EFEK PEMBERIAN GEL GETAH BATANG TANAMAN PISANG SECARA TOPIKAL TERHADAP KEPADATAN SERABUT KOLAGEN PADA PROSES PENYEMBUHAN LUKA PASCA EKSTRAKSI GIGI MARMUT
(EFFECT OF TOPICAL APPLICATION OF BANANA STEM SAP GEL ON THE DENSITY OF COLLAGEN FIBER IN THE WOUND HEALING PROCESS AFTER TOOTH EXTRACTION IN THE GUINEA PIG)
Yosaphat Bayu Rosanto*, Juni Handajani **, Heni Susilowati **
*Program Studi Kedokteran Gigi **Bagian Biologi Mulut Fakultas Kedokteran Gigi, Universitas Gadjah Mada Jl. Denta Sekip Utara Yogyakarta 55281

## Abstract
Banana stem sap contain of saponin, flavonoid, vitamin C, and tannin play a role in the wound healing process. The aim of this study was to determine the effect of topical application of banana stem sap gel on the density of collagen fiber in the wound healing process after tooth extraction in the guinea pig ( Cavia cobaya ). Fifty four guinea pigs were divided into three groups, each group consisted of 18 guinea pigs. Tooth extraction was performed on the mandibular left central incisive. The positive control group was treated with iod glycerin, and the negative control group was treated with CMC- Na. Subjects in the treated group were treated with 80% banana stem sap gel. After the treatment, three of each group were sacrified in 1, 3, 5, 7, 14, and 24 days after tooth extraction and the mandibles were collected. The mandibles were prossed  for  histological  treatment  prior  to  Mallory  staining.  Collagen  fiber  was  scored  under  light  microscope examination  and  then  statistically  analyzed  by  using  Kruskall-Wallis  and  Mann-Whitney  Tests.  The  result  showed significant difference of collagen fiber density between treated and control groups (p < 0.05). The increasing of collagen fiber showed significant difference in 3, 5, 7, and 14 days after tooth extraction between treated groups with negative and positive control. In conclusion, topical application of 80% banana stem sap gel could promote deposition of collagen fiber in socket healing process after tooth extraction in guinea pig.
Key words: banana stem sap gel, tooth extraction, collagen fiber

## Abstrak
Getah batang pisang mengandung saponin, flavonoid, vitamin C, dan tanin yang berperan dalam proses penyembuhan luka.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  efek  gel  getah  aplikasi  topikal  gel  getah  batang  pisang  raja  terhadap kepadatan  serabut kolagen  pada proses  penyembuhan  luka  pasca pencabutan  pada soket gigi  marmut ( Cavia  cobaya ). Lima puluh empat marmut dibagi menjadi 3 kelompok, masing-masing terdiri atas 18 marmut. Pencabutan gigi marmut dilakukan pada gigi insisivus sentralis kiri rahang bawah. Kelompok kontrol positif diperlakukan dengan iod gliserin dan kelompok kontrol negatif dengan CMC-Na. Subjek pada kelompok perlakuan diberi gel getah batang pisang 80% secara topikal. Setelah  perlakuan,  pada  3  marmut  dari  masing-masing  kelompok  dilakukan dekapitasi pada 1, 3, 5, 7, 14, dan  24  hari  pasca  pencabutan  gigi.  Rahang  bawah  marmut  dipotong  lalu  dibuat  preparat  histologis  untuk  pengecatan Mallory. Kepadatan serabut kolagen diamati dengan mikroskop cahaya, kemudian data dianalisis dengan Uji Kruskall- Wallis  dan  Mann-Whitney.  Hasil  penelitian  menunjukkan  ada  perbedaan  bermakna  serabut  kolagen  (p  <  0,05)  antara kelompok perlakuan dan kontrol. Peningkatan serabut kolagen menunjukkan perbedaan yang signifikan pada 3, 5, 7, dan 14  hari  pasca pencabutan gigi  antara  kelompok perlakuan dengan kontrol  negatif dan  positif.  Kesimpulannya, aplikasi topikal  gel getah  pisang 80% dapat  mempercepat pembentukan serabut kolagen pada  proses penyembuhan  luka  soket gigi marmut pasca pencabutan gigi marmut.
Kata kunci: getah pisang ( musa sapientum ), pencabutan gigi, serabut kolagen. Edisi Cetak Dentika Dental Journal, Juli 2012 (ISSN: 1693-671X)

## PENDAHULUAN
Pencabutan  gigi  merupakan  tindakan  yang  sering dilakukan  dalam  bidang  kedokteran  gigi  dan  dapat menimbulkan luka pada tulang alveolar dan mukosa rongga  mulut.  Pada  kondisi  normal  luka  mudah sembuh, tetapi apabila mengalami berbagai kompli- kasi  seperti  infeksi  dan  suplai  darah  kurang  maka proses penyembuhan akan terhambat. 1
Luka  adalah  rusaknya  kesatuan  atau  komponen jaringan,  yang  secara  spesifik  terdapat  sisa-sisa jaringan yang rusak atau hilang. Keadaan luka pada rongga mulut sering dijumpai, biasanya disebabkan agen-agen  fisik  atau  kimia  berupa  makanan  dan minuman  panas,  benda  tajam,  dan  aspirin.  Proses penyembuhan luka dapat dibagi atas 3 bagian, yaitu inflamasi, proliferasi, dan remodeling jaringan. 1,2
Tanaman yang tumbuh di Indonesia banyak sekali yang  memiliki  manfaat  bagi  kesehatan.  Salah  satu tanaman yang berguna bagi kesehatan adalah pisang raja  ( Musa  sapientum ).  Pisang  raja  merupakan jenis  tanaman  pisang  yang  paling  dikenal  oleh masyarakat Indonesia. Pisang raja memiliki volume getah yang lebih banyak dibandingkan jenis tanam- an pisang yang lain. Para orang tua dan masyarakat di  pedesaan  sering  menggunakan  getah  pohon pisang raja untuk menyembuhkan luka. Ada angga- pan getah pohon pisang raja terasa dingin dan dapat menghilangkan rasa nyeri akibat luka dengan cepat, bahkan  luka  pun  juga  bisa  tertutup.  Bahan-bahan yang terkandung dalam getah batang pisang tersebut diduga dapat membantu proses penyembuhan luka, antara lain luka pasca pencabutan gigi. 3
Getah  batang  pisang  raja  mengandung  saponin, asam  askorbat,  flavonoid,  dan  tanin.  Aliyu  me- nyatakan  bahwa  saponin,  flavonoid,  dan  tanin  juga bersifat  antioksidan  sehingga diduga  mampu mem- percepat  penyembuhan  luka. 4 Karodi  menyebutkan bahwa kandungan tanin dalam suatu tanaman secara histologis  menunjukkan  bahwa  zat  ini  dapat  mem- percepat  migrasi  sel  inflamasi,  meningkatkan  pem- bentukan  pembuluh  darah  baru,  dan  meningkatkan proliferasi  sel. 5 Tanin  mencegah  terjadinya  proses oksidasi  juga  merupakan  senyawa kuat yang dapat mempercepat penyembuhan luka dan inflamasi. 6
Saponin  terbukti  dapat  menghentikan  perdarahan dan  mengobati  perlukaan.  Saponin  adalah  zat  yang dapat  mempercepat  presipitasi  dan  koagulasi  sel darah  merah.  Senyawa  tersebut  dapat  membantu pembentukan  pembuluh  darah  dan  meningkatkan aktivitas  pembuluh  darah  vena  dengan  cara  me- ningkatkan  aktivitas protease dan migrasi  sel  endo- tel.  Flavonoid  memiliki  berbagai  efek  yaitu  anti- oksidan, analgesik, antiinflamasi, antivirus, antibak-
teri,  antifungal,  antidiare,  antihepatotoksik,  antihe- perglikemik dan sebagai vasodilatator. 6
Proses  penyembuhan  luka  dapat  dilihat  dari  be- berapa  parameter  yaitu  reepitelisasi,  jumlah  leu- kosit polimorfonuklear (PMN), jumlah sel fibroblas, kepadatan  serabut  kolagen,  dan  angiogenesis. 6 Se- rabut kolagen merupakan protein penyusun jaringan ikat  yang  jumlahnya  paling  dominan  dalam  tubuh. Jaringan  yang  sedang  mengalami  penyembuhan merupakan struktur yang memperbaharui diri secara dinamis.  Serabut  kolagen berperan  sebagai scaffold (perancah)  untuk  mempertahankan  struktur  yang normal. 7 Hasil penelitian ini diharapkan dapat mem- berikan  informasi  ilmiah  pada  masyarakat  manfaat mengenai  getah  batang  pisang  raja  yang  biasanya dibuang  sebagai  bahan  untuk  mempercepat  proses penyembuhan  luka  pasca  pencabutan  gigi.  Tujuan penelitian  adalah  untuk  mengetahui  efek  aplikasi topikal  gel  getah  batang  pisang  raja  terhadap  ke- padatan  serabut  kolagen pada proses penyembuhan luka soket gigi marmut pasca pencabutan.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  merupakan  jenis  penelitian  eksperi- mental  kuasi.  Penelitian  ini  telah  mendapat  per- setujuan dari Komisi Etik Penelitian Kedokteran dan Kesehatan Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada  No.KE/FK/91/EC  tanggal  8  Februari  2010. Subjek  penelitian  berupa  54  ekor  marmut  ( Cavia cobaya )  jantan  dipilih  dengan  kriteria  berumur  3-4 bulan, tidak ada kelainan anatomis, dan berat badan 300-500 gram. Semua marmut diperoleh dari Labo- ratorium  Penelitian  dan  PenBDC BT/F5(.0 1 326.1 356.3 Tm -0.3 Tc 406.9 Tm[(M)34(a)44(d)9(a)44( )-204(N)3-40(d)9(a)26(n)45( )-(h)27( )-113(p)9(a)44(d)9(a)44( )-113(m)14(a) )1 307.3 6 0 Tc[(b)27(u)m 8r42(,)3( )- mar1 0 0 1 307.3 343.5 Tm[(r)24(a)26(n)27(i)23( <</MCID 9ETBT1)44( )-204(0)44(d)9(a)44( )-r42(,)3( )-,    j8ETODbutD  denaring
Pembuatan  sediaan  gel  getah  batang  pisang  di- lakukan dengan cara bahan CMC-Na sebanyak 0,25 mg ditimbang dengan timbangan milligram kemudi- an  dilakukan  pengenceran  CMC-Na  dengan  akua- des  sampai  25  ml  sehingga  diperoleh  konsentrasi 1%  (b/v).  Getah  pisang  raja  dalam  bentuk  kental sebanyak  8  gram  ditimbang  dengan  timbangan gram. Getah pisang raja dicampur dengan CMC-Na 1%  sebanyak  2  gram  sehingga  diperoleh  gel  getah pisang raja dengan konsentrasi 80% (b/b).
Marmut  yang  akan  dipakai  sebagai  hewan  coba diadaptasikan  selama  3  hari  di  dalam  kandang. Marmut  dibagi  atas  tiga  kelompok,  masing-masing sejumlah  18  ekor;  kelompok  perlakuan,  kontrol positif,  dan  kontrol  negatif.  Marmut  diinjeksi  ke- tamin 10 mg/kgBB secara intramuskular pada paha bagian  atas  untuk  memberikan  efek  analgesik  dan sedasi  sebelum  dilakukan  pencabutan  gigi.  Gigi incisivus  kiri  rahang  bawah  digoyahkan  dengan ekskavator  kemudian  dicabut  dengan  hemostat. Kelompok perlakuan diolesi gel getah batang pisang konsentrasi  80%  sebanyak  14,3  mg  dengan ball applicator .  Kelompok  kontrol  positif  diolesi  iod gliserin sebanyak 0,1 ml dengan spuit injeksi selama 10  menit.  Kelompok  kontrol  negatif  diolesi  CMC- Na 1% sebanyak 0,1 ml dengan spuit injeksi selama 10 menit.
Marmut  didekapitasi  pada  1,  3,  5,  7,  14,  dan  24 hari  pasca  pencabutan  untuk  mendapatkan  preparat histologis.  Marmut dianestesi  inhalasi dengan dietil eter  10%  sebelum  dilakukan  dekapitasi.  Jaringan soket pasca pencabutan beserta sedikit tulang rahang disekitarnya  diambil  dan  dibersihkan dengan NaCl 0,9%  fisiologis.  Jaringan  difiksasi  dengan  larutan bufer  formalin  10% selama  24  jam  di  dalam  gelas kaca.
Jaringan  selanjutnya  diproses  iuntuk  pengecatan Mallory.  Pengamatan  serabut    kolagen  pada  10 lapang  pandang  pada  soket  pasca  pencabutan  gigi. Kriteria  kepadatan  serabut  kolagen  ditentukan  ber- dasarkan  skor  kepadatannya,  yaitu  skor  1  (sangat tipis), 2  (tipis), 3  (sedang), 4  (padat), dan 5  (sangat padat),  sebelum  melakukan  pengamatan  data  se- lanjutnya  dianalisis  menggunakan  pengukuran  data kualitatif  dengan  uji  nonparametric  (Uji  Kruskal- Wallis).

## HASIL
Hasil  pengamatan  pada  preparat  soket  gigi marmut  ( Cavia  cobaya ) 1  hari  pasca  pencabutan gigi  belum  menunjukkan  pembentukan  serabut kolagen. Kepadatan kolagen pada luka soket 3 dan 7 hari  pasca  pencabutan  gigi  dengan  perlakuan  gel getah  pisang  ( Musa  sapientum )  konsentrasi  80%
tampak  lebih  tebal  dibandingkan  kelompok  kontrol negatif  dengan  CMC-Na  1%  dan  kontrol  positif dengan iod gliserin (Gambar 1A-C dan 2A-C). Luka soket  pada  14  hari  pasca  pencabutan  gigi menunjukkan  kepadatan  kolagen  yang  sama  antara ketiga kelompok perlakuan (Gambar 3A-C).
Gambar 1.  Serabut kolagen tipis mulai terlihat dan masih banyak darah yang mengisi soket gigi pada 3 hari  pasca  pencabutan  gigi.  Serabut  kolagen pada  kelompok  perlakuan  (C)  lebih  tebal daripada  kelompok  kontrol  negatif  (A)  dan kontrol positif (B). Anak panah menunjukkan serabut kolagen
Gambar 2.  Pada  7  hari  pasca  pencabutan,  serabut kolagen  kelompok  perlakuan  mencapai  skor maksimal  dan  terlihat  lebih  tebal  dibanding kelompok  kontrol  negatif  (A)  dan  kontrol positif (B). Anak panah menunjukkan serabut kolagen
Gambar 3.  Serabut  kolagen  pada  kelompok  kontrol negatif (A), kontrol positif (B), dan perlakuan (C)  memiliki  ketebalan  yang  sama  pada  24 hari  pasca  pencabutan  gigi.  Anak  panah menunjukkan serabut kolagen
Kepadatan kolagen pada kelompok kontrol negatif meningkat  dari  1  sampai  24  hari  pasca  pencabutan gigi  (Gambar  4).  Kepadatan  serabut  kolagen  pada kelompok  kontrol  positif  dengan  iod  gliserin meningkat  dari  1  sampai  14  hari  pasca  pencabutan gigi, kemudian turun pada 24 hari pasca pencabutan gigi.  Kepadatan  serabut  kolagen  pada  kelompok perlakuan dengan gel getah pisang konsentrasi 80% meningkat  dari  1  hari  pasca  pencabutan  gigi  dan mencapai puncak pada 7 hari pasca pencabutan gigi, kemudian  turun  pada  14  dan  24  hari  pasca  pen-
A B C A B C A
B C
osteoklas. Fase awal penyembuhan soket gigi adalah aktivitas  osteoklas  mengikis  permukaan  dinding soket  lama  yang  terbuka  dan  terjadi  penyembuhan pada  permukaan  dinding  soket  yang  baru.  Hal  ini menunjukkan bahwa pada penyembuhan luka soket gigi,  fase  resorpsi  terjadi  terlebih  dahulu  sebelum fase  regenerasi.  Ligamen  periodontal  ditemukan berpindah  tempat  ke  tengah  soket  gigi  dan  tidak melekat pada dinding soket. Resorbsi dinding bukal dan alveolar  crest menyebabkan  soket  meluas  ke arah  bukal  dan alveolar  crest teresorbsi  ke  area soket gigi. 14
Thrombus akan digantikan oleh jaringan granulasi pada  5  hari  pasca  pencabutan  gigi.  Jaringan  granu- lasi tersusun atas pembuluh darah, fibroblas dan sel inflamasi  kronik.  Pembuluh  darah  kapiler  me- ningkatkan sirkulasi pada jaringan granulasi dengan menyediakan oksigen dan nutrisi untuk penyembuh- an  luka. 15 Fibroblas,  yang  akan  menghasilkan  se- rabut  kolagen,  dihasilkan  oleh  diferensiasi adventi- tial cells dan mitosis sel fibroblas yang sudah ada di ligamamen periodontal bawah pengaruh faktor per- tumbuhan yang dilepaskan oleh platelet. 12 Fibroblas yang  ada  di  ligamen  periodontal,  selain  berperan mensintesis  serabut  kolagen,  juga  merupakan  sel mesenkim yang mampu berdiferensiasi menjadi os- teoblas dan sementoblas. 16
Sintesis  serabut  kolagen  menambah  kerangka jaringan  granulasi  pada  matriks  ekstraseluler  yang masih  longgar  yang  berkembang  secara  dini  pada proses penyembuhan. Proses pembentukan jaringan ikat  pada  jaringan  granulasi  berlangsung  dalam  2 langkah,  yaitu  migrasi  dan  proliferasi  fibroblas  ke daerah luka dan deposisi sel ini pada matriks ekstra- seluler.  Rekrutmen  dan  stimulasi  fibroblas  di- kendalikan  oleh  TGF-β.  Fibroblas  memiliki  fase proliferatif  dan  fase  sintesis,  TGF-β  akan  me- rangsang reseptor yang ada pada fibroblas sehingga fibroblas  akan  berhenti  berproliferasi  dan  memulai fase  sintesis.  Jumlah  fibroblas  yang  berproliferasi akan berkurang, namun secara agresif fibroblas akan beralih ke fase sintesis sehingga terjadi peningkatan deposisi serabut kolagen. 7
Tujuh  hari  pasca  pencabutan  gigi,  jaringan  gra- nulasi  telah  digantikan  oleh  serabut  kolagen.  Pe- ngamatan  pada  preparat  7  hari  pasca  pencabutan gigi  dengan  perlakuan  gel  getah  pisang  menunjuk- kan tingkat kepadatan yang paling tinggi. Fibroblas akan berproliferasi dan bermigrasi ke area luka dan menghasilkan  serabut  kolagen  dan  filamen  pro- teoglikan. 14 Berkas  serabut  kolagen  terbentang panjang  di  dalam  interstistium.  Berkas  ini  sangat kuat  dan  paling  banyak  memberikan  daya  tegang pada  jaringan.  Filamen  proteoglikan  merupakan molekul sangat tipis yang terjalin tertekuk, bertindak
sebagai pengisi di antara serabut kolagen, dan terdiri dari sekitar 98%  asam  hialuronat dan 2% protein. 16 Serabut  kolagen  akan  semakin  meningkat  ke- padatannya  kemudian  berangsur-angsur  terjadi  de- posisi  tulang  yang  dimulai  dari  ujung  dan  perifer soket gigi. 9 Kolagen memiliki peranan penting pada penyembuhan  luka  soket  gigi.  Kolagen  merupakan struktur  utama  jaringan  ikat  dan  berfungsi  sebagai scaffold untuk regenerasi jaringan. 14 Fibroblas yang berasal dari adventitial cells dan sisa ligamen perio- dontal akan menghasilkan serabut kolagen tipe I dan III. Serabut kolagen tipe I dan III merupakan serabut kolagen yang paling dominan pada jaringan tulang. Serabut  kolagen  tipe  I  memberikan  kekuatan  me- kanis dan serabut kolagen tipe III memberikan flek- sibilitas jaringan. 17
Trabekula tulang bergelombang ( woven bone tra- becula ) terbentuk di perifer soket pada 14 hari pasca pencabutan  gigi.  Sel  osteopregenitor,  preosteoblas, dan  osteoblas  mengelilingi  trabekula  tersebut.  Os- teoid  disekresikan  kemudian  termineralisasi  mem- bentuk  kalus  yang  masih  sangat  lemah.  Semua tahapan  regenerasi  tulang  berkembang  dari  dasar dan  perifer  ke  tengah  dan  puncak  soket.  Hal  ini menjadi alasan pertumbuhan tulang terlihat terjadi di bawah  dinding  soket,  bukan  pada  permukaan  yang terbuka. 11,13
Kepadatan  serabut  kolagen  pada  14  hari  pasca pencabutan  gigi  menunjukkan  terjadi  penurunan tingkat  kepadatan  serabut  kolagen.  Hal  ini  karena telah  terjadi  proses remodeling. Proses remodeling bertujuan  membentuk  jaringan  dengan  ukuran, bentuk, dan kekuatan yang optimal. 13 Matrix metal- loproteinases (MMPs)  adalah  enzim  yang  mampu mendegradasi  hampir  semua  matriks  ekstraseluler dan  membran  basalis. Matrix  metalooproteinases yang  berperan  pada  penyembuhan  luka  pasca ekstraksi  gigi  adalah  MMP-1,  MMP-8,  dan  MMP- 13. Matrix  metalloproteinase -13  adalah  enzim kolagenase yang berperan dalam remodeling serabut kolagen  pada  luka  pasca  pencabutan  gigi.  Luka tidak  akan  mencapai  tingkat  kepadatan  serabut kolagen  yang  sama  seperti  pada  jaringan  sehat  dan pada 3 bulan setelah perlukaan. Jaringan yang sehat terdiri  dari  80-90%  serabut  kolagen  tipe  I  dan  10- 20%  serabut  kolagen  tipe  III,  tetapi  pada  jaringan granulasi  jumlah  serabut  kolagen  tipe  III  adalah 30%  dan  berkurang  hingga  10%  setelah  proses remodeling . 17 Luka mukosa rongga mulut memiliki kemampuan  regenerasi  yang  berbeda  dengan  kulit. Penyembuhan luka pada mukosa rongga mulut tidak terbentuk jaringan parut. 12
Penurunan  serabut  kolagen  pada  24  hari  pasca pencabutan  gigi menunjukkan bahwa belum terjadi aktivitas inhibitor MMPs. Tissue inhibitor of metal-
loproteinase (TIMPs)  adalah  inhibitor  utama  akti- vitas  MMPs. Tissue  inhibitor  of  metalloproteinase juga  memiliki  fungsi  tersendiri  untuk  merangsang pertumbuhan  dan  proliferasi  sel,  menghambat  an- giogenesis, dan meningkatkan maupun menurunkan apoptosis. Matrix  metalloproteinases juga  dapat dihambat oleh inhibitor endogen dari plasma seperti α 2 -makroglobulin  atau self-regulated oleh mekanis- me inaktivasi proteolitik. 17
Getah  pisang  mengandung  vitamin  C  sebagai antioksidan, flavonoid sebagai antiinflamasi, dan sa- ponin  yang  memacu  sintesis  TGF-β. 9 Antioksidan seperti  vitamin  C  dapat  menghambat  ekspresi MMP-1 pada fibroblas sehingga dapat mempercepat proses  maturasi  serabut  kolagen  pada  luka. 18
Antiinflamasi  seperti  flavonoid  dapat  menurunkan proses  inflamasi  sehingga  me