Penggunaan Minyak  Biji Pala Sebagai Bahan Anastesi …………. (Srie Rahayu dan Sanan)
Penggunaan Minyak  Biji Pala ( Myristica fragrans , Houtt) Sebagai Bahan Anastesi Dalam Proses Pengangkutan Kualitas Spermatozoa  Untuk Pemijahan Induk Ikan Nilem ( Osteochillus hasselti , C.V.)
Sata Yoshida Srie Rahayu 1 dan Sanan Supriatna 2 1,2) FMIPA Universitas Pakuan, Bogor
ABSTRACT
Aquaculture  of  nilem  fish  needs  parent  and  larvae.  The  good  parent  is  available  from research  station  with  good  facilities  and  management,  so  it  can  distribute  to  farmer  by transportation. The important factors that should be notice in transportation process is usage of anaesthetic ingredients to exhilarate fish during transportation process. This research was used  nutmeg  bean  oil  contained  of  miristisin  that  able  to  exhilarate.  The  result  of  main research showed that the more nutmeg bean oil concentration the more fast nilem fish will be insensible, the lowest concentration (75 mg/l) sensible time of 97,11 minutes while the highest concentration  (150  mg/l)  showed  insensible  time  of  10,13  minutes.  The  result  of  conscious time observation showed that 75 mg/l  resulted conscious time of 17,5 second while 150 mg/l resulted concious time of 740 second. 150 mg/l concentration is the best concentration because it has the fastest insensible time of 10,13 minutes, the longest concious time of 740 second, has hatch value degree and the longest larvae-life and  effective for exhilarate nilem fish. Nutmeg bean oil has influence towards  sperm quality, but all of the treatments have  the same effect (not  significant)  towards  sperm  quality,  egg-impregnation  degree,  egg  hatch  and  nilem  fish larvae-life.
Keywords: nutmeg bean oil,  anaesthetic ingredients in delivery process,  spermatozoa quality for spawning, nilem fish

## PENDAHULUAN
Ikan  nilem  ( Osteochilus  hasselti, C.V),  adalah  salah  satu  komoditas budidaya ikan air tawar yang terkonsentrasi  di  pulau  Jawa,  terutama  di wilayah Priangan. Secara umum, budidaya ikan  nilem  saat  ini  masih  bersifat tradisional,  bahkan  hanya  berupa  produk sampingan dari hasil budidaya ikan secara polikultur  dengan  ikan  mas,  mujaer  atau nila  dan  gurame,  sehingga  hasil  budidaya tidak  optimal  (Subagja  dkk , 2007), sedangkan  ikan  nilem  mempunyai  potensi masa  depan  yang  cukup  baik.  Kebutuhan benih yang baik diperoleh dari induk yang unggul. Induk yang unggul masih diperoleh  dari  balai-balai  penelitian  atau tempat budidaya ikan yang sudah memiliki fasilitas  yang  baik,  sehingga  untuk distribusi  ke  petani  memerlukan  trans- portasi. Transportasi  yang biasa dilakukan masyarakat  adalah  dengan  cara  tertutup
dan cara terbuka. Ternyata dalam kegiatan transportasi  termasuk  penanganan  pasca transportasi  terjadi  kematian  yang  sangat tinggi yaitu 30-40% (Dharma dkk, 2004).
Penggunaan  bahan  anastesi  untuk mengurangi keaktifan ikan selama pengangkutan  dengan  media  air  telah banyak  dilakukan,  antara  lain  menggu- nakan MS 222 , Benzocaine dan 2- Phenoxyethanol.  Dari  beberapa  bahan kimia  yang  digunakan  tersebut  hanya MS 222 yang terdaftar secara resmi di USA dengan  ketentuan  digunakan  21  hari sebelum  penjualan  (Pratiwi,  2000).  Hal tersebut dikhawatirkan bahan kimia tersebut  dapat  meninggalkan  residu  yang dapat  membahayakan  kesehatan.  Adanya kendala  tesebut  maka  dicari  bahan  alami yang  dapat  digunakan  sebagai  bahan anastesi  yang  dapat  digunakan  sebagai bahan  anastesi  dan  diharapkan  tidak menimbulkan  efek  negatif  terhadap  ikan selama  anastesi.  Beberapa  senyawa  yang
Penggunaan Minyak  Biji Pala Sebagai Bahan Anastesi …………. (Srie Rahayu dan Sanan)
diketahui  dapat  dipakai  sebagai  bahan anastesi  antara  lain  ekstrak  cairan  biji karet,  ekstrak  algae  laut  genus Caulerpa dan biji pala (Pratiwi, 2000).
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  konsentrasi  bahan  anastesi dengan menggunakan minyak biji pala dan penerapannya  dalam  pengangkutan  sistem tertutup serta pengaruhnya terhadap kualitas  sperma  akibat  pembiusan.  Hasil penelitian  ini  diharapkan  dapat  memberi- kan  informasi  yang  dapat  dijadikan  bahan pertimbangan  dalam  penggunaan  bahan anastesi  minyak  biji  pala  untuk  pengang- kutan  induk  ikan  nilem  ( Osteochilus hasselti, C.V.)  sehingga  dapat  tetap menjaga kualitas spermatozoanya.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  dilaksanakan  di Instalasi  Riset  Plasma  Nutfah  Perikanan Budidaya  Air  Tawar,  Cijeruk  Bogor. Bahan-bahan    yang  digunakan  adalah  1. induk  ikan  nilem  ( Osteochilus  hasselti,
C.V)  jantan  dan  betina  yang  telah  matang gonad.  Induk  ikan  nilem  jantan  yang digunakan memiliki bobot rata-rata  40 ± 5 g/ekor.  Jumlah  induk  ikan  nilem  yang digunakan  masing-masing  sebanyak    56 ekor  jantan  dan  5  ekor  betina.  2.  Minyak biji  pala  yang  digunakan  merupakan produk  tidak  berlebel  dan  dibeli  dari Fakultas  Teknologi  Pertanian  Institut Pertanian Bogor. 3. NaCl Fisiologis 0,9%, sebagai  pengencer  sperma  ikan  uji.  4. Oksigen.  5.  Alkohol  70%  sebagai  pelarut bahan anastesi. 6. Aquades untuk membersihkan  alat  dan  untuk  pemijahan. 7. Ovaprim untuk merangsang ovulasi. Alat-alat yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  :  1.  Mikroskop  untuk mengamati  motilitas  sperma.  2.  Akuarium ukuran  50  x  40  x  30  cm 3 untuk mencampurkan bahan anastesi. 3. Bak fiber kapasitas 1000 liter sebagai media simulasi transportasi.  4.  Aerator,  untuk  mensuplai oksigen dari luar. 5. Timbangan elektronik merk  ACIS  dengan  ketelitian  0,1  g  untuk
menimbang bobot ikan dan bahan anastesi. 6. Spuit, untuk mengambil sperma ikan uji. 7.  Plastik  polyetilen  ukuran  25x50  cm, untuk  wadah  pengangkutan  ikan  uji.  8. Objek glass dan cover glass. 9. Hemocytometer untuk pengamatan motilitas  sperma.  10.  Stopwatch,  untuk menghitung  waktu  induksi,  waktu  pulih sadar  dan  umur  sperma  ikan  uji.  11. Mangkok,  untuk  mencampurkan  telur  dan sperma  ikan  uji.  12.  Bulu  ayam,  untuk pengaduk  sperma  dan  telur  pada  saat dilakukan  proses  pembuahan.  13.  Blower, sebagai  alat  untuk  simulasi  pengangkutan penghasil guncangan.
Metode  penelitian  terdiri  dari  2 tahap  yaitu  :  1.  Penelitian  Pendahuluan dilakukan untuk menentukan median lethal concentration (LC 50 )  dan  konsentrasi minyak  biji  pala  yang  akan  digunakan sebagai perlakuan pada penelitian utama. 2. Penelitian utama untuk mengetahui pengaruh  minyak  biji  pala  sebagai  bahan anastesi  terhadap  kualitas  spermatozoa untuk  pemijahan  induk  ikan  Nilem ( Osteochilus hasselti, C.V) dengan konsentrasi yang berbeda.
Penelitian utama terdiri dari beberapa  tahapan  yaitu  :  persiapan, pelaksanaan dan penelitian efek penggunaan  minyak  biji  pala  ( Myristica fragrans ,Houtt)  sebagai  bahan  anastesi dalam  proses  pengangkutan  terhadap kualitas  spermatozoa  untuk  pemijahan induk  ikan  nilem  ( Osteochilus  hasselti , C.V).
Peubah yang diamati dalam penelitian ini adalah : 1. Waktu Pingsan. 2. Lama  Waktu  Pulih  Sadar.  3.  Lama  waktu pulih  sadar  dihitung  ketika  ikan  uji dimasukkan  dalam  air  segar  sampai  ikan sadar seperti keadaan normal.  Lama waktu pulih  sadar  dihitung  dengan  menggunakan stopwatch.  4.  Umur  Sperma.  5.  Umur sperma  dihitung  dari  sperma  mulai  aktif bergerak  sampai  sperma  tidak  bergerak dengan  menggunakan  stopwatch  di  bawah mikroskop.  6.  Motilitas  spermatozoa  ikan
Penggunaan Minyak  Biji Pala Sebagai Bahan Anastesi …………. (Srie Rahayu dan Sanan)
diidentifikasi berdasarkan kriteria penilaian motilitas  sperma  ikan.  7.  Nilai  derajat pembuahan dapat dihitung dengan menggunakan rumus (Effendie, 1979).
Derajat Pembuahan = Jumlah telur yang dibuahi  x 100%
Jumlah Total Telur
8.  Nilai  derajat  penetasan  dapat  dihitung dengan rumus (Effendie, 1979).
Derajat Penetasan = Jumlah telur yang menetas  x 100%

## Jumlah Total Telur
9.  Tingkat  kelangsungan  hidup  dapat dihitung  dengan  menggunakan  rumus (Effendie, 1979).

## Tingkat kelangsungan Hidup
= Jumlah ikan pada akhir percobaan x 100% Jumlah ikan pada awal percobaan

## Analisis Data
Penelitian  ini  dilakukan  dengan menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  4 kali  untuk  ulangan  dan  4  perlakuan  (Steel and  Torrie  1991)  dengan  model  sebagai berikut :
Yij = µ + Ti + Eij
Yij = Respon atau nilai pengamatan dari perlakuan ke-i dan ulangan ke-j µ   =  Rata-rata (nilai tengahrespon) Ti    =  pengaruh  perlakuan  ke-i  yang akan kita uji
Eij = pengaruh galat percobaan dari perlakuan ke-i dengan ulangan ke-j Uji  lanjut  menggunakan  uji  Duncan’s. Analisis  statistik  menggunakan  program SPSS Ver.11,5.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  pendahuluan  dilakukan untuk  menentukan  nilai  ambang  atas    dan nilai  ambang  bawah.  Berdasarkan  hasil pengamatan  dapat  diketahui  bahwa  LC 50 ( Median  Lethal  Concentration ) 24  jam yaitu 243,22 mg/l. Hasil pengamatan waktu pingsan  ikan  uji  menunjukkan  semakin
tinggi  konsentrasi  minyak  biji  pala  maka semakin cepat waktu pingsan ikan uji.
Hasil  pengamatan  menunjukkan semakin tinggi konsentrasi minyak biji pala keadaan fisiologis ikan semakin terganggu. Semakin  lama  waktu  dedah,  ikan  uji bergerak  semakin  lambat.  Berdasarkan penelitian pendahuluan, diperoleh konsentrasi  minyak  biji  pala  yang  akan digunakan  pada  penelitian  utama  yaitu sebesar 75 mg/l, 100 mg/l,         125 mg/l, dan 150 mg/l.
Penelitian utama menghasilkan waktu  pingsan  ikan  nilem,  waktu  sadar ikan  nilem,  motilitas  spermatozoa  ikan nilem,  umur  sperma  ikan  nilem,  derajat pembuahan, derajat penetasan dan kelangsungan  hidup  larva  ikan  nilem, seperti yang disampaikan berikut ini.

## Waktu pingsan
Waktu  pingsan  merupakan  waktu yang  dibutuhkan    ikan  dalam  keadaan normal  sampai  ikan  mengalami  pingsan (Gambar 1).
Gambar 1. Rata-rata Waktu Pingsan Ikan Nilem
Senyawa miristisin yang tekandung dalam  minyak  biji  pala  sebagai  bahan pembius  yang  mudah  larut  dalam  air  dan lemak,  maka  proses  difusi  zat  pembius tersebut  ke  dalam  darah  melalui  insang terjadi  sangat  cepat.  Masuknya  bahan anastesi ke dalam sistem aliran darah akan disebarkan ke seluruh tubuh termasuk otak dan jaringan lainnya.
Bahan  anastesi  akan  menghambat kerja enzim sitokhrome yang menyebabkan penurunan pasokan oksigen dan glukosa ke
97,11 26,57 19,41 10,13 0 20 40 60 80 100 120 75 100 125 150 Perlakuan (mg/l) Waktu Pingsan (menit)
Penggunaan Minyak  Biji Pala Sebagai Bahan Anastesi …………. (Srie Rahayu dan Sanan)
otak.  Kurangnya  oksigen  dalam  jaringan otak menyebabkan ikan pingsan. Pada fase pingsan,  konsumsi  oksigen  dari  tiap individu ikan berada pada kadar dasar yang dibutuhkan ikan agar dapat hidup (Willford, 1970). Stadium pembiusan pada ikan dapat di lihat pada Gambar 2, Gambar 3, Gambar 4, dan Gambar 5.
Gambar 2. Stadium 1 (Hilangnya reaksi terhadap rangsangan luar)
Gambar 3. Stadium 2 (sebagian keseimbangan hilang) Keseimbangan  tubuh  ikan  uji  semakin cepat terganggu seiring dengan bertambahnya konsentrasi minyak biji pala. Hasil  pengamatan  menunjukkan  semakin tinggi konsentrasi minyak biji pala keadaan fisiologis ikan semakin terganggu.
Gambar 4. Stadium 3 (seluruh keseimbangan hilang)
Gambar 5. Stadium 4 (pingsan)
Semakin  lama  waktu  dedah,  ikan uji  bergerak  semakin  lambat.  Hasil pengamatan  menunjukan  bahwa  semakin tinggi  konsentrasi  minyak  biji  pala menyebabkan  waktu  pingsan  ikan  nilem semakin  cepat.  Hal  ini  dapat  dilihat  pada konsentrasi  75  mg/l  waktu  pingsan  97,11 menit yang lambat pingsannya dibandingkan  konsentrasi              100  mg/l, 125  mg/l  dan  150  mg/l  sebesar  26,57 menit, 19,40 menit, 10,13 menit, ini diduga berkaitan dengan kecepatan bahan anastesi untuk  berdifusi  ke  dalam  tubuh  yang menyebabkan terjadinya penyerapan bahan anastesi  ke  dalam  aliran  darah,  dengan demikian  maka  semakin tinggi  konsentrasi bahan  anastesi  semakin  cepat  hewan  uji memberikan  respon.  Sebaliknya,  difusi bahan  pembius  dengan  konsentrasi  rendah terjadi  secara  perlahan-lahan  ke  dalam tubuh melalui aliran darah sehingga respon pingsan lebih lama.

## Waktu Sadar Ikan Nilem
Waktu  sadar  merupakan  waktu yang  dibutuhkan  ikan  dalam  keadaan pingsan  sampai  ikan  kembali  dalam keadaan  normal.  Rata-rata  waktu  sadar ikan  nilem  dari  berbagai  konsentrasi minyak biji pala  disajikan pada Gambar 6.
Penggunaan Minyak  Biji Pala Sebagai Bahan Anastesi …………. (Srie Rahayu dan Sanan)
Gambar  6.  Rata-rata  Waktu  Sadar  Ikan
Nilem Hasil pengamatan menunjukan semakin tinggi konsentrasi minyak biji pala semakin  lambat  waktu  sadar  ikan  nilem. Hal  ini  dikarenakan  semakin  tinggi konsentrasi  dan  mudah  larutnya  bahan anastesi  minyak  biji  pala  dalam  air  dan lemak  maka  semakin  cepat  dan  banyak minyak  pala  yang  masuk  ke  dalam  sistem aliran  darah  yang  kemudian  akan  disebar ke  seluruh  tubuh  termasuk  otak  dan jaringan  lainnya,  sehingga  membutuhkan waktu  yang  lama  untuk  mengembalikan tubuh  ke  keadaan  normal  kembali.  Bahan anastesi  akan  menghambat  kerja  enzim sitokhrome yang  menyebabkan  penurunan pasokan  oksigen  dan  glukosa  ke  otak. Kurangnya  oksigen  dalam  jaringan  otak menyebabkan ikan pingsan.
Penggunaan minyak biji pala dalam proses  anastesi  induk  ikan  Nilem  dengan konsentrasi  150  mg/l  merupakan  konsen- trasi  terbaik  dibandingkan  dengan  konsen- trasi  75  mg/l,  100  mg/l  dan  125  mg/l. minyak  biji  pala  dengan  konsentrasi  150 mg/l memiliki waktu pingsan 608 detik dan waktu  pulih  sadar  paling  lama  yaitu  740 detik.
3. Umur Spermatozoa Ikan Nilem Rata-rata  umur  spermatozoa  ikan nilem dari berbagai konsentrasi minyak biji pala  disajikan pada Gambar 7.
Gambar 7. Rata-rata Umur Spermatozoa Ikan Nilem Lamanya spermatozoa motil dipengaruhi  oleh  umur  dan  kematangan spermatozoa,  temperatur  dan  faktor-faktor lingkungan  lain  seperti  ion-ion,  pH  dan osmolalitas.  Sebagian  besar  spermatozoa ikan  air  tawar  dapat  motil  tidak  lebih  dari 2-3  menit  setelah  bersentuhan  dengan  air (Fujaya, 2004). Hasil penelitian menunjukan,  bahwa  umur  spermatozoa terendah  adalah  268,5  detik  (4  menit  28 detik),  hasil  ini  lebih  besar  dari  hasil penelitian Fujaya (2004) yaitu spermatozoa ikan  air  tawar  dapat  motil  tidak  lebih  dari 2-3  menit.  Hal  ini  menunjukan  bahwa pemberian  minyak  biji  pala  sebagai  bahan anastesi tidak mempengaruhi umur spermatozoa ikan uji.

## Motilitas Spermatozoa Ikan Nilem
Motilitas merupakan parameter paling  umum  yang  digunakan  untuk mengevaluasi  kualitas  sperma  (Robert, 1995).  Rata-rata  motilitas  ikan  nilem  dari berbagai  konsentrasi  minyak  biji  pala disajikan  pada  Gambar  8.  Berdasarkan pengamatan    menunjukan  nilai  motilitas spermatozoa tertinggi dari beberapa konsentrasi  terdapat  pada  konsentrasi  75 mg/l.
894,75 739,25 268,50 983,50 0 200 400 600 800 1000 1200 75 100 125 150 Perlakuan (mg/l) Umur (detik) 17,5 84,5 118,5 740 0 100 200 300 400 500 600 700 800 75 100 125 150 Perlakuan (mg/l) Waktu Sadar (detik)
Penggunaan Minyak  Biji Pala Sebagai Bahan Anastesi …………. (Srie Rahayu dan Sanan)
Gambar 8. Rata-rata Motilitas Spermatozoa Ikan Nilem
Rendahnya motilitas sperma diduga karena  stress  pada  ikan  setelah  mengalami pengangkutan dan pemberian bahan anastesi pada proses pengangkutan, terutama  pada  ikan  yang  telah  matang gonad.  Menurut  Pickering  (1981)  stress dapat  berpengaruh  negatif  pada  ikan  yaitu mengurangi  kekebalan  tubuh,  resistensi terhadap  penyakit,  mengurangi  kualitas telur  dan  spermatozoa  dalam  viabilitasnya serta menghambat pertumbuhan.

## Derajat Pembuahan Telur Ikan  Nilem
Proses  pembuahan  pada  ikan  nilem bersifat  monospermik,  yaitu  hanya  satu sperma  yang  akan  melewati  mikrofil  dan membuahi sel telur, dan setiap spermatozoa memiliki  kesempatan  yang  sama  untuk membuahi satu sel telur (Effendie, 1997).
Rata-rata  derajat  pembuahan  ikan nilem dari berbagai konsentrasi minyak biji pala  disajikan pada Gambar 9.
Gambar 9. Rata-rata Derajat Pembuahan Ikan Nilem
Keberhasilan  fertilitas  bukan  saja ditentukan  dari  kualitas  telur,  tetapi  juga ditentukan  oleh  kualitas  spermatozoa. Berdasarkan  pengamatan  menghasilkan derajat pembuahan  yang bervariasi sekitar 29,21  %  -  38,07  %.  Derajat  pembuahan tertinggi rata-rata didapatkan pada perlakuan  100  mg/l.  Rendahnya  derajat pembuahan  diduga  karena  motilitas  yang rendah  akibat  stress  pada  ikan  setelah mengalami  pengangkutan  dan  pemberian bahan  anastesi.  Harvey  dan  Hoar  (1979) dalam Pangestuningtyas (1993), menyatakan bahwa kemampuan membuahi sperma tidak hanya dipengaruhi motilitasnya saja, tetapi sperma yang sudah mulai berkurang motilitasnya hanya mempunyai waktu singkat untuk membuahi. Menurut Fowler (1999), akibat stress  yang  berlangsung  lama  berimplikasi pada  penurunan  keefektifan  sistem  imun, sistem syaraf dan endokrin di dalam tubuh. Lebih lanjut, dinyatakan bahwa stress dapat menimbulkan  respon-respon  yang  tidak mempengaruhi  kesejahteraan,  kesenangan dan  reproduksi  hewan.  Menurut  Hawari (2001), stress dapat menimbulkan perubahan berbagai fungsi endokrin. Selye  (1973)  menjelaskan  bahwa  respon stress  melibatkan  sistem  endokrin  dalam hal    pengaturan  sistem  tubuh  oleh hipotalamus dan hipofisis, serta mempengaruhi hormon reproduksi.

## Derajat Penetasan Telur Ikan Nilem
Hasil penelitian menunjukan, bahwa semua perlakuan tidak menghasilkan  perbedaan  nyata  (P>  0,05) untuk  tingkat  kelangsungan  hidup  benih ikan  nilem.  Kelangsungan  hidup  berkisar 18,41-35,88  %.Rata-rata  derajat  penetasan telur  ikan  nilem  pada  semua  perlakuan disajikan  pada  Gambar  10. Dari  hasil pengamatan menunjukan bahwa rendahnya derajat  penetasan  telur  dipengaruhi  oleh motilitas sperma untuk membuahi sperma.
32,46 38,07 29,21 37,35 0 5 10 15 20 25 30 35 40 75 100 125 150 Perlakuan (mg/l) Derajat Pembuahan (%) 3,25 2,75 2,75 3,00 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5 5 75 100 125 150 Perlakuan (mg/l) Motilitas Sperma
Penggunaan Minyak  Biji Pala Sebagai Bahan Anastesi …………. (Srie Rahayu dan Sanan)
Gambar 10. Rata-rata Derajat Penetasan Ikan Nilem Kualitas sperma tersebut dipengaruhi  oleh  kondisi  stress  pada  ikan setelah  mengalami  pengangkutan  dan pemberian bahan anastesi sehingga mengganggu  reproduksi  ikan  tersebut. Menurut Tang dan Affandi (2002) semakin cepat embrio bergerak, maka akan semakin cepat  terjadi  penetasan.  Motilitas  yang rendah berakibat pada lambatnya penetasan telur,  sehingga  nilai  derajat  penetasan rendah.  Rendahnya  derajat  penetasan  telur disebabkan oleh kegagalan proses pembuahan,
yaitu kemampuan spermatozoa  untuk  mencapai  mikrofil  sel telur,  untuk  mencapai  mikrofil  maka motilitas sperma haruslah tinggi. Rendahnya  motilitas  sperma  akibat  stress pada ikan mengakibatkan rendahnya derajat penetasan telur (Subroto, 1986).
Hasil penelitian nilai derajat penetasan  menunjukan  konsentrasi  150 mg/l  merupakan  konsentrasi  terbaik  untuk derajat penetasan dibandingkan konsentrasi 75  mg/l,  100  mg/l  dan  125  mg/l  karena memiliki  nilai  derajat  penetasan  tertinggi yaitu 35,88 %.
7. Tingkat Kelangsungan Hidup Larva Ikan Nilem  berkisar  37,37-92,11  %.  Rata-rata tingkat  kelangsungan  hidup  larva  ikan nilem pada semua perlakuan disajikan pada Tabel  13  dan  Gambar  11.  Kualitas  sperma yang  dihubungkan  dengan  kelangsungan hidup  benih,  merupakan  hal  yang  sangat menarik  untuk  diteliti.  Kualitas  sperma dipengaruhi oleh karakteristik induk jantan, baik  secara  genetik,  stres,  kondisi,  ukuran tubuh,  masa  bereproduksi  dan  dengan pengecualian pada faktor genetik,
Gambar 11. Rata-rata Kelangsungan Hidup Ikan Nilem
Rendahnya  tingkat  kelangsungan hidup  disebabkan  oleh  faktor  dalam  dan faktor luar. Faktor dalam yaitu kemampuan ikan  untuk  menyesuaikan  diri  dengan lingkungannya,  kematian  alamiah  dan penyakit  serta  kualitas  sperma  untuk membuahi  sel  telur  yang  mengakibatkan kondisi  larva  yang  tidak  baik,  sedangkan faktor  luar  adalah  kualitas  air.  Motilitas merupakan  parameter  paling  umum  yang dipergunakan  untuk  mengevaluasi  kualitas sperma  (Robert,  1995).  Data  yang  ada menunjukkan adanya korelasi positif antara kualitas  sperma  dan  kelangsungan  hidup larva.  Rendahnya  derajat  kelangsungan hidup  larva  diduga  karena  kualitas  sperma yang  kurang  baik,  dapat  dilihat  dari motilitas  yang  rendah.  Hal  ini  diduga karena kondisi ikan jantan yang menghasilkan  sperma  dalam  kondisi  stress setelah  mengalami  pengangkutan  dan pemberian  bahan  anastesi  dalam  proses pengangkutan.    Menurut  Hepher  dan Pruginin  (1984),  ikan-ikan  yang  masih berukuran benih akan lebih rentan terhadap penyakit dan penanganan yang kurang hati- hati  dalam  proses  pemeliharaan  dapat menurunkan  tingkat  kelangsungan  hidup ikan.  Hasil  penelitian  menunjukan  bahwa penggunaan minyak biji pala dalam proses anastesi induk ikan Nilem dengan konsentrasi 150 mg/l merupakan konsentrasi  terbaik  karena  memiliki  nilai kelangsungan  hidup  larva  tertinggi  yaitu
44,74 37,37 75 92,11 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 75 100 125 150 Perlakuan (mg/l) Kelangsungan Hidup (%) 18,41 20,7 20,31 35,88 0 5 10 15 20 25 30 35 40 75 100 125 150 Perlakuan (mg/l) Derajat Penetasan (%)
Penggunaan Minyak  Biji Pala Sebagai Bahan Anastesi …………. (Srie Rahayu dan Sanan)
92,11  %  dibanding  konsentrasi  75  mg/l, 100 mg/l dan 125 mg/l.

## KESIMPULAN
1.  Minyak  biji  pala  mengandung  senyawa miristisin yang dapat digunakan sebagai bahan pembius ikan.
2.Berdasarkan hasil analisis probit diperoleh  nilai  LC 50 minyak  biji  pala terhadap  ikan  nilem    ( Osteochilus hasselti, C.V)  pada  pemaparan  24  jam adalah    243,22 mg/l.
3.Semakin  tinggi  konsentrasi  minyak  biji pala  menyebabkan  waktu  pingsan  ikan nilem semakin cepat, konsentrasi terendah  (75  mg/l)  waktu  pingsan  97,11 menit  sedangkan  konsentrasi  tertinggi (150  mg/l)  menghasilkan  waktu  pingsan 10,13  menit.  Sedangkan  untuk  waktu sadar  semakin tinggi konsentrasi minyak biji pala semakin lambat waktu sadar ikan nilem,  konsentrasi  terendah  (75  mg/l) waktu  sadar  17,50  detik  sedangkan konsentrasi tertinggi (150 mg/l) menghasilkan waktu sadar 740,00 detik.
4.Konsentrasi 150 mg/l merupakan konsentrasi terbaik karena waktu pingsan tercepat  serta  nilai  derajat  penetasan  dan nilai  kelangsungan  hidup  larva  tertinggi. Minyak  biji  pala  berpengaruh  terhadap kualitas sperma.

## DAFTAR PUSTAKA
Dharma,  L.,  Abdul,  W.,  Zafril,  I.,  dan Yosmaniar.  2004. Penelitian  Teknik Transportasi  dan  penanganan  Pasca ransportasi  Ikan  Betutu  untuk  Menekan Mortalitas .  Laporan  Hasil  Riset.  Balai
Riset  Perikanan  Budidaya  air  Tawar.
Bogor. hlm. 209-215.
Effendie, M.I. 1979. Metode Biologi Perikanan. Yayasan Dewi Sri. Bogor.
Effendie,  M.I.  1997. Biologi  Perikanan . Yayasan Pustaka Nusatama. Yogyakarta. 163 hlm.
Fowler.  M.E.  1999 .  Zoo  and  Wild  Animal Medicine .  Ed  ke-4.  W.B.  Saunders
Company. Philadelphia. hlm 34-35.
Fujaya, Y. 2004. Fisiologi Ikan . Rineka Cipta. Jakarta. 179 hlm.
Hawari,  D.  2001. Manajemen  Stres,  Cemas dan Depresi . Fakultas Kedokteran Universitas  Indonesia.  Jakarta.  hlm  28- 109.
Hepher  and  Pruginin.  1984. Commercial  Fish Farming,  with  the  Special  Reference  to Fish  Culture  in  Israel. Jhon  Willey  and Sons. New York. 261p.
Pangestuningtias,  J.W.  (1993). Study  tentang Pengaruh Radiasi Sinar Ultra Violet dan Waktu  Penyimpanan  Sperma  Ikan  Mas ( Cyprinus carpio L) Terhadap Persentase  Pembuahan  dan  Persentase Penetasan  Telur. Fakultas  Peternakan, Universitas Dipenogoro, Semarang.
Pickering,A.D. 1981. Stress and Fish . Academic Press. London. 367 Pp.
Pratiwi,  T.  2000. Pengkajian  Pengaruh Pembiusan  dengan  Minyak  Biji  Pala pada  Ikan  Nila  (Oreochromis  niloticus) Gift dan Penerapannya dalam Pengangkutan .  Tesis.  Program  Studi Teknologi  Pasca  Panen.  Program  Pasca Sarjana IPB. Bogor.
Roberts,  R.  J.  1995. Sperm  Physiology  and quality .
Dalam :
Broodstock Management  and  Egg  and  Larval Quality .  Bromage,  N.  R  (Eds).  Institute of  Aquaculture,  University  of  Stirling. Scotland. hlm 25-52.
Selye,  H.  1973.  Studies  on  Adaptation. Endocrinology 21. hlm 169-188.
Steel, R. G. D., dan Torrie, J. H. 1991. Prinsip dan Prosedur Statistika . Suatu Pendekatan Biometrik. Edisi  II. Penerbit Gramedia.  Jakarta.  hlm.234  dan  688- 702.
Subagja,  J.,  Rudhy,  G.,  dan  Hidayat,  D.  2006. Penentuan  Dosis  Hormon  Steroid  dan Teknik Pemberian untuk Feminisasi Ikan Nilem ( Osteochilus hasselit C.V). Laporan Hasil Riset. Balai Riset
Penggunaan Minyak  Biji Pala Sebagai Bahan Anastesi …………. (Srie Rahayu dan Sanan)
Perikanan  Budidaya  air  Tawar.  Bogor. hlm. 300-310.
Subroto,  N.  1986.  Pengaruh  temperature Terhadap  Masa  Inkubasi  dan  Derajat Penetasan Telur Ikan Mas Koki (Carassius auratus). Fakultas Peternakan. Universitas Dipenogoro. 40 hlm. Tang,  U.  M.  dan  Affandi.  2002. Fisiologi
Hewan Air. Unri Press. Pekan Baru. hlm 172-195.
Willford,  W.A.  1970. Effect  of  MS-222  on Electrolyte  and  Water  Content  in  the Brain  of  Rainbow  Trout. Us  Bureau  of Sport Fisheries and Wild Life Investigation in Fish Control.