Akreditasi LIPI Nomor : 395/D/2012
Tanggal 24 April 2012

## PENGARUH NANO PARTIKEL TERHADAP AKTIFITAS ANTIAGEING PADA KRIM

## Dwinna Rahmi, RetnoYunilawati dan Emmy Ratnawati
Balai Besar Kimia dan Kemasan (BBKK)- Kemenperin Jl. Balai Kimia No. 1, Pekayon Pasar Rebo, Jakarta 13069 e-mail: dwinna2002@yahoo.com
Diterima: 23 Juli 2012 Diperbaiki: 17 Januari 2013 Disetujui: 14 Februari 2013

## ABSTRAK
PENGARUH NANO PARTIKEL TERHADAP AKTIFITAS ANTIAGEING PADA KRIM. Telah dilakukan penelitian efek nanopartikel terhadap aktifitas antiaging pada krim. Dalam penelitian ini aktifitas antiaging untuk krim biasa (ukuran partikel > nm) dan krim nanopartikel diuji dengan menggunakan hewan percobaan. Krim biasa dengan ukuran partikel 1439,8 nm hingga 2573,4 nm dibuat dengan metode konvensinal, sedangkan krim nano partikel (54,6 nm hingga 91,8 nm) dibuat dengan metode ultrasonikasi. Selain itu krim pasar dengan ukuran partikel 548,2 nm hingga 975 nm diolah kembali dengan ultrasonikasi menjadi krim nano partikel dengan ukuran 72,4 nm hingga 132,2 nm. Hasil uji antiaging untuk krim nano partikel menunjukkan skor rata-rata kerutan adalah 0. Ini menunjukkan bahwa krim nano partikel memiliki potensi untuk melindungi kerusakan kulit yang akan disertai proses penuaan. Begitu juga dengan hasil uji aktifitas antiaging pada krim pasar terlihat meningkat dari 0,25 kerutan menjadi 0 kerutan setelah diolah menjadi nano partikel.
Kata kunci : Krim nano partikel, Krim biasa, Antiageing , Konvensional, Ultrasonikasi, Krim pasar

## ABSTRACT
EFFECT OF PARTICLE NANO ON ANTIAGEINGACTIVITIES OF CREAM. Effect of particle nano on antiageing activities of cream had performed. In this research, the antiageing activities for common cream and particle nano cream have tested using experimental animal. Common cream with particle size 1439,8 nm-2573,4 nm was prepared by convensional methode, the other hand particle nano cream (54,6-91,8 nm) was prepared by ultrasonication. Futhermore, market cream with particle size is 548,2-975 nm then ultrasonicated be 72,4-132,2 nm. Antiageing testing result of particle nano cream shows score wrinkles is zero. From this result, particle nano cream has potencial to protect of skin damage. Moreover, the testing result of antiageing activities of market cream have been increasing from 0.25 wrinkles to be 0 wrinkles after reprocess to be particle nano by ultrasonicated.
Keywords : Particle nano cream, Common cream, Antiageing, Convensional, Ultrasonication, Market cream

## PENDAHULUAN
Nanoteknologi pada kosmetik dan obat dikenal sebagai nanoemulsi, nanosuspensi dan solid nano partikel. Nanosuspensi adalah suspensi yang mengandung nanokristal. Pembuatan nanosuspensi dimulai dari mikronisasi 0,1 µm hingga 300 µm lalu dilanjutkan ke nanonisasi [1]. Dikenal beberapa ukuran partikel pada bahan kosmetik dan obat, seperti coarse partikel yaitu lebih kecil dari 10 µm, fine partikel yaitu lebih kecil dari 2,5 µm, ultrafine partikel yaitu lebih kecil dari 0,1 µm, nano partikel yaitu 1 nm hingga 100 nm. juga termasuk 200 nm hingga 300 nm.
Penerapan nanoteknologi sudah berkembang ke inovasi bahan kosmetik dan system drug delivery, dimana dengan teknologi nano target untuk mengantarkan
bahan aktif pada kosmetik dan obat lebih tepat ke sasaran dengan efek samping yang kecil [2,3]. Bahan mineral pada ukuran nano akan mengubah sifat kuantum dari bahan yang berukuran lebih besar. Ukuran nano partikel pada kosmetik dan obat harus dilihat pada kebutuhan aplikasinya seperti bahan aktif kosmetik untuk kulit, diharapkan ukuran partikel tidak menembus membran yang terhubung langsung dengan pembuluh darah [4].
Ageing dapat diartikan perubahan manusia yang diakibatkan oleh faktor usia berupa fisik, psikologikal dan sosial. Antiageing untuk fisik manusia dapat berupa obat-obatan dan kosmetika. Kosmetik seperti krim pada umumnya mengandung zat aktif seperti retinol, egg oil,
Alpha Hydroxy Acids (AHAs), Peptodes, Coenzyme Q10 , Antioksidan, Sunscreen atau vitamin yang berfungsi sebagai antiageing . Pada tahun 2005 peneliti dari Germany memperkenalkan produknya Q10 yang merupakan produk nano partikel. Tahun 2006 peneliti dari Germany memperkenalkan produknya yang diberi nama Nano Lipid Restore CLR . Pada tahun yang sama dengan menggunakan bahan aktif omega-3 perusahaan Amore Pacifik dari Korea Selatan [5,6].

## METODE PERCOBAAN

## Bahan dan Alat
Bahan utama untuk membuat krim pada penelitian ini adalah asam stearat, cetyl alcohol, cetyl stearyl alcohol dan gliserin dari Ecogreen Oleochemicals . Air demineral dari Bratachem . Bahan tambahan olive oil diperoleh dari Ecogreen Oleochemicals , dan emulsifier dari Bratachem . Krim pasar yang digunakan pada penelitian ini adalah krim dengan bahan utama glyceryl stearate, stearyl acid, glycerin dan cetyl alcohol . Sedangkan peralatan yang digunakan adalah mixer merk Labortechnik dan Ultrasonic Processor merk Chrom Technology dengan diameter getaran < 10 mm.

## Pembuatan Krim Biasa
Bahan utama sebagai fasa lemak yaitu asam stearat, cetyl alcohol dan cetyl stearyl alcohol dengan prosentasi yang sama ditempatkan pada wadah gelas. Begitu juga sebagai fasa cair glycerin dan 65% air demineral juga ditempatkan dalam alat gelas yang berbeda. Kemudian panaskan fasa lemak pada suhu 70 o C dan fasa cair pada suhu 55 o C dengan water bath . Selanjutnya tambahkan fasa cair ke dalam fasa lemak sambil tetap dihomogenkan dengan alat mixer pada kecepatan 1000 rpm . Produk krim dimasukkan kedalam wadah kaca yang sudah dibersihkan dan disterilkan, tutup dan simpan didalam pendingin.

## Pembuatan Krim Nano Partikel
Dengan perlakuan dan komposisi yang sama krim dibuat dan ditempatkan pada wadah gelas. Setelah proses homogenisasi dengan alat mixer , lalu dilanjutkan homogenisasi dengan alat ultrasonik. Produk krim nano partikel dimasukkan kedalam wadah kaca yang sudah dibersihkan dan disterilkan, tutup dan simpan didalam pendingin.

## Re-Proses Krim Pasar
Krim pasar dilakukan proses homogenisasi menggunakan alat ultrasound untuk menjadikan nano partikel. Untuk mendapatkan ukuran optimum, proses ultrasonikasi dilakukan dengan variasi waktu sebesar 30 menit, 60 menit, 90 menit dan 120 menit.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Distribusi dan Ukuran Partikel
Tabel 1 dan Gambar 1 memperlihatkan distribusi partikel krim biasa dan krim nano partikel yang diperoleh dari hasil uji dengan Particle Size Analysis ( PSA ). Dari hasil uji distribusi ukuran partikel dengan PSA menunjukkan bahwa ukuran partikel dengan proses dibawah satu jam (60 menit) berukuran diatas 1.000 nano meter. Diketahui homogenisasi selama 90 menit menghasilkan partikel dengan ukuran 54,6 nm hingga 91,8 nm. Sementara homogenisasi lebih dari 90 menit menjadikan partikel teraglomerasi kembali sehingga ukuran partikelnya menjadi lebih besar.
Bila dilihat dari hasil uji PSA krim nano partikel mempunyai distribusi ukuran partikel yang optimal yaitu pada variabel waktu homogenisasi 90 menit telah menghasilkan partikel dengan ukran nanometer dengan kisaran 54,6 nm hingga 91,8 nm.

## Iritasi Terhadap Kulit
Uji iritasi terhadap kulit dilakukan dengan menggunakan kelinci New Zealand sehat dengan bobot sekitar 2.000 g. Reaksi secara subjektif setiap hari pada 1 jam, 24 jam, 48 jam dan 72 jam. Skoring dilakukan dengan sistem numerik dan kesimpulan akhir Indeks Iritasi Primer (IIP) dievaluasi sesuai prosedur OECD Guideline for the Testing of Chemicals, Acute dermal irritation / corrosion [7].
Waktu pengamatan Efek pada kulit
Skor
Skor rata-rata Kelinci 1 Kelinci 2 Kelinci 3 1 jam eritema 1,00 1,00 0,00 0,67 edema 0,00 0,00 0,00 0,00 24 jam eritema 1,00 1,00 0,00 0,67 edema 0,00 0,00 0,00 0,00 48 jam eritema 0,00 0,00 0,00 0,00 edema 0,00 0,00 0,00 0,00 72 jam eritema 0,00 0,00 0,00 0,00 edema 0,00 0,00 0,00 0,00 Indeks Iritasi Primer (IIP) 0,06 Tabel 1 . Pengamatan reaksi produk krim nano partikel terhadap kulit
0 30 60 90 120 150 10 2 10 3 10 4 u k u ra n P a rt ik e l / n m Waktu / menit Krim Biasa Krim Nanopartikel
Gambar 1 . Hasil uji dengan PSA , distribusi ukuran partikel produk krim biasa dan krim nano partikel
Hasil pengujian menunjukkan bahwa krim nano partikel hanya menyebabkan eritema ringan dan tidak menyebabkan pembentukan edema. Penghitungan IIP menilai bahwa krim nano partikel memiliki nilai IIP yang berada pada kategori non-iritan. Hasil selengkapnya dapat dilihat pada Tabel 3. Dari Tabel 2 dapat dilihat bahwa angka IIP sebesar 0,06 atau kurang dari 1 yang berarti bahwa krim nano partikel tidak menyebabkan iritasi, sehingga aman dalam pemakaiannya.

## Aktifitas Antiageing
Untuk mengetahui kemampuan krim yang memiliki potensi untuk melindungi kerusakan kulit yang menyertai proses penuaan akibat paparan sinar Ultra Violet Type B ( UV-B ) dilihat dari hasil uji aktivitas antiageing . Sebagai hewan percobaan, digunakan Tikus Wistar sehat dengan bobot sekitar 200 g. Tikus diimobilisasi sedemikian sehingga bagian posterior dari kaki belakang yang tidak berbulu menghadap ke atas. Sebelum penyinaran, sampel uji diaplikasikan pada kaki kanan tikus sedangkan kaki kiri tidak mendapat perlakuan sampel dan menjadi kontrol. Lampu UV-B (merek Philip ) dengan intensitas iradiasi 10 mW/cm 2 ditempatkan sekitar 10 cm tepat di atas kulit kaki. Penyinaran dilakukan 5 hari seminggu, dengan lama penyinaran 10 menit setiap harinya.
Pada akhir minggu ke-2, diamati kerutan pada bagian kaki yang terpapar UV-B, kerutan kemudian diberikan skoring menurut kriteria pengamatan yaitu; 0 = tidak ada kerutan kasar, 1 = sedikit kerutan kasar dangkal, 2 = beberapa kerutan kasar dan 3 = beberapa kerutan kasar dalam. Bersamaan dengan pengamatan di atas, dilihat terjadinya eksfoliasi kulit, menurut kriteria pengamatan yaitu ; 0 = tidak ada, 1 = sedikit, 2 = sedang dan 3 = banyak
Pengamatan secara visual pada kerutan kaki dan hasil penghitungan skor kerutan kaki setelah pemakaian krim nano partikel ditunjukkan pada Gambar 2. Dari Gambar 2 dapat dilihat bahwa kerutan tidak teramati pada kaki yang diberi perlakuan sampel krim nano partikel, sedangkan pada kaki yang tidak mendapat perlakuan
terlihat adanya kerutan dengan skor yang bervariasi antara 1 sampai 3. Hasil rata-rata perhitungan skor kerutan dapat dilihat pada Gambar 2.
Skor kerutan rata-rata pada kontrol menunjukkan nilai 0,53 sedangkan skor rata-rata kerutan pada kaki yang menggunakan krim nano partikel sebesar 0 (tidak ada kerutan). Hal ini menunjukkan bahwa krim nano partikel memiliki potensi untuk melindungi kerusakan kulit yang menyertai proses penuaan akibat paparan sinar UV-B .

## Antiaging Krim Pasar
Produk pasar yang dipilih adalah produk krim dengan komposisi bahan baku hampir sama dengan bahan baku krim nano partikel yang dibuat dalam penelitian ini, namun belum diketahui seberapa besar ukuran partikelnya. Sebagai tahap awal dilakukan analisis ukuran partikel produk krim pasar dengan menggunakan PSA. Dari hasil pengukuran diketahui bahwa krim pasar mempunyai ukuran partikel 548,2 nm hingga 975 nm. Ukuran sebesar ini merupakan ultrafine partikel, diatas ukuran nano partikel. Untuk mendapatkan produk dengan ukiran nanometer maka perlu dilakukan pengolahan kembali dengan menggunakan ultrasound . Pada krim pasar variabel waktu sebesar 30 menit, 60 menit, 90 menit dan 120 menit. Hasil ditampilkan pada Gambar 3. Dari Gambar 3 memperlihatkan bahwa proses dengan proses selama 90 menit sudah menghasilkan nano partikel. Dengan penambahan waktu proses ukuran partikel menjadi semakin kecil.
0 5 0 100 1 50 10 2 10 3 U k u ra n P a rt ik e l / n m Wak tu / menit Krim Pasar Krim Pasar N anopartikel Gambar 3 . Hasil pengujian PSA produk krim pasar dan krim pasar nano partikel
K r i m b i a s a K r i m N a n o p a r t i k e l
Gambar 2 . Pengaruh pemberian sampel krim nano partikel terhadap skor visual kerutan setelah paparan sinar UV-B
Gambar 4 . Pengaruh pemberian sampel krim pasar terhadap skor visual kerutan setelah paparan sinar UVB
Dari hasil pengamatan secara visual pada kerutan kaki tikus dan dari hasil penghitungan skor kerutan kaki setelah pemakaian krim pasar ditunjukkan pada Gambar 4. Dari Gambar 4 dapat dilihat bahwa kerutan tidak teramati pada kaki yang diberi perlakuan sampel krim pasar nano partikel, sebaliknya pada kaki yang diberi perlakuan sampel krim pasar terlihat adanya kerutan dengan skor yang bervariasi antara 1 sampai 3.

## KESIMPULAN
Krim nano partikel dengan bahan baku turunan kelapa sawit dibuat dengan proses ultrasonikasi pada getaran < 10 mm selama 90 menit. Diperoleh bahwa hasil uji iritasi terhadap kulit menunjukkan bahwa krim nano partikel berada pada level non iritan, sehingga krim nano partikel hasil penelitian lebih aman dalam pemakaian di kulit. Dari hasil uji aktivitas antiageing menunjukkan bahwa krim nano partikel memiliki potensi untuk melindungi kerusakan kulit yang menyertai proses penuaan akibat paparan sinar Ultra Violet Type B (UV-B).
Skor kerutan rata-rata pada kontrol menunjukkan nilai sebesar 0,53 sedangkan skor rata-rata kerutan pada kaki yang menggunakan krim pasar sebesar 0,25 dan skor rata-rata kerutan pada kaki yang menggunakan krim pasar nano partikel sebesar 0 (tidak ada kerutan). Hal ini menunjukkan bahwa krim pasar nano partikel memiliki potensi untuk melindungi kerusakan kulit yang menyertai proses penuaan akibat paparan sinar Ultra Violet Type B (UV-B) dibanding krim pasar.

## DAFTAR ACUAN
[1]. J. PARDEIKE,A. HOMMOSS and R. H. MULLER, International Journal Pharmaceutics , 366 (2009)
170-184
[2]. W. MENHNERT and K. MADER, Advanted Drug Delivery , 47 (2001) 165-196
[3]. MEDHA D. JOSHI, WENDY J. UNGER, GERT STORM, YVETTE VAN KOOYK, ENRICO MASTROBATTISTA, Journal of Controlled Release , 161 (1) (2012) 25-37
[4]. GERT STORM, SHEILA O. BELLIOT, TOOS DAEMEN, DANILO D. LASIC, Advanced Drug Delivery Reviews , 17 (1) (1995) 31-48
[5]. R. H. MULLER, R. D. PETERSEN,A. HOMMOSS, J. PARDEIKE, Advanced Drug Delivery Reviews,
59 (2007) 522-530
[6]. R. H. MULLER, R. D. PETERSEN,A. HOMMOSS, J. PARDEIKE, Advanced Drug Delivery Reviews , 59 (2007) 522-530
[7]. OECD GUIDELINE FOR THE TESTING OF CHEMICALS, Acute Dermal Irritation/Corrosion . Protocol 404, 24 th April 2002, (2002)
[8]. J. M. GUTIERREZ, C. GONZALEZ,A. MAESTRO, I. SOLE, C. M. PEY and J. NOLLA, Current Opinion in Colloid & Interface Science , 13 (4) (2008)
245-251