Jurnal : Jurnal Kesehatan Prima Volume
: 10, No.2, Agustus 2016, Halaman : 1726-1734
ISSN Print : 1978 – 1334, ISSN Online : 2460 – 8661

## ___________________________________________________________________________
Yunan Jiwintarum , Rohmi, I Dewa Putu Martha : Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Mataram, Jl. Prabu Rangkasari Dasan Cermen Sandubaya  Mataram
BUAH NAGA ( Hylocereus Polyrhizus ) SEBAGAI PEWARNA ALAMI

## UNTUK PEWARNAAN BAKTERI
Yunan Jiwintarum, Rohmi, I  Dewa Putu Martha Prayuda
Abstrak :  Bakteri  sulit  dilihat  dengan  mikroskop  cahaya,  karena  tidak  dapat  mengadsorbsi  atau  membiaskan cahaya,  sehingga  digunakan  zat  warna  untuk  mewarnai  bakteri  tersebut  atau  latar  belakangnya.  Zat  warna sintetik  memiliki  harga  yang  cukup  mahal  daripada  pewarna  alami.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui adanya pemanfaatan buah naga ( Hylocereus polyrhizus ) sebagai pewarna alami untuk pewarnaan bakteri. Jenis penelitian  ini  bersifat  quasi  eksperimen  dengan  pengolahan  data  secara  analisis  deskriptif  dengan  3  perlakuan yang  masing-masing  menggunakan  8  sampel.  Dari  hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  pada  kualitas  hasil pewarnaan preparat bakteri Staphylococcus aureus dan E.Coli ( E.Coli ) dengan menggunakan air perasan daging buah  naga  diperoleh  hasil  sebanyak  4  slide  preparat  bakteri Staphylococcus  aureus (33,33%)  dan  4  slide preparat  bakteri E.  coli (33,33%)  yang  tidak  terwarnai.  Dari  hasil  penelitian  dapat  ditarik  kesimpulan  bahwa buah naga ( Hylocereus polyrhizus ) tidak dapat digunakan sebagai pewarna alami untuk pewarnaan bakteri.
Kata Kunci: Buah Naga, Pewarna Alami, Pewarnaan Bakteri.
DRAGON FRUIT ( Hylocereus polyrhizus ) AS NATURAL DYES

## STAINING FOR BACTERIA
Abstract : the bacteria is difficult to be perceived with a light microscope because it can not adsorb or refract the light, consequently the dye applies for staining the bacteria or their background. Synthetic dye has a fairly expensive price than natural dye. This study aims to determine the usage of dragon fruit ( Hylocereus polyrhizus ) as a natural dye for staining the bacteria. This research is quasi experimental, while the data will be analysed by descriptive  analysis  with  3  treatments,  in  each  uses  eight  samples.  The  study  showed  that  on  the  quality  of stains,  bacterium Staphylococcus  aureus and E.  coli by  using  the  juice  of  the  dragon  is  obtained  a  result,  as many as 4 slides preparations of bacteria Staphylococcus aureus (33.33%) and 4 slides preparations of bacteria E .coli (33.33%) were not stained. Therefore, the result on the research can be concluded that the dragon fruit ( Hylocereus polyrhizus ) can not be used as a natural dye for staining bacteria.
Keywords: Dragon Fruit, Natural Dye, Staining the bacteria .

## LATAR BELAKANG
Infeksi  dapat  didefinisikan  sebagai  suatu keadaan  dimana  bakteri  patogenik  berada  di  dalam jaringan  inang.  Adanya  interaksi  antara  bakteri  dan inang  akan  menimbulkan  persaingan.  Bila  bakteri
lebih  unggul  dari  respon  kekebalan  inangnya,  maka terjadilah  penyakit  (Pelczar,  2009).  Bakteri  yang menyebabkan  infeksi  atau  sakit  dapat  diketahui dengan melakukan pemeriksaan laboratorium. Prosedur  laboratorium  untuk  diagnosis  penyebab infeksi  atau  sakit  oleh  bakteri  ada  7  jenis  prosedur,
yaitu 1) Hitung bakteri; 2)  Identifikasi; 3) Biokimia; 4)  Serologi;  5)  Inokulasi  pada  hewan  coba;  6) Kepekaan;  dan  7)  Genetik  (Anonim,  2016). Identifikasi bakteri merupakan prosedur laboratorium yang digunakan untuk mengetahui sifat-sifat morfologi  bakteri,  maka  bakteri  dapat  diperiksa dalam  keadaan  hidup  atau  mati.  Pemeriksaan morfologi  bakteri  ini  perlu,  untuk  mengenal  nama bakteri.  Disamping  itu  juga  perlu  pengenalan  sifat- sifat  fisiologisnya  bahkan  sifat-sifat  fisiologis  ini kebanyakan  merupakan  faktor  tertentu  dalam mengenal  nama  spesies  suatu  bakteri.  Sedangkan konfirmasi bakteri  yaitu  untuk  mengetahui  jenis bakteri dan koloninya. Konfirmasi jenis bakteri dapat menggunakan  berbagai  pewarnaan,  reaksi  ensimatis atau  reaksi  biokimia,  terutama  jika  identifikasi menggunakan media masih meragukan/belum memuaskan  (Anonim,  2016).  Kebanyakan  bakteri mudah  bereaksi  dengan  pewarna-pewarna  sederhana karena  sitoplasmanya  bersifat  basofilik  (suka  akan basa) sedangkan zat-zat warna yang digunakan untuk pewarnaan  sederhana  umumnya  bersifat  alkalin (komponen kromoforiknya bermuatan positif). Teknik  pewarnaan  pada  bakteri  dapat  dibedakan menjadi  empat  macam  yaitu  pengecatan  sederhana, pengecatan  negatif,  pengecatan  diferensial  dan pengecatan struktural. Pemberian warna pada bakteri atau  jasad-  jasad  renik  lain  dengan  menggunakan larutan tunggal suatu pewarna pada lapisan tipis, atau olesan,  yang  sudah  difiksasi,  dinamakan  pewarnaan sederhana.  Prosedur  pewarnaan  yang  menampilkan perbedaan  di  antara  sel-sel  bakteri  atau  bagian- bagian  sel  bakteri  disebut  teknik  pewarnaan diferensial.  Sedangkan  pengecatan  struktural  hanya
mewarnai  satu  bagian  dari  sel  sehingga  dapat membedakan  bagian-bagian  dari  sel.  Termasuk dalam  pengecatan  ini  adalah  pengecatan  endospora, flagella  dan  pengecatan  kapsul  (Waluyo,2010). Bakteri  sulit  dilihat  dengan  mikroskop  cahaya, karena  tidak  mengadsorbsi  ataupun  membiaskan cahaya. Alasan inilah yang menyebabkan  zat warna digunakan  untuk  mewarnai  bakteri  atau  latar belakangnya. Zat warna mengadsorbsi dan membiaskan cahaya sehingga kontras bakteri dengan sekelilingnya  ditingkatkan  (W.  Lay,  1994).  Zat pewarna  merupakan  suatu  bahan  kimia  baik  alami maupun sintetik yang memberikan warna. Berdasarkan sumbernya, zat pewarna untuk makanan dapat  diklasifikasikan  menjadi  pewarna  alami  dan sintetik  (Elbe  dkk.,1996).  Pewarna  alami  yaitu  zat warna  yang  diperoleh  dari  hewan  seperti  :  warna merah  muda  pada  flamingo  dan  ikan  salem sedangkan  dari  tumbuh-tumbuhan  seperti:  karamel, coklat  dan  daun  suji.  Pewarna  buatan  sering  juga disebut dengan zat warna sintetik. Proses pembuatan zat  warna  sintetik  ini  biasanya  melalui  perlakuan pemberian  asam  sulfat  atau  asam  nitrat  yang seringkali  terkontaminasi  (Winarno,  1992).  Pewarna alami  memiliki  nilai  ekonomis  yang  lebih  tinggi daripada  pewarna  buatan.  Salah  satu  bahan  pewarna alami  berasal  dari  buah-buahan.  Buah  naga  adalah salah  satu  buah-buahan  yang  dapat  digunakan sebagai  pewarna  alami.  Buah  naga  merah  adalah buah  yang  termasuk  dalam  buah  yang  mengandung antosianin.  Antosianin  juga  bisa  ditemukan  pada stroberi, semangka, apel, rasberi dan lain-lain. Kadar antosianin  cukup  tinggi  terdapat  pada  berbagai tumbuh-tumbuhan  (Jawi  dkk,  2007).  Antosianin
(bahasa  Inggris: anthocyanin ,  dari  gabungan  kata Yunani  : anthos =  "bunga",  dan cyanos =  "biru") adalah  pigmen  larut  air  yang  secara  alami  terdapat pada  berbagai  jenis  tumbuhan.  Sesuai  namanya, pigmen ini memberikan warna pada bunga, buah, dan daun  tumbuhan  hijau,  dan  telah  banyak  digunakan sebagai pewarna alami pada berbagai produk pangan dan berbagai aplikasi lainnya (Jawi dkk, 2007). Buah naga  memiliki  zat  warna  yang  sulit  hilang  dari  kain atau tangan, peneliti tertarik menggunakan zat warna pada buah naga tersebut untuk dapat mewarnai badan bakteri.  Peneliti  menggunakan  buah  naga  jenis Hylocereus  polyrhizus yang  memiliki  warna  kulit merah  dan  daging  berwarna  merah  keunguan (Anonim, 2016).

## METODE
Penelitian ini bersifat eksperimental, rancangan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah rancangan acak lengkap (RAL). Perlakuan ini terdiri  dari  pengecatan  preparat  bakteri  dengan  air perasan  buah  naga  ( Hylocereus  polyrhizus )  dan  2 kontrol  zat  warna  yaitu  gentian  violet  1%  dan safranin 1%. Perlakuan berupa :
T1 :  pengecatan preparat bakteri dengan
menggunakan cat Gentian Violet 1%
T2 :  pengecatan preparat bakteri dengan cat Safranin 1%
T3 :  pengecatan  preparat  bakteri  dengan  air  perasan (ekstrak) daging buah naga 100%

## Populasi Dan Sampel

## Populasi
Populasi yang digunakan dalam penelitian ini adalah buah  naga  yang  digunakan  sebagai  pewarna  alami untuk pewarnaan bakteri.

## Sampel
Sampel  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah buah  naga  jenis Hylocereus  polyrhizus yang digunakan  sebagai  pewarna  alami  untuk  pewarnaan bakteri.

## Variabel Penelitian
Variabel independent : buah naga Variabel dependent : pewarnaan alami

## Definisi Operasional
1. Pewarna  alami  merupakan  bahan  pewarna  yang bahan-bahannya  banyak  diambil  dari  tumbuh- tumbuhan atau hewan.
2. Buah  naga  adalah  daging  buah  naga  yang memiliki  daging  warna  merah  keunguan  yang diambil  airnya  dengan  cara  diperas  yang digunakan  sebagai  pewarnaan  bakteri S.  Aureus dan E. coli .
3. Pewarna  bakteri  adalah  pewarna  dari  buah  naga yang  digunakan  untuk  mewarnai  preparat  secara sederhana.
Instrumentasi Penelitian :
Alat :  Objek  glass,  Lampu  spritus,  Ose,  Rak pewarnaan, Mikroskop, Pisau Cutter, Wadah plastik, Pipet  tetes,  Kain  Bersih. Bahan :  Biakan  bakteri Gram positif dan Gram negatif, NaCl 0,85 % atau PZ steril, Cat Gram I (Gentian Violet 1%), Cat Gram IV (Safranin 1%), Oil imersi, Pewarna dari buah naga.
Cara Kerja :
Pembuatan  zat  warna  dari  dari  buah  naga ( Hylocereus polyrhizus )
1) Buah  naga  yang  sudah  dipilih,  dicuci  terlebih dahulu menggunakan air bersih.
2) Buah  naga  yang  sudah  dicuci,  dipotong-potong menjadi  ukuran  yang  lebih  kecil  dan  daging buahnya diambil
untuk memudahkan pengambilan air perasan buah naga.
3) Siapkan kain bersih
4) Ambil  potongan  buah  naga  dan  lakukan  proses pemerasan  untuk  memperoleh  zat  warna  dari buah naga.
5) Hasil  perasan  buah  naga  ditampung  pada  wadah yang bersih dan lebar untuk  memudahkan proses pengambilan zat warna.
Pembuatan  preparat  uji  : dibersihkan  kaca  objek dengan  kapas  yang  diberi  alkohol.  Ditulislah  kode organisme  pada  sudut  kanan  kaca  objek  dengan spidol.  diteteskan  2  mata  ose  PZ  di  bagian  tengah kaca  objek.  disentuhkan  ose  pada  biakan  bakteri, kemudian  campur  dengan  NaCl-faali  hingga  merata. Ulaskan  campuran  ini  di  atas  kaca  objek.Dibiarkan preparat  mengering  di  kaca  objek  sebentar.Difiksasi diatas api.
Pewarnaan  preparat  secara  sederhana  : Sediaan yang  sudah  kering  dan  difiksasi  ditaruh  diatas  bak pengecatan.  Genangi  dengan  cat  gentian  violet, safranin  dan  pewarna  dari  buah  naga  dan  ditunggu sesuai  dengan  batas  waktunya.Cat  dibuang,  dicuci dengan air mengalir sampai bersih.Keringkan dengan
tissue. Diamati dengan mikroskop dengan perbesaran 100x. Hasil Pengecatan bila bakteri gram positif atau gram  negatif  terwarnai  dengan  pewarna  buah  naga dengan kualitas yang sama dengan cat gentian violet 1%  atau  safranin  1%. Cara  Pengolahan  dan Analisis  Data  :  D ata  yang  diperoleh  berupa  hasil pengecatan bakteri dengan menggunakan perbandingan  cat  gentian  violet,  safranin  dan  buah naga  di  analisis  menggunakan  uji  dengan  kriteriaa pengecatan yaitu :
a Baik,  jika  hasil  penyerapan  zat  warna  pada preparat  terlihat  kontras  terhadap  latar  belakang dan  preparat  pewarnaan  terlihat  bersih  dari endapan cat pada pengamatan dibawah mikroskop.
b Kurang  Baik,  jika  hasil  penyerapan  zat  warna pada  preparat  terlihat  kurang  kontras  terhadap latar  belakang  dan  preparat  pewarnaan  terlihat bersih  dari  endapan  cat  pada  pengamatan dibawah mikroskop.
Tidak  Baik,  jika  hasil  penyerapan  zat  warna  pada preparat tidak terlihat kontras terhadap latar belakang dan  preparat  pewarnaan  terdapat  endapan  cat  pada pengamatan dibawah mikroskop.

## HASIL PENELITIAN
Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah  2  jenis  bakteri  yaitu  bakteri Staphylococcus aureus dan E.Coli .
Tabel 1 Hasil Pewarnaan Preparat Bakteri Staphylococcus Aureus Menggunakan Cat Gentian Violet 1%, Safranin 1% dan Ekstrak daging Buah Naga ( Hylocereus polyrhizus ) 100%.
Kode Slide Warna Bakteri Kontras terhadap latar belakang Kebersihan preparat pewarnaan Kualitas Hasil Pewarnaan Baik (B) / Kurang Baik (KB) / Tidak Baik (TB) T1 – Staph Ungu Kontras Tidak ada endapan cat Baik T1 – Staph Ungu Kontras Tidak ada endapan cat Baik T1 – Staph Ungu Kontras Tidak ada endapan cat Baik T1 – Staph Ungu Kontras Tidak ada endapan cat Baik T2 – Staph Merah Kurang kontras Tidak ada endapan cat Kurang Baik T2 – Staph Merah Kurang kontras Tidak ada endapan cat Kurang Baik T2 – Staph Merah Kurang kontras Tidak ada endapan cat Kurang Baik T2 – Staph Merah Kurang kontras Tidak ada endapan cat Kurang Baik T3 – Staph Tidak Terwarnai Tidak Kontras Tidak ada endapan cat Tidak Baik T3 – Staph Tidak Terwarnai Tidak Kontras Tidak ada endapan cat Tidak Baik T3 – Staph Tidak Terwarnai Tidak Kontras Tidak ada endapan cat Tidak Baik T3 – Staph Tidak Terwarnai Tidak Kontras Tidak ada endapan cat Tidak Baik
Keterangan :
T1  :  Pewarnaan  preparat  bakteri  menggunakan  cat Gentian Violet 1%
T2  :  Pewarnaan  preparat  bakteri  menggunakan  cat Safranin 1%
T3  :Pewarnaan  preparat  bakteri  menggunakan  air perasan  daging  buah  naga  ( Hylocereus  polyrhizus ) 1%
Tabel 2 Hasil  Pewarnaan Preparat  Bakteri E.  Coli Menggunakan  Cat Gentian Violet 1%, Safranin 1% dan Ekstrak daging Buah Naga ( Hylocereus polyrhizus ) 100%.
Kode Slide Warna Bakteri Kontras terhadap latar belakang Kebersihan preparat pewarnaan Kualitas Hasil Pewarnaan Baik (B) / Kurang Baik (KB) / Tidak Baik (TB) T1 – E. Coli Ungu Kurang kontras Tidak ada endapan cat Kurang Baik T1 – E. Coli Ungu Kurang kontras Tidak ada endapan cat Kurang Baik T1 – E. Coli Ungu Kurang kontras Tidak ada endapan cat Kurang Baik T1 – E. Coli Ungu Kurang kontras Tidak ada endapan cat Kurang Baik T2 – E. coli Merah Kontras Tidak ada endapan cat Baik T2 – E. Coli Merah Kontras Tidak ada endapan cat Baik T2 – E. Coli Merah Kontras Tidak ada endapan cat Baik T2 – E. Coli Merah Kontras Tidak ada endapan cat Baik T3 – E. Coli Tidak Terwarnai Tidak Kontras Tidak ada endapan cat Tidak Baik T3 – E. Coli Tidak Terwarnai Tidak Kontras Tidak ada endapan cat Tidak Baik T3 – E. Coli Tidak Terwarnai Tidak Kontras Tidak ada endapan cat Tidak Baik T3 – E. Coli Tidak Terwarnai Tidak Kontras Tidak ada endapan cat Tidak Baik
Keterangan :
T1  :  Pewarnaan  preparat  bakteri  menggunakan  cat Gentian Violet 1%
T2  :  Pewarnaan  preparat  bakteri  menggunakan  cat Safranin 1%
T3  :Pewarnaan  preparat  bakteri  menggunakan  air perasan  daging  buah  naga  ( Hylocereus  polyrhizus ) 1%
Tabel 1 dan 2 menunjukkan bahwa preparat bakteri
Staphylococcus aureus yang dicat
menggunakan cat Gentian Violet dihasilkan pewarnaan  yang  dapat  mewarnai  badan  bakteri, kontras  dan  kualitasnya  baik  terdapat  4  slide; menggunakan  Safranin  dihasilkan  pewarnaan  yang dapat  mewarnai  badan  bakteri,  kurang  kontras  dan kualitasnya  kurang  baik  terdapat  4  slide;  dan menggunakan  air  perasan  buah  naga  dihasilkan pewarnaan yang tidak dapat mewarnai badan bakteri, tidak  kontras  dan  kualitasnya  tidak  baik  terdapat  4 slide.  Untuk  preparat  bakteri E.  coli yang  dicat
menggunakan  cat  Gentian  Violet    dihasilkan pewarnaan  yang  dapat  mewarnai  badan  bakteri, kurang  kontras dan  kualitasnya  kurang baik terdapat 4 slide; menggunakan Safranin dihasilkan pewarnaan yang  dapat  mewarnai  badan  bakteri,  kontras,  dan kualitasnya  baik  terdapat  4  slide;  dan  menggunakan air  perasan  buah  naga  dihasilkan  pewarnaan  yang tidak  dapat  mewarnai  badan  bakteri,  tidak  kontras, dan  kualitasnya  tidak  baik  terdapat  4  slide.

## Tabel 3 Persentase Hasil Pewarnaan Dari Preparat Bakteri Staphylococcus Aureus
Pewarna Kualitas Pewarnaan Baik Kurang Baik Tidak Baik Jumlah % Jumlah % Jumlah % Gentian Violet 1% 4 slide 33, 33% - - - - Safranin 1% - - 4 slide 33, 33% - - Buah Naga 100% - - - - 4 slide 33, 33%
Tabel 4 Persentase Hasil Pewarnaan Dari Preparat Bakteri E.Coli Pewarna Kualitas Pewarnaan Baik Kurang Baik Tidak Baik Jumlah % Jumlah % Jumlah % Gentian Violet 1% - - 4 slide 33, 33% - - Safranin 1% 4 slide 33, 33% - - - - Buah Naga 100% - - - - 4 slide 33, 33%
Tabel  3  dan  4  menunjukkan  bahwa  diatas terlihat  bahwa  preparat  bakteri Staphylococcus aureus yang  dicat  menggunakan  cat  Gentian  Violet dihasilkan pewarnaan yang kualitasnya baik (33,33%)  ;  menggunakan  Safranin  dihasilkan pewarnaan  yang  kualitasnya  kurang  baik  (33,  33%); dan  menggunakan  air  perasan  buah  naga  dihasilkan pewarnaan  yang  n  kualitasnya  tidak  baik  (33,33%). Untuk  preparat  bakteri  E.  coli  yang  dicat menggunakan  cat  Gentian  Violet    dihasilkan pewarnaan  yang    kualitasnya  kurang  baik  (33,33%); menggunakan  Safranin  dihasilkan  pewarnaan  yang kualitasnya  baik  (33,33%);  dan  menggunakan  air perasan  buah  naga  dihasilkan  pewarnaan  yang kualitasnya tidak baik (33,33%).

## PEMBAHASAN
Bakteri  sulit  dilihat  dengan  mikroskop cahaya,  karena  tidak  dapat  mengadsorbsi  atau membiaskan  cahaya,  sehingga  digunakan  zat  warna untuk mewarnai bakteri tersebut atau latar belakangnya. Zat warna mengadsorbsi dan membiaskan cahaya sehingga bakteri kontras dengan sekelilingnya.  Zat  warna  yang  digunakan  dalam pewarnaan  bersifat  basa  atau  asam.  Zat  warna  basa lebih  banyak  digunakan  karena  muatan  negatif banyak  ditemukan  pada  dinding  sel  pada  proses pewarnaan. Zat warna asam yang bermuatan negatif, lazimnya  tidak  digunakan  untuk  mewarnai  bakteri, namun  biasanya  digunakan  untuk  mewarnai  latar
belakang preparat bakteri (W. Lay, 1994). Salah satu teknik  pewarnaan  pada  bakteri  adalah  pewarnaan sederhana yang hanya menggunakan satu macam zat warna  saja  untuk  meningkatkan  kontras  bakteri dengan latar belakangnya  yang berwarna transparan. Pewarnaan sederhana biasanya menggunakan pewarnaan  yang  bersifat  basa  seperti  gentian  violet, safranin, karbol fuchsin, methylen blue atau malachit green.  (W.  Lay,  1994).  Zat  warna  sintetik  memiliki harga  yang  cukup  mahal  daripada  pewarna  alami. Pewarna  alami  dapat  dijumpai  pada  tumbuhan  dan buah-buahan,  salah  satunya  adalah  buah  naga  jenis ( Hylocereus  polyrhizus )  sebagai  pewarna  alami untuk  mewarnai  bakteri  secara  sederhana,  karena buah  naga  jenis Hylocereus  polyrhizus memiliki warna  merah  yang  cukup  pekat.  Berdasarkan  hasil pada  tabel  4.3  dan  4.4  bahwa  preparat  bakteri Staphylococcus  aureus yang  dicat  menggunakan  cat Gentian  Violet  menggunakan  cat  Gentian  Violet dihasilkan  pewarnaan  yang  kualitasnya  baik  ada  4 preparat (33,33%) ; menggunakan Safranin dihasilkan pewarnaan yang kualitasnya kurang baik 4 preparat  (33,  33%);  dan  menggunakan  air  perasan buah  naga  dihasilkan  pewarnaan  yang  kualitasnya tidak  baik  4  preparat  (33,33%).  Untuk  preparat bakteri E.  coli yang  dicat  menggunakan  cat  Gentian Violet    dihasilkan  pewarnaan  yang    kualitasnya kurang  baik  4  preparat  (33,33%);  menggunakan Safranin dihasilkan pewarnaan yang kualitasnya baik 4  preparat  (33,33%);  dan  menggunakan  air  perasan buah  naga  dihasilkan  pewarnaan  yang  kualitasnya tidak baik 4 preparat (33,33%). Pada preparat bakteri Staphylococcus  aureus (gram  positif)  yang  diwarnai dengan  cat  gentian  violet  diperoleh  kualitas  yang
baik  karena  menurut  Pelczar  (2009),  dinding  sel bakteri  gram  positif  pada  umumnya  memiliki struktur  dinding  sel  yang  tebal  (15-80  nm)  dan sedikit  lemak  (1  –  4%).  Dinding  sel  bakteri  gram positif  memiliki  peptodoglikan  yang  lebih  banyak yang  mampu  mempertahankan  zat  warna  ungu sehingga warna ungu yang muncul pada pengamatan mikroskopis  terlihat  kontras.  Pada  penggunaan  cat safranin  diperoleh  kualitas  yang  kurang  baik  karena warna merah yang diserap oleh pri-pori peptodoglikan  dinding  sel  yang  lebih  tebal  tidak sempurna  sehingga  pada  pengamatan  mikroskopis terlihat kurang  kontras. Pada preparat bakteri E. coli (gram  negatif)  yang  diwarnai  dengan  Safranin diperoleh kualitas  yang baik  karena  menurut Pelczar (2009),  bakteri  gram  negatif  memiliki  dinding  sel yang  lebih  tipis  (  10-15  nm)  dan  persentase  lemak lebih  tinggi  (11-  24%)  daripada  bakteri  gram  positif dikarenakan bakteri gram negatif memiliki peptodoglikan  sedikit  yang  mampu  menyerap  warna merah  hingga  warna  merah  yang  muncul  pada pengamatan  mikroskopis  terlihat  kontras.  Pada penggunaan  cat  gentian  violet  diperoleh  kualitas yang  kurang  baik  karena  warna  ungu  yang  diserap oleh  pori-pori  pada  peptodoglikan  dinding  sel  tidak sempurna  sehingga  pada  pengamatan  mikroskopis terlihat  kurang  kontras.  Pada  preparat  bakteri Staphyloccous  aureus dan E.  coli yang  dicat menggunakan  air  perasan  daging  buah  naga  sama- sama  menunjukkan  kualitas  hasil  pewarnaan  yang tidak  baik,  bisa  disebabkan  oleh  ketidakstabilan  zat warna  antosianin  yang  terkandung  dalam  buah  naga tersebut.  Menurut  Charley  (1970),  antosianin  adalah senyawa  yang  bersifat  amfoter  yaitu  dapat  bereaksi
dengan  asam  maupun  basa  dengan  baik  dan perubahan warna karena kondisi lingkungan tergantung  dari  struktur  dasar  dari  posisi  ikatannya. Menurut  Arthey  dan  Arthust  (2001),  oksigen  dapat merusak  stabilitas  warna  antosianin  selama  proses pengambilan  air  dari  buah.  Menurut  Niendyah (2004),  kestabilan  antosianin  dipengaruhi  oleh beberapa  faktor,  antara  lain  ph,  temperatur,  oksigen dan ion logam.
Faktor-faktor  lain  yang  dapat  menghambat penyerapan cat pada preparat bakteri tersebut adalah tingginya  kadar  air  (90,2%  dari  berat  buah)  pada buah  naga Hylocereus  polyrhizus sehingga  ketika proses membilas cat dengan air mengalir, cat tersebut menjadi  luntur  secara  keseluruhan.  Hal  yang  perlu diperhatikan  dalam  melakukan  pewarnaan  bakteri agar  diperoleh  kualitas  pewarnaan  yang  baik  yaitu  : 1) preparat bakteri harus benar-benar kering sebelum diwarnai;  2)  dalam  melakukan  pewarnaan  bakteri harus  memperhatikan  cat  yang  digunakan  dengan jenis pewarnaan yang dilakukan; 3) untuk menghindari  hilangnya  sediaan  pada  preparat, cucilah sediaan dengan air mengalir secara perlahan- lahan.

## KESIMPULAN
Preparat  bakteri Staphylococcus  aureus yang  diwarnai  dengan  cat  Gentian  Violet  diperoleh kualitas pewarnaan  yang baik (33,33 %), dengan cat Safranin  diperoleh  kualitas  pewarnaan  yang  kurang baik  (33,33  %),  sedangkan  dengan  cat  dari  air perasan  (ekstrak)  buah  naga  diperoleh  kualitas pewarnaan  yang  tidak  baik  (33,  33  %).  Preparat bakteri E.  coli yang  diwarnai  dengan  cat  Gentian
Violet  diperoleh  kualitas  pewarnaan  yang  kurang baik  (33,33  %),  dengan  cat  Safranin  diperoleh kualitas  pewarnaan  yang  baik  (33,33  %),  sedangkan dengan  cat  dari  air  perasan  (ekstrak)  buah  naga diperoleh kualitas pewarnaan yang tidak baik (33, 33 %).  Buah  naga  jenis Hylocereus  polyrhizus tidak dapat  digunakan  sebagai  pewarnaan  bakteri,  karena kandungan air pada buah naga masih tinggi (90,2 %) sehingga  kemampuan  melekatnya  zat  warna  masih kurang.

## SARAN
Mengendalikan  kadar  air,  oksidasi  dan  pH agar  buah  naga  jenis Hylocereus  polyrhizus dapat digunakan sebagai pewarnaan bakteri.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim 1 .  2015. http://fungsi.web.id/2015/08/ciri- ciri-bakteri-secara-umum.html . Diakses tanggal 12 Januari 2016 pukul 14.06 WITA
Anonim 2 . 2016. http://ilmualam.net/perbedaan- pewarna-alami-dan-buatan.html . Diakses tanggal  16  Desember  2015  pukul  12.37 WITA
Arthey,  D.,  and  Ashurst,  P.R.  2001. Fruit Prossecing,  Nutrition  Product,  and  Quality
Management, 2nd  Edition . An  Aspen Publication. Maryland
Charley,  H.  1970. Food  Science .  Jhon  Willey  and sons. New York Dwidjoseputro, D., 1990. Dasar-Dasar
Mikrobiologi . Malang : Djambatan
Jawi,  I  Made,  Dewa  N.  Suprapta,  I  Nyoman  A, Agung W. Indrayani, A.A Ngurah  S. 2007. Efek  Antioksidan  Ekstrak  Air  Umbi Ubijalar Ungu (Ipomoea Batatas L)
Terhadap  Darah  Dan  Berbagai  Organ  Pada Mencit  Yang  Diberikan  Beban  Aktivitas Fisik  Maksimal. Universitas  Udayana  Bali . 29 Maret 2012
Jawetz,  Melnick  &  Adelberg.  2004. Mikrobiologi Kedokteran, Edisi ke-23, EGC  Jakarta Jimmo.,  2008,  http://Pembuatan  Preparat  dan Pengecatannya  BLoG KiTa.mht.    Diakses tanggal 05 Januari 2016 pukul 16.09 WITA
Nasukkah,  Ana T. 2012.  Fabrikasi dan Karakterisasi Dye  Sensitized  Solar  Cell  (DSSC)  dengan Menggunakan  Ektraksi  Daging  Buah  Naga Merah  ( Hylocereus  Polyrhizus )  Sebagai Dye Sensitizer. Jurnal sains dan seni ponits . Volume 1 no. 1
Niendyah,  H.  2004.  Efektivitas  Jenis  Pelarut  dan Bentuk  Pigmen  Antosianin  Bunga  Kana ( Canacoccinea mill) serta Aplikasinya pada Produk Pangan. Naskah Skripsi . UniversitasBrawijaya. Malang : 29
Notoatmodjo, Soekidjo. 2012. Metodologi Penelitian Kesehatan , PT Rineka  Cipta, Jakarta
Pelczar,  Michael  J.  &  Chan,  E.C.S.  2009. Dasar- Dasar Mikrobiologi . UI Press:  Jakarta Sacher  &  Ronald  A  .  2002 Tinjauan  Klinis  Hasil Pemeriksaan Laboratorium EGC Jakarta
Soemarno,  2000. Isolasi  dan  Identifikasi  Bakteri Klinik ,  Akademi  analis  kesehatan,  Depkes RI, Yogyakarta
Subagja, Hamid Prasetya, 2013, Saktinya Buah Naga Dan  Delima  Tangkal  Penyakit-Penyakit Mematikan , FlashBooks,  Jogjakarta
Suntoro,  Handani  S.  1980.  Metode  Pewarnaan.  PT.
Bhratara Karya Aksa. Jakarta. Trianda. 2011. Inokulasi Mikroba Mkrobiologi. www.trianda.herisonsurbakti.c om
Von  Elbe,  J.  H.  dan  S.J.  Schwartz.  1996.  Colorants.
Di  dalam  Fennema.  Marcel    Dekker  Inc. Food Chemistry . New York. Pp 651 -723.
W.  Lay,Bibiana.  1994. Analisis  Mikroba  di Laboratorium ,  PT  Raja  Grafindo  Persada,
Jakarta Waluyo,lud. 2010. Buku Petunjuk Praktikum
Mikrobiologi Umum. UMM. Malang
Winarno,  F.G.  1992. Kimia  Pangan  dan Gizi . Gramedia Pustaka Utama, Jakarta