Abstrak —Kedelai  ( Glycine  max )  merupakan  tanaman  pangan terpenting  ketiga  setelah  padi  dan  jagung.  Akan  tetapi, produktivitas  menurun  karena  kedelai  sensitif  terhadap genangan.  Sehingga  diperlukan  perakitan  varietas  unggul  yang tahan  cekaman  genangan  dengan  memanfaatkan  iradiasi  sinar gamma. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui morfologi dan profil protein tanaman kedelai varietas Grobogan yang diberikan perlakuan  iradiasi  pada  kondisi  cekaman  genangan.  Iradiasi menggunakan sinar gamma dengan dosis 0 Gy, 25 Gy, 50 Gy, 75 Gy, dan 100 Gy. Varian iradiasi diseleksi pada kondisi tergenang dengan  konsentrasi  0%,  100%,  150%,  200%,  dan  250%. Pengamatan  morfologi  meliputi  viabilitas  dan  vigoritas  benih, tinggi  tanaman,  dan  luas  daun.  Analisis  profil  protein  dengan SDS-PAGE.  Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan bahwa  dosis  iradiasi  dan  konsentrasi  genangan  memberikan respon  yang  berbeda-beda  pada  setiap  perlakuan.  Pengamatan morfologi dengan parameter viabilitas dan vigoritas benih, tinggi tanaman,  dan  luas  daun  paling  optimal  saat  diberikan  dosis iradiasi  0  Gy,  25  Gy,  dan  50  Gy  dengan  konsentrasi  genangan kontrol.  Sedangkan  terendah  saat  diberikan  dosis  iradiasi  75  Gy dan  100  Gy  dengan  konsentrasi  genangan  250%.  Analisis  profil protein  dengan  SDS-PAGE  didapatkan  bahwa  pita  protein dengan  mobilitas  terendah  sampai  tertinggi  terletak  pada  berat molekul 260-11 kDa. Hal tersebut ditunjukkan dengan perbedaan jumlah  pita  protein,  berat  molekul  pita  protein,  dan  ketebalan pita protein yang dihasilkan.
Kata Kunci — Genangan, Iradiasi, Kedelai.

## I. PENDAHULUAN
EDELAI  ( Glycine  max )  merupakan  tanaman  pangan terpenting  ketiga  setelah  padi  dan  jagung  [1].  Kedelai mengandung  sekitar  20%  minyak  berdasarkan  bahan  kering dengan  30-50%  protein.  Kedelai  juga  memiliki  profil  asam amino  yang  superior  dan  proteinnya  memiliki  potensi  besar sebagai  sumber  utama  protein  makanan  [2].  Produksi  kedelai di  dalam  negeri  hanya  mampu  memenuhi  sekitar  65,61% konsumsi  domestik  yang  menyebabkan  impor  [3].  Penurunan produktivitas  dikarenakan  kedelai  sangat  sensitif  terhadap genangan [4].
Cekaman  genangan  didefinisikan  ketika  pori-pori  tanah jenuh  dengan  air  sehingga  menjadi  lebih  dari  kapasitas  tanah paling tidak 20% [5]. Kekurangan oksigen dalam tanah akibat genangan  merupakan  faktor  pembatas  pertumbuhan  dan produktivitas  tanaman  [6].  Kekurangan  O 2 mempengaruhi permeabilitas  membran  sel,  hubungan  air-tanaman,  nutrisi
mineral,  produksi  zat  pengatur  tumbuh  dan  alokasinya, fotosintesis,  respirasi  dan  alokasi  karbohidrat  [7].  Perakitan varietas  unggul  merupakan  solusi  yang  tepat  dikarenakan karakternya  yang  stabil  pada  kondisi  lingkungan  yang  tidak menguntungkan.  Perakitan  varietas  unggul  memerlukan  tetua sebagai  sumber  gen  ketahanan  terhadap  genangan.  Saat  ini belum tersedia sumber gen ketahanan terhadap genangan pada tanaman  kedelai,  sehingga  perlu  dilakukan  induksi  variasi menggunakan sinar gamma.
Iradiasi  sinar  gamma  merupakan  salah  satu  cara  dalam meningkatkan keragaman genetik tanaman. Perubahan genetik hasil  iradiasi  bersifat  acak  sehingga  diperlukan  seleksi  varian secara  terarah.  Seleksi  dilakukan  untuk  memperoleh  tanaman dengan  sifat  yang  diinginkan,  seperti  toleran  cekaman genangan. Dalam  penelitian  ini  digunakan  kedelai  varietas Grobogan.  Varietas Grobogan  merupakan  varietas  unggul yang  berumur  genjah  dan  berproduktivitas  lebih  dari  2,5  t/ha [8].
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  morfologi  dan profil  protein  tanaman  kedelai  varietas  Grobogan  yang diberikan perlakuan iradiasi pada kondisi cekaman genangan.

## II. METODOLOGI

## A. Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan  Januari-Juni  2018. Iradiasi  dengan  menggunakan  sinar  Gamma  dilakukan  di BATAN. Pengamatan morfologi dilakukan di greenhouse dan Laboratorium Biosains dan Teknologi Tumbuhan, Departemen Biologi,  ITS,  Surabaya.  Analisis  profil  protein  dilakukan  di Laboratorium  Rumah  Sakit  Khusus  Infeksi  (RSKI),  UNAIR, Surabaya.

## B. Prosedur Kerja
Penelitian dilakukan sesuai dengan metode sebagai berikut: 1) Pengukuran Kapasitas Lapang Media Tanah
Pengukuran  kapasitas  lapang  bertujuan  untuk  menentukan volume  penyiraman  sebagai  patokan  pemberian  taraf penggenangan  yaitu  dengan  cara  media  tanam  dalam polybag disiram  dengan  air  sampai  menetes  (jenuh)  kemudian didiamkan  selama  3  hari  sampai  tidak  ada  air  yang  menetes. Selanjutnya,  media  tanam  ditimbang  berat  basah  dan  berat keringnya.  Berat  basah  ditimbang  setelah  tidak  ada  air  yang

## Analisis Morfologi dan Profil Protein Kedelai Varietas Grobogan Hasil Iradiasi Pada Kondisi Cekaman Genangan
Dianita Indahsari dan Triono Bagus Saputro Departemen Biologi, Fakultas Ilmu Alam, Institut Teknologi Sepuluh Nopember (ITS)
e-mail : trionobsaputro@bio.its.ac.id
K
menetes  dari polybag .  Berat  kering  ditimbang  setelah  media tanam  dioven  pada  suhu  105 o C  sampai  diperoleh  berat konstan.
Kebutuhan  air  berdasarkan  kapasitas  lapangnya  dihitung dengan rumus sebagai berikut:
KL (%) = 100% Keterangan: KL : Kapasitas Lapang
Tb  : Berat Basah Tanah
Tk  : Berat Kering Tanah

## 2) Iradiasi Benih
Biji  kedelai  varietas  Grobogan  diperoleh  dari  Balai Penelitian  Tanaman  Kacang-kacangan  dan  Umbi-umbian (BALITKABI),  Kendal  Payak-Malang.  Sebanyak  500  biji kedelai  direndam  pada  larutan  etanol  70%  selama  15  menit. Kemudian  dilanjutkan  dengan  melakukan  perendaman  pada larutan NaOCl 1% selama 2 menit. Selanjutnya biji diletakkan pada  cawan  petri  dan  diwrapping  untuk  menghindari kontaminasi.  Kemudian  dilakukan  pemaparan  sinar  Gamma pada  beberapa  level  yaitu  0  Gy,  25  Gy,  50    Gy,  75  Gy,  dan 100  Gy  yang  dilakukan  di  Badan  Teknologi  Atom  Nasional (BATAN).

## 3) Penyemaian Benih
Biji  kedelai  yang  telah  dipapar  sinar  Gamma  ditanam  pada media  yang  telah  disiapkan  untuk  proses  penyemaian.  Bahan yang digunakan meliputi media tanam siap digunakan, air dan potray .  Alat  yang  digunakan  meliputi  sekop,  bak,  dan timbangan.
Langkah  yang  dilakukan  adalah  biji  kedelai  varietas Grobogan  hasil iradiasi direndam selama 2 jam menggunakan aquades  kemudian  ditiriskan.  Hal  ini  bertujuan  untuk mempercepat  proses  imbibisi  sehingga  pertumbuhan  tunas akan  berlangsung  lebih  cepat.  Biji  yang  telah  direndam  dan ditiriskan  selanjutnya  ditumbuhkan  di potray berisi  media tanam kemudian disemai hingga muncul 2 daun.
4) Uji Viabilitas dan Vigoritas Benih
Viabilitas  benih  merupakan  salah  satu  unsur  dalam  mutu fisiologis benih. Viabilitas dapat dilihat dari daya berkecambah. Daya berkecambah menginformasikan kemungkinan  benih  tumbuh  normal  pada  kondisi  lapang  dan lingkungan  yang  optimum  [9].  Parameter  viabilitas  yang diamati dalam penelitian ini yaitu daya berkecambah (DB) dan laju perkecambahan (LP).
Daya  berkecambah  (DB)  yaitu  banyaknya  persentase kecambah  normal  pada  pengamatan  selama  7  hari  setelah tanam (hst), dengan rumus sebagai berikut:
DB = 100%
Laju  perkecambahan  (LP)  ditentukan  dengan  menghitung jumlah  hari  yang  diperlukan  untuk  munculnya  radikel  atau plumula  selama  jangka  waktu  tertentu  (7  hari),  dengan  rumus sebagai berikut:
LP
Keterangan: LP : laju perkecambahan
N  :  jumlah  benih  yang  berkecambah  pada  satuan  waktu tertentu
T  : jumlah waktu antara awal pengujian sampai dengan akhir dari interval tertentu suatu pengamatan
Vigor benih adalah kemampuan benih tumbuh normal pada kondisi lapang dan lingkungan suboptimum. Benih yang vigor mampu tumbuh pada berbagai macam kondisi di lapangan [9]. Parameter  vigoritas  yang  diamati  dalam  penelitian  ini  yaitu keserempakan tumbuh (KST).
Keserempakan tumbuh benih dihitung dengan menggunakan persentase  kecambah  normal  kuat  (hari  ke-4),  dengan  rumus sebagai berikut:
KST 100%
Keterangan:
KST : keserampakan tumbuh KK   : jumlah kecambah kuat
TB    : total benih yang dianalisis

## 5) Tahap Aklimatisasi
Pembuatan  media  tanam  dilakukan  dengan  menyiapkan tanah  taman  dan  pupuk  organik.  Setiap polybag memiliki komposisi  1,5  kg  tanah  taman  dan  0,5  kg  pupuk  organik sehingga didapatkan berat total sebanyak 2 kg /polybag . Media tanam  yang  telah  ditimbang  diaduk  secara  merata  untuk selanjutnya  dimasukkan  kedalam polybag dan  diatur  di  rak greenhouse sesuai  dengan lay  out percobaan.  Selanjutnya setiap polybag diberi label sesuai perlakuan.
Proses  aklimatisasi  tanaman  kedelai  ( Glycine  max) dilakukan  selama  10  hari.  Aklimatisasi  bertujuan  untuk adaptasi  tanaman kedelai ( Glycine max) terhadap media baru. Pemeliharaan  yang  dilakukan  adalah penyiraman. Penyiraman dilakukan pada saat proses penyemaian dan aklimatisasi secara teratur pada pagi dan sore hari sesuai kebutuhan.

## 6) Tahap Seleksi Genangan
Perlakuan  cekaman  genangan  dilakukan  di greenhouse , Departemen  Biologi,  ITS.  Tanaman  kedelai  yang  telah diaklimatisasi  selama  14  hari  selanjutnya  diberi  perlakuan cekaman  genangan  sesuai  perhitungan  kapasitas  lapang  yang diperoleh.
Penggenangan  dilakukan  selama  14  hari  pada  semua  taraf perlakuan    dengan  cara  memberikan  air  ke  dalam  masing- masing polybag sebanyak  konsentrasi  yang  telah  ditentukan berdasar  pada  hasil  kapasitas  lapang,  setelah  itu  diberikan penyangga  bambu  pada  masing-masing polybag yang berfungsi  untuk  menyangga  tanaman  karena  struktur  tanah yang jenuh air. Kemudian diukur tinggi genangan menggunakan penggaris sebagai ukuran dalam penambahan air setiap harinya.
7) Pengamatan Pertumbuhan Tanaman Kedelai (Glycine max)
Pemanenan  tanaman  kedelai  dilakukan  setelah  14  hari perlakuan  cekaman  genangan.  Tanaman  pada  tiap-tiap perlakuan diambil dan dibersihkan dari sisa tanah menggunakan  air  kemudian  dikeringanginkan.  Selanjutnya, tanaman dimasukkan ke dalam plastik ziplock dan diberi label. Kemudian  disimpan  dalam freezer untuk  selanjutnya  di lakukan analisis.
a. Tinggi Tanaman
Pengukuran terhadap tinggi tanaman dilakukan sebelum dan sesudah masa perlakuan cekaman genangan. Tanaman kedelai diukur  dari  pangkal  batang  sampai  ujung  batang  atau  titik tumbuh.
b. Luas Daun
Pengukuran  terhadap  luas  daun  dilakukan  setelah  proses pemberian  cekaman  genangan  selama  14  hari  dengan  metode gravimetri,  yaitu  dengan  cara  menggambar  daun  yang  akan ditaksir  luasnya  pada  selembar  kertas.  Luas  daun  dihitung berdasarkan  perbandingan  berat  replika  daun  dengan  berat total kertas. Sampel daun yang digunakan diambil dari bagian atas, tengah, dan bawah tanaman pada tiap perlakuan. Adapun rumus perhitungannya adalah sebagai berikut:
LD  = LK
Keterangan:
LD = luas daun Wr = berat kertas replika daun (g)
Wt = berat total kertas (g) LK = luas total kertas (cm)

## 8) Uji Profil Protein
Metode isolasi protein mengacu pada penelitian [10], yakni sebagai  berikut:  daun  tanaman  kedelai  berumur  30  hari dipanen  sebelum  dan  sesudah  perlakuan  cekaman  genangan. Daun ditimbang sebanyak 0,1 gram dan dimasukkan microtube steril.  Setelah  itu,  ditambahkan  300  μL  larutan  PBS  1 kemudian  digerus  dengan pellet  pestle hingga  homogen. Homogenat  disentrifus  dengan  suhu  4 kecepatan  5000  rpm selama 5 menit. Supernatan diambil dan dipindahkan ke dalam microtube steril yang baru dan disimpan pada suhu 4°C.
Supernatan  yang  didapat  mengandung  banyak  protein, karena  komposisi  yang  heterogen  maka  protein  tersebut  perlu dipisahkan  untuk  dilihat  profilnya.  Profil  protein  tanaman diamati  untuk  mengetahui  apakah  tanaman  tersebut  berhasil memproduksi  protein  yang  berperan  pada  saat  cekaman  atau tidak.  Terlebih  dahulu  dibuat sample  buffer ( loading  buffer ), running  buffer ( buffer  electrode ), staining  solution ,  dan destaining  solution .  Kemudian  pembuatan  gel  SDS-PAGE, persiapan  gel  SDS-PAGE, running sampel, staining dan destaining gel.
Prosedur  pembuatan  gel  SDS-PAGE  yaitu short  plate diletakkan  di  atas spacer  plate dan  diisolasi  pada  bagian bawah, sisi kanan, dan sisi kiri. Kemudian cams ditekan dalam posisi  terbuka  pada casting  frame .  Kedua plates dimasukkan ke dalam casting frame dengan menempatkan short plate pada bagian depan. Kunci cams dengan ditekan untuk mengamankan glass  plates . Casting  frame diamankan  pada casting  stand dengan  menarik  tuas  pegas.  Aquades  steril dimasukkan  pada glass  plates untuk  memastikan  tidak  ada kebocoran.  Dibersihkan glass  plates yang  sudah  dituang aquades steril dengan kertas saring. Separating gel 10% dibuat dan dituang ke glass plates . Segera dituang 2-propanol hingga penuh  untuk  meluruskan  garis separating gel .  Ditunggu beberapa  saat  hingga separating gel memadat. Glass  plates dibersihkan dari 2-propanol dengan kertas saring. Stacking gel 5%  dibuat  dan  dituang  ke glass  plates hingga  penuh. Kemudian beri comb antara glass plates sebelum stacking gel memadat.
Persiapan  gel  SDS-PAGE  dilakukan  dengan  cara gel cassette  sandwich dilepaskan dari casting  frame .  Kemudian gel  cassette sandwich dimasukkan  ke  dalam electrode assembly dengan short plate menghadap ke dalam. Kedua tuas cam s  ditutup  dari electrode  assembly . Inner  chamber diturunkan  ke  dalam mini  tank . Running  buffer ( buffer electrode) dituang pada inner chamber sampai level mencapai setengah  di  antara  bagian  atas glass  plates yang  lebih  tinggi dan lebih pendek dari gel cassettes dan lower buffer chamber sampai  batas  garis 2  gels . Comb secara  perlahan  diambil  dari glass plates agar terlihat sumuran gel . Langkah  selanjutnya  yaitu running sampel.  Disiapkan sampel  protein  sebanyak  40 yang  ditambahkan  10 sample  buffer pada microtube steril.  Sampel  dipanaskan dengan dry  block  heating  thermostat dengan  suhu  100 selama  2  menit  dan  di freezer pada  suhu 20 selama  15 menit.  Sementara  menunggu,  disiapkan  7 L  marker  ( spectra multicolor  broad  range  protein  ladder )  yang ditambahkan 10 sample  buffer pada microtube steril.  Sebanyak  20  L marker dan sampel  dimasukkan  pada  sumuran  gel elektroforesis  dengan  menggunakan sample  loading  guide . Proses running dilakukan  dengan  menggunakan  tenaga  150 volt,  50  mA  selama 2 jam. Proses running dihentikan apabila loading dye mendekati batas bawah dari lembaran gel. Proses  elektroforesis  selesai  maka  dilakukan staining dan destaining gel.  Langkah-langkah  yang  dilakukan  adalah  tutup tangki  dilepas  dan  diangkat inner  chamber  assembly dengan hati-hati. Running  buffer ( buffer  electrode) dituang  dari inner chamber assembly dan dibuang. Dibuka cams dan dikeluarkan gel  cassette  sandwich dari electrode  assembly .  Isolasi  yang masih  menempel  pada gel  cassette  sandwich dibuang. Gel cassette sandwich dibuka perlahan dengan plastic gel releaser . Gel dikeluarkan dari glass plates dengan cara mengapungkannya  pada  ddH 2 O  dengan  dibalik. Electrode assembly dan mini  tank segera  bilas  dengan  aquades  steril. Lembaran  gel  dimasukkan  pada  cawan  Petri  untuk  siap  di staining selama 24 jam. Pada proses staining akan didapatkan hasil  berupa  lembaran  gel  berwarna  biru  sehingga  perlu dilakukan  didestaining  untuk  menghilangkan  warna  biru, namun  pita-pita  hasil running pada  lembaran  gel  agar  tetap dipertahankan berwarna biru. Hasil staining pada lembaran gel dibilas  dengan destaining  solution selama  2  jam.  Kemudian destaining solution dibuang dan telihat pita-pita berwarna biru hasil running pada lembaran gel.

## C. Rancangan Penelitian
Percobaan menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) satu  faktor  dengan  3  ulangan.  Faktor  tersebut  adalah penggenangan dengan 4 taraf perlakuan yaitu:
G0 = Tanpa genangan (kontrol) G1 = Genangan 100% G2 = Genangan 150% G3 = Genangan 200% G4 = Genangan 250%

## D. Analisis Data
Analisis  pertumbuhan  tanaman  dianalisis  secara  statistik menggunakan  analisis  keragaman  (ANOVA) two-way taraf
signifikan  (α)  0,05%  untuk  mengetahui  pengaruh  perlakuan pada parameter yang diamati. Hipotesis yang digunakan adalah sebagai berikut:
H 0 :  Genangan  tidak  berpengaruh  terhadap  morfo-fisiologi kedelai ( Glycine max ) varietas Grobogan.
H 1 : Genangan berpengaruh terhadap morfo-fisiologi kedelai ( Glycine max ) varietas Grobogan.
Selanjutnya,  apabila  H 1 diterima  maka  dilakukan  uji lanjutan  yaitu  uji Duncan  Multiple  Range  Test (DMRT)  5% dengan  program  IBM  SPSS  Statistics  Version  23  untuk membandingkan  perlakuan  genangan  yang  paling  efektif diantara tiap-tiap perlakuan.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## A. Viabilitas dan Vigoritas Benih Kedelai
Peningkatan  produktivitas  dapat  diupayakan  sejak  dari tingkat  benih  yaitu  melalui  peningkatan  viabilitas  dan  vigor benih. Viabilitas dan vigor benih menentukan mutu benih yang digunakan,  yaitu  mutu  fisik  dan  fisiologi  benih.  Perbaikan mutu  benih  dapat  dilakukan  dengan  memanfaatkan  teknik iradiasi  sinar gamma, yaitu dapat meningkatkan viabilitas dan vigor  benih.  Pemanfaatan  teknik  iradiasi  sinar  gamma digunakan  sebagai seed  treatment [11].  Pengukuran  viabilitas dan  vigoritas  benih  pada  penelitian  ini  dilakukan  sesudah penyemaian  untuk  mengetahui  pengaruh  faktor  dosis  iradiasi terhadap viabilitas dan vigoritas benih.
Ta b el 1 H asi l P en g amat an R er at a V ia b il it as d an V ig o ri ta s B en ih K ed el ai V ar ie ta s G ro b o g an . V ig o ri ta s K eseremp ak an
Tu mb u h ( %)
7 5 ± 5 a 8 0 ± 5 a 7 2 ± 7 ,6 4 ab 6 2 ± 7 ,6 4 b 4 5 ± 5 c
K et er an g an : R er at a y an g d ii k u ti d en g an h u ru f y an g sama men u n ju k k an t id ak b er b ed a n y at a men u ru t u ji j ar ak b er g an d a D u n ca n p ad a ta ra f 5 %. A n g k a d i b el ak an g t an d a ± meru p ak an S ta n d ar D ev ia si ( S TD ). V ia b il it as
La ju P er k ec amb ah an
(H ar i) 3 ,7 ± 0 ,0 7 c 3 ,8 ± 0 ,1 c
3, 9 ± 0 ,0 8 b c 4 ,1 ± 0 ,1 7 b 4 ,4 ± 0 ,1 5 a
D ay a
B er k ec amb ah ( %)
9 3 ± 7 ,6 4 ab
9 8 ± 2 ,8 9 a
9 5 ± 5 ab 8 3 ± 7 ,6 4 b c
7 7 ± 1 0 ,4 1 c
D o si s Ir ad ia si
0 G y
2 5 G y 5 0 G y 7 5 G y
1 0 0 G y
Berdasarkan  Tabel  1  diketahui  bahwa  dosis  iradiasi  paling optimal  berdasarkan  parameter  daya  berkecambah  (DB)  dan keserempakan  tumbuh  (KST)  adalah  25  Gy.  Sedangkan  dosis iradiasi paling optimal berdasarkan parameter laju perkecambahan (LP) adalah 0 Gy. Hal ini dikarenakan iradiasi dengan  dosis  rendah  umumnya  menghasilkan  pengaruh
stimulasi  terhadap  perkecambahan  melalui  peningkatan aktivitas  enzim,  perbaikan  sel-sel  respirasi  dan  meningkatkan produksi  struktur  reproduksi  [12].  Penambahan  dosis  iradiasi menunjukkan  bahwa  perkecambahan  biji  dapat  ditingkatkan dengan  iradiasi  dosis  rendah,  dimana  iradiasi  dosis  tinggi dapat  menghambat  perkecambahan  dan  berkorelasi  secara langsung  dengan  laju  perkecambahan  [13]  [14].  Benih  yang mempunyai  keserempakan  tumbuh  yang  tinggi  memiliki tingkat  vigor  yang  tinggi.  Benih  yang  vigornya  baik/tinggi yaitu  benih  yang  cepat  tumbuhnya  dan  serempak/seragam, karena  benih  yang  cepat  tumbuhnya  dan  serempak mengindikasikan  bahwa  benih  tersebut  mampu  untuk beradaptasi  dengan  keadaan  lingkungan.  Keserempakan tumbuh  mengindikasikan  vigor  daya  simpan.  Artinya  bahwa keserempakan  tumbuh  yang  tinggi  mengindikasikan  daya simpan kelompok benih yang tinggi pula. Ketidakserempakkan tumbuh  dapat  diakibatkan  oleh  sifat  genetik  yang  tidak  sama, atau oleh kondisi lingkungan yang tidak homogen [15].
Dosis  iradiasi  100  Gy  memberikan  respon  daya berkecambah (DB), laju perkecambahan (LP), dan keserempakan  tumbuh  (KST)  terendah.  Hal  ini  dikarenakan iradiasi  sinar  gamma  dalam  dosis  yang  tinggi  umumnya menghasilkan  pengaruh  inhibitor  terhadap  perkecambahan, menurunnya  kadar  auksin  atau  kerusakan  kromosom  [12]. Penurunan laju perkecambahan pada kedelai disebabkan akibat pemberian  iradiasi  sinar  gamma,  hal  ini  memicu  penurunan pembelahan  sel,  sintesis  hormon,  terganggunya  transportasi nutrisi  keseluruh  bagian  tanaman,  dan  adanya  gangguan metabolisme pada apikal meristem [16][17]. Selain itu adanya efek deterministik yaitu efek yang disebabkan karena kematian sel akibat paparan iradiasi. Efek deterministik timbul bila dosis yang  diterima  tanaman  di  atas  dosis  ambang  ( threshold  dose ) dan  umumnya  timbul  beberapa  saat  setelah  iradiasi  [18]. Ketidakmampuan  biji  untuk  berkecambah  pada  dosis  sinar gamma  yang  lebih  tinggi  telah  dikaitkan  dengan  beberapa alasan:  (i)  banyak  perubahan  histologis  dan  sitologi;  (ii) gangguan  dan  disorganisasi  tunika  atau  lapisan  biji  yang berbanding lurus dengan intensitas paparan sinar gamma; (iii) gangguan mitosis atau eliminasi virtual pembelahan sel di zona meristematik selama perkecambahan. Penghambatan perkecambahan  benih  dan  pertumbuhan  benih  yang  diberikan oleh iradiasi sering dianggap berasal dari pembentukan radikal bebas pada biji yang diiradiasi [19].

## B. Tinggi Tanaman Kedelai
Tinggi tanaman merupakan sifat kuantitatif yang dikendalikan  oleh  banyak  gen.  Karakter  tinggi  tanaman  atau penurunan  tinggi  tanaman  merupakan  indikator  yang  paling umum  yang  digunakan  untuk  melihat  efek  mutagen  [20]. Pengukuran  tinggi  tanaman  pada  penelitian  ini  dilakukan sebelum  dan  sesudah  cekaman  genangan  untuk  mengetahui pengaruh  faktor  dosis  iradiasi,  faktor  konsentrasi  genangan, dan  interaksi  antara  faktor  dosis  iradiasi  dan  konsentrasi genangan terhadap pertumbuhan tinggi tanaman.
Ta b el 2 H asi l P en g amat an R er at a Ti n g g i Ta n aman K ed el ai V ar ie ta s Gr o b o g an . Ko n sent ra si Gena n g a n 250% 2 0 ,3 3 ± 1 8 ,2 3 a 2 1 ± 2 3 ,4 3 a 2 0 ,6 7 ± 6 ,4 3 c 8 ,6 7 ± 4 ,6 2 a 4 ± 0 b K et er an g an : R er at a y an g d ii k u ti d en g an h u ru f y an g sama men u n ju k k an t id ak b er b ed a n
y at a men u ru t u ji ja ra k b er g an d a D u n ca n p ad a ta ra f 5 %. A n g k a d i b el ak an g t an d a ± meru p ak an S ta n d ar D ev ia si ( S TD ). 200% 2 5 ± 1 8 ,5 2 a 2 6 ,6 7 ± 3 ,2 1 a 2 2 ,6 7 ± 1 ,1 5 b c 1 4 ± 7 a 5 ± 3 ,6 b 150% 3 7 ,3 3 ± 3 ,0 5 a 4 4 ± 2 5 ,5 3 a 3 7 ,6 7 ± 8 ,3 3 ab 2 0 ,3 3 ± 1 5 ,0 4 a 1 1 ,3 3 ± 7 ,5 ab 100% 3 9 ,6 7 ± 1 2 ,74a 4 8 ± 2 3 ,5 1 a 4 5 ± 7 ,9 4 a 2 2 ± 7 ,5 5 a 1 2 ± 7 ,9 4 ab Ko n tr o l 4 6 ± 4 a 5 5 ± 1 5 ,8 7 a 4 7 ,6 7 ± 1 3 ,6 5 a 2 3 ,3 3 ± 7 ,0 2 a 2 0 ,3 3 ± 1 0 ,4 1 a D o si s Ira d ia si 0 Gy 2 5 Gy 5 0 Gy 7 5 Gy 1 0 0 Gy Berdasarkan  Tabel  2  diketahui  bahwa  dosis  iradiasi  25  Gy dengan konsentrasi genangan kontrol efektif dalam meningkatkan pertumbuhan tinggi tanaman. Hal ini dikarenakan  iradiasi  dosis  rendah  akan  menginduksi  stimulasi pertumbuhan  dengan  mengubah  jaringan  sinyal  hormonal dalam  sel  tanaman  atau  dengan  meningkatkan  kapasitas  anti oksidatif  sel  [21].  Sedangkan  dosis  iradiasi  100  Gy  dengan konsentrasi  genangan  250%  memperlambat  pertumbuhan tinggi  tanaman.  Penurunan  tinggi  tanaman  atau  tanaman menjadi  kerdil  karena  pengaruh  dosis  yang  tinggi  akibatnya adanya  gangguan  fisiologis  atau  kerusakan  kromosom  yang diakibatkan  oleh  mutagen  (radiasi  sinar  gamma)  yang diberikan.  Pemberian  dosis  yang  terlalu  tinggi  akan menghambat  pembelahan  sel  yang  menyebabkan kematian sel yang  berpengaruh  terhadap  proses  pertumbuhan  tanaman. Tetapi  dosis  iradiasi  yang  terlalu  rendah  tidak  cukup  untuk memutasi tanaman karena frekuensi mutasi yang terlalu rendah hanya  menghasilkan  sedikit  sektor  yang  termutasi  [20]. Iradiasi  sinar  gamma  menyebabkan  terjadinya  mutasi  secara acak  mengakibatkan  kerusakan  fisiologis  dalam  metabolisme perkembangan  sel,  sehingga  potensi  pertumbuhan  tanaman dapat  lebih  cepat  atau  lebih  lambat  [22].  Etilen  merupakan salah  satu  hormon  yang  menstimulus  adanya  percepatan pemanjangan sel saat tanaman berada dalam kondisi tergenang [23][24].  Fungsi  etilen  tidak  hanya  berperan  dalam  elongasi sel  tetapi  juga  pembelahan  sel  [24]  [25].  Elongasi  batang
tanaman  disebabkan  oleh  interaksi  antara  giberelin  (GA)  dan etilen.  Proses  elongasi  tercepat  pada  ruas  diproduksi  oleh etilen  yang  menginduksi  rasio  spesifik  antara  giberelin  (GA) dan  asam  absisat  (ABA).  Genangan  menurunkan  ABA  alami dan  meningkatkan  GA  [26]  [27].  Penggenangan  yang  lebih lama akan mengurangi tinggi tanaman [7].

## C. Luas Daun
Daun  merupakan  salah  satu  organ  tanaman  yang  penting, karena  pada  daun  terdapat  bagian/komponen  dan  sekaligus tempat berlangsungnya proses fotosintesis dan transpirasi yang menentukan  pertumbuhan  tanaman.  Oleh karena itu luas daun merupakan  salah  satu  parameter  penting  dalam  analisis pertumbuhan  tanaman  [28].  Pengukuran  luas  daun  pada penelitian  ini  dilakukan  sesudah  cekaman  genangan  untuk mengetahui  pengaruh  faktor  dosis  iradiasi,  faktor  konsentrasi genangan,  dan  interaksi  antara  faktor  dosis  iradiasi  dan konsentrasi genangan terhadap luas daun.
Ta b el 3 H asi l P en g amat an R er at a Lu as Dau n K ed el ai V ar ie ta s Gr o b o g an . Ko n sent ra si Gena n g a n 250% 7 ,6 6 ± 0 ,8 b 1 0 ,7 5 ± 7 ,0 5 a 7 ,2 5 ± 3 ,0 4 b 6 ,9 9 ± 0 ,6 2 b 1 ,8 8 ± 0 ,8 4 c K et er an g an : R er at a y an g d ii k u ti d en g an h u ru f y an g sama men u n ju k k an t id ak b er b ed a n y at a men u ru t u ji ja ra k b er g an d a D u n ca n p ad a ta ra f 5 %. A n g k a d i b el ak an g t an d a ± meru p ak an S ta n d ar D ev ia si ( S TD ). 200% 9 ,2 7 ± 2 ,8 2 ab 1 3 ,1 6 ± 4 ,5 3 a 1 2 ,6 2 ± 2 ,7 4 ab 8 ,5 9 ± 3 ,0 2 ab 3 ,8 9 ± 0 ,8 4 b c 150% 1 1 ,2 8 ± 0 ,6 9 ab 1 3 ,8 3 ± 1 ,6 3 a 1 3 ,5 6 ± 1 ,8 2 ab 1 1 ,1 5 ± 1 ,6 3 ab 5 ,9 1 ± 1 ,8 2 b 100% 1 1 ,5 5 ± 4 ,4 2 ab 1 3 ,9 7 ± 0 ,8 4 a 1 5 ,8 5 ± 7 ,92a 1 2 ,6 2 ± 1 ,6 3 a 9 ,1 3 ± 1 ,2 9 a Ko n tr o l 1 3 ,3 ± 3 ,4 4 a 1 6 ,2 5 ± 6 ,5 5 a 2 0 ,0 1 ± 3 ,3 5 a 1 2 ,8 9 ± 4 ,9 5 a 1 0 ,3 4 ± 2 ,2 9 a D o si s Ira d ia si 0 Gy 2 5 Gy 5 0 Gy 7 5 Gy 1 0 0 Gy
Berdasarkan  Tabel  3  diketahui  bahwa  dosis  iradiasi  50  Gy dengan konsentrasi genangan kontrol efektif dalam meningkatkan  luas  daun.  Sedangkan  dosis  iradiasi  100  Gy dengan  konsentrasi  genangan  250%  menurunkan  luas  daun. Hal  ini  dikarenakan  iradiasi  menyebabkan  susunan  genetik tanaman  yang  berkaitan  dengan  luas  daun  menjadi  berubah [29].  ANR  daun  yang  tinggi  pada  tanaman  yang  toleran genangan  menunjukkan  efisiensi  pemanfaatan  nitrat  oleh
tanaman.  Selain  itu,  dalam  keadaan  tergenang,  reduksi  nitrat menjadi  nitrit  dapat  berperan  sebagai  alternatif  transfer elektron  untuk  mengganti  peran  oksigen  [7].  Organ  tanaman yang aktif melakukan fotosintesis adalah daun, oleh karena itu semakin besar luas daun maka hasil fotosintesis atau fotosintat akan  meningkat  yang  dapat  ditampung  dalam  bentuk  buah, polong atau biji [30].

## D. Profil Protein
Protein  terkait  dengan  fungsi  utama  organ,  secara  khusus diekspresikan dalam organ/jaringan spesifik. Organ spesifik ini mengekspresikan protein sehingga penting untuk pertumbuhan dan  perkembangan  tanaman  [31].  Pada  tumbuhan  tingkat tinggi,  akar  adalah  salah  satu  organ  indera  utama  untuk mendeteksi kondisi stres di dalam tanah, dan merupakan organ pertama  yang  terkena  dampak  karena  stres  ini.  Bagian-bagian aerial  tumbuhan  merasakan  adanya  stres  akar  melalui mekanisme  pensinyalan  sistemik  yang  melibatkan  kehilangan atau dapat mengirimkan zat aktif fisiologis dari akar ke tunas. Identifikasi  gen  atau  protein  yang  terlibat  dalam  respon  stres biotik atau abiotik adalah langkah mendasar dalam memahami mekanisme  molekuler  respons  stres  dan  mengembangkan tanaman  transgenik dengan toleransi yang lebih baik terhadap stres [32].
Gambar  1.  Hasil  Analisis  Profil  Protein  Kedelai  Varietas  Grobogan  dengan SDS-PAGE .
Keterangan : M= Marker; A= 0 Gy (kontrol) (sebelum genangan) ; B = 0 Gy (kontrol); C = 0 Gy (250%); D = 25 Gy (kontrol); E = 25 Gy (250%); F = 50 Gy (kontrol); G = 50 Gy (250%); H = 75 Gy (kontrol); I = 75 Gy (250%); J = 100 Gy (kontrol); K = 100 Gy (250%).
Berdasarkan  Gambar  1  menunjukkan  bahwa  perbedaan profil  protein  dapat  dilihat  berdasarkan  keberadaan  pita-pita protein dan variasi berat molekul protein. Pada dosis iradiasi 0 Gy  dan  50  Gy  dengan  konsentrasi  genangan  kontrol  (sesudah genangan)  ditemukan  8  pita  protein.  Pada  dosis  iradiasi  0  Gy dengan konsentrasi genangan kontrol (sebelum genangan) dan 250%  (sesudah  genangan)  ditemukan  7  pita  protein.  Pada dosis  iradiasi  25  Gy  dengan  konsentrasi  genangan  kontrol (sesudah  genangan)  ditemukan  6  pita  protein.  Pada  dosis iradiasi  25  Gy  dengan  konsentrasi  genangan  250%  (sesudah genangan),  dosis  iradiasi  75  Gy  dengan  konsentrasi  genangan kontrol (sesudah genangan), dan dosis iradiasi 100 Gy dengan
konsentrasi genangan kontrol (sesudah genangan) ditemukan 5 pita  protein.  Pada  dosis  iradiasi  50  Gy,  75  Gy,  dan  100  Gy dengan  konsentrasi  genangan  250%  (sesudah  genangan) ditemukan  3  pita  protein.  Hal  ini  membuktikan  bahwa  dosis iradiasi  dan  konsentrasi  genangan  mempengaruhi  jumlah  pita protein yang dihasilkan.
Tabel 4 Berat Molekul Protein Kedelai Varietas Grobogan dengan SDS-PAGE .
Berat Molekul Pita Protein (kDa) A B C D E F G H I J K 260 √ - - - - - - - - - - 259 - - - - - - - - - - √ 256 - - √ - - - - - - - - 229 - √ - - - - - - - - - 226 - - - - - - - - - √ - 224 - - - - - - - √ - - - 216 - - - - - - - - √ - - 193 - - - - - - √ - - - - 190 - - - √ - - - - - - - 183 - - - - √ √ - - - - - 115 - - √ - - - - - - - - 114 - √ - - - - - - - - - 111 - - - - - - - - - - √ 109 - - - - - - - - - √ - 102 - - - - - - - √ √ - - 80 √ - - - - - - - - - - 75 - √ - - - - - - - - - 72 - - √ - - - - - - - - 62 - - - - - - - - √ - - 59 - - - - - - - √ - √ - 55 - √ - - - - √ - - - - 53 - - √ - - - - - - - √ 51 - - - - √ - - - - - - 48 - - - √ - - - - - - - 45 - - - - - √ - - - - - 39 - - √ - - - - - - - - 37 - - - - √ - - - - - - 35 √ - - - - - - - - - - 33 - - - - - √ - - - - - 29 √ - - - - - - - - - - 28 - √ - - - - - - - - - 26 - - - - - √ - - - - - 24 √ - - √ - - - - - - - 23 - √ √ - - - - - - - - 21 - - - - √ - - - - - - 20 - - - √ - √ - - - - - 15 - - - - - √ - - - - - 14 √ √ - - - - - - - - - 13 √ √ √ - - √ - √ - √ - 12 - - - √ √ √ - √ - - - 11 - - - √ - - √ - - √ -
Keterangan:  √ (ada protein); - (tidak ada protein).
Analisis profil protein terlihat pita protein dengan mobilitas terendah  sampai  tertinggi  terletak  pada  berat  molekul  260-11 kDa (Tabel 4). Pita protein yang hanya dimiliki dosis iradiasi 0 Gy  dengan  konsentrasi  genangan  kontrol  (sebelum  genangan) adalah  pita  260,  80,  35,  dan  29  kDa.  Pita  protein yang hanya dimiliki  dosis  iradiasi  0  Gy  dengan  konsentrasi  genangan kontrol  (sesudah  genangan)  adalah  pita  229,  114,  79,  dan  28 kDa.  Pita  protein  yang  hanya  dimiliki  dosis  iradiasi  0  Gy dengan  konsentrasi  genangan  250%  (sesudah  genangan)
adalah pita 256, 115, 72, dan 39 kDa. Pita protein yang hanya dimiliki  dosis  iradiasi  25  Gy  dengan  konsentrasi  genangan kontrol  (sesudah  genangan)  adalah  pita  190  dan  48  kDa.  Pita protein  yang  hanya  dimiliki  dosis  iradiasi  25  Gy  dengan konsentrasi  genangan  250%  (sesudah  genangan)  adalah  pita 51,  37,  dan  21  kDa.  Pita  protein  yang  hanya  dimiliki  dosis iradiasi  50  Gy  dengan  konsentrasi  genangan  kontrol  (sesudah genangan)  adalah  pita  45,  33,  26,  dan  15  kDa.  Pita  protein yang  hanya  dimiliki  dosis  iradiasi  50  Gy  dengan  konsentrasi genangan 250% (sesudah genangan) adalah pita 193 kDa. Pita protein  yang  hanya  dimiliki  dosis  iradiasi  75  Gy  dengan konsentrasi  genangan  kontrol  (sesudah  genangan)  adalah  pita 224 kDa. Pita protein yang hanya dimiliki dosis iradiasi 75 Gy dengan  konsentrasi  genangan  250%  (sesudah  genangan) adalah  pita  216  dan  62  kDa.  Pita  protein yang hanya dimiliki dosis  iradiasi  100  Gy  dengan  konsentrasi  genangan  kontrol (sesudah genangan) adalah pita 226 dan 109 kDa. Pita protein yang  hanya  dimiliki dosis iradiasi 100 Gy dengan konsentrasi genangan  250%  (sesudah  genangan)  adalah  pita  229  dan  111 kDa.
Karakterisasi menggunakan kisaran berat molekul dilakukan karena  pita-pita  yang  dihasilkan  dari  hasil  SDS-PAGE beragam  dan  saling  berdekatan.  Pita-pita  protein  yang  saling berdekatan  ( doublet )  mengindikasikan  bahwa  protein  tersebut memiliki  kesamaan  jumlah  asam-asam  amino,  namun  salah satu  diantaranya  memiliki  ekstra  residu  asam  amino  sehingga menyebabkan  posisi  pitanya  sedikit  berbeda  [33].  Pita  yang terletak  pada  bagian  atas  menunjukkan  berat  molekul  yang besar  dibandingkan  dengan  pita  yang  berada  di  bawahnya karena  molekul  yang  lebih  kecil  dari  pori  gel  dapat  bergerak dengan  mudah  di  dalam  gel,  sedangkan  molekul  yang  lebih besar  hampir  tidak  bergerak.  Hal  itu  juga  menjadi  alasan tersebarnya keberadaan pita-pita protein yang muncul pada gel akrilamid [34].
Daun  memainkan  peran  utama  dalam  mengangkut  unsur- unsur  penting  dan  air  dari  akar  ke  bagian  aerial.  Sebagian besar  protein  yang  teridentifikasi  terlibat  dalam  produksi energi  dan  metabolisme  primer/sekunder  pada  jaringan  daun. Pada  tumbuhan  tingkat  tinggi,  daun  mewakili  organ  yang sangat  terspesialisasi  terutama  terlibat  dalam  fotosintesis. Tingkat  dan  aktivitas  fotosintesis  sangat  tergantung  pada perkembangan dan usia daun, dan ini juga berkorelasi dengan akumulasi protein seperti ribulosa-1,5-bifosfat karboksilase/oksigenase  ( RuBisCO )  dan  protein  lainnya  yang berhubungan  dengan  fotosintesis. RuBisCO memiliki  fungsi ganda:  bertindak  sebagai  karboksilase  yang  memediasi fotosintesis asimilasi CO 2 dan sebagai oksigenase mengkatalisis  tahap pertama dari jalur fotorespirasi. Cekaman genangan  menginduksi  pembentukan reactive  oxygen  species ( ROS )  yang  pada  akhirnya  menyebabkan  degradasi  subunit dari RuBisCO dan RuBisCO activase [31].
Genangan  menyebabkan  hipoksia  yaitu  berkurangnya konsentrasi  oksigen  di  dalam  tanah  dan  jika  genangan berkepanjangan  secara  progresif  menyebabkan  anoksia (ketiadaan  oksigen).  Karena  O 2 bertindak  sebagai  akseptor elektron  terminal  dalam  transpor  elektron  mitokondria,  oleh karena  itu,  menipisnya  O 2 menyebabkan  penurunan  rasio
ATP/ADP  yang  menggeser  metabolisme  sel  menjadi fermentasi  anaerobik  untuk  menghasilkan  ATP  dan  NADP + untuk mempertahankan kebutuhan energi dan dengan demikian memperpanjang kelangsungan hidup. Produksi ROS meningkat di  bawah  berbagai  stres.  Untuk  melindungi  sel  dari  efek merugikan ROS ,  jaringan  tanaman  memiliki ROS scavenging enzymes yaitu superoxide  dismutase ( SOD ), catalase (CAT), peroxidases (POX)  dan polyphenol  oxidase (PPO),  dan jaringan  massa  molekul  rendah  antioksidan  non  enzimatik seperti  askorbat,  glutathion,  senyawa  fenolik  dan  tokoferol. Untuk menetralkan ROS atau meregenerasi bentuk antioksidan aktif; enzim seperti ascorbate peroxidase ( APX ), dehydroascorbate  reductase ( DHAR ), glutathione  reductase ( GR ) pada dasarnya diperlukan [35].

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa dosis iradiasi  dan  konsentrasi  genangan  memberikan  respon  yang berbeda-beda  pada  setiap  perlakuan.  Pengamatan  morfologi dengan  parameter  viabilitas  dan  vigoritas  benih,  tinggi tanaman,  dan  luas  daun  paling  optimal  saat  diberikan  dosis iradiasi 0 Gy, 25 Gy, dan 50 Gy dengan konsentrasi genangan kontrol.  Sedangkan  terendah  saat  diberikan  dosis  iradiasi  75 Gy  dan  100  Gy  dengan  konsentrasi  genangan  250%.  Analisis profil  protein  dengan  SDS-PAGE  didapatkan  bahwa  pita protein  dengan  mobilitas  terendah  sampai  tertinggi  terletak pada  berat  molekul  260-11  kDa.  Hal  tersebut  ditunjukkan dengan  perbedaan  jumlah  pita  protein,  berat  molekul  pita protein, dan ketebalan pita protein yang dihasilkan.

## DAFTAR PUSTAKA

## [1]
M. Firdaus, “Self Sufficiency Outlook of Indonesia Soybean on the Era of Trade Liberalization,” J. Basic Appl. Sci. Res. , vol. 5, no. 1, pp. 105–110, 2015.
[2] and C. A. S. Lamptey, B. D. K. Ahiabor, S. Yeboah, “Response of Soybean  (Glycine  max)  to  Rhizobial  Inoculation  and  Phosphorus Application,” J.  Exp.  Biol.  Agric.  Sci. ,  vol.  2,  no.  1,  pp.  72–77, 2014.
[3] R. Aldillah, “Proyeksi Produksi dan Konsumsi Kedelai Indonesia,” J. Ekon. Kuantitatif Terap. , vol. 8, no. 1, pp. 9–23, 2015.
[4] and  S.  K.  M.  Oh,  Y.  Nanjo,  “Gel-free  Proteomic  Analysis  of Soybean  Root  Proteins  Affected  by  Calcium  Under  Flooding Stress,” Front. Plant Sci. , vol. 5, no. 559, pp. 1–15, 2014.
[5] and I. J. L. Y. H. Kim, S. J. Hwang, M. Waqas, A. L. Khan, J. H. Lee,  J.  D.  Lee,  H.  T.  Nguyen,  “Comparative  Analysis  of Endogenous  Hormones  Level  in  Two  Soybean  (Glycine  max  L.) Lines Differing in Waterlogging Tolerance,” Front. Plant Sci. , vol. 6, no. 714, pp. 1–13, 2015.
[6] dan  M.  M.  A.  R.  T.  Hapsari,  “Peluang  Perakitan  dan Pengembangan  Kedelai  Toleran  Genangan,” J.  Litbang  Pertan. , vol. 29, no. 2, pp. 50–57, 2010.
[7] dan  T.  B.  S.  V.  S.  Fatimah,  “Respon  Karakter  Fisiologis  Kedelai (Glycine  max  L.)  Verietas  Grobogan  terhadap  Cekaman Genangan,” J.  Sains  dan  Seni  ITS ,  vol.  5,  no.  2,  pp.  E71–E77, 2016.
[8] dan M. M. A. W. Rahajeng, “Varietas Kedelai Umur Genjah,” Bul.
Palawija , vol. 26, pp. 91–100, 2013.
[9] dan  R.  Z.  N.  L.  E.  Farida,  D.  Saptadi,  “Uji  Vigor  dan  dan Viabilitas  Benih  Dua  Klon  Karet  (Hevea  brasiliensis  Muell  Arg.) Pada Beberapa Periode Penyimpanan,” J. Produksi Tanam. , vol. 5, no. 3, pp. 484–492, 2017.
[10] T. B. Saputro, “Multiplikasi Tunas Pada Mikoropropagasi Tanaman Transgenik  Anggrek  (Phalaenopsis  amabilis  L.)  Blume  Pembawa
35S::KNAT1 Pada Media Tanpa Fitohormon,” UGM, 2012.
[11] dan  M.  D.  Y.  Bramasto,  Putri,  P.  K.  Zanzibar,  “Pemanfaatan Teknik  Irradiasi  Sinar  Gamma  Untuk  Meningkatkan  Viabilitas Benih Sengon,” J. Hutan Trop. , vol. 4, no. 1, pp. 14–20, 2016.
[12] dan  D.  J.  S.  M.  Zanzibar,  Megawati,  E.  Pujiastuti,  “Iradiasi  Sinar Gamma  (60Co)  untuk  Meningkatkan  Perkecambahan  dan Pertumbuhan Bibit Tembesu (Fagraea fragrans Roxb.),” J. Penelit. Hutan Tanam. , vol. 12, no. 3, pp. 165–174, 2015.
[13] and W. J. R. Q. H. Li, S. X. Wang, Y. M. Zhao, J. Xu, T. T. Gao, “Irradiation Dose and Effect on Germination and Growth of Desert Shrub  Nitraria  tangutorum  Borb.  with  Two  Gamma  Irradiation Modes,” Pak. J. Bot , vol. 44, no. 2, pp. 661–666, 2012.
[14] dan T. B. S. P. L. Nurrachmamila, “Analisis Daya Perkecambahan Padi (Oryza sativa L.) Varietas Bahbutong Hasil Iradiasi,” J. Sains dan Seni ITS , vol. 6, no. 2, pp. E17–E21, 2017.
[15] and N. T. M. K. Lesilolo, J. Patty, “Penggunaan Desikan Abu dan Lama Simpan Terhadap Kualitas Benih Jagung (Zea mays L.) pada Penyimpanan Ruang Terbuka,” Agrologia , vol. 1, no. 1, pp. 51–59, 2012.
[16] C. Jia and A. Li, “Effect of gamma radiation on mutant induction of Fagopyrum dibotrys Hara,” Photosynthetica , vol. 46, pp. 363–369, 2008.
[17] dan T. B. S. I. Prabhandaru., “Respon Perkecambahan Benih Padi (Oryza  sativa  L.)  Varietas  Lokal  SiGadis  Hasil  Iradiasi  Sinar Gamma,” J. Sains dan Seni ITS , vol. 6, no. 2, pp. E48–E52, 2017.
[18] S.  Utami,  “Uji  Viabilitas  dan  Vigoritas  Benih  Padi  Lokal  Ramos Adaptif  Deli  Serdang  dengan  Berbagai  Tingkat  Dosis  Irradiasi
Sinar Gamma di Persemaian,” Agrium , vol. 18, no. 2, pp. 158–161, 2013.
[19] and  M.  S.  Jan,  T.  Parween,  T.  O.  Siddiqi,  “Effect  of  Gamma Radiation  on  Morphological,  Biochemical,  and  Physiological Aspects  of  Plants  and  Plant Products,” Environ.  Rev. ,  vol.  20,  pp. 17–39, 2012.
[20] dan  I.  G.  A.  K.  G.  N.  Sutapa,  “Efek  Induksi  Mutasi  Radiasi Gamma  60Co  Pada  Pertumbuhan  Fisiologis  Tanaman  Tomat (Lycopersicon esculentum L.),” J. Keselam. Radiasi dan Lingkung. , vol. 1, no. 2, pp. 5–11, 2016.
[21] and  M.  N.  N.  F.  A.  Minisi,  M.  E.  El-mahrouk,  M.  E.  F.  Rida, “Effects  of  Gamma  Radiation  on  Germination,  Growth Characteristics  and  Morphological  Variations  of  Moluccella  laevis L,” Am. J. Agric. Environ. Sci. , vol. 13, no. 5, pp. 696–704, 2013.
[22] dan  L.  K.  D.  S.  R.  Anshori,  S.  I.  Aisyah,  “Induksi  Mutasi  Fisik dengan  Iradiasi  Sinar  Gamma  pada  Kunyit  (Curcuma  domestica
Val.),” J. Hortik. Indones. , vol. 5, no. 3, pp. 84–94, 2014.
[23] J.  and  T.  D.  C.  M.  B.,  “Response  and  Adaptation  by  Plants  to Flooding Stress,” Ann. Bot. , vol. 96, no. 4, pp. 501–505, 2005.
[24] dan  T.  B.  S.  E.  A.  Rohmah,  “Analisis  Pertumbuhan  Tanaman Kedelai  (Glycine  max  L.)  Varietas  Grobogan  Pada  Kondisi Cekaman Genangan,” J. Sains dan Seni ITS , vol. 5, no. 2, pp. E29– E33, 2016.
[25]
I.  K.  Sato,  T.,  Harada  T,  “Stimulation  of  glycolysis  in  anaerobic elongation  of  pondweed  (Potamogeton  distinctus)  turion,” J.  Exp. Bot , vol. 53, pp. 1847 –56, 2002.
[26] H.  Kende,  “Deepwater  Rice:  A  Model  Plant  to  Study  Stem Elongation,” Plant Physiol , vol. 118, pp. 1105–1110, 1998.
[27] E. M. S. and N. J. T B Saputro, K T Purwani, V S Fatimah, “The tolerance  improvement  of  local  soybean  in  waterlogging  condition through  the  combination  of  irradiation  and  in  vivo  selection,” J. Phys. Conf. Ser. , 2018.
[28] A.  W.  I.  dan  F.  Y.  Wicaksono,  “Perbandingan  Pengukuran  Luas Daun Kedelai dengan Metode Gravimetri, Regresi dan Scanner,” J. Kultiv. , vol. 16, no. 3, pp. 425–429, 2017.
[29] A. S. J. H. S. Meliala, N. Basuki, “Pengaruh Iradiasi Sinar Gamma Terhadap  Perubahan  Fenotipik  Tanaman  Padi  Gogo  (Oryza  sativa L.),” J. Produksi Tanam. , vol. 4, no. 7, pp. 585–594, 2016.
[30] L. M. M. dan T. Ginting, “Pertumbuhan dan Hasil Kedelai (Glycine max  (L)  Merr)  Akibat  Tinggi  Muka  Air  Tanah  pada  Beberapa Stadia Pertumbuhan,” vol. 19, no. 1, pp. 1–13, 2010.
[31] S.  K.  and  Z.  Hossain,  “Organ-Specific  Proteome  Analysis  for Identification  of  Abiotic  Stress  Response  Mechanism  in  Crop,” Front. Plant Sci. , vol. 4, no. 71, pp. 1–9, 2013.
[32] and  B.  H.  L.  N.  Ahsan,  D.  G.  Lee,  S.  H.  Lee,  K.  W.  Lee,  J.  D. Bahk,  “A  Proteomic  Screen  and  Identification  of  Waterlogging- Regulated Proteins in Tomato Roots,” Plant Soil , vol. 295, pp. 37– 51, 2007.
[33] dan P. L. P. S. A. D. Wibowo, M. T. Suhartono, “Fraksionasi dan Penentuan  Profil  Protein  Bungkil  Kelapa  dengan  SDS-PAGE,” J. Teknol. dan Ind. Pangan , vol. 23, no. 1, pp. 69–74, 2012.
[34] dan  D.  S.  M.  D.  Masyitoh,  I.  D.  A.  R.  Dewanti,  “Analisis  Profil Protein  Ekstrak  Aquades  dan  Etanol  Daun  Mimba  (Azadirachta indica  A.  Juss)  dengan  Metode  SDS-PAGE,” e-Jurnal  Pustaka Kesehat. , vol. 4, no. 3, pp. 533–539, 2016.
[35] A.  J.  and  J.  P.  Srivastava,  “Changes  in  Reactive  Oxygen Scavenging  Systems  and  Protein  Profiles  in  Maize  Roots  in Response  to  Nitric  Oxide  Under  Waterlogging  Stress,” Indian  J. Biochem. Biophys. , vol. 55, pp. 26–33, 2018.