Vol. 4 No. 1 Tahun 2022 Labagu et al., / JFPJ, 4 (1), 1-11
KADAR SAPONIN EKSTRAK BUAH MANGROVE ( Sonneratia alba ) DAN DAYA HAMBATNYA TERHADAP RADIKAL BEBAS DPPH
Repli Labagu 1 ; Asri Silvana Naiu* 1 ; Nikmawatisusanti Yusuf 1
1 Jurusan Teknologi Hasil Perikanan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Negeri Gorontalo, Jl.Jenderal Sudirman No.06, Kota Gorontalo 96128, Gorontalo, Indonesia
*Korespodensi : asri.silvana@ung.ac.id (Diterima 27-10-2021; Direvisi 17-12-2021; Dipublikasi 06-01-2022)

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis kadar saponin dalam ekstrak buah mangrove ( Sonneratia alba ) hasil ekstraksi dengan pelarut berbeda, serta mengetahui daya hambat senyawa saponin terhadap radikal bebas DPPH. Perlakuan pada penelitian ini yaitu variasi pelarut,yakni methanol (P1), etanol (P2) dan air (P3). Parameter yang di uji adalah  kadar  saponin,  yang  di  uji  menggunakan  KLT,  serta  daya  hambatnya  terhadap  radikal  bebas  yang  diuji menggunakan metode DPPH. Pengaruh variasi perbedaan pelarut terhadap kadar saponin dan  daya hambat dianalisis menggunakan Anova dan di uji lanjut Duncan . Hasil uji kromatografi KLT menunjukkan bahwa kadar saponin buah S. alba menunjukkan bercak noda ikatan rangkap dua dengan nilai Rf 0,80-0,85 yang menegaskan bahwa buah S. alba mengandung saponin.Hasil analisis ANOVA menunjukkan bahwa perbedaan jenis pelarut berpengaruh nyata terhadap kadar saponin. S. alba yang diekstraksi dengan pelarut P1, P2, dan P3 masing-masing menghasilkan kadar saponin sebesar  20,25 mg/g,  18,80 mg/g,  dan  10,65 mg/g.  Daya  hambat senyawa saponin  dari  ekstrak methanol,  ekstrak etanol, dan ekstrak air buah S. alba terhadap radikal bebas DPPH berturut-turut, yaitu 60,94 %, 63,31 % dan 23,88 %. Kata kunci : Antioksidan; Fitokimia; Kromatografi lapis tipis; Rendemen; Spektrofotometri
LEVELS OF SAPONIN IN MANGROVE FRUIT ( Sonneratia alba ) EXTRACT AND

## ITS INHIBITION AGAINST DPPH FREE RADICAL

## ABSTRACT
This  study  aims  to  analyze  the  levels  of  saponins  in  extracts  of  mangrove  fruit  ( Sonneratia  alba ) extracted  with  different  solvents,  and  to  determine  the  inhibitory  power  of  saponins  against  DPPH  free radicals. The treatments in this study were solvent variations, namely methanol (P1), ethanol (P2) and water (P3). The parameters tested were the levels of saponins, which were tested using TLC, and their inhibition against free radicals which were tested using the DPPH method. The effect of different solvent variations on saponin  levels  and  free  radical  inhibition  was  analyzed  using  Anova  and  further  tested  by  Duncan.  TLC chromatography test results showed that the levels of saponins in S. alba fruit showed double bond stains with an Rf value of 0.80-0.85 which confirmed that S. alba fruit contained of saponins. S. alba fruit extracted with solvents P1, P2, and P3 yielded saponin content of 20.25 mg/g, 18.80 mg/g, and 10.65 mg/g, respectively. The inhibition of saponin compounds from methanol extract, ethanol extract, and water extract of S. alba against DPPH free radicals were 60.94%, 63.31% and 23.88%, respectively.
Keywords : Antioxidant; KLT; Phytochemicals; Spectrophotometry; Yield
P-ISSN: 2655-3465     E-ISSN: 2720-8826 DOI: https://doi.org/10.37905/jfpj.v4i1.9344
Vol. 4 No. 1 Tahun 2022 Labagu et al., / JFPJ, 4 (1), 1-11

## PENDAHULUAN
Keseimbangan antara kandungan radikal bebas dan antioksidan dalam tubuh merupakan salah satu faktor  yang  memengaruhi  kesehatan  manusia.  Secara  alami  tubuh  menghasilkan  senyawa  antioksidan, namun tidak cukup kuat untuk berkompetisi dengan radikal bebas yang dihasilkan oleh tubuh sendiri setiap harinya  (Hernani  danRaharjo,  2005),  menyebabkan  radikal  bebas  menjadi  lebihdominan  di  dalam  tubuh. Radikal bebas merupakan molekul yang tidak stabil karena memiliki elektron yang tidak berpasangan pada orbital luarnya sehingga molekul ini dapat menyerang makromolekul sel. Makromolekul yang terserang oleh radikal bebas dapat mengalami oksidasi yang menyebabkan terjadinya kerusakan protein, DNA, penuaan dini, kanker, serangan jantung, dan penyakit degeneratif lainnya(Middleton et al ., 2000). Radikal bebas dapat dihambat dengan antioksidan.
Antioksidan  merupakan  senyawa  kimia  yang  dapat  menyumbangkan  elektron  yang  dikandungnya kepada  radikal  bebas  untuk  menghambat  atau  mencegah  terjadinya  oksidasi  pada  substrat  yang  mudah teroksidasi  (Middleton et  al .,  2000).  Kekurangan  antioksidan  dalam  tubuh  dapat  diatasi  melalui  asupan makanan dari luar yang cukup mengandung antioksidan. Salah satu sumber antioksidan yang berasal dari luar tubuh dapat diperoleh dari tumbuhanyang banyak mengandung senyawa metabolit sekunder. Tumbuh- tumbuhan mengandung senyawa metabolit sekunder berupa fenolik yang memiliki kemampuan menghambat kerja  radikal  bebas  (Duenas et  al .,  2009).  Salah  satu  jenis  tumbuhan  yang  potensial  sebagai  sumber antioksidan alami berasal dari ekosistem mangrove, yaitu Sonneratia alba . Ekstrak Sonneratia alba yang diaplikasikan pada kitosan memiliki antioksidan IC 50 sebesar 98.00 ppm (Nuraeni dan Sulistijowati, 2021); Dotulong et al ., (2020) menyatakan bahwa S. alba yang diekstrak dengan air panas suhu 40 ℃ mengandung metabolit sekunder flavonoid, tannin, alkaloid, terpenoid, dan saponin; Mile et al ., (2021) menyebutkan bahwa buah mangrove Rhizophora mucronata yang diekstrak menggunakan pelarut metanol teridentifikasi senyawa bioaktif flavonoid, saponin, tanin, tripertenoid, dan fenol hidroquinon; Syarif et al ., (2016) mengungkap bahwa saponin memiliki potensi sebagai senyawa antioksidan.
Pengambilan  senyawa  aktif  dalam  tumbuhan  dapat  dilakukan  dengan  ekstraksi  yang  sesuai. Pembuatan sediaan ekstrak dimaksudkan agar zat berkhasiat yang terdapat pada simplisia terdapat dalam bentuk  yang  mempunyai  kadar  tinggi  dan  hal  ini  memudahkan  zat  berkhasiat  dapat  diatur  dosisnya (Arief, 1987). Ekstraksi adalah suatu cara untuk mengambil pigmen/pewarna alami dari bagian tumbuhan dengan menggunakan pelarut yang sesuai kepolarannya dengan zat yang akan diekstrak. Ekstraksi dapat dilakukan dengan pelarut air maupun pelarut organik (Sintha et al ., 2008). Pemilihan pelarut merupakan faktor
Vol. 4 No. 1 Tahun 2022 Labagu et al., / JFPJ, 4 (1), 1-11
yang menentukan dalam ekstraksi. Pelarut yang digunakan dalam ekstraksi harus dapat menarik komponen aktif dari campuran. Hal-hal penting yang harus diperhatikan dalam memilih pelarut adalah selektivitas, sifat pelarut, kemampuan untuk mengekstraksi, tidak bersifat racun, mudah diuapkan dan harganya relatif murah (Sa’adah & Nurhasnawati, 2017)
Penelitian yang membedakan pengaruh jenis pelarut terhadap kadar saponin yang diekstrak dari buah S.  alba dan  daya  hambatnya  terhadap  radikal  bebas  DPPH  belum  pernah  dilaporkan.  Berdasarkan  hal tersebut, maka penelitian ini dibuat dengan mengujicobakan kemampuan pelarut methanol, etanol, dan air dalam mengekstrak saponin dari S.alba , sekaligus menguji daya hambat dari masing-masing ekstrak saponin tersebut.
Pelarut yang digunakan adalah pelarut yang dapat menyaring sebagian besar metabolit sekunder yang diinginkan dalam simplisia (Depkes RI, 2008). Pemilihan pelarut yang sesuai merupakan faktor penting dalam proses ekstraksi. Metanol merupakan pelarut yang bersifat universal sehingga dapat melarutkan analit yang bersifat polar dan nonpolar.Metanol dapat menarik alkaloid, steroid, saponin, dan flavonoid dari tanaman (Thompson, 1985). Etanol merupakan pelarut yang banyak digunakan untuk mengestrak komponen polar suatu  bahan  alam  dan  dikenal  sebagai  pelarut  universal.  Komponen  polar  dari  suatu  bahan  alam  dalam ekstrak etanol dapat diambil dengan teknik ekstraksi melalui proses pemisahan(Santana et al ., 2009). Etanol mempunyai titik didih yang rendah yaitu 79 o C sehingga memerlukan panas yang lebih sedikit untuk proses pemekatan.  Sedangkan  menurut  Hardiningtyas  (2009),  meskipun  air  mempunyai  konstanta  dielektrikum paling  besar  (paling  polar)  namun  penggunaannya  sebagai  pelarut  pengestrak  jarang  digunakan  karena mempunyai beberapa kelemahan seperti menyebabkan reaksi fermentatif (mengakibatkan perusakan bahan aktif lebih cepat), pembekakan sel dan larutannya mudah terkontaminasi. Tujuan penelitian ini adalah untuk menganalisis pengaruh jenis pelarut terhadap kadar saponin dalam ekstrak buah mangrove S. alba serta daya hambat masing-masing ekstrak terhadap radikal bebas DPPH.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan adalah neraca analitik (Metler Toledo),kompor (Hitachi), alat hidrolisis/pendingin balik, magnetic  stirrer (Biosan  MSH  300),  oven  (Memmert),  penangas  air,  atomizer,  mikropipet, sintered glass ,  lampu  UV  254  nm,  spektrofotometer  UV-Vis  Lambda  20  (Perkin  Elmer)  dan  kuvet  (Quartz),  serta peralatan gelas (pipet, tabung reaksi, Erlenmeyer , corong pisah, gelas Baker, dan lain-lain).
Vol. 4 No. 1 Tahun 2022 Labagu et al., / JFPJ, 4 (1), 1-11
Bahan yang digunakan untuk mengekstraksi buah mangrove ( S.alba ), yaitu:, methanol 99,9% (Merck), etanol 95% (Pudak scientific), dan akuades (Pudak scientific). Bahan untuk menguji fitokimia yaitu: silika gel GF 254 ,  akuades,  HCl  1  N  (Merck),  metanol  99,9%  (Merck),    etanol  95%  (Pudak  scientific),  dan  akuades (Pudak scientific).

## Prosedur Penelitian

## Pengambilan sampel dan preparasi buah S. alba
Buah S. alba dikumpulkan dari hutan mangrove di Kecamatan Anggrek Kabupaten Gorontalo Utara. Preparasi sampel diawali dengan mengeluarkan kelopak buah, mencuci buah dengan  air  yang mengalir, mengiris tipis lalu mengering anginkan diruang terbuka selama 7-10 hari sampai membentuk simplisia kering

## Proses ekstraksi buah S. alba
Ekstraksi  buah S.  alba menggunakan  metode  maserasi  yang  mengacu  pada  Permadi  (2018). Sebanyak 100g simplisia dilarutkan dengan masing-masing pelarut (metanol, etanol dan air) dalam gelas ukur 1000 ml. Maserasi dilakukan dalam suhu ruang selama 2x24 jam sambil sesekali diaduk. Filtrat hasil filtrasi dipekatkan menggunakan rotary evaporator pada suhu 50-60 ℃ .
Uji kualitatif saponin secara fitokimia dan penegasan dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Uji  kualitatif  fitokimia  mengacu  pada  Astuti et  al .,  (2011).  Ekstrak  buah S.alba sebanyak  0,5  mL dimasukkan dalam tabung  reaksi dan ditambahkan 0,5 mL akuades sambil  dikocok selama 1 menit, lalu ditambahkan 2 tetes HCl 1 N. Apabila busa terbentuk tetap stabil ± 7 menit, maka ekstrak positif mengandung saponin.  Identifikasi juga dilakukan menggunakan KLT yang mengacu pada Alen et al ., (2017). Pemisahan dengan  kromatografi  lapis  tipis  (KLT)  dilakukan  menggunakan  beberapa  eluen  dengan  tingkat  kepolaran yang  berbeda  yaitu  metanol  :  N-heksan  (3:2)  untuk  mendapatkan  pelarut  yang  mampu  memberikan pemisahan yang baik serta noda zat warna yang bagus. Penetuan golongan senyawa pada uji KLT dilakukan dengan penyemprotan plat KLT dengan pereaksi. Komponen kimia yang dievaluasi dari ekstrak meliput uji saponin dengan menggunakan pereaksi HCl 1 N. Noda atau bercak pada permukaan plat diamati dengan lampu UV pada panjang gelombang 366 nm. Kemudian  disemprot dengan  penampak noda dari masing- masing golongan senyawa dan dipanaskan di oven pada suhu 60 ℃ selama 10 menit. Selanjutnya diamati masing-masing noda yang terbentuk, meliputi jumlah noda, warna noda dan jarak perpindahan noda dari tempat asalnya, dan dihitung nila Rf nya.
Vol. 4 No. 1 Tahun 2022 Labagu et al., / JFPJ, 4 (1), 1-11

## Uji kadar saponin sperektrofotometri
Uji kadar saponin menggunakan spektrofotometri dengan terlebih dahulu membuat larutan standard saponin  dari Sigma. Larutan sampel masing-masing ekstrak mengikuti cara pembuatan larutan standard, kemudian  diukur  serapannya  pada  panjang  gelombang  serapan  maksimum.  Konsentrasi  saponin  dalam sampel ditentukan berdasarkan persamaan regresi dari kurva baku kalibrasi standard.

## Uji daya hambat saponin terhadap radikal bebas DPPH.
Uji aktivitas antioksidan menggunakan radikal 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) mengacu pada Molyneux (2004).

## Analisis Data
Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  dua  kali  ulangan.  Perlakuan dalam penelitian yaitu jenis pelarut berbeda yakni Metanol (P1), Etanol (P2), dan air/akuades (P3). Parameter uji yaitu rendemen, keberadaan saponin (secara fitokimia dan KLT), kadar saponin, dan daya hambat saponin terhadap DPPH.  Data hasil pengamatan dianalisis dengan Analisis Varians (ANOVA) dan diuji lanjut dengan Duncan.  Semua data ditabulasi dengan bantuan aplikasi SPSS 24.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Rendemen Ekstrak Buah Mangrove S. alba
Hasil  penelitian  menunjukan  bahwa  rendemen  simplisia  kering  buah  mangrove S.  alba sebesar 15,09%. Hasil ini diperoleh dari perbandingan berat buah S. alba setelah dikeringkan yaitu 300 gr dengan berat basah sebesar 1988 gr. Rendemen dari masing-masing ekstrak pelarut berbeda dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Rendemen ekstrak S.alba dari pelarut berbeda
Sampel (pelarut) Berat serbuk simplisia (g) Ekstrak  (g) % Rendemen Pelarut metanol (P1) Pelarut etanol (P2) Pelarut air (P3) 100 100 100 24,51 20,72 14,65 24,51±1,39 a 20,72±1,71 ab 14,65±0,98 b
Keterangan: huruf yang berbeda pada histogram menunjukkan hasil yang berbeda nyata (p<0,05)
Tabel 1 memperlihatkan bahwa ekstrak metanol lebih tinggi persentasi rendemennya dibandingkan ekstrak pelarut lainnya.  Berdasarkan uji Anova jenis pelarut memberikan pengaruh nyata (p<0.05) terhadap persen  rendemen  ekstrak  buah S.  alba .   Uji lanjut Duncan menunjukkan  bahwa  ekstrak metanol  dan  air menghasilkan rendemen yang berbeda nyata. Hal ini dapat disebabkan karena metanol yang lebih bersifat
Vol. 4 No. 1 Tahun 2022 Labagu et al., / JFPJ, 4 (1), 1-11
sebagai pelarut universal, yaitu dapat menarik senyawa-senyawa baik yang bersifat polar maupun non polar. Sedangkan  pelarut  air  hanya  dapat  menarik  senyawa  yang  bersifat  polar  dari  buah S.alba . (Sirait, 2007) menyatakan bahwa saponin mengandung dua molekul yang terdiri dari molekul hidrofil yang merupakan glikonnya dan hidrofob yang merupakan aglikonnya. Molekul aglikon ini yang sukar larut dalam air, sehingga tidak dapat terekstrak oleh pelarut air. Persentasi rendemen ekstrak air penelitian ini lebih tinggi dari yang dihasilkan oleh (Sendukh et al ., 2019) yang mengekstrak buah S.alba dari Desa Wori Minahasa menggunakan air panas. Hasil penelitian (Cahyadi et al ., 2018) menunjukkan rendemen yang lebih rendah pada ekstrak etanol S . alba dari Kota Tarakan, Kalimantan yang hanya sebesar 6,59%. Perbedaan metode preparasi  sampel,  jenis  pelarut,  maupun  asal  bahan  dapat  menyebabkan  perbedaan  hasil  rendemen. Perendaman suatu bahan dalam pelarut dapat meningkatkan permeabilitas dinding sel dalam tiga tahapan, yaitu  masuknya  pelarut  kedalam  dinding  sel  tanaman  atau  pembengkakan  sel,  kemudian  senyawa  yang terdapat  dalam  dinding  sel  akan  terlepas  dan  masuk  ke  dalam  pelarut,  diikuti  oleh  difusi  senyawa  yang terekstraksi oleh pelarut keluar dari dinding sel. Rendemen  ekstrak etanol buah S . alba juga jauh melampaui rendemen ekstrak daun maupun kulit batang yang dihasilkan pada penelitian (Delta & Hendri, 2021) yang berada pada kisaran 2,29% hingga 9,47%.

## Kandungan Fitokimia Saponin dan Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Ekstrak buah S. alba denga pelarut berbeda diuji secara kualitatif untuk melihat keberadaan saponin dengan cara menambahkan 2 tetes HCl 1 N dalam larutan ekstrak. Hasil pengamatan menunjukkan bahwa semua  perlakuan  pelarut  menghasilkan  busa  selama  lebih  dari  tujuh  menit,  hal  ini  menunjukkan  bahwa semua ekstrak dari tiga pelarut berbeda mengandung saponin. Busa terbentuk karena adanya glikosida yang mampu membentuk busa dalam air yang terhidrolisis menjadi glukosa dan senyawa lainnya.  Sirait (2007) menyebutkan bahwa glikosida saponin dapat membentuk larutan koloidal dalam air yang jika dikocok akan membuih membentuk busa.
Hasil profil KLT senyawa saponin yang dilihat pada dengan lampu UV pada panjang gelombang 366 nm, menghasilkan bercak noda yang berbeda-beda, serta menghasilkan perhitungan nilai Rf yang berbeda. Nilai  Rf  menunjukkan  bahwa  nilai  Rf  yang  teridentifikasi  menunjukkan  adanya  senyawa  saponin  dengan bercak noda seperti ikatan rangkap, sehingga dapat disimpulkan bahwa penggunaan ketiga pelarut dalam hasil  kromatografi  KLT  menghasilkan  nilai  Rf  yang  berbeda  tergantung  tingkat  kepolaran  pelarut  yang digunakan. Penggunaan pelarut metanol menghasilkan nilai Rf paling besar dimana lompatan berdasarkan penotolan menunjukkan nilai 0,85, dan pada pelarut etanol nilai Rf 0,80, berbeda dengan pelarut lainnya,
Vol. 4 No. 1 Tahun 2022 Labagu et al., / JFPJ, 4 (1), 1-11
penggunaan pelarut air menghasilkan nilai Rf yang cukup kecil dengan hasil lompatan sebesar 0,60. Keadaan tersebut dapat disebabkan oleh sifat kepolaran ketiga pelarut yang digunakan, serta kemampuan daya serap adsorben  terhadap  komponen-komponen  kimia  tidak  sama  sehingga  komponen  kimia  dapat  bergerak dengan jarak yang berbeda berdasarkan tingkat kepolarannya. Jika dikaitkan dengan hasil uji kadar saponin dengan tiga pelarut ini, memiliki kaitan dengan besaran nilai Rf yang dihasilkan dari uji KLT, dimana pada hasil spektofotometri UV-Vis lompatan hasil penotolan berbanding lurus dengan nilai Rf yang dihasilkan.
Menurut Stahl (2013) analisis menggunakan KLT merupakan pemisahan komponen kimia berdasarkan prinsip adsorbsi dan partisi yang ditentukan oleh fase diam (adsorben) dan fase gerak (eluen). Komponen kimia bergerak naik mengikuti fase gerak karena daya serap adsorben terhadap komponen-komponen kimia tidak  sama  sehingga  komponen  kimia  dapat  bergerak  dengan  jarak  yang  berbeda  berdasarkan  tingkat kepolarannya.  Kromatografi  lapis  tipis  (KLT)  adalah  memisahkan  beberapa  sampel  secara  bersamaan (Depkes  RI,  2008).  Beberapa  kelebihan  dengan  menggunakan  KLT  yaitu  cepat,  mudah  digunakan  pada penapisan  awal  dengan  penelitian  semi  kuantitatif  dari  pada  kromatografi  lainnya,  sederhana,  murah, persiapan  sampel  yang  mudah  serta  dapat  mendeteksi  dalam  jumlah  yang  besar(Liang  et  al.,  2004). Pengamatan adanya saponin pada bahan lain dengan metode KLT juga dilakukan oleh  (Pusparini, 2007) yang menggunakan silica gel GF 254 sebagai fase diam dan kloroform:methanol (95:5% v/v) sebagai fase gerak.  Penggunaan  kloroform  sebagai  fase  gerak  sama  halnya  dalam  penelitian  ini  yang  menggunakan N-heksan dengan pertimbangan bahwa saponin juga memiliki gugus non polar sehingga diharapkan saponin akan terelusi dengan baik.
Nilai Kadar Saponin Ekstrak Buah S.alba dengan Spektrofotometri
Kadar saponin yang diperoleh dari  buah S. alba berdasarkan pengukuran dengan spektrofotometri berkisar 10,65 mg/g – 20,25 mg/g. Hasil uji Anova menunjukkan bahwa perlakuan variasi pelarut berbeda berpengaruh nyata (p<0,05) terhadap kadar saponin yang dihasilkan. Hasil uji lanjut Duncan menunjukkan bahwa semua perlakuan pelarut P1, P2 dan P3 menunjukkan kadar saponin yang berbeda nyata.
Berdasarkan  hasil  pengujian,  penggunaan  pelarut  metanol  menghasilkan  kadar  saponin  tertinggi dibandingkan pelarut lain yaitu sebesar 20,25 mg/g, sedangkan kadar saponin terendah pada penggunaan pelarut air yaitu sebesar 10,65 mg/g. Perbedaan ini disebabkan karena sifat kelarutan ketiga pelarut yang berbeda dimana metanol lebih bersifat universal sehingga dapat meraih saponin yang memiliki gugus polar dan gugus nonpolar. Berbeda dengan pelarut etanol, walaupun etanol juga seringkali digunakan sebagai pelarut karena sifatnya yang dapat melarutkan polar maupun non polar, namun hasil penelitian menunjukkan
Vol. 4 No. 1 Tahun 2022 Labagu et al., / JFPJ, 4 (1), 1-11
bahwa  penggunaan metanol memiliki kemampuan dan sifat yang  paling baik  untuk memperoleh saponin dalam S.  alba .  Hal  tersebut  sesuai  dengan  penelitian  sebelumnya  oleh  Lazuarid,  (2006)  bahwa  metanol merupakan senyawa  bersifat polar,  sehingga saponin  dapat diekstrak secara baik dengan menggunakan pelarut metanol.
Keunggulan  dari  pelarut  metanol  sendiri  yaitu  memiliki  kecenderungan  menarik  analit-analit  yang bersifat polar maupun nonpolar, sementara saponin sendiri memiliki sifat polar maupun nonpolar, sehingga keduanya memiliki keterikatan yang kuat. Berbeda dengan penggunaan pelarut lain seperti etanol dan air, keduanya  juga  merupakan  pelarut  yang  baik  digunakan  dalam  proses  eksttraksi.  Hasil  penelitian menunjukkan bahwa pelarut etanol dan air tidak dapat menghasilkan kadar saponin dalam jumlah yang lebih besar, karena kemampuan dalam menarik analit dalam ekstrak lebih kecil serta dapat dibuktikan pada hasil uji kadar saponin hanya terdeteksi dalam jumlah yang lebih kecil dibandingkan penggunaan pelarut metanol. Astarina et al ., (2013) bahwa gugus hidroksil dan metil pada metanol memberikan kecenderungan menarik analit-analit yang bersifat polar dan nonpolar. Oleszek, (2000) mengungkapkan bahwa saponin merupakan senyawa  glikosida  yang  tersusun  atas  dua  jenis  molekul  sebagai  kerangka  utama  yaitu  steroid  atau triterpenoid  yang  bersifat  nonpolar  serta  memiliki  gugus  hidroksil  yang  mampu  berikatan  dengan  gula sederhana yang bersifat polar. Sehingga saponin mampu terlarut lebih baik dalam pelarut metanol. Metanol merupakan  senyawa  bersifat  polar,  saponin  dapat  diekstrak  secara  baik  dengan  menggunakan  pelarut metanol dengan konsentrasi lebih dari 40% (Oleszek, 2000).
Hasil  penelitian (Sa’adah  &  Nurhasnawati,  2017) mengungkap  bahwa  saponin  sedikit  larut  dalam etanol. Lebih lanjut dijelaskan bahwa etanol merupakan molekul yang sangat polar karena adanya gugus hidroksi  (OH)  dengan  keelektonegatifan  oksigen  yang  sangat  tinggi  yang  menyebabkan  terjadinya  ikatan hydrogen  dengan  molekul  lain,  sehingga  etanol  dapat  berikatan  dengan  molekul  polar  dan  molekul  ion. Gugus etil (C 2 H 5 ) pada etanol bersifat non-polar, sehingga etanol dapat berikatan juga dengan molekul non- polar (Schiller M., 2010). Menurut Azizah (2011) bahwa senyawa polar dapat larut dalam air dan membentuk ikatan hydrogen dengan air. Ikatan hidrogen dapat terjadi karena electron bebas pada atom yang memiliki elektronegatifan tinggi seperti N, O, F menarik proton yang dimiliki oleh atom H. Air memiliki berat molekul 18 gr/mol, titik didih 100 ℃ , viskositas 1,005 cP, dan konstanta dielktrik sebesar 80,37 pada 20 ℃ .

## Daya Hambat Senyawa Saponin dari Ekstrak Buah S.alba Terhadap Radikal Bebas DPPH
Daya hambat senyawa saponin buah S.alba terhadap radikal bebas dari hasil uji Anova menujukkan bahwa perbedaan jenis pelarut berpengaruh terhadap persen daya hambat radikal bebas DPPH. Ekstrak
Vol. 4 No. 1 Tahun 2022 Labagu et al., / JFPJ, 4 (1), 1-11
etanol menghasilkan daya hambat terhadap radikal bebas yang paling tinggi dan tidak berbeda nyata dengan ekstrak metanol, namun berbeda nyata denganekstrak air. Etanol memiliki molekul polar yang tinggi karena adanya gugus hidroksi (OH) dengan keelektonegatifan oksigen yang sangat tinggi menyebabkan terjadinya ikatan hydrogen dengan molekul lain, sehingga etanol dapat berikatan dengan molekul polar dan molekul ion. Namun, keberadaan gugus gugus etil (C 2 H 5 ) pada etanol yang bersifat non-polar jugamenyebabkannya dapat berikatan dengan molekul non-polar dari saponin. Sifat ini juga dimiliki oleh metanol yang mengandung gugus hidroksi dan gugus etil.
Oleszek, (2000) mengungkapkan bahwa saponin merupakan senyawa glikosida yang tersusun atas dua jenis molekul sebagai kerangka utama yaitu steroid atau triterpenoid yang bersifat nonpolar serta memiliki gugus hidroksil yang mampu berikatan dengan gula sederhana yang bersifat polar. Sehingga saponin mampu terlarut  lebih  baik  dalam  pelarut  metanol.  Tumbuh-tumbuhan  mengandung  senyawa  metabolit  sekunder berupa fenolik yang memiliki kemampuan menghambat kerja radikal bebas (Duenas et al ., 2009). Radikal bebas bersifat tidak stabil dan selalu berusaha mengambil elektron dari molekul lain. Suatu inisiator radikal bebas  ialah  segala  zat  yang  dapat  mengawali  suatu  reaksi  radikal  bebas.  Senyawa  yang  mudah  terurai menjadi radikal bebas dapat bertindak sebagai inisiator.

## SIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian disimpulkan bahwa buah S. alba mengandung saponin. Perbedaan jenis pelarut  metanol,  etanol,  dan  air  berpengaruh  terhadap  rendemen,  kadar  saponin  dan  daya  hambatnya terhadap redikal bebas DPPH. Metanol dan etanol memiliki kemampuan lebih tinggi dibandingkan air dalam mengestrak saponin dari buah S. Alba . Daya hambat DPPH dari saponin dalam ekstrak metanol dan ekstrak etanol terukur paling tinggi dibandingkan dengan saponin dalam ekstrak air.

## DAFTAR PUSTAKA
Alen,  Y.,  Agresa,  F.  L.,  &  Yuliandra,  Y.  (2017).  Analisis  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT)  dan  Aktivitas Antihiperurisemia  Ekstrak  Rebung Schizostachyum  brachycladum Kurz  (Kurz)  pada  Mencit  Putih
Jantan. Jurnal Sains Farmasi & KliniS , 3 (2), 146 – 152. http://jsfk.ffarmasi.unand.ac.id/index.php/jsfk/article/view/141/97.
Arief, M. (1987). Ilmu Meracik Obat. Teori dan Praktek (9th ed.). Gadjah Mada University Press.
Astarina, N. W. G., Astuti, K. W., & Warditiani, N. . (2013). Skrining fitokimia ekstrak metanol rimpang bangle. Jurnal Farmasi Udayana , 2 (4), 1 – 6.
Astuti, S. M., Sakinah A.M, M., Andayani B.M, R., & Risch, A. (2011). Determination of Saponin Compound from Anredera cordifolia (Ten) Steenis Plant (Binahong) to Potential Treatment for Several Diseases.
Vol. 4 No. 1 Tahun 2022 Labagu et al., / JFPJ, 4 (1), 1-11
Journal of Agricultural Science , 3 (4), 224 – 232. https://doi.org/10.5539/jas.v3n4p224
Cahyadi,  J.,  Satriani,  G.  I.,  Gusman,  E.,  Weliyadi,  E.,  &  Sabri.  (2018).  Skrining  fitokimia  ekstrak  buah mangrove ( Sonneratia alba ) sebagai bioenrichment pakan alami Artemia salina . Phytochemical . Jurnal Borneo Saintek , 1 , 33 – 39.
Delta, M., & Hendri, M. (2021). Aktivitas antioksidan ekstrak daun dan kulit batang mangrove Sonneratia alba di Tanjung Carat, Kabupaten Banyuasin, Provinsi Sumatera Selatan. Maspari Journal : Marine Science Research , 13 (2), 129 – 144. https://ejournal.unsri.ac.id/index.php/maspari/article/view/14577 Depkes RI. (2008). Farmakope Herbal Indonesia (1st ed.). Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Dotulong,  A.  R.,  Dotulong,  V.,  Wonggo,  D.,  Montolalu,  L.  A.  D.  .,  Harikedua,  S.  D.,  Mentang,  F.,  & Damongilala, L. J. (2020). Metabolit Sekunder Ekstrak Air Mendidih Daun Mangrove Sonneratia alba. Media Teknologi Hasil Perikanan , 8 (2), 66. https://doi.org/10.35800/mthp.8.2.2020.28437
Duenas,  M.,  Manzano,  S.,  Paramas,  A.,  &  Buelga,  S.  (2009).  Antioxidant  evaluation  of  O-methylated metabolites  of  catechins,  epicatechin,  and  quersetin. Journal  of  Pharmaceutical  and  Biomedical Analysis .
Hernani, & raharjo, M. (2005). Tanaman Berkhasiat Antioksidan . Penebar Swadaya.
Lazuarid, M. (2006). Aktifitas antiproliferatif ekstrak metanol daun benalu duku (Dendropthoe sp) terhadap sel mieloma secara in vitro . Airlangga University.
Liang, Y., Xie, P., & Chan, K. (2004). Quality control of herbal medicines. Journasl of Chromatography B ,
812 (1 – 2), 53 – 70. https://doi.org/https://doi.org/10.1016/j.jchromb.2004.08.041
Middleton, E., Kandaswami, C., & Theoharides, T. (2000). The effects of plant flavonoids on mammalian cells: implications for inflammation, heart disease, and cancer. Pharmacological , 52 , 673 – 751.
Mile, L., Nursyam, H., Setijawati, D., & Sulistiyati, T.D. (2021) Studi Fitokimia Buah Mangrove ( Rhizophora mucronata ) Di Desa Langge Kabupaten Gorontalo Utara. Jambura Fish Processing Journal, 3(1), 1-8 .
Nuraeni,  N.,  &  Sulistijowati,  R.  (2021).  Aktivitas  Antioksidan  Dan  Antibakteri  Sedian  Edible  Komplekas Kitosan-Ekstrak Buah Mangrove Sonneratia alba . Jambura Fish Processing Journal, 3(2), 51-59. Oleszek, W. . (2000). Saponins . CRC Press.
Pusparini, Y. S. (2007). Isolasi dan identifikasi saponin pada kecambah kedelai (Glycine max L.) . [ Skrpsi ]. Yogyakarta: Universitas Sanata Dharma
Sa’adah, H., & Nurhasnawati, H. (2017). Perbandingan pelarut etanol dan air pada pembuatan ekstrak umbi bawang tiwai ( Eleutherine americana merr) menggunakan metode maserasi. Jurnal Ilmiah Manuntung , 1 (2), 149. https://doi.org/10.51352/jim.v1i2.27
Santana, C. M., Ferrera, Z. ., Padron, M. E. ., & Rodriquez, J. J. . (2009). Methodologies for The Extraction of Phenolic Compounds from Enviromental Samples : New Approaches. Molecules , 14 , 298 – 320.
Sendukh, T. W., Linggama, G. A., Kembaren, M. S., & Montolalu, L. A. (2019). Aktivitas antibakteri air rebusan daun  mangrove Sonneratia  alba . Media  Teknologi  Hasil  Perikanan , 7 (3),  68. https://doi.org/10.35800/mthp.7.3.2019.23623
Sintha, Endro, & Puspitasari, A. (2008). Kulit Buah Manggis. Seminar Nasional Soebardjo Brotohardjono ,
1978 – 0427 , 1 – 4. https://core.ac.uk/download/pdf/12218194.pdf
Vol. 4 No. 1 Tahun 2022 Labagu et al., / JFPJ, 4 (1), 1-11
Sirait, M. (2007). Penuntun Fitokimia Dalam farmasi . Penerbit ITB.
Stahl, E. (2013). Thin-layer Chromatography. A Laboratory Handbook . Springer.
Syarif, R. A., Muhajir, M., Ahmad, A. R., & Malik, A. (2016). Identifikasi golongan senyawa antioksidan dengan menggunakan metode peredaman radikal DPPH ekstrak etanol daun Cordia myxa L. Jurnal Fitofarmaka Indonesia , 2 (1), 83 – 89. https://doi.org/10.33096/jffi.v2i1.184
Thompson, E. . (1985). Drug Bioscreening . America: Graceway Publishing Company, Inc.