## ARTIKEL PENELITIAN

## STUDI IN-VITRO : EFEK ANTI KOLESTEROL EKSTRAK DAUN RAMBUSA ( Passiflora Foetida , L)
Evi Mulyani 1
1 Dosen Program Studi DIII Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Palangkaraya
Email : evi.muly4ni@gmail.com

## ABSTRAK
Tumbuhan  Rambusa  ( Passiflora  foetida, L)  dikenal  memiliki  kandungan  senyawa  untuk berbagai  pengobatan,  secara  empiris  masyarakat  di  Indonesia  khususnya  Kalimantan Tengah  menggunakan  daun  rambusa  yang  dikenal  dengan  nama  tanaman  cemot  untuk menurunkan  kadar  kolesterol  dalam  darah.  Kolesterol  terbentuk  secara  alamiah.  Secara kimia  kolesterol  merupakan  senyawa  kompleks  yang  dihasilkan  oleh  tubuh  dengan bermacam-macam fungsi, antara  lain  memproduksi  hormon  seks,  hormon  korteks adrenal, vitamin D, dan produksi garam empedu yang membantu usus untuk menyerap lemak. Jadi, bila  takarannya  pas  atau  normal  maka  peranan  kolesterol  dalam  tubuh  akan  optimal (Nilawati et al ., 2008).
Tujuan  penelitian  ini  adala  untuk  mengetahui  efek  antikolesterol  ekstrak  daun rambusa ( Passiflora Foetida , L). Metode: penelitian ini merupakan penelitian eksperimental. Efek  antikolesterol  diuji  dengan  metode  cholesterol  enzymatic  endpoint  yang  dimodifikasi. Ekstrak daun Rambusa ( Passiflora Foetida ,L) dibuat dengan konsentrasi 0,5mg/ml, 1mg/ml dan 1,5mg/ml sebagai kontrol positif (pembandig) menggunakan simvastatin yang kemudian direaksikan  dengan  reagen  R1  dan  dibaca  hasilnya  menggunakan  fotometer  dan spektrofotometer  uv-vis  dengan  panjang  gelombang  546nm.  Hasil  pengukuran menggunakan fotometer menunjukan kadar kolesterol standard (kontrol negative) 200mg/dl, kontrol  positif  195mg/dl,  144mg/dl  (ekstrak  0,5mg/ml),  108mg/dl  (ekstrak  1mg/ml)  dan 103mg/dl (ekstrak 1,5mg/ml). Sedangkan pengukuran absorbansi dan konsentrasi kolesterol menggunakan spektrofotometer uv-vis pada panjang gelombang 546nm 0,179±159,8 mg/dl (Kontrol  +), 0,123±109,8mg/dl  (ekstrak 0,5mg/ml),  0,110±98,2  mg/dl  (ekstrak 1mg/ml),  dan 0,109±97,3  mg/dl  (ekstrak  1,5mg/ml).  Kesimpulan  :  Ekstrak  daun  rambusa  (Passiflora Foetida,L) dapat menurunkan kadar kolesterol secara  in vitro.
Kata kunci: Passiflora foetida, L, In Vitro, Antikolesterol

## ABSTRACT
The  Rambusa  plant  (Passiflora  foetida,  L)  is  known  to  contain  compounds  for  various treatments,  empirically  the  people  in  Indonesia,  especially  Central  Kalimantan,  use  the leaves  of  rambusa  known  as  the  cemot  plant  to  reduce  cholesterol  levels  in  the  blood. Cholesterol is formed naturally. Chemically cholesterol is a complex compound produced by the  body  with  various  functions,  including  producing  sex  hormones,  adrenal  cortex hormones, vitamin D, and the production of bile salts that help the intestines to absorb fat. So, if the dose is right or normal, the role of cholesterol in the body will be optimal (Nilawati et al., 2008).
The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the  effect  of  anticolesterol  in  rambusa  leaf extract  (Passiflora  Foetida,  L).  Method:  this  study  is  an  experimental  study.  The anticolesterol effect was tested by the modified enzymatic endpoint cholesterol method. The leaf extract of Rambusa (Passiflora Foetida, L) was made with a concentration of 0.5 mg / ml, 1 mg / ml and 1.5 mg / ml as a positive control (multiplier)  using simvastatin which was then  reacted  with  reagent  R1  and  read  the  results  using  a  photometer  and  UV- spectrophotometer.  vis  with  a  wavelength  of  546nm.  The  measurement  results  using  a
photometer  showed  standard  cholesterol  levels  (negative  control)  200mg  /  dl,  positive control 195mg / dl, 144mg / dl (extract 0.5mg / ml), 108mg / dl (extract 1mg / ml) and 103mg /  dl  (extract  1  ,  5mg  /  ml).  While  the  measurement  of  cholesterol  absorbance  and concentration using a uv-vis spectrophotometer at a wavelength of 546nm 0.179 ± 159.8 mg / dl (Control +), 0.123 ± 109.8mg / dl (extract 0.5mg / ml), 0.110 ± 98.2 mg / dl (extract 1mg / ml),  and  0.109  ±  97.3  mg  /  dl  (extract  1.5mg  /  ml).  Conclusion:  Rambusa  leaf  extract (Passiflora Foetida, L) can reduce cholesterol levels in vitro.
Keywords: Passiflora foetida, L, In Vitro, Antikolesterol

## PENDAHULUAN
Kolesterol  adalah  suatu  zat  lemak di  dalam darah, berwarna  kekuningan  dan berupa  seperti  lilin,  diproduksi  oleh  hati dan sangat diperlukan oleh tubuh.
Kolesterol  masuk  ke  dalam  golongan  lipid yang  tidak  terhidrolisis  dan  merupakan sterol utama pada jaringan tubuh manusia. Kolesterol  mempunyai  peranan  penting karena  merupakan  unsur  utama  dalam lipoprotein  plasma  dan  membran  plasma serta  menjadi  prekursor  sebagian  besar senyawa steroid 1 .
Kolesterol terbentuk secara alamiah. Secara kimia kolesterol merupakan senyawa kompleks yang dihasilkan  oleh  tubuh  dengan  bermacam- macam  fungsi,  antara  lain  memproduksi hormon  seks,  hormon  korteks  adrenal, vitamin  D,  dan  produksi  garam  empedu yang  membantu  usus  untuk  menyerap lemak.  Jadi,  bila  takarannya  pas  atau normal  maka  peranan  kolesterol  dalam tubuh akan optimal 2 .
Dengan perkembangan ilmu pengetahuan  dan  teknologi  (IPTEK)  di Negara-negara  maju  dan  berkembang salah  satunya  Indonesia  dalam  dunia pengobatan di era ini tidak hanya berfokus
pada  obat-obat  sintetis,  tapi  juga  pada obat-obat  yang  berasal  dari  alam  seperti buah-buahan,  daun-daunan,  biji-bijian  dan sebagainya. Salah satunya adalah tanaman  Rambusa  ( Passiflora  Foetida, L) yang dikenal masyarakat Kalimantan
Tengah Khususnya Palangka Raya sebagai  tanaman  Cemot.  Masyarakat mengenal tanaman ini adalah tanaman liar yang  tumbuh  disemak-semak  dan  dataran tinggi, biasanya buah langsung dikonsumsi segar.  Selain  itu  masyarakat  setempat menggunakan  daun  dari  buah  Cemot sebagai terapi pasca bersalin dan menurunkan lemak dalam darah (kolesterol) dengan cara direbus.
Aktivitas antioksidan juga ditemukan  pada  ekstrak  etanol  daun Rambusa ( Passiflora foetida ,L) pada dosis penggunaaan dosis 200 dan 500 mg/kg bb mencit 3 . Di Amerika, Jerman, Perancis dan negara-negara Eropa lainnya ekstrak daun dan  buah  Rambusa  ( Passiflora  foetida ,L) juga  dapat  digunakan  sebagai  obat antiinsomnia.  Penggunaan  ekstrak  etanol
Rambusa ( Passiflora
foetida ,L) menunjukan hasil lebih baik dalam penghambatan  berbagai  jenis  patogen, juga  menunjukkan  daya  hambat  terhadap
aktivitas  empat  bakteri  patogen  pada manusia, yaitu Pseudomonos putida, Vibriocholerae, Shigella flexneri dan
Streptococcus
pyogenes 4 .
Menurut Sathish, et  al. (2011),  pengobatan dengan esktrak etanol Rambusa (Passiflora foetida, L) signifikan (P <0,01) menurunkan indeks  ulkus  dan  secara  signifikan  (P <0,01)  meningkatkan  pH  lambung.  Selain itu Rambusa ( Passiflora foetida, L) menunjukkan  nilai  pengurangan  yang signifikan  (P  <0,01)  pada  peroksidasi  lipid dan  kadar  glutathione.  Hasil  pengamatan menunjukan bahwa EEPF (Etanolic Ekstrak  of Passiflora  foetida ,L)  pada seluruh  bagian  tanaman  memiliki  efek antiulcer dan kegiatan antioksidan.

## METODE PENELITIAN
Determinasi Tanaman Daun  Rambusa  ( Passiflora  Foetida ,  L) yang  digunakan  dalam  penelitian  yang diperoleh dari Palangka Raya di determinasi  menggunakan  Materia  Medika Indonesia untuk memastikan jenis tanaman yang dgunakan adalah Rambusa (Passiflora Foetida, L). Determinasi dilakukan  di  Laboratorium  MIPA  Lambung Mangkurat Banjarmasin.

## Penyiapan Simplisia
Daun  Rambusa  (Passiflora  Foetida,  L) dikumpukan dalam kondisi segar. Disortasi basah  kemudian  dicuci  pada  air  yang mengalir  dan  dikeringkan  menggunakan oven. Setelah kering, simplisia di haluskan dengan cara di blender.

## Pembuatan Ekstrak
Ekstrak daun Rambusa ( Passiflora Foetida ,  L)  dibuat  dari  simplisia  kering daun  yang  sudah  dihaluskan,  kemudian  di ekstraksi  dengan  cara  maserasi  dengan etanol  96%  selama  24  jam.  Maserat  yang dihasilkan  kemudian  disaring  dan  di evaporator  untuk  mendapatkan  ekstrak kental.

## Uji Fitokimia

## Identifikasi Alkaloid
Dalam  identifikasi  alkaloid  dibutuhkan  10 mg  ekstrak  kental  dan  tambahkan  10  ml klorofom aduk sampai homogen. Campuran kemudian disaring dan dimasukan  ke  dalam  tabung  reaksi  di tambahkam 0,5 ml H 2 SO 4 1M kocok pelan dan diamkan selama 5 menit. Lapisan atas (bening)  diambil  dibagi  menjadi  2  (dua) bagian.  Bagian  1  ditambahkan  2-3  tetes pereaksi Dragendorf, jika positif mengandung  alkaloid  maka  cairan  bening akan berubah menjadi jingga (orange) dan bagian  2  diteteskan  pereaksi  Mayer  2-3 tetes  jika  positif  akan  terjadi  endapan putih 5 .

## Identifikasi Flavonoid
Menambahkan  1  gram  ekstrak  kental  ke dalam  5  ml  etanol,  dikocok  hingga homogen  dan  ditambahkan  HCL  pekat beberapa tetes dan 1,5 gr logam magnesium.  Kocok  kembali  campuran hingga  homogen  dan  diamkan  selama  3 menit,  jika  terdapat  kandungan  flavonoid maka  akan  terjadi  perubahan  warna menjadi merah muda atau magenta 6 .

## Identifikasi Tanin
1  ml  ekstrak  direaksikan  dengan  larutan besi  (III)  klorida  10%,  ekstrak  dinyatakan mengandung  senyawa  tannin  apabila campuran  ekstrak  berubah  menjadi  warna biru tua atau hijau kehitaman 7 .

## Identifikasi Saponin
Masukan  0,5  ekstrak  ke  dalam  tabung reaksi  dan  ditambahkan  10  ml  air  panas, dinginkan  campuran  dan  kocok  secara vertical selama 10 detik. Ekstrak mengandung  saponin  jika  terbentuk  busa 1-  10  cm  yang  stabil  minimal  10  menit. Tidak ada perubahan busa (hilang) setelah ditambahkan 1 tetes HCL 2N 5 .
Identifikasi  senyawa  Terpenoid  dan

## Steroid
Identifikasi  senyawa  ini  dilakukan  dengan reaksi Lieberman-Burchard dengan
menambahkan  1  ml  ekstrak  dengan kloroform,  kemudian  menambahkan  asam asetat anhidrida dan beberapa tetes H 2 SO 4 pekat. Senyawa dinyatakan positif mengandung Terpenoid jika terjadi perubahan  warna  menjadi  hijau  gelap, sedangkan jika campuran ekstrak menunjukan  perubahan  menjadi  merah mudan hingga merah maka dapat disimpulkan positif mengandung steroid 8 .
Uji  aktivitas  antikolesterol  ekstrak  daun Rambusa  ( Passiflora  Foetida ,  L)  secara In Vitro
Membuat larutan ekstrak dengan konsentrasi  0,5  mg/ml,  1mg/ml  dan  1,5 mg/ml  dalam  etanol  96%  sebagai  sampel 1,2 dan 3 dalam labu ukur. Masing-masing variasi  konsentrasi  ekstrak  etanol  daun
rambusa (Passiflora  Foetida ,  L)  kemudian dimasukan  kedalam  tabung  reaksi  yang sudah  ditambahkan  20  µl  dan  2000  µl Reagen R1. Campuran dihomogenkan dan diinkubasi  selama  30  menit  dan  dibaca pada fotometer dan spektro uv vis  dengan panjang gelombang 546 nm.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Determinasi
Kingdom : Plantae Divisi : Spermatophyta Sub Divisi : Angiospermae Class : Dicotyledoneae Ordo : Malpighiales Family : Passifloraceae Genus : Passiflora Species : Passiflora foetida L. 9 Determinasi tanaman dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui kebenaran dari identitas tanaman tersebut,  apakah  tanaman  tersebut  benar- benar  tanaman  yang  diinginkan  dan  yang dimaksudkan  dalam  penelitian.  Dengan demikian  kesalahan  dalam  pengumpulan bahan yang akan diteliti dapat dihindari. Uji  Fitokimia  Ekstrak  Etanol  Daun Rambusa ( Passiflora Foetida , L)
Tabel  1.  Hasil  uji  kualitatif  metabolit sekunder  dalam  ekstrak  daun  Rambusa ( Passiflora Foetida, L) Uji Pengamatan Alkaloid + Flavonoid - Saponin + Tanin + Steroid +
Dari hasil uji fitokimia secara kualitatif menunjukan  bahwa  ekstrak  etanol  daun rambusa ( Passiflora Foetida, L) mengandung alkaloid, saponin, tannin, dan steroid. Uji yang sama juga dilakukan oleh Noviyanti., et  al (2017),  akan  tetapi  dalam penelitianya Noviyanti., et al tidak menemukan  saponin  dalam ekstrak  etanol daun  rambusa  ( Passiflora  Foetida, L)  nya.
Perbedaan kandungan ini dapat disebabkan  karena  beberpa  faktor  seperti kualitas  daun,  unsur  hara  demografis, serta dalam proses identifikasinya.
Uji  invitro  Efek  Antikolesterol  Ekstrak Etanol Daun Rambusa ( Passiflora Foetida , L)
Tabel   2. Hasil pengamatan kadar kolesterol pada fotometer (λ 546) Perlakuan Kadar Kolesterol Kol+ R1 200 mg/dl Kol+R1+Sim 195 mg/dl Kol+R1+Eks 0,5mg/ml  144 mg/dl Kol+R1+Eks 1mg/ml 108 mg/dl Kol+R1+Eks1,5mg/ml 103 mg/dl
Tabel  3      .  Hasil  pengamatan  kadar kolesterol  pada  spektrofotometer  uv  vis  (λ
546) Perlakuan Kadar Kolesterol Kol + R1 0,220 ± 196,4 µg/ml Kol+R1+Sim 0,179 ±159,8 µg/ml Kol+R1+Eks 0,5mg/ml  0,123 ± 109,8 µg/ml
Kol+R1+Eks 1mg/ml
0,110 ± 98,22 µg/ml
Kol+R1+Eks 1,5mg/ml  0,109 ± 97,33 µg/ml
Penurunan  kadar  kolesterol  yang ditunjukan  oleh  ekstrak  etanol  daun Rambusa  ( Passiflora  Foetida ,  L)  dapat disebabkan karena adanya saponin.
Saponin dapat menurunkan kadar kolesterol dalam darah kemungkinan dengan cara pengikatan 10 . Selain itu dalam penurunan  kolesterol  saponin  juga  dapat bekerja  dengan  mengendapkan  kolesterol dan ikut serta dalam sirkulasi enterohepatik  asam  empedu  yang  dapat menyebabkan  terganggunya  penyerapan kolesterol 11 .
Metabolit  sekunder  lain  yang  dapat menurunkan kadar kolesterol adalah tannin,  seperti  diketahui  dalam  ekstrak etanol  daun  Rambusa  ( Passiflora  Foetida,
L)  teridentifikasi  tannin  sebagai  metabolit sekundernya.  Tanin  merupakan  senyawa aktif  metabolit  sekunder  yang  diketahui mempunyai beberapa khasiat yaitu sebagai astringen,  anti  diare,  anti  bakteri  dan antioksidan.  Tanin  merupakan  komponen zat  organik  yang  sangat  kompleks,  terdiri dari senyawa fenolik yang sukar dipisahkan dan  sukar  mengkristal,  mengendapkan protein  dari  larutannya  dan  bersenyawa dengan protein tersebut 12 .
Alkaloid  yang  merupakan  senyawa metabolit  sekunder  utama  yang  banyak ditemukan  hamper  disetiap  tanaman  juga mempunyai  sifat  atau  efek  menurunkan kolesterol,  seperti  yang  dikemukakan  oleh Kou et  al (2016)  dalam  penelitianya menyimpulkan  bahwa  kombinasi  lima alkaloid utama (berberin, coptisine, palmatine,  epiberberin,  dan  jatrorrhizine) menunjukan efek penurunan kadar kolesterol secara sinergi.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil uji yang dilakukan, ekstrak daun Rambusa ( Passiflora  Foetida ,  L)  dapat  menurunkan kadar kolesterol total pada konsentrasi 0,5 mg/ml,  1  ml/ml,  dan  1,5  mg/ml.  Semakin besar konsentrasi ekstrak maka persentase  penurunan  kadar  kolesterol semakin  tinggi  yaitu  Adapun  persentase penurunan kadar kolesterolnya pada kontrol  positif  2,5%  ±  18,6%  ,  Ekstrak 0,5mg/ml  sebesar  28%  ±  29%,  Ekstrak 1mg/ml  sebesar  46%  ±  50%,  Ekstrak 1,5mg/ml sebesar 48,5% ± 50,4%.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Rasool, S.N., Jaheerunisa,S.,
Jayveera,K.N.  and  Suresh,C.2011.  In vitro  callus  induction  and  in  vivo antioxidant  activity  of Passiflora  foetida
L.  leaves. International  Journal  of
Applied  research  in  natural  Products .
4(1):1-10
2. Mohansundari, C., Natarajan, D., Srinivasan,K.,  Umamaheshwari,  S  and
Ramchandran, A. 2007.Antibacterial properties  of  Passiflora  foetida  L. –  a common  exotic  medicinal  plant. African
J. Biotech . 6 (23).
3. Departemen Kesehata RI.1995. Farmakope Indonesia Edisi IV.  Jakarta:  Departemen  Kesehatan  RI. Hal.1033.
4. Jones,  W.P  and  Kinghorn,  A.D.  2006 .
Extraction of Plant Secondary
Metabolites .  In:  Sharker,  S.D.  Latif  Z.,
Gray A.L, eds. Natural Product Isolation.
2nd edition. New Jersey, Humana Press.
5. Ceulei.  1984. Methodology  of  analysis vegetables and drugs . Buchares
Rumania : Faculty Of Pharmacy
6. Desmiaty, Y., Ratih H.,Dewi M.A.,Agustin R.  2008.  Penentuan  Jumlah  Tanin  Total pada  Daun  Jati  Belanda  (Guazuma ulmifolia  Lamk)  dan  Daun  Sambang Darah (Excoecaria bicolor Hassk.) Secara Kolorimetri dengan Pereaksi Biru Prusia. Ortocarpus. 8, 106-109
7. Kou,  S.,  Han,  B.,  Wang,  Y.,  Huang,  T.,
He, K., et al .2016. Synergetic cholesterol-lowering  effects  of  main alkaloids  from  Rhizoma  Coptidis  in HepG2  cells  and  hypercholesterolemia hamsters. Life Sci. 2016.15;151:50-6
8. Noviyanti, Y., Subur, P., Pasaribu, Daniel Tarigan.  2017.  Uji  Fitokimia,  Toksisitas
Dan Aktivitas Antibakteri Terhadap Ekstrak Etanol Daun Rambusa
(Passiflora  Foetida  L.)  Terhadap  Bakteri Staphylococcus  Aureus  Dan  Escherichia Coli. Jurnal  Kimia  Mulawarman .12(1).
31-36
9. Sathish,  R.,  Alok  Sahu,  and  Natarajan, K.2011.Antiulcer  and  antioxidant  activity of  ethanolic  extract  of  Passiflora  foetida L. Indian J Pharmacol . 43(3): 336 – 339