228 PARTNER, TAHUN 15 NOMOR 2, HALAMAN 228 - 237
GAMBARAN HISTOPATOLOGI GINJAL TIKUS ( Rattus rattus ) PADA PEMBERIAN LAMTORO MERAH ( Acacia villosa ) ADAPTASI DAN TANPA ADAPTASI

## Erda Eni Rame Hau
Program Studi Kesehatan Hewan Politeknik Pertanian Negeri Kupang Jalan Prof. Herman Yohanes Penfui-Kupang P.O.Box 1152 Kupang 85011 Telepon :(0380)881600,881601;Fax :(0380)881601;E-mail:politanikoe@plasa.com

## ABSTRACT
Incubation of red acacia (Acacia villosa) leaf i n   p r e a d a p t e d   r u m e n   f l u i d   o f   g o a t : I t s   e f f e c t s   o n   histopathologycal  changes  of  kidney  of  rat  (Rattus-rattus).  This  study was conducted to examine the detoxification potential of rumen microbes upon secondary compounds of Acacia villosa.  Leaf powder of A. villosa incubated in rumen fluid of goat pre-adapted  with  A.  villosa  was  fed  on  rats  used  as  experimental  animals.  Eigthteen rats  were  divided  into  3  groups,  consisting  of  control,  group  of  rats  fed  with  A.  villosa incubated  in  pre-adapted  rumen  fluid  (adaptation  group)  and  group  of  rats  fed  with  A. villosa  incubated  in  non  adapted  rumen  fluid  (non-adaptation  group).  That  results  of histopathologycal  examination  showed  a  significant  higher  gromerular  and tubular changes in the kidneys of the non-adaptation group compared to those in the  adaptation  and  control  groups.  The  changes  in  glomerulus  were  edema characterized  by  deposition  of  protein  in  the  mesangial  and  Bowman  space,  and enlargement  of  the  Bowman  space.  The  changes  in  tubules  were  consisting  of hydropic degeneration, deposition of protein in the tubules lumen and necrosis.
Key words: Acacia villosa, histopathologycal changes, adapted rumen fluid.

## PENDAHULUAN

## Latar Belakang
Peningkatan  produksi  peternakan  harus  didukung  dengan  pengadaan pakan  ternak  yang  merupakan  kebutuhan  utama  untuk  hidup  pokok, pertumbuhan, dan reproduksi. Di Indonesia penyediaan pakan pada umumnya dihadapkan  pada  beberapa  kendala  seperti  kualitas  pakan  yang  rendah, keterbatasan  sumber  pakan,  serta  jarak  antar  sumber  pakan  dan  lokasi peternakan
yang  menyulitkan  transportasi  (Trisyulianti et  al., 2001).  Leguminosa  pohon adalah salah satu pilihan yang tepat sebagai bahan pakan karena mudah didapat dan keberadaannya tersedia sepanjang musim.
Penggunaan leguminosa pohon sebagai sumber protein ransum mempunyai beberapa  keuntungan  yaitu  mengandung  protein  yang  cukup  tinggi,  murah  dan mudah  didapat,  mengandung  tanin  yang  dapat  mencegah  kembung  dan melindungi  degradasi  protein  yang  berlebihan  oleh  mikroba  rumen,  dan
beradaptasi baik pada berbagai lahan (Manurung, 1996). Contoh leguminosa pohon yang  biasa  digunakan  sebagai  pakan  ternak  antara  lain Caliandra  tetragona (kaliandra  bunga  putih), Sesbania  grandiflora (turi), Leucaena  leucocephalla (lamtoro) dan Acacia villosa.
A.  villosa merupakan  jenis  leguminosa  yang  sangat  potensial  digunakan sebagai sumber protein pakan dengan kandungan protein yang tinggi yaitu 22-28% (Lowry et  al., 1992).  Namun  penggunaan A.  villosa tidak  terlepas  dari berbagai  kendala,  antara  lain  kandungan  senyawa  antinutrisi  yang  menjadi faktor  pembatas  dalam  pemanfaatannya  sebagai  pakan  ternak  ruminansia. Kandungan  senyawa  sekunder A.  villosa meliputi  total  phenol  sebesar  15,24%, asam  amino  non-protein  sebesar  5,64%  dan  kandungan  tanin  terkondensasi sebesar  12,52%  (Bansi,  2001).  Tanin  sebagai  salah  satu  zat  antinutrisi  dapat menghambat degradasi protein pakan dalam rumen sehingga menurunkan nilai kecernaan  pakan.  Asam  amino  non-protein  yang  terkandung  dalam A.  villosa adalah ADAB (2-amino-4acetylaminobutyric acid),  DABA  (2,4-diamino  butyric acid)  dan Oxalylabizzine  yang  diduga  dapat  bersifat  toksik  terhadap  ternak (Evans , 1993).
Penelitian  pakan  yang  mengandung A.  villosa yang  pernah  dilakukan pada  ayam  menunjukkan  dampak  negatif  berupa  penurunan  palatibilitas, penurunan konversi pakan dan berat badan serta kerusakan pada organ ginjal dan hati (Raharjo, 2001; Santoso, 2001). Penelitian yang lain menunjukkan bahwa pemberian A. villosa dengan  masa  adaptasi  pada  domba  garut  dengan  dosis  70% dari  total  pakan  menunjukkan  adanya  kelemahan  umum,  akan  tetapi  pada dosis 100% menimbulkan efek toksik bahkan kematian (Bariata, 2000).
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Triyani  (2002)  menunjukkan  bahwa  keadaan keracunan seperti kasus di atas tidak terjadi pada ternak yang telah beradaptasi mengkonsumsi A. villosa secara alami, seperti pada ternak di daerah Kupang  - NTT.    Hal  tersebut  dikarenakan  mikroba  di  dalam  rumen  ternak  tersebut  sudah beradaptasi  sehingga  dapat  mendegradasi  zat  antinutrisi  dan  racun A.  villosa. Pada  penelitian  ini  dilakukan  inkubasi in  vitro  A.  villosa dalam  cairan  rumen, dengan harapan terjadi perubahan senyawa toksik A. villosa menjadi tidak toksik.

## Tujuan
Penelitian  ini  bertujuan  mempelajari  potensi  toksisitas A.  villosa hasil inkubasi  dalam  cairan  rumen  kambing  yang  telah  beradaptasi  maupun  belum
230 PARTNER, TAHUN 15 NOMOR 2, HALAMAN 228 - 237
beradaptasi dengan A. villosa melalui pengukuran gambaran histopatologi organ ginjal  tikus  putih (Rattus-rattus). Tikus  sebagai  hewan  coba  diberi  pakan A. villosa yang  telah  diinkubasikan  dalam  cairan  rumen  kambing  yang  telah diadaptasikan  dengan A.  villosa. Pemilihan  tikus  sebagai  hewan  model  dengan tujuan  tikus  berlambung  tunggal,  sehingga  dapat  menghilangkan  pengaruh  mikroba rumen yang diduga dapat berperan dalam proses pencernaan A. villosa.

## Hipotesa
H0 : Pemberian  tepung  daun A. villosa yang telah  diinkubasikan dalam cairan rumen  kambing  yang  telah  diadaptas ikan  dengan A.  villosa tidak mempengaruhi gambaran histopatogi ginjal tikus.
H1 : Pemberian  tepung  daun A.  villosa yang  telah  diinkubasikan  dalam  cairan rumen kambing yang telah diadaptasikan dengan A. villosa mempengaruhi gambaran hitopatologi ginjal tikus.

## Manfaat
Manfaat  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  peran  mikroba dalam  mengurangi  toksisitas  senyawa  sekunder A.  villosa sehingga  dapat diaplikasikan dalam penggunaan A. villosa di lapangan.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  dilaksanakan  di  Bagian  Patologi,  Departemen  Klinik, Reproduksi dan Patologi Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor dan Balai Penelitian Ternak (BPT) Ciawi, Bogor.   Hewan coba yang digunakan adalah delapan  belas  ekor  tikus  putih (Rattus-rattus) dan  empat  ekor  kambing  sebagai donor  cairan  rumen.  Bahan  yang  digunakan  adalah  daun A.  villosa yang diperoleh  dari  koleksi  pertanaman A.  villosa di  kebun  percobaan  BPT  Ciawi, bahan-bahan  pakan  dan  ether.  Bahan-bahan  lain  yang  digunakan  adalah  bahan untuk pembuatan sediaan histopatologi, seperti Buffer Normal Formalin 10%, alkohol bertingkat mulai dari 70% hingga 95%, alkohol absolut, xylol, paraffin (I-listoplast®, Shandon®),  zat  perekat  untuk  mounting  (Entellan®),  zat  warna Mayer Hematoxylin dan Eosin (Merck®), Reagen  Schiff;  basic  fuchsin,  potassium metabisulfit, Lithium carbonat dan air.
Peralatan  yang  digunakan  adalah  kandang  pemeliharaan  individu  dari kotak  plastik,  timbangan,  blender,  alat-alat  nekropsi,  pencetak  paraffin, rotary, microtom, gelas objek, gelas penutup dan mikroskop.

## Metode Penelitian

## 1.   Donor Cairan Rumen
Empat ekor kambing sebagai donor cairan rumen dipelihara selama 1 bulan. Dua ekor  diberi  pakan  rumput  gajah  dan A.  villosa secara  bertahap  (adaptasi) sebanyak  10%  sampai  60%  dari  total  pakan.  Dua  ekor  kambing  lainnya  sebagai kelompok tanpa adaptasi diberi pakan rumput gajah dan kaliandra secara bertahap 10 sampai 60%.

## 2. Tepung Daun
Daun A.  villosa dijemur  hingga  kering,  kemudian  diblender  hingga  halus membentuk  tepung  daun.    Tepung  daun  sebanyak  21%  (hasil  penelitian pendahuluan). Dari keseluruhan komposisi pakan tikus dicampurkan ke dalam masing-masing  cairan  rumen  kemudian  diinkubasikan  selama  72  jam  pada suhu 39 o C. Masing-masing tepung daun A. villosa hasil fermentasi dicampurkan ke dalam pakan tikus percobaan.

## 3. Desain Penelitian
Delapan  belas  ekor  tikus  betina  yang  baru  lepas  sapih  berumur  empat minggu dengan bobot badan rata-rata 50-60 gram dibagi ke dalam 3 kelompok yaitu  kelompok  kontrol,  kelompok  adaptasi  dan  kelompok  tanpa  adaptasi. Kelompok  kontrol  diberi  pakan  kontrol  tanpa  mengandung A.  villosa maupun cairan rumen. Kelompok adaptasi adalah kelompok yang diberi pakan berisi 21% A.  villosa yang  telah  dinkubasikan  dalam  cairan  rumen  yang  berasal  dari kambing  adaptasi.    Kelompok  tanpa  adaptasi  adalah  kelompok  yang  diberi pakan  berisi  21% A.villosa yang  telah  diinkubasikan  dalam  cairan  rumen  yang berasal  dari  kambing  tanpa  adaptasi.  Sebelum  perlakuan,  hewan  coba diadaptasikan  terlebih  dahulu  terhadap  pakan  kontrol  dan  kandang  selama  1 minggu,  pakan  dan  minum  diberikan ad  libitum .  Setelah  perlakuan  selama  1 bulan,  hewan  coba  ditidurkan  permanen  dengan  anasthesi  diethyl  ether. Selanjutnya hewan coba dinekropsi dan dilakukan sampling organ untuk dibuat sediaan histopatologi yang diwarnai dengan pewarnaan hematoksilin-eosin (HE).

## Evaluasi Histopatologi
Pengamatan  histopatologi  ginjal  dilakukan  pada  20  lapang  pandang dengan  fokus  glomerulus  dan  tubulus  proximal  di  sekitarnya  dengan pembesaran objektif 40x pada luasan 176 µm2.  Penilaian kerusakan glomerulus berdasarkan  jumlah  glomerulus  yang  memilik  endapan  protein  pada mesangium,  endapan  protein  pada  ruang  Bowman,  dan  perluasan  ruang Bowman.    Penilaian  kerusakan  tubulus  berdasarkan  persentasi  tubuli  yang mengalami  degenerassi  hidropis,  adanya  endapan  protein  pada  lumen  tubulus serta nekrosa epitel.

## Analisis Statistik
Evaluasi  pengaruh  perlakuan  terhadap  perubahan  histopatologi  ginjal dilakukan  dengan  analisis  sidik  ragam  dengan  rancangan  percobaan  acak lengkap  (ANOVA).    Jika  perlakuan  berpengaruh  nyata  dilanjutkan  dengan  uji berganda Duncan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada  pengamatan  histopatologi  ginjal  tikus  sesudah  pemberian Acacia villosa pasca  inkubasi  dalam  cairan  rumen  adaptasi  dan  tanpa  adaptasi ditemukan  adanya  perubahan  glomerulus  dan  tubulus,  baik  pada  kelompok kontrol  maupun  kelompok  perlakuan.    Selain  itu,  secara  umum  ditemukan adanya  pembendungan  (kongesti)  baik  pada  kelompok  kontrol  maupun  pada kelompok  perlakuan.  Menurut  Ganiswara  (1995),  kongesti  merupakan  respon umum pembuluh darah akibat penggunaan  ether pada waktu anasthesi  untuk pengambilan  darah  maupun  pada  waktu  euthanasia,  karena  ether  merupakan anasthetik kuat yang dapat menyebabkan vasodilatasi.
Glomerulus  umumnya  mengalami  edema  yang  dicirikan  oleh  adanya endapan protein pada jalinan mesangium hingga ke ruang Bowman dan adanya perluasan ruang Bowman (Gambar 2).  Perubahan tubulus yang ditemui adalah berupa  degenerasi  dan  nekrosa  pada  epitel  dan  adanya  endapan  protein  pada lumen.  Epitel tubulus yang mengalami nekrosa  ditandai oleh inti piknotis dan sitoplasma  yang  menyerap  eosin  lebih  intensif.    Perubahan  histopatologi  ginjal disebabkan  oleh  senyawa  asam  amino  non-protein A.  villosa yang  bersifat
Erda E.H Hau., Gambaran Histopatologi Ginjal… 233 nefrotoksik.  Gambaran histopatologi kerusakan ginjal disajikan pada Gambar 2, 4, 5 dan 6, dan perubahan histopatologi ginjal akibat pemberian A.villosa yang
diinkubasi  dalam  cairan  rumen  adaptasi  dan  tanpa  adaptasi  disajikan dalam Gambar 1 dan 3.
Gambar 1.   Perubahan  glomerulus  ginjal  tikus  pada  pemberian  A.villosa  pasca inkubasi dalam cairan rumen adaptasi dan tanpa adaptasi. M: endapan protein di mesangium, B: endapan protein di ruang Bowman, dan L: ruang Bowman meluas.
Berdasarkan hasil analisis sidik ragam, diperoleh hasil bahwa kerusakan pada  glomerulus  kelompok  tanpa  adaptasi  lebih  besar  dibandingkan  dengan kelompok  kontrol  dan  kelompok  adaptasi  (p<0,05).  Endapan  protein  pada mesangium  ditemukan  pada  seluruh  glomerulus  yang  diamati  sehingga  tidak ada  perbedaan  antara  kelompok  kontrol  dengan  kelompok  perlakuan  maupun antar  perlakuan  (p>0,05).    Endapan  protein  di  ruang  Bowman  pada  kelompok adaptasi lebih besar dan berbeda nyata  dengan kelompok kontrol dan adaptasi (p<0.05),  tetapi  tidak  berbeda  nyata  antara  kelompok  kontrol  dan  adaptasi (p>0.05).    Ruang  Bowman  yang  meluas  pada  kelompok  tanpa  adaptasi  lebih besar  dan  berbeda  nyata  dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol  dan  adaptasi (p<0.05),  tetapi  tidak  berbeda  nyata  antara  kelompok  kontrol  dan  adaptasi (p>0.05) (Gambar 1). Hasil tersebut  mengindikasikan bahwa fermentasi in vitro
234 PARTNER, TAHUN 15 NOMOR 2, HALAMAN 228 - 237
A.  villosa dalam  cairan  rumen  adaptasi  mampu  mengurangi  tingkat  toksisitas senyawa  sekunder A. villosa . Kerusakan ginjal pada kelompok perlakuan tanpa adaptasi disebabkan oleh senyawa sekunder yang bersifat nephrotoksik.
Gambar 2.   Edema glomerulus pada pemberian A. villosa pasca inkubasi dalam cairan rumen tanpa adaptasi. (a) endapan protein di mesangium, (b) endapan protein di ruang Bowman, (c) perluasan ruang Bowman.  Pewarnaan: HE, bar: 20 µm.
Gambar  2  menunjukkan  edema  glomerulus  yang  dicirikan  oleh  endapan protein  pada  mesangium  hingga  ke  ruang  Bowman  sehingga  menyebabkan ruang  Bowman  meluas.  Edema  ini  disebabkan  oleh  adanya  senyawa  yang bersifat nephrotoksik pada A.villosa .  Edema glomerulus merupakan perubahan pertama  yang terjadi pada toxic glomerular nephritis . Glomerulonephritis  sangat dipengaruhi oleh zat-zat toksik dan derajat perubahan tergantung pada sifat dan jumlah senyawa yang masuk ke dalam aliran darah (Hock et al., 2005).
Glomerulonephritis  akut  adalah  peradangan  pada  glomerulus  akibat bahan-bahan  toksik  dan  kompleks  antigen  antibody  yang  mengganggu  kapiler glomerulus.  Keberadaan  bahan-bahan  tersebut  menyebabkan  permeabilitas kapiler rusak sehingga membran kapiler bocor.  Pada filtrasi glomerulus, sekitar 20%  plasma  masuk  ke  kapiler,  menembus  kapiler  yang  akhirnya  masuk  ke ruang  Bowman.    Hanya  protein  tertentu  dengan  ukuran  molekul  yang  dapat difiltrasi.    Pada  keadaan  peradangan,  protein  besar  mudah  lolos  melalui membran  kapiler  glomerulus  yang  bocor  sehingga  menempati  ruang  Bowman bahkan sampai ke tubulus (Corwin, 2001).
Erda E.H Hau., Gambaran Histopatologi Ginjal… 235
Edema  glomerulus  yang  berlanjut  akan  membentuk  jaringan  parut, sehingga glomeruli diganti dengan tenunan pengikat yang kompak.  Kerusakan glomerulus tidak hanya menimbulkan ganggunan pada pembentukan urin yang ada  hubungannya  dengan  pengaliran  darah,  tetapi  juga  menghambat  sirkulasi darah pada glomeruli dan tubuli.  Hal tersebut dapat mengakibatkan degenerasi tubuli akibat kekurangan makanan dan akibat toksin (Seely, 1999).
Gambar 3.   Persentase perubahan tubulus ginjal tikus pada pemberian A. villosa pasca inkubasi pada cairan rumen adaptasi dan tanpa adaptasi. N: tubulus normal, H: tubulus degenerasi hidropis, NK: tubulus nekrosa, dan P: endapan protein di lumen tubulus.
Berdasarkan  hasil  analisis  sidik  ragam  didapat  hasil  bahwa  tubulus normal  yang  ditemukan  pada  kelompok  kontrol  lebih  besar  dan  berbeda  nyata dibandingkan  dengan  kelompok  adaptasi  dan  tanpa  adaptasi  (p<0.05),  dan tubulus normal kelompok adaptasi lebih besar dan berbeda nyata dibandingkan dengan  kelompok  tanpa  adaptasi  (p<0.05).  Degenerasi  hidropis  pada  tubulus kelompok  tanpa  adaptasi  lebih  besar  dan  berbeda  nyata  dibandingkan  dengan kelompok  kontrol  dan  kelompok  adaptasi  (p<0.05),  tetapi  tidak  berbeda  nyata antara kelompok kontrol dengan kelompok adaptasi (p>0.05).  Nekrosa tubulus kelompok  tanpa  adaptasi  lebih  besar  dan  berbeda  nyata  dibandingkan  dengan kelompok kontrol dan adaptasi (p<0.05), dan nekrosa tubulus kelompok kontrol lebih  besar  dan  berbeda  nyata  dibandingkan  dengan  kemlompok  adaptasi (p<0.05).  Endapan protein pada lumen tubulus kelompok adaptasi lebih besar dan berbeda  nyata  dibandingkan  dengan kelompok kontrol dan tanpa adaptasi (p<0.05), tetapi tidak berbeda nyata antara kelompok kontrol dan tanpa adaptasi (p>0.05)  (Gambar  3).    Hal  tersebut  mengindikasikan  bahwa  fermentasi  in  vitro A.villosa dalam  cairan  rumen  adaptasi  mampu  mengurangi  tingkat  toksisitas
236 PARTNER, TAHUN 15 NOMOR 2, HALAMAN 228 - 237
senyawa sekunder A. villosa .  Kerusakan ginjal pada kelompok perlakuan tanpa adaptasi disebabkan senyawa sekunder A. villosa yang bersifat nephrotoksik.
Perubahan  ginjal  berupa  degenerasi  hidropis  terjadi  pada  seluruh kelompok  hewan  coba.  Degenerasi  pada  kelompok  kontrol  disebabkan  oleh gangguan  lain  yang  bersifat  tidak  spesifik  karena  tikus  yang  digunakan  bukan dari kelompok spesifik pathogen free (SPF).
Gambar 4.  Tubulus ginjal tikus yang mengalami degenerasi hidropis pada pemberian A.villosa pasca inkubasi dalam cairan rumen tanpa adaptasi. Pewarnaan HE, bar: 10 µm.
Gambar 5.   Endapan protein pada lumen tubulus ginjal tikus pada pemberian A.villosa pasca inkubasi dalam cairan rumen tanpa adaptasi. Pewarnaan HE, bar: 10 µm.
Gambar 6.   Tubulus ginjal tikus yang mengalami nekrosa pada pemberian A.villosa pasca inkubasi dalam cairan rumen tanpa adaptasi. Pewarnaan HE, bar: 10 µm.
Degenerasi  terjadi  sebagai  respon  mitokondria  terhadap  iskemia  dan keracunun.  Mitokondria  membutuhkan  oksigen  untuk  fosforilasi  oksidatif  dan pembentukan  adenosine  trifosfat  (ATP).  Sel  mcmbutuhkan  ATP-ase  untuk mengaktifkan  pompa  natrium-kalium  dalam  pengaturan  keluar  masuknya  ion. Paada  saat  sel-sel  kekurangan  ATP  maka  sel  tidak  dapat  mempertahankan fungsinya, misalnya fungsi pemindahan natrium keluar dari kalium ke dalam sel melalui  pompa  natrium-kalium  (Corwin,  2001).    Iskemia  dan  keracunan mengakibatkan  pompa  ion  natrium-kalium  rusak  sehingga  kadar  natrium  dan tekanan osmotic di dalam sel meningkat dan terjadi penarikan air ke dalam sel. Pompa akan memindahkan ion dan air cepat keluar dari sitosol masuk ke dalam reticulum  endoplasma.  Pada  keadaan  ini  sitoplasma  membengkak  akibat akumulasi cairan di antara matriks sel dan reticulum endoplasma kasar.  Secara mikroskopis  sel-sel  terlihat  mengandung  ruangan-ruangan  jernih  yang mengelilingi inti tetapi tidak sejernih glikogen atau lemak (Cheville, 1999).
Degenerasi  hidropis  adalah  kerusakan  yang  bersifat reversible jika penyebab  dihilangkan,  sehingga  tubuus  dapat  kembali  ke  keadaan  normal. Apabila  kerusakan  berlanjut,  maka  akan  mencapai  suatu  titik  yang  bersifat permanen  yaitu  menyebabkan  kematian  sel  (nekrosa).  Pembengkakan  sel menyebabkan  pecahnya  vesikel-vesikel  lisosom  sehingga  terjadi  pelepasan enzim-enzim yang akhirnya menyebabkan kematian sel (Corwin, 2001). Nekrosa dicirikan dengan inti yang piknotis atau inti mengecil dan berwarna biru akibat penggumpalan  kromatin  inti  serta  sitoplasma  mengambil  warna  yang  lebih intensif sehingga tampak seperti limfosit (Selly, 1999).
Nekrosa  dapat  disebabkan  oleh  bahan-bahan  yang  bersifat  toksik, defisiensi  pakan,  dan  gangguan  metabolisme  termasuk  hipoksia.  Perubahan utama  pada  toksik  tubula  nephritis  adalah  degenerasi  dan  nekrosa  tubuli. Nekrosa tubuli terutama tubulus proksimal sering diakibatkan oleh iskemia atau zat  toksik  yang  masuk  ke  epitel.  Tubuli  proksimal  mudah  mengalami  nekrosa Karena merupakan lokasi absorbsi terbesar karena memiliki microvilli penyerab (Lu, 1995).

## 238 PARTNER, TAHUN 15 NOMOR 2, HALAMAN 228 - 237
Perubahan  lain  yang  ditemukan  pada  tubulus  adalah  adanya  endapan protein  di  lumen.  Keberadaan  protein  dalam  lumen  dipengaruhi  oleh  berbagai faktor  diantaranya  adalah  peningkatan  permeabilitas  kapiler  glomerulus  yang menyebabkan  lebih  banyak  protein  lolos.  Tertimbunnya  protein  dalam  jumlah banyak  yang  melebihi  daya  serap  epitel  tubulus,  menyebabkan  protein mengendap di lumen dan menyebabkan rusaknya epitel tubulus (MacLachlan & Cullen, 1995).

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
1. Perlakuan  inkubasi A.  villosa dalam  cairan  rumen  adaptasi  dapat mengurangi  toksisitas  senyawa  toksik  sehingga  mengurangi  derajat kerusakan ginjal tikus.
2. Perlakuan  inkubassi A.  villosa dalam  cairan  rumen  adaptasi  maupun tanpa adaptasi menyebabkan perubahan histopatologi pada glomerulus berupa  endapan  protein  di  mesangium  dan  di  ruang  Bowman  serta perluasan ruang Bowman dan pada tubulus berupa degenerasi hidropis, nekrosa serta endapan protein pada lumen tubulus.
3. Cairan  rumen  kambing  memiliki  potensi  untuk  beradaptasi  terhadap bahan toksik A. villosa dengan menurunkan efek nephrotoksiknya.
4. Cairan  rumen  kambing  yang  telah  adaptif  terhadap A.  villosa masih memiliki potensi adaptasi tersebut secara in vitro terhadap A. villosa.

## Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  lanjutan  untuk  mengetahui  populasi  mikroba rumen  yang  dapat  mendegradasi  senyawa-senyawa  toksik  pada A.  villosa. Perlakuan  inkubasi A.  villosa dalam  cairan  rumen  adaptasi  dapat mengurangi  toksisitas  senyawa  sekunder A.  villosa sehingga  dapat diaplikasikan dalam penggunaan A. villosa di lapangan.

## DAFTAR PUSTAKA
Bansi,  H.  2001.  Potensi  Lamtoro  Merah  ( Acacia  villosa )  dan  Kaliandra  Putih ( Calliandra  tetragona ) sebagai Pakan Sumber Protein Baru Bagi Ternak Ruminansia. Skripsi. Fakultas Peternakan Institut Pertanian Bogor.
Bariata,  N.C.  2000.  Gambaran  Histopatologi  Toksisitas  Hijauan  Mlanding Sabrang  ( Acacia  villosa )  Dosis  Tinggi  pada  Domba  Garut.  Skripsi. Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Cheville, N.F. 1999. Introduction to Veterinary Pathology. 2th ed. United States of America: Iowa State University Press.
Corwin,  E.J.  2001.  Handbook  of  Pathophysiology.  Albuquerque  New  Mexico: University of New Mexico.
Evans,  C.  S.  1993.  Non  Protein  Amino  Acids  in  Seeds  of  Neotropical  Species  of Acacia. Phytochemistry 32: 123-126.
Fajar,  R.  2004.  Pengaruh  Pemberian  Lamtoro  Merah  ( Acacia  villosa )  terhadap Histopatologi Ginjal Tikus ( Rattus rattus ). Skripsi. Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Ganiswara,  S.G.  1995.  Farmakologi  dan  Terapi  Edisi  ke-4.  Bagian Farmakologi,Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta.
Ganong,  W.F.  1995.  Buku  Ajar  Fisiologi  Kedokteran.  Ed  ke-4.  Penerbit  Buku Kedokteran. EGC. Jakarta.
Girindra, A. 1998. Biokimia Patologi. Pusat Antar Universitas. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Guyton,  A.G.  1994.  Buku  Ajar  Fisiologi  Kedokteran.  Ed  ke-7.  Penerbit  Buku Kedokteran. EGC, Jakarta.
Hegarty,  M.P.  1978.  Toxic  Amino  Acids  of  Plant  Origin.  In:  Keeler  RF,  KR  Van Kampen., James LF. Effects of Poisonous Plants on Livestock. Proceding of a Joint United States-Australian Symposium on Poisonous Plants at Utah State Univ. Academic Press.
Hobson,  P.N.  1988.  The  Rumen  Microbial  Ecosystem.  Elvieser  Applied  Science. London and New York.
Hock,  B  and  Elstner,  E.F.  2005.  Plant  Toxicologi.  4th  ed.  New  York:  Marcel Dekker.
Jukema,  J,  dan  Danimihardja,  S.  1997.  Acacia.  In:  Hainan,  I.  F  and  Van  der Maesen.  Auxiliary  Plants.  Plant  Resourves  of  South  Fast  Asia.  Prosea. Bogor. Indonesia. Pp: 58-60.
Lemmens, R.H.M.J dan Wulijarni N,S. 1992. Dye and Tannin Producing Plants. Plants Resources of South East Asia. No. 3. Porsea. Bogor. Indonesia. Pp. 22-25.
Lowry,  J.B.  1992.  Plants  Fed  to  Village  Ruminants  in  Indonesia.  MAAR. Technical Report No. 22. Canberra.
Lu, F.C. 1995. Toksikologi Dasar. Ed ke-2. UI Press. Jakarta.
MacLachlan,  N.J  and  Cullen,  J.M.  In:  Carlton,  WM  and  McGavin,  MD.  1995. Thomson Special Veterinary Pathology. 2nd. Mosby. A Times Mirror Co.
Manurung,  T.  1995.  Penggunaan  Leguminosa  Pohon  sebagai  Sumber  Protein Ransum Sapi Potong. Jurnal Ilmu Ternak dan Veteriner. 1(3): 143-147.
Malole, M.B.M dan Pramono, C,S,R. 1989. Penggunaan Hewan-hewan Percobaan di Laboratorium. Departemen Pendidikan dan Kebudayaan. Pusat Antar Universitas Bioteknologi. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
240 PARTNER, TAHUN 15 NOMOR 2, HALAMAN 228 - 237

## Nabib, R. 1983. Patologi Khusus Veteriner. Cetakan Ke-3. Fakultas Kedokteran Hewan. Institut Pertanian Bogor. Bogor
Preston, T.R dan Leng, R.A. 1987. Matching Ruminant Production System with Available Resources In The Tropic. Penambul Books. Armidale.
Raharjo, S. 2001. Pengaruh Pemberian Pakan Mengandung Berbagai Fraksi dan Konsentrasi Acacia  villosa Serta  Imbuhan  PEG  Terhadap  Penampilan dan  Histopatologi  Organ  Ayam.  Skripsi.  Fakultas  Kedokteran  Hewan Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Rosenthal,  G.A.  1982.  Plant  Non  Protein  Amino  and  Ammino  Acid.  Biological,
Biochemical and Toxicological Properties. Academic Press. London.
Santoso,  G.  2001.  Pengaruh  Pemberian  Dua  Varietas Acacia  villosa (Lamtoro Merah)  Terhadap  Pertumbuhan  dan  Histopatologi  Organ  Ayam. Skripsi. Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Wyaut,  W.  1992.  Chemically  Mediated  Interaction  Between  Woody  Plantand Browsing Mammal. Journal Range Manage. Volume ke-45: 18-24.