Abstrak—Lumpur tinja (septage) dalam septic tank terdiri atas feses, urine, dan air. Produk biostarter EM4 merupakan salah satu  alternatif  penanganan  lumpur  tinja  dengan  harga terjangkau  dan  mudah  ditemukan  di  pasaran.  Penelitian  ini bertujuan  menganalisis  efek  EM4  pada  penguraian  lumpur tinja  dalam  kondisi  anaerobik.  Penelitian  skala  laboratorium ini  menggunakan  reaktor  dengan  sistem  batch  sebanyak  66 buah, dengan destructive sampling method. Setiap reaktor diisi dengan  lumpur  tinja  sebanyak  1200  mL.  Penelitian  ini dilakukan  dalam  waktu  2  (dua)  bulan.  Terdapat  5  (lima) variasi perlakuan yaitu tanpa EM4 atau blanko (P1), EM4 1,2 mL atau 0,1% v/v (P2), EM4 4,8 mL atau 0,4% v/v (P3), EM4 9,6 mL atau 0,8% v/v (P4), dan EM4 1,2 mL + media attached growth (P5). Parameter yang dianalisis meliputi TSS (termasuk VSS  dan  FSS),  BOD 5 ,  COD  (termasuk  CODrb),  volume lumpur  dan  supernatan  dalam  reaktor,  pH,  dan  temperatur. Nilai BOD 5 , COD (0,45 mikron), CODrb (0,22 mikron) semakin menurun  selama  penelitian  berlangsung,  namun  TSS mengalami  kenaikan.  Pemisahan  antara  lumpur  dan supernatan terbaik adalah pada P4 = P5 > P3 > P2 > P1. Hasil menunjukkan  bahwa  semua  perlakuan  berada  pada  rentang pH  optimum  yaitu  6,5  hingga  8,0.  Sementara  itu,  temperatur semua perlakuan berada dalam rentang 30-34°C (mesophilic). Konsentrasi  terbaik  yang  dipilih  untuk  penguraian  lumpur tinja secara anaerobik menggunakan EM4 adalah 9,6 mL atau 0,8%  v/v.  Konsentrasi  ini  dipilih  karena  menunjukkan penyisihan  paling  signifikan  terhadap volume  lumpur,  BOD 5 , COD,  dan  CODrb  masing-masing  sebesar  71%,  91%,  94%, dan 100%, dibandingkan variasi konsentrasi lainnya.
Kata Kunci—Anaerobik, Bahan Organik, Bakteri Asam Laktat, EM4, Lumpur Tinja.

## I. PENDAHULUAN
RODUK  pengurai  lumpur septic  tank kian  beredar  di kalangan  masyarakat  sebagai  alternatif  penanganan lumpur septic tank . Septic tank berisi padatan dan cairan yang dinamakan  lumpur  tinja  ( septage ). Septage mengandung sebagian  besar  feses  manusia,  urine,  dan  air. Septic  tank didesain dengan kapasitas tertentu sehingga suatu saat akan penuh.  Tanda septic  tank penuh  yaitu  meluapnya  isi septic tank pada  lubang  kloset,  hal  ini  berpotensi  menimbulkan pencemaran, khususnya pencemaran air dan bau. Selain itu, dampak  lainnya  adalah  kerusakan  atau  penurunan  fungsi septic tank itu sendiri.
Upaya  yang  dianjurkan  oleh  pemerintah  saat  ini  untuk penanganan septic tank adalah melakukan pengurasan septic tank .  Pengurasan septic  tank dilakukan  tidak  lebih  dari  3 (tiga)  tahun  sekali  [1].  Hal  ini  dilakukan  dengan  dasar pertimbangan  antara  lain  jumlah  orang  dalam  1  (satu) keluarga, volume lumpur yang dihasilkan, dan volume septic tank yang  layak  untuk  keluarga.  Pelayanan  lumpur  tinja  di Indonesia selama ini berjalan didasarkan pada kebutuhan ( on call  basic ).  Ketika  masyarakat  membutuhkan  jasa pengurasan  tinja  maka  masyarakat  akan  menghubungi PDAM atau jasa swasta untuk pengurasan [1].
Penerapan pengurasan septic tank memiliki kendala seperti kurangnya  pengetahuan  masyarakat  tentang septic  tank dan fungsi penyedotan rutin lumpur tinja (Darwati, 2018). Selain itu, willingness  to  pay masyarakat  Indonesia  cukup  rendah bila diterapkan sistem pembayaran sekaligus atau tunai untuk pengurasan septic tank . Perilaku masyarakat Indonesia lebih cenderung  memilih  mencicil  atau  membayar  per  bulan. Sebanyak  100%  warga  yang  mengikuti  diskusi  di  Kota Malang  mau  melaksanakan  pengurasan septic  tank berkala dengan  membayar  retribusi  sebesar  Rp  5.000,00-Rp 10.000,00 per bulan  [2]. Sementara di Kota Makassar, 67% responden memilih tariff sebesar Rp 12.500,00-Rp 15.000,00 per bulan [3].
Produk biostarter digunakan masyarakat sebagai alternatif penanganan  lumpur  tinja,  sehingga  diharapkan  tidak  perlu melakukan  pengurasan  rutin.  Salah  satu  produk  yang digunakan  yaitu Effective  Microorganism 4  (EM4)  yang ditawarkan dengan harga terjangkau dan mudah ditemukan di pasaran.  EM4  merupakan  kultur  campuran  yang  sebagian besar adalah Lactobacillus sp. dan berisi mikroorganisme lain seperti yeast ( Saccharomyces sp.),  bakteri  fotosintetik ( Rhodopseudomonas sp.), dan Actinomycetes [4-7].
Lumpur tinja memiliki kandungan berupa karbon 44-55% dan protein 2-25%, karbohidrat 25%, dan lemak tak tercerna 2-15%  [8].  Komponen  feses  dalam  berat  kering  antara  lain karbohidrat  10-30%,  lemak  5-25%,  bakteri  10-30%,  bahan nitrogenous 2-3%,  dan  senyawa  anorganik  10-20%  [9]. Proses  anaerobik  dalam  lumpur  tinja  berlangsung  dengan

## Efek EM4 pada Penguraian Lumpur Tinja Secara Anaerobik
Veny Herdiana dan Eddy Setiadi Soedjono Departemen Teknik Lingkungan, Institut Teknologi Sepuluh Nopember (ITS) e-mail : soedjono@enviro.its.ac.id
P
Gambar 1.  Nilai TSS P1, P2, P3, P4, dan P5.
Gambar 2.  Nilai BOD 5 P1, P2, P3, P4, dan P5. 0 5000 10000 15000 20000 25000 30000 H-0 H-1 H-2 H-3 H-5 H-32 H-35 H-42 TSS ( m g/ L) Waktu (hari)
EM4 1,2 mL (0,1%) EM4 4,8 mL (0,4%) EM4 9,6 mL (0,8%)
EM4 1,2 mL + media Blanko 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 H-0 H-1
H-2 H-3 H-5 H-35 H-42 BO D 5 (m g/ L) Waktu (hari)
EM4 1,2 mL (0,1%) EM4 4,8 mL (0,4%) EM4 9,6 mL (0,8%)
EM4 1,2 mL + media Blanko
bantuan  mikroorganisme,  utamanya  bakteri  fermentasi  dan penghasil  metana  [10].  Mikroorganisme  EM4  mampu memecah senyawa organik kompleks (karbohidrat, protein, lemak) menjadi senyawa yang lebih sederhana [10-11]. EM4 memiliki  kandungan  dominan  berupa  bakteri  asam  laktat yang mampu memecah laktosa dengan cepat [12-13].
Penambahan  EM4  sebagai biostarter lumpur  tinja dimaksudkan  untuk  meningkatkan  pertumbuhan  mikro- organisme  agar  penguraian  lebih  optimal  [14].  Dengan jumlah  substrat  tetap,  pertumbuhan  mikroorganisme  yang semakin  meningkat  akan  menyebabkan  kompetisi  dalam memecah  substrat  menjadi  tinggi.  Sehingga,  penambahan EM4  diharapkan  dapat  mempercepat  proses  penguraian lumpur  tinja  dan  memperpanjang  masa  pengurasan sectic tank menjadi lebih dari 3 (tiga) tahun.
Penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengkaji  penguraian lumpur tinja ( septage ) menggunakan EM4. Tujuan penelitian ini  adalah  menganalisis  efek  dan  konsentrasi  terbaik penguraian  lumpur  tinja septic  tank menggunakan  EM4. Penelitian  ini  menggunakan  parameter  uji  berupa  TSS (termasuk  VSS  dan  FSS),  BOD 5 ,  COD  (termasuk  CODrb), volume  lumpur  dan  supernatan  pada  reaktor,  pH,  dan temperatur. Produksi gas dari proses anaerobik juga diamati dalam penelitian ini. Selain itu, biaya penggunaan EM4 untuk septic  tank dibandingkan  dengan  biaya  pengurasan septic tank . Reaktor batch anaerobik digunakan untuk mewujudkan kondisi  yang  serupa  dengan septic  tank .  Kemudian, konsentrasi  EM4  dan  penggunaan  media attached  growth dipilih  sebagai  variabel  bebas.  Hasil  penelitian  diharapkan dapat menjadi bahan kajian atau masukan untuk penanganan lumpur septic tank dan studi serupa.

## II. METODE PENELITIAN
A. Pengambilan Sampel
Lumpur  tinja  pada  penelitian ini  diambil  dari septic  tank yang berlokasi di Jalan Hidrodinamika IV Blok T Nomor 81
Perumdos  ITS,  Surabaya.  Lumpur  tinja  yang  diambil  yaitu bagian  atas  isi septic  tank .  Lumpur  tinja  yang  diambil merupakan  akumulasi  selama  3  (tiga)  tahun.  Lumpur  tinja diambil dengan bantuan jasa sedot tinja.
Isi septic tank yang telah diambil dengan selang sedot tinja, kemudian dipindahkan ke dalam kontainer.  Kontainer berisi lumpur  tinja  diangkut  ke  Workshop  Departemen  Teknik Lingkungan  FT-SPK  ITS.  Lumpur  tinja  bersifat  pekat, berwarna cokelat kehitaman, dan berbau. Kandungan lumpur tinja meliputi lumpur tinja, cairan, serta padatan lain seperti sisa makanan yang tidak dapat dicerna dan partikel yang bisa mengendap.  Selanjutnya,  lumpur  tinja  dituangkan  pada kontainer  kapasitas  130  L  dan  diaduk  menggunakan  rotor listrik  supaya  homogen.  Lumpur  tinja  yang  telah  homogen diambil sebanyak 1200 mL dan dipindahkan ke dalam reaktor kapasitas  1330  mL,  hal  ini  dilakukan  66  kali.  Sehingga, kandungan  lumpur  tinja  dalam  satu  reaktor  dan  yang  lain sama.

## B. Aktivasi EM4
Mikroorganisme  yang  terkandung  dalam  kemasan  EM4 yang  baru  dibeli  adalah  dalam  keadaan dormant (metabolisme tidak aktif, mikroorganisme membentuk kapsul atau  endospora)  sehingga  perlu  untuk  diaktivasi  sebelum digunakan.  Aktivasi  dilakukan  dengan  melarutkan  100  mL EM4  pada  500  mL  air  dan  menambahkan  setengah  sendok makan  gula  merah  cair.  Selanjutnya  campuran  didiamkan dalam  wadah  tertutup  rapat  selama  4  (empat)  hari  di  suhu ruang.
EM4 yang sudah aktif ditandai dengan pH > 4 dan terdapat lapisan  putih  pada  larutan  [5].  Hasil  pengukuran  pH  pada larutan EM4 pada saat aktivasi adalah pH 4,1. Selain itu, pada larutan  EM4  ditemukan  lapisan  putih  yang  tipis.  Sehingga, larutan EM4 dengan pH 4,1 ini dinyatakan telah teraktivasi
Tabel 1.
Karakteristik awal lumpur tinja Parameter Satuan Hasil Pengujian BOD 5 mg/L 1375 COD (0,45 mikron) mg/L 56880 CODrb (0,22 mikron) mg/L 45360 TSS mg/L 4400 VSS mg/L 3200 FSS mg/L 1200 pH - 7,3 Temperatur ° C 31 Gelembung Gas (tampak) - Tidak Gelembung  Gas  (tutup  stoples diketuk) - Ada Vol. Lumpur dan Supernatan - Tidak tampak Terbentuk Scum - Tidak Tabel 2. Waktu pengujian parameter Parameter Waktu Pengujian
TSS (VSS dan FSS)
H-0, H-1, H-2, H-3, H-4, H-5, H- 7, H-10, H-14*, H-21*, H-32, H-
35, H-42, H-49*, H-56*
BOD 5 COD (CODrb) pH Temperatur Vol. Lumpur dan Supernatan Gambar 3.  Nilai COD P1, P2, P3, P4, dan P5.
Gambar 4.  Nilai CODrb P1, P2, P3, P4, dan P5.
0 10000 20000 30000 40000 50000 60000 70000 H-0 H-1 H-2 H-3 H-5 H-7 H-32 H-35 H-42 C O D (m g /L ) Waktu (hari)
EM4 1,2 mL (0,1%) EM4 4,8 mL (0,4%) EM4 9,6 mL (0,8%) EM4 1,2 mL + media Blanko 0 10000 20000 30000 40000 50000 60000 H-0 H-1 H-2 H-3 H-5 H-32 H-35 H-42 C O D rb (m g /L ) Waktu (hari) EM4 1,2 mL (0,1%) EM4 4,8 mL (0,4%) EM4 9,6 mL (0,8%)
EM4 1,2 mL + media Blanko
dan dapat ditambahkan ke dalam reaktor berisi lumpur tinja.

## C. Penelitian Pendahuluan
Setelah  pengambilan  sampel  dilakukan,  sampel  yang sudah  diaduk  dengan  rotor  dan  ditempatkan  pada  reaktor kemudian  disimpan  selama  7  (tujuh)  hari.  Hal  ini dimaksudkan  untuk  memastikan  suasana  anaerobik  pada reaktor,  kemungkinan  udara  yang  masuk  saat  proses pengadukan dengan rotor dan pengambilan sampel berisiko mengubah  suasana  anaerobik.  Saat  proses  pengadukan, sampel diusahakan kontak seminimal mungkin dengan udara.
Pada  penelitian  pendahuluan  dilakukan  uji  karakteristik awal  lumpur  tinja.  Sebelum  diambil,  lumpur  tinja  dalam reaktor  Hari  ke-0  (H-0)  diaduk  secara  manual  supaya homogen. Hasil pengukuran parameter pada H-0 dapat dilihat pada Tabel 1.

## D. Penelitian Utama
Penelitian utama dilakukan setelah penelitian pendahuluan dan  didapatkan  karakteristik  awal  lumpur  tinja.  Pada penelitian  utama  dilakukan  penambahan  EM4  yang  sudah diaktivasi dengan variasi sebagai berikut:
1. Tanpa penambahan EM4 atau blanko (P1)
2. Penambahan EM4 1,2 mL atau 0,1% v/v (P2)
3. Penambahan EM4 4,8 mL atau 0,4% v/v (P3)
4. Penambahan EM4 9,6 mL atau 0,8% v/v (P4)
5. Penambahan  EM4  1,2  mL  +  media attached  growth sebanyak 10% atau 50 buah (P5)
Parameter  yang  diuji  pada  penelitian  ini  antara  lain  TSS (termasuk  VSS  dan  FSS),  BOD 5 ,  COD  (termasuk  CODrb), volume  lumpur  dan  supernatan  dalam  reaktor,  pH,  dan temperatur. Penelitian ini dilakukan selama 2 (dua) bulan dan dilaksanakan  selama  masa  pandemi  COVID-19.  Waktu pengukuran parameter yang direncanakan dapat dilihat pada Tabel 2. Analisis TSS, BOD 5 , dan COD secara berturut-turut
menggunakan  metode Gravimetric ,  Winkler,  dan Close Reflux Titrimetric yang  mengacu  pada  SNI  dan Standard Method for Examination of Water and Wastewater Edisi ke- 23.  Setiap  reaktor  berisi  1200  mL  lumpur  tinja  kemudian diambil sebanyak 6 mL (0,5% dari 1200 mL) sampel untuk dianalisis.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Efek Variasi Konsentrasi EM4 pada Penguraian Lumpur Tinja Secara Anaerobik
Hasil menunjukkan bahwa P1, P2, P3, P4, dan P5 memiliki pH yang berada dalam rentang optimum untuk pertumbuhan bakteri  yaitu  6,5  hingga  8,0  [15],  [5].  pH  dalam  rentang tersebut  optimal  untuk  memecah  bahan  organik  [15],  [5]. Penurunan  pH  disebabkan  karena  terjadi  proses  fermentasi oleh  bakteri  asam  laktat  EM4  yang  menghasilkan Volatile Fatty Acids atau VFAs. Penurunan pada pH dapat disebabkan karena  akumulasi  VFAs  yang  dihasilkan  selama  fase asidogenesis  dan  asetogenesis  proses  anaerobik.  Penurunan pH  dapat  menghambat  pertumbuhan  mikroorganisme patogen. Dalam penelitian ini, penurunan pH tidak signifikan sehingga tidak bisa untuk menghambat patogen.
Sementara  itu,  temperatur  P1,  P2,  P3,  P4,  dan  P5  berada dalam  rentang  30-34 ° C  (Gambar  1).  Hal  ini  menunjukkan bahwa  jenis  mikroorganisme  yang  hidup  di  dalam  reaktor adalah  jenis mesophilic dengan  ciri  temperatur  optimal  20- 45 ° C [15]. Sehingga, kesimpulan yang didapat adalah variasi konsentrasi  tidak  memberikan  efek  signifikan  untuk temperatur masing-masing perlakuan.
Variasi  konsentrasi  EM4  berpengaruh  terhadap  tingkat kekentalan sampel yaitu P4 = P5 > P3 > P2 > P1 pada H-1 hingga H-42. Variasi konsentrasi juga berpengaruh terhadap gelembung scum yang  terbentuk  selama  H-1  hingga  H-42. Scum terbanyak adalah pada P4 = P5 > P3 > P2 > P1. Hal ini menunjukkan bahwa semakin tinggi konsentrasi EM4 maka akan semakin kental lumpur tinja dan semakin banyak scum yang terbentuk.
Gambar 5.  Nilai pH H-0, H-1, dan H-42.
Gambar 6.  Nilai Temperatur H-0, H-1, dan H-42. 7.3 7.3 7.3 7.3 7.3 7.7 7.8 7.8 7.9 7.3 6.8 6.9 6.9 6.9 6.8 6.2 6.4 6.6 6.8 7 7.2 7.4 7.6 7.8 8 EM4 1,2 mL (0,1%) EM4 4,8 mL (0,4%)
EM4 9,6 mL (0,8%) EM4 1,2 mL + media Blanko pH Konsentrasi  EM4 H-0 H-1 H-42 31 31 31 31 31 34 32 33 34 31 30 30 30 30 30 28 29 30 31 32 33 34 35 EM4 1,2 mL (0,1%) EM4 4,8 mL
(0,4%) EM4 9,6 mL (0,8%) EM4 1,2 mL + media Blanko
Te m p e ra tu r ( C) Konsentrasi  EM4 H-0 H-1 H-42 Gambar 7.  Nilai TSS H-0, H-1, dan H-42.
Gambar 8.  Penurunan Volume Lumpur H-0, H-1, dan H-49.
4400 4400 4400 4400 4400 5200 4400 4800 3200 4400 7200 6400 5600 6800 6400 0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000 EM4 1,2 mL (0,1%) EM4 4,8 mL
(0,4%) EM4 9,6 mL (0,8%) EM4 1,2 mL + media Blanko TS S ( m g/ L) Konsentrasi  EM4 H-0 H-1 H-42 1200 1200 1200 1200
1200 1200 1200 1200 1200 1200 750 400 350 350 900 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 EM4 1,2 mL (0,1%) EM4 4,8 mL
(0,4%) EM4 9,6 mL (0,8%) EM4 1,2 mL + media Blanko V ol um e (m L) Konsentrasi  EM4 H-0 H-1 H-49
Analisis TSS yang dilakukan meliputi TSS, VSS, dan FSS. Nilai  TSS  dinyatakan  benar  apabila  nilai  VSS  lebih  besar daripada  FSS.  VSS  digunakan  untuk  menyatakan  bahan organik suspended sedangkan  FSS  untuk  bahan  anorganik suspended dalam sampel uji. Nilai TSS P1, P2, P3, P4, dan P5  mengalami  kenaikan  hingga  H-42,  dapat  dilihat  pada Gambar 1. Pada H-35 terjadi kenaikan pesat nilai TSS pada semua  perlakuan.  Pada  penguraian  anaerobik  sistem batch , TSS  seharusnya  semakin  menurun  karena substrat (jumlahnya tetap) diuraikan oleh mikroorganisme.
Sementara itu, mikroorganisme seiring berjalannya waktu akan  mengalami  kompetisi  sehingga  sebagian  mengalami fase endogenous  respiration atau decay [16].  Faktor  yang menyebabkan nilai TSS H-32 dan H-35 mengalami kenaikan drastis  salah  satunya  adalah  pengadukan  saat  pengambilan sampel.
Tujuan pengadukan adalah untuk membuat sampel lumpur tinja  homogen.  Namun,  dalam  penelitian  ini,  pengadukan kemungkinan  menyebabkan  partikulat  selain  TSS  (seperti grit )  di  bawah  reaktor  ikut  bercampur  bersama  sampel  uji. Karena  sampel  diaduk  dalam  kondisi  tutup  stoples  dibuka, maka ada kemungkinan terjadi intervensi oksigen. Sehingga, hal ini menyebabkan proses anaerobik terganggu, khususnya dalam  penguraian  TSS  karena  bahan suspended lebih  sulit diuraikan daripada bahan dissolved .
Dalam  penelitian  pengolahan  limbah  cair  tahu  dengan variasi  konsentrasi  EM4  dalam  reaktor batch aerobik- anaerobik, nilai TSS mengalami kenaikan sebesar 350% pada H-20.  Kenaikan  TSS  ini  dapat  disebabkan  oleh ammonia yang  terserap  dalam  bahan suspended sehingga  tercampur dalam sampel [5].
Dalam  penelitian  menggunakan  EM4  untuk  pengolahan aerobik  limbah  cair  industri  permen,  nilai  TSS  mengalami kenaikan  setelah  H-11  baik  pada  reaktor  tanpa  EM4  dan dengan  EM4.  Hal  ini  kemungkinan  disebabkan  oleh rendahnya  jumlah  mikroorganisme  aktif  yang  ada  di  dalam limbah cair atau kondisi lingkungan yang kurang mendukung mikroorganisme  EM4  untuk  berkembang  optimal.  Wujud TSS secara tampak (fisik) adalah berupa lumpur.
Pada  H-49,  terjadi  pemisahan  antara  lumpur  dan supernatan  untuk  P1,  P2,  P3,  P4,  dan  P5.  Pemisahan  yang paling  signifikan  adalah  pada  P4  dan  P5,  dengan  volume lumpur awal 1200 mL menjadi 350 mL lumpur dan 850 mL supernatan.  Penurunan  volume  lumpur  H-49  menandakan bahwa  lumpur  (TSS)  dapat  menurun  setelah  H-42.  Namun, dalam  penelitian  ini,  nilai  TSS  H-49  tidak  bisa  didapatkan karena  kebijakan lockdown Laboratorium.  Maka  dari  itu, penelitian dengan waktu lebih dari H-42 perlu dilakukan.
Nilai VSS cenderung mengalami kenaikan, serta pada H- 32  hingga  H-35  mengalami  kenaikan  signifikan.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  proses  anaerobik  tidak  sesuai  dengan kondisi  ideal.  Secara  teori,  penyebab volatile  solids meningkat  adalah  karena  bahan  organik  digunakan mikroorganisme  untuk  metabolisme  dan  pembelahan  sel sehingga  mikroorganisme  bertambah  jumlahnya.  Pada penguraian  anaerobik  sistem batch ,  lama-kelamaan  VSS akan  turun  sebab  mikroorganisme  akan  mengalami  fase endogenous  respiration atau decay akibat  berkurangnya substrat [16].
Nilai  FSS  cenderung  mengalami  kenaikan.  Penguraian bahan  organik  terjadi  dalam  dua  tahap.  Pertama,  bahan organik  diuraikan  menjadi  bahan  anorganik.  Kedua,  bahan anorganik  tidak  stabil  diubah  menjadi  stabil.  Sehingga, apabila terjadi kenaikan pada FSS, hal itu dapat disebabkan karena  mikroorganisme  mampu  mengubah  bahan  organik menjadi  bahan  anorganik.  Secara  teori,  nilai  FSS  akan semakin menurun. Mikroorganisme akan memecah substrat suspended menjadi dissolved .  Kenaikan  yang  terjadi menunjukkan bahwa FSS tidak sesuai dengan kondisi ideal. Faktor  penyebab  kenaikan  ini  diduga  karena  intervensi oksigen  akibat  pengadukan  sampel  dalam  keadaan  stoples terbuka.  Sehingga,  hal  ini  dapat  mengganggu  proses anaerobik berjalan sempurna.
BOD mewakili bahan organik biodegradable pada sampel lumpur tinja. Lumpur tinja memiliki nilai BOD 5 lebih tinggi daripada  air  limbah  ’kuat’  [15].  Distribusi  ukuran  partikel memberi  pengaruh  pada  BOD 5 .  Semakin  kecil  ukuran partikel maka akan semakin cepat reaksi BOD5 [15]. Faktor lain  yang  memengaruhi  nilai  BOD 5 yaitu  filtrasi, pengenceran,  dan  metode  pengambilan  sampel  [15].  Dalam pengujian  BOD 5 dengan  metode  Winkler,  pengadukan dengan stirrer memberikan  pengaruh  signifikan  yakni  nilai BOD 5 pada  sampel  yang  diaduk  lebih  besar  15-30% dibanding sampel yang tidak diaduk [17].
Nilai  BOD 5 semua  perlakuan  mengalami  penurunan  dari H-0  hingga  H-42,  dapat  dilihat  pada  Gambar  2.  Penurunan terbesar H-0 hingga H-42 dialami P4. Hal ini menunjukkan bahwa semakin tinggi konsentrasi EM4 maka semakin besar
Gambar 11.  Nilai CODrb H-0 dan H-5.
45360 45360 45360 45360 45360 36720
31680 30240 31680 37440 0 5000 10000 15000 20000 25000 30000 35000 40000 45000 50000 EM4 1,2 mL (0,1%) EM4 4,8 mL
(0,4%) EM4 9,6 mL (0,8%) EM4 1,2 mL + media Blanko C O D rb ( m g/ L) Konsentrasi  EM4 H-0 H-5 Gambar 9.  Nilai BOD 5 H-0, H-1, dan H-42.
Gambar 10.  Nilai COD H-0, H-1, dan H-42.
1375 1375 1375 1375 1375 375 375 500 250 1000 375 250 125 250 500 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 EM4 1,2 mL (0,1%) EM4 4,8 mL
(0,4%) EM4 9,6 mL (0,8%) EM4 1,2 mL + media
Blanko B O D 5 (m g/ L) Konsentrasi  EM4 H-0 H-1 H-42 56880 56880 56880 56880 56880
55440 51840 56880 51840 56880 18720 7920 3600 12960 20160 0 10000 20000 30000 40000 50000 60000 EM4 1,2 mL (0,1%) EM4 4,8 mL
(0,4%) EM4 9,6 mL (0,8%) EM4 1,2 mL + media Blanko C O D ( m g/ L) Konsentrasi  EM4 H-0 H-1 H-42
penyisihan  BOD 5 .  Penyisihan  dapat  disebabkan  karena aktivitas  mikroorganisme  EM4  yang  mampu  melakukan fermentasi  bahan  organik biodegradable .  EM4  memiliki kandungan dominan berupa bakteri asam laktat ( Lactobacillus sp.) yang mampu dengan cepat mengonversikan laktosa menjadi asam-asam organik dan gas anaerobik.  Keberadaan Lactobacillus sp.  Mempercepat terjadinya penguraian bahan organik yang ada dalam sampel [5]. Selain itu, yeast dalam EM4 ( Saccharomyces sp.) mampu menghasilkan enzim sehingga dapat mempercepat fermentasi bahan  organik.  Enzim-enzim  yang  berperan  dalam  proses fermentasi dengan Lactobacillus sp. dan Saccharomyces sp. di  antaranya  enzim lactase , zymase , protease ,  dan lipase . Enzim protease dapat  memecah  protein  menjadi ammonia , nitrit , nitrat , karbon dioksida , dan air .
Pada air limbah, nilai COD/BOD 5 yang tinggi (rasio > 2,5) menunjukkan  dekomposisi  yang  lambat  dan  kandungan bahan organik  tinggi dan  sulit terurai.  Dalam penelitian ini, hasil menunjukkan bahwa pada sampel uji semua perlakuan menunjukkan rasio COD/BOD 5 > 2,5 yang mengindikasikan bahwa  bahan  organik  tinggi  dan  sulit  terurai.  Nilai  BOD 5 yang  kecil  dapat  disebabkan  oleh  sebagian  BOD  yang terbawa  melalui  pembuangan  supernatan  ke  dalam  sistem infiltrasi tanah atau ke saluran permukaan.
Nilai COD (0,45 mikro) mengalami penurunan signifikan hingga  H-42  pada  semua  perlakuan,  dapat  dilihat  pada Gambar  3.  Penurunan  terbesar  terjadi  pada  P4.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  semakin  besar  konsentrasi  EM4  maka semakin  besar  pula  penurunan  COD.  Penurunan  nilai  COD disebabkan  oleh  aktivitas  mikroorganisme  anaerobik  yang menguraikan  bahan  organik.  Sebagian  besar  COD biodegradable dalam sampel tereliminasi habis pada proses metanogenesis  [18].  Dalam  penelitian  ini,  penurunan signifikan pada COD dibandingkan dengan BOD mengindikasikan  bahwa  mikroorganisme  EM4  dapat menguraikan  bahan  organik non- biodegradabel  dalam lumpur  tinja.  Sampel  yang  ditambah  EM4  mengalami penurunan lebih cepat dibandingkan sampel tanpa EM4. Hal ini  disebabkan  karena  EM4  mengandung Lactobacillus sp. yang dapat menguraikan laktosa secara cepat dengan enzim lactase [5].  Selain  itu, Saccharomyces sp.  mampu menghasilkan  enzim zymase sehingga  mempercepat fermentasi bahan organik. Enzim-enzim yang berperan dalam proses fermentasi dengan Lactobacillus sp. dan Saccharomyces sp.  di  antaranya  enzim lactase , zymase , protease , dan lipase . COD readily  biodegradable (CODrb)  semua  perlakuan mengalami  penurunan,  dapat  dilihat  pada  Gambar  4. Penurunan  signifikan  terjadi  pada  P4,  dimana  pada  H-35 memiliki nilai 0 mg/L. Hal ini menunjukkan bahwa CODrb telah  habis  terurai  dan  yang  tersisa  adalah  COD slowly biodegradable (CODsb) yang harus melalui tahap hidrolisis dahulu  sebelum  bisa  digunakan  mikroorganisme.  Bahan readily  biodegradable dapat  langsung  digunakan  oleh mikroorganisme  untuk  metabolisme.  Sedangkan,  bahan organik kompleks, slowly biodegradable , non- biodegradable ,  dan  tidak  terlarut  akan  mengalami  proses hidrolisis  yang  akan  menyebabkan  terbentuknya  monomer terlarut yang ukuran partikelnya lebih kecil. Dalam hidrolisis, polisakarida  diuraikan  menjadi  monomer  gula,  protein menjadi asam amino, serta lemak menjadi gliserol dan Long
Chain Fatty Acids atau LCFAs [15].
B. Efek  Penambahan  Media  Attached  Growth  pada Penguraian Lumpur Tinja Secara Anaerobik
P5  menggunakan  kombinasi  media attached  growth ( biocarriers )  dan  EM4  konsentrasi  0,1%  v/v.  Media biocarrier yang terendam terus-menerus akan menyebabkan mikroorganisme  membentuk  biofilm.  Biofilm  merupakan material organik berupa mikroorganisme yang melekat pada matriks  polimer  yang  dibentuk  oleh  mikroorganisme  itu sendiri. Komposisi biofilm antara lain sel-sel mikroorganisme,  detritus,  polisakarida,  dan  air.  Sementara bahan-bahan  pembentuk  lapisan  biofilm  dapat  berupa protein, lemak, dan lektin. Struktur bentuk biofilm tergantung pada lingkungannya.
Bakteri denitrifikasi ditemukan terakumulasi pada biofilm ( attached  growth )  [19].  Bakteri  denitrifikasi  mereduksi senyawa nitrat (NO 3- ) menjadi senyawa nitrogen bebas (N 2 ). Bakteri  yang  mampu  melakukan  metabolisme  ini  salah satunya Pseudomonas sp.  [20].  Sedangkan  pada suspended growth ,  bakteri  denitrifikasi  lebih  sedikit  ditemukan dibanding pada attached growth [19].
Nilai  pH  P5  berada  dalam  rentang  optimum  yaitu  6,5 hingga  8,0.  Temperatur  P5  juga  berada  dalam  rentang  30- 34 ° C  ( mesophilic ).  TSS  mengalami  kenaikan  hingga  H-42. Pada H-1, P5 yang merupakan kombinasi suspended growth dan attached  growth dapat  menyebabkan  penurunan  VSS lebih besar daripada P1 yang merupakan suspended growth saja. Penurunan VSS pada P5 sebesar 1200 mg/L lebih besar dibandingkan  P1  sebesar  400  mg/L.  Hal  ini  menunjukkan bahwa mikroorganisme P5 lebih banyak daripada P2. Namun, perbedaan ini tidak signifikan sehingga perlu ada peninjauan terhadap parameter lain. Dalam penelitian ini FSS mengalami kenaikan.  Hal  ini  tidak  sesuai  dengan  kondisi  ideal  dan kemungkinan  disebabkan  karena  ada  intervensi  oksigen selama pengadukan. Dalam kondisi ideal, FSS akan semakin menurun  karena  bahan  anorganik  terpecah  dari  bentuk suspended menjadi dissolved .
BOD5  P5  cenderung  mengalami  penurunan.  Penurunan BOD 5 disebabkan karena bahan organik biodegradable telah berhasil  diuraikan  oleh  mikroorganisme  anaerobik  dalam lumpur tinja. Pada H-42, P5 memiliki nilai BOD 5 lebih kecil yaitu  250  mg/L  daripada  P2  yaitu  375  mg/L.  Sehingga,  P5 memiliki  kemampuan  lebih  baik  untuk  menguraikan  bahan organik biodegradable dibandingkan P2. Hal ini disebabkan oleh  penambahan  media biocarrier .  COD  dan  CODrb  P5 mengalami penurunan signifikan. Penurunan COD P5 lebih besar daripada P2. Pada H-42, nilai COD P5 sebesar 12960 mg/L  sementara  P2  sebesar  18720  mg/L.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  dengan  penambahan  media biocarrier maka  kemampuan  menurunkan  COD  menjadi  lebih  baik dibandingkan tanpa media. Sementara untuk CODrb, P5 dan P2  menunjukkan  angka  0  mg/L  pada  H-42.  Penurunan CODrb pada P5 terjadi secara bertahap,  sedangkan pada P2 terjadi secara cepat di awal pekan. CODrb adalah COD yang langsung bisa digunakan untuk metabolisme mikroorganisme tanpa melalui proses hidrolisis  terlebih  dahulu. Keadaan ini menguntungkan  mikroorganisme suspended karena  area  di sekitarnya  adalah substrat itu  sendiri  (CODrb),  sementara pada mikroorganisme attached perlu menempel pada media.

## C. Penentuan Konsentrasi Terbaik EM4  untuk Penguraian Lumpur Tinja Secara Anaerobik
Waktu optimum penguraian lumpur tinja secara anaerobik yang didapatkan dalam penelitian ini yaitu H-42. Sementara itu, septic tank yang merupakan sistem kontinu diasumsikan memiliki waktu detensi satu hari. Sehingga, pada penelitian ini  dibandingkan  data  H-0,  H-1,  dan  H-42.  Efek  variasi konsentrasi EM4 dan media yang ditambahkan pada sampel lumpur tinja dianalisis berdasarkan H-0, H-1, dan H-42.
Semua  perlakuan  memiliki  pH  dalam  rentang  optimum yaitu  6,5  hingga  8,0,  dapat  dilihat  pada  Gambar  5.  Semua perlakuan berada dalam rentang 30-34 ° C ( mesophilic ), dapat dilihat  pada  Gambar  6.  Perubahan  pada  pH  dan  temperatur tidak  memberikan  efek  signifikan  dalam  penentuan konsentrasi  terbaik  karena  semua  dalam  rentang  optimum untuk penguraian lumpur tinja secara anaerobik.
Variasi  konsentrasi  menyebabkan  penurunan  volume lumpur dan supernatan pada H-49, dengan P4 = P5 > P3 > P2 >  P1.  Hal  ini  berarti  bahwa  sampel  yang  ditambah  EM4 memiliki  kemampuan  menurunkan  lumpur  lebih  tinggi dibandingkan  tanpa  EM4.  Semakin  besar  konsentrasi  EM4 menyebabkan semakin besar penurunan lumpur dan semakin baik  kinerja  penguraian  yang  terjasi.  Kinerja  penguraian terbaik ditinjau dari penurunan lumpur adalah P4 dan P5.
Nilai  TSS  ditinjau  dari  H-0  hingga  H-1  untuk  melihat efeknya  jika diterapkan pada septic  tank .  TSS  juga  ditinjau pada  waktu  optimum  yaitu  H-0  hingga  H-42  untuk  melihat proses  penguraian  anaerobik  yang  terjadi.  Penurunan  TSS tercepat dialami oleh P5 yang terjadi pada H-1, dapat dilihat pada  Gambar  7.  Wujud  TSS  secara  tampak  (fisik)  adalah berupa lumpur. Dalam penelitian ini, terjadi pemisahan antara lumpur dan supernatan pada H-49, dapat dilihat pada Gambar 8.  Penurunan  terbesar  terjadi  pada  P4  dan  P5  yaitu  volume lumpur  turun  dari  1200  mL  menjadi  350  mL.  Penurunan volume lumpur pada H-49 menandakan bahwa lumpur (TSS) dapat  menurun  setelah  H-42.  Namun,  dalam  penelitian  ini, nilai  TSS  H-49  tidak  bisa  didapatkan  karena  kebijakan lockdown Laboratorium. Maka dari itu, penelitian lebih dari H-42  perlu  dilakukan.  Penurunan  TSS  dapat  disebabkan karena  bahan  organik  didegradasi  oleh  mikroorganisme dalam  reaktor.  Selain  itu,  dengan  penambahan  media, penurunan  terjadi  lebih  cepat  karena  mikroorganisme  dan substrat juga melekat pada media.
Pada H-1, nilai TSS P3 dan P1 tetap. Sementara itu, P2 dan P4  mengalami kenaikan.  Namun, kenaikan  pada  P2  dan P4 tidak  signifikan.  Penelitian  tentang penggunaan  EM4 untuk penguraian  lumpur  tinja  anaerobik  dengan  variasi  kadar  air menunjukkan  hasil  berupa  kenaikan  pada volatile  solids mulai H-7 hingga H-21 [14]. Kenaikan ini dapat disebabkan karena  mikroorganisme  mengalami  pertumbuhan  setelah memanfaatkan  bahan  organik  untuk  metabolisme  dan pembelahan  selnya  [14].  Penelitian  tentang  pengolahan limbah  cair  tahu  dengan  variasi  konsentrasi  EM4  dalam reaktor batch aerobik-anaerobik  menunjukkan  hasil  berupa kenaikan TSS [5]. TSS mengalami kenaikan dari 330 mg/L pada H-0 menjadi 1881 mg/L (tanpa EM4), 1546 mg/L (EM4 5%), dan 2811 mg/L (EM4 10%) pada H-20 [5]. Kenaikan ini dapat  disebabkan  oleh ammonia (hasil  pemecahan  protein) terserap  dalam suspended  solids sehingga  tercampur  dalam sampel.
Semua  perlakuan  mengalami  kenaikan  TSS  pada  H-1,
kecuali P5. Jika dilihat dari hasil TSS tersisa di H-42, maka yang memiliki TSS paling sedikit adalah P4. Sementara untuk penurunan  volume  lumpur  sesuai  Gambar  8.,  P4  dan  P5 menunjukkan kinerja yang sama.
Selanjutnya,  nilai  BOD 5 pada  waktu  optimum  juga dibandingkan  untuk  menentukan  konsentrasi  terbaik  Em4 dalam penguraian lumpur tinja secara anaerobik. Nilai BOD 5 yang  mengalami  penurunan  berarti  bahwa  mikroorganisme mampu menguraikan bahan organik biodegradable . Penurunan  BOD 5 paling  signifikan  dari  H-0  hingga  H-42 yaitu pada P4, dapat dilihat pada Gambar 9. Sementara pada H-0 hingga H-1, penurunan terbanyak terjadi pada P5.
Pada H-42, jumlah BOD 5 pada P4 lebih kecil daripad P5. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  P5  lebih  cepat  memulai penguraian  bahan  organik biodegradable, namun removal BOD 5 di H-42 lebih kecil. P4 memerlukan penyesuaian lebih lama  di  dalam  reaktor,  namun  memberikan  hasil removal lebih  besar  dari  P5.  Karena septic  tank digunakan  secara kontinu  untuk  jangka  panjang,  maka  konsentrasi  terbaik ditinjau dari removal pada H-42.
Penurunan  nilai  COD  merepresentasikan  bahan  organik berhasil terurai pada lumpur tinja. Perubahan nilai COD dapat dilihat  pada  Gambar  10.  Pada  waktu  optimum  yaitu  H-42, nilai  COD  paling  kecil  adalah  pada  P4.  P4  tidak  langsung menguraikan bahan organik pada H-1 karena membutuhkan waktu  untuk  aklimatisasi  terlebih  dahulu.  P4  mendapatkan penambahan  EM4  dengan  konsentrasi  paling  tinggi  untuk penelitian ini. Hal ini membuktikan bahwa semakin banyak konsentrasi  yang  ditambahkan,  maka  semakin  cepat  pula penurunan  bahan  organik  yang  ada  pada  lumpur  tinja. Penurunan signifikan pada nilai COD dibandingkan dengan BOD  mengindikasikan  bahwa  mikroorganisme  EM4  dapat menguraikan bahan organik non-biodegradable .
Sementara itu, nilai CODrb mewakili bahan organik yang bisa  dipakai  mikroorganisme  untuk  metabolisme  dan pertumbuhan secara langsung tanpa melalui proses hidrolisis. Pada  H-0  hingga  H-5,  penurunan  tercepat  untuk  CODrb adalah  pada  P4,  dapat  dilihat  pada  Gambar  11.  Hal  ini menunjukkan bahwa semakin banyk konsentrasi EM4 maka semakin cepat penurunan bahan organik readily biodegradable . Penurunan signifikan pada CODrb menunjukkan  bahwa  bahan  organik readily  biodegradable suatu saat jumlahnya akan menipis karena termasuk substrat yang cepat diuraikan oleh mikroorganisme.
Ditinjau dari penurunan volume lumpur, semua perlakuan mengalami  penurunan.  Persen  penurunan  lumpur  berturut- turut untuk P1, P2, P3, P4, dan P5 sebesar 25%, 38%, 67%, 71%,  dan  71%.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  penurunan lumpur  terbanyak  terjadi  pada  P4  dan  P5.  Sementara  nilai TSS  semua  perlakuan  mengalami  kenaikan.  Pada  kondisi ideal,  TSS  dalam  proses  anaerobik  akan  menurun.  Namun, penurunan  TSS  pada  penguraian  anaerobik  memang membutuhkan waktu yang lama. Bila dilihat dari H-0, H-1, dan H-42, maka kenaikan yang paling tidak signifikan adalah pada  P4. Removal BOD 5 untuk  P1,  P2,  P3,  P4,  dan  P5 berturut-turut  adalah  64%,  73%,  82%,  91,  dan  82%.  Nilai BOD 5 yang turun paling signifikan yaitu pada P4. Removal COD berturut-turut untuk P1, P2, P3, P4, dan P5 adalah 65%, 67%,  86%, 94%,  dan  77%.  Penurunan  tercepat  untuk  COD dan CODrb adalah pada P4.
P5  mengalami  penurunan  paling  signifikan  untuk
parameter  TSS,  BOD,  dan  COD  pada  H-0  hingga  H-1. Namun, septic  tank tidak  beroperasi  hanya  dalam  satu  hari saja. Selain itu, pada P5 tidak ada jaminan bahwa setiap hari akan terjadi penurunan yang sama seperti pada H-0 hingga H- 1. P5 memberi reaksi cepat untuk menguraikan bahan organik dilihat  pada  perubahan  parameter  H-0  hingga  H-1.  Namun, jika  ditinjau dalam  jangka  waktu  yang  lebih panjang, maka P4 memberikan hasil penguraian bahan organik (TSS, BOD, COD) yang lebih baik.
P4  (EM4  9,6  mL  atau  0,8%  v/v)  mengalami  penurunan lumpur terbanyak, volume lumpur 1200 mL menjadi 350 mL. Di  antara  semua  perlakuan  yang  mengalami  kenaikan  TSS, P4 yang paling mengalami kenaikan tidak signifikan. Untuk BOD 5 ,  P4  memberikan  hasil removal paling  banyak  yaitu 91%. Sementara untuk COD, P4 mampu melakukan removal 94%  COD  yang  ada  dalam  lumpur  tinja.  P4  membutuhkan aklimatisasi terlebih dahulu selama dua hari, sehingga mulai bekerja  efektif  mengurai  bahan  organik  (COD)  pada  H-3. Sehingga, konsentrasi terbaik yang dipilih untuk penguraian lumpur  tinja  anaerobik  menggunakan  EM4  adalah  9,6  mL atau 0,8% v/v.

## IV. KESIMPULAN
Penambahan  EM4  dapat  menurunkan  bahan  organik biodegradable dan non-biodegradable pada  penguraian lumpur  tinja  secara  anaerobik.  EM4  menunjukkan  kinerja signifikan  dalam  menguraikan  BOD 5 dan  COD  (bahan dissolved )  pada  lumpur  tinja,  namun  menghasilkan  TSS (bahan suspended )  tinggi.  Pemisahan  antara  lumpur  dan supernatan terbaik adalah pada P4 (9,6 mL) = P5 (1,2 mL + media) > P3 (4,8 mL) > P2 (1,2 mL) > P1 (blanko). Sementara untuk  pH  dan  temperatur  tidak  memberi  efek  signifikan. Hasil  menunjukkan  bahwa  semua  perlakuan  berada  pada rentang  pH  optimum  yaitu  6,5  hingga  8,0.  Sementara  itu, temperatur  semua  perlakuan berada  dalam  rentang 30-34 ° C ( mesophilic ).
Konsentrasi terbaik yang dipilih untuk penguraian lumpur tinja secara anaerobik menggunakan EM4 adalah 9,6 mL atau 0,8%  v/v.  Konsentrasi  ini  dipilih  karena  menunjukkan penyisihan paling signifikan terhadap volume lumpur, BOD 5 , COD, dan CODrb masing-masing sebesar 71%, 91%, 94%, dan 100%, dibandingkan variasi konsentrasi lainnya.

## DAFTAR PUSTAKA
[1]  Kementerian  PUPR, Buku  E  Panduan  Perencanaan  Pelayanan Lumpur  Tinja ,  1st  ed.  Jakarta:  Kementerian  Pekerjaan  Umum  dan Perumahan Rakyat, 2018.
[2]  C.  A.  Azizah,  “Layanan  Lumpur  Tinja  Terjadwal  di  Kecamatan
Lowokwaru  Kota  Malang,”  Institut  Teknologi  Sepuluh  Nopember, 2017.
[3]  U.  Subhan,  M.  Selintung,  and  I.  R.  Rahim,  “Studi  Kelayakan Pelaksanaan  Program  Layanan  Lumpur  Tinja  Terjadwal  (LLTT)  di Kota Makassar,” Universitas Hasanuddin, Makasar, 2017.
[4]  I. W. K. Suryawan, G.  Prajati, A. S. Afifah, M. R. Apritama, and Y. Adicita,  “Continuous  piggery  wastewater  treatment  with  anaerobic baffled  reactor  (ABR)  by  bio-activator  effective  microorganisms (EM4),” Indones. J. Urban Environ. Technol. , vol. 3, no. 1, pp. 1–12,
2019.
[5]  U. Munawaroh, M. Sutisna, and K. Pharmawati, “Penyisihan parameter pencemar  lingkungan  pada  limbah  cair  industri  tahu  menggunakan efektif  mikroorganisme  4  (EM4)  serta  pemanfaatannya,” J.  Reka Lingkung. , vol. 1, no. 2, pp. 93–104, 2013.
[6]  I.  G.  E.  Kusuma,  A.  A.  G.  Arjana,  and  I.  K.  Berata,  “Pemberian effective microorganism (Em4®) terhadap gambaran histopatologi hati tikus putih (Rattus norvegicus) betina,” Indones. Med. veterinus , vol. 1, no. 5, pp. 582–595, 2012.
[7]  Z. Zakaria, S. Gairola, and N. M. Shariff, “Effective microorganisms (EM)  technology  for  water  quality  restoration  and  potential  for sustainable  water  resources  and  management,” Int.  Congr.  Environ. Model. Softw. , vol. 142, pp. 80–87, 2010.
[8]  C. Rose, A. Parker, B. Jefferson, and E. Cartmell, “The characterization of  feces  and  urine:  a  review  of  the  literature  to  inform  advanced treatment technology,” Crit.  Rev.  Environ. Sci.  Technol. , vol. 45,  no. 17, pp. 1827–1879, 2015.
[9]  J.  Colón,  A.  A.  Forbis-Stokes,  and  M.  A.  Deshusses,  “Anaerobic digestion  of  undiluted  simulant  human  excreta  for  sanitation  and energy  recovery  in  less-developed  countries,” Energy  Sustain.  Dev. , vol. 29, pp. 57–64, 2015.
[10]  M. Megawati, “Pengaruh penambahan EM4 (Effective
Microorganism-4)  pada  pembuatan  biogas  dari  eceng  gondok  dan rumen sapi,” J. Bahan Alam Terbarukan , vol. 3, no. 2, pp. 42–49, 2014.
[11]  F. Ali, D. P. Utami, and N. A. Komala, “Pengaruh penambahan EM4 dan larutan gula pada pembuatan pupuk kompos dari limbah industri crumb rubber,” J. Tek. Kim. , vol. 24, no. 2, pp. 47–55, 2018.
[12]  A.  Rahmadi, Bakteri  Asam  Laktat  dan  Mandai  Cempedak ,  1st  ed. Samarinda: Mulawarman University Press, 2018.
[13]  Y.-H. Moon, K.-B. Lee, Y.-J. Kim, and Y.-M. Koo, “Current status of EM (effective microorganisms) utilization,” KSBB J. , vol. 26, no. 5, pp. 365–373, 2011.
[14]  E.  Mirwandono et  al. ,  “Nutrition  Quality  Test  of  Fermented  Waste Vegetables  by  Bioactivator  Local  Microorganisms  (MOL)  and Effective  Microorganism  (EM4),”  in IOP  Conference  Series:  Earth and Environmental Science , 2018, vol. 122, no. 1, p. 12127.
[15]  L.  Strande,  M.  Ronteltap,  and  D.  Brdjanovic, Faecal  Sludge Management , 1st ed. London: IWA Publishing, 2015.
[16]  Metcalf and Eddy, Wastewater Engineering: Treatment and Resource Recovery , 5th ed. New York: McGraw-Hill Education, 2014.
[17]  U.  Heinss,  S.  A.  Larmie,  and  M.  Strauss, Characteristics  of  Faecal Sludges  and  their  Solids-Liquid  Separation ,  1st  ed.  Dübendorf: Eawag/Sandec, 1999.
[18]  R.  Petruy,  “Anaerobic Treatment  of Protein,  Lipid and Carbohydrate Containing Wastewaters Using the EGSB Technology,” Wageningen University and Research, 1999.
[19]  C.  Li,  X.  L.  Li,  M.  Ji,  and  J.  Liu,  “Performance  and  microbial characteristics of integrated fixed-film activated sludge system treating industrial wastewater,” Water Sci. Technol. , vol. 66, no. 12, pp. 2785– 2792, 2012.
[20]  C.  A. Carlson and  J. L.  Ingraham,  “Comparison  of  denitrification by Pseudomonas  stutzeri,  Pseudomonas  aeruginosa,  and  Paracoccus denitrificans,” Appl.  Environ.  Microbiol. ,  vol.  45,  no.  4,  pp.  1247– 1253, 1983.