## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL KULIT

## PISANG KEPOK (Musa paradisiaca formatypica ) MENTAH SECARA IN VITRO
Submitted : 12 Agustus 2019 Edited : 20 Desember 2019 Accepted : 30 Desember 2019
Novia Ariani, Rakhmadhan Niah
Akademi Farmasi ISFI Banjarmasin, Jl. Flamboyan III No. 7B, Banjarmasin, Indonesia Email : noviaariani91@gmail.com

## ABSTRACT
The  incidence  of  infections  in  the  gastrointestinal  tract  is  increasing  every  year.  Some bacteria that often cause infections in the gastrointestinal tract are Salmonella typhi, which is a bacterium that causes typhoid fever, and Shigella dysenteriae which is a bacterium that causes dysentery.  Handling  of  infection  can  only  be  done  by  using  antibiotics.  Improper  use  of antibiotics can lead to resistance, so it is necessary to look for alternative treatments that come from  nature  to  overcome  resistance levels.  One  of  them  is  raw Kepok banana  peel  (Musa paradisiaca formatypica)  which  has  secondary  metabolites  such  as  flavonoids,  alkaloids, tannins, and saponins,  where  these  compounds  have  many  antibacterial  activities  unknown  to the  public.  This  research was  an experimental  research. The  extraction method  was  using  the maceration method  with  96%  ethanol  solvent.  Antibacterial  activity  test  for  Salmonella  typhi and  Shigella dysenteriae was  using  diffusion  method  therefore  the  wells  were  divided  into  7 treatment  groups,  namely  extract  concentration  0.3125%;  0.625%;  1.25%;  2.5%;  5.0%; positive  control  (Chloramphenicol  dose  30  mg  /  ml  for  Salmonella  typhi, Ciprofloxacin dose 100 mg / ml for Shigella dysenteriae), and negative control (ethanol 96%). The diameter of the inhibitory zone formed was then measured using a caliper. From the results of the research that has  been  done,  it  was  found  that  the  ethanol  extract  of  raw Kepok banana  peel  (Musa paradisiaca forma typica) had inhibitory effect on the growth of Salmonella typhi and Shigella dysenteriae bacteria with the highest inhibition zone diameter of 11.36 mm and the lowest 6.45 mm for Salmonella typhi, and the highest inhibition zone for Shigella dysenteriae was 17.99 mm and the lowest was 15.13 mm. The minimum concentration of banana skin ethanol extract which had inhibitory power was 0.3125%.
Keywords : Infection,  Banana Kepok, Musa  paradisiaca  formatypica,  Salmonella  typhi,

## Shigella dysenteriae

## PENDAHULUAN
Masalah  global  yang  sedang  dihadapi salah  satunya  adalah  tingginya  tingkat resistensi  penggunaan  antibiotik  baik  pada negara  berkembang  maupun  negara  maju sehingga  diperlukan  beberapa  tindakan untuk  mengurangi  masalah  ini.  Salah satu upaya yang dapat dilakukan adalah
melakukan  penelitian  senyawa  aktif  obat yang  berasal  dari  alam.  Sejak  lama
tumbuhan telah menjadi sumber alami untuk menjaga  kesehatan  masyarakat,  terutama  di negara berkembang. Obat tradisional sekarang  ini  digunakan  sebagai  obat alternatif  dari  obat-obatan  modern  karena dinilai  lebih  aman  dan  diduga  terdapat  efek komplementer  atau  sinergisme  dalam  obat tradisional yang dinilai menguntungkan (1) .
Salah  satu  tumbuhan  yang  memiliki potensi  sebagai  obat  tradisional  adalah
tumbuhan  famili  pisang  (Musa  sp)  yang memiliki berbagai jenis atau spesies. Pisang kepok dengan nama ilmiah Musa paradisiaca merupakan  salah  satu  jenis  pisang  yang banyak  memiliki  khasiat  yaitu  sebagai  obat penyembuh luka bakar, anticacing, pelindung  mukosa  pencernaan  dari  erosi, hipertensi dan banyak lagi yang lainnya (2) .
Beberapa penelitian yang telah dilakukan dengan menggunakan kulit pisang kepok  kuning  menyebutkan  bahwa  kulit pisang  kepok  kuning  memiliki  kandungan saponin,  alkaloid,  tannin,  kuinon  dan flavonoid  yang  memiliki aktivitas  sebagai antimikroba (3,4) . Namun  penelitian  dengan menggunakan  kulit  pisang  kepok  mentah sebagai  antibakteri  masih  belum  ada sehingga  perlu  dilakukan  penelitian  untuk membuktikan  bahwa  kulit  pisang  kepok mentah  memiliki  kandungan  yang  sama dengan kulit  pisang  kepok  kuning  dan  juga memiliki aktivitas sebagai antibakteri.

## METODE PENELITIAN
Jenis  penelitian  ini  adalah  penelitian ekperimental. Sampel  pada  penelitian  ini adalah  pisang kepok mentah  yang  berasal dari  Desa  Jaro  Kabupaten  Tabalong, Kalimantan Selatan.
Alat dan bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  alat-alat  gelas,  bejana maserasi, pisau, timbangan analitik, waterbath, vacum rotary evaporator, vortex, cawan  petri,  ose,  bunsen,  tabung  reaksi, autoklaf,  oven,  etanol  96%,  akuadest  steril, Nacl  fisiologis,  media  NA,  aluminium  foil, biakan Salmonella  typhi dan Shigella dysenteriae, kloramfenikol,  siprofloksasin, reagen  mayer,  dragendorff,  gelatin,  HCl, FeCl 3 , KOH.
Metode  ekstraksi  yang  digunakan pada penelitian ini adalah maserasi selama 3 x  24  jam  dengan  menggunakan  pelarut etanol 96 % (5) . Ekstrak kental yang diperoleh dilakukan skrinning fitokimia terlebih dahulu yang meliputi uji alkaloid, flavonoid,
tannin  dan  saponin. Uji  aktivitas  antibakteri menggunakan metode sumuran yang terbagi menjadi 8 kelompok sebagai berikut :
a. Kelompok kontrol positif (kloramfenikol  untuk Salmonella  typhi dan siprofloksasin untuk Shigella dysenteriae)
b. Kelompok kontrol negatif (pembanding pelarut etanol 96%) c. Kelompok ekstrak konsentrasi 0,3125 %
d. Kelompok ekstrak konsentrasi 0,625 %
e. Kelompok ekstrak konsentrasi 1,25 %
f. Kelompok ekstrak konsentrasi 2,5 %
g. Kelompok ekstrak konsentrasi 5 %
h. Kelompok ekstrak konsentrasi 10 % Data  hasil  diameter  zona hambat dianalisis  dengan  menggunakan  SPSS  for Windows  Release  17.0.  Uji  yang  dilakukan adalah uji tidak berpasangan untuk mengetahui  aktivitas  antibakteri  ekstrak etanol  kulit  pisang  kepok  kuning  dengan antibiotik  kloramfenikol  dan  siprofloksasin sebagai kontrol positif.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Determinasi Pisang Kepok
Tujuan  dari  determinasi  adalah  untuk memastikan  identitas  dari  tanaman  yang akan  digunakan  dalam  penelitian  sehingga hasil  yang  di  peroleh  dari  penelitian  sesuai dengan yang diharapkan. Determinasi dilakukan di Laboratorium Biologi
Universitas  Lambung  Mangkurat.  Hasil determinasi  menyatakan  bahwa  tanaman pisang  kepok  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  berasal  dari  spesies Musa  paradisiaca forma  typica  dari  famili Musaceae.

## Pembuatan Ekstrak
Pembuatan ekstrak pada penelitian ini menggunakan  metode  maserasi.  Metode maserasi  adalah  metode  ekstraksi  dingin cocok untuk senyawa aktif yang tidak tahan terhadap  pemanasan  dan  sederhana  dalam pengerjaan serta tidak memerlukan peralatan
yang  khusus (6) . Pelarut  yang  digunakan adalah  etanol  96  %,  karena  etanol  memiliki gugus  hidroksil  (OH)  yang  mampu  menarik senyawa yang bersifat polar dan gugus alkil (R)  yang  mampu  menarik  senyawa  non polar (7) dan  etanol  lebih  mudah  menembus membran  sel  sehingga  dapat  menarik senyawa sampai kebagian intraseluler tumbuhan (6) dan diharapkan  senyawa  aktif yang  memiliki  aktivitas  sebagai  antibakteri dapat  tertarik (8) . Proses  maserasi  dilakukan dengan merendam serbuk kulit pisang kapok mentah  dengan  etanol  96%  pada  bejana maserasi  selama  3x24  sambil  dilakukan pengadukan  secara  berkala setiap  8  jam. Tujuan  dari  pengadukan  adalah  untuk mempercepat terjadinya kontak antara serbuk  simplisia  dan  pelarut  sehingga mempercepat  larutnya  senyawa  aktif  pada pelarut (9) . Hasil  maserasi  disaring  untuk memisahkan maserat dan ampasnya.
Maserat tersebut kemudian diuapkan dengan vacum rotary evaporator untuk memperoleh ekstrak  cair.  Tujuan  menggunakan vacum rotary evaporator adalah untuk memisahkan larutan dari pelarutnya kemudian dilanjutkan kembali  proses  penguapan  sisa  pelarut dengan menggunakan waterbath yang bertujuan  untuk  menghilangkan  sisa-sisa pelarut  yang  masih  tercampur  dengan ekstrak cair pada suhu 60-70 0 C (10) . Dari 900 gram  serbuk  simplisia  diperoleh  berat ekstrak 35,6 gram dengan rendemen sebesar 3,96 %.

## Skrinning Fitokimia
Skrining  fitokimia  merupakan  salah satu  metode  analisis  kualitatif  untuk mengetahui  keberadaan  senyawa  metabolit sekunder  pada  ekstrak  etanol  kulit  pisang kepok mentah. Pendekatan skrining
fitokimia meliputi analisa kualitatif kandungan kimia ekstrak kulit pisang kepok
hasil  maserasi  dengan  pelarut  etanol  96% yaitu flavonoid, fenol, alkaloid, saponin dan tannin yang dapat dilihat pada Tabel 1. Tabel 1. Skrinning Fitokimia
No. Senyawa Metabolit Sekunder Reaksi Pengujian Hasil 1. Flavonoid Sampel + HCl pekat + Sampel + KOH + 2. Alkaloid Sampel + Dragendorf + Sampel + Mayer + 3. Tanin Sampel + Fecl 3 + Sampel + Gelatin + 4. Saponin Penggojokkan sampel +

## Uji Aktivitas Antibakteri
Pengujian aktivitas antibakteri ekstrak etanol  kulit  pisang  kepok  mentah  terhadap pertumbuhan  bakteri Salmonella  typhi dan Shigella dysenteriae secara in vitro dilakukan  dengan  menggunakan  metode difusi agar sumuran (5) . Kelebihan metode ini adalah  ekstrak akan  berdifusi  langsung  ke dalam  agar,  sehingga  senyawa  antibakteri dapat  bekerja  tanpa  hambatan  dengan konsentrasi dan jumlah yang telah ditentukan (11) . Aktivitas  antibakteri  dapat diamati  dengan  melihat  zona  bening  yang mengelilingi sekitar lubang setelah dilakukan inkubasi (12) .
Kontrol  positif  pada  penelitian  ini bertujuan  untuk  membandingkan  potensi ekstrak  etanol  kulit  pisang  kepok  mentah dengan  senyawa  sintetik  obat  yang  menjadi pilihan utama dalam terapi yang disebabkan oleh  infeksi  bakteri Salmonella  typhi dan
Shigella dysenteriae. Untuk bakteri Salmonella  typhi digunakan  kloramfenikol dengan  dosis  30  mg/ml  sedangkan  untuk bakteri Shigella  dysenteriae menggunakan siprofloksasin  dengan  dosis  100  mg/ml.

## Keterangan :
I (Kontrol Positif); II (Kontrol negativ), III (Ekstrak 0,3125%); IV(Ekstrak 0,625%); V(Ekstrak 1,25%); VI(Ekstrak 2,5%); VII(Ekstrak 5%).
Suspensi Salmonella typhi dan
Shigella dysenteriae masing-masing diambil sebanyak  100  µg  dengan  menggunakan mikropipet kemudian  ditanam  pada  media Na  Agar  dan  diberi  perlakuan  dengan membuat  sumuran  dengan  diameter  ±  8,01 mm. Kemudian dimasukkan kedalam lubang sumuran  dan  diinkubasi  pada  suhu  ±  37 ˚C selama 24 jam. Setelah diinkubasi dilakukan pengukuran  diameter  zona  bening  yang merupakan  zona  hambat  sebagai  tanda adanya  aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak dengan  menggunakan  jangka  sorong  dalam satuan  milimiter  (mm).  Hasil  uji  dapat dilihat  berdasarkan  zona  hambat  yang diperoleh seperti yang tertera pada tabel 2 .
Pada  tabel  2 terlihat  bahwa  ekstrak etanol  kulit  pisang  kepok  mentah  memiliki aktivitas  sebagai  antibakteri. Daya  hambat tertinggi  pada  konsentrasi  5  %  dan  daya hambat terendah pada konsentrasi 0,3125 % baik untuk bakteri Salmonella typhi maupun Shigella  dysenteriae. Daya  hambat  yang terbentuk menyatakan bahwa semakin tinggi konsentrasi  ekstrak  etanol  kulit  pisang kepok,  maka  semakin  besar  pula  zona hambat  yang  terbentuk. Perbedaan  zona hambat  pada  berbagai  konsentrasi  ini disebabkan karena adanya perbedaan jumlah kandungan  senyawa  aktif  pada  masing- masing konsentrasi seperti flavonoid, tannin, triterpenoid/steroid dan saponin.
Aktivitas  antibakteri  tersebut  berasal dari kandungan metabolit sekunder yang ada dalam kulit pisang kepok mentah. Metabolit sekunder  yang  terdapat  dalam  ekstrak  kulit pisang  kepok  mentah  berdasarkan  hasil skrinning  fitokimia  antara  lain  flavonoid, alkaloid,  tannin  dan  saponin.  Senyawa – senyawa  tersebut  memiliki  mekanisme sebagai  antibakteri  dengan  mekanisme  yang berbeda-beda.  Flavonoid  bekerja dengan cara membentuk kompleks dan menyebabkan  denaturasi  ikatan  protein membran sel sehingga sel lisis dan senyawa flavonoid  masuk  menembus  ke  dalam  inti sel.  Tanin  menyebabkan  inaktifasi adhesin (suatu protein yang terdapat pada permukaan sel)  dan  juga  menargetkan  polipeptida dinding  sel  sehingga  terjadilah  kerusakan dinding sel (13) . Saponin menyebabkan
peningkatan permeabilitas sel melalui penurunan tegangan permukaan sel sehingga mengakibatkan keluarnya senyawa intraseluler.

## SIMPULAN
Ekstrak  etanol  kulit  pisang  kepok mentah memiliki aktivitas sebagai antibakteri  terhadap  pertumbuhan  bakteri Salmonella  typhi dan Shigella  dysenteriae. Konsentrasi  hambat  minimun  dari  ekstrak etanol  kulit  pisang  kepok  untuk  bakteri Salmonella  typhi dan Shigella  dysenteriae adalah konsentarsi 0,3125%.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Hastari,  Rizka.  2012.  “Uji  Aktivitas
Antibakteri Ekstrak Pelepah Dan Batang Tanaman Pisang Ambon (Musa Paradisiaca  Var.Sapientum)  Terhadap
Staphylococcus  Aureus.” Jurnal  Media Medika Muda.
2. Ramadhani,  Rizka  Maretiana.  2015.
“Formulasi Sampo Ekstrak Etanol Kulit Buah  Pisang  (Musa  Paradisiaca  L) Dengan  Basis  Emulsi  Minyak  Zaitun Sebagai Antifungi Terhadap
Pityrosporum Ovale.” Universitas
Ahmad Dahlan.
3. Chabuck,  Zainab  Adil  Ghani,  Alaa  H. Al-Charrakh,  Nada  Khazal  Kadhim
Hindi,  and  Shatha  Khazal  Kadhim Hindi.  2013.  “Antimicrobial  Effect  of Aqueous  Banana  Peel  Extract  ,  Iraq.” Research Gate: Pharmaceutical Sciences 1:73 – 75.
4. Saraswati, Faradhila N. U. R., Fakultas
Kedokteran,  D.  A.  N.  Ilmu,  and Progr am  Studi  Farmasi.  2015.  “Uji Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol 96%  Limbah  Kulit  Pisang  Kepok
Kuning  (  Musa  Balbisiana  )  Terhadap Bakteri Penyebab Jerawat ( Staphylococcus Epidermidis, Staphylococcus Aureus, Dan Propionibacterium Acne).” 5. Ariani,  Novia  and  Norjannah.  2017.
“Daya  Hambat  Ekstrak  Etanol  Kulit Buah  Pisang  Kepok  Mentah  (Musa Paradisiaca  Forma  Typica)  Terhadap Pertumbuhan  Escherichia  Coli  Secara In  Vitro.” Jurnal  Ilmiah  Ibnu  Sina 2(2):296 – 303.
6. Tiwari,  Prashant,  Bimlaesh  Kumar, Mandeep  Kaur,  Gurpreet  Kaur,  and Harleen  Kaur.  2011.  “Phytochemical Screening  and  Extraction:  A  Review.”
Internationale  Pharmaceutica  Science 1(1).
7. Mahatriny, N. N., N. P. S. Payani, I. B. M.  Oka,  and  K.  W.  Astuti.  2013. “Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Etanol
Daun  Pepaya (Carica  Papaya  L.)  Yang Diperoleh Dari Daerah Ubud, Kabupaten Gianyar, Bali.” 1. 8. Mozer,  Hardi.  2015.  “Uji  Aktivitas Antifungi  Ekstrak  Etanol  96%  Kulit Batang Kayu Jawa (Lannea Coromandelica)  Terhadap  Aspergillus Niger, Candida Albicans, Dan Trichophyton  Ru brum.”  UIN  Syarif Hidayatullah Jakarta.
9. Alfiah, Ida. 2016. “Aktivitas Antibakteri  Fraksi  Etil  Asetat  Ekstrak
Etanol  Daun  Pepaya  Gunung  (Carica Pubescens Lenne & K. Koch) Terhadap Bakteri  Salmonella  Typhi  Secara  In Silico Dan In Vitro.” Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang. 10. Ariani, Novia and Akhmad Riski. 2018.
“Aktivitas  Ekstrak  Etanol  Kulit  Buah Pisang Kepok Mentah (Musa Paradisiaca  Forma  Typica)  Terhadap Pertumbuhan  Candida  Albicans  Secara In Vitro.” Jurnal Pharmascience 05(01):39 – 44. 11. Anggrahini,  Dian  ND,  Rodesia  M. Roza,  and  Fitmawati.  2013.  “Aktivitas Antibakteri Daun Pepaya (Carica Papaya  L.)  Terhadap  Escherichia  Coli Dan Salmonella Typhy.” 12. Pratiwi, S. 2008. Mikrobiologi
Farmasi. Jakarta: Erlangga.
13. Pangalinan,  Frendsiane  R.,  Novel Kojong,  and  Paulina  V.  Y.  Yamlean. 2012. “Uji Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanol Kulit Batang Rambutan (Nephelium  Lappaceum  L  .)  Terhadap Jamur  Candida  Albicans  Secara  In Vitro.” 1(1):7– 12.