## Sasambo Journal of Pharmacy
https://jffk.unram.ac.id/index.php/sjp
___________ Email: oktapiyatira12@gmail.com (*Corresponding Author)
Copyright © 2022, The Author(s).
This article is distributed under a Lisensi Creative Commons Atribusi 4.0 Internasional .
Analisis fitokimia dan kromatografi lapis tipis ekstrak etanol daun rosella ( Hibiscus sabdariffa L.)
Tira Risa Oktapiya 1* , Nofran Putra Pratama 1 , Nur’aini Purnamaningsih 2
1 Program Studi Farmasi, Fakultas Kesehatan, Universitas Jenderal Achmad Yani Yogyakarta
2 Program Studi Teknologi Bank Darah, Fakultas Kesehtan, Universitas Jenderal Achmad Yani Yogyakarta
DOI: https://doi.org/10.29303/sjp.v3i2.181
Article Info
Abstract : Rosella ( Hibiscus sabdariffa L) is a plant belonging to the Malvaceae family. This plant  is  widely used as  herbal medicine.  Rosella  leaves  have  many  compounds  that can function as antioxidants and antibacterials. As a crude material for traditional medicine, it is necessary  to  know  the  content  of  secondary metabolites contained  in  rosella  leaves  both quantitatively and qualitatively as one of the standardization parameters. The objective of this study was to determine the content of secondary metabolites contained in the ethanolic extract of rosella leaves through phytochemical analysis and Thin Layer Chromatography. Rosella leaf extraction was carried out by maceration method using 70% ethanol as solvent. Testing the content of secondary metabolites in the ethanolic extract of rosella leaves was carried  out  by  phytochemical  screening.  Furthermore,  the  TLC  test  was  carried  out  to confirm  the  presence  of  a  positive  group  of  compounds  on  phytochemical  screening. Phytochemical  screening  from  rosella  leaves  extract  revealed  the  presence  of  alkaloids, flavonoids, saponins and tannins. The TLC system used in this study was able to separate the phytochemical content and gave positive results confirming the phytochemical screening results. The eluent used was chloroform:methanol:acetic acid with a ratio of 14:2:1 obtained spots with an Rf of 0.737 which is similar to the Rf standard of quercetin which is 0.762. Received : 2022-08-24 Revised : 2022-09-30 Accepted : 2022-09-30 Keywords: Analysis, Rosella leaves, Fhytochemical, TLC.
Citation: Oktapiya, T. R., Pratama, N. P., & Purnamaningsih, N. (2022). Analisis fitokimia dan kromatografi lapis tipis ekstrak etanol daun rosella  ( Hibiscus sabdariffa L.). Sasambo  Journal  of Pharmacy, 3 (2),  105-110. https://doi.org/10.29303/sjp.v3i2.181

## Pendahuluan
Rosella  merupakan tumbuhan  semak  umur  satu tahun, tumbuh mencapai 2,4 m. Bunga tunggal, kuncup bunga  dari  bagian  ketiak  daun,  tangkai  bunga berukuran  5-20  mm;  kelopak  bunga  berlekatan,  tidak gugur  tetap  mendukung  buah,  berbentuk  lonceng; mahkota bunga berlepasan, berjumlah 5 petal, mahkota bunga  berbentuk  bulat  telur  terbalik,  warna  kuning, kuning  kemerahan  (BPOM  RI,  2010).  Rosella  memiliki khasiat  diantaranya  sebagai  antibakteri,  antioksidan, antidiabetes, antifungal, antiinflamasi, dan antihipertensi.  Senyawa  yang  terdapat  pada  bunga rosella  yaitu gossypetin ,  glukosida, hibiscin ,  flavonoid, theflavin ,  katekin  dan  antosianin  (Mahadevan  et  al.,
2009).  Daun  rosella  mengandung  beberapa  senyawa fitokimia  yang  berperan  sebagai  antioksidan  dan  agen antibakteri.  Senyawa  antioksidan  yang  terdapat  pada daun  rosella  antara  lain  asam  neoklorogenik,  asam klorogenat,  asam  kriptoklorogenik,  rutin  dan isoquercitrin  (Wang  et  al.,  2014).  Pada  penelitian Mungole  &  Chaturvedi  (2011)  senyawa  aktif  biologis dengan  aktivitas  antibakteri  yang  terkandung  dalam daun  rosella  antara  lain  polifenol,  alkaloid,  flavonoid, saponin, dan tannin.
Berdasarkan  latar  belakang  tersebut,  peneliti tertarik  untuk  menganalisis  kandungan  metabolit sekunder yang terkandung pada daun rosella ( Hibiscus sabdariffa L.).  Penelitian  sebelumnya  melakukan ekstraksi  daun  rosella  menggunakan  metode  sonikasi
dan soxhletasi  (Mungole & Chaturvedi,  2011;  Wang  et al.,  2014).  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  yang terkandung  pada  ekstrak  etanol  daun  rosella  dengan metode  maserasi  melalui  analisis  fitokimia  dan Kromatografi Lapis Tipis.

## Metode dan Bahan

## Alat dan Bahan
Alat  yang digunakan  pada  penelitian  ini  adalah oven  (Memmert ® ),  spatula  kayu,  neraca  analitik (Ohaus ® ), wajan, toples besar, ayakan 40 mesh, kompor listrik  (Maspion ® ),  grinder, hotplate (IKA ® HS-7),  pipet tetes,  lampu  UV Viewing  Cabinet 254  nm  dan  366  nm (UvOC-02), dan alat-alat gelas laboratorium (Iwaki ® ). Bahan yang digunakan pada penelitian  ini yaitu daun  rosella,  HCl  2  N,  dragendroff,  mayer,  wagner, etanol 70%, serbuk Mg, aquades, FeCl 3 1%, kloroform : metanol  :  asam  asetat  (14:2:1),  kertas  saring,  serbuk kuersetin 0,1%, plat silika GF 254 , AlCl 3 5% .

## Pembuatan Ekstrak Daun Rosella
Daun  rosella  sebanyak  4  kg  yang  telah  dicuci bersih  dengan  air  mengalir,  kemudian  ditiriskan  lalu dikeringkan  dalam  oven  dengan  suhu  50 ℃ sampai menjadi  simplisia  kering.  Setelah  kering  selanjutnya dihaluskan  dengan  alat  grinder,  lalu  simplisia  yang telah halus diayak dengan ukuran ayakan 40 mesh.
Serbuk daun rosella ditimbang 500 g dimaserasi dengan 5000 mL etanol 70% selama 3 hari. Setiap 12 jam sekali dilakukan pengadukan. Kemudian filtrat disaring menggunakan  kain  mori  lalu  residunya  diremaserasi selama  1  hari.  Kemudian  dipekatkan  di  atas  kompor listik,  setelah  itu  dihitung  rendemen  ekstrak.  Uji organoleptik  dilakukan  dengan  pengamatan  secara visual antara lain warna, tekstur, serta bau ekstrak.

## Skrining Fitokimia
Identifikasi alkaloid dilakukan dengan menimbang ekstrak etanol daun rosella sebanyak 0,5 g dan ditambahkan 10 ml HCl 2 N. Sampel dipanaskan di atas  kompor  listrik  selama  30  menit,  setelah  itu didinginkan  dan  disaring  untuk  mendapatkan  filtrat. Filtrat yang diperoleh dibagi dan dimasukan ke dalam 3 tabung reaksi serta ditambahkan dengan pereaksi yang berbeda  setiap  tabungnya.  Untuk  tabung  pertama ditetesi  pereaksi  dragendroff  sebanyak  2  tetes  lalu diamati  jika  terdapat  endapan  berwarna  jingga  maka terdapatnya  kandungan  alkaloid  pada  sampel.  Pada tabung ke-2 ditambahkan reagen mayer sebanyak 2 tetes lalu  diamati  jika  muncul  endapan  putih  maka  sampel menunjukan  adanya  kandungan  alkaloid.  Tabung terakhir ditambahkan pereaksi wagner sebanyak 2 tetes
lalu  diamati  jika  terdapatnya  endapan  yang  berwarna merah kecoklatan maka sampel positif adanya alkaloid.
Identifikasi flavonoid dilakukan dengan menimbang sebanyak 0,5 g ekstrak etanol daun rosella dilarutkan  dengan  5  mL  etanol  70%.  Selanjutnya ditambahkan beberapa tetes HCl 2N pekat serta serbuk Mg  sebanyak  0,2  g.  Sampel  diamati  jika  terdapat endapan  yang  berwarna  merah  tua  atau  hitam kemerahan  maka  terdapat  kandungan  flavonoid  pada sampel.
Identifikasi saponin dilakukan dengan menimbang sebanyak 0,5 g ekstrak etanol daun rosella dilarutkan  dengan  10  mL  air  panas  kemudian didiamkan,  setelah  sampel  dingin  dikocok  kuat-kuat lalu  ditambahkan  2  tetes  HCl.  Sampel  diamati  jika terdapat  buih  yang  stabil  atau  dalam  beberapa  detik buih tersebut tidak hilang maka sampel tersebut positif adanya kandungan saponin.
Identifikasi tanin  dilakukan dengan  menimbang sebanyak 0,5 g ekstrak daun rosella dilarutkan dalam 5 mL  air  panas  dan  dikocok  hingga  rata.  Selanjutnya ditambahkan 2-3 tetes FeCl 3 1%, kemudian diamati jika membentuk  warna  biru  tua  atau  hitam maka terdapat kandungan tanin pada sampel.

## Analisis Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Sebelum  dilakukan  uji Kromatografi Lapis Tipis dilakukan  penjenuhan  bejana  terlebih  dahulu. Dilakukan  pembuatan  fase  gerak  menggunakan kloroform  :  metanol  :  asam  asetat  (14:2:1).  Selanjutnya dimasukan kertas saring yang telah dipotong ke dalam bejana yang terisi fase gerak, dan didiamkan sampai fase gerak jenuh.
Pembuatan  standar  kuersetin  0,1%  dengan  cara menimbang baku standar kuarsetin 0,1% sebanyak 2 mg kemudian dilarutkan dengan etanol 70% sampai 2 mL. Pembuatan  larutan  sampel  dilakukan  dengan melarutkan 5 mg ekstrak etanol daun rosella  ke dalam etanol hingga 5 mL.
Uji  KLT  dilakukan  dengan  dibuat  garis  bagian atas dan bawah pada plat silika GF 254 selebar 1 cm, lalu dipanaskan  di  oven  ±30  menit  dengan  suhu  110 ℃ . Sampel  ditotolkan  pada  plat  silika  dengan menggunakan whitetip dan  dimasukan  dalam  bejana yang  sebelumnya  telah  jenuhkan  terlebih  dahulu, kemudian didiamkan hingga eluen sampai tanda batas yang  telah  ditentukan.  Setelah  itu,  plat  silika dikeluarkan  dan  diangin-anginkan  sampai  kering, kemudian dilakukan penyinaran pada sinar UV dengan panjang  gelombang  254  nm  dan  366  nm.  Selanjutnya disemprotkan  AlCl 3 5% sebagai  penampak  bercak  lalu diamati dengan  melihat  noda  yang ada  pada  lempeng kemudian ditentukan nilai Rf.

## Hasil dan Pembahasan

## Pembuatan Ekstrak
Sebanyak  4  kg  daun  rosella  yang  telah dibersihkan  dengan  air  mengalir  kemudian  ditiriskan, tujuan  dicuci  menggunakan  air  mengalir  agar  kotoran dan  pestisida  tidak  menempel  kembali  ke  simplisia. Setelah  itu,  daun  rosella  dikeringkan  dengan menggunakan  oven  pada  suhu  50 ℃ .  Penelitian  oleh Warnis et  al .,  (2020)  membuktikan  bahwa  proses pengeringan  pada  suhu  50 ℃ dapat  menghasilkan simplisia  yang  memenuhi  kriteria  standar  mutu  yaitu kadar  air  di  bawah  10%.  Tujuan  pengeringan menggunakan  oven  adalah  untuk  mengurangi kontaminasi  jamur  akibat  suhu  yang  kurang  stabil (Warnis  et  al.,  2020).  Daun  rosella  yang  telah  kering sebanyak  1800  g  dihaluskan  dengan  menggunakan grinder,  dilakukan  pengayakan  dengan  menggunakan ayakan  40 mesh,  dan  serbuk  yang diperoleh sebanyak 500 g.
Ekstraksi  simplisia  daun  rosella  dilakukan dengan  metode  maserasi  menggunakan  pelarut  etanol 70%.  Proses  maserasi  adalah  teknik  ekstraksi  yang sangat sederhana tanpa sistem pemanasan atau dikenal dengan  ekstraksi  dingin,  sehingga  dalam  proses  ini sampel  dan  pelarut  tidak  melalui  proses  pemanasan sehingga  dapat  digunakan  pada  senyawa  yang  tidak tahan panas (Badaring et  al., 2020). Proses maserasi ini menggunakan  etanol  70%  sebagai  pelarut.  Menurut Snyder  (1997)  pada  penelitian  (Padmasari  et  al.,  2013) pemilihan pelarut etanol 70% karena etanol merupakan pelarut  universal  yang  dapat  menarik  senyawa- senyawa yang larut dalam pelarut non polar, polar dan semi  polar.  Harapannya  penggunaan  etanol  70% sebagai  pelarut  dapat  menarik  senyawa  aktif  yang terkandung  dalam  daun  rosella.  Filtrat  hasil  maserasi yang  didapat  kemudian  dilakukan  pengentalan, sehingga  mendapatkan  ekstrak  kental.  Setelah  itu dihitung nilai rendemen dari ekstrak etanol daun rosella untuk mengetahui banyaknya ekstrak yang didapatkan
setelah  proses  maserasi.  Hasil  perhitungan  rendemen yang diperoleh dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil perhitungan rendemen Bobot ekstrak (g) Hasil rendemen (% b/b) 96,83 19,366
Dilihat  dari Tabel  1 ,  rendemen  ekstrak  etanol daun  rosella  sebesar  19,366%.  Hasil  tersebut  telah memenuhi  persyaratan,  yaitu  rendemen  tidak  kurang dari 10% (Warnis et al., 2020).
Uji  organoleptik  dilakukan  untuk  mengetahui bahwa  daun  rosella  memiliki  hasil  yang  sama  dengan peneliti sebelumnya. Uji organoleptik dilakukan dengan mengamati warna, tekstur, serta bau sediaan. Hasil dari uji organoleptik dapat dilihat pada Tabel 2 .
Tabel 2. Hasil uji organoleptik ekstrak etanol daun
rosella Pengamatan Ekstrak etanol daun rosella Organoleptik Warna Coklat kehitaman Tekstur Kental Bau Khas
Tabel  2. menunjukkan  hasil  uji  organoleptik ekstrak etanol daun rosella menunjukkan bahwa ekstrak etanol  daun  rosella  berwarna  coklat  kehitaman, bertekstur kental dan berbau khas. Hasil penelitian ini sesuai  dengan  penelitian  terdahulu.  Penelitian  oleh Dahlia et al., (2012) ekstrak etanol daun rosella berwarna coklat kehitaman, bertekstur kental dan berbau khas.

## Skrining Fitokimia
Analisis  fitokimia  yang  dilakukan  meliputi  uji alkaloid,  flavonoid,  saponin  dan  tanin.  Uji  fitokimia dilakukan untuk mengidentifikasi kandungan senyawa yang  ada  pada  ekstrak  etanol  daun  rosella.  Hasil  uji fitokimia yang dilakukan dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil uji fitokimia ekstrak etanol daun rosella Uji fitokimia Hasil yang diperoleh Keterangan Alkaloid Pereaksi Mayer Terbentuk endapan putih Positif Pereaksi Wagner Terbentuk endapan merah kecoklatan Positif Pereaksi Dragendroff Terbentuk endapan jingga Positif Flavonoid Terbentuk endapan merah tua Positif Saponin Terbentuk buih yang stabil Positif Tanin Terbentuk warna hitam Positif
Tabel  3 menunjukkan  hasil  uji  fitokimia  yang dilakukan  pada  ekstrak  etanol  daun  rosella menunjukkan  adanya  kandungan  senyawa  metabolit sekunder diantaranya alkaloid, flavonoid, saponin dan
tanin.  Jika  suatu  senyawa  mengandung  alkaloid, pengujian  dengan  pereaksi  Dragendroff  akan membentuk  warna  coklat  orange  atau  jingga,  karena senyawa  alkaloid  tersebut  akan  berikatan  dengan
partikel tetraiodobismutat (III). Pada pengujian dengan pereaksi  Mayer  senyawa  alkaloid  akan  bekerja  sama dengan  partikel  tetraiodomercurate  (II)  untuk membentuk senyawa kompleks dan mengendap. Hal ini dikarenakan  partikel  merkuri  merupakan  partikel logam  berat  yang  dapat  mengendapkan  senyawa alkaloid basa (Sulistyarini et al., 2019). Pada uji Wagner, partikel  logam  K + akan  membentuk  ikatan  kovalen koordinasi  dengan  nitrogen  pada  alkaloid  untuk membentuk kompleks kalium-alkaloid yang mengendap.  Fungsi  penambahan  HCl  dalam identifikasi  alkaloid  dimaksudkan  untuk  menarik kandungan  alkaloid  dalam  ekstrak  karena  alkaloid bersifat basa, maka pada penambahan asam seperti HCl akan terbentuk garam, sehingga alkaloid akan terpisah dengan  komponen-komponen  lain  dari  sel  tumbuhan yang  ikut  terekstrak  dengan  mendistribusikannya  ke fase asam (Wullur et al., 2012).
Flavonoid  termasuk  dalam  golongan  senyawa fenol yang memiliki banyak gugus –OH dengan adanya perbedaan  keelektronegatifan  yang  tinggi,  sehingga sifatnya  polar.  Golongan  senyawa  ini  dengan  mudah terekstrak  dalam  pelarut  etanol  yang  memiliki  sifat polar,  sehingga  dapat  terbentuk  ikatan  hidrogen (Ikalinus  et  al.,  2015).  Dari  hasil  yang  diperoleh menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun rosella positif adanya  kandungan  flavonoid,  karena  terbentuk endapan hitam kemerahan. Tujuan penambahan logam Mg  dan  HCl  untuk  mereduksi  inti  benzopiron  yang terdapat  dalam  struktur  flavonoid  sehingga  terbentuk garam  flavilium  berwarna  merah  atau  jingga  (Ergina, 2014).
Dari  hasil  yang  diperoleh  menunjukkan  bahwa ekstrak  etanol  daun  rosella  positif  mengandung senyawa  saponin.  Menurut  Depkes  (1999)  dalam penelitian Sulistyarini et al., (2019) keberadaan saponin positif  karena  sampel  yang  diuji  membentuk  busa setinggi  1-10  cm,  dengan  selang  waktu  ±10  menit. Menurut Harborne (1987) dalam penelitian Sulistyarini et  al.,  (2019)  penambahan  HCl  dapat  membuat  buih semakin stabil. Munculnya buih ini disebabkan karena senyawa  saponin  mengandung  senyawa  yang  larut dalam  air  ( hidrofilik )  dan  senyawa  yang  larut  dalam pelarut  nonpolar  ( hidrofobik )  sebagai  surfaktan  yang dapat menurunkan tekanan permukaan.
Dari  hasil  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol daun  rosella  positif  mengandung  tanin,  karena terbentuknya  warna  biru  tua.  Menurut  Jones  dan Kinghorn  (2006);  Robinson  (1991)  dalam  penelitian Sulistyarini  et  al.,  (2019)  tanin  merupakan  senyawa polar yang mana ketika ditambahkan FeCl 3 akan terjadi perubahan warna menjadi biru tua atau hijau kehitaman yang menunjukkan adanya senyawa tanin.

## Analisis KLT
Pemilihan  metode  KLT  untuk  pemisahan senyawa  ekstrak  daun  rosella  karena  teknik  analisis yang  sederhana,  hemat  biaya,  mudah  dilakukan  dan hanya  dibutuhkan  sedikit  cuplikan  sampel  untuk analisisnya  (Coskun,  2016).  Kuersetin  digunakan sebagai  standar  pembanding  dari  ekstrak  etanol  daun rosella  karena  kuersetin  adalah  flavonoid  golongan flavonol yang memiliki gugus keto pada C-4 dan gugus hidroksil  pada  atom  C-3  atau  C-5  sehingga  dapat membentuk kompleks warna dengan AlCl 3 (Aminah et al.,  2017).  Selain  itu,  penggunaan  standar  kuersetin karena  pada  hasil  skrining  fitokimia,  ekstrak  etanol daun rosella diketahui mengandung golongan senyawa flavonoid.
Fase  diam  yang  digunakan  pada  penelitian  ini yaitu plat silika GF 254 yang memiliki sifat relatif polar, mengandung  silika  dengan  gipsum  sebagai  agen pengikat,  dan  indikator  fluoresen  yang  dapat berfluorosensi  (Husna  &  Mita,  2020).  Plat  silika  GF 254 yang berukuran 10 x 4 cm sebelum digunakan di oven terlebih dahulu pada suhu 110 ℃ selama 30 menit untuk meningkatkan  daya serap  plat  dengan  menghilangkan kandungan  air  yang  terdapat  dalam  plat.  Fase  gerak yang digunakan yaitu kloroform : metanol : asam asetat dengan  perbandingan  14:2:1  (v/v),  karena  fase  gerak tersebut  menghasilkan  kenaikan  bercak  pada  ekstrak etanol  daun  rosella  dan  standar  kuersetin  serta  tidak tailing . Fasek gerak yang digunakan adalah eluen semi- polar. Selanjutnya, jika bagian sampel dapat larut dalam fase gerak dan tidak tertahan dalam fase diam, sehingga dapat  diartikan  senyawa  pada  sampel  bersifat  semi- polar.  Pada  penelitian  ini  ekstrak  etanol  daun  rosella larut dalam fase gerak sehingga terbentuk bercak yang sempurna pada plat silika.
Sebelum  dilakukan  pemisahan  senyawa  dari sampel  ekstrak  daun  rosella,  dilakukan  penjenuhan terlebih  dahulu.  Penjenuhan  dilakukan  dengan memasukan  kertas  saring  ke  dalam  fase  gerak  pada bejana,  bejana  ditutup  menggunakan  cawan  petri. Penjenuhan dilakukan sampai kertas saring benar-benar basah.  Tujuan  dilakukan  penjenuhan  terlebih  dahulu karena  untuk  mengoptimalkan  proses  pengembangan fase  gerak,  memperkecil  penguapan  pelarut  dan menghasilkan bercak lebih bundar dan lebih baik. Pada saat  dilakukannya  penjenuhan  sebaiknya  bejana disimpan  ditempat  yang  aman  dan  tidak  mudah tergeser-geser  sehingga  dapat  mencegah  terjadinya ketidak  jenuhan  pelarut.  Sampel  dan  kuersetin ditotolkan  di  atas  plat  kemudian  dielusi.  Setelah mencapai  tanda  batas,  plat  diangkat  dan  diangin- anginkan.  Untuk  memperjelas  bercak  pada  plat, dilakukan  penyemprotan  dengan  pereaksi  AlCl 3 . Adanya senyawa flavonoid ditandai dengan munculnya
bercak berwarna kuning atau hijau kekuningan setelah disemprot pereaksi AlCl 3 5% (Nunung et al., 2019). Identifikasi  pemisahan  senyawa  dianalisis dengan  cara  menghitung  nilai  Rf.  Faktor-faktor  yang dapat mempengaruhi nilai Rf meliputi sifat dan ukuran lempeng, arah aliran fase gerak, volume dan komposisi fase  gerak,  kondisi  kesetimbangan,  dan  kejenuhan bejana  KLT  (Wulandari,  2011).  Hasil  uji  KLT  dapat dilihat pada Gambar 1 dan Tabel 4.
a b c
Gambar 1. Profil KLT ekstrak daun rosella pada fase diam silika gel GF 254 dan fase gerak kloroform:metanol:asam asetat (14:2:1). (a) sinar tampak, (b) sinar UV 254 nm, (c) UV 366 nm. E: ekstrak daun rosella, S: standar kuersetin
Tabel 4. Hasil Analisis KLT Sampel Jarak elusi sampel (cm) Sinar tampak Sinar UV 254 (nm) Sinar UV 366 (nm) Nilai Rf Ekstrak etanol daun rosella 5,9 Hijau tua Hijau tua Hijau 0,737 Standar kuersetin 6,1 Kuning  Kuning  Kuning 0,762
Dari Tabel 4 menunjukkan bahwa nilai Rf ekstrak etanol  daun  rosella  dan  standar  kuersetin  memiliki kemiripan.  Hal  ini  berarti  ekstrak  etanol  daun  rosella mengandung  senyawa  yang  memiliki  kepolaran  yang mirip dengan kuersetin karena senyawa tersebut dapat terelusi  oleh  fase  gerak  dengan  jarak  tempuh  yang hampir sama.

## Kesimpulan
Dari  hasil  skrining  fitokimia  dapat  disimpulkan bahwa  ekstrak  etanol  daun  rosella  mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, saponin, dan tannin. Hasil uji  KLT  dengan  eluen  kloroform:metanol:asam  asetat (14:2:1)  diperoleh  bercak  dengan  Rf  0,737  yang  mirip dengan Rf standar kuersetin yaitu 0,762.

## Ucapan Terima Kasih
Ucapan terima kasih kepada Universitas Jenderal Achmad Yani Yogyakarta yang memberikan dukungan sarana sehingga penelitian ini dapat terlaksana dengan baik  dan  seluruh  pihak        yang        telah        membantu penelitian.

## Daftar Pustaka
Aminah,  A.,  Tomayahu,  N.,  &  Abidin,  Z.  (2017). Penetapan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Etanol Kulit  Buah  Alpukat  (Persea  americana  Mill.) Dengan Metode Spektrofotometri UV-VIS. Jurnal Fitofarmaka Indonesia , 4 (2), 226–230. https://doi.org/10.33096/jffi.v4i2.265
Badaring, D. R., Sari, S. P. M., Nurhabiba, S., Wulan, W.,
& Lembang, S. A. R. (2020). Uji Ekstrak Daun Maja (Aegle  marmelos  L.)  terhadap  Pertumbuhan Bakteri  Escherichia  coli  dan  Staphylococcus aureus. Indonesian Journal of Fundamental Sciences , 6 (1), 16. https://doi.org/10.26858/ijfs.v6i1.13941
BPOM  RI.  (2010).  Rosella  Hibiscus  sabdariffa  L. Serial Data Ilmiah Terkini Tumbuhan Obat , 1–22. Coskun, O. (2016). Separation Tecniques:
Cromatograph. Northern  Clinics  of  Istanbul , 3 (2),
156–160.
https://doi.org/10.14744/nci.2016.32757
Dahlia, A. A., Amin, A., & Lestari, R. (2012). Identifikasi Morfologi  dan  Parameter Spesifik  Simplisia dan Ekstrak  Daun  Rosella  (Hibiscus  sabdariffa  L.) Asal  Kab.  Enrekang  (Sulawesi  Selatan). Jurnal Ilmiah As-Syifaa , 4 (2), 159–175. https://doi.org/10.33096/jifa.v4i2.81
Ergina, S. N. dan I. D. P. (2014). Uji Kualitatif Senyawa Metabolit  Sekunder  Pada  Daun  Palado  (Agave angustifolia)  Yang  Diekstraksi  Dengan  Air  dan Etanol Qualitative Test of Secondary Metabolites Compounds  in  Palado  Leaves  (Agave. J.  Akad. Kim , 3 (3), 165–172.
Husna, F., & Mita, S. R. (2020). Identifikasi Bahan Kimia Obat  dalam  Obat  Tradisional  Stamina  Pria dengan  Metode  Kromatografi  Lapis  Tipis.
Farmaka , 18 (2), 16–25.
https://jurnal.unpad.ac.id/farmaka/article/vie w/25955
Ikalinus,  R.,  Widyastuti,  S.,  &  Eka  Setiasih,  N.  (2015). Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Etanol  Kulit  Batang
E            S E          S E           S
Kelor  (Moringa  Oleifera). Indonesia  Medicus Veterinus , 4 (1), 71–79.
Mahadevan, N., Shivali, & Kamboj, P. (2009). Hibiscus sabdariffa Linn.–An overview N. Natural Product Radiance, 8 (1), 77–83.
https://doi.org/10.1007/978-0-387-70638-2_749
Mungole,  A.,  &  Chaturvedi,  A.  (2011).  Hibiscus sabdariffa  L  a  rich  source  of  secondary metabolites. International Journal of Pharmaceutical Sciences Review and Research , 6 (1), 83–87.
Nunung,  N.,  Luliana,  S.,  &  Apridamayanti,  P.  (2019). Identifikasi  senyawa  flavonoid  ekstrak  daun senggani (Melastoma
malabathricum
L.)
menggunakan  metode  Kromatografi  Lapis  Tipis (KLT).  Jurnal  Mahasiswa  Farmasi  Fakultas Kedokteran UNTAN, 4(1), 1–7.
https://jurnal.untan.ac.id/index.php/jmfarmasi /article/view/42840
Padmasari,  P.  .,  Astuti,  K.  .,  &  Warditiani,  N.  .  (2013). Skrining  fitokimia  ekstrak  etanol  70%  rimpang bangle (z. Jurnal Farmasi Udayana , 2 (4), 1–7.
Sulistyarini,  I.,  Sari,  D.  A.,  &  Wicaksono,  T.  A.  (2019). Skrining Fitokimia Senyawa Metabolit Sekunder Batang  Buah  Naga  (Hylocereus  polyrhizus).
Jurnal Ilmiah Cendekia Eksakta , 56–62.
Wang, J., Cao, X., Jiang, H., Qi, Y., Chin, K. L., & Yue, Y. (2014).  Antioxidant  activity  of  leaf  extracts from different  Hibiscus  Sabdariffa  accessions  and simultaneous determination five major antioxidant  compounds  by  LC-Q-TOF-MS.
Molecules , 19 (12), 12226–12238. https://doi.org/10.3390/molecules191221226
Warnis,  M.,  Aprilina,  L.  A.,  &  Maryanti,  L.  (2020). Pengaruh Suhu Pengeringan Simplisia Terhadap Kadar Flavonoid Total Pada Ekstrak Daun Kelor (Moringa  oleifera  L.). Prosiding  Seminar  Nasional Kahuripan I , 265–268.
Wulandari,  L.  (2011).  Kromatografi  Lapis  Tipis.  In Taman Kampus Presindo .
Wullur,  A.  C.,  Schaduw,  J.,  &  Wardhani,  A.  (2012). Identifikasi Alkaloid Pada Daun Sirsak  (Annona muricata  L.). Jurnal  Ilmiah  Farmasi  Poltekkes Manado , 3 (2), 96483.