PENGARUH METODE PENGERINGAN TERHADAP KADAR FLAVONOID DAUN SESEWANUA ( Clerodendron squamatum Vahl.)
Jeremi Jelio Hohakay 1) , Julius Pontoh 2) , Adithya Yudistira 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado,
2) Program Studi Kimia FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Glorybower  (Clerodendron  squamatum  Vahl.)  have  been  empirically  used  to  treat  fevers, fractures,  and  swelling-reduction.  Glorybower  leaves  contain  flavonoids  and  alkaloids which  can  be  potential  as  antioxidants.  The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the effect  of  the  drying  method  in  determining  the  levels  of  flavonoids  in  glorybower  leaves (Clerodendron  squamatum  Vahl.).  Extraction  of  leaves  using  the  maceration  method. Determination of flavonoid content was using UV-Vis Spectrophotometer method with the principle  of  AlCl 3 .  From  the  results  obtained,  the  samples  that  had  the  highest  to  lowest flavonoid content were fresh samples which were 12 mg/ g extracts, 40 o C samples were 7,8 mg/ g extract, air-dried samples were 7,2 mg / g extracts and 60 o C samples which were 6,2 mg/ g extracts. Data analysis using one-way ANOVA method and the results obtained are Fcount = 9,709661639 and Ftable = 4,066180551. From these results, it can be concluded that  Fcount  is  greater  than  Ftable.  So  that  it  can  be  seen  that  there  is  a  significant influence between the existing drying methods.
Keywords :  Clerodendron  squamatum  Vahl, Drying  Method,  Extraction,  Flavonoids,  UV Vis Spectrophotometer

## ABSTRAK
Sesewanua  ( Clerodendron  squamatum Vahl.)  secara  empiris  telah  digunakan  untuk mengobati  demam,  patah  tulang,  dan  penurun  bengkak.  Daun  sesewanua  mengandung flavonoid  dan  alkaloid  yang  dapat  berpotensi  sebagai  antioksidan.  Tujuan  penelitian  ini adalah  untuk  mengetahui  pengaruh  metode  pengeringan  dalam  penetapan  kadar  flavonoid pada  daun  sesewanua  ( Clerodendron  squamatum Vahl.).  Ekstraksi  daun  sesewanua menggunakan  metode  maserasi.  Penetapan  kadar  flavonoid  menggunakan  metode Spektrofotometer  UV-Vis  dengan prinsip AlCl 3 . Dari hasil  yang didapatkan,  sampel  yang memiliki  kadar  flavonoid  tertinggi  sampai  terendah  adalah  sampel  segar  yaitu  12  mg/g ekstrak,  sampel  40 o C  yaitu  7,8  mg/g  ekstrak,  sampel  keringanginkan  yaitu  7,2  mg/g ekstrak, dan sampel 60 o C yaitu 6,2 mg/g ekstrak. Analisis data menggunakan metode anova satu  jalur  dan  didapatkan  hasil  yaitu  F  hitung=  9,709661639  serta  F  tabel  =4,066180551. Dari hasil tersebut, dapat ditarik kesimpulan bahwa F hitung lebih besar dari pada F tabel. Sehingga  dapat  dilihat  bahwa  terjadi  pengaruh  yang  cukup  signifikan  antara  metode pengeringan yang ada.
Kata Kunci: Clerodendron squamatum Vahl., Metode Pengeringan, Ekstraksi, Flavonoid, Spektrofotometer UV-Vis

## PENDAHULUAN
Sesewanua ( Clerodendron squamatum Vahl.)  secara  empiris  telah digunakan  oleh  masyarakat  di  beberapa daerah  di  Sulawesi  Utara  khususnya  di wilayah  Minahasa  untuk  mengobati demam,  patah  tulang,  dan  penurun bengkak.  Daun  sesewanua  mengandung flavonoid  dan  alkaloid  yang  dapat berpotensi
sebagai antioksidan
(Huliselan, 2015). Pengeringan  mempunyai  pengertian yaitu  aplikasi  pemanasan  melalui  kondisi yang teratur, sehingga dapat menghilangkan  sebagian  besar  air  dalam suatu  bahan  dengan  cara  diuapkan (Muarif, 2013).
Ekstraksi  merupakan  suatu  proses pemisahan dua atau lebih komponen yang diinginkan  dari  suatu  bahan  yang  berasal dari  tumbuhan  atau  hewan  dengan menggunakan pelarut tertentu yang mampu  melarutkan  komponen  tersebut. Penggunaan pelarut dalam  mengekstraksi suatu  sampel  harus  didasari  pada  prinsip like  dissolves  like,  yaitu  senyawa  yang bersifat  polar  cenderung  larut  dalam pelarut  yang  polar  sedangkan  senyawa- senyawa non-polar cenderung larut dalam pelarut non-polar(Suryanto,2012).
Flavonoid merupakan senyawa polifenol sehingga bersifat kimia senyawa fenol  yaitu  agak  asam  dan  dapat  larut dalam  basa,  dan  karena  merupakan senyawa  polihidroksi  (Gugus  Hidroksil) maka  juga  bersifat  polar  sehingga  dapat larut  dalan  pelarut  polar  seperti  metanol, etanol,  aseton,  air,  butanol,  dimetil sulfoksida, dimetil formamida.
Disamping  itu  dengan  adanya  gugus glikosida  yang  terikat  pada  gugus flavonoid sehingga cenderung
menyebabkan  flavonoid  mudah  larut dalam air. (Harbone, 1987) Spektrofotometer merupakan alat yang  digunakan  untuk  mengukur  energi secara relatif jika energi tersebut ditransmisikan, direfleksikan, dan diemisikan  sebagai  fungsi  dari  spektrum dengan  panjang  gelombang  tertentu,  dan fotometer  adalah  alat  pengukur  intensitas cahaya  yang  ditransmisikan  atau  yang  di absorbsi (Khopkar, 2002).

## METODOLOGI PENELITIAN

## Alat
Alat-alat yang digunakan ialah
masker,  sarung  tangan,  gunting,  pisau, corong, seperangkat alat oven
(Memmert®), timbangan analitik (Mettler
Toledo tipe PL 303), alat spektrofotometer UV– Visibel (Shimadzu®    1240),  spatula,  alat-alat
gelas ( pyrex ) .

## Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan  ialah daun sesewanua ( Clerodendron squamatum Vahl.), etanol 96%, kuersetin, alumunium  (III)  klorida,  asam  asetat  dan aquades.

## Bentuk penelitian
Penelitian ini dilakukan secara eksperimental, dengan cara melihat pengaruh  metode  pengeringan  terhadap
penetapan kadar flavonoid daun
sesewanua.

## Prosedur Kerja Pengambilan sampel
Sampel  daun  sesewanua  diambil  dari daerah  Kecamatan  Malalayang,  Kota Manado.

## Preparasi sampel
Daun  sesewanua  segar  dicuci  di  air mengalir  dan  ditiriskan,  kemudian  dibagi menjadi  empat  bagian.  Bagian  pertama berupa sampel segar diekstraksi langsung dengan  etanol  96%  (Sampel  I).  Bagian kedua  dikeringanginkan  dalam  udara terbuka  pada  suhu  ±  25 o C  sampai  kadar air  <  10%  (Sampel  II).  Bagian  ketiga dikeringkan  dalam  oven  pada  suhu  ± 40 o C  sampai  kadar  air  <  10%  (Sampel III),  bagian  keempat  dikeringkan  dalam oven  pada  suhu  ±  60 o C  sampai  kadar  air < 10% (Sampel IV).

## Pembuatan ekstrak daun sesewanua
Ekstraksi
dilakukan
dengan menimbang  sampel  I  sebanyak  1,150  kg, sampel  II  sebanyak  150  g,  sampel  III sebanyak 200 g, sampel IV sebanyak 175 g  dan  masing-masing  direndam  dengan 1000 mL etanol 96 % selama 3 × 24 jam, lalu  disaring  dengan  kertas  saring  (filtrat 1).  Ampas  dari  sampel  diekstraksi  lagi dengan  750  mL  etanol  96  %  selama  2  × 24 jam, lalu disaring dengan kertas saring (filtrat  2).  Ampas  tersebut  direndam  lagi dengan  500  mL  etanol  96  %  selama  1  × 24 jam lalu disaring dengan kertas saring (filtrat  3).  Ketiga  filtrat  dari  tiap  sampel digabung lalu diuapkan dengan oven pada suhu 40 o C sampai kental.
Penentuan panjang gelombang maksimum Sebanyak 51,1 mg kuersetin
ditimbang  dan  dilarutkan  dalam  50  mL etanol p.a sebagai larutan stok 1000 ppm.
Larutan stok diambil sebanyak 1 mL lalu, ditambahkan  1  mL  aluminium  (III) klorida  10  %,  asam  asetat  1  M..  Diukur serapan dengan
spektrofotometer ultraviolet  pada  panjang  gelombang  300- 600  nm  dengan  menggunakan  blangko etanol absolut p.a .

## Pengenceran larutan standar kuersetin
Pengenceran  kuersetin  dibuat  dalam beberapa konsentrasi, diantaranya konsentrasi 5 ppm, 7,5 ppm, 10 ppm, 12,5 ppm  dan    15  ppm,    ditambahkan  1  mL aluminium (III) klorida 10%, asam asetat 1  M,  diukur  absorbansinya  pada  panjang gelombang 415 nm.

## Pembuatan kurva baku kuersetin
Kurva  baku  dibuat  dengan  cara menghubungkan titik-titik absorbansi dari masing-masing konsentrasi larutan standar  kuersetin  yang  diperoleh  dari pengukuran dengan menggunakan spektrofotometri  UV-Vis  pada  panjang gelombang 415 nm.
Penetapan kadar Flavanoid total dalam ekstrak
Sebanyak    5  mg  sampel  ditimbang dan  dilarutkan  dalam  10  mL    ethanol  p.a sebagai  konsentrasi  500  ppm.  Lalu dipipet  1  mL  kemudian  ditambahkan  1
Tabel 1. Hasil pengeringan sampel
mL aluminium  (III)  klorida 10 %, 1 mL asam  asetat  1  M.  Setelah  itu  diinkubasi selama  30  menit,  absorbansi  diukur menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis pada  panjang  gelombang    maksimum. Larutan  sampel  dibuat  dalam    tiga  kali replikasi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada  penelitian  ini,  sampel  yang digunakan ialah daun sesewanua (Clerodendron  squamatum  Vahl.).  Daun sesewanua dibagi dalam empat perlakukan  yaitu  sampel  segar  (1)  yang langsung dimaserasi, sampel yang dikering  anginkan  (2),  pengeringan  pada 40 o C  (3)  dan  pengeringan  pada  60 o C (Tabel  1).  Perlakuan  ini  dilakukan  untuk melihat  pengaruh  cara  pengeringan  pada penetapan kadar flavonoid.
Pada metode pengeringan yang
dilakukan  dapat  dilihat  bahwa  pada  berat sampel  basah  yang  sama  dengan  berat 1,150  kg  tetapi  menghasilkan  berat sampel kering yang berbeda-beda.
Menurut  Muarif  (2013),  perbedaan  suhu sekitar dapat mempengaruhi berat sampel kering,  karena  semakin  tinggi  suhu semakin  banyak  uap  air  yang  dapat ditampung  oleh  udara  tersebut  sebelum terjadi kejenuhan.
Pada  pengeringan  oven  yaitu  suhu 40 o C dan 60 o C , berat sampel kering pada suhu 60 o C lebih sedikit dikarenakan suhu tinggi  lebih  cepat  mengambil  air  dari bahan.
Ekstraksi yang dilakukan pada penelitian ini adalah maserasi, dikarenakan  maseri  adalah  cara  ekstraksi yang cukup sederhana dikarenakan hanya membutuhkan  wadah  perendam  dan prosesnya relatif mudah. Menurut Suryanto (2012), penambahan  pelarut  pada  suatu  bahan harus didasarkan pada sifat kelarutan dari pelarut  yang  digunakan  dan  sifat  dari komponen yang akan dilarutkan. Senyawa-senyawa  yang  bersifat  polar, cenderung  larut  dalam  pelarut  polar sedangkan senyawa-senyawa yang bersifat  non-polar  cenderung  larut  dalam pelarut  non-polar.  Hal  ini  seusai  dengan prinsip  like  dissolves  like.  Berdasarkan prinsip  tersebut,  dikarenakan  senyawa yang  diekstraksi  adalah  flavonoid    yang bersifat  polar  sehingga  pelarut  yang digunakan adalah etanol 96% dikarenakan etanol bersifat polar. Untuk mendapatkan ekstrak,
dilakukan  dengan  cara  diuapkan  pada oven  pada  suhu  40 o C  dengan  ekstrak yang didapatkan adalah ekstrak kental. Nomor Sampel Perlakuan Lama Pengeringan Berat Sampel Basah Berat Sampel Kering I II III IV Segar Keringanginkan(KA) Oven 40 o C Oven 60 o C - 14 hari 5 hari 5 hari 1,150 kg 1,150 kg 1,150 kg 1,150 kg - 150 g 200 g 175 g
Gambar 2. Panjang gelombang maksimum kuersetin
Berat  ekstrak  yang  didapatkan  pada proses  ekstraksi  dapat  dilihat  pada  Tabel 2.
Tabel 2. Hasil ekstraksi sampel
Perlakuan Berat Sampel Berat Esktrak Segar KA Oven 40 o C Oven 60 o C 1,150 kg 150 g 200 g 175 g 36 g 57 g 63 g 75 g Pada penelitian ini dilakukan penentuan panjang gelombang maksimum  untuk  mengetahui  absorbansi senyawa yang dibaca oleh spektrofotometer  uv-vis  secara  optimum. Prinsip penetapan kadar flavonoid metode aluminium klorida adalah terjadinyapembentukan  kompleks  antara aluminium  klorida  dengan  gugus  keto pada  atom  C-4  dan  gugus  hidroksi  pada atom C-3 atau   C-5 yang bertetangga dari golongan  flavon  dan  flavonol  (Gambar
1).
Gambar  1.  Pembentukan  senyawa  AlCl 3 dan Kuersetin
Senyawa  yang  digunakan  sebagai standar  pada  penetapan  kadar  flavonoid ini  adalah  kuersetin,  karena  kuersetin merupakan  flavonoid  golongan  flavonol yang memiliki gugus keto pada atom C-4 dan  juga  gugus  hidroksil  pada  atom  C-3 dan  C-5  yang  bertetangga  (Azizah  et  al, 2014).
Panjang gelombang maksimum dibaca  pada  rentang  300-600  nm.  Dari hasil yang didapatkan,
panjang gelombang  maksimum  kuersetin  adalah 415 nm dengan absorbansi 0,875 (Gambar 2).
y = 0.0438x + 0.2072 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1 0 2 4 6 8 10 12 14 16 Abs o rba ns i Konsentrasi
Larutan  standar  kuersetin  dibuat dalam 5 ppm, 7,5 ppm, 10 ppm, 12,5 ppm dan  15  ppm.  Berbagai  konsentrasi  dibuat dikarenakan pada penetapan kadar digunakan persamaan kurva baku, sehingga  untuk  membuat  kurva  baku dibuat terlebih dahulu beberapa konsentrasi dengan tujuan untuk mendapatkan  persamaan  linear  yang dapat digunakan untuk menghitung jumlah kadar flavonoid. Pada pengukuran panjang  gelombang  kuersetin,  panjang gelombang dibaca pada 415 nm.
Hasil  nilai  absorbansi  kuersetin  dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Nilai absorbansi kuersetin
sebagai pembanding Konsentrasi Absorbansi 5 ppm 7,5 ppm 10 ppm 12,5 ppm 15 ppm 0,425 0,542 0,648 0,738 0,875
Setelah  didapatkan  nilai  absorbansi dari kuersetin, selanjutnya dihitung persamaan menggunakan Microsoft Excel sehingga  didapatkan  persamaan        y  = 0.0438x + 0.2072 (Gambar 3).
Gambar 3. Persamaan regresi kuersetin
Untuk pengujian
flavonoid,
ditambahkan alumunium klorida , dengan tujuan mereduksi senyawa flavonoid yang terdapat  dalam  sampel  tersebut  sehingga menimbulkan  reaksi  warna  kuning  yang merupakan  ciri  adanya  flavonoid  pada sampel. Dan pada penambahan alumunium  klorida  pada  sampel,  dilihat bahwa  terjadi  reaksi  pada  sampel  yaitu sampel  menjadi  warna  kuning  yang menandakan  sampel  tersebut  terdapat flavonoid.
Sampel  yang  memiliki  kandungan flavonoid  tertinggi  sampai  terendah adalah  sampel  segar  12  mg/g  ekstrak, sampel  oven  40 o C  7,8  mg/g  ekstrak, sampel kering anginkan 7,2 mg/g ekstrak, dan sampel oven 60 o C 6,2 mg/g ekstrak. Kemudian dilakukan pengukuran panjang  gelombang  dari  sampel  daun sesewanua  ( Clerodendron  squamatum Vahl.)  dibaca  pada  panjang  gelombang 415 nm.
Nilai  absorbansi  dan  total  flavonoid pada  daun  sesewanua  ( Clerodendron squamatum Vahl.)  dapat  dlihat  dalam tabel 4.
Dari  hasil  total  flavonoid  tersebut, dapat  dibandingkan  dengan  penelitian lainnya terkait dengan kandungan flavonoid total dari beberapa sampel daun yang dapat dilihat pada tabel 5.
Hasil  tersebut  dapat  dibandingan dengan  kandungan  flavonoid  total  yang didapat  pada  daun  sesewanua,  dimana tidak  berbeda  jauh  kandungan  flavonoid total  antara  kandungan  flavonoid  daun diatas  dan  kandungan  flavonoid  total sampel  daun  sesewanua.  Ini  menandakan bahwa kandungan flavonoid daun sesewanua  sebanding  dengan  penelitian yang  dilakukan  oleh  Agbo et  al (2015),
Arya et al (2019) dan Zhao et al (2018). Sampel segar merupakan sampel yang paling  tinggi  kandungan  total  flavonoid dikarenakan  sampel  segar  masih  belum terjadi  penguraian  kandungan  flavonoid, sehingga  interaksi  sampel  segar  dan pelarut  cukup  besar  menarik  flavonoid. Hasil  ini  tidak  berbeda  jauh  dengan penelitian  yang  dilakukan  oleh  Sukrasno et  al  (2011),  bahwa  kandungan  total flavonoid pada daun segar berkisar 14,61 mg/g. Metode Pengeringan Absorbansi Kandungan Flavonoid Total (mg/g ekstrak) Pengulangan I II III Sampel Segar 0,469 0,483 0,493 12 Keringanginkan 0,367 0,364 0,371 7,2 Oven 40 o C 0,384 0,387 0,367 7,8 Oven 60 o C 0,340 0,341 0,359 6,2
Tabel 4. Nilai absorbansi dan total flavonoid pada daun sesewanua ( Clerodendron squamatum Vahl.)
Sampel  40 o C  merupakan  sampel tertinggi kedua yang memiliki kandungan total  flavonoid.  Ini  disebabkan  sampel masih stabil pada suhu 40 o C sebagaimana penelitian  yang dilakukan oleh Rivai dkk (2010). Sampel kering anginkan merupakan  sampel  tertinggi  ketiga  yang memiliki  kandungan  total  flavonoid.
Faktor-faktor yang
mempengaruhi kandungan  flavonoid  pada  sampel  kering anginkan adalah keadaan tempat pengeringan kurang terjamin kebersihannya, karena dilakukan di
tempat yang terbuka sehingga kemungkinan telah
terkontaminasi dengan  mikroba.  Menurut  Rachmawan (2001)  pengeringan  secara  alami  yaitu kering  anginkan  sangat  dipengaruhi  oleh suhu  udara  serta  kelembaban.  Apabila suhu  tinggi  maka  kelembaban  udara semakin  rendah,  sehingga  kemampuan udara  untuk  menangkap  uap  air  dari bahan yang dikeringkan semakin meningkat  atau  sebaliknya.  Pada  metode kering anginkan ini, dilakukan pada suhu ruangan  sehingga  kemampuan  udara untuk menangkap uap air dari bahan yang dikeringkan  sedikit  berjalan  lambat  serta memerlukan  waktu  yang  cukup  lama sehingga sampel tersebut
telah mengalami penguraian senyawa kimia.
Sampel 60 o C merupakan sampel yang memiliki  kandungan  total  flavonoid terendah.  Ini  dikarenakan  sampel  telah terjadi  reaksi  oksidasi  yang  memutus ikatan  rangkap  karbon  terkonjugasi,  hal ini  disebabkan  oleh  adanya  panas  yang mengalir (Susiani dkk, 2017).
Pada  penelitian  yang  dilakukan  oleh Sukrasno et  al (2011),  pada  pengeringan daun suhu 40 o C memilik kadar flavonoid total  yang  terbaik,  sedangkan  suhu  60 o C terjadi  penurunan  kadar  flavonoid  total. Pada  penelitian  yang  dilakukan  oleh Sharma et  al (2014)  dengan  melihat pengaruh pengeringan terhadap kandungan  flavonoid  total  dari  varietas bawang,  metode  pengeringan  yang  ada mempengaruhi kandungan flavonoid pada sampel.  Pengeringan  pada  suhu  yang tinggi menyebabkan kandungan flavonoid menurun. Ini disebabkan karena pada suhu yang tinggi, flavonoid telah mengalami  degradasi.  Menurut  Syafrida (2018),  semakin  tinggi  suhu  yang digunakan  dalam  proses  pengeringan maka semakin menurun kandungan flavonoid pada sampel. Kandungan flavonoid  mengalami  penurunan  seiring dengan  peningkatan  dan  tingginya  suhu yang  digunkaan  sehingga  terjadinya dekomposisi  fenol  yang  berpengaruh pada kandungan flavonoid. Sampel Kandungan Flavonoid Total (mg/g ekstrak) Referensi Daun giring landak Agbo et al (2015) Daun gondola merah 6,97 Aryal et al (2019) Daun mulberry 8,61 Zhao et al (2018)
Tabel 5. Perbandingan kandungan flavonoid total beberapa sampel daun
Flavonoid merupakan golongan polifenol  dengan  struktur  dasar  fenol yang  memiliki  sifat  mudah  teroksidasi dan sensitif terhadap panas sehingga suhu pengeringan mempengaruhi
kadar flavonoid.
Setelah  didapatkan  total  flavonoid, kemudian dilakukan analisis data menggunakan  metode  anova  satu  jalur dan  didapatkan  hasil  yaitu  F  hitung= 9,709661639 serta F tabel =4,066180551. Dari hasil tersebut, dapat ditarik kesimpulan  bahwa  F  hitung  lebih  besar dari  pada  F  tabel.  Dapat  dilihat  bahwa terjadi  perbedaan  yang  cukup  signifikan antara sampel satu  dan sampel  yang lain. Sehingga  dapat  dikatakan  bahwa  metode pengeringan  sangat  berpengaruh  pada kadar flavonoid suatu sampel.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  yang  didapatkan, sampel  segar  merupakan  sampel  yang memiliki kadar flavonoid tertinggi, diikuti  sampel  oven  40 o C,  kemudian sampel kering anginkan dan sampel oven 60 o C serta terdapat perbedaan yang cukup signifikan  antara  sampel  satu  dan  sampel lainnya.  Sehingga  dapat  disimpulkan bahwa metode pengeringan dapat berpengaruh  pada  kadar  flavonoid  yang didapatkan.

## SARAN
Perlu  adanya  penelitian  lebih  lanjut untuk metode-metode
pengeringan lainnya  untuk  melihat  pengaruh  metode pengeringan pada kadar flavonoid sampel.

## DAFTAR PUSTAKA
Agbo,M.O., P.F.Uzor., 2015. U.N.Akazie-  Nneji., C.U.Eze Odurukwe., U.B. Ogbatue., dan    E.C.Mbaoji.  Antioxidant Total  Phenolic  and  Flavonoid Content of Selected Nigerian Medicinal Plants. Journal  Pharmacy  Science .  14
(1).
Aryal,S.,M.K.Baniya.,K. Danekhu., P.Kunwar,. R. Gurung.,  dan N. Koirala. 2019. Total  Phenolic
Content, Flavonoid Content  and Antioxidant  Potential  of  Wild Vegetables  from  Western  Nepal. Plants.
Azizah,  D.,  E.  Kumolowati.,  dan  F.
Faramayuda. 2014 Penetapan Kadar  Flavonoid  Metode  AlCl 3 Pada Ekstrak  Metanol Kulit Buah Kakao ( Theobroma cacao L.). Jurnal Ilmiah Farmasi . 2 (2).
Harbone. 1987. Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis. ITB press, Bandung. Huliselan,Y.M., M.R.J. Runtuwene., D.S.Wewengkang., 2015. Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Etanol,  Etil Asetat,  dan  N-Heksan  Dari  Daun Sesewanua (Clerodendron Squamatum Vahl.) Jurnal Pharmacon . 4 (3).
Khopkar,  S.  M.  2002. Konsep  Dasar Kimia  Analitik. Diterjemahkan oleh Saptohardjo, A. Universitas Indonesia,  Jakarta. Muarif.  2013. Rancang  Bangun  Alat Pengering . Politeknik  Negeri Sriwijaya, Palembang.
Rachmawan. 2001. Prinsip Dasar
Pengeringan .  Jurusan  Teknologi
Industri IPB, Bogor. Rivai,H.,H.Nurdin.,  H.  Suyani.,  dan A.Bakhtiar.,  2015.  Pengaruh  Cara Pengeringan  Terhadap Perolehan Ekstraktif, Kadar Senyawa  Fenolat  dan  Aktivitas Antioksidan Dari Daun ( Gynura Pseudochina (L.) Dc.) Majalah  Obat  Tradisional . 15(1). Sharma,  K.,  E.Y.Ko.,  A.D.  Assefa.,  S. Ha., S.H. Nile.,  E.T.  Lee., dan S.W.Park. 2015 Temperature-dependent Studies on The Total Phenolics, Flavonoids, Antioxidants Activities,  and Sugar Content  in
Six Onion Varieties. Journal  of Food and Drug Analysis . 23.
Sukrasno.,  I. Fidriany., K. Anggadiredja.,
W.A.  Handayani., dan K. Anam. 2011.  Influence of Drying Method on Flavonoid  Content of Cosmos caudatus (Kunth)
Leaves. Research  Journal  of
Medicinal Plant . 5 (2).
Suryanto, E. 2012. Fitokimia Antioksidan .
Putra  Media Nusantara, Surabaya. Susiani,E.F.,  A.  Guntarti.,    dan  K. Kintoko. 2017. Pengaruh Suhu Pengeringan Terhadap Kadar  Flavonoid  Total  Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing ( Orthosiphon  Aristatus (BL)Miq). Journal  pf  Pharmacscientech. 02 (01).
Syafrida, M., S. Darmanti., dan M. Izzati. 2018.  Pengaruh Suhu Pengeringan Terhadap Kadar  Air,  Kadar  Flavonoid  dan Aktivitas  Antioksidan  Daun  dan
Umbi  Rumput  Teki  ( Cyperus rotundus L.). Bioma . 1 (20).
Zhao,J.G., & Y.Q. Zhang. 2018. A Novel
Estimation Method of Total Flavonoids  in  Edible  Medicinal Mulberry  Leaves  by  Ultrasound assisted Hydroalcohol-acid Extraction and HPLC-DAD. Journal of Applied Botany  and Food Quality. 91.