Tersedia  online  di:  http://ejournal-balitbang.kkp.go.id/index.php/jra
# Korespondensi:  Balai  Besar  Riset  Budidaya  Laut  dan Penyuluhan  Perikanan.  Jl.  Br.  Gondol  Ds.  Penyabangan  Kec. Gerokgak  Kab.  Buleleng,  Kotak  Pos  140,  Singaraja, Bali  81155,  Indonesia Tel.:  +62  362  92272 E-mail:  kmahardika@yahoo.com

## PEMANTAUAN  INSIDENSI  PENYAKIT  PADA  IKAN  KERAPU  DAN  KAKAP DI PEMBENIHAN DAN KERAMBA JARING APUNG DI BALI UTARA
Ketut  Mahardika # ,  Indah  Mastuti,  Des  Roza,  Dewi  Syahidah, Wayan Widya Astuti, Suko Ismi, dan Zafran
Balai Besar Riset Budidaya Laut dan Penyuluhan Perikanan Jl. Br. Gondol Ds. Penyabangan Kec. Gerokgak Kab. Buleleng, Kotak Pos 140, Singaraja, Bali 81155
(Naskah diterima: 8 Mei 2019; Revisi final: 8 April 2020; Disetujui publikasi: 8 April 2020)

## ABSTRAK
Pemantauan terjadinya infeksi penyakit terhadap kegiatan budidaya ikan sangat penting untuk mengetahui keragaman dan penyebaran penyakit ikan dalam suatu populasi dan lingkungan di suatu wilayah budidaya. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui penyebab penyakit pada ikan laut yang dibenihkan di pembenihan maupun  yang  dibesarkan  pada  keramba  jaring  apung  (KJA)  di  sentra  budidaya  ikan  laut  di  Bali  Utara. Sampel ikan diperoleh dari tiga lokasi sentra budidaya laut yang berada di Kecamatan Gerokgak, Kabupaten Buleleng. Sebanyak 35 sampel ikan dikoleksi dari masing-masing tiga pembenihan di Desa Gerokgak dan tiga pembenihan di Desa Penyabangan. Pada tiga KJA di Teluk Kaping, Desa Sumberkima masing-masing dikoleksi 10 ekor ikan. Pemantauan dilakukan sekali dalam sebulan dari bulan Februari hingga November 2018. Hasil penelitian menunjukkan bahwa insidensi infeksi parasit, bakteri, dan virus viral nervous necrosis (VNN) terjadi sepanjang tahun di tahun 2018 pada ikan dengan kondisi sehat maupun sakit. Pada ikan sakit yang diperoleh dari pembenihan dan KJA diindikasikan dengan gejala hitam dan borok. Sementara, jenis parasit yang dominan menginfeksi ikan laut di hatchery adalah Trichodina spp., sedangkan di KJA adalah gill fluke (cacing insang). Prevalensi infeksi virus VNN lebih banyak terjadi pada bulan Maret sampai bulan Juli, dan meningkat pada bulan November, sedangkan kasus infeksi iridovirus terpantau di bulan Oktober. Hasil pengamatan  terhadap  populasi  bakteri  pada  organ  hati  ikan  dengan  konsentrasi  tinggi  (10 7 -10 8 cfu/g) terjadi di bulan Februari, April, sampai Juli. Demikian pula pada total Vibrio spp. dengan konsentrasi tinggi (10 4 -10 6 cfu/g)  dan sangat  tinggi (10 7 -10 9 cfu/g)  teramati di  bulan Maret,  April, dan  Juni, mengikuti  pola kecenderungan  infeksi  VNN.  Dari  hasil  tersebut  dapat  disimpulkan  bahwa  ikan  yang  terserang  parasit dapat  pula  terinfeksi  oleh  VNN  secara  bersamaan.  Prevalensi  infeksi  virus  VNN  banyak  terjadi  di  bulan Maret  sampai Juli  dan  meningkat pada  bulan  November.  Prevalensi infeksi  virus  VNN cenderung  diikuti dengan pola peningkatan populasi total bakteri dan Vibrio spp.
KATA KUNCI: budidaya laut; penyakit ikan; parasit; VNN; bakteri
ABSTRACT: Monitoring the incidence of marine fish diseases in hatcheries and floating net cages in North Bali coastal water. By: Ketut Mahardika, Indah Mastuti, Des Roza, Dewi Syahidah, Wayan Widya Astuti, Suko Ismi, and Zafran
The monitoring of disease infections in fish farming activities is critical to determine the diversity and prevent the spread of fish diseases within a fish population and the fish farming environment. This study aimed to determine the causes of disease occurrences in cultured fish both in hatcheries and floating net cages in the mariculture center of North Bali. Fish samplings were conducted in three areas within the marine aquaculture center. There were 35 fish samples collected from each of the three hatcheries in Gerokgak Village and three hatcheries in Penyabangan Village. Ten fish were collected from each of three floating net cages located in Kaping Bay, Sumberkima Village. Diseases monitoring was carried out each month from February to November 2018. The results of the study showed that parasitic, bacteria, and viral nervous necrosis (VNN) infections occurred throughout the year. Parasites and VNN viruses were detected either in healthy fish or in sick fish. Sick fish were noticeable through darkened skin and skin ulcers. The
dominant parasite found in the hatcheries and floating net cages was Trichodina spp. and gill fluke (gill worm), respectively. The prevalence of VNN infection was higher from March to July and in November. Cases of iridovirus infection occurred in October. High concentrations of bacterial populations in the fish liver (10 7 -10 8 cfu/g) were observed in February and from April to July. Similarly, the total of Vibrio spp. with high (10 4 -10 6 cfu/g) and very high concentrations (10 7 -10 9 cfu/g) were observed in March, April, and June, which followed the trend of VNN infection. These results showed that fish infected with parasites could be also infected with VNN at the same time. The prevalence of VNN infection mostly occurs from March to July and in November. The prevalence of VNN virus infections tends to be followed by an increasing pattern of total bacterial populations and Vibrio spp. infections.
KEYWORDS: mariculture; fish diseases; parasites; VNN; bacteria
kematian  massal  pada  juvenil  dan  induk  ikan  laut budidaya (Mahardika et al., 2003; Amanu et al., 2016).
Hingga  saat  ini,  usaha  untuk  mengembangkan kegiatan  budidaya  ikan  laut  yang  lebih  ramah lingkungan  terus  dilakukan  di  perairan  Bali  Utara. Kegiatan  tersebut  diharapkan  mampu  mendukung kegiatan  budidaya  yang  lebih  bertanggung  jawab sehingga mampu meminimalisir kerusakan lingkungan perairan  dan  meningkatkan  produktivitas  di  masa mendatang. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui penyebab  penyakit  pada  budidaya  ikan  laut  di pembenihan dan keramba jaring apung (KJA) di Bali Utara.

## BAHAN DAN METODE

## Lokasi Pengambilan  Ikan  Uji
Pengambilan  ikan  uji  dilakukan  di  sentra pembenihan ikan kerapu/kakap putih (hatchery), dan sentra  pembesaran  ikan  kerapu/kakap  putih  di keramba  jaring  apung  di  Kecamatan  Gerokgak, Kabupaten Buleleng, Bali. Tiga lokasi tersebut adalah Desa Gerokgak, Desa Penyabangan, dan Teluk Kaping, Desa  Sumberkima.  Pengambilan  ikan  uji  dari pembenihan dan KJA dilakukan secara berkala setiap bulan  dari  bulan  Februari  sampai  bulan  November 2018.
Ikan  uji  berasal  dari  tiga  pembenihan  di  Desa Gerokgak dan tiga pembenihan di Desa Penyabangan, serta tiga KJA di Teluk Kaping, Desa Sumberkima. Ikan kerapu/kakap putih yang dikoleksi dari pembenihan, masing-masing  sebanyak  35  ekor  benih  dengan panjang total 1,4-12,5 cm (rata-rata 5,63 ± 0,51 cm); sedangkan ikan uji dari KJA dikoleksi masing-masing sebanyak 10 ekor dengan panjang total 17-30,5 cm (rata-rata 19,06 ±1,63 cm).

## Pengamatan  Performansi  Ikan  Uji
Pengamatan performansi ikan dilakukan terhadap gerakan ikan, warna kulit, kondisi permukaan tubuh seperti  kepala,  sirip,  dan  ekor.  Selanjutnya,  semua sampel ikan diukur panjang dan bobot badan.

## PENDAHULUAN
Akuakultur  merupakan  bagian  dari  sektor perikanan yang berkembang pesat di seluruh dunia. Sektor akuakultur menyumbangkan sekitar 44% dari total produksi ikan secara global (Assefa & Abunna, 2018).  Lebih  jauh  dilaporkan  bahwa  pertumbuhan produksi  akuakultur  dapat  dicapai  walaupun menghadapi  banyak  kendala  terutama  faktor lingkungan  akuakultur.  Di  antara  kendala  yang membatasi  produksi  adalah  penyakit  infeksi  yang merupakan  faktor  terbesar  sehingga  menyebabkan kerugian jutaan dollar setiap tahunnya. Penyakit infeksi yang sering menimbulkan kerugian bagi pembudidaya dapat  disebabkan  oleh  virus,  bakteri,  parasit,  dan patogen lainnya yang belum terdiagnosa (Harikrishnan et al., 2010; Bondad-Reantaso et al., 2005). Penyakit ikan berkembang sebagai akibat dari interaksi antara inang, patogen, dan stressor eksternal seperti degradasi lingkungan akibat perubahan iklim, eutrofikasi di habi- tat alami dan sistem pengelolaan budidaya yang tidak baik  (Toranzo  et  al.,  2005).  Pertumbuhan  aktivitas budidaya  juga  dapat  berdampak  pula  terhadap lingkungan (Lacerda et al., 2006). Penggunaan pakan buatan  dan  pupuk  pada  plankton,  serta  sisa  bahan organik dari bak-bak pemeliharaan induk atau larva ikan  merupakan  sumber  utama  pencemaran  ke perairan sekitarnya (Boyd, 2003).
Kondisi lingkungan seperti suhu, salinitas, oksigen terlarut,  partikel  tersuspensi,  dan  lainnya  menjadi faktor penting dalam budidaya ikan. Setiap perubahan pada parameter tersebut ke arah kondisi yang tidak baik  akan  membuat  ikan  rentan  terhadap  penyakit (Vijayan et al., 2015). Beberapa patogen seperti cacing insang dan lintah dilaporkan menyebabkan kematian massal  pada  ikan  kerapu  di  Teluk  Pegametan (Mahardika  et  al.,  2018a;  2018b).  Selain  itu,  infeksi virus viral nervous necrosis (VNN) dan iridovirus selalu ada sepanjang tahun di pembenihan maupun di KJA (Sembiring  et  al.,  2018).  VNN  dilaporkan  dapat menginfeksi dan menyebabkan kematian massal pada larva ikan kakap putih Lates calcarifer dan ikan kerapu (Zafran  et  al.,  1998;  2000).  Sedangkan  iridovirus dilaporkan  dapat  menginfeksi  dan  menyebabkan

## Pengamatan  Parasit
Pengamatan parasit melalui tahapan pengerokan kulit ikan dengan cover glass, sedangkan pengamatan parasit  pada  insang  dengan  menggunting  lamella insang. Kedua organ tersebut ditempatkan pada gelas objek  dan  diamati  di  bawah  mikroskop  dengan pembesaran  40-400x.  Hasil  pengamatan  ada  dan tidaknya infeksi parasit, serta jenis parasit pada satu populasi di tiap pembenihan dan KJA disajikan dengan tabulasi.

## Isolasi  Bakteri
Total  bakteri dan  Vibrio  spp.  diisolasi  dari  organ hati,  dari  masing-masing  pembenihan  dan  KJA dianalisis tiga ekor. Bakteri dikultur dalam media triptic soy agar (TSA)  dan thiosulfate  citrate bile  salts-sucrose agar (TCBSA), dan diinkubasi pada suhu 30°C selama 24 jam. Hasil perhitungan jumlah koloni bakteri (to- tal bakteri dibagi dalam empat kelompok populasi yaitu rendah  (<  10 5 cfu/g),  sedang  (10 5 -10 6 cfu/g),  tinggi (10 7 -10 8 cfu/g),  dan  sangat  tinggi  (10 9 -10 11 cfu/g). Sedangkan  jumlah  Vibrio  spp.  dibagi  dalam  empat kelompok populasi juga yaitu rendah (< 10 2 cfu/g), sedang (10 2 -10 3 cfu/g), tinggi (10 4 -10 6 cfu/g), dan sangat tinggi (10 7 -10 9 cfu/g). Perhitungan kelompok populasi tersebut mengacu pada standar Laboratorium Patologi BBRBLPP  (Balai  Besar  Riset  Budidaya  Laut  dan Penyuluhan  Perikanan),  Gondol,  Bali  yang  telah terakreditasi (ISO/IEC 17025:2017).

## Deteksi  Virus  dengan  PCR  Konvensional
Organ  target  berupa  mata,  otak  atau  kepala digunakan untuk deteksi VNN, sedangkan organ limpa dan  ginjal  atau  isi  perut  untuk  deteksi  iridovirus. Deteksi virus tersebut dikoleksi masing-masing lima benih  ikan  kerapu  atau  kakap  putih  dari  tiap pembenihan dan KJA. Organ ikan uji di pooling dalam satu  microtube  untuk  analisis  VNN  dan  iridovirus. Secara ringkas, genom RNA dari virus VNN diekstraksi menggunakan trizol sesuai prosedur (Mahardika et al., 2018b). Genom RNA disintesis menjadi cDNA dengan kit  reverse  transcription  system  (Promega).  Sampel diinkubasi  pada  suhu  70°C  selama  lima  menit, dilanjutkan pada suhu 42°C selama 60 menit. Reaksi dihentikan dengan pemanasan selama lima menit pada suhu 95°C. Sampel cDNA disimpan pada suhu -20°C sampai digunakan.
Deteksi virus VNN dilakukan mengikuti prosedur yang telah dilaporkan sebelumnya oleh Novriadi et al. (2015)  menggunakan  sepasang  primer  F2  dan  R3 (Koesharyani & Novita, 2006). Dua mikroliter sampel cDNA digunakan untuk amplifikasi PCR dalam reaksi 25 mL. Siklus suhu dan waktu untuk amplifikasi PCR adalah dengan: denaturasi awal pada 95°C untuk tiga
menit,  diikuti  39  siklus  denaturasi  pada  suhu  94°C selama 45 detik, annealing pada 55°C selama 45 detik, dan perpanjangan pada 72°C selama satu menit, dan tahap perpanjangan terakhir pada suhu 72°C selama lima menit. Produk PCR (5 µL) divisualisasikan pada 1,5% gel agarose dalam 1x TAE buffer yang diwarnai dengan etidium bromide, diamati dengan UV transil- luminator dan didokumentasikan dengan kamera gel.
Ekstraksi dan amplifikasi gen iridovirus mengikuti prosedur  yang  sebelumnya  telah  dilaporkan  oleh Sembiring et al. (2018) dengan modifikasi. Ekstraksi genom DNA dari iridovirus menggunakan larutan ly- sis  buffer  (IQ-2000)  dengan  tahapan  ekstraksi mengikuti  manual  kit  tersebut.  Amplifikasi  genom DNA  menggunakan  GoTaq  ®  PCR  Core  System  kit (Promega) dengan primer 1F (5’- CTCA A ACACTCTGGCTCATC-3’)  dan  1R  (5’- GCACCAACACATCTCC  TATC-3’).  Proses  amplifikasi PCR menggunakan suhu denaturasi 94°C (30 detik), annealing  58°C  (satu  menit),  ekstensi  72°C  (satu menit) dengan pengulangan 30 kali. Kemudian siklus berikutnya  diamplikasikan  denaturasi  dengan  suhu 94°C (30 detik), annealing 58°C (satu menit), ekstensi 72°C (lima menit) dengan pengulangan satu kali, dan proses  akhir  pada  suhu  inkubasi  4°C  selama  lima menit. Hasil PCR elektroforesis dibaca dalam agorase gel dengan buffer 1xTAE, diamati dengan UV transil- luminator dan didokumentasikan dengan kamera gel.

## Analisis  Data
Data  hasil  penelitian  dianalisis  secara  statistik deskriptif  bivarial  menggunakan  perangkat  lunak berbasis  daring  yaitu  “statulator beta ”  (http:// www.statulator.com).  Hasil  analisis  disajikan  dalam bentuk persentase dengan rumus:

## HASIL DAN BAHASAN
Hasil pemantauan melalui pengambilan ikan uji yang dipelihara di pembenihan di Desa Gerokgak dan Desa Penyabangan menunjukkan bahwa pembenihan dan atau pendederan ikan kerapu atau kakap putih di dua desa sentra pembenihan ikan laut di Bali Utara masih beroperasi  dengan  baik.  Hal  ini  ditunjukkan  dari ketersediaan benih ikan di pembenihan kedua lokasi sentra budidaya tersebut. Hasil pengambilan ikan uji di pembenihan menunjukkan bahwa persentase jenis ikan yang dibenihkan dan didederkan di pembenihan lebih didominasi dari jenis ikan kerapu hibrida cantang dibandingkan dengan ikan kerapu hibrida cantik dan kakap  putih  (Gambar  1).  Hal  ini  kemungkinan disebabkan karena harga jual dan permintaan dari ikan
100 x dihitung yang ikan total Jumlah dihitung yang target ikan Jumlah %       
kerapu hibrida cantang relatif lebih tinggi. Demikian pula pembesaran ikan yang dilakukan di sentra budidaya ikan  laut  di  Teluk  Kaping,  Desa  Sumberkima  masih didominasi oleh ikan kerapu hibrida cantang, daripada kerapu hibrida cantik dan kakap putih.
Rata-rata panjang dan bobot ikan yang dipantau setiap bulan terlihat pada Gambar 2. Panjang dan bobot benih ikan dari pembenihan masing-masing 1,4-12,5 cm (rata-rata 5,63 ± 0,51 cm) dan 0,05-31,2 g (rata- rata 3,98 ± 0,88 g). Sementara, panjang ikan di KJA bervariasi antara 17-30,5 cm (rata-rata 19,06 ± 1,63 cm), sedangkan bobot ikan berkisar 27,2-471,7 g (rata- rata 126,76 ± 32,23 g).
Hasil  pengamatan  terhadap  ikan  selama  bulan Februari sampai November 2018 menunjukkan bahwa kondisi kesehatan ikan kerapu hibrida dan kakap putih terdapat  dalam  kondisi  sehat  dan  sakit  (Tabel  1). Kondisi  kesehatan  ikan  yang  sakit  menunjukkan persentase yang tinggi di bulan Maret, Mei-Juli, dan November.  Persentase  total  ikan  yang  sakit  terlihat lebih kecil (30%) dibandingkan dengan persentase ikan yang sehat (70%).
Tabel  1  juga  menunjukkan  infeksi  parasit  tinggi setiap bulannya (44,44%-100%) dengan rata-rata total 67,78%. Infeksi virus VNN terjadi hampir setiap bulan dengan infeksi tinggi terjadi di bulan Mei, Juni, dan
Gambar 2. Diagram rata-rata panjang (A) dan bobot ikan (B) dari tiga lokasi budidaya ikan laut di Bali Utara. Figure 2. Diagram of the average length (A) and weight of fish (B) from three mariculture locations in North Bali.
B o b o t ik an Bo dy w ei gh t (g ) 300 250 200 150 100 50 Pa n ja n g t o ta l
To ta l le ng th ( cm ) 25 20 15 10 5 Hatchery
Desa  Gerokgak Hatchery Desa  Penyabangan KJA (Net  cage) Teluk  Kaping Hatchery Desa  Gerokgak Hatchery Desa  Penyabangan KJA (Net  cage) Teluk  Kaping

## A                                                                           B
0 20 40 60 80 100 Pembenihan di Desa Gerokgak (Hatchery in Gerokgak Village) Pembenihan di Desa Penyabangan (Hatchery in
Penyabangan Village) KJA di Teluk Kaping (Floating net cages in Kaping Bay) Kerapu hibrida "cantang" (hybrid grouper "cantang) Kerapu hibrida "cantik" (hybrid grouper "cantik") Kakap putih (sea bass) Kerapu hibrida “cantang” Kakap putih Sea  bass Hybrid  grouper  “cantang” Kerapu hibrida “cantik” Hybrid  grouper  “cantik” Pembenihan di Desa Gerokgak Hatchery  in  Gerokgak  Village Pembenihan di Desa Penyabangan Hatchery  in  Penyabangan  Village KJA di Teluk Kaping Floating  net  cages  in  Kaping  Bay 100 80 60 40 20 0 Gambar 1. Persentase populasi jenis ikan yang di-sampling setiap bulan selama penelitian (Februari-November 2018).
Figure 1. Percentage of population of fish species sampled each month during the research period (February-November 2018).
November (55,56%-66,67%). Infeksi iridovirus hampir tidak terdeteksi dalam 10 bulan pengambilan ikan uji. Infeksi iridovirus terjadi di bulan Oktober pada ikan kakap putih. Populasi bakteri pada hati ikan dengan konsentrasi  tinggi  (10 7 -10 8 cfu/g)  terjadi  di  bulan Februari, April, sampai Juli. Populasi bakteri dengan konsentrasi  sangat  tinggi  (10 9 -10 11 cfu/g)  terjadi  di
bulan  Februari,  April,  Juli,  sampai  September.  Total Vibrio spp. dengan konsentrasi tinggi (10 4 -10 6 cfu/g) dan sangat tinggi (10 7 -10 9 cfu/g) terjadi di bulan Maret, April,  dan  Juni.  Hasil  tersebut  menunjukkan  bahwa ada  kecenderungan  prevalensi  infeksi  VNN  diikuti dengan peningkatan populasi total bakteri dan Vibrio spp. pada hati ikan. Infeksi virus VNN juga dilaporkan
Tabel 1. Persentase kondisi kesehatan ikan dan populasi ikan yang terinfeksi oleh parasit, vi- rus, dan bakteri di pembenihan dan KJA
Table 1. Percentages of fish health condition and fish population infected by parasites, viruses, and bacteria every month in both hatcheries and floating net cages
Keterangan (Note): Populasi bakteri (Bacteria  populations) < 10 5 cfu/g = rendah (low) 10 5 -10 6 cfu/g = sedang  (moderate) 10 7 -10 8 cfu/g = tinggi (high) 10 9 -10 11 cfu/g = sangat tinggi (very high) Total Vibrio sp. < 10 2 cfu/g = rendah (low) 10 2 -10 3 cfu/g = sedang  (moderate) 10 4 -10 6 cfu/g = tinggi (high) 10 7 -10 9 cfu/g = sangat tinggi (very high)
Rendah Low Sedang Moderate Tinggi High Sangat tinggi Very high Rendah Low Sedang Moderate Tinggi High Sangat tinggi Very high Februari (February ) 0 0 77.78 22.22 55.56 44.44 0 0 Maret (March) 33.33 66.67 0 0 77.78 0 22.22 0 April 0 44.44 44.44 11.11 0 33.33 44.44 22.22 Mei (May ) 0 0 100 0 0 100 0 0 Juni (June ) 0 0 100 0 0 33.33 33.33 33.33 Juli (July ) 0 0 88.89 11.11 88.89 11.11 0 0 Agustus (August ) 0 66.67 0 33.33 100 0 0 0 September 0 66.67 0 33.33 100 0 0 0 Oktober (October ) 88.89 11.11 0 0 55.56 44.44 0 0 November 33.33 66.67 0 0 66.67 33.33 0 0 Total 15:56 32.33 41.11 11.11
54.44 30 10 5.56 Total populasi bakteri Total bacteria populations  (cfu/g) Total Vibrio  spp. (cfu/g)
Bulan sampling
Date of sampling Sehat Healthy Sakit Sick Parasit Parasite VNN Iridovirus Februari (February ) 88.89 11.11 55.56 0 0 Maret (March) 33.33 66.67 55.56 11.11 0 April 88.89 11:11 55.56 0 0 Mei (May ) 55.56 44.44 55.56 66.67 0 Juni (June ) 66.67 33.33 44.44 55.56 0 Juli (July ) 55.56 44.44 88.89 11.11 0 Agustus (August ) 88.89 11:11 66.67 11.11 0 September 88.89 11:11 77.78 11.11 0 Oktober (October ) 77.78 22.22 77.78 11.11 11:11 November 55.56 44.44 100 55.56 0 Total 70 30 67.78 23:33 1:11 Bulan sampling Date of sampling Kondisi ikan Fish condition  (%) Populasi sampel yang terinfeksi oleh Population samples were positive infected by  (%)
pada  ikan  jenis  sparid  (seabream)  yang  terinfeksi bakteri Vibrio spp. (García-Rosado et al., 2010). Phuoc et al. (2008) melaporkan bahwa infeksi buatan yang dilakukan pada udang vaname terhadap white spot syn- drome  virus  (WSSV)  bersama  dengan  V.  campbelii menghasilkan efek sinergi di mana mortalitas udang vaname lebih cepat (100% dalam empat hari) dengan kepadatan V. campbellii dalam haemolymph udang yang terinfeksi secara signifikan lebih tinggi (1,8 x 10 6 cfu/ mL) dibandingkan dengan kepadatan V. campbellii yang disuntikkan tanpa WSSV (< 100 cfu/mL).
Ikan-ikan yang sakit di pembenihan dan KJA pada umumnya menunjukkan gejala hitam dan borok atau sirip  geripis/lepas.  Kondisi  deformiti  juga  teramati pada ikan-ikan yang di koleksi seperti kepala bengkok, operculum terbuka, tubuh bengkok. Abnormalitas pada organ  dalam  ikan  juga  teramati  seperti  limpa membesar,  hati  bengkak  atau  merah  atau  hati mengecil, dan adanya tumor, dan cairan atau jaringan ikat pada gelembung renang.
Selama  10  bulan  pengambilan  benih  ikan  uji  di pembenihan  diperoleh  beberapa  parasit  yang menempel  dan  menginfeksi  ikan  kerapu  dan  kakap putih. Parasit yang selalu ada dan dominan menginfeksi ikan  yang  dibenihkan  dan  atau  didederkan  di pembenihan adalah Trichodina spp. (Tabel 2). Parasit lain  seperti  Cryptocaryon  irritans,  gill  fluke  (cacing insang),  nematoda,  Oodinium  spp.,  dan  hirudinea didapatkan pula pada kerokan lendir dan insang ikan, walaupun prevalensinya tidak setinggi Trichodina spp. Trichodina  spp.  merupakan  parasit  utama  yang mengancam keberlangsungan usaha produksi benih di pembenihan di sentra budidaya laut di Bali Utara (Zafran et al., 2019). Pada Tabel 2 juga terlihat parasit yang selalu  ada setiap pengambilan sampel  ikan uji dan menginfeksi ikan yang dipelihara dan dibesarkan di  KJA di  Teluk  Kaping yaitu  gill fluke  dari  golongan Pseudorabdoshinocus  spp.  Diikuti  dengan  Trichodina spp., Benedenia spp., hirudinea, serta nematoda dan Lepeophtheirus spp. dengan prevalensi rendah. Gill fluke, hirudinea, dan Benedinea spp. merupakan parasit utama yang selalu ada di lingkungan budidaya ikan di perairan terbuka di Teluk Kaping, Desa Sumberkima (Zafran et al., 2018).
Jika  dilihat  per  lokasi  sampling  (Tabel  3),  sampel ikan  dari  tiga  pembenihan  di  Desa  Gerokgak menunjukkan kondisi ikan yang sakit (26,67%) dengan infeksi  parasit  sebesar  73,33%  lebih  tinggi dibandingkan dengan kondisi ikan di tiga pembenihan di Desa Penyabangan. Namun, infeksi VNN pada ikan yang  dibenihkan  dan  didederkan  di  pembenihan  di Desa Penyabangan lebih tinggi (36,67%) dibandingkan dengan di pembenihan di Desa Gerokgak. Kondisi ikan sakit di KJA Teluk Kaping lebih banyak dibandingkan
dengan  di  pembenihan.  Kondisi  kesehatan  ikan tersebut dipengaruhi adanya parasit (100%) yang selalu menginfeksi  ikan  di  KJA.  Infeksi  VNN  terdata  lebih sedikit  (10%)  dibandingkan  dengan  di  pembenihan, sedangkan  infeksi  iridovirus  terjadi  pada  ikan  yang dibesarkan  di  KJA.  Populasi  total  bakteri  dan  Vibrio spp.  di  organ  hati  ikan  di  KJA  dengan  konsentrasi sangat  tinggi  terdata  lebih  banyak  masing-masing 46,67% dan 10% dibandingkan dengan di pembenihan (30% dan 0%). Hal tersebut kemungkinan disebabkan karena  ikan-ikan  yang  dipelihara  di  KJA  langsung berhubungan  dengan  lingkungan  air  sekitarnya. Perubahan  arus  dan  pasang  surut  memengaruhi terjadinya  perubahan  suhu  dan  akan  menentukan kualitas air perairan secara langsung (Krivokapic et al., 2011).  Perubahan  lingkungan  tersebut  dapat menimbulkan terjadinya stres pada ikan-ikan budidaya di KJA dan organisme setempat, serta meningkatkan potensi populasi bakteri di perairan termasuk bakteri patogen (Tammi et al., 2015).
Persentase infeksi parasit yang tinggi (73,33%) di pembenihan di Desa Gerokgak (Tabel 3) kemungkinan disebabkan  adanya  alih  fungsi  lahan,  limbah  dari pembenihan  itu  sendiri,  lokasi  pembenihan  yang mengelompok  dalam  satu  area/lokasi  dan  kondisi, serta manajemen beberapa pembenihan yang masih kurang  baik  sehingga  menimbulkan  peningkatan cemaran  bahan  organik  dan  anorganik  di  perairan pantai  tersebut.  Hal  tersebut  berbeda  dengan pembenihan di Desa Penyabangan yang lokasinya lebih menyebar  dan  merata  sepanjang  pantai,  kondisi perairan  yang  terlihat  lebih  jernih  dan  manajemen pembenihan  yang  lebih  baik  sehingga  persentase parasit yang ditemukan lebih sedikit (30%). Sedangkan persentase parasit pada ikan yang dipelihara di KJA di Teluk Kaping mencapai 100% karena ikan-ikan tersebut berhubungan  langsung  dengan  perairan  bebas sehingga  parasit  dengan  mudah  menyerang  ikan. Beberapa tahun sebelumnya telah dilaporkan bahwa perairan  laut  di  Kecamatan  Gerokgak  sudah  berada dalam  kategori  pencemaran  rendah  hingga  sedang berdasarkan  indeks  diversitas  organisme.  Kondisi tersebut kemungkinan dapat menimbulkan stres dan berkurangnya populasi biota laut, serta meningkatkan jumlah mikroorganisme patogen (seperti parasit, vi- rus, dan bakteri) di lingkungan perairan (Ismi et al., 2012). Tinggi rendahnya nilai prevalensi dan intensitas parasit pada setiap lokasi dipengaruhi oleh faktor in- ternal dan eksternal. Menurut Maulana et al. (2007), faktor  eksternal  tersebut  antara  lain  parameter kualitas  air,  yang  diakibatkan  oleh  pencemaran  di sekitar  perairan baik  limbah  rumah tangga  maupun limbah  pertanian.  Pencemaran  lingkungan  perairan akan  mengakibatkan  perubahan  kualitas  air  dan meningkatkan jumlah patogen seperti parasit, kondisi
Tabel 2. Prevalensi parasit yang diamati dan menginfeksi ikan di pembenihan dan KJA selama bulan Februari sampai  November  2018  (Data  disitir  dari  Zafran  et  al.,  2018;  2019,  dengan  penambahan  data primer pada bulan Juli sampai November 2018)
Table 2. Prevalence of parasites found and infecting fish in hatcheries and net cages (Parasitic data cited from Zafran et al., 2018; 2019, with the addition of our primary research data from July to November 2018)
Februari February Maret March April Mei May Juni June Trichodina 2.86-2.80 2.86-100 5.71 34.28-100 11.43 Cryptocaryon 0 8.57 0 0 0 Gill fluke 0 0 5.71 0 0 Nematoda 0 0 0 2.86 0 Oodineum 0 0 0 0 0 Trichodina 0 0 68.57 5.71 0 Cryptocaryon 0 0 0 0 0 Gill fluke 0 0 0 0 0 Nematoda 0 0 0 0 0 Oodineum 0 0 0 0 0 Hirudinea 0 0 0 0 0 Trichodina 10-40 0 20 10-70 20 Gill fluke 10 20 40 20-100 40-60 Benedinea 10-40 40 10 20-60 60 Nematoda 20 0 0 0 0 Oodineum 0 0 0 0 0 Cryptocaryon 0 0 0 0 0 Hirudinea 80 20-100 100 50-100 100 Lepeophtheirus 0 10-40 0 0 0 Juli July Agustus August September Oktober October November Trichodina 2.86-100 100 5.71 11.34-100 2.86-94.28 Cryptocaryon 5.71-8.57 0 8.57-45.71 2.85-5.71 0 Gill fluke 0 0 100 5.71 0 Nematoda 0 0 0 0 0 Oodineum 0 14.28 0 0 0 Trichodina 5.71-100 11.43-100 0 14.28-100 2.86-100 Cryptocaryon 0 0 5.71 0 0 Gill fluke 0 0 0 0 0 Nematoda 0 0 0 0 0 Oodineum 0 0 0 0 0 Hirudinea 0 0 0 0 0 Trichodina 10 0 0 30 0 Gill fluke 10-90 60-100 30-90 40-80 20-80 Benedinea 10-20 0 10 0 10 Nematoda 0 0 0 0 0 Oodineum 0 0 0 0 0 Cryptocaryon 10 0 10 0 0 Hirudinea 10 0 0 0 20 Lepeophtheirus 0 10 10 0 10
Prevalensi ektoparasit di pembenihan dan keramba jaring apung/KJA The prevalence of ectoparasites in hatcheries and floating net cages  (%)
Jenis ektoparasit Ectoparasites Lokasi sampling Sampling location Pembenihan di Desa Gerokgak Hatchery in the Gerokgak Village Pembenihan di Desa Penyabangan Hatchery in the Penyabangan Village Keramba jaring apung (KJA) di Teluk Kaping Floating net cages in the Kaping Bay Lokasi sampling Sampling location Jenis ektoparasit Ectoparasites Prevalensi ektoparasit di pembenihan dan keramba jaring apung/KJA The prevalence of ectoparasites in hatcheries and floating net cages  (%) Pembenihan di Desa Gerokgak Hatchery in the Gerokgak Village Pembenihan di Desa Penyabangan Hatchery in the Penyabangan Village Keramba jaring apung (KJA) di Teluk Kaping
Floating net cages in the Kaping Bay
tersebut akan membuat ikan menjadi stres sehingga terjadinya hubungan yang tidak seimbang antara ikan, lingkungan,  dan  patogen  (parasit).  Hal  ini  akan menyebabkan mudahnya ikan terinfeksi oleh parasit. Pada  kondisi  normal  di  lingkungan  perairan  bebas jumlah ikan yang terserang jasad patogen tidak besar baik prevalensi ataupun intensitasnya karena kualitas air belum mengalami perubahan-perubahan mendasar yang  mengakibatkan  ikan  sulit  untuk  beradaptasi (Ghufran et al., 2007). Sedangkan faktor internal dapat disebabkan manajemen pembenihan maupun KJA yang kurang baik. Ikan rucah merupakan salah satu media penyebaran  parasit  ke  ikan  budidaya.  Selain  itu, organisme hidup yang ada di sekitar keramba apung juga  dapat  menularkan  parasit  ke  ikan  budidaya (Rückert et al., 2009).
Hasil  pengambilan  ikan  uji  berdasarkan  kondisi kesehatan ikan di pembenihan dan KJA masing-masing menunjukkan bahwa 41,67% dan 53,33% ikan dalam kondisi sehat namun masih terdapat adanya parasit pada kulit dan organ insang, walapun jumlahnya tidak banyak (1-3 ekor) (Tabel 4). Ikan yang terlihat sehat di
pembenihan dan KJA juga 20% dan 3,33% terindikasi terinfeksi virus VNN dalam tubuhnya.
Tabel 4 juga menunjukkan bahwa dari 21,67% ikan sakit di pembenihan masing-masing 10% terinfeksi oleh parasit dan VNN, sedangkan sisanya sebanyak 1,67% kemungkinan  terinfeksi  oleh  mikroorganisme patogen  lainnya  seperti  bakteri  atau  endoparasit. Mahardika  et  al.  (2019)  melaporkan  adanya  infeksi endoparasit sejenis coccidia menyebabkan kematian ikan  kerapu  yang  dipelihara  di  KJA  maupun  di pembenihan.  Beberapa  spesies  bakteri  dari  genus Vibrio dan Streptococcus dilaporkan merupakan bakteri patogen  yang  dapat  menyebabkan  kematian  ikan budidaya (Jun & Woo, 2003; Delamare-Deboutteville et al., 2015).
Ikan yang sakit maupun yang sehat di pembenihan (Tabel  4)  juga  menunjukkan  adanya  populasi  total bakteri dengan konsentrasi tinggi (10 7 -10 8 cfu/g) dan sangat tinggi (10 9 -10 11 cfu/g). Demikian pula dengan populasi bakteri Vibrio spp. juga teramati pada organ hati  dari  ikan  dalam  kondisi  sakit  maupun  sehat. Kemungkinan  bakteri-bakteri  tersebut  merupakan
Tabel 3. Persentase  kondisi  kesehatan  ikan  yang  dihubungkan  dengan  infeksi  parasit,  bakteri,  dan  virus berdasarkan lokasi pengambilan sampel ikan
Table 3. Percentages  of  fish  condition  associated  with  parasitic,  bacterial,  and  viral  infections  based  on  sampling location
Rendah Low Sedang Moderate Tinggi High Sangat tinggi Very high Rendah Low Sedang Moderate Tinggi High Sangat tinggi Very high Pembenihan di Desa Gerokgak Hatchery in the Gerokgak Village 16.67 26.67 26.67 30 23.33 50 26.67 0 Pembenihan di Desa Penyabangan Hatchery in the Penyabangan Village 10 40 20 30 30 53.33 16.67 0 Keramba jaring apung (KJA) di Teluk Kaping Floating net cages in the Kaping Bay 10 13.33 30 46.67 33.33 43.33 13.33 10 Total Vibrio  spp. (cfu/g)
Bulan sampling
Date of sampling Total populasi bakteri Total bacteria populations  (cfu/g) Sehat Healthy Sakit Sick Parasit Parasite VNN Iridovirus Pembenihan di Desa Gerokgak Hatchery in the Gerokgak Village 73.33 26.67 73.33 23.33 0 Pembenihan di Desa Penyabangan Hatchery in the Penyabangan Village 83.33 16.67 30 36.67 0 Keramba jaring apung (KJA) di Teluk Kaping Floating net cages in the Kaping Bay 53.33 46.67 100 10 3.33 Bulan sampling Date of sampling Kondisi ikan Fish condition  (%) Populasi sampel yang terinfeksi oleh Population samples were positive infected by  (%)
flora  normal  pada  ikan  kerapu.  Konsentrasi  bakteri pada ikan rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) sehat di pembenihan dilaporkan berkisar antara 10 2 -10 7 cfu/g, meliputi bakteri gram positif cocci, Enterobacteriaceae sp.,  coryneforms  sp.,  Vibrio  spp.,  dan  Aeromonas  sp. (DÝler  et  al.,  2000).  Bakteri  Vibrio  gigantis  dan  V. scophthalmi dilaporkan ditemukan pada ikan olive floun- der sehat dan tidak bersifat patogen (Sohn et al., 2019).
Persentase  kondisi  ikan  yang  sakit  di  KJA  lebih tinggi dibandingkan dengan ikan di pembenihan (Tabel 4).  Ikan  yang  sakit  (46,67%)  terdata  tidak  ada  yang terinfeksi  parasit  (0%).  Ikan  yang  sakit  di  KJA disebabkan oleh infeksi virus VNN sebanyak 6,67% dan infeksi iridovirus sebanyak 3,33%; dan lainnya sebanyak 36,67% disebabkan oleh infeksi bakteri penyebab luka borok,  serta  penyebab  lainnya  yang  tidak  dianalisis pada penelitian ini. Ikan yang sakit di KJA lebih banyak ditemukan akibat luka borok dan sirip geripis. Luka borok tersebut kemungkinan disebabkan oleh infeksi bakteri Vibrio sp., yang ditunjukkan dengan persentase Vibrio  spp.  pada  organ  hati  ikan  yang  sakit  dengan konsentrasi  tinggi  (10 4 -10 6 cfu/g)  dan  sangat  tinggi (10 7 -10 9 cfu/g)  sedikit  lebih  tinggi  (10%  dan  6,67%) dibandingkan dengan persentase bakteri Vibrio spp. pada konsentrasi yang sama di ikan sehat (3,33%).
Hasil pengambilan ikan uji berdasarkan ikan yang terinfeksi  VNN  (Gambar  3A)  dan  iridovirus  (Gambar
3B) memperlihatkan bahwa ikan dari pembenihan dan KJA yang tidak terinfeksi VNN (negatif VNN), namun terindikasi terinfeksi parasit sebesar 36,67%-90%; dan hanya 0%-33,33% populasi ikan yang tidak terinfeksi VNN dan parasit. Populasi ikan yang terinfeksi VNN (positif  VNN)  menunjukkan  adanya  infeksi  parasit sebesar  10%-15%,  sedangkan  0%-15%  lainnya  tidak terinfeksi  parasit.  Infeksi  iridovirus  yang  hanya ditemukan pada satu kasus pada populasi ikan kakap putih  di  KJA  menunjukkan  bahwa  populasi  ikan tersebut  juga  terinfeksi  parasit  (3,33%).  Hasil  ini menunjukkan bahwa ikan yang terserang parasit dapat terinfeksi  oleh  VNN.  Parasit  dapat  menjadi  vektor penyakit VNN dan iridovirus. Infeksi bersama sering terjadi  di  alam  dan  sering  melibatkan  parasit  (Cox, 2001).  Selanjutnya  dilaporkan  bahwa  parasit  pada sistem kekebalan dapat menyebabkan immunodepresi dan  efek  sitokin.  Interaksi  dari  dua  patogen  dapat bersifat  sinergis  atau  antagonis  dan  dapat mengakibatkan peningkatan atau penghambatan salah satu  atau  kedua  patogen,  meningkatkan  atau mengurangi  keparahan  penyakit.  Interaksi  tersebut dapat memiliki dampak penting pada perkembangan dan keparahan penyakit (Kotob et al., 2016). Valdes- Donoso et al. (2013) menyebutkan bahwa wabah infec- tious  salmon  anaemia  virus  (ISAV)  pada  ikan  Atlantik salmon  (Salmo  salar  L.)  yang  terjadi  di  Chili  Selatan antara tahun 2007-2009 diakibatkan oleh ko-infeksi
Tabel 4. Persentase  infeksi  parasit,  virus,  dan  bakteri  pada  populasi  ikan  berdasarkan  kondisi kesehatan ikan
Table 4. Percentages of parasitic, viral, and bacterial infections in fish populations based on fish conditions
Lokasi sampling Sampling location Parasit Parasite VNN (%) Iridovirus (%) Sehat (Healthy ) 78.33 41.67 20 0 Sakit (Sick ) 21.67 10 10 0 Sehat (Healthy ) 53.33 53.33 3.33 0 Sakit (Sick ) 46.67 0 6.67 0 Rendah Low Sedang Moderate Tinggi High Sangat tinggi Very high Sehat (Healthy ) 78.33 8.33 33.33 16.67 20 Sakit (Sick ) 21.67 5 0 6.67 10 Sehat (Healthy ) 53.33 3.33 6.67 20 23.33 Sakit (Sick ) 46.67 6.67 6.67 10 23.33 Rendah Low Sedang Moderate Tinggi High Sangat tinggi Very high Sehat (Healthy ) 78.33 23.33 38.33 16.67 0 Sakit (Sick ) 21.67 3.33 13.33 5 0 Sehat (Healthy ) 53.33 23.33 23.33 3.33 3.33 Sakit (Sick ) 46.67 10 20 10 6.67 Kondisi ikan
Fish condition  (%) Lokasi sampling Sampling location Kondisi ikan Fish condition
(%) Lokasi sampling
Sampling location
Kondisi ikan Fish condition (%) Pembenihan Hatchery Keramba jaring apung (KJA) Floating net cages Populasi bakteri (Total bacteria ) (cfu/g) Total Vibrio  spp. (cfu/g) Pembenihan Hatchery Keramba jaring apung (KJA) Floating net cages

## Pembenihan
Hatchery Keramba jaring apung (KJA) Floating net cages
antara  kutu  laut  (Lepeophtheirus  salmonis)  dan  ISAV. Infeksi parasit juga dapat meningkatkan risiko infeksi sekunder bakteri. Efek sinergis tersebut merupakan hasil dari stres pada ikan yang disebabkan oleh parasit yang  dapat  mengurangi  resistensi  ikan  terhadap infeksi bakteri, dan efek merusak dari parasit (seperti luka  akibat  gigitan  parasit)  dapat  menjadi  tempat masuk bakteri patogen (Holzer et al., 2006).
Pada pengamatan ini ternyata pada populasi ikan yang  positif  terinfeksi  VNN,  namun  tidak  ada  yang positif  terinfeksi  iridovirus  (Gambar  4).  Hasil  ini menunjukkan bahwa kombinasi infeksi virus VNN dan iridovirus  belum  terdeteksi  dengan  metode  deteksi menggunakan  PCR  konvensional.  Hal  tersebut
kemungkinan  karena  jumlah  populasi  ikan  yang terinfeksi  iridovirus  sangat  sedikit  (satu  kasus) sehingga belum terdeteksi adanya kombinasi infeksi virus pada satu populasi ikan.
Populasi  Vibrio  spp.  pada  level  rendah  sampai moderat  mengikuti  pola  konsentrasi  total  bakteri (Gambar  5).  Namun,  konsentrasi  total  bakteri  yang tinggi (10 7 -10 8 cfu/g) sampai sangat tinggi (10 9 -10 11 cfu/g) menunjukkan tingkat populasi Vibrio spp. di level rendah  (<  10 2 cfu/g)  sampai  tinggi  (10 4 -10 6 cfu/g). Bakteri Vibrio spp. lebih banyak teramati pada kasus ikan yang mengalami luka atau borok. Spesies Vibrio spp. yang bersifat  patogen seperti V. anguillarum,  V. harveyii  (nama  lain:  V.  carchariae),  V.  ordalii,  dan  V.

## Gambar 3. Persentase populasi ikan yang terinfeksi VNN (A) dan iridovirus (B) yang dihubungkan dengan infeksi  parasit.
Figure 3. Percentages  of  fish  populations  infected  by  VNN  (A)  and  iridovirus  (B)  associated  with  parasitic infections.
Gambar 4. Persentase  populasi  ikan  yang  terinfeksi  VNN  yang dihubungkan dengan infeksi iridovirus pada budidaya ikan di pembenihan dan KJA.
Figure 4. Percentages  of fish  populations infected  by  VNN associated  with iridovirus infections in hatcheries and net cages.
0 20 40 60 80 100 Negative Positive Negative Positive Pembenihan (Hatchery) KJA (floating net cage) Pa ra si t (P ar as it e) ( % ) VNN (%) Parasite negative Parasite positive 0 20 40 60 80 100 Negative Positive Negative Positive Pembenihan (Hatchery) KJA (floating net cage) Pa ra si t (P ar as it e) ( % ) Iridovirus (%) Parasite negative Parasite positive A                                                                            B Pembenihan (Hatchery)     KJA (Floating net cage)                        Pembenihan (Hatchery)      KJA (Floating net cage) 0 20 40 60 80 100 Negative Positive Negative Positive Pembenihan (Hatchery)
KJA (floating net cage)
Ir id o vi ru s (% ) VNN (%) Iridovirus negative Iridovirus positive
Pembenihan (Hatchery)                          KJA (Floating net cage)
salmonicida (Austin & Austin, 2007). Kejadian infeksi vibriosis yang tinggi dapat terjadi pada pembenihan dan  pembesaran ikan,  tetapi  ikan ukuran  konsumsi lebih  rentan  terhadap  penyakit  ini.  Hal  tersebut dipengaruhi  oleh  berbagai  faktor,  terutama  sumber ikan,  faktor  lingkungan  termasuk  kualitas  air  dan manajemen budidaya, dan faktor virulensi dari Vibrio spp. (Ina-Salwany et al., 2019).
Prevalensi infeksi VNN paling  tinggi terjadi pada bulan  Maret  sampai  Juli,  kemudian  menurun  dan meningkat  lagi  di bulan  November.  Kejadian  infeksi VNN  dan  peningkatan  konsentrasi  populasi  bakteri pada hati ikan budidaya dipengaruhi oleh suhu perairan dan kadar ammonia. Hasil pemantauan kualitas air laut di tahun yang sama menunjukkan bahwa suhu perairan laut tinggi di bulan Maret sampai bulan Juli (berkisar antara 30°C-31°C) dan menurun di bulan selanjutnya (28°C-29°C). Namun suhu perairan naik kembali di bulan November (Nasukha et al., 2019). Lebih jauh dilaporkan bahwa kecenderungan kenaikan suhu perairan diikuti oleh kenaikan kadar ammonia hingga > 1,5 mg/L di atas ambang batas baku mutu menurut Kep.Men. LH No. 51 Tahun 2004 untuk biota laut sebesar 0,3 mg/L; maupun  menurut  FAO  (1989),  sebesar  <  0,5  mg/L. Hasil pemantauan lingkungan dan kejadian penyakit di  tahun  2018  sejalan  dengan  hasil  monitoring prevalensi infeksi VNN di tahun 2017 yang dilaporkan oleh Sembiring et al. (2018) yang mengatakan bahwa peningkatan  suhu  air  laut  berpengaruh  terhadap peningkatan  prevalensi  infeksi  VNN  di  pembenihan dan KJA di Bali Utara. Kasus wabah infeksi VNN pada
ikan Epinephelus septemfasciatus terjadi di musim panas yang diamati dari bulan Agustus (suhu air: 24°C-26°C) hingga  bulan  September  atau  Oktober  (20°C-25°C). Infeksi  virus  dapat  mengakibatkan  kematian  ikan secara tiba-tiba (akut) atau kronis (waktu lama), dengan tingkat kematian pada ikan muda lebih tinggi daripada ikan dewasa  (Kim et al., 2012).  Selain itu,  tingginya suhu air dapat pula meningkatkan kerentanan spesies ikan laut terhadap vibriosis (Albert & Ransangan, 2013). Lebih lanjut dilaporkan bahwa terdapat korelasi yang kuat antara suhu, keberadaan Vibrio spp., dan kematian ikan. Meskipun sulit untuk  mengontrol suhu dalam sistem perairan terbuka, sehingga yang paling sering dilakukan  adalah  pergantian  jaring  dan  penerapan manajemen budidaya di KJA yang baik.

## KESIMPULAN
Infeksi  parasit  dan  virus  VNN  terjadi  sepanjang tahun 2018 dan secara visual terlihat pada ikan dalam kondisi sehat maupun sakit. Kejadian infeksi parasit di  pembenihan  didominasi  oleh  Trichodina  spp., sedangkan di KJA didominasi oleh cacing insang dan hirudinea. Ikan yang terserang parasit dapat terinfeksi oleh VNN secara bersamaan. Prevalensi infeksi VNN lebih banyak terjadi di bulan Maret sampai bulan Juli, dan meningkat di bulan November. Infeksi iridovirus hanya  terjadi  satu  kasus  di  bulan  Oktober.  Ada kecenderungan bahwa prevalensi infeksi VNN diikuti dengan peningkatan populasi total bakteri dan Vibrio spp. pada hati ikan.
Gambar 5. Persentase total bakteri hati dihubungkan dengan total bakteri Vibrio spp. yang diisolasi dari organ hati (cfu/gram) pada ikan di pembenihan dan KJA.
Fgure 5. Percentages  of  total  bacteria  associated  with  total  bacteria  Vibrio  spp.  isolated  from  the  liver (cfu/gram) of fish in hatcheries and net cages.
0 5 10 15 20 25 Rendah (Low) Sedang (Moderate)
Tinggi (High) Sangat tinggi (very high) Rendah (Low) Sedang (Moderate) Tinggi (High) Sangat tinggi (very high)
Pembenihan (Hatchery) KJA (floating net cage) Pe rs en ta se p o p u la si V ib ri o sp p . Po pu la ti on o f V ib ri o sp p. ( % ) Persentase populasi total bakteri (Population of total bacteria) (%) Rendah (Low) Sedang (Moderate) Tinggi (High) Sangat tinggi (very high) Rendah (Low) Sedang  (Moderate) Tinggi (High) Sangat tinggi (Very high)
Rendah         Sedang               Tinggi     Sangat tinggi Low          Moderate                High          Very high
Rendah           Sedang         Tinggi         Sangat tinggi Low             Moderate         High             Very high Pembenihan (Hatchery)                                                     KJA (Floating net cage)

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian  ini  dibiayai  oleh  APBN  Balai  Besar Budidaya Laut dan Penyuluhan Perikanan (BBRBLPP) DIPA Tahun 2018. Penulis mengucapkan terima kasih kepada teknisi  litkayasa  pada  Laboratorium  Patologi, Laboratorium  Kimia,  dan  Laboratorium  lingkungan BBRBLPP-Gondol  yang  telah  membantu  dalam pelaksanaan penelitian ini.

## DAFTAR  ACUAN
Austin, B. & Austin, D.A. (2007). Bacterial fish patho- gens: Diseases of farmed and wild fish. Chichester, UK, Praxis Publishing, 183 pp.
Albert, V. & Ransangan, J. (2013). Effect of water tem- perature on susceptibility of culture marine fish species to vibriosis. International Journal of Research in Pure and Applied Microbiology, 3(3), 48-52.
Amanu, S.,  Sulistiyono, D., &  Suardana. I  N. (2016). Detection of fish disease caused by iridovirus on grouper  (Epinephelus  sp.)  and  pomfret  star (Trachinotus blochii) with co-agglutination method in Tanjungpinang, Indonesia. Journal of Agricultural Science and Technology B, 6, 121-128.
Assefa, A. &  Abunna, F. (2018). Maintenance  of fish health in aquaculture: Review of epidemiological approaches for  prevention and  control of  infec- tious disease of fish. Hindawi Veterinary Medicine International, Article ID 5432497, 10 pp.
Bondad-Reantaso, M.G., Subasinghe, R.P., Arthur, J.R., Ogawa,  K.,  Chinabut,  S.,  Adlard,  R.,  Tan,  Z.,  & Shariff,  M.  (2005).  Disease  and  Health  Manage- ment in Asian Aquaculture. Veterinary Parasitology, 132(3-4),  249-72;  DOI:  10.1016/j.vetpar.2005. 07.005.
Boyd, C.E. (2003). Guidelines for aquaculture effluent management  at  the  farm-level.  Aquaculture,  226 (1-4), 101-112.
Cox,  F.E.  (2001).  Concomitant  infections,  parasites and  immune  responses.  Parasitology,  122  Su., S23-38.
Delamare-Deboutteville, J.,  Bowater, R.,  Condon, K., Reynolds,  A.,  Fisk,  A.,  Aviles,  F.,  &  Barnes,  A.C. (2015).  Infection  and  pathology  in  Queensland grouper, Epinephelus lanceolatus, (Bloch), caused by exposure to Streptococcus agalactiae via different routes. Journal of Fish Diseases, 38, 1021-1035.
DÝler, Ö, Altun, S., Çalikuþu, F., & DÝler A. (2000). A study on qualitative and quantitative bacterial flora of the rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) living in different fish farms. Turk. J. Vet. Anim. Sci., 24,
251-259  (paper  bahasa  Turki  dengan  abstrak bahasa Inggris).
FAO. (1989). Site selection criteria for marine Finfish Netcage Culture in Asia. UNDP/FAO regional sea farming development and demonstration project. Network of Aquaculture Centres in Asia. FAO Doc. NACA-SF/WP/89/13.  http://www.fao.org/docrep/ field/003/AC262E/AC262E00.htm#TOC.
García-Rosado,  E.,  Cano,  I.,  Martín-Antonio,  B.,  La- bella, A., Manchado, M., Alonso, M.C., & Borrego, J.J.  (2010).  Co-occurrence  of  viral  and  bacterial pathogens  in  disease  outbreaks  affecting  newly cultured sparid fish. Int. Microbiol., 10, 193-199.
Ghufran,  M.H.,  Kordi,  &  Tancung,  K.A.B.  (2007). Pengelolaan kualitas air dalam budidaya perairan. Rineka Cipta, Jakarta, 35 hlm.
Harikrishnan,  R.,  Balasundaram,  C.,  &  Heo,  M-S. (2010). Molecular studies, disease status and pro- phylactic measures in grouper aquaculture: Eco- nomic  importance,  disease  and  immunology. Aquaculture, 309, 1-14.
Holzer, A.S., Sommerville, C., & Wootten, R. (2006). Molecular studies on the sea-sonal occurrence and development of five myxozoans in farmed Salmo trutta L. Parasitology, 132, 193-205.
Ina-Salwany, M.Y., Al-saari, N., Mohamad, A., Fathin- Amirah,  Aslizah  Mohd,  A.,  Amal,  M.N.A.,  Kasai, H., Mino, M., Sawabe, S., & Zamri-Saad, M. (2019). Vibriosis  in  Fish:  A  review  on  disease  develop- ment  and  prevention.  Journal  of  Aquatic  Animal Health, 31, 3-22.
Ismi, S., Arthana, I W., & Suyasa, I W.B. (2012). Studi dampak perbenihan ikan laut terhadap penurunan kualitas  lingkungan  di  Kecamatan  Gerokgak Kabupaten  Buleleng.  Ecotrophic:  Jurnal  Ilmu Lingkungan (Journal of Environmental Science), 3(1), 35-40.
Jun, L.I. & Woo, N.Y.S.  (2003). Pathogenicity of vibrios in fish: an overview. Journal of Ocean University of Qingdao  (Oceanic  and  Coastal  Sea  Research),  2(2), 117-128.
Kementerian  Lingkungan  Hidup  (KLH).  (2004). Keputusan  Menteri  Negara  Kependudukan  dan Lingkungan Hidup No. 51 tahun 2004, tanggal 8 April 2004 tentang baku mutu air laut. Kementerian Lingkungan Hidup. Jakarta, 11 hlm.
Kim, C-S., Kim, W-S., Nishizawa, T., & Oh, M-J. (2012). Prevalence  of  viral  nervous  necrosis  (VNN)  in sevenband  grouper  Epinephelus  septemfasciatus farms. J. Fish Pathol., 25(2), 111-116.
Koesharyani, I. & Novita, H. (2006). Diagnosa “nested reverse  transcriptase-PCR”  untuk  “viral  nervous necrosis”  pada  benih  ikan  kerapu  bebek, Cromileptes  altivelis.  Jurnal  Riset  Akuakultur,  1(3), 381-386.
Kotob,  M.H.,  Menanteau-Ledouble,  S.,  Kumar,  G., Abdelzaher,  M.,  &  El-Matbou,  M.  (2016).  The impact of  co-infections on  fish: A  review.  Veteri- nary Research, 47(98), 1-22.
Krivokapic, S., Pestoric, B., Bosak, S., Kuspilic, G., & Riser, C.W. (2011). Trophic State of Boka Kotorska Bay (South-Eastern Adriatic Sea). Fresenius Environ- ment Bulletin, 20(8), 1960-1969.
Lacerda, L.D., Vaisman, A.G., Maia, L.P., Silva, C.A.R., &  Cunha,  E.M.S.  (2006).  Relative  importance  of nitrogen and phosphorus emissions from shrimp farming and other anthropogenic sources for six estuaries  along  the  NE  Brazilian  coast.  Aquacul- ture, 253, 433-446.
Mahardika,  K.,  Koesharyani,  I., Prijono,  A.,  &  Yuasa, K.  (2003).  Infeksi  iridovirus  pada  induk  kerapu Lumpur (Epinephelus coioides). J. Penelitian Perikanan Indonesia, 9(1), 11-15.
Mahardika, K., Mastuti, I., Sudewi, & Zafran. (2018a). Identification and life cycle of marine leech iso- lated  from  cultured  hybrid  grouper  in  the Northern  Bali  waters  of  Indonesia.  Indonesian Aquaculture Journal, 13(1), 41-49.
Mahardika,  K.,  Mastuti,  I.,  &  Zafran.  (2018b). Intensitas parasit insang (trematoda monogenea: Pseudorhabdosynochus sp.) pada ikan kerapu hibrida melalui infeksi buatan. Jurnal Riset Akuakultur, 13(2), 169-177.
Mahardika,  K.,  Zafran,  Septori,  R.,  Nasukha,  A., Mastuti,  I.,  Syahidah,  D.,  Ismi,  S.,  Supii,  A.I., Setiadi,  A.,  &  Sudewi  (2019).  Aplikasi  vaksin polivalen pada ikan kerapu di keramba jaring apung dan pemantauan vertikal kualitas air lingkungan perairan dan kejadian penyakit di kawasan budidaya laut di Bali Utara. Laporan Teknis Balai Besar Riset Budidaya Laut dan Penyuluhan Perikanan, Gondol, Bali, 43 hlm.
Maulana,  D.M.,  Muchlisin,  Z.A.,  &  Sugito.  (2007). Intensitas dan prevalensi parasit pada ikan betok (Anabas  testudineus)  dari  perairan  umum  daratan Aceh bagian utara. Jurnal Ilmiah Mahasiswa Kelautan dan Perikanan Unsyiah, 2(1), 1-11.
Nasukha,  A.,  Septory,  R.,  Sudewi,  Setiadi,  A.,  & Mahardika,  K.  (2019).  Kajian  sebaran  temporal ammonia dan kualitas fisika perairan di kawasan
buangan limbah budidaya laut di Bali Utara. Jurnal Riset Akuakultur, 14(1), 17-27.
Novriadi,  R.,  Agustatik,  S.,  &  Dwi,  T.O.N.  (2015). Identifikasi keberadaan viral nervous necrosis dan iridovirus pada budidaya ikan laut di wilayah kerja Balai  Perikanan  Budidaya  Laut  Batam.  Omni- Akuatika, 14(20), 54-62.
Phuoc,  L.H.,  Corteel,  M.,  Nauwynck,  H.J.,  Pensaert, M.B.,  Alday-Sanz,  V.,  Broeck,  W.V.D.,  Sorgeloos, P., & Bossier, P. (2008). Increased susceptibility of white  spot  syndrome  virus-infected  Litopenaeus vannamei to Vibrio campbellii. Environmental Micro- biology, 10(10), 2718-2727.
Rückert,  S.,  Klimpel,  S.,  Al-Quraishy,  S.,  Mehlhorn, H.,  &  Palm,  H.W.  (2009).    Transmission  of  fish parasites  into  grouper  mariculture  (Serranidae: Epinephelus coioides Hamilton, 1822) in Lampung Bay, Indonesia. Parasitol. Res., 104, 523-532.
Sembiring, S.B.M., Wibawa, G.S., Mahardika, K., Zeny, W., & Haryanti. (2018). Prevalensi infeksi penyakit viral nervous necrosis (VNN) dan iridovirus pada budidaya ikan laut. Media Akuakultur, 13(1), 1-9.
Sohn, H., Kim, J.,  Jin, C., & Le, J. (2019). Identifica- tion  of  vibrio  species  isolated  from  cultured olive flounder (Paralichthys olivaceus) in Jeju Island, South Korea. Fisheries and Aquatic Sciences, 22(14), 1-8.
Tammi,  T.,  Pratiwi,  N.T.M.,  Hariyadi,  S.,  &  Radiarta, I  N.  (2015).  Aplikasi  analisis  klaster  dan  indeks TRIX untuk mengkaji variabilitas status trofik di Teluk  Pegametan,  Singaraja,  Bali.  Jurnal  Riset Akuakultur, 10(2), 271-281.
Toranzo, A.E., Magariños, B., & Romalde, J.L. (2005). A  review  of  the  main  bacterial  fish  diseases  in mariculture systems. Aquaculture, 246, 37-61.
Valdes-Donoso,  P.,  Mardones,  F.O.,  Jarpa,  M.,  Ulloa, M.,  Carpenter,  T.E.,  &  Perez,  A.M.  (2013).  Co- infection patterns of infectious salmon anaemia and sea lice in farmed Atlantic salmon, Salmo salar L.,  in  Southern  Chile  (2007-2009).  J.  Fish  Dis., 36, 353-360.
Vijayan, K.K., Rajendran, K.V., Sanil, N.K., & Alavandi, S.V. (2015). Fish health management in cage aqua- culture. In: Souvenir 5 th International Symposium on Cage Aquaculture  in Asia,  25-28 November  2015, Kochi, p. 94-103.
Zafran, Harada, T., Koesharyani, I., Yuasa, K., & Hatai, K.  (1998).  Indonesian  hatchery  reared  sea  bass larvae  (Lates  calcarifer),  associated  with  viral nervous necrosis (VNN). IFR Journal, IV(I), 19-22.
Zafran, Koesharyani, I., Johnny, F., Yuasa, K., Harada,
T.,  &  Hatai,  K.  (2000).  Viral  nervous  necrosis  in humpback grouper Cromileptes altivelis larvae and juveniles  in  Indonesia.  Fish  Pathology,  35(2), 95-96.
Zafran, Roza, D., & Mahardika, K. (2018). Prevalensi ektoparasit pada ikan budidaya di keramba jaring apung  di  Teluk  Kaping,  Buleleng,  Bali.  Prosiding
Ikatan Sarjana  Oseanologi Indonesia  (ISOI), Ilmu  & Teknologi  Kelautan  untuk  Pembangunan Berkelanjutan.  Yogyakarta,  1-3  November  2018, hlm. 100-108.
Zafran,  Roza,  D.,  &  Mahardika,  K.  (2019).  Infeksi ektoparasit  pada  benih  ikan  laut  di  hatchery  di Gerokgak,  Buleleng,  Bali.  Journal  of  Fisheries  and Marine Research, 3(1), 32-40.