p- ISSN 2354-6565 / e- ISSN 2502-3438
UJI TOKSISITAS AKUT EKSTRAK AIR HERBA PECUT KUDA ( Stachytarpheta jamaicensis (L) VAHL) PADA MENCIT SWISS WEBSTER
Afifah B. Sutjiatmo 1,2 , Elin Yulinah Sukandar 3 , Candra 1 , Suci Nar Vikasari 1, 2
1 Fakultas Farmasi, Universitas Jenderal Achmad Yani, Cimahi, Indonesia
2 Pusat Ilmu Hayati, Institut Teknologi Bandung, Indonesia
3 Sekolah Farmasi, Institut Teknologi Bandung, Indonesia fifahbs@yahoo.com

## ABSTRAK
Herba  pecut  kuda  ( Stachytarpheta  jamaicensis (L.)  Vahl)  secara  tradisional  dapat  digunakan untuk  mengobati  berbagai  penyakit,  seperti  infeksi  dan  batu  saluran  kencing,  diuretik, rheumatik, sakit tenggorokan (faringitis), pembersih darah, datang haid tidak teratur, keputihan, hepatitis A. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui keamanan penggunaan herba pecut kuda pada hewan uji. Ekstrak air herba pecut kuda dibuat dengan metode perebusan dalam air suling selama  30  menit.  Pengujian  toksisitas  akut  dilakukan  mengacu  pada  pedoman  BPOM. Pengujian  toksisitas  akut  dilakukan  pada  mencit  Swiss  Webster  jantan  dan  betina  dengan pemberian tunggal  ekstrak air herba pecut kuda pada dosis 100, 500, 2.000, 5.000 dan 10.000 mg/kg  bb.  Pengamatan  dilakukan  selama  14  hari.  Hasil  menunjukkan  bahwa  selama  14  hari setelah pemberian tunggal ekstrak air herba pecut kuda, tidak ada kematian pada seluruh hewan uji. Dapat disimpulkan bahwa LD50 ekstrak air herba pecut kuda lebih besar dari 5.000 mg/kg bb.
Kata kunci: pecut kuda, Stachytarpheta jamaicensis, toksisitas akut, ekstrak air, LD50

## ABSTRACT
Traditionally,  Pecut  kuda  (Stachytarpheta  jamaicensis  (L.)Vahl)  is  used  to  treat  various diseases such diuretic and rheumatic. The research objective was to determine safety of water extract S. jamaicensis herbas in mice. Water extract of S. jamaicensis were made using boiled water for 30 minutes. Acute toxicity test was done according to BPOM. Acute toxicity test was performed on Swiss Webster mice with a single administration of the water extract at doses of 100, 500, 2.000, 5.000 and 10.000 mg/kg bw. Observations of animal were done for a total of 14 days. The results showed that during 14 days of observation after single oral administration of water extract of S. jamaicensis up to 10000 mg/kg bw showed no toxicity of all experimental animals. It can be conclude that LD50 of water extract of S. jamaicensis is greater than 5.000 mg/kg bw.
Keywords : pecut kuda, Stachytarpheta jamaicensis, acute toxicity, water extract, LD50

## PENDAHULUAN
Pecut kuda merupakan terna semusim yang tumbuh  di  ketinggian  1-1500  m  di  atas permukaan  laut. Herba pecut  kuda digunakan masyarakat Indonesia untuk mengobati infeksi dan batu saluran kencing, diuretik, rheumatik, sakit  tenggorokan  (faringitis),  pembersih darah,  datang  haid  tidak  teratur,  keputihan, hepatitis  A.  Bagian  yang  digunakan  adalah daun, bunga, dan akar. (Dalimartha 2000)
Uji  efek  antimikroba  menunjukkan  bahwa efek  antimikroba  ekstrak  kloroform  herba
pecut kuda lebih baik  daripada ekstrak etanol terhadap  bakteri  Gram  positif  seperti
Staphylococcus aureus , Enterococcus faecalis ,  dan Bacillus  subtilis .  Ekstrak kloroform  dan  ekstrak  air  herba  pecut  kuda juga  mempunyai  efek  anti  jamur  terhadap Candida albicans dan Saccharomyces cerevisiae .  (Meena  dan  Pitchai  2011)  Efek analgesik  dan  antiinflamasi  ekstrak  etanol Stachytarpheta  jamaicensis (L.)  Vahl  telah diuji  pada  hewan  uji.  Hasil  menunjukkan bahwa  ektrak  etanol  dosis  50,  100  dan  150
mg/kg  bb  mempunyai  efek  analgesik  pada mencit  yang  diinduksi  asam  asetat  dan mempunyai efek antiinflamasi pada hewan uji yang  diinduksi  karagenan.  (Sulaiman,  et  al. 2007)
Pengujian  pada  hewan  yang  telah  diberi serbuk  kering  daun  pecut  kuda  yang dicampurkan  dalam  pakan  standar  dengan konsentrasi  75:25,  50:50,  dan  25:75  juga menunjukkan sedikit  variasi pada tanda-tanda atau  penampakan  fisik  hewan  uji  dan menunjukkan  adanya  sedikit  perbedaan  pada histopatologi  di  jumlah  lemak  dan  nekrosis jaringan  pada  organ  hati,  pembuluh  darah, ginjal,  paru,  dan  testis,  tetapi  otak,  mata  dan usus  (besar  dan  halus)  dan  haringan  jantung normal jika dibandingkan kontrol. (Ataman, et al. 2006)
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui keamanan penggunaan herba pecut kuda pada hewan uji.

## BAHAN DAN HEWAN UJI
Bahan. Herba  pecut  kuda  yang  diperoleh dari  kebun  tanaman  obat  Manoko-Lembang.
Bahan kemudian dideterminasi untuk menentukan kebenaran jenisnya di Herbarium Bandungense ,  Sekolah  Ilmu  dan  Teknologi Hayati, Institut Teknologi Bandung (ITB).
Hewan  uji .  Hewan  percobaan  yang  akan digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  mencit Swiss Webster jantan dan betina, berumur 6-8 minggu dengan bobot minimal 20 gram, yang diperoleh  Laboratorium  Hewan  Pusat  Ilmu Hayati Institut Teknologi Bandung.

## METODE
Pembuatan  simplisia. Herba  pecut  kuda yang  diperoleh,  dicuci  dengan  air  hingga bersih,  ditiriskan  dan  dikeringkan,  kemudian digiling serta diayak dengan ayakan mesh no. 44 sehingga berukuran seragam.
Pembuatan  ekstrak  air  herba  pecut kuda. Ekstrak  air  herba  pecut  kuda  dibuat dengan perebusan dalam air suling. Rendemen yang dihasilkan ±8,53%.
Pengujian  toksisitas  akut  ekstrak  air herba  pecut  kuda. Uji  toksisitas  akut dilakukan  pada  mencit  Swiss  Webster  sesuai dengan  Pedoman  Uji  Toksisitas  Nonklinik secara in vivo BPOM tahun 2014.
Prosedur  pengujian  toksisitas  akut  ekstrak air herba pecut kuda adalah sebagai berikut: 1. Sebelum  percobaan  dimulai,  hewan  uji diadaptasi selama lebih kurang 7 hari.
Hewan  dikelompokkan  secara  acak menjadi  7  kelompok,  setiap  kelompok terdiri dari 5 ekor hewan.
2. Sebelum  pemberian  zat  uji  secara  oral, mencit  dipuasakan  selama  16-18  jam, tetapi air tetap diberikan
3. Pada waktu ke-0 (T 0 ) dilakukan pengamatan perilaku Pengamatan perilaku terdiri dari
pengamatan  jumlah  jengukan,  aktivitas motorik,  fenomena  Straub,  piloereksi, ptosis,  refleks  korneal,  refleks  pineal, lakrimasi, vasodilatasi,
katalepsi, gelantung,  retablishment,  jalan  mundur, jalan  melingkar,  fleksi,  Haffner,  geliat, grooming, tremor, gemetar badan, vokalisasi,  urinasi,  defekasi,  denyut jantung,  pernafasan,  salivasi,  mortalitas, dan sikap tubuh.
4. Setiap  hewan  uji  diberi  sediaan  sesuai kelompoknya, yaitu:
 Kelompok 1 : kontrol air suling
 Kelompok  2  :  ekstrak  air  herba  pecut kuda dosis 100 mg/ kg bb
 Kelompok  3  :  ekstrak  air  herba  pecut kuda dosis 500 mg/ kg bb
 Kelompok  4  :  ekstrak  air  herba  pecut kuda dosis 2.000 mg/ kg bb
 Kelompok  5  :  ekstrak  air  herba  pecut kuda dosis 5.000 mg/ kg bb
 Kelompok  6  :  ekstrak  air  herba  pecut kuda dosis 10.000 mg/ kg bb
5. Setelah  pemberiaan  zat  uji,  dilakukan pengamatan perilaku mencit pada menit ke 30, 60, 120, dan 240.
6. Pengamatan    dan  penimbangan  bobot badan dilakukan setiap hari selama 14 hari.
7. Pada  akhir  percobaan  semua  kelompok dikorbankan,  kemudian  dibedah  dan dilakukan  penimbangan  bobot  organ (jantung,  paru-paru,  hati,  ginjal,  adrenal, dan alat-alat reproduksi).
Berdasarkan  data  yang  diperoleh  dihitung
LD50  dan  dilakukan  analisis  statistik terhadap  bobot  badan  dan  indeks  organ menggunakan Uji-t menggunakan perangkat  lunak  SPSS  20.0  untuk Windows.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada pengujian toksisitas akut,
pengamatan  dilakukan  terhadap  perilaku, bobot  badan,  indeks  organ  dan  kematian hewan  uji.  Aktivitas  farmakologik  meliputi aktivitas sistem autonomik, perilaku, sensorik, neuromuskular,  kardiovaskular,  pernapasan, mata,  gastrointestinal,  gastrourinari  dan  kulit. Pengamatan  aktivitas  sistem  autonomik meliputi  salivasi,  defekasi,  urinasi,  dan piloereksi.  Pengamatan  perilaku  meliputi grooming ,  sikap  agresif  atau  defensif,  posisi duduk  kepala  ke  atas,  kepala  tertunduk  dan aktivitas  yang  tidak  normal.  Pengamatan aktivitas  sensorik  meliputi righting  reflex , refleks  korneal,  peka  terhadap  bunyi  dan sentuhan.
Pengamatan aktivitas
neuromuskular  meliputi  aktivitas  meningkat atau  berkurang,  tremor,  lemas,  fenomena Straub,  refleks  fleksi,  dan  kematian. Pengamatan  aktivitas  kardiovaskular  meliputi denyut  jantung  meningkat  atau  berkurang, vasodilatasi  dan  perdarahan.  Pengamatan pernafasan  meliputi  terengah-engah,  apnea, atau  dipnea.  Pengamatan  mata  meliputi lakrimasi, ptosis dan refleks pupil. Pengamatan  aktivitas  gastrointestinal  dan gastrourinari  meliputi  salivasi,  diare,  berak atau  kencing  berdarah,  dan  konstipasi. Pengamatan pada kulit meliputi piloereksi dan bengkak.
Jumlah  jengukan  menandakan  sifat  ingin tahu    dari  mencit.  Ptosis  ditandai  dengan kelopak  mata  sekurang-kurangnya  50% tertutup.  Refleks  yang  dilakukan  meliputi refleks pineal, refleks korneal, refleks haffner, dan  refleks  fleksi.  Refleks  pineal  dilakukan dengan  cara  menggelitik  telinga  mencit, refleks  korneal  dilakukan  untuk  mengetahui masih  ada  atau  tidak  refleks  di  mata, sedangkan  refleks  fleksi  ditujukan  untuk mengetahui  adanya  refleks  pada  kaki.  Uji Haffner  dilakukan  dengan  cara  menjepit pangkal  ekor  mencit  dengan  pinset,  mencit
yang  normal  akan  langsung  berpaling dan/atau  mencicit.  Penentuan  sikap  tubuh dilakukan  dengan  cara  meletakkan  mencit pada  punggungnya  dan  dilihat  apakah langsung  membalik  ke  posisi  keempat kakinya.  Lakrimasi  ditunjukkan  dengan pengeluaran  air  mata,  ditandai  dengan  basah disekitar  mata.  Uji  gelantung  dilakukan dengan cara menggelantungkan mencit selama 5  detik  pada  kawat  horisontal;  jika  dalam waktu  lima  detik  mencit  tersebut  tidak berhasil  untuk  menaiki  kawat  tersebut  maka mencit  tersebut  dinilai  sebagai  telah kehilangan kemampuannya untuk
memulihkan  secara  fisik  posisi  dirinya ( righting  ability ).  Jika  mencit  tidak  mampu menggelantung dan jatuh maka dinilai sebagai kehilangan refleks untuk menggelantung.
Berdasarkan  hasil  uji  perilaku  hewan  uji, diperoleh  bahwa  semakin  besar  dosis,  maka aktivitas motorik semakin menurun. Penurunan  retablisment  terlihat  pada  dosis 300  dan  2.000  mg/kg  bb  pada  menit  ke-60. Hal ini menunjukkan bahwa herba pecut kuda mempunyai  efek  pada  sistem  saraf  pusat  dan sistem saraf perifer.
Penimbangan bobot badan bertujuan untuk mengetahui perubahan bobot badan hewan uji dalam 14 hari penimbangan.
Berdasarkan  hasil  penimbangan  bobot bdan  hewan  uji  selama  14  hari,  dapat  dilihat adanya  kenaikan  bobot  badan  pada  mencit jantan.  Sedangkan  bobot  badan  pada  mencit betina mengalami penurunan. Hasil penimbangan  bobot  badan  hewan  uji  selama 14 hari dapat dilihat pada Tabel 1 dan 2.
Tabel 1. Hasil  Penimbangan  Bobot  Badan  Mencit  Jantan  Uji  Toksisitas  Akut  Ekstrak  Air

## Herba Pecut Kuda
Kelompok Rata-Rata Bobot Badan (g) Pada Pengamatan Hari Ke- 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Kontrol 37,4± 3,1 37,4± 3,1 35± 3,3 38,8± 3,3 38,2± 3,3 38,4± 3,1 38,2± 3,1 38,6± 3,2 37,6± 3,5 38,2± 3,1 38,6± 2,7 38,4± 2,7 39± 2,9 38,4± 3,2 D1 32,4± 6,9 32,8± 4,7 28,2± 6,5 27,8± 4,4 27± 3,6 27,4± 4,2 28,4± 4,5 28,6± 4,3 30± 3,9 29,4± 4,3 30± 4 30± 4 33,6± 3,1 30,6± 3,3 D2 26,2± 3,6 27,8± 4,7 28,2± 4,6 27,8± 4,4 27± 3,6 27,4± 4,2 28,4± 4,5 28,6± 4,3 30± 3,9 29,4± 4,3 30± 4 30± 4 33,6± 3,1 30,6± 3,3 D3 37,4± 3,5 37,4± 3,5 37± 3,3 37,8± 3,5 38± 3,9 39,2± 3,8 37,8± 3,8 38,2± 3,4 39,4± 3,4 39,6± 3 39,4± 2,7 39,4± 2,3 39,4± 1,9 39,4± 2,7 D4 38,4± 1,5* 38,4± 1,5* 39,2± 1,3* 40,2± 1* 39± 1* 38,6± 1,6* 39,8± 1* 38,8± 1,6* 39± 1* 39,2± 0,8* 39,4± 1,1* 39,2± 0,4* 39,4± 0,8* 39± 0,7* D5 35,8± 3,1 35,8± 3,1 36,2± 3,4 35,8± 3,5* 36,4± 3,5* 36,4± 3,5* 37,4± 3,6* 37,8± 3,5* 36,6± 4,2 38,2± 4,6 37,6± 4,9 37,4± 4 38,2± 4,6 37,8± 4,2 Keterangan : D1 = Dosis 100 mg/kg BB D2 = Dosis 500 mg/kg BB D3 = Dosis 2.000 mg/kg BB D4 = Dosis 5.000 mg/kg BB D5 = Dosis 10.000 mg/kg BB *   = hasil berbeda dan bermakna (Sig < 0,05) Tabel 2. Hasil  Penimbangan  Bobot  Badan  Mencit  Betina  Uji  Toksisitas  Akut  Ekstrak  Air Herba Pecut Kuda Kelompok Rata-Rata Bobot Badan (g) pada pengamatan hari ke- 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Kontrol 34,2± 3,3 34,2± 3,3 31,4± 3 34,6± 3,2 33,8± 2,5 33,8± 3,1 33,2± 2,9 33± 3,3 33,4± 3,3 32,8± 2,7 32,6± 3,3 33 ± 3,3 33± 3,3 33± 3,6 D1 34,2± 2,5* 35,2± 2,7* 33± 2,7 33,2± 2,3* 32,8± 2,4* 33,6± 2,8* 33,4± 2,3* 33,4± 2* 32,6± 2,3* 32,4± 2,3* 31,8± 2,7* 32,2± 1,9* 31,2± 1,9* 31± 2,5* D2 31,2± 4,4* 31,6± 4,2* 30,8± 4,4 30,8± 4,5* 30,6± 4,2* 30,6± 4* 31± 3,8* 30,6± 3,7* 30,4± 3,6* 30,8± 3,9* 31,2± 2,9* 30,4± 3,3* 29,8± 3,1* 30,4± 3,3* D3 28± 2,5* 28± 2,5* 27,4± 3,1 27,4± 2,7* 28,4± 2,7* 28± 2,3* 28,6± 2,9* 28,4± 2,8* 28,4± 2,8* 28,4± 2,8* 29,6± 1,9* 29,2± 2,3* 29,2± 2,3* 29,2± 2,3* D4 26,8± 3,6 26,8± 3,6 28± 3 27,2± 3,4 27,4± 3,3 27,2± 3,4 27,6± 2,9 26,8± 3,7 27,2± 2,2 27,4± 2,8 27± 3,1 25,4± 2,6 26,4± 2,7 26,2± 2 D5 28,8± 5,8 28± 5,5 27,8± 4 28± 4,1 27,6± 4 27,6± 3 26,2± 3,7 26± 3,8 25,2± 4,3 27± 2,4 27± 2,9 27,5± 2,6 26,7± 2,5 28± 2,9 Keterangan : D1 = Dosis 100 mg/kg BB D2 = Dosis 500 mg/kg BB D3 = Dosis 2.000 mg/kg BB D4 = Dosis 5.000 mg/kg BB D5 = Dosis 10.000 mg/kg BB *    = hasil berbeda dan bermakna (Sig < 0,05)
Setelah 14 hari penimbangan bobot badan, hewan uji dibedah dan ditimbang bobot organ dari  setiap  mencit  dari  setiap  kelompok.  Hal ini  bertujuan  untuk  mengetahui  adanya  efek toksik  pada  organ  dalam  yang  terjadi  setelah pemberian ekstrak. Organ-organ yang diamati untuk pengujian ini adalah hati, jantung, paru-
paru,  ginjal,  limfa,  vesika  dan  testis  (jantan), serta  tuba  falopi  dan  ovarium  (betina).  Hasil perhitungan indeks organ mencit jantan dapat dilihat  pada  Gambar  1  dan  hasil  perhitungan indeks organ mencit betina dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar 1. Indeks organ mencit jantan uji toksisitas akut ekstrak air herba pecut kuda
Gambar 2. Indeks organ mencit betina uji toksisitas akut ekstrak air herba pecut kuda
Keterangan : D1 = Dosis 100 mg/kg BB D2 = Dosis 500 mg/kg BB D3 = Dosis 2.000 mg/kg BB D4 = Dosis 5.000 mg/kg BB D5 = Dosis 10.000 mg/kg BB *   = hasil berbeda dan bermakna (Sig < 0,05)
Hasil  analisis  statistik  uji-t  perhitungan indeks  organ  mencit  jantan  menunjukkan bahwa  indeks  organ  hati,  jantung,  dan  testis pada  kelompok  semua  uji  identik  dengan kelompok  kontrol  (p>0,05).  Sedangkan  pada indeks  organ  paru-paru  pada  kelompok  uji dosis 2000 mg/kg bb, indeks organ ginjal pada kelompok  dosis  uji  10.000  mg/kg  bb,  indeks organ  limpa  pada  kelompok  uji  dosis  5.000 mg/kg  bb  dan  indeks  organ  vesika  pada kelompok  uji  dosis  5.000  dan  10.000  mg/kg bb terjadi perbedaan bermakna jika dibandingkan kontrol (p<0,05).
Hasil  analisis  statistik  uji-t  perhitungan indeks  organ  mencit  betina  menunjukkan bahwa indeks organ jantung, paru-paru, limpa, dan  ovarium  pada  kelompok  uji  identik dengan  kelompok  kontrol  (p>0,05),  tetapi pada  indeks  organ  hati  pada  kelompok  uji dosis 100 mg/kg bb, indeks organ ginjal pada kelompok  dosis  uji  5.000  mg/kg  bb,  dan indeks  organ  tuba  falopi  pada  kelompok  uji dosis 500, 2.000, dan 10.000 terjadi perbedaan bermakna jika dibandingkan kontrol (p<0,05).
Hasil  di  atas  menunjukkan  bahwa  pada penggunaan ekstrak air herba pecut kuda dosis tinggi  berpotensi  toksik  pada  organ  ginjal, organ  reproduksi,  organ  limpa  dan  prgan paru-paru.  Oleh  karena  itu,  diharapkan penggunaan ekstrak air herba pecut kuda dosis tinggi harus hati-hati dan dipantau.

## KESIMPULAN
LD50  ekstrak  air  herba  pecut  kuda  lebih besar  dari  5.000  mg/kg  bb  dan  termasuk dalam kategori senyawa praktis tidak toksik.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  ditujukan  kepada
Lembaga Penelitian dan Pengabdian
Masyarakat  Universitas  Jenderal  Achmad Yani  yang  telah  membiayai  penelitian  ini melalui Hibah Penelitian Unggulan.

## DAFTAR PUSTAKA
Arnold,  D.  L.,  Harold  C.  G.,  and  D.  R. Krewski,  1990,  Handbook  of  In  Vivo Toxicity  Testing,  Academic  Press,  Inc., Toronto,
Ataman,  J  E,  et  al.,  et  al. Histopathologic effects  of  Stachytarpheta  jamaicensis  (L.) Vahl.  in  Wistar  Rats. 3,  2006,  Pakistan Journal of Biological Sciences, Vol. 9, hal. 477-482.
Dalimartha,  S. Atlas  Tumbuhan  Obat Indonesia  Jilid  II. Jakarta :  Trubus Agriwidya, 2000. hal. 146-148.
Indonesia,  Badan  Pengawas  Obat  dan Makanan  Republik. Peraturan  Kepala BPOM  RI  no.  7  Tahun  2014  tentang Pedoman  Uji  Toksisitas  Nonklinik  secara in vivo. Jakarta : s.n., 2014
Laurence,  D.  L.  and  A.  L.  Bacharach,  1964,
Evaluation Of Drug Activities : Pharmacometrics,  Vol,  Academic  Press, London.
Meena,  R  dan  Pitchai,  R. Evaluation  of antimicrobial  activity  and  preliminary phytochemical  studies  on  whole  plant  of Stachytarpheta  jamaicensis  (L.)  Vahl. 3, 2011, International Research  of Journal  of Pharmacy, Vol. 2, hal. 234-239.
Nielsen, E., Grete Ostergaard, John Christian
Larsen, 2008, Toxicological Risk Assessment of Chemicals : A Practical
Guide, Informa Healhtcare, New York, 107 - 111.
Research Guideline for Evaluating The Safety and  Efficacy  of  Herbal  Medicines,  1993, WHO-Regional  Office  For  The  Westrn Pasific, Manila.
Sulaiman,  M  R,  et  al.,  et  al. Antinociceptive and anti-inflammatory effects of
Stachyartarpheta  jamaicensis  (L.)  Vahl (Verbebaceae)  in  Experimental  Animal Models. 2007,  Medical  Principle  and Practise, Vol. 19, hal. 272-279.
Thompson,  E.  B.,  1985,  Drug  Bioscreening
Fundamentals of Drug Evaluation Techniques  in  Pharmacology,  Graceway Publ. Co Inc., New York.
Zar,  Jerrold  H.,  1996,  Biostatistical  Analysis,
3 rd Edition,  Prentice-Hall  International,
Inc, USA.