## PEMBENTUKAN DAN KARAKTERISASI KOMPLEKS INKLUSI FENILBUTAZON DAN Β-SIKLODEKSTRIN DENGAN METODA CO-GRINDING
Rini Agustin, Fathya Intan Lestari, Auzal Halim Universitas Andalas Padang riniagustin74@gmail.com

## ABSTRAK
Fenilbutazon  merupakan obat Anti Inflamasi Non Steroid (NSAID) dan diklasifikasikan dalam kelas  II  dari biopharmaceutic  classification  systems (BSC)  yang  memiliki  kelarutan  rendah permeabilitas  tinggi.  Pembentukan  kompleks  inklusi  merupakan  salah  satu  metoda  untuk meningkatkan  kelarutan  dan  disolusi  suatu  zat  dalam  air.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk meningkatkan  kelarutan  dan  laju  disolusi  fenilbutazon  dengan  cara  pembentukan  kompleks inklusi  fenilbutazon  dengan  β-siklodekstrin.  Pembuatan  kompleks  inklusi  dilakukan  dengan metoda co-grinding dengan  variasi  rasio  molar  1:1,  2:1  dan  1:2.  Interaksi  padatan  komplek inklusi  dan  campuran  fisik  dikarakterisasi  dengan  difraksi  sinar  X  serbuk,  spektrofotometri inframerah, Scanning  Microscopy  electron (SEM)  dan Differential  Thermal  Analyzer (DTA). Uji disolusi dilakukan dengan mengacu pada uji disolusi USP apparatus II. Hasil karakterisasi kompleks  inklusi  menggunakan  spektrofotometri  inframerah, Scanning  Microscopy  electron (SEM)  dan Differential  Thermal  Analyzer (DTA) memperlihatkan  adanya  interaksi  antara fenilbutazon  dan  β-siklodekstrin  dan  terbentuk  komplek  inklusi  fenilbutazon-β-siklodekstrin. Hasil  difraksi  sinar-x  menunjukkan  bahwa  pembentukan  komplek  inklusi  fenilbutazon-β- siklodekstrin  menurunkan  derjat  kristalinitas  obat.  Uji  disolusi  secara  in  vitro    menunjukkan terjadinya peningkatan laju disolusi komplek inklsi dibandingkan dengan fenilbutazon murni.
Kata kunci  : Fenilbutazon, β-siklodekstrin, Co-grinding , dan  kompleks inklusi.

## ABSTRACT
Phenylbutazone is a Non-Steroid Anti-Inflammatory drugs (NSAID and classified  in class II of biopharmaceutic  classification  system  (BSC)  which  has  low  solubility,  high  permeability. Formation of inclusion complexes is one method to increase the solubility and dissolution of a substance  in  the  water.  This  study  investigated  improving  of  inclusion  complex  with  B- cyclodextrin  to  solubility  and  dissolution  rate  of  phenylbutazone.  Inclusion  complexes  was made  by  co-grinding  method  in  molar  ratio  1:  1,  2:  1  and  1:  2.  The  solid  state  interaction inclusion  complexes  and  physical  mixture  was  evaluated  by  using  X-raypowder  diffraction, thermal DTA, and SEM. The dissolution studies were conducted in USP type II apparatus. The results  characterization  of  inclusion  complexes  using  infrared  spectrophotometry,  Scanning Electron Microscopy (SEM) and Differential Thermal Analyzer (DTA) showed that there was interaction between phenylbutazone and β-cyclodextrin, and  inclusion complexes  was formed. The results of x-ray diffraction showed that inclusion complex of β-cyclodextrin-phenylbutazon reduced  the  degrees  of  crystallinity  of  the  drug.  In  vitro  dissolution  test  showed  inclusion complex in dissolution rate was higher than pure phenylbutazone.
Key words  : Phenylbutazone, β- cyclodextrin, Co-grinding, and inclusion complex

## PENDAHULUAN
Fenilbutazon  adalah  obat  NSAID (Non Steroid  Anti  Inflamasi  Drug) turunan pirazolon.  Obat  ini  mempunyai  sifat  anti inflamasi  yang  kuat  dan  efektif  dalam
pengobatan  serangan  gout  akut  (Betram G.Katzung  1994).  Fenilbutazon  merupakan serbuk  hablur,  putih,  atau  agak  putih  dan tidak  bebau.  Fenilbutazon  sangat  sukar  larut dalam  air,  mudah  larut  dalam  aseton  dan
dalam  eter  serta  larut  dalam  etanol (Departemen Kesehatan R.I.,1995).
Kelarutan  merupakan  salah  satu  sifat fisikokimia  senyawa  obat  yang  penting dalam  meramalkan  derajat  absorbsi  obat  di saluran  cerna.  Obat–obat  yang  mempunyai kelarutan  kecil  dalam  air  ( poorly  soluble drugs )  seringkali  menunjukkan  ketersediaan hayati  rendah  dan  kecepatan  disolusi merupakan  tahap  penentu  (rate  limting  step) pada proses absorbsi obat (Neha dkk., 2012; Zaini E dkk., 2014).
Perbaikan  kelarutan  dan  kecepatan disolusi  untuk  obat  yang  sukar  larut merupakan langkah pertama
untuk meningkatkan  ketersediaan  hayati  obat (Bekers,  Beijnen,  Bult  &  Underberg,  1991; Loftsson  &  Brewster,  1996).  Peningkatan kelarutan  suatu  obat  yang  sukar  larut  dalam air,  salah  satunya  dikembangkan  melalui kompleks  inklusi  padat.  Komples  inklusi akan  lebih  cepat  larut  daripada  obat  itu sendiri sehingga dapat memperbaiki kecepatan  disolusi,  absorpsi,  ketersediaan hayati, dan stabilitas kimia obat (Loftsson & Brewster, 1996).
Pada  kompleks  inklusi,  molekul  obat sebagai molekul guest terjerap dalam rongga siklodekstrin  yang  bersifat  hidrofobik. Bagian  luar  siklodekstrin  bersifat  hidrofilik sehingga  mudah  larut  dalam  media  air. Kompleks  inklusi  dibuat  dengan  metode kopresipitasi, kneading , freezed  drying dan metode  penggilingan  ( Co-grinding ).  (Bekers et al., 1991).
Co-grinding adalah  salah  satu  metode yang  banyak  digunakan  untuk  mengurangi ukuran  partikel  obat  yang  sukar  larut  air dengan  tujuan  untuk  meningkatkan  laju disolusi  dan  ketersediaan  hayati  suatu  obat (Vogt,  Kunath  &  Dressman,  2008;  Bazegar- Jalali,  Valizadeh  &  Adibkia,  2007). Co- grinding senyawa  obat  yang  sukar  larut  air dengan  berbagai  polimer  hidrofilik  akan meningkatkan efek solubilisasi dan ketersediaan hayati, karena terjadi modifikasi sifat  padatan  senyawa  obat.  Pada  saat penggilingan padatan kristalin akan mengalami  transformasi  menjadi  fase  amorf dalam  rantai-rantai  polimer  (Friedrich,  Nada
&  Bodmeir,  200,  Zaini  E.,  Agnesia,  Rini  A,
2014).  Jika  dibandingkan  dengan  berbagai teknik peningkatan kelarutan lain, teknik co- grinding merupakan cara yang sederhana dan ramah  lingkungan  karena  tidak  memerlukan pelarut organik (Garg dan Singh, 2009).
β-siklodekstrin merupakan suatu senyawa oligosakarida siklik yang mengandung 7 unit D-(+)-glukopiranosa  yang  terikat  dengan ikatan  β-1,4.  β-siklodekstrin  mempunyai kemampuan  membentuk  kompleks  inklusi dengan  berbagai  macam  molekul.  Bentuk molekul  β-siklodekstrin  tidak  silindris melainkan berbentuk toroidal dengan bagian dalam  senyawa  bersifat  hidrofob  sedangkan bagian luar bersifat hidrofil.

## METODE PENELITIAN
Alat  dan  Bahan. Peralatan  gelas  standar laboratorium,  timbangan  digital  (Shimadzu- Aux  220),  nanomilling  (Fritsch  Premium
Line Nano Milling Pulverisette 7),
spektrofotometer  UV  (Shimadzu  UV-1700), XRD  (PAN  Analythical,  Netherland),  SEM (Jeol,  Japan),  spektrofotometer  IR  (Thermo Scientific),  DTA  (Analyzer  Mettler  Toledo FP  80)  dan  alat  uji  disolusi  (Hansen Research).  Fenilbutazon  (Dexa  Medika),  β- siklodekstrin  (Signa  Husada),  Kalium dihidrogen  fosfat  (Brataco),  etanol  96%, natrium hidroksida (Brataco), dan aquadest.
Pembuatan kompleks
inklusi fenilbutazon  dengan  β-  siklodekstrin. Fenilbutazon  dan  β-siklodekstrin  dicampur dengan perbandingan mol  F1 (1:1), F2 (2:1) dan  F3  (1:2).  Campuran  ini  kemudian digiling  dengan  alat  nanomilling  dengan kecepatan  500  rpm  dan  waktu  penggilingan selama 2 jam.
Karakterisasi  dengan  menggunakan Difraksi  Sinar-X  Serbuk. Analisis  difraksi sinar-X  serbuk  sampel  dilakukan  pada  suhu ruang  dengan  kondisi  pengukuran  sebagai berikut  :  target  logam  Cu,  filter  Kα,  voltase 40  kV,  arus  40  mA,  analisis  dilakukan  pada rentang  2  theta  5-35°  .  Sampel  diletakkan pada  sampel  holder  (kaca)  dan  diratakan untuk  mencegah  orientasi  partikel  selama penyiapan sampel.
Karakterisasi  dengan  menggunakan Spektrofotometer FT-IR. Sampel
diletakkan  diatas  kristal  ATR  hingga menutupi semua permukaan kristal kemudian diukur spektrum serapan IR sampel.
Karakterisasi  dengan  menggunakan Scanning  Electron  Microscopy  (SEM). Sampel  serbuk  diletakkan  pada  sampel holder  aluminium  dan  dilapisi  dengan  emas dengan  ketebalan  10  nm.  Sampel  kemudian diamati  berbagai  perbesaran  alat  SEM  (Jeol, Japan).  Voltase  diatur  pada  20  kV  dan  arus 12 mA.

## Karakterisasi  dengan  menggunakan Differential  Thermal  Analyzer  (DTA).
Analisis  dilakukan  menggunakan  alat  DTA terhadap sampel fenilbutazon, β-siklodekstrin dan  kompleks  inklusi  fenilbutazon  dan  β- siklodekstrin.  Suhu  pemanasan  dimulai  dari 50-250 0 C, dengan kecepatan pemanasan 5 0 C per menit.
Uji  Disolusi. Uji  disolusi  dilakukan dengan  menggunakan  media  disolusi  dapar fosfat pH 7,5 sebanya 900 mL. Metoda yang digunakan  yaitu  metoda  dayung  dengan kecepatan  pengadukan  100  rpm  dan  media disolusi  dibuat  suhunya  tetap  (  37±0,5 o C). Sampel  diambil  sebanyak  5  mL  pada  tiap rentang  waktu  yang  ditetapkan  dan  diganti dengan media disolusi dengan volume sama. Sampel  diukur dengan spektrofotometri  UV- VIS pada panjang gelombang 264 nm.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penentuan  karakter  padatan  dengan difraksi  sinar-X  serbuk  dilakukan  pada fenilbutazon,  β-siklodektrin,  dan  kompleks inklusi  fenilbutazon-β-siklodektrin.  Hasil Difraksi  sinar-X  (Gambar.1)  menunjukkan terjadinya  penurunan  intensitas  yang  sangat tajam  dari  fenilbutazon  sampai  mendekati profil difraktogram β-siklodektrin.
Hal  ini  menunjukkan  bahwa  molekul fenilbutazon  telah  masuk  ke  dalam  struktur rongga β-siklodektrin, sehingga yang terlihat lebih  dominan  difraktogram  β-siklodektrin. Jika  dibandingkan  dengan  fenilbutazon grinding  hanya  terjadi  sedikit  penurunan intensitas puncak difraktogramnya
dibandingkan  dengan  fenilbutazon  yang dikompleks dengan β-siklodektrin
(a) (b)
(c)                               (d)
(e)                                (f)
Gambar 1. Difraktogram X-RD, (a) Fenilbutazon murni, (b) Fenilbutazon grinding,
(c)  siklodektin  murni,  (d)  Kompleks  Inklusi F1,  (e)  Kompleks  Inklusi  F2,  (f)  Kompleks
Inklusi F3
Hasil DTA (Gambar 2) pada fenilbutazon menunjukkan  adanya  puncak  endotermik yang  tajam  pada  suhu  108,4 o C  yang merupakan  titik  lebur  fenilbutazon.  β- siklodektrin menunjukkan transisi gelas pada 176 o C. Termogram kompleks inklusi formula 1  menunjukkan  adanya  puncak  endotermik yang  melebar  pada  148 o C  yang  merupakan trransisi  gelas  yang  diimiliki  oleh  β- siklodektrin  dan  puncak  dari  fenilbutazon sudah  mulai  bergeser  dari  suhu  108 o C menjadi 99 o C. Formula 2 dan formula 3 juga terjadi  penurunan  puncak  dari  feniilbutazon. Jika  suatu  molekul  guest  masuk  ke  dalam rongga  β-siklodektrin,  maka  titik  lebur molekul guest tersebut akan menghilang atau bergeser  ke  suhu  yang  lebih  rendah (Manca,et.al.,2005).
Gambar 2. Termogram DTA (a) Fenilbutazon murni (b) Siklodektrin murni (c) kompleks Inklusi F1 (d) Kompleks inklusi F2
(e) Kompleks inklusi F3.
Karakterisasi dengan menggunakan spektrofotometer FT-IR (Gambar 3) fenilbutazon murni memberikan puncak pada bilangan  gelombang  1713,92  cm -1 dan 1292,96  cm -1 .  Puncak  pada  panjang gelombang  1713,92  cm -1 menunjukkan adanya  gugus  karbonil  dan    serapan  C-H muncul  pada  bilangan  gelombang  1292,96 cm -1 .  Spektra  β-siklodektrin  menunjukkan puncak yang lebar pada bilangan gelombang 3500 cm -1 yang  menandakan adanya alkohol dan  gugus  OH  pada  moolekul  kompleks selulosa,  sakarida,  polimer  dan  molekul  lain yang  mempunyai  gugus  yang  mengabsorbsi sangat  kuat.  Puncak  lain  pada  bilangan gelombang 1077,77 cm -1 menunjukan adanya ikatan C-O (Silverstein, et.al. , 1981).
Karakteristik  kompleks  inklusi  formula  1 (F1)  menunjukan adanya  gugus  fenilbutazon dan  β-siklodekstrin  yaitu  pada  puncak bilangan  gelombang  1078,80;  1026,92;
998,82; 753,73 dan 703,12. Hasil
karakterisasi  kompleks  inklusi  formula  1  ini menunjukkan  puncak-puncak  pada  β- siklodekstrin  dan  gugus  fungsi  fenilbutazon yang  terlihat  mengalami  pergeseran  dari puncak gelombang 1077,77 cm -1 dan 1023,51 cm -1 .  Hal  ini  dapat  diprediksi  bahwa fenilbutazon  terkurung  di  dalam  rongga siklodekstrin. Hal  yang  sama  juga  terjadi pada kompleks inklusi F2 dengan perbandingan  mol  2:1  menunjukkan  adanya penurunann  intensitas  pucak  gelombang
gugus fungsi fenilbutazon  yaitu pada puncak bilangan  gelombang  dari  1713,92  cm -1 menjadi  1716,14  cm -1 dan  adanya  gugus fungsi  dari  β-siklodekstrin  pada  panjang gelombang  1078,25  dan  1026,11  cm -1 yang juga mengalami pergeseran panjang
gelombang  dari  β-siklodekstrin  murni.  Pada kompleks  inklusi  formula  3  menunujukan puncak  fenilbutazon  dan  β-siiklodekstrin pada  panjang  gelombang  1078,98;  dan 1026,64      cm -1 .  Hilangnya  sebagian  puncak fenilbutazon dan pergeseran puncak fenilbutazon menunjukkan bahwa fenilbutazon diindikasikan mengalami kompleks ke dalam rongga  β-siklodekstrin.
Gambar 3. Spektrum FT-IR (a) Fenilbutazon murni  (b)  Siklodektrin  murni  (c)  kompleks Inklusi  F1  (d)  Kompleks  inklusi  F2  (e) Kompleks inklusi F3.
Scanning  Electron  Microscope (SEM) dengan  berbagai  perbesaran  memperlihatkan karakteristik dari fenilbutazon,
β- siklodestrin,  dan  kompleks  inklusi  (gambar 4). SEM perbesaran  5000 kali, fenilbutazon terlihat  seperti  silinder.  β-siklodekstrin  pada perbesaran  100  kali  terlihat  seperti  batang. Pada  kompleks  inklusi  F1  perbesaran  2000 kali  masih  terlihat  sebagian  kecil  morfologi fenilbutazon  murni  sedangkan  morfologi  β- siklodekstrin  murni  tidak  terlihat  lagi melainkan  berubah  menjadi  bentuk  yang tidak  beraturan  atau  amorf  membentuk aglomerat.  Permukaan  yang  tidak  rata tersebut  diperkirakan  telah  terjadi  interaksi antara  zat  aktif  dengan  β-siklodekstrin. Kompleks  inklusi  F2  perbesaran  2000  kali menunjukkan  bentuk  yang  lebih  halus dimana  bentuk  fenilbutazon  dan  β- siklodekstrin sulit dibedakan walaupun masih
a B b D d e c 1 a b c d e
terlihat  morfolgi  dari  fenilbutazon.  Pada formula  3  dengan  perbandingan  molar  1:2 juga terlihat adanya penggabungan fenilbutazon  dan  β-siklodekstrin  membentuk suatu  agregat  dengan  permukaan  yang  lebih kasar.
(a) (b) (c) (d) (e) Gambar  4 .  Morfologi  Serbuk  perbesaran  200x dan 2000x (a) Febilbutazon murni (b) β-siklodektrin murni (c) Kompleks Inklusi
F1  (d)  Kompleks  Inklusi  F2  (e)  Kompleks inklusi F3
Uji  disolusi  menunjukkan  pesentase disolusi pada menit ke- 5 untuk fenilbutazon murni  dan  kompleks  inklusi  F1,  F2,  F3 berturut-turut  adalah    23,21%;  29,613%; 23,396%  dan  59,007.  Pada  menit  ke-60 fenilbutazon yang  terdisoluusi  adalah 92,115%, kompleks inklusi F1 102,228%, F2 102,195%  dan  F3  adalah  103,747%.  Persen terdisolusi  yang  paling  tinggi  adalah
kompleks  inklusi formula  3  (1:2).  Semakin banyak  jumlah  polimer  yang  digunakan, maka  persentase  disolusi  akan  semakin meningkat (Barzegar- Jalali, et al .,2007). Uji disolusi  menunjukkan  peningkatan  persen disolusi  dibandingkan  dengan  fenilbutazon murni.  Peningkatan  persen  disolusi  dari kompleks inklusi disebabkan obat terkompleks  dalam  suatu  matriks  yang berbentuk  rongga  dimana  bagian  dalam rongga  bersifat  hidrofobik  dan  bagian  luar bersifat hidrofilik (β- siklodekstrin). Penambahan  pengompleks  β-  siklodekstrin pada  zat  yang  memiliki  masalah  kelarutan dalam  air  akan  mengompleks  zat  tersebut dalam rongga siklodekstrin sehingga meningkatkan  kelarutan dan laju  disolusinya lebih  cepat  dibandingkan  laju  disolusi  obat tunggal.  Hal  ini  juga  sesuai  dengan  teori bahwa co-  grinding zat  dengan  penambahan polimer  hidrofilik  dapat  meningkatkan persen  disolusi  obat  yang  memiliki  masalah kelarutan  dalam  air.  (Barzegar-  Jalali et al .,2007).
Penetapan  model  kinetika  uji  disolusi kompleks  inklusi  fenilbutazon  dan  β- siklodekstrin  telah  dilakukan  berdasarkan persamaan  orde  nol,  orde  satu,  persamaan Higuchi,  persamaan  Langenbucher,  dan persamaan  Korsemeyer-peppas.  Dari  kelima model  kinetika  tersebut,  koefisien  korelasi dari persamaan Langenbucherlah yang paling mendekati  satu.  Harga  koefisien  korelasi  r formula  1,  formula  2  dan  formula  3  secara berturut  –  turut  dalam  medium  dapar  fosfat pH 7,5 adalah 0,992; 0,99 3dan 0,945.
Gambar  5. Perbandingan  disolusi  fenilbutazon murni dengan kompleks Inklusi
β- siklodektrin.
Analisis  statistik  dari  persentase  disolusi dilakukan  dengan  menggunakan  uji  anova
0 20 40 60 80 100 120 0 50 100 % z at t e rd is o lu si Waktu (menit) % rata2 F1 %rata2 F2 % rata2 F3
dua  arah  menggunakan  program  SPSS  17. Hasil  perhitungan  anova  menunjukkan  nilai F dengan Sig. = 0.000 (< 0,05), yang berarti H o ditolak.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa formula  dan  waktu  mempunyai  pengaruh yang  berbeda  nyata  terhadap  persentase disolusi  yang  dihasilkan.  Hasil  uji  lanjut Duncan  menunjukkan  terhadap  formula terdapat                 4 kelompok yang berbeda, sehingga  memberikan  hasil  yang  berbeda secara  nyata  antara  fenilbutazon  murni, formula 1, formula 2 dan formula 3. Hasil uji terhadap  waktu  juga  menunjukkan  bahwa terdapat  6  kelompok  yang  berbeda.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  menit  ke  5,  10,  15,  30, 45,  dan  60  memberikan  hasil  yang  berbeda secara nyata.

## KESIMPULAN
Dari hasil penelitian yang dilakukan dapat disimpulkan  bahwa  dengan  metoda  co- grinding terbentuk kompleks inklusi fenilbutazon  dan  β-siklodekstrin  dengan variasi molar F1 (1:1), F2 (2:1) dan F3 (1:2). Hasil  karakterisasi  dengan  spektrofotometri inframerah,  SEM  dan  DTA  memperlihatkan telah  terjadinya  interaksi  antara  fenilbutazon dan β-siklodektrin sedangkan difraksi sinar-x menunjukkan  terjadinya  penurunan  derajat kristalinitas  fenibutazon.  Hasil  disolusi  juga menunjukkan  terjadinya  peningkatan  laju disolusi  dan  persentase  terdisolusi  kompleks inklusi  dibanding  dengan  fenilbutazon tunggal.  Hasil  pembentukan  kompleks inklusi  yang  paling  baik  secara  berurutan adalah  dengan  F3  (1:2),  F1  (1:1)  dan  F2 (2:1).

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim., 2003. United states pharmacopoeia XXVI (revision) . Rockville : United State Pharmacopoeia Conventing Inc.
Bazegar-Jalali,  M.,  Valizadeh,  H.,  Adibkia,
K.,  2007,  Enhancing  Dissolution  Rate  of Carbamazepine  via  Cogrinding  with crosspovidone and Hydroxypropylmethylcellulose, Iranian Journal  of  Pharmaceutical  Research,
6(3), 159-165.
Bekers,  O.,  Uijtendaal,  E.V.,  Beijnen,  J.H., Bult,  A.,  and  Undenberg,  W.J.M.,(1991), Cyclodextrin  in  Pharmaceutical  Field, Drug  Dev.  Ind.  Pharm ,  17  (11),  1503  – 1549.
Depkes  RI.,  1995.  Farmakope  Indonesia Edisi  IV. Departemen  Kesehatan  RI. Jakarta.
Friedrich,  H.,  Nada,  A.,  dan  Bodmeir,  R.,
(2005),  Solid  State  and  Dissolution  Rate characterization  of  co-ground  mixture  of Nifedipine and hydrophilic Carriers, Drug Development  Industrial  Pharmacy , 31, 719-728.
Garg,  A,  dan  Singh,  S.,  (2009),  Solid  State
Interaction  of  Raloxifene  HCL  with Diffeent Hydrophilic Carriers During Co- grinding  and  its  Effect  on  Dissolution Rate, Drug  Development  Industrial Pharmacy, 35, 455-470. Loftsson T, Brewster ME. (1996). Pharmaceutical applications of b-
siklodekstrin  I,  drug  solubilization  and stabilization. J  Pharm  Sci ,  85(10),  1017- 1024.
Neha, Preeti, C., Atin, K., Rajan, P., Kumar, M. R., Santanu, M., Pardeep, K., Munsab, A., & Shamim, A. (2012). Approaches to improve  the  solubility  and  bioavailability of  poorly  soluble  drugs  and  different parameter  to  screen  them, Novel  Science International  Journal  of  Pharmaceutical Science , 1(4), 171-182.
Silverstein,  R.M.,  Bassler,  G.C.,  Morrill, T.C., (1981). Spectrometric  Identification of  Organic  Compounds , 4 th ed.,  New
York:  John  Wiley  &  Sons,  hal.  108-120,
166-170.
Vogt  M,  Kunath  K,  Dressman  JB.  (2008).
Cogrinding enhances the oral
bioavailability  of  EMD  57033,  a  poorly water soluble  drug  in  dogs. Eur J Pharm Biopharm , 68, 338–45.
Zaini E, Agnesia S W, Rini A. Enhancement of Dissolution Rate  of Meloxicam by  co- grinding Technique Using Hydroxypropylmethylcellulose,  Journal of Chem.  And Pharm. Res, 2014 6 (11) : 263-2.