Status Kerentanan Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) pada Tahun 2006-2007 terhadap Malation di Bandung, Jakarta, Surabaya, Palembang dan Palu

## Intan Ahmad, Sita Astari, Resti Rahayu, dan Nova Hariani
Sekolah Ilmu dan Teknologi Hayati, Institut Teknologi Bandung Jalan Ganesha No. 10 Bandung 40132 Fax: (022)  251- 5033 Email: intan@itb.ac.id

## Abstract
Studies  on   the   susceptibility   of Aedes  aegypti collected   in   2006-2007   from  five   cities  in Indonesia, i.e. Jakarta, Bandung, Surabaya, Palembang and Palu were tested by using the WHO standard test to determine their susceptibility status to Malathion. The results showed that despite the fact that Malathion has been used for >32 years, in general Ae. aegypti from all study sites, except   from   Palembang,   were   still   susceptible   to   Malathion.   This   paper   offers   some   possible factors that might have involved in delaying the onset of resistance to Malathion.
Key words : Aedes aegypti , susceptibility, Organophosphate, Malathion, Indonesia

## Pendahuluan
Penyakit Demam Berdarah Dengue (DBD), pertama kali muncul di Indonesia pada tahun   1968.   Berbagai   strategi   untuk   mengendalikan   nyamuk Aedes   aegypti sebagai vektor  DBD   telah   dilakukan   secara  intensif.   Namun   wabah   penyakit   demam  berdarah masih terus terjadi di Indonesia. Pada tahun 2006, Departemen Kesehatan melaporkan terjadinya 11.173 kasus DBD dengan 1.152 kematian (Ahmad et al ., 2007). Di Indonesia dan banyak negara lainnya, upaya pengendalian Ae. aegypti sangat bergantung kepada insektisida. Sejak tahun 1970an golongan Organofosfat (Temefos dan Malation) sudah digunakan, begitu juga halnya dengan golongan Piretroid sintetik (antara lain Permetrin dan Deltametrin) digunakan sejak tahun 1980an sampai sekarang. Pada saat ini Temefos dalam bentuk granula 1 % yang dilarutkan dalam wadah/penampungan air   di   rumah   tangga,   banyak   digunakan   untuk   mengendalikan   larva Ae.   aegypti . Pengendalian rutin jangka pendek dengan cara thermal fogging ataupun ultra-low volume menggunakan Malation, Permetrin, atau Deltametrin untuk Ae. aegypti dewasa bila terjadi peledakan   kasus   deman   berdarah.   Demikian   pula   masyarakat   biasa   menggunakan insektisida aerosol ataupun semprot rumah tangga ( household sprays ) yang mengandung piretroid.
Di   berbagai   belahan   dunia,   telah   banyak   dilaporkan   bahwa Ae.   aegypti telah resisten terhadap berbagai kelas insektisida. Tahun 2001 di Brazil dilaporkan bahwa Ae. aegypti telah resisten terhadap Temefos (Braga et al., 2004). Hal yang sama terjadi di Thailand, Ponlawat et al . (2005), melaporkan bahwa Ae. aegypti telah resisten terhadap Permetrin dan Temefos tetapi masih rentan terhadap Malation. Brengues et al. (2003), melaporkan bahwa Ae. aegypti dari daerah Semarang telah resisten 296 kali terhadap Permetrin. Kasus  resistensi Ae. aegypti terhadap Piretroid serta  mekanisme resistensi yang   terjadi   dilaporkan   juga   oleh  Ahmad et   al. (2007),   yang   menyatakan   bahwa Ae. aegypti dari   Bandung   telah   resisten   terhadap   Permethrin   sebesar   79,3   kali,   dan Ae. aegypti asal Palembang telah resisten terhadap Deltametrin sebesar 23,7 kali. Kekhawatiran bahwa Ae. aegypti Indonesia sudah resisten terhadap Malation dan Temefos   adalah   hal   yang   cukup   beralasan   karena   kedua   insektisida   ini   sudah dipergunakan  di banyak tempat di Indonesia lebih dari 32 tahun. Resistensi serangga terhadap insektisida,  apapun jenisnya akan muncul ke permukaan setelah 2-20 tahun
digunakan   secara   terus   menerus   (Georghio,   1983).   Penggunaan   insektisida,   dapat bertindak sebagai agen seleksi populasi secara alami yang akan membuat serangga yang mempunyai gen resisten yang tetap hidup dan akan diturunkan ke generasi berikutnya. Akibatnya   persentase   serangga   yang   resisten   akan   terus   bertambah,   sedangkan serangga   rentan   akan   tereliminasi   karena   insektisida.   Pada   akhirnya,   penggunaan insektisida   menjadi   tidak   efektif   karena   jumlah   serangga   resisten   jauh   lebih   banyak dibandingkan dengan serangga rentan.
Ahmad et al . (2006), melaporkan bahwa Ae. aegypti dari Surabaya telah resisten terhadap   Temefos,   walaupun   masih   dalam   kisaran   resistensi   rendah   rasio   resistensi (RR) 90 =   4,39.   Walaupun   demikian,   belum   ada   laporan   tentang   kasus   resistensi   yang terjadi terhadap Malation.
Kekhawatiran     akan   terjadinya   resistensi Ae.   aegypti terhadap   Malation,   dapat dilihat dari perubahan penggunaan insektisida. Akhir-akhir ini Malation mulai digantikan oleh insektisida dari golongan Piretroid seperti Deltamethrin, Sipermetrin and λ-Sihalotrin, demikian pula penggunaan Temefos mulai digantikan dengan Insect Growth Regulator (IGR) Piriproksifen (WHO, 1997).
Laporan ini menjelaskan tentang status kerentanan Ae. aegypti terhadap Malation yang diketahui sudah digunakan di Indonesia untuk jangka waktu lebih dari 32 tahun,  dari Ae. aegypti yang dikoleksi dari lima kota yaitu Bandung, Jakarta, Surabaya, Palembang dan Palu pada tahun 2006-2007. Sampai saat ini insektisida masih merupakan pilihan pertama   untuk   mengendalian   nyamuk   vektor   deman   berdarah,   maka   data   mengenai status kerentanan atau resistensi Ae. aegypti terhadap insektisida amat penting karena dapat digunakan untuk merancang strategi pengendalian yang lebih baik.

## Materi dan Metode
Ae.   aegypti sebagai   serangga   uji   dikoleksi   pada   tahun   2006-2007   dari   kota Bandung, Jakarta, Surabaya, Palembang dan Palu. Sebagai galur ( strain ) pembanding digunakan Ae. aegypti rentan insektisida yang kami peroleh dari Vector Control Research Unit (VCRU), Universiti Sains Malaysia.  Sebelum digunakan, semua galur dipelihara di Laboratorium Entomologi, Sekolah Ilmu dan Teknologi Hayati, Institut Teknologi Bandung. Semua pengujian dilakukan pada suhu kamar (25 ± 1 o C), kelembaban relatif (61-82 %). Insektisida yang digunakan adalah Malation 5% yang diperoleh dari Vector Control Research Unit (VCRU), Penang, Malaysia dalam bentuk “ insecticide impregnated paper ” Bioassay untuk menentukan kerentanan Ae. aegypti terhadap Malation dilakukan dengan   metoda   WHO   (WHO,   1975).   Tiga   kelompok   15-25   ekor Ae.   aegypti betina berumur dua hari dalam kondisi lapar didedahkan dengan insektisida Malation selama 5, 10, 15, 30, 45, dan 60 menit. Nyamuk kemudian dibiarkan untuk pemulihan dan diberi makan dengan kapas basah yang direndam glukosa 10%, dan setelah 24 jam jumlah nyamuk yang mati dihitung (WHO, 1981).
Hasil bioassay dianalisis   dengan   analisis   probit   menggunakan   program   Polo-PC (LeOra Software, 2004). Tingkat resistensi dihitung berdasarkan perbandingan hasil yang diperoleh dengan strain standar (VCRU).
Kriteria yang diberikan oleh Mazzari dan Georghiou (1995), dijadikan acuan untuk menentukan   tingkat   resistensi.   Dikatakan   resistensi   tinggi   bila   Rasio   Resistensi   >10 hingga kelipatannya, resistensi menengah atau moderat bila RR diantara 5 dan 10, dan resistensi rendah bila RR <10.

## Hasil dan Pembahasan
Populasi Ae.   aegypti yang   diperoleh   dari   Bandung,   Surabaya,   Jakarta   dan   Palu semuanya masih mempunyai tingkat kerentanan yang hampir sama dengan strain rentan VCRU, bahkan Ae. aegypti yang diperoleh dari Jakarta dan Palu menunjukkan tingkat kerentaan yang lebih tinggi dibandingkan dengan strain rentan. Kecuali Ae. aegypti yang diperoleh dari Palembang yang menunjukkan tingkat resistensi rendah terhadap Malation (RR 90 =3,37). (Tabel 1).
Tabel 1. Kerentanan dan Rasio Resistensi (RR) Ae. aegypti dewasa terhadap Malation Table 1. Susceptibility and Resistance Ratio (RR) of adult Ae. aegypty to Malathion
Galur N LT 50 (menit) RR 50 LT 90 (menit) RR 90 Slope VCRU (standar) 336 7,17 1,00 14,41 1,00 4,226 Palembang 291 7,95 1,11 48,60 3,37 5,053 Surabaya 484 7,47 1,04 17,65 1,22 3,432 Bandung 365 7,55 1,05 15,66 1,09 4,044 Jakarta 308 6,61 0,92 11,94 0,83 4,986 Palu 330 6,19 0,86 10,16 0,70 5,957
Dari penelitian ini secara umum terlihat bahwa Ae. aegypti masih rentan terhadap Malation. Hasil yang didapat tidak diduga sebelumnya, karena Malation telah digunakan untuk mengendalikan Ae. aegypti di berbagai tempat di Indonesia sejak tahun 1970an (>32 tahun). Hasil penelitian ini dapat dibandingkan dengan laporan yang disampaikan oleh Huong et al. (2004) bahwa Ae. aegypti masih rentan terhadap Malation di sebagian besar  daerah  di  Vietnam.  Demikian  pula   yang  dilaporkan   oleh  Ponlawat et  al .  (2005) bahwa Ae.  aegypti dari  berbagai   daerah  di Thailand  masih  rentan  terhadap   Malation. Tetapi   hal   sebaliknya   terjadi   dengan   Temefos,   hampir   semua   daerah   telah   resistensi terhadap   Temefos   dengan   RR 90 (7,0-130,0).   Dilaporkan   juga   bahwa Ae.   aegypti dari semua tempat  di Thailand   telah  resisten terhadap Permetrin  (RR 90 = 13,0-72,0).  Hasil yang diperoleh  Ponlawat et al. (2005),  mirip dengan keadaan di Indonesia,  yaitu, Ae. aegypti masih rentan terhadap Malation, tetapi mulai resisten terhadap Temefos (Ahmad et al. 2006), dan resisten terhadap Permetrin dengan rasio resisten berkisar antara 8.60- 79.30 (Ahmad et al., 2007). Resistensi yang terjadi pada Permetrin dan Deltametrin di Indonesia, nampaknya sebagai akibat penggunaan DDT pada masa yang lalu sehingga terjadi cross   resistance antara   insektisida   DDT   dan   Piretroid.   Hal   ini   didukung   oleh penelitian Chadwick et al. (2006), yang melaporkan   bahwa Ae. aegypti Jakarta sudah resisten terhadap DDT.
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa Ae aegypti masih rentan terhadap malation walaupun telah digunakan >32 tahun. Kami menduga hal ini terjadi karena: 1) Secara tidak   sengaja   telah   terjadi   “rotasi”   penggunan   insektisida,   atau   dalam   hal   ini   untuk mengendalikan   nyamuk   dewasa   penggunaan   Malation   (Organofosfat)   kadang-kadang diganti   dengan   insektisida   dari   golongan   piretroid   seperti   Permetrin,   Deltametrin, Sipermetrin dan λ-Sihalothin atau dari golongan Karbamat yaitu Propoksur. 2) Demikian pula jenis insektisida yang digunakan untuk mengendalikan larva, tidak selalu digunakan Temefos (organofosfat) tetapi kadang-kadang digunakan juga IGR seperti Metopren dan akhir–akhir ini dengan  Piriproksifen. 3) Penggunaan berbagai cara pengendalian sesuai dengan   prinsip   pengendalian   hama   terpadu,   termasuk   penggunaan   insektisida   secara bijaksana.   Lebih   lanjut   Georghio   (1983),   menyampaikan   latar   belakang   teori   tentang pendekatan   “rotasi”   yang   dapat   memperlambat   terjadinya   resistensi   pada   insektisida. Sedangkan secara eksperimental hal ini dijelaskan oleh Lagunes (1980),   bahwa suatu galur Culex   quenquefasciatus yang   mengandung   gen   resisten   terhadap   tiga   jenis insektisida yaitu Temefos, Propoksur, dan Permetrin  tidak berkembang menjadi nyamuk resisten bila penggunaan ketiga jenis insektisida tersebut dilakukan secara rotasi.
Sebagai   konsekuensi   dari   penelitian   ini   dapat   disarankan   bahwa   penggunaan Malation   nampaknya   masih   dapat   terus   digunakan,   tetapi   penggunaan   Temefos   serta insektisida dari golongan Piretroid harus mulai digunakan secara hati-hati. Selain itu rotasi penggunaan insektisida dan manajemen resistensi sudah harus mulai dilakukan, untuk menghindari masalah pengendalian seperti yang pernah terjadi di Puerto Rico pada tahun
1978   (Fox,   1980),   dimana   Malation   gagal   mengendalikan Ae.   aegypti karena   sudah resisten.   Rotasi   penting   dilakukan   untuk   menghindari   terjadinya   resistensi.   Sebagai contoh   Leksono   (1997),   melaporkan   perubahan   tingkat   resistensi Ae.   aegypti menjadi 4,25 kali hanya dalam waktu delapan generasi, yang didedahkan dengan Malation pada setiap generasi.

## Kesimpulan
Walau   malation   telah   digunakan   lebih   dari   32   tahun   di   Indonesia   untuk mengendalikan   nyamuk Aedes   aegypti ,   hasil   penelitian   yang   dilakukan   menunjukkan bahwa  populasi Ae. aegypti dari Bandung, Jakarta, Surabaya, dan Palu ternyata masih rentan   terhadap   malation.   Tetapi Ae.   aegypti dari   Palembang   sudah   mulai mengembangkan   resistensi   rendah terhadap malation dengan RR 90 3,37. Kerentanan Ae. aegypti yang tinggi terhadap malation di Bandung, Jakarta, Surabaya dan Palu, serta mengetahui   bahwa Ae   aegypti dari   beberapa   kota   besar   di   Indonesia   sudah   resisten terhadap permetrin dan deltametrin (piretroid), merupakan salah satu dasar yang dapat digunakan untuk terus mempergunakan malation sebagai salah satu insektisida dalam program   pengendalian   hama   terpadu   untuk   mengendalikan   populasi Ae.   aegypti ke tingkat yang tidak membahayakan masyarakat.

## Ucapan terima kasih
Terima kasih kami ucapkan kepada Dr. Zairi Jaal dari Vector Control Research Unit, Universiti Sains Malaysia yang telah memberikan telur nyamuk rentan. Serta kepada  Dr. Amrul Munif, Balitbang Depkes yang telah memberikan telur nyamuk yang dikoleksi dari Palembang, Surabaya, dan Palu.

## Daftar Pustaka
Ahmad, I., Astari, S., and Tan, M., 2007. Resistance of Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) in 2006 to pyrethroid insecticides in Indonesia and its association with oxidase and esterase levels. Pakistan Journal of Biological Sciences 10 (20): 3688-3692.
Ahmad, I., Astari, S., Rahardjo, B., Tan,  M., and Munif, A., 2006. Resistance of Aedes aegypti   from   three   provinces   in   Indonesia   to   pyrethroid   and   organophosphate Insecticides.   Proceeding   International   Conference   on   Mathematics   and   Natural Sciences, Bandung, Indonesia
Braga I.A., Lima, J.B.P., Soares, S.S., and Valle, A.D., 2004. Aedes aegypti Resistance to Temephos during 2001 in Several Municipalities in the States of Rio de Janeiro, Sergipe, and Alagoas, Brazil. Mem Inst Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro 99(2): 199- 203
Brengues, C., Hawkes, N.J., Chandre, F., McCarroll, L., Duchon, S., Guillet, P., Maguin, S., Morgan, J.C., and Hemingway, J., 2003. Pyrethroid and DDT cross-resistance in Aedes aegypti correlated with novel mutations in the voltage-gated sodium channel gene. J. Med. Vet. Entomol . 17: 87-94.
Chadwick, P.R., Invest, J.F., and Bowron, M.J., 2006. An Example of Cross-resistance to Pyrethroids in DDT-resistant Aedes aegypti.  J. Pest Management Science 8 (6 ): 618-624.
Fox, I., 1980. Malathion resistence in Aedes aegypti of Puerto Rico induced by selection pressure on larvae. Am. J. Trop. Med. Hyg. 29 (6): 1456-1459.
Georghio,   G.P.,  and   Melon   R.B.,   1983.   In:   Georghio  G.P.,  and   Sito  T.,   (editors).   Pest Resistance to Pesticides. Plenum Press, New York, p. 769.
Huong,   V.D.,   Ngoc,   N.T.B.,   Hien,   D.T.,   and   Lien,   T.H.,   2004.   Susceptibility   of Aedes aegypti to Insecticides in Viet Nam. Dengue Bulletin 28.
Lagunes,   A.T.,  1980.   Impact   of   the   use   of   mixture   and   sequences   of   tissues   in   the evolution of resistance in Culex  quinquefaciatus . PhD. Dissertation , University of California Riverside.
Leksono,  A.S.,  1997.   Perubahan   Tingkat   Toleransi   Larva Aedes   aegypti (L.)   (Diptera: Culicidae) Terhadap Malation Dengan Seleksi Delapan Generasi. Skripsi Sarjana Biologi ITB. Bandung.
LeOra   Software,  2004. A   user’s   guide   to   probit   or   logit   analysis .   LeOra   Software, Petaluma, Ca.
Mazzari,   M.B.,  and   Georghiou   G.P.,  1995.   Characterization   or   Resistence   to Organophosphate, Carbamate, and Pyrethroid Insectisides in Field Populations of Aedes aegypti in Venezuela. J. Am. Mosq. Cont. Assoc 11:269–273
Ponlawat, A., Scott J.G., and Harrington L.C.,  2005. Insecticide susceptibility of Aedes aegypti and Aedes albopictus across Thailand, J. Med. Entomol , 42 (5): 821-825.
WHO Expert Commetee on Insecticides,  1975. Instruction for Determining Susceptibility or  Resistence   of  Adult   Mosquitos   to  Organophorus   and   Carbomate   Insecticides . Geneva.
WHO,   1981. Instructions   for   determining   the   susceptibility   or   resistance   of   mosquito larvae to insecticides. WHO/VBC/81.807. World Health Organization, Geneva.
WHO, 1997. Dengue Haemorrhagic fever: Diagnostic, Treatment, Prevention and Control, 2nd ed., World Health Organization , Geneva.