ISSN: 1410-8917 e-ISSN: 2597-9914
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 21 (4) (2018): 193 – 197

## Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi
Journal of Scientific and Applied Chemistry
Journal homepage: http://ejournal.undip.ac.id/index.php/ksa

## Synthesis of 4-Hydroxy-2-Methylchalcone from meta-Cresol Formilation Product and Its Activities as an Antibacteria
Ismiyarto a,* , Suyanti a , Purbowatiningrum Ria Sarjono a , Ngadiwiyana a , Nor Basid Adiwibawa Prasetya a
a Chemistry Department, Faculty of Sciences and Mathematics, Diponegoro University, Jalan Prof. Soedarto, Tembalang, Semarang
* Corresponding author: ismiyarto@live.undip.ac.id
https://doi.org/10.14710/jksa.21.4.193-197
A r t i c l e   I n fo

## A b s t r a c t
Article history:
Received: 20 August 2018
Revised: 22 October 2018 Accepted: 23 October 2018 Online: 31 October 2018
Keywords: Claisen-Schmidt ,
Chalcone, Reimer- Tiemann , Antibacterial Research  on  the  synthesis  of  4-hydroxy-2-methylchalcone  from  4-hidroksi-2- metilbenzaldehida as formilated meta-cresol product and its antibacterial activity test has been conducted. As the first step, synthesis of 4-hydroxy-2-methylbenzaldehyde was carried out by treatment meta-cresol with chloroform through the Reimer-Tiemann formylation. Product is a brown solid with 23.94% yields. Furthermore, the 4-hydroxy- 2-methylchalcone  was  synthesized  using  the  4-hydroxy-2-methylbenzaldehyde  and acetophenone through the Claisen-Schmidt reaction. The product is a brownish yellow solid  with  29.74%  yields.  Antibacterial  test against Escherichia  coli and Staphylococcus aureus bacteria  was  carried  out  by  comparing  the  activity  of  4-hydroxy-2- methylchalcone  with  4-hydroxy-3-methoxychalcone,  and  chalcone  compounds.  The antibacterial activity test showed that the 4-hydroxy-2-methylchalcone compound, 4- hydroxy-3-methoxychalcone,  and  chalcone  compounds  gave  a  better  antibacterial activity against Escherichia coli than the Staphylococcus aureus .

## A b s t r a k
Kata Kunci: Claisen-Schmidt , Kalkon, Reimer-Tiemann , Antibakteri Telah dilakukan sintesis 4-hidroksi-2-metilkalkon dari 4-hidroksi-2- metilbenzaldehida  sebagai  produk formilasi meta-kresol dan  uji  aktivitasnya sebagai antibakteri.  Pada  tahap  pertama  dilakukan  sintesis  4-hidroksi-2-metilbenzaldehida dengan  bahan  dasar  meta-kresol  dan  kloroform  melalui  reaksi  formilasi Reimer- Tiemann menghasilkan  padatan  berwarna  coklat  dengan  rendemen  23,94%.  Tahap selanjutnya  adalah  sintesis  4-hidroksi-2-metilkalkon  menggunakan  bahan  dasar  4- hidroksi-2-metilbenzaldehid  dan  asetofenon  melalui  reaksi Claisen-Schmidt menghasilkan  padatan  berwarna  kuning  kecoklatan  dengan  rendemen  29,74%.  Uji antibakteri  terhadap  bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus ,  dilakukan terhadap  4-hidroksi-2-metilkalkon  dan  dibandingkan  dengan  dua  turunan  senyawa kalkon  yaitu:  4-hidroksi-3-metoksikalkon  dan  kalkon.  Uji  aktivitas  antibakteri menunjukkan  bahwa  senyawa  4-hidroksi-2-metilkalkon,  senyawa  4-hidroksi-3- metoksikalkon, serta senyawa kalkon mempunyai aktivitas antibakteri yang lebih baik terhadap bakteri Escherichia coli daripada pada bakteri Staphylococcus aureus .

## 1. Pendahuluan
Senyawa  kalkon  (C 15 H 12 O)  merupakan  salah  satu golongan flavonoid yang sangat penting di alam namun penyebarannya  sangat  terbatas  dan  hanya  ditemukan pada beberapa golongan tumbuhan dengan jumlah yang sangat  sedikit  [1].  Hal  ini  disebabkan  kalkon  memiliki peranan  penting  dalam  pembuatan  turunan  flavonoid
karena berfungsi sebagai zat antara [2]. Menurut Gaikwad dkk. [3]  dan  Chavan dkk. [4],  senyawa  kalkon  dan turunannya  mempunyai  beberapa  aktivitas  pharmasi seperti  antibakteri,  antikanker,  antioksidan,  serta  anti inflamasi [3, 4].
Sintesis  kalkon  dapat  dihasilkan  melalui  reaksi kondensasi aldol  silang ( Claisen-Schmidt ) yang melibatkan aldehid aromatik dan alkil atau aril keton [5].
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 21 (4) (2018): 193 – 197
Aktivitas biologis kalkon dipengaruhi oleh gugus karbonil α , β -tak  jenuh  dan  subtituen  yang  terikat  pada  kedua cincin aromatic [6].
Kohler  dan  Chadwell  [7]  telah  berhasil  mensintesis senyawa kalkon yang paling sederhana, benzilidenasetofenon melalui mekanisme reaksi Claisen- Schmidt dengan  katalis  basa  (NaOH  15%).  Bahan  awal yang digunakan yaitu benzaldehid dan asetofenon. Selain itu,  penelitian  tentang  kalkon  juga  telah  dilakukan oleh Madiyono  [8]  dengan  mensintesis  senyawa  3-metoksi- 4-hidroksikalkon  dari  bahan  awal  vanilin  dan asetofenon.
Pada  penelitian  dilakukan  sintesis  senyawa  4- hidroksi-2-metilbenzaldehid  melalui  reaksi  formilasi Reimer-Tiemann menggunakan meta-kresol. Senyawa 4- hidroksi-2-metilbenzaldehid  ini  selanjutnya  digunakan sebagai  bahan  dasar  sintesis  turunan  kalkon  melalui reaksi kondensasi aldol silang ( Claisen-Schmidt ).
Senyawa yang didapatkan kemudian akan dibandingkan  sifat  antibakterinya  dengan  senyawa  4- hidroksi-3-metoksikalkon dan  senyawa  kalkon.  Adanya gugus metil  dan  hidroksi  pada  senyawa  turunan  kalkon ini,  diharapkan  dapat  memberikan  aktivitas  antibakteri yang lebih baik.

## 2. Metode Penelitian
Sintesis  senyawa  4-hidroksi-2-metilbenzaldehid dilakukan  melalui  reaksi  formilasi Reimer-Tiemann menggunakan  meta-kresol.  Hasil  sintesis  senyawa  4- hidroksi-2-metilbenzaldehid kemudian digunakan sebagai  bahan  dasar  sintesis  4-hidroksi-2-metilkalkon melalui reaksi Claisen-Schmidt . Identifikasi hasil sintesis dilakukan  menggunakan  FTIR,  GC-MS, H- NMR,  LC-MS, dan UV-Vis. Tahap terakhir yaitu uji aktivitas antibakteri Staphylococcus  aureus (G + )  dan Eschericia  coli (G - ) menggunakan  metode  difusi  cakram  terhadap  4- hidroksi-2-metilkalkon  dan  dibandingkan  dengan  4- hidroksi-3-metoksikalkon dan kalkon.

## 2.1. Alat dan Bahan
Alat:  Seperangkat  alat  gelas,  1  set  alat  refluks, evaporator, pengaduk, TLC, kertas saring, kromatografi kolom  gravitasi,  autoklaf,  inkubator,  laminar  air  flow, GC-MS  Perkin  Elmer,  FTIR,  H-NMR  (JEOL),  LCMS-ESI pos  ion,  UV-Vis.  Bahan:  m-kresol,  etanol  teknis  96%, etanol  p.a,  NaOH,  akuades,  kloroform  p.a,  HCl  1M,  etil asetat p.a, etil asetat teknis, Na 2 SO 4 anhidrat, silika gel 60 G,  asetofenon,  DMSO,  plat  KLT,  metanol  p.a,  kertas saring, amoxicillin , agar, yeast , alkohol 70%, pepton.
2.2. Sintesis 4-hidroksi-2-metilbenzaldehida
Larutan m-kresol (10 mmol) di dalam 10 mL etanol ditambahkan  3  g  NaOH  (75  mmol)  dalam  15  mL  air. Campuran  reaksi  direfluks  pada  suhu  80°C.  Sesudah reaksi  berlangsung  5  menit,  30  mL  kloroform ditambahkan  secara  perlahan.  Pengadukan  dilanjutkan selama  1  jam  sesudah  penambahan  kloroform  selesai. Pelarut  etanol  kemudian  diuapkan  dengan  evaporator dan 1 M HCl ditambahkan untuk menetralkan kelebihan NaOH hingga pH = 2-3. Larutan selanjutnya diekstraksi
dengan  etilasetat  sebanyak  3  kali.  Selanjutnya  fraksi etilasetat  dikeringkan  dengan  Na 2 SO 4 anhidrat  dan selanjutnya  dilakukan  evaporasi.  Residu  selanjutnya dimurnikan  dengan  Kromatografi  Kolom  Gravitasi menggunakan  silika  gel  untuk  menghasilkan  produk dengan  kemurnian  tinggi.9  Analisis  produk  dilakukan menggunakan GC-MS dan H- NMR.

## 2.3. Sintesis Senyawa 4-hidroksi-2-metilkalkon
Senyawa  2-metil-4-hidroksi  benzaldehid  1  g  (7,34 mmol)  dilarutkan  ke  dalam  6,80  mL  etanol  96%. Pelarutan  dilakukan  dengan  menggunakan  pengaduk magnetik. Asetofenon 0,857 mL (7,34 mmol) dan 4,50 mL NaOH  60%  ditambahkan.  Campuran  dipanaskan  pada suhu  60°C  selama  3  jam.  Monitoring  TLC  dilakukan dengan  perbandingan  eluen  etil  asetat:  n-hexana  1:3. Hasil  reaksi  dievaporasi  pada  suhu  45°C,  kemudian diasamkan dengan HCl 1 M hingga pH = 1. Ekstraksi hasil evaporasi  dilakukan  dengan  penambahan  etil  asetat  30 mL  sebanyak  3  kali.  Fraksi  etil  asetat  dipisahkan kemudian  dikeringkan  dengan  penambahan  Na 2 SO 4 anhidrat.  Penyaringan  dan  evaporasi  dilakukan  hingga semua  etil  asetat  menguap.  Pemurnian  menggunakan kromatografi  kolom  gravitasi  dengan  silika  gel  untuk mendapatkan  produk  yang  diinginkan.  Analisis  produk dilakukan menggunakan UV-Vis, FTIR, dan LC-MS.

## 2.4. Uji Aktivitas Antibakteri

## 2.4.1. Pembuatan Media Nutrient Agar (NA)
Media  agar  dibuat  dengan  cara  melarutkan  2,64 gram  serbuk  nutrient  agar  ke  dalam  120  mL  akuades. Campuran  diaduk  dan  dipanaskan  hingga  mendidih. Media  yang  sudah  mendidih  tersebut  disterilisasi menggunakan autoklaf pada suhu 121°C selama 15 menit.
2.4.2. Pembuatan Stok Kultur Bakteri S. aureus dan E. coli
Masing-masing  koloni  bakteri S.  aureus dan E.  coli diambil  menggunakan  jarum  ose  yang  telah  steril. Goresan  bakteri  ditanamkan  pada  NA  dengan  cara menggores.  Inkubasi  dalam  incubator  dilakukan  pada suhu 37°C selama 18-24 jam.

## 2.4.3. Penyiapan Inokulum Bakteri
Dari  stok  bakteri  yang  telah  diinkubasi  selama  24 jam, diambil satu gores enggunakan jarum ose yang telah steril.  Goresan  bakteri  disuspensikan  ke  dalam  10  mL larutan  NaCl  0,9%.  Suspensi  bakteri  kemudian  diukur absorbansinya  pada  panjang  gelombang  580  nm  dan diencerkan dalam media NaCl sampai didapat kekeruhan suspense  bakteri  sama  dengan  kekeruhan  larutan standard skala 0,5 Mc.Farland.

## 2.4.4. Pembuatan Larutan Uji
Dilakukan  pengenceran  terhadap  produk  hasil sintesis  menggunakan  DMSO  untuk  mendapatkan konsentrasi yang akan diujikan.
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 21 (4) (2018): 193 – 197 195

## 2.4.5. Uji Aktivitas Antibakteri dengan Metode Difusi

## Cakram
Sebanyak  15  mL  media  nutrient  agar  dituang  ke dalam cawan petri dan dibiarkan memadat. Sebanyak 0,1 mL suspense bakteri yang telah diencerkan diinokulasikan  ke  nutrient  agar  yang  telah  memadat. Selanjutnya, kertas cakram yang telah ditempelkan pada permukaan  media  agar  yang  telah  diberi  bakteri, diteteskan  sebanyak  15  µL  senyawa  hasil.  Dalam penelitian  ini,  ampisilin  digunakan  sebagai  kontrol positif  dan  DMSO  digunakan  sebagai  kontrol  negatif. Media uji yang telah siap diinkubasi dalam incubator pada suhu  37°C.  Pengukuran  diameter  daerah  hambatan pertumbuhan  bakteri disekitar  cakram  kertas  dilakukan pada waktu inkubasi jam ke 3, 6, 9, 18 dan 24.

## 3. Hasil dan Pembahasan

## 3.1. Sintesis 4-hidroksi-2-metilbenzaldehid
Tahap  ini  dilakukan  dengan  mereaksikan  50  mmol meta-kresol yaitu senyawa turunan fenol sebagai bahan utama  sintesis  4-hidroksi-2-metilbenzaldehid  dengan kloroform,  NaOH  serta  etanol  melalui  metode  refluks. Hasil reaksi selanjutnya dievaporasi untuk menguapkan pelarutnya  yaitu  etanol.  Selanjutnya  dilakukan  ektraksi menggunakan  kloroform.  Terdapat  2  lapisan  yaitu lapisan  bawah  berupa  kloroform  +  hasil  sintesis sedangkan lapisan atas berupa fraksi air. Monitoring TLC dilakukan  pada  lapisan  bawah  menggunakan  eluen  etil asetat: n-hexana (1: 3), profil TLC terdapat pada gambar 1 (4  noda).  Tahap  selanjutnya  yaitu  evaporasi  pada fraksi bawah untuk menguapkan kloroform.
Gambar 1. Profil TLC dengan eluen etil asetat: n-hexana
(1: 3) senyawa hasil reaksi melalui reaksi formilasi
Reimer-Tiemann
Gambar 2. Reaksi umum sintesis 4-hidroksi-2- metilbenzaldehid
Reaksi  reaksi  formilasi Reimer-Tiemann secara umum  dapat  dilihat  pada  gambar  2.  Analisis  campuran produk menggunakan GC-MS bertujuan untuk mengetahui  kelimpahan  masing-masing  fraksi  dalam senyawa  hasil  reaksi.  Hasil  analisis  komposisi  senyawa
hasil reaksi Reimer-Tiemann menggunakan meta-kresol terdapat pada tabel 1.
Tabel 1. Analisis komposisi senyawa hasil reaksi Reimer- Tiemann menggunakan meta-kresol
No. Nama Senyawa Waktu Retensi (menit) Massa Molekul (M+, g/mol) Kelimpahan (%) 1. meta-kresol 13,80 108 36 2. 2-metil salisilaldehid (A) 15,46 136 9 3. 4-metil salisilaldehid (B) 16,44 136 10 4. 4-hidroksi-2- metilbenzaldehid (C) 25,80 136 25
Pemurnian  noda  ke-4  atau  Noda  C  [1]  dilakukan menggunakan  kromatografi  kolom  cepat  dengan  eluen n-hexana:  etil  asetat.  Produk  yang  dihasilkan  berupa padatan  coklat  dengan  rendemen  23.94%.  Berdasarkan data H- NMR  dari  produk  pada  gambar  3  menunjukkan pergeseran  kimia  dengan  nilai  yang  identik  dengan  4- hidroksi-2-metilbenzaldehid.  Spektrum  pada  gambar  3 terdapat 8 puncak yang menunjukkan adanya senyawa C. Pergeseran  kimia  ( δ )  10,385  ppm  dengan  pemecahan singlet  menunjukkan  proton  yang  terikat  pada  gugus hidroksil.  Pergeseran  kimia  ( δ )  9,904  ppm  dengan pemecahan  singlet  menunjukkan  proton  yang  terikat pada  gugus  aldehid.  Pergeseran  kimia  ( δ )  7,571-7,588 ppm  dengan  pemecahan  duplet  memiliki  nilai  J=8,5  Hz yang menunjukkan bahwa proton pada pergeseran kimia tersebut  mengalami  kopling  dengan  1  proton  lainnya pada posisi orto, pergeseran kimia ( δ ) 6,665-6,687 ppm dengan  pemecahan duplet  memiliki  nilai J=8,5 Hz  yang menunjukkan  bahwa  proton  pada  pergeseran  kimia tersebut  mengalami  kopling  dengan  1  proton  lainnya pada  posisi  orto,  dan  pergeseran  kimia  ( δ )  6,593  ppm dengan  pemecahan  singlet,  ketiga  pergeseran  kimia tersebut menunjukkan adanya  proton  yang  terikat  pada cincin aromatik. Pergeseran kimia ( δ ) 2,438 ppm dengan pemecahan  singlet  menunjukkan  adanya  proton  yang terikat pada gugus metil.
Gambar 3. Hasil analisis H- NMR fraksi-4 senyawa

## 3.2. Sintesis 4-hidroksi-2-metilkalkon
Penelitian  ini  dilakukan  dengan  mereaksikan  4- hidroksi-2-metilbenzaldehid  dan  asetofenon  pada kondisi  basa  pekat  (NaOH  60  %)  dan  suhu  60°C,
H 3 C OH C O H
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 21 (4) (2018): 193 – 197
kemudian  dilakukan  monitoring  reaksi  menggunakan TLC  dengan  eluen  etil  asetat:  n-hexana  =  1:  3.  Hasil monitoring TLC terdapat pada gambar 4.
Gambar 4. Monitoring TLC reaksi 4-hidroksi-2-
metilkalkon
Hasil reaksi kemudian dievaporasi untuk menguapkan  pelarut  etanol  dan  setelah  itu  dilanjutkan dengan ekstraksi menggunakan etil asetat. Hasil ektraksi terdapat  2  lapisan  yaitu  fraksi  air  dan  fraksi  etil  asetat, kemudian  fraksi  etil  asetat  dilakukan  evaporasi  untuk menguapkan  etil  asetat.  Hasil  evaporasi  kemudian dilakukan  pemurnian  dengan  kromatografi  kolom gravitasi  menggunakan  eluen  etil  asetat  dan  n-hexana. Hasil pemurnian ini kemudian dilakukan evaporasi untuk menguapkan  eluennya.  Rendemen  yang  didapatkan setelah  dievaporasi  burupa  padatan  berwarna  kuning kecoklatan  sebesar  0,52  g  dengan  rendemen  29,74%. Reaksi secara umum terdapat pada Gambar 5.
Gambar 5 Reaksi umum sintesis 4-hidroksi-2-
metilkalkon Analisis produk dilakukan menggunakan spektrofotometer  UV-Vis  seperti  pada  Gambar  6 menunjukkan adanya 2 puncak yang merupakan ciri khas dari  senyawa  kalkon  yaitu  pada  daerah  panjang gelombang  272  nm  dan  353  nm.  Puncak  serapan  pada panjang gelombang 272 nm menunjukkan adanya sistem benzoil  sedangkan  puncak  serapan  pada  panjang gelombang  353  nm  menunjukkan  adanya  sistem sinamoil.
Gambar 6. Hasil spektra UV-Vis senyawa 4-hidroksi-2- metilkalkon
Analisis  selanjutnya  menggunakan  instrumen  FTIR yang  memberikan  informasi  tentang  gambaran  gugus fungsi  dari  senyawa  yang  dianalisis.  Hasil  spektra  FTIR terdapat pada gambar 7.
Gambar 7 Spektra FTIR senyawa 4-hidroksi-2- metilkalkon
Hasil analisis pada Gambar 7 di atas, terdapat puncak pada bilangan gelombang yang dilaporkan pada Tabel 2.
Tabel 2. Interpretasi spektra FTIR senyawa 4-hidroksi-
2-metilkalkon No. Bilangan gelombang (cm - 1 ) Keterangan 1 3155,31 (-OH) 2 3024,16 (C-H ulur aromatik) 3 2923,87 (C-H sp 3 ) 4 1647,09 (C=O terkonjugasi dengan cincin aromatik) 5 1546,80 (C=C tekuk aromatik) 6 1377,07 Gugus alkil (CH 3 )
Analisis selanjutnya yaitu identifikasi menggunakan instrumen  LC-MS  yang  dapat  memberikan  informasi kemurnian dan berat molekul dari senyawa 4-hiroksi-2- metilkalkon. Hasil analisis LC-MS disajikan pada gambar 8.
Gambar 8. Kromatogram LC senyawa 4-hidroksi-2- metilkalkon
Hasil kromatogram LC pada Gambar 9 menunjukkan adanya  satu  puncak  tertinggi  dengan  waktu  retensi  2,5 menit  yang  artinya  bahwa  senyawa  yang  dihasilkan murni.  Data  spektogram  pada  Gambar  9  menunjukkan bahwa  muncul  puncak  dengan  [M + H + ]  239,21  m/z sehingga  dapat  disimpulkan  bahwa  berat  molekul  238 g/mol  adalah  sesuai  dengan  berat  molekul  senyawa  4- hidroksi-2-metilkalkon.
Gambar 9 Spektogram massa senyawa 4-hidroksi-2- metilkalkon

## 3.3. Uji Antibakteri
Uji antibakteri dilakukan terhadap 3 senyawa dengan kontrol  (+)  dan  (-)  pada  konsentrasi  yang  sama  yaitu 4000 ppm (tabel 3).
Tabel 3. Hasil pengukuran luas zona hambat terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Eschericia coli Larutan Uji (4000 ppm) Luas Zona Hambat (mm) E. coli S. aureus 4-hidroksi-2- metilkalkon (A) 2,2 1,6 4-hidroksi-3- metoksikalkon (B) 1,6 1,5 Kalkon (C) 0,8 0,8 kontrol positif (+) 9,5 8,8 kontrol negatif (-) 0 0 4. Kesimpulan
Senyawa 4-hidroksi-2-metilbenzaldehid telah berhasil  disintesis  dari  bahan  dasar  meta-kresol  dan kloroform  melalui  reaksi  formilasi Reimer-Tiemann dengan  rendemen  sebesar  23,94  %  dan  berbentuk padatan  berwarna  coklat.  Senyawa  4-hidroksi-2- metilkalkon  telah  berhasil  disintesis  melalui  reaksi Claisen-Schmidt dari  bahan  dasar  4-hidroksi-2- metilbenzaldehid  dan  asetofenon  dengan  rendemen sebesar 29,74 % dan berbentuk padatan berwarna kuning kecoklatan. Senyawa 4-hidroksi-2-metilkalkon, senyawa  4-hidroksi-3-metoksikalkon,  dan  senyawa kalkon  memiliki  aktivitas  antibakteri  yang  lebih  baik terhadap  bakteri Escherichia  coli daripada Staphylococcus aureus .

## 5. Ucapan Terimakasih.
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada Universitas  Diponegoro  atas  dukungan  dana  melalui Hibah  Penelitian  RPP  (RISET  PENGEMBANGAN  DAN PENERAPAN)  Bacth  2,  Tahun  1  (2018)  (No:474- 30/UN7.P4.3/2018) Universitas Diponegoro

## 6. Daftar Pustaka
[1]  M.  Hapsari,  Tri  Windarti,  Purbowatiningrum  Ria Sarjono,  Ngadiwiyana,  Ismiyarto,  Synthesis  of  4- hydroxy-3-methylchalcone  from  Reimer-Tiemann reaction  product  and  its  antibacterial  activity  test, IOP  Conference  Series:  Materials  Science  and Engineering ,
349, 1,
(2018) 012036
https://doi.org/10.1088/1757-899X/349/1/012036
[2]  Rajat  Ghosh,  Abhijit  Das,  Synthesis  and  biological activities  of  chalcones  and  their  heterocyclic
derivatives: a review, World Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences , 3, 3, (2014) 578-595
[3]  Kishor  V  Gaikwad,  Sandip  V  Gaikwad,  Satish  B Jadhav, Shantilal D Rathod, Synthesis of some novel chalcones of phthalimidoester possessing good anti- inflammatory  and  antimicrobial  activity, Indian Jurnal of Chemistry , 49B, (2010) 131-136
[4]  B. B. Chavan, A. S. Gadekar, P. P. Mehta, P. K. Vawhal, A.  K.    Kolsure,  A.  R.  Chabukswar,  Synthesis  and Medicinal Signifiance of Chalcones- A Review, Asian Journal  of  Biomedical and  Pharmaceutical  Sciences , 6, 56, (2016) 1-7
[5]  Hery  Suwito,  Jumina,  Mustofa,  Alfinda  Novi Kristanti,  Ni  Nyoman  Tri  Puspaningsih,  Chalcones: Synthesis,  structure  diversity  and  pharmacological aspects, Journal  of  Chemical  and  Pharmaceutical Research , 6, 5, (2014) 1075-1088
[6]  V.  M.      Kamble,  G.  D.  Hatnapure,  A.  P.    Keche,  S. Birajdar,  S.  G.  Patil,  R.  H.  Tale,  A.  H.  Rodge,  S.  S. Turkar, K. Gour, Synthesis and biological evaluation of  a  novel  series  of  methoxylated  chalcones  as antioxidant  and  anti-microbial  agents, Journal  of Chemical  and  Pharmaceutical  Research ,  3,  6,  (2011) 639-648
[7]  E. P. Kohler, H. M. Chadwell, Organic Syntheses, in, 1941.
[8]  Madiyono, Sintesis Senyawa 4-hidroksi-3- metoksikalkon  dari  Vanilin  dan  Asetofenon, Departemen Kimia, Universitas Diponegoro, Semarang
179 227 275 323 371 419 Mass (m/z) 0 147.9 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 % I n te n s it y
Mariner Spec /64:68 (T /2.42:2.57) -36:47 (T -2.42:2.57)  ASC=>NR(2.00)[BP = 239.2, 148]
239.21 261.20 240.21 205.18 262.20 253.16 281.14 343.23 394.31 206.17 234.86 313.17 186.72 364.11