…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..
………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. ISSN 2798-3471 (Cetak)
Journal of Innovation Research and Knowledge
ISSN 2798-3641 (Online)
DOCKING MOLEKULER SENYAWA POTENSIAL DAUN KELOR (Moringa oleifera) TERHADAP RESEPTOR FOLAT
Oleh Rahmawaty Hasan 1* , Fauzah Cholashotul I’anah 2 , Rizky Resvita R Bahi 3 1 Program Studi S1 Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Ibrahimy
2 Program Studi S1 Kebidanan, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Ibrahimy 3 Program Studi S1 Farmasi, Institut Kesehatan dan Teknologi Graha Medika Email: 1 rahmahasan1234@gmail.com

## Abstrak
Asam folat merupakan mikronutrien yang sangat diperlukan oleh ibu hamil dalam perkembangan sistem saraf. Konsumsi daun kelor dapat meningkatkan kadar hemoglobin yaitu >11 gr%. Potensi zat  gizi  yang  terkandung  dalam  daun  kelor  mampu  memenuhi  kebutuhan  zat  gizi  ibu  hamil. Namun  identifikasi  senyawa  aktif  tersebut  terhadap  makromolekul  atau  target  aksi  molekuler asam  folat  belum  diketahui  dengan  jelas.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengidentifikasi kandungan kimia daun kelor yang dapat  berinteraksi  dengan reseptor folat  secara in  silico serta prediksi parameter farmakokinetika basis webserver SwissADME. Target molekuler yang dipilih adalah  reseptor  folat  alfa  (PDB:  4LRH)  dengan  teknik docking molekuler  menggunakan Autodock  4.2  yang  telah  dilakukan  validasi  sebelumnya  terhadap  ligan  asli.  Target  molekuler yang  dipilih  adalah  reseptor  folat  alfa  (PDB:  4LRH)  dengan  teknik docking molekuler menggunakan Autodock 4.2 yang telah dilakukan validasi sebelumnya terhadap ligan asli. Hasil docking molekuler  menunjukkan  bahwa  senyawa  potensial  daun  kelor  adalah  glucosinalbin, niazidin,  niazinin,  niazirin  dan  rhamnetin  yang  memiliki  nilai  energi  ikatan  kurang  dari  -8 kkal/mol. Namun senyawa potensial tersebut tidak lebih kurang dari nilai energi ikatan asam folat sebagai  ligan  asli  pada  makromolekul  reseptor  asam  folat  alfa.  Hasil  prediksi  parameter farmakokinetika menunjukkan bahwa seluruh senyawa potensial daun kelor menunjukkan bahwa niazinin, niazirin dan rhamnetin terabsorpsi dengan tinggi dalam saluran gastrointestinal, kecuali niazidin dan glucosinalbin. Rhamnetin merupakan senyawa potensial yang dapat dikatalisis oleh enzim CYP3A4, CYP1A2 dan CYP2D6.
Kata Kunci: Asam Folat; Moringa Oleifera; Docking Molekuler; Prediksi Farmakokinetika.
PENDAHULUAN
Masa kehamilan yang optimal tergantung  kepada  pemberian  asuhan  yang tepat,  persiapan  antenatal  yang  memadai  dan tercukupinya kebutuhan nutrisi pada ibu hamil. Konsekuensi  dari  kekurangan  gizi  selama masa kehamilan dapat memengaruhi kesehatan ibu, anak dan juga generasi mendatang. Sangat penting saat memasuki kehamilan ibu memiliki  status  gizi  normal  dan  mendapatkan nutrisi yang memadai selama kehamilan untuk kesehatan  ibu  dan  kesejahteraan  janin.  Usia ibu saat hamil dapat mempengaruhi kebutuhan zat gizi. Usia ibu saat hamil yang relatif muda atau  kurang  dari  20  tahun  membutuhkan  zat
gizi  lebih  banyak  dibandingkan  dengan  usia ibu  hamil  lebih  dari  20  tahun.  Zat  gizi  yang tidak  tercukupi  pada  ibu  hamil  dengan  usia kurang  dari  20  tahun  maka  menyebabkan terjadinya  kompetisi  pemenuhan  zat  gizi antara ibu dan bayi.
Menurut  Centers  for  Disease  Control and  Prevention  (CDC)  pada  tahun  2015, sekitar  2  miliar  orang  di  dunia  mengalami kekurangan  mikronutrien.  Berdasarkan  Food and  Nutrition  Technical  Assistance  III  Project (FANTA),  negara  di  Asia  termasuk  ke  dalam daftar  negara  yang  mengalami  kejadian malnutrisi  cukup  tinggi  (kekurangan  energi kronis  dan  kekurangan  mikronutrien)  yaitu
…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..
………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. Journal of Innovation Research and Knowledge
sekitar 10 – 40%. Ibu hamil rentan mengalami kekurangan mikronutrien karena saat kehamilan  terjadi  pertumbuhan  janin  yang cepat,  diferensiasi  organ,  dan  pembelahan  sel yang  cepat.  Penelitian  yang  dilakukan  di  Asia Selatan  menunjukkan  bahwa  ibu  hamil mengalami kekurangan asam folat sekitar 12 – 26% dan kekurangan seng sekitar 15 – 74%.
Mikronutrien  yang  dibutuhkan  saat kehamilan  diantaranya  adalah  asam  folat  dan seng  yang  berfungsi  untuk  perkembangan sistem saraf. Kecukupan nutrisi pada ibu hamil sangat  berdampak  pada  pertumbuhan  janin, perkembangan, berat lahir bayi, dan kesehatan ibu. Dampak dari kekurangan asam  folat pada saat  hamil  dapat  menyebabkan  anemia, abortus,    bayi    berat    lahir    rendah    (BBLR), anemia  sampai  dengan  kematian  perinatal. Pemenuhan  kebutuhan  asam  folat  didapatkan melalui  makanan  yang  dikonsumsi  ataupun melalui  suplemen.  Pemenuhan  zat  gizi  asam folat  didapatkan  dari  daun  kelor  (Moringa oliefera).  Daun  kelor  mengandung  vitamin  A, vitamin  C,  vitamin  B,  kalsium,  kalium,  besi dan  protein  dalam  jumlah  sangat  tinggi  yang mudah  dicerna  dan  diasimilasi  oleh  tubuh manusia.  Daun  kelor  mengandung  nurtisi penting seperti zat besi 28,2 mg, kalsium 20,03 mg  dan  vitamin  A  16,3  mg.    Berbagai  jenis senyawa  antioksidan  yang  terkandung  dalam daun  kelor  seperti  asam  askorbat,  flavonoid, fenolat dan karotenoid.
Penelitian Bora mengemukakan bahwa ibu  hamil  yang  mengkonsumsi  daun  kelor dapat  meningkatkan  kadar  hemoglobin  yaitu >11  gr%.  Potensi  zat  gizi  yang  terkandung dalam daun kelor mampu memenuhi kebutuhan  zat  gizi  ibu  hamil.6  Namun identifikasi  senyawa  aktif  tersebut  terhadap makromolekul atau target aksi molekuler asam folat belum diketahui dengan jelas. Identifikasi target  aksi  molekuler  dimaksudkan  guna optimasi aktivitas farmakodinamik yang terarah berdasarkan pola interaksi obat dengan targetnya.  Tantangan  yang  dihadapi  dalam identifikasi  target  aksi  molekuler  suatu senyawa  aktif  ialah  suatu  proses  pengujian
yang  panjang  dan  membutuhkan  biaya  yang besar. Tantangan tersebut dapat diatasi melalui eksperimen  komputasi  dengan  pendekatan  in silico  dalam  teknik  penambatan  molekuler (docking  molecular).  Pesatnya  perkembangan dan  kemajuan  teknik  komputasi  saat  ini memungkinkan  dilakukannya  uji  in  silico untuk mempercepat proses pemilihan senyawa-senyawa yang akan disintesis. Docking  molekuler  merupakan  salah  satu metode  CADD  (Computer  Aided  Drug Design) yang dapat digunakan untuk memberikan gambaran interaksi suatu senyawa  terhadap  protein  target  dengan memprediksi konformasi dan energi ikatannya. Pemanfaatan teknik docking molekuler,  protein  target  dari  beberapa kandungan  kimia  daun  kelor  yang  memiliki aktivitas  biologi  terhadap  reseptor  folat  dapat diprediksi  dan  diidentifkasi  berdasarkan  skor dan  model  interaksi  ligan  dan  protein  dengan teknik  komputasi  menggunakan  program Autodock 4.0 dalam Autodock Tools.
Selanjutnya  dilakukan  pengujian  secara  in silico untuk memprediksi parameter farmakokinetik kandungan kimia kelor terhadap  makromolekul  target  terapi  reseptor folat  menggunakan  webform  SwissADME. Berdasarkan  uraian  tersebut,  penelitian  ini bertujuan  untuk  mengidentifikasi  kandungan kimia  daun  kelor  yang  dapat  berinteraksi dengan  reseptor  folat  secara  in  silico  dengan teknik  docking  molekuler  serta  prediksi parameter  farmakokinetika  basis  webserver SwissADME.

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Perangkat keras yang digunakan adalah notebook Asus TP203NAH dengan spesifikasi processor  Intel(R)  Celeron(R)  CPU  N3350 @2.40  GHz,  RAM  4GB,  VGA  Integrated Intel®  HD.  Perangkat  lunak  yang  digunakan adalah SwissPred, SuperPred, Pubchem, Protein  Data  Bank,  AutoDock  4.0  (Autodock Tools), VegaZZ dan SwissADME.
…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..
ISSN 2798-3641 (Online)

## Cara Kerja
Preparasi Makromolekul dan Ligan Makromolekul reseptor folat (PDB ID: 4LRH)  yang  berhasil  diidentifikasi  melalui skrining  awal  SwissPred  dan  SuperPred Prediciton  diunduh  strukturnya  dari  PDB (https://www.rcsb.org)  dalam  format  .pdb. Struktur  tiga  dimensi  ligan  uji  yang  telah dibuat dengan VegaZZ dalam format .mol lalu dioptimasi  dengan  Autodock  Tools.  Preparasi dilakukan  melalui  Autodock  Tools  dengan tahap  pemisahan  ligan  asli  dan  molekul  air, serta  penambahan  hidrogen  dan  muatan Gasteiger. Pengaturan grid box juga dilakukan untuk  menempatkan  ligan  uji  serupa  dengan ligan  asli  yang  mengikat  sisi  aktif  reseptor folat.

## Validasi Metode Docking
Validasi  metode  dilakukan  terhadap docking  dari  ligan  asli  untuk  mencari konformasi  ligan  asli.  Makromolekul  yang telah dipreparasi sebelumnya dilakukan penambatan kembali (redocking) dengan ligan asli. Konformasi hasil docking yang diperoleh selanjutnya  disejajarkan  dengan  konformasi ligan asli pada struktur hasil kristalografi yang dinyatakan  dalam  nilai  RMSD.  Nilai  RMSD menyatakan  kesejajaran  konformasi  struktur yang masih dapat diterima dengan nilai kurang dari  2,5  Å,  bila  semakin  kecil  atau  mendekati nilai 0 maka nilai kesejajaran semakin baik.

## Docking Molekuler
Proses  docking  molekuler  dilakukan dengan  menggunakan  program  AutoDock  4.0 dengan  AutoDock  Tools  (ADT).  Pengaturan parameter docking dengan format makromolekul  rigid  serta  nomor  GA  Runs (200)  dan  Population  Size  (150).  Kemudian pilih  submenu  Output  untuk  Lamarckian  GA (4.2).  Hasil  docking  seluruh  ligan  uji menghasilkan ΔGbinding (kkal/mol).
Prediksi Parameter Farmakokinetik
Prediksi profil farmakokientik dilakukan secara daring menggunakan webserver Swiss ADME (http://www.swissadme.ch). Tahap awal
dilakukan dengan memasukkan kode SMILES dari  kandungan  kimia  oyong  atau  ligan  uji
yang didapatkan dari PubChem, lalu klik Run. Selanjutnya ditampilkan hasil prediksi senyawa  tersebut  yang  terdiri  dari  beberapa parameter  profil  farmakokientik.  Parameter tersebut terdiri dari radar bioavailabilitas, sifat fisikokimia,  lipofilisitas,  kelarutan  dalam  air, profil farmakokinetik, dan drug-likeness.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Preparasi Struktur Tiga Dimensi

## Makromolekul
Preparasi  makromolekul  atau  protein uji  merupakan  langkah  pertama  dalam melakukan proses docking molekuler. Struktur makromolekul  yang  digunakan  dapat  diunduh dari webform protein data bank (http://www.rscb.org/).  Makromolekul  terpilih adalah  reseptor  folat  (PDB  ID:  4LRH)  yang berhasil  diidentifikasi  melalui  skrining  awal SwissPred  dan  SuperPred  Prediciton.  Metode penentuan struktur makromolekul yang digunakan  ialah  metode  kristalografi  (difraksi sinar  X)  karena  dapat  diaplikasikan  untuk struktur  makromolekul  yang  besar  dan  lebih presisi.  Nilai  resolusi  konformasi  pula  harus diperhatikan  dengan  kriteria  RMSD  <2,5Å. Adapun  organisme  yang  digunakan  ialah manusia (Homo sapiens).
Hasil  unduhan  makromolekul  dalam format .pdb masih terdapat kompleks ligan asli dan molekul air hasil pengkristalan. Ligan asli dan molekul air tersebut harus dihilangkan dari makromolekul  melalui  optimasi  agar  tidak dapat  mengganggu  proses  docking  molekuler. Ligan  asli  dihilangkan  agar  mendapatkan individu makromolekul yang akan didockingkan  dengan  ligan  uji.  Molekul  air dihilangkan  karena  dapat  memediasi  interaksi antara ligan dengan reseptor dan hasil docking molekuler yang didapatkan kurang baik karena adanya  kompleksitas  perhitungan  matematika dalam  docking  sehingga  menyebabkan  waktu docking yang diperlukan menjadi lebih lama.9 Preparasi  atau  optimasi  dilakukan  melalui program
AutoDock Tools. Selain penghilangan  molekul  ligan  asli  dan  molekul air, preparasi juga dilakukan dengan menghilangkan  molekul-molekul  non  residu
…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..
………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. Journal of Innovation Research and Knowledge
asam  amino  dan  penambahan  muatan  untuk penyesuaian  lingkungan  kimia.  Residu  selain asam amino dihilangkan karena dapat mengganggu  interaksi  antara  ligan  dengan residu asam amino pada sisi aktif makromolekul.  Penghilangan  residu  selain asam  amino  perlu  ditinjau  kembali  dengan telaah  jurnal  makromolekul  terpilih  yang dilampirkan oleh PDB.

## Preparasi Struktur Tiga Dimensi Ligan Uji
Penelitian  ini  menggunakan  5  struktur senyawa  potensial  sebagai  ligan  uji.  Struktur tiga  dimensi  ligan  uji  didapatkan  melalui konversi  notasi  baris  Canonical  SMILES dengan  menggunakan  program  VegaZZ. Konversi  notasi  baris  Canonical  SMILES  ke representasi  tiga  dimensi  dilakukan  dengan pendekatan  minimalisasi  energi.  Preparasi ligan  uji  dilakukan  dengan  penghilangan molekul  air  agar  tidak  mengganggu  proses docking  dengan  mempermudah  kalkulasi matematika  dalam  docking  molekuler.10 Selanjutnya perlu dilakukan penambahan atom hidrogen  dengan  tujuan  untuk  menyesuaikan proses  docking  agar  mendekati  suasana  pH dalam  tubuh  serta  dapat  memunculkan kembali  atom  hidrogen  pada  molekul  agar dapat  mengamati  ikatan  hidrogen  yang nampak  pada  interaksi  ligan  dengan  reseptor target.
Struktur  ligan  uji  selanjutnya  dikaji dalam  mendapatkan  struktur  yang  lebih konvergen  atau  mampu  terpusat  pada  binding pocket  reseptor.  Hal  tersebut  didasarkan  pada jumlah torsi aktif yang dimiliki masing-masing ligan  uji.  Banyaknya  jumlah  torsi  aktif  yang dimiliki menjadikan waktu pencarian konformasi terbaik dan hasil docking molekuler  makin  lama  dan  sulit  diperoleh. Penentuan  jumlah  torsi  aktif  dimaksudkan untuk  mengetahui  ikatan-ikatan  aktif  yang dapat berotasi selama proses docking.

## Validasi Metode Docking Molekuler
Validasi  metode  docking  molekuler merupakan  uji  pendahuluan  dan  penting dilakukan  sebelum  proses  docking  molekuler terhadap  ligan  uji.  Pada  tahap  ini  dilakukan
proses penambatan kembali atau mendockingkan  kembali  ligan  asli  terhadap protein  target.  Penentuan  pusat  dari  gridbox merupakan langkah awal dalam tahap validasi. Gridbox  merupakan  suatu  analogi  terhadap ruang  bagi  ligan  asli  atau  senyawa  aktif membentuk  konformasi  ketika  ditambatkan dengan  protein  target.  Penentuan  gridbox dilakukan  untuk  mengetahui  titik  koordinat pada  binding  site  atau  sisi  aktif  dari  suatu protein.  Pengaturan  gridbox  yang  dilakukan adalah  pengaturan  koordinat  grid  center  dan pengaturan grid size.
Proses  redocking  dilakukan  dengan metode rigid, yaitu mengatur agar makromolekul  bersifat  rigid  atau  kaku sehingga  tidak  terjadi  pengubahan  bentuk binding site selama proses redocking sedangkan  ligan  yang  akan  di-docking-kan bersifat  fleksibel.10  Parameter  validasi  dalam molecular  docking  berupa  nilai  Root  Mean Square Deviation (RMSD). RMSD menunjukkan  perbandingan  konformasi  ligan asli hasil penambatan kembali dengan konformasi  ligan  asli  hasil  pengukuran kristalografi.  Batas  nilai  RMSD  yang  dapat diterima adalah ≤ 3Ǻ.
Makromolekul  folat  (reseptor  alfa folat)  memiliki  nilai  RMSD  sebesar  2,80  Ǻ yang terdiri dari 8 chain protein. Validasi ligan redocked  menunjukkkan  hasil  yang  baik dengan  nilai  RMSD  masing-masing  chain sebesar  <2Ǻ.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa konformasi  ligan  asli  hasil  penambatan kembali  terhadap  makromolekul  target  serupa dengan konformasi hasil kristalografi. Tabel 1 menunjukkan hasil validasi penambatan kembali terhadap ligan asli dengan nilai energi ikatan  atau  energi  Gibbs  yang  memenuhi syarat.  Dengan  demikian  makromolekul  yang dipilih  sebagai  protein  target  dapat  digunakan dalam docking molekuler.
Analisa Hasil Docking Molekuler Pemilihan makromolekul sebagai protein  target  berdasarkan  adanya  potensi interaksi berbagai kandungan kimia kelor yang diuraikan pada tabel 1 terhadap protein target.
…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..
ISSN 2798-3641 (Online)
Docking  molekuler  dilakukan  menggunakan program Autodock 4.2 dalam AutoDock Tools dengan  pengaturan  gridbox  yang  disesuaikan serupa  ketika  validasi  metode.  Docking molekuler  memberikan  hasil  berupa  nilai energi  ikatan  terendah  atau  energi  bebas (ΔGbinding)  dan  pose  konformasi  ligan. ΔGbinding  berguna  dalam  perhitungan  nilai konstanta  kecepatan  reaksi  yang  merupakan parameter  kekuatan  afinitas  pengikatan  ligan terhadap  reseptor.  Semakin  rendah  nilai tersebut,  ikatan  reseptor  dan  ligan  akan semakin  stabil  karena  gaya  tarik-menarik antaratom  semakin  besar  dan  gaya  tolak- menolak menjadi minimum sehingga konformasi menjadi semakin stabil.
Berdasarkan  hasil  docking  molekuler terhadap  8  chain  makromolekul,  ditemukan ligan  uji  atau  kandungan  kimia  kelor  yang potensial  dapat  berinteraksi  dengan  reseptor folat. Terdapat 5 ligan uji terbaik dengan nilai energi  ikatan  terendah  yang  lebih  kecil  dari ligan asli dan kurang dari -8 kkal/mol. Namun nilai  energi  ikatan  kandungan  kimia  kelor tidak  lebih  rendah  dari  ligan  asli  yaitu kompleks asam folat.
Tabel 1. Nilai Energi Ikatan Ligan Asli dan Ligan Uji

## Prediksi Farmakokinetika
Prediksi  sifat  fisikakimia  dan  profil farmakokinetika  dari  suatu  senyawa  kimia dimaksudkan agar lebih efektif dalam modifikasi  struktur  senyawa  obat  sebelum disintesis  setelah  didapatkan  hasil  terbaik  dari docking molekuler.
Prediksi profil farmakokinetika  dapat  dilakukan  secara  in silico  dengan  pendekatan  database  secara daring  terhadap  senyawa  terbaik  yang  diduga memiliki aktivitas farmakologi dengan protein target  tertentu.  Dengan  demikian  diperlukan suatu  informasi  profil  farmakokinetika  dari beberapa senyawa cukup potensial  yang dapat
berinteraksi  dengan  protein  target  terapi  asam folat.  Berikut  uraian  profil  farmakokinetika terhadap senyawa-senyawa terbaik yang dilakukan  secara  daring  melalui  webform SwissADME.
Penentuan  sifat  fisikakimia  suatu  ligan uji  ketika  melintasi  membran  sel  dapat dilakukan identifkasi aturan Lipinski (Lipinski’s  rule  of  five).  Syarat  yang  harus dipenuhi  oleh  senyawa  potensial  berdasarkan aturan  Lipinski  mulai  dari  bobot  molekul (BM)  <500  Da,  nilai  log  P  <5,  jumlah  ikatan hidrogen  donor  (HBD)  <5  dan  jumlah  ikatan hidrogen  akseptor  <10,  serta  reaktivitas  molar dalam  rentang  40  –  130.  Ligan  dengan  BM <500  Da  dapat  dengan  mudah  menembus membran  sel.  Nilai  log  P    menunjukkan polaritas  ligan  dalam  pelarut  lemak  atau  non polar  bilai  nilai  log  P  >5  karena  dapat berinteraksi  lebih  mundah  menembus  lapisan lipid  bilayer  dan  terdistribusi  luas  dalam jaringan. Nilai log P yang rendah menunjukkan ligan cenderung larut dalam air.
Adapun  jumlah  ikatan  hidrogen  donor dan  akseptor  berkaitan  dengan  aktivitas  kimia molekul  obat  dalam  tubuh.13  Apabila  ligan memenuhi  kriteria  aturan  Lipinski  tanpa  ada nilai  yang  menyimpang  maka  ligan  tersebut bersifat  drug-likeness  atau  senyawa  potensial sebagai kandidat obat. Drug-likeness mengacu pada  kemiripan  suatu  senyawa  dengan  obat oral  berdasarkan  evaluasi  dalam  aturan Lipinski.
Tabel 2. Sifat Fisikakimia Ligan Uji
Fase farmakokinetika terdiri dari proses  absorpsi  oleh  saluran  gastrointestinal, distribusi  dalam  darah  menuju  target  terapi, metabolisme  dalam  hati  menjadi  bentuk metabolit  aktif  sampai    diekskresikan  keluar tubuh  melalui  organ  tertentu.  Prediksi  profil farmakokinetika menunjukkan bahwa senyawa niazinin,  niazirin  dan  rhamnetin  merupakan ligan uji yang terabsorpsi tinggi dalam saluran
…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..
………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. Journal of Innovation Research and Knowledge
gastrointestinal,  sedangkan  tiga  senyawa lainnya  menunjukkan  tingkat  absorpsi  yang tinggi.  Berdasarkan  sifat  fisikakimia  ligan  uji pada  tabel  2  menunjukkan  bahwa  seluruh senyawa potensial karena tidak memiliki bobot molekul  yang  cukup  besar  (>500),  sehingga seluruh  ligan  uji  terbaik  diprediksi  dapat menembus membran sel.
Blood-brain  barier  atau  sawar  darah otak  merupakan  bagian  sawar  otak  dengan karakteristik  berupa  lapisan  difusi  essensial sebagai  pengatur  fisiologis  transfer  pasif  atau difusi  dari  suatu  molekul  obat.  Difusi  pasif BBB  melalui  difusi  hidrofilik  paraseluler  atau lipofilik  paraseluler.  Molekul  obat  lipofilik atau  kurang  dari  400-600  Dalton  dapat melewati  endotel  secara  bebas,  serta  molekul dengan  ikatan  hidrogen  kurang  dari  10  dapat masuk  ke  otak  melalui  rute  transeluler.14 Ligan  uji  harus  lipofilik  untuk  dapat menembus BBB. Substrat P-glikoprotein (Pgp) merupakan  sistem  efluks  transporter  yang dapat  membatasi  molekul  obat  menuju jaringan  otak.  Tabel  3  menunjukkan  bahwa niazinin  sebagai  ligan  uji  merupakan  substrat Pgp  sehingga  penetrasi  molekul  aktifnya menjadi terhambat ke sawar darah otak. Tabel 3. Parameter Farmakokinetika Ligan Uji
Enzim  sitokrom  P450  (CYP)  adalah enzim oksidase yang terlibat dalam metabolisme  berbagai  senyawa  endogen  atau eksogen (obat) di hati. Seluruh ligan uji terbaik bukan  inhibitor  enzim  CYP1A2,  CYP2C19, CYP2C9,  CYP2D6  dan  CYP3A4.  Ligan  uji rhamnetin  dapat  mengkatalisis  atau  inhibitor CYP1A2,  CYP2D6  dan  CYP3A4.  Enzim CYP2D6  dapat  mengkatalisis  senyawa  basa dengan  atom  terprotonasi  4-7  A  seperti beberapa  jenis  flavonoid  dan  alkaloid.  Enzim CYP3A4  merupakan  jenis  P450  yang  dapat
mengkatalisis  sebagian  besar  molekul  aktif yang  bersifat  lipofilik.15  Prediksi  parameter farmakokinetika  pada  tabel  3  menunjukkan bahwa  hanya  rhamnetin  sebagai  inhibitor CYP3A4,  CYP1A2  dan  CYP2D6  sehingga dapat dikatalisis enzim tersebut.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat disimpulkan  bahwa  glucosinalbin,  niazinin, niazidin,  niazirin  dan  rhamnetin  diprediksi memiliki  afinitas  ikatan  dan  berinteraksi terhadap  protein  target  reseptor  folat  alfa berdasarkan analisis bioinformatika dan docking  molekuler.  Prediksi  farmakokinetika terhadap  senyawa  potensial  daun  kelor menunjukkan  bahwa  niazinin,  niazirin  dan rhamnetin  terabsorpsi  dengan  tinggi  dalam saluran  gastrointestinal,  serta  rhamnetin  dapat dikatalisis oleh enzim CYP3A4, CYP1A2 dan CYP2D6.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Bara Ft. Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Status Anemia Pada Ibu Hamil.  Bogor,  Institut  Pertanian  Bogor. 2006.
[2] Chaparro  C,  Oot  L,  Sethuraman  K. Overview Of The Nutrition Situation In Seven  Countries  In  Southeast  Asia. Food And Nutrition Technical Assistance Iii Project (Fanta): Washington Dc, Usa. 2014. [3] Gernand, A. D., Schulze, K. J., Stewart, C. P., West, K. P. & Christian, P. 2016. Micronutrient Deficiencies In Pregnancy  Worldwide:  Health  Effects And Prevention. Nature Reviews
Endocrinology, 12, 274-289.
[4] Lassi, Z. S., Salam, R. A., Haider, B. A. &  Bhutta,  Z.  A.  2013.  Folic  Acid
Supplementation  During  Pregnancy  For Maternal Health And Pregnancy
Outcomes.  Cochrane  Database  Of Systematic Reviews.
…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..
[5] Almatsier,  S.  2010.  Prinsip  Dasar  Ilmu Gizi,  Pt.  Gramedia  Pustaka  Utama, Jakarta. [6] Bora,  Try  Restiningtyas  David.  2017. Hubungan  Pola  Konsumsi  Daun  Kelor
Dengan  Kadar  Hemoglobin  Ibu  Hamil Di  Wilayah  Kerja  Puskesmas  Kandai Kota Kendari Provinsi Sulawesi Tenggara.  Jurnal  Penelitian:  Politeknik Kesehatan Kemenkes Kendari. [7] Campbell  Na,  2002.  Biologi  Edisi
Kelima Jilid 1. Jakarta: Erlangga.
[8] Hypercube.  2002.  Hyperchem  Release
7:  Tools  For  Molecular  Modeling.
Ontorio:  Hypercube  Inc.  Ideaconsult. 2011. Toxtree User Manual 5th Version. Sofia, Bulgaria.
[9] Tjahjono  Dh,  Dan  Hamzah  N.  2013. Studi  Hubungan  Kuantitatif  Struktur-
Aktivitas, Fitur Farmakofor Dan Docking  Molekuler  Senyawa  Turunan Pirazolo-Pirimidin  Sebagai  Inhibitor Mer Torsin Kinase. Acta Pharmaceutica Indonesia 38(1): 1-10.
[10] Drie  Jh.  2005.  Pharmacophore-Based Virtual Screening: A Practical Perspective.  Boca  Raton:  Taylor  And Francis Group 157-205.
[11] Rachmania  R,  Supandi,  Christina  Fa.
2016.  Analisis  Penambatan  Molekul Senyawa  Flavonoid  Buah  Mahkota Dewa  Pada  Reseptor  Α-Glukosidase
Sebagai  Antidiabetes.  Pharmacy  13(2): 239-251.
[12] Jain  An,  Dan  Nicholls  A.  2008.
Recommendations  For  Evaluations  Of Computational  Methods.  J.  Compt.
Aided Mol. 22: 133-139.
[13] Lipinski  Ca,  Lombardo  F,  Segawa  T,
Ko D. 2001. Experimental And Computational Approaches To Estimate Solubility  And  Permability  In  Drug Discovery  And  Development  Setting. Adv. Drug Deliv Rev. 46: 3-26.
[14] Fiori Gml, D’agate S, Rocha A, Pereira Am,  Pasqua  Od.  2017.  Development And Validation Of Quantification
Method  For  Cucurbitacins  E  And  I  In
Rat  Plasma:  Application  To  Population Pharmacokinetic  Study.  Journal  Of Pharmaceutical And Biomedical Analysis. [15] Zanger Um, Schwab M. 2013. Cytochrome  P450  Enzymes  In  Drug Metabolism: Regulation Of Gene Expression,  Enzyme  Activities,  And Impact Of Genetic Variation. Pharmacology  &  Therapeutics  138:  1- 10.
…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..
………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….. Journal of Innovation Research and Knowledge

## HALAMAN INI SENGAJA DIKOSONGKAN