HUBUNGAN DOSIS TEPUNG GEMBILI ( Dioscorea esculenta )

## DENGAN TINGKAT EKSPRESI ENZIM Ampk-α2 PADA MODEL TIKUS DIABETES MELITUS
Neni Oktiyani 1 , Sunarti 2 , Prasetyastuti 2 , Jujuk Anton Cahyono 1
1 Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Banjarmasin Jl. Mistar Tjokrokusumo No. 4A Banjarbaru
2 Bagian Biokimia FK UGM jl Sekip Utara Yogyakarta
e -mail : neni.ok76@gmail.com
Abstract : Alternative methods of controlling glucose levels in patients with diabetes is by type of food, either by utilizing yam flour. At the flour contained inulin and resistant starch that can acti- vate the enzyme AMPK-α2. Activation of these enzymes will stimulate glucose transport in skele- tal muscle and liver, thus causing a decrease in glucose production. Varying doses of flour is ex- pected  to  affect  the  expression  of  AMPK-α2.  This  study  aims  to  dosage  relationship  yam  flour (Dioscorea  esculenta)  with  tigkat-α2  AMPK  enzyme  expression  in  the  nucleus  skeletal  muscle and liver in mouse models of diabetes mellitus. The study was a quasi-experimental design with Post Test Only Group Design. Rats were divided into 5 (five) groups, healthy mice, the mice with type 2 diabetes, and type 2 groups of diabetic rats with dietary intake yam flour addition of 1.25 g (TG-1:25),), 2.5 g (TG -2.5), 5.0 g (TG-5.0). Yam flour is mixed into the rat diet feed with varying doses. The results showed no significant correlation between the dose of yam flour with AMPK- α2 expression levels in skeletal muscle nuclei (p = 0.312) and liver (p = 0.474) in a mouse model of DM. The need for other studies using other types of food as an alternative arrangement of food for patients with diabetes
Keywords : diabetes mellitus type 2, AMPK-α2, yam flour
Abstrak : Metode alternatif pengendalian kadar glukosa pada penderita DM adalah dengan pen- gaturan jenis makanan, salah satunya dengan memanfaatkan tepung gembili. Pada tepung ter- dapat  inulin dan pati resisten yang dapat mengaktivasi enzim Ampk-α2. Aktivasi enzim ini akan menstimulasi transpor glukosa di otot skelet dan hepar, sehingga  menyebabkan terjadinya penu- runan produksi glukosa. Dosis bervariasi dari tepung diharapkan mampu berpengaruh terhadap ekspresi Ampk-α2. Penelitian ini bertujuan untuk hubungan dosis tepung gembili ( Dioscorea es- culenta ) dengan tigkat ekspresi enzim Ampk-α2  di nukleus otot skelet dan hepar pada model ti- kus Diabetes Melitus. Penelitian yang dilakukan adalah  eksperimental  kuasi dengan  rancangan Post Test Only Group Design. Tikus dibagi ke dalam 5 (lima) kelompok, yaitu kelompok tikus se- hat,  tikus  DM  tipe  2,  dan  kelompok  tikus  DM  tipe  2  dengan  asupan  makanan  penambahan tepung gembili 1,25 g (TG-1.25), ), 2,5 g (TG-2.5), 5,0 g (TG-5.0). Tepung gembili dicampurkan ke dalam pakan diet tikus dengan dosis yang bervariasi. Hasil penelitian menunjukkan tidak ada korelasi bermakna antara dosis tepung gembili dengan tingkat ekspresi Ampk-α2 di nukleus otot skelet  (p  =  0,312)  dan  hepar  (p  =  0,474)  pada  model  tikus  DM. Perlu  adanya  penelitian  lain menggunakan jenis makanan lain sebagai alternatif pengaturan makanan bagi penderita DM. Kata kunci : diabetes melitus tipe 2, Ampk-α2, tepung gembili

## Promotion Title Medical Laboratory Technology Journal
Available online at : http://ejurnal-analiskesehatan.web.id
1 (1), 2015, 7-13

## PENDAHULUAN
Menurut American  Diabetic  As- sociation (2006), prevalensi DM di selu- ruh dunia adalah sekitar 4%. Prevalens- inya  akan  terus  meningkat  dan diperkirakan  pada  tahun  2025  akan mencapai  5,4%.  Wild et  al . (2004) mengemukakan   bahwa  pada  tahun 2000 Indonesia menempati urutan ke-4 terbesar dalam jumlah penderita DM di dunia  (8,4  juta  penderita)  dan pada  ta- hun 2030 diperkirakan 21,3 juta pende- rita DM.
Resistensi  insulin  merupakan kondisi umum yang dialami oleh pende- rita DM tipe 2 yang mengakibatkan pe- nurunan  fungsi  mitokondria  dalam  me- tabolisme  energi.  Gangguan  pada  me- tabolisme energi memiliki peranan yang penting dalam menyebabkan komplikasi pada diabetes melitus akibat resistensi insulin (Segre et al ., 2010).
Resistensi  insulin  di  beberapa jaringan  erat  kaitannya  dengan  penu- runan ekspresi dan atau aktivitas enzim adenosine monophosphate-activated protein  kinase (AMPK)  (Hojlund et  al ., 2004). Adenosine  monophosphate- activated protein kinase (AMPK) adalah suatu serine/threonin  protein  kinase yang  bekerja  sebagai  sensor  keadaan energi  seluler  (Salminen et  al ., 2011). Enzim  ini  berperan  dalam  mengontrol keseimbangan  energi  seluler,  mengon- trol  homeostasis  glukosa,  metabolisme karbohidrat  dan  lipid  (Viollet  dan  An- dreelli,  2011)  di  berbagai  organ  teru- tama  otot  skelet  dan  hepar  (Gruzman, et  al .,  2009),  regulasi  biogenesis  dan fungsi  mitokondria,  autofagi,  polaritas sel  dan  pertumbuhan  dan  proliferasi sel.
Adenosine
monophosphate- activated  protein  kinase (AMPK)  ber- peran  penting  sebagai  regulator  dalam metabolisme  energi  karena  perannya dalam  aktivasi  beberapa  faktor  tran- skripsi lain seperti peroxisome prolifera- tor – activated  receptor (PPAR) - γ coacti- vator (PGC) -1 α ( Hardie, 2011a).
Penelitian  Gao et  al .  (2009) menunjukkan  bahwa  gangguan  fungsi mitokondria pada mencit dapat dicegah dengan pemberian sodium butirat. Buti- rat merupakan produk metabolit sekun- der  hasil  fermentasi  karbohidrat  tidak tercerna oleh flora usus khususnya  pati resisten  dan  makanan  yang  mengand- ung  serat  (Berni  Canani et  al .,  2011). Pati  resisten  ( resistant  starch )  meru- pakan karbohidrat yang tidak dapat ter- cerna oleh tubuh tetapi berperan sangat penting dalam menghasilkan asam buti- rat  (Cummings et  al .,  2001). Inulin me- rupakan serat larut air namun tidak da- pat  dicerna  oleh  enzim  pencernaan. Fermentasi  inulin  dalam  kolon  dapat meningkatkan  jumlah bifidobacterial dan  meningkatkan  produksi  butirat dalam  kolon  (De  Vuyst  dan  Leroy, 2011; Lattimer dan Haub, 2010).
Salah  satu  bahan  pangan  yang banyak  mengandung  pati  resisten  dan inulin  adalah  gembili  ( Dioscorea  escu- lenta ).  Gembili  merupakan  umbi  lokal yang  belum  dimanfaatkan  secara  opti- mal  oleh  masyarakat  namun  memiliki kadar  pati  resisten  yang  cukup  tinggi yaitu  sebesar  10,4  mg/g  berat  kering (Marsono, 1998) dan kadar inulin sebe- sar  14,77%  (Winarti et  al .,  2011). Oleh karena  itu  gembili  kemungkinan  dapat digunakan  sebagai  bahan  makanan yang  dapat  meningkatkan  produksi asam butirat dalam kolon dan  selanjut- nya akan meningkatkan ekspresi Ampk- α2  di  nukleus  otot  skelet  dan  hepar dalam  upaya  pencegahan  perkemban- gan  DM tipe 2.

## BAHAN DAN METODE
Jenis penelitian ini adalah  ekspe -rimental    kuasi  dengan    rancangan Post  Test  Only  Group  Design. Lokasi penelitian dilakukan di beberapa tempat yaitu  : Laboratorium  Pusat  Antar  Uni- versitas  (PAU),  dan    Laboratorium  Bi- okimia Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada.
Populasi  dan  sampel  yang digunakan  pada  penelitian  ini  adalah tikus galur Wistar jantan berumur 2 bu- lan dengan berat berkisar antara ± 200 g.
Pembuatan  Tepung  Gembili, yaitu gembili  dikupas,  dipotong  setebal 1-2 mm dan dicuci hingga bersih. Dila- kukan  pengeringan  pada  50 o C  selama 24 jam dan di haluskan sampai menjadi tepung (ukuran 90 mesh).
Perlakuan  Hewan  Coba  :  Tikus dikandangkan  dalam  kandang  plastik, tiap  kandang  berisi  10  ekor.  Tikus diadaptasi  selama  1  minggu  dengan pemberian diet standar semipurified di- ets for rats sebanyak 15 g. Selanjutnya dilakukan  pembagian  kelompok  hewan coba menjadi 5 kelompok :  kelompok I (Kelompok tikus tanpa induksi dan per- lakuan  pakan  stan-dar),  Kelompok  II (Kelompok tikus induk-si DM dan perla- kuan  pakan  standar),  Kelompok  III (Kelompok  tikus  dengan  induksi  DM dan  pakan  diet  1,25  g  gembili/15  g pakan standar), Kelompok IV
(Kelompok  tikus  dengan  induksi  DM dan  pakan  diet  2,50  g  gembili/15  g pakan  standar)  dan  Kelompok  V (Kelompok  tikus  dengan  induksi  DM dan pakan diet 5 g gembili/15 g pakan standar).
Induksi tikus menjadi DM : Tikus dipuasakan  selama  1  malam  sebe-lum penginduksian  pagi  harinya.  Induksi DM  tipe  2  dilakukan  dengan  injeksi in- traperitoneal nicotinamide (NA) 230 mg/ kg  BB  yang  dilarutkan  dalam  larutan salin  (NaCl  0,9%).  Setelah  15  menit, kemudian  dilanjutkan  dengan  pembe- rian streptozotocin (STZ)  65  mg/kg  BB yang dilarutkan dalam bufer sitrat 0,1 M dengan  pH  4,5  secara intraperitoneal untuk  merusak  sel  β - pankreas.  Tikus dikatakan DM tipe 2 apabila kadar glu- kosa  darahnya  mengalami  kenaikan >120 mg/dL setelah induksi 5 hari.
Analisis ekspresi Ampk α -2 di nuk- leus otot skelet dan hepar dengan me- tode  IHC  :  Proses  persiapan  jaringan,
meliputi  :  fiksasi  jaringan  otot  skelet ( vastus  lateralis )  dalam  larutan  bufer formalin 10%, Dehidrasi dengan alkohol persentase  yang  berbeda,  Pembersi- han  (clearing)  alkohol  dengan  larutan xylol.  Selanjutnya  dilakukan  infiltrasi parafin, pencetakan/pengeblokan ( embedding )  dan  Pemotongan  dengan mikrotom.Kemudian  di  inkubasi  pada suhu 39°C selama 1 malam.
Pemeriksaan  imuno  histokimia, meliputi  :  deparafinisasi  menggunakan xylol, Blocking peroxidase, Antigen Re- trieval,  Blocking  non  spesific  binding, IHC staining dan pengamatan dibawah mikroskop.  Persentase  nukleus  yang mengekspresikan Ampk-α2 secara sub- jektif  dinilai  dari  7  lapangan  pandang tiap irisan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Asupan Pakan
Data  asupan  tepung  gembili  pada
tikus dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Asupan Tepung Gembili Pada Tikus Keterangan :
K1.Sehat   =  Kelompok  tikus  tanpa  in- duksi dan perlakuan pakan standar K2.DM      = Kelompok tikus induksi DM dan perlakuan pakan standar TG-1.25  =  Kelompok  tikus  dengan induksi dan pakan diet 1,25 g gembili TG-2.5    =  Kelompok  tikus  dengan induksi dan pakan diet 2,50 g gembili TG-5.0    =  Kelompok  tikus  dengan induksi dan pakan diet 5,00 g gembili1
Kelom- pok Kandun- gan gem- bili dalam pakan Rerata asupan pakan (g) Asupan tepung gembili (g) K1.Seh at 0% 12,52 0 K2.DM 0% 12,90 0 TG- 1.25 8,33% 12,64 1,05 TG-2.5 16,67% 12,00 2,00 TG-5.0 33,33% 12,04 4,01
Ekspresi  Ampk-α2  di  nukleus  otot skelet dan hepar
Gambaran    ekspresi  Ampk-α2 di  nukleus  hepar  dapat  dilihat  pada Gambar 1.
Gambar 1. Ekspresi Ampk-α2 di hepar.
Nukleus yang mengekspresikan Ampk- α2  berwarna  coklat  (ditandai  dengan anak  panah  kuning).  Nukleus  yang  ti- dak  mengekspresikan  Ampk-α2  ber- warna  biru  (ditandai  dengan  anak panah merah). Pembesaran  400x.
Korelasi  dosis  tepung  gembili  den- gan  tingkat  ekspresi  Ampk-α2  di nukleus otot skelet dan hepar
Korelasi  antara  dosis  tepung gembili  dengan  tingkat  ekspresi  Ampk- α2  di nukleus otot  skelet dan hepar di- lakukan dengan menggunakan uji kore- lasi Pearson. Uji hipotesis berdasarkan kekuatan  korelasi  (r),  nilai  signifikansi (p),  dan  arah  korelasi.  Hasil  korelasi dosis  tepung  gembili    dengan    tingkat ekspresi      Ampk  -α2  di  nukleus  otot skelet dan hepar dapat dilihat pada Ta- bel 2 dan Tabel 3.
Tabel  2.Korelasi  dosis  tepung  gembili dengan    tingkat  ekspresi  Ampk- α2  di nukleus  otot skelet
Uji  Korelasi  Pearson.  Nilai  signifikansi p<0,05.
Tabel  2.  menunjukkan  nilai  sig- nifikansi  p>0,05  yang  berarti  tidak  ter- dapat  korelasi  yang  bermakna  antara dosis  tepung  gembili    dengan    tingkat ekspresi  Ampk-α2  di  nukleus  otot skelet. Nilai korelasi Pearson sebesar - 0,211  menunjukkan  korelasi  negatif dengan kekuatan korelasi yang lemah.
Tabel  3.  Korelasi  dosis  tepung  gembili dengan    tingkat  ekspresi  Ampk-
α2  di nukleus hepar
Uji  Korelasi  Pearson.  Nilai  signifikansi p<0,05.
Berdasarkan  Tabel  3.  diperoleh nilai  signifikansi  p>0,05  yang  menun- jukkan tidak terdapat korelasi yang ber- makna  antara  dosis  tepung  gembili dengan    tingkat  ekspresi  Ampk-α2  di nukleus  hepar.  Nilai  korelasi  Pearson sebesar  -0,150  menunjukkan  korelasi negatif  dengan  kekuatan  korelasi  yang sangat lemah.
Hasil analisa menunjukkan bahwa  terdapat  perbedaan  bermakna asupan  pakan  pada  minggu  ke-1  dan minggu ke-3.  Hal ini kemungkinan ber- kaitan dengan faktor intern dari masing- masing  tikus.  Jika  dilihat  dari  rerata asupan  pakan  secara  keseluruhan  se- lama  empat  minggu  perlakuan,  tidak terlihat  adanya perbedaan yang signifi- kan pada masing-masing kelompok. Ini berarti  bahwa  perbedaan  perlakuan  ti- dak  mempengaruhi  nafsu  makan  tikus sehingga rata-rata asupan pakan antar kelompok selama penelitian sama.
Pemberian  pakan  standar  dan pakan diet sebanyak 15 g pada hewan coba  setiap  harinya  dilakukan  secara ad  libitum (sekenyangnya).  Kelemahan dari cara ini adalah bahwa tidak semua pakan  yang  diberikan  dimakan  habis oleh    hewan    coba    sehingga   perlu
Tingkat ekspresi Ampk-α2 Dosis tepung gembili r p n -0,211 0,312 25 Tingkat ekspresi Ampk-α2 Dosis tepung gembili r p n -0,150 0,474 25
dilakukan  perhitungan  dosis  tepung gembili dalam pakan yang dimakan.
Dosis  tepung  gembili  yang diberikan  pada  masing-masing  kelom- pok  perlakuan  adalah  K1.Sehat  0  g; K2.DM 0 g; TG-1.25 1,25 g; TG-2.5 2,5 g  dan  TG-5.0  5,0  g.  Hasil  perhitungan jumlah  tepung  gembili  dalam  pakan yang dimakan hewan coba pada kelom- pok K1.Sehat 0 g; K2.DM 0 g; TG-1.25 1,05 g; TG-2.5 2,00 g dan TG-5.0 4,01 g.  Jika  dikonversi  asupan  tepung  gem- bili tikus ke manusia dengan faktor kon- versi  0,018  dan  nilai  rendemen  gembili menjadi tepung gembili sebesar 16,21%,  maka  didapatkan  jumlah  asu- pan tepung gembili tikus setara dengan K1.Sehat  0  g;  K2.DM  0  g;  TG-1.25 359,84  g;  TG-2.5  685,44  g  dan TG-5.0 1374,34 g gembili pada manusia.
Penelitian Gao et al. (2009) men- yebutkan  bahwa  butirat  dapat  menu- runkan  glukosa  darah  puasa  sebesar 30%  dan  resistensi  insulin  sebesar 50%.  Mekanismenya  terkait  dengan peningkatan energy  expenditure dan induksi  fungsi  mitokondria  melalui  akti- vasi adenosine monophosphate- activated protein kinase (AMPK). Enzim Ampk-α2  memiliki  peran penting  dalam penggunaan  glukosa  oleh  otot  melalui translokasi glucose
transporter-4
(GLUT-4)  dan  meningkatkan  metabo- lisme  glukosa  dengan  meningkatkan biogenesis  mitokondria  (Fujii et  al ., 2005). Selain itu meningkatkan oksidasi asam  lemak  dan  menurunkan  produksi glukosa,  kolesterol  dan  trigliserida  di hepar. Efek metabolik ini terkait dengan penurunan  kadar  glukosa  plasma (Gruzman et al ., 2009; Hardie, 2011b).
Adenosine
monophosphate- activated  protein  kinase (AMPK)  ber- peran  penting  sebagai  regulator  dalam metabolisme  energi  karena  perannya dalam  aktivasi  beberapa  faktor  tran- skripsi lain seperti peroxisome prolifera- tor – activated  receptor (PPAR) - γ coacti- vator (PGC) -1 α ( Hardie, 2011a). Faktor transkripsi  ini  merupakan  koaktivator
transkripsi  yang  mengontrol  berbagai faktor  transkripsi  lainnya  seperti estro- gen-related  receptor (ERR)-α, nuclear respiratory factor (NRF)-1 dan 2, perox- isome  proliferator – activated  receptor (PPAR)-α  dan  γ  dan thyroid  hormone receptor yang berperan langsung dalam biogenesis  mitokondria,  metabolisme glukosa  dan  asam  lemak  serta  per- nafasan (Gao et al ., 2009).
Enzim  AMPK  memiliki  3  subunit (α, β, γ). Isoform 2 subunit alpha (Ampk -α2)  banyak  diekspresikan  pada  jarin- gan  otot  skelet  dan  hepar  yang memiliki  peran  penting  dalam  peng- gunaan glukosa oleh otot melalui trans- lokasi glucose  transporter-4 (GLUT-4) ke membran plasma dan meningkatkan metabolisme  glukosa  dengan  mening- katkan  biogenesis  mitokondria  (Fujii et al .,  2005).  Enzim  ini  dapat  meningkat- kan sensitivitas insulin dengan mening- katkan  oksidasi  asam  lemak  dan  men- gurangi penyimpanan
trigliserida karena jumlah trigliserida otot yang ber- lebihan  dikaitkan  dengan  resistensi  in- sulin  (Hardie,  2011b). Selain  itu,  enzim ini  dapat    mencegah  biosintesis  koles- terol  dan  trigliserida  dan  mencegah glukoneogenesis  di  hepar  (Gruzman et al ., 2009; Hardie, 2011b).
Berdasarkan  hasil  uji  korelasi Pearson didapatkan hasil yang menun- jukkan  bahwa  terdapat  korelasi  yang tidak  bermakna  antara  dosis  tepung gembili  dengan  tingkat ekspresi Ampk- α2  di  nukleus  otot  skelet  dan  hepar. Nilai  korelasi  Pearson  negatif  artinya korelasi  bersifat  berlawanan  arah,  se- makin  besar  nilai  satu  variabel  maka semakin kecil nilai variabel lainnya. Ha- sil  penelitian  menunjukkan  bahwa  se- makin  besar  dosis  tepung  gembili  se- makin rendah tingkat ekspresi Ampk-α2 di nukleus otot skelet dan hepar.
Tingkat  ekspresi Ampk-α2  pal- ing  tinggi  justru  terjadi  pada  kelompok TG-1.25  dengan  dosis  tepung  gembili paling  kecil  yaitu  1,05  g.    Sedangkan kelompok  TG-2.5  dan  TG-5.0  dengan
dosis  tepung  gembili  lebih  besar menunjukkan tingkat ekspresi Ampk-α2 yang  lebih  rendah  dibanding  kelompok TG-1.25.  Hal  ini  terjadi  karena  pada kelompok  TG-2.5  dan  TG-5.0  kandun- gan serat dan RS lebih tinggi dibanding kelompok  TG-1.25. Fermentasi  serat dan RS berlebih di kolon akan mengha- silkan  energi,  untuk  serat  sebesar  1,5 Kkal/g  (Tensiska,  2008)  dan  RS  sebe- sar  2  Kkal/g  (Nugent,  2005). Selain  itu kandungan  karbohidrat  pada  kelompok TG-5.0 sangat  tinggi. Berdasarkan per- hitungan  pemenuhan  gizi  karbohidrat pada kelompok TG-5.0,  didapatkan ha- sil  kandungan  karbohidrat  dalam tepung gembili sebesar 132,45%. Kele- bihan  energi  menyebabkan  aktivasi Ampk-α2 menurun.

## KESIMPULAN
Dari  hasil  penelitian  disimpulkan bahwa  tidak  ada  korelasi  bermakna antara  dosis  tepung  gembili  dengan tingkat  ekspresi  Ampk-α2  di  nukleus otot  skelet  (p  =  0,312)  dan  hepar  (p  = 0,474) pada model tikus DM tipe 2.

## SARAN
Disarankan  perlu  kajian  bahan pangan  lokal  lain    terhadap  ekspresi Ampk-α2 dan perlu dilakukan penelitian ekspresi  Ampk-α2  di  jaringan-jaringan lain.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penelitian  ini  merupakan  bagian dari  Tesis,  sehingga  disampaikan  uca- pan terimakasih kepada Institusi Poltek- kes  Kemenkes  Banjarmasin  yang  telah membiayai.

## DAFTAR PUSTAKA
American Diabetes Association, (2006). Diagnosa  and  classification  of diabetes mellitus. Diabetes Care. 29(1 Suppl): 43S - 48S. Berni  Canani,  R.,  Di  Costanzo,  M.,
Leone,  L.,  Pedata,  M.,  Meli,  R., Calignano,  A.  (2011).  Potential beneficial  effects  of  butyrate  in intestinal  and  extraintestinal  dis- eases. World  J . Gastroenterol . 17(12):1519-1528. Cummings,  J.H.,  Macfarlane,  G.T., Englyst,  H.N.  (2001).  Prebiotic digestion  and  fermentation. Am . J . Clin . Nutr .  73(1supp):415S – 420S.
De  Vuyst,  L.,  Leroy,  F.  (2011).  Cross- feeding  between  bifidobacteria and  butyrate-producing  colon bacteria  explains  bifdobacterial competitiveness,  butyrate  pro- duction,  and  gas  production. Int .
J . Food Microbiol . 149:73 – 80.
Gao,  Z.,  Yin,  J.,  Ward,  R.E.,  Martin, R.J.,  Lefevre,  M.,  Cefalu,  W.T., Ye,  J.  (2009).  Butyrate  improves insulin  sensitivity  and  increases energy  expenditure  in  mice. Dia- betes . 58:1509-1517.
Gruzman,  A.,  Babai,  G.,  Sasson,  S. (2009).  Adenosine  Monophos- phate  -Activated  Protein  Kinase (AMPK)  as  a  New  Target  for Antidiabetic  Drugs:  A  Review  on Metabolic,  Pharmacological  and Chemical  Considerations. Rev .
Diabetic Studies. 6 (1): 13-36.
Hardie,  D.G.  (2011a).  AMP-activated protein kinase – an energy sensor that  regulates  all  aspects  of  cell function. Genes Dev. 25(18):1895 -1908.
Hardie,  D.G.  (2011b).  Sensing  of  en- ergy  and  nutrients  by  AMP- activated  protein  kinase. Am . J . Clin . Nutr . 93(suppl):891S-896S. Hojlund,  K.,  Mustard,  K.J.,  Staehr,  P., Hardie  D.G.,  Nielsen,  H.B.,  Rich- ter,  E.A.,  Wojtaszewski,  J.F.P. (2004). AMPK activity and isoform protein  expression  are  similiar  in muscle of obese subject with and without   type  2  diabetes. Am . J .
Physiol . Endocrinol. Metab . 286:E239-E244. Marsono,  Y.,  (1998). Perubahan  kadar resistant  starch  (RS)  dan  kom- posisi  kimia  beberapa  bahan pangan  kaya  karbohidrat  dalam pengolahan. Agritech .  19(3):124- 127.
Nugent, A.P.  (2005). Health Properties of Resistant Starch. British Nutri-
tion Foundation . 27-54. Salminen, A., Hyttinen, J.M.T., Kaarniranta, K. (2011). AMP- ac-
tivated protein kinase inhibits NF- kβ  signaling  and  inflammation: impact  on  healthspan  and  life- span. J . Mol . Med . 89:667-676. Segre,  A.V.,  DIAGRAM  Consortium, MAGIC  Investigators,  Groop,  L., Mootha,  V.K.,  Daly,  M.J.,  Alt- shuler,  D.  (2010).  Common  In-
herited  Variation  in  Mitochondrial Genes  Is  Not  Enriched for Asso- ciations  with  Type  2  Diabetes  or Related  Glycemic  Traits. Plos Genet . 6(8): e1001058.
doi:10.1371/
journal.pgen.1001058.
Tensiska.  (2008).  Serat  Makanan.  Ju- rusan  Teknologi  Industri  Pangan Fakultas  Teknologi  Industri  Per- tanian Universitas Padjadjaran. Viollet,  B.,  Andreelli,  F.  (2011).  AMP- activated  protein  kinase  and metabolic  control. Handb . Exp . Pharmacol . 203:303-330.
Wild,  S.,  Roglic,  G.,  Green,  A., Sicree, R.,  King,  H.  (2004).  Global Prevalence of Diabetes: Estimate for the year 2000 and projections for 2030. Diabetes Care . 27:1047 -1053.