## Kemampuan Daya Hambat Beberapa Macam Sabun Antiseptik Terhadap Pertumbuhan
Staphylococcus aureus dan Escherichia coli
(Inhibiton Ability of Antiseptic Soaps againts the Growth of Staphylococcus aureus and
Escherichia coli)
Lenni Fitri
Staf Pengajar Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Syiah Kuala

## Abstract
This research is  aimed to find out ability  some kind antiseptic soaps inhibiting the growth of Staphylococcus  aureus and Eschericia  coli bacteria.  The  research  method  used  Randomized Completely  Block  Design  Sub  Sampling  with  6  treament  and  3  replication,  they  are:  antiseptic soap A, B, C, D, phenol 2% and aquadest. The group consist of S. aureus and E. coli bacteria. The inhibit  experiment  was  done  by  using  Kirby-Bauer  methode.  The  parameter  analyzed  by  using Analysis  of  Variance  (ANOVA)  continue  with  the  Duncan’s  Multiple  Rang e  Test  (DMRT).  The result  showed  that  there  were    significant  differences  of  inhibit  zone  that  formed  from  both bacterias  .  The  result  of  the  antiseptic  soap  suspend  inhibit  zone, S.  aureus bacteria  has  larger diameter than E. coli. Soap A, B,  C and D  with 50% concentrate toward both bacteria,  each  has average diameter 25, 16 mm, 15,6 mm, 11,5 mm and 9,83 mm while phenol  has 15,0 mm. This result showed that soap A, B, and C has the equal ability to phenol 2%. Base on Duncan Multiple Range Test (DMRT), it is found out that the real differences of the inhibit zone between the two bacteria as well the real differences of treatment forward those bacteria (P<0,05).
Keyword: Antiseptic soap, Staphylococcus aureus and Escherichia coli

## PENDAHULUAN

## Latar Belakang
Sabun  merupakan  suatu  bahan  yang digunakan  untuk  membersihkan  kulit  baik dari  kotoran  maupun  bakteri.  Sabun  yang dapat  membunuh  bakteri  dikenal  dengan sabun  antiseptik  (Anonimus,  2008).  Sabun antiseptik  atau  disebut  juga  dengan  sabun obat mengandung asam lemak yang bersenyawa  dengan  alkali  dan  ditambah dengan  zat  kimia  atau  bahan  obat.  Sabun  ini berguna untuk mencegah, mengurangi ataupun  menghilangkan  penyakit  atau  gejala penyakit pada kulit (Lubis, 2003).
Tidak seperti sabun biasa, sabun antiseptik  mengandung  komposisi  khusus yang  berfungsi  sebagai  antibakteri.  Di  dalam sabun, triclosan dan triclocarban merupakan zat antibakteri yang paling sering ditambahkan.  Bahan  inilah  yang  berfungsi mengurangi  jumlah  bakteri  berbahaya  pada kulit.  Ada  juga sabun  antiseptik  yang menggunakan choroxylenol untuk membunuh bakteri.  Sabun  antiseptik  yang  baik  harus memiliki  standar  khusus.  Pertama,  sabun harus  efektif  menyingkirkan  kotoran.  Kedua, sabun  tidak  merusak  kesehatan  kulit,  karena kulit  yang  sehat  adalah bagian  dari  sistem
kekebalan  tubuh  (Rachmawati  dan  Triyana,
2008). Salah satu bakteri yang dapat menyebabkan  infeksi  pada  kulit  adalah Staphylococcus  aureus (gram  positif)  dan Escherichia  coli (gram  negatif).  Infeksi  kulit yang disebabkan oleh Staphylococcus aureus dapat berupa jerawat dan impetigo (Jawetz et al., 2001),  sedangkan Escherichia  coli merupakan  bakteri  gram  negatif  yang  sering menyebabkan  infeksi  diare  pada  manusia yang  dapat  ditularkan  melalui  air  maupun tangan yang kotor.
Sabun  antiseptik  memiliki  kemampuan dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri, baik  bakteri  gram  positif  maupun  gram negatif.  Untuk  mengetahui  kemampuan masing-masing daya hambat sabun antiseptik, perlu dilakukan penelitian tentang kemampuan sabun antiseptik dalam menghambat  pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Escherichia coli.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui daya hambat beberapa macam sabun
antiseptik terhadap pertumbuhan
Staphylococcus aureus dan Escherichia coli.

## METODE PENELITIAN

## Tempat Penelitian
Penelitian  dilaksanakan  di  Laboratorium Mikrobiologi  FMIPA  Universitas  Syiah Kuala Banda Aceh.
Alat dan Bahan Penelitian Alat-alat yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah:  oven,  timbangan, pengaduk,  cawan  petri  steril,  tabung  reaksi, pipet ukur, batang penyebar, pinset, autoklaf, inkubator,  jarum  ose,  kompor  listrik,  labu Erlenmeyer,  gelas  ukur,  lampu  spiritus  dan spidol.
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah:  4  sampel  sabun  yang akan  diperiksa  (sabun  A,  sabun  B,  sabun  C dan  sabun  D),    media Mueller  Hinton  Agar (MHA), biakan bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli yang berumur 24 jam,  fenol  2%,  aquades  steril,  kertas  cakram kosong,  larutan  pembanding McFarland 0,5 dan  alkohol  70%,  kapas,  kertas  label  dan alumunium foil.

## Metode Penelitian
Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  metode  Rancangan      Acak Kelompok Sub Sampling, dengan 6
perlakuan yaitu sabun A, B, C, dan D dengan konsentrasi  50%,  kontrol  negatif  (akuades) dan  kontrol  positif  (fenol  2  %).  Masing- masing perlakuan diulang sebanyak 3 kali.

## Cara Kerja
Pembuatan  media Mueller  Hinton  Agar (MHA)
Media MHA ditimbang sebanyak 6  gram dimasukkan    ke  dalam  erlenmeyer  1000  ml, kemudian  dilarutkan  dengan  200  ml  aquades steril, dipanaskan sampai mendidih. Kemudian  media  MHA  yang  dibuat  dalam erlenmeyer ditutup dengan kertas alumunium foil dan disterilkan dalam autoklaf selama 15 menit  dengan  suhu  121 o C.  Kemudian  media dituangkan  ke  dalam  cawan  petri  yang  akan digunakan, selanjutnya setelah media menjadi padat,  maka  cawan  petri  yang  berisi  media dibungkus  kemudian  disimpan  dalam  lemari es.  Media  dapat  digunakan  langsung  pada saat akan inokulasi.
Pembuatan suspensi sabun antiseptik Masing-masing sabun
ditimbang sebanyak  3  gram  kemudian  dimasukkan dalam tabung reaksi dan ditambah aquades 3
ml kemudian dilarutkan sampai larut. Setelah itu disterilkan menggunakan autoklaf.
Pembuatan suspensi bakteri.
Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli dibiakkan  pada  media  MHA  terlebih dahulu  selama  24  jam.  Kemudian  koloni S. aureus dan E.  coli hasil  biakan  tersebut diambil  satu  ose  dimasukkan  ke  dalam tabung reaksi yang telah berisi aquades steril, dengan  cara  koloni  bakteri  dikocok  sampai koloni  halus  dan  tercampur  dengan  suspensi media sampai terbentuk kekeruhan. Selanjutnya  disetarakan  dengan  standar McFarland (McF) 0,5.
Uji antimikrobial sabun antiseptik. Uji  antimikrobial  dilakukan  dengan metode kirby-bauer,  menggunakan  cakram. Tiap  cawan  petri  yang  berisi  media  MHA yang  telah  disterilkan  dimasukkan  masing- masing  0,1  ml  suspensi  bakteri  dengan kekeruhan  yang  sesuai  standar  McF  0,5 menggunakan  pipet  volume  steril. Kemudian disebarkan  atau  diratakan  dengan  batang penyebar  steril  hingga  suspensi  bakteri merata diseluruh permukaan media.
Selanjutnya  setelah  kering  diletakkan  kertas cakram  yang  telah  berisi  sabun  antiseptik yang  diinginkan  di  atas  media  yang  telah dibagi  menjadi  4  bagian  dengan  konsentrasi masing-masing  sampel  50%  dengan  volume 20  µl.  Kemudian  pada  MHA  lain  diletakkan cakram  yang  berisi  kontrol  negatif  (aquades) dan  kontrol  positif  (fenol  sebagai  antiseptik) pada daerah yang berbeda.
Selanjutnya  media  diinkubasi  pada  suhu 37 o C selama 24 jam dan diamati pertumbuhan  bakteri  dengan  zona  hambat pada  setiap  daerah.  Apabila  zona  hambat belum  tampak,  maka  media  diinkubasi  lagi selama  24  jam.  Zona  hambat  yang  terbentuk diukur  diameternya  dengan  menggunakan penggaris dalam milimeter.

## Parameter
Parameter  yang  diamati  adalah  diameter zona hambat yang terbentuk.

## Analisa data
Data  yang  diperoleh  dari  penelitian  ini dianalisis  dengan  menggunakan  Analisis Varian  (ANAVA),  dilanjutkan  Uji  Jarak Ganda Duncan (UJGD).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil penelitian diperoleh bahwa suspensi sabun  antiseptik  A,  B,  C  dan  D  dengan konsentrasi  50%  terhadap  kedua  bakteri  uji membentuk zona
hambat terhadap pertumbuhan bakteri dengan rata-rata diameter  15,6  mm,  11,5  mm,  9,83  mm  dan 25,16  mm.  Pemberian  akuades  sebagai kontrol  negatif  memiliki  rata-rata  diameter 5,00 mm sedangkan pemberian fenol sebagai kontrol  positif  dengan  konsentrasi  2% membentuk  zona  hambat  dengan  diameter rata-rata 15,00 mm.
Hasil  Analisis  Varian  dari  kedua  bakteri yang  diuji  menunjukkan  adanya  perbedaan yang  nyata.  Uji  suspensi  sabun  antiseptik memperlihatkan  pengaruh  yang  sangat  nyata terhadap  diameter  daya  hambat  (P<0,01). Hasil  Uji  Jarak  Ganda  Duncan  (UJGD)  pada taraf  0,05  dapat  dilihat  pada  tabel  dibawah ini.
Tabel 1. Rata-rata diameter zona daya hambat
akibat pemberian beberapa suspensi  sabun  antiseptik  dan fenol 2%. Perlakuan (konsentrasi 50%) Diameter daya hambat P 1 (suspensi sabun A) 15,6 b ± 7,06 P 2 (suspensi sabun B) 11,5 ab ± 4,46 P 3 (suspensi sabun C) 9,83 ab ± 2,78 P 4 (suspensi sabun D) 25,16 c ± 3,43 P 5 (akuades) 5,00 a ± 0,00 P 6 (fenol) 15,0 ab ± 3,09
Keterangan : Angka yang diikuti oleh huruf yang sama pada kolom atau baris yang sama tidak berbeda nyata b erdasar uji DMRT pada α = 0,05.
Berdasarkan  tabel  di  atas  terlihat  bahwa diameter  zona  hambat  yang  paling  besar ditemukan  pada  perlakuan  P 4 yaitu  sabun  D, dengan jumlah rata-rata 25,16 mm dan sangat berbeda  nyata  dengan  semua  perlakuan lainnya.  Pada  P 1, P 2, P 3 ,  P 5 dan  P 6 tidak menunjukkan  perbedaan  yang  nyata.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  sabun  A,  B  dan    C memiliki  kemampuan  yang  sama  dengan fenol 2%.
Tabel  di  atas  juga  menunjukkan  fenol mampu menghambat
pertumbuhan
Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli. Zona hambat yang terbentuk akibat pemberian  suspensi  sabun  antiseptik  dalam konsentrasi  50%  dan  fenol  2%  pada pertumbuhan  bakteri S.  aureus dapat  dilihat pada gambar 1 dan 2.
Tabel 2 Klasifikasi respon hambatan pertumbuhan  bakteri  menurut Greenwood yang  disitasi  oleh Pratama (2005). Diameter zona hambat Respon hambatan pertumbuhan ...>  20 mm Sangat kuat 10 - 20 mm Kuat 5 - 10 mm Sedang ≤ 5 mm Lemah
Tabel  di  atas  menyatakan  bahwa  apabila diameter zona hambat lebih besar dari 20 mm maka  respon  hambatan  pertumbuhannya sangat  kuat  sedangkan  respon  hambatan pertumbuhan dinyatakan lemah jika diameter zona  hambat ≤  5    mm.  Hasil  penelitian
menunjukkan bahwa konsentrasi sabun antiseptik  50%  dapat  digunakan  sebagai antibakteri  terhadap Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli.  Berdasarkan  tabel diatas  juga  menunjukkan  bahwa  suspensi sabun antiseptik dengan konsentrasi 50% dari kedua  bakteri  yang  berbeda  ini  memiliki diameter  zona  hambat  yang  berbeda-beda juga.  Zona  hambat  yang  dibentuk  oleh  fenol menunjukkan  respon  hambatan  pertumbuhan yang kuat. Sedangkan pada akuades tidak ada respon hambatan pertumbuhan karena memiliki  diameter  zona  hambat  5,00  mm yang  merupakan  diameter  dari  cakram tersebut.
Gambar 1 Zona hambat suspensi sabun antiseptik terhadap pertumbuhan S. aureus pada konsentrasi 50%. Keterangan :
A : Sabun yang mengandung triclosan dan triclocarban
B : Sabun yang mengandung triclocarban
C : Sabun yang mengandung chloroxylenol
D : Sabun yang mengandung triclosan dan triclocarban
1  : Cakram yang mengandung sabun antiseptik
2  :  Koloni bakteri
3  :  Zona Hambat
Gambar 2. Zona hambat fenol dan  akuades terhadap pertumbuhan S. aures pada konsentrasi 50%.
Keterangan : A : cakram yang mengandung fenol 2% B : cakram yang mengandung akuades C : Zona Hambat D : Koloni Bakteri
1 3 2 D C B A
B D C A
Gambar 4.3. Zona hambat suspensi sabun antiseptik terhadap pertumbuhan E.coli pada konsentrasi 50%. Keterangan :
A : Sabun yang mengandung triclosan dan triclocarban
B : Sabun yang mengandung triclocarban
C : Sabun yang mengandung chloroxylenol
D : Sabun yang mengandung triclosan dan triclocarban
1  : Cakram yang mengandung sabun antiseptik
2  :  Koloni bakteri
3  :  Zona Hambat
Gambar 4.4. Zona hambat fenol terhadap akuades pada pertumbuhan E.coli pada konsentrasi 50%. Keterangan : A : cakram yang mengandung fenol 2% B : cakram yang mengandung akuades
C : Zona Hambat D : Koloni Bakteri
C D B A 3 1 2 B C A D
Pada  hasil  penelitian  terlihat  bahwa  sabun  D memiliki  zona  hambat  yang  paling  besar dibandingkan dengan sabun yang lain. Hal ini mungkin  terjadi  karena  kandungan  bahan aktif  yang  berbeda  dari  ke  empat  sabun tersebut.  Sabun  A  hanya  mengandung triclosan dan triclocarban sedangkan  sabun B  mengandung triclocarban dan  sabun  C hanya  memiliki  kandungan  bahan  aktif chloroxylenol.  Dilihat  dari  komposisi  sabun tersebut, ternyata sabun D selain mengandung triclosan dan triclocarban sebagai    antibakteri,  sabun  tersebut  juga mengandung  zat  antibakteri  lain  yaitu benzyl alkohol.  Menurut  Rahardjo  (2008) benzyl alkohol tidak berwarna, berbentuk cairan dan berbau aromatik yang ringan. Biasa digunakan  pada  sabun,  parfum  dan  juga dibidang  industri.  Benzyl  alkohol  biasa digunakan sebagai antiseptik karena memiliki sifat bakteriostatik.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa diameter  zona  hambat  yang  terbentuk  dari bakteri Staphylococcus aureus berbeda dengan  zona  hambat  yang  terbentuk  dari bakteri Escherichia  coli.  Perbedaan  besarnya zona  hambat  ini  diduga  dipengaruhi  oleh struktur dinding sel antara bakteri Staphylococcus  aureus (gram  positif)  dan Escherichia  coli (gram  negatif).  Hal  ini sesuai dengan Dharmawan et al. (2009) yang menyatakan bahwa adanya variasi besar zona hambat  yang  diperoleh  dalam  penelitian disebabkan  oleh  senyawa  metabolit  skunder yang  dihasilkan  oleh  masing-masing  bakteri yang  memiliki struktur  kimia, komposisi dan kandungan yang berbeda.
Zona  hambat  yang  terbentuk  akibat pemberian  suspensi  sabun  antiseptik  dalam konsentrasi  50%  dan  fenol  2%  pada pertumbuhan bakteri E.coli dapat dilihat pada gambar 3 dan 4.
Hasil  penelitian  juga  menunjukkan bahwa  rata-rata  zona  hambat  yang  terbentuk pada E.  coli (gram  negatif)  lebih  kecil dibandingkan  dengan S.  aureus.  Hal  ini menunjukkan  bawa E.  coli lebih  tahan terhadap suspensi
sabun antiseptik dibandingkan S.  aureus.  Hal  ini  sesuai dengan  pernyataan  Zuhud et  al.  (2001) bahwa  bakteri  gram  negatif mempunyai ketahanan  yang  lebih  baik  terhadap  senyawa
antimikroba  dibandingkan  bakteri  gram positif.
Perbedaan zona hambat  yang  terjadi antara  ke dua bakteri tersebut di duga terjadi karena  kandungan  dinding  sel  yang  berbeda. Ajizah et  al.  (2007)  menyatakn  bahwa dinding  sel  bakteri  gram  positif  terdiri  atas peptidoglikan sangat tebal yang memberikan kekakuan untuk
mempertahankan  keutuhan  sel.  Campbell et al.  (1996)  menyatakan  bahwa  dinding  sel gram  negatif  mengandung  lipopolisakarida yang  membantu  melindungi  bakteri  dari antibiotik dengan cara menghalangi
masuknya antibiotik. Pada penggunaan fenol 2% sebagai bahan menunjukkan bahwa
fenol mampu
menghambat  pertumbuhan  bakteri.  Menurut Pelzcar dan Chan (1988) senyawa fenol dapat bersifat bakterisidal atau bakteriostatik tergantung pada  konsentrasi  yang digunakan. Hal  yang  sama  juga  dinyatakan  oleh  Todar yang disitasi oleh Rahayu (2007), fenol dapat di gunakan sebagai antiseptik pada konsentrasi  yang  rendah  (0,5-2%).  Dalam menghambat  aktivitas  bakteri,  fenol  bekerja dengan  cara  mendenaturasi  protein  sel  dan merusak membran sel.

## SIMPULAN
1. Sabun  antiseptik  memiliki  daya hambat yang berbeda dalam menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Escherichia coli.
2. Kemampuan  sabun  A,  B  dan  C setara dengan fenol 2%.
3. Diameter zona hambat pada sabun D lebih besar karena selain mengandung triclosan dan triclocarban juga menggunakan benzyl alkohol sebagai bahan antiseptik.

## TERIMA KASIH
Ucapan  terimakasih  disampaikan kepada  Dr.  Ahmad  Damhoeri  yang  telah memberikan banyak masukan pada tulisan ini dan  Windi  Yulia  Rahma  yang  telah membantu Penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Ajizah.  A,  Thihana  dan  Mirhanuddin (2007) Potensi Ekstrak Kayu Ulin
(Eusideroxylon  zwageri T  et  B)
Dalam Menghambat Pertumbuhan
Bakteri Staphylococcus  aureus Secara In Vitro. BIOSCIENTIAE. Volume  4,  Nomor  1,  Januari 2007.
Anonimus.  2008. Cantik  dengan  Sabun
Mandi. http://www.info
sehat.com/inside
level2.asp?artid=723&secid&intid=
5. Tanggal akses 9 Mei 2009.
Campbell,  N.  A.,  J.  B,  Reece  dan  L.A, Mitchell. Biologi. Edisi kelima, Jilid I.  Terjemahan  dari  Biology,  Oleh Rahayu  Lestari,  dkk.  Erlangga, Jakarta.
Dharmawan I.W.E., K. Retno dan S.P. Made. 2009.    Isolasi Streptomyces  Spp. Pada Kawasan Hutan Provinsi Bali Serta Uji Daya  Hambatnya  Terhadap  Lima Strain Diarrheagenic Escherichia Coli.
Jurnal Biologi XIII (1) : 1 – 6
Jawetz,  E.  L.  dan  E.  A.  Adelberg.  2001.
Mikrobiologi Kedokteran Buku ke 1. Terjemahan dari Medical Microbiology,  Twenty  Second  Ed, oleh  Bagian  Mikrobiologi  Fakultas Kedokteran  Universitas  Airlangga.
Salemba Medika, Jakarta.
Lubis, L. S. 2003. Sabun obat. http://library.usu.ac.id/download/fmi pa/farmasi-lely1.pdf.  Tanggal  akses, 9 Mei 2009
Pelczar,  M.  J.  dan  E.  C.  S.  Chan.  1988. Dasar-dasar  Mikrobiologi  Jilid  2.
Terjemahan dari Elements of Microbiology. oleh R.S. Hadioetomo,  Teja  Imas,  S.  Sutarmi Tjitrosomo,  Sri  Lestari  Angka  .  UI Press, Jakarta.
Pratama,  M.  R.,  2005.  Pengaruh  Ekstrak Serbuk  Kayu  Siwak  (Salvadora persica) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Streptococcus mutans dan Staphylococcus aureus Dengan Metode  Difusi  Agar, Skripsi.  IPB. Bogor. Rachdiati,  H.  2000.  Isolasi  dan  Pemurnian Senyawa  Antimikroba  Asal  Isolat Rizosfir Akar Rumput Pahit (Axonopus compressus Swartz Beauv)  dan  Rizosfir  Akar  Rumput Jampang (Eleusine indica L. Gaertn). Skripsi. IPB. Bogor.
Rahayu,  I.  D.  2007.  4  (1).  Sensitifitas
Staphylococcus aureus Sebagai Bakteri  Patogen  Penyebab  Masisitis Terhadap Antiseptika Pencelup Puting Sapi Perah. Jurnal Protein, 4
(1) : 31-36.
Rahardjo,  R.  2008.  Kumpulan  Kuliah Farmakologi, Ed. 2. Fakultas
Kedokteran  Universitas  Sriwijaya.
EGC. Jakarta.
Zuhud, E. A. M., W. P. Rahayu, C.H. Wijaya dan  P.  P.    Sari.  2001.  Aktivitas Antimikroba  Ekstrak  Kedawung (Parkia  roxburghii G.  Don)
Terhadap  Bakteri  Patogen. Jurnal Teknologi  dan  Industri  Pangan. Vol XII No.1 : 6 .