Yasir Harun : Kajian Patogenisitas Beauveria bassiana dan Metarhizium sp terhadap Larva Ulat Grayak (Spodoptera frugiperda) pada Tanaman Jagung
KAJIAN PATOGENISITAS Beauveria bassiana dan Metarhizium sp TERHADAP LARVA ULAT GRAYAK ( Spodoptera frugiperda ) PADA TANAMAN JAGUNG
Pathogenicity study of  Beauveria bassiana and Metarhizium sp to Fall Armyworm (Spodoptera frugiperda)  On Corn

## Yasir Harun*, Ayu K Parawansa, Abdul Haris
Program Studi  Magister Agroekoteknologi, Program Pasca Sarjana, UMI, Makassar 90245 *Corresponding author: yasirharun03@gmail.com ayukartini.parawansa@umi.ac.id abdul.haris@umi.ac.id

## ABSTRAK
Spodoptera  frugiperda  is  an  important  pest  on  maize.  The  purpose  of  this  research  were  to  determine  the pathogenicity of Beauveria bassiana and Metharizium sp in Fall armyworm (S. frugiperda) larvae, to determine the effective concentrations of B. bassiana and Metarhizium sp. to control  Fall armyworm (S. frugiperda), and to  determine the time span of  B. bassiana  and Metarhizium sp infection  which is effective for controlling  Fall armyworm  (S.  frugiperda).  This  research  was  conducted  at  the  Pesticide  and  Natural  Materials  Laboratory, Faculty of Agriculture, Universitas Muslim Indonesia, Makassar, UPTD Balai Proteksi of South Sulawesi and Corn Planting in Galung Village, Barru District. Barru Regency. The research start on April to October 2020. The research used a Fully Randomized Design  (FRD) with 2 factors and three repetition. The first factor was the type of fungus (Metarhizium sp and B. bassiana) and the second factor was the density of conidia (10⁶, 10⁷, 10⁸ and 10⁹ conidia/ml). The results showed that the type of fungus and the density of conidia were significantly different for all observed variables. The pathogenicity of the fungus B. bassiana was better than Metarhizium sp and the density of conidia (concentrations) of both B. bassiana and Metarhizium sp. were significantly different from those of S. frugiperda larvae, but the density of conidia (concentration) 10⁹ was faster infected and killed S.  frugiperda  larvae.  The  Symptoms  of  entomopathogenic  fungus  attack  on  S.  frugiperda  larvae  are  sluggish movement,  turning  pale  in  color,  decreased  appetite,  gradually  silence,  and  death.  The  dead  larvae  are hardened and slightly blackened.
Keywords: Pathogenicity; Beauveria bassiana; Metarhizium; Spodoptera frugiperda; Corn

## LATAR BELAKANG
Produktivitasi  jagung  di  Sulawesi Selatan  pada  tahun  2017-2018  mengalami penurunan  sebesar  2,13  %  (BPS,  2018). Rendahnya  hasil  jagung  disebabkan  oleh banyak faktor diantaranya faktor fisik (iklim, jenis  tanah  dan  lahan)  dan  faktor  biologis (varietas,  hama,  penyakit  dan  gulma),  serta faktor  sosial  ekonomi.    Di  Indonesia  hampir 50  jenis  serangga  yang  menyerang  tanaman jagung  tetapi  hanya  beberapa  saja  yang sering  menimbulkan  kerugian  ekonomi. Hama  yang  sering  dijumpai  menyerang pertanaman  jagung  adalah:  lalat  bibit ( Atherigona sp),  ulat  penggerek  batang jagung  ( Ostrinia  furnacalis ),  dan  ulat penggerek  tongkol  ( Helicoverpa  armigera ), sehingga dapat menurunkan produksi jagung mencapai  80%.  (Achmad  dan  Tandiabang, 2001).
Salah  satu  hama  yang  menyerang jagung  adalah  ulat  grayak  ( Spodoptera frugiperda )  yang  menyebabkan  swasembada
pangan  jagung  terancam.  Fall  Armyworm atau  ulat  grayak  ( Spodoptera  frugiperda ) merupakan  serangga  asli  daerah  tropis  dari Amerika  Serikat  hingga  Argentina.  Larva ulat  grayak    dapat  menyerang  lebih  dari  80 spesies  tanaman,  termasuk  jagung,  padi, sorgum,  jewawut,  tebu,  sayuran,  dan  kapas. ulat grayak  dapat mengakibatkan kehilangan hasil  yang  signifikan  apabila  tidak  ditangani dengan  baik.  Hama  ini  memiliki  beberapa generasi per tahun, ngengatnya dapat terbang hingga 100 km dalam satu malam.
Nonci  (2019)  melaporkan  bahwa  di Indonesia  tepatnya  di  Kabupaten  Pasaman Barat, Sumatera Barat, ulat grayak ( Spodoptera  frugiperda )  telah  ditemukan merusak  pada  tanaman  jagung  dengan tingkat  serangan  yang  berat,  populasi  larva antara  2-10  ekor  petanaman.  Di  Kabupaten Gowa  dan  Kabupaten  Takalar  (Sulawesi Selatan),  juga  telah  dilaporkan  serangan hama  ini  pada  tanaman  jagung.  Larva  ulat grayak  dapat merusak hampir semua bagian
tanaman  jagung  (akar,  daun,  bunga  jantan, bunga  betina  serta  tongkol).  Infestasi  ulat grayak pada tanaman jagung saat daun muda yang  masih  menggulung  menyebabkan kehilangan  hasil  15-73%  jika  populasi tanaman terserang 55-100%.
Upaya pengendalian oleh petani pada saat  ini  adalah  dengan  menggunakan pestisida  kimia  sintetis  atau  bahan  kimia lainnya  yang  tidak  ramah  lingkungan. Penggunaan  pestisida  kimia  sintetis  dalam perkembangannya telah menimbulkan dampak  negatif  terhadap  organisme  bukan sasaran  (hewan  dan  manusia),  serta  telah mencemari  lingkungan  tanah,  tanaman,  air dan ekosistem lain.
Selain  itu  pestisida  kimia  sintetis telah  menyebabkan  kecenderungan  hama menjadi  kebal/resisten  sehingga  menambah dosis  penggunaan  untuk  masa  tanam berikutnya,  sehingga  perlu  dicari  dan dikembangkan  cara  pengendalian  yang efektif  dan  aman  terhadap  lingkungan,  yaitu teknik  pengendalian  yang  dimaksud  adalah pengendalian  dengan  menggunakan  musuh alami (pengendalian hayati).
Salah  satu  teknik  pengendalian  hayati yang dapat digunakan yaitu dengan memanfaatkan  cendawan  entomopatogenik (Surtikanti  dan  Yasin,  2002).  Cendawan entomopatogen  merupakan  salah  satu  jenis mikroorganisme  yang  dapat  digunakan sebagai  agens  hayati  untuk  pengendalian hama (Prayogo, 2005).
Thalib (2013) Spesies jamur
entomopatogen Beauvaria.  bassiana and Metarhizium  sp yang  ditemukan  dari  tanah lebak  dan  pasang  surut  Sumatera  Selatan efektif dalam mengendalikan larva Penggerek  batang  padi  kuning  ( Scirpophaga incertulas) ( Lepidoptera : Pyralidae ).  Erika (2018) melaporkan bahwa Metarhizium riley dapat  mengurangi  kehilangan  hasil  akibat serangan  larva  ulat  grayak  ( Spodoptera frugiperda )  sebesar  57%.    Wraight  (2010) juga  melaporkan  terdapat    43  isolat  dari cendawan Beauveria bassiana dapat mengendalikan  larva Plutella  xylostella ,
Ostrinia  nubilalis , Helicoverpa  zea , Spodoptera frugiperda.
Beberapa  penelitian  mengungkapkan bahwa Beauveria  bassiana menghasilkan racun  (toksin)  dan  enzim  yang  dapat mengakibatkan  paralis  secara  agresif  pada larva  dan  imago  serangga. Beauveria bassiana menghasilkan  enzim  protease  yang dapat mempercepat degradasi kutikula serangga  inang,  sehingga  miselia Beauveria bassiana lebih  mudah  masuk  ke  rongga tubuh serangga (Tantowizal, 2015).
Beberapa  jenis  racun  yang  telah berhasil  diisolasi  dari Beauveria  bassiana antara  lain beauvericine, beauverolide, isorolide  dan  zat  warna  serta  asam  oksalat (Mahr,  2003). Jamur Metarhizium sp memiliki  spektrum  yang  sangat  luas  dan dapat menginfeksi lebih dari 100 spesies dari beberapa  ordo  serangga  seperti Scapteriscus sp,  semut  api, Salenopsis  invicta ,  larva kumbang seperti Oryctes rhinoceros , Phylophaga sp  dan Cetina  nitida (Prayogo, 2005).  Keberhasilan  pengendalian  hama dengan cendawan entomopatogen ditentukan oleh kerapatan spora  cendawan serta takaran suspensi yang diaplikasikan.
Berdasarkan uraian di atas, penelitian ini dilaksanakan  untuk  menggali  patogenisitas cendawan entomopatogen ( Beavuria bassiana dan Metharizum sp) terhadap larva ulat  grayak  ( Spodoptera  frugiperda) pada tanaman jagung.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium  Pestisida  dan  Bahan  Alami Fakultas  Pertanian  Universitas  Muslim Indonesia,  Makassar,  UPTD  Balai  Proteksi Provinsi  Sulawesi  Selatan    dan  Pertanaman Jagung  di  Desa  Galung,  Kecamatan  Barru. Kabupaten  Barru.  Waktu  penelitian  dimulai dari bulan April sampai Oktober 2020.
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini adalah miskroskop, gunting, pisau, pinset, cawan petri, alat pengaduk, haemocytometer, spatula,  timbangan  analitik,    laminar  air flow,  autoclave,  jarum  ose,    dan  alat
penyemprot.  Adapun  bahan  yang  digunakan aquades, kentang, agar, gula pasir, tween 80.
Penelitian  ini  menggunakan  metode Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan dua  faktor  dan  tiga  ulangan.  Faktor  pertama adalah  jenis  jamur  ( Metarhizium sp  dan Beauveria  bassiana )  dan  faktor  kedua kerapatan  konidia  jamur  (10 6 ,  10 7 ,  10 8 dan 10 9 konidia/ml).
Semua  alat  gelas  seperti  petridish, erlenmeyer, gelas piala dan jarum ose dicuci dengan  sabun  lalu  dikeringkan.  Setelah peralatan kering, masing-masing alat dibungkus  dengan  kertas  dan  disterilkan dengan oven pada suhu 180 0 C selama 1 jam. Pembuatan  media PDA dimulai  dengan menimbang media sesuai komposisi  kentang 200 gram, gula pasir 20 gram, agar 15 gram dan akuades 1  L.  Kemudian Kupas kentang potong 1 x 1 cm, cuci  bersih, rebus dengan 500  mL  akuades    sampai  mendidih,  lalu saring  dan    tambahkan  akuades  sampai volume 1000  mL. kemudian masukkan agar dan  gula  pasir,    masak  kembali  hingga mendidih  sambil    terus  diaduk.  Setelah mendidih  matikan    kompor,  salin  media kedalam  erlenmeyer.  Kemudian  media  PDA dilakukan sterilasasi dengan cara menempatkan  dalam    erlenmeyer  dibungkus dengan  plastik  kaca  lalu  sterilisasi    dengan Autoclave  dengan  tekanan  121 0 C  (2  Atm) selama 30 menit.
Pembiakan  Ulat  Grayak  ( Spodeptera frugiperda )  dilakukan  dengan  cara  Larva instar  I  ulat  grayak  ( Spodeptera  frugiperda ) dikumpulkan  dari  lahan  pertanaman  jagung di  Kecamatan  Barru  dan  dikembangbiakkan di  dalam  stoples  dengan  pakan  daun  dan batang jagung lalu ditempatkan di laboratorium.  Selama  dalam  perbanyakan, ulat  grayak  ( Spodoptera  frugiperda )  diberi pakan setiap hari sambil melakukan pembersihan  stoples  dari  kotoran  dan  sisa pakan  pada  stoples  tersebut.  Pemeliharaan dilakukan  hingga  didapat  larva  pada  stadia yang diinginkan di Laboratorium Entomologi  Universitas  Muslim  Indonesia, Makassar
Untuk  keperluan  aplikasi  digunakan biakan  jamur Beavuria  bassiana dan Metarhizium sp  dari  media  PDA  hasil perbanyakan. Biakkan jamur Beavuria bassiana dan Metarhizium  sp yang  telah berumur  tiga  minggu,  dicampur  dengan  10 ml  aquades  steril.  Kemudian  ditambahkan 0,1  %  Tween  80  dan  dilakukan  pengadukan sehingga spora terlepas dari media. Perhitungan  kerapatan  spora  digunakan haemocytometer.  Dengan  cara  tersebut dibuat  suspensi  dengan  kerapatan  untuk diujikan sebesar 10 6 , 10 7 , 10 8 , 10 9 spora/ml.
Pengujian
Konsentrasi Cendawan
Beauveria  bassiana  dan  Metarhizium  sp terhadap  mortalitas  larva  ulat  grayak ( Spodoptera  frugiperda ).  Konsentrasi  yang digunakan  dalam  penelitian  adalah  sebesar 10 5 , 10 6 , 10 7 , 10 8 , 10 9 spora/ml. Kemudian semua perlakuan disemprotkan pada 10 ekor larva  ulat  grayak  ( Spodeptera  frugiperda ). Larva  kemudian  dipindahkan  ke  tempat pemeliharaan  yang  dibuat  dari  toples  plastik dan  diberi  makan  berupa  batang  dan  daun jagung.  Pengamatan  serangga  yang  mati dilakukan  pada  1  sampai  10  hari  setelah aplikasi (HSA).
Persentase mortalitas Spodoptera Frugiperda dihitung dengan rumus :
Keterangan : M = Persentase mortalitas S. litura n = Jumlah larva yang mati N= Jumlah awal dari larva yang diuji (Laoh et al. 2003).
Pengujian
Keefektifan
Cendawan Beauveria  bassiana dan  Metarhizium  sp terhadap  mortalitas  larva  ulat  grayak ( Spodoptera  frugiperda ).  dilakukan  dengan melakukan  perbandingan  semua  konsentrasi cendawan Beauveria bassiana dan
Metarhizium sp dengan kontrol. Pengujian rentang waktu infeksi Cendawan Beauveria bassiana dan Metarhizium sp terhadap mortalitas larva ulat grayak  ( Spodoptera  frugiperda ).  dilakukan
dengan  melakukan  pengamatan  hari  1-10 setelah  aplikasi  pada  semua  konsentrasi cendawan Beauveria bassiana dan Metarhizium sp.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Gejala Kematian Spodoptera frugiperda Pada umumnya gejala kematian larva sama,  jamur  masuk  ke  tubuh  serangga melalui  kutikula  dimana  konidia  jamur menempel dan berpenetrasi pada integumen, selanjutnya terjadi perubahan fisiologi larva. Hal  ini  disebabkan  oleh  racun  yang dihasilkan oleh jamur entomopatogen merusak jaringan dan menyerap cairan tubuh larva, sehingga tubuh larva menjadi mengering.  Kaur  et  al.  (2011)  menyatakan bahwa  jamur  entomopatogen  menyebabkan kematian  serangga  inang  dengan  menyerap
nutrisi dan menyebarkan racun pada hemolymph  sehingga  dapat  mempengaruhi perkembangan dan fisiologis serangga terutama reproduksi.
Gejala  yang dialami oleh serangga  yang terinfeksi  jamur  entomopaogen  yaitu  nafsu makan  berkurang,  gerakan  tubuh  menjadi lamban,  bersembunyi  dibalik  daun,  terjadi perubahan  warna  pada  tubuh  serangga menjadi kepucatan, bahkan sama sekali sulit untuk  bergerak.  Seperti  yang  dinyatakan Prayogo  (2006)  gejala  yang  timbul  pada serangga  terinfeksi  jamur  patogen  adalah adanya  miselia  pada  serangga.  Pada  infeksi awal,  serangga  menunjukkan  gejala  sakit yaitu  tidak  mau  makan,  lemah  dan  kurang orientasi. Seringkali serangga tersebut berubah  warna  dan  pada  kutikula  terlihat bercak  hitam  yang  menunjukkan  tempat penetrasi jamur (Gambar 12 ).
Gambar 12 (a) Larva yang terinfeksi Beauveria bassiana (b) Larva yang terinfeksi Metarhizium sp
Serangga yang terinfeksi jamur entomopatogen  melalui  4  tahap  yaitu inokulasi,  penetrasi  infeksi  dan  invasi, setelah  itu  serangga  berubah  warna  menjadi kehitaman.  Menurut  Freimoser  et  al.  (2003) kutikula  serangga  yang  telah  mati  akan berubah  warna  menjadi  gelap.  Pertumbuhan konidia  dalam  tubuh  larva  melalui  berbagai tahap  seperti  inokulasi,  invasi,  penetrasi dan dekstruksi.
Hasil  pengamatan  menunjukkan  bahwa larva  ulat  grayak  frugiperda  yang  diberi perlakuan jamur Beauveria bassiana maupun Metarhizium  sp dari  beberapa
konsentrasi, mengalami infeksi dan memperlihatkan gejala menurunnya aktivitas gerak  dan  makan  serta  berlanjut  dengan kematian.  Tanda  awal  kematian  serangga tersebut ialah tubuhnya kaku serta warnanya menjadi  kusam  dan  beberapa  hari  kemudian muncul  benang  berwarna  putih  (Gambar  12 ).
Cendawan Metarhizium  sp menyerang tubuh  inangnya  dan  menyerap  cairan  dari tubuh  inangnya.  Jamur  tumbuh  keluar  dari tubuh  inangnya  dan  menghasilkan  konidia sehingga  tubuh  inangnya  menjadi  keras (mumifikasi).  Hal  ini  diduga  sebagai  akibat
dari mulai bekerjanya toksin yang diproduksi oleh jamur. Toksin tersebut merusak jaringan dan  menyerap  cairan  sel  tubuh  larva, sehingga  menyebabkan  larva  mengering  dan mati.
Menurut  Kherb  (2014)  jamur  hidup  dan tumbuh  dengan  memanfaatkan  cairan  di dalam  tubuh  serangga  dan  menghasilkan racun  yang  dapat  membunuh  serangga. Setelah  serangga  mati,  miselium  akan tumbuh di tubuh serangga.
Larva Spodoptera  frugiperda yang  mati terinfeksi Metarhizium sp awalnya tidak mau makan,  pergerakan  lambat,  mati  kaku  lalu kering  sesuai  Gambar  12  b.    Hifa  dari  spora Metarhizium sp  masuk  ke  rongga  dalam tubuh  inang  karena  bantuan  enzim  dan tekanan  mekanik,  seluruh  tubuh  serangga inang  penuh  dengan  propagul  dan  bagian yang  lunak  dari  tubuhnya  akan  ditembus keluar dan menampakan pertumbuhan hifa di luar tubuh serangga inang. Pertumbuhan hifa eksternal  akan  menghasilkan  konidia,  bila telah  masak  akan  disebarkan  ke  lingkungan dan  menginfeksi  serangga  hama  yang  sehat (Prayogo et al. 2005).
Hasil  pengamatan  menunjukkan  bahwa larva Spodoptera  frugiperda yang  terinfeksi Beauveria bassiana terjadi melalui integumen  yang  merusak  sistem  kekebalan larva Spodoptera  frugiperda .  Konidia  yang kontak dengan integumen segera berkecambah membentuk hifa dan menyerap nutrisi  yang  ada  di  tubuh  larva  serta mengeluarkan  toksin  yang  dihasilkannya, Beauveria  bassiana menghancurkan  struktur dalam  tubuh  larva Spodoptera  frugiperda dan  mengakibatkan  kematian  larva  tersebut. Konidia jamur Beauveria bassiana masuk ke tubuh  serangga  inang  melalui  kulit,  saluran pencernaan,  spirakel  dan  lubang  lainnya. Beauveria  bassiana juga  menghasilkan toksin seperti beauverisin, beauverolit, bassianalit,  isorolit,  dan  asam  oksalat  yang menyebabkan terjadinya kenaikan pH, penggumpalan  dan  terhentinya  peredaran darah  serta  merusak  saluran  pencernaan,
otot,  system  syaraf,  dan  pernafasan  (Mahr, 2003).
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa larva  yang  terinfeksi  telah  memperlihatkan adanya  gejala  infeksi  yaitu  badan  menjadi kaku,  berwarna  hitam  selanjutnya  disertai tumbuhnya  miselia  jamur  dipermukaan tubuh Spodoptera frugriperda berwana putih seperti benang. Saleh et  al. (2000) menyatakan bahwa hasil pembedahan terhadap larva yang mati, yang memperlihatkan  isi  saluran  percernaan  larva yang kering dan berwarna hitam. Kulit larva bagian dalam berwarna merah dengan warna putih  di  sekitarnya.  Gejala-gejala  ini  adalah gejala  yang  ditunjukkan  oleh  zat  pengurai khitin yang dikenal dengan nama Beauvericin, sebagai racun yamng dihasilkan oleh  konidia  jamur  tersebut.  Dari  hasil pengamatan  diketahui  bahwa  serangga  yang terinfeksi  jamur  entomopatogen  sebagian tidak menunjukkan gejala tumbuhnya miselia  diatas  permukaan  tubuh  serangga. Hal  ini  diakibatkan  jamur  entomopatogen tidak mampu menembus integumen serangga.  Jamur  tidak  selalu  tumbuh  ke  luar menembus  integumen  serangga.  Apabila keadaan  kurang  mendukung  perkembangan saprofit  hanya  berlangsung  di  dalam  jasad serangga  tanpa  keluar  menembus  integumen sehingga  larva  yang  terinfesi  jamur  tidak menunjukkan  adanya  hifa  yang  tumbuh  di permukaan  tubuh  serangga  (Prayogo  et  al. 2005).
Pengujian Keefektian Cendawan
Beauveria  bassiana dan Metarhizium sp terhadap  Mortalitas  Larva  Ulat  Grayak ( Spodoptera frugiperda )
Persentase mortalitas larva Spodoptera  frugiperda terhadap  cendawan entomopatogen  10  hari  setelah  aplikasi (HSA)  menunjukkan  hasil  berbeda  nyata pada cendawa Metarhizium sp dan Beauveria bassiana dengan kontrol. Hal ini dikarenakan senyawa  enzim  yang  dihasilkan  kedua  jenis cendawan  ini  mampu  dan  berpotensi  dalam
Yasir Harun : Kajian Patogenisitas Beauveria bassiana dan Metarhizium sp terhadap Larva Ulat Grayak (Spodoptera frugiperda) pada Tanaman Jagung
mengendalikan  dan  menginfeksi  larva  Ulat Grayak  ( Spodoptera frugiperda)  waktu  yang singkat,  sehingga  mengakibatkan  serangga sakit  dan  mengalami  kematian  dengan
jumlah  serangga  dalam  waktu  yang  singkat dan  dapat  menghasilkan  infeksi  yang  terjadi secara  lambat  dalam  periode  yang  lama (infeksi kronik) (Tanada & Kaya, 1993).
Tabel  1.  Persentase  mortalitas  larva Spodoptera  frugiperda akibat  aplikasi    Cendawan  entomopatogen  yang berbeda pada 1-10 hari setelah aplikasi (hsa).
Ket : Angka-angka yang diikuti notasi yang sama pada kelompok kolom yang sama menunjukkan tidak berbeda nyata pada Uji BNT  5%
Pada  Tabel  1  menunjukkan  hasil berbeda  nyata  pada  cendawan Metarhizium sp dan Beauveria  bassiana dengan  kontrol berarti    cendawan Beauveria  bassiana dan Metarhizium sp  mampu  bertindak  sebagai entomopatogen  pada  larva  ulat  grayak Spodoptera frugiperda . Beauveria  bassiana telah  menginfeksi larva  ulat  grayak Spodoptera  frugiperda sejak  hari  kedua  setelah aplikasi  hingga  hari ke  sepuluh  setelah  aplikasi  sedangkan cendawan Metarhizium sp  baru  mampu menginfeksi  larva  ulat  grayak Spodoptera frugiperda pada  hari  ketiga  sampai  hari  ke sepuluh setelah aplikasi.
Pada  tabel  diatas  juga  menunjukkan bahwa  cendawan Beauveria  bassiana lebih efektif  dibandingkan  cendawan Metarhizium sp,  hal  ini  berdasarkan  pada  kemampuan
cendawan Beauveria bassiana yang menginfeksi dan rentang waktu infeksi lebih cepat dibandingkan dengan Metarhizium sp.
Pengujian Keefektian Berbagai Konsentrasi Cendawan Beauveria
bassiana terhadap  Mortalitas  Larva  Ulat Grayak  ( Spodoptera  frugiperda )  dalam  1- 10 Hari Setelah Aplikasi
Pada  tabel  2  menunjukkan  bahwa  pada hari  pertama  belum  terdapat  presentase mortalitas  larva,  Hal  dikarenakan Baeuveria bassiana membutuhkan  proses  penempelan konidia pada tubuh serangga, perkecambahan,  penetrasi,  invasi  kolonisasi dalam hemosel, jaringan dan organ. (Rahayu dan Umrah, 2012).
Yasir Harun : Kajian Patogenisitas Beauveria bassiana dan Metarhizium sp terhadap Larva Ulat Grayak (Spodoptera frugiperda) pada Tanaman Jagung
Namun  mortalitas  baru  nampak  pada hari  kedua  sampai  kesepuluh  setelah aplikasi. pada tabel diatas juga menunjukkan bahwa  konsentrasi  10 9 telah  menunjukkan tingkat  presentase  mortalitas  paling  tinggi sejak hari kedua sampai keenam artinya pada konsentrasi  10 9 proses  infeksi  cendawan beauveria  bassiana lebih  cepat  dan  juga memerlukan  waktu  yang  begitu  singkat untuk  menyebabkan  kematian  100  persen. Begitupun  dengan  konsentrasi  10 6 proses infeksi  cendawan beauveria  bassiana lebih lambat  dan  juga  memerlukan  waktu  yang
begitu  lama  untuk  menyebabkan  kematian 100 persen dibandingkan dengan konsentrasi yang lain.
Hal  ini  menunjukkan  bahwa  semakin tinggi konsentrasi jamur Beauveria bassiana, maka  tingkat  kematiannya  pun  makin  tinggi karena semakin banyak jumlah konidia yang terkandung  maka  semakin  banyak  konidia yang mengadakan kontak dengan tubuh larva dan  kemungkinan  untuk  menginfeksi  larva semakin besar.
Tabel  3.  Presentase  Mortalitas  Larva  Ulat  Grayak  Frugiperda  yang  terinfeksi Beauveria  bassiana dalam berbagai konsentrasi
Berdasarkan tabel diatas
menunjukkan  bahwa  rata  rata  perlakuan memiliki  rentang  waktu  infeksi  antara  2 sampai 4 hari. Pada tabel diatas menunjukkan bahwa konsentrasi 10 9 dan 10 8 lebih cepat menyebabkan kematian yaitu hari kedua  setelah  aplikasi  dan  beda  nyata dibandingkan  dengan  perlakuan  yang  lain termasuk kontrol.
Pada  tabel  di  atas  juga  menunjukkan bahwa konsentrasi 10 9 hanya membutuhkan 3 hari saja untuk menyebabkan kematian 100 persen, konsentrasi
10 8 dan 10 7 membutuhkan waktu 5-6 hari setelah aplikasi sedangkan  konsentrasi  10 6 membutuhkan waktu yang begitu lama dibandingkan semua perlakuan  yaitu  7  Hari  .  Lama  waktu  yang dibutuhkan  isolat  jamur  entomopatogen
mulai  dari  infeksi  jamur  hingga  larva  dapat mati  berkisar  2-10  hari  (Herlinda  et  al. 2005).
Berdasarkan hasil uji statistik annova uji BNJ menunjukkan bahwa semua perlakuan  konsentrasi  berpengaruh  nyata terhadap  kontrol  artinya  bahwa  cendawan beauveria  bassiana dengan  konsentrasi  10 6 - 10 9 memiliki  virulensi  terhadap  larva  ulat grayak frugiperda.
Hasil penelitian Rusdi (2008) menunjukkan  bahwa  aplikasi  cendawan Baeuveria  bassiana pada  larva Spodoptera exigua instar  III  dengan  konsentrasi  10 6 konidia/ml  menghasilkan  mortalitas  larva sebesar  35  %  dan  pada  konsentrasi  10 9 konidia/ml mortalitas larva mencapai 80%.
Pada  tabel  di  atas  menunjukkan bahwa semua perlakuan menunjukkan tingkat  mortalitas  paling  tinggi  pada  hari ketiga  setelah  aplikasi  kecuali  konsentrasi 10 9 yang telah menunjukkan mortalitas larva sejak  hari  kedua  sedangkan  konsentrasi  10 6 baru menunjukkan tingkat mortalitas tertinggi  pada  hari  keempat  dan  kelima setelah  aplikasi.  Hal  ini  sesuai  dengan pendapat  Broome  et  al.  (1976)  menyatakan bahwa  37%  dari  konidium Beauveria bassiana dapat  berkecambah  di  dalam saluran  pencernaan  inangnya  dalam  waktu 72 jam, sedangkan hifanya mampu menembus  dinding  usus  antara  60-72  jam. Kematian  serangga  dapat  terjadi  dalam waktu 7 hari setelah aplikasi.
Efektivitas Beauveria bassiana dipengaruhi  oleh  jumlah  konsentrasi  dan viabilitas  spora  untuk  bersporulasi  dengan maksimal.  Viabilitas  spora  yang  baik  dapat dipengaruhi  oleh  keadaan  lingkungan  yang memguntungkan  bagi  spora  untuk  tumbuh dan berkembang selain itu dapat dipengaruhi oleh rentang waktu produktif viabilitas spora Beauveria  bassiana untuk  bersporulasi dengan  maksimal  berbeda-beda.  Viabilitas spora  yang  baik  dapat  dipengaruhi  oleh keadaan  lingkungan  yang  menguntungkan spora  tersebut  tumbuh.  Namun,  apabila interval  waktu  pemberian  agens  hayati
terlalu  panjang  dapat  mempengaruhi  pula viabilitas Beauveria  bassiana .  Viabilitas dapat  menurun  akibat  keadaan  lingkungan yang kurang menguntungkan bagi Beauveria bassiana .  Menurut  Sukamto  dan  Yuliantoro (2006),  pada  suhu  ruang  29 o C  dengan kondisi  terpapar  terlalu  banyak  cahaya  dan oksigen dapat mengakibatkan kematian pada sel spora karena mengering secara cepat dan spora  kehilangan  viabilitas.  Sehingga  pada aplikasi dilapang dengan kondisi lingkungan tidak  stabil  dapat  memberikan  dampak  yang lebih  buruk  bagi  viabilitas Baeuveria bassiana . Jangka waktu pemberian Baeuveria  bassiana dapat  dikaitkan  pula dengan  proses  spora    yang  menginfeksi serangga penggerek buah kakao. Spora yang telah disemprotkan menempel pada permukaan  kulit  buah  kakao  sehingga memungkinkan  spora  menempel  pada  kulit telur  penggerek  buah  kakao  yang  diletakkan pada  pangkal  buah  kakao.  Kemudian  spora akan  menyelimuti  kulit  telur  hingga  telur menetas  atau  gagal  menetas.  Apabila  telur gagal menetas maka stadium larva penggerek buah  kakao  tidak  terjadi.  Pada  kombinasi antara konsentrasi B.bassiana dengan interval waktu pemberiannya tidak berpengaruh terhadap presentase buah terserang, intensitas serangan dan penurunan berat  biji  akibat  serangan  penggerek  buah kakao.
Demikian  pula  tempayak  lalat  yang terinfeksi  B.  bassiana  sering  ditemukan secara berkelompok pada ujung-ujung rerumputan  (Plate,  1976  cit  Soetopo  dan Indrayani,  2007).  Jamur  dapat  bereproduksi secara aseksual dan seksual dengan membentuk  spora.  Terdapat  bermacam- macam  spora  aseksual  yang  dibentuk  oleh jamur,  antara  lain  ialah  konidium  (jamak: konidia),  spora,  dan  klamidospora  (spora berdinding  tebal  dan  terbentuk  dari  benang sel biasa yang membulat). Jamur B. bassiana melakukan reproduksi secara aseksual dengan cara membentuk konidium. Konidium ialah spora tunggal yang dihasilkan  dalam  kantung  (sporangium).
Yasir Harun : Kajian Patogenisitas Beauveria bassiana dan Metarhizium sp terhadap Larva Ulat Grayak (Spodoptera frugiperda) pada Tanaman Jagung
Selain itu, beberapa Ascomycota berkembang  biak  dengan  tunas  (blastopora), tunas terbentuk dari percabangan sel. Setelah semua bagian sel terbentuk, tunas melepaskan  diri  dari  induknya.  Reproduksi secara seksual dilakukan dengan membentuk askokarp. Prosesnya diawali dengan plasmogami antara elemen jantan (antheridium)  dengan  gametangium  betina (askogonium). Setelah terjadi fertilisasi akan terbentuk  askus  yang  mengandung  inti diploid.  Inti  diploid  pada  askus  muda  akan mengalami  meiosis  membentuk  4  inti haploid  yang  setelahnya  dapat  mengalami proses mitosis berkali-kali. Inti tersebut akan diselubungi dinding dan berkembang menjadi  askospora  matang.  Askus  dapat dibentuk  dalam  suatu  wadah  yang  disebut askokarp.  Askospora  yang  matang  akan keluar  dari  askus  dan  askokarp  (Gandjar, 2006).
Keefektifan Beauveria bassiana menginfeksi  serangga  hama  tergantung  pada
spesies  atau  strain  cendawan,  dan  kepekaan stadium  serangga  pada  tingkat  kelembaban lingkungan,  struktur  tanah  (untuk  serangga dalam  tanah),  dan  suhu  yang  tepat.  Selain itu,  harus  terjadi  kontak  antara  spora  B. bassiana  yang  diterbangkan  angin  atau terbawa  air  dengan  serangga  inang  agar terjadi  infeksi  (Soetopo  dan  Indarayani,
2007) Pengujian Keefektian Berbagai Konsentrasi Cendawan Beauveria bassiana terhadap  Mortalitas  Larva  Ulat Grayak  ( Spodoptera  frugiperda )  dalam  1- 10 Hari Setelah Aplikasi
Pada  Tabel  di  atas  menunjukkan bahwa  pada  hari  pertama  dan  kedua  belum ada  larva  ulat  grayak  frugiperda  yang  mati dengan  kata  lain  tingkat  mortalitas  larva masih 0%, mortalitas baru nampak pada hari ketiga sampai ke sepuluh setelah aplikasi.
Pada  tabel  di  atas  juga  menunjukkan bahwa  konsentrasi  10 9 lebih  cepat menimbulkan  kemataian  (mortalitas)  yaitu pada hari ketiga sedangkan pada konsentrasi yang  lain  baru  nampak  pada  hari  ke  empat. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  semakin  tinggi konsentrasi  jamur Metarhizium  sp maka tingkat kematiannya pun makin tinggi karena semakin  banyak  jumlah  konidia  yang terkandung  maka  semakin  banyak  konidia yang  mengadakan  kontak  dengan  tubuh serangga dan kemungkinan untuk menimbulkan  penyakit  besar  pula.  Semakin
banyak  konidia  yang  mengadakan  kontak dengan  tubuh  serangga  maka  kemungkinan untuk  menimbulkan  penyakit  besar  (Nazar, 2005).
Prayogo  (2006)  menyatakan  bahwa salah satu upaya untuk menambah keefektifan  suatu  cendawan  entomopatogen perlu dilakukan penentuan konsentrasi aplikasi  yang  tepat.  Penelitian  Baehaki  & Noviyanti  (1993)  mengindikasikan  bahwa untuk  menginfeksi  wereng  coklat  padi dengan  tingkat  mortalitas  71%,  jamur Metarhizium  anisopliae perlu  diaplikasikan
Yasir Harun : Kajian Patogenisitas Beauveria bassiana dan Metarhizium sp terhadap Larva Ulat Grayak (Spodoptera frugiperda) pada Tanaman Jagung
dengan kerapatan konidia 10 15 dalam volume semprot 500 liter per hektar.
Pada  tabel  di  atas  juga  menunjukkan bahwa  rata  rata  perlakuan  konsentrasi Metarhizium  sp  memerlukan  waktu  yang sama  yaitu  4  sampai  7  hari.  berarti  bahwa semua perlakuan memiliki kemampuan yang sama  dalam  menyebabkan  mortalitas  pada larva  ulat  grayak  frugiperda.  Hal  ini dikarenakan mekanisme perkembangan infeksi  Metarhizum  sp  di  dalam  tubuh
serangga  melalui  berbagai  tahap  sampai membunuh  serangga.  Metarhizum  sp  dapat berkembang  di  dalam  tumbuh  serangga sehingga  dapat  membunuh  serangga  hanya dalam  beberapa  hari  Dalam  hal  ini  jamur Metarhizum  sp  membutuhkan  waktu  selama 4 hari untuk membunuh serangga. Metarhizum  sp  dapat  berkembang  di  dalam tubuh  serangga  yang  dapat  dengan  cepat membunuh (Hosang, 1990).
Tabel  5.  Presentase  Mortalitas  Larva  Ulat  Grayak  Frugiperda  yang  terinfeksi Metarhizium sp dalam  berbagai konsentrasi
Sumber : Data Primer yang telah diolah dengan Dunchan taraf 5%
Pada tabel di atas menunjukkan bahwa pada hari pertama sampai hari kedua setelah aplikasi  semua  perlakuan  konsentrasi  belum berpengaruh  nyata  terhadap  kontrol.  Semua perlakuan  baru  berbeda  nyata  terhadap kontrol  pada  hari  keempat  setelah  aplikasi dan  pada  hari  ketujuh  setelah  aplikasi.  Hal ini  menunjukkan  bahwa  proses  infeksi Metarhizium sp  terjadi  melalui  dua  tahap yaitu  kontak  langsung    dan  melalui  larva yang  terinfeksi,  Kontak  langsung  yaitu mekanisme perkembangan infeksi Metarhizum sp  di  dalam  tubuh  serangga melalui  berbagai  tahap  sampai  membunuh serangga. Metarhizum sp  dapat  berkembang di  dalam  tumbuh  serangga  sehingga  dapat membunuh  serangga  hanya  dalam  beberapa hari.  Dalam  hal  ini  jamur Metarhizum  sp membutuhkan  waktu  selama  4  hari  untuk membunuh  serangga.  Metarhizum  sp  dapat berkembang  di  dalam  tubuh  serangga  yang
dapat  dengan  cepat  membunuh  (Hosang, 1990). Mortalitas serangga sangat ditentukan oleh kerapatan konidia cendawan entomopatogen  yang  diaplikasikan  (Baehaki et  al,  1993).  Makin  tinggi  kerapatan  konidia Metarhizum sp, makin tinggi pula mortalitas Spodoptera  litura (Prayogo  dan  Tengkano, 2004).  Kerapatan  konidia Metarhizum  sp 10 7 /ml  paling  optimal  untuk  mengendalikan Spodoptera litura. Romero et al. (1997) juga menyatakan  bahwa  kerapatan  konidia  10 7 /ml  sudah  mampu  membunuh  serangga  dari ordo Lepidoptera.
Kerapatan  konidia  yang  optimal  untuk mengendalikan  hama  bergantung  pada  jenis serangga  yang  akan  dikendalikan.  Baehaki dan Noviyanti (1993) memerlukan kerapatan konidia 10 15 /ml M. anisopliae untuk mengendalikan imago wereng coklat, sedangkan  Luz et al. (1998) serta Wang  dan Powell  (2001)  hanya  memerlukan  kerapatan
Yasir Harun : Kajian Patogenisitas Beauveria bassiana dan Metarhizium sp terhadap Larva Ulat Grayak (Spodoptera frugiperda) pada Tanaman Jagung
konidia  10 5 −10 6 /ml  untuk  mengendalikan Triatoma infestans.
Larva  instar  I  paling  rentan  terhadap cendawan Metarhizium  anisopliae, karena lapisan  integumen  serangga  masih  sangat tipis  sehingga  cendawan  sangat  mudah melakukan  penetrasi.  Di  samping  itu,
pergantian kulit serangga juga mempengaruhi keberhasilan aplikasi cendawan entomopatogen  (Prayogo. 2005)
Sedangkan melalui larva yang terinfeksi yaitu banyaknya populasi serangga yang  bersama-sama  berada  dalam  suatu patosistem  akan  berinteraksi  sesamanya  dan menimbulkan potensi kontak antara inokulum  dengan  serangga  inang  yang  sakit maupun yang sehat. Besarnya potensi kontak ini  berbanding  lurus  dengan  daya  infeksi patogennya  (Dewi  et  al.,  1998).  Penelitian aplikasi  jamur  entomopatogen Metarhizium sp  terhadap  kepik  hijau  (Nugroho  et  al., 1999)  dan  kutudaun  kedelai  (Arianti  et  al., 2000)  menunjukkan  bahwa  daya  infeksi jamur meningkat seiring dengan peningkatan jumlah  inang  yang  sudah  terinfeksi  maupun inang yang belum terinfeksi pada sekumpulan populasi inang .
Kesimpulan Berdasarkan hasil penelitian yang diperoleh, maka dapat disimpulkan bahwa :
1. Cendawan Beauveria  bassiana dan Metarhizium sp  dapat  bertindak  sebagai entomopatogen  terhadap  larva  ulat grayak frugiperda ( Spodoptera frugiperda ) karena
memiliki kemampuan patogenis diatas 45%
2. Konsentrasi yang efektif dalam mengendalikan larva ulat grayak frugiperda  adalah  semua  konsentrasi baik  cendawan Beauveria  bassiana maupun Metarhizium sp
3. Proses  infeksi  cendawan Beauveria bassiana dan Metarhizium sp  terhadap larva ulat grayak frugiperda ( Spodoptera frugiperda )  selama  2  sampai  10  hari setelah aplikasi
Saran
Perlu  adanya  sosialisasi  dan  pelatihan kepada petani dalam melakukan perbanyakan  cendawan Beauveria  bassiana dan Metarhizium sp  dan  penerapan  dosis serta  konsentrasi  yang  tepat  sehingga entomopathogen  ini  dapat  digunakan  dalam melakukan pengendalian.

## DAFTAR PUSTAKA
Achmad.T & J. Tandiabang, 2001. Dinamika Populasi Hama Utama Tanaman Jagung  Pada  Pola  Tanam  Berbasis Jagung.  Balai  Penelitian  Tanaman Serealia. Maros Sulawesi Selatan.
Ahsol  Hasyim,  Wiwin  Setiawati  ,  Abdi Hudayya dan Luthfy, 2016. Sinergisme Jamur  Entomopatogen  Metarhizium anisopliae  Dengan  Insektisida  Kimia untuk  Meningkatkan  Mortalitas  Ulat Bawang  Spodoptera  exigua.  Balai
Penelitian
Tanaman Sayuran. Lembang. Jawa Barat Arianti,  M.P.D.,  F.X.  Susilo,  &  Indriyati. 2000.  Daya  tular  dan  keterpautan kepadatan inokulum cendawan
Metarhizium anisopliae pada kutudaun kedelai  (Aphis  glycines).  J.  Pen. Pengb.  Wil.  Lahan  Kering  22  (1):  21- 27.
Baehaki,  S.E.  &  Noviyanti.  1993.  Pengaruh umur  biakan  Metarhizium  anisopliae strain lokal Sukamandi terhadap perkembangan
wereng coklat. Prosiding Makalah
Simposium
Patologi  Serangga  I.  Yogyakarta,  12- 13 Oktober 1993. pp. 113-124.
BPS.  2018.  Badan  Pusat  Statistik.  Jakarta. Indonesia
Busvine,  J.  A.  R.,  1971.  Techniques  for testing  insecticides.  Commonwealth Agricultural Bureau. London. 336 p.
Dewi, M., F.X. Susilo, & A.M. Hariri. 1998. Daya  infeksi,  efisiensi  penularan,  dan periode  letal  penyakit  muskardin  hijau (Metarhizium  anisopliae)  pada  wereng batang coklat padi (Nilaparvata
lugens).  Jurnal  Penelitian  Pertanian  9 (9): 156-166.
Erika  Paola  et  al.  2018.  Metarhizium rileyi biopesticide to control Spodoptera frugiperda: Stability and insecticidal activity under glasshouse  conditions.  Fungal  Biology Volume  122,  Issue  11, November 2018, Pages 1069-1076
Ferron  P.  1985.  Pest  control  by  fungi
Beauveria and Metarhizium. In: Burgers  HD,  editor.  Microbial  of  Pest and  Plant  Dieseses  1970-1980,  465- 482. London: Academic Press Inc.
Freimoser  F  M.,  Screen  S.,  Bagga  S.,  Hu  G &  St  Leger  R  J.  2003.  Expressed sequence  tag  (EST)  analysis  of  two subspecies  of  Metarhizium  anisopliae reveals  a  plethora  of  secreted  proteins with  potential  activity  in  insect  hosts. Microbiol. 239-247.
Hadioetomo, R. S. 1993. Mikrobiologi Dasar dalam  Praktek  :  Teknik  dan  Prosedur Dasar  Laboratorium.  PT  Gramedia Pustaka Utama. Jakarta. 163 hal.
Hosang,  M.  L.,  A.  A.  Lolong,  D.  Michellia dan  D.  Sitepu,  1989,  Pengendalian Hayati  Oryctes  rhinoceros  L.  Dengan Baculovirus  oryctes  dan  Metarhizium anisopliae.  Balai  Penelitian  Kelapa. Manado.  Balai  Penelitian  Tanaman Rempah dan Obat. Bogor.
Husein,  Umar.  (2003).  Metode  Riset Perilaku  Konsumen  Jasa.  Jakarta  : Ghalia Indonesia
Kaur  S.,  Harminder  P  K.,  Kirandeep  K  & Amarjeet  K.  2011.  Effect  of  different concentrations  of  Beauveria  bassiana on  development  and  reproductive potential of Spodoptera litura (Fabricius). J. Biopest. 4(2):161-168. Kementan.  2019.  Kementerian  Pertanian. Jakarta. Indonesia
Kherb  W  A  A.  2014.  Virulence  Bio-Assay Efficiency  of  Beauveria  bassiana  and Metarhizium anisopliae for the biological control of Spodoptera
exigua
Hubner (Lepidoptera:
Noctuidae)  eggs  and  the  1st  instar larvae.  Aust.  J.  Basic  &  Appl.  Sci. 8(3): 313-323.
Luz,  C.,  M.S.  Tigano,  I.G.  Silva,  C.M.T. Cordeiro,  and  S.M.  Aljanabi.  1998. Selection  of  Beauveria  bassiana  and Metarhizium  anisopliae  isolates  to control  Triatoma  infestans.  Memorias do Instituto Oswaldo Cruz 93: 839−846
Mahr  S.  2003.  The  Entomopathogen Beauveria  bassiana.  University  of Winconsin, Madison.
Nazar,  A.,  Elna,  K.,  dan  Jekvi,  H.,  2005. Pengaruh  Tingkat  Konsentrasi  Spora Jamur  Nomuraea  rileyi  Terhadap
Penggerek Batang Gula. Pusat Penelitian  Pengembangan  Tanaman
Industri. Lampung.
Nugroho,  A.N.,  F.X.  Susilo,  &  Indriyati. 1999.  Potensi  kontak  antara  inokulum dan inang menentukan efisiensi penularan  penyakit  muskardin  hijau pada  kepik  hijau  kedelai.  J.  Pen. Pengb. Wil. Lahan Kering. 24 : 28-36. Nurnina  Nonci.  2019.  Pengenalan  Fall Armyworm  ( Spodoptera  frugiperda J.E. Smith) Hama Baru pada Tanaman Jagung  di  Indonesia,  Balai  Penelitian Tanaman Serealia, Maros.
Prayogo  Y,  2005.  Potensi,  Kendala  dan
Upaya  Mempertahankan  Keefektifan Cendawan Entomopatogen untuk Mengendalikan Hama Tanaman Pangan. Buletin Palawija, 10: 53-65.
Prayogo,  Y.  2006.  Upaya  mempertahankan keefektifan  cendawan  entomopatogen untuk  mengendalikan  hama  tanaman pangan.  Jurnal  Litbang  Pertanian  25 (2): 47-54.
Prayogo  Y  &  Tengkano  W.  2004.  Pengaruh konsentrasi  dan  frekuensi  aplikasi Metarhizium anisopliae isolat kendalpayak terhadap tingkat kematian Spodoptera  litura.  Sainteks.  Jurnal Ilmiah  Ilmu-Ilmu  Pertanian  3  (10)  : 209-216.
Rahayu  dan  Umrah.  2012.  Uji  kemampuan formula  Beauveria  bassiana  balsamo bentuk sediaan tablet untuk mengendalikan Penggerek Buah Kakao (Conopomorpha  cramerella  Snellen sp).  Biocelebes,  Vol.  6  No.  1  Juni
2012, hlm. 31-39. http://jurnal.untad.ac.id/jurnal. Biocelebs. Riyanto, Santoso. 1991. Cendawan Beauveria bassiana dan Cara Pengendalian Guna Pengendalian Hama Bubuk  Kopi. Jakarta: Direktorat Bina Perlindungan Tanaman
Perkebunan.
Romero,  M.,  M.  Estrada,  R.F.  Castaneda, and  M.  Lujan.  1997.  Morphological and  pathogenical  characterization  of Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorokin. Cane Sugar 15(1): 17−25.
Rosdah  Thalib.  2013.  Patogenisitas  Isolat Beauveria  Bassiana  Dan  Metarhizium Anisopliae  Asal  Tanah  Lebak  Dan Pasang  Surut  Sumatera  Selatan  Untuk Agens  Hayati  Scirpophaga  Incertulas.
Jurusan Hama dan Penyakit Tumbuhan, Faperta, Universitas Sriwijaya, Indralaya.
Rusli  Rusdi.  2008.  Perbanyakan  Beauveria bassiana Pada Limbah Organik,
Formulasi  Dan  Uji  Efektivitasnya Sebagai Bioinsektisida Untuk Pengendalian Hama Spodoptera Exigua Hubner (Lepidoptera: Noctuidae) Jurusan Hama dan Penyakit Tumbuhan, Faperta, Universitas Andalas, Limau
S.P  Wraight  et  all.  2010.  Comparative virulence of Beauveria bassiana isolates  against  lepidopteran pests  of  vegetable  crops Journal  of Invertebrate  Pathology  Volume  103, Issue 3, March 2010, Pages 186-19
Sugiyono. 2011. Metode Penelitian Kuantitatif, Kualitatif dan R&D.
Bandung: Afabeta
Sugiyono. 2013. Metode Penelitian Pendidikan  Pendekatan  Kuantitatif, Kualitatif, dan R&D. Bandung: Alfabeta.
Sukamto  S  dan  K  Yuliantoro.  2006.
Pengaruh  suhu  penyimpanan  terhadap viabilitas  Beauveria  bassiana  (bals.) Vuill. dalam beberapa pembawa. Pelita
Perkebunan 22 (1), 40-56
Surtikanti, Yasin M, 2002. Tingkat Mortalitas  Ulat  Grayak  (Spodoptera litura)  Aibat  Pencelupan  Suspensi Beberapa  Isolat  Beauveria  bassiana. Makalah  Utama.  Disampaikan  pada Prosiding Seminar Ilmiah dan
Pertemuan  Tahunan  PEI,  PFI  dan HPTI  XV  Sul-Sel,  Maros  29  Oktober 2002.
Swain,  D.K.,  S.  Herath,  A.  Pathirane  and B.N.  Mittra.  2005.  Rainfed  lowland and flood prone rice:  A critical review on ecology and management technology  improving  the  productivity in  Asia.  Role  of  Water  Sciences  in Transboundary River Basin Management. Thailand. Tantawizal.  2015.    Potensi  Cendawan Entomopatogen Beauveria  bassiana (BALSAMO)
Vuillemin untuk Mengendalikan  Hama  Boleng Cylas formicarius f. Pada Tanaman Ubi Jalar. Balai  Penelitian  Tanaman  Aneka Kacang dan Umbi. Malang.
Wang,  C.  and  J.E.  Powell.  2001.  Isolation and evaluation of Metarhizium anisopliae  for  control  of  Coptotermes formosanus and Reticulitermes flavipes. An Entomol Odyssey of ESA.
Zainal  et  al.  2015.  “Identifikasi  Areal Pengembangan  Baru  Tanaman  Jagung Mendukung  Upaya  Khusus  (Upsus) Peningkatan Produksi Jagung Di Sulawesi  Tenggara.  Kendari.  Balai Pengkajian
Teknologi
Pertanian
Sulawesi Tenggara.