## PENGARUH KONSENTRASI KADMIUM TERHADAP PERUBAHANWARNA DAN PERSENTASE JENIS KELAMIN JANTAN ANAKAN Daphnia magna

## INFLUENCES CONCENTRATION OF CADMIUM TO COLOUR CHANGE AND MALE SEX
PERCENTAGE NEONATES Daphnia magna
Alfi Hermawati W. S., Rahayu Kusdarwati, Setyawati Sigit dan A. Shofy Mubarak
Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Kampus C Mulyorejo – Surabaya 60115 Telp. 031-5911451

## Abstract
Cadmium  is  one  of  dangerous  heavy  metal  and  it  can  cause  water  pollution.  As  an  alternative early  warning  toward  heavy  metal  in  water, Daphnia  magna can  be  used  as  biology  indicator  water pollution that caused by heavy metal.
Daphnia  magna is  organism  that  ussualy  used  for  bioassay  in  many  progressing  countries, because  that  organism  have  important  role  in  freshwater  ecology,  short  life  cycle  about  3  weeks  and sensitive toward chemical environment.  Grade of toxicity heavy metal can measured with lethal and sub lethal  parameter.  In Daphnia  magna ,  sub  lethal  parameter  that  can  be  observe  are  colour  changes  and male sex percentage neonates.
The purpose of this research was to know the colour changes and male sex percentage neonates Daphnia  magna in  different  concentration  of  cadmium.  Target  of  this  research  is  to  gets  information about level colour changes and male sex percentage neonates Daphnia magna in different concentration of  cadmium.  The  main  parameter  was  colour  changes  and  male  sex  percentage  neonates  and  the secondary parameters were water quality (temperature, pH, dissolved oxygen and NH 3 ) The  result  of  research  of  giving  different  cadmium  concentration  to the  adult  female Daphnia magna not showing significant influence, nevertheless it is showing significant influence toward male sex percentage  neonates Daphnia  magna. The  treatment  with  cadmium  concentration  0,0004  mg/l  produce 100%  male  neonates Daphnia  magna .  Water  quality  during  research  were  in  optimal  conditions  to support Daphnia magna life, those are temperature 26°C, pH range from 8,0 – 8,2 and dissolve oxygen (DO) range from 8,5 –  9,0 mg/l and ammonia 0 – 0,03 mg/l.
Key words : cadmium, Daphnia magna , colour changes and male sex percentage neonates.

## Pendahuluan
Semakin meningkatnya kegiatan manusia,  terutama  dalam  bidang  industri mendorong  masalah  pencemaran  air  oleh buangan limbah industri juga semakin meningkat. Salah satu masalah yang disebabkan oleh  buangan  limbah  industri  tersebut  adalah bahaya  toksisitas  logam  berat.  Salah  satunya adalah logam berat kadmium (Sunarto, 2007).
Sebagai  salah  satu  alternatif  dalam upaya deteksi dini  adanya  logam  berat perairan adalah  dengan  menggunakan  indikator  biologis Daphnia magna .  Organisme  tersebut  banyak dikembangkan sebagai uji toksisitas di berbagai negara  maju,  karena Daphnia  magna memiliki peran  penting  dalam  ekologi  air  tawar,  siklus hidupnya  yang  cepat  yakni  selama  tiga  minggu serta  sensitif  terhadap  kimia  lingkungan (Olmsteated, 2003).
Tingkatan  toksik  logam  berat  dapat ditentukan  dengan  menggunakan  parameter lethal  dan  sub  lethal  (Waldichuk,  1979 dalam
Connel  and  Miller,  1995).  Pada Daphnia magna, parameter  sub  lethal  yang  diamati meliputi  tingkatan  perubahan  warna  dan persentase  jenis  kelamin  jantan  anakan  yang dihasilkan (Rider et  al., 2005).  Berdasarkan  hal tersebut,  perlu  dilakukan  penelitian  tentang pengaruh konsentrasi kadmium terhadap perubahan  warna  dan  persentase  jenis  kelamin jantan anakan Daphnia magna .
Tujuan penelitian adalah untuk mengetahui tingkatan perubahan warna
Daphnia  magna pada  beberapa  konsentrasi kadmium  (Cd)  dan  persentase  jenis  kelamin jantan  anakan Daphnia  magna pada  beberapa konsentrasi kadmium (Cd).
Kegunaan  penelitian  ini  diharapkan dapat memberikan informasi mengenai tingkatan perubahan warna dan persentase jenis kelamin jantan anakan yang dihasilkan Daphnia magna akibat  pemaparan  bahan  toksik  logam berat  kadmium  agar  dapat  menjadi  dasar pengembangan alternatif deteksi dini perubahan
lingkungan  menggunakan bioindikator Daphnia magna dalam membangun kewaspadaan terhadap akibat pencemaran lingkungan perairan. Materi dan Metodologi Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada tanggal 8 – 20 September 2008 di Laboratorium Pendidikan Perikanan, Program Studi Budidaya Perikanan,  Fakultas  Perikanan  dan  Kelautan, Universitas Airlangga.
Materi penelitian yang digunakan terdiri dari  bahan  dan  alat  penelitian.  Bahan  yang digunakan  adalah Daphnia magna betina dewasa  (D4),  senyawa  logam  berat  kadmium klorida  (CdCl 2 )  sebanyak  0,1  g  dengan konsentrasi kadmium sebesar 0,0613 % (g / 100 ml),  air  tawar  yang  telah  dijaga  kualitas  airnya dalam  kondisi  optimal.  Alat  penelitian  yang digunakan  adalah  mikroskop,  obyek  glass, cover  glass ,  pipet,  saringan,  aerator  enam  titik, selang  aerasi,  termometer,  amoniak  tes  kit,  pH meter, tisu, dan  wadah perlakuan.
Metode  penelitian  yang  digunakan adalah  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL). Pemberian  konsentrasi  logam  berat  kadmium dalam penelitian ini adalah  perlakuan A (tanpa pemberian kadmium) sebagai kontrol, perlakuan B  0,0001  mg/l,  perlakuan  C  0,0002  mg/l, perlakuan  D  0,0003  mg/l  dan  perlakuan  E 0,0004  mg/l.  Setiap  perlakuan  diberikan ulangan sebanyak empat kali.
Persiapan Penelitian Peralatan  yang  akan  digunakan  dicuci sampai  bersih  kemudian  dibilas  dengan  air tawar.  Peralatan  yang  sudah  bersih  kemudian dikeringkan selama 24 jam.
Penentuan  Dosis Logam Berat Kadmium Uji  toksisitas  perlakuan  konsentrasi kadmium  (CdCl 2 )  berada  pada  kisaran  nol sampai dengan LC 50 selama 48 jam (Soemirat, 1994).  Penentuan  LC  50  dilakukan  terlebih dahulu  untuk  mendapatkan  ambang  batas konsentrasi  toksitan.  Bahan  yang  digunakan, antara  lain:  50  ekor Daphnia magna betina dewasa (D4) dalam 1 liter air. Pemaparan logam
berat  kadmium  berlangsung  selama  48  jam. Setelah  itu,  dilakukan  pengamatan  jumlah Daphnia magna yang  hidup  dan  mati.  Data diolah dengan regresi  linier (Y = a + bx) untuk mendapatkan  nilai  LC  50  selama  48  jam. Berdasarkan  rumus  persamaan  y  =  -  39503x  + 40,883  didapatkan  LC  50 Daphnia  magna sebesar 0.0004 mg/l.

## Persiapan Media
Media yang digunakan adalah air tawar (PDAM)  yang  diaerasi  terlebih  dahulu  selama tiga  hari  untuk  menjaga  kualitas  air  dalam kondisi optimal. Selanjutnya dilakukan pengukuran  kualitas  air  yang  optimum  untuk pertumbuhan Daphnia magna.
Penyediaan Induk Betina Daphnia magna
Induk Daphnia magna diperoleh  dari hasil  penetasan ephippium .  Setelah  empat  hari Daphnia magna menjadi dewasa (D4), Daphnia magna tersebut  siap  untuk  digunakan  untuk perlakuan uji toksisitas.

## Pengamatan Perubahan Warna
Sebanyak  20  ekor Daphnia  magna matang  gonad  dipelihara  dalam  wadah  dengan volume  air  sebanyak  setengah  liter  dengan beberapa  konsentrasi  logam  berat  kadmium, perubahan  warna  diamati  setelah  uji  toksisitas 48  jam  dengan  metode  skoring  warna  menurut Dekken  (2005).  Setiap  perlakuan  diambil sebanyak lima ekor sampel, kemudian diskoring menurut perubahan warna yang terjadi.
Pengamatan Jenis Kelamin Jantan Anakan
Pengamatan jenis  kelamin jantan anakan  dilakukan  pada  hari  kelima  dengan mengambil  anakan Daphnia magna pada  tiap perlakuan  sebanyak  5  ekor,  selanjutnya dilakukan identifikasi dan penghitungan jumlah anakan  jantan  dan  betina  menggunakan mikroskop dengan pembesaran seratus kali.
Parameter  utama  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  perubahan  warna dan  jumlah jenis  kelamin  jantan  anakan
Daphnia magna , sedangkan parameter
(Sumber: Dekken, 2005)
pendukungnya  adalah  oksigen  terlarut  (DO), suhu air, pH, dan amoniak.
Parameter Utama Perubahan Warna
Perubahan  warna  diamati setelah waktu  48  jam  dengan  metode  skoring    warna menurut  Dekken  (2005).  Setiap  perlakuan diambil  sebanyak  lima  ekor  sampel Daphnia magna , kemudian diskoring menurut perubahan warna yang terjadi.
Persentase Jenis Kelamin Jantan Anakan Penghitungan  jumlah  jenis  kelamin jantan  anakan Daphnia  magna dilakukan  pada hari kelima dengan mengambil anakan Daphnia magna pada tiap perlakuan sebanyak lima ekor, selanjutnya dilakukan
identifikasi dan penghitungan  jumlah  anakan  jantan.  Zairin (2002)  menyatakan,  persentase  jenis  kelamin dapat dihitung dengan rumus :
Persentase jantan =
x 100  (%)
Parameter Pendukung Pengukuran Oksigen Terlarut (DO) Alat  DO  meter  dikalibrasi  terlebih
dahulu hingga menunjukkan angka nol, kemudian  ujung  hitam  DO  meter  dimasukkan kedalam  media  air  percobaan,  lalu  dibiarkan kurang  lebih  tiga  menit.  Kemudian  baru dilakukan pencatatan hasil pengukuran DO.
Pengukuran Suhu Air Termometer  air  dimasukkan  ke  dalam air  lalu  dibiarkan  kurang  lebih  satu  menit, kemudian  dilakukan  pencatatan  hasil  yang tertera pada termometer tersebut.
Pengukuran Derajat Keasaman (pH) Derajat keasaman (pH) pen
dimasukkan  ke  dalam  air  sampai probe menyentuh  air  sekitar  1  cm.  Kemudian  tombol on dinyalakan  dan  dibiarkan  sebentar  sampai nilai  pH  yang  tertera  tidak  berubah,  hasilnya kemudian dicatat.
Pengukuran Kadar Amoniak Prosedur  pengukuran  kadar  amoniak menggunakan  amoniak  test  kit    antara  lain, mengambil  sampel  air  yang  akan  diukur sebanyak  5  ml  ke  dalam  gelas  pengukur,  lalu ditambahkan  14  tetes  reagen  1,  kemudian dilakukan pengocokan.
Selanjutnya
ditambahkan  reagen  2  dan  3  dengan  cara  yang sama  dengan  reagen  1  sebanyak  tujuh  tetes. Setelah  itu,  dibiarkan  selama  20  menit,  air sampel  akan  berubah  warna.  Kemudian  warna air  sampel  dicocokkan  dengan  indikator  warna pada  prosedur  penggunaan  untuk  diketahui kadar amoniak pada air sampel.
Analisis Data Data penelitian persentase jenis kelamin jantan anakan Daphnia magna dianalisis  secara  statistik  dengan  mengunakan ANOVA  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL). Data  yang  dihasilkan  bila  terdapat  perbedaan dapat  dilakukan  uji  lanjutan.  Uji  lanjutan  yang dapat  digunakan  adalah  Uji  Jarak  Berganda
Duncan ( Duncan Multiple Range Test ) (Kusriningrum, 2008). Sedangkan data penelitian  perubahan  warna Daphnia  magna dianalisis  secara  statistik  dengan  uji Kruskal Wallis H Test (Samsubar, 1996).

## Hasil dan Pembahasan
Pengamatan perubahan warna Daphnia magna dilakukan  setelah  perlakuan  pemaparan dengan  konsentrasi  kadmium  (CdCl 2 )  yang berbeda  diukur  menggunakan  standar Daphnia color  scale (Dekken,  2005)  yang  memiliki  6 nilai  skor  (skor  1  -  6),  skor  1  merupakan  nilai skor  terendah.  Hasil  pengamatan  skoring perubahan warna pada Daphnia magna tersebut ditunjukkan pada Tabel 1.
Tabel  1.    Skoring  tingkatan  perubahan  warna Daphnia  magna setelah  uji  toksisitas selama  48  jam  dengan  perlakuan konsentrasi kadmium (CdCl 2 ). Perlakuan (mg/l) Skoring Warna A (kontrol) B (0,0001) C (0,0002) D (0,0003) E (0,0004) 1,10 1,10 1,15 1,20 1,20
Berdasarkan  Tabel
1,  pemaparan konsentrasi kadmium (CdCl 2 ) pada perlakuan D (0,0003  mg/l)  dan  E  (0,0004  mg/l)  memiliki nilai  rata  -  rata  skoring  warna  yang  sama  dan lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  perlakuan lainnya,  yaitu  1,20,  sedangkan  perlakuan  C (0,0002  mg/l)  memiliki  nilai  rata  -  rata  skoring 1,15. Nilai ini lebih tinggi dibandingkan dengan rata  -  rata skoring perlakuan  A (kontrol) dan B (0,0001  mg/l)  yang  masing  –  masing  memiliki nilai  yang  sama,  yaitu  1,10.  Berdasarkan  hasil uji statistik terhadap tingkatan perubahan warna
Jumlah individu jantan
Jumlah total
Daphnia  magna menunjukkan  bahwa  H  hitung terkoreksi  <  H  tabel    0,05,  yang  berarti  bahwa pada perlakuan pemberian konsentrasi kadmium (CdCl 2 )  yang  berbeda  tidak  terdapat  perbedaan yang  nyata  terhadap  perubahan  warna Daphnia magna . Hasil  pengamatan  tentang  pengaruh konsentrasi kadmium(CdCl 2 )
terhadap persentase jenis kelamin jantan anakan Daphnia magna dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel  2.    Jumlah  jenis  kelamin  jantan  anakan Daphnia  magna pada  perlakuan konsentrasi kadmium (CdCl 2 ) dengan konsentrasi berbeda.
Perlakuan Konsentrasi Kadmium CdCl 2 (mg/l) Jumlah jenis kelamin jantan (%) A (kontrol) B (0,0001) C (0,0002) D (0,0003) E (0,0004) 0 d 55 c 70 c 90 b 100 a
Keterangan  :    superskrip  yang  berbeda  pada kolom  yang  sama  menunjukkan hasil  persentase  jenis  kelamin jantan  anakan Daphnia  magna yang  berbeda  sangat  nyata (p<0.01)
Hasil ANOVA menunjukkan perlakuan konsentrasi  kadmium  (CdCl 2 )  memberikan
pengaruh  yang  berbeda  sangat  nyata  (p<0,01) terhadap  persentase  anakan  jantan Daphnia magna. Hasil  Uji  Jarak  Berganda  Duncan menunjukkan  bahwa  persentase  anakan  jantan
Daphnia magna tertinggi terdapat pada perlakuan  E  (0,0004  mg/l)  berbeda  nyata dengan perlakuan lainnya. sedangkan perlakuan C  (0,0002  mg/l)  dan  B  (0,0001  mg/l) menunjukkan  hasil  yang  sama dan perlakuan  A (kontrol) merupakan perlakuan dengan persentase  anakan  jantan  terendah.  Grafik hubungan  perlakuan  konsentrasi  kadmium (CdCl 2 )  yang  berbeda  pada Daphnia  magna terhadap  persentase  anakan  jantan  dapat  dilihat pada Gambar 1.
Peningkatan konsentrasi kadmium
(CdCl 2 )    yang  dipaparkan  pada  induk Daphnia magna menunjukkan  kolerasi  positif  terhadap jumlah  anakan  jantan  yang  dihasilkan,  semakin tinggi  konsentrasi  kadmium  (CdCl 2 )  yang dipaparkan  pada  induk Daphnia  magna , semakin banyak pula jumlah anakan jantan yang dihasilkan.  Pemaparan  konsentrasi  kadmium (CdCl 2 )  pada  konsentrasi  0,0004  mg/l  (LC  50) menghasilkan 100% anakan jantan (Gambar 1).
Adapun  hasil  pengukuran  kualitas  air pada  awal  perlakuan  uji  toksisitas  antara  lain, suhu  air  26°C,  derajat  keasaman  (pH)  berkisar 8,0  -  8,2,  oksigen  terlarut  (DO)  berkisar  antara 8,5  –  9,0  mg/l  dan  amoniak  0,03  mg/l, sedangkan  hasil  pengukuran  kualitas  air  pada akhir  perlakuan  uji  toksisitas  meliputi,  suhu  air 26°C, derajat keasaman (pH) berkisar  8,2 - 8,3,
Gambar  1.  Grafik  hubungan  perlakuan  konsentrasi  kadmium  (CdCl 2 )  yang  berbeda  pada Daphnia magna terhadap persentase anakan jantan.
y = -6E+08x 2 + 477857x + 3.8571 R 2 = 0.9771 0 20 40 60 80 100 120 0 0.00005 5 0.0001 0.00015 0.0002 0.00025 0.0003 0.00035 0.0004 0.00045 5 Persentase jantan Series1 Poly. (Series1) Konsentrasi kadmium (CdCl 2 ) (mg/l)
oksigen  terlarut  (DO)  8,5    -  9,0  mg/l  dan amoniak 0,03 mg/l.
Daphnia  magna berkembang  biak secara seksual dan aseksual. Perkembangbiakan secara aseksual dilakukan dengan
parthenogenesis  yaitu  kemampuan  berkembang biak tanpa adanya fertilisasi yang menghasilkan anakan berkelamin betina (Clare, 2002).
Populasi  yang  terlalu  padat  serta kualitas dan kuantitas pakan yang menurun akan menginduksi produksi anakan berkelamin jantan (Hebert, 1978 dalam Rider et al, 2005). Kualitas air  yang  tidak  mendukung  juga  mempengaruhi siklus reproduksi Daphnia magna.
Terbentuknya  anakan  jantan  menyebabkan perubahan  siklus  reproduksi Daphnia  magna dari aseksual menjadi reproduksi seksual (Ebert, 2005).
Penelitian  ini,  menggunakan Daphnia magna betina  dewasa  (D4).  Mokoginta  (2003) menyatakan  bahwa Daphnia  magna sudah menjadi  dewasa  dalam  waktu  empat  hari  (D4), sedangkan  kepadatan  populasi Daphnia  magna yang  digunakan  dalam  penelitian  ini,  yaitu sebanyak  20  ekor  /  0,5  l.  Kepadatan  tersebut masih  berada  dalam  kisaran  yang  optimum untuk  perlakuan  uji  toksisitas.  USEPA  (1996) menyatakan bahwa untuk uji toksisitas, Daphnia  magna yang  digunakan  diharapkan tidak  melebihi  40  ekor/l.  Selain  itu,  pemberian pakan  yang  cukup  ( diural  feeding )  serta parameter  kualitas  air  yang  meliputi  oksigen terlarut  (DO),  suhu,  amoniak  dan  derajat keasaman  (pH)  juga  dikondisikan  optimum selama perlakuan pemaparan konsentrasi kadmium  (CdCl 2 ).  Berdasarkan  hal  tersebut, pakan  dan  kepadatan  populasi  serta  kualitas  air bukan  lagi  menjadi streesor pembentukan anakan  jantan. Hal  ini terlihat dari perlakuan  A (kontrol)  yang  menghasilkan  0%  anakan  jantan (100% anakan betina).
Berdasarkan hasil ANOVA menunjukkan  bahwa  perlakuan  A  (kontrol) merupakan perlakuan yang menghasilkan persentase anakan jantan terendah dibandingkan dengan perlakuan lainnya, sedangkan perlakuan B  (0,0001  mg/l)  menunjukkan  hasil  yang  sama dengan perlakuan C (0,0002 mg/l) hal ini berarti bahwa  pada  kedua  perlakuan  konsentrasi kadmium (CdCl 2 ) tersebut memberikan pengaruh yang sama terhadap persentase anakan jantan Daphnia  magna ,  namun  peningkatan pemberian konsentrasi kadmium (CdCl 2 ) menunjukkan pengaruh yang berbeda nyata. Hal ini terlihat dari perlakuan D (0,0003 mg/l) dan E (0,0004  mg/l)  yang  menunjukkan  hasil  yang berbeda  nyata  yang  mana perlakuan E (0,0004) menghasilkan persentase anakan jantan tertinggi
yaitu sebesar 100%  yang berbeda nyata dengan perlakuan lainnya. Hal ini menunjukkan, bahwa semakin  tinggi  pemaparan  konsentrasi  (CdCl 2 ) semakin  banyak  pula  anakan  jantan Daphnia magna yang dihasilkan. Toksitan kadmium (CdCl 2 ) mempengaruhi deferensiasi jenis kelamin
anakan Daphnia  magna .  LeBlanc et  al. (2005) menyatakan, stressor kimia  lingkungan  dapat memberikan  respon  balik  terhadap  sintesis ecdysteroid yang  berperan  sebagai testosterone antagonizes. Stresor  tersebut memberikan respon  pada  protein  reseptor,  kemudian  terjadi regulasi  negatif  yang  ditandai  dengan  aktifnya sintesa terpenoid hormon yakni Methyl
Farnesoate .  Hal  ini  menyebabkan  kegagalan pembentukan  kelamin  betina  oleh ecdysteroid - receptor  transcription  factor (E:EcR:RXR), sehingga  terbentuklah  kelamin  jantan (LeBlanc et al ., 2005) Ochlan and Ochlman (2003) menambahkan  bahwa  kadmium  merupakan toksitan yang dapat menurunkan level ecdysteroid crustacea , penurunan ini berpengaruh  terhadap  perubahan  jenis  kelamin
Daphnia  magna dengan  terbentuknya  anakan jantan Daphnia  magna oleh  karena  terjadinya penghambatan terhadap ecdysteroid dan teraktifasinya pembentukan Methyl Farnesoate . Seperti  halnya  Olmsteated  and  LeBlanc  (2002) yang  menyatakan  bahwa Methyl  Farnesoate berperan  dalam  menentukan  jenis  kelamin anakan Daphnia  magna pada  induk  matang telur  dalam  ovari.  Semakin  tinggi  konsentrasi kadmium  (CdCl 2 )  semakin  banyak Daphnia magna yang  terinduksi  untuk  memproduksi Methyl  Farnesoate, sehingga  semakin  besar persentase anakan jantan yang dihasilkan.
Rider et  al. (2005)  menyatakan, sintesa haemogloblin diatur  oleh  hormon terpenoid ( Methyl  Farnesoate ),  konsentrasi haemoglobin meningkat secara singnifikan pada pemaparan  hormon Methyl  Farnesoate .  Potensi hormon terpenoid untuk meningkatkan konsentrasi haemoglobin dan  induksi  anakan jantan  berkorelasi positif. Terbentuknya  anakan jantan Daphnia  magna pada  penelitian  ini mengindikasikan terjadinya peningkatan Methyl Farnesoate .  Namun  demikian,  tidak  terjadi peningkatan  sintesa haemoglobin. Hal  ini berdasarkan hasil nilai skoring warna yang tidak signifikan  pada  pemaparan  kadmium  (CdCl 2 ) hingga  konsentrasi  LC  50  anakan  jantannya mencapai 100%.
Dekken  (2005)    menyatakan  bahwa pada kondisi oksigen rendah ( hypoxia ) Daphnia magna yang  akan  meningkatkan  produksi haemoglobin ,  sehingga  pada  bagian  luar
carapace akan  terlihat  berwarna merah. Peningkatan  produksi haemoglobin tersebut bertujuan  untuk  membantu transportasi  oksigen di  dalam  tubuh,  sehingga  pada  saat  oksigen lingkungan rendah, Daphnia magna
meningkatkan kebutuhan oksigennya.
Haemoglobin  Daphnia  magna terdiri atas  sub  unit  hb1,  hb2  dan  hb3.  Zeit, et  al. (2003) dalam Eads, et  al. (2007)  menyatakan konsentrasi  mRNA  sub  unit  hb2  dan  hb3 meningkat selama kondisi hypoxia , namun tidak demikian  halnya  dengan  sub  unit  hb1.  Gorr, et al. (2006) dalam Eads, et  al. (2007) mengidentifikasi adanya ikatan Juvenoid
Respon  Element (JRE)  dengan Juvenoid Hormon  Analoge (JHA)  di  wilayah promotor region gen  hb2.  penambahan pyriproxyten (JHA) mengaktifasi sintesa mRNA hb2 haemoglobin  Daphnia  magna. Hasil  penelitian lain Gorr, et al. (2004) dalam Eads, et al . (2007) menyatakan  bahwa  ikatan Hypoxia  Inducible Factor (HIF)  dengan Hypoxia  Response Element (HRE)  juga  ditemukan  di promotor region dari  gen  hb2 Daphnia  magna .  Hal  ini menunjukkan,  sintesa haemoglobin Daphnia magna dipengaruhi  oleh  jalur signal terpenoid dari  hormon Methyl  Farnosoate dan  jalur hypoxia . Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa  pemaparan  konsentrasi  kadmium  yang mempengaruhi  jumlah  jenis  kelamin  jantan tidak  berpengaruh  terhadap  perubahan  warna pada Daphnia  magna .  Hal  ini  disebabkan karena  dalam  kondisi  oksigen  terlarut  (DO) tinggi  yang  berkisar  antara  8,5  –  9,0, Methyl Farnesoate tidak mampu menginduksi produksi haemoglobin serta pada prinsipnya
pembentukan haemoglobin di  dalam  tubuh Daphnia  magna merupakan  bentuk  adaptasi terhadap toleransi oksigen terlarut  yang rendah. Seperti  halnya,  Ebert  (2005)  yang  menyatakan bahwa  pada  kondisi  tersebut, Daphnia  magna
akan membentuk haemoglobin dalam
hemolymph untuk  membantu  pendistribusian oksigen  dalam  tubuhnya.  Adanya haemoglobin dalam hemolymph tersebut menyebabkan Daphnia  magna berwarna  merah.  Namun, ketika  oksigen  tinggi,  sintesa haemoglobin bukan merupakan suatu kebutuhan.
Berdasarkan  pengukuran  parameter kulitas  air  pada  awal  dan  akhir  penelitian, kualitas  air  secara  umum  berada  pada  kondisi optimal  untuk  kelangsungan  hidup Daphnia magna .  Oksigen  terlarut  pada  penelitian  ini berada  pada  kisaran  8,5  –  9,0  mg/l.  Kisaran tersebut  berada  pada  kisaran  optimum  untuk kelangsungan  hidup Daphnia  magna . Daphnia magna dapat  bertahan  hidup  dalam  konsentrasi
oksigen  terlarut  minimal  sebesar  3  mg/l  (Ebert, 2005).
Suhu  air  selama  penelitian  terukur sebesar 26°C. Suhu tersebut  masih  berada pada kisaran  optimum  pertumbuhan Daphnia  magna yang  berkisar  antara  22  -  31  °C  (Clare,  2002). Derajat  keasaman  (pH)  dalam  penelitian  ini berada pada kisaran optimum bagi kelangsungan  hidup Daphnia  magna, yaitu sebesar  8,0  –  8,2.  Clare  (2002)  menyatakan bahwa derajat keasaman (pH) optimum Daphnia  magna berkisar  antara  7,2  –  8,5. Kondisi  kualitas  air  pada  penelitian  ini  secara umum  berada  pada  kisaran  optimum  sehingga faktor  lain  selain  pengaruh  perlakuan  kadmium (CdCl 2 )  yang  mempengaruhi  perubahan  warna dan  pembentukan  anakan  kelamin  jantan Daphnia magna dapat dikontrol.

## Kesimpulan
Perlakuan konsentrasi kadmium (CdCl 2 ) yang berbeda terhadap 20 ekor Daphnia magna betina matang ovari selama 48 jam tidak memberikan  pengaruh  yang  berbeda  pada tingkat  perubahan  warna Daphnia  magna karena  kondisi  oksigen  terlarut  (DO)  yang tinggi Methyl Farnesoate tidak mampu menginduksi produksi haemoglobin . Peningkatan konsentrasi kadmium
(CdCl 2 )    yang  dipaparkan  pada  induk Daphnia magna berkolerasi  positif  terhadap  jumlah anakan  jantan  yang  dihasilkan,  semakin  tinggi konsentrasi kadmium (CdCl 2 )  yang dipaparkan, semakin  besar  pula  jumlah  anakan  jantan  yang dihasilkan.  Pemaparan  konsentrasi  kadmium (CdCl 2 )  pada  konsentrasi  0,0004  mg/l  (LC  50) menghasilkan anakan jantan 100%.
Diharapkan  adanya  penelitian  pada Daphnia  magna terhadap  berbagai  tingkat oksigen  terlarut  terhadap  perubahan  warna Daphnia  magna untuk  lebih  memberikan informasi yang  tepat  dalam mendukung penelitian ini maupun pengembangan penelitian  tentang    pencemaran  perairan selanjutnya. Sebaiknya  perlu  dilakukan  uji kandungan logam berat terhadap media air yang digunakan  untuk  uji  toksisitas  agar  hasil  yang didapatkan lebih akurat.

## Daftar Pustaka
Clare,  J.  2002. Daphnia an  Aquarist’s  Guide. Dalam :  http:  //  www.  Caudata.  Org/ daphnia. 13 hal.
Connell,  D.  W.  and  Milller,  G.  J.  1995.  Kimia dan Ekotoksikologi Pencemaran.
Terjemahan:  Yanti  Koestoer.  Penerbit Universitas  Indonesia  Press.  Jakarta.
hal. 52-337.
Eads,  B.,  J.  Andrews,  and  J.  K.  Coolbourne. 2007. Ecological Genomic in Daphnia : Stress  Responses  and  Environmental Sex Determination. Center For Genomic  and  Bioinformatics.  Indiana University  Bloomington.  Departement of Biology. USA.
Ebert,  D.  2005.  Ecology,  Epidemiology,  and Evolution  of  Parasitism  in Daphnia.
University  of  Basel.  Switzerland.  11 hal.
Darmono.  1995.  Logam  Dalam  Sistem  Biologi Makhluk  Hidup.  Universitas  Indonesia Press. Jakarta. hal 6-85. Deken,  A.  2005.  Seeing  Red:  Daphnia  and Hemoglobin.  Ste.  Genevieve  du  Bois
School.  Warson  Woods,  Missouri. Summer Reseach Fellowship for Science Teachers. Washington University Science Outreach. Missouri. Hal 2-8. Hodkinson,  I.  D.  2005.  Terrestrial  and  Aquatic Invertebrates as Bioindicators of Environmental Monitoring, With Particular  References  to  Mountain Ecosystems.  Liverpool  John  Moores University,  Byrom  Street.  Liverpool.
pp 649-666.
Joniansyah.  2004.  Reklamasi  Pantai  Mutiara Dadap  Merusak  Lingkungan.  Tempo Interaktif, 7 Juli 2004: 2
Kusriningrum,  R.  S.  2008.  Perancangan
Percobaan. Airlangga University Press.
Surabaya. Hal 43-50.
Laufer,  H.  and  Biggers,  W.  J.  2001.  Unfying Concepts  from  Methyl  Farnesoate  for Invertebrate  Reproduction  and  Post  –
Embryonic Development. Departement of  Molecular  and  Cell  Biology. University of Connecticut. Massachussetts. pp. 442- 457. LeBlanc,  G.  A.,  W.  A.  Olmsteated,  X.  Mu,  Y. W.  Helen,  R.  Bethany  and  Hong  Li. 2006.  Mechanictic  Approaches  to Screening  Chemicals  for  Endocrine Toxicity Using an Invertebrate. Depatement  of  Environtmental  and Moleculer  Toxicology.  North  Carolina State  University,  Raleigh  NC.  http:  // www. Epa.gov. 14/06/08. 1 hal.
Louekari,  K.,  Kurtto,  R.  M.  Pasanen,  J. Virtanen. 2000. Cadmium In Fertilizers-  Risk  to  Human  Health  and the Environtment. Ministry of
Agriculture  and  Forestry.  Finlandia. pp. 4-70. Mudjiman,  A.  1995.  Makanan  Ikan.  Penebar
Swadaya. Jakarta. Hal 28-37.
Mokoginta,  I.  2003.  Modul  Budidaya  Daphnia. Direktorat Pendidikan Menengah Kejuruan. Direktorat Jenderal Pendidikan  Dasar  dan  Menengah. Departemen  Pendidikan  Nasional.  Hal 25-26. Ochlan. J. and V. S. Ochlman. 2003. Endocrine Disruption in Invertebrata. Pure Applechem. Vol 75. pp 11-12 Olmsteated  and  LeBlanc.  2002a.  Effect  of
Endocrine  Active  Chemical  on  The Development  of  Sex  Characteristic  of Daphnia  Magna .  Departement  of Toxicology  North  Caroline.  USA.  pp
731-735. Olmsteated  and  LeBlanc.  2002b.  The  Juvenoid Hormon  Methyl  Farnesoate  is  a  Sex Determinant in the Crustacean Daphnia  Magna. Departement  of Toxicology  North  Caroline.  USA.  pp 736 – 739. Olmsteated,  W.  A.  2003.  Environtmental Toxicant Effect on Sexual Reproduction  in Daphnia  Magna . Dissertasions submitted to the Graduate  Faculty  of  North  Caroline State University. USA. 7 hal. Rider, C. V., T. A. Gorr., A.W. Olmstead, B. A. Wasilak,  and  G.  A.  LeBlanc.  2005. Stress  Signaling:  Coregulation  of Hemoglobin and Male Sex Determination  Through  a  Terpenoid Signaling  Pathway  in  a  Crustacean. Departement  of  Environmental  and
Molecular  Toxicology.  North  Carolina State University, Raleigh. USA. p. 15-
23. Rottman, R. W., J. S. Graves, C. Watson and R.
P. E. Yanong. 2003. Culture Techniques  of  Moina:  The  Ideal Daphnia  For  Feeding  Freshwater  Fish Fry.  Departement  of  Fisheries  and Aquatic Sciences, University of Florida. http:// www. Simply Discus.com. 12/05/08. 8 hal. Rusdyanto,  E.,  R.  A.  Wulandari,  A.  M. Wardiati, A. Winata, Hewindati dan B. Hardjojo.  1996.  Kimia  Fisik  Biologi Lingkungan. Universitas Terbuka. Jakarta. hal. 15-57. Samsubar,  S.  1996.  Statistik  Nonparametrik Edisi 2. BPFE-Yogyakarta. Yogyakarta. hal. 27-38. Setyawan. 2001. Pengertian Air Dari Perspektif Hukum Pusat Pengendalian Pencemaran  Air.  BPLHD  Jawa  Barat. 2 hal.
Setyorini,  D.  2003.  Waspadai  Bahaya  Merkuri di  Sumber  Air  Kita.  Ecological Observation and Wetlands Conversation. Ecoton. Gresik. 2 hal. Sunarto.  2007.  Bioindikator  Pencemar  Logam Berat  (Cd)  Dengan  Analisis  Struktur Mikroanatomi, Efisiensi Fungsi Insang, Morfologi  dan  Kondisi  Cangkang Kerang Air Tawar ( Anondonta woodiana Lea).  Tesis.  Program  Pasca Sarjana. Universitas Airlangga. Surabaya. 14 hal. Soemirat,  S,  J.  1994.  Kesehatan  Lingkungan. Gadjah Mada University Press. Yogyakarta. hal. 10-75. USEPA.  1996.  Aquatic  Invertebrate  Acute Toxicity  Test  Freshwater  Daphnids. Report. No. EPA-712C-96-114. United States Environmental Protection Agency, Washington, D. C. p. 96-114. Zairin, Jr. M. 2002. Sex Reversal, Memproduksi Benih Ikan Jantan atau Betina. Penebar
Swadaya. Jakarta. hal. 1- 88.