## PENAMBAHAN ISOLAT PROTEIN KEDELE DAN SUKROSA SEBAGAI ELISITOR TERHADAP SENYAWA ANTIOKSIDAN DAN RACUN PADA
KECAMBAH KORO KOMAK ( Lablab purpureus L Sweet )
Sukatiningsih 1, Kurniawan 2 ,Windrati 1
1 Staf pengajar Fakultas Teknologi Pertanian Universitas Jember
2 Alumni Fakultas Teknologi Pertanian Universitas Jember Korespondensi : Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Jember, Jl.Kalimantan 37 Jember
Email : sukatiftp@yahoo.com

## ABSTRACT
The  germination  of  “  koro  komak  ”  with  elicitation  can  improve  antioxidant substance. Sucrose and ISP on concentration 0, 500, 1000, 1500, 2000 ppm were use as elicitor. The  obyective  of  this  research  were  to  know  the  effect  of  the  kind  and  the  concentration  of elicitor  to  the  value  of  antioxidant  substance  and  the  best  time  of  germination  produced maximal antioxidant  and minimum toxic substance.The result of this research was the kind and the  concentration    of  elicitor  influence    antioxidant  substance  and  one  day is  the  best  time  of germination.

## Key word : komak , sprout, elicitor,antioxsidant

## PENDAHULUAN
Biji  koro-koroan  merupakan  tanaman bijian  terpenting  kedua  sebagai  sumber pangan utama dunia (Rubatzky dan Yamaguchi,  1997).  Salah  satu  spesies  koro- koroan  yang  banyak  terdapat  di  Indonesia adalah  koro  komak  ( Lablab  purpureus (L) Sweet).  Tanaman  koro  komak  atau  koro wedhus mudah dibudidayakan dan produksinya mencapai 2.600-4.500 kg/ha. Biji koro  komak  mengandung  protein  yang  cukup tinggi, sekitar 20-25%. Sedangkan kandungan lemaknya  sangat  rendah  yaitu  antara  0,2-3% dan  kandungan  karbohidratnya  relatif  tinggi, yaitu  50-60%  (Maensen  dan  Somaatmadja, 1993).
Koro  komak  mengandung  zat  gizi seperti  karbohidrat,  protein,  dan  serat  yang tinggi sehingga berpotensi untuk dikembangkan  sebagai  sumber  bahan  pangan fungsional  (Maensen  dan  Somaatmadja, 1993).  Karena  banyak  keistimewaan  yang terdapat pada koro komak maka mulai banyak dilakukan  berbagai  macam  penelitian  yang bertujuan  untuk  meningkatkan  karakteristik mutu termasuk peningkatan kadar antioksidan dan aktivitas antioksidan koro komak.
Menurut Vanderstoep dalam
Supriyanto  (1998),  nilai  gizi  biji-bijian  dapat ditingkatkan  dengan  proses  perkecambahan.
Perkecambahan diketahui dapat meningkatkan
kadar  senyawa  antioksidan  dan  aktivitas antioksidan koro komak. Proses perkecambahan adalah permulaan pertumbuhan  embrio  yang  aktif  sehingga menyebabkan  kulit  biji  menjadi  pecah kemudian  tumbuh  tunas  kecambah  (redikula) (Copeland  dalam  Supriyanto,  1998).  Pada proses  perkecambahan  akan  menyebabkan berkurangnya  atau  hilangnya  senyawa  racun serta  senyawa  anti  gizi  serta  meningkatkan kadar  polifenol  (Sutardi,  1998).  Selain  itu, pada  saat  perkecambahan  terjadi  proses hidrolisis  karbohidrat  dan  lemak  menjadi senyawa  lebih  sederhana  sehingga  dapat meningkatkan  daya  cerna  pada  proses pencernaan manusia (Sutardi, 1998).
Perkecambahan  dipengaruhi  oleh  beberapa faktor antara lain: kadar air, komposisi udara, suhu, cahaya, dan waktu (Susanto dan Saneto, 1994).  Aktifitas  antioksidan  pada  kecambah juga  dipengaruhi  oleh  faktor-faktor  tersebut dimana  waktu  perkecambahan  mempunyai suatu titik optimum. Perkecambahan melebihi waktu  optimum  justru  akan  menyebabkan turunnya  aktifitas  antioksidan.  Hal  tersebut disebabkan  senyawa  fenol  diubah  menjadi lignin (Randhir et al., 2004).
Untuk meningkatkan produksi metabolit  sekunder  pada  biji  maka  di  dalam proses  perkecambahan  digunakan  teknik elisitasi  yaitu  dengan  menambahkan  elisitor
pada saat perlakuan perendaman biji. Elisitasi merupakan  proses  penambahan  elisitor  pada sel tumbuhan dengan tujuan untuk
menginduksi dan meningkatkan pembentukan metabolit  sekunder  (Fitriani,  2003).  Elisitor merupakan  penyebab  adanya  sinyal  yang mengaktifkan  enzim-enzim  yang  kemudian mengkatalis
metabolisme pembentuk metabolit  sekunder  (Yuliana,  2003).  Elisitor yang  digunakan  adalah  isolat  protein  kedele (IPK)  dan sukrosa.
Penelitian tentang karakteristik mutu kecambah koro komak    menggunakan elisitor belum  pernah  dilakukan  sehingga  dalam penelitian  ini  akan  dilakukan  perlakuan perendaman  pada  biji  koro  komak  dengan menggunakan  elisitor    larutan  IPK    dan sukrosa  dalam  berbagai  variasi  konsentrasi serta waktu perkecambahan. Untuk melengkapi  informasi,  pada  perlakuan  yang terpilih  diamati  daya  cerna  pati,  protein  serta analisa proksimatnya.

## METODE PENELITIAN

## Bahan dan Alat Penelitian

## Bahan
Bahan utama yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  biji  koro  komak  putih etanol,  AgNO3,  K-tiosianat,  indikator  Feri, larutan Iodin, reagen Follin–ciocalteau, DPPH (difenil pikrilhidrasil ) , petroleum eter, Na 2 Co 3 ,  H 2 SO 4 ,  K 2 SO 4 ,  NaOH,  HCl,  HNO 3 , FeCl 3 ,  asam  dinitrosalisilat  (DNS),  Na-fosfat, asam borat, selenium
Alat Peralatan  yang  diperlukan  dalam menunjang  penelitian  ini  adalah  sebagai berikut  :  keranjang  plastik  berlubang,  gelas bekas minuman  kemasan, kain saring, karung goni, karet gelang, mortar, timbangan analitik, peralatan  gelas,,  spektrofotometer  (Secoman version 1,10), sentrifuge , mikropipet Eppendorf , desikator, oven , eksikator, kertas saring, stirer, vortex, cawan porselin.

## Rancangan penelitian
Penelitian    menggunakan  Metode Rancangan  Acak  Kelompok  (RAK)  yang terdiri dari dua faktor dan tiga ulangan. Faktor perlakuan yang digunakan adalah jenis elisitor
(A)  dan  konsentrasi  elisitor  (B)  dengan  taraf sebagai berikut:
Faktor A : Jenis Elisitor A 1 : Isolat  Protein kedele   (IPK) A 2 : Sukrosa Faktor B : Konsentrasi Elisitor B 1 : 0   ppm B 2 : 500   ppm B 3 : 1.000   ppm B 4 : 1.500   ppm B 5 : 2.000  ppm Dari kedua faktor diperoleh kombinasi perlakuan sebagai berikut:
A 1 B 1 ; A 1 B 2 ; A 1 B 3; A 1 B 4; A 1 B 5 A 2 B 1; A 2 B 2; A 2 B 3; A 2 B 4; A 2 B 5 Data  yang  diperoleh  digambarkan histogramnya  serta  dianalisis  menggunakan analisis  sidik  ragam  dan  bila  ada  perbedaan maka  dilanjutkan  dengan  Uji  Beda  Nyata menggunakan  uji  DMRT  (Duncan’s  Multiple Range Test) dengan α = 5% (Gasperz, 1991).

## Parameter Pengamatan
Parameter yang diamati pada perkecambahan koro komak antara lain : Kadar  Vitamin  C  (Sudarmadji  dkk., 1997), kadar β-Karoten (Tejasari,dkk, 2006),total  Polifenol  (Andarwulan  dkk., 1999), aktifitas  antioksidan  (Gadow et  al. , 1997),kadar  HCN  ,    Air  ,  abu  (Sudarmadji dkk., 1997), Analisa Proksimat (Subagio, dkk 2002 ),daya cerna pati dan daya cerna protein cara Enzimatis (Tejasari dkk., 2006) Pelaksanaan Penelitian Penelitian Apriliana (2007) menggunakan perlakuan  elisitor sukrosa pada berbagai konsentrasi  yaitu 0, 500, 1000, 1500 dan  2000  ppm  .Perlakuan  pada  penelitian  ini digunakan jenis elisitor sukrosa dan IPK  pada variasi  konsentrasi  sama.  Sebanyak  100  biji koro  komak  dengan  berat  ±2,75  gram dimasukkan  dalam  gelas  aqua  yang  berisi larutan  elisitor  sekitar  150  ml  (sampai  semua biji terendam). Kemudian direndam selama 24 jam.  Perendaman  dilakukan  sesuai  dengan berbagai  konsentrasi  dari  masing-masing elisitor,  yaitu  0,  500,  1.000,  1.500,  dan  2.000 ppm.  Lama  perendaman  24  jam  dan  setiap  6 jam  sekali  larutan  elisitor  diganti  dengan larutan  elisitor  yang  baru.  Setelah  24  jam direndam,  kemudian  dilakukan  penirisan  lalu
biji  koro  komak  ditempatkan  pada  keranjang berlubang  yang  dialasi  dengan  dua  lembar karung  goni.  Setelah  itu,  biji  koro  komak dikenakan  sinar  matahari  selama  1  jam  atau lebih. Setelah 1 jam dijemur, wadah keranjang ditutup  dengan  satu  lembar  karung  goni. Lama  perkecambahan  24  jam  dan  setiap  pagi dan  sore  hari  disiram.  Setelah  24  jam perkecambahan  tepatnya  pada  hari  pertama perkecambahan,  kecambah  biji  koro  diambil, ditimbang beratnya lalu dimasukkan ke dalam freezer.  Selanjutnya  pada  hari  kedua  dan ketiga perkecambahan dilakukan hal serupa.
Pada kecambah koro komak dilakukan  analisa  yang  meliputi:  kadar vitamin  C,  kadar  β-karoten,  total  polifenol, aktifitas  antioksidan  (DPPH),  kadar  HCN. Pada  perlakuan  terbaik  dilakukan  analisa proksimat, daya cerna protein, dan daya cerna pati.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Kadar Vitamin C
Kadar  vitamin  C  kecambah  koro komak  dengan  teknik  elisitasi  dapat  dilihat pada  Gambar  1  dan  Gambar  2.  Gambar  1 menunjukkan    bahwa  kadar  vitamin  C kecambah  koro  komak  meningkat  paling tinggi  pada  1  hari  perkecambahan  (24  jam), kadar  vitamin  C  terus  menurun  dari  1  hari,  2 hari,  dan  3  hari  perkecambahan.  Sehingga pada  1  hari  perkecambahan  dianggap  yang terbaik.  Kadar  vitamin  C    kecambah  koro komak  yang  tertinggi  dengan  elisitor  IPK terdapat  pada  1  hari  perkecambahan  dengan konsentrasi  elisitor  1.500  ppm  sebesar  1,905 mg/g.  Begitu  juga  dengan  elisitor  sukrosa diperoleh  kadar  vitamin  C  tertinggi  pada  1 hari perkecambahan dengan konsentrasi 1.500 ppm sebesar 1,409 mg/g.
Uji beda kadar Vitamin C kecambah komak  pada  variasi  jenis  elisitor  seperti terlihat pada Tabel 1.
Kemampuan  IPK  dalam  menyerap dan  mengikat  air  lebih  tinggi  dibanding sukrosa  ,  sehingga  elisitor   IPK    lebih  efektif dalam  mengaktivasi  enzim  gulunolakton oksidase  yang  terdapat  dalam  kecambah  koro komak  dan  menyebabkan  sintesa  vitamin  C oleh  enzim  gulunolakton  oksidase  semakin meningkat.
Uji beda kadar vitamin C kecambah koro  komak  pada  variasi  konsentrasi  elisitor dapat dilihat pada Tabel 2.
Gambar 1. Kadar Vitamin C Kecambah Koro Komak dengan  elisitor IPK
Gambar 2.  Kadar Vitamin C Kecambah Koro Komak dengan Elisitor Sukrosa
Tabel  1.  Uji  Beda  Kadar  Vitamin  C,  β karoten, Polifenol, aktivitas antioksidan, HCN Kecambah  Koro  Komak  pada  Variasi  Jenis Elisitor
Elisitor Vitami n C (mg/g) Β karoten (µg/g) Polifenol (µmol/m g) Aktivitas antioksid an (µmol/g) ISP Sukrosa 1,724 a 1,269 b 0,040  b 0,158  a 0,029  b 0,038  a 2,354  a 2,316  a
Keterangan  :  Huruf  yang  sama  menunjukkan berbeda  tidak  nyata  pada  uji  Duncan  tingkat kepercayaan 95%
Dari  Tabel  2.  dapat  dilihat  bahwa kadar  vitamin  C  meningkat  seiring  dengan peningkatan  konsentrasi  elisitor  sampai  pada batas  1.500  ppm.  Namun,  kadar  vitamin  C menurun pada konsentrasi elisitor 2.000 ppm. Peningkatan  kadar  vitamin  C  diduga  karena adanya  kemampuan  elisitor  IPK  dan  sukrosa dalam  mengikat  air.      Semakin  tinggi konsentrasi  elisitor  IPK  dan  sukrosa,  makin
1.00 1.15 1.30 1.45 1.60 1.75 1.90 0 1000 2000 K ad ar V it ami n C (mg/ g)

## Konsentrasi Elisitor (ppm)
1 Hari 2 Hari 3 Hari
0.50 0.65 0.80 0.95 1.10 1.25 1.40 0 1000 2000 K ad ar V it ami n C (mg/ g)
Konsentrasi Elisitor (ppm) 1 Hari 2 Hari 3 Hari
banyak  air  yang  terikat    maka  kerja  enzim akan semakin aktif.
Menurut Gupta dalam Setyati (1999),  air    mengaktifkan  bermacam-macam enzim dan memungkinkan pemecahan bermacam-macam  cadangan  makanan  di samping  sebagai  alat  transportasi  makanan dari  endosperm  ke  meristem  pada  sumbu embrio  untuk  membentuk  protoplasma  baru. Jadi  semakin  banyak  air  yang  tersedia, makin  meningkatkan  aktivitas  enzim  L- gulunolakton oksidase yang berperanan dalam mengkonversi  L-gulunolakton  ke  bentuk  2- keto-L-gulunolakton,  sebagai  tahap  akhir dalam  sintesis  vitamin  C  sehingga  kadar vitamin C akan meningkat selama perkecambahan. Hal ini sesuai dengan konsep elisitor menurut Yuliana (2003), yaitu elisitor merupakan  penyebab  adanya  sinyal  yang mengaktifkan  enzim-enzim  yang  kemudian mengkatalis metabolisme pembentuk
metabolit sekunder. Penurunan  kadar  vitamin  C  pada pemberian  elisitor  konsentrasi  2.000  ppm diduga  karena  jaringan  koro  komak  kurang efektif dalam menyerap elisitor pada konsentrasi  larutan  yang  pekat.  Akibatnya, sinyal induksi yang akan mengaktifkan enzim pensintesa  vitamin  C  tidak  tersampaikan dengan  optimal,  sehingga  sintesa  vitamin  C juga akan terhambat (Setyati, 1999).
Uji beda kadar vitamin C kecambah koro komak pada variasi jenis dan konsentrasi elisitor dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel  3.  Uji  beda  senyawa  dan  aktivitas antioksidan kecambah koro
Perlaku an vit.C (mg/g) B karoten (µg/g) Total Polifenol (µmol/mg) Aktivitas antioksida n (µmol/g) A1B1 A1B2 A1B3 A1B4 A1B5 A2B1 A2B2 A2B3 A2B4 A2B5 1,373 efg 1,756 bcd 1,791 abc 1,905 a 1,794 ab 1,136 hi 1,136 hi 1,284 fgh 1,409 e 1,377 ef 0,026 fghi 0,038 fgh 0,042 fgh 0,047 fg 0,045 f 0,104 de 0,125 cd 0,155 bc 0,216 a 1,191 ab 0,020 j 0,028 hi 0,030 fgh 0,032 def 0,033 d 0,032 def 0,033 d 0,039 bc 0,041 ab 0,042 a 2,207 i 2,350 bcd 2,384 abc 2,435 a 2,393 ab 2,236 hi 2,348 bcd 2,363 abcd 2,296 defg 2,334 bcde
Keterangan  :    huruf  yang  sama  menunjukkan berbeda tidak nyata pada tingkat kepercayaan 95%
Dari  Tabel  3.  menunjukkan  kadar vitamin  C  kecambah  koro  komak  yang
tertinggi  pada  perlakuan  A1B4  (jenis  elisitor: IPK  dan  konsentrasi  elisitor  =  1.500  ppm) sebesar 1,905 mg/g, sedangkan kadar vitamin C  terendah  terdapat  pada  perlakuan  A2B2 (jenis elisitor: sukrosa dan konsentrasi elisitor = 1.000 ppm) sebesar 1,136 mg/g.

## Kadar β-Karoten
Kadar  β-karoten  kecambah  koro komak  dengan  teknik  elisitasi  dapat  dilihat pada Gambar 3 dan Gambar 4.
Gambar 3.  Kadar β-Karoten Kecambah Koro Komak dengan elisitor IPK
Gambar 4 Kadar β-Karoten Kecambah Koro Komak dengan Elisitor Sukrosa Dari Gambar 3 dan Gambar 4. dapat diketahui  bahwa  kadar  β-karoten  kecambah koro  komak  meningkat  paling  tinggi  pada  1 hari  perkecambahan  (24  jam).  Dari  kedua gambar di atas terlihat bahwa kadar β-karoten terus  menurun  dari  1  hari,  2  hari,  dan  3  hari perkecambahan.  Sehingga  pada  1  hari perkecambahan  dianggap  yang  terbaik  untuk menghasilkan  β-karoten.    Kadar  β-karoten
0.010 0.015 0.020 0.025 0.030 0.035 0.040 0.045 0.050 0 1000 2000 K ad ar β -K aroten (µg/g)

## Konsentrasi Elisitor (ppm)
1 Hari 2 Hari 3 Hari 0.00 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25 0 500 1000 1500
2000 Kad a r β -Karote n (µg/g ) Konsentrasi Elisitor (ppm)
1 Hari 2 Hari 3 Hari
kecambah koro komak  tertinggi didapati pada elisitor  IPK    pada  1  hari  perkecambahan dengan konsentrasi elisitor 1.500 ppm sebesar 0,047  µg/g.  Begitu  juga  dengan  elisitor sukrosa  diperoleh  kadar  β-karoten  tertinggi pada 1 hari perkecambahan dengan konsentrasi 1.500 ppm sebesar 0,216 µg/g. Dari  Tabel  1  hasil  pengamatan,
kadar  β-karoten      kecambah  koro  komak dengan elisitor sukrosa lebih besar dibandingkan    kadar  β-karoten    kecambah koro  komak  dengan  elisitor  IPK.  Kadar  β- karoten kecambah koro komak dengan elisitor IPK  yaitu  0,0397  µg/g  sedangkan  untuk komak  dengan  elisitor  sukrosa  yaitu  0,1584 µg/g.  Dengan  ukuran  molekul  yang  kecil  , larutan  sukrosa  lebih  mudah  terserap  oleh jaringan  koro  komak.  Dengan  demikian elisitor sukrosa lebih efektif dalam
menginduksi enzim karotenase untuk
mensintesis β-karoten.
Dari  Tabel  2.  dapat  dilihat  bahwa konsentrasi elisitor yang semakin tinggi maka kadar  β-karoten  yang  dihasilkan  semakin tinggi.  Namun  pada  perlakuan  B5  kadar  β- karoten  menurun.  Peningkatan  kadar  β- karoten  diduga  karena  penambahan  elisitor pada  perkecambahan  koro  komak  memiliki peranan  dalam  transduksi  sinyal  sehingga mengaktifkan enzim karotenase dan menghasilkan  metabolit  sekunder,  salah satunya  berupa  senyawa  terpena.  Diketahui bahwa β-karoten merupakan salah satu bentuk dari senyawa terpena (karoten).
Seperti halnya
pengamatan parameter  kadar  vitamin  C,  kadar  β-karoten pada  konsentrasi  2.000  ppm  juga  mengalami penurunan. Hal ini disebabkan karena jaringan koro  komak  telah  jenuh.  Terhadap  elisitor, sehingga  jika  konsentrasinya  ditingkatkan diatas  konsentrasi  optimal  elisitor,  biosintesis β-karoten menjadi berkurang.
Dari Tabel 3. menunjukkan kadar β- karoten  kecambah  koro  komak  yang  tertinggi pada  perlakuan  A2B4  (jenis  elisitor:  sukrosa dan konsentrasi elisitor = 1.500 ppm) sebesar 0,2160  µg/g,  sedangkan  kadar  β-karoten terendah terdapat pada perlakuan A1B1 (jenis elisitor: IPK  dan konsentrasi elisitor = 0 ppm) sebesar 0,0264 µg/g.

## Total Polifenol
Data  hasil  pengamatan  terhadap. total  polifenol  kecambah  koro  komak  dengan teknik  elisitasi  dapat  dilihat  pada  Gambar  5 dan Gambar 6.
Dari  Gambar  5  dan  Gambar  6. terlihat  bahwa  total  polifenol  terus  menurun dari 1 hari, 2 hari, dan 3 hari perkecambahan. Sehingga pada 1 hari perkecambahan dianggap  yang  terbaik  untuk  menghasilkan total polifenol. Total polifenol rerata kecambah koro komak  tertinggi pada elisitor isolat protein terdapat pada 1 hari perkecambahan  dengan  konsentrasi  elisitor 2.000  ppm  sebesar  0,033  µmol/mg.  Begitu juga  dengan  elisitor  sukrosa  diperoleh  total polifenol tertinggi pada 1 hari perkecambahan dengan  konsentrasi  2.000  ppm  sebesar  0,042 µmol/mg.
Dari  Tabel  1.  Total  polifenol  pada perlakuan A1 lebih rendah dibandingkan pada perlakuan A2. Total polifenol  kecambah koro komak  dengan  elisitor  IPK  yaitu  0,0285 µmol/mg  sedangkan  komak  dengan  elisitor sukrosa  yaitu  0,0374  µmol/mg.      Selama perkecambahan  sukrosa  akan  terhidrolisis membentuk  glukosa.  Glukosa  akan  melewati jalur  glikolisis  dan  lintasan  pentosa  phospat, lebih  lanjut  oleh  enzim  guaiacol  peroksidase (GPX) akan diubah menjadi senyawa fenolik. Kemudian  akan  disintesis  menjadi  senyawa polifenol. Menurut Vattem pada perkecambahan fava bean (kedelai)
menggunakan  elisitor  akan  meningkatkan sintesis  fenolik  pada  jalur  pentosa  phosphat (Apriliana, 2007).
Dari  Tabel  2.  dapat  dilihat  bahwa dengan  konsentrasi  elisitor  yang  semakin tinggi  maka  total  polifenol  yang  dihasilkan semakin tinggi. Menurut Contin et al. (1999), elisitor dapat meningkatkan kandungan metabolit  sekunder  dengan  dua  cara,  yaitu meningkatkan
aktivitas enzim dan meningkatkan  sintesis  enzim  yang  terlibat dalam  jalur  biosintesis  metabolit  tertentu. Maka  diduga  elisitor  IPK  dan  sukrosa meningkatkan  aktivitas  enzim  phenolase dalam  mensintesis  senyawa  fenol  sehingga total  polifenol meningkat. Hasil penelitian ini sejalan  dengan  hasil  penelitian  Rhandir  ,et  al (2004),  bahwa  elisitasi  memberikan  pengaruh terhadap  peningkatan  senyawa  fenolik  dan aktifitas  antioksidan  selama  perkecambahan.
Dari Tabel  3. menunjukkan  total polifenol  kecambah  koro  komak  yang tertinggi  pada  perlakuan  A2B5  (jenis  elisitor: sukrosa dan konsentrasi elisitor = 2.000 ppm) sebesar  0,0423  µmol/mg,  sedangkan  total polifenol  terendah  terdapat  pada  perlakuan A1B1  (jenis  elisitor:  IPK  dan  konsentrasi elisitor = 0 ppm) sebesar 0,0202 µmol/mg.
Gambar 5. Total Polifenol Kecambah Koro

## Komak dengan elisitor IPK
Gambar 6 Total Polifenol Kecambah Koro Komak dengan Elisitor Sukrosa

## Aktivitas Antioksidan
Aktivitas  antioksidan  kecambah koro  komak  dengan  teknik  elisitasi  dapat dilihat pada Gambar 7 dan Gambar 8.
Gambar  7  Aktivitas  Antioksidan  Kecambah Koro Komak dengan elisitor IPK
Gambar 8.  Aktivitas Antioksidan Kecambah Koro Komak dengan Elisitor Sukrosa
Dari  Gambar  7  dan  Gambar  8. menunjukkan  aktivitas  antioksidan  kecambah koro  komak  meningkat  paling  tinggi  pada  1 hari  perkecambahan  (24  jam).  Hal  ini  sejalan dengan    peningkatan  optimal    vitamin  C,  β- karoten, dan polifenol sehingga menyebabkan aktivitas antioksidannya juga meningkat. Dari Gambar  7  dan  8  terlihat  bahwa  aktivitas antioksidan  terus  menurun dari  1  hari,  2  hari, dan  3  hari  perkecambahan.  Sehingga  pada  1 hari  perkecambahan  dianggap  yang  terbaik untuk  menghasilkan  aktivitas  antioksidan yang optimal. Aktivitas antioksidan kecambah  koro  komak  yang  tertinggi  dengan elisitor IPK terdapat pada 1 hari perkecambahan  dengan  konsentrasi  elisitor 1.500 ppm sebesar 2,435 µmol/g. Begitu juga dengan  elisitor  sukrosa  diperoleh  aktivitas antioksidan tertinggi pada 1 hari perkecambahan  dengan  konsentrasi  2.000 ppm sebesar 2,334 µmol/g. Dari Tabel 2 terlihat bahwa konsentrasi elisitor yang semakin tinggi maka
0.010 0.015 0.020 0.025 0.030 0.035 0 1000 2000 T otal P oli fen ol (µmol /mg) Konsentrasi Elisitor (ppm) 1 Hari 2 Hari 3 Hari 0.015 0.020 0.025 0.030 0.035 0.040 0.045 0 1000 2000 T otal P oli fen ol (µmol /mg) Konsentrasi Elisitor (ppm)
1 Hari 2 Hari 3 Hari 1.5 1.7 1.9 2.1 2.3 2.5 2.7 2.9 0 1000 2000 A kt iv it as A nt ioksi dan … Konsentrasi Elisitor (ppm) 1 Hari 2 Hari 3 Hari 1.0 1.5 2.0 2.5 0 1000 2000 A k tiv ita s A nti ok s id a n (µmo l/ g)
Konsentrasi Elisitor (ppm) 1 Hari 2 Hari 3 Hari
aktivitas antioksidan yang dihasilkan semakin tinggi.  Namun,  pada  perlakuan  B4  dan  B5 aktivitas  antioksidan  menurun.  Meningkatnya aktivitas antioksidan seiring dengan meningkatnya  senyawa  antioksidan  yang terbentuk. Menurut Bravo ( 1998) antioksidan fenol  berperan  dapat  menghalangi  proses oksidasi  lipida  dan  molekul  lain  dengan menyumbangkan  atom  hidrogen  pada  radikal bebas (DPPH).
Menurut Gardner FP dalam Novijanto  (1996),  sukrosa  yang  termasuk dalam golongan oligosakarida
dapat bersinergi  dengan  elisitor  endogen  pada tanaman  yang  kebanyakan  juga  merupakan golongan  oligosakarida.  Sehingga  diduga penggunaan  elisitor  sukrosa  lebih  dapat meningkatkan aktivitas antioksidan kecambah koro  komak.      Perlakuan  penjemuran  selama perkecambahan  memungkinkan  peningkatkan hidroksimetilfural (intermediet produksi MRP),  yang  kemudian  akan  membuat aktivitas  antioksidan  koro  komak  meningkat. (Soong dan Barlow, 2004).
Dari  Tabel  3.    menunjukkan aktivitas  antioksidan  kecambah  koro  komak yang  tertinggi  pada  perlakuan  A1B4  (jenis elisitor:  IPK  dan  konsentrasi  elisitor  =  1.500 ppm)  sebesar  2,4350  µmol/g,  sedangkan aktivitas  antioksidan  terendah  terdapat  pada perlakuan  A1B1  (jenis  elisitor:  IPK  dan konsentrasi elisitor = 0 ppm) sebesar 2,2068 µ mol/g.

## Kadar HCN
Kadar  HCN  kecambah  koro  komak dengan  teknik  elisitasi  dapat  dilihat  pada Gambar 9 dan Gambar 10.
Gambar 9. Kadar HCN Kecambah Koro Komak dengan elisitor IPK
Gambar 10. Kadar HCN Kecambah Koro Komak dengan Elisitor Sukrosa
Dari  Gambar  9  dan  Gambar  10. dapat  diketahui  bahwa  kadar  HCN  kecambah koro komak menurun paling tinggi pada 3 hari perkecambahan  (72  jam).  Hal  ini  diduga semakin  lama  waktu  perkecambahan    kadar HCN  kecambah  koro  komak  akan  semakin hilang.  Dari  kedua  gambar  di  atas  terlihat kadar HCN terus menurun dari 1 hari, 2 hari, dan 3 hari perkecambahan.
Kadar  HCN  kecambah  koro  komak yang  terendah  dengan  elisitor  IPK  terdapat pada 3 hari perkecambahan dengan konsentrasi  elisitor  1.500  ppm  sebesar  0,046 mg/g.  Begitu  juga  dengan  elisitor  sukrosa diperoleh  kadar  HCN  terendah  pada  3  hari perkecambahan  dengan  konsentrasi  1.500
ppm sebesar 0,054 mg/g Dari Tabel 2 terlihat bahwa konsentrasi  elisitor    semakin  tinggi  maka kadar  HCN  yang  dihasilkan  semakin  rendah.
Menurut  (Contin  et  al,  1999)  menjelaskan bahwa elisitor dapat meningkatkan kandungan metabolit  sekunder  dengan  dua  cara,  yaitu meningkatkan aktivitas enzim dan meningkatkan  sintesis  enzim  yang  terlibat dalam  jalur  biosintesis  metabolit  tertentu, maka  pada  penelitian  ini  ada  kemungkinan elisitor meningkatkan aktivitas enzim glikosianidase  sehingga  dengan  semakin meningkatnya penambahan konsentrasi elisitor  maka  akan  semakin  mengaktifkan kinerja enzim glukosianidase dalam menghidrolisis  HCN  selama  perkecambahan sehingga kadar HCN dapat menurun.
0.00 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25 0 1000 2000 K ad ar H C N ( mg/ g)
Konsentrasi Elisitor (ppm) 1 Hari 2 Hari
3 Hari
0.00 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25 0 1000 2000 K ad ar H C N ( mg/ g) Konsentrasi elisitor (ppm)
1 Hari 2 Hari 3 Hari
Daya Cerna Pati Daya cerna pati merupakan persentase  pati  yang  dihidrolisis  enzim.  Dari hasil pengamatan dapat diketahui bahwa daya cerna  pati  rata-rata  kecambah  koro  komak dengan  elisitor  isolat  protein  sebesar  92,15% dan  daya  cerna  pati  rata-rata  kecambah  koro komak  dengan  elisitor  sukrosa  sebesar 95,86%.
Pada Gambar  11 terlihat  bahwa elisitor  sukrosa  memiliki  peranan  lebih  besar terhadap peningkatan daya cerna pati kecambah koro komak dibanding elisitor ISP. Hal  ini  dikarenakan  elisitor  sukrosa  mampu menginduksi  enzim-enzim  yang  berfungsi menghidrolisis  pati  sehingga  menyebabkan daya  cerna  pati  meningkat.  Selain  itu, perbedaan  pengaruh  ini  juga  disebabkan karena  elisitor  sukrosa  memiliki ukuran molekul  yang  kecil  dan  sifatnya    larut  air sehingga larutan sukrosa lebih mudah terserap oleh  jaringan  koro  komak.  Dengan  demikian elisitor sukrosa lebih efektif dalam peningkatan  daya  cerna  pati  kecambah  koro komak.
Gambar 11. Histogram daya cerna pati Kecambah Koro Komak Terelisitasi

## Daya Cerna Protein
Daya  cerna  protein  menunjukkan tingkat  kemudahan  protein  untuk  dipecah menjadi asam amino atau komponen pembentuknya sehingga mudah diserap tubuh.
Dalam analisa ini digunakan BSA atau protein murni  sebagai  pembanding  dari  protein kecambah koro komak. Dari hasil pengamatan,  BSA  mempunyai  daya  cerna protein  sebesar  72,3381%.  Kemudian,  daya cerna  protein    kecambah  koro  komak dibandingkan  dengan  dengan  BSA  (dianggap memiliki  daya  cerna  protein  100%)  dan
diperoleh  daya  cerna  protein  kecambah  koro komak  dengan  elisitor  isolat  protein  sebesar 96,25%  dan  dengan  elisitor  sukrosa  sebesar 94,91%.
Tingginya daya cerna protein kecambah  koro  komak  ini  menunjukkan bahwa  protein  kecambah  koro  komak  dari hasil teknik elisitasi mudah diserap oleh tubuh karena  proteinnya  mudah  untuk  dihidrolisis atau  dipecah  menjadi  asam  amino  atau komponen pembentuknya.
Gambar  12.  Histogram  Daya  Cerna Protein Kecambah Koro Komak Terelisitasi
Daya Cerna Protein Daya  cerna  protein  menunjukkan tingkat  kemudahan  protein  untuk  dipecah menjadi asam amino atau komponen pembentuknya sehingga mudah diserap tubuh. Dalam analisa ini digunakan BSA atau protein murni  sebagai  pembanding  dari  protein kecambah koro komak. Dari hasil pengamatan,  BSA  mempunyai  daya  cerna protein  sebesar  72,3381%.  Kemudian,  daya cerna  protein    kecambah  koro  komak dibandingkan  dengan  dengan  BSA  (dianggap memiliki  daya  cerna  protein  100%)  dan diperoleh  daya  cerna  protein  kecambah  koro komak  dengan  elisitor  isolat  protein  sebesar 96,25%  dan  dengan  elisitor  sukrosa  sebesar 94,91%.
Tingginya daya cerna protein kecambah  koro  komak  ini  menunjukkan bahwa  protein  kecambah  koro  komak  dari hasil teknik elisitasi mudah diserap oleh tubuh karena  proteinnya  mudah  untuk  dihidrolisis atau  dipecah  menjadi  asam  amino  atau komponen pembentuknya.
90 92 94 96 ISP Sukrosa 92.15 95.86 % 92 94 96 98 100 ISP Sukrosa BSA 96.25 94.91 100 %
Gambar 12. Histogram Daya Cerna Protein Kecambah Koro Komak Terelisitasi

## 8.Kadar Proksimat
Kadar  proksimat  meliputi  kadar protein,  lemak,  karbohidrat,  abu,  dan  air. terlihat pada Gambar 13
Gambar 13. Histogram Kadar Proksimat
Kecambah Koro Komak 1 Hari Perkecambahan pada  konsentrasi
Elisitor IPK dan Sukrosa 1.500 ppm
Biji polong komak memiliki kandungan  air  9,6%,  abu  3,2%,  protein 24,9%,  lemak  0,8%,  karbohidrat  60,1%  serta serat  1,4%  per  100  g  biji  (Maesen  dan Somaatmadja, 1993).
Dari Gambar  13 .  dapat  diketahui bahwa  kadar  air  bahan  pada  perkecambahan dengan  elisitasi  mengalami  kenaikan.  Hal  ini dipengaruhi oleh perendaman dan penyiraman pada  saat  perkecambahan.  Agar  biji  mampu berkecambah  membutuhkan  kadar  air  30%  - 55%  (Supriyanto,  1998).  Kadar air  kecambah koro komak pada penelitian ini berkisar antara 43,87  –  50,37%.  Sehingga  kondisi  tersebut merupakan kondisi yang cukup untuk perkecambahan  dan  mengaktifkan  enzim- enzim yang terkandung di dalamnya.
Kadar  abu  mengalami  penurunan setelah dilakukan perkecambahan dan elisitasi.  Pada  biji  polong  kadar  abu  koro komak sebesar 3,2%. Namun, setelah dilakukan  perkecambahan  dan  elisitasi,  kadar abu  mengalami  penurunan  sekitar  2,06- 2,34%. Diduga beberapa senyawa dan mineral dalam bahan terlarut selama proses perendaman dan perkecambahan. Kandungan lemak kecambah komak kecambah  koro  komak  dengan  elisitor  IPK sebesar  1,00%  dan  dengan  elisitor  sukrosa sebesar 1,19%.
Kadar  protein    kecambah  koro komak  dengan  elisitor  IPK  sebesar  22,28% dan dengan elisitor sukrosa sebesar 27,58%.
Kadar  karbohidrat  kecambah  koro komak  dengan  elisitor  isolat  protein  sebesar 24,28%  dan  dengan  elisitor  sukrosa  sebesar 25,02%.
Karbohidrat  dan  protein  mengalami penurunan selama perkecambahan dibandingkan  sebelum  dikecambahkan.  Pada saat  perkecambahan  memerlukan  energi  yang sangat  besar  untuk  proses  pertumbuhan. Untuk  memenuhi  kebutuhan  energi  tersebut digunakan protein setelah cadangan karbohidrat menipis. Menurut Soetopo (2002), protein  dihidrolisis  menghasilkan  berbagai asam  amino  bebas,  salah  satunya    asam glutamin  dan  aspartat,  senyawa-senyawa  ini terutama dalam bentuk amidanya ditranslokasikan ke embrio.

## KESIMPULAN
1. Jenis  dan  konsentrasi  elisitor  ISP  dan sukrosa  berpengaruh  terhadap  mutu kecambah koro komak.
2. Lama perkecambahan yang terbaik dalam meningkatkan  mutu  kecambah  koro komak yaitu 1 hari perkecambahan.
3. Kombinasi  perlakuan  terbaik  adalah A2B4  (elisitor sukrosa  konsentrasi  1.500 ppm)  pada  1  hari  perkecambahan menghasilkan  kecambah  koro  komak dengan mutu terbaik, yaitu kadar vitamin C  sebesar  1,4090  mg/g;  kadar  β-karoten 0,2160  µg/g;  total  polifenol  0,0408 µmol/mg;  aktivitas  antioksidan  2,2959 µmol/g;  kadar  HCN  (zat  racun)  0,1301 mg/g;  kadar  air  43,8729  %;  kadar  abu 2,3357%;  kadar  protein  27,58%;  kadar lemak 1,19%; kadar karbohidrat 25,02%;
92 94 96 98 100 ISP Sukrosa BSA 96.25 94.91 100 % 0 50 100 50.37 2.06 22.28 1.00 24.29 43.87 2.34 27.58 1.19 25.02
%
ISP Sukrosa
daya  cerna  pati  95,86%;  dan  daya  cerna protein 94,91%.

## DAFTAR PUSTAKA
Andarwulan,  N.,  Fardiaz,  Wattimena,  dan Shetty.  1999.  Antioxidant  Activity Associated  with  Lippid  an  Phenolik Mobilization  During  Seed  Germination of  Pangium  Edule  Reinw.  J.  Agric. Food Chem, 47: 3158-3163.
Apriliana, Reny. 2007. Studi Optimasi Proses Perkecambahan Koro pedang
(Canavalia  ensiformis  (L.)  DC.)  Kajian
Kondisi Perkecambahan dan Konsentrasi  Elisitor  Sukrosa.  Jember  :
Fakultas Teknologi Pertanian
Universitas Jember.
Bravo,  L.  1998.  Polyphenols  :  Chemistry, Dietary Sources, Metabolism, and Nutritional Significance. Nutrition Reviews 56 : 317-332. Contin, A., Heijden, R. V. D., dan Verpoorte, R.  1999.  Effects  of  Alkoloid  Precusor Feeding and Elicitation on The
Accumulation  of  Secologanin  in  a Catharanthus  roseus  Dell  suspension culture.  Plant  Cell  Tiss.  &  Org.  Cult., 56: 111-119.
Fitriani,  A.  2003.  Kandungan  Ajmalisin  pada Kultur Kalus Catharanthus roseus (L.)
G.  Don  setelah  Dielisitasi  Homogenat
Jamur Pythium Aphanidermatum Edson  Fitzp.  Tesis  Magister,  Jurusan
Biologi.  Bandung:  Institut  Teknologi
Bandung
Gadow,  A.,  Joubert,  E.,  dan  Hansman,  C.  F. 1997.  Comparison  of  The  Antioxidant Activity  of  Aspalathin  with  That  of Other  Plant  Phenols  of  Rooibos  Tea (Aspalathin  Linearis).  J.  Agric.  Food Chem, 45: 832-630.
Gasperz,  V.  1991.  Metode  Rancangan Percobaan  untuk  Ilmu-Ilmu  Pertanian. Bandung: CV. Armico Maesen,  L.  J.  G.  dan  Somaatmadja.  1993. Prosea  Sumber  Daya  Nabati  Asia Tenggara  I.  Jakarta:  PT.  Gramedia Pustaka Utama.
Novijanto,  Noer.  1996.  Pengaruh  Suhu  dan
Lama  Perendaman  terhadap  Mutu Kecambah.  Jember:  Badan  Penelitian Universitas Jember Randhir,  Reena,  Yuan-Tong  Lin  dan  Kalidas Shetty. 2004. Phenolics, Their Antioxidants and Antimicrobial Activity ini Dark Germinated Fenugreek  Sproust  in  Response  to Peptide and Phytochemical Elicitors.http://www.healthyeatingclub. com/APJCN/Volume13/Vol13.3/finishe d/Randhir/pdf. Rubatzky,  V.  E.  dan  Yamaghuci,  M.  1998. Sayuran  Dunia:  Prinsip,  Produksi,  dan Gizi, Jilid 2. Bandung: Institut
Teknologi Bandung.
Rusdianto,  A.  S.  2004.  Karakterisasi  Biji  dan Protein Koro Komak (Lablab purpureus (L)  Sweet)  sebagai  Sumber  Protein. Jember: Jurusan Teknologi Hasil
Pertanian Fakultas Teknologi Pertanian,
Universitas Jember.
Setyati,  Dwi.  1999.  Perkecambahan  Biji
Tumbuhan  Penyusunan VegetasiPantai. Jember:  Badan  Penelitian,  Universitas Jember.
Soetopo,  L.  2002.  Teknologi  Benih.  Jakarta:
PT. Raja Grafindo Persada.
Subagio,  A.,  Yuli,  W.,  dan  Wiwik,  S.  W. 2002.  Protein  Albumin  dan  Globulin dari  Beberapa  Jenis  Koro-Koroan  di Indonesia.  Jurnal  Seminar  Nasional PATPI, 30-31 Juli: 135-140. Malang.
Sudarmadji, S. 1984. Analisa Bahan Makanan dan  Pertanian.  Yogyakarta:  Liberty bekerjasama dengan Pusat Antar Universitas pangan dan Gizi Universitas Gadjah Mada. Sudarmadji,  S.,  Haryono,  B.,  dan  Suhardi. 1997. Prosedur Analisa Bahan Makanan  dan  Pertanian.  Yogyakarta: Liberty. Supriyanto.  1998.  Tepung  Kecambah  sebagai Produk Alternatif Biji Kacang- Kacangan  Berkulit  Keras.  Yogyakarta: Prosiding Seminar Nasional PATPI.
Susanto,  T.  dan  Saneto,  B.  1994.  Teknologi
Pengolahan  Hasl  Pertanian.  Surabaya:
PT. Bina Ilmu.
Sutardi.  1998.  Perubahan  Kadar  Asam  Fitat dan Aktivitas Fitase selama Perkecambahan Beberapa Jenis Kacang-Kacangan. Yogyakarta: Prosiding Seminar Nasional PATPI. Tejasari,  Sukatiningsing,  dan  Praptiningsih,
Y. 2006. Evaluasi Gizi dalam
Pengolahan. Jember: Jurusan Teknologi Hasil  Pertanian  Fakultas  Teknologi
Pertanian Universitas Jember. Yuliana,  A.  2003.  Pengaruh  Penambahan Polisakarida  sebagai  Elisitor  untuk Produksi Antioksidan
selama
Germinasi  Biji  Kacang  Tunggak  dan Kedelai Hitam. Bogor: IPB.