PENGARUH PEMBERIAN DIET VIRGIN COCONUT OIL(VCO)TERHADAP JUMLAH TROMBOSIT PADA TIKUS PUTIH JANTAN (rattus norvegicus) HIPERKOLESTEROLEMIK
Asnilawati 1 , Kamaluddin, Swanny 3
Fisiologi Kedokteran, Biomedik Fakultas Kedokteran, Universitas Sriwijaya, Palembang, Indonesia
Email : Asnilawati.asni@gmail.com

## ABSTRAK
Peningkatan  kadar  kolesterol  yang  semakin  tinggi  dapat  menyebabkan  terjadinya aterosklerosis. Aterosklerosis adalah penyakit kronis yang ditandai dengan penebalan dan pengerasan  dinding  arteri.  Lesi  mengandung  deposit  lipid  dan  mengalami  kalsifikasi, mengakibatkan obstruksi pembuluh darah, agregasi trombosit dan vasokontriksi abnormal. Saat terjadi lesi pada pembuluh darah maka akan terbentuklah trombosit, Trombosit akan beragregasi  dan  melekat  ke  permukaan  plak  yang  rupture.  Untuk  menormalisir peningkatan  kolesterol  dan  menstabilkan  jumlah  trombosit  darah  dilakukan  dengan pemberian  diet.salah  satu  produk  pangan  fungsional  yang  popular  adalah  VCO  ( Virgin Cococnut Oil ) VCO merupakan minyak  yang  diolah dengan berbagai cara salah satunya diproses  tanpa  pemanasan  dari  daging  buah  kelapa  segar.  Tujuan  penelitian  ini  yaitu untuk  menganalisis  pengaruh  pemberian  diet Virgin  Coconut  Oil (VCO)  terhadapjumlah trombosit pada tikus putih ( Rattus Norvegiccus Wistar ) hiperkolesterolemik. Metode dalam penelitian  ini  adalah Laboraturium  Experimental dengan  rancangan one  group  pre-post test design . Penelitian ini dilakukan sendiri dan pemeriksaan darah akan dilakukan di Balai Besar  Laboraturium  Daerah  yang  berlangsung  dari  bulan  Februari  2015  sampai  dengan April 2015. Pada penelitian ini terdapat 2 kelompok, masing-masing kelompok terdiri atas 16  ekor  tikus,  jadi  keseluruhan  jumlah  sampel  yang  dibutuhkan  adalah  32  ekor.  Hasil penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  terjadi  perubahan  yang  bermakna  jumlah  trombosit kelompok  kontrol  dan  perlakuan  setelah  perlakuan  VCO  dengan  nilai p value  0,001 (p<0,05),  terdapat  perbedaan  rerata  jumlah  trombosit  antara  kelompok  perlakuan Virgin Coconut  Oil (VCO)  dengan  dosis  0,81  ml  dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol.  Ini artinya pemberian Virgin Coconut Oil (VCO) dengan dosis 0,81 ml berpengaruh terhadap stabilitas jumlah trombosit darah pada tikus wistar. Kesimpulan : Ada pengaruh pemberian diet virgin  coconut  oil (VCO)  dengan  dosis  0,81  ml/gr  BB  dalam  menurunkan  dan menstabilkan jumlah trombosit darah pada tikus yang hiperkolesterolemik Kata Kunci :

## ABSTRACT
The  increased  of  high  cholesterol  levels  can  cause  atherosclerosis.  Atherosclerosis  is  a chronic  disease  characterized  by  thickening  and  hardening  of  artery  walls.  The  lesions containing lipid deposits and calcified, resulting in obstruction of blood vessels, abnormal platelet aggregation  and abnormal vasoconstriction. When the lesions occur in the blood vessels  it  will  be  formed  platelets,  platelets  will  aggregate  and  adhere  to  the  surface  of plaque rupture. Thr  diet was giving to normalize elevated cholesterol and stabilize blood platelet  counts.  one  of  the  functional  food  product  that  is  popular  is  the  VCO (Virgin Cococnut Oil). VCO is an oil that is processed in various ways which is processed without heating of fresh coconut meat.The aim of this study is to analyza the effect of diet Virgin Coconut  Oil  (  VCO  )  on  platelet  counts  in  hiperkolesterolemic  rats  ( rattus  norvegiccus ). Methods Experimental Research Laboratory to design one group pre  - post test design . This research was conducted himself and blood tests will be performed in the Great Hall of  the  Regional  Laboratory  which  lasts  from  February  2015  to  April  2015.  In  this  study,
there are two groups , each group consisting of 16 rats , so the overall number of samples required is 32 tail.These results indicate that a significant change in platelet count control and treatment groups after treatment VCO with a p value of 0.001 ( p < 0.05 ) , there are differences  between  the  mean  platelet  counts  between  treatment  groups Virgin  Coconut Oil ( VCO ) with a dose of 0.81 ml compared to the control group . This means that the provision of Virgin Coconut Oil ( VCO ) with a dose of 0.81 ml affect the stability of blood platelet counts in rats wistar. Conclusion : There is the influence of dietary virgin coconut oil ( VCO ) with a dose of 0.81 ml / gr BB in lowering and stabilizing blood platelet counts in mice hypercholesterolemic
Key word :

## PENDAHULUAN
Pembangunan serta
perkembangan suatu negara telah memberikan  dampak  yang  signifikan pada  masyarakatnya,  tidak  terkecuali  di Indonesia.  Dampak  tersebut  nyatanya kini  telah  mengubah  pola  struktur masyarakat dari agraris menjadi industri, dari  gaya  hidup  desa  ke  gaya  hidup masyarakat  perkotaan.  Pola  makan  pun berubah  dari  yang  alami  menjadi  cepat saji. Akibat  dari perubahan pola tersebut adalah  terjadinya  pergeseran  penyakit dari  kecenderungan  penyakit  infeksi  ke degeneratif seperti penyakit kardiovaskuler. 26
Sumbatan dipembuluh darah koroner  terjadi  secara  pelan-pelan  dan dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor  risiko antara lain merokok, DM, hiperkolesterolemia,  hipertensi,  kurang olahraga,  stress  mental,  kegemukan, sejarah  keluarga,  gender,  umur,  dan genetik.  Dari  faktor  tersebut,  ternyata faktor  asupan  makanan  menjadi  sangat penting  karena  sekaligus  mempengaruhi beberapa faktor risiko yang ada, terutama faktor asupan lemak. 4
Data yang diperoleh dari American Heart Association (AHA) menunjukkan bahwa
penyakit kardiovaskuler  memiliki  satu  hingga  tiga jenis tipe penyakit kardiovaskuler.
Insiden  mortalitas  menunjukkan  angka sebesar  35,3  %  (864.480  orang  dari 2.448.017  orang  yang  meninggal)  pada tahun  2005  atau  satu  dari  2,8  kematian di Amerika. 1
Penyebab awal terjadinya penyakit  kardiovaskuler  adalah  keadaan hiperkolesterolemia.  Hiperkolesterolemia merupakan penyakit gangguan metabolisme kolesterol  yang disebabkan oleh  kadar  kolesterol  dalam  darah melebihi batas normal. 19
Diet hiperkolesterol dapat menyebabkan peningkatan kadar kolesterol dan LDL (low density lipoprotein) dalam  darah  yang  memicu terjadinya  LDL-oks  akibat  radikal  bebas pada  pembuluh  darah  aorta yang menyebabkan terjadinya reaksi inflamasi dan  dapat  berakibat  pada  perubahan dinding pembuluh darah aorta. 19
Peningkatan kadar kolesterol yang semakin tinggi dapat menyebabkan
terjadinya  aterosklerosis.  Aterosklerosis adalah  penyakit  kronis  yang  ditandai dengan  penebalan  dan  pengerasan dinding  arteri.  Lesi  mengandung  deposit lipid dan mengalami kalsifikasi, mengakibatkan obstruksi pembuluh darah, agregasi trombosit dan vasokontriksi abnormal. 21
Sel  endotel  yang  cidera  antara lain  mensekresi  kemoatraktan  monosit dan mengekspresikan molekul peninduksi  adhesi  permukaan  sel  yang akan  mengikat  monosit  dan  limfosit  dan meningkatkan  pengambilan  makrofag kedaerah cidera, melepaskan sitokin dan merangsang inflamasi, melepaskan lebih sedikit oksida nitrat (vasodilator) , mensekresi  faktor  pertumbuhan  yang meningkatkan  migrasi  dan  proliferasi  sel otot polos. 25
LDL teroksidasi oleh radikal oksigen, difagositosis oleh makrofag dan kemudian  dibawah  ke  dinding  pembuluh darah  (oksidasi  LDL  ditingkatkan  oleh kenaikan  LDL  serum,  peningkatkan aktivitas lipoksigenase dan peningkatkan radikal  oksigen).Makrofag  yang  terisi LDL teroksidasi dinamakan sel busa.Akumulasi  sel  tersebut  membentuk suatu  lesi  patologis  yang  dinamakan lapisan  berlemak (fatty  streak) yang menginduksi  perubahan  imunologis  dan inflamasi lebih lanjut sehingga mengakibatkan kerusakan pembuluh progresif.Leukosit dan makrofag melepaskan pejamu sitokin inflamasi dan
mitogen  yang  selanjutnya  merangsang proliferasi  otot  polos  dan  menghambat sintesis endotel serta melepaskan vasodilator endogen seperti oksida nitrat.Sel otot polos bermigrasi ke daerah yang diliputi sel busa sehingga membentuk semacam topi yang dinamakan plak fibrosa.Remodeling pembuluh darah terjadi dengan klasifikasi  dan  fibrosis,  apoptosis  dan nekrosis lesi, penebalan dinding pembuluh  peri  lesi  dan  penonjolan  ke dalam lumen pumbuluh darah. 25
Ketika  plak  berkembang  plak tersebut  akan  mengalami  ulserasi  atau ruptur  karena  tekanan  aliran  darah mekanis,  kolagenenase,  elastase  dan stromelisin yang dihasilakn oleh makrofag  dan  apoptosis  sel  pada  tepi plak
menyebabkan nekrosis berkelanjutan  pada  dinding  pembuluh darah.  Jumlah  deposisi  kolagen  dan elastin  pada  topi  dan  jumlah  LDL  di dalam  pusatnya  menentukan  kestabilan dan kerentananya terhadap ruptur. Selain  itu  limfosit  T  menghasilkan interferon gama yang menurunkan produksi  kolagen  dan  melemahkan  plak (autoimunitas) . Trombosit akan beragregasi  dan  melekat  ke  permukaan plak  yang  ruptur  akibat  berkurangnya antikoagulan endotel dan pajanan reseptor permukaan glikoprotein thrombosis, rangkaian peristiwa
koagulasi kemudian dimulai dan thrombus  terbentuk  di  permukaan  lesi
yang bias mengobstruksi lumen pembuluh darah secara lengkap, pelepasan tromboksane A menyebabkan vasokonstriksi  akan  lebih  mempersempit lumen pembuluh darah.
Penelitian  yang  dilakukan  oleh Rajamohan  tahun  2008  menyatakan bahwa  pemberian Virgin  Coconut  Oil (VCO)dapat mengurangi kadar kolesterol dan  trigliserida  dan  mempertahankan kadar  faktor  pembekuan  darah  pada tikus.
Virgin coconut oil (VCO) merupakan  minyak  berwarna  jernih sampai  agak  kuning  kecoklatan  yang mengandung  asam  laurat  dan  tergolong sebagai  asam  lemak  jenuh  berantai sedang.Asam  lemak  jenuh  berantai sedang  memiliki  sifat  metabolisme  yang berbeda  dengan  asam  lemak  jenuh berantai panjang. Asam laurat dan asam lemak jenuh berantai sedang lain seperti asam  kaorat,  asam  kaprilat  dan  asam miristat  yang  terdapat  dalam  minyak kelapa  juga  mampu  menyembuhkan berbagai macam penyakit. 25
Virgin  Coconut  Oil (VCO)  atau minyak  kelapa  murni  mengandung  100 %  lemak  yang  terdiri  atas  92  %  asam lemak jenuh,  6 % asam lemak tak jenuh tunggal  dan  2  %  asam  lemak  tak  jenuh ganda.  Asam  lemak  jenuh  pada  VCO terdiri  dari  atas  90  %  asam  lemak  rantai sedang  dan  10  %  asam  lemak  rantai panjang.Asam lemak rantai sedang pada VCO  didominasi  oleh  asam  laurat  (C12)
yaitu 45-55%.Didalam tubuh asam lemak jenuh  rantai  sedang  ini  dipecah  dan digunakan  untuk  memproduksi  energi dan  jarang  disimpan  sebagai  lemak tubuh  atau  menumpuk  dalam  pembuluh darah.Asam  lemak  ini  dengan  mudah dapat  diserap dan dengan cepat  dibakar dan  digunakan  sebagai  energi  untuk metabolisme sehingga meningkatkan aktivitas metabolic sehingga dapat membantu melindungi tubuh dari penyakit
dan mempercepat
penyembuhan. 9
Menurut  Kabara  (1998),  asam lemak jenuh bukanlah kelompok homogen tetapi terdiri atas tiga subkelompok, pertama kelompok minyak dengan  asam  lemak  rantai  pendek  atau short  chain  triglyceride (SCT).  Kedua kelompok  minyak  dengan  rantai  sedang atau mediunchain  triglyceride (MCT), ketiga adalah longchain  triglyceride (LCT).  Perbedaan panjang rantai karbon ini merupakan rantai utama yang menentukan  mekanisme  lemak  dicerna dan dimetabolisir tubuh, serta cara lemak tersebut mempengaruhi tubuh.
Kandungan  asam  lemak  jenuh minyak  kelapa  didominasi  oleh  asam laurat (44-52%) yang merupakan MCT.Asam laurat inilah yang menjadikan minyak  kelapa  menjadi  unik  karena kebanyakan  minyak  tidak  mengadung MCT.MCT  dalam  tubuh  dipecah  dan secara dominan digunakan untuk memproduksi energi dan jarang
tersimpan  sebagai  lemak  yang  tumbuh atau menumpuk dipembuluh nadi.Karena itu  asam  lemak  dari  minyak  kelapa menghasilkan  energi  bukan  lemak.MCT mempunyai  sifat  fisik  yang  unik  serta lebih  polar  atau  lebih  cepat  melepas  ion H  daripada  LCT.Sehingga  lebih  mudah larut dalam air. Karena pengaruh perbedaan  kelarutan  dalam  air,  MCT dimetabolisme  didalam  tubuh  dengan cara yang berbeda dari LCT. MCT dapat masuk  kedalam  lever  secara  langsung melalui  pembuluh  vena  dan  dengan cepat  dibakar  menjadi  energi.Hal  ini berarti  MCT  tidak  tertimbun  didalam jaringan tubuh.
Beberapa  peneliti  menyebutkan bahwa  VCO  dapat  menekan  produksi interleukin-1.Efek  penghambatan  pada produksi  interleukin-1  didasarkan  pada adanya efek VCO terhadap pengurangan produksi  prostaglandin  dan  leukotrin (Fallon,  2000).Seperti  diketahui  bahwa prostaglandin  dan  leukotrin  merupakan mediator  pro  inflamasi  yang  dapat menyebabkan suatu peradangan.
Hormon  polipeptida  interleukin  1 adalah  salah  satu  dari  mediator  kunci respon  tubuh  terhadap  invasi  mikroba, inflamasi,  reaksi  imunologi,  dan  trauma jaringan.IL-1  merupakan  anggota  dari kelompok mediator polipeptida yang saat ini disebut sebagai sitokin.IL-1 merupakan  mediator  respon  inflamasi pada  imunitas  alami  dan  menstimulasi reabsorbsi  tulang  meningkatkan  angka
sel prekursor osteoklas.IL-1 juga menstimulasi  fibroblas  dan  osteoklas untuk  memproduksi  prostaglandin  dan kolagen (Alves and Ribeiro, 2004).
Berdasarkan  latar  belakang  yang ada  maka  peneliti  ingin  membuktikan bagaimana pengaruh diet Virgin coconut oil (VCO)  terhadap  jumlah  trombosit pada tikus putih jantan (Rattus Norvegicus) Hiperkolesterolemik.

## METODE PENELITIAN

## Jenis  Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian dengan pendekatan
Laboratorium Experimental dengan rancangan  penelitian Pre-post  test  with control group design. (Ahmad, 2003)

## Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  dari bulan  Maret –  April  2015.  Penelitian  ini dilakukan sendiri dan pemeriksaan darah dilakukan  di  Balai  Besar  Laboratorium Daerah.

## Populasi dan Sampel Penelitian
Populasi  penelitian  adalah  tikus  putih jantan  ( Rattus  Norvegicus  wistar )  yang berumur  8-12  minggu  dengan  berat badan  berkisar  antara  150-200  gram dengan  kondisi  yang  sehat.  Tikus tersebut diperoleh dari bagian perhewanan  Pusat  Ilmu  Hayati  Institut Teknologi Bandung (ITB). Sampel dalam penelitian ini adalah tikus yang memenuhi kriteria inklusi.
Kriteria inklusi:
1.  Tikus  jenis Rattus  Novergicus  Galur
Wistar
2.  Jenis kelamin jantan
3.  Umur 8-12 minggu
4.  Tikus aktif dan sehat
Kriteria Eksklusi 1.  Tikus yang tidak mau makan
2.  Tikus  yang  mengalami  penurunan
keadaan fisik atau mati

## Cara Pengambilan Sampel
Besar Sampel penelitian ini ditentukan dengan rumus Federer dimana  t  merupakan  jumlah  kelompok perlakuan sedangkan r merupakan besar sampel setiap kelompok perlakuan .
Besar sampel : (n-1)(t- 1)≥15
(n-1)(2- 1)≥15 n ≥ 16 Dari perhitungan diatas
didapatkan  besar  sampel  minimal  16 ekor. Penelitian ini masing-masing kelompok terdiri atas 16 ekor. Penentuan setiap kelompok dilakukan dengan simple  random  sampling. Pada  penelitian ini  terdapat  2  kelompok,  masing-masing kelompok  terdiri  atas  16  ekor  tikus,  jadi keseluruhan jumlah sampel yang dibutuhkan adalah 32 ekor.
Alat dan Bahan
Alat yang digunakan pada penelitian  ini  adalah  kandang  individual, sonde  lambung,  pakan  tinggi  lemak, Virgin  coconut  oil  (VCO) ,  alat  untuk pengambilan  darah,  timbangan  hewan
coba,  spesimen  :  Darah  EDTA,  alat periksa hematology analyzer KX-21 Cara Kerja
1.  Persiapan Alat dan Bahan
Semua  alat  dan  bahan  untuk melakukan  penelitian  sudah  disiapkan sesuai prosedur dan valid untuk digunakan
2.  Persiapan Subjek
Sebelum  penelitian  berlangsung,
32 ekor sampel tikus wistar diadaptasikan  terlebih  dahulu  selama  7 hari  dan  diberi  pakan  tinggi  kolesterol dengan  menggunakan  pakan  standar dan  kuning  telur,  minum  air  putih  ad libitum dan dilanjutkan dengan pemberian Virgin  Coconut  Oil (VCO) selama 30  hari.  Sampel diberi perlakuan Virgin  coconut  Oil (VCO)  sebanyak  0,81 ml/200 gram menggunakan sonde lambung
Dosis  pemberian Virgin  Coconut Oil (VCO)  merupakan  hasil  perhitungan konversi  dosis  manusia  ke  hewan  coba. Penentuan  dosis Virgin  Coconut  Oil (VCO)  untuk  tikus  berpedoman  pada penelitian klinis yang membuktikan jumlah  MCFA  1  g  per  kg  berat  badan masih  aman.  Jumlah  tersebut  setara dengan 5-6,5 sendok makan farmasi (75- 97,5 ml atau 66-86 g) atau dikonversikan ke  dalam  takaran  sendok  makan  yang biasa  kita  gunakan  setara  dengan  12,5- 16,3 sendok makan per hari.
Jadi  dosis  untuk  tikus  dengan berat  badan  180-250  gram  , maka  dosis
harian  VCO  adalah  bila  dikonversikan untuk  tikus  maka  dosis  harian  VCO adalah  0,081  x  45  ml  =  0,81  ml/200  gr BB/hari (Marti, 2009) 3.  Persiapan team kerja Penelitian dilakukan secara mandiri  dengan  melibatkan  beberapa orang  staf  Laboratorium  Daerah  (Labda) Palembang  untuk  pemeriksaan  jumlah Trombosit pada tikus yang diteliti.Peneliti juga  dibantu  oleh  2  orang  asisten  yang membantu  mengawasi  dan  membantu peneliti memberikan pakan tinggi kolesterol dan membantu peneliti memberikan VCO  (virgin  coconut  oil) dengan menggunakan sonde lambung. 4.  Cara Pengambilan Data
Sebelum  penelitian  berlangsung, 32  ekor  tikus  diadaptasikan  terlebih dahulu  selama  7  hari  dengan  diberikan makan kuning telur agar tikus hiperkolesterolemia.
Dosis  pemberian virgin  coconut oil  (VCO) merupakan  hasil  perhitungan konversi  dosis  manusia  ke  hewan coba.Penentuan  dosis virgin  coconut  oil (VCO) untuk  tikus  berpedoman  pada penelitian klinis yang membuktikan jumlah  MCFA  1  g  per  kg  berat  badan masih  aman.  Jumlah  tersebut  setara dengan 5-6,5 sendok makan farmasi (75- 97,5 ml atau 66-86 g). (Ahkam, 2006)
Virgin  coconut  oil  (VCO) yang diberikan  untuk  terapi  manusia  adalah  3 sendok  makan  atau  setara  dengan  45 ml/hari.  Jadi  dosis  untuk  tikus  dengan
berat badan 150-200 gram, bila dikonversikan  untuk  tikus  maka  dosis harian VCO adalah 0,081 x 45 ml = 0,81 ml/200 gr BB/hari (Marti, 2009)
Sampel dibagi secara acak dalam 2  kelompok  perlakuan  yaitu  kelompok control  dan  kelompok  perlakuan  VCO sebagai berikut :
a)  Kelompok  control  yaitu  tikus  yang diberikan  pakan  tinggi  lemak  saja tanpa diberi virgin coconut oil (VCO)
b)  Kelompok  perlakuan,  tikus  yang diberikan  pakan  tinggi  lemak  dan diberi virgin  coconut  oil  (VCO) sebanyak  0,81  ml/200  gr  BB/hari menggunakan sonde lambung.
Kedua kelompok tersebut ditimbang  berat  badannya  sebelum diberikan  pakan  tinggi  lemak  untuk mengetahui perubahan berat badan tikus dengan tujuan untuk penentuan pemberian  pakan  tinggi  lemak  dan  diet virgin  coconut  oil  (VCO) .  Pengambilan darah  dilakukan  sebanyak  2  kali  yaitu sebelum  pemberian virgin  coconut  oil (VCO) dan  setelah  pemberian virgin coconut oil (VCO)
Pengambilan  darah  diambil  dari ekor tikus setelah itu dianalisis menggunakan alat analisis kimia otomatis  yaitu hematology  analyzer KX- 21  pada  hari  ke  7  dan  hari  ke  30 perlakuan
Cara pemeriksaan jumlah trombosit dengan  menggunakan  alat hematology analyzer KX-21 yaitu :

## 1)  Hidupkan  alat  sesuai  prosedur
“start  up” pada  buku  panduan
“quick reference”
2)  Pastikan nilai “background”
sesuai  dengan  spesifikasi  pada buku panduan “quick reference”
3) Jika  muncul  pesan  “background error”  ulangi  cek  background
dengan “start switch” atau
lakukan “auto rinse”
4)  Bila “background  error” masih terjadi hubungi “technical support”
5)  Perhatikan  tanggal  kadaluarsa reagen  dan  kecukupan  reagen atau kemungkinan adanya
kerusakan reagen
6)  Bila  alat  sudah “ready” lakukan
QC (quality control) internal LOW,
NORMAL dan HIGH sesuai dengan  prosedur  pada  buku panduan
“quick reference” perhatikan hal-hal sebagai berikut
: a.  No.LOT  bahan  control  sesuai yang diinput pada alat b.  Tanggal kadaluarsa dan “open stability” material control c.  Bila  hasil  QC  tidak  sesuai dengan nilai QC rujukan yang
direkomendasikan, ulangi
proses QC sesuai prosedur d.  Bila sudah beberapa kali hasil QC  tidak  sesuai  dengan  nilai QC rujukan
hubungi
“technical support”
atau
“application specialist”
7)  Bila  hasil  QC  sudah  tidak  baik lakukan pemeriksaan sampel pasien  sesuai  dengan  prosedur pada buku panduan “Quick reference” perhatikan hal-hal
sebagai berikut :
a.  Volume sampel memiliki perbandingan  yang  sesuai dengan jumlah antikoagulan
b.  Hindari  bahan  pemeriksaan yang  beku,  hemilisa  atau adanya  kemungkinan  terjadi hemokonsentrasi/hemodilusi
c.  Hindari penundaan pemeriksaan
8)  Perhatikan  timbulnya “flagging” pada  hasil  pemeriksaan  sampel, bila diperlukan lakukan tes konfirmasi  sesuai  dengan  buku panduan “PLT,  RBC  dan  WBC histogram  flagging” atau  untuk informasi  lebih  lanjut  hubungi “application specialist”
9)  Lakukan  perawatan  alat  sesuai panduan  pada  buku “operator manual”
10) Selesai  melakukan  pemeriksaan matikan  alat  sesuai  prosedur “shutdown” pada  buku “quick reference”
Parameter  Keberhasilan  dan  Analisa Data
1.  Parameter Keberhasilan
Parameter keberhasilan dilakukan  yaitu  dengan  melihat  hasil pemeriksaan darah
berupa jumlah trombosit setelah  diberikan  diet virgin  coconut  oil  (VCO). Apabila  hasil jumlah trombosit dalam  keadaan  stabil
(normal)  maka virgin  coconut  oil dapat dijadikan  suatu  cara  preventif  untuk mempertahankan jumlah trombosit dalam pembuluh darah 2.   Analisa Data Setelah  semua  data  terkumpul, maka  dilakukan  analisis  data  penelitian.
Proses ini dilakukan dengan menggunakan sistem kompeterisasi program  spss  19 for  windows dengan tingkat  signifikansi p kurang  dari  0,05.
Adapun  pengolahan  data  dilakukan sebagai berikut :
1. Uji normalitas data
Dilakukan  uji normalitas dengan uji Saphiro Wilk (p>0,05) untuk mengetahui rerata jumlah trombosit darah  tikus  wistar  berdistribusi normal atau tidak.
2. Uji t berpasangan Seluruh data hasil jumlah trombosit tikus  diuji t  test  berpasangan jika berdistribusi  normal,  jika  distribusi tidak  normal  maka  dilanjutkan dengan uji Non Parametrik yaitu uji
Saphiro Wilk .
3. Uji t tidak berpasangan
Untuk mengetahui Perbedaan pengaruh  dari  kedua  kelompok perlakuan dianalisis
dengan
menggunakan uji ttidak berpasangandengan  uji  alternatif Mann  Whitney  test untuk  data berdistribusi  tidak  normal(Ahmad, 2003)

## HASIL PENELITIAN
Penelitian  ini  merupakan  uji True experiment uji  klinik  pembanding  dalam bentuk pre-post test yang telah dilakukan pada  sampel  tikus  putih  jantan    galur wistar  yang  berusia  8-12  minggu  yang telah  memenuhi  kriteria  inklusi.  Sampel yang  digunakan  berjumlah  32  ekor  tikus yang  dibagi  menjadi  2  kelompok  yaitu kelompok kontrol dan kelompok perlakuan.
1. Sebelum dan Sesudah Pakan Tinggi

## Lemak
Sebelum dilakukan perlakuan pemberian  pakan  lemak  tinggi,  maka seluruh  sampel  pada  penelitian  ini  yaitu 32  ekor  tikus  putih  jantan    galur  wistar dibagi  menjadi  2  pengelompokkan  dan dilakukan penimbangan berat badan dan pemeriksaan  kadar  kolesterol  total  serta jumlah  trombosit  dengan  hasil  seperti diberikut ini :
Grafik 1 : Berat Badan sebelum dan sesudah pakan tinggi lemak
Grafik 2 : Kadar Kolesterol dan Trombosit Sebelum dan sesudah pakan tinggi lemak
Penelitian  ini  melalui  beberapa tahapan  yaitu  pada  saat  awal  tikus sebelum  diberikan  pakan  tinggi  lemak dilakukan  pemeriksaan  berat  badan  dan pemeriksaan darah berupa kadar kolesterol total  dan jumlah trombosit dan dilanjutkan dengan pemberian  diet tinggi kolesterol  selama  7  hari.  Sebanyak  32 tikus  dibagi  secara  acak  menjadi  2 kelompok.  Selanjutnya  tikus  memasuki masa hiperkolesterol selama 7 hari yang bertujuan    untuk  meningkatkan  kadar kolesterol  total  darah.  Pada  masa hiperkolesterol  ini  tikus  diberi  pakan  diet tinggi  lemak  180  g/100g  ransum  dan
dicekok  dengan  kuning  telur  bebek  dan telur  puyuh  yang  mengandung  17  gram protein,  35  gram  lemak,  884  mg/100  gr kolesterol  sebanyak  2ml/200  grBB/hari yang  diberikan  dengan  cara  disonde selama 7 hari.
Berdasarkan  hasil  analisis  dari  3 tabel diatas, dapat dilihat bahwa rata-rata berat  badan  pada  tikus  kontrol  dan  tikus perlakuan  mengalami  kenaikan  antara sebelum  dan  sesudah  pemberian  pakan tinggi  lemak.  Sedangkan  untuk  kadar kolesterol  total  terdapat  kenaikan  kadar kolesterol  sampel  sebelum  dan  setelah diberikan  pakan  tinggi  lemak  yaitu dengan  nilai p value  0.001  (p  <  0,05) yang  berarti  ada  pengaruh  pemberian pakan  tinggi  lemak  terhadap  kadar kolesterol total sampel penelitian.
Dari tabel diatas juga dapat dilihat bahwa terdapat perubahan jumlah trombosit  pada  sampel  percobaan  yang semula  sebelum  diberikan  pakan  tinggi lemak jumlah trombosit kelompok kontrol dengan nilai mean 375.12  dibandingkan dengan  jumlah  trombosit  setelah  diberi pakan  tinggi  lemak  yaitu  dengan  mean 643.18  dengan  nilai p value  0.001  (p  < 0,05) sedangkan untuk kelompok perlakuan  yaitu  mean  sebelum  pakan tinggi  lemak  adalah  375.81  dan  setelah pemberian  pakan  tinggi  lemak  naik menjadi 642.81 dengan p value 0.001 (p <  0,05)    yang  berarti  ada  pengaruh pemberian  pakan  tinggi  lemak  terhadap
160 165 170 175 180 kontrolperlakuan 167.81 169.06 177 178.06 bb pre pakan tinggi lemak bb post pakan tinggi lemak 0 100 200 300 400 500 600 700 52.73 52.16 375.12375.81 89.75 89.68
643.18642.81 pre pakan tinggi lemak post pakan tinggi lemak
perubahan jumlah trombosit pada sampel penelitian.
2. Sebelum  dan  Sesudah  Pemberian Diet  VCO  pada  tikus  Putih  Jantan Hiperkolesterolemik Setelah dilakukan perlakuan pemberian  pakan  lemak  tinggi  selama  7 hari,  maka  seluruh  sampel  yang  telah dibagi menjadi 2 kelompok yaitu kelompok kontrol dan kelompok perlakuan dilakukan pemeriksaan jumlah Trombosit dan dilanjutkan dengan pemberian  diet virgin  coconut  oil (VCO) selama 30 hari dan setelah itu dilakukan lagi pemeriksaan jumlah trombosit darah tikus percobaan, untuk mengetahui pengaruh  dari  pemberian  diet virgin coconut  oil (VCO)  maka  dilakukan  uji  T-
Test  tidak  berpasangan  yang  dapat dilihat  dengan  hasil  seperti  pada  tabel dibawah ini
Grafik 3 : Berat Badan dan jumlah Trombosit sebelum dan sesudah diet VCO

## Tabel 6 Pengaruh Pemberian diet
Virgin Coconut Oil (VCO) terhadapJumlah Trombosit pada tikus
putih hiperkolesterolemik Mean    ±  SD (μl) p* Post Kontrol 673.31 ± 58.46 0,001 Post Perlakuan VCO 343.93 ± 50.92 p* Independent T-Test (p <0,05)
berdasarkan  tabel  diatas  dapat dilihat  bahwa  terdapat  perbedaan  yang bermakna  jumlah  trombosit  pada  post kelompok  kontrol  dan  post  kelompok perlakuan dengan dilakukan uji independent  t-test  dengan  hasil  p  value 0.001 (<0.005) yang berarti ada pengaruh  pemberian virgin  coconut  oil (VCO) terhadap jumlah trombosit.

## PEMBAHASAN
Penelitian  ini  merupakan  uji True eksperimental dengan  rancangan one group pre-post test with control design dengan  tujuan  untuk  mengetahui pengaruh Virgin  Coconut  Oil (VCO) terhadap  jumlah  trombosit  pada  tikus putih ( Rattus
Norvegicus )
hiperkolesterolemik.  Terdapat  32  tikus putih  jantan  ( Rattus  Norvegicus )  galur wistar  berumur  8-12  minggu  yang  telah memenuhi  kriteria  inklusi  yang  dibagi menjadi  dua  kelompok  yaitu  kelompok control  dan  kelompok  perlakuan.  Tikus digunakan  karena  mempunyai  kemiripan dengan  manusia  dalam  hal  fisiologi,
0 200 400 600 800 177 178.06 643.18 643.81
187 160.44 673.31 343.93 pre diet vco post diet vco
anatomi,  nutrisi,  patologi,  matabolisme dan lazim digunakan dalam penelitian.
Parameter  yang  diamati  dalam penelitian  ini  adalah  jumlah  trombosit. Dari  uji  statistik,  pemberian  kuning  telur puyuh  dalam  pakan  diet  tinggi  kolesterol menyebabkan peningkatan kadar kolesterol pada tikus sehingga menyebabkan tikus
menjadi hiperkolesterol. Keadaan ini terjadi akibat peningkatan  penimbunan  lemak  dalam hepar  yang  menimbulkan  peningkatan jumlah acetil co-A dalam sel hepar untuk menghasilkan kolesterol (Guyton,
2003).Kuning  telur  puyuh  dan  kuning telur  bebek  mengandung  asam  lemak jenuh tinggi.Lemak jenuh mengakibatkan kolesterol  dalam  darah  meningkat  dan merupakan precursor kolesterol.
Diet hiperkolesterol dapat
menyebabkan
peningkatan kadar kolesterol dan LDL (low density lipoprotein) dalam  darah  yang  memicu terjadinya  LDL-oks  akibat  radikal  bebas pada  pembuluh  darah  aorta yang menyebabkan terjadinya reaksi inflamasi dan  dapat  berakibat  pada  perubahan dinding pembuluh darah aorta. 25
Peningkatan kadar kolesterol yang semakin tinggi dapat menyebabkan terjadinya  aterosklerosis  yang  ditandai dengan  penebalan  dan  pengerasan dinding  arteri.  Lesi  mengandung  deposit lipid dan mengalami kalsifikasi, mengakibatkan obstruksi pembuluh darah, agregasi trombosit dan
vasokontriksi abnormal (Prince & Wilson, 2005).  Sel  endotel  yang  cidera  antara lain  mensekresi  kemoatraktan  monosit dan mengekspresikan molekul peninduksi  adhesi  permukaan  sel  yang akan  mengikat  monosit  dan  limfosit  dan meningkatkan  pengambilan  makrofag kedaerah cidera, melepaskan sitokin  dan merangsang inflamasi, melepaskan lebih sedikit oksida nitrat (vasodilator), mensekresi  faktor  pertumbuhan  yang meningkatkan  migrasi  dan  proliferasi  sel otot polos. 25
LDL teroksidasi oleh radikal oksigen, difagositosis oleh makrofag dan kemudian  dibawah  ke  dinding  pembuluh darah  (oksidasi  LDL  ditingkatkan  oleh kenaikan  LDL  serum,  peningkatkan aktivitas lipoksigenase dan peningkatkan radikal  oksigen).Makrofag  yang  terisi LDL teroksidasi dinamakan sel busa.Akumulasi  sel  tersebut  membentuk suatu  lesi  patologis  yang  dinamakan lapisan  berlemak (fatty  streak) yang menginduksi  perubahan  imunologis  dan inflamasi lebih lanjut sehingga mengakibatkan kerusakan pembuluh progresif.Leukosit dan makrofag melepaskan pejamu sitokin inflamasi dan mitogen  yang  selanjutnya  merangsang proliferasi  otot  polos  dan  menghambat sintesis endotel serta melepaskan vasodilator endogen seperti oksida nitrat.Sel otot polos bermigrasi ke daerah yang diliputi sel busa sehingga membentuk semacam topi yang
dinamakan plak fibrosa.Remodeling
pembuluh darah terjadi dengan klasifikasi  dan  fibrosis,  apoptosis  dan nekrosis lesi, penebalan dinding pembuluh  peri  lesi  dan  penonjolan  ke dalam lumen pumbuluh darah. 25

## Uji  statistik  perlakuan  dengan
Virgin  Coconut  Oil (VCO)  mampu menurunkan  dan  menstabilkan  jumlah trombosit darah secara signifikan. Pemberian Virgin  Coconut  Oil (VCO) 0,81 ml per hari selama 30 hari berturut- turut dapat menstabilkan jumlah trombosit  darah.  Hal  ini  sejalan  dengan hasil  penelitian  yang  dilakukan  oleh Rajamohan  tahun  2007  menyatakan bahwa  pemberian  Virgin  Coconut  Oil (VCO)dapat mengurangi kadar kolesterol dan  trigliserida  dan  mempertahankan kadar  faktor  pembekuan  darah  pada tikus.
Virgin Coconut Oil (VCO)memiliki kandungan  asam  lemak  jenuh  yang didominasi  oleh  asam  lemak  rantai sedang.  Asam  lemak  rantai  sedang didominasi  oleh  asam  laurat.  Karena ukuran    molekulnya  yang  kecil,  asam lemak rantai sedang mudah diserap usus tanpa  melalui  proses  enzimatis.  Asam lemak  ini  dibawa  aliran  darah    ke  hati untuk  di  metabolisasi  dan  dibawa  ke mitokondria  tanpa  karnitin  menghasilkan energi  yang  cepat  dan  efisien  sehingga tidak  terdeposit  sebagai  lemak  dalam jaringan. Beberapa peneliti menyebutkan bahwa  VCO  dapat  menekan  produksi
interleukin-1.Efek  penghambatan  pada produksi  interleukin-1  didasarkan  pada adanya efek VCO terhadap pengurangan produksi  prostaglandin  dan  leukotrin (Fallon,  2000).Seperti  diketahui  bahwa prostaglandin  dan  leukotrin  merupakan mediator  pro  inflamasi  yang  dapat menyebabkan suatu peradangan.
Hormon  polipeptida  interleukin  1 adalah  salah  satu  dari  mediator  kunci respon  tubuh  terhadap  invasi  mikroba, inflamasi,  reaksi  imunologi,  dan  trauma jaringan.IL-1  merupakan  anggota  dari kelompok mediator polipeptida yang saat ini disebut sebagai sitokin.IL-1 merupakan  mediator  respon  inflamasi pada  imunitas  alami  dan  menstimulasi reabsorbsi  tulang  meningkatkan  angka sel prekursor osteoklas.IL-1 juga menstimulasi  fibroblas  dan  osteoklas untuk  memproduksi  prostaglandin  dan kolagen (Alves and Ribeiro, 2004).
Hasil  uji  t  tidak  berpasangan menunjukkan  bahwa  terdapat  pengaruh yang bermakna (p<0,05) jumlah trombositdarah  pada  tikus  wistar  pada kelompok  perlakuan Virgin  Coconut  Oil (VCO) dibandingkan kelompok kontrol.
Dari hasil penelitian ini menjawab hipotesis  bahwa  Ha  diterima  dan  Ho ditolak  yang  artinya  terjadi  perubahan jumlah trombosit darah tikus putih jantan hiperkoletsrolemik  setelah  pemberian diet Virgin Coconut Oil (VCO).

## SIMPULAN DAN SARAN

## Simpulan
Hasil penelitian menunjukkan ada
perbedaan yang bermakna jumlah
trombosit  setelah  pemberian  diet Virgin Coconut  Oil (VCO)  selama  30  hari dengan    ( p =  0,000).  Berdasarkan  hasil tersebut,  dapat  disimpulkan  sebagai berikut :
a.  Pemberian Virgin Coconut Oil (VCO) dengan  dosis  0,81  ml/gr  BB  dapat menurunkan dan menstabilkan jumlah  trombosit  darah  pada rattus norvegicus  wistar dengan  pakan tinggi lemak.
b.  Terdapat  perbedaan  rerata  jumlah trombosit darah pada rattus norvegicus
wistar hiperkolesterolemik  sebesar  49% antara kelompok kontrol yang hanya diberi  pakan  tinggi  lemak  dan kelompok  perlakuan  yang  diberikan pakan  tinggi  lemak  dan  diet Virgin Coconut  Oil (VCO)  dengan  dosis
0,81 ml/gr BB.

## Saran
Disarankan kepada peneliti
selanjutnya  untuk  meneliti  tentang pengaruh virgin  coconut  oil (VCO)
terhadap jumlah trombosit pada tikus yang hiperkolesterolemik dengan waktu  yang  lebih  lama  dan  dosis yang berbeda, serta diharapkan pada peneliti  selajutnya  untuk  meneliti pengaruh virgin  coconut  oil (VCO)
jangka  panjang  untuk  mengetahui efek  VCO  terhadap  pencegahan proses arterogenesis

## DAFTAR PUSTAKA
1.  Ahmad  watik,  (2003). Dasar-dasar Metodologi  Penelitian  Kedokteran dan  keshatan. Jakarta:  PT  Raja
Grafindo Persada. 2.  Amin,
Sarmidi.
(2009). Cocopreneurship  Aneka  Peluang
Bisnis  Dari  Kelapa.  Lily  Publisher,
Jogyakarta.
3.  Anonim, (2005). De nisi Virgin Coconut
Oil . (http:// www.indo- coco.com diakses  pada  tanggal  28
November 2014 4.  Bithell TC. (1993). Blood
Coagulation .In  :  Lee  GR.  Bithell  TC, Foerster  J,  Athens  JW,  Lukens  JN,
Editor. Wintrobe’s Clinical Hematotogu. Volume 1. Ed.
Philadelphia : Lea & Febiger.
5.  Bithell  TC.  (1993).  Platelets  and megakaryocytes.In  :  Lee  GR,  Bithell TC,  Foerster  J,  Athens  JW,  Lukens JN,  Editor.  Wintrobe’s  Clinical
Hematotogu.
Volume 1. Ed.
Philadelphia : Lea & Febiger.
6.  Brozovic  M.  (1993). Investigation  of Haemostasis .In  :  Dacie  SJV,  Lewis SM,  editors  Practical  Haemotology. Seventh  ed.  London  :  Chruchill Livingtone.
7.  Burstein  SA,  (1995).  Breton-Gorius J.  Megakaryopoiesis  and  platelet
formation.In  :  Beutler  E,  Lichtman MA,  Coller  BS,  Kipps  TJ,  Eds. Williams Hematology.  Ed.  New  York : McGraw-Hill.
8.  De Pablo, M.A.  de Cienfuegos, G.A,
(2000). Modulatory  effect  of  dietary
lipids on immune system
function .Abstrak  dalam  immunology and cell biology.
9.  Enig MG, (2001). Coconut in support of  good  health  in  21 st century . Available from URL:Hyperlinkhttp://www.nourishing connection.org .
10.  Fatimah, 2011. Pengaruh Diet emulsi  Virgin  Coconut  Oil  (VCO) terhadap  profil  lipid  tikus  putih (Rattus Norvegicus) . Journal Litri Vol
17  No  1  Maret  2011.  Halaman  18-
24, ISSN 0853 8212. Manado
11.  Ganong  W.F,  (2003). Buku  Ajar
Fisiologi Kedokteran. Edisi 20. Penerbit  Buku  Kedokteran  :  EGC. Jakarta 12.  Goodnight SH, Hathaway WE.
(2001) Disorder  of  haemostasis  & thrombosis  a  clinical  quide .  Second Ed. New York : McGraw-Hill.
13.  Guyton  Arthur  C,  (2012). Fisologi
Manusia  dan  Mekanisme  Penyakit (Human Psysiology and
mechanisms  of  disease). Edisi  3.
Penerbit  Buku  Kedokteran  :  EGC.
Jakarta
14.  Guyton  dan  Hall,  (2014). Buku  Ajar
Fisiologi Kedokteran . Edisi 12.
Elsevier  (Singapore)  Inc  Pte.Ltd. Singapore 15.  Irianto  Koes.  (2012). Anatomi  dan Fisiologi Untuk Mahasiswa. Badung  : Alfabeta, Cv 16.  Kabara,  Jon  J,  (1998). Health  oils from  the  tree  of  life  nutritional  and health  aspects  of  coconut  oil. Dalam pharmacological effect of lipids.
17.  Lauralle  Sherwood,  (2006). Fisiologi manusia  dari  sel  ke  sistem. EGC  :
Jakarta
18.  Marti,  (2009). Kadar  Kolestrol  darah dan  ekspresi  VCAM  pada  endotel aorta  tikus  putih  hiperkolesterolemik setelah perlakuan VCO.Thesis. Surakarta;  Universitas Sebelas Maret.
19.  Murray.  R.K,  Ganner  and  Rodwell. (1996) . Biokimia Hepar .Penerjemah
Andry Hartono.Buku Kedokteran EGC. Jakarta
20.  Nevin  KG  Rajoman  T,  (2008).
Influence  of  virgin  coconut  oil  on blood  coagulation  factor,  lipid  level and  LDL  oxidation  in  cholesterol  fed spragueedawley rats . Department of Biochemistry,  University  of  Kerala Kariavattom, Thiruvananthapuram-
695 581, India.Diakses pada tanggal
27 November 2014(http://intl.elsevierhealth.com/jo urnals/espen). 21.  Price, S.A & Wilson, L.M.
(2005). Patofisiologi  :  Konsep  Klinis
Proses-Proses  Penyakit  Edisi  6  vol
2 . Jakarta : EGC
22.  Subroto  Ahkam.(2006). VCO  Dosis Tepat Taklukkan Penyakit .
Penebarbit Swadaya. Tanggerang 23.  Sukartin, JK., Sitanggang, M. (2005).
Gempur
penyakit
dengan
VCO. Jakarta : Agro Media Pustaka 24.  Syaifuddin.(2013). Fisologi  Tubuh
Manusia  untuk  Mahasiswa .  Edisi
Kedua. Jakarta : Salemba Medika
25.  Valentine L Brashers,
(2008). Aplikasi  Klinis  Patofisiologi pemeriksaan  dan  manajemen .  Buku
Kedokteran EGC. Jakarta
26.  Widyanto, dkk.(2013). Trend Disease Trend Penyakit Saat ini.Jakarta :  Trans  Info  Media.