Website: https://jurnal.yudharta.ac.id/v2/index.php/Teknologi-Pangan
Licensed : Creative Commons Attribution 4.0 International License. (CC-BY)

## Pengayaan biskuit dengan fortifikasi fraksi tidak tersabunkan mengandung senyawa bioaktif multi komponen dari distilat asam lemak minyak sawit
Enrichment biscuits with fortification unsaponiable fraction contains bioactive compound from palm fatty acid distillate
Kgs Ahmadi 1)* , Teti Estiasih 2) , Wahyu Erwin Firmansyah 2)
1 Program Studi Teknologi Industri Pertanian, Universitas Tribhuwana Tungadewi, Malang, Jawa Timur
2 Jurusan Teknologi Hasil Pertanian, Universitas Brawijaya, Malang, Jawa Timur
* Email korespondensi: kgs.ahmadi@yahoo.com
Informasi Artikel: Dikirim: 03/06/2021; disetujui: 25/07/2021; diterbitkan: 28/09/2021

## ABSTRACT
Palm  Fatty  Acid  Distillate  (PFAD)  is  a  by  product  of  CPO  (crude  palm  oil)  physical refining.  PFAD  containing  multicomponent  bioactive  compounds  such  as  tocopherols, tocotrienols,  phytosterols,  and  squalene  which  accumulated  in  unsaponifiable fraction (UF) and can be separated by saponification. Utilization of bioactive compounds can be applied on food products by fortification into biscuits. The research aimed to determine the  effect  of  addition  level  of  UF  from  PFAD  on  physical  and  organoleptics  of  the biscuits  and  also  to  determine  chemical  characteristic  and  bioactive  compounds  from the  best  treatment  biscuit.  The  method  used  a  completely  randomized  design  with  one factor, namely the level of addition of the UF from PFAD consisted of 6 treatments and was  repeated  four  times.  Data  were  analyzed  using  Analysis  of  Variance  (ANOVA), then continued using the Duncan’s Multiple Range Test (DMRT) with significance level of 5%. The best treatment in this study was a treatment which contained 0.5% (w/w) of the UF from PFAD. The best biscuit had chemichal characteristics included those were the water content  1.81 ± 0.06%, 2.10 ± 0.06% ash content, 27.98 ± 0.54% fat content, 8.04  ±  0.13%  protein  content,  0.22  ±  0.02%  crude  fiber  content,  60.07  ±  0.66% carbohydrate content, 2.66 ± 0.00002% FFA, and 7.10 ± 0.19 mek/kg total  oxidation. The  best  biscuit  contained  bioactive  compounds  such  as  147.19  ppm  α–tocotrienol, 190.30  ppm  δ–tocotrienol,  68.091  ppm  ϒ–tocotrienol,  5,848.45  ppm  β–sitosterol, 143.97 ppm stigmasterol, 621.09 ppm campesterol, and squalene content 3,284.50 ppm. Keywords : Bioactive Compounds, Biscuits, Fortification, PFAD, UF

## ABSTRAK
Distilat  asam  lemak  minyak  sawit  (DALMS)  merupakan  produk  samping  dari  proses pemurnian  fisik  minyak sawit kasar atau CPO ( crude palm oil ). DALMS  mengandung senyawa  bioaktif  multikomponen  seperti  tokoferol,  tokotrienol,  fitosterol,  dan  skualen yang terakumulasi dalam  fraksi tidak tersabunkan (FTT) dan dapat dipisahkan  melalui proses  saponifikasi.  Pemanfaatan  senyawa  bioaktif  tersebut  dapat  diaplikasikan  pada produk  pangan  dengan  cara  fortifikasi  pada  biskuit.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  pengaruh  tingkat  penambahan  FTT  DALMS  terhadap  sifat  fisik  dan organoleptik  biskuit  serta  untuk  mengetahui  karakteristik  kimia  dan  senyawa  bioaktif biskuit  perlakuan  terbaik.  Metode  penelitian  yang  digunakan  adalah  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL)  dengan  1  faktor,  yaitu  tingkat  penambahan  FTT  yang  terdiri  dari  6 perlakuan dan diulang 4 kali. Data yang diperoleh dianalisis  menggunakan Analysis of
Variance (ANOVA)  dan  dilanjutkan  dengan Duncan  Multiple  Range  Test (DMRT) dengan taraf nyata 5%. Perlakuan terbaik pada penelitian ini yaitu pada biskuit dengan penambahan  FTT  DALMS  0.5%  (b/b).  Karakteristik  kimia  biskuit  terbaik  yaitu  kadar air 1.81 ± 0.06%, kadar abu 2.10 ± 0.06%, kadar  lemak 27.98 ± 0.54%, kadar protein 8.04 ± 0.13%, kadar serat kasar 0.22 ± 0.02%, kadar karbohidrat 60.07 ± 0.66%, ALB 2.66%,  total  oksidasi  7.10  ±  0.19  mek/kg.  Biskuit  perlakuan  terbaik  mengandung senyawa  bioaktif  antara  lain:  α–tokotrienol  sebesar  147.19  ppm,  δ–tokotrienol  sebesar 190.30  ppm,  ϒ–tokotrienol  sebesar  68.091  ppm,  β–sitosterol  sebesar  5,848.45  ppm, stigmasterol  sebesar  143.97  ppm,  dan  kampesterol  sebesar  621.09  ppm,  dan  kadar skualen sebesar 3,284.50 ppm.
Kata Kunci : Biskuit, Fortifikasi, DALMS, FTT, Senyawa Bioaktif

## PENDAHULUAN
Minyak  sawit  merupakan  komoditas hasil  perkebunan  yang  mempunyai  peranan cukup penting di Indonesia. Pada tahun 2009 produksi  minyak  sawit  dalam  bentuk  CPO ( Crude  Palm  Oil )  mencapai  21.39  juta  ton, meningkat  menjadi  27.8  juta  ton  pada  tahun 2013,  dan  diperkirakan  meningkat  5.47% menjadi  30.95  juta  ton  pada  tahun  2015 (Ulum  dan  Hariyanto,  2015),  dengan  luas area sebesar 11,44 juta hektar (Soependi dan Arianto,  2014).  Selama  proses  pemur-nian minyak kelapa  sawit dihasilkan distilat asam lemak  minyak  sawit  (DALMS)  pada  tahap deasidifikasi-deodorisasi yang masih mengandung  beberapa  senyawa  bioaktif multikomponen.  DALMS  yang  dihasilkan mencapai  5%  dari  berat  minyak  sawit (Zulkifli dan Estiasih, 2009).
Menurut Estiasih et al . (2013), DALMS  mengandung  senyawa  bioaktif multikom-ponen  yang  masih  belum  banyak dieksplor. DALMS mengandung asam  lemak dan  gliserida  sebanyak  96.1%,  senyawa bioaktif  seperti  tokoferol  dan  tokotrienol 0.48%, fitosterol 0.37%, skualen 0.76%, dan hidro-karbon lainnya 0.71%. Senyawa bioaktif  yang  terkumpul  dalam  DALMS dapat dimanfaatkan sebagai sumber senyawa bioaktif yang terakumulasi dalam fraksi tidak tersabunkan  (FTT)  dan  dapat  dipisah-kan melalui proses saponifikasi (Liu et al. , 2008). FTT dimanfaatkan sebagai sumber vitamin E (tokoferol dan tokotrienol), fitosterol, skualen,  pigmen,  dan  senyawa  hidrokarbon (Salimon el  al ,  2012).  Senyawa  biokatif dalam FTT DALMS secara umum
mempunyai efek hipokolesterolemik sehingga dapat mencegah penyerapan kolesterol  berlebih.  Dengan  demikian,  FTT berpotensi  sebagai  sumber  senyawa  bioaktif multikomponen  yang  dapat  bersinergi  untuk mengatasi penyakit dan masalah fisiologis.
Salah  satu aplikasi  FTT DALMS  yaitu dengan  cara  fortifikasi  pada  produk  pangan seperti  biskuit.  Biskuit  merupakan  makanan kecil ( snack ) yang biasanya dibuat dari bahan dasar tepung terigu atau tepung jenis lainnya. Biskuit  sifatnya  mudah  dibawa  karena volume  dan  beratnya  yang  kecil  dan  umur simpannya  relatif lama  (Hadi,  2007). Konsumsi  rata-rata  kue  kering  termasuk biskuit  di  kota  besar  dan  pedesaan  di Indonesia  mencapai  0.40  kg/kapita/tahun (Subagjo,  2007).  Oleh  karena  itu  biskuit memiliki  potensi  yang  cukup  besar  untuk dijadikan  produk  pangan  yang  difortifikasi zat  gizi  dari  FTT  DALMS.  Hal  tersebut didukung dengan kemudahan biskuit difortifikasi  zat  gizi  dan  didukung  oleh tingginya  tingkat  konsumsi  biskuit  di Indonesia.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui  pengaruh  tingkat  penambahan FTT  DALMS  terhadap  sifat  fisik  dan organoleptik  biskuit,  untuk  mengetahui konsentrasi terbaik pada tingkat penambahan FTT  DALM,  serta  untuk  mengetahui karakteristik  kimia  dan  senyawa  bioaktif biskuit perlakuan terbaik.

## BAHAN DAN METODE

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  pada  penelitian ini  yaitu  DALMS  yang  diperoleh  dari industry  pengolahan  CPO  PT.Salim  Ivomas Pratama  (Bimoli)  di  Surabaya.  Bahan saponifikasi yaitu asam askorbat, KOH 50%, etanol  96%,  heksana,  akuades,  dan  gas nitrogen.  Bahan  pembuatan  biskuit  terdiri dari  tepung  terigu,  margarin,  gula  halus, vanili, baking  powder ,  garam,  susu  bubuk, kuning  telur,  dan  FTT  DALMS.  Bahan analisis  kimia  terdiri  dari  petroleum  eter (PE), H 2 SO 4 , NaOH, K 2 SO 4 , etanol, metanol, HCl,  reagen  Nelson  A  dan  B,  raegen Arsenomolibdat,  asam  borat,  tablet kjedahl , indikator PP, indikator metil red,   kloroform (Merck),  heksana, benzene ,  reagen  p- anisidin,  ammonium  tiosianat,  HCl  37%, ferro  sulfat,  FeCl 3 ,  BaCl 2 ,  dan  H 2 O 2 .  Bahan kimia  untuk  analisis  senyawa  bioaktif  yaitu etanol,  methanol  (HPLC grade ),  aquabides, standar  tokoferol  (α–tokoferol),  standar tokotrienol (α–tokotrienol, δ–tokotrienol,  ϒ– tokotrienol)  “Santa  Cruz  Biotechnology”, dan standar fitosterol (β–sitosterol, stigmasterol,  dan  kampesterol)  “Sigma- Aldrich” dan MSTFA ( N-Methyl-N- trimethylsilyl trifluoroacetamide )  “Santa Cruz Biotechnology”.
Alat Peralatan  yang  digunakan  meliputi timbangan  digital, mixer (Miyako),  sendok, wadah  plastik,  cetakan  biskuit,  oven  listrik, timbangan  analitik  (Denver  Instrumen  M 310), glassware , shaker waterbath (Memmert),  termometer,  corong  pemisah 500  ml  (Duran), rotary  vacuum  evaporator (Buchi  Rotarovorator  R-200), freezer .  Alat yang  digunakan  untuk  analisis  biskuit  yaitu color  reader (Minolta  Chromameter  CR 400), tensile  strength (Imada), texture analyzer ,  oven, muffle  furnace , soxhlet , desikator, reflux ,  labu kjedahl ,  distilator, buret  25  ml, shaker ,  spektrofotometer (LaboMed), vortex , sentrifuge  1500  rpm , HPLC  (Shimadzu  LC-20  AT),  GC-MS (Shimadzu QP2010S), mikropipet, dan micropore .

## Metode
Metode  penelitian  yang  digunakan adalah  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL) dengan 1 faktor yang terdiri dari 6 level (b/b) (0%,  0.5%,  1%,  1.5%,  2%,  2.5%)  sehingga didapatkan  6  perlakuan.  Setiap  perlakuan diulang  sebanyak  4  kali  sehingga  diperoleh 24  satuan  percobaan.  Data  yang  didapatkan dianalisis  dengan  menggunakan Analysis  of Variance (ANOVA). Apabila terdapat pengaruh  nyata  maka  dilanjutkan  dengan Duncan  Multiple  Range  Test (DMRT) dengan  taraf  nyata  5%.  Analisis  perlakuan terbaik  biskuit  didapatkan  dari  hasil  analisis fisik  dan  organoleptik  menggunakan  metode Multiple  Atribute (Zeleny,  1982).  Penelitian yang  dilakukan  meliputi  proses  saponifikasi DALMS  (Modifikasi  Ahmadi,  1997),  proses pembuatan  biskuit  (Modifikasi  Rahmawati, 2014),  pengamatan  parameter  fisik  (tekstur, daya  patah,  daya  kembang,  densitas  kamba, warna)  dan  organoleptik  (Rahayu,  2001), ekstraksi lipid dari  biskuit  perlakuan  terbaik (Bligh and Dyer, 1959), pengamatan parameter  kimia  dan  senyawa  bioaktif  (total vitamin  E,  total  fitosterol,  dan  skualen) produk biskuit perlakuan terbaik.

## Saponifikasi DALMS
Saponifikasi  dilakukan  pada  DALMS untuk memisahkan asam lemak bebas dengan fraksi tidak tersabunkan. Saponifi-kasi dilakukan dengan modifikasi metode Ahmadi (1997). Tahapan saponifikasi DALMS antara lain:  1)Penimbangan  DALMS  sebanyak  50 gram  kemudian  dimasukkan  ke  dalam Erlenmeyer  1000  ml  yang  telah  ditutup alumuinium foil;  2)Penambahan  etanol sebanyak  441,5  ml,  asam  askorbat  sebanyak 2,5  gram,  dan  KOH  50%  sebanyak  50  ml; 3)Pemanasan  dalam shaker  waterbath suhu 65˚C selama 32 menit; 4)Pendinginan dalam suhu  ruang;  5)Pemindahan  larutan  ke  dalam corong  pemisah  dan  ditambahkan  heksana sebanyak 750 ml dan akuades sebanyak 1000 ml;  6)Pengocokan  lambat  dan  pendiaman sampai  terbentuk  dua  lapisan;  7)Pemisahan dalam  corong  pemisah.  Fraksi  tersabunkan dalam  air  (bagian  bawah  corong)  dibuang sedangkan  fraksi  tidak  tersabunkan  dalam heksana  (bagian  atas  corong)  disimpan;  dan
8) Pemisahan fraksi tidak tersabunkan dalam n-heksan  dilakukan  dengan rotary  vacuum evaporator dengan  suhu  45˚C  tekanan  200 mbar sehingga diperoleh FTT bebas pelarut.

## Pembuatan biskuit
Pembuatan  biskuit  dilakukan  dengan modifikasi  Rahmawati  (2014).  Prosedur pembuatan biskuit antara lain: 1)Penimbangan  bahan-bahan  sesuai  dengan formulasi yang telah ditentukan; 2)Pencampuran awal yaitu margarin dan gula halus.  Pengadukan  selama  2-3  menit  sampai tercampur;  3)Pencampuran  kedua  yaitu kuning  telur,  baking  powder,  vanili,  garam, susu bubuk, dan FTT. Pengadukan selama 2- 3  menit  sampai  tercampur;  4)Pencampuran ketiga  yaitu  tepung  terigu.  Pengadukan selama  2-3  menit  sampai  adonan  kalis; 5)Pemipihan adonan dan pencetakan adonan; dan  6)Pemanggangan  adonan  pada  suhu ±180˚C selama 10 menit.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Karakteristik DALMS dan FTT
DALMS  merupakan  hasil  samping ( by-product ) pemurnian  minyak sawit secara fisik.  Pada  proses  pemurnian  fisik  diperoleh
5% DALMS dari berat minyak sawit (Puah et al ., 2009). Fraksi tidak tersabunkan merupakan  hasil  dari  proses  saponifikasi yang  masih  mengandung  beberapa  senyawa bioaktif multikomponen. Pada proses saponifikasi,  dihasilkan  2  fraksi  yaitu  fraksi yang bereaksi dengan basa alkali membentuk sabun yang mengendap dan fraksi yang tidak tersabunkan  (FTT)  (Zulkifli,  2014).  Pada penelitian  sebelumnya,  kadar  fraksi  tidak tersabunkan  dari  DALMS  yang  diperoleh sebesar 2.21% (Puspitasari, 2013) dan 2.17% (Latifah,  2015).    Pada  penelitian  ini,  kadar FTT  dari  DALMS  yang  diperoleh  yaitu sebesar 1.93%.
Analisis  yang  dilakukan  pada  bahan baku  DALMS  dan  FTT  antara  lain  analisis kadar  asam  lemak  bebas,  analisis  tingkat oksidasi  yang  terdiri  dari  bilangan  peroksida dan  bilangan  p-anisidin,  serta  karakterisasi senyawa  bioaktif DALMS dan  FTT  meliputi total  vitamin  E  (α–tokoferol,  α–tokotrienol, δ–-tokotrienol,  dan  ϒ–tokotrienol),  total fitosterol  (β-sitosterol,  stigmasterol,  dan kampesterol), dan kadar skualen. Karakteristik DALMS dan FTT dapat dilihat pada Tabel 1.

## Tabel 1. Karakteristik DALMS dan FTT
Karakteristik DALMS FTT Hasil Analisis Literatur Hasil Analisis Literatur Asam Lemak Bebas (%) 92.49 ± 0.001 95.8 a 2.14 ± 0.00001 1.65 d Total Oksidasi (mek/kg) 6.61 ± 0.29 11.27 ± 2.31 b 9.20 ± 0.32 7.94 ± 1.92 e Bilangan peroksida (mek/kg) 1.65 ± 0.08 4.24 ± 1.48 b 3.06 ± 0.20 2.81 ± 0.20 e Bilangan p-anisidin (mek/kg) 3.31 ± 0.14 2.79 ± 0.66 b 3.08 ± 0.07 2.32 ± 0.66 e Senyawa Bioaktif Kadar Vitamin E (ppm) 1,491.93 196.50 c 77,147.91 342,375.80 b α–Tokoferol (ppm) - 37.99 c - 7,493.80 b α–Tokotrienol (ppm) 997.67 35.97 c 51,589.44 166,700.50 b δ–Tokotrienol (ppm) 120.65 4.56 c 6,238.85 32,121.04 b ϒ–Tokotrienol (ppm) 373.61 117.98 c 19,319.61 136,060.44 b Total Tokotrienol (ppm) 1,491.93 158.51 c 77,147.91 334,881.98 b Total Fitosterol  (ppm) 6,987.96 7.476.56 c 361,347.79 85,108.09 b β–Sitosterol (ppm) 5,310.83 3.913.37 c 274,623.58 78,506.40 b Stigmasterol (ppm) 419.03 1.774.66 c 21,667.89 5,254.56 b Kampesterol (ppm) 1,258.10 1.788.53 c 65,058.32 1,347.13 b Skualen (ppm) 10,172.59 1.092.38 c 165,979.43 21,018.59 b
Sumber: a) Rahmawati (2010); b) Asusti (2015); c) Zulkifli (2014); d) Muchlisyiyah (2013); e) Wahyuli (2015)
Asam lemak bebas (ALB) adalah asam lemak  dalam  keadaan  bebas  dan  tidak berikatan  lagi  dengan  gliserol  (Pasaribu, 2004). Kadar ALB merupakan bilangan asam suatu  minyak  yang  dihitung  berdasarkan berat  molekul  asam  lemak  campuran  atau asam lemak dominan yang terkandung dalam suatu minyak. Pada penelitian ini asam lemak bebas  dinyatakan  sebagai  asam  palmitat. Berdasarkan  Tabel  1  menunjukkan  bahwa kadar  ALB  dari  DALMS  pada  penelitian  ini sebesar 92.49 ± 0.001%. Secara umum, kadar ALB  dalam  DALMS  berada  pada  kisaran diatas  80%.  Kadar  ALB  dalam  DALMS dapat  dikatakan  tinggi  dikarenakan  DALMS merupakan  hasil  samping  pada  proses pemurnian  fisik  minyak  sawit  kasar  dan masih mengandung asam lemak bebas sekitar 80% (Puah et al ., 2009).
Berdasarkan  Tabel  1  menunjukkan bahwa  kadar  ALB  dari  fraksi  tidak tersabunkan  (FTT)  pada  penelitian  ini sebesar 2.14 ± 0.00001%. Hal ini menunjukkan  tingkat  penurunan  kadar  ALB sekitar  90%  dari  DALMS.  Penurunan tersebut  disebabkan  oleh  proses  saponifikasi yang  menghilangkan  sebagian  besar  asam lemak  bebas  yang  terikat  oleh  KOH  (basa alkali)  membentuk  sabun.  Sabun  tersebut dibuang setelah proses saponifikasi, sehingga didapatkan  fraksi  tidak  tersabunkan  dengan kadar  ALB  yang  rendah.  Puspitasari  (2013) menyebutkan  bahwa  proses  saponifikasi DALMS  secara  kimia  dapat  menurunkan kandungan  asam  lemak  bebas  sebesar  94– 98%.
Selain  mengandung asam lemak bebas, DALMS  dan  FTT  juga  mengandung  hasil oksidasi  dari  gliserida  (Hammod et  al ., 2005).  Keberadaan  peroksida  dan  aldehid yang  merupakan  hasil  oksidasi  primer  dan sekunder  dari  minyak  dapat  menunjukkan derajat kerusakan minyak. Ketengikan terbentuk oleh aldehid dan keton bukan oleh peroksida.  Kenaikan  bilangan  peroksida hanya  indikator  bahwa  minyak  sebentar  lagi akan mengalami ketengikan (Ketaren, 1986).
Bilangan  peroksida  merupakan  indeks jumlah  lemak  atau  minyak  yang  telah mengalami  oksidasi.  Selain  itu  bilangan
peroksida  juga  didefinisikan  sebagai  jumlah peroksida dalam miliekuivalen (mek) oksigen aktif per kg lemak atau dalam 1.000 gram  senyawa  (Raharjo,  2006).  Bilangan peroksida  dari  DALMS  hasil  analisis  pada penelitian  ini  sebesar  1.65  ±  0.08  mek/kg, sementara  itu  bilangan  peroksida  dari  FTT hasil analisis pada penelitian ini sebesar 3.06 ± 0.20 mek/kg.
Pengukuran bilangan anisidin bertujuan untuk  mengetahui  kandungan  aldehid  dalam minyak  sebagai  produk  sekunder  oksidasi paling  penting  yang  berkaitan  erat  dengan kualitas  rasa  dan  bau  (Puspitasari,  2013). Bilangan  p-anisidin  dari  DALMS  hasil analisis  pada  penelitian  ini  sebesar  3.31  ± 0.14  mek/kg,  sementara  itu  bilangan  p- anisidin dari FTT pada penelitian ini sebesar 3.08 ± 0.07 mek/kg.
Beberapa  komponen  senyawa  bioaktif yang terdapat dalam DALMS dan FTT  yaitu tokoferol, tokotrienol, fitosterol, dan skualen. Musalmah et  al .  (2005)  menambahkan keunggulan  DALMS  adalah  sebagian  besar vitamin  E  dalam  bentuk  tokotrienol  (70%) dan sisanya adalah tokoferol (30%). DALMS hasil  analisis  mengandung  vitamin  E  yang cukup  tinggi  yaitu  sebesar  1,491.93  ppm. Perbedaan kadar vitamin E diduga disebabkan  pada  proses  pemurnian  minyak sawit  terutama  pada  tahap  deodorisasi  yang berbeda. Kandungan fitosterol dalam DALMS  sebesar  6,987.96  ppm.  Komposisi fitosterol  dalam  DALMS  terdiri  dari  β– Sitosterol  (76%),  stigmaterol  (6%),  dan kampesterol  (18%).  Menurut  Hammond  dan Tong (2005), perbedaan komposisi penyusun fitosterol  dipengaruhi  oleh  jenis  bahan  baku dan kondisi proses pemurnian  minyak  sawit. Skualen  merupakan natural  lipid yang termasuk dalam kelompok triterpen hidrokarbon  yang  mengandung  6  buah isoprene  (Vazquez et  al .,  2007).  Kadar skualen  hasil  analisis  pada  penelitian  ini sebesar 10,172.59 ppm. Kadar skualen cukup tinggi  pada  DALMS  tersebut  didukung  oleh Posada et  al .,  (2007)  yang  menyatakan bahwa skualen yang terdapat dalam DALMS sebanyak 1.03% (b/b) lebih tinggi dibandingkan dengan minyak nabati lainnya.
FTT  dari  DALMS  pada  penelitian  ini mempunyai  kandungan  vitamin  E  sebesar 77,147.91  ppm.  Senyawa  α–tokoferol  dalam FTT  tidak  terdeteksi.  Hal  tersebut  diduga dipengaruhi  oleh  lama  penyimpanan  bahan baku, selain itu proses pemanasan pada suhu tinggi  pada  proses  deodorisasi  menyebabkan tokoferol  mengalami  kerusakan  yang  lebih intensif  daripada  tokotrienol,  sehingga  tidak dapat terdeteksi pada penelitian ini. Fitosterol (sterol  tumbuhan)  merupakan  penyusun alami  tumbuhan  dan  bagian  dari  kelompok isoprenoid  (Soupas,  2006).  Kandungan fitosterol  dalam  FTT  pada  penelitian  ini didapatkan  sebesar  361,347.79  ppm.  Secara kimiawi, skualen (C 30 H 50 ) termasuk hidrokarbon tidak  jenuh dengan enam  ikatan rangkap, bersifat tidak tersabunkan, berbentuk  minyak  jernih  yang  tidak  berbau dan tidak  berasa (Bahttacahrjee dan Shingal, 2003).  Kandungan  skualen  dalam  FTT  yang didapatkan  dari  penelitian  ini  yaitu  sebesar 165,979.43 ppm.

## Karakteristik  fisik  biskuit  terfortifikasi FTT DALMS
Parameter  fisik  yang  dianalisis  dari biskuit  yang  terfortifikasi  FTT  DALMS meliputi hardness (kekerasan),  daya  patah, daya kembang, densitas kamba, dan warna.

## Daya patah
Daya  patah  merupakan  salah  satu faktor yang penting dalam menentukan mutu sebuah  biskuit.  Daya  patah  pada  bahan pangan menunjukkan ketahanan bahan pangan  tersebut  terhadap  tekanan  yang diberikan.  Selain  itu  juga  berhubungan dengan  tingkat  kerenyahan  suatu  produk. Biskuit terfortifikasi FTT DALMS mempunyai  rerata  nilai  daya  patah  dengan kisaran  antara  3.93  –  4.53  N.  Hasil  rerata nilai  daya  patah  biskuit  terfortifikasi  FTT DALMS  disajikan  pada  Gambar  1.  Nilai daya  patah  biskuit  cenderung  semakin menurun seiring dengan meningkatnya penambahan  FTT  DALMS.  Namun  nilai daya patah meningkat dari perlakuan 1.5% ke 2%.
Gambar 1. Grafik rerata daya patah biskuit Menurut  Dewa  (2008),  faktor-faktor yang  mempengaruhi  besarnya  daya  patah pada suatu produk yaitu berat produk dimana semakin  berat  produk  maka  daya  patah semakin  tinggi.  Kemudian  kadar  air  dimana dengan adanya kandungan air dalam rongga- rongga antar sel suatu bahan dapat menurunkan  kekakuan  sel  sehingga  akan menurunkan  kerenyahan  produk.  Selain  itu faktor  yang  berpengaruh  yaitu  adanya  kadar protein  dimana  protein  yang  terdenaturasi akan mempengaruhi gugus reaktifnya sehingga  gugus  reaktifnya  akan  membuka dan  kemudian  terjadi  pengikatan  kembali antara  gugus  reaktif yang berdekatan sehingga  jumlah  ikatannya  menjadi  lebih banyak dan lebih kuat.

## Hardness (tingkat kekerasan)
Produk pangan mempunyai bentuk dan tekstur  yang  beraneka  macam. Hardness merupakan  salah  satu  indikator  penting dalam  menganalisis  tekstur  bahan  pangan terutama  dalam  bentuk  produk baked seperti roti  dan  biskuit  (Wenzhao et  al .,  2013). Biskuit terfortifikasi FTT DALMS mempunyai rerata nilai kekerasan ( hardness ) dengan  kisaran  antara  357.23  –  634.68  g. Hasil  rerata  nilai  kekerasan  ( hardness ) biskuit  terfortifikasi  FTT  DALMS  disajikan pada Gambar 2.
0 1 2 3 4 5 6 0 0.5 1 1.5 2 2.5 D ay a P ata h (N ) Tingkat Penambahan FTT DALMS (%) 0 200 400 600 800 1000 1200 0 0.5 1 1.5 2 2.5 H ar d n e ss (g )
Nilai hardness (tingkat kekerasan) pada biskuit cenderung semakin meningkat seiring dengan  meningkatnya  penambahan  FTT DALMS.  Namun  nilai hardness menurun dari  perlakuan  0.5%  ke  1%  serta  dari perlakuan  2%  ke  2.5%.  Menurut  Pratama et al. (2014),  nilai  kekerasan  biskuit  yang terukur serta tekstur biskuit akan dipengaruhi oleh  komposisi  penyusun  biskuit,  suhu,  dan waktu  pemanggangan-nya.  Selain  itu  pada penelitian  ini  diduga  bahwa  nilai  kekerasan juga  dipengaruhi  oleh  tingkat  ketebalan biskuit. Biskuit  yang dibuat setiap perlakuan diduga mempunyai sedikit perbedaan meskipun  telah  diukur  saat  pembuatan. Sehingga  biskuit  yang  lebih  tebal  diduga mempunyai nilai kekerasan yang lebih tinggi.

## Daya kembang
Daya  kembang  merupakan  parameter produk  pangan  yang  dipengaruhi  oleh komposisi  bahan,  proses  pembuatan,  dan proses  pemanggangan  pada  biskuit.  Daya kembang  merupakan  rasio  antara  selisih volume  setelah  dipanggang  dengan  volume sebelum  dipanggang  (Yuwono  dan  Susanto, 1998).  Biskuit  terfortifikasi  FTT  DALMS mempunyai  rerata  daya  kembang  dengan kisaran  antara  34.52  –  46.43%.  Hasil  rerata daya  kembang  biskuit  terfortifikasi  FTT DALMS disajikan pada Gambar 3.
Gambar 3. Grafik  rerata  daya  kembang biskuit
Nilai  daya  kembang  biskuit  cenderung semakin meningkat seiring dengan meningkatnya  penambahan  FTT  DALMS. Namun  nilai  daya  kembang  sedikit  menurun dari perlakuan 2% ke 2.5%. Salah satu faktor yang  mempengaruhi  proses  pengembangan biskuit  yaitu  dari  proses  pemanggangan. Ketika pemanggangan air yang terikat dalam granula  pati  terlepas  saat  pemanasan  pada
suhu  tertentu  sehingga  air  menguap  dan  uap yang  terbentuk  akan  mendesak  jaringan  sel untuk keluar. Hal tersebut akan menyebabkan terjadinya pe-ngembangan sekaligus pengosongan yang terbentuk rongga-rongga udara pada  biskuit  yang telah dipanggang (Visita et al. , 2014).

## Densitas kamba
Densitas  kamba  merupakan  parameter fisik  yang  menunjukkan  porositas  bahan. Densitas  kamba  adalah  perbandingan  bobot bahan  dengan  volume  yang  ditempatinya, termasuk  ruang  kosong  diantara  butiran makanan.  dapat  diukur  dengan  menimbang bahan yang menempati wadah sesuai dengan volumenya  (Yuwono  dan  Susanto,  1998). Biskuit terfortifikasi FTT DALMS mempunyai  rerata  densitas  kamba  dengan kisaran antara 144.92  – 161.46 mg/ml. Hasil rerata  daya  kembang  biskuit  terfortifikasi FTT DALMS disajikan pada Gambar 4.
Gambar 4.  Grafik  rerata  densitas  kamba biskuit
Nilai densitas kamba biskuit cenderung semakin
menurun seiring dengan meningkatnya  penambahan  FTT  DALMS. Namun nilai daya kembang sedikit meningkat  dari  perlakuan  1.5%  ke  2%  dan kembali  menurun  dari  perlakuan  2%  ke 2.5%.  Densitas  kamba semakin  kecil menunjukkan bahwa suatu produk mempunyai  daya  kembang  yang  besar. Densitas kamba mempengaruhi jumlah bahan yang  bisa  dikonsumsi  dan  biaya  produksi bahan.  Densitas  kamba  yang  cukup  tinggi diharapkan dapat mengurangi biaya pengiriman,  pengemasan,  dan  penyimpanan pada  biskuit.  Bahan  dengan  densitas  kamba kecil  akan  membutuhkan  tempat  yang  luas dibandingkan  dengan  densitas  kamba  yang lebih  besar  untuk  berat  yang  sama  sehingga
0 10 20 30 40 50 60 0 0.5 1 1.5 2 2.5 D ay a K e m b an g (% ) Tingkat Penambahan FTT DALMS (%) 0 50 100 150 200 0 0.5 1 1.5 2 2.5 D e n si ta s K am b a (m g/ m l) Tingkat Penambahan FTT DALMS (%)
tidak  efisien  dari  segi  tempat  penyimpanan dan kemasan (Hwang dan Hayakawa, 2006).

## Warna - tingkat kekuningan (b*)
Warna yang dinyatakan dalam koordinat  b*  menyatakan  perbedaan  antara biru  (-b*)  dan  kuning  (+b*)  dengan  kisaran nilai -100 hingga +100. Nilai warna negatif (- b*)  pada  hasil  pembacaan  alat  menunjukkan bahwa  biksuit  memiliki  warna  cenderung kebiruan,  sebaliknya  jika  nilai  warna  positif (+b*) pada hasil pembacaan alat maka warna biskuit cenderung memiliki warna kekuningan. Biskuit terfortifikasi FTT DALMS mem-punyai rerata tingkat kekuningan  (+b*)  dengan  kisaran  antara 27.52  –  32.04.  Hasil  rerata  daya  kembang biskuit  terfortifikasi  FTT  DALMS  disajikan pada Gambar 4.
Gambar 5. Grafik Rerata Tingkat kekuningan Biskuit
Rerata tingkat kekuningan (+b*) biskuit cenderung semakin meningkat seiring dengan  meningkatnya  penambahan  FTT DALMS.  Namun,  tingkat  kekuningan  (+b*) sedikit menurun dari perlakuan 0% ke 0.5%. Semakin  tinggi  nilai  warna  (b*)  menun- jukkan  bahwa  biskuit  yang  dihasilkan cenderung  memiliki  warna  kekuningan. Warna  kekuningan  pada  biskuit  disebabkan karena  adanya  penambahan  bahan  baku seperti  margarin,  kuning  telur,  dan  FTT DALMS  sendiri  yang  menyumbang  pigmen warna  karotenoid  yaitu  kuning  kemerahan. Tingkat  kekuningan  (+b*)  setelah  pemang- gangan  akan  menurun.  Hal  tersebut  dapat disebabkan  karena  selama  proses  pemang- gangan  terjadi  reaksi  antar  gula  reduksi dengan  gugus  amina  primer  pada  protein yang  disebut  reaksi Maillard .  Selain  itu terjadi  reaksi  karamelisasi  yang  timbul karena  pemanasan  gula  yang  mencair
melampaui  titik  leburnya  sehingga  terjadi karamelisasi  sukrosa.  Hasil  reaksi  tersebut menghasilkan  produk  yang  berwarna  coklat yang  dikehendaki  pada  biskuit  dan  tingkat kekuningan menurun (Winarno, 2004).
Karakteristik organoleptik biskuit terfortifikasi FTT DALMS
Penerimaan konsumen terhadap produk merupakan  hal  yang  paling  penting  dalam menentukan mutu produk, oleh karena itu uji organoleptik  yang  menggunakan  panelis dianggap mempunyai kepekaan untuk menilai  mutu  berbagai  jenis  makanan (Kartika et  al. ,  2008).  Uji  organoleptik  yang dilakukan  pada  penelitian  ini  yaitu  uji hedonik  (kesukaan)  dan  mutu  hedonik (skoring).
Uji hedonik dilakukan untuk mengetahui berapa besar kesukaan masyarakat terhadap suatu produk. Parameter yang diamati pada sampel biskuit terfortifikasi  FTT  DALMS  yaitu  rasa, tekstur,  kerenyahan,  aroma,  dan  warna. Tingkat  kesukaan  panelis  terhadap  rasa biskuit  terfortifikasi  FTT  DALMS  berada pada  skala  2.04  –  4.32  (tidak  suka  –  suka). Tingkat  kesukaan  panelis  terhadap  tekstur biskuit  terfortifikasi  FTT  DALMS  berada pada  skala  3.48  –  3.96  (agak  suka  –  suka). Tingkat kesukaan panelis terhadap kerenyahan biskuit terfortifikasi FTT DALMS  berada  pada  skala  3.52  –  4.00 (suka).  Tingkat  kesukaan  panelis  terhadap aroma  biskuit  terfortifikasi  FTT  DALMS berada  pada  skala  2.28  –  4.32  (tidak  suka  – suka).  Tingkat  kesukaan  panelis  terhadap warna  biskuit  terfortifikasi  FTT  DALMS berada  pada  skala  2.80  –  3.84  (agak  suka  – suka).
Uji mutu hedonik atau skoring bertujuan  untuk  mengetahui  repson  terhadap sifat-sifat  produk  yang  lebih  spesifik, misalnya rasa buah dalam permen, sifat pulen pada  nasi,  sifat  gurih  pada  kerupuk  dan  lain sebagainya.  Uji  skoring  biasanya  mem- berikan  nilai  secara  kuantitatif  dengan skoring  (angka)  yang  sudah  disepakati sebelumnya  (Sarastani,  2012).  Parameter atau  atribut  yang  digunakan  pada  uji organoleptik  mutu  hedonik  pada  penelitian
0 20 40 60 80 0 0.5 1 1.5 2 2.5 Ti n gka t K e ce ra h an (L *) Tingkat Penambahan FTT DALMS (%)
ini yaitu bau menyimpang, rasa menyimpang, rasa  enak,  kerenyahan,  keseragaman  warna, dan after  taste biskuit.  Pengaruh  tingkat penambahan FTT DALMS terhadap parameter  mutu  hedonik  pada  biskuit disajikan  dalam  bentuk spider  chart yang dapat dilihat pada Gambar 6.
Gambar 6. Pengaruh  tingkat  penambahan FTT DALMS  terhadap parameter mutu hedonik biskuit
Berdasarkan  Gambar  6  menunjukkan bahwa  secara  keseluruhan  atribut  pada perlakuan tingkat penambahan FTT DALMS 0%  pada  biskuit  yang  digambarkan  dengan garis warna biru mendekati garis terluar atau mendekati titik 5, artinya  secara keseluruhan biskuit  perlakuan  0%  mempunyai  mutu hedonik  yang  baik.  Sebaliknya  perlakuan tingkat  penambahan  FTT  DALMS  2.5% pada biskuit  yang digambarkan dengan garis warna  oranye  mendekati  garis  terdalam  atau mendekati titik 0, artinya  secara  keseluruhan biskuit  perlakuan  2.5%  mempunyai  mutu hedonik yang kurang baik.
Karakteristik  kimia  biskuit  terfortifikasi FTT DALMS perlakuan terbaik
Analisis kimia dilakukan untuk mengetahui informasi nilai gizi dan kandungan  senyawa  bioaktif  pada  biskuit perlakuan terbaik. Biskuit dengan penambahan FTT DALMS konsentrasi 0.5% (b/b)  merupakan  biskuit  perlakuan  terbaik pada  penelitian  ini.  Analisis  kimia  yang dilakukan  pada  biskuit  perlakuan  terbaik yaitu  analisis  proksimat  yang  terdiri  dari analisis  kadar  air,  kadar  abu,  kadar  lemak, kadar  protein,  kadar  karbohidrat,  dan  serat kasar.  Selain  itu  dilakukan  analisis  asam
lemak  bebas  serta  total  oksidasi  (bilangan peroksida dan p-anisidin).
Kadar asam lemak bebas dalam biskuit perlakuan  terbaik  pada  penelitian  ini  yaitu sebesar 2.66 ± 0.00002%. Menurut Muchtadi (1992), proses hidrolisis menyebabkan terjadinya hydrolytic  rancidity yaitu  terjadi flavor dan  rasa  tengik.  Namun  kadar  ALB yang  rendah  pada  biskuit  perlakuan  terbaik menunjukkan bahwa ketengikan yang rendah.  Bilangan  peroksida  yang  terukur dalam biskuit perlakuan terbaik yaitu sebesar 2.16  ±  0.08  mek/kg.  Sementara  bilangan  p- anisidin yang terukur dalam biskuit perlakuan  terbaik  yaitu  sebesar  2.79  ±  0.03 mek/kg.  Sehingga  didapatkan  total  oksidasi pada  biskuit  perlakuan  terbaik  yaitu  sebesar 7.10  ±  0.19  mek/kg.  Hasil  analisis  kimia (proksimat)  biskuit  perlakuan  terbaik  (0.5%) dan syarat mutu biskuit menurut SII 0177-90 disajikan pada Tabel 2.
Tabel 2. Karakteristik kimia biskuit terfortifikasi FTT DALMS perlakuan terbaik Parameter Hasil Analisis Syarat Mutu Menurut SII 0177-90 a Kadar Air (%) 1.81 ± 0.06 Maks  5 Kadar Abu (%) 2.10 ± 0.06 Maks 1.6 K. Lemak (%) 27.98 ± 0.54 Min 10 K. Protein (%) 8.04 ± 0.13 Min 9.5 K. Karbohidrat (%) 60.07 ± 0.66 Min  70 Serat Kasar (%) 0.22 ± 0.02 Maks  0.55 Total Kalori (kkal) 524.26 Min 400 Sumber: a)  Dewan  Standarisasi  Nasional (1994) dalam Rahmi (2004)
Karakterisasi  senyawa  bioaktif  biskuit terfortifikasi  FTT  DALMS  perlakuan terbaik
Analisis  senyawa  bioaktif  dilakukan  pada biskuit perlakuan terbaik dengan penambahan FTT DALMS 0.5% (b/b) untuk mengetahui  karakterisasi  senyawa  bioaktif pada  biskuit.  Kandungan  senyawa  bioaktif pada  biskuit  perlakuan  terbaik  dapat  dilihat pada Tabel 3.
0 1 2 3 4 5 Bau Menyimpang Rasa Menyimpang Rasa Enak Kerenyahan Keseragaman Warna After Taste 0% 0,5% 1%
1,5% 2% 2,5%
Tabel  3.  Kandungan  senyawa  bioaktif  pada biskuit  terfortifikasi  FTT  DALMS perlakuan terbaik Senyawa Bioaktif Hasil Analisis ppm % relatif Kadar Vitamin E 405.58 α–tokoferol - - α–tokotrienol 147.19 36.29 δ–tokotrienol 190.30 46.92 ϒ–tokotrienol 68.09 16.79 Total Tokotrienol 405.58 100.00 Total Fitosterol 6,613.52 β–sitosterol 5,848.45 88.43 Stigmasterol 143.97 2.18 Kampesterol 621.09 9.39 Skualen 3,284.50
Berdasarkan  Tabel  3  dapat  diketahui bahwa biskuit perlakuan terbaik (0.5%) pada penelitian ini mempunyai kandungan vitamin E  sebesar  405.58  ppm.  Vitamin  E  adalah vitamin  yang  larut dengan  baik dalam  lemak dan  mampu  melindungi  tubuh  dari  radikal bebas.  Vitamin  E  juga  berfungsi  mencegah penyakit hati, mengurangi kelelahan, membantu  memperlambat  penuaan  karena vitamin  E  berperan  dalam  suplai  oksigen  ke darah sampai dengan ke seluruh organ tubuh. Vitamin E juga menguatkan dinding pembuluh  kapiler  darah  dan  mencegah kerusakan  sel  darah  akibat  racun  (Papas, 2008).
Senyawa  bioaktif  fitosterol  dalam biskuit perlakuan terbaik memiliki kandungan  sebesar  6,613.52  ppm.  Fitosterol mampu  mengurangi  kadar  kolesterol  total dan LDL kolesterol di dalam darah. Dosis 2 – 3  gram  fitosterol  per  hari  dapat  mengurangi LDL  kolesterol  sekitar  5  –  15%  (Rafia, 2013).  Kehadiran  β–sitosterol  di  dalam  hati akan  memercepat  rusaknya  enzim  spesifik yang  dibutuhkan  hati  untuk  memproduksi kolesterol,  atau  secara  tidak  langsung menghambat  pembentukan  kolesterol  di  hati dan  menghambat  absorbsi  kolesterol  oleh darah (Ostlund et al ., 2003).
Kandungan skualen yang terdapat pada biskuit  hasil  penelitian  ini  yaitu  sebesar 3,284.50  ppm.  Fungsi  utama  skualen  adalah melindungi  permukaan  kulit  dari  sinar
ultraviolet  dan  sumber  radiasi  lainnya.  Oleh karena  itu,  senyawa  ini  sering  digunakan sebagai salah satu komposisi dalam perawatan  kulit.  Skualen  juga  menjadi  salah satu  komposisi  dalam  suplemen  untuk meningkatkan  kekebalan  tubuh.  Selain  itu skualen  dimanfaatkan  sebagai  bahan  untuk detoksifikasi, antistatic , bactericidal dan fungicidal agent (Bahttacahrjee  and  Shingal, 2003). Apabila mengonsumsi skualen, skualen tersebut akan bereaksi dengan cairan tubuh atau air (H 2 O) di dalam tubuh. Skualen dapat membantu memenuhi kebutuhan oksigen yang  diperlukan  pada  proses metabolisme  sel  tubuh  karena  bereaksi dengan air atau cairan tubuh (Vazquez et al ., 2007).

## KESIMPULAN
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa perlakuan tingkat penambahan FTT DALMS dengan  konsentrasi  penambahan  0%,  0.5%, 1%,  1.5%,  2%,  dan  2.5%  (b/b)  berpengaruh nyata  terhadap  daya  kembang  dan  tingkat kekuningan  (+b*)  biskuit.  Namun  tidak berpengaruh nyata terhadap hardness (tingkat kekerasan), daya patah, dan densitas kamba.  Biskuit perlakuan terbaik didapatkan pada  perlakuan  tingkat  penambahan  FTT DALMS sebesar 0,5% (b/b). Biskuit perlakuan  terbaik  mengandung  senyawa bioaktif  antara  lain:  α–tokotrienol  sebesar 147.19  ppm,  δ–tokotrienol  sebesar  190.30 ppm,  ϒ–tokotrienol  sebesar  68.091  ppm,  β– sitosterol sebesar 5,848.45 ppm, stigmasterol sebesar 143.97 ppm, dan kampesterol sebesar 621.09  ppm,  dan  kadar  skualen  sebesar 3,284.50 ppm.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahmadi,  K.  (1997). Aktivasi  zeolit  alam dan penggunaannya untuk pemurnian tokoferol  dari  distilat  asam  lemak minyak  sawit [Tesis].  Yogyakarta:
Program Pascasarjana UGM.
Asusti. (2015). Fortifikasi mikrokapsul fraksi tidak  tersabunkan  dari  distilat  asam lemak  minyak  sawit  (DALMS)  pada
Biskuit [Skripsi].  Fakultas  Teknologi Pertanian, Universitas Brawijaya, Malang.
Bligh,  E.  G.,  &  Dyer,  W.  J.  (1959).  A  rapid method  of  total  lipid  extraction  and purification. Canadian journal of biochemistry  and  physiology , 37 (8), 911-917.
Dewa, I. G. P. J. (2008). Karakteristik biskuit berserat  hasil  suplementasi  tepung ampas  tahu  dan  tepung  ampas  kelapa
[Skripsi]. Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Brawijaya
Malang.
Estiasih,  T.,  Ahmadi,  K.,  Widyaningsih,  T. D.,  Maligan,  J.  M.,  Mubarok,  A.  Z., Zubaidah,  E.,  ...  &  Puspitasari,  R. (2013).  Bioactive  compounds  of  palm fatty  acid  distillate  (PFAD)  from several  palm  oil  refineries. Advance Journal of Food Science and Technology , 5 (9), 1153-1159. Hadi, M. N. (2007). Kajian formulasi lighter biskuit  dalam  pengembangan  produk baru  di  PT  Arnott’s  Indonesia [Skripsi]. Departemen Ilmu dan Teknologi  Pangan,  Fakultas  Teknologi Pangan. Institut Pertanian Bogor.
Hammond,  E.G.,  Johnson,  L.A.,  &  Su,  C. (2005). Soybean oil. bailey’s industrial oil  and  fat  products, 6 th Edition,  Six Volume  Set.  John  Wiley  &  Sons  Inc., New York
Hwang,  M.  P.,  &  Yakawa,  K.  I.  H.  (1980). Bulk  densities  of  cookies  undergoing commercial  baking  processes. Journal of Food Science , 45 (5), 1400-1402.
Kartika,  B.,  Hastuti,  P.,  &  Supartono,  W. (2008). Pedoman  uji  inderawi  bahan pangan . Yogyakarta: UGM Press.
Ketaren,  S.  (1986).  Pengantar  teknologi minyak dan lemak pangan. Jakarta: UI- Press.
Latifah,  N.  (2014). Mikroenkapsulasi  fraksi tidak  tersabunkan  (FTT)  distilat  asam lemak minyak sawit (DALMS) menggunakan metode pengeringan semprot [Skripsi].  Fakultas  Teknologi
Pertanian, Universitas
Brawijaya
Malang
Liu, D., Shi, J., Posada, L. R., Kakuda, Y., &
Xue, S. J. (2008). Separating
tocotrienols from palm oil by molecular  distillation. Food  Reviews International , 24 (4), 376-391. Muchlisyiyah, J. (2013). Karakterisasi senyawa  bioaktif  distilat  asam  lemak minyak  sawit  (DALMS)  dari  beberapa industri  pemurnian  serta  peningkatan skala  saponifikasi  pada separasi  fraksi tidak  tersabunkan  DALMS [Tesis].
Fakultas Teknologi
Pertanian,
Universitas Brawijaya Malang.
Musalamah,  M.,  Nizam,  M.Y.,  Noor  Aini, A.H., Azian, A.I., Gapor, M.T., & Wah Ngah, W.Z. (2005). Comparative effect of  palm  vitamin  e  and  alfa  tocopherol on heading and wound tissue antioxidant  enzyme  level  in  diabetic rats. Lipids, 40 , 575 – 580.
Ostlund  Jr, R. E., Racette, S. B., & Stenson, W.  F.  (2003).  Inhibition  of  cholesterol absorption by phytosterol-replete wheat germ  compared  with  phytosterol- depleted  wheat  germ. The  American journal  of  clinical  nutrition , 77 (6), 1385-1389.
Papas,  A.  M.  (2008).  Vitamin  E:  a  new perspective. Nutri News, 9 (1), 1–8. Pasaribu,  N.  (2004). Minyak  buah  kelapa sawit. Universitas Sumatera Utara. Posada, L. R., Shi, J., Kakuda, Y., & Xue, S. J.  (2007).  Extraction  of  tocotrienols from  palm  fatty  acid  distillates  using molecular  distillation. Separation  and Purification  Technology , 57 (2),  220- 229.
Pratama,  R.  I.,  Rostini,  I.,  &  Liviawaty,  E. (2014).  Karakteristik  biskuit  dengan penambahan tepung tulang ikan Jangilus (Istiophorus SP.). Jurnal akuatika , 5 (1), 30 – 39. Puah,  C.,  Choo,  Y.,  Ma,  A.,  &  Chuah,  C. (2007).  The  effect  of  physical  refining on  palm  vitamin  E  (tocopherol, tocotrienol and tocomonoenol).
American
Journal of Applied Sciences , 4 (6), 374-377.
Puspitasari, R. (2013). Optimasi  saponifikasi distilat  asam  lemak  minyak  sawit
(DALMS)  pada  separasi  fraksi  tidak tersabunkan mengandung senyawa bioaktif  multi  komponen [Skripsi]. Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Brawijaya Malang.
Raharjo, S. (2006). Kerusakan oksidatif pada makanan .  Yogyakarta:  Gadjah  Mada University Press.
Rahayu,  W.  P.  (2001). Penuntun  praktikum penilaian organoleptik . Jurusan Teknologi  Pangan  dan  Gizi,  Institut Pertanian Bogor.
Rahmawati,  A.  (2010). Optimasi  kristalisasi pelarut  suhu  rendah  pada  pembuatan fraksi  kaya  tokotrienol  dari  DALMS
[Skripsi]. Fakultas Teknologi Pertanian Universitas Brawijaya Malang.
Rahmawati,  W.  E.  (2014). Fortifikasi kalsium cangkang telur pada pembuatan  cookies  (kajian  konsentrasi tepung  cangkang  telur  dan  baking powder) [Skripsi]. Universitas Brawijaya Malang.
Rahmi, E. (2004). Pengaruh perubahan suhu oven  terhadap  mutu  produk  biskuit kelapa  di  PT.  Mayora  Indah [Skripsi]. Institut Pertanian Bogor.
Salimon,  J.,  Abdullah,  B.  M.,  &  Salih,  N. (2012).  Saponification  of  Jatropha curcas  seed  oil:  optimization  by  D- optimal  design. International  Journal of Chemical Engineering , 2012 . Sarastani,  D.  (2012). Penuntun praktikum analisis organoleptik . Institut Pertanian Bogor.
Soupas,  L.  (2006). Oxidative  stability  of phytosterols  in  food  models  and  foods [Dissertasion] Agriculture and Forestry of the University of Helsinki.
Subagjo,  A.  (2007). Manajemen  pengolahan kue dan roti . Yogyakarta: Graha Ilmu.
Ulum,  M.  &  Hariyanto.  (2015). Statistik kelapa  sawit  Indonesia  2014 .  Jakarta:
Badan Pusat Statistik.
Vazquez,  L.,  Torres,  C.  F.,  Fornari,  T., Señoráns,  F.  J.,  &  Reglero,  G.  (2007). Recovery  of  squalene  from  vegetable oil sources using countercurrent supercritical carbon dioxide extraction. The Journal of supercritical fluids , 40 (1), 59-66. Visita,  B.  F.,  &  Putri,  W.  D.  R.  (2013). Pengaruh  penambahan  bubuk  mawar merah  (Rosa  damascene  Mill)  dengan jenis  bahan  pengisi  berbeda  pada cookies. Jurnal Pangan dan Agroindustri , 2 (1), 39-46.
Wenzhao,  L.,  Guangpeng,  L.,  Baoling,  S.,
Xianglei, T., & Xu, S. (2013). Effect of Sodim Stearoyl Lactylate on Refinement  of  Crisp  Bread  and  The Microstructure  of  Dough. Journal  of Food  Science  and  Technology , 5 (6), 682-687.
Winarno,  F.  G.  (2004). Kimia  pangan  dan gizi . Jakarta: Gramedia Pustaka Utama.
Yuwono,  S.  S.  &  Susanto,  T.  (1998).
Pengujian fisik pangan. Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Brawijaya Malang.
Zeleny, M. (1982). Multiple criteria decision making. New  York:  Mc  Graw  Hill Book Company Inc.
Zulkifli,  M.  (2014).  Optimasi  saponifikasi distilat  asam  lemak  minyak  sawit (DALMS)  tanpa  etanol [ Skripsi]. Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Brawijaya Malang.
Zulkifli, M., & Estiasih, T. (2014). sabun dari distilat  asam  lemak  minyak  sawit: kajian  pustaka  [In  Press  Oktober 2014]. Jurnal Pangan dan Agroindustri , 2 (4), 170-177.