e- Jurnal Rekayasa dan Teknologi Budidaya Perairan
Volume XI No 1 Oktober 2022 p-ISSN: 2302-3600, e-ISSN: 2597-5315

## EFFECTIVENESS WHOLE CELL VACCINE Edwardsiella ictaluri WITH DIFFERENT DOSAGE AND METHODS FOR PROTECTING SIAMESE CATFISH  (Pangasianodon hypophthalmus)  AGAINST EDWARDSIELLOSIS DISEASE
Octa Listia 1* , Agus Setyawan 1 , Edy Barkat Kholidin 2

## ABSTRACT
One  of  major  problem  of  siamse  catfish  (Pangasianodon  hypophthalmus) culture  is  Edwardsiliosis  bacterial  disease  of  Edwardsiella  ictaluri,  causes economic  losses  because  it  causes  high  mortality  and  reduces  the  quality  of fishery  products.  Currently,  the  use  of  antibiotics  as  an  effort  to  control  the disease has been prohibited due to the impact of residual hazards, resistance and decreased  food  safety  value.  Therefore  we  need  an  alternative  solution  that  is effective,  efficient  and  applicable  through  the  vaccines  application.  The  aim  of this  research  was  to  analyze  the  effectiveness  of  the  Whole  cell  Edwardsiella ictaluri  vaccine  with different  doses and different  application methods to  protect Siamese  catfish  (Pangasianodon  hypophthalmus)  from  Edwardsiellosis  disease. The  research  was  conducted  using  a  completely  randomized  design  (CRD) method  consisting  of  3  methods,  namely  oral  vaccine,  immersion  vaccine,  and injection  vaccine.  Each  method  consisted  of  4  different  dose  treatments  with  3 replications.  The  results  showed  that  the  vaccine  application  using  different methods  resulted  in  different  survival  rates,  relative  survival  rates,  specific growth  rates  and  mean  time  to  death.  The  oral  vaccine  method  using  each different dose resulted in the best survival rate, relative survival percentage, and mean time to death. The immersion vaccine method with a dose of 10.9 resulted in the highest specific growth rate.
Keyword:  whole  cell  vaccine,  edwardsiella  ictaluri,  siamese  catfish, edwardsiellosis disease
*E-mail: octalistia74@gmail.com
1 Jurusan Perikanan dan Kelautan, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung, Lampung
2 BPBAT Sungai Gelam Jambi, Indonesia

## Pendahuluan
Salah  satu  komoditas  perikanan budidaya  yang  memiliki  peluang pasar  nasional  dan  internasional adalah komoditas ikan patin Pangasianodon hypophthalmus (Susanti,  2017).  Ikan  patin  banyak diminati dikalangan masyarakat maupun  industri  untuk  dikonsumsi karena  memiliki  rasa  yang  enak, lezat,  gurih,  kandungan  kalori  dan protein  yang  cukup  tinggi  (Saputra, 2016).  Budidaya  ikan  patin  tidak terlepas  dari  berbagai  kendala.  Salah satu  kendala  yang  dihadapi  dalam budidaya  ikan  patin  yaitu  tingginya angka  kematian  mencapai  80-100% (Kholidin,2019).  Penyebab  kematian ikan patin umumnya disebabkan oleh penyakit bakterial.
Penyakit  bakterial  merupakan salah  satu  penyakit  infeksius  yang dapat  menimbulkan  kematian  pada ikan dalam kurun waktu yang singkat (Manurung,2017).  Faktor  pemicu timbulnya  penyakit  bakterial  pada ikan disebabkan oleh ketidak seimbangan  antara  inang,  patogen dan  lingkungan  (Ghufran,  2010). Penyakit bakteri yang sering menyerang ikan patin yaitu Edwardsiliosis . Penyakit Edwardsiliosis merupakan  penyakit  bakterial  akut atau  sub  akut  atau  kronis  yang disebabkan oleh bakteri Edwardsiella  ictaluri (Rahmawati, 2021). Penyakit Edwardsiliosis ditandai dengan gambaran Septicemia dan  pembentukan  abses.
Pada  penelitian  Indriasari  (2020),  di Kabupaten  Kubu  Raya  Pontianak masih  ditemukan  kasus  kematian yang disebabkan oleh bakteri
Edwardsiella pada golongan channel
catfish .  Hal  tersebut  serupa  dengan hasil  penelitian  Rahmawati  (2021) bahwa  masih  ditemukan  kasus  ikan yang  terinfeksi  bakteri E.  ictaluri di daerah  Yogyakarta,  sehingga  hal tersebut dapat mengakibatkan
kerugian  yang  cukup  besar  bagi pembudidaya ikan.
Vaksinasi  merupakan  salah  satu upaya  yang  dapat  digunakan  untuk menekan  infeksi  bakteri E.  ictaluri .
Vaksinasi  mampu  menekan  tingkat mortalitas,meningkatkan sistem kekebalan tubuh ikan terhadap penyakit, meningkatkan kelulushidupan ikan, dan mengurangi penggunaan  antibiotik. Pemberian vaksin  pada  ikan  dapat  meningkatkan imunogenisitas  ikan  tersebut.  Hal tersebut  sesuai  dengan  hasil  penelitian sebelumnya yang menunjukkan imunogenitas tinggi pada ikan, ditandai  dari  titer  antibodi  yang  tinggi (Setyawan dkk., 2012). Metode vaksin dapat dilakukan dengan menggunakan beberapa metode antara  lain  metode  oral  melalui pakan, metode injeksi melalui penyuntikan  ikan  pada  organ  target, dan  metode  perendaman  (Nitimulyo, 1990). Berdasarkan penelitian Danny (2017) menjelaskan bahwa pemberian  vaksin  inaktif  pada  benih ikan  koi  menggunakan  dosis  10 8 CFU/ml mampu meningkatkan sistem  imun  spesifik  pada  ikan  yaitu RPS  sebesar  94,12%  dan  83,33%.
Pengembangan  vaksin  inaktif whole cell Aeromonas salmonicida pada ikan mas  menunjukkan  bahwa  vaksin tersebut memiliki imunogenisitas yang cukup  tinggi  pada  ikan  mas  yang ditunjukkan dengan titer antibodi yang mencapai 2 7 (Setyawan dkk., 2012).
Sejauh  ini  belum  ditemukan metode  dan  dosis  vaksin whole  cell edwardsiella  ictaluri yang  tepat
untuk  melindungi  ikan  patin  siam terhadap  penyakit Edwardsiliosis . Oleh  karena  itu  perlu  dilakukan kajian  lebih  mendalam  mengenai efektivitas vaksin whole cell edwardsiella  ictaluri dengan  dosis dan metode pemberian yang berbeda untuk  melindungi  ikan  patin  siam ( Pangasianodon hypophthalmus ) terhadap penyakit Edwardsiliosis .

## Metode
Penelitian  ini  akan  dilaksanakan pada  bulan  Juli  –  Oktober  2021  di Balai Perikanan Budidaya Air Tawar (BPBAT)  Sungai  Gelam,  Kabupaten Muaro Jambi, Provinsi Jambi.
Rancangan penelitian yang digunakan  yakni  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL)  yang  terdiri  dari  3 metode  dengan  4  perlakuan  dalam  3 ulangan.  Masing-masing  perlakuan dilakukan  uji  tantang.  Metode  yang digunakan sebagai berikut:
1. Metode Vaksin Oral Perlakuan 1:  Tanpa pemberian Vaksin Perlakuan 2:  Pemberian  Vaksin E. ictaluri dengan dosis 10 7 CFU/ml per kg Pakan
Perlakuan 3:  Pemberian  Vaksin E. ictaluri dengan dosis 10 8 CFU/ml per kg Pakan Perlakuan 4:  Pemberian  Vaksin E. ictaluri dengan dosis 10 9 CFU/ml per kg Pakan
2. Metode Vaksin Rendam Perlakuan 1:  Tanpa perendaman
vaksin
Perlakuan 2:  Perendaman vaksin E. ictaluri selama  40  menit  dengan dosis 10 7 CFU/10ml Perlakuan 3:  Perendaman  vaksin E. ictaluri dengan dosis 10 8 CFU/10ml
Perlakuan 4:  Perendaman  vaksin E. ictaluri dengan dosis 10 9 CFU/10ml 3. Metode Vaksin Suntik Perlakuan 1:  Tanpa pemberian vaksin Perlakuan 2:  Pemberian  vaksin E.
ictaluri 0,1 ml/ekor dengan dosis 10 7 CFU/ml
Perlakuan 3:  Pemberian  vaksin E. ictaluri 0,1 ml/ekor dengan dosis 10 8 CFU/ml
Perlakuan 4:  Pemberian  vaksin E. ictaluri 0,1 ml/ekor dengan dosis 10 9 CFU/ml Uji  tantang dilakukan setelah 22 hari  pemeliharaan.  Ikan  yang  telah divaksin, dilakukan uji tantang dengan menyuntikkan bakteri sebanyak  0.1  ml/ekor  ikan.  Efikasi pemberian  vaksin E.ictaluri dilihat berdasarkan hasil pembandingan pengamatan  Gejala  Klinis,  Tingkat Kelulushidupan (SR), tingkat kelulushidupan relatif (RPS). Parameter  yang  diamati  pada penelitian ini adalah tingkat kelangsungan hidup, laju pertumbuhan  Spesifik,  gejala  klinis, persentase  kelulushidupan  Relatif, dan kualitas air. Data yang diperoleh dari hasil penelitian kemudian dianalisis secara deskriptif.

## Hasil dan Pembahasan

## Tingkat Kelulushidupan
Perbedaan  metode  vaksin  pada dosis  yang  berbeda  berpengaruh terhadap tingkat  kelulushidupan ikan patin  siam.  Pada  gambar  1  diketahui bahwa pemberian vaksin metode oral menggunakan  dosis  masing-masing perlakuan  memiliki  nilai  rata-rata tingkat  kelulushidupan  paling  tinggi diantara
perlakuan lainnya.
Sementara  itu,  perlakuan  kontrol pada  metode  vaksin  suntik  memiliki
rata-rata tingkat kelulushidupan terkecil diantara perlakuan lainnya.
Keterangan: A: kontrol, B: dosis vaksin 10 7 CFU/ml, C: dosis vaksin 10 8 CFU/ml, D: dosis vaksin10 9 CFU/ml
Gambar 1. Tingkatkelulushidupan ikan patin siam
Pemberian  vaksin  menggunakan metode  yang  berbea  pada  masing- masing  dosis  perlakuan  berpengaruh terhadap tingkat  kelulushidupan ikan patin  siam.  Metode  vaksin  vaksin oral  dengan  dosis  vaksin  berbeda masing-masing menghasilkan tingkat kelulushidupan tertinggi yaitu 100%. Hal  tersebut  menunjukkan  bahwa metode  vaksin  oral  lebih  optimal terhadap tingkat  kelulushidupan ikan patin  siam.  Sementara  itu,  perlakuan kontrol  pada  metode  vaksin  suntik menghasilkan
rata-rata tingkat kelulushidupan terendah yaitu 26%. Rendahnya tingkat kelulushidupan  tersebut  dikarenakan lemahnya  sistem  kekebalan  tubuh ikan patin siam yang untuk melawan infeksi bakteri E. Ictaluri. Berdasarkan penelitian Susanti (2016) ikan yang terinfeksi bakteri E.
Ictaluri mengalami  mortalitas  lebih dari  50%.  Berdasarkan  penelitian Purwaningsih  (2022)  kemaitian  ikan patin  akibat  infeksi  bakteri E. Ictaluri mencapai  97-100%.  Infeksi
bakteri E.  Ictaluri dapat  menularkan secara horizontal melalui kontak ikan satu  dengan  ikan  lainnya,  selain  itu media  pemeliharaan  ikan  sangat berperan  dalam  penularan  infeksi bakteri  tersebut  (Selviana,  2021). Sehingga  apabila  dalam  wadah budidaya terdapat ikan yang terinfeksi  bakteri E.  Ictaluri akan menyebabkan penularan kepada ikan lainnya,  hal  tersebut  dapat  dilihat pada tingkat kelulushidupan perlakuan  kontrol  (tanpa  vaksinasi) metode  suntik  dan  metode  rendam yang lebih rendah dari pada
perlakuan vaksinasi.
Menurut  Dong et  al. (2015) infeksi E. ictaluri dengan konsentrasi 2,6×10 6 sel/ml menyebabkan
kematian  ikan  patin  sebesar  80%. Hal  ini  membuktikan  bahwa E.
ictaluri bersifat  sangat  patogen terhadap  ikan  patin  karena  infeksi kepadatan yang rendah telah menyebabkan  tingginya  mortalitas.
Vaksin bakteri adalah antigen buatan yang berasal dari suatu jasad patogen
yang sudah dilemahkan atau dimatikan, selanjutnya akan merangsang sistem imun dengan cara meningkatkan  kekebalan  ikan  dari infeksi patogen tertentu. Vaksin yang efektif harus memenuhi  3  syarat  utama,  yaitu  1) mampu  menginduksi  imunitas  yang tepat,  2)  stabil  dalam  penyimpanan, dan 3) bersifat imunogenik. (Purwaningsih,  2022).  Pemberian vaksin  bakteri  sel  utuh  ( whole  cell ) yang diinaktivasi menggunakan formalin  menghasilkan  titer  antibodi dan  tingkat  kelulushidupan  ikan  uji yang  lebih  baik  (Taukhid  dan
Purwaningsih, 2011).
Pada  penelitian  ini  inaktivasi bakteri dilakukan menggunakan formalin, sehingga pemberian vaksin menggunakan metode berbeda mampu meningkatkan tingkat kelulushidupan  ikan  patin  siam.  Hal tersebut dapat dilihat pada Gambar 3,
bahwa  tingkat  kelulushidupan  ikan yang divaksin bakteri bakteri sel utuh ( Whole  cell ) E.  Ictaluri lebih  tinggi
dari  pada  ikan  patin  siam  tanpa vaksinasi. Menurtu Hastuti (2013), pemberian vaksin dapat meningkatkan  antibodi  pada  serum darah ikan dengan cara vaksin masuk ke  dalam  tubuh  ikan  sebagai  antigen dan  merangsang  respon  imun  untuk meningkatkan  antibodi  pada  ikan sehingga  ikan  mempunyai  sistem kekebalan tubuh.

## Persentase Kelulushidupan Relatif
Perbedaan  metode  vaksin  pada dosis  yang  berbeda  berpengaruh terhadap  persentase  kelulushidupan relatif  ikan  patin  siam.  Pada  gambar 2  diketahui  bahwa  pemberian  vaksin metode  oral  menggunakan  dosis masing-masing  perlakuan  memiliki nilai rata-rata persentase kelulushidupan  relatif  paling  tinggi diantara perlakuan lainnya. Sementara  itu,  perlakuan  dosis  10 9 CFU/ml pada metode vaksin rendam memiliki rata-rata persentase kelulushidupan relatif terkecil diantara perlakuan lainnya.
Keterangan: A: kontrol, B: dosis vaksin 10 7 CFU/ml, C: dosis vaksin 10 8 CFU/ml, D: dosis vaksin10 9 CFU/m. Gambar 2. Persentase kelulushidupan relatif ikan patin siam
Pemberian vaksin dengan metode  suntik,  oral,  dan  rendam memberikan pengaruh terhadap persentase  kelulushidupan  relatif.
Persentase kelulushidupan relatif adalah  nilai  proporsi  mortalitas antara  kelompok  ikan  yang  divaksin dengan  kontrol  selama  periode  uji tantang (challenge) atau  wabah penyakit (disease  outbreak). Nilai kelulushidupan  relatif  merupakan salah  satu  parameter  utama  yang digunakan dalam mengevaluasi suatu sediaan  vaksin  ikan  (Taukhid et  al., 2018).
Persentase  pemberian  vaksin dengan  metode  suntik  sebesar  90- 100%,  metode  oral  sebesar  100%, dan  metode  rendam  sebesar  83- 100%.  Hasil  tersebut  menunjukkan bahwa  pemberian  vaksin  dengan metode yang berbeda mampu memberikan  perlindungan  ikan  patin dari penyakit Edwadrsiliosis. Menurut  Yusuf et  al., (2021),  nilai kelulushidupan relatif optimum
apabila  memberikan  perlindungan relatif minimum 70%. Pemberian  vaksin  yang  efektif pada penelitian ini yaitu
menggunakan  metode  oral  dengan persentase  kelulushidupan  sebesar 100%.  Hal  ini  karena  vaksin  dengan metode  oral  dicampur  dengan  pakan sehingga mampu meningkatkan persentase  kelulushidupan  relatif. Menurut  Mulia et  al., (2015), vaksinasi  melalui  pakan  mampu merangsang respon imun yang
terbentuk  karena  adanya  antigen yang  sampai  ke  dalam  rongga  usus dan  merangsang  limfosit  dalam jaringan  usus  untuk  memproduksi antibodi sehingga persentase kelulushidupan relative menjadi maksimal. Pemberian vaksin dengan metode rendam menghasilkan persentase  kelulushidupan  relative sebesar  83-100%.  Hal  ini  diduga karena  kemampuan  ikan  dalam menyerap  vaksin  ke  dalam  tubuh berbeda-bedaa.  Menurut  Sugiani et al., (2015), metode pemberian vaksin melalui  perendaman  bertujuan  untuk mengekspos  permukaan  luar  tubuh ikan secara langsung terhadap larutan vaksin (perendaman langsung) mengandalkan  daya  serap  terutama oleh insang yang memiliki kemampuan imbibisi (peristiwa
penyerapan  air  oleh  permukaan  zat- zat yang hidrofilik).

## Mean Time to Death
Perbedaan  metode  vaksin  pada dosis  yang  berbeda  berpengaruh terhadap mean  time  to  death (MTD) ikan  patin  siam.  Pada  gambar  3 diketahui  bahwa  pemberian  vaksin metode  oral  memiliki  nilai  rerata MTD  terbaik,  karena  tidak  terdapat kematian ikan patin siam. Sementara itu, pemberian vaksin metode rendam memiliki rerata MTD tertinggi yaitu 49. Kemudian pemberian  vaksin  metode  suntik menghasilkan rerata MTD 48.
Keterangan:  A:  kontrol,  B:  dosis  vaksin  10 7 CFU/ml,  C:  dosis  vaksin  10 8 CFU/ml,
D: dosis vaksin10 9 CFU/ml. Gambar 3. Mean time to death ikan patin siam
Pemberian  vaksin  metode  oral menggunakan  dosis  masing-masing perlakuan  memiliki  nilai mean  time to death (MTD) terbaik, karena tidak terdapat  kematian  ikan  patin  siam. Sementara  itu,  pemberian  vaksin metode  suntik  dan  rendam  memiliki rerata  MTD  yang  lebih  tinggi  dan hampir sama yaitu 80 (metode vaksin suntik)  dan  88  (metode  vaksin rendam)  dan  perlakuan  control  58. Hal ini disebabkan karena daya tahan tubuh  ikan  patin  siam  pada  pada metode  suntik  dan  rendam  lebih rendah  dibandingkan  ikan  yang divaksin  metode  oral,  sehingga infeksi  bakteri E.  ictaluri mampu menghasilkan waktu kematian tercepat  dengan  jumlah  kematian terbanyak.
Sistem pertahanan spesifik tubuh ikan  terbagi  menjadi  dua,  yaitu pertahanan  seluler  ( cell  mediated immunity )  dan  pertahanan  humoral ( antibody production ). Paparan
antigen menghasilkan stimulasi sejumlah  sel  limfosit  muda  yang
dapat  mengenali  antigen  melalui reseptor spesifik (Purwaningsih, 2022).  Berdasarkan  hasil  penelitian rerata waktu kematian yang
dihasilkan  pada  penelitian  ini  relatif panjang,  sehingga  diduga  infeksi bakteri E. ictaluri pada penelitian ini bersifat  kronis.  Hal  tersebut  sesuai dengan  pendapat  Hardi  (2016), bakteri  patogen  bersifat  kronis  akan menghasilkan  nilai  waktu  kematian ikan  yang  lebih  panjang  dan  akan menonjolkan  tanda-tanda  serangan penyakit pada awal infeksi.
Bakteri  yang  bersifat  kronis menyebabkan  penyakit  menyebar secara perlahan, menurunkan kondisi kesehatan  inang  dan  akhirnya  terjadi kematian. Sedangkan bakteri patogen yang bersifat akut dapat
menyebabkan  kematian  kurang  dari 24  jam  secara  mendadak  dan  masal
(Azmi,  2021).  Menurut  Cunningham et al. (2014) bakteri E. ictaluri dapat menginfeksi  inangnya  secara  akut, subakut,  dan  kronis.  Hawke et  al . (2013)  menyatakan  pada  infeksi
58±50 80±84 0.0 88±84 0.0 20.0 40.0 60.0 80.0 100.0 120.0 Kontrol Suntik Oral Rendam R era ta Wa kt u Kem at ia n (% ) Perlakuan Kontrol Suntik Oral Rendam
kronis,  setelah  bakteri  menginfeksi kantung olfaktorius selanjutnya menyebar ke sepanjang saraf olfaktorius menuju otak, menyebabkan  meningoenchephalitis Infeksi E. ictaluri secara akut diduga melalui mukosa usus dan menyebabkan bakteremia. Infeksi bakteri E. ictaluri melalui  injeksi  secara  intramuskular pada ikan patin siam diduga mempengaruhi kecepatan waktu kematian ikan, karena bakteri langsung  masuk  ke  otot  ikan  dan merusak jaringan otot ikan. Selanjutnya masuk ke dalam pembuluh darah ikan yang
mengakibatkan  darah  mengandung bakteri.  Hal  ini  sesuai  dengan  Dung (2010) menyatakan bahwa bakteri ini memasuki  inang  melalui  berbagai rute,  dimana  rute  masuk  bakteri mempengaruhi
perkembangan
penyakit  dalam  inang.  Menurut Noales et  al. (2001)  menyatakan bahwa terdapat lima rute masuk (port entry)  bakteri,  yaitu  melalui  kulit (daging),  mulut,  hidung,  anus  dan insang. Hal tersebut tentunya mempengaruhi  gejala  klinis  dan waktu kematian ikan yang terinfeksi.
Faktor  virulensi E.  ictaluri ditemukan  pada  beberapa  bagian diantaranya  flagela  (Newton  dan Triche  1993),  kapsul  ekstraseluler polisakarida  (Standley et  al .,  1994), lipopolisakarida  (Lawrence et  al .
2001),  protein  membran  luar  (Arias et  al .,  2003),  hemolisin  (Williams dan Lawrence 2005) dan kondroitinase  (Copper et  al .,  1996). Edwarsiella ictaluri merupakan bakteri  penyebab terjadinya penyakit bakterial sistemik Enteric Septicemia of Catfish (ESC) (Rahmawati, 2021).

## Laju Pertumbuhan Spesifik
Perbedaan  metode  vaksin  pada dosis  yang  berbeda  berpengaruh terhadap  laju  pertumbuhan  spesifik ikan  patin  siam.  Pada  gambar  4 diketahui  bahwa  pemberian  vaksin metode  rendam  menggunakan  dosis 10 9 CFU/ml  memiliki  nilai  rata-rata laju  pertumbuhan  spesifik  paling tinggi  diantara  perlakuan  lainnya. Sementara  itu,  perlakuan  kontrol pada  metode  vaksin  suntik  memiliki rata-rata persentase laju pertumbuhan spesifik  terendah  diantara  perlakuan lainnya.
Keterangan: A: kontrol, B: dosis vaksin 10 7 CFU/ml, C: dosis vaksin 10 8 CFU/ml, D: dosis vaksin10 9 CFU/ml Gambar 4. Laju Pertumbuhan Spesifik Ikan Patin Siam.
Pemberian  vaksin  dengan  metode rendam  menghasilkan  laju  pertumbuhan spesifik  yang  paling  tinggi  daripada metode suntik dan oral. Laju pertumbuhan  spesifik  pada  metode suntik  berkisar  0,98-2,80%  dan  metode oral berkisar 1,73-2,10%. Laju pertumbuhan  spesifik  pada  metode rendam  berkisar  4,68-5,03%.  Hal  ini diduga  karena  penyerapan  vaksin  ke dalam  tubuh  ikan  berlangsung  secara maksimal  sehingga  meningkatkan  imun tubuh ikan. Meningkatnya  imun  tubuh  ikan berpengaruh terhadap pemanfaatan pakan  yang  diberikan.  Keefektifan dalam  pemanfaatan  pakan  dapat  terlihat dari  nilai  laju  pertumbuhan  spesifik. Laju  pertumbuhan  spesifik  meningkat apabila pemanfaatan pakan tinggi. Pakan
yang  diberikan  dapat  dimakan  dengan baik  dan  energi  dari  pakan  tidak  hanya digunakan  untuk  pemeliharaan  tubuh tetapi juga untuk pertumbuhan (Martilesi et al., 2018). Adanya penambahan bobot dan  panjang  pada  ikan  menunjukkan bahwa  kandungan  energi  pada  pakan yang  dikonsumsi  melebihi  kebutuhan energi  yang  digunakan  ikan  untuk beraktivitas (Astriani et al., 2019).

## Uji Patogenitas
Uji  patogenitas  pada  penelitian  ini meliputi pengamatan gejala fisik, tingkah  laku,  dan  nekropsi  ikan  patin siam.  Berdasarkan  hasil  pengamatan yang  dilakukan  diketahui  bahwa,  semua perlakuan  menimbulkan  kelainan  yang sama.  Hasil  pengamatan  dapat  dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Uji Patogenitas ikan patin siam
No Parameter pengamatan Keterangan 1 Gejala fisik Pigmen warna tubuh ikan menjadi pucat, insang pucat, anus berwarna kemerahan, terdapat luka, serta terjadi peradangan pada bagian perut ikan uji yang menyebabkan perut ikan membengkak 2 Tingkah laku Pergerakan ikan menjadi pasif, ikan cenderung berenang kepermukaan dan kurangnya keseimbangan pada tubuh ikan 3 Nekropsi Terdapat cairan bening pada bagian perut, pada bagian organ dalam terdapat bintik putih atau biasa disebut nodul di bagian hati, ginjal dan limpa ikan patin siam. Ikan  patin  siam  yang  diinfeksi E. Ictaluri pada  masing-masing  perlakuan menunjukkan gejala fisik berupa perubahan    warna  tubuh  ikan  menjadi pucat,  insang  pucat,  anus  berwarna kemerahan,  terdapat  luka,  serta  terjadi peradangan  pada  bagian  perut  ikan  uji yang menyebabkan perut ikan membengkak.  Huys et  al., (2002) menyatakan  bahwa  bakteri E.  ictaluri dapat  memproduksi  toksin  β-hemolisin,
toksin  tersebut  memecah  sel darah merah  hingga  sel  darah  merah  keluar dari pembuluh dan menyebabkan bercak
merah  pada  kulit. Gejala  klinis  internal ikan  patin  siam  pada  masing-masing perlakuan  yaitu,  terdapat  cairan  bening pada  bagian  perut,  pada  bagian  organ dalam  terdapat  bintik  putih  atau  biasa disebut  nodul  di  bagian  hati,  ginjal  dan limpa  ikan  patin  siam.  Hal  ini  dapat mengakibatkan  terjadinya  dropsy  pada ikan  yang  terinfeksi,  karena  ginjal  tidak berfungsi  dengan  baik,  sehingga  terjadi retensi  cairan  yang  membuat  perutnya membengkak  dan  cairan  tidak  bisa keluar dari tubuh.
Setelah diinfeksi  bakteri E. Ictaluri, ikan  patin  siam  pada  masing-masing perlakuan  menunjukkan  tingkah  laku yang  tidak  normal  dimana  ciri-cirinya adalah  pergerakan  ikan  menjadi  pasif, ikan  cenderung  berenang  kepermukaan dan  kurangnya  keseimbangan  pada tubuh ikan. Koswara (2009) menyatakan kerusakan jaringan pada otak mengakibatkan  terganggunya  kontrol pergerakan  dan  keseimbangan  ikan dalam berenang, sehingga terjadi perubahan  perilaku  gerakan  renang  ikan menjadi  tidak  normal  (gerak  renang vertikal). Sementara  itu  Williams  dan Lawrence  (2005)  dalam  penelitiannya melaporkan  bahwa E.  ictaluri dapat menghasilkan  hemolisin  dengan  tipe β- hemolysis yang  merupakan  salah  satu faktor virulensi bakteri tersebut. Hemolisin merupakan enzim ekstraseluler yang bersifat toksik, sehingga diduga enzim ini ikut berperan dalam  kerusakan  sel  hati  ikan  patin setelah terinfeksi E. ictaluri .
Sakai  et  al.  (2008),  merincikan gejala-gejala  klinis  ikan  yang  terserang penyakit  ESC  antara  lain,  terdapat
bercak  merah  pada  kulit  di  area  bawah rahang,  operkulum  (tutup  insang),  di sekitar  bagian  perut,  anus  dan  bawah sirip.  Abdomen  atau  perut  ikan,  liver, limpa dan ginjal membengkak serta pola renang ikan yang abnormal, yaitu secara vertikal dengan kepala mengarah ke atas atau  di  permukaan  air.  Hal  serupa  juga diungkapkan  oleh  Ali et  al. (2014), bahwa  ikan  yang  terserang  ESC  dan edwardsiellosis  akan  memperlihatkan tanda-tanda pergerakan renang melambat dan mati, warna kulit memucat, terdapat lendir yang
berlebihan, terdapat luka, pembengkakan serta  peradangan  dari  anus  sampai pangkal  ekor  dan  peradangan  di  bagian mulut  serta  di  bagian  tubuh  ikan  lain seperti  bagian  sirip  punggung,  dada  dan ekor berwarna kemerahan.

## Kualitas Air
Kualitas  air  merupakan  salah  satu faktor  penunjang  pertumbuhan  dan kelangsungan hidup ikan patin. Parameter  kualitas  air  yang  diamati selama penelitian meliputi pH, DO, suhu dan amoniak (Tabel 2).
Tabel 2. Hasil pengukuran kualitas air
Parameter Satuan Sampling Nilai Optimum Awal Tengah Akhir pH - 6.4-8.8 6.3-7.1 6.1-6.9 6,5-9,0 (Andriyanto dkk. 2012) DO mg/L 4.31- 7.39 5.64- 6.74 4.93- 7.31 >5 mg/L (Sihotang, 2018) Suhu °C 26.6-30 26.9-30 27-31 24-30 (Purba et al, 2017) Amoniak mg/L 0.01- 0.09 0.00- 0.01 0.07- 0.08 < 1 mg/l (Ahmadi et al, 2012) Kualitas  air  yang  baik  dapat mendukung  fungsi  fisiologis  pada tubuh  ikan  untuk  bekerja  secara optimal (Putra et al ., 2013). Suhu air sangat
mempengaruhi
laju
metabolisme  dan  pertumbuhan  ikan patin siam. Kisaran suhu pada media pemeliharaan selama penelitian yaitu 26 o C-  31 o C.  Selain  suhu,  pH  media
pemeliharaan berperan dalam pertumbuhan dan tingkat kelulushidupan  ikan  patin  siam.  pH memberikan gambaran pada intensitas asam-basa air
pemeliharaan.
Berdasarkan  hasil  pengukuran kualitas  air,  diperoleh  kisaran  pH pada  media  pemeliharaan  yaitu  6,1-
8,8.  Oksigen  terlarut  berperan  dalam proses  metabolisme  dalam  tubuh ikan. Oksigen terlarut pada penelitian ini  berkisar  antara  4,3  mg/L  sampai 7,3  mg/L.  Amonia  dalam  bentuk tidak  terionisasi  (NH 3 )  pada  media pemeliharaan  akan  bersifat  toksik bagi  ikan  patin  siam.  Berdasarkan hasil pengukuran amonia pada media pemeliharaan  berkisar  antara  0,001- 0,09 mg/L.
Minggawati  &  Saptono  (2012), menyatakan  bahwa  kisaran  suhu untuk  ikan  patin  yang  baik  adalah 25-32oC.  pH  6-8,5,  oksigen  terlarut 3-7 mg/L dan ammonia kurang dari 1 mg/L. Kualitas air sebagai parameter dalam penelitian ini berperan sebagai data  pendukung,  yang  menjelaskan bahwa  kualitas  air  selama  penelitian masih  dalam  rentang  yang  sesuai dengan  kebutuhan  hidup  ikan  dan kecepatan waktu kematian ikan tidak dipengaruhi  oleh  kualitas  air  yang berubah.

## Kesimpulan dan Saran
Vaksin Whole  cell  Edwardsiella ictaluri dengan  dosis  dan  metode pemberian  yang  berbeda  efektif dalam  melindungi  ikan  patin  siam Pangasianodon hypophthalamus terhadap  penyakit edwardsiliosis .
Tingkat  kelulushidupan,  persentase kelulushidupan relatif dan mean time to death terbaik yaitu pada perlakuan metode  vaksin  oral  dengan  dosis berbeda.  Laju  pertumbuhan  spesifik tertinggi  yaitu  pada  metode  vaksin rendam dengan dosis 10 9 CFU/ml.
Saran  yang  dapat  disampaikan adalah  perlu  adanya  pengamatan tambahan seperti pengujian laboratorium untuk mendukung hasil pengamatan dilapangan agar
mendapatkan data yang lebih akurat.

## Daftar Pustaka
Azmi.,  Nurul  H.N.,  Fatmawati.,  dan Olga.  2021.  Virulensi  bakteri Edwardsiella  ictaluri penyebab penyakit Enteric  Septicemia  Of Catfish  (ESC )  pada  ikan  patin siam  ( Pangasius  pangasius ). Fish Scientiae, 11 :3-11 Cunningham  FL,  Jack  SW,  Hardin
D,  Wills  RW.  2014.  Risk  factors associated with enteric septicemia of catfish on mississippi commercial catfish farms. Journal of Aquatic Animal Health 26: 84– 90.
Danny,  M.E.S.  2017. Imunogenitas vaksin inaktif whole cell
Edwardsiella    tarda    pada  ikan koi  (Cyprinus  carpio). (Skripsi). Universitas Brawijaya Ghufran, M., H.Kordi K.2010. Budidaya  Ikan  Patin  di Kolam Terpal .Yogyakarta. ANDI
Hawke  JP,  Kent  M,  Rogge  M, Baumgartner  W,  Wiles  J,  Shelley
J,  Savolainen  LC,  Wagner  R,
Murray  K,  Peterson  TS.  2013. Edwardsiellosis caused by Edwardsiella ictaluri in laboratory populations of zebrafish Danio  rerio . Journal  of Aquatic  Animal  Health 25:  171–
183. Kholidin, E.B., Rahmadnoviandi, A., Astuti,  I  dan  Ediwarman.  2019. Deteksi bakteri Edwarsiella ictaluri pada ikan patin
( Pangasianodon  hypophthalmus ) yang  dibudidayakan  di  Provinsi Sumatera  Selatan  dengan  metode serologi  dan  uji  biokimia. Jurnal Perekayasaan akuakultur Indonesia . 1 (3) : 49-56.
Manurung,U.N  &  Susantie,  D.2017. Identifikasi  bakteri  patogen  pada
ikan  Nila  ( Oreochromis  niloticus) di  lokasi  budidaya  ikan  air  tawar Kabupaten  Kepulauan  Sangihe.
Jurnal  Budidaya  Perairan .  5  (3): 11 – 17 Nitimulyo,  K.H.  1997.  Uji  lapang penggunaan  vaksin Aeromonas
hydrophila pada  lele  dumbo ( Clarias gariepinus). Jurnal Perikanan  UGM  (GMU  J.  Fish Sci.) I (2): 17-24. Purwaningsih U,. Novita H,. Sugiyani  D,.  dan  Andriyanto  S,. 2019. Identifikasi dan Karakterisasi  Bakteri Edwarsiella ictaluri Penyebab Penyakit Enteric  Septicemia  of  catfish ( ESC) Pada Ikan Patin ( Pangasius sp .). Jurnal  Riset  Akuakultur , 14(1):47-57
Rahmawati,  A.R,  Ulkhaq,  M.F,
Susanti. D, Kenconojati. H, Fasya. A.H.  2021.  Identifikasi  bakteri Aeromonas    salmonicida dan Edwardsiella  ictalury pada  ikan hidup yang akan dilalulintaskan di daerah istimewa Yogyakarta.
Journal  of  marine  and  coastal science .10 (2):68-72 Setyawan, A., Hudaidah, S.,
Ranopati,  Z.,S.,  and  Sumino. 2012. Imunogenisitas Vaksin
Inaktif Whole  Cell  Aeromonas salmonicida pada Ikan Mas
( Cyprinus  carpio ). Aquasains 1:
17–21.
Susanti W,. Indrawati A dan Pasaribu F,H,. 2016. Kajian Patogenitas    Bakteri  Edwarsiella ictaluri pada ikan patin Pangasianodon hypopthalmus. Jurnal Akuakultur Indonesia 15(2):99-107 Susanti,wiwik., Indrawati,agustin dan  Pasaribu  fachrian  H.  2016. Kajian patogenisitas bakteri
Edwardsiella  ictaluri  pada  ikan patin Pangasionodon hypophthalmus. Jurnal Akuakultur  Indonesia 15(2),  99- 107 Susanti,  S.,  Lestari,  D.  A.  H.,  & Kasymir, E. 2017. Sistem agribisnis  ikan  patin  (Pangasius sp) kelompok budidaya ikan sekar mina  di  Kecamatan  Kota    Gajah Lampung  Tengah. Jurnal  Ilmu- Ilmu Agribisnis, 5(2):116-123 Taukhid,  &  Purwaningsih,  U.  2011.
Efikasi  berbagai  sediaan  vaksin Streptococcus  agalactiae untuk pencegahan penyakit streptococcosis pada  ikan  nila, Oreochromis  niloticus . Prosiding Forum Inovasi Teknologi Akuakultur , 667-679