Media Farmasi Vol. 13 No. 2 September 2016 : 199-211

## SKRINING FITOKIMIA EKSTRAK ETANOL Ulva lactuca L. DENGAN METODE KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS
PHYTOCHEMICAL SCREENING OF ETHANOLIC EXTRACT FROM Ulva lactuca L. WITH THIN LAYER CHROMATOGRAPHY
Wahyu Widyaningsih 1 , Suwidjiyo Pramono 2 , Sitarina Widyarini 2 , Sugiyanto 2
1 Fakultas Farmasi Universitas Ahmad Dahlan Yogyakarta
2 Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta Email: widyaningsihwahyu@yahoo.com

## ABSTRAK
Ganggang hijau ( Ulva lactuca L.) merupakan spesies ganggang laut yang berpotensi sebagai  obat  kardiovaskuler.  Untuk  mendukung  pemanfaatannya  perlu  dilakukan skrining fitokimia kandungan ganggang hijau yang berasal dari pantai Drini, Daerah Istimewa  Yogyakarta.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  melakukan  skrining  fitokimia Ulva lactuca yang berasal dari pantai Drini dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT). Ulva  lactuca diekstraksi  dengan  metode  maserasi  dengan  etanol  96%.  Ekstrak  yang diperoleh ditetapkan randemen,  kadar air, kadar abu dan kadar logam berat (Pb dan Cd). Penetapan kadar air dengan alat Hydrogen Moisturizer Analyzer (HMA), kadar abu  dengan  metode  gravimetri  dan  penetapan  logam  berat  Pb  dan  Cd  dengan Spektrofotometer  Serapan  Atom  (SSA).  Skrining  fitokimia  dilakukan  untuk mengindentifikasi  golongan  senyawa  alkaloid,  flavonoid,  saponin,  antrakuinon  dan terpenoid dengan KLT.  Identifikasi klorofil dilakukan dengan metode Nollet (2004). Hasil  penelitian  menunjukkan  ekstrak  etanol Ulva  lactuca mempunyai  randemen 14,52%, kadar air 9,67±0,07%, kadar abu 34,05% , kadar logam Pb<0,07 mg/kg dan kadar  logam  Cd<0,01  mg/kg.  Terdapat  golongan  senyawa  flavonoid,  alkaloid  dan klorofil dalam ekstrak etanol Ulva lactuca L. yang diperoleh dari pantai Drini.
Kata kunci: Ulva lactuca L, skrining fitokimia, Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

## ABSTRACT
Green  algae ( Ulva  lactuc a  L.) is  a  species  of  marine  algae  as  a  potential cardiovascular  drug.  To  support  its  utilization  should  be  done  phytochemical screening of green algae from the beach Drini, Yogyakarta. The purpose of this study is to conduct phytochemical screening Ulva lactuca from Drini beach with thin layer chromatography  (TLC).  Ulva  lactuca L. extracted  by  maceration  method  with  96% ethanol.  The  extract  obtained  is  randemen,  water  content,  ash  content  and
Wahyu Widyaningsih, dkk
concentration  of  heavy  metals  (Pb  and  Cd).  Determination  of  water  content  by moisturizer  hydrogen  analyzer  (HMA),  ash  content  by  gravimetric  method  and  the determination  of  heavy  metals  Pb  and  Cd  by  atomic  absorption  spectrophotometer (AAS).  Phytochemical  screening  be  done  to  identify  of  alkaloids,  flavonoids, saponins, anthraquinone and terpenoids with TLC. Identification of chlorophyll using Nollet  method  (2004).  The  results  showed  the  ethanol  extract  of  Ulva  lactuca  has randemen  14.52%,  the  water  content  of  9.67±0.07%,  ash  content  of  34.05%,  the levels  of  Pb<0.07mg /  kg and Cd metal content <0.01 mg /  kg. There is flavonoids, alkaloids, saponins and chlorophyll in the ethanol extract of Ulva lactuca L. obtained from Drini beach.
Keywords: Ulva  lactuca L, phytochemical  screening,  Thin  Layer  Chromatography (TLC)

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan negara maritim dengan sumber daya organisme laut yang berlimpah.  Organisme  laut  sangat  potensial  dikembangkan  sebagai  sumber  bahan obat  (El  Gamal,  2010).  Spesies  ganggang  hijau  ( Ulva sp )  tersebar  luas  di  habitat pantai  di  seluruh  dunia  (Einav and Israel,  2007)  termasuk  Indonesia. Ulva  sp merupakan  sumber  alam  yang  mempunyai  potensi  utama  dalam  bidang  pertanian, bahan  makanan,  bidang  kefarmasian  (Abad  Martinez et  al .,  2005;  El-Baky,  2009;
Robic et  al. ,  2008).  Ganggang  hijau  merupakan  sumber  senyawa  bioaktif  alami (Lerner et  al .,  1960)  yang  mempunyai  aktivitas  sebagai  antihiperlipidemia,  anti- inflamasi,  antivirus,  antineoplastik,  antimikroba  dan  antihipertensi  karena mengandung  polisakarida  sulfat,  fenolat,  terpenoid,  lakton,  sterol  dan  asam  lemak (El-Baky et al ., 2008). Menurut Paredes et al . (2009) algae cukup efektif sebagai obat pada  penyakit  kardiovaskuler. Ulva  sp ( sea  lettuce )  merupakan  sumber  bahan  alam yang kaya  akan karbohidrat,  protein, vitamin B, vitamin C, vitamin E,  asam  amino, zink,  zat  besi,  serabut  dan  pigmen  yang  mengandung  sedikit  lipid  (El-Baky,  2009;
Pádua et al ., 2004; Sathivel et al ., 2008).
Beberapa penelitian yang telah dilakukan menunjukkan adanya potensi ekstrak etanol  ganggang  hijau  dari  pantai  Drini  (Yogyakarta)  sebagai  antihiperlipidemia, antioksidan,  antiangiogenesis  dan  antihepatitis  (Widyaningsih  dkk.,  2015a,  2015b).
Media Farmasi Vol. 13 No. 2 September 2016 : 199-211
Untuk  mendukung  pemanfaatan  ekstrak  etanol Ulva  lactuca L.  perlu  diketahui kandungan senyawa aktifnya. Berdasarkan skrining awal dengan reaksi warna dengan metode  Trease  Evans  (1983)  telah  diketahui  kemungkinan  adanya  kandungan senyawa  flavonoid,  alkaloid,  saponin  dan  glikosida  jantung  (Widyaningsih  dkk., 2016).  Untuk  mempertegas  skrining  fitokimia  dengan  reaksi  warna  perlu  dilakukan penegasan  dengan  metode  KLT.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mempertegas identifikasi  golongan  senyawa  dari  ekstrak  etanol Ulva  lactuca (EEUL)  dari  pantai Drini  dengan  metode  KLT.  Jenis  klorofil  dalam  penelitian  ini  juga  diidentifikasi untuk memperjelas jenis klorofil yang banyak terdapat pada EEUL.

## METODE PENELITIAN

## A. Identifikasi Tanaman Ganggang Hijau
Identifikasi  tanaman  ganggang  hijau  dilakukan  Laboratorium  Biologi  UGM. Identifikasi tanaman dilakukan guna menjamin kebenaran jenis dari obyek uji dalam penelitian.  Keaslian  simplisia  ganggang  hijau  dibuktikan  dengan  Surat  Keterangan 0626/S.Tb/I/2015.

## B. Pengambilan Ganggang Hijau (Widyaningsih dkk., 2015a, 2015b)
Ganggang  hijau  ( U.  lactuca )  yang  diperoleh  dari  pantai  Drini  Kabupaten
Gunungkidul  diambil  pada  bulan  Januari    2015  diambil  pada  sore  hari  (jam  4  sore) saat  air  laut  surut.  Tahap  perlakuan  adalah  sebagai  berikut:  1)  ganggang  hijau (sebanyak  kurang  lebih  80  kg)  dimasukkan  dalam  wadah  berisi  air  laut  dan didiamkan  selama  7  jam  sejak  pukul  4  sore.  2)  ganggang  hijau  dibersihkan  dari kotoran dengan pencucian menggunakan air mengalir.  3) ganggang ditiriskan sampai layu dan dipotong-potong dengan ketebalan 1-5 mm. 4) potongan-potongan tersebut dijemur hingga layu  di bawah sinar matahari dengan ditutupi oleh kain hitam selama 3  hari  5)  ganggang  yang  layu  kemudian  dioven  pada  suhu  40-50°C  selama  34  jam, kemudian daun kering diserbukkan dengan menggunakan alat penyerbuk simplisia.
202 Srining Fitokimia Ekstrak Etanol
Wahyu Widyaningsih, dkk

## C. Ekstraksi Ganggang Hijau   (Widyaningsih dkk., 2015a, 2015b)
Serbuk  ganggang  hijau  yang  telah  diayak  dengan  ayakan  20/40.  Serbuk ganggang  1000  g  diekstraksi  dengan  metode  maserasi  dengan  etanol  96% perbandingan 1:4. Sari etanol ganggang hijau kemudian diuapkan pelarutnya dengan rotary evaporator suhu 40ºC hingga diperoleh ekstrak kental.
D. Penetapan Kadar Air, Kadar Abu dan Kadar Logam Berat Ekstrak
Penetapan  kadar  air  dilakukan  dengan  alat Hydrogen  Moisturizer  analiser (HMA)  seri  BH43.  Kadar  abu    ditetapkan  dengan  metode  gravimeteri  dan  kadar logam berat  (Pb dan Cd) ditetapkan dengan metode Spektrofotometer Serapan Atom (SSA) di Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu (LPPT) UGM.
E. Deteksi Golongan Kandungan Kimia dan Melatonin dalam Ekstrak  dengan KLT
1. Flavonoid : ekstrak ditotolkan pada plat KLT fase diam selulosa dan fase gerak asam asetat 15%. Deteksi dilakukan dengan uap amoniak.
2. Saponin : ekstrak ditotolkan pada plat silika gel F 254 dengan fase gerak fase gerak etil  asetat  :  metanol  :  air  (100  :  13,5  :  10)  v/v  dengan  pereaksi  Liebermann Burchard .
3. Antrakuinon  :  ekstrak  etanol  ditotolkan  pada  plat  silika  gel  F 254 ,  fase  gerak  etil asetat : metanol : air (100 : 13,5 : 10) v/v dengan pereaksi semprot larutan KOH 5% dalam metanol.
4. Terpenoid  :  ekstrak  ditotolkan  pada  plat  KLT  silika  gel  F 254 ,  fase  gerak kloroform  :  metanol  (1:3),  kemudian  dilihat  dibawah  sinar  UV  366  nm  dan disemprot dengan pereaksi H 2 SO 4 10%
5. Alkaloid : ekstrak ditotolkan pada plat KLT silika gel F 254 , fase gerak n -butanol : asam asetat : air (4 : 1 : 5 )  v/v dengan pereaksi semprot Dragendof.
F. Identifikasi Jenis Klorofil dalam Ekstrak Etanol dengan Spektra UV
Identifikasi  jenis  klorofil  dalam  EEUL    dilakukan  dengan  metode  Nollet (2004)  yaitu sebanyak 0,1 g  ekstrak dilarutkan   dalam aseton  80% hingga 10,0 mL. Campuran  kemudian  disentrifugasi  pada  kecepatan  3000  rpm  selama  15  menit.
Larutan dibaca pada spektrofotometer UV  panjang gelombang 400-700 nm.
Media Farmasi Vol. 13 No. 2 September 2016 : 199-211

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## A. Hasil Ekstraksi  Ganggang Hijau
Metode  ektraksi U.  lactuca menggunakan  maserasi.  Metode  maserasi  adalah metode  penyarian  dengan  menggunakan  perendaman  dan  pengadukan.  Dasar pemilihan  metode  ini  adalah  karena  metode  ini  tidak  menggunakan  pemanasan sehingga senyawa yang terkandung di dalam ganggang hijau yang akan diidentifikasi tidak  rusak  (Harborne,  1996).    Pelarut  yang  digunakan  dalam  penyarian  ini  adalah etanol 96% karena beberapa senyawa aktif  yang terkandung dalam U. lactuca dapat tersari  dengan  etanol  96%.  Hasil  ekstraksi  dengan  metode    maserasi  tersaji  pada Tabel I.
Tabel I . Hasil ektraksi dengan metode maserasi dari U. lactuca Parameter Hasil  Ekstraksi Organoleptis ekstrak Ekstrak berwarna hijau, kental dan mempunyai bau khas Rendemen Ekstrak (%) 14,52 Kadar Air (rerata±SD %) 9,76±0,07 Kadar Abu ( % b/b) 34,05 Kadar Pb (mg/Kg) < 0,096 Kadar Cd (mg/Kg) < 0,01
Ekstrak  yang  diperoleh  memenuhi  syarat  susut  pengeringan  dengan  kadar  air ekstrak  9,76%.  Berdasarkan  persyaratan  Farmakope  Herbal  Indonesia  susut pengeringan  ekstrak  tidak  boleh  lebih  dari  10%  (BPPK  Depkes  RI,  2008).  Tujuan penetapan kadar air ekstrak adalah mengetahui kandungan air di dalam ekstrak yang menunjukkan  kemurnian  dan  kontaminasi.  Kadar  air  yang  tinggi  memungkinkan media  pertumbuhan  jamur  dan  kapang  yang  memungkinkan  terjadinya  reaksi enzimatik yang dapat menguraikan zat aktif di dalam ekstrak.
Ekstrak  yang  diperoleh  berupa  ekstrak  kental  berwarna  hijau  tua  dengan  bau khas.  Hasil  penetapan  kadar  abu  menunjukkan  bahwa  EEUL  memiliki  kadar  abu 34,05%. Hasil ini menunjukkan gambaran kandungan mineral  internal  dan eksternal yang  berasal  dari  proses  awal  sampai  terbentuknya  ekstrak.  Kadar  abu  yang  cukup
Wahyu Widyaningsih, dkk
tinggi  pada  EEUL  menunjukkan  tingginya  kadar  mineral  di  dalam  ekstrak  (BPPK Depkes  RI,  2008).  Habitat U  lactuca ada  di  perairan  memungkinkan  akumulasi mineral  yang menyebabkan tingginya kadar abu  dan logam berat seperti Pb dan Cd.
Hasil  penetapan  logam  Pb  dan  Cd  menunjukkan  bahwa  kadar  logam  Pb  dan  Cd dalam  EEUL    memenuhi  persyaratan  SNI  7387:  2009  tentang  batas  maksimum cemaran  logam  berat  dalam  pangan.  Persyaratan  tersebut  menyatakan  bahwa  batas maksimum  cemaran  logam  berat  dalam  rempah  rempah  adalah  0,1  mg/kg  (ppm). Hasil penetapan logam Pb dan Cd dalam EEUL juga memenuhi persyaratan Peraturan Badan  POM  No.  12  tahun  2014  tentang  persyaratan  mutu  obat  tradisional. Persyaratan tersebut menyatakan bahwa batas maksimum cemaran logam berat dalam obat tradisional Pb lebih kecil sama dengan  10 ppm sedangkan Cd lebih kecil sama dengan  0,3 ppm (BPOM RI, 2014).

## B. Hasil Skrining Fitokimia dengan metode KLT
Hasil  skrining  fitokimia  dengan  KLT  ditunjukkan  pada  Tabel  I.  Dari  Tabel  II terlihat bahwa hasil positif terlihat pada identifikasi flavonoid, alkaloid dan glikosida jantung.  Gambar  KLT  hasil  identifikasi  yang  positif  tersaji  pada  Gambar  1.  Hasil KLT  yang  menunjukkan  adanya  flavonoid  yang  ditandai  terbentuk  warna  kuning pada sinar tampak  setelah diuapi dengan amoniak. Perubahan warna kuning intensif karena pembentukan struktur kinoid pada cincin B yang mengandung ikatan rangkap terkonjugasi  yang  lebih  panjang  (Robinson,  1995).  Hasil  positif  alkaloid  dengan KLT dengan fase diam silika F 254 dan fase gerak BAW (4:5:1) menunjukkan adanya bercak  berwarna  merah  coklat  setelah  disemprot  dengan  pereaksi  Dragendorf  pada sinar  tampak.  Pada  uji  alkaloid  dengan  pereaksi  Dragendroff,  nitrogen  digunakan untuk  membentuk  ikatan  kovalen  koordinat  dengan  Bi  yang  merupakan  ion  logam sehingga  terbentuk  warna  merah  coklat.    Identifikasi  glikosida  jantung  dengan  fase gerak  CHCl 3 :  metanol  (1:1)  digunakan  untuk  identifikasi  kardenolin/bufadienol.
Terdapatnya  bercak  biru  violet  setelah  disemprot  dengan  pereaksi  Kedde, mengindikasikan adanya lakton tidak jenuh yang terdapat pada kardenolin/bufadienol (Harborne, 1996).
Media Farmasi Vol. 13 No. 2 September 2016 : 199-211
Tabel II . Hasil skrining fitokimia ekstrak etanol Ulva lactuca L dengan kromatografi lapis tipis (KLT) Metabolit sekunder Sistem KLT Pereaksi Hasil Keterangan Flavonoid Fase diam : selulosa dan fase gerak : asam asetat 15 % Uap amoniak Bercak berwarna kuning pada sinar tampak (+) Alkaloid Fase diam silika gel F 254 dan fase gerak BAW (4:1:5). Dragendorf Bercak berwarna merah coklat (+) Saponin Fase diam silika gel F 254 dan fase gerak etil asetat : metanol : air (100:13,5 : 10). Liebermann Burchard Bercak berwarna merah coklat dan berflouresensi biru di UV 366 (-) Glikosida jantung fase diam silika F 254 dan fase gerak kloroform : metanol = 1:1 Kedde (3,5- dinitrobenzen) Bercak berwarna biru pada sinar tampak (+) Antrakinon Fase diam silika gel F 254 dan fase gerak etil asetat : metanol : air (100 : 13,5 : 10). KOH 5 % Tidak terdapat bercak berwarna merah coklat dan tidak berflouresensi kuning di UV 366 (-) Terpenoid Fase diam silika gel F 254 dan fase gerak : kloroform : metanol (1 : 3) H 2 SO 4 10% Tidak terdapat bercak berwarna merah coklat dan berflouresensi hijau di UV 366 (-) Polifenol Fase diam silika gel F 254 dan fase gerak BAW (4: 1 : 5). FeCl 3 1 % Tidak terdapat bercak berwarna biru pada sinar tampak (-)
Berdasarkan  analisis  KLT  menunjukkan  adanya  alkaloid  dalam  ekstrak  etanol ganggang  hijau  dan  ternyata  adalah  melatonin  yang  ditunjukkan  dengan  Rf  yang sama  antara  standar  melatonin  dan  EEUL  yaitu  0,78  pada  sampel  (S 1 )  dan  sampel ekstrak yang dipurifikasi (S 2 ). Pada sampel ekstrak etanol ganggang hijau (S 1 ) terlihat dua  bercak  dengan  Rf  yang  berbeda  yaitu  0,78  dan  0,87.  Bercak  dengan  Rf  0,87 terlihat  berwarna hijau dengan sinar tampak dan UV-254. Bercak dengan Rf 0,87 ini diduga adalah klorofil karena berwarna hijau pada sinar tampak.
Wahyu Widyaningsih, dkk
Gambar  1 .  Hasil KLT yang menunjukkan adanya flavonoid yang ditandai terbentuk warna  kuning  pada  sinar  tampak  setelah  diuapi  dengan  amoniak (A), bercak  berwarna  merah  coklat  setelah  disemprot  dengan  pereaksi Dragendorf (B ), bercak  merah  kecoklatan setelah  disemprot  dengan Liebermann  Burchard (C) dan bercak    biru  setelah  disemprot  dengan pereaksi Kedde (3,5-dinitrobenzen)
Klorofil  diidentifikasi  karena  komponen  yang  cukup  besar  dalam  ganggang hijau yang kemungkinan mempunyai aktivitas antioksidan. Pada sampel ekstrak yang dipurifikasi  (S 2 )  terlihat  hanya  satu  bercak  saja  yaitu  bercak  melatonin.  Salah  satu langkah  purifikasi  melatonin  adalah  penambahan  petroleum  eter  yang  bertujuan menghilangkan  senyawa  non  polar  salah  satunya  adalah  klorofil.  Pada  sampel  yang dipurifikasi hanya ada 1 bercak saja dengan Rf 0,78 yang diduga adalah melatonin.
Hasil  KLT  standar  melatonin  dan  EEUL  dengan  deteksi    UV  254  tersaji  pada Gambar  2.  Untuk  memastikan  bahwa  bercak  pada  Rf  0,78  adalah  melatonin dilakukan analisis spektra UV dari bercak EEUL.  Hasil spektra spektrofotometer UV pada  panjang  gelombang  200-400  nm  terlihat  spektra  yang  mirip  antara  hasil  isolat melatonin  dari  EEUL  dan  melatonin  standar.  Kesamaan  spektra  tersebut menunjukkan bahwa bercak  yang diisolasi dari Rf 0,78 mempunyai  gugus kromofor yang sama dengan melatonin. Hasil spektra UV tersaji pada Gambar 3.
(A) (B) (C)
Media Farmasi Vol. 13 No. 2 September 2016 : 199-211
Gambar 2 .  Kromatogram  standar  melatonin (A) dan  ekstrak  ganggang  hijau (B) pada  fase  diam  silika  gel  F 254 dan  fase  gerak n- butanol-asam  asetat-air (12:3:5). Rf standar melatonin: 0,78; Rf bercak pada ekstrak: 0,78
Gambar 3 .  Kromatogram melatonin murni dan melatonin hasil pemisahan. Terlihat bahwa  kurva  spektra  UV  pada  panjang  gelombang  200-400  nm  antara melatonin murni  (Hitam) dan EEUL  (merah)   memperlihatkan spektra yang mirip.
Untuk memperkuat identifikasi adanya klorofil dalam EEUL dilakukan analisis klorofil  dengan  metode  Nollet  (2004).  Sebanyak  0,1  g  ekstrak  dilarutkan    dalam aseton 80% hingga 10,0 mL. Campuran kemudian disentrifugasi pada kecepatan 3000
Absorbansi (A) (B)
Panjang Gelombang (nm)
Wahyu Widyaningsih, dkk
rpm selama 15 menit. Larutan dibaca pada spektrofotometer UV panjang gelombang 400-700  nm.  Secara  teoritis,  panjang  gelombang  maksimal  klorofil  a  664  nm  dan klorofil b 647 nm (Nollet, 2004). Dari hasil penelitian didapatkan panjang gelombang maksimal 664 nm yang sesuai dengan teori panjang gelombang maksimal klorofil a.
Hasil  ini  menunjukkan  adanya  kandungan  klorofil  a  dalam  EEUL.  Spektra  UV-VIS dari EEUL dalam aseton tersaji pada Gambar 4.
Gambar 4 .  Spektra  UV-VIS  EEUL  dalam  aseton.  Hasil  tersebut  menunjukkan panjang  gelombang  maksimum  pada  664  nm  yang  sesuai  dengan panjang gelombang maksimum klorofil a dalam aseton.
Hasil keseluruhan skrining fitokimia dengan uji tabung dan KLT menunjukkan adanya senyawa alkaloid berupa melatonin dan klorofil.  Kandungan alkaloid dalam ganggang hijau sesuai dengan penelitian sebelumnya  (Abirami dan Kowsalya, 2011; Elmegeed dkk., 2014; Febriansah dkk., 2015). Pada penelitian sebelumnya ditemukan adanya  saponin  (Abirami  dan  Kowsalya,  2011;  Elmegeed  dkk.,  2014),  flavonoid (Elmegeed  dkk.,  2014;  Febriansah  dkk.,  2015;  Kosanić  dkk.,  2015;  Manchu  dkk.,
2014;  Meenakshi  dkk.,  2009;  Sava  dan  Sirbu,  2010)  dan  glikosida  jantung (Elmegeed  dkk.,  2014)  dalam U.  lactuca .  Pada  penelitian  ini  teridentifikasi  adanya senyawa  flavonoid  dan  glikosida  jantung  kurang  tegas    kemungkinan  karena kandungannya  yang  kecil  dalam  ekstrak.  Pada  EEUL  juga  teridentifikasi  adanya klorofil dengan warna hijau pada ekstrak dan spektra UV dalam aseton pada panjang
Absorbansi
Panjang Gelombang (nm)
Media Farmasi Vol. 13 No. 2 September 2016 : 199-211
gelombang  maksimal  yang  sesuai  dengan    kurva  standar  klorofil  a.  Adanya kandungan  klorofil  dalam  ganggang  hijau  sesuai  dengan  penelitian  terdahulu  oleh Abirami  dkk  (2011).  Hal  ini  membuktikan  bahwa  ganggang  hijau U.  lactuca yang ada di Indonesia juga mengandung klorofil a.

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol Ulva  lactuca mempunyai  randemen  14,52%,  kadar  air  9,67± 0,07%, kadar abu 34,05% , kadar logam Pb<0,067 mg/kg dan kadar logam Cd<0,01 mg/kg. Terdapat golongan senyawa flavonoid, alkaloid, glikosida jantung dan klorofil dalam ekstrak etanol Ulva lactuca yang diperoleh dari pantai Drini.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  kepada  Kemristek  Dikti  dan  Universitas  Ahmad  Dahlan  yang telah  membiayai  penelitian  yang  merupakan  bagian  dari  Disertasi  pada  Program Pasca Sarjana Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.

## DAFTAR PUSTAKA
Abad Martinez, M.J., Del Olmo, L.M.B., dan Benito, P.B., 2005, Antiviral activities of  polysaccharides  from  natural  sources,  dalam:  Atta-ur-Rahman  (Ed.), Studies in Natural Products Chemistry , Bioactive Natural Products (Part K) . Elsevier, hal. 393–418.
Abirami,  R.G.  dan  Kowsalya,  S.,  2011,  Nutrient  and  Nutraceutical  Potentials  of Seaweed  Biomass Ulva  lactuca and Kappaphycus  alvarezii , Journal  of Agricultural Science and Technology , 5 : 107–115. BPPK Depkes RI, 2008, Laporan Nasional Riskesdas 2007 , URL: https://www.k4health.org/sites/default/files/laporanNasional%20Riskesdas%2 02007.pdf (diakses tanggal 14/4/2016).
BPOM RI, 2014, Peraturan Kepala BPOM No. 12 Tahun 2014 tentang Persyaratan Mutu Obat Tradisional
Einav, R. dan Israel, A., 2007, Seaweeds on the Abrasion Platforms of the Intertidal Zone of Eastern Mediterranean Shores, dalam: Seckbach, J. (Ed.), Algae and
Wahyu Widyaningsih, dkk
Cyanobacteria in Extreme Environments . Springer Netherlands, Dordrecht, hal. 193–207.
El Gamal, A.A., 2010, Biological importance of marine algae. Saudi Pharmaceutical Journal : SPJ , 18 : 1–25.
El-Baky, F.K.E.B., 2009, Potential biological properties of sulphated polysaccharides extracted from the macroalgae Ulva lactuca L. Cancer Research , 2 : 1–11.
El-Baky, H.H.A., El-Baz, F.K., and El-Baroty, G.S., 2008, Evaluation of marine alga Ulva  lactuca  L  as  a  source  of  natural  preservative  ingredient. American Eurasian Journal Of Agricultural And Environmental Science , 3 : 434–444.
Elmegeed,  D.F.A.,  Ghareeb,  D.A.,  and  El-Saadani,  M.,  2014,  Phytochemical constituents  and  bioscreening  activities  of  green  algae  ( Ulva  lactuca ). International Journal of Agricultural Policy and Research , 2 : 373–378.
Febriansah, E.M., Eka Sakti, E.R., dan Kodir, R.A., 2015. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak  Selada  Laut  (Ulva  lactuca  L)  dengan  Ekstraksi  Bertingkat menggunakan  Metoda  DPPH. Prosiding  Farmasi;  Farmasi  (Gel  2  Th  Akad 2014-2015); 531-538 .
Harborne,  J.,  1996. Metode  Fitokimia :  Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis Tumbuhan . Penerbit ITB, Bandung.
Kosanić,  M.,  Ranković,  B.,  dan  Stanojković,  T.,  2015.  Biological  activities  of  two macroalgae  from  Adriatic  coast  of  Montenegro. Saudi  Journal  of  Biological Sciences , 22 : 390–397.
Lerner,  A.,  James,  D.,  and  Yoshiyata,  T.,  1960.  Isolation  of  melatonin  and  5- methoxyindole-3-acetic  acid  from  bovine  pineal  glands. The  Journal  of Biological Chemistry , 7 : 235.
Manchu, N., Melpha, Y., dan James, E., 2014. Phytochemical  investigation of three species  of  Ulva  from  Rasthacaud  Coast,  Tamil  Nadu,  India. Journal  of Chemical and Pharmaceutical Research , 6 : 570–574.
Meenakshi,  S.,  Gnanambigai,  D.M.,  Mozhi,  S.T.,  Arumugam,  M.,  dan Balasubramanian, T., 2009. Total Flavanoid and in vitro Antioxidant Activity of  Two  Seaweeds  from  Rameshwaram  Coast. Global  Journal  of Pharmacology , 3 : 59–62.
Nollet,  L.,  2004. Handbook  of  Food  Analysis  Vol.1.Second  Edition ,  Physical Characterization and Nutrien Analysis. Marcel Dekker Inc, New York.
Media Farmasi Vol. 13 No. 2 September 2016 : 199-211
Pádua,  M.  de,  Fontoura,  P.S.G.,  and  Mathias,  A.L.,  2004.  Chemical  composition  of Ulvaria  oxysperma (Kützing)  bliding, Ulva  lactuca (Linnaeus)  and Ulva fascita (Delile). Brazilian archives of biology and technology , 47 : 49–55.
Paredes,  S.D.,  Korkmaz,  A.,  Manchester,  L.C.,  Tan,  D.-X.,  and  Reiter,  R.J.,  2009. Phytomelatonin: a review. Journal of Experimental Botany , 60 : 57–69.
Robic, A., Sassi, J.-F., and Lahaye, M., 2008. Impact of stabilization treatments of the green  seaweed Ulva  rotundata (Chlorophyta)  on  the  extraction  yield,  the physico-chemical  and  rheological  properties  of  ulvan. Carbohydrate Polymers , 74 : 344–352.
Robinson,  T.,  1995. Kandungan  Organik  Tumbuhan  Tinggi  /  Trevor  Robinson ; Penerjemah  Kosasih  Padmawinata ;  Penyunting  Tetet  Sutomo ,  VI.  ed.  ITB Press, Bandung.
Santos,  A..,  Guevera,  B..,  Mascardo,  A..,  dan  Estrada,  S..,  1978. Phytochemical, Microbiological  and  Pharmacological,  Screening  of  Medical  Plants. Research Center University of Santo Thomas, Manila.
Sathivel,  A.,  Raghavendran,  H.R.B.,  Srinivasan,  P.,  and  Devaki,  T.,  2008.  Anti- peroxidative  and  anti-hyperlipidemic  nature  of Ulva  lactuca crude polysaccharide  on  D-galactosamine  induced  hepatitis  in  rats. Food  and Chemical  Toxicology:  An  International  Journal  Published  for  the  British Industrial Biological Research Association , 46 : 3262–3267.
Sava, C. dan Sirbu, R., 2010. Analytical study of the determination of flavonoids in Black Sea algae. Ovidius University Annals of Chemistry , 21 : 29–34.
Widyaningsih, W., Sativa, R., dan Primardiana,  I., 2015a. Efek Antioksidan Ekstrak Etanol  Ganggang  Hijau  ( Ulva  Lactuca L.)  terhadap  Kadar  Malondialdehid (MDA)  dan  Aktivitas  Enzim  Superoksida  Dismutase  (SOD)  Hepar  Tikus yang Diinduksi CCL4. Media Farmasi , 12 : 25–37.
Widyaningsih,  W.,  Utami,  P.,  Amalia,  C.R.,  Amelia,  S.,  Ramadhani,  M.R.,  dan Retnosari,  2015b.  Efek  Apoptosis  Ekstrak  Etanol  Ganggang  Hijau  ( Ulva lactuca )  pada  Jantung  Tikus  yang  Diinduksi  Isoproterenol. Jurnal  Farmasi dan Ilmu Kefarmasian , 2 : 59–63.
Widyaningsih,    W.,  Sugiyanto,  Pramono,  S.,  Widyarini,  S.,    2016,  Pengkajian Aktivitas  Kardiopotektif,  Antioksidan  dan  Antiapoptosis  Ekstrak  Etanol Terstandar  Melatonin  dari  Ganggang  Hijau  ( Ulva  Lactuca L), Disertasi , Universitas Gadjah Mada.