## ISSN: 0215-7950
*Alamat penulis korespondensi: Jurusan Agroekoteknologi, Universitas Lambung Mangkurat, Indonesia. Jalan Ahmad Yani Km. 36 Banjarbaru 70714. Tel/Faks: +62511-4772254, Surel: noorkomala.sari@ulm.ac.id.
Volume 17, Nomor 5, September 2021 Halaman 210–215 DOI: 10.14692/jfi.17.5. 210–215

## KOMUNIKASI SINGKAT
Aktivitas Antagonistik Cendawan Endofit Asal Bunga Bawang Dayak ( Eleutherine bulbosa (Mill.) Urb.) terhadap Fusarium sp. yang Menginfeksi Tanaman Cabai
Antagonistic Activity of Endophytic Fungi from Dayak Onions’ Flower ( Eleutherine bulbosa (Mill.) Urb.) Against Fusarium sp. Infecting Chili Plant
Noor Laili Aziza, Noorkomala Sari * , Sofiya Irsalina Universitas Lambung Mangkurat, Banjarmasin

## ABSTRAK
Penyakit layu yang disebabkan oleh Fusarium spp. merupakan penyakit penting dalam budi daya cabai. Salah satu cara potensial untuk mengendalikan penyakit tanaman ialah menggunakan agens hayati seperti cendawan endofit dari tanaman obat. Bawang dayak termasuk tanaman obat yang bersifat antibakteri,  anticendawan,  antiinflamasi,  dan  antioksidan.  Penelitian  bertujuan  menentukan  aktivitas antagonistik  cendawan  endofit  yang  berasal  dari  bunga  bawang  dayak  terhadap  cendawan  patogen Fusarium spp.  Sebanyak  tujuh  belas  isolat  cendawan  endofit  berhasil  diperoleh  dari  bunga  bawang dayak, yaitu isolat EnA, EnB, EnC, EnD, EnE, EnF, EnG, EnH, EnI, EnJ, EnK, EnL, EnM, EnN, EnO, EnP, dan EnQ. Lima dari tujuh belas isolat, yaitu  EnA, EnF, EnI, EnJ, dan EnK digunakan untuk uji antagonisme terhadap Fusarium spp. dengan metode dual kultur.   Penghambatan pertumbuhan koloni Fusarium spp. yang disebabkan oleh isolat EnA, EnF, EnI, EnJ, dan EnK berturut-turut sebesar 67.6%, 53.15%, 77.25%, 70,42% dan 67.1%.
Kata kunci: agens hayati, cendawan endofit, metode dual kultur, penyakit layu, uji antagonisme

## ABSTRACT
Wilt disease caused by Fusarium spp. is an important problem in chili cultivation. Meanwhile, use of biological agents such as endophytic fungi from medicinal plants have the potential to control plant diseases.  Dayak onions are medicinal plants that known to have antibacterial, anti-fungal, anti- inflammatory, and antioxidant properties. Therefore, a study was conducted to determine the antagonistic activity of endophytic fungi isolated from Dayak onion flowers against Fusarium spp. A total of seventeen isolates of endophytic fungi were obtained from the flower of Dayak onion flowers, namely EnA, EnB, EnC, EnD, EnE, EnF, EnG, EnH, EnI, EnJ, EnK, EnL, EnM, EnN, EnO, EnP, and EnQ. Five of the seventeen isolates, i.e.  EnA, EnF, EnI, EnJ, and EnK were further examined in antagonistic test against Fusarium spp. using dual culture method. Inhibition of colony growth of Fusarium spp. caused by isolates EnA, EnF, EnI, EnJ, and EnK were 67.6%, 53.15%, 77.25%, 70.42% and 67.1%, respectively.
Keywords: antagonistic test, biological control agent, dual culture method, endophytic fungi, wilt disease
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Aziza et al.
Salah satu penyakit yang sering menyerang tanaman cabai ialah layu Fusarium yang disebabkan oleh Fusarium spp dan menurunkan produksi cabai (Nurzannah et al . 2014). Para petani umumnya mengendalikan penyakit ini menggunakan bahan kimia secara terus menerus (Sarwono et al . 2013), sehingga perlu dicari alternatif pengendalian yang aman dan ramah lingkungan seperti penggunaan biopestisida menggunakan  cendawan  endofit.  Cendawan endofit  adalah  cendawan  yang  terdapat  di dalam sistem jaringan tanaman sehat. Cara mendapatkan  cendawan  endofit  salah  satu dengan mengisolasi cendawan tersebut dari batang, daun, akar, dan bunga yang sehat (Strobel 2003; Reckow et al . 2016) terutama pada tanaman berpotensi obat (Harahap et al. 2017). Di Pulau Kalimantan, tanaman yang diketahui mempunyai potensi untuk dijadikan obat-obatan yaitu tanaman bawang dayak ( Eleutherina bulbossa Mill. Urb.). Bawang dayak termasuk tanaman yang bersifat antibakteri,  anticendawan,  antiinflamasi, antioksidan, antiamuba, dan analgesik (Do et al . 2014) dan bunga bawang dayak mengandung antioksidan, fenol, dan flavonoid sebesar 33.8%
(Shi et al . 2019). Penelitian bertujuan untuk menentukan aktivitas antagonis cendawan endofit  pada  bunga  bawang  dayak  terhadap cendawan patogen Fusarium spp. Cendawan  endofit  diisolasi  dari  potongan mahkota bunga bawang dayak sehat berukuran 1 × 1 cm yang telah disterilkan dengan etanol 70% selama 5 menit dan NaOCl 2.5% selama dua menit. Potongan tersebut kemudian dibilas akuades steril sebanyak tiga kali dan dikeringkan di atas kertas saring steril, dan ditumbuhkan dalam medium agar-agar dekstrosa kentang (ADK). Cendawan yang tumbuh dimurnikan dan diinkubasi selama tiga hari, selanjutnya dilakukan isolasi single spore . Pada pengujian ini, didapatkan tujuh belas isolat cendawan endofit pada bunga bawang dayak, yaitu isolat EnA, EnB, EnC, EnD, EnE, EnF, EnG, EnH, EnI, EnJ, EnK, EnL, EnM, EnN, EnO, EnP, dan EnQ. Fusarium sp. (FuSS) yang diujikan merupakan hasil isolasi dari tanaman cabai yang bergejala layu. Patogen masuk ke dalam
jaringan  pembuluh  xilem  melalui  jaringan akar dan secara cepat mengkolonisasi daerah infeksi sehingga menyebabkan gejala layu yang khas (Wongpia dan Lomthaisong 2010). Secara mikroskopis cendawan ini memiliki konidium makro seperti bulan sabit, tangkai panjang, dan tidak bercabang. Fusarium spp. memiliki ciri konidium terbentuk pada konidiofor yang monofialid, panjang dan tidak bercabang (Sutejo et al . 2008). Ketujuh belas isolat endofit dan cendawan patogen Fusarium sp. diuji kecepatan pertumbuhan miseliumnya . Pada hari keenam setelah inkubasi masing-masing isolat cendawan diukur jari-jari miseliumnya. Salah satu kemampuan kompetisi yang harus  dimiliki  oleh  cendawan  endofit  ialah kemampuan kompetisi ruang, sehingga hanya  cendawan  endofit  yang  memiliki pertumbuhan miselia tercepatlah yang akan diuji lanjut pada pengujian antagonis. Salah satu faktor yang penting dalam menentukan potensi endofit sebagai agens hayati terhadap patogen ialah kecepatan pertumbuhan koloni cendawan (Djafaruddin 2000). Pertumbuhan koloni ini berperan penting dalam siklus hidup cendawan karena konidium sebagai alat reproduksi aseksual, penyebaran, dan ketahanan bergantung pada faktor lingkungan (Elbert et al . 2007).
Pada 6 hari setelah inokulasi (HSI) jari-jari miselium cendawan endofit EnA, EnF, EnI, EnJ, dan EnK tumbuh sebesar 4.5 cm, sedangkan isolat EnE hanya 1.25 cm. Fusarium sp. (FuSS) memiliki nilai pertumbuhan miselium yang  sama  dengan  isolat  cendawan  endofit EnO, EnH, dan EnC, yaitu 3 cm (Gambar 1). Pengujian aktivitas antagonis cendawan endofit  EnA,  EnF,  EnI,  EnJ,  dan  EnK terhadap cendawan patogen Fusarium sp. (FuSS) dilakukan dengan metode dual culture (Gambar 2). Perhitungan daya hambat dilakukan pada 3, 5, dan 7 HSI (Izzatinnisa’ et al. 2020) menggunakan rumus:
P = r1 – r2 r1

## × 100%, dengan
P, persentase daya hambat; r1, jarak pertumbuhan koloni cendawan patogen (P) pada cawan yang ditanam Fusarium spp. pada
cawan kontrol; dan r2, jarak pertumbuhan koloni cendawan patogen (P) yang tumbuh ke arah agens antagonis (A) pada cawan perlakuan.
Berdasarkan daya hambat pada uji antagonis,  lima  isolat  cendawan  endofit mempunyai aktivitas antagonis terhadap Fusarium sp. pada 3, 5, dan 7 HSI. Cendawan antagonis pada 3 HSI yang memiliki persentase daya hambat tertinggi dibandingkan dengan isolat cendawan lainnya, yaitu cendawan EnI dengan nilai daya hambat sebesar 34.7%. Namun  daya  hambat  cendawan  endofit  ini tidak berbeda nyata dengan cendawan endofit
EnJ dan EnK yang memiliki daya hambat lebih dari  20%.  Cendawan  endofit  EnA  dan  EnF menunjukkan aktivitas antagonis walaupun persentase daya hambatnya di bawah 10%. Menurut Izzatinnisa’ et al. (2020), rentang persentase daya hambat 0%–39% memiliki arti bahwa cendawan endofit yang diujikan masih berdaya hambat rendah terhadap cendawan patogen (Gambar 3).
Pada 5 HSI, lima cendawan endofit masih menunjukkan aktivitas antagonis yang rendah karena daya hambatnya berkisar antara 0% dan  39%.  Cendawan  endofit  EnI,  enJ,  dan EnK mempunyai persentase daya hambat di atas  30%,  sedangkan  cendawan  endofit  EnA dan EnF mempunyai persentase daya hambat di atas 20% (Gambar 3).
Pada 7 HSI, daya hambat isolat EnI, EnJ, dan EnK lebih tinggi dan berbeda nyata dengan isolat EnA dan EnF (Gambar 3). Perbedaan daya hambat dapat disebabkan oleh produksi senyawa metabolit sekunder yang dihsailkan cendawan  endofit  (Vinale et al . 2009). Selain itu, faktor lainnya ialah kemampuan berkompetisi mengambil nutrisi, oksigen, dan ruang (Yulianto 2014). Rentang persentase daya hambat 40%–69% berarti bahwa cendawan endofit memiliki daya hambat, sedangkan daya hambat 70%–100% termasuk kategori tinggi (Izzatinnisa’ et al. 2020).
Mekanisme penghambatan cendawan endofit  bisa  terjadi  dengan  cara  parasitisme, kompetisi, dan antibiotis (Gao et al . 2010).
Gambar  1    Jari-jari  pertumbuhan  miselium  tujuh  belas  isolat  cendawan  endofit  dan  isolat Fusarium spp. (FuSS) yang tumbuh pada kulrur murni pada 6 hari setelah inokulasi.
Gambar 2  Pengukuran persentase daya hambat metode dual culture dalam menentukan aktivitas  antagonisme  cendawan  endofit. a, Cawan kontrol; b, Cawan perlakuan; r, Jarak pertumbuhan koloni cendawan patogen (P) pada cawan yang ditanam Fusarium spp. pada cawan kontrol; dan r2, Jarak pertumbuhan koloni cendawan patogen (P) yang tumbuh ke  arah  cendawan  endofit  (A)  pada  cawan perlakuan.
Jari-jari miselium (mm) Isolat cendawan endofit 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 EnA EnB EnC EnD EnE EnF EnG EnH EnI EnJ EnK EnL EnM EnN EnO EnP EnQ FuSS a b
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Aziza et al.
Mekanisme penghambatan ini dapat dilihat dari pola cendawan endofit dan cendawan patogen Fusarium spp. pada yang ditanam pada cawan petri yang sama (Gambar 4).
Isolat  cendawan  endofit  EnA  dan  EnI menunjukkan mekanisme kompetisi ruang. Menurut Skidmore dan Dickinson (1976) jika  miselium  cendawan  endofit  lebih  cepat memenuhi cawan dan menutupi patogen maka terjadilah kompetisi ruang. Pertumbuhan Jika pertumbuhan cendawan endofit sangat cepat, maka perkembangan patogen akan terdesak serta tidak mendapatkan ruang tumbuh dan tidak dapat berkembang, menyebabkan terjadinya kompetisi ruang dan nutrisi (Kloeppe et al . 1999). Pada pengamatan uji antagonis isolat EnF terhadap Fusarium spp., mekanisme yang terjadi ialah antibiotis karena terbentuk zona bening di antara pertumbuhan keduanya.
Faktor terbentuknya zona bening ini dikarenakan produksi metabolit sekunder dari cendawan  endofit  dan  adanya  konsentrasi senyawa antibiotik (Zuhria et al 2017). Isolat EnJ menunjukkan mekanisme antibiotis yang dicirikan dengan terbentuknya zona terang. Zona terang ini terbentuk karena kehadiran senyawa penghambat pertumbuhan cendawan yang disekresikan oleh cendawan endofit.  Senyawa  fenol,  flavonoid,  dan antioksidan ditemukan sangat tinggi pada bunga bawang dayak dan karena kemampuan endofit  yang  mampu  menghasilkan  bioaktif senyawa yang sama dengan inangnya (Shi et al . 2019), maka diduga senyawa metabolit sekunder tersebut juga disintesis oleh cendawan EnJ untuk menghambat pertumbuhan Fusarium spp. Mekanisme yang terjadi pada isolat cendawan  endofit  EnK  ialah  antibiotis
4. 65 a 25. 625 ab 67. 6 b 6. 0725 a 20. 25 ab 53. 15 a 34. 7 b 38. 575 c 77. 25 b 20. 075 ab 33. 55 bc 70. 425 b 30. 8 b 30. 55 ab c 67. 1 b 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 3 5 7 Daya hambat (%)

## Hari setelah inokulasi
Gambar 3  Daya hambat cendawan endofit yang berasal dari bunga bawang dayak terhadap Fusarium sp. (FuSS).  ,  EnA;  , EnF;  , EnI;  , EnJ; dan  , EnK. Angka yang diikuti oleh huruf yang sama menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata berdasarkan uji lanjut DMRT dengan taraf nyata 5%.
Gambar 4  Antagonisme beberapa cendawan endofit bunga bawang dayak terhadap Fusarium sp. (FuSS). pada 7 hari setelah inokulasi.
EnA EnF EnI
EnJ
EnK
karena cendawan ini memproduksi enzim yang berwarna merah pada bagian yang bersinggungan dengan cendawan patogen yang diduga digunakan untuk melawan patogen. Selain antibiotis, isolat cendawan endofit  EnK  juga  mempunyai  mekanisme penghambatan parasitisme karena cendawan ini mampu hidup di atas permukaan cendawan patogen. Gao et al . (2010) mengemukakan hifa  cendawan  endofit  yang  tumbuh  di  atas permukaan hifa patogen termasuk mekanisme penghambatan yang memanfaatkan niche atau hiperpredasi.
Berdasarkan pengujian-pengujian yang telah dilakukan, maka isolat cendawan endofit EnA dan EnJ yang berasal dari bunga bawang dayak mempunyai aktivitas antagonis yang berpotensi untuk dijadikan biopestisida guna mengendalikan patogen Fusarium sp. (FuSS), penyebab layu pada tanaman cabai terutama. Perlu dilakukan pengekstrakkan metabolit sekunder untuk menghindari kondisi virulensi yang tidak stabil serta untuk menjaga keamanan aplikasi di alam.

## DAFTAR PUSTAKA
Djafaruddin. 2000. Dasar-dasar Pengendalian Penyakit Tanaman . Jakarta (ID): PT Bumi Aksara. Do QD, Angkawijaya AE, Tran-Nguyen PL, Huynh LH, Soetaredjo FE, Ismadji S,  Ju  YH.  2014.  Effect  of  extraction solvent on total phenol content, total flavonoid content, and antioxidant activity of Limnophila aromatic . J Food Drug Anal. 22(3):296–302. DOI: https://doi. org/10.1016/j.jfda.2013.11.001.
Elbert W, Taylor PE, Andreae MO, Pöschl U. 2007. Contribution of fungi to primary biogenic aerosols in the atmosphere: Wet and dry discharged spores, carbohydrates and inorganic ions. Atmos Chem Phys .
7(17) : 4569–4588. DOI: https://doi. org/10.5194/acp-7-4569-2007. Gao FK, Dai CC, Liu XZ. 2010. Mechanisms of fungal endophytes in plant protection against pathogens. Afr J Microbiol Res. 4(13):1346–1351.
Harahap I, Elsie, Nurjanah I. 2017. Isolasi dan  seleksi  cendawan  endofit  dari tanaman betadin ( Jatropha  multifida L.) dan potensinya sebagai antimikroba. J Photon. 7(2):109–114. DOI: https://doi. org/10.37859/jp.v7i02.514 .
Kloeppe JW, Rodriguez-Kabana R, Zehnder AW, Murphy JF, SikoraE, Fernandez C. 1999. Plant root-bacterial interactions in biological control of soilborne diseases and  potential  extension  to  systemic  and foliar diseases. Aus Plant Pathol. 28:21–26. DOI: https://doi.org/10.1071/AP99003.
Izzatinnisa’, Utami U, Mujahidin A. 2020.
Uji  antagonisme  beberapa  fungi  endofit pada tanaman kentang terhadap Fusarium oxysporum secara in vitro . JRBA. (2)1:18– 25. DOI: https://doi.org/10.26740/jrba. v2n1.p18-25 . Nahdah F, Sari N, Rizali A, Wahdah R. 2020. Antagonisme  fungi  endofit  daun  jarak pagar ( Jatropha curcas ) terhadap Fusarium oxysporum C2 penyebab busuk umbi pada bawang merah in Vitro. Agrotechnol Res J. 4(1):47-53. DOI: https://doi.org/10.20961/ agrotechresj.v4i1.41351.
Nurzannah SE, Lisnawita, Darma B. 2014. Potensi  cendawan  endofit  asal  cabai sebagai agens hayati untuk mengendalikan layu fusarium ( Fusarium oxysporum ) pada cabai dan interaksinya. JAET. (2)3:1230– 1238.
Reckow V, Widayat W, Rijai L. 2016. Jamur  endofit  dari  umbi  bawang  dayak ( Eleutherine palmifolia Merr.). Di dalam: Prosiding Seminar Nasional Kefarmasian Ke-4 ; 2016 Jan 11; Samarinda (ID): Universitas  Mulawarman.  hlm  377–383. DOI: https://doi.org/10.25026/mpc. v4i1.208.
Sarwono E, Nurdin M, Prasetyo J. 2013. Pengaruh kitosan dan Trichoderma sp. terhadap keparahan penyakit antraknosa ( Colletotrichum capsici (Syd.) Butl. Et Bisby) pada buah cabai ( Capsicum annuum L.). J Agrotek Tropika. 1(3):336– 340.  DOI:  http://dx.doi.org/10.23960/jat. v1i3.2061.
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Aziza et al.
Shi P, Du W, Wang Y, Teng X, Chen X, Ye L. 2019. Total phenolic, flavonoid content, and  antioxidant  activityof  bulbs,  leaves, and flowers made from Eleutherine bulbosa (Mill.) Urb. Food Sci Nutr. 7(1):148–154.
DOI: https://doi.org/10.1002/fsn3.834. Strobel GA. 2003 . Endophytes as sources of bioactive products. Microbes Infect. 5(6):535–544. DOI: https://doi. org/10.1016/S1286-4579(03)00073-X. Sutejo AM, A. Priyatmojo, A. Wibowo. 2008. Identifikasi  morfologi  beberapa  spesies jamur fusarium. JPTI. 14(1):7–13. Vinale F, Ghisalberti EL, Sivasithamparam K, Marra R, Ritieni A, Ferracane R, Woo
S,  Lorito  M.  2009.  Factors  affecting  the production of Trichoderma harzianum secondary metabolites during the interaction with different plant pathogens. Lett  Appl  Microbiol.  48(6):705–711.
DOI: https://doi.org/10.1111/j.1472- 765X.2009.02599.x.
Wongpia A, Lomthaisong K. 2010. Changes in  the  2DE  protein  profiles  of  chilli pepper ( Capsicum annum ) leavesin response to Fusarium oxysporum infection. Sci Asia. 36(4):259– 270. DOI: https://doi.org/10.2306/ scienceasia1513-1874.2010.36.259 . Yulianto E. 2014. Evaluasi potensi beberapa jamur agens antagonis dalam menghambat patogen Fusarium sp. pada tanaman jagung ( Zea mays L.) [tesis]. Bengkulu (ID): Universitas Bengkulu. Zuhria SA, Djauhari S, Muhibuddin A. 2017. Exploration  and  antagonistic  test  of endophytic fungi from soybean ( Glycine max L.  Merr)  with  different  resistance to Sclerotium rolfsii. The Journal of Experimental  Life  Science.  6(2):101– 105. DOI: https://doi.org/10.21776/ ub.jels.2016.006.02.08.