STRUKTUR MIKROANATOMI GINJAL MENCIT ( Mus Musculus L.) BETINA SETELAH PAPARAN EKSTRAK ETANOL DAUN MIMBA ( Azadirachta indica A. Juss)
Elsa Billah Septiva 1 , Agung Janika Sitasiwi 2 , dan Sri Isdadiyanto 3
1,2,3 Departemen Biologi, Fakultas Sains dan Matematika, Universitas Diponegoro, Semarang Corresponding author : elsabilla96@gmail.com

## Abstract
Neem  leaves  (Azadirachta  indica  A.  Juss.)  contain  organic  compounds  such  as  alkaloids,  steroids,  flavonoids, triterpenoids, saponins and tannins which have any potency as traditional medicinal. This study aimed to examine the ethanolic  extract  of  Neem  leaves  on  kidney  microanatomy  in  mice  (Mus  musculus  L.).  Completely  Random  Design consists  of  4  treatments,  5  replications,  namely  K  (aquadest),  P1,  P2  and  P3  (Treated  by  dosages  8.4;  11.2  and  14 mg/kg BB/day). The treatments were given orally with volume 0.2 mL for 21 days. Kidney organ was isolated, weighed and made by histological processed with a 5 μm incision thickness using the paraffin method with Hematoxylin-Eosin staining. Observation of preparations were carried out to calculate glomerular diameter,  Bowman’s capsule diameter and Bowman’s space diameter. The data were analyzed using ANOVA test at 95% confidence level and continued with DMRT test. The analysis results showed that there was significant affect (p<0.05) on exposure ethanolic extract of Neem leaves to the glomerular and Bowman's capsule diameter but didn’t show significantly affect (p>0.05) to the Bowman's space diameter, changes in kidney weight and drinking consumption of mice. It could be concluded that the exposure of ethanolic extract of Neem leaves in a period of 21 days is still safe to use as traditional alternative medicine.
Keywords : Glomerular diameter, kidney weight, Neem leaves

## PENDAHULUAN
Indonesia  tergolong  ke  dalam  wilayah beriklim tropis yang kaya berbagai jenis flora, baik endemik maupun non-endemik . Sejumlah 940  jenis  flora  yang  telah  dibudidayakan digunakan  sebagai  obat  tradisional  (Syukur dan Hernani, 2001). Tanaman Mimba ( Azadirachta  indica A.  Juss)  telah  dikenal memiliki  potensi  sebagai  bahan  obat  terutama pada  daun  dan  biji  dapat  digunakan  sebagai antifertilitas  baik  pada  hewan  jantan  maupun betina  Roop et  al. (2013).  Ekstrak  kulit  kayu Mimba    memiliki  potensi  terapeutik  dalam mengendalikan  hipersekresi  lambung  dan tukak gastroduodenal (Bandyopadhyay, 2004). Tanaman  Mimba  untuk  pertama  kali  telah
diisolasi  kandungan  senyawanya  pada  tahun 1942.  Lebih  dari  300  senyawa  turunan dihasilkan pada masing-masing bagian tanaman  tersebut.  Terdapat  dua  macam metabolit utama yang dihasilkan dari tanaman Mimba,  yaitu  metabolit  primer  yang  meliputi protein,  zat  lemak,  karbohidrat  atau  turunan gula dan metabolit sekunder meliputi alkaloid, steroid,  flavonoid  dan  saponin  (Biswas et  al ., 2002).
Kandungan  senyawa  bioaktif  pada tanaman  Mimba  terutama  bagian  daunnya telah terbukti dapat dimanfaatkan sebagai agen anti-bacterial, anti-diabetic, antioxidant, antidental caries, anti-hypertensive,
antivertility,  antimalarial,  anti-tumor,  anti-
ulcer dan larvicidal (Hashmat, 2012) . Sitasiwi (2017)  berdasarkan  penelitian  sebelumnya menyatakan  bahwa  ekstrak  etanolik  daun Mimba  memiliki  potensi  sebagai  obat  herbal dalam  aktivitas  antifertilitas  dengan  cara menghambat  perkembangan  folikel  pada ovarium  yang  bertindak  mengganggu  sintesis hormon estradiol dan keteraturan siklus estrus pada mencit betina.
Penggunaan  obat  tradisional  dengan dosis  dan  interval  waktu  pemberian  tertentu dapat  memberikan  efek  dan  indikasi  yang berbeda  pada  tubuh.  Keracunan  obat  dapat mengakibatkan kerusakan pada berbagai organ tubuh yang umum terjadi seperti nefrotoksisitas, neurotoksisitas, hepatotoksisitas, imunotoksisitas dan kardiotoksisitas (Suhita et al. , 2013). Senyawa asing yang masuk ke dalam tubuh sebagai obat secara  farmakokinetik  terjadi  melalui  proses absorbsi, distribusi, biotransformasi dan eliminasi.  Senyawa  asing  di  dalam  tubuh diekresikan  menuju  plasma  darah  melalui membran sel dan terjadi proses eliminasi pada ginjal  (Schofield,  2007).  Ginjal  memiliki peran  utama  sebagai  eliminator  obat-obatan, eksogen  dan  racun,  ditandai  dengan  volume suplai  darah  yang  tinggi  (20-25%  dari  output jantung)  menyebabkan  peningkatan  aliran toksikan  selama  periode  waktu  tertentu, sehingga  ginjal  rentan  terhadap  terjadinya
kerusakan  (Ekor,  2014).  Bagian  ginjal  yang berperan dalam proses filtrasi adalah glomerulus . Kapiler glomerulus memiliki pori- pori  besar  (sekitar  70  nm).  Sebagian  besar toksikan  dapat  melalui glomerulus ,  kecuali toksikan  yang  sangat  besar  (lebih  dari  BM 60.000)  atau  toksikan  yang  terikat  erat  pada protein  plasma  (Muttaqin  dan  Kumalasari, 2011).
Penelitian  ini  penting  dilakukan  untuk mengetahui  pengaruh  pemberian  ekstrak etanol  daun  Mimba  ( Azadirachta  indica A. Juss) dan pengaruhnya pada ginjal, diantaranya perubahan pada struktur mikroanatomi  ginjal.  Pengamatan  terhadap struktur  mikroanatomi  ginjal  pada  tikus  dapat dilakukan  dengan  mengukur  nilai  rata-rata diameter glomerulus , kapsula  Bowman dan ruang Bowman ginjal,  sedangkan  pengamatan makroanatomi  dilakukan  melalui  pengukuran bobot  ginjal  yang  dibandingkan  dengan  tikus normal.

## METODE PENELITIAN

## Materi dan metode
Unit  eksperimen  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  20  ekor  mencit  ( Mus musculus L.)  betina  galur  Swiss  Webster, berumur  2,5  bulan  dengan  bobot  berkisar antara  20-35  gram  dalam  keadaan  sehat. Setiap mencit diberi pakan standar (pelet merk HI-PRO-VITE 594 dewasa  yang  mengandung
Elsa Billah Septiva, Agung Janika Sitasiwi & Sri Isdadiyanto Struktur Mikroanatomi Ginjal Mencit ( Mus Musculus L.) Betina Setelah Paparan Ekstrak Etanol Daun Mimba ( Azadirachta indica A. Juss)
protein  19,5%,  lemak  3%,  serat  8%,  abu  7%, kalsium 0,9% dan fosfor 0,6%) dan air minum secara ad-libitum.
Bahan  uji  berupa  daun  tanaman  Mimba ( Azadirachta  indica. A.  Juss)  yang  didapat dari  area  kampus  FSM  UNDIP,  Tembalang, Semarang.  Bahan  uji  lain  yang  digunakan yaitu  akuades,  garam  fisiologis,  larutan giemsa, pakan dan minum mencit, kapas, tisu, larutan  garam  fisiologis  (0,95  %)  dan sperangkat  bahan pembuatan preparat  (larutan BNF  10%,  alkohol,  toluol,  xylol,  parafin, canada balsem dan perwarna hematoksilin dan eosin).
Sampel  yang  digunakan  berupa  sampel daun  Mimba  segar.  Daun  dibersihkan  dan dikeringkan  menggunakan  oven  selama  ±  7 hari  pada  suhu  40-50 0 C.  Daun  dibalik  setiap hari  hingga  kering  secara  merata.  Daun  yang sudah  kering  diekstraksi  menjadi  bentuk bubuk.  Ekstraksi  dilakukan  dengan  metode maserasi menggunakan pelarut etanol 70%.
Mencit  betina  dipelihara  pada  kandang terpisah  dengan  kepadatan  tiga  ekor  per kandang  setelah  diaklimasi  dalam  kondisi laboratorium  selama  dua  minggu.  Pemberian pakan  dan  minum  dilakukan  secara ad- libitum. Pemberian  perlakuan  oral  dengan volume  0,2  ml  per  hewan  uji/hari  yang dilakukan selama 21 hari berturut-turut. Bobot badan  mencit  diukur  setiap  tujuh  hari  sekali.
Konsumsi pakan diukur  setiap tiga hari sekali dan  konsumsi  minum  diukur  setiap  satu  hari sekali.  Penimbangan  bobot  mencit  dilakukan menggunakan  neraca  Ohaus  dengan  ketelitian 0,1  gram.  Penimbangan  dilakukan  pada  awal perlakuan,  sebanyak  satu  kali  dalam  satu minggu.
Variabel  yang  diamati  adalah  diameter glomerulus ,  diameter kapsula  Bowman dan diameter  ruang Bowman ginjal  mencit kelompok  kontrol  dan  kelompok  perlakuan. Pengamatan  preparat  dilakukan  menggunakan fotomikrograf perbesaran 20x10. Setiap preparat  diamati  tiga  bidang  pandang,  setiap bidang  pandang  diambil  masing-masing  lima glomerulus termasuk kapsula  Bowman dan ruang Bowman , kemudian diukur diameternya. Pengukuran  diameter  ruang Bowman dihitung melalui  hasil  pengurangan  diameter  terbesar dari  bagian  tepi kapsula  Bowman dengan diameter bagian tepi glomerulus .
Pengamatan dilakukan setelah perlakuan hewan uji telah  selama 21 hari, meliputi rerata bobot  ginjal  diameter glomerulus ,  diameter kapsula Bowman , diameter ruang Bowman dan konsumsi air minum mencit.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Analysis of Varians (ANOVA) dan uji  lanjut Duncan’s  Multiple  Range  Test (DMRT)  rata-rata  bobot  ginjal,  diameter glomerulus ,    diameter kapsula    Bowman ,
Tabel 1. Rerata bobot ginjal, diameter glomerulus , diameter kapsula Bowman , diameter ruang Bowman dan konsumsi air minum mencit betina setelah paparan ekstrak etanol daun Mimba selama 21 hari.
Keterangan: Data disajikan berupa rataan ( ) ± simpangan baku (SD). Rerata yang diikuti superksrip yang sama pada baris yang sama menunjukkan perbedaan tidak bermakna dengan uji ANOVA pada taraf kepercayaan 95%. K, kelompok kontrol dengan pelarut bahan uji akuades 0,2 ml/kg  BB/hari;  P1, kelompok  perlakuan  bahan uji  konsentrasi  8,4  mg/kg  BB/hari,  P2;  kelompok  perlakuan  bahan  uji  konsentrasi 11,2 mg/kg BB/hari, P3; kelompok perlakuan bahan uji konsentr asi 14 mg/kg BB/hari.
diameter  ruang Bowman dan  rerata  konsumsi  air  minum  mencit  ( Mus  musculus L.)  betina  setelah paparan ekstrak etanol daun Mimba ( Azadirachta Indica A. Juss) disajikan pada Tabel 1.
Struktur Makroanatomi Ginjal
Gambar  1. Makroanatomi  ginjal  semua kelompok perlakuan.
Keterangan: (A);  K dengan bahan uji akuades, (B); P1 dengan bahan uji ekstrak etanol daun Mimba dosis 8,4 mg/kg BB, (C); P2 dengan bahan uji ekstrak  etanol  daun  Mimba  dosis  11,2  mg/kg  BB,  (D);  P3  dengan  bahan  uji  ekstrak  etanol  daun  Mimba  dosis  14  mg/kg  BB
Variabel Perlakuan K P1 P2 P3 ± SD ± SD ± SD ± SD Bobot Ginjal (g) ±0.03 ±0.03 ±0.02 ±0.02 Diameter Glomerulus (µm) ±0.98 ±2.84 ±2.35 ±2.01 Diameter Kapsula Bowman (µm) ±1.86 ±3.21 ±4.93 ±3.79 Diameter Ruang Bowman (µm) ±1.93 ±1.47 ±3.70 ±2.42 Konsumsi Air Minum (ml) ±0.44 ±0.83 ±0.15 ±0.84
Elsa Billah Septiva, Agung Janika Sitasiwi & Sri Isdadiyanto Struktur Mikroanatomi Ginjal Mencit ( Mus Musculus L.) Betina Setelah Paparan Ekstrak Etanol Daun Mimba ( Azadirachta indica A. Juss)
Efek  toksik  terhadap  pemberian  bahan  uji terhadap  struktur  makroanatomi  ginjal  pada penelitian  ini  dievaluasi  rerata  bobot  ginjal dan  perubahan  morfologi  pada  ginjal. Struktur makroanatomi ginjal pada penelitian ini  tidak  menunjukkan  perbedaan  warna maupun perubahan morfologi yang mencolok antara kelompok perlakuan dengan kelompok kontrol.  Hal  tersebut  dimungkinkan  bahwa pemberian  ekstrak  etanol  daun  Mimba selama  21  hari  tergolong  aman  digunakan dan  belum  memengaruhi  pada  perubahan struktur  makroanatomi  ginjal  mencit.  Mappa et  al. (2013)  dalam  hasil  penelitiannya menyatakan  bahwa  gambaran  makroskopik ginjal tikus putih (wistar) dinilai berdasarkan warna,  konsistensi  dan  berat  kedua  ginjal (ginjal  kiri  dan  kanan).  Ceriana  dan  Sari (2016) dalam hasil penelitiannya menjelaskan bahwa  pengamatan makroskopik ginjal menunjukkan  warna  ginjal  pucat  dan  ukuran organ bertambah besar pada pemberian bahan uji yang bersifat nefrotoksik. Profil makroanatomi ginjal mencit setelah perlakuaan  ekstrak  etanol  daun  Mimba selama 21 hari ditunjukkan pada Gambar 1.

## Bobot Ginjal
Hasil  ANOVA  berdasarkan  Tabel  1. menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak etanol  daun  Mimba  memberikan  hasil  yang berbeda  tidak  bermakna  (p>0,05)  terhadap
perubahan  bobot  ginjal  antara  kelompok kontrol  (K)  dengan  kelompok  perlakuan bahan  uji  (P1,  P2  dan  P3).  Rerata  bobot ginjal  mencit  dari  masing-masing  kelompok perlakuan  yaitu:  kontrol  (K) ±0.03),  P1 ±0.03), P2 (0.16±0.02) dan P3 ±0.02).
Hasil ANOVA bobot ginjal pada semua perlakuan  memiliki  hasil  yang  berbeda  tidak bermakna (p>0,05)  diduga karena pemberian ekstrak  etanol  daun  Mimba  dengan  rentang dosis  8,4  mg/kg  BB/hari  sampai  14  mg/kg BB/hari  selama  21  hari  masih  dapat  ditolerir oleh  tubuh  dan  belum  memengaruhi  pada perubahan  bobot  ginjal.  Hal  tersebut  sesuai dengan  Sitasiwi et  al. (2018)  dalam  hasil penelitiannya  menyatakan,  bahwa  pemberian bahan  uji  ekstrak  daun  Mimba  hingga  dosis 14  mg/kg  BB/hari  masih  di  bawah  dosis toksik  Mimba.  Patel  (2016)  menambahkan bahwa  komponen  senyawa  yang  terkandung di  dalam  daun  Mimba,  salah  satunya azadirachtin  telah  terdaftar  di  Amerika Serikat  sebagai  agen  pestisida  dengan klasifikasi toksisitas IV (relatif tidak beracun).
Rerata  Diameter Glomerulus , Kapsula Bowman dan Ruang Bowman Ginjal Hasil  ANOVA  berdasarkan  Tabel  1. menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak etanol  daun  Mimba  memberikan  hasil  yang
berbeda bermakna (p<0,05) terhadap diameter glomerulus ginjal  mencit  betina. Diameter glomerulus mencit  dari  masing- masing  kelompok  perlakuan  yaitu:  kontrol (K) ±0.98),  P1 ±2.84),  P2
(54.65±2.35)  dan  P3 ±2.01).  Hasil  uji lanjut  DMRT  rerata  diameter glomerulus kelompok  kontrol  menunjukkan  perbedaan tidak  bermakna  (p>0.05)  dengan  kelompok perlakuan  P1  tetapi  menunjukkan  perbedaan bermakna  (p<0,05)  dengan  hewan  uji kelompok  P2  dan  P3.  Hal  tersebut  diduga pada  perlakuan  P1  menggunakan  ekstrak etanol  daun  Mimba  dosis  8,4  mg/kg  BB/hari selama  21  hari  tergolong  aman  dikonsumsi dan belum memengaruhi peningkatan keseluruhan diameter glomerulus .
Pengurangan  risiko  toksisitas  bahan  uji  juga dapat dimungkinkan karena proses detoksifikasi  di hepar sebelum  proses eliminasi melalui ginjal.
Hasil  uji  lanjut  DMRT  pada  perlakuan P2  dan  P3  menunjukkan  hasil  yang  berbeda bermakna (p<0,05) terhadap kelompok kontrol. Hal tersebut dimungkinkan pemberian  ekstrak  etanol  daun  Mimba selama 21 hari dapat menyebabkan peningkatan  diameter glomerulus ginjal mencit  betina.  Muttaqin  dan  Kumalasari (2011)  menyatakan  bahwa  toksikan  yang terperangkap  pada glomerulus ginjal  akan
memunculkan  respon  peradangan.  Guyton and Hall (2007) menyatakan bahwa glomerulus mengalami  penyumbatan  saat terjadi peradangan dan glomerulus yang tidak tersumbat  menjadi  lebih  permeabel  sehingga memungkinkan  protein  dan  sel-sel  darah merah  bocor  dari  kapiler glomerulus dan masuk  ke  filtrat glomerulus .  Mayori et  al. (2013) dalam hasil penelitiannya menjelaskan bahwa terjadinya kelainan pada fungsi filtrasi glomerulus dapat  menyebabkan  kerusakan pada  komponen  penyusun  ginjal  seperti penyempitan ruang Bowman pada glomerulus dan hipertropi.
Peningkatan diameter dapat disebabkan karena pembengkakan dan perubahan  pada  sel glomerulus sebagai bentuk  dari  adaptasi  seluler  seiring  dengan peningkatan  dosis  bahan  uji  yang  diberikan. Mayori et  al. (2013)  menyatakan  bahwa pembesaran ukuran sel pada organ merupakan  suatu  respon  yang  terjadi  apabila terdapat  peningkatan  beban  kerja  suatu  sel. Hipertropi  pada  nefron  dapat  terjadi  karena menggantikan  fungsi  nefron  lain  yang  telah hancur  dan  rusak.  Szende  and  Suba  (2000) menambahkan  bahwa  sebagian  besar  dari adaptasi secara biokimiawi pada sel digunakan untuk pengaturan fungsi metabolisme. Sejumlah besar adaptasi diikuti dengan  perubahan  struktural  yang  terlihat
Elsa Billah Septiva, Agung Janika Sitasiwi & Sri Isdadiyanto Struktur Mikroanatomi Ginjal Mencit ( Mus Musculus L.) Betina Setelah Paparan Ekstrak Etanol Daun Mimba ( Azadirachta indica A. Juss)
secara  mikro,  namun  perubahan  tersebut merupakan  pola  pertumbuhan  yang  normal pada jaringan. Ketidakmampuan untuk beradaptasi  terhadap  perubahan  lingkungan menyebabkan terjadinya kerusakan struktural pada sel.
Hasil  ANOVA  menunjukkan  bahwa pemberian  ekstrak  etanol  daun  Mimba memberikan  hasil  yang  berbeda  bermakna (p<0,05) terhadap  diameter kapsula  Bowman ginjal  mencit  betina.  Hasil  uji  lanjut  DMRT rerata  diameter kapsula  Bowman kelompok kontrol menunjukkan perbedaan tidak bermakna (p>0,05) dengan kelompok perlakuan  P1  tetapi  menunjukkan  perbedaan bermakna (p<0.05) dengan kelompok perlakuan  P2  dan  P3.  Diameter kapsula Bowman mencit dari masing-masing kelompok  perlakuan  yaitu:  kontrol  (K)
), P1 ), P2 (67.61±4.93) dan P3 ). Hasil uji
lanjut  DMRT  diameter kapsula  Bowman kelompok  kontrol  dengan  pelarut  akuades menunjukkan  perbedaan  yang  bermakna (p<0,05)  terhadap  kelompok  perlakuan  P2 dan  P3  diduga  dipengaruhi  oleh  adanya pembengkakan  pada  sel  pada glomerulus . Cahyaningsih et  al. (2011)  dalam  hasil penelitiannya  menjelaskan  bahwa  terjadinya peningkatan  diameter kapsula  Bowman
dipengaruhi oleh peningkatan diameter glomerulus seiring dengan peningkatan dosis. Pemberian  perlakuan  bahan  uji  P3 dengan  ekstrak  etanol  daun  Mimba  dosis  14 mg/kg  BB/hari  menunjukkan  terjadinya peningkatan tertinggi rerata diameter glomerulus dari seluruh kelompok perlakuan, namun  menyebabkan  terjadinya  penurunan rerata  diameter kapsula  Bowman mencit betina yang ditunjukkan pada Gambar 1. Hal tersebut  dimungkinkan  karena  jaringan  ikat pada  sel-sel  epitel  penyusun  membran kapsula  Bowman mengalami  perbaikan seiring  dengan  peningkatan  dosis  bahan  uji. Perbaikan sel diduga disebabkan oleh adanya efek  nefroprotektif  dari  bahan  uji  yang diberikan. Anusuya et al. (2013) menyatakan bahwa kombinasi obat herbal yang mengandung  metabolit  sebagai  antioksidan telah terbukti memiliki efek signifikan dalam aktivitas  nefroprotektif.  Supriyanto, et  al. (2017) dalam hasil penelitiannya menjelaskan bahwa  ekstrak  daun  Mimba  memiliki aktivitas  antioksidan  yang  kuat.  Antioksidan dapat  menghambat  oksidasi  lipid  melalui pengikatan oksigen secara kompetitif, menghambat tahap inisiasi , memblokir tahap propagasi dengan cara merusak atau mengikat  radikal  bebas,  menghambat  katalis atau menstabilkan hidrogen peroksida.
Perbaikan  diameter kapsula  Bowman juga  ditunjukkan  rerata  diameter  ruang Bowman yang  relatif  seragam  pada  seluruh kelompok perlakuan. Hasil ANOVA menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak etanol  daun  Mimba  memberikan  hasil  yang berbeda  tidak  bermakna  (p>0,05)  terhadap diameter ruang Bowman ginjal mencit betina. Rerata diameter ruang Bowman ginjal mencit dari  masing-masing  kelompok  perlakuan yaitu:  kelompok  kontrol  (K) ±1.93),  P1 ±1.47),  P2  (12.96±3.70)  dan  P3 ±2.42).  Wardani  (2012)  menyatakan bahwa  semakin  meluasnya  ruang Bowman ( Bowman’s  space ) menunjukkan  semakin banyak  filtrat  yang  masuk  ke  tubulus proksimal. Hal tersebut dapat pula mengindikasikan terjadinya atropi glomerulus .  Semakin  sempit  jarak  antara kapsula  Bowman dengan glomerulus dapat
menyebabkan  kemampuan  filtrasi  menurun karena  darah  hasil  fitrasi  tidak  dapat  keluar melalui  ruang Bowman .  Penyempitan  jarak antara kapsula  Bowman dan glomerulus dapat  disebabkan  oleh  dua  hal,  yaitu membesarnya glomerulus atau menyempitnya kapsula  Bowman dan  bisa pula  kombinasi  keduanya.  Hasil  ANOVA menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang tidak  bermakna  (p>0,05)  terhadap  diameter ruang Bowman antara  kelompok  kontrol  dan kelompok  perlakuan  dimungkinkan  bahwa pemberian  bahan  uji  ekstrak  etanol  daun Mimba  selama  21  hari  masih  dalam  dosis yang  aman  bagi  ginjal.  Perubahan  rerata diameter glomerulus , kapsula  Bowman dan ruang Bowman ginjal  mencit  betina  setelah pemberian  ekstrak  etanol  daun  Mimba selama  21  hari  ditunjukkan  pada  Gambar  2.
Gambar 2. Diagram rerata diameter glomerulus , kapsula Bowman , ruang Bowman ginjal mencit betina setelah pemberian ekstrak etanol daun Mimba selama 21 hari.
Elsa Billah Septiva, Agung Janika Sitasiwi & Sri Isdadiyanto Struktur Mikroanatomi Ginjal Mencit ( Mus Musculus L.) Betina Setelah Paparan Ekstrak Etanol Daun Mimba ( Azadirachta indica A. Juss)

## Konsumsi Air Minum
Hasil  ANOVA  berdasarkan  Tabel  1. menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak etanol  daun  Mimba  memberikan  hasil  yang berbeda  tidak  bermakna  (p>0,05)  terhadap perubahan  konsumsi  air  minum  mencit antara kelompok kontrol (K) dengan seluruh kelompok  perlakuan  bahan  uji  (P1,  P2  dan P3). Rerata konsumsi air minum mencit dari masing-masing  kelompok  perlakuan  yaitu: kontrol  (K)
±0.44),  P1 ±0.83),  P2
(5.08±0.15) dan P3
±0.84).
Metabolisme  air  utamanya  ditentukan oleh  kadar Blood  Urea  Nitrogen (BUN)  di dalam  ginjal.  Price  and  Wilson  (2005) menyatakan  bahwa  produk  akhir  protein tubuh diekskresikan oleh ginjal melalui urin yang  disebut  dengan Blood  Urea  Nitrogen (BUN).  Pengukuran  kadar  BUN  dapat memberikan  informasi  mengenai  jumlah jaringan  ginjal  yang  masih  berfungsi. Sutedjo (2009) menjelaskan bahwa penurunan  kadar  BUN  dapat  disebabkan salah satunya oleh hipervolemia (overhidrasi),  sedangkan  peningkatan  kadar BUN dapat disebabkan karena dehidrasi dan menurunnya suplai darah ke ginjal.
Keseimbangan  air  tubuh  terutama diatur  oleh  mekanisme  hormon  antidiuretik (ADH) dan rasa haus untuk
mempertahankan plasma isoosmotik.
Peningkatan  osmolalitas  plasma  dikenali oleh  osmoreseptor  pada  hipotalamus  yang kemudian  menyebabkan  pelepasan  ADH dari  hipofisis.  ADH  merangsang  pusat  haus dan  merangsang  tubulus  distalis,  sehingga menyebabkan  lebih banyak  air yang direabsorbsi dan lebih sedikit urin pekat yang diekskresi  (Price  and  Wilson,  2005). Senyawa  flavonoid  yang  terkandung  dalam tanaman  Mimba  dapat  memberikan  efek potensial  sebagai  agen  diuretikum  sehingga mampu meningkatkan laju filtrasi glomerulus . Peningkatan laju filtrasi glomerulus menyebabkan  zat  nefrotoksik yang masuk ke dalam ginjal akan dikeluarkan  secara  cepat  akibat  aktivitas urinisasi  yang  meningkat  (Tandi et  al. , 2017).  Analisis  konsumsi  air  minum  mencit menunjukkan  hasil  yang  berbeda  tidak bermakna  antara  kelompok  kontrol  dengan seluruh  kelompok  perlakuan  diduga  bahwa pemberian  ekstrak  etanol  daun  Mimba dalam jangka waktu 21 hari tidak memengaruhi keseimbangan air tubuh sehingga keadaan sistem metabolisme ginjal masih normal oleh pemberian bahan uji.

## KESIMPULAN
Penelitian  ini  disimpulkan  bahwa pemberian  ekstrak  etanol  daun  Mimba dalam  rentang  waktu  21  hari  masih  aman
digunakan  sebagai  bahan  obat  alternatif tradisional.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terima  kasih  penulis sampaikan kepada  Dr.  Agung  Janika  Sitasiwi,  S.Si, M.Si.  dan  Dr.  Sri  Isdadiyanto,  S.Si,  M.Si.
selaku dosen pembimbing sekalgus pemimpin  proyek  penelitian  yang  telah memberikan masukan dan bimbingan selama terlaksananya penelitian dan penulisan  skripsi  sehingga  skripsi  ini  dapat terselesaikan.

## DAFTAR PUSTAKA
Anusuya N, P Durgadevil, A Dhinek, and S.
Mythily.  2013.  Nephroprotective  effect of  ethanolic  extract  of  Garlic  ( Allium Sativum L.)  on  Cisplatin  Induced Nephrotoxicity  in  male  wistar  rats.
Asian J Pharm Clin Res, 6(4): 97-100. Bandyopadhyay U. 2004. Clinical studies on the effect  of  neem  ( Azadirachta  indica ) bark  extract  on  gastric  secretion  and gastroduodenal ulcer. Life Sci , 75-78. Biswas  K,  I  Chattopadhyay,  RK  Banerjee, and  U  Bandyopahyay.  2002.  Biological activities  and  medical  properties  of neem  ( Azadirachta  indica ). Curr.  Sc, 82: 1336-1345.
Cahyaningsih  RA,  Azizahwati,  dan  D Kusmana.  2011.  Efek  nefroprotektif infus  daun  Sukun (Artocarpus  Altilis (Park.)  Fsb.)  pada  tikus  jantan  yang diinduksi  karbon  tetraklorida. Majalah Ilmu Kefarmasian, 8(2): 59-73. Ceriana  R  dan  W  Sari.  2016.  Perubahan struktur  makroskopis  hati  dan  ginjal mencit  yang  diberi  ekstrak  batang Sipatah-Patah ( Cissus Quadrangula Salisb.). Prosiding  Seminar  Nasional Biotik , 196-202.
Ekor M. 2014. Nephrotoxicity and nephroprotective  potential  of  African medicinal plants . Ghana: Elsevier Inc.
Guyton  AC  and  JE  Hall.  2007. Buku  Ajar Fisiologi Kedokteran. Jakarta: EGC.
Hashmat  I,  H  Azad,  dan  A  Ahmed.  2012. Neem  ( Azadirachta  indica A.  Juss)-  a nature's drugstore: an overview. International  Research  Journal  of Biological Sciences, 1(6): 76-79. Mappa  IS,  C  Kairupan,  dan  L  Loho.  2013.
Gambaran  hitologi  ginjal  tikus  putih ( Wistar )  setelah  Pemberian  Rifampisin. Jurnal e-Biomedik (eBM) 1(1): 338-342. Mayori R, N Marusin, dan DH Tjong. 2013.
Pengaruh  pemberian  Rhodamin  B terhadap struktur histologis ginjal mencit putih ( Mus musculus L.). Jurnal Biologi Universitas Andalas, 2(1) Muttaqin  A  dan  Kumalasari.  2011. Asuhan keperawatan. Jakarta: Salemba Medika. Patel SM, KC Venkata,  P Bhattacharyya, G
Sethi,  and  A  Bishayee.  2016.  Potential of  neem  (Azadirachta  indica  L.)  for prevention  and  treatment  of  oncologic diseases. Seminars  in  Cancer  Biology,
40 (41): 100-115.
Price S and LM Wilson. 2005. Patofisiologi clinical  concepts  of  disease  process, edisi  6  Vol  1,  Alih  Bahasa  Brahm  U. Jakarta: EGC.
Roop  JK,  PK  Dhaliwal,  and  SS  Guraya. 2013.  Extracts  of Azadirachta  indica and Melia azedarach Seeds  inhibit folliculogenesis in albino rats. Brazilian Journal  of  Medical  and  Biological Research, 38: 943-947.
Elsa Billah Septiva, Agung Janika Sitasiwi & Sri Isdadiyanto Struktur Mikroanatomi Ginjal Mencit ( Mus Musculus L.) Betina Setelah Paparan Ekstrak Etanol Daun Mimba ( Azadirachta indica A. Juss)
Schofield P. 2007. The management of pain in older people . England: John Wiley & Sons Ltd.
Sitasiwi  AJ,  S  Isdadiyanto,  dan  SM
Mardiati.  2017.  Kadar  hemoglobin  dan jumlah  eritrosit  mencit  ( Mus  musculus ) jantan setelah perlakuan dengan ekstrak etanol daun nimba ( Azadirachta indica ).
Buletin  Anatomi  dan  Fisiologi, 2(2): 161-167
Sitasiwi  AJ,  S  Isdadiyanto,  dan  SM Mardiati.  2018.  Effect  of  ethanolic neem  ( Azadirachta indica)  leaf  extract as an herb contraceptive on Hepatosomatic  Index  of  the  male  mice ( Mus  musculus ). Journal  of  Physics.
Conference Series , 1-6.
Suhita S, Ni Luh PR, W Sudira, IB Winaya, dan  Oka.  2013.  Histopatologi  ginjal tikus  putih  akibat  pemberian  ekstrak pegagan  ( Centella  asiatica )  peroral.
Buletin Veterinr Udayana, 2(5).
Supriyanto  S,  B  Sinon,  M  Rivai,  dan Yunianta.  2017.  Uji  fitokimia  dan
aktivitas  antioksidan  ekstrak  daun mimba  ( Azaradiracta  indica A.  Juss). Prosiding SNATIF , 523-529. Sutedjo  SKM.  2009. Buku  saku  mengenal penyakit  melalui  hasil  pemeriksaan laboratorium cetakan kelima .
Yogyakarta: Amara Books.
Syukur  C  dan  Hernani.  2001. Budidaya tanaman obat komersial . Jakarta: Penebar Swadaya.
Szende B and Z Suba. 2000. Introduction to histopathology .  Hungary:  Mediciana Publishing House Co.
Tandi  J,  M  Roem,  dan  Yuliet.  2017.  Efek nefroprotektif  kombinasi  ekstrak  daun gedi merah dan daun kumis kucing pada tikus  induksi  etilen  glikol.  J .  Trop.
Pharm. Chem, 4(1): 27-34.
Wardani  GT.  2012.  Kajian  histopatologis pengaruh vaksin Streptococcus
Agalactiae yang  diradiasi  pada  organ hati  dan  ginjal  mencit  ( Mus  Musculus ). Skripsi .  Fakultas  Kedokteran  Hewan
Institiut
Pertanian
Bogor.