## PENGARUH EKSTRAK DAUN TEBU TERHADAP KADAR MALONDIALDEHID PLASMA TIKUS YANG DIINDUKSI KARBON TETRAKLORIDA

## THE EFFECT OF SUGARCANE LEAF EXTRACT ON MALONDIALDEHYDE PLASMA LEVELS IN CARBON TETRACHLORIDE-INDUCED RATS
IKA PUSPITA DEWI 1 , JIHAN ULYA ULINNUHA 1 , DIANA HOLIDAH 1
1 KELOMPOK RISET PRECLINICAL PHARMACOLOGY BAGIAN FARMASI KLINIK DAN KOMUNITAS FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS JEMBER JL KALIMANTAN I/2 KAMPUS TEGALBOTO JEMBER JAWA TIMUR e-mail: ikapdewi@unej.ac.id

## Abstrak
Peroksidasi  lipid  akibat  radikal  bebas  dapat  menyebabkan  kematian  sel  yang dapat merusak berbagai organ, termasuk liver. Hal ini dapat ditandai dengan peningkatan kadar malondialdehid. Pengukuran parameter ini pada darah dan organ digunakan sebagai penanda adanya stres oksidatif. Radikal bebas akibat peroksidasi  lipid  dapat  diredam  dengan  senyawa  antioksidan.  Beberapa penelitian  telah  membuktikan  aktivitas  antioksidan  tebu  ( Saccharum officinarum ).  Daun  tebu  dan  jus  tebu  dari  varietas  yang  berbeda-beda  telah menunjukkan  sifat  antioksidan  yang  baik.  Penelitian  ini  dilakukan  untuk mengetahui  efek  ekstrak  etanol  tebu  dengan  berbagai  dosis  terhadap  kadar malondialdehid  plasma  tikus  yang  diinduksi  stress  oksidatif  dengan  karbon tetraklorida  (CCl 4 ).  Daun  tebu  diekstraksi  dengan  maserasi  dengan  pelarut etanol  96%.  Pembuatan  kurva  baku  malondialdehid  dilakukan  dengan  seri larutan  1,1,2,2- tetraethoxypropane .  Pengujian  dilakukan  terhadap  hewan  uji tikus  Wistar  yang  dibagi  menjadi  beberapa  kelompok.  Pembagian  kelompok meliputi  kelompok  normal  tanpa  induksi  CCl 4 diberikan  CMC-Na  1%;  kontrol negatif diberikan CMC-Na 1%; kontrol positif diberikan Silybum marinum yang 100  mg/kgBB;  kelompok  dosis  yang  terdiri  atas  300,  400,  dan  500  yang masing-masing  diberikan  ekstrak  etanol  daun  tebu  dosis  dengan  dosis  300 mg/kgBB, 400 mg/kgBB dan 500 mg/kgBB berturut-turut. Tikus diperlakukan sepanjang  14  hari  lalu  diambil  sampel  plasmanya  pada  hari  ke-15  untuk pengukuran  kadar  malondialdehid.  Hasil  ekstraksi  daun  tebu  mendapatkan rendemen  sebesar  16,05%.  Kurva  baku  yang  digunakan  untuk  mengukur malondialdehid plasma tikus adalah y = 0,0059x + 0,0238. Hasil menunjukkan pemberian ekstrak daun tebu semua dosis memiliki nilai malondialdehid yang lebih rendah dibandingkan kontrol negatif. Dosis 400 mg/kgBB tidak memiliki perbedaan  signifikan  dengan  kontrol  positif,  sedangkan  dosis  500  mg/kgBB lebih rendah dibanding dengan kontrol positif. Hal ini diduga karena metabolit sekunder  seperti  flavon  yang  terdapat  pada  ekstrak  yang  dapat  meredam radikal  bebas.  Ekstrak  etanol  daun  tebu  dapat  berperan  sebagai  antioksidan dengan menurunkan kadar malondialdehid darah tikus terinduksi CCl 4 .
Kata kunci : Karbon tetraklorida, daun tebu, malondialdehid, tikus
Jurnal Farmasi,  e-ISSN: 2655-0814 Vol. 5 No.1 Edisi Mei-Oktober 2022 http://ejournal.medistra.ac.id/index.php/JFM ============================================================================================ Received: 22 September 2022 :: Accepted: 31 Oktober 2022 :: Published: 31 Oktober 2022

## Abstract
Lipid  peroxidation  due  to  free  radicals  causes  damage  to  various  organs, including  the  liver,  and  characterize  by  elevating  malondialdehyde  levels. Measurement of malondialdehyde in blood and organs is used as an oxidative stress  marker.  Free  radicals  can  be  neutralized  with  antioxidants.  Sugarcane (Saccharum officinarum) juice and leaves have been proven to have antioxidant activity. This study aimed to investigate the effect of sugarcane leaf extract on the  plasma  malondialdehyde  levels  of  rats  induced  by  oxidative  stress  with carbon  tetrachloride.  The  maceration  method  with  96%  ethanol  solvent  was used to extract sugarcane leaves. The standard curve for malondialdehyde was made using a series of 1,1,2,2-tetraethoxypropane solutions. Tests were carried out  on  Wistar  rats  which  were  split  up  into  several  groups.  Those  groups included the normal group was given 1% CMC-Na without CCl4 induction; the negative group was given 1% CMC-Na; the positive group was given Silybum marinum 100 mg/kg BW; dose groups consisting of 300, 400, and 500 each of which was given a dose of sugarcane leaf extract at a dose of 300 mg/kg BW, 400 mg/kg BW and 500 mg/kg BW, respectively. Rats were treated for 14 days, and plasma samples were taken on the 15th day. The extraction of sugarcane leaves got a yield of 16.05%. The standard curve of malondialdehyde was y = 0.0059x + 0.0238. The results showed that all doses of sugarcane leaf extract had a lower malondialdehyde value than the negative control. The dose of 400 was not significantly different from the positive  group, while the dose of 500 was lower than the positive control. This is presumably caused by the content of  phytoconstituent,  such  as  flavones  in  the  extract,  which  can  reduce  free radicals.  Sugarcane  leaf  extract  can  act  as  an  antioxidant  by  reducing  blood malondialdehyde levels in CCl4-induced rats.
Keywords : Carbon tetrachloride, sugarcane leaf, malondialdehyde, rats

## 1. PENDAHULUAN
Peroksidasi  lipid  yang  diinduksi
reactive
oxygen species (ROS)
berperan  penting  dalam  kematian  sel. ROS  dalam  jumlah  besar  dapat menyerang biomembran sehingga menginisiasi terjadinya peroksidasi lipid dan  menyebabkan  cedera  sel  yang berujung pada kematian sel (Su et al., 2019).  Peroksidasi  lipid  merupakan proses  dengan  berbagai  tahapan  yang melibatkan  pembentukan  berbagai radikal bebas dari polyunsaturated fatty acids (PUFA)/  asam  lemak  tak  jenuh. Induksi  kematian  sel  oleh  peroksidasi lipid  dapat  menyebabkan  kerusakan berbagai  organ  seperti  hati.  Hal  ini ditandai  dengan  peningkatan  kadar
pada  parameter  peroksidasi  lipid misalnya malondialdehid (MDA) (Woolbright & Jaeschke, 2018).
Malondialdehid  merupakan  hasil akhir  dari  peroksidasi  lipid  akibat pemutusan rantai asam lemak. Tingginya kadar MDA pada darah dapat menandakan  banyaknya  radikal  bebas dan  lemak  tak  jenuh  yang  bereaksi dalam tubuh. Hal inilah yang menyebabkan  MDA  dapat  merupakan salah satu parameter aktivitas antioksidan (Arora, Vig, & Arora, 2013). Pengukuran  kadar  MDA  pada  organ digunakan  sebagai  penanda  adanya stres  oksidatif  pada  organ  tersebut, misalnya pada liver (Itoh et al., 2010). Reaksi  ini  dapat  merusak  sel-sel  liver
secara berantai dan memicu terjadinya inflamasi.  Terjadinya  inflamasi  yang tidak  terkontrol  pada  liver  akan mengakibatkan  adanya  nekrosis  sel dan  sirosis  liver  (Tristanti,  Fatimawali,
& Widdhi, 2013).
Radikal  bebas  seperti  ROS  yang
terbentuk akibat peroksidasi lipid dapat diredam  dengan  senyawa  antioksidan. Beberapa penelitian menyatakan bahwa beberapa ekstrak tanaman yang megandung  senyawa  fenolik  dan flavonoid memiliki kemampuan sebagai antioksidan. Tebu ( Saccharum officinarum )  merupakan  salah  satu tanman  yang  telah  terbukti  sebagai antioksidan  pada  beberapa  penelitian (Ali,  El  Gedaily,  Mocan,  Farag,  &  El- Seedi, 2019).
Tebu ( Saccharum officinarum )
berasal  dari  Asia  Selatan  Tropis  dan Asia  Tenggara.  Di  Indonesia,  tanaman ini dibudidayakan karena nilai ekonomisnya  yang  tinggi.  Beberapa penelitian  menyatakan  bahwa  tebu telah  terbukti  sebagai  antioksidan. Abbas,et  al  (2014)  menyatakan  daun tebu  dan  jus  tebu  dari  varietas  yang berbeda-beda menunjukkan sifat antioksidan  yang  baik.  Sedangkan Khan  et  al,  (2018)  menunjukkan  efek hepatoprotektif dari jus tebu pada tikus yang diberi isoniazid (INH) dan memiliki efek  perlindungan  yang  lebih  baik dibandingkan dengan vitamin C dengan dugaan mekanisme sebagai antioksidan. Penelitian kami sebelumnya membuktikan  bahwa  ekstrak  etanol daun tebu berpotensi
sebagai hepatoprotektif pada tikus yang diberikan  karbon  tetraklorida  (CCl 4 ) (Dewi  et  al.,  2021).  CCl 4 adalah  salah satu  contoh  hepatotoksin  yang  sering dipakai untuk menginduksi cedera liver karena  metabolitnya  yang  berupa radikal bebas. Pemberian ekstrak daun tebu  diharapkan  dapat  mengurangi jumlah  radikal  bebas Penelitian  ini
dilakukan  untuk  mengetahui  efek ekstrak  etanol  tebu  dengan  berbagai dosis  terhadap  kadar  malondialdehid plasma  tikus  yang  diinduksi  stress oksidatif  dengan  karbon  tetraklorida (CCl 4 ).

## 2. METODE BAHAN
Bahan penelitian antara lain daun tebu, etanol
96%, aquadest, karbon tetraklorida  (CCl 4 )  (Merck),  ekstrak terstandar Silybum  marinum (Puritan’s Pride), CMC Na 1%, kloroform, 1,1,3,3- tetraethoxypropane  (TEP)  (Sigma),  tri kloro  asetat  (TCA)  20%  (Sigma),  Na- TBA  1%  (Sigma),  HCl  1  N  (Sigma), NaOH, pakan dan sekam hewan.

## ALAT
Alat penelitian meliputi rotary evaporator , timbangan analitik (Ohaus), mikropipet  (Socorex  Swiss),  timbangan hewan,  sonde,  alat  bedah,  spuit, microtube , sentrifuge (Hettich, EBA 20), vortex,  kuvet,  spektrofotometer  UV-Vis (Labomed, Inc
UVD-2950), dan peralatan gelas.

## PEMBUATAN EKSTRAK ETANOL DAUN TEBU
Daun tebu yang digunakan berasal dari Pakis  Kecamatan  Panti  Kabupaten Jember.  Sampel  daun  dibersihkan dengan  air  mengalir  dan  dikecilkan ukurannya  lalu  dikeringkan.  Potongan daun  yang  sudah  kering  kemudian dihaluskan menjadi serbuk daun tebu. Serbuk  daun  tebu  dimaserasi  dengan etanol  96%  (1:10).  Serbuk  tersebut dimaserasi  selama  48  jam  kemudian disaring menggunakan buchner sehingga  menghasilkan  ekstrak  cair. Ampas sisa diremaserasi dengan etanol 96% (1:5) kemudian diperlakukan sama dengan  sebelumnya.  Hasil  keduanya digabung untuk dipekatkan  pada rotary evaporator (suhu  50 ℃ ) .  Rendemen
ekstrak  kemudian  dihitung  dengan rumus berikut:
Persen rendemen= Berat  ekstrak  yang  diperoleh/  Berat simplisia  yang  diekstraksi  x  100% ........ ………………………………………………….(1)

## PENGELOMPOKAN DAN PERLAKUAN HEWAN UJI HEWAN UJI
Hewan uji diklasifikasikan menjadi enam kelompok. Hewan tersebut diperlakukan selama  14  hari  melalui  per  oral  (po). Hewan uji diinduksi dengan CCl 4 (dosis 1 mL/kgBB)  dengan  diinjeksi  melalui intraperitonial  (ip)  (Panjaitan  et  al., 2007).  Setiap  kelompok  (n=4  tikus) dengan  pembagian  berikut  beserta perlakuannya:
• Kelompok normal :  CMC-Na 1% (po) dan aquadest (1 mL/kgBB) (ip).
• Kelompok  kontrol  negatif:  CMC-Na 1% (po) dan CCl 4 (ip).
• Kelompok  kontrol  positif: Silybum marinum 100  mg/kgBB  (po)  dan larutan CCl 4 (ip).
• Kelompok  dosis  300:  ekstrak  daun tebu  dosis  300  mg/kgBB  (po)  dan larutan CCl 4 (ip).
• Kelompok  dosis  400:  ekstrak  daun tebu dosis 400 mg/kgBB dan larutan CCl 4 (ip).
• Kelompok  dosis  500:  ekstrak  daun tebu  dosis  500  mg/kgBB  (po)  dan larutan CCl 4 (ip).
Komisi Etik Penelitian Kesehatan (KEPK) Fakultas  Kedokteran  Gigi  Universitas Jember  telah  memberikan  persetujuan etik untuk
penelitian ini (No. 584/UN25.8/KEPK/DL/2019).

## PEMBUATAN KURVA BAKU MDA
Pengukuran nilai MDA plasma tikus post- test
menggunakan metode Thiobarbituric Acid Reactive Substances (TBARS) (Grotto et al., 2009). Pembuatan  kurva  baku  menggunakan reagen 1,1,2,2-tetraethoxypropane
(TEP)  yang  dilarutkan  dalam  aquadest.
Pembuatan  kurva  baku  dilakukan dengan  membuat  10  seri  konsentrasi larutan  TEP  yaitu  5-39  µM.  Masing- masing larutan diambil 50 µL kemudian dicampurkan  dengan  1  mL  aquadest, 100  µL  TCA  20%,  250  µL  HCl  1  N  dan 100  µL  Na-TBA  1%.  Pencampuran dilakukan  dengan  vortex  kemudian dipanaskan dalam air suhu 100 ℃ dalam waktu  30  menit.  Tabung  kemudian didinginkan pada suhu ruang selama 10 menit lalu dianalisis dengan spektrofotometer UV-Vis (λ= 532 nm).

## ANALISIS MDA PLASMA
Pengukuran kadar
MDA plasma menggunakan metode penelitian Grotto et  al.,  (2009).  Pengambilan  sampel darah post test dilakukan pada hari ke- 15.  Sampel  darah  diambil  secara intrakardial  dan  dimasukkan  dalam tabung
EDTA. Sampel
darah disentrifugasi  (3000  rpm)  selama  10 menit lalu diambil plasma darahnya. Sebanyak  50  µL  plasma  darah  tikus ditambahkan  aquadest  sebanyak  1  mL, TCA  20%  100  µL,  HCl  1  N  250  µL  dan Na-TBA  1%  100  µL.  Larutan  divortex agar homogen lalu kemudian dipanaskan  dalam  air  mendidih  (100 ℃ ) selama  30  menit.  Larutan  kemudian diinkubasi  selama  10  menit  pada  suhu ruang.  Larutan  yang  sudah  dingin disentrifugasi  (3000  rpm,  10  menit) kemudian diambil supernatannya. Hasilnya dianalisis dengan
spektrofotometer  UV-Vis (λ=  532  nm) untuk mengetahui abosrbansinya.

## ANALISIS STATISTIK
Data kadar MDA plasma serum post-test per  kelompok  lalu  dilakukan  analisis normalitas  menggunakan  uji  Shapiro- Wilk  dan  uji  homogenitas  data  dengan uji  Levene.  Uji  statistik  dilanjutkan dengan One-Way  Anova dan  uji Least Significantly Difference (LSD).

## 3. HASIL EKSTRAKSI
Simplisia  daun  tebu  yang  diekstraksi sebanyak 250 g serbuk daun tebu. Hasil penimbangan  ekstrak  diperoleh  berat 40,125  g.  Berdasarkan  perhitungan dengan  persamaan  (1)  diperoleh  nilai rendemen  ekstrak  etanol  daun  tebu adalah 16,05%.

## KURVA BAKU MDA
Pembuatan  kurva  baku  MDA  dilakukan dengan pembuatan seri konsentrasi TEP sebanyak  10  seri.  Hasil  menunjukkan persamaan  kurva  baku  adalah  y  = 0,0059x  +  0,0238  (r  =  0,996).  Hasil kurva baku dapat dilihat pada gambar 1. Persamaan kurva baku tersebut dipakai untuk  menghitung  kadar  MDA  plasma tikus.

## Gambar 1.  Kurva Baku Malondialdehid

## ANALISIS MDA PLASMA
Data  kadar  MDA  plasma  tikus  pada tabel  1  menunjukkan  bahwa  induksi karbon  tetraklorida  tanpa  adanya pemberian ekstrak nilai MDA lebih besar dibandingkan  kelompok  normal.  Hal tersebut  menunjukkan  bahwa  induksi CCl 4 dengan  dosis  1  ml/kgBB  dapat menyebabkan  peningkatan  kadar  MDA. Pemberian  proteksi  atau  pencegahan berupa silymarin dan ekstrak daun tebu menunjukkan nilai MDA yang lebih kecil dibandingkan dengan kelompok negatif. Hasil  analisis  (tabel  1)  menunjukkan pemberian  semua  dosis  ekstrak  daun
tebu  memiliki  nilai  MDA  yang  lebih rendah  dibandingkan  kontrol  negatif. Hasil menunjukkan ekstrak etanol daun tebu dosis 400 mg/kgBB tidak memiliki perbedaan  signifikan  dengan  kontrol positif,  sedangkan  dosis  500  mg/kgBB lebih  rendah  dibanding  dengan  kontrol positif.  Hal  ini  menunjukkan  adanya aktivitas  antioksidan  dari  ekstrak  daun tebu.
Tabel 1. Kadar MDA plasma tikus
y = 0,0059x + 0,0238 R² = 0,9929 0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0 10 20 30 40 50 A bsor bansi Konsentrasi (µM)
Jurnal Farmasi,  e-ISSN: 2655-0814 Vol. 5 No.1 Edisi Mei-Oktober 2022 http://ejournal.medistra.ac.id/index.php/JFM ============================================================================================ Received: 22 September 2022 :: Accepted: 31 Oktober 2022 :: Published: 31 Oktober 2022
Kelompok Perlakuan Rata-rata Kadar MDA ± SD (µM) Normal 3,55 ± 2,76 a Negatif (-) CMC Na 11,246 ± 1,43 b Positif (+) Silymarin 100 mg/kgBB 6,186 ± 1,28 c Ekstrak etanol daun tebu 300 mg/kgBB 9,442 ± 0,63 b Ekstrak etanol daun tebu 400 mg/kgBB 7,11 ± 1,26 c Ekstrak etanol daun tebu 500 mg/kgBB 3,471 ± 0,79 a
Data  ditunjukkan  dalam  rata-rata  ±  SD  dengan  n=4.  Huruf superscript yang  sama menunjukkan antar perlakuan tidak terdapat perbedaan yang signifikan berdasarkan uji LSD (p < 0,05).

## 4. PEMBAHASAN
Penelitian  ini  menggunakan  CCl 4 sebagai  penginduksi  cedera  oksidatif. CCl 4 di dalam tubuh akan diaktivasi oleh sitokrom  P450  di  liver  sehingga membentuk  radikal  triklorometil  dan radikal triklorometil peroksi yang sangat reaktif  (Panjaitan  et  al.,  2007).  Radikal ini  menyerang  lipid  membran  dan menyebabkan  peroksidasi  lipid  yang dapat meningkatkan kadar MDA (Chiu et al.,  2018).  Selain  itu,  hal  ini  akan menyebabkan  terjadinya  perubahan sifat  fisika  dan  kimia  membran  sel, sehingga berpengaruh pada fluiditas dan permeabilitasnya  untuk  pertukaran  ion yang  mengakibatkan  kebocoran  enzim dalam darah dan akhirnya menyebabkan pembengkakan,  sitolisis,  dan  kematian sel  (Fujimoto  &  Iimuro,  2010).  Induksi CCl 4 ini  akan  mengganggu  membran plasma
hepatoseluler sehingga
menyebabkan  enzim  yang  terdapat dalam sitosol (alanin transaminase (ALT) dan aspartat  aminotransferase  (AST)) dilepaskan  ke  dalam  aliran  darah  dan menyebabkan  hepatotoksisitas  (Chiu  et al., 2018).
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan ekstrak  daun  tebu  memiliki  kadar  MDA yang  rendah  dalam  darah  tikus  yang diinduksi  CCl 4 (Tabel  1).  Hal  ini menunjukkan  adanya  aktivitas  daun tebu  sebagai  penghambat  peroksidasi lipid dengan berperan
sebagai antioksidan.    Pada  penelitian Silybum
marinum yang  mengandung  silymarin digunakan sebagai kontrol positif karena aktivitasnya  sebagai  antioksidan  dan berperan sebagai hepatoprotektif dengan  penghambatan  radikal  bebas yang  dihasilkan  oleh  metabolisme  zat toksik, salah satunya karbon tetraklorida (Vargas-Mendoza et al., 2014).
Penelitian  mengenai  tebu  sebagai antioksidan telah dilakukan sebelumnya. Penelitian  oleh  Lee  et  al.,  (2013) menunjukkan bahwa pretreatment dengan  ekstrak  air  daun  tebu  mampu meredam  aktivitas  ROS  pada  sel  hati tikus klon 9 yang diinduksi dengan t-BHP ( tert-butyl  hidroperoxide ).  Coutinho  et al.,  (2016)  membuktikan  metabolit sekunder  yang  diidentifikasi  pada ekstrak  hidroalkohol  daun  tebu  adalah beberapa turunan asam hidroksisinamat,  asam  benzoat,  dan flavon.  Vila  et  al  (2008)  menyatakan bahwa daun tebu mengandung luteolin- 8-C-rhamnosylglucoside
(flavon
glikosida)  yang  dapat  menangkap senyawa  radikal.  Luteolin  memiliki mekanisme antioksidan dengan meredam  radikal  bebas,  mengkelat logam transisi, menginhibisi enzim pro- oksidan dan memicu enzim antioksidan. Pada struktur luteolin glukosida terdapat cincin-B  katekol  dan  ikatan  rangkap pada karbon C2-C3 terkonjugasi dengan kelompok okso  pada C4, yang memiliki aktivitas  donor  atom  hidrogen  atau
elektron  sehingga  dapat  menstabilkan spesies  radikal  bebas  (López-lázaro, 2009).  Berdasarkan  hal  tersebut, antioksidan  dapat  memainkan  peran dalam mekanisme hepatoprotektif karena pada sebagian besar mekanisme kerusakan  hati  terdapat  keterlibatan stres oksidatif (Domitrović & Potočnjak, 2015).  Dengan  demikian,  daun  tebu dapat berperan sebagai antioksidan dan hepatoprotektor.

## 5. KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  daun  tebu  dapat berperan  sebagai  antioksidan  dengan menurunkan  kadar  MDA  darah  tikus terinduksi CCl 4 .

## 6. DAFTAR PUSTAKA
Abbas, S. R., Sabir, S. M., Ahmad, S. D., Boligon,  A.  A.,  &  Athayde,  M.  L. (2014).
Phenolic profile, antioxidant  potential  and  DNA damage  protecting  activity  of sugarcane ( Saccharum officinarum ). Food Chemistry , 147 , 10 – 16. https://doi.org/10.1016/j.foodche m.2013.09.113 Ali, S. E., El Gedaily, R. A., Mocan, A., Farag,  M.  A.,  &  El-Seedi,  H.  R. (2019).  Profiling  metabolites  and biological  activities  of  sugarcane ( Saccharum officinarum linn.) juice and  its  product  molasses  via  a multiplex  metabolomics  approach. Molecules , 24 (934), 1 – 21.
https://doi.org/10.3390/molecules 24050934 Arora, R., Vig, A. P., & Arora, S. (2013). Lipid  Peroxidation :  A  Possible
Marker  for  Diabetes. J  Diabetes Metab S11: , S11 (007).
https://doi.org/10.4172/2155- 6156.S11-007
Azmir.J,  Zaidul.I.S.M,  Rahman.M.M, Sharif.K.M, Mohamed. A, F.
Sahena,  (2013).  Techniques  for extraction  of  bioactive  compounds from  plant  materials:  A  review. Journal  of  Food  Engineering , 117 , 426 – 436.
Azwanida,  N.  (2015).  A  Review  on  the
Extraction Methods Use in Medicinal Plants,  Principle,  Strength  and Limitation. Medicinal  &  Aromatic
Plants , 04 (03), 3 – 8. https://doi.org/10.4172/2167-
0412.1000196
Chiu, Y. J., Chou, S. C., Chiu, C. S., Kao, C.  P.,  Wu,  K.  C.,  Chen,  C.  J.,  …
Peng, W. H. (2018).
Hepatoprotective  effect  of  the ethanol  extract  of Polygonum orientale on  carbon  tetrachloride- induced  acute  liver  injury  in  mice. Journal of Food and Drug Analysis , 26 (1), 369 – 379. https://doi.org/10.1016/j.jfda.201
7.04.007
Coutinho, I. D., Baker, J. M., Ward, J. L., Beale,  M.  H.,  Creste,  S.,  & Cavalheiro, A. J. (2016). Metabolite profiling  of  sugarcane  genotypes and  identification  of  flavonoid glycosides  and  phenolic  acids. Journal  of  Agricultural  and  Food Chemistry , 64 (21),  4198 – 4206. https://doi.org/10.1021/acs.jafc.6 b01210 Dewi, I. P., Kwintana, R. B., Ulinnuha, J. U., Rachman, F., Christianty, F. M.,
& Holidah, D. (2021).
Hepatoprotective effect of ethanolic extract  of  sugarcane  ( Saccharum officinarum Linn)  leaves. J  Basic Clin Physiol Pharmacol , 32 (4), 533 – 540.
Domitrović, R., & Potočnjak, I. (2015).
A  comprehensive  overview  of hepatoprotective natural compounds:  mechanism  of  action and  clinical  perspectives . Archives of
Toxicology (Vol. 90). https://doi.org/10.1007/s00204- 015-1580-z
Fujimoto,  J.,  &  Iimuro,  Y.  (2010). Carbon Tetrachloride-Induced Hepatotoxicity.  In Comprehensive Toxicology,  Second  Edition (2nd ed., Vol. 9, pp. 437 – 455). Oxford: Elsevier. https://doi.org/10.1016/B978-0- 08-046884-6.01018-6 Grotto,  D.,  Maria,  L.  S.,  Valentini,  J., Paniz, C., Schmitt, G., & Garcia, C. (2009).  Importance  of  The  Lipid Peroxidation Biomarkers and Methodological Aspects For
Malondialdehyde Quantification. Quim Nova , 32 (1), 169 – 174. Itoh, A., Isoda, K., Kondoh, M., Kawase,
M., Watari, A., Kobayashi, M., Yagi,
K.  (2010).  Hepatoprotective  Effect of Syringic Acid and Vanillic Acid on CCl 4 -Induced Liver Injury. Biological and Pharmaceutical Bulletin , 33 (June), 983 – 987.
Khan, S. W., Ghafoor, A., & Ahamd, N. (2018).
Hepatoprotective Properties  of  Sugarcane  Juice  and
Vitamin  C  were  compared  in  a Mouse  Model  of  Liver  Injury Induced  by  INH  (  Isoniazid  ). PJMHS , 12 (2), 764 – 767.
Lee, C. P., Chen, Z. T., Yu, P. Y., Yen, W.  J.,  Lin,  K.  M.,  &  Duh,  P.  Der. (2013).  Comparison  of  protective effects  of  three  varieties  of sugarcane  leaves  on  oxidative stress  in  Clone  9  cells. Journal  of Functional  Foods , 5 (2),  878 – 887. https://doi.org/10.1016/j.jff.2013. 01.037 López-lázaro,  M.  (2009).  Distribution and  Biological  Activities  of  the Flavonoid Luteolin. Mini-Reviews in Medicinal Chemistry , 9 (1), 31 – 59. Panjaitan,  R.  G.,  Handharyani,  E.,
Chairul,  Masriani,  Zakiah,  Z.,  & Manalu,  W.  (2007).  The  Effect  of Carbon Tetrachloride Administration  on  Liver  and  Renal Function. Makara Kesehatan , 11 (1), 11 – 16.
Su, L., Zhang, J., Gomez, H., Murugan, R.,  Hong,  X.,  Xu,  D.,  Peng,  Z. (2019).  Review  Article  Reactive Oxygen Species-Induced Lipid
Peroxidation in Apoptosis ,
Autophagy  ,  and  Ferroptosis. Oxidative  Medicine  and  Cellular Longevity , 2019 . Tristanti,  I.,  Fatimawali,  &  Widdhi,  B. (2013).  Uji  efek  hepatoprotektor ekstrak etanol daun benalu langsat ( Dendrophthoe petandra ( l .) miq .) terhadap kadar malondialdehid ( mda ) pada hati tikus putih jantan galur wistar yang diinduksi karbon tetraklorida  (  CCl  4  ). Pharmacon , 2 (03), 75 – 78. Vargas-Mendoza, N., Madrigal-Santillán, E., Morales-González, Á., Esquivel- Soto,  J.,  Esquivel-Chirino,  C., García-Luna  y  González-Rubio,  M. G., Morales-González, J. A. (2014). Hepatoprotective
effect of silymarin. World Journal of Hepatology , 6 (3), 144 – 149.
https://doi.org/10.4254/wjh.v6.i3. 144 Vila, F. C., Colombo, R., De Lira, T. O., &  Yariwake,  J.  H.  (2008).  HPLC microfractionation  of  flavones  and antioxidant  (radical  scavenging) activity  of Saccharum  officinarum L. Journal of the Brazilian Chemical Society , 19 (5), 903 – 908.
https://doi.org/10.1590/S0103- 50532008000500014 Woolbright, B. J., & Jaeschke, H. (2018).
Mechanisms of Inflammatory Liver Injury and Drug-Induced Hepatotoxicity. Current Pharmacology Reports , 4 (5), 346 – 357. https://doi.org/10.1097/00024382 -200403001-00333