## Uji Aktivitas Antifungi Ekstrak Etanol dan Etil Asetat Daun Saga (Abrus precatorius) terhadap Candida albicans
Joko Untung 1* , Inda Mapiliandari 1 , Ratnawati Lilasari Djanis 2 , Cysilia Kusumawati Hindarto 1 , Annissa Amalia 1 , Silvia Rachmy 2
1 Program Studi Analisis Kimia, Politeknik AKA Bogor, Tanah Baru, Bogor
2 Program Studi Pengolahan Limbah Industri, Politeknik AKA Bogor, Tanah Baru, Bogor
* Email : joko.untung12@gmail.com (Received: 31 Oktober 2022; Accepted: 20 Desember 2022; Published: 30 Desember 2022)

## Abstrak
Tanaman  saga  (Abrus  precatorius)  oleh  masyarakat  Indonesia  telah  digunakan  sebagai  obat  tradisional  dalam pengobatan  batuk,  sariawan, dan  radang  tenggorokan.  Penelitian  ini bertujuan  untuk  menguji aktivitas  antijamur dari ekstrak etanol dan ekstrak etil asetat dari daun saga terhadap Candida albicans, jamur penyebab kandidiasis. Uji  antijamur  dilakukan  dengan  menggunakan  metode  difusi  agar.  Hasilnya  menunjukkan  rata-rata  daya  hambat ekstrak etanol adalah sebesar 13,50 mm sedangkan ekstrak etil asetat sebesar 12,75 mm, sehingga dapat disimpulkan ekstrak etanol dan etil asetat dari daun Saga memiliki aktivitas antijamur.

## Kata Kunci: Antijamur, Candida albicans, Abrus precatorius

## Abstract
Saga  (Abrus  precatorius)  have  been  used  by  Indonesian  as  a  traditional  medicine  for  cough,  lips,  and  throat inflammation. The research aims to determine the antifungal activity of the ethanolic and ethyl acetic extracts of saga leaves toward Candida albicans. Antifungal activity test was done with agar diffusion method. The results showed that both the ethanolic and ethyl acetic extracts of saga leaves formed growth inhibiton with consecutive average of 13,50 mm and 12,75 mm. Based on the results can be concluded that ethanolic and ethyl acetic extracts of saga leaves had antifungal activity.
Keywords: Antifungal, Candida albicans, Abrus precatorius

## PENDAHULUAN
Infeksi adalah invasi dan pembiakan mikroorganisme  di jaringan tubuh yang  dapat menimbulkan  reaksi  pertahanan  tubuh  (Kayser et.al. , 2005).  Salah  satu  infeksi  yang  sering  terjadi  adalah infeksi jamur, seperti Candida albicans yang merupakan flora  normal  dalam  tubuh  manusia.  Infeksi C.  albicans pada manusia dikenal sebagai kandidiasis.
Obat  yang  biasa  digunakan  sebagai  terapi  pada kandidiasis adalah nistatin, amfoterisin B dan senyawaan golongan  azol.  Tetapi  obat-obatan  tersebut  sedang mengalami  banyak  kasus  resistensi.  Data  menunjukkan pasien kandidiasis 7,69% resisten terhadap ketokonazol, 6,59%  resisten  terhadap  itrakonazol,  2,19%  resisten terhadap  klotrimazol  dan  1,09%  resisten  terhadap amfoterisin  B  (Sharma et.al. ,  2013).  Pemberian  terapi ketokonazol  pada  kandidisasis  juga  menimbulkan  efek
samping  seperti  mual  dan  muntah  sehingga  perlu dipikirkan  alternatif  terapi  pada  kandidiasis  (Bahry  dan Setiabudi, 2011).
Tanaman  saga  ( Abrus  precatorius )  yang termasuk kedalam famili Fabaceae. Saga termasuk jenis tumbuhan  perdu  dengan  batang  berukuran  kecil  dan merambat  pada  inang  dengan  cara  membelit.  Saga banyak  tumbuh  secara  liar  atau  sengaja  dipelihara  di pekarangan.  Daun  tanaman  majemuk,  berbentuk  bulat serta berukuran kecil-kecil antara 1-2 cm. Memiliki buah polong berisi biji-biji yang berwarna merah dengan titik hitam mengilat dan licin (Abednego, 2012).
Saga  banyak  digunakan  secara  tradisional  oleh masyarakat  Indonesia sebagai  obat  batuk,  radang tenggorokan  dan  sariawan  (Agoes,  2010).  Menurut Juniarti et.al. (2009) tanaman ini  mengandung senyawa metabolit  sekunder  berupa  flavonoid,  saponin,  alkaloid
dan  steroid.  Penelitian  terakhir  menunjukkan  ekstrak etanolik  daun  saga  memiliki    potensi  antibakteri  yang cukup  baik  (Andayani et.al. ,  2012;  Nisak et.al. ,  2021; Wahyuningsih, 2017), namun aktivitas anti jamur seperti penghambatan C.  albicans masih  sangat  sedikit dilakukan.  Maka  sangat  menarik  dilakukan  penelitian untuk mengetahui aktivitas antijamur dari ekstrak etanol dan etil asetat dari daun saga terhadap C. albicans .

## BAHAN DAN METODE

## Alat dan Bahan
Alat-alat yang akan digunakan dalam penelitian ini adalah autoklaf, blender , botol vial, hot plate , inkubator, jangka  sorong, laminary  flow  cabinet , magnetic  stirer , mikropipet,  neraca  analitik,  oven,  penggaris, rotary evaporator , sentrifuse, seperangkat  alat gelas, spektrofotometri UV-Vis dan vortex .
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  akuades,  alkohol  70%,  aluminium  foil,  asam klorida, daun saga pohon, Candida albicans , DMSO,  etil asetat, FeCl 3 1%, logam Mg, kapas, kertas tissue , media SDA, dan media cair SDB, metanol, n-heksana, natrium klorida,  pereaksi  Wagner,  pereaksi  Mayer,  pereaksi Dragendroff,  pereaksi  Liebermann-Burchard dan  plastik wrapping.

## Preparasi Sampel
Sampel  yang  akan  digunakan  untuk  diekstrak adalah daun saga ( Abrus precatorius) yang diperoleh dari pembelian dari pembibit dan penjual tanaman di berbagai wilayah  di  Indonesia.  Daun  saga  kemudian  dikering- anginkan  hingga  kering.  Selanjutnya,  sampel  tersebut dihaluskan menggunakan blender sampai halus sehingga membentuk serbuk.

## Ekstraksi
Sebanyak  500  gram  serbuk  bahan  alam  ditimbang dan dimasukkan ke dalam wadah maserasi dan direndam dengan 2 L pelarut etanol 96% hingga serbuk terendam sekitar 1 cm di bawah pelarut, ditutup dengan alumunium foil  dan  didiamkan  selama  4  x  24  jam  di  tempat  yang terlindung dari cahaya matahari sambil sesekali diaduk. Selanjutnya disaring dengan kertas saring dan dipisahkan antara ampas dan filtrat. Ampas yang didapat kemudian diekstrak kembali dengan etanol 96% yang baru dengan jumlah  setengah  dari  volume  awal.  Proses  ekstraksi dilakukan  sekurang-kurangnya  dua  kali  atau  hingga filtrat  hampir  tidak  berwarna.  Filtrat  yang  diperoleh kemudian  dipekatkan  dengan rotary  evaporator pada suhu 40°C hingga diperoleh ekstrak kental. Selanjutnya rendemen  dihitung  dari  ekstrak  kental  yang  dihasilkan dengan  perhitungan  (Kementrian  Kesehatan  Republik Indonesia, 2017):
Proses  yang  sama  dilakukan  dengan  menggunakan pelarut etil asetat hingga didapatkan ekstrak kental.

## Skrining Fitokimia
Skrining fitokimia dilakukan untuk mengidentifikasi golongan
senyawa alkaloid,
triterpenoid/  steroid,  polifenol/  tannin,  flavonoid  dan saponin.  Berikut  adalah  metode  yang  digunakan (Harborne, 1987):
Uji  Alkaloid. Uji  ini  dilakukan  dengan  terlebih  dahulu menambahkan  H 2 SO 4 2  N  ke  dalam  ekstrak  dan dipanaskan Selanjutnya diuji dengan reagen Dragendroff,  Mayer  dan  Wagner.  Hasil  uji  positif diperoleh  bila  terbentuk  endapan  merah  hingga  jingga pada penambahan reagen Dragendroff dan endapan putih kekuningan  pada  penambahan  reagen  Mayer.  Serta terbentuk endapan kecoklatan pada penambahan reagen Wagner.
Uji  Triterpenoid/  Steroid. Sebanyak  1  mL  larutan ekstrak ditambah dengan pereaksi Liebermann- Burchard.  Adanya  senyawa  steroid  ditandai  timbulnya warna hijau dan triterpenoid timbulnya warna merah.
Uji  Polifenol/Tanin. Larutan  ekstrak  dimasukkan kedalam tabung reaksi dan ditambahkan 2 tetes pereaksi FeCl 3 1%.  Senyawa  fenol  akan  menghasilkan  warna hijau atau biru.
Uji Flavonoid. Larutan ekstrak sebanyak 2 mL ditambah dengan sedikit serbuk Mg  dan 2 mL HCl 2N. Senyawa flavonoid  akan  menimbulkan  warna  jingga  sampai merah.
Uji  Saponin. Larutan  ekstrak  ditambahkan akuades, kemudian dikocok kuat-kuat. Terbentuknya busa 1-10 cm yang stabil dan tidak kurang dari 10 menit menunjukkan adanya    saponin.

## Uji Aktivitas Antijamur
Kultur C.  albicans ditumbuhkan  pada  medium NA miring. Aktivasi 1 dilakukan dengan memindahkan jarum ose kultur uji ke dalam Erlenmeyer berisi 10 mL medium  NB.  Tabung  reaksi  berisi  kultur C.  albicans diinkubasi pada suhu 37 o C selama 24 jam. Selanjutnya, dilakukan aktivasi 2  dengan memindahkan 4 mL kultur aktivasi 1 ke 36 mL (konsentrasi inokulum 10%) medium NB, kemudian diinkubasi pada suhu 37 o C selama 24 jam. Kultur C. albicans tersebut kemudian disesuaikan dengan pada OD sebesar 0,5 pada 600 nm yang setara dengan 1,5 x 108 cfu/mL.
Pengujian  aktivitas  antijamur  menggunakan metode  difusi  agar.  Kultur C.  albicans uji  sebanyak  50 μL  dengan  metode  tuang  ( Pour  Plate  Method )
diinokulasikan pada cawan petri steril. Medium NA pada cawan  petri  didinginkan  dan  dibiarkan  menjadi  padat. Pada  agar  dibuat  1,  2,  atau  3  buah  sumur  dengan menggunakan  perforator  berdiameter  5  mm.  Masing- masing sumur ditetesi dengan larutan uji sebanyak 80 μL. Percobaan  dilakukan  sebanyak  3  kali.  Kultur  uji diinkubasi pada suhu 37 o C selama 12-72 jam.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Analisis Fitokimia
Uji  fitokimia  dilakukan untuk  mengetahui golongan  senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat dalam  ekstrak  daun saga  pohon  pada  masing  -  masing fraksi. Metabolit sekunder merupakan senyawa metabolit yang  esensial  bagi  pertumbuhan  organisme  dan ditemukan  dalam  bentuk  yang  berbeda-beda  antara spesies  yang  satu  dengan  yang  lainya  (Verpoorte  dan Alfermann, 2000). Uji fitokimia yang dilakukan meliputi uji  golongan  senyawa  alkaloid,  steroid/triterpenoid, flavonoid,  fenol dan  saponin.  Hasil  pengujian  secara fitokimia dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil Uji Fitokimia  Ekstrak  Daun  Saga
Golongan Senyawa Ekstrak etanol Ekstrak Etil Asetat Alkaloid + - Steroid + + Triterpenoid - - Saponin + - Flavonoid - - Polifenol + + Keterangan:  +         = Teridentifikasi
-        = Tidak Teridentifikasi
Berdasarkan  Tabel  1  dapat  dilihat  golongan senyawa metabolit sekunder yang terdapat dalam ekstrak etanol  daun  saga  adalah  alkaloid,  steroid,  saponin  dan polifenol,  sedangkan  pada  ekstrak  etil  asetat  daun  saga terdapat metabolit sekunder steroid dan polifenol.

## Uji Aktivitas Antijamur
Uji  aktivitas  anti  jamur  diawali  dengan pembuatan  suspensi  cair  berupa Sabouraud  Dexstrose Broth (SDB). Suspensi cair ini dibuat dengan mengambil 1  ose  jamur C.  albicans dan dimasukkan  kedalam  SDB yang kemudian diinkubasi selama 18 – 24 jam pada suhu
37 o C  yang  digunakan  untuk  uji  aktivitas  dari  ekstrak daun  saga.  Hasil  uji  yang  diperoleh  pada  konsentrasi 2000  ppm  dapat  dilihat  pada  Gambar  1.  Berdasarkan hasil tersebut ditentukan ukuran zona beningnya dengan alat  ukur  berupa  jangka  sorong,  sehingga  didapatkan hasil seperti yang  tertera  pada Tabel 2.
(a) (b)

## (c)
Gambar 1. Hasil uji aktivitas   antijamur terhadap jamur C. albicans. Daya hambat ekstrak etanol daun Saga (a), daya hambat ekstrak etil asetat daun Saga (b), kontrol ketokonazol (c).
Tabel 2. Diameter zona bening aktivitas antijamur ekstrak daun saga terhadap C. albicans Sampel Uji Diameter zona bening (mm) Rata-rata Sumur 1 Sumur 2 Ekstrak etanol 13,50 13,50 13,50 Ekstrak etil asetat 12,00 13,50 12,75 Kontrol positif (Ketokonazol) 6,50 3,50 5,00
Dari data Tabel 2 dapat dilihat bahwa rata-rata daya  hambat  ekstrak  etanol  adalah  sebesar  13,50  mm sedangkan ekstrak etil asetat sebesar 12,75 mm. Rata-rata
daya  hambat  yang  kecil  dari  kontrol  positif  bisa disebabkan  oleh  kultur  C.  albicans  yang  sudah  resisten dengan ketokonazol, sehingga hasil penelitian ini cukup menarik  untuk  bisa  menggunakan  bahan  alam  sebagai alternatif  terapi  pengobatan  kandidiasis.  Kemampuan antijamur  merupakan  indikator  yang  sangat  penting dalam kaitannya dengan aktivitas biologi lainnya seperti antibakteri dan antiprotozoa.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan, maka dapat disimpulkan bahwa:
1. Metabolit  sekunder  yang  dikandung  oleh  ekstrak etanol  daun  Saga  ( Abrus  precatorius )  adalah alkaloid, steroid, saponin, dan polifenol.
2. Metabolit  sekunder  yang  dikandung  oleh  ekstrak etil  asetat  daun  Saga  ( Abrus  precatorius )  adalah steroid dan polifenol.
3. Daya  hambat  antijamur  ekstrak  etanol  daun  Saga ( Abrus  precatorius )  terhadap Candida  albicans sebesar 13,50 mm
4. Daya  hambat  antijamur  ekstrak  etil  asetat  Saga ( Abrus  precatorius )  terhadap Candida  albicans sebesar 12,75 mm

## DAFTAR PUSTAKA
Abednego,  B.  (2012). Ensiklopedia  Tanaman  Obat
Indonesia . Bandung:
Indonesia Publishing House
Agoes, A. (2010). Tanaman Obat Indonesia . Salemba Medika, Jakarta
Andayani,  R.,  Basri,  A,G.,  Wury,  H.  (2012).  Uji
Daya  Hambat  Ekstrak  Metanol  Daun  Saga ( Abrus precatorius Linn ) Terhadap Pertumbuhan Streptococcus mutans. Cakradonya Dental, Vol 4
Bahry,  B  dan  Setiabudy  R.  (2011). Obat  jamur,  dalam famakologi dan
terapi
Ed ke-5. Jakarta: Badan Penerbit FKUI
Harborne  J.B.  (1987). Metode  Fitokimia:  Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan , Edisi ke- 2, Penerjemah: Kosasih Padmawinata dan Iwang Soediro, ITB, Bandung.
Juniarti,  Osmeli,  D.,  Yuhernita.  (2009).  Kandungan Senyawa  Kimia,  Uji  Toksisitas  (Brine  Shrimp Lethality  Test)  dan  Antioksidan  (1,1-diphenyl- 2-  pikrilhydrazyl)  dari  Ekstrak  Daun  Saga ( Abrus  precatorius  L. ),  Universitas  YARSI, Jakarta, [Skripsi].
Kayser F, Bienz KA, Eckert J, Zinkernagel R M. (2005).
Medical Microbiology, New York:  Thieme
Kementrian  Kesehatan  Republik  Indonesia.  (2017).
Farmakope Herbal Indonesia Edisi II. Kementrian Kesehatan RI. Jakarta.
Nisak,  S.K.,  Pambudi,  D.B.,  Waznah,  U.,  Slamet,  S. (2021).  Uji  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun Saga  ( Abrus  precatorius L.)  Terhadap  Bakteri
Streptococcus mutans ATCC  31987  dan Staphylococcus aureus ATCC 25923PK/5, Prosiding Seminar Nasional Kesehatan, Universitas Muhammadiyah Pekajangan, Pekalongan Sharma  PC,  More  SR,  Raut  SS,  Rathod  VS.  (2013). In vitro antifungal
susceptibility  pattern  of  oropharyngeal  and oesophageal Candida species  in  HIV  infected patients. Internaional  Journal  of  Health Sciences and Research . 3(5): 1-6.
Verpoorte,  R  dan  Alfermann,  A.W.  (2000).  Metabolic engineering  of  plant  secondary  metabolism, Springer, Finlandia.
Wahyuningsih  I.  (2017).  Uji  Aktivitas  Ekstrak  Etanol Daun  Saga  Terhadap Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli serta  Profil  KLT, Skripsi , Fak.  Farmasi  Universitas  Muhammadiyah Surakarta.