Induksi pematangan gonad ikan koan Ctenopharyngodon idella (Valenciennes, 1844) dengan menggunakan hormon dan pakan Indigofera zollingeriana
[Maturational induction of grass carp, Ctenopharyngodon idella (Valenciennes, 1844) using hormone and Indigofera zollingeriana feed]
Dwi Mulyasih 1 , Agus Oman Sudrajat 2 , Luki Abdullah 3
1 Program Studi Ilmu Akuakultur, Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor (IPB)
2 Departemen Budidaya Perairan, Fakultas perikanan dan Ilmu Kelautan IPB
3 Departemen Ilmu Nutrisi dan Teknologi Pakan, Fakultas Peternakan IPB Jl. Agatis, Kampus IPB, Dramaga, Bogor 16680
Surel : dwi.mulyasih29@gmail.com
Diterima: 7 Agustus 2015; Disetujui: 15 Desember 2015

## Abstrak
Premiks hormon pregnant mare serum gonadotropin (PMSG) dan anti dopamin dapat mempercepat pematangan gonad pada ikan. Indigofera zollingeriana merupakan tumbuhan leguminosa yang memiliki nutrisi tinggi dan mengandung ka- rotenoid yang berfungsi untuk perkembangan oosit. Tujuan penelitian ini untuk mempercepat pematangan gonad meng- gunakan  premiks  hormon  serta  menggantikan  pakan  komersial  dengan  pakan  indigofera  pada  ikan  koan  ( Ctenopha- ryngodon idella ). Penelitian menggunakan rancangan acak lengkap dengan lima perlakuan yaitu A (NaCl fisiologis 0,5 ml  kg -1 bobot  tubuh  + pakan  komersial),  B  (NaCl  fisiologis  0,5 ml  kg -1 bobot  tubuh + pakan  indigofera),  C  (premiks hormon 0,5 ml kg -1 bobot tubuh + pakan komersial), D (premiks hormon 0,5 ml kg -1 bobot tubuh + pakan indigofera), E (premiks hormon 0,5 ml kg -1 bobot tubuh dalam pakan indigofera) dan lima kali ulangan individu. Hasil penelitian me- nunjukkan bahwa estradiol-17β mencapai puncak pada minggu keempat pada perlakuan C yaitu sebesar 1194,8 p g ml -1 sedangkan pada perlakuan E konsentrasi estradiol-17β lebih tinggi daripada perlakuan lain pada minggu kedelapan. Pa- da akhir penelitian indeks kematangan gonad tertinggi diperoleh pada perlakuan E. Penambahan premiks hormon pada pakan dapat meningkatkan kematangan gonad hingga mencapai fase perinukleus sedangkan pada kontrol tidak berkem- bang.  Hasil  ini  menunjukkan  bahwa  premiks  hormon  dapat  menginduksi  kematangan  gonad,  pakan  indigofera  dapat menggantikan pakan komersial sebagai pakan induk, dan induksi pematangan gonad secara hormonal dapat dilakukan dengan pemberian pakan yang lebih kompetitif.
Kata penting: Estradiol-17β, indeks kematangan gonad, Indigofera zollingeriana , koan, premiks hormon

## Abstract
Pregnant  mare  serum  gonadotropin  (PMSG)  premix  hormone  and  anti  dopamine  were  used  to  accelerate  maturation. Indigofera  zollingeriana a  legume  plant  that has  high nutrition  content  and  carotenoids  whose  has  function  in  oocyte development. The aim of this research was to accelerate the maturation of  grass carp ( Ctenopharyngodon idella ) using premix hormone and to replace the commercial feed with indigofera. The research was conducted in couple randomize design (CRD), using five treatments which were A (NaCl 0.5 ml kg -1 body weight + commercial feed), B (NaCl 0.5 ml kg -1 body weight + indigofera feed), C (premix hormone 0.5 ml kg -1 body weight + commercial feed), D (premix hor- mone 0.5 ml kg -1 body weight + indigofera feed) and E (premix hormone 0.5 ml kg -1 body weight in indigofera feed) and five fishes as individual replication. The result showed that 17β- estradiol concentration reached the highest level at 4-week  on  C  treatment  1194.8  pgmL -1 ,  while  in  E  treatment  17β-estradiol  concentrations  was  higher  than  the  other treatments  at  8-week.  At  the  end  of  research  period,  the  highest  gonadosomatic  index  (GSI)  was  performed  by  E treatment. Addition of premix hormone on feed could increase the gonadal maturation up to perinucleus phase, while in control  was  still  immature.  These  results  indicated  that  premix  hormone  could  induce  gonadal  maturity,  indigofera could  replace  commercial  feed  as  broodstock  diet,  and  gonadal  maturation  through  hormonal  induction  could  be perform by giving more competitive feed.
Keywords: Estradiol-17β, gonadosomatic index, Indigofera zollingeriana , grass carp premix hormone

## Pendahuluan
Ikan  koan  ( Ctenopharyngodon  idella ) merupakan komoditas perairan tawar yang ba-
nyak  digunakan  sebagai  indikator  dalam  mena- ngani blooming alga  yang  terjadi  di  perairan tawar (Mitchell & Kelly 2006). Hal ini dikarena- kan  ikan  koan  merupakan  ikan  herbivora  yang
 Penulis korespondensi
Surel: dwi.mulyasih29@gmail.com
pakannya  berupa  makrofita  seperti  rumput, makroalga, dan mikroalga (Cudmore & Mandrak 2004).  Dengan  demikian,  ikan  koan  dapat diperhitungkan kemampuannya untuk menangani salah satu permasalahan perairan dalam kegiatan budi daya.
Salah  satu  kendala  dalam  budi  daya  ikan koan  adalah  rendahnya  ketersediaan  benih  yang disebabkan  oleh  lamanya  waktu  pemijahan.  Pe- mijahan  koan  masih  dipengaruhi  oleh  musim (Cudmore  &  Mandrak  2004).  Pemijahan  koan dapat  terjadi  secara  optimal  pada  musim  peng- hujan dan sulit terjadi pada musim kemarau. La- manya  pemijahan  koan  dipengaruhi  oleh  lama- nya  proses  pematangan  gonad.  Selain  itu,  koan merupakan ikan herbivora, namun dalam pemeli- haraannya  menggunakan  pakan  komersial  de- ngan bahan baku terbesar yaitu tepung ikan. Oleh karena itu, perlu dilakukan  suatu cara untuk  me- nangani  pemijahan  koan  dan  mengurangi  peng- gunaan tepung ikan dalam kegiatan budi daya.
Induksi  pematangan  gonad  dengan  meng- gunakan  premiks  hormon Pregnan  Mare  Serum Gonadotropin (PMSG)  dan  anti  dopamin  meru- pakan salah  satu cara  untuk  mempercepat  pema- tangan  gonad  pada  ikan  koan.  Penggunaan  pre- miks hormon PMSG dan anti dopamin dapat me- ningkatkan  konsentrasi  estradiol-17β  dan  dapat meningkatkan kematangan gonad pada ikan patin (Rachman  2013)  dan  ikan  belut  (Putra  2013). PMSG  ( Pregnant  Mare  Serum  Gonadotropin ) merupakan  hormon  sintesis  glikoprotein  yang disekresikan  dari  sel-sel  tropoblas  kuda  yang  di dalamnya  terkandung Follicle  Stimulating  Hor- mone (FSH)  dan Luteinizing  Hormone (LH) (Moore & Ward 1980). Anti dopamin merupakan senyawa  kimiawi  yang  menghambat  kerja  dopa- min.  Pada  ikan,  dopamin  dapat  menghambat  ta- hapan  akhir  pada  regulasi  neuroendokrin  yang merupakan  tahap  akhir  gametogenesis  yaitu  per-
kembangan  oosit  akhir  dan  ovulasi  pada  jantan dan betina (Dufour et al . 2010).
Indigofera zollingeriana merupakan  tum- buhan  yang  termasuk  dalam  kelompok  legumi- nosa  yang  tumbuh  liar  di  daerah  subtropis  dan tropis.  Indigofera  memiliki  kandungan  protein hingga mencapai 31,31% (Abdullah  & Suharlina 2010, Abdullah et al . 2012). Selain itu indigofera juga  memiliki  kandungan  kalsium,  fosfor,  kali- um, xanthophyl, dan karotenoid (Akbarillah et al . 2002, Abdullah et al . 2012). Karotenoid yang ter- dapat  pada  pakan  indigofera  memiliki  pengaruh besar  terhadap  perkembangan  telur.  Pemberian daun  indigofera  segar  sebanyak  5-10%  pada  itik menghasilkan  produksi  dan  kualitas  telur  itik yang baik dibandingkan dengan yang tidak dibe- rikan (Akbarillah et al . 2010). Selain itu pembe- rian tepung daun indigofera  menghasilkan  kuali- tas  kuning  telur  burung  puyuh  yang  lebih  baik (Akbarillah et al . 2008). Karotenoid pada indigo- fera merupakan antioksidan yang dapat menahan lemak  dan  merupakan  penyusun  fosfolipid  agar tidak  teroksidasi.  Selanjutnya,  pada  proses  vite- logenesis,  folikel  akan  mensintesis  hormon  ste- roid  dan  dibawa  ke  dalam  gonad  untuk  menga- lami perkembangan oosit. Pemberian pakan yang mengandung  indigofera  belum  pernah  dilakukan pada  ikan.  Oleh  karena  itu,  pemberian  premiks hormon  PMSG  dan  anti  dopamin  dengan  pakan indigofera  bertujuan  untuk  mempercepat  pema- tangan gonad ikan koan.

## Bahan dan metode
Penelitian  dilaksanakan  di  Balai  Besar Perikanan  Budidaya  Air  Tawar  Sukabumi,  Jawa Barat  pada  bulan  Desember  2014  hingga  bulan April  2015.  Ikan  uji  yang  digunakan  adalah  in- duk ikan  koan  yang berasal dari Balai Besar Pe- ngembangan  Budidaya  Air  Tawar  Sukabumi  de-
ngan  bobot  rata-rata  3,22±0,30  kg  berjumlah lima ekor setiap ulangan.
Perlakuan  yang  diberikan  meliputi  A (NaCl  0,5  ml  kg -1 bobot  tubuh  +  pakan  komer- sial),  B  (NaCl  0,5  ml  kg -1 bobot  tubuh  +  pakan indigofera),  C  (premiks  hormon  0,5  ml  kg -1 bo- bot  tubuh  +  pakan  komersial),  D  (premiks  hor- mon 0,5 ml kg -1 bobot tubuh + pakan indigofera), dan  E  (premiks  hormon  0,5  ml  kg -1 bobot  tubuh dalam pakan indigofera). Ikan koan dipelihara di dalam  waring  dengan  ukuran  2  m  x  2  m  x  1  m. Pemberian  pakan  dilakukan  sebanyak  tiga  kali pada pagi, siang, dan sore hari sebanyak 3% dari bobot tubuh ikan koan.

## Pembuatan pakan indigofera
Pakan  indigofera  yang  digunakan  adalah bagian daun dan ranting dipilih kemudian dilaku- kan pengeringan selama dua  hari. Setelah itu di- lakukan penepungan dan pencetakan pakan. Pro- ses  pencetakan  pakan  indigofera  ditambahkan perekat  yaitu  sagu.  Selain  itu  ditambahkan  mi- nyak ikan sebanyak 30 g per kg pakan indigofera (Darwisito et al . 2008).

## Pencampuran hormon pada pakan indigofera
Hormon  yang digunakan dalam penelitian adalah premiks hormon PMSG dan anti dopamin. Pemberian premiks hormon dalam pakan indigo- fera  adalah  dengan  cara  disemprotkan  ke  pakan. Premiks hormon sebanyak 0,5 mL kg -1 pakan di- campurkan dengan NaCl fisiologi dan putih telur. Selanjutnya  premiks  hormon  baru  disemprotkan ke dalam pakan. Pemberian premiks hormon da- lam pakan ini dilakukan setiap dua minggu sekali selama tiga bulan masa pemeliharaan.

## Penyuntikan hormon
Hormon  yang digunakan dalam  penelitian adalah premiks hormon PMSG dan anti dopamin
dengan  dosis  0,5  mL  kg -1 bobot  tubuh  ikan.  Pe- nyuntikan  hormon  pada  induk  ikan  koan  dilaku- kan  secara intramuscullar pada  otot  punggung.
Penyuntikan  dilakukan  setiap  dua  minggu  sekali selama tiga bulan pemeliharaan.

## Sampling data
Parameter  uji  yang  diukur  meliputi  per- tambahan bobot tubuh, konsentrasi estradiol-17β, indeks  kematangan  gonad,  tingkat  kematangan gonad, dan histologi gonad.
Pengukuran  pertambahan  bobot  tubuh  di- lakukan  setiap  dua  minggu  sekali.  Pengukuran pertambahan  bobot  tubuh  pada  indukan  meng- gunakan persamaan sebagai berikut.
PB = B t – B 0
Keterangan:  PB=  pertambahan  bobot;  B t =  bobot  rata- rata ikan koan pada saat pengamatan; B 0 = bobot rata- rata ikan koan pada awal penelitian
Pengukuran  konsentrasi  estradiol-17β  da- lam  darah  menggunakan  metode Enzyme-linked Immunosorbent  Assay (ELISA)  dengan  kit  DRG Gmbh Jerman. Pengambilan darah dilakukan pa- da  bagian  pangkal  sirip  ekor  pada  minggu  ke  0, 4, 8, dan 12.
Indeks  kematangan  gonad  (IKG)  merupa- kan  persentase  bobot  gonad  dibandingkan  de- ngan bobot tubuh ikan uji. Penghitungan IKG di- lakukan pada awal dan akhir penelitian.
Pengamatan  tingkat  kematangan  gonad ikan koan dilakukan secara morfologis  dari hasil histologi  gonad  pada  awal  dan  akhir  penelitian. Histologi gonad dilakukan dengan menggunakan pewarnaan hematoksilin dan eosin (H & E).
Pengukuran total karotenoid dilakukan pa- da  indigofera  yang  sudah  dibuat  menjadi  pakan dan pakan komersial dengan menggunakan spek- trofotometer.

## Analisis data
Data  pertambahan  bobot  tubuh  dianalisis menggunakan  analisis  ragam  (ANOVA)  dengan
selang  kepercayaan  95%  menggunakan  program SPSS 20.0. Nilai estradiol-17β dan GSI dianalisis menggunakan  MS.  Excel  2010.  Histologi  gonad dianalisis secara deskriptif.

## Hasil

## Pertambahan bobot tubuh
Pertambahan  bobot  yang  memiliki  nilai tertinggi  terdapat  pada  perlakuan  pakan  komer- sial yang diikuti oleh pakan indigofera. Berdasar- kan hasil analisis statistik didapatkan bahwa per- lakuan  yang  diberikan  memengaruhi  pertambah- an bobot ikan koan (p<0,05) (Tabel 1).
Tabel  1.  Pertambahan  bobot  ikan  koan  selama
tiga bulan pemeliharaan Perlakuan Pertambahan bobot (kg) A 0,69±0,09 b B 0,28±0,03 a C 0,58±0,08 b D 0,24±0,02 a E 0,32±0,04 a
Keterangan: Nilai rataan yang diikuti huruf yang sama tidak  berbeda  nyata  (P>0,05).  (A:  NaCl  fisiologis  0,5 ml kg -1 bobot tubuh + pakan komersial; B: NaCl fisio- logis  0,5  ml  kg -1 bobot  tubuh  +  pakan  indigofera;  C: premiks  hormon  0,5  ml  kg -1 bobot  tubuh  +  pakan  ko- mersial; D: pre-miks hormon 0,5 ml kg -1 bobot tubuh + pakan indigofera; E: premiks hormon 0,5 ml kg -1 bobot tubuh dalam pakan indigofera).
Berdasarkan hasil pertambahan bobot ikan koan, didapatkan bahwa penggunaan pakan indi- gofera memiliki nilai yang masih di bawah pakan komersial.  Hal  ini  disebabkan  adanya  perbedaan
kandungan  protein  dan  serat  kasar  yang  terdapat pada masing-masing pakan (Tabel 2).

## Konsentrasi estradiol-17β
Pada  awal  pengamatan  sebelum  penyun- tikan  hormon,  konsentrasi  estradiol-17β  sebesar 344,6 p g ml -1 . Peningkatan konsentrasi estradiol- 17β  terjadi  pada  minggu  ke-4  dan  ke-8.  Pada minggu  ke-4  perlakuan  C  (premiks  hormon  0,5 ml kg -1 bobot tubuh + pakan komersial) memiliki konsentrasi  estradiol-17β  paling  tinggi  yaitu 1194,8  pg  ml -1 .  Pada  minggu  ke-8,  konsentrasi estradiol-17β tertinggi terdapat pada perlakuan E (premiks hormon 0,5  ml  kg -1 bobot tubuh dalam pakan  indigofera)  yaitu  sebesar  1180,6 p g  ml -1 . Pada akhir pengamatan semua perlakuan menga- lami  penurunan  konsentrasi  estradiol-17β  (Gam- bar  1).  Penurunan  konsentrasi  tersebut  menun- jukkan adanya pengaruh penggunaan tanaman in- digofera.

## Indeks kematangan gonad (IKG)
Pada awal penelitian diambil gonad betina ikan  koan  sebanyak  satu  ekor  mewakili  seluruh perlakuan dengan IKG sebesar 0,58%. Pada akhir penelitian  diambil  gonad  betina  ikan  koan  seba- nyak satu ekor setiap perlakuan. Nilai IKG secara berurutan  dari  yang  terendah  hingga  tertinggi adalah  perlakuan  E  (2,49%),  perlakuan  D (2,29%),  perlakuan  C  (2,27%),  perlakuan  A (2,13%), dan perlakuan B (1,74%) (Gambar 2).
Tabel 2. Hasil proksimat pakan indigofera dan pakan komersial yang digunakan selama penelitian
Kandungan Pakan indigofera (%) Pakan komersial (%) Air 4,05 10,12 Abu 13,74 9,77 Lemak 5,46 6,53 Protein 21,64 28,55 Serat kasar 10,39 2,34 Karbohidrat 44,72 42,69 GE (kkal 100 g -1 pakan) 355,86 394,29
Keterangan: GE: gross energy , 1 g protein=5,6 kkal GE, 1 g karbohidrat=4,1 kkal GE, 1 g lemak=9,4 kkal GE
Gambar 1. Konsentrasi estradiol-17β pada plasma darah ikan koan pada minggu ke 0, 4, 8 dan 12 (A: NaCl fisiologis 0,5 ml kg -1 bobot tubuh + pakan komersial; B: NaCl fisiologis 0,5 ml kg -1 bobot tubuh + pakan indigofera; C: premiks hormon 0,5 ml kg -1 bobot tubuh + pakan komersial; D: premiks hormon 0,5 ml kg -1 bobot tubuh + pakan indigofera; E: premiks hormon 0,5 ml kg -1 bobot tubuh dalam pakan indigofera).
Gambar 2. Indeks kematangan gonad (IKG) ikan koan pada awal dan akhir penelitian (A: NaCl fisiologis 0,5 ml kg -1 bobot tubuh + pakan komersial; B: NaCl fisiologis 0,5 ml kg -1 bobot tubuh + pakan indigofera; C: premiks hormon 0,5 ml kg -1 bobot tubuh + pakan komersial; D: premiks hormon 0,5 ml kg -1 bobot tubuh + pakan indigofera; E: premiks hormon 0,5 ml kg -1 bobot tubuh dalam pakan indigofera).
0 200 400 600 800 1000 1200 1400 0 4 8 12 C E B A D K onse nt ras i es tr adi ol -17 β (pg /m l) Minggu ke- 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 Awal Akhir C E B A D Inde ks ke mata ng an Gona d (% ) Waktu

## Histologi gonad
Pada akhir penelitian dilakukan uji his tologi pada gonad betina ikan koan. Dari ha- sil  histologi  didapatkan  bahwa  perlakuan  C, D  dan  E  mengalami  perkembangan  menuju pematangan  gonad,  sedangkan  perlakuan  A dan  B  tidak  mengalami  perkembangan  go- nad lebih lanjut. Secara keseluruhan perlaku- an  yang  diberikan  premiks  hormon  baik  se- cara  induksi  maupun  melalui  pakan  menga- lami  pematangan  gonad,  sedangkan  pada perlakuan  tanpa  premiks  hormon  gonad  ti-
dak  berkembang  (Gambar  3).  Hasil  pengu- kuran  total    karotenoid  pada  pakan  indi- gofera dan pakan komersial yang digunakan selama  pemeliharaan  ditunjukkan  dalam Tabel 3.
Tabel  3. Total  karotenoid  pada  pakan  indigofera dan  pakan  komersial  yang  digunakan
selama pemeliharaan Jenis pakan Total karotenoid (µg g -1 ) Pakan indigofera 456,87 Pakan komersial 11,43
Gambar  3.  Histologi  gonad  ikan  koan  (A:  NaCl  fisiologis  0,5  ml  kg -1 bobot  tubuh  +  pakan  komersial;  B: NaCl  fisiologis  0,5  ml  kg -1 bobot  tubuh  +  pakan  indigofera;  C:  premiks  hormon  0,5  ml  kg -1 bobot  tubuh  +  pakan  komersial;  D:  premiks  hormon  0,5  ml  kg -1 bobot  tubuh +  pakan  indi- gofera;  E:  premiks  hormon  0,5  ml  kg -1 bobot  tubuh  dalam  pakan  indigofera)  (N:Nukleus, No:Nukleolus, O:Ooplasma, Oog:Oogonia). Perbesaran mikroskop 40 x 10.
A E C D B

## Pembahasan
Perbedaan  kandungan  protein  pada  pakan komersial  dan  pakan  indigofera  menyebabkan pertambahan  bobot  tubuh  ikan  koan  mengalami perbedaan  nyata  (p<0,05). Protein  pakan  komer- sial  berasal  dari  protein  hewani  dan  nabati,  se- dangkan  protein  pakan  indigofera  hanya  berasal dari protein nabati. Perbedaan protein pakan akan menyebabkan  perbedaan  dalam  pertumbuhan ikan  (Ghazala et  al .  2011).  Hal  ini  yang  menye- babkan perbedaan pertambahan bobot ikan koan. Selain itu juga perbedaan bobot ikan dikarenakan kandungan  serat  kasar  pada  pakan  indigofera  le- bih tinggi dibandingkan dengan pakan  komersial (Tabel 2), sehingga menyebabkan daya cerna pa- da ikan koan  menjadi  menurun.  Rendahnya kan- dungan  protein  pada  pakan  indigofera  dan  ting- ginya serat kasar ini diduga karena umur indigo- fera yang terlalu tua pada saat pemanenan. Sema- kin tua umur tanaman indigofera maka akan me- nyebabkan berkurangnya protein dan meningkat- kan serat kasar (Palupi 2015).
Meningkatnya  konsentrasi  estradiol-17β plasma darah ikan  koan pada perlakuan yang di- berikan hormon dipengaruhi oleh Pregnant Mare Serum Gonadotropin (PMSG) dan anti dopamin.
PMSG  memiliki    kandungan Gonadotropin  hor- mon (GTH)  yang  terdiri  atas Folicle  Stimulating Hormone (FSH) yang memiliki peran yang lebih banyak  dibandingkan  dengan Luteinizing  Hor- mone (LH).  Peningkatan  konsentrasi  estradiol- 17β tersebut dikarenakan FSH bekerja dalam per- kembangan  oosit  dan  diduga  memengaruhi  bio- sintetis  estradiol-17β  (Kobayashi et  al .  2002,
Nagahama  &  Yamashita  2008).  FSH  memenga- ruhi sel teka untuk mengeluarkan substrat andro- gen yaitu testosteron yang akan menyebar ke da- lam sel  granulosa  sehingga  membuat cP450 aro- matase  mengkonversinya  menjadi  estradiol-17β (Senthilkumaran et  al .  2004,  Nagahama  &  Ya-
mashita  2008).  Peningkatan  level  plasma  estra- diol-17β  menyebabkan  hati  akan  mensintesis vitellogenin  yang  akan  dibawa  oleh  aliran  darah menuju  oosit  (Kobayashi et  al .  1996).  Selanjut- nya  estradiol-17β  disintesis  di  ovari  dibawah kendali GTH (Senthilkumaran et al . 2004).
Anti dopamin yang terdapat pada premiks hormon  memengaruhi  kinerja dopamin  yang ter- dapat pada ikan koan. Dopamin dapat mengham- bat GnRH merilis GTH di pituitari (Dufour et al . 2010, Isomura et al . 2013). Dopamin merupakan salah  satu  neurontrasmiter  katekolamin  yang  da- pat  menghambat  sekresi  LH  pada  famili  Cypri- nidae  (Dufour et  al .  2005,  Podhorec  &  Kouril 2009).  Peran  anti  dopamin  dalam  premiks  hor- mon  untuk  menahan  dopamin  agar  GnRH  dapat merilis  GTH  (FSH  dan  LH)  di  pituitari.  Selain pengaruh  hormon  yang  digunakan  pada  peneli- tian,  faktor  lingkungan  juga  memiliki  pengaruh dalam  meningkatkan  konsentrasi  estradiol-17β. Faktor lingkungan seperti fotoperiod dan kualitas air (seperti suhu) juga bisa berpengaruh terhadap perkembangan gonad ikan (Mylonas et al . 2010).
Oleh karena itu, diduga terjadi peningkatan kon- sentrasi  estradiol-17β  pada  perlakuan  tanpa menggunakan hormon.
Peningkatan  indeks  kematangan  gonad berhubungan  dengan  kalsium,  fosfoprotein  fos- for  dan  plasma  vitelogenin  sebagai  pembentuk kuning telur yang disintetis di hati (Rusety et al . 1992). Nilai IKG tertinggi terdapat pada perlaku- an yang diberikan premiks hormon dibandingkan dengan  kontrol.  Hal  ini  dikarenakan  peran  pre- miks  hormon  dan  karetenoid  yang  lebih  tinggi dalam  pakan  indigofera  yaitu  456,87  ug  g -1 di- bandingkan  dengan  pakan  komersial  yaitu  11,43 µg g -1 (Tabel 3) sehingga dapat membantu dalam perkembangan oosit yang mengakibatkan volume gonad pada ikan koan lebih besar (Lubzens et al . 2010).
Pakan indigofera  memiliki  kandungan  ka- rotenoid  dan  xanthophyl  yang  bersifat  anti-oksi- dan  (Akbarillah et  al .  2002).  Pakan  yang  me- ngandung antioksidan sangat dibutuhkan ikan se- lama reproduksi (Izquerdo et al . 2001). Pada bu- rung, antioksidan pada karotenoid sangat penting dalam perkembangan embrio dan penetasan telur (Biard et al . 2005) dan respon imun (Anbazahan et  al .  2010).  Pada  krustase,  karotenoid  berasosi- asi  dengan  lipoprotein  dari  vitellin  (Sagi et  al . 1995). Pada ikan, karotenoid dibawa oleh plasma kilomikron  atau  serum  albumin  melalui  plasma darah untuk menuju ovari. Plasma karotenoid se- perti xanthophyl dapat dipecah oleh sel ovari dan dapat  membantu  retinol  yang  diduga  untuk  per- kembangan  oosit  bersamaan  dengan  vitelogenin atau lipoprotein (Lubzens et al . 2010).
Hasil histologi gonad ikan koan pada akhir penelitian menunjukkan bahwa gonad betina ikan koan  pada  perlakuan  premiks  hormon  baik  de- ngan penyuntikan ataupun  yang dicampur dalam pakan  mengalami  perkembangan  dibandingkan dengan  perlakuan  yang  tidak  diberikan  premiks hormon.  Hal  ini  terlihat  pada  Gambar  3  dimana pada  perlakuan  yang  diberikan  premiks  hormon (perlakuan  C:  premiks  hormon  0,5  ml  kg -1 + pakan komersial; D: premiks hormon 0,5 ml kg -1
+  pakan  indigofera;  E:  premiks  hormon  0,5  ml kg -1 pakan  indigofera)  terdapat  inti  sel  yang  su- dah  mengalami  perkembangan  awal  vitelogenin dibandingkan  dengan  perlakuan  tanpa  premiks hormon  (A:  NaCl  fisiologis  0,5  ml  kg -1 +  pakan komersial; B: NaCl fisiologis 0,5 ml kg -1 + pakan indigofera).  Berdasarkan  perbandingan  histologi gonad  dari  Koç et  al .  (2008)  dan  Lee et  al.
(2012), perlakuan C (premiks hormon 0,5 ml kg -1
+  pakan  komersial),  D  (premiks  hormon  0,5  ml kg -1 + pakan indigofera), dan E (premiks hormon 0,5 ml kg -1 pakan indigofera) pada oosit terdapat ooplasma basofil dan sudah mengandung butiran
lemak.  Menurut  Santos et  al .  (2005),  fase tersebut  sudah  termasuk  fase  ketiga  yaitu  fase oosit  perinukleus.  Pada  perlakuan  A  (NaCl fisiologis  0,5  ml  kg -1 +  pakan  komersial)  dan  B (NaCl fisiologis 0,5 ml kg -1 + pakan indigofera), belum  terbentuk  nukleus  dan  masih  dalam  tahap pembentukan  sel  awal  oogonia.  Menurut  Reidel et  al .  (2010),  tahap  tersebut  merupakan  tahap  di mana  ikan  tidak  mengalami  pematangan  gonad. Pematangan gonad pada perlakuan yang diinduksi  premiks  hormon  menggunakan  pakan komersial  tidak  jauh  berbeda  dengan  perlakuan premiks  hormon  yang  diinduksi  ataupun  yang dicampurkan  ke dalam pakan indigofera. Hal ini membuktikan bahwa indigofera yang di- campurkan  dengan  premiks  hormon  juga  mem- berikan  pengaruh  terhadap  pematangan  gonad ikan koan.

## Simpulan
Premiks  hormon  dapat  menginduksi  lebih cepat  pematangan  gonad  baik  dengan  pakan  ko- mersial  maupun pakan indigofera. Pakan indigo- fera  lebih  efektif  untuk  reproduksi  daripada  un- tuk  pertumbuhan  somatik.  Untuk  mempercepat kematangan  gonad  ikan  koan,  disarankan menggunakan  kombinasi antara premiks  hormon dengan pakan indigofera.

## Daftar pustaka
Abdullah  L,  Suharlina.  2010.  Herbage  yield  and quality  of  two  vegetative  parts  of  indigo- fera  at  different  times  of  first  regrowth defoliation. Jurnal  Media  Peternakan , 33(1): 44-49.
Abdullah  L,  Tarigan  A,  Suharlina,  Budhi  D,  Jo- vintry  I,  Apdini  TA.  2012. Indigofera  zo- llingeriana: A  promising  forage  and shrubby  legum  crop  for  Indonesia. In : Astuti DA (editor). Proceeding of the 2nd International Seminar on Animal Industry . Fakultas  Peternakan  Institut  Pertanian Bogor. pp 70-72.
Akbarillah T, Kaharuddin, Kususiyah. 2002. Ka- jian daun tepung indigofera sebagai suple- men  pakan  produksi  dan  kualitas  telur.
Laporan  Penelitian. Lembaga  Penelitian Universitas Bengkulu, Bengkulu. 6 hlm.
Akbarillah  T,  Kususiyah,  Kaharuddin,  Hidayat.
2008. Kajian tepung daun indigofera seba- gai suplemen pakan terhadap produksi dan kualitas  telur  puyuh. Jurnal  Peternakan Indonesia, 3(1): 20-23.
Akbarillah  T,  Kususiyah,  Hidayat.  2010.  Penga- ruh penggunaan daun indigofera segar  se- bagai  suplemen  pakan  terhadap  produksi dan  warna  yolk  itik .  Jurnal  Sains  Peter- nakan Indonesia , 5(1): 27-33.
Anbazahan  S  M,  Mari  LSS,  Yogeshwari    G, Jagruthi C, Thirumurugan R, Arockiaraj J,
Velanganni  AAJ,  Krishnamoorthy  P, Balasundaram  C,  Harikrishnan  R.  2014. Immune response and disease resistance of carotenoids supplementation diet in Cypri- nus carpio against Aeromonas hydrophila . Fish & Shellfish Immunology , 40(1): 9-13.
Biard  C,  Surai  PF,  Møller  AP.  2005.  Effect  of carotenoid  availability  during  laying  on reproduction  in  the  blue  tit. Oecologia , 144(1): 32-44.
Cudmore  B,  Mandrak  NE.  2004.  Biological synopsis of grass carp (Ctenopharyngodon della ). Canadian  Manuscript  Report  of Fisheries and Aquatic Science, 2705: 44 p.
Darwisito S, M  Zairin Jr,  Sjafei  DS, Manalu W,
Sudrajat AO. 2008. Pemberian  pakan  me- ngandung vitamin E dan minyak ikan pada induk memperbaiki kualitas dan larva ikan nila  ( Orechromis  niloticus ). Jurnal  Akua- kultur Indonesia , 7(1): 1-10.
Dufour  S,  Weltzien  FA,  Sebert  ME,  Lebelle  N, Vidal B, Verier P, Pasqualini C. 2005. Do- paminergic  inhibition  of  reproduction  in teleost  fishes  ecophysiological  and  evolu- tionary  implications. New  York  Academy of Sciences . 1040: 9-21.
Dufour S, Sebert ME, Weltzien FA, Rousseau K, Pasqualini  C.  2010.  Neuroendocrine  con- trol  by  dopamine  of  teleost  reproduction. Journal of Fish Biology , 76: 29-160.
Ghazala R, Tabinda AB, Yasar A. 2011. Growth respone of juvenile  grass carp ( Ctenopha- ringodon  idella )  fed  isocaloric  diets  with variable  protein  levels, The  Journal  of
Animal  and  Plant  Sciences ,  21(4):  850- 856.
Isomura N, Yamauchi C, Takeuchi Y, Takemura A. 2013. Does dopamine block the spawn-
ing  of  the  acroporid  coral Acropora  tenu- is ? Scientific Reports . 3: 2649.
Izquerdo MS, Fernández-Palacios H, Tacon AGJ. 2001.  Effect  of  broodstock  nutrition  on reproductive  performance  of  fish. Aqua- culture , 197(1-4): 25-42.
Kobayashi  D,  Tanaka  M,  Fukada  S,  Nagahama Y.  1996.  Steroidogenesis  in  the  ovarian follicles  of  the  medaka  ( Oryzias  latipes) during  vitellogenesis  and  oocyte  matu- ration. Zoological  Science ,  13(6):  921- 927.
Kobayashi  M,  Sorensen  PW,  Stacey  NE.  2002. Hormonal  and  pheromonal  control  of spawning  behavior  in  the  goldfish. Fish Physiology  and  Biochemistry ,  26(1):  71- 84.
Koç N D, Yener A, Rikap Y. 2008. Ovary matu- ratıon stages and histological investigation of  ovary  of  the zebrafish (Danio  rerio).
Brazilian Archives of Biology Technology, 5(3): 513-522.
Lee  M-F,  Jing-Duan  H,  Ching-Fong  C.  2012. Development of ovarian tissue and female germ cells in the protandrous black porgy , Acanthopagrus  schlegeli  (Perciformes, Sparidae). Zoological Studies, 47(3): 302- 316.
Lubzens  E,  Young  G,  Bobe  J,  Cerdà  J.  2010. Oogenesis  in  Teleosts:  How  fish  eggs  are formed .  General  and  Comparative  Endo- crinology , 165(3): 367-389.
Mitchell  AJ, Kelly  AM. 2006. The  public sector role  in  the  establishment  of  grass  carp  in the  United  States. Fisheries ,  31(3):  113- 121.
Moore  WT,  Ward  DN.  1980.  Pregnant  mare  se- rum  gonadotropin  rapid  chromatographic procedures  for  the  purification  of  intact hormone and isolation of subunit. Journal of  Biological  Chemistry ,  17(4):  6928- 6929.
Mylonas  CC,  Fostier  A,  Zanuy  S.  2010.  Brood- stock  management and  hormonal  manipu- lation  of  fish  reproduction. General  and Comparative Endocrinology , 165(3): 516- 534.
Nagahama Y, Yamashita M. 2008. Regulation of oocyte  maturation  in  fish. Development,
Growth  and  Differentiation, 50(Supple- ment s1): S195-S219.
Palupi R. 2015. Subtitusi protein bungkil kedelai dengan  protein  tepung  pucuk Indigofera zollingeriana untuk  menghasilkan  telur
fungsional  tinggi  antioksidan. Disertasi .
Institut Pertanian Bogor. 91 hlm.
Podhorec  P,  Kouril  J.  2009.  Induction  of  final oocyte  maturation  in  Cyprinidae  fish  by hypothalamic  factor:  a  review. Veterina Medicana , 54(3): 97-110.
Putra  WKA.  2013.  Induksi  belut  sawah  ( Mono- pterus  albus )  secara  hormonal. Tesis .  In- stitut Pertanian Bogor. 42 hlm.
Rachman  B.  2013.  Manipulasi  hormonal  pada pematangan  gonad  ikan  patin  siam Pa- ngasianodon hypophthalmus . Tesis . Institut Pertanian Bogor. 47 hlm.
Reidel  A,  Boscolo  WR,  Feiden  A,  Romagosa  E. 2010. The effect of diets with different le- vels protein of Rhamdia quelen stocked in cages. Aquaculture . 298: 354-359.
Rosety  M,  Miguel  B,  Luisa  GDC,  Amalia  G,
Carmen  S.  1992.  Biochemical  parameters
during reproduction of the toad fish, Halo- batrachus  didactylus (Schneider,  1801). Science Marine , 56 (1): 87-94.
Sagi  A,  Rise  M,  Isam  K,  Araf  S.  1995.  Carote- noids  and  their  derivates  in  organs  of  the maturing  female  crayfish Cherax  quadry- carinatus . Biochemistry  and  Molecular, 112(2): 309-313.
Santos  IN,  Andrade  CC,  Santos  AF,  Santos  LN, Araujo FG. 2005. Histologycal analysis of ovarian  development  of  the  characiform Oligosarcus  hepsetus (Cuvier,  1829)  in  a Brazilian  reservoir. Brazilian  Biology Journal, 65(1): 77-169.
Senthilkumaran  B,  Yoshikuni  M,  Nagahama  Y. 2004. A shift in steroidegenesis in ovarian follicles prior to oocyte maturation. Mole- cular  and  Cellular  Endocrinology ,  215: 11-18.