Majalah Farmaseutik Vol. 14 No. 1: 1-10 ISSN-p : 1410-590x ISSN-e : 2614-0063 Pengaruh Kombinasi Ekstrak Tithonia diversifolia (Hemsley)  A.Gray  dan Curcuma  domestica Val.  pada Fungsi Hati dan Ginjal Tikus  Model Kanker
Effect  of  Extract  Combination Tithonia  diversifolia (Hemsley)  A.Gray  and Curcuma domestica Val. In Function of Heart and Kidney Rats of Cancer Model Angga Anugerah 1 , Woro Rukmi Pratiwi 2 , Mae Sri Hartati Wahyuningsih 2*
1. Mahasiswa Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran UGM
2. Departemen Farmakologi dan Terapi, Fakultas Kedokteran UGM
Corresponding author: Mae Sri Hartati Wahyuningsih: Email: maeshw@ugm.ac.id

## ABSTRAK
Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray dan rimpang kunyit ( Curcuma domestica Val.) memiliki senyawa bioaktif yang dapat dijadikan kandidat obat antikanker. Penelitian in vivo tentang efek kombinasi dua tanaman tersebut terhadap fungsi hati dan ginjal belum pernah dilakukan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengkaji  efek  campuran  ekstrak  etanol T. diversifolia (Td) dan C. domestica (Cd) terhadap fungsi hati dan ginjal tikus betina Sprague Dawley (SD) yang telah diinduksi dengan DMBA. Menggunakan desain quasi experimental. Sebanyak 31 ekor tikus betina dibagi menjadi 6 grup yaitu grup 1 (sehat); grup 2 (Positif); grup 3 (Kanker); grup 4 (Td+Cd dosis 1); grup 5 (Td+Cd dosis 2); grup 6 (Td+Cd dosis 3). DMBA yang digunakan untuk menginduksi kanker payudara diberikan 2 kali dalam satu minggu selama lima minggu. Setelah kanker payudara dapat dipalpasi muncul, kombinasi Td+Cd  diberikan  2  kali  sehari  selama  4  minggu  per  oral  dengan  dosis  masing-masing 40:150 mg/kgBB, 80:150 mg/kgBB, dan 160:150 mg/kgBB. Grup 2 (doxorubicin diberikan 0,032mg/20gBB intraperitoneal sekali dalam sehari selama 4 minggu). Tes fungsi hati dan ginjal dilakukan pada hari 0 dan hari terakhir dengan parameter SGOT, SGPT, Ureum, dan Kreatinin. Perbandingan hasil tes fungsi hati dan ginjal antara pemberian kombinasi Td+Cd dengan  perbandingan  dosis  40:150  mg/kgBB,  80:150  mg/kgBB,  160:150  mg/kgBB  dan grup  kontrol  menunjukkan  hasil  yang  tidak  berbeda  signifikan.  Parameter  yang  diukur adalah SGOT (p=0,847), SGPT (p=0,237), Creatinine (p=0,671), Ureum (p=459). Pemberian kombinasi ekstrak etanol kembang bulan dan rimpang kunyit dengan perbandingan dosis 40:150 mg/kgBB, 80:150 mg/kgBB, 160:150 mg/kgBB dan grup kontrol tidak memiliki efek signifikan terhadap fungsi hati dan fungsi ginjal.
Kata kunci : Tithonia diversifolia , Curcuma domestica, DMBA, fungsi hati, ginjal.

## ABSTRACT
Both Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray leaves and ( Curcuma domestica Val.) rhizome have bioactive compound which  are an anticancer drug candidate. However,  in vivo study about the effect of those to liver function and kidney function has never been carried  out.  The  aim  to  determine  the  effect  of  ethanol  extract T.  diversifolia (Td)  and C.domestica (Cd)  combination  to  Sprague  Dawley  female  rats  liver  and  kidney  function which have been induced with DMBA. This research used a quasi experimental study design. There were 31 female rats divided into 6 groups; healthy group; doxorubicin group;  breast cancer  model;  extract  combination  I  (n=5),  extract  combination  II  (n=5),  extract combination III (n=5). DMBA used to initiate breast cancer was given twice a week for 5 weeks. After palpable breast cancer was showed up, the combination extract groups were
given ethanol extract combination of kembang bulan leave and turmeric rhizome twice a day  for  4  weeks  orally  with  dosage  ratio  40:150  mg/kgBW,  80:150  mg/kgBW,  160:150 mg/kgBW, respectively. Doxorubicin group was given 0,032mg/20gBW intraperitoneally once a day for 4 weeks. Liver and kidney function test were conducted on day 0 and the last day with SGOT, SGPT, Ureum and Creatinine level as the parameters measured. Comparison of liver and kidney function test results between extract combination groups and control groups showed no significant difference. The parameters measured were SGOT (p=0,847), SGPT  (p=0,237),  Creatinine  (p=0,671),  Ureum  (p=459).  Extract  combination  groups compared to control groups have no significant effect to liver and kidney function.
Keyword : Tithonia diversifolia, Curcuma domestica , DMBA, liver function, kidney.

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  negara  tropis yang memiliki keanekaragaman hayati yang luar  biasa,  sekitar  1300  tumbuhan  dari 40.000 jenis dapat bermanfaat sebagai obat
(Rustam et al., 2007). Sejak zaman dahulu, masyarakat  Indonesia  telah  mengenal berbagai  macam  tanaman  yang  dapat dikonsumsi  sebagai  sumber  pengobatan berbagai  penyakit  dengan  cara  mencoba- coba.  Salah  satunya  adalah  tanaman kembang  bulan  yang  telah  banyak digunakan  untuk  pengobatan  berbagai macam  penyakit  (Obafemi et  al., 2006). Beberapa  penelitian  menunjukkan  bahwa ekstrak  etil  asetat  dan  ekstrak  etanol kembang  bulan  mampu  menghambat proliferasi sel kanker kolon (Col-2), dan anti leukemia  (Goffin et  al., 2002;  Gu et  al., 2002). Tagitinin  C  isolasi  dari  kembang bulan  paling  aktif  dan  selektif  pada  sel kanker WiDr dengan IC50=0,585 ug/mL, IS. 69,  015  (Wahyuningsih et  al .,2015). Rimpang  Kunyit  juga  sudah  digunakan sejak lama secara empiris oleh masyarakat untuk  berbagai  macam  pengobatan, termasuk penyakit kanker. Kunyit memiliki kandungan  senyawa  aktif  kurkuminoid yang  terdiri  dari  kurkumin,  desmetoksi kurkumin, trietil kurkumin, dan bisdesmetoksi kurkumin (Meiyanto, 1999). Beberapa  bukti  menunjukkan  bahwa kurkumin  berperan  secara  fungsional untuk  siklooksigenase-  dan  -lipoxygenase katalis  arachidonic  dan  metabolisme  asam
linoleat  dalam  perkembangan  kanker (Furstenberger et  al., 2007).  Kurkumin memiliki  aktivitas  antikanker  terhadap adenomous dengan kemungkinan memodulasi  fungsi  imun  yang  dimediasi oleh  limfosit  (Churchill,  2000).  Kurkumin dan genistein juga telah dilaporkan sebagai inhibitor yang baik terhadap pertumbuhan sel-sel tumor payudara manusia (Verma et al., 1998). Didalam  program  pengembangan obat  bahan  alam,  pengujian  in  vivo  pada hewan  coba  merupakan  syarat  mutlak sebelum  obat  bahan  alam  diberikan  pada manusia.  Pengujian  invivo  yang  dilakukan berupa  uji  aktivitas  farmakologi  untuk mengetahui  khasiat  dari  bahan  alam tersebut, dilanjutkan dengan uji keamanan untuk  mengetahui  pengaruh  bahan  alam tersebut terhadap tubuh hewan coba.
Berdasarkan  uji  aktivitas  campuran ekstrak T.  diversifolia dan C.  domestica terhadap  nodul  dan  berat  badan  Tikus model  kanker,  diperoleh  hasil  bahwa campuran  Td  dan  Cd  dosis  160/150 mgKgBB  dapat  mengurangi  volume  tumor dibandingkan  dengan  kontrol  tanpa treatmen  walau  perbedaannya  tidak signifikan  (Halimah et  al., 2017).  Melihat potensi kedua ekstrak tersebut, maka efek toksik  campuran  ekstrak  Td  dan  Cd  pada hewan coba model kanker payudara perlu dilakukan  untuk  mengkaji  bagaimanakah toksisitas campuran ekstrak tersebut pada organ liver dan ginjal tikus model.

## METODOLOGI
Jenis  penelitian  adalah  penelitian eksperimental.  Penelitian  dilakukan  pada tikus Sprague Dawley yang diinduksi 7,12- dimethylbenz[a]  antrasene,  kemudian diberikan perlakuan dengan ekstrak etanol T.  diversifolia (Hemsley)  A.Gray  dan Curcuma domestica Val.
Alat dan bahan Vakum  rotatory  evaporator,  corong Buchner, cawan porselin, mortar, stamper, neraca  (alat  timbang  digital),  sentrifuge, vortex, alumunium foil, tabung reaksi, spet, syringe  sonde,  kandang  tikus,  gloves, masker, tissue, kamera. Tabung berheparin 3  mL,  tabung  hematokrit,  syringe  sonde, kandang tikus, Ependorf 1,5 mL.
Tanaman Kembang Bulan dan Kunyit diambil  dari  Balai  Besar Litbang  Tanaman Obat  dan  Obat  Tradisional  (B2P2TO-OT) Tawangmangu pada bulan Januari 2013 dan keduanya  telah  dideterminasi  di  Bagian Biologi  Farmasi  Fakultas  Farmasi  UGM dengan  No  BF/28/  Ident/Det/I/2013  dan No.  BF/33/Ident/  Det/II/2013,  Tikus Sprague  Dawley yang  diperoleh  dari  LPPT Universitas  Gadjah  Mada  Yogyakarta. Etanol  (Merck),  suspensator  1%  (PGA), minyak  jagung,  air,  7,12-dimethylbenz [a]antrasene  (DMBA) Sigma  Chemical,  Co, USA),  formaldehide,  doksorubisin  1  vial, pakan tikus.
Cara penelitian Pembuatan ekstrak kembang bulan dan rimpang kunyit
Serbuk  daun  kembang  bulan  (1  kg) diekstraksi  secara maserasi dengan  etanol 70% (2 liter). Kemudian didiamkan selama 24  jam  pada  suhu  kamar  sambil  sesekali diaduk. Maserat yang ada disaring dengan corong  Buchner  sehingga  diperoleh maserat  dan  ampas.  Ampas  dimaserasi kembali  menggunakan  cara  yang  sama seperti  di  atas  sampai  3x  maserasi.
Maserat/Sari diuapkan menggunakan vakum rotatory evaporator sampai diperoleh  ekstrak  agak  kental  dan
dituangkan pada cawan porselin. Kemudian diuapkan sampai ekstrak kental. Pembuatan ekstrak kunyit juga menggunakan prosedur yang sama dengan pembuatan ekstrak kembang bulan.

## Pembuatan sediaan suspensi
Ekstrak  etanol T.diversifolia dan C. domestica ,  setelah  ditimbang  masing- masing  dimasukkan  dalam  mortar  dan stamfer.  Ditambahkan  suspensator  1% (PGA)  dan  air  sedikit  demi  sedikit  sampai homogen  sehingga  diperoleh  volume suspensi yang akan dipakai.
Perlakuan terhadap hewan coba: Aklimatisasi tikus Sprague-Dawley (SD) Tikus SD diaklimatisasi selama 7 hari dengan  diberi  makan  dan  minum  ad libitum. Sebelum diberikan sediaan uji tikus SD dipuasakan selama kurang lebih 12 jam, namun tetap diberi minum secukupnya.
Pembuatan model tikus kanker payudara Tiga  puluh  ekor  tikus  betina  galur Sprague  Dawley,  umur  4  minggu  dengan berat  70±20  g. Senyawa DBMA,  ditimbang dengan  dosis  20  mg/kgBB  dan  dilarutkan dalam  minyak  jagung  ( corn  oil )  dengan bantuan  vortex  hingga  diperoleh  larutan jernih  dan  homogen.  Kadar  DMBA  dalam minyak  jagung  yang  disarankan  adalah  4 mg/mL. Volume DBMA yang diberikan pada hewan  coba  adalah  (BB  tikus/1000)  x (20/kadar DBMA). Larutan DBMA diberikan 2 kali seminggu selama 5 minggu. Pengelompokan hewan coba Sebanyak  30  ekor  tikus  SD  dibagi dalam  6  kelompok,  masing-masing  terdiri dari  3-5  ekor  tikus  dengan  pembagian kelompok sebagai berikut: Kelompok 1 :  Kelompok  tikus  sehat diberi  pakan  standar  dan  air  secara  ad libitum. Kelompok 2 :  Kelompok  tikus  sakit (induksi   DMBA)   diberipakan  standar  dan air secara ad libitum.
Kelompok 3 :  Kelompok  tikus  sakit  dan diberi  obat  kanker  doksorubisin  1  kali perhari  0,032  mg/20  g  BB  secara  intra peritoneal selama 4 minggu. Kelompok 4 :  Kelompok  tikus  sakit  +
Campuran  ekstrak T.  diversifolia dosis  (40 mg/kgBB)  dan C.  domestica dosis  (150 mg/kgBB) 2x sehari selama 4 minggu. Kelompok 5 :  Kelompok  tikus  sakit  + Campuran  ekstrak T.  diversifolia dosis  (80 mg/kgBB)  dan C.  domestica dosis  (150 mg/kgBB) 2x sehari selama 4 minggu. Kelompok  6  :  Kelompok  tikus  sakit  + Campuran ekstrak T. diversifolia dosis (160 mg/kgBB)  dan C.  domestica dosis  (150 mg/kgBB) 2x sehari selama 4 minggu.
Penentuan dosis dan penyiapan doksorubisin Dosis  doksorubisin  untuk  tikus  SD adalah  8  mg/kgBB  (=  0,16  mg/20  gBB) sekali pemberian. Dosis tersebut juga dapat diberikan 5 kali pemberian (5 hari dalam 1 minggu). Jadi setiap kali pemberian 0,16 : 5 = 0,032  mg/20 g BB (Wahyuningsih et  al., 2012).
Pemeriksaan fungsi hati dan ginjal Pada  hari  ke  0  dan  terakhir,  hewan coba  diambil  darahnya  melalui  v. retrorbitalis  sebanyak  2  mL  untuk pemeriksaan darah rutin, fungsi ginjal, dan fungsi hepar
Analisis hasil Data  dari  kelompok  perlakuan  (4,5, dan  6)  dan  kelompok  kontrol  (1,2,  dan  3) dilihat  normalitas  datanya  dengan  uji Kolmogorov-Smirnoff. Kemudian kelompok perlakuan  (4,5,  dan  6)  dibandingkan dengan kelompok kontrol (1,2, dan 3) lalu dianalisis  dengan  uji  statistik  One  Way Anova (bila sebaran data normal), atau uji Kruskal  Wallis  (bila  sebaran  data  tidak normal).  Semua  perhitungan  analisis statistik  di  atas  menggunakan  program SPSS version 19 for Windows.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pemberian ekstrak kombinasi Td dan Cd terhadap fungsi hepar
Penilaian  fungsi  hepar  dilakukan dengan pengambilan darah tikus setelah 4 minggu pasca pemberian perlakuan. Darah diambil melalui v. retrorbitalis sebanyak 2 mL.  Kemudian  di  uji  fungsi  hepar  di Laboratorium  Patologi  Klinik  Fakultas Kedokteran UGM. Fungsi hepar dinilai dari kadar SGOT dan SGPT dalam plasma. Kadar SGOT dan SGPT sangat sensitif dan reliabel untuk  menguji  fungsi  dan  kelainan  hepar (Ghany et al ., 2010). Berdasarkan uji Kolmogorov- Smirnov,  data  kadar  SGOT  dan  SGPT memiliki  sebaran  normal.  Hasil  uji normalitas  data  kadar  SGOT  dan  SGPT menghasilkan  nilai  signifikansi  (p  >  0,05). Selanjutnya  uji  homogenitas  dengan  uji Levene, dan hasilnya data kadar SGOT (p <
0.05)  yang  berarti  data  tidak  homogen. Untuk data kadar SGPT (p > 0,05) hasilnya homogen.  Oleh  Karena  itu,  data  SGPT dianalisis  dengan  uji  one-way  ANOVA sedangkan  data  SGOT  akan  dianalisis dengan uji Kruskal-Wallis (Tabel I).
Berdasarkan  analisis  (Tabel  I), diketahui  tidak  ada  peningkatan  yang bermakna pada kadar SGOT maupun SGPT antara  kelompok  perlakuan  setelah diberikan  ekstrak  kombinasi  kembang bulan dan rimpang kunyit (p > 0,05). Hasil pengukuran kadar SGOT dan SGPT tersebut dianalisis secara statistik dengan Post Hoc LSD Test dan Post Hoc Kruskal Waliis Test dengan taraf kepercayaan 95 % (signifikansi  =  0,05)  untuk  mengetahui perbedaan  antar  kelompok.  Analisis  Post Hoc LSD Test digunakan untuk data kadar SGPT  (sebaran  dan  homogenisasi  normal) sedangkan analisis Post Hoc Kruskal-Wallis digunakan untuk data kadar SGOT (sebaran dan homogenisasi tidak normal).
Berdasarkan  analisis  (Tabel  II), diketahui tidak  terdapat  peningkatan  yang bermakna       pada     kadar     SGOT      antar
kelompok  perlakuan  setelah  diberikan ekstrak  kombinasi  kembang  bulan  dan rimpang kunyit (p > 0,05).
Berdasarkan (Tabel III), kelompok V
terdapat  peningkatan  yang  bermakna dibandingkan  dengan  kelompok I  (kontrol sehat)  kadar  SGPT.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  ada  pengaruh  pemberian  ekstrak etanol  kombinasi  kembang  bulan  dan kunyit  terhadap  kadar  SGPT.  Kelompok  V juga  diketahui  terdapat  peningkatan  yang bermakna dibandingkan dengan kelompok III (kontrol sakit). Namun bila dibandingkan dengan kelompok II, IV, V dan VI  tidak  berbeda  signifikan.  Hal  ini
menunjukkan  bahwa  pada  kelompok  V memberikan  pengaruh  yang  sama  dengan kelompok II, IV, V dan VI.
Pemberian ekstrak kombinasi Td dan Cd terhadap fungsi ginjal
Penilaian  fungsi  ginjal  dilakukan sama  dengan  penilaian  pada  fungsi  hepar. Perbedaan  disini  hanya  kadar  yang  diuji adalah  kadar  kreatinin  dan  ureum  dalam plasma.  Konsentrasi  kreatinin  dalam plasma  pada  individu  sehat  umumnya konstan, tidak terpengaruh oleh jumlah air yang diminum, beban kerja, dan kecepatan produksi  urin  (Sumaryono et  al .,  2008).
Tabel I. Analisis Fungsi Hepar (SGOT dan SGPT) pada kelompok perlakuan.
Variabel Kelompok pvalue I II III IV V VI SGOT b 116,5 78,00 99,00 215,00 115,00 105,50 0,847 (93- 180) (54- 346) (69- 165) (89- 341) (52- 161) (55- 154) SGPT a 49,33 41,00 49,60 34,50 33,20 41,2 0,237 ±6,9 ±11,9 ±16,77 ±10,6 ±3,76 ±19,6 SGOT  : serum  glutamic-oxaloacetic  transaminase ;  SGPT  : serum  glutamic-pyruvic transaminase ; a : data dinyatakan dalam mean ±SD, nilai p>0,05; b : data dinyatakan dalam median (min-max), nilai p<0,05 (Sumber: Anugerah, 2013)
Tabel II. Analisis Kadar SGOT dengan Post Hoc Kruskal-Wallis Kelompok I II III IV V VI I - II 0,584* - III 0,273* 0,754* - IV 1,000* 0,439* 0,439* - V 0,584* 0,602* 0,917* 0,439* - VI 0,201* 0,907* 0,754* 0,439* 0,917* - ** Berbeda signifikan (p<0,05); *Tidak signifikan (p>0,05) Tabel III. Analisis Kadar SGPT dengan Post Hoc LSD Test Kelompok I II III IV V VI I - II 0,272* - III 0,972* 0,278* - IV 0,151* 0,531* 0,154* - V 0,040** 0,324* 0,045** 0,900* - VI 0,345* 0,878* 0,349* 0,459* 0,257* - ** Berbeda signifikan (p<0,05); *Tidak signifikan (p>0,05)
Peningkatan kadar kreatinin dalam plasma selalu mengindikasikan adanya penurunan ekskresi  yang  disebabkan  oleh  adanya gangguan  fungsi  ginjal  (Sumaryono et  al ., 2008).  Gangguan  fungsi  ginjal  berdampak konsentrasi  urea  plasma  akan  meningkat karena  adanya  penurunan  proses  filtrasi glomerulus  (Anonime et  al .,  2006  disitasi dari Sumaryono et al ., 2008). Berdasarkan uji Kolmogorov- Smirnov,  data  kadar  Ureum  dan  Kreatinin memiliki  sebaran  yang  normal.  Hasil  uji normalitas data kadar Ureum dan Kreatinin menghasilkan  nilai  signifikansi  (p  >  0,05) maka data terdistribusi normal. Selanjutnya diuji  homogenitas  dengan  uji  Levene, hasilnya data kadar Ureum (p < 0.05) yang berarti  data  tidak  homogen.  Untuk  data kadar Kreatinin (p > 0,05) yang berarti data homogen.  Oleh  Karena  itu,  data  Kreatinin akan dianalisis dengan uji one-way ANOVA sedangkan  data  Ureum  akan  dianalisis dengan uji Kruskal-Wallis (Tabel IV).
Berdasarkan  analisis  (Tabel  IV), diketahui tidak terdapat peningkatan yang bermakna    pada   kadar  kreatinin   maupun
ureum antara kelompok perlakuan setelah diberikan  ekstrak  kombinasi  kembang bulan dan rimpang kunyit (p > 0,05).
Berdasarkan  analisis  (Tabel  V), menunjukkan bahwa kelompok I hingga VI tidak ada peningkatan yang bermakna (p > 0,05).

## Pembahasan
Penelitian  ini  dilakukan  untuk mengetahui  pengaruh  ekstrak  etanol T. diversifolia (Td)  dan C.  domestica (Cd) terhadap  fungsi  hati  dan  ginjal.  Hasil  ini menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol kombinasi  Td  dan  Cd  tidak  berpengaruh secara signifikan terhadap fungsi hepar dan ginjal.  Pada  (Tabel  I),  terlihat  bahwa  nilai tengah SGOT antara kelompok kontrol dan kelompok  perlakuan  terjadi  peningkatan. Namun        peningkatan      SGOT     tersebut tidak      menunjukkan     peningkatan    yang signifikan  (p>0,05).  Peningkatan  kadar SGPT terlihat bahwa rata-rata kadar SGOT antara  kelompok  kontrol  dan  perlakuan cenderung sama. Kadar normal SGPT   dan SGOT  secara  berurutan  adalah sekitar    26-
Tabel IV. Analisis Fungsi Ginjal (Kreatinin dan Ureum) pada Kelompok Perlakuan
Variabel Kelompok pvalue I II III IV V VI Kreatinin a 0,76 ±0,08 0,77 ±0,09 0,68 ±0,13 0,78 ±0,07 0,67 ±0,08 0,77 ±0,08 0,671 Ureum b 28,46 (26,1- 30,0) 27,90 (20,7- 29,1) 28,40 (20,7- 33,9) 27,01 (25,8- 28,2) 22,17 (14- 35,4) 24,8 (19,9- 28,5) 0,459
a data dinyatakan dalam mean ±SD,  nilai p>0,05; b data dinyatakan dalam median (min- max), nilai p<0,05 (Sumber: Anugerah, 2013)
Tabel V. Analisis Kadar Kreatinin dengan Post Hoc LSD Test Kelompok I II III IV V VI I - II 0,891* - III 0,286* 0,251* - IV 0,819* 0,901* 0,320* - V 0,253* 0,223* 0,939* 0,294* - VI 0,893* 0,995* 0,276* 0,908* 0,247* - ** Berbeda signifikan (p<0,05); *Tidak signifikan (p>0,05)
120    U/l     dan     69-191    U/l. Berdasarkan (Tabel VI), menunjukkan  bahwa  kelompok  VI  ada peningkatan bermakna dibandingkan dengan  kelompok  I  (kontrol  metode).  Hal ini  menunjukkan  bahwa  ada  pengaruh pemberian  ekstrak  etanol  kombinasi kembang bulan dan kunyit terhadap kadar ureum (p > 0,05).
Berdasarkan  kadar  normal  tersebut maka  rata-rata  kadar  SGPT  hewan percobaan, semua kelompok masih normal dan  untuk  nilai  tengah  SGOT  hewan percobaan semua kelompok masih normal kecuali  kelompok  IV  yang  mengalami peningkatan  sebesar  113  %  dari  ambang batas atas range normal. Peningkatan pada kelompok  IV  ini  diketahui  disebabkan organ  hepar  tikus  sudah  rusak  sebelum dilakukannya  uji  perlakuan.  Hasil  analisis kadar SGOT setelah diuji statistik post hoc Kruskal-Wallis pada (Tabel II) menunjukkan  bahwa  pemberian  ektrak etanol  kombinasi  Td  dan  Cd  tidak mempengaruhi kadar SGOT tikus dibandingkan dengan kelompok kontrol. SGOT singkatan dari serum glutamic- oxaloacetic  transaminase, dapat  juga disebut  AST  ( aspartate  aminotransferase ). Enzim SGOT dapat ditemukan di beberapa organ  dan  jaringan,  diantaranya  adalah hepar,  otot  skelet  dan  sel  darah  merah. Peningkatan  SGOT  tidak  spesifik  untuk gangguan  yang  terjadi  pada  hepar  saja. Peningkatan  yang  berasal  dari  sumber nonhepatik  saat  ini  sangat  sering  dibahas. Peningkatan SGOT yang berasal dari hepar disebabkan  oleh  beberapa  derajat  cedera
akut  sel  hepar.  SGOT  dilepaskan  atau  di sekresikan  dari  sel  yang  mengalami kerusakan.  Pada  cedera  sel  hepar  yang minimal,  kadar  SGOT  hanya  sedikit  atau minimal peningkatannya atau masih dalam batas  kadar  yang  normal.  Terdapat kelompok  besar  penyakit  umum  dengan peningkatan SGOT yang sedikit dan sedang (secara acak didefinisikan sebagai peningkatan yang kurang dari 10 kali lipat dari  batas  atas  nilai  normal).  Diantaranya adalah  hepatitis  akut  saat  fase  recovery, hepatitis kronis, sirosis atau alcoholic liver disease,  kongesti  pasif  hepar,  obat-induksi disfungsi hepar, metastatik tumor ke hepar, obstrusi saluran bilier ekstrahepatik dalam jangka waktu yang lama, infeksi mononucleosis,  infeksi  cytomegalovirus, dan  perlemakan  hepar  (Ravel,  1995) Kondisi yang disebutkan sebelumnya, pada sedikit  pasien  dengan  sirosis,  kongesti hepar,  infeksi  mononucleosis  dan  obat- induksi cedera sel hepar, kadar SGOT dapat mencapai 20 kali lipat dari batas atas kadar normal.  Untuk  pasien  dengan  metastasik tumor  ke  hepar,  peningkatan  kadar  SGOT dapat mencapai 5 kali lipat dari batas atas kadar normal (Ravel,1995). SGPT ( Serum glutamic-pyruvic transaminase )  dengan  nama  lain  SGPT adalah  ALT  (Alanine  Aminotransferase) setelah  diuji  statistik  post  hoc  LSD  pada (Tabel  III) menunjukkan  bahwa  kelompok V ada peningkatan bermakna dibandingkan dengan kelompok I (kontrol metode) dan III (kontrol  postif)  (p  <  0,05).  Hal  ini menunjukkan  bahwa  ada  pengaruh pemberian   ekstrak   etanol   kombinasi   Td Tabel VI. Analisis kadar Ureum dengan Post Hoc Kruskal-Wallis Kelompok I II III IV V VI I - II 0,465* - III 0,855* 0,754* - IV 0,241* 0,699* 0,699* - V 0,201* 0,347* 0,465* 0,439* - VI 0,028** 0,251* 0,465* 0,245* 0,602* - ** Berbeda signifikan (p<0,05); *Tidak signifikan (p>0,05)
dan  Cd  terhadap  kadar  SGPT  dan  masih dikategorikan  masuk  dalam  range  yang normal.  SGPT  merupakan  enzim  yang banyak  ditemukan  di  liver.  Pada  ginjal, enzim ini ditemukan dalam jumlah sedang. Sedangkan  pada  otot  jantung  dan  otot skelet  ditemukan  dalam  jumlah  sedikit. Pada  umumnya,  kenaikan  SGPT  lebih banyak  disebabkan  kerusakan  pada  hati, walaupun  kerusakan  beberapa  jaringan  di organ  lain  dapat  mempengaruhi  kadar serum SGPT. Kadar SGPT meningkat secara paralel  (derajat  dan  frekuensi)  dengan kadar  SGOT  pada  kondisi  hepatitis  virus hepatitis,  infeksi  mononucleosis  dan induksi  obat  yang  berakibat  cedera  sel hepar secara akut. Terdapat kondisi dimana kadar SGPT tidak meningkat sesering SGOT. Kondisi  tersebut  terjadi  pada  acute alcoholic  liver  disease  atau  sirosis  aktif, kongesti pasif liver,  obstruksi dari saluran bilier  eksrahepatik  dalam  jangka  waktu yang lama dan metastatis tumor ke hepar. Pada  kondisi  tersebut  peningkatan  kadar SGPT  tidak  meningkat  tajam.  Kadar  SGPT sebagian besar untuk membantu menegaskan  penyebab  dari  kadar  SGOT meningkat dan membantu dalam differential  diagnosis  dari  penyakit  liver dengan cara melihat nilai ratio SGOT/SGPT (Ravel, 1995).
Berdasarkan  analisis  (Tabel  IV), terlihat bahwa rata-rata kreatinin dan nilai tengah ureum antara kelompok kontrol dan kelompok  perlakuan  cenderung  sama. Kadar  kreatinin  tidak  menunjukkan peningkatan  yang  signifikan  (p  >  0,05). Kadar  normal  kreatinin  dan  ureum  secara berurutan adalah sekitar 0,5-0,8 mg/dl dan 28,79-68,18  mg/dl  (Sumaryono et  al., 2008).  Berdasarkan kadar normal tersebut maka rata-rata kadar kreatinin tikus, semua kelompok  masih  normal  dan  untuk  niai tengah ureum tikus semua kelompok masih normal.
Berdasarkan analisis (Tabel V), hasil analisis  kadar  kreatinin  setelah  diuji  post hoc  LSD  test  menunjukkan  bahwa kelompok  IV,  V  dan  VI  tidak  terdapat
perbedaan  yang  bermakna  dibandingkan dengan kelompok kontrol (p > 0,05). Hal ini menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak etanol  kombinasi  Td  dan  Cd  tidak mempengaruhi  kadar  kreatinin  tikus dibandingkan dengan kelompok kontrol. Kreatinin merupakan bentuk anhidrida  dari  kreatin  yang  mayoritas disintesis  di  dalam  otot  melalui  proses dehidrasi non-enzimatik dari kreatin fosfat (Sumaryono, 2008). Selain di otot, kreatinin terdapat  didalam  otak  dan  darah  dalam bentuk fosfokreatin maupun bentuk bebas. Kreatinin diekskresikan seluruhnya kedalam  urin  melalui  filtrasi  glomerulus. Rusaknya  fungsi  ginjal  ditandai  dengan meningkatnya  kadar  kreatinin  (Pearce, 2000  (disitasi  dari  Sumaryono,  2008)).
Menurut Kee (2008) disitasi dari Hertanto (2012),  asupan  makanan  atau  minuman tidak mempengaruh kadar kreatinin.
Berdasarkan analisis (Tabel VI), hasil analisis kadar ureum setelah diuji post hoc Kruskal-Wallis  test  menunjukkan  bahwa kelompok VI terdapat peningkatan bermakna dibandingkan dengan kelompok kontrol  (p  <  0,05).  Hal  ini  menunjukkan terdapat  pengaruh  pemberian  ekstrak etanol kombinasi Td dan Cd terhadap kadar ureum. Namun demikian, semua perbedaan tersebut  masih  dikategorikan  normal karena tidak melebihi range normal ureum yang  telah  ditentukan  yaitu  28,79-68,18 mg/dl (Sumaryono et al., 2008). Ureum  merupakan  produk  akhir proses  katabolisme  asam  amino.  Pada proses  pemecahan  asam  amino  akan terbentuk  senyawa  amonia  yang  bersifat toksik. Setelah itu, senyawa amonia ini akan diubah menjadi senyawa yang tidak toksik, yaitu  dalam  bentuk  urea  melalui  siklus pembentukan urea. Urea dalam darah  akan direabsorpsi  kedalam  medulla  ginjal  dan segera  dieksresikan  melalui  urin.  Ureum dalam darah  dapat dihitung sebagai Blood Urea  Nitrogen  (Sumaryono et  al .,  2008). Menurut  Schrier  (2007)  disitasi  dari Hertanto (2012), terdapat beberapa kondisi klinis  lain  yang  menyebabkan  kesalahan
perkiraan  laju  filtrasi  glomerulus  yang dilihat  dari  kadar  ureum.  Kondisi  klinis yang pertama adalah volume ekstraseluler dalam  tubuh.  Keadaan  dehidrasi  cairan tubuh  akan  meningkatkan  kadar  ureum dalam darah karena proses reabsorbsi urea pada  ginjal  juga  meningkat.  Kedua,  kadar protein  dalam  pakan.  Protein  yang  tinggi dalam pakan akan meningkatkan pembentukan  urea  yang  merupakan produk  terakhir  dari  katabolisme  asam amino.  Ketiga,  terdapat  penyakit  liver  dan malnutrisi hebat. KESIMPULAN Kombinasi Ekstrak etanol T. diversifolia dan C.  domestica tidak berpengaruh terhadap fungsi hati dan ginjal tikus  betina  galur  SD  yang  telah  diinduksi DMBA (7,12-dimethylbenz[a] antrasene).

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terimakasih kepada  Fakultas  Kedokteran  UGM  yang telah  memberikan  bantuan  dana  melalui Hibah Dana Masyarakat, Fakultas Kedokteran UGM Tahun 2012.

## DAFTAR PUSTAKA
Anugerah  A.,  2013.,  Pengaruh  Pemberian Campuran Ekstrak Etanol Terstandar
Tithonia  diversifolia (Hemsley)  A.
Gray  dan Curcuma  domestica Val.
Terhadap  Fungsi  Hati  dan  Ginjal Tikus Betina Model Kanker Payudara [Skripsi] Fakultas Kedokteran UGM. Churchill  M.  2000.  Inhibition  of  intestinal tumors  by  curcumin  is  associated with  changes  in  the  intestinal immune  cell  profile. J  Surg  Res. 89:169-75. Fürstenberger G., Krieg P., Müller-Decker K., Habenicht  AJ.,  2007.  What  are cyclooxygenases  and  lipoxygenases doing  in  the  driver's  seat  of carcinogenesis? Int  J  Cancer ,  119: 2247-54.
Garcia A, Delgado G. 2006. Constituents
from Tithonia diversifolia . Ster eochemical  revision  of  2α  –
hydroxytirotundin. J.Mex. Chem. Soc, 50(4): 180-183 .
Goffin, E., Ziemon, E., Mol, P. D., Madureina,
M.  C.,  Martins,  P.,  Cunha,  A.  P.,
Philippe,  G.,  Tits,  M.,  Angenot,  L., Frederich,  M.  2002.  In  Vitro Antiplasmodial  Activity  of Tithonia diversivolia and  Identification  of  its Main Active Constituent: Tagitinin C. Planta Med , 68(6): 543-545. Gu,  J.  Q.,  Gills,  J.  J.,  Park,  E.  J.,  Mata- Greenwood,  E.,  Hawthorne,  M.  E., Axelrod,  F.  Charez,  P.  I.,  Fong,  H.  H., Methta, R. G., Pezzuto, J. M., Kinghor, J. 2002.  Sesquiterpenes  from Tithonia diversifolia with  potential  cancer chemopreventive activity. J Nat Prod , 65: 532 – 36. Halimah  WN.,  Pratiwi  WR.,  Wahyuningsih MSH., 2017,  Efek Kombinasi Ekstrak Tithonia diversifolia (Hemsley) A.GRAY  dan Curcuma  domestica Val. terhadap  Nodul  dan  Berat  Badan Tikus  Model Kanker, Majalah Farmaseutik, Inpress. Hertanto,  A.B.  2012.  Efek  Pemberian
Subkronis  Ekstrak  Etanol  Biji  Pala ( Mysristica fragans Houtt ) pada Kadar BUN  ( Blood  Urea  Nitrogen )  dan Kreatinin  Darah  Tikus  Jantan  Galur Wistar  [Skripsi].  Fakultas  Farmasi Universitas Ahmad Dahlan, Yogyakarta. Meiyanto, E., 1999, Kurkumin Sebagai Obat Kanker: Menelusuri Mekanisme Aksinya  (Review), Indonesian  J. Pharm ., 10 (4), 224-236. Obafemi., C. A., Sulaimon., T. o., Akinpelu., D. A.,  Olugbade.,  2006.  Antimicrobial activity of extracts and a germacranolide-type  sesquiterpene lactone from Tithonia diversifolia leaf extract. Afr. J. Biotechnol, 5(12):1254- 8.
Ravel.,  R.  1995.  Clinical  Application  of Laboratory Data 6 th edition. USA.
Rustam,  E.,  Atmasari,  I.,  Yanwirasti.  2007.
Efek  Antiinflamasi  Ekstrak  Etanol Kunyit ( Curcuma domestica Val. ) pada Tikus  Putih  Jantan  Galur  Wist
JurnalSains  dan  Teknologi  Farmasi , 12(2) : 112-115. Sumaryono,  W.,  Wibowo,  A.E.,  Ningsih,  S., Agustini,  K.,  Sumarny,  R.,  Amri,  F., Winarno,  H.  2008.  Analisis  Urea- Kreatinin Tikus Putih Pasca Pemberian  Ekstrak  Buah  Mahkota Dewa  dan  Herba  Pegagan.  2008. Jurnal  Ilmu  Kefarmasian  Indonesia 6(1): 35-40. Verma  SP.,  Goldin  BR.,  Lin  PS.,  1998.  The inhibition of the estrogenic effects of pesticides and environmental chemicals by curcumin and isoflavonoids. Environ Health Perspect , 106: 807-12. Wahyuningsih  MSH.,  Wijayanti  MA., Budiyanto  A.,  Hanafi  M.  2015, Isolation  and  Identification  of Potential  Cytotoxic  Compound  from Kembang bulan [Tithonia diversifolia (Hemsley)  A.  Gray]  Leaves, Int  J
Pharm Pharm Sci . 7 (6): 298-301. Wahyuningsih  MSH.,  Pratiwi  WR.,  2012. Aktivitas  Antikanker  Ekstrak  Etanol Terstandar Tithonia diversifolia (Hemsley)  A.  Gray.  dan Curcuma Domestica Val.  pada  Tikus  Model Kanker Payudara Serta Toksisitasnya [Laporan  Penelitian].  Hibah  Dana
Masyarakat,  Fakultas  Kedokteran Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.