ISSN 2527-8401 (p) 2527-838X (e) © 2019 JISH Pascasarjana UIN Walisongo Semarang http://journal.walisongo.ac.id/index.php/jish
Journal of Islamic Studies and Humanities Vol. 4, No. 1 (2019) 104-126 DOI: http://dx.doi.org/10.21580/jish.41.4888

## PERKEMBANGAN PENELITIAN METODE DETEKSI KANDUNGAN BABI UNTUK MENJAMIN KEHALALAN PRODUK PANGAN OLAHAN
Elisa Andriyani 1 , Nor Lutfi Fais 2 , Siti Muarifah 3 Universitas Islam Negeri Walisongo Semarang Email: 1 elisa.andriyani98@gmail.com, 2 fais.enelf@gmail.com,
3 sitimuarifah88@gmail.com

## Abstract
Halal food is the most important thing to be considered by the Indonesian Muslim community. Halal food must be free from pork contents both as a basic ingredient and in the manufacturing process. Halal issues arise when there is a process of mixing meat or lard (adulteration) in halal animal meat for economic purposes. This research is a literature study that aims to examine the development of research on methods of detec- tion of pig content in food products to ensure a food product is free from pig content and its derivatives. The method used is the study of literature in the form of journal articles, proceedings, conferences, online news and official sites that have relationships or key- words related to the method of pig content detection. The assessment results show that the detection methods that can be used are PDK (Pork Detection Kit) and enzyme- linked immunosorbent assay (ELISA) analysis methods to detect pig protein. RT- PCR (Real-Time Polymerase Chain Reaction) and digital PCR duplex droplet meth- ods for detecting pig DNA. Gas chromatography (GC) methods, UV-Vis spectros- copy and Fourier-transform infrared spectroscopy (FTIR spectroscopy) for analysis of lard. The digital PCR (dddPCR) duplex droplet method has a very specific ability to detect pork content in processed food products compared to other methods. The dddPCR detection and quantification system is suitable for quality control and routine analysis of meat products. This can be taken into consideration for the development of research methods to detect pork content in processed food products that are more effective and efficient in the future.

## Abstrak
Makanan  halal  merupakan  suatu  hal  yang  sangat  penting  untuk  diper- hatikan oleh masyarakat muslim Indonesia. Makanan halal harus terbebas
105
dari kandungan babi baik sebagai bahan dasar maupun dalam proses pem- buatannya.  Permasalahan  kehalalan  timbul  ketika  terdapat  proses  pen- campuran  daging  atau  lemak  babi  (adulterasi) pada  daging  hewan  halal untuk tujuan ekonomis. Penelitian ini merupakan studi literatur yang ber- tujuan untuk menelaah perkembangan penelitian mengenai metode de- teksi  kandungan  babi  pada  produk  makanan  guna  memastikan  suatu produk  makanan  bebas  dari  kandungan  babi  dan  turunannya.  Metode yang digunakan adalah studi literatur berupa artikel jurnal, prosiding, kon- ferensi, berita daring dan official sites yang memiliki hubungan atau kata kunci  yang  berkaitan  dengan  metode  deteksi  kandungan  babi.  Hasil pengkajian  menunjukkan  bahwa  metode  deteksi  yang  dapat  digunakan yaitu metode analisis PDK (Pork Detection Kit) dan enzyme-linked im- munosorbent assay (ELISA) untuk mendeteksi protein babi. Metode RT- PCR (Real-Time Polymerase Chain Reaction) dan duplex droplet digital PCR untuk mendeteksi DNA babi. Metode gas chromatography (GC), spektroskopi  UV-Vis  serta  spektroskopi  Fourier-transform  infrared (spektroskopi FTIR) untuk analisis lemak babi. Metode duplex droplet digital PCR (dddPCR) memiliki kemampuan yang sangat spesifik untuk mendeteksi kandungan babi dalam produk pangan olahan dibandingkan dengan metode yang lain. Sistem deteksi dan kuantifikasi dddPCR cocok digunakan untuk kontrol kualitas dan analisis rutin produk daging. Hal ini dapat  dijadikan  pertimbangan  untuk  pengembangan  metode  penelitian untuk mendeteksi kandungan babi pada produk olahan pangan yang lebih efektif dan efisien di masa yang akan datang.
Keywords: babi; halal; produk pangan olahan; studi literatur.

## Pendahuluan
Makanan  telah  menjadi  kebutuhan  dasar  manusia.  Setiap  ma- kanan yang dikonsumsi biasanya mencerminkan gaya hidup, budaya, agama, dan kesehatan suatu kelompok masyarakat. Dalam komunitas umat muslim, keputusan  untuk mengonsumsi  suatu makanan ber- gantung  pada  status  kehalalannya.  Makanan  yang  dikonsumsi  oleh umat  muslim  harus  memenuhi  syarat-syarat  yang  telah  ditetapkan oleh agama islam yaitu halalan thoyiban 1 . Seiring dengan mening- katnya  kesadaran  umat  muslim  tentang  pentingnya  mengonsumsi
1 Waharjani,  “Makanan  yang  Halal  Lagi  Baik  dan  Implikasinya  Terhadap Kesalehan  Seseorang”. Jurnal  Komunikasi  dan  Pendidikan  Islam .  Vol.  4  No.  2. Desember 2015. Hal. 193
makanan yang terjamin kehalalannya. Maka, hal tersebut mendasari banyaknya penelitian mengenai uji kehalalan suatu produk makanan.
Halal  adalah  istilah  Arab  dan  dalam  Al-Quran  yang  artinya diizinkan, disetujui, diperbolehkan. Hal ini merujuk pada makanan atau produk-produk yang boleh dikonsumsi oleh umat muslim. Halal juga dapat diekpresikan  sebagai sesuatu yang diperbolehkan untuk dikonsumsi 2 . Istilah halal juga digunakan sehubungan dengan adanya izin untuk memakan dan mengonsumsi barang-barang yang lainnya.
Pedoman tentang halalnya suatu makanan dijelaskan oleh Allah di dalam Al-Quran Surah Al-Maidah ayat 3 yang artinya “Terlarang bagimu (untuk memakan) bangkai, darah, daging babi, (daging hewan) yang disembelih atas nama selain Allah, … ” Haram adalah kebalikan dari halal sedangkan syubhat berarti ragu atau kecurigaan.
Makanan dan bahan-bahan yang dianggap haram untuk dikon- sumsi umat muslim dapat diklasifikasikan dalam empat jenis antara lain yaitu bangkai, babi dan turunannya, alkohol dan turunannya serta darah  dan  turunannya.  Selain  itu,  makanan  yang  terkontaminasi dengan produk-produk yang tersebut juga haram untuk dikonsumsi 3 . Ketersediaan pangan yang aman, bergizi, dan sesuai dengan daya beli masyarakat serta tidak bertentangan dengan nilai-nilai agama, budaya maupun keyakinan seseorang adalah hak warga negara yang dijamin oleh UndangUndang Dasar 1945 dan Undang-Undang Perlindungan Konsumen  Nomor  8  Tahun  1999.  Menurut  keputusan  Menteri Agama RI No. 581 Tahun 2001 definisi pangan halal adalah pangan yang tidak mengandung unsur atau bahan haram atau dilarang untuk dikonsumsi  umat  Islam,  dan  pengolahannya  tidak  bertentangan dengan syariat Islam 4 .
2 Ahmad Robin Wahab, “Guidelines for the preparation of halal food and goods for the Mu slim consumers”, ,diakses dari http://www.halalrc.org/ tanggal 30 Oktober 2019 pukul 08.57 WIB
3 Siti Zulaekah dan Yuli Kusumawati, “Halal dan Haram Makanan dalam
Islam”, Jurnal SUHUF , Vol. XVII, No. 01. Mei 2005. Hal 26.
4 May Lim Charity, “Jaminan produk halal di Indonesia ( Halal products guar- antee in Indonesia )”, Jurnal Legislasi Indonesia . Vol. 14, No. 01. Maret 2017. Hal 99- 108
107
Seiring  dengan  semakin  bervariasinya  produk  makanan  yang beredar di pasaran. Baik  produk dalam negeri maupun impor dari luar  negeri  satu  sisi  memberikan  kebebasan  bagi  konsumen  untuk memilih produk makanan sesuai dengan keinginan. Namun, kema- juan teknologi industri makanan semakin banyak memperkenalkan kerumitan bahan baku dan produk olahannya di pasaran. Sehingga terdapat  kesulitan  untuk  mengidentifikasi  atau  melacak  asal  bahan suatu produk makanan. Meskipun, pembuatan produk tersebut su- dah menggunakan teknologi modern, tetapi masih memungkinkan adanya pencampuran bahan baku atau bahan-bahan lain yang berasal dari sumber yang tidak halal seperti babi.
Seperti kasus bakso babi berlabel halal pada tahun 2012 meru- pakan contoh permasalahan yang merugikan produsen, konsumen, dan dunia usaha. Secara umum, masalah kontaminasi haram difokus- kan pada produk hewani. Hal ini dilakukan oleh produsen makanan dalam  rangka  menekan  biaya  produksi  dan  meningkatkan  keun- tungan yang diperoleh 5 .
Kasus  pengoplosan  daging  babi  dengan  daging  sapi,  daging ayam  dan  produk  halal  lainnya.  Pengoplosan  dapat  terjadi  pada produk  segar daging babi dapat dibedakan dari daging sapi, ayam, kerbau dan lainnya, dimana daging babi mempunyai karakteristik se- rat  daging  yang  halus,  lemak  di  luar  lapisan  daging  dan  dagingnya berwarna merah muda. Namun, kandungan daging babi pada produk olahan seperti bakso, nugget, burger, dan sosis menjadi susah karena tidak dapat dibedakan secara makroskopis 6 .
Adanya substitusi bahan baku atau bahan tambahan lainnya ser- ing tidak diinformasikan oleh produsen kepada konsumen. Sehingga, perlu dilakukan verifikasi terhadap produk makanan yang beredar di pasaran  apakah  terdapat  kontaminasi  babi  atau  tidak.  Pengujian ilmiah merupakan sebuah solusi dalam menjawab permasalahan ter- sebut. Karena saat ini, bahan baku asal hewan halal dan non-halal
5 “Bakso  Babi  berlabel  halal,  PAN:  MUI  Kebobolan”,  dalam http://www.jaringnews.com (31 Oktober 2019)
6 Sandra,H. dan Meutia, C.D.K, “Identifikasi daging babi dalam sosis me- lalui karakteristik protein Myofibril ”, Jurnal Ternak . Vol 02, No. 01. 2011. Hal 8-15
telah  benar-benar  dimodifikasi  sehingga  sangat  sulit  untuk  men- gidentifikasi dan mengkonfirmasi apakah suatu produk makanan ter- sebut halal atau haram.
Terdapat  beberapa  metode  yang  telah  dikembangkan  untuk mengetahui adanya kontaminasi kandungan babi pada suatu produk daging olahan. Beberapa metode telah dikembangan dengan banyak metode menggunakan protein atau DNA. Analisis dengan protein meliputi immunoassay ,  elektroforesis  dan  kromatografi 7 .  Namun, metode ini memiliki kelemahan karena protein akan kehilangan ak- tivitas biologisnya setelah hewan mati. Selain itu, sifat protein yang kurang efektif  setelah daging mengalami pemrosesan yang tinggi ka- rena protein dapat terdenaturasi pada suhu tinggi, dan tekanan tinggi sehingga menghambat proses analisis 8 .
Dengan demikian tulisan ini bertujuan untuk meninjau beberapa teknologi laboratorium yang dapat digunakan untuk menyelidiki be- berapa zat yang telah diketahui keharamannya maupun yang masih diragukan keharamannya. Zat-zat tersebut antara lain yaitu babi dan turunannya,  gelatin,  kolagen,  pengemulsi  (monogliserida  dan  di- gliserida), lemak dan minyak, serta DNA. Sehingga diperoleh suatu metode yang efektif  dan efisien untuk memverifikasi kehalalan suatu produk pangan guna memberikan informasi halal yang tepat untuk keperluan konsumen.

## Metode Deteksi Makanan Halal untuk Menghindari Pem- alsuan Menggunakan Perbedaan Metode Analisis
Identifikasi  dan  proses  verifikasi  bahan  dalam  suatu  produk olahan makanan adalah sebuah langkah yang harus dilakukan untuk menjamin hak-hak konsumen. Keaslian suatu bahan dan memastikan bahwa bahan tersebut berasal dari sumber yang halal menjadi tujuan dari  metode-metode  deteksi  makanan  halal  saat  ini.  Pengujian
7 Asensio et al . “Determinatio n  of food authenticityby enzyme-linked im- munosorbent assay (ELISA)”, Food Control . Vol 19, No. 1. 2008. Hal 1-8. 8 Soares et  al .,  “Quantitative  detection  of  poultry  meat  adulteration  with pork by a duplex PCR assay”. Meat Science. Vol 85, No. 3. 2010. Hal 531-536
109
keaslian dan teknik analisis telah mengalami perkembangan yang san- gat pesat. Masing-masing teknik dikembangkan secara spesifik dan disesuaikan untuk menangani masalah tertentu. Teknik yang paling cocok  untuk  sampel  tertentu  sering  ditentukan  berdasarkan  sifat sampel  itu  sendiri,  misalnya  apakah  itu  mentah  atau  dimasak,  ma- kanan utuh atau bentuk padat, padat semi-padat atau cair 9 .
Adanya  keharusan  untuk  mendapatkan  sertifikasi  halal  bagi suatu produk makanan atau minuman memiliki tujuan untuk memas- tikan  kualitas  dan  mengurangi  informasi  palsu  pada  label  suatu produk. Otentikasi adalah proses dimana makanan diverifikasi sesuai dengan deskripsi labelnya. Ada banyak metode analisis yang saat ini digunakan  untuk  mendeteksi  otentikasi  makanan  halal  antara  lain yaitu metode analisis Pork Detection Kit (PDK), EnzymLinked Immuno- sorbent Assay (ELISA), Real-Time Polymerase Chain Reaction DNA (RT- PCR), duplex droplet digital  PCR (dddPCR), Gas Chromatography (GC), Gas Chromatography-Mass Spectrophotometri (GC-MS), Fourier Trnsform-In- frared  Spectroscopy  (FTIR),  High  Performance  Liquid  Chromatography (HPLC), Proton Nuclear Magnetic Resonance (1H NMR) Spetroscopy.

## Metode dan Konsep Aplikasi
Pork Detection Kit (PDK)
Pork Detection Test/Porcine Test merupakan uji cepat immu- nochromatograhic  (lateral  flow)  yang  digunakan  untuk  pengujian kualitatif  atau semi-kuantitatif  penentuan antigen daging babi. Pork Detection  Test/Porcine  Test  adalah  metode  berbasis  protein  yang berdasarkan pada ikatan antibodi-antigen. Kelemahan metode ber- basis protein adalah sifat protein yang tidak stabil terhadap panas dan perlakuan lain. Proses kerja dari Pork Detection Test/Porcine Test yaitu antigen dari sampel akan terikat oleh antibodi spesifik yang mel- ekat pada warna partikel mikro selanjutnya mengalir ke garis tes dan bercampur dengan antibodi babi hingga membentuk garis berwarna
9 Khadijah, N. et al ., “Halal authenticity issue in meat and meat products”. Meat science . Vol. 91. Hal 207-214
yang menunjukkan hasil positif 10 . Prosedur pengujian dan inter- pretasi hasil ditunjukkan pada gambar 1 dan gambar 2.
(a) (b)
Gambar 1. (a) prosedur pengujian dan (b) interpretasi hasil pengujian menggunakan Pork DetectionTest/Porcine Test

## Chromatography
Gas Chromatography (GC)
Gas chromatography (GC) juga dikenal sebagai vapour phase chroma- tography (VPC). Gas chromatography (GC) memberikan waktu analisis yang lebih singkat dan suhu elusi sampel lebih rendah karena laju ali- ran yang lebih tinggi dan berat molekul yang lebih rendah 11 . Adanya pemalsuan makanan terutama dalam miyak, lemak dan alkohol telah menjadi  masalah  bagi  konsumen  muslim.  Teknik  ini  mendeteksi pemalsuan dengan membandingkan waktu retensi dan daerah pun- cak asam lemak yang telah diderivatisasi menjadi metil asam lemak ester terhadap stadar yang sesuai.
Struktur dan komposisi asam lemak dalam lemak  dan minyak dapat digunakan sebagai indikator dalam penentuan sumber lipid 12 . Selain  itu,  kromatografi  gas  dapat  digunakan  untuk  melihat  profil metabolik alkohol yang berasal dari berbagai sumber karena minu- man beralkohol sering digunakan sebagai bahan untuk penyedap rasa dan pengawet dalam industri makanan. Seperti yang telah kita ketahu
10 “Brosur  Pork  Detection  Kit  (Porcine  Test  E  Catalogue)”.,  dalam https://ekatalog.lkpp.go.id/backend/produk/download_lampiran/104274  (di- akses tanggal 31 Oktober 2019)
11 Steven,  M.C.  dan  Russell,  J. M.  2008. Bioactive natural  products  : detection, isolation, and structural determination . CRC Press, Boca Raton. 2008. Hal 21-25
12 Fang, G., Goh, J.Y., Tay, M., Lau, H.F., Li, S.F.Y. 2013. Characterization of oils and fats by 1H NMR and GC/MS fingerprinting: classification, prediction and detection of adulteration. Food chemistry . 138, 1461-1469.
111
dalam hukum islam bahwa lemak babi, babi dan alkohol dilarang un- tuk  dikonsumsi  oleh  umat  islam.  Oleh  karena  itu,  pengembangan teknik  GC  menggunakan  berbagai  detektor  sangat  diminati  dalam otentikasi makanan halal untuk mengidentifikasi adanya alkohol dan sumber  lipid  dalam  makanan.  Tabel  3.  menunjukkan  berbagai  de- tektor yang digunakan dalam GC untuk otentikasi produk makanan dan minuman.
Tabel 3. Analisis kegunaan GC untuk dalam otentikasi halal produk
makanan Detektor GC Kasus Jenis makanan Referensi GCMS-HS Pencampuran Meat & babi sausage Nurjuliana et al . (2011)
GC x GCTOF- MS Pencampuran Animal fats lemak he- wan Indrasti et al. (2010) Gas Chromatography-Mass Spectrophotometri (GC-MS)
Gas  Chromatography-Mass  Spectrophotometri  (GC-MS) dapat digunakan untuk menganalisa kehalalan suatu produk pangan yang mengandung lemak hewani khususnya lemak babi yaitu dengan men- gubah asam lemak suatu sampel menjadi derivate esternya yang se- lanjutnya dianalisa dengan mengunakan GC-MS 13 .

## High Performance Liquid Chromatography (HPLC)
High  Performance  Liquid  Chromatography  (HPLC) adalah  teknik modern  yang  secara  luas  digunakan  untuk  pemisahan  analitik  dan preparative senyawa yang terkandung dalam suatu campuran 14 . Ap- likasi untuk analisis kontaminan atau deteksi pemalsuan dalam ma- kanan  telah  banyak  dilakukan  kaena  teknik  ini  memiliki  banyak keunggulan.  Salah  satu  keunggulannya  adalah  dapat  memisahkan komponen  sampel  yan  tidak  mudah  menguap  menjadi  dapat
13 Czarniecki,  J. et  al .  2003. GC/MS  Analysis  for  Unsaturated  Fat Content  in Animal Feed . Switzerland: Nafag Company 14 Fanali, C., et al. 2015. Chapter 24: High-performance liquid chromatography: an established separation technique in food chemistry . In Nollet, L.M.L. and Toldra, F. (Ed.) in Handbook of food analysis. 3rd Edition – Volume II. CRC Press. Taylor & Francis Group, U.S.
dipisahkan dengan mudah oleh HPLC, selain itu teknik ini berlaku untuk senyawa yang sangat polar, masa molekul yang tinggi, kompo- nen  yang  sangat  ionik  dan  tidak  stabil  secara  termal  dalam  sistem pangan. Keuntungan lain dari HPLC dalah bahwa derivatisasi analit tidak diperlukan seering dalam analisis kromatografi gas 15 . Tabel 4 menunjukkan beberapa otentikasi halal damam produk makanan.
Tabel 4. Analisis metode HPLC untuk otentikasi halal dalam produk
makanan. Kasus Jenis makanan Hasil analisis Referensi Babi dan lemak babi ( pork and
lard ) Daging babi ( pork )
Kulit atau produk segar dari sapi, kambing, dan babi serta beberapa produk olahan makanan
Profil dari triglyceride babi ber- beda dengan sapi atau kambing. Le- mak babi memiliki
triglyceride yang banyak dibandingan dag- ing yang lain. Saeed et al. (1989) Produk olahan makanan dari daging babi, kambing, ayam, dan lemak kalkun Mendeteksi lemak dari makanan olahan, pemisahan triglycer- ide dan menuji keaslian dan adanya pencampuran pada suatu produk Rashood et al. (1995)

## Spectrometry
1) Matrix-Assisted  Laser  Desorption  Ionization-Time  of   Flight Mass Spectrometry (MALDI-TOF-MS)
15 Marikkar, J.M.N., et al. 2005. Distinguishing lard from other animal fats in admixtures of some vegetable oils using liquid chromatographic data coupled with multivariate data analysis. Food Chemistry . 91, 5 – 14.
113
Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization-Time of  Flight Mass Spec- trometry (MALDI-TOF-MS) digunakan untuk identifikasi spesies dan untuk melihat profil protein. Teknik ini memiliki kelebihan yaitu han- dal, hemat biaya, sederhana, dan lebih cepat daripada fenotipik dan metode molekul konvensional untuk identifikasi pathogen manusia. Asal usul daging (babi, sapi, kuda, sapi dan ayam) dan gelatin (daging babi  atau  sapi)  dapat  diketahui  menggunakan  metode  MALDI- TOFMS. Berdasarakan penelitian mereka MALDI-TOF-MS mampu mendeteksi hingga 1% gelatin dalam permen dan mendeteksi hingga 20% gelatin babi dalam gelatin daging sapi 16 . Hal ini, membuktikan bahwa metode ini berpotesi untuk penelusuran daging dan kolagen yang sistematis dan rutin.
2) Fourier Transform-Infrared Spectroscopy (FTIR)
Fourier  Transform-Infrared  Spectroscopy (FTIR)  adalah  teknik  yang digunakan untuk memperoleh spectrum inframerah dari penyerapan, emisi, fotokonduktivitas atau raman hamburan benda padat, cair atau gas 17 . Analisa dengan menggunakan FTIR dapat digunakan untuk mengetahui kehalalan suatu produk makanan dengan melihat pola spektrum pada lemak hewaninya. Hasil dari FTIR bisa menjelaskan kelompok  fungional  produk  sampel.  Berbagai  teknik  FTIR  diap- likasikan  termasuk  spektroskopi  inframerah-dekat  (14.000  hingga 4000 cm -1 ) (NIR), spektroskopi inframerah-tengah (4000 hingga 400 cm -1 ) (MIR) dan spektroskopi inframerah-jauh (ATR) (400 hingga 50 cm -1 ) 18 . Spektroskopi MIR dan NIR paling umum digunakan, se- dangkan ATR digunakan sebagai analisis lanjutan untuk mendeteksi kontaminan makanan karena persiapan sampel yang lebih sedikit.
16 Flaudrops, C. et al . “ Determination  of the animal origin of meat and gelatin by MALDI-TOF-
MS”. Journal of Food Composition and Analysis. 2015. Vol. 41. pp. 104 – 112 17 Griffiths, P. dan de Hasseth, J.A. 2007. Fourier Trnsform-Infrared Spectroscopy (2 nd ed.). Wiley Blackckwell.
18 Domingo,  E.,  Tirelli,  A.A.,  Nunes,  C.A.,  Guerreiro,  M.C.,  Pinto,  S.M.
2013 Melamine detection in milk using vibrational spectroscopy and chemomet- rics analysis: A review. Food Research International . 60. pp. 131-139.
Elisa Andriyani, Nor Lutfi Fais, Siti Muarifah
Fourier Transform-Infrared Spectroscopy (FTIR) telah menjadi alterna- tive yang menarik untuk metode analitik tradisional karena memer- lukan sedikit persiapan sampel, penggunaan minimal pelarut berba- haya dan sensitivitas dan spesifitas tinggi sehingga dapat berfungsi dalam teknik sidik jari 19 . Selain itu metode FTIR dapat memberikan analisa lemak babi yang telah bercampur dengan lemak hewan lainnya secara konsisten, bahkan dengan kandungan lemak yang sangat ren- dah 2021 . Namun metode FTIR memiliki keterbatasan terutama ka- rena tidak dapat mengidentifikasi jenis dan kandungan masing-maing sampel secara pastu. Tabel 1. menunjukkan analisis FTIR dasar dan lanjutan dalam otentikasi makanan halal.
Tabel 1. Analisis FTIR dasar dan lanjutan dalam otentikasi halal produk
makanan Teknik FTIR Keaslian Isu Jenis Makanan Referensi FTIR Lemak babi ( Lard ) Mixed fats (chicken/lamb/cow) Che Man and Mirghani (2001) Cod-liver oil Rohman dan Che Man (2009) Babi ( porcine ) Bovine & Porcine Hashim et al . (2010) FT-MIR Lemak babi ( Lard ) Virgin coconut oil Rohman and Che Man (2011) FTIR-ATRPLS   Lemak babi ( Lard ) Butter Nurrulhidayah et al . (2015)
FTIR-ATRPCA   Daging
babi ( porcine ) bovine, porcine and fish gelatins Cebi et al . (2016)
19 Ibid., hal. 140 20 Irwandi, J., Saeed, M.E., Torla, h. and Zaki, M. “ Determination of Lard in Mixture of body fats of Mutton and Cow by Fourier Transform  Infrared Spectroscopy ”. J.
Oleo Sci. 2003. Vol. 52, No.
21 . pp. 633-638.
115

## d. Polymerase Chain Reaction (PCR)
Polymerase Chain Reaction (PCR) adalah teknologi dalam bidang bi- ologi  molekuler  yang  digunakan  untuk  memperbanyak  salinanan sepotong  DNA  di  bagian  tertentu  sehingga  menghasilkan  ribuan hingga jutaan salinan dari urutan DNA tertentu 22 . PCR adalah teknik penggandaan  atau  amplifikasi  sekuen  DNA  spesifik  secara  invitro dengan jalan polimerisasi secara simultan dengan primer yang kom- plementer  dengan  untai  DNA  target. 23 Primer  adalah  sekuen  oli- gonukleotida pendek biasanya tersusun atas 20 pasang basa yang ber- fungsi sebagai pemula sintesis rantai DNA dalam reaksi PCR. 24
Teknik PCR melibatkan tiga tahap yaitu denaturasi, penempelan primer ( annealing ), dan pemanjangan ( elongation ). Pada siklus pertama, DNA cetakan dipisahkan menjadi dua untai tunggal dengan pema- nasan 95 0 C di dalam campuran yang mengandung oligonukleotida primer  dengan  jumlah  berlebih  serta  keempat  dNTP.  Suhu  ini kemudian dikurangi menjadi 55 0 C, untuk memberi kesempatan pri- mer menempel ( anneal ) pada sekuen target. Primer akan membentuk ikatan hidrogen dengan cetakan pada daerah sekuen yang komple- menter  dengan  sekuen  primer.  Suhu  penempelan  tergantung  pada panjang primer dan sekuen DNA targetnya. Setelah penempelan pri- mer, suhu inkubasi dinaikkan menjadi 72 0 C untuk proses perpanjan- gan ( extension ) sekuen DNA target. Proses perpanjangan ini dapat ter- jadi karena enzim DNA polimerase. Produk pertama dari hasil am- plifikasi akan berfungsi sebagai cetakan untuk siklus kedua, demikian seterusnya. Apabila sikus denaturasi, penempelan primer dan pem- anjangan  diulang-ulang  maka  DNA  target  akan  dilipatgandakan.
22 Viljoen, G.J., Nel, L.h., Crowther, J.R. 2005. Chapther 1-Background. In: Viljoen, G.J., Nel, L.H., Crowther, J.R. (Eds.) in Molecular diagnostic PCR hand- book. Springer, Netherlands
23 Yuwono, T. 2006. Teori dan Aplikasi Polymerase Chain Reaction. Yogyakarta: Penerbit Andi. pp. 87-88.
24 Handoyo,  D.  dan Rudiretna, A.  2001. Prinsip  Umum  dan Pelaksanaan Polymerase Chain Reaction (PCR). Unity. 9 (1): 17-29.
Produk utama yang dihasilkan adalah segmen DNA untai ganda yang panjangnya ditentukan oleh jarak antara kedua primer 25 .
Analisis biologi molekuler khususnya DNA yang menggunakan PCR memiliki kelebihan dibandingkan dengan menggunakan protein atau molekul lain yaitu karena DNA lebih stabil. Keuntungan utama penggandaan  dengan  PCR  adalah  kemampuan  teknik  ini  untuk memperbanyak sekuen target pada preparasi DNA kasar atau RNA, sehingga tidak perlu dilakukan pemurnian cetakan. Melalui metode ini suatu segmen DNA yang panjangnya 110 pasang basa (5 x 10 -19 mol) dapat digandakan 200.000 kali setelah 20 siklus reaksi selama 20 menit,  sehingga  perbanyakan  dapat  dilakukan  dengan  cepat (Yuwono, 2006). 26
Ketika  molekul  DNA  dipanaskan,  ikatan  hydrogen  yang menyatukan heliks ganda terganggu dan memisahkan molekul men- jadi untaian tunggal.
DNA  relatif   stabil  dan  masih  terdapat  pada  banyak  produk bahkan setelah pemrosesan produk makanan 27 . PCR menarget uru- tan spesifik dari suatu DNA dengan menggunakan primer tertentu. Selanjutnya spesifitas dan sensitivitas PCR dapat ditingkatkan dengan memasukkan  internal  probe  hibridisasi  (Mohamad et  al .,  2013). Teknik PCR terbukti cepat dan spesifik dalam mendeteksi pemalsuan spesies. DNA dapat dideteksi dengan menggunakan beberapa analisis PCR sebagai berikut:
a. Multiplex PCR
Multiplex PCR adalah salah satu metode PCR yang secara bersamaan  dapat  memperbanyak  suatu  gen  dalam  satu  kali reaksi. Proses itu memperbanyak beberapa target DNA dalam
25 Klug, W.S., Cummings, M.R., Spencer, C.A., Palladino, M.A. 2012. Con- cepts of genetics. USA: Pearson. pp. 554-557.
26 Yuwono, T. 2006. Teori dan Aplikasi Polymerase Chain Reaction. Yogyakarta: Penerbit Andi. pp. 87-88.
27 Grohmann,  L.  2010.  Chapter  7 – Detection  of  Genetically  Modified Plants  in Seeds, Food and Feed. In  Frank Kempken,  Christian  Jung (Eds.)  in Genetic Modification of Plants: Agriculture,
Horticulture and Forestry. Springer-Verlag Berlin Heidelberg. Pp 118
117
sampel  menggunakan  beberapa  primer 28 .  Multiplex  PCR meningkatkan  efisiensi  dan  keandalan  untuk  analisis  simultan berbagai spesies hewan. Selain itu, multiplex PCR bekerja pada target  secara  bersamaan  yang  dapat  mengurangi  biaya  dan waktu 29 . Uji multiplex PCR  menggunakan  mitokondrial  ND5, ATPase, dan cytochrome b (cytb) untuk deteksi lima spesies dag- ing yang dilarang daam Islam untuk dimakan 30 . Multiplex PCR menargetkan  mitokondria  ND2,  16S  rRNA,  dan  cytb  adalah metode  yang  akurat  untuk  membedakan  daging  bebek,  babi, sapi,  dan  domba  dalam  produk  makanan  olahan 31 .  Selain  itu, metode ini juga dapat digunakan untuk mengidentifikasi daging anjing, kucing, dan harimau menggunaka cytb dalam produk ma- kanan dan kosmetik.
b. Real-Time  Polymerase  Chain  Reaction DNA  (RT-PCR)  Real-Time Polymerase  Chain  Reaction  DNA  (RT-PCR)  merupakan perkembangan  dari  PCR  konvensional  untuk  mengidentifikasi DNA  suatu  spesies  dalam  sampel.  RT-PCR  memiliki  kemam- puan untuk mendeteksi dalam jumlah sampel yang sedikit, dapat meniadakan  kebutuhan  visualisasi  menggunakan  gel  visualiza- tion, resiko kontaminasi yang sangat kecil, kemampuan proses dalam  jumlah  yang  sangat  besar.  Namun,  RT-PCR  memiliki
28 Ali, M.E., Razzak, M.A., Hamid, S.B.A., Rahman, M.M., Amin,M.A., Ra- shid, N.R.A., Asing. 2015. Multiplex PCR assay for the detection of five meat species forbidden in Islamic food. Food Chemistry . 177, 214-224.
29 Ali, M.E., Razzak, M.A., Hamid, S.B.A. 2014. Multiplex PCR in species authentication: Probability and prospects-A review. Food Anal. Methods 7, 1933- 1949.
30 Ali, M.E., Razzak, M.A., Hamid, S.B.A., Rahman, M.M., Amin,M.A., Ra- shid, N.R.A., Asing. 2015. Multiplex PCR assay for the detection of five meat species forbidden in Islamic food. Food Chemistry . 177, 214.
31 He et al . “ Application of uadruple multiplex PCR detection for beef, duck, mutton, and pork in mixed meat ”. J.Food Nutr Res . Vol 3, No 6. 2015. Hal 392-398.
kelemahan yaitu masih memerlukan probe dalam metode ujinya agar mendapatkan hasil yang optimal 32 .
c. Duplex droplet digital PCR (dddPCR)
Duplex PCR  dikembangkan  dengan  tujuan  memberikan biaya yang rendah, komprehensif, metodenya sederhana dan an- dal 33 .  Salah  satu  perkembangan  dari duplex PCR  adalah duplex droplet  digital PCR  (dddPCR).  Sistem  deteksi  dengan menggunakan  dddPCR  pada  sampel  daging  sapid  dan  daging babi tidak menunjukkan adanya cross reaction dengan spesies lain. Tidak  adanya  kesalahan  dalam  amplifikasi  mengindikaiskan bahwa kombinasi primer  untuk  sampel daging  sapid dan babi dapat digunakan secara spesifik dan dapat dipercaya untuk men- gidentifikasi material sapi dan babi dalam produk campuran dag- ing 34 .
Membandingkan  dengan  data  penelitian  menggunakan metode ddPCR sebelumnya, terdapat kelemahan yaitu tidak ada signifikansi terhadap spesifitas spesies seperti yang terdapat da- lam metode dddPCR 35 . Selain itu, berdasarkan perbandingan an- tara  jumlah  dan  quantifikasi  DNA  yang  digunakan  dalam penelitian, dddPCR adalah metode yang sesuai untuk digunakan pada penelitian dengan sampel yang sedikit. Selain itu, dddPCR sangat spesifik, dapat mendeteksi dalam waktu yang cepat untuk menidentifikasi  komposisi  daging  yang  kompleks  dalam  sam- pel 36 .
32 Triayu, S. “ Detection of Porcine DNA in Processed Beef Products Using Real Time- Polymerase Chain Reaction ” Indonesian Journal of Halal Research. Vol 1, No. 2. Hal
31-34.
33 Fenny, A.S., et al . “ Low cost and comprehensive pork detection in processed food products with a different food matrix ” Indonesian Journal of Biotechnology. Vol 23, No. 1. 2018. Hal 21-27
34 Yicun, C . Detection and quantification of beef and pork materials in meat products by duplex droplet digital PCR . PLOS ONE. Vol. 12, No. 8. 2017. Hal 1-19.
35 Cai Y., et al, “ Quantitative analysis of pork and chicken products by droplet digital PCR ”. BioMed research international . 2014 36 Morisset  D. et  al. , “ Quantitative  analysis  of  food  and  feed samples  with droplet digital PCR ”. PLoS One. Vol. 8, no. 5. 2013
119
Tabel 2 jenis PCR untuk deteksi DNA dalam permasalahan keaslian

## produk pangan
e. Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA)
Uji  ELISA  adalah  uji  imunologis  yang  biasa  digunakn  untuk mengukur antibody, antigen, protein dan glikoprotein dalam sampel biologis.  Tukiran et  al .  2016  menyebutkan  bahwa  telah  dikem- bangkan suatu metode untuk deteksi dengan cepat gelatin babi pada
sarang  burung  yang  dapat  dimakan  menggunakan  uji  ELISA.  Na- mun, uji ELISA ini memiliki kelemahan yaitu untuk menemukan an- tigen yang spesifik membutuhkan waktu yang cukup lama dan sulit dilakukan.
d. Proton nuclear magnetic resonance (1H NMR)
Proton nuclear magnetic resonance (1H NMR) adalah penera- pan resonansi magnetic nuklir dalam spektroskopi NMR sehubungan dengan inti 1 hydrogen dalam molekul suatu zat, untuk menentukan struktur  molekulnya. Proton  nuclear  magnetic  resonance (1H NMR) telah  digunakan  secara luas dalam otentikasi minyak zaitun karena membutukan minimal persiapan sampel, waktu analisis yang lebih singkat, sifatnya yang tidak merusak dan baik reproduktifitasnya apabia  dibandingkan  dengan  metode  kromatografi  yang digabungkan dengan spektrometri massa 37 .
Fang et al . (2013) telah melakukan penelitian untuk otentikasi 10 minyak nabati (minyak zaitun, minyak zaitun, minyak canola, minyak kelapa sawit, minyak kedelai, minyak jagung, minyak bunga matahari, minyak  dedak  padi,  minyak  kacang,  dan  minyak  kelapa)  dengan memanaskan  lemak  (jaringan  lemak  babi,  daging  kambing,  daging sapi, dan ayam) menggunakan Proton nuclear magnetic resonance (1H NMR), gas chromatography/mass spectroscopy (GC-MS). Na- mun data NMR tidak berhasil menetapkan deteksi yang baik dalam hal  sensitivitas  dan  spesifitas  sebagai  bandingan  data  GC/MS menggunakan analisis diskriminan kuadrat terkecil parsial (PLS-DA) dan  proyeksi  orthogonal  untuk  analisis  diskriminan  struktur  laten (OPLS-DA)  sebagai  model  klasifikasi.  Mereka  juga  melaporkan bahwa  model partial  east  square (PLS)  berhasil  dibuat  untuk mendeteksi sekitar 5% lemak babi dan lemak sapi dalam minyak can- ola 38 .
37 Fang, G., et al . “ Characterization  of oils  and fats by 1H NMR and GC/MS fingerprinting:
classification, prediction and detection of adulteration” Food chemistry. 138, 1468
38 Fang, G., Goh, J.Y., Tay, M., Lau, H.F., Li, S.F.Y. 2013. Characterization of oils and fats by 1H NMR and GC/MS fingerprinting: classification, prediction and detection of adulteration. Food chemistry . 138, 1466
121

## Kesimpulan
Metode  dasar  menjadi  bagian  yang  mendasar  terkait  dengan keahlian dan kefektifan waktu yang diperlukan untuk suatu analisis. Teknologi yang baik memiliki kemampuan yang non-destruktif, ce- pat, efisien, kinerja tinggi, analisis yang lebih tepat, praktis dan andal. Penelitian dan kemajuan berkelanjutan dalam suatu metode sangat penting dalam masalah keaslian dan verifikasi produk halal suatu ma- kanan.  Verifikasi  makanan  halal  adalah  langkah  penting  untuk melindungi  dan  mengidentifikasi  kasus-kasus  kesalahan  deskripsi produk makanan serta untuk menjaga kehalalan suatu produk pan- gan  sesuai  dengan  syariat  islam.  Setiap  metode  dan  peraatan  yang digunakan  memilki  kelebihan  yang  mana  menunjukkan  informasi spesifik  untuk  konfirmasi  status  halal  suatu  sampel  yang  diekstrak dari produk makanan. Sistem deteksi dan kuantifikasi dddPCR cocok digunakan untuk kontrol kualitas dan analisis rutin produk daging. Hal ini dapat dijadikan pertimbangan untuk pengembangan metode penelitian  untuk  mendeteksi  kandungan  babi  pada  produk  olahan pangan yang lebih efektif  dan efisien di masa yang akan datang.

## Daftar Pustaka
Ahmad Robin Wahab. Guidelines for the preparation of  halal food and goods for the Muslim consumers . Diakses dari http://www.halalrc.org/ tanggal 30 Oktober 2019 pukul 08.57 WIB.
Ali, M. E., Razzak, M. A., Hamid, S.B.A. 2014. Multiplex PCR in spe- cies authentication: Probability and prospects—A Review. Food Anal. Methods . Vol. 7.
Ali, M.E., Razzak, M.A., Hamid, S.B.A., Rahman, M.M., Amin,M.A., Rashid, N.R.A., Asing. 2015. Multiplex PCR assay for the de- tection of  five meat species forbidden in Islamic food. Food Chemistry . Vol. 177.
Asensio L., Gonzalez. i., Garcia T., Martin, R. 2008. Determination of  food authenticity by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Food Control . Vol 19, No. 1. authentication. Pro- ceeding of  the 3 rd International Halal Conference.
Cai Y, Li X, Lv R, Yang J, Li J, He Y, et al. 2014. Quantitative analysis of  pork and chicken products by droplet digital PCR. BioMed research international.
Cai, Y., He, Y., Lv R., Chen, H., Wang Q., dan Pan, L. 2017. Detection and quantification of  beef  and pork materials in meat products by duplex droplet digital PCR. PLOS ONE . Vol. 12, No. 8.
Cebi, N., Durak, M. Z., Toker, O.S., Sagdic, O., Arici, M. 2016. An evaluation  of   Fourier  transforms  infrared  spectroscopy method  for  the  classification  and  discrimination  of   bovine, porcine and fish gelatins. Food Chemistry. Vol. 190.
Charity, M.L. 2017. Jaminan produk halal di Indonesia (Halal products guarantee in Indonesia). Jurnal Legislasi Indonesia. Vol. 14, No. 01.
Che Man, Y., Aida, A., Raha, A., and Son, R. 2007. Identification of pork derivatives in. food products by species-specific polymer- ase chain reaction (PCR) for halal verification. Food Control . Vol. 18, No. 7.
Che Man, Y.B. and Mirghani, M.E.S. 2001. Detection of  lard mixed with body fats of  chicken, lamb, and cow by Fourier transform infrared spectroscopy. Journal of  the American Oil Chemists' Soci- ety. Vol. 78, No. 7.
Cheng, X., He, W., Huang, F., Huang, M., Zhou, G. 2014. Multiplex real-time  PCR  for  the  identification  and  quantification  of DNA from duck, pig and chicken in Chinese blood curds. Food Research International .
Czarniecki, J. et al. 2003. GC/MS Analysis for Unsaturated Fat Content in Animal Feed. Switzerland: Nafag Company.
Domingo, E., Tirelli, A.A., Nunes, C.A., Guerreiro, M.C., Pinto, S.M. 2013 Melamine detection in milk using vibrational spectros- copy and chemometrics analysis: A review. Food Research Inter- national. Vol. 60.
Fang, G., Goh, J.Y., Tay, M., Lau, H.F., Li, S.F.Y. 2013. Characteriza- tion of  oils and fats by 1H NMR and GC/MS fingerprinting: classification,  prediction  and  detection  of   adulteration. Food chemistry . Vol. 138.
Farrokhi, R. and Joozani, R. J. 2011. Identification of  pork genome in commercial meat extracts for Halal authentication by SYBR
123
green  I  realtime  PCR. International  Journal  of   Food  Science  and Technology. Vol. 46.
Fenny, A.S., Henndi W., Ali, W., Suryani, and Desriani. 2018. “Low cost  and  comprehensive  pork  detection  in  processed  food products with a different food matrix” Indonesian Journal of  Bi- otechnology . Vol 23, No. 1.
Flaudrops, C., Armstrong, N., Raoult, D., Chabrie`re, E. 2015. De- termination  of   the  animal  origin  of   meat  and  gelatin  by MALDI-TOF-MS. Journal of  Food Composition and Analysis . Vol.
41.
Griffiths, P. dan de Hasseth, J.A. 2007. Fourier Trnsform-Infrared Spec- troscopy (2 nd ed.). Wiley Blackckwell.
Grohmann, L. 2010. Chapter 7 – Detection of  Genetically Modified Plants in Seeds, Food and Feed. In Frank Kempken, Christian Jung  (Eds.)  in  Genetic  Modification  of   Plants:  Agriculture, Horticulture and Forestry. Springer-Verlag Berlin Heidelberg.
Handoyo, D. dan Rudiretna, A. 2001. Prinsip Umum dan Pelaksanaan Polymerase Chain Reaction (PCR). Unity. Vol. 9, No. 1.
Hashim, D.M., Che Man, Y.B., Norakasha, R., Shuhaimi, M., Salmah,
Y., Syahariza, Z.A. (2010). Potential use of  Fourier transforms infrared spectroscopy for differentiation of  bovine  and por- cine gelatins. Food Chemistry . Vol. 118.
He, H., Hong X. Feng Y., Wang, Y., Ying J, Liu, Q., Qian, Y., Zhou. X., Wang D. 2015. Application of  uadruple multiplex PCR de- tection for beef, duck, mutton, and pork in mixed meat. J.Food Nutr Res. Vol 3, No 6. pp. 392-398. in analysis of  food and baverages: a short review on adulteration and halal
Indrasti, D., Che Man, Y.B., Mustafa, S., Hashim, D.M. 2010. Lard detection based on fatty acids profile using comprehensive gas chromatography  hyphenated  with  time-of-flight  mass  spec- trometry. Food Chemistry . Vol. 122.
Irwandi, J., Saeed, M.E., Torla, h. and Zaki, M. 2003. Determination of  Lard in Mixture of  body fats of  Mutton and Cow by Fou- rier Transform Infrared Spectroscopy. J. Oleo Sci. Vol. 52, No.
12.
Karabasanavar, N.S., Singh, S.P., Kumar, D., Shebannavar, S. N. 2014. Detection of  pork adulteration by highly-specific PCR assay of  mitochondrial D-loop. Food Chemistry . Vol. 145.
Karim, N.A dan Muhamad, I. I. 2018. Detection methods and ad- vancement
Klug, W.S., Cummings, M.R., Spencer, C.A., Palladino, M.A. 2012.
Concepts of  genetics. USA: Pearson.
May Lim Charity, “Jaminan produk halal di Indonesia ( Halal products guarantee in Indonesia )”, Jurnal Legislasi Indonesia . Vol. 14, No. 01. Maret 2017.
Mohamad, N.A., Sheikha, A.F.E., Mustafa, S., Mokhtar N.F.K. 2013. Comparison of  gene nature used in real-time PCR for porcine identification and quantification: A review. Food Research Inter- national. Vol. 50.
Morisset D, Stebih D, Milavec M, Gruden K, Zel J. 2013. Quantitative analysis of  food and feed samples with droplet digital PCR. PLOS One . Vol. 8, No. 5
Nakyinsige,K., Che Man, Y.b., Sazili, A.Q. 2012. Halal authenticity issue in meat and meat products. Meat science. Vol 91. 207-214
Nurjuliana,  M.,  Che  Man,  Y.B.,  Hashim,  D.M.,  Mohamed,  A.K.S. 2011. Rapid identification of  pork for halal authentication us- ing the electronic nose and gas chromatography mass spec- trometer  with  headspace  analyser. Meat  Science. Vol.  88.  pp. 638– 644.
Nurrulhidayah, A.F., Che Man, Y.B., Amin, I., Arieff  Salleh, R., Fara- wahidah,  M.Y.,  Shuhaimi,  M.,  Khatib,  A.  2015.  FTIR-ATR Spectroscopy Based Metabolite Fingerprinting as A Direct De- termination of  Butter Adulterated With Lard. International Jour- nal of  Food Properties. Vol. 18, No. 2. pp. 372-379.
Rashood, K. A., Shaaban, R. R. A., Moety, E. M. A., & Rauf, A. 1995. Triacylglycerolsprofiling by high performance liquid chroma- tography: a tool for detection of  pork fat in processed foods . Journal of  Liquid Chromatography . Vol. 18.
Riaz, M. N. (1996). Hailing halal. Prepared Foods. Vol. 165, No. 12.
125
Rohman, A., and Che Man, Y. B. 2009. Analysis of  cod-liver oil adul- teration using Fourier transform infrared (FTIR) spectroscopy. Journal of  the American Oil Chemists' Society . Vol. 86, No. 12. pp.
1149–1153.
Rohman, A., and Che Man, Y. B. 2011. The use of  Fourier transform mid infrared (FTMIR) spectroscopy for detection and quanti- fication of  adulteration in virgin coconut oil. Food Chemistry. Vol. 129, No. 2. pp. 583–588.
Roostita, L.B., Lengkey, H.A.W., Suryaningsih, L., Rachmawan, O., Putranto, W.S., Wulandari, E., Utama, G. L. 2014. Beef  Meat- balls Adulteration Tests with Real Time Quantitative PCR De- tection For Halal Authentication - Case Studies Sellers at Tra- ditional Market and Small Medium Enterprises (SMEs) Mer- chants in Indonesia. AgroLife Scientific Journal. Vol. 32.
Saeed, T., Ali, S. G., Rahman, H. A. A., & Sawaya, W. N. 1989. De- tection of  pork and lard as adulterants in processed meat: liq- uid chromatographic analysis of  derivatized triglycerides. Jour- nal of  the Association of  Official Analytical Chemists . Vol. 72. pp.
921–925.
Sandra,H. dan Meutia, C.D.K, “Identifikasi daging babi dalam sosis melalui karakteristik protein Myofibril ”, Jurnal Ternak . Vol 02, No. 01. Juni 2011.
Septiani,  T.  2019.  Detection  of   Porcine  DNA  in  Processed  Beef Products Using Real Time-Polymerase Chain Reaction. Indone- sian Journal of  Halal Research. Vol 1, No. 2. Hal 31-34.
Siti Zulaekah dan Yuli Kusumawati. 2005. Halal dan Haram Makanan dalam Islam. Jurnal SUHUF . Vol. XVII, No. 01. p. 26.
Soares, S., Amaral, J.S., Mafra, I., and Oliveira, M.B.P.P. 2010. Quan- titative detection of  poultry meat adulteration with pork by a duplex PCR assay. Meat Science. Vol 85, No. 3. pp. 531-536
Sudjadi, Wardani, H.S., Sepminarti, T., Rohman, A. 2015. Analysis of porcine gelatin DNA in commercial capsule shell using real- time polymerase chain reaction for halal authentication. Inter- national Journal of  Food Properties .
Sugiana, F.A., Widyowati, H., Warisman, M.A., Suryani, dan Desriani. 2018.  Low  cost  and  comprehensive  pork  detection  in  pro- cessed food products with a different food matrix. Indonesian Journal of  Biotechnology. Vol 23, No. 1. 2018.
Tanabe, S., Hase, M., Tano, T., Sato, M., Fuijimura, T., Akiyama, H. 2007. A real-time quantitative PCR detection method for pork, chicken, beef, mutton and horseflesh in foods. Biosci. Biotechnol.
Biochem. Vol. 71, No. 12.
Viljoen, G.J., Nel, L.h., Crowther, J.R. 2005. Chapther 1-Background. In: Viljoen, G.J., Nel, L.H., Crowther, J.R. (Eds.) in Molecular diagnostic PCR handbook. Springer, Netherlands
Wahab, A. R. 2004. Guidelines for the preparation of  halal food and goods for the Muslim consumers. Diakses dari http://www.su- dairy.com tanggal 31 Oktober 2019.
Waharjani,  “Makanan  yang  Halal  Lagi  Baik  dan  Implikasinya  Ter- hadap Kesalehan Seseorang”. Jurnal Komunikasi dan Pendidikan Islam . Vol. 4 No. 2. Desember 2015.
Yuwono,  T.  2006.  Teori  dan  Aplikasi  Polymerase  Chain  Reaction. Yogyakarta: Penerbit Andi.
Zulaekah, S. dan Yuli, K. 2005. Halal dan haram makanan dalam is- lam. Jurnal SUHUF . Vol XVII, No. 01.