## AKTIVITAS ANTIOKSIDAN

## DARI EKSTRAK TONGKOL JAGUNG (Zea mays L.)
Lisa Purnawati Saleh 1 , Edi Suryanto 2 dan Adithya Yudistira 1
1 Program Studi Farmasi, FMIPA UNSRAT Manado, 95115
2 Program Studi Kimia, FMIPA UNSRAT, Manado, 95115

## ABSTRAK
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  menentukan  potensi  fitokimia  antioksidan  ekstrak tongkol  jagung  (Zea  mays  L.).  Tongkol  jagung  diekstraksi  menggunakan  metode  maserasi  selama 1x24  jam.   Penentuan  kandungan  fitokimia  dilakukan  dengan  menghitung  total  fenolik.  Pengujian aktivitas  antioksidan  menggunakan  penangkal  radikal  bebas  DPPH  (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil). Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  tongkol  jagung  memiliki  kandungan  total  fenolik. Ekstrak tongkol jagung 60% memiliki aktivitas penangkal radikal bebas yang paling tinggi, diikuti ekstrak  40,  80  dan  20%.    Kesimpulan  yang  diperoleh  dari  penelitian  ini  adalah  ekstrak  tongkol jagung memiliki potensi sebagai fitokimia antioksidan.
Kata Kunci : tongkol jagung, antioksidan, fenolik, DPPH

## ABSTRACT
The  objective  of  this  research  was  to  determine  the  potential  antioxidant  phytochemical extracts  corn  cob  (Zea  mays  L.).  Corn  cobs  extracted  using  maceration  method  for  1x24  hours. Determination  of  phytochemical  content  is  done  by  calculating  the  total  phenolic.  Testing antioxidant  activity  using  free-radical  scavengers  DPPH  (1,1-diphenyl-2-pikrilhidrazil).  Results  of this research showed that the extract of corn cobs have total phenolic. Extract 60% corn cobs have prophylactic  activity  of  free  radicals,  followed  by  extract  40,  80  and  20%.    Conclusion  of  this research is corn cob extracts have potential as antioxidants phytochemicals.
Keywords : corn cob, antioxidant, phenolic, DPPH

## PENDAHULUAN
Antioksidan  adalah  senyawa  yang mampu  menangkal  atau  meredam  dampak negatif  oksidan  dalam  tubuh.    Antioksidan bekerja  dengan  cara  mendonorkan  satu elektronnya  kepada  senyawa  yang  bersifat oksidan  sehingga  aktivitas  senyawa  oksidan tersebut  bisa  dihambat.    Keseimbangan oksidan  dan  antioksidan  sangat  penting
karena  berkaitan  dengan  berfungsinya  sistem imunitas tubuh (Meydani et al., 1995).
Penggunaan senyawa antioksidan semakin  berkembang,  baik  untuk  makanan maupun  untuk  pengobatan  seiring  dengan bertambahnya  pengetahuan  tentang  aktivitas radikal bebas (Boer, 2000).
Radikal  bebas  diduga  merupakan penyebab  kerusakan  sel  yang  mendasari timbulnya  berbagai  macam  penyakit,  seperti
kanker,  jantung  koroner,  rematik  artritis, penyakit  respiratorik,  katarak,  penyakit  hati, serta  berperan  utama  pada  proses  penuaan dini.    Radikal  bebas  terbentuk  dalam  tubuh sebagai  produk  samping  proses  metabolisme, selain  itu  juga  dapat  berasal  dari  luar  tubuh yang  terserap  melalui  pernafasan  atau  kulit (Bast et al., 1991).
Jagung  merupakan  bahan  alam  yang banyak  dikonsumsi  masyarakat  sehingga menghasilkan  limbah  tongkol  jagung  yang banyak pula.  Tongkol jagung hanya dianggap sebagai sesuatu yang tidak berguna. Kebanyakan  masyarakat  hanya  mengambil biji jagung yang menempel di tongkol jagung, kemudian  tongkol  jagung  dibuang  atau dibakar.    Padahal  tongkol  jagung  merupakan simpanan  makanan  untuk  pertumbuhan  biji jagung  selama  melekat  pada  tongkol,  maka dari  itu  tongkol  jagung  diduga  memiliki senyawa-senyawa aktif  yang dapat berpotensi sebagai antioksidan.
Penelitian ini bertujuan untuk menentukan  potensi  fitokimia  antioksidan dari ekstrak tongkol jagung (Zea mays L.).

## METODOLOGI PENELITIAN
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium  Advance  F-MIPA  UNSRAT pada  bulan  Juni-Juli  2012.    Sampel  yang digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  tongkol jagung  (Zea  mays  L.)  hibrida  dalam  keadaan kering  yang  berasal  dari  Propinsi  Gorontalo. Bahan  kimia  yang  digunakan  adalah  etanol (20,  40,  60,  80%),  larutan  natrium  karbonat 2%,  reagen  Folin-Ciocalteu  50%  dan  1,1- difenil-2-pikrilhidrazil  (DPPH)  93 µ M.    Alat yang digunakan yaitu alat-alat gelas (erlenmeyer, gelas kimia, tabung reaksi, gelas ukur),  botol  kaca  transparan,  mikropipet, blender,  spatula,  vortex,  saringan,  rotary evaporator dan spektrofotometer Milton Roy.

## Persiapan Sampel
Tongkol jagung dikeringkan, di potong-potong  menjadi  lebih  kecil,  lalu dihaluskan dengan cara diblender.
Ekstraksi
Ekstraksi
tongkol jagung menggunakan  pelarut  etanol  20,  40,  60  dan 80%.    Ekstraksi  dilakukan  dengan  cara maserasi.    Sebanyak  25  g  serbuk  tongkol jagung dimasukkan ke dalam gelas erlenmeyer  lalu  ditambahkan  pelarut  etanol 250  mL  hingga  sampel  terendam  semuanya. Maserasi  selama  24  jam  kemudian  disaring. Filtrat diuapkan untuk menghilangkan pelarutnya  menggunakan  rotary  evaporator. Setelah  itu  ekstrak  yang  telah  bebas  pelarut dikeringkan  dalam  oven  dengan  suhu  40°C untuk memperoleh ekstrak kering.

## Penentuan Kandungan Total Fenolik
Kandungan total fenolik ekstrak tongkol  jagung  (Zea  mays  L.)  ditentukan menggunakan metode Folin Ciocalteu (Conde et  al.,  1997).    Sebanyak  0,1  mL  larutan ekstrak  1000  ppm  dimasukkan  dalam  tabung reaksi, lalu ditambahkan 0,1 mL reagen Folin Ciocalteu  50%.    Campuran  tersebut  divortex, lalu  ditambahkan  2  mL  larutan  natrium karbonat 2%. Selanjunya campuran diinkubasi  dalam  ruang  gelap  selama  30 menit.  Absorbansinya dibaca pada ƛ 750 nm dengan  spektrofotometer.    Kandungan  total fenol  dinyatakan  sebagai  mg  ekivalen  asam galat/g ekstrak.
Penentuan Penangkal Radikal Bebas

## DPPH
Penentuan  aktivitas  penangkal  radikal bebas  DPPH  menurut  Burda  dan  Olezek (2001).    Sebanyak  0,5  mL  masing-masing ekstrak 1000 ppm ditambahkan dengan 2 mL larutan  1,1-difenil-2-pikrilhidrazil  (DPPH)  93 µ M  dalam  etanol  dan  divortekx  selama  2 menit.    Berubahnya  warna  larutan  dari  ungu ke  kuning  menunjukkan  efisiensi  penangkal radikal  bebas.    Selanjutnya  pada  5  menit terakhir  menjelang  30  menit  inkubasi, absorbansi  diukur  pada ƛ 517  nm  dengan menggunakan  spektrofotometer.    Aktivitas penangkapan  radikal  bebas  dihitung  sebagai persentase berkurangnya warna DPPH dengan menggunakan persamaan :
Aktivitas penangkal radikal bebas (%)
= 1 –
x 100%

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Ekstraksi Tongkol Jagung
Penelitian  ini  menggunakan  metode maserasi untuk mengekstraksi tongkol jagung. Metode ekstraksi maserasi ini biasanya umum dilakukan untuk mengekstrak sampel tumbuhan.    Sampel  yang  digunakan  adalah tongkol  jagung  yang  sudah  dikeringkan. Tongkol jagung dipotong-potong lalu dihaluskan dengan menggunakan alat penggiling.    Kemudian  tongkol  jagung  halus ditimbang  sebanyak  25  g  lalu  dimaserasi dengan masing-masing pelarut (20, 40, 60 dan 80%).    Setelah  dimaserasi  selama  24  jam, sampel disaring dengan kertas saring menggunakan  vacum,  kemudian  filtratnya dievaporasi  untuk  memisahkan  ekstrak  dari pelarutnya.    Ekstrak  yang  telah  terpisah  dari pelarut  dikeringkan  dalam  oven  pada  suhu 40°C  selama  beberapa  hari.    Setelah  kering, ekstrak  dikeruk  dan  ditempatkan  dalam wadah.
Rendemen  yang  diperoleh  dari  hasil ekstraksi  25  g  tongkol  jagung  dengan  pelarut etanol  konsentrasi  20,  40,  60  dan  80% sebanyak 250 mL dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel 1. Rendemen Hasil Ekstrak Kering Tongkol Jagung
Ekstrak Etanol (%) Rendemen (%) Warna E 20 E 40 E 60 E 80 1,28 1,48 1,68 1,12 Coklat tua Coklat tua Coklat tua Coklat tua
Ket : E 20 = Etanol 20%, E 40 = Etanol 40%, E 60 = Etanol 60%, E 80 = Etanol 80%
Berdasarkan  tabel  1,  dapat  diketahui bahwa  rendemen  terbanyak  dihasilkan  oleh ekstrak  dengan  pelarut  etanol  konsentrasi 60%  (l,68%)  diikuti  dengan  estrak  pelarut etanol  40%  (1,48%),  ekstrak  etanol  20% (1,28%) dan ekstrak etanol 80% (l,l2%).  Dari
hasil  penelitian  ini  dapat  diketahui  bahwa ekstrak dengan pelarut etanol dengan konsentrasi  40  dan  60%  memiliki  nilai rendemen  yang  lebih  tinggi  dibandingkan ekstrak  dengan  etanol  konsentrasi  20  dan 80%.    Harborne  (1983)  menyatakan  bahwa komponen  fenolik  dapat  diekstraksi  dari bahan tumbuhan dengan menggunakan pelarut  polar  seperti  air,  etanol,  metanol  dan aseton.    Penggunaan  etanol  sebagai  pelarut membuat  senyawa  fenolik  dalam  tongkol jagung  terekstraksi,  karena  senyawa  polar melarutkan yang polar.

## Penentuan Kandungan Total Fenolik
Hasil ekstraksi tongkol jagung dengan empat macam pelarut etanol (20, 40, 60, 80%) dibuat  konsentrasi  1000  ppm  kemudian  diuji kandungan  total  fenolik.    Hasil  analisis kandungan  total  fenolik  yang  diperoleh  pada penelitian ini dapat dilihat pada Tabel 2.

## Tabel 2. Kandungan Total Fenolik dari Ekstrak Tongkol Jagung
Jenis Ekstrak (1000 ppm) Penentuan Kandungan Total Fenolik (mg/kg) E 20 E 40 E 60 E 80 44,18 81,53 81,43 76,94
Ket : E 20 = Etanol 20%, E 40 = Etanol 40%, E 60 = Etanol 60%, E 80 = Etanol 80%
Analisis  kandungan  total  fenolik dilakukan  untuk  mengetahui  seberapa  besar kandungan  senyawa  fenolik  yang  terdapat dalam  ekstrak  tongkol  jagung.    Penentuan total  fenolik  dinyatakan  sebagai  asam  galat mg/kg  ekstrak.    Total  kandugan  fenolik  dari ekstrak  etanol  tongkol  jagung  20,  40,  60  dan 80%, dapat dilihat pada Tabel 2.
Berdasarkan  Tabel  2,  dapat  diketahui bahwa  ekstrak tongkol jagung dengan pelarut etanol  konsentrasi  40%  memiliki  kandungan total  fenolik  yang  paling  tinggi  yaitu  81,53 mg/kg,  diikuti  dengan  pelarut  etanol  60% yang tidak berbeda jauh (81,43 mg/kg), etanol
80%  (76,94  mg/kg)  dan  etanol  20%  (44,18 mrg/kg).    Pelarut  etanol  40  dan  60%  diduga lebih  banyak  melarutkan  senyawa  fenolik yang  terdapat  dalam  tongkol  jagung.    Hal inilah  yang  membuat  ekstrak  dengan  pelarut etanol  konsentrasi  40  dan  60%  memiliki kandungan  total  fenolik  yang  lebih  tinggi dibanding  ekstrak  dengan  pelarut  etanol konsentrasi 20 dan 80%.
Kandungan total fenolik dalam sampel ditentukan  berdasarkan  kemampuan  senyawa fenolik  dalam  tongkol  jagung,  bereaksi dengan asam fosfomolibdat-fosfotungstat dalam  reagen  Folin-ciocalteu  yang  berwarna kuning dan akan berubah menjadi warna biru. Semakin tua intensitas warnanya menandakan semakin  tingginya  kandungan  total  fenol  di dalam  ekstrak  (Shahidi  dan  Naczk,  1995). Dalam hal ini, ekstrak tongkol jagung dengan pelarut etanol 40 dan 60% memiliki intensitas warna  biru  yang  lebih  tua  dibandingkan ekstrak  dengan  etanol  20  dan  80%.    Oleh sebab  itu,  ekstrak  dengan  pelarut  etanol  40 dan  60%  memiliki  kandungan  total  fenolik tertinggi, dibandingkan ekstrak dengan etanol 20 dan 80%.

## Aktivitas Penangkal Radikal Bebas DPPH
Aktivitas  antioksidan  dari  ekstrak tongkol  jagung  dilakukan  dengan  metode penangkal  radikal  bebas  DPPH.    Prinsip metode penangkapan radikal adalah pengukuran penangkapan radikal bebas sintetik  dalam  pelarut  organik  polar  seperti etanol  pada  suhu  kamar  oleh  suatu  senyawa yang mempunyai aktivitas antioksidan.
Proses penangkapan radikal bebas ini melalui mekanisme  pengambilan  atom  hidrogen  dari senyawa  antioksidan  oleh  radikal  bebas sehingga  radikal  bebas  menangkap  satu elektron  dari  antioksidan.    Radikal  bebas sintetik  yang  digunakan  DPPH.    Senyawa DPPH  bereaksi  dengan  senyawa  antioksidan melalui  pengambilan  atom  hidrogen  dari senyawa  antioksidan  utnuk  mendapatkan pasangan elektron (Pokorny, 2001).
Senyawa yang beraksi sebagai penangkal  radikal  bebas  akan  mereduksi DPPH  yang  dapat  diamati  dengan  adanya peubahan  warna  DPHH  dari  ungu  menjadi kuning  ketika  elektron  ganjil  dari  radikal
DPPH  telah  berpasangan  dengan  hidrogen dari  senyawa  penangkal  radikal  bebas  yang akan menbentuk DPPH-H tereduksi (Molyneux, 2004).
Masing-masing ekstrak tongkol jagung (20,  40,  60,  80%)  dibuat  konsentrasi  1000 ppm, kemudian dihitung nilai persen aktivitas penangkal  radikal  bebas.    Hasil  pengujian aktivitas  antioksidan  dengan  metode  DPPH disajikan pada gambar di bawah ini.
Gambar. Aktivitas penangkal radikal bebas DPPH dari ekstrak tongkol jagung.
Berdasarkan hasil yang diperoleh pada Gambar, maka dapat diketahui bahwa ekstrak dengan pelarut etanol 60% memiliki kemampuan aktivitas penangkal radikal bebas yang  paling  tinggi  yaitu  75,9%,  selanjutnya diikuti  dengan  ekstrak  etanol  40%  (73,29%), 80%  (69,43%)  dan  yang  terendah  ekstrak etanol  20%  (40,22%).    Hal  ini  menunjukan bahwa  senyawa  aktif  yang  terkandung  dalam ekstrak  tongkol  jagung  memiliki  kemampuan yang baik dalam menangkal radikal bebas.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  yang  didapatkan  dari penelitian  ini,  dapat  diambil  kesimpulan bahwa,  ekstrak  tongkol  jagung  memiliki potensi  sebagai  fitokimia  antioksidan  karena di  dalam  ekstrak  terdapat  senyawa  yang berfungsi  sebagai  antioksidan  yaitu  fenolik. Ekstrak  tongkol  jagung  60%  memiliki aktivitas penangkal radikal bebas  yang paling tinggi, diikuti ekstrak 40, 80 dan 20%.
40.02 73.28 75.9 69.43 0 20 40 60 80 E 20 E 40 E 60 E 80 A k ti v it a s P e n a n g k a l R a d ik a l B e b a s (% )
Jenis Ekstrak (1000 ppm)
Bast,  A.,  G.R.M.M.  Haenen  and  C.J.A.
Doelman. 1991. Oxidants and Antioxidants: State of Art. The American journal of Medicine.
Proceedings  of  a  Symposium  Oxidants and  Antioxidats  :  Pathophysiologic Determinants and Therapeutic Agents. Boer,  Y.  2000  Uji  Aktivitas  Antioksidan Ekstrak  Kulit  Buah  Kandis  (Garcinia parvifolia Miq).  Jurnal  Matematika dan IPA. 1 : 26-33
Burda,  S.  dan  W.  Olezek.  2001.  Antioxidant
and Antiradical Activities of Flavonoids.  J.  Agric.  Food  Chem.  49  : 2774-2779
Conde,  E.E.,  M.C.  Cadahia,  G.  Vallejo,
B.F.D.  Simon  and  J.R.G.  Adrados. 1997. Low
Molecular Weight Polyphenol  in  Cork  of  Querceus  Suber.
J. Agric. Food Chem. 45 : 2695-2700
Harborne,  J.B.  1987.  Metode  Fitokimia  :
Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis
Tumbuhan. ITB : Bandung.
Meydani  et  al.  1995.  Antioxidants  and Immune  Response  in  Aged  Persons  :
Overview of Present Evidence.
American  Journal  of  Clinical  Nutrition. 62 : 1462 -1476 Molyneux,  P.  2004.  The  Use  of  the  Stable Free  Radical  Diphenylpicrylhidrazyl (DPPH)  for  Estimating  Antioxidant Activity.  Songklanakarin.  J.  Science
Technol. 26 : 211-219
Pokorny,  J.,  N.  Yanishlieva,  and  M.  Gordon. 2001.  Antioxidant  in  Food  :  Practical Application.  CRC  Pres.  Boca  Raton, Coston,  New  York,  Washington,  Dc.
Woodhead Publishing Limited. Cambridge, England. Shahidi,  F.  and  M.  Naczk.  1995.  Food Phenolic  :  Sources,  Chemistry,  Effect,
Applications. Lancaster, Technomic
Publishing, co.inc.