Formulasi  dan  uji  efektivitas  antioksidan  krim  ekstrak  etanol  daun  botto’-botto’  (chromolaena odorata l.) dengan metode DPPH

## FORMULASI DAN UJI EFEKTIVITAS ANTIOKSIDAN KRIM EKSTRAK ETANOL DAUN BOTTO’-BOTTO’ ( Chromolaena odorata L .) DENGAN METODE DPPH
Gemy Nastity Handayany 1 , Irna Umar 2 , Isriany Ismail 3
1,2,3 Universitas Islam Negeri Alauddin Makassar
* gemynastity75@gmail.com
** chacha.hadijah@yahoo.co.id
DOI : 10.24252/kesehatan.v11i2.5944

## Abstrak
Telah dilakukan  penelitian formulasi dan uji efektivitas antioksidan krim ekstrak etanol daun botto’-botto  ( Chromolaena  odorata  L .)  dengan  metode  DPPH.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui aktivitas antioksidan sediaan krim yang mengandung ekstrak etanol daun botto’- botto’  ( Chromolaena  odorata  L .)  terhadap  DPPH  dan  untuk  mengetahui  berapa  konsentrasi ekstrak etanol daun botto’-botto’ ( Chromolaena odorata L .) yang efektif sebagai antioksidan pada sediaan krim. Daun botto’-botto’ ( Chromolaena odorata L .) diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan  pelarut  etanol  96%  dan  dibuat  sediaan  krim  menggunakan  variasi  konsentrasi ekstrak pada formula I, II dan III berturut-turut 0,0008%, 0,0016% dan 0,0024%. Kemudian diuji aktivitas  antioksidannya  terhadap  DPPH  dan  dihitung  rata-rata  persen  peredaman  masing- masing formula. Hasil yang diperoleh menunjukkan rata-rata persen peredaman pada formula I, II, dan III berturut-turut 15,07%, 36,09% dan 41,62%. Dari ketiga formula yang paling efektif aktivitas antioksidannya yaitu pada konsentrasi ekstrak 0,0024%.

## Kata Kunci: Antioksidan; Radikal Bebas; DPPH (1,1 Difenil, 2 pikrilhidrazil)

## Abstract
A research have been done formulations and test the effectiveness of ethanol leaf extract antioxidant cream botto'-botto (Chromolaena odorata L.) by DPPH method. This study aims to determine the antioxidant activity of cream preparation containing ethanol extract of leaves botto'-botto '(Chromolaena odorata L.) against  DPPH  and  to  find  out  how  the  concentration  of  the  ethanol  extract  of  leaves  botto'-botto' (Chromolaena odorata L.) is effective as an antioxidant the cream preparation. Botto'-botto (Chromolaena odorata L.) was extracted by maceration using 96% ethanol and cream preparations made using various concentration of extract in the formula I, II and III respectively 0.0008%, 0.0016% and 0 , 0024%. Then tested antioxidant activity against DPPH and calculated the average percent reduction of each formula. The results showed an average percent reduction in formula I, II, and III respectively  15.07%, 36.09% and 41.62%. Of the three most effective formulas that antioxidant activity at a concentration of 0.0024% extract.
Keywords: Antioxidant; Free Radicals; DPPH (1,1 Diphenyl, 2 pikrilhidrazil)
Formulasi  dan  uji  efektivitas  antioksidan  krim  ekstrak  etanol  daun  botto’-botto’  (chromolaena odorata l.) dengan metode DPPH

## PENDAHULUAN
Dewasa ini, perhatian dunia kedokteran terhadap radikal bebas dan oksidan makin meningkat. Pengertian oksidan dan radikal bebas ( free radicals ) sering dikaitkan karena keduanya memiliki sifat yang sama serta aktivitas kedua jenis senyawa ini juga sering menghasilkan  akibat  yang  sama  (Dyatmiko,  2010:  24).  Oksidan  dan  radikal  bebas  ini memiliki    sifat  reaktif  yang  tinggi  dan  kecendrungannya  mengubah  molekul  lain menjadi  radikal.  Sehingga  menyebabkan  terjadinya  rantai  reaksi  ( chain  reaction )  yang sering  mengakibatkan  kerusakan  sel  dan  menjadi  penyebab  atau  mendasari  berbagai penyakit  degeneratif.  Bahkan  diketahui  ikut  berperan  dalam  proses  penuaan  ( aging ) (Winarsi, 2013).
Daun botto’-botto’ ( Chromolaena odorata L .) merupakan salah  satu  jenis  tumbuhan dari    famili    Asteraceae.  Daunnya  mengandung  beberapa    senyawa  utama  seperti tannin, fenol, flavonoid, saponin dan steroid . Minyak  essensial  dari  daunnya  memiliki kandungan α-pinene,  cadinene,  camphora, limonene,  β-caryophyllene dan candinol  isomer (Benjamin, 2011). Ekstrak  kasar  daun Chromolaena odorata memiliki  efek  antioksidan. Efek  yang  dihasilkan  ini  kemungkinan disebabkan oleh kandungannya yang tinggi akan flavonoid yang memiliki aktivitas  antioksidan, yang mampu menghambat proses oksidasi  (Ngozi, 2009 ).
Penggunaan  daun  botto’-botto  ( Chromolaena odorata  L .)  selama    ini    masih    sangat sederhana,  sehingga    efek    antioksidannya    belum  optimal.  Penggunaan  antioksidan secara  topikal  diharapkan  mampu  melindungi  kulit  dari    efek    buruk    radikal    bebas yang    disebabkan    oleh    sinar    matahari,    untuk    itu  dibuatlah  sediaan  dalam  bentuk krim yang lebih praktis  (Dirjen POM, 1979 ).
Keuntungan   sediaan    krim   ialah  kemampuan    penyebarannya    yang    baik  pada kulit, memberikan efek dingin karena lambatnya  penguapan  air  pada  kulit,  mudah dicuci  dengan  air,  serta  pelepasan  obat  yang  baik.  Selain    itu    tidak    terjadi penyumbatan dikulit  dan  krimnya  tampak  putih  dan bersifat  lembut  (Voight, 1995)
Berdasarkan  uraian  di  atas,  maka  perlu  dilakukan  penelitian  untuk  mengetahui potensi senyawa ekstrak daun botto’-botto’ yang berkhasiat sebagai antioksidan yang telah diketahui konsentrasinya, yaitu 400 µg/mL dan 800 µg/mL  (Phan TT, 2004) nilai ini yang akan menjadi konsentrasi zat aktif dalam sediaan krim yang akan diformulasi.

## METODOLOGI PENELITIAN
Penelitian  ini  adalah  penelitian  kuantitatif  yang  dilakukan  secara  eksperimental dengan  metode  DPPH,  menggunakan  alat  spektrofotometer  UV-Vis  untuk  melihat aktivitas  antioksidan  dari  ekstrak  etanol  daun  botto’-botto’  ( Chromolaena  odorata  L .). Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium  Fitokimia,  Farmasetika  dan  Kimia  Farmasi,
Fakultas  Ilmu  Kesehatan  Universitas  Islam  Negeri  Alauddin  Makassar.  Pendekatan penelitian ini adalah pendekatan eksperimentatif yaitu pengumpulan data berdasarkan hasil  dari  eksperimen  yang  dilakukan.  Dimana  Sampel  yang  digunakan  yaitu  daun botto’-botto’  ( Chromolaena  odorata  L .)  diperoleh  disekitar  kota  Pangkep,  Sulawesi Selatan. Pengambilan sampel dilakukan pada pagi hari. Daun yang digunakan adalah seluruh daun yang tidak rusak dan tidak berjamur.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  penelitian  yang  diperoleh  dari  pengujian  aktivitas  antioksidan  krim  ekstrak etanol daun botto’-botto’ ( Chromolaena odorata L .) adalah sebagai berikut:
Formula Absorbansi Peredaman (%) Peredaman rata- rata (%) 1 2 3 1 2 3 I 0,552  0,554 0,522 13,61  13,30  18,30 15,07 II 0,399  0,436 0,390 37,55  31,76  38,96 36,09 III 0,389  0,368 0,362 39,12  42,41  43,34 41,62 IV 0,595  0,574 0,615 6,88 10,17 3,75 6,93 V 0,334  0,332 0,328 47,64  47,96  48,58 48,06
Tabel 1. Hasil perhitungan persen penghambatan krim ekstrak etanol daun botto’- botto’ ( Chromolaena odorata L .)
Antioksidan  adalah  zat  yang  dapat  menunda,  memperlambat,  dan  mencegah terjadinya  proses  oksidasi  serta  menetralisir  radikal  bebas,  dimana  antioksidan menstabilkan radikal bebas dengan melengkapi kekurangan elektron yang dimiliki oleh radikal bebas. Salah satu uji untuk menetukan aktivitas antioksidan penangkap radikal adalah  metode  DPPH  (1,1  Difenil-2-picryhidrazil).  DPPH  merupakan  radikal  bebas yang  stabil  pada  suhu  kamar  dan  sering  digunakan  untuk  mengevaluasi  aktivitas antioksidan beberapa senyawa atau bahan alam. DPPH memberikan serapan kuat pada panjang gelombang 517 nm dengan warna violet yang gelap. Penangkal radikal bebas menyebabkan  elektron  menjadi  berpasangan  yang  kemudian  menyebabkan penghilangan warna yang sebanding dengan jumlah elektron yang diambil  (Sunarni, 2011).
Daun  botto’-botto’  ( Chromolaena  odorata  L .)  dikenal    dengan    nama    tekelan    atau gulma    siam  yang  mengganggu    pertumbuhan    tanaman    lain    dan    mengurangi kesuburan    tanah.  Ekstrak    kasar    daun  Chromolaena  odorata    memiliki    efek antioksidan. Efek  yang  dihasilkan  ini  kemungkinan disebabkan oleh kandungannya yang  tinggi  akan  flavonoid  yang  memiliki  aktivitas  antioksidan,  yang  mampu menghambat proses oksidasi  (Ngozi, 2009).
Formulasi  dan  uji  efektivitas  antioksidan  krim  ekstrak  etanol  daun  botto’-botto’  (chromolaena odorata l.) dengan metode DPPH
Simplisia  daun  botto’-botto’  ( Chromolaena  odorata  L .)  diekstraksi  secara  maserasi menggunakan cairan penyari etanol. Etanol adalah pelarut organik yang dapat menarik sebagian  besar  senyawa-senyawa  bioaktif  yang  terdapat  dalam  simplisia,  juga berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Damogalad  dkk  (2013),  metode  maserasi dengan cairan penyari etanol 96% digunakan untuk menyari senyawa-senyawa fenolik khususnya flavonoid dan tanin.
Antioksidan  diformulasi  dalam  bentuk  sediaan  topikal  yang  diharapkan  mampu melindungi  kulit  dari    efek    buruk    radikal    bebas    yang    disebabkan    oleh    sinar matahari,  untuk  itu dibuatlah sediaan dalam bentuk krim yang lebih praktis (Ngozi, 2009).  Krim    adalah    sediaan    setengah  padat,  berupa  emulsi  yang  mengandung  air tidak    kurang    dari    60%    dan    dimaksudkan  untuk    pemakaian    luar.  Sediaan  krim digunakan  karena  sediaan  ini  merupakan  sediaan  yang  menyenangkan,  mudah menyebar rata, dan praktis digunakan (Ansel, 2008: 515).
Kemampuan ekstrak etanol daun botto’-botto’ ( Chromolaena odorata L .) dapat dilihat dari berkurangnya intensitas warna ungu dari larutan DPPH yang telah  ditambahkan dalam  sampel.  Berkurangnya  intensitas  warna  larutan  DPPH  tersebut  dapat menunjukkan  bahwa  terjadi  reaksi  antara  atom  hydrogen  yang  lepas  oleh  bahan  uji dengan  molekul  radikal  DPPH  sehingga  terbentuk  senyawa  1,1  –difenil-2- pikrilhidrazin  yang  berwarna  kuning.  Semakin  besar  konsentrasi  bahan  uji,  warna kuning  yang  dihasilkan  akan  semakin  kuat.  Pengurangan  intensitas  warna  ungu larutan  DPPH    ini  secara  kuantitatif  dapat  dihitung  dari  berkurangnya  absorbansi larutan  tersebut.  Semakin  besar  konsentrasi  bahan  uji  maka  absorbansi  yang  terbaca semakin  kecil,  yang  berarti  aktivitas  bahan  uji  dalam  menangkap  radikal  DPPH semakin besar. Absorbansi yang terukur merupakan absorbansi sisa DPPH yang tidak bereaksi dengan larutan uji.
Hasil  pengamatan  dari  uji  aktivitas  krim  dari  ekstrak  etanol  daun  botto’-botto’ ( Chromolaena  odorata  L .)  terhadap  DPPH  di  peroleh  hasil  bahwa  formula  I  dengan konsentrasi  ekstrak  0,0008%  dengan  rata-rata  persen  peredaman  sebesar  15,07%; formula  II  dengan  konsentrasi  ekstrak  0,0016%  dengan  rata-rata  persen  peredaman sebesar 36,09%; formula III dengan konsentrasi ekstrak 0,0024% dengan rata-rata persen peredaman  41,62%;  formula  IV  sebagai  kontrol  negatif  dengan  rata-rata  persen peredaman  sebesar  6,93%;  dan  formula  V  sebagai  kontrol  positif  dengan  rata-rata persen peredaman sebesar 48,06%.
Dari  hasil  pengujian  aktivitas  krim  antioksidan  terhadap  DPPH  untuk  masing- masing formula F1, F2, F3, F4 dan F5 yang paling efektif sebagai krim antioksidan dari ekstrak etanol daun botto’-botto’ ( Chromolaena odorata L .) adalah F3 yang mengandung ekstrak  sebesar  0,0024%  dengan  rata-rata  persen  peredaman  sebesar  41,62%.  Hal  ini dibuktikan  setelah  dilakukan  penelitian  yang  sama  terhadap  DPPH  dengan menggunakan  krim  yang  mengandung  bahan  aktif  vitamin  C  sebagai  kontrol  positif
Formulasi  dan  uji  efektivitas  antioksidan  krim  ekstrak  etanol  daun  botto’-botto’  (chromolaena odorata l.) dengan metode DPPH
yaitu F5 dengan rata-rata persen peredaman sebesar 48,06%. Dalam hal ini, nilai persen penghambatan  F3  adalah  nilai  yang  paling  mendekati  rata-rata  persen  peredaman kontrol positif dari krim yang mengandung bahan aktif vitamin C. Penelitian ini juga dilakukan terhadap krim tanpa adanya kandungan bahan aktif dengan maksud apakah ada  pengaruh  dari  masing-masing  bahan  yang  digunakan  dalam  pembutan  krim sebagai  antioksidan  dan  terlihat  rata-rata  persen  peredamannya  terhadap  DPPH sebesar 6,93%.
Sebelumnya, terdapat penelitian yang dilakukan oleh Phan TT, See J, Lee ST, Chan SY  pada  tahun  2004  tentang  “Antioxidant  e ﬀ ects  of  the  extracts  from  the  leaves  of Chromolaena  odorata  on  human  dermal  ﬁbroblasts  and  epidermal  keratinocytes against  hydrogen  peroxide  and  hypoxanthine-xanthine  oxidase  induced  damage (Herbal  Traditional  Medicine)”  yang  menyatakan  bahwa  daun  botto’-botto’ ( Chromolaena odorata L .) memiliki aktivitas antioksidan dengan konsentrasi 400 µg/mL dan 800 µg/mL.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  dilakukan  dapat  disimpulkan  bahwa  Ekstrak etanol daun botto’-botto’ ( Chromolaena odorata L .) pada sediaan krim memiliki aktivitas antioksidan  terhadap  terhadap  DPPH  dan  Ekstrak  etanol  daun  botto’-botto’ ( Chromolaena odorata L .) pada sediaan krim yang paling efektif aktivitas antioksidannya yaitu  pada  F3  dengan  konsentrasi  ekstrak  0,12%  memiliki  persen  penghambatan sebesar 41,62%.

## DAFTAR PUSTAKA
Benjamin,  V.  (2011).  Phytochemical  and  Antibacterial  Studies  on  The  Essential  Oil  of Euphatorium Odoratum. Pharmaceutical Biology . 227. Dirjen POM. (1979). In Farmakope Indonesia . Edisi III, Jakarta: Depkes RI.
Ngozi,  I.  M.  (2009).  Chemical  Profile  of Chromolaena  odorata  L .  (King  and  Robinson) Leaves. Pakistan Journal of Nutrition . 8 (2).
Phan  TT,  S.  J.  (2004).  Antioxidant  E ﬀ ects  of  the  Extracts  from  the  Leaves  of Chromolaena Odorata on Human Dermal ﬁbroblasts and Epidermal Keratinocytes Against Hydrogen Peroxide and Hypoxanthine-Xanthine Oxidase Induced Damage ( Herbal Traditional Medicine ).  Marcel Dekker, 822.
Sunarni,  T.  (2011).  Aktivitas  Antioksidan  Penangkap  Radikal  Bebas  Beberapa Kecambah dari Biji Tanaman Familia Papilionaceae. Jurnal Farmasi Indonesia . 2 (53). Voight,  R.  (1995). In  Buku  Pelajaran  Teknologi  Farmasi .  Yogjakarta:  Gadjah  Mada University Press.
Winarsi, H. (2013). In Antioksidan Alami dan Radikal Bebas . Yogjakarta: Kanisius