JBP Vol. 20, No. 3, Desember 2018 – Halimatus Zahrah

## AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN PERUBAHAN MORFOLOGI DARI PROPIONIBACTERIUM
ACNES SETELAH PEMBERIAN EKSTRAK

## CURCUMA XANTHORRHIZA
Halimatus Zahrah 1 , Arifa Mustika 2 , Kartuti Debora 2
1, 3 Program Pascasarjana Fakultas Kedokteran, Universitas Airlangga; Jl. Airlangga No. 4-6 Kampus B, Surabaya (60286) Telp: 031-5041566, 5041536
2 Program Pascasarjana Fakultas Kedokteran, Universitas Airlangga, Surabaya e-mail: 1 zbcindonesia@gmail.com , 2 arifa-m@fk.unair.ac.id, 2 kartutidebora@gmail.com

## Abstrak
Penatalaksanaan utama pada masalah akne vulgaris adalah penggunaaan antibotik baik topikal  maupun  oral.  Akan  tetapi  penggunaan  antibiotik  dinilai  telah  menimbulkan  dugaan resistensi terhadap P. acnes sebagai agent penyebab akne sehingga  mendorong berbagai pihak untuk  mengembangkan  preparat  antiinflamasi  yang  dapat  diberikan  topical  ataupun  sistemik. Curcuma xanthorrhiza Roxb.  memiliki senyawa utama xanthorrizol yang dinilai potensial untuk dikembangan  sebagai  antibakteri.  Tujuan  penelitian ini  adalah  untuk  mengetahui  kadar  hambat minimum  dan  kadar  bunuh  minimum  serta  perubahan  struktur  dinding  sel  dari  Curcuma xanthorrhiza  Roxb.  terhadap  pertumbuhan  Propionibacterium  acnes.  Desain  penelitian  yang  di gunakan  adalah  eksperimen  dengan  sampel  P.  acnes  berupa  isolate  stock  culture  (ATCC ® 11827 ™ )  yang  selanjutnya  ditumbuhkan  pada  media  MHA.  Jumlah  replikasi  yang  digunakan sebanyak  4  ulangan.  Konsentrasi  ekstrak  Curcuma  xanthorrhiza  Roxb.  masing-masing  6,25 µg/ml,  12,5  µg/ml,  25   µg/ml,  50  µg/ml   dan  100  µg/ml.  Pengukuran  aktivitas  antibakteri didasrkan  pada  KHM,  KBM  dan  pengamatan  struktur  dinding  sel  bakteri  melalui  metode Microscop Electron Screening (MES). Pemberian ekstrak Curcuma xanthorrhiza Roxb. memiliki efek  antibakteri  terhadap  bakteri  P.  acnes  secara  in  vitro.  Konsentrasi  ekstrak  25   µg/ml merupakan kadar minimum yang mampu menghambat pertumbuhan P.acnes melalui dilusi cair, sedangkan  konsentrasi  minimal  yang  mampu  membunuh  P.acnes  adalah  50  µg/ml.  Bakteri  P. acnes  yang  dipapar  dengan  ekstrak  etanol  Curcuma  xanthorrhiza  Roxb.  mengalami  perubahan morfologi berupa timbulnya dinding sel kasar kasar akibat  penyusutan serta adanya  dinding sel yang  hancur  sehingga  sitoplasma  keluar  dan  tampak  seperti  meleleh.  Respon  daya  hambat pertumbuhan  bakteri  yang  dihasilkan  Curcuma  xanthorrhiza  Roxb.  dipengaruhi  oleh  senyawa aktif yang terkandung didalamnya seperti minyak atsiri, alkaloid, flavonoid, tanin, kurkuminoid dan terpenoid. Kandungan xanthorrizol yang dimiliki mampu menghambat pertumbuhan P.acnes mampu  merusak  aktivitas  enzim  sel,  selain  itu  kandungan  Curcuminoid  turut  berperan  dalam menghambat   pertumbuhan   bakteri   dengan  cara   mendenaturasi   dan   merusak   membran   sel sehingga proses metabolisme sel terganggu
Kata Kunci: Antibakteri, Akne vulgaris, Curcuma xanthorriza Roxb., MES

## 1.    PENDAHULUAN
Akne  vulgaris  (jerawat)  di  kawasan  Asia Tenggara,  terdapat  40-80%,  kasus  sedangkan  di
Indonesia  menurut  catatan  studi  dermatologi kosmetika  Indonesia  menunjukkan  yaitu  60% penderita  akne  vulgaris  pada  tahun  2014,  80% pada  tahun  2015  dan  90%  pada  tahun  2016.
Prevelansi tertinggi yaitu pada umur 14-17 tahun, dimana  pada  wanita  berkisar  83-85%  dan  pada pria  yaitu  pada  umur  16-19  tahun  berkisar  95- 100% (Afriyanti, 2015). Propionibacterium acnes dan staphylococcus  epidermis adalah  mikroba pembentuk nanah yang bertanggung jawab untuk pengembangan  berbagai  bentuk,  akne  vulgaris. Meskipun  akne  vulgaris  tidak  mengancam kehidupan,  namun  dapat  menyebabkan  masalah serius  dalam  kondisi  sosial  dan  psikologis penderita.  Hasil  penelitian  Vilar  (2015)  yang menunjukkan  bahwa  dari  317  responden  yang memiliki  masalah  jerawat,  48,6%  diantaranya merasa  stres,  19,4%  takut  untuk  berfoto,  22% takut  bertemu  seseorang  untuk  pertama  kali  dan 8,5% takut untuk bertemu dengan teman.
Penatalaksanaan akne vulgaris dibagi berdasarkan  derajat  keparahannya,  pada  akne derajat  ringan  terapi  yang  diberikan  hanya pengobatan topikal diantaranya asam retinoal atau benzoil peroksida. Pengobatan akne derajat sedang dan  berat  dapat  ditambahkan  terapi  oral  dengan menggunakan Doksisiklin ataupun antibiotik lain, namun pada ibu hamil dan menyusui direkomendasikan  untuk  memberikan  antibiotik eritromisin   (Widaty   dkk,   2017).   Tetrasiklin banyak  digunakan  untuk  akne  inflamasi,  akan tetapi  tetrasiklin  mulai  ditinggalkan  karena  angka resistensi  terhdap P.  acnes yang  cukup  tinggi. Turunan tetrasiklin yaitu doksisiklin dan minosiklin menggantikan tetrasiklin sebagai terapi antibiotik  oral  lini  pertama,  namun  eritromisin juga  dibatasi   penggunaannya  hanya  pada  ibu hamil  karena  mudah  terjadi  resistensi P.  acnes (Yenni,  2011).  Penggunaan  antibiotika      secara terus-menerus dapat menyebabkan resisten. Prevalensi P.  acnes resisten  antibiotik bervariasi  di  berbagai  negara.  Prevalensi  tinggi terjadi di berbagai negara eropa dengan resistensi eritromisin ⁄ klindamisin berkisar antara 45%–91% dan  resistensi  tetrasiklin  dari  5%  menjadi  26,4%. Prevalensi P.  acnes resisten antibiotik  di  wilayah asia  terdapat  perbedaan  yang  besar  misalnya  di Jepang, tingkat resisten eritromisin atau klindamicin  hanya  4%  dan  tetrasiklin  atau doksisiklin  hanya  2%.  Sedangkan  di  Korea, penelitian terbaru hanya menemukan satu dari 33 strain  (3,2%)  yang  diisolasi  resisten  terhadap klindamisin  hal  tersebut  dikarenakan P.  acnes resisten  antibiotik  belum berkembang  cukup  baik di Korea, sedangkan hasil penelitian di Indonesia
resistensi P.  acnes terhadap  antibiotik  tetrasiklin sebesar 12,9%, eritromisin 45,2% dan klindamisin 61,3% sedangkan pada doksisiklin dan minosiklin tidak didapatkan resistensi (Madelina, 2019).
Penggunaan antibiotik topikal hanya memicu resistensi  terbatas  pada  area  yang  dirawat  tetapi pada  penggunaan  antibiotik  oral  resistensi  dapat berkembang  ke  seluruh  area  tubuh.  Berdasarkan tinjauan    sistematis    terhadap    50    uji    klinis penggunaan antibiotik topikal, terdapat penurunan efektifitas  eritromisin  topikal  pada  jerawat  baik pada  lesi  inflamasi  maupun  non-inflamasi  yang diduga  terkait  dengan  perkembangan  resistensi antibiotik  dari P.  acnes (Clatici,  2015) . Hasil penelitian  lain  menunjukkan  munculnya  masalah penggunaan   eritromisin   topikal   dalam   jangka panjang  memicu  prevalensi  penderita  mengalami eritromisin yang resisten terhadap Staphylococcus dan Streptococcus (Leyden, 2009). Beberapa dari efek  samping  resistensi  antibiotik  berdasarkan hasil   penelitian   terdahulu   diantaranya   adalah infeksi  saluran  pernapasan  dimana  resiko terjadinya  infeksi  saluran  pernafasan  akut  (ISPA) pada  individu  dengan  jerawat  yang  menerima antibiotik 2,15 kali lebih besar dari pada individu yang  tidak  menerima  antibiotik.  Hasil  penelitian kohort  lain  didapatkan  resiko  terjadinya  faringitis pada pasien akne dengan terapi antibiotik sebesar 4,34    selain  itu  berbagai  hasil  studi  lain  juga menunjukkan  adanya  resiko  timbulnya  gangguan pembuluh vaskular, radang usus dan kanker pada pasien  akne  dengan  yang  mendapatkan  terapi antibiotik (Garret, 2012).
Timbulnya  dugaan  resistensi  penggunaan antibiotik   sebagai   terapi   jerawat    mendorong berbagai  pihak  untuk  mengembangkan  preparat antiinflamasi yang dapat diberikan topical ataupun sistemik,  misalnya  topical  nikotinamide  untuk mengobati  akne  meradang  ringan  dan  sedang, sementara benzoyl  peroxide dalam  obat  oles  anti akne  vulgaris  dianggap  sebagai  desinfektan  oles yang dijual bebas dan paling efektif dalam terapi bekas  noda  bekas  akne  vulgaris.  Oleh  karena  itu diperlukan alternatif bahan obat sebagai antibiotik terhadap P.  acnes pada  penatalaksanaan  masalah Akne vulgaris utamanya yang berasal dari bahan- bahan  alam  untuk  meminimalisir  efek  samping (Niyomkam, 2010).
Kandungan   potensial   sebagai   antibakteri yang  dimiliki  oleh Curcuma  xanthorrhiza  Roxb. adalah flavonoid.  Flavonoid merupakan  turunan
© (2018) Sekolah Pascasarjana Universitas Airlangga, Indonesia
JBP Vol. 20, No. 3, Desember 2018 – Halimatus Zahrah
senyawa fenol yang dapat menyebabkan terganggunya  integritas dinding dan  membran sel bakteri  yang  dapat  dilihat  dari  perubahan  ukuran dan morfologi sel bakteri (Jail, 2008). Kandungan bahan  aktif  pada Curcuma  xanthorrhiza  Roxb. yang  berpotensi  sebagai  antimikroba  membuat banyak pihak yang tertarik untuk memanfaatkannya  sebagai  terapi  topikal  jerawat. Saat ini telah beredar secara bebas berbagai jenis krim Temulawak yang  masih dipertanyakan hasil uji  klinis  serta  legalitasnya  dari  badan  pengawas obat  dan  makanan  BPOM  sehingga tingkat  dosis maksimal serta Kadar Hambat Minimum (KHM) serta  Kadar  Bunuh  Minimum  (KBM)  produk belum dapat diandalkan.
Berdasarakan latar belakang tersebut ditetapkan   tujuan   penelitian   yaitu:   mengetahui kadar    hambat    minimum    dan    kadar    bunuh minimum serta perubahan struktur dinding sel dari
Curcuma xanthorrhiza
Roxb.
terhadap pertumbuhan Propionibacterium acnes
2. TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Propionibacterium acnes
Akne vulgaris adalah reaksi dari penyumbatan pori-pori kulit disertai peradangan  yang  bermuara  pada  saluran kelenjar  minyak  kulit.  Sekresi  minyak  kulit menjadi  tersumbat,  membesar  dan  akhirnya mengering  menjadi  akne  vulgaris  (Muliyawan dan  Suriana,  2013).  Akne  vulgaris  adalah penyakit  peradangan  kelenjar  sebasea  yang sering  dijumpai  dan  berkaitan  dengan  folikel rambut   (disebut   unit   polisebasea).  Terdapat dua  jenis  akne  yaitu  meradang  dan  tidak meradang.  Kedua  jenis  akne  tersebut  ditandai oleh  pembentukan  sebum  yang  berlebihan. Sebum  yang  berlebihan  tersebut  tertimbun  di folikel sehingga folikel membengkak.
P.acnes merupakan  bakteri  gram  positif yang  secara  morfologi  dan  susunannya termasuk dalam kelompok bakteri corynebacteria ,    tetapi    tidak    bersifat toksigenik.  Bakteri  ini  termasuk  flora  normal pada  kulit, P.acnes merupakan  bakteri  yang memiliki peranan yang penting dalam patogenesis    akne    vulgaris    dengan menghasilkan  lipase  yang  memecah  asam lemak  bebas  dari  lipid  kulit.  Asam  lemak  ini
dapat  mengakibatkan  inflamasi  jaringan  ketika berhubungan dengan sistem imun dan mendukung  terjadinya  akne  vulgaris. P.acnes termasuk bakteri  yang tumbuh lambat. Bakteri ini  tipikal  bakteri  anaerob  gram  positif  yang toleran terhadap udara (Putri, 2010).
Gambar 1 Hasil Pengamatan Mikroskop Skrening Elektron  (MES) Propionibacterium acnes (Science Direct, 2016)

## 2.2 Curcuma xanthorhizza Roxb.
Temulawak    ( Curcuma    xanthorrhiza Roxb .)  merupakan  kelompok  jahe-jahean  yang tumbuh  setinggi  1,5  m.  Rimpang  temulawak merupakan bagian yang paling banyak digunakan  dan  merupakan  unsur  integral  dari masakan  dan  obat-obatan  di  Asian.  Konsumsi temulawak  secara  teratur  terbukti  memberikan perbaikan  signifikan  dari  kekakuan  sendi  di pagi  hari,  meningkatkan  kecepatan  berjalan dan    mengurangi    pembengkakan    sendi (Watson,    2019).    Temulawak    dapat    tumbuh baik  di  dataran  rendeh  hingga  ketinggian  750 meter  di  atas  permukaan  laut.  Temulawak dikembangbiakan  dari  rimpang,  rimpang  yang dipilih  sebagai  bibit  adalah  yang  sudah  dalam keadaan  kering  (Adiwijaya,  2010).  Secara tradisional,      temulawak      banyak      digunakan untuk  mengobati  batu  ginjal,  demam,  kadar kolesterol  tinggi,  nyeri  sendi,  dan  hepatitis. Banyak  penelitian  yang  telah  dilakukan  pada komponen  aktif  rimpang  temulawak  dalam potensinya  sebagai  antioksidan,  antilipidemia, antibakteri dan antijamur (Batubara, 2015).

## 3.    METODE PENELITIAN

## Rancangan Penelitian
Jenis penelitian yang digunakan di dalam penelitian    ini    yaitu    metode    eksperimen (experimental), dengan   rancangan post   test
JBP Vol. 20, No. 3, Desember 2018 – Halimatus Zahrah
Teknik  Mesin  Institut  Teknologi  Sepuluh
November Surabaya.
etanol Curcuma   xanthorrizha terhadap P. acnes dan mengetahui adanya perubahan pada 4.  Penelitian dilaksanakan pada bulan Januari struktur     dinding    sel P.     acnes dengan 2019
mengamati  ukuran  (diameter)  sel  bakteri P. acnes ,  keadaan  dinding  sel  bakteri P.  acnes dan  jumlah  sel  bakteri P.  acnes perlapangan pandang.  Pengujian  SEM  dilakukan  terhadap
only control group design .

## Sampel dan Besar Sampel
Sampel pada penelitian  ini  adalah Propionibacterium  acnes berupa isolate  stock culture   American   Type   Culture   Collection (ATCC)   dengan    nama Propionibacterium acnes (ATCC ® 11827 ™ )  yang  diperoleh  dari laboratorium  di  Medan  untuk  selanjutnya ditumbuhkan    dalam    media Mueller    Hinton Agar (MHA)  dan  diinkubasi  pada  suhu  35 o C selama  24  jam  dengan  kondisi  kadar  karbon dioksida sebesar 5%-10% (Forbes et al, 2007). Jumlah replikasi berdasarkan jumlah konsentrasi perlakuan adalah 4 ulangan. Variabel Penelitian Variabel bebas penelitian adalah konsentrasi   ekstrak Curcuma   xanthorrhiza Roxb. dengan konsentrasi masing-masing 6,25 µg/ml,  12,5  µg/ml,  25  µg/ml,  50  µg/ml  dan 100  µg/ml  (Anjusha,  2014).  Variabel  terikat pada penelitian ini adlaah aktivitas antibakteri yang    diukur    berdasarkan    Kadar    Hambat Minimum  (KHM)  dan  Kadar  Bunuh  Minimun (KBM)  pada  media  MHA  serta  perubahan struktur dinding sel bakteri P. acnes .

## Tempat Penelitian
1.  Ekstrak Curcuma xanthoriza diperoleh dari
Javaplant PT. Tri Rahardja Surakarta.
2.  Proses  uji  antibakteri  ekstrak  temulawak

## Prosedur Penelitian
Pembuatan  Media Mueller  Hinton  Agar dilakukan dengan menimbang 9,5 gram MHA, masukkan  dalam  gelas  baker  berisi  aquadest sebanyak   250   mL.   MHA   dihomogenkan dengan magnetic  stirer dan  dipanaskan  pada hot   plate   selama   ± 20   menit   pada   sushu 150 o C.    Media    harus    benar-benar    homogen yang    terlihat    dari    warna    kuning    bening. Masukkan  MHA  pada  tabung  erlenmeyer  500 ml,  tutup  dengan  kapas  dan  lakukan  sterilisasi pada   autoklaf   selama   15   menit   pada   suhu 121 o C  dan  tekanan  1,5  atm.  Selanjutnya menyiapkan  6  erlenmeyer  kemudian  berikan label  sesuai  dengan  perlakuan  P1,  P2,  P3,  P4 P5 dan K (kontrol).
Prosedur  pembuatan  media  MHA  yang mengandung ekstrak etanol Curcuma xanthorrhiza Roxb. berbagai konsentrasi adalah:
a.  Konsentrasi  larutan  stok  yang  digunakan adalah    1.000    µg/mL    kemudian ditambahkan  MHB  dengan  seri  konsentrasi pengenceran yang digunakan adalah 100%, 50%, 25%, 12,5%, 6,25% dan 0%.
b.  Larutan  diinkubasi pada suhu  25 o C selama 24 jam.
c.  Larutan  dari  setiap  erlenmeyer  kemudian dituangkan  ke  MHA  pada  dalam  cawan petri masing-masing berisi 10 mL.
d.  Ditunggu   sampai   media   di   dalam plate memadat.
e.  Media   yang   sudah   dilakukan   inokulasi
4
dilaksanakan    di    Laboratorium    Instalasi
bakteri P.acnes sebanyak  1,5x10  CFU  ke Mikrobiologi  Klinik  RSUD  Dr.  Soetomo Surabaya setiap  permukaan  media  MHA  di  cawan petri dengan metode mayo. 3. Proses       pengeringan       sampel       MES dilaksanakan  di  UPT.  Mikroskop  Elektron, Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga,  Surabaya  dan  di  Laboratorium f.   Media   uji   diinkubasi   pada   suhu   35 o C selama     24     jam     sebelum     dilakukan pengamatan
Pengamatan   menggunakan   MES   untuk mengetahui sifat aktivitas antimikroba ekstrak
© (2018) Sekolah Pascasarjana Universitas Airlangga, Indonesia
media  uji  MHA  dan  koloni P.  acnes dari konsentrasi  0  µg/mL  (Kontrol)  serta  MHA dengan ekstrak Curcuma xanthorriza konsentrasi 25 µg/mL (P3). Efek  antibakteri  ekstrak  etanol Curcuma xanthorrhiza Roxb.
terhadap
Propionibacterium  acnes secara in  vitro ditentukan  dari  ada  atau  tidak  adanya  bakteri P.acnes pada  media  MHA  yang  mengandung ekstrak  etanol Curcuma  xanthorrhiza  Roxb. pada berbagai konsentrasi. Gambaran perubahan struktur dinding sel P.acnes diamati pada Microscope  Electrone  Screening (MES). Hasil  pemeriksaan  MES  dijabarkan  secara deskriptif.

## 4.    HASIL DAN PEMBAHASAN
Penentuan  nilai  KHM  dilakukan  dengan mengidentifikasi  konsentrasi  ekstrak  terendah yang  telah  mampu  menghambat  pertumbuhan bakteri,  ditandai  dengan P.acnes tumbuh minimal  dibandingkan  dengan  konsentrasi kontrol. Hasil pengujian KHM ekstrak Curcuma xanthorrhiza Roxb. terhadap pertumbuhan    bakteri P.acnes dapat    dilihat pada tabel berikut:
Tabel 1. Hasil   Pengamatan   Kadar   Hambat Minimum   (KHM)   Ekstrak   Etanol
6,25  µg/ml  yang  ditunjukkan  dengan  adanya pertumbuhan bakteri pada MHA yang diinokulasi P.acnes demikian  pula  pada  MHA dan  MHB  pada  konsentrasi  kontrol  juga terdapat  pertumbuhan  bakteri P.acnes dalam jumlah  yang  cukup  banyak.  Berdsarkan  hasil pengamatan tampak bahwa konsentrasi terendah yang mampu menghambat pertumbuhan  bakteri  yang  ditunjukkan  dengan sedikitnya  bakteri  yang  umbuh  adalah  pada konsentrasi  25  µg/ml,  oleh  karena  itu  dapat disimpulkan bahwa ekstrak Curcuma xanthorrhiza  Roxb. memiliki  nilai  KHM terhadap  bakteri P.acnes pada  konsentrasi  25 µg/ml.
Kadar  Bunuh  Minimum  (KBM)  dinilai dengan mengam ati konsentrasi terendah yang menunjukkan    tidak    adanya    pertumbuhan bakteri   pada   media Mueller   Hinton   Agar (MHA)  pada  cawan  petri  yang  sudah diinokulasikan    sediaan    uji.    Konsentrasi terkecil    yang    dapat    membunuh    bakteri, ditandai  dengan P.acnes sudah  tidak  dapat tumbuh pada hasil goresan di cawan menandakan bakteri uji mati karena larutan uji dengan konsentrasi tersebut.
Tabel 2. Hasil    Pengamatan    Kadar    Bunuh Minimum  (KBM)  Ekstrak  Etanol Curcuma        xanthorrhiza        Roxb. Curcuma        xanthorrhiza        Roxb. Terhadap Bakteri P.acnes Terhadap Bakteri P.acnes KonsentrasiEkstrak KonsentrasiEkstrak 100      50 25       12,5 6,25  Kontrol 100      50 25       12,5 6,25  Kontrol R    µg/ml  µg/ml  µg/ml  µg/ml  µg/ml  (0 µg/ml) R    µg/ml  µg/ml   µg/ml    µg/ml   µg/ml  (0 µg/ml) R1       -          -          +         ++        ++         ++ R2       -          -          +         ++        ++         ++ R3       -          -          +          ++        ++          ++ R4       -          -          +         ++        ++          ++ Keterangan:
Negatif (-)      :  Tidak   ada    pertumbuhan   bakteri P.acnes pada media MHA Positif (+)      :  Ada  pertumbuhan  bakteri P.acnes pada media MHA
Positif (++)    :  Ada  pertumbuhan  bakteri P.acnes pada  media MHA dengan kuantitas tinggi
Berdasarkan  hasil  pada  5.1  diatas diperoleh  hasil  bahwa  ekstrak Curcuma xanthorrhiza  Roxb. memiliki  daya  antibakteri terhadap  bakteri P.acnes pada  MHA  dengan konsentrasi  ekstrak  25  µg/ml,  12,5  µg/ml  dan
R1       -          -          +         ++        ++          ++ R2       -          -          +         ++        ++          ++
R3       -          -          +         ++        ++          ++ R4       -          -          +         ++        ++          ++ Keterangan:
Negatif (-)      :  Tidak   ada    pertumbuhan   bakteri
P.acnes pada media MHA Positif (+)      :  Ada  pertumbuhan  bakteri P.acnes pada media MHA Positif (++)    :  Ada  pertumbuhan  bakteri P.acnes pada  media MHA dengan kuantitas tinggi
Berdasarkan tabel  5.2 dapat  dilihat  pada replikasi  R1-R4  pada  media  MHA  yang  berisi konsentrasi  ekstrak  50  µg/ml  dan  100  µg/ml tidak  tampak  adanya  pertumbuhan P.acnes . Sedangkan  pada  MHA  yang  mengandung ekstrak Curcuma  xanthorrhiza  Roxb. dengan konsentrasi  25  µg/ml  –  6,25  µg/ml  serta  pada
JBP Vol. 20, No. 3, Desember 2018 – Halimatus Zahrah
Hasil    uji    antibakteri    ekstrak    etanol Curcuma xanthorrhiza Roxb. terhadap P.acnes secara in   vitro dengan   metode   dilusi   agar diketahui  nilai KHM  adalah  25  µg/ml,  karena pada  konsentrasi  tersebut  media  uji  tampak jernih    yang    menunjukkan    tidak    adanya pertumbuhan  bakteri.  Nilai  dari  kadar  hambat minimal   ini   dapat   ditentukkan   dari   tingkat kekeruhan    dari    setiap    media,    kekeruhan Gambar 2. Hasil Mikrograf
Scanning tersebut    diakibatkan    adanya    pertumbuhan
MHA  kontrol  bakteri P.acnes tampak  tumbuh pada  media.  Hasil  pengamatan  diatas  tampak bahwa  konsentrasi  terendah  yang  mampu menghasilkan  MHA  yang  tidak  ditumbuhi bakteri P.acnes adalah  konsentrasi  50  µg/ml, maka  dapat  disimpulkan  bahwa  nilai  Kadar Bunuh  Minimum  (KBM) P.acnes pada perlakuan    ekstrak Curcuma    xanthorrhiza Roxb. adalah  50  µg/ml.  Berikut  hasil pengamatan  pertumbuhan  bakteri P.acnes perlakuan  ekstrak Curcuma  xanthorrhiza konsentrasi  50  µg/ml  pada  4  replikasi  yang dilakukan  baik  pada  media  MHA  maupun MHB.  Hasil  pengujian  aktivitas  antibakteri dengan  metode  dilusi  agar  menunjukkan aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri P.  acnes dengan  nilai  KHM  25  µg/ml  dan  KBM  50 µg/ml. Koloni bakteri P. acnes yang diperoleh dari    uji    antibakteri    menggunakan    metode dilusi  agar  pada  konsentrasi  ekstrak Curcuma xanthorrhiza    Roxb. 0%    (K)    dan    25% dilanjutkan  dengan  pemeriksaan  menggunakan
Scanning
Electron
Microscopy
pada pembesaran    5.000    –    20.000    kali    untuk mengetahui  gambaran  perubahan  struktur dinding sel bakteri P. acnes.
Electron Microscopy (SEM)  Bakteri P. acnes yang Tidak  Dipapar  Dengan  Ekstrak  Etanol Curcuma xanthorrhiza Roxb. Pada Pembesaran 5.000 Kali
Berdasarkan  hasil  pengamatan  diatas terlihat, bahwa bakteri P.acnes pada kelompok kontrol  terlihat  padat  dengan  kondisi  dinding sel bakteri utuh.
Gambar 3. Hasil       Mikrograf Scanning Electron Microscopy (SEM) Bakteri P. acnes yang Terpapar  Ekstrak  Etanol Curcuma  xanthorrhiza Roxb. dengan  Konsentrasi  25%  Pada  Pembesaran 5.000 Kali
Hasil  pengamatan  dinding  sel  bakteri P.acnes yang terpapar ekstrak etanol Curcuma xanthorrhiza  Roxb. dengan  konsentrasi  25% terjadi  perubahan  morfologi  berupa  dinding sel  yang  kasar  akibat  penyusutan  serta  adanya dinding  sel  yang  hancur  sehingga  sitoplasma keluar dan tampak seperti meleleh

## Analisis Hasil Penelitian
1.  Efek  Antibakteri  Ekstrak  Etanol Curcuma xanthorrhiza Roxb
bakteri pada media uji.
Konsentrasi  minimal  ekstrak Curcuma xanthorrhiza  Roxb. yang  mampu  membunuh P.acnes dinilai   dengan   mengamati   adanya pertumbuhan  bakteri  pada  media  MHA  yang telah  digoreskan  sediaan  uji  masing-masing konsentrasi.      Hasil      pengamatan      setelah dilakukan  inkubasi  selama  24  jam  pada  suhu 35 o C, bakteri P.acnes tidak dapat tumbuh pada konsentrasi  ekstrak  100  µg/ml  dan  50  µg/ml. Sehingga  dari  hasil  penelitian  ini,  konsentrasi 50  µg/ml  ditetapkan  sebagai  nilai  KBM  dari
© (2018) Sekolah Pascasarjana Universitas Airlangga, Indonesia
JBP Vol. 20, No. 3, Desember 2018 – Halimatus Zahrah
ekstrak  etanol Curcuma  xanthorrhiza  Roxb. yang mampu membunuh bakteri P.acnes.
2.  Gambaran Perubahan Struktur Dinding Sel Bakteri P.acnes
Hasil  pemeriksaan  menggunakan  SEM terhadap  bakteri P.acnes yang  tidak  dipapar dengan  ekstrak  etanol Curcuma  xanthorrhiza Roxb. 0  µg/ml.  (K)  menunjukkan  sel  bakteri P.acnes tidak  mengalami  kerusakan  morfologi dinding  sel.  Pertumbuhan  bakteri P.acnes terlihat   rapat   dengan   kondisi   dinding   sel bakteri  utuh  (Gambar  5.2).  Sedangkan  hasil pemeriksaan  menggunakan  SEM  terhadap bakteri P.acnes yang  dipapar  dcngan  ekstrak etanol Curcuma    xanthorrhiza    Roxb. konsentrasi  25  µg/ml   (P3),  menunjukkan  sel bakteri P.acnes mengalami perubahan morfologi  berupa  timbulnya  dinding  sel  kasar kasar  akibat  penyusutan  serta  adanya  dinding sel  yang  hancur  sehingga  sitoplasma  keluar dan tampak seperti meleleh.

## PEMBAHASAN
Hasil  penelitian  didapatkan  bahwa terdapat hubungan antara pemberian konsentrasi  bertingkat  ekstrak etanol Curcuma xanthorrhiza Roxb. terhadap hambatan pertumbuhan P.acnes ,  dimana  semakin  tinggi konsentrasi  ekstrak  maka  semakin  besar hambatan    pertumbuhan    sehingga    makin sedikit  jumlah  bakteri P.acnes yang  tumbuh. Kadar  hambat  minimal  adalah  konsentrasi terendah yang menunjukan pertumbuhan bakteri  dalam  jumlah  minimal  dibandingkan dengan konsentrasi kontrol, adapun nilai KHM pada  penelitian  ini  adlaah  25  µg/ml.  Kadar bunuh  minimal  adalah  konsentrasi  terendah yang  dapat  membunuh  pertumbuhan  bakteri dan diamati berdasarkan tidak adanya pertumbuhan bakteri pada media agar. Pengamatan  hasil  uji  dilusi  agar  menunjukkan bahwa  konsentrasi  50  µg/ml  merupakan  KBM yang ditandai dengan tidak ditemukan pertumbuhan bakteri P.acnes pada media agar.
Hasil  penelitian  ini  menunjukan  bahwa ekstrak Curcuma xanthorrhiza  Roxb. memiliki daya     antibakteri     terhadap     pertumbuhan
P.acnes yang  merupakan  jenis  bakteri  gram positif. Hasil ini sesuai dengan penelitian yang dilakukan oleh Diastuti (2014) yang menunjukan  ekstrak Curcuma  xanthorrhiza Roxb. yang mengandung α-curcumene, xanthorrizol dan monoterpen memiliki  efek antibakteri  yang  signifikan  terhadap  bakteri gram positif Bacillus subtilis dan Staphylococcus  aureus serta  bakteri  gram negatif Pseudomonas  aeruginosa dengan  nilai KBM  sebesar  15,6  g/mL  baik  pada  ekstrak dengan  ekstraksi aceton maupun n  hexane . Efek  antibakteri Curcuma  xanthorrhiza  Roxb. lemah  terhadap  bakteri  gram  negatif Shigella dysenteriae dan Vibrio  cholerae ,  serta  tidak memiliki   efek   antibakteri   terhadap   bakteri gram  negatif Escherichia  coli , Enterobacter aerogenes dan Salmonella thypi .
Hasil      penelitian      Diastuti      (2014) memiliki   nilai   KBM   yang   lebih   rendah daripada  penelitian  ini.  Hal  ni  dikarenakan perbedaan cara hidup bakteri. P.acnes merupakan  bakteri  anaerob  aerotoleran  yang berarti  bakteri  ini  dapat  hidup  walaupun  tidak terdapat  oksigen  disekitamya,  sedangkan B. subtilis bersifat strict aerob dan S. aureus serta P. aeruginosa bersifat aerobik atau mikroaerofilik  yang  berarti  bakteri  ini  masih bisa   bertahan   dalam   kadar   oksigen   yang rendah,  namun  tidak  dapat  bertahan  ketika tidak  ada  oksigen  (Cobas,  2010).  Sehingga diperlukan konsentrasi yang lebih agar mampu membunuh P.acnes pada penelitian ini.
Penelitian   lainnya   oleh   Adila   (2013) menyebutkan bahwa  ekstrak  Temulawak memberikan  daya  hambat  terhadap  ketiga mikroba  uji Candida  albicans (13,07  mm), Staphylococcus  aureus (15,75  mm)  dan Eschericia  coli (31,56  mm).  KHM  dan  KBM ekstrak  segar  rimpang  temulawak  terhadap E. coli masing-masing 12,5% dan 25%.
Sedangkan  pada C.  albicans dan S.  aureus ekstrak segar temulawak tidak mampu membunuh    bakteri    uji.    Perbedaan    nilai tersebut    dapat    disebabkan    oleh    struktur dinding  sel E.coli yang  berbeda  dengan S. aureus dan C.  albicans, dimana E.  coli meskipun  tergolong  pada  bakteri  gram  negatif yang   memiliki   susunan   dinding   sel   rumit namun E.coli memiliki  protein  porin  pada membran   luar   dinding   sel   yang   berfungsi
sebagai    saluran    keluar    masuknya    senyawa aktif,  sehingga  senyawa  aktif  pada  temulawak akan  mudah  masuk  dan  merusak  aktivitas enzim sel yang  menyebabkan kerusakan sel E. coli (Sunatmo,  2009).  Sedangkan  pada C. albicans meskipun  tergolong  bakteri  gram positif namun struktur selnya terjadi pembentukan  klamidospora  yang  membentuk dinding  lebih  tebal  sehingga  sulit  ditembus oleh   senyawa   antimikroba   (Jawetz,   et   al., 2011)
Hasil    penelitian    oleh    Adila    (2013) tersebut    mendukung    hasil    penelitian    ini dimana  ekstrak Curcuma  xanthorriza  Roxb. mampu  untuk  membunuh  bakteri.  Akan  tetapi pada  penelitian  Adilla      (2013)  ekstrak  segar rimpang  temulawak tidak  dapat  membunuh  C. albicans.  P.acnes sebagai  bakteri  gram  positif non  spora  dan  tersusun  dari  polimer  yang bersifat  polar  sehingga  mudah  ditembus  oleh antibakteri    (Dewi,    2010).    Dibandingkan dengan C.  albicans, meskipun  sama-sama tergolong  bakteri  gram  positif  namun C. albicans, mampu   membentuk   spora   yang dapat  melindunginya  dinding  selnya  dari pengaruh antibakteri.
Hasil  pemeriksaan  menggunakan  SEM terhadap  bakteri P.acnes yang  dipapar  dcngan ekstrak  etanol Curcuma  xanthorrhiza  Roxb. konsentrasi  25  µg/ml   (P3),  menunjukkan  sel bakteri P.acnes mengalami perubahan morfologi  berupa  timbulnya  diding  sel  kasar akibat  penyusutan  serta  adanya  dinding  sel yang  hancur  sehingga  sitoplasma  keluar  dan tampak  seperti  meleleh.  Hal  ini  selan disebabkan  oleh  kandungan  xanthorrizol  juga disebabkan  oleh  kandungan  curcumin  yang dmiliki Curcuma  xanthorriza  Roxb. Hasil penelitian  lain  oleh  Tyagi  (2015)  melaporkan bahwa Curcumin memiliki    antibakteri terhadap semua bakteri uji baik dari kelompok Gram  positif  maupun  Gram  negatif  dan  daya bunuh  meningkat  seiring  peningkatan  dosis dan  waktu  inkubasi.  Daya  bunuh  curcumin 100%  terhadap  bakteri  uji  dengan  dosis  100 μM  curcumin  bahkan  ketika  diujikan  pada bakteri  dengan  kepadatan  yang  lebih  tinggi (106    CFU/ml).    Sedangkan    ditinjau    dari pengamatan dilaporkan bawah terjadi perubahan    kekasaran    permukaan    dan timbulnya    lekuk    pada    dinding    sel.    Pada
inkubasi  dengan  dosis  yang  lebih  tinggi menyebabkan    terjadinya    kebocoran    dinding sel.
Dinding       sel       bakteri       berfungsi melindungi  membran  sitoplasma,  memelihara bentuk sel, dan mencegah lisis karena tekanan osmosis.  Jika  dinding  sel  rusak  atau  tidak terbentuk   sel   akan   lisis   atau   tidak   dapat membelah.  Lisisnya  sel  terjadi  karena  cairan disekitar  yang hipoosmosis berdifusi  ke  dalam sel  menyebabkan  pembengkakan  ( swell )  dan diikuti lisis (Priyanto, 2010).
Sebagian   besar   akne   ringan   sampai sedang   membutuhkan   terapi   topikal.   Acne sedang  sampai  berat  menggunakan  kombinasi terapi  topikal  dan  oral.  Terapi  acne  dimulai dari  pembersihan  wajah  menggunakan  sabun. Beberapa    sabun    sudah    mengandung antibakteri,       misalnya       triclosan       yang menghambat    kokus    positif    gram.    Selainitu juga    banyak    sabun    mengandung    benzoil peroksida   atau   asam   salisilat   (Yenni,   dkk, 2011).  Secara  in  vitro, P.acnes sangat  sensitif terhadap   beberapa   antibiotik   dari   golongan yang  berbeda,  termasuk  makrolida,  tetrasiklin, penisilin,          klindamisin,          sefalosporin, trimetoprin,  dan  sulfonamid.  Azitromisin merupakan   antibakterial   yang   mengandung nitrogen   dan   merupakan   derivat   metal   dari eritromisin  dengan  mekanisme  kerja  dan penggunaan  yang  mirip  dengan  eritromisin (Ramdani, 2015).
Kandungan  minyak  atsiri  yang  diduga bekerja pada bakteri adalah terpenoid, phenol. Terpenoid      merupakan     metabolit     sekunder yang  memberikan  bau-bauan  pada  tumbuhan dan  diduga  memiliki  kemampuan  secara  aktif melawan bakteri,  jamur, dan protozoa. Terpenoid         yang         disebut         dengan petalostemumol memperlihatkan aktifitas terhadap    Bacillus    subtilis,    dan    Candida albicans  (Naim,  2004).  Terpenoid  aktif melawan       bakteri,       tetapi       mekanisme antibakterial  terpenoid  masih  belum  benar- benar diketahui. Aktifitas antibakteri terpenoid diduga  melibatkan  pemecahan  membran  oleh komponen-komponen lipofilik (Cowan, 1999).
Ekstrak Curcuma   xanthorriza   Roxb. memiliki   senyawa   antimikroba   yang   khas yaitu xanthorrizol yang  tidak  dimiliki  oleh rimpang Curcuma yang     lain     meskipun
JBP Vol. 20, No. 3, Desember 2018 – Halimatus Zahrah
Clatici,     Victor     Gabriel, et     al . 2015. Propionibacterium Acnes And
kandungan   tersebut   hanya   dalam   jumlah sangat  kecil.  Hal  ini  sesuai  dengan  pernyataan Hansel   (1980)   yaitu   senyawa xhantorrizol pada temulawak ≥6 % sedangkan pada kunyit ≥3%.  Senyawa xanthorrizol merupakan senyawa  aktif  antibakteri  utama  yang  terdapat dalam    rimpang    temulawak    Aktivitas antibakteri dari xanthorrizol mempunyai stabilitas yang baik terhadap panas, yakni pada temperatur  tinggi  antara  60-121 o C.  Hasil penelitian  Fatmawati  (2008)  juga  mendapati bahwa  bahwa  kandungan xanthorrizol mampu menghambat pertumbuhan Streptococcus mutans dan S. aureus .
Respon  daya  hambat  pertumbuhan bakteri yang dihasilkan Curcuma  xanthorrhiza Roxb. dipengaruhi  oleh  senyawa  aktif  yang terkandung  didalamnya  seperti  minyak  atsiri, alkaloid,  flavonoid,  tanin,  kurkuminoid  dan terpenoid    (Rukmana,    2014).    Senyawa flavonoid    mampu    merusak    dinding    sel sehingga    menyebabkan    kematian    sel. Flavonoid juga dapat menghambat pembentukan  protein  sehingga  menghambat pertumbuhan bakteri. Selain flavonoid kandungan senyawa lain seperti senyawa tanin juga  dapat  merusak  membran  sel.  Senyawa tanin  dapat  merusak  pembentukan  konidia jamur.    Kandungan    senyawa    lain    seperti alkaloid  dalam  rimpang Curcuma  xanthorriza Roxb. mampu  mendenaturasi  protein  sehingga merusak  aktivitas  enzim  dan  menyebabkan kematian sel (Dermawaty, 2015).
Cikrici  et  al.,  (2008)  menambahkan  bahwa aktivitas    antibakteri    curcuminoid    terhadap aktivitas   bakteri   dengan   cara   menghambat aktivitas     enzim    siklooksigenase-2     (cox-2) yang  mengubah  asam  arakhidonat  menjadi prostaglandin  yang  menyebabkan  timbulnya rasa  sakit.Curcuminoid  merupakan  senyawa fenolik     yang     juga     dapat     menghambat pertumbuhan bakteri dengan cara mendenaturasi  dan  merusak  membran  sel sehingga proses metabolisme sel akan terganggu.

## 5.    KESIMPULAN DAN SARAN
Pemberian  ekstrak Curcuma  xanthorrhiza Roxb. memiliki  efek  antibakteri  terhadap bakteri P.acnes secara in  vitro yang  diduga karena       adanya       kandungan       senyawa
xanthorrizol, alkaloid, flavonoid, tanin, kurkuminoid dan terpenoid. Konsentrasi ekstrak  25  µg/ml  merupakan  kadar  minimum yang mampu menghambat (KHM) pertumbuhan P.acnes melalui  dilusi  cair, sedangkan  konsentrasi  minimal  yang  mampu membunuh  (KBM) P.acnes adalah  50  µg/ml. Bakteri P.acnes yang  dipapar  dengan  ekstrak etanol Curcuma    xanthorrhiza    Roxb. mengalami perubahan morfologi berupa timbulnya  dinding  sel  kasar  kasar  akibat penyusutan  serta  adanya  dinding  sel  yang hancur sehingga sitoplasma keluar dan tampak seperti meleleh

## REFERENSI
Afriyanti &  Rizqun,  N., 2015.  Akne  Vulgaris Pada Remaja. Jurnal       Majority Vol.4/No.6/    Februari 2015. Fakultas Kedokteran. Universitas Lampung. Balouiri,  Mounyr, et  al .  2016.  Methods  for  in vitro  evaluating  antimicrobial  activity: A  review. Journal  of  Pharmaceutical Analysis Vol. 6.
Antibiotic   Resistance   –   Impact   On Public  Health. Romanian  Journal  of Clinical and Experimental Dermatology – RoJCED. Online ISSN 2392-8697. 2. 242-247.
Coban,  M., et  al .  2017.  Quality  of  Life  in Patients  with  Mild  or  Moderate  Akne vulgaris. Clinical  Dermatology  Open Access Journal. Vol. 2(5): 1 Jawetz,  M.  & Adelberg’s. 2011. Mikrobiologi Kedokteran,   Edisi   23,   diterjemahkan oleh Mudihargi, E.,dkk . Jakarta: ECG. Kumala, Shirly., & Pratiwi, A. A. (2014). Efek Antimikroba dari Kapang Endofit Ranting  Tanaman  Biduri. JFIOnline| Print   ISSN   1412-1107|   e-ISSN   2355- 696X, 7(2) . Leyden,     J.     J., et     al .     2009.     Clinical Considerations   in   the   Treatment   of Akne  vulgaris  and  Other  Inflammatory Skin     Disorders:     a     Status     Report.
© (2018) Sekolah Pascasarjana Universitas Airlangga, Indonesia
JBP Vol. 20, No. 3, Desember 2018 – Halimatus Zahrah
Dermatologic Clinics Journal , 27(1), 1– 15. doi:10.1016/j.det.2008.07.008 Madelina,    W    dan    Sulistyaningsih.    2019. Review:    Resistensi    Antibiotik    Pada Terapi    Pengobatan    Jerawat. Jurnal Farmaka Volume 16 Nomor 2 Niyomkam,   P. et   al .   2010, Antibacterial activity of Thai herbal extracts on acne involved       microorganism,       Jurnal, Pharm. Biol ., 48(4), 375–380. Sari, P.Y. 2010. Pengaruh Penggunaan Masker Biji  Kembang  Pukul  Empat  (Mirabilis jalapa     L.)     Terhadap     Pengurangan Jerawat  (Akne  vulgaris)  Tipe  Ringan. Jurnal JTR UNJ Vol 8 No 8 (2015):
Science  Direct.  2016. Transcriptomic analysis  of  Propionibacterium  acnes biofilms in vitro. https://www.sciencedirect.com/scien ce/article/pii/ S1075996416301202
[Diakses tanggal 13 Agustus 2019] Vilar   GN,   Filho   JFS,   Santos   LA.   2015. Quality    of    Life,    Self-esteem    and psychosocial    factors    in    Adolescents with  Akne  vulgaris. An  Bras  Dermatol . 90(5): 622-629. Widaty,  S,  dkk.  2017. Panduan  Praktik  Klinis bagi Dokter Spesialis Kulit dan Kelamin di    Indonesia. Jakarta:    Perhimpunan Dokter Spesialis Kulit dan Kelamin. Wijayakusuma,       M.       Hembing.       2007. Penyembuhan      dengan      Temulawak . Jakarta: Sarana Pustaka Prima Yenni,  Amin  Safrudin,  Djawad  Khairuddin. 2011. Perbandingan        Efektivitas Adapelene  0.1%  Gel  Dan  Isotretinoin 0.05%    Gel    Yang    Dinilai    Dengan Gambaran Klinis Serta ProfilInterleukin  1  (IL-1)  Pada  Akne vulgaris. JST Kesehatan.
Zaghi,  F.  2011.  Transmission  And  Scanning Electron      Microscope      Study      Of Antimicrobial   Effect   Of   Pholiphenol Compound. Am. Soc. Microbiol : 1-14