Vol. 16, No. 1, 2023, Hal. 25-32 ISSN: 0216-3098 DOI: 10.20884/1.mandala.2023.16.1.8388
PENGARUH EKSTRAK DAUN COCOR BEBEK ( Bryophyllum pinnatum ) TERHADAP PERTUMBUHAN Escherichia coli WILD-TYPE DAN ATCC 35218
EFFECT OF COCOR BEBEK LEAF EXTRACT ( Bryophyllum pinnatum ) ON THE GROWTH OF Escherichia coli WILD-TYPE AND ATCC 35218
Nurul Fadiyah 1 , Nia Krisniawati 2*) , Ismiralda Oke Putranti 3
1 Fakultas Kedokteran Universitas Jenderal Soedirman Jl. Dr. Gumbreg No. 1, Purwokerto, Indonesia
2 Departemen Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Jenderal Soedirman Jl. Dr. Gumbreg
No. 1, Purwokerto, Indonesia
3 Departemen Departemen Kulit dan Kelamin Fakultas Kedokteran Universitas Jenderal Soedirman Jl. Dr. Gumbreg No. 1, Purwokerto, Indonesia

## ABSTRAK
Indonesia  merupakan  negara  yang  memiliki  banyak  keanekaragaman  hayati  dan hewani yang bermanfaat sebagai obat tradisonal yang dapat menjadi pengobatan alternatif. Salah  satu  tumbuhan  yang  dapat  digunakan  adalah  bagian  daun  dari  tumbuhan  Cocor Bebek  yang  memiliki  manfaat  seperti  antibakteri,  anti  diabetes,  anti  oksidan,  dan sebagainya  serta  mengandung  senyawa  aktif  seperti  flavonoid,  alkaloid,  saponin  dan steroid. Escherichia  coli adalah  flora  normal  yang  bersifat  patogen  dalam  tubuh. Pemberian ekstrak daun Cocor Bebek yang bersifat antibakteri diperkirakan memiliki efek yang  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli  wild-type dan  ATCC 35218.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  pengaruh  pemberian  ekstrak  daun Cocor  Bebek  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli  wild-type dan ATCC 35218. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental nyata dengan rancangan Post-Test-Only  Control  Group  Design .  Daun  Cocor  Bebek  diekstraksi  dengan  metanol menggunakan  metode  maserasi.  Sampel  penelitian  terdiri  dari  biakan  murni Escherichia coli  wild-type dan  ATCC  35218  dengan  kepadatan  1,5  X  10 8 sel/  ml.  Pengujian  dengan metode  Difusi  Cakram  Kirby  Bauer  dengan  konsentrasi  ekstrak  20%,  40%,  60%,  80%, aquades  sebagai  kontrol  negatif  dan  amoxicillin-clavulanat  sebagai  kontrol  positif.  Hasil penelitian menunjukkan ekstrak daun Cocor Bebek tidak dapat menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli ATCC 35218 dan Escherichia coli wild-type karena kemungkinan kedua  bakteri  termasuk  dalam  bakteri  ESBL.  Pada  penelitian  sebelumnya  mengatakan bahwa  66,7%  komunitas  yang  ada  di  Purwokerto  merupakan  carrier  tanpa  gejala. Kesimpulan  penelitian  ini,  ekstrak  daun Cocor  Bebek  tidak  memiliki  efek  penghambatan dalam pertumbuhan bakteri Escherichia coli wild-type dan ATCC 35218.
Kata Kunci : Daun Cocor Bebek, Difusi Cakram, Escherichia coli, Kirby Bauer

## ABSTRACT
Indonesia  is  a  country  that  has  a  lot  of  biodiversity  and  animals  that  are  useful  as  a traditional medicine that can be alternative medicine. One of the plants that can be used is the  leaf  part  of  the  Cocor  Bebek  plant,  which  has  benefits  such  as  antibacterial,  anti- diabetic,  anti-oxidant,  and  so  on  and  contains  active  compounds  such  as  flavonoids, alkaloids, saponins, and steroids. Escherichia coli is a normal flora of a pathogenic nature in the body. Giving antibacterial Cocor Bebek leaf extract is thought to have an effect that can inhibit the growth of Escherichia coli wild-type bacteria and ATCC 35218. This study aimed to determine the impact of giving Cocor Bebek leaf extract in inhibiting the growth of  Escherichia  coli  wild-type  bacteria  and  ATCC  35218.  This  research  is  experimental with  the  design  of  the  Post-Test-Only  Control  Group  Design.  Cocor  Bebek  leaves  are extracted with methanol using the maceration method. The study sample consisted of pure cultures of Escherichia coli wild-type and ATCC 35218 with a 1.5 X 10 8 cells/ml density. It is tested with the Kirby Bauer Disc Diffusion method with extract concentrations of 20%, 40%,  60%,  and  80%,  aqua  dest  as  a  negative  control,  and  amoxicillin-clavulanate  as  a positive  control.  The  results  showed  that  Cocor  Bebek  leaf  extract  could  not  inhibit  the growth of Escherichia coli  ATCC 35218 and Escherichia coli  wild-type bacteria because both  bacteria  may  be  included  in  ESBL  bacteria.  In  previous  research,  it  was  said  that 66.7% of communities in Purwokerto were asymptomatic carriers. The conclusion of this study,  Cocor  Bebek  leaf  extract  did  not  have  an  inhibitory  effect  on  the  growth  of Escherichia coli wild-type bacteria and ATCC 35218.
Keywords: Cocor Bebek Leaf, Disc Diffusion, Escherichia coli, Kirby Bauer
Penulis korespondesi:
Nia Krisniawati Departemen Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Jenderal Soedirman Jl. Dr. Gumbreg No. 1, Purwokerto, Indonesia Email: nia.krisniawati@unsoed.ac.id

## PENDAHULUAN
Cocor  Bebek  merupakan  salah  satu  keanekaragaman  hayati  yang  dimiliki Indonesia  yang  dapat  bermanfaat  sebagai  obat  tradisional  yang  berasal  dari  Madagaskar serta tersebar di daerah tropis seperti Australia, Selandia Baru, India Barat, Afrika, Hawaii, Amerika,  China  dan  Indonesia  (Khooshbu  dan  Ansari,  2019).  Cocor  Bebek  memiliki banyak manfaat seperti anti diabetes, antibakteri, anti kanker, anti jamur, antioksidan, anti asma  dan  sebagainya  serta  memiliki  banyak  kandungan  metabolit  sekunder  yang  dapat bermanfaat seperti flavonoid, alkaloid, saponin dan steroid. Salah satu metabolit sekunder yang  memiliki  manfaat  sebagai  antibaketi  adalah  flavonoid  (Hasanah  dan  Putri,  2017; Purwatiningsih dan Lestari, 2020; Tagousop et al., 2018).
World  Health  Organization  (WHO)  menyatakan  bahwa  tanaman  obat  dapat menjadi  obat  dari  berbagai  macam  penyakit  karena  banyak  kandungan  yang  bersifat
Mandala of Health                                                                                                                  ISSN: 0216-3098
pengaruh ekstrak daun cocor bebek ( bryophyllum pinnatum ) terhadap pertumbuhan escherichia coli wild-type dan atcc 35218 (nurul fadiyah)
terapeutik yang terkandung dalam seluruh bagian tumbuhan, obat herbal yang berasal dari tanaman obat ini tergolong lebih aman dan ekonomis sehingga menarik banyak perhatian para peneliti untuk meneliti lebih lanjut terkait efek terapeutik yang dimiliki oleh tanaman obat (Latief et al., 2019; Maulidiah et al., 2020).
Escherichia  coli adalah  flora  normal  yang  ada  dalam  usus  manusia  tetapi  dapat menjadi penyebab dari suatu penyakit seperti diare sekretorik, diare disertai darah, infeksi saluran  kemih,  meningitis,  infeksi  dalam  aliran  darah.  Escherichia  coli  yang  akan digunakan dalam penelitian ini adalah Escherichia coli wild-type yang merupakan bakteri tanpa rekayasa genetika dan Escherichia coli ATCC 35218 yang merupakan bakteri yang telah resistansi dengan antibiotik golongan beta-laktam (Cho, et al., 2018; Li et al., 2021).
Dalam penelitian yang dilakukan oleh Pinilih dan Hidayat (2014) diketahui bahwa konsentrasi  20%,  40%,  60%  dan  80%  ekstrak  daun  cocor  memiliki  berpengaruh  dalam penghambatan  pertumbuhan  bakteri  Escherichia  coli  dan  dalam  penelitian  Ngatin  dan Saputra  (2019)  yang  menggunakan  berbagai  pelarut  seperti  n-heksana,  asam  asetat  5%, metanol,  aseton,  dan  etil  asetat  didapatkan  hasil  bahwa  metanol  dapat  menarik  flavonoid cukup  baik  karena  merupakan  pelarut  yang  bersifat  polar.  Berdasarkan  penelitian  diatas, peneliti tertarik untuk melakukan penelitian tentang Pengaruh Ekstrak Daun Cocor Bebek ( Bryophyllum  pinnatum )  Terhadap  Pertumbuhan Escherichia  Coli  Wild-Type dan  ATCC 35218.

## METODE PENELITIAN

## Alat
Peralatan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  autoclave,  inkubator,  bejana maserasi, rotary evaporator dan waterbath.

## Bahan
Bahan  yang  akan  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  alkohol,  media  Mueller-Hilton Agar, ekstrak daun cocor bebek, aquades steril, pelarut methanol, pelarut etil asetat, biakan Eschericia coli ATCC 35218 dan wild-type , cakram kloramfenikol 30µg, cakram DMSO, spiritus, peptone  (Pancreatic  Digest  of  gelatin),  Proteose  peptone  (meat  and  casein), lactose monohydrate, bile salt, sodium chloride, neutral red¸crystal violet, agar, aquades, beef extract, acid hydrolysate of casein, starch.

## Jalannya Penelitian
1. Tahap Persiapan
Sterilisasi Alat dan Bahan
Seluruh  alat  dan  bahan  (hanya  aquades)  yang  akan  digunakan  distereilisasi  dengan menggunakan autoclave pada  suhu  121ºC  selama  15  menit  dengan  tekanan  1,5  atm yang  mana  sebelum  disterilisasi  alat  telah  dicuci  dengan  bersih,  dikeringkan  dan dibungkus dengan menggunakan kertas.
Pembuatan Ekstrak Daun Cocor Bebek dengan Pelarut Metanol Daun  cocor  bebek  yang  telah  dikeringkan  ditimbang  500g  lalu  dimasukkan  kedalam bejana  maserasi  yang  sudah  dilembabkan  dengan  cairan  metanol  hingga  simplisia tertutupi seluruhnya oleh metanol. Kemudian diamkan selama 5 hari  yang mana harus
terlindungi dari matahari dan aduk sesekali. Setelah 5 hari disaring ampasnya, kemudia ekstraksi  metanol  yang  diperoleh  akan  dipekatkan  dengan rotary  evaporator hingga didapatkan ekstrak yang kental.
Pembuatan Ekstrak Daun Cocor Bebek dengan Pelarut etil asetat Daun  cocor  bebek  yang  telah  dikeringkan  ditimbang  500g  lalu  dimasukkan  kedalam bejana  maserasi  yang  sudah  dilembabkan  dengan  cairan  etil  asetat  hingga  simplisia tertutupi seluruhnya oleh etil asetat. Kemudian diamkan selama 5 hari yang mana harus terlindungi dari matahari dan aduk sesekali. Setelah 5 hari disaring ampasnya, kemudia ekstraksi  metanol  yang  diperoleh  akan  dipekatkan  dengan rotary  evaporator hingga didapatkan ekstrak yang kental.

## Pembuatan Stok Variabel Konsentrasi
Variabel yang akan digunakan dalam penelitian terdapat 3 variabel, kontrol negatifnya adalah disc DMSO,  variasi  konsentrasi  ekstrak  daun  cocor  bebek  metanol  25%,  50%, 75%, 100%  dengan menggunakan pelarut metanol dan pelarut etil asetat, serta kontrol positifnya berupa disc yang berisikan kloramfenikol.

## Pembuatan Media Mac Conkey Agar
1) Timbang 50 gram bubuk Media Mac Conkey, larutkan dnegan 1 liter aquades.
2) Panaskan sampai mendidih untuk melarutkan media.
3) Sterilkan dalam autoclave pada suhu 121ºC selam 15 menit.
4) Tunggu suhu sampai hanga-hangat kuku (45ºC – 50ºC)
5) Homogenkan, tuang ke dalam cawan petri
Kultur Bakteri
Kultur  bakteri  ini  dilakukan  untuk  memperbanyak  stok  bakteri  dengan  cara, menginokulasikan  1  jarum  ose  biakan  murni Eschericia  coli ke  dalam  Media  Mac Conkey Agar, kemudian diamkan pada suhu 37º selama 24 jam.

## Pembuatan Media Mueller-Hilton Agar
1) Timbang 38 gram media, tambahkan 1 liter aquades
2) Panaskan sampai mendidih untuk melarutkan media
3) Sterilkan dengan autoclave pada suhu 121ºC selama 15 menit
4) Tunggu suhu sampai hangat-hangat kuku (45ºC - 50ºC)
5) Tuang ke dalam cawan petri steril
6) Simpan pada suhu 2-8ºC
2. Tahapan Pengujian Uji penghambatan pertumbuhan bakteri dengan cara cakram
a. Bakteri diencerkan dengan mencampurkan 1 ose suspense Eschericia coli  wild-type dan ATCC 35218 ke dalam 2 tabung reaksi yang telah berisi larutan NaCl.
b. Dihomogenkan  dnegan  menggunakan  vortex  dan  kekeruhannya  distandarisasi dengan  konsentrasi  0.5  Mc  Farland  sehingga  jumlah  bakteri  memenuhi  standarisasi untuk uji kepekaan yaitu: 10 5 -10 8 /ml.
Mandala of Health                                                                                                                  ISSN: 0216-3098
pengaruh ekstrak daun cocor bebek ( bryophyllum pinnatum ) terhadap pertumbuhan escherichia coli wild-type dan atcc 35218 (nurul fadiyah)
c. Kemudian  larutan  bakteri  yang  telah  distandarisasi  tadi,  dioleskan  pada  media pertumbuhan Mueller-Hilton Agar (MHA).
d. Cakram  uji  kosong  yang  telah  direndam  selama  15  menit  di  dalam  masing-masing stok  konsentrasi  ekstrak  daun  cocor  bebek  tadi  diletakkan  di  atas  permukaan  agar secara hiegenis.
e. Lalu media yag telah kita buat tadi, diinkubasi ke dalam incubator dengan suhu 37ºC selama  24  jam,  keesokan  harinya  diukur  diameter  zona  transparan/  terang  ( clear zone ) yang terbentuk dengan menggunakan jangka sorong.

## Analisis Data
Data hasil penelitian uji antibakteri ekstrak daun cocor bebek pada Eschericia coli wild-type dan ATCC 35218 dianalisis dengan menggunakan SPSS untuk melihat apakah ada perbedaan aktivitas antibakteri  yang  bermakna dari masing-masing cakram uji  yang mengandung kontrol negatif, kontrol positif dan berbagai konsentrasi ekstrak daun cocor bebek  yang  dilarutkan  dnegan  pelarut  metanol  dan  etil  asetat  dalam  menghambat pertumbuhan Eschericia  coli  wild-type dan  ATCC  35218.  Data  penelitian  ini  berupa variabel  numerik  lebih  dari  2  kelompok  tidak  berpasangan  sehingga  menggunakan  uji One  Way  ANOVA jika  distribusi  data  normal.  Jika  distribusi  data  tidak  normal  maka menggunakkan  uji  nonparametric  yaitu  Uji Kruskall-Wallis .  Kemudian  untuk membandingkan, menggunakan Uji T untuk melihat perbandingan antara ekstrak dengan pelarut metanol dan etil asetat.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  ini  menggunakan  tanaman Bryophyllum  pinnatum .  Dari  serbuk  simplisia daun  Cocor  Bebek  500  gram  yang  diekstraksi  dengan  pelarut  metanol,  didapatkan  hasil ekstrak  38  gram  dengan  metode  maserasi.  Ekstrak  daun  Cocor  Bebek  berwarna  coklat kehijauan  pekat.  Hasil  skrining  fitokimia  secara  kualitatif  diketahui  bahwa  ekstrak  daun Cocor Bebek mengandung flavonoid, alkaloid, saponin dan steroid (Tabel I)
Tabel I Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Daun Cocor Bebek
Senyawa Aktif Warna Hasil Flavonoid Kuning kehijauan + Saponin Kuning kehijauan dengan busa stabil (1 cm) + Alkoloid Hijau dan terdapat endapan putih + Steroid Biru hijau + Keterangan (+) : menunjukkan positif
Morfologi  sel  dari  hasil  pengamatan  diketahui  bahwa  bakteri  uji  yaitu Escherichia  coli karena  termasuk  dalam  bakteri  gram  negatif,  batang  pendek,  tidak  berspora  dan  bersifat anaerob  fakultatif.  Pada  media  Mc  Conkey  Agar  koloni E.coli berwarna  pink  karena
memfermentasi  laktosa  berbentuk  bulat,  cembung,  halus,  disertai  dengan  tepi  yang berbatas tegas (Jawetz et al ., 2013).
Gambar 1 (A). Morfologi koloni media Mc Conkey Agar E.coli ATCC 35218 (B) Morfologi sel pewarnaan gram E.coli ATCC 35218
Gambar 2 (A). Morfologi koloni media Mc Conkey Agar E.coli wild-type (B) Morfologi sel pewarnaan gram E.coli wild-type
Berdasarkan  hasil  pengamatan  pada  cawan  petri  setelah  diinkubasi  di  dalam inkubator  dengan  suhu  37ºC  selama  18-24  jam  didapatkan  bahwa  zona  inhibisi  dapat terlihat  pada  kontrol  positif  pada Escherichia  coli ATCC  35218.  Namun,  tidak  terlihat zona  inhibisi  pada  ekstrak  daun  Cocor  Bebek  konsentrasi  20%,  40%,  60%,  80%  dan aquades  sebagai  kontrol  negatif.  Berdasarkan  hasil  pengamatan  pada  tabel  4.3  ditemukan tidak  adanya  zona  inhibisi  di  seluruh  konsentrasi  pada Escherichia  coli  wild-type yang mana  sampel  untuk Escherichia  coli  wild-type menggunakan  swab  anal  bayi  di  daerah Purwokerto.
Dalam  penelitian  ini,  hasil  yang  didapatkan  tidak  sesuai  hipotesis  karena  ekstrak daun  Cocor  Bebek  tidak  memiliki  kemampuan  untuk  menghambat  pertumbuhan Escherichia  coli ATCC  35218  dan Escherichia  coli  wild-type .  Berdasarkan  standar  CLSI (2021), Escherichia  coli ATCC  35218  masih  sensitif  terhadap  antibiotik  Amoxicillin- clavulanat dan hal tersebut terbukti dalam penelitian ini. Sedangkan, Escherichia coli wild- type ,  antibiotik  Amoxicillin-clavulanat  didapatkan  hasil  resisten  sehingga  dapat
A B A B
Mandala of Health                                                                                                                  ISSN: 0216-3098
pengaruh ekstrak daun cocor bebek ( bryophyllum pinnatum ) terhadap pertumbuhan escherichia coli wild-type dan atcc 35218 (nurul fadiyah)
disimpulkan bahwa isolat Escherichia coli wild-type memiliki tingkat resistensi yang lebih tinggi dibandingkan dengan Escherichia coli ATCC 35218. Peneliti juga mencoba menguji pola sensitivitas antibiotik meropenem pada Escherichia coli wild-type dan memiliki hasil yang  sensitif.  Mekanisme  resisten  oleh  bakteri  ESBL  terhadap  enzim  beta-laktam  seperti inaktivasi  enzim  beta-laktam  oleh  enzim  beta-laktamase,  produksi Penicillin  Binding Protein (PBP)  dengan  afinitas  yang  lebih  rendah  terhadap  senyawa  aktif  yang  bersifat antibakteri, perubahan pada kanal porin yang dapat menyebabkan penurunan permeabilitas terhadap  senyawa  aktif  yang  bersifat  antibakteri  dan  pompa efflux yang  akan  mendorong senyawa  aktif  yang  bersifat  antibakteri  lepas  dari  sel  bakteri  (Wiyogo et  al .,  2021). Pengendalian resisten antimikroba dapat berpacu pada Permenkes No. 8 tahun 2015 seperti mengendalikan  berkembangnya  mikroba  resisten  akibat  tekanan  seleksi  oleh  antibiotik, melalui  penggunaan  antibiotik  secara  bijak  dan  mencegah  penyebaran  mikroba  resisten melalui peningkatan ketaatan terhadap prinsip pencegahan dan pengendalian infeksi.
Berdasarkan  klasifikasi  enzim  betalaktamase, Escherichia  coli  wild-type dalam penelitian ini termasuk dalam grup 1 cephalosporinases ( Bush-Jacoby-Medeiros (integron) system )  yang  memiliki  aktivitas enzyme  chromosomal  AmpC resistance.  Di  Indonesia, berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan di 5 rumah sakit pada tahun 2013, menujukkan bahwa prevalensi bakteri yang menghasilkan ESBL sebanyak 32-68% (Kuntaman K et al ., 2013).  Prevalensi  yang  cukup  tinggi  ini  tidak  sebanding  dengan  penelitian  tentang  bahan alam yang diujikan terhadap bakteri resisten karena jumlah penelitian yang telah dilakukan masih sedikit. Sebagian besar penelitian yang dilakukan menggunakan bakteri yang masih sensitif.  Pada  penelitian  yang  dilakukan  Krisniawati  dan  Widhi  (2021)  menyebutkan bahwa  66,7%  masyarakat  dalam  komunitas  sehat  Purwokerto  merupakan asymptomatic carriers dari ESBL producing Enterobacteriaceae (EPE).

## KESIMPULAN
Ekstrak  daun  Cocor  Bebek (Bryophyllum  pinnatum) tidak  memiliki  potensi  menghambat pertumbuhan Escherichia coli wild-type dan ATCC 35218.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Peneliti mengucapkan terima kasih kepada semua pihak yang berperan dalam penyusunan artikel ilmiah ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Cho, S., Hiott, L. M., Barrett, J. B., McMillan, E. A., House, S. L., et al ,. 2018. Prevalence and  characterization  of Escherichia  coli isolated  from  the  Upper  Oconee Watershed in Northeast Georgia. PLOS ONE . 13 (5): e0197005. CLSI. 2021. Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing. 31 ed. CLSI Supplement M100 . USA : Clinical and Laboratory Standards Institute. Hasanah, A. N., Putri, V. 2017. Review: Profiling Senyawa Kuersetin dari Tanaman Cocor Bebek  ( Kalanchoe  pinnata )  dengan  Menggunakan  Berbagai  Metode  Analisis. JFarmaka . 15(1) :134–14.
Jawetz, E., Melnick, J. L., Adelberg, E. A., Brooks, G. F. 2013. Mikrobiologi Kedokteran . Edisi ke-25. Jakarta: EGC.
Krisniawati, N., Widhi, A. P. K. N. 2021. Prevalance and Risk Factors of ESBL-producing Enterobacteriaceae in The Community. Journal of Biomedicine and Translational Research . 7(1) : 1-6.
Kuntaman, K et al . 2013. The Surveillance of Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli producing ESBL in Indonesia.
Latief,  A.,  Ashiq,  K.,  Qayyum,  M.,  Ashiq,  S.,  Ali,  E.,  &  Anwer,  I.  2019.  Phytochemical And Pharmacological Profile Of The Medicinal Herb: Bryophyllum pinnatum . The Journal of Animal & Plant Sciences . 29(6) : 1528-1534.
Li, D.,  Li, P., Yu, X., Zhang, X., Guo, Q., Xu, X., Wang, M., Wang, M. 2021 Molecular Characteristics of Escherichia coli Causing Bloodstream Infections During 2010– 2015 in a Tertiary Hospital, Shanghai, China. Infect Drug Resist . 14:2079-2086. Maulidiah., Winandari, O. P., Saputri, D. A. 2020. Pemanfaatan Organ Tumbuhan Sebagai Obat  Yang  Diolah  Secara  Tradisional  Di  Kecamatan  Kebun  Tebu  Kabupaten Lampung Bara. Jurnal Ilmu Kedokteran Dan Kesehatan . 7(2) : 443-447. Ngatin,  A.,  Saputra,  T.R.  2019.  Ekstraksi  Daun  Cocor  Bebek  Menggunakan  Berbagai Pelarut  Organik  Sebagai  Inhibitor  Korosi  Pada  Lingkungan  Asam  Klorida. Journal of Chemistry . 4 (1) : 21-27.
Purwatiningsih,  E  dan  Lestari,  D.  2020.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun  Cocor Bebek  ( Kalanchoe  pinnata (Lam))  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Salmonella typhi Dengan Metode Kirby Bauer. Jurnal Ilmiah Kesehatan . 12(2) : 142-148. Pinilih, S., Hidayat. 2014. Uji Sensitivitas Ekstrak Daun Cocor Bebek (Kalanchoe pinnata) Terhadap Staphylococcus aureus. Jurnal Kedokteran dan Kesehatan . 1 (1). Tagousop, C. N., Tamokou, Jd. D., Ekom, S. E., Ngnokam, D., Nazabadioko,  L.V. 2018. Antimicrobial  Activities  of  Flavonoid  Glycosides  from Graptophyllum grandulosum and  Their  Mechanism  of  Antibacterial  Action. BMC  Complement Altern Med . 18(252) : 1-10.
Wiyogo,  I.  O.,  Endraswari,  P.  D.,  Setiawati,  Y.  2021.  Antibacterial  Activity  of  Ethanol Extract of Kemuning ( Murraya paniculate ) Against Klebsiella pneumoniae ESBL by  In  Vitro  Test. Indonesian  Journal  of  Tropical  and  Infectious  Disease .  9(2)  : 102-107.