## TOTAL FLAVONOID DAN EFEKTIVITAS EKSTRAK ETANOL
BIJI KELOR ( Moringa oleifera L) ASAL KOTA PALU SULAWESI TENGAH TERHADAP HISTOPATOLOGI PANKREAS TIKUS PUTIH JANTAN ( Rattus norvegicus ) YANG DIINDUKSI

## STREPTOZOTOCIN
Submitted : 24 September 2019 Edited : 15 Juni 2020
Accepted : 25 Juni 2020
Viani Anggi , Joni Tandi, Veronika
Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Pelita Mas Palu Email : viani.anggi@gmail.com

## ABSTRACT
This study aims to determine the content of flavonoid and the effect of ethanol extract of moringa  seeds  on  the  regeneration  of  pancreatic  β  cells  in  male  white  rats  streptozotocin induced  diabetes.  This  study  method  used  has  total  flavonoid  equivalent  quercetin  by spectrophotometry uv-vis and to regeneration of pancreatic  β  cells  in male  white rats used 30 test animals,namely male white rats divided into 6 groups, each group consisted of 5 male white rats  with  details  of  group  I  as  normal  control,  Group  II  as  negative  control  given  0.5%  Na- CMC suspension, Group III as positive control given glibenclamide suspension and in Groups IV, V, and VI were given with each dose of 100 mg/kg BW, 200 mg/kg BW and 400 mg/kg BB. Histopathological  damage  picture  of  the  pancreas  was  observed  by  staining  HE using a 400x magnification  olympus  Cx21  microscope.  The  results  showed  that  the  ethanol  extract  of moringa  seeds  contained  secondary  metabolites,  namely  flavonoids,  alkaloids,  saponins  and tannins. The results showed has total flavonoid equivalent quercetin of moringa seeds is 1,26% and  regeneration  of  pancreatic  β  cells  in  male  white  rats  streptozotocin  induced  diabetes  of Moringa seed ethanol extract at a dose of 400 mg/kg BB can have an effect on the regeneration of β cells in the pancreas of white diabetic male rats.
Keywords : Total of flavonoid , moringa seeds, diabetes, histopathology, pancreas

## PENDAHULUAN
Dari data hasil riset didapatkan bahwa Provinsi Sulawesi Tengah memiliki
prevalensi  untuk  Diabetes  yang  terdiagnosis dengan  gejala  tertinggi  sekitar  3,7% (1) . Diabetes  Melitus  dapat  ditandai  oleh tingginya  kadar  glukosa  didalam  darah sebagai  akibat  adanya  gangguan  fungsi insulin  atau  penurunan  sekresi  insulin  oleh sel β-pankreas. Pankreas adalah suatu organ didalam  tubuh  yang  tersusun  atas  eksokrin dan  endokrin.  Kelenjar  endokrin  pankreas disusun  atas  pulau  langerhans  yaitu cluster
di  sepanjang  kelenjar eksokrin.  Unit endokrin  disebut  pulau  langerhans  dengan empat macam sel, yaitu sel alfa, sel beta, sel delta  dan  sel  F  (polipeptida  pankreas).  Pada Sel beta menghasilkan insulin yang berfungsi  untuk  menurunkan  glukosa  darah. Perubahan  dapat  terjadi  di  histopatologi pulau langerhans, seperti ukuran dan jumlah, maupun  secara  kualitatif,  dengan  terjadinya nekrosis  (kematian  sel),  Atrofi  (pengecilan sel)  dan  fibrinosis  (jaringan-jaringan  sel yang rusak). Sel-sel yang rusak akibat bahan kimia dapat menyebabkan inflamasi
(peradangan).  Kerusakan  sel  beta  pankreas dapat  disebabkan  oleh  faktor  genetik,infeksi oleh kuman dan radikal bebas (2) .
Penelitian  ini  menggunakan  tanaman
Kelor ( Moringa oleifera L) dengan mengambil  biji  sebagai  bahan  penelitian. Kelor  adalah  jenis  sayuran  yang  banyak dikonsumsi  oleh  masyarakat  kota  Palu sebagai menu sayuran favorit. Kelor dikenal sebagai  pohon  ajaib  karena  terbukti  secara ilmiah  merupakan  sumber  gizi  berkhasiat yang  kandungannya  di  luar  kebiasaan kandungan  tanaman  pada  umumnya.  Kelor diketahui  mengandung  lebih  dari  40 antioksidan  dan  90  jenis  nutrisi  berupa vitamin, mineral dan asam amino (3,4,5) .
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui  total  kandungan  flavonoid ekstrak  biji  kelor  dengan  menggunakan spektrofotometri uv-vis dan melihat efektivitas regenerasi sel β-pankreas dengan mengamati gambaran histopatologi pankreas pada  tikus  putih  jantan  ( Rattus  norvegicus ) yang  diinduksi  streptozotocin  dengan  dosis 40  mg/Kg  BB  secara  intraperitoneal  (i.p). Ekstrak  etanol  biji  kelor  asal  kota  Palu Sulawesi  Tengah  dibuat  variasi  dosis  yaitu 100,  200  dan  400  mg/Kg  BB.  Selanjutnya hasil  pengamatan  skoring  tingkat  kerusakan pankreas dianalisis secara statistik menggunakan  uji  non  parametrik  Kruskal- Wallis  untuk  mengetahui  perbedaan  yang signifikan  antara  kelompok  dan  kelompok kontrol,  dimana  jika  terdapat  perbedaan, akan  dilanjutkan  menggunakan  uji  Mann Whitney  untuk  melihat  perbedaan  yang bermakna dari setiap kelompok.

## METODE PENELITIAN Alat
Alat-alat  gelas,  ayakan  40  mesh, batang  pengaduk,  bejana  maserasi,  blender, cawan  porselin,  gelas  kimia,  gelas  ukur, glukometer,  glukotest  strip  test,  kandang hewan  uji,  mikroskop,  pipet  tetes,  pisau bedah, Rotary  Vacuum  Evaporator, spuit
injeksi,  spuit  oral,  tabung  reaksi,  timbangan analitik, Timbangan gram, Waterbath .

## Bahan
Air  suling,  Asam  klorida,  Besi  (III) klorida, Citrate-buffered  saline, biji  kelor, Dragendorf  LP,  Etanol  96%,  eter,  formalin 10%,  glibenklamid,  Liebermann-Burchard, Serbuk  Magnesium,  Na  CMC  0,5%,
Natrium hidroksida, Natrium klorida, pewarnaan Hematoxylin Eosin, Streptozotocin, Parafin cair, Aseton, Alkohol.
Pembuatan  Ekstrak  Etanol  biji  kelor ( Moringa oleifera L) Pembuatan ekstrak biji kelor
dilakukan  dengan  metode  maserasi,  yaitu ditimbang 2000 gram lalu diekstraksi selama 3  hari  dengan  menggunakan  pelarut  etanol 96%  sebanyak  8  liter.  Kemudian  dilakukan penyaringan  dengan  menggunakan  kertas saring  dan  diperoleh  filtrat  Ekstrak  etanol biji  kelor  Selanjutnya  dievaporasi  atau memisahkan  larutan  menggunakan Rotary Vacuum  Evaporator pada  suhu  60 C  dan dilanjutkan dengan penguapan yang dilakukan  dengan  menggunakan waterbath dengan  suhu  60 C  hingga  diperoleh  ekstrak kental sebanyak 75 gram.

## Analisis Total Kandungan Flavonoid
Melakukan  pembuatan  kurva  standar dengan  menimbang  quercetin  sebanyak  10 mg  dan  menambahkan  0,3  ml  natrium  nitrit 5%, kemudian setelah 5 menit
menambahkan  0,6  ml  aluminium  chloride 10%  tunggu  sampai  5  menit,  menambahkan
2 ml natrium hidroksida 1 M dan tambahkan aquades sampai 10 ml dengan menggunakan labu  takar  dan  pindahkan  ke  dalam  kuvet dan tetapkan serapan pada panjang gelombang 510 nm.
Untuk  Penetapan  uji  total  flavonoid ekstrak  biji  kelor  dengan  menimbang  100 mg  sampel  ekstrak  biji  kelor  dan  masukkan
kedalam tabung reaksi 10 ml. Menambahkan 0,3 ml natrium nitrit 5%, kemudian setelah 5 menit  menambahkan  0,6  ml  aluminium chloride  10%  dan  tunggu  sampai  5  menit, setelah  itu  menambahkan  2  ml  natrium hidroksida  1  M  dan  adukkan  dengan aquades  hingga  25  ml  dengan  labu  takar. Kemudian  mengencerkan  sesuai  kebutuhan dan  memindahkan  ke  dalam  kuvet  dan mengukur  serapan  pada  panjang  gelombang 510 nm.

## Pembuatan  Larutan  Koloidal  Na  CMC
0,5%
Natrium  karboksimetil  selulosa  (Na CMC)  ditimbang  sebanyak  0,5  gram dimasukan  kedalam lumpang yang berisi 10 ml aquades yang telah dipanaskan,
didiamkan selama 15 menit hingga diperoleh massa  yang  transparan,  lalu  dicampurkan
sampai homogen. Larutan Na-CMC dipindahkan  ke  dalam  labu  ukur  100  ml. Volumenya  kemudian  cukupkan  dengan aquades hingga 100 ml.

## Pembuatan Larutan Streptozotocin (STZ)
Streptozotocin  ditimbang  sebanyak 0,32  gram  lalu  dilarutkan  menggunakan citrate-buffer  saline dengan  pH  4,5  sampai 100 ml, lalu diinduksikan pada tikus melalui intraperitoneal  (ip).  Dosis  streptozotocin yaitu 40 mg/kg BB.

## Pengujian Histopatologi pankreas
Pemeriksaan  histopatologi  pankreas dilakukan  pada  hari  ke-28,  dimana  hewan  uji dikorbankan
dan dilakukan proses pembedahan untuk pengambilan organ pankreas,  kemudian  organ  pankreas  dipotong dan  dimasukkan  kedalam  wadah  yang  bersisi formalin 10%, kemudian dilakukan
pembuatan sediaan preparat histologi pankreas dengan  proses  fiksasi  menggunakan  larutan formalin  10%  selama  3-4  jam,  selanjutnya dilakukan  pengeringan  menggunakan  aseton sebanyak  3  kali  selama  2  jam,  kemudian
dilakukan  pembersihan  menggunakan  toluen sebanyak  3  kali  selama  1-2  jam,  selanjutnya dilakukan  proses  embedding  menggunakan parafin  cair  pada  suhu  60 ◯ C  sebanyak  3  kali selama  2  jam  kemudian  dilakukan  proses pencetakan dan selanjutnya dilakukan pewarnaan dan kemudian diamati
menggunakan mikroskop.

## Analisis Data
Data  hasil  pemeriksaan  mikroskopis yang diperoleh data skoring tingkat kerusakan pankreas  tikus  putih  jantan.  Selanjutnya dianalisis  menggunakan  uji  non  parametrik Kruskall  Wallis untuk  mengetahui  perbedaan yang  signifikan  antara  kelompok  perlakuan dengan kelompok kontrol dengan nilai p<0,05 dipilih  sebagai  tingkat  signifikansinya.  Jika terdapat  perbedaan  yang  signifikan  maka dilakukan  uji Mann  whitney untuk  melihat perbedaan  yang  bermakna  setiap  kelompok. Pengolahan  data  dilakukan  menggunakan program  software  SPSS  23.  Adapun  hasil penurunan  kadar  glukosa  darah  digunakan sebagai nilai rujukan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  Uji  Fitokimia  Ekstrak  Etanol  Biji Kelor No. Pengujian Hasil 1 Flavonoid + 2 Saponin + 3 Alkaloid + 5 Tanin + Hasil  Uji  Total  Flavonoid  equivalent quercetin Parameter Uji Hasil Satuan Metode Total Flavonoid equivalent quercetin 1,26% b/b Spektrofotometri Uv-Vis

## Hasil Skoring tingkat kerusakan Pankreas Tikus Putih Jantan
Perlakuan Skoring Histopatologi Rerata SD 1 2 3 4 5 Kontrol normal 0.33 0 0 0 0 0.666+0.149 Kontrol negatif (Na CMC 0,5%) 1.67 1.67 0 2.67 2.5 0.79+1.056 Kontrol positif (Suspensi glibenclamide 0,45 mg/Kg BB) 0.4 1.33 0.6 0.8 1.67 0.76+0.351 Ekstrak Etanol Biji Kelor Dosis 100 mg/Kg BB 0.8 1 0.75 1.5 0.6 1.143+0.416 Ekstrak Etanol Biji Kelor Dosis 200 mg/Kg BB 1.2 0.8 1.25 1 0.6 0.97+0.272 Ekstrak Etanol Biji Kelor Dosis 400 mg/Kg BB 0.4 1 1 1.2 1 0.92+0.303 Hasil Uji lanjut Mann whitney Kelompok Uji k.normal K.negatif K.positif Dosis 100 Dosis 200 Dosis 400 K.normal - 0.034* 0.007* 0.007* 0.007* 0.006* k.negatif 0.034* - 0.116 0.169 0.116 0.112 k.positif 0.007* 0.116 - 0.94 0.344 0.396 Dosis 100 mg/Kg BB 0.007* 0.169 0.94 - 0.599 0.666 Dosis 200 mg/Kg BB 0.007* 0.116 0.344 0.599 - 0.746 Dosis 400 mg/Kg BB 0.006* 0.112 0.396 0.666 0.746 -
Gambaran  histopatologi  pankreas  tikus putih jantan
Preparat  jaringan  pankreas  tikus  putih, pewarnaan HE Pembesaran 400x.
Kontrol normal Ket : sel mengalami piknosis Kontrol negatif:sel mengalami piknosis (biru),degenerasi (kuning), nekrosis (hijau), kerioreksi (putih), edema (hitam) dan radang (merah)
Kontrol  positif  :  sel  mengalami  piknosis (biru),degenerasi (kuning), nekrosis (hijau), dan radang (merah)
Dosis  100  mg/kg  BB  :  sel  mengalami piknosis
(biru),degenerasi (kuning), nekrosis  (hijau),  radang  (merah)  dan kerioreksi (putih)
Dosis  200  mg/kg  BB  :    sel  mengalami piknosis (biru),degenerasi (kuning), nekrosis  (hijau),  edema  (hitam)  dan kerioreksi (putih) Dosis  400  mg/kg  BB  :  sel  mengalami piknosis (biru),degenerasi (kuning), nekrosis (hijau) dan kerioreksi (putih)

## PEMBAHASAN
Penelitian  ini  menggunakan  biji kelor  ( Moringa  oleifera L)  yang  diperoleh dari  Kec  Palu  Selatan,  Kota  Palu  Sulawesi Tengah.  Sebelumnya  dilakukan  identifikasi tanaman  di  UPT.  Sumber  Daya  Hayati Universitas  Tadulako  Sulawesi.  Hasil identifikasi  membuktikan  bahwa  biji  kelor yang  digunakan  dalam  penelitian  benar adalah spesies ( Moringa oleifera L) Ekstrak kental  biji  kelor  diperoleh  dari  proses ekstraksi  dengan  menggunakan  metode maserasi Selanjutnya dilakukan uji fitokimia dengan tujuan untuk mengidentifikasi kandungan golongan senyawa  yang  terkandung  dalam  ekstrak biji  kelor.  Berdasarkan  hasil  dari  uji penapisan  fitokimia  ekstrak  biji  kelor ( Moringa Oleifera L) mengandung senyawa  metabolit  sekunder  yaitu  alkaloid, flavonoid, tanin dan saponin. Hal ini sesuai literatur  yang  diperoleh  bahwa  biji  kelor
( moringa  oleifera L)  memiliki  kandungan senyawa  metabolit  sekunder  yaitu  alkaloid, flavonoid,  tanin,  dan  saponin (6) .  Dari  hasil uji  total  flavonoid  ekstrak  biji  kelor  asal kota Palu Sulawesi Tengah dengan menggunakan metode spektrofotometri Uv-
Vis  diperoleh  hasil  total  flavonoid  sebesar 1,26% b/b.
Pada  pengujian  efek  ekstrak  etanol biji  kelor  terhadap  perbaikan  kerusakan
dengan melihat gambaran histologi pankreas tikus diabetes. Hewan uji dilakukan  dengan  cara  diinduksi  dengan streptozotocin 40 mg/kg BB yang diinjeksikan  secara  intraperitoneal  yang bertujuan untuk meningkatkan kadar
glukosa darah, streptozotocin dapat menginduksi  terjadinya  diabetes  di  mana STZ  menembus  sel  β  langerhans  melalui transporter  glukosa  GLUT  2.  Aksi  STZ intraseluler  menghasilkan  perubahan  DNA sel  β  pankreas (7) .  Setelah  diberi  perlakuan pada masing-masing kelompok tikus kemudian dilakukan pembedahan pada hari ke  28  untuk  diambil  organ  pankreasnya untuk  dibuat  preparat  histologi  pankreas. Pembuatan  preparat  histologi  dilakukan  di Balai  Besar  Veteriner  Maros  dengan menggunakan pewarnaan Hematoksilin Eosin (HE) kemudian dilanjutkan pengamatan dengan menggunakan mikroskop Pembesaran 400x.
Penelitian  ini  menganalisis  hasil pemeriksaan histopatologis pankreas model tikus  diabetes  dengan  terapi  ekstrak  etanol biji  kelor  menggunakan  pewarnaan  HE. Hasil  pemeriksaan  yang  didapatkan  pada pankreas secara umum menunjukkan struktur  pulau-pulau  Langerhans  sebagai kelenjar  endokrin,  pada  pewarnaan  HE terpulas  lebih  pucat  dibandingkan  dengan sel-sel  asinar  sebagai  kelenjar  eksokrin. Sitoplasma  sel-sel  asinar  maupun  sel-sel pada pulau Langerhans tampak merah muda sedangkan  inti  sel  tampak  ungu.  Pada kelompok  kontrol  normal  struktur  pulau- pulau  Langerhans  tampak  normal  yang ditandai dengan bentuk sel yang cenderung bulat,  sitoplasma  terpulas  merah  muda  dan nukleus  terpulas  ungu,  sel-sel  tersebut tersusun padat dan berbatas jelas. Pada satu lapangan  pandang  ditemukan  adanya  sel piknotik,  akan  tetapi  jumlahnya  sangat sedikit,  seperti  yang  terlihat  pada  gambar A.  Yang  merupakan  kelompok  kontrol negatif atau mengalami diabetes yang tidak
terkontrol;  menunjukkan  jumlah  pulau- pulau Langerhans lebih sedikit dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol normal.  Ukuran  pulau-pulau  Langerhans lebih  kecil  dengan  jumlah  sel  yang  kurang dari  dua  puluh  dan  tidak  tersusun  padat dengan  bentuk  pulau  Langerhans  yang cenderung  poligonal  dan  tidak  membulat. Sel-sel pada struktur pulau Langerhans juga tampak  mengalami  mengalami  degenerasi dan  nekrosis  serta  adanya  sel-sel  piknosis (inti sel memadat dan terpulas sangat gelap) maupun  karioreksis  (sel  menghilang  atau mengalami fragmentasi). adanya sel radang cukup  banyak  dijumpai  baik  di  dalam struktur  pulau  Langerhans  maupun  di sekitar  sel-sel  asinar.  Beberapa  lapangan pandang  memperlihatkan  adanya  edema yang  ditandai  dengan  adanya  rongga- rongga kosong pada struktur pulau Langerhans. Pada kelompok kontrol positif, struktur  pulau  Langerhans  menunjukkan gambaran  yang  berbeda  dengan  kelompok kontrol negatif dan tampak seperti kelompok  kontrol  normal.  Sel-sel  tersusun padat,  sekalipun  ditemukan  sel-sel  yang mengalami degenerasi, nekrosis dan piknosis.  Sel-sel  radang  juga  ditemukan pada  kelompok  ini,  serta  gambaran  edema pada beberapa lapangan pandang. Kelompok  ekstrak  biji  kelor  dosis  100 menunjukkan banyak sel-sel yang
mengalami degenerasi, dan sebagian nekrosis,  piknosis,  karioreksis  dan  adanya sel-sel  radang  yang  cukup  banyak.  Bentuk sel  tampak  tidak  beraturan  dengan  batas antar  sel  yang  tidak  jelas  serta  tersusun jarang. Pada kelompok ini kerusakan pulau Langerhans  lebih  parah  bila  dibandingkan kelompok  kontrol  positif  yang  diberikan suspensi  glibenklamid.  Kelompok  ekstrak etanol  biji  kelor  dosis  200,  menunjukkan gambaran  struktur  yang  sedikit  lebih  baik bila dibandingkan dengan kelompok ekstrak etanol biji kelor dosis 100 tapi tidak seperti  kelompok  kontrol  positif.  Bentuk
sel-sel  masih  banyak  yang  nekrosis, piknosis  maupun  karioreksis  serta  struktur pulau  Langerhans  yang  mengalami  edema maupun sel radang. Struktur pulau Langerhans  pada  kelompok  ekstrak  etanol biji  kelor  dosis  400  menunjukkan  hasil yang  berbeda  dengan  kelompok  ekstrak etanol  biji  kelor  dosis  200,  sel-sel  normal banyak ditemukan, namun masih ada sel-sel yang  mengalami  degenerasi,  nekrosis,  sel- sel  piknosis  maupun  karioreksis.  Secara umum  struktur  pulau  Langerhans  pada kelompok  ini  tidak  berbeda  dengan kelompok  ekstrak  etanol  biji  kelor  dosis 200.
Gambaran  histopatologi  pankreas
tikus  yang  telah  diamati  dan  diberikan skoring kemudian dianalisis dengan
menggunakan analisis non-parametrik kruskal-wallis. Uji  ini  dilakukan  untuk melihat  adanya  perbedaan  signifikan  dari semua  kelompok  perlakuan  Hal  tersebut dapat  dibuktikan  dengan  melihat  nilai signifikansi  P<0,05  =0,012  yang  artinya terdapat  perbedaan  dari  tiap  kelompok perlakuan  selanjutnya  dilakukan  uji Mann- Whitney untuk  mengetahui  perbedaan  tiap perlakuan. Pengujian Mann-Whitney kelompok normal berbeda signifikan terhadap kelompok kontrol negatif (p<0,05) =0,034,  positif  =  0,007,  dosis  100  =0,007, dosis  200  =0,007,  dosis  400  =  0,006. Pengujian Mann-Whitney kelompok negatif berbeda  signifikan  terhadap  kelompok positif  =  0,116,  dosis  100  0,169,  dosis  200
0,116, dosis 400 = 0,112. Pengujian Mann- Whitney kelompok positif berbeda
signifikan terhadap dosis 100 =0,094, dosis 200  =0,334,  dosis  400  =  0,396.  Pengujian Mann-Whitney kelompok  ekstrak  biji  kelor dosis  100  mg/kg  BB  berbeda  signifikan terhadap dosis 200 = 0,599), dan dosis 400
=0,666. Pengujian Mann-Whitney
kelompok  ekstrak  biji  kelor  dosis  200 berbeda  signifikan  terhadap  kelompok ekstrak biji kelor dosis 400 =0,746.
Berdasarkan  hasil  dari  preparat histopatologi  pankreas  dan  statistik  yang telah  dilakukan,  dapat  diketahui  bahwa pada  dosis  100  banyaknya  sel  yang mengalami  degenerasi,  sebagian  nekrosis, piknosis,  karioreksi  dan  adanya  sel-sel radang  yang  cukup  banyak.  Hal  ini kemungkinan  terjadi  karena  gangguan sistem  metabolisme  kandungan  zat  aktif yang  tidak  terlarut  sempurna  di  dalam tubuh tikus sehingga tidak terserap maksimal  di  dalam  reseptor (8,9) .  Pada  dosis 200  sedikit  lebih  baik  bila  dibandingkan dengan dosis 100, namun masih banyak sel- sel  yang  nekrosis,  piknosis,  karioreksi, edema  dan  sel-sel  radang.  Pada  dosis  400 menunjukan hasil yang berbeda dibandingkan  dengan  dosis  200,  sel-sel normal  banyak  ditemukan,  namun  ada beberapa  sel  yang  mengalami  degenerasi, nekrosis,  piknosis  dan  karioreksi.  Hal  ini terjadi  karena  zat  aktif  yang  terkandung diserap sempurna di dalam reseptor.
Salah  satu  metabolit  sekunder  yang terdapat pada ekstrak etanol biji kelor yaitu flavonoid  dengan  total  kandungan  1,26% b/b,. Flavonoid berperan terhadap mekanisme  molekuler  yang  melibatkan reaksi  stress  oksidatif  glycation  non enzymatic dan polyol pathway (10) . Senyawa flavonoid  berperan  sebagai  antioksidan yang  mampu  mengikat  radikal  bebas sehingga dapat mengurangi stress oksidatif (11) .  Berkurangnya  stress  oksidatif dapat  mengurangi  resistensi  insulin  dan mencegah  perkembangan  disfungsi  dan kerusakan sel β pankreas.

## SIMPULAN
Senyawa metabolit sekunder terdapat pada  ekstrak  etanol  biji  kelor  ( moringa oleifera L)  yaitu  flavonoid,  alkaloid,  tanin, dan  saponin.  Total  Flavonoid  ekstrak  biji kelor  dengan  metode  spektrofotometri  Uv- Vis  sebesar  1,26%  b/b.  Pemberian  ekstrak etanol  ekstrak  etanol  biji  kelor  ( moringa
oleifera L) mempunyai pengaruh terhadap
regenerasi  sel  β  pankreas  tikus  putih jantan  yang  diinduksi  streptozotocin, dengan  dosis  400  mg/Kg  BB  dapat memberikan efek yang lebih baik terhadap  regenerasi  sel  β  pankreas dibanding dosis 100 dan dosis 200 mg/Kg BB.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Kemenkes  RI.  2018. Riset  kesehatan
Dasar; RISKESDAS . Jakarta : Balitbang Kemenkes Republik Indonesia. 57. 2. William P. Glasheen, Andrew Renda, Yanting Dong. 2017. Diabetes Complication  Severity  Index  (DCSI)- Update  and  ICD-10  Translation . Journal  of  Diabetes  Complications 31:1007-1013.
3. Robertino Ikalinus, Sri Kayati
Widyastuti,  Niluh  Eka  Setiasih. 2015. Phytochemical screening ethanol  extract  ekim  stem  Moringa Oleifera . Indonesia Medicus Veterinus Journal, 4(1): 71-79. 4. Milan Stefek. 2011. Natural Flavonoids as Potential multifunctional  agents  in  Prevention Of  Diabetic. Interdiscip  Toxicology, 4(2) :69-77.
5. Meraiyebu
Ajibola, Ogunwole Eunice, Izuchukhwu Nnnedinma Stephanie.  2014. Effects  of  Moringa Oleifera  Seeds  on  Aloxan  Induced Hyperglicemia.  Basic  Sciences  of Medicine , 3(3):37-42.
6. Abdulrahman,  Al-Malki,  Haddad  A.
El  Rabey.  2015. The  Antidiabetic
Effect  of  Low  Doses  of  Moringa Oleifera Lam. Seeds on streptozotocin  Induced  Diabetes  and Diabetic  Nephropahty  in  Made  Rats . Biomed Research International,1-13. 7. Shailaja G.Mahajan, Rawindra E.Mali, Anita A.Mehta. 2007. Protective  Effect  of  ethanolic  extract of seed of Moringa Oleifera Lam.Against  Inflamation  Associated with  Development  of  Arthritis  in Rats .  Journal  of  Immunotoxiclogy,
4:39-47.
8. Nijveldt,  R.J,  Nood,  E.V,  Hoorn, D.E,  Beelens,  P.G,  Noreni,  K.V,
Paul,  A.M,  Leeuwen,  V.  2001. Flavonoids:  A  Review  of  Probable mechanism  of  action  and  Potential Applications .  Am.J.Clin  Nutrition, 74:418-425.
9. M.R. Khumbare, V.Guicha, T.Sivakumar.  2012. Estimation  of
Total  Phenolic  Content,  Cytotoxicity and  In  Vitro  Antioxidant  activity  of stem  bark  of  Moringa  Oleifera . Asian  Pacific  Journal  of  Tropical Disease, 2(2): 219-223.
10. F.  Anwar,  S.Latif,  M.  Ashraf,  A.H. Gilani.  2007. Moringa  Oleifera  :  A
Food  Plant  with  multiple  Medicinal Uses . Phytoteraphy Research, 21(1):17-25.
11. Urios P, Grigorova Borsos, Sternberg.  2007. Flavonoids  Inhibits to  the  Formation of  the  cross  linking Age Pentosidine in Colagen Incubated with Glucose According to their  Structure. Eur  J.Nutrition,  46:
139-146