Jurnal Farmasi Galenika ( Galenika Journal of Pharmacy ) 2017; 3 (2): 150 – 156 ISSN : 2442-8744 (electronic) http://jurnal.untad.ac.id/jurnal/index.php/Galenika/index
DOI : 10.22487/j24428744.2017.v3.i2.8815
Optimasi Formula Gel Antioksidan Ekstrak Etanol Buah Bligo ( Benincasa hispida ) dengan Metode Simplex Lattice Design ( SLD )
(Antioxidants  Gel  Formula  Optimation  of  Bligo  Fruit  Ethanolic  Extract  (Benincasa hispida) by Simplex Lattice Design (SLD) method)
Suryani * , Andi Nafisah, Syahrir Mana’an *
Jurusan Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Halu Oleo, Kendari-Sulawesi Tenggara, Indonesia
Article Info: Received: 14 Mei 2017 in revised form: 02 Juni 2017 Accepted: 30 Juni 2017
Available Online: 01 Oktober 2017

## ABSTRACT
Benincasa  hispida has  many  benefits  including  as  antioxidant.  This  study aims  to  evaluate  the  effect  of  Carbomer  940,  HPMC  and  NaOH concentrations  in  antioxidant  gel  formula  and  to  determine  Carbomer  940, HPMC and NaOH concentrations that could produce the optimal antioxidant gel  formula. Benincasa  hispida was  extracted  by  maceration  method  and antioxidant activity was tested by DPPH method. The antioxidant gels were formulated with variety combinations of Carbomer 940, HPMC and NaOH. The optimal gel formula was obtained by Design Expert 7.1.5 with Simplex Lattice  Design  method.  The  physical  characteristic  of  optimal  gel  formula was retested and compared with the results of Simplex Lattice Design .The results  showed  that  antioxidant  activity  of Benincasa  hispida ethanolic extract  has  potent  activity  with  the  IC 50 40,28 μ g/mL.  The  increasing concentration  of  Carbomer  940,  HPMC  and  NaOH  possessed  the  high coefficients  viscosity  (cPs)  with  the  value  of  4366,  4133  and  3750 respectively.  The  increasing  concentration  of  NaOH  possessed  pH  and dispersive power of the gel  with coefficients  of 11,0 and 5,21 respectively. The  desirability  values  suggested  by  Simplex  Lattice  Design  were  1,000 with component variation of the optimal formula were Carbomer 940 1,5%, HPMC 0,5% and NaOH 0,4%. The  significance test of the optimal formula compared to the results of laboratory experiments showed the significance of viscosity of 0,130, the dispersive power of 0,348 and pH of 0,184 that means there  was  no  significant  difference  between  the  prediction  values  by  using Simplex  Lattice  Design  and  results  of  laboratory  experiments.  It  was indicated that significance values of each responses were over 0,05 (p>0.05).
Keywords : Benincasa hispida ,
Antioxidant, Gel, Optimation,
SLD
Corresponding Author: Suryani Jurusan Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Halu Oleo, Kendari-Sulawesi Tenggara, Indonesia Phone : +62 -85292216254
Email: soerysuer@yahoo.com
Copyright © 2017 JFG-UNTAD
This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0 International license.

## How to cite (APA 6th Style):
Suryani., Nafisah A., Mana’an S. (2017). Optimasi Formula Gel Antioksidan Ekstrak Etanol Buah Bligo ( Benincasa hispida ) dengan  Metode Simplex  Lattice  Design ( SLD ), Jurnal  Farmasi  Galenika  (Galenika  Journal  of  Pharmacy),  3 (2),  150-156. doi:10.22487/j24428744.2017.v3.i2.8815

## ABSTRAK
Buah  Bligo  diketahui  memiliki  banyak  manfaat  termasuk  sebagai  antioksidan.  Penelitian  ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh konsentrasi Carbomer 940, HPMC dan NaOH terhadap formula gel  antioksidan  dan  menentukan  konsentrasi  dari  Carbomer  940,  HPMC  dan  NaOH  yang menghasilkan  formula  gel  antioksidan  yang  optimum.  Ekstrak  etanol  buah  Bligo  diperoleh  dengan metode maserasi kemudian dilakukan uji aktivitas antioksidan ekstrak dengan metode DPPH. Formula gel  antioksidan  dibuat  dengan  variasi  kombinasi  Carbomer  940,  HPMC  dan  NaOH.  Penentuan formula optimum  gel dilakukan dengan  menggunakan software Design Expert 7.1.5 metode Simplex Lattice Design. Formula optimum diuji kembali karakteristik fisiknya dan dibandingkan dengan hasil yang  diperoleh  menggunakan  metode Simplex  Lattice  Design. Hasil  penelitian  menunjukan  bahwa aktivitas antioksidan ekstrak etanol buah Bligo termasuk dalam kategori sangat kuat dengan nilai IC 50 sebesar  40,28 μ g/mL.  Peningkatan  konsentrasi  Carbomer  940,  HPMC  dan  NaOH  meningkatkan viskositas dengan nilai koefisien masing-masing 4366, 4133 dan 3750. Peningkatan konsentrasi NaOH meningkatkan pH dan daya sebar gel dengan koefisien masing-masing 11.0 dan 5.21. Nilai desirability yang disarankan Simplex Lattice Design adalah 1,000 dengan variasi komponen dari formula optimum yaitu  Carbomer  940  1.5%,  HPMC  0.5%  dan  NaOH  0.4%.  Pengujian  signifikansi  terhadap  prediksi formula optimum dengan hasil percobaan laboratorium menunjukan signifikan dengan nilai viskositas sebesar  0.130,  daya  sebar  0.348  dan  pH  0.184  yang  berarti  tidak  ada  perbedaan  signifikan  antara prediksi Simplex  Lattice  Design dengan  hasil  percobaan  laboratorium  yang  ditunjukan  dengan  nilai signifikansi masing-masing respons lebih dari 0.05.
Kata Kunci : Benincasa hispida , Antioksidan, Gel, Optimasi, SLD

## PENDAHULUAN
Penuaan  merupakan  proses  alamiah  dalam kehidupan  manusia.  Penuaan  dapat diartikan  sebagai penurunan fungsi biologis dan kemampuan organisme untuk beradaptasi terhadap stres metabolik.  Penuaan  dapat  mengakibatkan  penurunan berbagai sistem dan fungsi tubuh sehingga menyebabkan  munculnya  berbagai  penyakit.  Menua erat  kaitannya  dengan  berbagai  proses  degeneratif. Penyebab  penuaan  dikelompokkan  menjadi  faktor internal  dan  eksternal.  Salah  satu  faktor  internal penyebab    penuaan  adalah  radikal  bebas.  Radikal bebas terjadi akibat proses oksidatif merupakan teori yang  paling  sering  dianut.  Produksi  radikal  bebas meningkat  pada  keadaan  patologis  akibat  stres  fisik maupun  psikologis.  Suatu  kondisi  dimana  jumlah antioksidan lebih  rendah  dibandingkan  radikal  bebas disebut  stres  oksidatif.  Banyak  teori  diajukan  dan berbagai  penelitian  dilakukan  untuk  mencegah penuaan.  Penggunaan  antioksidan  merupakan  salah satu  upaya  yang  sering  dilakukan  untuk  mencegah penuaan  atau  setidaknya  menua  secara  sehat. Antioksidan  berperan  sebagai  penangkap  efek  buruk dari radikal bebas (Ardhie et al, 2011).
Antioksidan  merupakan  zat  yang  mampu melindungi sel melawan kerusakan yang ditimbulkan oleh radikal bebas ( Reactive Oxygen Species ), seperti
singlet  oksigen,  superoksid,  radikal  peroksid  dan radikal hidroksil. Penyinaran matahari yang berlebihan  menyebabkan  jaringan  epidermis  kulit tidak  cukup  mampu  melawan  efek  negatif  seperti kelainan kulit seperti dermatitis ringan sampai kanker kulit,  sehingga  diperlukan  perlindungan  baik  secara fisik dengan menutupi tubuh misalnya menggunakan payung,  topi  atau  jaket  dan  secara  kimia  misalnya dengan  menggunakan  kosmetik  yang  berfungsi sebagai  antioksidan  sehingga  dapat  melindungi  kulit dari  bahaya  radiasi  sinar  matahari  (Indika  et  al, 2012).  Salah  satu  tanaman  yang  dapat  menghasilkan antioksidan  alami  yaitu  buah  Bligo  ( Benincasa hispida )  dengan  kandungan  Vitamin  C  yang dimilikinya  (Garg  et  al,  2002).  Vitamin    ini    dapat bekerja    sebagai  antioksidan    dalam    tubuh.  Buah Bligo  diketahui  memiliki  aktivitas  antioksidan.  Sifat antioksidan  dari  buah  bligo  berasal  dari  adanya senyawa polifenol seperti flavon (iso-vitexin) (Kumar et al, 2004) . Optimasi dengan metode simplex lattice design bertujuan  untuk  menentukan  konsentrasi bahan  yang  tepat  sehingga  akan  diperoleh  formula yang  memiliki  sifat  fisik  yang  optimum  dan  respon yang  diterima  oleh  konsumen.  Metode Simplex Lattice  Design (SLD)  dapat  digunakan  untuk optimasi  formula  pada  berbagai  jumlah  komposisi bahan  yang  berbeda  sehingga  menghasilkan  formula
optimum  yang  memiliki  sifat-sifat  fisik  yang diharapkan.  Metode  ini  cepat  dan  praktis  karena dapat  menghindarkan  penentuan  formula  secara coba-coba ( trial and error ).
Berdasarkan  uraian  tersebut,  peneliti  tertarik untuk  melakukan  penelitian  mengenai  efektivitas formulasi  sediaan  gel  antioksidan  dari  ekstrak  buah Bligo.  Penentuan  formula  optimum  pada  penelitian ini  mengunakan  metode Simplex  Lattice  Design (SLD)  dengan  tiga  komponen  bahan  yang  akan dioptimasi.

## METODE PENELITIAN Alat
Alat-alat  yang  digunakan  pada  penelitian  ini meliputi  spektrofotometer  UV-Vis  (Shimadzu  V- 1800), rotary  vaccum  evaporator (Rotavapor ® R- 300), tube, hot  plate (Stuart ® ), stirrer (Model  SS30), timbangan analitik (Precisa XB 220A ® ) serta alat-alat gelas (Pyrex ® ).

## Bahan
Bahan-bahan yang digunakan pada penelitian ini  meliputi  ekstrak  buah  Bligo  ( B.  hispida ),  etanol
96 %, DPPH ( 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl ), akuades, NaOH, Carbomer 940, HPMC, Metilparaben, Oleum rosae dan propilenglikol .

## Ekstraksi
Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi selama 3x24 jam dengan penggantian pelarut setiap 1x24 jam. Ekstraksi dilakukan dengan menggunakan pelarut metanol 96% dalam wadah tertutup rapat dan tidak tembus cahaya.

## Uji aktivitas Antioksidan

## Pembuatan Pereaksi DPPH 40 ppm
Cara  membuatnya  adalah  menimbang  2  mg DPPH  kemudian    dilarutkan  dalam  etanol  hingga semua  larut,  selanjutnya  dimasukkan  ke  dalam  labu takar 50 mL dan diencerkan hingga tanda tera. Kocok sampai  homogen  sehingga  didapat  larutan  DPPH  40 μg/mL.
Pembuatan Larutan Blanko
Pembuatan  larutan  blanko  dilakukan  dengan cara  memipet  1,0  mL  larutan  DPPH  40  ppm, dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan 4,0  mL  etanol,  dikocok  hingga  homogen  dan diinkubasi pada suhu 37 0 C selama 30 menit.

## Pembuatan Larutan Stok 1000 ppm
Cara  membuatnya  adalah  dengan  menimbang  0,1 gram ekstrak etanol buah Bligo dan dilarutkan dalam etanol hingga larut, selanjutnya dimasukkan ke dalam labu takar 100 mL dan diencerkan hingga tanda tera.
Pembuatan Larutan Seri Bahan Uji
Dilakukan  pengenceran  pada  larutan  stok  1.000 ppm  dengan  cara  memipet  0,5,  1,  2,  4,  dan  8  mL larutan  stok  kemudian  masing-masing  dimasukan dalam  labu  ukur  10  mL  untuk  membuat  konsentrasi 50,  100,  200, 400  dan  800  ppm.  Setelah itu  masing- masing  konsentrasi  diambil  1  mL,  dimasukan  dalam tabung  reaksi  dan  ditambahkan  1  mL  DPPH kemudian  ditambahkan  lagi  3  mL  etanol.  Dikocok hingga  homogen  kemudian  diinkubasi  pada  suhu 37 0 C  selama  30  menit.  Uji  serapan  dilakukan  pada panjang gelombang 515,5 nm.

## Optimasi Formula
Penentuan  formula  optimum  ditentukan  oleh software Design Expert 7. 1. 5 dengan menggunakan metode Simplex  Latice  Design .  Formula  yang dihasilkan  oleh Simplex  Latice  Design terdiri  dari  7 formula  dengan  nomor  urut  ( run )  pembuatan.  Tiga faktor  komponen  yang  merupakan  variabel  bebas yakni Carbomer 940, HPMC dan NaOH.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi  dilakukan  dengan  metode  maserasi menggunakan  pelarut  etanol  96%.  Ekstrak  kental yang diperoleh sebanya 56,4 gram kemudian dihitung persen  rendemen  ekstrak  terhadapt  berat  sampel awal.  Rendemen  ketrak  yang  diperoleh  sebesar  5,64 gram.
Uji  aktivitas  antioksidan  ekstrak  buah  Bligo dilakukan  secara  kuantitatif  dengan  menggunakan Spektrofotometer UV-Vis. Pengujian secara kuantitatif  ini  dilakukan  untuk  mengetahui  serapan DPPH yang tersisa setelah ditambahkan ekstrak buah Bligo. Jika suatu sampel diketahui memiliki aktivitas antioksidan,  maka  akan  terjadi  penurunan  nilai serapan  DPPH  pada  rentang  panjang  gelombang 515,5  nm.    Hasil  uji  aktivitas  antioksidan  secara kuantitatif  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  buah Bligo  memiliki  aktivitas  antioksidan  dengat  kategori kuat  dengan  nilai  IC 50 40,28  ppm.  Adanya  aktivitas antioksidan  buah  Bligo  menurut  penelitian  Kumar dan Ramu (2004) disebabkan buah bligo mengandung  senyawa  polifenol  seperti  flavon  (iso-
vitexin) yang berkhasiat sebagai antioksidan.
Penentuan  formula  optimum  ditentukan  oleh software Design Expert 7. 1. 5 dengan menggunakan metode Simplex  Latice  Design .  Formula  yang dihasilkan  oleh Simplex  Latice  Design terdiri  dari  7 formula  dengan  nomor  urut  ( run )  pembuatan.  Tiga
faktor  komponen  yang  merupakan  variabel  bebas yakni  Carbomer  940,  HPMC  dan  NaOH.  Nilai variabel  terikat  dan  variabel  bebas  pada Simplex Latice  Design berguna  dalam  menentukan  formula optimum dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Variabel Bebas dan Variabel Terikat pada SLD untuk Menentukan Formula Optimum
Variabel Percobaan Batasan Variabel bebas Komposisi Rendah Komposisi Tinggi Target Carbopol 940 1% 1.5% In range HPMC 0.5% 1% In range NaOH 0.4% 0.9% In range Variabel Terikat Batas Bawah Batas Atas Target Daya sebar 5.8 cm 7.0 cm In range pH 4 6.8 In range Viskositas 2000 cPa.s 6000.0 dPa.s In range
Diantara  ketiga  komponen  variabel  terikat pada  Tabel  1  harus  menunjukan  persyaratan  yang memenuhi  sebagian  sediaan  gel  antioksidan.  Daya sebar    merupakan  kemampuan  gel  untuk  disebarkan di  permukaan  kulit.  Gel  yang  baik  memiliki  daya sebar  yang  luas  dalam  rentang  waku  yang  sempit selama proses penyebaran gel pada permukaan kulit. Nilai  daya  sebar  gel  yang  baik  berkisar  antara    4-5 cm.  Daya  sebar  gel  berbanding  terbalik  dengan viskositas.  Semakin  besar  daya  sebar  gel,  viskositas sediaan  semakin  kecil  (Indika  et  al,  2012).  Nilai  pH
untuk sediaan topikal  harus berada dalam kisaran pH balance yang  sesuai  dengan  pH  kulit  yaitu  4,5-6,5. Nilai  pH  tidak  boleh  terlalu  asam  karena  dapat menimbulkan iritasi
pada  kulit  dan  sebaliknya  tidak  boleh  terlalu  basah karena  dapat  menyebabkan  kulit  bersisik  (Ainaro  et al, 2015).
Nilai  karakteristik  fisik  (variabel  terikat) sediaan    yang  digunakan  dalam  metode Simplex Lattice  Design untuk  memperoleh  formula  optimum dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Nilai tiap-tiap karakteristik fisik sediaan gel antioksidan
Formula Run Viskositas (dPa.s) Daya sebar (cm) pH 1 1 4366 ± 115.4 4.14± 0.09 5.86 ± 0.28 2 3 4200 ± 100 4.59 ± 0.10 6.24 ± 0.17 3 5 4750 ± 50 4.3 ± 0.17 7.45 ± 0.12 4 6 4133 ± 152 4.83 ± 0.15 7.0 ± 0.2 5 2 3566 ± 208 5.49 ± 0.07 10.5 ± 0.05 6 7 4466 ± 152 4.49 ± 0.13 7.27 ± 0.14 7 4 243.3 ± 5.8 5.21 ± 0.11 11.6 ± 0.26

## 1.4 Formula Optimum
Prediksi  formula  optimum  dari  gel  antioksidan ekstrak  etanol  buah  Bligo  dilakukan  dengan menggunakan software  Design  Expert 7.1.5  yaitu
pada Simplex  Latice  Design .  Berdasarkan  analisis software tersebut  diperoleh  nilai desirability dari formula optimum yang dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Contour Plot Desirability Formula Optimum
Nilai desirability yang  paling  tinggi  yaitu satu  (Gambar  1).  Nilai  dari desirability maksimal adalah satu. Semakin mendekati satu, nilai desirability tersebut semakin baik. Hasil c ontour plot formula  optimum  pada  Gambar  12  diperoleh  daerah optimum  (daerah  berwarna  merah)  berdasarkan karakteristik  fisik  gel  antioksidan  yang  memenuhi persyaratan  yang  telah  ditetapkan.  Luasnya  daerah
optimum  (daerah  berwarna  merah)  mengindikasikan bahwa cukup banyak kemungkinan formula optimum yang  dapat  diperoleh  dan  memenuhi  persyaratan yang  telah  ditetapkan.  Berdasarkan  titik  daerah optimum tersebut maka diperoleh komposisi optimum  gel  antioksidan  yang  dapat  dilihat  pada Gambar 2.
Gambar 2. Superimposed dari Contour plot Respon Viskositas, Daya Sebar dan pH
Superimposed dari contour  plot semua respon  yaitu,  viskositas,  daya    sebar  dan  pH  sediaan gel  antioksidan  buah  Bligo,  sebagaimana  yang terlihat  pada  Gambar  2. Superimposed merupakan penjabaran nilai
desirability.Superimposed
menampilkan  nilai  masing-masing  variabel  terikat dan  bebas  dari  nilai desirability .  Komposisi  formula optimum dari s uperimposed untuk nilai desirability 1 sebagai berikut.
Tabel 3. Komposisi formula  optimum dari s uperimposed Bahan Konsentrasi Ekstrak etanol Buah Bligo 0.004% Carbomer 940 1.5% HPMC 0.5% NaOH 0.4% Propilenglikol 10% Metilparaben 0.09 gram Minyak melati q.s Aquadest Ad 100 gram
Superimposed merupakan  penjabaran  dari nilai desirability . Superimposed menampilkan  nilai masing-masing  variabel  terikat  dan  variabel  bebas dari nilai desirability . Berdasarkan formula optimum, prediksi  respon  dari  komposisi  formula  tersebut adalah  viskositas  sebesar  4366  c.Ps,    daya  sebar sebesar 4,11 cm dan pH 5,8.
Verifikasi Formula Optimum Menggunakan Statistik Prediksi respon yang dihasilkan dari Simplex Latice Design kemudian dibandingkan dengan respon hasil  percobaan.  Analisis  statistik  yang  digunakan adalah uji-t  one sample.  Uji-t  one  sample digunakan untuk  menguji  signifikansi  beda  rata-rata  antara  tiap nilai  hasil  percobaan  yang  telah  dilakukan  dengan nilai  teoritis  hasil  prediksi  dari Simplex  Latice Design . Tabel 4. Verifikasi Hasil Optimasi Menggunakan Uji-t One Sample Respon Prediksi Percobaan Signifikansi Kesimpulan Viskositas (dPa.s) 4366 4273 ± 64.29 0.130 Tidak signifikan Daya sebar (cm) 4.11 4.38 ± 0.39 0.348 Tidak signifikan pH 5.8 5.84 ± 0.04 0.184 Tidak signifikan
Tabel 4 menunjukkan bahwa respon daya sebar, viskositas  dan  pH  menunjukkan  hasil  yang  tidak berbeda  signifikan  antara  prediksi  dengan  metode Simplex  Lattice  Design dengan  hasil  percobaan.  Hal tersebut terlihat dari nilai signifikansi masing-masing respon yang lebih dari 0,05. Tidak adanya perbedaan signifikan  antara  prediksi Simplex  Lattice  Design dengan  hasil  percobaan  dapat  disimpulkan  bahwa software tersebut valid digunakan untuk mengoptimasi  sediaan  gel antioksidan  ekstrak  etanol buah Bligo.

## KESIMPULAN
A. Konsentrasi  Carbomer  940,  HPMC  dan  NaOH memberikan  pengaruh  terhadap  karakteristik
fisik  sediaan  gel  antioksidan  yang  meliputi viskositas,  daya  sebar  dan  pH  masing-masing sebagai berikut:
1) Carbomer 940, HPMC dan NaOH berpengaruh
terhadap peningkatan viskositas  dengan  nilai  koefisien  masing- masing  4366,  4133  dan  3750.  Interaksi Carbomer  940-HPMC  dan  HPMC-NaOH menurunkan  viskositas  dengan  koefisien  - 198,00  dan  -1502,00.  Interaksi  Carbomer 940-NaOH  dan  Carbomer  940-HPMC- NaOH  meningkatkan  viskositas  dengan koefisien 2768,00 dan 7137,00.
2) Carbomer 940, HPMC dan NaOH mempengaruhi  peningkatan  daya  sebar dengan koefisien masing-masing 4,11, 4,83
dan  5,21.  Interaksi  Carbomer  940-HPMC dan  HPMC-NaOH  meningkatkan  daya sebar  dengan  koefisien  0,36  dan  1,80 sedangkan  interaksi  Carbomer  940-NaOH dan Carbomer 940-HPMC-NaOH menurunkan  daya  sebar  dengan  koefisien  - 1,44 dan -8,28.
3) Ketiga  bahan  juga  meningkatkan  pH dengan  koefisien  5,80,  7,00  dan  11,60. Interaksi  HPMC-NaOH  meningkatkan  pH dengan  koefisien  4,80.  Interaksi  Carbomer 940-HPMC,  Carbomer  940-NaOH  dan Carbomer  940-HPMC-NaOH  menurunkan pH masing-masing 0,80, 5,20 dan 21,60
B. Kosentrasi  ketiga  bahan  yang  menghasilkan formula  optimum  masing-masing  1,5%,  0,5% dan 0,4%.

## DAFTAR PUSTAKA
Ainaro,  E.P.,  Gadri,  A.,  Priani,  S.E.  (2015). Formulasi  Sediaan  Masker  Gel Peel-Off Mengandung Lendir Bekicot ( Achatina Fulica
Bowdich)  sebagai  Pelembab  Kulit, Pros. Penelit. Spes. Unisba .
Anjarsari,  E.Y.,  Yonika  A.L.,  Fikri,  A.  (2012).
Masker  Antioksidan  dan  Anti  Aging  Berbasis Modernisasi  Bahan  Alam  Indonesia, Bimfi, 1(1).
Ardhie,  Ari,  Muhandari.  (2011).  Radikal  Bebas  dan Peran  Antioksidan  dalam  Mencegah  Penuaan. Medicinus . 24 (1).
Garg, A., D. Aggarwal., S. Garg., Sigla A.K. (2002). Spreading  of  Semisolid    Formulation, USA:
Pharmaceutical Technology. Pp. 84-104.
Indika,  O.M.,  dan  Arif    F.M.  (2012).  Pengaruh Suplementasi  Vitamin  C  Terhadap  Kapasitas Vital Paru Pada Perokok, Scientia, 2(1).
Kumar,  A.,  dan  P.  Ramu.  (2004).  Anti-convulsant activity  of Benincasa  hispida fruit  methanol extract, Journal of Natural Remedies, 4(2).