DOI: https://doi.org/10.51544/jmkm.v7i2.3194
© 2022 Jurnal Mutiara Kesehatan Masyarakat. This is an open access article under the CC BY-SA license Website: http://e-journal.sari-mutiara.ac.id/index.php/JMKM

## IDENTIFIKASI EKSTRAK METANOL BIJI KAKAO
( Theobroma cacao L .) SEBAGAI BAHAN DASAR PASTA GIGI
Cut  Aja  Nuraskin 1* , Reca 2 Teuku Salfiyadi 3
1,2 Program Studi Terapi Gigi, Jurusan Kesehatan Gigi, Politeknik Kesehatan Kemenkes RI Aceh Indonesia, Jl. Soekarno-Hatta,  Kampus  Terpadu Poltekkes Aceh,  Lampeunerut Aceh  Besar  23352,
Indonesia
*Penulis Korespondensi: Cut Aja Nuraskin Program Studi Terapi Gigi, Jurusan Kesehatan Gigi, Politeknik Kesehatan Kemenkes RI Aceh Indonesia,Jl.Soekarno-Hatta, Kampus Terpadu
Poltekkes Aceh, Lampeunerut Aceh Besar 23352,Indonesia, Email: cutajanuraskin2@gmail.com,  Phone:  081263711491

## ABSTRAK
Simplistis adalah bahan alam yang digunakan untuk obat dan belum mengalami perubahan proses berupa bahan yang telah dikeringkan. Pengeringan diperlukan   dalam   menjaga   kualitas   suatu simplistis.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menganalisis  jumlah  ekstrak  metanol  biji  kakao (Theobroma cacao L.), dan menghitung nilai hasil, berat kering simplisia, susut pengeringan, berat ekstrak, persen  rendemen dan mengidentifikasi senyawa  aktif dalam biji  kakao yang diambil dari daerah  Sare  Aceh  Kabupaten  Aceh  besar  Provinsi  Aceh.  Jenis  penelitian  uji  laboratorik dilaksanakan di laboratorium FMIPA Universitas Syiah Kuala. Waktu Pelaksanaan   Maret sampai dengan Mey 2022.   Penelitian ini diawali dengan metode pengeringan angin. Ekstraksi dilakukan dengan  metode  maserasi  menggunakan  pelarut  metanol  dengan  perbandingan  1:10  selama  3x  24 jam.  Kemudian,  ekstrak  dipekatkan  dengan  Rotary  evaporator,  dihitung  nilai  rendemen  dan  uji fitokimia.  Hasil  identifikasi  menunjukkan  berat  kering  simplistis  1,300  gram,  susut  pengeringan 2,448  gram,  rendemen  4,75%,  berat  ekstrak  61,78  gram.  Hasil  shrining  fitokimia  sampel  ekstrak metanol biji kakao mengandung senyawa fenolik, flavonoid, tanin, terpen id, saponin dan alkaloid. Kesimpulan  ekstrak  metanol  biji  kakao  Sare  Aceh  mengandung  kandungan  metabolik  sekunder dengan persen rendemen 4,75.Saran Sebaiknya ekstrak metanol biji kakao menjadi layak dijadikan bahan sebagai bahan dasar obat.
Kata kunci : Identifikasi,  ekstrak, metanol, biji kakao

## ABSTRACT
Simplistic is a natural material used for medicine and has not undergone a process change in the form of dried material. Drying is needed in maintaining the quality of a simplistic. This study aims to  analyze  the  amount  of  methanol  extract  of  cocoa  beans  (Theobroma  cacao  L.),  and  calculate yield values, simplistic dry weight, drying loss, extract weight, percent yield and identify the active compounds  in  cocoa  beans  taken  from  the  Sare  Aceh  area,  Aceh  Besar  district.  Aceh  Province. This  research  begins  with  the  wind  drying  method.  Extraction  was  carried  out  by  maceration method  using  methanol  solvent  in  a  ratio  of  1:10  for  3x  24  hours.  Then,  the  extract  was concentrated with a rotary evaporator, the yield value was calculated and the phytochemical test was carried out. The identification results showed a simplistic dry  weight of 1,300 grams, drying loss  2.448  grams,  yield  of  4.75%,  extract  weight  of  61.78  grams.  The  results  of  phytochemical screening of samples of cocoa bean methanol extract  contained phenolic compounds, flavonoids, tannins, terpenoids, saponins and alkaloids. Conclusion The methanol extract of Sare Aceh cocoa beans  contains  secondary  metabolic  content  with  a  yield  of  4.75.  Suggestion  It  is  recommended that  the  methanol  extract  of  cocoa  beans  be  suitable  as  an  ingredient  as  a  basic  ingredient  of medicine.
Keywords: Identification, metabolism, cocoa bean extract
DOI: https://doi.org/10.51544/jmkm.v7i2.3194
© 2022 Jurnal Mutiara Kesehatan Masyarakat. This is an open access article under the CC BY-SA license Website: http://e-journal.sari-mutiara.ac.id/index.php/JMKM

## PENDAHULUAN
Indonesia terkenal dengan  kekayaan  tumbuhan yang berkhasiat  sebagai obat.(1). Obat tradisional  merupakan  pengobatan  alternatif  yang  digunakan  secara  turun  temurun  oleh masyarakat Indonesia (2). Salah satu bahan alam yang digunakan sebagai obat herbal antara lain biji  kakao  (Theobroma  cacao  L.).  Biji  kakao  sering  digunakan  untuk  salah  satu  untuk meningkatkan stamina tubuh dan menghilangkan lelah.
Tanaman  kakao  banyak  ditemukan  di  Provinsi  Aceh,  daerah  Sare  Aceh  merupakan daerah manifestasi panas bumi yang terletak di zona outflow panas bumi gunung api Agam (3) Daerah  panas  bumi  berada  pada  ketinggian  59  sampai  89  m  di  atas  permukaan  laut.  Letak geografis dan  kondisi lingkungan berdampak pada biosintesis metabolit sekunder tanaman dan dapat  meningkatkan  jumlah  metabolit  sekunder  seperti  fenol,  dan  alkaloid.  Tanaman  Kakao tumbuh di daerah tropis dengan tinggi pohon 12-15m.
Biji  kakao  mempunyai  beberapa  komponen  aktif  salah  satunya  adalah  polifenol  yang didominasi  oleh  katekin  dan  epillogalokatekin,  antosianin,  dan  prosianidin  (4).  Polifenol memiliki  aktivitas  pencegahan  melawan  penyakit  infeksi  dan  degeneratif  termasuk  penyakit mulut.(5)
Polifenol  berpotensi  sebagai  anti  bakteri  dengan  meracuni  protoplasma,  merusak  sel bakteri (Afni, 2015). Polifenol dapat mengurangi pembentukan biofilm dan produk asam dari S. Mutans merupakan  suatu  senyawa  yang  bersifat  antibakteri  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri (7). S. Mutans. merupakan bakteri gram positif, berbentuk bulat atau lonjong (8), Bakteri utama penyebab karies gigi (9).
Ekstrak  biji  kakao  memiliki  efek  antibakteri  yang  tergolong  kuat  dalam  menghambat bakteri Porphyromonas gingivalis (5) Ekstrak kakao memiliki aktivitas antioksidan paling tinggi dengan  nilai  IC50 170 ppm. Ekstrak biji  kakao dapat menghambat pertumbuhan bakteri  mulai dari  konsentrasi  6,25%  hingga  100%,  ekstrak  biji  kakao  pada  konsentrasi  100%,  50%,  25  %, 12,5 %, 6,25 %, 3,13 %,  1,56 % dan 0,78% efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri S. Mutans . Terbentuknya daya hambat ekstrak biji kakao diduga dalam ektrak terkandung senyawa aktif seperti flafonoid, saponin dan alkaloid (10).
Berdasarkan hasil uji pendahuluan yang telah dilakukan peneliti dengan metode cakram ekstrak  metanol  biji  kakao  bersifat  antibakteri  dan  memiliki  daya  hambat  yang  kuat  terhadap bakteri S. Mutans pada konsentrasi 10 %, 20 %,  40 %, 60 %, 80 %.  Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengkaji perhitungan mutu ekstrak, bobot ekstrak , bobot hasil, bobot  rendemen dan mengidentifikasi  golongan  senyawa  metabolik  sekunder  dalam  biji  kakao  dengan  uji fitokimia.

## METODE

## Jenis penelitian
Jenis  penelitian  ini  adalah  eksperimen  laboratorium  yaitu  penelitian  untuk  melihat  penetuan nilai hasil, berat kering simplistis, susut pengeringan, berat ekstrak, persen rendemen

## Tempat dan Waktu penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  di  laboratorium  FMIPA  Universitas  Syiah  Kuala  Banda  Aceh  sejak April-juli  2022.

## Bahan
Bahan  yang  diperlukan  adalah  biji  kakao,  pelarut  metanol.  Air  suling  digunakan  untuk melarutkan  ekstrak. DMSO (Dimethyl  Sulfoxide) Polarity  Solvent digunakan  untuk membantu
DOI: https://doi.org/10.51544/jmkm.v7i2.3194
© 2022 Jurnal Mutiara Kesehatan Masyarakat. This is an open access article under the CC BY-SA license Website: http://e-journal.sari-mutiara.ac.id/index.php/JMKM
melarutkan ekstrak dalam air dan melarutkan reagen khusus dalam pengujian ekstrak fitokimia.

## Alat
Peralatan  yang  digunakan  adalah  alat  maserasi,  3  buah  glass  beker  ukuran  2000  cc,  sendok pengaduk, kertas saring, corong penyaring, piring porselen rotary evaporator, tabung reaksi, rak tabung reaksi, timbangan analitik, botol vial, dan alat penunjang lainnya.

## Sampel penelitian
Sampel penelitian ini adalah biji kakao yang berasal dari Sare Aceh Besar 2500 kg. dibersihkan kulit ari dari biji di kering anginkan selama 2 minggu dan dihaluskan menggunakan alu/blender hingga menjadi simplisia. Simplisia ditimbang untuk perhitungan rendemen.

## Ekstraksi
Sampel  simplisia  ditimbang  1300  kg  biji  kakao,  dimaserasi  dengan  metanol  selama  3x24  jam sampai  pelarut  jernih.  Resudu  dan  Filtrat  disaring  dengan  kertasa  saring  dan  filtrat  diuapkan dengan  rotary  evaporator  untuk  mendapatkan  ekstrak  metanol.  Sebelum  digunakan  terlebih dahulu  dilakukan  uji  kualitas  ekstrak,  bobot  susut,  bobot  ekstrak,  bobot  rendemen,  bobot simplisia, bobot segar sampel.

## Uji fitokimia
Skrining  fitokimia  adalah  pemeriksaan  kualitatif  metabolit  sekunder  senyawa  aktif  biologis yang ditemukan pada tanaman.

## Identifikasi Senyawa Triterpenoid dan Steroid
Ekstrak larutan ditambah asam asetat anhidrat sampai zat terendam. Kemudian diamkan selama 15  menit  dan  ditambahkan  1  tetes  asam  sulfat  pekat.  Langkah  selanjutnya  adalah  mengamati perubahan warna. Bila terbentuk biru-hijau  maka hasilnya positif steroid. Bila terbentuk  warna ungu, hasilnya positif triterpenoid.

## Identifikasi Senyawa Alkaloid
Sebanyak 2 ml ekstrak ditambahkan 1,5 ml asam klorida 2%. Larutan dibagi menjadi 3 tabung reaksi.  Pada  tabung  1  sebagai  pembanding  ditambahkan  pereaksi  Meyer  2  dan  ditambahkan pereaksi  Dragendorff  pada  tabung  3.  Adanya  alkaloid  ditunjukkan  dengan  adanya  endapan kekeruhan  atau  putih  kekuningan  pada  penambahan  pereaksi  Meyer,  dan  endapan  merah  pada penambahan pereaksi Dragendorff.

## Identifikasi Senyawa Flavonoid
Untuk  mengidentifikasi  flavonoid,  ditambahkan  larutan  logam  magnesium  dan  4-5  tetes  asam klorida  pekat.  Adanya  aglikon  flavonoid  ditunjukkan  dengan  perubahan  warna  menjadi  merah atau jingga.

## Identifikasi Senyawa Fenolik
Untuk  mengidentifikasi  Senyawa  Fenolik,  2  ml  ekstrak  ditambahkan  3  tetes  Fe  Cl3.  Jika terbentuk larutan berwarna hijau atau biru menjadi hitam menunjukkan adanya senyawa fenolik.

## Identifikasi Senyawa Saponin
Untuk  mengidentifikasi  Senyawa  Saponin  larutan  Ekstrak  dipanaskan  selama  5  menit,  setelah dingin disaring. Filtrat dikocok vertikal selama 1-2 menit. Senyawa saponin ditunjukkan dengan
DOI: https://doi.org/10.51544/jmkm.v7i2.3194
© 2022 Jurnal Mutiara Kesehatan Masyarakat. This is an open access article under the CC BY-SA license Website: http://e-journal.sari-mutiara.ac.id/index.php/JMKM
adanya buih setinggi 1 cm dan dibiarkan selama 1 jam. Busa juga terbentuk pada penambahan 1 tetes asam klorida (HCl) = 0,1 N

## Identifikasi Senyawa Tanin
Larutan  ekstrak  ditambahkan  gelatin  1%  ke  dalam  tabung  reaksi.  Hasil  positif  ditunjukkan dengan terbentuknya endapan putih.

## HASIL

## Hasil Perhitungan Ekstrak Rendemen Biji Kakao
Perhitungan nilai rendemen ekstrak Perhitungan parameter kualitas ekstrak biji kakao diperoleh data  rendemen  (4,75%).  Berat  ekstrak  61,78,  susut  pengeringan  2,448,  berat  kering  simplisia 1300  kg.  Hal  tersebut  disajikan  pada  Tabel-1  berikut  adalah  hasil  ekstraksi  biji  kakao  Sare Aceh.
Tabel 1. Hasil Ekstrak Metanol biji kakao Sare Aceh Kecamatan Lembah Selawah Aceh Besar
Sumber Data Riset  (% Rendemen ekstrak = (Berat Ekstrak / Berat Sampel) x 100)

## Uji Organoleptic
Uji  organoleptik  atau  uji  indera  adalah  pengujian  yang  menggunakan  indera  manusia  sebagai alat  ukur daya terima bahan atau sampel. Uji  organoleptik dilakukan pada ekstrak metanol biji kakao, yang disajikan pada tabel 2 sebagai berikut ini;

## Tabel 2. Hasil Organoleptic
Ekstrak metanol Biji Kakao Organoleptic Ekstrak metanol biji kakao warna Merah bata Aroma Asam Consistency Halus

## Hasil Uji  Identifikasi
Uji fitokimia untuk mengetahui metabolit sekunder yang terkandung dalam tumbuhan. Hasil Uji fitokimia ekstrak  metanol  biji  kakao  Sare  Aceh  mengandung  metabolit  sekunder  antara  lain; fenolik, tanin, flavonoid, terpenoid, saponin, dan alkaloid, yang disajikan seperti pada tabel 3.
NO Cara Pengerin gan Waktu pengeri ngan (hari) Berat sampel segar sebelum pengeringa n gram Berat kering simplisia gram Susut pengeringa n % Rende men Berat ekstrak % 1 Kering angin 14 hari 2.500 gram 1.300 gram 2.448 4,75 % 61,78 gram
DOI: https://doi.org/10.51544/jmkm.v7i2.3194
© 2022 Jurnal Mutiara Kesehatan Masyarakat. This is an open access article under the CC BY-SA license Website: http://e-journal.sari-mutiara.ac.id/index.php/JMKM

## Tabel 3. Hasil Uji identifikasi ekstrak metanol biji kakao
Metabolit sekunder Ekstrak metanol biji kakao Fenolik + Tanin + Flafonoid + Steroid - Terpenoid + Saponin + Alkaloid + dd Mayer + Wakner +

## PEMBAHASAN
Perhitungan  parameter  kualitas  ekstrak  biji  kakao  Sare  Aceh,  hasil  proses  ekstraksi diperoleh  data  rendemen  4,75  %.  Rendemen  adalah  perbandingan  jumlah  (kuantitas)  ekstrak yang dihasilkan dari ekstraksi. Nilai rendemen merupakan  indikator penting  untuk mengetahui efektif  atau  tidaknya  suatu  penelitian,  semakin  tinggi  nilai  rendemen  yang  dihasilkan  berarti perlakuan yang ditetapkan pada penelitian tersebut semakin efektif.(11) .
Berat    ekstrak    metanol  biji  kakao  61,78  gram.    Hal  ini  menunjukkan  bahwa  senyawa yang  terkandung  di  dalam  ekstrak  metanol  biji  kakao  didominasi  oleh  senyawa  yang  bersifat polar seperti senyawa flavonoid, glikosida, tanin, dan alkaloid (12) .
Kondisi  lingkungan  Sare  Aceh    yang  ekstrim  sangat  mempengaruhi  %  rendemen  dan berat  ekstrak,  karena  tumbuhan  di  kawasan  tersebut  mampu  tumbuh  dan  beradaptasi  dengan lingkungan sekitarnya.(13)
Hasil uji organoleptic menunjukan bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak metanol biji kakao  maka  warna  merah  bata  pada  ekstrak  semakin  pekat.  Dan  menghasilkan  tekstur  ekstrak yang lembut dan memberikan aroma asam jawa. Aroma dari suatu ekstrak mempunyai peranan penting agar dapat diterima oleh masyarakat, Aroma ekstrak biji kakao yang dihasilkan semakin lama  penyimpanan  semakin  terasa  aroma  khas  ekstrak  dan  semakin  tinggi  konsentrasi  yang diberikan semakin terasa khas aroma ekstrak (14)
Uji  identifikasi  ekstrak  metanol  biji  kakao  positif  mengandung,  alkaloid  dengan  Mayer, dragendroff,  terpeoid,  saponin,  flafonoid,  fenolik.  Mekanisme  kerja  flavonoid  sebagai antibakteri  dengan  membentuk  senyawa  kompleks  dengan  protein  ekstraseluler  dan  terlarut sehingga  dapat  merusak  membrane  sel  bakteri  dan  diikuti  dengan  keluarnya  senyawa  intra seluler. (15).
Identifikasi  Senyawa  flafonoid  merupakan  senyawa  fenol  dengan  cara  menghambat sintesis  dari  asam  nukleat  dari  bakteri.(16)  identifikasi  Senyawa  saponin  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri  karena  dapat  menurunkan  tegangan  permukaan  dinding  sel  bakteri, sehingga mengganggu metabolisme yang akan menyebabkan sel bakteri mati (17).
Identifikasi  Mekanisme  kerja  tanin  sebagai  antibakteri  dengan  menghambat  enzim reverse  transcriptase  dan  DNA  topoisomerase  sehingga  sel  bakteri  tidak  dapat  terbentuk,  dan mekanisme  anti  mikroba  senyawa  fenolik  dengan  merusak  lipid  pada  membran  plasma mikroorganisme sehingga menyebabkan isi sel keluar menyebabkan bakteri mati.

## SIMPULAN DAN SARAN
DOI: https://doi.org/10.51544/jmkm.v7i2.3194
© 2022 Jurnal Mutiara Kesehatan Masyarakat. This is an open access article under the CC BY-SA license Website: http://e-journal.sari-mutiara.ac.id/index.php/JMKM
Hasil identifikasi menunjukkan bahwa terdapat perbedaan berat ekstrak dan berat rendemen biji kakao  di  Sare  Aceh.  Hasil  uji  Identifikasi  ekstrak  metanol  biji  kakao  di  kawasan  Sare  Aceh positif mengandung alkaloid dengan mayer, dragendroff, terpenoid, saponin, flavonoid, fenolik, dan tanin.

## Saran
Berdasarkan  hasil  kesimpulan  disarankan  ekstrak  metanol  biji  kakao  layak  dijadikan  untuk bahan dasar pasta gigi. Karena kandungan dalam biji kakao diduga bersifat antibakteri.

## KATA PENGANTAR
Penulis  menyadari  dalam  penyusunan  artikel  ni  tidak  akan  selesai  tanpa  bantuan dariberbagai  pihak.  Karena  itu  pada  kesempatan  ini  saya  ingin  mengucapkan  terima kasihkepada :
1. Bapak  T.  Iskandar  Faisal,  S.Kp.  M.Kes  ,  selaku Direktur Politeknik Kesehatan Kemenkes Aceh.
2. Bapak  Dr.  Teuku  Salfiyadi,  SKM,  M.Pd,  selaku  Ketua jurusan keperawatan  gigi  Politeknik  Kesehatan  Kemenkes Aceh  yang  telah  memberi  fasilitas  selama  menempuh pendidikan di jurusan Diploma IV Keperawatan Gigi.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Chassagne  F, Hul S, Deharo E, Bourdy G. Natural remedies used by Bunong people in Mondulkiri province (Northeast Cambodia) with special reference to the treatment of 11 most  common  ailments.  J  Ethnopharmacol  [Internet].  2016;191:41–70.  Available  from: http://dx.doi.org/10.1016/j.jep.2016.06.003
2. Hafidhah  N,  Hakim  RF,  Fakhrurrazi  F.  Pengaruh  ekstrak  biji  kakao  (Theobroma  cacao L.)  terhadap  pertumbuhan  enterococcus  faecalis  pada  berbagai  konsentrasi.  J  Caninus Denstistry [Internet]. 2017;2(2):92–6. Available from: http://www.jim.unsyiah.ac.id/JCD/article/view/3413/1714
3. Rinaldi  Idroes,  Khairan,  Fajar  Fakri  Z.  Monograf  skrining  aktifitas  tumbuhan  yang berpotensi  sebagai  bahan  antimikroba  di  kawasan  ie  seu  um  Aceh  Besar.  Syiah  Kuala Univ Press. 2016;(ISBN 978-602-1270-52-3):58.
4. Dewi  ZY,  Nur  A,  Hertriani  T,  Studi  P,  Ilmu  M,  Gigi  K,  et  al.  Efek  Antibakteri  Dan Penghambatan  Biofilm  Ekstrak  Sereh  (Cymbopogon  nardus  L.)  Terhadap  Bakteri Streptococcus  Mutans.  Kedokt  Gigi  Univ  Gajah  Mada  [Internet].  2015;1(2):136–41. Available from: https://jurnal.ugm.ac.id/mkgi/article/view/9120/7662
5. Purnamasari DA, Munadziroh E, Yogiartono RM. Konsentrasi ekstrak biji kakao sebagai material  alam  dalam  menghambat  pertumbuhan  Streptococcus  mutans.  PDGI.
DOI: https://doi.org/10.51544/jmkm.v7i2.3194
© 2022 Jurnal Mutiara Kesehatan Masyarakat. This is an open access article under the CC BY-SA license Website: http://e-journal.sari-mutiara.ac.id/index.php/JMKM
2010;59(1):14–8.
6. Afni N, Said N, Yuliet. Uji Aktifitas Antibakteri Pasta Gigi Ekstrak Biji Pinang ( Areca catechu L . ) Terhadap Streptococcus mutans dan Staphylococcus aureus. Galen J Pharm ISSN  2442-8744. 2015;1(March):48–58.
7. Nuraskin CA, Reca, Wirza AM, Suhendra R, Faisal I, Salfiyadi T, et al. Effectiveness of Guava  Leaf  Steep  water  against  the  bacterial  growth  of  S.  Mutans  with  Microdillution Method. Res J Pharm Technol. 2021;14(11):5745–8.
8. Javed  M,  Chaundry  S.  Transmission  of  Streptococcus  mutans  from  Mother  to  Child. Pakistan Oral Dent J. 2013;32(3):493–6.
9. Vyas  YK,  Bharnaga  M    sHARMA.  In  vitro  Evaluation  of  Antibacterial  Activity  of  An Herbal  Dentrifice  Against  Sreptococcus  mutans  and  lactobacillus  acidophilus.  Indian Dent J res. 2008;
10. Wuri Handasari. Uji Daya HHambat Ekstrak Metanol daun Saga Terhadap Pertumbuhan Streptococcus mutans. 2011.
11. Asti  Permata  Nauli.  Karakteristik  Sabun  Cair  Dengan  Penambahan  Kolagen  Ikan  Air Laut Yang Berbeda. 4(4), 1–6. 2015;
12. Erawati.  Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Daun  Garcinia  daedalanthera  Dengan Metode  DPPH  (1,1-Difenil  Pikrilhidrazil)  dan  Identifikasi  Golongan  Senyawa  Kimia Dari Fraksi Paling Aktif, Skripsi, Universitas Indonesia, Depok. 2012;
13. Carey  B,  Dunstall  M,  Mcclintock  S,  White  B,  Bignall  G,  Luketina  K,  et  al.  2015 New Zealand Country Update. 2015;(April):19–25.
14. Amount. Takaran dan kriteria pasta gigi yang tepat untuk digunakan pada anak usia dini (. 2012;
15. Nuraskin  CA,  Reca  R,  Salfiyadi  T,  Abdurrahman  A,  Faisal  TI,  Soraya  C.  Toothpaste activity  test  of  laban  leaf  methanol  extract  (Vitex  pinnata)  against  the  growth  of streptococcus mutans bacteria. Open Access Maced J Med Sci. 2021;9:95–100.
16. Chismirina  S,  Poppy  A  NY.  Ekstrak  buah  jamblang  terhadap  pertumbuhan Streptococcus mutans sebagai penyebab utama karies. Dentika. 2011;16 (2):144–8.
17. Pratiwi.  PerahDaya  Hambat  Dekok  Daun  Kersen  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Staphilococcus  Aureus  Penyebab  Mastitis  Pada  Sapi.  Fak  Perten  Univ  Tanjung  Pura  p. 2010;59 (1):14–8.
18. Florensius  Rinaldi  F,  Arsyik  Ibrahim,  Jaka  Fadraersada  LR.  Identifikasi  Matabolit Sekunder  dan  Pengujian  Toksisitas  Ekstrak  Metanol  Kulit  Kayu  Laban  (Vitex  pinnata) dengan metode Brybene Shrimp Lethaltty Test (BSLT) Florensius. 2016;20–1.