## AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DARI BUAH MANGROVE
( Rhizophora mucronata Lamk.) PADA SUHU YANG BERBEDA

## Antioxidant Activity of Mangrove (Rhizophora mucronata Lamk.) Fruits at Diff erent Temperatures
Sri Purwaningsih, Ella Salamah, Aditya Yudha Prawira Sukarno*, Eka Deskawati
Departemen Teknologi Hasil Perairan
Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor, Kampus IPB Dramaga Jl. Agatis, Bogor 16680 Jawa Barat. Telp. (0251) 8622909-8622907, Fax (0251) 8622907 *Korespondensi: e-mail: yudhaditya49@gmail.com Diterima 8 November 2013/Disetujui 21 Januari 2014

## Abstract
Rhizophora mucronata Lamk. is a tropical mangrove plant which it’s fruit have been utilized as food and traditional medicine by local people live in coastal area. Th e purpose of this research were to determine phytochemical compound and to evaluate antioxidant activity of R. mucronat a fruit. Extraction was performed using diff erent evaporation temperature on (40, 50, 60, 70, and 80)oC. Fruit of R. mucronata Lamk. contained moisture, ash, fat, protein, and carbohydrate as follow (31,96; 1,10; 0,86; 2,59 and 63,50)%, respectively. Evaporation at 70oC gave the highest antioxidant activity with IC 50 was 0.72 ppm. Th e extract contained fl avonoids, tannins, hydroquinone, and saponin.
Keywords: antioxidant activity, IC 50 , phytochemical, Rhizophora mucronata Lamk.

## Abstrak
Rhizophora mucronata Lamk. merupakan tumbuhan mangrove di daerah tropis, dimana buahnya biasa digunakan sebagai bahan pangan dan obat tradisional oleh masyarakat yang hidup di pantai. Tujuan dari penelitian ini adalah menentukan senyawa fi tokimia, dan aktivitas antioksidan buah R. mucronata . Proses ekstraksi menggunakan perlakuan suhu evaporasi (40, 50, 60, 70, and 80)oC. Buah R. mucronata Lamk. mengandung kadar air, abu, lemak, protein, dan karbohidrat secara berturut-turut: (31,96; 1,10; 0,86; 2,59 and 63,50)%. Evaporasi pada suhu 70oC menghasilkan aktivitas antioksidan terbaik dengan nilai IC 50 sebesar 0,72 ppm. ekstrak tersebut mengandung fl avonoid, tanin, hidroquinon, dan saponin.
Kata kunci: aktivitas antioksidan, IC 50 , fi tokimia, Rhizophora mucronata Lamk.

## PENDAHULUAN
Radikal bebas dalam tubuh kita terbentuk melalui peristiwa metabolisme sel normal, peradangan, kekurangan gizi dan akibat respons terhadap pengaruh dari luar tubuh misalnya polusi lingkungan, sinar ultraviolet dan asap rokok. Lingkungan yang tercemar, kesalahan pola makan dan gaya hidup, mampu merangsang terbentuknya radikal bebas yang dapat merusak tubuh kita (Mega dan Swastini 2010). Radikal bebas merupakan salah satu penyebab timbulnya penyakit
degeneratif, antara lain kanker, aterosklerosis, stroke, rematik, dan jantung (Steinberg 2009; Pham-Huy et al. 2008; Th eroux dan Libby
2005; Souri et al. 2004).
Upaya untuk mencegah atau mengurangi resiko yang ditimbulkan oleh aktivitas radikal bebas adalah dengan mengkonsumsi makanan atau suplemen yang mengandung antioksidan. Antioksidan digolongkan dalam dua jenis berdasarkan sumbernya, yaitu antioksidan sintetik dan antioksidan alami. Contoh antioksidan sintetik yang sering digunakan
sumber alternatif antioksidan alami adalah buah bakau ( R. mucronata Lamk.) karena hasil penelitian sebelumnya menurut Priyanto (2012) buah bakau ini mempunyai aktivitas antioksidan yang sangat kuat, ada dalam jumlah banyak dan mudah didapat sepanjang pantai Indonesia, yang selama ini belum dimanfaatkan secara optimal.
Penelitian ini bertujuan mempelajari karakteristik fi sik, komposisi kimia, dan aktivitas antioksidan dari buah bakau ( R. mucronata Lamk.) yang diekstraksi pada  suhu yang berbeda dengan menggunakan pelarut etanol.

## BAHAN DAN METODE

## Bahan dan Alat
Bahan baku yang digunakan pada penelitian ini: buah bakau ( R. mucronata Lamk.) dari Pulau Seribu dalam bentuk segar. Bahan kimia untuk analisis proksimat meliputi: kjeltab jenis selenium, larutan H 2 SO 4 p.a. pekat, asam borat (H 3 BO 3 ) 4% yang mengandung indikator bromcherosol green-methyl red (1:2) berwarna merah muda, larutan HCl 0,0947 N, pelarut lemak (n-heksana p.a.), larutan HCl 10% dan larutan AgNO 3 0,10 N. Bahan untuk uji aktivitas antioksidan dan uji fi tokimia antara lain: kristal 1,1-diphenil-2-picryl hydrazil (DPPH), metanol p.a., vitamin C sebagai kontrol positif, pereaksi Wagner, pereaksi Meyer, pereaksi Dragendroff ,  kloroform, anhidrat asetat, asam sulfat pekat, serbuk magnesium, amil  alkohol, air panas, larutan HCl 2 N, etanol 70%, larutan FeCl 3 5%, peraksi Molisch, asam sulfat pekat, pereaksi Benedict, pereaksi Biuret, dan larutan ninhidrin 0,10%.
Alat-alat yang diperlukan dalam penelitian ini meliputi  alat untuk karakterisasi bahan baku: tanur pengabuan, kapas bebas lemak, labu lemak, kondensator, tabung Soxhlet, penangas air, labu Kjeldahl, destilator, labu Erlenmeyer, dan buret. Peralatan  yang digunakan untuk ektraksi dan uji aktivitas antara lain: kertas saring Whatman 42 bebas abu, pipet volumetrik, grindmill , orbital shaker, rotary vacuum evaporator , spektrofotometer UV-VIS, inkubator, dan vortex .
masyarakat adalah butylated hydroxyanisole (BHA), butylated hydroxytoluene (BHT), tert- butylhydroquinone (TBHQ) dan α-tocopherol (Irianti 2008). Keuntungan menggunakan antioksidan sintetik adalah aktivitas antioksidannya sangat kuat, namun terdapat kekurangannya terkait dengan dugaan sifat karsinogeniknya apabila penggunaanya melebihi dari batas yang direkomendasikan. Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan Wichi (1988); Th ompson dan Moldeus (1988) menunjukkan bahwa penggunaan antioksidan sintetik BHA dan BHT berpotensi karsinogenik. Menurut Sen et al. (2010), penambahan antioksidan sintetik pada makanan menyebabkan beberapa masalah kesehatan, misalnya kanker, penuaan dini, rheumatoid arthritis , dan penyakit jantung. Menurut Irianti (2008), sebenarnya antioksidan alami telah lama digunakan secara turun temurun, namun belum banyak diteliti aktivitas dan kandungan bioaktifnya. Sartini et al. (2007) menyatakan bahwa antioksidan alami adalah antioksidan yang umumnya diisolasi dari sumber alami yang kebanyakan berasal dari tumbuh-tumbuhan dan buah-buahan. Menurut Purwaningsih (2013), menyatakan bahwa salah satu buah yang mengandung antioksidan tinggi dari tanaman bakau adalah buah bakau hitam ( R. mucronata Lamk.).
Tanaman bakau adalah tanaman yang tumbuh subur di kawasan pesisir pantai yang memiliki potensi kandungan bioaktif yang sangat tinggi. Indonesia dengan wilayah perairannya yang sangat luas (2/3 dari luas wilayah) dan beriklim tropis merupakan tempat yang ideal bagi pertumbuhan tanaman bakau. Indonesia memiliki hutan bakau terluas di dunia, dengan luas sekitar 3,5 juta hektar (Noor et al. 2006).  Sekitar 202 jenis spesies bakau di Indonesia telah teridentifi kasi  dan tumbuh dengan subur.
Tanaman bakau telah ditapis aktivitasnya, yaitu sebagai antiviral, antibakteri, antibisul, dan antiinfl amasi  (Agoramoorthy et al. 2008;
Premanathan et al. 1999). Salah satu harapan
Aktivitas antioksidan dari buah mangrove, Purwaningsih S, et al.

## Metode Penelitian
Penelitian ini terdiri dari karakterisasi dan pengukuran morfometrik, komposisi kimia (uji proksimat) meliputi: kadar air, lemak, protein, abu, dan karbohidrat (AOAC 2005), ekstraksi dengan pelarut etanol pada suhu ruang selama 24 jam dan evaporasi pada suhu 40oC, 50oC, 60oC, 70oC, dan 80oC, pengujian aktivitas antioksidannya ekstrak dengan menggunakan metode DPPH (Salazar- Aranda et al. 2009) untuk buah bakau muda dan tua (penelitian pendahuluan), dengan kontrol positif menggunakan asam askorbat (vitamin C), pengujian kualitatif komponen bioaktif  dengan metode fi tokimia (Harborne 1984). Data hasil analisis kimia terlebih dahulu diuji kenormalan galat dengan uji Anderson- Darling. Data selanjutnya dianalisis dengan analisis ragam ( Analysis of variant /ANOVA) menggunakan model rancangan acak lengkap satu faktor yaitu suhu ekstraksi yang terdiri dari 5 taraf. Uji F pada ANOVA jika memberikan pengaruh nyata, maka dilanjutkan dengan uji lanjut Duncan (Steel dan Torrie 1993).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Karakteristik dan Morfometrik Rhizopoara mucronata Lamk.
Buah bakau terdiri dari dua bagian yaitu kelopak dan buah bakau. Kelopak buah bakau berbentuk seperti buah pir terbalik dan berwarna cokelat. Buah bakau memiliki penampakan berwarna hijau dan diselimuti oleh banyak lentisel pada lapisan permukaannya.  Daging buah bakau memiliki tekstur keras dan berwarna cokelat.
Sampel buah bakau yang digunakan pada peneltian ini mempunyai panjang buah rata-rata (58,45±4,22) cm, lebar buah rata- rata (1,64±0,12) cm, dan berat buah rata- rata (83,26±13,06) g. Metusalach (2007) menyatakan bahwa pertumbuhan suatu biota dipengaruhi faktor eksternal dan internal. Faktor eksternal yaitu habitat, musim, suhu perairan, jenis makanan yang tersedia dan faktor lingkungan lainnya, sedangkan faktor internalnya, yaitu umur, ukuran, dan faktor biologis lainnya.

## Komposisi Kimia
Kadar air dari R. mucronata Lamk. adalah 31,96% (Tabel 1). Kadar air buah bakau pada penelitian ini lebih rendah dibandingkan kadar air dari kulit pohon R. mucronata dan Bruguiera parvifl ora hasil penelitian Bunyapraphatsara et al. (2002).
Kadar lemak pada penelitian ini adalah 0,86%, hal ini lebih rendah dibandingkan penelitian Bunyapraphatsara et al. (2002), tetapi masih lebih tinggi dibandingkan penelitian Jacoeb et al. (2011) pada daun Avicenia marina (bakau) yaitu 0,72%. Protein berperan penting dalam proses metabolisme pada tanaman, hewan, dan manusia. Kadar protein pada penelitan ini (2,59%) lebih tinggi dibandingkan penelitian Bunyapraphatsara et al. (2002), namun lebih rendah dibandingkan penelitian Jacoeb et al. (2011) yaitu 3,67%. Kadar abu merupakan campuran dari komponen anorganik atau mineral yang terdapat dalam suatu bahan pangan. Kadar abu hasil penelitian adalah 1,10%, lebih
Tabel 1 Hasil uji proksimat buah bakau hasil penelitian dan penelitian lainnya
Komposisi Rhizophora mucronata Rhizophora mucronata* Bruguiera parvifl ora* Kadar air  (%) 31,96 46,63 51,75 Kadar lemak (%) 0,86 1,96 2,08 Kadarn protein (%) 2,59 0,41 0,12 Kadar abu (%) 1,10 1,25 1,38 Karbohidrat( by diff erence )(%) 63,50 22,29 22,14 Keterangan: *Bunyapraphatsara et al. (2002)
rendah dibandingkan  penelitian  Jacoeb et al.
(2011) yaitu 4,45%. Karbohidrat buah bakau (63,50%) lebih tinggi dibandingkan penelitian Bunyapraphatsara et al . (2002) pada kulit pohon R. mucronata dan Bruguiera parvifl ora dan penelitian Jacoeb et al. (2011) pada daun A. marina yaitu 23,00%.

## Ekstraksi Senyawa Aktif
Ekstrak etanol R. mucronata Lamk. memiliki warna cokelat kehitaman, dengan rendemen  berkisar  antara 9,76% sampai 10,95%. Hasil analisis ragam menunjukkan bahwa suhu tidak mempengaruhi rendemen yang dihasilkan. Banyaknya rendemen yang dihasilkan dalam ekstraksi sangat tergantung dari karakteristik bahan yang diekstrak, pelarut, dan metode yang digunakan. Proses maserasi pada penelitian ini hanya menggunakan etanol, karena penelitian ini merupakan lanjutan dari penelitian sebelumnya (Priyanto 2011) yang menunjukkan bahwa ekstraksi buah bakau ( R. mucronata Lamk.) paling baik apabila diektrasi pada kondisi polar dengan metanol.

## Aktivitas Antioksidan
Nilai IC 50 asam askorbat yang diperoleh dalam penelitian ini adalah 5,59 ppm. Penelitian yang dilakukan Banerjee et al. (2008) pada kulit batang tanaman R. mucronata mendapatkan nilai IC 50 asam askorbat sebesar 3,62 ppm. Hasil tersebut menunjukkan bahwa antioksidan asam askorbat merupakan
antioksidan dengan aktivitas sangat kuat, sesuai dengan pernyataan dari Molyneux (2004) bahwa suatu bahan dengan nilai IC 50 <50 ppm merupakan antioksidan yang sangat kuat. Pengujian aktivitas antioksidan asam askorbat ini menghasilkan hubungan antara konsentrasi asam askorbat dengan persen inhibisinya, yang dapat dilihat pada Gambar 1.
Rhizophora  mucronata muda menghasilkan IC 50 yang lebih tinggi (58,468 ppm) dibandingkan dengan R. mucronata tua (10,2571  ppm), yang berarti bahwa buah yang lebih muda mempunyai aktivitas antioksidan yang lebih rendah. Dapat disimpulkan bahwa kematangan R. mucronata menentukan nilai IC 50 . Tingginya aktivitas antioksidan pada ekstrak kasar berkorelasi dengan banyaknya senyawa aktif yang dapat terdeteksi melalui uji fi tokimia. Penelitian dari Attaau-rahman et al.
(2001) menyatakan bahwa senyawa yang berpotensi memiliki antioksidan umumnya adalah senyawa fl avonoid, alkaloid, dan fenolat yang merupakan senyawa-senyawa polar. Penelitian sejenis yang dilakukan oleh Banerjee et al. (2008) pada kulit batang tanaman R. mucronata yang diekstrak dengan pelarut metanol menghasilkan nilai IC 50 sebesar 193,82 ppm.
Penelitian selanjutnya menggunakan R. mucronata Lamk. yang tua (matang) untuk digunakan dengan perlakuan suhu evaporasi yang berbeda (40, 50, 60, 70, dan 80oC). Hasil penelitian menunjukkan bahwa nilai IC 50
Gambar 1 Aktivitas asam askorbat dengan persen inhibisinya: ( .... ) Ulangan 1;  ( ... ) Ulangan 2; ( ... ) Ulangan 3.
Aktivitas antioksidan dari buah mangrove, Purwaningsih S, et al.
R. mucronata yang diekstraksi pada suhu evaporasi 40oC  yaitu 10,2967 ppm,  50oC yaitu 11,0571 ppm, 60oC yaitu 8,2412 ppm, 70oC yaitu 0,7021 ppm, dan 80oC yaitu 1,4152 ppm. Hasil analisis ragam menunjukkan bahwa suhu mempengaruhi aktivitas antioksidan ekstrak kasar buah bakau. Hasil uji lanjut ditentukan bahwa ekstraksi pada suhu 70oC dipilih sebagai perlakuan terbaik untuk diteliti lebih lanjut. Pengujian aktivitas antioksidan buah bakau ( R. mucronata )  menghasilkan hubungan antara konsentrasi buah bakau  ( R. mucronata ) dengan persen inhibisinya pada suhu (40, 50, 60, 70, 80)oC disajikan pada Gambar 2.

## Komponen Bioaktif
Komponen aktif pada buah bakau adalah fl avonoid, fenol hidroquinon, saponin, tanin (Tabel 2). Penelitian tentang aktivitas antioksidan dilakukan oleh Jacoeb et al.
(2011) pada daun A. marina menunjukkan bahwa komponen bioaktif pada ekstrak kasar
adalah fl avonoid, steroid, dan gula pereduksi. Menurut Waji dan Sugrani (2009), bahwa fl avonoid merupakan senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada tanaman hijau,
Gambar 2 Persen inhibisi ekstrak buah bakau ( Rhizophora mucronata Lamk.) pada suhu 40oC, 50oC, 60oC, 70oC, dan 80oC.
Tabel 2 Komponen bioaktif ekstrak kasar buah bakau ( R. mucronata ) Komponen bioaktif Hasil uji Alkaloid - Dragendorff - Meyer - Wagner - Steroid/triterpenoid + Flavonoid + Saponin + Fenol hidrokuinon + Tanin - Molisch - Benedict - Biuret - Ninhidrin -
kecuali alga. Prasad et al. (2009) melaporkan fl avonoid merupakan senyawa fenol paling penting, dan mempunyai spektrum aktivitas kimiawi dan biologi luas termasuk aktivitas penangkapan radikal bebas. Menurut Meenakshi dan Gnanambigai (2009), kapasitas fl avonoid sebagai antioksidan bergantung pada struktur molekulnya.
Komponen lain pada ekstrak adalah tanin. Umumnya komponen utama senyawa tanin adalah fenolik dalam bentuk polimerik fenol yang banyak terdapat pada teh dan tanaman bakau. Das et al. (2008) melaporkan bahwa senyawa yang terkandung di dalam teh hitam, merupakan senyawa yang mempunyai fungsi sebagai antioksidan, antipatogen, dan antikanker. Reddy et al. (2007) juga melaporkan adanya aktivitas antioksidan, anti malaria dan anti mikroba dari tanaman Punica granatum L. pada fraksi yang mengandung banyak tanin.
Fenolat dan saponin terdapat juga pada ekstrak. Komponen fenolat memiliki struktur aromatik yang berikatan dengan satu atau lebih gugus hidroksil. Hasil penelitian Yim et al.
(2009) menyatakan bahwa fenol pada lima spesies jamur di Malaysia yang diekstrak dengan pelarut etanol lebih tinggi daripada yang diekstrak dengan pelarut metanol dan aseton. Penelitian Kiessoun et al. (2010) pada tanaman Malvaceae spesies Cienfuegosia digitata dan Sida alba yang mengandung komponen polifenol yang mempunyai aktivitas antioksidan dan anti-infl amasi yang tinggi. Chen dan Blumberg (2007) menyatakan bahwa mengkonsumsi senyawa fenol dipercaya dapat mengurangi resiko beberapa penyakit kronis karena senyawa ini bersifat sebagai antioksidan, anti-infl amasi, detoksifi kasi, dan antikolesterol. Saponin merupakan senyawa aktif permukaan dan bersifat seperti sabun. Saponin dapat dideteksi berdasarkan kemampuannya membentuk busa dan menghemolisis sel darah. Saponin juga dilaporkan memiliki sifat antioksidan, sitotoksik, dan antibakteri (Ashraf 2013; Khan et al. 2012).

## KESIMPULAN
Buah bakau hitam ( R. mucronata Lamk.) yang digunakan pada penelitian ini mempunyai karateristik fi sik, berupa panjang (58,45±4,22) cm, lebar (1,64±0,12) cm, dan berat (83,26±13,06) g. Memiliki karakteristik kimia dengan kadar air (31,96±0,19)%, kadar abu (1,10±1,10)%, kadar lemak (0,86±0,86)%, kadar protein (2,59±0,08)%, kadar karbohidrat (63,50±0,35)%. Suhu 70oC memiliki nilai IC 50 yang paling rendah yaitu 0,72 ppm, sebagai suhu terbaik. Komponen bioaktif yang terkandung pada ekstrak etanol terpilih adalah fl avonoid, tanin, fenol hidroquinon, dan saponin.

## DAFTAR PUSTAKA
[AOAC] Association of Offi cial  Analytical Chemist.  2005. Offi cial Method of Analysis of Th e Association of Offi cial  Analytical of Chemist International 18 th Edition. Maryland, USA: Th e Association of Offi cial Analytical Chemist International. Agoramoorthy G, Chen F, Venkatesalu V,
Kuo DH, Shea, PC. 2008. Evaluation of antioxidant polyphenols from selected mangrove plants of India. Asian Journal of Chemistry 20(2): 1311-1322.
Ashraf MF, Aziz MA,  Stanslas J, Ismail I, Kadir MA. 2013. Assessment of antioxidant and cytotoxicity activities of saponin and crude extracts of Chlorophytum borivilianum. Th e Scientifi c World Journal . Vol 2013: Article ID 216894, 7 halaman. Atta-au-rahman, MI Coudhary. 2001.
Bioactive natural product a potential of pharmacophorus. A Theory of memory. Pure and Applied Chemistry
73(2): 555-560.
Bunyapraphatsara N, Srisukh V, Hutivoboonsuk
A, Sornlek P, Th ongbainoi W, Chuakat W,
Fong HHS, Pezzuto JM, Kosmeder J. 2002. Vegetables from the mangrove areas. Th ai Journal of Phytopharmacy 9(1): 1-12. Banerjee D, Chakrabarti S, Hazra AK, Banerjee S, Ray J, Mukherjee B. 2008. Antioxidant activity and phenolics of some mangroves
Aktivitas antioksidan dari buah mangrove, Purwaningsih S, et al.
in Sudarbans. Journal of Biotechnology 7(3): 805-810. Chen CYO, Blumberg JB. 2007. Phytochemical composition of nuts. Asia Pacifi c Journal of Clinical Nutrition 17(1): 329-332.
Das T,  Sa G, Chattopadhyay S, Saha B. 2008. Black tea: the future panacea for cancer. Al Ameen Journal Medicine Sciences 1(2): 70-83. Harborne JB. 1984. Metode Fitokimia . Padmawinata K, Soediro I. Bandung: ITB Press. Terjemahan dari: Phytochemical method 2 nd . Hlm 69-274.
Irianti A. 2008. Aplikasi ekstrak daun sirih dalam menghambat oksidasi lemak jambal patin [tesis].  Bogor: Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor.
Jacoeb AM, Purwaningsih S, Rinto.  2011. Anatomi, komponen bioaktif, dan aktivitas antioksidan daun mangrove Api-api ( Avicenia marina ). Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia XIV(2): 141-150. Khan H, Khan MA, Dullah A. 2012. Antibacterial, antioxidant and cytotoxic studies of total saponin, alkaloid and sterols contents of decoction of Joshanda: Identifi cation of components identifi cation through thin layer chromatography. Toxicology and Industrial Health , doi: 10.1177/0748233712468023.
Kiessoun K, Souza A, Meda NTR, Coulibaly AY, Kiendrebeogo M, Meda AL, Lamidi M, Rasolodimby JM, Nacoulma OG. 2010.
Polyphenol contents, antioxidant and antiinfl amatory activities of six malvaceae species traditionally used to treat hepatitis b in burkina faso. European Journal of Scientifi c Research 44(4): 570-580.
Meenakshi S, Gnanambigai DM, Mozhi ST, Arumugam M, Balasubramanian T. 2009. Total fl avanoid and in-vitro antioxidant activity of two seaweeds of rameshwaram coast. Global Journal of Pharmacology 3(2): 59-62.
Mega IM, Swastini DA. 2010. Skrining fi tokimia dan aktivitas antiradikal bebas ekstrak metanol daun gaharu ( Gyrinops versteegii ). Jurnal Kimia 4(2): 187-192.
Metusalach. 2007. Pengaruh fase bulan dan ukuran tubuh terhadap rendemen, kadar protein, air dan abu daging kepiting rajungan (P ortunus spp). Jurnal Ilmu Kelautan dan Perikanan Universitas Hasanuddin 17(3): 233-239.
Molyneux P. 2004. Th e use of stable free radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioksidan activity. Songklanakarin Journal  Sciences Technology 26(2): 211-219.
Noor YR, Khazali M, Suryadiputra INN. 2006. Panduan Pengenalan Mangrove di Indonesia.  Wetlands International-Indonesia
Programme . Bogor: Ditjen PHKA. Pham-Huy LA, He Hua, Pham-Huy C. 2008.
Free radicals, antioxidants in disease and health. International Journal of Biomedical Science 4(2): 89–96.
Prasad KN, Yang B, Dong X, Jiang G, Zhang H, Xie H, Jiang Y. 2009.  Flavonoid contents and antioxidant activities from Cinnamomum species. Innovative Food Science and Emerging Technologies 10:
627–632.
Premanathan M, Arakaki R, Izumi H,
Kathiresan K, Nakano M, Yamamoto N, Nakashima H. 1999. Antiviral properties of a mangrove plant, Rhizophora apiculata blume, against human immunodefi ciency virus. Antiviral Research 44(2):113-22. Priyanto RA. 2012. Aktivitas antioksidan dan komponen bioaktif pada buah bakau ( Rhizophora mucronata Lamk.) [skripsi].
Bogor: Departemen Teknologi Hasil Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor.
Purwaningsih S, Handharyani E, Sukarno AYP. 2013. Hepotoprotective eff ects  extract ethanol of propagul mangrove ( Rhizophora mucronata ) in white rat strain Sprague DawleyI induced carbon tetrachloride (CCl 4 ). In: Maximizing Benefi ts  and Minimizing Risks on Aquatic Products Processing: Blue Economy Approach . Th e  1 st International Symposium on Aquatic Products Proseding; Bogor 13-
15 th November 2013. Bogor: FPIK IPB, MPHPI, TUMSAT, and KKP. Reddy MK, Gupta SK, Jacob MR, Khan SI, Ferreira D. 2007. Antioxidant, antimalarial and antimicrobial activities of tannin-rich fractions, ellagitannins and phenolic acids from Punica granatum L. Planta Medical 73(5): 461-7.
Salazar-aranda R, Perez-Lopez LA, Arroyo JL, Alanis Garza BA, de Torres NW. 2009. Antimicrobial and antioxidant activities of plants from northeast of Mexico. Journal of Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine 41(2): 233-236, doi:10.1093/ecam/nep127. Sartini, Djide MN, Alam G. 2007. Ekstraksi komponen bioaktif dari limbah buah kakao dan pengaruhnya terhadap aktivitas antioksidan dan antimikroba. Jurnal Farmasi Indonesia 5(1): 1-7. Sen S, Chakraborty R, Sridahar C, Reddy YSR, De B. 2010. Free radical, antioxidant, disease and phytomedicines: current status and future prospect. International Journal of Pharmaceutical Sciences Review and Research 3(1): 91-100.
Souri E, Amin G, Sherifabadi AD, Nazifi   A, Farsam H. 2004. Antioxidative activity of sixty plants from Iran. Journal of
Pharmacy Research 3: 55-59.
Steel RGD, Torrie JH. Prinsip dan prosedur statistika : Suatu pendekatan biometrik.
Bambang S, penerjemah. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama.
Steinberg D. 2009. Th e LDL modifi cation hypothesis of atherogenesis. Journal of Lipid Research 50:376-381.
Th eroux P, Libby P. 2005. Pathophysiology of coronary artery disease. Circulation 111:
3481-3488.
Th ompson D, Moldeus P. 1988. Cytotoxicity of butylated hydroxyanisole and butylated hydroxytoluene in isolated rat hepatocytes. Biochemistry and Pharmacology 37: 2201-2207.
Yim HS, Chey FY, Zu YG, Ho SK, Ho CW. 2009. Phenolic profi les of selected edible wild mushrooms as aff ected by extraction solvent, time and temperature. Asian Journal of Food and Agro-Industry 2(3): 392-401.
Waji RA, Sugrani A. 2009. Makalah kimia organik bahan alam: Flavonoid (Quercetin) [makalah]. Makasar: Program Pascasarjana Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam, Universitas Hasanuddin. Wichi HP. 1988. Enhanced tumour development by butylated hydroxytoluene (BHT) from the properties of eff ect on fure stomach and esophageal aquamoua epithelium. Food Chemical Toxicology 26: 723-727.