Pemanfaatan minyak biji krokot Portulaca oleracea sebagai sumber asam lemak esensial pada pakan ikan mas, Cyprinus carpio Linnaeus 1758
[Utilization of purslane Portulaca oleracea seed oil as a source of fatty acid essential
of common carp Cyprinus carpio Linnaeus 1758 diet]
Wiwik Hildayanti 1,  , Mia Setiawati 2 , Dedi Jusadi 2
1 Program Studi Ilmu Akuakultur, Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor Jln. Raya Dramaga, Kampus IPB Dramaga 16680
2 Departemen Budidaya Perairan, FPIK-IPB Jln. Agatis, Kampus IPB, Dramaga, Bogor 16680
Diterima: 18 November 2015; Disetujui: 29 Maret 2016

## Abstrak
Penelitian bertujuan mengkaji pemanfaatan minyak biji krokot Portulaca oleracea sebagai sumber asam lemak esensial pada pakan ikan mas Cyprinus carpio untuk menggantikan minyak ikan. Percobaan menggunakan rancangan acak leng- kap, terdiri atas empat perlakuan dan tiga ulangan. Pakan perlakuan terdiri atas minyak ikan, minyak jagung, dan mi- nyak kelapa (P0), minyak biji krokot, dan minyak kelapa (P1), minyak jagung dan minyak kelapa (P2), dan minyak ke- lapa (P3). Ikan mas dengan bobot 3,11±0,05 g dipelihara dalam akuarium berukuran 50×40×35 cm 3 dengan padat tebar 10  ekor  akuarium -1 selama  60  hari.  Hasil  penelitian  menunjukkan  perlakuan P1  menghasilkan  nilai  laju  pertumbuhan harian (3,5±0,1%), efisiensi pakan (71,7±4,9%), retensi protein (22,1±1,9%), dan retensi lemak (81,4±4,5%) tertinggi dan  memberikan  pengaruh  yang  nyata  (p<0,05). Parameter  tingkat  kelangsungan  hidup, indeks  hepatosomatik,  koles- terol, trigliserida, high density lipoprotein, dan low density lipoprotein tidak menunjukkan adanya  perbedaan  (p>0,05). Komposisi asam lemak tubuh ikan mas pada perlakuan P1 yaitu total asam lemak jenuh sebesar 21,4%, asam lemak tak jenuh tunggal  sebesar  36,9%,  n-3  sebesar  10,4%,  n-6  sebesar  16,1%  dan  rasio n-3/n-6  sebesar  0,6.  Berdasarkan  hasil yang diperoleh disimpulkan bahwa minyak biji krokot dapat menggantikan minyak ikan pada pakan ikan mas.
Kata penting: asam lemak, ikan mas, minyak biji krokot, 18:2n-6, 18:3n-3

## Abstract
This study attempts to evaluate the use of oils of purslane Portulaca oleracea as a source of an essential fatty in feed of common carp Cyprinus carpio to replace fish oil. The experiment used completely randomized design with 4 treatments and 3 replications, respectively. Feed treatment consists of fish oil, corn oil and coconut oil (P0), purslane seed oil and coconut oil (P1), corn oil and coconut oil (P2), and coconut oil (P3). Fishes with initial body weight 3.11±0.05 g reared in 50×40×35 cm 3 aquariums with a density of 10 fish aquarium -1 during 60 days rearing periods. Results showed that diet  P1  have  different  effects  (p<0.05)  which  had  the  highest  daily  growth  rate  (3.5±0.1%),  feed  efficiency (71.7±4.9%),  protein  retention  (22.1±1.9%)  and  lipid  retention  (81.4±4.5%).  The  survival  rate,  hepatosomatic  index, cholesterol, triglycerides, high density lipoprotein and low density lipoprotein showed no difference (p>0.05). The fatty acid composition of the carps’s body on diet P1  was total of saturated fatty acid 21,4%,  monounsaturated fatty acid 36,9%, n-3 fatty acids 10,4%, n-6 fatty acids 16,1% and ratio n-3/n6 is 0,6. Thus, it can be concluded that purslane seed oil can replace fish oil in carp.
Keywords: fatty acids, common carp, purslane seed oil, 18:2n-6, 18:3n-3

## Pendahuluan
Ikan  mas Cyprinus  carpio merupakan  je- nis  ikan  air  tawar  ketiga  yang  paling  penting  di dunia (FAO 2009, Ljubojević et al. 2015). Di In- donesia,  permintaan  pasar  akan  ikan  mas  terus meningkat  dari  282.695  ton  pada  tahun  2010 menjadi  484.110  pada  tahun  2014  (KKP  2015). Hal  ini  menunjukkan  budi  daya  ikan  mas  mem-
punyai prospek yang tinggi untuk dikembangkan. Namun,  kendala  yang  dihadapi  oleh  pembudi- daya  adalah  biaya  pakan  yang  tinggi  yang  tidak diikuti  dengan  harga  jual  ikan.  Mahalnya  biaya pakan  dikarenakan  bahan  bakunya  sebagian  be- sar  masih  diambil  dari  luar,  seperti  tepung  ikan, tepung udang, tepung kedelai, dan minyak ikan.
Minyak  ikan  merupakan  sumber  lemak dan  asam  lemak  esensial  pada  pakan,  terutama untuk  jenis  ikan  karnivora  (Ljubojević et  al.
Penulis korespondensi Surel: yanti.hilda90@gmail.com
2015). Menurut IFFO (2013), minyak ikan seba- nyak  75%  dari  total  pasokan  global  digunakan untuk  kegiatan  budi  daya  dan  87%-nya  diguna- kan  untuk  pakan  ikan  air  laut.  Merino et  al .
(2012)  mengatakan  bahwa  harga  minyak  ikan akan  meningkat  secara  signifikan  di  masa  depan dan  adanya  kekhawatiran  kontaminasi  minyak ikan  dengan  polutan  organik  (Bell et  al .  2012).
Permintaan  minyak  ikan  yang  terus  meningkat juga  menyebabkan  stok  ikan  global  ikut  berku- rang (Pauly et al . 2002).
Oleh karena itu, identifikasi sumber lemak alternatif  lokal  berkelanjutan  untuk  budi  daya merupakan tantangan besar bagi peneliti saat ini. Beberapa  penelitian  telah  menunjukkan  bahwa minyak  nabati  dapat  menggantikan  minyak  ikan tanpa  memengaruhi  pertumbuhan  dan  kelang- sungan hidup ikan (Kowalska et al. 2010). Akan tetapi  penggantian  minyak  ikan  dengan  minyak nabati  tersebut  mempunyai  kendala,  karena  mi- nyak  nabati  kaya  asam  lemak  n-6 polyunsa- turated  fatty  acids (PUFA)  sedangkan  minyak ikan  kaya  asam  lemak  n-3 highly  unsaturated fatty  acids (HUFA)  (Michaelsen et  al .  2011).
Menurut  Thanuthong et  al .  (2011),  penggantian minyak  ikan  dengan  minyak  nabati  harus  sede- mikian  rupa  sehingga  katabolisme  asam eicosa- pentaenoat (20:5n-3) dan asam docosahexaenoat (22:6n-3)  dapat  diminimalkan  dan  kelebihan pengendapan  asam linoleat (18:2n-6)  dapat  di- hindari.  Hal  ini  dikarenakan  pengurangan  asam lemak 20:5n-3 dan 22:6n-3 dalam otot ikan dapat memengaruhi  retensi  lemak  pada  jaringan  adi- posit,  sifat  fisikokimiawi  selama  penyimpanan dan  pengolahan,  serta  memengaruhi  kualitas akhir ikan (Hixson et al . 2014).
Salah satu minyak nabati lokal yang dapat dimanfaatkan  untuk  menggantikan  minyak  ikan adalah  minyak  biji  krokot Portulaca  oleracea .
Minyak biji  krokot dianggap potensial karena ti-
dak hanya  kaya asam lemak  18:2n-6, tetapi juga kaya  asam  lemak linolenat (18:3n-3)  yang  dibu- tuhkan oleh ikan mas (Uddin et al . 2014). Menu- rut  Liu et  al .  (2000),  biji  krokot  mengandung asam  lemak  18:3n-3  sebesar  43,7%  dan  18:2n-6 sebesar  27,1%.  Ikan  air  tawar,  seperti  ikan  mas, memiliki  kemampuan  untuk  mengubah  asam  le- mak 18:2n-6 menjadi arakidonat (20:4n-6), serta asam  lemak  8:3n-3  menjadi  (20:5n-3)  dan (22:6n-3),  karena  mengandung  enzim elongase ,
Δ5 dan Δ6 desaturase (Morais et al . 2009) yang tidak dipunyai oleh kebanyakan ikan air laut.
Di  Indonesia  krokot  tersebar  di  seluruh daerah  dan  banyak  tumbuh  di  Bogor,  Semarang, Blitar,  dan  Kalimantan  Tengah  (Irawan et  al . 2003).  Masa  budi  daya  yang  dibutuhkan  untuk menghasilkan minyak biji krokot sebagai sumber lemak  pakan  cukup  singkat  yaitu  selama  70  hari (Liu et al . 2000). Selain itu, krokot dapat tumbuh sepanjang  tahun  mulai  dari  dataran  rendah  sam- pai 1800 m di atas permukaan laut, serta mampu menoleransi  kondisi  tanah  yang  tidak  subur,  pa- dat, dan kering (Uddin et al. 2014), sehingga da- pat  diproduksi  secara  berkelanjutan  dan  massal. Pemanfaatan  krokot  di  Indonesia  belum  dilaku- kan  secara  maksimal,  yaitu  krokot  dijadikan  se- bagai  tanaman  hias,  campuran  masakan  dan  ta- naman herbal, serta beberapa petani menganggap krokot  sebagai  tumbuhan  gulma  (Irawan et  al . 2003).  Oleh  karena  itu,  penelitian  ini  dilakukan dengan  tujuan  untuk  mengkaji  pemanfaatan  mi- nyak  biji  krokot  sebagai  sumber  asam  lemak esensial  pada  pakan  ikan  mas  untuk  menggan- tikan minyak ikan.

## Bahan dan metode

## Rancangan percobaan
Penelitian ini terdiri dari atas empat perla- kuan dan tiga kali ulangan. Perlakuan  yang dila- kukan  adalah  penggunaan  sumber  asam  lemak
esensial yang berbeda dalam pakan buatan, yaitu: Perlakuan P0 (kontrol):  minyak ikan,  minyak ja- gung, dan  minyak kelapa; Perlakuan P1:  minyak biji krokot dan minyak kelapa; Perlakuan P2: mi- nyak  jagung  dan  minyak  kelapa;  dan  Perlakuan P3: minyak kelapa.

## Pembuatan minyak biji krokot
Biji krokot yang digunakan diperoleh dari Tanjung Pandan, Belitung. Biji krokot dijemur di bawah sinar matahari selama  dua hari, kemudian biji  tersebut  dihaluskan.  Minyak  dari  biji  krokot diekstrak  dengan  pelarut n-hexan menggunakan metode remaserasi sederhana.  Biji  krokot  dan pelarut  dengan  perbandingan  1:3  dimasukkan  ke dalam wadah dan ditutup selama tiga hari sambil diaduk  sesekali  selama  15  menit  setiap  hari.  Se- lanjutnya,  rendaman  disaring  dengan  kertas  sa- ring dan hasil saringan disisihkan. Biji krokot di- rendam kembali dengan perbandingan 1:3 selama dua  hari,  kemudian  disaring.  Hasil  saringan  per- tama  dan  kedua  digabung  lalu  diuapkan  dengan evaporator untuk menguapkan pelarut pada suhu 50°C selama tujuh jam (Stroescu et al . 2013).

## Pembuatan pakan uji
Pakan  diformulasikan  sesuai  dengan  ke- butuhan  dari  benih  ikan  mas,  yaitu  protein sebesar  40%  (Ogino  &  Saito  1970),  karbohidrat sebesar 40% (Furuichi 1988), dan lemak sebesar
7%  (Brett  &  Groves  1979)  dengan  kandungan asam lemak 18:3n-3 dan 18:2n-6 masing-masing sebesar  1%  (Takeuchi et  al .  2002).  Adapun bahan baku pakan yang digunakan adalah tepung ikan, dekstrin ,  vitamin,  mineral, carboxylmethyl cellu-lose (CMC),  minyak  ikan,  minyak  biji krokot,  minyak  jagung,  dan  minyak  kelapa. Tepung  ikan  terlebih  dahulu  diekstraksi  dengan pelarut n-hexan dengan  metode remaserasi sederhana  untuk  menghilangkan  kandungan lemak.
Bahan  baku  pakan  ditimbang  sesuai  de- ngan  formulasi  yang disajikan pada Tabel 1, ke- mudian  dicampur  dan  ditambahkan  air  sebanyak 30%  sampai  membentuk  adonan.  Adonan  pakan dicetak  dengan  mesin  pencetak  berdiameter  1-2 mm  dan  dipanaskan  menggunakan oven pada suhu  35 o C  selama  24  jam.  Hasil  analisis  proksi- mat pakan uji disajikan pada Tabel 2 dan analisis asam lemak pakan uji disajikan pada Tabel 3.
Hasil  analisis  asam  lemak  pakan  menun- jukkan  pada  semua  perlakuan  kandungan  asam lemak  18:2n-6  sesuai  dengan  target,  namun  ha- nya perlakuan P1 kandungan asam lemak 18:3n- 3  yang  sesuai  target.  Hal  tersebut  disebabkan oleh  sumber  bahan  baku  asam  lemak  esensial yang  digunakan.  Kemudian,  adanya  kandungan asam lemak 20:5n-3 dan 22:6n-3 pada perlakuan P1,  P2,  dan  P3  disebabkan  lemak  pada  tepung ikan tidak habis terekstraksi.
Tabel 1. Formulasi pakan dengan sumber asam lemak esensial berbeda
Komposisi Perlakuan sumber asam lemak esensial berbeda (%) P0 P1 P2 P3 Tepung ikan 54,0 54,0 54,0 54,0 Dekstrin 33,0 33,0 33,0 33,0 Minyak ikan 3,5 0,0 0,0 0,0 Minyak biji krokot 0,0 4,9 0,0 0,0 Minyak jagung 1,8 0,0 3,1 0,0 Minyak kelapa 1,7 2,1 3,9 7,0 Vitamin dan mineral 3,0 3,0 3,0 3,0 Carboxylmethyl cellulose 3,0 3,0 3,0 3,0 Total (%) 100,0 100,0 100,0 100,0
Keterangan: P0: minyak ikan, minyak jagung, dan minyak kelapa, P1: minyak biji krokot dan minyak kelapa, P2: minyak jagung dan minyak kelapa, P3: minyak kelapa.
Tabel 2. Hasil analisis proksimat pakan dengan sumber asam lemak esensial berbeda (bobot kering)
Proksimat Perlakuan sumber asam lemak esensial berbeda P0 P1 P2 P3 Protein (%) 42,4 41,0 43,7 44,0 Lemak (%) 6,7 7,2 7,8 6,6 Abu (%) 9,9 9,8 10,0 9,9 Serat kasar (%) 0,1 0,2 0,2 0,4 BETN (%) 41,0 41,6 38,3 39,1 GE (kkal GE kg -1 ) 4682,1 4688,1 4747,5 4690,3 C/P 10,8 11,2 10,6 10,4
Keterangan: BETN: bahan ekstrak tanpa nitrogen, GE = Gross Energy (Watanabe 1988), 1 g protein = 5,6 kkal GE, 1 g karbohidrat/BETN  =  4,1  kkal  GE,  1g  lemak  =  9,4  kkal  GE,  C/P:  rasio  energi  protein,  P0:  minyak  ikan, minyak  jagung,  dan  minyak  kelapa,  P1:  minyak  biji  krokot  dan  minyak  kelapa,  P2:  minyak  jagung  dan minyak kelapa, P3: minyak kelapa.
Tabel 3. Hasil analisis asam lemak pakan dengan sumber asam lemak esensial berbeda
Asam lemak Perlakuan sumber asam lemak esensial berbeda (% area) P0 P1 P2 P3 8:0 0,1 0,9 1,0 2,8 10:0 0,6 1,2 1,7 3,8 12:0 8,4 14,0 21,2 41,6 14:0 4,8 5,1 8,2 16,2 16:0 13,0 10,9 11,5 9,0 16:1 4,0 0,8 0,5 0,2 18:0 3,0 4,0 3,0 3,0 18:1n-9 14,6 14,3 10,7 6,3 18:2n-6 1,7 1,2 1,3 0,4 18:3n-3 0,3 1,1 0,3 0,1 20:0 0,2 0,6 0,2 0,1 20:1 5,2 1,5 6,3 0,3 20:2n-6 0,3 0,2 0,2 0,1 20:5n-3 3,1 0,5 0,2 0,4 22:0 0,2 0,4 0,1 0,0 22:1n-9 0,2 0,1 0,1 0,1 22:6n-3 3,0 1,0 0,2 1,1 24:0 0,1 0,3 0,1 0,1 ΣAsam lemak  jenuh 30,4 37,4 47,0 76,6 ΣAsam lemak tak jenuh tunggal 24,0 16,9 17,8 6,9 Σn-3 6,4 2,6 0,7 1,6 Σn-6 2,0 1,4 1,5 0,5 Σ n-3/n-6 3,2 1,8 0,5 3,2
Keterangan:  P0: minyak ikan, minyak jagung, dan minyak kelapa, P1: minyak biji krokot dan minyak kelapa, P2:  mi- nyak jagung dan minyak kelapa, P3: minyak kelapa.

## Pemeliharaan ikan
Ikan  uji  yang  digunakan  adalah  ikan  mas C. carpio dengan bobot awal rata-rata 3,11±0,05 g sebanyak 135 ekor. Ikan dipelihara di akuarium berukuran 50×40×35 cm 3 sebanyak 12 unit, yang dilengkapi  dengan top  filter , thermostat dan  ae- rasi.  Adaptasi  dilakukan  selama  tujuh  hari  sebe- lum penebaran. Ikan sebanyak 15 ekor dibius ke- mudian  disimpan  ke  dalam freezer untuk  keper- luan  analisis  proksimat  dan  asam  lemak  ikan awal. Padat penebaran yang digunakan adalah 10 ekor akuarium -1 dan diberi pakan secara at satia-
tion dengan frekuensi tiga kali sehari. Ikan dipe- lihara  selama  60  hari  dan  penimbangan  bobot ikan dilakukan pada hari ke-0, ke-30, dan ke-60.
Penyiponan  dilakukan  setiap  hari  dan  air diganti sebanyak 25% setiap lima hari sekali un- tuk menjaga kualitas air. Metode yang digunakan untuk  pengukuran  oksigen  terlarut  dan  pH  yaitu dengan  cara  pembacaan  skala  di  Laboratorium Lingkungan,  IPB,  sedangkan  suhu  diukur  secara in  situ dengan  menggunakan  termometer.  Total amonium  nitrogen  (TAN)  diukur  menggunakan spektrofotometer  pada  panjang  gelombang  630
nm. Kondisi air selama pemeliharaan, yaitu suhu 28-30°C,  oksigen  terlarut  7,7-10,6  mg  L -1 ,  pH 5,4-6,4,  dan  total  ammonium  nitrogen  (TAN)
0,7-1,4  mg L -1 CaCO 3 .
Pada akhir pemeliharaan, ikan dipuasakan selama satu hari kemudian dilakukan penimbang- an  bobot  ikan  pada  setiap  perlakuan.  Ikan  seba- nyak  tiga  ekor  diambil  dari  setiap  akuarium  un- tuk  uji  kadar  kolesterol,  trigliserida,  HDL  ( High Density  Lipoprotein ),  dan  LDL  ( Low  Density Lipoprotein ).  Kemudian  diambil  kembali  seba- nyak  tiga  ekor  dari  setiap  akuarium  untuk  ana- lisis  proksimat  tubuh  dan  lima  ekor  dari  setiap perlakuan untuk analisis asam lemak tubuh ikan.

## Analisis kimia
Pengukuran  kadar  air  pakan  dan  tubuh ikan dilakukan dengan metode pemanasan di da- lam  oven  bersuhu  105-110°C  selama  dua  jam, metode  yang  sama  untuk  kadar  abu  pada  suhu 600°C.  Metode  yang  digunakan  untuk  protein kasar  adalah  metode Kjeldahl ,  lemak  kering  de- ngan  metode Soxchlet ,  lemak  basah  dengan  me- tode Folch dan serat kasar menggunakan metode pelarutan  sampel  dengan  asam  kuat,  basa  kuat dan pemanasan (Watanabe 1988).
Analisis  asam  lemak  pakan  dan  tubuh ikan  ditentukan  dengan  gas kromatografi .  Volu- me injeksi  yang digunakan sebesar 1 µL dengan rasio split 1:50. Laju alir hidrogen sebesar 40 mL menit -1 ,  laju  alir  udara  400  mL  menit -1 ,  dan  laju alir nitrogen sebesar 30 mL menit -1 . Suhu kolom initial 125 °C, suhu kolom final 230°C, suhu in- jector 250°C, dan suhu detector 280°C. Asam le- mak  diinjeksi  ke  dalam  kolom  dan  diidentifikasi dengan  membandingkan  waktu  retensi  dengan methyl esters standar (FAME 37 MIX).
Analisis  kadar kolesterol, trigliserida, dan HDL darah ikan mas menggunakan alat  spektro- fotometer  dengan  merek  HITACHI  4-2001.
Panjang  gelombang  yang  digunakan  adalah  500 nm,  Hg  546  nm,  jalur  optiknya  1  cm,  dan temperatur  yang  digunakan  yaitu  25°C  atau 37°C. Analisis kolesterol darah ikan menggunakan  metode  CHOD-PAP.  Kolesterol ditentukan  setelah  hidrolisis  enzimatik  dan oksidasi.  Indikator quinoneirnine terbentuk  dari hidrogen  peroksida  dan  4-arninophenazone  de- ngan adanya fenol dan peroksida. Analisis trigli- serida  menggunakan  metode  GPO-PAP.  Trigli- serida  ditentukan  setelah  hidrolisis  enzimatik dengan  lipase.  Indikator quinoneimine terbentuk dari  hidrogen  peroksida  ,  4-amio-antipyrine,  dan 4-klorofenol dengan bantuan enzim peroksida.

## Parameter penelitian
Parameter  penelitian  yang  diukur  adalah bobot ikan, jumlah konsumsi pakan, laju pertum- buhan harian, efisiensi pakan, retensi protein, re- tensi lemak, tingkat  kelangsungan  hidup, proksi- mat  tubuh  ikan,  kolesterol,  trigliserida,  HDL, LDL, dan analisis tubuh ikan uji. Berikut ini ada- lah rumus dari parameter penelitian.
 Jumlah  konsumsi  pakan  ditentukan  dengan cara jumlah pakan yang dimakan dibagi de- ngan  jumlah  ikan  yang  dapat  dihitung  de- ngan rumus sebagai berikut:

## F1 = F N
Keterangan:  F1=  Jumlah  pakan  yang  dikonsumsi  se- lama  pemeliharaan  (g  ekor -1 );  F=  Jumlah  pakan  (g); N= jumlah populasi.
 Laju  pertumbuhan  harian  ikan  dihitung  de- ngan persamaan sebagai berikut:
LPH = [√ Wt Wo t − 1] x 100
Keterangan: LPH= laju pertumbuhan harian (%), Wt= bobot rata-rata ikan pada akhir pemeliharaan (g); Wo= bobot rata-rata ikan pada awal pemeliharaan (g); t= pe- riode pengamatan.
 Efisiensi pakan dihitung  menggunakan per- samaan sebagai berikut:
EP =   [ [(Wt + Wd) − Wo] F
]  x 100
Keterangan:  EP=  efisiensi  pakan  (%);  Wt=  biomassa ikan pada akhir pemeliharaan (g); Wo= biomassa ikan pada awal pemeliharaan (g); Wd= biomassa ikan yang mati  selama  pemeliharaan  (g);  F=  jumlah  pakan  yang diberikan selama pemeliharaan (g)
 Retensi  protein  dihitung  melalui  analisis proksimat  protein  tubuh  ikan  uji  pada  awal dan akhir penelitian. Rumus perhitungan re- tensi protein adalah sebagai berikut:
RP =   [ Pt − Po
Pp ]  x 100
Keterangan: RP= retensi protein (%); Pt= jumlah pro- tein tubuh ikan pada akhir pemeliharaan (g); Po= jum- lah  protein  tubuh  ikan  pada  awal  pemeliharaan  (g); Pp= jumlah protein pakan yang dikonsumsi ikan (g)
 Retensi  lemak  dihitung  melalui  analisis proksimat  lemak  tubuh  ikan  uji  pada  awal dan akhir penelitian. Rumus perhitungan re- tensi lemak adalah sebagai berikut:
RL =   [ Lt − Lo
Ll ]  x 100
Keterangan: RL= retensi lemak (%); Lt= jumlah lemak tubuh  ikan  pada  akhir  pemeliharaan  (g);  Lo=  jumlah lemak  tubuh  ikan  pada  awal  pemeliharaan  (g);  Ll= jumlah lemak pakan yang dikonsumsi ikan (g).
 Kelangsungan  hidup  ikan  uji  dihitung menggunakan rumus sebagai berikut:
Kelangsungan hidup = [ Nt N0 ] x 100
Keterangan:  TKH=  tingkat  kelangsungan  hidup  (%); Nt= jumlah ikan pada akhir pemeliharaan; No= jumlah ikan pada awal pemeliharaan
 Analisis  indeks  hepatosomatik  (IHS)  dila- kukan  pada  akhir  pemeliharaan.  Pengukur- an  dilakukan  dalam  keadaan  bobot  basah. Rumus  yang  digunakan  untuk  menghitung IHS sebagai berikut:
IHS =   [ Bobot organ hati (g) Bobot tubuh ikan uji (g) ] x 100
 Pengukuran  kolesterol  dilakukan  menggu- nakan  metode  CHOD-PAP  dengan  rumus sebagai berikut:
K = As  ×   [sk]

## Ask
Keterangan:  K=  kolesterol  (mg  dL -1 );  As=  absorbansi sampel; [sk]= konsentrasi standar kolesterol; Ask= ab- sorbansi standar kolesterol
 Pengukuran  trigliserida  dilakukan  menggu- nakan  metode  GPO-PAP  dengan  rumus  se- bagai berikut:
TG  = As  ×   [st]

## Ast
Keterangan:  TG=  trigliserida  (mg  dL -1 );  As=  absor- bansi  sampel;  [st]=  konsentrasi  standar  trigliserida; Ask= absorbansi standar trigliserida
 Pengukuran high density lipoprotein (HDL) dilakukan  menggunakan  metode  CHOD- PAP dengan rumus sebagai berikut:

## HDL  = As  × [s HDL] As HDL
Keterangan: HDL= high density lipoprotein (mg dL -1 ); As= absorbansi sampel; [s HDL]= konsentrasi standar HDL; As HDL= absorbansi standar HDL
 Pengukuran low  density  lipoprotein (LDL) dilakukan  menggunakan  metode  CHOD- PAP dengan rumus sebagai berikut:
LDL ( mg dl ⁄ ) = K − (HDL + TG 5 )

## Analisis data
Data  yang diperoleh diolah  menggunakan piranti lunak MS Excel 2007 dan dilakukan ana- lisis  sidik  ragam  (ANOVA)  dengan  taraf  keper- cayaan  95%  menggunakan  piranti  lunak  SPSS 17.  Apabila  hasil  menunjukkan  perbedaan  yang nyata antarperlakuan maka dilakukan uji Duncan.

## Hasil
Pada  Tabel  4  disajikan  hasil  kinerja  per- tumbuhan  ikan  mas  yang  diberi  pakan  dengan sumber  lemak  esensial  berbeda  selama  60  hari pemeliharaan. Hasil menunjukkan pada akhir pe- meliharaan  perlakuan  P1  memberikan  pengaruh yang berbeda nyata (p<0,05) terhadap bobot indi- vidu,  laju  pertumbuhan  harian,  efisiensi  pakan, retensi  protein  tubuh,  dan  retensi  lemak  tubuh ikan mas.
Tabel  5  memperlihatkan  bahwa  pada  tu- buh  ikan  mengalami  peningkatan  kadar  protein dan  lemak  pada  hari  ke-60.  Penggunaan  sumber asam  lemak  esensial  berbeda  tidak  memberikan pengaruh  yang  berbeda  nyata  (p>0,05)  terhadap kadar protein tubuh ikan mas.
Hasil  pengukuran  indeks  hepatosomatik dan  biokimia  darah  terdiri  atas  kadar  kolesterol,
trigliserida, HDL, dan LDL disajikan pada Tabel 6.  Berdasarkan  hasil  tersebut,  diketahui  bahwa pemberian  pakan  dengan  sumber  asam  lemak esensial  berbeda  tidak  memberikan  pengaruh yang berbeda nyata (p>0,05) terhadap indeks he- patosomatik dan biokimia darah ikan mas.
Pada Tabel 7 disajikan hasil analisis asam lemak  tubuh  ikan  mas  pada  awal  dan  hari  ke-60 pemeliharaan  yang  diberi  pakan  dengan  sumber asam lemak esensial berbeda. Hasil menunjukkan bahwa  pada  hari  ke-60  terjadi  peningkatkan jumlah asam lemak jenuh, asam lemak tak jenuh tunggal, dan asam lemak n-3 pada pakan kontrol dan  perlakuan  P1.  Pada  perlakuan  P2  dan  P3 cendrrung  menurun.  Penurunan  asam  lemak  n-6 tubuh  ikan  mas  terjadi  pada  semua  perlakuan  di hari ke-60.
Tabel 4. Kinerja pertumbuhan ikan mas yang diberi pakan dengan sumber asam lemak esensial berbeda selama 60 hari pemeliharaan
Parameter Perlakuan sumber asam lemak esensial berbeda P0 P1 P2 P3 Bobot hari ke-0 (g) 3,1±0 a 3,1±0 a 3,1±0,1 a 3,1±0 a Bobot hari ke-30 (g) 9,5±0,3 a 11,7±1,3 b 9,2±0,7 a 8,9±0,2 a Bobot hari ke-60 (g) 18,9±1,4 a 23,6±1,6 b 18,5±2,3 a 16,3±1,1 a Jumlah konsumsi pakan (g ekor -1 ) 28,6±0,3 ab 28,6±0,3 ab 29±0,1 b 28,2± 0,3 a Laju pertumbuhan harian (%) 3,0±0,1 a 3,5±0,1 b 3,0±0,2 a 2,8±0,2 a Efisiensi pakan (%) 55,2±4,5 a 71,7±4,9 b 53,1±8,0 a 46,5±3,6 a Retensi protein (%) 16,2±1,6 a 22,1±1,9 b 14,8±2,4 a 12,6±1,2 a Retensi lemak (%) 69,2±8,4 ab 81,4±4,5 b 58,8±9,2 a 60,9±4,0 a Tingkat kelangsungan hidup (%) 100,0±0,0 a 100,0±0,0 a 100,0±0,0 a 100,0±0,0 a
Keterangan:  P0:  minyak  ikan,  minyak  jagung,  dan  minyak  kelapa,  P1:  minyak  biji  krokot  dan  minyak  kelapa,  P2: minyak jagung dan minyak  kelapa, P3: minyak kelapa. Huruf tika atas di belakang nilai simpangan baku yang berbeda pada setiap baris menunjukkan pengaruh yang berbeda nyata (p<0,05).
Tabel 5. Kadar protein dan lemak tubuh ikan mas yang diberi pakan dengan sumber asam lemak esensial berbeda selama 60 hari pemeliharaan (bobot kering)
Parameter Awal Perlakuan sumber asam lemak esensial berbeda (%) P0 P1 P2 P3 Protein 43,9 47,9±0,7 a 47,0±2,2 a 45,5±0,9 a 47,3±2,3 a Lemak 22,0 31,1±2,0 ab 29,7±0,6 a 30,9±0,5 ab 32,5±1,2 b
Keterangan: Kadar air awal: 75,7% dan akhir perlakuan P0: 74,6%, P1: 73,7%, P2: 73,8%, P3: 75,4%. P0: minyak ikan, minyak  jagung,  dan  minyak  kelapa,  P1:  minyak  biji  krokot  dan  minyak  kelapa,  P2:  minyak  jagung  dan minyak kelapa, P3: minyak kelapa. Huruf  tika atas di belakang nilai  simpangan baku  yang berbeda pada setiap baris menunjukkan pengaruh yang berbeda nyata (p<0,05).
Tabel 6.   Parameter indeks hepatosomatik dan biokimia darah ikan mas yang diberi pakan dengan sumber asam lemak esensial berbeda selama 60 hari pemeliharaan
Parameter Awal Perlakuan sumber asam lemak esensial berbeda (mg dL -1 ) P0 P1 P2 P3 HIS - 1,0±0,2 a 1,2±0,3 a 1,1±0,2 a 1,4±0,2 a Kolesterol 94,7 127,9±1,1 a 131,0±15,0 a 129,3± 25,7 a 116,0±4,5 a Trigliserida 206,3 235,2±35,7 a 199,5±39,4 a 195,6±38,2 a 200,8±20,0 a HDL 82,3 108,5±5,2 a 111,0±8,7 a 108,0±19,0 a 102,9± 6,6 a LDL ttd ttd ttd Ttd ttd
Keterangan:  IHS: indeks hepatosomatik, ttd: tidak terdeteksi, P0: minyak ikan, minyak jagung, dan minyak kelapa, P1: minyak biji krokot dan minyak kelapa, P2: minyak jagung dan minyak kelapa, P3: minyak kelapa. Huruf tika  atas  di  belakang  nilai  simpangan  baku  yang  sama  menunjukkan  pengaruh  yang  tidak  berbeda  nyata (p>0,05).
Tabel 7. Hasil analisis asam lemak tubuh ikan mas yang diberi pakan dengan sumber asam lemak esensial berbeda Asam lemak Perlakuan sumber asam lemak esensial berbeda (% area) Awal P0 P1 P2 P3 12:0 0,2 3,1 4,4 8,1 10,4 14:0 1,0 2,7 3,1 4,8 5,9 14:1 0,0 0,1 0,1 0,1 0,2 15:0 0,1 0,1 0,1 0,1 0,2 16:0 14,5 11,7 11,0 12,1 13,1 16:1 2,5 3,3 2,7 2,8 3,1 17:0 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 17:1 0,1 0,1 0,2 0,0 0,0 18:0 2,8 2,5 2,5 2,2 2,3 18:1n-9 32,0 32,0 28,5 30,4 28,9 18:2n-6 19,3 15,1 15,0 11,3 7,2 18:3n-3 2,3 2,7 6,7 1,8 0,0 20:0 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 20:1 1,9 2,2 5,3 1,4 1,5 20:2n-6 0,4 0,3 0,4 0,3 0,2 20:4n-6 0,7 0,6 0,7 0,6 0,0 20:5n-3 0,4 1,1 0,8 0,2 0,5 22:1n-9 0,1 0,1 0,1 0,0 0,1 22:5n-3 0,2 0,4 0,3 0,2 0,0 22:6n-3 1,5 3,0 2,6 1,3 2 ΣAsam lemak jenuh 18,9 20,5 21,4 27,8 32,2 ΣAsam lemak tak jenuh tunggal 36,6 37,8 36,9 34,8 33,9 Σn-3 4,4 7,2 10,4 3,5 2,5 Σn-6 20,4 16,0 16,1 12,2 7,4 Σ n-3/n-6 0,2 0,5 0,6 0,3 0,3 Σn-6/Σn-3 4,6 2,2 1,5 3,5 3,0
Keterangan: P0: minyak ikan,  minyak jagung, dan minyak kelapa, P1: minyak biji krokot dan minyak kelapa, P2:  mi- nyak jagung dan minyak kelapa, P3: minyak kelapa.

## Pembahasan
Ikan  mas  tidak  mempunyai  kemampuan untuk  menyintesis  asam  lemak  PUFA  maupun HUFA  di  dalam  tubuhnya,  sehingga  harus  dibe-
rikan  melalui pakan.  Asam lemak esensial terse- but  adalah  bagian  dari  lemak  yang  merupakan komponen penting yang dapat memengaruhi per- tumbuhan ikan. Pada Tabel 4 terlihat bahwa per-
lakuan  yang  menggunakan  minyak  biji  krokot menghasilkan  bobot  individu  rata-rata  tertinggi pada akhir pemeliharaan yaitu sebesar 23,6±1,6 g dan  memberikan  pengaruh  yang  berbeda  nyata (p<0,05)  terhadap  perlakuan  yang  menggunakan minyak ikan.
Hasil  tersebut  sama  dengan  yang  dihasil- kan  oleh  penelitian  Schultz et  al .  (2015),  ikan mas  yang  diberi  pakan  dengan  sumber  minyak nabati  yaitu  minyak  biji  rami  selama  210  hari juga  memberikan  pengaruh  yang  berbeda  nyata (p<0,05)  terhadap  perlakuan  yang  menggunakan minyak  ikan.  Bobot  akhir  yang  dihasilkan  pada pakan yang menggunakan minyak biji rami sebe- sar  565,0±149,5  g,  sedangkan  yang  mengguna- kan  minyak  ikan  sebesar  281,3±72,0  g.  Namun, pada  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Ljubojević et  al .  (2015),  penggunaan  minyak  kanola  pada pakan ikan mas selama 75 hari tidak memberikan pengaruh  yang  nyata  (p>0,05)  terhadap  perlaku- an  yang  menggunakan  minyak ikan. Begitu pula pada  penelitian  Mráz et  al .  (2012),  penggunaan minyak  zaitun  pada  pakan  ikan  mas  selama  100 hari  tidak  memberikan  pengaruh  yang  berbeda nyata (p>0,05) terhadap perlakuan yang menggu- nakan minyak ikan. Hasil penelitian yang dilaku- kan  oleh  Yilmaz  &  Genc  (2006),  pakan  yang menggunakan sumber lemak berupa minyak ikan pada pakan ikan mas menghasilkan bobot terting- gi  setelah  dipelihara  selama  60  hari  sebesar 32,46±0,88  g  dan  memberikan  pengaruh  yang berbeda  nyata  (p<0,05)  terhadap  perlakuan  yang menggunakan  minyak  kedelai.  Penggunaan  mi- nyak  ikan  pada  pakan  ikan  mas  juga  menghasil- kan  bobot  tertinggi  pada  penelitian  yang  dilaku- kan  oleh  Aprodu et  al .  (2012)  dan  memberikan pengaruh  yang  berbeda  nyata  (p<0,05)  terhadap perlakuan yang menggunakan minyak zaitun ser- ta minyak kedelai.
Pakan  yang  menggunakan  minyak  biji krokot  menghasilkan  bobot  tertinggi  diduga  ka- rena  kandungan  asam  lemak  esensialnya  sesuai dengan  kebutuhan  ikan  mas  yaitu  asam  lemak 18:3n-3 dan 18:2n-6 masing-masing sebesar 1%. Menurut  Steffens  &  Wirth  (2007),  kandungan asam  lemak  esensial  pakan  yang  sesuai  dengan kebutuhan  ikan  dapat  meningkatkan  sifat  cair membran  sel  sehingga  memberikan  sifat  lentur pada  membran  yang  memudahkan  masuknya nutrien  dari  luar  membran  ke  dalam  membran serta  mengaktifkan  kerja  enzim  (Na + /K + )  ATP- ase pada membran.
Kelancaran  perpindahan  nutrien  dari luar  ke  dalam  membran  sel  tersebut  dapat  me- nunjang  proses  metabolisme  secara  keseluruh- an,  diantaranya  yaitu  menunjang  pengubahan asam  lemak  menjadi  energi,  menunjang  sinte- sis  lemak  yang  digambarkan  dari  nilai  retensi lemak,  dan  sintesis  protein  yang  digambarkan dari nilai retensi protein.  Hal ini sesuai dengan hasil  yang  diperoleh,  ikan  yang  diberi  pakan perlakuan  P1  menghasilkan  retensi  lemak  dan retensi  protein  tertinggi  serta  memberikan  pe- ngaruh  yang  berbeda  nyata  (p<0,05).  Semakin banyak retensi protein yang terbentuk di dalam tubuh maka semakin besar nilai perubahan bo- bot  ikan  yang  digambarkan  dengan  nilai  laju pertumbuhan harian, yaitu perlakuan  P1 meng- hasilkan  laju  pertumbuhan  harian  tertinggi  se- besar  3,5±0,1%  dan  memberikan  pengaruh yang berbeda nyata (p<0,05). Laju pertumbuh- an harian tersebut sejalan dengan nilai efisiensi pakan,  yaitu  perlakuan  P1  menghasilkan  nilai tertinggi  sebesar  71,7±4,9%  dan  memberikan pengaruh yang berbeda nyata (p<0,05).
Ikan  yang  diberi  pakan  dengan  sumber lemak  berupa  minyak  ikan  pada  pakan  P0 menghasilkan  pertumbuhan  yang  lebih  rendah dibandingkan  perlakuan  yang  menggunakan
minyak biji krokot. Hal ini terjadi diduga kare- na tingginya rasio n-3/n-6 pada pakan P0 yaitu sebesar  3,2,  sedangkan  rasio  pada  perlakuan P1  sebesar  1,8.    Menurut  Steffens  &  Wirth (2005),  rasio  asam  lemak  n-3/n-6  pada  pakan yang  dapat  diberikan  pada  ikan  mas  berkisar antara  0,08-2,4.  Kekurangan  dan  kelebihan asam lemak esensial sebanyak empat kali lipat dari  kebutuhan  ikan  di  dalam  pakan  dapat memperlambat pertumbuhan, menurunkan efisiensi  pakan  dan  meningkatkan  mortalitas (Arts  &  Kohler  2009).  Namun  pada  penelitian ini  pemberian  pakan  dengan  sumber  asam  le- mak  esensial  berbeda  tidak  memberikan  pe- ngaruh  yang  berbeda  nyata  (p>0,05)  terhadap tingkat kelangsungan hidup ikan.
Pengukuran kolesterol darah pada pene- litian  dilakukan  karena  ikan  memiliki  kemam- puan sendiri untuk menyintesis kolesterol yang dibutuhkan  di  dalam  tubuhnya.  Masuknya  ko- lesterol  yang  berlebihan  dapat  meningkatkan kadar  kolesterol  di  dalam  darah  dan  memberi- kan  beban  yang  terlalu  berat  sehingga  dapat merusak  arteri.  Hasil  pada  Tabel  6  menunjuk- kan  bahwa  kadar  kolesterol  pada  semua  perla- kuan  berada pada  batas  normal  yaitu  <200  mg dL-1  (Akoh  &  Min  2008)  dan  tidak  memberi- kan  pengaruh  yang  berbeda  nyata  (p>0,05). LDL  adalah  pembawa  kolesterol  utama  dalam darah.  Jika  sel-sel  sudah  cukup  kolesterol, maka LDL diblok masuk ke dalam sel jaringan dan  kolesterol  tersebut  diakumulasi  dalam  da- rah  membentuk  plak  arteri  ( atherosclerosis ).
Pada Tabel 6 terlihat bahwa pada semua perla- kuan  LDL  tidak  terdeteksi.  Hal  tersebut  dika- renakan  tingginya  kadar  HDL  di  dalam  darah yang  dapat  mencegah  terjadinya  penimbunan LDL  pada  dinding  pembuluh  darah.  Hal  terse- but  sesuai  dengan  pernyataan  Akoh  &  Min (2008)  yang  menyatakan  bahwa  HDL  merupa-
kan kolesterol baik, karena HDL tersebut men- cari-cari sisa kelebihan kolesterol di dalam da- rah dan menurunkan kemungkinan pembentuk- an plak arteri.
Ikan mas memiliki kemampuan mengubah asam lemak 18:3n-3 menjadi 20:5n-3 dan 22:6n- 3  karena  di  dalam  tubuhnya  terkandung  enzim elongase ,  Δ5  dan  Δ6 desaturase (Mráz  2011).
Kemampuan tersebut dapat dilihat dari hasil ana- lisis  asam  lemak  pakan  pada  Tabel  3  dan  tubuh ikan mas pada Tabel 7. Pada perlakuan P1 terjadi perpanjangan  asam  lemak  dari  18:3n-3  menjadi 20:5n-3  dan  22:6n-3  yaitu  sebesar  0,8%  dan 2,6% dan hasil tersebut lebih tinggi dibandingkan perlakuan  P2  dan  P3.  Akan  tetapi  kandungan asam lemak 20:5n-3 dan 22:6n-3 pada perlakuan P0  lebih  tinggi  dibandingan  perlakuan  P1  yaitu sebesar  1,1%  dan  3,0%.  Menurut  Böhm et  al . (2014),  hal  tersebut  terjadi  disebabkan  dalam jangka  waktu  yang  pendek  minyak  ikan  mampu menghasilkan  konsentrasi  20:5n-3  dan  22:6n-3 lebih  cepat  secara  signifikan  daripada  minyak nabati.  Codabaccus et  al .  (2012)  juga  menyata- kan  bahwa  pakan  dengan  sumber  asam  lemak yang berasal dari minyak nabati kandungan asam lemak  jenuhnya  lebih  tinggi  yang  memudahkan terjadinya  pencernaan  dan  preferensial  substrat untuk  β-oksidasi  sehingga  dalam  jangka  waktu yang pendek mengurangi oksidasi rantai panjang tak jenuh.
Selain  dapat  mengubah  asam  lemak 18:3n-3,  ikan  mas  mas  juga  mampu  mengubah asam  lemak  18:2n-6  menjadi  20:4n-6.  Pada  pa- kan P0 dan perlakuan P3 kandungan asam lemak 20:4n-6  lebih  rendah  dibandingkan  asam  lemak 20:5n-3. Hal ini dapat terjadi karena asam lemak 18:2n-6  dan  18:3n-3  merupakan  substrat  yang sama untuk enzim Δ6 desaturase , dan enzim ter- sebut  memiliki  afinitas  yang  lebih  tinggi  untuk asam  lemak  18:3n-3  dibandingkan  18:2n-6
(Glencross  2009).  Oleh  karena  itu  asam  lemak 18:3n-3  menghambat  biosintesis  asam  lemak 18:2n-6 untuk diubah menjadi 20:4n-6, meskipun kandungan  asam  lemak  18:2n-6  di  dalam  pakan lebih  banyak  dan  sesuai  dengan  kebutuhan  ikan mas.  Secara  umum  profil  asam  lemak  pada  pe- nelitian  ini  sama  dengan  penelitian  Stancheva  & Merdzhanova  (2011),  Zivic et  al .  (2014),  dan Schultz et al . (2015), yang ditandai dengan ting- ginya  kandungan  asam  lemak  n-6  dibandingkan n-3  yang  merupakan  ciri  utama  ikan  mas.  Pada perlakuan P1 rasio n-3/n-6 adalah 0,6, sedangkan pakan  P0,  P2,  dan  P3  berturut-turut  adalah  0,5; 0,3; dan 0,3. Menurut Stancheva & Merdzhanova (2011)  rasio  n-3/n-6  pada  ikan  air  tawar  adalah 0,5-5,6  dan  pada  ikan  air  laut  adalah  4,7-14,4 yang  merupakan  indikator  untuk  membanding- kan  nilai  gizi  relatif  ikan  yang  berbeda  spesies. Hasil  pada  penelitian  ini  rasio  n-6/n-3  di  akhir pemeliharaan  pada  semua  perlakuan  berada  di bawah  4,0  yang  sesuai  dengan  rekomendasi  Si- mopoulos (2008) untuk nutrisi manusia.

## Simpulan
Minyak  biji  krokot  dapat  dimanfaatkan sebagai  sumber  asam  lemak  esensial  alternatif pada  pakan  ikan  mas C.  carpio untuk  menggan- tikan minyak ikan.

## Daftar pustaka
Akoh CC, Min DB. 2008. Food lipids: Chemist- ry,  Nnutrition,  and  Biotechnology .  CRC Press, USA. 914 p.
Aprodu  I,  Vasile  A,  Gurau  G,  Ionescu  A,  Palte- nea  E.  2012.  Evaluation  of  nutritional  qua- lity  of  the  common  carp  ( Cyprinus  carpio ) enriched  in  fatty  acids. Food  Technology 36(1): 61-73.
Arts MT, Kohler CC. 2009. Health and condition in fish: the influence of lipids on membrane competency and immune response. In : Arts MT,  Brett  MT,  Kainz  MJ,  (ed). Lipids  in Aquatic  Ecosystems .  Springer,  New  York. pp. 237-256.
Bell JG, Dick JR, Strachan F, Guy DR, Berntssen MH,  Sprague  M.  2012.  Complete  replace- ment  of  ﬁsh  oil  with  a  blend  of  vegetable oils  affects  dioxin,  dioxin-like  polychlori- nated  biphenyls  (PCBs)  and  polybromi- nated diphenyl ethers (PBDEs) in 3 Atlantic salmon  ( Salmo  salar )  families  differing  in ﬂesh  adiposity. Aquaculture 324(18):  118- 126.
Böhm  M,  Schultz  S,  Koussoroplis  AM,  Kainz MJ.  2014.  Tissue-specific  fatty  acids  res- ponse  to  different  diets  in  common  carp ( Cyprinus carpio L.). Plos One 9(4): 1-4.
Brett  JR,  Groves  TDD.  1979.  Physiological energetics. In : Hoar WR, Randall DJ, Brett JR  (ed). Fish  Physiology  vol  8:  Bioener- getic  and  Growth .  Academic  Press,  New York. pp. 279-352.
Codabaccus  M,  Bridle  A,  Nichols  P,  Carter  C. 2012.  Restoration  of  fillet  n-3  long-chain polyunsaturated fatty acid is improved by a modified  fish  oil  finishing  diet  strategy  for Atlantic  salmon Salmo  Salar L.  smolts  fed palm  fatty  acid  distillate. Journal  of  Agri- cultural Food Chemistry 60(1): 458-466.
FAO.  2009.  The  state  of  world  fisheries  and aquaculture  2008.  Food  and  Agriculture Organization  of  the  United  Nations,  Rome. 196 p.
Furuichi  M.  1988.  Dietary  activity  of  carbohyd- rates.  In:  Watanabe  T.  (Ed). Fish  Nutrition and  Mariculture .  Departement  of  Aquatic Biosciences Tokyo University of Fisheriess, Tokyo. pp. 1-77.
Glencross  BD.  2009.  Exploring  the  nutritional demand for essential fatty acids by aquacul- ture  species. Reviews  in  Aquaculture 1(2): 71-124.
Hixson  SM,  Parrish  CC,  Anderson  DM.  2014. Changes  in  tissue  lipid  and  fatty  acid  com- position  of  farmed  rainbow  trout  in  res- ponse  to  dietary  camelina  oil  as  a  replace- ment of ﬁsh oil. Lipids 49(1): 97-111.
IFFO.  2013.  The  marine  ingredients  organiza- tion:  fishmeal  and  fish  oil  statistical  year- book 2013. [Internet]. [diunduh 21 Desember 2015]. Tersedia pada:
www.iffo.net.
Irawan  D,  Hariyadi  P,  Wijaya  H.  2003.  The  po- tency of krokot Portulaca oleracea as func- tional  food  ingredients. Indonesian  Food and Nutrition Progress 10(1): 1-12.
KKP  (Kementerian  Kelautan  dan  Perikanan). 2015.  Pelepasan  ikan  mas  mantap  sebagai pendukung  produksi  perikanan  budi  daya
yang  berkelanjutan.  [Internet].  [diunduh  9 November 2015]. Tersedia pada: www.djpb.kkp.go.id.
Kowalska  A,  Zakes  Z, Jankowska B, Siwicki  A. 2010. Impact of diets with vegetable oils on the growth, histological structure of internal organs,  biochemical  blood  parameters,  and proximate composition of pikeperch Sander lucioperca (L.). Aquaculture 301(1): 69-77.
Liu  L,  Howe  P,  Zhou  YF,  Xu  ZQ,  Hocart  C, Zhang  R.  2000.  Fatty  acids  and  b-carotene in  Australian  purslane Portulaca  oleracea varieties. Journal  of  Chromatography  A 893(1): 207-213.
Ljubojević D, Radosavljević V, Puvaĉa N, Baloš MZ, Ðorpević V, Jovanović R, Ćirković M.
2015.  Interactive  effects  of  dietary  protein level and oil source on proximate composi- tion and  fatty acid composition in common carp ( Cyprinus carpio L.). Journal of Food Composition and Analysis 37(5): 44-50.
Merino  G,  Barange  M,  Blanchard  JL,  Harle  J,
Holmes R, Allen I, Rodwell LD. 2012. Can marine  ﬁsheries  and  aquaculture  meet  ﬁsh demand  from  a  growing  human  population in  a  changing  climate? Global    Environ- mental Change 22(4): 795-806.
Michaelsen KF, Dewey KG, Perez-Exposito AB,
Nurhasan  M,  Lauritzen  L,  Roos  N.  2011. Food sources and intake of n-6 and n-3 fatty acids  in  low-income  countries  with  empha- sis  on  infants,  young  children  (6–24 months),  pregnant  and    lactating  women.
Maternal  and  Child  Nutrition 7(2):  124- 140.
Morais  S,  Monroig  O,  Zheng  XZ,  Leaver  MJ, Tocher  DR.  2009.  Highly  unsaturated  fatty acid  synthesis  in  Atlantic  salmon:  Charac- terization  of  ELOVL5  and  ELOVL2-  like elongase. Marine Biotechnology 11(5): 627- 639.
Mráz  J.  2011.  Lipid  quality  of  common  carp Cyprinus  carpio in  pond  culture. Thesis . Swedish  University  of  Agricultural  Sci- ences, Uppsala. 52 p.
Mráz  J,  Zajíc  T,  Pickova  J.  2012.  Culture  of common  carp  ( Cyprinus  carpio )  with  de- fined flesh quality for prevention of cardio- vascular  diseases  using  finishing  feeding strategy. Neuroendocrinol  Letters 33(2): 60-67.
Ogino C, Saito K. 1970. Protein nutrition in fish. 1. The utilization of dietary protein by carp. Bulletin  of  the    Japanese  Society  of  Scien- tific Fisheries 36(3): 250-254.
Pauly  D,  Christensen  V,  Guenette  S,  Pitcher  TJ, Sumaila  UR,  Walters  CJ,  Watson  R,  Zeller D.  2002.  Towards  sustainability  in  world ﬁsheries. Nature 418(6898): 689-695.
Schultz S, Koussoroplis AM, Changizi-Magrhoor Z,  Watzke  J,  Kainz  MJ.  2015.  Fish  oil- based  finishing  diet  strongly  increase  long- chain  polyunsaturated  fatty  acid  concentra- tions  in  farm-raised  common  carp  ( Cyp- rinus  carpio L.). Aquaculture  Research
46(9): 2174-2184.
Simopoulos  AP.  2008.  The  importance  of  the omega-6/omega-3 fatty acid ratio in cardio- vascular disease and other chronic diseases. Experimental Biology and Medicine 233(6): 674-688.
Stancheva  M,  Merdzhanova  A.  2011.  Fatty  acid composition of common carp, rainbow trout and  grey  mullet  fish  species. Agricultural Science and Technology 3(3): 285-289.
Steffens  W,  Wirth  M.  2005.  Freshwater  fish-an important  source  of  n-3  polyunsaturated fatty  acids:  A  review. Archives  of  Polish Fisheries 13(1): 5-16.
Steffens  W,  Wirth  M.  2007.  Influence  of  nutri- tion on  the lipid quality of pond fish: com- mon  carp Cyprinus  carpio and  tench Tinca tinca . Aquaculture International 15(3): 313- 319.
Stroescu M, Stoica-Guzun A, Ghergu S, Chira N, Jipa  I.  2013.  Optimization  of  fatty  acids extraction  from Portulaca  oleracea seed using response surface methodology. Indus- trial Crops and Products 43(1): 405-411.
Takeuchi  T,  Satoh  S,  Kiron  V.  2002.  Common carp, Cyprinus carpio . In : Webster CD, Lim C  (eds). Nutrient  Requirements  and  Feed- ing  of  Finfish  for  Aquaculture .  CABI Publishing, pp. 245-261.
Thanuthong  T,  Francis  DS,  Manickam  E,  Sena- dheera  SD,  Cameron-Smith  D,  Turchini GM. 2011. Fish oil replacement in rainbow trout  diets  and  total  dietary  PUFA  content: effects on fatty acid metabolism and in vivo fatty  acid  bioconversion. Aquaculture 322(1): 99-108.
Uddin  KM,  Juraimi  AS,  Hossain  MS,  Un  Nahar MA, Ali ME, Rahman MM. 2014. Purslane weed Portulaca  oleracea :  A  prospective plant  source  of  nutrition,  omega-3  fatty acid,  and  antioxidant  attributes. The  Scien- tific World Journal 2014(1): 1-6.
Watanabe  T.  1988. Fish  Nutrition  and  Maricul- ture . JICA. Textbook. Department of Aqua-
tic  Biosience.  Tokyo  University  of  Fish- eries, Japan. 233 p.
Yilmaz  E,  Genc  E.  2006.  Effects  of  alternative dietary  lipid  sources  (soy-acid  oil  and  yel- low grease) on growth and hepatic lipidosis of  common  carp  ( Cyprinus  carpio )  finger- ling:  a  preliminary  study. Turkish  Journal of Fisheries and Aquatic Sciences 6(2): 37- 42.
Zivic  I,  Zivic  M,  Bjelanovic  K,  Spasic  M,  Ras- kovic  B,  Stankovic  M,  Markovic  Z.  2014. Fatty acid profile in muscles of carp Cypri- nus carpio L. raised in a semi-intensive pro- duction system fed with grains, pelleted and extruded  feed. Archieves  of  Biological  Sci- ences 66(2): 877-887.