Jurnal Pharmascience, Vol. 10, No.2, Oktober 2023, hal: 209-222 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 https://ppjp.ulm.ac.id/journal/index.php/pharmascience Research Article

## Analisis Kadar Kafein pada Minuman Kopi Kekinian di Bekasi Timur dengan Metode Spektrofotometri UV-Vis
Aprilia Lestari, Sari Defi Okzelia* , Wahyuni
Program Studi Farmasi, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Bani Saleh, Bekasi, Indonesia Email: sd.okzelia02@gmail.com

## ABSTRAK
Jumlah  coffee  shops  di  Bekasi  Timur  terus  bertambah  karena  meningkatnya minat  masyarakat  terhadap  konsumsi  kopi  kekinian  yang  variasi  menunya  lebih beragam  dan  modern.  Kopi  mengandung  senyawa  kafein  yang  jumlah  konsumsinya perlu  diperhatikan.  Menurut  SNI  01-7152-2006  batasan  maksimum  kafein  dalam minuman  adalah  50  mg  persajian.  Jumlah  kafein  yang  melebihi  batas  dapat menyebabkan  insomnia,  cemas,  gelisah,  panik,  tremor,  palpitasi,  takikardia,  aritmia dan hipertensi. Tujuan penelitian ini adalah menentukan kadar kafein pada minuman kopi  kekinian  di  Bekasi  Timur.  Penelitian  ini  dilakukan  dengan  metode  analisis kualitatif  menggunakan  reagen  Parry  dan  analisis  kuantitatif  dengan  menggunakan metode  spektrofotometri  UV-Vis  pada  panjang  gelombang  maksimum  272,7  nm. Penelitian  pendahuluan  dilakukan  sebelum  analisis  kualitatif  dan  kuantitatif  melalui kuesioner.  Data  yang  didapatkan  kemudian  dianalisis  menggunakan  Microsoft  Excel dan  SPSS.  Hasil  penelitian  pendahuluan  menunjukkan  bahwa  kopi  susu  gula  aren merupakan  varian  menu  kopi  kekinian  yang  paling  diminati  dengan  harga  maksimal Rp25.000  dan  intensitas  konsumsi  kopi  sebanyak  1  gelas  perhari.  Hasil  uji  kualitatif dengan  reagen  Parry  didapatkan  bahwa  11  sampel  yang  diidentifikasi  positif mengandung kafein. Hasil uji kuantitatif menunjukkan kadar kafein dengan kode A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, dan K secara berturut-turut adalah sebesar 42 mg, 38 mg, 39 mg, 61  mg,  32  mg,  45  mg,  53  mg,  36  mg,  44  mg,  18  mg  dan  44  mg.  Sebanyak  2  dari  11 sampel kopi kekinian di Bekasi Timur mengandung kafein melebihi batasan maksimum yang telah ditetapkan.
Kata Kunci: Minuman Kopi Kekinian, Kopi Susu Gula Aren, Kafein, Spektrofotometri UV-Vis, Bekasi Timur

## ABSTRACT
The number of coffee shops in East Bekasi continues to increase in line with the increasing public interest in coffee consumption. Coffee contains caffeine, in which case
the  amount  consumed  needs  attention.  According  to  SNI  01-7152-2006,  the  maximum caffeine  limit  in  drinks  is  50  milligrams  per  serving.  Excessive  amounts  of  caffeine  can cause  insomnia,  anxiety,  panic,  muscle  pain,  palpitation,  tachycardia,  arrhythmia,  and hypertension. The aim of this study was to determine the caffeine levels in modern coffee beverages at East Bekasi. The qualitative and quantitative analysis were carried out using Parry  reagent  and  UV-Vis  spectrophotometry  method  at  a  wavelength  of  272,7  nm, respectively. Preliminary study was conducted before qualitative and quantitative analysis using  questionnaires.  The  data  obtained  were  then  analyzed  using  Microsoft  Excel  and SPSS. The results of preliminary study showed that palm sugar milk coffee was the most popular variant of modern coffee beverages with a maximum price of Rp. 25,000 and the intensity of coffee consumption was 1 cup per day. Qualitative analysis showed that all 11 samples  contained  caffeine.  Quantitative  analysis  showed  that  caffeine  levels  of  samples with codes of A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, and K were 42 mg, 38 mg, 39 mg, 61 mg, 32 mg, 45 mg, 53 mg, 36 mg, 44 mg, 18 mg, and 44 mg, respectively. 2 out of  11 modern coffee beverages  samples  analyzed  in  East  Bekasi  contained  caffeine  above  maximum  limit recommendation.
Keywords:  Modern  Coffee  Beverages,  Palm  Sugar  Milk  Coffee,  Caffeine,  UV-Vis Spectrophotometry, East Bekasi

## I. PENDAHULUAN
Kopi merupakan salah satu produk minuman  yang  terkenal  dan  banyak diminati  di  dunia.  Peningkatan  konsumsi kopi di Indonesia dapat dilihat dari jumlah coffee shop yang meningkat tiga kali lipat dibandingkan tahun 2016. Hal ini menunjukkan  bahwa  minat  masyarakat terhadap  kopi  semakin  tinggi  (Toffin  & Mix, 2020).
Coffee shop hadir dalam kehidupan masyarakat  saat  ini  dalam  melakukan kegiatan  bersosialisasi.  Fasilitas  yang ditawarkan diantaranya adalah menyediakan  kenyamanan  tempat,  akses internet seperti wi-fi , juga hadirnya konsep kopi  kekinian.  Kopi  kekinian  merupakan varian menu kopi yang lebih beragam dan lebih  modern  baik  dalam  hal  kemasan, penyajian  maupun  metode  penyeduhan
(Alfirahmi,  2019).  Berdasarkan  hasil penelitian  pendahuluan  melalui  kuesioner diketahui  bahwa  pengunjung coffee  shop berusia  18-25  tahun  dimana  mayoritas adalah  mahasiswa  dan  karyawan  dengan intensitas konsumsi kopi kekinian sebanyak 1 gelas perhari.
Kopi mengandung senyawa kafein.
Kafein  merupakan  senyawa  golongan alkaloid xantin. Manfaat kafein
diantaranya adalah memberikan rangsangan  terhadap  susunan  saraf  pusat, diuretika,  relaksasi  pada  otot  polos  dan otot  bronkus  serta  merangsang  otot jantung.  Namun,  konsumsi  kafein  yang berlebihan dapat menimbulkan efek samping  seperti  sulit  tidur  atau  insomnia, cemas,  gelisah,  tremor,  palpitasi,  kejang dan  sakit  kepala.  Bahkan,  kafein  dengan kadar  yang  tinggi  dapat  menyebabkan
hipertensi, takikardia dan aritmia (Gunawan et al ., 2012; Sweetman, 2009).
Untuk  mencegah  terjadinya  efek tidak baik yang ditimbulkan maka penggunaan kafein harus dibatasi. Menurut SNI 01-7152-2006 takaran maksimum  kafein  dalam  minuman  adalah 150 mg perhari dan 50 mg persajian.
Berdasarkan penelitian yang dilakukan  oleh  Maramis et  al .  (2013) mengenai kadar kafein pada kopi bubuk di
Kota Manado menggunakan
spektrofotometri
UV-Vis ditemukan bahwa  jumlah  kafein  yang  dikonsumsi masyarakat  di  kota  tersebut  sebesar  170- 250  mg  perhari.  Selain  itu  penelitian Tjahjani et  al .  (2021)  juga  menunjukkan bahwa kadar kafein pada kopi bubuk putih dan kopi bubuk hitam instan sebesar 113- 197  mg  persajian.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  konsumsi  kafein  tidak  memenuhi SNI (Standar Nasional Indonesia).
Berdasarkan  uraian  di  atas  maka dilakukan  penelitian  mengenai  analisis kadar kafein pada minuman kopi kekinian di Bekasi Timur menggunakan spektrofotometri  UV-Vis,  sehingga  dapat dipastikan  kadar  kafein  telah  sesuai dengan yang ditetapkan oleh SNI 01-7152- 2006.

## II. METODE
A. Bahan
Bahan yang digunakan pada penelitian  ini  antara  lain  adalah  akuades, amonia  21%,  kalsium  karbonat  (CaCO₃), cobalt  nitrate [Co(NO₃)₂],  etanol  96%, kloroform,  metanol,  sampel  kopi  susu kekinian dan standar kafein Sigma Aldrich.

## B. Penelitian Pendahuluan
Pengambilan data melalui kuesioner  dilakukan  di coffee  shop yang berada  di  Bekasi  Timur  dengan  metode purposive sampling sebanyak 30 responden  yang  memenuhi  persyaratan kriteria inklusi responden.

## C. Pemilihan Sampel
1. Pengambilan Sampel
Pemilihan sampel dilakukan dengan  menggunakan  teknik purposive sampling ,  yaitu  teknik  pemilihan  subjek atau sampel berdasarkan pada karakteristik atau kriteria tertentu yang telah ditentukan (Masturoh & Anggita, 2018).
2. Preparasi Sampel
Diambil sebanyak 100 gram sampel  minuman  kopi  susu  kekinian, kemudian ditambahkan 1 gram CaCO₃ lalu dimasukkan  ke  dalam  corong  pisah ( Pyrex ® USA ).  Selanjutnya  dilakukan ekstraksi  sebanyak  3  kali  dengan  masing- masing  penambahan  25  mL  kloroform. Lapisan  bawah  (fase  kloroform)  diambil lalu  diuapkan  dengan waterbath hingga
kloroform menguap seluruhnya
(Elfariyanti et al ., 2020).

## D. Analisis  Kualitatif  Kafein  Metode

## Parry
Reagen  Parry  merupakan  reagen
untuk identifikasi kafein yang mengandung kation Co (II). Reagen Parry dibuat  dengan  melarutkan  sebanyak  0,25 gram cobalt nitrate dalam 16 mL metanol pada  labu  ukur  50  mL  lalu  dicukupkan dengan  akuades  sampai  tanda  batas. Analisis kualitatif kafein dilakukan dengan menambahkan 5 tetes amonia 21% dan 1-2 mL reagen Parry ke dalam 1-2 mL ekstrak kafein  sampel  yang  dilarutkan  dalam etanol  96%.  Menurut  DepKes  (1995) dalam  Maramis et  al . (2013),  hasil  positif kafein ditandai dengan terbentuknya warna biru tua atau hijau.

## E. Analisis Kuantitatif Kafein
1. Pembuatan Larutan Standar Kafein 100 ppm
Sebanyak  0,1  gram  kafein  standar dilarutkan  dengan  30  mL  akuades  dalam labu ukur 100 mL. Kemudian dicukupkan dengan  akuades  sampai  tanda  batas  dan dihomogenkan sehingga didapatkan larutan induk kafein 1000 ppm.
Selanjutnya  dibuat  larutan  standar  kafein 100  ppm  dengan  dipipet  sebanyak  10  mL larutan  induk  kafein  1000  ppm  dan dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur  100  mL
lalu  dicukupkan  dengan  akuades  sampai tanda batas dan dihomogenkan.
2. Penentuan Panjang
Gelombang Maksimum
Panjang  gelombang  maksimum dianalisis  menggunakan  larutan  standar kafein  10  ppm  yang  kemudian  diukur serapan maksimumnya pada rentang panjang gelombang
220-350 nm menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis ( Thermo  Scientific ® USA )  dengan  akudes sebagai blanko.
3. Pembuatan Kurva Kalibrasi Standar
Dipipet  larutan  standar  kafein  100 ppm  ke  dalam  labu  ukur  10  mL  masing- masing  sebanyak  0,6  mL,  0,8  mL,  1  mL, 1,2  mL  dan  1,4  mL  sehingga  diperoleh konsentrasi  6  ppm,  8  ppm,  10  ppm,  12 ppm  dan  14  ppm.  Kemudian  masing- masing  konsentrasi  diukur  pada  panjang gelombang maksimum 272,7 nm menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis ( Thermo  Scientific ® USA )  dengan  blanko akuades.
4. Penetapan Kadar Kafein
Ekstrak  kafein  sampel  dimasukkan ke dalam labu ukur 100 mL dan dilarutkan dengan  akuades  sampai  tanda  batas. Kemudian  dilakukan  pengenceran  25  kali dengan  cara  dipipet  sebanyak  0,4  mL larutan  sampel  uji  lalu  dimasukkan  ke dalam  labu  ukur  10  mL  dan  dicukupkan dengan  akuades  sampai  tanda  batas. Selanjutnya  ditentukan  kadarnya  dengan
spektrofotometer UV-Vis ( Thermo
Scientific ® USA ) pada panjang gelombang 272,7 nm. Pengujian dilakukan sebanyak 3 kali pengulangan.

## F. Validasi Metode

## 1. Linearitas
Uji  linearitas  dilakukan  dengan mengukur  absorbansi  larutan  standar kafein konsentrasi 0,5; 1; 1,5; 2; 3; 4; 6; 8; 10; 12; 14; 16; 18; 20; 30; 40; 50; 60; 70; 80;  100;  120;  140;  160;  180;  200  ppm pada panjang gelombang maksimum 272,7 nm  menggunakan  spektrofotometer  UV- Vis.  Hasil  absorbansi  kemudian  dianalisis dengan  membuat  persamaan  garis  regresi linear dan ditentukan koefisien korelasinya.  Hubungan  dikatakan  linear apabila  nilai  r  mendekati  angka  1 (Harmita, 2004).
2. Presisi
Uji presisi dilakukan dengan menganalisis  larutan  standar  kafein  10 ppm sebanyak 6 kali pengukuran.
Kemudian dilakukan pengukuran berulang secara intraday (tiap  jam)  dan interday (selama  6  hari)  pada  panjang  gelombang maksimum 272,7 nm. Selanjutnya dihitung nilai SD, KV dan KV horwitz.
3. LOD dan LOQ
Uji  LOD  dan  LOQ  dilakukan dengan mengukur blanko akuades sebanyak  10  kali  pengulangan  pada panjang  gelombang  maksimum  272,7  nm
menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis. Kemudian  dihitung  nilai  SD,  LOD  dan LOQ.
4. Akurasi
Uji  akurasi  dilakukan  dengan mengukur sejumlah sampel yang dianalisis kemudian sejumlah analit ditambahkan ke dalam sampel lalu dicampur dan dianalisis. Kemudian kedua hasil tersebut dibandingkan  dengan  kadar  analit  yang sebenarnya.  Syarat  keterimaan  perolehan kembali  (% recovery )  dinilai  baik  jika berada  pada  kisaran  90-107%  (Riyanto, 2014).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN A. Penelitian Pendahuluan
Tujuan penelitian pendahuluan adalah  menentukan  kriteria  inklusi  pada pemilihan  sampel  uji  dan  menentukan intensitas  konsumsi  kopi  kekinian  di masyarakat  dalam  1  hari.  Pengumpulan data pada penelitian pendahuluan dilakukan menggunakan kuesioner dengan jumlah 30 responden.
Berdasarkan  data  yang  diperoleh diketahui  bahwa  minuman  kopi  kekinian di  Bekasi  Timur  diminati  oleh  laki-laki dan perempuan dimana mayoritas merupakan mahasiswa dan karyawan yang berusia 18-25 tahun.
Data  yang  didapatkan  dari  30 responden  konsumen  kopi  kekinian  di Bekasi Timur menunjukkan bahwa
mayoritas konsumen kopi kekinian mengkonsumsi  kopi  kekinian  sebanyak  1 gelas  perhari.  Kemudian  untuk  varian menu  kopi  kekinian  yang  paling  banyak diminati  oleh  konsumen  adalah  varian menu kopi susu gula aren. Konsumen kopi kekinian  di  Bekasi  Timur  biasa  membeli kopi  kekinian  tersebut  pada  kisaran  harga Rp15.000-25.000.

## B. Pengambilan Sampel
Sampel  uji  yang  diperoleh  yaitu sebanyak  11  sampel  dan  diambil  dari coffee shop yang berbeda-beda di Kecamatan  Bekasi  Timur.  Kemudian masing-masing  sampel  tersebut  diberikan kode  A,  B,  C,  D,  E,  F,  G,  H,  I,  J  dan  K. Pengambilan sampel uji dilakukan dengan menggunakan  teknik purposive  sampling . Kriteria inklusi sampel diantaranya merupakan menu kopi susu gula aren yang merupakan  varian  menu  kopi  kekinian yang paling banyak diminati dengan harga persajian tidak melebihi Rp25.000. Hal ini dikarenakan  harga  minuman  kopi  susu gula  aren  di  pasaran  berada  pada  rentang harga  Rp15.000–Rp25.000.  Selanjutnya dipilih  minuman  kopi  susu  gula  aren
dalam bentuk cair yang artinya merupakan minuman siap minum atau siap dikonsumsi.

## C. Preparasi Sampel
Pada  preparasi  sampel  masing- masing  sampel  ditimbang  sebanyak  100 gram  lalu  dimasukkan  ke  dalam  corong pisah. Kemudian ditambahkan sebanyak 1 gram  kalsium  karbonat  (CaCO₃)  yang berfungsi  untuk  memutus  ikatan  kafein dengan senyawa lain sehingga menghasilkan  kafein  dalam  basa  bebas (Mahendradatta,  2007).  Reaksi  kafein dengan CaCO₃ dapat  dilihat  pada  Gambar 1.
Selanjutnya  dilakukan  ekstraksi cair-cair sebanyak 3 kali dengan menambahkan  kloroform  masing-masing sebanyak  25  mL.  Kafein  adalah  alkaloid xantin dan merupakan senyawa heterosiklik,  karena  di  dalam  kerangka cincin  tidak  hanya  terdapat  atom  karbon tetapi  juga  atom  nitrogen.  Dalam  ektraksi cair-cair  dengan  corong  pisah  dilakukan berdasarkan  kepolaran  atau “like  dissolve like ”,  dimana  suatu  senyawa  akan  larut pada pelarut yang kepolarannya sama.
Gambar 1. Dugaan Reaksi Kafein dan CaCO₃
Kafein  merupakan  alkaloid  yang bersifat  non  polar,  sehingga  memerlukan pelarut non polar yaitu kloroform.
Kloroform  merupakan  pelarut  yang  cocok untuk  kafein  karena  sifatnya  yang  tidak bercampur  dengan  pelarut  sebelumnya. Pemilihan  kloroform  sebagai  pelarut  juga dikarenakan  kafein  mudah  larut  dalam kloroform,  sehingga  mampu  membuat kafein terekstraksi lebih banyak
(Kemenkes  RI,  2020;  Maramis et  al .,
2013).  Ekstraksi  cair-cair  atau  proses
pemisahan dilakukan dengan cara penggojokan. Dalam hal ini perlu diketahui  bahwa  proses  tersebut  dapat menyebabkan  naiknya  tekanan  uap  di dalam  corong  pisah  akibat  guncangan sehingga  untuk  menurunkan  tekanan  uap tersebut  maka  tutup  corong  pisah  harus sesekali dibuka.
Proses ekstraksi menghasilkan kesetimbangan konsentrasi di dalam corong  pisah  sehingga  menyebabkan terbentuknya  dua  lapisan.  Perbedaan lapisan  tersebut  juga  diakibatkan  karena adanya perbedaan kepolaran. Fase kloroform  yang  bersifat  non  polar  berada pada lapisan bawah karena memiliki berat jenis  lebih  besar  (1,498  dibandingkan dengan lapisan kopi yang berada di lapisan atas serta bersifat polar.
Kemudian lapisan bawah atau fase kloroform  diambil  dan  diuapkan  dengan waterbath sehingga kloroform akan
menguap  seluruhnya  dan  meninggalkan ekstrak  kafein  (Maramis et  al .,  2013).
Hasil  ekstrak  kafein  sampel  dapat  dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2. Contoh Ekstrak Kafein
(Sampel B) D. Analisis Kualitatif
Kafein

## Metode Parry
Uji  kualitatif  kafein  dilakukan untuk  mengindentifikasi  ada  tidaknya kandungan  kafein  pada  11  sampel  kopi kekinian. Pada uji kualitatif, ekstrak kafein terlebih  dahulu  dilarutkan  dengan  etanol 96%. Kemudian ditambahkan amonia 21% untuk  membuat  larutan  sedikit  basa  dan ditambahkan reagen Parry untuk membentuk  senyawa  kompleks.  Hasil  uji kualitatif  sampel  dapat  dilihat  pada  Tabel I.
Berdasarkan Tabel I dapat diketahui  bahwa  11  sampel  dinyatakan positif  mengandung  kafein.  Hasil  positif mengandung kafein ditandai dengan terbentuknya warna hijau yang berasal dari senyawa  kompleks yang dihasilkan  antara kafein  dengan  logam  Co  (II)  dalam suasana  basa  (NH₃).  Pada  senyawa kompleks  ini,  Co  (II)  sebagai  atom  pusat
dapat membentuk ikatan kovalen koordinasi  dengan  kafein  dan  NH₃  yang berperan sebagai ligan. Reaksi
pembentukan  kompleks  antara  Co  (II) dengan  kafein  dapat  dilihat  pada  Gambar
3.
Gambar 3. Reaksi Pembentukan Kompleks antara Co (II) dengan Kafein

## E. Analisis Kuantitatif Kafein
1. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Pengukuran  larutan  standar  kafein 10  ppm  pada  rentang  panjang  gelombang
220-350 nm menghasilkan panjang gelombang  maksimum  yaitu  272,7  nm. Menurut  Egan  dalam  (Fajriana  &  Fajriati, 2018),  panjang  gelombang  maksimum kafein  berada  pada  272-276 nm,  sehingga hasil  pengukuran  yang  didapatkan  telah sesuai. Data pengukuran panjang gelombang dapat dilihat pada Gambar 4.
Gambar  4. Scan  Panjang  Gelombang Kafein
2. Penentuan Kurva Kalibrasi Kafein
Kurva kalibrasi merupakan
persamaan  garis  yang  menghubungkan
antara  konsentrasi  dan  absorbansi  suatu zat.  Kurva  kalibrasi  kafein  dibuat  dengan mengukur  larutan  deret  standar  6  ppm,  8 ppm,  10  ppm,  12  ppm  dan  14  ppm  pada panjang  gelombang  maksimum  272,7  nm menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis. Hasil  pengukuran  larutan  deret  standar dapat  dilihat  pada  Tabel  II,  kemudian untuk hasil kurva kalibrasi dan persamaan garis  linear  kafein  ditunjukkan  pada Gambar 5.
Pada  Gambar  5  dapat  diketahui  bahwa kurva  kalibrasi  kafein  yang  dihasilkan memiliki hubungan linear antara
konsentrasi dan absorbansi dengan korelasi  y  =  0,0511x  +  0,0612,  nilai  r²  = 0,9968 dan nilai r sebesar 0,9984. Menurut literatur nilai koefisien determinasi (r²) dan koefisien korelasi (r) dapat dikatakan baik jika  nilai  r²  >  0,995  dan  nilai  r  mendekati angka  1,  sehingga  dapat  disimpulkan bahwa hasil yang diperoleh telah memenuhi syarat (Eurachem Guide, 2014; Harmita, 2004).
Tabel I. Hasil Uji Kualitatif Sampel Sampel Hasil Keterangan (+/-) 1 A Hijau + 2 B Hijau + 3 C Hijau + 4 D Hijau + 5 E Hijau + 6 F Hijau + 7 G Hijau + 8 H Hijau + 9 I Hijau + 10 J Hijau + 11 K Hijau + Tabel II. Hasil Pengukuran Larutan Deret Standar Kafein No Konsentrasi (ppm) Nilai Absorbansi SD Rata-rata Rata-rata ± SD 1 2 3 1 6 0,354 0,387  0,355  0,019 0,365 0,365±0,019 2 8 0,470 0,471  0,449  0,015 0,463 0,463±0,015 3 10 0,588 0,587  0,588  0,001 0,587 0,587±0,001 4 12 0,765 0,643  0,624  0,077 0,677 0,677±0,077 5 14 0,771 0,764  0,771  0,004 0,769 0,769±0,004 3. Penetapan Kadar Kafein Larutan  sampel  dibuat  dengan
mengencerkan  ekstrak  kafein  masing-
masing sampel dengan akuades dalam labu ukur  100  mL.  Larutan  sampel  diukur menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis
pada  panjang  gelombang  maksimum. Hasil  pengukuran  menunjukkan  bahwa nilai  absorbansi  lebih  dari  0,8  dan  tidak termasuk ke dalam rentang nilai absorbansi  yang  baik  yaitu  0,2  -  0,8 sehingga  perlu  dilakukan  pengenceran
larutan  sampel  25  kali.  Selanjutnya masing-masing larutan sampel pengenceran 25 kali diukur absorbansinya pada  panjang  gelombang  maksimum. Hasil  pengukuran  dan  perhitungan  kadar ditunjukkan pada Tabel III.
Tabel III. Hasil Uji Kuantitatif Kafein Sampel Abs Konsentrasi (ppm) Kadar Kafein (%) Kadar Kafein Persajian (mg) SD Rata-rata Kadar Kafein Persajian (mg)±SD A1 A2 A3 0,404 0,399 0,429 167,710 165,265 179,941 0,01677 0,01653 0,01799 41 40 44 2,0817 42 ± 2,0817 B1 B2 B3 0,412 0,423 0,465 171,625 177,005 195,555 0,01716 0,01770 0,01976 35 37 41 3,0551 38 ± 3,0551 C1 C2 C3 0,414 0,417 0,424 172,603 174,070 177,495 0,01726 0,01741 0,01775 38 39 39 0,5774 39 ± 0,5774 D1 D2 D3 0,433 0,451 0,451 181,898 190,705 190,705 0,01819 0,01907 0,01907 60 62 62 1,1547 61 ± 1,1547 E1 E2 E3 0,382 0,342 0,351 156,948 137,378 141,780 0,01569 0,01374 0,01418 34 30 31 2,0817 32 ± 2,0817 F1 F2 F3 0,432 0,451 0,486 181,410 190,705 207,828 0,01814 0,01907 0,02078 42 44 48 3,0551 45 ± 3,0551 G1 G2 G3 0,590 0,583 0,577 258,708 255,285 252,348 0,02587 0,02553 0,02523 54 53 53 0,5774 53 ± 0,5774 H1 H2 H3 0,402 0,403 0,405 166,733 167,220 168,200 0,01667 0,01672 0,01682 36 36 36 0 36 ± 0 I1 I2 I3 0,350 0,348 0,351 141,293 140,313 141,780 0,01413 0,01403 0,01418 44 44 44 0 44 ± 0
Sampel Abs Konsentrasi (ppm) Kadar Kafein (%) Kadar Kafein Persajian (mg) SD Rata-rata Kadar Kafein Persajian (mg)±SD J1 J2 J3 0,217 0,216 0,217 76,2225 75,7325 76,2225 0,00762 0,00757 0,00762 18 18 18 0 18 ± 0 K1 K2 K3 0,515 0,511 0,507 222,015 220,058 218,103 0,02220 0,02201 0,02181 45 44 44 0,5774 44 ± 0,5774 Gambar 5. Kurva Kalibrasi dan Persamaan Regresi Linear Kafein Berdasarkan hasil pengukuran diketahui  bahwa  kadar  kafein  persajian pada  11  sampel  dengan  kode  A,  B,  C,  D, E, F, G, H, I, J dan K secara berturut-turut sebesar 42 mg; 38 mg; 39 mg; 61 mg; 32 mg; 45 mg; 53 mg; 36 mg; 44 mg; 18 mg; dan  44  mg.  Menurut  SNI  01-7152-2006 batasan maksimum kafein dalam minuman adalah 50 mg persajian sehingga terdapat 2 dari  11  sampel  melebihi  batas  yang  telah ditetapkan.
Penelitian  ini  sejalan  dengan  yang dilakukan  oleh  Maramis et  al .  (2013)
dimana  sebanyak  6  sampel  kopi  bubuk  di Kota  Manado  yang  diuji  semuanya melebihi  batas  maksimum  konsumsi  yang ditetapkan oleh SNI karena lebih dari 150 mg  perhari.  Penelitian  ini  juga  didukung oleh  penelitian  yang  dilakukan  oleh Tjahjani et  al .  (2021)  yang  menunjukkan bahwa  5  sampel  kopi  bubuk  putih  instan dan  5  sampel  kopi  bubuk  hitam  instan yang  diuji  semuanya  memiliki  kadar kafein  persajian  yang  tidak  sesuai  dengan SNI karena melebihi 50 mg persajian.
Kafein dalam jumlah yang melebihi  batas  dapat  memberikan  efek yang  tidak  baik  mulai  dari  efek  ringan hingga  efek  yang  serius  pada  tubuh.  Efek kafein diantaranya adalah dapat menyebabkan  insomnia,  cemas,  gelisah, panik,  tremor,  palpitasi,  dan  jantung berdebar. Kafein juga dapat menyebabkan takikardia,  aritmia  bahkan  hipertensi (Gunawan et al., 2012; Sweetman, 2009).

## F. Validasi Metode
1. Linearitas
0.365 0.463 0.587 0.677 0.769 y = 0.0511x  + 0.0612 R² = 0.9968 0. 0.225 0.45 0.675 0.9 0 4 7 11 14 18 A b so rb a n si Konsentrasi (ppm)
Linearitas  adalah  metode  dalam analisis  yang  memberikan  respon  secara langsung atau dengan transformasi matematik  yang  baik  dan  proporsional terhadap  konsentrasi  analit  dan  sampel yang dinyatakan dalam garis regresi.
Hasil pengukuran absorbansi larutan  seri  konsentrasi  kemudian  dibuat kurva yang menghubungkan antara konsentrasi  dan  absorbansi.  Hasil  data linearitas larutan standar kafein ditunjukkan pada Gambar 6.
Gambar 6. Hasil Uji Linearitas Kafein
Hasil  pengukuran  menunjukkan bahwa  terdapat  hubungan  linear  pada konsentrasi  0,5-100  ppm  yang  dapat dilihat pada kurva standar kafein.
Persamaan  regresi  linear  yang  didapatkan adalah y = 0,0334x + 0,1718 dengan nilai r²  =  0,9912.  Data  yang  dihasilkan menunjukkan kurva standar kafein memiliki  linearitas  yang  baik  karena memiliki  nilai  r  sebesar  0,9956  dimana nilai tersebut mendekati angka 1 (Harmita, 2004).
2. Presisi Presisi adalah ukuran yang menunjukkan  kedekatan  antar  hasil  uji melalui  pengulangan  pengukuran  pada sampel  yang  sama.  Presisi  dapat  dilihat melalui  pengukuran  SD  (Standar  Deviasi) dan  KV  (Koefisien  Variasi).  Standar deviasi  atau  simpangan  baku  adalah  nilai yang digunakan untuk menentukan sebaran  data  dalam  suatu  sampel  dan mengetahui  sebarapa  dekat  data  tersebut dengan  nilai  rata-rata.  Setelah  diketahui nilai  SD  maka  nilai  KV  (Koefisien Variasi)  dapat  dihitung.  Koefisien  variasi dinyatakan  dalam  bentuk  persentase  yang dihasilkan dari perbandingan antara simpangan  baku  (SD)  dengan  nilai  rata- rata.  Koefisien  variasi  digunakan  untuk mengamati  persebaran  data  dari  rata-rata hitung.
Hasil  pengukuran  presisi intraday didapatkan  nilai  KV  sebesar  5,96%  dan interday sebesar  1,61%.  Nilai  KV  yang telah  didapatkan  kemudian  dibandingkan dengan hasil nilai KV Horwitz yaitu kurva yang menghubungkan reproducibilitas (presisi  yang  dinyatakan  %  KV)  dengan konsentrasi.  Nilai  KV  Horwitz  yang diperoleh adalah sebesar 11,314%. Menurut  Riyanto  (2019)  presisi  dapat dikatakan  memenuhi  syarat  apabila  nilai KV  lebih  kecil  dibandingkan  dengan  nilai KV  Horwitz,  sehingga  dapat  dinyatakan
y = 0.0334x + 0.1718 R² = 0.9912 0. 1. 2. 3. 4. 0 25 50 75 100 125 A b so rb a n si Konsentrasi (ppm)
bahwa  nilai  presisi  yang  didapatkan  dari hasil pengukuran adalah baik.
3. LOD dan LOQ
Nilai  LOD  yang  diperoleh  dari pengukuran  yaitu  sebesar  0,0483  ppm. Nilai  tersebut  menunjukkan  jumlah  analit terkecil  yang  masih  dapat  terdeteksi  oleh spektrofotometer  UV-Vis,  artinya  pada konsentrasi tersebut masih dapat dilakukan pengukuran  sampel  yang  memberikan hasil ketelitian. Sedangkan nilai LOQ yang diperoleh  yaitu  sebesar  0,1611  ppm  yang menunjukkan  konsentrasi  analit  terendah yang  terkuantisasi  dan  masih  memenuhi kriteria dimana jika dilakukan pengukuran pada  konsentrasi  tersebut  maka  masih dapat  memberikan  kecermatan  analisis (Riyanto, 2014).
4. Akurasi
Akurasi adalah ukuran yang
menunjukkan  derajat  kedekatan  hasil analis dengan kadar analit yang sebenarnya.  Hasil  pengukuran  akurasi dinyatakan  sebagai  persen  perolehan kembali  atau  % recovery .  Pada  penelitian ini  nilai  akurasi  ditentukan  menggunakan metode  penambahan  bahan  baku.  Data hasil uji akurasi menunjukkan bahwa nilai
% recovery sampel A, B, C, D, E, F, G, H,
I, J dan K berkisar antara 90,17-104,38%. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  masing- masing  sampel  masih  memenuhi  syarat keterimaan  akurasi  90-107%    (Riyanto, 2014).

## IV. KESIMPULAN
Hasil  uji  kualitatif  kafein  dengan reagen  Parry  menunjukkan  bahwa  seluruh sampel  (11  sampel)  minuman  kopi kekinian  di  Bekasi  Timur  yang  dianalisis positif  mengandung  kafein.  Hasil  uji kuantitatif kafein dengan metode spektrofotometri  UV-Vis  menunjukkan bahwa  2  dari  11  sampel  memiliki  kadar kafein  yang  melebihi  batas  persyaratan SNI  01-7152-2006  yaitu  pada  sampel dengan  kode  D  dan  G  dengan  kadar masing-masing sebesar 61 mg dan 53 mg.

## KONFLIK KEPENTINGAN
Seluruh penulis menyatakan bahwa tidak  ada  konflik  kepentingan  dalam penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Alfirahmi. (2019). Fenomena Kopi
Kekinian  di  Era  4.0  Ditinjau  dari Marketing  4.0  dan  Teori  Uses  and Effect. Lugas  Jurnal  Komunikasi , 3(1), 24–32.
Databoks. (2020). Konsumsi Kopi Domestik di Indonesia Terus
Meningkat selama 5 Tahun Terakhir. https://databoks.com
DepKes.  (1995).  Farmakope  Indonesia (Edisi  IV).  Departemen  Kesehatan RI. Jakarta.
Elfariyanti,  Silviana,  E.,  &  Santika,  M.
(2020).  Analisis  Kandungan  Kafein Pada  Kopi  Seduhan. Lantanida Journal , 8(1) , 1–12.
Eurachem  Guide.  (2014).  The  Fitness  for
Purpose  of  Analytical  Methods  –  A Laboratory Guide to Method Validation  and  Related  Topics  (2nd
ed). www.eurachem.org Fajriana,  N.  H.,  &  Fajriati,  I.  (2018).
Analisis Kadar Kafein Kopi Arabika ( Coffea  arabica  L .)  Pada  Variasi Temperatur Sangrai Secara Spektrofotometri Ultra Violet. Analit: Analytical and Environmental Chemistry , 3(2) , 148–162.
Gandjar,  I.  G.,  &  Rohman,  A.  (2007). Kimia  Farmasi  Analisis.  Pustaka Pelajar. Yogyakarta.
Gandjar,  I.  G.,  &  Rohman,  A.  (2018).
Spektroskopi Molekuler Untuk Analisis  Farmasi.  Gadjah  Mada University Press. Yogyakarta. Gunawan,  S.  G.,  Nafrialdi,  R.  S.,  &
Elysabeth.  (2012).  Farmakologi  dan
Terapi  (Edisi  V).  Badan  Penerbit FKUI. Jakarta Harmita.  (2004).  Petunjuk  Pelaksanaan Validasi Metode Dan Cara Perhitungannya. Majalah Ilmu Kefarmasian , 1(3) , 117–135. Katzung, B. G.,  Masters, S. B., &  Trevor, A.  J.  (2012).  Basic  &  Clinical Pharmacology  (12th  ed.,  Issue  C). The McGraw-Hill Companies, Inc.
Latunra, A. I., Johannes, E., Mulihardianti,
B.,  &  Sumule,  O.  (2021).  Analisis Kandungan  Kafein  Kopi  (Coffea arabica)  Pada  Tingkat  Kematangan
Berbeda Menggunakan Spektrofotometer  UV-VIS.  Jurnal Ilmu  Alam  Dan  Lingkungan, 12(1), 45–50. Kemenkes RI. (2020). Farmakope Indonesia  Edisi  VI.  Kementerian Kesehatan RI. Jakarta.
Mahendradatta,  M.  (2007).  Pangan  Aman
dan  Sehat:  Prasyarat  Kebutuhan
Mutlak Sehari-hari. Lembaga
Penerbitan  Universitas  Hasanuddin.
Makassar. Maramis,  R.  K.,  Citraningtyas,  G.,  & Wehantouw,  F.  (2013).  Analisis Kafein  Dalam  Kopi  Bubuk  Di  Kota Manado Menggunakan Spektrofotometri UV-Vis. Pharmacon  Jurnal  Ilmiah  Farmasi ,
2(4) , 122–128.
Mutmainnah,  N.  (2017).  Penentuan  Suhu dan  Waktu  Optimum  Penyeduhan Batang Teh Hijau (Camelia Sinensis L.) Terhadap Kandungan Antioksidan  Kafein,  Tanin  dan Katekin. UIN Alauddin Makassar. Riyanto.  (2014).  Validasi  &  Verifikasi Metode Uji: Sesuai Dengan ISO/IEC
17025  Laboratorium  Pengujian  dan Kalibrasi. Penerbit Deepublish. Yogyakarta. Sweetman,  S.  C.  (2009).  Martindale:  The Complete Drug Reference (36th ed.). The Pharmaceutical Press. https://doi.org/10.1093/nq/172.19.33 3-a.
Tjahjani,  N.  P.,  Chairunnisa,  A.,  & Handayani,  H.  (2021).  Analisis Perbedaan  Kadar  Kafein  Pada  Kopi Bubuk Hitam dan Kopi Bubuk Putih Instan  Secara  Spektrofotometri  UV- Vis. Cendikia  Journal  Farmacy , 5(1), 52–62.
Toffin,  &  Mix.  (2020). Brewing  in Indonesia:  Insights  For  Successful Coffee Shop Business . Toffin Indonesia.https://insight.toffin.id/toff in-stories/toffin-indonesia-merilis- riset-2020-brewing-in-indonesia.