## PENAMBAHAN GLUKOSA PADA MEDIA BEKATUL AGAR UNTUK PERTUMBUHAN Aspergillus sp
Mujahidah Basarang 1) , Muh. Rifo Rianto 1) , Magfirah Arifuddin 1)
1) Akademi Analis Kesehatan Muhammadiyah Makassar Alamat Korespondensi: peatoduri@yahoo.com

## Abstrak
Pembiakan  jamur  di  laboratorium  dipengaruhi  oleh  komponen  nutrien  media.  Media  harus mengandung  semua  nutrisi  yang  mudah  digunakan  mikroba.  Persyaratan  media  petumbuhan jamur  adalah  tersedianya  karbohidrat  dan  nitrogen.  Bekatul  mengandung  karbohidrat  sebanyak 84,36% yang merupakan salah satu sumber energi utama dalam pertumbuhan dan perkembangan jamur.  Selain  itu  bekatul  merupakan  sumber  nitrogen  yang  kompleks.  Oleh  karena  itu  bekatul dapat dijadikan sebagai media alternatif pertumbuhan jamur. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pertumbuhan jamur Aspergillus sp pada media bekatul agar. Selain itu penelitian ini bertujuan  membandingkan  pertumbuhan  Aspergillus  sp  pada  bekatul  agar  dengan  penambahan glukosa dan bekatul agar tanpa penambahan glukosa. Metode yang digunakan adalah single dot dengan cara inokulasi  Aspergillus sp menggunakan ose jarum yang ditusukkan di bagian tengah permukaan  agar  dan  diinkubasi  pada  suhu  25 0 C.  Pertumbuhan  jamur  dilihat  dari  hasil pengukuran  diameter  koloni  jamur  dilakukan  setiap  24  jam  selama  5    hari.  Hasil  pengamatan memperlihatkan gambaran pertumbuhan optimum Aspergillus sp. pada media bekatul agar, media bekatul  agar  penambahan  glukosa. Pertumbuhan  eksponensial  Aspergillus  sp.  dimulai  pada  jam ke-24,  jamke-48  dan  jam  ke-72.  Kemudian  dari  jam  ke-72  sampai  jam  ke-102  Aspergillus  sp. mengalami  fase  pertumbuhan  stasioneri.    Dari  penelitian  ini  dapat  disimpulkan  bahwa  bekatul dapat dimanfaatkan sebagai media pertumbuhan jamur Aspergillus sp.
Kata kunci : Media Bekatul Agar, Pertumbuhan Aspergillus sp.

## PENDAHULUAN
Media menjadi sesuatu yang penting dalam pertumbuhan jamur karena akan  mempengaruhi  morfologi,  warna koloni dan jumlah koloni. Secara kimiawi media  pertumbuhan  dibedakan  menjadi dua,  yaitu  media  sintetik  dan  media nonsintetik.  Media  sintetik  memiliki kandungan yang diketahui secara terperinci,  yaitu  senyawa  organik  dan inorganik  ditambahkan  harus  murni.
Media  sintetik  yang  secara  selektif menumbuhkan  jamur  adalah Sabouraud
Dextrose  Agar (SDA)  atau Potato dextrose Agar (PDA) karena keasamannya rendah (pH 4,5-5,6) sehingga menghambat pertumbuhan bakteri  (Cappucino,  2014).  Penelitian Mikrobiologi  seringkali  terkendala  pada media  yang  harganya  mahal  dan  susah didapatkan khususnya pada negara berkembang.  Oleh  karena  itu  dibutuhkan media dengan formulasi baru yang mudah didapatkan  dan  harga  lebih  murah dibandingkan  media  sintetik  seperti  SDA
atau PDA.
Media  nonsintetik  menggunakan bahan-bahan  yang  terdapat  di  alam  yang seringkali  tidak  diketahui  kandungan kimianya secara rinci tapi sering digunakan  di  laboratorium  karena  mudah disiapkan  dan  harganya  murah.  Beberapa penelitian yang menggunakan bahan alam sebagai  media  elternatif  seperti  pati singkong  (Kwoseh et  al ,  2012),    kacang tunggak, kacang hijau, kacang soya hitam, dan  kedelei  (Ravimannan  et  al,    2014), ganyong,  gembili  dan  garut  (Aini  dan Rahayu,  2015),  dan  sereal,  kacang- kacangan (Uthayasooriyan, et.al., 2016).
Melimpahnya  sumber  daya  alam
Indonesia memungkinkan ditemukan media alternatif pengganti SDA
(Sabouraud  Dextrose  Agar).  Salah  satu bahan  alam  yang  berpotensi  sebagai media pertumbuhan adalah bekatul.
Bekatul  adalah  bahan  alam  yang merupakan  limbah  halus  yang  diperoleh dari  proses  penggilingan  gabah  padi. Produksi  bekatul  dari  penggilingan  padi di  Indonesia  mencapai  4-6  juta  ton  per tahun.  Menurut  catatan  Pusat  Penelitian
dan  Pengembangan  Pertanian  Bogor, kegiatan  penyosohan  beras  bisa  mengikis 7,5%  dari  bobot  beras  awal.  Tujuh setengah  persen  tersebut  berupa  bekatul yang  memiliki  kadar  selulosa  dan hemiselulosa yang paling tinggi dibandingkan dengan  berasnya  itu  sendiri (Nursalim  dan  Razali,  2007).  Bekatul mempunyai  sumber  karbon  dan  nitrogen lebih  kompleks  dibanding  media  lain (Satyawiharja  1984  dalam  Dewi et  al , 2005).  Pemanfaatan  bekatul  sebagai media pertumbuhan mikroorganisme didasarkan  pada  kandungan  komponen- komponen nutrisi yang dibutuhkan mikroorganisme.   Bekatul   mengandung karbohidrat tinggi, protein, lemak, vitamin,  dan  serat  kasar  (Houston  1972 dalam Dewi et al , 2005).
Bekatul  mempunyai  kandungan vitamin  B.  Vitamin  B  tertentu  yang terdapat dalam medium merupakan faktor penting untuk pertumbuhan jamur. Beberapa  penelitian  menunjukkan  bahwa bekatul dapat dimanfaatkan sebagai media untuk  pertumbuhan  jamur  penghasil enzim, seperti Aspergillus niger , Rhizopus sp,  dan Mucor sp.  Dengan  kata  lain, bekatul  dapat  digunakan  sebagai  substrat untuk  menghasilkan  enzim.  Jenis  enzim yang  dihasilkan  tergantung  pada  media dan  kondisi  lingkungan  (Houston  1972 dalam Dewi et al , 2005).
Untuk  mempelajari  karakteristik mikroorganisme  seperti  jamur  tergantung pada  kultur  di  laboratorium.  Komponen- komponen yang terdiri atas nutrisi penting pada bekatul menjadi syarat pertumbuhan optimal jamur, seperti Aspergillus sp pada media  bekatul  seperti  pada  media  sintetik seperti SDA yang telah banyak digunakan. Media padat, yaitu media agar lebih  mudah  digunakan  untuk  keperluan identifikasi  dari  spesimen  patologi  dan dapat mengurangi kontaminasi dibandingkan  media  cair.  Media  cair sangat susah disiapkan untuk mengkultur, identifikasi mikroorganisme dan kemungkinan  terjadi  kontaminasi  sangat tinggi (Prescot, et.al.(2002) dalam Kowesh, et.al. (2012)). SDA didukung oleh sumber karbon berupa penambahan gula sederhana
berupa  dextrosa.  Molekul  sederhana seperti  glukosa  akan  langsung  diserap oleh  hifa  jamur  sebagai  saprofit.  Oleh karena  itu  dibutuhkan  modifikasi  media dengan penambahan glukosa pada bekatul agar  untuk  mengoptimalkan  pertumbuhan jamur.  Pengayaan  media  tersebut  akan memberikan  peluang  bagi  jamur  yang kurang  tumbuh  subur  pada  media  SDA akan  tumbuh  lebih  baik.  Penambahan glukosa  dalam  medium  SDB  ( Sabouraud Dextrose  Broth )  dapat  mempengaruhi pertumbuhan C.  albicans. Pada C.
albicans isolat klinik penambahan glukosa  5%  dan  10%  selama  7  hari menyebabkan  peningkatan  pertumbuhan yang  signifikan  (Leepel et  al ,  2009). Sehingga  penambahan  glukosa  sebagai sumber  karbon  pada  media  bekatul  agar dapat  memacu  pertumbuhan Aspergillus sp lebih cepat dan optimal.
Berdasarkan  uraian  di  atas  peneliti tertarik  untuk  mengetahui  pertumbuhan Aspergillus  sp pada  media  bekatul  agar baik pada bekatul agar yang ditambahkan glukosa maupun tidak.
METODE PENELITIAN Alat dan Bahan Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah autoklaf ,   incubator, hotplate , timbangan digital, erlenmeyer ,  gelas  ukur,  beker  gelas, batang pengaduk, sendok tanduk,
nall/ose ,  corong,  cawan  petri,  wadah sampel,  kertas  saring,    ayakan,  dan  alat tulis.
Bahan  yang  digunakan  adalah sampel  bekatul,  kultur  jamur Aspergillus sp ,  agar,  gula,  kloramfenikol,  dan aquadest.
Prosedur Kerja

## Persiapan sampel
Sampel  bekatul  terlebih  dahulu dipisahkan  dari  kandungan  beras-beras halus  dan  kotoran  dengan  menggunakan ayakan,

## Pembuatan media bekatul agar
Media  bekatul  dibuat  berdasarkan prosedur  dari  Aini  dan  Rahayu  (2015) yang  telah  dimodifikasi.  Timbang  sampel bekatul  dan  agar  dengan  menggunakan timbangan  digital  dan  dimasukkan  ke dalam  gelas  beker  1000  ml.  Ke  dalam
gelas  beker  ditambahkan  1000  ml aquades. Media dipanaskan dengan menggunakan hot  plate sambil  diaduk sampai  larut  dengan  sempurna.  Bekatul agar  suhu  +  50 0 C  yang  telah  disterilkan dituang  ke  cawan  petri  15-20  ml. Diamkan
Pembuatan  media  bekatul  agar  + glukosa
Bekatul,  gula  dan  agar  ditimbang dengan  menggunakan  timbangan  digital dan  dimasukkan  ke  dalam  gelas  beker 1000  ml. Ke dalam gelas beker ditambahkan  1000  ml    aquades.  Media dipanaskan  dengan  menggunakan hot plate sambil  diaduk  sampai  larut  dengan sempurna.  Bekatul  agar  suhu  +  50 0 C yang  telah  disterilkan  dituang  ke  cawan petri  15-20  ml.  Diamkan  media  sampai memadat.

## Pembuatan media SDA
Media  SDA  dimasukkan  ke  dalam erlenmeyer ,  lalu  ditambahkan  aquades steril.  Media  dihomogenkan  dengan bantuan  pemanasan  dan  pengadukan. Setelah  proses  sterilisasi,  media    suhu    ± 50 0 C  dituangkan  ke  cawan  petri.  Media didiamkan sampai memadat.
Inokulasi jamur Aspergillus sp Metode  penanaman  jamur  pada media  yang  digunakan  adalah single  dot . Aspergillus    sp .  diinokulasikan  pada media  bekatul  agar  dan  media  SDA menggunakan  ose  jarum  dan  ditusukkan dibagian tengah permukaan agar. Pengamatan pertumbuhan jamur dilakukan dengan mengamati pada hari/jam  keberapa  jamur  tersebut  tumbuh dan  mengukur  diameter  koloninyanya. Perlakuan terhadap media bekatul dilakukan  dengan  tiga  kali  ulangan dengan media SDA sebagai kontrol. Pengamatan mikroskopik
jamur
Aspergillus sp Untuk  memastikan Aspergillus  sp yang  tumbuh  maka  perlu  dilakukan  uji konfirmasi dengan pengamatan mikroskoppada  perbesaran  10x40  untuk melihat  hifa  maupun  spora  dari  jamur
Aspergillus sp .

## Analisis data
Adapun  tekhnik  analisa  data  pada penelitian  ini  menggunakan  analisis deskriptif yaitu mendeskripsikan pertumbuhan  koloni Aspergillus  sp. dari pengukuran  diameter  koloni.  Diameter koloni Aspergillus sp. pada media bekatul agar,  media  bekatul  agar  penambahan glukosa  dan  media  SDA  dibandingkan dalam bentuk tabel dan grafik.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Untuk  tumbuh  dan  berkembang, jamur  membutuhkan  nutrien  dan  faktor- faktor  lingkungan  yang  sesuai.  Nutrien berupa  unsur-unsur  atau  senyawa  kimia dari  lingkungan  digunakan  sel  sebagai konstituen  kimia  penyusun  sel.  Menurut Basu,  et.al.  (2015),  jamur  akan  tumbuh optimal  pada  media  dengan  sumber karbohidrat  dan  nitrogen  yang  tinggi. Media bekatul agar menggunakan bekatul sebagai  sumber  nutrisi  bagi  jamur  karena mengandung  karbohidrat  (84,36%)  dan protein  (8,77%).  Tercukupinya  sumber karbon  dan  protein  bagi Aspergillus  sp. dalam  media  bekatul  agar  memicu pertumbuhan Aspergillus sp tersebut. Pertumbuhan Aspergillus  sp pada bekatul  agar  dinyatakan  dalam  bentuk diameter  koloni Aspergillus  sp. yang diukur  setiap  24  jam  selama  5  hari.  Hasil pengukuran  disajikan  dalam  tabel  1 berikut.
Tabel 1. Diameter koloni Aspergillus sp pada media bekatul dan media SDA. Inkubasi Selama (Jam) Rata-rata Diameter Koloni pada Media (Dalam mm) Bekatul Agar Bekatul Agar + Glukosa SDA 24 10.33 10.5 11 48 33.5 33.7 35 72 60.5 61 57 96 77.5 77.8 69 120 90 90 80 Berikut  adalah  grafik  pertumbuhan jamur Aspergillus sp pada  media bekatul dan SDA.
Gambar 1. Grafik pertumbuhan jamur Aspergillus sp pada media bekatul agar
dan SDA Dari grafik di atas terlihat pertumbuhan  jamur Aspergillus  sp yang diinokulasi  pada  media  bekatul  agar  dan diinkubasi  pada  suhu  kamar  (25 0 C) dalam  waktu  24  jam  memperlihatkan adanya  pertumbuhan  ditandai  dengan terbentuknya koloni jamur.
Diagram  di  atas  menunjukkan  fase pertumbuhan Aspergillus  sp. pada  tiga media  berbeda.    Jam  ke-0  sejak  inokulasi dilakukan  sampai  terbentuk  benang- benang halus pada permukaan media pada jam  ke-24  ditemukan  rata-rata  diameter koloni  10,33  mm  pada  media  bekatul, 10,5 mm pada media bekatul agar dengan penambahan  glukosa  dan  pada  media SDA  11  mm.  Hal  ini  menandakan  terjadi pertumbuhan Aspergillus sp. Menurt Gandjar (20016), salah satu parameter pertumbuhan adalah pertambahan  volume  sel,  karena  adanya pertambahan  protoplasma  dan  senyawa asam  nukleat.  Pertambahan  volume  sel tersebut  adalah  irreversibel,  artinya  tidak dapat  kembali  ke  volume  semula.  Pada umumnya suatu koloni digunakan sebagai kriteria  terjadinya  pertumbuhan,  karena massa  sel  tersebut  berasal  dari  satu  sel. Jadi  sesuatu  yang  semula  tidak  terlihat, yaitu  suatu  spora  atau  konidia  jamur, menjadi  miselium  atau  koloni  yang dapat
dilihat.  Jika  suatu  konidia  atau  spora jamur  ditanam  di  atas  agar  dalam  cawan petri, maka setelah satu atau dua hari akan terlihat  struktur  berupa  benang-benang pada permukaan agar, pemeriksaan mikroskopis  membuktikan  bahwa  yang tumbuh adalah koloni Apergillus sp . Pertumbuhan Aspergillus  sp. pada jam  ke-0  sampai  jam  ke-24  merupakan fase lag (fase awal) yaitu fase penyesuaian sel-sel jamur dengan
lingkungannya.  Pada  fase  ini  tidak  ada peningkatan jumlah sel, melainkan peningkatan ukuran dan besar sel.
Pertumbuhan jamur pada jam ke-48 menunjukkan  pertumbuhan  terbaik  pada media  SDA  sebagai  kontrol  dengan diameter  35  mm,  sedangkan  pada  media bekatul  agar  dan  media  bekatul  agar penambahan  glukosa  memiliki  diameter yang  hampir  sama.  Hal  ini  berbeda  pada jam  ke-72, Aspergillus  sp. mengalami pertumbuhan  terbaik  pada  media  bekatul agar  penambahan  glukosa,  yaitu  61  mm. Pada jam ke-24 sampai jam ke-72 terlihat pertumbuhan Aspergillus  sp. mengalami peningkatan  secara  eksponensial  pada kurva pertumbuhan pada grafik. Pertumbuhan  berlangsung  cepat  dan merupakan  periode  yang  di  dalamnya biasanya  teramati  ciri  khas  sel-sel  yang
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 24 48 72 96 120 Diameter Pertumbuhan Aspergillus sp. Pada Media Bekatul Agar
Diameter Pertumbuhan
Aspergillus sp. Pada
Media Bekatul Agar + Glukosa Diameter Pertumbuhan Aspergillus sp. Pada Media SDA Waktu Inkubasi (Jam) D ia ma te r P er tu mbuha n K ol oni
aktif. Pada fase ini diameter pertumbuhan Aspergillus sp. pada media tidak Pada  jam  ke-96  sampai  jam  ke-120 pertumbuhan Aspergillus  sp. memasuki fase stationeri. Hal ini terlihat pada kurva pertumbuhan mengalami penurunan. Grafik  tidak  mengalami  pertambahan secara
eksponensial
seperti pada pertumbuhan  jam  ke-24  sampai  jam  ke- 72.  Fase  ini  ditandai  dengan  kecepatan tumbuh  sama  dengan kecepatan  kematian sel,  sehingga  jumlah  sel  konstan  (tetap). Hal ini disebabkan berkurangnya substrat, kepadatan  populasi  sel  sangat  tinggi, tekanan parsial oksigen yang rendah serta adanya  akumulasi  produk  metabolisme yang  toksik.  Fase  transisi  antara  fase stasioner dengan fase eksponensial merupakan  periode  pertumbuhan  tak seimbang  karena  laju  sintesis  berbagai komponen  seluler  tidak  sama.  Akibatnya sel-sel  pada  fase  ini  memiliki  komposisi kimiawi  yang  berbeda  dengan  fase eksponensial (Ali, 2005).
Komponen media merupakan kriteria  penting  untuk  kultur  dan  studi jamur.  Media  menjadi  parameter  penting fisiologis jamur yang menyebabkan sporulasi  maksimum  (Gupta,  et.  al.,
2012).  Diameter  koloni,  karakteristik (tekstur,  permukaan,  dan  pewarnaan,
zonasi)  dan  sporulasi  jamur  uji  sangat dipengaruhi
oleh jenis medium pertumbuhan  yang  digunakan  (Sharma, 2010).  Pada  permukaan  koloni  tampak seperti  tepung  atau  granula  menandakan spora  diproduksi  secara  berlimpah.  Pada jam  ke-120,  diameter  koloni  memenuhi memenuhi  permukaan  media,  baik  media bekatul  agar  ataupun  media  bekatul  agar dengan  penambahan  glukosa.  Berbeda dengan  media  SDA,  diameter  koloni masih  dapat  di  ukur  yaitu  80  mm. Perbedaan pertumbuhan jamur Aspergillus  sp pada  media  bekatul  dan media  SDA  sangat  nampak,  permukaan koloni  pada  media  SDA  seperti  benang- benang  halus  berwarna  hitam  namun spora  yang  dihasilkan  belum  nampak. Sedangkan  gambaran  koloni Aspergillus sp pada  media  bekatul  agar  dan  media bekatul agar dengan penambahan glukosa warna  hitam  pekat  dan  ada  pula  yang
berwarna hijau tua. Spora yang dihasilkan pada media bekatul terlihat subur
membentuk gundukan. Hal ini disebabkan karena media bekatul memiliki komposisi lengkap  dengan  kandungan  gizi  yang cukup tinggi.

## Gambar 2. Pertumbuhan
Aspergillus sp pada media bekatul agar
Pada media bekatul agar dan media bekatul  agar  penambahan  glukosa  koloni Aspergillus  sp memiliki  gambaran  koloni yang sama. Penambahan glukosa
sederhana  akan  menopang  pertumbuhan jamur.  Hal  ini  disebabkan  karena  ukuran molekul  glukosa  dapat  diserap  secara langsung  oleh  hifa Aspergillus  sp. akan tetapi perbedaan diameter ini menunjukkan perbedaan yang tidak terlalu besar.
Kandungan  gizi  bekatul  tersusun dari  beberapa  zat,  seperti  air,  protein, lemak,  vitamin,  mineral,  serat  dan karbohidrat.  Berdasarkan  analisis  yang dilakukan  oleh  Sucofindo  kandungan- kandungan  tersebut  dapat  berupa  air 2,49%,  protein  8,77%,  lemak  1,09%,  abu 1,60%,  serat  1,69%,  karbohidrat  84,36% dan  kalori  382,32  kal  (Nursalim  dan Razali,  2007).  Kandungan  nutrisi  pada media  bekatul  ini  sangat  kompleks  dan kaya  gizi  sehingga  dapat  mempengaruhi pertumbuhan  jamur Aspergillus  sp ini baik itu warna koloni, ukuran sel, maupun kecepatan pertumbuhan.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa:
1. Aspergillus sp. mengalami
pertumbuhan  optimal  pada  media bekatul  agar  baik  pada  media  yang ditambahkan  glukosa  maupun  tanpa penambahan.
2. Bekatul  dapat  dimanfaatkan  sebagai media  pertumbuhan Aspergillus  sp

## SARAN
Saran dari penelitian ini yaitu lebih memperhatikan  kualitas  bekatul  yang digunakan  serta  tempat  penyimpanannya. Selain itu untuk peneliti selanjutnya, perlu dilakukan penelitian  tentang  ukuran bekatul  sebagai  media  pertumbuhan jamur. DAFTAR PUSTAKA Aini,  N.,  dan  Rahayu,  T.  2015. Media Alternatif untuk Pertumbuhan Jamur Menggunakan Sumber Karbohidrat yang Berbeda (Skripsi). Surakarta:  Universitas Sebelas Maret. Ali,  A.  2005. Mikrobiologi  Dasar  Jilid  I. Makassar: Badan Penerbit Universitas Negeri Makassar. Basu,  et.al.  2015. Evolution  of  Bacterial and Fungal Growth Media. Bioinformation 11(4): 182-184. Brooks,  G.F. et  al .  2005. Mikrobiologi Kedokteran  Jawets,  Melnick  & Adelberg’s  Ed.  25. Alih  Bahasa: Aryandhito  Widhi  Nugroho,  dkk.
Jakarta:  Penerbit  Buku  Kedokteran EGC. Dewi, C., Purwoko, T., dan Pangastuti, A. 2005. Produksi  Gula  Reduksi  oleh Rhizopus  oryzae  dari  Substrat Bekatul,  (online). Bioteknologi 2 (1): 21-26.
Gandjar,  I. et  al .  2006. Mikologi  Dasar dan  Terapan. Jakarta:  Yayasan obor Indonesia.
Goldman,  G.,  H.  dan  Osmani.,  S.,  A.
2008. The  Aspergilli.  Genomics, Medical  Aspects,  Biotechnology, and  Research  Methods .  United
Stated  of  America:  CRP  Press Taylor and Francis Group. Gupta,  M.,  Manisha,  K.,  dan  Grover,  R. 2012. Effect of various media types on the rate of growth of Aspergillus niger . Indian Journal of Fundamental  and  Applied  Life Sciences  Vol.  2  (2)  April-June, pp.141-144.
Hidayat,  N. et  al .  2006. Mikrobiologi Industri . Yogyakarta: Andi Offset.
Kowesh, C.K., Darko, M.A., dan
Adubofour,  K.  2012. Cassava starch-agar  blend  as  alternative
gelling  agent  for  mycological culture media . Bots. J. Agric. Appl. Sci. Vol. 8(1). Leepel, L.A., et.al. 2009. Efek Penambahan Glukosa pada Saburoud Dextrose Broth Terhadap Pertumbuhan Candida albicans(Uji in  Vitro) .  Indonesian  Journal  of Dentistry 2009; 16 (1):58- 63. Nursalim,  Y.,  dan  Razali,  Z.Y.  2007. Bekatul Makanan yang Menyehatkan. Agro  Jakarta:  Media Pustaka.
Ravimannan,  N.,  et.al.  2104. Alternative culture  media  for  fungal  growth using  different  formulation  of protein sources . Annals of Biological Research, 2014, 5
(1):36-39.
Sharma,  D.,  dan  Pandey,  R.  R.  2010.
Influence  of  culture  media  on growth,  colony  character  and sporulation  of  fungi  isolated  from decaying  vegetable  wastes .  Journal of  Yeast  and  Fungal  Research  Vol.
1(8), pp. 157 – 164. Uthayasooriyan, M., et.al. 2016. Formulation  of  Alternative  Culture Media  for  Bacterial  and  Fungal Growth .  Der  Pharmacia  Lettre  8 (1):431-436.