## UJI KUALITAS KITOSAN DARI LIMBAH TULANG SOTONG DENGAN VARIASI SUHU DEASETILASI
Iin Lidia Putama Mursal*, Farhamzah, Ajeng Selistiawati, Dewi Sheyka Meli, Nanda Chaerani, Naufal Muyasyar, Tita Latipah, Vivi Vidia
Fakultas Farmasi, Universitas Buana Perjuangan Karawang, Jawa Barat, Indonesia * Penulis Koresponding: iin.lidia@ubpkarawang.ac.id

## Abstrak
Telah  dilakukan  penelitian  mengenai  pengujian  kualitas  kitosan  dari  limbah  tulang  sotong  dengan  variasi  suhu deasetilasi.  Tujuan  dilakukan  penelitian  ini  adalah  melihat  bagaimana  potensi  tulang  sotong  sebagai  bahan  baku penghasil  kitosan  dan  pengaruh  variasi  suhu  deasetilasi  terhadap  kualitas  kitosan  yang  terbentuk.  Pengujian  yang dilakukan berupa uji kadar air, kadar abu dan nilai kelarutan kitosan. Pengujian kelarutan menunjukkan ketiga sampel dapat larut dalam asam asetat 2 %. Hasil pengujian kadar air dengan variasi suhu deasetilasi 110 0 C, 120 0 C, 130 0 C berturut-turut adalah 0,3467 %, 0,1063 % dan 0,0135 %. Kadar abu kitosan adalah 0,2627%, 0,0125% dan 0,0060 %. Hasil pengujian kadar air dan kadar abu menunjukkan penurunan nilai yang linear seiring dengan peningkatan suhu.
Kata kunci : sotong, kitosan, kadar air, kadar abu, kelarutan

## Abstract
Research  has  been  carried  out  on  testing  the  quality  of characteristics chitosan  from  cuttlefish  bone  waste  with variations in deacetylation temperature. The purpose of this study is to identify  the potential of cuttlefish bone as a raw material for producing chitosan and the effect of variations in deacetylation temperature on the quality of the chitosan. The tests of water content, ash content and chitosan solubility values. Solubility test showed that the three samples  were  soluble  in  2%  acetic  acid.  The  results  of  the  water  content  test  with  variations  in  deacetylation temperatures  of  110 0 C,  120 0 C,  130 0 C  were  0.3467%,  0.1063%  and  0.0135%,  respectively.  The  ash  content  of chitosan is 0.2627%, 0.0125% and 0.0060%. The results of testing water and ash content showed a decrease in the value linear within increasing temperature.
Keywords: cuttlefish, chitosan, the water content, the ash content, solubility

## PENDAHULUAN
Sotong merupakan salah satu jenis biota laut yang biasa  dijadikan  penganan  atau seafood .  Bagian  sotong yang  pada  umumnya  dikonsumsi  hanya  bagian dagingnya saja, sedangkan tulangnya tidak dimanfaatkan sehingga  hanya  menjadi  limbah.  Limbah  yang  berasal dari sotong juga bervariasi berkisar antara 65 – 85% dari berat sotong, tergantung dari jenisnya (Dewi et al ., 2015). Limbah  tulang  sotong  dapat  menimbulkan  masalah pencemaran  lingkungan  terutama  masalah  penumpukan dan bau yang dikeluarkan.
Menurut  penelitian  (Siregar et  al .,  2016)  tulang sotong  dapat  dijadikan  bahan  untuk  membuat  kitin  dan kitosan.  Kitosan  adalah  polimer  alami  yang  dihasilkan dari proses deasetilasi kitin. Kitosan menjadi salah satu jenis  material  yang  sedang  banyak  dikembangkan beberapa  waktu  belakangan  ini.  Hal  ini  disebabkan karena  sifat  kitosan  yang  bioaktifis,  biokompartibel, biodegredasi,  tidak  beracun  dan  antimikroba  (Irianto, Muljanah, 2011).
Kitosan mempunyai banyak kegunaan, antara lain untuk  flokulasi,  menyembuhkan  luka,  penguat  kertas, sarana penghantar obat dan gen serta biomaterial untuk imobilisasi,  seperti  biomolekul  kitosan  memiliki
karakteristik  biokompatibilitas  yang  diinginkan  serta kemampuan untuk meningkatkan permeabilitas membran, oleh karenanya kitosan merupakan salah satu matriks  imobilitas    yang  paling  menjanjikan  karena memiliki kemampuan membentuk membran, sifat adhesi yang baik, harga murah, tidak beracun, kekuatan mekanis dan  hidrofilisitas  yang  tinggi  serta  perbaikan  stabilitas (Irianto, dan Muljanah, 2011).
Pemanfaatan  limbah  sotong  hasil  perikanan menjadi  kitosan  bukan  saja  memberikan  nilai  tambah pada usaha pengolahan hasil perikanan, tetapi juga dapat menanggulangi  masalah  pencemaran  lingkungan  yang ditimbulkan,  terutama  masalah  bau  yang  dikeluarkan serta estetika lingkungan yang kurang bagus.
Preparasi  kitosan  berlangsung  melalui  tahapan demineralisasi, deproteinasi, dan deasetilasi. Kitin yang diperoleh  dapat  diubah  menjadi  kitosan  dengan  cara merubah  gugus  asetamida  (-NHCOCH)  pada  kitin menjadi gugus amina (-NH) (Mursida, et al 2018).
Tahap  deasetilasi  sangat  menentukan  mutu kitosan  dan  juga  karakteristik  kitosan  yang  dihasilkan. Semakin tinggi mutu kitosan berarti semakin tinggi pula kemurniannya. Beberapa karakteristik mutu kitosan yang cukup penting antara lain adalah kadar air, kadar abu dan
nilai kelarutan kitosan. Karakteristik dari produk kitosan dapat  mempengaruhi  sifat  kimia  dan  kegunaannya. Keunggulan karakteristik dari kitosan tersebut membuat kitosan  mempunyai  aplikasi  dan  kegunaan  yang  luas (Martien et  al ,  2012).  Penelitian  ini  bertujuan  untuk melakukan  sintesis  kitosan  dari  limbah  tulang  sotong dengan memvariasikan suhu deasetilasi untuk mengetahui  pengaruhnya  terhadap  mutu  kitosan  yang dihasilkan.

## METODE PENELITIAN
Pada  Penelitian  ini  dilakukan  pengujian  terhadap kualitas kitosan dari limbah tulang sotong dengan variasi suhu  deasetilasi.  Pengujian  yang  dilakukan  meliputi kadar  air,  kadar  abu  dan  nilai  kelarutan  kitosan.  Data yang  diperoleh  kemudian  disajikan  secara  deskriptif dalam bentuk tabel.

## Bahan dan Alat
Tulang  sotong,  HCl,  NaOH,  asam  asetat  glasial, aquades, kertas saring whatmann no.42, alumunium foil, mortir  dan  stemper,  corong,  gelas  kimia,  pipet  volume dan  pipet  filler,  gelas  ukur,  labu  ukur,  kaca  arloji, termometer,  batang  pengaduk,  spatula,  kurs  porselen, desikator, hotplate  stirrer ,  neraca  analitik,  lemari  asam dan basa, ayakan no.80, kertas pH meter, dan oven .

## Prosedur Penelitian

## A. Preparasi Kitosan
Bahan  baku  yang  digunakan  dalam  penelitian yaitu tulang sotong yang diperoleh dari pengepul biota  laut yang  ada  di  Pasar  Cikampek, Karawang.  Preparasi  bahan  baku  yaitu  terlebih dahulu  bahan  dicuci  dengan  air  agar  kotoran yang melekat hilang, lalu dikeringkan di bawah sinar  matahari.  Setelah  kering,  tulang  sotong dihaluskan agar diperoleh serbuk tulang sotong, kemudian  diayak  menggunakan  ayakan  80 Mesh, bahan diserbuk berguna untuk memperbesar  luas  permukaan.  Bahan  berupa serbuk yang telah lolos ayakan maka siap untuk disintesis  lebih  lanjut  menjadi  kitosan.  Proses sintesis bahan menjadi kitosan dilakukan melalui tiga  tahap  yaitu  tahap  demineralisasi,  tahap deproteinisasi, dan tahap deasetilasi.

## Demineralisasi
Serbuk tulang sotong yang sudah dihaluskan dan diayak  dengan  ayakan  80  Mesh,  kemudian ditimbang sebanyak 200 g ditambahi larutan HCl 1,5  M  dengan  perbandingan  1:15  (b/v).  Serbuk tulang  sotong  dan  larutan HCl  1,5  M  dicampur dalam gelas kimia kemudian direndam selama 72 jam,  setelah  itu  dipanaskan  pada  suhu  60 o C selama  4  jam  sambil  dilakukan  pengadukan menggunakan hotplate stirrer dengan kecepatan pengadukan 100 rpm. Setelah proses pengadukan  selesai  campuran  disaring,  dan residu hasil penyaringan dicuci dengan aquades hingga  pH  netral  dan  disaring  kembali.  Residu
yang sudah netral dikeringkan dalam oven pada suhu  80 o C  hingga  berat  konstan.  Diperoleh serbuk tulang sotong tanpa mineral (Agustina et al ., 2015).

## Deproteinisasi
Serbuk  tulang  sotong  hasil  demineralisasi ditambahi larutan NaOH 3,5% dengan perbandingan  1:10  (b/v)  antara  sampel  dan pelarut.  Campuran  dimasukkan  ke  dalam  gelas kimia, dipanaskan pada suhu 60 o C selama 4 jam sambil  dilakukan  pengadukan  menggunakan hotplate  stirrer dengan  kecepatan  pengadukan 100  rpm.  Setelah  proses  pengadukan  selesai campuran disaring, dan residu hasil penyaringan dicuci  dengan  aquades  hingga  pH  netral  dan disaring  kembali.  Residu  yang  sudah  netral dikeringkan dalam oven pada suhu 80 o C hingga berat konstan. Diperoleh hasil produk kitin dari tulang sotong (Agustina et al. , 2015).

## Deasetilasi
Sintesis kitosan melalui proses deasetilasi, hasil yang  diperoleh  dari  proses  demineralisasi  dan deproteinasi dilanjutkan dengan proses deasetilasi  dengan  menambah  NaOH  60% dengan  perbandingan  1:20  (b/v).  Campuran diaduk  dan  dipanaskan.  Tetapi  pada  penelitian kali ini peneliti melakukan variasi suhu dengan tiga suhu yang berbeda yaitu 110ºC, 120ºC dan 130ºC pada metode deasetilasi.

## B. Pengujian Kualitas Kitosan Rendemen
Rendemen  transformasi  kitin  menjadi  kitosan ditentukan berdasarkan persentase berat kitosan yang  dihasilkan  terhadap  berat  kitin  yang diperoleh (Agustina et al., 2015).

## Kadar Air
Kadar air merupakan salah satu parameter yang sangat penting untuk menentukan mutu kitosan. Protan  Laboratory menetapkan  standar  mutu untuk kadar air kitosan adalah ≤10%. Pengujian kadar air dapat dilakukan dengan cara : sampel ditimbang  sebanyak  0,5  gram  dalam  cawan porselin  atau  gelas  arloji  yang  telah  diketahui beratnya. Sampel dipanaskan dalam oven pada suhu  100-105oC  selama  1-2  jam  (tergantung bahannya).  Kemudian  didinginkan  dalam desikator  selama  kurang  lebih  30  menit  dan ditimbang.  Dipanaskan  lagi  dalam  oven,  lalu didinginkan  dalam  desikator  dan  diulangi hingga berat konstan (Agustina et al ., 2015).

## Kelarutan
Kelarutan  kitosan  merupakan  salah  satu parameter yang dapat dijadikan sebagai standar penilaian  mutu  kitosan.  Semakin  tinggi kelarutan  kitosan  berarti  mutu  kitosan  yang
dihasilkan  semakin  baik.  Kelarutan  kitosan dilakukan  dengan  cara  :  kitosan  dilarutkan  ke dalam  asam  asetat  konsentrasi  2%  dengan perbandingan  1:100  (b/v)  (Agustina et  al ., 2015).

## Kadar Abu
Kadar  abu  merupakan  parameter  untuk mengetahui  mineral  yang  terkandung  pada kitosan.  Standar  mutu  kadar  abu  kitosan menurut Protan  Laboratory adalah  ≤  2%.
Pengujian  kadar  abu  dapat  dilakukan  dengan cara : Kurs porselen kosong ditimbang sebelum dimasukkan ke oven, dipanaskan di dalam oven dengan  suhu  105  ˚C  selama  1  jam.  Perlakuan diulang  sampai  menemukan  bobot  konstan. Sampel  kitosan  0,5  gram  dimasukkan  dalam kurs  porselen  yang  sudah  diketahui  beratnya dan  di furnace pada  suhu 600  ˚C  selama  satu jam. Kitosan yang telah diabukan dimasukkan kedalam  desikator  hingga  suhu  ruang  lalu ditimbang  beratnya  (Musyrofah  &  Pestariati, 2018)

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Proses  deasetilasi  kitin  pada  penelitian  ini dilakukan  dengan  penambahan  NaOH  60  %  dengan perbandingan 1:20 b/v dengan variasi suhu 110 0 C, 120 0 C,130 0 C.  Masing-masing  sampel  direaksikan  dengan NaOH  dengan  pengadukan  dan  pemanasan  dengan masing-masing suhu dengan waktu 4 jam dan kecepatan pengadukan  konstan  100,  kemudian  di  saring  dan dilakukan  pencucian  dengan  aquadest  menggunakan kertas saring hingga pH netral kembali, kemudian residu yang diperoleh di keringkan dalam oven dengan suhu 80 0 C hingga berat konstan yang menandakan tidak ada lagi kandungan air pada serbuk deasetilasi.
110 0 C                       120 0 C                   130 0 C
Gambar 1. Larutan Kitosan Dengan Variasi Suhu Deasetilasi
Derajat  deasetilasi  adalah  suatu  parameter  mutu yang menunjukkan gugus asetil yang dapat dihilangkan dari  kitin.  Semakin  tinggi  derajat  deasetilasi  kitosan, maka gugus asetil yang terdapat dalam kitosan tersebut semakin sedikit (siregar, 2016).

## 1. Rendemen Kitosan
Rendemen  merupakan  salah  satu  parameter penting  dalam  mensintesis  kitosan.  Rendemen  kitosan dipengaruhi  oleh  bahan  baku  dan  proses  produksinya.
Menurut  (Azhar et  al ,  2010).  Perhitungan  rendemen kitosan dengan rumus berikut :
Rendemen kitosan (%) = x 100%
Tabel 1. Hasil Rendemen Kitosan dengan Variasi Suhu
Suhu ( o C) Rendemen (%) 110 16,6511 120 16,8521 130 29,5047
Berdasarkan  tabel  1  terdapat  rendemen  tertinggi pada suhu deasetilasi 130 0 C didapat rendemen sebesar 29,5047 % , kemudian rendemen suhu deasetilasi 110 0 C sebesar 16,8521 % %, dan yang paling terendah yaitu deasetilasi  dengan  suhu  120 0 C  dengan  rendemen sebesar  16,6511  %.  Peningkatan  jumlah  rendemen kemungkinan  disebabkan  oleh  jumlah  substitusi  atom H + yang terdapat pada kitosan dengan gugus CH2COO dari  asam  monokloroasetat  semakin  meningkat. Semakin  tinggi  suhu  maka  reaksi  yang  terjadi  juga semakin  banyak  sehingga  substitusi  yang  terjadi  juga semakin  besar  dan  berpengaruh  pada  hasil  akhir rendemen. Sesuai dengan reaksi kimia yang menyatakan  bahwa  semakin  tinggi  suhu  maka  reaksi akan berjalan lebih cepat. Menurut Cahyono Eko (2018) jumlah rendemen kitosan dipengaruhi oleh konsentrasi reagen, temperatur, waktu reaksi, dan ukuran partikel.
Rendemen  yang  rendah  belum  tentu  memiliki kualitas kitosan yang didapat tidak baik. Oleh karena itu kecilnya  rendemen  tidak  mempengaruhi  kualitas kitosan  yang  dihasilkan.  Karena  mutu  atau  kualitas kitosan  dipengaruhi  oleh  kadar  air,  kadar  abu,  derajat deastilasi (Wittriansyah et al , 2019)

## 2. Kadar Air
Kadar  air  merupakan  standar  mutu  produk  yang penting,  karena  kadar  air  merupakan  faktor  yang menentukan shelf  time- nya.  Semakin  tinggi  kadar  air akan  semakin  rentan  dan  memiiliki  daya  simpan  yang relatif tidak lama. Penurunan kadar air sebanding dengan waktu  pengeringan.  Semakin  lama  waktu  pengeringan, kadar air dalam bahan makin berkurang, namun dengan kecepatan  penurunan  kadar  air  makin  sedikit.  Makin tinggi  suhu  pengeringan,  maka  waktu  yang  diperlukan bahan  untuk  mengering  semakin  cepat.  Awal  proses pengeringan  penurunan  kadar  air  sangat  signifikan dibandingkan dengan saat-saat akhir proses pengeringan. Saat  awal  proses  pengeringan  berlangsung,  kandungan air yang diuapkan terlebih dahulu adalah kandungan air yang  terletak  pada  sisi  permukaan  bahan  sehingga penurunan  kadar  air  untuk  tahap-tahap  awal  proses pengeringan berlangsung dalam waktu yang relatif lebih singkat.  Setelah  kandungan  air  pada  sisi  permukaan bahan habis teruapkan maka kandungan air yang berada ditengah bahan akan naik menuju sisi permukaan bahan dan selanjutnya mengalami penguapan. Oleh karena itu waktu  yang  diperlukan  untuk  proses  penguapan  pada
saat-saat  akhir  atau  hampir  mencapai  kadar  air  yang minimum memerlukan waktu yang lebih lama.
Kadar  air  merupakan  salah  satu  parameter  yang sangat  penting  untuk  menentukan  mutu  kitosan.  Protan labolatory  menetapkan  standar  mutu  kadar  air  kitosan adalah <10%. Kadar air yang terkandung dalam kitosan dipengaruhi oleh proses pengeringan, lama pengeringan yang  dilakukan,  jumlah  kitosan  yang  dikeringkan  dan luas permukaan tempat kitosan yang dikeringkan.
Pengujian kadar air Metode AOAC (Association of Analytical
Communities ) cara
pemanasan (Mahatmanti,2010).    Timbang  Sampel  sebanyak  0,5 gram  dalam  kaca  arloji  yang  telah  diketahui  beratnya. masukan dalam oven pada suhu 100 – 105 0 C selama 1 – 2 jam, kemudian didinginkan dalam desikator selama kurang  lebih  30  menit  dan  ditimbang.  Kemudian panaskan lagi dalam oven, didinginkan dalam desikator dan diulangi hingga berat konstan. Perhitungan kadar air dapat dilakukan dengan rumus sebagai berikut :
Keterangan : Sampel : Kitin dan Kitosan a : Berat cawan dan sampel awal (g) b : Berat cawan dan sampel setelah kering (g) c : Berat sampel awal (g)
Pengujian pada penilitian kali ini dapat dilihat pada tabel 2 berikut ini :
Tabel 2. Kadar Air Kitosan Suhu ( o C) Kadar Air (%) 110 0,3467 120 0,1063 130 0,0135
Berdasarkan  tabel  2  kadar  air  kitosan  tertinggi yaitu  pada  suhu  deasetilasi  110 0 C  sebesar  0,3467  % sedangkan  suhu  deasetilasi  120 0 C  0,1063  %  dan  suhu deasetilasi  130 0 C  0,0135  %.  Hasil  tersebut  memenuhi standar  mutu  dari Protan  Laboratory untuk  kadar  air kitosan adalah ≤10% (Suptijah et all, 2011). Menyatakan kadar air yang terkandung pada kitosan dipengaruhi oleh proses  pengeringan,  lama  pengeringan  yang  dilakukan, jumlah  kitosan  yang  dikeringkan  dan  luas  permukaan tempat kitosan dikeringkan.
Tingginya  kadar  air  pada kitosan memungkinkan terjadinya  proses  penggelembungan (sweeling) pada kitosan,  mengingat  sifat  kitosan  yang  higroskopis karena  kemampuan  gugus  amina  kitosan  mengikat molekul air. Kadar air yang rendah dapat menekan atau mengurangi kerusakan pada kitosan, misalnya terhindar dari adanya aktivitas mikroorganisme akibat kelembaban  (Fadli et  al ,  2018)  melaporkan  bahwa kitosan bersifat higroskopis, karena kitosan mengandung gugus amina kitosan yang dapat mengikat molekul air (Cahyono, 2018). Juga (Walke et al , 2014) Menyatakan  bahwa  kitosan  merupakan  senyawa  yang bersifat  higroskopis  di  alam  oleh  karena  itu,  sampel
kitosan  memiliki  kemampuan  menyerap  air  selama peyimpanan.

## 3. Kadar Abu
Kadar  abu  bisa  digunakan  sebagai  indikasi kandungan mineral – mineral dalam sampel. Penentuan kadar abu pada serbuk tulang sotong dilakukan dengan metode  pengabuan  cara  langsung.  Prinsip  metode  ini yaitu  dengan  mengoksidasi  semua  zat  organik  pada suhu  tinggi  yaitu  sekitar  500  –  600  °C  dan  kemudian melakukan  penimbangan  zat  yang  tertinggal  setelah proses pembakaran.
Timbang  sampel  sebanyak  dalam  krus  porselin yang kering dan telah diketahui beratnya. Lalu pijarkan dalam fornes sampai diperoleh abu berwarna keputih- putihan.  Kemudian  krus  dan  abu  didinginkan  dalam desikator selama kurang lebih 30 menit.  Setelah dingin abu ditimbang (Mahatmanti, 2010).
Perhitungan kadar  abu  dapat dilakukan  dengan rumus sebagai berikut :
Keterangan : Sampel : Kitin dan Kitosan a : Berat kurs dan sampel awal (g) b : Berat kurs dan sampel setelah menjadi abu (g) c : Berat sampel awal (g)
Tabel 3. Kadar Abu Kitosan Suhu ( o C) Kadar Abu (%) 110 0,2627 120 0,0125 130 0,0060
Berdasarkan  tabel  3  hasil  pengujian  kadar  abu diatas  menunjukan  pada  suhu  110 0 C  sebesar  0,2627% kemudian pada suhu 120 0 C 0,0125% dan terendah pada suhu 130 0 C 0,0060%. Kadar abu kitosan yang dihasilkan jauh di bawah standar mutu yang ditetapkan yaitu ≤ 2,0 %. Hal ini menunjukkan kandungan mineral kitosan yang rendah  dan kitosan  yang  dihasilkan mempunyai tingkat kemurnian yang tinggi. Pengujian kadar abu dipengaruhi oleh konsentrasi NaOH dan suhu pemanasan. Kadar abu yang  besar  dapat  mempengaruhi  tingkat  kelarutan  dan dapat  menurunkan  viskositas.  Kadar  abu  kitosan komersil  berdasarkan  EFSA  (2010)  yaitu  ≤  3%  dan protan laboratory 2%.
Kadar abu merupakan parameter untuk mengetahui mineral  yang  terkandung  dalam  suatu  bahan  yang mencirikan  keberhasilan  proses  deemineralisasi  yang dilakukan. Semakin rendah nilai kadar abu, maka tingkat kemurnian  kitosan  semakin  tinggi,  dan  sebaliknya. Menurut  (Citrowati et  al. 2017) konsentrasi  NaOH  60% menghasilkan  nilai  kadar  abu  tinggi.  Kadar  abu  dapat dipengaruhi  oleh  proses  pencucian  kitosan  pada  saat penetralan. Konsentrasi NaOH yang semakin tinggi akan mempersulit  proses  penetralan  karena  kitosan  harus dinetralkan  lebih  lama  dibandingkan  dengan  perlakuan
yang  menggunakan  konsentrasi  NaOH  lebih  rendah. Proses pencucian yang tidak berjalan maksimal dan tidak mencapai pH netral akan mengakibatkan atom Na masih terdapat  pada  kitosan  sehingga  ketika  dianalisis  kadar abu, kitosan memiliki kadar abu yang cukup tinggi.
Dari  gambar  diatas  dapat  dilihat  bahwa  semakin tinggi suhu maka kadar abu kitosan semakin berkurang. Hal  tersebut  dikarenakan  oleh  suhu  dapat  membuat mineral  yang  terkandung  dalam  bahan  larut  dalam pelarut. Waktu deasetilasi juga mempengaruhi kadar abu kitosan.  Dimana  semakin  lama  waktu  deasetilasi  maka kadar abu kitosan yang didapat semakin menurun. Kadar abu yang menurun dikarenakan oleh semakin lama proses dan tinggi suhu deasetilasi maka semakin banyak mineral dalam  kitosan  yang  larut  dalam  larutan  NaOH.  Dan semakin  tinggi  kadar  kitosan  yang  digunakan  maka semakin  lama  pula  pencucian  yang  dilakukan  untuk menetralkan  pH  kitosan.  Pada  saat  pencucian  mineral- mineral  yang  tidak  terlarut  pada  proses  demineralisasi ikut terbawa oleh air pencucian (Siregar, 2016)
Hasil analisis kadar abu dari kitosan yang dihasilkan dapat  berkisar  antara  0,5-  0,1%.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  kitosan  yang  dihasilkan  telah  memenuhi  standar mutu kadar abu kitosan yang telah diharapkan . Semakin tingi  suhu  deasetilasi  yang  digunakan  menyebabkan kadar  abu  kitosan  semakin  kecil.  Hal  tersebut dikarenakan  oleh  semakin  tingginya  suhu  reaksi  maka semakin banyak pula mineral yang terlarut pada pelarut saat proses deasetilasi.

## 4. Kelarutan
Kelarutan  kitosan  dalam  asam  asetat  glasial merupakan  salah  satu  parameter  yang  dapat  dijadikan sebagai  standar  penilaian  mutu  kitosan.  Semakin tinggi kelarutan  kitosan  dalam  asam  asetat  glasial  2%  (1:100 b/v) berarti mutu kitosan yang dihasilkan semakin baik. Kitosan  yang  dihasilkan  memiliki  kelarutan  yang sempurna  dalam  asam  asetat  glasial  2%.  Kelarutan diamati  dengan  menambahkan  serbuk  kitosan  didalam gelas  kimia  kemudian  ditambah  sedikit  demi  sedikit larutan  asam  asetat  glasial  2%,  percobaan  pertama sebanyak  10  ml  larutan  asam  glasial  ditambahkan  ke dalam kitosan kemudia diaduk, kitosan larut tetapi masih terdapat gumpalan serbuk kitosan kemudian ditambahkan kembali larutan asam asetat glasian 10 ml menjadi  lebih  larut  dan  tidak  terdapat  gumpalan, kemudian  dilakukan  pemastian  kelarutan  dengan penambahan  larutan  asam  asetat  sebanyak  10  ml kemudian  di  aduk  dan  kitosan  larut  dengan  sempurna sama seperti percobaan kedua yang artinya kitosan yang diperoleh  dengan  variasi  suhu  deasetilasi  dapat  larut dengan sempurna dalam larutan asam asetat 2% sebanyak 20 – 30 ml asam asetat glasial .
Gambar 2. Uji Kelarutan
Pengaruh variasi suhu terhadap penelitian ini yaitu semakin tinggi suhu yang digunakan maka hasil serbuk kitosan  semakin  gelap,  meskipun  memberikan  warna yang  lebih  gelap,  peningkatan  suhu  pada  proses deasetilasi  hingga  130 0 C  ternyata  dapat  menghasilkan kelarutan  dan  rendemen  yang  lebih baik  dari  perlakuan lainnya. Menurut standar sebaiknya berwarna putih atau kuning cerah  dan tidak  berbau,  faktor  ini  kemungkinan yang  menjadi  pertimbangan  penggunaan  suhu  55 0 C sebagaimana  yang  digunakan  pada  penelitian  lain, walaupun  dengan  konsekuensi  membutuhkan  waktu yang lebih lama yaitu 5 jam.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan diketahui bahwa limbah tulang sotong memiliki potensi untuk  dikembangkan  sebagai  bahan  baku  pembuatan kitosan.  Hasil  pengujian  karakteristik  kitosan  terbaik berdasarkan  nilai  kadar  air,  kadar  abu  dan  kelarutan didapatkan  pada  sampel  kitosan  dengan  variasi  suhu deasetilasi sebesar 130 0 C. Hasil pengujian kadar air dan kadar  abu  menunjukkan  adanya  penurunan  nilai  secara linear seiring dengan peningkatan suhu.

## SARAN
Perlu adanya penelitian lebih lanjut dengan variasi suhu  yang  lebih  beragam  dan  jenis  bahan  baku  yang berbeda  untuk  mendapatkan  parameter  pengaruh  suhu deasetilasi  yang  paling  optimal  dalam  proses  preparasi kitosan.

## DAFTAR PUSTAKA
Agustina, S., Swantara, I. M. D., & Suartha, I. N. 2015.
Isolasi  Kitin,  Karakterisasi,  dan  Sintesis Kitosan  dari  Kulit  Udang.  Jurnal  Kimia 9(2): 271–278.
Azhar M, Efendi J, Syofyeni E, Lesi R.M dan Novalina S.  2010.  Pengaruh  Konsentrasi  NaOH  dan KOH  Terhadap  Derajat  Deasetilasi  Kitin dari Limbah Kulit Udang.  Jurnal Eksakta. 1: 1-8.
Cahyono,  E.  2018.  Karakteristik  Kitosan  dari  Limbah
Cangkang Udang Windu (Panaeus
monodon).  Akuatika  Indonesia  3(2):  96- 102. Citrowati, Anggun Nurani, Satyantini, Woro Hastuti, dan Mahasari, Gunanti. 2017. Pengaruh
Kombinasi  NaOH  dan  Suhu  Berbeda Terhadap Nilai Derajat Deasetilasi Kitosan
Dari Cangkang Kerang Kampak. Journal of Aquaculture and Fish Health 6(2): 48-56 Dewi  S  T,  Maulana  I  T,  Syahfir  L.  2015.  Analisis Kandungan  Asam  Lemak  Pada  Sotong (Sepia Sp) degan metode kg-sm. Iniversitas Islam Bandung.
Fadli  Ahmad,  Drastinawati1,  Ongky  Alexander  dan Feblil  Huda.  2017.  Pengaruh  Rasio  Massa Kitin/Naoh  dan  Waktu  Reaksi  Terhadap
Karakteristik  Kitosan  yang  Disintesis  dari
Limbah Industri Udang Kering. Jurnal Sains Materi Indonesia 18(2): 61-67
Irianto H E., Muljanah ijah. 2011. Proses Dan Aplikasi Nanopartikel  Kitosan  Sebagai  Penghantar
Obat. Squalen Vol. 6.
Mursida.,  Tasir.,  Sahriawati.  2018.  Efektifitas  larutan Alkali  Pada  Proses  Deasetilasi  Dari
Berbagai  Bahan  Baku  Kitosan.  Politeknik pertanian Negri pangkep.
Martien,  Adhyatmika,  Iramie  D,  Farida,  Sari.  2012. Perkembangan  Teknologi  Nanopartikel Sebagai Sistem Penghantaran Obat. Universitas Gajah Mada.
Musyrofah,  L.,  &  Pestariati.  2018.  Sintesis  dan
Penentuan Karakteristik Kitosan dari Cangkang  Kupang  Putih  (Corbula  Faba
Hinds). Analis Kesehatan Sains 7(2): 624– 631. Mahatmanti,  F.  W,  Warlan,  S,  dan  Wisnu,  S.  2010.
Sintesis  Kitosan  dan  Pemanfaatannya sebagai Anti Mikroba Ikan Segar. Sains dan Teknologi 8(2): 101-111.
Siregar, E. C, Suryati, & Hakim, L. 2016. Pengaruh Suhu dan Waktu Reaksi pada Pembuatan Kitosan dari  Tulang  Sotong  (Sepia  officinalis).
Jurnal  Teknologi  Kimia  Unimal  5(2):  37– 44.
Suptijah,  P,  Jacoeb,  A.  M.,  &  Rachmania,  D.  2011. Karakterisasi  Nano  Kitosan  Cangkang Udang  Vannamei  (Litopenaeus  vannamei) dengan  Metode  Gelasi  Ionik.  Jurnal Pengolahan  Hasil  Perikanan  Indonesia
XIV(2): 78–84.
Walke, S., Srivastava, G., Nikalje, M., Doshi, J., Kumar, R.,  Ravetkar,  S.,  &  Doshi,  P.  2014.
Physicochemical and Functional Characterization of Chitosan Prepared from Shrimp  Shells  and  Investigation  of  its Antibacterial,  Antioxidant  and  Tetanus Toxoid Entrapment Efficiency.
International  Journal  of  Pharmaceutical
Sciences Review and Research 26(2): 215– 225.
Wittriansyah,  K.,  Soedihono,  &  Satriawan,  D.  2019.
Aplikasi Kitosan Emerita sp. sebagai Bahan Pengawet  Alternatif  pada  Ikan  Belanak (Mugil  cephalus).  Jurnal  Ilmiah  Perikanan Dan Kelautan 11(1): 34–42.