## KONSENTRASI KLOROFIL DAUN PADI PADA SAAT KEKURANGAN AIR YANG DIINDUKSI DENGAN POLIETILEN GLIKOL
Yunia E. Banyo 1) , Nio Song Ai 1) , Parluhutan Siahaan 1) , Agustina M. Tangapo 1)

## 1)Program Studi Biologi FMIPA Universitas Sam Ratulangi
Jl. Kampus Unsrat Manado 95115 e-mail: banyoyunia@yahoo.com ; nio_ai@yahoo.com ; luhut_siahaan68@yahoo.co.id ; iin_truly@yahoo.co.id

## ABSTRAK
Telah  dilakukan  penelitian  mengenai  konsentrasi  klorofil  daun  padi  ( Oryza  sativa L.)  kultivar Serayu  dan  IR  64  pada  saat  kekurangan  air  yang  diinduksi  dengan  polietilen  glikol  (PEG). Penelitian ini bertujuan untuk membandingkan konsentrasi klorofil total, klorofil a dan klorofil b pada  daun  padi  pada  saat  kekurangan  air  yang  diinduksi  dengan  PEG  8000  dengan  mengkultur tanaman padi pada medium dengan potensial air (PA) 0; -0,5 dan -1 MPa.  Sampel helaian daun (lamina)  untuk  tiap  perlakuan  diambil  sebanyak  1  g,  dihaluskan  dengan  mortar  dan  pestel,  lalu diekstraksi  dengan  alkohol  95%  sampai semua  klorofil terlarut.  Ekstrak  disaring  dan supernatan ditampung dalam labu ukur 100 ml, lalu ditambahkan alkohol 95% sampai 100 ml.   Konsentrasi klorofil diukur dengan spektrofotometer  pada panjang gelombang 649 dan 665 nm.   Berdasarkan hasil yang diperoleh, tanaman padi kultivar Serayu dan IR 64 mulai mengalami kekeringan pada PEG  dengan  PA  -0,5  MPa  dengan  ciri-ciri  daun  yang  kering,  menggulung  dan  batang  yang berwarna  kecoklatan.  Perbedaan  konsentrasi  klorofil  total,  klorofil  a,  dan  klorofil  b  pada  daun padi kultivar Serayu dan IR 64 diamati pada PEG dengan PA 0; -0,5 dan -0,1 MPa.
Kata kunci: konsentrasi klorofil, polietilen glikol (PEG), kekurangan air, padi kultivar Serayu dan IR 64

## THE CHLOROPHYLL CONCENTRATION IN RICE LEAVES UNDER POLYETHYLENE-GLYCOL- INDUCED WATER DEFICIT

## ABSTRACT
A  research  was  conducted  to  evaluate  the  concentrations  of  total  clorophyll,  chlorophyll  a  and clorophyll b in rice ( Oryza sativa L.) leaves under polyethylene-glycol-induced water deficit. The water  deficit  was  induced  by  culturing  the  plants  in  medium  containing  polyethylene  glycol (PEG) 8000 with water potential (PA) 0;-0,5; and            -1 MPa for 2 days. Leaf lamina (1 g) was sampled from each treatment at day 0 and 2. Each sample was ground using porcelain mortar and pestle,  and  extracted  with  95%  ethanol  until  all  chlorophyll  was  dissolved.  The  extract  was filtered, the supernatant was collected in 100 ml flask and added with 95% ethanol until 100 ml. The chlorophyll concentration was measured using spechtrophotometer at 649 and 665 nm. The dry  and  rolled  leaves  and  brown  stems  were  observed  in  cultivar  Serayu  and  IR  64  that  were cultivated  in  media  containing  PEG  with  PA  -0,5  and  -1,0  MPa.  The  concentrations  of  total chlorophyll,  chlorophyll  a  and  b  in  leaves  of  cultivar  Serayu  and  IR  64  cultivated  in  media containing  PEG with PA 0; -0,5 and -1,0 MPa were different.
Keywords: chlorophyll concentration, polyethylene glycol (PEG), water deficit, Serayu and IR 64 rice cultivars

## PENDAHULUAN
Kekurangan  air  mempengaruhi  semua aspek  pertumbuhan  tanaman,  yang  meliputi proses  fisiologi,  biokimia,  anatomi  dan morfologi. Pada saat kekurangan air, sebagian  stomata  daun  menutup  sehingga
terjadi hambatan masuknya CO 2 dan menurunkan  aktivitas  fotosintesis.  Selain menghambat
aktivitas fotosintesis, kekurangan  air  juga  menghambat  sintesis protein  dan  dinding  sel  (Salisbury  &  Ross, 1995). Tanaman yang mengalami kekurangan
air  secara  umum  mempunyai  ukuran  yang lebih  kecil  dibandingkan  dengan  tanaman yang  tumbuh  normal  (Kurniasari et  al. , 2010). Kekurangan air menyebabkan penurunan  hasil  yang  sangat  signifikan  dan bahkan  menjadi  penyebab  kematian  pada tanaman (Salisbury & Ross, 1995).
Pengukuran  karakter  fisiologi  seperti konsentrasi  klorofil,  merupakan  salah  satu pendekatan  untuk  mempelajari  pengaruh kekurangan  air  terhadap  pertumbuhan  dan hasil produksi karena parameter ini berkaitan erat dengan laju fotosintesis (Li et al. , 2006).
Kekurangan  air  dari  tingkat  paling  ringan sampai  paling  berat  mempengaruhi  proses- proses biokimia yang berlangsung dalam sel. Kekurangan  air  akan  menurunkan  laju fotosintesis (Fitter & Hay, 1994; Ju & Zhang, 1999).  Salah  satu  aspek  fotosintesis  yang sangat  sensitif  terhadap  kekurangan  air adalah  biosintesis  klorofil  dan  pembentukan protoklorofil  terhambat  pada  potensial  air sedikit  di  bawah  0  atm  (Salisbury  &  Ross, 1992).
Beberapa  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan  untuk  mempelajari  respons  padi terhadap  kekurangan  air  adalah  protein  18 kDa  yang  dapat  dikaitkan  dengan  toleransi kalus  padi  terhadap  kekeringan  (Nio,  1996); lebih tingginya kandungan protein kalus padi yang dikultur pada medium dengan potensial air -2 atm dibandingkan dengan         0 atm atau tidak  mengalami  kekurangan air (Nio et al. , 2001); pertambahan berat basah tanaman padi yang kekurangan air lebih kecil daripada yang  tidak  tercekam  (Nio  &  Kandou,  2000). Selanjutnya  kekeringan  pada  tanaman  padi merupakan salah satu faktor lingkungan yang menghambat fotosintesis (Ju & Zhang, 1999). Untuk  lebih  memperkaya  wawasan  tentang tanggap  tanaman  padi  terhadap  kekeringan, perlu diungkapkan lebih lanjut dapat tidaknya kandungan  klorofil  total,  klorofil  a  dan  b dipakai  sebagai  indikator  kekurangan  air yang  diinduksi  dengan  polietilen  glikol (PEG) pada fase vegetatif tanaman padi.
Berdasarkan  latar  belakang  tersebut maka dilakukan penelitian tentang konsentrasi  klorofil  daun  tanaman  padi ( Oryza  sativa  L .)  pada  saat  kekurangan  air yang  diinduksi  dengan  polietilen  glikol. Penelitian  ini  berkaitan  dengan  masalah pengaruh kekurangan air terhadap konsentrasi  klorofil  total,  klorofil  a  dan  b pada  daun  tanaman  padi . Kekurangan  air
yang  dimaksud  dalam  penelitian  ini  adalah pengurangan  potensial  air  (PA)  dengan menambahkan  polietilen  glikol  (PEG)  sesuai dengan PA yang diinginkan. Dalam penelitian  ini  akan  diuji  3  macam  medium, yaitu  medium  dengan      PA  0;  -0,5  dan  -1 MPa.  Kekurangan  air  yang  diaplikasikan termasuk  kategori  ringan.  Hipotesis  yang diuji  dalam  penelitian  ini  ialah  adanya perbedaan konsentrasi klorofil total, klorofil a dan  b  pada  daun tanaman padi  yang  dikultur pada medium dengan       PA 0; -0,5; -1 MPa.

## METODOLOGI PENELITIAN

## a. Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian  dilakukan    dari  Juli  hingga September  2012.  Penelitian  ini  dilakukan  di Laboratorium Biokonservasi dan di Laboratorium  Bioteknologi  Jurusan  Biologi, FMIPA Universitas Sam Ratulangi.

## b. Bahan dan Cara Kerja
Bahan penelitian yang digunakan yaitu benih tanaman padi kultivar Serayu dan IR 64 dan,  alkohol  95%,  polietilen  glikol  (PEG) 8000, akuades, pupuk Gandasil D. Benih padi diperoleh  dari  Balai  Pengawasan  Sertifikasi Benih  Tanaman  Pangan  dan  Hortikultura Provinsi  Sulawesi  Utara.  Peralatan  yang digunakan  adalah  spektrofotometer  tipe Genesis  20, hot  plate ,  timbangan  analitik, tabung  reaksi,  rak  tabung  reaksi,  labu  ukur, gelas  ukur,  batang  pengaduk,  busa,  mortar dan  pestel,  tisu,  alat  tulis,  kertas  label, saringan, gunting, dan kamera digital.
Penelitian  ini  merupakan  percobaan faktorial  dalam  rancangan  acak  lengkap dengan  3  perlakuan  dan  3  ulangan  pada  2 kultivar  tanaman  padi  yaitu  IR  64  dan Serayu.  Peubah  bebas  dalam  penelitian  ini adalah  3  macam  perlakuan  kekeringan  yaitu larutan  PEG  dengan  potensial  air  (PA)  yaitu 0; -0,5 dan -1 MPa. Larutan PEG dengan PA yaitu  0;  -0,5  dan  -1  MPa  dibuat  dengan menambahkan  0  g,  198  g  dan  287  g  PEG 8000  ke  dalam  1  L  larutan  medium  basal (Michel, 1983). Medium basal yang digunakan adalah larutan Gandasil D 0,025% yang  mengandung  N  (20%),  P 2 O 5 (15%), K 2 O (15%),      MgSO 4 (1%), Mn, B, Cu, Co, Zn, aneurine , lactoflavine dan nicotinic  acid amide .  Peubah  terikatnya  ialah  konsentrasi klorofil  total,  klorofil  a  dan  b  pada  daun tanaman padi setelah 2 hari perlakuan.
Benih  padi  dikecambahkan  pada  tanah yang  digenangi  air  dalam  bak  plastik  yang tidak dilubangi, sehingga air yang disiramkan hanya hilang karena evapotranspirasi. Perkecambahan dilakukan  selama 3 minggu. Tanaman  muda  hasil  perkecambahan  yang berumur  3  minggu  akan  dikultur  pada medium  yang  berupa  larutan  PEG  dengan PA  yaitu  0;  -0,5  dan  -1  MPa  selama  2  hari. Konsentrasi klorofil pada daun padi ditentukan  dengan  cara sampel  helaian  daun (lamina)  untuk  tiap  perlakuan  diambil sebanyak  1  g,  dihaluskan  dengan  mortar  dan pestel,  lalu  diekstraksi  dengan  alkohol  95% sampai  semua  klorofil  terlarut.  Konsentrasi klorofil  total,  klorofil  a  dan  klorofil  b dihitung  dengan  metode  Wintermans  &  de Mots  (1965) dalam Sasmitamihardja  (1990) sebagai berikut:
Klorofil total (mg/L)=20,0 OD 649 + 6,1 OD 665 Klorofil a (mg/L) = 13,7 OD 665 – 5,76 OD 649 Klorofil b (mg/L)=25,8 OD 649 – 7,7 OD 665 (OD = Optical density = Nilai absorbansi)
c. Analisis data
Data dianalisis dengan Anova. Jika ada perbedaan  nyata  akan  diuji  lanjut  dengan BNT  5%  (Sastrosupadi,  2000;  Hanafiah, 2004).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada  kondisi  kontrol,  faktor  kultivar menyebabkan  perbedaan  konsentrasi  klorofil total. Konsentrasi klorofil total dari daun padi kultivar Serayu lebih tinggi               (31.27 ± 0.31)  mg/L  daripada  kultivar  IR  64  (29.95  ± 0.42)  mg/L  (Gambar  1).  Hal  ini  disebabkan oleh  perbedaan  proses  metabolisme  yang berkaitan  dengan  umur  tanaman,  umur  daun, morfologi  dan  faktor  genetik  (Biber,  2007). Lama fase vegetatif kultivar     IR 64 berbeda dengan kultivar Serayu. Perbedaan lama fase vegetatif  mengakibatkan  perbedaan  umur tanaman. Umur tanaman kultivar IR 64 yaitu 115  hari  dengan  fase  vegetatif  45  hari, sedangkan  umur  tanaman  kultivar  Serayu yaitu  120-130  hari  dengan  fase  vegetatifnya selama 65 hari (IRRI, 2007). Pada perlakuan kekurangan  air  yang  diinduksi  dengan  PEG selama  2  hari,  faktor  PEG  menyebabkan perbedaan  konsentrasi  klorofil  total  daun pada  kultivar  IR  64  dan  Serayu.  Konsentrasi klorofil total pada perlakuan PEG -0,5 dan -1 MPa  lebih  tinggi  daripada  PEG  0  MPa
(Gambar 1). Perlakuan PEG -0,5 dan -1 MPa menurunkan  potensial  air  pada  medium sehingga  air  dari  medium  dihambat  untuk masuk  ke  dalam  jaringan  tumbuhan  melalui akar  atau  dengan  kata  lain  mengalami kekurangan  air.  Tidak  tersedianya  air merupakan  salah  satu  cekaman  abiotik  yang menghambat pertumbuhan dan perkembangan  suatu  tanaman.  Air  juga merupakan reagent yang  penting  dalam fotosintesis  dan  reaksi-reaksi  hidrolisis  (Nio & Banyo, 2011). Peranan air yang penting ini menimbulkan konsekuensi bahwa kekurangan  air  akan  mempengaruhi  semua proses  metabolisme  tanaman  baik  secara langsung  atau  tidak  langsung  (Pugnaire  & Pardos, 1999 dalam Lestari, 2005), termasuk sintesis klorofil.
Pada  kondisi  kontrol,  konsentrasi klorofil a pada daun padi kultivar IR 64 lebih tinggi  daripada  kultivar  Serayu  (Gambar  2). Perbedaan ini disebabkan oleh faktor kultivar dan  hari.  Kultivar        IR  64  merupakan  padi gogo  yang  berumur  pendek  hidup  di  lahan kering  tanpa  penggenangan  air,  sedangkan Serayu  merupakan  padi  sawah  yang  seluruh waktu pertumbuhannya digenangi air (Anonim,  2012).  Oleh  sebab  itu,  konsentrasi klorofil  a  pada  kultivar  IR  64  lebih  tinggi (21.01 ± 1.36) mg/L daripada kultivar Serayu (17.78  ±  2.05)  mg/L.  Perbedaan  konsentrasi klorofil  a  pada  perlakuan  kekurangan  air selama  2  hari  yang  diinduksi  oleh  PEG disebabkan  oleh  faktor  PEG.  Konsentrasi klorofil  a  pada  kultivar  IR  64  dan  Serayu yang ditumbuhkan di larutan    PEG -0,5 dan -1  MPa  lebih  tinggi  daripada  di  larutan  0 MPa. Hasil ini berbeda dengan penelitian Nio (2010) yang menginformasikan bahwa konsentrasi  klorofil  a  pada  daun  padi  yang ditumbuhkan  pada  medium  dengan  PA  0 MPa lebih tinggi daripada yang ditumbuhkan pada  medium  dengan  potensial  air  (PA)  -0,5 dan -1 MPa selama 1 bulan.
Gambar 1.   Konsentrasi klorofil total (mg/L) daun  padi kultivar IR 64 dan Serayu pada  kondisi kontrol dan kekurangan air selama 2 hari (rata-rata ± standar deviasi)
Gambar 2. Konsentrasi  klorofil a (mg/L) daun padi kultivar IR 64 dan Serayu pada kontrol dan kekurangan air selama 2 hari (rata-rata ± standar deviasi)
Konsentrasi  klorofil  b  daun  padi kultivar  IR  64  dan  Serayu  (Gambar  3)  pada kondisi  kontrol  (hari  ke-0)  tidak  berbeda dengan  pada  perlakuan  PEG  0  MPa  (hari ke-2). Hasil ini menunjukkan bahwa pemindahan  tanaman  padi  dari  media campuran tanah, kompos dan sekam ke media basal  (PEG  0  MPa)  yang  ditumbuhkan selama        2 hari tidak mengganggu sintesis klorofil  b.  Konsentrasi  klorofil  b  daun  padi pada  perlakuan    PEG  -0,5  dan  -1  MPa  lebih tinggi  daripada  PEG  0  MPa  (Gambar  3).
Hasil ini berbeda dengan penelitian Prihastanti  (2010)  yang  menunjukkan  bahwa konsentrasi  klorofil  b  pada  semai  kakao dengan  kandungan  air  tanah  50%  lebih rendah dibandingkan perlakuan air tanah 70% selama 2 bulan. Kekurangan air menyebabkan  perbedaan  respons  fisiologi dan  biokimia  pada  tanaman.  Pembentukan klorofil akan optimal apabila kondisi lingkungan mampu mendukung proses fisiologi, di antaranya ketersediaan air.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 Kontrol PEG 0 MPa PEG -0.5 MPa PEG -1 MPa [Klor o fil to tal ( m g /L )] Perlakuan IR 64 Serayu 0 5 10 15 20 25 30 35 Kontrol PEG 0 MPa PEG -0.5 MPa PEG -1 MPa [ k lo ro fil a ( m g /L )] Perlakuan IR 64 Serayu
Tanaman  yang  tetap  hijau  dapat meningkatkan produksi dan efisiensi transpirasi  pada  saat  tanaman  mengalami kekurangan  air,  seperti  pada  sorgum,  jagung dan gandum (Li et al ., 2006). Hasil penelitian van  der  Mescht et  al. (1999)  menunjukkan bahwa  daun  kentang  yang  mengalami kekurangan  air  selama  4  minggu  memiliki
kandungan  klorofil  a,  klorofil  b,  dan  klorofil total  lebih  rendah  dibandingkan  dengan tanaman kentang yang diberi air yang cukup, tetapi  kandungan  klorofil  a,  kandungan klorofil  b  dan  klorofil  total  tersebut  pada kentang bervariasi dan tidak dapat menggambarkan  sensitivitas  atau  toleransi terhadap kekurangan air dengan jelas.
Gambar  3.  Konsentrasi    klorofil  b  (mg/L) O.  sativa kultivar  IR  64  dan  Serayu  pada kontrol dan kekurangan air selama 2 hari (rata-rata ± standar deviasi)
Gambar 4. Tanaman  padi kultivar Serayu dan IR 64 pada perlakuan kekurangan air yang iinduksi PEG pada hari ke-0 (a), 1 (b) dan 2 (c)
Konsentrasi klorofil total dan klorofil a pada  kultivar  Serayu  yang  ditumbuhkan  di
larutan PEG 0 MPa selama 2 hari lebih besar daripada konsentrasinya pada kondisi kontrol.
0 5 10 15 20 25 30 35 40 Kontrol PEG 0 MPa PEG -0,5 MPa PEG -1 MPa [ k lo ro fil b ( m g /L )] Perlakuan IR 64 Serayu
Keterangan: A (Kultivar Serayu pada PEG -1 MPa) B (Kultivar IR 64 pada PEG -1 MPa)
C (Kultivar Serayu pada PEG -0,5 MPa) D (Kultivar IR 64 pada PEG -0,5 MPa) E (Kultivar Serayu pada PEG 0 MPa)
F (Kultivar IR 64 pada PEG 0 MPa)
Keterangan: A (Kultivar IR 64 pada PEG 0 MPa) B (Kultivar IR 64 pada PEG -0,5 MPa)
C (Kultivar IR 64 pada PEG -1 MPa)
D (Kultivar Serayu pada PEG 0 MPa) E (Kultivar Serayu pada PEG -0,5 MPa) F (Kultivar Serayu pada PEG -1 MPa)
Keterangan:
A (Kultivar Serayu pada PEG -1 MPa)
B (Kultivar Serayu pada PEG -0,5 MPa) C (Kultivar Serayu pada PEG 0 MPa) D (Kultivar IR 64 pada PEG -1 MPa) E (Kultivar IR 64 pada PEG -0,5 MPa) F (Kultivar IR 64 pada PEG 0 MPa)
(a)
(b) (c)
Tetapi pada kultivar IR 64 konsentrasi kedua macam  tersebut  pada  daun  padi yang ditumbuhkan di larutan PEG 0 MPa selama 2 hari  lebih  rendah  daripada  kondisi  kontrol. Hal ini disebabkan oleh perbedaan kemampuan  adaptasi  dari  kedua  kultivar tersebut.  Tanaman  padi  kultivar  IR  64  dan Serayu  pada  penelitian  ini  dipindahkan  dari media  tanah  kompos  ke  media  cair  (dalam tabung  reaksi)  diletakkan  dalam  ruangan terbuka  dengan  intensitas  sedang  selama  2 hari. Setelah dipindahkan ke larutan PEG  0  MPa  dalam  waktu  2  hari  kultivar  IR 64  beradaptasi  lebih  baik  dibandingkan dengan kultivar Serayu (Gambar 4c).
Pada penelitian ini, konsentrasi klorofil total, klorofil a dan klorofil b pada       PEG 0 MPa lebih rendah daripada  -0,5 dan -1 MPa. Hal ini disebabkan karena pada saat tanaman padi ditumbuhkan pada larutan PEG -0,5 dan -1  MPa  selama  2  hari,  daun  padi  tampak mulai mengering  dan  menggulung  (Gambar 4c). Oleh sebab itu perlakuan  segera diakhiri lalu  konsentrasi  klorofil  segera  diukur. Keadaan  daun  padi tersebut  menunjukkan sejumlah  besar  air  keluar  dari  daun  akibat kekurangan  air.  Sampel  daun  dengan  berat basah  yang  sama  untuk  perlakuan  PEG  0 MPa  mempunyai  jumlah  sel  yang  lebih sedikit  daripada  sampel  daun  dari  perlakuan PEG  -0,5  dan  -1  MPa.  Hal  ini  yang menyebabkan peningkatan konsentrasi klorofil  total,  klorofil  a,  dan  klorofil  b  pada kedua perlakuan tersebut. Hasil penelitian ini menunjukkan  bahwa  pengukuran  konsentrasi klorofil  daun  tanaman  yang  mengalami kekurangan  air  sebaiknya  menggunakan satuan  luas jaringan  daun bukan  berdasarkan berat basah.
Pada  hari  hari  ke-  0  tanaman  padi kultivar  IR  64  dan  Serayu  pada  kondisi kontrol  (PEG  0  MPa)  tidak  mengalami perubahan  baik  pada  daun  maupun  batang. Daun  dan  batangnya  masih  tetap  hijau  dan segar  (Gambar  4a).  Setelah  hari  hari  ke-1 tampak  perubahan  pada  kultivar  Serayu (Gambar  4b).  Satu  helaian  daun  di  bagian ujung  mulai  menggulung  dan  pada  hari  ke-2 satu  helaian  daunnya  menggulung  dan tampak  kering  dengan  batang  yang  mulai berwarna kecoklatan sedangkan pada kultivar IR 64 tidak mengalami perubahan pada daun dan batangnya yang tetap hijau segar.
Tanaman  padi  kultivar  IR  64  dan Serayu  pada  hari  ke-0  yang  diberi  perlakuan
dengan PEG pada   PA -0,5 MPa dan -1 MPa terlihat  subur  dan  berwarna  kehijauan (Gambar  4a),  setelah  hari  ke-1  mulai  terjadi perubahan. Pada kultivar Serayu dengan PEG pada PA -0,5 MPa tanaman tidak mampu lagi mentolerir adanya senyawa tersebut sehingga mulai mengalami kekurangan air dengan ciri- ciri  daun  tampak  kering  dan  menggulung serta  berwarna  kecoklatan  pada  bagian batangnya  (Gambar  4b)  pada  kultivar  IR  64 hanya  terjadi  perubahan  pada  daun  yang menggulung  sedangkan  batangnya  tetap hijau. Perubahan ini juga terjadi pada hari ke- 2, tanaman semakin tercekam dan mengering. Pada  perlakuan  PEG  -1  MPa  tanaman  padi kultivar  Serayu  pada  hari  ke-1  tanaman tersebut  mengalami  kekurangan  air  yang ditandai  dengan  daunnya  yang  kering  dan menggulung  dan  pada  hari  ke-2  beberapa daun  tanaman  tersebut  berwarna  kekuningan dengan  batang  yang  berwarna  kecoklatan. Pada  kultivar  IR  64  pada hari  ke-  1  daunnya menggulung  dan  mengering  dengan  batang yang  tetap  hijau  sedangkan  pada  hari  ke-2 batangnya berubah warna menjadi kecoklatan (Gambar 4c).
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa  tanaman  padi  yang  mengalami perlakuan yang berbeda yaitu pemberian PEG yang  berbeda  akan  menunjukkan  tampilan fisik  yang  berbeda  pula  setelah  diperlakukan selama  2  hari.  Tampilan  daun  yang menggulung  dan  mengering  yang  dimulai dari  hari  pertama  dan  semakin  besar  tingkat dan  banyaknya  daun  yang  menggulung  dan mengering  memberi  petunjuk  bahwa  daun tidak  akan  dapat  melakukan  aktivitas metabolisme.  Daun  yang  mengering  dan menggulung  mengindikasikan  bahwa  daun tidak mampu lagi menyerap unsur-unsur hara dari  medium,  sehingga  tidak  akan  mampu melanjutkan  proses  metabolisme,  termasuk proses  pembentukan  klorofil  daun.  Dalam hal,  jumlah  klorofil  yang  lebih  tinggi  pada perlakuan  yang  mengalami  kekurangan  air akibat pemberian PEG semata-mata disebabkan  oleh  teknik  pengukuran  dan pengambilan  sampel  yang  masih  perlu dilakukan  perbaikan.  Dalam  hal  ini,  teknik pengambilan  data  yang  lebih  baik  akan dilakukan pada penelitian lebih lanjut. Teknik yang dapat dicoba untuk mengukur konsentrasi klorofil yaitu pengambilan sampel  berdasarkan  luas  daun  atau  dengan
cara  pengeringan  sampel  daun  pada  suhu 40°C selama 24 jam.

## KESIMPULAN
1. Terdapat  perbedaan  konsentrasi  klorofil total,  klorofil  a,  dan  klorofil  b  pada  daun padi  kultivar  Serayu  dan  IR  64  pada  saat kekurangan  air  yang  diinduksi  dengan PEG pada PA -0 ; -0,5 dan -0,1 MPa.
2. Tanaman  padi kultivar  Serayu  dan  IR  64 mulai  mengalami  kekurangan  air  pada larutan PEG dengan PA -0,5 MPa dengan ciri-ciri  daun  yang  kering,  menggulung dan batang yang berwarna kecoklatan.
3. Perbedaan  tampilan  fisik  daun  yang kering,  menggulung  dan  batang  berwarna kecoklatan  merupakan  indikasi  tumbuhan mengalami gangguan dalam proses metabolisme  maupun  proses  fisiologi lainnya.  Terhambatnya  proses  ini  juga akan  mempengaruhi  proses  pembentukan klorofil.
4. Perlu dilakukan penelitian lanjutan tentang konsentrasi klorofil yang
kekurangan air dengan kultivar yang lebih banyak,  waktu  yang  lebih  lama,  dan potensial air medium yang lebih rendah.
5. Perlu  dilakukan  penelitian  dengan  teknik yang berbeda untuk mengukur konsentrasi klorofil  dengan  cara  pengambilan  sampel berdasarkan  luas  daun  atau  dengan  cara pengeringan daun pada suhu 40°C selama 24 jam.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim. 2012. Padi. http://id.wikipedia.org/wiki/Padi [9 Agustus 2012].
Biber,  P.D.  2007.  Evaluating  a  Chlorophyll Content  Meter  on  Three  Coastal Wetland Plant Species. J. Agricultural, Food  and  Environmental  Sciences .  1
(2): p. 1-11
Fitter,  A.H  and  R.K.M.  Hay.  1994.  Fisiologi Lingkungan  Tanaman.  Gadjah  Mada University Press,Yogyakarta.
Hanafiah, K.A.  2004.  Rancangan Percobaan dan  Teori  Aplikasi . Fakultas  Pertanian Universitas Sriwijaya, Palembang.
[IRRI]  Internasional  Rice  Research  Institute.
2007. Rice Knowledge Bank. www.knowledgebankirri.org/morph welcome_to_Mophology_of_the_Rice _Plant.htm     [18 September 2012]. Ju,C  and  J.  Zhang.  1999 . Effect  of  Water Stress on Photosystem II Photochemistry and its Thermostability in Wheat Plants. J. Exp. Bot . 50 (336): p.1196-1206.
Kurniasari, A.M., Adisyahputra dan R.Rosman. 2010. Pengaruh Kekeringan  pada  Tanah  Bergaram
Nacl  terhadap  Pertumbuhan  Tanaman Nilam. Bul. Littro. 21 (1):      p.18- 27.
Lestari.  2005.  Hubungan  antara  Kerapatan
Stomata dengan Ketahanan Kekeringan pada Somaklon Padi Gajahmungkur,  Towuti,  dan  IR  64. Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan Sumberdaya Genetik Pertanian (Balitbiogen), Bogor.
Li,  R.P.G.,  M.  Baum,  S.  Grando  and S.Ceccarelli.    2006.    Evaluation  of Chlorophyll  Content  and  Fluorescence Parameters  as  Indicators  of  Drought Tolerance  in  Barley. Agricultural Sciences in China. 5 (10): p.751-757.
Michel,  B.E.    1983.    Evaluation  Of  The Water  Potertials  of  Solutions  Of Polyethylene Glycol 8000 Both In The Absence  And  Presence  Of  Other Solutes. Plant Physiol . 72: p.66-70.
Nio,  S.A.  1996.  Aktivitas  Peroksidase  dan Profil  Protein  Lini  Kalus  Padi  ( Oryza sativa L.)  Toleran  Kekeringan  [Tesis]. ITB, Bandung.
Nio, S.A. dan F.E.F.Kandou.  2000.  Respons Pertumbuhan  Padi  ( Oryza  sativa L.) Sawah  dan  Gogo  pada  Fase  Vegetatif Awal Terhadap Kekurangan air.
Eugenia. 6: p.270-273.
Nio,  S.A.,W.  Tilaar  dan    J.  Assa.    2001. Analisis  Pertumbuhan  dan  Kandungan Protein  pada  Kalus  Padi  ( Oryza  sativa
L.) Sawah yang Mengalami Kekurangan  Air. Eugenia 7:  p.208-
212.
Nio,  S.A.  2010.  Pengujian  Kandungan Klorofil  Total,  Klorofil  A  dan  B sebagai Indikator Kekurangan Air pada Padi ( Oryza sativa L.). J. Ilmiah Sains. 10: p.86-90.
Nio, S.A. dan Y. Banyo.  2011. Konsentrasi Klorofil Daun sebagai Indikator Kekurangan  Air  pada  Tanaman. J.
Ilmiah Sains . 11 ( 2): p. 167-173. Prihastanti.  2010.  Kandungan  Klorofil  Dan Pertumbuhan Semai Kakao ( Theobroma  cacao L.)  pada  Perlakuan
Kekurangan  air  Yang  Berbeda. J. Bioma. 12 (2): p.35-39.
Salisbury, F.B. dan C.W. Ross.  1992. Plant Physiology . 4rd ed. Wadsworth
Publishing Company, California.
_______.  1995.  Fisiologi  Tumbuhan.  Jilid  2. Penerbit ITB, Bandung.
Sastrosupadi.  2000.  Rancangan  Percobaan
Praktis Bidang Pertanian. Edisi Revisi.
Penerbit Kanisius, Jakarta.
Sasmitamihardja, D. 1990. Penuntun Praktikum  Fisiologi  Tumbuhan. ITB, Bandung.
van  der  Mescht  A.,  J.A.de  Ronde  and
F.T.Rossouw. 1999. Chlorophyll fluorescence  and  chlorophyll  content as  a  measure  of  drought  tolerance  in potato. South African J. of Science. 95: p. 407-412.