p-ISSN 2354-6565 / e-ISSN 2502-3438 DOI: 10.26874/kjif.v8i1.286

## Pengaruh pemberian ekstrak air daun kecubung gunung (Brugmansia candida pers) terhadap depresiasi katalepsi

## Ita Nur Anisa, Sulaeman Al Jati, Suci Nar Vikasari
Fakultas Farmasi, Universitas Jenderal Achmad Yani, Cimahi, Indonesia
Corresponding author email: ita.nuranisa@gmail.com

## Abstrak
Katalepsi merupakan tanda efek ekstrapiramidal dari obat-obatan yang menghambat transmisi dopaminergik  atau  meningkatkan  pelepasan  histamin  di  otak.  Salah  satu  tanaman  yang memiliki efek menurunkan kadar histamin adalah kecubung gunung. Metode yang di gunakan adalah  pencegahan  di  mana  hewan  uji  dibagi  dalam  beberapa  kelompok,  yang  terdiri  atas kelompok  kontrol  yang  diberikan  Natrium  CMC  10  mL/kg  bb  secara  oral,  kelompok pembanding  diberikan  difenhidramin  hidroklorida  1  mg/kg  bb  secara  intraperitoneal,  dan  3 kelompok terakhir di berikan ekstrak air daun kecubung gunung 15,75 mg/kg bb; 31,5 mg/kg bb; serta dosis 63 mg/kg bb secara per oral. Semua kelompok diinduksi oleh obat klonidin 1 mg/kg  bb  secara  subkutan  setelah  30  menit  pemberian  sediaan  uji,  kemudian  diukur  durasi katalepsinya  pada  rentang  waktu  5,  30,  60,  90,  120,  150  dan  180  menit.  Parameter  yang digunakan adalah durasi katalepsi. Hasil penelitian yang diperoleh, yaitu kelompok ekstrak air daun kecubung gunung dosis 31,5 mg/kg bb merupakan ekstrak uji yang paling sedikit durasi katalepsinya dibandingkan dengan kelompok kontrol, pembanding dan dua dosis ekstrak yang lain.  Rata  –rata  kumulatif  durasi  katalepsinya  yaitu  1,5+1,1  ;  3,0+1,5;  4,3+1,9  ;  7,2+2,9  ; 9,4+3,1  ;  11,9+3,1  dan  pada  menit  terakhir  14,7+3,4.  Hasil  yang  didapatkan  bahwa  semua kelompok uji dan pembanding  berbeda bermakna  secara statistik pada P<0,05 dibandingkan dengan kelompok kontrol dengan uji t-student. Kesimpulan yang didapatkan bahwa ekstrak air daun  kecubung  gunung  memiliki  efek  menurunkan  durasi  katalepsi  yang  diinduksi  oleh klonidin.
Kata kunci: Daun kecubung gunung, katalepsi, klonidin, histamin

## Brugmansia candida pers leaves water extract effect on the depreciation of catalepsy

## Abstract
Catalepsy is a sign of extrapyramidal effects from drugs that inhibit dopaminergic transmission or increase the release of  histamine in the brain. One of  the plants which have the effect  of reducing histamine levels is Brugmansia candida Pers. The method used is prevention where animals are tested divided into several groups, which consist of a control group given CMC Sodium 10 mL/kg bw oral, the comparison group is given Diphenhydramine hydrochloride 1 mg  /kg  bw  intraperitoneal,  and  the  last  3  groups  were  given  water  extract  of  Brugmansia candida  Pers  leaves  15,75  mg/kg  bw;  31,5  mg  /kg  bw;  and  63  mg  /kg  bw  given  orally.  All groups were induced by clonidine drug 1 mg /kg bw subcutaneous after 30 minutes of the test preparation, then the duration of catalepsy was measured in the range of 5, 30, 60, 90, 120, 150 and 180 minutes. The parameter used is the duration of catalepsy. The results obtained,
namely, the Brugmansia  candida  leaves  water  extract  dose  31,5  mg  /kg  body  weight  is  the extract with the least duration of catalepsy compared with the control group, comparison, and two other extract doses. The cumulative average duration of the catalepsy is 1.5+1.1; 3,0+1,5; 4,3+1,9; 7.2+ 2.9; 9,4+ 3,1; 11.9+ 3.1 and at the last minute 14.7+3.4. The results obtained were  statistically  significantly  different  at  P  <0.05  compared  to  the  control  group  with  the Student-T  test.  The  conclusion  is  that the  water  extract  Brugmansia  candida  leaves  has  the effect of reducing the duration of the catalepsy induced by clonidine.

## Keywords: Brugmansia candida leaves, Catalepsy, Clonidin, Histamine

## Pendahuluan
Senyawa  histamin  disintesis  dari  reaksi dekarboksilasi  asam  amino  L-Histidin  oleh enzim  histidin  dekarboksilase  (Leurs  et  al., 2012). Histamin  menstimulasi  kontraksi  otot polos dan sekresi asam lambung, meningkatkan permeabilitas pembuluh darah, berfungsi sebagai neurotransmiter dan memainkan berbagai peran dalam immunomodulasi,  reaksi  alergi,  inflamasi, hematopoiesis serta meregulasi proliferasi sel dan  diferensiasi  sel.  (Mahdy  &  Webster, 2011).  Alergi  dan  anafilaksis  merupakan faktor  yang  paling  mungkin  menyebabkan penyakit  seperti  asma,  rinitis,  bronkitis, demam, batuk, nyeri, inflamasi dan lain-lain. (Dongre  et  al.,  2017).  Reaksi  alergi  sistem imun yang dimediasi oleh antibody IgE akan menyebabkan  sensitisasi  dan  menginduksi degranulasi sel mastosit sehingga melepaskan mediator kimia yang penting bagi pertahanan inang  dan  reaksi  alergi  seperti  histamin, prostaglandin, dan  leukotriene  (Nakazawa et al., 2014). Histamin sering digunakan sebagai indikator  pelepasan  mediator  kimia  pada anafilaksis  tipe  langsung  yang  bergantung pada  IgE  (Obiri  et  al.,  2013).  Histamin merupakan molekul persinyalan yang tersebar dimana-mana  yang  menargetkan  terutama reseptor terhubung protein G histamin H1 dan H2  yang  tersebar  di  berbagai  jaringan (Rutkowski  et  al.,  2018).  Katalepsi  adalah suatu kondisi dimana hewan mempertahankan  postur  yang  kaku  untuk
waktu  yang  lama  sebelum  mendapatkan kembali  postur  normal  (S.  S.  Patil,  2010). Katalepsi merupakan tanda efek ekstrapiramidal dari obat-obatan yang menghambat  transmisi  dopaminergik  atau meningkatkan pelepasan histamin di otak (S. Patil  &  Ninave,  2016).  Histamin  juga berperan  dalam  obstruksi  saluran  nafas melalui kontraksi otot polos, sekresi bronkial, dan edema mukosa saluran nafas  (Yamauchi &  Ogasawara,  2019).  Salah  satu  tanaman yang  secara  empiris  telah  digunakan  untuk mengobati obstruksi  saluran nafas  atau asma adalah  kecubung  gunung  atau  Brugmansia candida  (Dalimartha,  2000).  Salah  satu  obat yang digunakan untuk menginduksi terjadinya katalepsi adalah klonidin. Klonidin melepaskan  histamin  dari  sel  mastosit  yang mana  bertanggung  jawab  atas  berbagai kondisi  asma.  Katalepsi  yang  diinduksi  oleh klonidin  dimediasi  oleh  histamin  melalui reseptor H1 sehingga keadaan tersebut dapat dihambat oleh antagonis reseptor histamin H1 tetapi  tidak  oleh  antagonis  reseptor  H2  (D  J Taur  et  al.,  2009).  Beberapa  tanaman  yang telah  diuji  aktivitas  antihistamin  yang diinduksi klonidin yaitu akar Clitoria ternatea L  ((Dnyaneshwar  J  Taur  &  Patil,  2010), Albizzia  lebbeck,  Syzygium  cumin  (MV, 2016),  Euhorbia  hirta  Linn  (Shelke  et  al., 2014)  dan  senyawa  aktif  quercetin  (H.  & Nadaf,  2019),  sehingga  penelitian  mengenai efek katalepsi dari Brugmansia candida belum diteliti.    Berdasarkan   hal    tersebut     akan
dilakukan  penelitian  mengenai  pengaruh kecubung gunung (Brugmansia candida Pers) dalam  penurunan  durasi  katalepsi  yang digunakan  sebagai  indikator  penghambatan pelepasan histamin secara tidak langsung.

## Metode Penelitian
Bahan. Daun  kecubung  gunung  yang  di peroleh  dari  Kebun  percobaan  Manoko, lembang,  Jawa  Barat,  Na-CMC  0,5%, klonidin
HCl
Ampul (Catapres®),
Difenhidramin  hidroklorida  Injeksi,  NaCl 0,9%
Alat. Jarum  suntik,  sonde  oral,  Alat  gelas kimia,  spatel,  mortir  dan  stamper,  dan  tiang horizontal untuk uji katalepsi
Hewan  Percobaan. Mencit swiss webster betina  dengan  bobot  rata-rata  20  –  25  gram yang  di  peroleh  dari  Institut  Teknologi Bandung.  Persetujuan  etik  penggunaan hewan  sudah  diperoleh  dari  komisi  etik fakultas Farmasi, Universitas Jenderal Achmad Yani.
Penyiapan Simplisia. Tanaman Brugmansia candida yang  sudah  diperoleh,  dibersihkan dari pengotornya kemudian dicuci dengan air mengalir,lalu dikeringkan dengan cara diangin-anginkan  dan  dioven  pada  suhu  50- 60°C. tanda tanaman sudah kering secara fisik adalah  daun  akan  hancur  apabila  diremas. Tanaman  yang  sudah  kering  kemudian dihaluskan  dan  diayak  dengan  pengayak  no 80,  selanjutnya  simplisa  disimpan  dalam wadah  tertutup  rapat  yang  bersih  pada  suhu kamar.
Pembuatan  Ekstrak. Ekstrak  air  daun kecubung gunung dibuat dengan menggunakan  metode  perebusan,  yaitu
sebanyak 200 gram simplisia daun kecubung gunung  direbus  dengan  air  suling  sebanyak 1,5  liter  pada  suhu  100°C  selama  15  menit dengan pengulangan sebanyak 3 kali. Ekstrak cair  yang  diperoleh,  dikumpulkan  kemudian dikeringkan  dengan  menggunakan  metode pengeringan beku/ freeze dry .
Prosedur Katalepsi yang diinduksi klonidin pada mencit, Mencit Swiss webster dikelompokkan  secara  acak  menjadi  5 kelompok  (n=5)  yaitu  kontrol  (CMC-Na  10 mL/kg  bb,  p.o),  pembanding  (difenhidramin hidroklorida 1 mg/kg bb, ip), ekstrak air daun kecubung gunung (15,75; 31,5; dan 63 mg/kg bb, po). Setelah 30 menit pemberian sediaan, semua kelompok diinduksi klonidin 1 mg/kg bb  secara  subkutan,  kemudian  durasi katalepsi  setiap  kelompok  diukur  pada rentang  waktu  15,  30,  60,  90,  120,  150  dan 180  menit.  Evaluasi  dilakukan  dengan mengamati  penurunan  durasi  katalepsi  pada kelompok  pembanding  dan  sediaan  uji terhadap  kelompok  kontrol.  Data  hasil pengamatan  yang  diperoleh  dianalisis  secara statistik  dengan  metode  ANOVA  ( one  way test ) dan t-Student dengan taraf nyata P< 0,05 (Dnyaneshwar J Taur & Patil, 2010)

## Hasil Dan Pembahasan
Katalepsi  adalah  suatu  kondisi  dimana hewan  mempertahankan  postur  yang  kaku untuk waktu yang lama sebelum mendapatkan kembali  postur  normal  (S.  S.  Patil,  2010). Katalepsi merupakan tanda efek ekstrapiramidal dari obat-obatan yang menghambat  transmisi  dopaminergik  atau meningkatkan pelepasan histamin di otak (S. Patil  &  Ninave,  2016).  Dari  data  penelitian yang  diperoleh,  diketahui  bahwa  pemberian sediaan tunggal  klonidin  1 mg/ kg bb  secara subkutan  telah  terbukti  dapat  menginduksi terjadinya katalepsi, pada semua kelompok.
Parameter yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  durasi  terjadinya katalepsi.    Hasil  rata-rata  durasi  katalepsi  di tampilkan pada Tabel 1.
Dari hasil penelitian terlihat, bahwa durasi katalepsi  perwaktu  paling  besar  ada  pada kelompok  kontrol  pada  menit  ke  180  yaitu 30,2 +  12,4  detik,  hampir  semua  durasi katalepsi  pada  semua  kelompok  berbeda bermakna secara statistik pada P<0,05 dengan uji T-student dibandingkan dengan kelompok kontrol. Kelompok ekstrak air daun kecubung gunung dosis 31,5 mg/kg bb adalah kelompok uji yang memiliki durasi katalepsi yang paling kecil  diantara  dua  kelompok  uji  yang  lain perrentang  waktu  pengukuran,  akan  tetapi setelah  dilakukan  uji  statistik  dengan  T- student, kelompok ekstrak air daun kecubung gunung dosis 63 mg/kg bb memiliki efek yang setara dengan kelompok pembanding Difenhidramin HCl 1 mg/kg bb.
Kelompok ekstrak air daun kecubung dosis 15,75  mg/kg  bb  pada  menit  ke  150  dan  180 berbeda  bermakna  secara  statistik  pada P<0,05 dimana perbedaan ini menunjukan bahwa  ekstrak  air  daun  kecubung  gunung dosis  15,75  mg/kg  bb  lebih  rendah  efeknya
atau lebih tinggi durasi katalepsinya dibandingkan  kelompok  pembanding,  akan tetapi pada menit ke 180, efek yang dihasilkan lebih  tinggi  atau  lebih  sedikit  durasi katalepsinya.  Hasil  yang  hampir  sama didapatkan  pada  kelompok  uji  ekstrak  air daun kecubung gunung dosis 31,5 mg/kg bb pada menit ke 120, 150, dan 180.
Pada  menit  ke  120  dan  150  setelah dilakukan uji statistik memberikan hasil yang tidak berbeda bermakna secara statistik pada P<0,05,  artinya  berdasarkan  durasi  rata-rata katalepsinya,  efeknya  lebih  besar  karena memiliki  durasi  katalepsi  lebih  kecil,  tapi pada menit ke 180 efeknya lebih kecil karena durasi katalepsinya lebih panjang dibandingkan dengan kelompok pembanding di menit yang sama
Pada  hewan  pengerat,  katalepsi  terjadi dengan  mempertahankan  postur  tubuh  yang kaku dalam jangka waktu yang lama sebelum kembali  pada  postur  tubuh  yang  normal (Nirmal  et  al.,  2012)  Pada  hewan  pengerat, peningkatan  kadar  histamin  di  otak  atau penghambatan neurotransmiter dopamin dapat menginduksi terjadinya katalepsi (MV, 2016) Beberapa  obat  diketahui  dapat menginduksi terjadinya katalepsi pada hewan pengerat salah satunya adalah klonidin.

## Tabel 1 Rata-rata Durasi katalepsi
Kelompok Rata-rata durasi katalepsi (detik) pada menit ke- 15 30 60 90 120 150 180 Cmc Na 0,5% -10 mL.kg bb  13,1+7,3  31,5+14,1  21,2+22,0  33,9+7,1 22,6+6,0 20,8+8,6 30,2+12,4 Difenhidramin 1 mg/kg bb 5,4+3,1 2,4+1,2 a 1,3+1,8 a 1,0+0,7 a 5,4+6,3 a 3,2+2,6 a 1,7+2,3 a EADKG 15,75 mg/kg bb 1,3+0,4 a,b 3,3+3,6 a,b 5,1+2,6 a,b 5,4+1,8 a,b 2,9+1,8 a,b 9,9+6,1 a,c 1,3+0,9 a,c EADKG 31,5 mg/kg bb 1,5+1,1 a,b 1,6+1,4 a,b 1,3+0,8 a,b 2,9+1,7 a,b 2,2+1,4 a,c 2,5+1,8 a,c 2,8+1,4 a,c EADKG 63 mg/kg bb 2,6+2,2 b 2,5+3,5 a,b 1,3+0,9 a,b 3,9+2,5 a,b 2,0+2,5 a,b 3,3+2,1 a,b 2,8+2,1 a,b Keterangan : n =  4 EAKG =  Ekstrak Air Daun Kecubung Gunung a =  Ada  perbedaan  bermakna  secara  statistik  dengan  uji  T-student  pada  P<0,05  dibandingkan  dengan kelompok kontrol CMC-Na 0,5%
b =  Tidak ada perbedaan bermakna secara statistik dengan uji T-student pada P<0,05 dibandingkan dengan kelompok
pembanding Difenhidramin HCl 1 mg/kg bb
c =  Ada  perbedaan  bermakna  secara  statistik  dengan  uji  T-student  pada  P<0,05  dibandingkan  dengan kelompok pembanding Difenhidramin HCl 1 mg/kg bb
DOI: 10.26874/kjif.v8i1.286
Klonidin. merupakan agonis α2 adrenoseptor  yang  biasanya  digunakan dalam  pengobatan  hipertensi.  Klonidin merupakan  agonis  alfa-2  adrenoreseptor yang pada dosis tertentu dapat menginduksi katalepsi pada mencit dengan meningkatkan kadar histamin di otak, yang dapat  dihambat  oleh  antagonis  histamin reseptor  H1  (D  J  Taur  et  al.,  2009). Klonidin  melepaskan  histamin  dari  sel mastosit  melalui  mekanisme  yang  sama dengan  liberator  selektif  seperti  senyawa 48/80  yaitu  dengan  mengganggu  stabilitas membran  sel  mastosit  tanpa  menyebabkan kerusakan  pada  dinding  sel  (Rakh  et  al., 2011).  Klonidin  menginduksi  terjadinya katalepsi melalui rangsangan reseptor alfa- 2 pada permukaan sel  mastosit yang mana berikatan  dengan  protein  G  sebagai messenger  dalam  persinyalan  selular (DeBattista,  2015).Untuk  mengetahui efek dari pemberian sediaan uji dapat dilakukan dengan  menghitung  durasi  kumulatif katalepsi.  Hal  tersebut  berguna  untuk memastikan pengaruh yang diberikan oleh
klonidin sebagai induktor. Kumulatif durasi katalepsi pada hewan uji dapat dilihat pada Gambar 1.
Kandungan alkaloid seperti skopolamin, hiosiamin,  dan  atropin  yang  ditemukan pada keluarga solanacecae seperti Brugmansia candida Pers, diketahui memiliki  efektivitas  pada  penggunaan medis seperti spasmolitik, antiasma, antikolinergik,  narkotika  dan  anestesi (Cardillo  et  al.,  2010)(Niño  et  al.,
2003)(Pitta-Alvarez et al., 2000).
Skopolamin  yang  ada  pada  keluarga solanacecae  dapat  mengurangi  terjadinya katalepsi  (Ibrahim  et  al.,  2018)  artinya bahwa  ekstrak  air  daun  kecubung  gunung dapat  mengurangi  jumlah  histamin  pada sistem  saraf  pusat  yang  diinduksi  oleh klonidin. Pengurangan jumlah histamin ini ditandai  dengan  berkurangnya  durasi katalepsi,  yang  telah  dibuktikan  pada kelompok  ekstrak  air  daun  kecubung gunung  dimana  durasi  katalepsi  yang dihasilkan  lebih  sedikit  dibandingkan dengan kelompok kontrol.
Beberapa  tanaman  yang  telah  diuji aktivitas  antihistamin  yang  diinduksi klonidin  yaitu  akar Clitoria  ternatea L ((Dnyaneshwar  J  Taur  &  Patil,  2010),
Albizzia  lebbeck , Syzygium  cumin (MV, 2016), Euhorbia  hirta Linn  (Shelke  et  al.,
2014)  dan  senyawa  aktif  quercetin  (H.  &
Nadaf, 2019), Keterbatasan dari  penelitian ini  adalah  alat  uji  katalepsi  yang  harus dibuat  terlebih  dahulu  dan  dampak  dari hasil penelitian ini dapat membuktikan efek dari  ekstrak  air  daun  kecubung  gunung sebagai  bahan  yang  dapat  menurunkan jumlah histamin.

## Kesimpulan
Hasil pengujian antikatalepsi menunjukkan  bahwa  ekstrak  air  daun kecubung gunung pada ketiga  dosis dapat menurunkan durasi katalepsi secara signifikan dibandingkan kelompok kontrol pada (P<0,05) dengan uji t-student. Ekstrak air daun kecubung gunung dosis 63 mg/kg bb  memiliki  efek  yang  setara  dengan kelompok pembanding Difenhidramin HCl 1  mg/kg  bb.  Dosis  yang  terbaik  pada ekstrak  air  daun  kecubung  gunung  31,5 mg/kg  bb  karena  durasi  katalepsi  yang dihasilkan  lebih  sedikit  dibandingkan dengan kelompok pembanding
Difenhidramin  HCl  1  mg/kg  bb  dan berbeda  secara  bermakna  secara  statistik pada (P<0,05) dengan uji t-student. Hal ini menandakan  bahwa  ekstrak  air  kecubung gunung  memiliki  aktivitas  yang  dapat menurunkan jumlah histamin yang diinduksi  oleh  klonidin  yang  dapat mengurangi terjadinya durasi katalepsi.

## Ucapan Terima Kasih
Ucapan terima kasih penulis sampaikan kepada
Lembaga penelitian dan Pengabdian  Kepada  Masyarakat  (LPPM) Universitas  Jenderal  Achmad  Yani,  atas pemberian dana dalam penelitian ini.

## Daftar Pustaka
Cardillo, A. B., Otálvaro, A. Á. M., Busto, V. D., Talou, J. R., Velásquez, L. M. E., & Giulietti, A. M. (2010). Scopolamine, anisodamine and hyoscyamine production by Brugmansia candida hairy root  cultures  in  bioreactors. Process
Biochemistry .
Dalimartha,  S.  (2000). Atlas  Tumbuhan Obat  Indonesia (Second).  PT.  Pustaka Pembangunan Swadaya Nusantara.
DeBattista, C. (2015). Antipsychotic agents
&  lithium.  In Basic  &  Clinical Pharmacology .
Dongre, P. R., Doifode, C. A., Chilate, V. V,  &  Bhujbal,  S.  S.  (2017). Anti- Inflammatory and Anti Cataleptic Effect of  Herbal  Formulation  Consisting  of Various
Indigenous Plants in
Experimental Animals . 9 (3), 323–326. H.,  R.,  &  Nadaf,  R.  (2019).  Evaluation  of antihistaminic  activity  of  quercetin  by using  histamine  induced  bronchospasm and clonidine induced catalepsy models. International  Journal  of  Basic  & Clinical Pharmacology , 8 (4), 647. Ibrahim,  M.,  Siddique,  S.,  Rehman,  K., Husnain, M., Hussain, A., Akash, M. S. H., & Azam, F. (2018). Comprehensive analysis  of  phytochemical  constituents and ethnopharmacological  investigation of  genus  Datura. Critical  Reviews  in Eukaryotic  Gene  Expression , 28 (3), 223–283.
Leurs,  R.,  Hough,  L.  B.,  Blandina,  P.,  & Haas,
H. L. (2012). Basic Neurochemistry siegel. In Basic Neurochemistry .
Mahdy,  A.  M.,  &  Webster,  N.  R.  (2011). Histamine and antihistamines.
DOI: 10.26874/kjif.v8i1.286
Anaesthesia and Intensive Care Medicine , 12 (7), 324–329.
MV, R. R. (2016). Anti-Allergic Studies of Albizzia Lebbeck and Syzygium Cumini (L- Syzygium Gambolana). Open Access  Journal  of  Microbiology  & Biotechnology , 1 (1).
Nakazawa,  S.,  Sakanaka,  M.,  Furuta,  K., Natsuhara, M., Takano, H., Tsuchiya, S., Okuno,  Y.,  Ohtsu,  H.,  Nishibori,  M., Thurmond,  R.  L.,  Hirasawa,  N., Nakayama, K., Ichikawa, A., Sugimoto, Y.,  &  Tanaka,  S.  (2014).  Histamine synthesis  is  required  for  granule maturation  in  murine  mast  cells. European Journal of Immunology . Niño, J., Gallego, C. M., Correa, Y. M., & Mosquera, O. M. (2003). Production of scopolamine by normal root  cultures of Brugmansia candida. Plant Cell, Tissue and Organ Culture .
Nirmal, S. A., Patel, A. P., Bhawar, S. B.,
&  Pattan,  S.  R.  (2012).  Antihistaminic and  antiallergic  actions  of  extracts  of Solanum nigrum berries: Possible role in the  treatment  of  asthma. Journal  of Ethnopharmacology , 142 (1), 91–97. Obiri,  D.  D.,  Osafo,  N.,  &  Abotsi,  R.  E. (2013).    Antiallergic  and  Antiarthritic Effects  of  Stem  Bark  Extract  of Glyphaea  brevis  (Spreng)  Monachino (Tiliaceae)  in  Murine  Models  . ISRN Pharmacology .
Patil, S., & Ninave, P. (2016). In-vivo and in-vitro screening models of asthma: an overview. International  Journal  of Research and Development in Pharmacy and Life Sciences . Patil, S. S. (2010). Available online through STUDY  OF  HERBAL  FORMULATION CONSISTING OF VARIOUS INDIGENOUS  PLANTS  FOR  THEIR ANTI-ASTHMATIC ACTIVITY IN . 1 (2),
515–521.
Pitta-Alvarez,  S.  I.,  Spollansky,  T.  C.,  & Giulietti, A. M. (2000). The influence of different  biotic  and  abiotic  elicitors  on the  production  and  profile  of  tropane alkaloids  in  hairy  root  cultures  of Brugmansia  candida. Enzyme  and Microbial Technology .
Rakh, M. S., Khedkar, A. N., Aghav, N. N., Raut,  D.,  &  Chaudhari,  S.  R.  (2011). Anticataleptic  Activity  of  the  Various Extracts  of  Momordica  dioica  Seed  on Clonidine and Haloperidol . 3 , 592–600. Rutkowski,  K.,  Li,  P.  H.,  &  Wagner,  A. (2018).  The  Paradox  of  Antihistamine Hypersensitivity.  In Journal  of  Allergy and Clinical Immunology: In Practice . Shelke,  P.,  Derle,  D.,  Derle,  N.,  &
Vyawahare, J. (2014). Preclinical Evaluation  and  Antiasthmatic  Activity of Euphorbia hirta Linn . Iinternatiional Jjournal of Pure & Appliied
Biiosciience , 2 (2), 262–266. Taur,  D  J,  Patil,  R.  Y.,  Khalate,  A.  H., Dnyaneshwar,  M.,  &  Taur,  J.  (2009). Phytochemical Investigation and Evaluation  of  Clitoria  Ternatea  Seeds Extracts on Clonidine Induced Catalepsy in Mice. Pharmacologyonline .
Taur, Dnyaneshwar J, & Patil, R. Y. (2010).
Antihistaminic  activity  of  Clitoria ternatea  L.  roots. Journal  of  Basic  and Clinical Pharmacy .
Yamauchi,  K.,  &  Ogasawara,  M.  (2019). The role of histamine in the pathophysiology  of  asthma  and  the clinical  efficacy  of  antihistamines  in asthma therapy. International Journal of Molecular Sciences , 20 (7).