PENGARUH EKSTRAK BUAH Carica  pubescens Lenne & K. Koch YANG TUMBUH DI BEBERAPA TEMPAT DI INDONESIA TERHADAP PENYEMBUHAN LUKA MUKOSA RONGGA MULUT

## Risma Aprinda Kristanti
Jurusan Biologi Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang E-mail: risma.aprinda@yahoo.com

## ABSTRACT
The  aim  of  this  study  is  to  examine  the  effect  of  Carica    pubescens Lenne  &  K. Koch extract to the epihtelialization on the wound healing of gingival mucosa and to  examine  the  effect  of  C.  pubescens  extract  from  different  region  (Dieng  and Cangar) to the epithelialization process.Twenty eight adult male albino rats were devided into four group, we created cutlet along 1 cm on the mandibular gingival mucosa below insisiv teeth. K1 group were treated with aquadest while K2 group were treated with C. pubescens extract from Dieng, K3 group were treated with C. pubescens  extract  from  Cangar,  and  K4  group  were  treated  with  policresulen preparations. At the end of fifth day, the rats were sacrificed and the mandibular gingival mucosa were collected for histologist preparations. The result of this study shows  that  K3  group  has  the  thickest  gingival  epithel  layers  while  there  is  no significant different among four group for the thikness gingival epithel layers. Key word: epithel, epithelialization, gingival, wound, mucosa, oral, C. pubescens

## PENDAHULUAN
Perlukaan  pada  mukosa  mulut  sering dijumpai  dalam  praktek  kedokteran  gigi.  Luka pada  mukosa  mulut  dapat  disebabkan  oleh berbagai  agen  fisik  maupun  kimiawi,  seperti trauma,  suhu  panas  atau  dingin,  sayatan  benda tajam,  dan  paparan  zat  kimia  (Underwood, 1999).  Obat  yang  saat  ini  banyak  digunakan  di masyarakat  umtuk  pengobatan  luka  mukosa rongga  mulut  adalah  sediaan  policresulen  yang umum  ada  di  pasaran.  Policresulen  mempunyai efek  selektif  hanya  bekerja  terhadap  jaringan rusak  atau  patologis,  yaitu  koagulasi  dan kemudian dikeluarkan atau dilepaskan. Sedangkan  epitel  skuamosa  yang  sehat  tidak dipengaruhi  oleh  obat  ini.  (Lacy  &  Amstrong 2009).  Obat-obatan  yang  ada  di  pasaran sebagian  besar  dapat  menyebabkan  efek samping  yang  tidak  diharapkan,  oleh  karena  itu obat  herbal  dapat  menjadi  alternatif  pengobatan (Manson & Eley, 1993; Lewis & Lamey, 1998).
Dewasa  ini  studi  mengenai  tanaman obat  dan  potensinya  banyak  dikembangkan, tidak terkecuali untuk kesehatan gigi dan rongga mulut. C.  pubescens merupakan  salah  satu tanaman khas dataran tinggi di Indonesia dengan kandungan  vitamin  C  tinggi  yang  berpotensi sebagai  bahan  alami  dalam  penyembuhan mukosa  mulut.  Selain  itu,  buah C.  pubescens juga  mengandung  Vitamin  A.  Vitamin  A  yang
yang  berupa  asam  retinoat  memiliki  peranan dalam  differensiasi  sel,  sehingga  vitamin  A mengatur  pada  proses  reepitelisasi  pada  mitosis sel-sel di sekitar luka (MacKay & Miller , 2003). Di  Indonesia, C.  pubescens dapat dijumpai  di  Dataran  Tinggi  Dieng,  Jawa Tengah;  di  Cangar,  Batu;  dan  Bromo  Tengger, Jawa  Timur. C.  pubescens merupakan  spesies yang  beradaptasi  di  tempat  dengan  ketinggian 1.400-2.400 meter di atas permukaan laut (dpl), temperatur rendah, dan curah hujan tinggi.
Ketinggian yang berbeda bisa menentukan faktor lingkungan iklim serta proses metabolisme  tanaman. Cuaca  adalah  keadaan atau  kelakuan  atmosfer  pada  waktu  tertentu yang  sifatnya  berubah-ubah  dari  waktu  ke waktu, sedangkan iklim adalah rata-rata keadaan cuaca  dalam  jangka  waktu  yang  cukup  lama, minimal 30 tahun yang sifatnya tetap (Kartosapoetra, 2004).
Pengaruh iklim terhadap tanaman diawali  oleh  pengaruh  langsung  cuaca  terutama radiasi dan suhu terhadap fotosintesis dan proses metabolisme  lain  di  dalam  sel  organ  tanaman. Fotosintesis  dan  respirasi  merupakan  awal proses hidup. Kedua proses tersebut berlangsung serentak,  hanya  saja  fotosintesis  berlangsung pada  periode  cahaya  matahari  siang  hari  atau perlakuan  dengan  lampu,  sedang  respirasi
berlangsung  terus-menerus  (Fitriningrum  dkk, 2013).

## MATERI DAN METODE PENELITIAN
Jenis  penelitian  ini  adalah  penelitian eksperimental  laboratoris  dengan  rancangan penelitian the  post  test  only  control  group design .  Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium Fisiologi  Hewan  dan  Laboratorium  Optik  UIN Maliki  Malang,  serta  Laboratorium  Histologi Universitas Brawijaya Malang.

## Sampel
Sampel  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  tikus  putih Rattus  norvegicus sebanyak  28  buah,  berusia  40-  60  hari  dengan berat  150  -200  gram,  dalam  keadaan  sehat  dan belum pernah digunakan untuk penelitian.
Sampel  dibagi  menjadi  4  kelompok, yaitu K1, K2, K3, dan K4. Kelompok K1 adalah kelompok  control,  pada  kelompok  ini  hewan coba  hanya  dibuat  luka  pada  mukosa  gingiva dan  diberikan  larutan  aquadest  secara  topical pada  daerah  luka.  Pada  kelompok  K2  hewan coba  dibuat  luka  pada  mukosa  gingiva  dan diberikan  larutan  ekstrak  buah C.  pubescens yang  berasal  dari  daerah  Dieng  secara  topikal pada  daerah  luka.  Pada  kelompok  K3  hewan coba  dibuat  luka  pada  mukosa  gingiva  dan diberikan  larutan  ekstrak  buah C.  pubescens yang  berasal  dari  Cangar  secara topical pada daerah  luka.  Pada  K4  hewan  coba  dibuat  luka pada  mukosa  gingiva  dan  diberikan  sediaan policresulen  yang  umum  ada  di  pasaran  secara topical pada daerah luka.
Induksi Luka Mukosa Rongga Mulut Induksi luka mukosa rongga mulut dilakukan dengan membuat sayatan
menggunakan mess no.3  pada  mukosa  labial tikus,  di  bawah  gigi  insisiv  rahang  bawah. Sayatan  dibuat  sepanjang  1  cm  dengan kedalaman  sampai  mencapai  tulang  alveolar. Setelah  dibuat  sayatan,  untuk  mempercepat pembentukan luka, diaplikasikan larutan peroksida  (H 2 O 2 )  30%  menggunakan cotton pellet pada daerah luka selama 3 detik.

## Pemberian Ekstrak Buah C. pubescens
Pada  penelitian  ini  digunakan  ekstrak  buah C.  pubescens dengan  konsentrasi  100%.
Pembuatan ekstrah buah C. pubescens dilakukan dengan menggunakan metode maserasi
menggunakan etanol. Pemberian ekstrak buah C. pubescens dilakukan  sehari  setelah  pembuatan luka sampai dengan hari ke-5 dengan menggunakan  mikropipet  pada  daerah  mukosa gingiva  yang  telah  dilukai.  Ekstrak  buah C. pubescens diberikan pada kelompok K2 dan K3 sebanyak  100  µl  untuk  setiap  tikus.  Pada kelompok  K2  diberikan  ekstrak  buah C. pubescens yang  berasal  dari  Daerah  Dieng, sedangkan  pada  K3  diberikan  ekstrak  buah C. pubescens yang berasal dari Cangar.

## Pengambilan Data
Pada  hari  ke-6,  semua  tikus  dikorbankan dan  diambil  mukosa  gingiva  labial  rahang bawah  untuk  dibuat  sediaan  histologis.  Setelah sediaan  histologis  selesai  dibuat,  dilakukan pengukuran ketebalan epitel gingiva menggunakan micrometer  grid .  Data  yang didapat  diuji  normalitas  dengan Kolmogorov- Smirnov .  Untuk  melihat  perbedaan  ketebalan epitel  antar  kelompok  dilakukan  Uji Games- Howell .

## HASIL PENELITIAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan,  diperoleh  hasil  rata-rata  ketebalan epitel  gingiva  tikus  pada  masing-masing kelompok sebagai berikut:
Tabel  1.  Nilai  rerata  ( mean )  dan  simpang  baku (SD)  ketebalan  epitel  gingiva  tikus pada kelompok K1, K2, K3, dan K4
Kelompok N Mean dan SD K1 K2 K3 K4 7 7 7 7 3,484 ± 0,941 2,712 ± 0,654 5,244 ± 3,103 3,479 ± 1,295 Total 28 3,730 ± 1,923
Gambar  1.  Gambaran  histologis  epitel  gingiva  kelompok  K1  (1);  Gambaran  histologis  epitel  gingiva kelompok  K2  (2);  Gambaran  histologis  epitel  gingiva  kelompok  K3  (3);  Gambaran  histologis epitel gingiva kelompok K4 (4)
Data  terlebih  dahulu  diuji  normalitas Kolmogorov-smirnov dan menunjukkan (p>0,05)  sehingga  dapat  disimpulkan  bahwa data berdistribusi normal, selanjutnya dilakukan uji  homogenitas  menggunakan  uji Levene  test, setelah diuji menunjukkan (p<0,05) artinya data tidak  homogen,  selanjutnya  untuk  mengetahui beda  variabel  tebal  epitel  gingiva  antar kelompok dilakukan Brown-Forsythe Test . Hasil selengkapnya dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel 2. Hasil uji beda Games-Howell ketebalan epitel gingiva  pada  kelompok K1, K2,
K3 dan K4 Kelompok p Keterangan K1 dan K2 K1 dan K3 K1 dan K4 K2 dan K3 0,333 0,518 1,000 0,243 Tidak signifikan Tidak signifikan Tidak signifikan Tidak signifikan K2 dan K4 K3 dan K4 0,531 0,539 Tidak signifikan Tidak signifikan
Tabel  2  menunjukkan  bahwa  tidak  terdapat perbedaan  yang  signifikan  untuk  ketebalan epitel gingiva antar kelompok.

## PEMBAHASAN
C.  pubescens merupakan  salah  satu tanaman khas dataran tinggi di Indonesia dengan kandungan  Vitamin  C  tinggi  yang  berpotensi sebagai  bahan  alami  dalam  penyembuhan mukosa mulut. Di Indonesia, C. pubescens dapat dijumpai di Dataran Tinggi Dieng, Jawa Tengah dan di Cangar, Batu, dan Bromo Tengger, Jawa Timur. C.  pubescens merupakan  spesies  yang beradaptasi di tempat dengan ketinggian 1.400 – 2.400  meter  di  atas  permukaan  laut  (dpl), temperatur rendah, dan curah hujan tinggi.
Beberapa  komponen  dalam  tanaman C. pubescens terbukti  memiliki  aktivitas  yang
1 2
3 4
signifikan dalam penyembuhan penyakit, diantaranya  adalah  minyak  atsiri,  polifenol,  dan flavanoid.  Minyak  atsiri  berfungsi  sebagai antibakteri sehingga dapat mempercepat netralisasi  bahan  asing  (Parwata  dan  Dewi, 2008). Polifenol berfungsi sebagai antihistamin. Sedangkan manfaat flavonoid antara lain adalah untuk melindungi struktur sel, memiliki hubungan sinergis dengan vitamin C (meningkatkan efektivitas vitamin C), mencegah keropos tulang, antibiotik, dan sebagai antiinflamasi. Selain memiliki kandungan vitamin  C  yang  tinggi, C.pubescens juga mengandung vitamin A (Ahkam, 2008; Hidayat, 2001). Adanya senyawa-senyawa tersebut dapat memungkinkan C.pubescens dapat  digunakan sebagai  obat  herbal  yang  dapat  meningkatkan kecepatan  regenerasi  epitel  pada  penyembuhan luka.  Penelitian  ini  bertujuan  mengkaji  lebih dalam  tentang  pengaruh  pemberian  ekstrak C.pubescens yang berasal dari daerah Dieng dan Cangar  terhadap  kecepatan  regenerasi  epitel pada  penyembuhan  luka  mukosa  rongga  mulut pada  tikus  putih  jantan  Galur  Wistar  ( Rattus norvegicus ).
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental  laboratories  yang  memenuhi kriteria  sebagai  penelitian  eksperimen  murni ( true  experiment ).  Perlakuan  terhadap  sampel penelitian  dilakukan  pada  ruangan  yang  telah tersedia dan pemeriksaan terhadap variabel yang diukur  dilakukan  di  laboratorium  (Zainuddin, 2000).
Rancangan  penelitian  yang  digunakan adalah post  test  only  control  group  design karena  hewan  coba  dibagi  menjadi  4  kelompok menggunakan  teknik  alokasi  random  dan  data variabel tergantung untuk masing-masing sampel  diperoleh  hanya  setelah  perlakuan  atau tidak  dilakukan  pengambilan  data  variabel tergantung  sebelum  perlakuan  (Zainuddin, 2000).
Hasil  analisa  deskriptif  menunjukkan bahwa  rerata  ketebalan  epitel  gingiva  untuk kelompok  kontrol  adalah  3,484  µm,  untuk kelompok  yang  diberi  ekstrak C.pubescens dari daerah Dieng adalah 2,712 µm, untuk kelompok yang  diberi  ekstrak C.pubescens dari  daerah Cangar  adalah  5,244  µm,  dan  untuk  kelompok yang  diberi  sediaan  policresulen  adalah  3,479 µm.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  epitel  gingiva memiliki  ketebalan  paling  tebal  pada  kelompok yang  mendapatkan  pemberian  ekstrak  buah C.pubescens yang  berasal  dari  daerah  Cangar, sedangkan  epitel  gingiva  yang memiliki
ketebalan  paling  tipis  adalah  pada  kelompok yang  mendapatkan  pemberian  ekstrak  buah C.pubescens yang berasal dari daerah Dieng.
Hasil  yang  diperoleh  tersebut  dapat disebabkan  karena  buah C.  pubescens sebagai bahan utama ekstrak memiliki tingkat kematangan  yang  berbeda  antara  yang  berasal dari  daerah  Dieng  dan  daerah  Cangar.  Menurut Abidin  (1991)  selama  proses  pematangan  buah terjadi  perubahan  dalam  berbagai  segi  antara lain perubahan struktur, tekstur, warna, rasa, dan proses  biokimia  yang  terjadi  di  dalamnya.  Hal ini  tentu  juga  mempengaruhi  kandungan senyawa  yang  terdapat  dalam  buah C. pubescens .
Selain  itu,  pada  proses  metabolisme tanaman,  suhu  juga  mempengaruhi  kecepatan respirasi  yang  cenderung  menurun  pada  suhu rendah,  sehingga  hasil  fotosintesis  kalau  tidak direspirasi  diubah  menjadi  bentuk  lain,  dan untuk  adaptasi  terhadap  tekanan  lingkungan yang ekstrim tumbuhan mengembangkan antioksidan  termasuk  Vitamin  C  dan  keasaman tinggi.  Di  dalam  metabolisme  karbohidrat dijelaskan  bahwa  Vitamin  C  memang  dibuat dari  monosakarida  melalui  serangkaian  proses biokimia  yang  melibatkan  enzim-enzim  yang akan mengubah molekul D-Glukosa-6-P akhirnya  menjadi  vitaminC  (L-Ascorbic  acid) (Wheeler et  al .,  1998).  Telah  diketahui  bahwa Vitamin  C  merupakan  salah  satu  kandungan utama  dari  buah C.  pubescens yang  memiliki kemampuan  mempercepat  proses  epitelisasi. Vitamin  C  berperan  dalam  sintesis  kolagen, proteoglikan  dan  komponen  organik  lain  dalam intrasellular matrik jaringan seperti tulang, kulit, dinding  kapiler,  dan  jaringan  ikat  yang  lain (MacKay  &  Miller,  2003).  Hal  ini  juga dibuktikan  oleh  penelitian  sebelumnya  bahwa bahwa  terjadi  peningkatan  ketebalan  epital gingival pada tikus wistar jantan (Astuti, 2005). Vitamin  C  akan  mengaktifkan  katalisator  ion Fe 2+ dan  ion  Cu + yang  akan  mengaktifkan enzim-enzim  pada  proses  hidroksilasi  asam amino  prolin  dan  lisin  menjadi  hidroksiprolin dan  hidroksilisin.  Reaksi  hidroksilasi  ini diperlukan  untuk  mengadakan  perlekatan  silang ( cross  linking )  dan  tripel  helix  pada  jaringan sehingga  didapat  struktur  jaringan  yang  sehat dan  kuat  (Yendriwati,  2006).  Jika  proses proliferasi  yang  meliputi  sintesis  kolagen  dapat tercapai, maka proses epitelisasi akan berlangsung lebih cepat.
Dari  hasi  Uji Games-Howell diketahui bahwa tidak terdapat perbedaan yang  signifikan
untuk ketebalan gingiva antara keempat kelompok.  Hal  ini  dapat  disebabkan  karena dalam  penelitian  ini  belum  menggunakan konsentrasi  dan  dosis  yang  optimal  untuk pemberian  ekstrak  buah C.  pubescens dan sediaan  policresulen  untuk  diberikan  kepada hewan  coba  sehingga  hasil  yang  didapat  tidak jauh berbeda dengan kelompok kontrol.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan  dapat  disimpulkan bahwa pemberian ekstrak  buah C.  Pubescens yang  berasal  dari Daerah  Dieng  tidak  dapat  mempercepat  proses epitelisasi  pada  proses  penyembuhan  luka mukosa  rongga  mulut  pada  tikus Rattus norvegicus .  Sedangkan  pemberian  ekstrak  buah C.  Pubescens yang  berasal  dari  Daerah  Cangar dapat  mempercepat  proses  epitelisasi  pada proses penyembuhan luka mukosa rongga mulut pada tikus Rattus norvegicus.
Saran  yang  dapat  diberikan  adalah  perlu penelitian lebih lanjut tentang pengaruh ketinggian  dan  keadaan  iklim  daerah  terhadap kandungan  senyawa  aktif  buah C.  pubescens yang  bermanfaat  terhadap  proses`epitelisasi pada  penyembuhan  luka  mukosa  rongga  mulut. Selain  itu, juga  perlu  dilakukan  penelitian  lebih lanjut  tentang  dosis  optimal  ekstrak  buah C. pubescens yang dapat digunakan untuk membantu  mempercepat  proses`epitelisasi  pada penyembuhan luka mukosa rongga mulut.

## DAFTAR PUSTAKA
Abidin Z. 1991. Dasar-dasar Pengetahuan Ilmu Tanaman . Angkasa,Bandung Ahkam,  MS.  2008.  Obat Alternatif:  Sarang Semut Penakluk Penyakit Maut. www.sarangsemut.50webs.com Astuti,  DI.  2005. Gambaran  Mikroskopois Ketebalan Epitel Gingiva Setelah Pemberian  Vitamin  C  Pada  Proses Penyembuhan  Luka  Pada  Tikus  Wistar Jantan. Tidak  diterbitkan.  Skripsi. Jember:  Fakultas Kedokteran  Gigi
Universita Jember
Fitriningrum  R,  Sugiyarto  and  Susilowati  A. 2013.  Analisis  Kandungan  Karbohidrat Pada  Berbagai  Tingkat  Kematangan Buah  Karika  ( Carica  pubescens )  Di
Kejajar Dan Sembungan, Dataran Tinggi Dieng, Jawa Tengah. Bioteknologi 10  (1):  6-14.  ISSN:  0216-
6887, EISSN: 2301-8658
Kartosapoetra AG. 2004. Klimatologi;
Pengaruh  Iklim  terhadap  Tanah  dan Tanaman . Bumi Aksara, Jakarta Lacy,  C.F.,  Amstrong,  L.L,  2008. Drug Information  Handbook,  Ed.  17th .USA  : Lexi-Comp Inc.
Lewis, M. A. O dan P. J Lamey. 1998. Tinjauan Klinis Penyakit Mulut . Terjemahan Elly Wiriawan. Jakarta: Widya Medika MacKay, Douglas and alan L. Miller, Nutrional Support for Wound Healing. Alternative Reviews. Vol 8 No.4 (2003).
Manson,  J.D  dan  B.  M.  Eley.  1993. Buku  Ajar
Periodonti  Edisi  2. Terjemahan  oleh Anastasia S dari Outline of

## Periodontics. Jakarta: Hipokrates
Parwata,  Adi  IMO,  Dewi,  Sastra  PF.  2008.
Isolasi  dan  Uji  Aktivitas  Antibakteri Minyak  Atsiri  Dari  Rimpang  Lengkuas . ejournal.unud.ac.id Underwood,  JCE.  1999. Patologi  Umum  dan Sistematik . Jakarta: EGC
Wheeler GL, Jones MA, Smirnoff N. 1998 The Biosynthetic  Pathway  Of  Vitamin  C  In Higher Plants. Nature . 393 (6683): 365- 369
Yendriwati, Kebutuhan Vitamin C dan
Pengaruhnya terhadap Kesehatan Tubuh  dan  Rongga  Mulut. Dentika Dental  Journal,  Vol  11,  No.  1  :  (2006) 78-83.
Zainuddin,  M.  2000. Metodologi  Penelitian .
Surabaya: Pasca Sarjana Unair