## UJI AKTIVITAS ANALGESIK FRAKSI DAUN SENGGANI
( Clidemia hirta [L] D.Don) PADA MENCIT PUTIH GALUR SWISS WEBSTER
Taufik Septiyan Hidayat 1 *, Dadan Rohdiana 1 , Syumillah Saepudin 1 , Dini Febrianty 1 , Yunita Al Azzahra 2
1 Program Studi Farmasi, Fakultas MIPA Universitas Al Ghifari, Bandung, Jawa Barat Indonesia 2 Akademi Farmasi Bumi Siliwangi, Bandung, Jawa Barat, Indonesia *Penulis Korespondensi: taufikseptiyan44@gmail.com

## Abstrak
Rasa  nyeri  merupakan  sensasi  yang  dapat  mengganggu  aktivitas  dan  menurunkan  kualitas  hidup penderitanya  apabila  tidak  ditangani  dan  dibiarkan  berkepanjangan.  Senggani  merupakan  salah  satu tanaman  yang  mengandung  senyawa  flavonoid  dan  steroid  yang  memiliki  aktivitas  analgesik. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menguji  aktivitas  analgesik  fraksi  daun  senggani  ( Clidemia  hirta [L] D.Don) pada mencit putih galur swiss webster yang diinduksi asam asetat dan menentukan fraksi yang paling  efektif  menghasilkan  aktivitas  analgesik.  Jenis  penelitian  yang  dilakukan  adalah  true eksperimental  design  berdasarkan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL).  Hewan  uji  yang  digunakan sebanyak 25 ekor yang dibagi menjadi 5 kelompok dengan 5 replikasi yaitu kontrol negatif (CMC 1%), kontrol positif (dexametason) dan kelompok uji fraksi daun senggani yaitu fraksi n-heksan, etil asetat, dan etanol. Data yang diperoleh dianalisis dengan menggunakan uji alternatif dari One Way ANOVA yaitu  Kruskal  Wallis  dengan  uji  lanjutan  post  hoc  uji  Mann  Whitney.  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa fraksi daun senggani pada semua jenis pelarut memiliki aktivitas analgesik dibandingkan kontrol negatif  (CMC  1%)  dengan  perbedaan  yang  bermakna  (p0,05). Dari hasil tersebut disimpulkan bahwa fraksi daun senggani dapat dimanfaatkan sebagai analgesik.
Kata kunci: Asam asetat, Analgesik, Dexametason, Daun senggani.

## Abstract
Pain is a sensation that can interfere with activities and reduce the quality of life of the sufferer if left untreated  and  left  prolonged.  Senggani  is  one  of  the  plants  that  contains  flavonoid  compounds  and steroids  that  have  analgesic  activity.  This  study  aimed  to  test  the  analgesic  activity  of  senggani  leaf fraction  (Clidemia  hirta  [L]  D.Don)  in  white  mice  swiss  webster  strain  induced  acetic  acid  and determine the fraction that most effectively produces analgesic activity. The type of research conducted is true experimental design based on Complete Randomized Design (RAL). The test animals used were 25  heads  divided  into  5  groups  with  5  replications,  namely  negative  control  (CMC  1%),  positive control  (dexamethasone)  and  the  test  group  of  senggani  leaf fraction, namely n-hexane, ethyl acetate, and  ethanol  fractions.  The  data  obtained  were  analyzed  using  an  alternative  test  from  One  Way ANOVA namely Kruskal Wallis with a follow-up test post hoc Mann Whitney test. The results showed that the fraction of senggani leaves in all types of solvents had analgesic activity compared to negative controls  (CMC  1%)  with  a  significant  difference  (p0.05).  From  these  results  it  is  concluded  that  the senggani leaf fraction can be used as an analgesic.
Keywords: Acetic acid, Analgesic, Dexamethasone, Senggani fleaves.

## PENDAHULUAN
World Health Organization (WHO) mengestimasi
bahwa sebagai alternatif pengobatan  80%  masyarakat  di  Indonesia  masih tergantung dengan obat-obatan tradisional. Masyarakat di Indonesia lebih memilih
pengobatan  tradisional  dengan  menggunakan herbal  karena  tidak  menimbulkan  efek  samping atau menimbulkan efek samping yang relatif kecil (Andini  et  al.,  2024;  Ujung  et  al.,  2024). Penggunaan  obat  tradisional  didukung  dengan sumber  daya  alam  yang  melinpah  sehingga
masyarakat  lebih  mudah  menggunakan  obat- obatan tradisional khususnya di pedesaan (Budiyanti et al., 2024; Nurhamidah et al., 2024).
Sensasi  nyeri  dapat  dipicu  oleh  suatu rangsangan  mekanis,  kimia,  maupun  fisis  yang menimbulkan  kerusakan  jaringan.  Rangsangan tersebut memicu pelepasan mediator nyeri seperti bradikinin, histamin, leukotrien dan prostaglandin (Khan  et  al.,  2022;  Keswara  et  al.,  2019).  Rasa nyeri dapat mengakibatkan respon tertentu apabila tidak  ditangani  dan  dibiarkan  berkepanjangan. Respon  yang  dapat  terjadi  yaitu  peningkatan  rasa cemas,  frekuensi  napas,  tekanan  darah,  denyut jantung  dan  dapat  menurunkan  fungsi  imun sehingga  akan  memicu  kerusakan  jaringan (Tamimi  et  al.,  2020;  Alkandahri  et  al.,  2018).
Obat  atau  senyawa  yang  digunakan  untuk menghilangkan  rasa  nyeri  disebut  sebagai analgesik. Analgesik dapat meredakan nyeri tanpa menghilangkan  kesadaran  (Khan  et  al.,  2022; Amalia  et  al.,  2024).  Konsumsi  jangka  panjang obat analgesik umumnya menyebabkan efek pada lambung karena obat ini langsung menghambat ke siklooksigenase (COX) non-spesifik dan berakibat pada  pembentukan  senyawa  prostaglandin  yang menyebabkan gangguan pada sistem gastrointestinal  seperti  mual,  muntah,  dispepsia, hingga  perdarahan  pada  lambung  (Nosek  et  al., 2022; Nurulhadi et al., 2024). Sedangkan inhibitor selektif  COX-2  dapat  meningkatkan  resiko perdarahan  dan  penyakit  kardiovaskular  (Lee  et al., 2022; Putri et al., 2024).
Salah  satu  tanaman  yang  sering  digunakan oleh  masyarakat  adalah  senggani  ( Clidemia  hirta
[L] D.Don). Tanaman herbal ini mudah ditemukan juga  sering  digunakan  masyarakat  sebagai  obat tradisional.  Senggani  memiliki  rasa  pahit  yang berkhasiat  sebagai  penghilang  nyeri  (analgesik), pereda demam (antipiretik) menghilangkan pembengkakan  (antiinflamasi)  maupun  untuk peluruh  kencing  (diuretik)  (Zheng  et  al.,  2021). Daun  senggani  memiliki  kandungan  metabolit sekunder.  Salah  satu  metabolit  yang  terkandung dalam  senggani  ini  adalah  saponin  dan  steroid yang  memiliki  fungsi  antibakteri,  glikosida  yang bersifat analgesik, flavonoid/fenol yang merupakan  antioksidan  kuat,  analgesik  dan antiinflamasi  (Halima  et  al.,  2019;  Low  et  al., 2021).

## METODE PENELITIAN

## Alat Penelitian
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian yaitu nampan,  kawat  ram,  sekam  kayu,  pipet  tetes, sonde, spuit 1 cc, beaker glass, gelas ukur dengan merk  pyrex,  mortir  dan  stamper,  timbangan analitik  dengan  merk  fujitsu,  timbangan  analitik mencit  dengan  merk  excellent,  rotary  vacuum evaporator  dengan  merk  IKA  RV-10,  corong pisah,  water  bath,  cawan  penguap,  alat  suntik, pipet  volume  20  mL,  sendok  tanduk,  spatel, kaca arloji,  batang  pengaduk,  sudip,  erlenmeyer,  labu ukur.

## Bahan Penelitian
Mencit  jantan  dewasa  umur  ±  2  bulan sebanyak  25  ekor  dengan  berat  badan  mencit antara 20 sampai 30 g/ekor, ekstrak n-heksan, etil asetat, ekstrak etanol daun senggani,
dexametasone,  asam  asetat,  aqua  destilata,  pakan mencit,  H2SO4  2N,  Etanol  70%,  HCl  2N,  logam Mg, kloroform, pereaksi Mayer, pereaksi Dragendorff,  pereaksi  Wagner,  KOH  5N,  H2O2 3%,  FeCl3  10%,  asam  asetat  glasial,  benzena, ammonia, n-heksan, dan etil asetat.

## Prosedur penelitian

## Pengumpulan Bahan Tanaman
Bahan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini adalah  daun  senggani  yang  diperoleh  dari Kampung Kertamanah Desa Pengalengan Kabupaten Bandung Jawa Barat. Sampel tumbuhan  senggani  diidentifikasi  di  Departemen Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Padjadjaran dengan  No  Surat.  15/HB/03/2023  menyatakan bahwa  sampel  tumbuhan  tersebut  adalah  benar daun senggani bulu ( Clidemia hirta [L] D.Don) .

## Ekstraksi dan Fraksinasi
Simplisia daun senggani yang telah dihaluskan  dimasukkan  kedalam  bejana  maserasi dan  ditambahkan  pelarut  etanol  70%  hingga simplisia  terendam  (Nurul  et  al.,  2021).  Proses maserasi  dilakukan  dengan  perendaman  serbuk simplisia  dalam  tabung  ekstraksi  dengan  alkohol 70% dengan perbandingan 1 : 10 atau hingga 1 cm di  atas  permukaan  sampel  selama  3  x  24  jam sambil  sesekali  diaduk.  Setiap  hari  dilakukan penyaringan  dan  simplisia  yang  tersisa  juga diperas hingga memperoleh maseratnya.
Selanjutnya  dilakukan  pemekatan  hingga diperoleh  ekstrak  kental,  dihitung  rendemen ekstrak  yang  didapat.  Selanjutnya  dilakukan Ekstraksi  Cair-Cair  (ECC)  menggunakan  corong pisah  (Kusuma  et  al.,  2022).  Ekstra  etanol  yang
telah  diperoleh  ditambahkan  n-heksan  dengan perbandingan  1:1.  Corong  pisah  ditutup  dan dilakukan  pengocokan  kuat  dan  sesekali  gas dibuang. Setelah itu, diamkan hingga membentuk 2 lapisan, bagian atas merupakan lapisan n-heksan dan  bagian  bawah  merupakan  lapisan  etanol. lapisan n-heksan disimpan didalam botol vial atau erlenmeyer  tutup  asah  sementara  lapisan  etanol dimasukkan  kembali  kedalam  corong  pisah  dan ditambahkan  etil asetat dengan perbandingan 1:1. Corong  pisah  ditutup  dan  dilakukan  pengocokan kuat  dan  sesekali  gas  dibuang.  Setelah  itu, diamkan hingga membentuk 2 lapisan, bagian atas merupakan  lapisan  etil  asetat  dan  bagian  bawah merupakan lapisan etanol. Buka kran corong pisah untuk  mendapatkan  lapisan  etanol  dan  bagian paling atas merupakan lapisan etil asetat.
Selanjutnya  dilakukan  pemekatkan  dengan menggunakan  alat rotary  vacuum  evaporator kemudian  diuapkan  dengan water  bath untuk mendapatkan  ekstrak  kental  (Noviyanty  et  al, 2022;  Santoso  et  al.,  2022).  Hasil  fraksinasi ditimbang  dan  dihitung  rendemen  fraksi  yang dihasilkan  kemudian  disimpan  di  dalam  lemari pendingin  dengan  suhu  4ºC  (Wibowo  dan  Erna, 2015). Rendemen dihitung dengan membandingkan bobot ekstrak/fraksi yang dihasilkan  dengan  bobot  awal  simplisia  sehingga diperoleh  hasil  dalam  bentuk  persen.  Berikut merupakan  rumus  perhitungan  rendemen  (Noval dan Ali, 2014):
RE (%) = Bobot Simplisia x 100% Bobot Ekstrak
RF (%) = Bobot Fraksi x 100%
Bobot Ekstrak
% PG = 100 – [(P/K) x 100]
Skrining Fitokimia
Skrining fitokimia merupakan tahap pendahuluan untuk mengetahui kandungan metabolit  sekunder  seperti  alkaloid,  flavonoid, tannin,  saponin  dan  steroid.  Sampel  yang digunakan  adalah  ekstrak  n-heksan,  etil  asetat, dan  etanol  70%  daun  senggani  bulu  ( Clidemia hirta [L]  D.Don).  Prosedur  yang  dilakukan berdasarkan metode Harborne, 1998.

## Pembuatan Larutan Pembanding
Dexametasone  dengan  dosis  0,5  mg  x 0,0026  yaitu  0,0013  mg/20  g  BB  mencit. Sebanyak  0,5  mg  dexametason  akan  dilarutkan dalam  50  mL.  Sehingga  dibutuhkan  0,13  mL untuk 20gBB mencit.

## Pembuatan Larutan Asam Asetat 1%
Larutan asam asetat dibuat dari larutan asam asetat glasial 100% v/v dan dilakukan pengenceran dengan rumus volume 1 x konsentrasi 1 =  volume 2 x  konsentrasi 2 .  Sehingga untuk  0,25  mL  asam  asetat  glasial  100%  akan diencerkan pada labu ukur 25 mL dengan aquades hingga tanda batas.

## Pengujian Aktivitas Analgesik
Mencit putih jantan dipuasakan selama ±18 jam  setelah  diadaptasikan  selama  ±  7  hari  di tempat penelitian. Kemudian mencit putih jantan sebanyak  25  ekor  dikelompokkan  secara  acak dalam  5  kelompok  yaitu  kelompok  kontrol negatif,  positif/pembanding,  ekstrak  n-heksan, ekstrak  etil  asetat  dan  ekstrak  etanol  daun
senggani  dengan  masing-masing  kelompok terdiri atas 5 ekor mencit putih jantan.
1) Kelompok  1  yaitu  kelompok  kontrol negatif  yang  diberikan  CMC  1%  melalui rute oral (PO).
2) Kelompok 2 yaitu kelompok kontrol positif atau  pembanding  yang  diberikan  suspensi dexametason melalui rute oral (PO).
3) Kelompok  3  yaitu  suspensi  fraksi  n-heksan daun senggani dosis 160 mg/kg BB melalui rute oral (PO).
4) Kelompok 4 yaitu suspensi fraksi etil asetat daun senggani dosis 160 mg/kg BB melalui rute oral (PO).
5) Kelompok  6  yaitu  suspensi  fraksi  etanol daun senggani dosis 160 mg/kg BB melalui rute oral (PO).
Enam  puluh  menit  setelah  perlakuan, hewan  uji  diinjeksi  dengan  penginduksi  yaitu asam  asetat  1%  secara  intraperitoneal  (IP)  dosis 50  mg/kgBB  dan  diamati  geliat  setiap  5  menit dalam jangka waktu selama 60 menit.

## Analisis Statistik
Daya  analgesik  yang  diperoleh  berupa jumlah  kumulatif  geliat  dievaluasi  dengan menggunakan persen penghambatan geliat (Dewi dan Salim, 2018), yaitu:
Keterangan : P  = Jumlah geliat setelah pemberian obat K = Jumlah rata-rata kelompok kontrol negatif
Setelah  itu  data  dianalisis  secara  statistika menggunakan  program  SPSS  dengan  terlebih dahulu  dilakukan  uji  homogenitas  (Levene’s Test)  dan  uji  normalitas  (Shapiro-Wilk)  sebagai
syarat  untuk  dapat  melakukan  uji  statistika  one way  ANOVA, jika hasilnya berdistribusi normal dan homogen maka bisa dilanjutkan uji one way ANOVA  dengan  taraf  kepercayaan  95%  untuk melihat apakah terdapat perbedaan  yang signifikan  dari  data  hasil  uji  (Styawan  dan Budiman, 2015).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Ekstrak dan Fraksi
Ekstrak  yang  dihasilkan  berwarna  hijau kecoklatan  hal  tersebut  sesuai  dengan  hasil penelitian Nurul  et  al.,  (2021) dan  Harahap  et  al (2022)  yang  menyatakan  bahwa  ekstrak  daun senggani  yang  diperoleh  dengan  pelarut  etanol berwarna  hjau  kehitaman,  disebabkan  dari  zat warna  tanin  tidak  larut  air  tetapi  larut  dalam etanol  sedangkan  flavonoid  larut  dalam  air maupun etanol. Hasil uji organoleptik ada ekstrak daun senggani sebagai berikut.
Tabel 1 Hasil Uji Organoleptik

## Uji Organoleptik  Hasil pengamatan
Bentuk Kental Warna Hijau Kehitaman Bau Khas
Proses  selanjutnya  dilakukan  fraksinasi untuk  memisahkan  senyawa  kimia  yang  tidak diinginkan  dan  senyawa  kimia  yang  terkandung ada  daun  senggani  bulu  berdasarkan  tingkat kepolarannya.  Ekstrak  kental  daun  senggani dilakukan  fraksinasi  secara  partisi  menggunakan corong  pisah  dengan  3  pelarut  yang  berbeda kepolarannya  yaitu  n-heksan,  etil  asetat  dan etanol.  Kepolaran  suatu  pelarut  daat  dilihat melalui polarity  index .  Berdasarkan polarity
index ,  pelarut  n-heksan  memiliki  index  (0,1) sedangkan  etil  aetat  (4,4),  dan  etanol  (5,2). Semakin besar nilai polarity index maka semakin polar pelarut tersebut (Maravirnadita, 2019). Dari ragam nilai indeks tersebut dapat diketahui bahwa urutan  pelarut  dari  non  polar  ke  polar  adalah  n- heksan, etil asetat, dan etanol.
Fraksinasi  menggunakan  pelarut  n-heksan yang  bersifat  nonpolar  akan  menarik  senyawa- senyawa  nonpolar  seperti  steroid,  klorofil  dan terenoid yang terdapat dalam ekstrak etanol daun senggani.  Penggunaan  pelarut  etil  asetat  sendiri untuk  memisahkan  senyawa  golongan  polifenol. Sedangkan  pelarut  etanol  yang  bersifat  polar melarutkan  senyawa  yang  bersifat  polar  seperti golongan  flavonoid  dan  fenol.  Berdasarkan Tabel 2 penggunaan pelarut etanol menghasilkan fraksi  yang  lebih  banyak  dibandingkan  dengan pelarut  yang  lain.  Sehingga,  dapat  dikatakan bahwa  pada  ekstrak  daun  senggani  bulu  ini banyak  memiliki  metabolit  sekunder  yang bersifat polar.
Tabel 2 Hasil Fraksinasi Hasil Bobot (g)  Rendemen (%) Ekstrak 60,30 42,55 n-heksan 0,48 0,80 etil asetat 1,62 2,70 etanol 35,19 58,62

## Skrining fitokimia
Skrining  fitokimia  dilakukan  terhadap ekstrak  dan  fraksi  n-hexan,  etil  asetat,  dan  etanol 70%  daun  senggani  bulu  menggunakan  reagen (ammonia  pekat,  pereaksi  Dragendorff,  Wilstater kloroform,  FeCl 3 ,  serbuk  Mg,  HCl  pekat,  larutan
gelatin 1%, Eter, pereaksi Liebermann-Bouchard). Dari skrining fitokimia fraksi n-heksan, etil asetat, dan  etanol  70%  daun  senggani  bulu  dapat  dilihat pada Tabel  3 .  Adanya  senyawa  metabolit sekunder pada fraksi daun senggani menghasilkan aktivitas  analgesik.  Daun  senggani  mengandung flavonoid  dan  saponin  yang  menunjukkan bioaktivitas  terhadap  analggesik.  Bioaktivitas yang  dimiliki  oleh  flavonoid  salah  satunya analgesik  yang  bekerja  menghambat  COX  untuk
memicu  pembentukan  prostaglandin  (Parawansah et al., 2016; Nurfitriah et al., 2021).
Senyawa  metabolit  sekunder  flavonoid  dan steroid  pada  fraksi  daun  senggani  bulu  bekerja sebagai  analgesik  dengan  cara  menghambat produksi dari mediator-mediator inflamasi seperti prostaglandin  melalui  menghambat  pelepasan asam arakidonat, sehingga memblokir kerja enzim siklooksigenase.  flavonoid  juga  menghambat degranulasi (Sasongko et al., 2019). Tabel 3 Hasil Skrining Fitokimia
Metabolit Sekunder Pereaksi Hasil pengamatan n-heksan Etil  Asetat Etanol Alkaloid Mayer + + - Dragendorff + + + Flavonoid Wilstater + + + Triterpenoid/steroi d Lieberman- Bouchard + - - Polifenol FeCl 3 + + + Tannin Gelatin 1% + + + Saponin Aquadest + + + Keterangan : (+) Hasil dinyatakan positif (mengandung senyawa metabolit sekunder) (-) Hasil negatif (tidak mengandung senyawa metabolit sekunder)

## Uji Aktivitas Analgesik
Penelitian  mengenai  uji  analgesik  ekstrak daun  senggani  menggunakan  25  ekor  mencit putih jantan ( Mus musculus) galur Swiss Webster, hewan  uji  dipilih  karena  memiliki  karakteristik reproduksi  yang  mirip  dengan  hewan  mamalia lain, struktur anatomi, fisiologi serta genetik yang mirip  dengan  manusia,  pemilihan  jenis  kelamin jantan lebih didasarkan pada pertimbangan bahwa mencit  Jantan  mempunyai  hormon  estrogen dalam  jumlah  yang  relatif  sedikit  serta  kondisi hormonal  pada  jantan  lebih.  Selain  itu  tingkat stress pada mencit betina lebih tinggi
dibandingkan dengan mencit jantan yang mungkin  dapat  mengganggu  pada  saat  pengujian (Mutiarahmi et al., 2021) . Mencit yang digunakan merupakan  mencit  dengan  bobot  20–30  gr  dan telah  diaklimatisasi  selama  7  hari  dengan  tetap diberikan makanan dan minuman ad libitum
Pemberian  perlakuan  dilakukan  secara intraperitonial  pada  mencit  yang  menyebabkan timbulnya  rasa  nyeri.  Rasa  nyeri  ini  akan menimbulkan mencit menggeliat. Gerakan mencit yang  dianggap  sebagai  geliat  adalah  saat  mencit menarik  kedua  kaki  kebelakang  hingga  batas
maksimal  menyebabkan  perut  bagian  bawah menyentuh  alas  temapt  perlakuan  seperti  pada gambar berikut.

## Gambar 1 Kriteria geliat
Hasil  pengamatan  yang  diperoleh  berupa rata-rata jumlah geliat yang terjadi dalam selang
waktu  5  menit  selama  60  menit  untuk  setiap kelompoknya  dan  dapat  dilihat  pada Tabel  4 . Pada  ketiga  kelompok  fraksi  baik  itu  fraksi  n- heksan,  etil  asetat  maupun  etanol  menunjukkan adanya  perbedaan  rata-rata  jumlah  geliat dibandingkan  kelompok  kontrol  negatif  (CMC), dimana  geliat  pada  kelompok  CMC  ini  lebih besar  dari  kelompok.  Hal  ini  menunjukkan adanya efek analgesik dari dexametason maupun
fraksi daun senggani.
Tabel 4 Rata-rata geliat mencit selama perlakuan Kelompok Menit Ke- 5 10 15 20 25  30 35 40  45 50 55  60 CMC 17,8  18,6  15,2  12,8 11  8,6 7,2  4,6  5,6  5,6  5,8  6,4 Dexa 5 4,6 3,8 2,2 2,4  0,8 0,4  0,8  0,8  0,6  0,2  0,4 n-heksan 4,4 5 2,4 3,2 2,6  2,4 1,2 1  0,6  0,4  0,4  0 Etil asetat 2,8  4,2 2,4 2,8 2  2,8 1,4 1  0,4  0,8  0,6  0 Etanol 2 3 1,8 2,2 1,8  1 1,4  0,8  0,4  0,2  0,2  0
Efek  analgesik  akan  berbanding  terbalik dengan  jumlah  geliat,  dimana  semakin  banyak jumlah  geliat  maka  semakin  rendah  efek analgesiknya. Pada kelompok CMC menghasilkan  geliat  paling  banyak  karena  CMC ini tidak memiliki senyawa yang dapat membantu dalam  efek  analgesik.  Kelompok  yang  paling sedikit  menghasilkan  rata-rata  jumlah  geliat adalah kelompok kontrol positif yaitu dexametason dan fraksi etanol, dimana berdasarkan  hasil  ini  dapat  dinyatakan  bahwa semakin  sedikit  jumlah  rata-rata  geliat  yang dihasilkan  maka  semakin  baik  efek  analgesik
yang  ditimbulkan.  Obat  dexametason  digunakan sebagai kontrol positif karena dapat menghambatrespon  sistem  kekebalan  tubuh berlebih yang memicu munculnya reaksi peradangan
sehingga dapat mengurangi rasa nyeri.
Pemberian  fraksi  daun  senggani  dan dexametason sebagai kontrol positif bisa meningkat atau menurun karena penyerapan yang tidak  bagus  pada  saluran  cerna,  pembuluh  darah atau  peningkatan  ekskresi  melalui  ginjal.  Hal tersebut  bergantung  pada  faktor  patologik  dari masing-masing mencit itu sendiri.

## Gambar 2 Hasil Pengamatan Geliat
Hasil  pengamatan  berdasarkan Gambar  2 menyatakan  bahwa  jumlah  geliat  terbanyak ditunjukkan pada menit ke-10 dan setelahnya akan berangsur-angsur  menurun.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  asam  asetat  sebagai  penginduksi  nyeri mempunyai  efek  maksimal  pada  menit  ke10  dan sesudahnya  akan  melemah kerjanya dalam menginduksi  nyeri.  Namun,  induksi  nyeri  masih tetap terjadi sampai menit ke-60 meski tidak sekuat awal. Hal ini ditandai dengan masih terdapat geliat hingga menit ke- 60.
Jumlah  geliat  pada  kontrol  negatif  pada setiap  waktu  pengamatan  selalu  jauh  di  atas kelompok lain yang diberi perlakuan. Dari hasil ini dapat  dikatakan  bahwa  kelompok  uji  selain  CMC memiliki  aktivitas  analgetik  ditandai  dengan adanya  penurunan  jumlah  geliat  dibandingan dengan kontrol negatif. Hal ini menandakan bahwa CMC tidak bertindak sebagai analgesik. Kelompok CMC  ini  menginterpretasikan  kondisi  normal tubuh  saat  mendapat  induksi  nyeri  dimana  asam asetat  sebagai  penginduksi  nyeri  akan  mengiritasi jaringan  dengan  cara  pelepasan  ion  H+  di  dalam rongga  peritoneal  sehingga  dapat  merangsang ujung  saraf  nyeri  atau  nosiseptor  sehingga  akan terjadi  proses  transduksi,  transmisi,  modulasi  dan diakhiri  dengan  persesi  nyeri  yang  menyebabkan
timbul  gerakan  menggeliat  pada  mencit  (Khoerul et  al.,  2019).  Sehingga,  berdasarkan  gambar  2 tersebut  dapat  diketahui  bahwa  kelompok  fraksi etanol  menunjukkan  jumlah  geliat  paling  sedikit degan  rata-rata  jumlah  geliat  sebesar  diikuti kelompok  fraksi  etil  asetat,  kontrol  positif,  fraksi n-heksan  dan  kontrol  negatif  yaitu  kelomok  CMC dengan nilai paling besar.
Induksi  asam  asetat  melalui  intraperitoneal menyebabkan  respon  nyeri  (geliat)  karena  adanya rangsangan  nosiseptif  perifer  oleh  prostaglandin. Asam  asetat  tersebut  menyebabkan  terjadinya pelepasan substansi endogen berupa asam arakhidonat  yang  melalui  jalur  siklooksigenase (COX)  melepaskan  prostaglandin  yang  berperan sebagai  mediator  inflamasi.  Prostaglandin  melalui sumsum tulang belakang dan stimulasi saraf aferen kemudian  menghasilkan  respon  nyeri  berupa kontraksi geliat (Ali et al., 2016).
Hasil rata-rata jumlah geliat digunakan untuk menghitung  persentase  proteksi  analgesik,  yang dimaksudkan  untuk  mengetahui  besarnya  daya analgetic  dari dexametason, fraksi n-heksan, fraksi etil  asetat,  dan  fraksi  etanol  dibandingkan kelonpok  kontrol  CMC.  Persentase  proteksi  (%) dapat menunjukkan besar daya analgetik bahan uji

## Geliat  Hewan Uji Dari Berbagai Kelompok Berdasarkan Waktu
20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 5' 10' 15' 20' 25' 30' 35' 40' 45' 50' 55' 60' CMC-Na Dexamethason n-Heksan Etil Asetat Etanol
dalam  mengurangi  respon  nyeri  (geliat)  (Khoerul et al., 2019)
Gambar 3 Persen proteksi analgesik Berdasarkan Gambar 3 menunjukkan bahwa kelompok fraksi etanol memberikan persen proteksi  analgesik  yang  paling  tinggi  sebesar 87,58%  diikuti  dengan  kelompok  etil  asetat sebesar 82,21%, dexametason sebesar 81,54% dan n-heksan  sebesar  80,20%.  Perbedaan  tersebut mengindikasikan  bahwa  aktivitas  analgesik  dari fraksi  etanol  lebih  tinggi  dibandingkan  ekstrak lain.  Bahkan  sedikit  lebih  kuat  bila  dibandingkan kontrol  positif  yaitu  dexametason.  Hal  ini  terjadi karena  fraksi  etanol  daun  senggani  akan  menyari lebih  banyak  senyawa  polar  seperti  senyawa fenolik,  flavonoid,  tanin  dan  saponin.  Beberapa senyawa  polar  tersebut  salah  satunya  yaitu flavonoid  diketahui  mempunyai  aktivitas  sebagai analgesik.  Penelitian  Khoerul  et  al.,  (2019) menunjukkan  bahwa  ekstrak  tumbuhan  yang mengandung  senyawa  fenol  dapat  menurunkan jumlah geliat mencit secara signifikan dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif.
Mekanisme  kerja  analgesik  pada  fraksi terbaik  yaitu  fraksi  etanol  yang  memiliki  senyawa flavonoid  yaitu  dengan  cara  menghambat  enzim siklooksigenase  (COX)  dan  lipoksigenase  (LOX) pada  jalur  asam  arakidonat  sehingga  menghambat pembentukan  mediator  nyeri.  Senyawa  flavonoid
dapat  bekerja  sebagai  agen  analgesik  dengan  cara menghambat  aktivitas  enzim  siklooksigenase (COX)  dan  lipoksigenase  (LOX)  sehingga  terjadi pengurangan  produksi  prostaglandin di jalur asam arakidonat sehingga mengurangi terjadinya vasodilatasi  pembuluh  darah  dan  aliran  darah lokal.  Hal  tersebut  mengakibatkan  migrasi  sel radang  pada  area  radang  akan  menurun.  Sehingga dapat  mengurangi  terbentuknya  radang,  timbulnya rasa  nyeri,  menstabilisasi  reseptor  nyeri,  dan menjadi  penentu  lamanya  nyeri.  Selain  itu  dalam fraksi  etanol  juga  mengandung  steroid  yang mempunyai  aktivitas  sebagai  antiinflamasi  yang menghambat  faktor  peradangan sehingga produksi berbagai  mediator  nyeri  turun  yang  menyebabkan persepsi  nyeri  turun  (Setiawan  et  al.,  2024; Zulkarnaen et al., 2024).
Mekanisme  steroid  sebagai  analgesik  yaitu dengan merangsang biosintesis protein lipomodulin yang menyebabkan terhambatnya cara kerja  enzim  fosfolipase  yang  berperan  langsung pada  inflamasi  dan  nyeri  dengan  melepaskan prostanoid  pada  jalur  asam  arakidonat  kemudian dikatalisasi  oleh  siklooksigenase  membentuk  jalur prostaglandin.  Terhambatnya  cara  kerja  enzim fosfolipase akan menyebabkan jalur siklooksigenase  (COX)  dan  lipoksigenase  (LOX) terblok  sehingga  pembentukan  mediator  nyeri menjadi terhambat (Lara dan Elisma. 2021). Selain itu  dalam  fraksi  etanol  juga  mengandung saponin. Menurut penelitian Khoerul et al., (2019) diketahui bahwa  fraksi  yang  mengandung  senyawa  saponin juga  dapat  menurunkan  jumlah  geliat  mencit dengan menghambat aktivitas enzim siklooksigenase  (COX)  yang  bertanggung  jawab
Persetase Penghambatan Geliat  Setiap Kelompok 90 87,58 85
80 81,54 82,21 80,20 75
dexa n-heksan    etil asetat  etanol
dalam  produksi  prostaglandin.  Sehingga  hal  ini menyebabkan  fraksi  etanol  menjadi  fraksi  paling efektif pada penelitian ini.

## Analisis Statistik
Analisis data dilakukan dengan uji One way ANOVA untuk  mengetahui  perbedaan  proteksi analgesik  dari  tiap  perlakuan  yang  ditandai dengan  jumlah  geliat.  Hipotesis  perbandingan antar  kelomok  yang  diuji  analgesik  adalah  Ho tidak terdapat perbedaan geliat antar kelomok dan H1  dimana  terdapat  perbedaan  geliat  antar kelompok.
Hasil  uji  yang  telah  diperoleh  dilanjutkan dengan  pengolahan  data  menggunakan  analisis statistik.  Uji  normalitas  digunakan  untuk  melihat apakah  data  tersebut  terdistribusi  normal  atau tidak. Sedangkan uji homogenitas digunakan untuk menentukan  apakah  data  terdistribusi  homogen atau tidak. variansi satu arah  (ANOVA  one  way). Hasil  uji  statistik yang diperoleh dari pengamatan jumlah  geliat  pada  mencit  memiliki  nilai signifikansi  normalitas  sebesar  ρ  =  0,000 sementara, nilai signifikansi homogenitas sebesar ρ =  0,000  Hal  ini  menandakan  bahwa  data  tidak
terdistribusi normal dan tidak bervariansi homogen karena tidak memenuhi syarat yaitu ρ >0,05. maka analisis  tidak  dapat  dilanjutkan  dengan  analisis menggunakan ANOVA one way. Karena syarat dari analisis  one  way  ANOVA  yaitu  data  harus terdistribusi  normal  dan  homogen.  Penyelesaian yang  bisa  dilakukan  saat  pengujian One  way ANOVA tidak  berlaku  yaitu  digunakan  uji alternatif,  dimana  pada  uji  alternatif Kruskal Wallis tidak  mensyaratkan  data  yang  diperoleh normal dan homogen.
Tabel 5 Hasil analisis kruskal wallis
Geliat Chi-Square 123,614 Df 4 Asym.Sig 0,000
Berdasarkan uji kruskal-wallis pada Tabel 5 diperoleh  nilai  ρ  =  0,000.  Oleh  karena  nilai  ρ <0,05  maka  dapat  diambil  kesimpulan  bahwa paling  tidak  terdapat  perbedaan  geliat  antara  dua kelompok.  Untuk  menentukan  kelompok  mana yang memiliki perbedaan tersebut maka dilakukan analisis post  hoc yang  dilakukan  dengan membandingkan ada tidaknya perbedaan bermakna tiap kelompok.
Tabel 6 Hasil analisis Mann Whitney geliat mencit tiap kelompok
Kelompok CMC Dexa n-heksan Etil asetat  Etanol CMC 0,000** 0,000** 0,000** 0,000** Dexa 0,587 0,757 0,141 n-heksan 0,713 0,052* Etil asetat 0,075*

## Etanol
Keterangan :   (*) terdapat perbedaan bermakna pada derajat kepercayaan 95% (ρ <0,05)
(**) terdapat perbedaan bermakna pada derajat kepercayaan 99% (ρ <0,01)
Alat  untuk  melakukan  uji post  hoc pada  uji Kruskal  Wallis adalah  dengan  uji Mann  Whitney
antar kelompok. Keempat kelompok tersebut dapat digunakan  untuk  terapi  analgesik  karena  semua
dosis ekstrak menghasilkan nilai p<0,01 dibandingkan  kelompok  CMC.  Hal  tersebut menyatakan  bahwa  semua  kelompok  ekstrak memiliki  perbedaan  persen  analgesik  yang  sangat berbeda bermakna dengan kelompok kontrol negatif yang  diberi  CMC  1%,  dimana  kelompok  fraksi memiliki  persen  proteksi  antipiretik  yang  lebih tinggi dari kelompok CMC.
Kelompok  CMC  memiliki  efek  yang  berbeda bermakna  bila  dibandingkan  dengan  keempat kelompok lainya. Hal tersebut terjadi karena CMC tidak memiliki kandungan senyawa yang berkhasiat sebagai analgesik. Jika dilihat dari tabel rata-rata  persen  proteksi  analgesik  fraksi  etanol memiliki nilai yang lebih besar daripada kelompok dosis  lainnya.  Hal  tersebut  kemungkinan  terjadi karena metabolit sekunder flavonoid yang terkandung sebagai analgesik lebih besar.

## KESIMPULAN
Fraksi daun senggani telah teruji memiliki aktivitas analgesik. Aktivitas analgesik menggunakan  metode  induksi  kimia  yang  paling optimum  memberikan  aktivitas  analgetik  adalah fraksi  etanol  dengan  nilai  %  proteksi  sebesar 87,58%. Karena metabolit sekunder yang terkandung  dalam  fraksi  daun  senggani  memiliki senyawa alkaloid, flavonoid, saponin dan tanin.

## DAFTAR PUSTAKA
Ali,  A.H.A.,  Rinidar,  Armansyah,  T.,  Rosmaidar, Harris,  A.,  dan  Dasrul.  (2016).  Potensi Ekstrak  Daun  Sernai  ( Wedelia  biflora ) Sebagai  Antinyeri  Pada  Mencit  ( Mus musculus ). Jurnal  MedikaVeterinaria .  10  :
137-140.
Alkandahri MY, PN Siahaan, Salim E, Fatimah C.
AntiInflammatory  activity  of  Cep-cepan
leaves  ( Castanopsis  costata (Blume)  A.DC). Int J Curr Med Sci . 2018;8(4A):424-429. Amalia  A,  Romdon  DS,  Kusumawati  N,  Salsabila MA,  Afifah  ND,  Shaomitha  R, et  al . Antihyperuricemia activities of several active compounds from medicinal plants: A review. Eur J Biomed Pharm Sci , 2024; 11(3): 15-18. Andini  DAP,  Utami  DSP,  Puspawati  I,  Geralda AY,  Apriani  IP,  Syalomita  D, et  al .
Antidyslipidemic  activity  of  some  medicinal plants from Karawang, West Java, Indonesia: A  review. Eur  J  Pharm  Med  Res ,  2024; 11(3): 1-4.
Anwar, Khoerul., Riswandi, Muhammad., Nurlely. (2019).  Perbandingan  Aktivitas  Analgetik Infusa dan Ekstrak Etanol Umbi Akar Tawas Ut (Ampelocissus rubiginosa Lauterb.). Jurnal Pharmascience, Vol.  06  ,  No.02,  Oktober 2019, hal:  40  – 47.
Budiyanti  LE,  Saputra  MYKA,  Wulandari  SA, Amallia  S,  Azzahra  AJ,  Sagala  BC, et  al .
Antihypertensive  effects  of  some  medicinal plants  in  Indonesia:  A  review. Eur  J  Pharm Med Res , 2024; 11(3): 5-8.
Dewi,  Sisilia  Rosmala.,  dan  Salim, Hiany. (2018).
Uji  Efek  Analgetik  Infusa  Jahe  (Zingiber Officinale  Roscoe)  Terhadap  Hewan  Uji Mencit  Jantan  (Mus  musculus). Media Farmasi p.issn 0216- 2083  e.issn  2622-0962
Vol.  XV  No.  2, Oktober 2018.
Halima,  Susanna.,  Ermi,  Girsangb.,  I  Nyoman Ehrich  Listerc.,  &  Ali,  Napiah  Nasutiond.
(2019).  Effectivity  of  Gel  Ethanolic  Extract of Senggani Leaves (Melastoma candidum D. Don)  in  Increasing  the  Number of Fibroblast Cells  and  Thickness  of  Collagen  Fibers Against Socket Wound after Tooth
Extraction  on  Male  White  Rats. American Scientific  Research  Journal  for  Engineering, Technology,  and  Sciences (ASRJETS)  ISSN 2313-4410, ISSN 2313-4402.
Keswara,  Yane  Dila.,  Handayani.,  Sri  Rejeki.
(2019).  Uji  Aktivitas  Analgetik  Ekstrak Etanol  Daun  Inggu  (Ruta  angustifolia  [l.] Pers) Pada Tikus Putih Jantan. Journal Syifa Sciences  and  Clinical  Research Volume  1 Nomor 2, September 2019.
Khan,  B.  A.,  Ahmad,  S.,  Khan,  M.  K.,  Hosny, K. M.,  Bukhary,  D.  M.,  Iqbal,  H.,  Murshid,  S. S.,  Halwani, A. A., Alissa, M., & Menaa, F. (2022). Fabrication  and  Characterizations of  Pharmaceutical  Emulgel  Co-Loaded with Naproxen-Eugenol for Improved
Analgesic  and  Anti-Inflammatory  Effects. Gels, 8(10), 608.
Lara,  AD,  Elisma,  Sani  F.  (2021)  Uji  aktivitas analgesik  infusa  daun  jeruju  (Acanthus ilicifolius  L.)  Pada  mencit  putih  jantan (Mus musculus ).  Ind  J  Pharma  Science ,  3(2):  71- 80..
Lee,  Y.  M.,  Son,  E.,  Kim,  S.-H.,  &  Kim,  D.-S.
(2022). Anti-Inflammatory  and  Analgesic
Effects of Schisandra chinensis Leaf Extracts and  Monosodium Iodoacetate- Induced  Osteoarthritis  in  Rats  and  Acetic Acid- Induced  Writhing in Mice. Nutrients, 14(7), 1356. https://doi.org/10.3390/nu14071356.
Low, Jun Sheng., Kit-Kay, Mak., Mallikarjuna, Rao Pichika.,  Puvaneswari,  Marappan.,  Shiming Zhang.,Apiwat,  Jiampanichkul.,  Servenna Chua.,  Kavitha  Mohandas.,  &  Madhu Katyayani  Balijepalli.  (2021).  Melastoma Malabathricum  L.:  A  Review  Of  Its
Traditional Uses, Phytochemical
Constituents  And  Bioactivities. Journal  of Global  Trends  in  Pharmaceutical  Sciences ISSN- 2230-7346 12 (2): 9257– 9274.
Maravirnadita,  Ariadna  Hisela.  (2019). Uji Aktivitas  Antioksidan  Fraksi  N-Heksan,  Etil Asetat, Dan Air Dari Buah Belimbing Manis (Averrhoa  Carambola)  Dengan  Metode DPPH. Yogyakarta  :  Universitas  Ahmad
Dahlan.
Nosek,  K.,  Leppert,  W.,  Puchała,  Ł.,  &  Łoń,  K.
(2022).  Efficacy  and  Safety  of  Topical
Morphine: A Narrative Review. Pharmaceutics, 14(7), 1499. https://doi.org/10.3390/pharmaceutics14
071499.
Noval  dan  Ali,  R.  H.  (2014). Uji  Aktivitas Antipiretik Infusa Daun Mahkota Dewa
62  (Phaleria  Macrocarpa  (Scheff)  Boerl.)  Pada Tikus  Putih  Galur  Wistar.  Banjarmasin :
Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Sari Mulia.
Noviyanty,  Yuska.,  Reni,  Febrianti.,  Hepiyansori.
(2022).  Ekstraknasi  Dan  Skrining  Ekstrak Ekstrak  Etanol  Daun  Binahong  (Anredera Cordifolia (Ten) Steenis) Dengan Menggunakan  Metode  Kromatografi  Lapis Tipis. Jurnal Ilmiah Pharmacy, 2022, Vol. 9 No.2,
Nurfitriah SF, Jayanti K, Putri BA, Trisnawati, T, Putri  R,  Oktavia  SS, et  al .  Aktivitas Antipiretik  dari  Beberapa  Senyawa  Aktif. Jurnal Buana Farma . 2021;1(3):14-20.
Nurhamidah W, Wijaya GD, Nurshazidah S, Zulfa AN,  Chaerunnisa,  Solihat  S, et  al . Anticoagulant  activities  of  several  active compounds  from  medicinal  plants:  A review. Eur J Pharm Med Res , 2024; 11(3): 13-16.
Nurul.,  Dani,  Sujana.,  Yogi,  Rahman  Nugraha.,
Zahara,  Farhan.,  &  Dadang,  Muhammad Hasyim.  (2021).  Studi  In  Vivo  :  Efek Analgesik  Ekstrak  Dan  Ekstrak  Air  Akar Pakis  Tangkur  (Polypodium  Feei  Mett).
Journal of Pharmacopolium, Volume 4, No. 3, Desember 2021, 242-249.
Nurulhadi  ZF,  Mudrikah  S,  Amelia  T,  Valentina DP,  Kurniawati  I,  Yuniar  RR, et  al .  Anti- hyperuricemia  activity  of  some  medicinal plants from Karawang, West Java, Indonesia: A review. Eur J Pharm Med Res , 2024; 11(3): 9-12.
Santoso,  Budi.,  danang,  Raharjo,.  Desy,  Ayu.
(2022).  Penetapan  Kadar Flavonoid dan Uji Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol  70%,
Fraksi  N-Heksana,  Etil  Asetat,  dan  Air  dari Kubis  Putih  dan  Kubis  Ungu Menggunakan Metode  Frap.  Cerdika: Jurnal  Ilmiah Indonesia, September 2022, 2 (9), 752-764. Setiawan MA, Fuadah TZ, Ningsih DU, Nabil M,
Nababan  A,  Nurhabibah  I, et  al .  The  genus Begonia  ( Begoniaceae ):  A  review  of pharmacological  studies. Eur  J  Biomed Pharm Sci , 2024; 11(3): 04-07.
Styawan, Anita. A., dan Budiman, Hendra. (2015).
Pengaruh  Penurunan  Dosis  Dari  Ekstrak Batang  Brotowali  (Tinospora  Crispa,  L.) Terhadap  Efek  Antipiretik  Pada  Tikus  Putih Jantan  Galur  Wistar.  Cerata  Journal  Of Pharmacy Science.
Tamimi,  Alyah  Ananta  Pratiwi.,  Edwin,  de Queljoe.,  Jainer,  Pasca  Siampa.(2020).  Uji Efek  Analgesik  Ekstrak  Etanol  Daun  Kelor (Moringa  Oleifera  Lam.)  Pada  Tikus  Putih Jantan  Galur  Wistar  (Rattus  Norvegicus).
Manado :

## PHARMACON- FMIPA
Universitas Sam Ratulangi.
Ujung  RMU,  Khoerunnisa  A,  Abimanyu  ARP,
Amalia,  Rahayu  ADP,  Mangunsong  DT, et al . Anti-diarrheal activity of some medicinal plants in Indonesia: A review. Eur J Biomed Pharm Sci , 2024; 11(3): 11-14.
Putri  A,  Putri  AA,  Nurhalisa  E,  Nurazizah  F,
Labibah  HT,  Iskandar  JD, et  al . Apium graveolens for the treatment
of cardiovascular  disease:  A  review. Eur  J Biomed Pharm Sci , 2024; 11(3): 19-23.
Zheng,  When-Jun.,  Ying-Shan,  Ren.,  Miao-Li,
Wu., Ya-Ling, Yang., Yi, Fan e., Xiu- Hong,
Piao.,  Yue-Wei,  Ge.,  &  Shu-Mei,  Wang.
(2021).  A  review  of  the  traditional  uses, phytochemistry  and  biological  activities  of the Melastoma genus. Journal of
Ethnopharmacology.
https://doi.org/10.1016/j.jep.2020.11332.
Zulkarnaen  P,  Fadila  N,  Fadhilah  LN,  Kartika,
Kardila  K,  Laely  N, et  al .  Pharmacological activity  of Selaginella  doederleinii Hieron: An  updated  review. Eur  J  Pharm  Med  Res , 2024; 11(3): 17-20.