AKTIVITAS ANTIBAKTERI MADU MURNI KALIMANTAN BARAT TERHADAP BAKTERI Escherichia coli DAN Staphylococcus aureus DENGAN METODE DIFUSI AGAR

## Shendi Suryana
Prodi Farmasi FMIPA Universitas Garut shendi@uniga.ac.id

## abstrak
Telah  dilakukan  uji  aktivitas  antibakteri  madu  murni  Kalimantan  Barat  jenis Apis dorsata terhadap bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus dengan metode difusi  agar.  Hasil  pengujian  menunjukan  bahwa  madu  murni  Kalimantan  Barat menunjukan  aktivitas  antibakteri  hanya  pada Staphylococcus  aureus .  Madu  murni Kalimantan Barat menunjukan aktivitas pada konsentrasi 40%, 30%, 20%  dan 10% (b/v)  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dengan  diameter  hambat  masing- masing sebesar 27.3 mm, 20.5 mm, 17.4 mm dan 9.7 mm. Nilai konsentrasi hambat minimum madu murni Kalimantan Barat adalah 6% (b/v). Nilai kesetaraan aktivitas madu  murni  Kalimantan  Barat  terhadap  tetrasiklin  adalah  0.03134873  terhadap Staphylococcus aureus.
Kata kunci : antibakteri, madu murni, Staphylococcus aureus, konsentrasi hambat minimum

## 1. Pendahuluan
Indonesia memiliki keanekaragaman tumbuhan berbunga yang tinggi dan  selalu ada  sepanjang tahun.  Indonesia  dikenal  dunia  internasional  sebagai  negara  yang  kaya  akan  jenis  lebah  madu. Salah  satunya  jenis Apis  dorsata hidup  secara  alami  di  hutan  Sumatra,  Kalimantan,  Jawa, Sulawesi dan kepulauan Nuasa Tenggara . Madu adalah cairan manis alamai berasal dari nektar tumbuhan  yang  diproduksi  lebah  madu  (1).  Seperti  kita  ketahui  madu  memiliki  banyak  sekali manfaat dan kegunaan bagi manusia, baik untuk obat luar maupun dalam. Salah satu khasiat madu adalah  memiliki sifat antibakteri (2). Efek antibakteri pertamakali dikenalkan tahun 1892 oleh van  ketel.  Awalnya  efek  antibakteri  ini  diduga  karna  kandungan  gula  madu  yang  tinggi,  yang disebut efek osmotik. Namun, penelitian lebih lanjut menunjukkan adanya zat inhibine yang pada akhirnya diidentifikasikan sebagai hidrogen peroksida yang berfungsi sebagai antibakteri (3)
Dr.  WG  Sackett,  ahlibakteriologi  dari  Colorado  Agricultural  Academy  menemukan  secara  in vitro, madu dapat mematikan kuman tifus dalam 48 jam, kuman penyebab penyakit radang paru- paru mati pada hari keempat bersamaan dengan kuman penyebab peritonitis, radang selaput paru,
dan kuman penghasil nanah. Adapun bakteri  penyebab diare disentri mati hanya dalam 10 jam (4).
Sebelum  antibiotik  ditemukan  di  tahun  1930-an,  madu  masih  digunakan  dalam  perawatan berbagai  penyakit.  Dengan  beralihnya  manusia  ke  pengobatan  modern,  madu  kian  tersisih perannya. Belakangan ini  ketika banyak bakteri menjadi  resisten  terhadap obat-obatan, banyak orang “kembali ke alam” dengan memanfaatkan madu dalam pengobatan (5).
Dari  beberapa  informasi  ilmiah  diatas  mengenai  aktivitas  antibakteri  madu,  makan  dilakukan penelitian  yang  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  daya  hambat  antibakteri  dan  KHM  pada madu murni Kalimantan Barat terhadap bakteri Escherecia coli dan Staphylococcus aureus, serta menentukan kesetaraan aktivitas antibakteri madu murni Kalimantan Barat terhadap pembanding (tetrasiklin).

## 2. Metode Penelitian
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  laboratorium,  dengan  tahapan  penelitian  sebagai  berikut  : (1)Pengumpulan dan penyiapan sampel madu murni Kalimantan Barat, serta bahan kimia dan bahan  pendukung  keberhasilan  penelitian,  (2  )uji  kualitas  madu  murni  Kalimantan  Barat, meliputi keasaman, viskositas, kadar air, pH, berat jenis., (3)uji aktivitas madu murni Kalimantan Barat  terhadap  bakteri  uji  E.  coli  dan  S.  Aureus,    (4)  penentuan  nilai  konsentrasi  hambat minimum (KHM) dari madu murni Kalimantan Barat terhadap bakteri  E. coli dan  S. Aureus, (5) uji banding aktivitas antibakteri madu murni Kalimantan Barat dengan antibiotik tetrasiklin, (6)Pengolahan data,
Pengujian  aktivitas  antibakteri  dilakukan  dengan  menggunakan  metode  difusi  agar  untuk mengetahui aktivitas antibakteri madu murni  dari hutan  kalbar terhadap bakteri E. coli dan S. aureus.
Penentuan  konsentrasi  hambat  minimum  (KHM)  dilakukan  untuk  mengetahui  konsentrasi terendah pada aktivitas antibakteri madu murni dari hutan Kalbar terhadap bakteri E. coli dan bakteri S. aureus.

## 3. Hasil Penelitian dan Pembahasan
Pada  penelitian  ini  digunakan  madu  murni  kalimantan  Barat,  karena  madu  diketahui  memiliki banyak sekali manfaat dan kegunaan bagi manusi baik untuk obat luar maupun dalam, salah satu khasiat  madu  adalah  memiliki  sifat  antibakteri,  maka  untuk  membuktikan  khasiat  madu  murni Kalimantan  Barat  sebagai  antibakteri,  dilakukan  uji  aktivitas  madu  murni  Kalimantan  Barat terhadap bakteri E. coli dan S. aureus dengan metode difusi agar cakram kertas.
Pada  hasil  pengujian  analisis  kualitas  madu  murni  Kalimantan  Barat  keriteria  yang  diperoleh masih  memenuhi  standar,  hanya  pada  uji  viskositas  hasil  pengujian  sampel  cukup  kental  yaitu 19,6 (pois) (min) jika dibandingkan dengan standar SNI yaitu pada angka 10,7 (pois) (min). Jadi dapat dikatakan madu murni Kalimantan Barat yang digunakan dalam penelitian ini mempunyai kualitas yang baik.
Tabel 1: Hasil Analisis Kualitas Madu Murni Kalimantan Barat
Kriteria Madu murni kalbar Standar SNI  2004 Keasaman (ml NaOH 1 N/kg) 43,3 50 PH 4,1 3,2-4,5 Kadar air (%) (maks) 16,36 22 Viskositas (poise) (min) 19,6 10,7 Berat jenis (g/ml) 1,346 1,354-1,416
Dari data hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa, aktivitas antibakteri madu murni Kalimantan Barat hanya terjadi pada bakteri S. aureus. Sedangkan pada pengujian aktivitas terhadap E. coli tidak menunjukkan hasil aktivitas antibakteri. Hal ini mungkin dikarenakan kandungan senyawa zat aktif yang terdapat didalam madu murni Kalimantan Barat hanya berpengaruh pada bakteri bakteri  gram  positif  (S.  aureus).  Dengan  mekanisme  kerja  zat  antibakteri  yang  terkandung didalam madu murni Kalimantan Barat  dapat mengganggu sintesis dinding sel bakteri sehingga dinding sel yang terbentuk menjadi kurang sempurna atau rusak.
Tabel 2: Uji Aktivitas Antibakteri  Madu Murni Kalimantan Barat
Konsentrasi (%) Escherichia coli Staphylococcus aureus 40 % - 27,3 mm 30 % - 20,5 mm 20 % - 17,4 mm 10 % - 9,7 mm
Penentuan  konsentrasi  hambat  minimun  (KHM)  pada  penelitian  ini  untuk  menentukan aktivitas  antibakteri dengan konsentrasi terendah dari madu murni Kalimanatan Barat terhadap bakteri  S.  aureus.  Hasil  uji  yang  didapat  bahwa  pada  konsentrasi  3  %,  4  %,  dan  5%    positif ditumbuhi bakteri disekitar jalur jigzak sedangkan pada konsentrasi 6 %, tidak terjadi perubahan yang ditandai dengan warna bening tetap didalam cawan petri. Jadi dapat dikatakan bahwa nilai konsentrasi hambat minimum (KHM) madu murni Kalimantan Barat berada pada konsentrasi 6 %.
Tabel 3: Uji Konsentrasi Hambat Minimum
Mikro uji Konsentrasi dalam µL 3 4 5 6 Staphylococcus aureus + + + - Keterangan : -  = tidak ada pertumbuhan bakteri + = ada pertumbuhan bakteri
Gambar 1: Penentuan kesetaraan aktivitas madu murni kalimantan barat dengan antibiotik pembanding (tetrasiklin)
Keterangan gambar : uji aktivitas antibakteri madu murni Kalimantan Barat dengan konsentrasi 10%, 20%, 30%, 40%, 50%. Terhadap bakteri Staphylococcus aureus.
Tabel 4: Persamaan Kesetaraan Aktivitas Madu Dengan Antibiotik Pembanding Tetrasiklin
Konsentrasi Antibiotik (%) Konsentrasi Per cakram (µg) Log Konsentrasi Per Cakram Diameter Hambat (mm) 50 2.5 0,3937 35,3 40 2 0,301 31,7 30 1,5 0,176 23,4 20 1 0 20,7 10 0.5 -0,301 15

## Kurva Potensi Tetrasiklin
Grafik 5.1 Kurva potensi tetrasiklin terhadap Staphylococcus aureus dengan persamaan garis y = 28,69x + 21,9.
y = 28,699x + 21,95 R² = 0,916 0 5 10 15 20 25 30 35 40 -0,4 -0,2 0 0,2 0,4
0,6
d ia m e te r h am b at ( m m ) log konsentrasi percakram log konsentrasi percakram vs diameter hambat (mm) log konsentrasi percakram vs diameter hambat (mm)
Linear (log konsentrasi percakram vs diameter hambat (mm))
Uji  kesetaran,  penentuan  kesetaraan  aktivitas  antibakteri  madu  murni  Kalimantan  Barat  untuk nilai  kesetaraan  terhadap  tetrasiklin  diperoleh  hasil  yaitu  1  mg  madu  murni  Kalimantan  Barat setara dengan 0,03134879 mg tetrasiklin terhadap bakteri s.  aureus.

## 4. Kesimpulan
Dari  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan  bahwa  madu  murni  Kalimantan  Barat  hanya  memiliki aktivitas antibakteri terhadap S. aureus. Nilai konsentrasi hambat minimum (KHM)  dari madu murni  Kalimantan  Barat  adalah  pada  konsentrasi  6%  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus. Nilai kesetaraan terhadap tetrasiklin menunjukan bahwa 1 mg madu maurni Kalbar setara dengan 0,03134873 mg tetrasiklin terhadap S. Aureus

## 5. Daftar Pustaka
1. Benech, A. 2004. Honey: Functional Sweetness Wellness Food. Wellness Food Europe.
2. Brooks,  G.F.,  J.S.  Butel  dan  S.A.  Morse.  2001 .  Mikrobiologi  Kedokteran.  Buku  1. Penerjemah dan editor: Bagian Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga. Edisi Pertama. Jakarta: Salemba Medika. hal. 301 – 8, 317 – 26.
3. Caron, D.W. 2004. Honey. J MAAREC Publication. 3 .8. Available at: Hadinegoro, S. R. 1999 .  Masalah  Multi Drug  Resistance pada  Demam  Tifoid  Anak.  Cermin  Dunia kedoteran. 124. Hal. 5-8.
4. Hadioetomo, S.R, 1993. Mikrobiologi Dasar Dalam Praktek. Editor: Sidhi P.I,  Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama. Hal.1.
5. Yuliani,  L.E,  2007.  Madu  Hutan  Organik  dan Higienis  KalBar.  Availabel at: HTTP/file///D:/Riak Bumi- [Diakses tanggal 1 juni 2012].
6. Molan, P. C. 1992. The Antibacterial Activity of Honey: The Nature of The Antibacterial Activity. Bee World. 73 (1). P. 5-28.
7. Mulu,  A.,  B.  Tessema  and  F.  Derbie.  2004.  In  vitro  Assesment  of  the  antimicrobial potential of honey on common human patogens. Ethiop J Health Dev.18(2):107-11.
8. National  Honey  Board.  2001.  Honey:  a  reference  guide  to  a  nature’s  sweetener. Availabel at: http://www.honeylocator/ref.guide [Diakses 29 november 2012].
9. Radji, M. 2011. Buku Ajar Mikrobiologi: Panduan Mahasiswa Farmasi dan Kedokteran, Jakarta: Buku Kedokteran EGC. Hal 31, 33.
10. Sukartiko, 1986. Prosessing Madu Lebah. Prosiding  Lokakarya Pembudidayaan  Lebah Madu untuk Peningkatan Kesejahtraan Masyarakat. Perum Perhutani, Jakarta. Halaman 129-133.
11. Suranto, A. 2004. Khasiat dan Manfaat Madu Herbal. Editor: T. Yulia. Cetakan Pertama. Jakarta: AgroMedia Pustaka. Hal. 1 – 4, 14, 19
12. Suranto,  A.  2007.Terapi  madu.  Editor:  Inriadi.  H,K.  Shinta  Cetakan  Pertama.  Jakarta: Penebar Swadaya. Hal. 26, 33, 43-45.
Vol. 7; No. 2; 2016 Halaman 31-36
13. Susilo, 2004. Komposisi Madu. Available at: http://habbat.com/madu [Diakses Tanggal 13 Oktober 2008].
14. Tjay, T. H., dan K. Rahardja. 2002. Obat-Obat Penting: Khasiat, Penggunaan, dan Efek- Efek Sampingnya, edisi ke-5. Elex Media Komputindo. Jakarta. Hal. 59.
15. Titasmara,  2011.  Merambah  Aneka  Bakteri.  Editor:  Muttaqien,  Z.M  cetakan  pertama. bandung: Salsabila Publishing. Hal. 41-42, 47-48.
16. White JW, Riethof ML, Kushnir I. 1960. Composition of Honey. VI. The effect of storage on carbohydrates, acidity and diastase content. J Food Sci, 26(1): 63-71.
17. Wilix, D. J., P. C. Molan, and C. J. Harfoot. 1992. A Comparison of The Sensitivity of Wound Infecting Species of Bacteria to The Antibacterial Activity of Manuka and Other Honey. J. Applied Bacteriology. 73. P. 388- 394.