## SKRINING SENYAWA KIMIA DAN PENGARUH METODE MASERASI
DAN REFLUKS PADA BIJI KELOR ( Moringa oleifera , Lamk)

## TERHADAP RENDEMEN EKSTRAK YANG DIHASILKAN
Agung Abadi Kiswandono
Dosen Kopertis Wil I NAD-Sumut dpk Universitas Prima Indonesia (UNPRI) Medan e-mail : nau_shila@yahoo.com

## ABSTRACT
Chemical Compounds  and Effect of Screening Method on Seeds maceration and refluxing moringa (Moringa oleifera, Lamk) to the yield Extract Generated
Studies  had  been  conducted  with  the  goal  of  identifying  chemical  compounds  and  compare  the  two methods  of  extraction,  the  maceration  and  reflux  in  moringa  seeds  (Moringa  oleifera,  Lamk)  to  the  yield generated. The study was conducted by using the method of extraction and maceration reflux with solvent hexane and  80%  methanol,  and  then  the  identification  of  classes  of  secondary  metabolites  phytochemical  test  done. Moringa seed samples had 11.6% moisture content. Yield produced by the reflux method using n-hexane solvent were 23.03% and 21.22% maceration method. While the 80% methanol solvent refluxing method had yield 6.16% and  5.26%  maceration  method.  Phytochemical  test  results  on  seed  powder  contained  alkaloids  and  saponins. Phytochemical test results on seed extract reflux method was an alkaloid, hydroquinone phenols, flavonoids and saponins while the maceration method was a class of compounds alkaloids and saponins.
Keywords : Moringa oleifera, reflux, maceration, phytochemicals

## ABSTRAK
Telah  dilakukan  penelitian  dengan  tujuan  mengidentifikasi  senyawa  kimia  dan  membandingkan  dua metode  ekstraksi,  yaitu  maserasi  dan  refluks  pada  biji  kelor  ( Moringa oleifera, Lamk)  terhadap  rendemen  yang dihasilkan.  Penelitian  dilakukan  dengan  menggunakan  metode  ekstraksi  maserasi  dan  refluks  dengan  pelarut heksana  dan  metanol  80%,  kemudian  identifikasi  golongan  senyawa  metabolit  sekunder  dilakukan  dengan  uji fitokimia.  Sampel  biji  kelor  memiliki  kadar  air  11,6%.  Rendemen  yang  dihasilkan  dengan  metode  refluks menggunakan  pelarut  n-heksana  adalah  23,03%  dan  metode  maserasi  21,22%.  Sedangkan  dengan  pelarut Metanol 80% metode refluks mempunyai rendemen 6,16% dan metode maserasi 5,26%. Hasil uji fitokimia pada serbuk biji mengandung alkaloid dan saponin. Hasil uji fitokimia pada ekstrak biji menggunakan metode refluks adalah  alkaloid,  fenol  hidrokuinon,  flavonoid,  dan  saponin  sedangkan  dengan  metode  maserasi  adalah  senyawa golongan alkaloid dan saponin.
Kata kunci : Moringa oleifera, refluks, maserasi, fitokimia

## PENDAHULUAN
Indonesia sangat kaya akan tumbuhan  yang  mengandung  metabolit sekunder  yang  dapat  dijadikan  sebagai sumber  obat  tradisional  oleh  masyarakat. Pencarian obat baru dalam upaya menyembuhkan berbagai penyakit mendorong banyak peneliti untuk berusaha menemukan dengan memanfaatkan tumbuh-tumbuhan.    Diantara  tumbuhan yang  berpotensi  sebagai  obat  tradisional adalah  tumbuhan  kelor  atau Moringa oleifera L (Siddhuraju dan Beccer,  2003).
Menurut  penelitian  Sato, et  al.  ( 2002)
pada  20  tumbuhan  dari  Asia  selatan  dan Asia  Tenggara, Moringa  oleifera L termasuk  dalam  dua  besar  tumbuhan  yang mempunyai aktivitas antioksidan tertinggi.
Ekstraksi atau pemisahan senyawa kimia  dari  sumber  tanaman  merupakan awal  proses  isolasi  senyawa  bioaktif  yang berada pada tumbuhan, baik pada biji, biji, akar  ataupun  batang  (Sidik,  1997).  Pada proses pemisahan senyawa bioaktif, pemilihan  metode  pemisahan  senyawa merupakan  hal  yang  penting  untuk diperhatikan, karena pada proses pemisahan  ini  akan  ditentukan  berapa besar rendemen yang dihasilkan.
Gambar 1.   Biji Tumbuhan Kelor
Metode  pemisahan  pada  ekstraksi pelarut  menggunakan  prinsip  kelarutan. Prinsip  kelarutan  adalah like  dissolve  like,
yaitu  pelarut  polar  akan  melarutkan senyawa  polar  dan  pelarut  non  polar  akan melarutkan senyawa non polar (Simanjuntak,  1988).  Beberapa  pelarut organik  yang  sering  digunakan  sebagai ekstraktan seperti benzena, toluena, petroleum  eter,  metilenklorida,  klorofrom, karbon  tetraklorida,  etil  asetat  dan  dietil eter.  Dalam  pemilihan  pelarut,  hal-hal yang perlu dipertimbangkan adalah selektifitas, sifat racun  dan  kemudahannya untuk diuapkan. Alkohol merupakan pelarut yang baik untuk ekstraksi pendahuluan (Harborne, 1996). Ekstraksi digunakan untuk memperoleh  kandungan  senyawa  kimia yang  larut  pada  pelarut.  Ada  beberapa macam  ekstraksi  yang  biasa  digunakan pada  proses  pemisahan  senyawa  bioaktif dari  tumbuhan  dalam  rangka  mengetahui rendemen  yang  akan  dihasilkan,  yakni ekstraksi  cara  dingin  yang  terdiri  dari maserasi,  perkolasi  dan  sokletasi  serta ekstraksi  cara  panas,  yakni  dengan  cara refluks.
Metode  maserasi  digunakan  untuk mengekstrak  sampel  yang  relatif  tidak tahan  panas.  Metode  ini  dilakukan  hanya dengan  merendam  sampel  dalam  suatu pelarut  dalam  jangka  waktu  tertentu, biasanya  dilakukan  selama  24  jam  tanpa menggunakan pemanasan.
Kelebihan metode  ini  diantaranya  adalah  tidak memerlukan  peralatan  yang  rumit,  relatif murah,  dapat  menghindari  penguapan komponen senyawa karena tidak menggunakan panas,
sedangkan kelemahannya  adalah  memerlukan  waktu
yang  lama  dan  pelarut  yang  banyak sehingga tidak efisien (Meloan, 1999).
Metode  refluks  digunakan  untuk mengekstrak  sampel  yang  relative  tahan panas.  Metode  ini  dilakukan  dengan  cara menggodok  sampel  dalam  suatu  pelarut yang diletakan dalam wadah dan dilengkapi  dengan  kondensor  dengan jangka  waktu  lebih  cepat,  biasanya  3–7 jam. Kelebihan metode ini adalah waktunya  lebih  singkat,  terjadi  kontak langsung  dengan  pelarut  secara  terus menerus, dan pelarut yang digunakan lebih sedikit sehingga efektif dan efisien.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk membandingan dua proses pemisahan  atau ekstraksi  senyawa  kimia  yang  terkandung pada biji Moringa oleifera L, yakni dengan cara dingin (menggunakan proses maserasi) dan dengan cara panas (menggunakan proses refluks).

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Sampel  biji  kelor  diambil  pada bulan April dari Nusa Tenggara Barat. Zat kimia  yang  dipakai  semua pure  analysis, yaitu metanol,  heksana,  satu  set  pereaksi uji  fitokimia  (terdiri  dari  uji  alkaloid, terpenoid,  flavonoid,  saponin  dan  tanin), kertas  saring,  akuades,  aluminium  foil, kapas bebas lemak dan tissue.

## Peralatan
Alat  yang  digunakan  adalah  satu set  alat  –  alat  gelas,  alat  ekstraksi  refluks dan  maserasi,  oven,  labu  penguap  putar, blender,  neraca  analitik,    desikator,
refrigerator  dan  satu  set  alat  untuk  uji fitokimia.

## Prosedur  Kerja
Sampel biji kelor yang didapatkan, kemudian dibersihkan dari kotoran-kotoran dan  dikeringkan  di  udara  terbuka.  Sampel yang  telah  kering  lalu  dihaluskan  dengan menggunakan  blender,  kemudian  dihitung kadar airnya dan dilakukan proses ekstraksi cara dingin dan panas.

## Penentuan Kadar Air
Penentuan kadar air sampel dengan  cara  sejumlah  berat  sampel  kering dimasukkan ke dalam cawan porselin yang telah diketahui bobot kosongnya.
Kemudian  cawan  tersebut  dipanaskan  di dalam  oven  pada  suhu  105 o C  selama  3 jam.  Setelah  itu  didinginkan  di  dalam desikator dan ditimbang untuk mengetahui bobot keringnya, pemanasan sampel diulang  sampai  diperoleh  bobot  yang konstan.  Kadar  air  ditentukan  dengan rumus Kadar Air (%) = [(B – C) / (B – A)] x 100
Keterangan : A : Berat cawan kosong B : Berat cawan + berat sampel C : Berat akhir sampel

## Ekstraksi Dingin (Maserasi)
Sebanyak 20 - 25 g sample kering yang  telah  dihaluskan  dimaserasi  dengan heksana  sampai  bebas  lemak.  Ekstraksi dilakukan  sebanyak  4  kali  ulangan. Ekstrak yang dihasilkan disaring, kemudian  filtratnya  di  pekatkan  dengan menggunakan  labu  penguap  putar  pada suhu  40 o C  sehingga  diperoleh  ekstrak kasar dan dihitung rendemennya. Ampasnya  dikering  anginkan  lalu  setelah kering, dimaserasi kembali dengan metanol  80%  dengan  cara  yang  sama seperti heksana. Filtrat yang dihasilkan lalu dipekatkan  dan  didapatkan  ekstrak  kasar dan dihitung rendemennya.

## Ekstraksi Panas (Refluks)
Sebanyak 20 – 25 g sample kering yang telah dihaluskan dimasukkan kedalam  labu  bulat,  ditambahkan  heksana secukupnya  dan  direfluks  selama  7  jam. Ekstraksi  dilakukan  sebanyak  4  kali ulangan.  Ekstrak  yang  dihasilkan  disaring, kemudian  filtratnya  di  pekatkan  dengan menggunakan  labu  penguap  putar  pada suhu  40 o C  sehingga  diperoleh  ekstrak kental dan dihitung rendemennya. Ampasnya  dikering  anginkan  lalu  setelah kering,  direfluks  kembali  menggunakan metanol  80%  dengan  cara  yang  sama seperti heksana. Filtrat yang dihasilkan lalu dipekatkan  sehingga  didapatkan  ekstrak kasar dan dihitung rendemennya.
Rendemen  yang  dihasilkan  dari kedua metode ekstraksi tersebut lalu di uji dengan  uji  t.  Untuk  menarik  kesimpulan dapat  dilihat  dari  nilai-t  (t  hitung)  yang kemudian  dibandingkan  dengan  nilai  t- tabel. Jika nilai t hitung > dari t-tabel maka kesimpulannya  tolak  H 0 artinya  terdapat perbedaan diantara kedua metode tersebut.
Ekstrak metanol 80% yang dihasilkan dari proses maserasi dan refluks serta  sampel  serbuk  biji  kelor  diuji fitokimia  untuk  mengetahui  golongan senyawa  kimianya.  Uji  fitokimia  yang dilakukan  meliputi  uji  kualitatif  untuk alkaloid, triterpenoid-steroid, saponin, flavonoid, dan tanin.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Bagian  tumbuhan  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  biji.  Biji  kelor yang  sudah  kering  lalu  dihaluskan  dengan menggunakan  blender.  Tujuannya  adalah untuk memudahkan kontak dengan pelarut sehingga  pada  tahap  ekstraksi,  interaksi antara  pelarut  pengekstrak  dengan  sampel yang  diekstraksi  menjadi  lebih  efektif  dan pelarut  pengekstrak  akan  lebih  mudah mengambil zat-zat yang terkandung dalam sampel.
Sampel  yang  digunakan  pada penelitian  ini  merupakan  bahan  yang berasal dari tumbuh – tumbuhan, sehingga sampel  mengandung  air  yang  jumlahnya relatif tinggi. Oleh karena itu, dalam tahap
persiapan sampel harus dilakukan penentuan  kadar  air  yang  terkandung dalam  sampel.  Kadar  air  merupakan parameter  penting  dalam  bahan  pangan, karena  akan  mempengaruhi  daya  tahan bahan  pangan  terhadap  serangan  atau aktivitas  mikroorganisme.  Bahan  pangan yang memiliki kadar air tinggi lebih mudah rusak  karena  akan  menjadi  media  yang kondusif bagi pertumbuhan mikroorganisme.
Kadar  air  ditetapkan  dengan  cara gravimetri,  yaitu  diperoleh  dengan  cara menghitung  bobot  bahan  sebelum  dan sesudah  dikeringkan  pada  temperatur  di atas  titik  didih  air,  sehingga  diharapkan semua  air  akan  menguap  pada  suhu tersebut  dan  pada  periode  waktu  tertentu (Harjadi, 1986).
Berdasarkan  penentuan  kadar  air yang  telah  dilakukan  (tabel  1),  didapatkan bahwa sampel biji mempunyai kadar air di atas  10%,  yakni  11,6%.  Hal  yang  sama, pernah  didapatkan  oleh  Budiman  (2001), yakni  11,9%  dengan  sampel  kering  giling dari  tumbuhan A.  Sacrorum Ledeb, Wulandari  (2005)  memperoleh  13,3% dengan  sampel  buah  mahkota  dewa,  dan Putri  (2004)  memperoleh  8,4  –  11,1% dengan  sampel  kulit  buah  kakao.  Menurut Winarno  (1997),    sampel  yang  baik  untuk disimpan dalam jangka panjang adalah jika kadar  air  sampel  kurang  dari  10%.  Kadar air  dalam  penelitian  ini  rata-rata  diatas 10%,  oleh  karena  itu  sampel  tidak  bisa digunakan  dalam  jangka  waktu  yang  lama karena  memungkinkan  timbulnya  jamur. Untuk  menghindari  hal  tersebut  maka sampel disimpan di dalam freezer.
Pemisahan  Senyawa  Kimia  dan  Uji Fitokimia
Pemisahan golongan senyawa
kimia  pada  penelitian  ini  menggunakan metode  maserasi  dan  refluks.  Mekanisme metode  maserasi  adalah  proses  difusi pelarut  ke  dalam  dinding  sel  tumbuhan untuk mengekstrak senyawa-senyawa yang ada  dalam  tumbuhan  tersebut.  Metode maserasi  digunakan  untuk  mengekstrak
senyawa  yang  kurang  tahan  terhadap panas,  biasanya  digunakan  untuk  sampel yang belum diketahui karakterisasi senyawanya,  sedangkan  metode  refluks menggunakan efek panas untuk membantu proses  difusi  pelarut  ke  dalam  dinding  sel tumbuhan.
Pelarut  yang  digunakan  pada masing-masing  sampel  adalah    heksana dan  metanol  80%.  Senyawa  yang  akan terbawa  pada  proses  ini  adalah  senyawa- senyawa  yang  memiliki  polaritas  yang sesuai  dengan  pelarut  yang  digunakan. Kemudian larutan yang dihasilkan (gambar 2)  di  kentalkan  menggunakan  labu penguap  putar  untuk  mendapatkan  ekstrak kental,  kemudian  dihitung  rendemennya. Ampas  dari ekstraksi  lalu dikeringkan  dan di lakukan ekstraksi kembali menggunakan pelarut  matanol  80%,  dengan  perlakuan yang  sama,  larutan  di  kentalkan  dan dihitung  rendemennya.  Setelah  diperoleh ekstrak kasar metanol 80%.
Pelarut heksana adalah pelarut non polar,  sehingga  senyawa  –  senyawa  yang larut  juga  berfsifat  non  polar,  sedangkan metanol  80%  adalah  pelarut  yang  bersifat polar,  digunakan  untuk  menarik  senyawa- senyawa  yang  bersifat  polar.  Pemisahan pertama terhadap sampel digunakan pelarut  heksana  dengan  tujuan  untuk memisahkan  senyawa-senyawa  non  polar termasuk  lemak  yang  terkandung  pada sampel.  Setelah  diperoleh  ekstrak  kasar metanol 80%, lalu di lakukan uji fitokimia.
Dalimartha  (2003)  menyatakan bahwa  toksisitas  tanaman  berhubungan dengan metabolit sekunder yang terkandung  di  dalamnya.  Oleh  karena  itu uji  fitokimia  secara  kualitatif  dilakukan sebagai  uji  awal  untuk  mengetahui keberadaan  senyawa  kimia  spesifik.  Uji fitokimia  bertujuan  untuk  melakukan keberadaan  terhadap  beberapa  senyawa kimia  yang  terkandung  dalam  sampel.  Uji fitokimia yang dilakukan  pada serbuk biji, serta pada ekstrak metanol 80% biji adalah uji alkaloid,
flavonoid, steroid, triterpenoid,  tanin,  fenol  hidrokuinon  dan saponin.
Tabel 1.  Pengukuran Kadar Air pada Serbuk  Biji Kelor
Sampel Berat (gram) Kadar Air (%) Cawan kosong Cawan + Sampel (sebelum pengeringan) Cawan + Sampel (setelah pengeringan) A B C Biji 1 1,262 3,292 3,058 11,527 Biji 2 0,757 2,765 2,532 11,604 Rata-rata Kadar air 11,6 % Gambar 2.  Warna Ekstrak Biji.
Adanya  alkaloid  pada  sampel ditunjukkan  dengan  terdapatnya  endapan putih  dengan  pereaksi Mayer ,  endapan merah jingga dengan pereaksi Dragendroff , dan  endapan  coklat  dengan pereaksi Wagner . Adanya fenol
hidrokuinon  ditunjukkan  dengan  warna merah  saat  penambahan  NaOH  10%. Adanya  steroid  ditunjukkan  dengan  warna hijau  pada  lapisan  eter  yang  ditambahkan dengan  pereaksi  Liebermann-burchard. Adanya  tanin  ditunjukkan  atau  ditandai dengan  adanya  warna  biru  tua  atau  hijau kehitaman,  sedangkan  adanya  saponin pada sampel ditunjukkan dengan terbentuknya  busa  yang  stabil  pada  filtrat yang ditutup serlama 10 menit pada tabung reaksi.
Hasil uji fitokimia terhadap sampel serbuk  biji  kelor  dapat  dilihat  pada  Tabel 2.  Dari  tabel  tersebut  terlihat  bahwa, serbuk  biji  kelor  hanya  mengandung alkaloid  dan  saponin.  Senyawa  alkaloid pada  serbuk  biji  mempunyai  intensitas yang besar dibandingkan saponin. Hasil uji fitokimia terhadap ekstrak biji menggunakan metode refluks, dan maserasi seperti pada tabel 3.  Pada tabel 3 terlihat bahwa, intensitas golongan senyawa  alkaloid  dengan  metode  refluks lebih rendah dibandingkan dengan menggunakan  metode  maserasi,  demikian pula dengan saponin.
Tabel 2.    Hasil Uji Fitokimia Serbuk Biji Kelor Keterangan : - :  negatif (tidak terdapat senyawa yang diuji)
+ : positif menyatakan intensitas warna/
endapan
Hal  ini  menunjukkan  bahwa,  ada beberapa  senyawa  alkaloid  tidak  tahan terhadap  panas,  sehingga  mengakibatkan intensitasnya  berkurang  setelah  dilakukan pemisahan  dengan  metode  refluks.  Tetapi disisi  lain,  bahwa  dengan  metode  refluks, senyawa  metabolit  sekunder  yang  negatif (-)  pada  serbuk  biji,  kemudian  (+)  setelah dilakukan  refluks,  yakni  senyawa  fenol hidrokuinon  dan  flavonoid  walaupun intensitasnya  kecil.  Hal  ini  disebabkan, bahwa  pemisahan  pertama  yang  dilakukan dengan  pelarut  non  polar  (heksana),  dapat membantu memunculkan golongan senyawa-senyawa tersebut, karena heksana dapat  melarutkan  lemak,  minyak  dan senyawa – senyawa non polar lainnya yang dapat  mengganggu  munculnya  golongan senyawa  tersebut  pada  saat  pengujian fitokimia serbuk biji.
Hasil  pengujian  terhadap  sampel menunjukkan, bahwa biji kelor
mengandung  alkaloid,  fenol  hidrokuinon, flavonoid,  dan  saponin  sehingga  biji  kelor berpotensi  sebagai  antioksidan  (Pratt  and Hudson 1990, Benabdesselam e t.al. 2007). Beberapa peneliti juga menyatakan, bahwa tumbuhan  kelor  atau Moringa  oleifera L adalah salah satu tumbuhan yang berpotensi  sebagai  antioksidan  (Siddiq e t.al. 2005,  Chumark et  al. 2007,  Sato et.al., 2002,  Kumar  dan  Pari,    2003). Senyawa tersebut berperan sebagai
antioksidan  dengan  cara  menghambat peroksida  lipid sehingga  dapat  melindungi tubuh dari penyakit kanker.
Sampel  biji  kelor  juga  berpotensi sebagai  penurun  kolesterol  dan  dapat memperkecil  resiko  arteroskeloris  pada diabetes  karena  mengandung  saponin (Rafi,  2003)  juga  berpotensi  sebagai penurun  kadar  glukosa  darah  karena mengandung  senyawa  bioaktif  alkaloid (Hermawan, 2002).
Rendemen Senyawa Kimia yang dihasilkan Rendemen  adalah  perbandingan produk  akhir  yang  diperoleh  terhadap bahan baku yang digunakan. Nilai rendemen  yang  diperoleh  berdasar  berat kering  bahan  baku.  Rendemen  produk berkaitan  dengan  metode  ekstraksi  yang dipakai untuk memisahkan senyawa kimia.
Metode  ekstraksi  yang  digunakan pada  penelitian  ini  adalah  maserasi (ekstraksi  dingin)  dan  refluks  (ekstraksi panas).  Hal  ini  dilakukan  dengan  tujuan untuk  melihat  pengaruh  proses  ekstraksi yang berbeda-beda terhadap rendemen dan golongan senyawa kimia yang dihasilkan.
Rendemen  yang  diperoleh  dari hasil  ekstraksi  pada  sampel  biji  (tabel  4) menunjukkan bahwa metode refluks dengan pelarut heksana memiliki
rendemen  lebih  besar  yakni  23,030% dibandingkan  metode  maserasi  dengan rendemennya  hanya  21,221%.  Hal  yang sama  juga  terjadi  dengan  pelarut  metanol 80%.  Rendemen  yang  diperoleh  dari  hasil ekstraksi  pada  sampel  biji  (Tabel  5) menunjukkan  bahwa    metode  refluks mempunyai  rendemen  yang  lebih  besar, yakni 6,157% dibandingkan metode maserasi yang hanya menghasilkan
5,256%.
Pada  tabel  4,  5  dan  gambar  3 terlihat  bahwa  perbedaan  rendemen  yang diperoleh  pada  ekstraksi  biji  kelor  dengan metode refluks dan maserasi menggunakan pelarut  heksana  adalah  1,808  %  dan dengan  menggunakan  pelarut    Metanol 80% adalah  0,901%. Uji Fitokimia Sebuk Biji Alkaloid ++++ Fenol hidrokuinon - Flavonoid - Steroid - Triterpenoid - Tanin - Saponin ++
Ref luks Ref luks Maserasi Maserasi 0.000 5.000 10.000 15.000 20.000 25.000 Pelarut Re nd em en (% ) Ref luks 23.030 6.018 Maserasi 21.221
5.337
Heksana MeOH : A ir
Tabel 3.    Hasil  uji  Fitokimia  dengan  Metode  Refluks  dan  Maserasi  Menggunakan  Pelarut Metanol 80%
Tabel 4.  Rendemen pada Sampel Biji  dengan Pelarut Heksana.
Sampel Biji Rendemen (%) Selisih (ke dua metode) Metode Refluks Metode Maserasi Ulangan 1 22,792 20,359 1,808 % Ulangan 2 22,410 21,712 Ulangan 3 23,360 21,568 Ulangan 4 23,556 21,247 Rata-rata 23,030 21,221
Tabel 5.  Rendemen pada Sampel Biji  dengan Pelarut Metanol 80%
Sampel Biji Rendemen (%) Selisih (ke dua metode) Metode Refluks Metode Maserasi Ulangan 1 5,885 4,920 0,901 % Ulangan 2 5,852 5,334 Ulangan 3 6,267 5,807 Ulangan 4 6,625 4,963 Rata-rata 6,157 5,256
Gambar 3.   Perbandingan Rendemen pada Sampel Biji Menggunakan Pelarut Heksana dan Metanol 80% (MeOH : air, 4:1) dengan Metode Refluks dan Maserasi.
Uji Fitokimia Metode Refluks Metode Maserasi Alkaloid ++ +++ Fenol hidrokuinon + - Flavonoid + - Steroid - - Triterpenoid - - Tanin - - Saponin + ++
Uji  t    antara  metode  refluks  dan maserasi  biji  kelor  menggunakan  pelarut metanol 80% (Lampiran 2), dapat diketahui  bahwa  nilai-p  dari  uji    adalah
0,172.  Karena  nilai-p  nya  lebih  besar  dari taraf  nyata  (α)  5%,  maka  kesimpulannya terima  H 0 artinya  antara  metode  refluk- heksana dan maserasi-heksana tidak berbeda  nyata  pada  taraf  nyata  5%,  atau untuk  menarik  kesimpulan  dapat  dilihat dari  nilai-t  (t  hitung),  yakni  nilai  t  hitung didapat  sebesar  1,59,  sedangkan  nilai  t- tabel  dengan  df=5,  dan  α=  5%    adalah 2,571,  karena  nilai  t  hitung  <  dari  t-tabel maka  kesimpulannya  terima  H 0 artinya tidak  terdapat  perbedaan  diantara  kedua metode tersebut.
Secara  uji  statistik  tidak  terdapat perbedaan nyata antara metode refluks dan maserasi  dengan  menggunakan  pelarut metanol  80%,  tetapi  metode  refluks,  dari segi  waktu  memiliki  efisiensi  ekstraksi yang  lebih  singkat  dibandingkan  dengan metode  maserasi.  Proses  ekstraksi  dengan refluks  memerlukan  waktu  4  ×  2  jam, sedangkan  dengan  maserasi  memerlukan waktu  sampai  3  ×  24  jam.  Kemudian  dari segi  pelarut  yang  digunakan,  metode maserasi relatif menggunakan pelarut lebih banyak  dibandingkan  dengan  metode refluks.
Metode  refluks  ataupun  maserasi menggunakan  pelarut  heksana,    secara rata–rata  pada  sampel  biji  dihasilkan rendemen  yang  lebih  besar,  dengan demikian  dapat  disimpulkan,  bahwa  pada biji  kelor  banyak  terdapat  senyawa metabolit  sekunder  yang  bersifat  non- polar.

## KESIMPULAN
Dari hasil penelitian dapat disimpulkan :
1. Kadar  air  rata-rata  pada  sampel  biji 11,565%.
2. Golongan senyawa kimia pada ekstrak biji  dengan  pelarut  methanol  80% dengan refluks adalah alkaloid,
phenol  hidroquinin,  flavonoid  dan saponin,  sedangkan  dengan  maserasi hanya alkaloid dan saponin.
3. Metode  refluks  dapat  mengekstrak senyawa  kimia  lebih  besar  dari  pada metode maserasi.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih kepada Kopertis  Wilayah  I  NAD-SUMUT    yang telah  membiayai  penelitian  ini.  Terima kasih  juga  kepada  Dewi  Wulandari,  MS., Dekan  FMIPA  Universitas  Tri  Karya Medan, DR. Dyah Iswantini, M.Agr. dosen Sekolah  Pascasarjana  Kimia  IPB  Bogor yang  telah  membimbing  selama  penelitian ini berlangsung.

## DAFTAR PUSTAKA
Budiman,  A.  2001. Senyawa  Bioaktif Golongan  Kumarin  Artemisia
Sacrorum    Ledeb (Skripsi). Bogor : FMIPA. IPB. Benabdesselam FM. Et.al. 2007. Antioxidant activities of alkaloid extracts of two Algerian  species  of Fumaria : Fumaria capreolata and Fumaria bastardii . ACG Publication Rec. Nat. Prod . 1:2- 3 (2007) 28-35.
Chumark P et al. 2007. The in vitro and ex vivo antioxidant properties, hypolipidaemic and antiatherosclerotic  activities  of water extract of Moringa oleifera Lam.  Leaves. Journal of Ethnopharmacology 116(2008) 439-446. Dalimarta, S. 2003. Karakteristik Tumbuhan  Obat di  dalam Prosiding Seminar dan Pameran Nasional Tumbuhan Obat Indonesia XXIV. Darmaga, Bogor.  Pusat  Studi  Biofarmaka IPB.
Harborne, J.  B.   1996. Metode  Fitokimia. Cara modern menganalisa Tumbuhan. Terjemahan Kosasih Patmawinata dan
Iwang  Soediro.  Edisi  ke  3. Bandung. Penerbit ITB. Harjadi  W.  1986. Ilmu  Kimia  Analitik dasar .  Jakarta.  PT  Gramedia
Pustaka Umum.
Hermawan, H. 2002. Isolasi dan Pencirian Senyawa  Aktif  dari  Tumbuhan Anting-anting  (Acalypha indica L.) yang Berpotensi Menurunkan  Kadar    Glukosa Darah. Bogor:  FMIPA. IPB. Hidayat  MG.  2004. Perbandingan  Metode Ekstraksi Flavonoid dan Terpenoid  dari  Sidaguri  Serta Daya Inhibisi Ekstrak Terhadap  Aktivitas    Xantin Oxidase . (Skripsi) Bogor:
FMIPA. IPB.
Kumar  NA  &  Pari  L.  2003      Antioxidant Action  of Moringa  oleifera Lam. (Drumstick) Against Antitubercular  Drugs  Induced Lipid  Peroxidation  in  Rats. Journal  of  Medicinal  Food. 6(3): 255-259. Meloan CE. 1999. Chemical Separation. New york: J. Willey. Prat  DE,  BJF.  Hudson.  1990. Natural Antioxidant not Exploited Commercially. Di            dalam BJF  Hudson  .  Editor Food Antioxidant. London.  Elsevier Science.
Putri,    LD.  2004. Pemisahan  dan Pencirian  Pektin  Dari  Kulit Buah  Kakao (Skripsi).    Bogor:
FMIPA. IPB. Rafi,  M.  2003. Identifikasi  Fisik  dan Senyawa Kimia Pada Tumbuhan  Obat  Fokus  Untuk Tumbuhan Obat Diabites
Melitus . Dalam makalah Pelatihan  Tanaman  Tradisional (swamedikasi) Pengobatan Penyakit Diabites Melitus. Bogor. Pusat Studi Biofarmaka. IPB.
Sato  T et  al. 2002 , Evaluation  of antioxidant activity of indigenous vegetables  from South  and  Southeast  Asia . JIRCAS Research Highlights .
Siddhuraju P, Becker K. 2003. Antioxidant Properties  of  Various  Solvent Extract of Total Phenolic Constituents from Three Different  Agroclimatic  Origins of  Drumstick  Tree  ( Moringa oleifera Lam.) .  J.  Agric.  Food Chem. 51 (8) : 2144-2155.
Simanjuntak,  P.  1988. Metode  Isolasi  dan Pemurnian  Ekstrak  Air  dari Tumbuhan. Warta AKAB.
Sidik  M.  1997. Antioksidan  Alami  Asal Tumbuhan. Prosiding  Seminar Nasional Tumbuhan Obat Indonesia XII. ITB. Bandung. Siddiq A et al. 2005. Antioxidant activity of  different  solvent  extracts  of Moringa  oleifera leaves  under accelerated storage of sunflower oil. Asian  Journal  of Plant Sciences 4(6) 630-635. Wulandari,  NDM.  2005. Perbandingan Metode Ekstraksi Buah Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa ) dan Uji Toksisitas
Subkronis  Pada  tikus  Putih (Skripsi). Bogor: FMIPA. IPB.
Winarno,  WP.  1997. Kimia  Pangan  dan Gizi. Jakarta. Gramedia.