S CRIPTA B IOLOGICA | VOLUME 1 | NOMER 2 | JUNI 2014 | 153–156 | HTTPS :// DOI . ORG /10.20884/1. SB .2014.1.2.442

## AKTIVITAS GLUTATION PEROKSIDASE DAN KADAR GULA DARAH TIKUS DIABETES YANG DIBERI EKSTRAK DAUN KAPULAGA ( Amomum cardamomum )

## H AFSAH R IYANTI , S ORTA B ASAR I DA S IMANJUNTAK , H ERY W INARSI
Fakultas Biologi, Universitas Jenderal Soedirman, Jalan dr. Suparno 63 Purwokerto 53122

## A B S T R A C T
Oxidative stress in a patient with diabetes known to decrease the activity of GSH-PX and increase the level of blood glucose. Glibenclamide is  commonly  used  by  patients  with  diabetes  to  lower  the blood  glucose.  However,  the  long-term  use  of  glibenclamide  may  induce  the damage of pancreatic β-cells. The extract containing flavonoids and vitamin C of cardamoms leaf can reduce free radicals. The effect of cardamoms leaf extract on the enzymes activity and the level of blood glucose in diabetic rats is yet unknown. The aim of this study was to examine the effect of cardamoms leaf extract administration in the GSH-PX activities and the level of blood glucose of diabetic rats. The method used in this study was experimental with completely randomized design (CRD). There were three groups with five replicates for each. The first group, diabetic rats as control group were given no treatment; the second group, diabetic rats were given cardamoms leaf extract at the dose of 100 mg/kg of body weight; the third group, the diabetic rat were given glibenclamide at the dose of 2 mg/kg of body weight. Blood samples were taken three times at 0, 7, and 14 days after each treatment. Parameters measured were GSH-PX activity and the level of blood glucose. The data were analyzed using ANOVA F-test with a confidence level of 95%. The result of this study showed that  the  cardamoms  leaf  extract  treatment  decreased  the  activity  of  GSH-PX  activity  and  decreased  the  level  of  blood  glucose  at  a significant level (p < 0.05) from 278.8 to 101.4 mg/dl.
K EY W ORDS : diabetic-rats, cardamom-leaf-extract, GSH-PX, blood-glucose
Corresponding Author: S ORTA B ASAR I DA S IMANJUNTAK | email: sortabida@gmail.com

## P E N D A H U L U A N
Dibetes  melitus  dikategorikan  sebagai  penyakit  yang diakibatkan  adanya  kerusakan  dari  sekresi  insulin, aksi insulin, ataupun keduanya (ADA, 2006). Penyakit ini  dapat  dicirikan  dengan  terjadinya  hiperglikemia (Nair et  al. ,  2012).  Hiperglikemia  kronis  dapat menyebabkan  kerusakan,  disfungsi  berbagai  macam organ  khususnya  mata,  ginjal,  saraf,  jantung  dan pembuluh  darah  (ADA,  2006),  serta  menyebabkan stres oksidatif (Gumieniczek et al. , 2002).
Stres  oksidatif  dapat  menurunkan  status antioksidan  dan  memicu  perkembangan  penyakit yang  terjadi  akibat  peningkatan  produksi  radikal bebas  (Sujith et  al. ,  2011),  diantaranya  adalah diabetes  (Gumieniczek et  al. ,  2002).  Tubuh  dalam keadaan  normal  terlindungi  dari  stres  oksidatif  oleh antioksidan seperti SOD, katalase, GSH-PX, Gred, GSH, asam urat, dan bilirubin ( Nair et al. , 2012). Glutation peroksidase  (GSH-PX)  yang  merupakan  antioksidan enzimatik mampu mendetoksifikasi hidrogen peroksida dan lipid hidroperoksida dengan mereduksi glutation  (Odzen et  al. ,  2002),  serta  mencegah pembentukan  radikal  bebas  baru,  atau  mengubah radikal  bebas  yang  telah  terbentuk  menjadi  molekul yang kurang reaktif (Chevion et al. , 2003). Status GSH- PX  turun  dalam  kondisi  diabetes  (Pasaoglu et  al. , 2004).
Penderita  diabetes  melitus  tipe-2  biasanya mengkonsumsi  glibenklamid  untuk  menurunkan kadar glukosa darah dikarenakan mampu menstimuli sekresi  insulin  (Baroroh et  al. ,  2011).  Pemberian glibenklamid secara terus menerus dapat menimbulkan  degranulasi  pada  sel-sel  β-pankreas (Ling et  al. ,  2006).  Tanaman  herbal  dapat  dijadikan
alternatif  dalam  pengobatan  karena  memiliki kandungan  antioksidan  yang  dapat  menjaga kesehatan  tanpa  menimbulkan  efek  toksisitas  (Jain, 2011). Salah satunya adalah daun kapulaga ( Amomum cardamomun )  yang  dilaporkan  Winarsi et  al. (2012) memiliki  senyawa  flavonoid  126,9  mg/g  ekstrak  dan vitamin  C  19  mg/g  ekstrak.  Penelitian  sebelumnya menunjukan  bahwa  kapulaga  mengurangi  efek inflamasi dan sebagai obat terapi pada penyakit asma, karena  memiliki  potensi  untuk  mengurangi  tingkat ROS,  dan  sitokin  yang  diproduksi  oleh  T  helper (Shivakumar & Shalam, 2012), akibat stres oksidatif.
Tujuan  penelitian  ini  adalah  mengetahui  efek pemberian  ekstrak  daun  kapulaga  terhadap  aktivitas glutation  peroksidase  dan  kadar  gula  darah  tikus diabetes.  Manfaat  penelitian  ini  diharapkan  dapat memberikan  informasi  mengenai  efek  pemberian ekstrak  daun  kapulaga  ( Amomum  cardamomum ) untuk  memperbaiki  status  antioksidan  tikus  diabetes dilihat  dari  aktivitas  glutation  peroksidase  (GSH-PX) dan kadar glukosa darah.

## M E T O D E
Penelitian  ini  menggunakan  15  ekor  tikus  galus  Sprague Dawley  jantan  berumur  2–3  bulan,  aloksan,  glibenklamid, ekstrak  daun  kapulaga,  pakan  dan  minum.  Alat  yang digunakan  adalah  spuit  injection,  sonde,  botol  minum, kandang  pemeliharaan,  tabung  penampung  darah  dan sentrifuge.  Penelitian  ini  dilakukan  selama  dua  bulan  sejak Oktober 2012–Februari 2013.
Penelitian  dilakukan  secara  eksperimental  dengan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  yang  dibagi  menjadi  tiga perlakuan  yaitu  tikus  diabetes  tanpa  perlakuan  (kontrol), tikus  diabetes  yang  diberi  glibenklamid  dan  tikus  diabetes yang diberi ekstrak daun kapulaga. Perlakuan ekstrak daun kapulaga  dengan  dosis  100  mg/kg  berat  tubuh  dan
perlakuan glibenklamid dengan dosis 2 mg/kg berat tubuh. Masing-masing  perlakuan  menggunakan  5  ekor  tikus. Parameter  yang  diukur  adalah  aktivitas  glutation peroksidase  (nmol/mg/menit)  dan  kadar  gula  darah (mg/dl).
Tikus Sprague dawley jantan dipuasakan selama 24 jam kemudian  diinjeksi  dengan  aloksan  monohidrat  yang dilarutkan dalam larutan NaCl fisiologis steril dengan dosis 120  mg/kg  bb  secara  intraperitoneal  (Kim et  al. ,  2006). Pengukuran  kadar  gula  darah  dilakukan  pada  hari ketujuh setelah induksi aloksan. Kisaran diabetogenik aloksan untuk memperlihatkan  aktivitas  toksisitas  antara  180–200  mg/dl (Jeloda r et al. , 2007), namun untuk ditetapkan dabetes dan digunakan  sebagai  hewan  uji  diambil  yang  kadar  glukosa darah ≥ 200 mg/dl.
Ekstrak daun kapulaga yang akan diberikan sebelumnya di  larutkan  dengan  aquabides,  kemudian  diberikan  secara oral  dengan  dosis  100  mg/kg  berat  badan  tikus.  Obat (glibenklamid) diberikan dengan dosis 2 mg/kg berat badan tikus  (Kim et  al ,  2006).  Air  dan  pakan  standar  diberikan secara  ad  libitum  selama  masa  percobaan.  Tikus  dibagi  ke dalam  tiga  pelakuan,  perlakuan  pertama  sebanyak  5  ekor tikus  yang  tidak  diberi  perlakuan  (kontrol),  perlakuan kedua  sebanyak  5  ekor  tikus  diabetes  diberi  glibenklamid dengan  kode  G1-5,  dan  perlakuan  ketiga  sebanyak  5  ekor tikus  diabetes  diberi  ekstrak  daun  kapulaga  dengan  kode K1-5.  Perlakuan  ekstrak  daun  kapulaga  maupun glibenklamid pada masing-masing perlakuan diberikan pada pagi hari selama dua minggu.
Pengambilan  sampel  plasma  darah  untuk  pengukuran aktivitas  enzim  glutation  peroksidase  dilakukan  pada  hari ke-0,  ke-7  dan  ke-14.  Sampel  darah  tikus  diambil  melalui vena orbital dengan menggunakan pipet kapiler hematokrit merk  Nesco  sebanyak  1  cc.  Darah  yang  telah  ditampung selanjutnya di sentrifus untuk mendapatkan plasma selama 10 menit dengan kecepatan 3.000 rpm. Plasma yang sudah terpisah  dipipet  kedalam  tabung  ependorf  lain  dan  siap untuk diuji.
Pengukuran kadar  gula  darah  tikus  menurut  Soemardji (2004)  dilakukan  menggunakan  Glucose  test  merk  Nesco. Tikus  yang  akan  diuji  gula  darahnya,  sebelumnya  bagian ekor  yang  akan  dipotong,  dibasahi  dengan  alkohol  70% kemudian  digunting,  tetesan  darah  pertama  dibuang, tetesan  darah  berikutnya  akan  diserap  oleh  test  strip. Pendarahan  tikus  dihentikan,  tunggu  5  detik  sampai  pada layar  Gluco  test  muncul  kadar  gula  darah  dalam  satuan mg/dl.  Pengukuran  aktvitas  GSH-PX  menggunakan  metode Xia et al (1995).
Data  yang  diperoleh  dianalisis  menggunakan  analisis ragam  (ANOVA)  menggunakan  uji  F  dengan  tingkat kepercayaan  95%.  Apabila  antar  perlakuan  terdapat perbedaan  yang  bermakna,  dilanjutkan  dengan  uji  Beda Nyata Terkecil (BNT).

## H A S I L D A N P E M B A H A S A N
Aktivitas  Glutation  Peroksidase  (GSH-PX)  tikus diabetes galur Sprague dawley yang diinduksi aloksan sebesar  18,34  nmol/mg/menit  ternyata  lebih  rendah dibandingkan  tikus  normal  (86,6  nmol/mg/menit) (Winarsi et  al., 2012).  Moussa  (2008)  bahwa  dalam tubuh  penderita  diabetes  aktivitas  GSH-PX  menurun. Pemberian  aloksan  yang  merupakan  derivat  asam urat menyebabkan nekrosis sel-sel β pankreas akibat meningkatnya stres oksidatif (Euteuk, 2010), sehingga sekresi  insulin  akan  menurun  dan  mengakibatkan hiperglikemia (Gong et al. , 2012).
Perbaikan  aktivitas  GSH-PX  tikus  diabetes  dalam penelitian  ini  dilakukan  dengan  pemberian glibenklamid dan EDK. Aktivitas GSH-PX setelah satu minggu  pertama  pada  kelompok  tikus  yang  diberi glibenklamid  menunjukkan  adanya  peningkatan dibandingkan  saat  awalnya.  Begitu  pula  dengan perlakuan  EDK.  Namun,  berdasarkan  analisis kemaknaan ANOVA dengan uji F tidak berbeda nyata (p > 0,05).
Pemberian  glibenklamid  setelah  satu  minggu berikutnya  menunjukan  aktivitas  GSH-PX  menurun, berbeda  halnya  dengan  pemberian  EDK  yang aktivitasnya  meningkat  dari  29,40  menjadi  47,97 nmol/mg/menit (Gambar 1). Meskipun ada peningkatan  namun  berdasarkan analisis kemaknaan ANOVA tidak berbeda nyata (p > 0,05).
Gambar 1 . Aktivitas GSH-PX Tikus Diabetes Keterangan: grafik yang diikuti huruf sama menunjukkan tidak ada perbedaan yang nyata pada uji BNT 5%(p > 0,05) setiap perlakuan
Perlakuan  glibenklamid  pada  tikus  diabetes  tidak mempengaruhi  aktivitas  GSH-PX.  Ling et  al. (2006) menambahkan pemberian glibenklamid pada penderita  diabetes  hanya  mampu  memperbaiki sekresi  insulin  untuk  menurunkan  kadar  glukosa darah.  Aktivitas  antioksidannya.  Berbeda  halnya dengan  perlakuan  EDK  pada  tikus  diabetes  yang menunjukan  adanya  peningkatan  aktivitas  GSH-PX baik  satu  maupun  dua  minggu  setelah  intervensi. Sesuai dengan hasil penelitian yang dilakukan Kaleem et  al. (2006),  memberikan  ekstrak  daun  Srikaya ( Anona  squamosa )  dan  Kalaivani et  al. (2008), memberikan  ekstrak  daun  Cassia  ( Cassia  auriculata ) pada  tikus  diabetes,  ternyata  dapat  meningkatkan aktivitas GSH-PX. Demikian pula yang telah dilakukan Dhuley  (1999),  bahwa  biji  kapulaga  yang  diberikan kepada  tikus  dengan  pakan  tinggi  lemak,  mampu meningkatkan aktivitas GSH dalam darah. Bhattacharjee et  al. (2007),  menyatakan  didalam  biji kapulaga  terdapat  senyawa  flavonoid,  dapat menetralkan lipid peroksida dan hidrogen peroksida.
Selain  flavonoid  juga  terdapat  vitamin  C  yang dalam EDK (Winarsi et al. , 2012). Kandungan vitamin C  dalam  EDK  diduga  mampu  memperkuat  aktivitas GSH-PX.  Seperti  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Day dan  Lal  (2012)  pemberian  vitamin  C  mampu meningkatkan  aktivitas  GSH-PX  secara  signifikan.
S CRIPTA B IOLOGICA | VOLUME 1 | NOMER 2 | JUNI 2014 | 153–156 | HTTPS :// DOI . ORG /10.20884/1. SB .2014.1.2.442
Pemberian  EDK  yang  memiliki  kandungan  flavonoid dan  vitamin  C  sudah  memperlihatkan  adanya peningkatan  aktivitas  GSH-PX.  Tampak  bahwa kapulaga  sebagai  tanaman  dengan  kandungan antioksidan memiliki kemampuan untuk memperbaiki kerja antioksidan enzimatis.
Kadar  gula  darah  tikus  diabetes  yang  diinduksi aloksan  sebelum  diberi  perlakuan  sebesar  287.8 mg/dl.  Kadar  gula  tersebut  ternyata  lebih  tinggi dibandingkan  tikus  normal  (110  mg/dl)  (Winarsi et al. ,  2012).  Aloksan  bersifat  toksik  dan  selektif terhadap  sel  β  pankreas  yang  memproduksi  insulin, karena  terakumulasinya  aloksan  melalui  glukosa transporter  yaitu  GLUT2.  Terakumulasinya  aloksan pada  sel  β  pankreas  dikarenakan  aloksan  memiliki sifat  yang  analog  dengan  glukosa,  sehingga  diterima oleh  GLUT2  dan  dapat  masuk  kedalam  membran plasma  lipid  bilayer  sel  β  pankreas.  Akibat  dengan masuknya  aloksan  kedalam  sel  β  pankreas  adalah kerusakan granula-granula penghasil insulin (Lenzen, 2007), dan naiknya kadar gula darah.
Perlakuan  glibenklamid  dan  EDK  pada  tikus diabetes dalam menurunkan kadar gula darah setelah pemberian  satu  minggu  menujukan  hasil  yang berbeda  (p  <  0,05).  Setelah  dua  minggu  perlakuan glibenklamid dan EDK menujukan hasil yang berbeda nyata (p < 0,05) dalam menurunkan kadar gula darah tikus diabetes (Gambar 2).
Perlakuan glibenklamid yang merupakan golongan sulfonylurea,  merupakan  obat  pilihan  bagi  penderita diabetes  dewasa  yang  terbukti  mampu  menurunkan kadar  gula  darah  menjadi  normal.  Glibenklamid bekerja  merangsang  sekresi  insulin  di  kelenjar pancreas (Departemen Kesehatan RI, 2005).
Gambar 2 . Kadar Gula Darah Tikus Diabetes. Keterangan: grafik yang diikuti huruf sama menunjukkan hasil yang berbeda nyata pada uji BNT 5%(p < 0,05) setiap perlakuan
Pemberian  EDK  pada  tikus  diabetes  juga menunjukan  penurunan,  seperti  penelitian  yang dilakukan  Elshater et  al. (2009)  dan  Zainab et  al . (2006),  berupa  ekstrak  etanol  jahe  ( Zingiber officinale )  yang  menunjukan  penurunan  kada  gula darah.  Elshater et al. (2009) menyatakan  bahwa  jahe mengandung  senyawa  fenolik  (gingerol,  shagaol, zingerone,  dan  paradol)  yang  dapat  memperbaiki sekresi  insulin  sel  β  pankreas.  Raj et  al .  (2011) menyatakan,  pemberian  ekstrak  etanol  rhizom lengkuas  ( Alpinia  calcarata )  yang  mengandung senyawa  flavonoid,  alkaloid,  dan  kumarin  yang memiliki fungsi yang sama dengan ekstrak etanol jahe.
Sifat  vitamin  C  sebagai  antioksidan  yang  kuat mampu  meredam  ROS  yang  mengakibatkan kerusakan  jaringan  pada  penderita  diabetes  (Lee et al. ,  2004).  Penelitian  yang  dilakukan  Dakhale et  al. (2011)  menunjukan  kombinasi  pemberian  vitamin  C dengan  metformin  mampu  mengontrol  kadar  gula pada  penderita  diabetes.  ngan  metformin  mampu mengontrol  kadar  gula  pada  penderita  diabetes. Metformin  yang  berkerja  memperbaiki  transport glukosa  kedalam  sel-sel  otot  (Departemen  Kesehatan RI,  2005)  dan  vitamin  C  yang  mampu  meredam  ROS (Lee et  al. ,  2004),  merupakan  kombinasi  yang  baik dalam mengendalikan hiperglikemia yang diakibatkan oleh rusaknya sel β pankreas.

## K E S I M P U L A N
Berdasarkan  hasil  dan  pembahasan  maka  dapat diambil  kesimpulan  bahwa  pemberian  ekstrak  daun kapulaga  pada  tikus  diabetes  belum  dapat meningkatkan  aktivitas  glutation  peroksidase  (GSH- PX) tetapi  dapat  menurunkan  kadar  gula  darah  tikus diabetes.  Perlunya  penelitian  lebih  lanjut  dengan menggunakan dosis ekstrak daun kapulaga yang lebih tinggi atau mengkombinasikan ekstrak daun kapulaga dan glibenklamid guna memperbaiki status GSH-PX.

## D A F T A R R E F E R E N S I
American  Diabetes  Association  (ADA).  2006.  Diagnosis  and classification of diabetes mellitus. Diabetes Care. 2:43–48.
Baroroh  F,  Nufrina  A,  Hari  S.  2011.  Uji  efek  antihiperglikemik ekstrak etanol daun Kacapiring ( Gardenia augusta , Merr) pada tikus putih jantan galur Wistar. Jurnal Ilmiah
Kefarmasian.1(1):43–53.
Bhattacharjee  S,  Rana  T,  Sengupta  A.  2007.  Inhibition  of  lipid peroxidation  and  enhancement  of  GST  activity  by Cardamom and Cinnamon during chemically induced colon carcinogenesis in Swiss albino mice. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention. 8:578–582.
Chevion S, Danny SM, Yuval H, Yoav S, Gilad R, Benny A, Eduard B,
Earl  RS,  Yoram  E.  2003.  Plasma  antioxidant  status  and  cell injury after severe physical exercise. PNAS. 100(9):5119–5123.
Dakhale  GN,  Chaudhari  HV,  Shrivastava  M.  2011.  Supplementation of vitamin C reduces blood glucose and  improves glycosylated hemoglobin in type 2 diabetesmellitus: a randomized, double– blind study. Advances in Pharmacological Sciences. 195–271.
Day L, Lal SS. 2012. Supplementation effect of vitamin C and vitamin E on oxidative stress in post menopausal diabetic woman. The Journal of Diabetic Research. 12(2).
Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia.  2005.  Pharmaceutical care untuk penyakit diabetes mellitus.  [diakses pada tangal 01 Januari 2013]. Tersedia pada: http://ilmufarmasis. filr.wordpress. com//2011/03/ph–care–dm.pdf.
Dhuley  JN.  1999.  Anti–oxidant  effects  of  Cinnamon  ( Cinnamomum verum )  bark  and  greater  Cardamom  ( Amomum  subulatum ) seeds  in  rats  fed  high  fat  diet.  Indian  Journal  of  Experimental Biology.37(3):238–242.
Elshater AA, Muhammad MAS, Mahrous MAM. 2009. Effect of ginger extract consumption on levels of blood glucose, lipid profile and kidney  functions  in  Alloxan  induced–diabetic  rats.  Egyptian Academic Journal Biology. Science. 2(1):153–162.
Eutuk  EU.  2010.  Animals  models  for  studying  diabetes  mellitus. Agriculture  and  Biology  Journal  of  North  America.  1(2):130– 134.
Gong F, Fenglin L, Wanming Z, Jing L, Zhong Z. 2012. Effects of crude flavonoids  from  Tatary  Buckwheat  on  Alloxan  induced oxidative  stress  in  mice.  Bangladesh  Journal  of  Pharmacology. 7:124–130.
Gumieniczek A, Hanna H, Zbigniew W, Justyna N. 2002. Changes in antioxidant  status  of  heart  muscle  tissue  in  experimental diabetes in rabbits. Acta Biochimica Polonica. 49(2):529–535. Jain  N,  Goyal  S,  Ramawat  KG.  2011.  Evaluation  of  antioxidant properties and total phenolic content of Medicinal plants used in  diet  therapy  during  postpartum  healthcare  in  Rajasthan. International journal of pharmacy and pharmaceutical sciences. 3(3):248–253.
Jelodar  G,  Maleki  M,  Shahram  S.  2007.  Effect  of  walnut  leaf, coriander  and  pomegranate  on  blood  glucose  and histopathology  of  pancreas  of  Alloxan  induced  diabetic  rat. African  Journal  Traditional  Complementary  and  Alternative Medical.4 (3):299 – 305.
Kalaivani  A,  Umamaheswari  A,Vinayagam  A,  Kalaivani  K.  2008.
Anti–hyperglycemic  and  antioxidant  properties  of  Cassia auriculata leaves and flowers on Alloxan induced diabetic rats. Pharmacologyonline. 1:204–217.
Kaleem  M,  Asif  M,  Ahmed  QU,  Bano  B.  2006.  Antidiabetic  and antioxidant activity Annona squamosa Extract in Streptozotocin–induced  diabetic  rats.  Singapore  Medical Journal. 47(8):670.
Kim  SJ,  Ju  BJ,  Choi  WC,  Kin  CS.  2006.  Hypoglemic  and antihyperlipidemic  effect  of  four  Korean  medical  plants  in Alloxan  induce  diabetic  rats.  American  Journal  Biochemistry Biotechnology. 2(4):154–160.
Lee  D,  Folsom  AR,  Harnack  L,  Halliwell  B,  Jacobs  DR.  2004.  Does supplemental vitamin C increase cardiovascular disease risk in women  with  diabetes?.  American  Journal  Clinical  Nutrition. 80:1194–200.
Lenzen S. 2007. Alloxan and Streptozotocin diabetes.[ diakses pada tanggal 24 Januari
2013].
Tersedia pada http://www.sawlepzig.de/forschung/projekte/zeitstrukturen– endokrinersysteme/endokrinologieiii/endo_07–lenzen.pdf.
Ling Z, Wang Q, Stange G, Veld PI, Pipeleers D. 2006. Glibenclamide treatment  recruits  β  cell  subpopulation  into  elevated  and sustained basal insulin synthetic activity. Diabetes. 5:78–85.
Moussa  SA.  2008.  Oxidative  stress  in  diabetes  mellitus.  Romanian Journal Biophysic. 18(3):225–236.
Nair  SP,  Shah  NC,  Shah  RM.  2012.  Alteration  in  enzymatic antioxidant  defense  in  diabetes  mellitus.  Biomedical  Research. 23(3):402–404.
Ozden  M.,  Maral  H,  Akydin  D,  Cetnalp  P,  Kalender  B.  2002. Erythrocyte glutathione peroxidase activity, plasma malondialdehyde  and  erythrocyte  glutathione  levels  in hemodialysis and CAPD patients. Clinical Biochemistry. 35:269– 273.
Paşaoğlu  H,  Banu  S,  Neslihan  B.  2004.  Lipid  peroxidation  and resistance  to  oxidation  in  pantiens  with  type  2  diabetes mellitus. Tohoku Journal Experimental Medicine. 203:211–218.
Raj N, Nadeem S, Jain S, Raj C, Nandi KCP. 2011. Ameliorative effects of  Alpinia  calcarata  in  Alloxan–induced  diabetic  rats.  Digest Journal of Nanomaterials and Biostructures. 6(3):891–897.
Ramakrishna V, Jailkhani R. 2007. Evaluation of oxidative stress in insulin dependent diabetes mellitus (IDDM) patients. Diagnostic Phatology. 2(22):1–6.
Shivakumar  L,  Shalam.  2012.  A  short  review  on  management  of asthma  through  alternative  therapies.  International  Journal  of Life  Sciences  Biothecnology  and  Pharma  Reserch.  1(1):2250– 3137.
Soemardji  AA.  2004.  Penentuan  kadar  gula  darah  mencit  secara cepat : untuk diterapkan dalam penapisan aktivitas antidiabetes in vivo. Acta Pharmaceutica Indonesia. 29(3):115.
Winarsi  H,  Sasongko  ND,  Purwanto  A,  Nuraeni  I.  2012.  Minuman berbasis kestrak kapulaga sebagai antioksidan yang berpotensi antidiabetes.Laporan  Penelitian  MP3EI.  LPPM.  Universitas Jenderal Soedirman.
Xia E, Govinda R,  Holly VR, Ahmad RH, Arlan R. 1995. Activities of antioxidant enzymes in various tissues of male fischer 344 rats are altered by food restriction. Am Ins Nutr. 195–201.
Zainab  MA,  Martha  T,  Khaled  KA,  Riitta  PS,  Muslim  A.  2006.  Anti– diabetic  and  hypolipidaemic  properties  of  ginger  (Zingiber officinale)  in  streptozotocin–induced  diabetic  rats.  British Journal of Nutrition. 96:660–666.