## AKTIVITAS ANTIFUNGI CUKA NANAS (Ananas comosus) PADA PERTUMBUHAN JAMUR Malassezia furfur
ANTIFUNGAL ACTIVITY OF PINEAPPLE VINEGAR (Ananas comosus) ON Malassezia furfur GROWTH
Tefia Riswanda Lumban Gaol 1 , Ika Dyah Kurniati 2 , Maya Dian Rakhmawatie 2 1 Graduated Student , Fakultas Kedokteran, Universitas Muhammadiyah Semarang 2 Bagian Biomedik , Fakultas Kedokteran, Universitas Muhammadiyah Semarang Korespondensi: Maya Dian Rakhmawatie. Alamat email: mayadianr@unimus.ac.id

## ABSTRAK
Malassezia  furfur  merupakan  flora  normal  yang  terdapat  pada  kulit  manusia,  namun  dapat  menjadi patogen pada pasien imunosupresi. Di Indonesia, penyakit kulit pityriasis versicolor (hampir 50% penyakit kulit) disebabkan oleh M. furfur. Ketokonazol merupakan obat yang paling umum digunakan untuk pengobatan infeksi M. furfur, namun diketahui memiliki efek samping kerusakan hati. Oleh sebab itu perlu dilakukan pengembangan antijamur  yang  lebih  aman.  Cuka  nanas  mempunyai  potensi  sebagai  antijamur  karena  mengandung  senyawa saponin dan tanin. Penelitian ini melakukan uji kadar hambat minimal (KHM) cuka nanas dengan metode two- fold dilution pewarnaan Resazurin Microplate Assay (REMA). Konsentrasi cuka nanas yang digunakan berada pada  rentang  62.5-  4000  µg/mL.  Analisis  regresi  digunakan  untuk  menilai  hubungan  antara  konsentrasi  cuka nanas dengan pertumbuhan jamur M. furfur. Hasil penelitian menunjukkan bahwa konsentrasi cuka nanas 4000 µg/mL  belum  dapat  menghambat  pertumbuhan  jamur  M.  furfur.  Namun,  berdasarkan  hasil  uji  regresi  linier sederhana,  diketahui  terdapat  hubungan  antara  peningkatan  konsentrasi  cuka  nanas  terhadap  pertumbuhan jamur  dengan  persamaan  garis  y  =  -0,000097x  +  5,88  dan  nilai  korelasi  determinasi  (R2)  0,729  =  72,9  % (p=0,000). Peningkatan dosis uji cuka nanas mungkin dapat bermanfaat untuk menghambat pertumbuhan jamur M. furfur.

## Kata Kunci: Antijamur, Cuka Nanas, Malassezia Furfur, Resazurin Microplate Assay.

## ABSTRACT
Malassezia  furfur  is  normal  flora  found  on  human  skin,  but  can  be  pathogenic  in  immunosuppressed patients. In tropical areas such as Indonesia, pityriasis versicolor skin disease (almost 50% of skin diseases) is caused by M. furfur.). Ketoconazole is commonly drug for the treatment of M. furfur infection, but it’s known to have hepatotoxic effects. Therefore, it’s necessary to develop safer antifungals. Pineapple vinegar has potential as an antifungal because it contains saponins and tannins. Minimum inhibitory concentration (MIC) of pineapple vinegar was carried out using two-fold dilution method and Resazurin Microplate Assay (REMA) staining. The concentration range of pineapple vinegar used is 62.5- 4000 g/mL. Regression analysis was used to assess the relationship  between  pineapple  vinegar  concentration  and  the  growth  of  the  M.  furfur.  The  concentration  of pineapple vinegar 4000 g/mL could not inhibit the growth of the M. furfur. However, based on a linear regression test, there is a relationship between increasing the concentration of pineapple vinegar on the growth of M. furfur, with regression line equation y = -0.000097x + 5.88 and (R2) 0.729 = 72.9% (p = 0.000). Increasing the dose of pineapple vinegar may be useful for inhibiting the growth of the M. furfur.
Keywords: Antifungal, Malassezia furfur, pineapple vinegar, pytiriasis versicolor, resazurin microplate assay How  to  Cite: Gaol,  T.,  Kurniati,  I.,  &  Rakhmawatie,  M.  (2022).  Aktivitas  Antifungi  Cuka  Nanas  ( Ananas comosus ) Pada Pertumbuhan Jamur Malassezia furfur . Biomedika, 14(2), 136-146. doi: https://doi.org/10.23917/biomedika.v14i2.18564
DOI: https://doi.org/10.23917/ biomedika. v14i2.18564

## PENDAHULUAN
Infeksi  akibat  jamur pityriasis  versicolor atau  yang  disebut  dengan penyakit  panu,  sering dijumpai  di  Indonesia.  Hal  tersebut  disebabkan karena Indonesia mempunyai iklim tropis dengan suhu  hangat  dan  kelembaban  yang  tinggi.
Kondisi  tersebut  menyebabkan  jamur  mudah tumbuh, sehingga  penduduk  Indonesia  lebih rentan  terkena  infeksi  jamur  pada  kulit (Rahmawati dan Rasiyanto, 2019).
Prevalensi pityriasis  versicolor yang disebabkan  oleh  jamur Malassezia  furfur di negara-negara tropis, termasuk Indonesia dilaporkan  mencapai  50%  dari  total  jumlah penduduk.  Pada  tahun  2014,  infeksi  kulit Pityriasis  versicolor menempati  urutan  ke-2 penyakit  kulit  terbanyak  di  Jakarta  setelah dermatitis  (Mustofa,  2014), namun  laporan terakhir  di  Palu,  kejadian  infeksi Pityriasis versicolor pada lima tahun terakhir berada pada urutan  ke-4  dari  keseluruhan  pasien  dengan infeksi  dermatofitosis.  Infeksi  ini  banyak ditemukan  pada  penduduk  dengan sosial ekonomi yang rendah, serta berhubungan dengan rendahnya  higienitas  (Sofyan et  al .,  2022).
Penyakit ptyriasis  versicolor sendiri  termasuk dalam  infeksi  oportunistik  (Vandeputte et  al .,
2012).
Malassezia  furfur merupakan  salah  satu spesies lipofilik dan dimorfik menular.
Organisme  ini  dapat  memiliki  dua  struktur, terutama bentuk yeast dan mold. Saat menginvasi jaringan,  jamur M.  furfur berbentuk  miselium, yaitu  bentuk mold (Sugawara  dan  Nikaido, 2016).
Patogenesis  jamur M.  furfur dimulai  saat jamur mengenai kulit manusia. Awalnya, infeksi ini bermanifestasi sebagai sel khamir, yang akan berubah  menjadi  patogen  setelah  menjadi miselium  dan  mengakibatkan  timbulnya  lesi (Sihombing dan Saraswati, 2018) . Perkembangan  ini  dipicu  oleh  keadaan  yang berbeda,  termasuk  kelembaban  dan  suhu  yang tinggi,  keringat  berlebihan,  dan  keadaan imunosupresi  (Gupta  dan  Foley,  2015).      Lesi hipopigmentasi  disebabkan  karena  adanya  asam azaleat yaitu asam dikarboksilat yang diproduksi oleh jamur  dari genus Malassezia , yang bersifat menghambat  enzim  tyrosinase  dalam  produksi melanin (Gaitanis et  al .,  2012) .  Jamur  dari genus Malassezia juga memproduksi pityriacitrin yang  dapat  mengabsorbi  sinar  ultraviolet sehingga membuat jamur M. furfur lebih resisten terhadap sinar matahari (Bramono dan Budimulja, 2013).
Infeksi ptyriasis versicolor  dapat  diterapi dengan obat kimia. Antijamur yang bekerja pada membran sterol sel jamur adalah jenis antijamur yang  sering  digunakan  dalam  praktik  klinis, diantaranya adalah obat golongan azol, polyenes, dan alilamin. (Minarni dkk, 2020)
Obat  antijamur  yang  biasa digunakan  untuk infeksi akibat M.  furfur adalah  obat  golongan azol, diantaranya ketokonazol,  itrakonazol, klotrimazol,  mikonazol,  dan  flukonazol.  Obat- obat  tersebut, terutama  ketokonazol  dapat mempunyai  efek  samping  berupa  mual,  diare, kembung,  hingga  bersifat  hepatotoksik.  Selain itu, penggunaan obat antijamur yang tidak tepat juga  dapat  menyebabkan  peningkatan  resistensi (Tanu,  2011). Oleh  sebab  itu,  diperlukan alternatif  antijamur  dari  bahan  alami  untuk mengurangi  kejadian  efek  samping  yang  dapat terjadi.  Salah  satu  yang  menarik  untuk  diteliti adalah penggunaan cuka buah sebagai antijamur.
Cuka  buah  merupakan  salah  satu  hasil bioteknologi  pemanfaatan  buah  yang  hasil panennya berlimpah. Bentuk cuka termasuk salah satu  hasil  olahan  buah  yang  tidak  mengubah kualitas produk akhir (María Luzón-Quintana et al ., 2021) . Salah satu cuka buah, yaitu cuka apel telah teruji bermanfaat pada hambatan jamur M.
furfur secara in  vitro (Itsa  dkk,  2018) .  Kadar hambat cuka apel yang disebutkan pada beberapa penelitian  diantaranya  adalah  konsentrasi  50% (diameter  zona  hambat  23  mm) (Arun et  al .,
2019) dan  konsentrasi  75%  (diameter  zona hambat 11,75 mm) (Syafina et al ., 2020).
Buah lain yang dapat dikembangkan sebagai antijamur  adalah  nanas.  E kstrak  kulit  nanas diketahui dapat menghambat pertumbuhan jamur M.  furfur dengan  kadar  hambat  minimal  12,5% (Rahmasari,  2018),  namun  hingga  saat ini  uji efektivitas cuka nanas terhadap M. furfur belum pernah dilakukan. Buah nanas jika dibandingkan dengan  apel,  memiliki  keunggulan lebih  mudah didapatkan  karena  mudah  untuk  tumbuh  di Indonesia  dengan  iklim  tropis  (Bartholomew et al ., 2018).
Berdasarkan  uraian  diatas, diperlukan penelitian  untuk  melakukan  uji  aktivitas  cuka nanas  terhadap  pertumbuhan  jamur M.  furfur.
Penelitian ini juga  melakukan  analisis fitokimia kandungan  senyawa  yang  terdapat  pada  cuka nanas .

## METODE

## Jenis dan Obyek Penelitian
Penelitian ini adalah penelitian
eksperimental in  vitro dengan  rancangan the post-test  only  control  group  design. Obyek  uji
aktivitas cuka nanas adalah jamur M. furfur yang diperoleh  dari  Laboratorium  Mikrobiologi Fakultas  Kedokteran  Universitas  Diponegoro. Cuka nanas yang diuji adalah produk organik dari Vinega. Penelitian ini telah mendapat persetujuan komisi  etik  Fakultas  Kedokteran  Universitas Muhammadiyah Semarang dengan nomor 151/EC/FK/2021.
Uji Aktivitas Antijamur Cuka Nanas terhadap Jamur M. furfur
Uji kadar hambat minimal (KHM) dilakukan dengan metode two fold microdilution serta  pewarnaan Resazurin  Microplate  Assay (REMA). Konsentrasi cuka nanas (Vinega) yang digunakan adalah 4000,0 µg/mL; 2000,0 µg/mL; 1000,0  µg/mL;  500,0  µg/mL;  250,0  µg/mL; 125,0  µg/mL; dan  62,5  µg/mL.  Pemilihan konsentrasi  uji  berdasarkan  beberapa  penelitian yang  menyatakan  cuka  buah  secara  umum mempunyai aktivitas antimikroba pada konsentrasi 0,1 hingga 10% (Elhage et al ., 2021).
Pada  uji  aktivitas  antijamur  cuka  nanas, suspensi uji . M. furfur yang digunakan adalah 5 x 10 4 colony  forming  unit (cfu)/mL.  Setelah penambahan  cuka  nanas,  mikroplate  diinkubasi pada suhu 37  C selama 72 jam. Pembacaan hasil uji  dilakukan  dengan  pewarnaan  resazurin 0,025%  (Sigma  Aldrich). Resazurin  yang
berwarna  biru atau  ungu  dapat tereduksi menjadi  warna  merah  muda  akibat  adanya pertumbuhan mikroba (Guerin et al ., 2001). Uji KHM  dilakukan  selama  3  hari,  dengan masing-masing replikasi sebanyak 4 kali.
Untuk  memastikan  validitas  hasil  uji, digunakan  kontrol  antijamur  yang  terdiri  dari media Saboraud  Dextrose  Broth (SDB,  Merck Millipore) , biakan  jamur,  dan  ketokonazol (Phapros Tbk.) dengan konsentrasi 16,0 µg/mL; 8,0  µg/mL;  4,0  µg/mL;  2,0  µg/mL;  1,0  µg/mL; 0,5 µg/mL; dan 0,25 µg/mL. Uji KHM antijamur dilakukan dengan metode yang sama dengan uji KHM  cuka  nanas.  Selain  itu,  dilakukan  uji terhadap kontrol pertumbuhan berisi media SDB dan  biakan  jamur,  serta  kontrol  sterilitas  yang berisi media SDB dan cuka nanas.
Penentuan  nilai  Kadar  Hambat  Minimum (KBM)  ditentukan dengan  menggoreskan  1 ose (1 µL) dari masing-masing tabung hasil uji KHM ke media Sabouraud Dextrose Agar (SDA, Merck Millipore) . Biakan diinkubasi selama 72 jam pada suhu 37℃, selanjutnya dilakukan  perhitungan  koloni  jamur  dengan colony counter (Funke Gerber 8500).

## Analisis Fitokimia Cuka Nanas
Skrining  senyawa  flavonoid  dilakukan dengan memasukkan 1 mL cuka nanas ke dalam tabung  reaksi,  lalu  ditambahkan  1  g  serbuk Magnesium  (Merck)  dan  larutan  HCl  pekat (38%,  Merck).  Adanya  senyawa  flavonoid ditandai  dengan  perubahan  warna  larutan menjadi  warna  kuning,  jingga  atau  merah  bata (Wahid dan Safwan, 2020) . Untuk uji saponin, cuka nanas sebanyak 2 mL dimasukkan ke dalam tabung reaksi, lalu ditambahkan dengan air dan di kocok selama 10 menit. Senyawa positif saponin ditandai  dengan  adanya  buih  setinggi  1-10  cm yang tidak hilang (Natalia et al ., 2017). Analisis senyawa  tanin  dilakukan  dengan  mengambil  1 mL  cuka  ditambah  dengan  gelatin  1%  dalam NaCl.  Apabila  terbentuk  endapan  berwarna putih,  maka  sampel  mengandung  tannin. Pengujian terpenoid dilakukan dengan menambahkan  2  mL  cuka  nanas  dengan  3  tetes HCl  pekat  (Merck)  dan  1  tetes  H 2 SO 4 pekat (Merck).  Positif  terpenoid  terjadi  apabila terbentuk warna merah atau ungu pada sampe uji (Ergina et al. , 2014).

## Analisis data
Nilai  KHM  ditentukan  dari  konsentrasi terkecil cuka nanas untuk menghambat pertumbuhan  jamur M.  furfur .  Untuk  uji  KBM
dilakukan  dengan  melihat  konsentrasi  terkecil cuka  nanas  yang  menyebabkan  ketiadaan pertumbuhan  jamur M.  furfur pada  cawan  petri agar.  Uji  keeratan  hubungan  antara  konsentrasi cuka nanas dengan jumlah koloni jamur M. furfur dianalisis menggunakan uji regresi linier.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini didahului dengan uji fitokimia terhadap  cuka  buah  nanas.  Uji  fitokimia dilakukan untuk mengetahui kandungan golongan senyawa aktif yang terdapat pada cuka nanas.
Cuka  nanas  Vinega  positif  mengandung saponin  dan  tannin,  namun  tidak  mengandung senyawa  flavonoid  dan  terpenoid  ( Tabel  1 ).
Saponin  dan  tanin  diketahui  memiliki  aktivitas antijamur  melalui  perusakan  sterol  pada membran  sel.  Saponin  juga  dapat  menurunkan tegangan  permukaan  pada  membran  sterol  sel jamur hingga permeabilitasnya meningkat, cairan intraseluler  tertarik  keluar  hingga  akhirnya menghilangkan  nutrisi,  zat  metabolisme  dan protein  dalam  sel,  dan  sel  jamur  mengalami kematian  (Jalianto et  al. ,  2015).  Senyawa  tanin mampu menghambat biosintesis ergosterol yang merupakan  sterol  utama  penyusun  membran (Arifin dkk, 2018).
Tabel 1. Hasil Uji Fitokimia Cuka Nanas No Jenis Uji Fitokimia Rujukan Hasil Positif Hasil Uji Cuka Nanas 1. Uji Flavonoid Kuning, Jingga, atau Merah bata (-) Negatif 2. Uji Saponin Busa Stabil (+) Positif 3. Uji Tanin Terdapat Endapan Putih (+) Positif 4. Uji Terpenoid Terbentuk warna merah atau ungu (-) Negatif
Berdasarkan  uji  fitokimia,  cuka  nanas terdeteksi  golongan  senyawa  yang  mempunyai potensi  antijamur.  Setelah  dilakukan  uji  kadar hambat minimum menggunakan metode pewarnaan resazurin, didapatkan  hasil  bahwa cuka nanas tidak dapat menghambat pertumbuhan  jamur M.  furfur pada  konsentrasi uji terbesar (4000 µg/mL) ( Gambar 1 ).
Gambar 1. Hasil uji KHM cuka nanas dan ketokonazol terhadap pertumbuhan M. furfur menggunaan metode mikrodilusi pewarnaan resazurin.
Keterangan:
Sumuran B2-B8 dan C2-C8 adalah sumuran uji cuka nanas,  dengan  rincian  B2/C2  cuka  nanas  dengan
konsentrasi 4000 µg/mL; sumuran B3/C3 konsentrasi 2000  µg/mL;  sumuran  B4/C4  konsentrasi  1000 µg/mL;  sumuran  B5/C5  konsentrasi  500  µg/mL; sumuran  B6/C6  konsentrasi  250  µg/mL;  sumuran B7/C7  konsentrasi  125  µg/mL;  dan  sumuran  B8/C8 konsentrasi 62,5 µg/mL. Sumuran B9 dan C9 adalah kontrol sterilitas cuka nanas. Sumuran D2-D8 dan E2- E8  adalah  sumuran  uji  ketokonazol,  dengan  rincian D2/E2  ketokonazol  dengan  konsentrasi  16  µg/mL; sumuran D3/E3 konsentrasi 8 µg/mL; sumuran D4/E4 konsentrasi  4  µg/mL;  sumuran  D5/E5  konsentrasi  2 µg/mL;  sumuran  D6/E6  konsentrasi  1  µg/mL; sumuran D7/E7 konsentrasi 0,5 µg/mL; dan sumuran D8/E8 konsentrasi 0,25 µg/mL. Sumuran D9 dan E9 adalah kontrol sterilitas ketokonazol; B11 -E11 adalah kontrol pertumbuhan M. furfur ; F2-F5 adalah kontrol pelarut; dan G2-G5 adalah kontrol sterilitas media.
Ketokonazol  digunakan  sebagai  kontrol obat  positif.  Hasil  nilai  KHM  dari  kontrol  obat ketokonazol  adalah  0,25  µg/ml.  Nilai  KHM tersebut  menunjukkan  bahwa  isolat M.  furfur yang digunakan masih sensitif terhadap ketokonazol (Leong et al ., 2017).
Hasil  penelitian  uji  aktivitas  antijamur M. furfur menunjukkan  semua  konsentrasi  cuka nanas  tidak  dapat  menghambat  pertumbuhan jamur M.  furfur, ditunjukkan  dengan  perubahan warna  resazurin  dari  biru  keunguan  menjadi merah  muda.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  pada konsentrasi  cuka  nanas  tertinggi  masih  terdapat pertumbuhan jamur M. furfur. Hasil penelitian ini berbeda  dengan  penelitian  sebelumnya  yang menggunakan  cuka  apel.  Penelitian  yang dilakukan oleh Syafina et al . (2020),
menunjukkan bahwa cuka apel mampu menghambat dan membunuh jamur M. furfur .
Perbedaan hasil uji cuka nanas dengan cuka apel dapat terjadi karena adanya perbedaan jenis senyawa antijamur yang terkandung di dalamnya. Cuka  nanas  pada  penelitian  ini  hanya  positif memiliki kandungan senyawa saponin dan tanin, sedangkan  pada  cuka  apel  selain  kedua  jenis senyawa  tersebut,  juga  mengandung  senyawa flavonoid, alkaloid, dan glikosida (Syafina et al .,
2020).  Perbedaan  konsentrasi  cuka  dan  metode penelitian  uji  KHM  yang  digunakan  juga  dapat mempengaruhi  perbedaan  hasil  dari  aktivitas cuka  nanas  dan  cuka  apel. Pada  penelitian Syafina et  al .  (2020),  metode  uji  KHM  yang digunakan  adalah  metode  difusi  cakram.  Kadar hambat  minimal  cuka  apel  untuk  menghambat pertumbuhan M.  furfur pada  penelitian  tersebut adalah 25% b/v (setara dengan 250000 µg/mL), atau  dapat  dikatakan  62,5  kali  lebih  besar dibandingkan  konsentrasi  uji  terbesar  pada penelitian ini (4000 µg/mL).
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini,  jika dibandingkan  dengan  hasil  uji  fitokimia  cuka nanas pada penelitian Praveena dan Estherlydya (2014), cuka nanas pada penelitian tersebut selain mengandung  saponin  dan tannin juga  terdeteksi adanya  senyawa  potensi  antijamur  lain  seperti flavonoid dan terpenoid (Praveena dan Estherlydia,  2014).  Hal  ini  salah  satunya  dapat
disebabkan karena perbedaan metode pembuatan cuka. Proses pengolahan buah menjadi cuka ada beberapa  tahap.  Setiap  tahap  pengolahan  dapat berdampak pada penurunan kadar total flavonoid dari produk yang dihasilkan (Bakir et al ., 2016).
Pada  penelitian  Praveena  dan  Estherlydya (2014), cuka dibuat menggunakan kulit dan buah nanas  yang  di  fermentasikan  secara  mandiri, sedangkan  pada  penelitian  ini  cuka  nanas  tidak diketahui proses pembuatannya.
Setelah uji kadar hambat minimal, penelitian ini  dilanjutkan  dengan  melakukan  uji  kadar bunuh minimum cuka nanas terhadap pertumbuhan jamur M. furfur. Hasil perhitungan koloni jamur pada setiap konsentrasi cuka nanas dan  obat  ketokonazol  digunakan  untuk  melihat hubungan  peningkatan  dosis  dengan  aktivitas bunuh jamur M. furfur .
Tabel 2. Hasil Perhitungan Rerata ± Standar
Deviasi (SD) Log Koloni Jamur M.furfur Setelah Perlakuan Cuka Nanas No. Konsentrasi Cuka Nanas (µg/mL) Nilai Rerata ± SD Log Koloni M. furfur 1. 4000 5,58 ± 0,108 2. 2000 5,58 ± 0,233 3. 1000 5,72 ± 0,067 4. 500 5,78 ± 0,098 5. 250 5,87 ± 0,043 6. 125 5,92 ± 0,031 7. 62,5 5,99 ± 0,031 8. Kontrol Pertumbuhan 6.23 ± 0,057
Berdasarkan  hasil  uji  KBM,  konsentrasi 4000  µg/mL  cuka  nanas  belum  mampu
membunuh  jamur M.  furfur .  Hasil  penelitian menunjukkan  peningkatan  konsentrasi  cuka nanas  menyebabkan  penurunan  jumlah  log koloni  jamur.  Rata-  rata  log  jumlah  koloni M. furfur yang  tertinggi  adalah  5,99  yaitu  pada konsentrasi cuka nanas 62,5 µg/mL, dan terendah adalah 5,58 yaitu pada konsentrasi 4000 µg/mL ( Tabel 2 ).
Selanjutnya  dilakukan  uji  regresi  linier sederhana antara konsentrasi cuka nanas dengan log jumlah koloni jamur M. furfur. Hasil dari uji korelasi  diperoleh  persamaan  garis  regresi  y=  - 0,000097x  +  5,88.  Hasil  nilai  korelasi determinasi  (R 2 )  didapatkan  0,729  =  72,9  %
(p=0,000).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  variasi variabel  pertumbuhan  jamur M.  furfur dapat dijelaskan  oleh  variabel  konsentrasi  cuka  nanas sebesar 72,9 % ( Gambar 2 ).
Hasil  uji  regresi  linier  menjelaskan  bahwa terdapat  keeratan  hubungan  antara  konsentrasi cuka nanas dengan pertumbuhan jamur M. furfur .
Persamaan  kurva  regresi  linear  tersebut  dapat digunakan  peneliti  lain  untuk  dasar  penetapan konsentrasi  uji  cuka  nanas  dalam  menghambat pertumbuhan M. furfur atau secara umum untuk uji aktivitas antijamur lainnya.
Nilai  konsentrasi  suspensi  jamur  uji  (y) dapat  dihitung  untuk  mendapatkan  perkiraan
nilai  konsentrasi  cuka  nanas  (x).  Misalnya diinginkan  penurunan  jumlah  koloni  sebesar  90 %  dari  jumlah  suspensi  jamur  awal  5  x  10 4 cfu/mL  (nilai  y),  maka  akan  didapatkan  nilai konsentrasi  cuka  nanas  (nilai  x)  sebesar  22474 µg/mL  atau  2,25%  (b/v).  Konsentrasi  tersebut dapat digunakan oleh peneliti lain sebagai dasar penentuan  dosis  antijamur  lainnya,  namun peningkatan konsentrasi cuka nanas untuk terapi infeksi  topikal pytyriasis  versicolor atau antijamur  perlu  memperhatikan  resiko  efek samping.  Cuka  nanas  diketahui  mengandung asam  asetat  (Samad et  al .,  2016).  Peningkatan konsentrasi  asam  asetat  berpotensi  toksik  pada kulit.  Asam  asetat  pada  cuka  diketahui  dapat menyebabkan  resiko  kulit  terbakar  dan  eritema terutama penggunaan oleh anak-anak (Elhage et al ., 2021).
Gambar  2. Kurva  regresi  linier  antara  konsentrasi cuka nanas dengan log jumlah koloni jamur M. furfur.
y = --0,000097x + 5,8858 R² = 0,7296 5.4 5.5 5.6 5.7 5.8 5.9 6 6.1 0 1000 2000 3000 4000 5000 Re ra ta L o g Kolo n i J amu r
Konsentrasi Cuka Nanas
Tabel 3. Hasil perhitungan rerata ± standar deviasi (SD) log koloni jamur M. furfur setelah
mendapat perlakuan ketokonazol No. Konsentrasi ketokonazol (µg/mL) Nilai rerata ± SD Log Koloni M. furfur 1. 16 0 ± 0 2. 8 1,15 ± 2,30 3. 4 0 ± 0 4. 2 0 ± 0 5. 1 2,50 ± 2,90 6. 0,5 3,68 ± 2,49 7. 0,25 3,86  ± 2,57
Hasil  uji  KBM  kontrol  obat  ketokonazol, diketahui  bahwa  ketokonazol  mulai  membunuh M.  furfur pada  konsentrasi  terendah 2  µg/mL ( Tabel  3 ).  Namun  pada  konsentrasi  8  µg/mL kembali  timbul  pertumbuhan  koloni  jamur M. furfur. Hal  tersebut  dapat  disebabkan  karena adanya  fenomena  toleransi  antijamur,  yaitu  sub populasi  sel  jamur  yang  dapat  tumbuh  lambat pada konsentrasi di atas nilai KHM (Fisher et al .,
2022).  Mekanisme  toleransi  tersebut  dapat disebabkan  karena  respons  fisiologis  yang muncul  secara  heterogen  di  antara  populasi  sel, seperti  misalnya  pada  beberapa  sel Candida albicans yang dapat melakukan sintesis sphingolipid  sebagai  mekanisme  bertahan  dari penipisan  ergosterol  yang  diinduksi  azol (Berman and Krysan, 2020). Fenomena toleransi ini  berbeda  dengan  mekanisme  resistensi  pada antijamur  golongan  azol.  Jamur  mempunyai mekanisme resisten terhadap antijamur golongan azol karena adanya ekspresi pompa effluks, yang
menghasilkan peningkatan transportasi antijamur ke luar sel (Hokken et al ., 2019).
Hasil  dari  uji  korelasi  antara  konsentrasi obat ketokonazol dengan log koloni jumlah jamur M.  furfur adalah  persamaan  garis  regresi  y=  - 0,184x  +  2,43.  Nilai  korelasi  determinasi  (R 2 ) didapatkan  0,175  =17,5%  (p=0,027).  Hal  ini menunjukkan bahwa variasi variabel pertumbuhan jamur M. furfur tidak berhubungan dengan penambahan konsentrasi ketokonazol.

## SIMPULAN DAN SARAN
Pada  uji  fitokimia  cuka  nanas  pada penelitian ini, ditemukan golongan senyawa yang berpotensi  sebagai  antijamur  yaitu  saponin  dan tannin.  Konsentrasi  cuka  nanas  terbesar  yaitu 4000 µg/mL belum dapat menghambat pertumbuhan  atau  membunuh  jamur M.  furfur, oleh  sebab  itu,  disimpulkan  pada  penelitian  ini tidak ditemukan nilai KHM dan KBM cuka buah nanas terhadap pertumbuhan jamur M. furfur .
Berdasarkan hasil analisis KBM menggunakan  persamaan  regresi,  ditemukan adanya  hubungan  yang  kuat  antara  konsentrasi cuka nanas terhadap pertumbuhan M. furfur (R 2 ) 0,729  (p=0,000)  dengan  persamaan  y=  - 0,000097x + 5,88. Persamaan garis regresi linear tersebut dapat digunakan oleh peneliti lain untuk menentukan  konsentrasi  uji  cuka  nanas  dalam
menghambat pertumbuhan M. furfur atau sebagai antijamur lainnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Arifin,  Z.,  Khotimah,  S.,  dan  Rahmayanti,  S. 2018.  Aktivitas  Antijamur  Ekstrak  Etil Asetat Daun Mangga Bacang (Mangifera foetida L.) terhadap Candida albicans  secara  In  Vitro. Jurnal Cerebellum . Vol. 4 (3). Pp= 1106–19.
Arun,  P.  P.  S.,  Vineetha,  Y.,  Waheed,  M.,  and Ravikanth,  K.  2019.  Quantification  of the minimum amount of lemon juice and apple  cider  vinegar  required  for  the growth  inhibition  of  dandruff  causing fungi  Malassezia  furfur. International Journal  of  Scientific  Research  in Biological Sciences . Vol. 6 (2). Pp= 144–
7.
Bakir,  S.,  Toydemir,  G.,  Boyacioglu,  D., Beekwilder, J., and Capanoglu, E. 2016. Fruit antioxidants during vinegar processing:  Changes  in  content  and  in vitro  bio-accessibility. International Journal  of  Molecular  Sciences .  Vol.
17 (10).
Bartholomew,  D.,  Pull,  R.,  and  Rohrbach,  K. 2018. The pineapple botany, production and uses (2nd ed.). CABI.
Berman,  J.,  and  Krysan,  D.  J.  2020.  Drug resistance  and  tolerance  in  fungi.  In Nature Reviews Microbiology (Vol. 18,
Issue 6. Pp= 319–31. Nature Research.
Bramono,  K.,  dan  Budimulja,  U.  2013.
Dermatomikosis Suoerfisialis (S. Suyoso,  W.  Indriatmi,  L.  Ramali,  S. Widaty, dan E. Ervianti, Eds.; 2nd ed.). FKUI.
Elhage,  K.  G.,  st.  Claire,  K.,  and  Daveluy,  S. 2021. Acetic acid and the skin: a review of vinegar in dermatology. In
International  Journal  of  Dermatology .
John Wiley and Sons Inc.
Ergina, Nuryanti, S., dan Pursitasari, I. D. 2014. Uji Kualitatif Senyawa Metabolit
Sekunder  pada  Daun  Palado  yang Diekstrasi  dengan  Pelarut  Air  dan Etanol. Akademika  Kimia .  Vol. 3 (3).
Pp= 165–72.
Fisher, M. C., Alastruey-Izquierdo, A., Berman, J., Bicanic, T., Bignell, E. M., Bowyer, P.,  Bromley,  M.,  Brüggemann,  R., Garber, G., Cornely, O. A., Gurr, S. J., Harrison, T. S., Kuijper, E., Rhodes, J., Sheppard,  D.  C.,  Warris,  A.,  White,  P. L., Xu, J., Zwaan, B., and Verweij, P. E. 2022.  Tackling  the  emerging  threat  of antifungal resistance to human health. In Nature  Reviews  Microbiology .  Nature Research.
Gaitanis,  G.,  Magiatis,  P.,  Hantschke,  M.,
Bassukas, I. D., and Velegraki, A. 2012.
The  Malassezia  genus  in  skin  and systemic diseases.
Clinical Microbiology Reviews . Vol. 25 (1). Pp=
106–141.
Guerin,  T.  F.,  Mondido,  M.,  Mcclenn,  B.,  and Peasley,  B.  2001. Application  of resazurin  for  estimating  abundance  of contaminant-degrading micro- organisms .
Gupta, A. K., and Foley, K. A. 2015. Antifungal treatment  for  pityriasis  versicolor.
Journal of Fungi , 1 (1).  Pp= 13–29.
Hokken, M. W. J., Zwaan, B. J., Melchers, W. J. G., and Verweij, P. E. 2019. Facilitators of  adaptation  and  antifungal  resistance mechanisms in clinically relevant fungi. In Fungal  Genetics  and  Biology .  Vol. 132. Academic Press Inc.
Tanu,  I.  2011.  dalam Farmakologi  dan  Terapi FK UI 5 th ed. Gaya Baru, Jakarta.
Itsa,  N.  S.,  Sukohar,  A.,  dan  Anggraini,  D.  I. 2018.  Pemanfaatan  Cuka  Sari  Apel Sebagai  Terapi  Antifungi  Terhadap Infeksi  Candida  albicans  (Kandidiasis). Majority . Pp= 290–5.
Jalianto,  Khotimah,  S.,  dan  Raharjo,  W.  2015. Uji  Aktivitas  Antijamur  Ekstrak  Etanol Biji Buah Langsat (Lansium domesticum
Corr.) Terhadap Jamur Candida
albicans  Secara  In  Vitro .  Universitas Tanjungpura Pontianak.
Praveena,  J.R.,  and  Estherlydia,  D.  2014.
Comparative  study  of  phytochemical screening  and  antioxidant  capacities  of vinegar  made  from  peel  and  fruit  of pineapple (Ananas comosus L.). International  Journal  of  Pharma  and Bio  Sciences .  Vol. 5 (4).  Pp=  B394–
B403.
Leong,  C.,  Buttafuoco,  A.,  Glatz,  M.,  and Bosshard,  P.  P.  2017.  Antifungal Susceptibility  Testing  of  Malassezia spp.  with  an  Optimized  Colorimetric Broth Microdilution Method. Journal of Clinical  Microbiology . Vol. 55 (6).  Pp= 1883–93.
María  Luzón-Quintana,  L.,  Castro,  R.,  and Durán-Guerrero, E. 2021. Biotechnological  Processes  in  Fruit Vinegar Production .
Minarni, A., Widarti, W., dan Rahman, R. 2020. Uji  Daya  Hambat  Beberapa  Jenis  Obat Antijamur  Pada  Jamur  Yang  Di  Isolasi Dari  Kuku  Kaki. Jurnal  Media  Analis Kesehatan . Vol. 11 (2). P= 119.
Mustofa, A. 2014. Prevalensi Dan Faktor Resiko Terjadinya  Pityriasis  Versicolor  Pada Polisi  Lalu  Lintas  Kota  Semarang .
Universitas Diponegoro.
Natalia,  D.,  Rahmayanti,  S.,  dan  Aisyah.  2017. Uji  Aktivitas  Antijamur  Ekstrak  Etanol Umbi  Bawang  Dayak  (Eleutherine americana (Aubl.) Merr. Ex K. Heyne.) terhadap  Malassezia  furfur  secara  In Vitro. Jurnal Untan . Vol. 5 (1).
Wahid,  A.  R.,  dan  Safwan.  2020.  Skrining Fitokimia Senyawa Metabolit Sekunder Terhadap  Ekstrak  Tanaman  Ranting Patah  Tulang  (Euphorbia  tirucalli  L.). Jurnal Ilmu Kefarmasian . Vol. 1 (1).
Rahmasari,  D.  S.  2018. Pengaruh  Pemberian Ekstrak Kulit Nanas (Ananas Comosus) Terhadap  Pertumbuhan  Koloni  Jamur
Malassezia  Furfur  Secara  In  Vitro [Universitas Muhammadiyah Malang]. Rahmawati, A., dan Rasiyanto, E. 2019. Potensi Estrak Daun Miana (Coleus atropurpureus) Menghambat Pertumbuhan  Malassezia  furfur  pada Penderita  Pityriasis  versicolor. Medula . Vol. 6 (3). Pp= 627–634.
Samad,  A.,  Azlan,  A.,  and  Ismail,  A.  2016. Therapeutic  effects  of  vinegar:  A review.  In Current  Opinion  in  Food Science .  Vol.  8.  Pp=  56–61.  Elsevier Ltd.
Sihombing,  M.  A.,  dan  Saraswati,  I.  2018.  Uji Efektivitas  Antijamur  Ekstrak  Biji Pepaya  (Carica  Papaya  L.)  Terhadap Pertumbuhan  Malassezia  Furfur  Secara In  Vitro. Diponegoro  Medical  Journal .
Vol. 7 (2) Pp= 724–732.
Sofyan, A., Hikmah Buchair, N., Ilmu, B., Kulit, K.,  Kelamin,  D.,  Kedokteran,  F.,  dan Tadulako,  U.  2022. Preventif:  Jurnal Kesehatan  Masyarakat  Penyakit  Kulit Dan  Kelamin  Akibat  Infeksi  Jamur  Di Poliklinik  RSUD  Undata  Palu  Tahun 2013-2021 . Vol. 13 . Pp= 384–392.
Sugawara,  E.,  dan  Nikaido,  H.  2016. Ilmu Penyakit Kulit dan Kelamin (Sp. K. Dr. dr.  Sri  Linuwih  SW  Menaldi,  Sp.  K. Prof.  dr.  Kusmarinah  Bramono,  PhD, dan  Sp.  K.  Dr.  dr.  Wresti  lndriatmi, M.Epid, Eds.; 7th ed., Vol. 58, Issue 12). Badan  Penerbit  Fakultas  Kedokteran Universitas Indonesia.
Syafina,  B.  S.,  Zulfa,  F.,  dan  Simanjuntak,  K.
2020.  Uji  Efektivitas  Cuka  Apel Terhadap Pertumbuhan Malassezia furfur  Secara  In  Vitro  Dengan  Metode Difusi Perforasi. Seminar Nasional Riset Kedokteran . Pp= 202–207.
Vandeputte,  P.,  Ferrari,  S.,  and  Coste,  A.  T. 2012.  Antifungal  resistance  and  new strategies  to  control  fungal  infections. International  Journal  of  Microbiology ,
2012 . Pp= 1–26