Online: http://bit.ly/OJSIbnuSina
Ibnu Sina: Jurnal Kedokteran dan Kesehatan-Fakultas Kedokteran Universitas Islam Sumatera Utara
ISSN 1411-9986 (Print) | ISSN 2614-2996 (Online)

## Artikel Penelitian

## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN SINGKONG (MANIHOT ESCULENTA) TERHADAP PERTUMBUHAN STAPHYLOCOCCUS AUREUS DAN ESCHERICHIA COLI

## THE LAB TEST RESULT ANTIBACTERIAL EFFECT OF ETHANOL EXTRACTES FROM CASSAVA
LEAVES ON THE GROWTH OF S. AUREUS AND E. COLI
Sukma Sahreni a , Isramilda a ,  Miftahuliah Rohima Sururi a
a Fakultas Kedokteran Universitas Batam, Jl. Uniba No.5,29432
Histori Artikel A B S T R A K Diterima: 23 Desember 2019 Revisi: 10 Januari 2020 Terbit: 20 Januari 2020 Daun  singkong  ( Manihot esculenta )  merupakan  salah  satu  bahan  alam yang  dimanfaatkan  sebagai  antibakteri.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun singkong ( Manihot esculenta )  terhadap S.  aureus dan E.  coli .  Penelitian  ini  merupakan penelitian dengan desain post test only control group. Ekstrak etanol daun singkong dibuat dengan metode ekstraksi maserasi. Sampel terdiri dari 5 kelompok perlakuan yaitu ekstrak etanol daun singkong konsentrasi 75%, 80%,  85%,  kontrol  positif  ( Chloramphenicol )  dan  kontrol  negatif (DMSO). Hasil pengamatan akan dianalisis menggunakan analisis varians (ANOVA).  Ekstrak  etanol  daun  singkong  ( Manihot esculenta ) menghasilkan zona bening disekitar cakram yang diartikan adanya daya hambat dengan mengukur diameternya, Hasil uji Oneway pada S. aureus dan E.  coli menunjukkan  nilai  signifikan  0,000  (<0,05)  dan  kemudian dilanjutkan  dengan  uji  LSD  menunjukan  adanya  perbedaan  signifikan pada  setiap  kelompok perlakuan.  Berdasarkan  hasil  penelitian  ini  dapat disinpulkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  singkong  ( Manihot esculenta ) dapat menghambat pertumbuhan bakteri S. aureus dan E. coli . Kata Kunci A B S T R A C T
antibakteria, S  aureus , E.  coli ,
daun singkong, Manihot esculenta Cassava  (Manihot  esculenta)  leaf  is  one  of  recent  natural  alternatives widely  studied  and  developed  to  become  an  antibacterial  remedy.  This research  aims  to  examine  the  lab  test  results  of  antibacterial  effects  of ethanol extracted from cassava leaves on the growth of S.  aureus and E.
coli. The research design employs laboratory-based experimental method with post-test only control groups. The ethanol is extracted from cassava leaves  using  the  technique  of  maceration.  The  five  sample  groups  are classified  based  on  the  concentration  levels  of  cassava  leaves-based ethanol extract; 75%, 80%, 85%, positive control (chloramphenicol), and negative control (DMSO). Data analyzing technique employs analysis of variance (ANOVA). The cassava leaves-based ethanol extract produces transparent  circles  around  the  disks  giving  the  possibility  of  inhibition from measuring its diameter. One-way ANOVA on S. aureus and E.  coli indicates p value=0.000 a significant, followed by the LSD test confirming significant  differences  on  each  treatment  group.  In  conclusion,  the findings  suggest  cassava  leaves-based  ethanol  extract  is  able  to  inhibit the growth of pathogenic bacteria such as S.  aureus and E.  coli.

## Korespondensi
Tel. 081376482840 Email: sukmasahreni@univbatam.ac.id

## PENDAHULUAN
Tumbuhahan-tumbuhan  herbal  saat  ini telah menjadi pilhan utama  sebagai pengobatan bagi  masyarakat  Indonesia  dan  bahkan  sampai dibeberapa belahan dunia lainnya.
Kecenderungan  itu  disebabkan  karena  adanya perubahan gaya hidup manusia yaitu kembali ke alam atau disebut juga back to nature . Selain itu, masyarakat memilih pengobatan tradisional juga disebabkan  oleh  mahalnya  harga  obat-obatan modern  yang  membuat  permintaan  obat-obat tradisoinal semakin meningkat. Beberapa penyakit  dapat  diobati  dengan  mengunakan tanaman herbal salah satu contoh penyakit yang sering  mengunakan  tanaman  herbal  adalah penyakit infeksi yang disebabkan oleh bakteri.
Salah satu tanaman yang dapat dimanfaatkan  sebagai  obat-obatan  tradisional adalah daun singkong. Pemilihan daun  singkong karena  daun  singkong  ini    banyak  terdapat  di Riau    dan  pemanfaatan  daun  singkong  sebagai bahan  pangan  sudah  menjadi  budaya  untuk masyarakat  Riau.  Beberapa  penelitian  telah membuktikan  bahwa  esktrak  daun  singkong memiliki  aktivitas  antibakteri  baik  terhadap bakteri  gram  positif  maupun  bakteri  gram negatif.
Analisis  fitokimia  membuktikan  bahwa daun  singkong  mengandung  senyawa  alkaloid, saponin,  flavonoid,  dan  tanin.  Flavonoid berfungsi  menghambat  pertumbuhan  bakteri dengan  cara  merusak  permeabilitas  dinding  sel bakteri.  Saponin  dapat  menurunkan  tegangan permukaan dinding sel bakteri.
Antibakteri  merupakan  zat  yang  dapat mengganggu pertumbuhan atau bahkan mematikan  bakteri  dengan  cara  mengganggu
metabolisme mikroba yang merugikan. Mekanisme  kerja    dari  senyawa  antibakteri diantaranya  yaitu  menghambat  sintesis  dinding sel, menghambat keutuhan permeabilitas dinding  sel  bakteri,  menghambat  kerja  enzim, dan  menghambat  sintesis  asam  nukleat  dan protein. 1
Pengobatan  modern  berupa  antibiotik untuk  melawan  infeksi  telah  mengalami perkembangan  yang  cukup  pesat.  Penggunaan antibiotik  yang  tidak  rasional  dikalangan masyarakat  merupakan  penyebab  terjadinya resistensi  dari  obat  antibiotik.  Resistesi  dari antibiotik  semakin  mempersulit  proses  terapi penyembuhan  pada  penderita  penyakit  infeksi yang mengakibatkan peningkatan mortalitas dan morbiditas pada penderita tersebut.
Dalam penelitian ini daun singkong akan dibuat  ekstrak  dengan  menggunakan  etanol sebagai  pelarut. Ekstraksi  adalah  proses penarikan kandungan kimia yang dapat larut dari suatu  serbuk  simplisia,  sehingga  terpisah  dari bahan  yang  tidak  dapat  larut.  Pemilihan  etanol sebagai pelarut karena etanol merupakan pelarut universal sehingga dapat mengekstraksi hampir semua kandungan  kimia dalam simplisia  selain itu  etanol  tidak  beracun  dan  tidak  berbahaya sehingga aman untuk dikonsumsi.
Menurut  hasil  penelitian  yang  dilakukan Pratiwi et al 2 menujukkan bahwa  ekstrak etanol daun  singkong  dengan  konsentrasi  40%,  50%, 60%,  70%,  dan  80%  ( Manihot esculenta Crantz .)  mempunyai    daya  hambat  terhadap Shigella sp .    Selain  itu,    pada  hasil  penelitian yang dilakukan oleh Dwiyanto, Harlis dan Retni 3 menujukkan  bahwa    ekstrak  etanol  daun singkong  dengan  konsentrasi  5%,  10%,  20%,
40%,  80%,  dan  100%  ( Manihot esculenta
Crantz .)  mempunyai  daya  hambat  terhadap
Escherichia coli .  Berdasarkan  hal  tersebut, peneliti  tertarik  untuk  melakukan  penelitian mengenai uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun  singkong  dengan  konsentrasi  75%,  80%, dan  85%  ( Manihot  esculenta  Crantz )  terhadap dan Staphylococcus aureus dan Escherichia coli .

## METODE
Jenis  penelitian  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah eksperimen murni menggunakan rancangan secara acak dengan tes dan kelompok kontrol ( The Randomized Posttest Only  Control  Group  Design ).  Penelitian  ini menggunakan 3 variasi konsentrasi dan 2 kontrol dengan jumlah ulangan yang digunakan adalah 5 kali ulangan, karena telah memenuhi persamaan (r − 1)(t − 1 )   ≥  15.
Penelitian  ini  akan  dilaksanakan  di  UPT Laboratorium  Biota  Sumatera  Laboratorium Bioteknologi    pada  bulan  Juli-Agustus  2019. Populasi dari penelitian ini  adalah biakan murni biakan murni bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli . Sampel yang digunakan adalah daun singkong yang dipetik dari salah satu lahan warga di Riau.
Hasil  penelitian  ini  ditentukan  dengan cara  mengamati  hambatan  yang  terbentuk dengan  mengukur  diameter  zona  hambat  yang timbul  pada  koloni  bakteri Staphylococcus aureus dan Escherihia coli . Data yang diperoleh dianalisis  menggunakan  uji  One  Way  Anova untuk melihat apakah ada perbedaan efektif dari masing-masing konsentrasi ekstrak. Jika terdapat perbedaan yang nyata antara perlakuan yang  diberikan,  maka  analisis  dilanjutkan
dengan  uji  LSD.  Selanjutnya  data  disajikan dalam bentuk tabel.

## HASIL

## Hasil Penapisan Fitokimia
Hasil  dari  penapisan  dari  ekstrak  etanol daun singkong dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Hasil Penapisan Ekstrak Etanol daun Singkong Senyawa yang dideteksi Hasil Alkaloid + Flavonoid + Tanin + Terpenoid + Fenol + Hasil pengujian aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus
Uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol daun  singkong  ( Manihot  esculenta )  terhadap pertumbuhan S.  aureus menunjukkan  adanya zona  bening  sekitar  kertas  cakram  yang menandakan  terjadinya  hambatan  pertumbuhan bakteri S. aureus setelah diberikan ekstrak etanol daun singkong berbagai konsentrasi.
Berdasarkan  hasil  pengamatan  dan perhitungan diameter  rata-rata  zona  hambat  setiap  variasi konsentrasi dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel 2. Diameter zona hambat kelompok kontrol dan perlakuan (mm) bakteri
Stapylococcus aureus Hasil Pengujian Aktifikas Antibakteri

## Terhadap Esherichia coli
Uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol daun  singkong  ( Manihot  esculenta  Crantz .) terhadap pertumbuhan Escherichia coli menunjukkan adanya zona bening sekitar kertas cakram  yang  menandakan  terjadinya  hambatan pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli setelah diberi  intervensi  dengan  ekstrak  etanol  daun singkong  berbagai  konsentrasi.  Berdasarkan hasil pengamatan dan perhitungan diameter rata- rata zona hambat dapat dilihat pada tabel 3.

## DISKUSI
Hasil  Uji  Ekstra  Etanol  daun  singkong terhadap Staphylococcus aureus
Hasil pengukuran pada tabel 2 menunjukkan  bahwa  pada  ekstrak  etanol terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus yang memiliki nilai rerata paling tinggi setelah 5 kali adalah pada kelompok konsentrasi 80%  dengan nilai  adalah  5,59  mm.  Sedangkan  nilai  rerata terendah adalah pada kelompok konsentrasi 75% dengan  nilai  4,12  mm.  Pada  kelompok  85% menunjukkan hasil 5,28 mm yang ternyata lebih kecil dibandingkan dengan konsentrasi 80%. Hal ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun
singkong  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus dari  golongan gram positif dari berbagai konsentrasi, walaupun rerata diameter zona hambat pada ekstrak etanol tidak setinggi pada kelompok perlakuan kontrol positif yang menggunakan Chloramphenicol .
Tabel 3. Diameter zona hambat kelompok kontrol dan perlakuan (mm) bakteri

## Escherichia coli
Kecilnya  zona  hambat  yang  didapatkan pada konsentrasi 85% disebabkan oleh kepekatan  dan  kemampuan  difusi  bahan. Menurut  Fitriani 4 kemampuan  difusi  yang rendah  disebabkan  oleh  ekstrak  yang  terlalu pekat karena konsetrasi yang terlalu tinggi. Hal inilah  yang  menyebabkan  ekstrak  sulit  untuk berdifusi secara maksimal terhadap bakteri yang diuji.
Penelitian  ini  sejalan  dengan  penelitian sebelumnya yang telah dilakukan oleh Dwiyanto,  Harlis  dan  Retni 3 dengan  judul penelitian  Pengaruh  Konsentrasi  Ekstrak  Daun Singkong  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Escherichia coli Untuk Pengayaan Materi Pada Pratikum  Mata  Kuliah  Mikrobiologi  yang mendapatkan hasil bahwa pada konsentrasi yang lebih tinggi mengalami penurunan diameter zona hambat.
Replikasi Diameter zona hambat (mm) 5% 0% 85% + K- I 0,06 0,37 0,10 7,50 0 II 0,09 0,19 0,05 8,55 0 III 0,17 0,60 0,65 4,93 0 IV 4,09 0,23 0,23 7,53 0 V 0,20 0,10 0,97 7,49 0 Rata-rata 4,12 5,59 0,28 7,2 0 Replikasi Diameter zona hambat (mm) 5% 0% 5% + K- I 0,07 0,90 0,36 4,68 0 II 0,09 4,94 0,30 4,65 0 III 0,01 0,92 0,49 4,70 0 IV 0,15 0,02 0,40 4,79 0 V 0,06 0,89 0,48 4,78 0 Rata-rata 0,07 0,93 0,40 14,72 0
Hasil  Uji  Ekstra  Etanol  daun  singkong terhadap Escherichia coli
Hasil pengukuran pada tabel 3 menunjukkan  bahwa  pada  ekstrak  etanol terhadap bakteri Escherichia coli yang memiliki nilai  rerata  paling  tinggi  setelah  5  kali  adalah pada kelompok  konsentrasi 80%  dengan nilai adalah  4,93    mm  (sedang).  Sedangkan  nilai rerata terendah adalah pada kelompok konsentrasi 75% dengan nilai 4,07  mm. Namun pada  uji  konsentrasi  85%  memiliki  hasil  rerata daya  hambat  sebesar  4,40  mm  yang  ternyata lebih  kecil  dari  konsentrasi  80%.    Hal  ini menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun singkong  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri Escherichia  coli dari  golongan  gram negatif  dari  berbagai  konsentrasi,  walaupun rerata diameter zona hambat pada ekstrak etanol tidak sebesar pada kelompok perlakuan kontrol positif yang menggunakan Chloramphenicol .
Kecilnya  zona  hambat  yang  didapatkan pada konsentrasi 85% disebabkan oleh kepekatan  dan  kemampuan  difusi  bahan. Menurut  Fitriani 4 kemampuan  difusi  yang rendah  disebabkan  oleh  ekstrak  yang  terlalu pekat karena konsetrasi yang terlalu tinggi. Hal inilah  yang  menyebabkan  ekstrak  sulit  untuk berdifusi secara maksimal terhadap bakteri yang diuji.
Penelitian  ini  sejalan  dengan  penelitian sebelumnya yang telah dilakukan oleh Dwiyanto,  Harlis  dan  Retni 3 dengan  judul penelitian  Pengaruh  Konsentrasi  Ekstrak  Daun Singkong  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Escherichia coli Untuk Pengayaan Materi Pada Pratikum  Mata  Kulia  Mikrobiologi  yang mendapatkan hasil bahwa pada konsentrasi yang
lebih tinggi mengalami penurunan diameter zona hambat.

## Peran Kandungan Senyawa Kimia Terhadap Pertumbuhan Bakteri
Zona  hambat  yang  terbentuk  disekitar cakram  pada  penelitian  ini  disebabkan  karena adanya kandunga senyawa kimia yaitu alkanoid, tanin, steroid dan flavonoid pada ekstrak etanol daun singkong ( Manihot esculenta Crantz .) yang bersifat sebagai antibakteri. Mekanisme antibakteri  yaitu  dengan  cara  merusak  dan menghambat pertumbuhan pada bakteri sehingga bakteri tidak bisa tumbuh sempurna. Menurut Khunaifi 5 mekanisme alkaloid sebagai antibakteri  dengan  cara  menganggu  komponen penyusun  peptidoglikan  pada  sel  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli , sehingga  lapisan  dinding  sel  tidak  terbentuk secara  utuh  dan  menyebabkan  kematian  sel. Tanin  sebagai  antibakteri  yaitu  dengan  cara menghambat  enzim  sehingga  sel  bakteri  tidak terbentuk. Menurut Retnowati 6 mekanisme kerja flavonoid dengan cara memghambat pertumbuhan  bakteri  dengan  cara  merusak permeabilitas dinding sel bakteri.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini  dapat disimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun singkong  memiliki  daya  hambat  terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli, meskipun tidak lebih besar dari hasil perlakuan menggunakan chloramphenicol .

## DAFTAR REFERENSI
1.  Dwidjoseputro D. Dasar-Dasar Mikrobiologi . Jakarta: Djambatan; 2017.
2.  Pratiwi A. Aktivitas antibakteri ekstrak daun singkong ( Manihot esculenta Crantz .)
terhadap Shigella sp . J Kesehat .
2016;7(1):161-164.
3.  Dwiyanto,  Harlis,  Budiarti  R.  Pengaruh konsentrasi  ekstrak  daun  singkong  gajah ( Manihot utilissima Pohl var . gajah ) terhadap  pertumbuhan  bakteri Escherichia coli untuk pengayaan materi pada praktikum mata kuliah mikrobiologi. 2017.
4.  Fitriani  A.  Aktivitas  alkaloid Ageratum conyzoides L . terhadap pertumbuhan bakteri
Staphylococcus aureus secara  in  vitro.  In:
Simposium Penelitian Bahan Obat Alami XVI & Muktamar Perhipba XII . Bandung; 2014.
5.  Mufid  K.  Uji  aktivitas  antibakteri  daun binahong ( Anredera cordifolia ( Ten ) Steenis ) terhadap  bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa . 2010.
6.  Retnowati  Y,  Bialangi  N,  Posangi  N. Pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus pada media yang diekspos dengan infus daun sambiloto ( Andrographis paniculata ).
Saintek . 2011;6(2):1-9.