SKRINING FITOKIMIA DAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL PELEPAH DAUN TERUBUK ( Saccharum spontaneum var. edulis (Hassk) K. Schum.)
Shofia Difa Aulia*, Eko Sri Wahyuningsih, Neni Sri Gunarti
Fakultas Farmasi, Universitas Buana Perjuangan Karawang, Karawang, Indonesia * Penulis Korespondensi : fm19.shofiaaulia@mhs.ubpkarawang.ac.id

## ABSTRAK
Pemanfaatan  daun  terubuk  secara  efektif  dapat  menaikkan  nilai  pangan  limbah  makanan  tersebut.  Hal  ini mempengaruhi  peneliti  untuk  mengetahui  kandungan  metabolit  sekunder  dan  aktivitas  antioksidan  pada  daun terubuk.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengidentifikasi  kandungan  senyawa  etanol  daun  terubuk  melalui skrining  fitokimia  dan  analisis  KLT  serta  mengetahui aktivitas antioksidan pada pelepah daun terubuk.  Tujuan penelitian ini adalah untuk  mengidentifikasi kandungan senyawa etanol daun terubuk melalui skrining fitokimia dan  analisis  KLT  serta  mengetahui  aktivitas  antioksidan  pada  pelepah  daun  terubuk.  Metode  penelitian  ini menggunakan  metode  kuantitatif  yaitu  identifikasi  senyawa  dengan  skrining  fitokimia,  dilanjut  identifikasi Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT)  dan  kualitatif  pengujian  aktivitas  antioksidan  dengan  metode  DPPH  (1,1- difenil-2-fikrihidrazil) diukur menggunakan spektrofotometer Uv-Visible. dengan variasi konsentrasi 25, 50, 75, 100,  dan  125  μg/mLHasil  skrining  fitokimia  menunjukkan  ekstrak  etanol  daun  terubuk  positif  mengandung alkaloid,  flavonoid,  saponin,  tanin,  kuinon.  Hasil  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT)  positif  mengandung Flavonoid,  Alkaloid,  Kuinon,  Tanin.  Hasil  penelitian  antioksidan  menggunakan  ekstrak  etanol  daun  terubuk memiliki aktivitas sebagai antioksidan. Intensitas aktivitas antioksidan pelepah daun terubuk sebesar 180,148 ± 0,898 μg/mL sehingga dari hasil penelitian tersebut pelepah daun terubuk memiliki potensi aktivitas antioksidan yang sedang terhadap radikal bebas DPPH. Ekstrak etanol daun terubuk memiliki kandungan metabolit sekunder dan memiliki aktivitas antioksidan.
Kata kunci : Pelepah Daun Terubuk, Skrining Fitokimia, KLT, Antioksidan .

## ABSTRACT
Utilization  of  terubuk  leaves  effectively  can  increase  the  food  value  of  the  food  waste.    This  influenced researchers  to  determine  the  content of secondary metabolites and antioxidant activity in terubuk leaves.  The purpose of this study was to identify the ethanol content of terubuk leaves through phytochemical screening and TLC analysis and to determine the antioxidant activity of terubuk leaves. This research method uses quantitative methods  namely  Identification  of  compounds  by  phytochemical  screening,  followed  by  chromatographic identification  Thin  Layer  (TLC)  and  qualitative  testing  of  antioxidant  activity  with  the  method  DPPH  (1,1- diphenyl-2-fikrihidrazyl) was measured using a Uv-Visible spectrophotometer with various concentrations of 25, 50, 75, 100, and 125 μg/mL. The results of the phytochemical screening showed that the ethanol extract of the leaves was positive for alkaloids, flavonoids, saponins, tannins, quinones, monoterpenoids and sesquiterpenoids. Thin  Layer  Chromatography  (TLC)  results  were  positive  for  Flavonoids,  Alkaloids,  Quinones,  Tannins.The results of antioxidant research using μg/mL the ethanol extract of terubuk leaves have activity as antioxidants. The  intensity of antioxidant activity of terubuk leaves was 180.148 ± 0,898 μg/mL so that from the results of this study terubuk leaves had moderate potential antioxidant activity against DPPH free radicals. Terubuk leaf ethanol extract contains secondary metabolites and has antioxidant activity.
Keywords: Crushed Leaf Terubuk, Phytochemical Screening, TLC, Antioxidan

## PENDAHULUAN
Indonesia  memasuki  urutan  dalam  negara agraris  yang  bergantung  dalam  pemanfaatan  alam untuk  keberlangsungan  hidup  sehari-hari,  dengan pemanfaatan alam tersebut masyarakat di Indonesia mayoritas  penduduk  bermata  pencaharian  sebagai petani  (Anugrah et  al .,  2016).  Penduduk  Indonesia bekerja  di  sektor  pertanian  sebesar  33  % berdasarkan  Data  Badan  Pusat  Statistik  (Dahar et al .,  2016).  Jenis  tanaman  yang berkontribusi dalam pembangunan  sektor  tanaman  yaitu  tanaman hortikultura.  Sayuran  masuk  ke  dalam  varietas tumbuhan  hortikultura  yang  banyak  ditanam  di Indonesia (Septiadi, 2020).
Sayuran  merupakan  jenis  pangan  yang dikonsumsi  setiap  saat  dikarenakan  sayuran memiliki nilai gizi pangan yang sehat, mengandung gizi,  karbohidrat,  protein,  vitamin,  dan  mineral (Susanto, 2014; Nuraeni et al., 2022). Sayuran juga menjadi  sumber  adanya  antioksidan  berdasarkan laporan  (Aman,  2017).  Sayuran  juga  merupakan jenis  tanaman  yang  baik  dikonsumsi  dalam  menu makanan  di  karenakan  mudah  diperoleh,  murah harganya, dapat diolah menjadi hidangan yang lezat menjadikan  sayuran  menjadi  komoditas  yang banyak diminati masyarakat (Septiadi et al ., 2020).
Senyawa  yang  mampu  menghambat  dan mencegah  semua  reaksi  oksidasi  serta  menangkap radikal bebas adalah senyawa antioksidan (Simanjuntak,  2012;  Kusumawati  et  al.,  2021). Radikal  bebas  diakibatkan  beberapa  faktor  yaitu pencemaran  udara,  makanan  instan,  sinar  UV, metabolisme  tubuh  (Rahmi,  2017;  Momuat et  al.,
2010).  Antioksidan  berperan  dalam  menggantikan radikal  bebas  dengan  cara  menghentikan  aksi radikal  bebas  yang  muncul  di  dalam  tubuh  atau
bersumber  dari  area  luar  (Meigaria et  al .,  2016; Shafirany  et  al.,  2021).  Penggunaan  bahan  alami sebagai antioksidan sangat penting untuk meningkatkan  mutu  kesehatan  masyarakat  dengan harga yang terjangkau (Werdhasari, 2014). Antioksidan  alami  dapat  ditemukan  dalam  bahan makanan  seperti  buah,  bumbu  dapur,  teh,  coklat, daun, benih , hasil bumi , katalis serta asam amino (Rahmi, 2017).
Tumbuhan  terubuk  merupakan  komoditas sayuran paling popular di Kota Karawang tepatnya di Kecamatan Tegalwaru Loji.
Gambar 1 Terubuk ( Saccharum spontaneum var. edulis (Hassk) K. Schum.)
(Sumber: Dokumen Pribadi)
Tumbuhan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini ditentukan  sebagai Saccharum  spontaneum  var. edulis (Hassk)  K.  Schum.  Klasifikasi  tanaman terubuk  berdasarkan  ITIS  (Integrated  Taxonomy Information System) sebagai berikut :
Kingdom  : Plantae
Divisi : Tracheophyta Kelas : Liliopsida Ordo : Poales Famili : Poaceae Genus : Saccharum Spesies : Saccharum spontaneum var.
Struktur tanaman terubuk menyerupai tanaman  tebu  ciri  puncuk  yang  terbagi  dan berwarna  hijau  merah.  Tanaman  ini  pada  bagian bunganya mengalami malformasi. Terubuk tumbuh pada  suhu  temperature  20-30  ºC.  Daerah  tumbuh terubuk ini pada ketinggian 1-200 mdpl (ketinggian diatas permukaan laut), tumbuh subur pada kondisi tanah  dengan  pH  5-6.  Spesies  botani  ini direproduksi melalui stek karena tidak menghasilkan biji. Stek batang akan mengembangkan  akar  dan  membentuk  kelompok tumbuhan dan bunga yang dihasilkan dalam batang tanaman  (malai  muda)  serta  diselimuti  dengan pelepah daun/kelobot (Fariroh et al ., 2011).
Masyarakat  dalam  mengolah  terubuk  sering di  makan  untuk  dijadikan  sayur,  tumis,  cobek, kukus  dan  pepes.  Namun  demikian  bagian tumbuhan  terubuk  yang  biasa  dijadikan  makanan yaitu  pada  bunga,  untuk  bagian  pelepah  daun terubuk  seringkali  di  buang  oleh  masyarakat menjadi limbah rumah tangga (Akda et al. , 2022)
Berdasarkan latar belakang diatas maka perlu dilakukan  penelitian  Skrining  fitokimia  dan aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol  pelepah  daun terubuk  ( Saccharum  spontaneum  var.  edulis (Hassk) K. Schum.).

## METODE PENELITIAN

## Alat
Peralatan  yang  dipakai  yaitu  timbangan  analitik, alat gelas, glass beaker, gelas ukur, water bath, kain hitam,  botol  coklat,  blender,  batang  pengaduk, tabung  reaksi, water  bath,  rotary  evaporator , spektrofotometer  UV-Vis,  mikropipet.  toples  kaca kedap udara, batang pengaduk, Plat KLT, Chamber
KLT,  lampu  UV,  penutup  kaca,  lampu  bunsen, cawan  penguap,  kurs  porselin,  tanur,  oven, desikator,  pipet  tetes,  hot  plate,  labu  ukur,  pipa kapiler, chamber, kertas saring, corong, Erlenmeyer, Kuvet.

## Bahan
Bahan  yang  dipakai  pada  penelitian  ini  yaitu Ekstraksi  maserasi  etanol  70%  Pelepah  Daun Terubuk  ( Saccharum  spontaneum  var.  edulis (Hassk)  K.  Schum.),  Larutan  DPPH,  aquadest, methanol  p.a,  asam  askorbat  (Vitamin  C). Kloroform,  HCl,  KOH,  FeCl 3 ,  Gelatin,  Vanillin, Dragendrof, Mayer, Magnesium, Lieberman Buchard.  Etil  asetat,  N-Heksan,  Etanol. Sitroborat, AlCl 3.

## Penyiapan Simplisia
Tumbuhan terubuk ( Saccharum spontaneum var. edulis (Hassk) K. Schum) diambil di  daerah  Puncak  Loji  Kota  Karawang.  Proses penyiapan simplisia dilakukan dengan Pengumpulan, sortasi basah, pencucian, perajangan,  pengeringan  di  bawah  sinar  matahari menggunakan kain hitam, pisahkan daun yang telah mengering  dari  benda  asing,  dihaluskan,  lalu tempatkan di tempat yang kering.

## Standarisasi Mutu Simplisia

## Parameter Non  Spesifik

## 1. Kadar Air
Penetapan  kadar  air  dengan  teknik  gravimetri yaitu memanaskan kurs porselin dipanaskan di oven dalam suhu 105ºC dalam kurun waktu 30 menit,  lalu  ditiriskan  ke  dalam  desikator dalam  kurun  waktu  30  menit  dan  telah  ditera (ditimbang), serbuk simplisia ditimbang
sebanyak  2  gram  dalam  kurs  porselin,  sampel dikeringkan  pada  suhu  105ºC  selama  5  jam dan  ditimbang.  Masukkan  kurs  porselin  ke dalam  desikator  selama  15  menit  dan ditimbang (Supomo et al., 2016).
Rumus Kadar Air (SNI, 2013) :

## Kadar Air

## 2. Kadar Abu
Simplisia  2  gram  ditimbang  dan  tuangkan kedalam  kurs  yang  telah  ditera  dan  dipijarkan terlebih dahulu, lalu diratakan, kurs dipijarkan perlahan-lahan  hingga  arang  habis,  dan didinginkan.  pijarkan  dilakukan  pada  suhu 500-600 ºC menggunakan tanur selama 3 jam, kemudian  hasil  pemijaran  didinginkan  dalam desikator,  serta  ditimbang  berat  abu  (Supomo et al., 2016) :
Rumus Kadar Abu Total (SNI, 2013) :

## Kadar Abu

## 3. Kadar Abu Tidak Larut Asam
Abu  yang  didapatkan,  dipanaskan  dengan  25 ml  asam  klorida  encer  kurun  waktu  5  menit, bagian yang tidak larut asam disatukan, saring melalui kertas saring bebas abu, dibilas dengan air yang telah panas, tempatkan kembali kertas saring  dan  dipindahkan  ke  dalam  cawan, uapkan diatas penangas air, kemudian panaskan  dalam  tanur  pada  suhu  525  dalam waktu  3  jam,  kemudian  didinginkan  pada desikator  selama  30  menit.  (SNI,  2013; Supomo, 2016 ).
Rumus Kadar Abu Tidak Larut Asam :
KATLAsam

## Parameter Spesifik

## 1. Kadar Sari Larut Air
Sejumlah  5  gram  simplisia  dimaserasi  di dalam labu Erlenmeyer selama 24 jam dengan 100  mL  air-kloroform  (2,5  mL  kloroform dalam  aquades  1000  mL).  Campuran  sesekali dikocok  tiap  jam,  selama  6  jam  pertama  dan didiamkan  selama  18  jam,  kemudian  disaring. 20  ml  filtrate  diuapkan  diatas  penangas  air hingga  kering  dalam  cawan  penguap  yang telah  ditera  (Saifudin et  al., 2011).  Zat  yang tersisa  dipanaskan  pada  suhu  105  ºC  sampai berat  konstan  tercapai.  Persentase  senyawa yang  larut  dalam  air  dihitung  dengan  rumus (Supomo et al., 2016) :

## 2. Kadar Sari Larut Etanol
Sejumlah 5 gram simplisia dimaserasi kedalam labu  Erlenmeyer  dengan  100  milliliter  Etanol 96  %.  Campuran  sesekali  diaduk  per  6  jam sekali  dan  didiamkan  selama  18  jam.  Sample disaring  dengan  cepat  untuk  tidak  terjadinya penguapan  etanol,  kemudian  20  mililiter filtrate  diuapkan  diatas  penangas  air  hingga mengering  pada  cawan  penguap  yang  telah ditara  (Saifudin et  al., 2011).  Zat  yang  tersisa dipanaskan  pada  105  ºC  sampai  berat  konstan tercapai.  persentase  senyawa  yang  larut  pada etanol  96  %  dihitung  berdasarkan  berat  awal ekstrak  dengan  menggunakan  rumus  (Supomo et al., 2016) :

## Pembuatan Ekstrak
Ekstraksi  pelepah  daun  terubuk  dengan teknik  maserasi  memakai  pelarut  Etanol  70%. Perbandingan  pada  maserasi  simplisia  dan  pelarut 1:10  (Padmasari et  al., 2016).  Ekstraksi  pelepah daun  terubuk  serbuk  simplisia  timbang  dilakukan sebanyak  3  kali  perlakuan  yaitu  500  gram  dalam 5000  mL  pelarut,  300  gram  dalam  3000  mL pelarut,  200  gram  dalam  2000  mililiter  pelarut Etanol 70% dimasukkan ke dalam wadah maserasi selama  3  hari  setiap  sesinya.  Setiap  perlakukan sesekali ekstrak diaduk setiap 6 jam sekali. Filtrate kemudian  disaring  menggunakan  corong  buchner. Filtrat yang didapatkan setelah itu diuapkan dengan vacum  rotary  evaporator  dengan  suhu  50-60ºC. Ekstrak  diuapkan  menggunakan  waterbath  hingga memperoleh ekstrak kental (Aryahidayani, 2020).

## Skrining Fitokimia
1. Alkaloid
Ekstrak  dibasahkan  dengan  Amonia  encer, digerus  dalam  miortir,  ditambahkan  beberapa mili  CHCl 3 sambil  terus  digerus.  Setelah disaring.  Filtrat  ditambahkan  5  mililiter  HCl 2N. Lapisan asam di pisahkan kemudian dibagi menjadi  3  bagian.  Tabung  pertama  diisi dengan  asam  encer  yang  berfungsi  sebagai control.  Tabung  kedua  diisi  dengan  3  tetes reagen Dragendorff dan tabung ketiga ditambahkan 3 tetes reagen Mayer. Munculnya padatan jingga pada tabung kedua dan padatan putih  pada  tabung  ketiga  menandakan  adanya alkaloid (Abriyani et al., 2021).

## 2. Flavonoid
Tambahkan  sekitar  1  mililiter  ekstrak  dan taburi  bubuk  magnesium  secukupnya  bersama dengan  10  tetes  asam  klorida  pekat.  Adanya flavonoid  ditunjukkan  dengan  adanya  warna merah kehitaman, kuning atau jingga (Abriyani et al., 2022)

## 3. Tanin
Sebanyak  3  mililiter  ekstrak  dimasukkan kedalam  tabung  reaksi  dan  ditambah  5  tetes gelatin  1%,  adanya  rona  kuning  jernih, endapan  putih  menunjukkan  positif  tanin (Abriyani et al ., 2021).

## 4. Fenolik
Tuang  1  milliliter  ekstrak  pada  tabung  reaksi dan masukkan 10 tetes larutan FeCl 3 1%. Hasil positif  ditunjukkan  dengan  terciptanya warna merah, biru, ungu, hitam atau hijau (Abriyani et al.,
2022)

## 5. Kuinon
Ekstrak serbuk pelepah daun ditimbang 1 gram dan  ditambahkan  20  mL  lalu  disaring, ditempatkan  dalam  tabung  reaksi,  kemudian digabungkan  dengan  larutan  KOH  5%  .  Jika rona  kuning  hingga  merah  menunjukkan  hasil yang didapatkan positif (Rezeki, 2017).

## 6. Saponin
Ekstrak  dilarutkan  dalam aquades yg didihkan kurun waktu 15 menit, Selanjutnya digoyangkan dengan kuat kurun waktu 15 atau 10 detik, jika terbentuk buih yang stabil kurun waktu  sekitar  10  menit  dan  tidak  hilang sejumlah  kecil  HCl  2N  dimasukkan,  maka sampel  positif  mengandung  saponin  (Abriyani et al., 2022).

## 7. Monoterpenoid dan Sesquiterpenoid
Sampel  dilarutkan  dengan  eter  digerus, disaring,  lalu  diuapkan  sampai  kering,  lalu teteskan vanilin 10% dalam H 2 SO 4 pekat. Hasil positif  menunjukkan  adanya  terbentuknya warna–warna (Rezeki, 2017).

## 8. Triterpenoid dan Steroid
Sampel  dilarutkan  dengan  eter  lalu  digerus, disaring, lalu diuapkan sampai kering, kemudian diteteskan dengan pereaksi Lieberman-Burchard. Jika hasil positif mengandung  triterpenoid  ditunjukan  dengan adanya  warna  ungu,  dan  golongan  steroid ditunjukkan  dengan  warna  biru-kehijauan (Abriyani et al., 2021).

## Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Ekstrak  yang  digunakan  pada  Kromatografi  Lapis Tipis  (KLT)  ini  yaitu  sampel  ekstrak  etanol  70% Pelepah  Daun  Terubuk  ( Saccharum  spontaneum var.  edulis (Hassk)  K.  Schum.)  yang  telah  pekat.
Fase  diam  yang  digunakan  pada  Uji  Kromatografi lapis  tipis  (KLT)  yaitu  fase  diam  silika  GF 254 ,  dan fase  gerak  menggunakan  pelarut  pengembang. Ekstrak  ditotolkan  pada  plat  KLT  memakai  pipa kapiler.  Setelah  mengering  dimasukkan  kedalam bejana  chamber,  apabila  fase  gerak  n-Heksan  dan Etil  Asetat  dengan  perbandingan  7:3  mencapai batas, plat di angkat, noda yang terbentuk di amati dengan  lampu  UV  254  nm dan 366 nm, kemudian dilakukan  penyemprotan  dengan  penampak  bercak spesifik, penyemprotan dilakukan untuk mempermudah identifikasi bercak KLT. Penampak bercak  noda  untuk  memperjelas  noda  pada  plat KLT.
Uji  Aktivitas  Antioksidan  dengan  Metode DPPH ( 1,1-difenil-2-fikrihidrazil )

## 1. Pembuatan Larutan DPPH 50 ppm
Larutan  DPPH  dibuat  dengan  konsentrasi  50 ppm  yakni  dengan  menimbang  sebanyak  2,5 milligram  (mg)  kemudian  dilarutkan  dengan metanol  p.a  sampai  50  mililiter  (mL)  dan ditambahkan pelarut secukupnya hingga mencapai volume yang diinginkan, dilanjutkan dengan  pencampuran  hingga  homogen  dan dilapisi alumunium foil. Dalam setiap percobaan, larutan DPPH dibuat baru.

## 2. Pembuatan Larutan Blanko
Larutan  DPPH  50  ppm  sebanyak  2  mL ditambahkan  ke  dalam  botol  coklat  dan ditambahkan  dengan  metanol  p.a  sebanyak  2 mL, diinkubasi selama 30 menit.

## 3. Penentuan Panjang Gelombang
Ambil  larutan  DPPH  50  ppm  dan  dipipet  ke dalam  kuvet  sebanyak  4  milliliter,  kemudian tentukan spektrum serapan memakai spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang  400-800  nm  serta  ditemukan panjang gelombang optimumnya.

## 4. Penentuan Serapan Absorbansi
Larutan DPPH 2 mililiter dimasukkan ke botol coklat  dan  ditambahkan  dengan  metanol  p.a sebanyak  2  mililiter,  diinkubasi  selama  30 menit  suhu  37ºC,  lalu  diukur  serapan  dengan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang  517  nm.  Perlakuan  dilakukan  di ruangan  yang  tertutup  dan  terhindar  dari cahaya,  serta  pengerjaan  dilakukan  secara triplo.

## 5. Pembuatan Larutan Vitamin C
Vitamin  C  sebanyak  100  ppm  ditimbang  2,5 milligram  (mg),  kemudian  dilarutkan  dalam metanol  p.a  25  mililiter,  dituangkan  ke  dalam labu  ukur  25  mililiter  sampai  tanda  yang ditentukan,  dan  larutan  diisi  hingga  tanda. Selanjutnya dibuat variasi konsentrasi 10 ppm, 8 ppm, 6 ppm, 4 ppm, 2 ppm (Indrawati et al .,
2022).  Setiap  konsentrasi  dilarutkan  dalam  10 mililiter  metanol  p.a  sampai  tanda.  Pindahkan 2  mililiter  setiap  larutan  uji  ke  dalam  botol coklat,  dimasukkan  ke  dalam  botol  coklat, tambahkan  2  mililiter  larutan  DPPH,  dan kocok  hingga  homogen.  Kemudian,  biarkan diinkubasi  pada  suhu  kamar  selama  30  menit. Selanjutnya,  serapan  larutan  uji  dinilai spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 517 nm.

## 6. Pembuatan  Larutan  Ekstraksi  Pelepah Daun Terubuk
Ekstrak  Etanol  dibuat  larutan  induk  dengan konsentrasi  1000  ppm  dengan  mengukur ekstrak  25  miligram,  kemudian  dilarutkan dengan metanol p.a ditempatkan kedalam labu volumetric  25  milliliter,  dan  pelarutnya ditambahkan  mencapai  tanda yang ditentukan. Kemudian ekstrak disiapkan dengan konsentrasi 125 ppm, 100 ppm, 75, 50 ppm, 25 ppm.  Pada  setiap  konsentrasi  dipindahkan kedalam  labu  volumetric  10  mililiter  dan tambahkan metanol p.a hingga mencapai tanda yang ditentukan.

## 7. Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol Pelepah Daun Terubuk
Pengujian  dilakukan  dengan  cara  memipet larutan induk ekstraksi Pelepah Daun Terubuk
sebanyak  2  mL  masing-masing  konsentrasi, dilanjutkan  dengan  penambahan  2  mL  larutan DPPH.
Selanjutnya,  diinkubasi  selama  30  menit, kemudian  dianalisi  absorbansinya  memakai spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelomang  517  nm  dan  perlakukan  dilakukan berulang secara triplo.

## 8. Penentuan Nilai IC 50
Persentase penghambatan adalah persentase yang menunjukkan aktivitas radikal. Persentase  penghambatan  terhadap  radikal DPPH  dari  masing  –  masing  konsentrasi sampel  dapat  dihitung  dengan  menggunakan persamaan berikut :
Setelah  didapatkan  persentase  inhibisi  dari masing  –masing  konsentrasi,  konsentrasi sampel  dan  persen  penghambatan  dapat didapatkan pada sub x dan y dalam persamaan regresi linear y = a ± bx. Persamaan ini untuk menentukan  nilai  IC 50 dari  masing-masing sampel.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Standarisasi Mutu Simplisia

## Parameter Spesifik

## 1. Kadar Sari Larut Air
Pada  simplisia  Daun  Terubuk  memiliki  hasil standarisasi  mutu  simplisia  yaitu  kadar  sari larut  air  11,16    ±  0,01  %.  Analisis  kadar  sari larut  air  dan  kadar  sari  larut  etanol  bertujuan untuk  mengukur  adanya  komponen  senyawa aktif  yang  bersifat  polar  (larut  dalam  air) (Warnis, 2021).

## 2. Kadar Sari Larut Etanol
Pada  simplisia  Daun  Terubuk  memiliki  hasil standarisasi  mutu  simplisia  yaitu  kadar  sari larut  air  etanol  5,16  ±  0,01  %.  Analisis  kadar sari  larut  air  larut  etanol  bertujuan  untuk mengukur  adanya  komponen  senyawa  aktif yang  bersifat  semi  polar  –  non  polar  (larut dalam etanol) (Warnis, 2021).

## Parameter Non Spesifik

## 1. Kadar Air
Pada simplisia daun terubuk mempunyai hasil standarisasi parameter non spesifik yaitu kadar air sebesar 8,71 % ± 0,01 dan parameter sesuai dengan  SNI  <  10  %.  Tujuan  dilakukanya pengujian  kadar  air  yaitu  untuk  mengetahui kualitas  dan  daya  simpan  suatu  bahan  serta mengetahui  banyak  nya  air  terkandung  pada bahan  yang  dinyatakan  dalam  persen  (Aditya, 2019).

## 2. Kadar Abu Total
Pada simplisia daun terubuk mempunyai hasil standarisasi parameter non spesifik yaitu kadar abu total 4,42 %  ± 0,01. Penentuan kadar abu dilakukan  untuk  mengukur  sisa  zat  anorganik atau  mineral  setelah  prosedur  pengabuan, penentuan  kadar  abu  tidak  larut  asam menentukan  jumlah  kadar  abu  yang  berasal dari  sumber  luar  seperti  pengotor  dari  pasir atau  tanah  (Fatimawali,  2020)  serta  cemaran mineral  atau  logam  tidak  larut  asam  terdapat pada simplisia, Kadar Abu membantu mengidentifikasi keberadaan kandungan silikat dari tanah atau pasir, serta unsur logam termasuk perak, timbal, dan merkuri. (Gunarti et al., 2015).

## 3. Kadar Abu Tidak Larut Asam
Pada simplisia daun terubuk mempunyai hasil standarisasi parameter non spesifik yaitu kadar abu  tidak larut asam 0,63 %  ± 0,03. Besarnya kadar  abu  tidak  larut  asam disebabkan karena pengaruh  dari  tempat  tumbuh  daun  terubuk yang  berada  di  daerah  pegunungan  loji karawang yang memiliki banyaknya pegunungan batu kapur. Batu kapur terdiri dari hingga  95  %  mineral  kalsium  karbonat (Megawati et al., 2019).
Hasil Ekstraksi Pelepah Daun Terubuk
( Saccharum  spontaneum  var.  edulis (Hassk)  K. Schum.)
Ekstraksi  terhadap  serbuk  simplisia  Pelepah Daun  Terubuk  ( Saccharum  spontaneum  var.  edulis
(Hassk) K.
Schum.) dilakukan dengaan menggunakan  ekstraksi  cara  dingin,  yaitu  dengan metode maserasi. Berikut adalah hasil dari maserasi dan presentase rendemenya.
Tabel 1 . Rendemen Ekstrak Pelepah Daun Terubuk ( Saccharum spontaneum var. edulis
(Hassk) K. Schum.) Pelarut Simplisia (gram) Ekstrak Kental (gram) Rendemen (%) Etanol 70% 1000 52 5,2

## Skrining Fitokomia
Skrining  fitokimia  dilakukan  terhadap  ekstrak pelepah  daun  terubuk  segar.  Skrining  fitokimia bertujuan  untuk  menentukan  kandungan  senyawa kimia  metabolit  sekunder  yang  memiliki  aktivitas biologi bagi tanaman.
Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia Pelepah Daun
Terubuk No Golongan Senyawa Reagen Hasil 1 Alkaloid Dragendrof Mayer + 2 Flavonoid HCl + Mg + 3 Saponin Aquadest + HCl - 4 Tanin Gelatin 1% + 5 Fenolik FeCl 3 5% + 6 Kuinon KOH 5% + 7 Monoterpenoid dan Sesquiterpenoid Vanilin 10% - 8 Triterpenoid dan Steroid Liberman Buchard -
Keterangan : (+) : terdeteksi (-) : tidak terdeteksi
Berdasarkan  hasil  uji  skrining  fitokimia  ekstrak etanol Pelepah Daun Terubuk menunjukkan adanya senyawa  metabolit  sekunder  Alkaloid,  Flavonoid, Tanin, Fenolik, Kuinon.

## Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Pengujian  Uji  dengan  KLT  dilakukan  untuk menegaskan  hasil  yang  didapat  dari  skrining fitokimia, sehingga hanya dilakukan untuk golongan senyawa  yang  menunjukkan  hasil  positif  pada skrining  fitokimia  (Flavonid,  Alkaloid,  Tanin, Kuinon).
Tabel 3. Hasil KLT Ekstrak Pelepah Daun Terubuk ( Saccharum spontaneum var. edulis (Hassk) K.
Schum.) Senyawa Penampak Bercak Rf Warna Hasil Flavonoid Sitroborat 0,5 0,6 Kuning Jingga + AlCl 3 0,7 Kuning + Alkaloid Dragendorf  0,5 Kuning +
Tanin FeCl 3 5% 0,6 Hijau Kehitama n + Kuinon KOH+Etanol  0,6 Kuning orange +
Pelarut  pengembang  yang  digunakan  pada KLT untuk Flavonoid adalah n-Heksan : Etil Asetat (7:3).  Analisis  pada  KLT  ini  yaitu  adanya  noda warna pada plat KLT.
Uji  Aktivitas  Antioksidan  dengan  Metode  DPPH ( 1,1-difenil-2-fikrihidrazil )
Penelitian  ini  dengan  cara  menguji  aktivitas antioksidan  terhadap  ekstrak  etanol  pelepah  daun terubuk  secara  kuantitatif  dengan  menggunakan teknik  DPPH.  Teknik  DPPH  ini  memiliki keunggulan kesederhanaan, kecepatan, dan sensitivitas,  serta  membutuhkan  jumlah  sampel yang  sedikit.  Vitamin  C  dipilih  untuk  referensi pembanding  dikarenakan  vitamin  C  dapat  sebagai antioksidan yang berperan efektif dalam penangkapan radikal bebas dengan cara mendonorkan  elektron.  Vitamin  C  merupakan senyawa antioksidan alami (Rantung, et al., 2021).
Hasil  perhitungan  absorbansi  DPPH  setelah ditambahkan  dengan  sampel  menunjukkan  adanya pengurangan  intensitas  warna  yang  diamati  pada vial.  Setelah  berinteraksi  dengan  senyawa  ini, DPPH  mengalami  perubahan  warna  yaitu  warna ungu menjadi kuning, yang disebabkan oleh reduksi ikatan  rangkap  ikatan  terkonjugasi  dalam  DPPH (Rahmadani, 2021). Perubahan warna ini menyebabkan  variasi  absorbansi  pada  panjang gelombang  DPPH  ketika  diperiksa  menggunakan spektrofotometer  UV-Vis,  yang  memungkinkan penentuan nilai aktivitas penangkapan radikal bebas
yang  dinyatakan  dengan  nilai  IC 50 .  Nilai  IC 50 mempresentasikan  konsentrasi  senyawa  uji  yang dibutuhkan  untuk  menurunkan  radikal  bebas sebesar  50%.  Nilai  IC 50 yang  lebih  kecil  kecil menunjukkan aktivitas peredaman yang lebih tinggi, sehingga  menunjukkan  aktivitas  antioksidan  yang lebih tinggi dalam sampel.
Gambar 2. Reduksi DPPH dari Senyawa
Peredam Radikal Bebas (Sumber: Amalia., 2011)
Uji  aktivitas  antioksidan  terhadap  25  mg  ekstrak pelapah  daun  terubuk  dilakukan  dengan  membuat seri konsentrasi 125 µg/mL, 100 µg/mL, 75 µg/mL, 50  µg/mL,  25  µg/mL.  Hasil  pengujian  dari  ekstrak diperoleh nilai IC 50 sebesar 180,148 ± 0,898 µg/mL.
Gambar 3. Kurva Regresi Linear Pelepah Daun
Terubuk
Hal  ini  menunjukan  ekstrak  pelepah  daun  terubuk mempunyai  aktivitas  antioksidan  yang  sedang karena  memiliki  nilai  IC 50 dari  100-250  µg/mL.
Hasil  antioksidan  ekstrak  pelepah  daun  terubuk tersebut  tidak  mencapai  nilai  IC 50. Aktivitas antioksidan  merupakan  aktivitas  pencegahan  reaksi oksidasi  dari  radikal  bebas  melalui  mekanisme adanya  senyawa  yang  menyumbangkan  satu  atau lebih  elektron  pada  radikal  bebas  sehingga  radikal
bebas  tersebut  menjadi  stabil  (Farhamzah  et  al., 2022).  Aktivitas  tersebut  dimiliki  oleh  senyawa fenolik  karena  senyawa  fenolik  mengandung  satu atau dua gugus hidroksil pada cincin aromatik yang bisa berperan sebagai donor hydrogen (Yuniarsih et al.,  2023). Pelepah daun terubuk memiliki aktivitas antioksidan  disebabkan  karena  danya  kandungan flavonoid  dan  alkaloid.  Alkaloid  berfungsi  sebagai antioksidan  karena  mengandung  atom  nitrogen  di dalam  strukturnya,  atom  tersebut  mempunyai pasangan  elektron  bebas  yang  berfungsi  untuk meredam  aktivitas  radikal  bebas  di  dalam  tubuh (Puspitasari,  2018)  dan  flavonoid  merupakan senyawa pereduksi yang dapat menghambat banyak reaksi  oksidasi.  Flavonoid  sebagai  antioksidan karena  mampu  mentransfer  sebuah  elektron  pada senyawa  radikal  bebas,  Dimana  R*  merunapan senyawa  radikal  bebas,  FI-OH  merupakan  senyawa flavonoid  sedangkan  FI-OH*  merupakan  radikal flavonoid (Kandaswami, 1997).
Gambar 4. Mekanisme Reaksi Peredaman Radikal pada Flavonoid (Sumber : Kandaswami and Middleton, 1997).

## Analisis Data
Hasil dari analisis statistik Test of Homogeneity of Variances dari aktivitas antioksidan  yang  diuji  menggunakan  one  way anova  menunjukkan  bahwa  antioksidan  pelepah daun  terubuk  sebesar  0,355>0,05  menunjukkan nilai  signifikan  p>0,05.  Maka  dari  itu,  diartikan
jika  data  yang  telah  terdistribusi  sama  (homogen) dan  untuk  hasil  uji  one  way  anova  menunjukan hasil 0,000 < 0,05 yang artinya terdapat perbedaan yang signifikan.

## KESIMPULAN
1. Hasil  metabolit  sekunder  pada  ekstrak  etanol pelepah  daun  terubuk  mengandung  senyawa metabolit  sekunder  flavonoid,  alkaloid,  tanin,
kuinon.
2. Hasil  aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol pelepah  daun  terubuk  yang  telah  dilakukan bahwa  pelepah  daun  terubuk  memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai  IC 50

## 180,14801 ± 0,8 µg/mL.

## SARAN
1. Lakukan  pengujian  penggunaan  dengan  2 pelarut lainya yaitu n-heksan, etil asetat, etanol 96%.
2. Lakukan pengujian antioksidan yang lain yaitu dengan metode FRAP dan ABTS.
3. Lakukan  penelitian  antioksidan  pelepah  daun terubuk dengan menggunakan variasi konsentrasi yang lebih tinggi yaitu 500 µg/mL, 1000  µg/mL,  1.500  µg/mL,  2.000  µg/mL, 2.500 µg/mL atau variasi yang lebih tinggi lagi untuk mencapai nilai IC 50 .
4. Lakukan  pengujian  secara  invivo  dan  invitro pada  bagian  bunga  dan  daun  pada  tumbuhan terubuk  ( Saccharum  spontaneum  var.  edulis
(Hassk) K. Schum).

## DAFTAR PUSTAKA
Abriyani  E,  Lia  F,  Fifit  S.  Skrining  Fitokimia  Dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak  Metanol
Bunga  Kangkung  Pagar  ( Ipomoea  carnea Jack  .)  dengan  Metode DPPH ( 2,2-Difenil-1- Pikrilhidrazil ).  Pharma  Xplore.  2021;    6(1): 32–42.
Abriyani  E,  Lia  F,  Mia  AS,  Arie  W.  Skrining Fitokimia  Dan  Uji  Antioksidan  Terhadap Ekstrak  Bunga  Limnocharis  Flava  L  Dengan Metode  DPPH.  Jurnal  Buana  Farma.  2022; 2(2): 56-59.
Aditya  YS.  Analisis  Kadar  Air  Dan  Kadar  Abu
Pada  Tepung  Buah  Sirsak  Gunung  (Annona montana Macf.). 2019; 1–10.
Aman IGM. Makanan Sebagai Sumber Antioksidan. Bali Health Journal. 2017; 1(1):
49–55.
Akda ZW, Annisa IP, Muhamad S, N.N.T. Potensi Olahan Terubuk Menjadi Aneka Makanan Di
Umkm Desa Cintawargi Kecamatan
Tegalwaru.  Konferensi  Nasional  Penelitian dan Pengabdian. Universitas Buana Perjuangan Karawang.2022.
Anugrah  R,  Dewi  MA,  Subekti  A.  Analisis
Kandungan Fenolftalein Pada Jamu
Pelangsing.  Kartika  Jurnal  Ilmiah  Farmasi, 2016; 4(1): 4–9.
Aryahidayani W. Aktivitas Bunga dan Daun Pepaya ( Carica  papaya L.)  Varietas  Bangkok  dan California,  Skripsi,  Fakultas  Sains  dan Teknologi,  UIN  Syarif  Hidayatullah, Jakarta. 2020.
Dahar  D,  Farmawati.  Analisis  Sosial  Ekonomi Masyarakat  Petani  Kecamatan  Randangan Kabupaten  Pohuwato.  Jurnal  Ilmiah  Ilmu Ekonomi, 2016; 5(9): 55-67.
Fatimawati,  Billy  J,  Kepel, Widdhi  B. Standarisasi Parameter Spesifik dan Non-Spesifik Ekstrak Rimpang Lengkuas Merah (Alpinia Purpurata K.  Schum)  sebagai  Obat  Antibakteri. EBiomedik. 2020; 8(1): 63–67.
Fariroh  I,  Palupi  ER,  Wahyudin  DS.  Media Perkecambahan  Dan  Kondisi  Ruang  Simpan Serbuk  Sari  Mentimun  ( Cucumis  sativus L.).
In Seminar nasional perhimpunan
hortikultura Indonesia.2011.
Farhamzah,  Kusumawati,  AH.,  Alkandahri,  MY.,
Hidayah,  H.,  Sujana,  D.,  Gunarti,  NS., Yuniarsih,  N.,  Apriana,  SD.,  and  Agustina, LS.  Sun  Protection  Factor  Activity  of  Black Glutinous Rice Emulgel Extract (Oryza sativa var glutinosa). Indian Journal of
Pharmaceutical  Education  and  Research.
2022; 56(1): 302-310.
Guntarti  A,  Sholehah  K,  Irna  N.  Fistianingrum  W.
Penentuan  Parameter  Non  Spesifik  Ekstrak Etanol  Kulit  Buah  Manggis  (Garcinia mangostana)  Pada  Variasi  Asal  Daerah. Fakultas Farmasi Universitas Ahmad Dahlan. Farmasains. 2015; 2(5): 202-207.
Kusumawati,  AH.,  Farhamzah,  F.,  Alkandahri, MY., Sadino, A., Agustina, LS., and Apriana, SD.  Antioxidant  Activity  and  Sun Protection Factor of Black Glutinous Rice (Oryza sativa var.   glutinosa). Tropical  Journal  of  Natural Product Research . 2021; 5(11): 1958-1961.
Meigaria  KM,  I  Wayan,  Ni  WM.  Skrining Fitokimia  Dan  Uji  Aktivitas  Antioksidan Ekstrak  Aseton  Daun  Kelor  ( Moringa Oleifera ).  Jurnal  Wahana  Matematika  dan Sains. 2016; 10(2): 1–11.
Megawati  M.,  Alimuddin,  Laode  AK.  Komposisi Kimia  Batu  Kapur  Alam  dari  Indutri  Kapur Kabupaten Kolaka Sulawesi Tenggara. Saintifik. 2019; 5 (2): 104–108.
Momuat  L,  Fatimah  F.,  Wehantouw  F.  Efek Pemanasan Terhadap Total Antioksidan Dari Beberapa  Jenis Sayuran Tinutuan.  Chemistry Progress. 2010; 3(2):  85–90.
Nuraeni,  E.,  Alkandahri,  MY.,  Tanuwidjaja,  SM., Fadhilah,  KN.,  Kurnia,  GS.,  Indah,  D., Permana,  A.,  et  al.  Ethnopharmacological Study  of  Medicinal  Plants  in  the  Rawamerta Region  Karawang,  West  Java,  Indonesia. Open Access Macedonian Journal of Medical Sciences. 2022; 10(A): 1560-1564.
Padmasari  PD,  Astuti  KW,  Warditiani  NK.
Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Etanol  70%
Rimpang Bangle ( Zingiber purpureum Roxb.). Journal 2013; 366: 1–7.
Puspitarsari, Laode, Herman. Identifikasi Golongan
Metabolit Sekunder dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Brotowali
(Tinospora  tuberculata  Beumee).  ISTN. Jagakarsa Jakarta. 2018.
Rahmi  H.  Review:  Aktivitas  Antioksidan  dari Berbagai  Sumber  Buah-buahan  di  Indonesia. Jurnal Agrotek Indonesia. 2017; 2(1): 34–3.
Rahmadani  D,  Nasution  HM.  Potensi  Antioksidan Fraksi  Etil  Asetat  dan  Fraks  N-Heksana Ekstrak  Etanol  Kulit  Buah  Asam  Jawa (Tamarindus indica. L) Terhadap Penangkapan Radikal Bebas. Jurnal
Farmasinkes. 2021;1 (1): 28-37.
Rantung  O,  Aneke  I.K,  Hasan  D.  Perbandingan Ekstraksi  Vitamin  C  Dari  10  Jenis  Buah-
Buahan Menggunakan Sonokasi dan Homogenisasi. Indonesian Journal Of Laboratory. 2021; 4(3): 124-133.
Rezeki  SNE.  Pembuatan  Ekstrak  Etanol  Dan Penapisan  Fitokimia  Ekstrak  Etanol  Kulit Batang  Sintok  ( Cinnamomun  Sintoc Bl.).
Jurnal Hexago. 2017; 1(2): 29-35.
Saifudin  A,  Viesa  T,  Hilwan  YT.  Standarisasi Bahan  Obat  Alam  Yogyakarta:  Graha  Ilmu.
2011.
Shafirany,  MZ.,  Indawati,  I.,  Sulastri,  L.,  Sadino,
A.,  Kusumawati,  AH., and  Alkandahri,  MY.
Antioxidant  Activity  of  Red  and  Purple Rosella Flower  Petals  Extract  (Hibiscus sabdariffa  L.).  Journal  of Pharmaceutical Research  International.  2021;  33(46B):  186- 192.
Supomo,  Risa  S,  Risaldi  J.  Karakterisasi  Dan
Skrining Fitokimia Daun
Kerehau
( Callicarpa  Longifolia Lamk.).  Jurnal  Kimia
Mulawarman. 2016; 13(2): 89-96.
Simanjuntak,  Ritina.  Peran  Antioksidan  Flavonoid
Dalam  Meningkatkan  Kesehatan.  FK  UBPN
Veteran Jakarta. 2012.
Susanto,  Budhi.  Fakta  Buah  dan  Sayur  Beracun.
Cemerlang Publishing. 2014: Yogyakarta.
Warnis  M,  Salsabila  J,  Rulianti  MR.  Pemeriksaan
Rendemen,  Kadar  Sari Larut Air,  Dan Kadar
Sari  Larut  Etanol  Dari  Ekstrak  Batang
Brotowali. Jurnal  Kesehatan  Pharmasi .
2021; 3 (2): 118–123.
Werdhasari  A.  Peran  Antioksidan  Bagi  Kesehatan.
Jurnal  Biomedik  Medisiana  Indonesia.  2014;
3(2): 59–68.
Yuniarsih,  N.,  Hidayah,  H.,  Gunarti,  NS., Kusumawati, AH., Farhamzah, F., Sadino, A., and  Alkandahri,  MY.  Evaluation  of  Wound- Healing  Activity  of  Hydrogel  Extract  of
Sansevieria trifasciata Leaves (Asparagaceae). Advances in Pharmacological and Pharmaceutical
Sciences.  2023;  2023  (Article  ID  7680518): 1-10.