Ekplorasi dan Karakterisasi Biokimia Bakteri Resisten Timbal (Pb) dari Sungai Tallo Makassar
Fahruddin Fahruddin 1* , Nur Haedar 2 , Slamet Santosa 3 , Sri Wahyuni 4
1,2,3,4 Departemen Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Hasanuddin, Makassar * Koresponden email : fahruddin_science@unhas.ac.id

## Diterima: 15 Juli 2020                                                                                Disetujui: 22 Juli 2020

## Abstract
Industrial progress and waste of urban domestic activities have an impact on the Pb heavy metal pollution on the environment, this will have an impact on human health. Pb metal can be overcome with biological methods  by  utilizing  bacteria  in  reducing  Pb  metal.  The  study  aimed  to  obtain  the  species    of  resistant bacterial isolates of Pb metal and determine its characteristics. Sediment and water samples were obtained from  the  Tallo  River.  Isolation  and  selection  of  Pb  metal  resistant  bacteria  were  carried  out  on  nutrient agar  media  is  10  ppm  added  of  PbAgNO 3 ,  afterwards  the  colonies  that  grew  and  differed  were characterized  by  morphological  morphology  and  several  biochemical  tests.  The  characterization  results obtained  8  isolates  of  Pb  metal  resistant  bacteria  consisted  of  8  isolates  from  sediment  samples  and  3 isolates from water samples. The characteristics of each bacterial isolate on cell morphology are the same and biochemical tests show different results.
Keywords: lead heavy metal , sediment , river water , resistant , isolate

## Abstrak
Kemajuan  industri  dan  buangan  dari  aktifitas  domestik  perkotaan  memberikan  dampak  pencemaran logam berat Pb pada lingkungan, ini akan memberikan dampak pada kesehatan manusia. Logam Pb dapat ditanggulangin  dengan  metode  biologis  dengan  memanfaatkan  bakteri  dalam  mereduksi  logam  Pb. Tujuan  penelitian  adalah  memperoleh  jenis  isolat  bakteri  resisten  pada  logam  Pb  dan  mengetahui karakteristiknya. Sampel sedimen dan air diperoleh dari Sungai Tallo. Isolasi dan seleksi bakteri resisten logam  Pb  dilakukan  pada  media  nutrient  agar  yang  ditambahkan  PbAgNO 3 10  ppm,  selajutnya  koloni yang  tumbuh  dan  berbeda  dilakukan  karakterisasi  meliputi  morfologi  secara  miksroskopis  dan  beberapa uji  biokimia.  Hasil  karakterisasi  diperoleh  8  isolat  bakteri  resisten  logam  Pb  terdiri  dari  5  isolat  dari sampel  sedimen dan 3 isolat dari  sampel  air.  Pada pengamatan morfologi sel memiliki karakteristik  ada yang sama, sedangkan pada uji biokimia terdapat perbedaan.
Kata Kunci: logam berat timbal , sedimen , air sungai , resisten , isolat

## 1. Pendahuluan
Kemajuan  industri  yang  makin  pesat  memberikan  kontribusi  pada  peningkatan  taraf  ekonomi, namun di lain pihak juga memberikan dampak pada pencemaran lingkungan yang bersumber dari limbah [1].  Salah  satu  pencemaran  yang  timbul  adalah  dalam  bentuk  logam  berat  yang  bersumber  dari  industri elektronik  dan  sisa  buangan  limbah  pertambangan.  Selain  itu,  limbah  logam  berat  dapat  bersumber  dari aplikasi  insektisida  dan  pupuk  sintetik  pada  pertanian  [2].  Keberadaan  logam  berat  dalam  konsentrasi tinggi  menyebabkan  akumulasi  yang  berakibat  pada  degradasi  lingkungan  dan  sifat  toksisitas  yang berdampak negatif pada lingkungan dan kesehatan manusia [3].
Sejumlah  logam  berat  sangat  dikhawatirkan,  termasuk  logam  berat  timbal  (Pb)  jika  masuk  pada lingkungan,  karena  bersifat  toksik  [4].  Sesuai  pada  PP  RI  No.82  Tahun  2001  mengenai  Pengelolaan Kualitas  Air  dan  Pengendalian  Pencemaran  Air,  standar  baku  mutu  logam  berat  Pb  berdasarkan  kelas yaitu 0,03 mg/L (kelas I, II dan III) dan 1 mg/L (kelas IV) [5]. Logam Pb dalam air akan berikatan dengan protein  jika  terkontaminasi  dengan  biota  air  seperti  pada  ikan  membentuk  suatu  persenyawaan  yang disebut  metalotionein,  sehingga  secara  perlahan-lahan  terjadi  bioakumulatif  dalam  tubuh  ikan.  Jika konsentrasi  sudah  di  atas  batas  toleransi  maka  bersifat  fatal  dan  mengakibatkan  terjadinya  keracunan, dimana secara tidak langsung akan membahayakan kesehatan manusia jika mengkonsumsinya [3].
Logam  berat  Pb  yang  mencemari  lingkungan  badan  air  akan  terjadi  redeposisi  yang  berikutnya akan terjadi akumulasi dalam sedimen. Demikian pula logam berat terdapat banyak dalam kolom air yang tidak mengendap karena pengaruh faktor lingkungan seperti sifat asam basa atau pun kandungan senyawa
organik  yang  terkandung  dalam  air.  Karena  itu,  pada  saat  logam  berat  Pb  masuk  dalam  perairan  dapat terakumulasi  pada  biota  dan  berikutnya  masuk  pada  jaring  –  jaring  makanan  ataupun  rantai  makanan melalui proses makan - memakan [6].
Salah  satu  perairan  di  Makassar  telah  mengalami  kontaminasi  logam  Pb  adalah  Sungai  Tallo tepatnya  berada  di  bagian  utara  Kota  Makassar  seperti  pada Gambar  1 .  Secara  geografis  Sungai  Tallo posisinya    membelah  kota  Makassar  bermuara  di  Selat  Makassar,  sangat  dipengaruhi  oleh  pasang surutnya air laut dan pada bagian dasar sungai tersebut letaknya lebih dalam dari pada muka laut sehingga mengakibatkan  air  asin  [7].  Sungai  Tallo  memiliki  panjang  10  km  aliran  sungai  yang  berkelok-kelok dimana pada sisi kanan dan kiri ditumbuhi pohon nipa. Ditambah dengan kondisikemiringan yang landai (1/10.000) dan pasang surut air laut yang dapat menjalar hingga jarak 20 km, maka kecepatan sedimentasi seperti  ini  menjadi  rawan  bagi  daerah  pelabuhan  Paotere,  pemukiman  termasuk  Kawasan  Industri Makassar. Banyaknya industri yang ada di kota ini menyebabkan limbah industri yang ada di sungai pun meningkat. Kadar Pb, Cu, Cd, Cr dan Hg semakin meningkat tidak diimbangi dengan penanganan limbah yang baik sehingga logam berat yang ada di Sungai Tallo pun terbawa ke bagian delta sungai.  Ada tiga sumber  pencemaran  pada  aliran  Sungai  tallo,  yaitu  buangan  limbah  dari  pabrik  gula  Makassar  Te’ne, limbah  rumah  tangga  dan  limbah  solar  hasil  buangan  Pembangkit  Listrik  Tenaga  Uap  (PLTU). Pencemaran  ini  menyebabkan  hilangnya  keanekaragaman  hayati,  juga  peningkatan  bioakumulasi  dari bahan beracun di jaring-jaring makanan [8,9].
Gambar 1 . Peta kawasan Sungai Tallo
Sumber pencemaran lain pada Sungai Tallo  adalah pembuangan limbah yang mengandung logam berat  berasal  kegiatan  domestik  dan  usaha  industri  di  perkotaan  [10].  Kadar  total  logam  Pb  yang mengkontaminasi  muara  Sungai  Tallo  menunjukkan  konsentrasi  diatas  baku  mutu  yaitu  sekitar  18,01- 27,33  ppm  [11].  Di  muara  Sungai  Tallo  mengandung  logam  berat  Pb  dengan  kadar  rata-rata  110,44 mg/kg dari baku mutu yang ditetapkan adalah 36 mg/kg, hal ini terkait dengan pedoman kualitas sedimen. Sedimen  pada  perairan  Sungai  Tallo  memiliki  kemampuan  yang  tinggi  dalam  mengikat  logam  karena karakteristik sedimennya yang berlumpur dan memiliki ukuran partikel halus dengan kadar bahan organik yang tinggi. Hal ini menunjukkan bahwa konsentrasi logam berat Pb dalam sedimen dan air pada Sungai Tallo telah melebihi baku mutu lingkungan atau nilai ambang batas [10].
Salah  satu  upaya  untuk  menangani  dampak  dari  logam  timbal  (Pb)  di  lingkungan  perairan  yaitu memanfaatkan  bakteri,  karena  mempunyai  sifat  daya  resisten  terhadap  logam  berat  melalui  pengikatan logam  berat,  dengan  memproduksi  protein  pada  permukaan  dinding  selnya.  Bakteri  mempunyai kemampuan  melakukan  aktifitas  metabolisme  melalui  mekanisme  biokimia  dalam  masa  perkembangan dan pertumbuhannya. Bakteri dalam proses ini memerlukan nutrisi yang didapatkan dari  organisme lain ataupun  dari  lingkungan  sekitarnya  [12,13].  Mekanisme  biokimia  terjadi  melalui  reaksi  enzimatik  yang diatur  dengan  katalis  biologis  secara  bertahap.  Aktivitas  metabolisme  oleh  bakteri  karena  memiliki kemampuan untuk mensintesis dan merombak senyawa kompleks seperti protein, lemak, karbohidrat, dan asam nukleat [14].
p-ISSN : 2528-3561 e-ISSN : 2541-1934

## 2. Metodologi Penelitian

## Tempat Penelitian
Pelaksanaan  penelitian  dilakukan  di  Laboratorium  Terpadu  Fakultas  dan  di  Laboratorium Mikrobiologi,  Departemen  Biologi,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Universitas Hasanuddin, Makassar, pada Februari – Agustus 2019.

## Pengambilan Sampel dan Bahan
Sampel  yang  diambil  adalah  air  sungai  dan  sedimen  dari  Sungai  Tallo,  dengan  alasan  sungai  ini telah  tercemar  logam  timbal  (Pb)  [11].  Sampel  selanjutnya  dimasukkan  ke  dalam  wadah  plastik  steril untuk  dilakukan  pengamatan  mikrobiologi  di  laboratorium.  Media  pertumbuhan  yang  digunakan  adalah nutrient agar dengan komposisi adalah 0,5% pepton, 0,3% ekstrak daging, 1,5% agar,  0,5% NaCl dalam 1000 mL aquades.

## Media Seleksi Bakteri Resisten Pb
Untuk  seleksi  bakteri  resisten  logam  Pb  dibuat  pada  media nutrient  agar 100  mL  dalam erlenmeyer,  diatur  pada  pH  7.  Kemudian  dipanaskan  dan  dilakukan  pengadukan  sampai  homogen, selanjutnya  dilakukan  sterilisasi  dengan  autoklaf  pada  suhu  121 o C,  tekanan  2  atm  selama  15  menit. Setelah disterilkan dibiarkan tidak terlalu panas, kemudian ditambahkan 10 ppm Pb(NO) 3 .

## Isolasi Bakteri Resistensi Logam Timbal (Pb)
Bakteri  resistensi  logam  Pb  diisolasi  dari  sampel  sedimen  diambil  sebanyak  5  gr  dan  dilakukan pengenceran secara berseri menggunakan aquades steril dari 10 -1 – 10 -5 . Dari pengenceran diambil 1 mL kemudian diinokulasikan pada media pertumbuhan nutrient agar dengan penambahan 10 ppm Pb (NO) 3 . Selanjutnya, dilakukan inkubasi selama 2 x 24 jam pada suhu 37 o C. Untuk perlakuan sampel air, diambil 1 mL lalu dilakukan pengenceran berseri menggunakan aquades steril dari 10 -1 – 10 -5 . Dari pengenceran 1 mL  dipipet  untuk  diinokulasikan  pada  media  pertumbuhan nutrient  agar yang  mengandung  10  ppm Pb(NO) 3 . Selanjutnya, dilakukan inkubasi selama 2 x 24 jam pada suhu 37 o C. Lalu dilakukan pengamatan dan menghitung jumlah koloni dengan metode SPC ( Standart Plate Count ). Koloni bakteri yang tumbuh merupakan bakteri yang resisten terhadap logam Pb. Tahap pemurnian isolat, setiap koloni yang berbeda dalam morfologi secara makroskopis diinokulasi pada medium nutrient agar miring dalam tabung reaksi.

## Karakterisasi Isolat
Karakterisasi  isolat  meliputi  morfologi  secara  makroskopis  dengan  mengamati  ciri  pertumbuhan koloni  seperti  warna,  tepi,  pemukaan  dan  teksur  [12].  Karakteristik  sel  secara  mikroskopis  dengan pengecatan  gram  dan  pengecatan  endosposra  dilakukan  untuk  mengelompokkan  isolat  yang  diperoleh [14].

## Karakterisasi Biokimia
Setiap jenis koloni yang berbeda, diinokulasi pada agar miring dalam tabung reaksi sebagai bahan kultur  untuk  uji  pada  beberapa  jenis  uji  biokimia,  meliputi  uji  fermentasi  gula  pada  media  TSIA,  uji kemampuan  mengoksidasi    glukosa    memproduksi    asam  menggunakan  media  MRVP,  uji  indol  untuk melihat kemampuan bakteri mengurai triptofan dan uji motil yaitu dengan media SIM,  uji  sitrat dengan media simmons citrate , uji nitrat pada media nitrat agar, dan uji urea pada media urea agar [14] .

## 3. Hasil dan Pembahasan

## Isolasi Bakteri Resisten Pb
Isolat  bakteri  yang  resisten  pada  logam  Pb  hasil  isolasi  dari  sampel  sedimen  dan  air  Sungai  Tallo tercemar  Pb,  ditumbuhkan  dengan  menginokulasikan  pada  media  pertumbuhan nutrient  agar yang mengandung  10  ppm  Pb,  hasilnya  diperoleh  koloni  bakteri  yang  tumbuh  berasal  dari  sampel  sedimen adalah  lebih  tinggi  adalah  5,4  x  10 11 CFU/ml  dibanding  sampel  air  yaitu  1,4  x  10 7 CFU/ml.  Hal  ini disebabkan logam berat Pb yang mencemari perairan, akan mengendap atapun terjadi bioakumulasi dalam sedimen  [15].  Koloni  bakteri  yang  tumbuh  tersebut  diasumsikan  sebagai  kultur  isolat  bakteri  yang memiliki sifat resisten atau daya tahan terhadap Pb setelah diinokulasikan pada media nutrient agar yang ditambahkan Pb 10 ppm.
Limbah  logam  berat  yang  mencemari  lingkungan  perairan  mudah  mengalami  kelarutan  dalam media  air  dan  selanjutnya  mengendap  pada  sedimen  seraca  perlahan  –  lahan,  tergantung  pada  kondisi lingkungan perairan [16]. Berdasarkan pada pengamatan morfologi koloni secara makroskopis diperoleh 13 jenis isolat. Morfologi koloni meliputi warna, tepi, tekstur dan ciri lainnya [11]. Selanjutnya dari hasil seleksi resistensi pada logam berat Pb terdapat 8 isolat bakteri yang memiliki resistensi pada logam berat Pb, yaitu 5 isolat dari sedimen (SM3, SM5, SM6, SM9, SM10) dan 3 isolat dari sampel air sungai (AR1, AR2, AR3).
Hasil  ini  dapat  didukung  bahwa  kelompok  bakteri  dapat  menyesuaikan  diri  terhadap  lingkungan ekstrim  yang  tercemar  logam  Pb  10  ppm  sampai  25  ppm.  Mikroba  yang  hidup  pada  air  yang  yang tercemar dapat bertahan hidup pada lingkungan yang mengandung logam berat dengan konsentrasi yang tinggi.  Bakteri  yang  resisten  pada  logam  berat  karena  kemampuan  bakteri  dalam  mendetoksifikasi  efek logam berat melalui mekanisme khusus di dalam sel yang mampu mengikat Pb [15].

## Morfologi Mikroskopis Sel Bakteri Resisten Pb
Berdasarkan  hasil  pengamatan  koloni  yang  tumbuh  pada  media nutrient  agar diperoleh  13  jenis isolat  bakteri,  berdasarkan  ciri  morfologi  koloni.  Selanjutnya  dilakukan  karakterisasi  morfologi  secara mikroskopis meliputi  pengecatan Gram dan pengecatan endospore.
Tabel 1. Karakteristik isolat berdasarkan pengecatan Gram Isolat Sumber Pengecatan Gram Bentuk Gram SM1 sedimen coccus positif SM2 sedimen coccus negatif SM3 sedimen coccus negatif SM4 sedimen coccus negatif SM5 sedimen coccus negatif SM6 sedimen basil negatif SM7 sedimen coccus negatif SM8 sedimen coccus negatif SM9 sedimen coccus negatif SM10 sedimen basil negatif AR1 air basil negatif AR2 air coccus negatif AR3 air coccus negatif Sumber: Hasil pengamatan peneliti
Pada hasil pengamatan isolat bakteri secara mikroskopis melalui pengecatan Gram yaitu 9 isolat bakteri Gram negatif berbentuk coccus , adalah isolat SM2, SM3, SM4, SM5, SM7, SM8, SM9, AR2, dan  AR3,  kemudian  isolat  SM1  juga  berbentuk coccus dengan  Gram  positif.  Sedangkan  3  isolat bakteri  adalah  Gram  negatif  dan  berbentuk  basil  atau  batang  yaitu  isolat  SM6,  SM10  dan  isolat  AR seperti  pada Tabel  1 .  Hasil  pengamatan  karakteristik  isolat  bakteri  berdasarkan  pewarnaan  Gram seperti pada Gambar 2.
Gambar 2 . Hasil Pengecatan Gram bakteri diwakili oleh isolat SM1 bentuk coccus Gram positif (A), isolat SM2 bentuk coccus Gram negatif (B), dan isolat AR1 bentuk basil Gram negatif (C)
Sumber: Gambar pribadi hasil penelitian
Bakteri yang memiliki Gram positif memperlihatkan ciri mikroskopis warna biru ungu, sedangkan bakteri  Gram  negatif  menunjukkan  karakteristik  mikroskopis  berwarna  merah.  Bakteri  Gram  positif mempunyai  karakteristik  berdinding  sel  tebal,  namun  akan  mengendor  jika  terkena  dengan  larutan alkohol  yang  menyebabkan  rongga  atau  pori  tertutup  dan  menghalangi  lepasnya  pewarna  primer kompleks  ketika  dilakukan  pengecatan.  Sementara  itu,  bakteri  Gram  negatif  dinding  selnya  terdiri  dari kompleks lemak yang mudah larut ketika pembilasan dengan alkohol [17].
Tabel 2 . Hasil pengecatan endospora Isolat Endospora AR1 Ada SM6 Tidak ada SM10 Ada Sumber: Hasil pengamatan peneliti
A C
B
Pada  hasil  pewarnaan  endospora,  terdapat  endospora  pada  2  isolat  bakteri  setelah  pengamatan dibawah  mikroskop,  yaitu  isolat  AR1  dan  isolat  SM10  dengan  ciri  berwarna  hijau  dan  refraktil, sedangkan  pada  isolat  SM6  tidak  memperlihatkan  adanya  endospora  pada Tabel  2 .  Hasil  pengamatan karakteristik  isolat  bakteri  berdasarkan  pengecatan  endospora  dapat  dilihat  pada Gambar  3 .  Sesuai dengan  sifat  hidup  bakteri,  dapat  mentolerir  lingkungan  yang  tidak  menguntungkan  seperti  salinitas tinggi,  tekanan  tinggi,  nutrisi  yang  kurang,  kondisi  kering,  terjadi  pembekuan,  adanya  radiasi  sinar ultraviolet dan kondisi lingkungan ekstrim yang lain yang dapat merusak sel bakteri [18].
Gambar 3. Pengecatan endospora diwakili oleh isolat SM10 Sumber: Gambar pribadi hasil penelitian

## Karakteristik Biokimia Bakteri Resisten Pb
Hasil pengamatan uji biokimia meliputi uji penggunaan beberapa jenis substrat gula menggunakan media  TSIA,  uji  H2S,  uji  MRVP,  uji  motilitas,  uji  indol,  uji  urea,  uji  sitrat  dan  uji  nitrat.  Hasil  dari beberapa  uji  biokimia  pada  bakteri  dapat  berbeda,  ada  juga  yang  sama  hasilnya  pada  setiap  jenis  isolat bakteri seperti pada Tabel 3.
Berdasarkan uji TSIA menunjukkan glukosa dapat difermentasi oleh semua isolat, ditandai dengan adanya  perubahan  warna  pada  media  menjadi  kuning  pada  bagian butt yaitu  pada  5  isolat  SM3,  SM5, SM6,  SM9,  SM10  dan  isolat  AR2.  Hal  ini  menandakan  bahwa  isolat  bakteri  mampu  memfermentasi sukrosa dan laktosa. Akan tetapi ada 2 isolat yang tidak mampu memfermentasi sukrosa dan laktosa yaitu isolat  AR1  dan  isolat  AR3  yang  menyebabkan  pada  media  TSIA  masih  berwarna  merah  pada  bagian slant .
Tabel 3. Karakteristik biokimia pada isolat bakteri resisten pada logam berat Pb Kode isolat Uji TSIA MR VP Motilitas Indol Urea Sitrat Nitrat Slant Butt Gas H 2 S SM3 kuning Kuning - - + + + - + + + SM5 kuning kuning + - + + + - + + + SM6 kuning Kuning - - + + + - + + + SM9 kuning kuning + - + + + - + + + SM10 kuning kuning - - + + + - + - + AR1 merah Kuning - - + - + - - - + AR2 kuning kuning + - + + + + - + + AR3 merah kuning - - + - + - - - + Sumber: Hasil pengamatan peneliti
Pada  tahap  fermentasi  yang  terjadi  pada  media  TSIA  memproduksi  senyawa  asam  format, selanjutnya mengalami oksidasi sempurna membentuk karbondioksida dan gas hidrogen yang dikatalisis oleh  enzim formate  hydrogenase .  Gas  hidrogen  secara  kimiawi  tidak  larut  dalam  media  dan  terjadi akumulasi  dengan  hasil  bentukan  gelembung  udara  di  sekitar  pertumbuhan  isolat  dalam  media  dan tabung, atau gelembung udara terbentuk pada bagian dasar tabung [17].
Dari  hasil  uji  MR  ( Methyl  Red ),  menunjukkan  kemampuan  semua  isolat  mampu  memfermentasi asam  campuran  dengan  ciri  ada  warna  media  berubah  menjadi  kemerah-merahan,  diakibatkan  oleh peningkatan  asam  atau  penurunan  pH  pada  media,  dari  senyawa  asam  yang  dihasilkan  pada  fermentasi
p-ISSN : 2528-3561 e-ISSN : 2541-1934
glukosa.  Pada  uji  VP  ( Voges  Proskaurer ),  terdapat  6  isolat  yang  positif  dengan  ciri  media  berwarna merah  sebagai bukti bakteri dapat melakukan fermentasi bahan  karbohidrat menghasilkan  produk utama yaitu  2.3-butanadiol.  Selain  itu,  terdapat  2  isolat  yang  negatif  dengan  adanya  warna  medium  menjadi kuning setelah ditambahkan KOH 40% dan α-naftol [19].
Pada hasil pengamatan uji motilitas memperlihatkan ada sifat motil pada semua isolat. Adanya sifat motil  pada  bakteri  akan  memperlihatkan  perambatan  di  sekitar  tusukan  dalam  media  yang  telah diinokulasikan. Sifat motil bakteri akibat dari sifat taksis oleh adanya rangsangan dari faktor lingkungan. Mekanisme  motilitas  bakteri  yaitu  tumbuh  dengan  pola  menyebar  di  sekitar  inokulasi  kultur  bakteri dengan cara penusukan. Pola penyebaran dapat terlihat dengan terbentuknya pertumbuhan berwarna putih seperti  akar  di  sekitar  inokulasi.  Pada  hasil  pengamatan  dari  uji  indol  terdapat  1  isolat  bakteri  yang mampu menghasilkan indol yang ditandai dengan terbentuknya cincin indol berwarna merah. Sedangkan 7 isolat bakteri lainnya tidak memproduksi indol. Hal ini dapat dilihat ketika ditambahkan reagen kovach warna  merah  tidak  terbentuk  [17].  Uji  indol  dilakukan  untuk  mengetahui  kemampuan  metabolisme bakteri  pada  asam  amino  triptofan  yang  terdapat  dalam  protein,  dirombak  menghasilkan  indol.  Dengan mekanisme ini, asam amino triptofan akan lebih mudah dimanfaatkan oleh bakteri dari penguraian protein [19].
Berdasarkan  hasil  uji  urease,  memperlihatkan  5  isolat  bakteri  bersifat  positif  dengan  adanya perubahan  warna  pada  media  urease  menjadi  warna  merah.  Pada  3  isolat  bakteri  lainnya  adalah  negatif dengan  warna  media  yang  tetap  berwarna  kuning.  Hal  ini  disebabkan  karena  bakteri  tidak  dapat memproduksi  enzim  urease  yang  merombak  molekul  urea  ((NH 2 ) 2 CO 2 )  menghasilkan  karbondioksida (CO 2 )  dan  amonia  (NH 3 ).  Uji  urease  dimanfaatkan  untuk  mengidentifikasi  kapasitas  bakteri  dalam mendegradasi  urea oleh enzim urease. Molekul amonia  yang terbentuk membuat  nilai pH memiliki sifat alkali terjadi warna merah muda pada media berarti tes positif [17,19].
Pada  hasil  uji  sitrat,  terdapat  5  isolat  bakteri  yang  menunjukkan  hasil  positif,  yaitu  isolat  SM3, SM5, SM6, SM9, dan isolat AR2. Hal ini ditandai dengan terjadinya perubahan warna medium menjadi biru.  Selain  itu,  terdapat  3  isolat  yang  menunjukkan  hasil  negatif,  yaitu  isolat  SM10,  AR1,  dan  isolat AR3.  Hal  ini  dikarenakan  warna  medium  tidak  mengalami  perubahan  yaitu  tetap  berwarna  hijau. Berdasarkan  hasil  uji  nitrat,  menunjukkan  semua  isolat  bakteri  menunjukkan  hasil  yang  positif  mampu mereduksi nitrat menjadi nitrit yang ditandai dengan terjadinya perubahan warna menjadi merah [17].

## 4. Kesimpulan
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan diperoleh 8 isolat bakteri yang resisten terhadap logam berat Pb dari  Sungai Tallo Makassar yaitu terdiri dari  5 isolat dari sampel sedimen dan pada sampel  air diperoleh  3  isolat;  karakteristik  morfologi  secara  mikroskopik  menunjukkan  ada  persamaan  pada karakteristik  setiap  isolat  bakteri  pada  pengamatan  morfologi  sel.  Dari  uji  biokimia  meliputi  uji kemampuan  fermentasi  gula,  kemampuan  menggunakan  glukosa,  motilitas,  indol,  urea,  sitrat,  dan  nitrat menunjukkan isolat bakteri memiliki persamaan dan perbedaan.

## 5. Referensi
[1] Y.M.  Hardiyanti,  F  Fahruddin,  and  P.  Taba,  “Effect  of  heavy  metals  accumulation  of  cadmium (Cd)  on  leaf  chlorophyll  green  champa  ( Polyaltia  longifolia )  in  Industrial  Area  Makassar,  South Sulawesi,” Advances in Environmental Biology , vol. 14, pp.16-20, 2020.
[2] F.  Fahruddin,  N.  Haedar,  A.  Abdullah,  W.  Abdul,  dan  R.  Rifaat,  “Deteksi  unsur  logam  dengan XRF  dan  analisis  mikroba  pada  limbah  air  asam  tambang  dari  pertambangan  di  Lamuru  - Kabupaten Bone,” Jurnal Geocelebes, vol. 4, pp. 7-13, 2020.
[3] Darmono,  “ Lingkungan  Hidup  dan  Pencemaran  Hubungannya  dengan  Toksikologi  Senyawa Logam ,” Universitas Indonesia (UI-Press), Jakarta, 2001.
[4] R.  E.  Tanjung,  F.  Fahruddin,  and  M.  F.  Samawi,  “Phytoremediation  relationship  of  lead  (Pb)  by Eichhornia crassipes on pH, BOD and COD in groundwater,” J Phys Conf Ser , vol. 1341, pp. 1-6, 2019.
[5] T.M.  Palapa  and  A.A.  Maramis,  “Heavy  metals  in  water  of  stream  near  an  amalgamation  tailing ponds  in  TalawaanTatelu  gold  mining,  North  Sulawesi,  Indonesia,” Procedia  Chem ,  vol.14,  pp. 428-436, 2015.
[6] R.  E.  Tanjung,  F.  Fahruddin,  and  F.  Samawi,  “Absorption  of  heavy  metal  lead  (Pb)  by  water hyacinth  ( Eichhornia  crassipes )  and  its  influence  to  total  dissolved  solids  of  groundwater  in phytoremediation,” Indonesia Chimica Acta , vol.13, pp.10-15, 2020.
[7]      Zulfahmi, A.S.N. Syam, dan Jufriadi, “Dampak sedimentasi Sungai Tallo terhadap  kerawanan banjir di Kota Makassar,” Plano Madani, vol 5, pp180-191, 2016.
[8]     S. Suhadiyah, “Keanekaragaman dan fungsi ekonomi flora di Delta Lakkang, Sungai Tallo, Makassar,” Sulawesi Selatan.” Seminar Nasional Masyarakat, Biodiversitas Indonesia , Juni 2015
[9]     Arifuddin, M. T. Ishak, R.Ibrahim, “Pengembangan kawasan Sungai Tallo: sebuah upaya Peningkatan kualitas Kota Makassar,” Prosiding Temu Ilmiah IPLBI , 2013
[10]   T. Indarwati, S. Mahendra, dan W. Arthana, “Analisis kadar logam berat air sungai Sekonyer Kabupaten Kotawaringin Barat Kalimantan Tengah,” Ecotrophic ,  vol. 2, pp. 1-10, 2007.
[11]    M.  Roem,  ”Distribusi  Pb  pada  beberapa  organ  ikan  kakap  putih  ( Lates  calcarifer )  dari  perairan muara  Sungai Karajae Pare-Pare dan muara  Sungai Tallo Makassar,” Skripsi , Program Studi Ilmu Kelautan, Jurusan Ilmu Kelautan, Fakultas Ilmu Kelautan dan Perikanan, Universitas Hasanuddin, Makassar, 2007.
[12]  F.  Fahruddin  and  R.  E.  Tanjung,  “The  study  of  bacteria  populations  in  phytoremediation  of cadmium using Eichhornia crassipes ,” J Phys Conf Ser , vol.1341, pp. 1-8, 2019.
[13]  J.  S.  Hamilton  and  P.  M.  Mehrle,  “Metallothionein  in  fish:  review  of  its  importance  in  assessing stress from metal contaminants,” Journal Transactions of the American Fisheries Society , vol.115, pp.590-609, 1986.
[14]  F. Fahruddin, E. Johannes, and  Z. Dwyana, “Antifouling potential of Thalassia hemprichii extract against growth of biofilmforming bacteria,” Scienceasia , vol. 45, pp. 21-27, 2019.
[15]  Fahruddin, N. Haedar, S. Santosa, dan S. Wahyuni, “Uji kemampuan tumbuh isolat bakteri dari air dan sedimen Sungai Tallo terhadap logam timbal (Pb),” Jurnal Ilmu Alam dan Lingkungan, vol.10, pp. 58 – 64, 2019.
[16]  S.  Wulandari,  ”Identifikasi  bakteri  pengikat  timbal  (Pb)  pada  sedimen  di  perairan  Sungai  Siak,” Jurnal Biogenesis, Vol 1, pp. 62-65, 2005.
[17]    J.G.  Cappucino  and  N.  Sherman, Microbiology:  A  Laboratory  Manual,  6th  Edition ,  Pearson Education Inc. San Fransisco, USA, 2001.
[18]  H.  Thoyib,  R.  Setyaningsih,  and  Suranto,  “Selection  and  identification  of  xylanase  producing alkaliphilic bacteria isolated from soil in Krakitan hill, Bayat, Klaten,” Bioteknologi, vol . 4, pp.6-12, 2007.
[19]   M. J. Pelczar dan E.C.S. Chan, Dasar-Dasar Mikrobiologi, Universitas Indonesia, Jakarta, 1986.