SEDUHAN BIJI KURMA (Phoenix Dactylifera) MEMPERKUAT MEMBRAN SEL SPERMA UNTUK MENURUNKAN KADAR MALONDIALDEHID
(Date Seeds Steeping (Phoenix Dactylifera) Strengthen Sperm Cells Membrane and Reduce Malondialdehyde Level)
Saryono * , Retnani H ** , Santoso D **
* Jurusan Keperawatan, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto. Jalan Dr. Soeparno Purwokerto 53122
** Prodi Keperawatan, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Muhammadiyah Gombong Email: sarbiokim@gmail.com

## ABSTRAK
Pendahuluan: Infertilitas  pada  pria  semakin  sering  terjadi  dan  umumnya  disebabkan  oleh  tingginya  kadar  radikal bebas akibat makanan, merokok maupun polusi. Stress oksidatif dapat diturunkan dengan antioksidan, namun sumber antioksidan  eksogen  umumnya  mahal.  Biji  kurma  diketahui  banyak  mengandung  antioksidan.  Tujuan  penelitian  ini adalah untuk mengetahui pengaruh seduhan biji kurma terhadap kadar MDA dan jumlah sperma pada tikus putih yang diinduksi monosodium glutamate (MSG). Metode: Penelitian  ini  menggunakan  metode  eksperimen  murni  dengan menggunakan post test only with control group design . Jumlah kelompok perlakuan sebanyak 4 kelompok. Biji kurma yang digunakan berjenis Deglet Noor , dicuci dan dikeringkan sebelum disangrai dan dihaluskan. Jumlah sperma dihitung sesuai penelitian Rahmanisa dan Maisuri, (2013) dan pemeriksaan MDA dengan Metode TBARS C-18 (Thiobarbituric Acid Reactive Substances) . Analisis data menggunakan oneway Anova dilanjutkan uji post hoc . Hasil: Terdapat perbedaan kadar MDA dan jumlah sperma pada masing-masing kelompok. Seduhan biji kurma 10,5 mg/gBB secara signifikan dapat menurunkan kadar malondialdehid dan meningkatkan jumlah sperma pada kelompok perlakuan setelah induksi MSG Diskusi: Kandungan flavonoid dan fenolik dalam biji kurma terbukti dapat menurunkan kadar malondialdehid pada hewan coba setelah dipapar MSG.
Kata kunci : radikal bebas, biji kurma, malondialdehide, jumlah sperma, infertilitas

## ABSTRACT
Introduction: Infertility in men is becoming more frequent and are usually caused by high levels of free radicals as a result of diet, smoking or pollution. Oxidative stress can be reduced by antioxidants, but a source of exogenous antioxidants are generally expensive. Date seed known contain a lot of antioxidants. The purpose of this study was to determine the effect of date seed steeping against MDA levels and sperm counts in rats model induced of monosodium glutamate (MSG). Methods: This study was a pure experimental method using a post-test only with control group design. The treatments were grouped into 4 groups. Deglet Noor of date seed were used, washed and dried before roasting and smoothed. Sperm count is calculated in accordance research of Rahmanisa and Maisuri, (2013) and MDA examination with the C-18 method of TBARS (Thiobarbituric Acid Reactive Substances). Data were analyzed by one way ANOVA and continued with post hoc test. Results: There were differences in MDA levels and sperm counts between various groups. Giving date seed steeping 10.5 mg/gBW can decrease malondialdehyde levels in experimental animals after MSG induced significantly. The number of sperm increased significantly after the experimental animals were given a dose of date seed steeping 10.5 mg/g. Discussion: Flavonoid and fenolic substances of date seeds reduce malondialdehyde level on after MSG exposed
Keywords : free radicals, date seeds, malondialdehyde, sperm count, infertility.

## PENDAHULUAN
Kondisi  yang  menakutkan  bagi pasangan baru yang telah berhubungan seksual secara teratur dalam periode yang lama adalah tidak terjadinya kehamilan (infertile). Kondisi infertile  akhir-akhir  ini  semakin  meningkat, 64% umumnya terjadi pada wanita dan 36% terjadi pada pria. Pada pasangan usia subur, kejadian  infertile  dapat  mencapai  15–20%.
Menurut  perkiraan  badan  kesehatan  dunia, akan semakin banyak terjadinya peningkatan infertil  di  masa  mendatang  yaitu  sekitar  2 jutaan. Banyak faktor yang menjadi penyebab infertil, diantaranya adalah kuantitas sperma (Dahlan, M.S. dan Tjokronegoro, A., 2012).
Kuantitas  sperma  dipengaruhi  oleh berbagai  hal  seperti  makanan,  gaya  hidup, stress,  olahraga  dan  obesitas,  penyakit,
Jurnal Ners Vol. 10 No. 2 Oktober 2015: 355–359
lingkungan  polusi  yang  buruk  dan  lain- lain.  Faktor  lain  yang  sering  terjadi  adalah penolakan sperma suami oleh antigen dalam vagina  istri  (Bambang,  2006).  Paparan radikal  bebas  dalam  jangka  waktu  tertentu juga dapat menyebabkan penurunan fertilitas akibat  penurunan  berat  testis,  peningkatan peroksidasi  lipid,  penurunan  antioksidan (vitamin C) dan kerusakan oksidatif. Oksigen reaktif  pada  tikus  wistar  jantan  dewasa  di dalam  testis  dapat  menyebabkan  stress oksidatif sehingga kemampuan testis menurun (Nayanatara dan Vinodini, 2008; Dahlan, M.S. dan Tjokronegoro, A., 2012). Sumber radikal bebas  yang  umum  pada  seorang  laki-laki adalah rokok, pengawet/perasa pada makanan, pembakaran  tidak  sempurna  dan  polusi  di tempat kerja.
Pada  kondisi  normal,  spesies  oksigen reaktif  (ROS)  berada  dalam  jumlah sedikit  dihasilkan  oleh  spermatozoa,  yang diperlukan untuk regulasi sperma, kapasitasi sperma  dan  reaksi  akrosom.  Namun  dalam jumlah  besar,  ROS  dapat  mengoksidasi  sel normal  khususnya  sperma  sehingga  dapat menurunkan  tingkat  kesuburan  akibat peningkatan kematian sel sperma (apoptosis) dan kerusakan asam deoksiribonukleat (DNA). Proses spermatogenesis dapat terganggu akibat paparan  radikal  bebas,  yang  dapat  merusak membrane sel sehingga dapat terjadi gangguan morfologi  sel  sperma.  Paparan  ROS  terus menerus dapat menyebabkan disfungsi seluler, apoptosis dan nekrosis (Brittenham, 2011).
Salah  satu  cara  untuk  melindungi dinding  sel  sperma  dari  kerusakan  oksidatif adalah  dengan  meningkatkan  intake antioksidan.  Sumber  antioksidan  vitamin E  dan  C  umumnya  cukup  mahal  sehingga perlu  diberikan  makanan  alternative  tinggi antioksidan, salah satunya biji kurma. Apalagi banyak masyarakat khususnya laki-laki yang menyukai  minuman  kopi  dan  biji  kurma terbuang percuma setelah dikonsumsi daging buahnya.  Biji  kurma  banyak  mengandung antioksidan,  karena  mengandung  senyawa fenolik,  yang  diduga  dapat  menurunkan radikal  bebas.  Biji  kurma  juga  mengandung vitamin C, senyawa polifenol dan flavonoid.
Biji  kurma  banyak  mengandung senyawa  fenolik,  yang  bermanfaat  sebagai antioksidan  (Takaeidi, et al .,  2014).  Biji kurma  mengandung  komponen  bioaktif seperti polifenol dan serat dalam jumlah yang besar, yang bersifat protektif bagi kesehatan (Habib et al ., 2013). Senyawa pektin dalam biji kurma sebagai komponen serat (Al-Shahib & Marshall, 2003), mampu menghambat absorpsi kolesterol di usus halus.
Penelitian  sebelumnya  menunjukkan bahwa  pemberian  vitamin  C  10  mg/kg  BB secara  intraperitoneal  mampu  mengurangi kadar  malondialdehid  (MDA)  dalam  testis dan  peningkatan  jumlah  sperma  disertai penurunan  persentase  sperma  abnormal (Acharya  dan  Mishra,  2006).  Penelitian  lain juga  memberikan  bukti  bahwa  pemberian vitamin  C  sampai  dosis  0.20  mg/grBB/ hari  dapat  mengurangi  jumlah  kerusakan spermatozoa (Wibisono, 2011).
Banyak  senyawa  aktif  dalam  biji kurma yang diduga berperan sebagai sumber antioksidan untuk menurunkan radikal bebas dalam  tubuh,  tetapi  mekanisme  pastinya belum  jelas  sehingga  diperlukan  penelitian lebih  lanjut.  Oleh  sebab  itu,  peneliti  tertarik untuk melakukan penelitian tentang pengaruh seduhan  biji  kurma  terhadap  kadar  MDA dan  status  sperma  pada  tikus  putih  model. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh seduhan biji kurma terhadap kadar MDA  dan  jumlah  sperma  pada  tikus  putih model yang diinduksi monosodium glutamate (MSG).

## BAHAN DAN METODE
Metode  penelitian  yang  digunakan a d ala h  ek s p e r i me n  mu r n i  de nga n menggunakan post test only with control group design .  Perlakuan  dikelompokkan menjadi 4 kelompok yaitu Kelompok kontrol negatif = dosis seduhan 0 mg/g/BB dan tanpa MSG;  Kelompok  1  (kontrol  positif)=  diberi MSG 4,2 mg/g BB selama 11 hari selanjutnya dibiarkan  sampai  hari  ke-25;  Kelompok  2  = diberi MSG 4,2 mg/gBB selama 11 hari dan selanjutnya seduhan biji kurma dosis 3,5 mg/g
Seduhan Biji Kurma ( Phoenix Dactylifera ) Memperkuat Membran Sel Sperma (Saryono, dkk.)
BB selama 14 hari; Kelompok 3 = diberi MSG 4,2  mg/gBB  selama  11  hari  dan  selanjutnya seduhan  biji  kurma  dengan  dosis  10,5  mg/g BB selama 14 hari. Biji kurma yang digunakan berjenis Deglet Noor, dicuci dan dikeringkan sebelum  disangrai  dan  dihaluskan.  Jumlah sperma dihitung sesuai penelitian Rahmanisa dan  Maisuri,  (2013)  dan  pemeriksaan  MDA dengan Metode TBARS C-18 (Thiobarbituric Acid  Reactive  Substances).  Analisis  data menggunakan oneway Anova dilanjutkan uji post hoc .

## HASIL
Kadar  MDA  pada  masing-masing kelompok  menunjukkan  adanya  perbedaan (Gambar  1).  Kadar  MDA  tertinggi  terjadi pada kelompok yang dipapar MSG selama 11 hari sedangkan kadar terendah terdapat pada kelompok 3 yaitu kelompok tikus yang diberi seduhan biji kurma dengan dosis 10,5 mg/gBB pada tikus.
Hasil  uji Oneway Anova  diperoleh nilai  F  sebesar  114,01  (p  <  0,05),  hal  ini menunjukkan bahwa terdapat perbedaan kadar MDA  di  antara  kelompok  setelah  perlakuan secara bermakna (Tabel 1). Pemberian seduhan biji kurma terbukti dapat menurunkan produk peroksidasi lipid berupa MDA. Berdasarkan uji post hoc Duncan, keempat kelompok berada dalam  subset  yang  berbeda,  yang  artinya bahwa  keempat  kelompok  masing-masing berbeda secara bermakna. Kelompok 3 yaitu yang diberi seduhan biji kurma 10,5 mg/g BB mempunyai rerata kadar MDA paling rendah bila dibandingkan dengan kelompok lainnya.
Rerata  jumlah  sperma  pada  masing- masing  kelompok  menunjukkan  adanya perbedaan.  Rerata  jumlah  sperma  tertinggi terdapat pada kelompok 3 setelah pemberian seduhan biji kurma, sedangkan jumlah sperma terendah  terdapat  pada  kelompok  2  yaitu kelompok tikus yang diinduksi MSG.
Hasil uji Oneway Anova diperoleh nilai F sebesar 87,55 (p < 0,05), hal ini menunjukkan bahwa  terdapat  perbedaan  secara  bermakna jumlah  sperma  di  antara  berbagai  kelompok perlakuan.  Pemberian  seduhan  biji  kurma
terbukti dapat meningkatkan jumlah sperma pada hewan coba setelah terpapar MSG.
Hasil uji post hoc Duncan menunjukkan bahwa  kelompok  yang  diberi  seduhan  biji kurma dosis 10,5 mg/g BB mempunyai rerata jumlah sperma tertinggi disbanding kelompok lainnya  secara  signifikan.  Kelompok  yang
Gambar 1.  Distribusi  kadar  MDA  setelah perlakuan  diantara  berbagai kelompok.
Gambar 2.  Distribusi  Jumlah  Sperma  pada beberapa kelompok perlakuan.
Tabel 1.  Rerata  kadar  MDA  masing-masing kelompok setelah periode perlakuan
Kelompok  MDA SD Uji Anova p Kontrol 1,34 0,08 114,01 0,000 1 2,01 0,11 2 1,08 0,078 3 0,81 0,10
Jurnal Ners Vol. 10 No. 2 Oktober 2015: 355–359
hanya  terpapar  MSG  mempunyai  jumlah sperma terendah.

## PEMBAHASAN
Kandungan flavonoid dan fenolik dalam biji kurma terbukti dapat menurunkan kadar malondialdehid  pada  hewan  coba  setelah dipapar  MSG.  Kandungan  fenolik  pada  biji kurma yaitu asam galat, asam protokatekuat, p-hidroksibenzoat, asam vanili, asam kafeat, asam p-kumarat, m-kumarat, dan o-kumarat (Takaeidi, et al ., 2014) . Kandungan fenolik pada biji kurma sekitar 48.64 mg/100 g (Ardekania et al., 2010.  Selain  fenolik,  biji  kurma  juga mengandung  f lavonoid  (Satuhu,  2010). Senyawa  flavonoid  telah  terbukti  memiliki banyak  manfaat,  yaitu  sebagai  antioksidan, anti-karsinogenik,  antimikroba,  anti- mutagenik,  anti-inflamasi,  dan  mengurangi risiko  penyakit  kardiovaskular  (Al-Farsi  & Lee, 2007). Kombinasi flavonoid dan fenolik secara  bersama-sama  membantu  mencegah terjadinya oksidasi lipid oleh radikal bebas.
Stress  oksidatif  pada  spermatozoa merupakan  penyebab  terbanyak  disfungsi spermatozoa. Stress oksidatif diakibatkan oleh tingginya senyawa oksigen reaktif (ROS), yang sebenarnya dalam jumlah sedikit dibutuhkan regulasi fungsi sperma. Kandungan antioksidan biji  kurma  lebih  tinggi  dibanding  daging buahnya (Ardekania et al ., 2010). Oleh karena itu membrane sel  sperma  menjadi  kuat  dan tidak mudah rusak, sehingga jumlah sperma banyak. Reactive oxygen species (ROS) yang meningkat  dapat  menyebabkan  gangguan pada proses spermatogenesis sehingga dapat menyebabkan adanya kelainan pada morfologi sel  spermatozoa,  kerusakan  membran  sel,
penurunan motilitas, penurunan viabilitas dan kemampuan  membuahi  (Twigg  dan  Fulton, 2008).  Spesies  oksigen  reaktif  dari  MSG dapat menyebabkan gangguan perkembangan testis,  sel  sertoli  dan  sel  leydig  pada  masa prapubertas.  Stres  oksidatif  MSG  dapat merusak  integritas  DNA  inti  spermatozoa sehingga  merangsang  terjadinya  apoptosis, akibatnya jumlah sperma menurun (Archarya & Mirshra, 2006; Lamarinde, 2007). Spermatozoa mudah rusak oleh induksi stress oksidatif karena membran selnya banyak mengandung  asam  lemak  tidak  jenuh  ganda (Dahlan,  M.S.  dan  Tjokronegoro,  A.,  2012). Selain  oksidasi  membran  sel,  kerusakan mitokondria sperma juga dapat menyebabkan penurunan  ketersediaan  energi  yang  dapat berakibat pada menurunnya motilitas sperma. Keberadaan  mitokondria  bagi  sel  sangat penting karena energi banyak dihasilkan dari metabolism  aerob  di  mitokondria.  Ketika mitokondria  rusak,  energi  yang  dihasilkan akan menurun.

## SIMPULAN DAN SARAN Simpulan
Pemberian seduhan biji kurma 10,5 mg/g BB dapat menurunkan kadar malondialdehid pada  hewan  coba  setelah  diinduksi  MSG secara bermakna. Jumlah sperma meningkat signifikan setelah hewan coba diberi seduhan biji  kurma  dosis  10,5  mg/g  BB.  Terdapat perbedaan  kadar  MDA  dan  jumlah  sperma yang signifikan antar berbagai kelompok.

## Saran
Perlu  penelitian  lebih  lanjut  efek penggunaan seduhan biji kurma dalam jangka waktu  lebih  lama,  sehingga  dapat  dijamin keamanannya  jika  digunakan  pada  manusia. Respon pada manusia juga perlu diteliti untuk melihat efek yang lebih nyata.

## KEPUSTAKAAN
Acharya, U. dan Mishra, M., 2006. Testicular dysfunction  and  antioxidative  defense system of Swiss mice after chromic acid exposure . Reprod Toxicol . 22, 87–91.
Tabel 2.  Jumlah sperma pada masing masing kelompok setelah perlakuan
Kelompok Jumlah sperma (juta/ml) SD Uji Anova p Kontrol 20,81 0,87 87,55 0,000 1 7,5 1,02 2 32,68 9,51 3 108,0 16,67
Seduhan Biji Kurma ( Phoenix Dactylifera ) Memperkuat Membran Sel Sperma (Saryono, dkk.)
Al-Farsi, M.A., & Lee, C.Y., 2007. Optimization of phenolics and dietary ﬁbre extraction from date seeds. Elsevier Journal, 108
(3), 977–985.
Al-Shahib,  W.,  &  Marshall,  R.J.,  2003.  The fruit  of  the  date  palm:  its  possible use  as  the  best  food  for  the  future? International Journal of Food Sciences and Nutrition, 54 (4), 247–295.
A r d e k a n i a ,   M . R .,   K h a n av i a ,   M ., Hajimahmoodib, M., Jahangiria, M., & Hadjiakhoondi,  A.,  2010.  Comparison of antioxidant activity and total phenol contents of some date seed varieties from Iran. Iranian Journal of Pharmaceutical Research, 9 (2), 141–146.
Brittenham,  G.M.,  2011.  Iron-Chelating Therapy  for  Transfusional  Iron Overload. N Engl J Med, 364,  146– 156.
Dahlan,  M.S.  dan  Tjokronegoro,  A.,  2012. Oxidative  stress  and  male  infertility. pathophisiology and clinical implication.
Jurnal Kedokteran YARSI , 10(1), 50.
Habib,  H.M.,  Platat,  C.,  Meudec,  E., Cheynier,  V.,  &  Ibrahim,  WH.,  2013. Polyphenolic  compound  in  date  fruit seed characterization and quantiﬁ cation by using UPLC-DAD-ESI-MS. Whiley Online Library . doi:10.1002/jsfa.6387. Lamarinde, E., 2007 . Reactive Oxygen Species and  Sperm  Physiology. Review of Reproduction, 2, 48–54.
Nayanatara, A., dan Vinodini, N. 2008. Role of ascorbic acid in monosodium glutamat
mediated  effect  on  testicular  weight, sperm morphology and sperm count, in rat  testis. Journal of Chinese Clinical Medicine, 3, 1–5.
Rahmanisa,  S.  dan  R.A.  Maisuri,  2013. Pengaruh  Pemberian  Ekstrak  Jahe Merah  (Zingiber  ofﬁ cinale  Roxb.  var Rubrum) dan Zinc (Zn) terhadap Jumlah, Motilitas  dan  Morfologi  Spermatozoa pada  Tikus  Putih  (Rattus  norvegicus) Jantan Dewasa strain Sprague Dawley. Jurnal Kedokteran Unila, 3 (2), 33–7. Satuhu,  S.,  2010. Kurma, Kasiat dan Olahannya. Jakarta: Penebar Swadaya Takaeidi,  M.R.,  Jahangiri,  A.,  Khodayar, M.J.,  Siahpoosh,  A.,  Yaghooti,  H., Rezaei,  S., et al .,  2014.  The  Effect  of Date Seed (Phoenix dactylifera) Extract on  Paraoxonase  and  Arylesterase Activities  in  Hypercolesterolemic Rats. Jundishapur Journal National Pharmacology, 9(1) , 30–34.
Twigg,  J.,  dan  Fulton,  N.,  2008.  Analysis  of the  impact  of  intracellular  reactive oxygen species generation on structural and  functional  integrity  of  human spermatozoa: Lipid peroxidation, DNA fragmentation  and  effectiveness  of antioxidants. Human Reproduction , 13, 1429–36.
Wibisono, 2001. Pemanfaatan Vitamin C untuk Meningkatkan  Jumlah  Spermatozoa pada  Mus  musculus  yang  Dipapar Gelombang  Ultrasonik. Jurnal Media Medika , 12(3), 20.