## TOTAL BAKTERI Escherichia coli PADA AIR PENCUCI IKAN DI TEMPAT PELELANGAN IKAN PASAR BERSEHATI MANADO
Dessy Ateta, Engel V. Pandey, Frans G. Ijong
Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Sam Ratulangi, Manado, Sulawesi Utara.

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  keberadaan  bakteri E.  coli pada  air  pencuci  di  TPI Pasar  Bersehati  Kota  Manado.  Hasil  penelitian  diharapkan  memberikan  informasi  mengenai  keberadaan bakteri E. coli pada air pencuci di TPI Pasar Bersehati Kota Manado. Penelitian ini dilaksanakan di TPI Pasar Bersehati dalam  fokus pada  air pencuci ikan,  sedangkan untuk analisa  mikrobiologis bertempat di Laboratorium  Mikrobiologi  Pengolahan  Hasil  Perikanan,  Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan Universitas  Sam  Ratulangi  Manado.  Pengambilan  sampel  air  dilakukan  pada  saat  kegiatan  di  TPI  Pasar Bersehati  sedang  berlangsung.  Air  pencucian  diambil  dari  air  laut  dan  air  PAM  dengan  cara  sampel dimasukan dalam botol sebanyak volume botol dan masukan dalam cool box selama transportasi dari TPI ke  Laboratorium.  Sampling  dilakukan  sebanyak  satu  kali  dalam  ulangan  1  kali.  A 1 =  pengambilan pertama  sampel  air  laut,  A 2 =pengambilan  kedua  sampel  air  laut,  B 1 =pengambilan  pertama  sampel  air PAM, B 2 =pengambilan kedua sampel air PAM. Total koliform dalam 100 ml sampel air yaitu: A 2 = 150, B 2 = 0. Jumlah bakteri secara umum, total koliform dan E. coli lebih banyak pada sampel A2.
Kata kunci: Eschericia coli, air pencuci ikan, tempat pelelangan ikan.

## PENDAHULUAN
Salah satu penyebab terjadinya kerusakan  atau  kebusukan  pada  produk  ikan adalah  akibat  aktivitas  bakteri  yang  ada  pada tubuh  ikan  itu  sendiri  maupun  dari  lingkungan tempat  hidupnya.  Keberadaan  bakteri  ini  dapat menimbulkan  penyakit  berupa  keracunan  atau infeksi.
Keracunan dapat terjadi karena tertelannya  racun  atau  toksin  yang  dihasilkan oleh  bakteri  yang  bersifat  toksik  sehingga menimbulkan gejala penyakit. Sedangkan infeksi  terjadi  karena  masuknya  bakteri  atau mikroba  lainnya  ke  dalam  tubuh,  menembus system  pertahanan  tubuh  dan  hidup  serta berkembang  biak  di  dalam  tubuh  kemudian menimbulkan penyakit.
Menurut  (Supardi  dan  Sukamto,  1999) jenis-jenis  bakteri  yang  terdapat  pada  air pencuci  antara  lain  yaitu Escherichia  coli , Flavobacterium , Pseudomonas  Staphylococcus . Bakteri-bakteri  ini  ada  yang  bersifat  patogen dapat menimbulkan penyakit.
Tempat
Pelelangan Ikan (TPI)
merupakan  salah  satu  tempat  yang  banyak dikunjungi  oleh  masyarakat  umum.  Sanitasi yang tidak memenuhi persyaratan akan menimbulkan  masalah  kesehatan  diantaranya adalah and  food  borne  disease dan  munculnya
vektor  penyakit  (Sri  Laksmi,  B.J.,  1988).  TPI dalam  menjalankan  usahanya  harus  memenuhi persyaratan  higienis  dan  sanitasi.  Menurut Keputusan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 1098/Menkes/SK/
VII/VII/2003  tentang  persyaratan  higienis  dan sanitasi TPI yaitu terdiri dari persyaratan lokasi dan  bangunan,  persyaratan  fasilitas  sanitasi seperti  air  bersih,  alat-alat  yang  digunakan, tempat  penyimpanan  bahan  baku  persyaratan penyajian  makanan  dan  persyaratan  peralatan yang  digunakan.  Alat-alat  yang  digunakan dalam  proses  pelelangan  sering  terkontaminasi oleh E.  Coli yang  berasal  dari  air  yang digunakan  untuk  mencuci.  Kontaminasi  bakteri ini pada pangan atau alat pengolahan merupakan  suatu  tanda  praktek  sanitasi  yang kurang baik (Sri Laksmi, B. J., 1988). TPI yang higienis  dan  sanitasinya  kurang  baik  akan beresiko  untuk  kesehatan  para  konsumen  yang ada  di TPI  tersebut  karena TPI juga  merupakan tempat  terjadinya  penularan  penyakit  secara tidak  langsung.  TPI  Pasar  Bersehati  juga merupakan tempat umum yang memiliki banyak konsumen. Oleh sebab itu peneliti tertarik untuk melakukan  penelitian  tentang  keberadaan E. coli pada  peralatan  di  TPI  Pasar  Bersehati Manado.
E.  coli adalah  bakteri  gram  negatif berbentuk  batang.  Sel E.  coli mempunyai
ukuran panjang 2,6-6-0 µ dan bersifat non-motil atau  motil  dengan  peritrikus  flagella  (Fardias, 1983).
Program  higienis  merupakan  program kebersihan  personalia,  prosedur  dan  fasilitas yang  diperlukan.  Jadwal  kebersihan  meliputi semua bangunan, wilayah, pekerja dan peralatan  yang  terlibat  dalam  penanganan  ikan. Secara  terperinci  ditentukan  jadwal  kapan waktu  kebersihan  dilaksanakan,  prosedur  yang harus  diikuti,  jenis  alat  dan  bahan  pembersih (air,  detergen,sanitizer  dan  lain-lain)  yang digunakan. Program higienis personalia berstandar  tinggi,  untuk  itu  semua  fasilitas kebersihan  harus  disediakan  untuk  mereka khususnya  bagi  petugas-petugas  kebersihan (IIyas,1983).  Pengetahuan  ini  dapat  diambil tindakan  dan  dikembangkan  suatu  program untuk  mencega  terjadinya  penyakit  yang ditularkan  melalui  bahan pangan  yang tercemar oleh mikroorganisme dalam masyarakat program  untuk  mencegah  terjadinya  penyakit yang  di  tularkan  melalui  bahan  pangan  disebut sebagai  sanitasi  dan  higienis  bahan  pangan (Buckle,1987).
Escherchia coli merupakan mikroorganisme indikator yang dipakai didalam analisis  air  untuk  menguji  adanya  pencemaran oleh  tinja,  tetapi  memindah  sebarannya  tidak selalu melalui air, melainkan diteruskan melalui mulut,  akan  tetapi  E.  coli  pun  dapat  ditemukan tersebar di alam sekitar kita. Penyebaran secara pasif  dapat  terjadi  melalui  makanan  atau minuman.
Didalam  uji  analisis  air,  E.  coli merupakan mikroorganisme yang dipakai sebagai indikator untuk menguji adanya pencemaran  air  oleh  tinja.  Didalam  kehidupan kita  E.  coli  mempunyai  peranan  yang  cukup penting  yaitu  selain  penghuni  tubuh  “  didalam usus  besar”  juga  E.  colimenghasilkan  kolisin yang  dapat  melindungi  saluran  pencernaan  dari bakteri  patogenik.  Escherchiacoli  akan  menjadi pathogen  bila  pindah  dari  habitan  yang  normal kebagian  lain  dalam  inang,  misalnya,  bila E. coli didalam  usus  masuk  kedalam  saluran kandung  kemih  kelamin  dapat  menyebabkan sistitis,  yaitu  suatu  peradangan  pada  selaput lendir organ tersebut.
E.  coli  umumnya  merupakan  flora normal  saluran  pencernaan manusia  dan hewan.Memiliki  peranan  penting  dalam  system pencernaan  manusia  karena  dapat  mensintesa vitamin  khususnya  vitamin  K  tetapi  dapat
beruba  menjadi  oportunis  pathogen  bila  hidup di  luar  usus,  misalnya  pada  infeksi  saluran kemih,  infeksi  luka  dan  meltitis.  Serotype  dari E.  coli yang  dapat  menyebabkan  diare  pada manusia  disebut E.  coli enteropatogenik (EPEK).
Bakteri  ini  termasuk  basil  koliform, hidup  aerob  fakultatif,  membantu  mengurangi jumlah  oksigen  dalam  usus  sehingga  akan tercipta  akan  suasana  anaerobik  di  usus. Merupakan  bakteri  gram  negatif,  umumnya mempunyai fibria dan bersifat motil. Bakteri ini mampu  memfermentasikan  laktosa  dengan cepat  sehingga  pada  media  EMB  akan membentuk koloni berwarna hijau metalik.
E.  coli tumbuh  pada  kisaran  suhu  10– 40ºC  dengan  suhu  optimum  37ºC,  Nilai  AW minimum  untuk  pertumbuhan E.  coli adalah kemampuan untuk melakukan adesi pada sel-sel hewan  dan  manusia.  Keberadaan E.  coli merupakan indikator adanya pencemaran populasi.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui  keberadaan  bakteri E.  coli pada  air pencuci  di  TPI  Pasar  Bersehati  Kota  Manado. Hasil penelitian diharapkan memberikan informasi  mengenai  keberadaan  bakteri E.  coli pada  air  pencuci  di  TPI  Pasar  Bersehati  Kota Manado.

## METODOLOGI PENELITIAN
Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan  metode  deskriptif,  dengan  teknik pengumpulan  data  menggunakan  sampling dilanjutkan dengan uji mikrobiologis. Menurut(Manus  O.A  dan  E.  Mantjoro,  1987) bahwa  penelitian  deskriptif  yaitu  penelitian yang menuturkan, menganalisa dan mengklarifikasi  serta  menginterpretasikan  data tersebut  kemudian  membandingkan  persamaan dan  perbedaan  fenomena  lalu,  mengambil bentuk studi komperatif.

## Tata Laksana Penelitian Pengambilan Sampel Air
Pengambilan  sampel  air  dilakukan  pada saat  kegiatan  di  TPI  Pasar  Bersehati  sedang berlangsung. Air pencucian diambil dari air laut dan  air  PAM  dengan  cara  sampel  dimasukan dalam  botol  sebanyak  volume  botol  dan langsung  ditutup  masukan  dalam  cool  box selama  transportasi  dari  TPI  ke  Laboratorium. Sampling  dilakukan  sebanyak  satu  kali  dalam ulangan 1 kali.
A 1 = Pengambilan pertama sampel air laut. A 2 = Pengambilan kedua sampel air laut.
B 1 = Pengambilan pertama sampel air PAM. B 2 = Pengambilan kedua sampel air PAM.
Analisa Coliform dan E. coli Uji pendugaan
1. Siapkan  3  grup  tabung  reaksi  lengkap dengan tabung durham, masing-masing grup terdiri dari 3 seri tabung.
2. Masukan  sejumlah  6  ml  Kaldu  Laktosa  ke dalam  setiap  tabung  dan  sterilisasi  pada suhu 121ºC, pada tekanan 15 psi, selama 15 menit.
3. Sampel  dibuat  suspense  dengan  tingkat pengenceran bertingkat (10¯ 1 , 10¯ 2 dan 10¯ 3 ) dengan  menggunakan  larutan  NaCl  0,9% steril.
4. Secara  aseptik,  masukan  masing-masing sejumlah  1  ml  suspense  dari  setiap  tingkat pengenceran  ke  dalam  setiap  seri  tabung. Kocok  perlahan  agar  suspense  tercampur dengan  media  dan  apabila  ada  udara  dalam tabung  durham  harus  dibebaskan  untuk menghindari kesalahan pembacaan hasil.
5. Masukan  semua  tabung  ke  dalam  inkubator dan inkubasi pada suhu 37ºC selama 24 jam dan dapat dilanjutkan hingga 48 jam.
6. Catat  tabung  yang  menunjukkan  hasil positif,  ditunjukkan  dengan  adanya  asam dan  gas  dalam  tabung  durham.  Bandingkan hasil  yang  diperoleh  dengan  tabel  Hopkins, dan  dinyatakan  sebagai  Total  Coliform (MPN/100 ml atau gram sampel).

## Uji penguatan
1. Media  EMB-Agar  sejumlah  tabung  yang positif (biasanya 1 cawan petri dapat dibagi 3 bagian untuk 3 tabung positif).
2. Secara  aseptik,  ambil  1  mata  ose  biakan pada  tabung  yang  positif  dan  gores  pada EMB Agar.
3. Masukan  ke  dalam  inkubator  dan  inkubasi pada suhu 37ºC selama semalam.
4. Catat  hasil  positif  yang  ditunjukkan  dengan tumbuhnya tipikal koloni E. coli . Bandingkan  hasil  yang  diperoleh  dengan tabel Hopkins, dan dinyatakan sebagai Total E. coli (MPN/100 ml atau gram sampel).

## Uji lengkap
1. Siapkan  media  kaldu  laktosa  dan  dengan menggunakan  jarum  ose  pindahkan  tipikal koloni bebas ke dalam media tersebut.
2. Inkubasi  pada  suhu  37ºC  selama  semalam dan amati adanya pembentuk asam dan gas.
3. Secara  aseptik  ambil  1  mata  ose  dan goreskan  pada  media  NA,  selanjutnya inkubasi pada suhu 37ºC selama semalam.
4. Uji  koloni  yang  tumbuh  pada  NA  terhadap gram-pewarnaan.  Uji  akan  melengkapi kesimpulan uji penguatan apabila hasil yang diperoleh  sebagai  berikut:  terbentuknya asam  dan  gas  pada  Kaldu  Laktosa  serta  sel bakteri  memiliki  sifat  gram-negatif  dan bentuk batang.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Analisa Total Koliform dan E. coli Pengujian koliform menggunakan media EC  mediun.  Dalam  media  EC  Medium menunjukkan  bahwa  tabung  positif  adalah bakteri  koliform  yang  menghasilkan  asam  dan gas  dalam  tabung  durham.  Hasil  pengamatan pada media EC medium menunjukkan pertumbuhan E.  coli paling  banyak  terdapat pada  sampel  air  laut  yaitu  pengambilan  kedua adalah  A 2 =150.  Nilai  rata-rata  Total  Coliform dan E.  coli dapat  dilihat  pada  Tabel  2. Sedangkan  hasil  uji  positif  koliform  dapat dilihat pada Gambar 1.
Tabel  01.  Nilai  rata-rata  total  koliform  dan E. coli pada air pencuci ikan.
Sampel Air Koliform ( MPN/100 ml ) Total E. coli ( MPN/ 100 ) A 1 0 0 A 2 150 4 B 1 0 - B 2 0 -
Keterangan:A 1 (air  laut  pengambilan  pertama);  A 2 (air  laut pengambilan  kedua);  B 1 (air  PAM  pengambilan  pertama);  B 2 (air PAM pengambilan kedua).
Gambar 1.  Hasil uji koliform
Total  koliform  terbanyak  pada  sampel A 2 yaitu  150  dan  juga  total E.  coli tertinggi pada  sampel  A 2 yaitu  4.  Total  koliform  dan E. coli terendah  pada  sampel  A 1 ,B 1 ,  B 2 yaitu  0.
Adanya E.  coli dari  air  pencucian  ikan dikarenakan  ikan  tersebut  sudah  terkontaminasi atau air pencucian tidak memenuhi standar atau syarat sebagai air pencucian.
Pada  Gambar  1  menunjukkan  bahwa tabung  positif  berada  pada  kiri  gambar sedangkan  tabung  yang  negative  berada  di sebelah kanan.
Kontaminasi  kemungkinan  berasal  dari air  laut  yang  digunakan,  pedagang  yang  tidak memperhatikan kesehatan dan kebersihan pribadi,  alat  yang  digunakan,  ikan  sebagai bahan  jualan,  wadah  pencuci,  saluran  air  atau lingkungan  TPI  pencucian.  Oleh  sebab  itu, perlu pengendalian terhadap faktor-faktor kontaminasi  di  atas  dengan  cara  meningkatkan pengawasan  mutu,  terutama  sanitasi  dan higienis selama pencucian ikan.
Tingginya  koliform  dan E.  coli pada sampel  A 2 kemungkinan  berasal  dari  bahan baku  ikan  yang  digunakan  dalam  pencucian peralatan  pekerja  yang  tidak  memperhatikan sanitasi  selama  pekerjaan.  Sampel  A 1 tidak ditemukan  koliform  dan E.  coli kecuali  sampel A 2 koliform pada sampel A 2 = 150 dan E. coli = 40.  Adanya  bakteri  tersebut  kemungkinan kontaminasi  dari  sumber  air  PAM.  Dan  juga sekitar  pasar  TPI  yang  kurang  bersih  sehingga fluktuasi  jumlah  koliform  dan E.  coli yang ditemukan  dipengaruhi  oleh  lingkungan  sekitar sumber air PAM dan laut tersebut.
Gambar 2.  Penampakan  koloni E.  coli pada EMB Agar.

## KESIMPULAN
Kontaminasi  kemungkinan  berasal  dari air  laut  yang  digunakan,  pedagang  yang  tidak memperhatikan kesehatan dan kebersihan
pribadi,  alat  yang  digunakan,  ikan  sebagai bahan  jualan,  wadah  pencuci,  saluran  air  atau lingkungan  TPI  pencucian.  Oleh  sebab  itu, perlu pengendalian terhadap faktor-faktor kontaminasi  di  atas  dengan  cara  meningkatkan pengawasan  mutu,  terutama  sanitasi  dan higienis selama pencucian ikan.
Total koliform dalam 100 ml sampel air yaitu:  A 2 =  150,  B 2 =  0.  Jumlah  bakteri  secara umum,  total  koliform  dan E.  coli lebih  banyak ditentukan  pada  sampel  A 2 .  Koloni  yang tumbuh  pada  media  EMB  Agar  berupa E.  coli adalah berwarna hijau metalik.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonimous.  1993.  Mikrobiologi  Kedokteran,  Edisi Revisi. Binarupa Aksara. Jakarta Barat.
Buckle,  K.A.  Edwards,  R.  A.  Fleet,  G.  H,  Wooton,  M. 1987.  Ilmu  Pangan.  Penerjemah:  Hari  Adiono. Penerbit Universitas Indonesia. Jakarta
Capuccino  dan  Sherman  (1992).  Microbiology  A Laboratory Manual. Third Edition. Benjamin Cummings Science Publishing. California.
Dundu,  B.,  2000.  Penuntun  Praktikum  Mikrobiologi.
Fakultas Pertanian. UNSRAT Manado.
Fardiaz,  S.,  1983.  Keamanan  Pangan.  Jurusan  Ilmu  dan Teknologi  Pangan.  Fakultas  Teknologi  Pertanian. Institut Pertanian Bogor.
IIyas,  S.  1983.  Teknologi  Refrigerasi  Hasil  Perikanan Jilid  1.  Teknik  pendinginan  Ikan  CV.  Paripurna. Jakarta.
Irawan,  H.S.R.,  1995.  Pengolahan  Hasil  Perikanan. Penerbit Agency.Solo.
Junianto,  2003.  Teknologi  Penanganan  Ikan.  Swadaya.
Jakarta.
Lay,  B.W.,  1994.  Analisis  Mikroba  di  Laboratorium.  PT. Raja Grafindo Persada. Jakarta.
Manus  O.A  dan  E.  Mantjoro,  1987.  Metodologi
Penelitian. Fakultas Perikanan. UNSRAT. MANADO.
Purnomo,  H.,  1995.  Aktivitas  Air  dan  Peranannya  dalam Pengawetan  Bahan  Pangan.  Universitas  Indonesia Press.
__________. 1987.Standar  Nasional Indonesia (SNI),  Air Minum, Syarat dan Pengawasan Jakarta.  Supardi dan Sukamto,  1999.Mikrobiologi  dalam  Pengolahan  dan Keamanan  Pangan.  Jurusan  Ilmu  dan  Teknologi Pangan. Fakultas Teknologi Pertanian. IPB Bogor.
Sri  Laksmi,  B.  J.  1988.  Sanitasi  Dalam  Industri  Pangan.
Penerbit  Kanisius  Kerja  sama  Dengan  Pusat  Antar Universitas Pangan Dan Gizi, IPB. Bogor