Antibacterial Potential Ethanol Extract of Papaya Leaves ( Carica papaya Linn.) Towards Salmonella typhi
Mahatir Muhammad(1)*, Nasri(2), Vera Estefania Kaban(3), Denny Satria(4), Henni Cintya(5)
(1)*,(4) Program Studi Sarjana Farmasi, Departemen Biologi Farmasi, Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
(2),(3) Program Studi Sarjana Farmasi, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan (STIKes) Senior Medan
(5) Program Studi Sarjana Farmasi, Departemen Kimia Farmasi, Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
mahatir,muhammad@usu.ac.id (1)*, nasri32.xb@gmail.com (2), erakaban20@gmail.com (3), dennysatria@usu.ac.id (4), henni.cintya@usu.ac.id (5)

## ABSTRAK
Penyakit  infeksi  merupakan  permasalahan  yang  sangat  dikhawatirkan  didunia.  Infeksi  bakteri  seperti Salmonella  typhi sering  mnyerang pada anak-anak dan  menyebabkan penyakit diare  maupun demam tifoid. Salmonella  typhi adalah  bakteri  Gram  negatif  beflagel  yang  dapat  menular  melalui  makanan  dan  minuman atau  air  yang  terkontaminasi.  Pengobatan  infeksi  dengan  menggunakan  antibiotic  dimana  sering  kali penggunaan antibiotic yang tidak tercapai pada target terapi dikarenakan  kurangnya kepatuhan pasien dalam mengonsumsi  antibiotic  akan  menimbulkan  masalah  baru  yaitu  masalah  terkait  resistensi  antibiotic.  Daun papaya  merupakan  tanaman  berasal  dari  famili  Caricaceae  dimana  berdasarkan  studi  yang  telah  dilaporkan memiliki efek sebagai antimikroba, antidiabetes, immunomodulator. Tujuan dari penelitian  ini  adalah untuk mengkaji potensi antibakteri ekstrak etanol daun papaya (Carica papaya Linn.) terhadap bakteri Salmonella typhi .  Metode  penelitian  ini  menggunakan  metode  difusi  agar  (Kirby-Bauer)  dengan  variasi  konsentrasi untuk penentuan kadar hambat minimum (KHM) dan dengan streaking method untuk penentuan konsentrasi bunuh minimum (KBM). Konsentrasi hambat minimum didapat pada konsentrasi 3,125 mg/mL dengan nilai diameter zona hambat sebesar 6,70 ± 0,20 mm dan konsentrasi bunuh minimum pada konsentrasi 50 mg/mL. nilai  aktivitas  indeks  pada  konsentrasi  300  mg/mL  sebesar  0,688  ±  0,05.  Maka  dapat  disimpulkan  bahwa ekstrak etanol daun papaya memiliki potensi aktivitas antibakteri terhadap bakteri Salmonella typhi.
Kata Kunci : Carica papaya Linn., antibakteri, KHM, KBM, Salmonella typhi

## ABSTRACT
Infectious  diseases  are  a  problem  of  great  concern  throughout  the  world.  Bacterial  infections  such  as Salmonella  typhi  often  attack  children  and  cause  diarrhea  and  typhoid  fever.  Salmonella  typhi  is  a beflagellated  Gram  negative  bacteria  that  can  be  transmitted  through  contaminated  food,  drink,  or  water. Treatment of infections using antibiotics, where often the use of antibiotics is not achieved on the therapeutic target  due  to  lack  of  patient  compliance  in  taking  antibiotics,  will  cause  new  problems,  namely  problems related to antibiotic resistance. Papaya leaf is a plant originating from the Caricaceae family which, based on studies, has been reported to have antimicrobial, antidiabetic, and immunomodulatory effects. The purpose of this  study  was  to  examine  the  antibacterial  potential  of  ethanol  extract  of  papaya  leaves  ( Carica papaya Linn.) against Salmonella typhi bacteria. This research method uses the agar diffusion method (Kirby-Bauer) with  various  concentrations  to  determine  the  minimum  inhibitory  concentration  (MIC)  and  the  streaking method to determine the minimum killing concentration (MBC). The minimum inhibitory concentration was obtained  at  a  concentration  of  3.125  mg/mL  with  an  inhibitory  zone  diameter  of  6.70  ±  0.20  mm  and  a minimum killing concentration of 50 mg/mL. The index activity value at a concentration of 300 mg/mL was 0.688  ±  0.05.  So  it  can  be  concluded  that  the  ethanol  extract  of  papaya  leaves  has  potential  antibacterial activity against Salmonella typhi bacteria.
Keywords : Carica papaya Linn., antibacterial, MIC, MBC, Salmonella typhi

## I. PENDAHULUAN

## 1. Latar Belakang
Penyakit  infeksi  terutama  pada  infeksi  yang  disebabkan  organisme  merupakan  masalah utama disetiap belahan dunia yang menjadi tantangan terbesar dalam kelangsungan hidup manusia  (Morens  dkk.,  2004).  Infeksi  bakteri  pada  anak-anak  sering  terjadi  yaitu  infeksi bakteri Salmonella typhi yang dapat menyebabkan beberapa penyakit seperti diare maupun demam tifoid. Salmonella sp adalah bakteri berflagel, Gram negative yang mampu menular melalui  makanan  dan  air  (Mathur  dkk.,  2012).  Pengobatan  infeksi  sering  kali  diberikan penggunaan  terapi  antibiotic  namun  kepatuhan  yang  kurang  pada  pasien  menyebabkan kelalaian pengobatan sehingga cenderung menimbulkan permasalahan baru yaitu ancaman terjadinya  resistensi  antibiotik.  Ancaman  signifikan  terhadap  resistensi  antibiotic  yaitu kemampuan  bakteri  melawan  efek  antibiotic  yang  awalnya  sensitif  menjadi  resisten  atau tidak memberikan efek (Adedeji, 2016).  Papaya ( Carica papaya Linn.) merupakan familia Caricaceae.  Tanaman  ini  dikenal  memiliki  batang  yang  lunak  dan  lemah,  biasanya  tidak bercabang,  menghasilkan  getah  putih  dengan  bentuk  daun  yang  besar  dan  bertangkai panjang. Secara tradisional daun papaya telah banyak digunakan untuk pengobatan seperti demam  berdarah,  penyakit  kuning,  immunomodulator  dan  antimikroba  (Yogiraj  dkk., 2014).  Berdasarkan  studi  lain  telah  dilaporkan  aktivitas  antikanker,  antiinflamasi, antidiabetes  dan  antivirus  dari  daun  papaya  (Singh  dkk.,  2020).  Kandungan  nutrisi  daun papaya  telah  dilaporkan  mengandung  beberapa  vitamin  seperti ascorbic  acid (16,29) , thiamin (0.94) ,  riboflavin (0,13)  dan  hasil  skrining  fitokimia  menunjukkan  kandungan senyawa  yang  positif  yaitu  saponin,  glokosida,  dan  alkaloid  (Ayoola  &  Adeyeye,  2010). Dimasyarakat  daun  papaya  banyak  digunakan  sebagai  makanan  dalam  kehidupan  sehari- hari  baik  sebagai  beberapa  olahan  sayuran  maupun  sebagai  rebusan  (lalapan)  (Nasri, Kaban,  Gurning,  dkk.,  2022).  Sehingga  peneliti  tertarik  untuk  mengkaji  aktivitas antibakteri  ekstrak  etanol  daun  papaya  terhadap  pertumbuhan  bakteri Salmonella  typhi . Dengan tujuan dan harapan dapat memberikan sumbangan informasi ilmiah manfaat dalam penggunaan daun papaya dikehidupan sehari-hari.

## 2. Perumusan Masalah
Rumusan adalah dalam penelitian ini adalah :
1. Apakah  ekstrak  etanol  daun  papaya  berbagai  variasi  konsentrasi  memiliki  potensi antibakteri dalam menghambat dan membunuh pertumbuhan bakteri Salmonella typhi ?
2. Berapakah  konsentrasi  hambat  minimum  (KHM)  dan  konsentrasi  bunuh  minimum (KBM) ekstrak etanol daun papaya yang memiliki potensi antibakteri terhadap bakteri Salmonella typhi ?

## 3. Tujuan Penelitian
Tujuan penelitian ini adalah:
1. Untuk  mengetahui  potensi  antibakteri  ekstrak  etanol  daun  pepaya  berbagai  variasi konsentrasi  dalam  menghambat  dan  membunuh  pertumbuhan  bakteri Salmonella typhi.
2. Untuk  mengetahui  pada  konsentrasi  berapa  ekstrak  etanol  daun  papaya  mampu menghambat dan membunuh pertumbuhan bakteri Salmonella typhi .

## 4. Manfaat Penelitian
Manfaat  dari  penelitian  ini  adalah  memberikan  informasi  ilmiah  kepada  masyarakat mengenai  potensi  antibakteri ekstrak  etanol  daun  pepaya  ( Carica  papaya Linn.)  terhadap pertumbuhan  bakteri Salmonella  typhi yang  dimana  daun  papaya  sering  dikonsumsi
Muhammad  M,  Nasri,,  Estefania  Kaban    V,  Satria  D,  Cintya  H  :  Antibacterial  Potential  Ethanol Extract Of Papaya Leaves ( Carica papaya Linn.) Towards Salmonella typhi
didalam kehidupan sehari-hari baik diolah menjadi olahan sayuran maupun hanya sebagai rebusan (lalapan).

## II. METODE Tahapan Penelitian
Pengambilan dan Persiapan Sampel Daun Pepaya ( Carica papaya Linn.)
Sampel  yang  digunakan  merupakan  sampel  daun  papaya  tua  yang  dipanen  dari  kebun papaya yang terdapat di Namorambe, Delitua, Sumatera Utara. Sampel yang telah dipanen kemudian  di  cuci  bersih  dibawah  air  mengalir  kemudia  ditiriskan.  Selanjutnya  dilakukan perajangan  pada  sampel  dan  dikeringan  dilemari  pengering  pada  suhu  40ᵒC-50ᵒC  sampai didapatkan daun papaya kering. Daun papaya dinyatkan kering apabila daun diremas akan menunjukkan  kerapuhan  dan  hancur  menjadi  serbuk.  Kemudian  simplisia  daun  papaya kering di blender hingga menjadi serbuk (Nasri, Kaban, Gurning, dkk., 2022).
Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Pepaya ( Carica papaya Linn.)
Metode  pembuatan  ekstrak  etanol  daun  papaya  dengan  menggunakan  metode  maserasi. Sebanyak 300 gram serbuk simplisia daun papaya direndam dengan 2250 mL etanol 96% (pa)  selama  5  hari  dan  disimpan  pada  tempat  yang  gelap  dengan  sesekali  dilakukan pengadukan.  Kemudian  dilakukan  penyaringan  dan  ampas  dimaserasi  ulang  dengan menambahkan  750  mL  etanol  96%  (pa)  dan  didiamkan  selama  2  hari.  Dilakukan penyaringan  kembali  dan  filtrat  kedua  digabung  dengan  filtart  pertama.  Dilakukan pemekatan ekstrak dengan menggunakan alat rotary vacuum evaporator sampai diperoleh ekstrak kental (Mahdiva dkk., 2021; Nasri, Kaban, Syahputra, dkk., 2022).

## Pengujian Potensi Antibakteri
Pengujian Konsentrasi Hambat Minimum (KHM)
Metode  difusi  agar  (Kirby-Bauer)  digunakan  pada  penelitian  ini  untuk  menentukan konsentrasi  hambat  minimum  ekstrak  etanol  daun  papaya  terhadap  bakteri Salmonella typhi .  Dipipet  0,1  mL  suspense  bakteri  uji  dan  dipindahkan  kedalam  cawan  petri. Kemudian  ditanam  dengan  media  MHA  sebanyak  15mL  dan  dihomogenkan. Blac  dics ditetesi dengan variasi konsentrasi sebnayak 25µL didiamkan selama 15 menit. Setelah itu diletakkan diatas permukaan media yang sudah berisi bakteri uji. Dilakukan hal yang sama pada  control  positif  dan  control  negative.  Diinkubasi  semua  perlakuan  pada  cawan  petri selama  24  jam  pada  suhu  37ᵒC.  perlakuan  dilakukan  pengulangan  sebanyak  3  kali (Harahap dkk., 2021; Haro dkk., 2020).

## Perhitungan Nilai Aktivitas Indeks
Perhitungan nilai aktivitas indeks dengan menggunakan rumus:
(Kuspradini dkk., 2019) . Analisis Data data  hasil  penelitian  dilakukan  sebanyak  3  kali  pengulangan  dan  dirata-ratakan  dengan nilai standar deviasi (SD). Data dianalisis menggunakan aplikasi SPSS IB. v.26

## III. HASIL
Hasil  uji  potensi  antibakteri  ekstrak  etanol  daun  papaya  ( Carica  papaya Linn.)  terhadap bakteri Salmonella typhi dapat dilihat pada Tabel  1. Adanya pembentukan diameter zona hambat disekitar blanc dics menunjukkan adanya aktivitas antibakteri  (Retnaningsih dkk., 2019).
Muhammad  M,  Nasri,,  Estefania  Kaban    V,  Satria  D,  Cintya  H  :  Antibacterial  Potential  Ethanol Extract Of Papaya Leaves ( Carica papaya Linn.) Towards Salmonella typhi
Tabel 1. Data nilai diameter zona hambat terhadap variasi konsentrasi
Konsentrasi (mg/mL) Diameter Zona Hambat (mm) P1 P2 P3 X ± SD Kategori 300 11,6 11,7 11,8 11,70 ± 0,10 * Kuat 200 11,3 11,2 11,2 11,23 ± 0,06 * Kuat 100 10,6 10,6 10,4 10,53 ± 0,12 * Kuat 50 9,2 9,0 9,1 9,10 ± 0,10 * Sedang 25 8,5 8,6 8,3 8,47 ± 0,15 * Sedang 12,5 8,0 7,9 8,1 8,00 ± 0,10 * Sedang 6,25 7,2 7,0 7,2 7,13 ± 0,12 * Sedang 3,125 6,9 6,5 6,7 6,70 ± 0,20 Sedang K- 6,0 6,0 6,0 6,00 ± 0,00 Tidak ada aktivitas K+ 17,2 16,8 17,0 17,00 ± 0,20 * kuat Keterangan:  K- (kontrol -)  : DMSO
K+ (Kontrol +) : Amoxicillin antibiotic disc 30 mcg *sig P<0,05 : terdapat perbedaan signifikan antara perlakuan dengan K- & K+ Pembentukkan diameter zona hambat disekitar blac disc disebabkan karena adanya variasi konsentrasi pada masing-masing blanc dics . Hal ini disebabkan karena adanya proses daya difusi  dari blanc  dics ke  permukaan  media  karena  adanya  perbedaan  tekanan  osmosis antara  konsentrasi  dengan  media  (Firdaus,  2014;  Fitriana,  2010).  Diameter  zona  hambat yang terbentuk dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Diameter zona hambat ekstrak etanol daun papaya terhadap bakteri Salmonella typhi
Gambar 2. Grafik diameter zona hambat variasi konsentrasi ekstrak etanol daun papaya terhadap bakteri Salmonella typhi 0 5 10 15 20 300 mg/mL 200 mg/mL
100 mg/mL 50 mg/mL 25 mg/mL 12,5 mg/mL 6,25 mg/mL 3,125 mg/mL K- K+
D iamet er z o n a h amb at ( mm) Variasi Konsentrasi Uji Grafik Diameter Zona Hambat terhadap bakteri Salmonella typhi P1 P2 P3 X ± SD 300 200 100 50 25 12,5 6,25 3,125 K+ K-
Muhammad  M,  Nasri,,  Estefania  Kaban    V,  Satria  D,  Cintya  H  :  Antibacterial  Potential  Ethanol Extract Of Papaya Leaves ( Carica papaya Linn.) Towards Salmonella typhi
Tabel 2. Perhitungan nilai aktivitas indeks
Konsentrasi (mg/mL) Diameter Zona Hambat (mm) Aktivitas Indeks X ± SD K+ 300 11,70 ± 0,10 17,00 ± 0,20 0,688 ± 0,05 200 11,23 ± 0,06 0,660 ± 0,03 100 10,53 ± 0,12 0,619 ± 0,06 50 9,10 ± 0,10 0,535 ± 0,05 25 8,47 ± 0,15 0,498 ± 0,07 12,5 8,00 ± 0,10 0,470 ± 0,05 6,25 7,13 ± 0,12 0,419 ± 0,06 3,125 6,70 ± 0,20 0,394 ± 0,10 K- 6,00 ± 0,00 0,352 ± 0,00
Penentuan  kadar  bunuh  minimum  dengan  menggunakan streaking  method dari  zona hambat yang terbentuk dapat dilihat pada Tabel 3. Dari hasil tersebut dapat dilihat bahwa masih  adanya  pertumbuhan  bakteri  pada konsentrasi  3,125  mg/mL  hingga  konsentrasi  50 mg/mL.  Namun  pada  konsentrasi  100  mg/mL  tidak  terlihat  adanya  pertumbuhan  bakteri pada media yang digores.  Zona hambat yang di cuplik kemudian di goreskan pada media baru menunjukkan tidak adanya pertumbuhan bakteri dikarenakan ekstrak atau konsentrasi uji  tidak  hanya  menghambat  pertumbuhan  bakteri  pada  zona  tersebut  namun  juga membunuh pertumbuhan bakteri hingga terjadi lisis sel.

## IV. KESIMPULAN
1. Ekstrak  etanol  daun  pepaya  ( Carica  papaya Linn.)  memiliki  potensi  antibakteri terhadap bakteri Salmonella typhi ditnadai dengan adanya pembentukan zona hambat disekitar blanc disc dengan kategori kuat pada konsentrasi 300 mg/mL.
2. Konsentrasi hambat minimum pada ekstrak etanol daun papaya pada konsentrasi 3,125 mg/mL  dengan  diameter  zona  hambat  sebesar  6,70  ±  0,20  dan  konsentrasi  bunuh minimum  pada  konsentrasi  100  mg/mL  yang  ditandai  dengan  tidak  adanya pertumbuhan bakteri pada media yang digores.

## DAFTAR PUSTAKA
Adedeji,  W.  A.  (2016).  THE  TREASURE  CALLED  ANTIBIOTICS. Annals  of  Ibadan Postgraduate Medicine , 14 (2), 56–57.
Ayoola,  P.  B.,  &  Adeyeye,  A.  (2010).  Phytochemical  and  nutrient  evaluation  of  Carica papaya (pawpaw) leaves. Ijrras , 5 (3), 325–328.
Dewi,  M.  A.,  Ratnawati,  J.,  &  Sukmanengsih,  F.  (2015).  Aktivitas  Antimikroba  Ekstrak Etanol Dan Fraksi Pelepah Aren (Arenga Pinnata Merr) Terhadap Propionibacterium Acnes dan Staphylococcus Aureus. Kartika: Jurnal Ilmiah Farmasi , 3 (1), 43–48. Dwicahyani,  T.,  Sumardianto,  S.,  &  Rianingsih,  L.  (2018).  UJI  BIOAKTIVITAS EKSTRAK  TERIPANG  KELING  Holothuria  atra  SEBAGAI  ANTIBAKTERI Staphylococcus  aureus  dan  Escherichia  coli. Jurnal  Pengolahan  Dan  Bioteknologi Hasil Perikanan , 7 (1), 15–24. Firdaus,  T.  (2014). Efektivitas  ekstrak  bawang  dayak  (eleutherine  palmifolia)  dalam menghambat pertumbuhan bakteri staphylococcus aureus . Fitriana,  F.  (2010). Pengaruh  Metode  Ekstraksi  Terhadap  Aktivitas  Antimikroba  Ekstrak Metanol  Daun  Jati  (Tectona  grandis  LF) [PhD  Thesis].  Universitas  Islam  Negeri Alauddin Makassar.
Muhammad  M,  Nasri,,  Estefania  Kaban    V,  Satria  D,  Cintya  H  :  Antibacterial  Potential  Ethanol Extract Of Papaya Leaves ( Carica papaya Linn.) Towards Salmonella typhi
Handayani,  K.,  Putri,  A.  E.,  &  Martha,  R.  D.  (2020).  UJI  AKTIVITAS  ANTIBAKTERI FRAKSI  BATANG  PEPAYA  (Carica  Papaya  Linn.)  TERHADAP  BAKTERI Staphylococcus Aureus. JOPS (Journal Of Pharmacy and Science) , 4 (1), 21–30.
Harahap,  U.,  Dalimunthe,  A.,  Hertiani,  T.,  Muhammad,  M.,  Nasri,  &  Satria,  D.  (2021). Antioxidant  and  antibacterial  activities  of  ethanol  extract  of  Vernonia  amygdalina Delile. Leaves. AIP Conference Proceedings , 2342 (1), 080011.
Haro,  G.,  Iksen,  I.,  &  Nasri,  N.  (2020).  Identification,  characterization  and  antibacterial potential  of  probiotic  lactic  acid  bacteria  isolated  from  naniura  (A  traditional  batak fermented food from carp) against Salmonella typhi. Rasayan Journal of Chemistry , 13 (1), 464–468.
Hati,  A.  K.,  Dyahariesti,  N.,  &  Yuswantina,  R.  (2019).  Penetapan  Kadar  Flavonoid  Dan Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Sereh  (Cymbopogon  nardus)  Dan  Temu  Kunci (Boesnbergia  pandurata  Roxb)  Terhadap Bakteri  Streptococcus  Mutans. Indonesian Journal of Pharmacy and Natural Product , 2 (2).
Kuspradini, H., Putri, A. S., Egra, S., & YANTI, Y. (2019). In vitro antibacterial activity of essential  oils  from  twelve  aromatic  plants  from  East  Kalimantan,  Indonesia. Biodiversitas Journal of Biological Diversity , 20 (7).
Mahdiva,  A.  S.,  Febriani,  H.,  &  Rahmadina.  (2021).  UJI  AKTIVITAS  ANTIBAKTERI GETAH  JARAK  PAGAR  (Jatropha  curcas  L.)  TERHADAP  PERTUMBUHAN BAKTERI  Staphylococcus  epidermidis. BEST  Journal  (Biology  Education,  Sains and Technology) , 4 (2), 109–114. https://doi.org/10.30743/best.v4i2.4413 Mathur,  R.,  Oh,  H.,  Zhang,  D.,  Park,  S.-G.,  Seo,  J.,  Koblansky,  A.,  Hayden,  M.  S.,  & Ghosh, S. (2012). A Mouse Model of Salmonella Typhi Infection. Cell , 151 (3), 590– 602. https://doi.org/10.1016/j.cell.2012.08.042
Nasri,  N.,  Kaban,  V.  E.,  Gurning,  K.,  Syahputra,  H.  D.,  &  Satria,  D.  (2022).  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun  Pepaya  (Carica  papaya  Linn.)  Terhadap  Bakteri Pseudomonas  aeruginosa. INSOLOGI:  Jurnal  Sains  Dan  Teknologi , 1 (3),  252–259. https://doi.org/10.55123/insologi.v1i3.438
Nasri,  N.,  Kaban,  V.  E.,  Syahputra,  H.  D.,  &  Satria,  D.  (2022).  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak  Etanol  Daun  Alpukat  (Persea  americana  Mill)  Terhadap  Escherichia  coli, Salmonella typhi, dan Pseudomonas aeruginosa. Herbal Medicine Journal , 5 (1), 13– 19.
Retnaningsih,  A.,  Primadiamanti,  A.,  &  Febrianti,  A.  (2019).  UJI  DAYA  HAMBAT EKSTRAK  ETANOL  DAUN  UNGU  (Graptophyllum  pictum  (L.)  GRIFF) TERHADAP BAKTERI Staphylococcus epidermidis DAN BAKTERI Propionibacterium acnesPENYEBAB JERAWAT DENGAN METODE CAKRAM. Jurnal Analis Farmasi , 4 (1).
Singh, S. P., Kumar, S., Mathan, S. V., Tomar, M. S., Singh, R. K., Verma, P. K., Kumar, A., Kumar, S., Singh, R. P., & Acharya, A. (2020). Therapeutic application of Carica papaya  leaf  extract  in  the  management  of  human  diseases. DARU  Journal  of Pharmaceutical  Sciences , 28 (2),  735–744.  https://doi.org/10.1007/s40199-020- 00348-7.
Accepted Date Revised Date Decided Date Accepted to Publish 24 Juli 2022 30 Juli  2022 2 Agustus 2022 Ya