## BIOEDUSAINS: Jurnal Pendidikan Biologi dan Sains
Volume 3, Nomor 2, Desember 2020 e-ISSN : 2598-7453 DOI: https://doi.org/10.31539/bioedusains.v3i2.1804

## IDENTIFIKASI BAKTERI PROBIOTIK PADA SALURAN
PENCERNAAN IKAN SEMAH (Tor sp.)
Andriyanto 1 , Eni Yulianti 2
STKIP YPM Bangko 1,2 andrixt.ax@gmail.com 1

## ABSTRAK
Tujuan  penelitian  ini  yaitu  untuk  mengisolasi  dan  mengidentifikasi  jenis  bakteri potensial  probiotik  pada  saluran  pencernaan  ikan  semah  ( Tor sp.)  yang  berasal dari  sungai  Batang  Merangin,  Provinsi  Jambi.  Pengambilan  sampel  ikan  semah dilaksanakan  pada  tiga  stasiun  pengamatan  yaitu  daerah  aliran  sungai  Batang Merangin, Stasiun I berlokasi di  Desa Talang Kawo, stasiun II berlokasi di Desa Guguk dan stasiun III berlokasi di Desa Muara Emat. Pada Stasiun I diperoleh 4 ekor  ikan,  stasiun  II  diperoleh  5  ekor  ikan  dan  stasiun  III  diperoleh  2  ekor  ikan. Panjang total ikan yang diperoleh berkisar antara 16cm-22 cm. Dari semua sampel ikan  semah  yang  di  dapatkan,  semua  merupakan  spesies Tor  tambroides . Simpulan,  hasil  isolasi  dan  identifikasi  bakteri  potensial  probiotik  pada  saluran pencernaan ikan semah ( Tor tambroides ) yang hidup di sungai Batang Merangin diperoleh  dua  Genus  bakteri  potensial  probiotik  yaitu Bacillus sp.  dan Alcaligenes sp.
Kata Kunci : Ikan Semah, Isolasi, Identifikasi, Probiotik

## ABSTRACT
The purpose of this study was to isolate and identify the type of probiotic potential bacteria  in  the  digestive  tract  of  semah  fish  (Tor  sp.)  originating  from  Batang Merangin  river,  Jambi  Province.  Semah  fish  sampling  was  carried  out  at  three observation  stations  namely  Batang  Merangin  river  watershed,  Station  I  was located  in  Talang  Kawo  Village,  station  II  was  located  in  Guguk  Village  and station III was located in Muara Emat Village. In Station I, 4 fish were obtained, station II obtained 5 fish and station III obtained 2 fish. The total length of the fish obtained ranges from 16cm-22 cm. Of all the samples of semah fish obtained, all are  species  of  Tor  tambroides.  Conclusion,  the  results  of  isolation  and identification  of  potential  probiotic  bacteria  in  the  digestive  tract  of  fish  (Tor tambroides) living in the Batang Merangin river obtained two genus of probiotic potential bacteria namely Bacillus sp. and Alcaligenes sp.
Keywords: Semah Fish, Isolation, Identification, Probiotics

## PENDAHULUAN
Daerah  hulu  sungai  Batanghari  Provinsi  Jambi  merupakan  habitat  ikan semah  ( Tor sp.)  yang  dikenal  sebagai  ikan  lokal  endemik  bernilai  ekonomis tinggi.  Ikan  semah  banyak  dijumpai  pada  sungai  berarus  deras  di  Kabupaten Merangin,  Sarolangun,  Muara  Bungo  dan  Kerinci.  Ikan  semah  memiliki karakteristik  berdaging  tebal,  memiliki  rasa  yang  enak,  manis  dan  kaya  minyak. Selain  sebagai  ikan  konsumsi,  ikan  semah  berpotensi  untuk  dikembangkan sebagai  ikan  hias,  bentuk  dan  ukuran  tubuh  ikan  semah  sangat  eksotik  karena dapat  mencapai  di  atas 30 kg dengan panjang tubuh  lebih dari 1 m.  Oleh karena ukuran tubuhnya  yang sangat besar, maka ikan semah dijuluki sebagai  " Kings of the rivers ’ (Ng, 2004).
Permintaan pasar terhadap ikan semah cukup tinggi. Namun, populasi ikan semah  semakin  menurun  dan  terancam  punah  akibat  pencemaran  sungai  dan degradasi  habitat.  Sebagai  akibatnya,  dipasaran  ikan  semah  sulit  didapatkan  dan apabila tersedia harganya cukup mahal, berkisar antara Rp. 150.000 – 200.000 per kilogram.  Untuk  mencegah  kepunahan  ikan  semah  telah  dilakukan  domestifikasi ikan  semah  untuk  dibudidayakan  (Subagja,  Kristanto,  &  Sulhi,  2013)  .  Namun, ikan  semah  tergolong  ikan  dengan  pertumbuhan  yang  lambat  sehingga  proses budidaya  memerlukan  waktu  yang  lama.  Oleh  karena  itu,  perlu  dilakukan  upaya yang  dapat  mempercepat  pertumbuhan  ikan  semah,  salah  satunya  yaitu  dengan menggunakan probiotik dalam aplikasi pakan.
Probiotik  diketahui  dapat  meningkatkan  pertumbuhan  ikan  (Afrilasari, Widanarni,  &  Meryandini,  2016).  Probiotik  adalah  mikroorganisme  yang  hidup dengan  cara  memperbaiki  keseimbangan  mikroba  usus  dan  juga  sebagai penyiapan  sel  mikroba  atau  komponen  sel  mikroba  yang  memiliki  pengaruh menguntungkan  pada  kesehatan  inang  (Sornplang  &  Piyadeatsoontorn,  2016). Prinsip  dasar  kerja  probiotik  adalah  pemanfaatan  kemampuan  mikroba  dalam meningkatkan  penyerapan  pada  saluran  pencernaan  ikan.  Probiotik  tidak  hanya menjaga  keseimbangan  ekosistem  dalam  saluran  pencernaan  namun  juga  dapat menahan aktifitas mikroba pengurai protein sehingga menyebabkan kadar amonia feses  menurun.  Suplementasi  probiotik  dapat  memperbaiki  fungsi  dan  kesehatan usus  serta  meningkatkan  penyerapan  nutrient  (Manin,  Hendalia,  &  Yusrizal, 2012).
Seleksi  terhadap  jenis  mikroorganisme  sebagai  probiotik  merupakan  hal yang sangat penting. Apabila microorganisme yang digunakan tidak cocok dengan inang  (ikan  yang  dibudidayakan)  maka  dapat  menyebabkan  ketidak  seimbangan rasio  antara  bakteri  baik  dan  bakteri  tidak  baik  dalam  saluran  pencernaan  ikan yang  dapat  berakibat  negatif  terhadap  metabolisme  nutriens,  meningkatkan aktivitas  antagonis  bakteri  pathogen,  dan  lain  sebagainya.  Mikroorganisme probiotik yang ideal harus dapat mengkolonisasi dan bertahan dan menggandakan diri  dalam  saluran  pencernaan  inang  tanpa  tergantung  dengan  asalnya  (Lazado, Caipang, & Estante-Superio, 2015).
Saat  ini  terdapat  berbagai  jenis  merek  probiotik  yang  beredar  dipasaran. Namun,  kadang  kala  penggunaan  probiotik  tersebut  cenderung  tidak  efektif karenan  mikroorganisme  tidak  dapat  bertahan  hidup  atau  tidak  tersedia  dalam jumlah  konsentrasi  optimum  di  dalam  usus  ikan.  Hal  ini  disebabkan mikroorganisme  dalam  probiotik  tersebut  bukan  mikroorganisme  asli  dari  ikan yang diberi aplikasi probiotik. Kemungkinan jenis probiotik tertentu hanya efektif
untuk  satu  spesies  ikan  dan  tidak  efektif  untuk  spesies  ikan  lain.  Satu  jenis probiotik tidak dapat digunakan untuk semua spesies ikan (Lazado et al ., 2015). Berdasarkan uraian diatas maka peneliti tertarik melakukan penelitian  jenis bakteri  potensial  probiotik  pada  saluran  pencernaan  ikan  semah  ( Tor sp.)  yang berasal  dari  sungai  Batang  Merangin.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengisolasi dan  mengidentifikasi  jenis  mikroorganisme  potensial  probiotik  serta  mengetahui komposisi  bakteri  probiotik  pada  saluran  pencernaan  ikan  semah  ( Tor sp.)  yang berasal dari sungai Batang Merangin, Jambi.

## METODE PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Maret sampai dengan Oktober Tahun 2020. Pengambilan ikan  semah di  lakukan di  Sungai  Batang Merangin pada tiga stasiun  yaitu  di  Desa  yang  dilewati  Sungai  Batang  Merangin  yaitu  Desa  Talang Kawo, Desa Guguk dan Desa Muara Emat. Identifikasi bakteri potensial probiotik di lakukan di Laboratorium Pendidikan Biologi STKIP YPM Bangko.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  untuk  isolasi  dan  identifikasi  antara  lain,  inkubator, autoclave, pipet tetes,  erlenmeyer, bunsen, cawan petri, beaker glass, mikroskop, mortar  porselen,  kamera  digital,  pisau,  laminar  air  flow,  objek  glass,  tabung reaksi,  rak  tabung,  cover  glass,  timbangan  digital,  sarung  tangan,  rak  tabung, penjepit  tabung,  gunting,  pinset,  batang  pengaduk,  lemari  pendingin,  jangka sorong,  masker,  jarum  ose  dan  alat  tulis.  Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah organ pencernaan lambung usus halus, usus besar ikan semah (Tor  sp.)  yang  berasal  dari  tangkapan  alam.  media  Tryptic  Soya  Agar  (TSA), bahan-bahan  untuk  uji:  oksidatif  fermentative  (O/F),  uji  citrate,  uji  triple  sugar iron Agar (TSIA), uji Motil Indol dan Ornithin (MIO), uji Lysin Iron Agar (LIA), uji  urease,  uji  gelatin,  uji  Methyl  Red,  uji  Voges  Proskauer,  uji  gula  (glukosa, manitol,  maltose,  sukrosa,  laktosa),  bahan  untuk  uji  pewarnaan  Gram  (crystal violet, lugol iodine, safranin, etil alkohol 95%, dan aquades), NaCl fisiologis dan imersi.

## Pengambilan sampel ikan dan identifikasi spesies ikan
Pengambilan  sampel  ikan  semah  dilakukan  dengan  memasang  jaring  dan bubu  (jebakan  ikan)  pada  tiga  stasiun  pengamatan  yaitu  (1)  Talang  kawo;  (2) Guguk dan (3) Muara Emat. Pemasangan jaring dan bubu dilakukan selama 1 x 24 jam.  Identifikasi  dilakukan  dengan  mengamati  karakter  ikan  secara  morfometri dan meristik.

## Isolasi Bakteri Potensial Probiotik Dari Saluran Pencernaan Ikan Semah
Isolat  bakteri  potensial  probiotik  di  isolasi  dari  dari  bagian  saluran pencernaan  ikan  yaitu  pada  bagian  lambung  dan  usus.  Perut  ikan  dibedah  lalu diambil  bagian  lambung  dan  usus,  kemudian  dimasukan  ke  dalam  larutan fisiologis  NaCl.  Setelah  itu,  lambung  dan  usus  dihaluskan  dengan  menggunakan stomacher. Lambung dan usus yang telah halus kemudian dibuat seri pengenceran hingga 10 -1 , 10 -2 dan 10 -3 . Masing-masing dari seri pengenceran tersebut diambil 1 ml  kemudian  di  teteskan  kedalam  cawan  pertri  yang  berisi  media  Tryptic  Soy
Agar (TSA),  cairan 1 ml tersebut  diratakan dengan teknik cawan sebarkemudian di  inkubasi  pada  posisi  terbalik  pada  ruangan  gelap  selama  24-48  jam  pada temperatur 35 o C.

## Tahapan pemurnian kultur bakteri
Setelah  dilakukan  inkubasi  selama  24-48  jam,  koloni  bakteri  yang  tumbuh pada media TSA di amati penampakan morfologi koloni meliputi warna, bentuk, tepian  dan  elevasi,  kemudian  tiap-tiap  koloni  yang  berbeda  tersebut  diambil  dan dimurnikan  pada  media  TSA  yang  baru  untuk  mendapatkan  kultur  murni. Pemurnian  dilakukan  dengan  teknik  cawan  gores  dengan  beberapa  tahap  sampai di daptkan koloni bakteri tunggal sebagai isolat murni.

## Uji Hidrolisis Pati (Amilum)
Satu  ose  suspensi  kultur  murni  bakteri  digoreskan  pada  cawan  yang  berisi media Strach Agar, kemudian di inkubasi pada suhu 35 o C selama 24 jam. Setelah itu  dilakukan  uji  iodine  dengan  cara  meneteskan  iodine  pada  permukaan  cawan yang  berisi  isolat.  Uji  hidrolisis  pati  dinyatakan  positif  apabila  ada  zona  kuning bening disekitar isolat.

## Uji Hidrolisis Kasein (Protein)
Satu  ose  suspensi  kultur  murni  bakteri  digoreskan  pada  cawan  yang  berisi media Skim Milk Agar (SMA), kemudian di inkubasi pada suhu 35 o C selama 24 jam. Uji hidrolisis protein dinyatakan positif apabila ada zona bening di sekeliling koloni.

## Karakterisasi morfologi isolat
Identifikasi morfologi sel dari isolat-isolat yang diperoleh dilakukan dengan menggunakan  uji  pewarnaan  gram  dan  pengamatan  bentuk  sel  dilakukan menggunakan  mikroskop.  Tahapan  pewarnaan  gram  adalah  sebagai  berikut:  (1) membersihkan kaca objek dengan alkohol dan di sterilkan pada nyala api bunsen; (2)  isolat  bakteri  diambil  dengan  menggunakan  ose  kemudian  dioleskan  pada objek glass kemudia di fiksasi dengan melewatkan objek glass secara singkat pada nyala  api  bunsen;  (3)  isolat  kemudian  ditetesi  kristal  violet  sampai  rata  dan dibiarkan  selama  1  menit  kemudian  di    cuci  pada  air  mengalir  dan  dianinkan hingga  kering;  (4)  isolat  bakteri  kemudian  ditetesi  dengan  larutan  iodin  dan dibiarkan selama 1 menit,  kemudian di  cuci  dengan air mengalir dan dianginkan hingga kering; (5) Selanjutnya isolat ditetesi dengan alkohol 95% selama 30 detik, kemudian  di  aliri  air  dan  dianginkan  hingga  kering;  (6)  Tahap  selanjutnya  yaitu isolat ditetesi dengan safranin selama 30 detik kemudian di aliri air dan di kering anginkan.  Selanjutnya  dilakukan  pengamatan  dibawah  mikroskop.  Bakteri  gram positif  dtandai  dengan  sel  bakteri  yang  berwarna  ungu,  sedangkan  bakteri  gram negatif ditandai dengan warna merah muda pada sel bakteri. Selain itu, dilakukan pengamatan terhadap bentuk sel bakteri.

## Uji Katalase
Objek glass steril diberi 2 tetes H 2 O 2 kemudian di oleskan isolat bakteri dari kultur murni. Hasil uji dinyatakan positif apabila terbentuk gelembung-gelembung
oksigen  dan  dinyatakan  negatif  apabilarida  ada  perubahan  atau  tidak  ada gelembung oksigen yang muncul (Hadioetomo, 1990).

## Uji Oksidase
Satu ose isolat bakteri digoreskan pada kertas Oxidase Test Strip , kemudian ditunggu  selama  satu  menit.  Uji  dinyatakan  positif  apabila  terjadi  perubuhan warna  menjadi  biru  violet  dan  uji  dinyatakan  negatif  apabila  tidak  terjadi perubahan warna.

## Uji Motilitas
Satu ose isolat bakteri ditusukan ke medium uji SIM dan diinkubasi selama 24  jam  pada  suhu  29 o C.  uji  dinyatatakan  positif  apabila  ditandai  dengan pertumbuhan bakteri yang menyebar, maka bakteri tersebut dapat bergerak (motil) dan  bila  pertumbuhan  bakteri  tidak  menyebar,  maka  bakteri  tersebut  tidak  dapat bergerak (non motil).

## Uji TSIA
Satu  ose  isolat  bakteri  diinokulasi  ke  dalam  media  TSIA  dengan  cara ditusuk  tegaklurus  pada  bagian  butt  (tusuk)  dan  cara  zig  zag  pada  bagian  slant (miring),  kemudian  diinkubasi  selama  24  jam  padasuhu  29 o C.  Perubahan  warna pada  media  kemudian  diamati,  apabila  bagian  slant  berwarna  merah  dan  butt berwarna  kuning  maka  bakteri  mampu  memfermentasi  glukosa,  sedangkan apabila  bagian  slant  dan  butt  keduanya  berwarna  kuning  maka  bakteri  mampu memfermentasi sukrosa dan laktosa.

## Uji Gelatin
Satu  ose  isolat  bakteri  diinokulasikan  pada  media  Gelatin  cair,  kemudian diinkubasi  selama  24  jam  pada  suhu  29 o C.  Hasil  uji  dinyatakan  positif  apabila media cair tetap mencair meskipun diletakan di dalam lemari es selama beberapa menit  dan  hasil  uji  dinyatakan  negatif  apabila  media  gelatin  membeku  jika diletakan dalam lemati es.

## Uji Citrat
Satu  ose  isolat  bakteri  diinokulasikan  secara  zig-zag  pada  permukaan  agar miring  media  Simmons  Sitrat,  kemudian  diinkubasi  selama  24  jam  pada  suhu 29 o C. Hasil uji dinyatakan positif apabila terjadi perubahan warna media menjadi biru  dan  hasil  uji  dinyatakan  negatif  apabila  tidak  terjadi  perubahan  warna  pada media.

## Uji MR (Methyl Red)
Satu  ose  isolat  bakteri  diinokulasikan  ke  dalam  media  MR-VP,  kemudian diinkubasi  selama  24  jam  pada  suhu  29 o C.  Sebanyak  3-4  tetes  indikator  methyl red  ditambahkan  pada  media  berisi  isolat  yang  telah  diinkubasi.  Hasil  uji dinyatakan  positif  apabila  terjadi  perubahan  warna  media  menjadi  merah,  yang artinya  terbentuk  asam  dan  hasil  uji  dinyatakan  negatif  apabila  tidak  terjadi perubahan warna pada media (Hadioetomo, 1990).

## Uji VP (Voges Proskauer)
Satu  ose  bakteri  di  ambil  dengan  menggunakan  ose  bulat  dari  stok  kultur, kemudian diinokulasikan pada media MR-VP cair pada tabung reaksi. Selanjutnya diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 o C. Media kemudian ditambahkan 0,2mL KOH  40%  dan  0,6  mL  alfanatol  lalu  dikocok  selama  30  detik.  Hasil  uji dinyatakan positif apabila media berubah warna menjadi merah keunguan.

## Uji LIA
Satu  ose  isolat  bakteri  diinokulasikan  secara  tusuk  lalu  zig  zag  pada permukaan  agar  miring  media  LIA,  kemudian  diinkubasi  selama  24  jam  pada suhu  29 o C.  Hasil  uji  dinyatakan  positif  apabila  terjadi  perubahan  warna  media menjadi ungu dan negatif apabila tidak terjadi perubahan warna.

## Uji Gula-gula
Satu  ose  isolat  bakteri  diinokulasikan  ke  dalam  tabung-tabung  reaksi  yang berisi  medium  fermentasi  glukosa,  arabinosa,  sorbitol,  manitol,  inositol  dan sukrosa,  dan  diinkubasi  selama  24  jam  pada  suhu  29ºC.  Uji  positif  ditandai dengan  berubahnya  warna  medium  menjadi  kuning  dan  apabila  dalam  tabung terdapat gelembung, berart fermentasi tersebut menghasilkan gas (CO 2 ).

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh  dianalisis  secara  deskriptif  dengan  mendeskripsikan secara  sistematis,  akurat  dan  ilmiah.  Hasil  uji  terhadap  isolat-isolat  yang diperoleh,  dilakukan  identifikasi  bakteri  berdasarkan  karakter  biokimia  sesuai dengan  tabel  biokimia  karakter  bakteri  dengan  berpedoman  pada  buku Bergey’s Manual  of  Determinative  Bacteriology  Second  Edition dari  Brenner,  Krieg,  & Staley (2005).

## HASIL PENELITIAN Pengambilan Sampel dan Identifikasi Spesies Ikan Semah
Data ikan semah  yang diperoleh pada tiga stasiun pengamatan  tertera pada Tabel 1 berikut:
Tabel 1. Data sampel ikan semah yang diperoleh Stasiun Lokasi Jumlah ikan yang diperoleh Panjang Total 1 Talang Kawo 4 ekor Ikan a = 18 cm Ikan b = 19 cm Ikan c = 17 cm Ikan d = 17 cm 2 Guguk 5 ekor Ikan a = 19 cm Ikan b = 19 cm Ikan c = 16 cm Ikan d = 17 cm Ikan e = 18 cm 3 Muara Emat 2 ekor Ikan a = 25 cm Ikan b = 22 cm
Identifikasi  dilakukan  dengan  mengamati  karakter  mofologi  secara morfometri dan meristik. Ikan yang semah yang diperoleh seperti pada Gambar 1.

## Gambar 1. Sampel ikan semah yang diperoleh

## Bakteri Potensial Probiotik Pada Lambung dan Usus Ikan Semah
Pada tahap ini diawali dengan pembedahan perut ikan semah untuk diamati saluran  pencernaan  ikan  semah  (Gambar  2)  untuk  diambil  bagian  lambung  dan ususnya.
Gambar 2. Saluran pencernaan ikan semah
Pada  penelitian  ini  diperoleh  hasil  bahwa  jumlah  isolat  bakteri  probiotik yang di isolasi (Gambar 3) dari lambung dan usus ikan semah ( Tor sp.) ditemukan sebanyak  2  isolat  bakteri.  Hasil  ini  diperoleh  setelah  dilakukan  pengamatan morfologi koloni, sel dan juga uji biokimia.
Gambar 3. Koloni yang didapat
Morfologi Koloni dan Sel Bakteri Potensial Probiotik Pada Ikan Semah Isolat-isolat  bakteri  potensial  probiotik  yang  ditemukan  dari  isolasi  pada saluran pencernaan ikan semah ( Tor sp.) dilihat morfologi koloni meliputi tepian, elevasi  dan  warna  koloni.  Adapun  hasil  yang  diperoleh  dari  hasil  pengamatan kedua koloni yang berhasil diisolasi dapat dilihat pada Tabel 1. Berdasarkan Tabel 1  dapat  dijelaskan  bahwa  kedua  isolat  memiliki  kemiripan  pada  bentuk,  tepian, elevasi dan warna koloni.
Pengamatan  morfologi  pada  isolat  bakteri  potensial  probiotik  yang diperoleh  dari  saluran  pencernaan  ikan  semah  dilakukan  untuk  mengidentifikasi bakteri  potensial  probiotik  pada  saluran  pencernaan  ikan  semah.  Hasil pengamatan  setelah  pewarnaan  gram  menunjukan  pada  isolat  SMH  01  berwarna ungu yang merupakan bakteri gram positif karena mampu mengikat kristal violet, sedangkan  isolat  SMH  02  hasil  pewarnaan  gram  menunjukan  berwarna  merah yaitu bakteri gram positif.
Tabel 1.  Kode Isolat dari Koloni yang ditemukan didalam ikan semah
Kode Isolat Koloni Bentuk Tepian Elevasi Warna SMH 01 Bulat Halus Cembung Krem SMH 02 Bulat Halus Cembung Krem

## Karakterisasi dan Identifikasi Bakteri Potensial Probiotik Pada Ikan Semah
Hasil pengamatan morfologi sel baik pewarnaan gram dan uji biokimia dari ke-2 isolat yang diperoleh dapat dilihat pada Tabel 2. Hasil uji Biokimia dari ke-4 bakteri  yang  diperoleh  diidentifikasi  menurut  buku Bergey’s  Manual  of Determinative Bacteriology 8 th Edition oleh Brenner et al., (2005) .
Tabel 2. Hasil Uji biokimia pada isolat yang diperoleh
Karakterisasi Bakteri Isolat Bakteri SMH 01 SMH 02 Morfologi Sifat Gram Positif Negatif Bentuk Batang Batang Uji Biokimia Motilitas + + Katalase + + Oksidase - + TSIA A/A A/A Gelatin + - Indol - - Ureaase - - Citrat + + MR/VP +/+ +/+ O/F - - LIA - - Kasein + + Pati + + Uji Gula Glukosa + -
Mannitol - - Maltosa + - Sukrosa + - Sorbitol - - Inositol - - Laktosa - + Rafinosa - - Arabinosa - - Genus Bakteri Bacillus sp. Alcaligenes sp.
Hasil karakterisasi dan identifikasi isolat dengan kode SMH 01 merupakan Bacillus sp.  sedangkan  isolat  dengan  kode  SMH  02  merupakan Alcaligenes sp. Identifikasi bakteri dilakukan dengan menggunakan metode konvensional dengan membandingkan  bakteri  yang  sedang  diidentifikasi  dengan  bakteri  yang sebelumnya telah diketahui karekteristiknya. Apabila tidak diperoleh bakteri yang tingkat  kemiripannya  100%,  maka  dilakukan  pendekatan  terhadap  bakteri  yang ciri-cirinya  paling  mendekati.  Oleh  karena  itu,  identifikasi  bakteri  dengan  teknik konvensional akan selalu menghasilkan spesies bakteri yang sudah teridentifikasi sebelumnya dan tidak dapat menemukan spesies baru (Brenner et al ., 2005).

## PEMBAHASAN

## Pengambilan Sampel dan Identifikasi Spesies Ikan Semah
Dari semua sampel ikan semah yang di dapatkan, semua merupakan spesies Tor  tambroides .  Karakter  ikan  semah  (Tor  tambroides)  yang  membedakannya dengan spesies ikan semah lain yaitu: terdapat cuping di pertengahan bibir bawah yang mencapai ujung mulut (Gambar 4) selain itu Tor tambroides sisiknya 2 layer (ada  sisik  halus  dipangkal  sisik)  dan  bentuk  sisik  cenderung  membulat/lonjong (Gambar 5)  (Utomo, 2006). Di  Indonesia terdapat  empat jenis ikan semah,  yaitu Tor  soro , Tor  tambra , Tor  douronensis dan Tor  tambroides .  Membedakan diantara  jenis  ikan  tambra  yang  berasal  dari  Indonesia  sementara  ini  masih berdasarkan ada tidaknya cuping pada bibir bawah dan ukuran  cuping (Haryono, 2006).
Gambar 4. Cuping ikan semah                           Gambar 5. Bentuk sisik ikan semah

## Bakteri Potensial Probiotik Pada Lambung dan Usus Ikan Semah
Dari hasil isolasi  yang telah dilakukan pada lambung dan usus  ikan semah didapatkan  sebanyak  2  isolat  murni.  Isolasi  dilakukan  pada  lambung  dan  usus
karena  lambung  dan  usus  merupakan  organ  yang  memegang  peranan  penting dalam  merombak  pakan  dari  senyawa  kompleks  menjadi  senyawa  yang sederhana.  Menurut  (Hai,  2015),  di  dalam  saluran  pencernaan  ikan  terdapat bakteri  yang  menghasilkan  enzim  pencernaan  yang  dapat  merombak  nutrient makro yang masuk melalui pakan dan memudahkan diserap oleh ikan. Selain itu Beberapa  mikroflora  dalam  saluran  pencernaan  dapat  melindungi  usus  dari serangan bakteri patogen dan merangsang pembentukan imunitas.
Probiotik dapat mempengaruhi proses fermentasi pakan yang dimakan oleh ikan  dalam  saluran  pencernaan  menjadi  lebih  cepat,  sehingga  memudahkan penyerapan nutrient. Proses fermentasi pakan dapat merombak senyawa kompleks menjadi  senyawa  sederhana  sehingga  lebih  mudah  dicerna  oleh  ikan.  Bakteri probiotik yang terdapat pada saluran pencernaan mampu mensintesis vitamin dan asam  amino  yang  dibutuhkan  oleh  hewan  akuatik  (AFRC,  1989).  Pakan  yang disuplementasi  dengan  bakteri  probiotik  mampu  meningkatkan  pencernaan  dan penyerapan  protein  pada  saluran  percernaan  karena  meningkatnya  aktivitas protease usus (Macey & Coyne, 2005).
Isolasi  probiotik  pada  saluran  pencernaan  ikan  telah  dilakukan  pada beberapa  penelitian  sebelumnya.  Antara  lain  pada  ikan  nila  ( Oreochromis niloticus ) (Reda, Selim, El-Sayed, & El-Hady, 2018), ikan mas ( Cyprinus carpio ) (Yulvizar, Cut; Dewiyanti, Irma; Defira, 2014)  ikan kerapu macan ( Ephinephelus fuscogatus ) oleh (Feliatra, Efendi, & Suryadi, 2004).

## Identifikasi Bakteri Potensial Probiotik dari Ikan Semah
Hasil  identifikasi  melalui  uji  biokimia  diperoleh  bahwa  berdasarkan  buku Bergey’s  Determinative  pada  isolat  SMH  01  masuk  dalam  genus  Bacillus,  dan berdasarkan literatur mirip dengan spesies Bacillus cereus , sedangkan pada isolat SMH 02 masuk kedalam genus Alcaligenes dan mirip dengan spesies Alcaligenes faecalis .  Hasil  penelitian  ini  sedikit  berbeda  dengan  penelitian  sebelumnya  yang dilakukan  oleh  (Asaduzzaman et  al .,  2018)  yang  mengisolasi  probiotik  dari  ikan semah ( Tor tambroides ) hasil penelitian tersebut memperoleh  tiga spesies bakteri probiotik yaitu Bacillus sp. AHG22, Alcaligenes sp. dan Shewanella sp. AFG21. Sementara itu hasil  yang sangat berbeda ditunjukan oleh penelitian (Tan et al .,  2019)  yang  menunjukan  bahwa  pada  saluran  pencernaan  ikan  semah  ( Tor tambroides )  hasil  tangkapan  liar  diperoleh  bakteri Cetobacterium spp., Citrobacter spp.,  Famili  Aeromonadaceae,  Famili  Peptostreptococcaceae  dan Turicibacter  spp .  Dari  hasil  penelitian  penulis  dan  dua  hasil  penelitian sebelumnya  sepertinya  terdapat  pengaruh  faktor  lain  seperti  lingkungan  habitat sampel  ikan  tinggal,  atau  metode  identifikasi  yang  mempengaruhi  komposisi bakteri probiotik pada saluran ikan semah sehingga diperoleh hasil yang berbeda meskipun hostnya sama yaitu ikan semah spesies Tor tambroides .
Metode identifikasi  yang digunakan berpengaruh terhadap hasil isolat  yang diperoleh.  Pada  penelitian  ini  metode  identifikasi  yang  digunakan  menggunakan metode  konvensional.  Pertimbangan  pemilihan  metode  identifikasi  secara konvensional  adalah  karena  biayanya  relatif  murah  bila  dibandingkan  dengan identifikasi  menggunakan Polymerase  Chain  Reaction dan  Sekuensing  DNA namun  dapat  memberikan  hasil  yang  memuaskan.  Meskipun  demikian,  metode identifikasi bakteri secara konvensional ini memiliki beberapa kelemahan. Metode ini tidak dapat digunakan untuk  organisme yang belum teridentifikasi. Selain itu,
kadang  data  hasil  penelitian  menunjukan  organisme  yang  diidentifikasi menunjukkan  karakteristik  biokimia  yang  tidak  cocok  dengan  pola  setiap  genus dan  spesies  yang  dikenal  (Setiawan,  Sulistyanto,  &  Senjarini,  2017)  karena karakter  fisik  dan  biokimiawi  merupakan  karakter  yang  tidak  statis  dan  berubah karena  adanya  stress  dan  evolusi,  maka  hal  ini  juga  mempengaruhi  hasil identifikasi (Ochman & Santos, 2005).

## SIMPULAN
Spesies ikan semah yang diperoleh pada sungai Batang Merangin pada tiga stasiun pengamatan seluruhnya adalah Tor tambroides . Bakteri potensial probiotik yang  diperoleh  pada  saluran  pencernaan  ikan  semah  ( Tor  tambroides )  yaitu Bacillus sp. dan Alcaligenes sp.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis  berterimakasih  kepada  KEMENRISTEK  DIKTI  yang  mendanai penelitian ini dengan Nomer Kontrak : 066/LL10/PG/2020

## DAFTAR PUSTAKA
AFRC,  R.  F.  (1989).  Probiotics  in  man  and  animals. Journal  of  Applied Bacteriology , 66 (5), 365–378. https://doi.org/10.1111/jam.1989.66.issue-5 Afrilasari, W., Widanarni, & Meryandini, A. (2016). Effect of Probiotic Bacillus megaterium  PTB  1.4  on  the  Population  of  Intestinal  Microflora,  Digestive Enzyme Activity and the Growth of Catfish (Clarias sp.). Hayati Journal of Biosciences , 23 (4), 168–172. https://doi.org/10.1016/j.hjb.2016.12.005
Asaduzzaman, M., Iehata, S., Akter, S., Kader, M. A., Ghosh, S. K., Khan, M. N. A.,  &  Abol-Munafi,  A.  B.  (2018).  Effects  of  host  gut-derived  probiotic bacteria on gut morphology, microbiota composition and volatile short chain fatty  acids  production  of  Malaysian  Mahseer  Tor  tambroides. Aquaculture Reports , 9 , 53–61. https://doi.org/10.1016/j.aqrep.2017.12.003 Brenner,  D.  J.,  Krieg,  N.  R.,  &  Staley,  J.  T.  (2005). Bergey's  Manual®  of Systematic Bacteriology (Second Editiion) . Springer. Feliatra, Efendi, I., & Suryadi, E. (2004). Isolasi dan identifikasi bakteri probiotik dari  ikan  kerapu  macan  (Ephinephelus  fuscogatus)  dalam  upaya  efisiensi pakan  ikan. Jurnal  Natur  Indonesia , 6 (2),  75–80.  Retrieved  from http://blog.ub.ac.id/andyqpujianto/files/2013/04/Feliatra.pdf Hadioetomo,  R.  S.  (1990). Mikrobiologi  dasar  dalam  praktek:  teknik  dan prosedur dasar laboratorium . Retrieved from https://books.google.co.id/books?id=RSnSnQEACAAJ Hai,  N.  V.  (2015).  The  use  of  probiotics  in  aquaculture. Journal  of  Applied Microbiology , 119 (4), 917–935. https://doi.org/10.1111/jam.12886 Haryono, H. (2006). Biological aspects of tambra fish (Tor tambroides Blkr.) that exotic  and  rare  for  its  domestication. Biodiversitas,  Journal  of  Biological Diversity , 7 (2), 195–198. https://doi.org/10.13057/biodiv/d070222
Lazado,  C.,  Caipang,  C.  M.,  &  Estante-Superio,  E.  (2015).  Prospects  of  host- associated  microorganisms  in  fish  and  penaeids  as  probiotics  with immunomodulatory  functions. Fish  &  Shellfish  Immunology , 45 . https://doi.org/10.1016/j.fsi.2015.02.023
Macey, B.,  & Coyne, V. (2005).  Improved  growth rate and disease resistance in
farmed  Haliotis  midae  through  probiotic  treatment. Aquaculture , 245 ,  249– 261. https://doi.org/10.1016/j.aquaculture.2004.11.031
Manin,  F.,  Hendalia,  E.,  &  Yusrizal,  -.  (2012).  Potensi  Bakteri  Bacillus  dan Lactobacillus  sebagai  Probiotik  Untuk  Mengurangi  Pencemaran  Amonia pada Kandang Unggas. Jurnal Peternakan Indonesia (Indonesian Journal of Animal Science) , 14 (2), 360. https://doi.org/10.25077/jpi.14.2.360-367.2012
Ng,  C.  K.  (2004). Kings  of  the  Rivers:  Mahseer  in  Malaysia  and  the  Region . Retrieved from https://books.google.co.id/books?id=EYr7AAAACAAJ Ochman,  H.,  &  Santos,  S.  R.  (2005).  Exploring  microbial  microevolution  with microarrays. Infection, Genetics and Evolution , 5 (2), 103–108.
https://doi.org/10.1016/j.meegid.2004.09.002
Reda, R. M.,  Selim,  K. M.,  El-Sayed, H. M.,  &  El-Hady, M. A. (2018).  In vitro selection  and  identification  of  potential  probiotics  isolated  from  the gastrointestinal Tract of Nile Tilapia, Oreochromis niloticus. Probiotics and Antimicrobial Proteins , 10 (4), 692–703. https://doi.org/10.1007/s12602-017- 9314-6
Setiawan, B., Sulistyanto, D., & Senjarini, K. (2017). Karakterisasi Fisiologi dan Molekuler  Bakteri  Simbion-Nematoda  Entomopatogen  Berdasarkan  Sekuen Gen  Pengkode  16S  rRNA  dari  Bromo  Kabupaten  Probolinggo Characterization Physiology and Molecular Bacteria Symbiont- Entomopathogenic Nematodes Based of Gene Seq. Jurnal Ilmu Dasar , 18 (1), 39–42.
Sornplang,  P.,  &  Piyadeatsoontorn,  S.  (2016).  Probiotic  isolates  from unconventional  sources:  a  review. Journal  of  Animal  Science  and Technology , 58 (1). https://doi.org/10.1186/s40781-016-0108-2 Subagja, J., Kristanto, A. H., & Sulhi, M. (2013). Domestikasi Ikan Semah ( Tor Douronensis ) Melalui Pengembangan Budidaya . (2005), 1–7. Tan, C. K., Natrah, I., Suyub, I. B., Edward, M. J., Kaman, N., & Samsudin, A. A. (2019). Comparative study of gut microbiota in wild and captive Malaysian
Mahseer (Tor tambroides). MicrobiologyOpen , 8 (5). https://doi.org/10.1002/mbo3.734
Utomo, K. &. (2006). 39. Ikan Langka Sungai Musi.Pdf (pp. 309–330). pp. 309– 330. Retrieved from https://repository.ipb.ac.id/jspui/bitstream/123456789/42179/1/prosiding seminar nasional ikan IV37.pdf
Yulvizar,  C.,  Dewiyanti,  I.,  Defira,  N.  (2014).  Seleksi  Bakteri  Berpotensi Probiotik  dari  Ikan  Mas  (Cyprinus  Carpio)  Indegenous  Jantho  Berdasarkan Aktivitas  Antibakteri  secara  In  Vitro. Jurnal  Teknologi  Dan  Industri Pertanian Indonesia , 6 (2). https://doi.org/10.17969/jtipi.v6i2.2066