Jurnal Pro-Life, Volume 8 Nomor 3, November 2021
Pengaruh Paparan Ekstrak Biji Klabet (Trigonella foenum-graecum L.) terhadap Kadar Hemoglobin, Indeks Hepatosomatik dan Kadar Protein Hepar Tikus Putih (Rattus
norvegicus L.)
Rofiatul Adawiyah Putri * , Agung Janika Sitasiwi, Kasiyati Fakultas Sains dan Matematika, Universitas Diponegoro, Semarang. *Corresponding Author: rofiatulputri@gmail.com

## Article History
Received    :   24 September 2021 Approved   :   05 November 2021 Published   :   30 November 2021

## Keywords
dose, liver function,
fenugreek seed extract

## ABSTRACT
Fenugreek is one of the herbal plants whose seeds contain flavonoid antioxidant compounds, essential amino acids and minerals but their effect on liver function has not been tested. This study consisting of 4 treatment  groups,  namely  P0  (white  rats  were  given  aquadest),  P1 (white  rats  were  given  fenugreek  seed  extract  at  dose  of  500  mg/kg BW), P2 (white rats were given fenugreek seed extract at dose of 1000 mg/kg BW), and P3 (white rats given fenugreek seed extract at dose of 1500  mg/kg  BW).  Statistical  analysis  test  used  Kruskal  Wallis  and continued  with  Mann  Whitney  test.  The  results  showed  that  the administration of fenugreek seed extract on the highest hepatosomatic index  was  found  in  research  rats  treated  with  a  dose  of  500  mg/kg BW, the highest hemoglobin levels were found in research rats treated with  a  dose  of  1500  mg/kg  BW  and  the  highest  liver  protein  levels were  found  in  research  rats.  treated  with  a  dose  of  500  mg/kg  BW. The  conclusion  of  this  study  was  that  exposure  to  fenugreek  seed extract  was  able  to  maintain  liver  function  by  showing  the  value  of hepatosomatic  index,  hemoglobin  and  liver  protein  levels  in  white rats.

## PENDAHULUAN
Tanaman  klabet  ( Trigonella  foenum- graecum L.) merupakan salah satu tanaman  obat  yang  biasa  dimanfaatkan bagiannya,  terutama  pada  bagian  biji (Srinivasan, 2006). Biji klabet berwarna
kuning kecokelatan, memiliki tekstur keras dan  berukuran  panjang  sekitar  5  mm (Snehlata  &  Payal,  2012).  Biji  klabet mengandung  banyak  asam  folat  (84 mg/100 g), diosgenin, gitogenin, neogitogenin, homorientin, saponaretin,

## Prolife

## Jurnal Pendidikan Biologi, Biologi, dan Ilmu Serumpun
https://ejournal.uki.ac.id/index.php/prolife
neogigogenin, dan trigogenin (Khorshidian et  al .,  2016),  juga  mengandung  komponen dalam  jumlah  kecil  seperti  flavonoid, alkaloid  (trigonolin,  cholin,  gentianin, carpaine), asam amino (4- hydroxyisoleucine), spirostanol dan furastanol (diosgenin, gitogenin, dan yamogenin) yang memberikan efek farmakologis (Trivedi et al., 2007).
Efek  antidiabetes  pada  biji  klabet terkandung  dari  senyawa  galaktomanan yang  mengontrol  kadar  glukosa  darah  dan mengurangi  penyerapan  glukosa  di  usus. Efek  antiinflamasi  dan  analgesik  pada  biji klabet  terkandung  dalam  senyawa  kimia saponin, flavonoid, dan tanin (Yadav et al ., 2016).  Efek  antikanker  pada  biji  klabet terkandung  dalam  senyawa  utama  seperti naringenin,  kuersetin,  dan  skualen  (Khalil et  al .,  2015).  Efek  antimikroba  pada  biji klabet terkandung dalam senyawa flavonoid  dan  polifenol  (Kumari et  al ., 2016;  Norziah et  al .,  2015).  Efek antifertilitas  pada  biji  klabet  terkandung dari senyawa saponin yang mengakibatkan sekresi  FSH  menurun  dan  LH  terhambat (Hanum,  2010).  Efek  antioksidan  dalam biji  klabet  terkandung  dalam  senyawa flavonoid (Bukhari et al ., 2008).
Manfaat  biji  klabet  terhadap  hepar telah  dibuktikan  dengan  ekstrak  polifenol biji  klabet  dapat  berfungsi  sebagai  agen pelindung  atau  agen  hepatoprotektif  pada hati yang diinduksi oleh etanol (Kaviarasan
et  al. ,  2009).  Biji  klabet  juga  mampu meningkatkan  biosintesis  hemoglobin  dan meningkatkan  kadar  darah  karena  kaya akan  kandungan  sumber  protein,  terutama asam  amino  esensial  seperti  lisin  dan treonin,  sumber  mineral  seperti  besi  dan tembaga,  sumber  vitamin  seperti  folat  dan askorbat. Komponen asam amino, mineral, dan vitamin esensial tersebut memiliki efek yang menguntungkan dan membantu untuk pencegahan ataupun penyembuhan penyakit anemia (Doshi et al ., 2012).
Tikus  merupakan  hewan  pengerat dan  tergolong  ke  dalam  kelas  mamalia yang  sering  digunakan  sebagai  hewan percobaan  di  laboratorium  karena  sifatnya mudah  dipelihara,  relatif  sehat  dan  karena tergolong hewan mamalia sehingga kelengkapan  organ,  kebutuhan  nutrisi, metabolisme  biokimia,  sistem  reproduksi, sistem  pernafasan,  sistem  peredaran  darah dan sistem ekskresi dianggap mirip dengan manusia  (Bredo  & Vazquez,  2011).  Tikus putih jantan jika digunakan dalam penelitian  memiliki  hasil  lebih  stabil karena  kecepatan  metabolisme  obat  yang lebih  cepat,  kondisi  biologis  tubuh  yang cenderung  stabil,  dan  tidak  dipengaruhi oleh  adanya  siklus  estrus  dan  kehamilan seperti  bila  dibandingkan  pada  tikus  putih betina (Pujiatiningsih, 2014). Ciri luar atau morfologis  dari  tikus  putih (Rattus norvegicus) ialah  kepalanya  kecil,  warna tubuh  albino,  dan  panjang  ekor  lebih
panjang  dibandingkan  badannya.  Berat badan  rata-rata  tikus  putih  pada  umur  satu bulan  berkisar  antara  35–40  gram  dan untuk  berat  badan  tikus  dewasa  rata-rata sekitar 200-250 gram. Habitat tikus berada dalam  lubang  dan  berkelompok,  dalam satu  kelompok  bisa  mencapai  200  ekor tikus.  Tikus  mudah  dijumpai  di  area perkebunan  kelapa,  selokan,  dan  padang rumput (Akbar, 2010).
Hemoglobin adalah komponen utama sel darah merah. Globin terdiri atas 4 rantai polipeptida,  yaitu  2  rantai  polipeptida  alfa yang  terdiri  atas  141  asam  amino  dan  2 rantai polipeptida beta yang terdiri atas 146 asam  amino  dengan  total  asam  amino sebanyak  574  buah  (Norsiah,  2015). Fungsi  hemoglobin  ialah  mengangkut oksigen ke jaringan tubuh, dan mengangkut  karbondioksida  dan  proton dari  jaringan  perifer  ke  organ  respirasi. Hubungan kadar hemoglobin dengan kadar eritrosit  sangat  erat,  yaitu  apabila  eritrosit rendah,  maka  kemampuan  hemoglobin membawa  oksigen  ke  seluruh  jaringan akan terhambat dan tubuh akan mengalami anemia apabila kekurangan oksigen (Gunadi dkk., 2016).
Hepar adalah salah satu organ sistem pencernaan  yang  terletak  dipermukaan kaudal  diafragma  hingga  sisi  median  dan lengkungan  kosta  kiri,  di  bagian  kranial hepar  berbatasan  dengan  abdomen  dari duodenum dan berbentuk seperti cekungan.
Hepar  dibungkus  dengan  Kapsula  Glisson yang  merupakan  jaringan  ikat  tipis  yang menebal  di  hilum  (Bredo  & Vazquez, 2011).  Hepar  tikus  dibagi  menjadi  empat lobus, yaitu lobus kiri, lobus median, lobus kanan,  dan  lobus  caudatus  (Boorman, 2006).  Hepar  memiliki  peran  besar  dalam aktivitas  metabolisme  (Salasia  &  Hariono, 2010).  Menurut  Price  &  Lorraine  (2006), hepar  menjadi  organ  penghubung  antara sistem pencernaan dengan sistem peredaran darah.
Permasalahan  dalam  penelitian  ini adalah bagaimana pengaruh paparan ekstrak biji klabet terhadap kadar hemoglobin,  indeks  hepatosomatik  dan kadar  protein  pada  tikus  putih  jantan. Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  menguji pengaruh  paparan  ekstrak  biji  klabet terhadap kadar hemoglobin, indeks hepatosomatik  dan  kadar  protein  hepar tikus putih jantan.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilakukan  selama empat  bulan  di  Laboratorium  Biologi Struktur  dan  Fungsi  Hewan,  Departemen Biologi,  Fakultas  Sains  dan  Matematika (FSM),  Universitas  Diponegoro  (UNDIP). Analisis  kadar  hemoglobin  dilakukan  di Laboratorium Kesehatan Hewan, Semarang. Analisis kadar protein dilakukan di Laboratorium Terpadu Universitas  Diponegoro  Semarang  dan
Laboratorium  Fakultas  Kedokteran  Hewan Universitas Gajahmada Yogyakarta.
Alat  yang  digunakan  yaitu  36  set kandang pemeliharaan tikus beserta tempat pakan dan botol minum,  timbangan digital dengan  akurasi  0,01  gram,  timbangan analitik  dengan  akurasi  0,001  gram, logbook , spidol, bolpoin, penggaris, gunting,  sarung  tangan,  spuit  injeksi ukuran 5 ml, alat sonde mencit, gelas ukur, termohigrometer, rotary evaporator , lemari  pendingin, freezer -20 ° C,  set  alat bedah,  bak  paraffin,  jarum  pentul,  cawan petri,  tabung  EDTA,  mortar    dan  stamper, mikropipet, white pippete tip, blue pippete tip, yellow pippete tip, microtube , sentrifuge, ice gel , cooler bag , spektrofotometeter, dan kuvet. Bahan yang digunakan  yaitu  biji  klabet,  36  individu tikus  putih  jantan  strain  Wistar  berumur satu  bulan,  pakan  standar  A594,  air  kran, akuades,  kertas  label,  kloroform,  kapas, tisu,  larutan  garam  fisiologis,  etanol  70%, larutan Buffer  Neutral  Formalin ,  larutan PBS Solution , biorad protein assay , sekam padi,  plastik  klip,  kertas  minyak,  kertas milimeter  blok,  alumunium  foil,  dan plastik mika.
Penelitian  ini  menggunakan  desain Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL),  dengan 4  kelompok  perlakuan  dan  9  kali  ulangan, dengan  rincian  tiap  kelompok  sebagai berikut :
P0  :  Kontrol,  tikus  putih  normal  diberi aquades
P1 : Tikus  putih normal diberi  ekstrak biji klabet 500 mg/kg BB
P2 :  Tikus  putih  normal diberi  ekstrak biji klabet 1000 mg/kg BB
P3 :  Tikus  putih  normal diberi  ekstrak biji klabet 1500 mg/kg BB
Pembuatan  ekstrak  biji  dimulai dengan  cara  biji  klabet  dikeringkan  di dalam  oven  dengan  suhu ± 45-50 ° C, selanjutnya  dihancurkan,  digiling,  dan diayak  menjadi  serbuk.  Ekstrak  biji  klabet direndam dengan etanol 70% selama 2 hari kemudian  disaring  dan  diuapkan  dengan alat  rotary  evaporator  sampai  diperoleh ekstrak  biji  klabet  berbentuk  tepung. Pemberian  perlakuan  menggunakan  spuit berkanul  yang dipasang  pada syringe 1 ml dengan mengambil 0,2 ml larutan ekstraksi untuk satu tikus semua kelompok perlakuan  selama  21  hari.  Pembedahan hewan  uji  dilakukan  pada  minggu  ke-3 dengan pengambilan tiap kelompok perlakuan  secara  acak  dari  P0,  P1,  P2  dan P3.  Pengambilan  sampel  darah  dan  organ dilakukan  dengan  diseksi  yang  diawali dengan anesthesia menggunakan kloroform.  Hewan  uji  pingsan  segera dikeluarkan  dari  wadah  dan  diletakkan  di atas  bak  paraffin  dengan  bagian  anterior menghadap  ke  atas  dan  diseksi  dilakukan dengan  memotong  jaringan  kulit  dari
bagian bawah menuju bagian atas abdomen.
Pengambilan sampel darah dilakukan dengan menggunakan spuit yang ditusukkan    ke  bagian  jantung  kemudian sampel  darah  dihisap  dengan  spuit  secara perlahan.  Sampel  darah  yang  sudah terkumpul dimasukan dalam tabung EDTA dan  dihomogenkan  dengan  cara  memutar tabung EDTA secara perlahan dan hati-hati agar  tidak  menggumpal.  Isolasi  organ dilakukan  dengan  alat-alat  bedah  untuk mengambil hepar. Organ hepar selanjutnya ditimbang dengan timbangan digital ketelitian  0,01  gram.  Pemotongan  sedikit pada  bagian  hepar  kurang  dari  1  gram untuk digunakan sebagai sampel perhitungan  kadar  protein  lalu  ditimbang dan dicatat sebagai berat organ hepar untuk sampel  penentuan  kadar  protein.  Sampel hepar  selanjutnya  dicuci  dengan  larutan garam  fisiologis  0,8%,  disimpan  di  dalam freezer  -20 °C  sampai dipergunakan untuk analisis protein hepar.
Analisis protein hepar dimulai dengan  cara hepar  dipotong,  ditimbang, dan  disimpan  di  dalam freezer -20 ° C.
Hepar  dihancurkan  dengan  mortar  dan stampler  dan  diberi  larutan  PBS    dengan perbandingan  1:1,  kemudian  jus  yang dihasilkan dimasukkan ke dalam microtube dengan  mikrotip  dan  disentrifuge  dengan kecepatan  10.000  rpm  selama  4  menit dengan  suhu  4 ° C.  Natan  diambil  dan
dipindahkan  ke  mikrotube  baru  kemudian diberi  label  keterangan  nomor  perlakuan dan  disimpan  didalam freezer -20 ° C. Pembuatan larutan blanko dengan mencampurkan  800  µl  aquadest  steril  dan 200 µl Biorad Protein Assay sehingga total larutan  blanko  ialah  1000  µl,  dan selanjutnya membuat larutan sampel dengan  mencampurkan  798  µl  aquadest steril;  2  µl  sampel  natan  hepar;  200  µl Biorad  Protein  Assay,  sehingga  total larutan sampel adalah 1000 µl. Selanjutnya, dihomogenkan dan diinkubasi selama  5  menit  dan  dilanjutkan  dengan spektrofometer dengan panjang gelombang 595  nm  untuk  mengetahui  nilai  absorbans total protein.
Pengukuran parameter dimulai dengan  menghitung  indeks  hepatosomatik, yaitu  dengan  menimbang  terlebih  dahulu bobot  badan  akhir  pada  tikus  putih  dan bobot hepar tikus putih dengan menggunakan  timbangan  digital  dengan akurasi  0,01  gram.  Penghitungan  indeks hepatosomatik  dilakukan  dengan  rumus bobot hepar dibagi bobot badan tikus dikali 100%.  Pengukuran  kadar  hemoglobin dilakukan dengan menggunakan alat Hematology  Analyzer dimana  nanti  nilai akan  langsung  tertera  pada  monitor. Pengukuran kadar protein dilakukan Menurut  Rosita  (2018),  menggunakan persamaan  regresi  linear  kurva  baku sebagai berikut :
Y = 0, 0465x – 0,0157  atau   X =
x = konsentrasi protein; y = nilai absorbans
dengan nilai 0,0465x–0,0157. Nilai konsentrasi dalam satuan mg/µl.
Analisis  data  indeks  hepatosomatik,  kadar hemoglobin  dan  kadar  protein  hepar menggunakan  SPSS  versi  25.0.  Uji homogenitas  dengan  uji Lavene kemudian dianalisis dengan menggunakan uji Kruskal  Wallis dengan  taraf  kepercayaan 95% (α = 0,05) dan dilanjutkan dengan uji
Mann  Whitney apabila  hasil  analisis Kruskal Wallis berbeda nyata.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  analisis  indeks  hepatosomatik (HSI), kadar hemoglobin dan kadar protein hepar pada penelitian ini ditampilkan pada Tabel  1 .  Rata-rata  indeks  hepatosomatik menunjukkan  adanya  perbedaan  nyata antarkelompok perlakuan (p<0,05), sedangkan  rata-rata  kadar  hemoglobin  dan kadar protein hepar menujukkan perbedaan tidak nyata antarkelompok perlakuan.
Tabel 1. Hasil analisis rata-rata indeks hepatosomatik (%), kadar protein hepar tikus putih (mg/µl), kadar hemoglobin (g/dL) tikus putih setelah paparan ekstrak biji klabet selama 21 hari.
Waktu pengamatan Perlakuan P0 x̄ ± SD P1 x̄ ± SD
P2 x̄ ± SD P3 x̄ ± SD HIS 4,17 b ± 0,30 4,67 a ± 0,23 4,11 b ± 0,3 3,97 b ± 0,25 Kadar Hemoglobin 9,48 a ± 1,97 11,38 a ± 0,41 11,25 a ± 0,29 11,40 a ± 1,01 Kadar Protein 15,05 a ± 1,86 17,61 a ± 2,79 16,11 a ± 0,49 15,51 a ± 0,92
Keterangan:  Data  yang  ditampilkan  berupa  rata-rata  ±  standar  deviasi.  P0=  tikus  putih  normal  diberi  aquades. P1= tikus putih normal diberi 500 mg/kg BB ekstrak biji klabet. P2= tikus putih normal diberi 1000 mg/kg BB ekstrak  biji  klabet.  P3=  tikus putih  normal  diberi  1500 mg/kg  BB  ekstrak biji  klabet.  Superskrip yang  berbeda pada kolom yang sama menunjukkan berbeda nyata (p<0,05).
Indeks  hepatosomatik  (HSI)  pada hari  ke-21  memperlihatkan  bahwa  P0 berbeda  nyata  (p<0,05)  dengan  kelompok dosis  500  mg/kg  BB  (P1)  namun  berbeda tidak  nyata  dengan  kelompok  dosis  1000 mg/kg  BB  (P2)  dan  kelompok  dosis  1500 mg/kg  BB  (P3).  Nilai  HSI  P1  berbeda nyata (p<0,05) dengan P0, kelompok dosis
500  mg/kg  BB  (P1)  dan  kelompok  dosis 1500  mg/kg  BB  (P3).  Nilai  HSI  P2 berbeda  nyata  (p<0,05)  dengan  kelompok dosis  500  mg/kg  BB  (P1)  namun  berbeda tidak nyata dengan P0 dan kelompok dosis 1500  mg/kg  BB  (P3).  Nilai  HSI  P3 berbeda  nyata  (p<0,05)  dengan  kelompok dosis  500  mg/kg  BB  (P1)  namun  berbeda
tidak nyata dengan P0 dan kelompok dosis 1000 mg/kg BB (P2).
Berdasarkan hasil penelitian menunjukkan  bahwa  paparan  ekstrak  biji klabet  selama  21  hari  menyebabkan perubahan  indeks  hepatosomatik.  Indeks hepatosomatik tertinggi terdapat pada tikus penelitian yang diberi  perlakuan dosis 500 mg/kg  BB.  Perubahan  yang  terjadi  pada nilai  indeks  hepatosomatik  disebabkan adanya  perubahan  nilai  pada  bobot  badan dan bobot hepar tikus. Nunes et al . (2011) menjelaskan bahwa nilai indeks
hepatosomatik digunakan sebagai bioindikator  senyawa  toksik  di  dalam tubuh  dan  menunjukkan  besaran  energi pada  hepar  untuk  mengetahui  status kesehatan  hewan.  Yuneldi et  al .  (2018) menjelaskan bahwa indeks normal hepatosomatik  tikus  berkisar  4,46-4,86  %. Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa nilai  indeks  hepatosomatik  masih  berada dalam  kisaran  nilai  normal  sehingga paparan  biji  klabet  tidak  menyebabkan efek toksik dan juga mampu mempertahankan  fungsi  hepar  dalam ketersediaan energi hewan uji.
Kadar  hemoglobin  pada  hari  ke-21 memperlihatkan  bahwa  P0  berbeda  tidak nyata  dengan  semua  kelompok  dosis perlakuan,  yaitu  kelompok  dosis  500 mg/kg  BB  (P1),  kelompok  dosis  1000 mg/kg  BB  (P2)  dan  kelompok  dosis  1500 mg/kg  BB  (P3).  Kadar  hemoglobin
tertinggi  terdapat  pada  tikus  penelitian yang  diberi  perlakuan  dosis  1500  mg/kg BB. Hasil dalam penelitian ini menunjukkan bahwa nilai kadar hemoglobin  dalam  lebih  rendah  dari normal.  Douglas  &  Wardrop  (2010) menyatakan bahwa nilai normal hemoglobin  tikus  berkisar  dari  11,6-16,1 g/dL. Kandungan protein dalam biji klabet, terutama  asam  amino  esensial  seperti  lisin dan  treonin;  mineral  seperti  besi  dan tembaga; vitamin seperti folat dan askorbat diduga  berkontribusi  dalam  meningkatkan sintesis hemoglobin. Penelitian Doshi et al.
(2012)  menunjukkan  bahwa  biosintesis hemoglobin dan  kadar  darah  dapat meningkat  karena  adanya  kandungan sumber  protein  asam  amino  esensial  pada biji klabet seperti lisin dan treonin.
Kadar  protein  pada  hari  ke-21 memperlihatkan  bahwa  P0  berbeda  tidak nyata  dengan  semua  kelompok  dosis perlakuan,  yaitu  kelompok  dosis  500 mg/kg  BB  (P1),  kelompok  dosis  1000 mg/kg  BB  (P2)  dan  kelompok  dosis  1500 mg/kg  BB  (P3).  Kadar  protein  hepar tertinggi  terdapat  pada  tikus  penelitian yang diberi perlakuan dosis 500 mg/kg BB. Peningkatan kadar protein hepar mengindikasikan  terjadinya  peningkatan sintesis  protein  hepar.  Kandungan  asam amino  pada  biji  klabet  yang  dapat  diserap oleh  intestinum  dan  diedarkan  ke  hati dapat  dijadikan  sebagai  substrat  pada
biosintesis  protein  hepar.  Trivedi et  al . (2007)  menyatakan  bahwa  kandungan asam  amino  pada  biji  klabet  seperti  4- hydroxyisoleucine memberikan efek farmakologis.  Penelitian  Doshi et  al.
(2012) juga menyatakan bahwa kandungan protein  asam  amino  esensial  pada  biji klabet,  yaitu  lisin  dan  treonin.  Andri  dkk. (2020) menyatakan bahwa lisin ialah salah satu asam amino essensial yang bermanfaat untuk menurunkan kadar trigliserida berlebih  dalam  darah  dan  bahan  baku antibodi  darah.  Harli  (2008)  menyatakan bahwa treonin berperan dalam mempertahankan  keseimbangan  protein, sintesis kolagen dan elastin, dan meningkatkan fungsi hati.
Antioksidan dalam kandungan ekstrak  biji  klabet  ialah  senyawa  yang dapat  melindungi  sel  dari  kerusakan radikal  bebas  dengan  menstabilkan  dan menghentikan  reaksi  berantai.  Menurut Miryanti dkk. (2011) antioksidan berfungsi dalam  menghentikan  reaksi  berantai  dari radikal bebas sehingga menghambat terjadinya oksidasi. Antioksidan dibedakan menjadi antioksidan enzim dan antioksidan vitamin.  Antioksidan  yang  termasuk  ke dalam  vitamin  dan  fitokimia  biasa  dikenal dengan  sebutan  flavonoid.  Kandungan flavonoid  seperti  quersetin  dan  silymarin yang  terdapat  pada  biji  klabet  diduga memberikan  efek  proteksi  terhadap  hepar. Ikalinus  dkk.  (2015)  menyatakan  bahwa
quersetin  golongan  flavonoid  bertindak sebagai  antioksidan  yang  menetralkan radikal  bebas  dengan  gugus  OH  fenolik untuk menghambat inflamasi dan memperbaiki keadaan jaringan yang rusak. Penelitian  Selvakumar et  al. (2012) membuktikan  bahwa  perlakuan  quersetin pada  tikus  jantan  dewasa  yang  diberi paparan Polychlorinated  biphenyls (PCBs) menghasilkan peningkatkan kadar hemoglobin.

## SIMPULAN
Simpulan  dari  penelitian  ini  adalah paparan ekstrak biji  klabet mampu mempertahankan  fungsi  hepar  dengan ditunjukkan  nilai  indeks  hepatosomatik, kadar hemoglobin  dan kadar protein  hepar tikus putih.

## DAFTAR PUSTAKA
Akbar  B.  2010. Tumbuhan  Dengan Kandungan  Senyawa  Aktif  Yang Berpotensi  Sebagai  Bahan  Anti Fertilitas . Jakarta : Adabia Press.
Andri,  RP  Harahap,  &  YA  Tribudi.  2020.
Estimasi  dan  Validasi  Asam  Amino Metionin,  Lysin  dan  Threonin  Dari Pakan Bijian Sebagai Sumber Protein Nabati. Jurnal Nutrisi Ternak Tropis ,
1:18-22.
Boorman  GA.  2006. Pathology  of  the Fischer  Rat:  Reference  and  Atlas .
California : Academics Press
Bredo RM. 2011. Anatomy of the Liver In Wistar  Rat  ( Rattus  norvegicus ). Jurnal  International  J.  Morphol .  Hal 77
Bukhari  SB,  IB  Muhammad,  &  M Shahabuddin.  2008.  Antioxidative Activity  of  Extracts  from  Fenugreek Seeds  ( Trigonella  foenum-graecum ).
Pak.  J. Anal.  Environ.  Chem , 9(2):78-83.
Doshi  M,  A  Mirza,  B  Umarji,  &  R
Karambelkar. 2012. Effect of Trigonella foenum-graceum
(Fenugreek  /  Methi)  on  Hemoglobin
Levels  in  Females  of  Child  Bearing
Age. Biomedical Research , 23(1).
Douglas  JW,  &  KJ  Wardrop.  2010. Schalm’s  Veterinary  Hematology.
6th ed . Wiley-Blackwell, p.852-887.
Gunadi VIR, YM Mewo, & M Tiho. 2016. Gambaran  Kadar  Hemoglobin  Pada Pekerja Bangunan. Jurnal e-
Biomedik (eBm), 4(2).
Hanum  M.  2010. Biologi  Reproduksi . Yogyakarta: Nuha Medika. Harli  M.  2008. Asam  amino  esensial . www.suparmas.com.
Norsiah.
2015. Perbedaan Kadar Hemoglobin Metode Sianmethemoglobin  Dengan  Dan Tanpa  Sentrifugasi  Pada  Sampel Leukositosis. Journal Medical Laboratory Technology.
Price  SA,  &  MW  Lorraine.  2006.
Patofisiologi  Konsep  Klinis  Proses- Proses Penyakit. Jakarta: EGC.
Pujiatiningsih  S.  2014.  Pemberian  Ekstrak Daun  Putri  Malu  ( Mimosa  Pudica Linn )  Secara  Oral  Menurunkan Kadar  Gula  Darah  Post  Prandial Pada  Tikus  ( Rattus  norvegicus ) Jantan  Galur  Wistar  Prediabetes. Tesis . Fakultas biomedik. Denpasar :
Universitas Udayana. Salasia, SIO &  Hariono  B.  2010 . Patologi Klinik  Veteriner:  Kasus  Patologi Klinis . Yogyakarta: Samudra Biru. Trivedi  PD,  K  Pundarikakshudu,  S Rathnam,  &  KS  Shah.  2007.  A Validated  Quantitative  Thin-layer
Chromatographic Method for Estimation  of  Diosgenin  in  Various Plant  Samples,  Extract,  and  Market
Formulation. J  Aoac  Int ,  90(2):  358- 63.
Yadav R, R Tiwari, & F Amin. 2016. The Screening  of  Analgesic  and  Anti- inflammatory Activities of Trigonella foenum-graecum Seeds . International Journal  of  Pharmaceutical  Science Invention , 5(7):50-53.
Yuneldi  RF,  TR  Saraswati,  &  EYW Yuniwarti.  2018.  Profile  of  SGPT and  SGOT  on  Male  Rats  ( Rattus norvegicus )  Hyperglycemic  After
Giving Insulin Leaf Extract ( Tithonia  diversifolia ). Journal  of Biology & Biology Education