UJI EFEKTIVITAS EKSTRAK  DAUN BINAHONG (Anredera Cordifolia Steenis) TERHADAP PERTUMBUHAN Streptococcus mutans SECARA IN

## VITRO
Silvana Rimporok 1) , Billy J. Kepel 2) , Krista V. Siagian 1)
1) Program Studi Pendidikan Dokter Gigi Fakultas Kedokteran, UNSRAT
2) Bagian Fakultas kedokteran, UNSRAT

## ABSTRACT
Herbal  plants  in  Indonesia  has  been  mostly  used  as  traditional  medicines.  One  of  the  natural materials is Binahong (Anredera Cordifolia Steenis). Binahong leaf contains active compunds which are  flavonoid,  terpenoid,  alkanoid,  saponin.  The  major  Oral  health  problem  is  tooth  caries.  Tooth caries  is  a  localized  pathology  process  after  eruption  and  caused  by  the  role  of  pathogens Streptococcus mutans bacteria. The purpose of this study is to acknowledge whether the Binahong leaf can effectively inhibit the growth of Streptococcus mutans. This research is an experimental research with  post  test  only  control  design  based  on  the  Kirby-bauer  modification  method  by  using  filter papers.  Binahong  leaf  extract  is  obtained  by  maceration  method  with  solvent  of  96%  ethanol. Streptococcus  mutans  is  taken  from  the  pure  bacteria  stock  in  Medical  Faculty  Microbiology Laboratorium  of  Sam  Ratulangi  University  Manado.  The  result  of  this  research  shows  that  the extensive of Binahong leaf inhibitor zone to Streptococcus Mutans is 8,3 mm. By this research, it can be  concluded  that  Binahong  leaf  extract  has  an  antibacterial  effect  to  inhibit  the  growth  of Streptococcus mutans. The result of this research can be an idea for advanced research in the future about Binahong leaf extract and can be a useful information and knowledge for societies.
Key words: Binahong leaf (Anredera cordifolia), Streptococcus mutans

## ABSTRAK
Tanaman herbal di Indonesia telah banyak digunakan sebagai bahan obat tradisional. Salah satu bahan alami  ialah  Binahong (Anredera  Cordifolia  Steenis). Daun  binahong  memiliki  kandungan  senyawa aktif yang antara lain flavonoid, terpenoid, alkanoid, saponin. Masalah kesehatan gigi dan mulut yang paling menonjol saat ini masalah penyakit karies gigi. Karies gigi adalah proses patologi pasca erupsi yang  terlokalisasi  yang  salah  satu  penyebabnya  diakibatkan  karena  peran  dari  bakteri  pathogen Streptococcus mutans .Tujuan penelitian  untuk mengetahui apakah antibakteri daun binahong  efektif untuk  menghambat  pertumbuhan  bakteri Streptococcus  mutans .  Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental  menggunakan  desain post  test  only  control  design dengan  menggunakan  metode modifikasi Kirby-bauer menggunakan kertas saring. Ekstrak daun binahong diperoleh dengan metode maserasi  menggunakan pelarut etanol 96%. Bakteri Streptococcus mutans diambil dari stok bakteri murni  Laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas  Kedokteran  Universitas  Sam  Ratulangi  Manado.  Hasil penelitian  didapatkan  rata-rata  diameter  zona  hambat  ekstrak  daun  binahong  terhadap Streptococcus mutans sebesar  8,3  mm 2 .  Penelitian  ini  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  daun  binahong    memiliki efek  antibakteri  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri Streptococcus  mutans .  Hasil  penelitian  ini dapat  dijadikan  masukan  agar  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  mengenai  efektivitas  daun  binahong sehingga dapat  memberikan informasi dan sumber pengetahuan  kepada masyarakat.
Kata kunci: Daun Binahong ( Anredera Cordifolia Steenis), Streptococcus mutans

## PENDAHULUAN
Tanaman  herbal  di  Indonesia  telah  banyak digunakan  sebagai  bahan  obat  tradisional. Salah  satu  bahan  alami  yang  dimanfaatkan sebagai bahan obat ialah tanaman binahong (Anredera  Cordifolia  Steenis ) 1 Binahong memiliki  akar,  umbi,  batang,  bunga,  daun yang  mengandung  senyawa  aktif  yaitu flavonoid, alkanoid, terpenoid dan saponin. 2,3 Senyawa  aktif  flavonoid  dapat berperan langsung sebagai antibiotik dengan menggangu  fungsi  dari  mikroorganisme seperti  bakteri  dan  virus. 4,5 Binahong  juga mengandung antimikroba yang aktif sehingga  dapat  digunakan  dalam  mencegah pertumbuhan  bakteri. 6 Bakteri  yang    sering di  jumpai  dalam  rongga  mulut  ialah Streptococcus mutans .
Steptoccocus  mutans merupakan  bakteri penyebab  utama  terjadinya  karies  gigi diketahui  sebagai  bagian  dari  flora  normal dalam  rongga  mulut  yang  berperan  dalam proses  fermentasi  karbohidrat  sehingga menghasilkan asam menyebabkan terjadinya  demineralisasi  gigi  dan  infeksi pada rongga mulut. 7
Karies gigi merupakan masalah kesehatan gigi dan mulut yang sering terjadi di  Indonesia.  Berdasarkan  Riset  Kesehatan Dasar  (Rikesdes)  Nasional  tahun  2013, prevalensi  nasional  masalah  kesehatan  gigi dan mulut mencapai 25,9% dan sebanyak 14 provinsi  di  Indonesia  memiliki  prevalensi masalah  gigi  dan  mulut  diatas  prevalensi nasional. 8 Kesadaran  masyarakat  perlu ditingkatkan  dalam  menjaga  kesehatan  gigi dan  mulut.  Salah  satu  alternatif  yang  dapat ditempuh  ialah  memanfaatkan  bahan  – bahan  alam  dari  senyawa  kimia  tanaman binahong. 4 Penelitian ekstrak daun binahong
terhadap  uji  bakteri Streptococcus  mutans belum pernah diteliti.
Berdasarkan  latar  belakang  di  atas, peneliti  tertarik  untuk  melakukan  penelitian tentang efektivitas daun binahong (Anredera Cordifolia  Steenis) terhadap  pertumbuhan Streptoccocus mutans secara in vitro . Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui  bagaimana  efektifitas  ekstrak daun binahong (Anredera Cordifolia Steenis) terhadap pertumbuhan Streptococcus mutans secara in vitro .

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental  laboratoris  dengan  rancangan penelitian post  test  only  control  group design .  Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan Juni - Juli 2015. Subjek dari penelitian ini  adalah  bakteri Streptococcus  mutans . Variabel  penelitian  ini  yaitu  ekstrak  daun binahong  dan  pertumbuhan Streptococcus mutans .
Pembuatan ekstrak dilakukan di Laboratorium  Farmasi  F-MIPA  Universitas Sam  Ratulangi.  Daun  binahong  dikeringkan selama seminggu kemudian diblender hingga  halus  mendapatkan  serat  kasar, kemudian  dimaserasi  dengan  etanol  96%, setelah  itu  hasil  maserasi  difiltrasi  sampai tiga kali untuk mendapatkan ekstrak murni.
Streptococcus  mutans yang  digunakan diambil    dari  stok  bakteri  murni  di Laboratorium Mikrobiologi
Fakultas
Kedokteran  Universitas  Sam  Ratulangi Manado. Streptococcus  mutans kemudian dikembangbiakkan selama 1x24 jam dengan suhu  37 0 C  pada  lima  cawan  petri  untuk selanjutnya  diberi  perlakuan  dengan  kertas saring.  Pengukuran  zona  hambat  ekstrak daun binahong dilakukan pada 5 cawan petri dengan  tiga  perlakuan  yang  berbeda  yaitu
kelompok ekstrak,
kontrol positif doksisiklin, dan kontrol negatif akuades. Metode  yang  digunakan  ialah  metode difusi  lempeng  agar  (Kirby-Bauer)  yang merupakan  metode  uji  kepekaan  langsung. Agar Muller-Hinton (MHA) disediakan sebanyak  lima  cawan  petri. Streptococcus mutans dioleskan  secara  merata  dengan menggunakan kapas lidi steril pada permukaan  agar Muller-Hinton (MHA) dibiarkan tiga sampai lima menit dalam suhu kamar.  Kertas  saring  dibentuk  seperti cakram  dengan  menggunakan perforator sebanyak  lima  belas  buah,  lima  cakram diantaranya  diberi  ekstrak  daun  binahong sedangkan  lima  cakram  diberi  doksisiklin sebagai    kontrol  positif,  dan  lima  cakram diberi  akuades  sebagai  kontrol  negatif. Cakram  tersebut  lalu  diletakkan  di  media agar Muller-Hinton (MHA)  yang  sudah dioleskan  baktreri Streptococcus  mutans di dalamnya  kemudian  dimasukkan  ke  dalam inkubator  dan  diinkubasi  selama  24  jam pada  suhu  37 0 C.  Setiap  cawan  petri  terdiri dari  satu  cakram  kelompok  intervensi  dan satu  cakram  kelompok  kontrol  positif  dan satu  cakram  kontrol  negatif.  Bila  dalam  24 jam  ada  koloni Streptococcus  mutans yang terbentuk berarti sudah terdapat pertumbuhan Streptococcus  mutans yang memberikan  hasil  berupa  koloni  bulat, berwarna  krem,  halus  dan  berbau  seperti ragi.  Diameter  zona  hambat  diukur  dengan jangka sorong dengan rumus
(D v – D c ) + (D h – D c ) 2
Data  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini diolah dengan menggunakan program Microsoft  Excel  secara  komputerisasi, dalam bentuk tabel, gambar dan tulisan.

## HASIL PENELITIAN
Cawan  petri  yang  berisi  Agar Muller- Hinton (MHA)  dan Streptococcus  mutans yang  telah  diberi  perlakuan    diambil  dari dalam    inkubator  setelah  diinkubasi  selama 1x24 jam.
Gambar 3. Zona hambat yang terbentuk pada media Muller-Hinton Agar (MHA) Diameter  zona  hambat  yang  terbentuk pada  ekstrak  daun  binahong  sebesar  8,32 mm 2 ,  diameter  zona  hambat  doksisiklin sebesar  11,72  mm 2 dan  pada  akuades  tidak terbentuk  zona  hambatan  dapat  dilihat  pada tabel 1.
Ekstrak daun binahong Doksisiklin Ekstrak daun binahong Doksisiklin
Tabel  1.  Diameter  zona  hambat  terhadap pertumbuhan Streptococcus mutans

## Diamater zona hambat (mm)
Perlakuan Ekstrak daun binahong Doksisiklin (kontrol postif) Akuade (kontrol negatif) 1 10,3 12,3 0 2 7,5 14,8 0 3 7,9 10,5 0 4 9,7 11,5 0 5 6,2 9,5 0 Rerata 8,32 11,72 0
Diameter  zona  hambat  yang  terbentuk pada  tiap  cawan  petri  berbeda.  Berdasarkan hasil penelitian pada cawan petri I, diameter zona hambat yang terbentuk pada area kertas saring  ekstrak  daun  binahong  sebesar  10,3 mm 2 , zona hambat yang terbentuk pada area kertas  saring  doksisiklin  sebesar  12,3  mm 2 , dan  pada  area  kertas  saring  akuades  tidak terbentuk zona hambat.
Pada  cawan  petri  II,  diameter  zona hambat yang terbentuk di sekitar area kertas saring  ekstrak  daun  binahong  sebesar  7,5 mm 2 , zona hambat yang terbentuk pada area kertas saring doksisiklin 14,8 mm 2 dan pada area  kertas  saring  akuades  tidak  terbentuk zona hambat. Pada cawan petri III, diamater zona  hambat  yang  terbentuk  di  area  kertas saring  ekstrak  daun  binahong  sebesar  7,9 mm 2 ,  zona  hambat  yang  terbentuk  di  area kertas  saring  doksisiklin  sebesar    10,5  mm 2 dan  di  area  kertas  saring  akuades  tidak terbentuk zona hambat.
Pada  cawan  petri  IV,  diameter  zona hambat  yang  terbentuk  di  sekitar  kertas saring  ekstrak  daun  binahong  sebesar  9,7
mm 2 ,  zona  hambat  di  sekitar  kertas  saring doksisiklin  sebesar  11,5  mm 2 dan  sekitar kertas  saring  akuades  tidak  terbentuk  zona hambat.  Pada  cawan  petri  V,  diameter  zona hambat  yang  terbentuk  di  sekitar  kertas saring  ekstrak  daun  binahong  sebesar  6,2 mm 2 , zona hambat yang terbentuk di sekitar kertas  saring  doksisiklin  sebesar  9,5  mm 2 dan  di  sekitar  kertas  saring  akuades  tidak terbentuk zona hambat. Selanjutnya gambaran dari hasil perhitungan dimasukkan ke dalam diagram.
Gambar  3.  Diagram  diameter  zona  hambat terhadap Streptococcus mutans

## PEMBAHASAN
Tanaman  binahong  merupakan  salah satu  tanaman  yang  biasa  digunakan  sebagai tanaman obat dapat menyembuhkan berbagai  penyakit,  pada  tanaman  ini memiliki  daun  binahong  yang    memiliki kandungan  antibakteri  dan antimikroba.  Hal ini disebabkan karena dalam daun binahong terdapat senyawa aktif yaitu flavonoid,alkanoid,  terpenoid,  dan  saponin Flaonoid merupakan zat yang  terbesar yang yang  dapat  berperan  langsung  sebagai antioksidan dan antibakteri. 9
0 5 10 15 20 1 2 3 4 5 Perbandingan Diagram
Diameter Zona Hambat
ekstrak daun binahong doksisiklin akuades
Salah  satu  zat  aktif  yang  terdapat  dalam daun  binahong  yaitu  flavonoid.  Mekanisme kerja  senyawa  flavonoid    dengan  cara mendenaturasi  protein  sel  bakteri  dan merusak  membran  sel.  Di  dalam  flavonoid mengandung  senyawa  fenol  yang  dapat menganggu pertumbuhan bakteri streptococcus mutans . 10 Penelitian ini merupakan  uji  eksperimental  laboratorium yang  bertujuan  untuk  mengetahui  efek antibakteri  dari  ekstrak  daun  binahong terhadap Streptococcus  mutans .  Penelitian ini  dilakukan  dengan  cara  membiakkan bakteri Streptococcus  mutans dalam  media Muller-Hinton  Agar selanjutnya  diberi perlakuan  dengan  kertas  saring  yang direndam  dalam  ekstrak  daun  binahong, doksisikllin  sebagai  kontrol  positif  dan akuades sebagai kontrol negatif lalu diinkubasi  dengan  suhu  37 0 C    selama  1x24 jam.
Zona  hambat  yang  terbentuk  di  sekitar kertas  saring  pada  kelompok  intervensi  dan kontrol  positif  menunjukkan    tidak  adanya pertumbuhan Streptococcus mutans , sedangkan  pada  kontrol  negatif  tidak terbentuk zona hambat. Hal ini membuktikan    bahwa  akuades  tidak  dapat menghambat  pertumbuhan Streptococcus mutans .  Zona  hambat  yang  terbentuk  pada kertas  saring  yang  berisi  ekstrak  daun binahong menunjukkan bahwa efek antibakteri  dari  ekstrak  daun  binahon memiliki  daya  hambat  yang  sedang  dengan zona hambat sebesar 8,32 mm (Tabel 1).
Penilaian  zona  hambat  dilihat  dari  hasil pengukuran  diameter  dan  digolongkan menjadi  (1)  tidak  ada  zona  hambat,  (2) lemah yaitu zona hambat kurang dari 5 mm, (3) sedang yaitu zona hambat 5–10 mm, (4) kuat  yaitu  zona  hambat  11–20  mm,  dan  (5) sangat  kuat  yaitu  zona  hambat  21-30  mm
pada  penelitian  Davis  dan  Stout  pada  tahun 1971. 11
Hasil penelitian ini menunjukkan diameter zona hambat yang bervariasi antara kelompok  intervensi  dengan  kelompok kontrol  positif.  Hal  ini  mungkin  disebabkan oleh  jumlah  ekstrak    yang  terserap  oleh kertas  saring  berbeda  dan    juga  dipengaruhi perbedaan  waktu    pada  saat  perendaman kertas saring pada kelompok  intervensi dan jumlah Sterptococcus mutans yang terhapus pada  setiap  cawan  petri  di  media  agar  tidak merata  di  tiap  bagian.  Selisih  antara diameter zona hambat  membuktikan bahwa efek  antibakteri  doksisiklin  masih  lebih besar dibandingkan dengan antibakteri  yang ada pada ekstrak daun binahong pertumbuhan Streptococcus  mutans. (Tabel 1).
Pada  perhitungan  diameter  zona  hambat selama  1x24  jam    memperlihatkan    rerata diameter  kertas  saring  yang  berisi  ekstrak daun binahong sebesar 8,32 mm 2 , sedangkan rerata  diameter  zona  hambat  kertas  saring yang  berisi  kontrol  positif  sebesar  11,72 mm 2 dan kertas saring berisi  kontrol negatif tidak memiliki zona hambat.
Hasil  penelitian  ini  didukung  penelitian sebelumnya tentang uji efektifitas antibakteri  ekstrak  daun  binahong  terhadap bakteri Straphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa. Hasil dari penelitian  tersebut  memperlihatkan  adanya kemampuan  ekstrak  daun  binahong  untuk menghambat pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans. 9,12
Peneliti  berharap  akan  ada  penelitian selanjutnya  mengenai efektivitas daun binahong
terhadap
pertumbuhan
Streptococcus mutans pada berbagai konsentrasi  kepekatan  ekstrak,  sehingga dapat diketahui minimal inhibitor
concentration ekstrak  terhadap  bakteri Streptococcus mutans .

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  uji  efek antibakteri  ekstrak  daun  binahong  terhadap bakteri Streptococcus mutans secara in vitro , dapat  disimpulkan  yaitu  ekstrak  daun binahong  memiliki  efek  antibakteri  dalam menghambat pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans, Antibiotik doksisiklin sebagai  kontrol  positif  memiliki  daya hambat  yang  lebih  besar  dibandingkan ekstrak daun binahong pada bakteri Streptococcus mutans.

## SARAN
Diharapkan dapat dilakukan penelitian lanjut mengenai  daya  hambat  ekstrak  daun binahong    terhadap  bakteri  lain,  efektivitas daun binahong terhadap bakteri Streptococcus mutans pada berbagai konsentrasi kepekatan ekstrak

## DAFTAR PUSTAKA
Saputra S. Pengaruh Ekstrak Daun Binahong
(Anredera Cordifolia Steenis)
Terhadap  Pertumbuhan Salmonella
Typhi . Journal. 2008. h.1-2.
Prayudi Y. Warta Balai  Penelitian Tanaman Rempah dan Obat. 2009.h.6.
Sulistyani  S.  Uji  Efek  Ekstrak  Etanol  70%
Daun  Binahong (Anredera  Cordifolia
Steenis) Terhadap  Kadar  Alt (  Alanin Aminotransferase) pada  Tikus  Jantan Galur  Wistar (  Rattus  Norvegicus) yang  Di  Induksi  dengan  Parasetamol. Kedok Journal. 2013. h.3.
Manoi
F. Warta Penelitian dan Pengembangan Tanaman Industri.
2009;15(1):h 3-5.
Ying  L,  Hernawan  I.  Daya  Hambat  Ekstrak Daun  Binahong  Terhadap  Polibakteri pada Stomatitis Aftosa Rekuren (SAR) . Oral Medice Dental Journal.
2011;3(2):18-25.
Utami,  Uspaninghtyas  S. The  Miracle  Of Herbs . Edisi 2. Jakarta h.37-39.
Andris  J.  Uji  Efek  Antibakteri  Ekstrak Bunga  Cengkeh  Terhadap  Bakteri Streptococcus mutans Secara In Vitro .
Jurnal e-GIGI. 2014;2(2).
Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan  Departemen  Kesehatan  RI Laporan  Hasil  Riset  Kesehatan  Dasar (Riskesdas) Nasional, Jakarta;2013.
Khunaifi  M.  Uji  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak  Daun  Binahong (Anredera Cordifolia  Steenis) Terhadap  Bakteri
Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa. [Skripsi] Jurusan  Biologi  Fakultas  Sains  dan Teknologi.  Universitas  Islam  Ngeri Malang.2010.h.11-15.
Dwyana  Z,  Johannes  Eva,  Saerong  W.  Uji ekstrak kasar alga merah Eucheuma cottonii sebagai antibakteri terhadap bakteri patogen. 2011.
Davis WW, Stout TR. Disc Plate Method Of
Microbiology Antibiotic Assay.
Microbiology    Edisi  2.  Jakarta  1971;
22(4): 659-65.
Rochani, N. Uji Aktivitas Antijamur Ekstrak Daun  Binahog  (Anredera  Cordifolia Steenis) terhadap candida albicans.[Skripsi]  Fakultas  Farmasi UMS Surakarta.2009.