## Borneo Journal Of Medical Laboratory Technology

## Lama Pemanasan Carbol Fuchsin Pada Pewarnaan Preparat BTA

## Heating Time Carbol Fucshin In BTA Staining Preparations
Riska Maulida 1
Fera Sartika 2* Al Hidayani 3
1 Universitas Muhammadiyah Palangkaraya, Palangka Raya, Kalimantan Tengah, Indonesia
*2 Universitas Muhammadiyah Palangkaraya, Palangka Raya, Kalimantan Tengah,Indonesia
3 Universitas Muhammadiyah Palangkaraya, Palangka Raya, Kalimantan Tengah,Indonesia
*email: sartikafera3@gmail.com

## Abstrak Abstrak
Tuberkulosis (TB paru) adalah penyakit infeksi menular yang menyerang paru-paru di sebabkan oleh bakteri Mycrobacterium tubercolusi s. Salah satu pemeriksaan  laboratorium  yang  digunakan  untuk  diagnosa Tubercolusis yaitu  metode  mikroskopis  dengan  pewarwaan Ziehl  neelsen komponen dalam pewarnaan ini seperti Carbol Fuchsin membutuhkan adanya proses pemanasan dimana pemanasan itu akan menyerap zat warna dan akan tahan diikat tanpa mampu dilunturkan oleh peluntur yang kuat sekalipun seperti asam  alkohol,  tujuan  penelitian  ini  untuk  mengetahui  lama  pemanasan Carbol  Fuchsin pada  pewarnaan  preparat  dengan  variasi  waktu  lama pemanasan yaitu 0 detik, 10 detik, 45 detik dan 120 detik. Sampel yang digunakan  adalah  sputum  BTA  positif  yang  berjumlah  6  sampel.  Hasil penelitian menunjukan waktu pemanasan larutan Carbol fuchsin yang baik adalah  direntang  waktu 10-45  detik  dimana  hasil  yang  didapatkan  warna BTA terlihat jelas, leukosit dan BTTA terlihat jelas dibandingkan  dengan waktu  0  detik  dan  120  detik  terlihat  jelas  dan  ada  bercak  merah  dapat menggangu pemeriksaan.

## Kata Kunci:
Mycobacterium tuberculosis , Pewarnaan Ziehl Neelsen , Lama Pemanasan
Keywords : Mycobacterium  tuberculosis , Ziehl  Neelsen staining, heating time

## Abstract
Tuberculosis (pulmonary TB) is a contagious infectious disease that attacks the lungs caused by the bacteria Mycobacterium tuberculosis. One of the laboratory tests  used  to  diagnose  Tubercolusis  is  the  microscopic  method  using  Ziehl Neelsen  staining.  The  components  in  this  coloring,  such  as  Carbol  Fuchsin, require  a  heating  process,  where  the  heating  will  absorb  the  dye  and  will  be resistant to bonding without being able to be worn off by even strong bleaches such as alcohol acid. The research aims to determine the heating time for Carbol Fuchsin  in  staining  preparations  with  variations  in  heating  time,  namely  0 seconds, 10 seconds, 45 seconds 120 seconds. The samples used were sputum BTA Positive, totaling 6 samples. The results of the research show that a good heating  time  for  the  Carbol  fuchsin  solution  is  in  the  range  of  10- 45 seconds where  the  results  obtained  are  that  the  BTA  color  is  visible, leukocytes and BTTA are visible compared to the time of 0 seconds and 120 seconds,  it  is  visible  and  there  are  red  spots  that  can  interfere  with  the examination.

## PENDAHULUAN
Tuberkulosis  atau  TB  adalah  penyakit  yang disebabkan  oleh  infeksi  bakteri Mycobacterium tuberculosis di  paru.  Kondisi  ini,  kadang  disebut  juga dengan TB paru. Bakteri tuberkulosis yang menyerang paru menyebabkan gangguan pernapasan, seperti batuk kronis  dan  sesak  napas.  Penderita  TB  biasanya  juga mengalami gejala lain seperti berkeringat di malam hari dan demam. Pengobatan penyakit tuberkulosis biasanya membutuhkan  waktu  berbulan-bulan  dengan  aturan minum obat yang ketat guna mencegah risiko terjadinya resistensi antibiotik. Jika tidak ditangani dengan segera, TB  dapat  berakibat  fatal.  Bakteri Mycobacterium tuberculosis dapat  menginfeksi  bagian  organ  tubuh lainnya,  seperti  ginjal,  tulang,  sendi,  kelenjar  getah bening, atau selaput otak, kondisi ini dinamakan dengan TB ekstra (Kemenkes RI, 2022).
Menurut World  Health  Organization (2020)
Indonesia  sekarang  berada  pada  urutan  ketiga  negara dengan  beban  Tuberkulosis  Paru  tertinggi  di  Dunia. Estimasi  prevalensi  Tuberkulosis  Paru  semua  kasus adalah  sebesar  660,000.  Indonesia  menjadi  urutan tertinggi di dunia setelah India dan cina. Data tahun 2019 menunjukkan,  ada  sekitar  845.000  penderita  TB  di Indonesia. ( Kemenkes RI, 2022 ). Menurut data profil kesehatan  Indonesia  pada  tahun  2021  jumlah  kasus tuberkulosis  yang  ditemukan  sebanyak  397.377  kasus, meningkat bila dibandingkan semua kasus tuberkulosis yang ditemukan pada tahun 2020 yaitu sebesar 351.936 kasus.
Di  Kalimantan  Tengah  Tahun  2022  sebanyak 2933  kasus  TB  atau Treatment  Coverage sebesar  31% masih  di  bawah  rata-rata  Nasional  yaitu Treatment Coverage 55%,  capaian  tertinggi  ada  di  Kabupaten Murung Raya dengan Treatment Coverage sebesar 68%, sedangkan angka keberhasilan pengobatan ( Succes Rate ) Provinsi  Kalimantan  Tengah  pertengahan  tahun  2022 (pasien pengobatan 2021) sebesar 78 % atau masih di bawah target Nasional yaitu 90% dan sama dengan rata- rata  Nasional  78%  (Dinkes  Kalteng,  2022).  Di  Kota
Palangka Raya tampaknya mengalami peningkatan jika di bandingkan  tahun  2021  dengan  angka  kejadian  kasus sebanyak 421, sedangkan di tahun 2022 angka kejadian kasus  TB  sebanyak  421  sampai  akhir  tahun,  (Dinkes Kota Palangka Raya, 2022).
Pemeriksaan  mikroskopik  BTA  dari  sputum memegang  peran  dalam  mendiagnosis  awal  atau pemantauan  pengobatan  tuberkulosis.  Diagnosis  TB paru  dilakukan  dengan  pemeriksaan  klinis  terlebih dahulu,  dilanjutkan  pemeriksaan  foto  toraks, pemeriksaan  laboratorium  klinis  dan  pemeriksaan penunjang lainnya. Salah satu pemeriksaan laboratorium yang  digunakan  untuk  mendiagnosa  TB  Paru  yaitu pemeriksaan  Basil  Tahan  Asam  (BTA)  metode mikroskopis dengan pewarnaan Ziehl Neelsen .
Bakteri  tahan  asam  adalah  kelompok  bakteri yang  mempunyai  sifat  khusus  tahan  terhadap dekolorisasi  atau  pelunturan  warna  dengan  asam alkohol  sehingga  digolongkan  sebagai  bakteri  gram positif.  Kelompok  bakteri  ini  memiliki  bentuk  batang atau  basil  sehingga  dikenal  juga  dengan  sebutan  Basil Tahan  Asam  (BTA)  .  Ketahanan  terhadap  asam  dan alkohol  pada  proses  pewarnaan  yang  dimiliki  BTA disebabkan karena bakteri ini memiliki karakter Acid-fast yakni kondisi tebalnya dinding sel sehingga sulit terjadi dekolorisasi pada sel, hal ini disebabkan karena adanya kandungan  peptidoglikan  dan  lipid  dalam  kadar  yang tinggi  pada  dinding  sel  sehingga  sel  menjadi  bersifat waxy,  hidrofobik  serta  sulit  terwarnai.  Bakteri  yang tergolong  dalam  kelompok  basil  tahan  asam  adalah bakteri yang berasal dari genus Mycobacteria , salah satu diantaranya  adalah M.  tuberculosis patogen  pemicu timbulnya infeksi Tuberkulosis (Febriani et al, 2022).
Pemeriksaan  BTA  dengan  pewarnaan Ziehl Nelseen merupakan  metode  pemeriksaan  yang direkomendasikan oleh WHO. Sampel yang dibutuhkan untuk  melakukan  pemeriksaan  ini  adalah  sputum. Sputum yang purulen akan dibuat sediaan, lalu setelah kering ditambahkan karbol fuksin dan dipanaskan sampai menguap. Pemanasan bertujuan untuk membuka dinding
sel bakteri sehingga memudahkan dalam penyerapan zat warna.  Hal  ini  disebabkan  karena  dinding  sel M. tuberkulosis mengandung  lapisan  lemak  yang  sukar ditembus oleh zat warna, sehingga sukar menyerap zat warna,  namun  jika  bakteri  diberi  zat  warna  khusus misalnya  karbol  fukhsin  melalui  proses  pemanasan, maka  akan menyerap zat warna dan  akan tahan diikat tanpa  mampu  dilunturkan  oleh  peluntur  yang  kuat sekalipun  seperti  asam  alkohol  (Mirawat et  al ,  2017).
Fuchsin basa adalah suatu campuran homolog dari fuchsin dasar, yang diubah dengan penambahan gugus sulfonat. Sedangkan  ini  menghasilkan  12  kemungkinan  isomer. Dalam  larutan  bersama  fenol  (juga  disebut  asam karbolat) sebagai accentuator disebut carbol fuchsin dan digunakan  untuk  untuk  pewarnaan Ziehl-Neelsen dan pewarnaan asam cepat serupa lainnya dari mikobakteri yang menyebabkan tuberkulosis, kusta dll. Fuchsin dasar banyak  digunakan  dalam  biologi  untuk  mewarnai  inti.
Carbol fuchsin yang terdiri dari larutan fuchsin dan larutan phenol  yang  mempunyai  fungsi  membuka  lapisan  lilin agar menjadi lunak sehingga cat dapat menembus masuk ke  dalam  sel  bakteri Mycobacterium  tuberculosis (Alvinova, 2016)
Berdasarkan  penelitian  Mirawati et  al ,  (2017) tentang  Pengaruh  Pemberian Carbol  Fuchsin Dan Pemanasan  Sputum  Sebelum  Pembuatan  Sediaan Terhadap  Hasil  Pewarnaan  BTA,  terdapat  perbedaan hasil pewarnaan antara beberapa suhu yang digunakan dapat diketahui bahwa didapat 15 sediaan dengan hasil pewarnaan tipis, 4 sediaan dengan tidak terwarnaai dan 21 terwarnai dengan jelas. Selain itu berdasarkan studi pendahuluan  yang  telah  dilakukan  didapatkan  hasil Carbol  Fuchsin yang  tanpa  dilakukan  pemanasaan  dan pemanasan  hingga  mendidih,  terdapat  perbedaan  hasil pewarnaan antara beberapa waktu. Sediaan dahak yang baik  adalah  sediaan  yang  memenuhi  6  syarat  kualitas sediaan  yang  baik  yaitu  kualitas  contoh  uji,  ukuran, ketebalan, kerataan, pewarnaan dan kebersihan (Kardi, 2022).

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  menggunakan  metode  deskriptif, menurut Sugiyono, (2005) menyatakan bahwa metode deskriptif  adalah  suatu metode  yang  digunakan  untuk menggambarkan atau menganalisis suatu hasil penelitian tetapi tidak digunakan untuk membuat kesimpulan yang lebih  luas.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui gambaran  bakteri Mycobacterium  tuberculosis terhadap variasi  waktu  lama  pemanasan Carbol  Fuchsin pada pewarnaan Ziehl nelseen. Pada penelitian ini sampel yang digunakan  yaitu  sampel  dahak  positif  TB.  Banyaknya sampel ditentukan dengan rumus Federer dimana setiap kelompoknya  terdapat  6  sampel  positif  TB  dengan  4 variasi waktu lama pemanasan carbol fuchsin 0 detik, 10 detik ,45 detik, dan 120 detik sehingga total sampel yaitu 24 slide sedian dahak .

## HASIL DAN PEMBAHASAN HASIL
Berdasarkan  hasil  penelitian  terhadap  6  sampel sputum  dengan  BTA  positif  dengan  perlakuan  sputum terlebih  dahulu  difiksasi  dengan  melewatkan  api sebanyak  3  kali,    diberi  karbol  fuchsin  dengan konsentrasi 0,3 % dan dipanaskan dengan waktu 0 detik, 10 detik, 45 detik, dan 120 detik. Didapat hasil seperti tertera pada tabel 1.
Tabel  1 .  Hasil  pewarnaan  menggunakan  beberapa waktu pemanasan Kode Sampel Waktu Lama Pemanasan (detik) 0 10 45 120 I BTA merah pudar, BTTA dan leukosit jelas BTA merah jelas, BTTA dan leukosit jelas BTA  merah jelas,  BTTA dan  leukosit jelas BTA merah jelas, BTTA dan leukosit jelas,
terdapat bercak – bercak merah II BTA merah pudar, BTTA dan leukosit jelas BTA merah jelas, BTTA dan leukosit jelas BTA  merah jelas,BTTA dan  leukosit jelas BTA merah jelas, BTTA
dan leukosit jelas, terdapat
bercak – bercak merah III BTA merah pudar, BTTA dan leukosit jelas BTA merah jelas, BTTA dan leukosit jelas BTA  merah jelas,  BTTA dan  leukosit jelas BTA merah jelas, BTTA dan leukosit jelas, terdapat bercak – bercak merah IV BTA merah pudar, BTTA dan leukosit jelas BTA merah jelas, BTTA dan leukosit jelas BTA  merah jelas,  BTTA dan  leukosit jelas BTA merah jelas, BTTA dan leukosit jelas, terdapat bercak – bercak merah V BTA merah pudar, BTTA dan leukosit jelas BTA merah jelas, BTTA dan leukosit jelas BTA  merah jelas,  BTTA dan  leukosit jelas BTA merah jelas, BTTA dan leukosit jelas, terdapat bercak – bercak merah VI BTA merah pudar, BTTA dan leukosit jelas BTA merah jelas, BTTA dan leukosit jelas BTA  merah jelas,  BTTA dan  leukosit jelas BTA merah jelas, BTTA dan leukosit jelas, terdapat bercak – bercak merah

## PEMBAHASAN
Pada tabel 1 dapat terlihat bahwa preparat hasil pewarnaan  BTA  yang  tidak  dipanaskan  (0  detik)  pada prosedur pemanasan larutan carbol fuchsin menunjukan hasil  bakteri M.tuberculosis tidak  tewarnai  dengan sempurna yaitu warna  BTA  merah pudar , BTTA  dan leukosit jelas sehingga BTA sulit diidentifikasi jumlahnya. Hal ini sesuai dengan Jawetz et.al (2013) dalam penelitian Mirawati et.al (2017) bahwa Mycobacterium tuberculosis merupakan bakteri tahan asam yang mempunyai dinding sel yang kaya akan peptidoglikan dan lipid sehingga tidak dapat  menyerap  zat  warna.  Pemanasan  sangat dibutuhkan agar BTA dapat menyerap zat warna.
Kontrol  negatif  yang  digunakan  adalah  aquades  seteril yang  dimasukkan  dalam  metode  difusi  sumuran sebanyak 40 µL sesuai dengan banyaknya antibiotik yang dimasukkan  dalam  metode  difusi  sumuran,  untuk pembanding  pada  pengujian  ini  digunakan  aquadest sebagai  kontrol  negatif  karena  tidak  memiliki  aktivitas antibakteri juga digunakan untuk melarutkan sampel uji.
Media  yang  digunakan  sebagai  tempat pertumbuhan bakteri pada uji sensitivitas ini ialah media Brain Heart Infusion (BHI), media Eosin  Methyleme  Blue (EMB),  dan Muller  Hinton  Agar (MHA).  Media-media tersebut juga disterilisasi menggunakan autoklaf dengan suhu 121˚C selama 15 -20 menit. Dengan tujuan untuk mencegah  kontaminan  bakteri.  Pada  penelitian  ini, bakteri dikultur pada media BHI yang berfungsi sebagai media penyubur kemudian bakteri diisolasi pada media EMB. Penggunaan EMB dalam penelitian ini dikarenakan media  tersebut  merupakan  media  selektif  bagi pertumbuhaan E. coli.
Preparat hasil pewarnaan BTA yang dipanaskan (10  dan  45  detik)  pada  prosedur  pemanasan  larutan carbol  fuchsin menunjukan  hasil  bakteri M.tuberculosis tewarnai  dengan  sempurna  yaitu  warna  BTA  merah jelas  ,  BTTA  dan  leukosit  jelas  sehingga  BTA  mudah untuk diidentifikasi jumlahnya, pada proses pemanasan 10 detik adalah proses pemanasan sampai terlihat asap tetapi belum sampai mendidih, sedangkan pada proses pemanasan  45  detik  sampai  terlihat  mendidih  tetapi hanya  sekedar  mendidih  warna  BTA  terlihat  jelas, sejalan  dalam  penelitian  Mirawati et.al (2017)  bahwa Mycobacterium  tuberculosis merupakan  bakteri  tahan asam  yang  mempunyai  dinding  sel  yang  kaya  akan peptidoglikan  dan lipid sehingga tidak  dapat  menyerap zat  warna.  Pemanasan  sangat  dibutuhkan  agar  BTA dapat  menyerap  zat  warna.  Warna  latar  preparat terlihat  baik  tidak  terdapat  bercak  yang  mengganggu proses identifikasi.
Preparat  hasil  pewarnaan  BTA  yang  dipanaskan  (120 detik) pada prosedur pemanasan larutan carbol fuchsin menunjukan hasil bakteri M.tuberculosis tewarnai dengan
sempurna  yaitu  warna  BTA  merah  jelas  ,  BTTA  dan leukosit jelas sehingga BTA mudah untuk diidentifikasi jumlahnya,  dan  ada  sedikit  tertinggal  bercak  merah dikarenakan  memanaskan carbol  fuchsin yang  terlalu lama sehingga meninggalkan bercak merah diantara BTA yang  dapat  menggangu  proses  indentifikasi  serta perhitungan  BTA.  Hal  ini  kurang  sesuai  dengan pernyataan  Mirawati et.al (2017)  batas  waktu pemanasan  ditandai  dengan  menguap  dan  tidak  boleh sampai  mendidih  bertujuan  agar  tidak  merusak  sel bakteri Mycobacterium tuberculosis . Menurut anggara et al. (2019) carbol  fucsin 1%  di  suhu  pemanasan  80ºC menunjukan hasil yang jelas. penambahan Carbol Fuchsin 1%  dengan  suhu  pemanasan  80ºC  memberikan  hasil yang jelas. Hal tesebut menunjukkan bahwa dengan suhu pemanasan  80ºC  akan  memberikan  hasil  pewarnaan BTA  yang  optimal  jika  konsentrasi Carbol  Fuchsin dinaikkan  menjadi  1%.    Konsentrasi Carbol  Fuchsin 1% dapat  menembus  dinding  sel M.  Tubercolusis dengan volume Carbol  Fuchsin 1%.  Proses  pemanasan  dalam waktu  120  detik  mengakibatkan  diding  sel  bakteri terbuka  keselurahan,  sehingga  larutan  warna carbol fuchsin masuk  dan  mewarnai  dengan  baik,  akan  tetapi pada  penelitian  ini  proses  tersebut  meninggalkan bercak-bercak  berwarna  merah  pada  latar  preparat BTA  yang  dapat  menggangu  proses  identifikasi M. Tuberculosis. Namun, keterbatasan penelitian ini adalah tidak adanya pengukuran suhu pada variasi waktu lama pemanasan.
Menurut Dirjen P2PL namun pada penelitian dan Bina Upaya Yankes, (2012) dan Depkes, (2012) dalam penelitian Jaya, (2016) Pengendalian mutu pemeriksaan mikroskopis TB Tindakan pencegahan dan pengawasan untuk menilai kualitas sediaan BTA perlu dilaksanakan sejak tahap pra analitik, analitik dan pasca analitik. Tahap pra analitik adalah tahap mulai mempersiapkan pasien, pengambilan  dan  penanganan  spesimen  dahak, menerima spesimen dahak, memberi identitas spesimen sampai  dengan  menguji  kualitas  reagen  Ziehl-Neelsen. Tahap  analitik yaitu tahap  mulai penyusunan prosedur
tetap  (Protap),  mengolah  dan  memeriksa  spesimen dahak  sesuai  prosedur  tetap,  memelihara  mikroskop, penilaian pembuatan sediaan dengan penilaian terhadap 6  unsur  menggunakan  skala  sarang  laba-  laba  (Sediaan yang baik harus memperlihatkan sarang laba-laba yang penuh,  6  unsur  penilaian  tersebut  meliputi  kualitas spesimen  dahak,  ukuran  sediaan,  pewarnaan, kebersihan,  ketebalan  dan  kerataan  sediaan),  dan penyimpanan  sediaan  untuk  uji  silang  metode  LQAS. Tahap  pasca  analitik  yaitu  tahap  mulai  dari  mencatat hasil  pemeriksaan,  interpretasi  hasil  sampai  dengan pelaporan. Kegiatan tersebut harus terus dilaksanakan oleh  semua  petugas  laboratorium  secara  rutin,  terus menerus  dan  terekam  dalam  suatu  laporan  kegiatan Pemantapan Mutu Internal yang harus dilaporkan secara berkala.

## KESIMPULAN
Dari  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan,  maka  dapat disimpulkan  bahwa  Proses  pemanasan  larutan Carbol Fucshin dengan waktu 0 detik mengakibatkan BTA tidak terwarnai  dengan  baik  dan  BTA  tidak  terlihat  jelas, leukosit  dan  BTTA  terlihat  jelas.  Proses  pemanasan larutan Carbol  Fucshin dengan  waktu  10  dan  45  detik didapatkatkan hasil BTA terwarnai dengan baik, leukosit dan  BTTA  terlihat  jelas.  Proses  pemanasan  larutan Carbol  Fucshin dengan  waktu  120  detik  didapatkatkan hasil  BTA  terwarnai  dengan  baik,  leukosit  dan  BTTA terlihat jelas, tetapi ada bercak-bercak merah yang dapat menggangu proses identifikasi BTA. Pada penelitian ini waktu  pemanasan  larutan Carbol  Fuchsin sehingga didapatkan hasil yang baik adalah di rentang waktu 10- 45 detik.

## DAFTAR PUSTAKA
Anggara,  Romi  Y.,  Dermawan,  Asep,  Kurniati,  Iis, Nurhayati, Dewi. 2019. Hasil Pewarnaan Basil Tahan  asam  Dengan  Penambahan  Carbol Fuchsin Dan Pemanasan Sputum Sebelum dan Sesudah  pembuatan  Sediaan.  Jurnal  Riset Kesehatan Poltekkes Depkes Bandung. 11 (1)
Alvinova, Adriyani. 2016. Gambaran Hasil Perbandingan Pemeriksaan  Mikroskopis  Basil  Tahan  Asam Dengan  Variasi  Carbol  Fuchsin  Dan  Methyelen Blue. Skripsi. Universitas Muhammadiyah
Semarang, Semarang.
Ariyani, F., Inggriani, M. dan Ilsan, N.A. 2019. Perbedaan Hasil Deteksi Pewarnaan Bakteri Tahan Asam Dan  Rapid  Antigen  Pada  Pasien  Diagnosa Tuberkulosis  Paru. Jurnal  Mitra  Kesehatan . 01(02): 101-105.
Cahyanti, A. A. 2017. Kualitas Sediaan Basil Tahan Asam Pada Fasilitas Pelayanan Kesehatan Dan Rujukan Uji  Silang  Dengan  Metode  Lqas  di  Kota Salatiga.Skripsi .Universitas Muhammadiyah
Semarang, Semarang.
Dinkes  Kalteng.  2022.  Dinkes  Kalteng  Lakukan Penguatan  Kapasitas  Petugas  Dan  Kader Dalam  Pengawasan  Minum  Obat  Dan Investigasi  Kontak ( Diakses  pada  08  Maret 2023)
Dinkes Kota Palangka Raya. 2022. Warga Palangka Raya Pernah Kena Tuberkulosis
Febriani, A., Sijid, S. A., Hidayat, K. S., Muthiadin, C. Z. dan  Zulkarnain.  2022.  Gambaran  hasil pemeriksaan  mikroskopik  basil  tahan  asam pada  penderita  tuberculosis  paru  di  BBKPM Makassar. Jurnal Mahasiswa Biologi . 2(1):21-26.
Icha,  Nurmala. 2021. Analisis  Kepuasan  Penumpang Terhadap  Rekonstruksi  Terminal  Check-In Counter  Di  Bandar  Udara  Internasional  Radin Inten Ii Lampung.Skripsi .Sekolah Tinggi Teknologi Kerdigantaraan Yogyakarta, Yogyakarta
Indiyah.  2018. Hubungan  Motivasi  dengan  Kepatuhan Minum  Obat Pada Penderita  Tuberkulosis  (Studi di  Puskesmas  Ngujung  Kecamatan  Maospati
Kabupaten
Magetan).Skripsi .STIKes Insan Cendekia Medika Jombang, Jombang.
Jaya  ,  A.2016. Analisa  Pengendalian  Mutu  Internal Pemeriksaan  Mikroskopis  Tb  Dengan  Penilaian Kualitas  Sediaan  Bta  Di  Balai  Kesehatan  Paru Masyarakat  (BKPM)  Wilayah  Semarang. Skrips i. Universitas
Muhammadiyah Semarang,
Semarang.
Kenedyanti,  E.  dan  Sulistyorini,  l.  2017.  Analisis Mycobacterium  Tuberkulosis Dan  Kondisi  Fisik Rumah  Dengan  Kejadian  Tuberkulosis  Paru. Jurnal Berkala Epidemiologi . 5(2): 152 – 162.
Keputusan  Menteri  Kesehatan  Republik  Indonesia Nomor  HK.01.07/Menkes/775/2019  Tentang
Pedoman Nasional Pelayanan Kedokteran Tata Laksana Tuberkulosis (10-11)
Keputusan  Menteri  Kesehatan  Republik  Indonesia Nomor  HK.01.07/Menkes/775/2019  Tentang Pedoman Nasional Pelayanan Kedokteran Tata Laksana Tuberkulosis (11-13)
Mirawati,  M.,  Lestari,  E.  2017.  Pengaruh  Pemberian Karbol  Fuchsin  dan  Pemanasan  Sputum Sebelum  pembuatan  Sediaan  Terhadap  Hasil Pewarnaan  BTA. Jurnal  Ilmu  dan  Teknologi Kesehatan . 5(1); 23 -33.
Murtfi'ah, N., Fadhilah, F. R. dan Krisdaryani, R. 2020. Perbandingan hasil pemeriksaan Mycobacterium tuberculosis dengan GeneXpert dan pewarnaan Ziehl  Neelsen . Jurnal  Riset  Informasi  Kesehatan . 9(2).