Abstrak — Tembakau  ( Nicotiana  tabacum )  merupakan  tanaman dengan  nilai  ekonomi  tinggi.  Saat  ini  tembakau  banyak digunakan  untuk  bahan  baku  industri  rokok,  biopestisida, bioinsektisida  dan  lainnya.  Tingkat  produksi  tembakau dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor  lingkungan  seperti  iklim. Dewasa  ini  fenomena  la  nina  yang  mengakibatkan  pergeseran iklim  berdampak  langsung  pada  tingkat  produksi  tembakau. Untuk  itu  dilakukan  seleksi  tembakau  agar  didapat  tembakau yang  tahan  terhadap  kondisi  iklim  yang  ekstrim  dengan  cara mutasi  iradiasi.  Tujuan  dilakukan  penelitian  ini  yaitu  untuk mengetahui  respon  perkecambahan  tembakau  yang  telah diiiradiasi.  Tembakau  diberi  perlakuan  iiradiasi  dengan berbagai  konsentrasi  yaitu  0  Gy,  10  Gy,  25  Gy,  50  Gy,  dan  100 Gy. Biji diamati selama 7 hari.  Hasilnya viabilitas dan vigoritas biji  tembakau  yang  telah  diiradiasi  menunjukkan  adannya penurunan  perkecambahan  dilihat  dari  daya  kecambah, keserempakan tumbuh,  dan laju perkecambahan seiring dengan meningkatnya dosis iradisi yang diberikan.
Kata Kunci — Tembakau, Iradiasi, Perkecambahan.

## I. PENDAHULUAN
EMBAKAU ( Nicotiana Tabacum) merupakan salah satu komoditas  perkebunan  utama  di  Jawa  Timur  yang memiliki peran penting dalam pembangunan ekonomi regional maupun  nasional  [1].    Tembakau  merupakan  tanaman semusim  sekali  panen  pada  saat  sudah  berumur  ±90-120  hari [2].  Salah  satu  faktor  yang  mempengaruhi  pertumbuhan tembakau adalah iklim. Dewasa ini adanya fenomena El Nino dan La  Nina secara  global  menyebabkan  adanya  pergeseran iklim  yang  dapat  mempengaruhi  pertumbuhan  dan  produksi tembakau [3].
Hingga  saat  ini  tidak  tersedia  sumber  gen  ketahanan  untuk sifat  tahan  kering  pada  tanaman  tembakau.  Oleh  karena  itu diperlukan induksi keragaman. Salah satu metode yang efektif untuk  induksi  keragaman  adalah  teknik  iradiasi.  Induksi keragaman  merupakan  langkah  awal  sebelum  dilakukan seleksi  untuk  karakter  ketahanan  terhadap  kekeringan.  Selain menggunakan  teknik  iradiasi,  induksi  keragaman  juga  dapat dilakukan dengan menggunakan EMS ( Ethyl methanesulfonate ),  variasi  somaklonal,  pengkalusan  dan lainnya [4].
Iradiasi merupakan salah satu metode yang dapat digunakan untuk  melakukan  mutasi  atau  induksi  keragaman  pada tanaman.  Mutasi  yang  dihasilkan  dari  perlakuan  iradiasi  bisa bersifat  merugikan  atau  sebaliknya  berisfat  menguntungkan [5][6]. Penggunaan mutagen fisik seperti iradiasi sinar gamma
banyak dilaporkan penggunaannya dalam upaya mendapatkan varian  tanaman  dengan  berbagai  karakter  unggul  yang diinginkan [7].
Induksi  keragaman  dapat  dilakukan  pula  menggunakan mutagen  kimia  seperti  EMS.  Senyawa  EMS  merupakan senyawa  alkil  yang    mengubah  guanin  menjadi  7-  etilguanin yang  berpasangan  dengan  timin  [8].  Senyawa  ini  banyak digunakan  untuk  meningkatkan  keragaman  genetik  tanaman dan perbaikan kualitas tanaman [9]. Salah Satu penelitian yang dilakukan  oleh  [10],  [11]  menggunakan  EMS  sebagai  agen mutasi pada tanaman abaka berhasil mendapatkan mutan yang tahan  terhadap  penyakit  layu  Fusarium.  Keberhasilan  mutasi dengan  mutagen  kimia  pada  tiap  tanaman  tergantung  pada konsentrasi dan lama perendaman yang digunakan [12].
Selain  dua  metode  diatas,  dapat  pula  digunakan  teknik variasi  somaklonal  sebagai  agen  mutasi  atau  induksi keragaman.  Variasi  somaklonal  telah  digunakan  untuk memperoleh  kultivar  yang  unik  dan  bermanfaat  bagi pemuliaan  tanaman  secara  konvensional.  Pada  teknik  ini kemungkinan terjadinya sifat dominan lebih besar dibandingkan  induksi  mutasi  menggunakan  teknik in  vivo. Teknik  variasi  somaklonal  yang  dilakukan  secara  in  vitro merupakan  tahap  seleksi  genetik  yang  pertama.  Tahap selanjutnya  sel  akan  beregenerasi  membentuk  variasi somaklonal    dan  setelah  diaklimatisasi,  planlet  akan menghasilkan tanaman mutan dengan sifat beragam [13], [14].
Dari  beberapa  metode  induksi  keragaman  tersebut,  induksi menggunakan  iradiasi  sinar  gamma  lebih  dipilih  karena  jika menggunakan  mutagen  kimia  seperti  EMS  ( ethyl  methane sulphonat ),  DES,  etilin  amina  (EM),  etil  nitroso  urea  (ENH), dan metil nitroso urea serta kelompok azida bersifat toksik dan mudah terhidrolisis sehingga menjadi tidak efektif lagi sebagai mutagen  [4][15][16].  Induksi  mutasi  menggunakan  teknik iradiasi  sinar  gamma  juga  lebih  menguntungkan  karena  dosis yang  digunakan  lebih  akurat  dan  penetrasi  penyinaran  ke dalam sel bersifat homogen [17]. Sehingga dapat menghasilkan sifat tau variasi tanaman yang diinginkan.
Dari  uraian  diatas  perlu  adanya  peningkatan  kualitas tanaman  tembakau  untuk  meningkatkan  ketahanan  terhadap kekeringan. Salah satu cara untuk  mendapatkan tanaman yang tahan  terhadap  kekeringan  dapat  digunakan  metode  induksi mutasi.  Mutasi  dapat  dilakukan  dengan  berbagai  cara  seperti menggunakan  EMS  ( Ethyl  methanesulfonate ),  iradiasi  sinar gamma, subkultur berulang dan pengkalusan [4].
Tembakau memiliki sistem perakaran tunggang dan rambut- rambut  akar  yang  tumbuh  kesamping.  Daun  tanaman

## Respon Perkecambahan Tembakau ( Nicotiana tabacum ) Varietas Jepon Mawar Hasil Iradiasi Sinar Gamma
Khoirun Nisak dan Triono B. Saputro Departemen Biologi, Fakultas Ilmu Alam, Institut Teknologi Sepuluh Nopember (ITS)
e-mail : trionobsaputro@bio.its.ac.id
T
tembakau  berbentuk  bulat  lonjong  atau  bulat  tergantung  pada varietasnya.  Lapisan  atas  dari  daun  tembakau  terdiri  atas lapisan  palisade  parenkim  dan  parenkim  spongy  pada  bagian bawah daun. Umumnya permukaan adaksial dan abaksial daun diselimuti  oleh  bulu-bulu  halus  putih.  Tanaman  tembakau memiliki  bentuk  batang  agak  bulat  dan  termasuk  tanaman herbaceous  atau  tidak  berkayu.  Tanaman  tembakau  memiliki bakal buah yang berada diatas dasar bunga dan terdiri dari dua ruang  yang  dapat  membesar.  Buah  tembakau  berbentuk  bulat lonjong  setiap  ruang  berisi  bakal  biji.  Bunga  dari  tanaman tembakau  berbentuk  seperti  terompet  dan  berwarna  putih- merah  muda  hingga  kemerahan.  Umumya  bunga  tembakau termasuk  bunga  majemuk  yang  tumbuh  di  ujung  batang, memiliki  kelopak  bunga  yang  berbulu,  memiliki  lima  benang sari (anther) dan satu kepala putik [18][19].
Tanaman  tembakau  pada  umumnya  tidak  menghendaki iklim  yang  kering  maupun  iklim  yang  basah  [20].  Tanaman tembakau  merupakan  tanaman  yang  sangat  peka  terhadap perubahan  panjang  hari  atau  lama  penyinaran  sinar  matahari. Kurangnya  penyinaran  matahari  menyebabkan  terhambatnya pertumbuhan dan produksi tembakau [21].
Tanaman  tembakau  memiliki  banyak  varietas  atau  sub spesies.  Namun  pada  penelitian  ini  hanya  akan  digunakan varietas    Jepon  Mawar  yang  telah  diberi  perlakuan  iiradiasi dengan berbagai varian konsentrasi. Iiradiasi merupakan salah satu  metode  yang  dapat  digunakan  untuk  melakukan  mutasi pada  tanaman    [22].  Hal  ini  telah  banyak  dilaporkan  dapat memperbesar  ragam  genetik  tanaman  dalam  program pemuliaan tanaman seperti pada tanaman padi, kedelai, kacang hijau, gandum dan lain-lain [5].

## II. METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat
A.
Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan  Februari  2016  sampai Mei  2016.  Penelitian  ini  dilakukan  dalam  dua  tahap  yaitu tahap iradiasi dan tahap pengujian viabilitas dan vigoritas biji. Tahap  iradiasi  biji  dilakukan  di  Pusat  Aplikasi  Teknologi Isotop  dan  Iradiasi  (PATIR)  BATAN  Jakarta.  Pengujian viabilitas  dan  vigoritas  biji  dilakukan  selama  satu  minggu  di Laboratorium Biosains dan Teknologi Tumbuhan Biologi ITS Surabaya.

## Alat dan Bahan
B.
Dalam penelitian ini digunakan peralatan antara lain: pinset dan  cawan  petri.  Sedangkan  bahan  yang  digunakan  dalam penelitian ini yaitu: biji tembakau varietas Jepon Mawar yang tidak  diiiradiasi  dan  yang  diiiradiasi,  kapas,  akuades,  dan kertas strimin.

## Biji Tembakau
C.
Biji  tembakau  yang  digunakna  dalam  penelitian  ini  terdiri dari dua jenis yaitu biji tembakau varietas Jepon Mawar (Lihat lampiran)  tanpa  iradiasi  dan  biji  tembakau  varietas  Jepon Mawar dengan iradiasi sinar gamma 0 Gy, 25 Gy, 50 Gy, 100 Gy.  Kemudian  biji  akan  ditumbuhkan  pada  medium perkecambahan  selama  7  hari.  Tembakau  dapat  dipanen  dan diambil bijinya pada saat sudah berumur ±90-120 hari [2]. Biji yang telah dipanen umumnya disimpan terlebih dahulu dalam
cool  storage dengan  suhu  ±  10˚C  dan  disimpan  selama  ±  1 tahun.

## Inokulasi Eksplan
D.
Eksplan  yang  digunakan  berupa  biji  tembakau.  Media perkecambahan  berupa  kapas  yang  diatasnya  telah  diletakkan kertas strimin 10 x 10. Media yang telah diberi kertas strimin, disiram  menggunakan  akuades  secukupnya  namun  tidak sampai menggenang.  Kemudian  biji  tembakau yang diinokulasi ke media perkecambahan. Biji diamati perkecambahannya selama 7 hari.

## Parameter Pengamatan E.
Perkecambahan  tanaman  diamati  dengan  cara  mengamati proses  perkecambahan  atau  pecah  benih  dalam  waktu  1 minggu.  Pada  pengamatan  perkecambahan  biji  tembakau dicatat  pada  hari  ke  berapa  tanaman  mulai  muncul  radikula dan  tumbuh  planlet  hingga  muncul  2  daun.  Pengamatan  biji dilakukan setiap hari.

## 1) Daya Berkecambah
Biji  tembakau  yang  berkecambah,  kemudian  dihitung menggunakan rumus [23] sebagai berikut:
JK
JC
Keterangan: DK : Daya kecambah JK : Jumlah kecambah normal yang dihasilkan
JC : Jumlah contoh benih yang diuji

## 2) Laju Perkecambahan
Laju perkecambahan ditentukan dengan menghitung jumlah hari  yang  diperlukan  untuk  munculnya  radikula  atau  plumula selama jangka waktu tertentu (7 hari). Menurut Soetopo dalam [23] sebagai berikut:
N1T1 + N2T2 + N3T3 … + NXTX Jumlah total benih yang berkecambah Keterangan:
LP: Laju perkecambahan
N  :Jumlah  benih  yang  berkecambah  dalam  satuan  waktu tertentu
T  : Jumlah waktu antara pengujian awal sampai   akhir dari interval tertentu suatu pengamatan
3) Keserempakan Tumbuh
Keserempakan
tumbuh benih dihitung dengan menggunakan  presentase  kecambah  normal  kuat  pada hitungan  antara  pengamatan  I  dan  II  hari  ke-4  menurut  Sajad dalam [23] dengan rumus sebagai berikut:
KST = KK TB Keterangan: KST : Keserampakan tumbuh KK  : Jumlah kecambah kuat TB  : Total benih yang dianalisis
X 100% DK =
LP =
(1) (2)
(3)
Gambar  1.  Grafik  daya  kecambah  tembakau  varietas  Jepon  Mawar  terhadap iradiasi sinar gamma dengan berbagai konsentrasi.
Gambar 2. Grafik keserempakan tumbuh tembakau varietas Jepon Mawar terhadap iradiasi sinar gamma dengan berbagai konsentrasi.
Tabel 1. Presentase Daya kecambah biji tembakau hasil iradiasi Dosis iradiasi (Gy) Presentase perkecambahan (%) 0 93 25 69 50 63 100 49 Tabel 2. presentase keserempakan tumbuh biji tembakau hasil iradiasi Dosis iradiasi (Gy) Presentase perkecambahan (%) Jumlah kecambah abnormal 0 93 0 25 42 27 50 34 29 100 29 20 Tabel 3. Laju perkecambahan biji tembakau hasil iradiasi Dosis iradiasi (Gy) Laju perkecambahan 0 8,5 25 8,3 50 8,2 100 8,2

## Rancangan Penelitian dan Analisis Data F.
Rancangan  penelitian  untuk  pengujian  vigoritas  dan viabilitas biji tembakau menggunakan rancangan acak lengkap dengan  satu  faktor  yaitu  dosis  iradiasi  sinar  gamma  yang digunakan.

## III. HASIL DAN DISKUSI

## Hasil  Iradiasi  Sinar  Gamma  pada  Viabilitas  Biji A. Tembakau Varietas Jepon Mawar
Biji  tembakau  yang  diberi  perlakuan  iradiasi  menunjukkan adanya  penurunan  perkecambahan.  Dari  daya  kecambah (Detail  data  dapat  dilihat  gambar  1)  dan  keserempakan tumbuh  (gambar  2)  dapat  diketahui  bahwa  biji  tanpa  iradiasi cenderung  berkecambah  lebih  baik,  yaitu  93%  dengan kecambah mati paling sedikit yaitu 7 biji dan 0 biji abnormal. Sedangkan  pada  iradiasi  25  Gy  dan  50  Gy  Didapatkan persentase  daya  kecambah  hampir  sama  yaitu  69%  dan  63% namun memiliki keserempakan tumbuh yang secara signifikan berbeda.  Pada  presentase  keserempakan  tumbuh  biji  iradiasi 25  Gy  didapatkan  presentase  sebesar  42%  dengan  kecambah abnormal  27  kecambah.  Sedangkan  pada  50  Gy  didapatkan presentase  sebesar  34%  dengan  kecambah  abnormal  lebih tinggi  dibandingkan  tanaman  kontrol  yakni  29  kecambah. Untuk  biji  tembakau  dengan  iradiasi  100  Gy  memiliki presentase daya kecambah paling rendah dibandingkan dengan tanaman  kontrol  dan  biji  yang  diiradiasi  25  Gy  dan  50  Gy, yakni 49%. Begitu pula denga hasil presentase  keserempakan tumbuh,  biji  iradiasi  100  Gy  memiliki  presentase  paling rendah  yaitu  29%  namun  memiliki  jumlah  kecambah abnormal  lebih  sedikit  dibandingkan  dengan  biji  iradiasi  25 Gy  dan  50  Gy,  yaitu  20  kecambah.  Dari  tabel  4.3  dapat diketahui  tanaman  kontrol  memiliki  laju  perkecambahan paling tinggi yaitu sebesar 8,5. Sedangkan untuk biji tembakau dengan  iradiasi  25  Gy  memiliki  laju  perkecambahan  sebesar
8,3.  Sedangkan  biji  iradiasi  100  Gy  dan  50  Gy  memiliki  laju perkecambahan yang sama yaitu 8,2.
Pengaruh Iradiasi Sinar Gamma terhadap Vigoritas Biji B.

## Tembakau Varietas Jepon Mawar
Meskipun  persentase  perkecambahan  yang  diperoleh  dari uji  perkecambahan  cenderung  tinggi,  namun  setiap  dosis menunjukkan  jumlah  kecambah  abnormal  yang  berbeda.  Hal ini  sesuai  dengan  pernyataan  [24]  yaitu  pada  beberapa percobaan radiasi pada benih, radiasi pada dosis rendah dapat meningkatkan  persen  perkecambahan,  namun  jika  radiasinya terlalu tinggi maka benih-benih tersebut akan mati. Penurunan perkecambahan pada uji perkecambahan terjadi seiring dengan meningkatnya  dosis  iradiasi  pada  penelitian,  tergantung  pada pemberian  radiasi  sinar  gamma  [25].  Dosis  iradiasi  yang digunakan  dan  pengaruhnya  terhadap  perkecambahan  benih berbeda-beda  untuk  tiap  jenis  dan  genotipe.  Namun  secara umum, dosis iradiasi yang lebih tinggi cenderung menghambat perkecambahan [26].
Pada biji kontrol (tanpa iradiasi) hasil yang didapatkan tidak 100%,  baik  pada  perhitungan  laju  perkecamabhan,  daya kecambah maupun keserempakan tumbuh. Hal ini dimungkinkan  biji  yang  digunakan  memiliki  vigoritas  yang kurang  baik.  Biji  yang  mempunyai  kekuatan  tumbuh  (vigor) yang baik akan menjadi cepat proses reaktivasi metebolismenya apabila kondisi lingkungan tumbuh optimum dan proses metabolisme biji tidak terhambat. Biji dengan vigor yang  baik  akan  mempunyai  nilai  keserempakan  tumbuh  yang tinggi.  Sebaliknya,  biji  yang  mempunyai  vigor  buruk  akan berpengaruh  terhadap  fisiologi  maupun  morfologi  tanaman yang dihasilkan [27].
Dalam  penelitian  [28]  melaporkan  juga  bahwa  iradiasi benih  pepaya  dosis  10  Gy  meningkatkan  persentase perkecambahan menjadi 50% dari kontrol 30%. Hal ini sesuai dengan  uji  perkecambahan  pada  penelitian  iradiasi  tembakau dimana  terjadi  penurunan  presentase  daya  kecambah  dan keserempakan tumbuh pada dosis iradiasi tertinggi 100 Gy.
Gambar  3.  Grafik  laju  perkecambahan  biji  tembakau  varietas  Jepon  Mawar terhadap iradiasi sinar gamma dengan berbagai konsentrasi. a b
Gambar  4.  a.  tanaman  tembakau  Jepon  Mawar,  b.  daun  tembakau  Jepon Mawar
Hasil  yang  didapat  pada  penelitian  ini  juga  menunjukkan kecenderungan  yang  sama  dengan  yang  ditemukan  oleh  [29] dan  [30]  yang  menyatakan  bahwa  iradiasi  dosis  tinggi  dapat mengurangi  perkecambahan  benih.  Fenomena  ini  dikenal dengan  istilah  pengaruh  hormesis  yang  didefinisikan  [31] sebagai  stimulasi  dengan  dosis  rendah  iradiasi  ionisasi  dan penghambatan pada dosis yang tinggi.
Dosis  iradiasi  rendah  yang  digunakan  pada  biji,  umbi- umbian,  dan  spora  dilaporkan  dapat  mempercepat  proses perkecambahan,  mempercepat  proses  pertumbuhan,  dan meningkatkan hasil akhir pada saat dipanen. Sebaliknya, dosis yang  tinggi  akan  mengakibatkan  adanya  penghambatan pertumbuhan  atau  bahkan  letal  pada  tanaman  [32][33],  dan [34].  Namun  terdapat    pula  faktor  fisiologi  yang  dapat meningkatkan bahaya iradiasi pada tanaman  seperti suhu, air, konsentrasi  oksigen,  dan  ketersediaan  nutrisi  [34].  Iradiasi yang  dilakukan  pada  benih,  secara  umum  memiliki  kisaran dosis  efektif  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  jika  dilakukan pada  bagian  tanaman  lainnya,  yaitu  berkisar  50  Gy  -  250  Gy [16].  Umumnya  dosis  optimum  dalam  induksi  mutasi  yang dapat  menimbulkan  keragaman  dan  menghasilkan  mutan terbanyak  biasanya  terjadi  di  sekitar  LD 50 yaitu  tingkat  dosis yang  menyebabkan  kematian  sebesar  50%  dari  populasi tanaman  yang  diiradiasi  [33].  Seperti  yang  terlihat  dari  daya kecambah tanaman dengan dosis iradiasi 100 Gy dengan daya kecambah hanya 49%.
Pada  uji  keserempakan  tumbuh  didapatkan  hasil  dimana kecambah tidak serempak pertumbuhannya seiring meningkatnya dosis iradiasi. Keserempakan tumbuh merupakan  salah  satu  parameter  vigor.  Cara  yang  digunakan adalah  dengan  menghitung  persentase  kecambah  normal  kuat pada hari ke-7. Hal tersebut menunjukkan bahwa iradiasi sinar gamma  menyebabkan  vigor  benih  menurun,  akibat  pengaruh radiosensitivitas  masing-masing  varietas  berbeda  [35]. Perlakuan  iradiasi  pada  benih  menyebabkan  kerusakan  fisik ( physical  damage )  yaitu  menurunkan  daya  pertumbuhan tanaman.  Semakin  tinggi  dosis  iradiasi  akan  semakin menghambat  pertumbuhan  [36].  Indikasi  biokimia  dalam benih  yang  mengalami  kemunduran  viabilitas  dan  vigoritas menurut  [37]  adalah  (a)  perubahan  aktivitas  enzim  (b) perubahan  laju  respirasi;  (c)  perubahan  di  dalam  cadangan makanan; (d) perubahan di dalam membran, dan (e) kerusakan kromosom.  Hal  ini  terjadi  karena  prinsip  kerja  sinar  gamma yaitu  menghasilkan  radikal  bebas  yang  reaktif  dan  bereaksi dengan molekul dalam sistem biologi, sehingga mengacaukan proses  proses  biokimia  di  dalam  sel  sehingga  mengganggu homeostatis/keseimbangan sel [16].
Selain  itu  ketidakserempakan  kecambah  tumbuh  dapat dikarenakan  oleh  faktor  fisiologi  dalam  benih  tersebut sehingga  dapat  menurunkan  daya  tumbuh  kecambah. Penurunan daya tumbuh benih menurut [37] dapat ditunjukkan oleh gejala fisiologis sebagai berikut: (a) terjadinya perubahan warna benih (b) tertundanya  perkecambahan; (c)  menurunnya toleransi  terhadap  kondisi  lingkungan  suboptimum  selama perkecambahan  (d)  rendahnya  toleransi  terhadap  kondisi simpan  yang  kurang  sesuai  (e)  peka  terhadap  radiasi;  (f) menurunnya    pertumbuhan  kecambah;  (g)  menurunnya  daya berkecambah,  dan  (h)  meningkatnya  jumlah    kecambah abnormal.
Dalam penelitian [25] melaporkan bahwa untuk mendapatkan  individu  yang  memperlihatkan  perubahan  sifat (mutan)  tergantung  pada jenis  tanaman,  fase  tumbuh,  ukuran, kekerasan, dan material uji. Pemanfaatan radiasi sinar gamma pada  berbagai  konsentrasi  diharapkan  mendapatkan  jenis varietas  unggul  yang  mempunyai  karakter  lebih  baik  dari sebelumnya. Seperti yang dilaporkan oleh [17] bahwa iradiasi sinar  gamma  dapat  meningkatkan  daya  kecambah  dan kecepatan berkecambah sengon ( Albizia falcataria ) pada dosis rendah yaitu 5 Gy sampai 90 Gy. Sedangkan [38] melaporkan padi  varietas  Situ  Bagendit  yang  diiradiasi  sinar  gamma mengalami penurunan perkecambahan seiring dengan meningkatnya dosis iradiasi yaitu 200 Gy dan 300 Gy. Namun mengalami  peningkatan  perkecambahan  dan  pertumbuhan pada  dosis  100  Gy.  Begitu  pula  dalam  penelitian  [39] menggunakan  kalus  embrio  somatik  kacang  tanah  varietas Lokal  Bima  yang  mengalami  pertumbuhan  maksimal  pada iradiasi  sinar  gamma  dengan  dosis  rendah  15  Gy  dan  20  Gy. Sedangkan  pada  iradiasi  25  Gy  kalus  terjadi  penurunan pertumbuhan.

## IV. KESIMPULAN
Viabilitas  dan  vigoritas  biji  tembakau  yang  telah  diiradiasi menunjukkan  adannya  penurunan  perkecambahan  dilihat  dari daya kecambah, keserempakan tumbuh, dan laju perkecambahan  seiring  dengan  meningkatnya  dosis  iradisi yang diberikan.

## LAMPIRAN
Tembakau  ( N.  tabacum )  varietas  Jepon  Mawar  umumnya memiliki  tinggi  tanaman  sedang  antara  119,6  cm-149,8  cm. Tembakau  ini  memiliki  warna  batang  hijau  kekuningan  dan sepanjang  batang  diselimuti  oleh  bulu-bulu  halus.  Bentuk daun  tembakau  ( N.  tabacum )  Jepon  Mawar  bulat  memanjang
dengan  tepi  daun  licin  atau  rata.  Dalam  satu  tanaman umumnya  memiliki  jumlah  daun  20-26  lembar  atau  rata-rata 23  lembar  daun.  Memiliki  panjang  daun  48,3cm-77,0cm  atau rata-rata 62,5cm serta lebar daun 31,2cm-42,5cm atau rata-rata 36,8 cm [40].

## DAFTAR PUSTAKA
[1]  Dinas  Perkebunan  Provinsi  Jawa  Timur, “ Komoditi  Tanaman Tembakau, ” 2016.
[2]  A.  Suwarso,  A.  Herwati,  and  S.  Rachman, “ Pemuliaan  Tembakau Madura, ” Malang, 1999.
[3]  T.  Yohannes,  M.  Andargie,  and  A.  Takele, “ In  Vitro  Screening  for Drought Tolerance in Different Sorghum (Sorghum bicolor (L.) Moench) Varieties, ” J. Stress Physiol. Biochem. , vol. 9, no. 3, 2013.
[4]  R. Yunita, “ Pemanfaatan Variasi Somaklonal Dan Seleksi In Vitro Dalam Perakitan  Tanaman  Toleran  Cekaman  Abiotik, ” J.  Litbang  Pertan. ,  vol. 28, no. 4, pp. 142 – 148, 2009. [5]  H.  Soeharto, “ Pemuliaan  Mutasi  Pada  Sorghum  (Sorghum  Bicolor  L.) Untuk  Perbaikan  Tanaman  Sebagai  Pakan  Ternak  Ruminansia, ” Jakarta, 1998.
[6]  D.  Ermavitalinia,  I.  P.  Sari,  E.  N.  Prasetyo,  N.  Abdulgani,  and  T.  B. Saputro, “ Effect  of  Gamma  60Co  Irradiation  On  The  Lipid  Content  and Fatty  Acid  Composition  of  Nannochloropsis  sp.  Microalgae, ” in Proceeding of International Biology Conference , 2016.
[7]  I.  S.  Aisyah,  A.  Hajrial,  S.  Asep,  M.  Budo,  and  S.  Sarsidi, “ Induksi Mutasi  Pada  Stek  Pucuk  Anyelir  (Danthus  caryophyllus  Linn.)  Melalui Iradiasi  Sinar  Gamma, ” J.  Agron  Indones. ,  vol.  37,  no.  1,  pp.  62 – 70, 2009.
[8]  C.  VL.  Mutagenesis, “ Investigating  the  process  and  processing  the outcome  for  crop  improvement, ” J.  Curr.  Sci. ,  vol.  89,  pp.  353 – 359, 2005.
[9]  \  M.  Imelda,  P.  Deswina,  S.  Hartati,  Estiati,  and  S.  Atmowijoyo,
“ Chemical Mutation by Ethyl Methane Sulfonate (EMS) for Bunchy Top Virus  Resistence  in  Banana, ” Ann.  Bogor. ,  vol.  38,  no.  3,  pp.  205 – 211, 2000.
[10] R.  D.  Purwati,  U.  Budi,  and  S.  Sudarsono, “ Penggunaan  Asam  Fusarat dalam  Seleksi  in  vitro  untuk  Resistensi  terhadap  Fusarium  oxysporum f.sp. cubense, ” J. Littri , vol. 7, no. 2, pp. 80 – 91, 2007.
[11] R. D. Purwati, K. E. Sudjindro, and S. Sudarsono, “ Keragaman Genetika Varian Abaka yang Diinduksi dengan Ethyl Methane Sulphonate (EMS), ” J. Littri , vol. 15, no. 4, pp. 152 – 161, 2008.
[12] Y.  Yanti, “ Banana  Treatments  of  Ethyl  Methane  Sulphonate  Muthagen Throuhg  In  Vitro, ” in The  Third  Asian  Conference  on  Plant  Pathology , 2007, pp. 467 – 471. [13] S.  Soedjono, “ Aplikasi  Mutasi  Induksi  Dan  Variasi  Somaklonal  Dalam Pemuliaan Tanaman, ” J. Litbang Pertan. , vol. 22, no. 2, 2003.
[14] T.  B.  Saputro,  S.  Dianawati,  N.  F.  Sholihah,  and  D.  Ermavitalini,
“ Genetic diversity of improved salt tolerant calli of maize (Zea mays L.) using RAPD, ” in Proceeding of International Biology Conference , 2016. [15] IAEA, “ Manual On Mutation, Viability  And Population Structure, ” Acta Agric. Cand , vol. 4, pp. 601 – 632, 1997.
[16] A. M. Van Harten, Mutation breeding. Theory and Practical Aplications . USA: Cambridge University Press, 1998.
[17] Litbang Pertanian, “ Teknik Mutasi Untuk Pemuliaan Tanaman, ” 2014. . [18] Listyanto, Budidaya  Tembakau  (Nicotiana  tabacum  L.)  Menggunakan Pupuk Hayati Bio Z . Jakarta: PT Alam Lestari Maju Indonesia, 2010. [19] K.  Kamal, “ Monograph  Of  Tobacco  (Nicotiana  tabacum), ” Indian  J. Drugs , vol. 2, no. 1, pp. 5 – 23, 2014.
[20] BAPPEDA Kendal, “ Tentang Tembakau, ” 2016. .
[21] P.  J.  G.  Smykal,  D.  B.  Stefanie,  R.  Venkatesh,  and  M.  Siegbert, “ Flowering Of Strict Photoperiodict Nicotiana Varieties In Non-Inductive
Condition By Transgenic Approaches, ” Plant Mol Bio , vol. 6, 2007.
[22] M.  Zanzibar  and  Witjaksono, “ Pengaruh  Penuaan  Dan  Iiradiasi  Benih Dengan Sinar Gamma (60C) Terhadap Pertumbuhan Bibit Suren (Toona sureni Blume Merr), ” J. Penelit. Hutan Tanam. , vol. 8, no. 2, pp. 89 – 95, 2011.
[23] M.  K.  Lesilolo,  J.  Patty,  and  N.  Tetty, “ Penggunaan  Desikan  Abu  dan Lama  Simpan  terhadap  Kualitas  Benih  Jagung  (Zea  mays  L.)  pada Penyimpanan Ruang Terbuka, ” Agrogolia , vol. 1, no. 1, pp. 51 – 59, 2012. [24] N.  D.  S.  Daeli,  A.P.P.Lollie,  and  N.  Isman, “ Pengaruh  Radiasi  Simar Gamma Terhadaptanaman Kacang Hijau (Vigna radiata L.) Pada Kondisi Salin, ” J. Online Agroekoteknologi , vol. 1, no. 2, 2013.
[25] G.  N.  Sutapa  and  I.  G.  A.  Kasmawan, “ Efek  Induksi  Mutasi  Radiasi Gamma 60co Pada Pertumbuhan Fisiologis Tanaman Tomat (Lycopersicon  esculentum L.), ” J. Keselam.  Radiasi dan  Lingkung. ,  vol. 1, no. 2, 2016.
[26] M. Zanzibar and D. J. Sudrajat, “ Prospek Dan Aplikasi Teknologi Iradiasi Sinar Gamma Untuk Perbaikan Mutu Benih Dan Bibit Tanaman Hutan, ” Jakarta, 2009.
[27] D.  S.  Rini,  Mustikoweni,  and  T.  Surtiningsih, “ Perkecambahan  Benih Sorgum
(Sorghum bicolor L. Moench) Terhadap Perlakuan Osmoconditioning Dalam Mengatasi Cekaman Salinitas, ” Ber. Biol. , vol. 7, no. 6, 2005.
[28] Y.  K.  Chan  and  P.  F.  Lam, “ Irradiation-Induced  Mutations  In  Papaya With  Special  Emphasis  On  Papaya  Ringspot  Resistance  And  Delayed Fruit  Ripening.  Working  Material – Improvement  Of  Tropical  And Subtropical Fruit Trees Through Induced Mutations And Biotechnology, ” Vienna , pp. 35 – 45, 2002.
[29] K.  G.  Hell  and  M.  Silveira, “ Imbibition  And  Germination  Of  Gamma Irradiation Phaseolus vulgaris Seeds, ” F. Crop Abst , vol. 38, no. 6, p. 300, 1974.
[30] D. Marcu, V. Cristea, and L. Daraban, “ Dose-dependent effects of gamma radiation  on  lettuce  (Lactuca  sativa  var.  capitata)  seedlings, ” Int.  J. Radiat. Biol. , pp. 1 – 5, 2012.
[31] T.  Luckey, “ Radiation  Hormesis  Overview, ” RSO  Mag. ,  vol.  4,  pp.  19 – 36, 2003.
[32] H.  Ali,  G.  Zoya,  S.  Sandal,  and  G.  Alvina, Effect  Of  Gamma  Radiation On Crop Production . Springer, 2016.
[33] Asadi, “ Peran  Sumberdaya  Genetik  Pertanian  Bagi  Pemuliaan  Mutasi ” Dalam  Mugiono,  D.  Sopandi,  S.  Hudiyono,  N.  Kuswandi,  Z.  Irawati,  P. Sidauruk,  H.  Winarno,  Sobrizal,  dan  R.  Chosdu  (eds.), ” in Prosiding Simposium dan Pameran Teknologi Aplikasi Isotop dan Radiasi , 2011.
[34] M.  G.  Hale  and  D.  M.  Orcutt, The  Physiology  Of  Plant  Under  Stress . New York: John Wiley & Sons Inc, 1987.
[35] F.  C.  Indriani,  H.  Kuswantoro,  R.  T.  Hapsari,  and  A.  Supeno, “ Radiosensitivitas  Beberapa  Varietas  Kedelai  Terhadap  Iradiasi  Sinar Gamma, ” in Prosiding Seminar Hasil Penelitian Tanaman Aneka Kacang dan Umbi , 2012.
[36] T.  D.S.  Hanafiah,  S.  Yahya,  and  D.  Wirnas, “ Studi  Radiosensitivitas Kedelai  (Glycine  max  (L.)  Merr)  Varietas  Argomulyo  Melalui  Iradiasi Sinar Gamma, ” Bionatura , vol. 12, no. 2, pp. 105 – 111, 2010. [37] B.H. Siwi, “ Pengaruh Radiasi Sinar Gamma (Co-60) Terhadap Beberapa Varietas
Padi Di Indonesia, ” 2016. [Online]. Available: http://www.digilib.batan.go.id/e-prosiding/pdf.
[38] Y.  C.  F.  Salsinha, “Pengaruh Iradiasi Sinar Γ (Gamma) Co -60  Terhadap Pertumbuhan  Padi  (Oryza  Sativa) ‘ Situ  Bagendit ’ Pada  Cekaman Kekeringan, ” Pap. J. Fak. Biol. , 2015.
[39] A.  F.  Hermon, “ Induksi  Mutasi  Dengan  Iradiasi  Sinar  Gamma  Dan Seleksi  In  Vitro  Untuk  Identifikasi  Embrio  Somatik  Kacang  Tanah  Cv. Lokal  Bima  Yang  Toleran  Pada  Media  Polietilen  Glikol, ” Crop.  Agro , vol. 3, no. 1, pp. 65 – 71, 2010.
[40] PT.  SADHANA, Buku  Kunci  Identifikasi  Tanaman  Tembakau .  Sadhana Agro Center, 2015.