(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2018, 1 (1), 13-17

## UJI EFEKTIVITAS EKSTRAK ETANOL DAUN  BANDOTAN
Ageratum conyzoides L SEBAGAI HEMOSTATIS TERHADAP LUKA POTONG PADA TIKUS PUTIH.
Rivaldy Lobot 1* , Olvie Datu 1 , Wilmar Maarisit 1 , Silvana Tumbel 2
1 Program Studi Farmasi, Fakultas MIPA, Universitas Kristen Indonesia
2 Program Studi Biologi, Fakultas MIPA, Universitas Kristen Indonesia
* Penulis Korespondensi, email: rivaldylobot@yahoo.com Diterima: 4 September 2018, Disetujui: 11 September 2018

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  efektivitas  ekstrak  etanol  daun  bandotan  ( Ageratum conyzoides L)  sebagai  hemostatis  terhadap  luka  potong  pada  tikus  putih.  Metode  penelitian  yang digunakan  adalah  metode  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL),  dengan  lima  kelompok  perlakuan dengan  tiga  kali  ulangan.  Kelompok  pertama  yaitu  kelompok  tanpa  perlakuan,  kelompok  kedua, pemberian  ekstrak  daun  bandotan  konsentrasi  50 % ,  kelompok  ketiga,  pemberian  ekstrak  daun bandotan konsentrasi 75 % , kelompok keempat, pemberian ekstrak daun bandotan konsentrasi 100 % , kelompok kelima, kontol positif betadin povidone iodine 10%. Data dianalisis menggunakan metode ANOVA ( Analysis of variant ) dengan tingkat kepercayaan 95 % (α=0,05). Dan dilanjutkan dengan uji  LSD  ( Least  Significant  Different )  untuk  melihat  perlakuan  mana  yang  menberikan  efek  yang berbeda. Hasil penelitian terdapat perbedaan  waktu berhentinya pendarahan dari setiap perlakuan. Ekstrak daun bandotan memiliki efektivitas sebagai hemostatis terbaik pada konsentrasi 75%
Kata Kunci : Hemostatis, Ageratum conyzoides L, tikus putih

## ABSTRACT
The  aims  of  this  research  is  to  determine  the  effectiveness  of  ethanol  extract  from  Bandotan Ageratum conyzoides L leaves as hemostatic against cut wounds in white rats. The research method used  completely  randomized  design  method  (CRD)  with  five  treatment  groups  with  three replications. Group 1 was group without treatment, group 2 was treatment with 50% bandotan leaf extract, group 3 was treatment  with 75% bandotan leaf extract, group 4 was treatment with 100% bandotan  leaf  extract, and  group  5  was  treatment  with  10%  povidone  iodine.  Data  were  analyzed using ANOVA (Analysis of variant) method with a confidence level of 95% (α = 0.05) and continued with the LSD (Least Significant Different) test to see which treatment gave a different effect. The results  of  this  research  is  Bandotan  leaf  extract  has  the  best  hemostatic  effectiveness  at  a concentration of 75%
Keyword s : hemostatic , Ageratum conyzoides L, white rats

## PENDAHULUAN
Manusia  memiiki  berbagai  macam aktivitas dalam kehidupannya baik aktivitas di kantor, di dalam rumah, maupun aktivitas di  alam  terbuka  dan  dalam  aktivitas  ini manusia  rentang  terkena  luka.  Ketika permukaan  tubuh  mengalami  luka  maka, tubuh akan mengeluarkan darah, tubuh yang
normal  ketika  mengalami  luka  setelah beberapa saat darah akan berhenti mengalir, sedangkan  pada  luka  yang  besar  dapat menyebabkan  pendarahan  yang  banyak sehingga  mengakibatkan  kekurangan  darah bahkan  sampai  menyebabkan  kematian, maka  harus  sesegera  mungkin  melakukan penghentian pendarahan. Penghentian pendarahan  adalah  proses  yang  kompleks.
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2018, 1 (1), 13-17
Pembekuan  dimulai  ketika  keping-keping darah  dan  faktor-faktor  lain  dalam  plasma darah kontak dengan permukaan yang tidak biasa,  seperti  pembuluh  darah  yang  rusak atau  terluka.  Saat  terjadi  luka  pada permukaan  tubuh,  komponen  darah,  yaitu trombosit akan segera berkumpul mengerumuni bagian yang terluka dan akan menggumpal  sehingga  dapat  menyumbat dan  menutupi  luka.  Rentang  waktu  antara mulainya  pendarahan  sampai  terbentuknya sumbatan  sering  disebut  sebagai  waktu pendarahan (Gunawan, 2008).
Tubuh  mempunyai  sistem  untuk menyumbat dan memperbaiki sistem sirkulasi,  salah  satunya  adalah  melalui hemostatis.  Hemostatis  merupakan  proses penghentian  pendarahan  pada  pembuluh darah yang cedera. Berbagai obat hemostatik telah  dikembangkan  untuk  melindungi individu  dari  pendarahan  akibat  trauma (Pitojo 2002). Salah satu tanaman obat yang cukup dikenal di masyarakat adalah tanaman bandotan Ageratum conyzoides L. Dari hasil skrining beberapa penelitian terhadap bandotan  mengandung  alkaloid,  tanin, saponin,  steroid,  flavonoid,  minyak  adsiri, dan  lemak  (Warella,  2003).  Khasiat bandotan antara lain untuk pengobatan luka, gatal-gatal,  flu, demam, diare, radang usus, dan rematik (Hasim, 2005).
Tanaman bandotan sering ditemukan di  wilayah  Sulawesi  Utara  khususnya Minahasa  namun  pemanfaatannya  masih kurang  khususnya  dibidang  pengobatan. Berdasarkan data empiris yang didapat pada masyarakat Desa Kali Kecamatan Tombatu, daun  sengit  (bandotan)  dapat  digunakan untuk  menangani  luka  berdarah  dengaan cara,  daun  bandotan  dicuci  bersih  lalu ditumbuk sampai halus, kemudian dibubuhkan di atas bagian tubuh yang sakit / luka,  lalu  balut  dengan  perban.  Pengobatan dilakukan  sampai  luka  sembuh.  Bahkan menurut  masyarakat  luka  potong  dengan pendarahan ketika, ditampalkan daun bandotan  yang  sudah  dihaluskan  lalu menunggu  beberapa  detik  pendarahan langsung berhenti.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat–alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  gelas  ukur, rotary evaporator ,  kertas  saring,  aluminium  foil, timbangan  analitik, stopwatch ,  gunting bedah, kandang tikus putih, toples kaca, alat ukur  (penggaris),  spidol,  rak tabung  reaksi, tabung  reaksi,  pipet,  batang  pengaduk, sarung  tangan,  kamera  digital.  Sedangkan bahan yang digunakan adalah daun bandotan,  etanol  70%,  betadin  povidone iodine 10%, aquades, makanan tikus (pelet, jagung, kacang hijau).

## Ekstrasi Simplisia Daun Keji Beling
Ekstraksi  simplisia  daun  bandotan dilakukan  dengan  cara  maserasi.  Serbuk simplisia daun bandotan sebanyak 500 gram dimasukkan kedalam toples kaca kemudian direndam  dengan  pelarut  etanol  70%, ditutup  menggunakan  aluminium  foil  dan dibiarkan  selama  lima  hari  sambil  sesekali diaduk.  Setelah  lima  hari,  sampel  yang direndam tersebut disaring dengan menggunakan  kertas  saring,  menghasilkan filtrat  satu  dan  ampas  satu.  Ampas  satu kemudian  ditambah  dengan  larutan  etanol 70%,  ditutup  dengan  aluminium  foil  dan dibiarkan  selama  dua  hari  sambil  sesekali diaduk.  Setelah  dua  hari,  sampel  tersebut disaring menggunakan kertas saring, menghasilkan  filtrat  dua  dan  ampas  dua. Filtrat  pertama  dan  filtrat  kedua  disatukan untuk  memperoleh  filtrat  total,  kemudian dipekatkan  dengan  menggunakan  rotary evaporator hingga diperoleh ekstrak kental
Pengujian Ekstrak Daun  Bandotan Terhadap Hewan Uji
Sebanyak lima belas ekor tikus putih jantan  dibagi  menjadi  lima  kelompok sebanyak masing–masing tiga ekor. Sebelum  perlakuan,  ditentukan  tikus  putih dengan cara pengacakan.
Setelah itu tikus diberi tanda menurut
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2018, 1 (1), 13-17
perlakuan  dengan  menggunakan  spidol. Misalnya untuk P11 ulangan pertama diberi tanda  P1,  untuk  perlakuan  P2  ulangan pertama  diberi  tanda  P21,  demikian seterusnya  untuk  perlakuan  lain  prinsip pemberian  tanda  adalah  seperti  contoh tersebut. Untuk kelompok 1 (tanpa perlakuan)  ekor  tikus  dipotong.  Stopwatch mulai dijalankan bersamaan dengan terlihatnya darah yang keluar dari ekor tikus sampai darah berhenti. Waktu dicatat. Untuk kelompok  2,  3,  dan  4,  dilakukan  prosedur yang  sama  akan  tetapi  masing–masing kelompok perlakuan dicelupkan pada ekstrak  daun  bandotan  dengan  konsentrasi masing–masing yaitu, P2 diberi ekstrak daun bandotan konsentrasi 50%, P3 diberi sediaan ekstrak daun bandotan konsentrasi 75%, dan P4  diberi  sediaan  ekstrak  daun  bandotan konsentrasi  100%,  untuk  perlakuan  5 dilakukan  prosedur  yang  sama  akan  tetapi kelompok  perlakuan  5  dicelupkan  pada control positif betadin povidone iodine 10%.

## Analisis Data
Untuk mendukung adanya perbedaan efek  hemostatis,  data  dianalisis  denga metode  ANOVA (Analysis  of  variant) dengan  tingkat  kepercayaan  95% (α=0,05). Jika  ada  pebedaan  yang  signifikan  maka dilanjutkan dengan uji LSD (Least Significant Different) untuk melihat perlakuan mana yang menberikan efek yang berbeda.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstrak kental daun bandotan dibuat konsentrasi  50%,  75%,  dan  100%  dan diberikan dengan cara ekor tikus putih yang telah  dipotong  dicelupkan  pada  masing- masing  kosentrasi,  sedangkan  kelompok lima  kontrol  positif  menggunakan  betadin. Pengujian dilakukan dengan cara mengamati waktu  pendarahan  pada  luka  potang  ekor tikus  putih,  perhitungan  waktu  pengamatan
dimulai dari waktu pertama kali darah keluar dari luka ekor tikus dan darah menetes pada kertas  saring  sampai  darah  berhenti  keluar yang  ditandai  kertas  saring  tidak  lagi menyerap darah. Berikut data yang diperoleh setelah dilakukan pengujian dapat dilihat pada tabel 1:
Data hasil pengukuran waktu pendarahan  luka  potong  ekor  tikus  pada Table 1 menunjukkan bahwa kelompok satu (tanpa  perlakuan  tidak  memiliki  efek hemostatis hal ini dapat dilihat dari lamanya waktu  pendarahan  pada  kelompok  satu dibandingkan dengan kelompok menggunakan  ekstrak  daun  bandotan. Pengamatan pada kelompok dua (konsentrasi  50%)  waktu  pendarahan  lebih cepat dari kelompok satu (tanpa perlakuan), kelompok  tiga  (konsentrasi  75%)  waktu pendarahan  lebih  cepat  dari  kelompok  dua konsentrasi 50%, kelompok empat (konsentrasi 100%), waktu pendarahan lebih lama dibanding kelompok dua dan kelompok tiga, tetapi kelompok empat, tetap memberikan  efek  hemostatis,  hasil  tersebut menunjukan  bahwa  pada  konsentrasi  75% penghentian  pendarahan  tercepat  diikuti dengan  konsentrasi  50%  dan  konsentrasi 100%,  kelompok  lima  yaitu  kontrol  positif waktu  pendarahan  paling  cepat  dari kelompok  satu  hingga  kelompok  empat. Hasil  uji  homogenitas  varians  menunjukan nilai  sig  0.180  >α  =  0.05  ini  berarti  ragam dari data (populasi) homogen atau berdistribusi normal. Karena homogen maka dapat  dilanjutkan  untuk  analisis  ragam (varians).  Hasil  analisis  ragam  (varians) menunjukan  nilai  sig.  0.00  <  α  =  0.05,  ini berarti  Ekstrak  Etanol  Daun  Bandotan memiliki efektivitas sebagai hemostatis pada tikus  putih.  Karena  nilai  siknifikan  maka dilanjutkan  dengan  uji  perbandingan  untuk melihat perlakuan-perlakuan mana saja yang memberi efek yang sama sebagai hemostatis pada  tikus  putih  menggunakan  uji  Tukey HSD 5%.
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2018, 1 (1), 13-17

## Tabel 1. Hasil pengukuran waktu pendarahan pada luka ekor tikus
Perlakuan Ulangan / Waktu pendarahan Rata-rata 1 2 3 Tanpa Perlakuan 146 154 139 146 Konsentrasi 50 % 91 95 98 94 Konsentrasi 75 % 71 80 84 78 Konsentrasi 100 % 104 110 98 104 Kontrol positif 73 52 49 58 Hasil uji perbandingan
menggunakan  uji Tuckey HSD 5% Betadin dan  ektrak  etanol  daun  bandotan  75% terletak  pada  kolom  yang  sama  berarti memberi  efek  yang  sama  demikian  halnya ekstrak  etanol  daun  bandotan  75%  dan ektrak  etanol  daun  bandotan  50%  terlatak pada  kolom  yang  sama  dan  ekstrak  etanol daun bandotan 50% dan 100% terletak pada kolom yang  sama.  Sementara  tanpa perlakuan  berada  di  kolom  yang  berbeda dari  kolom  betadin  maupun  untuk  kolom ekstrak  50%,  75%  dan  100%.  Dari  tiga konsenrtasi  ekstrak  Etanol  Daun  Bandotan ternyata  konsentrasi  ektrak  etanol  daun bandotan  75%  memiliki  efek  yang  sama dengan betadin.
Dari hasil penelitiaan tersebut terbukti  bahwah  ekstrak  daun  bandotan memiliki  efek  hemostatis  pada  konsentrasi 50%,  75%,  dan  100%  efek  hemostatis terbaik  pada  konentrasi  75%.  Dari  hasil skrining  bandotan  mengandung  alkaloid, tannin, saponin, steroid, flavonoid (Warella, 3003).  Senyawa  utama  yang  diduga  dapat berefek sebagai hemostatis adalah tanin dan flavonoid.  Tanin  bersifat  astrigen  yang memiliki  kemampuan  untuk  membentuk kompleks  dengan  makromolekul,  terutama protein, kemampuan tersebut dapat mempercepat
proses hemostatis (Hassanpour et  al ,  2011).  Dalam  tubuh, flavonoid  umumnya  merupakan  pigmen- pigmen  yang  tersebar  luas  dalam  bentuk
senyawa  glikogen  dan  aglikon  dan  dapat menghambat  pendarahan  (Narayana et  al , 2001. Mekanisme lain dari flavonoid dalam penghentian  pendarahan  adalah  dengan mekanisme  vasokonstriksi.  Vasokonstriksi dapat  memacu  agregasi  trombosit  sehingga sumbat trombosit dapat terbentuk dan terjadi penyumbatan  luka  melalui  peran  bekuan darah, setelah darah tersumbat, maka darah akan berhenti (Purnamasari et al , 2012).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  daun bandotan  berkhasiat  sebagai  hemostatis terhadap  luka  potong  pada  tikus  putih dengan  konsentrtasi  50%,  75%,  dan  100%. Ekstrak  daun  bandotan  konsentrasi  75% memiliki efek hemostatis paling efektif

## DAFTAR PUSTAKA
Gunawan,  2008.  Farmakologi  dan  Terapi Edisi  5.  Departemen  Farmakologi dan
Terapeutik Fakultas Kedokteran UI. Jakarta. Hassanpour, S., N. Maheri-Sis., B. Eksshratkhah., dan F. B.
Mehmandar.  2011.  Plants  and Seceondary Metabolites ( Tannins ): A  Review.  Int.  J  Forest,  Soil  and Erosion .1 (10): p, 47-53.
Hasim,  2005,  mengembangkan  potensial bakteeri  bandotan.  http://www.
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2018, 1 (1), 13-17
Kompas com [23 mei 2005]. Narayana,  K.  R,.  M.R.  Reddy,.  Dan  M.R.
Chaluvadi.  2001. Bioflavonoids Classification, Pharmacological, Biochemical Effects and Theraupetic Potentia l. Indian Journal Pharmacology . P 2-6.
Pitojo, S. 2002. Ceplukan (Herba Berkhasiat
Obat), Kanisius. Yogyakarta
Purnamasari,  O.  R.,  I.  Arundina.,  dan  T.  I.
Budhy.  2012.  Efek  Hemostatik Ektrak Etanol Daun Teratai ( Nymphae rubra Roxb.) Pada Luka Potong Ekor Mencit (Mus
musculus).  Oral  Biology  Dent.  J.
4(1): hal. 15-19.
Warella, N.E, 2003. Diferensiasi Leukokosit Darah  Ayam  yang  di  Infeksi Eimeria Tenella Setelah Pemberian Serbuk Bandotan Dengan Berbagai Dosis Pada Pakan, IPB.