http://ejournal.mandalanursa.org/index.php/JUPE/index
Vol. 5. No. 6 Desember 2020 p-ISSN: 2548-5555 e-ISSN: 2656-6745
UJI EFEKTIVITAS ANTIOKSIDANT (IC 50 ) DAN TOKSISITAS AKUT (LD 50 ) FRAKSI ETANOL DAUN NANGKA (Artocarpus Heterophyllus Lam.)
Recta Olivia Umboro 1 , Dedent Eka Bimmaharyanto S 2 ,  Ni Komang Wijiani Yanti 3
1 Fakultas Kesehatan, Universitas Bumigora
2 Fakultas Kesehatan, Universitas Qamarul Huda Badaruddin Bagu
3 Fakultas Kesehatan, Universitas Nahdlatul Ulama NTB Email: umboroolivia@gmail.com 1 , Dedenthariyanto@gmail.com 2 , wijiani16@gmail.com 3

## Abstract
Antioxidants are needed by the body to ward of free radicals from internal and external factors. The presence of free radicals is related to human helath conditions. Back to nature lifestyle and the  high  cost  of  drugs  therapy  makes  people  preferring  to  use  traditional  medicine.  Jackfruit (Artocarpus  heterophyllus  Lam)  leaves    is  contain  several  secondary  metabolites  such  a flavanoids,  alkaloids,  sapaonins,  steroids  and  tannins.  Flavanoid  have  an  antioxidant  effect.In this  study,  the  antioxidant  activity  of  ethanol  jackfruit  (Artocarpus  heterophyllus  Lam)  leaves extract  was  tested  using  1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl  (DPPH)  method  by  UV-Vis Spectrophotometry, wich Vitamin C as comparison standart. Acute toxicity test was carried out by  giving  oral  doses  of  ethanol  jackfruit  leaf  extract  to  4  groups  of  male  rats.  Group  I  as  a control  (aquadest);II(100mg/30gBW);III  (150mg/30gBW);  IV  (200mg/30gBW)  were  then observed  for  7  days.The  antioxidant  activity  test  showed  that  ethanol  jackfruit    (Artocarpus heterophyllus  Lam)    leaves  extract    had  effectiveness  as  an  antioxidant  with  an  IC 50 value  of 58.58  ppm.  The  data  were  analyzed    using  one-way  ANOVA  showing  sig  value  0.228,  which means (P>0.005), then followed by post hoc test, an average value of 0.00,probability value  is 1.000 (sig>0.005). It can be concluded that there is no significant difference between the control and    the  treatment  dose  of  100mg,  and  there  is  a  significant  difference  in  the  150mg/30gBW, 200mg/30gBW dose groups. LD 50 value dosage range in 150mg and 200mg.
Key Words: Jackfruits leaf, antioxidant, IC 50 , toxicity test, LD 50

## Abstrak
Antioksidan  diperlukan  tubuh  untuk  menangkal  radikal  bebas  baik  yang  berasal  dari  faktor internal  maupun  eksternal  tubuh,  dimana  keberadaan  radikal  bebas  didalalam  tubuh berhubungan  dengan  kondisi  kesehatan  manusia.  Gaya  hidup  back  to  nature,  dan  tingginya biaya  pengobatan  mengakibatkan  masyarakat  lebih  memilih  menggunakan  obat  tradisional. Daun  nangka  (Artocarpus  heterophyllus  Lam)  mengandung  beberapa  senyawa  metabolit sekunder  yaitu  flavonoid,  alkaloid,  saponin,  steroid,  dan  tanin.  Flavonoid  memiliki  berbagai manfaat bagi kesehatan salah satunya adalah sebagai antioksidan. Pada penelitian ini dilakukan uji  aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol  daun  nangka  (Artocarpus  heterophyllus  Lam)  dengan metode 1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl (DPPH) secara spektrofotometri UV-Visible menggunakan standar  pembanding  vitamin  C.  Uji  toksisitas  akut  dilakukan  dengan  memberikan  perlakuan dosis  secara  oral  ekstrak  daun  nangka,  kepada  4  kelompok  hewan  uji  tikus  jantan,  dimana kelompok  I  sebagai  kontrol(aquadest),II(100  mg/30gBB),  III(150  mg/30gBB),  dan  IV(200 mg/30gBB)  selanjutnya  dilakukan  pengamatan  selama  7  hari.  Hasil  uji  aktivitas  antioksidan menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  nangka  (Artocarpus  heterophyllus  Lam)  memiliki efektivitas  sebagi  antioksidant  dengan  nilai  IC 50 sebesar  58,58  ppm.  Hasil  analisis  data menggunakan  statistik  one  way  anova  diperoleh  nilai  sig  sebesar  0.228  yang  berarti  (P>0.05), lalu  dilanjutkan  dengan  post  hoc  test  diperoleh  nilai  rata-rata  sebesar  0.00  dengan  nilai probabilitas  sebesar  1.000  (sig>0.05)  sehingga  dapat  ditarik  kesimpulan  bahwa  tidak  terdapat
http://ejournal.mandalanursa.org/index.php/JUPE/index
Vol. 5. No. 6 Desember 2020 p-ISSN: 2548-5555 e-ISSN: 2656-6745
perbedaan  signifikan  antara  perlakuan  kontrol  dengan  pemberian  dosis  100mg.,  dan  terdapat perbedaan  signifikan  pada  kelompok  dosis  150mg/30gBB,  200mg/30gBB.  Pada  uji  tokdsisitas akut  menunjukkan  nilai  LD 50 ekstrak  etanol  daun  nangka  (Artocarpus  heterophyllus  lam)  pada penelitian ini berada pada rentang dosis 150mg dan 200mg.
Kata kunci : Daun nangka, antioksidan,IC 50 , uji tosisitas, LD 50

## PENDAHULUAN
Radikal  bebas  adalah  suatu  senyawa atau  molekul  yang  mengandung  satu  atau lebih  elektron  yang  tidak  berpasangan  pada orbital  luarnya.  Adanya  elektron  yang  tidak berpasangan  menyebabkan  senyawa  tersebut sangat reaktif mencari pasangan, dengan  cara menyerang    dan  mengikat  elektron  molekul yang ada disekitarnya (Winarsi, 2007). Secara alamiah,  radikal  bebas  terbentuk  melalui sistem  biologis  tubuh  dan  juga  dapat  berasal dari  lingkungan.  Penelitian  dari  Murray  dkk (2009),  menyatakan  bahwa  adanya  radikal bebas  dalam  tubuh  disebabkan  oleh  hasil samping proses oksidasi dan pembakaran sel, olahraga  yang  berlebih,  peradangan,  dan terpapar  polusi.  Faktor  eksternal  pemicu radikal  bebas  antara  lain  sinar  Ultra  Violet, polusi,  asap  rokok,  emisi  kendaraan,  maupun alkohol.Adanya radikal bebas dapat menyerang  sel-sel  sehat  dalam  tubuh.  Tubuh dapat memberikan pertahanan dengan memproduksi senyawa antioksidan.
Pertahanan  yang  tidak  optimal  menyebabkan sel-sel sehat tersebut akan terserang atau sakit jika  jumlah  radikal  bebas  lebih  banyak dibandingkan  dengan  persediaan  antioksidan dalam tubuh. Hal tersebut dapat mengakibatkan  kerusakan  oksidatif  jaringan yang sering disebut stress oksidatif.
Antioksidan merupakan senyawa yang mampu menangkal atau meredam efek negatif oksidan  dalam  tubuh  (Ramadhan,  2015). Antioksidan adalah substansi yang diperlukan tubuh  untuk  menetralisir  radikal  bebas  dan mencegah  kerusakan  akibat  radikal  bebas terhadap  sel  normal  pada  tubuh  yang  dapat menyebabkan  penyakit  degeneratif  seperti hipertensi,  jantung,  diabetes,  stroke,  dan kanker.  Faktor  pemicu  penyakit  degeneratif juga disebabkan karena pencemaran lingkungan yang dapat merangsang timbulnya radikal  bebas  dan  stress  oksidatif  sehingga
dapat  merusak  tubuh  (Hanjani,  2010). World Health Organization (WHO) memperkirakan, pada  tahun  2020  penyebab  kematian  karena penyakit degeneratif akan mencapai 73% dari seluruh penyebab kematian. Berdasarkan data WHO tahun.
2011, kematian akibat penyakit degeneratif di negara-negara berkembang menyumbang sekitar 60% dari seluruh penyebab kematian.Tubuh dapat memberikan pertahanan  dengan  memproduksi  senyawa antioksidan.  Pertahanan  yang  tidak  optimal menyebabkan  sel-sel  sehat  tersebut  akan terserang atau sakit jika jumlah radikal bebas lebih banyak dibandingkan dengan persediaan antioksidan  dalam  tubuh.  Hal  tersebut  dapat mengakibatkan  kerusakan  oksidatif  jaringan yang  sering  disebut  stress  oksidatif  (Winarsi, 2007).  Selain  dari  dalam  tubuh  sumber antiosidan  dapat  diperoleh  dari    asupan makanan  yang  mengandung  flavonoid.  Salah satu sumber potensial antioksidan alami salah satunya berasal dari tumbuhan.
Tingginya  biaya  pengobatan  dan perubahan gaya hidup menyebabkan masyarakat lebih  memilih  menggunakan  obat yang  berasal  dari  bahan  alam.  Masyarakat pedesaan  cendrung  memilih  obat  tradisional untuk  menyembuhkan  luka.  Hal  ini  didasari dengan  alasan  kandungan  obat  yang  berasal dari  tanaman  atau  herbal  jauh  lebih  aman digunakan,  mudah  didapat  dan  secara ekonomi  lebih  terjangkau  (Ismail,  2009). Senyawa-senyawa antioksidan alami biasanya terdapat  dalam  daun,  bunga,  buah  dan  sayur bagian-bagian dari tanaman. Nangka merupakan salah satu tanaman yang memiliki khasiat  sebagai  obat,  Berdasarkan  skrining fitokimia,  bagian  daun  nangka  ( Artocarpus Heterophyllus Lam .) dapat digunakan sebagai atioksidan alami karena mengandung metabolit  sekunder.  yaitu  flavonoid,  alkaloid,
http://ejournal.mandalanursa.org/index.php/JUPE/index
Vol. 5. No. 6 Desember 2020 p-ISSN: 2548-5555 e-ISSN: 2656-6745
saponin,  steroid,  dan  tanin.  (Marianne  dkk, 2011).  Flavonoid  dikenal  memiliki  fungsi sebagai  antioksidan,  antiinflamasi,  antifungi, antiviral, antikanker dan antibakteri.
Pada  dasarnya,  semua  zat,  bahan  dan sediaan kimia baru yang akan digunakan pada manusia,  hewan  dan  lingkungannya  perlu dilakukan pengujian baik dari segi keamanannya,  dan  kemampaunnya  sebagai senyawa obat. Penggunaan ekstrak dari bahan tanaman sebagai obat sudah lazim dimasyarakat.  Penggunaan  daun  nangka sebagai  obat  tradisional  sudah  sangat  lazim dimasyarakat.  Namun  saja  kemampuannya sebagai  antioksidan  masih  belum  banyak digunakan. Daun nangka ( Artocarpus Heterophyllus Lam .) yang memiliki kandungan senyawa flavonoid, dimana flavonoid  memiliki  khasiat  sebagai  anti oksidant yang mampu mengikat radikal bebas didalam  tubuh.  Sehingga  dengan  adanya antioksidan dapat mencegah terjadinya penyakit  degeneratif  seperti  stroke,  diabetes, hipertensi, dll. Agar penggunaan daun nangka ( Artocarpus  Heterophyllus  Lam .)    sesuai dengan  khasiatnya  maka  untuk  itu  perlu dilakukan  pengujian  terhadap  kemampuan ekstrak  dari  daun  nangka  ( Artocarpus Heterophyllus Lam .) sebagai senyawa antioksidan.  Selain  itu  untuk  mengukur tingkat  keamanan  ekstrak  tersebut  sebelum digunakan  sebagai  bahan  berkhasiat  perlu dilakukan  uji  toksisitas  (DiPasquale  LC, Hayes AW ,2001), untuk melihat kemampuan ekstrak  untuk  menimbulkan  kerusakan  pada organisme  hidup.  Salah  satu  uji  toksisitas yang  dapat  dijadikan  parameter  adalah  uji toksisitas  akut.  Untuk  melihat  efek  yang timbul segera setelah pemberian dosis tunggal dari  suatu  zat  atau  pemberian  dosis  berulang dalam  waktu  24  jam  secara  oral  dengan parameter uji Letal Dose (LD 50 ).

## KAJIAN PUSTAKA Antioksidan
Antioksidan merupakan senyawa yang mampu menangkal atau meredam efek negatif oksidan  dalam  tubuh  (Ramadhan,  2015). Substansi  yang  diperlukan  tubuh  untuk menetralisir  radikal  bebas  dan  mencegah
kerusakan  akibat  radikal  bebas  terhadap  sel normal  pada  tubuh  yang  dapat  menyebabkan penyakit degeneratif. Beberapa jenis penyakit degeneratif  diantaranya  yaitu  hipertensi, jantung,  diabetes,  stroke,  dan  kanker. World Health Organization (WHO) memperkirakan, pada  tahun  2020  penyebab  kematian  karena penyakit degeneratif akan mencapai 73% dari seluruh penyebab kematian. Penyakit degeneratif juga disebabkan karena pencemaran lingkungan yang dapat merangsang  timbulnya  radikal  bebas  dan stress  oksidatif  sehingga  dapat  merusak tubuh.  Radikal  bebas  merupakan  suatu senyawa atau molekul yang mengandung satu atau lebih elektron tidak berpasangan, adanya radikal  bebas  dapat  menyerang  sel-sel  sehat dalam tubuh.
Sistem  antioksidan  yang  terdiri  dari  3 golongan yaitu : (Parwata, 2015 )
1. Antioksidan Primer yaitu antioksidan  yang berfungsi  mencegah  pembentukan  radikal bebas  selanjutnya  (propagasi),  antioksidan tersebut adalah transferin, feritin, albumin.
2. Antioksidan  Sekunder  yaitu  antioksidan yang  berfungsi  menangkap  radikal  bebas dan  menghentikan  pembentukan  radikal bebas, antioksidan tersebut adalah Superoxide  Dismutase  (SOD),  Glutathion Peroxidase (GPx) dan katalase.
3. Antioksidan  Tersier  atau  repair  enzyme yaitu antioksidan yang berfungsi memperbaiki  jaringan  tubuh  yang  rusak oleh  radikal  bebas,  antioksidan  tersebut adalah  Metionin  sulfosida  reduktase, Metionin  sulfosida  reduktase,  DNA  repair enzymes, protease, transferasedan lipase. Antioksidan  memiliki  dua  fungsi,  yaitu sebagai  pemberi  atom  hidrogen.  Antioksidan (AH)  yang mempunyai fungsi utama tersebut sering  disebut  sebagai  antioksidan  primer. Senyawa ini dapat memberikan atom hidrogen  secara  cepat  ke  radikal  lipida  (R  ⃰, ROO⃰ ) atau mengubahnya ke bentuk lebih stabil, sementara  turunan  radikal  antioksidan  (A⃰  ) tersebut memiliki keadaan lebih stabil dibanding radikal lipida. Fungsi kedua merupakan fungsi sekunder  antioksidan,  yaitu  memperlambat laju. autooksidasi dengan berbagai mekanisme  diluar  mekanisme  pemutusan
http://ejournal.mandalanursa.org/index.php/JUPE/index
Vol. 5. No. 6 Desember 2020 p-ISSN: 2548-5555 e-ISSN: 2656-6745
rantai autooksidasi dengan pengubahan radikal  lipida  ke  bentuk  lebih  stabil  (Gordon, 1990 ).
Vitamin c atau L-asam askorbat merupakan  antioksidan  yang  larut  dalam  air (aqueous  antioxidant).  Sebagai  antioksidan, vitamin  c  bekeja  sebagai  donor  elektron, dengan  cara  memindahkan  satu  elektron  ke senyawa  logam  Cu.  Antioksidan  vitamin  c mampu  bereaksi  dengan  radikal  bebas, kemudian  mengubahnya  menjadi  radikal askorbil.
Nangka Pohon Artocarpus heterophyllus  Lam,  atau yang lebih dikenal dengan nama nangka dapat digunakan  sebagai  antioksidan  alami  karena mengandung metabolit sekunder. Hasil skrining  fitokimia  ekstrak  daun  nangka terdapat  beberapa  senyawa  yaitu  flavonoid, alkaloid, saponin, steroid, dan tanin. Flavonoid  dikenal  memiliki  fungsi  sebagai antioksidan, antiinflamasi, antifungi, antiviral, antikanker  dan  antibakteri  (Marianne  dkk, 2011).

## Simplisia
Simplisia  secara  umum  merupakan produk hasil pertanian tumbuhan obat setelah melalui  proses  pasca  panen  dan  proses preparasi  secara  sederhana  menjadi  bentuk produk  kefarmasian  yang  siap  dipakai  atau siap  diproses  untuk  dijadikan  produk  sediaan farmasi  yang  umumnya  melalui  proses ekstraksi,  separasi  dan  pemurnian,  yaitu menjadi  ekstrak,  fraksi  atau  bahan  isolat senyawa murni.Simplisia nabati adalah simplisia yang berupa tumbuhan utuh, bagian tumbuhan  atau  eksudat  tumbuhan.  Eksudat tumbuhan  adalah  isi  sel  yang  secara  spontan keluar dari tumbuhan atau isi sel yang dengan cara  tertentu  dikeluarkan  dari  selnya  dan belum berupa senyawa kimia murni (Anonim,2000).

## Ekstrak
Ekstrak  adalah  sediaan  pekat  yang diperoleh dengan mengekstraksi zat aktif dari simplisia  nabati  atau  hewani  menggunakan pelarut  yang  sesuai,  kemudian  semua  atau hampir  semua  pelarut  diuapkan,  dan  massa serbuk  yang  tersisa  diperlakukan  sedemikian rupa  hingga  memenuhi  baku  yang  telah
ditetapkan  (Departemen  Kesehatan  Republik Indonesia,
1995). Berdasarkan
konsistensinya,  ekstrak  dapat  dibagi  menjadi 3  bentuk,  yaitu  Ekstrak  cair  ( Extracta  Fluida /Liquida ),  ekstrak  kental  ( Extracta  spissa ), ekstrak  kering  ( Extracta  sicca ).  Ekstrak  cair biasanya masih mengandung sejumlah pelarut tertentu  (kadar  air  >  20%,  ekstrak  kental, merupakan  ekstrak  yang  pelarutnya  telah diuapkan sampai batas tertentu (kadar air 10- 20%).
Etanol dapat melarutkan alkaloid basa, minyak menguap, kurkumin, kumarin, antrakinon, flavonoid, steroid, klorofil, lemak, malam,  tanin,  dan  saponin.  Etanol  digunakan sebagai  penyari  karena  lebih  selektif,  kapang dan kuman sulit tumbuh dalam etanol 20% ke atas,  tidak  beracun,  netral,  absorbsinya  baik, dan  mudah  bercampur  dengan  air.  Untuk meningkatkan  penyarian  biasanya  digunakan campuran antara etanol dan air.
DPPH (1,1-Diphenyl-2-Picrylhydrazyl)
Gambar  1. Rumus  Struktur  1,1-Diphenyl-2- Picryl Hidrazyl, Prakash, 2001 Radikal DPPH (1,1 difenil-2- Picrylhydrazyl) adalah suatu senyawa organik yang  mengandung  nitrogen  tidak  stabil dengan  absorbansi  kuat  pada  λmax  517  nm dan  berwarna  ungu  gelap.  Setelah  bereaksi dengan  senyawa  antioksidan,  DPPH  akan tereduksi dan warnanya akan berubah menjadi kuning.  Perubahan  tersebut  dapat  diukur dengan spektrofotometer dan diplotkan terhadap  konsentrasi.  Penurunan  intensitas warna yang terjadi disebabkan oleh berkurangnya  ikatan  rangkap  terkonjugasi pada  DPPH.  Hal  ini  dapat  terjadi  apabila adanya  penangkapan  satu  elektron  tersebut untuk beresonansi (Pratimasari, 2009).
Spektrofotometri
Spektrofotometer UV-Vis adalah analisis  spektroskopik  yang  memakai  sumber radiasi elektromagnetik ultraviolet dekat (190- 380  nm)  dan  sinar  tampak  (380-780  nm)
http://ejournal.mandalanursa.org/index.php/JUPE/index
Vol. 5. No. 6 Desember 2020 p-ISSN: 2548-5555 e-ISSN: 2656-6745
dengan  memakai  instrument  spektrofotometer UV-Vis  melibatkan  energi  elektronik  yang cukup  besar  pada  molekul  yang  dianalisis sehingga  spektrofotometer  UV-Vis  lebih banyak  dipakai  untuk  analisis  kuantitatif dibanding kualitatif (Syifa, 2010).
Sinar  tampak  (Visible)  adalah  sinar polikromatis yang
dengan bantuan monokromator misalnya prisma dapat diuraikan menjadi beberapa sinar
monokromatis dengan berbagai panjang gelombang.  Analisa  spektrofotometri  UV- Visible  biasanya  dilakukan  pada  panjang gelombang absorpsi maksimum (λ maks) yang didefinisikan  sebagai  jarak  antara  dua  puncak dari suatu gelombang. Dimana sinar ultraviolet berada pada panjang gelombang 200 – 400 nm sedangkan sinar tampak pada panjang gelombang 400 – 800 nm(Syifa,2010).

## Toksisitas
Tingkat  keamanan  suatu  obat  dapat diteliti  dengan  menentukan  toksisitasnya. Toksisitas suatu zat adalah kemampuan suatu zat  untuk  menimbulkan  kerusakan  pada organisme  hidup.  Pada  dasarnya,  semua  zat, bahan  dan  sediaan  kimia  baru  yang  akan digunakan pada manusia, hewan dan lingkungannya  perlu  diuji  keamanannya,  bila ada  kemungkinan  berbahaya  untuk  kesehatan ( DiPasquale LC, Hayes AW , 2001).
Salah  satu  uji  toksisitas  yang  dapat dilakukan adalah uji toksisitas akut. Toksisitas  akut  adalah  efek-efek  merugikan yang  timbul  segera  setelah  pemberian  dosis tunggal  dari  suatu  zat  atau  pemberian  dosis berulang  dalam  waktu  24  jam.  Ada  beberapa macam  cara  pemberian  untuk  pengujian toksisitas  akut,  yaitu  secara  oral,  parenteral, inhalasi,  kulit  dan  mata.  Suatu  indeks  untuk mendefinisikan toksisitas akut dikenal dengan istilah  Dosis  Letal  50  (LD 50 ).  Uji  toksisitas akut  dirancang  untuk  menentukan  atau menunjukan  secara  kasar  median  lethal  dose (LD50)  dari  toksikan.  LD50  ditetapkan sebagai  tanda  statistik  pada  pemberian  suatu bahan  sebagai  dosis  tunggal  yang  dapat menyebabkan  kematian  50%  hewan  uji (Priyanto, 2010).
Secara  umum,  semakin  kecil  nilai LD50,  semakin  toksik  senyawa  tersebut.
Begitu  pula  sebaliknya,  semakin  besar  nilai LD50,  semakin  rendah  toksisitasnya.  Hasil yang  diperoleh  (dalam  mg/KgBB)  dapat digolongkan menurut potensi ketoksikan akut senyawa  uji  menjadi  beberapa  kelas,  seperti yang terlihat pada tabel berikut (Priyanto,2010).

## METODE PENELITIAN Rancangan Penelitian
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental  laboratorium  yang  menguji kemampuan  antioksidan  ekstrak  etanol  daun nangka  ( Artocarpus  Heterophyllus  Lam) dengan  menggunakan  metode1,1-diphenyl-2- picrylhidrazyl  (DPPH),  menggunakan  alat spektrofotometer  UV-Vis.  Kemudian  ekstrak etanol  diuji  tosisitas  rancangan  acak  lengkap (RAL) yang terdiri dari 4 kelompok hewan uji.
Populasi  dalam  penelitian  ini  adalah kelompok  hewan  uji  yang  terdiri  dari  1 kelompok  kontrol  (aquadest)  dan  3  kelompok perlakuan dosis ekstak daun nangka ( Artocarpus Heterophyllus Lam) (100mg/gBB;150mg/gBB;200mg/gBB). Sampel  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah daun nangka (Artocarpus Heterophyllus  Lam )  yang  diambil  dari Kecamatan  Gunungsari  Kabupaten  Lombok Barat.
Alat dan Bahan 1. Alat
Alat-alat  yang  digunakan  pada  penelitian ini adalah timbangan analitik, vacum rotary evaporator, oven, kertas perkamen, timbangan hewan, gunting, aluminium foil, selang sonde, spuit, beacker glass, kandang hewan,  ,  batang  pengaduk,  pipet  tetes, tabung reaksi, spektrofotometer UV-Vis.
2. Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan  adalah  daun nangka, aqua destillata, mg stearat, aerosil, talk, cangkang kapsul, mencit, etanol 96%, DPPH  (1,1-  diphenyl-2-picrylhidrazyl), methanol p.a, larutan standar Vitamin C.
Prosedur Penelitian
Determinasi Tanaman Determinasi simplisia
dilakukan di Laboratorium  Biologi  Universitas  Mataram,
bertujuan untuk mengetahui spesifikasi
http://ejournal.mandalanursa.org/index.php/JUPE/index
Vol. 5. No. 6 Desember 2020 p-ISSN: 2548-5555 e-ISSN: 2656-6745
tanaman yang akan digunakan sebagai sampel dalam penelitian.
Pembuatan Simplisia Simplisia
dibuat dengan melakukan pemanenan  daun  nangka  yang  usianya  tidak terlalu tua dan  tidak terlalu muda, selanjutnya dilakukan pencucian dengan menggunakan air mengalir  sebanyak  3  kali.  Setelah  pencucian proses  perajangan  atau  perubahan  ukuran. Tahap selanjutnya adalah pengeringan, metode pengeringan  dilakukan  dengan  menjemur simplisia  di  bawah  sinar  matahari  dengan ditutupi kain hitam untuk mencegah sinar UV secara  langsung  sampai  tingkat  kerapuhan yang sesuai (Rauhul dkk, 2017).
Pembuatan Ekstrak
Sampel  daun  nangka  ( Artocarpus Heterophyllus  Lam ) yang  telah  kering ditimbang  sebanyak  500  gr  dan  di  ekstraksi secara  maserasi  dengan  menggunakan  pelarut etanol  96%  hingga  semua  sampel  terendam. Rendam  selama  6  jam  pertama  sambil  sekali- kali diaduk, kemudian diamkan selama 18 jam pada temperatur ruangan (kamar). Selanjutnya disaring,  dipisahkan  antara  ampas  dan  filtrat. Ekstrak  hasil  maserasi  dipekatkan  dengan rotary  vacum  evaporator  kemudian  ekstrak dikentalkan dengan waterbath sampai diperoleh  ekstrak  yang  kental  (Rauhul  dkk, 2017).
Penetapan IC 50

## Pembuatan larutan DPPH
Larutan DPPH 0,1 mM dibuat dengan cara  menimbang  DPPH  (1,1-  difenil-2- picrylhidrazil)  sebanyak  3,9  mg  kemudian dilarutkan dalam 100 ml methanol p.a dengan menggunakan  labu  ukur.  Larutan  dijaga pada suhu  kamar,  terlindung  dari  cahaya  untuk segera digunakan.
Penetapan  panjang  gelombang  maksimum DPPH
Sebanyak  2  ml  larutan  DPPH  0,1  Mm dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur  10  ml  dan dicukupkan volumenya dengan methanol p.a. Larutan  ini  kemudian  dipindahkan  dalam wadah gelas coklat dan didiamkan selama 30 menit pada suhu ruang dan amati absorbansinya pada panjang gelombang  400- 800  nm  menggunakan  spektrofotometri  UV- visibel. Diperoleh panjang gelombang
maksimum DPPH yaitu 517 nm. Pengukuran aktivitas antioksidan
5 mg ekstrak etanol dilarutkan dengan 50  ml  methanol  p.a,  campur  dan  rendam selama  24  jam,  Saring  dengan  kertas  saring. Selanjutnya  dibuat  larutan  konsentrasi  50 ppm,  100  ppm,  150  ppm,  200  ppm  dan  250 ppm. Pengujian dilakukan dengan memipet 1 ml  larutan  sampel  dari  berbagai  konsentrasi (50  ppm,100    ppm,    150    ppm,    200    ppm, 250    ppm).    Kemudian    masing-masing ditambahkan  2  ml  larutan  DPPH  0,1  mM. Campur,  Kemudian  diinkubasi  selama  30 menit  pada  suhu  ruang  pada  ruangan  gelap. Diukur absobansinya pada panjang gelombang 517 nm.

## Pembuatan standar pembanding
Timbang  vitamin  C  sebanyak  5  mg  , kemudian  dilarutkan  dengan  50  ml  methanol p.a,  campur  dan  rendam  selama  24  jam, saring  dengan  kertas  saring.  Selanjutnya dibuat  larutan  konsentrasi  20  ppm,  40  ppm, 60  ppm,  80  ppm  dan  100  ppm  .  Pengujian dilakukan  dengan  memipet  1  ml  larutan vitamin c dari berbagai konsentrasi (20 ppm, 40  ppm,  60  ppm,  80  ppm,  100  ppm). Kemudian  masing-masing  ditambahkan  2  ml larutan DPPH 0,1 mM. Kemudian diinkubasi selama  30  menit  pada  suhu  ruang  pada ruangan  gelap.  Diukur  absorbansinya  pada panjang  gelombang  517  nm(  Zuhra  dkk, 2008).

## Uji Toksisitas Akut Persiapan hewan uji
Hewan yang digunakan adalah mencit putih  jantan  umur  2-3  bulan  dengan  berat antara  20-30  gram  sebanyak  20  ekor  (4 kelompok).  Mencit  diaklimatisasi  selama  7 hari  dengan  diberi  makan  dan  minum  yang cukup  yang  bertujuan  untuk  mengadaptasi hewan uji.

## Persiapan dosis uji
Dosis  ekstrak  daun  nangka  yang diberikan  pada  mencit  putih  jantan  adalah 100  mg/KgBB,  150  mg/KgBB,  dan  200 mg/KgBB yang diberikan secara oral.

## Tahap Pengujian
Mencit  dibagi  kedalam  4  kelompok uji,  yang  masing-masing  kelompok  terdiri dari  5  ekor  mencit.Kelompok    1  sebagai
http://ejournal.mandalanursa.org/index.php/JUPE/index
Vol. 5. No. 6 Desember 2020 p-ISSN: 2548-5555 e-ISSN: 2656-6745
kontrol dengan perlakuan pemberian aquadest secara  oral,  kelompok  2  diberi perlakuan ekstrak
dengan dosis 100mg/30gBB,  kelompok  3  diberi  perlakuan dengan dosis ekstrak 150mg/30gBB, kelompok  4  diberi  perlakuan  dosis  ekstrak sebesar 200mg/30gBB.
Penentuan  Nilai  LD 50 dan  Pengamatan Gejala Toksik
Nilai LD 50 ditentukan dengan menghitung  jumlah  kematian  hewan  uji selama  24  jam  yang  disebabkan  oleh pemberian tunggal sediaan uji pada kelompok mencit dengan dosis 100 mg/30gBB, 150 mg/30gBB,  dan 200 mg/30gBB.  Pengamatan  gejala  toksisitas dilakukan  3  jam  setelah  pemberian  ekstrak dengan  melihat  gejala  konvulsi  (kejang), tremor  (gemetar),  letargi  (kelesuan),  diare dan mati.

## Analisis Data
Data yang diperoleh dari penelitian ini dianalisis  menggunakan one  way ANOVA ( Analysis Of Variance).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Determinasi  bagian  tanaman  berupa daun  nangka  dilakukan  di  Laboratorium Biologi  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Mataram pada tanggal  26  agustus  2019.  Hasil  determinasi didapatkan  bahwa  sampel  tanaman  yang digunakan dalam penelitian adalah benar daun nangka ( Artocarpus Heterophyllus Lam ).
Daun nangka ( Artocarpus
Heterophyllus Lam )diperoleh dari Kecamatan Gunungsari  Kabupaten  Lombok  Barat  NTB. Pemilihan daun berdasarkan kesegaran, berwarna  hijau,  tidak  terlalu  tua  dan  tidak terlalu muda, Pemanenan dilakukan pada saat siang  hari  untuk  menjaga  kualitas  dari  zat aktif. Selanjutnya dilakukan pencucian, perajangan,  pengeringan,  perubahan  ukuran partikel dengan cara di blender dan penyarian menggunakan metode maserasi dengan pelarut  etanol.  Pemilihan  pelarut  didasari pada  sifat  kepolaran  senyawa  flavonoid dimana mengacu pada princip “like dissolved like”.

## Hasil Pengukuran Antioksidant
Uji  aktivitas  antioksidan  dilakukan untuk  mengetahui  apakah  daun  nangka (artocarpus heterophyllus lam) terbukti memiliki aktivitas pengikatan terhadap radikal bebas. Tanaman yang digunakan pada penelitian ini adalah daun nangka. Antioksidan  sendiri  merupakan  senyawa yang mampu menangkal efek negatif oksidan dalam  tubuh.  Antioksidan  menstabilkan radikal bebas dengan melengkapi kekurangan elektron  yang  dimilki  radikal  bebas,  dan menghambat  terjadinya  reaksi  pembentukan radikal  bebas  yang  dapat  menimbulkan  stres oksidatif (Holistic Health Solution, 2011).
Pengukuran aktivitas antioksidan dilakukan
dengan menggunakan
spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang 517 nm yang merupakan panjang gelombang maksimum untuk DPPH.
Senyawa  DPPH  merupakan  sebuah  molekul yang  mengandung  senyawa  radikal  bebas nitrogen  yang  tidak  stabil  yang  dapat mengikat  ion  hidrogen  sehingga  digunakan untuk pengujian aktivitas antioksidan. Adanya  senyawa  antioksidan  dari  sampel mengakibatkan perubahan warna pada larutan DPPH  dalam  etanol  yang  semula  berwarna ungu pekat menjadi kuning pucat. Perubahan warna  ini  terjadi  karena  DPPH  mengalami reduksi  sehingga  menyebabkan  elektron menjadi  berpasangan.  Dalam  penelitian  ini vitamin  C  digunakan  sebagai  pembanding karna  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang baik (Pratimasari, 2009).
Uji  aktivitas  antioksidan  menggunakan metode  DPPH  terhadap  ekstrak  etanol  daun nangka  diperoleh  IC 50 sebesar  58,58  ppm sedangkan  vitamin  C  diperoleh  IC 50 sebesar 41,39  ppm.  Hal  ini  berarti  aktivitas antioksidan  dari  daun  nangka  lebih  rendah dibandingkan  dengan  aktivitas  antioksidan vitamin  C.  Hal  ini  kemungkinan  disebabkan oleh  lama  waktu  maserasi.  Semakin  lama waktu maserasi, semakin kecil nilai IC 50 yang diperoleh  artinya  semakin  besar  aktivitas antioksidannya  (Ramadhan,2015).  Berikut hasil perhitungan IC 50 dapat dilihat pada
http://ejournal.mandalanursa.org/index.php/JUPE/index
Vol. 5. No. 6 Desember 2020 p-ISSN: 2548-5555 e-ISSN: 2656-6745
Tabel 1.
Tabel 1 . Hasil perhitungan IC50 dari ekstrak etanol daun nangka dan vitamin C

## Uji Toksisitas
Uji  toksisitas  perlu  dilakukan  untuk mengetahui  tingkat  keamanan  dari  ekstrak daun  nangka  sebagai  antioksidan.  Uji  ini dilakukan  dengan  melihat  parameter  LD 50, dimana  menggunakan  perlakuan  hewan  ujie mencit  jantan  yang  sebelumnya  telah diaklimatisasi  selama  1  minggu yang bertujuan  untuk  mengkondisikan  hewan dengan  suasana  laboratorium  dan  untuk menghilangkan  stres  akibat  transportasi. Kemudian  hewan  uji  dibagi  menjadi  4 kelompok,  yang  masing-masing  kelompok terdiri  dari  5  ekor  mencit,  dari  hasil  uji pendahuluan,  ditentukan  rentang  dosis  yang digunakan  untuk  uji  toksisitas  sebagai berikut, kelompok 1 (kontrol) diberi aquadest dan kelompok perlakuan dosis I (100mg/30gBB mencit), dosis II (150mg/30gBB mencit), dosis III (200mg/30gBB  mencit).  Pemberian  ekstrak dilakukan  secara  oral  menggunakan  sonde, pengamatan  gejala  toksik  dilakukan  dengan melihat  parameter  gejala  konvulsi  (kejang), tremor  (gemetar),  letargi  (kelesuan),  diare dan  mati.  Pengamatan  dilakukan  selama  7 hari, 3 jam setelah pemberian perlakuan dosis ekstrak.
Kematian  mencit  dimulai  dari  dosis tertinggi  yaitu  200mg/30gBB  atau  kelompok IV pada hari pertama, kemudian pada hari ke dua  dan  tiga  tidak  ada  terjadinya  kematian pada  hewan  uji.  Pada  hari  ke  4  pengujian terdapat  1  hewan  uji  yang  mati  pada kelompok  IV  namun,  kematian  hewan  uji tersebut  tidak  disebabkan  oleh  pengaruh pemberian  ekstrak  melainkan  gigitan  dari mencit  lainnya.  Kemudian  pada  hari  ke  5 terdapat 1 mencit  yg mati pada kelompok  III
dan 1 pada kelompok IV. Pada hari ke enam terdapat  4  hewan  uji  yang  mati,  yaitu  pada kelompok  perlakuan  150mg/30gBB  atau kelompok III terdapat 3 hewan uji yang  mati dan  kelompok  perlakuan  200mg/30gBB  atau kelompok IV terdapat 1 hewan uji yang mati. Pada  hari  ke  7  tidak  ada  1  pun  hewan  uji yang  mati,  hasil  pengamatan  dapat  dilihat pada ( Tabel 2.) Tabel 2. Hasil Uji Toksisitas

## Hasil Analisis Data
Hasil  dari  penelitian  ini  dianalisis menggunakan  analisa  varian  one  way ANOVA  dengan  menggunakan  program SPSS.  Pertama  dengan  menguji  kesamaan varian  (uji  homogenitas),  berdasarkan  output SPSS  pada  tabel  diatas  diperoleh levene statistic
sebesar
8.711 dengan signifikansi/probabilitas  sebesar  .000,  karena nilai  uji  homogenitas  diatas  signifikansi  .000 sehingga  (P<0.05)  sehingga  homogenitas tidak  terpenuhi  maka  dilanjutkan  dengan anova.  Dalam  penelitian  ini,  diketahui  nilai sig  sebesar  0.228  yang  berarti  (P>0.05) sehingga  dapat  disimpulkan  bahwa  tidak ada perbedaan  signifikan  antara  masing-masing perlakuan.  Lalu  dilanjutkan  dengan post  hoc test. Diperoleh interpretasi baris perbandingan  perlakuan  kontrol  positif  dan pemberian  dosis  100mg  memiliki  perbedaan nilai  rata-rata  sebesar  0.00  dengan  nilai probabilitas sebesar 1.000 (sig>0.05) sehingga  dapat  ditarik  kesimpulan  bahwa tidak  terdapat  perbedaan  signifikan  antara perlakuan  kontrol  dengan  pemberian  dosis 100mg. Selanjutnya dilakukan uji homogeneous  subsets,  uji  ini  sebenarnya rangkuman  dari  tabel post  hoc  test untuk melihat  kesamaan  rata-rata  menggunakan output  Tukey  HSD .  Pada  subset  antara kelompok    kontrol    dan    perlakuan    100mg menunjukkan    tidak    ada    perbedaan. signifikan. Namun, jika dibandingkan dengan
No Kode Sampel
Kons.Sampel (µg/m) Abs % Inhibisi Persamaan ( Y = bx+a)
ES 50 (µg/ml) 1 Ekstrak Daun Nangka 50,0 0,515 49,66 2 100,0 0,465 54,55 Y= 0.1196x + 42.994 3 150,0 0,414 59,53 R 2 = 0.988
58,58
4 200,0 0,325 68,23 5 250,0 0,279 72,73 1 Vit C 20,0 0,602 41,15
2 40,0 0,524 48,78 Y= 0.4537x + 31.219 3 60,0 0,425 58,46 R 2 = 0.9877
41,39
4 80,0 0,350 65,79 5 100,0 0,225 78,01 Jumlah mencit Dosis (mg/30gBB mencit) Jumlah kematian/hari Rata-rata kematian No Kelompok
1 2 3 4 5 6 7 1 Kontrol 5 ekor Aquadest - - - - - - - 2 II 5 ekor 100mg/30g BB mencit - - - - - - - 3 III 5 ekor 50mg/30g BB mencit - - - - 1 3 - 4 ekor 4 IV 5 ekor 200mg/30g BB mencit 1 - - - 1 1 - 3 ekor
http://ejournal.mandalanursa.org/index.php/JUPE/index
Vol. 5. No. 6 Desember 2020 p-ISSN: 2548-5555 e-ISSN: 2656-6745
kelompok  perlakuan  100mg,  150mg  dan
200mg mempunyai perbedaan yang signifikan.  Berdasarkan  hasil  analisis  data menggunakan One  Way  ANOVA maka diperoleh  nilai  nilai  LD50  ekstrak  etanol daun  nangka  ( Artocarpus  heterophyllus  lam ) pada rentang dosis 150mg dan 200mg.

## KESIMPULAN
Dari  penelitian  uji  laboratorium  yang  telah dilakukan  terhadap  ekstrak  daun  nangka ( artocarpus  heterophyllus  lam )  maka  dapat disimpulkan bahwa:
1. Ekstrak  etanol  daun  nangka  ( artocarpus heterophyllus  lam )  memiliki  aktifitas sebagai  antioksidan,  ini  ditunjukkan dengan nilai IC 50 sebesar 58,58 ppm.
2. Ekstrak  etanol  daun  nangka  ( artocarpus heterophyllus  lam )  dapat  digunakan sebagai alternatif antioksidan alami.
3. Berdasarkan  dari  tingkatan  toksisitas harga/nilai  LD 50 yang  diujikan  pada mencit  jantan,  ekstrak  etanol    daun nangka  ( artocarpus  heterophyllus  lam ) dalam  penelitian  ini  termasuk  dalam kategori toksik dengan range dosis sekitar 150mg/30gBB -200mg/30gBB.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim,  2000, Parameter  Standar  Umum Ekstrak  Tumbuhan  Obat ,1,3,    Direktorat
Jendral  Pengawasan  Obat  Dan  Makanan Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta. Asmaliani,  ira.,  Lwo,  Maria  Immaculata. 2016. Uji  Aktivitas  Antiinflamasi  Dari Ekstrak Metanol Daun Nangka (Artocarpus Heterophyllus Lam) Terhadap Tikus yang Diinduksi Karagenan  Lambda .,.  Fakultas  farmasi
UMI Makasar dan ITB.
Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia.
(1995 ). Farmakope Indonesia  edisi  IV . Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia.
(2000 ). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat . Jakarta: Departemen Kesehatan Republik
Indonesia.
DiPasquale  LC,  Hayes  AW.  2001. Acute Toxicity  and  Eye Irritancy in  Principles and  Methods  of  Toxicology .4th  Ed. Philadelphia:Taylor and Francis Donatus,  I.A.  2005. Toksikologi  Dasar , Laboatorium Farmakologi dan Toksikologi,  Fakultas  Farmasi,  UGM, Yogyakarta Dyta,  P.S.,  2011, Uji  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Nangka (artocarpus heterophyllus) terhadap Bakteri  Staphyllococcus  aureus  dan Pseudomonas aeruginosa , Skripsi, Universitas Sebelas Maret, Surakarta Gordon,  M.H  1990.  The  mechanism  of antioxidants action in vitro. Didalam :
B.J.F  Hudson,  editor.  Food  Antioxidants. Elsivier Applied Science, London.
Hanani,  E,  A.  Mun`im,  R.  Sekarini,  2005, Identifikasi  Senyawa  Antioksidan  Dalam Spons  Callyspongia  SP  Dari Kepulauan Seribu ,  Majalah  Ilmu  Kefarmasian,  Vol II, No 3.
Handajani.  (2010). Gizi  dan  penyakit degeneratif .  Makasar:  FKM  UNHAS
Hidayat,  A.Aziz  Alimul,  2010. Metode Penelitian Kesehatan Paradigma Kuantitatif ,  Surabaya:  Penerbit  Health
Books Publishing.
Holistic  Health  Solution.  (2011). Khasiat Fantastis  Kulit  Man g gis .  Grasindo,
Jakarta : 17-71
Katzung,  Bertram  G.  2004. Farmakologi Dasar  dan  Klinik ,  Buku  ke  3  Edisi  8,
Jakarta: Penerbit Salemba Medika
Marianne,  Yuandani,  dan  Rosnani,  2011,
Antidiabetic  Activity  From Ethanol Extract  Of  Kluwih’s  Leaf  (Artocarpus Camansi ), Jurnal Natural, 11 (2): 64-68
Murray  R.K.,  Granner  D.K.,  and  Rodwell
V.W., 2009, Biokimia Harper ,
Diterjemahkan  Oleh  Andri  Hartono, Edisi  27,  Penerbit  Buku  Kedokteran,
EGC, Jakarta
Ozyurt,  D,  2005, Determination  Of Total Antioxidant Capacity By a New Spectrophotometric  Method  Based  On Ce (IV) Reducing Capacity measurement ,  Diakses  Tanggal  18  Mei 2010.
http://ejournal.mandalanursa.org/index.php/JUPE/index
Vol. 5. No. 6 Desember 2020 p-ISSN: 2548-5555 e-ISSN: 2656-6745
Parwata, I Made Oka Adi. 2015. Antioksidan, Bahan  Ajar  Uji  Bioaktivitas .  Kimia Terapan Program Pasca Sarjana Universitas Udayana. Pinnell,  SR.  2003.  Cutaneous  Photodamage, Oxidative Stress, and Topical Antioxidant  Protection.  J  Am  Acad Dermatol. Vol 48. 1-19. Priyanto.  2010. Toksikologi Ed:  2.  Depok: Leskonfi Lembaga Studi dan Konsultasi Farmakologi. Ramadhan,  P.,  2015, Mengenal  Antioksidan , Cetakan Pertama, Graha Ilmu, Yogyakarta