## UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN BAYAM HIJAU ( Amaranthus hybridus L) DENGAN PEREDAMAN DPPH
Yanulia Handayani 1* , Ricka Islamiyati 2 ,  Kadar Ismah 3 , Dwi Susiloningrum 4 1-4 Institut Teknologi Kesehatan Cendekia Utama Kudus Jln. Lingkar Raya Kudus-Pati km. 5 Jepang Mejobo Kudus 59381 Email: yanulia.handayani@gmail.com

## ABSTRAK
Bayam  adalah  tanaman  yang  termasuk  dalam  famili  yang  merupakan  tanaman  perdu  dan  semak. Manfaat dari daun bayam diantaranya dapat memperbaiki daya kerja ginjal, akarnya dapat digunakan untuk mengobati penyakit disentri dan mempercepat pertumbuhan sel. Bayam termasuk sayuran yang kaya  nutrisi,  dengan  kandungan  rendah  kalori,  namun  sangat  tinggi  vitamin  dan  mineral.Bayam mengandung flavonoid berfungsi sebagai antioksidan yang dapat melindungi tubuh dari radikal bebas. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kadar flavonoid total dan aktivitas antioksidan pada ekstrak etanol  daun  bayam  hijau.  Ekstraksi  dilakukan  dengan  metode  maserasi  menggunakan  pelarut  etanol 70% dengan perbandingan 1:3. Penentuan kadar flavonoid total menggunakan pereaksi AICI 3 dan uji aktivitas  antioksidan  menggunakan  metode  peredaman  radikan  bebas  DPPH  dengan  menggunakan perbandingan kuersetin. Analis dilakukan dengan menggunakan alat spektrofotometri UV-Vis. Ekstrak etanol  daun  bayam  mengandung  kadar  flavonoid  total  6,893%  dan  memiliki  aktivitas  antioksidan dengan  nilai  IC 50 sebesar  69,34  ppm.  Ekstrak  etanol  daun  bayam  ( Amarantus  hybridus L)  memiliki aktivitas antioksidan yang kuat.
Kata Kunci : Daun Bayam, flavonoid total, aktivitas antioksidan, Spektrofotometri UV-Vis

## ABSTRACT
Spinach is a plant that belongs to the family of shrubs and shrubs. The benefits of spinach leaves include improving the functioning of the kidneys, the roots can be used to treat dysentery and accelerate cell growth.  Spinach  is  a  vegetable  that  is  rich  in  nutrients,  with  a  low  calorie  content, but  very  high  in vitamins and minerals. Spinach contains flavonoids that function as antioxidants that can protect the body from free radicals. This study aims to determine the total flavonoid levels and antioxidant activity in the ethanol extract of green spinach leaves. Extraction was carried out by maceration method using 70% ethanol solvent with a ratio of 1: 3. Determination of total flavonoid levels using AICI3 reagent and antioxidant activity test using DPPH-free ravine reduction method using quercetin comparisons. The analysis was carried out using a UV-Vis spectrophotometric device. The ethanol extract of spinach leaves contains a total flavonoid content of 6.893% and has antioxidant activity with an IC 50 value of 69.34 ppm. Spinach leaf ethanol extract (Amarantus hybridus L) has strong antioxidant activity
Keywords: Spinach leaves, total flavonoids, antioxidant activity, UV-Vis spectrophotometry
Cendekia Journal of Pharmacy ITEKES Cendekia Utama Kudus P-ISSN 2559 – 2163           E-ISSN 2599 – 2155 Vol. 7, No. 2, September 2023 http://cjp.jurnal.stikescendekiautamakudus.ac.id

## LATAR BELAKANG
Radikal bebas adalah molekul yang sifatnya tidak stabil. Radikal bebas mempunyai satu elektron  atau  lebih  sehingga  untuk  menjadi  stabil  cenderung  mengambil  elektron  lainnya, kemudian  menimbulkan  senyawa  yang  tidak  normal  dan  memulai  aksi  berantai  yang  dapat merusak  jaringan  (Yulinda,  Mukhtar  &  Khairunnisa,  2012).  Selain  itu  radikal  bebas  juga terlibat dalam peradangan, pengapuran tulang, gangguan pencernaan, gangguan pencernaan, gangguan  fungsi  hati,  meningkatkan  kadar Low  Density  Lipoprotein (LDL)  yang  kemudian menjadi  penyebab  penimbunan  kolesterol  pada  dinding  pembuluh  darah  sehingga  terjadi penyakit jantung koroner (Alif, 2010).
Salah  satu  penyakit  yang  dikarenakan  radikal  bebas  adalah  penyakit  degeneratif. Penyakit degeneratif terjadi karena menghasilkan radikal bebas secara terus menerus selama proses  metabolisme  normal,  dianggap  sebagai  penyebab  terjadinya  kerusakan  fungsi  sel-sel tubuh (Juniarti , Osmeli & Yuhernita, 2009).
Antioksidan  merupakan  suatu  substansi  pada  konsentrasi  kecil  secara  signifikan mampu  menghambat  oksidasi  pada  substratyang  disebabkan  oleh  radikal  bebas.  Senyawa antioksidan  dapat  menjadi  donor  hidrogen  yang  mendapatkan  suatu  antioksidan  yang  bagus dan senyawa tersebut diketahui mempunyai aktivitas antioksidan melalui beberapa mekanisme, diantaranya  menangkal  radikal  bebas  dengan  cara  menghambat  kinerja  enzim  yang  terlibat dalam pembentukan radikal bebas (Kalim, Bhattacharyya, Banerjee, & Chattopadhyay, 2010).
Flavonoid  merupakan  senyawa  golongan  fenolik  dengan  kerangka  c6-c3-c6  (c15) memiliki aktivitas antioksidan tinggi sebab keberadaan gugus hidroksil pada struktur kimianya yang dapat menetralkan radikal bebas (Khanam & Oba, 2013). Jenis antioksidan yang berasal dari  tumbuhan  dan  hewan  yang  mempunyai  gugus  hidroksi  dalam  struktur  molekul  disebut antioksidan  alami,  tanaman  yang  sering  diteliti  umumnya  berasal  dari  golongan  senyawa fenolik  (Ihklas,  2013).  Senyawa  flavonoid  bersifat  polar  sehingga  dibutuhkan  pelarut  yang bersifat  polar.  Efektivitas  ekstraksi  suatu  senyawa  oleh  pelarut  sangat  tergantung  kepada kelarutan senyawa tersebut dalam pelarut, sesuai dengan prinsip like dissolve like yaitu suatu senyawa  akan  terlarut  pada  pelarut  dengan  sifat  yang  sama.  Pelarut  yang  bersifat  polar diantaranya  adalah  etanol,  metanol,  aseton  dan  air.Menurut  Sayuti  (2017)  pelarut  etanol menghasilkan  aktivitas  antioksidan  tertinggi  pada  ekstrak  daun  bayam  hijau (Amaranthus hybridus L). Menurut Erawati (2012) aktivitas antioksidan dapat ditentukan dengan beberapa metode salah satunya menggunakan metode 2.2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH).DPPH adalah radikal  bebas  yang  stabil  pada  suhu  kamar  dan  sering  digunakan  untuk  menilai  aktivitas antioksidan dari beberapa senyawa (Erawati, 2012).
Bayam adalah tanaman yang termasuk dalam famili yang merupakan tanaman perdu dan  semak.Terdapat  beberapa  macam  daun  bayam  ada  yang  dibudidaya  ada  yang  tidak dibudidaya.Manfaat  dari  daun  bayam  diantaranya  dapat  memperbaiki  daya  kerja  ginjal, akarnya  dapat  digunakan  untuk  mengobati  penyakit  disentri  dan mempercepat  pertumbuhan sel  (Tafajani,  2011).  Menurut  penelitianKhandaker,  Masum,  &  Oba  (2010)  tanaman  bayam mengandung antosianin dan daun bayam mengandung senyawa protein, karotenoin, vitamin C, mineral, fenolik dan flavonoid.
Bayam termasuk sayuran yang kaya nutrisi, dengan kandungan rendah kalori, namun sangat tinggi vitamin dan mineral.Bayam mengandung flavonoid berfungsi sebagai antioksidan yang dapat melindungi tubuh dari radikal bebas.Tanaman ini tergolong sayuran sumber gizi bagi penduduk di negara berkembang karena kandungan vitamin dan mineralnya yang relatif tinggi.  Dalam  100  g  daun  bayam  ( Amaranthus  tricolor )  terkandung  39,9  g  protein,  358  mg
kalsium,  2,4  mg  besi,  0,8  mg  seng,  18  mg  vitamin  A,  62  mg  vitamin  C  (Yang  &  Kidding, 2009).

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini merupakan jenis penelitian eksperimen secara deskriptif kuantitatif.

## Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian dilakukan mulai bulan April sampai Juni 2022 di laboratorium mikrobiologi, kimia dan teknologi farmasi ITEKES Cendekia Utama Kudus.

## Populasi dan Sampel
Populasi yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun bayam hijau yang diperoleh daerah Babalan Undaan Kudus Jawa Tengah. Sampel penelitian yang digunakan daun bayam dalam keadaan baik dan tidak busuk.

## Alat
Spektrofotometer  UV-VIS,  kurvet  kuarsa,  penangas  air,  bunsen,  kaki  tiga,  blender, gunting, alumunium  foil ,  tabung  reaksi,  rak  tabung  reaksi,  thermometer,  Erlenmeyer,  gelas kimia, gelas ukur, botol kaca, corong kaca, oven, rotary evaporator , pipet volume, mikro pipet, pipet tetes, cawan penguap, labu ukur, batang pengaduk, spatel, sendok tanduk, penjepit kayu, kain penyaring, karet dan plastik hitam.

## Bahan
Bahan  utama  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  daun  bayam  hijau  yang diperoleh dari Desa Babalan Undaan Kudus. Bahan kimia yang digunakan seperti etanol 70%, etanol p.a, natrium asetat 1M, alumunium klorida 10%, asam klorida pekat, besi (III) klorida, HCI 2 N, NaOH 10%, AICI 3 10%, air panas, pereaksi mayer, wagner dan dragendroff , akuades, kuersetin, DPPH ( 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl ).

## Prosedur Penelitian

## 1. Pembuatan Simplisia
Daun bayam segar sebanyak 3 kg dicuci dan ditiriskan, kemudian dirajang, dilanjutkan dengan pengeringan menggunakan pengeringan tidak langsung, kemudian dihaluskan dengan menggunakan  blender  dan  diayak  dengan  ayakan  44  mesh,  dilanjutkan  dengan  perhitungan susut pengeringan dan susut bobot simplisia.

## 2. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Bayam
Serbuk  simplisia  daun  bayam  hijau  yang  sudah  dikeringkan  kemudian  dimaserasi dengan perbandingan 1:3. Ditimbang serbuk simplisia 200 gram dimasukkan ke dalam wadah, ditambahkan  pelarut  etanol  70%  sebanyak  600  mL  diaduk  sampai  homogen,  maserasi dilakukan  selama  1  x  24  jam.  Remaserasi  dilakukan  selama  3  hari  berturut-turut. Hasil  dari maserasi  kemudian  dikumpulkan  menjadi  satu  dan  dipekatkan  Waterbath  pada  suhu  40 0 C hingga didapatkan ekstrak kental.

## 3. Skrining Fitokimia
a. Flavonoid
1. Pereaksi  NaOH  10%:  Sampel  sebanyak  20  mg  ditambahkan  2-5  tetes  pereaksi NaOH  10%.  Reaksi  positif  jika  terjadi  perubahan  warna  menjadi  orange  atau jingga.
2. Pereaksi Wilstater : Sampel sebanyak 20 mg ditambahkan 2-5 tetes HCL pekat dan sedikit serbuk Mg. Reaksi positif jika terjadi perubahan warna menjadi merah.
3. Pereaksi Bate Smite-Metcalfe : Sampel sebanyak 20 mg ditambahkan beberapa tetes
H 2 SO 4 pekat, kemudian dipanaskan diatas penangas air selama 15 menit. Reaksi positif jika terjadi perubahan warna menjadi merah.

## b. Fenol
Sampel sebanyak 20 mg dimasukkan dalam tabung reaksi, selanjutnya ditambahkan 3 tetes  larutan  FeCI 3 .  Hasil  menunjukkan  terbentuknya  warna  hitam  hijau  kebiruan mengidentifikasi adanya fenol (Syarif et al ., 2015).

## c. Saponin
Sampel sebanyak 20 mg dimasukkan dalam tabung reaksi ditambahkan 10 ml air panas, didinginkan kemudian dikocok kuat-kuat selama 2 detik. Selanjutnya campuran ditambahkan dengan 2 tetes HCl 2 N dan dikocok lagi sampai terbentuk buih selama 10 menit.Hasil positif ditunjukkan dengan terbentuknya buih yang stabil selama tidak kurang dari 10 menit (Waris, Najib, & Pratiwi, 2016).

## d. Tannin
Sampel  sebanyak  20  mg  didihkan  selama  3  menit  dengan  akuadest  diambil  5  ml selanjutnya  ditambahkan  1-2  tetes  larutan  FeCI 3 .  Jika  terjadi  perubahan  warna  coklat kehitaman atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin.

## e. Alkaloid
Sampel sebanyak 20 mg dimasukkan dalam tabung reaksi, kemudian ditambahkan 10 tetes  asam  sulfat  2N.  Tambahkan  pereaksi  alkaloid  dragendorf  pada  tabung  reaksi.Sampel dinyatakan  positif  apabila  terbentuk  warna  merah  sampai  jingga  pada  pereaksi  Dragendorf (Syarif et al ., 2015).

## 4. Penetapan Kadar Flavonoid
a. Pembuatan Larutan Induk Kuersetin
Larutan induk dibuat 1000 ppm dengan cara menimbang 10 mg kuersetin dilarutkan dengan etanol p.a hingga volume 10 mL. Selanjutnya dari larutan induk 1000 ppm diencerkan menjadi 100 ppm, kemudian dibuat larutan seri baku standar kuersetin dengan deret konsentrasi 20 ppm, 30 ppm, 40 ppm, 50 ppm, 60 ppm. Diambil salah satu konsentrasi larutan standar, sebanyak 0,5 mL, ditambahkan 0,1 mL AlCl 3 10% dan 0,1 mL natrium asetat 1 M ditambahkan dengan etanol p.a hingga tanda batas. Diukur absorbansinya pada panjang gelombang 400-800 nm.

## b. Pembuatan Kurva Baku Kuersetin
Kurva standar dibuat dibuat dengan cara menghubungkan konsentrasi larutan standar kuersetin  dengan  hasil  serapannya  yang  diperoleh  dari  pengukuran  dengan  menggunakan spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang 444.0 nm.

## c. Penetapan Kadar Flavonoid total
Sebanyak 25 mg ekstrak kemudian dilarutkan dengan etanol p.a sampai tanda batas 25 mL. Dari larutan tersebut dipipet 0,5 mL kemudian ditambahkan 0,1 mL larutan AlCl 3 10% dan 0,1 mL natrium asetat 1 M ditambahkan etanol p.a sampai tanda batas labu ukur 10 mL. Campuran dikocok hingga homogen dibiarkan selama 8 menit, Kemudian diukur serapannya menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis  pada  panjang  gelombang  maksimum  444,0  nm dilakukan  replikasi  tiga  kali  sehingga  kadar  flavonoid  yang  diperoleh  sebagai  ukuivalen kuersetin (Chang, 2002).

## 5. Pengujian Aktivitas Antioksidan Dengan Metode DPPH
Serbuk  DPPH  ditimbang  10  mg,  dimasukan  ke  dalam  labu  ukur  50  mL,  lalu ditambahkan etanol  p.a  sampai  tanda  batas  hingga  diperoleh  larutan  dengan  konsentrasi  0,5 mM.  Diambil  1,0  mL  larutan  DPPH  0,5  mM,  dimasukkan  dalam  labu  ukur  ditambahakan dengan  etanol  p.a  sampai  tanda  batas  10  mL,  dikocok  hingga  homogen  dan  diukur absorbansinya  pada  panjang  gelombang  400-800  nm.  Penentuan  operating  time  mengambil larutan ekstrak etanol daun bayam sebanyak 0,1 mL dengan DPPH 0,4 mL dimasukkan dalam labu  ukur  10  mL  dan  ditambahkan  etanol  p.a  sampai  tanda  batas.  Kocok  sampai  homogen kemudian  amati  absorbansinya  dengan  panjang  gelombang  maksimum  515,0  nm  dengan menggunakan spektofotometer UV-Vis setiap interval waktu 1 menit. Pembuatan larutan uji antioksidan ekstrak etanol daun bayam  dengan konsentrasi 40 ppm, 60 ppm, 80 ppm, 100 ppm, 120  ppm,  selanjutnya  dari masing-masing  konsentrasi  diambil  0,1  mL  ditambahkan  0,4  mL larutan DPPH 0,5 mM dimasukkan dalam labu ukur 10 mL, ditambahkan dengan etanol p.a sampai  tanda  batas.  Kemudian  diukur  serapan  panjang  gelombang  dengan  menggunakan spektrofotometer UV-Vis dengan panjang gelombang 515,0 nm. Dilakukan replikasi sebanyak 3 kali setelah itu dihitung persen peredaman dan dimasukkan dalam persamaan regresi linier dan didapatkan nilai lC 50 .
% inhibisi = absorbansi kontrol−absonbansi sampel absorbansi kontrol
× 100%

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## 1. Pengeringan Simplisia
Hasil pengeringan simplisia Daun bayam ( Amarantus hybridus L) dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Hasil perhitungan susut pengeringan Simplisia Sampel basah (gram) Simplisia kering (gram) Susut pengeringan (%) Daun bayam 3000 276 90,8 %

## 2. Pembuatan Ekstrak
Hasil pembuatan ekstrak etanol daun bayam hijau ( Amarantus hybridus L) dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel 2. Rendemen ekstrak etanol daun bayam Serbuk Daun Bayam Ekstrak Rendemen 200 gram 27,386 gram 13,693 %

## 3. Skrining Fitokimia
Hasil identifikasi ekstrak etanol daun bayam ( Amarantus hybridus L) dapat dilihat pada tabel 3.
Tabel 3. Hasil identifikasi fitokimia ekstrak etanol daun bayam hijau Senyawa Indikator Hasil Keterangan Flavonoid: NaOH 10% Wilstater Bate Smite-Metcalfe
Sampel+NaOH 10% Sampel+HCl pekat+Mg Sampel+H 2 SO 4 pekat + + + Orange Kuning Merah Fenol Sampel+FeCl 3 + Hitam kehijauan
Saponin Sampel+air panas+HCl 2 N + Berbentuk buih Tanin Sampel dipanaskan dengan aquades+FeCl 3 + Coklat kehitaman Alkaloid Sampel+Asam sulfat 2 N+dragendrof - Tidak berubah warna

## 4. Hasil penetapan kadar flavonoid total ekstrak etanol daun bayam
Hasil penetapan kadar flavonoid total daun bayam ( Amarantus hybridus L) dapat dilihat pada tabel 4.
Tabel 4. Hasil penetapan kadar flavonoid total dari ekstrak etanol daun bayam
Konsentrasi (ppm) Absorbansi Kadar ekuivalen (ppm) Kadar flavonoid total (%) Rata-rata ± SD 1000
0,218 0,220
0,222 68,370
68,932
69,494 6,837 %
6,893 %
6,949 % 6,893 ± 0,056

## 5. Hasil peredaman DPPH oleh ekstrak etanol daun bayam
Hasil peredaman DPPH oleh ekstrak etanol daun bayam ( Amarantus hybridus L) dapat dilihat pada tabel 5.
Tabel 5. Hasil peredaman DPPH oleh ekstrak etanol daun bayam
Kadar Absorbansi % peredaman Rata-rata ± SD 40 ppm 0,650 0,650 0,650 34,47 % 34,47 % 34,47 % 34,47 ± 0 60 ppm 0,557 0,559 0,556 43,85 % 43,64 % 43,95 % 43,81 ± 0,15 80 ppm 0,425 0,426 0,426 56,95 % 57,05 % 57,05 % 57,01 ± 0,05 100 ppm 0,335 0,336 0,336 66,22 % 66,12 % 66,12 % 66,16 ± 0,05 120 ppm 0,224 0,223 0,226 77,41 %
77,52 %
77,21 % 77,38 ± 0,15 IC 50 : 69,34 ppm Absorbansi kontrol: 0,992
Hasil  penelitian  menujukan  bahwa  daun  bayam  mengandung  senyawa  flavonoid ditandai dengan adanya perubahan warna jingga, dengan menggunakan pereaksi NaOH 10%, Wilstater, Bate Smite-Metcalfe . Senyawa flavonoid merupakan senyawa yang mudah terlarut atau  terekstrak  dalam  pelarut  etanol  yang  bersifat  polar  karena  adanya  gugus  hidroksil, sehingga  dapat  terbentuk  suatu  ikatan  hidrogen  (Sriwahyuni,  2010).  Selain  flavonoid  daun bayam juga mengandung senyawa saponin, dan fenolik .
Pada  analisis  penentuan  potensi  aktivitas  antioksidan  suatu  sampel  menggunakan metode  pungukuran  terhadap  (%)  peredaman  terhadap  radikal  bebas,  yang  selanjutnya
digunakan  untuk  menghitung  nilai  lC 50 .  IC 50 adalah  bilangan  yang  menunjukan  konsentrasi ekstrak  yang  mampu  menghambat  50%  oksidasi.  Nilai  IC 50 berbanding  terbalik  dengan aktivitas antioksidan. Semakin tinggi nilai IC 50 maka semakin kecil aktivitas antioksidannya, begitu pula sebaliknya semakin kecil nilai IC 50 maka semakin tinggi aktivitas antioksidannya (Haeria,  Hermawati  &  Pine,  2006).  Hasil  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  bayam memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  kuat  dengan  nilai  lC 50 69,34  ppm.  Semakin  kecil  nilai flavonoid total maka semakin besar nilai lC 50 , yang berarti bahwa semakin kecil nilai flavonoid total maka aktivitas antioksidannya semakin rendah.

## SIMPULAN DAN SARAN Simpulan
Ekstrak  Etanol  Daun  Bayam  hijau  ( Amarantus  hybridus L)  memiliki  aktivitas antioksidan  kuat  dimana  nilai  lC 50 masuk  dalam  range  50-100  ppm.  Ekstrak  Etanol  Daun Bayam hijau ( Amarantus hybridus L) memiliki kadar flavonoid total 6,893%. Ekstrak Etanol Daun Bayam hijau ( Amarantus hybridus L) mempunyai nilai lC 50 69,34 ppm.

## Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  mengenahi  penentuan  kadar  flavonoid  total ekstrak etanol daun bayam hijau dengan metode lain. Pada tanaman bayam hijau yang memiliki banyak kandungan senyawa seperti flavonoid, tannin, fenol, saponin dan alkaloid yang sangat berkhasiat selain sebagai antioksidan bisa untuk mencegah kanker, mengontrol tekanan darah, antidiabetes.

## DAFTAR PUSTAKA
Alif  A.  (2010).  Minyak  kelapa  murni  menghalau  penyakit  akibat  radikal  bebas. Journal  of Natural Sciences and Engineering. (2).
Chang  C.  Yang  M,  Wen  Hand  Chern  J.  (2002).  'Estimation  of  Total  Flavonoid  Content  in Propolis by Two Complementary Colorimetric Methods', J. Food Drug Anal.vol 10, p. 178-182.
Erawati, (2012) Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Garciniadaedalanthera Pierre Dengan Metode Dpph ( 1,1-Difenil Pikrilhidrazil ) Dan Identifikasi Golongan Senyawa Kimia Dari Fraksi Paling Aktif, Skripsi , Program Sarjana Ekstensi Farmasi, Depok. Haeria, Hermawati, & Dg.Pine, A. T. U. (2016). 'Penentuan kadar flavonoid total dan aktivitas antioksidan  ekstrak  etanol  daun  bidara  (Ziziphus  spina-christi  L.)'.  Journal  of Pharmaceutical and Medicinal Sciences, vol. 1(2), p. 57–61.
Ikhlas, Nur (2013) Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Herba Kemangi ( Ocimun americanum Linn ) dengan Metoda DPPH.Skripsi, Fakulats Kedokteran dan Kesehatan.UIN Syarif Hidayatullah. Jakarta.
Juniarti,  Osmeli,  D.,  &  Yuhernita.  (2009).  Kandungan  senyawa  kimia,  uji  toksisitas  (Brinc shrimp lethality test) dan antioksidan (1,1-diphenyl-2-pikrilhydrazyl) dari ekstrak daun saga ( Abrus precatorius L ). Makara sains , 13(1), 50-54.
Kalim,  M.  D.,  Bhattacharyya,  D.,    Banerjee,  A.  and  Chattopadhyay,  S.,  (2010),  Oxydative DNA damage preventive activity and antioxidant potential of plant used in unani system of medicine, Complementary and Alternative Medicine , 10: 77. Khanam  &  Oba,  S.,  (2013)  Bioactives  Substances  in  Leaves  of  Two Amaranth  spesies, Amaranthus tricolor and A. hypochondriacus, Can. J. Plant Sci, 93:47-58. Khandaker, L., Masum, A.S.M.G & Oba, S., (2010), Air temperature and sunlight intensity of different  growing  period  effect  the  biomass,  leaf  color  and  betacyanin  pigment accumulation in red amaranth (Amaranthus tricolor L.), Agricultura , 10(4): 439-448.
Sayuti, M. (2017). Pengaruh Peredaman Metode Ekstraksi, Bagian Dan Jenis Pelarut Terhadap Rendemen  Dan  Aktivitas  Antioksidan  Bamboo  Laut (Isis  Hippuris) . Technology Science And Engineering Journal 1(3) 2549-1601.
Syarif,  RA,  Muhajir,  M,  Ahmad,  AR  &  Malik,  A.  (2015),  Identifikasi  golongan  senyawa antioksidan dengan menggunakan metode perendaman radikal  DPPH Ekstrak Etanol Daun Cordia myxa L ., Jurnal Fitofarmaka Indonesia , 2(1): 83-89.
Sriwahyuni.(2010).  Uji  fitokimia  ekstrak  tanaman  anting-anting (Acalypha  Indica  Linn) dengan  variasi  pelarut  dan  uji  toksisitas  menggunakan brine  shrimp  (artemia  salina leach) . Skripsi. Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri (UIN) Maulana Malik Ibrahim. Malang.
Tafajani.  H,  (2011), panduan  komplitBertanam  Sayuran  dan  Buah-buahan, Yogyakarta, Cahaya Atma, research of applied science and education , 9(2) : 179-184.
Waris,  R,  Najib,  A  &  Pratiwi,  ED  (2016),  Radical  Scavenging  Activity  of  Leaf  Extract  of Edible  Hibiscus  ( Abelmoschus  manihot  (L .)  Medik)  Using  1,1-  Diphenyl-2-Picryl Hydrazil (DPPH), International Journal of PharmTech Research , 9 (6) : 343-347. Yang  &  Kidding,  GB  (2009)  Nutritional  contributions  of  important  African  indigenous vegetables. In: Shackleton ) CM, Pasquini MW, Drescher A (eds) African indigenous vegetables in urban agriculture. Earthscan, London, UK, 2(2) :105-143.
Yulinda E, Mukhtar H, Khairunnisa, (2012). Penentuan Aktivitas Antioksidan dari Beberapa Ekstrak Sayur-sayuran Segar dan Dikukus dengan metodeDPPH .Scientia. 2 (1): 1-5.