## PENGARUH SUBTITUSI TEPUNG, DAUN KELOR DAN TULANG IKAN TEMBANG TERHADAP SIFAT FISIKOKIMIA DAN DAYA TERIMA BISKUIT
Ira Y. Nuhalawang 1* , Anna Henny Talahatu 2 , Marselinus Laga Nur 3
1 Program Studi Ilmu Kesehatan Masyarakat, FKM Universitas Nusa Cendana
2 Bagian Gizi Kesehatan Masyarakat, FKM Universitas Nusa Cendana *Korespondensi: iyunita912@gmail.com

## Abstract
Kelor plants may be an alternative to a potential source of protein and calcium to satisfy the need for nourishment in pregnant mothers and infants. Food diversification can be made by making foods that contain high calcium from the calcium intake contained in fish bones. Pregnant women are one group that  is  very  at  risk  of  experiencing  malnutrition.  During  pregnancy,  the  need  for  nutritional  intake increases, but it is not balanced with the consumption of sufficient nutritious food.  Kelor-processing development with the addition of fish bones may be an alternative to the treatment of nutrient deficiency problems mainly in pregnant mothers and infants.  This study aims  to  determine  the  effect  of  adding Moringa leaf flour with tembang fish bone meal to the physicochemical properties and acceptability of biscuits.  The  research  conducted  was  an  experimental  study  using  factorial  completely  randomized design  (CRD),  namely  conducting  an  experiment  in  making  biscuits  with  wheat  flour  as  a  base ingredient by adding Moringa leaf flour and fishbone meal with treatment levels of 0%, 10%, 20% and 30%. The results showed that the addition of Moringa leaf flour with tembang fish bone meal had an effect  on  calcium  ( p=0,00 ),  phosphorus  content  ( p=0,00 ),  moisture  content  ( p=0,520 ),  ash  content ( p=0,00 ), hardness test ( p=0,152 ), taste ( p=0,00 ), aroma ( p=0,00 ) and texture ( p=0,043 ), and had no effect on color ( p=0,743 ) acceptability. For further researchers it is recommended to continue further research  with  other  nutritional  content  related  to  meeting  the  nutritional  needs  of  pregnant  women, breastfeeding mothers and infants as well as all circles of society.
Keywords: Biscuits, Nutritional Problems, Moringa Leaves, Fish Bones.

## Abstrak
Tanaman  kelor  dapat  dijadikan  sebagai  alternatif  sumber  protein  dan  kalsium  yang  potensial  untuk mencukupi kebutuhan gizi pada ibu hamil dan anak balita. Diversifikasi pangan dapat dilakukan dengan membuat jenis makanan yang mengandung kalsium tinggi dari pemanfaatan kalsium yang terkandung dalam  tulang  ikan.  Selama  masa  kehamilan  kebutuhan  akan  asupan  gizi  meningkat,  namun  tidak diimbangi  dengan  konsumsi  makanan  bergizi  yang  cukup.  Pengembangan  pengolahan  kelor  dengan penambahan tulang ikan dapat dijadikan alternatif penanganan masalah defisiensi gizi terutama pada ibu hamil dan anak balita.Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh penambahan tepung daun kelor dengan tepung tulang ikan tembang terhadap sifat fisikokimia dan daya terima biskuit. Penelitian yang  dilakukan  merupakan  penelitian  eksperimental  dengan  menggunakan  desain  rancangan  acak lengkap (RAL) faktorial yaitu melakukan eksperimen pembuatan biskuit berbahan dasar tepung terigu dengan menambahkan tepung daun kelor dan tepung tulang ikan dengan taraf perlakuan 0%, 10%, 20% dan  30%.  Hasil  penelitian  menunjukan  penambahan  tepung  daun  kelor  dengan  tepung  tulang  ikan tembang memberi pengaruh terhadap kalsium ( p=0,00 ), kadar fosfor ( p=0,00 ), kadar abu ( p=0,00 ) dan tidak  memberi  pengaruh  terhadap  kadar  air  ( p=0,520 ),  uji  kekerasan  ( p=0,152 ).  Daya  terima  rasa ( p=0,00 ),  aroma  ( p=0,00 )  dan  tekstur  ( p=0,043 ),  tidak  berpengarauh  terhadap  daya  terima  warna ( p=0,743 ).  Bagi  peneliti  selanjutnya  disarankan  untuk  melanjutkan  penelitian  lebih  lanjut  dengan kandungan gizi lainnya yang berkaitan untuk memenuhi kebutuhan gizi ibu hamil, ibu menyusi dan bayi balita maupun semua kalangan masyarakat.
Kata Kunci: Biskuit, Masalah Gizi, Daun Kelor, Tulang Ikan.

## Pendahuluan
Indonesia  merupakan  negara  dengan  masalah  gizi  yang  beragam.  Seiring  dengan meningkatnya prevalensi kasus akibat gizi lebih, prevalensi penyakit akibat gizi kurang masih tinggi. Ibu hamil merupakan salah satu kelompok yang sangat berisiko mengalami gizi kurang. Meningkatnya kebutuhan asupan gizi selama hamil sering tidak diimbangi dengan konsumsi yang cukup selama masa kehamilan. Ibu hamil yang memiliki berat badan rendah berdampak terhadap  risiko  melahirkan  dengan  berat  badan  lahir  rendah  (BBLR)  dan  kemungkinan timbulnya  implikasi  kesehatan  dalam  jangka  panjang. 1 Periode  1000  hari  pertama  kehidupan (HPK) dimulai sejak masa kehamilan 270 hari atau 9 bulan dan 730 hari atau 2 tahun pertama pasca  kelahiran.  Program  1000  hari  pertama  kehidupan  difokuskan  pada  ibu  hamil,  ibu menyusui,  bayi  baru  lahir  dan  anak  usia  di  bawah  dua  tahun  (baduta)  yang  bertujuan  untuk meningkatkan kualitas kehidupan 1000 hari pertama manusia. 2
Asupan zat gizi merupakan salah satu penyebab langsung yang dapat mempengaruhi zat gizi balita. Asupan zat gizi diantaranya yaitu zat gizi makro seperti energi karbohidrat, protein dan lemak. Balita dengan tingkat konsumsi energi dan protein yang mencukupi dan memenuhi kebutuhan tubuh akan berbanding lurus dengan status gizi baik. Peningkatan mutu konsumsi pangan dapat dilakukan melalui diversifikasi pengolahan pangan lokal, dan dijadikan alternatif dalam penanganan masalah defisiensi gizi terutama pada ibu hamil dan anak balita.
Daun    kelor  dapat  dijadikan  sebagai  alternatif  sumber  protein  dan  kalsium  yang potensial untuk mencukupi kebutuhan gizi pada ibu hamil dan anak balita. Tepung tulang ikan merupakan  salah  satu  produk  pengawetan  limbah  ikan  dalam  bentuk  kering  yang  digiling menjadi tepung. Dalam 100 gr tepung tulang ikan terdapat 735 mg kalsium; 9,2 g protein, 44 mg lemak, 345 mg fosfor, 78 mg zat besi; 24,5 g abu; 0,1 g karbohidrat dan mineral lainnya.. Hal  ini karena tepung daun kelor mengandung protein  3 kali lebih tinggi dibandingkan susu bubuk  fullcream  atau  9  kali  protein  yogurt  dan  kalsium  17  kali  lebih  tinggi  dibandingkan kalsium pada susu. 3 Pembuatan biscuit dengan penambahan tepung daun kelor dan tulang ikan tembang didasarkan karena kandungan mineral pada kandungan mineral yang tinggi dari kedua bahan tersebut
Biskuit dikonsumsi oleh seluruh kalangan usia, baik bayi hingga dewasa namun dengan jenis yang berbeda-beda. 4 Daun kelor dan tulang ikan memiliki kandungan protein, vitamin dan mineral yang memiliki potensi terapi dan makanan tambahan untuk anak-anak kekurangan gizi. Atas dasar permsalahan dan potensi daun kelor tersebut diatas maka dilakukan penelitian ini dengan  tujuan  utama  untuk  mengetahui  tentang  pengaruh  penambahan  tepung  daun  kelor dengan tepung tulang ikan tembang terhadap sifat fisikokimia dan daya terima biskuit.

## Metode
Jenis penelitian ini adalah eksperimen.  Disain penelitian ini menggunakan rancangan acak  lengkap  sederhana  dengan  perbandingan  1:1.  Perlakuan  dalam  penelitian  ini  adalah penambahan  daun  kelor  dan  tepung  ikan  10%,  20  %  dan  30%.  Penggunaan  proporsi  jenis shortening 1:2, 1:1, dan 2:1.
Tabel 1. Rancangan Percobaaan Pembuatan Biskuit
Perlakuan Perlakuan kombinasi Ulangan A T.Terigu (gr) B T.Daun Kelor : T.Ikan Tembang (gr) 1 2 3 A1 200 B1 0 P1P1 P1P1.1  P1P1.2  P1P1.3 A2 180 B2 10:10 (dari jumlah tepung terigu) P2P2 P2P2.1  P2P2.2  P2P2.3 A3 160 B3 20:20 (dari jumlah tepung terigu) P3P3 P3P3.1  P3P3.2  P3P3.3 A4 140 B4 30:30 (dari jumlah tepung terigu) P4P4 P4P4.1  P4P4.2  P4P4.3
Pengujian  sifat  fisikokimia  dilakukan  di  Laboratorium  Nutrisi  Pakan  Ternak  Politani Kupang dan uji daya terima dilaksanakan di Fakultas Kesehatan Masyarakat, Universitas Nusa Cendana.  Pengujian  daya  terima  menggunakan  uji  tingkat  kesukaan  atau  daya  terima  yang meliputi tingkat penerimaan suka atau tidak suka pada rasa, tekstur, warna dan aroma pada hasil olahan biscuit dengan penambahan tepung daun kelor dan tulang ikan tembang. Pengujian daya terima  dilakukan  pada  25  panelis  yang  tidak  terlatih.  Panelis  dalam  penelitian  ini  adalah mahasiswa/i FKM Undana. Uji sifat fisikokimia data dianalisis dengan menggunakan analisis ragam (Analysis of Varian) , dan diperoleh hasil uji yang berpengaruh nyata terhadap variabel pengamatan, maka dilanjutkan dengan uji Duncan Multiple Range Test (DMRT) dengan selang kepercayaan  5%  (α=0,05).  Data  yang  berhubungan  dengan  daya  terima  biscuit  dengan penambahan  tepung  daun  kelor  dan  tulang  ikan  akan  dianalisis  menggunakan  uji Friedman , yaitu  versi non  parametric dari Anova dengan  tingkat  signifikasi  0,05.  Penelitian  ini  telah mendapat  kelayakan etik  ( ethical  approval )  dari  Komisi  Etik  Penelitian Kesehatan,  Fakultas Kesehatan Masyarakat, Universitas Nusa Cendana dengan nomor: 2020113 – KEPK.
Peralatan  dan  bahan  yang  digunakan  dalam  pembuatan  biskuit  kelor  dengan penambangan tulang ikan  dimulai dari persiapan persiapan, pengolahan dan pengemasan dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Alat dan Bahan yang Digunakan dalam Pembuatan Biskuit
Alat Bahan Perlakuan P1 P2 P3 P4 Baskom Tepung terigu 200 gr 180 gr 160 gr 140 gr Oven Tepung daun kelor dan tepung tulang ikan tembang 0 gr 20 gr 40 gr 60 gr Mikser Telur 2 butir 2 butir 2 butir 2 butir Gelas Susu bubuk 57 gr 57 gr 57 gr 57 gr Loyang Margarin 250 gr 250 gr 250 gr 250 gr Spatula Gula 100 gr 100 gr 100 gr 100 gr Vanili 1 / 4 sdm 1 / 4 sdm ¼ sdm 1 / 4 sdm

## Hasil
1. Hasil Sifat Fisikokimia
a. Kadar Kalsium
Hasil uji statistik One Way Anova pada tingkat kepercayaan 95% menunjukan bahwa ada  pengaruh  yaitu  0.00  <  0.05  terhadap  kadar  kalsium  biskuit  dengan  penambahan  tepung daun kelor dan tepung tulang ikan tembang.
Tabel 3. Kadar kalsium biskuit dengan penambahan tepung daun kelor dengan tepung tulang ikan tembang
Perlakuan n Kalsium (%) Sig. P1 3 0.38 a .000 P2 3 6.11 c P3 3 12.33 d P4 3 2.20 b
Analisis  lanjutan, Duncan  Multiple  Range  Test  (DMRT) terhadap  kadar  kalsium menunjukan  beda  nyata  kadar  kalsium  biskuit  dengan  penambahan  tepung  daun  kelor  dan tepung tulang ikan tembang.
b. Kadar Fosfor
Hasil uji statistik One Way Anova pada tingkat kepercayaan 95% menunjukan bahwa ada pengaruh yaitu 0.00 < 0.05 terhadap kadar fosfor biskuit dengan penambahan tepung daun kelor dan tepung tulang ikan tembang.
Tabel 4. Kadar fosfor biskuit dengan penambahan tepung daun kelor dengan tepung tulang ikan tembang
Perlakuan n Fosfor (mg/L) Sig. P1 3 0.84 a .000 P2 3 13.84 c P3 3 19.05 d P4 3 6.86 b
Analisis  lanjutan, Duncan  Multiple  Range  Test  (DMRT) terhadap  kadar  fosfor menunjukan beda nyata kadar fosfor biskuit dengan penambahan tepung daun kelor dan tepung tulang ikan tembang.
c. Kadar Air Hasil uji statistik One Way Anova pada tingkat kepercayaan 95% menunjukan bahwa tidak ada pengaruh yaitu 0.520 > 0.05 terhadap kadar air biskuit dengan penambahan tepung daun kelor dan tepung tulang ikan tembang.
Tabel 5. Kadar air biskuit dengan penambahan tepung daun kelor dengan tepung tulang ikan tembang
Perlakuan n Air (%) Sig. P1 3 2.78 a .520 P2 3 2.96 a P3 3 3.34 a P4 3 2.95 a
Analisis  lanjutan, Duncan  Multiple  Range  Test  (DMRT) menunjukan  bahwa  taraf perlakuan P1 tidak berbeda nyata dengan taraf pelakuan lainnya.
d. Kadar Abu
Hasil uji statistik One Way Anova pada tingkat kepercayaan 95% menunjukan bahwa ada pengaruh yaitu 0.00 < 0.05 terhadap kadar abu pada biskuit dengan penambahan tepung daun kelor dan tepung tulang ikan tembang.
Tabel 6. Kadar abu biskuit dengan penambahan tepung daun kelor dengan tepung tulang ikan tembang
Perlakuan n Abu (%) Sig. P1 3 1.24 a .000 P2 3 2.36 c P3 3 2.61 d P4 3 1.79 b
Analisis  lanjutan, Duncan  Multiple  Range  Test  (DMRT) terhadap  kadar  abu menunjukan beda nyata kadar abu biskuit dengan penambahan tepung daun kelor dan tepung tulang ikan tembang.
e. Uji Kekerasan Hasil uji statistik One Way Anova pada tingkat kepercayaan 95% menunjukan bahwa
tidak ada pengaruh yaitu 0.152 > 0.05 terhadap kekerasan biskuit dengan penambahan tepung daun kelor dan tepung tulang ikan tembang.
Tabel 7. Kadar air biskuit dengan penambahan tepung daun kelor dengan  tepung tulang ikan tembang
Perlakuan n Kekerasan (mm) Sig. P1 3 0.27 a .152 P2 3 0.53 a P3 3 0.70 a P4 3 0.70 a
Analisis  lanjutan, Duncan  Multiple  Range  Test  (DMRT) terhadap  kadar  air  biskuit menunjukan bahwa taraf perlakuan P1 tidak berbeda nyata dengan taraf pelakuan lainnya. 2. Hasil Uji Daya Terima Biskuit
Uji  daya  terima  dengan  metode  test  hedonik  dilakukan  untuk  mengetahui  tingkat kesukaan  oleh  konsumen  terhadap  25  panelis.  Analisa  data  penelitian  ini  yaitu  analisis laboratorium berupa sifat fisikokimia (Kadar Air, Kadar Abu, Kadar fosor, kadar kalsium, dan uji kekerasan).
Tabel 8. Hasil Uji daya terima
Kriteria  Perlakuan Frekuensi panelis 1 2 3 4 5 Sig. Panelis   %  Panelis   % Panelis   %  Panelis   %  Panelis   % Aroma P1 (0%) 0 0 0 0 5 20 9 36 11 44 .000 P2 (10%) 0 0 9 36
9 36 3 12 4 16 P3 (20%) 0 0 9 36
10 40 3 12 3 12 P4 (30%) 2 8 12 48 3 12 4 16 4 16 Rasa P1 (0%) 0 0 0 0 1 4 8 32 16 64 .000 P2 (10%) 0 0 5 20
7 28 9 36 4 16 P3 (20%) 0 0 6 24
5 20 10 40 4 16 P4 (30%) 0 0 5 20 4 16 10 40 6 24 Tekstur P1 (0%) 0 0 0 0 3 12 13 52 9 36 .043 P2 (10%) 0 0 1 4
4 16 15 60 5 20 P3 (20%) 0 0 1 4
6 24 12 48 6 24 P4 (30%) 0 0 3 12 5 20 13 52 4 16 Warna P1 (0%) 0 0 0 0 6 24 7 28 12 48 .043 P2 (10%) 0 0 0 0
2 8 17 68 6 24 P3 (20%) 0 0 1 4
3 12 11 44 10 40 P4 (30%) 0 0 1 4 3 12 10 40 11 44
Keterangan: 1 (sangat tidak suka), 2  (tidak suka) , 3 (biasa), 4 (suka), 5 (sangat suka)
Penilaian panelis untuk aroma biskuit tertinggi adalah terdapat pada biskuit perlakuan 20%  kriteria  biasa  10  panelis  (44%)  dan  aroma  biskuit  terendah  adalah  biskuit  dengan perlakuan 10% dengan kriteria sangat suka 3 panelis (12%). Hasil uji Friedman menunjukan nilai signifikansi yaitu 0.00 < 0.05 yang berarti penambahan tepung daun kelor dan tulang ikan tembang sangat berpengaruh signifikan terhadap aroma biskuit.
Penilaian  panelis  untuk  rasa  biskuit  tertinggi  adalah  terdapat  pada  biskuit  perlakuan 20% dan 30% dengan kriteria suka 10 panelis (40%) dan rasa terendah adalah biskuit dengan penambahan 10% dengan kriteria sangat suka 4 panelis (16%). Hasil uji Friedman menunjukan
nilai signifikansi yaitu 0.00 < 0.05 yang berarti penambahan tepung daun kelor dan tulang ikan tembang sangat berpengaruh signifikan terhadap rasa biskuit.
Pendapat panelis untuk tekstur biskuit tertinggi adalah dengan perlakuan 10% dengan kriteria suka 15 panelis  (60%)  dan  tekstur  terendah adalah  biskuit dengan penambahan 30% dengan kriteria sangat suka 4 panelis (16%). Hasil uji Friedman menunjukan nilai signifikansi yaitu 0.043 < 0.05 yang berarti penambahan tepung daun kelor dan tulang ikan tembang sangat berpengaruh signifikan terhadap tekstur biskuit.
Pendapat  panelis  untuk  warna  biskuit  tertinggi  adalah  biskuit  dengan  perlakuan  10% kriteria suka 17 panelis (68%) dan warna terendah adalah biskuit dengan penambahan 20% dan 30% dengan kriteria biasa 3 panelis (12%). Hasil uji Friedman menunjukan nilai signifikansi yaitu 0.743 > 0.05 yang berarti penambahan tepung daun kelor dan tulang ikan tembang tidak berpengaruh signifikan terhadap warna biskuit.

## Pembahasan

## 1. Sifat Fisikokimia Biskuit
a. Kadar Kalsium
Hasil analisis One Way Anova menunjukan penambahan tepung daun kelor dan tulang ikan tembang dengan perlakuan 0%, 10%, 20% dan 30% berpengaruh nyata yaitu 0,00 < 0,05 terhadap kadar kalsium biskuit. Hasil uji lanjut Ducan menunjukan bahwa ada perbedaan pada setiap perlakuan. Pada perlakuan P1 atau 0% diperoleh hasil 0.38 %, perlakuan P2 diperoleh hasil 2-20 %, perlakuan P3 atau 20% diperoleh hasil 6.11 % dan perlakuan P4 diperoleh hasil 12.33  %.  Hal  ini  menunjukan  bahwa  kadar  kalsium  tertinggi  pada  biskuit  dengan  perlakuan 30%  dan  kadar  kalsium  terendah  pada  biskuit  dengan  perlakuan  0%.  Kadar  kalsium  biskuit dengan penambahan tepung daun kelor dan tepung tulang ikan tembang pada setiap perlakuan cenderung  mengalami  peningkatan.  Meningkatanya  kadar  kalsium  dari  setiap  perlakuan  ini dikarenakan terdapat bahan yang mengandung kalsium yang cukup tinggi yaitu tepung daun kelor dan tepung tulang ikan. Hasil analisis menunjukan bahwa kadar kalsium tertinggi pada biskuit dengan perlakuan 30% dan kadar kalsium terendah pada biskuit dengan perlakuan 0%. Kadar  kalsium  biskuit  dengan  penambahan  tepung  daun  kelor  dengan  tepung  tulang  ikan tembang  pada  setiap  perlakuan  cenderung  mengalami  peningkatan.  Meningkatnya  kadar kalsium dari setiap perlakuan ini dikarenakan terdapat bahan yang mengandung kalsium yang cukup tinggi yaitu tepung daun kelor dan tepung tulang ikan. Tulang ikan mengandung mineral kalsium sehingga mempengaruhi nilai kalsium suatu produk yang dibuat dengan tepung tulang ikan. 5
Kebutuhan tubuh akan kalsium selama kehamilan sangat penting. Kalsium diperlukan untuk  pertumbuhan  tulang-tulang  bayi  maupun  balita  dan  anak-anak  sehingga  perlu mengkonsumsi  kalsium  lebih  banyak  daripada  biasanya.  Kebutuhan  kalsium  selama  hamil adalah 1.200 mg per hari idealnya 1.500 mg per hari, kalsium tidak hanya didapat dari tablet namun  alternatif  sumber  kalsium  lain  yaitu  biskuit  dengan  penambahan  tepung  daun  kelor dengan  tulang  ikan  tembang  karena  mengandung  kadar  kalsium  yang  tinggi.  Penelitian  ini sejalan dengan penelitian sebelumnya yang menyatakan bahwa kadar kalsium diperoleh setiap perlakuan  penambahan  tepung  tulang  berkisar  antara  4452-19574  mg/kg.  Fortifikasi  tepung tulang  bandeng  dengan  perlakuan  penambahan  tepung  tulang  ikan  bandeng  dapat meningkatkan kadar kalsium crackers yang dihasilkan. 6
b. Kadar Fosfor
Hasil analisis One Way Anova menunjukan bahwa penambahan tepung daun kelor dan tulang ikan tembang dengan perlakuan 0%, 10%, 20% dan 30% berpengaruh nyata yaitu 0.000 < 0.05 terhadap kadar fosfor biskuit. Hasil uji lanjut Ducan menunjukan bahwa ada perbedaan
pada setiap perlakuan. Pada perlakuan P1 atau 0% diperolah hasil 0.84 mg/L, perlakuan P2 atau 10%  diperolah  hasil  6.86  mg/L,  perlakuan  P3  atau  20%  diperoleh  hasil  13.84  mg/L  dan perlakuan P4 diperoleh hasil 19.05 mg/L. Hal ini menunjukan bahwa kadar fosfor tertinggi pada biskuit dengan perlakuan 30% dan kadar fosfor terendah pada biskuit dengan perlakuan 0%. Perbedaan  kandungan  fosfor  pada  setiap  perlakuan  dikarenakan  biskuit  yang  dilakukan perlakuan dengan tepung daun kelor dan tulang ikan tembang memiliki kandungan fosfor yang lebih tinggi dibandingkan dengan biskuit tanpa penambahan tepung daun kelor dan tulang ikan tembang. Hal ini karena tepung daun kelor dan tulang ikan tembang merupakan sumber mineral kalsium dan fosfor pada bahan baku biskuit, diketahui bahwa dalam 100 gr tepung tulang ikan terdapat 345 mg fosfor
Fosfor  sebagai  fosfat  memiliki  peranan  penting  yaitu  dalam  fungsi  sel  hidup  dan struktur.  Fosfor  berfungsi  sebagai  pembentukan  tulang,  persenyawaan  organik,  karbohidrat, metabolisme energi, lemak dan asam  amino,  bagian koenzim dan transportasi  asam  lemak. 7 . Perbedaan  kandungan  fosfor  pada  setiap  perlakuan  dikarenakan  biskuit  yang  dilakukan perlakuan dengan tepung daun kelor dan tulang ikan tembang memiliki kandungan fosfor yang lebih tinggi dibandingkan dengan biskuit tanpa penambahan tepung daun kelor dan tulang ikan tembang. Hal ini karena tepung daun kelor dan tulang ikan tembang merupakan sumber mineral kalsium dan fosfor pada bahan baku biskuit. Dalam 100 gr tepung tulang ikan terdapat 345 mg fosfor.
Fosfor berhubungan erat dengan kalsium. Fosfor berfungsi pada pembentukan rangka dan  gigi  janin  serta  kenaikan  metabolisme  kalsium  ibu.  Jika  jumlah  didalam  tubuh  tidak seimbang sering mengakibatkan kram pada tungkai. Biskuit tepung daun kelor dengan tulang ikan tembang dapat dijadikan alternatif karena tinggi kandungan mineral yang dapat mencukupi kebutuhan ibu selama kehamilan maupun dalam proses tumbuh kembang anak-anak. Penelitian ini  sejalan  dengan  penelitian  sebelumnya  yang  menyatakan  bahwa  perlakuan  kontrol  yaitu tanpa  penambahan  tepung  tulang  ikan  sebesar  0,4  mg/kg.  Fortifikasi  tepung  tulang  bandeng dapat meningkatkan nilai kandungan fosfor. 6
c. Kadar Air
Hasil  analisis  One  Way  Anova  menunjukan  penambahan  tepung  daun  kelor  dan tulang ikan tembang dengan perlakuan 0%, 10%, 20% dan 30% tidak berpengaruh nyata yaitu 0.520 > 0,05 terhadap kadar air biskuit. Hasil uji lanjut Ducan menunjukan bahwa tidak ada perbedaan nyata antar nilai kadar air pada perlakuan P1 atau 0% dengan nilai 2,78 % , P2 atau 10% dengan nilai 2,96 %, P3 atau 20% dengan nilai 3,34 % dan P4 atau 30% dengan nilai 2,95 %. Hal ini menunjukan bahwa kadar air tertinggi pada biskuit dengan perlakuan 20% dan kadar air terendah pada biskuit dengan perlakuan 0%. Berdasarkan persyaratan mutu biskuit SNI 01- 2937-1992  yang  menyatakan  bahwa  kadar  air  maksimal  biskuit  adalah  5  %  maka  semua perlakuan  biskuit  memenuhi  persyaratan  SNI  01-2937-2011.  Kadar  air  pada  biskuit  akan mempengaruhi daya terima terhadap tekstur dan tingkat kekerasan biskuit. Selain itu kadar air yang  rendah  diharapkan  mampu  memperpanjang  masa  simpan  biskuit  menjadi  lebih  tahan lama.
Kadar air berfungsi menentukan kesegaran dan daya awet pada bahan pangan. Kadar air yang sangat tinggi akan mengakibatkan mudahnya masuk bakteri, khamir dan kapang untuk berkembang  biak  sehingga  terjadi  perubahan  pada  bahan  pangan  yang  dapat  mempercepat adanya pembusukan. 8 Kadar air pada biskuit akan mempengaruhi daya terima terhadap tekstur dan  tingkat  kekerasan  biskuit.  Selain  itu  kadar  air  yang  rendah  diharapkan  mampu memperpanjang masa simpan biskuit tepung daun kelor dengan tulang ikan tembang menjadi lebih tahan lama dan masih layak untuk dikonsumsi tanpa mengurangi nilai gizi dari biskuit. Penelitian ini sejalan dengan dengan penelitian sebelumnya yang menyatakan bahwa semakin
meningkat proporsi tepung ikan patin dan kecabah kedelai semakin tinggi pula kadar air. 9 d. Kadar Abu
Hasil analisis One Way Anova menunjukan penambahan tepung daun kelor dan tulang ikan tembang dengan perlakuan 0%, 10%, 20% dan 30% berpengaruh nyata yaitu 0,00 < 0,05 terhadap  kadar  abu  biskuit.  Hasil  uji  lanjut  Ducan  menunjukan  bahwa  ada  perbedaan  pada setiap perlakuan. Pada perlakuan P1 atau 0% diperoleh hasil 1,24 %, perlakuan P2 atau 10% diperoleh hasil 1,79 %, pada perlakuan P3 atau 20% diperoleh hasil 2,36 % dan pada perlakuan P4 atau 30% diperoleh hasil 2,61 %. Hasil analisis menunjukan bahwa kadar abu tertinggi pada biskuit  dengan  perlakuan  20%  dan  kadar  abu  terendah  pada  biskuit  dengan  perlakuan  0%. Berdasarkan persyaratan kualitas biskuit SNI 01-2937-1992 yang menyatakan bahwa kadar abu paling tinggi biskuit adalah 2% maka yang memenuhi syarat adalah biskuit dengan perlakuan P1  dan  P2,  untuk  P3  dan  P4  belum  memenuhi  syarat  maksimum.  Meskipun  demikian, kandungan abu beberapa biskuit dan crackers komersial dapat berkisar antara 0,5 – 4,3 %. 10 . Kadar  abu suatu  bahan  menggambarkan banyaknya mineral  yang tidak terbakar menjadi  zat yang  dapat  menguap.  Semakin  besar  kadar  abu  suatu  bahan  makanan,  menunjukan  semakin tinggi  mineral  yang  dikandung  bahan  tersebut.  Peningkatan  kadar  abu  pada  biskuit  dengan penambahan tepung daun kelor dan tepung tulang ikan tembang disebabkan oleh kandungan mineral pada kedua bahan tersebut.
Kadar  abu  dipengaruhi  oleh  adanya  kandungan  mineral-mineral  awal  dalam  bahan baku.  Nilai  kadar  abu  cenderung  meningkat  mulai  dari  perlakuan  P1  hingga  perlakuan  P4. Kadar abu biskuit meningkat  bersamaan dengan semakin bertambahnya jumlah tepung daun kelor dan tulang ikan tembang dalam formulasi biskuit. Penambahan jumlah kadar abu biskuit ini disebabkan oleh adanya tambahan mineral yang berada dalam tepung daun kelor dan tulang ikan tembang. 11
Penentuan kadar abu total dapat digunakan untuk menentukan baik atau tidaknya suatu olahan  yang  digunakan  sebagai  parameter  nilai  gizi.  Kadar  abu  yang  terdapat  dalam  biskuit tepung daun kelor dan tulang ikan tembang cukup tinggi atau memenuhi syarat SNI sehinggga dapat  dijadikan  alternatif  cemilan  bagi  ibu  hamil  dan  juga  anak-anak  dalam  peroses pertumbuhan.  Penelitian  ini  sejalan  dengan  penelitian  sebelumnya  yang  menyatakan  bahwa kadar  abu  dari  biskuit  cenderung  meningkat  dari  perlakuan  A  (0%)  sebesar  0,62%  hingga perlakuan E (20%) sebesar 3,89%. 11
e. Uji Kekerasan
Hasil analisis menunjukan bahwa kekerasan dengan perlakuan 20% dan 30% memiliki kekerasan paling tinggi dan perlakuan 0% memiliki  kekerasan terendah. Terdapat perbedaan jarak,  yang  mana  sampel  ditekan  agar  terpisah  ketika  puncak  beban  dan  meningkat  dari perlakuan P1 hingga perlakuan P4.
Tulang ikan patin dapat meningkatkan nilai uji kekerasan suatu produk karena pengaruh kadar air dan komponen kimia lainnya. 12 Perbedaan berat, tebal dan diameter biskuit formulasi dengan  biskuit  komersial  disebabkan  karena  pembuatan  biskuit  formulasi  dilakukan  secara manual  khususnya  pada  waktu  pencetakan  dibandingkan  dengan  biskuit  komersial  yang menggunakan  mesin.  Penelitian  ini  sejalan  dengan  penelitian  sebelumnya  yang  menemukan bahwa kekerasan biskuit tertinggi  yaitu subtitusi 10% dengan nilai  kekerasan 33,79 newton, dan terdapat pengaruh jenis subtitusi terhadap kekerasan biskuit. 13
2. Uji Daya Terima Biskuit
a. Aroma
Penambahan  tepung  daun  kelor  dan  tepung  ikan  tembang  memberi  pengaruh  pada aroma  biskuit.  Panelis  memberikan  penilaian  tinggi  pada  biskuit  dengan  perlakuan  20%. Biskuit dengan perlakuan 30% memiliki penilaian kesukaan terendah. Tingkat kesukaan panelis
cenderung  menurun.  Hal  ini  dikarenakan  aroma  tepung  daun  kelor  dan  tulang  ikan  sedikit tercium sehingga memberikan penilaian rendah terhadap panelis. Aroma adalah rasa atau bau yang  sangat  subyektif  serta  sulit  diukur  karena  setiap  orang  mempunyai  sensitifitas  dan kesukaan yang berbeda.
Biskuit tepung daun kelor dengan tulang ikan tembang memiliki aroma yang khas yaitu aroma ikan tembang yang sangat tercium yang menutupi aroma daun kelor sehingga diminati oleh setiap kalangan dari ibu hamil, ibu menyususi juga anak-anak. Meskipun demikian setiap individu  memiliki  kesukaan  yang  berlainan.  Penelitian  ini  sejalan  dengan  penelitian penambahan tepung daun kelor dan ikan lele terhadap crackers yang menyatakan bahwa uji daya terima terhadap aroma pada perlakuan A1 tergolong disukai. 14
b. Rasa
Penambahan  tepung  daun  kelor  dan  tepung  ikan  tembang  menghasilkan  pengaruh terhadap  rasa  biskuit.  Panelis  memberikan  yang  penilaian  tinggi  pada  biskuit  yang perlakuannya  20%  dan  30%.  Panelis  memberikan  penilaian  rendah  pada  biskuit  dengan perlakuan 10% secara keseluruhan keempat perlakuan termasuk dalam kategori suka dan sangat suka.  Hal  ini  dikarenakan  semakin  banyak  konsentrasi  tepung  ikan  yang  ditambahkan  maka rasanya semakin gurih. Sifat dasar yang dimiliki tepung ikan adalah gurih. 15 Senyawa kimia, suhu,  konsentrasi  dan  interaksi  dengan  komponen  rasa  merupakan  faktor  yang  juga mempengaruhi penilaian panelis terhadap rasa. 13
Rasa ikan yang kuat dalam biskuit tepung daun kelor dan tulang ikan tembang tembang menambah rasa suka terhadap produk tersebut sehingga digemari oleh ibu hamil maupun anak- anak yang dapat membantu dalam proses tumbuh kembang anak karena kandungan gizi yang juga tinggi. Penelitian ini sejalan penelitian penambahan tepung labu kuning dan tepung ikan lele terhadap biskuit yang menyatakan bahwa daya terima terhadap  rasa  menunjukan bahwa rasa  biskuit  dengan  penambahan  tepung  labu  kuning  dan  tepung  ikan  lele  20%  disukai  oleh mahasiswa dan anak-anak karena rasanya manis dan gurih. 16
c. Tekstur
Tekstur  dan  konsistensi  suatu  bahan  akan  mempengaruhi  cita  rasa  yang  ditimbulkan bahan tersebut karena dapat mempengaruhi kecepatan timbulnya rangsangan terhadap kelenjar air liur. 17 Sedangkan menurut penelitian biskuit tepung daun kelor dengan penambahan jamur tiram menyatakan bahwa tekstur biskuit keras, dipengaruhi komposisi bahan. 18
Penambahan tepung daun kelor dan tepung ikan tembang memberi pengaruh terhadap tekstur biskuit yang dihasilkan, tekstur biskuit dirasakan dari kekerasan biskuit. Tekstur yang banyak disukai oleh panelis terdapat pada perlakuan 10%, karena biskuit ini memiliki tekstur yang  baik  dan  terasa  renyah.  Penilaian  panelis  paling  rendah  terdapat  pada  biskuit  yang perlakuannya 30%, karena teksturnya yang sedikit keras. Hasil analisis uji kekerasan biskuit menunjukan nilai kekerasan biskuit menunjukan biskuit dengan perlakuan 20% dan 30%. Hal tersebut  dikarenakan  beberapa  faktor  antara  lain  formulasi  biskuit,  campuran  tepung  terigu, tepung ikan yang digunakan serta ketebalan biskuit. 13
Tekstur  dari  biskuit  tepung  daun  kelor  dengan  tulang  ikan  tembang  sangat  renyah sehingga membantu ketika anak-anak mengkonsumsinya dapat diolah dengan baik dan mudah dicerna oleh tubuh. Penelitian ini sejalan dengan dengan penelitian penambahan tepung ikan patin dan tepung kecabah kedelai untuk biskuit balita gizi kurang menyatakan bahwa semakin tinggi subtitusi tepung ikan patin dan tepung kecabah kedelai akan menambah kekerasan biskuit dimana terjadi penurunan volume biskuit. 9
d. Warna
Penambahan  tepung  daun  kelor  dan  tepung  ikan  tembang  tidak  memberi  pengaruh terhadap  warna  biskuit  yang  dihasilkan.  Penilaian  kesukaan  panelis  terhadap  warna  tetinggi
adalah  biskuit  dengan  perlakuan  10%.  Penilaian  kesukaan  terhadap  warna  terendah  adalah biskuit  dengan  perlakuan  20%  dan  30%.  Warna  yang  dihasilkan  pada  perlakuan  0%  terlihat warna  kuning  kecoklatan  sedangkan  pada  perlakuan  10%,  20%  dan  30%  cenderung  kuning kehijauan. Warna yang terlihat pada biskuit disebabkan karena terjadi proses pemanggangan dan juga penambahan tepung daun kelor dan tepung tulang ikan.
Makanan yang telihat enak dan begizi belum menjamin bahwa makanan tersebut disukai oleh konsumen apabila bahan pangan tersebut memiliki warna yang kurang sedap dipandang atau menyimpang dari warna yang seharusnya. Anak-anak cenderung melihat biskuit dengan warna yang menarik dan bentuk yang lucu. Bentuk dari biskuit tepung daun kelor dengan tulang ikan  tembang  seperti  biskuit  komersil  biasa.  Namun  karena  adanya  warna  hijau  daun  kelor, biskuit  terlihat  hijau  keemasan,  enak  dipandang  dan  menarik  bagi  anak-anak  bahkan  setiap kalangan.  Hasil  penelitian  ini  juga  sejalan  dengan  penelitian  penambahan  tepung  ikan  lele dumbo  dan  daun  bangun  pada  biskuit  yang  menyatakan  bahwa  biskuit  dengan  penambahan 10% tepung ikan lele dan daun bangun lebih banyak disukai. 19 Namun, berdasarkan Uji Man Whitney warna dari perlakuan biskuit menunjukan bahwa penambahan tepung ikan lele dan daun bangun tidak memberi pengaruh nyata terhadap warna yang dihasilkan. Penilaian panelis terhadap  daya  terima  biskuit  secara  keseluruhan  semakin  tinggi  perlakuan  maka  semakin kurang disukai oleh panelis. Biskuit dengan perlakuan yang paling disukai adalah 10% dan 20% karena pada perlakuan tersebut menunjukan sedikit panelis yang tidak suka pada produk biskuit tersebut.

## Kesimpulan
Dari hasil dan pembahasan maka dapat ditarik kesimpulan sebagai berikut:
1. Penambahan  tepung  daun  kelor  dan  tepung  tulang  ikan  tembang  dengan  perlakuan  0%, 10%, 20% dan 30% memberi pengaruh terhadap kadar kalsium.
2. Penambahan  tepung  daun  kelor  dan  tepung  tulang  ikan  tembang  dengan  perlakuan  0%, 10%, 20% dan 30% memberi pengaruh terhadap kadar Fosfor.
3. Penambahan  tepung  daun  kelor  dan  tepung  tulang  ikan  tembang  dengan  perlakuan  0%, 10%, 20% dan 30% tidak memberi pengaruh terhadap kadar air.
4. Penambahan  tepung  daun  kelor  dan  tepung  tulang  ikan  tembang  dengan  perlakuan  0%, 10%, 20% dan 30% memberi pengaruh terhadap kadar Abu.
5. Penambahan  tepung  daun  kelor  dan  tepung  tulang  ikan  tembang  dengan  perlakuan  0%, 10%, 20% dan 30% tidak memberi pengaruh terhadap Kekerasan biskuit.
6. Penambahan  tepung  daun  kelor  dan  tepung  tulang  ikan  tembang  dengan  perlakuan  0%, 10%, 20% dan 30% memberi pengaruh terhadap daya terima aroma, rasa dan tekstur namun tidak memberi pengaruh terhadap warna biskuit.
7. Hasil analisis sifat fisikokimia pada keempat perlakuan kandungan gizi yang terdapat kadar air  yang  tinggi  pada  biskuit  dengan  perlakuan  P3  yaitu  3.34%,  kadar  abu  tertinggi  pada biskuit  dengan  perlakuan  P4  yaitu  2.61%,  kadar  fosfor  tertinggi  pada  biskuit  dengan perlakuan P4 yaitu 19.05 mg/L, kadar kalsium tertinggi pada bikuit dengan perlakuan P4 yaitu 12.33% dan kekerasan tertinggi pada perlakuan P3 dan P4 yaitu 0.70 mm.
Disarankan untuk penelitian selanjutnya sebagai berikut: (1) Perlu dilakukan perbaikan mutu  daya  terima  biskuit  dan  juga  prateatmen  lan  dalam  pengolahan  tepung  daun  kelor  dan tepung tulang ikan tembang serta menambahkan bahan  pangan yang bisa mengurangi aroma amis  pada  biskuit,  dan  (2)  Pengaruh  pemberian  biskuit  multigizi  berbahan  dasar  kelor  dan tulang ikan terhadap peningkatan kadar kalsium dalam darah dan status gizi pada ibu hamil dan anak balita.

## Daftar Pustaka
1.   Andriana S D. Uji Daya Terima dan Kandungan Gizi Biskuit dengan Penambahan Tepung Ikan Lele Dumbo (Clarias Gariepinus) dan Daun Bangun Bangun (Coleus Ambonicus :our) [Internet]. Skripsi Universitas Sumatra Utara. Universitas Sumatra Utara; 2017. Available from: http://repositori.usu.ac.id
2.   Alkham F. Uji Kadar Protein dan Organoleptik Biskuit Tepung Terigu dan Tepung Daun Kelor (Moringa Oleifera) dengan Penambahan Jamur Tiram (Pleurotus Ostreatus). Artik Publ Ilm [Internet]. 2014;11(c):363–7. Available from: http://eprints.ums.ac.id/28730/
3.   Asni Y. Studi Pembuatan Biskuit dengan Penambahan Tepung Tulang Ikan Patin [Internet]. Skripsi. Institut Pertanian Bogor. Institut Pertania Bogor; 2004. Available from: https://repository.ipb.ac.id/handle/123456789/19598?show=full
4.   Akhmadi M., Imra, Maulianawati D. Fortifikasi Kalsium dan Fosfor pada Crackers dengan Penambahan Tepung Tulang Ikan Bandeng (Chanos chanos) Calcium. J Ilm Perikan dan Kelaut [Internet]. 2019;11(1):49–54. Available from: https://repository.ipb.ac.id/handle/123456789/87853
5.   Evi L, Budiono Irwan. Prevalensi dan Determinan Kejadian Gizi Kurang pada Balita. J Kesehat Masy [Internet]. 2010;5(2):138–44. Available from: http://journal.unnes.ac.id/index.php/kemas%0APREVALENSI
6.   Eny Maghfiroh. Pengaruh Konsentrasi Penambahan Tepung Ikan Banjar (Rastrelliger Sp) dalam Tepung Ubi Jalar pada Pembuatan Biscuit PMT Terhadap Kadar Potein dan Daya Terimanya [Internet]. Tesis Universitas Negeri Semarang. Semarang; 2012. Available from: http://lib.unnes.ac.id/id/eprint/12671
7.   Kholis N, Hadi DF. Pengujian Bioassay Biskuit Balita yang Disuplementasi Konsentrat Protein Daun Kelor (Moringa Oleifera) pada Model Tikus Malnutrisi. J Teknol Pertan [Internet]. 2010;11(3):144–51. Available from: https://jtp.ub.ac.id/index.php/jtp/article/download/320/398
8.   Mahmuda S. Pengaruh Substitusi Tepung Tulang Ikan Lele (Clarias Batrachus) Terhadap Kadar Kalsium, Kekerasan, dan Daya Terima Biskuit. J Publ [Internet]. 2013;13(april):1– 13. Available from: http://eprints.ums.ac.id/25588/11/NASKAH_PUBLIKASI.pdf
9.   Pramandani Merita, Razak M, Sulistiastik. Pengembangan Makanan Pendamping Air Susu Ibu (MPASI) Berbasis Tepung Ikan Patin (Pangasius Sp.) dan Tepung Kecambah Kedelai (Glycine Max) untuk Biskuit Balita Gizi Kurang Usia 12-24 Bulan. J Ilm [Internet]. 27(1):30–8. Available from: https://vidya.wisnuwardhana.ac.id/index.php/vidya/article/view/119
10.  Putra M, Nopianti R, Herpandi H. Fortifikasi Tepung Tulang Ikan Gabus (Channa Striata) Pada Kerupuk Sebagai Sumber Kalsium. J Teknol Has Perikan [Internet]. 2015;4(2):128–39. Available from: http://ejournal.unsri.ac.id/index.php/fishtech
11.  Pratama RI, Rostini I, Liviawaty E. Karakteristik Biskuit dengan Penambahan Tepung Tulang Ikan Jangilus ( Istiophorus Sp .). J Akuatika [Internet]. 2014;Vol. V(1):30–9. Available from: http://jurnal.unpad.ac.id/akuatika/article/view/3702
12.  Passos MEA dos, Moreira CFF, Pacheco MTB, Takase I, Lopes MLM, Valente-Mesquita VL. Proximate and mineral composition of industrialized biscuits. Food Sci Technol [Internet]. 2013 May 17 [cited 2021 Mar 24];33(2):323–31. Available from: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0101- 20612013000200017&lng=en&tlng=en
13.  Rohimah I, Sudaryati E, Nasution E. Analisis Energi dan Protein serta Uji Daya Terima Biskuit Tepung Labu Kuning dan Ikan Lele. J Chem Inf Model [Internet]. 2013;53(9):1689–99. Available from:
https://jurnal.usu.ac.id/index.php/gkre/article/view/5160
14.  Sunita A. Prinsip dasar ilmu gizi [Internet]. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama; 2010. 333 halaman. Available from:
https://books.google.co.id/books/about/Prinsip_dasar_ilmu_gizi.html?id=aEmYNwAAC AAJ&hl=id
15.  Syari M, Serudji J, Mariati U. Peran Asupan Zat Gizi Makronutrien Ibu Hamil terhadap Berat Badan Lahir Bayi di Kota Padang. J Kesehat Andalas [Internet]. 2015;4(3):729–36. Available from: http://jurnal.fk.unand.ac.id
16.  Sulistyoningsih M, Rakhmawati R, Ayu W. Kandungan Fosfor dan Kalsium Daging Akibat Pemberian Tambahan Kunyit Jahe dan Salam pada Ransum Bebek. J Pangan dan Gizi [Internet]. 2017;7(2):124–31. Available from:
https://jurnal.unimus.ac.id/index.php/JPDG/article/view/3183
17.  Sari OF. Formula Biskuit Kaya Protein Berbasis Spirulina dan Kerusakan Mikrobiologis Selama Penyimpanan [Internet]. Skripsi Institut Pertanian Bogor. Institut Pertanian Bogor; 2013. Available from: https://repository.ipb.ac.id/handle/123456789/61365
18.  Setyaningsih D, Anton A, Sari MP. Analisis Sensori Untuk Industri Pangan dan Agro [Internet]. Edisi ke-1. Bandung: IPB Press; 2010. Available from: https://lppm.ipb.ac.id/analisis-sensori-untuk-industri-pangan-dan-agro/
19.  Sidabutar LM. Analisa Kandungan Gizi dan Daya Terima Crackers dengan Pemanfaatan Tepung Daun Kelor dan Tepung Ikan Lele [Internet]. Skripsi Institut Pertanian Bogor. Universitas Sumatra Utara; 2018. Available from: http://repositori.usu.ac.id/handle/123456789/2219
20.  UNICEF. The State of the World’s Children [Internet]. 2016. Available from: https://www.unicef.org/reports/state-worlds-children-2016
21.  Wahyuni S, Nuryuniarti R, Kurniawati A. Pendidikan Kesehatan Ibu Hamil “1000 Hari Pertama Kehidupan Untuk Generasi Yang Lebih Baik.” J ABDIMAS UMTAS [Internet]. 2018;1(1):7–13. Available from:
https://journal.umtas.ac.id/index.php/ABDIMAS/article/view/234
22. Winarno GF. Kimia Pangan dan Gizi [Internet]. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama; 2004. 253 p. Available from: http://pustaka.poltekkes-
pdg.ac.id/index.php?p=show_detail&id=675