendiri  terdiri  atas  glomerolus  dan  tubulus yang  berfungsi  membuang  bahan-bahan  sampah dari  hasil  pencernaan  atau  metabolisme  dan mengontrol  volume  dan  komposisi  cairan  tubuh. Fungsi pengaturan ginjal ini memelihara kestabilan lingkungan sel-sel yang diperlukan untuk melakukan  berbagai  macam  aktivitasnya.  Jalannya fungsi  ginjal  tersebut  dapat  terganggu  akibat kerusakan  komponennya  (Munawar,  2009).  Salah satu  penyebabnya  adalah  obstruksi  pada  ginjal. Radikal bebas terbentuk pada keadaan hipoksia sel, hal  ini  dapat  terjadi  pada  tekanan  intrarenal meningkat akibat obstruksi ginjal. Dan menyebabkan  perubahan  hemodinamik  kemudian penurunan  ATP  ( Adenosine triphosphate )  yang
merupakan  sumber  energi  sel.  Metabolisme anaerob menyebabkan perubahan biokimia sel yang berakibat  kerusakan  sel  dan  timbulnya  radikal bebas  yang  merusak  sel  dan  vaskular  (Yusuf, 2000).
Latihan  fisik  dengan  aktifitas  maksimal akan  menyebabkan  otot  berkontraksi  secara anaerob  (Bompa,1990,Fox,1993).  Nangaku  (2006) menunjukkan analisis  statistik hubungan bermakna antara  jumlah  kapiler  peritubuler  sebagai  indikator fungsi  ginjal.  Histologis  pada  model  tikus membuktikan  apotosis  sel  tubulus  ginjal  terjadi akibat  keadaan  hipoksia.  Kerusakan  ginjal  dapat terjadi  secara  langsung  pada  sel  atau  akibat gangguan  sirkulasi  darah  (iskemi).    Gejala kliniknya  meliputi  hipertensi,  anemia  dan  gagal ginjal  kronik.  Gambaran  morfologiknya  tampak papila  nekrotik,  berwarna  coklat  kekuningan disertai  timbunan  hasil  metabolisme  fenasetin  atau pigmen  mirip  lipofusin,  kemudian  papila  hancur dan lepas dalam pelvis ginjal. Mikroskopik tampak papila  mengalami  nekrosis  koagulativa,  disertai kalsifikasi  distrofik  (Alpers,  2007).  Korteks mengalami  atrofi,  fibrosis  intertisial,  dan  sebukan sel  radang.  Dinding  pembuluh  darah  kecil  dalam papila dan submukosa saluran kemih menunjukkan gambaran  khas  penebalan  membran  basal  yang positif  pada  pulasan  PAS  (Wijaya,  2005). Podhorska (2006)  menemukan  kerusakan  pada tubulus  distal  setelah  latihan  fisik  akut  yang ditandai  dengan  perubahan  sel  dan  inti  sel  yang membengkak,  nekrosis  dan  apoptosis  tubuler dengan penonjolan mikrovili pada tubulus proksimal yang terlihat dalam korteks tubulus pada mencit dewasa yang mendapat latihan fisik berlebih yaitu  treadmill  sampai  kelelahan  selama  enam  jam dalam empat minggu.
Vitamin  E  merupakan  antioksidan  dan berfungsi  penting  dalam  pemeliharaan  integritas membrane  sel  utama  tubuh  (Allan,  2001).  Vitamin E mengendalikan peroksida lemak dengan menyumbangkan  hidrogen  ke  dalam  reaksi  yang mampu mengubah radikal peroksil (hasil peroksida lipid)  menjadi  radikal  tokoferol  yang  kurang reaktif, sehingga tidak mampu merusak rantai asam lemak  dan  selanjutnya  melindungi  sel  dari kerusakan  (Winarsi,  2007;  Hariatmi,  2004). Penelitian  yang  dilakukan  terhadap  tikus  dengan pemberian beberapa anti oksidan seperti vitamin C, Vitamin  E,  allupurinol,  katalase, superoxida dismutase (SOD) pada oklusi arteri renalis binatang atau isolated ginjal  dapat  mengurangi  peroksidasi lipid  korteks  dan  memperbaiki  fungsi  ginjal. Bahkan  mengurangi  resiko  penolakan  ginjal  ( graft rejection )  pada  transplantasi  ginjal.  Percobaan perbandingan  pada  binatang  dengan  pemberian antioksidan dengan yang tidak diberikan antioksidan  pada  kerusakan  ginjal  pada  obstruksi akut  selama  14  hari  dengan  cara  tindakan nefrektomi  menemukan  adanya  kerusakan  ginjal
Jurnal Riset Hesti Medan , Vol. 1, No. 1  Juni 2016
(berupa-  nekrosis,  destruksi  glomerulus  dan tubulus) yakni hilangnya pembuluh darah glomerulus  dan  tubulus  proksimal  serta  ditemukan adanya    kerusakan  mikrofili  sepanjang  lumen tubulus antara kelompok yang diberikan antioksidan  dan  yang  tidak  diberikan  antioksidan secara  bermakna  berbeda  atau  kerusakan  ginjal lebih  ringan  pada  kelompok  yang  diberikan antioksidan  dibandingkan  yang  tidak  diberikan antioksidan.

## Bahan dan Metode
Rancangan pada penelitian ini adalah eksperimen.  Pada  penelitian  ini  menggunakan mencit ( Mus musculus ) dari strain Webster dewasa fertil berumur ± 3 bulan dengan berat badan 25-35 gram.  Mencit  tersebut  ditempatkan  dalam  (ukuran 30  x  20  x10  cm)  yang  ditutup  dengan  kawat  kasa. Dasar  kandang  dilapisi  dengan  sekam  padi  setebal 0,5-1  cm  dan  diganti  setiap  tiga  hari.  Cahaya ruangan  dikontrol  persis  12  jam  terang  (pukul 06.00  sampai  dengan  pukul  18.00)  dan  12  jam gelap  (pukul  18.00  sampai  dengan  pukul  06.00), sedangkan suhu dan kelembaban ruangan dibiarkan berada  pada  kisaran  alamiah  serta  di  beri  makan dan minum secara ad libitum.
Perlakuan pemberian latihan fisik pada mencit dengan  cara  berenang  sampai  kelelahan  (Laksmi, 2010;  Jawi et  al .,  2008;  Yu et  al .,  2006;
Leeuwenburgh and Li, 1998). Mencit di renangkan di  dalam  wadah  kaca  (ukuran  100  x  50  x  80  cm) yang  diisi  dengan  air  setinggi  60  cm,  tidak  ada jalan  keluar.  Saat  mencit  menghentikan  segala gerakannya,  kecuali  gerakan  untuk  bertahan  hidup (mempertahankan kepala tetap berada di permukaan  air),  hal  ini  dianggap  mencit  sudah melakukan  latihan  fisik  maksimal.  Segera  setelah itu, keluarkan mencit dari wadah, keringkan dengan handuk kering, dan kembalikan ke dalam kandang.
Vitamin  E  yang  diberikan  adalah α-tokoferol asetat yang  dilarutkan  dalam  larutan tween aquadest.  Dosis  vitamin  E  yang  diberikan  adalah 2mg/hari  per  oral  dalam  0,5  ml  larutan  (Verma  et al., 2001)
Pemberian  vitamin  E  diberikan  kepada  lima kelompok  mencit  yang  telah  dibagi  yang  terdiri dari :
a) Kelompok  I  (P0)  =  terdiri  dari  5  ekor  mencit betina  dewasa  yang  tidak  diberi  perlakuan (kelompok kontrol).
b) Kelompok II (P1) = terdiri dari 5 ekor mencit betina  dewasa  yang  diberi  latihan  fisik maksimal setiap hari selama 30 hari.
c) Kelompok III (P2) = terdiri dari 5 ekor mencit betina  dewasa  yang  diberi  latihan  fisik maksimal dan larutan aquadest 0,5 ml/hari per oral selama 30 hari.
d) Kelompok IV (P3) = terdiri dari 5 ekor mencit betina  dewasa    yang  diberi  latihan  fisik maksimal  setiap  hari  selama  15  hari  pertama,
kemudian 15 hari berikutnya diberikan latihan fisik  maksimal  dan  vitamin  E  2mg/hari  per oral setiap hari.
e) Kelompok V (P4) = terdiri dari 5 ekor mencit betina  dewasa  yang  diberi  latihan  fisik maksimal  dan  vitamin  E  2mg/hari  per  oral setiap hari selama 30 hari.
Setelah 30 hari perlakuan, masing-masing hewan coba  dikorbankan  dengan  cara  dislokasi  leher  dan dibedah Selanjutnya dilakukan pengamatan terhadap  semua  isolasi  ginjal  (30  ekor  mencit jantan  dewasa)  maka  ginjal  kiri  dan  kanan diletakkan  pada  kertas  ukur  dan  ditimbang  pada timbangan  mikrogram,  kemudian  dicatat  berat masing-masing  ginjal.  Kemudian  dilakukan  tahap fiksasi  dimana  organ  ginjal  yang  telah  di  potong- potong  kemudian  di  masukkan  kedalam  larutan fiksatif Bouin selama 2-10 jam.
Pembuatan sediaan histologis menurut Suntoro, S.H, (1983) dengan metode parafin adalah : pertama fiksasi  yakni  pencucian  dengan  alcohol 70%, kedua, dehidrasi  dilakukan  secara  bertahap, dengan  alkohol  70%  selama  10  menit,  alkohol 80%,  90%,  96%,  masing-masing  selama  60  menit, kemudian dengan alkohol absolut selama 30 menit, ketiga penjernihan Dilakukan segera setelah proses dehidrasi  dengan  menggunakan  toluol  murni, keempat ,  infiltrasi  paraffin  dilakukan  di  dalam oven dengan suhu 56○C. Organ ginjal di masukkan kedalam campuran toluol-parafin dengan perbandingan  1:1  selama  30  menit.  Kemudian berturut  dimasukkan  kedalam:  Parafin  Murni  I selama 60 menit, Parafin Murni II selama 60 menit, Parafin  Murni  III  selama  60  menit, kelima penanaman  Blok  parafin  ginjal  yang  telah mengeras  di  tempelkan  pada  holder  kayu  sampai melekat  erat, keenam pengirisan  kemudian dipasangkan  pada  mikrotom.  Pengirisan  dilakukan dengan ketebalan 6 µm, ketujuh penempelan Pada gelas  benda  siolesi  dengan  larutan  albumin  mayer dan  ditetresi  dengan  aquadest.  Kemudian  beberapa pipa  parafin  diletakkan  di  permukaan  aquadest pada  gelas  benda  dan  dibiarkan  beberapa  saat, kemudian  gelas  benda  dipindahkan  ke  meja pemanas  hingga  kering,  deparafinasi, kedelapan pewarnaan  Pewarnaan  dengan  Hematoxylin  Eosin (H-E) melalui tahapan
a. Preparat  dideparafinasi  dalam xylol sampai bebas parafin.
b. Dimasukkan  dalam  alkohol  96%,  90  %,  80  %, 70%, 50%, 30%, aquadest.
c. Diamsukkan  dalam  larutan hematoxylin  Erlich selama 1 menit.
d. Dicuci  dengan  air mengalir,  dicelupkan kedalam aquadest, alkohol 30%, 50%, 70%
e. Kemudian  dimasukkan  kedalam  larutan EOSi n 0,5% selama 1 menit
f. Kemudian  dimasukkan  ke  dalam  alkohol  70%, 80%, (0% dan alkohol absolut.
g. Selanjutnya dimasukkan kedalam xylol.
Kesembilan, penutupan  preparat  ditutup  dengan gelas  penutup  setelah  ditetesi  dengan  canada balsem terlebih dahulu, lalu diberi label.
Pemeriksaan  Histopatologi  dan  Penilaian Perubahan  Jaringan  Ginjal  (  Tubulus  Proksimal)  : Prosedur  Kerja: Setiap  mencit  dibuat  preparat ginjal  (kiri  dan  kanan)  dan  tiap  preparat  dibaca (dibagi)  dalam  4  lapangan  pandang  yaitu  keempat sudut bagian preparat dengan pembesaran 400 kali dengan memakai mikroskop, serta batasan jumlahnya  setiap  bagian  lapangan  pandang  adalah 25 sel, kemudian disesuaikan dengan tingkat/derajat kerusakan 0,1, 2,3 dan 4 selanjutnya dicari  rata-ratanya  di  4  lapangan  pandang.  Sasaran yang  dibaca  adalah  perubahan  struktur  (gambaran) histologis  tubulus  kontortus  proksimal ginjal mencit,  karena  sel  epitel  tubulus  proksimal  mencit merupakan tempat
absorbsi
dan mengkonsentrasikan racun (Rubin, 2009). Kriteria Normal bila tidak diketemukan : a. Degenerasi  Hidrofilik (pembengkakan  pada sitoplasma)
b. Nekrosis (kematian  sel),yang  ditandai  dengan perubahan sebagai berikut :
- Karyopiknosis (inti kecil dan padat)
- Karyolisis (inti pucat dan larut)
- Karyoreksis (inti  pecah  menjadi  beberapa gumpalan)
Tingkat  kerusakan  sel  epitel  pelapis  tubulus proksimal :
0  =  Sel  dengan  inti  dan  sitoplasma  yang  masih dalam batas normal 1 = Sesuai dengan kriteria (degenerasi hidrofilik) 2 = Ditemukan nekrotik tubulus proksimal, dengan luas < 25 %
3=  Ditemukan  nekrotik  tubulus  proksimal,  dengan luas 26-50 %
4 = Ditemukan nekrotik tubulus proksimal, dengan luas>50%
Hasil dan Pembahasan a.  Bobot  Ginjal  Mencit  Betina  Dewasa  ( Mus musculus L.) Setelah  dilakukan  penilaian  terhadap  bobot ginjal  mencit  ( Mus  musculus L)  betina  dewasa setelah  melakukan  aktifitas  fisik  maksimal  pada tiap kelompok didapatkan hasil seperti yang telihat pada berikut :
Tabel  Rata-rata Bobot Ginjal
Perlakuan Bobot Ginjal (g) P0 0,21 ± 0,05 P1 0,19 ± 0,02 P2 0,21 ± 0,03 P3 0,22 ± 0,01 P4 0,23 ± 0,01
x =  Rata-rata,  SD  =  Standar  deviasi,  P0  =  Mencit betina  dewasa  tidak  diberi  perlakuan  (kelompok kontrol),  P1  =  Mencit  betina  dewasa  yang  diberi
latihan  fisik  maksimal  setiap  hari  selama  30  hari, P2 = Mencit betina dewasa yang diberi latihan fisik maksimal dan larutan aquadest 0,5 ml/hari per oral selama  30  hari,  P3  =  Mencit  betina  dewasa  yang diberi  latihan  fisik  maksimal  setiap  hari  selama  15 hari  pertama,  kemudian  15  hari  berikutnya diberikan  latihan  fisik  maksimal  dan  vitamin  E 2mg/hari  per  oral  setiap  hari,  P4  =  Mencit  betina dewasa  yang  diberi  latihan  fisik  maksimal  dan vitamin  E  2mg/hari  per  oral  setiap  hari  selama  30 hari.
Grafik Histogram hasil rata-rata    bobot ginjal Pada  Tabel  dapat  dilihat  rata-rata  bobot ginjal  pada  setiap  perlakuan  didapati  paling tertinggi  terdapat  pada  mencit  betina  dewasa  yang diberi  latihan  fisik  maksimal  setiap  hari  selama  30 hari  (P3)  yakni  (0,23±0,01  g),  dan  paling  terendah pada mencit betina dewasa yang diberi latihan fisik setiap  hari  selama  15  hari  pertama,  kemudian  15 hari  berikutnya  diberikan  latihan  fisik  maksimal dan  vitamin  E  2mg/hari  per  oral  setiap  hari  (P1) yakni  (0,19±0,02  g),  namun  kedua  hasil  tersebut bila  masing-masing  dibandingkan  dengan  kontrol didapati  hasil  yang  perbedaan  tidak  nyata. Demikian  pula  diantara  masing-masing  perlakuan bila dibandingkan satu dengan perlakuan yang lain masih didapati perbedaan tidak nyata.
b.  Penilaian  Perubahan  Jaringan  Ginjal  (Sel Ginjal  Nekrotik)  Mencit  ( Mus  musculus L.) jantan Hasil pengukuran dan perhitungan perubahan tubulus proksimal mencit ( Mus musculus L)  betina  dewasa    setelah  melakukan aktifitas fisik maksimal ditampilkan.
Rata-rata  Luas    nekrotik  Sel  Ginjal  tubulus
Proksimal Perlakuan Luas Nekrotik Sel Tubulus Proksimal (%) P0 6,65 ± 1,42 a P1 54,25 ± 4,16 a P2 32,80 ± 7,11 b P3 27,81 ± 2,86 b
P4 29,06 ± 6,04 b a b a a a Jurnal Riset Hesti Medan , Vol. 1, No. 1  Juni 2016
Gambar  2.  Grafik  Histogram  hasil  rata-rata perubahan jaringan Ginjal sel nekrotik.
Pada  Tabel  4  dan  Gambar  2  dapat  dilihat  rata-rata luas  sel  ginjal  (tubulus  proksimal)  nekrotik  yang terluas  didapatkan  pada  P1  (54,25  ±  4,16%), jumlah  sel  ginjal  (tubulus  proksimal)  nekrotik mencit  betina  dewasa  pada  setiap  perlakuan didapati  paling  luas  terdapat  pada  mencit  betina dewasa  yang  diberi  latihan  fisik  maksimal  setiap hari  selama  30  hari  bila  dibandingkan  dengan kontrol,  P2,  P3  dan  P4,  didapati  hasilnya  berbeda nyata.
Rata-rata  jumlah  sel  ginjal  (tubulus proksimal)  nekrotik  mencit  betina  dewasa  pada setiap  perlakuan  didapati  paling  sedikit  luas kerusakan terdapat pada mencit betina dewasa yang diberi  latihan  fisik  maksimal  setiap  hari  selama  15 hari  pertama,  kemudian  15  hari  berikutnya diberikan  latihan  fisik  maksimal  dan  vitamin  E 2mg/hari  per  oral  setiap  hari  (P3)  yakni (27,81±2,86%),  bila  dibandingkan  dengan  kontrol, P2  dan  P4  didapati  hasilnya  berbeda  tidak  nyata, namun    bila  dibandingkan  dengan  P1  didapati hasilnya berbeda nyata.
(a)                               (b)
(c)                               (d)
(e) Gambar. Perubahan Struktur Histopatologi Jaringan  Tubulus  Proksimal  Ginjal  Mencit  (a)  P  0 (b)  P  1  (c)  P  2  (c)  P  3  (d)  P  4  (e)  P  5.  Melalui pembesaran 400 x
Pembahasan a. Bobot Ginjal  (g) Mencit Betina Dewasa ( Mus musculus L.) Pada penelitian ini didapati rata-rata bobot ginjal  terberat  pada  mencit  betina  dewasa  yang mendapat latihan fisik maksimal setiap hari selama 30  hari  tidak  nyata.  Hal  ini  sesuai  dengan  hasil penelitian  yang  telah  dilakukan  sebelumnya  oleh Wresdiyati  dan  Makita  (2005)  mendapatkan  hasil adanya  kondisi  stres  mengakibatkan  terjadinya
kelainan morfologi dan peningkatan jumlah organel peroksisomes  pada  ginjal  kera.  Wresdiyati,  Made, dan  I  Ketut  (2003),  kerusakan  sel  disini  termasuk kerusakan  sel  parenkhim  ginjal  dan  kerusakan  sel endotel pembuluh darah yang dapat mengakibatkan permeabilitas  pembuluh  darah  meningkat,  serta diapedesis  sel  radang  atau  leukosit.  Proses fagositosis  yang  dilakukan  oleh  sel-sel  inflamasi juga dapat menghasilkan radikal bebas. Kondisi ini lebih  memperparah  keadaan  kerusakan  sel  akibat radikal  bebas,  termasuk  terjadinya  inflamasi. Menurut Ames and Shigenaga (1992), kondisi stres oksidatif  dapat  diinduksi  oleh  berbagai  faktor seperti  kurangnya  antioksidan  dan  kelebihan produksi  radikal  bebas.  Keadaan  ini  dapat mempengaruhi  prosesproses  fisologis  maupun biokimia  tubuh,  yang  mengakibatkan  terjadinya gangguan  metabolisme  fungsi  sel  dan  dapat berakhir  pada  kematian  sel.  Oksigen  reaktif  dapat bereaksi  dengan  beberapa  makromolekul  seperti DNA, protein, dan lemak. Gangguan dan kerusakan tersebut  dapat  menginduksi  terjadinya  berbagai penyakit  dan  proses  degeneratif  seperti  penuaan dan  karsinogenesis.  Menurut  Nayanatara  (2004). Latihan  fisik  maksimal  renang  pada  tikus  dengan durasi  45  menit  dengan  suhu  lingkungan  20 0 C selama tujuh hari memberikan gambaran makroskopis  berupa  peningkatan  berat  hati,  ginjal, kelenjar adrenal dan kortek serebri.
Pada  penelitian  ini  pemberian  vitamin  E  2 mg/hari  per  oral  setiap  hari  setelah  aktifitas  fisik maksimal  15  hari  berikutnya  didapati  rata-rata bobot ginjal yang terkecil, tetapi masih dalam batas normal.  Hal  ini  menurut  penelitian    Suhartono et al .,  (2007)  bahwa,  vitamin  E  berada  di  dalam lapisan  fosfolipid  membran  sel  dan  berfungsi melindungi  asam lemak  jenuh  ganda  dan komponen  membran  sel  lain  dari  oksidasi  radikal bebas dengan  memutuskan rantai peroksidase lipid dengan  cara  menyumbangkan  satu  atom  hidrogen dari  gugus  OH  pada  cincinnya  ke  radikal  bebas, sehingga  terbentuk  radikal  vitamin  E  yang  stabil dan  tidak  merusak.  Vitamin  E  berfungsi  sebagai pelindung  terhadap  peroksidasi  lipid  di  dalam membran.
b.  Penilaian  perubahan  jaringan  ginjal  (sel ginjal  nekrotik)  mencit  ( Mus  musculus L.) jantan dewasa.
Pada  penelitian  ini  didapati  penilaian perubahan  jaringan  ginjal  (Tubulus  proksimal) nekrotik  mencit  betina  dewasa  yang  diberi  latihan fisik  maksimal  setiap  hari  selama  30  hari  nyata. Kemungkinan hal ini timbul karena adanya  adanya stres  oksidatif  yang  ditimbulkan  oleh  latihan  fisik maksimal  yang  diberikan,  sehingga  meningkatkan akumulasi  oksidan  pengaruh  radikal  bebas  yang menyebabkan  kerusakan  sel.  Pengaruh  radikal bebas  yang  menyebabkan  kerusakan  sel  otot tungkai  mencit  yang  ditandai  oleh  adanya
Jurnal Riset Hesti Medan , Vol. 1, No. 1  Juni 2016
semiquinone, diikuti  dengan  berbagai  kerusakan seluler  karena  peroksidasi  lipid  seperti  hilangnya kelenturan  retikulum  sarkoplasma  sel.  Seperti pernyataan  Astuti  (1999),  bahwa  radikal  bebas yang  muncul  pada  tikus  dapat  terdeteksi  pada  otot tungkai  dan  hati  tikus.  Ini  ditantandai  dengan adanya semiquinone, diiringi  dengan  berbagai kerusakan  seluler  akibat  peroksidasi  lipid  seperti hilangnya  kelenturan  sarkoplasma  dan uncoupling mitokondria.  Peningkatan  kadar  anion  superoksida dalam  sel  menyebabkan  akumulasi  produk  antara seperti  peroksidasi  lipid  yang  dapat  mengubah integritas  membran,  bahkan  dapat  menyebabkan kematian sel.
Pada penelitian ini didapat jumlah perubahan  jaringan  ginjal  (Tubulus  proksimal) nekrotik  mencit  betina  dewasa  yang  diberi  latihan fisik  maksimal  setiap  hari  selama  15  hari  pertama, kemudian 15 hari berikutnya diberikan latihan fisik maksimal  dan  vitamin  E  2mg/hari  per  oral  setiap hari terdapat perbedaan tidak nyata.

## Simpulan Dan Saran Simpulan
Berdasarkan hasil dan pembahasan diatas, dapat disimpulkan sebagai berikut : 1. Pemberian vitamin E tidak mempengaruhi bobot ginjal  mencit  betina  dewasa  ( Mus  musculus L) yang mendapat perlakuan  latihan fisik maksimal 2.  Pemberian  vitamin  E  mempengaruhi  nyata (p<0,05)  gambaran  histologis  tubulus  proksimal mencit  betina  dewasa  ( Mus  musculus L)  yang mendapat perlakuan  latihan fisik maksimal Saran
a. Disarankan  adanya  penelitian  lanjutan  dengan memeriksa berbagai indikator stres oksidatif.
b. Membandingkan vitamin E dengan antioksidan lain  seperti  vitamin  C  dan  beta  karotin  dalam menekan oksidan (radikal bebas) yang diakibatkan  oleh  latihan  fisik  maksimal  pada mencit betina.

## Daftar Pustaka
Allan,  S.,2001.  Michael,  IL,  Timothy  DN.  Neural
Control of Force Output During Maximal and Submaximal Exercise. Sports Medicine 31(9). p. 637-50.
Belviranh  M,  Gokbel  H.  Acute  exercise  induced oxidative  stress  and  antioxidative  stress  and antioxidant  changes.,    2006.  Eur  J  Gen,  126- 131.
Bompa T.O. Theory and Methodology of Training. Toronto,  Ontorio,  Canada,  Kendall/Hunt Publishing Company.,  1990. p. 343.
Brezis  M,  Rosen  S.  Hypoxia  of  the  renal  medulla: its  implication  for  disease.,  1995  N.Eng  J Med, 332: 647-55.
Coller  BS.  Leukocytosis  and  ischemic  vascular disease  morbidity  and  mortality:  is  it  time  to
intervene?  Arterioscler  Thromb  Vasc  Biol., 2005 Apr;25(4):658-70.
Cooper,  K.H.  1994.  Antioxidant  Revolution  , Thomas  Nelson  Publishers  ,  Nashville- Atlanta-London-Vancouver.
Eckardt  K,  Bernhardt  WM,  Weidemann  A, Wernecke  C,  Rosenberger  C,  Wiesener  WS, Willam  C.,  2005.  Role  of  hypoxia  in  the pathogenesis  of  renal  disease.  Kidney  Int  , 68:S46-S51.
Fox  SI.  Muscle.,  2003.  Mechanism  of  Contraction and  Neural  Control.  In  :  Fox  SI.  Human Physiology, 8nd ed. McGraw-Hill, p. 343.
Gillenwater  JY.,  1992.    The  pathophysiology  of urinary  tract  obstruction.  In:  Campbell’s urology. Sixth Ed. W.B. Saunders. Philadelphia,  London,  Toronto,  Montrel, Sydney,Tokyo. Vol I: 499-532.
Gunduz F, Senturk U.K, Kuru O, Aktekin B, M.R. Aktekin.  2004.  The  effect  of  One  Ywer's Swimming  Exercise  on  Oxidant  Stress  ans Antioxidant  Capacity  in  Aged  Rats,  (4)  3:
121-176. Guyton  AC,  Hall  JE.  2006.  Textbook  of  medical physiology. Eleventh ed. Philadelphia: Elsevier saunders;
Halliwell  B,  Gutteridge  JMC.  1994.  Free  radicals, antioxidants,  and  human  disease.  Curiosity, cause,  or  cosequence?.  Neurogenerative disease  research  Group,  King  College, London . Vol. 344. 721-725.
Hariyatmi.  2004.  Kemampuan  vitamin  E  sebagai antioksidan terhadap radikal bebas pada lanjut usia. MIPA , 14(1), 52-60
Jawi,  I.M.,  Suprapta,  D.N.,  Subawa,  A.A.N.  2008. Ubi  Jalar  Ungu  menurunkan  Kadar  MDA dalam  Darah  dan  Hati  Mencit  setelah Aktivitas  Fisik  Maksimal. Jurnal  Veteriner , 9(2), 65-72.
Ji.L.L.  1999.  Antioxidant  Enzyme  Response  to Exercise  and  Aging  .  Med  Scient  Sport Exercise, 25, 225-231.
Junqueira,  L.C.,  Carneiro,  J.,  Kelley,  R.O.,  ahli bahasa,  Jan  Tambayong.  1995,  Histologi Dasar. Edisi ke 8, Jakarta. EGC.:370-387.
Junqueira,  L.E.,  Carneiro,  J.,  Kelley,  R.O.  2005,
Basic  Histology .  11 th Edition,  Boston:  Mc Graw-Hill, p: 373-90.
Khassaf  M,  McArdle  A,  Esanu  C,  Vasilaki  A,
McArdle  F,  Griffiths  RD,  et  al.  Effect  of vitamin C supplements on antioxidant defence and stress proteins in human lymphocytes and skeletal  muscle.  J  Physiol.  2003 Jun  1;549(Pt 2):645-52.
Laksmi,  D.N.D.I.  2010.  Glutathion  meningkatkan kualitas tubulus seminiferus pada mencit yang menerima  pelatihan  fisik  berlebih.  Buletin Veteriner Udayana, 3, 719-21
Leeuwenburgh,  C.,  Ji,  L.L.  1998.  Glutathione  and
Glutathione  Ethyl  Ester  Supplementation  of
Mice  Alter  Glutathione  Homeostasis  during Exercise. The Journal of Nutrition , 128, 2420- 26.
Leeuwenburgh  C,  Heinecke  J.W.2001.  Oxidative stress  and  Antioxidants  in  Exercise.  Current Medicinal Cemistry Rev. 8(7):829-838
Munawar.  2009.  Uji  Toksisitas  Akut  Ekstrak Valerian (valerian Officinalis) terhadap Ginjal mencit Balb/C. J Farmakologi UNDIP Nangaku.  2006.  M.  Chronic  hypoxia  and tubulointerstitial  injury:  a  final  common pathway  to  end-stage  renal  failure.  J  Am  Soc Nephrol ,17:17-25.
Physical  Fitness  and  Activity  in  School.  1994. American  Academy of Pedriatics. Pedriatics  , 93 : 686-8.
Poodhorska Marzena O, et.all. 2006. Expression of metallothionein  in  renal  tubules  of  rats exposed  to  acute  and  endurance  exercise.  J Histology and embriologi,195-200-44 Poortmans  JR,  Vanderstraeten.  1994.  J. Kidney function  during  exercise  in  healthy  and diseased  humans.  An  update .  Sports  Med 18: 419–437. Sastrawan  I.G.P.  2008.  Peran  Hipoksia  Pada Patogenesis  Penyakit  Ginjal.  J  Penyakit Dalam. (1): 9(1).
Senturk  UK,  Gunduz  F,  Kuru  O,  Aktekin  MR,
Kipmen  D,  Yalcin  O,  et  al.  .  2001.  Exercise- induced  oxidative  stress  affects  erythrocytes in sedentary rats but  not exercise-trained rats.
J Appl Physiol. Nov; 91(5):1999-2004. Senturk UK, Gunduz F, Kuru O, Kocer G, Ozkaya YG,  Yesilkaya  A,  et  al.  2005.Exercise- induced  oxidative  stress  leads  hemolysis  in sedentary  but  not  trained  humans.  J  Appl Physiol. Oct, 99(4):1434-41. Suhartono E, Fachir H & Setiawan B. 2007. Kapita Sketsa  Biokimia  Stres  Oksidatif  Dasar  dan Penyakit .  Universitas  Lambung  Mangkurat, Banjarmasin: Pustaka Banua. Terblance  SE.  2000.  The  Effects  of  exhausative exercise  on  the  activity  levels  of  catalase  in various tissue of male and female.  Cell Biol ,
23(11):749-53.
Underwood  JCE.  2000.  Patologi  Umum  dan
Sistemik. Vol.2. 2nd ed. Jakarta: EGC Verma,  R.J.,  Nair,  A.  2001. Ameliorative  effect  of vitamin E on aflatoxin-induced lipid peroxidation  in  the  testis  of  mice. Asian  J Androl , 3, 217-21 Wijaya  A.  1996.  Radikal  bebas  dan  parameter status  antioksidan.  Forum  diagnosticum. Prodia diagnostics educational services. No. 1. 1-11. Winarsi,  H.  2007.  Antioksidan  Alami  dan  Radikal Bebas:  Potensi  dan  Aplikasinya  dalam Kesehatan. KANISIUS, Yogyakarta Yusuf  M.A,  Widodo  J.P,  Soebadi  D.M.  2000. Hubungan  Radikal  bebas  dan  Antioksidan
dengan  Kerusakan  Ginjal  Pada  Obstruksi Akut,  Eksperimen  Pada  Hewan  Coba.  Jurnal
Bedah.
Jurnal Riset Hesti Medan , Vol. 1, No. 1  Juni 2016