## 1. Pendahuluan
Tape  merupakan  panganan  tradisional khas  Indonesia,  berasal  dari  singkong  yang d i f e r m e n t a s i k a n   d e n g a n   r a g i ( Saccharomyces  cerevisiae )  (Rukmana, 1997).  Hasil  fermentasi  dari  mikroba tersebut  adalah  etanol  (C H OH)  yang 2 5 merupakan alkohol dengan dua rantai karbon dan  satu  gugus  hidroksil  (-OH).  Hasanah (2008)  melaporkan  bahwa  lama  fermentasi pada  tape  dapat  berdampak  terhadap  kadar alkohol,  dimana  kadar  alkohol  mencapai 11,81% setelah 2 hari fermentasi. Indrayani dkk.,  (2008)  melaporkan  bahwa  konsumsi alkohol  dapat  menurunkan  kerusakan  pada hati  tikus  yang  terinduksi  parasetamol, berupa penurunan kadar alanin transaminase (ALT) dan aspartat transaminase (AST).
Hati merupakan organ terbesar dan organ
pemetabolisme  yang  paling  kompleks  di dalam  tubuh.  Fungsi  hati  sangat  penting terutama  untuk  melaksanakan  fungsi  vital dan  mengatur  homeostasis  dalam  tubuh (Ward dan Daly, 2000). Dalam hubungannya dengan fungsi hati bagi kelangsungan hidup manusia,  maka  organ  hati  perlu  mendapat perhatian  serius.  Penyakit  hati  dapat disebabkan  antara  lain  oleh  obat  atau hepatotoksin,  infeksi  virus  dan  reaksi imunogenik  (Williamson,  Okpako  dan Evans,  1996). World  Health  Organization (WHO)  mencatat  sekitar  180  juta  manusia terinfeksi  virus  hepatitis  C,  dengan  angka kejadian sebesar 3% (WHO, 2009).
Salah satu senyawa yang dapat digunakan sebagai senyawa model untuk menimbulkan kerusakan  pada  hati  adalah  karbon tetraklorida  (Janakat  dan  Al-Merie,  2003).
JURNAL FARMASI SAINS DAN KOMUNITAS, November 2013, hlm. 95-100
ISSN : 1693-5683

## POTENSI TAPE SEBAGAI PANGANAN TRADISIONAL TERHADAP EFEK HEPATOTOKSIK TIKUS TERINDUKSI KARBON-TETRAKLORIDA

## GIDION KRISNADI YOSEPH, CHRISTIANA DESTIA ANGGRAENI, NI LUH PUTU DIAN PRAWITA PUTRI, ABEDNEGO YOGA DWI PRASETYO, PHEBE HENDRA

## Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta
Abstract: The purpose of this study was to determine the effect of “Tape” that has an alcoholic compound, to the hepatotoxic effect in the rat induced Carbon Tetrachloride. And also determine which fermentation time of the Tape can give effect to the hepatotoxic in the rat induced Carbon tetrachloride. Healthy rats were randomly divided into 7 groups of 5 animals in each. Group 1 received carbon tetrachloride 2ml/kgBW treated intraperitoneal. Group 2-4 were given “Tape” suspension 18g/kgBW once daily for 6 days with different fermentation time (3, 5, 7 days). Group 5-7 were given “Tape” suspension 18g/KgBW once daily  for 6 days with different fermentation th
time  and  carbon  tetrachloride  was  given    on  the  7   day.  Blood  sample  from  all  groups  was obtained  by  sinus  orbitalis  after  24  hours  application  for  estimation  the  serum  level  of transaminase. The result showed that “Tape” suspension had a potential effect to reduce the hepatotoxicity induced by carbon tetrachloride. “Tape” suspension with 5 days fermentation was significantly decreased serum level of transaminase (P<0,05) upon carbon tetrachloride- induced hepatic damage in rats.
Keywords: hepatotoxicity, tape, fermentation time,carbon tetrachloride
Senyawa  CCl   akan  dimetabolisme  di  hati 4 oleh enzim sitokrom P450 dan menghasilkan metabolit aktif berupa radikal bebas karbon triklorometil  yang  bersifat  toksik.  Senyawa radikal  bebas  ini  menyebabkan  peroksidasi lipid  yang  memicu  kerusakan  membran  sel dan  mitokondria,  sehingga  substansi- substansi  yang  terdapat  pada  sitoplasma seperti enzim ALT dan AST masuk ke aliran darah..  Selain  itu,  radikal  bebas  ini  dapat mengganggu  produksi  lipoprotein  yang berfungsi  membawa  lipid  keluar  dari  hati. Akibatnya terjadi penumpukan lemak di hati yang dikenal sebagai steatosis (Johnston dan Kroening,  1998;  Timbrell,  2008;  Wahyuni, 2005; Arhoghro et.al., 2009).
Berdasarkan  uraian  tersebut,  maka  perlu dilakukan penelitian pengaruh alkohol yang terkandung  dalam  tape  terhadap  efek hepatotoksik  pada  tikus  terinduksi  karbon tetraklorida.

## 2. Metode Penelitian
Bahan yang digunakan dalam pe-nelitian ini adalah tape, larutan CMC-Na 1%, karbon tetraklorida, minyak zaitun ( olive oil ), tikus jantan (galur Wistar).
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah blender (Laboratorium Far-makologi- Toksikologi, USD), spuit injek-si oral, spuit injeksi  intraperitoneal,  dan  alat-alat  gelas ( Pyrex ).

## 2.1. Pembuatan Suspensi Tape
S u s p e n s i   Ta p e   d i b u a t   d e n g a n mencampurkan  50  g  tape  ke  dalam  50  ml CMC-Na  1%  dengan  bantuan blender
sehingga  diperoleh  konsentrasi  suspensi sebesar  100%.  Selanjutnya  suspensi  ini dipejankan pada hewan uji tikus.
2.2. Pembuatan Toksin Karbon Tetraklorida
Menurut  Janakat  dan Al-Merie  (2003) dosis  karbon  tetraklorida  yang  mampu menginduksi  terjadinya  kerusakan  hepar adalah  2  ml/kgBB  diberikan  secara  in- traperitoneal.  Toksin  karbon  tetraklorida dibuat dengan mencampurkan 50 ml karbon tetraklorida  dengan  100  ml  minyak  zaitun ( olive  oil )  sehingga  diperoleh  konsentrasi 50%.

## 2.3. Pengelompokkan  dan  Perlakuan Hewan Uji
Penelitian  ini  menggunakan  35  ekor tikus jantan (galur Wistar) dibagi secara acak ke dalam 7 kelompok perlakuan. Kelompok 1 (K1)  diberi  karbon  tetraklorida  (CCl )  2 4 ml/kgBB secara in-traperitoneal. Kelompok 2-4 merupakan kelompok kontrol tape (K2, K3,  K4),  diberi  suspensi  tape  dosis 18g/kgBB  selama  6  hari  dengan  waktu fermentasi tape yang berbeda (3, 5, 7 hari). Kelom-pok  5-7  merupakan  kelompok perlakuan  (P5,  P6,  P7)  diberi  suspensi  tape dosis 18g/KgBB selama 6 hari dengan waktu fermentasi  yang  berbeda  dan  diinduksi dengan  karbon  tetraklorida  pada  hari  ke-7. Pada  jam  ke-24  setelah  pemberian  karbon tetraklorida,  semua  kelompok  diambil darahnya  pada  daerah  sinus  orbitalis  mata untuk  penetapan  aktivitas  ALT  dan  AST. Untuk  kontrol  tape  pengambilan  darah dilakukan 24 jam setelah pemejanan tape hari ke-6.
GIDION KRISNADI YOSEPH, dkk. 96

## 2.4. Analisis data
Data  aktivitas  serum  ALT  dan  AST dianalisis  dengan Kolmogorov-Smirnov untuk mengetahui distribusi data dan analisis varian  untuk  melihat  homogenitas  varian antar  kelompoknya  sabagai  syarat  analisis parametrik.  Selanjutnya  di-lakukan  analisis dengan Kruskal  Wallis untuk  mengetahui perbedaan  aktivitas  serum  ALT-AST  antar kelompok. Kemudian dilanjutkan uji dengan Mann Whitney untuk melihat perbedaan tiap kelompok.    Hasilnya  dihitung  sebagai presentase  hepatoprotektif.  Secara  umum, persen efek hepatoprotektif dihitung dengan rumus :

## 3. Hasil Dan Pembahasan
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh  pemberian  tape  serta  pengaruh lama  fermentasi  tape  terhadap  efek hepatotoksik  pada  tikus  terinduksi  karbon tetraklorida  dengan  melihat  aktivitas  serum ALT dan AST.

## 3.1. Uji Hepatotoksin
Tahap  awal  dalam  proses  penelitian  ini adalah menentukan waktu pencuplikan darah h e w a n   u j i   y a n g   s e b e l u m n y a   t e l a h diintervensi  dengan  pemberian  senyawa model  yang  memodulasi  terjadinya hepatotoksik yaitu karbon tetraklorida. Karbon tetraklorida diinduksikan melalui rute intraperitoneal dengan dosis 2 ml/kgBB.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa karbon tetraklorida mampu menginduksi terjadinya kerusakan hati (Gambar 1 dan 2). Pengukuran jam ke-24 setelah induksi karbon tetraklorida memberikan pe-
ningkatan serum ALT dan AST secara signifikan bila dibandingkan dengan jam ke-0.
Hasil  yang  diperoleh  sudah  sesuai dengan  pustaka  acuan  bahwa  induksi  CCl 4 dosis  2  ml/kgBB  secara  intraperitoneal mampu  meningkatkan  aktivitas  serum ALT dan AST  3-5  kali  lipat  dari  kadar  awalnya (Zimmerman, 1999).

## 3.2. Kontrol Tape
Pengukuran aktivitas ALT dan AST pada kelompok  kontrol  tape  bertujuan  untuk memastikan bahwa pemejanan tape selama 6 hari  tidak  memberikan  peningkatan  pada aktivitas ALT dan AST yang berdampak pada
(aktivitas ALT serum kontrol hepatotoksin) - (aktivitas ALT serum perlakuan) (aktivitas ALT serum kontrol hepatotoksin)
x100%
Gambar 1. Diagram Batang Rata-Rata Aktivitas
Serum ALT pada Tikus Terinduksi CCl  2ml/kgBB
4
Gambar 2. Diagram Batang Rata-Rata Aktivitas Serum AST pada Tikus Terinduksi CCl 2ml/kgBB
4 GIDION KRISNADI YOSEPH, dkk. Jurnal Farmasi Sains dan Komunitas 97
kerusakan  hati.  Hasil  pengukuran  aktivitas serum ALT/AST kontrol tape menunjukkan bahwa  tape  tidak  menginduksi  kenaikan aktivitas serum ALT dan AST.
Pada  gambar  3  dan  4  menunjukkan bahwa  kontrol  tape  dengan  variasi  waktu fermentasi  (3,  5  dan  7  hari)  memiliki  nilai aktivitas  serum  ALT  dan  AST  yang  lebih kecil  dibandingkan  dengan  nilai  aktivitas serum ALT/AST kontrol CCl . Berdasarkan 4 hal  tersebut,  maka  tape  dengan  berbagai variasi waktu fermentasi tidak menginduksi kenaikkan aktivitas serum ALT maupun AST.

## 3.3. Perlakuan Tape
Hasil  perlakuan  tape  pada  tikus  yang diinduksi  CCl   (P5,  P6,  P7)  menunjukkan,
4 pemberian tape dengan lama fermentasi 3, 5, dan 7 hari memiliki pengaruh terhadap tikus yang  diinduksi  hepatotoksin,  karbon tetraklorida.  Pengaruh  tape  berupa kemampuan  menurunkan  potensi  karbon tetraklorida  yang  menginduksi  terjadinya kerusakan hati, dilihat dari penurunan kadar ALT  dan  AST  serum  dibanding  kelompok kontrol  karbon  tetraklorida.  Aktivitas  ALT
pada  tikus  yang  diberi  perlakuan  tape fermentasi  hari  ke-3  dan  7  menunjukkan perbedaan  yang  tidak  bermakna  terhadap kelompok  perlakuan  karbon  tetraklorida. Perlakuan tape dengan lama fermentasi 5 hari mem-berikan  penurunan  aktivitas ALT  dan AST yang signifikan terhadap kontrol karbon tetraklorida.
Berdasarkan  hal  tersebut,  maka kelompok  perlakuan  tape  dengan  waktu fermentasi  5  hari  memiliki  potensi  proteksi yang lebih besar dalam mencegah terjadinya kerusakan  hati.  Hal  ini  dilihat  dari kemampuan  reduksi  kenaikan  aktivitas serum ALT/AST yang seharusnya meningkat ketika  hewan  uji  diinduksi  oleh  karbon tetraklorida  sebagai  senyawa  model penginduksi terjadinya kerusakan hati.
Potensi proteksi tape terhadap CCl  yang 4 menginduksi  hepatotoksik  disajikan  dalam %  hepatoprotektif  untuk  masing-masing waktu fermentasi (Tabel 1).
Perhitungan  persentase  efek  he- patoprotektif  didasarkan  pada  nilai  ALT karena lebih spesifik menggambarkan fungsi hati  daripada  AST.  Enzim  AST  terdapat dalam konsentrasi tinggi pada hati, pankreas, ginjal, paru paru, otot dan sel darah merah. ALT  juga  ditemukan  pada  jaringan  lain,
Kelompok perlakuan Efek hepatoprotektif (%) Tape fermentasi 3 hari 29,5 Tape fermentasi 5 hari 87,4 Tape fermentasi 7 hari 48,2 Gambar 3. Diagram Batang Rata-Rata Aktivitas Serum ALT
Tabel 1. Persentase efek hepatoprotektif perlakuan tape pada tikus terinduksi karbon tetraklorida
GIDION KRISNADI YOSEPH, dkk.
namun jumlah yang dihasilkan di hati lebih banyak,  sehingga  dapat  secara  spesifik menggambarkan  fungsi  hati  (North-Lewis, 2 0 0 8 ) .   B e r d a s a r k a n   n i l a i   e f e k hepatoprotektif  yang  dihasilkan  tiap kelompok  fermentasi  tape  (Tabel  1),  yang memiliki  persentase  paling  tinggi  adalah kelompok  tape  fermentasi  5  hari  sebesar 97,4%.  Adanya  efek  hepatoprotektif  dari tape,  dapat  disebabkan  dari  alkohol  yang dihasilkan. Hal ini sesuai dengan penelitian Indrayani  dkk.,  (2008)  yang  menyatakan bahwa konsumsi alkohol dapat menurunkan kerusakan  pada  hati  tikus  yang  terinduksi parasetamol, berupa penurunan kadar alanin t r a n s a m i n a s e   ( A LT )   d a n   a s p a r t a t transaminase (AST).

## 4.Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang dilakukan untuk membuktikan pengaruh tape
terhadap ketoksikan hati, disimpulkan bahwa tape  memiliki  pengaruh  terhadap  efek hepatotoksik  pada  tikus  terinduksi  karbon tetraklorida.
Waktu  fermentasi  tape  selama  5  hari memberikan pengaruh paling optimal dalam mereduksi terjadinya ketoksikan hati akibat induksi karbon tetraklorida. Potensi proteksi tape fermentasi 5 hari sebesar 87,4%.

## Ucapan Terima Kasih
Penulis  mengucapkan  terima  kasih kepada  Dirjen  DIKTI  melalui  PKMP  yang telah  membantu  dalam  pembiayaan penelitian  ini,  serta  semua  pihak  yang membantu dalam penelitian ini.

## Daftar Pustaka
Arhoghro, E.M., Ekpo, K.E., Ibeh, G.O., 2009, Effect of  aqueous  extract  of  scent  leaf  ( Ocimum gratissimum )  on  carbon  tetrachloride  (CCl ) 4
Gambar 4. Diagram Batang Rata-Rata Aktivitas Serum AST
GIDION KRISNADI YOSEPH, dkk.
induced liver damage in albino Wister rats, African Journal  of  Pharmacy  and  Pharmacology ,  3(11) 562-567.
Hasanah,  H.  2008. Pengaruh  Lama  Fermentasi Terhadap  Kadar  Alkohol  Tape  Ketan  Hitam (Oryza  sativa  L  var  forma  glutinosa)  dan  Tape Singkong  (Manihot  utilissima  Pohl) .  Universitas
Islam Negeri Malang. Hlm 91.
Indrayani  dkk.  2008.  Efek  Parasetamol  terhadap Kadar  SGPT  dan  SGOT  Darah  Mencit  yang Diberikan  Alkohol  Akut  dan  Alkohol  Kronis. Jurnal  Kongres  Nasional  Ikatan  Farmakologi Indonesia. Vol.  21.  No.  3.  Edisi  Juli-September. Hlm 1-3.
Janakat, S., dan Al-Merie, H. 2002. Optimization of t h e   d o s e   a n d   r o u t e   o f   i n j e c t i o n ,   a n d characterization  of  the  time  course  of  carbon tetrachloride-induced hepatotoxicity in the rat. J. Pharm. Tox. Methods. 48. 41-44.
Johnston., D.E., and Kroening, C. 1998. Mechanism of Early Carbon Tetrachloride Toxicity in Cultured Rat Hepatocytes. Pharmacology & Toxicology. 83.
231-239.
North-Lewis, P. 2008. Drugs and The Liver, A Guide to D r u g   H a n d l i n g   i n   L i v e r   D y s f u n c t i o n .
Pharmaceutical Press. London. 12. 17-18. Rukmana,  R.  1997. Ubi  Kayu  Budi  Daya  dan Paskapanen . Penerbit Kanisius. Yogyakarta. Hlm 12.
Timbrell,  J.A.  2008. Principles  of  Biochemical Toxicology. 4th  Edition.  Iinforma  Health  Care.
USA. pp. 309-311.
Wahyuni,  S.  2005.  Pengaruh  Daun  Sambiloto ( Andrographis paniculata , Ness.) terhadap Kadar SGPT dan SGOT Tikus Putih. GAMMA. 1 (1). 45-
53.
Ward, F.M. dan Daly, M.J. 2000. Hepatitic Disease. in Halber,  R.  and  Edwards  C.(Eds).  Clinical
nd Pharmacy  and  Therapeutics.  2   Ed.  Churchill Livingstone. Edinburgh. 197.
Williamson,  E.M.,  Okpako,  D.T.,  Evans,  F.J.  1996. Pharmacological  Methods  in  Phytotherapy R e s e a r c h   S e l e c t i o n   P r e p a r a t i o n   a n d Pharmacological Evaluation in Plant Material. I.
John Wiley & Sons Ltd. London. Hlm 47-66.
World  Health  Organization.  2009.  Initiative  for vaccine research, viral cancers, hepatitis C. . nd Ziemmerman, H.J., 1999, Hepatotoxicity , 2  edition, Lippincott Williams and Wilkins, Philadelphia, pp. 195-210.
GIDION KRISNADI YOSEPH, dkk. 100