p-ISSN 2527-6751

## Profil Lipid Tikus Putih Setelah Pemberian Teh Kombucha Kadar 50% Waktu
Fermentasi 6, 9 Dan 12 Hari
The Influences Of Tea Kombucha Fermentation Time 6, 9 And 12 Days On Level 50% To Lipid Profile
Sri Isdadiyanto
Departemen Biologi, Fakultas Sains dan Matematika, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH Tembalang Semarang
Email: isdadiyanto@yahoo.com
Diterima 28 November 2016/Disetujui 20 Februari 2017

## ABSTRAK
Tujuan penelitian ini untuk mengetahui pengaruh pemberian teh kombucha kadar 50% sebagai drinking water dengan  variasi  waktu  fermentasi.  Penelitian  ini  menggunakan  Tikus  putih  ( Rattus  norvegicus )  jantan sebanyak 16 ekor umur 2 bulan, dengan perlakuan Teh kombucha yang difermentasi selama 6, 9 dan 12 hari pada suhu 25 o C per oral . Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap dengan 4 perlakuan (selama 28  hari)  dan  4  ulangan,  yaitu  :  P0  =  kontrol,  tanpa  tambahan  teh  kombucha,  P1  =  air  minum  +  1,8  ml  teh kombucha pagi dan sore fermentasi 6 hari, P2 = air minum + 1,8 ml teh kombucha pagi dan sore fermentasi 9 hari, P3 = air minum + 1,8 ml teh kombucha pagi dan sore fermentasi 12 hari.  Variabel yang diukur adalah kadar  kolesterol,  HDL  dan  LDL.  Data  yang  diperoleh  dianalisis  menggunakan  ANOVA  yang  dilanjutkan dengan  Uji  Duncan  dengan  taraf  kepercayaan 95%  dengan  menggunakan  perangkat  lunak  SPSS  10,0.  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  pemberian  teh  kombucha  dapat  menaikkan  kadar  HDL,  menurunkan  kadar kolesterol dan LDL serum darah tikus putih ( Rattus norvegicus ).
Kata kunci : Rattus norvegicus, teh kombucha kadar 50%, kolesterol, HDL, LDL

## ABSTRACT
The objective of this study was to analyze the influences of 50% kombucha tea level on lipid profile in rats. Sixteen  male  Rattus  norvegicus  rats,  2  months  of  age  were  used  as  experimental  animals,  with  treatment kombucha tea that has been fermented for 6, 9 and 12 days at the temperature of 25 o C per oral. The research design  used  to  a  completely  randomized  with  4  treatment  (for  4  weeks)  and  4  replications,  namely:  P0  = control, without of kombucha tea, P1 = water + 1,8 ml kombucha tea that has been fermented for 6 days in the morning and afternoon, P2 = water + 1,8 ml kombucha tea that has been fermented for 9 days in morning and afternoon, P3 = water + 1,8 ml kombucha tea that has been fermented for 12 days in morning and afternoon. Variables measured were cholesterol , LDL and HDL level. Data were analyzed with ANOVA followed by Duncan  test  at  95%  confidence  level  were  performed  using  SPSS  version  10,0.  The  result  showed  that kombucha tea increased HDL level, but decreased total cholesterol level and LDL level in rats.
Keywords : Rattus norvegicus, 50% kombucha tea level, cholesterol, HDL, LDL

## PENDAHULUAN
Teh kombucha adalah minuman yang murah dan  mudah  dibuat  oleh  masyarakat  di  Indonesia yang  memiliki  beberapa  khasiat  bagi  tubuh  antara lain dapat mempengaruhi tubuh secara menyeluruh dengan  menstabilkan  metabolisme  tubuh.  Melalui peningkatan  metabolisme,  penimbunan  lemak  di
dalam  tubuh  yang  terlalu  banyak  bisa  dihindari. Teh  kombucha  mengandung  senyawa-senyawa kimia yaitu vitamin B (tiamin / B1, riboflavin / B2, niasin / B3, piridoksin / B6, sianokobalanin / B12), vitamin  C  dan  polyfenol.  Teh  kombucha  diduga berperan  dalam  metabolisme  lemak  sehingga mempunyai  potensi  untuk  menurunkan  kadar kolesterol LDL dan trigliserida, serta
meningkatkan kadar HDL, hingga bisa mengurangi  risiko  terhadap  penyakit  pembuluh darah  dan  jantung  coroner  .  Katekin  merupakan salah  satu  unsur  dari  polyfenol  dapat  mencegah tekanan  darah  tinggi,  mengurangi  penimbunan kolesterol dalam darah, mempercepat pembuangan kolesterol melalui feces, menangkal radikal bebas, serta dapat mengurangi risiko penyakit kardiovaskuler (Naland, 2008). Hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh Purwaning (2010) dan Rahayu (2005) menggunakan  teh  kombucha  terhadap  tikus  putih menunjukkan  penurunan  kadar  kolesterol.  Hal  ini didukung  pula  oleh  Winarni  dkk.  (2010) menyatakan  bahwa  teh  kombucha  mempunyai kecenderungan menurunkan kadar kolesterol darah meskipun  secara  statistik  tidak  terbukti  dengan obyek  perlakuan  terhadap  mahasiswa  Fakultas Kedokteran  Universitas  Sebelas  Maret  Surakarta. Adriani et  al. (2011)  yang  menggunakan  itik sebagai  hewan  percobaan  menyatakan  bahwa  teh kombucha dapat menurunkan kadar kolesterol total darah,  selain  itu  juga  mengurangi  kolesterol  LDL dan  menaikkan  kolesterol    HDL  sesudah mengkonsumsi  teh  kombucha  selama  4  minggu. Hasil  penelitian  Pratiwi et  al. (2012)  menyatakan pembuatan  teh  kombucha  mempunyai  kandungan alkohol  tertinggi  pada  fermentasi  hari  ke-12  dan menurun  pada  hari  ke-16,  kandungan  vitamin  C menurun  pada  hari  ke-4  dan  meningkat  kembali hingga  hari  ke-16.  Asam  total  terus  meningkat sampai hari ke-16, nilai pH dan gula total semakin menurun pada hari ke-16.
Kolesterol  di  dalam  darah  beredar  tidak dalam  keadaan  bebas,  akan  tetapi  berada  dalam partikel  –  partikel  lipoprotein.  Lipoprotein merupakan  senyawa  kompleks  antara  lemak  dan protein.  Lipoprotein  terdiri  atas  4  jenis  yaitu kilomikron, VLDL, low density lipoprotein (LDL), dan high density lipoprotein (HDL) (Devlin, 2002; Mayes  &  Botham,  2003 a ).  Satu  atau  lebih apoprotein  (protein  dan  polipeptida)  ditemukan pada  setiap  lipoprotein.  Apoprotein  utama  HDL adalah  apoprotein  A,  apoprotein  utama  LDL adalah  apoprotein  B,  yang  juga  ditemukan  pada VLDL  dan  kilomikron.  Fungsi    apoprotein  A sebagai  reseptor  HDL  dan  apoprotein  B  sebagai reseptor  LDL.  Aterosklerosis  berkaitan  dengan
rasio  yang  tinggi  LDL:HDL  atau  rasio  tinggi apoprotein  B:A  dalam  plasma  (Mayes  &  Botham, 2003 b ).  Apoprotein  B  merupakan  protein  utama dalam    partikel  lipoprotein  aterogenik  dan terutama  terdapat  dalam  partikel  LDL.  Setiap partikel  LDL  mengandung  satu  molekul  apo  B, dengan  demikian  konsentrasi  apoprotein  B mencerminkan  jumlah  partikel  LDL  dalam  tubuh (Haksa, 2010).
Aterosklerosis berhubungan dengan peningkatan  LDL.  Pengaruh  peningkatan  kadar LDL akan diikuti akumulasi ester kolesterol dalam makrofag  sehingga  kemudian  makrofag  disebut sebagai  sel  busa.  Kadar  LDL  yang  tinggi menyebabkan  tingginya  kadar  LDL  intimal. Selanjutnya LDL intimal akan mengalami oksidasi dan  menarik  monosit  dari  sirkulasi  darah  serta berubah  secara  fenotipik  menjadi  makrofag. Peningkatan  LDL  teroksidasi  pada  dinding  arteri disertai  dengan    terbentuknya  sel  busa,  akan berkembang menjadi lempeng lemak (Yanuartono, 2007).
Berdasarkan  latar  belakang  di  atas,  perlu dilakukan penelitian untuk mendapatkan bukti dan informasi  tentang  profil  lipid  tikus  putih setelah pemberian  teh  kombucha  kadar  50%  sebagai drinking water dengan variasi waktu fermentasi.

## METODE PENELITIAN
Penelitian dilakukan di Laboratorium Biologi    Struktur  dan  Fungsi  Hewan  Jurusan Biologi Fakultas Sains dan Matematika Universitas  Diponegoro  Semarang.  Menggunakan Tikus  putih  ( Rattus  norvegicus )  jantan    sebanyak 16  ekor  umur  2  bulan,  sedang  untuk  bahan perlakuan  yaitu  Teh  kombucha  kadar  50%  yang difermentasi  selama  6,  9  dan  12  hari  pada  suhu 25 o C per oral dengan spuit injeksi ujung berkanul. Adapun alat-alat yang digunakan yaitu 20 kandang individu  yang  dilengkapi  dengan    tempat  minum dan pakan, gelas ukur, timbangan digital, disetting set.
Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan Acak  Lengkap  dengan  4  perlakuan  dan  4  ulangan yaitu  :  P0  =  kontrol,  tanpa  tambahan  teh kombucha, P1 = air minum + 1,8 ml teh kombucha kadar  50%  pagi  dan  sore  fermentasi  6  hari,  P2  =
air minum + 1,8 ml teh kombucha kadar 50%  pagi dan  sore  fermentasi  9  hari,  P3  =  air  minum  +  1,8 ml  teh  kombucha  kadar  50%    pagi  dan  sore fermentasi  12  hari.  Pakan  dan  minum  diberikan secara ad libitum .
Variabel yang diukur adalah kadar kolesterol,  HDL  dan  LDL.  Data  yang  diperoleh dianalisis dengan ANOVA, berdasarkan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  pada  taraf kepercayaan 95% (α = 0,05). Analisis keseluruhan menggunakan perangkat lunak software SPSS 10,0 (Mattjik dan Sumertajaya, 2006)

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Data  hasil  analisis  penelitian  terhadap  rata- rata  kolesterol,  HDL  dan  LDL  pada  Tikus  putih ( Rattus norvegicus ) jantan  setelah pemberian Teh kombucha kadar 50% yang difermentasi selama 6, 9 dan 12 hari disajikan pada Tabel 1.
Hasil  analisis  pemberian  Teh  kombucha kadar  50%  yang  difermentasi  menunjukkan  hasil yang  berbeda  nyata  (P<0.05).  Semakin  lama fermentasi teh kombucha yang diberikan, semakin menurun kadar kolesterol pada tikus putih  ( Rattus norvegicus )  dibandingkan  dengan  kontrol  seperti tampak pada Tabel 1 dan Gambar 1.
Metabolit  yang  terkandung  dalam  teh kombucha  antara  lain  adalah  Niasin  atau  vitamin (vitamin  B3)  yang  juga  disebut  asam  nikotinat, bekerja  di  dalam  tubuh  sebagai  koenzim  dalam bentuk Nikotinamida Adenin Dinukleotida (NAD) dan  Nikotinamida  Adenin  Dinukleotida  Fosfat (NADP).  Koenzim  ini  adalah  akseptor  hidrogen berikatan  dengan  atom  hidrogen  dalam  bentuk koenzim  dehidrogenase  yang  merupakan  katalis pada  reaksi  oksidasi  reduksi.  NAD + berfungsi sebagai  koenzim  dalam  reaksi  oksidasi  alkohol dalam  reaksi  berikut  :  CH 3 CH 2 OH  +  NAD + ↔ CH 3 CHO  +  NADH  +  H + .  Reaksi  ini  akan menghasilkan  ion  H + ,  maka  akan  berjalan  baik pada pH rendah (suasana asam) (Poedjiadi,  2009). Nikotinamid  merupakan  komponen  dari  hampir semua  zat-zat  pembawa  elektron  dalam  sel  hidup (NAD+/NADH;  NADP+/NADPH)  dan  berfungsi dalam  banyak  lintasan  metabolisme  terutama dalam:  (1)  glikolisis  anaerob,  (2)  oksidatif
fosforilasi  siklus  kreb  dan  (3)  sintesis  β-oksidasi asam lemak (Linder, 2010).
Penurunan  kadar  kolesterol  oleh  niasin dapat dilakukan dengan cara menghambat perubahan lemak jaringan, mengurangi pengambilan  asam  lemak  bebas  oleh  hati  dan meningkatkan  pengeluaran  kolesterol  oleh  hepar melalui  getah  empedu.  Niasin  berperan  dalam merangsang pembentukan hormon prostaglandin I 2 yaitu  hormon  yang  mencegah  penggumpaklan (agregasi)  trombosit  sehingga  dapat  memperkecil risiko aterosklerosis (Rahayu, 2005).
Mekanisme  naiknya  kadar  HDL  karena pengaruh  pemberian  Teh  kombucha  kemungkinan disebabkan  oleh  pengikatan  asam  empedu  oleh metabolit  (yang  terkandung  dalam  teh  kombucha) di dalam usus halus yang menyebabkan meningkatnya  ekskresi  asam  empedu  fekal, sehingga  terjadi  penurunan  absorbsi  lemak  dan kolesterol, hal ini mengakibatkan kolesterol dalam hati rendah sehingga kolesterol untuk memproduksi  asam  empedu  kurang.  Kondisi  ini merangsang  terjadinya  sintesis  HDL  dalam  hati untuk  memenuhi  kekurangan  kolesterol  tersebut. Akibatnya LDL serum lebih rendah daripada HDL serum.
Seiring  dengan  penurunan  kadar  kolesterol dalam  serum  darah  dari  hasil  analisis  kadar  HDL pada  perlakuan  pemberian  teh  kombucha  kadar 50%  yang  difermentasi  selama  6,  9  dan  12  hari menunjukkan  perbedaan  yang  nyata  terhadap kontrol. Perlakuan pemberian teh kombucha kadar 50%  fermentasi  6  dan  9  hari  menunjukkan perbedaan  yang  tidak  nyata,  kemudian  pada perlakuan  pemberian  teh  kombucha  kadar  50% fermentasi  6  dan  12hari  maupun  9  dan  12  hari menunjukkan  perbedaan  yang  tidak  nyata  seperti terlihat pada Tabel 1 dan Gambar 2.
Hasil  analisis  kadar  LDL  pada  perlakuan pemberian  teh  kombucha  kadar  50%  yang difermentasi selama 6, 9 dan 12 hari menunjukkan perbedaan  yang  nyata  terhadap  kontrol.  Perlakuan pemberian  teh  kombucha  kadar  50%  fermentasi  6 dan  9  maupun  9  dan  12    hari  menunjukkan perbedaan  yang  tidak  nyata,  kemudian  pada perlakuan  pemberian  teh  kombucha  kadar  50% fermentasi 6 dan 12 menunjukkan perbedaan yang nyata seperti tampak pada Tabel 1 dan Gambar 3.
Tabel 1.  Hasil analisis rata-rata kadar kolesterol, HDL dan LDL  pada Tikus putih ( Rattus norvegicus ) jantan setelah pemberian Teh kombucha kadar 50% yang difermentasi  selama 6, 9 dan 12 hari
Variabel (mg/dL) P0 P1 P2 P3 Cholesterol 132.16 a ± 2.23          124.51 b ± 1.28        119.75 c ± 3.00      116.56 c ± 2.00 HDL 82.16 b ± 1.04            85.99 a ± 1.98         87.12 a ± 1.34        82.15 a ± 1.80
LDL
133.86 a ± 2.65       128.07 bc ± 2.72 126.13 cd ± 1.36        122.96 d ± 1.33
Keterangan :     Angka dengan superskrip yang berbeda pada baris yang sama menunjukkan perbedaan yang nyata antar perlakuan. P0 = kontrol, tanpa tambahan teh kombucha kadar 50%, P1 = air minum + 1,8 ml teh kombucha kadar 50% pagi dan sore fermentasi 6 hari, P2 = air minum + 1,8 ml teh kombucha kadar  50%  pagi  dan sore fermentasi  9  hari,  P3  =  air  minum  1,8  ml  teh kombucha kadar 50%  pagi dan sore fermentasi 12 hari.
132,16 124,51 119,75 116,56 105 110 115 120 125 130 135 P0 P1 P2 P3

## Gambar 1. Histogram rata-rata kadar kolesterol (mg/dL) pada setiap perlakuan
Keterangan  :  P0  =  kontrol,  tanpa  tambahan  teh  kombucha  kadar  50%,  P1  =  air  minum    +  1,8  ml  teh kombucha  kadar  50%    pagi  dan  sore  fermentasi    6  hari,  P2  =  air  minum  1,8  ml  teh kombucha  kadar  50%    pagi  dan  sore  fermentasi  9  hari,    P3  =  air  minum  1,8  ml  teh kombucha kadar 50% pagi dan sore fermentasi 12 hari.
Penyakit  pada  arteria  dapat  terjadi  dengan peningkatan  kadar  kolesterol  LDL  dan  VLDL dalam  darah  (hiperkolesterol).  Kenaikan  kadar kolesterol  ini  dapat  terjadi  bila  ada  gangguan pembentukan  kolesterol  dalam  hepar  atau  usus halus  (Sherwood,  2001).  Kadar  kolesterol  LDL yang  tinggi  akan  memicu  penimbunan  kolesterol di  sel  pembuluh  darah,  yang  menyebabkan munculnya aterosklerosis dan terbentuknya plak di dinding pembuluh darah (Libby & Theroux, 2005). Aterosklerosis  berhubungan  dengan  peningkatan
LDL.  Pengaruh  peningkatan  kadar  LDL  akan diikuti akumulasi ester kolesterol dalam  makrofag sehingga  kemudian  makrofag  disebut  sebagai  sel busa.  Kadar  LDL  yang  tinggi  menyebabkan tingginya  kadar  LDL  intimal.  Selanjutnya  LDL intimal  akan  mengalami  oksidasi  dan  menarik monosit  dari  sirkulasi  darah  serta  berubah  secara fenotipik  menjadi  makrofag.  Peningkatan  LDL teroksidasi  pada  dinding  arteri  disertai  dengan terbentuknya  sel  busa,  akan  berkembang  menjadi lempeng lemak (Yanuartono , 2007).
82,16 85,99 87,19 88,87 78 80 82 84 86 88 90 P0 P1 P2 P3

## Gambar 2. Histogram rata-rata HDL (mg/dL) pada setiap perlakuan
Keterangan  :    P0  =  kontrol,  tanpa  tambahan  teh  kombucha  kadar  50%,  P1  =  air  minum    +  1,8  ml  teh kombucha kadar 50%  pagi dan sore fermentasi  6 hari, P2  = air minum 1,8 ml teh kombucha kadar 50%  pagi dan sore fermentasi 9 hari,  P3 = air minum 1,8 ml teh kombucha kadar 50% pagi dan sore fermentasi 12 hari.
133,86 128,07 126,13 122,96 116 118 120 122 124 126 128 130 132 134 136 P0 P1 P2 P3

## Gambar 3. Histogram rata-rata kadar LDL (mg/dL) pada setiap perlakuan
Keterangan  :    P0  =  kontrol,  tanpa  tambahan  teh  kombucha  kadar  50%,  P1  =  air  minum    +  1,8  ml  teh kombucha  kadar  50%    pagi  dan  sore  fermentasi    6  hari,  P2    =  air  minum  1,8  ml  teh kombucha  kadar  50%    pagi  dan  sore  fermentasi  9  hari,    P3  =  air  minum  1,8  ml  teh kombucha kadar 50% pagi dan sore fermentasi 12 hari.

## KESIMPULAN
Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian  teh  kombucha  kadar  50%    yang difermentasi  selama  6,  9  dan  12  hari  dapat menaikkan  kadar  HDL,  menurunkan  kadar
kolesterol dan kadar LDL serum darah tikus putih ( Rattus  norvegicus ),  sehingga  dapat  disimpulkan bahwa teh kombucha kadar 50% yang difermentasi selama  6,  9  dan  12  hari  berpotensi  digunakan sebagai  suplemen  untuk  pencegahan  risiko
terhadap  penyakit  pembuluh  darah  dan  jantung koroner.

## DAFTAR PUSTAKA
Adriani, L., Mayasari, N., Angga and
Kartasudjana,  R.  2011.  The  effect  of fermented  Kombucha tea on HDL,LDL and Total Cholesterol levels in the duck bloods. Faculty  of  Animal  Husbandry,  Padjadjaran University, Bandung. Indonesia. Biotechnology in Animal Husbandry,
Volume  27,  No.  4.  1749-1755.  1  maret 2012.
Devlin,  M.  2002. Textbook  of  Biochemistry,  with Clinical Corelations . Willeyliss. New York.
Haksa,  K.  2010. Kadar  kolesterol  normal  bukan jaminan  terbebas  dari  risiko  penyakit jantung  koroner. 17  September  2010.
Kompas.com. All rights reserved.
Libby,  P.  and  P.  Theroux.  2005.  Pathophysiology of  coronary  artery  disease. Circulation . 111:3481-3488.
Linder,  M.C.  2010. Biokimia  Nutrisi  dan Metabolisme ,  dengan  Pemakaian  secara klinis.  Penerjemah  Aminuddin  Parakkasi.
Cetakan ke 1. Penerbit Universitas Indonesia (UI-Press). Jakarta.
Mathews,  K.C.  and  K.  E.  Van  Holde.  2012.
Biochemistry . The Benjamin/Cummings Co.Inc. New York.
Mattjik,  A.A.  dan  I.M.  Sumertajaya.  2006. Perancangan  Percobaan  dengan  Aplikasi SAS  dan    Minitab .  Ed.  Ke-3.  IPB-Press.
Bogor.
Mayes,  P.A.  and  K.M.  Botham.  2003 a . Lipid Storage  &  Transport.  Harper’s  Illustrated Biochemistry,  26 nd edition .  Mc.Graw  Hill, 205-217.
Mayes, P.A. and K.M. Botham. 2003 b . Cholesterol
Synthesis, Transport, and Excretion.
Harper’s  Illustrated  Biochemistry,  26 nd edition . Mc.Graw Hill, 219-227.
Naland,  H.  2008. Kombucha;  Teh  dengan  seribu khasiat . Agromedia Pustaka, Jakarta.
Poedjiadi,  A.  2009. Dasar-dasar  Biokimia .  UI
Press. Jakarta.
Pratiwi,  A.  Elfira,  Aryawati,  R.  2012.  Pengaruh Waktu  Fermentasi  terhadap  sifat  fisik  dan kimia  pada  pembuatan  minuman  kombucha dari  Rumput  Laut  Sargassum  sp. Maspari Journal. 2012. 4(1). 131-136.
Purwaning,  A.  2010.  Pengaruh  kombucha  Teh ( Acetobacter xylinum ) terhadap kadar kolesterol tikus putih jantan ( Rattus norvegicus ). Jurnal Department  of  Biology
Universitas Muhammadiyah, Malang. Student-
research.umn.ac.id/print/student_research _4178.html 4 Maret 2012
Rahayu,  T.  2005.  Kadar  kolesterol  darah  tikus putih  setelah  pemberian  cairan  kombucha per oral.
Jurusan  Pendidikan  Biologi,  FKIP  Universitas
Muhammadiyah, Surakarta. Jurnal
Penelitian  Sains  dan  Teknologi ,  Volume  6,
No.2.
Sherwood,  L.  2001. Human  Phisiology:  From Cells to Systems . A Division of Internasional  Thomson  Publishing  Inc.  All Right Reserved.
Winarni, D., Eva,N., Faqihuddin, A., Galih,H. dan Toumi,  S.  2010.  Pengaruh  pemberian  teh kombucha terhadap penurunan kadar kolesterol  total  dalam    darah. Universitas Sebelas  Maret  Surakarta.  Fk.uns.ac.id. 1 Maret 2012
Yanuartono.  2007.  Role  of  high  cholesterol  and high  fat  diet  on  lipid  profiles  in Sprague Dawley rats. Jurnal Sain Vet . 25: 25-33.