## UJI TOKSISITAS AKUT BIOPESTISIDA PADA Bellamya javanica, v.d Bush 1884 DAN Lymnaea rubiginosa, Michellin 1831
Ida IDewa Agung Willy Pramana (1) , Setijono Samino (2)
1), 2) Jurusan Biologi FMIPA Universitas Brawijaya
Jalan Veteran Nomor 169 Malang
(1) agungwillypramana@ymail.com (2) setijono07@yahoo.com

## ABSTRAK
Uji toksisitas akut merupakan salah satu metode uji pra-klinik yang digunakan untuk menentukan derajat  toksisitas  dari  suatu  senyawa  dalam  waktu  24  Jam.  Biopestisida  merupakan  produk  pestisida alami  yang  terbuat  dari  tanaman.  Tujuan  dari  penelitian  ini  untuk  mengetahui  nilai  toksisitas  akut biopestisida terhadap Bellamya javanica, v.d Bush 1884  dan Lymnaea rubiginosa, Michellin 1831 dengan pengukuran  secara  kuantitatif  menggunakan  LC 50 dengan  rentang  waktu  24,  48,  72,  dan  96  jam. Penelitian dilakukan dalam skala laboratorium dengan rancangan acak lengkap faktorial, menggunakan enam  seri  konsentrasi  dan  tiga  kali  ulangan  untuk  masing  masing  spesies.  Analisa  LC 50 menggunakan metode  analisis  probit.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  nilai  LC 50 untuk  B.  javanica,  v.d  Bush  1884 pada waktu pengamatan 24 jam, 48 jam, 72 jam, dan 96 jam adalah 38,418 %, 18,820 %, 11,817 %, dan 6,637 % dan nilai LC 50 untuk L. rubiginosa, Michellin 1831 pada waktu pengamatan 24 jam, 48 jam, 72 jam, dan 96 jam adalah 6,704 %, 4,513 %, 3,451 %, dan 1,307 %.
Kata kunci : Biopestisida, Faktor abiotik, LC 50 , Toksisitas Akut

## ABSTRACT
Acute toxicity test is one method of pre-clinical trials are used to determine the degree of toxicity of a  compound  within  24  Hours.  Biopesticides  are  a  natural  pesticide  products  made  from  plants.  The purpose of this study was to determine the acute toxicity value of biopesticides against Bellamyâ javanica, v.d Bush 1884  and Lymnaea rubiginosa, Michellin 1831 with quantitative measurement using LC 50 with a span  of  24,  48,  72,  and  96  hours.  The  study  was  conducted  in  a  laboratory  scale  with  a  completely randomized  factorial  design,  using  a  series  of  six  concentrations  and  three  replicates  for  each  species. LC 50 analysis using probit analysis. The results of this study indicate LC 50 values for B. javanica, v.d Bush 1884  at observation time 24 hours, 48 hours, 72 hours, and 96 hours is 38.418%, 18.820%, 11.817% and 6.637%  and  LC 50 values  for  L.  rubiginosa,  Michellin  1831  at  observation  time  24  hours,  48  hours,  72 hours, and 96 hours is 6.704%, 4.513%, 3.451%, and 1.307%.
Keywords : Biopesticides, Abiotic factors, LC 50 ,  Acute toxicity

## PENDAHULUAN
Biopestisida adalah sebutan yang digunakan untuk produk yang digunakan sebagai penangkal atau  repelien  dari  hama  yang  menyerang  atau merusak  tanaman  pertanian  akan  tetapi  dibuat dari  bahan  bahan  alami  sehingga  dampak  racun yang ditimbulkan bisa diminimalisir. Penggunaan  biopestisida  memiliki  keunggulan dibandingkan dengan pestisida sintetik, terutama dari dampak yang ditimbulkan terhadap organisme  non-target.  Salah  satu  dampak  yang ditimbulkan  dari  hilangnya  hewan  non-target adalah dapat mengganggu keseimbangan ekosistem. Salah satu organisme non-target yang
secara  tidak  sengaja  terpapar  pestisida  adalah manusia.  Paparan  pestisida  pada  manusia  bisa terjadi  melalui  paparan  dari  pakaian  yang digunakan pada saat pencampuran dan penggunaan pestisida yang tidak sengaja terhirup dan  masuk  ke  dalam  sistem  metabolisme  [1]. Rempah rempah dari kelompok rimpang termasuk dalam kelompok biopestisida serbaguna  karena  untuk  satu  jenis  tanaman memiliki  beberapa  bahan  aktif  yang  dapat berfungsi sebagai insektisida, fungisida, bakterisida, moluskisida, dan nematisida. Sehingga dengan menggabungkan beberapa jenis tanaman  maka  bisa  menjadi  bipestisida  yang lebih baik [2].
Uji  toksisitas  akut  merupakan  salah  satu metode  uji  pra-klinik  yang  digunakan  untuk menentukan  atau  mengukur  derajat  efek  toksik dari  suatu  senyawa  dalam  waktu  singkat  setelah pemberian  senyawa  dalam  dosis  tunggal. Biasanya  jangka  waktu  yang  digunakan  sekitar 24  Jam.  LC  (Lethal  concentration)  atau  LD (Lethal dosage) merupakan satuan yang digunakan  untuk  menentukan  tingkat  kepekaan terhadap konsentrasi toksik untuk hewan uji [3].
Gastropoda yang digunakan dalam penelitian  ini  ditujukan  untuk  mengetahui berapakah nilai efikasi dari biopestisida terhadap hewan  non-target  yang  ada  di  sawah  yaitu  B. javanica,  v.d  Bush  1884    dan  L.  rubiginosa, Michellin  1831.  Dipilih  kedua  jenis  hewan  ini sebagai  objek  penelitian  dikarenakan  dari kelompok gastropoda memiliki tingkat mobilitas yang  rendah  sehingga  apabila  terjadi  akumulasi maka  akan  terakumulasi  paling  banyak.  Selain itu  gastropoda  juga  memiliki  peran  penting sebagai  detrivor  di  daerah  persawahan  sehingga dengan mengetahui nilai efikasi dari biopestisida maka  dapat  ditentukan  konsentrasi  penggunaan biopestisida yang aman.

## METODE PENELITIAN
Waktu  dan  Lokasi.  Penelitian  ini dilakukan  pada  Bulan  Agustus  2013  sampai dengan  Juli  2014  di  Laboratorium  Ekologi  dan Diversitas  Hewan  Jurusan  Biologi  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Universitas  Brawijaya  Malang.  Pengambilan sampel dilakukan di sawah dan perairan tawar di daerah Sumber Ngenep dan Merjosari Malang.. Pengambilan  Sampel.  Lymnaea  rubiginosa, Michellin 1831 dan Bellamya javanica, v.d Bush 1884 diambil di  sawah dan perairan air tawar di Daerah Sumber Ngenep dan Merjosari. Untuk L. rubiginosa,  Michellin  1831  yang  digunakan adalah yang memiliki ukuran tinggi cangkang 1- 1,5  cm  dan  B.  Javanica,  v.d  Bush  1884    yang memiliki ukuran tinggi cangkang 2-2,5 cm.
Gambar 1. Bellamya javanica, v.d Bush 1884

## Gambar 2. Lymnaea rubiginosa, Michellin 1831
Aklimatisasi.  Hewan  uji  yang  berjumlah  180 ekor  untuk  masing-masing  jenis  diaklimatisasi selama satu minggu.
Penentuan  critical  range.  Tiga  ekor  hewan  uji untuk masing-masing spesies dimasukkan dalam larutan  biopestisida  yang  sudah  diencerkan dengan  prosentase  pengenceran  dalam  jarak konsentrasi  yang  lebar  yaitu  0%,  10%,  20%, 30%,  40%,  50%,  60%,  70%,  80%,  90%,  dan 100%. Kemudian ditentukan konsentrasi terendah  yang  dapat  membunuh  keseluruhan populasi  hewan  uji  dalam  waktu  24  jam  tanpa ulangan.
Penentuan  nilai  LC 50 .  Nilai  LC 50 ditentukan dengan cara memberikan biopestisida berdasarkan nilai konsentrasi yang diperoleh dari penentuan critical range dengan jarak yang lebih kecil  menggunakan  10  ekor  hewan  uji  untuk masing-masing  seri  konsentrasi  dengan  tiga  kali perulangan. Untuk Lymnaea rubiginosa, Michellin 1831 seluruh hewan coba critical range mati  pada  konsentrasi  10%  dan  untuk  Bellamya javanica,  v.d  Bush  1884  seluruh  hewan  coba critical  range  mati  pada  konsentrasi  40%. Penentuan nilai LC 50 untuk Lymnaea rubiginosa, Michellin  1831    menggunakan  konsentrasi  0%, 0,5%,  1%,  3%,  7%,  dan  10%  sedangkan  untuk Bellamya javanica, v.d Bush 1884 menggunakan  konsentrasi  0%,  3,5%,  7%,  14%, 21%,  dan  40%  dalam  waktu  pengamatan  0,  24, 48, 72, dan 96 jam.
Rancangan  Perlakuan  dan  Analisis  Data. Penelitian menggunakan Rancangan Acak Lengkap Faktorial [4]. Analisis data menggunakan SPSS 16.0 for Windows. Penentuan  nilai  LC 50 dengan  menggunakan analisis  probit  kemudian  dilanjutkan  dengan pengujian ANOVA menggunakan uji Tukey jika data  normal  dan  homogen  dan  Gamess  Howell jika  data  tidak  homogen  untuk  mengetahui perbedaan  nilai  LC 50 dari  masing-masing  waktu pengamatan.  Analisis  probit  dilakukan  dengan cara  menghitung  jumlah  hewan  coba  yang  mati dan  dihubungkan  dengan  konsentrai  dan  jumlah total hewan coba. Kemudian diambil konsentrasi
yang menunjukan kemampuan untuk membunuh 50 % dari jumlah total hewan coba

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Data  yang  diperoleh  dari  hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  nilai  LC 50 untuk  B. javanica,  v.d  Bush  1884    dan  L.  rubiginosa, Michellin  1831  berbeda.  Nilai  LC 50 untuk  L. rubiginosa,  Michellin  1831  jauh  lebih  rendah dari pada LC 50 untuk B. javanica, v.d Bush 1884. Hal ini sebenarnya sudah terlihat sejak pengujian critical  range  untuk  menentukan  konsentrasi pengujian LC 50 bagi masing masing spesies. Dari
uji  tersebut  diperoleh  hasil  bahwa    B.  javanica, v.d  Bush  1884    memiliki  rentang  konsentrasi yang  lebih  tinggi  dibanding  L.  rubiginosa, Michellin  1831  sehingga  bisa  dikatakan  lebih toleran.  Efikasi  dengan  nilai  LC 50 dari  L. rubiginosa,  Michellin  1831  dalam  waktu pengamatan berturut-turut mulai 24 jam, 48 jam, 72  jam,  dan  96  jam  adalah  6,704  %,  4,513  %, 3,451  %,  dan  1,307  %.  Sedangkan  untuk  B. javanica  ,  v.d  Bush  1884  berturut-turut  dari  24 jam,  48  jam,  72  jam  dan  96  jam  adalah  38,418 %,  18,820  %,  11,817  %,  dan  6,637  %  (Gambar 3).
Gambar 3. Efikasi biopestisida untuk B. Javanica, v.d Bush 1884  dan L. rubiginosa, Michellin 1831 (LC 50 ) Keterangan: Efikasi untuk B. javanica
Efikasi untuk L. rubiginosa
Notasi  yang  berbeda  menunjukkan  adanya  perbedaan  signifikan  nilai  LC 50 ( α :  0.05)  berdasarkan  uji  Brown-  Forsythe yang  dilanjutkan dengan uji Gamess-Howell.
Nilai  LC 50 yang  diperoleh  dari  waktu pengamatan  24  jam  hingga  mencapai  waktu pengamatan  96  jam  terus  menurun.  Hal  ini dimungkinkan  karena  semakin  lama  hewan  uji terus bersentuhan dengan biopestisida maka daya tahan tubuhnya akan semakin menurun sehingga akan  semakin  rendah  nilai  konsentrasi  yang diperlukan  untuk  membunuh  50  %  dari  total keseluruhan  hewan  uji.  Selain  itu  pemberian biopestisida  secara  tiba-tiba  terhadap  hewan  uji terutama  untuk  konsentrasi  yang  tinggi  akan mengakibatkan  hewan  uji  mengalami  stress sehingga  pada  24  hingga  48  jam  jumlah  hewan uji  yang  mati  cukup  banyak.  Menurunnya  daya tahan  tubuh  hewan  uji  juga  diakibatkan  dengan semakin  kuat  sifat  toksik  dari  biopestisida terhadap  hewan  uji  seiring  waktu  pengamatan
dari  24  jam  hingga  96  jam  sehingga  semakin lama konsentrasi yang diperlukan untuk membunuh  50  %  dari  total  hewan  uji  yang digunakan semakin kecil [5]. Analisis nilai LC 50 dalam  waktu  pengamatan  24  hingga  96  jam antara  kedua  spesies  menunjukkan  perbedaan yang signifikan dimana L. rubiginosa, Michellin 1831  jelas  terlihat  memiliki  tingkat  toleransi yang  jauh  lebih  rendah  dibandingkan  B. javanica,  v.d  Bush  1884.  Hal  ini  dimungkinkan karena  adanya  perbedaan  ukuran  tubuh  yang cukup  mencolok  antara  keduanya.  Selain  itu struktur  cangkang  dari  B.  javanica,  v.d  Bush 1884    juga  terlihat  lebih  kokoh  dan  kuat  serta memiliki  lapisan  operculum  pada  bagian  bawah cangkang  sehingga  biopestisida  akan  sulit  untuk masuk ke dalam tubuh dari B. javanica, v.d Bush
1884  dibandingkan cangkang dari L. rubiginosa, Michellin  1831  yang  terlihat  lebih  rapuh  dan tidak  memiliki  lapisan  pelindung  operculum pada  bagian  bawah  cangkangnya  sehingga biopestisida  akan  cenderung  lebih  mudah  untuk masuk  dan  secara  langsung  mengenai  tubuh  L. rubignosa, Michellin 1831 [6].
Untuk  spesies  uji  B.  javanica,  v.d  Bush 1884  (Gambar 4), jumlah hewan coba yang mati baik  untuk  24  jam  hingga  96  jam  adalah  pada konsentrasi  tertinggi  yaitu  40%.  Begitu  pula untuk  spesies  uji  L.  rubiginosa,  Michellin  1831 (Gambar  5)  jumlah  hewan  coba  yang  mati  baik untuk  24  jam  hingga  96  jam  yang  terbanyak adalah  pada  konsentrasi  tertinggi  yaitu  10%
Gambar 4. Tingkat kematian B. javanica, v.d Bush 1884  untuk pengamatan 0 jam, 24 jam, 48 jam, 72 jam, dan 96 jam dengan konsentrasi 0%, 3,5%, 7%, 14%, 21%, dan 40%.
Keterangan: Notasi yang berbeda menunjukkan terdapat perbedaan signifikan tiap konsentrasi per waktu pengamatan berdasarkan uji ANOVA dilanjutkan dengan uji Tukey untuk konsentrasi 14%  dan sisanya  menggunakan uji Gamess Howell
Gambar  5. Tingkat  kematian  L.  rubiginosa,  Michellin  1831  pengamatan  0 jam,  24 jam,  48 jam,  72 jam, dan 96 jam dengan konsentrasi 0%, 0,5%, 1%, 3%, 7%, dan 10%.
Keterangan: Notasi yang berbeda menunjukkan terdapat perbedaan signifikan tiap konsentrasi per waktu pengamatan berdasarkan uji ANOVA dilanjutkan dengan uji Tukey untuk konsentrasi  3% dan 7% , konsentrasi 1%  dan 10%   menggunakan uji Gamess Howell
Mekanisme  masuknya  biopestisida  ke  dalam tubuh  dari  hewan  coba  bisa  melalui  dua  cara yaitu  melalui  sistem  respirasi  dan  sistem pencernaan. Dalam sistem respirasi gastropoda terutama  gastropoda  air  yang  melakukan sistem pernafasan menggunakan insang, gastropoda  akan  mengambil  oksigen  yang terlarut  di  air  melalui  insang  dengan  cara memasukkan  air  yang  ada  di  sekitarnya kemudian  di  insang  air  tersebut  akan dipisahkan  antara  oksigen  dengan  substansi yang  lain.  Sedangkan  dalam  mekanisme pencernaan, gastropoda herbivora akan menggunakan  radula  atau  bagian  bawah mantel yang menyerupai mulut untuk memasukkan susbstansi yang ada di sekitarnya untuk  kemudian  masuk  ke  dalam  tubuh  dan masuk  ke  dalam  sistem  pencernaan.  Dalam penelitian ini, kondisi air yang menjadi tempat hidup  gastropoda  sudah  diberikan  biopestisida dengan  konsentrasi  yang  berbeda,  sehingga disaat  gastropoda  melakukan  mekanisme respirasi  ataupun  pencernaan  dengan  cara memasukkan  air,  maka  larutan  biopestisida yang ada di air juga akan ikut masuk dan dapat membunuh gastropoda [7].

## KESIMPULAN
Nilai LC 50 untuk B. javanica, v.d Bush 1884    berturut-turut  mulai 24 jam,  48  jam,  72 jam,  dan  96  jam  adalah  38,418  %,  18,820  %,
11,817  %,  dan  6,637  %.  Nilai  LC 50 untuk  L. rubiginosa,  Michellin  1831  secara  berurutan mulai  24  jam,  48  jam,  72  jam,  dan  96  jam adalah 6,704 %, 4,513 %, 3,451 %, dan 1,307 %.  B.  javanica,  v.d  Bush  1884    lebih  resisten terhadap biopestisida dibandingkan L. rubiginosa, Michellin 1831.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penelitian  ini  didukung  oleh  Proyek
Unggulan
Perguruan Tinggi BOPTN Universitas  Brawijaya  Nomor:  DIPA  – 023.04.2.414989/2013. Berdasarkan SK Rektor Universitas Brawijaya Nomor: 295/SK/2013  tanggal    12  Juni  2013  dan  juga ucapan terimakasih kepada Pak Pudji Rahardjo selaku  produsen  biopestisida  yang  telah bersedia  membantu  dalam  realisasi  penelitian ini, Kepala Laboratorium Ekologi dan Diversitas  Hewan  Universitas  Brawijaya  serta semua  pihak  yang  telah  membantu  dalam
penyelesaian  jurnal  ini.  Semoga  karya  ilmiah ini dapat berguna dan bermanfaat.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Frank  &  William.1999.  Food,  Crop Pests,  and  the  environment.  APS
PRESS.St Paul Minesota USA.
[2] Syakir. 2011. Status Penelitian Pestisida Nabati Pusat Pengembangan dan Penelitian Tanaman Perkebunan. Semnas Pesnab IV. Jakarta [3] Harmita  &  Maksum.2006.  Buku  Ajar Analisis Hayati Edisi 3. Buku kedokteran EGC. Jakarta. [4] Suntoyo Y. 1993. Percobaan Perancangan, Analisis, dan Interpretasinya. PT. Gramedia Pustaka Utama. Jakarta
[5] Supriyono,  P.  R.  Pong  Masak,  P.  E. Naiborhu.2005. Studi Toksisitas Trikolforn Terhadap Ikan Nila Oreochromis  sp.  Jurnal  Akuakultur Indonesia, 4(2)163-170. Fakultas Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan,  IPB.
Bogor
[6] Heriyanto,  Ristiyanti  M.,  Fredinan  Y.. 2006. Metode Survei dan Pemantauan Populasi Satwa Seri Kelima Siput dan Kerang. Bidang Zoologi Pusat Penelitian Biologi-LIPI. Cibingong. Jawa Barat.
[7] John  H. Leal.  2012.  GASTROPODS. The  Bailey-Matthew  Shell  Museum. Florida. USA