Agri- SosioEkonomi Unsrat, ISSN (p) 1907– 4298, ISSN (e) 2685-063X , Sinta 5, Volume 20 Nomor 2, Mei 2024 : 661 – 668
Patogenisitas Jamur Entomopatogen Metarhizium Anisopliae Metch. Terhadap Larva Spodoptera Litura F. Pada Tanaman Kubis (Brassicae Oleracea L.)

## Di Laboratorium
Pathogenicity Of The Entomopathogenic Fungus Metarhizium anisopliae Metch. Against Spodoptera litura F. Larvae On Cabbage (Brassica oleracea L.)
In The Laboratory
Tirsa Salasa (1)(*) , Dantje Tarore (2) , Jimmy Rimbing (2)
1) Peneliti Independen
2) Staf Pengajar dan Peneliti pada Program Studi Entomologi Program Pascasarjana, Universitas Sam Ratulangi, Manado *Penulis untuk korespondensi: tirsasalasa02@gmail.com
Naskah diterima melalui e-mail jurnal ilmiah agrisosioekonomi@unsrat.ac.id
: Senin, 27 Mei 2024
Disetujui diterbitkan
: Jumat, 31 Mei 2024

## ABSTRACT
This study aims to analyze the pathogenicity of the entomopathogenic fungus M. anisopliae in infecting S. litura. The  research  was  conducted  over  a  period  of  3  months,  from  February  to  May  2024.  It  took  place  at  the  Kalasey Biological Agents Laboratory, Balai Perlindungan dan Pengujian Mutu Tanaman Pangan dan Hortikultura (BPPMTPH) in  North  Sulawesi  Province.  The  study  employed  a  Completely  Randomized  Design  (CRD)  with  4  treatments,  each replicated 4 times. The number of samples per replication was 20 larvae, resulting in a total of 80 larvae per treatment. Data  were  analyzed  using  probit  analysis  and  ANOVA  followed  by  Least  Significance  Different  (LSD)  test  at  a  5% significance level. The results indicated that the pathogenicity of the entomopathogenic fungus M. anisopliae could infect S. litura larvae as early as one day after application. The concentration of 10 8 conidia/ml was highly effective, achieving 100% mortality within 6 days of application. The fastest LT 50 value was observed at the concentration of 10 8 conidia/ml, which required only 2.8 days, while the LC 50 value was found at a concentration of 10 7.6 conidia/ml.
Keywords : pathogenesis; cabbage plant; spodoptera litura; metarhizium anisopliae

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis kemampuan patogenisitas jamur entomopatogen M. anisopliae dalam  menginfeksi S.  litura .  Penelitian  berlangsung  selama  3  bulan,  sejak  bulan  Februari  hingga  Mei  2024. Penelitian dilaksanakan di  Laboratorium Agens Hayati Kalasey Balai Perlindungan dan Pengujian Mutu  Tanaman Pangan  dan  Hortikultura  (BPPMTPH)  Provinsi  Sulawesi  Utara.  Penelitian  ini  dilakukan  menggunakan  metode Rancangan Acak Lengkap yang terdiri dari 4 perlakuan dan dari masing-masing perlakuan diulang sebanyak 4 kali. Jumlah  sampel  per  ulangan  yakni  20  larva,  sehingga  total  sampel  untuk  satu  perlakuan  yaitu  80  larva.  Data dianalisis  menggunakan  analisis  probit  dan  uji  ANOVA  dengan  uji  lanjut  Beda  Nyata  Terkecil  (BNT)  pada  taraf 5%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa patogenisitas jamur entomopatogen M. anisopliae dapat menginfeksi larva S.  litura sejak  satu  hari  setelah  aplikasi.  Konsentrasi  kerapatan  10 8 konidia/ml  sangat  efektif  dan  mampu menyebabkan  mortalitas  100%  pada  6  hari  setelah  aplikasi.  Nilai  LT 50 tercepat  terdapat  pada  perlakuan  dengan kerapatan  10 8 konidia/ml  yaitu  hanya  membutuhkan  waktu  2,8  hari  dan  LC 50 yaitu  pada  konsentrasi  dengan kerapatan 10 7,6 konidia/ml.
Kata kunci : patogenisis; tanaman kubis; spodoptera litura ; metarhizium anisopliae
Patogenisitas Jamur Entomopatogen……..………………………………………….………(Tirsa Salasa, Dantje Tarore, Jimmy Rimbing)

## PENDAHULUAN

## Latar Belakang
Tanaman  kubis  merupakan  salah  satu tanaman sayuran yang banyak dibudidayakan oleh para  petani  sayuran  dan  umum  dikonsumsi  oleh masyarakat luas di Indonesia. Manfaat yang dapat diperoleh diantaranya sebagai sumber vitamin (A, B1,  dan  C),  sumber  mineral  (kalsium,  kalium, klor,  fosfor,  sodium,  sulfur),  dan  mengandung senyawa  anti  kanker.  Sayuran  ini  banyak digunakan  sebagai  sumber  pangan  baik  di Indonesia  maupun  di  negara  lain  seperti Singapura,  Brunei  Darussalam,  China,  dan Malaysia (Setiawan, 2011).
Berdasarkan data dari Badan Pusat Statistik Indonesia  produksi  tanaman  kubis  dalam  5  tahun terakhir  pada  tahun  2016-2020  mengalami penurunan  yaitu  berturut-turut  1.513.326  ton, 1.442.624  ton,  1.407.932  ton,  1.413.060  ton, 1.406.985 ton. Produksi kubis di daerah Sulawesi Utara  dari  tahun  2018-2020  terus  mengalami penurunan  yaitu  dari  75.666  ton,  61.318  ton,  dan 49.723  ton.  Rendahnya  produksi  kubis  di Indonesia  disebabkan  oleh  serangan  hama  dan penyakit yang dapat mengurangi dan menurunkan hasil  pertanian.  Salah  satu  diantaranya  masalah hama  yang  dapat  menurunkan  hasil  produksi kubis (Anonim, 2020).
S.  litura merupakan  hama  yang  bersifat polifag  atau  dapat  menyerang  berbagai  jenis tanaman  salah  satunya  yaitu  menyerang  tanaman kubis. Serangan hama tersebut dapat menyebabkan  kerusakan  hingga  90%  jika  tidak dilakukan  tindakan  pengendalian  (Manikome et al .,  2020).  Sejauh  ini  pengendalian  hama  pada petani  umumnya  masih  menggunakan  pestisida sintetik.  Sedangkan penggunaan  pestisida  sintetik secara  terus-menerus  dapat  berdampak  negatif bagi  lingkungan,  kematian  musuh  alami  dan kesehatan  manusia,  serta  dapat  menyebabkan resistensi  terhadap  hama  yang  dikendalikan dengan  pestisida  sintetik.  Untuk  mencermati permasalahan tersebut perlu dilakukan pengendalian hama secara hayati yang aman bagi lingkungan.  Salah  satu  alternatif  yang  dapat dilakukan  yaitu  dengan  pemanfaatan  jamur entomopatogen Metarhizium spp.  yang  mampu mengendalikan serangan hama (Effendy, 2010).
Terdapat  lebih  dari  700  spesies  jamur  yang bersifat  entomopatogen,  salah  satunya  yaitu
Metarhizium  anisopliae. Jamur  ini  memiliki kemampuan  parasit  pada  beberapa  ordo  serangga termasuk  Ordo  Lepidoptera  (Prayogo et  al ., 2005). Kemampuan patogenisitas suatu entomopatogen  berbeda-beda,  perbedaan  itu  bisa diakibatkan  oleh  faktor  lokasi  dari  mana entomopatogen  itu  diambil,  karena  tingkat patogenesitas  dari  suatu  jamur  dapat  dipengaruhi oleh  potensi  dari  serangga  inang  dan  lingkungan sekitarnya,  juga  tingkat  kerapatan  konidia memberikan  pengaruh  pada  tingkat  mortalitas (Masyitah et al ., 2017).
Pemanfaatan  jamur  entomopatogen  dalam pengendalian  hama S.  litura pada  tanaman  kubis masih  terbatas  karena  petani  lebih  mengandalkan pestisida  kimia.  Hal  tersebut  mendorong  peneliti untuk melakukan penelitian mengenai uji patogenisitas di laboratorium dengan memanfaatkan  agensia  pengendali  hayati M. anisopliae terhadap  hama  penting  tanaman  kubis yakni S. litura.

## Tujuan Penelitian
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menganalisis kemampuan  patogenisitas  jamur  entomopatogen M. anisopliae dalam menginfeksi hama S. litura.

## Manfaat Penelitian
Penelitian  ini  diharapkan  dapat  menjadi solusi  bagi  petani  dan  sebagai  acuan  bagi mahasiswa untuk mengetahui tentang pengendalian hayati hama S. Litura pada tanaman kubis dengan memanfaatkan jamur entomopatogen M. anisopliae .

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  berlangsung  selama  3  bulan, sejak bulan Februari hingga Mei 2024. Penelitian dilaksanakan  di  Laboratorium  Agens  Hayati Kalasey  Balai  Perlindungan  dan  Pengujian  Mutu Tanaman  Pangan  dan  Hortikultura  (BPPMTPH) Provinsi Sulawesi Utara.

## Bahan dan Alat
Bahan yang  digunakan dalam  penelitian  ini adalah  isolat  jamur M.  anisopliae ,  isolat  lokal Tomohon,  media  PDA,  media  WA, aluminium foil ,  air  steril,  alkohol  70%,  tisu,  kapas,
Agri- SosioEkonomi Unsrat, ISSN (p) 1907– 4298, ISSN (e) 2685-063X , Sinta 5, Volume 20 Nomor 2, Mei 2024 : 661 – 668
kloramfenikol,  larutan  klorin,  beras,  daun  kubis, dan  larva S.  litura .  Adapun  alat  yang  digunakan dalam penelitian ini yaitu cawan petri, jarum ose, lampu  bunsen,  timbangan  analitik, erlenmeyer , laminar  air  flow ,  inkubator, hiclave ,  tabung reaksi, alat vorteks, spatula stainlessteel , hemocytometer,  mikroskop, hand  counter , hand sprayer kecil  ukuran  100  ml, plastik  gula,  wadah plastik  ukuran  500  ml  dan  100  ml,  botol  kaca kecil,  corong,  kuas,  kertas  label,  hekter,  alat  tulis menulis dan kamera handphone .

## Metode Pengambilan Sampel
Penelitian  ini  dilakukan  menggunakan rancangan acak lengkap (RAL) yang terdiri dari 4 perlakuan,  berdasarkan  konsentrasi  kerapatan yaitu:
P1 = 108 konidia/ml P2 = 107 konidia/ml
P3 = 106 konidia/ml P0 (Kontrol) = Air
Kemudian masing-masing perlakuan diulang  sebanyak  4  kali.  Jumlah  sampel  per ulangan  yakni  20  larva,  sehingga  total  sampel untuk satu perlakuan yaitu 80 larva.

## Prosedur Penelitian
1. Pembuatan Media PDA
Media  PDA  merupakan  jenis  media  biakan yang  memiliki  bentuk  padat.  Pada  penelitian  ini digunakan  250  ml  media  yang  dikomposisikan dengan  10  gr  PDA  bubuk,  1  bubuk  kapsul kloramfenikol  dan  250  ml aquades .  PDA  bubuk ditimbang  terlebih  dahulu  dan  dimasukkan  ke dalam  panci  yang  sudah  berisi  250  ml aquades dan  kloramfenikol,  lalu  dimasak  dan  diaduk hingga  merata  sampai  mendidih.  Semua  larutan dimasukkan  ke  dalam  tabung erlenmeyer , kemudian  ditutup  dengan alumunium  foil , selanjutnya  larutan  PDA  disterilkan  pada hiclave dengan  suhu  121°C  selama  20 menit.  Setelah  itu, dibiarkan  agak  dingin  beberapa  saat.  Kemudian larutan PDA dituangkan ke masing-masing cawan petri dalam laminar air flow . 2. Eksplorasi Jamur Entomopatogen M. anisopliae
Isolat  jamur M.  anisopliae yang  digunakan dalam  penelitian  ini  merupakan  hasil  dari eksplorasi  larva S.  litura yang  terinfeksi  jamur entomopatogen  di  lapangan  tepatnya  di  Desa Rurukan,  Kecamatan  Tomohon  Timur,  Kota
Tomohon.  Larva  yang  terinfeksi  dimasukkan  ke dalam  botol  kaca  kecil,  kemudian  dibawa  ke laboratorium untuk diisolasi dan diidentifikasi. 3. Isolasi  Jamur  Entomopatogen M.  anisopliae dan Perbanyakan pada Media PDA Larva yang terinfeksi sebelum ditumbuhkan pada  media  PDA,  disterilkan  terlebih  dahulu dengan  cara  direndam  pada  larutan  klorin  selama ±1 menit, setelah itu dikeringanginkan diatas tisu. Kemudian  larva  tersebut  direndam  lagi  ke  dalam air  steril  selama  ±1  menit,  lalu  dikeringanginkan. Selanjutnya  dilakukan  isolasi.  Isolasi  dilakukan untuk mendapatkan isolat yang murni dengan cara menggores  spora  jamur  entomopatogen  yang menempel  pada  tubuh  larva  yang  terinfeksi kemudian  diinokulasikan  pada  media  PDA  untuk diperbanyak dengan menggunakan metode kuadran  gores  dan  tabur.  Kemudian  jamur diinkubasi  selama  1  minggu  sampai  jamur  yang diisolasi  sudah  berwarna  hijau  dan  memenuhi permukaan cawan petri.
4. Perbanyakan pada Media Beras
Perbanyakan  pada  media  beras  diawali dengan perendaman beras selama 5 menit dengan air  mendidih,  lalu  dikukus  10  menit.  Setelah  itu didinginkan dan dimasukkan ke dalam plastik 100 gr.  Kemudian  beras  disterilkan  pada hiclave selama 1,5 jam, lalu didinginkan. Starter jamur M. anisopliae dimasukkan  ke  dalam  plastik  yang berisi  beras  lalu  dilipat  dan  dihekter.  Kemudian diinkubasikan  selama  14  hari  dan  siap  digunakan atau sampai beras dipenuhi jamur M. anisopliae.
5. Persiapan Serangga Uji
Penyediaan  serangga  uji  dilakukan  dengan cara mengumpulkan kelompok telur S. Litura dari lapangan, kemudian dipindahkan ke dalam wadah plastik  ukuran  500  ml  yang  sudah  diberi  tisu  dan dibasahi  sedikit  air  untuk  menjaga  kelembapan dan  ditutup  dengan  kain  kasa.  Kemudian  telur dipelihara  sampai  menjadi  larva.  Setelah  menetas larva  dimasukkan  ke  dalam  wadah  yang  lebih kecil  ukuran  100  ml  (1  wadah  terdiri  dari  1  ekor larva uji) sesuai dengan banyaknya perlakuan dan ulangan  yang  telah  ditentukan.  Pada  tahap pemeliharaan  larva S.  Litura diberi  pakan  daun kubis  setiap  hari.  Larva  instar  3  yang  digunakan dalam pengujian.
6. Uji Kerapatan Konidia
Perhitungan  kerapatan  konidia  dilakukan menggunakan haemocytometer neubauer improve dengan  cara  suspensi  konidia  dari  perlakuan
Patogenisitas Jamur Entomopatogen……..………………………………………….………(Tirsa Salasa, Dantje Tarore, Jimmy Rimbing)
perbanyakan  isolat  diambil  sebanyak  0,2  ml. Kemudian  suspensi  tersebut  diteteskan  pada haemocytometer dan  diamati  dibawah  mikroskop dengan perbesaran 400x dan dihitung menggunakan rumus menurut (ISO, 2015):
S = X ̅ L × t × d × 10 3
Keterangan:
S = kerapatan konidia/ml
X ̅ = rerata jumlah konidia pada kotak a,b,c,d,e
L = luas kotak hitung 0,04 mm 2
t = kedalaman bidang hitung 0,1 mm
10 3 =  volume  suspensi  yang  dihitung  (1  ml=10 3 mm 3 )
7.   Pembuatan  Suspensi  dan  Aplikasi  Jamur M. anisopliae
Sebelum pengaplikasian, dilakukan pengenceran guna mendapatkan kerapatan konidia yang  telah  ditentukan.  Pada  100  gr  media  beras yang  sudah  ditumbuhi  jamur M.  anisopliae dicampurkan  dengan  1  liter  air  steril  kemudian diaduk  hingga  merata  dan  diencerkan  lagi  pada 900  ml  air  dan  diambil  sebanyak  100  ml  dari pengenceran  sebelumnya  sampai  mendapatkan kerapatan  konidia  yang  siap  digunakan  dalam pengaplikasian.  Larva  uji  yang  ada  diaplikasikan dengan suspensi jamur M. anisopliae dengan cara menyemprotkan  suspensi  sebanyak  3  kali  untuk setiap  ulangan  dengan  menggunakan hand sprayer ,  kemudian  dilakukan  pengamatan  larva uji  setiap  hari  selama  8  hari  dimulai  dari  1  hari setelah aplikasi (HSA).

## Parameter Pengamatan
Terdapat  beberapa  parameter  pengamatan yang dilakukan dalam penelitian, yaitu:
1. Identifikasi jamur.
2. Gejala infeksi M. anisopliae pada S. litura.
3. Persentase  mortalitas  larva  uji  dihitung menggunakan rumus:
Mortalitas = Jumlah larva mati
Total larva uji × 100% 4. Lethal Time 50 (LT 50 ) dan Lethal Concentration 50  (LC 50 )  jamur M. anisopliae terhadap larva S. Litura.

## Metode Analisa Data
Data  mortalitas  larva S.  Litura terhadap jamur M.  anisopliae dianalisis  menggunakan Microsoft  Excel 2013  dengan  menghitung
persentase  mortalitas  dilanjutkan  analisis  sidik ragam  (ANOVA).  Apabila  ada  perbedaan  nyata, maka  dilanjutkan  uji  lanjut  dengan  menggunakan uji  BNT  (Beda  Nyata  Terkecil)  pada  taraf  5%. Data  waktu  kematian  dan  konsentrasi  mematikan larva S.  Litura dianalisis  dengan  analisis  probit menggunakan  apilkasi  SPSS  versi  25.0  untuk perhitungan Median  Lethal  Time (LT 50 )  dan Median Lethal Consentration (LC 50 ).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Identifikasi Jamur M. anisopliae
Morfologi  isolat  jamur  entomopatogen diamati  secara  makroskopis  dan  mikroskopis. Identifikasi  jamur  entomopatogen  menggunakan buku  kunci  determinasi  jamur  entomopatogen oleh  Humber  (2005).  Hasil  identifikasi  morfologi terhadap  isolat  jamur  yang  telah  ditumbuhkan pada media PDA, secara makroskopis memperlihatkan koloni yang berwarna putih pada awal  masa  pertumbuhan, yang kemudian berubah warna  menjadi  hijau  gelap  dengan  bertambahnya umur ± 2 minggu (Gambar 1).
(a)                               (b) Gambar  1.  Morfologi  jamur M.  anisopliae secara makroskopis. Fase pertumbuhan vegetatif  (a)  dan  fase  pertumbuhan generatif (b).
Hasil identifikasi morfologi secara mikroskopis,  yakni  isolat  jamur  yang  telah ditumbuhkan pada media WA diamati menggunakan  mikroskop  dengan  perbesaran 400x,  secara  mikroskopis  jamur  entomopatogen M.  anisopliae memiliki  kodiofor  yang  tersusun tegak  dengan  ukuran  yang  berbeda-beda,  dan bercabang  yang  ditumbuhi  dengan  konidia, konidia  bersel  satu  dengan  warna  hialin  dan memiliki  bentuk  seperti  beras  atau  bulat  silinder (Humber, 2005) (Gambar 2).
Agri- SosioEkonomi Unsrat, ISSN (p) 1907– 4298, ISSN (e) 2685-063X , Sinta 5, Volume 20 Nomor 2, Mei 2024 : 661 – 668
Hasil  penelitiian  Ilmiah et  al .,  (2020), mengenai  identifikasi  morfologi  jamur M. anisopliae menyatakan bahwa secara mikroskopis,  jamur M.  anisopliae memiliki konidia berbentuk lonjong atau silinder dan bersel satu,  konidiofor  berbentuk  tegak  dengan  panjang 6-16  µm,  bercabang  dan  miseliumnya  memiliki sekat. Secara makroskopis, koloni jamur berwarna putih pada fase vegetatif lama-kelamaan berwarna hijau tua pada fase generatif.
Gambar 2. Morfologi Jamur M. anisopliae Secara Mikroskopis
Gejala Infeksi M. anisopliae pada S. litura Berdasarkan  hasil  pengamatan  yang  telah dilakukan  di  laboratorium  setelah  pengaplikasian jamur M.  Anisopliae terhadap  larva S.  Litura menunjukkan pada kerapatan konidia 10 8 konidia/ml,  10 7 konidia/ml,  dan  10 6 konidia/ml memperlihatkan  gejala  awal  sehari  setelah aplikasi gerakan tubuh menjadi lambat, berkurangnya  aktifitas  makan,  tubuh  menjadi kaku dan berwarna hitam (Gambar 3), dibandingkan  dengan  perlakuan  kontrol  yang menunjukkan  pergerakan  dan  aktifitas  makan larva yang masih aktif.
(a)                                 (b) Gambar  3.  Larva S.  litura yang  terinfeksi  jamur M. anisopliae . Sacara makroskopis (a) dan secara mikroskopis (b)
Larva  yang  mati  dan  terinfeksi M. anisopliae menunjukkan  tubuh  yang  kaku  dan menghitam.  Pada  hari  kedua  setelah  aplikasi, terlihat  adanya  pertumbuhan  miselium  berwarna
putih  pada  bagian  permukaan  tubuh  larva, kemudian  miselium  berubah  menjadi  warna hijau gelap pada 5 hari setelah aplikasi (Gambar 3). Hal ini sesuai dengan penelitian yang dilaporkan oleh Han et  al., (2014)  bahwa  aplikasi  jamur M. anisopliae dengan  konsentrasi  10 9 konidia/ml pada larva instar 2 Spodoptera exigua menimbulkan  gejala  adanya  miselium  berwarna putih  pada  tubuhnya  setelah  3  HSA  kemudian berubah menjadi hijau setelah 5 HSA. Sedangkan Ulya et  al., (2016)  melaporkan  bahwa  setelah dilakukannya  apikasi  jamur M.  anisopliae pada Lepidiota  stigma timbulnya  gejala,  tumbuh miselium  berwarna  putih  setelah  6  HSA  pada kerapatan 10 10 konidia/ml.

## Persentase Mortalitas
Persentase mortalitas S. litura akibat infeksi M.  anisopliae pada  perlakuan  kerapatan  konidia yang  berbeda  dapat  dilihat  pada  Gambar  4. Berdasarkan  hasil  yang  didapat,  persentase mortalitas S. litura menunjukkan adanya perbedaan  mortalitas  antara  satu  perlakuan dengan  perlakuan  lainnya,  dari  1  HSA  sampai dengan  8  HSA.  Pada  2  HSA  perlakuan  dengan konsentrasi  kerapatan  10 8 (P1)  konidia/ml  sudah mampu menyebabkan mortalitas >50%, dibandingkan  dengan  perlakuan  kerapatan  10 7 (P2)  dan  10 6 (P3) konidia/ml  yang  hanya  mampu mematikan <50%.
Gambar  4.  Grafik  Persentase  Mortalitas S.  litura Setelah  Aplikasi  Beberapa  Perlakuan M. anisopliae
Pada  3  HSA  perlakuan  dengan  kerapatan 10 7 (P2)  konidia/ml  sudah  mampu  menyebabkan mortalitas  >50%  dan  pada  perlakuan  dengan kerapatan 10 6 (P1) konidia/ml mampu menyebabkan  mortaliltas  >50%  pada  4  HSA. Berdasarkan hasil tersebut tidak adanya perbedaan  yang  jauh  dari  ketiga  perlakuan  ini, dimana  pada  ketiga  perlakuan  (P1,  P2  dan  P3)
0 20 40 60 80 100 1 2 3 4 5 6 7 8 RA T A - RA T A

## MO RT
A L IT A S (% ) HARI KE- P0 (Kontrol) P1 P2 P3
Patogenisitas Jamur Entomopatogen……..………………………………………….………(Tirsa Salasa, Dantje Tarore, Jimmy Rimbing)
mampu  menyebabkan  mortalitas  hingga  100%. Adapun terlihat perbedaan pada perlakuan kontrol yang  mana  tidak  menunjukkan  adanya  mortalitas terhadap S. litura.
Berdasarkan  Gambar  4,  terlihat  bahwa perlakuan  yang  paling  cepat  mematikan  larva hingga  mencapai  rata-rata  mortalitas  100% merupakan  perlakuan  dengan  kerapatan  10 8 (P1) konidia/ml  yaitu  pada  6  HSA,  kemudian  diikuti oleh  perlakuan  dengan  kerapatan  10 7 (P2) konidia/ml  pada  7  HSA  dan  kerapatan  10 6 (P3) konidia/ml  pada  8  HSA.  Dengan  demikian  maka perlakuan  yang  telah  diuji  dapat  mematikan S. litura dalam  rentang  waktu  yang  berbeda.  Hal tersebut  terkait  dengan  konsentrasi  konidia  yang terkandung  pada  ketiga  perlakuan,  sehingga semakin  tinggi  konsentrasinya  maka  semakin cepat  pula  waktu  jamur M.  anisopliae berpotensi menginfeksi S.  litura .  Hal  ini  sesuai  dengan pernyataan  Azhari et  al., (2019),  menyatakan bahwa tinggi dan rendahnya mortalitas disebabkan karena perbedaan konsentrasi kerapatan  konidia  yang  menyebabkan  enzim  dan toksin  yang  dihasilkan  mempengaruhi  cepat  atau lambatnya  jamur  dalam  melakukan  penetrasi kedalam tubuh serangga.
Semakin  tinggi  konsentrasi  jamur M. anisopliae yang diaplikasikan pada S. litura maka semakin  tinggi  mortalitasnya.  Tetapi  tidak menutup  kemungkinan  jika  kondisi  fisiologis larva  dapat  juga  berpengaruh  pada  tingkat kematian S.  litura .  Menurut  Nasution et  al., (2023),  tinggi  rendahnya  mortalitas  serangga dapat  disebabkan  oleh  perbedaan  stadia  yang mengakibatkan  perbedaan  ketebalan  kutikula serangga.  Kutikula  serangga  instar  muda  lebih tipis dan belum terbentuk sempurna dibandingkan dengan  kutikula  serangga  dewasa  sehingga mempengaruhi  jamur  dalam  melakukan  proses penetrasi.
Lethal Time 50 (LT 50 ) dan Lethal Consentration 50 (LC 50 )
Berdasarkan  hasil  uji  patogenisitas  jamur M.  anisopliae ,  nilai  LT 50 dan  LC 50 dapat  dilihat pada  Tabel  1.  LT 50 yaitu  waktu  yang  diperlukan untuk  mematikan  50%  populasi  serangga,  dan LC 50 yaitu  konsentrasi  yang  diperlukan  untuk mematikan  50%  serangga  (ISO,  2015).  Hasil analisis  probit  menunjukkan  nilai  LT 50 pada perlakuan  kerapatan  konidia  10 8 (P1),  10 7 (P2)
dan 10 6 (P3) secara berturut-turut, yaitu 2,8 hari; 3 hari;  dan  3,5  hari.  Berdasarkan  nilai  LT 50 yang ada,  perlakuan  dengan  kerapatan  konidia  10 8 konidia/ml lebih cepat mematikan 50% larva yaitu hanya  membutuhkan  waktu  selama  2,8  hari. Sesuai  dengan hasil  penelitian  Han et  al .,  (2014), menyatakan bahwa aplikasi cendawan M. anisopliae pada  larva Spodoptera  exigua dengan konsentrasi  10 8 konidia/ml  mendapatkan  nilai LT 50 yaitu  2,1  hari,  sedangkan  konsentrasi  10 5 konidia/ml mendapatkan nilai LT 50 yaitu 4,7 hari. Dari data tersebut maka dapat disimpulkan bahwa hasil penelitian ini menunjukkan perbedaan waktu yang tidak cukup jauh pada tiap konsentrasi  yang digunakan  karena  waktu  yang  dibutuhkan  untuk membunuh 50% dari larva tersebut hanya berkisar 2 hingga 4 hari setelah aplikasi.
Tabel 1. Nilai LT 50 dan LC 50 Perlakuan Isolat M. anisopliae pada S.
litura Hama Konsentrasi LT 50 LC 50 1 × 10 8 2.8 S. litura 1 × 10 7 3 7.6 1 × 10 6 3.5
Sumber: Hasil Olahan Analisis Data, 2024
Patogenisitas  jamur  entomopatogen M. anisopliae juga  dapat  dilihat  dari  nilai  LC 50 . Berdasarkan  hasil  analisis  probit  pada  Tabel  1, konsentrasi kerapatan konidia yang dapat mematikan  50%  larva  uji  yaitu  pada  konsentrasi dengan  kerapatan  konidia  10 7,6 konidia/ml  pada hari  kedua.  Berdasarkan  hasil  penelitian  Ulya et al., (2016), melaporkan  bahwa  nilai  LC 50 dari  uji patogenisitas M.  anisopliae terhadap Lepidiota stigma instar  2  sebesar  10 9 konidia/ml  dan  pada instar  3  sebesar  10 8 konidia/ml.  Dalam  hal  ini kerapatan konidia yang tinggi dapat mempengaruhi  peluang  terinfeksinya S.  litura . Semakin tinggi penggunaan konsentrasi jamur M. anisopliae yang  diaplikasikan,  maka  semakin cepat  timbulnya  gejala  penyakit green  muscardin fungus pada S. litura . Sedangkan pada konsentrasi rendah mampu menyebabkan 50% kematian larva S. litura namun membutuhkan waktu sedikit lebih lama  dibandingkan  pada  konsentrasi  dengan kerapatan yang lebih tinggi.
Hasil  analisis  sidik  ragam  setelah  aplikasi jamur M.  anisopliae yang  lebih  berpengaruh terhadap  persentase  mortalitas S.  litura dapat dilihat  pada  Tabel  2.  Hasil  analisis  rata-rata persentase mortalitas S. litura dengan menggunakan  uji  anova,  menunjukkan  bahwa  F-
Agri- SosioEkonomi Unsrat, ISSN (p) 1907– 4298, ISSN (e) 2685-063X , Sinta 5, Volume 20 Nomor 2, Mei 2024 : 661 – 668
hitung memiliki nilai yang lebih besar daripada F- tabel  yakni  101.53  >  3.49.  Dalam  hal  ini, pemberian  perlakuan  kerapatan  10 8 konidia/ml (P1), 10 7 konidia/ml (P2), 10 6 konidia/ml (P3) dan kontrol (P0) memberi pengaruh yang sangat nyata terhadap mortalitas  larva S. litura . Oleh sebab itu analisis  dilanjutkan  dengan  menggunakan  Uji BNT (Beda Nyata Terkecil) (Gambar 5).
Tabel  2.  Hasil  Analisis  Sidik  Ragam  Terhadap  Persentase Mortalitas  S.  litura  Setelah  Aplikasi  Jamur  M. anisopliae
SK DB JK KT F-hitung  F-tabel  Notasi Perlakuan 3  260.1875 86.72917 101.53 3.49 ** Galat 12 10.25 0.854167 Total 15  270.4375
Ket : ** = Berdeda sangat nyata Sumber: Hasil Olahan Analisis Data, 2024
Gambar 5. Hasil Analisis Mortalitas S. litura pada Hari  Kedua  ±  Standar  Deviasi;  Huruf kecil yang sama diatas bar menunjukkan  tidak  berbeda  nyata berdasarkan uji BNT pada α 5%
Berdasarkan  hasil  uji  BNT  menunjukkan perbedaan  nyata,  yang  dimana  konsentrasi kerapatan  10 8 konidia/ml  (P1)  berbeda  nyata dengan kontrol (P0) dan konsentrasi kerapatan 10 6 konidia/ml  (P3).  Hal  ini  dikarenakan  perbedaan banyaknya  kerapatan  konidia  yang  diaplikasikan, yang  dimana  kerapatan  konidia  10 8 (P1)  lebih banyak  dibandingkan  dengan  kerapatan  konidia 10 6 (P3)  sehingga  ini  mempengaruhi  cepat  atau lambatnya  jamur  dalam  melakukan  penetrasi kedalam tubuh larva S. litura .
Konsentrasi  kerapatan  10 7 konidia/ml  (P2) berbeda nyata dengan kontrol (P0) dan konsentrasi  kerapatan  10 6 konidia/ml  (P3)  tetapi tidak berbeda nyata dengan konsentrasi kerapatan 10 8 konidia/ml  (P1),  ini  dikarenakan  konsentrasi kerapatan  10 7 kondia/ml  (P2)  mempunyai  jumlah konidia  yang  lebih  banyak  daripada  konsentrasi
kerapatan  10 6 konidia/ml  (P3)  tapi  lebih  sedikit dari  konsentrasi  kerapatan  10 8 konidia/ml  (P1) dan  penetrasi  yang  disebabkan  oleh  konsentrasi kerapatan  10 7 konidia/ml  (P2)  yaitu  lebih  cepat daripada  konsentrasi  kerapatan  10 6 konidia/ml (P3)  tapi  lebih  lambat  daripada  konsentrasi kerapatan  10 8 konidia/ml  (P1).  Sedangkan  untuk perlakuan  kontrol  (P0)  berbeda  nyata  dengan konsentrasi  kerapatan  10 8 konidia/ml  (P1),  10 7 konidia/ml  (P2),  dan  10 6 konidia/ml  (P3) dikarenakan  kontrol  (P0)  hanya  menggunakan  air sehingga larva uji yang digunakan tidak ada yang mati.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Patogenisitas  jamur  entomopatogen M. anisopliae dapat menginfeksi larva S. litura sejak satu  hari  setelah  aplikasi.  Konsentrasi  kerapatan 10 8 konidia/ml  sangat  efektif  dan  mampu menyebabkan mortalitas 100% pada hari keenam. Nilai  LT 50 tercepat  terdapat  pada  perlakuan dengan kerapatan 10 8 konidia/ml (P1) yaitu hanya membutuhkan waktu 2,8 hari dan LC 50 yaitu pada konsentrasi dengan kerapatan 10 7,6 konidia/ml.

## Saran
Jamur M.  anisopliae berpotensi  sebagai agensia  pengendali  hayati  dalam  mengendalikan larva S.  litura yang  berwawasan  lingkungan. Untuk  itu  penggunaan  entomopatogen  ini  dapat dianjurkan  pada  petani  agar  dapat  memanfaatkan jamur M.  anisopliae dalam  mengendalikan  larva S. litura pada tanaman kubis.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim.  2020.  Produksi  Tanaman  Kubis,  2016-
2020. URL: https://www.bps.go.id/id.
Diakses pada 12 April 2023.
Azhari. A.A., Muhammad., dan S. Hasnah. 2019.
Patogenisitas Cendawan Metarhizium anisopliae  (Metsch)  dalam  mengendalikan Kepik  Hijau  (Nezara  viridula  L.)  pada  Stadia Perkembangan
yang Berbeda di
Laboratorium. JIM  Pertanian  -  AGT ,  4(2),
178-18.
Patogenisitas Jamur Entomopatogen……..………………………………………….………(Tirsa Salasa, Dantje Tarore, Jimmy Rimbing)
Effendy, T.A. 2010. Uji Toksisitas Bioinsektisida
Jamur  Metarhizium  sp.  berbahan  Pembawa Bentuk Tepung untuk Mengendalikan Nilaparvata lugens (Stal.) (Homoptera: Delphacidae). In Prosiding Seminar Nasional.
Jurusan  HPT,  Fakultas  Pertanian,  Universitas Sriwijaya Palembang.
Han,  J.H.,  Jin,  B.R.,  Kim,  J.J.,  dan  Lee,  S.Y.
2014.  Virulence  of  Entomopathogenic  Fungi Metarhizium  anisopliae  and  Paecilomyces fumosoroseus  for  the  Microbial  Control  of Spodoptera  exigua. Mycobiology ,  42(4),  385-
390.
Humber,  R.A.    2005.  Entomopathogenic  Fungal Identification.  USDA-ARS  Plant  Protection Research  Unit  US  Plant. Soil  &  Nutrition Laboratory Tower Road Ithaca , New York.
Ilmiah, A., Pujiastuti, Y., dan Kusuma, S.S. 2020. Exploration,  isolation  and  identification  of entomopathogenic fungi infecting pest insects. Journal of Tropical Crops Protection , 1(2), 70-76.
ISO.  2015.  Sistem  Manajemen  Mutu.  Balai
Perlindungan  dan  Pengujian  Mutu  Tanaman Pangan dan Hortikultura Laboratorium Agens
Hayati (LAH) Kalasey.
Manikome N., Kastanja A.Y., dan Patty, Z. 2020.
Efektivitas Ekstrak Buah Bitung (Barringtonia  asiatica  L.)  Terhadap  Hama Spodoptera  litura  F.  Pada  Tanaman  Kubis (Brassica oleraceae). Agrikan: Jurnal Agribisnis Perikanan, 13(1), 17-22.
Masyitha,  I.,  Sitepu,  S.F.,  dan  Safni,  I.  2017.
Potensi Jamur Entomopatogen untuk Mengendalikan Ulat Grayak Spodoptera litura F.  pada  Tanaman  Tembakau  In  Vivo. Jurnal
Agroekoteknologi FP USU , 5(3), 484-493. Nasution,  M.M.,  Sayuthi,  M.,  dan  Hasnah,  H. 2023. Patogenisitas Cendawan Entomopatogen  Beauveria  bassiana  terhadap
Serangga  Nezara  viridula  (L.)  pada  Stadia yang  berbeda. Jurnal  Ilmiah  Mahasiswa Pertanian, 8(1), 421-437.
Prayogo,  Y.,  Tengkano,  W.,  dan  Marwoto.  2005. Prospek Cendawan Entomopatogen Metarhizium anisopliae untuk Mengendalikan
Ulat  Grayak  Spodoptera  litura  pada  Kedelai. Jurnal litbang pertanian , 24(1), 19-26.
Setiawan  S.,  2011.  Nilai  Ekonomi  Penggunaan Trichoderma  harzianum  Dalam  Pengelolaan Penyakit Akar Gada (Plasmodiophora brassicae Wor.) Pada Sayuran Kubis-Kubisan Di Daerah Puncak, Cianjur. URL: https://repository.ipb.ac.id/handle/123456789/ 52284. Diakses pada 03 Juni 2023. Ulya, L.N., Himawan, T., dan Mudjiono, G. 2016. Uji  Patogenesitas  Jamur  Entomopatogen Metarhizium anisopliae (Moniliales:
Moniliaceae)  terhadap  Hama  Uret  Lepidiota stigma  F.  (Coleoptera:  Scarabaeidae). Jurnal HPT  (Hama  Penyakit  Tumbuhan), 4(1),  24- 31.