## Medical Laboratory Technology Journal
Available online at : http://ejurnal-analiskesehatan.web.id
2 (2), 2016, 42-45

## DAYA HAMBAT NaCl TERHADAP PERTUMBUHAN Staphylococcus aureus

## Amalia, Ratih Dewi Dwiyanti, Haitami
Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Banjarmasin Jl Mistar Cokrokusumo 4a Banjarbaru e-mail : haitami4@yahoo.co.id
Abstract : Staphylococcus aureus is a pathogenic bacterial that causes infectious disease and human poisoning through enterotoxin produced by the bacteria. Salt or sodium chloride is used by human for food preservation process because it can inhibit the growth of bacteria, especially Staphylococcus aureus. The purposes of the study were to determine the effect of NaCl in me- dia on the growth of Staphylococcus aureus and determine the effective concentration of NaCl. The type of research used in this study was true experiment posttest only control group design. Samples were prepared in 5 NaCl concentrations, they were 10%, 15%, 20%, 25% dan 30%. The  study  conclusion  was  there  were  effects  of  NaCl  addition  to  the  media  on  the  growth  of Staphylococcus aureus with a significance value of 0.000 (<0.05). The effective NaCl concen- tration that inhibited the growth of Staphylococcus aureus is 15%. The advice for next study is to conduct similar studies with NaCl concentration of 10% - 15%.
Keywords : Staphylococcus aureus ; Sodium Chloride
Abstrak : Staphylococcus aureus merupakan bakteri patogen yang menyebabkan penyakit in- feksi dan keracunan pada manusia melalui enterotoksin yang dihasilkan oleh bakteri tersebut. Garam dapur atau natrium klorida dimanfaatkan oleh manusia untuk proses pengawetan ma- kanan  karena  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri  khususnya Staphylococcus  aureus . Tujuan penelitian adalah untuk mengetahui pengaruh penambahan NaCl pada media terhadap pertumbuhan Staphylococcus  aureus dan  menentukan  konsentrasi  efektif  dari  NaCl.  Jenis penelitian yang digunakan dalam penelitian adalah true experiment dengan rancangan posttest only  control  group  design .  Sampel  penelitian  adalah  NaCl  yang  dibuat  dalam  5  konsentrasi, yaitu  10%,  15%,  20%,  25%  dan  30%.  Penelitian  dilakukan  dengan  teknik  cawan sebar  pada media nutrien agar. Hasil penelitian menunjukkan bahwa tidak terdapat koloni Staphylococcus aureus pada  media  dengan  penambahan  NaCl  konsentrasi  15%  sampai  konsentrasi  30%. Kesimpulan  penelitian  terdapat  pengaruh  penambahan  NaCl  pada  media  terhadap  pertum- buhan Staphylococcus  aureus dengan  nilai  signifikasi  0,000  (<0,05).  Konsentrasi  NaCl  yang efektif menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus adalah 15%. Saran untuk melakukan penelitian yang serupa dengan konsentrasi NaCl 10%-15%.
Kata kunci : Staphylococcus aureus; natrium clorida
Received 2016-12-22; Received in revised form 2016-12-30; Accepted 2016-12-30

## PENDAHULUAN
Natrium  klorida  atau  yang  biasa  disebut garam  dapur  adalah  senyawa  dengan  rumus NaCl.  Dalam  suatu  proses  fermentasi  bahan pangan,  natrium  klorida  bermanfaat  untuk membatasi  pertumbuhan  organisme  pem- busuk dan mencegah pertumbuhan sebagian organisme.  Namun,  bakteri  tertentu  masih dapat  tumbuh  dalam  larutan  berkadar  garam tinggi (Desrosier, 2008).
Garam  merupakan  salah  satu  bahan pembantu yang sangat penting bagi manusia salah satunya garam digunakan untuk proses pengawetan  ikan.  Selain  itu  garam  juga mempunyai  peran  dalam  menghambat  per- tumbuhan  bakteri  khususnya Staphylococcus aureus (Indarti, 2009).
Garam  dapat  memperpanjang  umur  sim- pan  produk,  karena  garam  mempunyai  sifat bakteriosid  (daya  membunuh)  dan  bakterio- statik (daya menghambat). Aksi osmotik laru- tan  garam  terhadap  bahan  pangan  disebab- kan  karena  bahan  pangan  bertindak  sebagai membran  semipermiabel  menurunkan  kadar air  sehingga  garam  berperan  untuk  meng- hambat  kegiatan  bakteriologis  dan  enzimatis (Ilyas dan Arifudin dalam Helmiyati, 2010).
Staphylococcus  aureus adalah  bakteri berbentuk  bulat,  bersifat  gram  positif,  bi- asanya  tersusun  dalam  rangkaian  tidak beraturan  seperti  buah  anggur.  Beberapa  di- antaranya  tergolong  flora  normal  pada  kulit dan  selaput  mukosa  manusia,  menyebabkan abses,  berbagai  infeksi  piogen  dan  bahkan septikemia yang fatal. Staphylococcus aureus mengandung  polisakarida  dan  protein  yang berfungsi  sebagai  antigen  dan  merupakan substansi  penting  didalam  struktur  dinding sel,  tidak  membentuk  spora,  dan  tidak  mem- bentuk flagel (Jawetz et al ., 2008).
Staphylococcus  aureus merupakan  flora normal kulit dan saluran nafas atas pada indi- vidu yang carrier (Honeyman, 2001). Staphy- lococcus  aureus memproduksi Staphylococ- cal  enterotoxins (SE)  yaitu  bersifat  patogen yang dapat menyebabkan keracunan pangan. Gejala umum keracunan SE ditandai dengan mual, muntah, kram perut dan diare yang ter- jadi selama 24 - 48 jam, masa penyembuhan biasanya  terjadi  antara  1-3  hari  (Balaban& Rasooly, 2000).
Laporan  tahunan  BPOM  tahun  2009 menunjukkan  bahwa  pada  tahun  2009  di  In- donesia  telah  terjadi  115  kejadian  luar  biasa (KLB)  karena  keracunan  pangan.  Berdasar- kan  data  BPOM  kemungkinan Staphylococ- cus aureus adalah salah satu penyebab kera-
cunan  di  Indonesia  karena Staphylococcus aureus merupakan  flora  normal  yang  secara alami terdapat pada tubuh manusia dan dapat mengkontaminasi  makanan  yang  diolah dengan  kondisi  sanitasi  kurang  baik.  Di  Kali- mantan  Selatan  terjadi  keracunan  massal sebanyak 72 pasien 1 diantaranya meninggal dunia. Rata-rata pasien mengeluh sakit diare, muntah-muntah dan sakit perut. Berdasarkan hasil  penelitian  dari  laboratorium  Balai  Besar Tekhnologi  Kesehatan  Lingkungan  dan Pencegahan  Penyakit  (BBTKLPP)  Banjarba- ru, makanan yang terkontaminasi adalah kare ayam  positif  mengandung  bakteri Staphylo- coccus aureus (Jaya, 2013) Staphylococcus  aureus merupakan  bak- teri tahan garam dan tumbuh baik pada media yang mengandung 7,5% NaCl, seperti halnya pada  media  manithol  salt  agar    (MSA) (Srikandi, 1993).
Hasil  penelitian  Dini  Ruliani  (2010) pengaruh  larutan  garam  dapur  terhadap  per- tumbuhan Staphylococcus  aureus pada  me- dia  nutrient  agar  menunjukkan  terdapat pengaruh  larutan  garam  dapur  (NaCl)  pada konsentrasi 18%. Dalam penelitian Indra Aris- tyan et  al .,  (2014)  pada  proses  pembuatan terasi dengan perbedaan penambahan garam (2%,  8,5%  dan  15%)  mempengaruhi  kualitas organoleptik  dan  mikrobiologis  terasi  rebon. Semakin  tinggi  kadar  garam  semakin  rendah pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus dan bakteri halofilik. Tujuan penelitian ini ada- lah untuk mengetahui pengaruh penambahan NaCl  dalam  media  terhadap  pertumbuhan Staphylococcus aureus dan menentukan kon- sentrasi efektif dari NaCl.

## BAHAN DAN METODE
Jenis  penelitian  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah true  experiment. Rancangan penelitian yang digunakan adalah posttest dengan  kelompok  kontrol  ( posttest only control group design ). Sampel penelitian ini  adalah  NaCl  yang  akan  dibuat  dalam  5 konsentrasi,  yaitu  10%,  15%,  20%,  25%  dan 30%. Variabel bebas dari penelitian ini adalah NaCl  dengan  konsentrasi  10%,  15%,  20%, 25%  dan  30%.  Variabel  terikat  dalam penelitian  ini  adalah  jumlah  koloni Staphylo- coccus aureus pada media Nutrient Agar (NA) merck  dengan  konsentrasi  NaCl  10%,  15%, 20%,  25%  dan  30%.  Penelitian  ini  dilakukan dengan  cara  koloni  kuman Staphylococcus aureus pada  media  Manit  Salt  Agar  (MSA) merck dihomogenkan ke dalam tabung reaksi yang berisi 10 ml larutan NaCl 0,9% steril.
Kekeruhan  suspensi  kuman  pada  larutan NaCl  0,9%  disamakan  dengan  standar  Mc Farland 0,5  yang setara dengan  150 juta/ml. Ambil 10 µl suspensi Staphylococcus aureus yang telah disamakan kekeruhannya dengan Mc Farland 0,5 dimasukkan dalam media Nu- trient  Agar  (NA)  yang  telah  ditambah  NaCl dengan  konsentrasi  10%,  15%,  20%,  25% dan  30%  kemudian  disebarkan  dengan menggunakan segitiga bengkok dan inkubasi pada suhu 37 o C selama 24 jam. Ambil 10 µl suspensi Staphylococcus  aureus yang  telah disamakan  kekeruhannya  dengan  Mc  Far- land  0,5  dimasukkan  dalam  media  Nutrient Agar  (NA)  tanpa  penambahan  NaCl  sebagai kontrol,  inkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  24 jam.  Amati  dan  hitung  jumlah  koloni  yang tumbuh pada media yang ditambah NaCl pa- da konsentrasi yang berbeda, serta pada me- dia  Nutrien  Agar  (NA)  tanpa  penambahan NaCl atau kontrol.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  pengujian  pertumbuhan  koloni Staphylococcus  aureus pada  konsentrasi NaCl yang berbeda disajikan pada tabel 1.
Tabel 1. Pertumbuhan koloni Staphylococcus aureus
Konsentrasi  NaCl  yang  efektif  dalam menghambat  pertumbuhan Staphylococcus aureus adalah  15% . Konsentrasi  ini  adalah konsentrasi  terkecil  dimana  koloni Staphylo- coccus  aureus sudah  tidak  dapat  tumbuh. Untuk mengetahui adanya pengaruh dari per- lakuan NaCl terhadap pertumbuhan Staphylo- coccus  aureus maka  dilakukan  uji  statistik.
Hasil uji normalitas data dengan
menggunakan uji Sgapiro-Wilk, diketahui nilai asymp. Sig = 0,751. Apabila nilai  asymp. Sig >  0,05  maka  dapat  dinyatakan  bahwa  data berdistribusi  normal,  kemudian  dilanjutkan dengan  Anova.  Berdasarkan  hasil  uji  Anova diperoleh  nilai  signifikasi  0,000  apabila  nilai signifikasi < 0,05 menunjukkan adanya perbe- daan  pertumbuhan  koloni  dari  perlakuan berbagai konsentrasi sehingga dapat dilanjut- kan ke uji Regresi untuk mengetahui ada tid- aknya pengaruh.
Berdasarkan  hasil  uji  analisa  statistik menggunakan uji regresi didapatkan nilai sig- nifikasi  =  0,000.  Sesuai  ketentuan  apabila nilai signifikasi < 0.05 maka dapat dinyatakan bahwa berbagai media nutrien agar yang dit- ambah  NaCl  dengan  konsentrasi  yang  ber- beda  berpengaruh  terhadap  pertumbuhan Staphylococcus  aureus .  Dengan  persamaan (x=konsentrasi,  y=jumlah  koloni).  Untuk melihat seberapa besar pengaruh konsentra- si  NaCl  terhadap  pertumbuhan Staphylococ- cus aureus , pada jumlah koloni dilakukan an- alisis  koefisien  determinasi  atau  disimbolkan dengan  R 2 yang  merupakan  hasil  dari  pen- gujian terhadap penurunan jumlah koloni.
Gambar 1. Grafik penurunan jumlah koloni pada persamaan garis lurus varian konsentrasi NaCl
Nilai  R  square  yang  diperoleh  adalah sebesar 0,493 atau 49,3% nilai ini menyimpul- kan  bahwa  pengaruh  konsentrasi  NaCl  ter- hadap  pertumbuhan Staphylococcus  aureus sebesar 49,3%.
Natrium  klorida  dapat  menghambat  per- tumbuhan Staphylococcus  aureus karena dapat meningkatkan tekanan osmotik substrat yang  menyebabkan  terjadinya  penarikan  air dari  dalam  sel  mikroorganisme  sehingga  sel akan kehilangan air dan mengalami pengeru- tan hal ini menyebabkan aktifitas mikroorgan- isme  terhambat.  Selain  itu  konsentrasi  NaCl dapat  menyebabkan  protein  mikroba  ter- denaturasi  (Winiati  P  R,  1992).  Natrium  klor- ida  juga  memiliki  daya  toksisitas  yang  tinggi pada mikroba, ionisasi garam akan menghasilkan ion klor yang beracun terhadap mikroorganisme serta dapat memblokir sistem respirasinya (Indarti, 2009).
Hasil  penelitian  Indarti  (2009)  pada  kon- sentrasi garam 4%, 6%, 8%, 10%, 12% belum dapat  menghambat  pertumbuhan Staphylo- coccus  aureus dan  hasilnya  pun  tidak  dapat dihitung.  Sedangkan  pada  konsentrasi  16%, 20%,  30%,  40%  pertumbuhan  koloninya masih tampak hanya saja kerapatanya berku- rang, sehingga koloninya dapat dihitung.
Pertumbuhan ini dapat terlihat pada waktu kontak  20,  30,  40,  50,  60  menit,  dimana  se- makin  tinggi  waktu  kontak  yang  digunakan maka semakin berkurang pertumbuhan koloni tersebut.  Berdasarkan  hasil  penelitian  Indarti menunjukkan  bahwa  garam  dapur  pada  kon- sentrasi  4%  tidak  mampu  menghambat  per- tumbuhan Staphylococcus aureus dalam wak- tu  60  menit,  sedangkan  pada  konsentrasi garam dapur 40% sudah sedikit menghambat pertumbuhan Staphylococcus  aureus dalam waktu 60 menit.
Hasil  penelitian  Dini  Ruliani  (2010) pengaruh  larutan  garam  dapur  terhadap  per- tumbuhan Staphylococcus  aureus pada  me- dia  nutrient  agar  menunjukkan  terdapat pengaruh  larutan  garam  dapur  (NaCl)  pada konsentrasi 18%. Sedangkan pada penelitian ini  konsentrasi  NaCl  15%  sudah  tidak  ada bakteri  yang  tumbuh.  Perbedaan  dari  hasil penelitian  ini  disebabkan  dari  berbagai  faktor yang  dapat  mempengaruhi  perkembang- biakan  bakteri.  Faktor  yang  menyokong perkembangbiakan  bakteri  diantaranya  ada- lah  temperatur,  waktu,  kelembaban,  oksigen, pH dan cahaya (Arisman,2012).
Adapun keadaan lingkungan serta temper- atur  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  ada- lah  untuk  temperatur  pada  inkubator  yaitu dengan  suhu  37 0 C,  waktu  yang  digunakan yaitu selama 24 jam dan pH yang digunakan adalah pH netral 7,0.
Selain  faktor-faktor  tersebut  yang  me- nyebabkan  hasil  berbeda  adalah  metode yang digunakan pada saat penelitian. Metode penelitian yang digunakan Indarti (2009) ada- lah  media  yang  digunakan  yaitu  media  cair Nutrient Broth dengan konsentrasi garam 4%, 6%,  8%,  10%,  12%,  16%,  20%,  30%,  40% dan masing-masing menggunakan waktu kon- tak  20,  30,  40,  50,  60  menit  yang  kemudian dilakukan kultur pada media BAP. Sedangkan pada penelitian ini menggunakan media padat Nutrient Agar plat dengan konsentrasi garam 10%,  15%,  20%,  25%  dan  30%  dan  tanpa menggunakan waktu kontak.

## KESIMPULAN
Terdapat pengaruh penambahan NaCl pa- da  media  terhadap  pertumbuhan Staphylo- coccus  aureus dengan  nilai  signifikasi  0,000 (<0,05). Konsentrasi NaCl yang efektif meng- hambat  pertumbuhan Staphylococcus  aureus adalah 15%.

## SARAN
Melakukan  penelitian  tentang  pengaruh konsentrasi  NaCl  terhadap  pertumbuhan
Staphylococcus  aureus dari  konsentrasi  10% sampai dengan konsentrasi 15%.

## DAFTAR PUSTAKA
Arisman.  (2012). Keracunan  Makanan,  Buku Ajar Ilmu Gizi . Jakarta: EGC.
Balaban,  N.,  &  Rasooly,  A.  (2000).  Review Staphylococcal  enterotoxins. J.Food  Mi- crobiol , 61 , 1 – 10. Desrosier,  N.  (2008). Teknologi  Pengawetan Pangan,  Edisi  3 .  Jakarta:  Penerbit  Uni- versitas Indonesia.
Helmiyati  AF.  (2010). Pengaruh  Konsentrasi Tawas  terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Gram Positif dan Negatif . Universitas Mu- hammadiyah Semarang.
Honeyman, A. L., Friedman, H., & Bendinelli, M.  (2001).  Staphylococcus  aureus  infec- tion  and  disease. Plenum  Publishers , 40 (8), 667 – 671. . Indarti.  (2009). Pertumbuhan  Staphylococcus aureus  pada  Media  yang  Ditambah Garam  Dapur .  Universitas  Muhammadi- yah Semarang.
Aristyan,  I.,  Ratna,  I.,  &  Laras,  R.  (2014). Pengaruh  Perbedaan  Kadar  Garam  Ter- hadap Mutu Organoleptik Dan Mikrobiolo- gis  Terasi  Rebon  (Acetes  Sp.) .  Universi- tas Diponegoro.
Jaya,  D.  (2013).  Keracunan  Massal  Di  Batu- licin Terungkap. Buana Kalimantan News . Kalimantan Selatan. . Jawetz, Melnick, & Adelberg ’ s. (2008). Mikro- biologi  Kedokteran  (23rd  ed.).  Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC. Dini,  R.  (2010). Pengaruh  Larutan  Garam Dapur  Terhadap  Pertumbuhan  Staphylo- coccus  aureus  Pada  Agar  Nutrien . Sekolah  Tinggi  Analis  Bakti  Asih  Ban- dung.
Srikandi, F. (1993). Analisis Mikrobiologi Pan- gan . Jakarta: Raja Grafindo Persada.