## PENGARUH GMH DAN LA TERHADAP KOLONI BAKTERI LACTOBACILLUS spp PADA BACTRIAL VAGINOSIS
Miftakhul Mahfirah Ermadona 1 , Indah Mauludiyah 2
1 Prodi Sarjana Kebidanan Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Kendedes Malang Email: miftakhulmahfirahermadona@gmail.com
2 Prodi Profesi Kebidanan Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Kendedes Malang Email: mauludiyahpitoyo@gmail.com

## ABSTRACT
Bacterial Vaginosis (BV) is an infection caused by an imbalance in the normal vaginal flora where lactobacillus spp., producing  hydrogen peroxidase  (H2O2)  is  replaced  by anaerobic  bacteria  such  as Gardnerella  vaginalis, Mobiluncus  spp.,  Prevotella  spp.,  Bacterides,  and  Mycoplasma  sp.,  which  are  generally  occurs  in  women  of childbearing age  (WUS).  Substitution of  Lactobacillus  spp.,  this  causes  a decrease  in  H2O2  which  is  generally characterized  by  the  production  of  a  lot  of  vaginal  secretions,  gray  to  yellow,  thin,  homogeneous,  has  a  fishy odor, and  there  is  an  increase  in  pH.  Glucomannan  Hydrolysates  (GMH)  as  a prebiotic  is  expected  to  provide nutrition to Lactobacillus spp so that it can multiply and increase in number, while BV gel containing Lactic Acid (LA)  can  reduce  vaginal  pH  to  become  acidic  so  that  pathogenic  bacteria  are  not  suitable  for  growing  in  an acidic  environment.  The  type  of  research  used  is  true  experiment  pretest  -  posttest.  Respondents  in  the  study totaled  28  people  and  were  grouped  into  4,  namely  1)  Given  metronidazole  antibiotics.  2)  Given  Antibiotics  + GMH.  3)  Given  LA.  4)  Given  LA+GMH.  The  number  of  bacterial  colonies  through  the  streak  plate  method. Giving  LA+GMH  to  BV  women  of  childbearing  age  has  a  significant  effect  on  increasing  the  number  of Lactobacillus spp bacterial colonies. Therefore giving LA+GMH is useful in treating BV
Keywords: Glucomannan Hydrolysates (GMH), Lactic Acid (LA), Bacterial Vaginosis

## 1. PENDAHULUAN
Lactobacillus merupakan  bakteri  dominan didalam  vagina  wanita  yang  berperan  sebagai regulator flora normal vagina. Bacterial Vaginosis (BV)  adalah  infeksi  yang  disebabkan  oleh ketidakseimbangan  flora  normal  pada  vagina dimana lactobacillus  spp., penghasil  hydrogen peroksidase  (H 2 O 2 )  digantikan  oleh  bakteri anaerob seperti Gardnerella vaginalis , Mobiluncus  spp,  Prevotella  spp.,  Bacterides, dan Mycoplasma  sp., yang  umumnya  terjadi  pada Wanita Usia Subur (WUS) .
Pergantian lactobacillus  spp., ini  menyebabkan  penurunan H 2 O 2 yang  umumnya  ditandai  dengan  adanya produksi secret vagina  yang  banyak,  berwarna abu-abu  hingga  kuning,  tipis,  homogen,  berbau amis  ( fishy  odor ),  dan  terdapat  peningkatan  pH. Diperkirakan  75%  wanita  pernah  mengalami gejala ini setidaknya sekali seumur hidup.
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Agustina periode 2007-2011, mengemukakan bahwa terdapat  kasus  baru  BV  sebanyak  35  pasien  dari 33.201  (0,1%)  kunjungan  baru  URJ  Kesehatan Kulit  dan  Kelamin  RSUD  Dr.  Soetomo  Surabaya dengan  kelompok  usia  25-44  tahun  sebanyak  26 pasien  (74,3%),  31  pasien  (88,6%)  sudah menikah.  Keluhan  utama  terbanyak  berupa  duh tubuh vagina tanpa keluhan sebyektif.
Hingga  saat  ini  belum  diketahui  secara  pasti yang  menjadi  pencetus  terjadinya  BV,  walaupun tidak  dimasukkan  kedalam  kelompok  Infeksi Menular  Seksual  (IMS),  namun  peran  aktivitas seksual  merupakan  salah  satu  pencetus  terjadinya BV  karena  dapat  mengubah  bentuk  duh  tubuh vagina  yang  dikaitkan  dengan  BV.  BV  juga dikaitkan  dengan  penggunaan Intra  Uterine Device (IUD),  dan  BV  masih  bisa  berkembang
pada  wanita  yang  belum  melakukan  hubungan seksual (Cunningham et al., 2010).
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Agustina, 2011  bahwa  penatalaksanaan  BV  diberikan  pada semua pasien yang ada keluhan. Pada wanita tidak hamil  BV  diobati  dengan  tujuan  menghilangkan tanda  dan  gejala  infeksi  vagina  dan  mengurangi resiko  komplikasi  infeksi.  (Murtiastutik,  2008). Berdasarkan  Pedoman  Diagnosis  dan  Terapi (PDT)  Ilmu  Kesehatan  Kulit  dan  Kelamin  tahun 2005  penatalaksanaan  BV  berupa  metronidazol atau  antibiotik  klindamisin  baik  berupa  sistemik maupun  topical  (Lumintang,  2008).  Dari  data penelitian  metronidazol  merupakan  obat  yang paling  sering  diberikan  sebesar  74,3%  kasus. terhadap infeksi bakteri anaerob, seperti
Gardnerella vaginalis (Agustina, 2011).
Penatalaksanaan  lainnya  adalah  metronidazol dengan  kombinasi  terapi  lainnya.  Beberapa penelitian  melaporkan  kesembuhan  BV  sebesar 71-89%  dalam  jangka  waktu  1  bulan  sesudah terapi.  Resistensi  terhadap  metronidazol  telah dilaporkan,  namun  metronidazol  masih  menjadi terapi standar.
Penelitian  Tester et  al ,  2011,  pasien  yang menderita  infeksi  vagina  dibagi  menjadi  dua kelompok  yang  terdiri  dari  kelompok  kontrol  dan kelompok perlakuan. diberikan pengobatan antibiotik  standart  ditambah  dengan pessary yang mengandung  200  mg Glucomannan  Hydrolysates (GMH)  (dua  kali  seminggu  selama  tiga  puluh hari),  hasil  penelitian  menunjukkan  perbaikan pemulihan  kesehatan  vagina,  terutama  pada kelompok perlakuan adanya mikroflora yang sehat akibat pengenalan GMH di vagina.
Pemberian pessary yang mengandung 300 mg Glucomannan  Hydrolysates (GMH)  sebagai prebiotik  diharapkan  dapat  memberikan  nutrisi pada lactobacillus  spp agar  dapat  berkembang biak dan meningkatkan jumlahnya, sedangkan BV
gel  yang  mengandung Lactic  Acid (LA)  dapat menurunkan  pH  vagina  menjadi  asam  sehingga bakteri  patogen  tidak  cocok  tumbuh  dalam suasana asam.

## 2. METODE PENELITIAN
Metode  penelitian  yang  digunakan  adalah True  Experimental dengan  jenis  penelitian The Randomized  pretest  –  posttest secara  in  vivo. Responden  dalam  penelitian  ini  berjumlah  28 orang, yang terbagi menjadi 4 kelompok, masing- masing kelompok berjumlah 7 orang. Kelompok 1 diberikan terapi antibiotik Metronidazole diminum dengan  dosis  500  mg,  2  x  sehari  selama  7  hari, kelompok  2  diberikan  Metronidazole  diminum dengan dosis 500 mg, 2 x sehari selama 7 hari dan juga  diberikan  terapi pessary yang  mengandung 300  mg  GMH  dimasukkan  kedalam  lubang vagina,  pasien  diberikan pessary 3  kali  seminggu dan  dianjurkan  digunakan  sebelum  tidur  selama 21  hari,  kelompok  3  diberikan  terapi  LA,  berupa produk  BV  gel  digunakan  sesuai  petunjuk  pabrik pembuatnya,  sekali  sehari  selama  7  hari, kelompok  4  diberikan  terapi pessary yang mengandung  300  mg  GMH  3  kali  seminggu  dan dianjurkan  digunakan  sebelum  tidur  selama  21 hari  serta  diberikan  terapi  LA,  produk  BV  gel digunakan  sesuai  petunjuk  pabrik  pembuatnya, sekali sehari selama 7 hari.

## Penghitungan Jumlah Koloni Bakteri
Penelitian  ini  untuk  mengidentifikasi  koloni bakteri lactobacillus  spp dilakukan  isolasi  bakteri menggunakan metode streak plate untuk mendapatkan  koloni  tunggal  yang  terpisah. Penghitungan  dilakukan  sebanyak  tiga  kali  yaitu pada Hari ke 0 (H0) sebelum diberikan perlakuan, hari  ke  11  (H11)  dan  hari  ke  22  (H22)  setelah diberikan perlakuan.

## 3. HASIL PENELITIAN
Berdasarkan pada hasil penelitian yaitu :
Tabel  1  Hasil  Uji  Normalitas  dan  Homogenitas  Residual  Pengaruh  Periode  Pengukuran  Jumlah Koloni Bakteri Lactobacillus spp
Keterangan: jika p-value < 0,05 berarti data tidak terdistribusi normal  dan tidak homogen dan jika p-value > 0,05 maka data terdistribusi normal dan homogen Hasil  analisis  dengan  menggunakan  ANOVA, didapatkan  p-value  lebih  besar  daripada  α  =  0,05 (p>0,05).  Pengujian  perbedaan  pengaruh  periode pengukuran  terhadap  jumlah  koloni  bakteri lactobacillus spp dilakukan menggunakan
Friedman. Kriteria pengujian menyebutkan
apabila  probabilitas  ≤ level  of  significance (α  = 0,05) maka H0 ditolak, sehingga dapat dinyatakan bahwa  minimal  ada  satu  pasang  periode pengamatan  yang  menghasilkan  kadar  koloni bakteri yang berbeda signifikan.
Gambar  1  Grafik  Rerata  Jumlah  Koloni  Bakteri Lactobacillus  spp pada  Kelompok  Perlakuan yang  diberikan  Terapi  Antibiotik,  Antibiotik+GMH,  LA,  serta  LA+GMH  pada  H0,  H11 dan H22
0 20 40 60 80 100 120 H0 H11 H22 Antibiotik Antibiotik +GMH LA
Keterangan : Kelompok perlakuan antibiotik, antibiotik+GMH, LA, LA+GMH, H0 : hari ke-1, H11 : hari ke-11, H22 : hari ke-22.
Berdasarkan gambar grafik diatas didapatkan hasil bahwa  rerata  ±  standar  deviasi  jumlah  koloni bakteri lactobacillus  spp Kelompok  Antibiotik, Antibiotik+GMH,  LA  serta  LA+GMH  pada  H0,
H11  dan  H22.  Pada  kelompok  Antibiotik+GMH dan  LA+GMH  memiliki  rerata  ±  standar  deviasi hampir  sama  dibandingkan  kelompok  perlakuan yang lain.
Kelompok Pengujian Asumsi Koefisien p-value Keterangan Antibiotik Normalitas Homogenitas 0.950 6.524
0.337
0.007
Normal
Tidak Homogen Antibiotik + GMH Normalitas Homogenitas 0.885 6.991
0.018
0.006
Tidak Normal
Homogen
LA
Normalitas Homogenitas 0.916 2.075 0.072 0.155 Normal Homogen LA + GMH Normalitas Homogenitas 0.881 6.996
0.015 0.006 Tidak Normal
Tidak Homogen
Gambar  4  Pertumbuhan  Koloni  Bakteri Lactobacillus  spp pada deMan  Rogosa  Sharpe  Agar (MRSA)
Keterangan : Koloni berbentuk bulat, bergerombol, permukaan halus mengkilap, dan  berwarna putih susu,
A) Pertumbuhan koloni bakteri H0 pada perlakuan antibiotik
B) Pertumbuhan koloni bakteri H11 pada perlakuan antibiotik
C) Pertumbuhan koloni bakteri H22 pada perlakuan antibiotik
D) Pertumbuhan koloni bakteri H0 pada perlakuan antibiotik+GMH
E) Pertumbuhan koloni bakteri H11 pada perlakuan antibiotik+GMH
F) Pertumbuhan koloni bakteri H22 pada perlakuan antibiotik+GMH
G) Pertumbuhan koloni bakteri H0 pada perlakuan LA
H) Pertumbuhan koloni bakteri H11 pada perlakuan LA
I) Pertumbuhan koloni bakteri H22 pada perlakuan LA
J) Pertumbuhan koloni bakteri H0 pada perlakuan LA+GMH
K) Pertumbuhan koloni bakteri H11 pada perlakuan LA+GMH
L) Pertumbuhan koloni bakteri H22 pada perlakuan LA+GMH
Pada  gambar  menunjukkan  pada  H0  sebelum perlakuan  pemberian  terapi  (A,  D,  G  dan  J)  tidak terdapat  koloni  bakteri lactobacillus  spp ,  hal  ini dikarenakan  pada  BV  bakteri lactobacillus  spp , yang  merupakan  bakteri  normal  didalam  vagina tergantikan oleh bakteri pathogen

## 4. PEMBAHASAN
Lactobacillus  spp adalah  bakteri  dominan yang ada didalam vagina wanita yang mempunyai peran  penting  sebagai  regulator  flora  normal vagina. Bacterial  Vaginosis (BV)  menyebabkan ketidakseimbangan  flora  normal  pada  vagina dimana lactobacillus spp., digantikan oleh bakteri an aerob seperti Gardnerella vaginalis , Mobiluncus spp., Prevotella spp., Bacterides., dan Mycoplasma  sp., yang  umumnya  terjadi  pada
Wanita Usia Subur (WUS) . Pergantian lactobacillus  spp., ini  menyebabkan  penurunan H 2 O 2 yang  umumnya  ditandai  dengan  adanya produksi secret vagina  yang  banyak,  berwarna abu-abu  hingga  kuning,  tipis,  homogen,  berbau amis  ( fishy  odor ),  dan  terdapat  peningkatan  pH (Sharon H, 2008).
Penelitian ini untuk mengetahui peningkatan jumlah  koloni  bakteri lactobacillus  spp yang terganggu  oleh  BV . Penelitian  eksperimental  ini dilakukan  untuk  membuktikan  adanya  pengaruh pemberian Glucomannan  Hydrolysates (GMH) dan  LA  ( Lactic Acid ) terhadap peningkatan  kadar sIg  A,  kadar  β-Defensins,  dan  jumlah  koloni bakteri lactobacillus spp pada Bacterial Vaginosis (BV) Wanita Usia Subur (WUS) dengan diberikan perlakuan  sesuai  dengan  kelompok  pemberian terapi  yaitu  kelompok  1)  Pemberian  antibiotik,
A B C D E F G H I J K L
kelompok 2) Pemberian antibiotik+GMH, kelompok  3)  Pemberian  LA,  kelompok  4) Pemberian  LA+GMH.  Hal  ini  sudah  sesuai dengan penatalaksanaan pengobatan BV Berdasarkan  Pedoman  Diagnosis  dan  Terapi (PDT)  Ilmu  Kesehatan  Kulit  dan  Kelamin  tahun 2005 tentang penatalaksanaan BV berupa metronidazol  atau  antibiotik  klindamisin  baik berupa  sistemik  maupun  topikal  (Lumintang, 2008)
Dari  hasil  penelitian  menunjukkan  adanya peningkatan  jumlah lactobacillus  spp yang signifikan  dari  H0  ke  H11  dan  H22,  peningkatan ini  terjadi  pada  semua  kelompok  perlakuan, namun kelompok perlakuan terapi LA+GMH yang mengalami  peningkatan  lebih  banyak  jumlah koloni bakteri lactobacillus mya.

## 5. KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan, maka  dapat  ditarik  kesimpulan  bahwa  ada pengaruh  pemberian  antibiotik,  antibiotik+GMH, LA,  dan  LA+GMH  terhadap  peningkatan  kadar sIg A, β-Defensins dan jumlah koloni bakteri Pada Bacterial  Vaginosis (BV)  Wanita  Usia  Subur
(WUS) adalah pemberian Glucomannan Hydrolisates (GMH)  dan Lactic  Acid (LA) terbukti dapat meningkatkan jumlah koloni bakteri Lactobacillus  spp pada Bacterial  Vaginosis Wanita Usia Subur.

## 6. REFERENSI
Abbas,  A.K,et  al.  2015.  Cellular  and  molecular immunology-7 th ed. text book Adam, et all. 2011. Bakterial vaginosis Alice,  et  al.  2012.  Screening  for  bacterial vaginosis  at  the  time  of  intrauterine contraceptive  device  insertion:  Is  There  a Role? http://www.jogc.com/abstracts/full/201202_G ynaecology_1.pdf. Diakses tanggal 2 Februari 2017
Antarini,  A.  2011.  Sinbiotik  antara  prebiotik  dan probiotik. J Ilmu Gizi 2 (2): 148-155.
CDC, 2016. Bacterial Vaginosis–CDC Fact Sheet. Division  of  STD  Prevention  (DSTDP) Centers  for  Disease  Control  and  Prevention www.cdc.gov/std
Departemen Kesehatan Repubik Indonesia. Undang-Undang  Nomor  23  Tahun  1992
Tentang Kesehatan.Http:
//Id.Wikipedia.Org/Wiki/Promosi Kesehatan,  Diakses  Tanggal  25  September 2008
Eriksson,  Katarina.  2011.  Bacterial  Vaginosis: Diagnosis,  Prevalence,  and  Treatment. Sweden:  Obstetrics  and  Gynecology  and Clinical Microbiology Department of Clinical and Experimental Medicine Linköping University Sweden Fethers K, Twin J, Fairley Ck, Fowkes Fj, Garland Sm,  Fehler  G,  Et  Al.  Bacterial  Vaginosis (Bv)  Candidate  Bacteria:  Associations  With Bv  And  Behavioural  Practices  In  Sexually- Experienced  And  Inexperienced  Women. Plos One 2012;7(2):E30633
Gajer  P,  Brotman  RM,  Bai  G,  et  al.  Temporal dynamics of the human vaginal microbiota. Sci Transl Med. 2012;4(132):32ra52. [ PMC free
article ] [ PubMed ] Gelber  SE , Aguilar  JL , Lewis  KL , Ratner  AJ . 2008. Functional and phylogenetic characterization  of  Vaginolysin,  the  human- specific cytolysin from Gardnerella vaginalis. J Bacteriol. 2008 Jun;190(11):3896-903. doi: 10.1128/JB.01965-07. Epub 2008 Apr 4
Guaschino  S,  De  Santo  D,  De  Seta  F:  New perspectives  in  antibiotic  prophylaxis  for obstetric and gynaecological surgery. J Hosp Infect 2002, 50(Suppl A):S13–S16.
Hillier  Sl.  The  complexity  of  microbial  diversity in bacterial vaginosis. New England Journal Medicine 2005;353:18.
Kirmani,  N.,  1988.  Normal  bacterial  flora  of vagina. Jpma.  The  journal  of  the  pakistan medical association, 38(1), Pp.1-3.
Mestecky J et al. 2005. Mucosal Immunology 3rd edn. Academic press: San Diego
Murtiastutik  D.  Vaginosis  Bakterial.  Dalam:
Barakbah J, Lumintang H. Martodihardjo S. editor.  Infeksi  Menular  Seksual.  Surabaya: AUP: 2008. H 72-83.
Ness  RB,  Soper  DE,  Holley  RL,  et  al.:  Douching and  endometritis:  results  from  the  PID evaluation  and  clinical  health  (PEACH) study. Sex Transm Dis 2001, 28:240–245.
Ningrat  Fs.  2011.  Uji  sensitivitas  dan  spesitifitas autobio  bv  assay  dan  kriteria  amsel
dibandingkan  dengan  skor  nugent  pada vaginosis  bakterial  bag/smf  ilmu  kesehatan kulit  dan  kelamin.  Semarang:  Universitas Diponegoro,; V. Ppds1
Nursalam.  2013.  Metodologi  penelitian  ilmu keperawatan  pendekatan  praktis.  Edisi  3. Jakarta: Salemba Medi
Ociviyanti  D,  Rosana  Y.  Wibowo  N.  Profil  flora vagina  dan  tingkat  keasamaan  vagina perempuan Indonesia. Majalah Obstet Ginekol Indonesia 2009; 33:124-31
Pratiwi  En.  2012.  Prevalensi  dan  karakteristik wanita hamil penderita bacterial vaginosis di Poliklinik  Obstetri  Dan  Ginekologi  Rsud Arifin Achmad Pekanbaru Putra, B.R.M., Dewantiningrum, J. And
Ciptaningtyas,  V.R.,  2014. Uji  diagnostik kriteria  amsel  dibandingkan  dengan  kriteria nugent  dalam  skrining  infeksi  bakterial vaginosis pada kehamilan (Doctoral Dissertation, Faculty Of Medicine Diponegoro University). Siegemund,  S.,  et  al.  2009.  “Differential  IL-23 requirement for IL-22 and IL-17A
production  during  innate  immunity  against Salmonella  enterica  serovar  Enteritidis." International immunology 21 (5): 555-565 Shuklov,  et  al.  2016.  “Chemo  –  Catalyzed Pathways  to  Lactic  Acid  and  Lactates”.
Advanced Synthesis and Catalysis. 358 (24):
3910-3931. doi:10.1002/adsc.201600768
Suharsimi,  Arikunto.  2006.  Prosedur  penelitian suatu  pendekatan  praktek.  Jakarta,  Rineke Cipta
Sweet  RL:  Gynecologic  conditions  and  bacterial vaginosis: implications for the non-pregnant patient.  Infect  Dis  Obstet  Gynecol  2000, 8:184–190.
Tamonud  Modak  Pa,  Charan  Agnes,  Raja  Ray,
Sebanti  Goswami,  Pramit  Ghosh,  Nilay Kanti Das. Diagnosis Of Bacterial Vaginosis In  Cases  Of  Abnormal  Vaginal  Discharge:
Comparison Of Clinical And
Microbiological Criteria. J Infect Dev Ctries 2011;5(5):353-60
Tester.,  et  al.  2012.  The  use  of  Konjac Glucomannan  Hydrolysates  to  Recover Healthy  Microbiota  in  Infected  Vaginas Treated With an Antifungal Agent.
Wageningen  Academic  Publisher.  March 2012; 3 (1) : 61-66
Thurman,  Andrea  Ries  et.al.  2015.  Bacterial vaginosis and subclinical markers of genital tract  inflammation  and  mucosal  immunity. Aids  research  and  human  retroviruses. Volume 31, Number 11. Mary  Ann  Liebert, Inc.
Todd  R.  Klaenhammer.  2006.  Genetics  of bacteriocins  produced  by  lactic  acid bacteria. FEMS  Microbiol  Rev 1993;  12  (1- 3): 39-85. doi: 10.1111/j.1574- 6976.1993.tb00012.x Wilson J:  Managing recurrent bacterial vaginosis. Sex Transm Infect 2004, 80:8–11