## UJI EFEK ANTIBAKTERI JAMUR ENDOFIT PADA TUMBUHAN
KEMANGI ( Ocimum bassilicum L.) PADA BAKTERI UJI
Staphylococcus aureus DAN Escherichia coli
Marfincy Silva Walewangko 1) , Jimmy Posangi 1) , Paulina V.Y. Yamlean 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Endophytic  microbes  are microbes  that  live  in  plant  tissues.  Endophytic  fungi can  produce  various  functional compounds  in  the  form  of  anticancer  compounds,  antiviral,  antibacterial,  antifungal  and  plant  growth hormones. Basil (Ocimum Sanctim L.) is the largest species both in fresh form or for the production of essential oils. Ethanol and methanol extracts, from Basil leaves is stated to have antibacterial activity. This study aimed to examine the presence or absence of antibacterial effects of endophytic fungi isolated from the stem and leaves of  basil  (Ocimum  basilicum  L.)  against  Escherichia  coli  and  Staphylococcus  aureus.  The  method  used  is  an experimental laboratory by  testing  antibacterial  activity.  From the research  carried  out  four  endophytic fungi isolated from the stems and leaves of the Basil (Ocimum basilicum L.) plant. The four endophytic fungi have an antibacterial effect on the two test bacteria. Endophytic fungus from Basil stem 1.2 by 8mm which is categorized as medium and extract of Basil Stem 4.1 by 7mm which is categorized as medium and Basil Stem 1.1 by 17mm categorized as strong and Basil Leaf 2.1 by 22mm categorized as very strong. The conclusion is that endophytic fungi  isolated  from  the  Basil  (Ocimum  bassilicum  L.)  plant  obtained  from  Lemoh  Uner  Village  have antibacterial activity.
Keywords : Antibacterial, Endophytic Fungi, Basil (Ocimum basilicum L.)

## ABSTRAK
Mikroba  endofit  merupakan  mikroba  yang  hidup  di  dalam  jaringan  tumbuhan.  Jamur  endofit  dapat menghasilkan berbagai senyawa fungsional berupa senyawa antikanker, antivirus, antibakteri, antifungi serta hormon pertumbuhan tanaman. Kemangi ( Ocimum Sanctim L.) merupakan spesies terbesar baik dalam  bentuk  segar  ataupun  untuk  produksi  minyak  esensial.  Ekstrak  etanol,  metanol  daun  Kemangi dinyatakan  memiliki  aktivitas  antibakteri.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menguji  ada  tidaknya  efek antibakteri jamur endofit yang diisolasi dari batang dan daun tumbuhan  Kemangi ( Ocimum basilicum L.) terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus aureus. Metode yang digunakan ialah eksperimental laboratorium  dengan  menguji  aktivitas  antibakteri.  Dari  penelitian  yang  dilakukan  diperoleh  empat jenis  jamur  endofit  yang  diisolasi  dari  batang  dan  daun  tumbuhan  Kemangi  ( Ocimum  basilic  um L.). Keempat jamur endofit memiliki efek sebagai antibakteri terhadap kedua bakteri uji. Jamur endofit dari Kemangi batang 1.2 sebesar 8mm yang dikategorikan sedang dan ekstrak Kemangi Batang 4.1 sebesar 7mm  yang  dikategorikan  sedang  dan  Kemangi  Batang  1.1  sebesar  17mm  dikategorikan  kuat  dan Kemangi  Daun  2.1  sebesar  22mm  dikategorikan  sangat  kuat.  Kesimpulanya  jamur  endofit  yang diisolasi  dari  tumbuhan  Kemangi  ( Ocimum  bassilicum L.)  yang  diperoleh  dari  Desa  Lemoh  Uner memiliki aktivitas antibakteri.
Kata kunci :  Antibakteri, Jamur Endofit, Kemangi ( Ocimum basilicum L.)

## PENDAHULUAN
Indonesia  dengan  luas dan  terdiri  dari  lebih  dari  17.500  pulau menjadikannya  negara  kepulauan  yang paling  besar  di  dunia.  Oleh  karena  itu, Indonesia  juga  memiliki  keanekaragaman hayati ketiga tertinggi di dunia.
Keanekaragaman  hayati  ini  menyebabkan tingginya bioresource dimana  tanaman- tanaman  tersebut  memiliki  bioaktivitas tersendiri sesuai dengan kandungan kimianya diantaranya yaitu Ocimum basilicum L.  yang  berasal  dari  genus Ocimum . Genus ini dikenal karena kandungan minyak atsirinya yang berlimpah.  Kandungan  minyak  atsiri  yang berlimpah  dari  berbagai  spesies Ocimum seperti Ocimum  basilicum L., Ocimum citriodorum , Ocimum  basilicum  canum Sims. dan spesies Ocimum lainnya dilaporkan  memiliki  aktivitas  antioksidan, antimikroba, insektisida dan aktivitas terapeutik  seperti  anti-inflamasi, antipiretik, analgesik dan lain-lain (Schulz, 2006).
Mikroba endofit merupakan mikroba yang hidup di dalam jaringan tumbuhan dan mampu  membentuk  koloni  dalam  jaringan tumbuhan  tanpa  memberikan  efek  negatif pada  inangnya.  Mikroba  endofit  dapat berupa  bakteri,  jamur  atau  mikroba  lainnya, tetapi saat ini yang lebih banyak dieksplorasi ialah  jamur  endofit.  Isolat-isolat  jamur endofit  memiliki  daya  antibakteri  yang poten  dengan  spektrum  luas  (Rukmana, 2016).
Jamur  endofit  dapat  menghasilkan berbagai senyawa fungsional berupa senyawa  antikanker,  antivirus,  antibakteri, antifungi serta hormon pertumbuhan tanaman. jamur endofit banyak
menghasilkan senyawa bioaktif yang digunakan  untuk  meningkatkan  ketahanan inang  dari  serangan  patogen.  Jamur  endofit menginfeksi  tumbuhan  yang  sehat  pada jaringan  tertentu  dan  mampu  menghasilkan mikotoksin, enzim serta antibiotik (Noverita , 2009).
Staphylococcus aureus sering ditemukan sebagai bakteri flora normal pada kulit  dan  selaput  lendir  pada  manusia, namun  kuman  ini  juga  dapat  menjadi penyebab  infeksi  pada  manusia  maupun hewan. Staphylococcus aureus dapat menginfeksi  jaringan  atau  alat  tubuh  lain yang  menyebabkan  timbulnya  penyakit dengan  tanda-tanda  yang  khas  seperti nekrosis,  peradangan  dan  pembentukan abses (Angelina , 2015).
Bakteri  yang  merupakan  bagian  dari mikroflora  yang  secara  normal  ada  dalam saluran  pencernaan  manusia  dan  hewan berdarah  panas  yaitu Escherichia  coli . Escherichia  coli termasuk  ke  dalam  bakteri heterotrof yang memperoleh makanan berupa  zat  oganik  dari  lingkungannya karena  tidak  dapat  menyusun  sendiri  zat organik  yang  dibutuhkannya  (Angelina , 2015).
Zona
hambatan terhadap
pertumbuhan  bakteri  akan  semakin  besar seiring dengan peningkatan konsentrasi yang ditambahkan.
Adanya perbedaan  zona  hambatan  pada  masing- masing  konsentrasi  disebabkan  karena perbedaan besarnya zat aktif yang terkandung pada konsentrasi tersebut. Semakin  besar  suatu  konsentrasi,  semakin besar  pula  komponen  zat  aktif  yang terkandung  di  dalamnya  sehingga  zona
hambatan  yang  terbentuk  juga  berbeda (Brooks, 2005).

## METODOLOGI PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  telah  dilaksanakan pada  bulan  Maret  sampai  Juni  2019  di Laboratorium Biologi Molekuler dan Farmasetika  Laut  Fakultas  Perikanan  dan Ilmu  Kelautan  Universitas  Sam  Ratulangi Manado serta Laboratorium Lanjutan Devisi Mikrobiologi Program Studi Farmasi Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam Universitas Sam Ratulangi.

## Bentuk Penelitian
Metode  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu  metode  eksperimental. Dan  untuk  pengukuran  aktivitas  antibakteri digunakan metode difusi cakram.
Alat dan Bahan a. Alat Alat-alat yang  digunakan  yaitu cawan  petri,  erlenmeyer,  autoklaf,  gunting, pinset,  kertas  label,  lakban,  keranjang, kompor,  mikrotip,  sedotan,  lampu  spritus, kawat  ose, laminar  air  flow ,  oven, evaporator, labu evaporator.
b. Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan  yaitu batang, dan daun tumbuhan Kemangi, potato dextrose  agar  (PDA),  medium  nutrient  agar (NA),  alkohol  95%,  alkohol  75%  aquades, kapsul  kloramfenikol  250  mg,  beras,  kertas cakram.

## Prosedur Penelitian Preparasi Sampel
Dan  untuk  pengambilan  sampel, sampel  Kemangi  diambil  di  Desa  Lemoh
Uner,  Jaga  III  Kec.  Tombariri  Timur  Kab. Minahasa pada bulan Maret 2019. Kemudian  tanaman  Kemangi  yang  sudah diambil  dibersihkan.  Daun  dan  batang Kemangi yang dibersihkan kemudian dipotong menggunakan gunting dan dipotong  menjadi  4  bagian  kecil.  Sebelum ditanamkan kedalam media PDA+AB rendam  terlebih  dahulu  alat-alat  dan  sampel yang akan diguanakan dalam larutan alkohol 95%  selama  1  menit  untuk  menghindari kontaminasi bakteri. Potongan sampel tersebut  kemudian  diangkat  menggunakan pingset  yang  sudah  direndam  didalam larutan  alkohol  terlebih  dahulu  dan  sudah dibakar  selama  beberapa  menit  dengan menggunakan lampu spritus (Yohanis,  2017).

## Sterilisasi dan Pembuatan Media Sterilisasi Alat
Alat-alat  yang  digunakan  dalam
penelitian aktivitas antimikroba ini disterilkan terlebih dahulu dengan menggunakan  autoklaf  pada  suhu  121  ºC selama  15  menit,  pinset  dibakar  dengan pembakaran di  atas api langsung dan media disterilkan  di  autoklaf  pada  suhu  121  ºC selama 15 menit (Ortez, 2005).

## Pembuatan Media PDA dan PDA+AB Pembuatan Media PDA
Media  PDA  yang  dibuat  sesuai kebutuhan.  Pada  saat  pembuatan  15  media, PDA  ditimbang  sebanyak  11,7  g  dan ditambahkan  NA  sebanyak  3,6  g  dan dilarutkan kedalam 300 ml aquades. 1 media diperlukan  setidaknya  20mL.  Kemudian dipanaskan  didalam  Erlenmeyer  selama beberapa  menit  sehingga  kedua  bahan tersebut menyatu. Kemudian PDA yg sudah
dipanaskan tadi dimasukan kedalam autoklaf untuk  disterilisasi.  Selama  proses  sterilisasi autoklaf  harus  terus  dipantau  supaya suhunya  tetap  stabil  agar  tidak  merusak proses sterilisasi tersebut. Setelah disterilisasi PDA tersebut kemudian dituangkan kedalam cawan petri yang sudah disterilisasi terlebih dahulu. Proses penuangan  PDA  dilakukan  di  dalam  alat laminar  airflow agar  tetap  steril.  Selama proses  penuangan  PDA  tangan  harus disterilkan  menggunakan  alkohol.  Setelah dituang,  cawan  petri  harus  langsung  ditutup menggunakan  lakban  dengann  melingkari seluruh pinggiran luar cawan petri agar tidak terkontaminasi  oleh  organisme  dari  luar (Michelle , 2014).

## Pembuatan Media PDA+AB
Proses  pembuatan  media  PDA+AB juga sama seperti pembuatan media sebelumnya hanya saja disini PDA ditambahkan dengan antibiotik
kloramfenikol  sebanyak  150  mL.  Tujuan penambahan  antibiotik  pada  media  PDA
yaitu agar mencegah terjadinya
pertumbuhan bakteri
pada media.
Pembuatan  media  PDA+AB  ada  4  media. Diambil  PDA  sebanyak  3.9  g,  NA seabanyak  1,2  g  dan  aquades  sebanyak  100 mL.  Kemudian  panaskan  seperti  cara pembuatan  PDA  sebelumnya  (Michelle, 2014).

## Pembuatan Media PDA+AB
Proses  pembuatan  media  PDA+AB juga sama seperti pembuatan media sebelumnya hanya saja disini PDA ditambahkan dengan antibiotik
kloramfenikol  sebanyak  150  mL.  Tujuan
penambahan  antibiotik  pada  media  PDA yaitu agar mencegah terjadinya pertumbuhan bakteri pada media. Pembuatan  media  PDA+AB  ada  4  media. Diambil  PDA  sebanyak  3.9  g,  NA seabanyak  1,2  g  dan  aquades  sebanyak  100 mL.  Kemudian  panaskan  seperti  cara pembuatan  PDA  sebelumnya  (Michelle, 2014).

## Isolasi Jamur Pada Media PDA+AB
Setelah sampel di preparasi, kemudian  sampel  ditanam  pada  media Potato  Dextrose  Agar (PDA)+AB  di  dalam cawan  petri.  Cawan  petri  yang    berisi  daun dan Kemangi tersebut ditutup menggunakan lakban  agar  tidak  terjadi  kontaminasi oraganisme  lain  dari  luar,  kemudian disimpan  pada  suhu  ruangan  selama  3  x  24 jam  untuk  menumbuhkan  jamur.  Pada  hari ke-1  tidak  terlihat  pertumbuhan  dari  jamur di sekitar batang dan daun Kemangi didalam media.  Kemudian  pada  hari  ke  tiga  sudah mulai  tumbuh  jamur  pada  batang  dan  daun Kemangi. (Michelle, 2014).

## Pemurnian Jamur Endofit
Pada  hari  ketiga  setelah  penanaman sampel  terlihat  adanya  jamur  yang  tumbuh dipermukaan  media  PDA+AB.  Jamur  yang sudah  tumbuh  diambil  koloni  yang  terdapat pada  permukaan  media  dengan  kawat  ose dan  dipindahkan  ke  media  PDA  yang  lain untuk  ditumbuhkan  kembali.  Ini  bertujuan untuk  mendapatkan  1  jenis  jamur  endofit yang  murni.  Simpan  pada  suhu  ruangan selama  2  X  24  jam.  Jamur  yang dipindahakan  yaitu  berasal  dari  media  yang ditanamkan sampel daun ada dua media dan sampel  batang  ada  dua  media.  Jadi  total
pemindahan  jamur  ada  empat  media (Michelle , 2014).

## Pembuatan Media Kulturnasi
Pembuatan  media  ini  menggunakan beras  yang  ditimbang  sebanyak  40g  dan aquades  sebanyak  50  mL.  Dimasukkan kedalam Erlenmeyer untuk kemudian disterilisasikan    kedalam  autoklaf.  Ini bertujuan  juga  agar  beras  tersebut  bisa masak.  Sebelumnya  Erlenmeyer  harus ditutup  terlebih  dahulu  menggunakan  kain kasa  yang  telah  berbentuk  bulat  dan kemudian  dibungkus  lagi  menggunakan kertas  alumunium  foil.  Autoklaf  dilakukan selama  20  menit  pada  suhu  120ºC  dengan tekanan  1atmosfer.  Setelah  itu  didinginkan untuk  dilakukan  penanaman  jamur  pada media (Yohanes, 2017).

## Pemindahan Miselia pada Media Kulturnasi
Miselia  yang  sudah  tumbuh  diambil sebagian  dari  permukaan  agar  dengan  cara dipotong  memanjang  dan  dipotong  lagi menjadi  bagian-bagian  kecil  berbentuk  segi empat.  Kemudian  dipindahkan  ke  media beras yang sudah dimasak tadi. Sebelumnya alat  yang  akan  digunakan  untuk  memotong harus disterilisasikan terlebih dahulu dengan dicelupkan  kedalam  alkohol.  Ujung  dari Erlenmeyer  yang  berisikan  nasi  tersebut juga  harus  dipanaskan  atau  dibakar  pada lampu spritus beberapa detik kemudian baru bisa  dibuka  dan  dimasukan  jamur  kedalam erlenmeyer.  Ini  bertujuan  untuk  membunuh oragnisme  yang  terdapat  pada  ujung Erlenmeyer dan kasa. Pada saat pemindahan juga  dipastikan  tangan  sudah  disterilkan menggunakan  alkohol  terlebih  dahulu. Erlenmeyer  yang  sudah  dimasukkan  jamur ditutup kembali. Kasa dan ujung erlenmeyer dibakar  secara  bersamaan  sebelum  ditutup
kembali dan kemudian dibungkus menggunakan  perban  agar  tidak  terjadi kontaminasi.  Jamur  didiamkan  selama  7-10 hari untuk dilihat pertumbuhannnya (Yohanis, 2017).

## Kultivasi dan Pemberian Pelarut Etil Asetat
Setelah  didamkan  selama  3-5  hari jamur  dalam  media  kulturnasi,  dicek kembali  apakah  jamur  yang  sudah  tumbuh mencapai  bagian  dasar  nasi  dalam  labu erlenmeyer.  Jika  sudah  menutupi  semua nasi,  diberikan  pelarut  etil  asetat  sebanyak 200  mL  sampai  nasi  terendam.  Kemudian menggunakan  kawat  ose  jamur  yang  sudah tumbuh  dan  menutupi  semua  permukaan nasi  diaduk-aduk  hingga  pelarut  etil  asetat dapat  menembus  semua  permukaan  nasi. Pemberian pelarut etil asetat kedalam media kulturnasi  ini  bertujuan  agar  supaya  pelarut bisa masuk kedalam sel sehingga diharapkan senyawa-senyawa  yang  ada  di  dalam  media tersebut bisa keluar. Setalah berikan pelarut, maka  media  harus  di  aduk-aduk  selama 1x24  jam  menggunakan  alat shaker agar media  benar-benar  terlarut  dan senyawa- senyawa bisa keluar (Yohanes, 2017).

## Proses Evaporasi
Setelah  1x24  jam  di  aduk-aduk menggunakan  alat shaker ,  ekstrak  yang  ada dalam labu erlenmeyer dipindahkan kedalam labu  evaporator  untuk  dilakukan  proses evaporasi  pada  suhu  40°C.  Jika  ekstrak mulai  habis  atau  mengering  ditambahkan sedikit  alkohol  95%  untuk  membantu pengenceran ekstrak yang masih tersisa, lalu dilakukan  kembali  proses  evaporasi  untuk mendapatkan kekentalan dari ekstrak tersebut. Jika sudah kental, ekstrak
dipindahkan  kedalam  botol  kecil  untuk dikeringkan  (dengan  cara  diuapkan)  untuk selanjutnya  akan  diuji    antibakterinya (Michelle, 2014).

## Pengukuran Aktivitas Antibakteri
Metode  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu  metode  difusi  cakram. Pada  pengujian  aktivitas  antimikroba  ini, cakram  yang  digunakan  berukuran  6  mm dengan  daya  serap  50  μL  tiap  cakram.
Bakteri S. aureus dan E. coli masing-masing diambil  menggunakan  kawat  ose  dilarutkn dalam  5mL  NaCl  kemudian  dikocok-kocok hingga homogen dan kemudian menggunakan  mikropipet  0,4mL  suspensi bakteri  diambil  dan  dimasukkan  kedalam media  NA,  kemudian  dikocok  hingga tercampur. Media NA  yang sudah diberikan suspensi bakteri dituangkan ke dalam cawan petri  dan  tunggu  sampai  media  agar mengeras.  Setelah  agar  mengeras,  kertas cakram yang telah ditotolkan sampel ekstrak batang  dan  daun  tumbuhan  Kemangi, kontrol positif dan kontrol negatif diletakkan ke  dalam  cawan  petri  dengan  menggunakan pinset.  Selanjutnya,  cawan  petri  diberi  label dan  diinkubasi  dalam  inkubator  pada  suhu 37 0 C selama 1 x 24 Jam (Ortez, 2005).

## Pengamatan  dan  Pengukuran  Diameter Zona Hambat
Pengamatan  dilakukan  setelah  24 jam  masa  inkubasi.  Daerah  pada  sekitaran cakram  menunjukkan  kepekaan  ekstrak terhadap  bakteri  yang  digunakan  sebagai bahan  uji  yang  dinyatakan  dengan  diameter zona  bening.  Diameter  zona  bening  diukur menggunakkan jangka  sorong.  Kemudian zona bening yang diukur (Davis, 1971).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Isolat  Jamur  Endofit  Daun  dan  Batang Tumbuhan Kemangi
Pembiakan jamur endofit yang berasal  dari  daun  dan  batang  tumbuhan Kemangi  yang  diambil  dari  Desa  Lemoh Uner  Jaga  III  Kec.  Tombariri  Timur  Kab. Minahasa  menghasilkan  empat  jenis  jamur secara  makroskopik.  Tiga  jamur    dari Kemangi  batang,  satu  jamur  dari  Kemangi daun. Secara makroskopik pembiakan semua  jamur  memiliki  karakteristik  yang sama  yaitu  miselia  berwarna  pitih  ( Strobel, 2004). Dapat dilihat pada Gambar 1.
(A)             (B)              (C)

## (D)
Gambar 1. Biakan Jamur Endofit. Keterangan :
(A).  Jamur  endofit  pembiakan  dari  sampel Kemangi Batang (K.B1)
(B).  Jamur  endofit  pembiakan  dari  sampel Kemangi Batang (K.B 2)
(C).  Jamur  endofit  pembiakan  dari  sampel Kemangi Batang (K.B 3)
(D).  Jamur  endofit  pembiakan  dari  sampel Kemangi Daun (K.D 4)

## Aktivitas Antibakteri Isolat Jamur Endofit
Pada penelitian ini dilakukan sebanyak  empat  sampel  untuk  kedua  jenis bakteri  uji.  Hasil  pengujian  efek  antibakteri jamur  endofit  daun,  dan  batang  tumbuhan Kemangi ( Ocimum bassilicum L.)
menghasilkan  adanya  aktivitas  dan  daya hambat  yang  di  tandai  dengan  adanya  zona bening  terdapat  disekeliling  cakram  yang masing-masing  berbeda  berukuran,  dengan adanya  zona  bening  menunjukkan  adanya kepekaan terhadap ekstrak Kemangi . Pengamatan  ini  dilakukan  setelah  di inkubasi  selama  1x24  jaM  pada  suhu  37 . Pada Tabel 1 menunjukkan hasil rata-rata uji aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak  Kemangi batang dan daun.
Tabel 1.Hasil rata-rata Aktivitas Antibakteri ekstrak Kemangi batang dan daun terhadap bakteri uji Staphylococcus aureus dan Escherichia coli
Keterangan : K.B 1.1 : Kemangi Batang 1.1
K.B 1.2 : Kemangi Batang 1.2 K.B 2.1 : Kemangi Batang 2.1 K.D 4.1 : Kemangi Daun 4.1
U1 : Ulangan 1
K (+)   : Kontrol Positif U2       : Ulangan 2 K (-)    : Kontrol Negatif U3 : Ulangan 3
Pada pengujian ini digunakan kontrol positif  dan  negatif  sebagai  pembanding. kontrol  positif  yang  digunakan  dalam penelitian ini yaitu Kloramfenikol, digunakan kloramfenikol dikarenakan Kloramfenikol  memiliki  spektrum  yang luas.  Penggunaan  kontrol  positif  berfungsi sebagai  kontrol  dari  zat  uji,  dengan membandingkan  diameter  daerah  hambat yang  terbentuk  (Dwijendra,  2014).  Kontrol negatif  yaitu  akuades,  kontrol  negatif digunakan  untuk  mengetahui  ada  atau tidaknya  pengaruh  terhadap  pertumbuhan mikroba  uji.  Kontrol  negatif  digunakan untuk  mengetahui  ada  atau  tidaknya pengaruh  terhadap  pertumbuhan  bakteri  uji, sehingga  dapat  diketahui  bahwa  aktivitas yang  ditunjukan  oleh  ekstrak  ialah  zat  yang terkandung dalam sampel bukan berasal dari pelarut  yang  digunakan.    Diperoleh  zona hambat  keseluruhan  dari  kontrol  positif Kloramfenikol  yaitu  sebesar  6,5  mm dibandingkan  dengan  kontrol  negatif  yang tidak  terdapat  zona  bening  dan  aktivitas antibakteri (Mujipradhana, 2018).
Pada  penelitian  ini  ekstrak  dari tumbuhan Kemangi merupakan ekstrak yang efektif  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri  gram  positif Staphylococcus  aureus bakteri  gram  negatif Escherichia  coli .  Pada pengujian  aktivitas  antibakteri  dari  sampel Kemangi,  penggolangan    kekuatan  daya antibakteri  digolongkan  menurut  pedoman Davis  and  Stout  (1971)  yang  ditunjukkan pada Tabel 2.
Sampel Escherichia coli K(+) K(-)
U1 (mm) U2 (mm) U3 (mm) K.B 1.1 17 16 18 - - K.B 1.2 - - - 6,5 - K.B 2.1 24 25 22 6,5 - K.D 4.1 7 7 6,5 - - Sampel Staphylococcus aureus K(+) K(-) U1 (mm) U2 (mm) U3 (mm) K.B 1.1 15 14 17 - - K.B 1.2 - 8 - - - K.B 2.1 21 22 20 - - K.D 4.1 - - - - -
Tabel 2.Kategori Kekuatan Daya Antibakteri Berdasarkan Pedoman Davis and Stout (1971) Ekstrak K.B 1.1 menunjukkan bahwa zona bening yang terbentuk pada Escherichia coli tergolong kuat dimana pada ulangan  1  yaitu  (17  mm),  ulangan  2  yaitu (16 mm), serta ulangan 3 yaitu (18 mm) dan pada Staphylococcus  aureus juga  tergolong kuat  dimana  ulangan  1  yaitu  (15  mm), ulangan 2 (14 mm), ulangan 3 (17 mm). Hal ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  batang Kemangi memiliki spektrum kerja yang luas dalam  menghambat  aktivitas  antibakteri dengan  bakteri Staphylococcus  aureus, Escherichia  coli .  Hal  ini  juga  dipengaruhi oleh  kandungan  kimia  teringgi  Kemangi terdapat pada batang Kemangi (Kicel, 2005)
Ekstrak  K.B 1.2  ulangan 1, ulangan 2 dan  ulangan  3  menunjukkan  bahwa  tidak terdapat  zona  bening  yang  terbentuk  pada Escherichia  coli yaitu  (0  mm)  dan  pada Staphylococcus  aureus juga  hanya  pada ulangan 2 yang terdapat zona bening (8 mm) selain itu  tidak terdpat  zona bening  yaitu (0 mm).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak K.B  1.2  memiliki  spektrum  kerja  yang sempit dalam menghambat aktivitas antibakteri  dengan  bakteri Staphylococcus aureus, Escherichia coli .
Ekstrak K.B 2.1 menunjukkan bahwa zona bening yang terbentuk pada Escherichia coli tergolong sangat kuat  yaitu
Ulangan  1  (24  mm),  Ulangan  2  (25  mm),
Ulangan 3 (22 mm) dan pada Staphylococcus aureus juga tergolong sangat  kuat  yaitu  Ulangan  1  (21  mm), Ulangan  2  (22  mm),  Ulangan  3  (20  mm). Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak K.B 2.1 memiliki  spektrum  kerja  yang  luas  dalam menghambat  aktivitas  antibakteri  dengan bakteri Staphylococcus aureus, dan Escherichia  coli .  Hal  ini  juga  dipengaruhi oleh  kandungan  kimia  teringgi  Kemangi terdapat pada batang Kemangi (Kicel, 2005)
Ekstrak K.D 4.1 menunjukkan bahwa  zona  bening  yang  terbentuk  pada Escherichia  coli yaitu  Ulangan  1  (7  mm), Ulangan 2 (7 mm), Ulangan 3 (6,5 mm) dan pada Staphylococcus  aureus tidak  terdpat zona  bening  yaitu  Ulangan  1  (0  mm), Ulangan  2  (0  mm),  Ulangan  3  (0  mm).  Hal ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  K.D  4.1 memiliki spektrum kerja yang sempit dalam menghambat  aktivitas  antibakteri  dengan bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli .
Hasil  yang  diperoleh  menunjukkan bahwa  ekstrak  K.B    1.2  dan  K.D  4.1 menghasilkan  zona  bening  berdiameter sedang  dan  lemah  untuk  mengambat pertumbuhan  bakteri  uji Staphylococcus aureus dan Escherichia  coli . Ekstrak  K.B 1.1  dan  ekstrak  K.B  2.1  menghasilkan  zona bening  berdiameter  sangat  kuat  dan  mampu mengambat pertumbuhan bakteri uji Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli .  Berdasarkan  penelitian  sebelumnya menunjukkan ekstrak Kemangi daun berdiameter  sangat  kuat  karena  dipengaruhi oleh  kandungan  kimia  teringgi  Kemangi terdapat pada daun Kemangi (Kicel, 2005)
Diameter zona bening (mm) Kategori ≥20 Sangat Kuat 10-20 Kuat 5-10 Sedang ≤5 Lemah

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan  dapat  disimpulkan  bahwa jamur  endofit  yang  diisolasi  dari  tumbuhan Kemangi  ( Ocimum bassilicum L.) dari Desa Lemoh  Uner  memiliki  aktivitas  antibakteri. Ekstrak  Kemangi  batang  1.2  sebesar  8  mm yang  dikategorikan  sedang  dan  ekstrak Kemangi  Batang  4.1  sebesar  7  mm  yang dikategorikan sedang dihasilkan pada bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia .  Ekstrak  Kemangi  Batang  1.1 sebesar  17  mm  dikategorikan  kuat  dan Kemangi  Daun  2.1  sebesar  22  mm dikategorikan sangat kuat.

## SARAN
Dari  hasil  dan  pembahasan  aktivitas antibakteri  ekstrak  Kemangi  maka  dapat diberikan  saran  yaitu    perlu  dilakukan pengujian  efek  antibakteri  menggunakan ekstrak  Kemangi  akar  dan  terhadap  bakteri jenis  lainnya,  serta  melakukan  pengujian efek samping, efek toksik, senyawa aktif dan identifikasi dari jamur endofit yang diisolasi dari tumbuhan Kemangi ( Ocimum bassilicum L.).

## DAFTAR PUSTAKA
Angelina,  Maria,  Masnur  Turnip,  and  Siti Khotimah.  Uji  Aktivitas  Antibakteri
Ekstrak Etanol Daun Kemangi ( Ocimum  sanctum L.)  Terhadap Pertumbuhan  Bakteri  Escherichia coli  dan  Staphylococcus  aureus. Protobiont 4.1 (2015).
Brooks, G.F., Butel, J.S., Morse, S.A., 2005. Mikrobiologi  Kedokteran  Jawetz, Melnick,  &  Adelberg ed.23 . EGC, Jakarta
Davis,  W.  W.,  T.R.  Stout.  1971.  Disc  plate method  of  microbiological  assay. Journal  of  microbiology . 22 :  659- 665.
Kicel.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Daun  Kemangi  ( Ocimum  sanctum L.)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Escherichia  coli  dan  Staphylococcus aureus. Protobiont 4.1 (2005).
Michelle  Sumampouw,  et  al.2014.  Uji  Efek Antibakteri  Jamur  Endofit  Akar Bakau Rhizopora  Stylosa Terhadap Bakteri Staphylococcus  Aureus Dan Escherichia Coli. Jurnal e-Biomedik. Vol(2) No (1).
Noverita,  D.  Fitria  dan  E.  Sinaga.  2009. Isolasi  dan  uji  aktivitas  antibakteri jamur  endofit  dari  daun  rimpang
Zingiber ottensiin Val. Jurnal Farmasi Indonesia, 4(4): 171-176. Ortez,  J.  H.  2005. Disk  Diffusion  testing  in manual
of antimicrobial susceptibility testing. Marie B. Coyle (Coord.  Ed).  American  society  for Microbiology, America.
Rukmana  rahmat  h,  Yudirahman  Herdi  h. 2016.  Kemangi  dan  selasih.  Liliy Publisher. Jogyakarta.
Schulz  B,  Boyle  C.  2006. What  are Endophytes. Soil Biology. ;9:1. Yohanis Nawea, et al . 2017. Uji Antibakteri Jamur Endofit Dari Tumbuhan Mangrove  Soneratia  alba Yang Tumbuh Di Perairan Pantai Tanahwangko.  Jurnal  Pesisir  dan
Laut Tropis. Vol (1) No (1).
Schlagel,G.H.  1993.General  Microbiologi seventh edition. Cambrige University Press.