## UJI EFEKTIVITAS DIURETIK EKSTRAK ETANOL BIJI SALAK
( Salacca zalacca varietas zalacca (gaert.) Voss) PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR ( Rattus norvegicus )
Novita Handayani Latuconsina 1) , Fatimawali 1) , dan Gayatri Citraningtyas 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
This research has purpose to examine the diuretic effects of Salak seed’s ethanol extract and to analyze the relationship of dose concentration of Salak seed’s ethanol extract upon diuretic effect  on  Wistar  white  male  mice  ( Rattus  norvegicus ).  15  mice  were  divided  into  five different  treatment  groups,  namely:  negative  control  (0.5%  CMC  suspension),  positive control (5.04 mg/kg furosemide suspension), suspension of Salak seed’s ethanol extract 0.07 g/KgBB, suspension of Salak seed’s ethanol extract 0.14 g/KgBB, and suspensions of ethanol extract of salak seeds 0.28 g/KgBB. The Tests of diuretic effect were conducted by calculate the  urine  volume  which  was  excreted  urine  during  6  hours  of  treatment.  The  data  were analyzed  by  SPSS  ver.20,  one  way  ANOVA  test  to  find  out  the  average  difference  in  each treatment group, if there is significant difference, it is continued with LSD test. The result of LSD test showed that the treatment group of Salak seed’s ethanol extract 0.07 g/KgBB didn’t give  any  significant  results  with  CMC  0.5%  (negative  control)  as  compared  with  the treatment  group  of  Salak  seed’s  ethanol  extract  0.14  g/KgBB  and  0.028  g/KgBB  that  gave significant results, this means that the higher concentration of Salak seed’s ethanol extract is set, the bigger diuretic effect is created.
Key words :  ethanol extract of  salak seeds, diuretic effect, Wistar white male mice (Rattus novergicus )

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk menguji efek diuretik ekstrak etanol biji salak dan menganalisis hubungan  konsentrasi  dosis  ekstrak  etanol  biji  buah  salak  terhadap  efek  diuretik  pada  tikus putih jantan galur Wistar ( Rattus norvegicus ). Sebanyak 15 ekor hewan uji dibagi menjadi 5 kelompok perlakuan,  yaitu:  kontrol  negatif  (suspensi  CMC 0,5%), kontrol positif (suspensi furosemide 5,04 mg/KgBB), suspensi ekstrak etanol biji salak 0,07 g/KgBB, suspensi ekstrak etanol biji salak 0,14 g/KgBB, dan suspensi ekstrak etanol biji salak 0,28 g/KgBB. Pengujian terhadap  efek  diuretik  dilakukan  dengan  mengukur  volume  urin  yang  dikeluarkan  selama  6 jam. Data yang diperoleh dianalisis dengan spss ver.20, uji one way ANOVA untuk melihat perbedaan  rata-rata  setiap  kelompok  perlakuan,  jika  terdapat  beda  nyata  dilanjutkan  dengan uji  LSD  untuk  melihat  perbedaan  antar  setiap  kelompok  perlakuan.  Dari  hasil  uji  LSD menunjukkan  kelompok  perlakuan  suspensi  ekstrak  etanol  biji  salak  0,07  g/KgBB  tidak memberikan hasil yang signifikan dengan CMC 0,5% (kontrol negatif) dibandingkan dengan kelompok  perlakuan  suspensi  ekstrak  etanol  biji  salak  0,14  g/KgBB  dan  0,028  g/KgBB memberikan hasil yang signifikan dengan kelompok CMC 0,5%, hal ini berati semakin tinggi konsentrasi suspensi biji salak maka semakin besar efek diuretik yang dihasilkan.
Kata  kunci  :  ekstrak  etanol  biji  salak,  efek  diuretik,  tikus  putih  jantan  galur  wistar  ( Rattus norvegicus) .

## PENDAHULUAN
Masyarakat Indonesia telah mengenal berbagai jenis tanaman obat dan memanfaatkannya untuk
menjaga kesehatan dan pengobatan berbagai penyakit. Pengobatan tersebut  kebanyakan diperoleh berdasarkan pengetahuan masyarakat  secara  turun-temurun,  namun sebagian  besar  tanaman  obat  yang  ada belum  dapat  dibuktikan  secara  ilmiah. Tanaman  salak  ( Salacca    zalacca (Gaert.) Voss.)  merupakan  salah  satunya,  buah  ini merupakan buah khas  dari  Indonesia  yang dapat ditemukan hampir di setiap daerah.
Di  Sulawesi  Utara  di  kenal  dengan dua  varietas  salak  yaitu  varietas  zalacca terdapat  di  Pulau  Tagulandang  Sangir Talaud  dan  varietas  amboinensis  di  Desa Pangu,  Minahasa  Tenggara  (Darmadi, 2001). Saat ini daging salak telah diproses menjadi  berbagai  macam  produk  olahan pangan  oleh  industri,  dari  hasil  olahan pangan ini menghasilkan limbah biji salak yang  sangat  banyak.  Studi  pemanfaatan biji  salak  selama  ini  sangatlah  kurang karena  biji  salak  mempunyai  tekstur  yang keras  dan  tidak  mudah  hancur,  sehingga untuk  mengolah  biji  salak  ini  cukup  sulit. Hampir  semua  limbah  biji  salak  tersebut dibuang  karena  dianggap  sudah  tidak bermanfaat lagi.
Seiring  berkembangnya  teknologi dan pengetahuan maka kini biji salak telah diolah  menjadi  kopi    dan  mulai  dinikmati sebagai  produk  baru  oleh  masyarakat  di daerah Sumatera Utara dan Jawa. Manfaat yang  dirasakan  oleh  masyarakat  setelah mengonsumsi  kopi  biji  salak  ini  yaitu adanya penurunan tekanan darah. Penurunan tekanan darah dapat berhubungan dengan terjadinya diuresis.
Diuresis  menyebabkan  penurunan volume  plasma  yang  akan  menurunkan curah  jantung  dan  akhirnya  menurunkan tekanan darah (Anonim, 2008).
Senyawa  yang  mempunyai  aktivitas biologis  sebagai  diuretik  adalah  flavonoid (Anna,  2011).  Mekanisme  kerja  flavonoid sebagai diuretik yaitu dengan menghambat reabsorpsi Na +, K + dan Cl - sehingga terjadi peningkatan  elektrolit  di  tubulus  sehingga terjadilah diuresis (Khabibah, 2011).
Penelitian  sebelumnya  oleh  Kanon (2012) dan Sahputra (2008) lebih terfokus pada  kulit  dan  daging  buahnya  yang bermanfaat  sebagai  antidiabetes  karena adanya senyawa flavonoid. Dengan adanya senyawa  flavonoid  dalam  buah  salak  dan penurunan  tekanan  darah  dari  kopi  biji salak  yang  dikonsumsi  masyarakat,  maka diduga biji salak mempunyai efek diuretik. Hal  inilah  yang  menjadi  latar  belakang dilakukan  penelitian  untuk  mengetahui efektivitas  diuretik  biji  salak  pada  tikus putih jantan galur wistar.

## METODOLOGI PENELITIAN Bahan dan Alat
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu biji salak, etanol 80%, akuades, CMC 0,5% dan Furosemide.
Alat-alat  yang  digunakan  pada penelitian  ini  ialah  kandang  hewan  uji, tempat  makan  dan  minum  hewan  uji, sarung  tangan,  alat-alat  gelas  ( Pyrex ), blender  ( Laboratory  blender ),  kertas saring,  masker,  ayakan mesh 200, timbangan analitik, oven, vaccum evaporator,  waterbath , Nasogatric  Tube (NGT)  No.  5, disposable  syringe 1  dan 5 mL, wadah penampung urin.

## Prosedur kerja

## Gambar 1. Alur Proses Penelitian

## Rancangan penelitian
Hewan  uji  yang  digunakan  ialah  tikus putih jantan galur wistar ( Rattus norvegius )  sebanyak  15  ekor  dan  dibagi dalam  5  kelompok  perlakuan  (kontrol positif  (suspensi  furosemide),  kontrol negatif  (suspensi  CMC  0,5%),  suspensi ekstrak etanol biji salak 0,07 g/KgBB, 0,14 g/KgBB, dan 0,28 g/KgBB) dimana setiap kelompok  terdiri  dari  3  ekor  dengan  berat badan  150-250  g  dan  masing-masing perlakuan  diberikan  pada  3  hewan  uji dalam setiap kelompok perlakuan.

## Pengukuran  Urin  Dan  Analisis

## Data
Pengambilan  urin  tikus  dilakukan setelah perlakuan pada jam ke-1, 2, 3, 4, 5, dan  6.  Urin  yang  tertampung  pada  wadah penampungan urin diambil dengan menggunakan disposable  syringe dan kemudian dicatat volumenya selama waktu pengamatan. Data yang diperoleh dianalisis  dengan  menggunakan  program statistika metode SPSS ver.20. Beda nyata antar  perlakuan  diuji  dengan one  way ANOVA  ( Analisis  Of  Varians ),  dan
dilanjutkan  dengan  uji  LSD  ( Least Significant Difference).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Pembuatan Ekstrak Biji Salak
Biji  Salak  dicuci  bersih,  dan ditimbang  sebanyak  800  g,  kemudian dikeringkan dan dihaluskan hingga diperoleh  serbuk  kering  yaitu  300  g. Serbuk  simplisia  kemudian  diekstraksi menggunakan metode maserasi. Diperoleh hasil  maserat  etanol  biji  salak  (Filtrat  I  + Filtrat  II)  sebanyak  1.870  mL.  Hasil maserat  etanol  biji  salak  kemudian diuapkan  dengan  alat  penguap  vakum putar ( vacum evaporator ) kemudian dilanjutkan dengan pengeringan oven pada suhu 40 o C sampai diperoleh massa konstan yang disebut ekstrak kental sebanyak 30 g.

## Hasil Pengukuran Volume Urin
Setelah hewan uji diberikan perlakuan  dan  diamati  selama  6  jam, diperoleh  data  penelitian  pada  Tabel  2. menunjukan  rerata  hasil  pengamatan volume  urin  kumulatif  selama  6  jam. Volume  urin  komulatif  menggambarkan kenaikan (peningkatan) volume urin secara keseluruhan  selama  waktu  pengamatan. Dari  Tabel  2.  menunjukkan  rerata  volume
urin  kumulatif    terendah  yaitu  pada kelompok perlakuan CMC 0,5% (1,65 mL) dan rerata volume kumulatif tertinggi pada
kelompok  perlakuan  suspensi  ekstrak  biji salak dosis 3 (3,56 mL).
Tabel 2. Data rerata volume urine kumulatif tiap waktu pengamatan
Perlakuan Volume Urine Tiap Jam 1 2 3 4 5 6 K (-) 0,65 0,60 0,60 1,17 1,65 1,65 K (+) 1,24 1,69 2,23 2,54 2,65 2,83 KP 1 1,15 1,23 1,60 1,63 1,80 1,89 KP 2 1,33 1,53 1,85 2,15 2,38 2,70 KP 3 0,96 1,24 1,85 2,08 2,53 3,56
Keterangan:  K(-)    :  Suspensi  CMC  0,5  %  ;  K(+):  Suspensi  Furosemide  dosis  5,04  g/kg  BB  ;  KP 1 :  Suspensi Ekstrak Etanol Biji Salak dosis 0,07 g/kgBB; KP 2 : Suspensi Ekstrak Etanol Biji Salak dosis 0,14 g/kgBB; KP 3 : Suspensi Ekstrak Etanol Biji Salak dosis 0,28 g/kgBB
Rerata  volume  urin  kumulatif suspensi  CMC  0,5%  (kontrol  negatif) menunjukkan  rerata  urin  kumulatif  yang paling rendah diantara kelompok perlakuan  lainnya.  Hal  ini  disebabkan karena  didalam  suspensi  CMC  0,5%  tidak terkandung zat-zat yang dapat meningkatkan  volume  urin  (diuretik). Untuk suspensi furosemide (kontrol positif)  memberikan  rerata  urin  kumulatif yang  paling  tinggi  ialah  pada  jam  ke-5 diantara  kelompok  perlakuan  sebanyak 2,85  mL,  sedangkan  pada  jam  ke-6 kelompok perlakuan dengan dosis tertinggi suspensi ekstrak etanol biji salak memberikan  hasil  yang  lebih  baik  dari suspensi  furosemide  (kontrol  positif)  dan suspensi CMC 0,5% (kontrol negatif) yaitu sebanyak  3,56  mL.  Hal  ini  dikarenakan furosemide  memiliki  masa  kerja  yang relatif  pendek  ±  6-8  jam,  sehingga  pada jam  ke-6  efek  dari  furosemide  mulai berkurang,  sedangkan  untuk  kelompok perlakuan ekstrak etanol biji salak
memberikan  kenaikan  volume  urin  dari tiap  dosis,  hal  ini  disebabkan  karena adanya kandungan flavonoid yang
berperan dalam meningkatkan volume urin (diuretik). Penelitian ini
memperkuat kesimpulan  Anna  (2011),  bahwa  senyawa yang mempunyai aktivitas biologis sebagai diuretik  adalah  flavonoid.  Mekanisme kerja flavonoid sebagai diuretik sebagaimana  yang  disebutkan  Khabibah (2012), yaitu dengan menghambat
reabsorpsi Na +, K + dan Cl - sehingga terjadi peningkatan  elektrolit  di  tubulus  sehingga terjadilah  diuresis.  Hal  ini  dapat  dilihat dari  jumlah  rerata  urin  kumulatif  ekstrak biji  salak  dosis  3  yang  memberikan  efek diuretik yang paling tinggi.
Untuk mempermudah
pengamatan,  rerata  hasil  urin  kumulatif tiap  jam  pada  masing-masing  kelompok perlakuan  disajikan  dalam  bentuk  grafik yang dapat dilihat pada Gambar 5.

## Gambar 5. Grafik rerata volume urin kumulatif tiap waktu pengamatan
Dari  grafik  pada  Gambar  5.  terlihat bahwa  pemberian  ekstrak  etanol  biji  salak memberikan  efek  diuretik  yang  sangat
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 1 2 3 4 5 6
CMC 0,5 % Furosemide 5,04 mg/kgBB
Ekstrak Dosis 1 Ekstrak Dosis 2 Ekstrak Dosis 3
signifikan  dari  kelompok  perlakuan  CMC 0,5%  (kontrol  negatif),  semakin  tinggi konsentrasi  dosis  ekstrak  etanol  biji  salak yang  diberikan  maka  semakin  banyak volume urin  yang akan dihasilkan. Hal  ini dapat  dilihat  (Gambar  5.)  pada  jam  ke-6 suspensi  ekstrak  etanol  biji  salak  dengan dosis  3  (dosis  tertinggi)  memberikan  hasil yang sangat baik dari suspensi CMC 0,5% (kontrol  negatif)  dan  suspensi  furosemide (kontrol  positif),  dibanding  dosis  1  dan  2 memberikan hasil yang tidak berbeda jauh dengan  kelompok  perlakuan  suspensi
CMC  0,5%  (kontrol  negatif)  dan  suspensi furosemide (kontrol positif).
Untuk  melihat  adanya  perbedaan rata-rata  dari  setiap  kelomok  perlakuan maka  dilakukan  uji  statistika  dengan analisis one  way ANOVA.  Sebelum  uji ANOVA dilakukan, perlu dianalisis terlebih  dahulu  dengan  uji  homogenitas varians  untuk  melihat  apakah  data  yang diperoleh  telah  tersebar  secara  homogen. Pengujian akan dilanjutkan dengan uji one way ANOVA  apabila  nilai  P  lebih  besar dari taraf nyata (0,05) (P>0,05). Tabel 3. Hasil Tes Homogenitas Volume_Urine Levene Statistic df1 df2 Sig. 1.522 4 25 .226 Dari  uji  homogenitas  pada  Tabel  3. menunjukkan nilai signifikan 0,226
dengan  nilai  signifikan  yang  lebih  besar
dari  0,05  (P>0,05),  hal  ini  berarti pengujian  dapat  dilanjutkan  karena  telah terpenuhi  syarat  untuk  uji  ANOVA
Tabel 4. Hasil Uji ANOVA
Hasil  pengujian  ANOVA  (Tabel  5.) dengan  menggunakan  uji  F,  menunjukkan F  hitung  sebesar  3,495  dan  signifikan 0,021.  Pengambilan  keputusan  didasarkan pada  perbandingan  F  hitung  dan  F  tabel, jika  F  hitung  lebih  kecil  dari  F  tabel (F hitung <  F tabel )  maka  H 0 diterima  dan  jika F  hitung  lebih  besar  dari  F  tabel (F hitung >F tabel )      maka  H 1 diterima.    Dari hasil uji ANOVA  ekstrak  etanol biji  salak diperoleh  bahwa  F  hitung  lebih  besar  dari F tabel (3,495 > 2,76) maka H 0 ditolak dan H 1 diterima.  Hal  ini  berarti  ada  hubungan ekstrak etanol  biji  buah  salak  dengan  efek
diuretik. Sehingga ekstrak etanol biji salak dapat menaikkan volume urin.
Untuk  melihat  perbedaan  signifikan nilai  rata-rata  antara  setiap  kelompok perlakuan  yang  mengalami  perbedaan secara statistik, maka pengujian dilanjutkan dengan uji LSD.
Hasil uji LSD menunjukkan perbedaan  yang  signifikan  atau  bermakna bila  nilai  signifikansi  tiap  kelompok perlakuan  kurang  dari  0,05  (≤0,05). Kelompok  perlakuan  suspensi  CMC  0,5% (kontrol  negatif)  memberikan  perbedaan yang signifikan dengan suspensi furosemide  (kontrol  positif)  dan  suspensi
ektrak  etanol  biji  salak  dosis  2  dan  3, sedangkan untuk dosis 1 tidak memberikan perbedaan  yang  signifikan.  Selanjutnya, kelompok  perlakuan  suspensi  furosemide menunjukkan  perbedaan  yang  signifikan dengan  kelompok  perlakuan  suspensi CMC  0,5%,  dan  tidak  menunjukkan perbedaan  dengan  kelompok  perlakuan suspensi  ekstrak  etanol  biji  salak.  Hal  ini berarti  suspensi  ekstrak  etanol  biji  salak mempunyai  efek  yang  tidak  jauh  berbeda (sama) dengan furosemide dalam mengeksresikan  urin.  Dengan  demikian, suspensi  ekstrak  etanol  biji  salak  dapat meningkatkan  volume  selama  6  jam  dan memberikan efek diuretik.

## PENUTUP Kesimpulan
Dari  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan  dapat  disimpulkan  sebagai berikut:
1. Ekstrak etanol biji salak memiliki efek diuretik  terhadap  tikus  putih  jantan galur wistar ( Rattus norvegicus ).
2. Ada  hubungan  antara  konsentrasi ekstrak etanol biji  salak terhadap efek diuretik  pada  tikus  putih  jantan  galur wistar, dimana semakin tinggi konsentrasi  suspensi  ekstrak biji  salak maka  semakin  besar  efek  diuretik yang  dihasilkan.    Ekstrak  etanol  biji salak  dengan  dosis  0,28  g/kgBB memberikan efek diuretik yang paling signifikan dari setiap kelompok perlakuan  yaitu  sebanyak  3,56  mL, dan dosis 0,14 g/KgBB sebanyak 2,70 mL,  sedangkan  untuk  dosis  0,07 g/KgBB  memberikan  efek  diuretik sebanyak 1,89 mL yang tidak berbeda jauh  dengan  CMC  0,5%  (kontrol negatif).
Saran Disarankan kepada peneliti selanjutnya  untuk  uji  fitokimia  dan dilakukan  pengujian  efek  diuretik  biji salak pada varietas lain dengan menggunakan hewan uji yang lainnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Anna.  2011. Uji  Efek  Diuretik  Ekstrak Etanol  70%  Daun  Ceplukan ( Physalis  angulata L.)  [ Skripsi].
Universitas Muhammadiyah Surakarta, Surakarta. Anonim. 2008. Farmakoterapi Info . Penggunaan Diuretik pada Hipertensi. http://yosefw.wordpress.com/200 8/01/01/penggunaan-diuretik-
pada-hipertensi/  [Diunduh  pada tanggal 11-11-2013], Manado. Darmadi, A.A.K. 2001. Kajian Taksonomi Kultivar Salak Bali (Salacca zalacca varietas amboinensis ( Becc.) Mogea) [Tesis]. IPB, Bogor.
Khabibah,  N.  2011. Uji  Efek  Diuretik Ekstrak Buncis ( Phaseolus
Vulgaris L) Pada  Tikus  Putih Jantan  Galur  Wistar [ Skripsi ] STIKES Ngudi Waluyo, Ungaran. Kanon,  M.  Q.  2012. Uji  Efektivitas
Ekstrak Kulit Buah Salak
( Salacca  zalacca (Gaertn.)  Voss) Terhadap Penurunan Kadar Gula Darah  Tikus  Putih  Jantan  Galur Wistar  (Rattus  norvegicus  L.) yang
Diinduksi Sukrosa [Skripsi].  Program  Studi  Farmasi FMIPA Universitas Sam Ratulangi, Manado. Sahputra,  Fahrizan  Manda.  2008. Potensi Ekstrak  Kulit  dan  Daging  Buah Salak sebagai Antidiabetes [Skripsi].  FMIPA  Institut  Pertanian Bogor, Bogor.