10

## PLANTROPICA Journal of Agricultural Science. 2017. 2(1): 10-17
PENGARUH KONSENTRASI BA TERHADAP PEMBENTUKAN EMBRIO SOMATIK PADA TANAMAN KENTANG ( Solanum tuberosum L.)

## SECARA IN VITRO
THE EFFECT OF BA CONCENTRATION ON SOMATIC EMBRYO FORMATION OF POTATO PLANTS ( Solanum tuberosum L.) IN VITRO
Yolanda Retno Nandika Viola*), Moch. Roviq ,Tatik Wardiyati
Jurusan Budidaya Pertanian Fakultas Pertanian Universitas Brawijaya Jl. Veteran, Malang 65145 Jawa Timur
*) Email: yolandaviola93@yahoo.co.id

## ABSTRAK
Solanum  tuberosum L.  merupakan  salah
satu  komoditas  yang  mendapat  prioritas pengembangan  karena  dapat  digunakan sebagai sumber karbohidrat dan mempunyai  potensi  dalam  diversifikasi pangan. Kendala utama dalam peningkatan produksi  kentang  adalah  pengadaan  benih kentang  berkualitas  yang  belum  memadai. Upaya yang dapat dilakukan untuk mengatasi  kendala  tersebut  adalah  dengan memanfaatkan  bioteknologi  yaitu  melalui kultur  jaringan  yang  ditempuh  melalui embriogenesis somatik. Penelitian ini bertujuan  untuk  mendapatkan  rasio  BA yang  tepat  untuk  memacu  terbentuknya embrio  somatik  kentang  varietas  Atlantik dan  Granola  Transgenik.  Penelitian  ini dilakukan  pada  bulan  Februari  hingga  Juni 2016  di  Laboratorium  kultur  jaringan Fakultas  Pertanian  Universitas  Brawijaya. Perlakuan  disusun  dalam  Rancangan  Acak Kelompok  Faktorial  dengan  3  kali  ulangan. Faktor  pertama  adalah  2  varietas  yakni  A: Atlantik dan B: Granola Transgenik, sedangkan faktor kedua adalah konsentrasi BA yakni K0: 0ppm, K1: 0,5ppm, K2: 1ppm, K3: 1,5ppm, dan K4: 2ppm. Hasil penelitian menunjukkan  bahwa  beberapa  konsentrasi sitokinin  (BA)  yang  diberikan  berpengaruh nyata  terhadap  pertumbuhan  eksplan  dan berpengaruh  terhadap  keberhasilan  induksi embrio  somatik  pada  tanaman  kentang ( Solanum  tuberosum L.).  Konsentrasi  BA yang diberikan berpengaruh terhadap induksi kalus, induksi embrio somatik, serta
jumlah  akar  dan  tunas  yang  berhasil tumbuh.
Kata  kunci: Solanum  tuberosum L.,  Embrio somatik, BA, Kultur Jaringan.

## ABSTRACT
Solanum  tuberosum L.  is  one  commodity that  has  a  development  priority  because  it can  be  used  as  a  source  of  carbohydrates and  it  has  the  potential  for  diversification. The  main  obstacle  to  increasing  the production  of  potatoes  is  the  provision  of quality  seed  potatoes  that  have  not  been adequate.  Efforts  that  can  do  to  overcome these  obstacles  is  to  use  biotechnology  is that  tissue  culture  can  be  reached  by somatic  embryogenesis.  The  purpose  of research  is  to  get  the  right  ratio  of  BA  to spur embryogenesis potato varieties Atlantic and Granola Transgenic. Research conducted  in  February  until  June  2016  at Tissue Culture Laboratory Brawijaya University.  The  treatment  used  a  Factorial Randomized  Block  Design  with  three replication.  The  first  factor  is  the  two varieties  of  potatoes  are  A:  Atlantic  and  B: Granola  Transgenic,  the  second  factor  is the  growth  regulator  BA  with  level  K0: 0ppm,  K1:  0.5ppm,  K2:  1ppm,  K3:  1.5ppm, and K4: 2ppm. The result showed that some of  the  concentration  of  cytokinin  (BA) provided significantly affected somatic embryos on potato ( Solanum tuberosum L.). BA  concentration  is  given  effect  on  callus induction,  induction  of  somatic  embryos,
Yolanda Retno Nandika Viola, etal.: Pengaruh Konsentrasi BA Terhadap Pembentukan Embrio..
and  the  number  of  roots  and  shoots  were successfully grown.
Keywords:  Solanum  tuberosum  L.,  Somatic Embryo, BA, Tissue Culture.

## PENDAHULUAN
Solanum tuberosum L. adalah tanaman  semusim  yang  berbentuk  semak dan  berasal  dari    dataran  tinggi  Andes, Amerika  Selatan  dan  telah  dibudidayakan oleh  penduduk  di  sana  sejak  ribuan  tahun silam  (Smith,  1968).  Teknik  budidaya  yang mempengaruhi produktivitas kentang meliputi  penggunaan  bibit  berkualitas  baik, varietas  berproduksi  tinggi,  pengendalian hama dan penyakit yang optimal,penggunaan  sarana  produksi  yang tepat,  serta  pengelolaan  tanah  dan  air (Rosliani et  al., 1998).  Kendala  utama dalam peningkatan produksi kentang adalah pengadaan  benih  kentang  berkualitas  yang belum memadai. Upaya yang dapat dilakukan untuk mengatasi kendala tersebut
adalah  dengan  memanfaatkan  bioteknologi yaitu melalui kultur jaringan atau pembiakan mikro  kentang.  Perbanyakan  melalui  kultur jaringan dapat ditempuh melalui
embriogenesis somatik. Embriogenesis  somatik  merupakan suatu  proses  pembentukan  embrio  dari  sel somatic  menjadi  tumbuhan  baru,  tanpa melalui  fusi  sel  gamet.  Semua  tumbuhan yang  dihasilkan  dari  proses  embriogenesis somatik  akan  memiliki  sifat  genetik  yang identik dengan tumbuhan induknya (William dan  Maheswaran,  1986).  Selanjutnya  Litz dan  Gray  (1995)  menyatakan  bahwa embrioid  dapat  dihasilkan  dari  satu  sel sehingga  produksi  bibit  jauh  lebih  banyak disbanding  penggunaan  teknik  yang  lain. Pertumbuhan mikro sangat tergantung pada interaksi antara ZPT eksogen yang ditambahkan  ke  dalam  media  dan  ZPT endogen.  Efektifitas  zat  pengatur  tumbuh pada tanaman dipengaruhi oleh konsentrasi yang diberikan, karena perbedaan konsentrasi  akan  menimbulkan  perbedaan aktivitas. Perbedaan aktivitas ZPT ditentukan  oleh  spesies  bahan  stek  yang digunakan  (Ortega,  2007).    ZPT  eksogen yang  biasa  digunakan  pada  kultur  jaringan
adalah  auksn  dan  sitokinin.hormon  2,4-D merupakan  golongan  auksin  yang  sering digunakan untuk menginduksi pembentukan kalus  embriogenik  dan  berperan  untuk memacu  hipermetilasi  pada  DNA  agar pembelahan  sel  selalu  dalam  fase  mitosis sehingga pembentukan kalus menjadi optimal  (Menneses et  al., 2005).  Selain auksin, hormone yang sangat penting untuk pertumbuhan  tanaman  adalah  hormone sitokinin.  Hormon  sitokinin  yang  paling sering digunakan adalah BA, yang berfungsi untuk  memacu  penggandaan  tunas  karena mempunyai
aktivitas yang kuat dibandingkan kinetin. Purnamaningsih (2006)  menyatakan  bahwa  pada  umumnya tanaman  memiliki  respon  yang  lebih  baik terhadap  BA,  sehingga  BA  lebih  efektif untuk produksi tunas in vitro.
Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan  rasio  BA  yang  tepat  untuk memacu  terbentuknya  embrio  somatik kentang  varietas  Atlantik  dan  Granola Transgenik.

## BAHAN DAN METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan Februari  hingga  Juni  2016  di  Laboratorium kultur jaringan Fakultas Pertanian Universitas  Brawijaya.  Bahan  tanam  yang digunakan  berupa  batang  bibit  kentang varietas Atlantik dan Granla Transgenik. Zat pengatur  tumbuh  yang  digunakan  berupa BA  dan  2,4-D.  penelitian  menggunakan Rancangan Acak Kelompok Faktorial dengan  2  faktor.  Faktor  pertama  adalah varietas  kentang  yaitu  A:  Atlantik,  B: Granola  Transgenik.  Faktor  kedua  adalah BA  dengan  beberapa  konsentrasi  yaitu  K0: 0ppm,  K1:  0,5ppm,  K2:  1ppm,  K3:  1,5ppm, dan  K4:  2ppm.  Setiap  kombinasi  perlakuan diulang  3  kali,  setiap  perlakuan  terdapat  2 satuan  percobaan  sehingga  didapatkan  60 satuan percobaan. Setiap perlakuan terdapat 6 eksplan.
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian ini  antara  lain  pinset,  scalpel,  cawan  petri, gunting,  timbangan  analitik,  Ph  meter, Bunsen,  Erlenmeyer,  pengaduk, labu  takar, gelas  ukur,  pipet,  corong,  botol  kultur, kompor,  autoklaf,  laminar  air  flow  cabinet, alat  tulis  dan  kamera.  Sedangkan  bahan

## 12
Yolanda Retno Nandika Viola, etal.: Pengaruh Konsentrasi BA Terhadap Pembentukan Embrio..
yang  digunakan  adalah  2  varietas  kentang yaitu  Atlantik  dan  Granola  Transgenik,  2,4- D 0,5ppm, BA dengan konsentrasi 0; 0,5; 1; 1,5;  dan  2ppm,  serta  media  dasar  yang terbuat dari larutan stok MS. Pelaksanaan penelitian diawali dengan sterilisasi alat dan media, perbanyakan  eksplan,  sub  kultur  planlet dengan  menggunakan  media  MS,  induksi kalus,  induksi  embrio  dengan  perlakuan beberpaa  konsentrasi  BA,  dan  hasil. Stresilisasi  alat  yang  dilakukan  adalah dengan  mencuci  botol  kultur  sampai  bersih dan direndam dalam larutan bayclin selama 24  jam  dengan  tujuan  agar  botol  tidak terkontaminasi oleh bakteri. Tahap selanjutnya  adalah  pengovenan  botol  yang dilakukan  selama  24  jam  juga.  Tahap selanjutnya  adalah  pembuatan  larutan  stok MS  untuk  sub  kultur.  Larutan  MS  tersebut terdiri  dari  unsur  makro,  mikro,  Fe-EDTA, dan  vitamin  yang  ditambahkan  sukrosa, aquades,  dan  agar.  Takaran  media  untuk perbanyakan  planlet,  induksi  kalus,  dan induksi  embrio  berbeda  konsentrasi  sesuai dengan  berpa  banyak  volume  media  yang ingin  digunakan.  Planlet  yang  sudah  ada  di sub kultur dengan tujuan untuk perbanyakan  sesuai  dengan  jumlah  planlet yang akan dijadikan eksplan penelitian. Sub kultur  planlet  dilakukan  dalam  LAF  yang sebelumnya  telah  disterilkan  dengan lampu UV  selama  1  jam.  Setiap  botol  dapat ditanam sebanyak 8-10 eksplan, lalu ditutup dengan plastic dan dirapatkan dengan karet gelang dan diletakkan pada ruang inkubasi. Pada tahap induksi kalus, ekpslan potongan ruas  tanpa  nodus  masing-masing  ditanam pada  botol  kultur  dan  di  subkultur  setiap  2 minggu  sekali  agar  nutrisi  media  tetap terjaga. Kalus yang terbentuk pada tahapan sebelumnya  yang  remah  dan  berwarna bening kekuningan dipindahkan pada media induksi  embrio  somatik  secara  aseptik. Eksplan diinkubasi pada ruangan steril pada suhu  18-21ºC.  Eksplan  diamati  dan  di subkultur  setiap  2  minggu  sekali  hingga terbentuk  embrio  somatik.  Pemeliharaan dilakukan dengan cara jika media terkontaminasi  dan  eksplan  masih  belum terkena  kontaminasi  tersebut  langsung dipindah  pada  media  yang  baru.  Langkah pemeliharaan yang lain adalah dengan cara
melakukan sterilisasi ruangan dengan menyemprotkan  desinfektan  ke  seluruh ruangan inkubasi. Pengamatan dilakukan untuk mendapatkan  data  kualitatif  dan  kuantitatif terhadap  petumbuhan  dan  perkembangan embrio  somatik  kentang  pada  beberapa taraf  konsentrasi  BA  dalam  media  MS. Pengamatan  dilakukan  setiap  hari  selang satu  hari  setelah  inokulasi  sampai  eksplan berumur  8  minggu  setelah  inokulasi  (MSI). Parameter pengamatan yang diamati meliputi  persentase  eksplan  yang  hidup, mati,  dan  terkontaminasi,  persentase  kalus yang  menjadi  embrio,  waktu  muncul  akar dan  tunas  pada  setiap  perlakuan,  serta jumlah  akar  dan  tunas  yang  berhasil terbentuk pada setiap eksplan. Analisa data menggunakan analysis  of  varian (ANOVA) dilakukan untuk menguji pengaruh pemberian konsentrasi BA terhadap pertumbuhan embrio somatik pada tanaman kentang  varietas  Atlantik  dan  Granola Transgenik.  Apabila  terjadi  pengaruh  nyata pada  perlakuan  maka  dilakukan  dengan  uji BNJ pada taraf 5%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Persentase  Eksplan  Hidup,  Mati,  dan Terkontaminasi
Induksi  kalus  merupakan  tahap  awal dari  penelitian  ini.  Bagian  tanaman  yang digunakan pada penelitian ini adalah batang tanaman  kentang  varietas  Atlantik  dan Granola Transgenik. Batang tersebut diinokulasi pada media MS dengan konsentrasi 2,4-D sebanyak 0,5ppm dengan tujuan  agar  terbentuk  kalus.  Seelah  kalus terbentuk  eksplan  dipindahkan  pada  media pendewasaan yang bertujuan utnuk perkembangan  dari  struktur  kalus  yang globular membentuk kotiledon dan primordial  akar.  Hasil  pengamatan  pada parameter  persentase  jumlah  eksplan  yang hidup didapatkan bahwa persentase tertinggi  eksplan  yang  hidup  adalah  pada perlakuan  varietas  Atlantik  dan  Granola Transgenik  dengna  konsentrasi  BA  yang diberikan sebanyak 1ppm, tingkat persentase  yang  didapatkan  adalah  100%. namun  pada  salah  satu  perlakuan  terdapat eksplan  yang  mati  karena  browning.
Yolanda Retno Nandika Viola, etal.: Pengaruh Konsentrasi BA Terhadap Pembentukan Embrio..
Lengkong (2009) menyatakan bahwa pencoklatan  jaringan  terjadi  karena  aktivasi enzim  oksidase  dan  tirosinase.  Hasil pengamatan  yang  didapatkan  menunjukan bahwa  perlakuan  yang  diberikan  tidak berpengaruh  terhadap  jumlah  eksplan  yang mati.  Pada  data  yang  didapatkan  diketahui bahwa  dari  semua  perlakuan,  hanya  1 eksplan  yang  mengalami  kematian  akibat browning  yakni  pada  perlakuan  varietas Atlantik  dengan  konsentrasi  BA  0,5ppm. Kematian  eksplan  yang  terjadi  disebabkan karena beberapa faktor antara lain kemunduran fisiologis eksplan dan kematian  sel  karena  alat  inokulasi  yang terlalu  panas  dan  eksplan  mengalami browning.  Pengamatan  dilakukan  juga untuk mengetahui eksplan yang terkontaminasi. Hasil pengamatan menunjukkan  bahwa  terdapat  beberapa eksplan  yang  terkontaminasi  antara  lain pada  perlakuan  AK 0, BK 0, BK 1, dan  BK 4, dimana  pada  masing-masing  perlakuan yang  terkontaminasi  tersebut  menunjukkan persentase  sebanyak  17%.  Eksplan  yang terkontaminasi  tersebut  akibat  dari  jamur dan  bakteri.  Eksplan  yang  terkontaminasi akibat  jamur  dicirikan  dengan  adanya serabut halus yang muncul pada permukaan  media  di  sekitar  eksplan  yang setiap waktu terus berkembang membentuk koloni yang nantinya akan menutupi semua bagian eksplan sehingga eksplan tidak bisa berkembang lagi dan akhirnya mati. Sedangkan  eksplan  yang  terkontaminasi akibat  bakteri  dicirikan  dengan  adanya lendir dan bercak keruh berpola pada media di  sekitar  eksplan  yang  terserang.  Sumber kontaminasi  eksplan  dapat  berasal  dari eskplan  tumbuhan,  organisme  kecil  yang masuk  ke  dalam  media,  alat  yang  tidak steril dan lingkungan kerja yang yang kotor, sehingga harus dilakukan sterilisasi lingkungan  kerja,  alat-alat,  media  dan bahan tanaman (Gunawan, 1988).
Penampang  eksplan  yang  hidup/  segar,
mati  karena  browning,  dan  terkontaminasi akibat  jamur  dan  bakteri  dapat  dilihat  pada Gambar 1.

## Jumlah Kalus Membentuk Embrio
Sel-sel  embriogenik  yang  terinduksi pada media yang digunakan ternyata dapat terus  menerus  tumbuh  dan  berkembang membentuk embrio somatik. Beberapa hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  pada  tahap pembentukan  embrio  somatik  adalah  tahap yang  paling  sulit  dan  pada  tahap  ini  sering digunakan auksin pada konsentrasi rendah. Faktor  yang  penting  dalam  induksi  dan perkembangan embriogenesis somatik adalah  komposisi  zat  pengatur  tumbuh pada  media  kultur.  Konsentrasi  antara auksin  dan  sitokinin  harus  tepat  agar  dapat menghasilkan embrio somatik pada eksplan tersebut. Hasil induksi embrio somatik pada penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  adanya pengaruh  nyata  dari  perlakuan  yang diberikan.  Menurut  hasil  pengamatan  yang dilakukan didapatkan bahwa respon varietas  Atlantik  terhadap  pemberian  BA 1ppm  menghasilkan  embrio  paling  banyak dibandingkan  pemberian  BA  yang  lainnya Sedangkan pada perlakuan dengan varietas Granola Transgenik dengan konsentrasi BA tidak  memberikan  respon  yang  berbeda (Tabel 1). Hal tersebut dikarenakan konsentrasi  BA  yang  digunakan  untuk membentuk  embrio  pada  eksplan  harus sesuai.  Selain  itu,  diduga  perbandingan rasio  yang  digunakan  antara  auksin  dan sitokinin  yang  terdapat  pada  eksplan  tidak seimbang  sehingga  eksplan  mengalami pertumbuhan  yang  lambat.  Hal  tersebut sesuai dengan yang dikemukakan Sikder et al., (2006) bahwa penggunaan media dasar dan  penambahan  zat  pengatur  tumbuh dengan  jenis  dan  konsentrasi  yang  tepat dapat  menginduksi  pembentukan  embrio somatik.

## 14
Yolanda Retno Nandika Viola, etal.: Pengaruh Konsentrasi BA Terhadap Pembentukan Embrio..
Gambar 1 Kondisi Eksplan Selama Pengamatan
Keterangan:  (a)  Eksplan  hidup,  (b)  Eksplan        browning,  (c)  Eksplan  terkontaminasi  jamur,(d)  Eksplan terkontaminasi bakteri
Tabel 1 Jumlah Embrio yang Terbentuk pada Semua Perlakuan
Perlakuan Jumlah Embrio Atlantik + BA 0 ppm (AK0) 3,7 a Atlantik + BA 0,5 ppm (AK1) 3,2 a Atlantik + BA 1 ppm (AK2) 6,2 b Atlantik + BA 1,5 ppm (AK3) 3,0 a Atlantik + BA 2 ppm (AK4) 3,8 a Granola Transgenik + BA 0 ppm (BK0) 2,5 a Granola Transgenik + BA 0,5 ppm (BK1) 2,8 a Granola Transgenik + BA 1 ppm (BK2) 4,7 ab Granola Transgenik + BA 1,5 ppm (BK3) 2,5 a Granola Transgenik + BA 2 ppm (BK4) 2,0 a BNJ 5% 2.88
Keterangan: angka- angka yang diikuti dengan huruf yang berbeda menunjukkan berbeda nyata pada uji BNJ 5%.

## Waktu Muncul Akar dan Tunas
Pada  perkembangannya  beberapa eksplan  dari  berbagai  perlakuan  yang menghasilkan  kalus  embriogenik  mampu beregenerasi  membentuk  organ  tanaman dan  juga  planlet  yang  utuh  dan  lengkap. Pada  tahap  ini  sel  somatik  yang  telah terbentuk  mampu  berkembang  menjadi embrio  somatik  hingga  mencapai  tahap torpedo setelah melalui beberapa perubahan  morfologi.  Embrio  somatik  pada tahap ini akan mengalami proses pemanjangan dan penonjolan membentuk 2 kutub  (bipolar)  yang  berlawanan,  yang masing-masing kutub tersebut akan membentuk bakal tunas dan dan bakal akar
(Kalimuthu et  al., 2007).  Pada  penelitian ini didapatkan  hasil  bahwa  respon  eksplan perlakuan varietas Atlantik dengan konsentrasi BA sebanyak 0ppm  merupakan eksplan  yang  paling  lama  memunculkan akar  dibandingkan  dengan  perlakuan  yang lainnya  (Tabel  2).  Sedangakan  respon  dari varietas Granola Transgenik terhadap pemberian BA sebanyak 1,5ppm merupakan  perlakuan  yang  paling  lama memunculkan  akar  dibandingkan  dengan perlakuan lainnya. Sedangkan hasil pengamatan  menunjukkan  bahwa  tidak adanya  pengaruh  nyata  terhadap  waktu munculnya  tunas  pada  semua  eksplan (Tabel 3).
Yolanda Retno Nandika Viola, etal.: Pengaruh Konsentrasi BA Terhadap Pembentukan Embrio..

## Tabel 2 Rerata Eksplan saat Muncul Akar
Perlakuan Saat Muncul Akar (HSI) Atlantik + BA 0 ppm (AK0) 19,3 d Atlantik + BA 0,5ppm (AK1) 6,7 ab Atlantik + BA 1 ppm (AK2) 5,7 ab Atlantik + BA 1,5 ppm (AK3) 7,7 ab Atlantik + BA 2 ppm (AK4) 8,2 bc Granola Transgenik + BA 0 ppm (BK0) 8,5 c Granola Transgenik + BA 0,5 ppm (BK1) 5,7 ab Granola Transgenik + BA 1 ppm (BK2) 4,5 a Granola Transgenik + BA 1,5 ppm (BK3) 18,5 cd Granola Transgenik + BA 2 ppm (BK4) 6,5 ab BNJ 5% 3,5
Keterangan: Bilangan yang didampingi huruf yang sama menunjukkan tidak berbeda nyata berdasarkan uji lanjut BNJ 5%; HSI: Hari setelah inokulasi.
Tabel 3 Rerata Muncul Tunas pada Semua Perlakuan Perlakuan Saat Muncul Tunas (HSI) Atlantik + BA 0 ppm (AK0) 9,3 Atlantik + BA 0,5 ppm (AK1) 5,8 Atlantik + BA 1 ppm (AK2) 8,7 Atlantik + BA 1,5 ppm (AK3) 9,2 Atlantik + BA 2 ppm (AK4) 9,7 Granola Transgenik + BA 0 ppm (BK0) 9,5 Granola Transgenik + BA 0,5 ppm (BK1) 8,0 Granola Transgenik + BA 1 ppm (BK2) 10,3 Granola Transgenik + BA 1,5 ppm (BK3) 13,2 Granola Transgenik + BA 2 ppm (BK3) 9,7 tn
Keterangan:  angka  yang  diikuti  dengan  huruf  yang  sama  tidak  berbeda  nyata  berdasarkan  uji  lanjut  BNJ
5%.
Jumlah Organ Akar dan Tunas Eksplan Akar dan tunas yang mampu terinisiasi,  tetap  diamati  hingga  akhir pengamatan  untuk  mengetahui  jumlah  akar dan tunas yang terbentuk sehingga menjadi planlet.  Dari  hasil  analisis  ragam,  respon dari varietas Atlantik dengan pemberian BA sebanyak 1ppm pada umur 14 HSI memiliki jumlah  akar  paling  banyak  dibandingkan dengan perlakuan yang lainnya, sedangkan respon  dari  varietas  Granola  Transgenik terhadap BA sebanyak 1ppm juga menghasilkan jumlah akar terbanyak dibandingkan dengan perlakuan yang lainnya.  Beberapa  eksplan  juga  tidak  dapat memunculkan akar dikarenakan terdapat
eksplan  yang  mati  sehingga  sel  eksplan tersebut  sudah  tidak  dapat  tumbuh  (Tabel 4).    Jumlah  tunas  yang  terbentuk  juga diamati  setiap  minggu  sampai  pada  akhir pengamatan  yakni  8  MSI.  Dalam  kultur jaringan  jumlah  tunas  dapat  diindikasikan sebagai  keberhasilan  dalam  multiplikasi. Berdasarkan  hasil  analisis ragam,  diketahui bahwa  konsentrasi  BA  yang  diberikan berpengaruh  nyata  terhadap  jumlah  tunas yang  muncul.  Jumlah  tunas  yang  paling banyak  tumbuh  adalah  respon  dari  eksplan perlakuan varietas Atlantik dengan konsentrasi BA sebanyak 1ppm dibandingkan dengan beberapa konsentrasi

## 16
Yolanda Retno Nandika Viola, etal.: Pengaruh Konsentrasi BA Terhadap Pembentukan Embrio..
BA  yang  lainnya,  pada  respon  varietas Granola Transgenik dengan konsentrasi BA 1ppm  juga  menghasilkan  jumlah  tunas terbanyak  dibandingkan  dengan  respon perlakuan  yang  lainnya.  Hal  tersebut  sama dengan  eksplan  yang  memiliki  jumlah  akar yang  paling banyak (Tabel  5).  Diduga  yang menyebabkan jumlah tunas yang dihasilkan oleh  eksplan  sedikit  karena  konsentrasi sitokinin (BA) yang sangat rendah, sehingga
eksplan  tersebut  tidak  mampu  untuk menginisiasi tunas dan pertumbuhan eksplan menjadi sangat lambat. Hal tersebut sesuai dengan pernyataan Hijmans (2001)  bahwa  konsentrasi  sitokinin  yang lebih tinggi dibandingkan dengan konsentrasi auksin akan memacu multiplikasi tunas. Tabel 4 Rata-rata Jumlah Akar pada Semua Perlakuan
Umur Pengamatan Jumlah Akar (HSI) Perlakuan 7 HSI 14 HSI 21 HSI 28 HSI Atlantik + BA 0 ppm (AK0) 0,0 a 0,0 a 2,0 ab 2,0 ab Atlantik + BA 0,5 ppm (AK1) 0,2 ab 0,8 a 1,5 a 1,8 a Atlantik + BA 1 ppm (AK2) 0,8 bc 3,2 d 3,8 c 4,5 c Atlantik + BA 1,5 ppm (AK3) 0,2 ab 1,0 bc 1,5 a 1,7 a Atlantik + BA 2 ppm (AK4) 0,3 ab 0,8 a 2,0 ab 2,2 ab Granola Transgenik + BA 0 ppm (BK0) 0,2 ab 1,0 bc 1,5 a 1,8 a Granola Transgenik + BA 0,5 ppm(BK1) 0,7 ab 1,2 bc 1,8 ab 1,8 a Granola Transgenik + BA 1 ppm (BK2) 1,5 c 1,7 c 3,3 bc 3,8 bc Granola Transgenik + BA 1,5 ppm(BK3) 0,0 a 0,0 a 1,8 ab 1,8 a Granola Transgenik + BA 2 ppm (BK4) 0,2 ab 1,0 bc 1,5 a 1,7 a BNJ 5% 0,745 0,79 1,56 1,93
Keterangan:  angka-angka  yang  didampingi  dengan  huruf  yang  berbeda  pada  kolom  yang  sama meunjukkan berbeda nyata pada uji BNJ 5%; HSI: hari setelah inokulasi.
Tabel 5 Jumlah Tunas yang Muncul pada Eksplan Semua Perlakuan Perlakuan Jumlah Tunas Atlantik + BA 0 ppm (AK0) 2,0 ab Atlantik + BA 0,5 ppm (AK1) 1,8 a Atlantik + BA 1 ppm (AK2) 4,5 c Atlantik + BA 1,5 ppm (AK3) 1,7 a Atlantik + BA 2 ppm (AK4) 2,2 ab Granola Transgenik + BA 0 ppm (BK0) 1,8 a Granola Transgenik + BA 0,5 ppm (BK1) 1,8 a Granola Transgenik + BA 1 ppm (BK2) 3,8 bc Granola Transgenik + BA 1,5 ppm (BK3) 1,8 a Granola Transgenik + BA 2 ppm (BK4) 1,7 a BNJ 5% 1,93
Keterangan:  Angka-angka  yang  diikuti  huruf  yang  berbeda  pada  kolom  yang  sama  menunjukkan  berbeda nyata pada uji BNJ 5%.

## Sari, dkk, Pengaruh Jumlah Potongan …

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat disimpulkan bahwa terdapat interaksi antara konsentrasi  BA  dengan  varietas  terhadap pembentukan embrio somatik pada tanaman  kentang.  BA  yang  paling  optimum untuk  menginduksi  embrio  somatic  kentang ( Solanum  tuberosum L.)  pada  konsentrasi 1ppm.  Eksplan  yang  paling  potensial  untuk mengahsilkan embrio somatik pada tanaman  kentang  dengan  pemberian  BA adalah varietas Atlantik.

## DAFTAR PUSTAKA
Gunawan, L.U. 1988. Teknik kultur jaringan tumbuhan. Laboratorium Kultur Jaringan Tumbuhan. PAU Bioteknologi. Institut Pertanian Bogor.
Hal 304.
Hijmans, R. 2001. Global distribution of the potato  crop. American  Journal  of Potato Research .78(6): 403 –412. Kalimuthu, K., M. Saravanakumar, and R. Senthilkumar. 2007. In vitro micropropagation  of Musa  sapientum L. (Cavendish Dwarf). African Journal of Biotechnology . 6(9):1106-1109.
Litz,  R.E  and  D.J.  Gray.  1995. Somatic embryogenesis for agriculture
improvement. World Journal Microbiol And Biotech. 11(2):416 – 425. Lengkong, E. F. 2009. Regenerasi tanaman melalui embryogenesis
somatic  pada  kentang  unggul  lokal
superjohn  asal  Minahasa  Selatan. Jurnal FORMAS . 2(4):244-249. Menneses,  A.,  Flores,  D.,  Munoz,  M., Arriesta  dan  Espinosa. 2005. Effect of  2,4-D,  Hydric  Stress  and  Light  on Indica  Rice  Somatic  Embryogenesis.
Journal Biology . 53 (3): 361-368.
Ortega-Baes,  P.,  M.  Rojas-Arechiga.
2007. Seed germination of Trichocereus terscheckii (Cactaceae): light, temperature and gibberellic acid effects. Journal of Arid Environments . 69(1):169-176.
Purnamaningsih,  R.  2006. Induksi  Kalus dan  Optimasi  Regenerasi  Empat Varietas  Padi  Melalui  Kultur In  Vitro . Journal Agrobiogen. 2(2): 74-80. Rosliani,  R.,  N.  Sumarni,  dan  Suwandi. 1998 .  Pengaruh  sumber  dan  dosis pupuk  N,  P,  dan  K  pada  tanaman kentang. Jurnal  Hortikultura .  6(1): 988-999.
Sikder,  H.  B.,  Kumar,  P.,  Abdullah,  M., Raihan,  A.,  dan  Rahman,  M.  2006. In  vitro  Regeneration  of  Aromatic Rice  ( Oriza  sativa) . International Journal  of  Agriculture  and  Biology. 8 (6): 759-762.
Smith, O. 1968. Potato: Production, Storing and  Processing.  The  Avil.  London. Hal 16-22.
Williams, E. G. and G. Maheswaran. 1986. Somatic embryogenesis: Factors
influencing  coordinated  behavior  of cells  as  an  embryogenic  group. Journal Botanical . 57 (7): 443-462. Mengetahui, Pembimbing Utama
Prof. Dr. Ir. Tatik Wardiyati, MS. NIP. 194602011977012001