## Deteksi Awal Ketahanan Beberapa Aksesi Pisang Lokal dan Hasil Persilangan terhadap Penyakit Layu Fusarium (Foc VCG 01213/16 TR4)
Early Detection for Fusarium Wilt Resistance (Foc VCG 01213/16 TR4) in Local and Hibrid Accession of Banana Plants
Tri Handayani 1* , Diyah Martanti 1 , Yuyu S. Poerba 1 , dan Witjaksono 1
Diterima 26 Januari 2017/Disetujui 10 Juli 2017

## ABSTRACT
Early  detection  for  Fusarium  wilt  resistant  of  banana  plants  can  be  done  at  seedling  phase under  greenhouse  condition.  The  purpose  of  early  detection  was  to  screen  and  evaluate  some number of local and hybrid accession of banana plants for resistance to Fusarium oxysporum f. sp. cubense  (Foc  VCG  01213/16  TR4  or  Foc  TR4).  The  treatments  were  done  by  immersing  the  root seedling  in  Fusarium  inoculant  at  concentration  of  10 6 conidia  mL -1 ,  for  2  hours,  then  planted  in sterile sand media and placed in container with "double tray system". Experiments were performed using  15  accessions  of banana  i.e.  1 accession  of wild musa  (Musa  acuminata  var.  malaccesis), 7 local  accessions  and  7  hybrid  bananas.  Based  on  greenhouse  bioassay,  banana  Rejang#2  (AA) showed resistance to Foc TR4. The results were consistent in the field condition. Tetraploid plants for  pisang  Rejang#2  (AAAA)  also  showed  resistant  to  Foc  TR4.  Cultivar  Cavendish  (AAA)  and Madu  (AA)  showed  highly  susceptible;  Ustrali  (AAAB)  and  Goroho  (AAA)  showed  susceptible  to Foc  TR4.  Wild  banana  (Musa  acuminata  var.  malaccensis)  and  Mas  Jambe  4x  (AAAA)  showed moderate susceptible. Of the total 7 hybrids accession; 3 hybrids showed moderate susceptible, and 4 other hybrids showed susceptible to Foc TR4.
Keywords: banana plants, early detection, Foc TR4, hybrid, local

## ABSTRAK
Deteksi  awal  tingkat  ketahananan  tanaman  pisang  terhadap  penyakit  layu Fusarium oxysporum f.  sp. cubense (Foc)  dapat  dilakukan  pada  masa  pembibitan  di  rumah  kaca.  Penelitian bertujuan untuk evaluasi awal tingkat ketahanan beberapa aksesi pisang liar, pisang lokal dan pisang hasil persilangan terhadap penyakit layu  Fusarium. Akar bibit pisang pada air yang berisi inokulan Fusarium (Foc VCG 01213/16 atau Foc TR4) pada konsentrasi 10 6 konidia mL -1 , selama 2 jam yang selanjutnya  ditanam  pada  media  pasir  steril  dan  diletakkan  pada  kontainer  dengan  pengaturan “ double  tray  system ”.  Lima  belas  aksesi  pisang  yang  terdiri  atas  1  aksesi  pisang  liar  ( Musa acuminata  var.  malaccensis ),  7  aksesi  pisang  budidaya  dan  7  nomor  pisang  hasil  persilangan dievaluasi  tingkat  ketahanan  terhadap  Foc  TR4.  Dari  hasil  pengujian  di  rumah  kaca,  pisang Rejang#2 (AA) menunjukkan status tahan terhadap penyakit layu Fusarium Foc VCG 01213/16 TR4 yang hasilnya sesuai dan stabil dengan tingkat ketahanannya di lapangan. Pisang Rejang#2 tetraploid (AAAA)  juga  menunjukkan  status  tahan  terhadap  Foc  TR4.  Pisang  Madu  (AA)  dan  Cavendish (AAA)  menunjukkan  hasil  sangat  rentan,  sedangkan  pisang  Goroho  (AAA)  dan  pisang  Ustrali (AAAB) menunjukkan status rentan. Pisang liar Musa acuminata var. malaccensis (AA) dan pisang Mas  Jambe  4x  (AAAA)  menunjukkan  status  agak  rentan.  Pada  seleksi  pisang  hasil  persilangan, didapatkan 3 nomor pisang hibrid dengan status agak rentan yakni 816 MDRK, 1060 MDRK, 2284 MMRK, sedangkan 4 nomor hibrid lainnya menunjukkan status rentan.
Kata kunci: deteksi dini, Foc TR4, hibrid, lokal, pisang
1 Bidang Botani, Pusat Penelitian Biologi-LIPI Jl. Raya Jakarta-Bogor Km.46, Cibinong 16911 email: trihandayani08@gmail.com (*penulis korespondensi)

## PENDAHULUAN
Penyakit layu Fusarium yang
disebabkan  cendawan F.  oxysporum f.sp. cubense (Foc)  merupakan  salah  satu  masalah utama yang banyak ditemukan pada pertanaman  pisang  khususnya  yang  ditanam secara  monokultur.  Diketahui  terdapat  tiga jenis  Foc  yang  banyak  menyerang  tanaman pisang  yakni  Foc  „ Tropical  Race ‟  (TR)  1,  2 dan  4.  Cendawan  Foc  ras  4  merupakan  salah satu  jenis  Fusarium  yang  banyak  tersebar  di Asia Tenggara dan menyerang banyak kultivar pisang  yang  sebelumnya  diketahui  tahan terhadap  Foc  TR1  dan  2,  salah  satunya  yakni pisang  dari  golongan  „Cavendish‟  (genom AAA)  yang  tahan  terhadap  Foc  TR1  tetapi rentan terhadap Foc TR4 (Wu et al. , 2013). Cendawan  Foc  mampu  bertahan  di dalam  tanah  dalam  jangka  waktu  yang  lama. Cendawan  Fusarium  mempunyai  kemampuan untuk membentuk chlamidospora tanpa tanaman  inang,  dimana  cendawan  dapat menginfeksi  kembali  tanaman  jika  ditemukan inang  yang  tepat  (Swarupa et  al .,  2013). Pengendalian secara kimiawi dengan menggunakan  fungisida  atau  fumigan  dalam tanah, bukanlah suatu metode yang efektif dan ekonomis.  Salah  satu  pengendalian  yang efektif  dan  berkelanjutan  diantaranya  yakni dengan  penggunaan  kultivar  pisang  tahan penyakit  layu  Fusarium.  Ini  dapat  diperoleh dengan  melakukan  seleksi  terhadap  aksesi pisang  lokal,  pisang  liar  ataupun  dengan melakukan  persilangan  antara  pisang  yang tahan dengan yang rentan (Poerba et al ., 2012). Beberapa  pisang  budidaya  komersial diketahui  rentan  terhadap  penyakit  layu Fusarium  Foc  TR4  diantaranya  yakni  pisang ambon  kuning  (Rahmi-Anna et  al. ,  2014), pisang  raja  (AAB),  pisang  barangan  (AAA), pisang  kepok  (ABB)  dan  pisang  siem  (ABB) (Jumjunidang et  al .,  2012).  Pisang  liar Musa acuminata var. malaccensis diketahui merupakan  salah  satu  jenis  yang  tahan terhadap penyakit layu Fusarium (Kayat et al ., 2009),  sedangkan  pisang  liar M.  acuminata var.  zebrina dan M.  acuminata  var.  banksii berdasarkan  pengujian  Garcias-Bastidas  dan Kema (2014) menunjukkan sifat rentan. Evaluasi  dan  seleksi  ketahanan  pisang terhadap  penyakit  layu  Fusarium  dapat dilakukan  di  tanah  yang  sudah  terinfeksi dengan  cendawan  Foc.  Akan  tetapi,  evaluasi
lapangan akan membutuhkan waktu yang lebih lama karena umumnya tanaman baru menunjukkan  gejala  terserang  4-5  bulan setelah  tanaman  ditanam,  selain  itu  perlu penanganan  yang lebih  rumit  untuk  mencegah penyebaran  patogen  (Mak et  al .,  2004).  Sifat ketahanan  tanaman  pisang  terhadap  penyakit layu  Fusarium  dapat  dideteksi  dengan  lebih dini  yakni  pada  masa  pembibitan  di  rumah kaca.  Deteksi  dini  dilakukan  dengan  tujuan sebagai  seleksi  awal  tingkat  ketahanan tanaman terhadap penyakit layu Fusarium  Foc TR4  dalam  waktu  yang  relatif  cepat  sebelum pengujian  dilakukan  di  lahan.  Tujuan  penelitian ini  ialah  untuk  memperoleh  informasi  tingkat ketahanan  beberapa  aksesi  pisang  lokal  dan pisang  hasil  persilangan  terhadap  penyakit layu Fusarium pada masa pembibitan.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  dilakukan  di  rumah  kaca Mikrobiologi,  Pusat  Penelitian  Biologi  LIPI, Cibinong,  pada  Maret  2014  sampai  April 2015.  Pengujian  dilakukan  terhadap  15  aksesi pisang  yang  disajikan  pada  Tabel  1.  Dari  15 aksesi  pisang  yang  diuji,  pisang  Cavendish digunakan  sebagai  kontrol  positif  tingkat virulensi Foc TR4 (VCG 01213/16 TR4).
Bahan tanaman pisang yakni pisang liar dan pisang budidaya berasal dari perbanyakan dengan teknik kultur jaringan in vitro , dengan eksplan  awal  yakni  bonggol  tanaman,  yang diambil  dari  kebun  koleksi  plasma  nutfah pisang  di  Pusat  Penelitian  Biologi  -  LIPI Cibinong.  Bahan  tanaman  pisang  hibrid berasal  dari  penyelamatan  embrio  secara in vitro pada biji yang dihasilkan dari persilangan seksual,  yang  selanjutnya  diperbanyak  secara kultur jaringan sampai didapatkan jumlah yang cukup.  Tunas  pisang in  vitro selanjutnya diaklimatisasi  di  rumah  pembibitan  dan dilakukan  pengujian  pada  tanaman  yang  telah berumur 4-5 bulan.
Percobaan  disusun  dengan  metode rancangan  acak  kelompok,  dengan  perlakuan 1) aksesi pisang yang terdiri atas 15 aksesi dan
2)  perlakuan  inokulasi  Foc  TR4  dengan konsentrasi  0  (kontrol)  dan  10 6 konidia  mL -1 .
Setiap  perlakuan  pada  tiap-tiap  konsentrasi Fusarium  menggunakan  masing-masing  6 tanaman untuk aksesi pisang liar atau budidaya serta 3 tanaman untuk aksesi pisang hibrid.

## Tabel 1. Aksesi pisang yang dievaluasi tingkat ketahanan terhadap Foc TR4
No Aksesi Pisang Genom Keterangan Aksesi 1 M. acuminata var. malaccensis AA liar 2  Cavendish AAA budidaya 3  Goroho AAA budidaya 4  Ustrali AAAB budidaya 5  Madu AA budidaya 6  Rejang#2 2x AA budidaya 7  Rejang#2 4x AAAA hasil induksi poliploidi Rejang#2 (AA) 8  Mas Jambe 4x AAAA hasil induksi poliploidi Mas Jambe 2x 9  816 MDRK AA hibrid (Madu x Rejang) 10  847 MDRK AA hibrid (Madu x Rejang) 11  1061 MDRK AA hibrid (Madu x Rejang) 12  1060 MDRK AA hibrid (Madu x Rejang) 13  798 MDMT AA hibrid (Madu x M. acuminata var. Tomentosa ) 14  1160 MDMT AA hibrid (Madu x M. acuminata var. Tomentosa 15  2284 MMRK AA hibrid ( M. acuminata var. Malaccensis x Rejang)
Inokulan Fusarium  oxysporum f.  sp. cubense „Tropical  Race  4‟  (Foc  VCG 01213/16 Foc TR4)  yang  digunakan,  berasal dari  koleksi  mikroba  Dr.  Sarjiya  Antonius (Pusat Penelitian Biologi - LIPI). Sebelumnya, konidia  inokulan  Fusarium  yang  berasal  dari media PDA ( Potato Dextrose Agar ) diperbanyak  dalam  media  cair  PDB  ( Potato Dextrose  Broth ).  Setelah  dua  minggu  dalam media  PDB,  konsentrasi  konidia  Fusarium dihitung menggunakan haemocytometer . Aksesi  tanaman  pisang  yang  diuji, dicuci  bersih  akarnya  dengan  air  mengalir, selanjutnya  tanaman  direndam  di  dalam  air yang  sudah  ditambahkan  inokulan  Fusarium Foc  VCG  01213/16  Foc TR4  dengan konsentrasi  0  (kontrol)  dan  10 6 konidia  mL -1 selama 2 jam. Tanaman yang telah diinokulasi dengan  Fusarium  selanjutnya  ditanam  di polibag  ukuran  30  cm  x  35  cm  dengan  media tanam  pasir  steril.  Tanaman  yang  sudah terinfeksi  selanjutnya  diletakkan  di  bak
“ double tray system ”. Tanaman disiram setiap hari  dan  disiram  dengan  larutan  pupuk  daun (N:P:K  =  20:20:20)  2  g  L -1 sebanyak  250  ml/ tanaman setiap 2-3 hari sekali.
Pengamatan  respon  tanaman  terhadap Fusarium  (Foc  TR4)  dilakukan  menurut  Mak et  al .  (2004).  Pengamatan  dilakukan  pada umur 4 minggu setelah perlakuan perendaman dengan  cara  skoring  penampakkan  gejala serangan  pada  bagian  tajuk  tanaman  (bagian daun/ leaf  severity  index (LSI))  (Gambar  1) dan  gejala  serangan  pada  bagian  bonggol tanaman/ rhizome  discoloration  index (RDI) (Gambar  2).  Tingkat  ketahanan  tanaman terhadap Fusarium ditentukan dengan menghitung disease  severity  index (DSI)  dari nilai skor LSI dan RDI, dengan rumus:
DSI = Ʃ (Skor x Jumlah tanaman pada skor tersebut) Ʃ (Jumlah tanaman yang diperlakukan)
Keterangan:  skor 1 (daun berwarna hijau, tidak terdapat gejala kekuningan), skor 2 (mulai muncul gejala kekuningan pada bagian bawah daun), skor 3 (daun yang berwarna kuning hampir pada seluruh bagian bawah daun), skor 4 (daun mulai tampak pada hampir pada seluruh bagian daun), skor 5 (tanaman mati).
Gambar 1. Skoring leaf symptom index (LSI) (Mak et al ., 2004)
Keterangan:  skor  1  (tidak  terdapat  perubahan  warna  pada  bagian  rhizome  batang),  skor  2  (perubahan  warna (kecoklatan/  kemerahan)  pada  percabangan  akar  dan  rhizome),  skor  3  (sekitar  5%  terjadi  perubahan warna  (kecoklatan/  kemerahan)  pada  rhizome),  skor  4  (sekitar  6  –  20%  terjadi  perubahan  warna (kecoklatan/ kemerahan) pada rhizome), skor 5 (sekitar 21 – 50% terjadi perubahan warna (kecoklatan/ kemerahan)  pada  rhizome),  skor  6  (lebih  dari  50%  terjadi  perubahan  warna  (kecoklatan/  kemerahan) pada rhizome), skor 7 (terjadi perubahan warna (kecoklatan/ kemerahan) pada seluruh bagian rhizome), skor 8 (tanaman mati).
Gambar 2. Skoring rhizome discoloration index (RDI) (Mak et al ., 2004)
Tabel 2. Translasi nilai DSI dan interpretasi tingkat ketahanan terhadap penyakit layu Fusarium
Nilai DSI untuk LSI Nilai DSI untuk RDI Translasi 1 1 tahan Antara 1.1 – 2 Antara 1.1 – 3 agak rentan Antara 2.1 – 3 Antara 3.1 – 5 rentan Antara 3.1 – 4 Antara 5.1 – 8 sangat rentan
Keterangan: DSI ( Disease Severity Index ), LSI ( Leaf Symptom Index ) dan RDI ( Rhizome Discoloration Index )
Nilai DSI digunakan untuk menentukan kategori ketahanan tanaman terhadap Fusarium yakni tahan, agak rentan, rentan dan sangat rentan. Penentuan kategori berdasarkan nilai DSI ditampilkan pada Tabel 2.
Evaluasi  tingkat  ketahanan  terhadap Fusarium  hasil  pengujian  di  rumah  kaca  pada fase pembibitan dibandingkan dengan evaluasi pengujian di lapangan yang dilakukan di lahan percobaan PT Nusantara Tropical Farm - Way Jepara  Lampung.  Evaluasi  dilakukan  terhadap 3  aksesi  pisang  yakni M.  acuminata  var. malaccensis , pisang Rejang, dan pisang Madu, masing-masing jenis pisang ditanam sebanyak 10  tanaman.  Pisang  ditanam  dengan  jarak tanam  2.0  m  x  1.5  m,  pemupukan  dan pemeliharaan tanaman dilakukan secara optimum.
Pengamatan ketahanan tanaman di lapangan dilakukan selama 2 siklus pertumbuhan  tanaman.  Satu  siklus  tanaman menunjukkan  satu  kali  tanaman  menghasilkan buah/  berproduksi  atau  satu  kali  pertumbuhan tunas  baru  sampai  tanaman  berproduksi. Tingkat  ketahanan  tanaman  ditentukan  dengan pengamatan  persentase  tanaman  terserang Fusarium yang tampak dari gejala daun, batang dan bonggol tanaman. Tanaman yang terserang Fusarium akan menunjukkan gejala penguningan
mulai pada  bagian  daun  tertua kemudian diikuti daun  yang  termuda.  Pada  gejala  serangan  lebih lanjut,  daun  seluruhnya  akan  menguning  dan kemudian  tanaman  akan  mengalami  kematian. Pada bagian bonggol dan batang tanaman akan ditemukan  bercak  atau  garis  berwarna  merah  - keunguan  (Soesanto et  al .,  2012).  Penentuan status  ketahanan  di  lapangan  yakni:  1)  agak rentan, jika tanaman yang terserang Foc <50%;
2)  rentan:  tanaman  terserang  Foc  >  50%;  3) tahan:  tanaman  tumbuh  baik  dan  bisa berproduksi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Dari  hasil  evaluasi  didapatkan  kultivar Cavendish  yang  dijadikan  kontrol  positif virulensi  Foc  TR4  menunjukkan  status  sangat rentan,  sedangkan  aksesi  pisang  yang  tahan yakni  pisang  Rejang#2  diploid  (AA)  dan  juga pisang  Rejang#2  tetraploid  (AAAA)  dengan nilai  DSI-RDI  =  1.00  (Tabel  3).  Beberapa pisang lokal diantaranya pisang Madu tergolong  sangat  rentan,  sedangkan  pisang Goroho dan pisang Ustrali menunjukkan status rentan.  Pisang  liar M.  acuminata  var. malaccensis dan  pisang  Mas  Jambe  tetraploid menunjukkan  status  agak  rentan  dengan  nilai
DSI-RDI  >  1  (Tabel  3).  Penentuan  status ketahanan  terhadap  Foc  TR4  lebih  ditekankan pada  nilai  DSI-RDI  atau  penilaian  dari penampakkan  gejala  pada  bonggol  tanaman dikarenakan  nilainya  lebih  konsisten  terhadap gejala serangan karena Fusarium dibandingkan pengamatan gejala dari daun.
Dari hasil pengujian yang telah dilakukan didapatkan bahwa pisang liar aksesi M.  acuminata  var.  malaccensis menunjukkan sifat  agak  rentan  terhadap  penyakit  layu Fusarium Foc TR4. Pengujian pada pisang liar M.  acuminata  var.  malaccensis menunjukkan hasil  yang  berbeda  dibandingkan  penelitian yang  telah  dilakukan  oleh  Javed et  al .  (2004) dan  Kayat et  al .  (2009),  yang  menyatakan bahwa tanaman pisang liar M.  acuminata  var. malaccensis diketahui  mempunyai  sifat  tahan terhadap Fusarium  oxysporum f.  sp.  cubense (Foc)  „Tropical  Race  4‟  dan  mulai  banyak digunakan dalam studi populasi pengembangan penanda  molekuler  serta  kloning  gen  ketahanan biotik terhadap penyakit layu Fusarium.
Satu  nomor  aksesi M.  acuminata  var. malaccensis yang  berasal  dari  kebun  koleksi plasma nutfah pisang Pusat Penelitian Biologi menunjukkan  sifat  agak  rentan.  Kerentanan pisang  liar M.  acuminata  var.  malaccensis pada  pengujian  ini  diduga  karena  tanaman pisang  liar  yang  menghasilkan  banyak  biji besar kemungkinan mempunyai sifat ketahanan  yang  berbeda  pada  tiap  aksesi/ genotipe  akibat  segregasi  dari  persilangan yang  terjadi  secara  alami.  Kegiatan  eksplorasi dan  evaluasi  plasma  nutfah  pisang  liar M.
acuminata  var.  malaccensis lainnya  dapat dilakukan  untuk  mendapatkan  nomor  yang tahan terhadap Foc TR4.
Dari  tujuh  aksesi  lokal,  diketahui  2 aksesi  pisang  tahan  terhadap  Foc  TR4  yakni pisang  Rejang#2  diploid  dan  pisang  Rejang#2 tetraploid  (Gambar  3).  Pisang  Rejang#2 tetraploid  merupakan  hasil  induksi  poliploidi pisang Rejang#2 diploid dengan menggunakan senyawa oryzalin sehingga terjadi penggandaan kromosom (Poerba et al ., 2017). Ketahanan pisang Rejang#2 terhadap Foc TR4 diduga  karena  tanaman  mempunyai  suatu  gen atau mekanisme ketahanan tertentu (Sutanto et al .,  2011)  atau  adanya  simbiosis  dengan cendawan  endofit  yang  dapat  menghambat pertumbuhan  Foc  dengan  cara  memproduksi metabolit  volatil  atau  bukan  volatil  atau keduanya (Suciatmih et al ., 2014).
Berdasarkan  hasil  pengamatan  dan skoring  yang  dilakukan  pada  sejumlah  nomor pisang  hasil  persilangan, diantaranya  4  nomor hibrid  MDRK,  2  nomor  hibrid  MDMT  dan  1 nomor hibrid MMRK menunjukkan ketahanan terhadap  penyakit  layu Fusarium  yang berbeda,  mulai  agak  rentan  hingga  rentan (Tabel  4).  Dari  4  nomor  hibrid  MDRK, terdapat  2  nomor  hibrid  MDRK  yang menunjukkan  status  agak  rentan,  dan  sisanya menunjukkan  status  rentan.  Dari  kegiatan persilangan  pisang  Madu  dan  pisang  Rejang didapatkan  sedikit  peningkatan  ketahanan pisang  Madu  yang  semula  sangat  rentan menjadi agak rentan.
Tabel 3. Hasil pengujian ketahanan beberapa aksesi pisang lokal terhadap penyakit layu Fusarium di rumah kaca Aksesi Genom Persentase Serangan (%) DSI Status Ketahanan* LSI RDI M. acuminata var. malaccensis AA 66.7 2.40 2.00 agak rentan Cavendish AAA 100 3.83 5.17 sangat rentan Goroho AAA 100 4.00 4.00 rentan Ustrali AAAB 100 3.67 4.00 rentan Madu AA 100 5.00 5.00 sangat rentan Rejang#2 2x AA 0 2.00 1.00 tahan Rejang#2 4x AAAA 0 1.00 1.00 tahan Mas Jambe 4x AAAA 50 3.00 2.00 agak rentan
Keterangan:  LSI  = Leaf  Symptom  Index ,  RDI  = Rhizome  Discoloration  Index ,  DSI  = Desease  Severity  Index ,
*konsentrasi perlakuan FOC VCG 01213/16 (TR4) sebesar 10 6 konidia m L -1 .
Pada  hibrid  hasil  persilangan  pisang Madu  dengan  pisang  liar M.  acuminata  var. tomentosa yakni  hibrid  MDMT,  dari  dua nomor  yang  diuji  (798  MDMT  dan  1160 MDMT),  keduanya  menunjukkan  sifat  rentan, sehingga hasil persilangan Ztidak menunjukkan  peningkatan  ketahanan  tanaman terhadap  penyakit  layu  Fusarium.  Satu  nomor hibrid  MMRK  juga  belum  menunjukkan  sifat tahan terhadap penyakit layu Fusarium dengan hasil  pengujian  menunjukkan  status  agak rentan ( moderat susceptible ). Gejala  perkembangan  penyakit  layu Fusarium  seperti  daun  layu  atau  menguning sebagai  tanggapan  tanaman  umumnya  akan
mulai  tampak  pada  2-3  minggu  setelah tanaman diinokulasi dengan cendawan patogen.  Pada  pengamatan  yang  dilakukan pada 4 minggu setelah inokulasi cendawan Foc TR4  (Gambar  3)  terlihat  bahwa  pada  nomor aksesi yang rentan dan sangat rentan, sebagian besar  daunnya  berwarna  kuning  dan  pada akhirnya  tanaman  mengalami  kematian.  Pada bagian  bonggolnya  akan  ditemukan  bercak berwarna merah - keunguan yang menandakan adanya bagian yang mulai mengalami nekrosis. Pada nomor aksesi yang tahan, tidak ditemukan  bagian  yang  berwarna  merah  pada bagian  bonggol  dan  tanaman  masih  dapat tumbuh dengan baik.
Gambar 3.  Hasil  uji  ketahanan  pisang  terhadap  penyakit  layu  Fusarium;  atas  Cavendish  (AAA) (sangat rentan), tengah Rejang#2 (AAAA) (tahan) dan bawah hibrid 1060 MDRK (AA) (agak rentan)
Tabel 4. Hasil uji ketahanan beberapa aksesi pisang hibrid terhadap penyakit layu Fusarium di rumah kaca
Aksesi Genom DSI Status Ketahanan* LSI RDI 816 MDRK AA 1.00 2.00 agak rentan 847 MDRK AA 4.00 5.00 rentan 1061 MDRK AA 3.67 4.67 rentan 1060 MDRK AA 3.00 3.00 agak rentan 798 MDMT AA 3.00 4.00 rentan 1160 MDMT AA 5.00 5.00 rentan 2284 MMRK AA 4.00 2.00 agak rentan
Keterangan:  LSI  = Leaf  Symptom  Index ,  RDI  = Rhizome  Discoloration  Index ,  DSI  = Desease  Severity  Index , *konsentrasi perlakuan FOC VCG 01213/16 (TR4) sebesar 10 6 konidia/ m L -1 .
Tabel 5. Hasil uji lapangan ketahanan tiga aksesi pisang terhadap penyakit layu Fusarium
Aksesi Persentase Serangan Penyakit (%) Ketahanan Siklus ke-1 Siklus ke-2 M. acuminata var. malaccensis 40 30 agak rentan Rejang#2 0 0 tahan Madu 20 60 rentan
Keterangan:  Pengujian dilakukan di kebun PT NTF – Way Jepara Lampung, satu siklus tanaman menunjukkan satu kali  tanaman  menghasilkan  buah/  berproduksi,  tanaman  yang  terserang  penyakit  dihitung  berdasarkan gejala yang tampak pada daun, batang dan bonggol tanaman.
Serangan penyakit layu Fusarium dimulai  dengan  konidia  cendawan  yang menempel  pada  akar  rambut  tanaman,  akan berkecambah  dan  masuk  ke  epidermis  akar. Patogen  yang  masuk  ke  dalam  sistem perakaran  selanjutnya  akan  mendegradasi dinding sel dengan membentuk hifa, berkembang  membentuk  cabang  dan  akan masuk  ke  sel  yang  lain  (Sutanto,  2014). Dengan  semakin  tingginya  serangan  maka gejala akan teramati tidak hanya pada bonggol tanaman tetapi juga akan teramati pada batang dan  daun  tanaman,  yang  secara  kasat  mata jaringan  akan  menunjukkan  warna  kemerahan pada bagian tanaman yang terserang. Membran  sel  yang  rusak  baik  pada  akar  atau batang tanaman akan menghambat penyerapan hara akibatnya gejala akan mulai terlihat pada daun  yang  tua  berwarna  kuning  yang  dimulai dari  tepi  daun.  Namun  demikian,  hasil pengamatan  uji  ketahanan  pisang  terhadap perlakuan Foc TR4 di rumah kaca menunjukkan  bahwa  gejala  serangan  pada bonggol  (gejala  internal)  merupakan  gejala yang  paling  penting  dibandingkan  gejala serangan  pada  daun/  tajuk  (gejala  eksternal) (Kasutjianingati et  al .,  2011).  Hal  ini  dapat dijelaskan  dengan  banyaknya  pengaruh  yang menyebabkan  daun  menguning,  baik  dari  segi nutrisi  maupun  gejala  serangan  penyakit lainnya.
Hasil  pengujian  tingkat  ketahanan terhadap
Fusarium di rumah kaca
menunjukkan  kesesuaian  dengan  pengujian  di lapangan. Pisang Rejang#2 yang terbukti tahan pada pengujian di green house juga menunjukkan  sifat  yang  tahan  saat  di pengujian  di  lapangan  (Tabel  5).  Hasil  ini memperkuat  hasil  sebelumnya  bahwa  Pisang Rejang  menunjukkan  respon  konsisten  stabil tahan  terhadap  penyakit  layu  Fusarium, sedangkan  pisang  liar M.  acuminata  var. malaccensis dan  pisang  Madu  menunjukkan status agak rentan dan rentan (Tabel 5).
Pisang  Rejang#2  baik  diploid  maupun tetraploidnya  berdasarkan  hasil  pengujian menunjukkan  ketahanan  terhadap  penyakit layu  Fusarium  Foc  TR4,  sehingga  dijadikan sebagai  salah  satu  sumber  tetua  untuk persilangan tanaman pisang
untuk mendapatkan  tanaman  yang  tahan  terhadap penyakit  layu  Fusarium.  Akan  tetapi,  pada hasil  evaluasi  awal  7  nomor  silangan  belum didapatkan pisang hibrid yang tahan. Kegiatan pemuliaan tanaman pisang melalui persilangan secara  konvensional  maupun  rekayasa  genetik terutama  untuk  mendapatkan  tanaman  yang tahan  terhadap  penyakit  layu  Fusarium  belum banyak dilaporkan keberhasilannya. Hal tersebut  karena  kegiatan  persilangan  pada tanaman  pisang  masih  mempunyai  banyak hambatan.  Keberhasilan  persilangan  pisang sampai  saat  ini  masih  terkendala  kompleknya sistem  genetik,  adanya  sifat  paternokarpi, fertilitas  polen,  kegagalan  dalam  sistem penyerbukan  atau  pembuahan,  heterozigositas yang  tinggi,  serta  genom  yang  berlainan (Poerba et al ., 2016).

## KESIMPULAN
Dari  hasil  pengujian  di  rumah  kaca, pisang  Rejang#2  (AA)  menunjukkan  status tahan  terhadap  penyakit  layu  Fusarium  Foc- VCG  01213/16  TR4  yang  mana  hasilnya sesuai dan stabil dengan tingkat ketahanannnya  di  lapangan.  Tetraploid  dari pisang  Rejang#2  (AAAA)  juga  menunjukkan status  tahan  terhadap  Foc  TR4.  Pisang  Madu (AA)  menunjukkan  status  sangat  rentan, sedangkan  pisang  Goroho  (AAA)  dan  pisang Ustrali  (AAAB)  menunjukkan  status  rentan. Pisang  liar M.  acuminata  var.  malaccensis (AA)  dan  pisang  Mas  Jambe  4x  (AAAA) menunjukkan  status  agak  rentan.  Pada  seleksi pisang  hasil  persilangan,  didapatkan  3  nomor pisang  hibrid  dengan  status  agak  rentan  yakni
816  MDRK,  1060  MDRK,  2284  MMRK, sedangkan 4 nomor hibrid lainnya menunjukkan status rentan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian ini sepenuhnya didukung oleh dana  proyek  penelitian  kompetitif  LIPI  sub- kegiatan  Eksplorasi  dan  Pemanfaatan  Terukur Sumber  Daya  Hayati  (Darat  dan  Laut) Indonesia  tahun  2014  -  2015,  dengan  judul “Evaluasi,  karakterisasi  dan  seleksi  varietas baru  pisang  hasil  induksi  poliploidi  dan persilangan”.  Terima  kasih  disampaikan kepada  Dr.  Sarjiya  Antonius  untuk  kultur Fusarium  Foc-VCG  01213/16  TR4  dan seluruh pihak yang telah membantu pelaksanaan kegiatan penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Garcia-Bastidas,  F.,  G.H.J.  Kema.  2014.

## Banana  germplasm  phenotyping  with
Fusarium  oxysporum  f.sp.  cubense tropical race 4. http://panama
disease.org/en/research. [29 Januari
2015].
Javed,  M.A.,  M.  Chai,  R.Y.  Othman.  2004.
Study  of  resistance  of Musa  acuminata to Fusarium  oxysporum using  RAPD markers. Biologia Plantarum. 48(4): 93- 99.
Jumjunidang,  Edison,  Riska,  C.  Hermanto. 2012.  Penyakit  layu  fusarium  pada tanaman  pisang  di  Propinsi  NAD: sebaran dan identifikasi isolat berdasarkan analisis vegetative compatibility group . J.
Hort. 22(2): 164-171.
Kasutjianingati,  R.  Poerwanto,  Widodo,  N. Khumaida,  D.  Efendi.  2011.  Efektivitas aplikasi in  vitro Rhizobakteri  sebagai agen  antagonis  layu  fusarium  pada pisang Rajabulu/AAB di rumah kaca. J. Hort. Indonesia. 2(1): 34-42.
Kayat,  F.,  N.  Bonar,  R.  Waugh,  S.  Rajinder, A.R.  Rahimah,  K.A.  Rashid.  2009. Development  of  a  genetic  linkage  map for genes associated with resistance and
susceptibility  to Fusarium  oxysporum f. sp. cubense from  an  F1  hybrid population  of Musa  acuminata  ssp. malaccensis . Acta Hort. 828: 333-40.
Mak,  C.,  A.A.  Mohamed,  K.W.  Liew,  Y.W. Yo. 2004. Early screening technique for fusarium  wilt  resistance  in  banana micropropagated  plants.  Di  dalam: Mohan,  J.S.,  R.  Swennen,  editor. Banana  improvement:  cellular,  molecular biology,  and  induced  mutations.  Italy: FAO Science Publisher, Inc.
Poerba,  Y.S.,  F.  Ahmad,  Witjaksono.  2012. Persilangan  pisang  liar  diploid Musa acuminata  Colla var. malaccensis (RIDL.) Nasution sebagai sumber pollen dengan  pisang  madu  tetraploid.  J.  Bio. Indonesia. 8(1): 181-196.
Poerba, Y.S., Witjaksono, T. Handayani. 2016. Pembentukan  dan  penampilan  pisang Rejang  hibrid  triploid  hasil  persilangan pisang Rejang mixoploid dengan pisang Rejang diploid. J. Bio. Indonesia. 12(1): 19-30.
Poerba, Y.S., T. Handayani, Witjaksono. 2017. Karakterisasi  pisang  Rejang  tetraploid hasil  induksi  dengan  oryzalin.  Berita Biologi. 16(1): 85-93.
Rahmi-Anna,  F.G., N. Nasir, Jumjunidang, C. Hermanto.  2014.  Uji  ketahanan  pisang Ambon  koleksi  dari  Jambi  terhadap beberapa vegetatif  compatibility  group (VCG) Fusarium oxysporum f.sp. cubense (Foc).  J.  Biologi  Universitas  Andalas 3(1): 1-8.
Soesanto,  L.,  E.  Mugiastuti,  F.  Ahmad,
Witjaksono.  2012.  Diagnosis  lima penyakit  utama  karena  jamur  pada  100 kultivar bibit pisang. J. HPT Tropika 12: 36-45.
Suciatmi,  A.,  I.  Antonius,  T.R.  Hidayat, Sulistiyani.  2014.  Isolasi,  identifikasi dan  evaluasi  antagonisme  terhadap Fusarium  oxysporum f.sp. cubense (Foc)  secara in  vitro dari  jamur  endofit tanaman  pisang.  Berita  Biologi.  13(1): 71-83.
Sutanto,  A.  2014.  Karakterisasi  molekuler ketahanan  beberapa  kultivar  pisang ( Musa spp.)  terhadap  penyakit  layu Fusarium  oxysporum f.sp. cubense . [Disertasi]. Sekolah Pascasarjana. Institut Pertanian Bogor.
Sutanto,  A.,  Sudarsono,  D.  Sukma,  C.
Hermanto.  2011.  The  study  and  early evaluation  of  resistance  of  banana accessions  for  wilt  disease  caused  by Fusarium  oxysporum f.sp. cubense VCG  01213/16  (TR4).  Proceeding  of The 7 th ACSA Conference 2011.
Swarupa,  V.,  K.V.  Ravishankar,  A.  Rekha. 2013.  Characterization  of  tolerance  to Fusarium  oxysporum f.sp. cubense infection  in  banana  using  suppression subtractive  hybridization  and  gene expression  analysis.  Physiological  and Molekular Plant Pathology. 83: 1-7. Wu,  Y.,  G.  Yi,  X.  Peng,  B.  Huang,  E.  Liu,  J. Zhang. 2013. Systemic acquired resistance  in  Cavendish banana  induced by infection with an incompatible strain of Fusarium oxysporum f.sp. cubense . J.
Plant Physiology. 170: 1039-1046.