## UJI AKTIVITAS ANTIINFLAMASI KUERSETIN KULIT
BAWANG MERAH ( Allium cepa L.) PADA MENCIT PUTIH
JANTAN ( Mus musculus )

## Yulistia Budianti Soemarie
Akademi Farmasi Samarinda Email: yulistiabudianti@ymail.com

## ABSTRAK
Inflamasi merupakan reaksi lokal jaringan terhadap infeksi atau cedera dan melibatkan lebih banyak mediator. Pemanfaatan obat tradisional perlu digunakan untuk  meminimalisir  efek  samping  obat  golongan  antiinflamasi  non  steroid, seperti penggunaan kulit bawang merah ( Allium cepa L.). Penelitian ini bertujuan untuk  mengetahui  aktivitas  antiinflamasi  kuersetin  dari  ekstrak  kulit  bawang merah yang diperoleh dengan metode maserasi.
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental  yang  dibagi  menjadi  5 kelompok yaitu kontrol positif (Kalium Diklofenak 6,5mg/kgBB), kontrol negatif (Na-CMC),  kuersetin  kulit  bawang  merah  dosis  I  (50mg/kgBB),  dosis  II (100mg/kgBB)  dan  dosis  III  (200mg/kgBB).  Pemberian  senyawa  uji  dilakukan secara  peroral,  setelah  30  menit  kaki  mencit  sebelah  kanan  diinduksi  dengan karagenin  1%.  Dianalisis  volume  radang  kaki  mencit  dengan area  under  curve (AUC).
Hasil  penelitian  menunjukan  bahwa  kuersetin  kulit  bawang  merah memiliki aktivitas antiinflamasi. Dari hasil perhitungan nilai AUC tiap perlakuan didapatkan  hasil  nilai  daya  antiinflamasi  untuk  dosis  I  sebesar  57,13%,  dosis  II sebesar 59,08%, dan dosis III sebesar 73,75% dan dilakukan uji statistik ANOVA dengan  nilai p-value 0,005  (<  0,05)  yang  berarti  terdapat  perbedaan  bermakna antara  kontrol  positif,  dosis  I,  dan  dosis  II  berbeda  dengan  dosis  III,  sehingga dosis optimal yang didapat yaitu dosis III (200 mg/kgBB).
Kata Kunci : Antiinflamasi, Allium cepa L., kuarsetin, Area Under Curve

## ABSTRACT
Inflammation  is  a  local  reaction  of  infection  or  tissue  injury  and  involves more mediators. Utilization of traditional medicine should be used to minimize the side  effects  of  non-steroidal  anti-inflammatory  drugs,  such  as  the  use  of  onion skin (Allium cepa L.). This study aims to determine the activity of quercetin onion skin  and the optimal dose of  quercetin as a potential  anti-inflammatory on male white mice.
This  study  is  an  experimental  research.  Red  onion  skins  extracted  by maceration  method.  Preparation  of  the  test  is  divided  into  five  groups:  control positive (Diclofenac Potassium 6,5mg/kg), control negative (Na-CMC), quercetin of  onion  skin  dose  I  (50mg/kg),  dose  II  (100mg/kg)  and  dose  III  (200mg/kg). Adduction  of  test  compounds  is  given  by  oral,  after  30  minute  the  right  paw  of
mice induced by  karagenin  1 %. Paw  volume is  analyzed with area under curve (AUC).
The results showed that quercetin of onions skin have an anti-inflammatory activity.  From  the  analyzed  of  AUC  for  each  dose  of  quercetin  showed  anti- inflammatory  power  value  for  dose  I  amounted  57.13  %,  dose  II  59.08%  ,  and dose III 73.75 % and ANOVA statistical test with p-value 0.005 ( < 0.05 ), which means there is a significant difference between control positive,  dose I , and dose II with dose III,  the optimal dose is dose III (200 mg / kg).
Key Words : Anti-inflamation, Allium cepa L., kuarsetin, Area Under Curve

## PENDAHULUAN
Inflamasi atau radang
merupakan  reaksi  lokal  jaringan terhadap  infeksi  atau  cedera  dan melibatkan  lebih  banyak  mediator. Inflamasi  memiliki  angka  kejadian yang cukup tinggi, dimana inflamasi dapat  disebabkan  oleh  trauma  fisik, infeksi  maupun  reaksi  antigen  dari suatu  penyakit  (Yuliati,  2010). Pengobatan  inflamasi  yang  selama ini dilakukan pada umumnya menggunakan  obat-obatan  modern yang  memiliki  efek  samping  yang tinggi .  Obat  modern  yang  biasa digunakan  ialah  obat  antiinflamasi non  steroid  (AINS)  yang  memiliki efek  samping  merugikan  tubuh seperti  tukak  lambung (Tjay  dan Rahardja, 2007).
Salah  satu  tanaman  yang  dapat digunakan sebagai antiinflamasi bahan  obat  alam  adalah  bawang merah  ( Allium  cepa L.).  Bawang
merah  memiliki  kandungan  senyawa flavonoid  seperti  rutin  dan  kuersetin yang diyakini dapat digunakan sebagai  antiinflamasi  (Filomena et al ,  2007).  Menurut  Jayasekara, et  al (2002), flavonoid dapat menghambat pelepasan mediator-mediator inflamasi seperti histamin dan prostaglandin.  Menurut  penelitian sebelumnya mengatakan bahwa, senyawa  rutin  dan  kuersetin  yang terkandung  dalam  suatu  ekstrak dapat memberikan aktivitas antiinflamasi  pada  tikus  dan  bawang merah  mampu  memberikan  aktivitas antiinflamasi karena adanya senyawa flavonoid yang terkandung di dalamnya (Teresita et al , 2001).
Berdasarkan  uraian  di  atas, maka  dilakukan  penelitian  aktivitas antiinflamasi  dari  kuersetin  kulit bawang  merah  sebagai  antiinflamasi pada  mencit  putih  jantan  ( Mus musculus ).

## METODE PENELITIAN
Determinasi  Tanaman  Bawang
Merah ( Allium cepa L.)
Determinasi tumbuhan dilakukan  terlebih  dahulu  sebelum dilakukan penelitian untuk memastikan  jenis  dan  kebenaran tumbuhan yang digunakan. Determinasi dilakukan di Laboratorium Fisiologi Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam (FMIPA) Universitas
Mulawarman Samarinda.
Penyiapan Simplisia Kulit Bawang
Merah ( Allium cepa L.)
Kulit  bawang  merah  ( Allium cepa L) dikumpulkan dari salah satu pedagang  bawang  di  Pasar  Segiri, Samarinda.  Kulit  bawang  merah kemudian  disortasi  dari  pengotor yang  masih  menempel,  kemudian kulit  bawang  merah  dicuci  dengan air  mengalir.  Pengeringan  simplisia dilakukan  dengan  cara  diangin- anginkan dan tidak langsung terkena paparan cahaya matahari.
Pembuatan
Kuersetin Kulit
Bawang Merah ( Allium cepa L.)
Proses ekstraksi kulit bawang merah menggunakan metode
maserasi dengan pelarut etanol 95%.
Kulit  bawang  merah  sebanyak  2  kg dimasukkan ke dalam bejana maserasi kemudian ditambahkan pelarut  etanol  95%  sebanyak  2  liter (dengan  perbandingan  1:10)  dan diaduk  selama  6  jam  dan  didiamkan selama  18  jam  sambil  sesekali diaduk.  Bejana  disimpan  tertutup rapat  dan  terhindar  dari  sinar matahari. Maserat disaring, kemudian  filtrat  yang  terkumpul diuapkan menggunakan rotary evaporator hingga  volume  menjadi sepertiganya.  Simpan  filtrat  dalam lemari  pendingin  selama  1  hari, kemudian  akan  muncul  endapan. Saring  dengan  kertas  saring.  Bilas endapan  yang  didapat  dengan  etanol 95%.  Saring  menggunakan  kertas saring,  lalu  filtrat  diuapkan  hingga didapat  menjadi  serbuk  kuning kemerahan  sedangkan  endapan  yang didapat  dicuci  dengan  etanol  95%. Perlakuan  ini  diulang  sebanyak  3 kali untuk memisahkan senyawa lain yang  tidak  diinginkan.  Timbang untuk  mengetahui  rendemen  dari hasil yang didapat.
Rekristalisasi Kuersetin Kulit Bawang Merah ( Allium cepa L.)
Proses rekristalisasi
dilakukan dengan melarutkan
endapan kulit bawang merah dengan  etanol p.a dan  ditambahkan dengan air suling. Didiamkan selama 24  jam didalam suhu rendah
(2-8 o C).  Setelah  tampak  endapan kuning  pada  dasar  botol  kemudin disaring dengan menggunakan kertas  saring.  Selanjutnya  filtrat yang  tertahan  pada  kertas  saring dibilas  dengan  etanol  95%  dan dikeringkan menggunakan hair dryer .  Ditimbang  untuk  mengetahui rendemen  hasil rekristalisasi.
Pengujian Aktivitas Antiinflamasi
Disiapkan  20  ekor  mencit putih  jantan,  sebelum  dilakukan pengujian mencit dipuasakan terlebih  dahulu  selama  18  jam  dan tetap  diberi  air  minum.  Mencit dibagi menjadi 5 kelompok masing- masing  4  ekor  mencit.  Setiap kelompok  mencit  ditimbang  dan telapak  kaki  kanan  belakang  diberi tanda  diatas  mata  kaki.  Semua mencit  putih  diukur  volume  kaki awalnya  pada  pletismometer  (V 0 ) sampai  batas  tanda  yang  telah
diberikan. Kelompok kontrol negatif diberi suspensi Na-CMC. Kelompok kontrol positif diberi suspensi kalium diklofenak. Kelompok perlakuan  pada  mencit  putih  jantan masing-masing diberi suspensi kuersetin  dengan  dosis  50,  100  dan 200mg/kgBB.  Tiga  puluh  menit kemudian  seluruh  kelompok  hewan yang  telah  mendapatkan  perlakuan disuntikkan  karagenin  1%  dalam larutan NaCl 0,9% pada telapak kaki kanan mencit dengan volume 0,1 ml. Pengukuran volume selama dilakukan  10  kali  setiap  30  menit setelah pemberian karagenin dengan menggunakan  alat  pletismometer (V t ).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Determinasi dilakukan di Laboratorium Anatomi dan Sistematika Tumbuhan, Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam Universitas Mulawaran Samarinda. Hasil determinasi
tanaman  ini  menyatakan  bahwa sampel  yang  digunakan  adalah  kulit bawang  merah  ( Allium  cepa L . )  dari genus Allium dan family Liliaceae.
Kulit  bawang  merah  ( Allium cepa L . ) dikumpulkan dari salah satu pedagang  bawang  di  Pasar  Segiri, Samarinda.  Kulit  bawang  merah kemudian disortasi basah dari pengotor  yang  masih  menempel selanjutnya  kulit  bawang  merah dicuci  dengan  air  mengalir.  Proses pengeringan  dilakukan  dengan  cara dikering  anginkan  dan  tidak  terkena paparan  cahaya  matahari  secara langsung.  Pengeringan  dengan  suhu yang terlalu tinggi akan
mengakibatkan perubahan kimia pada  kandungan  senyawa  aktifnya diantara  senyawa  tersebut  adalah alkaloid dan glikosida (Mega, 2014). Proses pengeringan dilakukan dengan  tujuan  mengurangi  kadar  air yang  terdapat  dalam  kulit  bawang merah  agar  tidak  terjadi  kerusakan yang oleh jamur atau kapang (Agoes, 2007).  Setelah  itu  dilakukan  sortasi kering  untuk  memisahkan  pengotor yang masih tersisa
Metode ekstraksi yang digunakan pada penelitian ini adalah metode maserasi menggunakan etanol 95%. Proses maserasi
dilakukan  pengulangan  sebanyak  2 kali. Maserat yang diperoleh
kemudian  disaring  lalu  diuapkan menggunakan rotary evaporator hingga volumenya menjadi sepertiganya.  Filtrat  yang  didapat kemudian  diberi  air  dingin  dan disimpan  dalam  lemari  pendingin selama  24  jam  kemudian  akan muncul  endapan  berwarna  coklat. Berdasarkan  hasil  endapan  yang didapat  berwarna  coklat,  saring  dan endapan  dibilas  dengan  etanol  95% kemudian disaring kembali. Perlakuan  ini  diulang  sebanyak  3-4 kali  atau  setelah  filtrat  penyaringan menjadi  bening.  Filtrat  yang  telah didapat  tadi  kemudian  diuapkan, kemudian  diberi  air  dingin  dan disimpan  dalam  lemari  pendingin selama  24  jam  dengan  suhu  rendah (2-8°C) akan muncul endapan kuning.  Endapan  kuning  disaring dengan kertas saring dan serbuk yang didapat kemudian ditimbang.
Penelitian ini dilakukan dengan pembuatan  kuersetin  kulit  bawang merah dengan dosis I
(500mg/kgBB),  II  (100mg/kgBB) dan  III  (200mg/kgBB),  Na-CMC 0,5%  sebagai  kontrol  negatif  dan Kalium  Diklofenak  50  mg  sebagai pembanding  dengan  dosis  tersebut.
Dalam pembuatan suspensi kuersetin kulit bawang merah, digunakan  Na-CMC  0,5%  untuk memudahkan  tercampurnya  ekstrak dalam  air.  Karagenin  dilarutkan dengan  campuran  NaCl  dengan tujuan agar larutan isotonis, sehingga saat  diinjeksikan  dalam  tubuh  tidak merusak sel-sel darah (Farista, 2015).
Kontrol  positif  yang digunakan adalah  Kalium  Diklofenak.  Pada umumnya digunakan  sebagai kontrol positif dalam
penelitian antiinflamasi  karena  garam  kalium lebih    mudah    larut    dalam    air sehingga    kalium    diklofenak    dapat diabsorbsi    lebih    cepat    dan    lebih aman  dilambung  dan  obat  ini  juga memiliki  daya  antiradang yang paling  kuat  dengan  efek  samping yang lebih kecil dibandingkan dengan  obat  lainnya  (Indometasin dan  Piroksikam)  (Tjay,  T.H.,  dan Raharja, K. 2002) Pengukuran volume  radang  pada  telapak  kaki mencit  dilakukan  setiap  30  menit selama  5,5  jam  setelah  telapak  kaki belakang mencit diinduksikan karagenin.  Rata-rata  volume  radang dihitung  sesuai  data  volume radang
yang  terbentuk  pada  tiap  jam  dan dosisnya.
Hewan  uji  yang  digunakan adalah  mencit  putih  jantan  dengan alasan kondisi biologis mencit jantan lebih stabil bila dibandingkan dengan mencit betina yang kondisis biologisnya  dipengaruhi  masa  siklus etrus dan jenis kelamin jantan dipilih agar  respon  inflamasi  pada  mencit tidak dipengaruhi oleh  hormon esterogen  dan  progesterone  (Herni, 2015).
Pengujian aktivitas antiinflamasi  pada  penelitian  ini menggunakan  20  ekor  mencit  dan dikelompokkan  menjadi  5  kelompok perlakuan yang masing-masing kelompok  perlakuan  terdiri  dari  4 ekor mencit. Bahan yang digunakan dalam pengujian ditambahkan suspensi Na-CMC
0,5%  sebagai  pensuspensi  sekaligus sebagai  kontrol  negatif.  Perlakuan pertama yaitu kontrol positif dimana menggunakan kalium diklofenak  pada  dosis  6,5  mg/kgBB yang  dilarutkan  menggunakan  Na- CMC  0,5%.  Perlakuan  kedua  yaitu kontrol negatif, dimana menggunakan Na.  CMC  0,5%.
Perlakuan  ketiga  yaitu  dosis  I dimana kuersetin kulit bawang merah dengan dosis 50 mg/kgBB ditimbang  sebanyak  40  mg  dan ditambahkan  10  ml  Na-CMC  0,5%. Perlakuan  keempat  yaitu  Dosis  II dimana kuersetin kulit bawang merah dosis 200 mg/kgBB ditimbang sebanyak  80  mg  dan  dilarutkan
dalam  10  ml  Na-CMC  0,5%  sebagai pensuspensi  dan  begitu  pula  untuk perlakuan  ketiga  yaitu  Dosis  III dimana kuersetin kulit bawang merah dengan dosis 400 mg/kgBB ditimbang  sebanyak  160  mg  dan dilarutkan  dalam  bentuk  suspensi dengan  Na-CMC  0,5%  sebagai pensuspensi sebanyak 10 ml.
Tabel I. Nilai Area Under Curve dan Daya Antiinflamasi No Perlakuan AUC (ml.jam) % Daya Anti Inflamasi 1 Kontrol Negatif 0,213 - 2 Kontrol Positif 0,077 62,92% 3 Dosis I 125 mg/kgBB 0,089 57,13% 4 Dosis II 250 mg/kgBB 0,085 59,08% 5 Dosis III 500 mg/kgBB 0,055 73,75%
Nilai  AUC  dan  persen  daya antiinflamasi  yang  tertera  pada  tabel
I,  menunjukkan  nilai  AUC  dan persen  daya  antiinflamasi  (%  DAI)
setiap kelompok perlakuan berdasarkan  hasil  pengamatan  rata- rata  volume  radang  kaki  mencit. Efek  ditunjukkan  dengan  terlihatnya semakin  kecil  nilai  AUC  yang diperoleh.  Semakin  kecil  nilai  yang diperoleh maka semakin besar kemampuan sediaan uji yang diberikan  pada  kelompok  perlakuan dalam menghambat peradangan pada kaki  mencit  yang  telah  diinduksi dengan karagenin.
Pada  Gambar  1  menunjukkan bahwa kurva tertinggi adalah kelompok  kontrol  negatif  yang hanya diberikan larutan uji Na-CMC 0,5%. Volume radang dan nilai AUC pada  kelompok  kontrol  negatif adalah yang terbesar jika dibandingkan dengan kelompok perlakuan  lainnya.  Pada  kelompok tersebut, pemberian karagenin menghasilkan edema yang
meningkat pada jam ke-0,5. Kelompok  kontrol  negatif  memiliki nilai  AUC  sebesar  0,213  ml.jam, besarnya  nilai  AUC  yang  didapat pada  pengukuran  kontrol  negatif
dikarenakan tidak adanya pemberian
sediaan  uji  yang  mampu  menekan radang pada kaki mencit. Pada setiap kelompok
perlakuan dosis menunjukkan  terjadinya  penurunan volume radang. Pemberian sediaan uji dilakukan 0,5 jam sebelum
dilakukan  induksi  karagenin,  pada saat  diinduksi  daya  antiinflamasi dari masing-masing perlakuan belum mampu  menekan  inflamasi  yang terjadi.  Daya  antiinflamasi  untuk kontrol  positif  yaitu  62,92%  dan dosis  yang  daya  antiinflamasinya melebihi  perlakuan  kontrol  positif ialah  dosis  III  daya  antiinflamasi sebesar  73,75%  sementara  untuk dosis I dan dosis II daya antiinflamasinya  mendekati  dengan perlakuan  kontrol  positif.  Adanya penurunan pada Dosis I, Dosis II dan Dosis III menunjukkan bahwa kuersetin  kulit  bawang  merah  dapat
berkhasiat sebagai antiinflamasi karena kemampuan menurunkan volume radang pada kaki mencit. Presentase nilai daya antiinflamasi  menunjukkan  bahwa semakin  besar  nilai  yang  didapatkan maka  semakin  kecil  nilai  AUC sehingga  dapat  dinyatakan  bahwa semakin  baik  kuersetin  kulit  bawang merah  menurunkan  volume  radang pada  kaki  mencit  setelah  diinduksi karagenin sebagai zat iritan. Berdasarkan  hasil  pengukuran  yang telah  dilakukan  diketahui  bahwa kuersetin kulit bawang merah mampu  menghambat  pembentukan radang  pada  telapak  kaki  mencit yang diakibatkan oleh induksi
Gambar 1. Grafik Area Under Curve (AUC )
karagenin. Penurunan volume radang  pada  kaki  mencit  diduga karena aktivitas dari senyawa metabolit  sekunder  yang  terkandung dalam  kulit  bawang  merah  yaitu senyawa flavonoid dimana salah satu senyawa  yang  diduga  memberikan aktivitas antiinflamasi ialah senyawa kuersetin.Senyawa  flavonoid  dapat menghambat  inflamasi  dengan  cara menghambat  enzim  siklooksigenase dan  enzim  lipooksigenase  pada  saat metabolisme asam arakhidonat,
sehingga mediator inflamasi leukotrin, histamin, bradikinin, tromboksan dan prostaglandin terhambat. Flavonoid bekerja dengan menghambat  fase  penting  dalam biosintesis  prostaglandin,  yaitu  pada jalur  enzim  siklooksigenase  (Sabir, 2003).

## KESIMPULAN
Dari  penelitian  yang  telah dilakukan,  dapat  disimpulkan  bahwa Kuersetin kulit bawang merah memiliki aktivitas antiinflamasi pada mencit  putih  jantan  dengan  daya antiinflamasi  dosis  I  (50  mg/kgBB)
57,13%,  dosis  II  (100  mg/kgBB)
59,08% dan dosis III (200 mg/kgBB)
73,75%. Dosis optimum yang mampu  memiliki  potensi  sebagai antiinflamasi  adalah  dosis  III  200 mg/kgBB sebesar 73,75%.

## DAFTAR PUSTAKA
Agoes,  Goeswin.  2007. Teknologi Bahan Alam . Bandung:  ITB.
Hal. 14.
Farista,  Mila  Ulfah.  2015.  Uji Aktivitas Antiinflamasi Ekstrak  Etanol  Daun  Kersen ( Muntingia calabura L.)
Pada  Mencit  Putih  Jantan ( Mus musculus ). Karya Tulis Ilmiah . Samarinda: Akademi Farmasi Samarinda. Hal 37.
Filomena, C., Silvio., S., Mariangela, M.,  Federica,  M.,  Giancarlo, A.S., Dimitar, U., Aurelia, T.,
Francesco,  M.,  and  Roberto, D.L.  2007.  In  Vivo  Anti- inflammatory  and  In  Vitro Antioxidant Activities of Mediterranean Dietary Plants. Journal of Ethnopharmaclogy. 116 (2008). 144-151 Herni,  Mantulangi  Anita.  2015. Uji Aktivitas Antiinflamasi Ekstrak  Etanl  Daun  Pandan Wangi ( Pandanus amaryllifolius Roxb.)  Pada Mencit  Putih  Jantan  ( Mus musculus ). Karya Tulis
Ilmiah .  Samarinda:  Akademi
Farmasi  Samarinda.  Hal.  47,
56 -57.
Jayasekara,  T.I.,  Stevenson,  P.C., Belmain,  S.R.,  Farman,  D.I., and Hall, D.R. 2002. Identification \of
Metylsalicylate as the Principal Volatile Component in  the  Methanol  Exstract  of Root  Bark  of Securidaca
longipedunculata Fers. J. Mass Spec. 37:577-580.
Mega. 2014. Uji Aktivitas Antibakteri  Pada  Sediaan Gel  Ekstrak  Umbi  Bawang Tiwai  ( Eleutherine  bulbosa
(Mill.)  Urb.)  Sebagai Anti Acne . Karya  Tulis  Ilmiah . Samarinda:
Akademi Farmasi Samarinda. Hal. 37. Sabir, A. 2003. Pemanfaatan Flavonoid di Bidang Kedokteran  Gigi .  Majalah Kedokteran Gigi. Edisi Khusus Temu Ilmiah Nasional III. Surabaya: FKG Unair. Teresita, G., Alejandra, E.R., Americo,  O.  J.,  &  Lilian, E.P. 2001. Anti- inflammatory  Properties  of Plant  Flavonoids.  Effects  of Rutin, Quercetin and Hisperidin on Adjusvant
Arthritis  in  Rat. Elsevier  Il Farmaco 56(2001) , 683-687. Tjay,  T.H.,  dan  Raharja,  K.  2007.
Obat-Obat  Penting .Jakarta:
PT. Gramedia Yuliati, K.S. 2010. Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol Kulit Kacang Tanah (Arachis  hypogaea  L.)  Pada Tikus  Putih  Jantan  Galur Wistar Yang Diinduksi Karagenin . Skripsi .
Surakarta:  Fakultas  Farmasi Muhammadiyah Surakarta.