## DOI: 10.30644/rik.v11i2.634
Perbandingan  ekspresi  sitokin  proinflamasi  interferon-gamma  dan  antiinflamasi interleukin-10  pada  whole  blood  culture  terhadap  pajanan  mikroorganisme  yang distimulasi  dengan  phytohemagglutinin  pada  subjek  di  pemukiman  kumuh  dan  non kumuh
Talitha Vania Salsabella 1 , Ndaru Andri Damayanti 2 , Heri Wibowo 3* 1 Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jalan Salemba Raya No. 6, Jakarta Pusat, 10430, Indonesia
2 Parasitologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Yarsi, Jalan Letjend Suprapto No.Kav. 13, Cempaka Putih, Jakarta Pusat 10510, Indonesia
3* Departemen Parasitologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Indonesia, Jalan Pegangsaan Timur 16, Cikini, Jakarta Pusat 10320, Indonesia
*Email korespondensi: bowoheri04@gmail.com
Accepted: 15 April 2022; Revision: 2 October 2022; published: 31 December 2022

## Abstract
Background : Living conditions might affect the pathogenic exposure of its population. People that live in slum areas have a higher risk of being exposed to pathogens from their environment. This study aims to determine differences in the expression of IFN- γ and IL -10 in whole blood culture (WBC) of slum and non-slums residents stimulated by phytohemagglutinin (PHA).
Method : A cross-sectional study is conducted to define the different expression of IFN- γ and IL - 10 in whole blood culture from rural and urban areas stimulated with phytohemagglutinin (PHA). The data were obtained from a previous study.
Results : The expressions of IFN- γ in the basa l condition were found to be higher in the urban group than in the rural group (p=0.004). Similar results were shown in basal levels of interleukin- 10 (p=0.002). Stimulated with PHA, IFN-  levels were not different in the rural and urban group (p=0.488)  however,  IL-10  levels  were  higher  in  rural  group  (p=0.001).  The  ratio  of stimulated/basal IFN- γ were higher in the rural group compared to urban group (p=0.010), similar results were found in stimulated/basal IL-10 (p=0.004). The inflammatory potential was assessed by calculating the ratio of IFN- γ to IL -10, a higher inflammatory potential was found in urban areas compared to rural (p=0.002). Both cytokines showed a strong positive correlation, especially seen in the rural group (r=0.642, p=0.002).
Conclusion : There are differences in IFN- γ and IL -10 expressions in rural and urban subjects spontaneously.  After  stimulation  with  PHA,  a  difference  was  only  seen  on  IL-10  level.  The balanced ratio between IFN- γ and IL -10, which depicts the inflammation potency, is stronger in urban subjects when compared to rural subjects. There is a positive correlation between IFN- γ and IL-10, wherein an increase of IFN- γ will be followed by an increase of IL -10, which is shown better in rural subjects.
Key words: interferon-gamma, interleukin-10, non-slum, phytohemagglutinin, slum

## Abstrak
Latar  Belakang :  Kondisi  permukiman  dapat  mempengaruhi  tingkat  pajanan  mikroorganisme penduduknya. Penduduk yang tinggal di daerah kumuh memiliki risiko lebih tinggi untuk terpajan mikroorganisme. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui perbedaan ekspresi IFN- γ dan IL -10 pada whole blood culture (WBC) penduduk daerah kumuh dan non kumuh yang distimulasi oleh phytohemagglutinin (PHA).
Metode : Penelitian potong-lintang dilakukan untuk menentukan perbedaan kadar IFN- γ dan IL - 10 pada WBC yang berasal dari subjek daerah kumuh dan non kumuh yang distimulasi dengan mitogen PHA. Data sitokin merupakan data sekunder.
Hasil : Kadar IFN- γ pada kondisi basal ditemukan secara signifikan lebih tinggi pada kelompok non kumuh daripada kelompok kumuh (p=0,004). Temuan serupa terlihat pada kadar IL-10 basal
Talitha Vania Salsabella, Ndaru Andri Damayanti, Heri Wibowo     Perbandingan ekspresi sitokin proinflamasi interferon gamma dan  antiinflamasi  interleukin-10  pada  wholeblood  culture terhadap  pajanan  mikroorganisme  yang  distimulasi  dengan phytohemagglutinin  pada  subjek  di  pemukiman  kumuh  dan non kumuh
(p=0,002).  Pasca  stimulasi  PHA,  tidak  ditemukan  perbedaan  signifikan  pada  kadar  IFN- γ (p=0,488),  sedangkan  kadar  IL-10  pascastimulasi  PHA  secara  signifikan  lebih  tinggi  pada kelompok  kumuh  dibandingkan  non  kumuh  (p=0,001).  Rasio  IFN- γ  terstimulasi/IFN - γ  basal secara  signifikan  lebih  tinggi  pada  kelompok  kumuh  dibandingkan  non  kumuh  (p=0,010)  dan rasio  IL-10  terstimulasi/IL-10  basal  juga  secara  signifikan  lebih  tinggi  pada  kelompok  kumuh dibandingkan non kumuh (p=0,004). Potensi inflamasi dinilai dengan rasio keseimbangan IFN- γ terhadap IL-10, didapatkan potensi inflamasi yang secara signifikan lebih tinggi pada daerah non kumuh dibandingkan daerah kumuh (p=0,002). Kedua sitokin menunjukkan korelasi positif yang cukup kuat dan signifikan, terutama terlihat pada kelompok kumuh (R=0,642 dan p=0,002). Kesimpulan : Terdapat perbedaan kadar sitokin IFN- γ dan IL -10 pada kelompok kumuh dan non kumuh  pada  kondisi  basal.  Pasca  stimulasi  PHA  perbedaan  hanya  terlihat  pada  kadar  IL-10. Rasio keseimbangan kedua sitokin di kedua kelompok berbeda, menunjukkan potensi inflamasi kelompok non kumuh lebih kuat dibandingkan kelompok kumuh. Terdapat korelasi positif antara sitokin  IFN- γ  dan  IL -10  dimana  peningkatan  IFN- γ  akan  diikuti  dengan  peningkatan  IL -10, terutama terlihat pada kelompok kumuh.
Kata  kunci: daerah  kumuh,  daerah  non  kumuh, interferon-gamma,  interleukin-10, phytohemagglutinin

## PENDAHULUAN
Permukiman kumuh
adalah permukiman  yang  tidak  layak  huni,  dicirikan dengan  tidak  tersedianya  akses  air  minum yang  aman,  drainase  lingkungan,  maupun sistem pengelolaan air limbah dan sampah.(1)  Sebaliknya,  permukiman  non kumuh  memiliki  kemudahan  akses  terhadap air bersih dan sanitasi yang baik. Perbedaan ini menyebabkan perbedaan tingkat pajanan mikroorganisme  pada  penduduk  dari  kedua daerah tersebut.(2,3)
Tingginya  pajanan  mikroorganisme pada daerah kumuh menimbulkan perbedaan respons  imun  antara  populasi  tersebut dengan yang populasi non kumuh. Mikroorganisme  akan  menginduksi  respons imun  manusia,  salah  satunya  respons  imun seluler  yang  diperankan  oleh  sel  T  beserta sitokinnya.  Frekuensi  pajanan  patogen  yang lebih tinggi meningkatkan jumlah sitokin yang disekresikan sel dendritik pada respons imun innate, memicu diferensiasi sel T. Salah satu subset set T adalah sel T helper 1, sel efektor yang  mensekresikan  sitokin  inflamatori  IFN- γ.(4)  Terjadinya  inflamasi  sebagai  upaya eliminasi  patogen  akan  diikuti  usaha  tubuh mempertahankan  homeostasis  agar  tidak terjadi  kerusakan  berlebih,  salah  satunya dengan  pelepasan  sitokin  antiinflamasi seperti  sitokin  antiinflamasi  IL-10  yang diproduksi sel T regulator.
Peningkatan  frekuensi  pajanan  akan meningkatkan  aktivasi  respons  imun,  yang kemudian  meningkatkan  efek  imunoregulasi IL-10. Diamati pada kejadian infeksi malaria, rasio  IFN- γ/IL -10  yang  lebih  rendah  pada populasi endemis menunjukkan infeksi kronik dengan gejala minimal, sedangkan manifestasi  klinis  yang  lebih  hebat  terlihat pada penduduk non endemik malaria dengan respons  inflamasi  yang  terjadi  lebih  kuat tanpa  disertai  produksi  sitokin  antiinflamasi yang  seimbang.(5)  Penelitian  ini  bertujuan melihat  respons  inflamasi  pada  variasi pajanan  lain,  lokasi  permukiman.  Stimulasi mitogen  limfosit  phytohemagglutinin  (PHA) pada  kultur  darah  subjek  kumuh  dan  non kumuh  diharapkan  dapat  memperlihatkan perbedaan kadar IFN- γ dan IL -10 produksi sel T pada kedua populasi tersebut.

## METODE
Penelitian  ini  menggunakan  desain penelitian cross sectional menggunakan data sekunder  dari  penelitian  utama  Regulasi Respons  Imun  Subyek  di  Permukiman Kumuh:  Studi  Imunitas  Seluler  pada  Kultur Sel  Darah  yang  Distimulasi  Malaria,  Vaksin BCG  dan  LDL  ( unpublished ).  Penelitian  ini dilakukan  menggunakan  bahan  biologi tersimpan di Laboratorium Terpadu Fakultas Kedokteran  Universitas  Indonesia  pada November 2019 – Februari 2020.
Talitha Vania Salsabella, Ndaru Andri Damayanti, Heri Wibowo     Perbandingan ekspresi sitokin proinflamasi interferon gamma dan  antiinflamasi  interleukin-10  pada  wholeblood  culture terhadap  pajanan  mikroorganisme  yang  distimulasi  dengan phytohemagglutinin  pada  subjek  di  pemukiman  kumuh  dan non kumuh

## Sampel Penelitian
Populasi target adalah masyarakat yang tinggal di daerah kumuh dan yang tinggal di daerah  non  kumuh,  populasi  terjangkau adalah masyarakat yang bermukim di sekitar wilayah  Terminal-5  TPST  Bantar  Gebang serta  mahasiswa  Universitas  Yarsi,  Jakarta Pusat yang keduanya dipilih secara random. Sampel penelitian adalah populasi terjangkau yang  memenuhi  kriteria  inklusi  dan  lolos kriteria  eksklusi  penelitian  utama.  Kriteria inklusi yaitu laki-laki dan perempuan usia 19- 35  tahun  yang  bersedia  menjadi  subyek penelitian  dan  telah  mendapatkan  lembar informed  consent  serta  menandatangani lembar  persetujuan.  Kriteria  eksklusi  adalah subjek  penelitian  yang  sedang  mengalami demam,  influenza,  dan/atau  diare.  Besar sampel  minimal  yang  diperlukan  untuk penelitian  adalah  22  sampel  dihitung berdasarkan  rumus  uji  hipotesis  perbedaan rerata dua populasi independen berikut:

## Teknis Pelaksanaan
Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  tabel  data  ekspresi sitokin  IFN- γ  dan  IL -10  dari  kultur  WBC penduduk  permukiman  kumuh  dan  non kumuh  yang  distimulasi  dengan  PHA  dari penelitian utama. Penelitian ini dilaksanakan dengan  melakukan  analisis  statistik  pada data  penelitian  utama.  Teknis  pelaksanaan penelitian disesuaikan dengan tahapan pada penelitian  utama  yaitu:  Pengambilan  data karakteristik  subjek  dengan  kuesioner, Pengambilan sampel darah subjek, Pembuatan  Whole  Blood  Culture  dan Pengukuran IFN- γ dan IL -10 dengan luminex kit dari data primer.

## Analisis Data
Variabel  bebas  dalam  penelitian  ini adalah status permukiman yaitu permukiman kumuh  dan  non  kumuh,  sedangkan  variabel terikatnya adalah kadar IFN- γ dan IL -10 yang diperoleh  dari  supernatan  WBC  kelompok kumuh  dan  non  kumuh  yang  distimulasi dengan  PHA.  Hasil  pengukuran kadar  IFN- γ dan  IL-10  merupakan  data  numerik.  Data penelitian  diolah  menggunakan  program statistik  IBM  SPSS  24  for  Macintosh.
Pengolahan  data  diawali  uji  normalitas dengan  uji  Shapiro-Wilk.  Apabila  data terdistribusi  normal,  perbedaan  rerata  diuji dengan uji T tidak berpasangan dan apabila data tidak berdistribusi normal, digunakan uji Mann-Whitney.  Korelasi  kedua  sitokin  dinilai dengan  uji  Pearson  apabila  data  linier  dan berdistribusi  normal  serta  uji  Spearman apabila  data  linier  namun  tidak  berdistribusi normal. Seluruh uji dilakukan dengan nilai α = 5%.
Penelitian  ini  lolos  kaji  etik  dari  Komisi
Etik Penelitian Kesehatan Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia tahun 2019 dengan nomor KET- 074/UN2.F1.D1.2/PDP.01/Riset-2/2019.

## HASIL Karakteristik Subjek Penelitian
Subjek  pada  penelitian  ini  diambil  dari subjek  penelitian  utama  dan  dilakukan analisis terhadap respons imun seluler pada 18  subjek,  dengan  rincian  8  subjek  berasal dari daerah non kumuh dan 10 subjek berasal dari  daerah  kumuh.  Karakteristik  dari  subjek berupa  status  demografi,  status  infeksi  dan tempat tinggal dapat dilihat pada tabel 1.

## Tabel 1. Karakteristik subjek
Karakteristik Kumuh Non kumuh p Jumlah subjek 10 8 Jenis kelamin Perempuan 8 4 0,321 1 Laki-laki 2 4 Usia (Mean±SD) 32,1±7, 04 21,1±2, 29 0,001 2 Kependudukan Pendatang 9 5 0,537 1 Asli 1 2 Lama tinggal (> 1 tahun) 10 8 Status infeksi GI Positif 4 2 0,437 1 Negatif 6 6 Sumber air minum Air tanah 0 4 0,023 1 PAM 10 4 1 Uji Fisher
2 Uji T tidak berpasangan
Talitha Vania Salsabella, Ndaru Andri Damayanti, Heri Wibowo     Perbandingan ekspresi sitokin proinflamasi interferon gamma dan  antiinflamasi  interleukin-10  pada  wholeblood  culture terhadap  pajanan  mikroorganisme  yang  distimulasi  dengan phytohemagglutinin  pada  subjek  di  pemukiman  kumuh  dan non kumuh
Subjek  penelitian  pada  daerah  kumuh dan  non  kumuh  memiliki  rerata  usia  yang berbeda, rerata usia subjek adalah 32,1 tahun di  daerah  kumuh  dan  21,1  tahun  di  daerah non  kumuh.  Perbedaan  rerata  usia  berbeda signifikan  secara  statistik  (p=0,001).  Lokasi permukiman  subjek  juga  secara  statistik berhubungan  dengan  sumber  air  minum (p=0,023).  Tidak  terdapat  hubungan  antara jenis kelamin dengan lokasi subjek (p=0,321) dan  status  infeksi  GI  dengan  lokasi  subjek (p=0,437).
Uji multivariat dilakukan untuk pastikan  perbedaan  kadar  sitokin  yang didapatkan  adalah  hanya  pengaruh  dari lokasi  permukiman  subjek.  Usia  (p=0,153), IFN- γ  (p=0,248)  dan  sumber  air  minum (p=0,576)  selanjutnya  tidak  dimasukkan  ke dalam  uji regresi  logistik.  Didapatkan  bahwa lokasi permukiman subjek memiliki hubungan yang  paling  kuat  dengan  kadar  IFN- γ dibandingkan  gender.  Dapat  dipastikan bahwa perbedaan kadar IFN- γ terjadi karena perbedaan lokasi permukiman subjek, bukan karakteristik  lain.  Uji  regresi  logistik  juga dilakukan untuk IL-10 dan didapatkan bahwa lokasi permukiman subjek memiliki hubungan yang  paling  kuat  dengan  kadar  IL-10  walau tidak signifikan secara statistik (p=0,999).

## Perbandingan Kadar Sitokin pada WBC di Medium RPMI
Kadar  sitokin  IFN- γ  dan  IL -10  basal dilihat dari WBC yang berada dalam medium RPMI  tanpa  stimulasi  memperlihatkan distribusi  data  yang  tidak  normal  dan dilakukan  uji  Mann-Whitney.  Gambar  1 memperlihatkan hasil analisis uji menunjukkan  kadar  IFN- γ  pada  daerah kumuh  dan  non  kumuh  berbeda  bermakna secara  statistik  (p=0,004).  Median  IFN- γ adalah  3,25  pada  daerah  kumuh  dan  15,25 pada  non  kumuh.  Hasil  serupa  terlihat  pada kadar  IL-10  (p=0,002).  Median  kadar  IL-10
dari daerah kumuh adalah sebesar 4,00 dan dari daerah non kumuh 117,75.
Gambar  1. Kadar  sitokin  IFN- γ  (atas) dan  IL-10  (bawah)  dari  subjek  daerah kumuh  dan  non  kumuh  pada  WBC  di medium RPMI (skala logaritmik)
Perbandingan  Kadar  Sitokin  pada  WBC dengan Stimulasi PHA
Kultur darah distimulasi dengan mitogen PHA  untuk  mengamati  kadar  sitokin  IFN- γ dan  IL-10  yang  diproduksi  sel  limfosit  T.  Uji normalitas data dengan Shapiro-Wilk menunjukkan kedua data berdistribusi normal dan uji hipotesis dengan uji Mann-Whitney.
Gambar  2  memperlihatkan  hasil  kadar IFN- γ pascastimulasi PHA, didapatkan rerata pada  subjek  daerah  kumuh  lebih  tinggi (8269,31±4751,65)  dibandingkan  subjek daerah  non  kumuh  (6906,60±3396,37), perbedaan  tersebut  tidak  bermakna  secara statistik (p=0,488). Sementara itu, kadar IL-10 setelah distimulasi dengan PHA menunjukkan  perbedaan  yang  bermakna (p=0,001) dimana kadar IL-10 pada WBC dari kelompok  kumuh  (1121,20±535,69)  lebih
Mann Whitney Test p=0,004
Mann Whitney Test p=0,002
Talitha Vania Salsabella, Ndaru Andri Damayanti, Heri Wibowo     Perbandingan ekspresi sitokin proinflamasi interferon gamma dan  antiinflamasi  interleukin-10  pada  wholeblood  culture terhadap  pajanan  mikroorganisme  yang  distimulasi  dengan phytohemagglutinin  pada  subjek  di  pemukiman  kumuh  dan non kumuh
tinggi  dibandingkan  dengan kadar IL-10  dari kelompok non kumuh (335,06±168,41).
Gambar  2. Kadar  sitokin  IFN- γ  (atas) dan  IL-10  (bawah)  dari  subjek  daerah kumuh  dan  non  kumuh  Pada  WBC setelah distimulasi PHA (skala linear)

## Perbandingan Rasio Sitokin
Nilai  rasio  dihitung  dengan  nilai  kadar IFN- γ  terstimulasi/IFN - γ  basal  dan  IL -10 terstimulasi/IL-10 basal. Data rasio IFN- γ dan rasio  IL-10  berdistribusi  normal  sehingga dilakukan uji T tidak berpasangan pada kedua variable (gambar 3). Rasio IFN- γ pada subjek daerah  kumuh  (2211,97±1698,36)  secara bermakna (p=0,010) lebih tinggi dibandingkan dengan rasio pada subjek daerah non kumuh (462,14±332,75).  Rerata  rasio  IL-10  pada subjek daerah kumuh adalah 259,75±214,70 dan  pada  subjek  daerah  non  kumuh  adalah 2,67±1,53,  dimana  perbedaan  tersebut bermakna secara statistik (p=0,004).
Gambar  3. Kadar  sitokin  IFN- γ  (atas) dan  IL-10  (bawah)  dari  subjek  daerah kumuh  dan  non  kumuh  Pada  WBC setelah distimulasi PHA (skala
logaritmik)

## Rasio  Keseimbangan  Kadar  Sitokin Proinflamasi dan Antiinflamasi
Interferon-gamma  merupakan  sitokin yang  bersifat  proinflamasi  dan  IL-10 merupakan sitokin yang bersifat antiinflamasi. Rasio  keseimbangan  pro-  dan  anti  inflamasi merupakan nilai yang diperoleh dari hasil bagi IFN- γ  terhadap  IL -10.  Semakin  besar  nilai rasio inflamasi menunjukkan potensi inflamasi yang semakin kuat. Hasil pengukuran  terhadap  rasio  keseimbangan pro-  dan  anti  inflamasi  pada  uji  normalitas menunjukkan  sebaran  data  yang  normal setelah  sebelumnya  dilakukan  transformasi data dengan logaritma dan besar perbedaan nilai  rerata  kadar  dilakukan  uji  T  tidak berpasangan.  Tabel  2  memperlihatkan  hasil analisa  rerata  rasio  keseimbangan  pro-  dan antiinflamasi  pada  kelompok  non  kumuh secara signifikan lebih tinggi dibanding rerata kadar dari kelompok kumuh (p=0,002).
Independent T Test p=0,488
Independent T Test p=0,001 Independent T-Test p=0,010
Independent T-Test
p=0,004
Talitha Vania Salsabella, Ndaru Andri Damayanti, Heri Wibowo     Perbandingan ekspresi sitokin proinflamasi interferon gamma dan  antiinflamasi  interleukin-10  pada  wholeblood  culture terhadap  pajanan  mikroorganisme  yang  distimulasi  dengan phytohemagglutinin  pada  subjek  di  pemukiman  kumuh  dan non kumuh
Tabel 2. Hasil analisa pada rasio keseimbangan
IFN –γ dibandingkan IL -10
n Rerata ±SD Nilai p Jenis uji Kumuh 10 1,178± 0,63 0,002 Uji T tidak berpasan gan Non Kumuh 8 2,159± 0,49
Gambar  4. Korelasi  antara  kadar  rasio IFN- γ dan rasio IL -10 yang berasal dari kelompok  kumuh  dan  non  kumuh  (titik merah  =  non  kumuh  dan  titik  hijau  = kumuh)
Gambar  5. Korelasi  positif  kadar  IFN- γ dan  IL-10  yang  berasal  dari  kelompok
kumuh (atas) dan korelasi negatif kadar IFN- γ  dan  IL -10  yang  berasal  dari kelompok non kumuh (bawah).
Korelasi Kadar IFN- γ dan IL -10 pada WBC dengan Stimulasi PHA
Interferon-gamma  merupakan  sitokin yang  digunakan  untuk  menilai  fungsi proinflamatorik  sel  Th1 dan IL-10  digunakan untuk menilai fungsi anti inflamatorik sel Treg. Kenaikan  kadar  sitokin  proinflamasi  akibat pajanan patogen akan diikuti kenaikan kadar sitokin antiinflamasi. Hubungan antara kedua sitokin  dapat  dilihat  dengan  uji  korelasi, dimana kadar yang dikorelasikan adalah rasio IFN- γ dan rasio IL -10. Kenaikan  kadar  IFN- γ  akan  diikuti dengan kenaikan kadar IL-10. Korelasi yang cukup kuat (R=0,642) antara kadar IFN- γ dan IL-10 dan korelasi tersebut bermakna secara statistik  (p=0,002).  Data  kelompok  kumuh terlihat berada di atas garis median IFN- γ dan IL-10, sementara data kelompok non kumuh cenderung  berada  di  bawah  garis  median kedua sitokin (gambar 4).
Pada  uji  korelasi  IFN- γ  dan  IL -10 terpisah  antar  kelompok  kumuh  dan  non kumuh  pada  distribusi  data  normal  setelah dilakukan  transformasi  dengan  logaritma. Gambar  5  memperlihatkan  bahwa  korelasi positif  antar  sitokin  hanya  terlihat  pada kelompok  kumuh  dengan  koefisien  korelasi yang  cukup  kuat  (r=0,671)  dan  bermakna secara  statistik  (p=0,017).  Sementara  itu, pada  kelompok  non  kumuh  tidak  terlihat adanya korelasi antara IFN- γ dan IL -10 (r= - 0,044, p=0,459).

## PEMBAHASAN
Tidak ditemukan perbedaan
karakteristik  subjek  pada  kedua  kelompok. Pada kondisi basal, kadar IFN- γ maupun IL - 10  lebih  rendah  pada  daerah  kumuh dibandingkan  dengan  daerah  non  kumuh. Pasca  Stimulasi  PHA,  tidak  ditemukan perbedaan  kadar  IFN- γ  namun,  kadar  IL -10 pada daerah kumuh lebih tinggi dibandingkan daerah non kumuh. Nilai rasio IFN- γ maupun IL-10  pada  kelompok  kumuh  meningkat berkali lipat dari kadar basalnya dan nilainya lebih  tinggi  dibanding  kelompok  non  kumuh.
Pearson R=0,642 p=0,002 Pearson R=0,671 p=0,017 Pearson R=-0,044 p=0,459
Talitha Vania Salsabella, Ndaru Andri Damayanti, Heri Wibowo     Perbandingan ekspresi sitokin proinflamasi interferon gamma dan  antiinflamasi  interleukin-10  pada  wholeblood  culture terhadap  pajanan  mikroorganisme  yang  distimulasi  dengan phytohemagglutinin  pada  subjek  di  pemukiman  kumuh  dan non kumuh
Peningkatan ini dapat didasari oleh frekuensi sel T memori yang lebih tinggi pada kelompok kumuh. Menurut studi Jong et al, frekuensi sel T  memori  ditemukan  lebih  banyak  pada kelompok  kumuh  dibandingkan  dengan kelompok  non  kumuh.(6)  Sel  T  memori adalah sebagian kecil sel T efektor yang tidak dieliminasi setelah proses inflamasi, sehingga sel  tersebut  memiliki  memori  terhadap patogen spesifik.(7,8) Pada reinfeksi, jumlah sel  T  memori  lebih  banyak  dibandingkan dengan  sel  T naive sehingga  sel  T  memori memberikan respons yang lebih dominan dan lebih  cepat.(7)  Aktivasi  sel  T  efektor  yang lebih tinggi pada kelompok kumuh selanjutnya  memicu  sel  T  regulator  untuk lebih  sering  teraktivasi.2  Hal  ini  dapat menjelaskan mengapa kadar IFN- γ dan IL -10 pada kelompok kumuh mengalami peningkatan yang hebat dari kadar basalnya setelah dipajankan PHA.
Penelitian  Moebius  et  al  tentang  kadar sitokin  pada  anak  penderita  malaria  dari daerah  yang  risiko  pajanan  patogennya tinggi, setara dengan kelompok kumuh pada penelitian ini. Ditemukan bahwa kadar IFN- γ dan  IL-10  lebih  tinggi  pada  darah  subjek kondisi  sembuh  malaria  dibandingkan dengan  sebelum  terpajan  malaria  sama sekali.(9)  Studi Sanchez et al meneliti sitokin Th1 dan Th2 pada subjek di daerah endemis Entamoeba histolytica (Eh) dan menemukan bahwa  pada  kelompok  asimptomatik  (positif Eh) kadar IFN- γ secara signifikan lebih tinggi dibandingkan  kelompok  kontrol  (negatif Eh).(10)  Temuan  tersebut  juga  sejalan dengan hasil penelitian ini dimana kelompok non  kumuh  memunculkan  kadar  IFN- γ  yang lebih  rendah,  serupa  dengan  kelompok negatif Eh.
Ketidakseimbangan sitokin proinflamasi dan  antiinflamasi  pada  populasi  dengan pajanan  rendah  diduga  merupakan  bentuk ketertinggalan  perkembangan regulasi  imun. Menurut  Figueiredo  et  al,  pajanan  mikroba lingkungan  yang  lebih  tinggi  pada  daerah kumuh dapat memicu perkembangan regulasi imun  subjek.(11)  Cooper  et  al  juga memaparkan  bahwa  higienitas  yang  buruk dapat  memediasi  peningkatan  sitokin  IL-10 sehingga  populasi  yang  bermukim  pada
lingkungan  tersebut  memiliki  regulasi  sistem imun yang lebih kuat.(12)
Berbagai  studi  sudah  dilakukan  untuk mencari  faktor yang menghubungkan  antara pajanan mikroorganisme dengan sistem imun dan  ditemukan  bahwa  terdapat  peran  dari mikrobiota.(13)  Komunitas  mikrobiota  yang kompleks  memiliki  peran  dalam  berbagai fungsi  fisiologis  manusia,  salah  satunya menjaga  homeostasis  sistem  imun  bila kolonisasi  mikrobiota  berjalan  baik.(14) Mikrobiota  dapat  masuk  ke  saluran  cerna melalui  konsumsi  air  susu  ibu  (ASI).(14,15) Efek  kolonisasi  mikroba  pada  masa  bayi diketahui  mempengaruhi  perkembangan  gut associated  lymphoid  tissue  (GALT),  yang baru  akan  mencapai  puncak  kematangan pada usia 15-25 tahun.(16)
Terdapat korelasi positif yang kuat dan signifikan  antara  kadar  IFN- γ  dengan  IL -10 namun korelasi hanya terlihat pada populasi kumuh  saja.  Temuan  serupa  dipaparkan dalam  studi  Jong  et  al  yang  meneliti  profil sitokin  pada  tiga  populasi  dengan  kondisi permukiman berbeda yaitu kelompok kumuh di Senegal, non kumuh di Senegal, serta non kumuh  di  Belanda.(6)  Tidak  hanya  berbeda, kedua  sitokin  juga  memperlihatkan  gradien korelasi  dimana  IFN- γ  dan  IL -10  hanya ditemukan  berkorelasi  kuat  pada  populasi yang  paling  kumuh  saja  yaitu  kelompok kumuh Senegal (r=0,636 p=0,048). Sementara  itu,  pada  kelompok  non  kumuh Senegal dan non kumuh Belanda) ditemukan korelasi  lemah  (berturut-turut  r=0,162  dan r=0,001).(6) Informasi ini kembali menegaskan
adanya keterbatasan perkembangan  regulasi  imun  subjek  pada populasi non kumuh untuk mengkompensasi respons inflamasi yang terjadi.
Perbedaan pola respons imun pada dua populasi  dapat  berdampak  pada  tampilan klinis yang berbeda pula. Keuntungan proses inflamasi  dalam  eradikasi  patogen  terutama dibutuhkan  pada  infeksi  akut,  sedangkan pada  beberapa  infeksi  yang  bersifat  kronik seperti pada infeksi parasit, respons inflamasi yang  sangat  kuat  cenderung  menimbulkan imunopatologi.(17)
Dampak  lain  yang  berpotensi  ditemui populasi  non  kumuh  akibat  keterbatasan
Talitha Vania Salsabella, Ndaru Andri Damayanti, Heri Wibowo     Perbandingan ekspresi sitokin proinflamasi interferon gamma dan  antiinflamasi  interleukin-10  pada  wholeblood  culture terhadap  pajanan  mikroorganisme  yang  distimulasi  dengan phytohemagglutinin  pada  subjek  di  pemukiman  kumuh  dan non kumuh
kemampuan
regulasi imun adalah peningkatan  risiko terjadinya penyakit autoimun. Menurut Hygiene Hypothesis yang dikembangkan  oleh  Stracthan,  peningkatan kejadian penyakit autoimun bersama dengan penurunan kejadian infeksi seringkali dikaitkan  dengan  urbanisasi.(18)  Penyakit autoimun  yang  peningkatan  insidensinya dapat dijelaskan dengan Hygiene Hypothesis diantaranya  adalah  diabetes  tipe  1,  multiple sclerosis  (MS),  inflammatory  bowel  disease (IBD),  serta  rheumatoid  arthritis  (RA).(18) Terdapat  beberapa  mekanisme  molekuler yang  mendasari  hubungan  tersebut,  salah satunya  adalah  teori  bystander  activation dimana  patogen  akan  memicu  sistem  imun membentuk  lingkungan  yang  inflamatif.(19) Lingkungan inflamatif ini berpotensi mengaktivasi  sel  autoimun  non  spesifik sehingga  tercetus  serangan  terhadap  sel inang.(19)  Semakin  inflamatif  respons  imun yang terjadi maka semakin besar pula risiko aktivasi sel yang bersifat autoimun sehingga pada populasi non kumuh yang bersifat lebih inflamatif, terdapat risiko munculnya penyakit autoimun lebih besar.
Mengetahui  perbedaan  kadar  sitokin proinflamasi dan antiinflamasi pada populasi kumuh dan nonkumuh memberikan gambaran  bagaimana  lokasi  permukiman individu,  dikaitkan  dengan  higienitas  dan pajanan  mikroba,  dapat  mempengaruhi perkembangan  respons  imun  seluler.  Pada kelompok  kumuh  terlihat  adanya  aktivasi inflamasi  yang  kuat  ketika  terpajan  namun disertai  kompensasi  adekuat  dari  komponen antiinflamasi.  Keunggulan  perkembangan regulasi  imun  ini  merupakan  hasil  proses aklimasi  jangka  panjang  yang  diawali  sejak lahir.  Fenomena  ini  tidak  ditemui  pada populasi non kumuh sehingga pada populasi tersebut, keterbatasan ini tidak hanya berisiko menimbulkan  gejala  penyakit  yang  lebih parah  namun  juga  tercetusnya  penyakit autoimun.

## KESIMPULAN
Terdapat perbedaan kadar sitokin IFN- γ dan IL-10 pada kultur darah populasi kumuh dan non kumuh. Kadar IFN- γ dan IL -10 pada kondisi  basal  lebih  tinggi  pada  populasi  non
kumuh;  kadar  IFN- γ  pasca  stimulasi  PHA tidak  berbeda  pada  kedua  kelompok  namun kadar IL-10 lebih tinggi pada populasi kumuh; peningkatan kadar IFN- γ dan IL -10 pascastimulasi PHA dari kadar basalnya lebih tinggi  pada  populasi  kumuh.  Pola  respons imun  populasi  non  kumuh  bersifat  lebih inflamatif  dibandingkan  populasi  kumuh. Terdapat  korelasi  positif  antara  kadar  IFN- γ dan  IL-10  dimana  peningkatan  kadar  IFN- γ akan diikuti dengan peningkatan kadar IL-10 dan  korelasi  hanya  terlihat  pada  populasi kumuh.

## DAFTAR PUSTAKA
1.  Undang-Undang.  PERUMAHAN  DAN KAWASAN  PERMUKIMAN  [Internet]. 2011.
2.  Sungkar  S,  Pohan  APN,  Ramadani  A, Albar  N,  Azizah  F,  Nugraha  ARA,  et  al. Heavy  burden  of  intestinal  parasite infections in Kalena Rongo village, a rural area in South West Sumba, eastern part of  Indonesia:  A  cross  sectional  study. BMC Public Health. 2015 Dec 24;15(1).
3.  Chen W, Shu W, Wang M, Hou Y, Xia Y, Xu  W,  et  al.  Pulmonary  Tuberculosis Incidence and Risk Factors in Rural Areas of  China:  A  Cohort  Study.  PLoS  One. 2013 Mar 12;8(3).
4.  Abbas AK, Lichtman AH. Basic immunology:  functions  and  disorders  of the  immune  system.  Philadelphia ,  PA : Saunders/Elsevier; 2009.
5.  Sinha S,  Qidwai  T,  Kanchan K, Jha  GN, Anand P, Pati SS, Mohanty S, Mishra SK, Tyagi  PK,  Sharma  SK,  Awasthi  S, Venkatesh V HS. Distinct cytokine profiles define  clinical  immune  response  to falciparum  malaria  in  regions  of  high  or low  disease  transmission.  Eur  Cytokine Netw [Internet]. 2010;21(4):231 – 40. 6.  Jong
SE de, Ridderprint BV.
Immunological differences between urban and rural populations. 191 p.
7.  MacLeod MKL, Clambey ET, Kappler JW, Marrack P. CD4 memory T cells: What are they  and  what  can  they  do?  Vol.  21, Seminars in Immunology. 2009. p. 53 – 61.
8.  Sprent  J  SC.  T  cell  memory.  Annu  Rev Immunol [Internet]. 2002;20:551 – 79.
Talitha Vania Salsabella, Ndaru Andri Damayanti, Heri Wibowo     Perbandingan ekspresi sitokin proinflamasi interferon gamma dan  antiinflamasi  interleukin-10  pada  wholeblood  culture terhadap  pajanan  mikroorganisme  yang  distimulasi  dengan phytohemagglutinin  pada  subjek  di  pemukiman  kumuh  dan non kumuh
9.  Portugal  S,  Moebius  J,  Skinner  J, Doumbo  S,  Doumtabe  D,  Kone  Y,  et  al. Exposure-Dependent  Control  of  Malaria- Induced  Inflammation  in  Children.  PLoS Pathog. 2014;10(4).
10. Sanchez-Guillen, Perez-Fuentes R, Salgado-Rosas H, Ruiz. Differentiation of Entamoeba Histolytica/Entamoeba Dispar by  PCR  and  Their  Correlation  with Humoral  and  Cellular  Immunity  in Individuals  with  Clinical  variants  of Amoebiasis. 2002.
11. Figueiredo  CA,  Barreto  ML,  Rodrigues LC, Cooper PJ, Silva NB, Amorim LD, et al.  Chronic  intestinal  helminth  infections are associated with immune hyporesponsiveness  and  induction  of  a regulatory  network.  Infect  Immun.  2010 Jul;78(7):3160 – 7.
12. Cooper  PJ,  Amorim  LD,  Figueiredo  CA, Esquivel  R,  Tupiza  F,  Erazo  S,  et  al. Effects of environment on human cytokine responses during childhood in the tropics: role  of  urban  versus  rural  residence. World Allergy Organ J. 2015 Aug 6;8(1).
13. Renz  H,  Holt  PG,  Inouye  M,  Logan  AC, Prescott  SL,  Sly  PD.  An  exposome perspective: Early-life events and immune development  in  a  changing  world.  Vol.
140,  Journal  of  Allergy  and  Clinical Immunology. Mosby Inc.; 2017. p. 24 – 40. 14. Belkaid  Y,  Hand  TW.  Role  of  the microbiota in immunity and inflammation. Vol.  157,  Cell.  Elsevier  B.V.;  2014.  p. 121 – 41.
15. Perez PF, Doré J, Leclerc M, Levenez F, Benyacoub  J,  Serrant  P.  Bacterial Imprinting  of  the  Neonatal  Immune System:  Lessons  From  Maternal  Cells? Pediatrics. 2007 Mar 1;119(3):e724 – 32. 16. Jung  C,  Hugot  J- P,  Barreau  F.  Peyer’s Patches:  The  Immune  Sensors  of  the Intestine. Int J Inflam. 2010;2010:1 – 12.
17. John  Richard  Seed.  Chapter  78: Protozoa:  Pathogenesis  and  Defenses. In: Baron S, editor. Medical Microbiology. 4th  edition.    University  of  Texas Medical Branch at Galveston; 1996.
18. Okada H, Kuhn C, Feillet H, Bach JF. The “hygiene hypothesis” for autoimmune and allergic  diseases:  An  update.  Vol.  160, Clinical  and  Experimental  Immunology. 2010. p. 1 – 9.
19. Ercolini  AM,  Miller  SD.  The  role  of infections  in  autoimmune  disease.  Vol. 155, Clinical and Experimental Immunology. 2009. p. 1 – 15.