## EKSTRAK GETAH PEPAYA SEBAGAI AUTOLITIK DEBRIDEMENT LUKA KRONIS
(Sap Extract Papaya for Autolitic Debridement Chronic Wound)
Tri Johan Agus Yuswanto*, Tanto Hariyanto* *Poltekkes Kemenkes Malang, Jl. Besar Ijen No.77C, Klojen, Kota Malang, Jawa Timur, 65119, Tel. (0341) 551893 Email: denbagusjohan@yahoo.co.id

## ABSTRAK
Pendahuluan: Mahalnya obat-obatan atau dressing luka yang spesifik untuk luka kronis yang minimal bisa sembuh dalam dua minggu bergantung pada stadium luka dan kadar gula darah. Berdasarkan hal inilah perlu adanya suatu inovasi pengolahan sumber daya alam (SDA) untuk menghasilkan suatu produk perawatan luka kronis yang bisa dijangkau oleh semua kalangan. Salah satu yang sedang trend saat ini adalah dengan menggunakan enzim protease (ekstrak getah papaya) yang berfungsi sebagai autolitik debridement pada perawatan luka kronis. Tujuan penelitian ini adalah mengidentifikasi karakteristik enzim protease yang terdapat dalam getah papaya. Metode: Desain penelitian yang digunakan merupakan deskriptif eksploratif dengan melakukan pure ekstrak enzim protease getah pepaya. Hasil: Hasil pengukuran berat molekul dengan menggunakan kit Pre-stained Protein Markers (Broad Range) for SDS PAGE. Nacalai tesque No produksi 02525 diperoleh hasil berat molekul yang homogen dengan gambaran diatas sedikit dari 28 kD. Hasil pengukuran kadar enzim menggunakan kit NanoDrop Spectrophotometer ND-1000, dengan marker aquades, diperoleh hasil relatif homogen dengan rentang antara 43–61% dengan rata-rata 53,88%. Hasil penambahan ekstrak papain ke dalam masing-masing tabung reaksi yang berisi 7 ml gelatin diperoleh hasil: kelompok kontrol terdapat penggumpalan sempurna pada gelatin; kelompok dengan penambahan 2 tetes (± 0,5 ml) didapatkan hasil, gelatin terhidrolisis 50%; kelompok dengan penambahan 4 tetes (± 0,5 ml) didapatkan hasil, gelatin terhidrolisis 75%. Diskusi: Aktivitas pure ekstraksi getah papaya (protease enzim) dalam menghidrolisis gelatin menunjukkan gambaran secara kualitatif dapat digunakan sebagai autolitik debridement. Hasil identifikasi dapat dikatakan bahwa ektraksi getah papaya identik dengan enzim protease, maka perlu kiranya dilanjutkan dengan uji struktur dan aktivitas enzim dengan determinan yang lebih banyak (suhu, waktu, dan dosis).
Kata kunci: ekstraksi getah papaya, enzim protease

## ABSTRACT
Introduction: The high cost of drugs or specific wound dressings for chronic wounds can be healed at least in two weeks depending on the stage of the wound and blood sugar levels. Hence the need for an innovative processing of natural resources (NR) to produce a chronic wound care products that are accessible to all people. One of the current trends is to use protease enzymes (sap extract papaya) that serves as autolitic debridement in the treatment of chronic wounds. The aims of this research was to indentify characteristics of protease enzyme present in sap of papaya. Methods: This study was a descriptive exploratory that doing pure protease enzyme extract of papaya sap. Results: Molecular weight measurement using a kit Pre-stained Protein Markers (Broad Range) for SDS PAGE, Nacalai tesque No. 02525 showed a homogeneous molecular weight that slightly above 28 kD. Measurements of the enzyme levels using NanoDrop Spectrophotometer ND kit-1000 (with a distilled water marker) showed a relatively homogeneous enzyme level with a range between 43–61% and 53,88% in average. The addition of papaya sap extract into each tube containing 7 ml gelatin obtained results: the control group there were clots perfectly on gelatin; groups with the addition of 2 drops (± 0.5 ml) obtained 50% hydrolyzed gelatin; and groups with the addition of 4 drops (± 0.5 ml) obtained 75% hydrolyzed gelatin. Discussions: The results showed that papaya sap extraction synonymous with protease enzyme. Papaya sap extraction activity (protease enzymes) on hydrolyzing gelatin shows a qualitative picture. Therefore, it can be used as autholitic debridement. Further, the following study is essential to identify structure and activity of the enzyme with a more determinant (temperature, time, and dose).
Keywords: sap papaya extraction, protease enzymes

## PENDAHULUAN
Model  dan  seni  perawatan  luka sesungguhnya telah lama di kembangkan yaitu sejak  jaman  prasejarah  dengan  pemanfaatan bahan  alami  yang  diturunkan  dari  generasi ke  generasi  berikutnya,  yang  akhirnya
perkembangan perawatan luka menjadi modern seiring  ditemukannya  ribuan  balutan  untuk luka. Menurut Carville (1998) tidak ada satu jenis  balutan  yang  cocok  atau  sesuai  untuk setiap jenis luka. Pernyataan ini menjadikan kita harus dapat memilih balutan yang tepat untuk mendukung proses penyembuhan luka.
Ekstrak Getah Pepaya sebagai Autolitik (Tri Johan Agus Yuswanto dan Tanto Hariyanto)
Pemilihan balutan luka yang baik dan benar selalu berdasarkan pengkajian luka.
Pe r awat a n   lu k a   k r o n i s   y a ng berkesinambungan  dan  intensif  berimbas pada unit cost perawatan  yang  tidak  dapat dijangkau oleh seluruh kalangan masyarakat, khususnya  rumpun  menengah  ke  bawah. Mahalnya perawatan luka kronis disebabkan oleh dua hal, pertama karena total care pasien yang  belum  mandiri  sehingga  perawatannya mutlak perlu dilakukan oleh perawat, namun permasalahan  ini  bisa  diselesaikan  dengan memberikan edukasi pada keluarga atau pasien untuk  meningkatkan  kemampuan  perawatan diri  menjadi  semi  mandiri  ( partial care ) dan menuju keperawatan mandiri ( self care ).
Kedua,  mahalnya  obat-obatan  atau  dressing luka  yang  spesifik  untuk  luka  kronis,  luka kronis minimal bisa sembuh dalam 2 minggu atau  lebih  lama  bergantung  pada  stadium luka dan kadar gula darah (Dyah Ayu, 2011). Berdasarkan  hal  inilah  perlu  adanya  suatu inovasi pengolahan sumber daya alam (SDA) untuk menghasilkan suatu produk perawatan luka  kronis  yang  bisa  dijangkau  oleh  semua kalangan.
Pengembangan  teknologi  tepat  guna dengan memanfaatkan kekayaan sumber hayati yang ada di wilayah Negara Indonesia sangat memungkinkan  dapat  digunakan  sebagai pengganti peralatan dan bahan perawatan luka kronis. Salah satu yang sedang trend saat ini adalah dengan menggunakan protease enzim yang berfungsi sebagai autolitik debridement pada perawatan luka kronis. Protease selama ini sudah banyak berkembang untuk perawatan kulit  dan  beberapa  kegiatan  rumah  tangga lainnya, namun belum dalam perawatan luka kronis. Protease secara alamiah di Negara kita dapat  diambil  dengan  menggunakan  getah pepaya ( crude ekstrak papain ). Getah papaya yang sudah disadap dikeringkan dan langsung diaplikasikan untuk kegiatan rumah tangga.
Pepaya sangatlah mudah didapatkan di Indonesia,  khususnya  di  malang.  Kabupaten Malang  merupakan  salah  satu  sentra perkebunan  pepaya  di  Jatim.  Menurut  data Dinas Pertanian Provinsi Jawa Timur, produksi pepaya di Kabupaten Malang 2005 mencapai
23.361 ton, meningkat dari tahun sebelumnya yang hanya 4.557 ton. Di Kabupaten Malang, setidaknya  terdapat  500  keluarga  tani  yang mengusahakan  tanaman  asal  Karibia  ini meskipun kepemilikan lahan rata-rata hanya 0,3  hektar.  Penelitian  ini  sekaligus  untuk mengoptimalkan kearifan sumber daya lokal sebagai solusi dalam permasalahan perawatan luka  kronis  pasien  diabetes  melitus  dengan prinsip nekrotomi enzimatis dari kandungan enzim protease pada Carica papaya .
Penelitian  ini  ber t ujuan  unt uk mengidentifikasi karakteristik protease enzim yang terdapat dalam getah papaya, antara lain berat  molekul  protease  enzim  getah  papaya, kadar protease enzim pada getah papaya, dan aktifitas  enzim  secara  kualitatif.  Manfaat yang diharapkan antara lain dapat menambah pengetahuan  tentang  karakteristik  protease enzim dalam getah pepaya, dapat digunakan sebagai  salah  satu  dasar  pengembangan penelitian  lebih  lanjut  mengenai  protease enzim  pepaya  sebagai  autolitik  debridement dalam  perawatan  luka  kronis,  sebagai  dasar pengembangan  metode  perawatan  pada  luka kronis  dengan  tanpa  melakukan  nekrotomi pada  jaringan  nekrotiknya,  dan  sebagai  asar pengembangan  untuk  penurunan unit cost dalam perawatan luka kronis.

## BAHAN DAN METODE
Desain  penelitian  yang  digunakan merupakan  diskriptif  eksploratif  dengan melakukan  pure  ekstrak  protease  enzim getah pepaya, mengidentifikasi berat molekul, aktivitas  kualitatif  enzim  dan  kadar  enzim dalam  pure  ekstraksi  papain.  Penelitian dilaksanakan  di  Laboratorium  Biokimia Poltekkes  Kemenkes  malang  (ekstraksi papain dan aktivitas enzim secara kualitatif), Laboratorium  Sentral  Ilmu  Hayati  (analisis kadar  protease)  dan  Laboratorium  Sentral Biomedik  (analisis  berat  molekul)  Fakultas Kedokteran  Universitas  Brawijaya  Malang mulai  tanggal  5  September  2012  sampai dengan 26 Nopember 2012.
Getah pepaya disadap dari buah pepaya dengan species paris KW 1 yang berusia 3–4
Jurnal Ners Vol. 10 No. 2 Oktober 2015: 296–300
bulan. Pengambilan dilakukan pada pagi hari dengan  melukai  kulit  buah  papaya  sedalam 1–2  mm.  bertempat  di  perkebunan  papaya wilayah  kabupaten  Malang.  Sampel  getah pepaya  diambil  dari  species  pepaya  yang sama pada tempat dan waktu yang bersamaan pula.  Dalam  penelitian  eksploratif  peneliti menggunakan  besar  sampel  sebanyak  10 pohon  pepaya  dengan  sepesies  dan  tempat lokasi penanaman yang sama.
Pemisahan  protease  enzim  dari  getah pepaya  menggunakan  metode  kromatografi, pH  isoelektrik  papain  8,75.  Berat  molekul diperoleh  dengan  mengukur  larutan  dan endapan  ekstraksi  papain  menggunakan  kit Pre-stained Protein Markers (Broad Range) for SDS PAGE. Nacalai tesque No produksi 02525. Kadar  enzim  diukur  dengan  menggunakan kit  NanoDrop  Spectrophotometer  ND-1000, dengan  marker  aquades.  Pengujian  aktivitas kualitatif  enzim  dengan  menggunakan larutan gelatin yang dipapar ekstraksi papain (penambahan ekstrak papain masing-masing 2  tetes  dan  4  tetes  ke  dalam  masing-masing tabung reaksi yang berisi 7 ml gelatin, kecuali pada kelompok kontrol tidak ditambah ekstrak papain).

## HASIL
Hasil  penyadapan  diperoleh  getah antara  3–5  ml  sekali  penyadapan  pada  pagi hari, dengan karakteristik warna putih bersih, konsistensi  kental,  bau  segar  khas  getah papaya.  Hasil  pengukuran  berat  molekul dengan menggunakan kit Pre-stained Protein Markers (Broad Range) for SDS PAGE. Nacalai tesque No produksi 02525 diperoleh hasil  berat  molekul  yang  homogen  dengan gambaran  diatas  sedikit  dari  28  kD.  Dapat disimpulkan  bahwa  dengan  menggunakan metode  kromatografi  yang  telah  peneliti modifikasi  dapat  diperoleh  protease  enzim dan sudah memisahkan dengan chemocine.
Hasil  pengukuran  kadar  enzim menggunakan kit NanoDrop Spectrophotometer ND-1000, dengan marker aquades. Diperoleh hasil  relatif  homogen  dengan  rentang  antara 43– 61% dengan rata-rata 53, 88% (tabel 1).
Hasil  penambahan  ekstrak  papain  ke dalam  masing-masing  tabung  reaksi  yang
, 28 kD 31 kD S.1  S.3  S.4  S.5  S.6  S.7 S.8  S.9  S.10 Gambar 1.  Berat  Molekul  Supernatant Ekstrak Papain 28 kD 31 kD S.9 S.8 S.7 S.6 S.5 S.4 S.3 S.1
Gambar 2.  Berat Molekul Endapan Ekstrak Papain
Tabel 1   Kadar Enzim dalam Ekstraksi Getah Pepaya Sampel Kadar (%) S 1 50,98 S 3 61,93 S 4 56,34 S 5 49,36 S 6 43,46 S 7 61,02 S 8 52,71 S 9 56,08
berisi  7  ml  gelatin.  Penambahan  masing- masing  2  tetes  dan  4  tetes,  serta  kelompok control  tidak  di  tambah  ekstrak  papain diperoleh hasil pada kelompok control terdapat penggumpalan  sempurna  pada  gelatin, kelompok dengan penambahan 2 tetes (± 0,5 ml) didapatkan hasil, gelatin terhidrolisis 50%, dan  kelompok  dengan  penambahan  4  tetes (± 0,5 ml) didapatkan hasil gelatin terhidrolisis 75%.
Ekstrak Getah Pepaya sebagai Autolitik (Tri Johan Agus Yuswanto dan Tanto Hariyanto)

## PEMBAHASAN
Metode kromatografi merupakan suatu cara  yang  tepat  untuk  memisahkan  protease enzim  dengan  bahan  lain  yang  terdapat pada  getah  papain.  Prinsip  kromatografi yaitu salt in dan salt out dapat  digunakan untuk  memisahkan  enzim  dengan  protein yang  lain,  namun  sangat  perlu  diperhatikan kadar pH yang optimal untuk memindahkan enzim tersebut keluar dari sel getah papaya. Berdasarkan  beberapa  kali  percobaan  dari pH netral diperoleh pH isoelektris yang dapat digunakan untuk memisahkan protease enzim yaitu sebesar 8,75. Penggunaan pH isoelektris sangat  menentukan  untuk  pemisahan  enzim tersebut.
Berat  molekul  yang  diperoleh  dari pengukuran  dalam  kisaran  28–30  kD menandakan bahwa molekul hasil pemisahan dari  getah  papaya  tersebut  adalah  protease enzim. Berat molekul hasil pemisahan sesuai dengan  marker  yang  diambilkan  dari  berat molekul protease enzim. Berat molekul ekstrak papain yang dipisahkan dengan kromatografi sesuai  dengan  berat  enzim  protease,  maka ekstrak  tersebut  kemungkinan  adalah  enzim protease juga, dengan demikian ekstrak papain dapat  dijadikan  kandidat  untuk  pengobatan luka  kronis  yang  bertujuan  untuk  autolitik debridement.  Penggunaan  metode  autolitik debridement  dengan  menggunakan  ekstrak papain  dimungkinkan  akan  dapat  menekan unit cost perawatan  luka  kronis  di  samping dapat  digunakan  untuk  meningkatkan  nilai ekonomis papaya di dunia pengobatan.
Identifikasi kadar protein dari nano drop dapat diidentikkan dengan kadar enzim asalkan diikuti dengan identifikasi yang lainnya, yaitu: berat molekul dan aktivitas protein tersebut. Hasil  analisis  kadar  protein  menunjukkan gambaran yang menakjubkan yaitu kadar rata- rata 53,99%. Nilai terendah kadar 43,46% dan tertinggi  61,93%.  Kadar  enzim  yang  dapat dikatakan  relative  tinggi  tersebut  sangat mendukung  untuk  pengembangan  ekstraksi getah pepaya untuk dunia kedokteran. Sampai saat ini yang banyak diterapkan adalah crude ekstrak  getah  papaya  (protease  enzim  dan
chemocine)  untuk  kepentingan  industri makanan. Penemuan pure ekstrak papain yang mirip (bahkan sama) dengan protease enzim sangat memungkinkan untuk pengembangan dalam  pengobatan  luka  kronis  yang  banyak terdapat jaringan nekrotiknya.
Hasil  penambahan  ekstrak  papain  ke dalam  masing-masing  tabung  reaksi  yang berisi  7  ml  gelatin  dan  juga  hasil  observasi pada  kelompok  kontrol  menunjukkan gambaran kualitatif yang bermakna, di mana ekstrak getah pepaya mampu menghidrolisis gelatin  yang  identik  dengan  karakteristik jaringan nekrotik. Oleh karena itu, penelitian berikutnya perlu mengidentifikasi efektivitas dari  aktivitas  enzim  protease  dari  ekstrak getah pepaya agar dapat dijadikan salah satu alternatif produk perawatan luka kronis yang murah dan terjangkau.

## SIMPULAN DAN SARAN Simpulan
Pemisahan  enzim  protease  dengan menggunakan  metode  kromatografi  perlu memperhatikan kadar pH untuk mendapatkan hasil  yang  maksimal.  Berat  molekul  hasil ekstraksi getah papaya menunjukkan gambaran yang  identik  dengan  berat  molekul  protease enzim di mana pada kisaran 28kD – 31 kD. Kadar enzim protease pada getah pepaya relatif banyak yaitu lebih dari 50% dengan rata-rata 53,99%. Berdasarkan hasil penelitian, aktifitas protease enzim dalam menghidrolisis gelatin menunjukkan gambaran secara kualitatif dapat digunakan sebagai autolitik debridement.

## Saran
Perlu adanya penelitian lanjutan tentang uji  struktur  dan  aktivitas  enzim  dengan determinan yang lebih banyak (suhu, waktu, dan  dosis).  Selain  itu,  diperlukan  pula  uji stabilisasi protease enzim dari ekstraksi getah papaya serta analisis formulasi protease enzim dari  ekstrak  getah  pepaya  agar  dapat  dibuat dan  digunakan  sebagai  sediaan  obat  rawat luka.
Jurnal Ners Vol. 10 No. 2 Oktober 2015: 296–300

## KEPUSTAKAAN
Andrew  H.,  1998,  Frequently  Asked Questions:  Alginate  Dressings,  www. worldwidewounds.com Berger,  Karen  J.,  1999. Fundamental of Nursing: Collaborating For Optimal Health, 2 nd Edition,  Connecticut:
Appleton & Lange.
Drenth,J.,  J.N.Jansonius,  R.Koekoek,  and B.G.Wolthers.  1971. Papain X-Ray Structure .  dalam  P.D.Boyer. The Enzymes . Academic Press, New York. Gitarja, Widasari S., 2002. Penatalaksanaan Perawatan Luka . Makalah disampaikan pada Pelatihan Wound dan Stoma Care Ke-2  Bagi  Perawat,  RSUP.  Dr.  Hasan Sadikin Bandung, 21–25 Mei 2002
Hartmann,  1999. Compedium Wounds and Wound Management .  First  Hartmann Medical Edition. Joanne T., 2002. Wound Management: A Pain Free  and  Cost  Effecctive  Approach , Convatec. Disampaikan pada Pelatihan Wound  dan  Stoma  Care  Ke-2  Bagi Perawat,  RSUP  Dr.  Hasan  Sadikin Bandung, 21–25 Mei 2002 Perry,  AG,  dan  Potter,  PA.,  1994. Pocket Guide to Basic Skills and Procedures 3 rd edition , St Louis, Missouri: Mosby Yearbook.
Riset  Kesehatan  Dasar  (Riskesdas)  2007a. Pedoman Pewawancara Petugas Pengumpul Data .  Jakarta:  Badan Litbangkes, Depkes RI, 2007. Riset  Kesehatan  Dasar  (Riskesdas),  2007b. Laporan Nasional 2007 . Jakarta: Badan Litbangkes. DepKes RI.
Scrimgeour,  K.G.,  1977. Chemistry and Control of Enzyme Reaction . Academic Press, New York. Smeltzer, S.C., dan Bare, B.G., 2005. Brunner and Suddart’s textbook of Medical Surgical Nursing 10th Edition . Lippincot William & Wilkins.
Smith  S.F,  Duell  D.J,  Martin  B.C.,  2004. Clinical Nursing Skills – Basic to Advanced Skills Sixth Edition .  New Jersey: Pearson Prentice Hall. Suhartono, M.T., 1992. Protease. Departemen Pendidikandan  Kebudayaan,  Dirjen Pendidikan  Tinggi,  Pusat  Antar Universitas  Bioteknologi,  Institut Pertanian Bogor.
Tandra, H., 2008. Segala Sesuatu yang Harus Anda Ketahui tentang Diabetes. Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama. Taylor, et al. 1989. Fundamental of Nursing – The Art and Science of Nursing Care .  Philadelphia:  J.B. Lippincott Co.