Journal Syifa Sciences and Clinical Research Volume 2 Nomor 1, Maret 2020
Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/jsscr , E-ISSN: 2656-9612 P-ISSN:2656-8187

## Aktivitas Ekstrak Daun Bangle (zingiber purpureum roxb.)

## Terhadap Pertumbuhan Bakteri Pseudomonas aeruginosa
Fajrin Noviyanto 1* , Siti Hodijah 2 , Yusransyah 3 1,3 Jurusan Farmasi, Fakultas Farmasi, Stikes Salsabila Serang, Jl. Raya Serang-Pandeglang Km.06 No.33, Kota Serang, Banten
2 Jurusan Farmasi, Fakultas Farmasi, Unma Banten, Jl. Raya Labuan KM 23, Cikaliung, Saketi, Pandeglang, Banten * Penulis Korespondensi. Email: fanosalam@gmail.com

## ABSTRAK
Bakteri penyebab infeksi yang dapat menimbulkan kesakitan dan kematian yang tinggi, yaitu bakteri Pseudomonas  aeruginosa . Bangle  memiliki aktivitas  farmakologi  sebagai antibakteri, laksatif, inhibitor lipase pankreas, dan melindungi  sel  dari  kerusakan  akibat  stress oksidatif. Tujuan penelitian ini yaitu: mengetahui kandungan kimia yang terdapat pada ekstrak daun bangle  ( Zingiber    purpureum Roxb.)  dapat  berkhasiat  sebagai  antibakteri  dan  mengetahui Kadar  Hambat  Minimal  (KHM)  dari  ekstrak  daun  bangle  terhadap Pseudomonas  aeruginosa. Pengujian terhadap aktivitas antibakteri ekstrak daun bangle terhadap Pseudomonas aeruginosa dilakukan dengan metode Kirby Bauer dan pelarut yang dipergunakan adalah DMSO. Larutan uji dengan konsentrasi ekstrak daun bangle  200, 400, 600, 800 dan 1.000 ppm,  larutan kontrol positif  (ciprofoxacin)  dan  larutan  kontrol  negatif  (DMSO).  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa kandungan kimia yang terdapat pada ekstrak daun bangle ( Zingiber purpureum Roxb.) yaitu  flavonoid,  saponin,  tanin,  alkaloid  dan  steroid.  Nilai  Konsentrasi  Hambat  Minimum (KHM) ekstrak etanol daun bangle terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa adalah konsentrasi 40 % dengan rata-rata diameter hambatnya sebesar 8,17 mm. Nilai KHM ekstrak ekstrak etanol daun bangle termasuk ke dalam aktivitas bakteri yang cukup kuat.
Kata Kunci:
Antibakteri, Pseudomonas aeruginosa, Zingiber  purpureum Roxb.
Diterima:
19-09-2019 Disetujui: 23-12-2019 Online: 20-02-2020

## ABSTRACT
T he bacteria that cause infections that can lead to high morbidity and mortality, the bacterium Pseudomonas  aeruginosa .  Bangle  has  a  pharmacological  activity  as  antibacterial,  laxative, pancreatic  lipase  inhibitor,  and  protect  cells  from  damage  caused  by  oxidative  stress.  The purpose of this study are: to know the chemical constituents present in the extract of leaves bangle ( Zingiber purpureum Roxb.) Can be efficacious as an antibacterial and knowing Minimal Inhibitory concentration (MIC) of the extracts of leaves bangle against Pseudomonas aeruginosa . Tests on the leaf extracts for antibacterial activity against Pseudomonas aeruginosa bangle made by the method of Kirby Bauer and solvents used are DMSO. Test solution with a concentration of  leaf  extract  bangle  200,  400,  600,  800  and  1,000  ppm,  the  positive  control  solution (ciprofoxacin) and the solution negative control (DMSO). The results showed that the chemical
constituents present in the extract of leaves bangle ( Zingiber purpureum Roxb.) Are flavonoids, saponins, tannins, alkaloids and steroids. Value Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of ethanol extract of the leaf bangle S bacteria Pseudomonas aeruginosa is a concentration of 40 % with  an  average  diameter of  5.44  mm  inhibitory.  MIC  extract  ethanol  extract  of  leaf  bangle belonging to the bacterial activity that is strong enough. .
Keywords: Antibacterial, Pseudomonas aeruginosa, Zingiber purpureum Roxb.
Received: 2019-09-19 Accepted: 2019-12-23 Online: 2020-02-20

## 1. Pendahuluan
Dewasa ini, istilah back to nature cenderung menjadi lazim dan dikenal di masyarakat. Seiring dengan berkembangnya teknologi,  manusia  mulai menyadari efek negatif dari perkembangan teknologi dan memilih cara yang lebih alami  dengan  harapan dapat meminimalisir  efek  yang  mungkin  timbul [5].  Gaya hidup banyak mempengaruhi manusia di berbagai bidang, termasuk bidang kesehatan. Dengan semakin banyaknya efek samping akibat penggunaan obat sintetis jangka panjang, masyarakat mulai banyak melirik  obat-obatan  tradisional  dalam  mengobati,  menjaga  kesehatan  dan  mencegah penyakit itu sendiri [9]. Sebuah  data  menyebutkan  bahwa  di  beberapa  negara  di Asia  dan  Afrika sebanyak  80%  dari  jumlah  populasi  menggunakan  obat-obatan tradisional sebagai primary health care dan sebanyak 70-80% dari populasi di negara maju menggunakan  obat  tradisional  sebagai  alternatif  pengobatan  maupun  pelengkap pengobatan [2,13].
Salah  satu  obat  tradisional  yang  telah  dikenal  sebagian  masyarakat  memiliki  khasiat yang bermanfaat bagi tubuh adalah bangle. Bangle ( Zingiber purpureum Roxb.) termasuk dalam  famili  zingiberaceae  telah  banyak  digunakan  dalam  pengobatan  tradisional. Bangle  berkhasiat sebagai  obat  demam,  perut  nyeri, sembelit, masuk  angin,  cacingan, dan  encok.  Bangle mengandung  saponin, flavonoid,  minyak  atsiri,  tanin,  steroid, triterpenoid,  antioksidan  seperti  vitamin  C, vitamin E, karoten, dan senyawa fenolik. Berdasarkan  hasil  penelitian  ekstrak rimpang  bangle  memiliki  aktivitas  farmakologi sebagai  antibakteri,  laksatif,  inhibitor  lipase  pankreas,  dan  melindungi    sel    dari kerusakan  akibat  stress oksidatif  oleh  H 2 O 2 [8,12].
Penyakit  infeksi  masih  menjadi  salah  satu  masalah  kesehatan  serius yang dihadapi oleh  dunia.  Hampir  14  juta  orang  tiap  tahunnya  meninggal  dunia  akibat  menderita penyakit infeksi [7]. Penyakit infeksi diduga menjadi salah satu masalah  utama  yang menyebabkan    kecacatan  dan    kematian  di  negara  berkembang.  Infeksi  dapat  terjadi karena  dipengaruhi oleh  faktor-faktor  utama, yaitu kerentanan hospes, kemampuan mikroba  untuk  menimbulkan  infeksi  dan  keadaan  lingkungan  yang  sesuai  untuk perkembangan mikroba. Salah satu bakteri penyebab infeksi yang dapat menimbulkan kesakitan  dan  kematian  yang  tinggi,  yaitu  bakteri Pseudomonas  aeruginosa .  Angka kematian akibat infeksi oleh Pseudomonas aeruginosa diduga mencapai 50%, tergantung dengan jenis infeksinya [3].
Pseudomonas aeruginosa adalah salah satu dari Pseudomonas sp yang sering terdapat pada infeksi opportunistik dan infeksi nosokomial  pada pasien immunocompromised sebagai akibat  dari  luka bakar  atau  trauma  yang  berat, penyakit  seperti  kanker,  diabetes, dan  cystic  fibrosis  (CF),  immunosuppresion, dan  operasi  besar. Bakteri batang gram
negatif  ini  merupakan  bakteri  ketiga  terbanyak  penyebab  infeksi  nosokomial  setelah Staphylococcus aureus dan Eschericia Coli . Kemampuannya untuk mengembangkan MDR ( Multi    Drug    Resistance) yang    tinggi    terhadap    beberapa  golongan    antibiotika, diantaranya    yaitu    penisilin,  sefalosporin  generasi  pertama  dan  kedua,  tetrasiklin, kloramfenikol,    dan    mikrolid,    cenderung  menyebabkan  bakteri  ini  bersifat  resisten terhadap  banyak  golongan  antibiotika.  MDR-PA  ( Multi  Drug  Resistance-Pseudomonas aeruginosa) didefinisikan sebagai resistensi Pseudomonas aeruginosa terhadap tiga atau lebih  golongan  antibiotika  dari  kelas  β-lactam,  carbapenem,  aminoglikosida,  dan fluoroquinolone dengan tingkat MDR-PA sekitar 0,6-32 % [15,16].
Oleh  karena  itu,  penanganan  terhadap Pseudomonas  aeruginosa ini  relatif    sulit. Dibutuhkan  langkah  yang tepat dalam  mengatasi   infeksi  ini,  salah satunya yaitu menemukan  antibiotika  baru  dimana  bakteri  ini  belum diketahui resisten.
Peneliti  tertarik  untuk  mengkaji  penelitian  yang  berjudul  “Aktivitas  Ekstrak  Daun Bangle  ( Zingiber  purpureum Roxb.)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Pseudomonas aeruginosa”
2.  Metode
2.1 Alat
Blender, cawan petri, gelas beaker, incubator, jangka sorong, jarum ose, kapas steril, labu ukur, lemari pengering, mikro pipet, mortar dan stamper, neraca analitik (Mettler AE 200), neraca kasar (Ohanus), pH meter, pipet, pisau, rotary evaporator , spatula, tabung reaksi, tisu, tampah.
2.2 Bahan
Daun bangle, Pseudomonas aeruginosa ( ATCC 9027), etanol 70%, nipagin, nutrient agar, akuades, larutan Mc.Farland, larutan dapar pH netral, asam klorida 2 N, asam asetat anhidrida, asam sulfat 2 N, besi (III) klorida, methanol, pereaksi wagner , Pereaksi Maye r, Magnesium.

## 2.3 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Bangle
Sebanyak 1000 g serbuk simplisia dimasukkan ke dalam bejana, Dimaserasi dengan 7000 ml etanol 70% kemudian diaduk sesekali selama 6 jam. Didiamkan selama 24 jam lalu tampung maserat (maserat pertama). Diulangi sebanyak dua kali seperti di atas. Maserat yang diperoleh dipekatkan dengan alat rotary evaporator . Kemudian dikeringkan dengan alat pengering beku ( freeze dryer ) pada suhu 40 0 C pada tekanan 2 atmosfer selama lebih kurang    24 jam dan diperoleh ekstrak kental.
2.4 Pembuatan Media MHA ( Muller - Hinton Agar)
Menimbang  media Nutrient  MHA ( Muller - Hinton Agar) sebanyak 2,3 g. Dilarutkan dengan aquades sebanyak 100 ml. Dimasukkan kedalam botol Scoot kemudian di kocok. Disterilkan di autoklaf pada suhu 121°C dengan tekanan 15 Psi selama 15 menit. Dituang ke dalam cawan petri didalam alat laminar air flow (diamkan selama 24 jam). Simpan pada waterbath pada suhu 45-50 0 C.

## 2.5 Pembuatan Suspensi standar Mc. Farland
Suspensi  standar  yang  menunjukkan  konsentrasi  kekeruhan  suspensi  bakteri  sama dengan 10 8 CFU/ml. Komposisi: Larutan asam sulfat 1%  99,5 mL dan Larutan barium
klorida 1,175% b/v  0,5 mL. Cara pembuatan: Larutan keduanya dicampurkan dalam tabung  reaksi  steril,  dikocok  sampai  homogen  dan  ditutup.  Apabila  kekeruhan  hasil suspensi bakteri sama dengan kekeruhan suspensi standar berarti konsentrasi bakteri 10 8 CFU/mL.

## 2.6 Penyiapan Inokulum Bakteri Pseudomonas aeruginosa
Biakan bakteri Pseudomonas aeruginosa dari strain utama diambil dengan jarum ose steril, diinokulasikan  pada  permukaan  media  agar  miring,  kemudian  diinkubasikan  pada suhu 35±2 o C selama 24 jam.

## 2.7 Pembuatan Suspensi Bakteri Pseudomonas aeruginosa
Bakteri uji yang telah diinokulasi diambil dengan kawat ose steril lalu disuspensikan kedalam tabung yang berisi 2 ml larutan NaCl 0,9% hingga di peroleh kekeruhan yang samadengan standar kekeruhan larutan Mc. Farland.

## 2.8 Pembuatan Larutan Kontrol Positif
Kontrol  positif  dibuat  dari  sediaan  tablet  Ciprofloxacin  500  mg.  Tablet Ciprofloxacin digerus, lalu ditimbang dan disetarakan dengan 50 mg ciprofloxacin murni. Kemudian serbuk  Ciprofloxacin  sebanyak 50  mg  dilarutkan  dalam  50  mL larutan DMSO  untuk memperoleh larutan Ciprofloxacin 50 μg/50 μL. Selanjutnya diencerkan dengan diambil 1 mL dari larutan Ciprofloxacin 50 μg/50 μL dan digenapkan sampai 10 mL dengan DMSO 1% sehingga didapat larutan kontrol positif dengan konsentrasi 5 μg/50 mL .

## 2.9 Pengujian Aktivitas Antibakteri Terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa
Suspensi bakteri Pseudomonas aeruginosa dimasukkan kedalam MHA 100 mL dan darah domba  5-10%  (dicampurkan).  Tuang  kedalam  cawan  petri  yang  sudah  berisi  media (MHA 100 mL).  Setelah kering (menjadi agar) dibuat sumuran. Dibuat label masing- masing sumur dengan konsentrasi yang ditentukan, kontrol positif dan kontrol negatif. Sebanyak  50  µL  diambil  dari  masing-masing  larutan  uji  dengan  konsentrasi  ekstrak daun bangle  1100 %, 80%, 60 %, 40 %, 20 %, kontrol negatif (DMSO) dan larutan kontrol positif (Ciprofloxacin).  Dimasukkan ke dalam sumur-sumur yang telah dibentuk pada media pengujian. Diinkubasi pada suhu 37 o C selama 24 jam. Diamati zona hambat yang terbentuk dan diukur dengan jangka sorong.

## 2.10 Analisis Data
Data  berupa  Diameter  zona  hambat  terhadap Pseudomonas  aeruginosa .  Data  hasil penelitian dianalisis secara statistik menggunakan metode ANOVA (Analisis Varians) dengan program SPSS versi 23. dengan tingkat kepercayaan 95% dilanjutkan dengan uji metode Duncan untuk mengetahui  kelompok yang mempunyai  pengaruh sama atau berbeda satu dengan yang lainnya.

## 3.  Hasil dan Pembahasan
Pembuatan  simplisia  daun  bangle  melalui  pembuatan  tahapan  sesuai  standar pembuatan  simplisia  didapatkan  1000  gram.  Lalu  diolah  dengan  metode  maserasi dengan pelarut etanol 70% dan didapatkan ektrak kental sebanyak 60 gram.

## Tabel 1 Hasil Ektrak Etanol Daun Bangle
Serbuk Kering Daun Bangle Pelarut Etanol 70% Ekstrak Kental Daun Bangle Rendemen 1.000 gram 7.000 mL 60 gram 6%
Hasil uji skrining fitokimia daun bangle menunjukkan bahwa metabolit sekunder pada simplisia dan ekstrak daun bangle adalah flavonoid, tanin, saponin, steroid dan alkaloid. Tabel 2 Hasil Skrining Fitokimia SImplisia dan Ekstrak Daun Bangle
Golongan Metabolit Sekunder Uji Pereaksi Hasil Pengamatan Visual Hasil Simplisia Ekstrak Flavonoid Magnesium, asam klorida Merah + + Tanin Besi (III) klorida Hijau kehitaman + + Saponin Akuades, asam klorida Busa mantap + + Steroid Etanol, eter, asam asetat anhidrat, asam sulfat Hijau + + Alkaloid Wagner Mayer Terdapat Endapan + + Keterangan :
+  = memberikan hasil positif -   = memberikan hasil negatif Sumber: Data Primer yang diolah 2019
Berdasarkan hasil yang terlihat Tabel 3 bahwa dari ekstrak etanol daun Bangle ( Zingiber purpureum Roxb.)  konsentrasi  20%  tidak  memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap Pseudomonas  aeruginosa. Ekstrak  etanol  daun  Bangle  ( Zingiber  purpureum Roxb.) konsentrasi 40% memiliki aktivitas antibakteri terhadap Pseudomonas aeruginosa dengan zona hambat rata-rata 8,17 mm.
Tabel 3 Diameter Zona Hambat Terhadap Pseudomonas aeruginosa
Perlakuan Satuan Hasil Pemeriksaan Diameter zona hambat terhadap Pseudomonas aeruginosa 1 2 Rata 2 Kontrol Negatif (DMSO) mm - - - Kontrol Positif (Ciprofloxacin) mm 22,2 22,34 22,27 Ekstrak Daun Bangle Konsentrasi 100% mm 10,44 10,66 10,55 Ekstrak Daun Bangle Konsentrasi 80 % mm 9,68 9,86 9,77 Ekstrak Daun Bangle Konsentrasi 60 % mm 10,02 9,54 9,78 Ekstrak Daun Bangle Konsentrasi 40 % mm 7,96 8,38 8,17 Ekstrak Daun Bangle Konsentrasi 20 % mm - - - Keterangan (-) tidak memiliki kadar hambat
Ekstrak  etanol  daun  Bangle  ( Zingiber  purpureum Roxb.)  konsentrasi  60%  memiliki aktivitas antibakteri terhadap Pseudomonas aeruginosa dengan zona hambat rata-rata 9,78 mm. Ekstrak etanol daun Bangle ( Zingiber purpureum Roxb.) konsentrasi 80% memiliki aktivitas antibakteri terhadap Pseudomonas aeruginosa dengan zona hambat rata-rata 9,77 mm. Ekstrak etanol daun Bangle ( Zingiber purpureum Roxb.) konsentrasi 100% memiliki aktivitas  antibakteri  terhadap Pseudomonas  aeruginosa dengan  zona  hambat  rata-rata 10,55 mm.
Hasil analisis ANOVA didapatkan nilai F hitung 12,829 dengan nilai sig <0,05 (0,000 < 0,05) artinya terdapat perbedaan signifikan efek aktivitas antibakteri terhadap Pseudomonas aeruginosa pada  masing-masing  perlakuan . Urutan  aktivitas  antibakteri  terhadap Pseudomonas  aeruginosa dari  yang  terlemah  ke  terkuat  yaitu  kontrol  negatif  (DMSO), ekstrak bangle 20 %, ekstrak bangle 40 %,  ekstrak bangle 80 %, ekstrak bangle 60 %, ekstrak bangle 100 %dan kontrol positif.

## 4.  Kesimpulan
Kandungan kimia yang terdapat pada ekstrak daun bangle ( Zingiber purpureum Roxb.) yaitu  flavonoid,  saponin,  tanin,  alkaloid  dan  steroid. Nilai  Konsentrasi  Hambat Minimum (KHM) ekstrak etanol daun bangle terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa adalah konsentrasi 40 % dengan rata-rata diameter hambatnya sebesar 8,17 mm.

## Referensi
[1]. Assidqi  K,  Tjahjaningsih  W,  Sigit  S.  2012, Potensi Ekstrak  Daun  Patikan  Kebo (Euphorbia hirta)  sebagai  Antibakteri  terhadap Aeromonas  hydrophila  secara In  Vitro. Journal  of  Marine  and  Coastal  Science.;1(2):113 – 124.
[2]. Citrasari, Hesthiana. 2012. Korelasi Antara Tingkat  Pengetahuan Pembuat Jamu Gendong Terhadap Ketepatan Dalam Proses Pembuatan Jamu Gendong Di Desa Jenengan  Kecamatan  Sawit  Kabupaten  Boyolali. Skripsi. Fakultas  Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Surakarta.
[3]. Daslina,  Eryati  Darwin  &  A.Aziz  Djamal.  2015.  Pengaruh  Pemberian  Glutamin pada Kemampuan Fagositosis Makrofag terhadap Pseudomonas Aeruginosa . Jurnal Kesehatan Andalas . Vol. 4(3) : 689-695.
[4]. Firdaus I. M. dan P. I. Utami. 2009. Analisis Kualitatif Paracetamol Pada Sediaan Jamu Serbuk Pegal Linu yang Beredar di Purwokerto. Pharmacy, Vol. 06 No. 02. Fakultas Farmasi: Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
[5]. Hermanto dan Subroto. 2007. Pilih jamu dan herbal tanpa efek samping. PT. Elex Media Komputindo: Jakarta.
[6]. Katno. 2008. Tingkat Manfaat Keamanan dan Efektivitas Tanaman Obat dan Obat Tradisional.  Badan    Penelitian    dan    Pengembangan    Kesehatan    Depkes    RI: Karanganyar. Jawa Tengah.
[7]. Kaur  SP,  Rao  R,  Nanda  S. 2011,  Amoxicillin:  A  Broad Spectrum Antibiotic. India.;3(3):30-37.
[8]. Marliani, L. 2012. Aktivitas Antibakteri dan Telaah Senyawa  Komponen Minyak Atsiri  Rimpang  Bangle  ( Zingiber  cassumunar Roxb.). Prosiding    Seminar  Nasional Penelitian  dan  PKM:  Sains , Teknologi, dan Kesehatan. Bandung.
[9]. Menteri  Kesehatan  Republik  Indonesia.  2007.  Peraturan  Menteri  Kesehatan Nomor:    381/MENKES/SK/III/2007    Tentang    Kebijakan    Obat    Tradisional Nasional. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta.
[10]. Muslimin,    L.,    B.    Wicaksena,    dan    B.    Setiyawan.    2009.    Kajian    Potensi Pengembangan Pasar Jamu. Kementerian Perdagangan. Jakarta.
[11]. Nikham,Basjir TE. 2012,  Uji  Bahan Baku Antibakteri  dari  Buah Mahkota Dewa (Phaleria  Macrocarpa  (Scheff)    Boerl.)    Hasil    Iradiasi    Gamma    dan  Antibiotik terhadap    Bakteri    Patogen.  Serpong:    Prosiding    Pertemuan    Ilmiah    Ilmu Pengetahuan dan Teknologi Bahan.
[12]. Rastina,    Sudarwanto    M,    Wientarsih    I.  2012,    Aktivitas  Antibakteri    Ekstrak Etanol    Daun    Kari    (Murraya  koenigii  )    terhadap      Staphylococcus    aureus, Escherichia    coli,    dan    Pseudomonas    sp.  Jurnal    Kedokteran    Hewan. 2015;9(2):185-188.
[13]. Santoso, S. O. 2006. Penggunaan Obat Tradisional Secara Rasional.Artikel Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia: Jakarta
[14]. Sudjadi.  1988.  Metode  Pemisahan.  Fakultas  Farmasi  Universitas  Gadjah  Mada. Yogyakarta.
[15]. Sulistiyaningsih.    2014.  Uji    kepekaan    beberapa    sediaan  antiseptik    terhadap bakteri Pseudomonas  aeruginosa dan Pseudomonas    aeruginosa multi  resisten (PAMR). Tersedia dari:  URL:  HYPERLINK  http://www.pustaka.unpad.ac.id/.
[16]. Victor    L.    Antibiotics  in  Laboratory  Test.USA:    The  Williams  and  Wilkins Company, 1980; p. 181.