## Aplikasi Natural Deep Eutectic Solvent (NADES) Sebagai Green Solvent pada Ekstraksi Kafein dan Katekin dari Limbah Kulit Kopi
Fitria Puspita 1* , Isna Nurhidayati 1 , Bella Mellisani 1 , Fajar Amelia Rachmawati Putri 1 , Anton Restu Prihadi 2 1. Program Studi Analisis Kimia, Politeknik AKA Bogor, Jl. Pangeran Sogiri No.283, Tanah Baru, Bogor Utara, Kota Bogor, Jawa Barat 16154
2. Program Studi Penjaminan Mutu Industri Pangan, Politeknik AKA Bogor, Jl. Pangeran Sogiri No.283, Tanah Baru, Bogor Utara, Kota Bogor, Jawa Barat 16154
*Corresponding author: pipitfpuspita@gmail.com
Received: 13 May 2023; Accepted: 05 July 2023
Abstract: Various  studies have been developed to support green industry by developing green solvents to replace organic solvents  which  are  generally  toxic,  volatile  and  harmful  to  human  health  and  the  environment.  Environmentally  friendly solvents that have  been  successfully  developed  in  the 21st  century  are  eutectic  solvents or  known  as  natural deep  eutectic solvents (NADES). NADES can be formed from primary metabolites such as amino acids, organic acids, sugars, or choline derivatives NADES has a high ability to extract polar, non-polar compounds and several other secondary  metabolites. The amount of waste generated from the process of separating coffee from its seeds is abundant but has not been used optimally. In  fact,  the  coffee  husk  waste  has  the  potential  to  be  used  further  as  a  food  product  because  it  contains  many  active substances,  especially  phenolic  compounds  such  as  caffeine  and  catechins.  In  this  study,  the  NADES  solvent  based  on choline chloride-proline (1:1) was successfully synthesized and used to extract phenolic compounds in the form of caffeine and  catechins  from  coffee  husk  waste.  The  results  of  the  analysis  using  HPLC  showed  that  the  levels  of  caffeine  and catechins extracted were 14.5 ppm and 61 ppm, respectively. Based on these results, the caffeine and catechins in coffee skin waste were successfully extracted using NADES based on choline chloride – proline (1:1).
Keywords: Caffeine, cathecin, green solvent, HPLC, NADES
Abstrak: Berbagai riset telah dikembangkan untuk mendukung green industry dengan mengembangkan green solvent untuk menggantikan pelarut organik yang umumnya bersifat toksik, mudah menguap, dan berbahaya bagi kesehatan manusia dan lingkungan.  Pelarut  ramah  lingkungan  yang  berhasil  dikembangkan  pada  abad  21  adalah  pelarut  eutektik  atau  dikenal dengan istilah natural deep eutectic solvent (NADES). NADES dapat dibentuk dari metabolit primer seperti asam amino, asam  organik, gula,  atau  turunan  kolin dan  NADES  memiliki  kemampuan  yang  tinggi untuk  ekstraksi  senyawa polar, non polar dan beberapa metabolit sekunder lainnya. Limbah yang dihasilkan dari proses pemisahan kopi dengan bijinya memiliki jumlah  yang  melimpah  namun  belum  dimanfaatkan  secara  optimal.  Padahal,  kulit  kopi  tersebut  berpotensi  dimanfaatkan lebih  lanjut  sebagai  produk  pangan  karena  mengandung  banyak  zat  aktif  terutama  senyawa  fenolik  seperti  kafein  dan katekin. Pada penelitian ini, pelarut NADES berbasis kolin klorida-prolin (1:1) telah berhasil disintesis dan digunakan untuk ekstraksi  senyawa  fenolik  dalam  bentuk  kafein  dan  katekin  dari  limbah  kulit  kopi.  Hasil  analisis  menggunakan  HPLC menunjukkan  bahwa  kadar  kafein  dan  katekin  yang  berhasil  diekstraksi  berturut-turut  sebesar  14,5  ppm  dan  61  ppm. Berdasarkan  hasil  tersebut,  maka  kafein  dan  katekin  dalam  limbah  kulit  kopi  berhasil  diekstraksi  menggunakan  NADES berbasis kolin klorida – prolin (1:1).
Kata kunci : Green solvent , HPLC, kafein, katekin, NADES
DOI: 10.15408/pbsj.v5i1.32256

## 1. PENDAHULUAN
Green ekstraksi  adalah  salah  satu  cara  untuk mencari  pelarut  baru  yang  aman  menggantikan pelarut organik yang umumnya memiliki volatilitas tinggi.  Saat  ini,  proses  ekstraksi  pelarut  banyak
menggunakan  pelarut  organik  yang  umumnya bersifat  toksik  (Abbot  et  al.,  2002).  Metode ekstraksi untuk senyawa dari bahan alam umumnya dilakukan  dengan  metode  maserasi  menggunakan

## Pharmaceutical and Biomedical Sciences Journal
Volume 5(1), 2023, 35-42
pelarut  organik  seperti  metanol,  etanol,  aseton, heksana,  dan  etil  asetat.  Proses  ini  membutuhkan waktu yang lama serta menggunakan pelarut dalam jumlah  banyak.  Selain  itu,  teknik  ekstraksi  tersebut juga membutuhkan proses penghilangan pelarut dan pemurnian  untuk  memperoleh  ekstrak  yang  bebas dari  pelarut.  Oleh  sebab  itu,  perkembangan  pelarut yang  ramah  lingkungan  sangatlah  diperlukan sehingga  didapatkan  ekstrak  alami  dengan  sisa pelarut yang aman bagi kesehatan dan lingkungan.
Metode  yang  dikembangkan  untuk  mendapatkan pelarut  yang  aman  adalah  dengan  menggunakan pelarut  eutektik  atau  dikenal  dengan natural  deep eutectic  solvent (NADES)  yang  berasal  dari  bahan alami.  NADES  dapat  dibuat  dengan  komposisi senyawa  yang  bersifat hydrogen  bond  acceptor (HBA)  dan hydrogen  bond  donor (HBD).  NADES yang  paling  umum  didasarkan  pada  senyawa  kolin klorida  (ChCl),  asam  karboksilat  dan  donor  ikatan hidrogen  lainnya  seperti  gula,  asam  sitrat,  asam suksinat,  asam  amino  dan  gliserol  yang  umumnya terdapat  dalam  sel  organisme  hidup  (Bajkacz  & Adamek.  2018).  NADES  memiliki  kemampuan yang  tinggi  untuk  mengekstraksi  senyawa  polar maupun non polar dan beberapa metabolit sekunder lainnya.  NADES  juga  memiliki  keunggulan  lain seperti  mudah diproduksi,  tidak  beracun,  dan  dapat terurai secara alami (Altamash et al., 2017; Paiva, et al.,  2014).  Selain  itu,  NADES  juga  dapat melarutkan  senyawa  makromolekul  (Francisco  et al.,  2012).  Beberapa  penelitian  mengenai  NADES berkembang  untuk  menentukan  sifat  fisiko  kimia dan stabilitas pelarut.
Namun,  penggunaaan  pelarut  NADES  yang diaplikasikan  pada  pemisahan  zat  aktif  dari  bahan alam  masih  terbatas  penggunaannya.  Beberapa penelitian  yang  pernah  dilakukan  menggunakan NADES  sebagai  pelarut  untuk  pemisahan  senyawa diaplikasikan  untuk  ekstraksi  fenolik  dari aronia melanocarpa (Razborsek  et  al.,  2020),  aktivitas
antioksidan  (Pavlic  et  al.,  2022),  flavonoid  (Wei  et al., 2015) dan alkaloid (Duan et al., 2016).
Pada  penelitian  ini  akan  dikembangkan  pelarut NADES  untuk  ekstraksi  zat  aktif  dari  kulit  kopi. Limbah  kulit  kopi  dalam  bentuk  biomassa  sangat melimpah  jumlahnya  namun  hanya  dimanfaatkan beberapa persen untuk makanan ternak, kompos dan sebagai  bahan  baku  pembuatan  bioetanol  (Raudah & Ernawati, 2012). Selain itu, kulit kopi juga dapat dimanfaatkan  sebagai  biosorben,  minuman  dan kosmetik (Murthy & Naidu, 2012). Kulit buah kopi berpotensi  digunakan  karena  mengandung  zat  aktif seperti kafein, tanin, polifenol dan pektin (Padmapriya,  et  al.,  2013;  Silva,  et  al.,  2021; Janissen,  et  al.,  2018)  yang  dapat  digunakan  dalam produk pangan.
Berbagai  teknik  ekstraksi  pernah  dilakukan  untuk memisahkan  senyawa  aktif  dari  limbah  kulit  kopi seperti  ekstraksi  fenolik  menggunakan  air,  metanol (Silva et al., 2021), etanol (Prihadi et al., 2020) dan teknik  ekstraksi  fluida  superkritis  menggunakan CO 2 (Andrade et al., 2012). Limbah yang dihasilkan oleh  suatu  proses  industri  apabila  dikelola  dengan baik  dan  berkelanjutan  dapat  meningkatkan  nilai tambah  dari  limbah  tersebut  sehingga  dapat mengembangkan  produk  baru  yang  inovatif. Eksplorasi untuk penambahan nilai dari sisi produk yang  dihasilkan  oleh  limbah  kulit  kopi  dapat dikelola  dan  diaplikasikan  pada  produk  industri pangan  (Machado  et  al.,  2012;  Maimulyanti,  et  al., 2023).  Potensi  yang  terdapat  pada  kulit  kopi  dapat dikelola dengan ekstraksi bahan aktif menggunakan NADES.  NADES  yang  digunakan  lebih  aman  dan mudah  didegradasi  oleh  lingkungan  serta  dapat diaplikasikan  ke  produk  pangan  secara  aman. Penelitian  ini  dilakukan  untuk  menerapkan  pelarut yang  aman  untuk  mengekstrak  kafein  dan  katekin dari kulit kopi.

## 2. BAHAN DAN METODE

## 2.1 Alat dan Bahan Penelitian
Bahan-bahan yang  digunakan  antara  lain  kulit  kopi yang  diambil  dari  perkebunan  di  Jawa  Barat, Indonesia,  kolin  klorida  (Merck),  prolin  (Merck), asam  asetat  (Merck),  asam  fosfat  (Merck), asetonitril  (Merck),  aquabides  dan  kertas  saring whatman,  sementara  instrumen  yang  digunakan adalah HPLC (Agilent, 1200).

## 2.2 Prosedur Penelitian
a. Preparasi Sampel
Sampel yang digunakan adalah kulit kopi husk yang telah  dikeringkan  di  udara  terbuka  (<1%)  dan dihaluskan pada ukuran 20 mesh. Sampel disimpan dalam  kontainer  plastik  untuk  menghindari  kontak dengan udara dan cahaya matahari.

## b. Preparasi NADES
NADES dipreparasi dengan perbandingan komposisi  mol  tertentu  sesuai  antara  HBA  dan HBD. Pada penelitian ini digunakan senyawa HBA yang  bersumber  dari  kolin  klorida  (ChCl)  dan senyawa  HBA  yang  digunakan  adalah  prolin dengan  perbandingan  mol  HBA  dan  HBD  adalah 1:1  (Dai  et  al.,  2019).  NADES  tersebut  dipreparasi dengan pemanasan yang terdiri dari campuran solid- solid campuran pada suhu 100 o C dengan pengadukan  yang  konstan.  Pengadukan  dilakukan dengan rentang  120 menit sampai terbentuk larutan jernih (Dai et al., 2013).

## c. Ekstraksi  Zat  Aktif  dari  Kulit  Kopi menggunakan NADES
Ekstraksi  senyawa  zat  aktif  dalam  kulit  kopi dilakukan dengan cara mencampurkan 0,5 g sampel kulit  kopi  kering  yang  telah  dihaluskan  dengan  10 mL  NADES  lalu  diaduk  menggunakan  shaker dengan kecepatan 120 rpm pada suhu ruang selama
30  menit.  Campuran  selanjutnya  disaring  dan dianalisis  menggunakan  spektrofotometri  UV-Vis dengan  metode  Folin-Ciocalteu  untuk  mengukur total  polifenol  yang  terekstrak  (Maimulyanti  et  al., 2023)

## d. Penentuan Kafein Menggunakan HPLC
Larutan  ekstrak  kulit  kopi  sebanyak  10  mg/mL dianalisis  dengan  menggunakan  kolom  HPLC (Zorbax  SB-C18,  4.6  x  250  mm  x  5  micron)  fasa terbalik.  Fasa  gerak  yang  digunakan  terdiri  dari pelarut  A  (50  mM  asam  asetat  dalam  akuabides) dan pelarut B (50 mM asam asetat dalam asetonitril) dengan menggunakan metode elusi gradien sebagai berikut  :  menit  ke  0–30,  0–20%  (v/v)  pelarut  B; menit ke 30 – 45, 20–35% (v/v) pelarut B; menit ke 45–50,  35–80%  (v/v)  pelarut  B;  menit  ke  50–50,1, 80–5%  (v/v)  pelarut  B;  dan  menit  ke  50,1–60,  0% (v/v) pelarut B. Volume injeksi sampel ekstrak kulit kopi adalah 10 µL dan laju alir 1.0 mL/min. Kafein dideteksi pada panjang gelombang absorpsi 270 nm (Maimulyanti, et al., 2023; Narita & Inouye, 2011).

## e. Penentuan Katekin Menggunakan HPLC
Sebanyak 50 mg ekstrak kulit kopi dilarutkan dalam 50 mL labu ukur lalu ditandabataskan menggunakan asam fosfat 0,1% lalu disaring menggunakan kertas Whatman  42.  Sebanyak  20  µL  larutan  tersebut dianalisis  menggunakan  kolom  HPLC  (Zorbax  SB- C18, 4.6 x 250 mm x 5 micron) fasa terbalik. Fasa gerak  yang  digunakan  terdiri  dari  pelarut  A  (0,1% asam fosfat dalam akuabides) dan pelarut B (0,1 % asam fosfat dalam asetonitril) dengan menggunakan metode  elusi  gradien  sebagai  berikut  :  menit  ke  0– 35  menit,  92%  (v/v)  pelarut  A;  menit  ke  35–36, 78% (v/v) pelarut A dan menit ke 36–45, 92% (v/v) pelarut A. Volume injeksi sampel ekstrak kulit kopi adalah  20  µL  dan  laju  alir  1.0  mL/min.  Katekin dideteksi pada panjang gelombang absorpsi 280 nm.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1 Preparasi NADES
NADES  dapat  dibuat  dengan  komposisi  tertentu dari senyawa yang bersifat hydrogen bond acceptor (HBA)  dan hydrogen  bond donor (HBD). Pada penelitian ini, NADES disintesis dengan menggabungkan  senyawa  HBA  dari  kolin  klorida dan  senyawa  HBD  dari  prolin.  Struktur  kolin klorida dan prolin dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Struktur (a) kolin klorida dan (b) prolin
Kolin  klorida  dan  prolin  dicampurkan  dengan perbandingan  mol  1:1.  NADES  dibuat  dengan memanaskan  campuran  pada  suhu  100 o C  dengan pengadukan  konstan  sampai  kristal  meleleh  dan terbentuk  cairan.  Penambahan  akuabides  sebanyak 20% dilakukan untuk menghasilkan pelarut NADES yang jernih, tidak berwarna, dan memiliki viskositas yang  rendah  suhu  kamar.  Ali,  et  al.,  2019,  juga menyebutkan  bahwa  penambahan  air  ke  NADES berbasis asam amino dapat menghasilkan peningkatan  polaritas,  mengurangi  viskositas  dan mempertahankan efisiensi ekstraksi. Namun, jumlah air  yang  terlalu  tinggi  juga  dapat  menghancurkan struktur  molekul  NADES  dan  mengganggu  ikatan hidrogen.  Jadi  perlu  dibatasi  interaksi  ikatan hidrogen antara senyawa bioaktif dengan komponen NADES  (Ali,  et  al.,  2019).  Pelarut  NADES  yang disintesis dapat dilihat pada Gambar 2(c).
(a)
(b)
(b)
(a) (b)                             (c)
Gambar 2. (a) kolin klorida, (b) prolin, (c) NADES hasil sintesis
NADES yang berhasil sintesis selanjutnya dikarakterisasi  menggunakan  metode  FT-IR.  Hasil karakterisasi NADES tersebut telah dilaporkan oleh Maimulyanti,  et  al.,  (2023).  Senyawa  kolin  klorida dan  prolin  yang  dicampurkan  berhasil  membentuk ikatan  hidrogen  yang  ditunjukkan  dengan  adanya puncak  gugus  OH  yang  melebar  pada  bilangan gelombang  3500  cm -1 .  Ikatan  hidrogen  tersebut terbentuk  karena  adanya  interaksi  antar  molekul hidrogen dengan atom yang memiliki kelektronegatifan  yang  tinggi  pada  senyawa  HBD. Keberadaan  gugus  hidroksil  tersebut  menunjukkan bahwa  pelarut  NADES  yang  disintesis  dapat membentuk  ikatan  hidrogen  dengan  suatu  senyawa lain  sehingga  dapat  mengektraksi  zat  aktif  dari suatu bahan alam (Maimulyanti, et al., 2023).

## 3.2 Ekstraksi  Zat  Aktif  dari  Kulit  Kopi Menggunakan NADES
Hasil ekstraksi zat aktif dari kopi dapat dilihat pada Gambar  3.  Dari  Gambar  3,  terlihat  adanya perubahan warna NADES dari kekuningan menjadi coklat  jernih  dengan  viskositas  yang  rendah  pada suhu  kamar  (dibandingkan  dengan  Gambar  2(c)). Hal  ini  menunjukkan  bahwa  zat-zat  tertentu  dalam limbah  kulit  kopi  berhasil  terekstrak  dalam  pelarut NADES.
Gambar 3. Hasil ekstraksi zat aktif dari limbah kulit kopi
Kadar  senyawa  fenolik  dalam  ekstrak  tersebut selanjutnya  dianalisis  menggunakan  standar  asam galat dan hasilnya telah dilaporkan oleh Maimulyanti,  et  al.,  (2023).  Senyawa  fenolik  yang terekstrak  adalah  sebesar  5,88  mg/g  dengan  kadar fenol total sebesar 294,02 ppm.
3.3 Penentuan Kafein dan
Katekin

## Menggunakan HPLC
Kafein  dan  katekin  masing-masing  dianalisis menggunakan HPLC dengan metode yang berbeda. Puncak  masing-masing  analit  diidentifikasi  dengan
membandingkan  waktu  retensinya  dengan  kafein dan  katekin  standar.  Selanjutnya,  puncak  tersebut dikuantifikasi menggunakan metode standar eksternal.  Kromatogram  kafein  dan  katekin  standar yang  diperoleh  ditunjukkan  pada  Gambar  4.
(a)
(b)
Gambar 4. Kromatogram Kafein (a) dan Katekin (b) Standar
Kromatogram  penentuan  kafein  dan  katekin  dalam ekstrak  kulit  kopi  dapat  dilihat  pada  Gambar  5. Melalui perbandingan waktu retensi pada kromotogram  standar  dan  sampel,  diketahui  bahwa puncak  untuk  senyawa  kafein  dan  katekin  dalam sampel  berturut-turut  ditunjukkan  pada  waktu retensi  13,750  menit  dan  14,491  menit.  Luas  area puncak  sampel  yang  terukur  selanjutnya  dianalisis menggunakan  metode  standar  eksternal  dan diperoleh kadar  kafein sebesar 14,5 ppm dan kadar total  katekin  sebesar  61  ppm.  Berdasarkan  hasil tersebut,  maka  kafein  dan  katekin  dalam  limbah kulit  kopi  berhasil  diekstraksi  menggunakan NADES  berbasis  kolin  klorida–prolin  (1:1).  Amini et al., (2022) sebelumnya juga berhasil mengesktrak kafein  dari  limbah  kulit  kopi  yang  ditanam  di
Bondowoso, Jawa Timur, menggunakan pelarut etil asetat  dan  diperoleh  kadar  kafein  sebesar  36,33 ppm.  Namun,  ekstraksi  menggunakan  pelarut  ini membutuhkan  pelarut  dan  sampel  dalam  jumlah besar serta tidak ramah lingkungan.
Penggunaan  pelarut  NADES  sejenis  berbasis  kolin klorida-sorbitol  (4:1)  untuk  ekstraksi  kafein  dari Coffea canephora juga telah berhasil dilakukan oleh Yuniarti,  et  al.,  (2019)  dan  diperoleh  persen  hasil sebesar  4,49  mg/g.  Pelarut  NADES  dari  kolin klorida-etilen glikol (1:5) juga berhasil mengekstrak katekin  dari  teh  hijau  dengan  persen  hasil  sebesar 2,302  mg/g  (Zhang  et  al.,  2014).  Dengan  demikian ektraksi menggunakan NADES yang berbasis green solvent bisa  digunakan  untuk  menangani  limbah
yang  dapat  menghasilkan  senyawa  aktif  sebagai nilai  tambah  untuk  suatu  produk.  Proses  ekstraksi dilakukan tanpa menggunakan pelarut organik yang dapat menimbulkan masalah baru pada pencemaran
lingkungan dan mudah didegradasi oleh lingkungan serta  dapat  diaplikasikan  ke  produk  pangan  secara aman.
(a)
(b)
Gambar 5. Kromatogram Penentuan Kafein (a) dan Katekin (b) dalam Ekstrak Kulit Kopi menggunakan HPLC

## 4. KESIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan, senyawa  fenolik  dalam  bentuk  kafein  dan  katekin telah  berhasil  diekstrak  dari  limbah  kulit  kopi menggunakan  pelarut  NADES  berbasis  kolin klorida-prolin  dengan  perbandingan  mol  1:1.  Hasil analisis  menggunakan  HPLC  menunjukkan  adanya puncak  kafein  puncak  untuk  senyawa  kafein  dan katekin  berturut-turut  pada  waktu  retensi  13,750 menit  dan  14,491  menit.  Hasil  identifikasi dilakukan menggunakan standar kafein dan katekin dan  diperoleh  kadar  kafein  sebesar  14,5  ppm  dan kadar  total  katekin  sebesar  61  ppm.  Dengan demikian,  pelarut  NADES  berbasis  kolin  klorida- prolin dapat digunakan sebagai green solvent untuk menggantikan pelarut organik yang biasa digunakan
untuk mengekstrak zat aktif dalam limbah kulit kopi seperti metanol dan etanol.

## 5. UCAPAN TERIMA KASIH
Terima kasih kepada Program Studi Analisis Kimia dan  Program  Studi  Penjaminan  Mutu  Industri Pangan,  Politeknik  AKA  Bogor  atas  sarana  dan prasarana  yang  disediakan  sehingga  penelitian  ini dapat terlaksana.

## 6. DAFTAR PUSTAKA
Abbot,  A.P.,  Capper,  G.,  Davies,  D.L.,  Rasheed, R.K.  &  Tambyrajah,  V.,  2002,  ‘Novel  Solvent Properties of Choline Chloride/Urea Mixtures’, The Royal Society of Chemistry , (1), 70–71.
Altamash,  T.,  Nasser,  M.S.,  Elhamarnah,  Y., Magzoub, M., Ullah, R., Anaya, B., Aparicio, S. & Atilhan, M., 2017, ‘Gas Solubility and Rheological Behavior  of  Natural  Deep  Eutectic  Solvents (NADES) via Combined Experimental and Molecular Simulation Techniques’, ChemistrySelect , 2(24), 7278–7295.
Amini, H.W., Pratiwi, W., Hartanto, G.P.P., Palupi, B.,  Fachri,  B.A.,  Rizkiana,  M.F.  &  Rahmawati,  I., 2022,  ‘Ekstraksi  Limbah  Kulit  Kopi  Robusta  Dari Desa  Tanah  Wulan  Kecamatan  Maesan  Kabupaten Bondowoso  Dengan  Etil  Asetat  Serta  Analisa Aktivitas Antioksidannya’, e  -  Prosiding  Kolokium Hasil Penelitian dan Pengabdian Kepada Masyarakat , 87–92.
Andrade,  K.S.,  Gonalvez,  R.T.,  Maraschin,  M., Ribeiro-Do-Valle,  R.M.,  Martínez,  J.  &  Ferreira, S.R.S.,  2012,  ‘Supercritical  fluid  extraction  from spent coffee grounds and coffee husks: Antioxidant activity  and  effect  of  operational  variables  on extract composition’, Talanta , 88, 544–552.
Bajkacz, S. & Adamek, J., 2018, ‘Development of a Method  Based  on  Natural  Deep  Eutectic  Solvents for  Extraction  of  Flavonoids  from  Food  Samples’,
Food Analytical Methods , 11(5), 1330–1344.
Dai, Y. & Row, K.H., 2019, ‘Application of natural deep eutectic solvents in the extraction of quercetin from vegetables’, Molecules , 24(12).
Duan, L., Dou, L.-L., Guo, L., Li, P. & Liu, E.-H., 2016, ‘Comprehensive Evaluation of Deep Eutectic Solvents  in  Extraction  of  Bioactive  Natural Products’,
ACS Sustainable
Chemistry &
Engineering , 4(4), 2405–2411.
Francisco,  M.,  Bruinhorst,  A.  Van  Den  &  Kroon, M.C.,  2012,  ‘New  natural  and  renewable  low transition temperature mixtures (LTTMs): Screening  as  solvents  for  lignocellulosic  biomass processing’, Green Chemistry , 14(8), 2153–2157.
Janissen,  B.  &  Huynh,  T.,  2018,  ‘Chemical composition  and  value-adding  applications  of coffee  industry  by-products:  A  review’, Resources, Conservation and Recycling , 128(September 2017),
110–117.
Machado, E.M.S., Rodriguez-Jasso, R.M., Teixeira, J.A.  &  Mussatto,  S.I.,  2012,  ‘Growth  of  Fungal Strains  on  Coffee  Industry  Residues  with  Removal of Polyphenolic Compounds’, Biochemical
Engineering Journal , 60, 87–90.
Maimulyanti,  A.,  Nurhidayati,  I.,  Mellisani,  B., Putri,  F.A.R.,  Puspita,  F.  &  Prihadi,  A.R.,  2023, ‘Development  of  Natural  Deep  Eutectic  Solvent (NADES)  based  on  Choline  Chloride  as  a  Green
Solvent to Extract Phenolic Compound from Coffee Husk Waste’, Arabian Journal of Chemistry , 16(4).
Murthy,  P.S.  &  Madhava  Naidu,  M.,  2012, ‘Sustainable  management  of  coffee  industry  by- products and value addition - A review’, Resources, Conservation and Recycling , 66, 45–58.
Narita,  Y.  &  Inouye,  K.,  2012,  ‘High  antioxidant activity of coffee silverskin extracts obtained by the treatment  of  coffee  silverskin  with  subcritical water’, Food Chemistry , 135(3), 943–949.
Padmapriya,  R.,  Tharian,  J.A.  &  Thirunalasundari, T.,  2019,  ‘Coffee  waste  management-An  overview Coffee waste management-An overview’, International  Journal  of  Current  Research, 3(1)  9- 16.
Paiva, A., Craveiro, R., Aroso, I., Martins, M., Reis, R.L. & Duarte, A.R.C., 2014, ‘Natural deep eutectic solvents  -  Solvents  for  the  21st  century’, ACS Sustainable  Chemistry  and  Engineering ,  2(5), 1063–1071.
Pavlić,  B.,  Mrkonjić,  Ž.,  Teslić,  N.,  Kljakić,  A.C., Pojić,  M.,  Mandić,  A.,  Stupar,  A.,  Santos,  F., Duarte,  A.R.C.  &  Mišan,  A.,  2022,  ‘Natural  Deep Eutectic  Solvent  (NADES)  Extraction  Improves Polyphenol Yield and Antioxidant Activity of Wild Thyme (Thymus serpyllum L.) Extracts’,
Molecules , 27(5).
Prihadi,  A.R.,  Maimulyanti,  A.,  Mellisani,  B.  & Nurhasanah,  2020,  ‘Antioxidant  activity,  tannin content  and  dietary  fiber  from  coffee  husk  extract and potential for nutraceutical’, Rasayan Journal of Chemistry , 13(2), 955–959.
Raudah & Ernawati, 2016, ‘Pemanfaatan Kulit Kopi Arabika  dari  Proses  Pulping  untuk  Pembuatan Bioetanol’, Jurnal  Sains  dan  Teknologi  Reaksi , 10(1).
Razborsek,  M.,  Ivanovic,  M.,  Krajnc,  P.  &  Kolar, M.,  2020,  ‘Choline  Chloride  Based  Natural  Deep Eutectic  Solvents  as  Extraction  Media  for Extracting Phenolic’, Molecules , 25, 1–14.
Silva,  M.  de  O.,  Honfoga,  J.N.B.,  Medeiros,  L.L. de,  Madruga,  M.S.  &  Bezerra,  T.K.A.,  2021, ‘Obtaining  Bioactive  Compounds  from  the  Coffee Husk (Coffea arabica L.) Using Different Extraction Methods’, Molecules , 26(1).
Wei, Z., Qi, X., Li, T., Luo, M., Wang, W., Zu, Y. &  Fu,  Y.,  2015,  ‘Application  of  natural  deep eutectic solvents for extraction and determination of phenolics  in  Cajanus  cajan  leaves  by  ultra performance  liquid  chromatography’, Separation and Purification Technology , 149, 237–244.
Yuniarti,  E.,  Saputri,  F.C.  &  Mun’im,  A.,  2019, ‘Application  of  the  natural  deep  eutectic  solvent choline  chloridesorbitol  to  extract  chlorogenic  acid and  caffeine  from  green  coffee  beans  (Coffea canephora)’, Journal  of  Applied  Pharmaceutical Science , 82–90.
Zhang, H., Tang, B. & Row, K., 2014, ‘Extraction of  catechin  compounds  from  green  tea  with  a  new green  solvent’, Chemical  Research  in  Chinese Universities , 30(1), 37–41.