https://jurnal.unimor.ac.id/JTAST

## PENGARUH PENGENCER EKSTRAK AIR TEBU DALAM SITRAT-KUNING TELUR TERHADAP VIABILITAS DAN ABNORMALITAS SPERMATOZOA, SERTA pH SEMEN SAPI BALI
The Effect of Filteret Sugarcane Juice in Egg Yolk Citrate on Viability and Spermatozoa Abnormality, and pH of Bali Catle Semen
Rindiyani Y. Tanii 1 , Agustinus A. Dethan 2 dan Theresia Ika Purwantiningsih 3
1,2,3 Program Studi Peternakan, Fakultas Pertanian Universitas Timor, NTT *Coresponding Author: rinditanii5@gmail.com

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh level pengencer sari air tebu dalam sitrat kuning  telur  terhadap  viabilitas,  abnormalitas  spermatozoa,  dan  pH  semen  sapi  Bali. Penelitian ini telah dilakukan di kandang milik Program Studi Peternakan Fakultas Pertanian Universitas  Timor  dan  di  Laboratorium  Fakultas  Pertanian  Universitas  Timor.  Semen ditampung  dari  seekor  sapi  Bali  jantan  dewasa  kelamin  umur  ±  4,5  tahun  dengan  kondisi sehat.  Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  metode  rancangan  acak  lengkap dengan  5  perlakuan  dan  4  ulangan.  Perlakuan  yang  diberikan  adalah  T0:  Pengencer  sitrat- kuning telur tanpa sari tebu, T1: Pengencer sitrat-kuning telur + sari tebu 5ml, T2: Pengencer sitrat-kuning telur + sari tebu 10ml, T3: Pengencer sitrat-kuning telur + sari tebu 15ml, T4: Pengencer  sitrat-kuning  telur  +  sari  tebu  20ml.  Variabl  yang  diukur  dalam  penelitian  ini adalah  viabilitas,  abnormalitas  spermatozoa  dan  pH  semen  sapi  Bali.  Hasil  penelitian menunjukkan bahwa perlakuan T4 dengan level sari air tebu 20 ml menunjukkan nilai rataan terbaik pada viabilitas spermatozoa (92,875%), abnormalitas spermatozoa (6,375%), dan pH semen  (6,6).  Kesimpulan  dari  penelitian  ini  adalah  level  20  ml  sari  air  tebu  dalam  sitrat kuning telur dapat mempertahankan kehidupan spermatozoa sapi Bali.

## Kata kunci: Abnormalitas dan Viabilitas spermatozoa, pH, Sari air tebu, Semen Sapi  Bali, Sitrat kuning telur

## ABSTRACT
This study aims to determine the effect of the sugarcane juice diluent  in egg  yolk citrate on viability,  spermatozoa abnormality, and pH of  Bali  bull semen. This study has been carried out in Poultry Housing of Animal Science Study Program, and the Laboratory of the Faculty of  Agriculture,  University  of  Timor.  Semen  is  collected  from  a  a  bull,  ±  4.5  years  old,  in healthy  condition.  The  method  used  in  this  study  was  a  completely  randomized  design method with 5 treatments and 4 replications. The treatment giving are: T0 (diluent citrate-egg yolk  without  sugarcane  juice);  T1  (diluent  citrate-egg  yolk  +  5ml  sugarcane  juice);  T2 (diluent  citrate-egg  yolk  +  10  ml  sugarcane  juice);  T3  (diluent  citrate-egg  yolk  +  15  ml sugarcane  juice)  and  T4  (diluent  citrate-yolk  +  sugar  cane  juice  20  ml).  The  variables measured  were  viability,  abnormal  spermatozoa,  and  semen  pH  of  Bali  bull.  The  results showed  that  T4  treatment  with  a  20  ml  sugarcane  juice  level  showed  the  best  value  for spermatozoa  viability  (92.875%),  spermatozoa  abnormality  (6.375%),  and  semen  pH  (6.6). Conclusion: that the level of 20 ml of sugarcane juice in semen diluent can maintain the life of Bali bull spermatozoa.
Keywords: Bali bull semen, Sugarcane juice, Egg yolk citrate, Viability and Abnormalities Spermatozoa, pH of semen
E-ISSN:2685-452X Journal of Tropical Animal Science and Technology, Januari 2022:4 (1): 5 6 - 65 DOI: https://doi.org/ 10.32938/jtast.v4i1.1098

## PENDAHULUAN
Bioteknologi reproduksi sampai sekarang  ini  mengalami  peningkatan  yang sangat  pesat.  Salah  satu  bioteknologi reproduksi  yang  cepat  berkembang  adalah Inseminasi Buatan (IB). Inseminasi Buatan (IB)  atau  kawin  suntik  adalah  suatu  cara memasukan spermatozoa yang telah diencerkan  terlebih  dahulu  ke  dalam saluran  alat  kelamin  betina.  Keberhasilan inseminasi  buatan  sangat  tergantung  pada kualitas  semen  yang  digunakan.  Semen yang  berkualitas  dapat  diperoleh  dari pejantan  unggul  yang  sehat.  Cara  yang digunakan untuk mempertahankan kualitas semen  tetap  bagus  dan  bisa  disimpan dalam  waktu  yang  lama  yaitu  melalui pengenceran  dengan  penambahan  bahan- bahan  yang  dibutuhkan  spermatozoa  saat disimpan.
Tujuan dilakukan pengenceran adalah  untuk  mempertahankan  kualitas spermatozoa, memperbanyak volume semen  sehingga  memungkinkan  untuk melakukan  IB  terhadap  betina  dalam jumlah  lebih  banyak  dari  satu  ejakulat. Bahan  pengencer  yang  baik  adalah sederhana,  murah,  praktis  dibuat  dan memiliki  masa  simpan  yang  lebih  lama (Parera et  al .,  2009).  Syarat  setiap  bahan pengencer adalah harus dapat menyediakan  nutrien  bagi  kebutuhan spermatozoa  selama  penyimpanan,  harus memungkinkan spermatozoa dapat bergerak  secara  progresif,  tidak  bersifat racun bagi spermatozoa, menjadi penyanggah spermatozoa, dapat melindungi  spermatozoa  dari  kejutan dingin ( cold shock ) baik untuk semen beku maupun  semen  yang  tidak  dibekukan (Solihati dan Kune, 2009).
Bahan pengencer yang sering digunakan  untuk  pengenceran  semen
adalah  sitrat-kuning  telur.  Sitrat-kuning telur memiliki kelebihan yaitu mengandung  lipoprotein  dan  lecitin  yang berfungsi sebagai bahan penyangga ( buffer ) untuk mempertahankan dan mengatur  pH  semen,  juga  mencegah terjadinya cold  shock yang  disebabkan oleh  perubahan  temperatur.  Pengencer sitrat-kuning telur mengandung karbohidrat  yang  diperlukan  spermatozoa untuk  melakukan  aktivitas  fisiologisnya sebelum dideposisikan ke saluran reproduksi betina.
Pengencer semen perlu ditambahkan glukosa  dan  fruktosa  sebagai  sumber energi bagi spermatozoa. Pengencer sitrat- kuning  telur  tidak  mengandung  glukosa dan  fruktosa  sehingga  ditambahkan  bahan pengencer yang mengandung unsur tersebut.  Salah  satu  bahan  organik  yang mengandung  glukosa  dan  fruktosa  adalah air  tebu.  Air  tebu  mengandung  20-25% bahan  kering  dan  mengandung  unsur amilum (karbohidrat) berupa sukrosa (gula tebu),  yang  terdiri  dari  glukosa  dan fruktosa  (Yovita  dan  Sumiarsih,  2000). Karbohidrat  yang  terdapat  dalam  air  tebu berfungsi  sebagai  sumber  energi  bagi spermatozoa.  Kedua  bahan  pengencer tersebut masing-masing memiliki fungsinya yaitu sebagai penyangga (buffer) untuk mempertahankan dan mengatur  pH  semen  dan  sebagai  sumber energi  yang  dibutuhkan  spermatozoa  pada saat  pengenceran.  Tujuan  dari  penelitian ini  adalah  untuk  mengetahui  pengaruh level  pengencer  sari  air  tebu  dalam  sitrat- kuning telur terhadap viabilitas,
abnormalitas  spermatozoa,  dan  pH  semen sapi Bali.
E-ISSN:2685-452X Journal of Tropical Animal Science and Technology, Januari 2022:4 (1): 5 6 - 65 DOI: https://doi.org/ 10.32938/jtast.v4i1.1098

## MATERI DAN METODE

## Waktu, tempat dan Materi
Penelitian ini telah dilakukankan pada bulan  Oktober  sampai  November  2020,  di Kandang
Unggas
Program
Studi Peternakan,  dan  di  Laboratorium  Fakultas Pertanian,  Universitas  Timor.  Penelitian ini  menggunakan  seekor  sapi  Bali  jantan unggul  umur  ±4,5    tahun  milik  Prodi Peternakan, Fakultas Pertanian,Universitas Timor dan seekor sapi betina pemancing.
Alat-alat  yang  di  gunakan  adalah kandang jepit, vagina buatan, parang steril, gelas  ukur,  pipet  steril,  mikroskop, cool box , hemacytometer, cover gelas, saringan, glas  objek,  tabung  reaksi,  rak  tabung reaksi, handcounter ,  termos  air  panas, lampu bunsen, timbangan, tabung erlenmeyer,  spoit  plastik,  blender  dan  alat tulis. Bahan-bahan  yang digunakan adalah semen segar sapi Bali, sari air tebu, kuning telur, natrium sitrat, antibiotik (penicillin), fruktosa,  gliserol,  aquabides,  vaselin, larutan eosin, larutan hayem, alkohol 70% dan air panas, tisue, kertas aluminium foil, kertas indikator.

## Metode Penelitian
Penelitian  ini  menggunakan  metode rancangan  acak  lengkap  (RAL)  dengan  5 perlakuan dan 4 ulangan yaitu:
T0:  Pengencer  sitrat-kuning  telur  tanpa sari tebu
T1:  Pengencer  sitrat-kuning  telur  +  sari tebu 5ml
T2:  Pengencer  sitrat-kuning  telur  +  sari tebu 10ml
T3:  Pengencer  sitrat-kuning  telur  +  sari tebu 15ml
T4:  Pengencer  sitrat-kuning  telur  +  sari tebu 20ml

## Prosedur Penelitian
Persiapan bahan pengencer
Persiapan awal yang dilakukan adalah ternak  pejantan  untuk  diambil  semen, betina  pemancing,  vagina  buatan,  alat  dan bahan  dalam  pembuatan  bahan  pengencer dan  pengenceran  semen.  Pembuatan  sari air  tebu  dilakukan  dengan  cara  tebu
dipotong  dari  rumpunnya  dan  dibersihkan dengan  cara  dicuci  mengunakan  air.  Kulit tebu  dipisahkan  menggunakan  parang  dan dipotong menjadi bagian-bagian kecil ±1,5 cm  dan  diblender.  Setelah  itu  airnya disaring dan disimpan pada gelas ukur dan ditutup dengan kertas alumunium steril.
Kuning  telur  yang  digunakan  adalah telur  ayam  kampung.  Telur  dibersihkan dan  dicuci  dengan  alcohol  70%.  Kuning telur  diletakan  diatas  kertas  saring  untuk menghilangkan  selaput  putih  telurnya. Kuning  telur  dimasukkan  kedalam  gelas ukur  dan  ditutup  kertas  aluminium. Selanjutnya  proses  pembuatan  bahan pengencer  sitrat  kuning  telur-sari  air  tebu disesuaikan dengan perlakuan yang diberikan.

## Persiapan Vagina Buatan
Persiapan  vagina  buatan  dimulai  dari pemasangan  selongsong  karet  tipis  ke dalam  tabung  luar.  Ujung  selongsong karet  tipis  ditarik  ke  kiri  dan  ke  kanan kemudian  dibuka  dan  dipasang  pada  bibir tabung luar. Kedua ujung selongsong karet tipis dieratkan pada tabung luar menggunakan  karet  gelang.    Corong  dari karet  tipis  disalah  satu  ujung  dari  tabung dan  dieratkan  dengan  karet  gelang. Tabung  penampung  dipasang  di  ujung corong  karet  tersebut  dan  dieratkan menggunakan  karet  gelang  setelah  itu vaselin  dioleskan  sebagai  pelicin  ± setengah  bagian  tabung,  dan  ditambahkan air  hangat  dengan  suhu    ±  45 0 C  melalui lubang yang ada hingga penuh.
Penampungan Semen
Langkah awal dari proses penampungan  semen  adalah  masukan betina pemancing ke dalam kandang jepit. Kurang lebih satu jam sebelum ditampung semennya.  Pejantan  didekatkan  ke  betina pemancing  untuk  mempertinggi  libido ternak  jantan,  sehingga  kualitas  dan kuantitas  semen  yang  dihasilkan  lebih tinggi.  Pada  saat  pejantan  pertama  kali naik, penis dibelokkan dan tidak masuk ke
E-ISSN:2685-452X Journal of Tropical Animal Science and Technology, Januari 2022:4 (1): 5 6 - 65 DOI: https://doi.org/ 10.32938/jtast.v4i1.1098
https://jurnal.unimor.ac.id/JTAST
vagina betina pemancing sehingga pejantan  akan  turun  dengan  sendirinya. Pada saat manaiki untuk kedua atau ketiga kalinya, baru penampungan semen dilakukan  dengan  cara  mengarahkan vagina  buatan  ke  penis  pejantan  hingga penis  pejantan  masuk  ke  dalam  vagina buatan dan mengeluarkan semen ke dalam vagina buatan tersebut. Hasil penampungan  semen  tersebut  dievaluasi tersebut untuk mengetahui kualitas semen.

## Evaluasi Semen
Evaluasi  semen  dibedakan  menjadi dua yaitu secara makroskopis dan mikrokopis.  Evaluasi  makroskopis  yaitu evaluasi  terhadap  volume  semen  (dapat dilihat  dari  tabung  penampungnya  yang memiliki  skala),  warna  semen  (dapat diamati secara langsung setelah penampungan),  bau  semen  (mencium  bau khas  dari  semen  setelah  penampungan), konsistensi  semen  (dilihat  dengan  cara menggoyangkan tabung yang berisi semen secara  perlahan-lahan  sehingga  terlihat gerakan  permukaan  semen  di  dalam tabung),  dan  pH  semen  (diukur  dengan menggunakan kertas indikator).
Evaluasi mikroskopis:
1. Motilitas  massa  spermatozoa,  diamati dengan cara meletakkan semen sebanyak  satu  tetes  di  atas objek  glass tanpa  ditutup cover  glass kemudian diamati  dibawah  mikroskop  perbesaran 100 kali. Berdasarkan penilaian gerakan massa, maka kualitas semen dikategorikan: sangat baik (+++) terlihat  gelombang-gelombang  besar, banyak,  gelap,  tebal  dan  aktif  serta bergerak cepat berpindah-pindah tempat (Evan dan maxwell. 1987); baik (++) bila terlihat gelombang-gelombang kecil,tipis,  jarang,  kurang  jelas  dan bergerak  lamban;  cukup  (+)  bila  tidak terlihat  gelombang  tapi  hanya  terlihat
gerakan  individual  aktif  progresif;  dan buruk  (Necrospermia,  0)  jika  hnaya sedikit  atau  tidak  terlihat  gerakan individual sama sekali.
1. Motilias  Individu  spermatozoa,  diamati dengan mengambil satu tetes semen dan diletakkan  di  atas objek  glass dan ditutup  menggunakan cover  glass kemudian diperiksa di bawah mikroskop  dengan  perbesaran  400  kali. Berdasarkan  motilitas  individual,  maka penilaian terhadap kualitas spermatozoa adalah  0-5  yaitu:  0  jika  spermatozoa imotil  atau  tidak  bergerak;  1  jika gerakan  berputar  di  tempat;  2  jika gerakan  melingkar,  kurang  dari  50% bergerak progresif dan tidak adagelombang;  3  jika  50%  -80% spermatozoa  bergerak  progresif  dan meghasilkan  gerakan  massa;  4  jika spermatozoa  bergerak  secara  progresif dan  membentuk  gelombang  dengan 90%  spermatozoa  motil;  dan  5  jika gerakan  spermatozoa  yang  sangat progresif,  membentuk  gelombang  yang sangat  cepat  dan  menunjukkan  100% sperma motil.
3. Viabilitas Spermatozoa, dihitung dengan  cara  meneteskan  satu  tetes semen  ke  atas  gelas  objek  lalu tambahkan  satu  tetes  larutan  eosin  dan dicampur  secara  merata.    Setelah  itu ambil  gelas  objek  yang  lain  dan  tarik membentuk susdut 45 0 lalu dikeringkan di  atas  api  bunsen  sehingga  terbentuk preparat ulas lalu diamati menggunakan mikroskop  pembesaran  10  x  40  kali. Toelihere  (1993)  menyatakan  bahwa, spermatozoa  yang  hidup  tidak  akan menyerap larutan eosin sehingga kepala bening dan spermatozoa yang mati akan menyerap larutan eosin sehingga kepalanya akan berwarna merah.
4. Abnormalitas  Spermatozoa,  dievaluasi menggunakan pewarnaan eosin- negrosin dan diamati di bawah mikroskop  dengan  pembesaran  400 kali.  Pengamatan  abnormalitas  dilihat
dari  spermatozoa  yang  mempunyai bentuk  abnormal  seperti  ekor  putus, tidak  ada  kepala  spermatozoa,  ekor menggulung  dan  adanya  bentuk  kepala yang tidak normal. Abnormalitas
E-ISSN:2685-452X Journal of Tropical Animal Science and Technology, Januari 2022:4 (1): 5 6 - 65 DOI: https://doi.org/ 10.32938/jtast.v4i1.1098
https://jurnal.unimor.ac.id/JTAST
spermatozoa dihitung dengan persamaan  sebagai  berikut  (Dethan  e t al., 2010): PAS  : x 100 % Keterangan; SA: Spermatozoa Abnormal Y: Total sperma
yang dihitung
5. Konsentrasi  spermatozoa,  yaitu  jumlah spermatozoa  yang  terdapat  dalam  1  ml semen.  Kosentrasi  spermatozoa  dapat diamati  menggunakan  Hemacytometer dengan cara menghisap semen sebanyak  0,5  ml  menggunakan  pipet hemacytometer,  kemudian  tambahkan larutan  hayem  hingga  101  ml  yang berfungsi untuk mematikan spermatozoa. Homogenkan spermatozoa dan larutan hayem
digoyang  perlahan,  dan  diteteskan  ke kamar hitung hemacytometer. Perhitungannya pada lima titik menurut arah  diagonal  menggunakan  mikroskop pembesaran 400 kali. Kosentrasi spermatozoa
dapat diamati menggunakan Hemacytometer dan dihitung  dengan  persamaan  berikut (Dethan et al., 2010) Konsentrasi spermatozoa = X . . = 10.000 m 3 x 10 juta Keterangan :  X  jumlah spermatozoa pengamatan 400 : jumlah kotak kecil di dalam kamar 80 : jumlah kotak kecil di dalam 5 kotak besar 200 : pengenceran sebanyak 200 kali 0,1 : volume kotak hitung (m 3 )

## Pengenceran Semen
Semen  segar  yang  dapat  diproses menjadi  semen  cair  harus  memenuhi syarat dengan motilitas ≥ 70%, konsentrasi
≥  200  x  10 6 sel/ml,  viabilitas  ≥  80%  dan abnormalitas  ≤  20%  diencerkan  dengan bahan  pengencer  yang  sudah  disiapkan (Sumardani, 2007). Semen sapi  Bali segar diencerkan  dengan  menggunakan  sari  air tebu  dan  sitrat-kuning  telur.  Langkah- langkah  dalam  pengenceran  semen  adalah masukkan  0,6  ml  pengencer  ke  dalam tabung  reaksi  sebanyak  20  tabung  lalu tambahkan  0,15  ml  semen  ke  dalam tabung  yang  berisi  bahan  pengencer. Tabung reaksi yang berisi semen disimpan selama  3  jam  dan  dilakukan  pengamatan terkait viabilitas, abnormalitas spermatozoa dan pH.

## Variabel Penelitian
Viabilitas spermatozoa, Persentase spermatozoa hidup (PSH) dihitung dengan persamaan  sebagai  berikut  (Dethan et  al.,
2010):
PSH : x 100 %
Abnormalitas  spermatozoa ,  Persentase abnormalitas spermatozoa (PAS) di hitung dengan rumus (Dethan et al., 2010):
PAS = X 100% pH spermatozoa , diukur dengan menggunakan kertas indikator dengan cara meneteskan semen ke atas kertas indikator setelah  itu  amati  perubahan  warna  pada kertas  indikator  dengan  membandingkan warna pada kemasan kertas indikator.

## Analisis Data
Data  dianalisis  menggunakan  analisis ragam analysis  of  variance (ANOVA) berdasarkan  Rancangan  Acak  Lengkap dengan  bantuan  SPSS  vers  20  dan dilanjutkan dengan uji Duncan.
E-ISSN:2685-452X Journal of Tropical Animal Science and Technology, Januari 2022:4 (1): 5 6 - 65 DOI: https://doi.org/ 10.32938/jtast.v4i1.1098

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  valuasi  semen  segar  secara makroskopis
dan mikroskopis menunjukkan  hasil  yang  layak  digunakan dan  diproses  lebih  lanjut  sebagai  bahan pengencer  semen  karena  memenuhi  syarat sebagai semen yang berkualitas (Tabel 1).

## Viabilitas Spermatozoa
Viabilitas
spermatozoa adalah kemampuan  spermatozoa  untuk  bertahan
hidup setelah pengenceran dan merupakan salah  satu  indikator  penting  dalam menentukan  kualitas  spermatozoa  karna semakin  banyak  spermatozoa  yang  hidup maka peluang untuk mebuahi sel telur saat kopulasi  sangat  tinggi.  Rata-rata  viabilitas spermatozoa  sapi  Bali  yang  diencerkan dengan sitrat kuning telur dan sari air tebu pada level yang berbeda tersaji pada Tabel 2.
Tabel 1. Evaluasi semen segar sapi Bali secara makroskopis dan mikroskopis No Krakteristik Hasil Pengamatan 1 Volume 4 ml 2 Warna Krem/putih susu 3 Bau Kas 4 pH 6,7 5 Konsistensi Kental 6. Motilitas massa +++ 7. Motilitas individu 80 8. Abnormalitas 4,5% 9. Viabilitas spermatozoa 96% 10. Konsentrasi spermatozoa 2. 640. 000. 000 spermatozoa/ml semen
Keterangan : +++: Gerakan masa sangat baik bila terlihat gelombang-gelombang besar, banyak, gelap, tebal dan aktif serta bergerak cepat berpindah-pindah tempat
Tabel 2. Rata-rata viabilitas spermatozoa sapi Bali yang diencerkan dengan sitrat kuning telur dan sari air tebu
Ulangan Perlakuan T0 T1 T2 T3 T4 1 82 86 87.5 95 94.5 2 80 88 89.5 94 93.5 3 83 85 90 90 91.5 4 86 87.5 91 91 92 Jumlah 331 346.5 358 370 371.5 Rata-rata(%) 82.75±2,50 d 86,625±1,37 c 89.5±1,47 b 92.5±2,38 a 92,875±1,37 a
Keterangan:  a,b,c,d  superskrip  yang  berbeda  pada  baris  yang  sama  menunjukkan  pengaruh  perlakuan  berbeda nyata pada (P<0,05)
Rata-rata  viabilitas  spermatozoa  tertinggi terdapat  pada  perlakuan  T4  yaitu  sebesar 92,875±1,37%  dan  diikuti  perlakuan  T3  sebesar 92,5±2,38%,  T2  sebesar  89,5±1,47%,  T1  sebesar 86,625±1,37%  dan  terendah  perlakuan  T0  yaitu sebesar 82,75±2,50% . Analisis statistik menunjukkan  bahwa  perlakuan  berbeda  nyata (P<0,05).  Semakin  tingginya  kandungan  sari air  tebu  dalam  bahan  pengencer  maka
ketersediaan  energipun  semakin  tinggi  dan cukup untuk menunjang kehidupan spermatozoa.  Anwar  (2011)  menyatakan bahwa  semakin  ditingkatkannya  pemberian konsentrasi  ekstrak  sari  air  tebu  maka berpengaruh  lebih  baik  terhadap  daya  hidup spermatozoa. Spermatozoa
dapat
memanfaatkan  sukrosa  dari  ekstrak  air  tebu dalam  metabolisme  sebagai  penunjang  energi
J.Trop.Anim.Sci.Technology, Januari 2022
E-ISSN:2685-452X Journal of Tropical Animal Science and Technology, Januari 2022:4 (1): 5 6 - 65 DOI: https://doi.org/ 10.32938/jtast.v4i1.1098
https://jurnal.unimor.ac.id/JTAST
pergerakan.  Bardan et  al .  (2009)  menyatakan bahwa  sari  air  tebu  yang  dikombinasikan dengan  kuning  telur  dapat  mempertahankan daya  tahan  hidup  spermatozoa.  Triana  (2006) juga berpendapat bahwa kuning telur mempunyai  zat  pelindung  yaitu  phospolipid dan lecithin, yang bekerja melindungi membran  sel  dari  cekaman  dingin  atau cold shock terhadap  spermatozoa  serta  sebagai sumber energi.
Penurunan viabilitas spermatozoa terutama  pada  T0  dan  T1,  disebabkan  oleh ketidakcukupan  energi  bagi  spermatozoa untuk  hidup  sehingga  terjadi  penimbunan asam laktat. Hal ini menyebabkan pH menjadi asam.  Triana  (2006)  menyatakan  bahwa  hasil metabolisme  spermatozoa  akan  menghasilkan CO 2 ,  H 2 O  dan  asam  laktat.  Akumulasi  asam laktat  akan  menyebabkan  perubahan  pH sehingga  daya  tahan  hidup  spermatozoa berkurang.  Selanjutnya  Solihati et  al .  (2008) menyatakan  bahwa  pH  terlalu  tinggi  atau  pun rendah menyebabkan proses metabolisme akan terhambat  dan  akan  menurunkan  daya  tahan hidup spermatozoa.
Mumu
(2009) menambahkan bahwa kemampuan spermatozoa  untuk  bertahan  hidup  lebih  lama di  dalam  suatu  medium  pengencer  sangat dipengaruhi  oleh  sifat  fisik.  Pramono  dan Triana  (2006)  dan  Rizal et  al. (2006) menyatakan  bahwa  motilitas  spermatozoa sangat  tergantung  pada  suplai  energi  berupa Adenosine
Triphosphat (ATP) hasil metabolisme.

## Abnomalitas Spermatozoa
Abnormalitas  spermatozoa  merupakan tingkat  kelainan  spermatozoa  dan  merupakan salah  Salah  satu  indikator  penting  dalam menentukan  kualitas  spermatozoa.  Semakin tinggi  abnormalitas  spermatozoa  maka  akan semakin  menurun  kualitas  spermatozoanya. Rata-rata  abnormalitas  spermatozoa  sapi  Bali yang diencerkan dengan sitrat kuning telur dan sari  air  tebu  pada  level  yang  berbeda  tersaji pada Tabel 3.
Rata-rata abnormalitas spermatozoa terendah  terdapat  pada  perlakuan  T4  yaitu sebesar 6,375±0,94% dan diikuti perlakuan T3 sebesar 7,125±0,47%, T2 sebesar 7,25±0,64%, perlakuan  T1  sebesar  9,25±0,95%  dan tertinggi  pada  perlakuan  T0  yaitu  sebesar 10,75±1,25%.  Analisis  statistik  menunjukkan bahwa  perlakuan  berbeda  nyata  (P<0,05). Semakin  tinggi  level  sari  air  tebu  maka semakin  tinggi  ketersedian  makanan  bagi spermatozoa  sehingga  tetap  mempertahankan keseimbangan tekanan osmotik dan lipoprotein  dan  lesitin  mampu  melindungi integritas selubung membran plasma spermatozoa sehingga dapat menekan kerusakan membran plasma pada spermatozoa. Susilawati (2011) menyatakan bahwa lipoprotein dan lesitin mampu mempertahankan  dan  melindungi  integritas selubung membran plasma spermatozoa sehingga  dapat  menekan  kerusakan  membran plasma pada spermatozoa.
Tabel 3. Rata-rata abnormalitas spermatozoa sapi  Bali yang diencerkan dengan sitrat kuning telur dan sari air tebu Ulangan Perlakuan T0 T1 T2 T3 T4 1 9 8 7.5 7.5 5 2 11 10 6.5 6.5 6.5 3 11 9 8 7.5 7 4 12 10 7 7 7 Jumlah 43 37 29 28.5 25.5 Rata-rata(%) 10.75±1,25 a 9.25±0,95 b 7.25±0,64 c 7,125±0,47 c 6,375±0,94 c
Keterangan:  a,b,c  superskrip  yang  berbeda  pada  baris  yang  sama  menunjukkan  pengaruh  perlakuan  berbeda nyata (P<0,05)
Proses pengolahan pada saat pengenceran  juga  menyebabkan  kerusakan fisik  pada  spermatozoa.  Herdis  (2005) menjelaskan  bahwa  proses  pengolahan  dan
penyimpanan  akan  menyebabkan  perubahan fisik  pada semen yang  mempengaruhi motilitas  spermatozoa.  Rata-rata  persentasi abnormalitas  tersebut  masih  dikategorikan
E-ISSN:2685-452X Journal of Tropical Animal Science and Technology, Januari 2022:4 (1): 5 6 - 65 DOI: https://doi.org/ 10.32938/jtast.v4i1.1098
https://jurnal.unimor.ac.id/JTAST
baik sesuai yang dijelaskan Bretzlaff (1995) bahwa  persentase  abnormalitas  spermatozoa yang  baik  untuk  inseminasi  buatan  tidak lebih dari 20%. Berdasarkan hasil pengamatan,  abnormalitas  yang  paling banyak ditemukan yaitu abnormalitas sekunder seperti, ekor patah, kepala dan ekor terpisah, dan ekor tergulung.
Abnormalitas spermatozoa dapat disebabkan  oleh  tekanan  osmotik  yang terjadi  selama  penyimpanan.  Solihati et  al . (2008)  menyatakan  bahwa  abnormalitas disebabkan  karena  kejutan  suhu  dingin  dan ketidak  seimbangan  tekanan  osmotik  akibat dari proses metabolik yang terus berlangsung. Ditambahkan oleh  Salisbury et al . (1985) bahwa perubahan tekanan osmotik terhadap spermatozoa menyebabkan perubahan  pembentukan  spermatozoa  yang dapat  menyebabkan  abnormalitas.  Suyadi et al. (2015)  menyatakan  bahwa  peningkatan abnormalitas  disebabkan  karena  adanya proses  peroksidase  lipid,  perubahan  tekanan osmotik akibat radikal bebas dan asam laktat hasil  dari  proses  metabolik,  sehingga merusak membran plasma dan menyebabkan peningkatan abnormalitas spermatozoa.

## pH Semen
pH semen merupakan tingkat keasaman dari semen dan merupakan indikator penting dalam  mementukan  kualitas semen.  Jika  pH semen  semakin  rendah  maka  pH  semen bersifat asam dan akan berpengaruh terhadap  penurunan  kualitas  spermatozoa yang  terkandung  di  dalam  semen  tersebut,
Sebaliknya  pH  semen  tinggi  maka  semen akan  bersifat  basa  dan  akan  berpengaruh juga  pada  penurunan  kualitas  spermatozoa. Rata-rata  pH  semen  sapi  Bali  yang diencerkan  dengan  sitrat  kuning  telur  dan sari  air  tebu  tersaji  pada  Tabel  4.  Rata-rata pH  tertinggi  terdapat  pada  perlakuan  T1 yaitu sebesar 6,63 dan diikuti oleh perlakuan T0,  T3,  T3  dan  T4  sebesar  6,6.  Analisis statistik  menunjukkan  bahwa  perlakuan berbeda  tidak  nyata.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  sari  tebu  tidak  mempengaruhi perubahan pH semen, tetapi tetap mempertahankan  pH  semen  berada  pada kisaran  normal.  Salisbury  dan  Vandemark (1985)  menyatakan  bahwa  pH  semen  sapi berkisar  antara  6,0  sampai  8,0.  Hal  ini karena  ketersedian  energi  yang  terkandung di  dalam  sari  air  tebu  dapat  dimanfaatkan dengan  baik  oleh  spermatozoa  untuk memenuhi  kebutuhannya  sehingga  tidak memaksa  spermatozoa  untuk  memproduksi asam  laktat.  Kultsum  (2009)  menyatakan bahwa  kandungan  sukrosa  yang  terdapat pada tebu dapat dimanfaatkan sebagai bahan pengencer  yang  merupakan  energi  yang digunakan  dan  kandungan  protein,  vitamin- vitamin  yang  terdapat  dalam  air  tebu  yang dapat  menguntungkan  bagi  spermatozoa. Sumarsono  (1998)  menjelaskan  bahwa spermatozoa sangat peka terhadap perubahan  pH  medium  dari  keadaan  netral, terutama  terhadap  pH  rendah.  Kondisi terebut  menyebabkan  perubahan  kondisi asam  yang  bersifat  racun  bagi  spermatozoa (Sugiarti et al., 2004).
Tabel 4. Rata-rata pH semen sapi bali yang diencerkan dengan sitrat kuning telur dan sari air tebu pada level yang berbeda. Ulangan Perlakuan T0 T1 T2 T3 T4 1 6,6 6,6 6,6 6,6 6,6 2 6,6 6,6 6,6 6,6 6,6 3 6,6 6,6 6,6 6,6 6,6 4 6,6 6,7 6,6 6,6 6,6 Jumlah 26,4 26,5 26,4 26,4 26,4 Rata-rata(%) 6,6 6,625 6,6 6,6 6,6
E-ISSN:2685-452X Journal of Tropical Animal Science and Technology, Januari 2022:4 (1): 5 6 - 65 DOI: https://doi.org/ 10.32938/jtast.v4i1.1098
Toelihere  (1993)  menyatakan  bahwa pH  semen  dipengaruhi  oleh  metabolisme fruktosa plasma seminalis dan menghasilkan  asam  laktat  dalam  jumlah tinggi.  Banyaknya  asam  laktat  merupakan racun bagi kehidupan spermatozoa, akumulasi  asam  laktat  akan  menyebabkan
perubahan  pH  sehingga  daya  tahan spermatozoa  berkurang  (Triana,  2006). Herdis dan Rizal (2008) juga  menjelaskan bahwa pH semen semakin asam disebabkan  oleh  semakin  tinggi  asam laktat yang diproduksi oleh spermatozoa.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  dan  pembahasan di  atas  maka  dapat  disimpulkan  bahwa level  20  ml  sari  air  tebu  dalam  pengencer
semen  dapat  mempertahankan  kehidupan spermatozoa sapi Bali.

## DAFTAR PUSTAKA
Anwar,  P.  2011.  Motilitasa  dan  Viabilitas Semen  Sapi  Bali  yang  diencerkan dengan  Pengencer  air  Tebu  yang berbeda.  Skripsi.  Fakultas  Pertanian dan  Peternakan  Universitas  Islam
Negeri Sultan SyarifKasimRiau.Pekanbaru. Bardan.,  Feradis  dan  T.  Adelina.  2009. Penggunaan Air Tebu Yang Dikombinasikan  Dengan  Kuning
Telur  Sebagai  Pengencer  Semen Sapi  Bali.  Jurnal  Peternakan,  6  (2): 36-43.
Brezlaff,  K.  1995.  Goat  Breeding  and
Infertility.p. 169-207. in. J. Meredith (eds). Animal Breeding and Infertility. Blackweel Science Ltd.Victoria, Australia.
Dethan, A.A., Kustono., dan Hari Hartadi. 2010. Kualitas dan Kuantitas Sperma Kambing  Bligon  Jantan  Yang  diberi
Pakan Rumput Gajah Dengan Suplementasi Tepung Darah. Buletin Peternakan, 34(3): 145153.
Herdis.,  dan  M.  Rizal.  2008.  Inseminasi
Buatan Pada Domba. Rineka Cipta.Jakarta.33-34,39.
Kultsum,  U.  2009.  Pengaruh  variasi  nira tebu  ( Saccharum  officinarum )  dari beberapa varietas tebu dengan penambahan sumber nitrogen(n) dari kedelai hitam ( Glycine soja ) sebagai substrat terhadap efisiensi fermentasi
etanol. Skripsi .  Fakultas  Sains  dan Teknologi  Universitas  Islam  Negeri (UIN)  Maulana  Ibrahim  Malik,
Malang.
Mumu, M.  I. 2009.  Viabilitas Semen Sapi
Simmental yang Dibekukan Menggunakan Krioprotektal Gliserol. Skripsi. Universitas Tadulako. Sulawesi Tengah. Parera,  F.,  Z.  Prihatiny.,  D.F.  Suhoka  dan M.  Rizal.  Pemanfaatan  Sari  Wortel Sebagai Pengencer Alternatif Spermatozoa Epididimis Sapi Bali. J. Indon.  Trop.  Anim.  Agric,  34  (1):
50-56.
Rizal,  M.,  Herdis.,  Yulnawati  dan  H. Maheswari.    2006.  Peningkatan
Kualitas  Spermatozoa  Epididimis Kerbau Belang yang Dikriopreservasi  dengan  Beberapa Konsentrasi Sukrosa. Jurnal Veterinar, 188-193. Salisbury,  G.W.  dan  N.L.  Van  Denmark. 1985.  Fisiologi  Reproduksi  dan
Inseminasi Buatan pada Sapi. Gadjah  Mada  University  Press, Yogyakarta.
Solihati,  N.,  R.  Idi.,  S.D.  Rasad.,  M. Rizal.,  dan  M.  Fitriati.  2008.
Kualitas Spermatozoa
Cauda EpididimisSapi  Peranakan  Ongole (PO)  dalam  Pengencer  Susu,  Tris dan  Sitrat  Kuning  Telur  pada
J.Trop.Anim.Sci.Technology, Januari 2022
E-ISSN:2685-452X Journal of Tropical Animal Science and Technology, Januari 2022:4 (1): 5 6 - 65 DOI: https://doi.org/ 10.32938/jtast.v4i1.1098
https://jurnal.unimor.ac.id/JTAST
Penyimpanan 4-5 °C. Animal Production, 10 (1): 22-29. Solihati, N., dan P. Kune. 2011. Pengaruh jenis  pengencer  terhadap  motilitas dan  daya  tahan  hidup  spermatozoa semen cair sapi Simmental. http://pustaka.unpad.ac.id/wp- content/uploads/2009/03/pengaruh_j enis_pengencer_terhadap_otilitas.pd f [diakses  tanggal  20  November 2020].
Sugiarti, T., E. Triwlanningsih, P. Situmorang, R. G. Sianturi dan D. A.
Kusumaningrum.  2004.  Penggunaan katalase  dalam  produksi  semen dingin  sapi.  Pros.  Seminar  Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner. Bogor,  4  –  5  Agustus  2004. Puslitbang  Peternakan.  Bogor.  Hlm.
215 – 220
Sumarsono  T.  1998.  Peningkatan  kualitas spermatozoa  kerbau  lumpur  dengan penambahan  asam  akorbat  dalam pengencer semen beku. Tesis . Program Pascasarjana, Institut
Pertanian Bogor, Bogor.
Susilawati,  T.  2011.  Tingkat  Keberhasilan Inseminasi  Buatan  dengan  Kualitas dan  Deposisi  Semen  yang  Berbeda pada  Sapi  Peranakan  Ongole.  J. Ternak Tropika,12(2):15-24.
Suyadi,  T.  E,  Susilorini  dan  L.  Amalta. 2015.  Kualitas  Semen  Kambing Peranakan  Etawah  dalam  Pengencer dengan Penambahan Ekstrak Bawang  Merah  ( Allium  Cepa L)
selama  Penyimpanan  Suhu  Dingin. Fakultas Peternakan Universitas
Brawijaya, Malang.
Toelihere,  M.  R.  1993.  Inseminasi  Buatan pada Ternak.Angkasa. Bandung
Triana,  I.N.  2006.  Pengaruh  Waktu
Inseminasi  Terhadap  Motilitas  dan Viabilitas Spermatozoa Pascainseminasi Pada Kambing. Berk. Penel. Hayati.11:147-150 Yovita dan Sumiarsih. 2000. Pembudidayaan  Tebu  di  Lahan Sawah dan Tegalan. Penebar Swadaya. Surabaya.
E-ISSN:2685-452X Journal of Tropical Animal Science and Technology, Januari 2022:4 (1): 5 6 - 65 DOI: https://doi.org/ 10.32938/jtast.v4i1.1098