KADAR SERAT KASAR DAN PROTEIN KASAR KULIT BUAH KAKAO YANG DIFERMENTASI SECARA BERTINGKAT MENGGUNAKAN Trichoderma viride DAN Saccharomyces cerevisiae
(The Content of Crude Fiber and Crude Protein Cocoa Pods Fermented Gradually Using Trichoderma viride and Saccharomyces cerevisiae )
Intan Kembang Bahari, Ning Iriyanti dan Titin Widiyastuti
Fakultas Peternakan Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto Email : kembangbahari@gmail.com

## ABSTRACT
The aim of the research was to examine the effect of multilevel fermentation on cocoa pod skin using T. viride and S. cerevisiae and determine the best level in reducing crude fiber or increasing crude protein con - tent of cocoa pod skin. The research was conducted experimentally according to a completely randomized design with four treatments and five replications. The treatments were the level of T. viride and S. cerevisiae isolate used for cocoa pod skin fermentation, respectively: R0: cocoa pod without fermentation, R1: cocoa pod + 4% isolate, R2: cocoa pod + 8% isolate, R3: cocoa pods + 12% isolate. Data were analyzed using an analysis of variance followed by an Orthogonal Polynomial Test. The results of the research showed both crude fiber and crude protein increased significantly along with the increase of the isolate levels. The pattern of crude fiber value change was based on the equation Y=32.76+1.89X-0.28X 2 +0.015X 3 , coefficient of correlation (r) 0.998 and coefficient of determination (R 2 )= 99.75%, while crude protein equation was Y=8.17+0.66X-0.012X 2 -0.002X 3 , coefficient of correlation (r)= 0.9994 and coefficient of determination (R 2 )= 99.88%. In conclusion, the optimal level of T. viride and S. cerevisiae in cocoa pods fermentation was 8.4% resulting in a crude fiber value of 38.09% and a crude protein value of 11.6%.
Keywords : Cocoa Pods, Crude Fiber, Crude Protein, S. cerevisiae, T. viride

## ABSTRAK
Tujuan penelitian adalah mengkaji pengaruh fermentasi bertingkat pada kulit buah kakao menggunakan T. viride dan S. cerevisiae serta level terbaik dalam menurunkan kadar serat kasar dan meningkatkan kadar protein  kasar  kulit  buah  Kakao.  Penelitian  dilakukan  secara  eksperimental  menggunakan  Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 4 perlakuan dan 5 ulangan. Perlakuan yang diterapkan ialah penggunaan isolat T. viride dan S. cerevisiae dengan level bertingkat pada proses fermentasi kulit buah kakao yaitu masing-masing R0: kulit buah kakao tanpa fermentasi, R1: kulit buah kakao yang difermentasi isolat 4%,  R2:  kulit  buah  kakao  yang  difermentasi  isolat  8%,  R3:  kulit  buah  kakao  yang  difermentasi  isolat 12%. Data dianalisis menggunakan analisis variansi dan dilanjutkan dengan uji Orthogonal Polynomial. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kadar serat kasar dan protein kasar kulit buah kakao secara nyata mengalami  peningkatan  seiring  dengan  peningkatan  level  isolat  yang  digunakan.  Pola  peningkatan kadar serat kasar mengikuti persamaan Y=32,76+1,89X-0,28X 2 +0,015X 3 , koefisien korelasi (r) = 0,9988 dan koefisien determinasi (R²) = 99,75%, sementara kadar protein kasar mengikuti persamaan Y=8,17+0,66X- 0,012X 2 -0,002X 3 , koefisien korelasi (r) = 0,9994 dan koefisien determinasi (R²) = 99,88%. Penggunaan T. viride dan S. cerevisiae yang optimal dalam fermentasi kulit buah kakao adalah pada level mikroba 8,4% menghasilkan kandungan serat kasar sebesar 38,09% dan protein kasar sebesar 11,6%.
Kata Kunci : Kulit Buah Kakao, Protein Kasar, S. cerevisiae , Serat Kasar, T. viride

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan salah satu penghasil buah  kakao  terbesar  di  dunia.  Menurut  Ditjen Perkebunan  (2016),  produksi  buah  kakao  di Indonesia  mencapai  656.817  ton.  Banyaknya buah  kakao  yang  dihasilkan  menyebabkan
adanya  peningkatan  jumlah  kulit  buah  kakao. Bagian  buah  kakao  yang  mempunyai  nilai ekonomis adalah bijinya, sedangkan kulit buah kakao merupakan limbah pengolahan dari biji kakao  yang  tidak  dimanfaatkan  (Erika,  2013). Menurut  Kamelia  dan  Fathurohman  (2017), perbandingan  limbah  dari  hasil  panen  kakao
JITP Vol. 11 No. 1,  2023
mencapai  75%,  maka  kontribusi  kulit  buah kakao mencapai 492.613 ton.
Kendala yang dihadapi adalah kandungan nutrien  dan  daya  cerna  yang  rendah  karena adanya  kandungan  serat  kasar  yang  tinggi. Selain kadar serat kasar yang tinggi, kulit buah kakao juga memiliki kadar protein kasar yang rendah.  Komposisi  buah  kakao  terdiri  dari 74%  kulit,  24%  biji  kakao  dan  2%  plasenta. Berdasarkan  komposisi  tersebut,  kulit  buah kakao  merupakan  komposisi  terbesar  dari produksi  buah  kakao  (Ria,  2012).  Kulit  buah kakao  tanpa  fermentasi  memiliki  kadar  serat kasar  sebesar  42,55%  mengalami  penurunan kadar serat kasar menjadi 34,36% setelah diberi perlakuan fermentasi. Kadar protein kasar pada kulit buah kakao tanpa fermentasi yaitu 8,69% dan  setelah  fermentasi  13,84%  mengalami mengalami peningkatan namun kurang optimal (Suparjo et al ., 2011). Fermentasi merupakan pengolahan secara biologi, yaitu pengolahan dengan memanfaatkan mikroorganisme yang akan menghasilkan enzim untuk melakukan perubahan terhadap molekul kompleks  seperti  protein,  karbohidrat,  dan lemak  menjadi  molekul  yang  lebih  sederhana (Pakaya et  al .,  2019).  Teknologi  pengolahan kulit  buah  kakao  dapat  dilakukan  melalui pengolahan  secara  fisik,  kimiawi,  dan  biologi. Proses pengolahan secara biologis salah satunya dengan  fermentasi  (Tangendjaja,  2007).  Proses fermentasi  kulit  buah  kakao  menggunakan mikroba  yaitu  dengan  mendegradasi  senyawa kompleks menjadi senyawa yang lebih sederhana. Mikroorganisme  yang  dapat  mendegradasi ikatan  lignoselulosa  dan  lignohemiselulosa antara  lain Tricoderma  viride dan Saccharomyces cerevisiae .  Proses  fermentasi  yang  dilakukan T.  viride berpengaruh  dalam  mengubah selulosa  dan  hemiselulosa  menjadi  gula  yang lebih  sederhana. T.  viride merupakan  kapang yang  bisa  menghasilkan  selulase.  Kelebihan dari T.  viride selain  menghasilkan  enzim selulolitik  yang  lengkap,  juga  menghasilkan enzim xyloglukanolitik .  Keberadaan  enzim  ini akan  semakin  mempermudah  selulase  dalam memecah  selulosa  (Gunam et  al .,  2011). S. cerevisiae secara keseluruhan mengandung 40% protein, 15% asam nukleat, 25% polisakarida, dan 15% lipid, serta mampu menghasilkan beberapa vitamin dan mineral, dan meningkatkan nilai gizi (Suhermiyati,  2003;  Manin,  2003).  Abun  (2005) dan Soeharsono (2010), menyatakan S. cerevisiae mampu memproduksi sejumlah enzim meliputi amilase,  lipase,  protease,  dan  peptidase  yang
dapat  melisis  komponen  karbohidrat,  lemak, dan  protein  sehingga  adanya  peningkatan kandungan  nilai  nutrisi.  Gula  yang  lebih sederhana  hasil  fermentasi  sebelumnya,  dapat difermentasi  menggunakan  yeast S.  cerevisiae yang  diharapkan  dapat  meningkatkan  protein kasar, sehingga meningkatkan kualitas nutrien. Informasi  mengenai  penggunaan  kedua  jenis fungi  ini  dalam  proses  fermentasi  kulit  buah kakao masih kurang. Oleh karena itu dilakukan penelitian  yang  bertujuan  untuk  mengetahui pengaruh  fermentasi  bertingkat  menggunakan T.  viride dan S.  cerevisiae sebagai  upaya meningkatkan kualitas pada kulit buah kakao.

## MATERI DAN METODE

## Desain penelitian
Penelitian dilakukan dengan menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  4 perlakuan fermentasi kulit buah kakao dengan dua jenis isolat fungi berbeda. Setiap perlakuan diulang 5 kali sehingga jumlah unit percobaan adalah 20 unit. Perlakuan yang diterapkan pada penelitian  ini  yaitu  masing-masing  R 0 =  Kulit buah  kakao  tanpa  fermentasi,  R 1 =  Kulit  buah kakao  yang  difermentasi  dengan T.  viride 4% dilanjutkan S.  cerevisiae 4%  (v/w),  R 2 =  Kulit buah kakao yang difermentasi dengan T. viride 8% dilanjutkan S. cerevisiae 8% (v/w), R 3 = Kulit buah kakao yang difermentasi dengan T. viride 12% dilanjutkan S. cerevisiae 12% (v/w).

## Peremajaan dan pembuatan inokulum
Peralatan  dan  media  yang  digunakan disterilisasi  menggunakan autoclave dengan tekanan  1,5  atm  dan  suhu  mencapai  121 o C selama 15 menit. Membuat media PDB dan PCB dengan  komposisi  masing-masing  (12  gram  + 500 ml aquades dan 8,5 gram + 500 ml aquades). Substrat  kulit  buah  kakao  yang  berasal  dari desa  Kotayasa-Sumbang,  dihaluskan  (ukuran partikel 30 mesh), dan ditimbang 50 gram untuk setiap unit percobaan.
Isolat  yang  digunakan  yaitu T.  viride dan S. cerevisiae masing-masing sebanyak 8% (w/v) diremajakan dengan cara diinokulasi ke dalam media PDB untuk T. viride dan media PCB untuk S.  cerevisiae ,  kemudian  diinkubasi  pada  suhu ruang selama 2 x 24 jam. Proses selanjutnya yaitu pembuatan  inokulum,  media  PDB  dan  PCB masing-masing 200 ml ditambahkan 5% (w/v) kulit  buah  kakao,  kemudian  disterilisasi  lalu didinginkan  hingga  mencapai  suhu  ruang. T.
viride diinokulasikan ke dalam PCB, kemudian diinkubasi selama 2 x 24 jam hingga populasinya mencapai 10 8 CFU/ml.

## Proses fermentasi
Setelah  inokulum  siap  digunakan, dilakukan proses fermentasi secara batch culture . Substrat  sebanyak  50  gram  kulit  buah  kakao ditambah  molases  2%  (v/w)  (sebagai  sumber energi mikroba), urea 1% (sumber N mikroba) dan  50%  aquades  dari  substrat,  disterilisasi uap  basah  dengan autoclave (tekanan  1,5  atm dan  suhu  121 o C)  selama  15  menit,  kemudian didinginkan  hingga  suhu  mencapai  ±  40 o C. Setelah  itu,  inoculum T.  viride diinokulasikan pada substrat, dan diinkubasi pada suhu 37 o C selama  5  x  24  jam  dan  dilanjutkan  fermentasi kedua menggunakan S. cerevisiae , lalu diinkubasi selama 2 x 24 jam.
Variabel yang diukur dalam penelitian ini adalah kandungan kadar serat kasar dan kadar protein kasar hasil fermentasi kulit buah kakao yang  dianalisis  menggunakan  metode  AOAC (1990).

## Analisis data
Data  kandungan  serat  dan  protein  kasar dianalisis variansi berdasarkan Rancangan Acak Lengkap (4x5) dan Orthogonal Polynomial untuk uji  lanjut  untuk  mengetahui  pola  perubahan yang  terjadi  diantara  perlakuan  (Steel  dan Torrie, 1991).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Kadar serat kasar kulit buah kakao
Kadar  serat  kasar  kulit  buah  kakao  yang difermentasi  menggunakan T.  viride dan S. cerevisiae dengan  level  bertingkat  hingga 12%  menunjukkan  adanya  peningkatan  dari 32,76±0,13  (level  fungi  0%)  hingga  41,85±0,22 (level fungi 12%). Hasil analisis varians (Tabel 1)  menunjukkan  bahwa  perbedaan  level  fungi yang  digunakan  menghasilkan  kadar  serat kasar  yang  nyata  berbeda  (P<0,01)  diantara level  perlakuan  dengan  nilai  tertinggi  pada level T. viride dan S. cerevisiae 12%. Kadar serat kasar kulit buah kakao sebelum fermentasi pada penelitian Indariyanti dan Rakhmawati (2013),
Gambar 1. Kulit buah kakao setelah Fermentasi T. viride dan S. cerevisiae
Tabel 1. Rataan kadar serat kasar dan protein kasar kulit buah kakao yang difermentasi menggunakan T. viride dan S. cerevisiae . Perlakuan Serat kasar (%) Protein kasar (%) R0 32,76±0,13 a 8,17±0,03 a R1 36,86±0,11 b 10,49±0,03 b R2 37,92±0,24 bc 11,59±0,07 c R3 41,85±0,22 c 10,64±0,05 b
Keterangan: abc Superskrip berbeda pada kolom yang sama menunjukkan pengaruh sangat nyata (P<0,01). R0= Kulit buah kakao tanpa fermentasi, R1= Kulit buah kakao difermentasi dengan T. viride dan S. cerevisiae 4%, R2= Kulit buah kakao difermentasi dengan T. viride dan S. cerevisiae 8%, R3= Kulit buah kakao difermentasi dengan T. viride dan S. cerevisiae 12%.
sebesar 34,5%, sedangkan kadar serat kasar kulit buah  kakao  yang  telah  difermentasi  dengan Aspergillus niger sebesar 16,7%. Peningkatan  nilai  serat  kasar  hasil fermentasi  pada  penelitian  ini,  kemungkinan bisa juga disebabkan oleh serat kasar dari hasil pertumbuhan kapang T. viride sangat dominan yang  ditandai  dengan  munculnya  hifa  yang terdiri  dari  miselium-miselium.  Miselium yang tumbuh akan terukur sebagai fraksi serat sehingga dapat meningkatkan kadar serat kasar dari kulit buah kakao (Gambar 1). Hal tersebut sesuai  dengan  pernyataan  Winarno  (2010), bahwa  kandungan  serat  kasar  dipengaruhi oleh  kemampuan  jamur  memecah  serat  kasar untuk  memenuhi  kebutuhan  energi  dan kehilangan  bahan  kering  selama  fermentasi. Ditambahkan  dengan  pernyataan  Adelina (2008), bahwa kapang yang dapat berkembang lebih baik akibat cukupnya nutrisi dari substrat akan  menyebabkan  miselium  yang  terbentuk juga  semakin  banyak.  Penambahan  miselium yang  terbentuk  selama  fermentasi  dapat meningkatkan kadar serat kasar produk. Hal ini juga sejalan dengan hasil penelitian Aisjah (2001), bahwa terjadi kenaikan kandungan serat kasar pada  bungkil  kelapa  sawit  yang  difermentasi oleh T. viride pada dosis inokulum 0,6% (suhu inkubasi  30 o C).  Peningkatan  kandungan  serat kasar ini diduga berasal dari miselium kapang T.  viride yang  tumbuh  pada  substrat  bungkil kelapa sawit.
Uji  lanjut  dengan  Uji  Orthogonal Polynomial,  menunjukkan  bahwa  konsentrasi serat  kasar  dalam  kurva  respon  kubik  dengan persamaan Y = 32,76 + 1,89X - 0,28X 2 + 0,015X 3 , koefisien  korelasi  (r)  =  0,9988  dan  koefisien
determinasi  (R²)  =  99,75%  (Gambar  2).  Kurva menunjukkan  bahwa  level T.  viride dan S. cerevisiae paling optimal 8,4% dengan serat kasar sebesar 38,09%. Hal tersebut terjadi dikarenakan pada level 8,4% jumlah nutrien yang tersedia di dalam kulit buah kakao mencukupi kebutuhan dari mikroba. Jika jumlah nutrien yang tersedia mencukupi, maka pertumbuhan mikroba akan optimal.  Pertumbuhan  mikroba  yang  baik akan  sejalan  dengan  optimalnya  degradasi serat  yang  dilakukan  mikroba  dan  enzim. Sesuai  dengan  pernyataan  Rizal et  al .  (2006), bahwa meningkatnya dosis inokulum T. viride , maka  pertumbuhan  kapang  juga  akan  lebih banyak  sesuai  dengan  ketersediaan  substrat. Lebih  lanjut  dinyatakan  bahwa  substrat  dapat berupa  substrat  sumber  karbon  dan  substrat sumber nitrogen. Sumber karbon dan nitrogen merupakan  komponen  yang  utama  dalam suatu  media  kultur,  karena  sel-sel  mikroba dan  fermentasi  sebagian  besar  memerlukan sumber karbon dan nitrogen dalam prosesnya. Peningkatan  produksi  pertumbuhan  sel-sel memerlukan nutrisi yang optimum (Hidayat et al ., 2006). T.  viride menghasilkan  enzim  selulase yang dapat mendegradasi serat. Enzim selulase terdiri  dari  endoglukanase,  eksoglukanase, dan  β-glukosidase  yang  bertugas  dalam mendegradasi  serat  kompleks  menjadi karbohidrat/  gula  sederhana. S.  cerevisiae menghasilkan  enzim  amilase,  protease,  dan peptidase  yang  dapat  mendegradasi  hasil fermentasi sebelumnya sehingga ada perbaikan kualitas  nutrien.  Sesuai  dengan  Miyamoto (1997),  mekanisme  kerja  enzim  selulase  dalam substrat  adalah  endoglukanase  menyerang
Gambar 2 . Hubungan antara level T. viride dan S. cerevisisae , dengan kadar serat kasar kulit buah kakao.

## Bahari, dkk
bagian  selulosa  yang  amorf,  membuka jalan  bagi  eksoglukanase.  Eksoglukanase (Selobiohidrolase)  menyerang  bagian  selulosa yang  telah  terbuka  oleh  endoglukanase membebaskan  selobiosa  dari  serat  selulosa. Terjadi  kerjasama  antara  endoglukanase  dan eksoglukanase  merombak  selulosa  menjadi selo-oligosakarida dan selobiosa. β-glukosidase mengubah selobiosa yaitu hasil kerjasama antara endoglukanase  dan  eksoglukanase  menjadi glukosa. Aktivitas β-CMC-ase atau endoselulase pada T. viride lebih tinggi dibandingkan dengan aktivitas  β-glukosidase  dan  FP-ase.  Aktivitas endoselulase  yang  secara  acak  memutuskan ikatan  pada  bagian  amorf  selulosa  yang sangat  mudah  mengalami  hidrolisis  (Irawadi, 1991).  Aktivitas  FP-ase  pada T.  viride juga diperoleh  lebih  tinggi  dibandingkan  aktivitas β-glukosidase.  Trichoderma  menghasilkan β-glukosidase dalam jumlah yang relatif rendah. Aktivitas β-glukosidase maksimum dari kapang T. viride diperoleh pada lama fermentasi 14 hari yaitu sebesar 0,073 IU/ml (Montesqrit, 2007).

## Kadar protein kasar kulit buah kakao
Kadar  protein  kasar  kulit  buah  kakao pada  penelitian  ini  mengalami  peningkatan setelah difermentasi dengan fungi T. viride dan S. cerevisiae hingga 12%. Hasil analisis varians (Tabel  1)  menunjukkan  bahwa  perlakuan fungi  dengan  level  8%  menghasilkan  protein kasar  tertinggi  dan  nyata  berbeda  dibanding level  lainnya.  Hal  ini  mengindikasikan  bahwa peningkatan  level  fungi  diatas  8%  tidak  lagi diikuti  oleh  peningkatan  kadar  protein  yang dihasilkan. Kadar protein kasar kulit buah kakao sebelum fermentasi pada penelitian Indariyanti dan  Rakhmawati  (2013),  sebesar  11,4%, sedangkan kadar protein kasar kulit buah kakao yang telah difermentasi dengan Aspergillus niger sebesar 20,2%.
Peningkatan kadar protein hasil fermentasi kulit  kakao  pada  penelitian  ini  juga  dapat disebabkan  oleh  adanya  penambahan  jumlah sel dan produksi enzim yang dihasilkan fungi. Penambahan jumlah fungi dapat meningkatkan kadar  protein  kasar  dikarenakan  sumbangan protein  berasal  dari  komponen  fungi  yang tumbuh.  Membran  sel  mikroba  dan  miselium dapat  menambah  kandungan  sumber  protein, dengan demikian semakin banyak sel fungi yang sejalan dengan pertumbuhan miselium di dalam kulit  buah  kakao  fermentasi  mempengaruhi kadar protein kasar. Hal tersebut sesuai dengan pernyataan Mangunwidjaja et al . (2012) bahwa
salah  satu  indikator  yang  digunakan  untuk mengetahui adanya peningkatan kadar protein pada  suatu  substrat  yang  difermentasi  adalah dari  jumlah  miselium  fungi  yang  tumbuh pada  substrat  tersebut.  Kadar  protein  pada suatu  substrat  akan  berbanding  lurus  dengan intensitas  pertumbuhan  miselium  fungi  atau jumlah  sel  yang  terbentuk.  Ditambahkan menurut  Fardiaz  (1989),  bahwa  tingginya kandungan  protein  kasar  setelah  fermentasi disebabkan  oleh  pertumbuhan  kapang  yang subur,  yang  menyumbangkan  protein  lebih banyak ke dalam substrat karena tubuh kapang mengandung  protein  yang  cukup  tinggi yaitu 40 - 50% dari total komponen tubuhnya. Ditambahkan  pendapat  Madigan et  al. (2000), bahwa kapang mendapatkan nutrisi dengan cara mensekresikan enzim ekstraselular yang dapat mencerna  senyawa  organik  kompleks  seperti polisakarida  dan  protein  menjadi  penyusun monomer,  kemudian  diserap  ke  dalam  sel kapang.  Meningkatnya  kadar  protein  ini  ada hubungannya  dengan  pertumbuhan  pada kapang A.  niger .  Semakin  subur  pertumbuhan kapang semakin tinggi pula kadar proteinnya, karena  sebagian  besar  sel  kapang  merupakan protein (Sari dan Purwadaria, 2004).
T.  viride menghasilkan  enzim  untuk mendegradasi makanan di substrat. Enzim akan terukur sebagai protein kasar, maka banyaknya enzim  yang  dihasilkan  mikroba  dapat mempengaruhi kadar protein kasar kulit buah kakao.  Hal  tersebut  sesuai  dengan  pernyataan Samsuri et al . (2007), bahwa enzim merupakan protein  yang  bersifat  katalis,  sehingga  sering disebut  biokatalis.  Ditambahkan  dengan pernyataan  Lunar et  al .  (2012),  bahwa  tingkat dosis  berkaitan  dengan  besaran  populasi mikroba  yang  menentukan  cepat  tidaknya perkembangan  mikroba  dalam  menghasilkan enzim  untuk  merombak  substrat  menjadi komponen  yang  lebih  sederhana.  Hal  ini  juga sejalan  dengan  pendapat  Palupi  dan  Imsya (2011), bahwa mikroba pada proses fermentasi menghasilkan enzim yang akan mendegradasi senyawa-senyawa  kompleks  menjadi  lebih sederhana.
Uji lanjut dengan uji orthogonal polynomial, menunjukkan bahwa konsentrasi protein kasar dalam  kurva  respon  kubik  dengan  persamaan Y=8,17  +  0,66X  -  0,012X 2 -  0,002X 3 ,  koefisien korelasi (r) = 0,9994 dan koefisien determinasi (R²) = 99,88% (Gambar 3). Penambahan fungi pada level 8,4% optimal dalam meningkatkan protein kasar hingga sebesar 11,6%. Hal tersebut terjadi dikarenakan  pada  level  8,4%  pertumbuhan
fungi  optimal  sejalan  dengan  bertambahnya jumlah sel dan banyaknya produksi enzim oleh fungi tersebut. Hal ini sesuai dengan pernyataan Purwanti  (2012),  bahwa  mikroorganisme memerlukan karbohidrat, nitrogen dan mineral yang cukup untuk dapat tumbuh dan produksi dengan optimal. Mikroba tumbuh dengan cara merombak  kandungan  nutrisi  yang  ada  pada media tumbuhnya, oleh karena itu diperlukan tambahan  bahan-bahan  sumber  nitrogen  dan mineral.  Ditambahkan  dengan  pernyataan Purwitasari et  al .  (2004),  bahwa  perbedaan jumlah  sel S.  cerevisiae pada  medium  yang digunakan  disebabkan  oleh  persediaan  zat-zat nutrien yang terdapat dalam medium tersebut. Ditambahkan  menurut  Ade et  al .  (2023),  kulit buah  kakao  sebaiknya  difermentasi  terlebih dahulu  sebelum  diberikan  kepada  ternak, adapun  tujuan  fermentasi  kulit  buah  kakao adalah  untuk  meningkatkan  daya  cerna  dan kesukaan ternak (palatabilitas) terhadap pakan tersebut,  serta  meningkatkan  kandungan protein dan serat kasar, menekan efek racun zat theobromine, dan menurunkan  kandungan  zat tannin  yang  dapat  menghambat  pencernaan.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Kadar  serat  kasar  dan  protein  kasar kulit  kakao  mengalami  peningkatan  setelah difermentasi  menggunakan T.  viride dan S. cerevisiae. Penggunaan T. viride dan S. cerevisiae yang  optimal  dalam  fermentasi  kulit  buah kakao  adalah  pada  level  8,4%  menghasilkan kandungan  serat  kasar  sebesar  38,09%  dan
protein kasar sebesar 11,6%.

## Saran
Fermentasi  secara  bertingkat  menggunakan T. viride dan S. cerevisiae menjadi kombinasi yang baik  dalam  meningkatkan  kualitas  nutrisi  dari pakan yang berasal dari limbah agroindustri. Akan tetapi,  perlu  adanya  pertimbangan  ketersediaan nutrien  pada  substrat  sebelum  dilakukan  proses fermentasi,  dikarenakan  proses  fermentasi bertingkat  dilakukan  oleh  dua  jenis  fungi  yang diberikan tidak dalam satu waktu inkubasi.

## DAFTAR PUSTAKA
Abun. 2005. Efek suplementasi produk fermentasi dalam  ransum  terhadap  komponen  darah kelinci.  Karya  Ilmiah.  Departemen  Nutrisi dan  Makanan  Ternak,  Fakultas  Peternakan Universitas  Padjadjaran.  Bandung.  (Tidak dipublikasi)
Adelina,  T.  2008.  Pengaruh  komposisi  substrat dan dosis inokulum laru terhadap nilai gizi ampas sagu ( Metroxylon sp ) fermentasi. Jurnal Peternakan, 5(2): 71-74.
Aisjah,  T.  2001.  Pengaruh  takaran  inokulum ( Trichoderma  viride )  dan  suhu  fermentor terhadap  nilai  gizi  protein  kasar  dan  serat kasar  produk  fermentasi  bungkil  kelapa sawit. Jurnal Bionatura, 3(3): 185 – 189.
AOAC.  1990.  Official  Methods  of  Analysis. Association of Official. Agricultural.
Direktorat  Jenderal  Perkebunan.  2016.  Statistik Perkebunan  Indonesia  Komoditas  Kakao 2013-2015.  Direktorat  Jenderal  Perkebunan, Jakarta.
Gambar 3 . Hubungan antara level T. viride dan S. cerevisisae , dengan kadar protein kasar kulit buah kakao.

## Bahari, dkk
Erika,  C.  2013.  Ekstraksi  pektin  dari  kulit  buah kakao  ( Theobroma  cacao  L. )  menggunakan amonium  oksalat.  Jurnal  Teknologi  dan Industri Pertanian Indonesia, 5(2): 1-6.
Fardiaz, S. 1989. Fisiologi Fermentasi. Departemen
Pendidikan  dan  Kebudayaan  Direktorat Jenderal  Pendidikan  Tinggi  Pusat  Antar Universitas  Pangan  dan  Gizi,  Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Gunam, I. B. W., W. R. Aryanta dan I. B. N. S. Darma. 2011. Produksi selulase kasar dari kapang T. viride dengan perlakuan konsentrasi substrat ampas  tebu  dan  lama  fermentasi.  Jurnal Biologi, 15(2): 29-33.
Hidayat,  N.,  M.  C.  Padaga  dan  S.  Suhartini.
2006.  Mikrobiologi  Industri.  Penerbit  Andi, Yogyakarta.
Indariyanti,  N.,  dan  Rakhmawati.  2013.
Peningkatan  kualitas  nutrisi  limbah  kulit buah  kakao  dan  daun  lamtoro  melalui fermentasi sebagai basis protein pakan ikan nila.  Jurnal  Penelitian  Pertanian  Terapan, 13(2): 108-115.
Irawadi, T. T. 1991. Produksi enzim ekstraselular
(selulase  dan  xilanase)  dari Neurospora sithopila pada  substrat  limbah  padat  kelapa sawit.  Disertasi.  Program  Pascasarjana  IPB, Bogor.
Kamelia, M. dan Fathurohman. 2017. Pemanfaatan kulit buah kakao fermentasi sebagai alternatif bahan  pakan  nabati  serta  pengaruhnya terhadap pertumbuhan ternak entok ( Cairina muschata ). BIOSFER Jurnal Tadris Pendidikan Biologi, 8(1): 66-77.
Lunar,  A.  M.,  H.  Supratman,  dan  Abun.  2012.
Pengaruh  dosis  inokulum  dan  lama fermentasi buah ketapang ( Ficus lyrata ) oleh Aspergillus  niger terhadap  bahan  kering, serat kasar, dan energi bruto. Artikel Ilmiah.
Fakultas Peternakan Universitas Padjadjaran, Bandung.
Madigan, M. C., J. Martinko, and J. Parker, 2000. Biology  of  Microorganisms.  9 th ed.  Prentice Hall International Inc.,  New York.
Mangunwidjaja,  D.,  T.  E.  Sukmaratri,  dan  C.
Setiyarto.  2012.  Peningkatan  kadar  protein kasar ampas kulit nanas melalui fermentasi media  padat.  Artikel  Ilmiah.  Fateta  IPB, Bogor.
Manin, F. 2003. Efektivitas kultur Bacillus circulans , Bacillus  sp. dan S.  cerevisiae sebagai  sumber probiotik  dan  implikasinya  terhadap produktivitas  ternak  itik  lokal  kerinci.
Disertasi. Universitas Padjadjaran, Bandung. (Tidak dipublikasi).

## Miyamoto,  K.  1997.  Renewable  Biological
System  For  Alternative  Sustainable  Senergy Production.  FAO  Agricultural  Services Bulletin 128.
Montesqrit.  2007.  Isolasi  dan  karakterisasi selulase dari Trichoderma viride dan Rhizopus Spp dengan  substrat  jerami  padi.  Jurnal Peternakan Indonesia, 12(2): 112-123.
Pakaya,  S.  A.,  S.  Zainudin,  dan  S.  Dako.  2019.
Performa  Ayam  Kampung  Super  yang Diberi  Level  Penambahan  Tepung  Kulit Kakao ( Theobroma cacao L. ) Fermentasi dalam Ransum. Jambura Journal of Animal Science, 1(2): 40-45.
Palupi,  R.  dan  A.  Imsya.  2011.  Pemanfaatan kapang Trichoderma  viride dalam  proses fermentasi untuk meningkatkan kualitas dan daya  cerna  protein  limbah  udang  sebagai pakan  ternak  unggas.  Fakultas  Pertanian Universitas  Sriwijaya  Palembang.  Prosiding Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner, Bogor. pp 672-677.
Purwanti,  F.  W.  2012.  Kualitas  nutrien  onggok yang  difermentasi Aspergillus  niger dengan penambahan  level  urea  dan  zeolit  yang berbeda. Skripsi. Fakultas Peternakan Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Purwitasari, E., A. Pangastuti, dan R. Setyaningsih.
2004.  Pengaruh  media  tumbuh  terhadap kadar protein Saccharomyces cerevisiae dalam pembuatan protein sel tunggal. Bioteknologi, 1(2): 37-42.
Rizal,  Y.,  Y.  Marlida,  N.  Farianti,  dan  D.  P.  Sari.
2006.  Pengaruh  fermentasi  dengan T.  viride terhadap  penyusutan  bahan  kering  dan kandungan  bahan  organik,  abu,  protein kasar, lemak kasar dan HCN daun ubi kayu limbah isolasi rutin. Stigma, 14(1): 1-5.
Samsuri,  M.,  M.  Gozan,  R.  Mardias,  M.  Baiquni, H.  Hermansyah,  A.  Wijanarko,  B.  Prasetya, dan M. Nasikin. 2007. Pemanfaatan sellulosa bagas  untuk  produksi  ethanol  melalui sakarifikasi dan fermentasi serentak dengan enzim xylanase. Makara, Teknologi, 11(1): 17- 24.
Sari, L., dan T. Purwadaria. 2004. Pengkajian nilai gizi hasil fermentasi mutan Aspergillus niger pada substrat bungkil kelapa dan bungkil inti sawit. Biodiversitas, 5(2): 48-51.
Soeharsono. 2010. Probiotik. Basis Ilmiah, Aplikasi, dan  Aspek  Praktis.  Widya  Padjadjaran, Bandung.

## JITP Vol. 11 No. 1,  2023
Steel,  R.  G.  D.,  dan  J.  H.  Torrie.  1995.  Prinsip dan  Prosedur  Statistika:  Suatu  Pendekatan Biometrik.  Gramedia  Pustaka  Utama, Jakarta.
Suhermiyati,  S.  2003.  Biokonversi  limbah  buah kakao  oleh Marasmus  sp. dan S.  cerevisiae serta  implikasi  efeknya  terhadap  tampilan produksi ayam broiler. Disertasi. Universitas Padjadjaran, Bandung.
Suparjo,  K.  G.  Wiryawan,  E.  B.  Laconi,  dan  D. Mangunwidjaja.  2011.  Performa  kambing yang  diberi  kulit  buah  kakao  terfermentasi.
Media Peternakan, 34(1): 35-41.
Ria,  S.  P.  2012.  Pemanfaatan  Kulit  Buah  Kakao Sebagai  Pakan  Ternak.  https://livestock- l i v e s t o c k . b l o g s p o t . c o m / 2 0 1 2 / 0 4 / pemanfaatan-kulit-buah-kakao-sebagai. html#more.Jurusan  Peternakan,  Fakultas Pertanian,  Universitas  Bengkulu.  Diakses  : November 2023.
Tangendjaja,  B.  2007.  Inovasi  teknologi  pakan menuju  kemandirian  usaha  ternak  unggas. Wartazoa, 17(1): 12-20.
Winarno, F. G. 2010. Enzim Pangan. Mbrio Press,
Bogor.