## PERBEDAAN EKSPRESI PROTEIN CYCLIN D1 ANTARA ADENOMA DAN ADENOKARSINOMA KOLOREKTAL, SERTA KORELASINYA DENGAN GRADING DAN STADIUM TUMOR
Aris Rosidah*  , Eviana Norahmawati*, Kenty Wantri Anita*, Harun Al Rasyid**

## Abstrak
Sebagian  besar  karsinoma  kolorektal  adalah  adenokarsinoma,  dan  lebih  dari  95%  karsinoma kolorektal  diawali  oleh  lesi  prekursor  yaitu  adenoma.  Risiko  suatu  adenoma  berubah  menjadi  suatu karsinoma  akan  lebih  tinggi  pada  adenoma  dengan  ukuran  lebih  dari  1  cm,  tipe  villous,  dan  disertai displasia high grade . Telah diketahui bahwa grading dan stadium merupakan faktor prognostik penting baik pada adenoma maupun adenokarsinoma. Perkembangan adenoma menjadi adenokarsinoma melibatkan peran  banyak  gen  dan  protein,  salah  satunya  cyclin  D1  yang  berperan  meningkatkan  proliferasi  sel, angiogenesis dan invasi sel. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui perbedaan ekspresi cyclin D1 antara adenoma  dan  adenokarsinoma  kolorektal,  serta  hubungannya  dengan grading dan  stadium  tumor.  Lalu, ditentukan  30  sampel  untuk  masing-masing  adenoma  dan  adenokarsinoma  yang  diambil  dari  Instalasi Patologi  Anatomi  RS.  dr.  Saiful  Anwar  Malang.  Keseluruhan  sampel  dilakukan  pulasan  imunohistokimia dengan  antibodi  cyclin  D1  kemudian  dihitung  persentase  ekspresinya,  dan  dianalisis  hubungan  antara cyclin D1 tersebut dengan grading pada adenoma dan grading serta stadium pada adenokarsinoma. Hasil penelitian menunjukkan terdapat perbedaan ekspresi cyclin D1 yang bermakna  antara kelompok adenoma dan adenokarsinoma dengan p < 0,01. Tidak terdapat hubungan yang bermakna antara ekspresi cyclin D1 dengan grading adenoma serta grading dan stadium adenokarsinoma (p > 0,05). Kesimpulan penelitian ini adalah  ekspresi  cyclin  D1  dapat  digunakan  untuk  membedakan  antara  adenoma  dan  adenokarsinoma, tetapi ekspresi tersebut tidak berhubungan dengan grading dan stadium tumor.
Kata kunci: adenokarsinoma, cyclin D1, grading , kolorektal, stadium.
DIFFERENCES OF CYCLIN D1 EXPRESSION BETWEEN COLORECTAL ADENOMA AND ADENOCARCINOMA, AND ITS CORRELATION WITH GRADING AND STAGING OF TUMOR

## Abstract
Most colorectal carcinomas are adenocarcinomas, and more than 95% of colorectal carcinomas are preceded  by  precursor  lesions  as  adenomas.  The  risk  of  an  adenoma  turning  into  a  carcinoma  will  be higher in adenomas with a size of more than 1 cm, villous type, and high grade dysplasia. It is known that grading  and  staging  are  important  prognostic  factors  in  both  adenomas  and  adenocarcinomas.  The development  of  adenomas  into  adenocarcinomas  involves  the  role  of  many  genes  and  proteins,  one  of which is cyclin D1 which plays a role in cell proliferation, angiogenesis and cell invasion. This study aims to determine differences in cyclin D1 expression between colorectal adenomas and adenocarcinomas, as well as  its  correlation  between  grading  and  stage.  Thirty  samples  were  determined  for  each  adenoma  and adenocarcinoma  that  obtained  from  the  Anatomical  Pathology  Installation  of  dr.  Saiful  Anwar  Hospital Malang. All samples were examined immunohistochemically with cyclin D1 antibodies, then calculated the expression, and also analyzed the correlation between cyclin D1 with grading on adenoma and grading and stage on adenocarcinoma. The results showed that there was a significant difference in the expression of cyclin  D1  between  the  adenoma  and  adenocarcinoma  groups  with  p  <  0.01.  There  was  no  significant correlation  between  cyclin  D1  expression  with  grading  of  adenoma  and  grading  and  stage  of adenocarcinoma (p > 0.05). The conclusion is cyclin D1  expression can be used to distinguish between adenomas and adenocarcinomas, but this expression not associated with grading and stadium of tumor.
Keywords: adenocarcinoma, colorectal, cyclin D1, grading, staging.
* Departemen Patologi Anatomik, Fakultas Kedokteran, Universitas Brawijaya-RSUD dr. Saiful Anwar Malang
** Departemen Ilmu Kesehatan Masyarakat dan Kedokteran Pencegahan, Fakultas Kedokteran, Universitas Brawijaya
 E-mail: rosie_21dr@yahoo.co.id

## Pendahuluan
Kanker  kolorektal  merupakan  kega- nasan kedua terbanyak pada wanita (614.000 kasus,  9,2%  dari  seluruh  kanker)  dan  kega- nasan  ketiga  pada  laki-laki    (746.000  kasus, 10% dari total keganasan) di seluruh dunia. 1,2
Kanker  kolorektal  diawali  dari  lesi  prekursor yang pada umumnya berjalan lambat sampai menjadi  suatu  keganasan.  Lesi  prekursor tersebut  meliputi  adenoma  konvensional ( adenomatous  polyp ), serrated  polyp ,  lesi yang  terdapat  pada  beberapa  sindrom poliposis  yaitu Familial  Adematous  Polyposis (FAP), Lynch  syndrome , Peutz-Jeghers syndrome dan Juvenile Polyposis Syndrome, serta lesi  pada Irritable  Bowel  Disease (IBD) yang disertai displasia. 3
Perjalanan dari epitel kolon normal men- jadi lesi prekursor dan akhirnya menjadi suatu kanker  melibatkan  dua  jalur  utama.  Pertama jalur  klasik,  melibatkan  perubahan  epitel normal  menjadi  suatu  adenoma  dan  akan menjadi  karsinoma.  Kedua,  jalur  alternatif, yang  melibatkan  perubahan  epitel  normal menjadi serrated  polyp sebelum  menjadi suatu  karsinoma.  Meskipun  hanya  sekitar 10%  dari  adenoma  kolorektal,  beberapa penelitian  me-nyebutkan  bahwa  80%  dari kasus  kanker  kolorektal  berawal  dari adenoma,  sedangkan  sisanya  20%  berasal dari Sessile  Serrated  Polyp (SSP).  Risiko adenoma  menjadi  suatu  karsinoma  lebih tinggi  pada  adenoma  dengan  ukuran  >1 cm, gambaran villous dan adenoma yang disertai displasia berat. 4,5,6,7
Salah satu protein yang berperan dalam perkembangan  epitel  kolon  normal  menjadi suatu  lesi  adenoma  dan  akhirnya  menjadi suatu karsinoma adalah cyclin D1 . Cyclin D1 mempunyai  banyak  fungsi  sebagai  onkogen, yaitu mengatur beberapa proses transformasi sel  menjadi  ganas  meliputi  pertumbuhan  ab- normal,  angiogenesis  dan  resistensi  terha- dap apoptosis.
Cyclin D1 mempunyai peran penting da-
lam  regulasi  mitosis,  khususnya  pada  pro- gresi tahap G1 menuju tahap S dalam siklus sel,  serta  mempunyai  efek  meningkatkan Vascular  Endothelial  Growth  Factor (VEGF) dan menghambat TSP-1 ( Thrombospondin-1 ) yang  menyebabkan  peningkatan  angio- genesis,  dimana  kedua  hal  tersebut  me- nyebabkan  terjadinya  pertumbuhan  sel  me- ningkat.  Selain  itu,  cyclin  D1  juga  dihu- bungkan  dengan  peningkatan Transforming Growth  Factor  Beta (TGF β) ser-ta penghambatan  terhadap  sinyal  Rho/ROCK dan TSP-1, yang akan menyebabkan proses invasi dan metastasis dari sel ganas. 8,9,10
Lebih  dari  sepertiga  kanker  kolorektal menunjukkan  overekspresi  dari  cyclin  D1, meskipun  peran  cyclin  D1  pada  siklus  sel sudah  jelas,  namun  terdapat  kontroversi tentang  hubungan  antara  ekspresi  cyclin  D1 dengan  prognosis  kanker  kolorektal.  Bebe- rapa  studi  menunjukkan  bahwa  ekspresi cyclin  D1  berhubungan  dengan  prognosis buruk,  sedangkan  studi  lain  menunjukkan ekspresi  protein  tersebut  berhubungan dengan  prognosis  baik,  dan  beberapa  pene- litian lain mengemukakan tidak ada hubungan antara  ekspresi  cyclin  D1  dengan  prognosis pasien kanker kolorektal. 11,12
Penentuan prognosis dari adenoma dan adenokarsinoma di antaranya adalah dengan melihat grading dan  stadium  tumor. Grading ditentukan  dari  derajat  diferensiasi  sel, sedangkan  stadium  berdasarkan  klasifikasi Dukes  yang  dilihat  dari  kedalaman  tumor menembus dinding usus, ada tidaknya invasi pada kelenjar getah bening, dan ada tidaknya metastasis jauh.
Berdasarkan  berbagai  teori  tersebut, maka  penelitian  ini  bertujuan  untuk  menge- tahui  perbedaan  ekspresi  cyclin  D1  antara adenoma  dan  adenokarsinoma  kolorektal, sehingga ekspresinya dapat digunakan untuk membedakan  keduanya.  Kepentingan  klinis yang diharapkan adalah apabila ahli patologi mendapatkan  sediaan  biopsi  dengan  kecuri- gaan klinis suatu adenoma, namun secara
histopatologis terdapat hasil yang meragukan suatu  lesi  yag  jinak,  maka  pemeriksaan ekspresi  cyclin  D1  dapat  digunakan  untuk membantu  diagnosis  agar  menjadi  kewaspa- daan  bagi  klinisi  apabila  kemungkinan  lesi mengarah  ke  suatu  keganasan.  Selain  itu, penelitian  tentang  cyclin  D1  pada  kasus adenoma  dan  adenokarsinoma  kolorektal  di Indonesia  juga  belum  pernah  dipublikasikan. Penelitian  ini  juga  bertujuan  mengetahui hubungan  protein  cyclin  D1  dengan  profil klinikopatologi  keduanya,  dalam  hal  ini grading dan  stadium  tumor.  Penentuan g rading pada  adenoma  penting  karena  ter- masuk  salah  satu  indikator  suatu  adenoma mengalami  progresifitas  menjadi  karsinoma. Sedangkan  stadium  pada  adenokarsinoma merupakan  salah  satu  bahan  pertimbangan penentuan terapi oleh klinisi.

## Bahan dan Metode
Penelitian ini bersifat observasional ana- litik  dengan  desain cross-sectional .  Sampel dan  kegiatan penelitian  diperoleh  dan  dilaku- kan  di  Instalasi  Patologi  Anatomi  RSUD  dr Saiful Anwar Malang, dari blok parafin pasien yang  didiagnosis  adenoma  dan  adenokarsi- noma kolorektal antara tahun 2016-2019. Pe- nelitian ini telah mendapatkan persetujuan laik etik dari Komisi Etik Penelitian Kesehatan RS. dr. Saiful Anwar Malang dengan nomer surat 400/262/K.3/302/2019.
Berdasarkan kriteria inklusi dan eksklusi serta penghitungan besar sampel, didapatkan masing-masing  30  sampel  setiap  kelompok, sehingga  sampel  total  adalah  60.  Sediaan dengan  pewarnaan hematoksilin-eosin (HE) yang  sudah  ada  sebelumnya  dikumpulkan dan dievaluasi ulang untuk penentuan grading berdasarkan  kriteria  WHO  dan  sta-diumnya berdasarkan  klasifikasi  Dukes.  Dari  sediaan blok  parafin  tersebut  dilakukan  pulasan imunohistokimia dengan antibodi rabbit mono- clonal  anti-human  cyclin  D1  antibody (Bio- genex;  Cat:  NU815-UC),  dengan  pengen-
ceran 1:30.
Pulasan  imunohistokimia  menggunakan metode  streptavidin-biotin  kompleks,  dengan kontrol  menggunakan  sediaan  karsinoma payudara. Kemudian hasil pulasan diamati di bawah mikroskop cahaya binokuler Olymphus BX43  dan  dilakukan  penghitungan  persen- tase  protein  cyclin  D1  dengan  bantuan  pro- gram hsel .  Penghitungan  sel  yang  terpulas coklat  pada  inti  sel  kolumnar  neoplastik  di kelenjar, pada 1000 sel dari 5 lapang pandang besar  (400x)  secara  acak  (masing-masing lapang pandang besar diambil 200 sel). 13 Ha- sil  penghitungan  dinyatakan  dalam  persen- tase. Slide preparat dibaca oleh 1 ahli patologi dan  1  peneliti  tanpa  mengetahui  data  klinis maupun histopatologisnya ( double blind ). Analisis  data  untuk  melihat  perbedaan ekspresi  antar  kelompok  menggunakan inde- pendent  t-test untuk  data  yang  terdistribusi normal  dan  homogen.  Sedangkan  untuk  me- lihat hubungan cyclin D1 dengan grading dan stadium  tumor  digunakan  uji korelasi  dengan Spearman.  Analisis  statistik  menggunakan perangkat  lunak statistical  package  for  social sciences (SPSS) 20.0.

## Hasil

## Karakteristik Sampel
Sampel  total  pasien  yang  didapatkan berjumlah 60, dengan rincian kasus adenoma 30  dan  adenokarsinoma  30,  yang  telah  me- menuhi  kriteria  inklusi.  Karakteristik  kliniko- patologi  sampel  dapat  dilihat  pada  Tabel  1. Dari  30  sampel  adenoma  didapatkan  se- banyak 16 (53,3%) pria dan 14 (46,7%) wani- ta, dengan  rentang  usia  mulai  2-82  tahun, dengan  rerata  54,67+19,11  tahun,  dan  me- dian  usia  55  tahun.  Lokasi  tersering  didapat- kan  pada  daerah  rektosigmoid  sebanyak  17 pasien  (56,7%).  Gambaran  histopatologi  ter- sering adalah tipe tubular sebanyak 16 pasien (53,3%),  sedangkan  ber-dasarkan grading , sebanyak  23  pasien  (76,7%) low  grade ,  7 pasien (23,3%) high grade .
Dari  30  sampel  kasus  adenokarsinoma, didapatkan  sebanyak  12  pasien  pria  (40%) dan  18  wanita  (60%),  dengan  rentang  usia mulai  31  sampai  dengan  78  tahun  dengan rerata  55,77+12,07  tahun,  dan  median  usia 55,5 tahun. Lokasi tersering didapatkan pada daerah colon  ascenden sebanyak  14  pasien
(46,7%),  gambaran  histopatologi  terbanyak adalah well  differentiated sebesar  21  pasien
(70%),  sedangkan grading terbanyak  adalah low  grade sebanyak  27  pasien  (90%)  dan high  grade 3  pasien  (10%).  Stadium  ber- dasarkan  klasifikasi  Dukes  terbanyak  adalah Dukes  B2  sebesar  18  pasien  (60%),  Dukes C2  dan  D  masing-masing  4  pasien  (13,3%), Dukes  B1  dan  C1  masing-masing  2  pasien (6,7%).
Tabel 1. Karakteristik klinikopatologi sampel penelitian
Parameter Adenoma Adenokarsinoma Frekuensi (%) Frekuensi (%) Jenis kelamin Laki-laki 16 (53.3) 12 (40) Perempuan 14 (46.7) 18 (60) Usia <50 tahun 11 (36.7) 11 (36.7) >51 tahun 19 (63.3) 19 (63.3) Lokasi Colon ascenden 7 (23.3) 14 (46.7) Colon transversum 1 (3.3) 3 (10) Colon Descenden 5 (16.7) 4 (13.3) Rectosigmoid 17 (56.7) 9 (30) Tipe Histopatologi Tubular 16 (53.3) - Tubulovillous 5 (16.7) - Villous 9 (30) - Derajat diferensiasi Well differentiated - 21 (70) Moderately differentiated - 6 (20) Poorly differentiated - 3 (10) Grading Low grading 23 (76.7) 27 (90) High grading 7 (23.3) 3 (10) Stadium Dukes B1 - 2 (6.7) Dukes B2 - 18 (60) Dukes C1 - 2 (6.7) Dukes C2 - 4 (13.3) Dukes D - 4 (13.3)
Keterangan:  Angka  yang  dicetak  tebal  menunjukkan  jumlah  terbanyak  dari  masing-masing  kelompok sesuai parameter.
Perbedaan Ekspresi Protein Cyclin D1 antara Adenoma dan Adenokarsinoma Kolorektal
Rerata  ekspresi  protein  cyclin  D1  pada adenoma  adalah  sebesar  31,38+12,12%,
dengan  nilai range antara  11,3-64,3%.  Pada kasus  adenokarsinoma  kolorektal  didapatkan ekspresi  protein  cyclin  D1  sebesar 46,70+12,92%,  dengan  rentang  antara  16,2- 70,8%.  Data  yang  didapatkan  terdistribusi normal dan homogen, sehingga untuk melihat perbedaan kedua kelompok dianalisis dengan uji  parametrik,  yaitu independent  t-test .  Hasil menunjukkan  nilai  p  <  0,01,  sehingga  dapat diartikan  bahwa  terdapat perbedaan ekspresi yang  signifikan  antara  kelompok  adenoma dan adenokarsinoma (Tabel 2).
Tabel 2. Hasil analisis statistik perbedaan ekspresi protein cyclin D1 antara kelompok adenoma dan adenokarsinoma kolorektal Kelompok Sampel n Ekspresi Cyclin D1 (%) Mean+SD Independent T-Test Adenoma 30 31,38+12,12 46,70+12,92 p < 0,01 Adenokarsinoma 30
Gambar 1. Pulasan hematoksilin-eosin (HE) dan imunohistokimia dengan antibodi cyclin D1 pada kelompok adenoma low grade (A,B) dan high grade (C,D) (400x).
Keterangan:  A.  Pulasan  HE  dari  adenoma low  grade ;  B.  Ekspresi  cyclin  D1  pada  adenoma low  grade , terpulas coklat pada inti sel tumor (tanda panah merah); C. Pulasan HE dari adenoma high grade ;  D.  Ekspresi  cyclin  D1  pada  adenoma high  grade ,  terpulas  coklat  pada  inti  sel  tumor (tanda panah merah).
Gambar 2. Pulasan hematoksilin-eosin (HE) dan imunohistokimia dengan antibodi cyclin D1 pada kelompok adenokarsinoma low grade (A,B) dan high grade (C,D) (400x).
Keterangan:  A.  Pulasan  HE  dari  adenokarsinoma low  grade ;  B.  Ekspresi  cyclin  D1  pada adenokarsinomama low grade , terpulas coklat pada inti sel tumor (tanda panah merah); C. Pulasan  HE dari adenokarsinoma high grade ; D. Ekspresi cyclin D1 pada adenokarsinoma high grade , terpulas coklat pada inti sel tumor (tanda panah merah).

## Hubungan antara Ekspresi Protein Cyclin D1 dengan Grading Adenoma
Hubungan antara ekspresi protein cyclin D1 dengan grading adenoma ( low grade dan high  grade) dianalisis  dengan  uji  korelasi Spearman (karena  merupakan  data  ordinal). Hasil analisis menunjukkan angka signifikansi sebesar  0,502  (p  >  0,05),  yang  berarti  tidak terdapat  hubungan  yang  signifikan  antara ekspresi cyclin  D1  dengan grading adenoma kolorektal.
Hubungan antara Ekspresi Protein Cyclin D1 d e n g a n   G r a d i n g   d a n   S t a d i u m
Adenokarsinoma
Hubungan antara ekspresi protein cyclin
D1 dengan grading adenokarsinoma dianalisis dengan uji korelasi Spearman . Hasil analisis  menunjukkan  angka  signifikansi
sebesar  0,661  (p  >  0,05)  yang  menunjukkan tidak  terdapat  hubungan  yang  signifikan antara  ekspresi  cyclin  D1  dengan grading adenokarsinoma ( low grade dan high grade ).
Demikian  halnya  korelasi  antara  ekspresi protein cyclin D1 dengan stadium adenokarsinoma  berdasarkan  klasifikasi
Dukes,  hasil  uji  menunjukkan  angka signifikansi  sebesar  0,905  (p  >  0,05).  Hasil tersebut menunjukkan tidak terdapat korelasi yang signifikan antara ekspresi protein cyclin D1  dengan  stadium  adenokarsinoma kolorektal berdasarkan klasifikasi Dukes.

## Pembahasan
Karakteristik  sampel  penelitian  yang dianalisis  berdasarkan  pengelompokan  jenis kelamin, pada kelompok adenoma sebanyak
53,3%  didapatkan  pada  laki-laki  dan  sedikit predominasi pria dibandingkan wanita dengan rasio 1,2 : 1. Data ini sesuai dengan literatur dan  hasil  penelitian  sebelumnya  yang menyatakan  bahwa  kasus  adenoma  sedikit lebih  sering  didapatkan  pada  pria. 14,15 Pene- litian lain  menyebutkan  adenoma  maupun adenokarsinoma  lebih  jarang  terjadi  pada wanita  karena  berhubungan  dengan  efek proteksi  hormon  seks  yang  dalam  hal  ini diperankan  oleh  kombinasi  estrogen  dan progesteron. 16
Kelompok  adenokarsinoma  lebih  di- dominasi wanita yaitu sebesar 60%, berbeda dengan  hasil  dari  beberapa  penelitian sebelumnya,  termasuk  penelitian  retrospektif yang  dilakukan  di  instalasi  yang  sama  oleh peneliti,  yang  menunjukkan  bahwa  tidak didapatkan  perbe-daan  jenis  kelamin  pada angka  kejadian  adenoma  maupun  adeno- karsinoma.  Hal  ini  bisa  disebabkan  karena perbedaan karakteristik  sampel yang dilibatkan. 17,18,19
Berdasarkan pengelompokan usia, baik kasus  adenoma  maupun  adenokarsinoma terbanyak  dijumpai  pada  usia    55  tahun,  hal ini  sesuai  dengan  beberapa  penelitian sebelumnya  yang  menyatakan  bahwa  kasus keduanya banyak terjadi pada usia di atas 50 tahun  dengan  puncak  51-60  tahun.  Pening- katan  insiden  pada  usia  tua  dapat  terjadi karena  akumulasi  mutasi  somatik  yang disebabkan  berkembangnya  neoplasma  dan juga  dipengaruhi  oleh  faktor  imunitas  seiring bertambahnya  usia.  Hasil  ini  juga  sesuai dengan  data  dari  WHO  yang  menyebutkan bahwa  insiden  karsinoma  kolorektal  me- ningkat  seiring  dengan  bertambahnya  usia dan  jarang  terjadi  pada  usia  di  bawah  40 tahun,  kecuali  pada  individu  dengan predisposisi  genetik  atau  suatu  kondisi predisposisi  seperti inflammatory  bowel disease yang kronis. 20,21,22,23
Lokasi  terbanyak  adenoma  adalah rektosigmoid,  hasil  ini  sesuai dengan banyak penelitian  sebelumnya  yang  menyatakan
bahwa  lokasi  tersering  dari  adenoma  adalah daerah  rektosignoid.  Sedangkan  hasil  untuk kelompok  adenokarsinoma  pada  penelitian terbanyak di daerah colon ascenden , hasil ini tidak  sesuai  dengan  penelitian  retrospektif oleh  peneliti  yang  dilakukan  sebelumnya  di instalasi  yang  sama,  yaitu  dari  300  kasus adenokarsinoma  pada  tahun  2016-2018 didapatkan  sebanyak  62%  adenokarsinoma terletak  di  daerah  rektosigmoid.  Hal  ini kemungkinan  disebabkan  oleh  perbedaan sampel  penelitian  yang  digunakan.  Sebagai- mana disebutkan di beberapa literatur bahwa rektum  dan  sigmoid  merupakan  lokasi tersering  (50-60%),  disusul  kemudian  daerah colon  ascenden (9%), caecum (8%), colon descenden (5%)  dan colon  transversum (4%). 4,18,24,25
Rerata  ekspresi  cyclin  D1  pada  ke- lompok adenoma adalah sebesar 31,18% dan kelompok  adenokarsinoma  sebesar  46,69%. Hasil analisis uji beda dengan independent t- test dari  kedua  kelompok  sampel  tersebut menunjukkan  angka  signifikansi  p  <  0,01, artinya  terdapat  perbedaan  ekspresi  yang signifikan di antara keduanya. Hasil penelitian ini  sesuai  dengan  penelitian  oleh  Albasri (2019), yang membandingkan hasil microarray antara  kelompok  mukosa  kolon normal, adenoma dan adenokarsinoma. Tidak didapatkan  overekspresi  cyclin  D1  pada mukosa  normal,  namun  meningkat  bertahap pada  kelompok  adenoma  dan  adeno- karsinoma. 25 Hal  ini  memperlihatkan  bahwa protein  cyclin  D1  berperan  dalam  karsino- genesis  pada  kanker  kolorektal.  Sebagai salah  satu  protein  yang  memegang  peranan penting  pada  progresi  fase  G1  ke  S  pada siklus  sel,  cyclin  D1  diketahui  meningkat ekspresinya  pada  bebe-rapa  tumor,  dan ditemukan  terjadi  pada  lebih  dari  sepertiga kasus  kanker  kolorektal.    Di  samping  telah banyak  penelitian  yang  sudah  membuktikan hal tersebut secara in situ dengan pengecatan imunohistokimia,    beberapa  studi  juga  telah meneliti ekspresi gen cyclin D1 atau mRNA
dengan metode Southern Blotting maupun RT -PCR . Bahnassy et al ., (2004) dalam Li et al .,
(2014)  menemukan  adanya  amplifikasi  gen cyclin  D1 pada  50  kasus  kanker  kolorektal yang  diteliti,  dan  menemukan  amplikasi  ter- sebut  berhubungan  secara  signifikan  dengan stadium lanjut dari kanker kolorektal. 26
Pada  penelitian  ini,  tidak  terdapat hubungan  yang  signifikan  antara  cyclin  D1 dengan grading pada  adenoma.  Hasil penelitian  ini  berbeda  dengan  penelitian  lain sebelumnya  yang  menunjukkan  terdapat hubungan  antara  ekspresi  cyclin  D1  dengan grading dari  adenoma. 15 Pada  beberapa literatur menjelaskan bahwa adenoma dengan gambaran high  grade merupakan  adenoma yang  berisiko  mengalami  transformasi  men- jadi  ganas,  namun  hal  ini  bukan    suatu kepastian  karena  pada  beberapa  kasus karsinoma berasal dari adenoma low grade . 27
Fakta ini mendukung hasil penelitian ini yaitu tidak  didapatkan  hubungan  yang  signifikan antara  cyclin  D1  dengan grading pada adenoma.
Grading dan  derajat  diferensiasi  mem- punyai  peran  sebagaimana  stadium  tumor yaitu  suatu  faktor  prognostik  dari  kanker kolorektal, sehingga tumor dengan gambaran high  grade atau poorly  differentiated sering dihubungkan dengan prognosis buruk. Pilihan terapi  dan  penentuan  prognosis  juga  sangat tergantung  pada  saat  stadium  pertama  kali pasien  terdeteksi.  Stadium  awal  penyakit sering  diterapi  dengan  hanya  pembedahan, stadium  lebih  lanjut  atau  yang  sudah metastasis  pada  umumnya  memerlukan tambahan  kemoterapi atau  terapi  target,  baik terpisah  maupun  digunakan  sebagai kombinasi . 27,28
Hasil  analisis  pada  penelitian  ini  juga menunjukkan  tidak  terdapat  hubungan  yang signifikan  antara  ekspresi cyclin  D1 dengan stadium  adenokarsinoma.  Hal  ini  ber- tentangan  dengan  penelitian  sebelumnya yang  menunjukkan  hubungan  signifikan antara cyclin D1 dengan stadium lanjut dalam
hal  ini  Dukes  C1,  C2  dan  D.  Sedangkan penelitian lain yang meneliti peran dari 3 tipe cyclin  (D1,D2  dan  D3),  memberikan  bukti bahwa  di  antara  ketiga  tipe  tersebut,  yang paling  berhubungan  dengan  peningkatan stadium kanker adalah protein cyclin D1 , dan yang  paling  berhubungan  dengan  derajat diferensiasi ( grading ) adalah cyclin D1 . 26,29
Penelitian lain juga menyebutkan bahwa lokasi  cyclin  D1  berpengaruh  terhadap  efek yang ditimbulkan. Ekspresi cyclin D1 di inti sel lebih  berpengaruh  terhadap  proliferasi, sedangkan  ekspresi  pada  sitoplasma  lebih berpengaruh terhadap kemampuan adesi sel, migasi  sel  dan  metastasis  jauh. 30 Penelitian ini  hanya  memperhitungkan  ekspresi  cyclin D1 pada inti sel tumor, sehingga bisa menjadi salah  satu  faktor  perancu  penyebab  tidak didapatkannya  hubungan  yang  signifikan  de- ngan stadium adenokarsinoma.
Meskipun  banyak  studi  telah  dilakukan untuk melihat ekspresi protein cyclin D1 pada kanker  kolorektal,  namun  kesimpulan  yang didapatkan  masih  sangat  bervariasi.  Hal  ini karena  sebagian  besar  penelitian  meng- gunakan  metode  imunohistokimia,  maka ketidakseragaman  hasil  sangat  bisa  dipe- ngaruhi  oleh  cara  penetapan  penghitungan baik  kuantitatif  maupun  semikuantiatif  yang memang  belum  terstandarisasi.  Faktor  lain adalah  jumlah  sampel,  serta  teknik  yang digunakan. 12,15,29
Kelebihan  dari  penelitian  ini  adalah penghitungan  ekspresi  cyclin  D1  dilakukan dengan  metode  kuantitatif  yaitu  dengan menghitung per sel, sehingga dapat  memini- malkan  bias  penghitungan,  karena  sebagian besar  penelitian  yang  melibatkan  ekspresi cyclin  D1  dengan  menggunakan  teknik imunohistokimia  menilai  ekspresi  dengan metode  kualitatif  (menggunakan  skoring  dan melihat intensitas pewarnaan).
Keterbatasan  penelitian  ini  yang  bisa menjadikan  faktor  perancu  adalah  sediaan biopsi  adenoma  yang  sebagian  besar  hanya berupa jaringan biopsi yang berukuran kecil,
Majalah Kesehatan                                                                                 Volume 7, Nomor 3, September 2020
dan  hanya  beberapa  sampel  yang  berupa sediaan  polipektomi,  sehingga  apabila dilakukan  penelitian  yang  relevan  perlu melibatkan  disiplin  ilmu  lain  seperti  Ilmu Penyakit Dalam dan Bedah Digestif.

## Kesimpulan
Penelitian  ini  nenunjukkan  ekspresi protein  cyclin  D1  yang  berbeda  signifikan antara  adenoma  dan  adenokarsinoma,  na- mun  ekspresi  tersebut  tidak  berhubungan dengan grading adenoma  maupun grading dan  stadium  adenokarsinoma.  Dapat  dikata- kan  bahwa  cyclin  D1  dapat  digunakan  untuk membedakan  antara  adenoma  dan  adeno- karsinoma  kolorektal,  namun  ekspresi  cyclin D1  tersebut  tidak  berhubungan  dengan grading dan stadium tumor dari keduanya.

## Saran
Perlu penelitian lanjutan dengan sampel yang lebih banyak dan multidisiplin ilmu, untuk menentukan  nilai cut  off point ekspresi  cyclin D1  yang  bisa  membedakan  antara  adenoma dan adenokarsinoma kolorektal.

## Daftar Pustaka
1.  Siegel R, Desantis C, Jemal A. Colorectal Cancer Statistic, 2014. CA Cancer J Clin .
2014;  64(2):104-17.
2.  Dragovich  T.  Colon  Cancer.  (Online). 2019. http://emedicine.medscape.com/ article/277496-overview.  [accessed  5 th
June 2019].
3.  Hamza AH, Aglan HA, Ahmed HH. Recent Concepts in the Pathogenesis and Mana- gement of Colorectal Cancer. Recent Ad- vanced in Colon Cancer . 2017. Chapter 6.
4.  Shussman  N  and  Wexner  SD.  Colorectal Polyps  and  Polyposis  Syndrome. Gastro- enterology Report. 2014; 2(1):1-15.
5.  Conteduca  V,  Sansonno  D,  Russi  S, Dammacco  F.  Precancerous  Colorectal
Lesion  (Review). International  Journal  of Oncology . 2013; 43(4):973-984.
6.  Simon K. Colorectal Cancer Development and  Advances  in  Screening. Clinical Intervention in Aging . 2016; 11:967-976.
7.  Romero  JJG,  Trevino  AIV,  Flores  EHC, Mera  BB,  Enriquez  MH,  Ruiz  KU,  et  al. Colorectal  Cancer:  A  Review. Inter-
national  Journal  of  Research  in  Medical Sciences. 2017; 5(11):4667-4676. 8.  Pestell RG and Li. Antisense to Cyclin D1 Inhibits  VEGF-Stimulated  Growth  of Vascular  Endothelial  Cells:  Implication  of Tumor  Vascularization. Clin  Cancer  Res . 2006; 12(15):4720.
9.  Li Z, Wang C, Prendergast G, Pestell RG. Cyclin D1 Functions in Cell Migration. Cell Cycle . 2006; 5(21):2440-2442.
10.  Dai M, Al-Odaini AA, Fils-Aime N, Villatoro
MA,  Guo J,  Arakelian  A. et  al .  Cyclin  D1 Cooperates  with  p21  to  Regulate  TGF β - Mediated  Breast  Cancer  Cell  Migration and Tumor Local Invasion. Breast Cancer Research . 2013; 15:R49.
11.  Wangefjord  S,  Manjer  J,  Gaber  A,  Nodin B,  Eberhard  J,  Jirstrom  K.  Cyclin  D1 Expression  in  Colorectal  Cancer  is  a Favorable  Prognostic  Factor  in  Men  but Not  in  Women  in  a  Prospective,  Popu- lation-Based Cohort Study. Biology of Sex Differences. 2011; 2:10.
12.  Jang  KY,  Kim  YN,  Bae  JS,  Chung  MJ, Moon WS, Kang MJ, et al . Expression of Cyclin  D1  is  Associated  with β -Catenin Expression  and  Correlates  with  Good Prognosis  in  Colorectal  Adenocarcinoma. Translational  Oncology. 2012;  5(5):370 – 378.
13.  Ahlin C, Lundgren C, Embretsen-Varro E,
Jirstrom K, Blomqvist C, Fjallskog M. High Expression  of  Cyclin  D1  is  Associated  to High  Proliferation  Rate  and  Increased Risk  of  Mortality  In  Women  with  ER- Positive  but  Not  in  ER-Negative Breast Cancers. Breast Cancer Res Treat . 2017; 164(3):667-678.
12.  Kumar  V,  Abbas  AK,  Aster  JC. Robbins Basic Pathology . 9 th Edition. Philladelphia:
Elsevier Sanders. 2015. 13.  Nassrat  FL,  Ali  HH,  Qasim  BJ.
Immunohistochemical  Expression  of Cyclin  D1  in  Colorectal  Adenomas:  a Clinicopathological  Study. Kasr  Al  Ainy Medical Journal. 2016; 22(3):115-122.
14.  Meijer  BJ,  Wielenga  MCB,  Hoyer  PB, Amos-Landgraf  JM,  Hakvoort  TBM, Muncan  V, et  al .  Colorectal  Tumor Prevention  by  the  Progestin  Medro- xyprogesterone  Acetate  is  Critically Dependent  on  Postmenopausal  Status. Oncotarget. 2018; 9(55):30561-30567. 15.  El-Taher  SM,  Alenezy  A,  Salama  BMM,
Hassan  TMM.  Risk  Factors  of  Colorectal Cancer;  A  Case-Control  Study. The Egyptian Journal of Community Medicine . 2016; 34(1). 16.  Goldblum  JR,  Lamps  LW,  Kenney  JK. Rosai and Ackerman’s Surgical Pathology .  11 th Edition.  Philadelphia:
Elsevier Inc . 2018.
17.  Rosidah  A,  Norahmawati  E,  Anita  KW. Profil  Klinikopatologi  Pasien  Adenoma dan  Adenokarsinoma  Kolorektal  di Instalasi  Patologi  Anatomi  RSUD  Saiful Anwar  Malang  Periode  2016-2018. Penelitian Retrospektif. 2019.
18.  Silva SM, Rosa VF, Santos ACN, Almeida
RM,  Oliveira  PG,  Sousa  JB.  Influence  of Patient Age and Colorectal Polyp Size on Histopathology  Finding. ABCD  Arg  Bras Cir Dir . 2014; 27(2):109-113.
19.  Strum WB. Colorectal Adenoma. N Engl J Med . 2016; 374(11):1065-75.
20.  Pantow PR, Waleleng JB, Sedli PB. Profil Adenocarcinoma Kolon di RSUP Prof. Dr. R.  D.  Kandou  dan  Siloam  Hospitals Periode Januari 2016-Juni 2017. Jurnal e- Clinic (eCl) . 2017; 5(2):326-331.
21. Hamilton SR, Bosman FT, Boffeta P, Ilyas M,  Moreau  H,  Nakamura  SI, et  al . Carcioma of the Colon and Rectum. WHO Classification  of  Tumors  of  the  Digestive System. WHO Press . 2010; 131-182. 22.  Hachmanoochehry  F,  Asefzadeh  S, Kazemifar AM, Ebtehaj M. Clinicopathological  Feature  of  Colon Adenocarcinoma  in  Qazvin,  Iran:  A  16
Year  Study. Asian  Pac  J  Cancer  Prev. 2014; 15 (2):951-955.
23.  Albasri  AA,  Elkablawy  MA,  Ansari  IA, Alhujayli  AS.  Prognostic  Significance  of Cyclin  D1 Over-Expression  in  Colorectal Cancer: An Experience in Madinah, Saudi Arabia. Asian  Pac  J  Cancer  Prev .  2019; 20(8):2471.
24.  Li  Y,  Wei  J,  Xu  C,  Zhao  Z,  You  T. Prognostic  Significance  of  Cyclin  D1 Expression in Colorectal Cancer: A Meta- Analysis  of  Observational  Studies. PLoS ONE .  2014; 9(4).e94508.
27.  Salmo  E  and  Haboubi  N.  Adenoma  and Malignant  Colorectal  Polyp:  Pathological Considerations  and  Clinical  Applications. EMJ Gastroenterol . 2018;  7(1):92-102. 28.  Nguyen  HT  and  Duong  HQ.  The Molecular  Characteristics  of  Colorectal Cancer: Implications  for  Diagnosis  and Therapy  (Review). Oncology  Letters . 2018; 16(1):9-18.
29.  Mermelshtein  A,  Gerson  A,  Walfisch  S,
Delgado B, Shechter G, Delgado J, et al . Expression  of  D-type  Cyclins  in  Colon Cancer  and  in  Cell  Lines  from  Colon Carcinomas. Br  J  Cancer .  2005;  93(3): 338-345.
30.  Fuste  NP,  Fernandez-Hernandez  R, Cemeli  T,  Mirantes  C,  Pedraza  N,  Rafel
M, et al . Cytoplasmic Cyclin D1 Regulates Cell Invasion and Metastasis Through  the  Phosphorylation  of  Paxillin. Nature Communication . 2016; 7:11581.