## DYHYDROKAEMPFEROL-3- O -RAMNOSIDE FROM ETHYL ACETATE EXTRACT KI ENCOK ( Plumbago zeynalica L.) LEAVES
Nani Suryani 1 *, Euis Julaeha 2 , Tati Herlina 2
1 Program Studi Kimia, Fakultas Sains, Farmasi dan Kesehatan Universitas Mathla’ul Anwar 2 Departemen Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Padjadjaran
E-mail: nanisuryani7688@gmail.com
Received: 07 September 2020. Accepted: 21 Januari 2021. Published: 30 Januari 2021 DOI: 10.30870/educhemia.v6i1.9025
Abstract: Plumbago zeynalica L. plant belongs to the Plumbaginaceae family, which is spread as a weed in all tropical and sub-tropical countries, and its abundance is very high in Asia and Africa. P. zeynalica L.  plants  are  ethnopharmacologically  used  as  antitumor,  antioxidant, antimicrobial,  anticancer,  wound  healed,  and  anti-inflammatory.  This  study  aims  to  isolate secondary metabolites from the fraction of P. zeynalica L. leaf extracts with work stages that included  isolation  and  determination  of  chemical  structures  by  spectroscopy.  Based  on  the results of the separation and purification of the ethyl acetate fraction obtained isolates in the form  of  a  yellow  oil  suspected  as  a  flavonoid. The  chemical  structure  of  the  isolates  was identified based on UV-Vis spectroscopy data giving maximum absorption at λmax 339.60 nm and 278.80 nm, which are typical for dihydroflavonol. IR spectroscopy analysis of the isolates  provided  data  information  on  the  presence  of  aliphatic  OH,  C-H  groups,  carbonyl groups (C = O), C = C aromatic groups, and ether strain (C-O-C). NMR data showed that the isolate had the molecular formula of C 21 H 22 O 10 , and its molecular weight confirmed by MS spectrometer was obtained m/z 434. Isolates from this ethyl acetate fraction were suspected as dyhydrokaempferol-3- O -ramnoside or engeletin.
Keywords: Plumbago zeynalica; flavonoid; dyhydrokaempferol-3- O -rhamnoside; engeletin
Abstrak: Tumbuhan Plumbago zeynalica L. termasuk ke dalam famili Plumbaginaceae yang tersebar sebagai gulma di seluruh negara-negara tropis dan  sub tropis, dan kelimpahannya sangat tinggi di Asia dan Afrika. Tumbuhan P. zeynalica L. secara etnofarmakologi digunakan sebagai antitumor, antioksidan, antimikroba, antikanker, penyembuh luka dan antiinflamasi. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengisolasi  metabolit  sekunder  dari  fraksi  ekstrak  daun P. zeynalica L.  dengan  tahapan  kerja  meliputi  isolasi  dan  penentuan  struktur  kimia  dengan spektroskopi.  Berdasarkan  hasil  pemisahan  dan  pemurnian  dari  fraksi  etil  asetat  diperoleh isolat berbentuk minyak berwarna kuning yang diduga sebagai flavonoid. Struktur kimia isolat diidentifikasi berdasarkan data spektroskopi UV-Vis memberikan serapan  maksimum pada λ maks 339,60 dan 278,80 nm yang menunjukkan serapan yang khas untuk dihidroflavonol, data IR  diperoleh  informasi  keberadaan  gugus  OH,  C-H  alifatik,  gugus  karbonil  (C=O),  gugus aromatiK  C=C  dan  regang  eter  (C-O-C).  Data  NMR  menunjukan  isolat  memiliki  rumus molekul C 21 H 22 O 10 dan dikonfimasi berat molekulnya dengan spektrometer MS diperoleh m/z
434.  Isolat  dari  fraksi  etil  asetat  ini  diduga  sebagai  dihidrokaemferol-3- O -ramnosida  atau engeletin.
Kata kunci: Plumbago zeynalica; flavonoid; dihidrokaemferol-3- O -ramnosida; engeletin

## PENDAHULUAN
Plumbago  zeynalica termasuk  ke dalama  Famili  Plumbaginaceae,  dimana family  ini  memiliki  10  genus  dan  280 jenis.  Genus  Plumbago  mencakup  3 spesies,  yaitu,  yaitu Plumbago  indica L.
( P.  rosea L.), P.  capensis L.  ( P.
Auriculata L.) dan P. zeynalica L (Kapare, et  al.,  2020).  Di  Asia  Tenggara  tiga spesies  ini  kelimpahannya  sangat  tinggi dan  digunakan  sebagai  tanaman  obat tradisional secara turun temurun (Cong et al.,  2013).  Tiga  spesies  tumbuhan  ini dapat  dibedakan  dari  warna  bunganya. Bunga pada P. indica L. berwarna merah,
P. capensis L. berwarna biru sedangkan P. zeynalica L.  berwarna  putih  (Ganesan  &
Gani 2013).
Dalam pengobatan tradisional Ethiopia,  daun P.zeylanica digunakan untuk  pengobatan  beberapa  penyakit termasuk  sakit  usus,  penyakit  kulit, sebagai  antitumor,  antimikroba,  dan antioksidan (Beyene, et al., 2020), untuk obat  encok  atau  rematik,  masuk  angin, susah  buang  air  kecil,  dan  sakit  kepala. Akarnya secara empiris digunakan untuk mengobati  kurap  atau  gatal–gatal.  Selain
itu, tanaman ini juga dapat menghilangkan rasa sakit dan mampu mengobati penyakit kanker  darah.  Tanaman  ini  sudah  lama popular  di  Asia  dan  Afrika  sebagai  obat untuk menyembuhkan penyakit kulit yang disebabkan oleh parasit (Syahid & Nova, 2016).
P.  zeylanica mengandung  berbagai metabolit  sekunder  seperti  flavonoid, alkaloid, glikosida, saponin, steroid, tanin, triterpenoid,  kumarin,  senyawa  fenolik, dan  naftakuinon.  Naftakuinon  yang terkandung adalah plumbagin, citranon, 3- biplumbagin, kloroplumbagin, 5-metoksi- seselin,  santiletin,  suberosin.  Senyawa lainnya yang ada pada tanaman ini adalah asam plumbagin, β -sitosterol, 2,2-dimetil- 5-hidroksi-6-asetilkromen,  saponaretin, dan isoaffinetin. Diantara semua senyawa yang  terkandung  dalam  tumbuhan  ini, plumbagin adalah senyawa bioaktif yang paling tinggi (Roy & Bharadvaja 2017).
Tanaman P.zeynalica dikenal dengan senyawa  bioaktifnya  yaitu  plumbagin. Senyawa ini dilaporkan memiliki aktivitas antikarsinogenik,  antioksidan,  cardio- protektif, antimalaria, antijamur, antiaterosklerotik,  stimulasi  sistem  saraf
pusat,  antihiperglikemik,  dan  anti- inflamasi  (Dhalani et  al .,  2020).  Ekstrak etanolik  daun P.  zeylanica dilaporkan dapat  menghambat  pertumbuhan Ehrlich Ascites Carcinoma , dan juga mengurangi tingkat  peroksidasi  lipid  oleh  terpenoid dan  flavonoid  (Kapare, et  al., 2020).
Namun  belum  banyak  informasi  tentang metabolit  sekunder  dari  bagian  daun tumbuhan  ini,  sehingga  perlu  ditelusuri agar  bisa  dijadikan  sebagai  acuan  atau lead  compound yang  bisa  diaplikasikan dalam  berbagai  bidang,  salah  satunya adalah untuk kesehatan.

## METODE
Alat
Alat-alat  gelas  laboratorium, rotary eveporator ,  kolom  kromatogafi  berbagai ukuran,  alat  vakum,  bejana  kaca,  lampu UV Vilbert Luomart (λ 254 dan 365 nm), spektrometer  Infra  Merah  (Perkin  Elmer spectrum-100 FTIR), spektroskopi massa (TQD-ESI-UPLC-MS/MS Waters), resonansi  magnet  inti  (Spektrometer JEOL JNM ECA-500 1 H NMR 500 MHz,
13 C-NMR 125 MHz, HMBC dan HMQC), dan UV-Vis (Shimadzu UV-1800).

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  meliputi  daun  ki  encok ( P.zeynalica L.) dari perkebunan Manoko,
Lembang-Jawa  Barat,  pelarut n- heksana,
kloroform p.a, etil asetat, aseton, metanol, asam  sulfat  10%  dalam  etanol  dan alumunium  klorida 5%,  silika  gel  G60
(70-230 mesh), plat silika gel GF 254 .

## Cara Kerja
Daun P. zeynalica L.  (3,2  kg) dikeringkan dan dihaluskan menghasilkan serbuk  kering  (2,7  kg),  kemudian dimaserasi  dengan  metanol  selama  3x24 jam dan diperoleh ekstrak pekat methanol (235,59 g). Ekstrak pekat metanol (200 g) kemudian  dipartisi  dengan  air  dan n - heksana (1:1), diperoleh fraksi n -heksana pekat (112,46 g) dan fraksi air. Fraksi air tersebut kemudian diekstraksi lagi dengan menggunakan  etil  asetat,  dan  diperoleh fraksi etil asetat pekat (15,21 g).
Fraksi  etil  asetat  pekat  dipilih  untuk dilakukan  pemisahan  selanjutnya  karena dari penelitian sebelumnya menunjukkan aktivitas  antibakteri  yang  paling  kuat. Fraksi etil asetat (15 g) dipisahkan dengan menggunakan metode kromatografi kolom vakum dengan fasa diam silika gel G60 dan fasa gerak pelarut n -heksana, etil asetat, dan metanol yang dielusikan secara bertahap  dengan  gradien  10%  (v/v),  dan diperoleh 7 fraksi gabungan (EA.1-EA.7), yaitu EA.1 (225 mg); EA.2 (2,8 g); EA.3 (400  mg);  EA.4  (3,65  g);  EA.5  (2,4  g); EA.6 (1,02 g), dan EA7 (2,25 g).
Fraksi  EA.6  menunjukkan  noda berwarna  kuning  setelah  disemprot
dengan H 2 SO 4 10%, yang mengindikasikan adanya senyawa flavonoid.  Dugaan  tersebut  diperkuat dengan  analisis  KLT  menggunakan reagen penyemprot AlCl 3 5% menghasilkan  warna  kuning  di  bawah lampu  UV λ  365  yang  memperjelas dugaan senyawa flavonoid. Fraksi EA.6 (1 g) dipisahkan secara kromatografi kolom dengan fasa diam silika gel G60 (70-230 mesh), eluen kloroform : metanol dengan peningkatan kepolaran  5%, dan diperoleh lima  fraksi  gabungan  (EA6.1-EA6.5). Fraksi  EA6.3  (96  mg)  dilakukan pemisahan  kembali  dengan  kromatografi kolom  dengan  fasa  diam  yang  sama menggunakan pelarut kloroform : metanol dengan  peningkatan  kepolaran  0,1%  dan diperoleh lima fraksi gabungan (EA6.3.1- EA6.3.5). Pada fraksi EA6.3.3 dimurnikan  dengan  menggunakan  KLT preparatif dengan eluen kloroform:metanol  (7,5:2,5)  diperoleh  1 isolat. Isolat tersebut berbentuk minyak/ oily (16,3  mg)  berwarna  kuning dan menunjukkan pola noda tunggal pada kromatogram  KLT  dua  dimensi  dengan pelarut  kloroform:metanol  (7:3)  dan  etil asetat:metanol  (8:2).  Isolat  murni  ini dikarakterisasi  dengan  spektrofotometer UV-Vis, IR, NMR dan MS.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Penentuan struktur kimia isolat ekstrak etil asetat P. zeynalica L.
Senyawa  murni  yang  diperoleh  dari proses  isolasi  kemudian  ditentukan struktur kimianya dengan
mengidentifikasi  data  hasil  pengukuran spektrometer  ultra  violet,  spektrometer inframerah,  spektrometer  NMR  ( 1 H- NMR, 13 C-NMR,  HMBC,  HMQC), dan spektrometer Massa. Isolat berupa minyak berwarna  kuning.  Rumus  molekul ditetapkan sebagai C 21 H 22 O 10 berdasarkan hasil  dari  data    spektrum  massa  dengan m/z 433,1862  [M-H] - (mode  ion  negatif) (Gambar  1),  sehingga m/z isolat berdasarkan perhitungan
adalah
434,3863.  Isolat memiliki  11  derajat ketidakjenuhan.
Berdasarkan data pengukuran serapan UV  dari  isolat  dalam  pelarut    metanol (Gambar  2),  isolat  memberikan  serapan maksimum pada λ maks 339,60 (pita I) dan 278,80  nm  (pita  II)    yang  menunjukkan serapan yang khas untuk dihidroflavonol. Spektra    dari    flavon    dan    flavonol memperlihatkan  dua  puncak  utama  pada daerah    240-400    nm.    flavonol menunjukkan  dua  pita  serapan  utama, dimana  Pita  I  (320–385  nm)  mewakili absorpsi oleh cincin B, sedangkan pita II (250-285  nm)  berhubungan  dengan absorpsi  pada  cincin  A.  Pita  I
menunjukkan absorbsi yang sesuai untuk cincin    B    sinamoil,    sedang    pita    II
berhubungan  absorbsi  cincin  A  benzoil (Kumar & Pandey 2013).
Gambar 1. Spektrum Massa Isolat
Gambar 2. Spektrum UV isolat dengan pelarut metanol ( A ), dengan penambahan pereaksi penggeser NaOH ( B ), AlCl 3 ( C ) dan AlCl 3 + HCl ( D )
m/z = 433,1862 nm. 200.00 250.00 300.00 350.00 400.00 Ab s. 2.300 2.000 1.500 1.000 0.500 0.000 2 1 4 3 2 1 nm. 200.00 250.00 300.00 350.00 400.00 Ab s. 1.300 1.000 0.500 0.000 2 1 4 3 2 1 nm. 200.00 250.00 300.00 350.00 400.00 A bs. 1.300 1.000 0.500 0.000 2 1 4 3 2 1 nm. 200.00 250.00 300.00 350.00 400.00 Ab s. 1.000 0.800 0.600 0.400 0.200 0.000 2 1 π – π * π – π * (B) (A) (C) (D)
Puncak  serapan  UV  untuk  isolat mengalami pergeseran batokromik akibat penambahan  pereaksi  penggeser,  salah satunya  adalah  NaOH.  Isolat  setelah penambahan
NaOH mengalami pergeseran sebesar 57,8 nm (λ maks 339 nm
menjadi 397,40 nm) pada pita I (cincin B) (Tabel  1)  yang  merupakan  pergeseran batokromik, pergeseran tersebut mengindikasikan  adanya  gugus  hidroksil pada karbon 4′ pada cincin B (Parveen & Ghalib 2012). Isolat dengan penambahan reagen  penggeser  AlCl 3 mengalami
pergeseran  batokromik  pada  pita  II sebesar  26,2  dan  dengan  penambahan AlCl 3 + HCl juga mengalami pergeseran batokromik  pada  kedua  pita  serapannya sebesar 60,2 (pita I λ maks 339 nm menjadi 342  nm  dan  pita  II  λ maks 278,80  nm menjadi  339  nm).  Reagen  AlCl 3 selanjutnya mengkonfirmasi adanya gugus OH bebas  pada C-5 dan C-3 yang diindikasikan  dengan  adanya  pergeseran batokromik pada pita1 (Parveen & Ghalib 2012).
Tabel 1. Spektrum Ultraviolet (UV) isolat
λ maks (nm) ε Isolat + NaOH + AlCl 3 + (AlCl 3 dan HCl) Pita I 339,60 397,40 339,60 342 1185 Pita II 278,80 339,80 305 339 2048
(a) (b)
Gambar 3. Kompleks yang terbentuk antara isolat dengan NaOH (a) dan AlCl 3 (b)
Spektrum  inframerah  isolat  (Gambar 4)  diperoleh  informasi  pada  bilangan gelombang  3445  cm -1 menunjukkan keberadaan  gugus  OH,  2918  cm -1 untuk
serapan  C-H  alifatik,  1646  cm -1 untuk lentur karbonil (C=O), 1560,7 cm -1 untuk regang  C=C  dan  pada  1417  cm -1 regang eter (C-O-C) (Tabel 2).
1′ 2 ′ 3′ 4′ 5′ 6′ O O O Al 2 A 3 5
Gambar 4. Spektrum inframerah isolat (KBr)
Tabel 2. Spektrum inframerah isolat
Bilangan gelombang (cm -1 ) Bentuk puncak Intensitas Dugaan gugus fungsi 3445 Lebar Kuat O-H 2918 Tajam Lemah C-H (alifatik) 1646 Lebar Sedang C=O 1560 Lebar Sedang C=C (aril) 1417 Lebar Sedang C-O-C
Analisis  spektroskopi 13 C-NMR  dan DEPT  menunjukkan  bahwa  isolat (Gambar  5)  muncul  19  sinyal  karbon, namun    dari  data  spektrum  HMQC menunjukkan bahwa pada masing-masing karbon    pada δ C 129,1  dan  118,6  ppm masing-masing mengikat 2H,  sedangkan pada  spektrum    DEPT,  karbon-karbon tersebut merupakan sinyal untuk CH, hal tersebut  mengindikasikan  bahwa  dua sinyal  proton  tersebut  dimiliki  oleh  dua karbon.  Sehingga  total  karbon  yang dimiliki  oleh  isolat  adalah  sebanyak  21
karbon, yang terdiri dari satu karbon sp 3 , tujuh  karbon  kuartener  (satu  diantaranya karbon  karbonil),  enam  karbon sp 2 dan tujuh buah karbon metin sp 3 teroksigenasi. Berdasarkan data spektroskopi 13 C-NMR, DEPT  dan  didukung  oleh  data  MS  yang menyatakan bahwa rumus molekul isolat adalah  C 21 H 22 O 10 ,  sehingga  diketahui bahwa  DBE  isolat  adalah  sebanyak  11, yang  berasal  dari  enam  C=C sp 2 ,  satu untuk ikatan rangkap dari  karbonil, satu cincin  rhamnosida  dan  tiga  untuk kerangka flavontrisiklik.
4000.0 3000 2000 1500 1000 450.0 cm-1 %T 3445.6 1560.0 1417.2 2369.3 2918.9 1646.0
Gambar 5. Spektrum 13 C-NMR dan DEPT isolat ( CD 3 OD, 125 MHz)
Spektrum 1 H-NMR (CD 3 OD, 500 Hz) isolat  (Gambar  6),  menunjukkan  sinyal proton pada δ H 7,72 ppm (1H; d ; J = 9,1
Hz;  H-2′  dan  H-6′)  yang  diduga  terikat pada karbon nomor 2′ (δ C 129,1 ppm) dan proton dengan  δ H 6,79 ppm (1H, d , J = 8,4
Hz;  H-3′  dan  H-5′)  diduga  terikat  pada karbon    nomor    5′  (δ C 118,6  ppm)  yang mengindikasikan proton yang terikat pada cincin  aromatik  dengan  posisi orto (penjodohan orto ) dengan posisi substituen  berada  pada  posisi para .
Proton H-2′; H-6′; H-3′ dan H-5′ dengan nilai coupling constant sama mengindikasikan  empat  proton  aromatik pada  cincin  B  yang  merupakan
karakteristik  1′,  4′-disubstitusi  flavonol. Hal  tersebut  juga  didukung  dengan  data UV, yang meunjukkan keberadaan gugus hidroksil bebas pada posisi karbon  4′ di cincin B.
Analisis spektroskopi 1 H-NMR menunjukan unit C − H dari karbohidrat biasanya menempati pergeseran δ H 3−5,5 ppm  (Brown et  al .,  2018).  Satu  sinyal proton  pada  pergeseran  1,3  ppm mengindikasikan    keberadaan  gugus metil . Kehadiran  sinyal  proton  anomerik δ H 3,69  (1H, s ,  H-1″)  dan  empat  sinyal proton metin teroksigenasi yang terinduksi oleh metil merupakan khas dari keberadaan cincin ramnosida.
Cq = 7 CH sp 2 = 6 CH 3 = 1 O-CH = 7 Σ C = 21 ΣH = 22 ΣO = 10
RM
= C 21 H 22 O 10 m/z =434 DBE = 11 O-CH Cq CH 3 CH CH
Gambar 6. Spektrum 1 H-NMR (CD 3 OD, 500 Hz)
Tabel 3. Data 1 H-NMR, 13 C-NMR dan 2D NMR Isolat Posisi δ C (ppm)* δ H (ΣH;  m; J= Hz)* DEPT* HMBC* COSY* δ C (ppm)** δ H (ΣH;  m; J= Hz)** Engeletin 2 82,0 3,45 (1H; m ) O-CH 83,8 5,13 (1H; d ; 10,8) 3 75,9 4,81 (1H; d ; 9,8) O-CH 78,6 4,62(1H; d ; 10) 4 182,7 - C 196,0 - 5 162,0 - O-C H-3 165,4 - 6 97,3 6,2(1H; s ) CH H-2 97,3 5,92 (1H; d ; 1,6) 7 169,0 - O-C 168,5 - 8 96,1 6,33 (1H; s ) CH H-8 96,2 5,89 (1H; d ; 1,6) 9 165,6 - O-C 164,1 - 10 101,4 - C H-8 102,2 - 1′ 130,0 - C 128,5 - 2′ 129,1 7,72 (1H; d ; 9,1) CH H-3 H-3′ 130,0 7,36 (1H; d , 8,4) 3′ 118,6 6,79 (1H; d ; 8,4) CH H-2′ 116,4 6,85 (1H; d , 8,4) 4′ 159,7 - C 159,4 - 5′ 118,6 6,79 (1H; d ; 8,4) CH H-6 116,4 6,85 (1H; d ; 8,4) 6′ 129,1 7,72(1H; d ; 9,1) CH H-2′; H- 3′ 130.0 7,36 (1H; d; 8,4) 1″ 101,5 3,69 (1H, s ) O-CH 102,4 3,99 (1H; s ) 2″ 72,2 4,39 ((1H; t ; 9,05) O-CH 71,7 4,30 (1H; m ) 3″ 72,2 4,39 ((1H; t ; 9,05) O-CH 72,1 3,67 (1H; dd ; 9,2 ; 2,8) 4″ 73,9 3,9 (1H; m ) O-CH H-5″ 73,7 3,50 (1H; m ) 5″ 71,5 3,57 (1H; m ) O-CH H-4″ 70,5 3,34 (1H; m ) 6″ 21,7 1,31 (3H; s ) CH 3 17,8 1,19 (3H; d ; 6,0)
* 1 H-NMR (500 MHz, CD 3 OD), dan 13 C-NMR (125 MHz, CD 3 OD)
** 1 H-NMR (600 MHz, CD 3 OD),  dan 13 C-NMR (150 MHz, CD 3 OD) (Huang et al ., 2011)
Spektrum HMQC menunjukkan adanya  korelasi  antara  karbon δ C 129,1 dengan proton δ H 7,72 ppm (1H; d ; J = 9,1
Hz), δ C 118,6 dengan δ H 6,79 ppm (1H; d ; J = 8,4 Hz). Pada spektrum 2D-NMR 1 H- 1 H COSY terpilih isolat, terlihat korelasi dari  proton  kerangka  dasar  δ H 7,72  ppm (1H; d ; J = 9,1 Hz) dengan δ H 6,79 ppm (1H; d ; J = 8,4 Hz), sehingga menguatkan dugaan  bahwa  kedua  proton  tersebut mengalami penjodohan secara orto ( J =8) .
Selain itu, pada spektrum, terlihat adanya korelasi pada proton δ H 3,9 ppm (1H; m ), δ H 3,57 ppm  (1H; m ).
Spektrum  HMBC  terpilih  isolat, menunjukkan  korelasi  ( 3 J )  antara  H-8 dengan C-7, H-8 dan H-10 terhadap C-9, H-3  dengan  C-2  dan  C-5,  serta  H-6″ dengan C-5″. Adanya korelasi antara H-6” dengan karbon CH 3 (δ C 21,7)
menyarankan  adanya  substitusi  gugus metil  pada  cincin  gula  yang  berbentuk cincin  ramnosida.  Data 1 H-NMR, 13 C- NMR dan 2D NMR (HMBC dan COSY) isolat (Tabel 3).
Dari hasil analisis spektrum UV-Vis, MS, 1 H-NMR, 13 C NMR, DEPT dan 2D- NMR,  isolat  memiliki  kemiripan  yang
tinggi  dengan  Engeletin  (Huang et  al ., 2011) sehingga dapat disimpulkan bahwa isolat merupakan dihidrokaempferol-3- O - ramnosida  (engeletin).  Engeletin  adalah senyawa  flavonoid  yang  diisolasi  dari banyak  tanaman  penting  di  Indonesia yang  digunakan  sebagai  obat  tradisional dan  dilaporkan  memiliki  bioaktivitas sebagai antiinflamasi, aktivitas antioksidan, antiHIV-1 (Ruangnoo et al ., 2012),  berperan  dalam  pencegahan kerusakan  hepatosit  imunologi  dan  efek antihiperurisemia  dan  nephoprotektif (Chen et al ., 2011), serta berperan sebagai antiplasmodial (Ali et al ., 2014).

## KESIMPULAN
Senyawa dihidrokaempferol-3- O - ramnosida atau engeletin berhasil diisolasi dari  fraksi  etil  asetat  daun  ki  encok ( Plumbago  zeynalica L.)  dengan  massa 16,3 mg berbentuk minyak/ oily berwarna kuning.  Engeletin  dilaporkan  memiliki efek farmakologis  sebagai antiinflamasi, antioksidan,  antiHIV-1,  berperan  dalam pencegahan kerusakan hepatosit
imunologi, antihiperurisemia, nephoprotektif dan antiplasmodial

## DAFTAR RUJUKAN
Ali, A. H., Hassan, N. M., Shukor, N. I., Embi, N., Latip, J., & Mohd Sidek, H. M.  (2014).  Anti-plasmodial  activity of engeletin isolated from Artocarpus scortechinii. Malaysian
Applied
Biology , 43 (1).
Beyene, B. B., Alem, F. A., & Ayana, M.
T.  (2020).    Determination  of antioxidant and antibacterial activities of leaf extracts of Plumbago zeylanica (Amira)  . Cogent  Chemistry , 6 (1),
1831715. https://doi.org/10.1080/23312009.20
20.1831715
Brown, G. D., Bauer, J., Osborn, H. M. I.,
& Kuemmerle, R. (2018). A Solution
NMR  Approach  to  Determine  the
Chemical Structures of Carbohydrates Using  the  Hydroxyl  Groups  as Starting  Points. ACS  Omega , 3 (12),
17957–17975. https://doi.org/10.1021/acsomega.8b
02136
Chen, L., Yin, H., Lan, Z., Ma, S., Zhang,
C., Yang, Z., Li, P., & Lin, B. (2011). Anti-hyperuricemic and nephroprotective  effects  of  Smilax china L. Journal of Ethnopharmacology , 135 (2).
https://doi.org/10.1016/j.jep.2011.03.
033
Cong,  H.  J.,  Zhang,  S.  W.,  Shen,  Y.,
Zheng,  Y.,  Huang,  Y.  J.,  Wang,  W. Q.,  Leng,  Y.,  &  Xuan,  L.  J.  (2013).
Guanidine  alkaloids  from  Plumbago zeylanica. Journal of Natural Products , 76 (7), 1351–1357.
https://doi.org/10.1021/np400235s
Dhalani,  J.,  Dubal,  G.,  Rathod,  C.,  &
Nariya, P. (2020). Evaluation of Non- polar  Composition  in  Plumbago Zeylanica Leaves by Gas Chromatography and Mass
Spectrometry. Folia  Medica , 62 (2),
308–313.
https://doi.org/10.3897/folmed.62.e4
7647
Ganesan,  K.,  &  Gani,  S.  (2013).
Ethnomedical  and  Pharmacological Potentials of Plumbago zeylanica LA. American  Journal  of  Phytomedicine and Clinical Therapeutics , 1 (3), 313–
337. http://www.ajpct.org/PA-
400163-[6].pdf
Huang,  H.,  Cheng,  Z.,  Shi,  H.,  Xin,  W.,
Wang,  T.  T.  Y.,  &  Yu,  L.  (2011). Isolation  and  characterization  of  two flavonoids,  engeletin  and  astilbin, from  the  leaves  of  Engelhardia roxburghiana and their potential anti- inflammatory  properties. Journal  of Agricultural  and  Food  Chemistry ,
59 (9),
4562–4569.
https://doi.org/10.1021/jf2002969
Kapare, H. S., Metkar, S. R., & Shirolkar,
S.  (2020).  Anticancer  Potential  Of Plumbago  Zeylanica  Linn  .  And  Its
Isolated  Constituent  Plumbagin :  A Review  ’. International  Journal  of Pharmaceutical Sciences and Research , 11 (October). https://doi.org/10.13040/IJPSR.0975- 8232.11(10).4859-65
Kumar,  S.,  &  Pandey,  A.  K.  (2013). Chemistry  and  Biological  Activities
of Flavonoids: An Overview. TheScientificWorldJournal , 2013 ,
162750. http://www.pubmedcentral.nih.gov/ar ticlerender.fcgi?artid=3891543&tool =pmcentrez&rendertype=abstract
Parveen,  M.,  &  Ghalib,  R.  M.  (2012).
Flavonoids and antimicrobial activity of  leaves  of  Xylosma  longifolium.
Journal  of  the  Chilean  Chemical
Society , 57 (1),
989–991.
https://doi.org/10.4067/S0717-
97072012000100007
Roy,  A.,  &  Bharadvaja,  N.  (2017).  A review on pharmaceutically important medical  plant:  Plumbago  zeylanica.
Journal  of  Ayurvedic  and  Herbal Medicine , 3 (4), 225–228. www.ayurvedjournal.com
Ruangnoo, S., Jaiaree, N., Makchuchit, S.,
Panthong,  S.,  Thongdeeying,  P.,  & Itharat,  A.  (2012).  An  in  vitro inhibitory effect on RAW 264.7 cells by antiinflammatory compounds from Smilax  corbularia  Kunth. Asian Pacific  Journal  of  Allergy  and Immunology , 30 (4), 268–274.
Syahid  S.F  &  Nova  K.N.  (2016).
Multiplikasi Tunas, Aklimatisasi Dan Analisis Mutu Simplisia Daun Encok (Plumbago zeylanica L.) Asal Kultur In  Vitro  Periode  Panjang. Buletin Penelitian  Tanaman  Rempah  Dan
Obat , 19 (2), 117–128. https://doi.org/10.21082/bullittro.v19 n2.2008.%p.