## UJI ANGKA LEMPENG TOTAL (ALT) PADA JAMU GENDONG TEMU IRENG DI DESA TANJUNG KABUPATEN BREBES
Inur Tivani 1 1 Prodi DIII Farmasi Politeknik Harapan Bersama email: tiva.nie40@gmail.com

## Abstrak
Jamu merupakan obat tradisonal yang dibuat oleh masyarakat secara turun menurun.Jamu gendong tidak  memerlukan  ijin  usaha  industry  tetapi  tetap  harus  aman,  sehingga  perlu  adanya  parameter keamanan. Parameter  keamanan meliputi uji cemar anmikrobia seperti uji mikro biapatogen,uji angka kapang/khamir,ujiangka lempeng total, ujinilaidugaterdekatcoliformdan uji aflatoksin serta uji cemaran logam  berat.  Penelitian  ini  bertujuan untuk  mengetahui  Angka  Lempeng Total (ALT)  jamu  gendong temu ireng di Desa Tanjung Kabupaten Brebes. Penelitian ini merupakan penelitian non eksperimental deskriptif. Tahapan dari penelitian ini meliputi pemilihan dan pengambilan sampel, persiapan sampel, pembuatan  media,  sterilisasi  alat,  bahan  dan  ruangan  serta  pengitungan  angka  lempeng  total  (ALT). Salah  satu  parameter  dari  PerKBPOM  Nomor  12  Tahun  2014  menyatakan  bahwa  untuk  Angka Lempeng  Total  (ALT)  tidak  lebih  dari  10 4 .  Hasil  dari  penelitian  ini  menunjukan  bahwa  nilai  Angka Lempeng Total yang didapatkan adalah 2,9x10 3 hingga 1,4x10 7 koloni/mL.
Kata Kunci : Jamu gendong temu ireng, desa Tanjung, Angka Lempeng Total (ALT )

## 1. Pendahuluan
Indonesia  adalah  negara  yang  sangat kaya  akan  berbagai  macam  jenis  tanaman yang  bisa  dimanfaatkan  sebagai  bahan obat.  Walaupun  saat  ini  sudah  banyak beredar obat-obat dengan bahan kimia yang lebih  praktis  dan  mudah  didapat,  masih banyak masyarakat indonesia yang mengkonsumsi  obat-obat  herbal  salah satunya jamu. [1]
Jamu  masih  banyak  digunakan  untuk pengobatan alternatif karena pembuatannya berasal dari bahan herbal dan harganya pun terjangkau  masih  relatif  murah.  Salah  satu jamu  yang  banyak  digemari    masyarakat adalah    jamu    gendong.    Usaha    jamu gendong   menurut Kepmenkes Nomor 007 tahun  2012  adalah  usaha  yang  dilakukan perorangan  dengan  menggunakan  obat tradisional dalam bentuk cairan yang dibuat segar  dengan  tujuan  langsung  dijajakan kepada konsumen.
Departemen  Kesehatan  (Depkes)  RI dalam  Keputusan  Menteri  Kesehatan  RI Nomor    661/MENKES/SK/VII/1994 [2] menyatakan  bahwa    perlu  dicegah beredarnya  obat  tradisional  yang  tidak memenuhi persyaratan
keamanan,
kemanfaatan dan mutu. Parameter keamanan meliputi uji cemaran mikroorganisme seperti uji mikroorganisme  patogen,  uji  Angka
Lempeng  Total,  uji  Angka  Kapang/ Khamir,  uji  aflatoksinserta  uji  cemaran logam berat. [3]
Angka  Lempeng  Total  (ALT)  dapat digunakan sebagai petunjuk sampai tingkat berapa  dalam  pembuatan  obat  tradisional tersebut  melaksanakan  Cara  Pembuatan Obat  Tradisional  yang  Baik  (CPOTB).  Uji ALT digunakan untuk menghitung banyaknya  bakteri  yang  tumbuh  dan berkembang  pada  sampel,  juga  sebagai acuan yang dapat menentukan kualitas dan keamanan  simplisia [2] .  Salah  satu parameter  dari  Per  KBPOM  Nomor  12 Tahun  2014  menyatakan  bahwauntuk Angka  Lempeng  Total(ALT)  tidak  lebih dari 10 4 . Angka  lempeng  total  dan  angka kapang/  khamir  dapat  digunakan  sebagai petunjuk  sampai  tingkat  berapa  dalam pembuatan  obat  tradisional tersebut melaksanakan cara pembuatan obat tradisional  yang  baik  (CPOTB).  Makin kecil  angka  lempeng  total  dan  angka kapang/khamir  bagi  setiap  produk  yang dihasilkan menunjukan semakin ringgi nilai penerapan  CPOTB  dalam  pembuatan  obat tradisional [4] .  Pertumbuhan  kapang  kamir pada  makanan  ataupun  bahan  baku  obat tradisional  dapat  mengurangi  kualitas
makananan ataupun obat tradisional karena kapang menghasilkan toksin yang berbahaya bagi tubuh manusia. [5]
Berdasarkan observasi yang dilakukan peneliti pada penjual jamu gendong didesa Tanjung  kabupaten  Brebes  pada  bulan Agustus  2017,jamu  temu  ireng  merupakan jamu  yang  paling  banyak  diminati  oleh pembeli  khususnya  orang  tua  (kaum  ibu- ibu)  untuk  mengatasi  anak  mereka  yang sulit  makan  (nafsu  makan  menurun). Berdasarkan paparan di atas, maka peneliti ingin  mengetahui  nilai  ALT  dalam  jamu gendong  temu  ireng  yang  beredar  di  desa Tanjung kabupaten Brebes.
2. Metode Penelitian
a. Tahapan penelitian
1) Pemilihan dan PengambilanSampel Sampel  jamu  gendong  temu  ireng diperoleh  dari  penjual  jamu  yang melewati  desa  Tanjung  Kabupaten Brebes  pada  pagi  hari.  Sampel  jamu dimasukkan  kedalam  botol  kacayang sudah  steril  dan  tertutup  rapat,  setelah itu  botol  steril  dimasukkan  ke  dalam coolbox dan dibawa ke laboratorium.
2) Sterilisasi Alat, MediadanRuangan Pada  penelitian  ini,  digunakan autoklaf  untuk  sterilisasi  media,  oven untuk  sterilisasi  peralatan  atau  cawan yang  digunakan  dan  alcohol  atau sterilisasi  secara  kimia  untuk  ruang dan  meja  peralatan  yang  digunakan untuk penelitian.
3) Persiapan Sampel
a) Pembuatan Pepton Water (PW) Pembuatan  larutan  Pepton  Water (PW) yaitu sebagai makanan bagi bakteri. Untuk pembuatan larutan PW  yang  pertama  menimbang serbuk  Pepton  sebanyak  1,35
gram, lalu menambahkan aquades  sebanyak  90  mL,  dan mengaduk hingga homogen, serta larutan PW disterilkan. b) Pembuatan  Larutan  Pengencer NaCl Pembuatan larutan NaCl digunakan untuk menjaga keseimbangan  ion  dari  mikroba. Larutan  NaCl  diperlukan  untuk memberikan  tekanan  osmotik
tertentu.  Bila  pembenihan  dibuat tanpa NaCl ataupun dengan NaCl berkadar  tinggi,  pertumbuhan bakteri akan berkurang terhenti. c) Homogenisasi sampel dan pengenceran sampel Homogenisasi  sampel  dilakukan dengan  cara  mengambil  sampel (jamu  temu  ireng  )  sebanak  10 mL,  kemudian  masukan  sampel ke dalam Erlenmeyer lalu tambah pepton  water  90  mL.  lalu  di kocok sampai homogen. Pengeneran  sampel  dilakukan dengan  meniapkan  larutan  NACl ke dalam tabung reaksi sebanyak 5 tabung (9ml) beri kode 10 -1 dan 10 -5 .Selanjutna mengambil 1 mL larutan  yang  ada  di  Erlenmeyer (Hasil homogenisasi) masukan ke dalam tabung reaksi 10 -1 . Selanjutnya  mengambil  1  ml larutan  10 -1 lalu  masukkan kedalam  tabung  reaksi  10 -2 melakukan  perlakuan  tersebut hingga pengenceran 10 -5 . d) Pembuatan  Media  Nutrien  Agar (NA)
Pembuatan  media  NA  dilakukan dengan  cara  merebus  0,9  daging dalam  300mL  aquades  sampai volume  setengahnya.  Menyaring rebusan daging, kemudian tambahkan  200mL  aquadest  dan cek pH antara 6,8-7,0. Menambahkan  1,5  gram  pepton kemudian  rebus  kembali  dan tambahkan  4,5  gram  agar-agar yang  dimasukan  secara  sedikit demi  sedikit,  aduk  sampai homogen.  Mensterilkan  dalam autoklaf pada suhu 121 o C selama
15 menit. 4) Uji Angka Lempeng Total (ALT) Kedalam tiap cawan petri dituangkan  ±  15  ml  media  NA  (45 o ± 1 o )  kemudian  segera  cawan  petri digoyang  sambil  diputar  agar  media tersebar  merata  kemudian  dibuat duplo.  Masing-masing  cawan  di  beri label  10 1 sampai  10 5. Selanjutnya menuangkan  sampel  yang  telah  dibuat pengenceran  sesuai  dengan  label  yang
terdapat  pada  cawan  petri.  Seluruh cawan  petri  diinkubasi  pada  suhu 35 o Cselama  24  jam  hingga  48  jam dengan  posisi  terbalik,  jumlah  koloni yang  tumbuh  diamati  dan  dihitung dengan menggunakan colony counter.
5) Analisis Hasil Cara  menganalisis  hasil  pengujian
sesuai dengan PPOMN (2006) yaitu:
a) Pilih  cawan  petri  dari  satu pengenceran  yang  menunjukkan jumlah koloni antara 25-250 setiap cawan.  Dihitung  semua  koloni dalam cawan petri dengan menggunakan  alat  penghitung koloni  (Colony  counter).  Dihitung rata-rata jumlah koloni dan dikalikan dengan faktor pengenceran dan dinyatakan hasilnya sebagai jumlah bakteri per mL atau gram.
b) Jika  salah  satu  dari  dua  cawan terdapat  jumlah  koloni  lebih  kecil dari25  atau  lebih  besar  dari  250, dihitung  rata-rata  jumlah  koloni, dikalikan  dengan  faktor  pengencer dan  dinyatakan  hasilnya  sebagai jumlah bakteri pergram.
c) Jika  hasil  dari  2  pengenceran jumlahnya  berturut-turut  terletak antara25-250    koloni  ,  dihitung jumlah  koloni  dari  masing-masing pengenceran  seperti    pada  poin  a dan  b  diatas  dan  dihitung  jumlah koloni  dari  kedua  pengenceran tersebut. Jika jumlah yang tertinggi lebih  besar  2  kali  jumlah  yang terkecil,  dinyatakan  jumlah  yang terkecil sebagai jumlah bakteri per gram.
d) Jika  rata-rata  jumlah  koloni masing-masing  petri  tidak  terletak antara 25-250koloni, dihitung jumlah  koloni  seperti  pada  poin  a dan  b  diatas  dan  dinyatakan sebagai    jumlah  bakteri  pergram.  .
Jumlah koloni dari semua pengenceran lebih dari 250 koloni, maka  setiap  dua  cawan  petri dengan pengenceran tertinggi dibagi  dalam  2,  4,  atau  8 sektor.Dihitung  jumlah  koloni dalam  satu  bagian  atau  lebih.
Untuk mendapatkan jumlah koloni dalam  satu  cawan    petri,  dihitung rata-rata jumlah koloni dan kalikan dengan factor pembagi dan pengenceran.  Dinyatakan  sebagai jumlah bakteri perkiraan pergram. e) Jika  dalam  1/8 bagian  cawan  petri terdapat  lebih  dari  200  koloni, maka  jumlah  koloni  yang  didapat = 8x200 (1600). Dikalikan dengan faktor  pengenceran      dan dinyatakan hasilnya sebagai jumlah   bakteri perkiraan per mili liter  atau  gram    lebihbesar  dari jumlah  yang    didapat    (>1600x faktor pengenceran). f) Jika tidak ada koloni yang tumbuh dalam cawanpetri, nyatakan jumlah  bakteri  perkiraan  lebih kecil  dari  satu  dikalikan  dengan faktor  pengenceran  yang  terendah (<10). g) Menghitung koloni perambat (spreader)
h) Kalau  terjadi  hanya  1  perambatan maka  koloni  dianggap1.  Tetapi bila  1  atau  lebih  rantai  terbentuk dan yang berasal dari sumber yang terpisah-  pisah,  maka  tiap  sumber dihitung sebagai 1 koloni. i) Cara menghitung dan membulatkan angka j) Dalam  melaporkan  jumlah  koloni atau jumlah koloni perkiraan hanya 2  angka  penting  yang  digunakan, angka  yang  pertama  dan  kedua (dimulai  dari  kiri),  sedangkan angka yang ketiga diganti dengan 0 apabila kurang dari 5 dan apabila 5 atau  lebih  dijadikan  1  yang ditambahkan  pada  angka  yang kedua. k) Contoh :523.000 dilaporkan sebagai 520.000(5,2x10 5 ) laporkan sebagai 84.000 ( 8,4 x104).
3. Hasil dan Pembahasan
Hasil  perhitungan  Angka  Lempeng total seperti pada tabel 1 berikut:
Tabel 1. Hasil Perhitungan Angka Lempeng Total Pengenceran Jumlah Koloni ALT (Koloni/mL) 10 -1 293 2,9x10 3 10 -2 281 2,8x10 4 10 -3 231 2,3x10 5 10 -4 177 1,8x10 6 10 -5 139 1,4x10 7 Hasil perhitungan menunjukan jumlah bakteri yang banyak.Nilai Angka Lempeng Total  yang  didapatkan  pada  penelitian  ini adalah  2,9x10 3 hingga  1,0x10 7 koloni/mL. Banyaknya  jumlah  pertumbuhan  bakteri tersebut  kemungkinan  didapatkan  dari proses pembuatan jamu yang kurang steril, dan  terdapat  kontak  pula  dengan  sediaan lain  dilingkungan  sekitar  atau  tercemar dengan bakteri yang ada disekitar. Standar atau  range  dari  jumlah  koloni  untuk  jamu gendong  temu  ireng  yaitu  sekitar  25-250 koloni  serta  standar  untuk  pengenceran Angka  Lempeng  Total  yaitu  pada pengenceran  10 -4 . Dari  tabel  diatas menunjukan bahwa semakin tinggi  tingkat pengenceran  semakin  rendah  jumlah koloni  yang  tumbuh  dalam  medium, namun ada beberapa yang tidak memenuhi persyaratan  jumlah  koloni  umumnya  yang berkisar  antara  25-250  koloni,  yaitu  pada pengenceran 10 -1 menunjukan hasil koloni sebanyak 293 koloni dan pada pengenceran  10 -2 sebanyak  282  koloni, pengenceran  ke  10 -3 .  Hal  ini  menunjukan bahwa  jamu  gendong  temu  ireng  belum memenuhi  persyaratan  mutu  kualitas mikrobiologis karena pada pengenceran ke 10 -4 masih  ada    koloni  yang  tumbuh. Banyaknya  jumlah  pertumbuhan  bakteri tersebut  kemungkinan  didapatkan  dari proses  pembuatan  jamu.  Pada  proses pembuatan jamu, pemanasan tidak dilakukan hingga mendidih, karena dengan alas  an  apabila  dilakukan  pemanasan hingga  mendidih  maka  khasiat  jamu  akan hilang atau berkurang.

## 4. Kesimpulan
Nilai  Angka  Lempeng  Total  jamu gendong  temu  ireng  di  desaa  Tanjung
Kabupaten  Brebes  adalah  2,9x10 3 hingga 1,0x10 7 koloni/mL.

## 5. Daftar Pustaka
[1] Torri,  C.M.,2013,  Knowlegde  and Risk  perceptions  of  traditional  jamu medicine  among  urban  consumer, http://www.sciencedomain.org/uplo ad/1370434024-12-revived manuscript_version@.pdf,  diakses tanggal 1 mei 2015
[2] Departemen  Kesehatan  Republik Indonesia, 1994, Keputusan Menteri Kesehatan Republik Indonesia NOMOR:661/MENKES/SK/VII/19 94  Tentang  Persyaratan  Obat Tradisional, Jakarta,pp.12,17-18.
[3] Anonim,2005, Peraturan
KepalaBadan  Pengawas  Obat  dan Makanan  Republik  Idonesia  Nomor HK.00.05.4.1380  Tentang  Pedoman Cara  Pembuatan  Obat  Tradisional yang      Baik ,      Badan      Pengawas Obat      dan      Makanan    Republik Indonesia, Jakarta
[4] Wasito,  H.  2011.  Obat  tradisional Kekayaan  Indonesia,  Graha  Ilmu, Yogyakarta, pp, 5, 14, 17, 19, 26, 28 [5] Pratiwi,  S,T.  2008.  Mikrobiologi Farmasi, Fakultas Farmasi Universitas Gajah Mada, Yogyakarta,  pp,  38,  135-140,  206- 207.