## Tanjung Subrata
Bagian Fisiologi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Warmadewa, Denpasar Email: tanjung.subrata@gmail.com

## Abstrak
Penurunan  kadar  testosteron  pada  laki-laki  mulai  usia  pertengahan  antara  45-59  tahun  dan menyebabkan terjadinya ganguan seperti menurunnya kekuatan otot, meningkatnya lemak visceral, gangguan fungsi  seksual  seperti  libido  menurun  dan/atau  disfungsi  ereksi.  Akupunktur  dengan  konsep  pengobatan hantaran  rangsang  dapat  digunakan  untuk  meningkatkan  fungsi  seksual  laki-laki.  Pada  penelitian  ini  diteliti pengaruh  perangsangan  pada  titik  akupunktur  no.16  dan  49  terhadap  kadar  hormon  testosteron  pada  mencit (Mus  musculus)  yang  telah  mengalami  proses  penuaan.    Sebanyak  28  ekor  mencit  jantan  usia  9  bulan dijadikan  binatang  coba.  Binatang  coba  dibagi  menjadi  empat  kelompok  eksperimen  secara  random. Kelompok 1 diberikan rangsangan pada  titik akupunktur no.16, kelompok 2 diberikan rangsangan pada  titik akupunktur  no.49  dan  kelompok  3  diberi  rangsangan  pada  titik  akupunktur  no.16  dan  49,  dan  kelompok  4 sebagai kontrol. Perlakuan diberikan selama 10 menit, diulang sebanyak tiga  kali per minggu, dan diberikan selama empat  minggu. Kadar hormon testosteron diukur dari sampel darah mencit setelah perlakuan selesai. Perbedaan rerata kadar hormon testosterone antar kelompok eksperimen diuji dengan uji Kruskal-Wallis dan Man-Whitney  pada  tingkat  kemaknaan  a=0,05.  Hasil  penelitian  menunjukan  rerata  (±sd)  kadar  hormon testosteron pada kelompok 1, 2, 3, dan 4 adalah 815,0 (±568,8) ng/dl,   229,5 (±337,4) ng/dl, 538,2 (±715,0) ng/dl, dan 50,8 (±32,2) ng/dl secara berurutan. Analisis Mann-Whitney menunjukan bahwa  kadar testosteron kelompok  eksperimen  1  berbeda  dengan  kelompok  lain  dan  control  (P<0,05).  Sehingga  dapat  disimpulkan bahwa  pemberian  rangsangan  pada  titik  akupunktur  no.16  meningkatkan  kadar  hormon  testosteron  mencit secara signifikan.
Kata Kunci: akupunktur, hormon testosteron, mencit tua
Abstract
[Stimulation on Acupuncture Point Number 16 Increases Testosterone Hormone Level in Nine-Month-old Male Mice].
Decreasing level of testosterone in man starts at the age between 45-59 years which causes disorders such as decreased muscle strength, increased visceral fat, sexual dysfunction such as decreased libido and / or erectile dysfunction. Acupuncture with excitatory conduction treatment concept can be used to enhance male sexual  function.  In  this  study  we  examined  the  effect  of  stimulation  of  acupuncture  points  no.16  and  49  on testosterone levels in mice (Mus musculus) who are aging. A total of 28 male mice aged 9 months were used as experimental animals. The  experiment animals were  divided into four groups randomly. Group 1 was given stimulation of acupuncture  pointno.16, group 2 was given stimulation of acupuncture  point 49 and group 3 was given stimulation of acupuncture points no.16 and 49, and group 4 as the control group. Treatment was given for 10 minutes, repeated three times per week, for four weeks. Testosterone levels were measured from blood  samples  of  mice  after  treatment  was  completed.  The  mean  differences  of  testosterone  levels  between experimental groups were tested by Kruskal-Wallis and Man-Whitney at significance level a =0.05. The results showed    the  mean  (±sd)    of  testosterone  levels  in  group  1,  2,  3, and 4    were  815.0  (±568.8)  ng  / dl,  229.5 (±337.4) ng/dl, 538, 2 (±715,0) ng / dl, and 50.8 (±32.2) ng / dl, respectively. Mann-Whitney analysis showed that testosterone level of group 1 was different from those of the other groups and the control (P<0.05). It is concluded that stimulation of acupuncture pointno.16 increases testosterone levels in mice significantly.
Keywords: acupuncture, testosterone hormone, aging mice
WMJ (WARMADEWA MEDICAL JOURNAL), Vol. 1 No. 1 Mei 2016, Hal. 24-29

## Rangsangan Titik Akupunktur Nomer 16 Meningkatkan Kadar Hormon Testosteron Mencit Jantan Usia Sembilan Bulan

## PENDAHULUAN
Hormon kelamin pria atau yang lebih dikenal  sebagai  testosteron  adalah  hormon yang  diproduksi  oleh  organ  testis. [1] Kadar hormon  testosteron  mengalami  penurunan mulai usia pertengahan yaitu antara usia 45- 59  tahun.  Penurunan  hormon  testosteron yang  disertai  penurunan  fungsi  reproduksi adalah  merupakan aging  process ,  yang menyebabkan  menurunnya  massa  dan kekuatan  otot,  libido,  dan  frekuensi hubungan  seksual. [2,3] Penurunan  kadar testosteron  ini  dapat  diatasi  dengan pemberian
Testosterone Replacement
Therapy (TRT),  yang  dalam  berbagai  uji klinis  memberikan  hasil  yang  cukup memuaskan,  tapi  TRT  juga  memiliki beberapa  kelemahan  selain  harga  yang relatif  mahal  dan  pemberian  yang  terus menerus juga memiliki kontraindikasi  pada kanker prostat. [4,5]
Akupunktur  adalah  suatu  metode terapi  dengan  konsep  hantaran  rangsangan, yang  berasal  dari  daratan  China,  dan  telah berkembang  sekitar  5000  tahun  yang  lalu. Fenomena  hantaran  rangsang  dari  suatu area di  tubuh,  tidak terlepas dari terjadinya hantaran  rangsang  pada  daerah  perlakuan, yang  disebut  sebagai  sinyal  transduksi. [6] Terjadinya  migrasi  isotop  teknesium perteknetat  (sinar  gamma)  melalui  sinyal tranduksi  intraseluler  dan  timbulnya gambaran  cacah  yang  tinggi  pada  organ testis  ipsilateral  dari  tempat  suntikan  pada titik Ki. 3 orang coba. Titik akupunktur Ki- 3  pada  manusia  analog  dengan  titik akupunktur  no.  49  pada  mencit.  Titik akupunktur  no.  49  merupakan  hantaran rangsangan dari kaki melalui jalur meridian ke  testis. [7] Titik  akupunktur  no.  16 merupakan hantaran rangsangan dari spinal menuju thalamus (spino thalamikus trak.). [8] Adikara  membuktikan  adanya  rangsangan tersebut  akan  mempengaruhi  sekresi hormon-hormon hipothalamus-pituitari. [8]
Pada  paper  ini  dibahas  efek akupunktur,  khusunya  perangsangan  titik akupunktur  no.  16  dan  49  terhadap  kadar hormon  testosteron  pada  mencit  jantan. Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  pengaruh  perangsangan  titik
akupunktur  no  16  dan  49  terhadap peningkatan  kadar  testosteron  dengan hipotesis  yang  ingin  dibuktikan  adalah perangsangan  titik  akupunktur  no.  16  atau no  49  dapat  meningkatkan  kadar  hormon testosteron  mencit jantan usia 9 bulan.

## METODE
Penelitian eksperimental dengan rancangan Randomized  post  test  only control  group  design dilakukan  pada  28 ekor  mencit  (Mus  musculus)  jantan  usia  9 bulan  dengan  berat  badan  antara  35-40 gram  dan  memiliki  panjang  badan  mulai dari  pangkal  ekor  sampai  ujung  hidung antara 8-10 cm. [9] Mencit pada usia tersebut telah  mengalami  proses  penuaan. [10] Pada penelitian ini, binatang coba dibagi menjadi 4  kelompok,  yaitu  3  kelompok  perlakuan dan  1  kelompok  kontrol.  Kelompok  1  (P1) diberikan rangsangan akupunktur pada titik akupunktur  no.16,  kelompok  2  (P2) diberikan  rangsangan akupunktur pada titik akupunktur  no.49,  kelompok  3  (P3) diberikan  rangsangan akupunktur pada titik akupunktur no.16 dan no.49, dan kelompok 4  (P4)  adalah  kontrol  yang  diberikan rangsangan  akupunktur  pada  jarak  1  cm sebelah lateral dari titik akupunktur no. 16.
Perlakuan  perangsangan  akupunktur pada  titik  akupunktur  16  dilakukan  dengan cara  menusukan  jarum  akupungkur  pada titik  akupunktur  di  garis  tengah  punggung antara  vertebra  lumbal  IV  dan  V  dengan kedalaman  2-3  mm.  Perangsangan  titik akupunktur  no.  49  dilakukan  dengan menusukan  jarum  akupunktur  ke  dalam musculus  flexor  digitalis  longus  pedis  dan tendon achiles dengan ke dalaman 2-3 mm, yang  merupakan  titik  akupunktur  kaki belakang  yang  terletak  pada  tepi  kaudal maleolus  medialis. [11,12] Perangsangan akupunktur  dilakukan  dengan  prosedur: mencit diletakkan pada  papan dan difiksasi dengan  kawat  jaring,  dilakukan  persiapan daerah  uji  dengan  pembersihan  bulu, disinfeksi  dengan  Etanol  70%,  kemudian ditusukan jarum akupunktur 38G  sedalam 2 -3mm  pada  titik  akupunktur  sesuai  dengan perlakuan.  Perangsangan  dilakukan  selama 10  menit  dan  dilakukan  sebanyak  tiga  kali
WMJ (WARMADEWA MEDICAL JOURNAL), Vol. 1 No. 1, Mei 2016, Hal. 25
WMJ (Warmadewa Medical Journal), Vol.1, No.1, Mei 2016, p-ISSN 2527-4627 DOI: 10.22225/wmj.1.1.7.24-29.
dalam seminggu. Kadar hormon testosteron diukur dari sampel  darah  vena  yang  diambil  dari  ekor mencit  setelah  perlakuan  selesai.  Kadar hormon  testoteron  diperiksa  dengan  teknik radioimmunoassay  yang  dilakukan  di laboratorium Kebidanan Fakultas Kedokteran  Hewan  Universitas  Airlangga Surabaya. Data  kadar  hormone  testosteron  dari setiap kelompok eksperiemen tidak berdistribusi  normal  (uji  KS:  P<0,05)  dan tidak  homogen  (levene’s  test:  p<0,05), maka  perbedaan  rerata  kadar  hormon tertosteron  diuji  dengan  uji  Kruskal-Wallis dan dilanjutkan dengan   uji Mann-Whitney pada tingkat kemaknaan a=0,05.

## HASIL
Dari 28 mencit yang diteliti, sebanyak 24  (85,7%)  dapat  menyelesaikan  penelitian dan  1  ekor  dari  masing-masing  kelompok mati sebelum penelitian selesai.
Tabel  1.  Perbedaan  kadar  hormon  testosteron  antar kelompok eksperimen
perangsangan  pada  titik  akupunktur  no.  16 yang memberikan efek peningkatan bermakna,  seperti  yang  disajikan  pada Tabel 2.
Tabel  2.  Analisis  perbedaan  kadar  testosteron  antar kelompok eksperimen
WMJ (WARMADEWA MEDICAL JOURNAL), Vol. 1 No. 1, Mei 2016, Hal. 26
Kelompok Perlakuan n Rerata (±sd) Nilai P (Kruskal -Wallis) P1 6  815,0 (±568,8) 0,041 P2 6  229,5 (±337,8) P3 6  538,2 (±715,0) P4 6 50,8 (  ±32,2) Ket:  P1: titik akupunktur no.16 P2: titik akupunktur no.49 P3: titik akupunktur no.16 dan 49 P4: kontrol
Hasil  analisis  perbedaan  rerata  kadar hormon testosteron antar kelompok eksperimen  seperti  yang  disajikan  pada Tabel  1,  menunjukan  bahwa  paling  sedikit ada  satau  kelompok  eksperimen  yang memiliki  kadar  hormon  testosteron  yang berbeda  dengan  kelompok  eksperimen lainnya  (p<0,05).  Dari  hasil  analisis perbedaan antar kelompok dengan uji Mann -Whitney  didapatkan  bahwa  perangsangan akupunktur pada titik akupunktur no.16 dan 49  memberikan  efek  peningkatan  kadar hormon  testosteron,  akan  tetapi  hanya
Kelompok yang dibandingkan Beda rerata (ng/dl) Nilai p (Mann- Whitney) P1-P4 746,2 0,016 P2-P4 178,7 0,150 P3-P4 487,4 0,065 P1-P2 585,5 0,065 P1-P3 276,8 0,423 P2-P3 -308,7 0,337
Hasil  uji  statistik  dengan  uji  Mann Whitney  menunjukan,  bahwa  pemberian rangsangan  titik  akupunktur  no.  16  (P1) pada  mencit  jantan  usia  sembilan  bulan selama  4  minggu,  dapat  meningkatkan kadar  hormon  testosteron  mencit  jika dibandingkan dengan kontrol secara bermakna  (p<0,05).  Sedangkan  rangsangan titik  akupunktur  no.  49  (P2)  dan  titik akupunktur  no.16  dan  no.49  (P3),  pada mencit jantan usia sembilan bulan selama 4 minggu terdapat peningkatan rata-rata kadar hormon testosteron mencit jika dibandingkan  dengan  kontrol  (P4),  tapi tidak  signifikan  (p>0,05).  Tidak  terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok perlakuan  P1  dengan  P2,  perlakuan  P1 dengan  P3,  dan  kelompok  perlakuan  P2 dengan P3.

## DISKUSI
Testosteron  adalah    hormon  kelamin pria  yang  diproduksi  oleh  organ  testis. Produksi testosteron oleh testis dipengaruhi oleh  Luteinizing  Hormone  (LH)  dan Follicle  Stimulating  Hormone  (FSH)  yang dihasilkan  oleh  kelenjar  Hipofise.  LH mempengaruhi sel Leydig pada testis untuk memproduksi testosterone. [1] Kelenjar
Hipofise anterior dipengaruhi oleh hipothalamus, di mana low frequency pulse akan merangsang pelepasan FSH.
WMJ (Warmadewa Medical Journal), Vol.1, No.1, Mei 2016, p-ISSN 2527-4627 DOI: 10.22225/wmj.1.1.7.24-29.
Sebaliknya, high  frequency  pulse akan merangsang  pelepasan  LH [13] .  Kadar  FSH dan  LH  selalu  pada critical  range karena adanya feed back mechanism. [1] Penurunan  hormon  testosteron  pada pria lanjut usia (lansia) dikarenakan adanya gangguan  fungsi  dan  penurunan  aktivitas sel  Leydig pada testis, gangguan pada feed back  mechanism pada Hipothalamic- Pituitary-Testis  axis ,  gangguan  irama circadian,  dan  menurunnya bioavailability dari  hormon  seks.  Rata-rata  penurunan hormon  testosteron  pada  lanjut  usia  adalah 1%-2% setiap tahunnya. [3] Titik akupunktur merupakan kumpulan  sel  yang  berbeda  aktivitas listriknya dibanding dengan sel di luar titik akupunktur.  Titik  akupunktur  mempunyai tegangan listriknya tinggi dengan hambatan rendah  dan  memiliki  aktifitas  migrasi  ITP (Isotop  Teknesium  Perteknetat)  yang  aktif.
[14]
Secara konseptual, akupunktur merupakan  suatu  cara  pengobatan  yang memanfaatkan  rangsangan  pada  titik-titik akupunktur  sehingga  mempengaruhi  aliran bioenergi  dalam  tubuh. [15] Ada  empat  cara kerja  rangsangan  titik-titik  akupunktur dalam mempengaruhi keseimbangan homeostasis  tubuh  dapat  dijelaskan  dengan empat  cara  yaitu:  melalui  reaksi  inflamasi local,  reflek  somato  visceral,  transmisi neural  melalui  jalur  neuro  akupunktur,  dan transmisi interseluler melalui jalur meridian. [8] Rangsangan  pada  titik  akupunktur akan  menginisiasi  proses  tranduksi  dengan mengubah  potensial  membran  ujung  sel saraf dan menghasilkan potensial aksi yang kemudian  diteruskan  ke  sistem  saraf  pusat. Hantaran  rangsang  tersebut  diteruskan  ke sentral  melalui  tractus  ascenderen  seperti tractus  spinothalamicus,  spinoreticularis, dan  spinomesencephalicus. [16] Rangsangan akupunktur  tersebut  akan  menimbulkan efek  langsung  pada  sistem  parakrin  dan autokrin  dari  steroidogenesis  dengan menstimulasi  produksi  dan  pelepasan epineprin,  norepineprin  (NE),  serotonin  (5- HT),  gamma  amino  butyric  acid  (GABA), growth  factors ,  LH  dan  FSH. [13,17]
Peningkatan  kadar  LH  akan  menimbulkan rangsangan  pada  sel  Leydig  testis  untuk memproduksi hormon testosteron. [1]
Pada  penelitian  yang  menggunakan isotop teknesium perteknetat yang disuntikkan pada titik akupunktur mempunyai gambaran migrasi yang spesifik dibanding  dengan  jaringan  di  luar  titik akupunktur, pada sinyal transduksi ternyata tidak  hanya  mengalirkan  elektron  tapi  juga materi  selular  yang  dilabel  dengan  isotop teknesium  perteknetat  (ITP).  Terjadinya migrasi  isotop  teknesium  perteknetat  (sinar gamma)  tidak  melalui  pembuluh  darah maupun kelenjar getah bening tetapi melalui sinyal  tranduksi  intraseluler  dan  timbul gambaran  cacah  yang  tinggi  pada  organ testis  ipsilateral  dari  tempat  suntikan  pada titik  Ki.  3  orang  coba.  Rangsangan  pada lokasi titik akupunktur sebagai  sekelompok sel aktif listrik, akan menimbulkan aktivitas yang  khusus  bagi  kumpulan  sel  tersebut berupa  depolarisasi  ion,  stimulasi  rRNA, aktivasi  mRNA  dan  proses  sintesa  protein berlangsung,  kemudian  terjadi  mekanisme komunikasi  antar  sel  melalui  sistim transformasi  dan  informasi  dengan  C-AMP atau  dengan  transfer  desmosom  melalui jembatan antar sel sehingga akan meningkatkan  respon  selular  pada  target organ yaitu testis. [15] Titik akupunktur Ki. 3 pada manusia analog dengan titik akupunktur no. 49 pada mencit. [11,12] Hasil beberapa penelitian sebelumnya juga  memberikan  hasil  yang  serupa  seperti yang dilakukan Adikara [8] dan Rachmawati [18] yang  menggunakan  hewan  coba  kelinci jantan  usia  3  bulan  dengan  perlakuan rangsangan  pada  titik  akupunktur  no  16 yang  menghasilkan  peningkatan  kadar hormon testosteron.
Adapun  kelemahan  penelitian  ini adalah  pada  penusukan  titik  akupunktur no.49  (P2)  di  daerah  kaki  mencit,  mencit- mencit tersebut cenderung lebih  iritatif dan meronta-ronta  selama  proses  penusukan dibandingkan  dengan  penusukan  pada  titik akupunktur no.16 (P1) di daerah punggung. Gerakan-gerakan mencit tersebut mengakibatkan terjadinya pergeseran tusukan  jarum  akupunktur  dari  titik
WMJ (WARMADEWA MEDICAL JOURNAL), Vol. 1 No. 1, Mei 2016, Hal. 27
WMJ (Warmadewa Medical Journal), Vol.1, No.1, Mei 2016, p-ISSN 2527-4627 DOI: 10.22225/wmj.1.1.7.24-29.
akupunktur  yang  seharusnya,  dan  akibat pergeseran  tersebut  akan  mengurangi efektifitas  dari  rangsangan  akupunktur. Selain  faktor  tersebut  diatas,  faktor  stress selama  perlakuan  penusukan  jarum  pada mencit  dapat  mempengaruhi  kadar  hormon testosteron  mencit,  di  mana  stress  akan merangsang  pelepasan  hormon  kortisol yang  berakibat  negatif  pada  kadar  hormon testosteron.
Dari  hasil  penelitian  di  atas  dapat dipertimbangkan
penggunaan
terapi akupunktur, terutama titik akupunktur no.16 pada  manusia,  baik  sebagai  terapi  utama ataupun  sebagai  terapi  komplemen  dalam mengatasi  gangguan-gangguan  fisik  yang dikarenakan  penurunan  kadar  hormon testosteron,  sebagai  akibat  proses  penuaan atau aging  process ,  dengan  biaya  yang relatif  terjangkau  dan  efek  samping  yang minimal.

## KESIMPULAN
Dari  penelitian  ini  dapat  disimpulkan bahwa pemberian perangsangan akupunktur pada  titik  akupunktur  no.16  selama  10 menit,  yang  diberikan  sebanyak  3  kali seminggu  selama  4  minggu,  dapat meningkatkan  kadar  hormon  testosteron pada  mencit  jantan  usia  9  bulan  dengan peningkatan  yang  signifikan.  Sebaliknya, perangsangan  akupunktur  yang  diberikan pada  titik  akupunktur  no.  49  dengan  dosis yang  sama,  memberikan  peningktan  yang tidak sigifikan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis menyampaikan ucapan terima kasih  kepada  semua  pihak  yang  telah membantu  dalam  pelaksanaan  penelitian ini.  Secara  khusus  penulis  menyampaikan ucapan terima kasih kepada Prof. Dr. dr. J. Alex  Pangkahila,  M.Sc.,  Sp.And.,  Dr. Koosnadi Saputra, MD., dan Prof. drh. Laba Mahaputra  atas  kontribusinya  selama penelitian dan penulisan artikel ini.

## DAFTAR PUSTAKA
1.  Daryl  K.G.,  1992.  Hormon  kelamin. In: Harper’s Review of Biochemistry, Martin  D.W.  et  all.  EGC  Penerbit
Buku Kedokteran. Hal. 634-647.
2.  Dotson  A.,  2003.  Methods  of Testosterone  Supplementation  for Man  and  Women.  Men’s  Health Abstracts, December 2003.
3. Kaufman  J.M.,  Vermeulen  A.,  2005. The  Decline  of  Androgen  Levels  in Elderly  Men  and  Its  Clinical  and Therapeutic  Implication.  Endocrine Reviews  26  (6):                833-876. Copyright  ©  2005  by  The  Endocrine Society.  Published  online  ahead  of print  May  18,  2005.  Available  from: http://edrv.endojournals.org/cgi/ content/short/er/2004_00/3vi.  Access: 01/02/2006
4. Arsyad  K.M.,  2002.  Problem  pria lansia  dari  aspek  andrologi.  Dalam Majalah  Andrologi  Indonesia,  No1, Maret.
5.  Pangkahila  A.,  2002.  Disfungsi seksual  pada  pria  andropause.  Dalam Buku  Acara  dan  Kumpulan  Abstrak, Pertemuan  Ilmiah  Tahunan  XIV Perkumpulan Andrologi Indonesia 18- 19  Juli  dan  Kongres  Nasional  I Asosiasi  Seksologi  Indonesia  20-21 Juli. 6.  Saputra  K.,  1994.  Penelitian  Ilmiah Akupunktur Untuk Menunjang Konsep Bio Energi dalam Pengembangan Teknologi Kedokteran.  Majalah  Kedokteran Indonesia. 44: 45-50. 7. Saputra K., 1992. Acupoints Scintigraphy. Tracing Meridian Acupuncture Corresponding Organ by Radionucleide  Technique.  Bali.  AAR VII, September.
8. Saputra K. , Idayanti A., Budiyanto D., Prihatin,  2000.  Penelitian  Faal Akupunktur. Dalam Akupunktur dalam Penendekatan Ilmu Kedokteran.  Airlangga  Univercity Press. Surabaya.
9. Arnitage  P.,  Berry  G.,  Matthews J.N.S.,  2002.  Statistical  Methods  in Medical  Research.  Fourth  Edition. Massachusetts.  Blackwell  Publishing Company.
WMJ (WARMADEWA MEDICAL JOURNAL), Vol. 1 No. 1, Mei 2016, Hal. 28
WMJ (Warmadewa Medical Journal), Vol.1, No.1, Mei 2016, p-ISSN 2527-4627 DOI: 10.22225/wmj.1.1.7.24-29.
10. Smith J.B., Mangkoewidjojo S., 1988.
Pemeliharaan, Pembiakan dan Penggunaan  Hewan  Percobaan  di Daerah Tropis.  Jakarta.  UI Press: 84-
110.
11. Chuan  Y.,  1987.  Origin  and Development  of  The  Traditional Chinese  Veterinary  Acupucture  and Its  Therapeutic  Effect.  International Conference on Veterinary Acupuncture.  Beijing-China.  Beijing Agriculture University. May: 15-18. 12.  Anonymous,  1975.  Hand  book  on Chinese  veterinary  David  CC.  and WC.  Dorothy.  The  principle  of Chinese  acupucture  medicine  life science medical laboratory. Hongkong. 13.  Lovejoy  D.A.,  2005.  Reproduction. In: Neuroendocrinology An Integrated  Approach.  London.  John Wiley & Sons, Ltd. 14.  Saputra  K.,  1997.  Titik  Akupunktur sebagai  Kumpulan  Sel  Aktif  Listrik.
Meridian 4: 80-87.
15.  Saputra  K.,  1999.  Profil  Tranduksi Rangsangan Titik Akupunktur Oryctolangus  Cuniclus.  Disertasi. Program  Pasca  Sarjana  Universitas Airlangga. Surabaya.
16.  Sudirman  S.,  2005.  Neuro  Fisiologi Nyeri.  Dalam  Penanganan  Nyeri dengan  Neuro  Akupunktur.  LP3A- Puslitbang  Yantekkes  Depkes  RI. Surabaya.
17. Jen  H.I.,  Wing  W.C.,  Leang  S.W., 2001.  Acupucnture  for  Reproductive Disorder.  In:  Veterinary  Acupuncture Ancient  Art  to  Modern  Medicine, Allen  M.  Schoen.  Second  Edition. London. Mosby.
18. Rachmawati,  N.  1993.  Pengaruh tindakan akupunktur terhadap perubahan  kadar  hormon  testosteron kelinci  (Orytolagus cuniculus) jantan. [Skripsi]. Surabaya Universitas Airlanga. Fakultas Kedokteran Hewan. WMJ (WARMADEWA MEDICAL JOURNAL), Vol. 1 No. 1, Mei 2016, Hal. 29