Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.12, No.2, November 2023, pp. 208-213 ISSN 2715-1115 (Online), ISSN 2302 – 8610 (Print)
Antioxidant Activity of Edible Film Made From Catfish ( Pangasius hypophthalmus ) Gelatin Supplemented With Astaxanthin Using DPPH Method
Uji Aktivitas Antioksidan Edible Film dari Gelatin Ikan Patin (Pangasius hypophthalmus) yang Ditambahkan Astaxanthin Menggunakan Metode DPPH
Azlaini Yuz Nasution 1 , Intan Sri Wahyuni 2 1,2 Fakultas Farmasi dan Ilmu Kesehatan, Universitas Abdurrab, Pekanbaru, Indonesia Email: azlaini.yus@univrab.ac.id

## Abstract
Edible film is a food packaging material that can be consumed along with the packaged product. In this study, the edible film was made from catfish gelatin and supplemented with astaxanthin, which possesses antioxidant activity. The objective of this research was to determine the antioxidant activity of catfish gelatin edible film supplemented with 0.5% astaxanthin and compared with comparative film. The antioxidant activity was measured using the DPPH method with a microplate reader at five concentrations of sample 62.5 mcg/ml, 125 mcg/ml, 250 mcg/ml, 500 mcg/ml, and 1000 mcg/ml. The results of the antioxidant activity test showed that  the  IC50  value  of  the  edible  film  supplemented  with  astaxanthin  was 251.06x10 3 mcg/ml, while the comparative edible film was 133.12 mcg/ml. In conclusion,  the  edible  film  supplemented  with  astaxanthin  exhibited  weaker antioxidant activity compared to the comparative film.
Keywords:
Catfish gelatin (Pangasius hypophthalmus); Edible film; Astaxanthin; Antioxidant
Abstrak Edible  film merupakan  bahan  pengemas  makanan  yang  sekaligus  dapat dimakan  bersama  dengan  produk  yang  dikemas.  Pada  pengujian  ini edible film terbuat dari gelatin ikan patin dan ditambahkan astaxanthin yang memiliki aktivitas  antioksidan.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui aktivitas  antioksidan  pada edible  film gelatin  ikan  patin  yang  ditambahkan astaxanthin pada  konsentrasi  0,5%  dan  dibandingkan  dengan edible  film pembanding.  Pengukuran  aktivitas  antioksidan  dilakukan  menggunakan metode DPPH dengan alat microplate reader pada lima konsentrasi yaitu 62,5 mcg/ml, 125 mcg/ml, 250 mcg/ml, 500 mcg/ml, dan 1000 mcg/ml. Hasil uji aktivitas antioksidan menunjukkan nilai IC 50 dari edible film yang ditambahkan astaxanthin yaitu 251,06x10 3 mcg/ml sedangkan edible film pembanding yaitu 133,12  mcg/ml.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa edible  film yang  ditambahkan astaxanthin memiliki  aktivitas  antioksidan  lebih  lemah  dibandingkan  dengan pembanding.
Kata Kunci: Gelatin ikan patin ( Pangasius hypophthalmus ); Edible film ; Astaxanthin ; Antioksidan

## Article Info
Article history Received date: 2023-07-27 Revised date: 2023-09-13 Accepted date: 2024-10-09
Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.12, No.2, November 2023, pp. 208-213 ISSN 2715-1115 (Online), ISSN 2302 – 8610 (Print)
Azlaini Yuz Nasution and azlaini.yus@univrab.ac.id

## PENDAHULUAN
Gelatin  merupakan  bahan  yang  diperoleh dengan  mengekstrak  kolagen  dari  kulit  atau tulang  rawan  hewan.  Saat  ini  gelatin  dapat digunakan dalam pembuatan edible film , tidak hanya  sebagai edible  coating (menjaga makanan  kehilangan  kadar  air,  oksigen  dan cahaya)  tetapi  juga  menambah  nutrisi  pada bahan  makanan  yang  dilapisi.  Alasan  utama gelatin sebagai bahan baku pembuatan edible film karena  tingginya  kandungan proline , glycine, dan hydroxyproline pada gelatin ikan sehingga lebih flexible dan mudah diaplikasikan dalam bahan pangan. Edible film dapat  difungsikan  sebagai  bahan  kemasan antimikroba dan antioksidan dengan menambahkan  senyawa  antimikroba  dan antioksidan  baik  yang  bersifat  alami  maupun sintesis [1], [2].
Beberapa  penelitian  telah  dilakukan  untuk menguji  antioksidan  pada edible film seperti penelitian  Nuansa [3], dimana  nilai  aktivitas antioksidan  terbaik  sebesar  15,12  %  pada edible film refined karaginan yang ditambahkan  minyak  atsiri.  Penelitian  ini menggunakan edible film dari gelatin ikan patin yang  ditambahkan astaxanthin .  Penelitian tentang  antioksidan  dari astaxanthin telah diteliti  oleh  Mauludia et  al [4],  yang  menguji aktivitas  antioksidan astaxanthin dari  produk fermentasi udang (cincalok) dan diperoleh IC 50 sebesar 568,32 mcg/ml. Peneliti lain  Sukmaya et  al [5]  menyatakan  hasil  bahwa  aktivitas antioksidan astaxanthin memberikan  aktivitas yang  sangat  kuat  dengan  nilai  IC 50 30,46 mcg/ml,  dan  aktivitas  antioksidan  sediaan sabun  transparan astaxanthin mengalami penurunan  aktivitas  dari  sangat  kuat  menjadi kuat dengan IC 50 sebesar 70,47 mcg/ml . Astaxanthin merupakan  antioksidan  alami golongan carotenoid xanthophyll . Penambahan astaxanthin pada edible  film berfungsi  untuk melindungi makanan dari ketengikan oksidatif, degradasi, dan diskolorasi. Astaxanthin adalah kelompok xantofil berwarna merah muda yang terdapat pada hewan-hewan perairan. Selain
itu,  mikroalga  seperti Phaffia  rhodozyma, Chlorella vulgaris, dan Haematococcus pluvialis juga  menghasilkan astaxanthin dalam  jumlah yang cukup banyak [6].
Salah satu metode untuk menentukan aktivitas antioksidan  adalah  dengan  menggunakan radikal bebas DPPH ( 1,1-diphenyl-2- picrylhidrazil ). Metode DPPH dapat digunakan untuk  menguji  kemampuan  suatu  komponen sebagai  penangkap  radikal  bebas  dalam suatu bahan atau ekstrak. Keunggulan metode DPPH adalah dapat dikerjakan dengan cepat dan  sederhana [7] .  Penelitian  ini  bertujuan untuk  mengetahui  aktivitas  antioksidan  pada edible  film dari  gelatin  ikan  patin  yang ditambahkan astaxanthin pada  konsentrasi 0,5%.

## METODE
Penelitian  ini  menggunakan  kulit  ikan  patin segar (Pangasius hypophthalmus) yang diambil dari peternak ikan patin di Desa Pulau Gadang (Kabupaten  Kampar,  Provinsi  Riau),  aquades, NaCl 0,8N (Merck), NaOH 0,2N (Merck), asam asetat 0,05N (Merck), Astaxanthin (AstaLuxe TM 10%  Oleoresin),  gliserol  (Merck),  etanol  pro analisa (Merck), reagen DPPH (Sigma Aldrich), Na CMC, asam askorbat (Merck). Alat  yang  digunakan  terdiri  dari microplate reader, inkubator,  oven, water  bath ,  desikator, hot  plate ,  blender,  timbangan analitik, stirer , mikrometer,  vortex,  kuvet,  termometer,  cawan porselen, dan alat-alat gelas.
1. Penyiapan Kulit Ikan Patin
Kulit  ikan  yang  diperoleh  berasal  dari  ikan patin dengan berat rata-rata 500 g/ekor. Kulit ini  dibersihkan  dari  sisa  daging  yang menempel menggunakan pisau dan selanjutnya dipreparasi seperti pada Oktaviani et al [8].
2. Ekstraksi Gelatin dari Kulit Ikan Patin Kulit  ikan  patin  yang  telah  disiapkan selanjutnya  dilakukan  proses  ekstraksi  untuk memperoleh  gelatin.  Proses  ekstraksi  gelatin dari kulit tersebut menggunakan metode basa seperti pada Nasution et al [9].
Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.12, No.2, November 2023, pp. 208-213 ISSN 2715-1115 (Online), ISSN 2302 – 8610 (Print)
3. Pembuatan Edible  Film dari  Gelatin  Ikan Patin (F1)
Edible film dari gelatin ikan patin dibuat sesuai prosedur  pada  Nasution,  et  al  [2]  dengan sedikit modifikasi yaitu mengganti gelatin sapi dengan gelatin ikan patin.
4. Pembuatan Edible Film dari Gelatin Ikan Patin yang ditambahkan Astaxanthin (F2)
Edible film yang dibuat dari gelatin ikan patin dengan  penambahan  astaxanthin  0,5% dilakukan dengan cara yang sama seperti poin 3. Setelah pemambahan Na CMC ditambahkan astaxanthin 0,5%, lalu ditambahkan air hingga 100  ml.  Kemudian  larutan  tetap  dipanaskan sambil  diaduk  pada  suhu  45 ℃ dan dipertahankan  selama  10  menit,  didinginkan pada  suhu  ruang.  Suspensi  kemudian dituangkan  ke  dalam cetakan. Lalu dilakukan pengeringan pada suhu 25 ℃ . 5. Pembuatan Edible  Film dari  Gelatin  Ikan Patin  yang  ditambahkan  Pembanding Asam Askorbat (F3) Asam askorbat digunakan sebagai pembanding. Pembuatan edible film ini seperti pada poin 4, tetapi yang ditambahkan adalah asam askorbat 0,5%.
6. Uji Ketebalan Edible Film Ketebalan edible  film diukur  dengan menggunakan  mikrometer  pada  lima  tempat yang  berbeda  di  keempat  sisi  dan  bagian tengah edible film (20x20 cm), nilai ketebalan edible film yang diukur sama dengan rata-rata hasil lima kali pengukuran tersebut [10].
Ketebalan (mm) = !"#"$"%"&
'
7. Uji Aktivitas Antioksidan Edible Film dari Gelatin Ikan Patin yang ditambahkan Astaxanthin Uji aktivitas antioksidan dengan metode DPPH dilakukan dengan beberapa tahap yaitu:
a. Pembuatan  larutan  DPPH  80  mcg/ml menggunakan pelarut metanol.
b. Pembuatan  larutan  sampel,  dengan  cara menimbang sampel edible film sebanyak 40 mg  dilarutkan  dengan  40  ml  metanol sehingga  diperoleh  konsentrasi  larutan
sampel  1000  mcg/ml.  Lalu  dilakukan pengenceran  hingga  diperoleh  variasi konsentrasi  larutan  500  mcg/ml,  250 mcg/ml, 125 mcg/ml, dan 62,5 mcg/ml. c. Pembuatan  larutan  pembanding  (asam askorbat)  dilakukan  seperti  pada  poin  b dengan menggunakan edible film pembanding.
d. Penentuan  aktivitas  antioksidan  e dible film menggunakan microplate  reader dengan metode  DPPH  ( 1,1-Difenil-2-pikrilhidrazil ). Dilakukan  pengukuran  absorbansi  metanol, DPPH, dan sampel pada setiap konsentrasi menggunakan microplate  reader .  Volume larutan  yang  dipipet  sebanyak  50 µ l  dan waktu  diinkubasi  selama  30  menit  pada panjang  gelombang  492  nm. Edible  film yang ditambahkan asam askorbat digunakan  sebagai  kontrol  positif  dengan perlakuan  yang  sama  seperti  perlakuan sampel  dengan  variasi  konsentrasi  larutan 500  mcg/ml,  250  mcg/ml,  125  mcg/ml,
62,5 mcg/ml, dan 31,25 mcg/ml [11] .

## Analisis Data
Data  absorbansi  yang  diperoleh  dari microplate  reader dimasukkan  ke  rumus  di bawah ini, untuk menghitung % inhibisinya:
% inhibisi = !"#$%$& ()&*#)+,!"#$%$& !$-%"+ !"#$%$& ()&*#)+ × 100 %
Setelah  itu  diplot  ke  persamaan  regresi  linier y= ax + b, dimana sumbu x adalah konsentrasi sampel  dan  sumbu  y  adalah  %  inhibisi.  Dari persamaan  ini  dapat  dihitung  nilai  IC 50 dari masing-masing  sampel.  Nilai  IC 50 adalah konsentrasi  sampel  yang  dapat  meredam radikal DPPH sebanyak 50% konsentrasi awal. Nilai  IC 50 didapatkan  dari  nilai  x  setelah mengganti nilai y dengan 50.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Proses pembuatan edible film dari gelatin ikan patin  ini  menggunakan  bahan  tambahan  lain yaitu gliserol dan Na CMC. Gliserol berfungsi untuk  meningkatkan  fleksibilitas film, agar
Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.12, No.2, November 2023, pp. 208-213 ISSN 2715-1115 (Online), ISSN 2302 – 8610 (Print)
permukaan film lebih  halus,  dan  juga  dapat meningkatkan  kemampuan edible  film dalam mengurangi laju transmisi uap air [12]. Adapun fungsi  dari  Na  CMC  yaitu  untuk  membantu dalam pembentukan gel yang baik dan elastis. Na  CMC  sebagai  senyawa  polimer  dengan berat molekul yang tinggi, sehingga edible film yang  dihasilkan  lebih  kuat [13] .  Kemudian pelarut  yang  digunakan  dalam  pembuatan edible  film ini  adalah  air  karena  gelatin  larut dalam  air [14] .  Penambahan  bahan-bahan tersebut di atas sangat mempengaruhi kualitas edible film yang dihasilkan.
Edible  film yang  dibuat  diukur  ketebalannya menggunakan  mikrometer  dan  diperoleh  hasil ketebalan  rata-rata edible  film pada  tabel  1 berikut.
Tabel 1. Ketebalan rata-rata edible film No.  Jenis Edible Film Ketebalan rata-rata (mm)±SD 1. Edible  Film  Gelatin  Ikan Patin (F1) 0,110±0,020 2. Edible  Film  Gelatin  Ikan Patin+Astaxanthin (F2) 0,098±0,004 3. Edible  Film  Gelatin  Ikan Patin+Asam Askorbat (F3) 0,118±0,042
Ketebalan edible  film merupakan  suatu parameter  yang  penting  karena  dapat mempengaruhi
kualitas dalam mempertahankan produk. Ketebalan edible film ini  telah  memenuhi  standar  ketebalan edible film menurut Japanese  Industrial  Standart [15], yaitu  maksimal  memiliki  ketebalan  sebesar 0,25  mm.  Faktor-faktor  yang  mempengaruhi ketebalan  film  ini  antara  lain:  konsentrasi gelatin yang digunakan, luas wadah pencetak, dan permukaan cetakan yang harus rata [10]. Pada pengujian aktivitas antioksidan edible film yang  ditambahkan astaxanthin dilakukan dengan metode DPPH. DPPH merupakan suatu molekul  radikal  bebas  berwarna  ungu  yang akan  berubah  menjadi  senyawa  yang  stabil dengan  warna  kuning  karena  adanya  reaksi dengan  antioksidan,  dimana  antioksidan
memberikan  satu  elektronnya  pada  DPPH sehingga  terjadi  peredaman  pada  radikal bebas  DPPH.  Aktivitas  antioksidan  dari  suatu senyawa ditunjukkan oleh pengukuran serapan DPPH  yang  bereaksi  dengan  senyawa antioksidan [16].
Hasil uji aktivitas antioksidan edible film gelatin ikan patin terdapat pada tabel 2 di bawah ini:
Tabel 2. Hasil uji aktivitas antioksidan edible film Sampel konsentrasi (mcg/ml) % inhibisi IC 50 (mcg/ml) edible film + astaxanthin 0,5% (F2) 1000 500 250 125 62,5 13,64 12,43 10,73 6,42 6,61 251,0 x10 3 edible film + Asam askorbat 0,5% (F3) 500 250 125 62,5 31,25 80,38 77,56 47,80 25,08 10,43 133,11 Pengujian  ini  menggunakan edible  film yang ditambahkan asam askorbat sebagai pembanding, karena asam askorbat merupakan  salah  satu  sumber  antioksidan sintetis yang murni, larut dalam air, dan sering digunakan pada berbagai sediaan [17]. Hasil  persamaan  regresi  linier  saat  penentuan aktivitas antioksidan dari edible film gelatin ikan patin  yang  ditambahkan  astaxanthin  0,5% adalah  y=2,89629x-6,01778  dan  pada edible  film  pembanding  persamaan  yang diperoleh y=27,75528x-85,75822. Dari persamaan regresi linier ini dapat dihitung nilai IC 50 .  Nilai  IC 50 adalah  nilai . yang  digunakan dalam  penentuan  aktivitas  penangkal  radikal bebas.  Nilai  tersebut  menunjukkan  konsentrasi senyawa  uji  yang  dapat  menangkap  radikal sebesar  50%.  Semakin  kecil  nilai  IC 50 berarti aktivitas  antioksidannya  semakin  tinggi  [18], [19]. Nilai IC 50 sampel yang didapatkan yaitu 251,06x10 3 mcg/ml, dan pembanding sebesar 133,11mcg/ml.    Hal  ini  menunjukkan  bahwa edible  film yang  ditambahkan astaxanthin memiliki  aktivitas  antioksidan  lebih  lemah
Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.12, No.2, November 2023, pp. 208-213 ISSN 2715-1115 (Online), ISSN 2302 – 8610 (Print)
dibandingkan  dengan  pembanding.  Nilai  IC 50 sampel  sangat  besar,  sehingga  aktivitas antioksidannya  dapat  dikategorikan  tidak aktif. Hal ini terjadi disebabkan karena struktur rantai  yang  dimiliki astaxanthin terdiri  dari rantai tidak jenuh sehingga senyawa ini menjadi sangat  sensitif  terhadap  panas,  cahaya,  dan kondisi  oksidatif  serta  faktor  lingkungan  yang dapat  mempengaruhi  stabilitas astaxanthin [20 ] .

## SIMPULAN
Dari  penelitian  yang  telah  dilakukan  dapat disimpulkan bahwa edible film dari gelatin ikan patin  yang  ditambahkan  astaxanthin  0,5% mempunyai  aktivitas  antioksidan  dengan  nilai IC 50 sebesar  251,06x10 3 mcg/ml  dan pembanding  yaitu  133,11  mcg/ml.  Hal  ini menunjukkan  bahwa edible  film yang ditambahkan astaxanthin memiliki  aktivitas antioksidan  lebih  lemah  dibandingkan  dengan pembanding.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Pada kesempatan ini peneliti ingin menyampaikan  ucapan  terimakasih  kepada Pimpinan Pondok Pesantren Ummahatul Mukminin  yang  telah  memberikan  izin  dalam pelaksanaan penelitian ini. Dan ucapan terima kasih  kepada  Poltekkes  Kemenkes  Riau  yang telah memfasilitasi peneliti dalam melaksanakan penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Santoso,  B. Edible  film  Teknologi  dan aplikasinya. Palembang: Noer Fikri Offset, 2020.
[2] Nasution, A. Y., Wardaniati, I., & Lestari, S. A. Antibacterial Activity of Edible Film with  the  Addition  of  Betel  Leaf  Extract (Piper  betle)  againts  Streptococcus mutans. JPK: Jurnal Proteksi Kesehatan , vol. 11,  no. 1,  pp.  12-16, 2022.
[3]    Nuansa,  M.F.,  T.W.  Agustina,  dan E.Susanto.  Karakteristik  dan  Aktivitas
Antioksidan  Edible  Film  dari  Refined Karaginan dengan Penambahan Minyak Atsiri. http://www.ejournal- s1.undip.ac.id/index.php/jpbhp . vol. 6, no.
1, pp. 54-62, 2017.
[4] Mauludia,  T.  Usman.,  W.Rahmalia.,  D.I. Prayitno.,  dan  S.N.  Nurbaeti.  2021.
Ekstrak,  Karakteristik  dan  Uji  Aktivitas Antioksidan  Astaxanthin  dari  Produk Fermentasi  Udang  (Cincalok).  Jurnal kelautan tropis. Vol. 24, no. 3, pp. 311-
322, 2021.
[5] Sukmaya,  R.  S.,  Indra,  R.  Yulianti  &  L. Nurdianti.  Formulasi  dan  Uji  Aktivitas Antioksidan Sabun Transparan Astaxanthin. Prosiding seminar  nasional desiminasi penelitian. STIKes BTH
Tasikmalaya. Tasikmalaya, 2021.
[6]  Syukri,  D. Pengetahuan  Dasar  Tentang
Senyawa Karotenoid sebagai Bahan Baku Produksi  Produk  Olahan  Hasil  Pertanian . Padang: Andalas University Press, 2021. [7]  Rorong, J. A. Uji Aktivitas Antioksidan dari Daun  Cengkeh  ( Eugenia  carryophyllus ) dengan  Metode  DPPH. Chem.  Prog ,  vol. 1, no. 2, pp. 11-116, 2008.
[8] Oktaviani, I., Perdana, F., & Nasution, A. Y.  Perbandingan  sifat  gelatin  yang berasal  dari  kulit  ikan  patin  (Pangasius hypophthalmus)  dan  gelatin  yang berasal  dari  kulit  ikan  komersil. JOPS (Journal Of Pharmacy and Science) , vol. 1,
no. 1, pp. 1-8, 2017.
[9]   Nasution, A.Y., Harmita, dan Y. Harahap. Karakterisasi Gelatin Hasil Ekstraksi dari Kulit Ikan Patin (Pangasius hypophthalmus) dengan Proses Asam dan Basa. Pharmaceutical  Sciences  and Research  (PSR ),  vol.  5,  no.  3,  pp.  142  – 151, 2018.
[10] Chae, S. dan T.R. Heo. Production and properties  of  edible  film  using  whey protein.  Departemen  of  Biological Engineering  Inha  University,  Inchon. Korea. Biotechnol  Bioprocess .  Eng,  vol. 2, 122-125, 1997.
Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.12, No.2, November 2023, pp. 208-213 ISSN 2715-1115 (Online), ISSN 2302 – 8610 (Print)
Azlaini Yuz Nasution and azlaini.yus@univrab.ac.id
[11]  Cristine,  J.,  Hilwan,  Y.D.  Uji  Aktivitas Antioksidan  dan  Toksisitas  Ekstrak  Akar Tanaman Amaranthus spinosus . J.Ind Che , Acta , vol. 1, 2013.
[12]  Luthana,  Y.  Review  Lengkap  Tentang Edible  Film,  Pembuatannya  Dari  Bubuk Pektin  Cincau,  dan  Aplikasinya.  Online. ( Https://Yisluth.Wordpress.Com/2010/
12/17/Review-Lengkap-TentangEdible- Film  Pembuatannya-Dari-Bubuk-Pektin- Cincau Dan Aplikasinya/ ). 2013. Diakses tanggal: 8 maret 2017.
[13]  Tongdeesoontorn,  W.  LJ  Mauer,  S. Wongruong,  P  Sriburi,  &  P.  Rachtana- pun. Effect of Carboxymethyl Cellu- lose Concentration  on  Physical  Properties  of Biodegradable  Cassava  Starch-Based Film. Chemistry Central Journal , vol. 5, no.
6, pp. 3-8, 2011.
[14] Haris, M. A. Pemanfaatan Limbah Tulang Ikan Nila (Oreochromis niloticus) sebagai Gelatin dan Pengaruh Lama Penyimpanan pada Suhu Ruang. Skripsi.
Bogor:  Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu Kelautan Institut Pertanian Bogor, 2008.
[15]   JIS. Japanese Industrial Standart 2 1707 . Japanese  standards  association.  Japan,
1975.
[16] Tristantini,  D.,  Ismawati,  A.,  Pradana, B.T.,  dan  Jonathan,  J.G.  Pengujian Aktivitas  Antioksidan  Menggunakan
Metode  DPPH  Pada  Daun  Tanjung ( mimusops  elengi  L ). Prosiding  Seminar Nasional  Teknik  Kimia  “Kejuangan” .
Universitas Pembangun Nasional Veteran. Yogyakarta, 2016. [17] Weng,  W.,  Osako,  K.,  &  Tanaka,  M. Oxygen permeability and antioxidative  properties  of  edible surimi  films. Fisheries  Science ,  vol.  75,
no. 1, pp. 233-240, 2009.
[18] Pratiwi,  D.,  &  Wardaniati,  I.  Pengaruh Variasi Perlakuan (Segar Dan Simplisia) Rimpang  Kunyit  ( Curcuma  domestica ) Terhadap  Aktivitas  Antioksidan  Dan
Kadar  Fenol  Total. Jurnal  Farmasi Higea , vol. 11, no . 2, pp. 159-165, 2019.
[19] Devitria,  R.,  Juariah,  S.,  &  Putri,  L.  Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol Biji Jambu  Bol  ( Syzygium  malaccense L) Dengan Metode DPPH (2, 2-Diphenyl-1- picrylhidrazil). Klinikal Sains: Jurnal Analis Kesehatan , vol.  10,  no.  1,  pp.  45-52, 2022.
[20] Franco,  Z.  M.  E.,  P.  R.  Jimenez,  C.  A. Tomasini,  dan  L.  I.  Guerrero.  2010. Astaxanthin  Extraction  from  Shrimp Wastes  and  Its  Stability  in  2  Model Systems. Journal of Food Science. Vol. 75 no. 5, pp. 394 – 399, 2010.