AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN ANTIHIPERTENSI TEPUNG PUTIH TELUR HASIL “ PAN
DRYING” PADA SUHU DAN WAKTU PENGERINGAN YANG BERBEDA
(Antioxidant  and Antihypertensive  Activity  Egg White Powder Produced by Pan Drying at Different Temperature and Drying Time)
Nahariah 1 , Anang Mohamad Legowo 2 , Effendi  Abustam 1 , Antonius  Hintono 2
1 Laboratorium  Daging dan Telur  Fakultas Peternakan Universitas Hasanuddin, Makassar Jl. Perintis Kemerdekaan km 8, Makassar 90245
2 Program Studi Teknologi Pangan Fakultas Peternakan dan Pertanian Universitas  Diponegoro,  Semarang, Jl. Drh. Soejono Koesoemowardojo Tembalang-Semarang 50275
Email:nahariah11@gmail.com

## ABSTRACT
Antioxidant and antihypertensive (ACE-Inhibitors) are commonly known as bioactive molecules in foodstuff. Both molecules can be obtained naturally or through processing and preservation of egg white of poultry eggs. One way of preserving the egg white with drying method is by pan drying method. The objective of this study was to determine an appropriate temperature and drying time to produce high yield of antioxidant and antihypertensive activity. The materials used for this study were 900 eggs which were obtained from the same farm. That amount was calculated based on the number of experimental units required to run the experiment with the total number of treatment (3 x 3) with 4 replications for each treatment combination giving 25 chicken eggs for each treatment. The experiment was carried out using a 3x3 factorial arrangement according to completely randomized design. The first factor was drying temperature, i.e. 45 o C, 50 o C, and 55 o C and the second factor was drying time, i.e. 30h, 39h, and 48h. The results showed that high antioxidant activity was found on egg white which was dried at temperature of 45 o C for 39 hours which reached 26.85%. However, antihypertensive activity was optimum at 50 o C and drying for 48 hours, which was up to 75.06%. Drying the egg white using appropriate temperature and time may improve the antioxidant and antihypertensive activities.
Key Word :  Activity, Antioksidant, Antihypertensi , Pan drying , Egg white powder

## ABSTRAK
Aktivitas antioksidan dan antihipertensi (ACE- Inhibitor )  merupakan senyawa bioaktif yang terdapat pada bahan pangan.  Kedua senyawa tersebut dapat diperoleh secara alami maupun setelah melalui proses pengolahan atau pengawetan pada putih telur unggas.  Pengeringan merupakan salah satu jenis pengawetan telur antara lain menggunakan pan drying .  Beberapa penelitian telah dilakukan  namun  penelitian  aktivitas    antioksidan  dan  antihipertensi  pada  putih  telur  yang dikeringkan menggunakan pan drying dengan suhu dan waktu pengeringan yang berbeda masih terbatas. Tujuan penelitian ini adalah mengevaluasi suhu dan waktu pengeringan yang tepat untuk menghasilkan aktivitas antioksidan  dan  antihipertensi yang tinggi. Materi yang digunakan adalah telur sebanyak   900 butir  berasal dari peternakan yang sama,  jumlah tersebut dihitung berdasarkan jumlah unit perlakuan secara keseluruhan sebesar  (3 X 3)  dengan 4 ulangan,  setiap  unit perlakuan membutuhkan  25  butir telur ayam ras. Menggunakan RAL pola faktorial 3x3 dengan perlakuan suhu pengeringan 45; 50; 55 o C dan waktu pengeringan 30; 39; 48 jam.  Hasil penelitian menunjukkan aktivitas antioksidan yang tinggi pada pengeringan putih telur ayam ras ditemukan pada suhu 45 o C dan waktu pengeringan 39 jam sebesar 26,85%.  Namun aktivitas antihipertensi  ditemukan optimal pada proses pengeringan 50 o C selama 48 jam sebesar 75,06%. Pengeringan putih telur ayam ras    menggunakan pan  drying pada  suhu  dan  waktu  yang  tepat  dapat  meningkatkan    aktivitas antioksidan dan  antihipertensi.
Kata Kunci :  Aktivitas, Antioksidan, Antihipertensi , Pan drying , Tepung putih telur

## Nahariah, dkk

## PENDAHULUAN
Aktivitas  antioksidan  dan  antihipertensi merupakan  senyawa  bioaktif  yang  terdapat pada bahan pangan dan dikenal sebagai pangan fungsional  yang  memberikan  efek  fisiologis yang  dapat  membantu  memelihara  kesehatan manusia.  Kedua  senyawa  tersebut  dapat diperoleh dari bahan pangan yang mengandung protein tinggi antara lain bahan asal nabati yang banyak  mengandung  senyawa  phenol,    lipid, protein  dan  karbohidrat  (Morelli et  al .,  2003; Balasuriya  dan  Rupasinghe;  2011;  Girgih et al ., 2013).  Selain itu juga dapat diperoleh dari bahan  pangan  asal  hewani  meliputi  d aging, susu dan telur (Hernandez et al ., 2003; Yu et al .,
2011; Nahariah et al ., 2014a).
Telur  merupakan  bahan  pangan  hewani yang  mengandung  protein  tinggi,  mudah, murah,  dan  memiliki  antioksidan  endogenous (Nahariah et  al ., 2014b). Kandungan protein yang tinggi mengakibatkan telur mudah mengalami kerusakan sehingga perlu dilakukan pengawetan dan  pengolahan.  Beberapa  penelitian  yang bertujuan untuk  pengawetan dan pengolahan antara  lain  pembuatan  tepung  telur  telah dilakukan  dengan menggunakan metode freeze drying ( Bakalivanov et al., 2007;  Hintono et al ., 2013), metode spray drying (Lechevalier et al. , 2007; Caboni et al ., 2010; Talansier et al., 2009), Nahariah dkk. (2010) menggunakan metode pan drying dengan suhu 55 o C,  penelitian Landfeld et al . (2007)  menggunakan metode pilot hot rooming menghasilkan tepung putih telur.
Pengawetan  dan  pengolahan  dengan pengeringan telah dilakukan untuk menghasilkan  kualitas  tepung  telur  yang  baik dan  dapat  mempertahankan  senyawa  bioaktif yang  ada  dalam  bahan  pangan.    Pengeringan diharapkan  tidak  mengubah  unsur  atau komposisi  bahan  selama  proses  terutama protein atau senyawa bioaktif bahan.  Meskipun pada putih telur mengalami perubahan selama proses  pengolahan,  terutama  kandungan  air dan glukosa. Pengeringan menggunakan spray drying dapat  menghasilkan  lisin    atu  senyawa furosine  (Caboni et  al .,  2010).  Pengeringan menggunakan pan drying mengakibatkan putih telur  berwarna  coklat  akibat  reaksi  mailard (Nahariah  dkk.,  2010;  Rao  dan  Labuza,  2011) namun dari reaksi tersebut dapat menghasilkan senyawa  antioksidan  (Miranda et  al .,  2011; Winarno dan Kartawidjajaputra, 2007) dan yang diindikasi baik untuk kesehatan. Freeze drying pada tekanan 0,37 mbar dengan ketebalan cairan sample  putih  telur  6  mm  dapat  menghasilkan
ACE- Inhibitor 94% (Nahariah dkk., 2013). Pengeringan  menggunakan pan  drying sangat  ditentukan  oleh  penggunaan  suhu  dan waktu pengeringan untuk menghasilkan kualitas tepung  putih  telur  yang  baik  dan  diharapkan dapat  meningkatkan  aktivitas  antioksidan dan  antihipertensi.  Belum  banyak  penelitian yang  mengkaji  suhu  dan  waktu  pengeringan yang  tepat  dan  dapat  meningkatkan  aktivitas antioksidan  dan  antihipertensi  pada  tepung putih telur yang dihasilkan sehingga penelitian ini penting dilakukan.

## MATERI DAN METODE

## Materi penelitian
Materi penelitian  yang digunakan adalah telur ayam ras sebanyak   900 butir berasal dari lokasi  peternakan  dengan  pemeliharaan  dan pakan  yang  sama.    Jumlah  tersebut  dihitung berdasarkan  jumlah  unit  perlakuan  secara keseluruhan sebesar  ( 3 X 3)  dengan 4 ulangan, setiap  unit perlakuan  membutuhkan  25  butir telur ayam ras.  Suhu dan waktu  pengeringan yang  digunakan  adalah  suhu  45,  50  dan  55 o C dan waktu  pengeringan 30, 39, dan 48 jam. Bahan  kimia  yang  digunakan  untuk pengukuran:  substrat  HHL  ( hippuryl-L-histidyl- L-leusin ),  enzim  ACE(diisolasi  dari  paru-paru kelinci, diproduksi oleh  Sigma Singapura), borate buffer, NaCl, HCl, dan aquabidestila,  methanol, dan  DPPH  (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl). Peralatan  yang  digunakan  adalah:    tabung reaksi, mikropipet dengan berbagai ukuran, tip 10 µl, 20 µl, 100 µl, dan 1000 µl, botol sample , rak  tabung, water  bath, inkubator, tube  shaker , centrifuge ,  spectrophotometer  ( Perkin  Elmer Lambda  35).  Data  yang  diperoleh  dianalisis ragam  (Steel  dan  Torrie,  1991)  berdasarkan rancangan acak lengkap  pola faktorial (3 x 3).

## Preparasi sample
Putih  telur  dipisahkan  kuningnya dan  dihomogenisasi  selama  3  menit  tanpa membentuk busa, dan  selanjutnya  difermentasi selama  18  jam.    Putih  telur  hasil  fermentasi dibuat    tepung  putih  telur  melalui  metode pengeringan pan  drying dengan  ketebalan larutan  6  mm.    Putih  telur  yang  telah  kering berbentuk lembaran  siap digerus dan  digiling untuk menghasilkan tepung putih  telur.   Produk tepung  putih  telur  yang  telah  jadi  selanjutnya dikemas  dalam  plastik  hampa  udara  ( vacuum ) untuk selanjutnya dianalisa (Dimodifikasi dari Winarno dan Koswara, 2002).

## Pengukuran  aktivitas antioksidan
Pengukuran aktivitas antioksidan  dengan metode DPPH  (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) (Pajak et  al .,  2014)  yang  dimodifikasi.  Sebuah alikuot dari 3,9 ml dari 0,1 mM DPPH radikal dalam  methanol    dicampur  dengan  0,1  ml ekstrak  metanol  sampel.  Setelah  60  menit inkubasi dalam ruang gelap serapannya diukur menggunakan  spectrophotometer  UV-VIS (merek Shimadzu) pada 515 nm.  DPPH Radical Scavenging Effect  (%) = [(A DPPH - A Sample )/A DPPH ] x 100,  A DPPH adalah absorbansi DPPH, A Sample adalah absorbansi sample.  Pengujian dilakukan di  Laboratorium  Farmasi  Fakultas  Farmasi Universitas Hasanuddin, Makassar.

## Pengukuran aktivitas ACE-inhibitor
Analisa  ACE- Inhibitor (Liu et  al., 2010 yang  dimodifikasi)  dengan  menggunakan spectrofotometer untuk mengevaluasi aktivitas ACE- Inhibitor pada putih telur meliputi:  Larutan buffer borat (100 mM, pH 8.3) yang  mengandung 300 mM NaCl ditambahkan pada sample putih telur.    Buffer  yang  sama  digunakan  untuk substrat, dan enzim.  Volume total reaksi 60 µl terdiri  dari    100  mM  borate  buffer  (pH  8.3),  4 mM hippuryl-L-histidyl-L-leusin, 300 mMNaCl, dan 10 ACE milliunit.  Semua cairan  diinkubasi pada 37 o C selama 30 menit dalam water batch yang  dikendalikan  sebelum    pencampuran bahan,    dan  tambahan    30  menit  pada  suhu yang sama setelah pencampuran bahan.  Reaksi dihentikan dengan menambahkan 60 µl HCl  1 M  dan  diuji  menggunakan  spectrophotometer ( Perkin  Elmer Lambda  35)    untuk  mengukur asam  hipurat  yang  diproduksi  oleh  hidrolisis enzimatik  dari  substrat  hippuryl-L-histidyl- L-leusin  dengan  panjang  gelombang  228  nm. Aktivitas ACE- Inhibitor (%) =  [(A - B)/A-C] x 100,    dimana  A  adalah  control  (reaksi  larutan buffer tanpa sampel),  B adalah sample dan C adalah blanko.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Aktivitas  antioksidan  pada  tepung  putih telur  hasil  pan  drying  pada  suhu  dan  waktu pengeringan yang berbeda
Hasil    penelitian  (Tabel  1)  menunjukkan bahwa  suhu  dan  waktu  pengeringan  berpe— ngaruh sangat nyata (P≤0,01) terhadap  aktivitas antioksidan tepung  putih telur, dan keduanya menunjukkan  interaksi sangat nyata (P≤0,01).
Penambahan suhu pengeringan mengakibatkan  adanya  penurunan  yang berbeda nyata terhadap  aktivitas antioksidan. Hal ini menunjukkan bahwa suhu tinggi pada proses  pengeringan  mengakibatkan  berkurang antioksidannya  yang  dihasilkan.  Peningkatan suhu pengeringan  kemungkinan menyebabkan adanya  perubahan    pada  struktur    protein bahan    yang  dapat  menurunkan  aktivitas antioksidan  yang  ada  di  dalamnya.    Hasil  ini berbeda dengan Miranda et al. (2011) dan  Rao dan  Labuza  (2011)  yang  menyatakan  bahwa pengeringan  mengakibatkan  reaksi  maillard yaitu  reaksi  antara  asam  amino  dan  glukosa pada  produk  terutama  pada  ikatan  disulfida antarmolekulnya  dan  dari  reaksi  tersebut menghasilkan  senyawa  antioksidan.  Waktu pengeringan yang panjang dapat meningkatkan aktivitas  antioksidan  (%)  yang  berbeda  nyata pada masing-masing waktu pengeringan. Hal ini menunjukkan waktu pengeringan berkontribusi terhadap meningkatnya aktivitas antioksidan. Interaksi  antara  suhu  dan  waktu pengeringan  (Gambar  1)  menunjukkan bahwa  pengeringan  pada  suhu  rendah  45 o C menghasilkan  aktivitas  antioksidan  yang meningkat    sejalan  dengan  bertambahnya waktu  pengeringan  dan  optimal  pada  39  jam pengeringan  dan  selanjutnya  mengalami penurunan  dengan  bertambahnya  waktu pengeringan 48 jam. Suhu 45 o C membutuhkan waktu  pengeringan  selama  39  jam  untuk
Tabel  1 .  Aktivitas  antioksidan  tepung    putih  telur    pada  suhu  dan  waktu pengeringan yang berbeda Suhu ( o C) Waktu (Jam) Rataan 30 39 48 45 15,363 26,849 12,924 18,378 C 50 10,679 12,049 25,494 16,074 B 55 7,080 8,238 14,055 9,791 A Rataan 11,041 a 15,712 b 17,491 c 14,748 Keterangan :  Supersikrip a,b,c  yang mengikuti angka pada baris yang sama, dan  A,B,C  yang mengikuti angka pada kolom  yang sama menunjukkan perbedaan nyata (P < 0,01)
menghasilkan  aktivitas  antioksidan  yang optimum,  namun  jika  waktu  pengeringan ditambahkan maka akan menurunkan aktivitas antioksidan yang dihasilkan.  Penambahan suhu 50 dan 55 o C  mengalami peningkatan aktivitas antioksidan  sejalan  dengan  meningkatnya waktu  pengeringan.  Hal  ini  kemungkinan karena  penambahan  waktu  pengeringan mengakibatkan  stress  oksidatif  yang  panjang pada  bahan yang dikeringkan.  Stress oksidatif dapat  disebabkan  oleh  reaksi  radikal  bebas yang  menghasilkan  efek  kerusakan  terhadap protein.  Namun  kerusakan  tersebut  berefek pada  pembentukan  antioksidan  selama  masa pengeringan  untuk  menangkap  lebih  banyak radical bebas sehingga aktivitas antioksidannya lebih  tinggi.  Hal  ini  sesuai  dengan  Winarno dan Kartawidjajaputra (2007) yang menyatakan bahwa  pengeringan  tidak  selalu  berpengaruh buruk.   Stress oksidatif kemungkinan disebabkan oleh  reaksi  radikal  bebas  yang  menghasilkan efek  kerusakan  terhadap  membram,  protein, enzim dan DNA  dan telah berhasil dilakukan skrining    terhadap  banyaknya    antioksidan yang  ditemukan  pada  bahan  makanan  akibat pengeringan  (Surai,  2003).    Penambahan  suhu 50 dan 55 o C  mengalami peningkatan aktivitas antioksidan  sejalan  dengan  meningkatnya waktu  pengeringan  namun  nilai  aktivitas antioksidannya  lebih  rendah  dari  suhu  45 o C selama 39 jam.
Aktivitas  ACE-Inhibitor  pada  tepung  putih telur  hasil  pan  drying  pada  suhu  dan  waktu pengeringan yang berbeda
Hasil  penelitian  pada  Gambar  2 menunjukkan  adanya peningkatan antihipertensi (ACE-Inhibitor)  pada  tepung  putih  telur  pada suhu  dan  waktu  pengeringan  yang  berbeda. Pengeringan  putih  telur  pada  suhu  45 o C mengalami  peningkatan  antihipertensi  sejalan dengan bertambahnya waktu pengeringan. Penambahan  suhu  50 o C  meningkatkan aktivitas antihipertensi sejalan dengan bertambahnya  waktu  pengeringan  30,  36 dan  48  jam.    Namun  penambahan  suhu  55 o C menurunkan  aktivitas  antihipertensi  yang dihasilkan.  Meskipun pada suhu tersebut masih menunjukkan  pola  kenaikan  antihipertensi yang  meningkat  dengan  bertambahnya waktu  pengeringan.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  suhu  pemanasan  pada  waktu  tertentu mempengaruhi pemecahan protein yang dapat menghasilkan  urutan  asam  amino  (peptida) dan  diindikasi  bersifat  sebagai  antihipertensi. Suhu  55 o C  pada  proses  pengeringan  putih telur   kemungkinan telah mengubah struktur protein  yang  diindikasi  sebagai  antihipertensi sehingga nilainya lebih rendah.  Perubahan ini akibat adanya perubahan temperatur, fase, dan pengeringan yang diindikasi menjadi penyebab kerusakan protein (Kearney et al ., 2008).
Gambar  1.  Interaksi Suhu dan Waktu Pengeringan Terhadap Aktivitas Anti- oksidan Tepung Putih Telur
Putih  telur  merupakan  sumber  pangan yang  kaya  akan  gizi  dan  senyawa  bioaktif yang  memiliki  aktivitas  biologis  antara lain  antihipertensi.  Protein  jika  dipanaskan mengakibatkan  protein  terdenaturasi  dan mengubah  struktur  protein  yang  terdiri  dari susunan  peptida  peptida  menjadi  senyawa yang  kemungkinan  sebagai  susunan  urutan asam amino penghasil antihipertensi atau ACE- Inhibitor  (Legowo dan Hayakawa, 2012 : Yu et al ., 2011). Aktivitas antihipertensi  meningkat dengan bertambahnya waktu pengeringan, dan optimal pada    suhu  50 o C  selama    48  jam  pengeringan sebesar 75,06%.  Hasil yang diperoleh lebih tinggi dari  hidrolisis  menggunakan  enzim  alcalase pada putih telur selama 180 menit menghasilkan aktivitas  antihipertensi  sebesar  58%  (Liu et  al. , 2010).  Hal ini mungkin disebabkan oleh protein yang  ada  pada  putih  telur  didominasi  oleh protein  sederhana  dan  konjugasi  (Rojas et  al. , 2006 ; Rihastuti et al. , 2011)  yang jika dipanaskan akan lebih mudah terurai dibandingkan dengan menggunakan  enzim  alcalase.  Pada  legume perlakuan pemanasan 50 menit akan bermanfaat pada  pelepasan  peptide  antihipertensi  dari legume  dan  akan  meningkatkan  senyawa antihipertensi  dibandingkan  dengan  legume segarnya (Akillioglu dan Karakaya, 2009).
Pengeringan  menggunakan  pan  drying pada  suhu  50 o C  selama  48  jam    menghasilkan antihipertensi yang   lebih rendah dari vakum- freeze drying  dengan ketebalan cairan sample 6 mm dan tekanan 0,37 mbar yang menghasilkan aktivitas antihipertensi   sebesar 94%  (Nahariah
dkk.,  2013).  Hal  ini  disebabkan  oleh  senyawa antihipertensi  pada  vakum-  freeze  drying tidak  banyak  mengalami  kerusakan  meskipun ada  perubahan  struktur  protein  pada  putih telur  sehingga  senyawa  aktif  lebih  mudah terurai.    Hal  ini  sesuai  dengan  George  dan Datta  (2002) bahwa, freeze drying merupakan jenis pengeringan dehidrasi yaitu  pengeringan yang  menggunakan  metode  sublimasi  yang membawa kristal  es dari bahan keluar ke ruang pengering  yang  bertekanan  rendah  dan  tidak merusak bahan aktif yang dikeringkan. Freeze drying merupakan jenis pengeringan bertekanan rendah yang dapat menstabilkan produk yang dikeringkan,  meskipun  dapat  mengakibatkan proses  perubahan  struktur  jaringan  bahan sehingga lebih mudah terekstraksi.  Perubahan ini  terutama pada senyawa yang bersifat non polar namun mengurangi kerusakan bahan aktif dan  umumnya  digunakan  untuk  kepentingan farmasi  (Ganguly et  al .,  2012  ;  Gregorio et  al .,
2011; Tsinontides et al ., 2004).
Hasil penelitian ini juga lebih rendah dari penelitian Cheng et al . (2008) yang menghasilkan aktivitas antihipertensi pada tulang kaki ayam dengan menggunakan metode hidrolisis enzim alcalase  sebesar  84,33%  selama  4  jam,  pepsin sebesar  75,53%  selama  6  jam  dan  trypsin sebesar  77,86  selama  8  jam  hidrolisa.  Hal  ini kemungkinan  adanya  perbedaan  sifat  protein pada tulang kaki ayam dan protein putih telur. Protein  tulang  kaki  ayam  didominasi  oleh kolagen yang mudah larut oleh enzim  alcalase dibandingkan  protein  yang  ada  pada  putih telur.
Gambar  2.  Aktivitas antihipertensi  tepung  putih telur fermentasi  pada suhu dan waktu  pengeringan yang berbeda

## Nahariah, dkk

## KESIMPULAN
Pengeringan  putih  telur  ayam  ras menggunakan  pan  drying  menghasilkan aktivitas  antioksidan    yang  tinggi  pada  suhu 45 o C selama  39 jam sebesar 26,85%.  Aktivitas antihipertensi  ditemukan optimal pada proses pengeringan 50 o C selama 48 jam sebesar 75,06%.

## DAFTAR PUSTAKA
Akillioglu, H. G and S. Karakaya.  2009.  Effect of heat treatment and in vitro digestion on the angiotensin converting  enzyme  inhibitory  of  some  legume species.  Eur. Food. Res. Technol. 229: 915-921.
Bakalivanov,  S.,  E.  Tsvetkova,  T.  Bakalivanova,  T.
Tsvetkov,  N.  Kaloyanov,  S.  Grigorova  and  V.
Alexieva.  2008.  Characteristic of freeze dried egg mélange long stored after irradiation.  Radiation Physics and Chem., 77: 58-63.
Balasuriya,  B.  W.  N  and  H.  P.  V.  Rupasinghe.    2011.
Plant flavonoid as angiotensin converting enzyme inhibitory in regulation of hypertension.  Functional Food in Healthy and Disease, 5: 172-188.
Caboni, M. F., E. Boselli, M. C. Messia, V. Velazco, A. Fratianni, G. Pantili, and  E. Marconi.  2008.  Effect of processing and storage on the chemical quality markers of spray dried whole egg.  Food Chem., 92: 293 -303.
Cheng,F.Y.,Y.T.Liu,  T.C.Wan,  L.C.Lin,  and  R.  Sakata. 2008.  The development of angiotensin I-converting enzyme  inhibitor  derived  from  chicken  bone protein.  Anim. Sci. J., 79 : 122-128.
Ganguly, A  and  A. A. Alexeenko.  2012.  Modeling and measurements  of  water-vapor  flow  and  icing  at low pressures with application to pharmaceutical freeze-drying, Inter. J. Heat and Mass Transfer, 55: 5503-5513.
Girgih, A.T., C. C. Udenigwe, F. M. Hasan, T. A. Gill, and    R.  E.  Aluko.  2013.  Antioksidant  properties of  salmon  (salmo  salar)  protein  hydrolysate  and peptide fractions isolated by reverse-phase HPLC. Food  Res. Int.,  52: 315-322.
George, J. P. and A. K. Datta.  2002.  Development and validation  of  heat  and  mass  transfer  models  for freeze- drying of vegetables slices.  J. Food Eng., 52 : 89-93
Gregorio, M. R. P., J. Requeiro, C. G. Barreiro, R. R. Otero, and J. S. Gandara.  2011.  Change in antioksidant flavonoid during freeze –drying of red onions and subsequent store.  Food Control., 22: 1108-1113
Hernandez,  L.  Zomeno,  B.  Arino,  and  Blasco.    2003.
Antioxidant,  lipolitic  and  proteolitic  enzyme activities in pork meat from different genotypes. Meat Sci., 66: 525- 529.
Hintono,  A.,  Sutaryo,  Nahariah,  dan  A.  M.  Legowo. 2013.  Evaluasi  metode    pengeringan  vakum- freeze  drying    pada  tekanan  pengeringan    dan ketebalan cairan sample  yang berbeda terhadap karakteristik  fungsional  tepung  putih  telur. Prosiding Seminar Rekayasa Kimia dan Bioproses (SRKP)  2013.  Jurusan  Teknik  Kimia,    Fakultas Teknik, Universitas Diponegoro.  Semarang.  Hal E-06-1 – E-06-6.
Kearney,  N.,  C.  Stanton,  C.  Desmond,  M.  Coakley,  J.
K.  Collins,  G.  Fitzgerald,  and  R.  P.  Ross.    2008. Challenges  Associated  with  the  Development of  Probiotic-Containing  Functional  Foods.    In: Handbook  of  Fermented  Functional  Foods. Farnworth,E.R.  CRC Press.  New York.
Landfeld,  A.,  P.  Nesvadba,  K.  Kyhos,  P.  Novotna,  J. Pruchova,  and M. Houska.  2008.  Sorption and thermal  properties  of  dried  egg  whites.    J.  Food Eng., 87: 59 -63.
Lechevalier, V., R. Jeantet, A. Arhaliass,  J. Legrand, and F.  Nau.    2007.    Egg  White  Drying:  Influence  of industry processing steps on protein structure and functionalities.  Engineering, 83: 404 – 413.
Legowo, A. M and S. Hayakawa.   2012.   Functionalities of Animal Food Protein.  Badan Penerbit Universitas Diponegoro Semarang, Semarang.   Jawa Tengah.
Liu, J. B.,  Z. P. Yu, W. Z. Zhao, S. Y. Lin, E. L. Wang, Y.  Zhang,  H.  Hao,  Z.  Z.  Wang,  and  F.  Chen. 2010.    Isolation  and  identifikasi  of  angiotension- converting  enzyme  inhibiting    peptide  from  egg white  protein  hydrolysates.    Food  Chem.,  122: 1159 – 1163.
Morelli, R., S. R.  Volpe, N. Bruno, and R. L.  Scalzo.  2003. Fenton-dependent damage to carbohydrates: Free radical scavenging activity of some simple sugars. J. Agri. Food Chem, 51: 7418-7425.
Miranda,  L.  T.,  C.  Rakovski  and,  L.  M.    Were.    2011. Effect  of  mailard  reaction  product  on  oxidation product in ground chicken breast.  Meat Sci., 90: 352 - 360.
Nahariah.,  E.  Abustam,  dan  R.  Malaka.    2010. Karakteristik  fisikokimia  tepung  putih  telur hasil  fermentasi  saccharomyces  cereviceae    dan penambahan  sukrosa  pada  putih  telur  segar. Jurnal  Ilmu  dan  Teknologi  Peternakan.  1(1):  35- 42.
Nahariah, A. Hintono, Sutaryo, A. M. Legowo, dan E. Abustam.  2013.    Aktivitas angiotensin- converting enzyme  inhibitor  (ACE-  Inhibitor)  pada  tepung putih telur hasil vakum-freeze drying. Prosiding Seminar  Nasional  Peternakan  Berkelanjutan 5:  Peningkatan  Produktivitas  Sumber  Daya Peternakan.  12-13  November  2013.    Fakultas Peternakan,    Universitas  Padjajaran.    Bandung. Hal. 296-299.
Nahariah, A. M. Legowo, E. Abustam, A. Hintono, V. P. Bintoro, dan Y. B. Pramono.   2014a.  Endogenous antioxidant  activity  in  the  egg  whites  of  various types  of  local  poultry  egg  in  South  Sulawesi, Indonesia.  Int. J. Poultry. Sci., 13(1): 21-25.
Nahariah, A. M. Legowo, E. Abustam, A. Hintono, V. P.  Bintoro,  dan  Y.  B.  Pramono.    2014b.  Evaluasi potensi  aktivitas  ACE-Inhibitor  endogenous pada putih telur dari jenis unggas yang berbeda. Prosiding  Seminar  Nasional    Optimasi  Sumber Daya  Lokal  pada  Peternakan  Rakyat  Berbasis Teknologi:  Peningkatan  Produktivitas  Ternak Lokal.    Tanggal  9-10  Oktober  2014.    Fakultas Peternakan, Universitas Hasanuddin.  Makassar. Hal. 207-213.
Pajak, P., R. Socha, D. Galkowska, J. Roznowski, and T.
Fortuna.  2013.  Phenolic profile and antioxidant activity  in  selected  seeds  and  sprouts.    Food Chem., 143: 300-306.
Rao,  Q  and  T.  P.    Labuza.      2011.    Effect  of  moisture content  on  selected  physicochemical  properties of two commercial hen egg white powders.  Food Chem., 132: 373 -384.
Rihastuti, R. A., Indratiningsih dan S. Triatmojo.  2011.
Dasar  Teknologi  Hasil  Ternak.    Gadjah  Mada University Press,  Yogyakarta.
Rojas, E. E. G., J. S. R. Coimbra and L. A. Minim.  2006.
Hydrophobic  interaction  adsorption  of  hen egg  white  proteins  albumin,  conalbumin,  and lysozyme.  J. Chromatography B., 80: 85- 93.
Steel,  R.  G.  D  and  J.  H.  Torrie.    1991.    Principle  and Procedure of Statistics. 2 nd .ed.  International Book Company.  Tokyo.
Surai,  P.  F.    2003.    Natural  Antioksidans  In  Avian Nutrition  And  Reproduction.    Nottingham University Press.  Nottingham.
Talansier, E., C. Loisel, D. Dellavaile, A. Desrumaux, V. Lechevalier, and J. Legrand.  2009.  Optimization of dry heat treatment of egg white in relation to foam  and  interfacial  properties.    Food  Sci.  and Technol., 42: 496 -503.
Tsinontides, S. C., P. Rajniak, D. Pham,  W. A. Hunke, J. Placek,  and S. D. Reynolds.  2004.  Freeze Drying- Principle and Practice for Successful Scale- Up to Manufacturing.  Pharmaceutics.  280: 1-16.
Winarno, F.G  dan F.  Kartawidjajaputra.  2007.  Pangan Fungsional dan Minuman Energi.   M-BRIO Press. Bogor.
Winarno, F.G dan S. Koswara.  2002.  Telur, Penanganan dan Pengolahannya.   M-BRIO Press.  Bogor.
Yu,  Z.,  Y.  Yin,  W.  Zhao,  Y.  Yu,  B.  Liu,  J.  Liu,  and  F.
Chen.  2011.  Novel  peptide  derived  from  egg white protein inhibiting alpha-glucosidase.   Food Chem., 129 : 1376 – 1382.