## PENGUJIAN MIKROBIOLOGI FILLET IKAN BANDENG PADA PENYIMPANAN SUHU REFRIGERATOR
(Microbiology Testing of milk fish Fillet on Refrigerator Storage)
Yulistiani R 1) , Winarti S 1) dan Irawati EH 2)
1) Staff Pengajar Progdi Tekn. Pangan, FTI UPN “Veteran”, Jatim
2) Alumni Progdi Tekn. Pangan, FTI UPN “Veteran” Jatim Jl. Raya Rungkut Madya Gunung Anyar Surabaya 60294 Email : ratnayulistiani@yahoo.co.id

## Abstract
Many milkfish fish consumed by society, but there are some people who are less fond of fish due to the large number of milkfish spines present on the fish whitefish. One of the alternatives offered, namely in the form of milkfish fillets. The purpose of this research is to know the best results on the treatment of Chitosan concentration and long storage on a storage temperature of refrigerator to the quality of physical, chemical and organoleptik fish  fillet  banding.  The  study  use  a  factorial  completely  randomized  Design  with  two- factor  and 2 replications. The first Factor  concentration of Chitosan (b/v), consisting of: C1 = C2 = 0%, 1%, 2% and C3 = C4 = 3% and the second Factor prolonged storage consisting of: P1 = P2 = 0 days, 4 days, 8 days = P3 and P4 = 12 days. Based on the results  of  the  chemical  analysis,  microbiology  and  organoleptic  obtained  the  best concentration of Chitosan treatment combination 2% can prolong the save milkfish fillet on  the  temperature  of  the  refrigerator  for  storage  8  days  produce  milkfish  fillet  with criteria water content 76,2250%, water activity 0.85% pH 5.86, , total microbial 4,6845 log  CFU/g  of  the  test  shows  negative  Postma,  (-)  (milkfish  fillet  has  not  experienced canker).  The  average  results  of  organoleptic  scooring  showed  the  highest  value  of  the texture  of  2.90  (somewhat  hard),  the  scent  of  3.30  (acid)  and  color  of  2.95  (white  is rather dull, there is very little streaks).
Keyword : milkfish, fillet, chitosan

## Abstrak
Ikan bandeng banyak dikonsumsi oleh masyarakat, namun ada sebagian masyarakat yang  kurang  menyukai  ikan  bandeng  dikarenakan  banyaknya  duri  yang  terdapat  pada ikan bandeng.    Salah satu alternatif  yang  ditawarkan  yaitu ikan bandeng  dalam  bentuk fillet.Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  mengetahui  hasil  terbaik  pada  perlakuan konsentrasi  Chitosan    dan  lama  penyimpanan  pada  penyimpanan  suhu  refrigerator terhadap kualitas fisik, kimia dan organoleptik fillet ikan bandeng. Penelitian ini adalah menggunakan Rancangan acak lengkap ( RAL ) pola faktorial dua faktor dengan 2 kali ulangan Faktor  I Konsentrasi Chitosan (b/v) yang terdiri atas: C1 =  0 %, C2  =   1 %, C3 =  2 % dan C4  =  3 % dan Faktor II  Lama penyimpanan yang terdiri atas: P1 = 0 hari, P2 =  4 hari, P3 =  8 hari dan P4 = 12 hari. Berdasarkan hasil analisa kimiawi, mikrobiologi  dan  organoleptik  didapatkan  kombinasi  perlakuan  terbaik  konsentrasi Chitosan  2%  dapat  memperpanjang  masa  simpan  fillet  ikan  bandeng  pada  suhu refrigerator  selama  penyimpanan  8  hari  menghasilkan  fillet  ikan  bandeng  dengan kriteria  kadar  air  76,2250%,  aktivitas  air  0,85%,  pH  5,86,    total  mikroba  4,6845  log CFU/gr,  uji  Postma  menunjukkan  negatif  (-)  (fillet  ikan  bandeng  belum  mengalami kebusukan).  Hasil  rata-rata  uji  organoleptik  scooring  menunjukkan  nilai  tertinggi terhadap  tekstur  2,90  (agak  keras),  aroma  3,30  (asam)  dan  warna  2,95  (putih  agak kusam,terdapat sedikit bercak).

## Kata kunci : bandeng, fillet, chitosan

## PENDAHULUAN
Ikan bandeng banyak dikonsumsi  oleh  masyarakat  karena rasanya  gurih,  tidak  terlalu  berbau amis,  harganya  relatif  murah  dan mudah didapatkan di pasaran, namun ada sebagian masyarakat yang kurang  menyukai  ikan  bandeng dikarenakan  banyaknya  duri  yang terdapat  pada  ikan  bandeng.    Salah satu  alternatif  yang  ditawarkan  yaitu ikan  bandeng  dalam  bentuk  fillet yang  berupa  daging  ikan  tanpa  duri sehingga  siap  untuk  dikonsumsi. Daging  ikan,  seperti  halnya    hasil hewani pada umumnya, mengandung zat  gizi  yang  diperlukan  bagi  tubuh. Mutu  protein  ikan  dapat  dikatakan tinggi,  karena  mudah  dicerna  dan mengandung asam-asam amino dalam  jenis  dan  jumlah  yang  relatif sesuai  dengan  kebutuhan  tubuh (Kanoni,1992).  Ikan termasuk dalam bahan pangan yang mudah mengalami pembusukan atau penguraian  jaringan  apabila  tidak dilakukan  penanganan  lebih  lanjut (yang  bertujuan  untuk  menghambat pembusukan)  sehingga  ikan  tetap layak  untuk  dikonsumsi  (Moeljanto, 1992).
Ikan  yang  dibiarkan  di  ruang terbuka  akan  cepat  sekali  menjadi busuk, hal tersebut disebabkan karena  adanya  proses  autolisis, peristiwa  kimiawi  dan  pertumbuhan mikroorganisme (Ilyas, 1983). Beberapa faktor penyebab kebusukan ikan  antara  lain  :  tubuh  ikan mempunyai  kadar  air  yang  tinggi (80%) dan pH yang mendekati netral sehingga  merupakan  media  yang baik  untuk  pertumbuhan  bakteri pembusuk. Daging ikan mengandung sedikit  sekali  tenunan  pengikat
sehingga  sangat  mudah  dicerna  oleh enzim  autolisis dan hasil pencernaan ini menyebabkan ikan menjadi lunak dan  merupakan  media  yang  cocok untuk  pertumbuhan mikroorganisme. Mengingat hasil-hasil perikanan yang  begitu  mudah  mengalami kerusakan  atau  kebusukan  maka perlu  dilakukan  teknik  pengawetan pada  fillet  ikan  bandeng  salah satunya dengan menggunakan Chitosan . Chitosan (β  1,4  berikatan dengan  glukosamin  dan  N  acetyl glukosamin)  merupakan  polisakarida yang  diperoleh  dengan  cara  destilasi dari Chitin yang  merupakan  salah satu  polimer  alami  terbesar  yang terdapat  pada  makhluk  hidup  seperti crustasea, insekta dan fungi.
Chitosan telah  dibuktikan  dapat menjadi  antitoksin, biodegradable dan biocompatible .    Pemanfaatan Chitosan dapat  digunakan  secara luas  pada  industri  pangan  sebagai pengawet,  serat  alami  dan  pengikat komponen  lemak  (Coma,  2002).
Hasil penelitian You-Jin Jeon (2002) menunjukkan bahwa dengan penggunaan Chitosan 1%  dapat memperpanjang  masa  simpan  fillet daging  ikan  salmon  selama  12  hari pada  suhu  +  4 o C.    Penelitian  yang dilakukan Bhale (2003) menunjukkan bahwa dengan penggunaan Chitosan 2%  dapat memperpanjang  masa  simpan  telur selama  5  minggu  pada  suhu  kamar; Penelitian  yang  dilakukan  Darmadji (1996)  menunjukkan  bahwa  dengan penggunaan Chitosan 0,1%  dapat memperpanjang masa simpan daging selama 10 hari pada refrigerator Oleh karena itu perlu dilakukan penelitian pengawetan  fillet  ikan  bandeng dengan perlakuan
konsentrasi Chitosan dan  lama  penyimpanan. Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah
untuk  mengetahui  hasil  terbaik  pada perlakuan  konsentrasi Chitosan dan lama penyimpanan pada penyimpanan suhu refrigerator terhadap  kualitas  fisik,  kimia  dan organoleptik fillet ikan bandeng.

## METODOLOGI PENELITIAN

## A. BAHAN-BAHAN
Bahan  baku  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  ikan bandeng  segar  yang  diperoleh  dari nelayan tambak di Sidoarjo dan Kulit udang  yang  diperoleh  dari  Pabrik Pembekuan udang di daerah Sidoarjo.
Bahan  kimia  yang  digunakan untuk penelitian adalah NaOH 30 %, HCl  0,01  N,  aquadest,  Media Nutrient  Broth,    Media  Muller Hinton  Agar,  Media  PCA,  Media Chrom Agar, NaOH, HCl.
B. METODE PENELITIAN
a. Rancangan Percobaan Penelitian  ini  dilakukan  dalam  3
tahap yaitu : Tahap I      :   Pembuatan Chitosan. Tahap  II    :  Penelitian  pengujian aktivitas  anti  mikrobia Chitosan terhadap bakteri  ikan  bandeng menggunakan konsentrasi Chitosan sebesar (0, 1, 2, 3)%. Tahap III :    Penelitian  penggunaan Chitosan untuk  meningkatkan  daya awet  fillet ikan
bandeng. Rancangan percobaan pada penelitian tahap III adalah menggunakan Rancangan acak lengkap  (  RAL  )  pola  faktorial  dua faktor  dengan  2  kali  ulangan.  Data yang  diperoleh  dianalisis  dengan analisis  ragam,  untuk  mengetahui adanya perbedaan diantara perlakuan digunakan  Uji  Duncan  dan  apabila terjadi  interaksi  diantara    kedua
perlakuan  maka  dilanjutkan  dengan uji regresi.
Peubah berubah : - Faktor I Konsentrasi Chitosan ( b / v )  yang  terdiri atas: C 1 =  0 %, C 2 = 1 %, C 3 =  2 % dan C 4 =  3 %
- Faktor II  Lama penyimpanan yang  terdiri  atas:  P 1 =  0  hari,
P 2 =    4  hari,  P 3 =   8  hari  dan P 4 = 12 hari Parameter yang diamati :
1. Pada  sampel  (  fillet  ikan bandeng segar ) :
- Analisa  kadar  air  ,  metode oven ( Sudarmadji, 1976 ) - Analisa Total mikroba, metode TPC (Fardiaz, 1993).
- Analisa pH. (Fardiaz, 1993).
- Analisa Aw (Purnomo, 1995).
2. Pada  fillet  ikan  bandeng  setelah pengawetan :
- Analisa  kadar  air,  metode oven (Sudarmadji,1976)
- Analisa pH (Fardiaz, 1985)
- Analisa Total mikroba, metode TPC (Fardiaz, 1993) - Analisa  Aw  (  Purnomo,
1995)
- Uji  Awal  Kebusukan  (Uji Postma) 3. Uji Organoleptik (bau,warna,tekstur), dengan menggunakan  metode  Skoring (Susrini,1984)
b. Prosedur Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  dalam  3 tahap, yaitu :
Tahap I.     Pembuatan Chitosan
1. Pembersihan  cangkang  udang untuk  menghilangkan  kotoran dan  daging  yang  melekat  pada cangkang udang.
2. Pengecilan  ukuran  cangkang udang dengan menggunakan
blender.
3. Proses Deproteinisasi Proses penghilangan protein yang  terdapat    dalam  cangkang udang.    Kondisi  optimum  untuk proses ini adalah dengan memanaskan  cangkang  udang menggunakan larutan NaOH 4% pada suhu 100 o C selama 2 jam.
4. Proses Demineralisasi Proses pemisahan mineral bertujuan  untuk  menghilangkan senyawa  organik  yang  ada  pada limbah udang.  Kondisi optimum dilakukan  dengan  menggunakan larutan asam khlorida 8% direndam  selama  6    jam  pada suhu kamar.
5. Proses Deasetylasi
Proses  deasetylasi  merupakan transformasi Chitin menjadi Chitosan dengan  memanaskan cangkang  udang  dalam  NaOH 40%  pada  suhu  100 o C  selama  3
jam.
6. Pengeringan
menggunakan
kabinet  dryer  pada  suhu  40 o C selama 8 jam
7. Pengecilan ukuran dan pengayakan  dengan  40  mesh sehingga dihasilkan Chitosan . Tahap  II.  Pengujian  aktivitas antimikrobia dari berbagai konsentrasi Chitosan terhadap bakteri  bandeng  adalah  sebagai berikut :
1. Penyiapan larutan Chitosan
0%,1%,2% dan 3%
a. Chitosan 0% = 0 gr Chitosan
: 100 ml aquadest
b. Chitosan 1% = 1 gr Chitosan : 100 ml aquadest
c. Chitosan 2% = 2 gr Chitosan : 100 ml aquadest
d. Chitosan 3% = 3 gr Chitosan : 100 ml aquadest
2. Sterilisasi larutan Chitosan 121 o C selama 15
menit
kemudian  ditambahkan  1  ml asam  asetat  glasial  kedalam masing-masing larutan Chitosan .
3. Ikan  bandeng  segar  disimpan selama  24  jam  dalam  suhu kamar sehingga terjadi pertumbuhan  bakteri  pada  ikan bandeng. 4. Pengambilan  1  gram    daging ikan kemudian dilakukan inokulasi  pada  media    Nutrient Broth  10  ml  kemudian  divortek dan  dinkubasi  selama  24  jam pada  suhu  kamar  sehingga diperoleh  kultur  bakteri  dari daging ikan bandeng. 5. 400 μl kultur bakteri diinokulasikan  dalam  100  ml media Muller Hinton Agar steril, suhu  (40-50) o C.
6. Penuangan media Muller Hinton agar  (yang  telah  diinokulasi kultur  bakteri)  pada  petridish steril  dan  dibiarkan  sampai memadat.
7. Peletakan  paper  disc  diameter  8 mm  yang  telah  disterilisasi  dan masing-masing telah ditetesi 100μl konsentrasi Chitosan
sebesar (0, 1, 2, 3) %. 8. Inkubasi pada suhu kamar selama 24 jam.
9. Diameter  zona  hambatan  yang terjadi diukur menggunakan jangka sorong (mm).
Tahap  III.      Penggunaan Chitosan sebagai pengawet fillet ikan  bandeng
1. Penyiapan larutan Chitosan
konsentrasi 0%, 1%, 2% & 3%.
a. konsentrasi Chitosan 0% terdiri dari asam asetat glasial : aquadest = 1,88 ml : 200 ml.
b. konsentrasi Chitosan 1  % terdiri  dari Chitosan :  asam
asetat  glasial  :  aquadest  =  2 gr : 1,88 ml : 200 ml c. konsentrasi Chitosan 2 % terdiri  dari Chitosan :  asam asetat  glasial  :  aquadest    =  4
gr  : 1,88 ml : 200 ml
d. konsentrasi Chitosan 3%
terdiri  dari Chitosan :  asam asetat  glasial  :  aquadest  =  6 gr : 1,88 ml : 200 ml
2. Pelarutan  dalam  asam  asetat glasial : aquadest = 1,88 ml : 200 ml.
3. Pengadukan  pada  suhu  40 o C selama  1  jam  menggunakan
Hotplate/Magnetic stirer. 4. Penyaringan menggunakan kertas saring untuk memisahkan padatan yang tidak terlarut. 5. Penyiapan  fillet  ikan  ukuran  2,5 cm  x  7,5  cm  x  0,7  mm  dan sebelumnya  dilakukan  analisa bahan  awal  meliputi  kadar  air, a w , total mikroba dan pH.
6. Pencelupan  fillet  ikan  bandeng selama 30 detik.
7. Pengeringan  pada  suhu  40 o C selama  2  jam  menggunakan kabinet dryer .
8. Pengemasan dalam kantong plastik. 9. Penyimpanan pada suhu refrigerator.  (  +  4 o C)  selama (0,4,8,12)  hari  dan  dilakukan pengamatan  untuk  mengetahui kadar air, pH, Aw, Total mikroba dan  Organoleptik  dari  fillet  ikan bandeng.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## A. Analisa Bahan Baku
Pada penelitian pengawetan  fillet  ikan  bandeng dilakukan  analisa  bahan  awal  pada ikan  bandeng.  Hasil  analisa  ikan bandeng dapat dilihat pada Tabel 1 sebagai berikut : Tabel 1.  Hasil analisa kimia & total bakteri pada fillet ikan bandeng Komponen Jumlah / kadar Kadar air a w pH Total mikroba 76,858 % 0,91 6,4 4,2430 (log CFU/gram) Hasil  analisa  awal  bahan  baku pada fillet ikan bandeng menunjukkan  bahwa  kadar  air  ikan bandeng sebesar  76,858%;  a w 0,91; pH 6,4 dan total mikroba 4,2430 log CFU/gram.  Menurut  Anonymous (1988),  kadar  air  ikan  bandeng  74% dan  menurut  Hadiwiyoto  (1993),  pH ikan  bandeng  6,2.    Perbedaan komposisi ini dipengaruhi oleh jenis, umur dan waktu panen ikan bandeng. Hasil  analisa  a w dan  total  mikroba sesuai  dengan  Wibowo  (1993)  yang mengemukakan  bahwa  nilai  a w pada ikan  bandeng  berkisar  0,844-0,985 dan total mikroba ikan bandeng <10 6
CFU/gram . Hasil analisa total mikroba  diketahui  bahwa  didalam daging  ikan  sudah  terdapat  mikroba yang  berasal  dari  lingkungan  luar maupun  dari  dalam  tubuh  ikan dikarenakan  ikan  merupakan  media yang baik bagi pertumbuhan mikrobia.    Hal  ini  didukung  oleh
Afrianto  dan  Liviawaty  (1989)  yang menyatakan  ikan  mempunyai  kadar air  yang  tinggi  dan  pH  yang mendekati
netral sehingga
merupakan  media  yang  baik  untuk pertumbuhan mikrobia.
B.  Penelitian Tahap II. 1. Pengujian Aktivitas Antimikrobia  dari  Berbagai Konsentrasi Chitosan terhadap  Kultur  Bakteri  Ikan Bandeng Hasil Pengujian aktivitas antimikrobia  pada  Tabel  2  dan Gambar  1  menunjukkan  bahwa konsentrasi Chitosan 0%  -  3% mempunyai  aktivitas  antimikrobia terhadap kultur bakteri ikan bandeng. Hasil pengujian aktivitas antimikrobia dari berbagai konsentrasi Chitosan terhadap  kultur bakteri  pada  ikan  bandeng  dapat dilihat pada Tabel 2 dan Gambar 1.
Tabel 2.  Hasil pengamatan aktivitas antimikrobia dari berbagai konsentrasi Chitosan terhadap kultur bakteri ikan bandeng. Konsentrasi Chitosan (%) Diameter Zona hambatan (mm) 0 1 2 3
10,8 mm
12,78 mm
13,6  mm 13,82 mm
Keterangan : diameter paper dish = 8 mm.
Gambar  1.    Hasil  pengujian  aktivitas  antimikrobia  dari  berbagai  konsentrasi Chitosan
terhadap kultur bakteri ikan bandeng Pada  Gambar  1,  menunjukkan bahwa  konsentrasi  0%  mulai  dapat menghambat kultur bakteri pada ikan bandeng  dengan  ditunjukkan  adanya zona hambatan sebesar 10,8 mm. Hal ini  dikarenakan  komposisi  larutan Chitosan 0% adalah terdiri dari 1 ml asam  asetat  glasial  dan  100  ml aquadet. Asam asetat glasial
merupakan asam organik lemah yang mempunyai  aktivitas  antimikrobia hal  ini  didukung  oleh  Ray  and
Sandine  (1993)    yang  menyatakan bahwa  asam  asetat  merupakan  asam
organik  lemah  yang  dapat  berperan sebagai bahan antimikrobia.
Berdasarkan  Tabel 2  dan
Gambar  1  dapat  diketahui  bahwa semakin  besar  konsentrasi Chitosan yang digunakan maka semakin besar zona  hambatan  yang  dihasilkan  hal ini  didukung  oleh  Harini,  (2007) yang menyatakan bahwa penggunaan Chitosan dengan  konsentrasi  yang semakin tinggi menyebabkan kemampuan  menghambat  bakteri semakin besar.
Chitosan 3% Chitosan 0% Chitosan 2% Chitosan 1%
2.      Aplikasi Chitosan untuk pengawetan Fillet ikan bandeng. 1.  Kadar air Nilai  rata-rata  kadar  air  fillet ikan  dengan  perlakuan  konsentrasi Chitosan dan  lama  penyimpanan dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Nilai rata-rata kadar air dengan perlakuan konsentrasi Chitosan dan lama penyimpanan Perlakuan Rata-rata Kadar air (%) DMRT 5% Notasi Konsentrasi Chitosan (%) Lama penyimpanan (hari) 0 0 4 8 12 80,6275 75,4075 73,5583 59,0100 2,3927 2,3178 2,2484 - fg de d a 1 0 4 8 12 82,1400 77,5450 74,0700 66,6100 2,4011 2,3872 2,2900 2,0818 fg ef de b 2 0 4 8 12 81,7600 79,8000 76,2250 69,2200 2,3983 2,3899 2,3455 2,1790 fg f e c 3 0 4 8 12 82,6975 80,9125 77,1985 77,0667 2,4038 2,3955 2,3733 2,3594 g f e e
Keterangan  :  Nilai  rata-rata  yang  didampingi  huruf  yang  berbeda  berarti  berbeda  nyata
(p ≤ 0,05)
Pada  Tabel  3,  menunjukkan bahwa  rata-rata  kadar  air  fillet  ikan bandeng  pada  perlakuan  konsentrasi
Chitosan dan  lama  penyimpanan berkisar  antara  59,0100  %    –
79,8000 %. Pada perendaman Chitosan 2% dan lama penyimpanan 4  hari  memberikan  hasil  Kadar  air yang tertinggi (79,8000 %), sedangkan pada perlakuan perendaman Chitosan 0 % dan lama penyimpanan  12  hari  menghasilkan Kadar  air  terendah  (59,0100  %).
Hubungan antara perlakuan konsentrasi Chitosan dan lama penyimpanan terhadap kadar air fillet ikan  bandeng  dapat  dilihat  pada
Gambar 2.
y = -0,5152x + 82,56
R 2 = 0,906 y = -1,0299x + 82,931 R 2 = 0,9286 y = -1,2516x + 82,601
R 2 = 0,9739 y = -1,6675x + 82,156
R 2 = 0,8652 55,0000 59,0000 63,0000 67,0000 71,0000 75,0000 79,0000 83,0000 87,0000 0 2 4 6 8 10 12 14 Lama Penyimpanan (hari) K a d a r a ir (% ) Konsentrasi Chitosan 0% Konsentrasi Chitosan 1% Konsentrasi Chitosan 2% Konsentrasi Chitosan 3%
Linear (Konsentrasi Chitosan 3%) Linear (Konsentrasi Chitosan 2%) Linear (Konsentrasi Chitosan 1%) Linear (Konsentrasi Chitosan 0%)
Gambar  2.  Hubungan  antara  konsentrasi Chitosan dan  lama  penyimpanan terhadap kadar air  .
Pada  Gambar  2  menunjukkan bahwa  semakin  lama  penyimpanan fillet  ikan  bandeng  dan  semakin rendah konsentrasi Chitosan menyebabkan kadar air fillet semakin turun. Terjadinya penurunan kadar air ini kemungkinan disebabkan  hilangnya  sebagian  air produk karena dehidrasi pada penyimpanan  suhu  dingin.  Semakin rendah konsentrasi Chitosan menyebabkan  penurunan  kadar  air fillet  ikan  bandeng  ,  hal  ini disebabkan  jumlah Chitosan pada fillet ikan bandeng berkurang sehingga kemampuan Edible Coating Chitosan pada produk juga berkurang yang mempunyai kemampuan sebagai pelindung melapisi  produk  sehingga  dapat menghambat  laju    transmisi  uap  air (nilai  laju  transmisi  uap  airnya rendah).  Hal  ini  didukung  oleh Desroirer (1988), yang
mengemukakan  bahwa  daging  yang disimpan  pada  penyimpanan  dingin semakin  lama  semakin  kering  atau kehilangan  kesegaran  permukaan akibat  proses  dehidrasi.  Menurut
Illyas (1988), dehidrasi pada pendinginan  dapat  terjadi  karena perpindahan  panas  dalam  ruang pendingin  (dari  produk  ke  ruang pendingin  yang  membawa  uap  air). Sedangkan  menurut  Kittur,  et  al (1998),  yang  menyatakan Chitosan mempunyai kemampuan Edible
Coating yang  berfungsi  melapisi produk

## 2.  Aktivitas Air (a
w )
Nilai rata-rata aktivitas air fillet ikan  bandeng  dengan  perlakuan konsentrasi Chitosan dan lama penyimpanan  dapat  dilihat  pada Tabel 4.
Tabel  4.  Nilai  rata-rata  aktivitas  air  fillet  ikan  bandeng  dengan  perlakuan konsentrasi Chitosan dan lama penyimpanan Perlakuan Rata-rata aktivitas air (a w ) DMRT 5% Notasi Konsentrasi Chitosan (%) Lama penyimpanan (hari) 0 0 4 8 12 0,85 0,84 0,84 0,83 0,0027 0,0026 0,0026 - c b b a 1 0 4 8 12 0,85 0,85 0,84 0,83 0,0027 0,0027 0,0026 0,0023 c c b a 2 0 4 8 12 0,85 0,85 0,85 0,83 0,0027 0,0027 0,0027 0,0025 c c c a 3 0 4 8 12 0,85 0,85 0,85 0,84 0,0027 0,0027 0,0027 0,0025 c c c b
Keterangan  :  Nilai  rata-rata  yang  didampingi  huruf  yang  berbeda  berarti  berbeda  nyata (p ≤ 0,05)
Pada  Tabel  4  menunjukkan bahwa  rata-rata  aktivitas  air  (a w ) fillet  ikan  bandeng  pada  perlakuan perendaman Chitosan dan  lama penyimpanan  berkisar  antara  0,83– 0,85.  Pada  perlakuan  konsentrasi Chitosan (2,  3)  %  dan  lama penyimpanan  (0,  4,  8)  hari  ; konsentrasi Chitosan 1%  dan  lama penyimpanan (0, 4) hari;  konsentrasi
Chitosan 0% dan lama penyimpanan
(0)  hari  memberikan  hasil  aktivitas air  (a w )  yang  tertinggi  (0,85), sedangkan pada perlakuan konsentrasi Chitosan (0, 1, 2 ) % dan lama penyimpanan 12 hari
menghasilkan  aktivitas  air  (a w ) terendah  (0,83).  Hubungan  antara perendaman Chitosan dan  lama penyimpanan  terhadap  aktivitas  air (a w ) fillet ikan bandeng  dapat  dilihat pada Gambar 3.
y = -0,0015x + 0,849 R 2 = 0,9000 y = -0,0015x + 0,854
R 2 = 0,6000
y = -0,0018x + 0,853 R 2 = 0,8909 y = -0,0007x + 0,852 R 2 = 0,6000 0,810 0,820 0,830 0,840 0,850 0,860 0,870 0 2 4 6 8 10 12 14 Lam a Penyim panan (hari) A w Konsentrasi Chitosan 0% Konsentrasi Chitosan 1% Konsentrasi Chitosan 2% Konsentrasi Chitosan 3%
Linear (Konsentrasi Chitosan 0%) Linear (Konsentrasi Chitosan 2%) Linear (Konsentrasi Chitosan 1%) Linear (Konsentrasi Chitosan 3%)
Gambar  3.  Hubungan  antara  perendaman Chitosan dan  lama  penyimpanan terhadap aktivitas air (a w ) fillet ikan bandeng.
Pada  Gambar  3  menunjukkan bahwa  semakin  lama  penyimpanan fillet  ikan  bandeng  dan  semakin rendah  konsentrasi Chitosan dapat menurunkan aktivitas air.  Penurunan a w ini disebabkan hilangnya sebagian air  bebas  produk  karena  dehidrasi pada  penyimpanan  suhu  dingin, dimana RH lingkungan penyimpanan suhu  refrigerator (81%)  lebih rendah dibanding  RH  produk.  Semakin rendah konsentrasi Chitosan menyebabkan  a W fillet  ikan  bandeng semakin  turun,    hal  ini  disebabkan berkurangnya  jumlah Chitosan pada fillet ikan bandeng sehingga kemampuan Edible Coating Chitosan pada produk juga berkurang yang mempunyai kemampuan  sebagai  pelindung  yang dapat  melapisi  produk  sehingga dapat menghambat hilangnya sebagian  air  didalam  produk  hal  ini didukung  Hadiwiyoto  (1993)  yang menyatakan bahwa
hilangnya sebagian  air  tersebut  disebabkan adanya peristiwa penguapan air pada suhu  rendah.    Sedangkan  menurut Kittur, et al (1998) yang menyatakan Chitosan mempunyai  kemampuan Edible Coating yang berfungsi
melapisi produk
3.  Total Mikroba
Nilai  rata-rata  total  mikroba fillet ikan bandeng dengan perlakuan konsentrasi Chitosan dan lama penyimpanan  dapat  dilihat  pada Tabel 5.
Tabel 5. Nilai rata-rata total bakteri dengan perlakuan konsentrasi Chitosan dan Lama penyimpanan Perlakuan Rata-rata Total Mikroba (Log CFU/gr) DMRT 5% Notasi Konsentrasi Chitosan (%) Lama penyimpanan (hari) 0 0 4 8 12 3,6500 5,1395 7,0600 7,1330 0,0821 0,0904 0,0905 0,0906 bc h i i 1 0 4 8 12 3,6800 4,2030 4,7155 4,9185 0,0863 0,0884 0,0901 0,0903 b d f g 2 0 4 8 12 3,2760 3,6625 4,6845 4,9160 - 0,0848 0,0900 0,0902 a bc e g 3 0 4 8 12 3,6980 3,6125 4,3775 4,4610 0,0874 0,0785 0,0889 0,0895 c b e e
Keterangan  :  Nilai  rata-rata  yang  didampingi  huruf  yang  berbeda  berarti  berbeda  nyata
(p ≤ 0,05) Pada Tabel 5. menunjukkan bahwa  rata-rata  total  mikroba  fillet ikan bandeng pada perlakuan konsentrasi Chitosan dan lama penyimpanan  berkisar  antara  3,2760 – 7,1330. Pada perlakuan konsentrasi
Chitosan 0% dan lama penyimpanan
12  hari  memberikan  hasil  total bakteri  yang  tertinggi  (7,1330),
sedangkan pada perlakuan penambahan Chitosan 2%  dan  lama penyimpanan  0  hari  menghasilkan total  bakteri  terendah  (3,2760).
Hubungan antara perendaman konsentrasi Chitosan dan lama penyimpanan  terhadap  total  mikroba fillet ikan bandeng dapat dilihat pada
Gambar 4 .
y = 0,3092x + 3,8902
R 2 = 0,9095 y = 0,1057x + 3,7451 R 2 = 0,9675
y = 0,1486x + 3,2435
R 2 = 0,9425 y = 0,0764x + 3,5792 R 2 = 0,7893 2,5000 3,0000 3,5000 4,0000 4,5000 5,0000 5,5000 6,0000 6,5000 7,0000 7,5000 8,0000 0 2 4 6 8 10 12 14 Lam a Penyim panan (hari) T o ta l M ik ro b a ( lo g C F U /g ra m ) Konsentrasi Chitosan 0% Konsentrasi Chitosan 1%
Konsentrasi Chitosan 2%
Konsentrasi Chitosan 3% Linear (Konsentrasi Chitosan 0%) Linear (Konsentrasi Chitosan 1%) Linear (Konsentrasi Chitosan 2%) Linear (Konsentrasi Chitosan 3%)
Gambar  4.  Hubungan  antara  perendaman Chitosan dan  lama    penyimpanan terhadap Total Mikroba fillet ikan bandeng.
Pada  Gambar  4  menunjukkan bahwa    semakin  lama  penyimpanan dan  semakin  rendah  konsentrasi Chitosan maka  total  mikroba  fillet ikan  bandeng  mengalami  kenaikan. Kenaikan  total  mikroba  pada  fillet ikan  bandeng  selama  penyimpanan kemungkinan disebabkan oleh mikroorganisme  yang  masih  tumbuh secara aktif karena masih tersedianya nutrisi,  a w ,  kadar  air  serta  pH  yang mencukupi untuk pertumbuhan mikrobia  pada  fillet  ikan  bandeng. Semakin rendah konsentrasi Chitosan menyebabkan  kenaikan total  mikroba  pada  fillet  ikan bandeng  dikarenakan  berkurangnya jumlah Chitosan pada  fillet  ikan bandeng sehingga kemampuan
Chitosan sebagai  antimikrobia  dan
Edible Coating juga berkurang, yang berfungsi  melapisi  dan  melindungi produk  dari  pertumbuhan  mikrobia.
Pengaruh    antimikrobia Chitosan terhadap  fillet  ikan  bandeng  dapat berkurang dikarenakan Chitosan berfungsi  sebagai  zat  penghambat pertumbuhan mikrobia sehingga
masih  dimungkinkan  terjadinya  fase log pertumbuhan mikrobia.  Menurut Hadiwiyoto  (1993),  setelah  ikan mati, daging ikan kehilangan ketahanannya  sementara  kebutuhan bakteri tidak lagi dapat terpenuhi dari lingkungannya,  maka  bakteri  akan menggunakan daging untuk memenuhi  kebutuhan  hidupnya  dan populasinya segera berkembang cepat. Daging ikan merupakan media yang  cocok  untuk  pertumbuhan mikroorganisme (Afrianto dan Liviawaty, 1989). Menurut Darmadji and Izumimoto (1994) yang mengemukakan bahwa Chitosan
mampu  menyerap  nutrisi  yang  ada pada  bakteri  dan  memiliki  kapasitas untuk menghambat air dan menghalangi  sistem  enzim  beberapa bakteri, Mekanisme aktivitas antimikrobia Chitosan sangat berkaitan  dengan  protonasi  gugus amine  dari Chitosan. Gugus  amine dari Chitosan (NH 2 )  akan  bereaksi dengan  ion  H + (proton)  dari  asam asetat sehingga akan terbentuk gugus
NH 3 + pada Chitosan .    Hal  ini  akan menyebabkan Chitosan bersifat polielektrolit.    Bagian  dari  gugus NH 3 + ini  akan  bereaksi  dengan bagian  hidrofilik  dinding  sel  bakteri yang dapat mengganggu kerja enzim-enzim  sel  bakteri  sehingga mengakibatkan kematian sel. (Agullo, 2003). Menurut  Hadiwiyoto  (1989), Bakteri golongan Pseudomonas adalah  yang  memegang  peranan terbesar  pada  pembusukan  hasil perikanan  dan  menurut  Yin-Chin  et al  (2004),  bakteri Pseudomonas
(termasuk  golongan  bakteri  gram negatif) lebih sensitif terhadap
Chitosan dibanding bakteri yang lain dan  didapatkan  bahwa  bakteri  Gram negatif lebih sensitif terhadap
Chitosan dibanding  Gram  positif. Berdasarkan standart SNI, ikan segar mempunyai  Total  mikroba  <10 6
koloni/gr (Wibowo, 1993) dan menurut  Stenstrom  (1985),  bahwa daging  ikan  pada  penyimpanan  suhu 2 o C  mempunyai  nilai  Total  mikroba maksimal  10 6 koloni/gr.    Mengacu pada  batasan  nilai  tersebut  maka Chitosan efektif menghambat pertumbuhan  mikrobia  pada  fillet ikan bandeng. 4.  pH Nilai  rata-rata  pH  fillet  ikan bandeng dengan perlakuan konsentrasi Chitosan dan lama penyimpanan  dapat  dilihat  pada Tabel 6.
Tabel 6. Nilai rata-rata pH dengan perlakuan konsentrasi Chitosan dan Lama penyimpanan Perlakuan Rata-rata pH DMRT 5% Notasi Konsentrasi Chitosan (%) Lama penyimpanan (hari) 0 0 4 8 12 6,05 6,75 7,25 7,50 0,1620 0,1724 0,1730 0,1732 a cd f g 1 0 4 8 12 6,00 6,50 6,85 7,05 0,1500 0,1700 0,1726 0,1728 a c cd e 2 0 4 8 12 6,00 6,40 6,55 6,70 - 0,1690 0,1710 0,1722 a b c cd 3 0 4 8 12 6,00 6,15 6,30 6,65 0.1570 0,1650 0,1670 0,1720 a a b c
Keterangan  :  Nilai  rata-rata  yang  didampingi  huruf  yang  berbeda  berarti  berbeda  nyata
(p ≤ 0,05) Pada  Tabel  6.  menunjukkan bahwa  rata-rata  pH  fillet  ikan
bandeng  pada  perlakuan  konsentrasi
Chitosan dan  lama  penyimpanan
berkisar  antara  6,00  –  7,50.  Pada perlakuan  konsentrasi Chitosan 0% dan  lama  penyimpanan  12  hari memberikan  hasil  pH  yang  tertinggi
(7,50),  sedangkan  pada  perlakuan penambahan Chitosan 1  %,  2%,  3%
dan  lama  penyimpanan  0  hari menghasilkan pH terendah (6,00).
Hubungan  antara    konsentrasi
Chitosan dan  lama  penyimpanan terhadap  pH  fillet  ikan  bandeng dapat dilihat pada  Gambar 5 .
y = 0,1213x + 6,16
R 2 = 0,9586 y = 0,0875x + 6,075 R 2 = 0,9646 y = 0,0563x + 6,075 R 2 = 0,931 y = 0,0525x + 5,96 R 2 = 0,9484 5,50 5,70 5,90 6,10 6,30 6,50 6,70 6,90 7,10 7,30 7,50 7,70 0 2 4 6 8 10 12 14 Lam a Penyim panan (hari) PH Konsentrasi Chitosan 0% Konsentrasi Chitosan 1%
Konsentrasi Chitosan 2%
Konsentrasi Chitosan 3%
Linear (Konsentrasi Chitosan 0%) Linear (Konsentrasi Chitosan 1%) Linear (Konsentrasi Chitosan 2%) Linear (Konsentrasi Chitosan 3%) Gambar  5.  Hubungan  antara  perendaman Chitosan dan  lama    penyimpanan terhadap pH fillet ikan bandeng.
Pada  Gambar  5  menunjukkan bahwa    semakin  lama  penyimpanan dan  semakin  rendah  konsentrasi
Chitosan  maka  dapat  meningkatkan pH.  Kenaikan  pH  selama  lama penyimpanan  hal  ini  diduga  sebagai akibat adanya kegiatan mikroorganisme  yang  menguraikan asam amino menjadi senyawa- senyawa  yang mudah menguap  yang bersifat basa sehingga mengakibatkan kenaikan pH. Semakin rendah konsentrasi Chitosan menyebabkan  kenaikan  pH dikarenakan berkurangnya kemampuan Chitosan dalam menghambat  pertumbuhan  mikrobia yang  dapat  yang  menguraikan  asam amino  menjadi  senyawa-senyawa yang  mudah  menguap  yang  bersifat basa. Menurut Ilyas (1983) menyatakan bahwa aksi mikroorganisme  akan  menguraikan asam  amino  yang  menghasilkan senyawa  –  senyawa  volatile  bersifat basa sehingga mengakibatkan kenaikan  nilai  pH  produk  pangan, selain  itu,  dapat  juga  dihasilkan komponen  –  komponen  tertentu seperti amoniak,
H 2 S yang
memberikan  bau  busuk,  dengan semakin  lama  penyimpanan  maka mikroorganisme semakin berkembang biak. Sedangkan menurut Agullo (2003) yang menyatakan bahwa aktivitas antimikrobia Chitosan sangat berkaitan  dengan  protonasi  gugus amine  dari Chitosan. Gugus  amine dari Chitosan (NH 2 )  akan  bereaksi dengan  ion  H + (proton)  dari  asam asetat sehingga akan terbentuk gugus
NH 3 + pada Chitosan .    Hal  ini  akan menyebabkan Chitosan bersifat polielektrolit.    Bagian  dari  gugus NH 3 + ini  akan  bereaksi  dengan bagian  hidrofilik  dinding  sel  bakteri yang dapat mengganggu kerja enzim-enzim  sel  bakteri  sehingga mengakibatkan kematian sel. 5. Uji Postma (Uji Awal Kebusukan) Berdasarkan  hasil  analisa  uji Postma menunjukkan bahwa perbedaan konsentrasi Chitosan
menyebabkan  perbedaan  hasil  uji postma  (yang  merupakan  uji  awal kebusukan).  Hasil  anlisa  uji  Postma fillet ikan bandeng dengan perlakuan konsentrasi Chitosan dan lama penyimpanan  dapat  dilihat  pada Tabel 7. Tabel 7.  Hasil Uji Postma Fillet Ikan Bandeng Perlakuan Hasil Uji Postma Konsentrasi Chitosan (%) LamaPenyimpanan (hari) 0 0 4 8 12 - + + + 1
0 4
8 12 - - + + 2 0 4
8 12 - - - + 3 0 4
8 12 - - - +
Keterangan : (+)  = kertas lakmus berubah warna menjadi biru muda/ungu (fillet ikan sudah mengalami kebusukan)
(-)  = kertas lakmus tidak berubah warna (fillet ikan belum mengalami kebusukan)
( + ) = kertas lakmus berubah sebagian (dubius)
(fillet ikan mulai mengalami kebusukan)
Pada  Tabel  7  menunjukkan bahwa  dengan  konsentrasi Chitosan 0  %  fillet  ikan  bandeng  sudah mengalami pembusukan pada penyimpanan 4 hari (dengan ditunjukkan  hasil  uji  postma  yang  + pada  hari  ke  4).    Pada  konsentrasi 1%  fillet  ikan  bandeng  sudah mengalami
pembusukan pada
penyimpanan 8 hari (dengan
ditunjukkan  hasil  uji  postma  +  pada hari ke 8).  Pada konsentrasi 2% dan 3%  fillet  ikan  mulai  mengalami kebusukan  pada  penyimpanan  12 hari  (dengan  ditunjukkan  hasil  uji postma  +  pada  hari  ke  12  ).    Prinsip
dasar  uji  postma  adalah  mendeteksi pelepasan  NH3  akibat  kerusakan protein daging dengan menggunakan indikator  kertas  lakmus.  Menurut Prawesthirini  (2006),  Pembacaan hasil pengujian uji Postma menunjukkan hasil positif (+) apabila terjadi  perubahan  kertas  lakmus menjadi warna menjadi biru muda/ungu,  untuk  hasil  negatif  (-) apabila  tidak  terjadi  perubahan warna  pada  kertas  lakmus,  untuk hasil  dubius  (  +  )  apabila  kertas lakmus berubah sebagian.
Berdasarkan  hasil  penelitian diatas  dapat  disimpulkan  bahwa semakin  besar  konsentrasi Chitosan yang  digunakan  dapat  menghambat proses  pembusukan  pada  fillet  ikan bandeng yang disebabkan oleh
aktivitas  mikroorganisme  sehingga pertumbuhan  mikrobia  menurun  dan proses  pembusukan  pada  fillet  ikan bandeng  juga  menurun.  Hal  ini didukung  oleh  Agullo  (2003)  yang menyatakan bahwa Chitosan
mempunyai aktivitas antimikrobia

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil analisa kimiawi, mikrobiologi dan organoleptik  didapatkan  kombinasi perlakuan terbaik konsentrasi Chitosan 2%  dapat  memperpanjang masa  simpan  fillet  ikan  bandeng pada suhu refrigerator selama penyimpanan  8  hari  menghasilkan fillet  ikan  bandeng  dengan  kriteria kadar  air  76,2250%,  aktivitas  air 0,85%,  pH  5,86,    total  mikroba
4,6845  log  CFU/gr,  uji  Postma menunjukkan  negatif  (-)  (fillet  ikan bandeng
belum mengalami
kebusukan). Hasil rata-rata uji organoleptik  scooring  menunjukkan nilai  tertinggi  terhadap  tekstur  2,90 (agak keras), aroma 3,30 (asam) dan warna 2,95 (putih agak kusam,terdapat sedikit bercak).

## PUSTAKA
Afrianto,  E  dan  Liviawaty,  E.  1989. Pengawetan dan Pengolahan Ikan .  Kanisus. Jakarta. Agullo, E., Rodriguez, s., Ramos, V. 2003. Present  and  Future Role of Chitin and Chitosan in Food . Argentina.    J.    Bioscience 3, 521-530. Bhale,  S.    Prinyawiwatku  I,  W., Farr,  A.  J.,    Nadarajah,  K., Meyers, P.S. 2003. Chitosan Coating Improves Shelf Life of Eggs .  J.  Food Science.  Vol 68. Coma,  V.,  A.    Martial  Gross,  S. Garreau,  A.    Copinet. Salin,  and  A.    Deschamps. 2002. Edible Antimicrobia Film  Based  on  Chitosan matri x.    J.    Food  Science,
67, 1162-1169.
Darmadji,  P  and  Izumimoto,  M.
1996. Effect  of  Chitosan on  Meat  Preservation.    J. Indonesian Food and
Nutrition  Progress Vol  3. no 2.
Desroirer,  N.    1988. Teknologi Pengawetan Pangan. Universitas Indonesia . Jakarta.
Fardiaz,  S.    1992 .    Mikrobiologi
Pangan I .  Gramedia Pustaka Utama.  Jakarta.
Hadiwiyoto,  S.    1993. Teknologi Pengolahan Hasil Perikanan .  Jilid I. Liberty. Yogyakarta. Harini, Noor. 2007. Uji Kemampuan Kitosan Sebagai Antimikrobia Terhadap Pertumbuhan Bakteri Pseudomonas aeroginosa dan Sallmonella  thyphimurium Secara In Vitro. Universitas  Muhamadiyah Malang.  Malang. Ilyas,  S.    1983 .    Pengantar Pengolahan Ikan . Lembaga Teknologi Perikanan.  Jakarta.
Kanoni,  S  dan  Naruki,  S.    1992.
Biokimia  dan  Teknologi Protein  Hewani .    PAU Pangan  dan  Gizi  UGM. Yogyakarta.
Kittur,  F.S.,  Kumar,  K.R.  and Tharanathan,  R.N.  1998. Fungtional Pakaging Properties of Chitosan Films. Department  of Biochemistry and Nutrition Central  Food  Technology
Research  Institute.    India.
206, 44-47. Krochta,  J.M.,  Baldwin,  E.A.  and Nisperos-carriedo.    1992. Edible Coating and Film to Improve Food Quality . Technomic, Publ.  Co.  Inc. USA. Prawesthirini, Soetji., Siswanto, H.P.,  Estoepangestie,  A.T., Lusiastuti,M.A. dan Effendi, M.H. 2006. Analisa  Kualitas  Susu  dan Daging . Universitas Airlangga.  Surabaya. Moeljanto.  1982. Penggaraman dan Pengeringan Ikan . Penebar Swadaya.  Jakarta. Muchtadi,  T.,    Fardiaz,  S.,  dan Nastiti,  S.    1992. Analisa Mikroteknik  dalam  Ilmu Pangan. Departemen Pendidikan dan kebudayaan Direktorat Jendral  Pendidikan  Tinggi Pusat  Antar  Universitas Pangan  dan  Gizi.    Institut
Pertanian Bogor.  Bogor.
Nur,  D.    2006. Pemanfaatan Chitosan dari Eksoskeleton Udang atau Rajungan sebagai Penganti Formalin . SMUN 3 Tuban.  Tuban. Purnomo, H. 1995. Aktivitas Air dan Peranannya Dalam Pengawetan  Pangan .    UI Press.  Jakarta.
Ray  and  Sandine.    1993. Aseptic, Propionic  and  Lactid  Acid of  Starter  Culture  and Bacteria as Biopreservative. J.  Food Biopreservative of Microbial  Origin.    Press Bocaration.  Page 103-132. Stenstrom,  I.M.  1985. Microbial Flora of Cod Fillets (Gadus  Morhua)  Stored  at 2 o C in Different mixtures of Carbondioksida and Nitrogen/Oksigen. Journal
of Food Protect.  48, 585 – 589.
Sudarmadji,  S.,  B.    Haryono  dan Suhardi.    1997. Prosedur Analisa Untuk Bahan Makanan  dan  Pertanian. Penerbit Liberty. Yogyakarta.
Wibowo,  Djoko  dan  Ristanto.  1993.
Petunjuk  Khusus  Deteksi Mikroba Pangan . Pusat Antar  Universitas  Pangan dan Gizi UGM. Yogyakarta.
Ying-chin.,  Ya-Ping  Su.,  Ciing-
Chang  Chen.,  Guang  JIA.,
Huey-lan  Wang.,  Gaston
Wu.,  Jaung-geng.    2004. Relationship Between Antimicrobial  Activity  of Chitosan and Surface Characteristic of Cell Wall. J.    Pharmacol  Science,  25,
932-936.
Yong Jin Kim., Hoon Oh., Eun Jung
Chang.,  Jee  Young  Kim. 2001. Antimicrobial Characteristic  of  chitosan againt Food spoilage Microorganisms  in  Liquid media  and  Mayonnaise .
Seoul.