## Pengaruh Letak Posisi Eksplan dan Sitokinin Pada Perkecambahan Biji Manggis (Garcinia mangostana L.) Lokal Aceh Secara in-Vitro
The Influence of Position of Explants and Cytokinin At Germination of Local Mangosteen Seeds (Garcinia mangostana L.) in Aceh by In-Vitro

## Rd. Selvi Handayani, Maisura, dan Astia Rizki
Jurusan Agroteknologi Fakultas Pertanian Universitas Malikussaleh Muara Batu Lhokseumawe

## Abstrak
Untuk  meningkatkan  keragaman  genetik  manggis  harus  dilakukan  dengan  cara  bioteknologi  modern. Kultur  jaringan  pada  manggis  merupakan  hal  yang  penting  dilakukan  untuk  menunjang  program bioteknologi tanaman manggis. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui pengaruh letak posisi eksplan dan konsentrasi  Benzil  Amino  Purin  (BAP)  pada  perkecambahan  manggis  lokal  Aceh  secara  in  vitro. Penelitian ini dilaksanakan di Laboraturium Kultur Jaringan Fakultas Pertanian Universitas Malikussaleh. Penelitian  dilaksanakan  dari  bulan  Maret  sampai  dengan  bulan  Mei  2017.  Penelitian  ini  menggunakan rancangan  lingkungan  berupa  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  dua  faktor  perlakuan.    Faktor pertama adalah letak posisi eksplan yaitu letak abaksial / luka menghadap media (L1) dan adaksial / luka membelakangi  media  (L2).  Faktor  kedua  adalah  konsentrasi  BAP  0  mg/L  (B0),  2,5  mg/L  (b1),  dan  5 mg/L (B2).  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa  letak posisi eksplan berpengaruh pada perkecambahan manggis secara in vitro untuk peubah panjang tunas. Posisi eksplan yang memberi pengaruh terbaik pada pertumbuhan  kecambah  manggis  in  vitro  adalah  adaksial.  Konsentrasi  BAP  berpengaruh  pada perkecambahan  manggis  secara  in  vitro  untuk  peubah  waktu  tumbuh  tunas  dan  persentase  hidup. Konsentrasi BAP 2,5 ppm merupakan konsentrasi terbaik  untuk pertumbuhan  kecambah manggis secara in vitro. Tidak ada interaksi antara posisi eksplan dan konsentrasi BAP disemua peubah yang diamati.
Kata Kunci: Biji, eksplan, in-vitro, sterilisasi, tunas

## Abstract
The  application  of  modern  biotechnology  is  needed  in  order  to  enhance  the  genetic  diversity  of mangosteens. The application of tissue culture on mangosteens is an important thing to do to support the biotechnology  program  of  mangosteen  plants.  The  purpose  of  this  research  is  to  reveal  the  influence  of location  of  explants and  Benzylaminopurine  (BAP)  concentration  on  germination  of  local  Acehnese mangosteens  in  vitro.  This  research  was  conducted  at  the  Laboratory  of  tissue  culture  of  the  Faculty  of Agriculture, Malikussaleh University from March to May 2017. The study used an environmental design in the form of Completely Randomized Design (CRD) with two factors. The first factor is the location of explant position is abaxial (L1) and adaxial (L2) . The second factor was the concentration of BAP 0 mg / L (B0), 2.5 mg / L (b1), and 5 mg / L (B2). The results showed that the position of eksplan gave an effect on mangosteen germination in vitro for its shoot length variables. The explant positions that had the best effect  on  the  growth  of  in  vitro  mangosteen  sprouts  were  adaxial.  BAP  concentration  had  an  effect  on germination of mangosteen in vitro for its bud growth and life percentage. 2.5 ppm of BAP concentration was  the  best  concentration  for  mangosteen  seed  growth  in  vitro.  There  was  no  interaction  between eksplan position and BAP concentration in all observed variables.
Keywords: Seeds, explants, in-vitro, sterilization, buds

## Pendahuluan
Manggis  (Garcinia  mangostana  L.) merupakan  komoditas  buah  asli  Indonesia  yang mempunyai prospek sangat baik untuk
dikembangkan.  Manggis  merupakan  salah  satu buah  tropis  yang  sangat  terkenal,  dan  disebut sebagai  Queen  of  Fruits  karena  rasa  buahnya yang  lezat  dan  banyak  digemari.  Selain  itu, manggis  juga  dimanfaatkan  sebagai  obat-obatan
diantaranya  sebagai  anti  inflamasi,  anti  bakteri dan  sebagai  perlakuan  terhadap  infeksi  dan  luka (Widiastuti et al., 2013).
Produksi manggis di Provinsi Aceh pada Tahun 2012 sebesar 23.057 kuintal (Badan Pusat Statistik, 2013), dengan daerah produksi tersebar di  18  Kabupaten/Kota.  Daerah  utama  penghasil buah  manggis  di  Provinsi  Aceh  adalah Kabupaten  Aceh  Timur,  Aceh  Utara,  dan  Pidie Jaya.  Daerah  sentra  manggis  di  Aceh  kabupaten Pidie  Jaya  yang  mendapat  peringkat  ke  tiga setelah  Aceh  Timur  dan  Aceh  Utara  (Badan Pusat Statistik, 2013).
Tanaman manggis sudah dikenal
berabad-abad  yang  lalu,  namun  masih  banyak yang  belum  membudidayakannya.  Hal  ini disebabkan karena pertumbuhannya yang lambat.  Selain  itu  biji  manggis  hanya  tersedia pada  musim  tertentu  ketika  musim  berbuah  (1-2 kali  setahun).  Setiap  buah  hanya  menghasilkan 1-2  biji  yang  berukuran  besar  dan  yang  layak untuk  dijadikan  benih.  Tanaman  manggis  secara alami  berbuah  setelah  berumur  12  –  15  tahun (Ashari  dan  Sunarsih,  2006).  Pertumbuhan tanaman  manggis  yang  lambat  berkaitan  erat dengan  sistem  perakaran.  Tanaman  manggis mempunyai  akar  tunggang  yang  panjang  dan kuat,  tetapi  percabangan  akarnya  sangat  sedikit, dan  hamper  tidak  memiliki  bulu  akar.  Hal  ini menimbulkan  masalah  serius  pada  proses penyerapan air dan unsur hara dari dalam tanah.
Biji manggis bersifat apomitik, yaitu biji yang  terjadi  bukan  dari  hasil  peleburan  sel kelamin  jantan  dan  betina,  sehingga  perbaikan sifat  tidak  dapat  dilakukan  secara  generatif (melalui  persilangan  tanaman).  Salah  satu  usaha peningkatan  sistem  perakaran  manggis  adalah melalui bioteknologi modern yaitu irradiasi sinar gamma untuk meningkatkan keragaman tanaman (Qosim,  2015).  Hasil  perlakuan  irradiasi  sinar gamma  harus  dilanjutkan  dengan  perbanyakan secara  kultur  jaringan  tanaman  (in  vitro).  Oleh karena  itu,  kultur  jaringan  pada  manggis merupakan  hal  yang  penting  dilakukan  untuk menunjang bioteknologi tanaman manggis.
Kultur  jaringan  tanaman  adalah  metode mengisolasi  bagian  tanaman  (organ,  jaringan, sel,  protoplas)  dan  menumbuhkannya  dalam kondisi aseptik, sehingga bagian-bagian tanaman tersebut dapat memperbanyak diri dan
beregenerasi  menjadi  tanaman  lengkap.  Cara perbanyakan ini
memiliki kelebihan dibandingkan  perbanyakan  yang  lain  karena semua  bagian  tanaman  dapat  ditumbuhkan
menjadi  tanaman  yang  utuh.  Teknik  kultur jaringan  tanaman  juga  dapat  menghasilkan  bibit dalam  jumlah  banyak  dalam  waktu  yang  relatif singkat  dibandingkan  cara  perbanyakan  lain. Bagian tanaman yang digunakan sebagai eksplan dapat  berupa  tunas  pucuk,  potongan  batang  satu buku  (nodal  eksplan),  potongan  akar,  potongan daun dan bagian bunga (Yusnita, 2003), biji dan tunas mikro (Handayani et al., 2013).
Penanaman  manggis  in  vitro  dapat dilakukan dengan teknik perkecambahan poliembrio,  yaitu  pada  satu  biji  manggis dilakukan  proses  pembelahan  biji.  Hal  ini dilakukan untuk melihat perbedaan antara posisi eksplan  dan  untuk  memisahkan  embrio-embrio yang ada dalam satu biji. Berdasarkan penelitian sebelumnya  pada  tanaman  manggis  diketahui bahwa  dengan  adanya  variasi  potongan  biji mampu  dihasilkan  jumlah  bibit  tanaman  yang lebih banyak. Biji dapat dibelah dan ditanamkan pada  beberapa  posisi  eksplan  pada  media  (Ihsan dan Sukarmin, 2011).
Salah  satu  faktor  penentu  keberhasilan kultur  jaringan  adalah  pemberian  Zat  Pengatur Tumbuh  (ZPT).  ZPT  yang  biasa  digunakan untuk  perkecambahan  tunas  tanaman  adalah Sitokinin.  Salah  satu  golongan  sitokinin  sintetik yang biasa digunakan pada teknik kultur jaringan adalah  Benzil  Amino  Purin  (BAP).  BAP  adalah golongan  hormon  sitokinin  sintetik  yang  aktif dan  daya  rangsangnya  lebih  lama  karena  tidak mudah  dirombak  oleh  tanaman.  Selain  itu,  BAP juga merupakan jenis golongan ZPT yang sering digunakan karena paling efektif untuk merangsang pembentukan tunas, lebih stabil dan tahan  terhadap  oksidasi  serta  lebih  murah dibandingkan  jenis  sitokinin  sintetik  lainnya (George dan Sherrington (1984) dalam Andaryani, 2010).
Hasil  penelitian  di  Balitbio  Bogor  pada tahun 1999 menunjukkan bahwa pemberian BAP 5  mg/l  pada  media  pertunasan  memberikan jumlah  tunas  yang  lebih  banyak  daripada pemberian  BAP  2  mg/l  (Supriati  et  al.,  2000). Sebaliknya  untuk  pertumbuhan  tunas  manggis BAP  3  mg/l  menyebabkan  pertumbuhan  yang lebih  baik  daripada  BAP  5  mg/l  (Supriati  et  al., 2001).

## Bahan dan Metode
Penelitian ini dilaksanakan di Laboraturium Kultur Jaringan Fakultas Pertanian Universitas Malikussaleh. Penelitian
dilaksanakan  dari  bulan  Maret  sampai  dengan bulan Mei 2017.
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  biji  manggis  yang  berasal  dari  Kota Lhokseumawe,  alkohol,  bayclin,  fungisida  dan bakterisida,  gula  pasir,  spirtus,  agar-agar, aquades  steril,  plastik  bening,  karet  gelang, kertas  buram,  media  MS  dan  BAP.  Alat  yang digunakan dalam penelitian ini adalah gelas piala ukuran 100 ml dan 1000 ml, timbangan analitik, botol  ukur,  gelas  ukur,  cawan  petri,  lampu bunsen,  pipet,  scalpel,  pengaduk,  kulkas,  pH meter,  Laminar  Air  Flow  Cabinet  (LAFC), autoclave, hotplate, magnetik stirer, dan kamera digital.
Penelitian  ini  menggunakan  rancangan lingkungan  berupa  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL)  dengan  dua  faktor  perlakuan.    Faktor pertama  adalah  letak  posisi  eksplan  yaitu  letak abaksial  /  luka  menghadap  media  (L1)  dan adaksial / luka membelakangi media (L2). Faktor kedua  adalah konsentrasi  BAP 0 mg/L (B0), 2,5 mg/L  (b1),  dan  5  mg/L  (B2).  Jumlah  perlakuan ada  6  dengan  10  ulangan,  sehingga  didapatkan 60 satuan percobaan.

## Sterilisasi Eksplan
Biji manggis segar dilepaskan dari selaput berserat  tempat  menempelnya  daging  buah.  Biji dibersihkan arilnya, kemudian dipilih yang besar dan  beratnya  hampir  seragam  ( ≥ 0,8  g).    Biji kemudian  dicuci  dengan  air  deterjen  encer selama 10 menit, lalu dibilas dan dimasukkan ke Laminar  Air  Flow  (LAF).    Eksplan  (biji manggis)  lalu  direndam  dengan  fungisida bakterisida  sebanyak  0,8  g/l  selama  30  menit. Biji  dibilas  dengan  aquades  streril  beberapa  kali sampai bersih, lalu direndam dalam alhohol 70% selama 5 menit  dan dibilas dengan aquades steril sebanyak 1 kali. Eksplan direndam dalam larutan bayclin  30%,  20%,  dan  10%,  masing-masing selama 15, 20 dan 25 menit, lalu dibilas aquades steril.

## Penanaman Eksplan
Eksplan  biji  manggis  yang  sudah disterilisasi, kemudian diletakkan di cawan petri yang  dilapisi  oleh  kertas  steril.  Biji  manggis dibelah  menjadi  4  bagian,  kemudian  ditanam  ke dalam  media  tanam  sesuai  perlakuan.    Setiap botol  kultur    4  eksplan.  Botol  kultur  ditutup dengan rapat, diberi label, dan disimpan di ruang inkubasi pada suhu 24-26°C.

## Pengamatan dan analisis data
Pengamatan  dilakukan  pada  beberapa  peubah, yaitu   waktu  tumbuh  tunas,  panjang  tunas, waktu  tumbuh  akar,  jumlah  akar,  jumlah  daun, persentase  keberhasilan.  Pengamatan  dilakukan selama  8  minggu.  Data  dianalisis  secara  statitisk dengan  menggunakan  Analisis  Ragam  (Anova). Data  yang  menunjukkan  perbedaan  nyata  pada Anova  5%  dilakukan  analisis  lanjut  dengan  Uji Jarak  Berganda  Duncan  (UJBD).  Analisis statistik  dilakukan  menggunakan  software  SAS ver9.12.

## Hasil dan Pembahasan
Hasil Berdasarkan hasil pengamatan,
didapatkan bahwa tidak  terdapat interaksi antara perlakuan letak posisi  eksplan  (L) dan konsentrasi  BAP  (B).  Pengaruh  masing-masing perlakuan  secara  tunggal  terlihat  pada  peubah waktu  tumbuh  tunas,  panjang  tunas,  dan persentase  tumbuh  tunas.  Data  hasil  uji  lanjut pengaruh  letak  posisi  eksplan  dan  konsentrasi BAP  terhadap  peubah  waktu  tumbuh  tunas, panjang tunas, dan persentase tumbuh tunas pada perkecambahan  biji  manggis  secara  in  vitro disajikan pada Tabel 1.
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  pemberian eksplan  yang  ditanam  secara  adaksial  memiliki panjang  tunas  lebih  baik  daripada  secara abaksial.  Pada  peubah  lainnya  yaitu  waktu tumbuh  tunas  dan  persentase  tumbuh  tunas, kedua posisi eksplan tidak memberikan perbedaan.
Tabel  1.  Pengaruh  letak  posisi  eksplan  dan  konsentrasi  BAP  terhadap  waktu  tumbuh  tunas,  panjang tunas, dan persentase tumbuh tunas pada perkecambahan biji manggis secara in vitro.
Perlakuan Waktu Tumbuh Tunas (HST) Panjang Tunas (cm) Persentase Tumbuh Tunas (%) Letak Posisi Eksplan : Abaksial (L1) 11,77 (3,45)  a 2,00 (1,57)  b 68,18 (8,21) a Adaksial (L2) 11,54 (3,43)  a 3,18 (1,90)  a 60,40 (7,64) a Konsentrasi BAP: 0 mg/L (B0) 14,28 (3,88) a 2,25 (1,64) a 59,37 (7,69) b 2,5 mg/L(B1) 11,00 (3,33) ab 3,00 (1,85) a 85,71 (9,26) a 5 mg/L (B2) 9,71 (3,15) b 2,83 (1,80) a 50,00 (6,95) b
Keterangan : Angka yang diikuti oleh huruf yang sama pada kolom yang sama tidak berbeda nyata berdasarkan
uji DMRT pada taraf 0,05. Angka dalam kurung adalah data hasil transformasi . Tabel  1  juga  menunjukkan  bahwa konsentrasi BAP 2,5
mg/L ternyata menyebabkan  eksplan  tumbuh  tunas  lebih  cepat dan  persentase  tumbuh  tunasnya  lebih  tinggi dibandingkan  perlakuan  lainnya.  Pada  peubah panjang  tunas  meskipun  secara  statistik  tidak menunjukkan  perbedaan,  namun  secara  rataan perlakuan  BAP  2.5  mg/L  menyebabkan  panjang tunas terbaik.
Pengaruh masing-masing perlakuan secara tunggal pada peubah lainnya yaitu jumlah daun,  persentase  tumbuh  akar,  dan  jumlah  akar ternyata  tidak  menujukkan  adanya  perbedaan secara  statisitik.  Data  hasil  uji  lanjut  pengaruh
letak  posisi  eksplan  dan  konsentrasi  BAP terhadap peubah jumlah daun, persentase tumbuh akar,  dan  jumlah  akar  perkecambahan  biji manggis secara in vitro disajikan pada Tabel 2.
Tabel  2  menunjukkan  bahwa  secara statistik  pengaruh  masing-masing  perlakuan secara  tunggal  pada  jumlah  daun,  persentase tumbuh  akar,  dan  jumlah  akar  tidak  ada perbedaan.    Nilai  rataan  secara  umum  eksplan yanag ditanam dengan posisi adaksial pertumbuhannya  lebih  baik,  dan  konsentrasi BAP 0 mg/L menyebabkan pertumbuhan eksplan lebih baik.
Tabel 2. Pengaruh letak posisi eksplan dan konsentrasi BAP terhadap jumlah daun, persentase tumbuh akar, dan jumlah akar pada perkecambahan biji manggis secara in vitro.
Perlakuan Jumlah Daun Persentase Tumbuh Akar Jumlah Akar 6 MST 7 MST ------------------ helai ------------------ % Letak Posisi Eksplan : Abaksial (L1) 3,77 (2,06)  a 4,33 (2,17)  a 66 (1,27)  a 1,000 a Adaksial (L2) 3,63 (2,02)  a 4,18 (2,13)  a 75 (1,31)  a 1,000 a Konsentrasi BAP: 0 mg/L (B0) 3,62 (2,02)  a 3,75 (2,05)  a 87 (1,36) a 1,000 a 2,5 mg/L(B1) 3,50 (1,98)  a 4,50 (2,18)  a 62 (1,25) a 1,000 a 5 mg/L (B2) 4,00 (2,12)  a 4,66 (2,26)  a 62 (1,25) a 1,000 a
Keterangan : Angka yang diikuti oleh huruf yang sama pada kolom yang sama tidak berbeda nyata berdasarkan
uji DMRT pada taraf 0,05. Angka dalam kurung adalah data hasil transformasi .
Perkecambahan biji manggis mulai terjadi setelah  7  hari  setelah  tanam  (HST).  Eksplan manggis  yang  berasal  dari  biji  manggis  dibelah empat  dapat  tumbuh  tunas  lebih  dari  1,  bahkan pada  kondisi  tertentu  dapat  tumbuh  banyak
tunas. Eksplan yang memiliki banyak tunas tidak baik untuk dijadikan sumber tanaman pada tahap pertumbuhan  selanjutnya,  karena  ukuran  tunas menjadi  lebih  kecil  dibandingkan  tunas  normal (Gambar 1).
Gambar 1.Tunas yang tumbuh pada eksplan. Eksplan yang tumbuh banyak tunas (a); eksplan yang  hanya tumbuh 1 tunas (b).
Eksplan  manggis  lokal  asal  Aceh memiliki  warna  daun  yang  berbeda  saat baru  berkecambah  dan  setelah  tumbuh menjadi daun dewasa.  Saat pertama kali mekar  (fase  pertumbuhan  daun  muda),
daun manggis berwarna
merah keunguan,  dan  warna  akan  berubah menjadi hijau seiring pertumbuhan daun (Gambar 2). Eksplan yang ditanam pada posisi abaksial biasanya akan menghasilkan tunas yang lebih banyak.
Gambar  2.  Perubahan  warna  daun  manggis  seiring  pertumbuhan  daun.  Fase  daun  mekar  berwarna merah  kecoklatan (a); daun muda berwana hijau muda (b); daun dewasa berwarna hijau tua (c).
a
b

## Pembahasan
Penelitian  ini  menggunakan  letak  posisi eksplan  yang  berbeda  yaitu  secara  abaksial  (L1) dan posisi adaksial (L2). Posisi eksplan  adaksial memberikan  pengaruh  lebih  baik  secara  statistik pada peubah panjang tunas, dibandingkan posisi abaksial. Perlakuan  eksplan  pada posisi  adaksial secara  rataan  juga  memberikan  pengaruh  lebih baik daripada posisi abaksial pada peubah waktu tumbuh tunas dan persentase tumbuh akar (Tabel 1 dan 2).
Letak  posisi  eksplan  secara  abaksial adalah  bagian  eksplan  yang  terkena  luka  akibat pemotongan  biji  menghadap  media  (telungkup), sedangkan  letak  posisi  adaksial    yaitu  bagian eksplan  yang  tidak  terkena  luka  menghadap media  (telentang).  Eksplan  dengan  posisi abaksial  lebih  cepat  menyerap  unsur  hara  yang terkandung  pada  media,  karena  luas  permukaan bagian  luka  lebih  banyak  kontak  langsung dengan  media.  Hal  ini  dapat  menyebabkan eksplan  manggis  posisi  abaksial  menghasilkan tunas lebih banyak sehingga terkadang pertumbuhan tunas menjadi roset dan hanya satu tunas saja yang  biasanya  akan  tumbuh
(Handayani,  2012).  Pertumbuhan  tanaman  roset menyebabkan terjadinya persaingan hara diantara  tunas-tunas  yang  tumbuh.  Oleh  karena itu,  pada  penelitian  ini  pertumbuhan  tunas  pada posisi adaksial lebih baik daripada abaksial.
Pemotongan  eksplan  juga  menyebabkan eksplan  mengalami  luka.  Biji  yang  mengalami pemotongan  akan  menghasilkan  jumlah  tunas yang  lebih  banyak  daripada  biji  utuh (Ihsan  dan Sukarmin  (2011).  Biji  dibelah  memiliki  jumlah tunas  yang  tinggi.  Biji  manggis  yang  dibelah dengan  posisi  telungkup  dan  bagian  luka menghadap  media  menyebabkan  terjadi  kontak langsung antara media dengan biji manggis yang dilukai  (Romeida  2007).  Pemotongan  biji  juga menyebabkan  terjadi  kontak  antara  permukaan biji  dan  media  yang  mengandung  hara  dan  zat pengatur tumbuh tanaman,
Pembelahan  biji  menyebabkan  dominansi apikal  eksplan  biji  manggis  hilang,  terutama karena  adanya  pelukaan  akibat  pemotongan  biji. (Handayani  et  al.,  2013).    Hal  ini  disebabkan karena hilangnya dominasi apikal yang menyababkan  pertumbuhan  tunas  samping.  Biji manggis  adalah  biji  apomiksis,  tunas  manggis terbentuk  dari  sel-sel  embriogenik  yang  berada di  daerah  jaringan  nuselus . Sel-sel  embriogenik jumlahnya  sangat  banyak  sehingga  dalam
kondisi memungkinkan eksplan dapat menumbuhkan banyak tunas. Munculnya tunas ditandai dengan terbentuknya  tonjolan  atau  kuncup  berwarna hijau  pada  permukaan  biji  tanaman  manggis yang  lama  kelamaan  akan  membesar  kemudian muncul  primordia  daun  pada  ujung  tonjolan. Hasil  percobaan  menunjukkan  bahwa  tidak semua  eksplan  membentuk  tunas.  Hal  ini disebabkan  karena  eksplan  tumbuh  kalus, sehingga  terjadi  persaingan  energi  untuk pembentukan tunas.
Letak  posisi  eksplan  tidak  berpengaruh pada  persentase  tumbuh  akar  dan  jumlah  akar. Hal  ini  diperkirakan  karena  eksplan  manggis lebih  dominan  menyerap  unsur  hara  untuk pembentukan tunas.
Faktor  konsentrasi  BAP  secara  statistik berpengaruh  terhadap  peubah  waktu  tumbuh tunas  dan  persentase  tumbuh  tunas.  Eksplan yang ditanam pada media MS ditambah BAP 2,5 mg/L  menyebabkan  tunas  tumbuh  lebih  cepat dan  memiliki  persentase  pertumbuhan  tunas lebih baik daripada perlakuan lainnya (Tabel 1). Pada  peubah  lainnya  konsentrasi  BAP  tidak memberikan  pengaruh  nyata  secara  statistik (Tabel 2).
BAP  merupakan  zat  pengatur  tumbuh golongan  sitokinin.  Pemberian  zat  pengatur tumbuh sitokinin berpengaruh terhadap pertumbuhan  tunas  dan  dapat  menyebabkan tunas  tumbuh  lebih  cepat.  Konsentrasi  sitokinin yang  tinggi  lebih  cocok  diaplikasikan  untuk perkembangan, pelipatgandaan dan pertumbuhan tunas  pada  eksplan.  BAP  merupakan  golongan sitokinin  aktif  yang  bila  diberikan  pada  tunas akan mendorong proliferasi tunas yaitu keluarnya tunas lebih dari satu (Yusnita, 2003).
Pemberian  BAP  5  mg/L  ternyata  kurang memberi  pengaruh  baik  pada  pertumbuhan kecambah  manggis  in  vitro  (Tabel  1).    Hal  ini diduga    karena  pada    konsentrasi  BAP  5  mg/L kandungan  sitokinin  menjadi  tinggi  sehingga menyebabkan  terhambatnya  pertumbuhan  tunas pada eksplan. ZPT hanya efektif pada konsentrasi  tertentu,  konsentrasi  yang  terlalu tinggi dapat menghambat perkecambahan (Hartmann et al., 2002).
Pada  eksplan  manggis  asal  Bengkalis perlakuan  3  mg/L  BAP  menghasilkan  jumlah tunas  tertinggi  dibandingkan  perlakuan  lainnya. Pemberian BAP 2 ppm memberikan tinggi tunas tanaman buah naga yang baik (Trisnahati, 2007). Pemberian  BAP  2  ppm  dan  4  ppm  memberikan
pertumbuhan eksplan gingseng jawa yang relatif baik (Isharyati, 1999).
Pemberian  BAP  tidak  berpengaruh  nyata pada  peubah  persentase  dan  jumlah  akar. Pembentukan  akar  manggis  sangat  sulit  terjadi. Hal  ini  disebabkan  karena  manggis  memiliki sifat  perakaran  yang  sangat  lemah.  Pengakaran pada manggis mudah patah, lambat tumbuh, dan mudah  terganggu  karena  tidak  dijumpai  akar rambut  pada  akar  utama  maupun  akar  lateral. Tanaman manggis termasuk  tanaman yang  tidak memiliki  (sedikit)  bulu-bulu  akar,  sehingga kemampuan  menyerap  air  dan  hara  terbatas. Sehingga jumlah akar yang muncul pada eksplan biji  manggis  mendapatkan  hasil  yang  sedikit.
Tidak terbentuknya akar pada
tunas mempengaruhi  penyerapan  unsur  hara  untuk pembentukan daun (Isda et al., 2016).
Eksplan  tanpa  pemberian  BAP  juga berhasil  tumbuh  tunas  meskipun  lebih  lambat. Hal  ini  membuktikan  bahwa  suatu  organ  dan jaringan tumbuhan mengandung hormon endogen yang dapat mempengaruhi pertumbuhan dan  perkembangan  organ  atau  jaringan  tersebut hingga  tahapan  yang  paling  sempurna  walaupun tidak ditambahkan zat pengatur tumbuh dari luar. media MS umum digunakan untuk induksi tunas dan  mengandung  nutrisi  yang  sesuai  untuk menunjang  pertumbuhan  optimal  dari  tanaman secara in vitro (Razdan 2003).
Banyak kendala dalam pembibitan tanaman manggis, baik secara in vitro maupun ex vivo.  Kendala  yang dihadapi  misalnya produksi biji  layak  tanam  yang  rendah  dan  sifat  biji rekalsitran (Qosim, 2004), pertumbuhan tanaman sangat  lambat  dan  lemah  serta  perakaran  yang sangat sedikit (Harahap et al., 2014). Oleh sebab itu, budidaya secara in vitro dengan penambahan zat  pengatur  tumbuh  perlu  dilakukan  lebih intensif,
agar mengoptimalkan hasil pertumbuhan tanaman manggis.

## Kesimpulan
Dari  hasil  penelitian  ini  dapat  disimpulkan sebagai berikut:
1. Letak  posisi  eksplan  berpengaruh  pada perkecambahan  manggis  secara  in  vitro untuk  peubah  panjang  tunas.  Posisi  eksplan yang  memberi  pengaruh  terbaik  pada pertumbuhan  kecambah  manggis  in  vitro adalah adaksial.
2. Konsentrasi BAP berpengaruh pada perkecambahan  manggis  secara  in  vitro untuk  peubah  waktu  tumbuh  tunas  dan persentase hidup. Konsentrasi BAP 2,5 ppm
merupakan konsentrasi terbaik untuk pertumbuhan  kecambah  manggis  secara  in vitro.
3. Tidak  ada  interaksi  antara  posisi  eksplan dan  konsentrasi  BAP  disemua  peubah  yang diamati.

## Daftar Pustaka
Ashari  dan  Sunarsih.  2006.  Manggis  Komoditas Unggulan  Tasikmalaya.  Warta  Penelitian dan  Pengembangan  Pertanian.  28  (1)  : 27–28.
[BPS}  Badan  Pusat  Statistik.  2013.  Statistik Indonesia.    Badan  Pusat  Statistik,  Aceh Utara.
George,  E.F  and  Sherington,  P.D.  1984.  Plant Propogation  by  Tissue  Culture Exegetics Limited. England.
Handayani,  R.S.  2012.  Rekayasa  teknologi sambung  mikro  dan  setek  mikro  pada tanaman manggis (Garcinia mangostana). [disertasi]. Bogor: Institut Pertanian Bogor, Program Pascasarjana. 127 hal.
Handayani,  R.S., Poerwanto, R., Sobir,  Purwito,
A.,  Ermayanti,  TM.  2013.  Pengaruh Batang  Bawah  dan  Jenis  Tunas  Pada Mikrograftting
Manggis (Garcinia mangostana L.) Secara In Vitro. J. Agron. Indonesia. 41 (1) : 47-53.
Harahap,  F.,  Poerwanto,  P.,  Suharsono,  Suriani, C.,  &  Rahayu,  S.  (2014).  In  vitro  growth and  rooting  of  mangosteen  (Garcinia mangostana  l.)  on  medium  with  different concentration  of  plant  growth  regulator. HAYATI  Journal  of  Biociences,  21  (4), 151-158.
Hartmann  HT,  Kester  DE,  Davies  FT,  Geneve RL. 2002. Plant Propagation Principal and Practise.  Pearson  Education  Inc.New Jersey: Upper Saddle River.
Ihsan, F. dan Sukarmin. 2011. Teknik pengujian pembelahan biji terhadap efektifitas perbanyakan manggis (Garcinia mangostana L.) melalui biji.
Isda, M. N. 2009. Induksi Kalus Centella asiatica Melalui  Aplikasi  Auksin  dan  Sitokinin. Jerami 2(3) : 162-165.
Isharyati, 1999. Pengaruh Kadar NAA dan BAP terhadap  Pertumbuhan  Eksplan  Ginseng Jawa  (Talinum  paniculatum)  secara  in vitro.  Skripsi  S1.  Fakultas  Pertanian Universitas Muhammadiyah. Yogyakarta.
Qosim,  W.  A.  2004.  Pemuliaan  Manggis  tak Sesulit Dibayangkan. Diakses dari www.pikiran- rakyat.com/cetak/1204/cakrawala/lainnya
4.htm. Tanggal 15 Desember 2016. Qosim,  W.A.,  Yuwariah,  Y.,  Hamdani,  J.S., Rachmadi,  M.  2015.  Pengaruh  Mutagen Etil  Metan  Sufonat  Terhadap  Regenerasi Tunas  Pasa  Dua  Genotip  Manggis  Asal Purwakarta  dan  Pandeglang.  J.  Hort.  25 (1) : 9-14.
Razdan, M.K. 2003. Introduction to Plant Tissue Culture.  2 nd Edition.  Science  Publisher,
Inc. 377 hal. Romeida  A.    2007.    Respon  berbagai  tipe eksplan biji manggis (Garcinia mangostana L.) pada beberapa konsentrasi  benzyl  amino  purin  (BAP) terhadap  pembentukan  dan  regenerasi polyembrioninya  secara  in  vitro.  Jurnal
Akta Agrosia. 10 (2): 162-166.
Supriati, Y., N. Sunarlim, W.H. Adil, I. Mariska, Y.  Rusyadi,  D.  Sukmadjaja,  E.G.  Lestari, dan  Murtado.  2001.  Studi  regenerasi tanaman  potensial  dan  bernilai  ekonomi tinggi.  Laporan  Hasil  Penelitian  Balitbio, Bogor.
Trisnahati,  A.  2007.  Pengaruh  Jenis  Media  dan
Konsentrasi  BAP  terhadap  Multiplikasi Tanaman Buah Naga (Hylocereus polyrhizus)  secara  in  vitro.  Skripsi  S1. Fakultas  Pertanian  Universitas  Sebelas Maret. Surakarta.
Widiastuti,  A.,Sobir.,Suhartanto,  M.R.  2013. Analisis  Keragaman  Genetik  Manggis (Garcinia  mangostana  L.)  Diiradiasi
Dengan Sinar Gamma Berdasarkan Penanda ISSR. J. Bioteknologi Vol 10 (1): 15-22. Yusnita. 2003. Kultur Jaringan: Cara Memperbanyak  Tanaman  Secara  Efisien. Agromedia     Pustaka: Jakarta. 105 Hal.