Pengolahan Limbah Padat Tapioka Menjadi Etanol dengan Menggunakan Aspergillus niger , Bacillus licheniformis dan Saccharomyces cerevisiae, A. Rinanti et al., JTL Vol. 7 No. 1 Juni 2015, 17 - 23

## PENGOLAHAN LIMBAH PADAT TAPIOKA MENJADI ETANOL
DENGAN MENGGUNAKAN Aspergillus niger , Bacillus licheniformis

## DAN Saccharomyces cerevisiae
Astri Nugroho, Edison Effendi, Tika Novaria
Jurusan Teknik Lingkungan, FALTL, Universitas Trisakti, Jl Kyai Tapa No.1, Jakarta 11440, Indonesia

## astririnanti@trisakti.ac.id

## Abstrak
Limbah padat tapioka merupakan hasil samping dari pengolahan tepung tapioka berupa ampas dan banyak mengandung  karbohidrat  yang  dapat  dikembangkan  manfaatnya  dengan  cara  mengolah  limbah  tersebut melalui  proses  hidrolisis  asam  dan  fermentasi.  Penelitian  ini  bertujuan  mengetahui  nilai  C/N  sebagai  cara untuk mengetahui laju dekomposisi bahan organik dan mengetahui kadar etanol yang dihasilkan dari proses hidrolisis  dan  fermentasi  pada  limbah  padat  tapioka.  Hidrolisis  dilakukan  dengan  menggunakan  1.5%  1M H 2 SO 4 .  Fermentasi  dilakukan  dengan  variasi  mikroorganisme  10%  dan  20%  secara mixed  culture menggunakan Bacillus  licheniformis , Aspergillus  niger dan Saccharomyces  cerevisiae pada  limbah  padat tapioka  50  gr,  100  gr,  150  gr  dan  200  gr.  Kadar  etanol  tertinggi  pada  variasi  mikroorganisme  10%  terjadi pada substrat 50 gr jam ke-120 yaitu 4.40% dengan jumlah mikroorganisme 2.29x10 17 koloni/ml, pH = 4.60, nilai C/N = 36.43 Pada variasi mikroorganisme 20%, kadar etanol tertinggi terjadi pada substrat 50 gr jam ke-120 yaitu 3.26%, jumlah mikroorganisme 1.82x10 17 koloni/ml,             pH = 3.70,  nilai C/N= 49.33. Nilai kinetika pada limbah padat tapioka 50 gr, µ = 0.003206 – 0.009712 1/jam, µ m = 0.00006120 /jam, Ks = 1036.78 mg/1, Y = 23.79, q = 0.000135 – 0.000408 1/jam, Y T = 23.79 /jam,               Y obs = 1.8147 – 5.4977 /jam dan Kd = 0.0323 – 0.0388 /jam. Nilai kinetika pada mixed culture 20% pada limbah padat tapioka 50 gr, µ = 0.001818 – 0.008016 1/jam, µ m =0.00004288/jam, K s= 965.94 mg/1, Y = 7.27, q = 0.000250 – 0.001103 1/jam,  Y T = 7.27 /jam, Y obs = 0.0961 – 0.4235  /jam dan Kd = 0.1296 – 0.1358 /jam.
Kata  kunci:  Limbah  padat  tapioka,  Bioethanol,  Fermentasi, Aspergillus  niger , Bacillus  licheniformis , Saccharomyces cerevisiae

## Abstract
Tapioca  Waste  Treatment  becoming  Ethanol  using Aspergillus  niger , Bacillus  licheniformis and Saccharomyces  cerevisiae . Tapioca  solid  waste  is  a  by  product  of  processing  waste  in  the  form  of  tapioca flour  and  a  lot  of  carbohydrates  that  can  be  developed  in  a  way  beneficial  to  process  waste  through  the process of acid hydrolysis and fermentation. This study aims to know the value of C/N as a way to know the rate of decomposition of organic materials and know the level of ethanol produced from the hydrolysis and fermentation  processes  on  solid  waste  of  tapioca.  Hydrolysis  carried  out  by  using  1.5%  1M  H 2 SO 4 . Fermentation  of  microorganisms  is  done  by  variation  10%  and  20%  in mixed  culture with Bacillus licheniformis , Aspergillus  niger and Saccharomyces  cerevisiae in  solid  waste  tapioca  50  gr,  100  gr,  150  gr and  200  gr.  The  highest  ethanol  content  in  microorganisms  variation  occurs  in  10%  50  g  substrate  to  120 hours is 4.40% with the number of microorganisms 2.2910 17 colony/ml, pH = 4.60, the value of C/N = 36.43. In a variation of microorganisms 20%, the highest ethanol content occurs in the substrate     50 grams to 120 hours is 3.26%, the number of microorganisms 1.82x10 17 colony/ml, pH = 3.70, the value of       C/N = 49.33. Value of the kinetics of solid waste 50 gr tapioca, µ = 0.003206 – 0.009712 1/hour, µ m =0.00006120/hour, Ks = 1036.78 mg/1, Y = 23.79, q = 0.000135 – 0.000408 1/hour, Y T = 23.79 /hour,   Y obs = 1.8147 – 5.4977 /hour
Pengolahan Limbah Padat Tapioka Menjadi Etanol dengan Menggunakan Aspergillus niger , Bacillus licheniformis dan Saccharomyces cerevisiae, A. Rinanti et al., JTL Vol. 7 No. 1 Juni 2015, 17 - 23
and  Kd  =  0.0323  –  0.0388  /hour.  Value  of  the  kinetics  of mixed  culture at  20%  solids  50  g  tapioca, µ = 0.001818 – 0.008016 1/hour, µ m = 0.00004288/hour, K s= 965.94 mg/1, Y = 7.27, q = 0.000250 – 0.001103 1/hour,Y T = 7.27 /hour,   Y obs = 0.0961 – 0.4235  /hour and Kd = 0.1296 – 0.1358 /hour.
Keywords  :  Solid  Waste  Of  Tapioca,  Bioethanol,  Fermentation, Aspergillus  niger , Bacillus  licheniformis , Saccharomyces cerevisiae

## 1. Pendahuluan
Di  Indonesia,  singkong  atau  tapioka merupakan  bahan  pangan  yang  banyak diproduksi  dan  termasuk  sebagai  negara penghasil  singkong  terbesar  ketiga (13.300.000 ton). Berdasarkan data Ditjen Tanaman  Pangan  Departemen  Pertanian tahun  2007,  produksi  singkong  adalah 18,9  juta  ton.  Pada  proses  pengolahan singkong menjadi tepung tapioka dihasilkan limbah padat tapioka (onggok) sekitar  2/3  bagian  atau  sekitar  75%  dari bahan  mentahnya  dengan  kandungan karbohidrat  singkong  mencapai  72,49%-
85,99%  (Asngad,  2005).  Menurut  hasil pengamatan  yang  dilakukan  di  Sekolah Menengah  Analisis  Kimia,  Bogor  pada onggok PT. Naga Mas Lestari, Cibinong, Bogor  nutrisi  kandungannya  adalah  : 40.40  %  karbohidrat,  21.33%  protein, 1.09  %  lemak,  1.67%  abu,10.38  %  air. Onggok merupakan bahan sumber energi yang  mempunyai  kadar  protein  kasar rendah, tetapi kaya akan karbohidrat yang mudah dicerna bagi ternak.
Dalam  rangka  upaya  mengurangi  limbah padat  yang  dihasilkan  dari  industri tapioka  dan  agar  dapat  dimanfaatkan kembali  serta  bernilai  lebih  ekonomis, limbah  padat  tapioka  dapat  dijadikan salah  satu  bahan  baku  sebagai  bioetanol. Etanol  dikenal  sebagai  bahan  pelarut, bahan anti septik, bahan baku pembuatan eter, minuman dan bahan bakar alternatif pengganti bensin.
Proses bioetanol dengan bahan baku yang mengandung  pati  atau  karbohidrat dilakukan  melalui  proses  konversi karbohidrat  menjadi  glukosa.  Selain  dari bahan  baku  tanaman  yang  mengandung pati atau karbohidrat, bioetanol juga dapat diproduksi  dari  bahan  tanaman  yang mengandung  selulosa.  Limbah  padat tapioka  mempunyai  potensial  untuk dimanfaatkan dalam menghasilkan etanol karena mengandung                 selulosa (24.99%  w/w),  hemiselulosa  (6.67% w/w)  dan strach (61%  w/w)  (Fungsin, 2007).
Untuk  memproduksi  bioetanol  dari material  selulosa  diperlukan  proses hidrolisis yang bertujuan untuk memecah selulosa  dan  hemiselulosa  menjadi monosakarida  (glukosa  &  xylosa)  yang selanjutnya  difermentasi  menjadi  etanol. Secara  umum  teknik  hidrolisis  dibagi menjadi  dua  yaitu  hidrolisis  asam  dan hidrolisis  dengan  enzim.  Hidrolisis  asam dapat  dilakukan  dengan  menambahkan H 2 SO 4 atau  HCl.  Hidrolisis  pati  dengan asam memerlukan suhu tinggi yaitu 120- 160ºC.
Aspergillus  niger merupakan  mikroba mesofilik , suhu maksimum pertumbuhan 35-37°C  dan  pH  =  2.0-8.5  tetapi pertumbuhan  akan  lebih  baik  pada kondisi  pH  yang  rendah. Aspergillus niger menghasilkan  enzim  amilase  yang dapat menguraikan pati (amilum) menjadi glukosa  (Susanti  dkk,  2008). Bacillus licheniformis bakteri  anaerobik  fakultatif
Pengolahan Limbah Padat Tapioka Menjadi Etanol dengan Menggunakan Aspergillus niger , Bacillus licheniformis dan Saccharomyces cerevisiae, A. Rinanti et al., JTL Vol. 7 No. 1 Juni 2015, 17 - 23
dengan  suhu  optimum  =  50-55 0 C,  suhu minimumnya    15°C  menghasilkan  enzim α -amilase  yang  mampu  menghidrolisis molekul  pati  menjadi                          molekul yang  lebih  sederhana  seperti  dekstrin,
maltosa,  dan  glukosa. Saccharomyces cerevisiae dengan kisaran pH pertumbuhan  =  1.5-8.5.  Namun    lebih cocok  tumbuh  pada  kondisi  asam,  yaitu 4-4.5  dan  suhu  yang  cocok      =  28-35 o C
(Chonvatana, 2008). Saccharomyces cerevisiae biasa  digunakan  dalam batch fermentation untuk  mengubah  gula menjadi etanol Fermentasi  adalah  peruraian  senyawa organik  menjadi  senyawa  sederhana dengan bantuan mikroorganisme sehingga  menghasilkan  energi.  Glukosa yang  merupakan  gula  paling  sederhana, melalui  fermentasi  akan  menghasilkan etanol.
Dengan persamaan reaksi gula :
C 6 H 12 O 6 → 2C 2 H 5 OH + 2CO 2 +  2 ATP
Secara  teori  100  gram  glukosa  akan menghasilkan  51.4  gram  etanol  dan  48.8 gram CO 2 (Bagder, 2002)
2. Metode
Alat. Fermentor,  Piknometer,  Alat destilasi. Cawan petri. Refraktrometer. Bahan . Limbah padat tapioka (PT. Naga Mas  Lestari,  Cibinong,  Bogor),  Aquades steril,  Medium  padat  NA  dan  PDA, Medium cair NB dan DB, Untuk analisis N total diperlukan batu didih, HgO, K 2 SO 4 , indikator Phenol Pthalein, NaOH, Na 2 S 2 O 3 , H 3 BO 3 , H 2 SO 4 .
Penelitian ini menggunakan limbah padat tapioka dengan variasi konsentrasi massa yang  akan  diujikan  yaitu  50  gr,100  gr,
150  gr,  200  gr.  Berikut  adalah  tahapan yang dilakukan pada penelitian ini :

## Hidrolisis dan Netralisasi Asam
• Hidrolisis  bertujuan  untuk  memecah selulosa  dan  hemiselulosa  menjadi monosakarida (glukosa)
• Limbah  padat  tapioka  ditambahkan aquades  dengan  perbandingan  1:4 (b/v)
• Pada  larutan  ditambahkan  1.5  %  1  M H 2 SO 4
• Kemudian  dipanaskan  pada  suhu 120°C selama 30 menit
• Hasil  hidrolisis  ditambahkan  1  M NaOH  yang  dimaksudkan  untuk menjaga  kondisi  pH  pada  proses fermentasi

## Fermentasi
• Hasil hidrolisis yang telah dinetralisasi dengan  1  M  NaOH,  dilanjutkan dengan proses fermentasi
• Fermentasi  dilakukan  pada  fermentor yang  bertujuan  menyediakan  kondisi lingkungan yang cocok bagi mikroorganisme yang ada di dalamnya.  Fermentor  berkapasitas  2 Liter dan diberi laju udara serta diaduk dengan mixer
• Mikroorganisme yang digunakan adalah Aspergillus  niger , Bacillus licheniformis dan Saccharomyces cerevisiae dengan  variasi  konsentrasi 10% dan 20%
• Fermentasi  dilakukan  selama  120  jam dengan  pengambilan  sampling  setiap 12 jam dan dilakukan pada suhu kamar
• Analisis  yang  dilakukan  pada  tahap fermentasi  adalah  derajat  keasaman (pH), nilai C/N, kadar gula dan jumlah mikroorganisme
Pengolahan Limbah Padat Tapioka Menjadi Etanol dengan Menggunakan Aspergillus niger , Bacillus licheniformis dan Saccharomyces cerevisiae, A. Rinanti et al., JTL Vol. 7 No. 1 Juni 2015, 17 - 23

## Destilasi
• Unit destilasi berfungsi untuk memisahkan  etanol  dari  cairan  lain khususnya air.
• Titik didih etanol pada suhu 78°C lalu proses  destilasi  ini  berlanjut    dengan mengalirkan  uap  zat  cair  melalui kondensor  lalu  hasilnya  ditampung dalam wadah
Analisis  sampel  dilakukan  pengukuran kadar  etanol  dengan  metode specific gravity ,  pengukuran  terhadap  C organik secara  gravimetri,  pengukuran  N total dengan  metode  Kjedahl,  pengukuran kadar  Gula  dengan  Refraktrometer, jumlah  biomassa  dengan Total  Plate
Count (TPC).

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Pertumbuhan Mikroorganisme ditentukan  dengan  perhitungan Total Plate Count
(A)

## (B)
Keterangan: A = variasi mikroorganisme 10% B = variasi mikroorganisme 20%
Gambar 1. Kurva Pertumbuhan Mikroorganisme
Pada Gambar 1. dapat terlihat pertumbuhan  mikroorganisme.  Pada  jam 0-12,  mengalami  fase  lag  dengan penurunan  jumlah  mikroorganisme.  Hal ini disebabkan mikroorganisme menyesuaikan  diri  terhadap  lingkungan baru  dan  kultur  yang  dipindahkan  dari medium  kaya  nutrien  ke  medium  yang kandungan  nutriennya  terbatas  hingga adanya  mikroorganisme  yang  mati.  Pada jam ke 12-48, mikroorganisme mengalami  fase  eksponensial,  dimana jumlah mikroorganisme mulai meningkat. Fase  eksponensial  ditandai  dengan kecepatan sel membelah diri paling cepat dengan  waktu  generasi  pendek  dan konstan. Setelah fase eksponensial, terjadi fase stasioner pada jam ke 48-72 dimana populasi  sel  mencapai  maksimum  dan tidak  bertambah  lagi  (Thontowi,  2007), namun  populasi  masih  aktif  secara metabolik  untuk  memproduksi  metabolit sekunder  (Thontowi,  2007).  Setelah  itu terjadi  fase  kematian  pada  jam  72-120 yang  disebabkan  adanya  perubahan kondisi  lingkungan  seperti  hilangnya sumber nutrien dan adanya hasil buangan metabolisme yang bersifat toksik terhadap pertumbuhan mikroorganisme.
Derajat keasaman (pH) merupakan satu diantara  beberapa  faktor  penting  yang mampu  mempengaruhi  proses  pada fermentasi. (A) 1E+17 2E+17 3E+17 0 12 24 36 48 72 96 120 ko lo ni /m l waktu (jam) 10% 50 gr 10% 100 gr 10% 150 gr 10% 200 gr 9E+16 1.9E+17 2.9E+17 0 12 24 36 48 72 96 120 ko lo ni /m l waktu (jam) 20% 50 gr 20% 100 gr 20% 150 gr 20% 200 gr 4.5 5 5.5 0 12 24 36 48 72 96 120 pH waktu (jam) 10% 50 gr 10% 100 gr 10% 150 gr
10% 200 gr
Pengolahan Limbah Padat Tapioka Menjadi Etanol dengan Menggunakan Aspergillus niger , Bacillus licheniformis dan Saccharomyces cerevisiae, A. Rinanti et al., JTL Vol. 7 No. 1 Juni 2015, 17 - 23

## (B)
Keterangan: A = variasi mikroorganisme 10% B = variasi mikroorganisme 20%

## Gambar 2 . Kurva Perubahan Nilai pH
Selama  proses  fermentasi  pH  substrat cenderung mengalami perubahan. Hal ini disebabkan  adanya  pembentukan  asam organik sebagai salah satu uraian substrat (Abun,  2006).  Menurut  Sumanti  dkk (2003), penurunan nilai pH terjadi karena terbentuknya  asam-asam  organik  seperti asam piruvat, asam laktat dan asam asetat selama  proses  fermentasi.  Asam-asam tersebut dihasilkan dari pemecahan rantai karbon  dari  glukosa  dan  pelepasan  atom hydrogen.  Nilai  pH  pada  fermentasi limbah  padat  tapioka  berkisar  dari  5 hingga 3.
Nilai  C/N .  Karbon  (C)  merupakan sumber  energi  yang  dibutuhkan  selama proses  fermentasi  dan  unsur  N  juga diperlukan  pada  proses  fermentasi sebagai  sumber  pembentukan  komponen sel.
(A)

## (B)
Keterangan: A = variasi mikroorganisme 10% B = variasi mikroorganisme 20%
Gambar 3 . Kurva Perubahan Nilai C/N
Pada Gambar 3 dapat dilihat bahwa nilai C/N  mengalami  penurunan.  Penurunan nilai  C/N  disebabkan  karena  substrat mengalami  dekomposisi.  C organik dalam substrat  sebagai  sumber  makanan  bagi mikroorganisme  sehingga  jumlahnya berkurang.  Selain  itu  C organik juga  terurai menjadi  CO 2 ke  udara.  N total dalam substrat  mengalami  peningkatan  karena proses dekomposisi subtrat oleh mikroorganisme yang menghasilkan ammonia  dan  nitrogen,  sehingga  kadar N total meningkat.  Dengan  menurunnya kandungan  C organik dan  meningkatnya kandungan  N total maka  nilai  C/N mengalami penurunan.
Kadar  Gula. Analisis  terhadap  kadar gula dilakukan dengan menggunakan alat Refraktrometer.
(A)
3.5 4.1 4.7 5.3 0 12 24 36 48 72 96 120 pH waktu (jam) 20% 50 gr 20% 100 gr 20% 150 gr 20% 200 gr 30 120 210 300 0 12 24 36 48 72 96 120 C/ N waktu (jam) 10% 50 gr 10% 100 gr 10% 150 gr 10% 200 gr 0 100 200 300 0 12 24 36 48 72 96 120 C/ N waktu (jam) 20% 50 gr 20% 100 gr 20% 150 gr 20% 200 gr 0 2 4 6 8 0 12 24 36 48 72 96 120 K ad ar G ul a (%B ri x) waktu (jam) 10% 50 gr 10% 100 gr 10% 150 gr
10% 200 gr
Pengolahan Limbah Padat Tapioka Menjadi Etanol dengan Menggunakan Aspergillus niger , Bacillus licheniformis dan Saccharomyces cerevisiae, A. Rinanti et al., JTL Vol. 7 No. 1 Juni 2015, 17 - 23

## (B)
Keterangan: A = variasi mikroorganisme 10% B = variasi mikroorganisme 20%

## Gambar 4 . Kurva Perubahan Kadar Gula
Pada alat refraktrometer dihasilkan kadar gula  (sukrosa)  dengan  satuan  %Brix. Pada variasi mikroorganisme 10% dengan substrat  50  gr  dihasilkan  kadar  gula (sukrosa)  yaitu  1.8%  yang  artinya banyaknya  zat  terlarut  (sukrosa)   adalah 1.8%  m/m  atau  terdapat  1.8  gr  sukrosa dalam  100  gram  larutan.  Pada  waktu kandungan  pati  menurun,  kandungan sukrosa  akan  naik,  dan  sukrosa  yang terbentuk  akan  dipecah  menjadi  glukosa dan  fruktosa.  Glukosa  yang  terbentuk akan  digunakan  untuk  proses  respirasi atau diubah menjadi senyawa lain (Noor, 2007).
Kadar  Etanol .  penentuan  kadar  etanol menggunakan  metode specific  gravity dengan  mengukur  berat  jenis  larutan etanol menggunakan piknometer.
(A)
(B)
Keterangan: A = variasi mikroorganisme 10% B = variasi mikroorganisme 20%
Gambar 5 . Kurva Perubahan Kadar Etanol
Pada  Gambar  5.  dapat  dilihat  bahwa kadar etanol semakin meningkat dari hari ke hari. Kadar tertinggi didapat pada jam ke-120  dan  substrat  50  gr  baik  pada variasi  mikroorganisme  10%  maupun 20% yaitu 4.4% dan 3.26%. Kadar etanol dipengaruhi  waktu  fermentasi  (Putri, 2008).  Semakin  lama  waktu  yang digunakan  pada  proses  fermentasi  maka kesempatan  mikroba  untuk  memecah substrat semakin banyak dan sebaliknya.
Kinetika  Degradasi .  Nilai  parameter mixed  culture 10%  pada  limbah  padat tapioka      50 gr, nilai µ yang diperoleh berkisar  antara µ = 0.003206-0.009712 1/jam, dengan µ m = 0.00006210 /jam dan Ks = 1036.78 mg/1, Y = 23.79, q =  0.000135  –  0.000408  1/jam,  Y obs = 1.8147 – 5.4977 /jam,            Y T = 23.79
/jam dan Kd = 0.0323 – 0.0388 /jam. (A) 0 1 2 3 4 0 12 24 36 48 72 96 120 K ad ar G ul a (%B ri x) waktu (jam) 20% 50 gr 20% 100 gr 20% 150 gr 20% 200 gr 0 2 4 6 0 12 24 36 48 72 96 120 K ad ar E ta no l ( %) waktu (jam) 10% 50 gr 10% 100 gr 10% 150 gr 10% 200 gr 0 1 2 3 4 0 12 24 36 48 72 96 120 K ad ar E ta no l ( %) waktu (jam) 20% 50 gr 20% 100 gr 20% 150 gr 20% 200 gr y = -2E+07x + 16102 R ² = 0.0813 0 150 300 450 0.000950 0.000952 0.000954 0.000956 1/ µ 1/S
Pengolahan Limbah Padat Tapioka Menjadi Etanol dengan Menggunakan Aspergillus niger , Bacillus licheniformis dan Saccharomyces cerevisiae, A. Rinanti et al., JTL Vol. 7 No. 1 Juni 2015, 17 - 23
mikroorganisme  10%  maupun  20% yaitu 4.40% dan 3.26%.
3. Nilai  parameter mixed  culture 10% pada  limbah  padat  tapioka  50  gr, µ = 0.003206–0.009712 1/jam, µ m = 0.00006120  /jam, Ks =  1036.78 mg/1, Y =  23.79, q =  0.000135  – 0.000408  1/jam,  Y T =  23.79  /jam,
Y obs = 1.8147 – 5.4977 /jam dan Kd = 0.0323 – 0.0388 /jam.
4. Nilai  parameter mixed  culture 20% pada  limbah  padat  tapioka  50  gr, µ = 0.001818  –  0.008016  1/jam, µ m =  0.00004288/jam, Ks =  965.94 mg/1, Y =  7.27, q =  0.000250  – 0.001103 1/jam, Y T = 7.27 /jam, Y obs =  0.0961  –  0.4235  /jam  dan  Kd  = 0.1296 – 0.1358 /jam.
5. Nilai k tertinggi diperoleh pada berat limbah  padat  tapioka  50  gr  dengan penambahan konsentrasi mikroorganisme 20% sedangkan nilai k  terendah  diperoleh  pada  berat limbah  padat  200  gr  dengan konsentrasi mikroorganisme 20%

## DAFTAR PUSTAKA
[1]    Abun.  2006.  Makalah  Ilmiah  Bioproses Limbah  Udang  Windu  Melalui  Tahapan Deproteinasi  Dan  Demineralisasi  Terhadap Protein  Dan  Mineral  Terlarut.  Jurusan Nutrisi  Dan  Makanan  Ternak.  Fakultas Peternakan Universitas Padjadjaran Jatinangor [2]  Asngad,  Aminah.  2005. Perubahan  Kadar Protein  Pada  Fermentasi  Jerami  Padi Dengan Penambahan Onggok Untuk Makanan  Ternak .  Jurusan  Pendidikan Biologi  FKIP.Universitas  Muhammadiyah Surakarta. Jurnal  Penelitian  Sains  & Teknologi, Vol. 6, No. 1, 2005:          65 – 74
[3] Badger, P. C. 2002. Ethanol From Cellulose : A  General  Review .  Reprinted  From  Trends In New Crops And New Uses. ASHS Press, Alexandria, VA.
[4]  Chongvatana,  Dr.Piya.  2006. Cooling  System in  Ethanol  Plant  with  Starch  Base
Feedstock .  Patkol  Public  Co.,  Ltd.  348 Chalerm  Prakiat  Rama  9  Rd.,  Nongbon, Pravate,  Bangkok  10250,Thailand.  Ashare Journal 2007 – 2008.
[5]    Fungsin,  Budit  et  al.  2007. Conversion  of Waste  Into  Sugar  Using    Aspergillus  niger and  Trichoderma  reesei  for  Ethanol Production .  Thailand  Institute  of  Scientific and  Technological  Research  (TISTR). Thailand [6]  Noor,  Zulafa.  2007.  Perilaku  Selulase  Buah
Pisang Dalam Penyimpanan Udara Termodifikasi. STTNAS Yogyakarta.
Seminar  Nasional  Teknologi  2007  (SNT 2007) ISSN : 1978 – 9777
[7]  Putri,  Lily  Surayya  Eka.  Sukandar,  Dede. 2008. Konversi Pati Ganyong (Canna Edulis Ker.)  Menjadi  Bioetanol  Melalui  Hidrolisis Asam Dan Fermentas i.
[8] Sumanti, dkk. 2003. Laporan Penelitian Dasar Mempelajari  Mekanisme  Produksi  Minyak Sel  Tunggal  Dengan  Sistem  Fermentasi Padat  Pada  Media  Onggok-Ampas  Tahu Dengan  Menggunakan  Kapang Aspergillus terreus. Fakultas Pertanian. Universitas Padjadjaran
[9] Susanti, Evi. Fitria Fenis. Ariyanto, Makhrus. 2008 .  Komparasi  Teknik  Sakarifikasi  dan
Fermentasi Simultan (SFS) dengan Hidrolisis  dan  Fermentasi  Terpisah  (HFT) Pada  Pembuatan  Bioetanol  dari  Ubi  Jalar Putih  (Ipomoea  Batatas  L) .  Universitas Negeri Malang. Malang. [10]  Thontowi,  Ahmad.  Kusmiati.  Nuswantara, Sukma. 2007. Produksi ß-Glukan
Saccharomyces  cerevisiae  dalam  media Dengan Sumber Nitrogen Berbeda Pada Air- Lift Fermentor . Jurnal Biodiversitas Volume 8, Nomor 4 Halaman  253-256