Senewe et al. Pelita Perkebunan 29(2)  2013, 108 - 119

## Tingkat Keefektifan Formulasi Bioinsektisida Bacillus thuringiensis Terhadap Hama Penggerek Buah Kakao pada Kondisi di Lapangan
Effectiveness of Bioinsecticide Bacillus thuringiensis Formulation

## Against Cocoa Pod Borer in Field Condition
Rein E. Senewe 1) , F.X. Wagiman 2) , dan Soekadar Wiryadiputra 3*)
1) Balai Pengkajian  Teknologi  Pertanian  (BPTP)  Maluku.
2) Fakultas Pertanian, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
3) Pusat Penelitian Kopi dan Kakao Indonesia, Jl. PB. Sudirman No. 90 Jember, Indonesia
*) Alamat penulis  (corresponding author): soekadar@yahoo.com Naskah diterima (received) 16 Agustus 2011, disetujui (accepted) 31 Mei 2012

## Abstrak
Penelitian  lapangan  bioinsektisida  Bt  dengan  kode  Formulasi-A  +1WP terhadap hama sasaran penggerek buah kakao (PBK) (Conopomorpha cramerella) telah  dilakukan  di  daerah  endemik  PBK  di  Desa  Holo,  Kecamatan  Amahai, Kabupaten Maluku Tengah. Sebagai pembanding adalah formulasi-B 2,5WP yang telah  lama  beredar  di  pasaran.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  dibanding dengan tanpa perlakuan (kontrol), formulasi-A +1WP sangat signifikan menurunkan populasi,  tingkat  serangan, dan kehilangan hasil panen biji kakao kering  akibat serangan hama PBK. Pada konsentrasi yang sama (2,5 g/L) keefektifan formulasi- A +1WP dalam pengendalian hama PBK relatif sama dengan formulasi-B 2,5WP. Dengan konsentrasi 2,5 g/L, formulasi-A +1WP cenderung lebih unggul daripada formulasi-B 2,5WP dalam peningkatan hasil panen biji kering kakao. Formulasi- A  +1WP  tidak  fitotoksik  terhadap  tanaman  kakao.  Untuk  keperluan  aplikasi komersial, disarankan untuk menggunakan konsentrasi 2,5 g/L. Pelaksanaan aplikasi formulasi-A  +1WP  disarankan  pada  saat  tidak  terik  matahari,  yaitu  pada  pagi hari  sebelum  jam  09.00  dan  atau  setelah  pukul  15.00  waktu  setempat.  Sasaran penyemprotan adalah buah kakao yang belum disukai ngengat PBK untuk bertelur, yaitu ukuran panjang <8 cm.
Kata kunci: Kakao, penggerek buah kakao, Conopomorpha cramerella, kontrol, keefektifan, insektisida mikrobia, Bacillus thuringiensis

## Abstract
Field trial of Bt insecticide formulation with a code of formulation-A +1WP against cocoa pod borer (CPB) (Conopomorpha cramerella) has been conducted at the heavily infested  cocoa area in Holo village, Amahai sub district, Central Maluku  regency.  Formulation-B  2.5  WP  as  a  commercial  Bt  insecticide  which has  been distributed widely in  the  market was used  as a  comparison Bt  insecti- cide.  The  results  of  the  trial  revealed  that  compared  with  untreated  treatment, Bt  insecticide  formulation-A  +1WP  significantly  reduced  infestation  of  CPB, CPB population, and yield losses of dry cocoa bean caused by CPB. At the same concentration  (2.5  g/L),  the  effectiveness  of  formulation-A  +1WP  was  not significantly  different  with  formulation-B  2.5WP.  In  the  case  of  production increase, at the same concentration (2.5 g/L) formulation-A +1WP caused higher yield than formulation-B 2.5WP, i.e. 39.9% compared with 35.1%, respectively. Both  Bt  insecticide  formulations  tried  did  not  caused  phytotoxic  against  cocoa
plant.  It  is  recommended  that  controling  of  CPB  should  use  concentration  of 2.5  g/L  Bt insecticide  formulation/L  of water,  and  should  be applied  at  around early morning  until 09.00 AM  and / or at the afternoon after 15.00  PM. Spray- ing  targets  should be cocoa pods  at the length of  less than 8.0 cm which  is not laid eggs of CPB yet.
Key words: Cocoa,  cocoa  pod  borer,  Conopomorpha  cramerella,  control,  effectiveness, microbial insecticide, Bacillus thuringiensis

## PENDAHULUAN
Maluku  dengan  potensi  lahan perkebunan seluas 1.398.672 ha memberikan peluang  investasi  untuk  dikembangkan. Badan  Pusat  Statistik  Maluku  (2010), melaporkan  bahwa  sampai  dengan  tahun 2008  luas  areal  kakao  di  Maluku  adalah 12.008 ha dengan produksi 4.617 ton. Salah satu kendala utama dalam upaya peningkatan produktivitas kakao adalah serangan hama dan  penyakit.  Hama  utama  kakao  yaitu penggerek buah kakao (PBK, Conopomorpha cramerella (Snellen)), pengisap buah dan pucuk  kakao (Helopeltis  spp.), ulat kilan (Hyposidra  talaca  Walker),  penggerek batang atau cabang (Zeuzera coffeae Nietn), dan  ulat  api  (Darna  trima  Moor e) (Kalshoven, 1981). Hama PBK merupakan hama penting dan penyebab utama kehilangan hasil kakao di Indonesia. Atmawinata et al. (1994) melaporkan bahwa serangan hama ini sudah ada sejak awal kakao diusahakan di  Indonesia,  yaitu  di  daerah  Minahasa (Sulawesi  Utara)  dan  Maluku,  sehingga mempengaruhi nilai ekspor biji kakao dari Manado ke Manila. Kehilangan hasil tersebut terjadi akibat buah yang terserang PBK bijinya lengket dan kandungan lemaknya turun.
Kakao rakyat yang diusahakan di Maluku banyak yang rusak akibat terserang hama dan penyakit yang didominasi oleh hama PBK (Dinas Pertanian Provinsi Maluku, 2007). Serangan  hama  PBK  di  Maluku  semakin cepat dan meluas hampir di semua sentra produksi kakao dan telah menjadi ancaman terhadap kelestarian perkebunan kakao di
Maluku.  Hasil  pengamatan  pada  bulan November dan Desember 2006 di Kecamatan Teon Nila Serua, Kabupaten Maluku Tengah diketahui rata-rata serangan mencapai 93% (Dinas Pertanian Provinsi Maluku, 2007). Dengan demikian maka perlu adanya upaya untuk mengantisipasi penyebaran dan luas serangan  hama  PBK  di  Maluku  dengan melakukan tindakan pengendalian, diantara- nya pengendalian hayati.
Berbagai agens hayati telah diketahui merupakan  musuh  alami  serangga  hama PBK.  Dari  golongan  pemangsa  telah dilaporkan beberapa spesies predator yang berperan  dalam  menurunkan  populasi serangga PBK secara alami, antara lain semut hitam  (Dolichoderus  thoracicus)  (Goot, 1917;  See  &  Koo,  1996;  Wiryadiputra, 2007),  semut  rangrang  (Oesophylla smaragdina), laba-laba (Lim, 1992), cecopet (Dermeptera)  (Sulistyowati  &  Junianto, 1995). Dari golongan parasitoid, Ooi (1992) telah membuat daftar sebanyak 24 spesies dar i  or do  Hymenoptera  dan  Diptera memarasit  stadia  telur,  larva  dan  pupa serangga  PBK.  Hasil  inventarisasi  dari daerah Maluku ditemukan beberapa spesies parasitoid antara lain, parasitoid telur dari spesies Trichogrammatoidea spp. dan para- sitoid  pupa  dar i  family  Braconidae (Sulistyowati & Junianto, 1995).
Beberapa  spesies  jamur  yang menginfeksi  serangga  PBK  juga  telah dilaporkan  dan  dikembangkan  sebagai insektisida biologi, antara lain jamur Beau- veria bassiana, Acrostalagmus sp., Penicil-

## Senewe et al.
lium sp., Verticillium sp., Fusarium sp., dan Spicaria  sp.  (Sulistyowati  &  Junianto, 1995). Jamur B. bassiana telah diujicoba untuk  PBK  pada  kondisi  lapangan  di Sumatera Utara dengan hasil sangat efektif dibanding  cara  pengendalian  yang  lain (Wiryadiputra, 2000). Nematoda entomo- patogen spesies Steirnema carpocapsae juga telah  dicoba  untuk  pengendalian  PBK  di daerah Sulawesi Selatan (Rosmana et al., 2010).
Jenis bakteri Bacillus thuringiensis (Bt) telah diketahui sebagai pembunuh serangga lebih  dari  satu  abad  yang lalu.  Ciri  khas bakteri Bt adalah kemampuannya membentuk kristal protein selama sporulasi yang disebut δ -endotoxin (delta-endotoksin) yang sangat beracun  terhadap  serangga  (Prabagaran et al., 2003). Hasil penelitian penggunaan Bt sebagai insektisida untuk mengendalikan penggerek batang jagung Eropa (Ostrinia nubilalis) di lapangan dengan hasil sangat efektif mendorong untuk membuat formulasi insektisida Bt komersial yang pertama pada tahun 1938 (Sanahuja et al., 2011).
Kelebihan pengendalian serangga hama tanaman menggunakan Bt, yaitu: 1) mikroba Bt  umumnya  tidak  beracun  dan  tidak menyebabkan penyakit pada organisme lain yang tidak bertalian dekat secara taksonomi dengan serangga hama sasaran, 2) sifat racun insektisida mikroba umumnya spesifik untuk satu  kelompok  spesies  ser angga  dan 3) residunya tidak berbahaya pada manusia maupun binatang, maka dapat diaplikasikan meskipun  pertanaman menjelang dipanen (Hunsberger, 2000).
Kekurangan  insektisida  mikroba  Bt adalah: 1) serangga hama kelompok lain yang menyerang pertanaman yang diaplikasi, akan tetap berkembang, 2) pemanasan dan radiasi sinar ultra violet akan menurunkan tingkat keefektifan  beberapa  tipe  insektisida mikroba, dan 3) perlu formulasi khusus dan
cara penyimpanan yang spesifik agar tingkat keefektifannya tidak menurun. Tulisan ini melaporkan  hasil  penelitian  keefektifan insektisida mikroba berbahan aktif bakteri Bt dalam menurunkan tingkat serangan hama PBK di lapangan.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  lapangan  dilaksanakan  di daerah endemik serangan hama PBK (lebih dari 90% sepanjang musim) di Pulau Seram, di Desa Holo, Kecamatan Amahai, Kabupaten Maluku  Tengah.  Kebun  kakao  yang digunakan  untuk  pengujian  adalah  kebun kakao rakyat (lokal) dengan tanaman kakao yang  telah  menghasilkan  (TM,  berumur 10  tahun  lebih),  monokultur,  dengan beberapa  pohon  pelindung,  jarak  tanam dan jumlah tanaman per hektar mengikuti keadaan yang sudah tersedia di kebun kakao; yaitu 3 m x 3 m dengan kepadatan tanaman sekitar 1.000 pohon per hektar. Rancangan percobaan yang digunakan adalah rancangan acak kelompok lengkap. Jumlah perlakuan yang diuji sebanyak enam perlakuan termasuk kontrol (tanpa perlakuan bioinsektisida) dan pembanding.  Perlakuan  teridiri  dari: 1)  aplikasi  formulasi-A  +1WP  2,5  g/L; 2)  aplikasi  formulasi-A  +1WP  5,0  g/L; 3)  aplikasi  formulasi-A  +1WP  7,5  g/L; 4)  aplikasi  formulasi-A  +1WP  10  g/L; 5) aplikasi formulasi-B WP 2,5 g/L; dan kontrol  (tidak  disemprot  dengan bioinsektisida). Masing-masing perlakuan diulang tiga kali. Bioinsektisida formulasi- A  +1WP  yang  diproduksi  oleh  Biotech Ltd., India, berbahan aktif kristal para-sporal mengandung delta-endotoksin (Sinaga, 2007) dan formulasi-B 2,4 WP mengandung spora Bacillus thuringiensis var. kurstaki Serotype H-3a 3b, Strain Z-52, dalam formulasi WP (tepung yang dapat disuspensikan).
Ukuran petak perlakuan adalah 12 m x  18  m.  Populasi  tanaman  per  petak

## Keefektifan bioinsektisida Bacillus thuringiensis terhadap PBK pada kondisi lapangan
perlakuan sebanyak 28 pohon, dan sebanyak 18 pohon merupakan tanaman pinggir dan 10  pohon  di  dalam  petak  per lakuan merupakan tanaman yang diperlakukan. Jarak antarpetak perlakuan adalah 6 m. Antara barisan  tanaman  pinggir  dari  satu  petak perlakuan dengan barisan tanaman pinggir petak sebelahnya terdapat satu baris tanaman kakao.  Pengaturan  tata  letak  perlakuan disesuaikan dengan rancangan percobaan. Aplikasi  bioinsektisida  menggunakan penyem prot  punggung  semiotomatis bertekanan tinggi volume 15 L. Semua buah pada  setiap  pohon  dalam  setiap  petak perlakuan  (28  pohon  termasuk  tanaman pinggir) disemprot secara merata. Volume penyemprotan sebanyak 200 L/ha.  Sasaran aplikasi  penyemprotan  ialah  buah  kakao muda  ukuran  panjang  7  -  8  cm  (belum disukai hama PBK untuk  bertelur). Buah yang  lebih  besar  kemungkinan  ikut tersemprot  karena  ukuran  buah  tidak seragam. Aplikasi penyemprotan dilakukan pada sore hari ketika sinar matahari tidak terik, karena bioinsektisida peka terhadap sinar  ultra  violet.  Aplikasi  pertama dilakukan  satu  hari  setelah  pengamatan pendahuluan yaitu apabila telah ditemukan jumlah buah muda (panjang 7 - 8 cm) per petak  percobaan  minimal  100  buah. Sebanyak 100 buah muda ukuran tersebut pada  setiap  petak  perlakuan  dan  kontrol diberi  label  dengan  menggantungkan potongan plastik merah pada tangkai buah. Interval aplikasi 14 - 21 hari apabila dalam setiap  petak  percobaan  telah  ditemukan minimal  100  buah  muda  baru  (panjang 7  -  8  cm).  Aplikasi  pertama  dilanjutkan aplikasi kedua, dan terakhir ketiga.
Pengamatan dilakukan pada 10 pohon per petak perlakuan. Setiap pohon berbuah sekitar 50 buah karena per petak percobaan akan diambil 400 buah contoh. Sekiranya buah  contoh  tidak  tercukupi  dari  pohon contoh maka kekurangannya diambil dari
pohon lain terdekat yang masih dalam petak percobaan.  Pengambilan  tanaman  contoh meliputi, tanaman pinggir sebanyak 18 pohon dalam setiap petak percobaan.
Pengamatan  dilakukan  terhadap intensitas kerusakan PBK pada buah yang dipanen  untuk  menentukan  persentase kehilangan hasil per petak percobaan. Panen sebanyak beberapa kali putaran, jika sampai empat  kali  putaran  selama  empat  bulan percobaan maka putaran pertama, kedua, ketiga, dan keempat contoh buah berlabel merah, hijau, kuning, dan putih. Buah contoh panjang 7 - 8 cm ketika diaplikasi bioinsek- tisida diyakini belum terserang hama PBK. Intensitas kerusakan diamati setelah buah contoh dipanen. Intensitas kerusakan PBK terhadap buah ditunjukkan oleh persentase biji  lengket  dan  dinyatakan  dalam  tiga kategori. Serangan ringan bila semua biji masih dapat dikeluarkan dari kulit buah dan antarbiji tidak terlalu lengket (biji lengket <10%). Serangan sedang bila biji saling lengket tetapi masih dapat dikeluarkan dari kulit buah (biji lengket 10 - 50%). Serangan berat bila biji saling lengket dan tidak dapat dikeluarkan  dari  kulit  buah  (biji  lengket >50%).
Persentase  kehilangan  hasil  dihitung berdasarkan persamaan intensitas serangan yang dikemukakan oleh Wardani et al. (1998) dengan rumus:
Y = - 0,0210 + 0,1005X
Y =persentase kehilangan hasil (%)
X =skor  intensitas  serangan  yakni  indeks  yang diperoleh melalui transformasi pengamatan kriteria serangan
=
nBSH = jumlah buah sehat (number of  healthy pod) nBTR =  jumlah  buah  terserang  ringan  (number  of  light damaged pod)
nBTS = jumlah buah terserang sedang (number of moderate damaged pod)
nBTB =  jumlah  buah  terserang  berat  (number  of  severe damaged pod)
TJBYD =  total  jumlah  buah  yang  diamati  (total  number of pod observed)
A = nilai  skor tertinggi  yang dijumpai di lapangan TJBYD A nBTB nBTS nBTR nBSH ) ( ) ( 9 ) ( 3 ) ( 1 ) ( 0   

## Senewe et al.
Populasi hama PBK ditentukan dengan indeks, yakni berupa lubang bekas keluarnya ulat  PBK  pada  kulit  buah  kakao.  Indeks populasi  ulat  kakao  dihitung  pada  saat pemisahan biji dari kulit buah. Pengamatan kehilangan hasil dan indeks populasi PBK dilakukan pada saat pengeluaran biji kakao dar i  buah.  Data  penunjang  m eliputi fitotoksisitas  tanaman  kakao  oleh  bio- insektisida  yang  diuji  yakni  banyaknya tanaman  yang  m enunjukkan  gejala fitotoksisitas akibat aplikasi bioinsektisida. Gejala fitotoksitas tersebut mugkin terlihat pada  buah muda,  daun  muda, tunas  atau pucuk.  Juga  diamati  hama  dan  penyakit bukan sasaran, intensitas serangan oleh hama atau penyakit bukan sasaran dihitung pada setiap petak perlakuan, serta hasil panen biji kering tiap petak perlakuan.
Analisis  data  utama  dan  penunjang disesuaikan  dengan  rancangan  percobaan yang digunakan menurut Gomez  & Gomez (1995).  Tingkat perbedaan dinyatakan pada taraf  = 5%. Tingkat keefektifan (tingkat efikasi) bioinsektisida yang diuji  dihitung dengan rumus Abbott (Ciba-Geigy, 1981 cit. Ditjen PSP, 2011).
EBI = efikasi bioinsektisida yang diuji (%) Ta =kehilangan  hasil  (%)  pada  petak perlakuan bioinsektisida yang diuji setelah penyemprotan bioinsektisida.
Ca =kehilangan  hasil  (%)  pada  petak kontrol  setelah  penyem protan bioinsektisida.
Kriteria efikasi bioinsektisida yang diuji dikatakan  efektif  apabila  pada  sekurang- kurangnya  (1/2  n  +1)  kali  pengamatan (n  =  jumlah  total  pengamatan  setelah aplikasi),  tingkat  efikasi  bioinsektisida tersebut  (EBI)  50%  dengan  syarat:
1) Kehilangan hasil (%) kakao pada petak perlakuan  bioinsektisida  yang  diuji  lebih rendah  atau  tidak  berbeda  nyata  dengan kehilangan  hasil  (%)  kakao  pada  petak perlakuan bioinsektisida pembanding (pada taraf  =  5%), 2)  Kehilangan hasil  (%) kakao pada petak perlakuan bioinsektisida yang diuji  secara  signifikan  lebih  rendah daripada kehilangan hasil (%) kakao pada petak kontrol (pada taraf  = 5%).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  analisis  data  pengujian  tingkat keefektifan  lapangan  bioinsektisida  Bt formulasi menunjukkan kehandalannya yang sangat signifikan (Prob>F = 0,0001) dalam pengendalian hama sasaran PBK.
Dari 100 buah muda yang diperlakukan 2 - 14% buah mati fisiologis (Tabel 1). Rata- rata kematian buah karena faktor fisiologis di  antara  perlakuan  berkisar  antara  7,11 sampai  8,66  buah.  Dilihat  dari  nilai koefisien keragaman (KK) yang relatif rendah (<30%), maka rata-rata tingkat kematian fisiologis ini presisinya cukup tinggi.  Hasil analisis  ragam  menunjukkan  bahwa  nilai Prob>F  pada  aplikasi  I,  II,  III,  dan reratanya jauh  lebih dari  0,05 (Tabel  1). Hal  ini  berarti  bahwa  rata-rata  tingkat kematian fisiologis buah di antara perlakuan tidak berbeda nyata. Implikasinya bahwa faktor kematian karena proses fisiologis tidak mengganggu keakuratan data setiap variabel yang diukur sehingga variabel pada perlakuan dapat diperbandingkan.
Persentase buah terserang hama PBK atau intensitas serangan PBK yaitu banyaknya buah yang  terserang  oleh  hama  tersebut  tanpa memperhatikan tingkat kerusakan biji kakao. Keakuratan data rata-rata pada setiap perlakuan dan setiap aplikasi insektisida Bt formulasi- A  +1WP  ditunjukkan oleh  nilai  KK  yang kurang dari 30%. Dengan demikian data yang
EBI = Ca – Ta Ca x 100%
tersaji  cukup  mewakili  perlakuan  yang diaplikasikan.
Hasil  analisis  menunjukkan  bahwa aplikasi  insektisida  Bt,  baik  formulasi-A +1WP pada berbagai tingkat konsentrasi maupun  formulasi-B  2,5WP  signifikan mengurangi persentase  buah terserang hama PBK  (Tabel  2).  Pada  perlakuan,  buah terserang  berkisar  antara  24,2  -  32,3% sedangkan pada kontrol buah terserang sebesar 91,2%, yang menunjukkan bahwa perlakuan mampu menurunkan serangan PBK hingga 69%.  Sementara  itu  kehandalan  antara Formulasi-A +1WP pada berbagai tingkat
konsentrasi  tidak  berbeda  nyata  dengan Formulasi-B 2,5WP.

## Populasi Hama PBK
Populasi hama PBK menentukan tingkat serangan  dan  kehilangan  hasil  panen  biji kakao. Populasi riil ulat PBK sulit diamati sehingga  berdasarkan  bekas  lubang  yang ditinggalkan saja populasi hama diduga. Satu lubang bekas keluarnya ulat yang teramati pada kulit buah yang disayat dianggap satu ekor. Tabel 3 menunjukkan indeks populasi hama PBK pada setiap perlakuan dari buah
Tabel 2. Persentase buah kakao terserang hama PBK pada berbagai perlakuan formulasi insektisida Bt dan kontrol
Table 2. Cocoa pod borer infestation on cocoa treated with Bt insecticide formulations and untreated treatment
Formulasi-A +1 WP 2.5 g/L 44.67 b **) 9.82 24.33 b 10.01 28.00 b 6.32 32.33 b 16.41 Formulasi-A +1 WP 5 g/L 41.33 bc 14.04 27.33 b 14.54 17.67 c 19.14 28.78 b 21.07 Formulasi-A +1 WP 7.5 g/L 29.00 c 3.01 22.67 b 13.65 21.00b c 0.00 24.22 b 8.58 Formulasi-A +1 WP 10 g/L 32.67 bc 13.27 25.00 b 3.50 22.00b c 20.48 26.56 b 10.24 Formulasi-B WP 2.5 g/L 43.67 bc 14.21 27.33 b 19.51 19.33b c 12.52 30.11 b 20.65 Kontrol (Untreated) 89.67 a 1.70 91.33 a 0.84 92.67 a 1.64 91.22 a 0.82 Prob>F <0.0001 <0.0001 <0.0001 <0.0001 Keterangan (Notes): C.V. = Koefisien keragaman (coefficient of variation); *) Rerata dari 3 aplikasi ( average of 3 applications); **) Angka rata-rata dalam kolom yang sama dan diikuti huruf sama menunjukkan tidak berbeda nyata menurut uji jarak Duncan pada taraf 5% (Figure in the same column followed by the same letter(s) are not significantly different according to DMRT test at 5% level).
Tabel 1. Tingkat kematian fisiologis buah kakao (%) pada berbagai perlakuan insektisida Bt dan kontrol
Table1. Cherelle wilt of cocoa pods(%) at some treatments of Bt insecticide application
Formulasi-A +1 WP 2.5 g/L 5.33 29.78 7.33 21.45 8.67 6.56 7.11 23.64 Formulasi-A +1 WP 5 g/L 8.67 23.77 6.33 17.47 7.67 10.21 7.56 15.54 Formulasi-A +1 WP 7.5 gL 6.67 4.39 9.67 24.93 7.00 14.55 7.78 21.15 Formulasi-A +1 WP 10 g/L 9.33 17.22 8.33 9.10 8.33 18.86 8.66 6.66 Formulasi-B WP 2.5 g/L 6.33 20.17 7.67 24.15 5.00 16.83 6.33 21.08 Kontrol (Untreated) 9.33 11.55 7.33 8.10 6.33 36.05 7.66 19.93 Prob>F 0.407 0.4454 0.613 0.4885 Keterangan (Notes): C.V. = coeficient of variation; *) Rerata dari 3 aplikasi (average of 3 applications). Perlakuan Treatment Aplikasi-2 Application-2 Aplikasi-3 Application-3 Rerata Average *) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V.
Average (%) Aplikasi-1 Application-1 Perlakuan Treatment
Aplikasi-2 Application-2 Aplikasi-3 Application-3 Rerata Average *) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V. Average (%) Aplikasi-1
Application-1
Senewe et al.
kakao yang dipanen. Populasi PBK per buah cukup bervariasi antara 1 - 16 ekor, dengan rata-r ata  2,22  ekor.  Hasil  analisis menunjukkan bahwa aplikasi insektsida Bt, baik  formulasi-A  +1WP  pada  berbagai tingkat konsentrasi maupun formulasi-B 2,5 WP signifikan mengurangi populasi indeks hama PBK. Pada perlakuan, populasi indeks hama PBK berkisar antara 21,5 - 28,6 ekor sedang pada kontrol 153,1 ekor, sehingga perlakuan mampu menurunkan populasi PBK sebesar 83,6%. Sementara itu kehandalan antara insektisida Bt formulasi-A  +1WP pada  berbagai  tingkat  konsentrasi  dalam menekan indeks populasi hama PBK tidak berbeda nyata dengan insektisida pembanding formulasi-B 2,5 WP.

## Intensitas Kerusakan
Intensitas  kerusakan  yaitu  ukuran tingkat keparahan kerusakan biji kakao yang terserang  oleh  ulat  PBK.  Variasi  data intensitas kerusakan hama PBK mirip dengan variasi  data  indeks  populasi  hama  PBK. Tabel 4 menunjukkan intensitas kerusakan hama  PBK  pada  setiap  perlakuan.  Hasil analisis  menunjukkan  bahwa  aplikasi
insektsida Bt, baik formulasi-A +1WP pada berbagai  tingkat  konsentrasi  maupun formulasi-B  2,5  WP  sangat  signifikan mengurangi intensitas kerusakan hama PBK. Pada perlakuan, intensitas kerusakan hama PBK berkisar antara 9,2 - 14,8% sedang pada  kontrol  80,7%;  hampir  mampu menurunkan intensitas kerusakan 70,2%. Sementara itu kehandalan antara Formulasi- A +1WP pada berbagai tingkat konsentrasi dalam mengurangi intensitas kerusakan hama PBK tidak berbeda nyata dengan formulasi- B 2,5WP.

## Kehilangan Hasil
Estimasi  kehilangan  hasil  panen  biji kakao  akibat  kerusakan  hama  P BK berdasarkan model regresi linier menurut Wardani  et  al.  (1998)  disajikan  dalam Tabel 5. Variasi data kehilangan hasil panen biji kakao mirip dengan variasi data populasi indeks  hama  PBK  dan  data  intensitas kerusakan hama tersebut.
Hasil  analisis  menunjukkan  bahwa aplikasi  insektsida  Bt  baik  formulasi-A +1WP pada berbagai tingkat konsentrasi maupun  formulasi-B  2,5WP  signifikan

## Tabel 3. Indeks pupulasi hama PBK pada berbagai perlakuan insektisida Bt dan kontrol
Table 3. Population index of cocoa pod borer on the plots treated with Bt insecticide formulations compared with untreated plots
Keterangan (Notes): C.V. = Koefisien keragaman (coefficient of variation); *) Rerata dari 3 aplikasi (average of 3 applications); **) Angka rata-rata dalam kolom yang sama dan diikuti huruf sama menunjukkan tidak berbeda nyata menurut uji jarak Duncan pada taraf 5% (Figure in the same column followed by the same letter(s) are not significantly different according to DMRT test at 5% level).
Formulasi-A +1 WP 2.5 g/l 109.33 bc 8.75 44.00 b 25.20 48.33 b 12.30 28.61 b 12.15 Formulasi-A +1 WP 5 g/l 79.67 cd 6.39 45.33 b 34.66 21.33 c 25.08 27.02 b 17.63 Formulasi-A +1 WP 7.5 g/l 59.33 d 8.56 37.00 b 32.62 29.33b c 2.59 21.51 b 9.73 Formulasi-A +1 WP 10 g/l 75.00 d 6.85 34.67 b 8.02 24.00 c 34.17 22.06 b 15.80 Formulasi-B WP 2.5 g/l 125.33 b 15.98 38.67 b 22.66 28.00b c 18.54 23.07 b 20.02 Kontrol (Untreated) 382.67 a 1.50 420.00 a 7.85 450.67 a 0.76 153.09 a 1.36 Prob>F <0.0001 <0.0001 <0.0001 0.0013 Perlakuan Treatment Aplikasi-2 Application-2 Aplikasi-3 Application-3 Rerata Average *) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V. Average (%)
Rerata C.V. Average (%) Aplikasi-1 Application-1

## Keefektifan bioinsektisida Bacillus thuringiensis terhadap PBK pada kondisi lapangan
mengurangi  kehilangan  hasil  panen  biji kakao.  Pada  perlakuan,  kehilangan  hasil berkisar antara 0,91 - 1,47% sedang pada kontrol  8,09%,  yang  hampir  mampu menurunkan  kehilangan  hasil  panen  biji kakao  85,3%.  Sementara  itu  kehandalan antara formulasi-A +1WP pada berbagai tingkat  konsentrasi  dalam  mengurangi kehilangan  hasil  panen  biji  kakao  tidak berbeda  signifikan  dengan  formulasi-B 2,5WP.

## Tingkat Keefektifan Insektisida Bt.
Efikasi bioinsektisida yang diuji dihitung dengan  rumus  Abbott  dinyatakan  dalam persen.  Nilai  efikasi  insektisida  Bt  pada berbagai  konsentrasi  disajikan  dalam Tabel  6.  Dilihat  dari  nilai  coeficient  of variation (C.V.) yang relatif rendah pada perhitungan kumulatif (<30%) maka rata- rata  tingkat  efikasi  dari  setiap  perlakuan cukup akurat.

## Tabel 4. Intensitas kerusakan hama PBK pada berbagai perlakuan insektisida Bt dan kontrol
Table 4. Damage intensity of pods caused by cocoa pod borer treated by Bt insecticide formulation compared with untreated pods
Keterangan (Notes): C.V. = Koefisien keragaman (coefficient of variation); *) Rerata dari 3 aplikasi (average of 3 applications); **) Angka rata-rata dalam kolom yang sama dan diikuti huruf sama menunjukkan tidak berbeda nyata menurut uji jarak Duncan pada taraf 5% (Figure in the same column followed by the same letter(s) are not significantly different according to DMRT test at 5% level).
Formulasi-A +1 WP 2,5 g/L 17.62 b 20.70 6.34 c 11.81 12.44 b 18.72 12.13 b 21.54 Formulasi-A +1 WP 5 g/L 19.60 b 29.33 13.79 b 31.54 10.95 b 12.74 14.78 b 11 Formulasi-A +1 WP 7,5 g/L 9.00 b 6.07 9.97 bc 5.24 8.77 b 23.18 9.25 b 3.05 Formulasi-A +1 WP 10 g/L 13.60 b 7.80 10.40 bc 24.06 13.01 b 38.61 12.34 b 5.74 Formulasi-B WP 2,5 g/L 19.60 b 19.47 7.96 bc 5.79 7.33 b 12.04 11.63 b 23.24 Kontrol (Untreated) 70.41 a 10.97 85.54 a 1.02 86.09 a 2.50 80.68 a 2.61 Prob>F <0.0001 <0.0001 <0.0001 <0.0001
Tabel 5. Kehilangan hasil biji kakao akibat kerusakan hama PBK pada berbagai perlakuan insektisida Bt dan kontrol Table 5. Yield losses of cocoa beans caused by cocoa pod borer on the treatments of Bt insecticide formulation compared with untreated treatment Formulasi-A +1 WP 2,5 g/L 1.75 b 20.99 0.62 c 12.19 1.23 b 19.03 1.20 b 25.12 Formulasi-A +1 WP 5 g/L 1.95 b 29.67 1.37 b 31.92 1.08 b 12.96 1.47 b 15.03 Formulasi-A +1 WP 7,5 g/L 0.88 b 6.12 0.98 bc 5.40 0.86 b 23.66 0.91 b 3.52 Formulasi-A +1 WP 10 g/L 1.34 b 7.97 1.02 bc 24.72 1.28 b 39.33 1.21 b 7.16 Formulasi-B WP 2,5 g/L 1.95 b 19.80 0.78 bc 5.84 0.72 b 12.40 1.15 b 29.42 Kontrol (Untreated) 7.06 a 10.98 8.58 a 1.02 8.63 a 2.48 8.09 a 5.62 Prob>F <0.0001 <0.0001 <0.0001 <0.0001 Keterangan (Notes): C.V. = Koefisien keragaman (coefficient of variation); *) Rerata dari 3 aplikasi (average of 3 applications);
**) Angka rata-rata dalam kolom yang sama dan diikuti huruf sama menunjukkan tidak berbeda nyata menurut uji jarak Duncan pda taraf 5% (Figure in the same column followed by the same letter(s) are not significantly different according to DMRT test at 5% level).
Perlakuan Treatment Aplikasi-2 Application-2 Aplikasi-3 Application-3 Rerata Average *) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V.
Average (%) Aplikasi-1 Application-1 Perlakuan Treatment
Aplikasi-2 Application-2 Aplikasi-3 Application-3 Rerata Average *) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V. Average (%)
Aplikasi-1 Application-1

## Senewe et al.
Hasil analisis ragam menunjukkan bahwa nilai Prob>F pada aplikasi I, II, III, dan kumulatif jauh lebih dari 0,05 (Tabel 6). Hal ini berarti bahwa rata-rata tingkat efikasi insektisida  Formulasi-A  +1WP  pada berbagai  konsentrasi  dan  Formulasi-B 2,5WP tidak berbeda nyata. Implikasinya bahwa  insektisida  Bt  formula  baru  yakni Formulasi-A +1WP sebaik dengan formula Formulasi-B  2,5WP  yang  sudah  beredar lama di pasaran.

## Hasil Panen Biji Kering Kakao
Hasil panen biji kering kakao ditentukan oleh  berbagai  faktor,  antara  lain  tingkat
intensitas kerusakan hama PBK. Intensitas kerusakan hama PBK berbeda nyata antara perlakuan  insektisida  Bt  dan  kontrol. Tabel 7 menunjukkan variasi hasil biji kakao kering  pada  berbagai  perlakuan.  Hasil analisis  menunjukkan  bahwa  aplikasi insektsida Bt, baik formulasi-A +1WP pada berbagai  tingkat  konsentrasi  maupun formulasi-B  2,5WP  nyata  meningkatkan hasil  panen  biji  kering  kakao.  Pada perlakuan,  hasil  panen  biji  kering  kakao berkisar antara 3,30 - 3,37 kg sedang pada kontrol 2,40 kg, artinya mampu meningkat- kan  hasil panen biji kering kakao sekitar 38,96%. Sementara itu hasil panen biji kakao kering antara perlakuan formulasi-A +1WP
Tabel 7. Hasil panen biji kakao kering (kg) pada berbagai perlakuan formulasi insektisida Bt dan kontrol Table 7. Harvested dry cocoa beans (kg) in the plots treated with Bt insecticide formulation compared with untreated plot
Formulasi-A +1 WP 2.5 g/L 3.32 ab 4.67 3.42 a 4.72 3.33 a 1.71 3.36 a 1.64 Formulasi-A +1 WP 5 g/L 3.17 bc 3.37 3.41 a 1.95 3.46 a 3.22 3.35 a 4.63 Formulasi-A +1 WP 7.5 g/L 3.35 a 1.21 3.30 a 3.16 3.46 a 2.34 3.37 a 2.43 Formulasi-A +1 WP 10 g/L 3.20 abc 0.36 3.37 a 2.37 3.41 a 2.08 3.33 a 3.35 Formulasi-B WP 2.5 g/L 3.12 c 2.21 3.37 a 6.34 3.41 a 4.25 3.30 a 4.76 Kontrol (Untreated) 2.42 d 3.74 2.35 b 0.65 2.43 b 2.11 2.40 b 1.82 Prob>F <0.0001 <0.0001 <0.0001 <0.0001
Keterangan (Notes): C.V. = Koefisien keragaman (coefficient of variation); *) Rerata dari 3 aplikasi (average of 3 applications); **) Angka rata-rata dalam kolom yang sama dan diikuti huruf sama menunjukkan tidak berbeda nyata menurut uji jarak Duncan pada taraf 5% (Figure in the same column followed by the same letter(s) are not significantly different according to DMRT test at 5% level).
Tabel 6. Tingkat efikasi (%) insektisida Bt pada berbagai perlakuan insektisida Bt pada kondisi aplikasi di lapangan
Table 6. Efficacy level (%) of Bt insecticide formulation against cocoa pod borer in field application
Formulasi-A +1 WP 2.5 g/L 72.69 13.17 92.80 1.00 85.89 2.67 83.79 12.19 Formulasi-A +1 WP 5 g/L 68.84 20.64 84.15 5.11 87.57 1.46 80.19 12.44 Formulasi-A +1 WP 7.5 g/L 86.82 2.76 88.59 0.80 89.98 2.46 88.46 1.79 Formulasi-A +1 WP 10 g/L 79.83 5.12 88.00 3.12 85.16 7.03 84.33 4.92 Formulasi-B WP 2.5 g/L 69.84 13.07 90.89 0.67 91.71 1.02 84.15 14.73 Prob>F 0.6744 0.2917 0.6698 0.8433 Keterangan (Notes): c.v. = Koefisien keragaman (coefficient of variation); *) Rerata dari 3 aplikasi (average of 3 applications). Perlakuan Treatment
Aplikasi-2
Application-2 Aplikasi-3 Application-3 Rerata Average *) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V. Average (%)
Rerata C.V. Average (%) Aplikasi-1 Application-1 Perlakuan Treatment Aplikasi-2
Application-2 Aplikasi-3 Application-3 Rerata Average *) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V. Average (%)
Rerata C.V.
Average (%) Aplikasi-1 Application-1

## Keefektifan bioinsektisida Bacillus thuringiensis terhadap PBK pada kondisi lapangan
pada  berbagai  tingkat  konsentrasi  dan perlakuan formulasi-B 2,5WP relatif sama.

## Tambahan Hasil Panen
Tambahan hasil panen akibat perlakuan insektisida Bt berkisar antara 35,1 - 40,4% jika  dibanding  dengan  kontrol.  Kontrol adalah  pengendalian  hama  PBK  yang dilakukan  oleh  petani  setempat.  Sampai dengan musim buah pada saat kajian efikasi lapangan ini dilakukan petani setempat tidak melakukan  pengendalian  hama  PBK. Seberapa besar upaya pengendalian hama PBK dengan insektisida Bt dapat meningkat- kan hasil panen biji kering kakao, disajikan pada Tabel 8.
Hasil analisis menunjukkan bahwa rata- rata persentase tambahan hasil biji kering kakao akibat perlakuan insektisida formulasi- A  +1WP  pada  berbagai  konsentrasi  dan formulasi-B  2,5WP  tidak  berbeda  nyata. Implikasinya bahwa insektisida Bt formula baru yakni formulasi-A +1WP sebaik dengan formulasi-B 2,5WP yang sudah beredar lama di pasaran. Walaupun demikian, dari segi tambahan hasil panen perlakuan formulasi- A +1WP cenderung lebih unggul daripada formulasi-B 2,5WP pada tingkat konsentrasi yang sama (2,5g/L) yakni selisih 4,79%.
Pengamatan gejala fitotoksisitas akibat aplikasi  insektisida  Bt  baik  formulasi-A +1WP maupun formulasi-B 2,5WP tidak dijumpai pada buah muda, daun muda, tu- nas, atau pucuk. Keberadaan hama selain PBK dan penyakit tanaman kakao selama kajian berlangsung tidak berarti. Beberapa hama yang dijumpai antara lain kutu putih, ulat api, dengan populasi yang sangat rendah.
Keefektifan  B.  thuringiensis  dalam membunuh serangga PBK telah diteliti di laboratorium  oleh  Widiastuti  &  Santoso (1996), dan Santoso et al. (2004). Sebanyak 16  isolat  Bt  yang  diambil  dari  berbagai ekosistem  dan  koleksi  Institut  Pertanian Bogor serta dua isolat dari produk komersial telah diuji di laboratorium untuk mengetahui isolat yang paling efektif dalam membunuh larva  serangga  PBK.  Hasil  pemilihan (skrining) menunjukkan bahwa tiga isolat yang paling efektif dalam membunuh larva PBK, yaitu isolat TPi 6.1; TKa 25.2; dan DKa 35.2. Isolat TPi 6.1 berasal dari tanah hutan pinus di daerah Wonosobo, TKa 25.2 berasal dari tanah kebun kakao di Pemalang, dan DKa 35.2 merupakan isolat dari daun kakao asal Cianjur, Jawa Barat. Hasil analisis PCR (polymerase chain reaction) menunjuk- kan bahwa isolat DKa 35.2 dan TKa 25.2 mengandung  gen  cryI  tetapi  bukan  cryIA sedangkan TPi 6.1 diduga mengandung gen
Formulasi-A +1 WP 2,5 g/L
37.1 1.39 45.5 15.68 37.1 7.05 39.9 12.11 Formulasi-A +1 WP 5 g/L 31.1 24.65 45.1 6.83 42.6 9.96 39.6 18.80 Formulasi-A +1 WP 7,5 g/L 38.5 9.48 40.2 10.63 42.4 0.97 40.4 4.93 Formulasi-A +1 WP 10 g/L 32.3 16.60 43.2 9.98 40.4 9.67 38.7 14.64 Formulasi-B WP 2,5 g/L 29.6 7.15 43.2 23.08 32.5 4.73 35.1 20.45 Prob>F 0.1583 0.8535 0.6698 0.8020 Keterangan (Notes): C.V. = Koefisien keragaman (coefficient of variation); *) Rerata dari 3 aplikasi (average of 3 applications).
Tabel 8. Persentase tambahan hasil biji kakao kering pada berbagai perlakuan insektisida Bt dibandingkan dengan kontrol Table 8. Percentage of additional increase of dry cocoa bean production on the plots treated with Bt insecticide formulation compared with untreated plots
Perlakuan Treatment Aplikasi-2 Application-2 Aplikasi-3 Application-3 Rerata Average *) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V. Average (%) Rerata C.V. Average (%) Aplikasi-1
Application-1
Senewe et al.
cry  tetapi  bukan  gen  cryI.  (Widiastuti  & Santoso, 1996).
Pengujian  laboratorium  terhadap berbagai  tipe  toksin  juga  mendapatkan bahwa toksin Cry1Ia dan SN 19 merupakan yang  paling  efektif  dalam  membunuh larva  PBK  dengan  nilai  LC-50  (Lethal Concentration 50%) masing-masing sebesar 3.90  ng/cm2  dan  4.70  ng/cm2  (Santoso et  al.,  2004).  Insektisida  Bt  formulasi-A +1WP   mengandung  bahan  aktif  bakteri Bacillus thuringiensis var. kurstaki strain
Z-52 serotipe H-3a 3b.Varietas kurstaki oleh beberapa peneliti disebut mengandung gen cryIA, bahkan cry1Aa, cry1Ac dan cry2Aa. Penyandi gen ini akan menghasilkan toksin yang spesifik sangat toksik terhadap serangga hama dari golongan Lepidoptera (Budiani et  al.,  1996;  Bozlagan  et  al.,  2010). Penggunaan insektisida Bt hendaknya juga dipertimbangkan  secara  hati-hati,  karena sampai dengan saat ini telah banyak serangga hama yang kebal (tahan) terhadap insektisida mikroba ini, baik dari golongan serangga ordo Lepidoptera, Diptera maupun Coleoptera (Bauer, 1995).

## KESIMPULAN
1. Dibanding  dengan  perlakuan  kontrol, Formulasi-A +1WP signifikan menurunkan tingkat serangan  dan  populasi,  tingkat kerusakan, dan kehilangan hasil panen biji kakao kering akibat hama PBK.
2. Pada  tingkat  konsentrasi  yang  sama (2,5 g/L) keefektifan Formulasi-A +1WP dalam mengendalikan hama PBK relatif sama dengan Formulasi-B 2,5WP.
3. Pada konsentrasi 2,5 g/L, formulasi-A +1WP cenderung lebih unggul daripada formulasi-B 2,5WP, dalam meningkatkan hasil panen biji kakao kering.
4. Formulasi-A  +1WP  maupun  formu- lasi-B  2,5WP  tidak  bersifat  fitotoksik terhadap tanaman kakao.

## DAFTAR PUSTAKA
Atmawinata, O.; S. Wiryadiputra; N. Priatno; E. Sulistyowati & Zaenudin (1994). Strategi  penanggulangan  hama penggerek buah kakao di Indonesia. Prosiding Lokakarya Penanggulangan Hama PBK. Pusat Penelitian Kopi dan
Kakao. Jember.
Badan Pusat Statistik Maluku (2010). Maluku dalam Angka. BAPPEDA Maluku.
Bauer, L.S. (1995). Resistance: A threat to the insecticidal crystal proteins of Bacil- lus thuringiensis. Florida Entomologist, 78,414 - 443.
Bozlagan, I.; A. Ayvaz;  F. Ozturk; L. Acik; M.  Akbulut  &  S.  Yilmaz  (2010). Detection of the cry1 gene in Bacil- lus thurngiensis isolates from agricul- tural fields and their bioactivity against two  stored  product  moth  larvae. Turkish  Journal  of  Agriculture  and Forestry. 34, 145 - 154.

## Dinas Pertanian Provinsi Maluku (2007). Peta
Sebaran  Organisme  Pengganggu Tanaman (OPT) Perkebunan di Provinsi Maluku Tahun 2006. Dinas Pertanian
Provinsi Maluku, Ambon.
Ditjen PSP (2011). Pedoman Umum Skrining Pestisida.  Direktorat  Jenderal Prasarana  dan  Sarana  Pertanian, Direktorat  Pupuk  dan  Pestisida, Kementerian Pertanian.
Gomez, K.A. & A.A. Gomez  (1995).  Prosedur Statistik Untuk Penelitian Pertanian. Edisi Kedua. Penerjemah: E. Sjam- sudin  &  J.S.  Baharsjah.  Penerbit Universitas Indonesia (UI-Press).
Goot, P. van der (1917). De swarte cacao-mier (Dolichoderus bituberculatus Mayr) en haar beteekenis voor de cacao-cultuur op  Java.  (The  black  cocoa  ant, Dolichoderus bituberculatus Mayr, and its importance for the cocoa culture in Java). Mededeelingen Proefstation Midden Java, 25, 1 - 124.
Hunsberger,  A.  (2000).  Bt.  (Bacillus  thu- ringiensis), A Microbial Insecticide.
University  of  Florida  Publication ENY-275.
Kalshoven, L.G.E. (1981).  The Pests of Crops in Indonesia. P.T. Ichtiar Baru-Van Hoeve, Jakarta.
Lim,  G.T.  (1992).  Biology,  ecology  and control  of  cocoa  pod  borer, Conopomorpha cramerella (Snellen). p. 85 - 100. In:  P.J. Keane & C.A.J. Putter (Eds.). Cocoa Pest and Disease Management  in  Southeast  Asia  and Australasia. FAO Plant Production and
Protection Paper 112. FAO. Rome.
Ooi, P.A.C. (1992). Prospects for biological control  of  cocoa  insect  pests. p.  101  -  107.    In:  P.J.  Keane  & C.A.J. Putter (Eds.). Cocoa Pest and Disease Management in Southeast Asia and Australasia. FAO Plant Production and Protection Paper 112. FAO. Rome.
Prabagaran, S.R.; K.R. Rupesh; S.J. Nimal; S.  Sudha-Rani  &  S.  Jayachandran (2003).  Advances  in  pest  control: The  role  of  Bacillus  thuringiensis. Indian Journal of Biotechnology, 2, 302 - 321.
Rosmana,  A.;  M.  Shepard;  P.  Hebbar  & A. Mustari (2010). Control of cocoa pod  borer  and  Phytophthora  pod rot  using  degradable  plastic  pod sleeves  and  nematode,  Steinernema carpocapsae. Indonesian Journal of Agricultural Science, 11, 41 - 47.
Sanahuja,  G.;  R. Banakar;  R.M. Twyman; T. Capel & P. Christou (2011). Bacillus thuringiensis: a century of research, development and commercial applica- tion. Plant Biotechnology Journal, 9, 283 - 300.
Santoso, D; T. Chaidamsari; S. Wiryadiputra & R.A. de Maagd (2004). Activity of Bacillus thuringiensis toxins against cocoa pod borer larvae. Pest Manage- ment Science, 60, 735 - 738.
See,Y.A. & K.C. Khoo (1996). Influence of Dolichoderus thoracicus (Hymenoptera: Formicidae) on cocoa pod damage by Conopomorpha  cramerella  (Lepi- doptera: Gracillariidae) in Malaysia. Bulltin Entomological Research, 86, 467 - 474.
Sinaga, M.S. (2007). Laporan Pemeriksaan Kadar Bahan Aktif dan Uji Kemurnian Formulasi  Batindo+1.  Departemen Proteksi Tanaman, Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor.
Sulistyowati,  E.  &  Y.D.  Yunianto  (1995). Inventarisasi  musuh  alami  hama penggerek  buah  kakao  (PBK),
Conopomorpha cramerella Snell. di
Provinsi Maluku. Pelita Perkebunan 11, 76 - 89.
Wardani, S.; H. Winarno & E. Sulistyowati. (1998). Model pendugaan kehilangan hasil akibat kerusakan hama penggerek buah kakao. Pelita Perkebunan, 13, 33 - 39.
Widiastuti, H. & D. Santoso (1996). Toksisitas beberapa isolat Bacillus thuringiensis terhadap penggerek buah kakao dan karasteristik  gen  cry-nya.  Menara
Perkebunan, 64, 123 - 132.
Wiryadiputra, S. (2000). The use of entomo- pathogenic fungus (Beauveria bassiana) to control cocoa pod borer (Conopo- morpha  cramerella)  in  the  field. p. 27 - 32. In: C.L. Bong; C.H. Lee & F.S. Shari (Eds.). Proceedings of INCOPED 3 rd International Seminar on Cocoa  Pests  and  Diseases.  16  -  17 October 2000. Kota Kinabalu, Sabah, Malaysia.
Wiryadiputra, S. (2007). Pemapanan semut hitam (Dolichoderus thoracicus) pada perkebunan kakao dan pengaruhnya terhadap kerusakan hama Helopeltis spp. Pelita Perkebunan, 23, 57 - 71.
*********.