Diabetes  melitus  merupakan  suatu  penyakit  metabolik  dengan  terganggunya  metabolisme  karbohidrat, lemak  dan  protein  yang  ditandai  dengan  meningkatanya  kadar  gula  darah  akibat  berkurangnya  sekresi insulin,  penurunan  sensitivitas  jaringan  terhadap  insulin.  Diabetes  melitus  merupakan  penyebab  utama kematian di Indonesia terutama di negara-negara berkembang. Sebagian besar (90%) tergolong diabetes melitus  tipe  2  dan  10%  diabetes  melitus  tipe  1.  Pada  DM  terjadi  peningkatan  stres  oksidatif.  Stres oksidatif  pada  DM  disebabkan  karena  meningkatnya  radikal  bebas  dalam  tubuh.  Stres  oksidatif  dapat menyebabkan  jejas  endotel  yang  ireversibel  yang  akan  mengarah  ke  lepasnya  sel  endotel  yang  ditandai oleh  ekspresi  CD  146.  Ubi  jalar  ungu  mengandung  senyawa  antosianin  yang  merupakan  suatu antioksidan yang dapat menetraslisir radikal bebas dan mengurangi kerusakan sel akibat oksidatif radikal bebas. Dari hasil analisis data didapatkan sari ubi  jalar ungu  mempunyai pengaruh terhadap kadar CEC sebesar 42,5%.
Kata Kunci: Antosianin, diabetes melitus, CEC, stres oksidatif

## Abstract
Diabetes mellitus is a metabolic disease with impaired metabolism of carbohydrates, fats and proteins are  characterized  by  hiperglycemia  caused  by  insufficiency  of  insulin  secretion  and  insulin  resistance. Diabetes  mellitus  is  the  leading  cause  of  death  in  Indonesia,  especially  in  developing  countries.  Most (90%)  classified  as  type  2  diabetes  mellitus  and  10%  of  type  1  diabetes  mellitus.  In  DM,  increased oxidative stres. DM oxidative stres due to the increase of free radicals in the body. Oxidative  stres can lead to irreversible endothelial injury that would lead to the loss of endothelial cells characterized by the expression of CD 146. Ipomoea batatas L. anthocyanin-containing compound is an antioxidant that can reduce free radicals and reduce oxidative cell damage caused by free radicals. From the analysis of the data obtained Ipomoea batatas L. mempuyai influence on the content of the CEC of 42.5%.
Keywords: Antosianin, Diabetes mellitus, CEC, oxidative stres
Pengaruh Sari Ubi Jalar Ungu Terhadap Kadar CEC ( Circulating Endothelial Cell ) Pada Tikus Model Diabetes
The Effect of Purple Sweet Potato Extract on The Circulating Endothelial Cell (CEC) levels in Rat Model of Diabetes
Emilia Puspita Sari 1 , Edi Junaidi 2 , Heni Fatmawati 3
1 Mahasiswa Fakultas Kedokteran Universitas Jember
2 Laboratorium Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Jember
3 Laboratorium Histologi Fakultas Kedokteran Universitas Jember Jalan Kalimantan No. 37 Kampus Tegalboto, Jember 68121 e-mail korespondensi: edy.junaidi@unej.ac.id
Abstrak

## Pendahuluan
Diabetes  mellitus  (DM)  merupakan  suatu  kelompok penyakit  metabolik  yang  ditandai  oleh  peningkatan kadar  glukosa  darah  melebihi  normal.  Terdapat beberapa  tipe  diabetes  yang  diketahui  dan umumnya  disebabkan  oleh  interaksi  yang  kompleks antara  faktor  genetik,  lingkungan  dan  gaya  hidup (Gauyton and Hall, 2008). Secara global WHO ( World Health Organization ) menyatakan bahwa pada tahun 2004  terdapat  1,1  juta  penduduk  mengalami kematian  akibat  diabetes  dengan  prevalensi  sekiar 1,9 % dan pada tahun 2007 dilaporkan terdapat 246 juta  penderita  diabetes,  6  juta  kasus  baru  DM  dan 3,5  juta  penduduk  mengalami  kematian  akibat diabetes. Sebagian besar (90%) tergolong DM tipe 2 dan 10% DM tipe 1 (Wulandari, 2003).
Diabetes  melitus  yang  tidak  ditangani  dengan  baik akan  menyebabkan  terjadinya  komplikasi  kronik, baik  mikroangiopati  dan  makroangiopati  (Sudoyo et al., 2006).  Stres  oksidatif  pada  DM  disebabkan karena  ketidakseimbangan  reaksi  redoks  akibat perubahan metabolisme karbohidrat dan lipid.  Stres oksidatif dapat menyebabkan jejas endotel sehingga sel  endotel  kehilangan  integritas  lapisannya  dan menyebabkan  sel  endotel  lepas  atau circulating endothelial  cell (CEC,)  yang  akan  mengalami nekrosis.  CEC  dideteksi  melalu  ekspresi  CD  14  di pembuluh darah perifer (Erdbruegger, 2006).
Ubi  jalar  ungu  merupakan  tanaman  komoditi  di Indonesia  yag  memiliki  kandungan  antosianin  yang lebih  besar  dari  pada  ubi  jalar  varietas  yang  lain, sekitar  110-210  mg/dl.  Antosianin  yang  tersimpan dalam  ubi  jalar  ungu  sangat  bermanfaat  bagi kesehatan  tubuh  manusia  yaitu  dapat  berfungsi sebagai  antioksidan  yang  mampu  menghalangi  laju perusakan  sel  radikal  bebas  pada  pasien  DM (Suprapta, 2004).  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah untuk  mengetahui  pegaruh  sari  ubi  jalar  ungu terhadap  kadar  CEC  dan  untuk  mengetahui perbedaan  pemberian  dosis  1,4  ml/ekor/hari,  3,5 ml/ekor/hari, dan 5,6 ml/ekor/hari.

## Metode Penelitian
Jenis
penelitian yang digunakan adalah eksperimental  laboratoris.  Rancangan  penelitian adalah post  test  only  group  design .  Sampel penelitian ini adalah tikus putih Wistar jantan umur 3 bulan dengan berat antara 150-275 gram.

## Persiapan Sampel dan Sari Ubi Jalar Ungu
Teknik  pengambilan  sampel  dengan  menggunakan aplikasi  G power dan  didapatkan  jumlah  sampel sebanyak  5  ekor  tikus  tiap  kelompok,  yang  meliputi kelompok  kontrol  negatif  (K-)  yaitu  tikus  yang  tidak diinjeksi aloksan dan tidak diberi sari ubi jalar  ungu, kelompok kontrol positif (K+) yaitu tikus yang diijeksi aloksan, kelompok perlakuan 1 (P1) yaitu tikus yang diinjeksi  aloksan  dan  diberi  ubi  jalar  ungu  1,4 ml/ekor/hari, kelompok  perlakuan 2 (P2) yaitu tikus yang  diinjeksi  aloksan  dan  diberi  ubi  jalar  ungu  3,5 ml/ekor/hari  dan  kelompok  perlakuan  3  (P3)  yaitu tikus yang diinjeksi aloksan dan diberi ubi jalar ungu 5,6  ml/ekor/hari,  sehingga  didapatkan  total sebanyak 25 sampel.
Sebanyak  20  sampel  dibuat  hiperglikemik  dengan pemberian  suntikan  aloksan  monohidrat  secara intravena pada ekor tikus, dengan dosis 75 mg/kgBB. Setelah diinjeksi, ditunggu selama 1 minggu sehingga tikus  dalam  kondisi  hiperglikemik  (Maliya,  2006), kemudian  kadar  gula  darah  puasa  diukur  untuk memastikan  tikus  dalam  keadaan  hiperglikemik. Pemeriksaan  glukosa  darah  puasa  tikus  dilakukan dengan  alat  pengukur  glukosa  darah easy  touch untuk  diukur  glukosa  darahnya.  Kadar  gula  darah puasa  normal  pada  tikus  50-109  mg/dl  (Wulandari, 2010).
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Jawi  (2008) menggunakan  ubi  jalar  ungu  dengan  dosis  0,5 ml/ekor/hari  pada  sampel  mencit  selama  7  hari. Dosis  yang  dibutuhkan  peneliti  untuk  diberikan kepada  tikus  dengan  rerata  berat  badan  200  gram adalah  dosis  ubi  jalar  ungu  pada  mencit  dikalikan dengan  faktor  konversi,  yaitu  0,5  ml  x  7  (setara dengan  3,5  ml/ekor/hari).  Sebagai  pembanding peneliti menggunakan dosis 1,4 ml/ekor/hari dan 5,6 ml/ekor/hari.  Sari  ubi  jalar  ungu  diberikan  dengan cara  sonde  selama  14  hari.  Volume  maksimal pemberian  ekstrak  ubi  jalar  pada  hewan  coba  per oral ± 10ml (Suhardjono, 1997).

## Pengukuran Kadar CEC
Isolasi  PBMCs  ( Peripheral  Blood  Mononuclear  Cells ) dengan menambah Ficoll 5 ml pada tabung dan 5 ml darah dengan perbandingan 1:1. Kemudian disentrifus  dengan  kecepatan  10  rpm  selama  30 menit.  Kemudian  diambil  bagian  yang  berbentuk cincin  dan  dipindahkan  ke  tabung  yang  lain,  lalu dimasukkan PBS ( Phospat Buffer Saline ) sebanyak 10 ml  dan  disentrifus  dengan  kecepatan  1200  rpm selama 10 menit.  Kemudian supernatannya dibuang
dan  diambil  peletnya,  ditambahkan  RBC  ( Red  Blood Cell )  lisis  buffer  sebanyak  5  ml  ke  dalam  pelet, disentrifus  lagi  dengan  kecepatan  1200  rpm  selama 10 menit, supernatan dibuang dan diambil peletnya. Selanjutnya PBS dan cell staining buffer ditambahkan sebanyak 100 ml. Dilakukan pipeting sampai dengan homogen  kemudian  dibagi  menjadi  2  eppendorf masing-masing  berisi  50  ml,  disentrifus  kembali dengan  kecepatan  2000  rpm  selama  3  menit.  Lalu PBS  dibuang  dengan  cara  dituang.  Kemudian ditambahkan  reagen flowcytometry @  400   µl. resuspen  dengan  homogen.  Tiap  eppendorf dibungkus dengan aluminium foil , diberi tanda pada bagian  atas  eppendorf.  Dilakukan  inkubasi  di waterbath 37°C selama 10 menit untuk mengaktivasi RNase,  resuspen  lagi,  kemudian  suspensi  sel ditransfer  ke  dalam flowcyto-tube melalui  filter (kain  nylon/  kain  kaca)  menggunakan  mikropipet  1 ml.  Hasil  dibaca  dengan flowcytometer FACS Calibur.
Untuk  mengetahui  pengaruh  sari  ubi  jalar  ungu terhadap  kadar  CEC  ( Circulating  Endothelial  Cell ) pada  tikus  model  diabetes,  peneliti  menggunakan regresi  linier.  Selanjutnya,  untuk  mengetahui perbedaan  pemberian  dosis  sari  ubi  jalar  ungu terhadap  kadar  CEC (Circulating  Endothelial  Cell ) pada  tikus  model  diabetes  pada  kelima  kelompok digunakan uji One Way Anova.

## Hasil Penelitian
Pada  penelitian  ini  menggunakan  sampel  sebanyak 25  ekor  tikus  yang  dibagi  dalam  5  kelompok.  2 kelompok  kontrol  (K-  dan  K+)  dan  3  kelompok perlakuan (P1, P2, dan P3). Pada proses penelitian ini terdapat lima ekor tikus yang mati, yaitu 1 ekor dari K+, 1 ekor dari P1, 2 ekor dari P2, 1 ekor dari P3.
Lima  kelompok  dengan  kelompok  kontrol  negatif (non  diabetes),  kelompok  kontrol  positif  dan kelompok  perlakuan  yang  sudah  diabetes  dengan kadar  gula  darah  lebih  dari  110  mg/dl  dilakukan pemeriksaan dengan flowcytometry untuk mengukur kadar  CEC.  Hasil  pemeriksaan  kadar  CEC  pada  tiap kelompok dapat dilihat pada Tabel 1.
Berdasarkan Tabel 1, rerata kadar CEC terbesar pada kelompok  P1  yakni  sebesar  0,1275  pada  pemberian dosis Aloksan 75mg/Kg/BB  dan  ubi  jalar  ungu  1,4 ml/ekor/hari  dan  rata-rata  kadar  CEC  terkecil  pada kelompok  P3  yakni  sebesar  0,0200  pada  pemberian Aloksan 75mg/Kg/BB  dan  ubi  jalar  ungu  5,6 ml/ekor/hari.  Selain  itu,  dapat  dilihat  bahwa
terdapat  penurunan  kadar  CEC  seiring  dengan meningkatnya  dosis  pemberian  ekstrak  ubi  jalar ungu.
Tabel 1. Kadar CEC dari Pemeriksaan Flowcytometry
Kelompok Kadar CEC (Rerata± Std. Deviasi) K- 0,0250±0,00707 K+ 0,0325±0,04573 P1 0,1275±0,15414 P2 0,0750±0,02121 P3 0,0200±0,01414
Data tersebut kemudian dianalisis dengan uji regresi linier  dan  uji one  way Anova,  setelah  diketahui bahwa data terdistribusi normal dan varians datanya homogen.  Berdasarkan  uji  regresi  linier, R  square = 0,180,  koefisien  korelasi  R  sebesar  42,5%,  yang berarti ubi jalar ungu memberikan pengaruh sebesar 42,5% terhadap kadar CEC. Sedangkan sisanya 57,5% dipengaruhi  oleh  faktor  luar.  Bentuk  umum  garis regresi  (x  terhadap  y)  yaitu  Y  =  a  +  bX,  dengan  a  = 0,163  dan  b  =  -0,026  yang  didapat  dari  hasil  uji regresi  linier.  Sehingga  persamaannya  menjadi  Y  = 0,163-0,026X.  Dengan  Y  adalah  kadar  CEC  dan  X adalah  sari  ubi  jalar  ungu.  Jadi,  dari  rumus  tersebut berarti  setiap  kenaikan  1  mg  dosis,  akan menurunkan  kadar  CEC  sebesar  0,026.  Hasil  uji analisis one  way Anova  diperoleh significancy 0,564 ( p >  0,05)  yang  berarti  tidak  terdapat  perbedaan bermakna kadar CEC antar kelompok, baik kelompok kontrol maupun kelompok perlakuan.

## Pembahasan
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh pemberian  sari  ubi  jalar  ungu  terhadap  kadar  CEC ( Circulating  Endothelial  Cell )  pada  tikus  model diabetes.  Ubi  jalar  ungu  diberikan  dalam  berbagai dosis dengan tujuan mengetahui pengaruh perbedaan  pemberian  dosis  ubi  jalar  ungu  tersebut terhadap  kadar  CEC  ( Circulating  Endothelial  Cell ) pada  tikus  model  diabetes.  Tikus  Wistar  yang digunakan  merupakan  tikus  jantan  karena  karena tikus jantan dapat memberikan hasil penelitian yang lebih  stabil  karena  tidak  dipengaruhi  oleh  adanya siklus  menstruasi  dan  kehamilan  seperti  pada  tikus
putih  betina.  Tikus  jantan  juga  mempunyai kecepatan  metabolisme  obat  yang  lebih  cepat  dan kondisi  biologis  tubuh  yang  lebih  stabil  dibanding tikus betina (Setiawan and Suhartono, 2005).
Meningkatnya  kadar glukosa  darah pada pemberian aloksan  dapat  disebabkan  oleh  dua  proses  yaitu terbentuknya radikal bebas dan kerusakan permeabilitas  membran  sel  sehingga  terjadi kerusakan  sel  beta  pankreas  yang  berfungsi menghasilkan insulin.  Aksi toksik  aloksan pada  sel β pankreas diinisiasi oleh radikal  bebas yang dibentuk oleh  reaksi  redoks.  Aloksan  dan  produk  reduksinya, asam  dialurik,  membentuk  siklus  redoks  dengan formasi  radikal  superoksida.  Radikal  ini  mengalami dismutasi  menjadi  hidrogen  peroksida.  Radikal hidroksil  dengan  kereaktifan  yang  tinggi  dibentuk oleh  reaksi  Fenton.  Aksi  radikal  bebas  dengan rangsangan tinggi meningkatkan konsentrasi kalsium sitosol  yg  menyebabkan  destruksi  cepat  sel  beta pankreas.  Meningkatnya  konsentrasi  kalsium  sitosol juga  disebabkan  karena  aloksan  menginduksi pengeluaran kalsium dari mitokondria yang kemudian  menyebabkan  terganggunya  proses oksidasi  sel  beta  pankreas.  Karena  rusaknya  sel  β pankreas  maka  insulin  tidak  terbentuk  sehingga kadar  glukosa  darah  meningkat.  Hal  ini  seperti proses  yang  terjadi  pada  diabetes  melitus  tipe  1 pada manusia (Yuriska, 2009).
Dari  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  Rosalina (2009)  membuktikan bahwa  kenaikan kadar glukosa darah  (hiperglikemi)  memiliki  peran  penting terhadap  kerusakan  vaskuler.  Bagian  terdalam vaskuler dilapisi oleh sel endotel. Hiperglikemia akut akan menyebabkan jejas endotel yang nantinya akan mengarah  ke  nekrosis  dan  lepasnya  sel  endotel (CEC).
Ubi  jalar  ungu  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini mengandung  antosianin  yang  berfungsi  sebagai antioksidan  yang  dapat  menangkap  radikal  bebas pada  diabetes.  Kemampuan  antioksidatif  antosianin timbul  dari  reaktifitasnya  yang  tinggi  sebagai pendonor  hidrogen  atau  elektron,  dan  kemampuan radikal  turunan  polifenol  untuk  menstabilkan  dan mendelokalisasi elektron tidak berpasangan (Suda et al., 2003).
Dari penelitian yang dilakukan oleh Jawi (2008) telah terbukti  mengenai  efek  antioksidan  dari  ekstrak  air ubi jalar ungu dapat menurunkan kadar malondialdehyde (MDA)  yang  merupakan  indikator stres  oksidatif  pada  darah  dan  berbagai  organ mencit yang diberikan beban aktivitas fisik maksimal.
Pada  penelitian ini terlihat efek  antioksidan dari ubi jalar  ungu  terhadap  kadar  CEC  dalam  tubuh  tikus model  diabetes  terbukti  dengan  menurunnya  kadar CEC seiring bertambahnya pemberian dosis ubi jalar ungu.  Namun,  secara  statistik  perbedaannya  tidak bermakna.  Rendahnya  kadar  CEC  pada  kelompok kontrol  positif  (K+)  bisa  dipengaruhi  faktor  biologis tikus,  yakni  tikus  yang  laju  aliran  darahnya  tinggi akan  mengurangi  lepasnya  sel  endotel  (CEC) sehingga pada kelompok K+ perhitungan CEC dengan flowcytometry rendah.
Tidak ada perbedaan secara statistik antar kelompok perlakuan  yang  diberi  sari  ubi  jalar  ungu.  Hal  ini disebabkan  karena  beberapa   hal.  Pertama,  pada saat  pembuatan  sari  ubi  jalar  ungu  kandungan antosianinnya  berkurang  karena  pemanasan.  Sesuai dengan  penelitian  Apriliyanti  tahun  2010,  bahwa pemanasan  yang  tinggi  akan  merusak  antosianin. Tantituvanont et al ., (2008) menyatakan bahwa suhu yang  semakin  tinggi  akan  mendorong  terlepasnya bagian glikosil pada antosianin dengan menghidrolisis  ikatan  glikosidik  sehingga  terbentuk aglikon  tidak  stabil  dan  selanjutnya  antosianin kehilangan warna. Kedua, jika kandungan gula dalam ubi  jalar  ungu  tinggi  akan  menurunkan  kandungan antosianin  dalam  ubi  jalar  ungu.  Ketiga,  dengan semakin lama waktu ekstraksi maka interaksi antara pelarut  (air)  dengan  zat  terlarut  (antosianin  dalam jaringan)  semakin  lama,  sehingga  proses  pelarutan maksimal  dan  akhirnya  zat  yang  terekstrak  juga besar.  Namun  setelah  waktu  pemanasan  sekitar  25 menit  total  antosianin  mengalami  penurunan  dan paling  rendah  pada  waktu  30  menit.  Karena  bila terlalu  lama  akan  berdampak  negatif  yaitu kemungkinan  kerusakan  zat  yang  dilarutkan (antosianin) (Yudiono, 2011).
Pada  penelitian  ini  ada  lima  ekor  tikus  yang  mati yang disebabkan karena tikus sudah terlalu tua yang dalam  penelitian  ini  tikus  sudah  mencapai  umur  4 bulan,  tikus mengalami perdarahan lambung akibat pemberian  ekstrak  ubi  jalar  ungu  melalui  per oral/sonde. Pada pengukuran CEC dengan flowcytometry ada  empat  sampel  yang  tidak  bisa digunakan  untuk  uji flowcytometry karena  pada pembentukan  cincin  PBMCs  tidak  terbentuk  cincin dan  tidak  bisa  ditemukan  densitas  sel  yang  baik untuk uji flowcytometry .
Pengukuran  kadar  CEC  dapat  dideteksi  melalui ekspresi  antigen  CD146  dengan  menggunakan pemeriksaan flowcytometry .  CD  146  merupakan marker  dari  sel  melanoma, nerve  endings, sel
limfosit T, sel otot polos dan sel endotel. Oleh karena itu, untuk mengetahui kadar CEC dalam tubuh perlu dilakukan  penghitungan  sel  hematopoiesis  melalui marker  CD 45 untuk  menghindari positif palsu pada kadar  CEC  (Sethi,  2012).  Dalam  keadaan  normal, kadar  CEC  dalam  pembuluh  darah  perifer  sangat rendah  sekitar  0-12  ml/darah.  pembuluh  CEC  akan meningkat pada penyakit yang menyerang pembuluh  darah  salah  satunya  diabetes  melitus (Erdbruegger, 2006).
Pemberian sari ubi jalar ungu mempunyai  pengaruh terhadap  kadar  CEC  sebesar  42,5%  dan  pemberian dosis  sari  ubi  jalar  ungu  tidak  menunjukkan  adanya perbedaan  secara  statistik.  Untuk  mendukung penelitian  ini,  perlu  dilakukan  penelitian  yang  sama dengan metode yang tepat untuk mendapatkan hasil yang signifikan, salah satunya membuat sari ubi jalar ungu  dengan  alokasi  waktu  20  menit  dan  dengan suhu 115oC. Perlu dikaji ulang mengenai penentuan dosis  sari  ubi  jalar  ungu,  hewan  coba  yang digunakan berumur  kurang  dari  3  bulan,  dan  sonde yang  terbuat  dari  plastik  sehingga  mengurangi perdarahan lambung.

## Kesimpulan
Kesimpulan pada penelitian ini adalah pemberian ubi jalar  ungu  berpengaruh  terhadap  kadar  CEC ( Circulating  Endothelial  Cell )  tikus  model  diabetes sebesar  42,5%,  namun  tidak  menunjukkan  adanya perbedaan  secara  statistik  antar  kelompok,  baik kelompok kontrol maupun kelompok perlakuan.

## Daftar Pustaka
Apriliyanti,  T.,  2010.  Kajian  Sifat  Fisikokimia  dan
Sensori  Tepung  Ubi  Jalar  Ungu  dengan  Variasi Proses Pengeringan. http://www.scribd.com.
Erdbruegger  U,  Woywodt  A,  and  Haubitz  M.  2006.
Circulating endothelial cells: A novel marker of endothelial damage. Clinica chimica Acta. 373: 17-26
Guyton,  AC,  Hall  JE.  2008.  Buku  Ajar  Fisiologi Kedokteran, Edisi 11. Jakarta: EGC.
Jawi, IM, Suprapta DN, Dwi SU, Wiwiek I. 2006. Efek Antioksidan Ekstrak Umbi Ubi Jalar Ungu pada Darah  dan  Berbagai  Organ  pada  Mencit  yang Diberikan  Beban  Aktivitas  Fisik  Maksimal. Denpasar: Bappeda, Provinsi Bali.
Maliya  A.  2006.  Perbedaan  Profil  Lipid  Serum  dan Perkembangan  Lesi  Aterosklerotik  Aorta Abdominalis  Antara  Kelompok  yang  Diberi Perasan  Pare  (Momordica  charantia)  dan Kontrol.  Diterbitkan. Thesis,  Diponegoro:

## Universitas Diponegoro
Sethi, S., Simonetto, D. A., Abdelmoneim, S. S., et al.
2012.  Comparison  of  Circulating  Endothelial
Cell/Platelet  Count  Ratio  to  Aspartate Transaminase/Platelet Ratio Index for Identifying  Patients  with  Cirrhosis. Journal  of Clinical  and  Experimental  Hepatology , 2 (1), 19 – 26. http://doi.org/10.1016/S0973-
6883(12)60078-4
Setiawan  B,  Suhartono  E.  2005.  Stress  Oksidatif  dan Peran  Antioksidan  pada  Diabetes  Melitus. Jurnal  Kedokteran  Indonesia.  Kalimantan Selatan:  Fakultas  Kedokteran  Universitas Lambung Mangkurat.
Suda  I,  Oki  T,  Masuda  M,  Kobayashi  M,  Nishiba  Y,
Furuta  S.  2003.  Physiological  Functionality  of Purplefleshed  Sweet  Potatoes  Containing Anthocyanins  and  Their  Utilization  in  Foods. JARQ. 37(3): 167-173.
Sudoyo,  A.  W.,  Setiyohadi,  B.,  Alwi,  I.,  Simadibrata, M., dan Setiati, S.  2006.  Buku Ajar Ilmu penyakit Dalam.  Edisi  IV.  Jakarta:  Departemen  Ilmu Penyakit  Dalam  Fakultas  Kedokteran  Universitas Indonesia
Suhardjono.  1975.  Percobaan  Hewan  Laboratorium. Yogyakarta: Gajah MadaUniversity Press:  207
Suprapta  DN.  2004.  Kajian  Aspek Pembibitan, Budidaya  dan  Pemanfaatan  umbi-umbian sebagai  sumber  pangan  alternatif.  Laporan Hasil  Penelitian.  Kerjasama  BAPEDA  Propinsi Bali dengan Fakultas Pertanian UNUD.
Tantituvanont  A,  Werawatganone  P,  Jiamchaisri  P, Manopakdee K. 2008. Preparation and stability of  butterfly  pea  color  extract  loaded  in microparticles  prepared  by  spray  drying.  Thai. J. Pharm. Sci. 32:59-69
Wulandari  CE.  2010.  Pengaruh  Pemberian  Ekstrak Bawang Merah (allium ascalonicum) Terhadap Penurunan  Kadar  Glukosa  Darah  Pada  Tikus Wistar  dengan  Hiperglikemia.  Diterbitkan. Karya Tulis Ilmiah. Diponegoro: Program Studi Pendidikan Dokter Universitas Diponegoro.
Wulandari N. 2003. Perubahan Pupil Cycle Time Pada Penderita  Diabetes  Mellitus.  Diterbitkan.
Sumatera  Utara:  Bagian  Ilmu  Penyakit  Mata Fakultas  Kedokteran  Universitas  Sumatera Utara.
Yudiono  K.  2011.  Ekstraksi  Antosianin  dari  Ubi  Jalar Ungu  (ipomoea  batatas  cv.  Ayamurasaki)
Dengan  teknik  Ekstraksi  subcritical  water.
Jurnal Teknologi Pangan. 2(1): 2-3.
Yuriska  AF.  2009.  Efek  Aloksan  Terhadap  Kadar
Glukosa  Darah  Tikus  Wistar.  Laporan  khir
Penelitian  Karya  Tulis  Ilmiah.  Diterbitkan. Semarang:  Fakultas  Keodkteran  Universitas Diponegoro.