Journal of Nutrition College, Volume 9, Nomor 1, Tahun 2020

## EFEK SUPLEMENTASI VIRGIN COCONUT OIL TERHADAP PARAMETER METABOLIK DAN ANTROPOMETRIK TIKUS WISTAR JANTAN OBESITAS
Hendy Wijaya 1* , Siti Surdijati 2
1 Laboratorium Biomedik, Fakultas Farmasi, Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya. Jl. Kalisari Selatan No.1, Kalisari, Mulyorejo, Surabaya, Jawa Timur 60112, Indonesia. * Penulis Penanggungjawab: E-mail: hendy_wijaya@ukwms.ac.id
2 Laboratorium Kimia Klinik, Fakultas Farmasi, Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya. Jl. Kalisari Selatan No.1, Kalisari, Mulyorejo, Surabaya, Jawa Timur 60112, Indonesia

## ABSTRACT
Background: There are several lifestyle modifications protocols to overcome global obesity epidemic, through dieting and  excercising.  Two  diet  protocols  recognized  by  many  people  are  low-fat  diet  and  low-carbohydrate  diet.  Several researchs showed that positive effects exerted by the low-carbohydrate diet are mediated by ketone bodies in blood. In addition to alternative energy source, ketone also acts as signal molecule that can affect cell metabolism and behavior. Virgin  coconut  oil  is  a  natural  source  of  medium  chain  fatty  acids  which  high  in  quantity  and  quality  that  could  be absorbed through the small intestine and metabolized by the liver directly and easily to produce ketone bodies. Objectives: This research was conducted to investigate the effect of virgin coconut oil supplementation on blood ketone level, blood glucose level, food intake, visceral mass and body weight . in high-fat sucrose diet induced obesity model. Methods:  A total of 32 male wistar rats which had been induced to become obesity (Lee’s index > 0,300) through high- fat  sucrose  diet  induced  for  20  weeks  divided  into  four  groups.  Group  (A)  for  distilled  water,  Group  (S)  for  sucrose solution, group (VCO) for virgin coconut oil, and Group (CO) for corn oil. All of those treatment was provided orally for four weeks before every meal in the dark cycle.
Results: The results indicated that there was no significant difference observed in blood glucose, food intake, visceral mass  and  body  weight  between  groups.  However,  this  research  indicated  that  giving  virgin  coconut  oil  orally preprandially increased ketone level and decreased food intake significantly (p=0,023 and p=0,000, respectively). These results showed that virgin coconut oil supplementation could decrease food intake in subsequent mea compared to other substances.
Conclusion: Virgin coconut oil supplementation could increase blood ketone level and suppress food intake in high-fat sucrose induced obese rats. But it’s effect in suppressing food intake was unlikely mediated by ketone levels.
Keywords: Virgin coconut oil; medium chain fatty acids; ketone bodies; food intake; obesity

## ABSTRAK
Latar  Belakang:  Untuk  mengatasi  masalah  obesitas  ada  banyak program  modifikasi  gaya  hidup  melalui  pengaturan pola makan dan peningkatan aktivitas fisik. Di antara program diet dikenal diet rendah lemak serta derivatnya dan diet rendah  karbohidrat.  Beberapa  penelitian  menunjukkan  bahwa  efek  positif  diet  rendah  karbohidrat  sebagian  besar diperantarai oleh keton dalam darah. Selain dapat berfungsi sebagai sumber energi alternatif yang efisien, keton dapat berperan  juga  sebagai  molekul  sinyal  yang  dapat  mempengaruhi  metabolisme  sel  dan  perilaku.  Virgin  Coconut  Oil (VCO) adalah sumber asam lemak rantai sedang alamiah dengan kuantitas dan kualitas tinggi yang dapat diserap dan dimetabolisme di dalam liver dengan mudah dan cepat menjadi keton
Tujuan: Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui efek suplementasi virgin coconut oil terhadap kadar glukosa darah, keton darah, asupan makanan, massa lemak viseral dan berat badan pada model obesitas yang diinduksi melalui diet tinggi lemak-sukrosa.
Metode: Tiga puluh dua subyek tikus wistar jantan yang sebelumnya sudah dibuat obesitas (indeks Lee >0,300) melalui diet tinggi lemak-sukrosa selama 20 minggu dibagi ke dalam empat kelompok. Kelompok (A) mendapat akuades per oral, kelompok  (S)  mendapat  larutan  sukrosa  per  oral,  kelompok  (VCO)  mendapat  VCO  per  oral,  dan  kelompok  (CO) mendapat minyak jagung per oral selama 4 minggu, diberikan sebelum makan pada siklus malam tikus.
Hasil: Hasil penelitian menunjukkan tidak  ada perbedaan bermakna pada kadar glukosa darah, massa lemak viseral dan  berat  badan  antar  kelompok  subyek.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  pemberian  virgin  coconut  oil  dapat meningkatkan  kadar  keton  darah  dan  menurunkan  asupan  makanan  (p=0,023  dan  p=0,000) dibandingkan  dengan kelompok perlakuan lain .
Simpulan:  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa  suplementasi  VCO  sebelum  makan  dapat  meningkatkan  kadar  keton darah dan menekan asupan makanan tikus obesitas yang diinduksi diet tinggi lemak-sukros. Namun, penurunan asupan makanan tampaknya tidak dipengaruhi oleh kadar keton dalam darah.
Kata kunci: Virgin coconut oil; asam lemak rantai sedang; badan keton; asupan makanan; obesitas
Submitted : 28 Oktober 2019 Accepted : 24 Maret 2020 Volume 9, Nomor 1, Tahun 2020, Halaman 20-30 Online di : http://ejournal3.undip.ac.id/index.php/jnc/

## J OURNAL OF N UTRITION C OLLEGE

## PENDAHULUAN
Seiring  dengan  bertambah  panjangnya  usia harapan  hidup  manusia,  semakin  meningkat  pula populasi lanjut usia di bumi. Bertambahnya populasi orang  berusia  lanjut  membawa  dampak  negatif tertentu  bagi  dunia  kesehatan.  Semakin  renta  usia seseorang, semakin tinggi pula risiko untuk menderita penyakit  kronik.  Ini  berarti  bahwa  semakin  banyak orang berusia lanjut, semakin banyak pula penyakit- penyakit  kronik  dijumpai  di  masyarakat.  Rata-rata ada  sekitar  sembilan  tahun  hidup  seseorang  berada dalam  kondisi  sakit.  Data Survey  in  Europe  on Nutrition  and  the  Elderly (SENECA)  menyebutkan bahwa  68%  pria  dan  78%  wanita  usia  75-80  tahun sedikitnya  menderita  satu  macam  penyakit  kronik. 1 Penyakit  kronik  ( Non-Communicable  Diseases, NCD)  adalah  penyumbang  angka  morbiditas  dan mortalitas  tertinggi  di  abad  ke-21,  mengalahkan angka morbiditas dan mortalitas oleh sebab penyakit menular ( communicable diseases ). Penyakit-penyakit kronik tersebut di antaranya adalah penyakit jantung, hipertensi  sistemik, stroke , diabetes  mellitus tipe  2, dan penyakit ginjal kronik.
Peningkatan NCD tidak semata disebabkan oleh meningkatnya populasi lansia tetapi juga oleh faktor lain. Penyakit-penyakit kronik degeneratif atau NCD hampir  tidak  pernah  ditemukan  pada  beberapa masyarakat tradisional atau primitif yang masih hidup sebagai pemburu-pengumpul ( hunters and gatherers ).  Populasi  lansia  pada  masyarakat  seperti itu  relatif  bebas  dari  penyakit-penyakit  seperti hipertensi, diabetes mellitus tipe 2, stroke dan kanker. Dari  fakta  itu  dapat  ditarik  sebuah  kesimpulan sederhana  bahwa  proses  penuaan per  se bukanlah kontributor  penting  bagi  munculnya  penyakit- penyakit  degeneratif.  Ada faktor lain  yang  berperan dominan  di  sana.  Salah  satu  yang  kini  menjadi perhatian banyak ilmuwan adalah obesitas.
Pada  tahun  2010,  WHO  telah  mendeklarasikan bahwa  obesitas  termasuk  salah  satu  dari  10  faktor risiko mayor penyakit kronik. Dalam kurun waktu 30- 40  tahun  terakhir,  obesitas  telah  menjadi  epidemi global. Insiden dan prevalensi obesitas meningkat di seluruh  dunia.    Hasil  analisis  terhadap  199  negara menyebutkan  ada  1,46  milyar  orang  dewasa menderita overweight di  dunia  dan  502  juta  di antaranya  menderita  obesitas 2 .  Di  samping  itu, minimal terdapat 20 juta anak-anak berusia di bawah 5 tahun yang tergolong obesitas pada tahun 2005. Jika tren  pertumbuhan  penduduk  obesitas  ini  terus berlangsung seperti laju saat ini, maka diproyeksikan angka overweight global akan meningkat menjadi 2,3 milyar  dan  setidaknya  700  juta  di  antaranya menderita obesitas.
Pada  tahun  2010, overweight dan  obesitas diprediksi menyebabkan 3,4 juta kematian, 3,9% year
of  life  lost ,  dan  3,8% disability-adjusted  life  year (DALY) di dunia. 3 WHO melaporkan bahwa obesitas derajat tiga atau morbid obesity meningkatkan risiko kematian  sampai  dua  belas  kali  lipat  pada  individu berusia  25-35  tahun.  Pada  anak-anak,  obesitas menaikkan  risiko  kematian  sampai  dua  kali  lipat. Obesitas  menyebabkan  kematian  secara  tidak langsung melalui peningkatan risiko penyakit kronik, di  antaranya diabetes  mellitus tipe  2  (DMT2), penyakit kardiovaskuler, hipertensi, stroke , penyakit kandung  empedu,  osteoartritis, sleep  apnea/obesity hypoventilation  syndrome ,  kanker, non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD), metabolic syndrome dan abnormalitas  reproduktif.  Akibat  penyakit-penyakit tersebut, penderita obesitas rata-rata berusia 6-7 tahun lebih  pendek  daripada  orang  dengan  berat  badan ideal. 2,4
Besarnya  risiko  NCD  pada  penderita  obesitas menjadi  alasan  yang  kuat  bagi  banyak  program penurunan berat badan. Beberapa di antaranya adalah diet  rendah  lemak  ( low  fat  diet ,  LFD)  yang direkomendasikan oleh United States Department of Agriculture (USDA) serta derivatnya dan diet rendah karbohidrat  ( low  carbohydrate  diet ,  LCD).  Diet rendah karbohidrat semakin populer dalam beberapa tahun  terakhir  karena  mampu  menurunkan  berat badan lebih banyak dibandingkan diet rendah lemak. Beberapa penelitian menunjukkan bahwa efek positif diet  rendah  karbohidrat  sebagian  besar  diperantarai oleh keton dalam darah. Keton, selain dapat berfungsi sebagai  sumber  energi  alternatif  yang  efisien,  dapat berperan  juga  sebagai  molekul  sinyal. 5,6 Terdapat beberapa  macam  suplemen  keton  eksogen  yang secara  garis  besar  dapat  dibagi  menjadi  dua  macam berdasar  sumbernya,  sumplemen  keton  alami  dan sintetik. Medium  chain  triglycerides (MCT)  dan garam  keton  termasuk  suplemen  keton  alami sedangkan  keton  ester  (KE)  adalah  jenis  suplemen keton  sintetik.  Beberapa  studi  membuktikan  bahwa pemberian MCT juga terbukti mampu menekan nafsu makan  dan  meningkatkan energy  expenditure (EE). Efek penekanan nafsu makan tampaknya diperantarai oleh  kadar  keton  dalam  darah  dan  efek  metabolik yang dihasilkannya. 7,8
Virgin  coconut  oil (VCO)  adalah  sumber Medium  Chain  Fatty  Acids (MCFA)  alami  dengan kuantitas dan kualitas yang tinggi. VCO berasal dari ekstraksi unrefined kernel  kelapa  ( Cocos  nucifera ) melalui  prosedur  alami  atau  mekanikal.  Selain kandungan  MCT  yang  tinggi,  VCO  mengandung beberapa antioksidan polifenolik seperti caffeic acid, ferulic acid, syringic acid, catechin dan epigallocatechin .  Senyawa  polifenolik  ini  terbukti memiliki efek antidiabetik, meningkatkan sensitivitas jaringan  terhadap  insulin,  menurunkan  lipogenesis, meningkatkan  laju  oksidasi  asam  lemak,  serta
memilki  feel  anti-inflamasi,  analgesik  dan  anti- piretik. 9 Selain  itu,  konsumsi  VCO  terbukti  juga memperbaiki  profil  lipid  tikus  wistar  diabetes. 10 Penelitian lain  menunjukkan  bahwa  konsumsi  VCO membantu  menurunkan  komposisi  lemak  visceral. 11 Penurunan  kadar  lemak  tubuh  ini  tampaknya disebabkan  oleh  berkurangnya  nafsu  makan. 12 Dengan tingginya konsumsi VCO sebagai suplemen diet,  terutama  diet  rendah  karbohidrat,  maka  perlu diteliti  apakah  pemberian  VCO  sebanyak  5  ml  per kilogram  berat  badan  selama  satu  bulan  dapat bermanfaat dalam memperbaiki parameter antropometrik  dan  metabolik,  terlebih  karena  VCO adalah  suplemen  yang  cukup  aman  dan  mudah didapatkan di masyarakat.

## METODE Desain Penelitian
Desain  penelitian  ini  adalah Randomized  Pre Test-Post  Test  Control  Group  Design .  Penelitian dilakukan  terhadap  tikus  yang  dibagi  dalam  empat kelompok  yang  semuanya  adalah  tikus  yang dikondisikan  obesitas  melalui  diet  tinggi  lemak  dan sukrosa.  Kelompok  perlakuan  ada  dua,  yaitu kelompok  yang diberikan VCO dan kelompok  yang diberikan minyak jagung. Kelompok kontrol ada dua, yaitu  kelompok  yang  mendapatkan  akuades  dan kelompok  yang  mendapatkan  larutan  sukrosa. Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium  Hewan Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya mulai bulan April 2018 sampai Januari 2019.

## Hewan Coba
Sampel dalam penelitian ini adalah tikus jantan strain  Wistar  ( Rattus  norvegicus ),  usia  3-4  bulan, berat  80-150  gram.  Jumlah  sampel  tikus  dihitung berdasarkan rumus Federer 13 , dan didapatkan bahwa jumlah minimal sampel per kelompok adalah 6 ekor tikus. Untuk mengantisipasi kemungkinan tikus sakit dan  mati,  maka  jumlah  sampel  ditambahkan  30% menjadi 8 ekor tikus per kelompok, atau total n=32. Semua tikus diletakkan di dalam kandang berukuran 40cm x 30cm x 25cm. Siklus siang dan malam diatur 12  jam:12  jam.  Sebelum  dikondisikan  obesitas, semua  tikus  diadaptasikan  selama  14  hari  dengan pakan  standar  tikus  wistar.  Semua  tikus  dibuat obesitas  melalui  diet  tinggi  lemak-sukrosa  dengan metode.

## Pembuatan Model Obesitas
Semua  kelompok  tikus  dibuat  obesitas  dengan diberikan  pakan  tinggi  lemak  (570  Kkal/100  gram) yang  terdiri  dari  60%  lemak,  32%  karbohidrat,  dan 8%  protein,  dan  air  gula  atau  sukrosa  dengan konsentrasi 30% (300gram/liter) selama 20 minggu. Pemberian  makanan  dilakukan  secara ad  libitum . Berat  badan  tikus  ditimbang  setiap  minggu  dan panjang  naso-anal  diukur  di  akhir  minggu  ke-20. Tikus disebut mengalami obesitas jika indeks Lee > 0,300. 14 Formula indeks Lee adalah sebagai berikut:
∛{ Berat badan (g) } panjang badan (cm)

## Pemberian Perlakuan
Semua tikus yang memiliki indeks Lee >0,300 akan dimasukkan  sebagai  sampel  penelitian  dan  dibagi secara  random  ke  dalam  empat  kelompok  berbeda, kelompok  VCO  (VCO),  kelompok  minyak  jagung (CO), larutan sukrosa (S) dan kelompok akuades (A). Semua  perlakuan  diberikan  secara  per  oral menggunakan  sonde  dengan  dosis  5  ml/kg  berat badan untuk VCO, 5ml/kg berat badan untuk CO, 3,8 ml/kg  berat  badan  untuk  S  dan  5ml/kg  berat  badan untuk akuades. Semua perlakauan diberikan satu kali dalam sehari selama empat minggu. 7
Pengukuran  Glukosa  Darah,  Keton  Darah, Asupan  Makanan,  Lemak  Viseral  dan  Berat Badan
Di  hari  awal  sebelum  perlakuan  dan  di  hari terakhir  pemberian  perlakuan,  pada  semua  tikus dilakukan penimbangan baik panjang badan maupun berat  badan  menggunakan  timbangan  digital, kemudian  dipuasakan  selama  10-12  jam.  Selama puasa  disediakan  air  minum  di  masing-masing kandang.  Setelah  itu  diberikan  perlakuan  sesuai masing-masing  kelompok.  Makanan  diberikan  satu jam  setelah  perlakuan.  Pada  jam  keempat  setelah perlakuan, diukur kadar keton dan glukosa darah pada darah  vena  dorsalis  ekor  tikus  melalui  kanula. Pengukuran kadar glukosa dan keton darah dilakukan menggunakan  alat  ukur  glukosa  dan  keton  darah portable merk Optium Freestyle . Darah diambil dari ekor  tikus.  Selanjutnya  tikus  dikorbankan  dengan cara dilakukan dislokasi vertebra servikal, kemudian dilakukan  pembedahan  dan  penimbangan  massa lemak  retroperitoneal dan lemak  epididimal.  Lemak retroperitoneal  dan  epididimal  pada  tikus  adalah respresentasi dari lemak viseral. 15
B er at B ada n (g ) Indek s Lee 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 Awal Akhir ambang obesitas p= 0,000
Gambar 1. Bagan alur waktu pemberian perlakuan dan pengukuran kadar glukosa dan keton darah tikus percobaan
Untuk mengetahui efek peningkatan kadar keton dalam  darah  terhadap  nafsu  makan,  maka  makanan diberikan pada saat kadar keton di dalam darah mulai meningkat.  Karena,  menurut  hasil  penelitian sebelumnya  yang  dilakukan  oleh  Kesl et  al tentang suplementasi keton eksogen, kadar keton darah mulai meningkat setelah satu jam perlakuan dan mencapai puncak setelah empat jam, 7 maka makanan diberikan satu jam setelah tikus diberikan perlakuan.

## Analisis Data
Semua  data  hasil  pengukuran  disajikan  dalam tabel dan dianalisis menggunakan Statistical Package for Social Sciences (SPSS) ver. 17.

## HASIL Karakteristik Fisik Tikus Jantan Wistar
Semua tikus diberi makan dan minum secara ad libitum .  Untuk  membuat  model  obesitas,  pada  hari ke-15  semua  tikus  diberi  makan  tinggi  lemak- sukrosa.  Berat  badan  dan  panjang  naso-anal  tikus diukur  kembali  di  akhir  minggu  ke-20.  Data karakteristik  disajikan  pada  Tabel  1  di  bawah  ini.
Berat badan awal adalah berat badan di hari pertama setelah fase adaptasi selama 14 hari, sedangkan berat badan  akhir  adalah  berat  badan  di  hari  pertama setelah proses pembuatan menjadi obesitas.
Di  akhir  massa  penggemukan,  yaitu  pada  hari terakhir minggu ke-20, 28 ekor tikus memiliki berat badan dan Indeks Lee rata-rata awal dan akhir. Empat ekor tikus tidak berhasil mencapai indeks Lee >0,300 dan  oleh  sebab  itu  dieksklusikan  dari  kelompok. Ambang  batas  obesitas  ini  sesuai  dengan  hasil  riset Novelli et  al (2007). 16 Berdasarkan  uji  T-tes berpasangan  untuk  berat  badan  didapatkan  bahwa terdapat perbedaan bermakna antara berat badan awal sebelum  dibuat  obesitas  dan  akhir,  setelah  dibuat obesitas  ( p= 0,000),  sedangkan  untuk  indeks  Lee dilakukan  uji  Wilcoxon,  karena  data  tidak berdistribusi  normal  dan  didapatkan  nilai p =0,000. Gambar  1  dan  Gambar  2  memberikan  gambaran tentang  perbandingan  berat  badan  dan  indeks  Lee tikus  di  awal  dan  akhir  pembuatan  obesitas. Tikus yang mengalami obesitas dibagi secara acak ke dalam empat kelompok, yaitu kelompok VCO, CO, S dan A.
Tabel 1. Rata-rata Karakteristik Fisik Tikus Wistar di Awal dan Akhir Pengkondisian Obesitas
Parameter Mean ± SD Awal Akhir Nilai p Berat badan (g) Panjang Naso-anal (cm) Indeks Lee 112,59 ± 20,63 19,49 ± 1,40 0,246 ± 0,018 258,72 ± 59,92 20,143 ± 1,42 0,314 ± 0,017 0,000 a 0,000 a
0,000 b Keterangan : Awal : 1 hari setelah masa adaptasi selama 2 minggu; Akhir : Pada hari pertama sebelum diberi perlakuan; a : nilai p berdasarkan uji T- tes berpasangan karena data berdistribusi normal; b : nilai p berdasarkan uji Wilcoxon karena data tidak berdistribusi normal
Gambar 2. Perbandingan Berat Badan pada TIkus Wistar Jantan Sebelum dan Sesudah Pembuatan
Model Obesitas (p=0,000) Gambar 3. Perbandingan Indeks Lee pada Tikus Wistar Jantan Sebelum dan Sesudah Pembuatan Model Obesitas (p=0,000)
0 50 100 150 200 250 300 Awal Akhir p= 0,000
Pemberian makanan ad libitum
Pengukuran glukosa dan keton darah Pemberian perlakuan -12 0 4 1 Jam ke
Puasa 12 jam selama siklus siang
Journal of Nutrition College, Volume 9, Nomor 1, Tahun 2020 24

## Kadar Glukosa Darah
Pengukuran  glukosa  darah  dilakukan  di  awal sebelum  diberikan  perlakuan  dan  di  akhir  setelah diberikan  perlakuan  selama  4  minggu.  Pengukuran dilakukan  setelah  empat  jam  sejak  diberikan
makanan. Semua tikus dipuasakan selama 10-12 jam sebelum diberikan makanan. Data mengenai rata-rata kadar glukosa darah antar masing-masing kelompok dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Rata-rata Kadar Glukosa Darah Tikus Wistar Jantan Obesitas di Awal dan Akhir Perlakuan
No Kelompok Kadar Glukosa Darah (mg/dL) (mean ± SD) Awal Akhir 1 VCO 83,88 ± 12,61 85,25 ± 18,73 2 CO 100,33 ± 23,80 71,50 ± 20,09 3 S 100,50 ± 16,53 75,67 ± 11,40 * 4 A 101,00 ± 25,36 84,43 ± 13,37
VCO adalah kelompok tikus yang mendapat perlakuan pemberian VCO ( Virgin Coconut Oil 5ml), CO ( Corn Oil atau minyak jagung 5ml), S ( Sugar / larutan sukrosa 30%, 3,8ml) dan A (Akuades 5ml). * menunjukkan perbedaan bermakna ( p< 0,05) jika dibandingkan dengan kadar di awal perlakuan
Gambar 4. Perbandingan Kadar Glukosa Darah pada Awal Minggu ke-1 antar Kelompok Perlakuan.
Gambar 5. Perbandingan Kadar Glukosa Darah pada Akhir Minggu ke-4 antar Kelompok Perlakuan.
Gambar 6. Perubahan Kadar Glukosa Darah antara Awal Minggu ke-1 dan Akhir Minggu ke-4.
Dari  tabel  2  dan  grafik  rata-rata  kadar  glukosa darah antar kelompok di awal minggu ke-1 dan akhir minggu  ke-4  tidak  ditemukan  perbedaan  yang signifikan.

## Kadar Keton Darah
Hasil pengukuran kadar keton darah di awal sebelum dan  setelah  pemberian  perlakuan  dapat  dilihat  pada tabel 3. Kadar keton darah di akhir perlakuan dalam kelompok  tikus  yang  mendapatkan  VCO  dan  CO menunjukkan peningkatan yang signifikan ( p< 0.05)
Tabel 3. Rata-rata Kadar Keton Darah Tikus Wistar Jantan Obesitas di Akhir Perlakuan
No Kelompok Kadar Keton Darah (mmol/L) (mean ± SD) Awal Akhir 1 VCO 1,64 ± 0,80 2,73 ± 1,22 * 2 CO 1,78 ± 0,25 3,42 ± 1,00 * 3 S 1,10 ± 0,24 2,30 ± 0,49 4 A 1,73 ± 0,36 1,89 ± 0,50
VCO adalah kelompok tikus yang mendapat perlakuan pemberian VCO ( Virgin Coconut Oil 5ml), CO ( Corn Oil atau minyak jagung 5ml), S ( Sugar / larutan sukrosa 30%, 3,8ml) dan A (Akuades 5ml). * menunjukkan perbedaan bermakna ( p< 0,05) jika dibandingkan dengan kadar di awal perlakuan
K ad ar G lu k o sa D ar ah ( m g /d L) Jenis Perlakuan Jenis Perlakuan K ad ar G lu k o sa D ar ah ( m g /d L) 0 20 40 60 80 100 120 Awal Akhir VCO CO
S A K ad ar G lu k o sa D ar ah ( m g /d L)
Gambar 7. Perbandingan Kadar Keton Darah pada Awal Minggu ke-1 antar Kelompok Perlakuan.
Gambar 8. Perbandingan Kadar Keton Darah pada Akhir Minggu ke-4 antar Kelompok Perlakuan.

## Gambar 9. Perubahan Kadar Keton Darah antara
Awal Minggu ke-1 dan Akhir Minggu ke-4.
Hasil pengukuran kadar keton yang disajikan di atas  menunjukkan  adanya  peningkatan  kadar  keton darah  setelah  4  minggu  perlakuan  pada  kelompok VCO dan CO ( p= 0,023 dan p= 0,046).

## Asupan Makanan
Dalam  penelitian  ini  asupan  makanan  diukur berdasarkan  selisih  antara  makanan  pertama  kali diberikan  dengan  sisa  makanan  yang  diukur  pada akhir jam ke empat. Pengukuran dilakukan pada jam ke  empat  berdasarkan  fakta  hasil  penelitian  bahwa efek ketogenik suplemen keton eksogen, alam hal ini berupa VCO, mencapai maksimal pada jam ke empat dan menurun setelahnya. 7 Tabel dan grafik di bawah ini  menyajikan  data  selisih  berat  makanan  sebelum dan  sesudah  diberikan  perlakuan  antar  kelompok tikus
Tabel 4. Rata-rata Asupan Makanan Tikus Wistar Jantan Obesitas Setelah Empat Jam No Kelompok Asupan makanan (gram) (mean ± SD) Awal Akhir 1 VCO 1,95 ± 0,22 1,82 ± 0,17 2 CO 2,31 ± 0,71 3,71 ± 1,02 3 S 0,30 ± 0,07 5,04 ± 1,11 4 A 3,90 ±0,70 4,95 ± 0,76
VCO adalah kelompok tikus yang mendapat perlakuan pemberian VCO ( Virgin Coconut Oil 5ml), CO ( Corn Oil atau minyak jagung 5ml), S ( Sugar / larutan sukrosa 30%, 3,8ml) dan A (Akuades 5ml).
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 Awal Akhir VCO CO S A K ad ar K et o n D ar ah (m m o l/ L) Jenis Perlakuan K ad ar K et o n Dar ah (m m o l/ L) Jenis Perlakuan * * K ad ar K et o n D ar ah ( mm o l/ L)
Gambar 10. Perbandingan Asupan Makanan antar Kelompok Perlakuan di (A) Awal minggu ke-1 dan (B) akhir Minggu ke-4.
Hasil  pengukuran  asupan  makanan  yang disajikan  pada  tabel    dan  gambar    di  atas menunjukkan bahwa asupan makanan pada kelompok  (S)  di  awal  minggu  ke-1  lebih  rendah dibandingkan  kelompok  lain  ( p =0,000),  namun  di akhir  minggu  ke-4,  kelompok  (VCO)  di  minggu  ke empat  lebih  rendah  dibandingkan  pada  ketiga kelompok  lainnya,  yaitu  CO,  S  dan  A  ( p= 0,000). Pada  gambar  10  dapat  dilihat  bahwa  terjadi perubahan  asupan  makanan  yang  siginfikan  pada semua  kelompok,  namun  hanya  kelompok  (VCO) yang  menunjukkan  penurunan  meskipun  kecil ( p= 0,004), sedangkan kelompok lainnya meningkat. Peningkatan asupan makanan paling besar didapatkan pada kelopok (S).

## Lemak Viseral
Hasil  pengukuran  lemak  viseral  di  akhir penelitian  dapat  dilihat  pada  tabel  5  dan  gambar  6. Lemak viseral adalah hasil penjumlahan antara lemak retroperitoneal dan lemak di sekitar epididimis.

## Tabel 5. Rata-rata Massa Lemak Viseral Tikus Wistar
Obesitas di Akhir Perlakuan
No Kelompok Massa Lemak Viseral (gram) (mean ± SD) 1 VCO 2,40 ± 0,76 2 CO 2,77 ± 0,59 3 S 2,52 ± 1,14 4 A 2,54 ± 0,49
VCO adalah kelompok tikus yang mendapat perlakuan pemberian VCO ( Virgin  Coconut  Oil 5ml),  CO  ( Corn  Oil atau  minyak  jagung  5ml),  S ( Sugar /larutan sukrosa 30%, 3,8ml) dan A (Akuades 5ml).

## Gambar 12. Perbandingan Massa Lemak Viseral antar Kelompok Perlakuan.
Dari hasil pengukuran yang dalam penelitian ini didapatkan  bahwa  massa  lemak  viseral  total,  yaitu penjumlahan antara massa lemak retroperitoneal dan massa  lemak  epididimis  tidak  berbeda  bermakna antar kelompok perlakuan dan kontrol ( p = 0,767).

## Berat Badan
Hasil pengukuran berat badan di akhir penelitian dapat dilihat pada tabel 6 dan gambar 7 di bawah ini.
Tabel 6. Rata-rata Berat Badan Tikus Wistar Obesitas Per Minggu Antar Kelompok
Berat badan (g) VCO (mean ± SD) CO (mean ± SD) S (mean ± SD) A (mean ± SD) Minggu 1 248,13 ± 32,34 305,00 ± 85,19 231,44 ± 63,00 267,13 ± 27,06 Minggu 2 254,75 ± 34,07 301,86 ± 83,17 236,22 ± 57,82 267,88 ± 32,96 Minggu 3 253,38 ± 27,08 307,86 ± 82,62 242,56 ± 53,39 270,38 ± 32,08 Minggu 4 258,25 ± 22,53 296,29 ± 79,10 240,56 ± 49,53 266,25 ± 37,69
VCO  adalah  kelompok  tikus  yang  mendapat  perlakuan  pemberian  VCO  ( Virgin  Coconut  Oil 5ml),  CO  ( Corn  Oil atau  minyak  jagung  5ml),  S ( Sugar /larutan sukrosa 30%, 3,8ml) dan A (Akuades 5ml).
* * M ass a L ema k V iser al (g ram) Jenis Perlakuan A su p an ma k an an ( g ra m) Jenis Perlakuan A Jenis Perlakuan A su p an ma k an an ( g ra m) B
Gambar 13. Perbandingan Berat Badan per Minggu antar Kelompok Perlakuan.

## PEMBAHASAN
Pembuatan  tikus  obesitas  melalui  diet  tinggi lemak-sukrosa  menjadi  metode  pembuatan  model obesitas  dalam  penelitian  ini  sebab  merefleksikan pola  diet  manusia  saat  ini.    Selain  itu,  diet  tinggi lemak-sukrosa telah terbukti di penelitian sebelumnya  dapat  meningkatkan  massa  lemak  yang berakibat  pada  obesitas,  terutama  jika  sukrosa diberikan dalam bentuk cairan daripada dalam bentuk makanan padat. 17,18 Dari hasil penelitian ini memang didapatkan  bahwa  berat  badan  tikus  meningkat signifikan  dalam  waktu  20  minggu.  Tikus  disebut mengalami  obesitas  jika  melebihi  indikator  obesitas berdasar indeks Lee, yaitu akar pangkat tiga dari berat badan  (g)  dibagi  dengan  panjang  naso-anal  (cm) mencapai lebih dari 0,300. 14,16
Pemberian suplementasi virgin coconut oil tidak terbukti  mampu  menurunkan  kadar  glukosa  darah lebih  rendah  daripada  kelompok  akuades,  larutan sukrosa  dan  minyak  jagung,  baik  pada  saat  awal pemberian,  maupun  di  akhir  penelitian  dengan harapan  telah  terjadi  adaptasi  tubuh  terhadap metabolisme asam lemak rantai sedang seperti pada penelitian  sebelumnya 7 .  Adanya  kecenderungan kadar  glukosa  darah  yang  tinggi  pada  saat  awal perlakuan  di  semua  kelompok  tikus  kemungkinan disebabkan  oleh  efek carry  over yang  terjadi  pada proses penggemukan dengan asupan larutan sukrosa 30%. Setelah asupan larutan sukrosa dihentikan, tikus kembali  beradaptasi  dengan  diet  tinggi  lemak.  Diet tinggi  lemak  dan  rendah  karbohidrat/glukosa memang  terbukti  bisa  menurunkan  kadar  glukosa darah  pada  tikus  sebab  metabolisme  hewan  coba menjadi bersifat adipogenik dan bukan glukogenik. 19 Artinya,  hewan  coba  lebih  mengandalkan  sumber energi  dalam  bentuk  keton  hasil  pemecahan  lemak daripada  glukosa.  Hasil  pengukuran  keton  darah  di bawah  ini  mendukung  pernyataan  ini.  Pemberian virgin coconut oil tidak terbukti mampu menurunkan kadar  glukosa  darah  pada  tikus  percobaan  di penelitian  ini.  Tampaknya  efek  hipoglikemik virgin
coconut  oil tidak  mampu  menekan  kadar  glukosa darah  jika  kadar  glukosa  darah  hewan  percobaan berada dalam batas normal.
Pemberian suplemen minyak virgin coconut oil dan minyak jagung dapat meningkatkan kadar keton darah  pada  tikus  wistar  jantan  obesitas  setelah  4 minggu  ( p= 0,023).  Peningkatan  kadar  keton  tidak ditemukan pada awal perlakuan tapi muncul di akhir minggu  ke-4.  Metabolisme  adipogenik  memerlukan proses adaptasi terutama setelah proses penggemukan menggunakan  larutan  sukrosa.  Asupan  sukrosa dengan  konsentrasi  tinggi  dapat  memicu  sekresi insulin yang menekan proses lipolisis dan ketogenesis. Setelah asupan sukrosa tinggi dihentikan,  terjadi  adaptasi  terhadap  diet  tinggi lemak. Pemberian suplemen virgin coconut oil yang banyak  mengandung  asam  lemak  rantai  sedang ( Medium Chain Fatty Acids , MCFA) terutama asam lemak  laurat  (C12)  memang  dapat  meningkatkan kadar keton lebih jauh secara signifikan sebab MCFA relatif  lebih  mudah  dan  cepat  diabsorbsi  dan dimetabolisme oleh liver menjadi keton. Keton darah adalah  indikator  adanya  peningkatan  katabolisme asam  lemak  oleh  liver  karena  peningkatan ketersediaannya  di  dalam  sirkulasi  darah. 7 Namun, apakah peningkatan ini murni disebabkan oleh kadar MCFA atau disebabkan oleh kandungan  asam lemak yang  lain  masih  belum  diketahui  pasti  mengingat minyak  jagung  pun  mampu  meningkatkan  kadar keton  darah  ( p= 0,008),  padahal  kadar  asam  lemak rantai  sedang  lebih  sedikit  dibandingkan  dengan kadarnya di dalam virgin coconut oil . Minyak jagung mengandung lebih banyak linoleic acid (C18:2) dan oleic acid (C18:1) yang tergolong minyak tidak jenuh poli  dan  mono.  Minyak  jagung  hanya  sedikit  sekali mengandung  MCFA,  yaitu  kurang  dari  1%, sedangkan  VCO  mengandung  MCFA  hampir 60%. 11,20
Selama  proses  pembuatan  obesitas  melalui induksi diet tinggi lemak-sukrosa, metabolisme tikus cenderung  glukogenik.  Asupan  makanan  tinggi sukrosa yang diberikan lewat minuman menyebabkan tubuh  lebih  cenderung  memanfaatkan  glukosa sebagai sumber  energi  utama.  Asupan  sukrosa  yang tinggi  juga  menyebabkan  kadar  insulin  darah  yang tinggi  dan  pada  akhirnya  mencegah  proses  lipolisis serta  oksidasi  asam  lemak. 21 Hal  ini  menjelaskan mengapa  pemberian  larutan  sukrosa  pada  awal minggu ke-1 dapat menekan nafsu makan tikus lebih baik  dibandingkan  ketiga  kelompok  pelakuan  lain ( p= 0,000). Ketika larutan sukrosa tidak diberikan lagi selama  perlakuan,  metabolisme  tikus  menjadi  lebih bersifat  adipogenik  karena  diet  tinggi  lemak  yang mereka  makan.  Penurunan  kadar  insulin  akan melepaskan  hambatan  oksidasi  asam  lemak  dan menyebabkan metabolisme tikus cenderung
0 50 100 150 200 250 300 350 Minggu 1 Minggu 2 Minggu 3 Minggu 4 VCO CO S A B er at B ad an T ik u s ( g ra m)
Journal of Nutrition College, Volume 9, Nomor 1, Tahun 2020 28
adipogenik.  Tikus  memanfaatkan  asam  lemak sebagai sumber energi utama. Dalam kondisi seperti ini,  pemberian  larutan  sukrosa  tidak  dapat  menekan nafsu  makan  dan  justru  meningkatkan  nafsu  makan sebab peningkatan sekresi insulin yang diinduksi oleh asupan  sukrosa  justru  mencegah  pemanfaatan  asam lemak sebagai sumber energi oleh sel.
Virgin coconut oil dapat menekan nafsu makan terbukti  dari  rendahnya  asupan  makanan  tikus dibandingkan  ketiga  kelompok  lain  pada  akhir minggu  ke-4  ( p= 0,000).  Penekanan  nafsu  makan pada  kelompok  (VCO) tampaknya  diperantarai  oleh kadar keton dalam darah sesuai dengan penjelasan di atas bahwa pemberian virgin coconut oil meningkatkan  kadar  keton  darah  tikus  secara signifikan.  Keton  memang  telah  diketahui  sebagai senyawa yang mampu menekan asupan makanan.
Suplemen  keton  eksogen  dalam  bentuk  keton diester  dapat  menekan  nafsu  makan  pada  beberapa eksperimen. 21,22 Namun efek penekanan nafsu makan ini  tidak  dijumpai  pada  kelompok  yang  diberikan minyak  jagung  (CO)  meskipun  pada  kelompok  ini juga ditemukan peningkatan kadar keton darah yang signifikan.  Peningkatan  kadar  keton pada  kelompok (CO)  mungkin  disebabkan  oleh  adaptasi  tikus terhadap  diet  tinggi  lemak  selama  perlakuan. Adaptasi  terhadap  diet  tinggi  lemak  memang  dapat meningkatkan  kadar  keton  dalam  darah  sebagai sumber  energi,  namun  peningkatan  kadar  keton  ini tidak cukup tinggi untuk dapat menekan nafsu makan serendah  kelompok  (VCO). 19 Dengan  demikian, peningkatan kadar keton saja tampaknya tidak cukup untuk menekan asupan makan.
Penurunan  asupan  makan  yang  terjadi  pada kelompok tikus (VCO) tampaknya lebih disebabkan oleh  peningkatan  oksidasi  MCFA  yang  terjadi  pada liver.  Berbeda  dengan  oksidasi  LCFA  ( Long  Chain Fatty  Acid ),  oksidasi  MCFA  tidak  memerlukan L- carnitine dan  katalisis  enzim  CPT-I  ( Carnitine Palmitoyltransferase- I)  untuk  dapat  menembus dinding  mitokondria  sebelah  dalam,  sehingga oksidasi  MCFA  lebih  mudah  dan  cepat  daripada LCFA. Dari data penelitian sebelumnya menyebutkan  bahwa  peningkatan  oksidasi  asam lemak  oleh  liver dan  enterosit  dapat  menekan  nafsu makan terlepas dari kadar keton di dalam darah. 24,25
MCFA tidak saja menyuplai liver dengan asam lemak yang mudah dan cepat dioksidasi dan meningkatkan kadar keton dalam darah sirkulasi, tapi juga memiliki efek biologis lain. Hasil penelitian mengindikasikan bahwa  asam  lemak  dekanoat,  termasuk  ke  dalam MCFA,  dapat  meningkatkan  aktivitas  enzim  sitrat sintase  dan  biogenesis  mitokondria 26,27 .  Dua  hal  ini dapat meningkatkan produksi energi dan laju oksidasi asam lemak. Semakin lama konsumsi asam dekanoat, semakin cepat laju oksidasi asam lemak terjadi. Hal
ini  menjelaskan  mengapa  efek  penekanan  asupan makanan  oleh virgin  coconut  oil menunjukkan adanya peningkatan setelah empat minggu ( p= 0,004).
Berdasarkan  penjelasan  di  atas  dapat  maka peningkatan  keton  darah  saja  tidak  cukup  untuk menekan  nafsu  makan  jika  tidak  diimbangi  dengan peningkatan  laju  oksidasi  asam  lemak  oleh  liver melalui peningkatan jumlah mitokondria. Jadi, virgin coconut  oil dapat  berperan  sebagai  sumber  MCFA alamiah  yang  dapat  dimanfaatkan  sebagai  sumber energi dengan cepat dan mudah oleh sel tubuh serta membantu  meningkatkan  laju  oksidasi  asam  lemak. Hal  ini  berakibat  pada  penurunan  asupan  makanan pada tikus selama diet tinggi lemak.
Hasil  penelitian  ini  bertentangan  dengan penelitian sebelumnya yang mengindikasikan bahwa konsumsi virgin coconut oil dapat menurunkan massa lemak  viseral. 11 Tidak  didapatkan  perbedaan bermakna  pada  massa  lemak  viseral  pada  semua kelompok  tikus  pada  penelitian  ini.  Demikian  juga dengan  parameter  berat  badan.  Tidak  adanya perubahan  berat  badan  pada  kelompok  (VCO) meskipun  asupan  makanan  pada  kelompok  ini menunjukkan  penurunan  asupan  makanan  yang signifikan  setelah  empat  jam  pertama  tampaknya disebabkan oleh peningkatan asupan makanan setelah efek virgin  coconut  oil telah  habis  mengingat pemberian virgin coconut oil hanya dilakukan sekali dalam  sehari.  Penelitian  sebelumnya  memang membuktikan bahwa pemberian MCT yang mengandung caprylic acid , termasuk ke dalam asam lemak  rantai  sedang  ( Medium  Chain  Fatty  Acid, MCFA mampu menekan asupan makan. 28 Kemungkinan  lain  adalah  penurunan  nafsu  makan dibarengi  dengan  penurunan basal  metabolic  rate (BMR)  dan non-exercise  activity  thermogenesis (NEAT).  Kondisi  ini  disebut  dengan adaptive thermogenesis , yaitu hambatan pada penurunan berat badan  oleh  sebab  efisiensi  metabolisme  energi tubuh. 29,30 Untuk mengkonfirmasi adanya kemungkinan  seperti  itu  perlu  dilakukan  penelitian lebih lanjut yang mengikutsertakan pengukuran suhu tubuh,  kadar  hormon  tiroksin,  dan  aktivitas  fisik spontan.

## SIMPULAN
Dari  hasil  penelitian  di  atas  dapat  disimpulkan bahwa  pemberian virgin  coconut  oil dapat meningkatkan kadar keton darah dan menekan nafsu makan  tikus  wistar  obesitas.  Penelitian  ini  tidak membuktikan  bahwa  penurunan  nafsu  makan diimbangi  oleh  penurunan  massa  lemak  viseral  dan berat  badan.  Diperlukan  penelitian  lebih  lanjut mengenai pemberian virgin coconut oil dengan dosis lebih  tinggi  dan  dengan  frekuensi  pemberian  yang
lebih sering agar efek penekanan nafsu makan dapat bertahan  lebih  lama  sehingga  terjadi  penurunan massa lemak viseral dan berat badan yang lebih nyata. Penelitian  lebih  jauh  juga  perlu  dilakukan  terhadap efek pemberian virgin coconut oil bagi ekspresi gen- gen  yang  terlibat  dalam  oksidasi  asam  lemak,  laju oksidasi  asam  lemak  di  dalam  hepatosit  dan jumlah mitokondria.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Stanner S, Thompson R, and Buttriss J. Healthy Ageing:  The  Role  Of  Nutrition  and  Lifestyle. UK: Wiley-Blackwell, 2009.
2. Lin  EA,  Barlow  GM,  and  Mathur  R.  The Clinician’s  Guide  to  the  Treatment  of  Obesity.
1 st rev.  ed.  Youdim  A,  Editor.  California:
Springer. 2015. 19-42 p.
3. The  GBD  2013  Obesity  Collaboration.  Global, Regional, and National Prevalence of
Overweight and Obesity in Children and Adults 1980-2013: A Systematic Analysis. The Lancet. 2013; 384(9945): 766-781.
4. Moore  BJ,  and  Pi-Sunyer  X.  Textbook  of Obesity: Biological, Psychological and Cultural Influences. 1 st rev. ed. Akabas S, Lederman SA, and  Moore  BJ,  Editors.  Singapore:  Wiley- Blackwell. 2012. 5-41 p.
5. Cox PJ, Kirk T, Ashmore T, Wilerton K, Evans R,  Smith  A,  Murray  AJ,  Stubbs  B,  West  J, McLure SW, King MT, Dodd MS, Holloway C, Neubauer  S,  Drawer  S,  Veech  RL,  Griffin  JL, and  Clarke  K.  Nutritional  ketosis  alters  fuels preference  and  thereby  endurance  performance in athletes. Cell Metabolism . 2016; 24: 1-13.
6. Puchalska  P  and  Crawford  PA.  Multi- dimensional  roles  of  ketone  bodies  in  fuel metabolism,  signaling,  and  therapeutics.  Cell Metabolism. 2017; 25: 262-284.
7. Kesl SL, Poff AM, Ward NP, Fiorelli TN, Ari C, Putten  AJV,  Sherwood  JW,  Arnold  P,  and D’Agostino  DP.  Effects  of  exogenous  ketone supplementation  on  blood  ketone,  glucose, triglyceride,  and  lipoprotein  levels  in  sprague- dawley  rats.  Nutrition  and  Metabolism . 2016; 13(9): 1-15.
8. Clegg  ME.  Medium-chain  triglycerides  are advantageous  in  promoting  weight  Loss although not beneficial to exercise performance. International  Journal  of  Food  Sciences  and Nutrition. 2010; 61(7): 653-679.
9. Narayanankutty  A,  Mukesh  RK,  Ayoob  SK,
Ramavarma  SK,  Suseela  IM,  Manalil  JJ, Kuzhivelil BT, and Raghavamenon AC. Virgin coconut oil maintains redox status and improves glycemic  conditions  in  high  fructose  fed  tats.
Journal of Food Science and Technology. 2016; 53(1): 895-901.
10. Akinnuga  AM,  Jeje  SO,  Bamidele  O,  and Sunday  VE.  Dietary  consumption  of  virgin coconut oil ameliorates lipid profiles in diabetic rats. Physiology Journal. 2014; 2014: 1-5.
11. Liau KM, Lee YY, Chen CK, and Rasool AHG. An  open-label  pilot  study  to  asses  the  efficacy and  safety  of  virgin  coconut  oil  in  reducing visceral  adiposity.  International  Scholarly Research  Network  Pharmacology.  2011;  2011: 1-7 12. Valente FX, Cândido FG, Lopes LL, Dias DM, Carvalho  SMDL,  Pereira  PF,  and  Bressan  J. Effects  of  coconut  oil  consumption  on  energy metabolism,  cardiometabolic  risk  markers,  and appetitive responses in women with excess body fat. European Journal of Nutrition. 2017; 57(4): 1627-1637.
13. Ihwah A, Deoranto P, Wijana S, and Dewi IA. Comparative  study  between  federer and  gomez method  for  number  of  replication  in  complete randomized  design  using  simulation:  study  of areca palm ( areca catechu ) as organic waste for producing  handicraft  paper.  IOP  Conf.  Series: Earth and Environmental Science. 2018; 131: 1- 6.
14. Damasceno DC, Sinzato YK, Bueno A, Dallaqua B,  Lima  PH,  Calderon  IMP,  Rudge  MVC,  and Campos KE. Metabolix profile and genotoxicity in  obese  rats  exposed  to  cigarette  smoke. Obesit y . 2013; 21: 1596-1601.
15. Chusyd DE, Wang D, Huffman DM, and Nagy TR. Relationship between rodent white adipose fat  pads  and  human  white  adipose  fat  depots. Frontiers in Nutrition. 2016; 3(10): 1-12.
16. Novelli  ELB,  Diniz  YS,  Galhardi  CM,  Ebaid GMX, Rodrigues HG, Mani F, Fernandes A AH,
Cicogna AC, and Filho JLVBN.
Anthropometrical  parameters  and  markers  of obesity  in  rats.  Laboratory  Animals.  2007;  41: 111-119.
17. Rasool S, Geetha T, Broderick TL, and Babu JR. High fat with high sucrose diet leads to obesity and  induces  myodegeneration.  Frontiers  in Physiology. 2018; 9(1054): 1-10.
18. Togo J, Hu S, Li M, Niu C, and Speakman JR. Impact  of  dietary  sucrose  on  adiposity  and glucose  homeostasis  in  c57bl/6j  mice  depends on mode of ingestion: liquid or solid. Molecular Metabolism. 2019; 27: 22-32 19. Bielohuby M, Menhofer D, Kirchner H, Stoehr BJ, Müller TD, Stock P, Hempel M, Stemmer K, Pfluger  PT,  Kienzle  E,  Christ  B,  Tschöp  MH, and Bidlingmaier M. Induction of ketosis in rats fed low-carbohydrate, high-fat diets depends on
Journal of Nutrition College, Volume 9, Nomor 1, Tahun 2020 30
the relative abundance of dietary fat and protein. American Journal of Physiology, Endocrinology and Metabolism. 2011; 300(1): 65-76.
20. Maki KC, Lawless AL, Kelley KM, Kaden VN, Geiger CJ, and Dicklin MR. Corn  oil improves the  plasma  lipoprotein  lipid  profile  compared with  extra-virgin  olive  oil  consumption in  men and  women  with  elevated  cholesterol:  result from  randomized  controlled  feeding  trial. Journal of  Clinical Lipidology. 2015; 9: 49-57. 21. Botham  KM  and  Mayes,  PA.  Harper’s Illustrated  Biochemistry.  30 th rev.  ed.  Murray RK,  Granner  DK,  and  Rodwell  VW,  Editors. Boston: McGraw-Hill. 2015. 223-231p. 22. Kashiwaya Y, Pawlosky R, Markis W, King MT, Bergman C, Srivastava S, Murray A, Clarke K, and  Veech  RL.  A  ketone  ester  diet  increases brain malonyl-coa and uncoupling proteins 4 and 5  while  decreaseing  food  intake  in  the  normal wistar rat. The Journal of Biological Chemistry. 2010; 285(34): 25950-25956.
23. Stubbs BJ, Cox PJ, Evans RD, Santer P, Miller JJ,  Faull  OK,  Magor-Elliott  S,  Hiyama  S, Stirling M and Clarke K. On The metabolism of exogenous  ketones  in  human.  Frontiers  in Physiology. 2017; 8: 848.
24. Carreiro  AL,  Dhillon  J,  Gordon  S,  Jacobs  AG, Higgins KA, McArthur BM, Redan BW, Rivera RL,  Schimdt  LR  and  Mattes  RD.  The macronutrients,  appetite  and  energy  intake.
Annu Rev Nutr. 2016; 36: 73-103.
25. Azari EK, Leitner C, Jaggi T, Langhans W, and Mansouri A. Possible role of intestinal fatty acid
oxidation  in  the  eating-inhibitory  effect  of  the PPAR-  agonist Wy-14643 in high-fat diet fed rats. PLos One. 2013; 8(9): 1-12.
26. Hughes  SD,  Kanabus  M,  Anderson  G, Hargreaves  IP,  Rutherford  T,  O’Donnell  M, Cross  JH,  Rahman  S,  Eaton  S,  and  Heales  SJ. The  ketogenic  diet  component  decanoic  acid increases  mitochondrial  citrate  synthase  and complex  i  activity  in  neuronal  cells. Journal  of Neurochemistry. 2014; 129(3): 426-433. 27. Agustin  K,  Khabbush  A,  Williams  S,  Eaton  S, Orford  M,  Cross  JH,  Heales  SJR,  Walker  MC, and Williams RSB. Mechanism of action for the medium-chain  triglyceride  ketogenic  diet  in neurological  and  metabolic  disorders.  The Lancet Neurology. 2018; 17(1): 84-93. 28. Maher  T,  Sampson  A,  Goslawska  M,  Pangua- Irigaray C, Shafat A, and Clegg ME. Food intake and  satiety  response  after  medium-chain triglycerides  ingested  as  solid  or  liquid. Nutrients. 2019; 11(1638): 1-11.
29. Byrne NM, Sainsbury A, King NA, Hills AP and Wood  RE.  Intermittent  energy  restriction improves  weight  loss  efficiency  in  obese  men: the  MATADOR  study.  International Journal  of Obesity. 2018; 42(2): 129-138.
30. Blomain  ES,  Dirhan  DA,  Valentino  MA,  Kim GW,  and  Waldman  SA.  Mechanism  of  weight regain  following  weight  loss.  ISRN  Obesity. 2013; 2013:210524.