Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Rumput Israel ( Asystasia gangetica L.) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Eschericia coli
Herviani Sari (1), Firdaus Fahdi (2)
Fakultas Farmasi, Institut Kesehatan Deli Husada Deli Tua
sari.herviani21@gmail.com (1) daus2966@gmail.com (2)

## ABSTRAK
Rumput israel (Asystasia gangetica) atau sering disebut dengan tanaman Ara sungsang merupakan salah satu tanaman  budidaya  yang  berpotensi  sebagai  antibakteri.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas antibakteri ekstrak etanol rumput Israel dalam menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli dan untuk mengetahui perbedaan aktivitas antibakteri ekstrak etanol rumput Israel pada berbagai konsentrasi. Metode : Ekstraksi  dilakukan  dengan  metode  maserasi  menggunakan  etanol  70%.  Pengujian  aktivitas  antibakteri dilakukan  dengan  menggunakan  metode  difusi  cakram  kertas.  Aktivitas  ini  ditandai  dengan  terbentuknya zona  bening  pada  area  paper  disc.  Penelitian  ini  dilakukan  dengan  menggunakan  4  perlakuan  konsentrasi yaitu  25%,  50%,  75%,  100%,  dan  kontrol  negatif  aquades  dan  kontrol  positif  amoksisilin. Hasil  : Berdasarkan  hasil  uji  one  way  ANOVA  menunjukkan  adanya  pengaruh  aktivitas  antibakteri  terhadap Escherichia  coli  dengan  nilai  signifikansi  (p<0,05)  dengan  nilai  F  =  53.393.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa terdapat  perbedaan  yang  signifikan  penggunaan  berbagai  konsentrasi  ekstrak  rumput  Israel  dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri  Escherichia  coli.  Penentuan  diameter  zona  hambat  sebelum  perlakuan adalah  16mm  dan  sesudah  perlakuan.  Konsentrasi  ekstrak  lebih  baik  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri Escherichia coli yaitu konsentrasi 100% dengan diameter 20,4 mm.
Kata Kunci : Aktivitas Antibakteri, Rumput Israel ( Asystasia Gangetica ), E.Coli.

## ABSTRACT
Israeli grass (Asystasia gangetica) or often referred to  as Ara sungsang plant  is one of the cultivated plants that  has  potential  as  an  antibacterial.  This  study  aims  to  determine  the  antibacterial  activity  of  the  ethanol extract of Israeli grass in inhibiting the growth of Escherichia coli bacteria and to determine the differences in the  antibacterial  activity  of  the  ethanolic  extract  of  Israeli  grass  at  various  concentrations. Method  : Extraction  was  carried  out  by  maceration  method  using  70%  ethanol.  Antibacterial  activity  testing  was carried out using the paper disc diffusion method. This activity is indicated by the formation of a clear zone in  the  paper  disc  area. This  research  was  conducted  using  4  concentration  treatments  including  25%,  50%, 75%, 100%, and negative control was distilled water and positive control was amoxicillin. Result : Based on the results of the one way ANOVA test: it shows the effect of antibacterial activity on Escherichia coli with a significance value (p <0.05) with an F value = 53,393. This indicates that there is a significant difference in the use of various concentrations of Israeli grass extract in inhibiting the growth of Escherichia coli bacteria. The determination of the diameter of the inhibition zone before treatment was 16mm and after treatment. The concentration  of  the  extract  was  better  in  inhibiting  the  growth  of  Escherichia  coli  bacteria,  namely  the concentration of 100% with a diameter of 20.4 mm.
Keywords : Antibacterial Activity, Israeli Grass (Asystasia Gangetica), E.Coli.
Sari  H,  Fahdi  F  :  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Rumput  Laut  Israel ( Asystasiagangetica L.) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Eschericia coli

## I. PENDAHULUAN

## 1. Latar Belakang
Penyakit Infeksi merupakan salah satu masalah dalam bidang kesehatan manusia yang dari waktu ke waktu terus berkembang. Infeksi merupakan penyakit yang dapat ditularkan dari satu  orang  ke  orang  lain  atau  dari  hewan  ke  manusia.  Penyebab  infeksi  ada  berbagai macam, seperti disebabkan oleh berbagai mikroorganisme seperti virus, bakteri, jamur dan protozoa  (Joegijantoro,  2019).  Antibakteri  merupakan  zat  yang  dapat  menghambat pertumbuhan  atau  bahkan  membunuh  bakteri  dengan  cara  mengganggu  metabolisme bakteri  berbahaya.  Mekanisme  kerja  senyawa  antibakteri  meliputi  penghambatan  sintesis dinding  sel,  penghambatan  integritas  permeabilitas  dinding  sel  bakteri,  penghambatan aktivitas  enzim,  dan  penghambatan  sintesis  asam  nukleat  dan  protein  (Talaro,  2001). Mikroba  atau  bakteri  yang  dapat  menyebabkan  infeksi  salah  satunya  adalah  bakteri Eschericia  coli, bakteri  ini  merupakan  bakteri  Gram  negatif  dan  normalnya  hidup  di saluran  pencernaan  manusia,  namun  ada  kondisi  yang  dapat  menyebabkan  munculmya bakteri E.coli patogen  yang dapat menyebabkan diare pada manusia (Rahayu dkk, 2018). Diare akut yang disebabkan oleh bakteri Escherichia coli dapat diatasi dengan pengobatan antibiotik,  seperti  antibiotik  siprofloksasin,  trimetoprim/sulfametoksazol,  eritromisin  dan metronidazole  (Wahyuni,  2014).  Namun  trend  penggunaan  tanaman  obat/herbal  menjadi alternatif  pilihan  belakangan  ini.  Tanaman  obat  atau  tumbuhan  yang  memiliki  efek  obat memiliki  nilai  ekonomis  lebih  tinggi.  Dimasyarakat  penggunaan  tanaman  obat  masih dipercaya  menjadi  salah  satu  alternatif  untuk  meredakan  penyakit  seperti  diare.  Tanaman obat  merupakan  segala  jenis  tumbuh-tumbuhan  yang  mempunyai  khasiat  atau  kegunaan sebagai  obat,  baik  itu  berupa  buah,  batang,  daun,  bunga,  akar  atau  umbi.  Penggunaan tanaman obat menjadi piilihan karena minim/kecil efek samping (Trimin, 2015). Salah satu tanaman  obat  yang  menarik  untuk  diteliti  dan  diperiksa  aktivitas  antibakterinya  adalah rumput  israel/ara  sungsang  atau  yang  dikenal  dengan  nama  ilmiah  ( Asystasia  gangetica L.).    Rumput  israel  biasanya  dianggap  sebagai  gulma,  tanaman  ini  dipercaya  berasal  dari Afrika dan banyak tersebar di wilayah Asia tenggara salah satunya Indonesia (Priwiratama, 2011).  Tanaman  rumput  israel  ( Asystasia  gangetica L.)  diketahui  mengandung  senyawa metabolit  sekunder  dan  memiliki  sifat  antijamur,  antiinflamasi,  antimikroba  dan antioksidan  (Kensa,  2011).  Tanaman  ini  juga  biasa  dimanfaatkan  sebagai  obat  rematik, asma,  dan  alergi  pada  kulit,  karena  mengandung  senyawa  aktif  flavonoid  (Gopal  et  al, 2013).  Aktivitas  antibakteri,  dan  antimikroba  juga  telah  ditunjukkan  oleh  flavonoid  yang ditemukan diberbagai bahan tanaman. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas ekstrak  etanol  Rumput  Israel  ( Asystasia  gangetica  L.) Terhadap  pertumbuhan  bakteri Escherichia coli.

## 2. Perumusan Masalah
Berdasarkan  penjelasan  latar  belakang,  peneliti  ingin  meneliti  bagaimana  aktivitas  anti bakteri  dari  rumput  Israel  ( Asystasia  gangetica L.)  terhadap  pertumbuhan  bakteri Eschericia coli penyebab diare.

## 3. Tujuan Penelitian
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak etanol rumput Israel dalam menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli dan untuk mengetahui perbedaan aktivitas antibakteri ekstrak etanol rumput Israel pada berbagai konsentrasi

## 4. Manfaat Penelitian
Manfaat  dari  penelitian  ini  yaitu  memberikan  informasi  mengenai  kandungan  metabolit sekunder  pada  tanaman  rumput  israel.  Kemudian  mengetahui  bagaimana  aktivitas
Sari  H,  Fahdi  F  :  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Rumput  Laut  Israel ( Asystasiagangetica L.) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Eschericia coli
antibakteri  pada  ekstrak  etanol  rumput  israel  dan  dapat  dijadikan  referensi  dan  informasi dalam  bidang  akademis  dan  masyarakat  mengenai  manfaat  dan  kemampuan  dari  rumput israel dalam menghambat pertumbuhan bakteri Eschericia coli.

## II. METODE Tempat Penelitian
Tempat  penelitian  dilakukan  di  laboratorium  Institut  Kesehatan  Deli  Husada  Deli  tua. Ekstratk Etanol rumput Israel ( Asystasia gangetica L. ) dilakukan di laboratorium teknologi formulasi  Iinstitut  Kesehatan  Deli  Husada  Deli  Tua.  Pengujian  bakteri  dilakukan  di laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas  Farmasi  Institut  Kesehatan  Deli  Husada  Deli  Tua. Sampel rumput israel diambil dari daerah Deli Tua, Kecamatan Deli Tua Timur, Kab. Deli Serdang, Sumatera Utara.

## Rancangan Penelitian
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental  dengan  memberikan  perlakuan  ekstrak etanol rumput israel pada media bakteri dengan berbagai konsentrasi ekstrak etanol rumput israel.  Konsentrasi  ekstrak  etanol  yang  diberikan  yaitu  :  25%,  50%,  75%,  dan  100%  dan kontrol dengan pengulangan sebanyak 3 kali.

## Bahan dan Peralatan
Bahan yang digunakan adalah : sampel rumput israel segar. amoniak, asam asetat anhidrat, as. klorida, as. Sulfat, aquadest, etanol 70%, media agar (NA)Kloroform, pereaksi mayer, pereaksi dragendrof, pereaksi boucharat, pereaksi besi (III) klorida 1%,  kloroform, HCL, Metanol, Eter, FeCl 3 10%, alkohol, H 2 SO 4 1%, , NaCl, Kontrol positif (amoxicilin 500mg). Peralatan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  aluminium  foil,  autoklaf,  batang pengaduk, bunsen, blender, cawan petri, erlenmeyer, gelas ukur, gunting, inkubator, kawat ose,  kapas,  kertas  saring/filtrat,  pinset,  rotary  evaporator,  spatula,  timbangan  analitik, laminar air flow, water bath, kapas steril, cawan penguap, rak tabung reaksi.

## Tahapan Penelitian Pembuatan Ekstrak Simplisia
Rumput  Israel  ( Asystasia  gangetica) diekstraksi  dengan menggunakan  metode  maserasi dengan  menggunakan  pelarut  etanol 70%  selama  3x24  jam  sambil sesekali  diaduk. Kemudian sampel disaring dengan menggunakan kertas saring. Hasil penyaringan pertama akan  menghasilkan  filtrat  pertama  dan  residu  pertama.  Sampel  kemudian  diremaserasi dengan  cara  yang  sama  hingga  menghasilkan  filtrat  kedua.  Hasil  penyaringan  filtrat pertama  dan  filtrat  kedua  kemudian  digabungkan  untuk  memperoleh  filtrat  total.  Filtrat total  ini  kemudian  di  dipekatkan  menggunakan  rotary  evaporator  untuk  mendapatkan ekstrak  kental.  Ekstrak  kental  Rumput  Israel  yang  dihasilkan  kemudian  ditimbang  dan dimasukkan kedalam wadah.

## Pembuatan Media Agar media suplemen (NA)
Suplemen  agar  dapat  menjadi  media  padat  untuk  pengembangan  mikroorganisme  yang umum digunakan dalam kultur mikroorganisme yang berbeda. Cara pembuatannya adalah sebanyak  23  g  bahan  supplemen  dimasukkan  ke  dalam  erlenmeyer,  dimasukkan 1000  ml aquades  dan  setelah  itu  dikocok  sampai hancur  dan  setelah  itu  disterilkan  dalam autoklaf pada suhu 121 derajat celcius selama 15 menit.
Sari  H,  Fahdi  F  :  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Rumput  Laut  Israel ( Asystasiagangetica L.) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Eschericia coli

## Pembuatan Media Agar Miring
Media  agar  suplemen  0,56  g  sebanyak  3  ml  yang  telah  dicairkan  dimasukkan  ke  dalam tabung reaksi steril dan didiamkan pada suhu kamar sampai set  dalam posisi miring dan setelah itu dimasukkan ke dalam lemari es.

## III. HASIL PENELITIAN
Hasil  Uji  Aktivitas  Anti  Bakteri  Ekstrak  Etanol  Rumput  Israel  ( Asystasia  gangetica L.) terhadap pertumbuhan bakteri Eschericia coli diilihat dari terbentuknya zona hambat pada media tumbuh bakteri. Dari penelitian ini didapatkan rata-rata zona hambat yang terbentuk setelah tiga kali pengulangan pada konsentrasi 25% yaitu 10,4 mm, konsentrasi 50% yaitu 12,6  mm,  pada  konsentrasi  75%  yaitu  13,9  mm,  pada  konsentrasi  100%  yaitu  19,6  mm. Sementara  itu  untuk  kontrol  negatif  tidak  ditemukan  adanya  daya  hambat  pada  media tumbuh bakteri, dan untuk kontrol positif terdapat daya hambat sebesar 20,4mm (Tabel 1).
Tabel 1. Rata-rata diameter zona hambat yang terbentuk pad auji aktivitas anti bakteri terhadap ekstrak etanol rumput israel.
No. Konsentrasi Diameter zona hambat P1 P2 P3 R 1 25% 8,4 mm 10,9 mm 12 mm 10,4 mm 2 50% 10 mm 13,5 mm 14,3 mm 12,6 mm 3 75% 11 mm 14,5 mm 16,4 mm 13,9 mm 4 100% 18,4 mm 19,8 mm 20,8 mm 19,6 mm 5 K (+) 19,4 mm 20,4 mm 21,4 mm 20,4 mm 6 K (-) 0 0 0 0
Perbedaan  diameter  zona  hambat  pada  setiap  konsentrasi  dikarenakan  adanya  senyawa- senyawa  fitokimia  pada  ekstrak  rumput  israel,  seperti  phenol,  flavonoid,  alkaloid, glicosida,  tanin,  terpenoid  dan  saponin  (Sivaraj  et  al,  2012).  Flavonoid  bekerja  sebagai antibakteri,  cara  kerja  senyawa  ini  dengan  cara  merusak  kemampuan  permeabilitas  dari membran  sitoplasma  akibatnya  nutrisi  yang  dibutuhkan  oleh  bakteri  sulit  masuk  dan protein-protein  penyusun  sel  akan  keluar  dengan  sendirinya  karena  permeabilitas sitoplasma  sudah  rusak  hal  ini  menyebabkan  bakteri  tidak  bisa  berkembang  biak  dan hidup.  Alkaloid  dapat  bertindak  sebagai  antibakteri,  cara  kerjanya  dengan  mengganggu komponen penyusun dinding sel bakteri yaitu peptidoglikan, akibatnya lapisan dinding sel tidak terbentuk dengan sempurna hal ini menyebabkan kematian pada selnya (Saptowo et al, 2022). Senyawa lain yang dapat berfungsi sebagai antobakteri dan terdapat pada ekstrak rumput  israel  adalah  tanin,  tanin  menyebabkan  lisis  pada  sel  bakteri.  Target  tanin  adalah dinding  polipeptida  dinding  sel  bakteri,  akibatnya  pembentukan  dinding  sel  bakteri  tidak sempurna dan menyebabkan kematian pada dinding sel bakteri.
Selain itu tanin juga mampu menon-aktifkan enzim bakteri dan akan mengganggu jalannya protein  pada  lapisan  dalam  sel  bakteri  (Ngajow  et  al,  2013).  Saponin  bekerja  dengan meningkatkan  kemampuan  permeabilitas  membran  sel  hal  aini  akan  mengakibatkan hemolisis, ketika bakteri berinteraksi dengan sel bakteri maka akan terjadi lisis (pecahnya sel  bakteri)  (Saptowo  et  al,  2022).  Kontrol  negatif  yang  menggunakan  aquadest  tidak memperlihatkan adanya zona hambat. Aquadest digunakan sebagai pengencer larutan dan
Sari  H,  Fahdi  F  :  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Rumput  Laut  Israel ( Asystasiagangetica L.) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Eschericia coli
tidak  memberikan  pengaruh  terhadap  aktiviyas  antibakteri.  Karena  itu  aktivitas penghambatan  dipastikan  berasal  dari  ekstrak  tumbuhan  rumput  israel  yang  digunakan. Kontrol  positif  yang  digunakan  adalah  amoxicilin,  obat  ini  termasuk  kedalam  obat antibiotik golongan penisilin dan sering digunakan untuk mengobati penyakit infeksi yang diakibatkan  oleh  bakteri  gram  positif  dan  gram  negatif.  Zona  hambat  ditandai  dengan adanya  zona  bening  dan  digunakan  sebagai  acuan  penentuan  tingkat  resistensi  bakteri terhadap  antibiotik  dimana  semakin  besar  diameter  zona  bening  yang  terbentuk  maka semakin  menghambat  pertumbuhan  bakteri.  Zona  hambat  yang  lebih  besar  dapat  terlihat pada  konsentrasi  100%  dibandingkan  dengan  yang  terbentuk  pada  konsentrasi  75%,  50% dan  25%.  Ketika  konsentrasi  ekstrak  yang  semakin  tinggi  maka  bahan  aktif  antibakteri yang terkandung juga semakin banyak (Gambar 2).
Gambar 2. Grafik rata-rata luas zona hambat yang terbentuk pada biakan bakteri Eschericia coli yang diberikan ekstrak etanol rumput israel ( Asystasia gangetica L.)
Gambar 3 . Bakteri E. Coli 10.4 12.6 13.9 19.6 20.4 0 0 5 10 15 20 25 25% 50% 75% 100% Kontrol (+) Kontrol (-) K on sent ra si Rata-rata (mm)

## Rata-rata luas zona hambat (mm)
Sari  H,  Fahdi  F  :  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Rumput  Laut  Israel ( Asystasiagangetica L.) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Eschericia coli
Berdasarkan  Hasil  output  dari  analisis  data  statistik  yang  diperoleh  menunjukkan  bahwa data  uji  aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri Escherichia  coli bersifat  normal  dan homogen  dilihat  dari  nilai  signifikan  0,080>0,05  dan  uji  one  way  anova  yang  diperoleh yaitu  nilai  signifikan  0,000<0,05  maka  disimpulkan  hipotesis  diterima.  Berdasarkan  uji Shapiro wilk yang bertujuan untuk mengolah data yang jumlahnyadibawah 50 didapatkan hasil  signifikansi  0,037>0,005  maka  disimpulkan  data  terdistribusi  secara  normal. Berdasarkan uji Descriptive statistics diperoleh standar deviasi yaitu 7,1307.  Berdasarkan uji  Tukeys  B  didapatkan  hasil  rata-rata  zona  hambat  yang  lebih  baik  pada  konsentrasi 100%  yaitu  sebesar  19,6mm.  Aktivitas  penghambatan  antimikroba  dapat  dikelompokkan kedalam empat kategori, yaitu: aktivitas lemah (< 5 mm), sedang (5-10mm), kuat (10-20) dan sangat kuat (>20). Penentuan daya hambatnya ditentukan dengan adanya zona bening yang  dihasilkan  didaerah  kertas  cakram  dan  diameternya  diukur  dalam  satuan  milimeter (Kusumawati  et  al.,  2008).  Pada  penelitian  ini  aktivitas  zona  hambat  dari  rumput  israel terhadap pertumbuhan bakteri Eschericia coli dapat dikategorikan kedalam kategori kuat.

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan  tentang  pengaruh  ekstrak  Rumput  Israel ( Asystasia  gangetica  L.) terhadap  pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli dengan  metode difusi  agar  dapat  disimpulkan  bahwa  Ekstrak  rumput  israel  ( Asystasia gangetica  L .) mempunyai  efektivitas  terhadap  pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli yang  ditunjukkan dengan  adanya  daerah  jernih  yang  terbentuk  pada  media.  Konsentrasi  ekstrak  Rumput Israel  yang  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli yaitu  konsentrasi 100%,  75%,  50%,  25%  dan  yang  paling  besar  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri Escherichia coli adalah konsentrasi 100%.

## DAFTAR PUSTAKA
Gopal,  T.  K.,  Megha,  G.,  et  al.  2013.  Phytochemical  and  Pharmacological  Studies  ion Whole  Plant  of  Asystasia  gangetica .  Indian  Journal  of  Research  in  Pharmacy  and Biotechnology . 1(3) : 365-370.
Joegijantoro, R. 2019. Penyakit Infeksi . Intimedia. Malang.
Kensa,  V.M.  2011.  Studies  on  Phytochemical  Profile  and  Antimicrobial  Activity  on Asystasia gangetica (L.) T. Anderson. Plant Sci Feed , 1(7): 112-117.
Ngajow, M., Abidjulu, J. & Kamu, V.S. 2013. Pengaruh Antibakteri Ekstrak Kulit Batang Matoa  ( Pometia  pinnata )  terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus secara  In  vitro. Jurnal MIPA UNSTRAT , 2(2). Priwiratama,  H.  2011. Asystasia  gangetica  subsp.  Micrantha.  Vol.  G.  Edisi  001. Pusat Penelitian Kelapa Sawit.
Rahayu, W.P., Nurjannah, S., Komalasari, E. 2018. Eschericia coli : Patogenitas, Analisis dan Kajian Risiko.IPB Press. Bogor.
Saptowo, A., Supriningrum, R., dan Supomo. 2022. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kulit Batang  Sekilang  ( Embeliaborneensis  Scheff )  terhadap  Bakteri Propionibacterium acnes dan Staphylococcus  epidermidis. Jurnal  Al  Ulum  Sains  dan  Teknologi ,  Vol 7(2).
Sivaraj,  R.,  Sama,  K.,  Abdul  Salam,  H.,  dan  P.  Rajiv.  2013.  Pharmacognostical  and phytocemichal  screening  of Asystasia  gangetica (Chinese  violet). International research journal of pharmacy, 4(2). Talaro,  K.P.  2001. Foundation  in  michrobiology  :  Basic  Principles,  Fourth  Edition. Mc Graw Hill. New York.
Sari  H,  Fahdi  F  :  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Rumput  Laut  Israel ( Asystasiagangetica L.) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Eschericia coli
Trimin,  K.  2015.  Inventarisasi  Jenis-Jenis  Tumbuhan  Berkhasiat  Obat  Di  Desa  Tanjung Baru  Petai  Kecamatan  Tanjung  Batu  Kabupaten  Ogan  Ilir  (OI)  Provinsi  Sumatera Selatan. Jurnal Sainmatik , Vol 12(1). 32-41.
Wahyuni,  L.,  S.  2014.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Kubis  ( Brassica  oleracea L.)  terhadap bakteri Eschericia coli. UIN Syarif Hidayatullah. Jakarta.
Accepted Date Revised Date Decided Date Accepted to Publish 02 Mei  2023 18 Mei  2023 07 Juni 2023 Ya