## UJI PERBANDINGAN EFEKTIVITAS ANTIDIABETES EKSTRAK POLISAKARIDA DAN SENYAWA POLIFENOL ALGA COKLAT
( Sargassum sp.) PADA MENCIT YANG DIINDUKSI ALOKSAN
Submitted : 20 Maret 2018 Edited : 7 Mei 2018
Accepted : 17 Mei 2018
Agung Giri Samudra, Fathnur Sani K, Moniq Chintama
Akademi Farmasi Al-Fatah Bengkulu Jl. Indragiri gang 3 Serangkai Padang Harapan Bengkulu Email : agunggirisamudra@gmail.com

## ABSTRACT
Diabetes is one of the most common diseases in the world. So there is an effort to prevent or  treat  the  disease.  As  brown  algae  (Sargassum  sp.)  Contains  polysaccharides  that  regulate sugar  intake  in  the  body,  and  polyphenols  act  as  antioxidants  that  can  stimulate  insulin secretion  in  pancreatic  β  cells.  This  study  aims  to  determine  the  effectiveness  of  Antidiabetes Polysaccharide  Extract  and  Brown  Algae  Polifenol  Compounds  (Sargassum  sp)  On  Alloxan- induced  Mice.  The  test  animals  were  grouped  into  4  groups  I  (CMC  1%),  Group  II (Glibenclamide  0.52mg  /  20grBB),  Group  III  (5mg  /  20grBB  polyphenol  extract),  Group  IV (5mg  /  20grBB  polysaccharide  extract).  Blood  glucose  was  measured  using  Easy  touch glucometer  on days  0, 3, 7, 14,  21, and  28. Analyze  data  using  one-way  ANOVA,  followed  by LSD test. The percentage decrease in blood glucose level in positive control, polyphenol extract and polysaccharide  were  42,86%,  58,12%,  and  54,20%.  Statistically,  the  polyphenolic  extract and the brown algae polysaccharide lower the blood glucose level significantly compared with the  negative  control  (p≤0,05).  Decreased  blood  glucose  in  polyphenol  extracts  and polysaccharides showed statistically significant differences.
Keywords : Brown Algae (Sargassum sp.), Antidiabetic, Polyphenols, Polysaccharides

## PENDAHULUAN
Diabetes  Mellitus  adalah  salah  satu jenis  penyakit  degeneratif  yang  mengalami peningkatan  setiap  tahun  di  negara-negara seluruh  dunia.  Menurut  WHO  tahun  2011, diabetes  mellitus  termasuk  penyakit  yang paling  banyak  diderita  oleh  penduduk  di seluruh  dunia  dan  merupakan  urutan keempat  dari  prioritas  penelitian  nasional untuk  penyakit  degeneratif.  Prevalensi diabetes  mellitus  pada  populasi  dewasa  di seluruh  dunia  diperkirakan  akan  meningkat 35%  dalam  dua  dasawarsa  dan  menjangkit 300  juta  orang  dewasa  pada  tahun  2025. Bagian terbesar peningkatan angka
prevalensi  ini  akan  terjadi  di  negara-negara berkembang (1) .
Indonesia  memiliki  hasil  kekayaan alam bahari yang sangat besar, salah satunya adalah  alga  laut.  Alga  laut  sejak  dulu  telah banyak  dimanfaatkan  sebagai  bahan  pangan dan seiring berkembangnya ilmu pengetahuan  dan  teknologi  alga  laut  telah banyak  dimanfaatkan  di  bidang  industri  dan farmasi (2) .
Salah satu jenis alga laut yang bernilai ekonomis, tersebar luas di perairan Indonesia  adalah  Alga  coklat  ( Sargassum sp.).  Alga  coklat  mengandung  sejumlah besar  polisakarida  dan  senyawa  bioaktif polifenol.  Polisakarida  tersebut  antara  lain
alginat dari rumput laut  coklat. Kebanyakan dari  polisakarida  tersebut  bila  bertemu dengan bakteri di dalam usus manusia, tidak dicerna  oleh  manusia,  sehingga  dapat berfungsi sebagai serat (3) .
Polifenol  rumput  laut  dikenal  sebagai florotanin, memiliki sifat yang khas dibandingkan  dengan  polifenol  yang  ada dalam  tumbuhan  darat.  Berdasarkan  uraian diatas maka peneliti tertarik untuk melakukan penelitian tentang “Uji Perbandingan Efektivitas Antidiabetes Ekstrak Polisakarida dan Senyawa Polifenol Alga  coklat  ( Sargassum sp.)  Pada  Mencit yang Diinduksi Aloksan”.

## METODE PENELITIAN
Bahan
Alga coklat ( Sargassum sp) , aquadest, aloksan,  glibenklamid,  Na.CMC,  NaCl fisiologis  0,9%,  asam  klorida  5%,  natrium karbonat  4%,  hidrogen  peroksida  25  %, metanol.

## Alat
Handscoon, masker, sonde oral, spuit, beaker  glass,  batang  pengaduk,  labu  ukur, glukometer, neraca analitik.

## Prosedur Penelitian Ekstraksi Polisakarida
Timbang  serbuk  alga  coklat  sebanyak
25  gram.  Rendam  dalam  HCl  5%  selama  1
jam. Cuci dengan aquadest untuk menghilangkan  sisa  asam.  Tambahkan larutan  Na 2 CO 3 4%  untuk  pembentukan Natrium  panaskan  ke  dalam  beaker  glass selama 2 jam sambil diaduk sampai menjadi pasta.  Pasta  yang  terbentuk  kemudian disaring.  Filtrat  ditambahkan  larutan  H 2 O 2 25%  larutan  HCl  5%  sehingga  terbentuk gumpalan  di  bagian  atas  cairan.  Setelah disaring,  residu  yang  diperoleh  dikeringkan dalam  oven  suhu  60⁰C.  Endapan  yang  telah kering  ditimbang  bersama  kertas  saring untuk penentuan kadar natrium alginat (4) .

## Ekstraksi Polifenol
Alga coklat ( Sargassum sp.) diekstrak dalam  metanol  50%.  Metanol  diuapkan dengan menggunakan water bath (5) .

## Uji Efektivitas Antidiabetes
Hewan  uji  dibagi  4  kelompok,  terdiri dari  3  ekor  mencit  yang  diadaptasikan  dan dipuasakan  selama  8-10  jam  namun  tetap diberi minum ad libitum sebelum perlakuan.
Ukur  kadar  glukosa  darah  mencit  sebelum diabetes.  Selanjutnya  mencit  diinduksi aloksan dengan dosis 3mg/kg BB diinjeksikan secara intraperitonial. Kemudian setiap kelompok mendapat perlakuan  setiap  hari  selama  28  hari  yaitu, kelompok  I  (Na.CMC  1%),  kelompok  II (Glibenklamid 0,026 mg/20gr BB), kelompok III (ekstrak polifenol 5mg/20grBB), kelompok IV(ekstrak polisakarida 5mg/20grBB). Pengukuran  kadar  glukosa  darah
dimulai  dari  mencit  telah  dinyatakan diabetes  yaitu  dengan  kadar  gula  darah >175mg/dl, hari ke 3; 7; 14; 21; 28 (6) .

## Analisa Data
Data yang diperoleh dianalisis dengan menggunakan  uji  statistik  Anova  satu  arah dengan  program  SPSS  18.  Kemudian dilanjutkan  dengan  uji  LSD  dengan  tingkat kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi
Tabel 1. Hasil  Pembuatan  ekstrak  Alga coklat ( Sargassum sp.) Simplisia Berat Simplisia Hasil ekstrak Hasil Rendemen Alga Coklat (Polisakarida) 25 gram 8,11 gram 32,44 Alga Coklat (Polifenol) 400 gram 44,5 gram 11,12
Ekstraksi  polifenol  dari  alga  coklat
Sargassum sp.  diekstrak  menggunakan metode  maserasi.  Pelarut  ekstraksi  yang digunakan yaitu metanol karena mempunyai kemampuan  yang  paling  baik  mengekstrak polifenol.  Hal  ini  telah  dibuktikan  oleh penelitian Renrohan (7) mengekstrak polifenol alga Sargassum polycistum menggunakan  pelarut  metanol  sebagai pelarut  polar  menunjukan  nilai  rendemen polifenol tertinggi sebesar 17,93%
dibandingkan  pelarut  etil  asetat  sebagai pelarut semipolar sebesar 1% dan n-heksana sebagai  pelarut  nonpolar  sebesar  0,57%. Pelarut  metanol  terbukti  dapat  mengekstrak kandungan  fenol  total  alga Sargassum sp.
Sehingga  diduga  bahwa  senyawa  yang terdapat  pada Sargassum sp.,  cenderung bersifat polar. Rendemen polifenol
Sargassum sp.  sebesar  11,12% dapat  dilihat pada Tabel 1.
Ekstraksi  polisakarida  digunakan  metode jalur  asam  alginat  yang  menggunakan
pelarut  HCl  dalam  memisahkan  alginat.
Menurut penelitian Husni (8) , dengan
penggunaan  CaCl 2 dalam  mengekstraksi alginat  menghasilkan  rendemen  lebih  tinggi (53,33%) dibandingkan dengan menggunakan  HCl  (31,67%).  Tingginya rendemen ini diduga karena dengan penambahan  ion  Ca  lebih  efektif  dalam mengendapkan  alginat  dalam  bentuk  Ca- alginat  dibandingkan  penambahan  HCl untuk  memisahkan  alginat  dalam  bentuk asam  alginat.  Hasil  rendemen  ekstrak polisakarida  sebesar  32,44%  dapat  dilihat pada Tabel 1.

## Uji Efektivitas
Pengujian efektivitas antidiabetes ekstrak  polisakarida  dan  senyawa  polifenol alga  coklat  ( Sargassum sp.)  pada  mencit yang  diinduksi  aloksan  didapatkan  hasil sebagai berikut :
Gambar 1. Grafik Rata-Rata Penurunan Kadar Glukosa Darah
0 50 100 150 200 250 300 350 400 0 5 10 15 20 25 30 K ad ar Gl u kosa d ar ah ( m g/ d L) Waktu (Hari) Kontrol Negatif Kontrol Positif Ekstrak Polifenol Ekstrak Polisakarida
Gambar 2. Persentase Efektivitas Antidiabetes Ekstrak Polisakarida dan Polifenol Alga
Coklat ( Sargassum sp.) Hasil persentase menunjukkan, ekstrak yang paling baik dalam menurunkan
gula  darah  mencit  adalah  ekstrak  polifenol 5mg/20grBB.  Karena  persentase  penurunan kadar  gula  darah  pada  ekstrak  polifenol adalah sebesar 58,12%, lebih besar dibandingkan  dengan  persentase  penurunan kadar  gula  darah  pada  ekstrak  polisakarida yakni  sebesar  54,20%.  Di  samping  itu  jika kedua  ekstrak  dibandingkan  dengan  mencit yang  diberi  obat  antidiabetes  glibenklamid (kontrol positif), penurunan kadar gula darah hanya mencapai 42,86%. Hal ini menunjukkan  bahwa  efek  penurunan  kadar gula darah ekstrak alga coklat sangat kuat.
Hasil pengukuran kadar glukosa darah mencit  jika  dianalisis  secara  statistika menggunakan program SPSS 18.0 Diketahui bahwa data terdistribusi normal dengan nilai signifikan  >0,05.  Dilanjutkan  dengan  uji Beda  Nyata  Terkecil  (BNT)  atau LSD didapatkan  nilai  signifikan  <  α  antara kontrol  negatif  dengan  kontrol  positif  dan nilai  signifikan  <α  antara  kontrol  positif dengan  dosis  1  dan  dosis  2.  Jadi  terdapat perbedaan bermakna antara kelompok kontrol  negatif  dengan  kontrol  positif  dan terdapat perbedaan bermakna antara
kelompok kontrol positif dengan dosis 1 dan 2.
Dari  penelitian  yang  telah  peneliti lakukan,  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak polifenol  dan  polisakarida  pada  alga  coklat (Sargassum sp.) mempunyai potensi sebagai antidiabetes. Ekstrak Polifenol dapat
menghambat  kematian  sel  β  pankreas sehingga  insulin  dapat  dihasilkan  lebih banyak (9) .  Karena  mekanisme  senyawa polifenol  memiliki  sifat  antioksidan  yang dapat  menstabilkan  radikal  bebas  dengan melengkapi kekurangan elektron yang dimiliki radikal bebas aloksan dan menghambat  terjadinya  reaksi  berantai  dari pembentukan  radikal  bebas  aloksan  yang dapat  menimbulkan  stress  oksidatif (10) . Menurut  Sandapare (11) polisakarida  juga memiliki  kemampuan  untuk  menghambat kerusakan  sel  yang  disebabkan  oleh  radikal bebas  karena  polisakarida  ini  mengandung banyak  gugus  hidroksil  dan  ikatan  rangkap terkonjugasi serta gugus ester sulfat.

## SIMPULAN
Ekstrak  alga  coklat Sargassum sp. mempunyai  potensi  sebagai  antidiabetes, karena  secara  statistik  berbeda  makna (p<0,05).  Ekstrak  terbaik  yang  dapat
0.00% 10.00% 20.00% 30.00% 40.00% 50.00% 60.00% 70.00% Kontrol Positif Ekstrak Polifenol Ekstrak Polisakarida P er se nt ase
menurunkan  kadar  glukosa  darah  pada mencit  yang  diinduksi  aloksan  adalah ekstrak  polifenol  5mg/20grBB  dengan persentase  efektivitas  58,12%  lebih  tinggi dari kontrol positif dan ekstrak polisakarida.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Gibney,  M.J.,  2009. Gizi  Kesehatan Masyarakat . Jakarta: EGC.
2. Zada,  A.  2009. Pengaruh  Diet  Rumput
Laut  Eucheuma  Sp.  terhadap  Jumlah Eritrosit  Tikus  Wistar  dengan  Diabetes Aloksan . Fakultas Kedokteran. Universitas Diponegoro. Semarang.
3. Suparmi  dan  Sahri,  A.  2009. Mengenal Potensi Rumput Laut: Kajian Pemanfaatan  Sumber  Daya  Rumput Laut dari Aspek Industri dan Kesehatan . Semarang: Universitas Diponegoro. hlm. 13-14.
4. Rasyid,  A.  2010. Ekstraksi  Natrium
Alginat  dari  Alga  Coklat  Sargassum echinocarphum . Oseanologi dan Limnologi Indonesia. Jakarta.
5. Nyoman,  N.  2016. Efektivitas  Ekstrak Metanol  Alga  Coklat  Terhadap  Kadar Malondialdehid  dan  Kreatinin  Serum
Sebagai  Prevensi  Gangguan  Fungsi Ginjal. Jember:  Fakultas  Kedokteran.
Universitas Jember. 6. Nichols,  J.  B.,  2003, The  Laboratory Mouse . University Veterinarian, Florida 7. Renrohan, M. 2012. Aktivitas Antioksidan  dan  Antimikroba  Ekstrak Sargassum Polycystum. Fakultas Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan.  Institut Pertanian Bogor. Bogor.
8. Husni, A., Subaryono, Yudi P., Tazwir, Ustadi.  2012.  Pengembangan  Metode Ekstraksi  Alginat  Dari  Rumput  Laut Sargassum sp. Sebagai Bahan Pengental.  Universitas  Gadjah  Mada. Yogyakarta.
9. Kajimoto  dan  Kaneto.  2004. Role  of Oxidative  Stress  in  Pancreatic  β-Cell
Dysfunction. Ann. N.Y. Acad. Sci. 1011: 168–176.  New  York  Academy  of Sciences . DOI: 10.1196/annals.1293.017. Hal 168-176. 10. Kuncahyo  I,  Sunardi.  2007. Uji aktivitas  antioksidan  ekstrak  belimbing wuluh  (Averrhoa  bilimbi,  L.)  terhadap 1,1-Diphenyl-2-Picrylhidrazyl  (DPPH) [makalah]. Yogyakarta: Fakultas Teknik, Universitas Setia Budi.
11. Sandapare,  M.  2015. Uji  Aktivitas Antioksidan  Dan  Toksisitas  Ekstrak Kasar  Polisakarida  Yang  Diisolasi Dari Alga Coklat Sargassum Duplicatum. Universitas  Hasanudin. Makassar.