## 204

## Pengaruh suhu dan lama penyimpanan terhadap antioksidan ASI

## Effect of temperature and length of storage on Breast milk antioxidants
Enggar 1 *, Margareta Paula Klara 2
* 1 Akademi Kebidanan Palu Sulawesi Tengah, Jalan Cendrawasih No. 44 Palu, Sulawesi Tengah, email: enggardarwis@gmail.com, Indonesia 2 Akademi Kebidanan Palu Sulawesi Tengah, Jalan Cendrawasih No. 44 Palu, Sulawesi Tengah, email: gretha.cla86@gmail.com, Indonesia

## ABSTRACT
Background: Breast milk contains antioxidants that can inhibit oxidative stress in infants. Milking is now a much-done  option.  Breast  milk  is  stored  so  that  the  baby  can  drink  it  at  any  time.  The  presence  of temperature treatment and long storage of breast milk triggers physical and chemical changes, one of which is antioxidants that babies desperately need to combat the effects of free radicals.
Objective: The research aimed at comparing antioxidants in the fresh breast milk and storage breast milk. Methods: This  was  the  true  experimental  research.  Samples  were  taken  using  the  purposive  sampling technique of 24 samples. The breast milk was tested its antioxidant content using DPPH, initial control, and giving  two  treatment  factors.  The  first  treatment  was  the  breast  milk  storage  at  room  temperature  (fresh breast  milk),  refrigerator  temperature,  and  freezer  temperature.  The  second  treatment  was  breast  milk storage for 7, 14, 30, and 60 days. The data were analyzed using T-Test and repeated Anova.
Results: The research result indicates that there is a decrease of the antioxidants between the fresh breast milk and the breast milk stored in the refrigerator temperature of 2 0 C with the storage duration of 7 days, and freezer temperature of -16 0 C with the storage duration 14, 30, and 60 days, p=0.000. Conclusion: The antioxidant is better stored at the temperature of -16 0 C than the temperature of 2 0 C. The longer the storage, the lower the breast milk antioxidant.
Keywords: Antioxidant, Breastmilk, Cold Temperature, Freezing Temperature, Room Temperature,

## PENDAHULUAN
World  Health  Organization (WHO) dan United Nations Children's Fund
(UNICEF)  dalam Global Strategy  for  Infant and  Young  Child Feeding (GSIYCF) , serta Kementerian  Kesehatan  melalui  Kepmenkes
RI No 450/MENKES/SK/IV/2004 dan Undang-Undang  Kesehatan  No  36  Tahun 2009  pasal  128  merekomendasikan  antara lain  1)  Memberikan  ASI  kepada  bayi  segera 30  menit  setelah  bayi  lahir.  2)  Memberikan ASI eksklusif sejak lahir sampai bayi berumur 6  bulan.  3)  Memberikan  MP-ASI  sejak  bayi berusia 6-24 bulan. 4) Meneruskan
pemberian  ASI  sampai  bayi  usia  24  bulan atau lebih. 1,2
Radikal bebas bisa mengubah ekspresi gen  atau  kerusakan  lipid,  protein,  dan kerusakan  DNA.  Stres  Oksidatif  (OS)  terjadi jika  ketidakseimbangan  antara  produksi radikal  bebas  (FR)  dengan  kapasitas antioksidan.  OS  dapat  menjadi  faktor  risiko gangguan  janin,  kelahiran  prematur,  dan meningkatkan  risiko  penyakit  pada  masa remaja  bahkan  hingga  dewasa.  Dampak pada  periode  neonatal  yang  meliputi gangguan  perkembangan  saraf  (masalah motorik  dan  kognitif, attention  deficit hyperactivity ,  dan  gangguan  psikotik),  asma,
205 resistensi insulin,
diabetes melitus, hipertensi,  penyakit  jantung  koroner,  dan stroke. 3
Peningkatan  stres  oksidatif  telah dikaitkan dengan meningkatnya risiko radikal bebas.  Stres  oksidatif  (OS)  menyebabkab banyak  penyakit  pada  janin  dan  bayi  baru lahir. 4 Sistem  antioksidan  yang  rendah  yang pada  bayi  tidak  mampu  melawan  efek berbahaya  radikal  bebas  (FR)  dampak  dari "penyakit  terkait  radikal  bebas"  pada  bayi baru lahir yaitu  kerusakan sel, jaringan, dan organ  (ginjal,  retina,  paru-paru,  usus,  dan cedera  otak). 5 Jadi  Stres  oksidatif  dapat terjadi diawal kehamilan dan berlanjut sampai masa  nifas.  Kondisi  ini  menyebabkan beberapa  penyakit  patogenesis  pada  bayi baru lahir.
Air  Susu  Ibu  memilki  kemampuan untuk mengikat radikal bebas dan menghambat peroksidasi lipid dibanding susu formula.  ASI  memiliki  keunggulan  yang  jelas meskipun  diketahui  antioksidan  molekul seperti  vitamin  C  dan  E  yang  tinggi  pada produk susu formula. Sehingga untuk tingkat F2-IsoPs lebih  rendah  dalam  urin  bayi  yang diberi  ASI  dibandingkan  dengan  bayi  susu formula. 6
Berdasarkan  hasil  penelitian  bahwa TAC  ( Total  Antioxidan  Capasity )  ASI bervariasi dan dipengaruhi oleh nutrisi. Hal ini diketahui  bahwa  TAC  secara  signifikan  lebih tinggi dalam ASI dibandingkan susu formula, yang  berarti  ASI  memberikan  potensi antioksidan  lebih  baik  dari  pada  susu
formula. 7 Penelitian  menunjukkan  bahwa kapasitas  antioksidan  yang  tinggi  dalam kolostrum  sangat  penting  pada  awal kehidupan bayi baru lahir dan antioksidan ini akan  berkurang  selama  periode  menyusui disesuaikan dengan kebutuhan pertumbuhan bayi.  Penelitian  ini  juga  mengungkapkan bahwa  aktivitas  antioksidan  yang  tinggi dalam  kolostrum  segera  setelah  lahir  akan menjadi  faktor  yang  paling  penting  untuk melindungi  bayi  yang  baru  lahir  dikehidupan luar kandungan. 8
Anak  adalah  anugrah  yang  diciptakan Tuhan untuk para orang tua. Oleh karena itu anak  harus  dirawat  dengan  sebaik-baiknya dengan penuh kasih sayang agar kelak dapat tumbuh  dan  berkembang  dengan  sehat. Pertumbuhan  dan  perkembangan  anak  yang sehat  tidak  terlepas  dari  makanan  yang diberikan  kepada  anak  tersebut  terutama diawal  kelahirannya.  Bayi  diharapkan  dapat tumbuh  menjadi  sempurna  dan  sehat  perlu makanan yang tepat pula. Air Susu Ibu (ASI) adalah  makanan  utama  dan  tepat  bagi  bayi. Seiiring  dengan  berbagai  kemajuan  yang telah  dicapai  oleh  kaum  perempuan  dan kemajuan  zaman,  dewasa  ini  banyak perempuan terlibat di sektor publik. Bertambahnya  jumlah  kesempatan  kerja, meningkatnya  pendidikan,  dan  perubahan sosial  ekonomi  menyebabkan  banyak  wanita bahkan ibu rumah tangga beralih menjadi ibu bekerja. Meningkatnya tenaga kerja perempuan  dapat  mempengaruhi  pemberian ASI kepada bayi sehingga alternatif agar bayi

## 206
tetap  menerima  ASI  ibu  bekerja  dapat memerah  ASI  dan  menyimpannya  di  lemari pendingin.
ASI  mengandung  antioksidan  yang dapat  menghambat  stres  oksidatif  pada  bayi baru lahir. Sedikit yang diketahui tentang efek dari  penyimpanan,  dan  lama  penyimpanan pada  ASI  pada  tingkat  antioksidan  yang dikandungnya.  Adanya  perlakuan  suhu  dan lama  penyimpanan  ASI  dapat  menyebabkan perubahan  fisik  maupun  komposisi  kimia. Dengan  adanya  perubahan  kimiawi  tersebut maka  kemungkinan  besar  akan  terjadi kerusakan  terhadap  kapasitas  antioksidan dalam ASI. Selain itu, tidak ada rekomendasi untuk  standar  proses  pembekuan  mengenai kapasitas  antioksidan  pada  ASI  perah  ini dalam praktik klinis. Dengan demikian, tujuan dari penelitian ini adalah untuk membandingkan  antioksidan  pada  ASI langsung 0 hari, ASI penyimpanan pada suhu dingin ( refrigerator ) dan suhu beku ( freezer ).

## BAHAN DAN CARA PENELITIAN
Penelitian ini adalah penelitian eksperimental  laboratorium  yang  bertujuan memperoleh  total  antioksidan  pada  ASI. Rancangan  penelitian  menggunakan  metode true  experimental dengan  menggunakan kontrol  awal  dan  memberikan  dua  faktor perlakuan.  Faktor  perlakuan  pertama  yaitu perlakuan  penyimpanan  ASI  pada  3  suhu yaitu  suhu  ruangan  (ASI  segar),  suhu  dingin ( refrigerator ), dan suhu beku ( freezer) . Faktor perlakuan kedua yaitu perlakuan
penyimpanan  ASI  selama  7  hari,  14  hari,  30 hari,  dan  60  hari.  Selanjutnya  kedua perlakuan  tersebut  diukur  antioksidan  pada sampel ASInya.  Sampel dalam penelitian ini adalah 24 orang, teknik pengambilan sampel dengan cara purposisive sampling.
Dilakukan  pengambilan  sampel  ASI pada responden sebanyak 30 cc menggunakan pompa ASI. Setiap ASI dibagi menjadi 5 bagian, kemudian akan diberi label dengan  informasi  nomor,  waktu,  suhu,  dan lama penyimpanan. Sampel dibagi berdasarkan  perlakuan  penyimpanannya yaitu  6  cc  untuk  ASI  segar  dengan  suhu ruangan  2-6  jam,  6  cc  untuk  penyimpanan refregerator ,    dan  18  cc  untuk  penyimpanan frezeer .  ASI  akan  diuji  kadar  antioksidannya menggunakan pengujian aktivitas antioksidan metode DPPH
( 1,1-diphenyl-2- picrylhydrazyl), dengan  selang  waktu  7  hari, 14 hari, 30 hari, dan 60 hari. ASI segar , ASI hari ke7 untuk suhu refrigerator ,  dan ASI 14, 30,  dan  60  hari  untuk  suhu freezer .  Untuk mengetahui  suatu  konsentrasi  antioksidan dalam  ASI  digunakan  parameter  IC 50 (50%
Inhibitory Concentration ).
Untuk  melihat  perbandingan  antara ASI segar suhu ruangan (0 hari) dengan ASI penyimpanan suhu refregerator penyimpanan 7  hari,  dengan  ASI  penyimpanan  suhu freezer pada hari hari 14, hari 30, dan hari 60 menggunakan  uji  T- Test dan  analisis Repeated Anova . Sedangkan untuk mengetahui  hubungan  suhu freezer lama penyimpanan  hari  14,  hari  30,  dan  hari  60
terhadap  antioksidan  ASI  maka  dilanjutkan dengan  analisis  uji post  hoc .  Penelitian  ini menggunakan  derajat  kepercayaan  95% dengan α = 0,05 .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Untuk  mengetahui  suatu  konsentrasi total  antioksidan  dalam  ASI  digunakan parameter IC 50 (50% Inhibitory
Concentration ).  Oleh  karena  itu  dikaji perhitungan  untuk  menentukan  nilai  IC 50 yang  diperoleh  dari  uji  aktivitas  antioksidan serta  korelasinya.  Aktivitas  antioksidan dinyatakan  dalam  persen  inhibisi  untuk mengetahui nilai IC 50 . IC 50 adalah Konsentrasi  dari  antioksidan  yang  dapat meredam  atau  menghambat  50%  radikal bebas.
Tabel 1. Perbandingan Rerata Antioksidan ASI Segar dengan ASI Penyimpanan
ASI penyimpanan (n = 24) Nilai IC 50 ASI Nilai p Suhu Lama penyimpanan Mean ± SD (% v/v) CI 95% Ruang (ASI segar) Suhu Dingin 2 0 C
Ruang (ASI segar) Suhu Beku -16 0 C 0 hari
7 Hari 0 hari 14 Hari
30 Hari 60 Hari 10,50±1,55
18,11±3,51 10,50±1,55 11,53±1,57 12,92±2,01 14,17±2,49 9,83-11,15 16,63-19,59 9,83-11,15 10,87-12,19 12,07-13,77 13,12-15,22 0,000 0,000

## Uji Paired Samples T Test dan Repeated ANOVA
Tabel 1 menunjukkan bahwa nilai rata- rata  IC 50 ASI  sebelum  disimpan  yaitu  ASI segar  dengan  suhu  ruang  (0  hari)  adalah 10,50  (SD±1,55).  Selanjutnya  IC 50 ASI  yang mengalami  penyimpanan  pada  suhu  dingin ( refrigerator) 2 0 C  dengan  lama  penyimpanan 7  hari  mengalami  peningkatan  IC 50 dengan nilai rata-rata 18,11 (SD±3,51). Nilai IC 50 ASI penyimpanan  pada  suhu  beku  ( freezer) -16
0 C  dengan  lama  penyimpanan  14  hari  rata- rata 11,53 (SD±1,57), 30 hari rata-rata 12,92 (SD±2,01),  dan  60  hari  rata-rata  14,17 (SD±2,49) masing-masing mengalami
peningkatan dibandingkan ASI segar. Berdasarkan  hasil  uji  statistik  terdapat perbedaan  antioksidan  antara  ASI  segar dengan ASI yang disimpan pada suhu dingin 2 0 C lama penyimpanan 7 hari dimana nilai p=0,000 p< α =0,05, antara ASI segar dengan suhu beku -16 0 C lama penyimpanan 14 hari, 30 hari, dan 60 hari terhadap antioksidan ASI dimana  nilai  p=0,000  p< α =0,05.  Terdapat perbedaan  antioksidan  ASI  dengan  antara lama  penyimpanan  14  hari,  30  hari,  dan  60 hari  pada  suhu  beku  -16 0 C  dimana  nilai p=0,000 p< α =0,05.

## 208

## Gambar 1 Perbandingan Nilai IC 50 ASI Segar dengan ASI Penyimpanan
Keterangan: suhu dingin 2 0 C suhu beku -16 0 C
Gambar  1  menunjukkan  peningkatan nilai IC 50 antara ASI segar suhu ruang 0 hari dengan  ASI  penyimpanan  suhu  dingin  2 0 C dengan  lama  penyimpanan  7  hari,  dan  ASI penyimpanan suhu beku -16 0 C dengan lama penyimpanan  14  hari,  30  hari,  dan  60  hari
juga  mengalami  peningkatan  nilai  IC 50 tetapi nilai  ini  lebih  rendah  IC 50 jika  dibandingkan ASI  penyimpanan  suhu  dingin  2 0 C  dengan lama penyimpanan 7 hari.

## Tabel 2. Perbandingan Rerata Antioksidan ASI Antara Kelompok Suhu dengan Lama
Penyimpanan ASI Penyimpanan (n=24) Nilai IC 50 ASI Nilai p Suhu Lama Penyimpanan Mean ± SD (% v/v) Selisih Mean Ruang (ASI segar) 0 hari 10,50±1,55 -7,614 -1,037 -2,420 -3,672 6,577 5,193 3,942 -1,383 0,000 0,000 0.000 0.000 0,000 0,000 0,000
0,000*
Dingin /Referegerator 2 0 C Ruang (ASI segar) 7 hari 0 hari
18,11±3,51
10,50±1,55
Beku/ freezer -16 0 C Ruang (ASI segar) 14 hari 0 hari
11,53±1,57
10,50±1,55
Beku -16 0 C Ruang (ASI segar) 30 hari 0 hari
12,92±2,01
10,50±1,55
Beku -16 0 C
Dingin /Refrigerator 2 0 C 60 hari 7 hari
14,17±2,49 18,11±3,51
Beku -16 0 C
Dingin/ Refrigerator 2 0 C 14 hari 7 hari 11,53±1,57
18,11±3,51
Beku -16 0 C
Dingin/ Refrigerator 2 0 C 30 hari 7 hari
12,92±2,01 18,11±3,51
Beku -16 0 C
Beku/ freezer -16 0 C 60 hari 14 Hari 14,17±2,49 11,53±1,57
ASI Penyimpanan (n=24) Nilai IC 50 ASI Nilai p Suhu Lama Penyimpanan Mean ± SD (% v/v) Selisih Mean Beku/ freezer -16 0 C
Beku/ freezer -16 0 C
30 Hari
14 Hari
12,92±2,01 11,53±1,57 -2,635 -1,251 0,000*
0,000* Beku/ freezer -16 0 C
Beku/ freezer -16 0 C
60 Hari 30 Hari 14,17±2,49
12,92±2,01
Beku/ freezer -16 0 C 60 Hari 14,17±2,49 Uji Paired Samples T Test
* Uji Repeated ANOVA
Tabel  2  menunjukkan  bahwa  terdapat perbedaan  antioksidan  pada  ASI  segar dengan  ASI  yang  disimpan  dalam  suhu dingin  2 0 C  selama  7  hari  dimana  nilai p=0,000  p< α =0,05  yang  berarti  secara signifikan terdapat perbedaan yang bermakna.  Terdapat  perbedaan  antioksidan pada  ASI  segar  dengan  ASI  yang  disimpan pada  suhu  beku -16 0 C  selama  14,  30,  dan 60  hari  dimana  nilai  p=0,000  p< α =0,05  yang berarti  secara  signifikan  terdapat  perbedaan yang bermakna. Selanjutnya terdapat perbedaan  antioksidan  pada  ASI  yang disimpan  dalam  suhu  dingin  2 0 C  selama  7 hari dengan ASI yang disimpan dalam dalam suhu beku -16 0 C selama 14, 30, dan 60 hari dimana  nilai  p=0,000  p< α =0,05  yang  berarti secara  signifikan  terdapat  perbedaan  yang bermakna.  Berdasarkan  lama  penyimpanan menunjukkan  bahwa  terdapat  perbedaan antioksidan  pada  ASI  yang  disimpan  dalam suhu  beku-16 0 C  selama  14  hari  dengan  ASI yang  disimpan  dalam  dalam  suhu  beku  -16 0 C  selama  30  dan  60  hari  dimana  nilai p=0,000  p< α =0,05  yang  berarti  secara signifikan terdapat perbedaan yang bermakna.  Terdapat  perbedaan  antioksidan pada  ASI  yang  disimpan  dalam  suhu  beku  -
16 0 C  selama  30  hari  dengan  ASI  yang disimpan  dalam  dalam  suhu  beku -16 0 C selama  60  hari  dimana  nilai  p=0,000 p< α =0,05  yang  berarti  secara  signifikan terdapat perbedaan yang bermakna.
1.  Perbandingan  antioksidan  pada  ASI segar  dengan  ASI  yang  disimpan dalam suhu refrigerator 2 0 C selama 7 hari
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa  terdapat  perbedaan  antioksidan pada  ASI  segar  suhu  ruang  0  hari dengan  ASI  yang  disimpan  dalam  suhu refrigerator 2 0 C selama 7 hari. Penelitian ini  menunjukkan  bahwa  ASI  yang disimpan dalam refrigerator 2 0 C selama
7  hari  mengalami  peningkatan  rata-rata IC 50 dibandingkan  ASI  segar  dimana kemampuan  antioksidan  ASI  dalam menangkal radikal bebas terjadi penurunan tetapi masih memiliki antioksidan  karena  masih  di  bawah  nilai 50. Semakin kecil nilai IC 50 menunjukkan semakin tinggi aktivitas antioksidannya. 9
Sejalan  dengan  penelitain Akzu et
al.
(2014) .
Penyimpanan tidak mepengaruhi  tingkat  IL-10  ASI,  namun kapasitas  antioksidan  ASI  segar  sedikit

## 210
berkurang  setelah  72  jam  pada  suhu    4 0 C  dan  menurun  pada  hari  ke  14  dalam suhu 2 0 C. 10 Penelitian lain yang sejalan menunjukkan Total kapasitas antioksidan (TAC) ASI perah yang dinilai pada 0 jam suhu  kamar,  pada  48  jam,  dan  7  hari setelah  pendinginan  (4 0 C),  hasil ditemukan bahwa TAC berkurang seiring dengan lama penyimpanan suhu dingin 4 0 C. 11
Suhu dingin yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  2 0 C.  Kandungan antioksidan  ASI  sebelum  disimpan  jauh lebih tinggi jika dibandingkan dengan ASI penyimpanan  suhu refrigerator 2 0 C selama 7 hari. Penyimpanan suhu dingin biasanya merupakan suatu cara pengawetan  yang  sering  digunakan,
efeknya  sangat  kecil  sekali  terhadap kualitas bahan pangan secara keseluruhan.  Sehingga  pengawetan  di dalam  lemari  es  sangat  baik  untuk memperpanjang  kesegaran  atau  masa simpan  ASI.  Penyimpanan  suhu  dingin merupakan  cara  penyimpanan  pada suhu  sedikit  diatas  tititk  beku  air,  yang merupakan cara umum bagi pengawetan makanan dan bersifat sementara.
Kisaran  suhu  pendinginan  atau refrigerasi  yang  digunakan  biasanya antara  1 0 C  sampai  4 0 C.  Pada  suhu tersebut pertumbuhan bakteri dan proses biokimia  akan  terhambat  sehingga perubahan  yang  terjadi  pada  produk yang  disimpan  dapat  diminimalisir  atau
diperlambat.  Pendinginan  mempunyai pengaruh yang kecil terhadap perubahan mutu bahan pangan secara keseluruhan. Namun pendinginan hanya dapat mengawetkan  bahan  pangan  selama beberapa  hari  atau  beberapa  minggu, tergantung kepada jenis bahan pangannya.
2.  Perbandingan  antioksidan  pada  ASI segar  dengan  ASI  yang  disimpan dalam  dalam  suhu freezer -16 0 C selama 14, 30, dan 60 hari
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa  terdapat  perbedaan  antioksidan pada  ASI  segar  dengan  ASI  yang disimpan  pada  suhu freezer -16 0 C dengan  lama  penyimpanan  14,  30,  dan 60  hari.  Penelitian  ini  menunjukkan bahwa  terjadi  peningkatan  nilai  IC 50 ASI yang disimpan pada suhu freezer -16 0 C selama 14 hari, 30 hari, dan 60, semakin lama  ASI  disimpan  maka  semakin menurun  antioksidannya.  Berdasarkan uji  antioksidan  dalam  penelitian  ini dimana  suhu  beku  yang  digunakan adalah
-16 0 C dengan lama
penyimpanan  14,  30,  dan  60  hari merekomendasikan bahwa suhu tersebut aman  untuk  antioksidan  ASI  karena  IC 50
ASI  meskipun  mengalami  peningkatan tetapi  masih  nilai  ini  tidak  jauh  berbeda jika  dibandingkan  dengan  ASI  tanpa proses penyimpanan.
Penelitian sebelumnya dimana ASI yang disimpan pada suhu freezer -80 0 C
menunjukkan  bahwa  penyimpanan  ASI pada  suhu  beku  -80 0 C  selama  2  bulan tidak  menjadi  kondisi  optimal  untuk mempertahankan  kapasitas    antioksidan ASI. 12 Penelitian  lain  tentang  efek  dari penyimpanan  pada    suhu  -8 0 C  dalam menjaga kapasitas antioksidan kolostrum didapatkan  hasil  bahwa  TAC  ( Total
Antioxidan Capacity ) dan status oksidasi kolostrum tidak berubah dengan menyimpan  di  suhu  -8 0 C  selama  3 bulan. 13
Hasil  penelitian  pada  aktivitas glutathione  peroksidase dan  konsentrasi malondialdehyde ASI  ketika  disimpan pada suhu beku, dimana
membandingkan efek dari 2 suhu (-20 0 C dan  -80 0 C)  dan  waktu  penyimpanan yang  berbeda  (15,  30,  dan  60  hari).
Hasilnya
menunjukkan bahwa pembekuan  dari  kedua  suhu  tersebut menurunkan  antioksidan  dalam  ASI  dan penurunan  tersebut  terus  menurun seiring  dengan  lamanya  penyimpanan pada  kedua  suhu,  dari  kedua  perlakuan suhu  tersebut  antioksidan  ASI  lebih  baik pada suhu -80 0 C
dibandingkan
penyimpanan  pada  suhu  -20 0 C. 14
Marinkovic et al. (2016) dalam
penelitiannya  menemukan  penurunan antioksidan  non  enzimatik superoksida dismutase pada  suhu  beku  -20 0 C  lama penyimpanan 30 hari. 15
Dalam  penelitian  ini  suhu  yang digunakan  adalah  suhu  dingin  2 0 C  dan
suhu  beku  -16 0 C,  sejalan  dengan penelitian sebelumnya dapat disimpulkan bahwa semakin tinggi suhunya penyimpanan yang digunakan baik untuk mempertahankan  senyawa  antioksidan, karena  dalam  suhu  beku  tidak  mudah mengalami  oksidasi  jika  dibandingkan suhu  dingin.  Didukung  oleh  penelitian bahwa ASI ketika mengalami penyimpanan,  pembekuan,  dan  proses pencairan, menunjukkan penurunan kadar  lemak  (hingga  9%  pengurangan) dalam berbagai wadah. Lebih baik untuk bayi  untuk  menerima  ASI  langsung  dari ibu melalui payudara. 16
3.  Perbandingan  antioksidan  pada  ASI yang disimpan dalam suhu
refrigerator 2 0 C selama 7 hari dengan ASI yang disimpan dalam dalam suhu freezer -16 0 C  selama  14,  30,  dan  60 hari
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa  terdapat  perbedaan  antioksidan pada  ASI  yang  disimpan  dalam  suhu refrigerator 2 0 C  selama  7  hari  dengan ASI  yang  disimpan  dalam  dalam  suhu freezer -16 0 C  selama  14,  30,  dan  60 hari.  Penelitian  ini  menunjukkan  bahwa IC 50 ASI  yang  disimpan  pada  suhu refrigerator 2 0 C  selama  7  hari  terjadi penurunan  nilai  IC 50 dibandingkan  ASI pada  suhu freezer -16 0 C  lama penyimpanan  hari  14  hari,  30  hari,  dan 60  hari.  Selain  itu  penelitian  ini  juga menunjukkan  bahwa  ASI  yang  disimpan

## 212
pada suhu freezer -16 0 C selama 14, 30, dan  60  hari  lebih  baik  antioksidannya dibandingkan dengan suhu refrigerator 2
0 C  selama  7  hari.  Meskipun  dengan mendinginkan  dan  membekukan  dapat memperpanjang  umur  penyimpanan  ASI tetapi  cara  ini  juga  bisa  berpengaruh terhadap  antioksidan  ASI  jika  tidak diperhatikan  suhu  penyimpanan  dan lama penyimpanannya.
Pada penelitian ini
suhu refrigerator 2 0 C  lebih  tinggi  daripada suhu freezer -16 0 C sehingga antioksidan dalam  ASI  yang  disimpan  dalam  suhu refrigerator lebih  mudah  mengalami oksidasi  dibandingkan  dengan  ASI  yang disimpan  dalam  suhu freezer .  Hasil penelitian  ini  penyimpanan  ASI  pada suhu refregerator 2 0 C  lebih  sering dibuka  sehingga  memungkinkan  sampel ASI  terpapar  oksigen  lebih  banyak dibandingkan  penyimpanan  ASI  di  suhu freezer -16 0 C karena  paparan  udara pada refrigerator 2 0 C  lebih  terbuka dibandingkan freezer -16 0 C.
Penelitian  lain  yang  sejalan  di mana hasil yang didapatkan adalah suhu penyimpanan  (suhu  ruang,  suhu  dingin, dan  suhu  beku)  berpengaruh  secara signifikan  terhadap  kadar  taurin  ASI dengan  p=0,000  dan  lama  waktu penyimpanan  (0  jam,  24  jam,  2  minggu,
4  minggu)  memberikan  efek  terhadap kadar  taurin  ASI  dengan  p=0,000. Sehingga sama halnya dengan
penelitian  ini  yang  melihat  pengaruh suhu  dan  lama  penyimpanan  terhadap objek  yang  berbeda  yaitu  antioksidan ASI bahwa semakin tinggi suhu penyimpanan  maka  semakin  baik  untuk mempertahankan antioksidan ASI, semakin lama waktu penyimpanan maka semakin  menurun  antioksidan  dalam ASI. 17
Total  Kapasitas  Antioksidan  (TAC) ASI  perah  yang  dinilai  pada  0  jam  suhu kamar,  pada  48  jam,  dan  7  hari  pasca pendinginan  (4 0 C),  dan  pembekuan  (-8
0 C) masing-masing menggunakan metode phosphomolybdenum . Hasil ditemukan bahwa TAC berkurang seiring dengan  lama  penyimpanan  dan  setelah mengalami
pendinginan dan pembekuan. 11 ASI  tanpa  perlakuan penyimpanan  memiliki  kadar  asam lemak  sebanyak  29,12%.  Sedangkan ASI yang disimpan di dalam suhu freezer (-2 0 C)  dan  suhu refrigerator (7 0 C)  pada kulkas  satu  pintu  selama  1  minggu memiliki  kadar  asam  lemak  omega-3 berturut-turut  sebesar  28,24%  dan 16,43%.  Penurunan  kadar  asam  lemak omega-3 pada sampel ASI menunjukkan bahwa  suhu  penyimpanan  mepengaruhi kerusakan  asam  lemak  omega-3  pada ASI. 18
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini ditemukan  bahwa  suhu  penyimpanan dan  lama  penyimpanan  berpengaruh terhadap  antioksidan  ASI.  Meskipun
terjadi  penurunan  antioksidan  tetapi  ASI masih  memiliki  antioksidan  hal  ini  dapat dilihat dari parameter nilai IC 50 nya masih memiliki  antioksidan  karena  lebih  kecil dari 50% Inhibitory
Concentration meskipun telah disimpan pada suhu dan lama  penyimpanan,  dalam  hal  ini  ASI terkait  suhu  dan  lama  penyimpanan tersebut  masih  bisa  diberikan  kepada bayi  mengingat  antioksidan  dalam  ASI sangat  dibutuhkan  oleh  bayi  untuk mencegah stres oksidatif karena makanan  utama  bagi  bayi  adalah  ASI. Hasil  penelitian  ini  merekomendasikan untuk  penyimpanan  dalam  waktu  lama sebaiknya  ASI  disimpan  dalam  suhu beku  atau freezer karena  penurunan antioksidan yang terjadi selama penyimpanan suhu freezer tidak sebesar perubahan yang terjadi pada suhu dingin atau refergerator .
4.  Perbandingan  antioksidan  pada  ASI
yang disimpan dalam suhu freezer -16
0 C dengan lama penyimpanan 14 hari,
30 hari, dan 60 hari
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa  terdapat  perbedaan  antioksidan pada  ASI  yang  disimpan  dalam  suhu freezer -16 0 C  selama  14  hari,  30  hari
dengan 60 hari.
Penelitian ini menunjukkan  bahwa  pada  suhu  yang sama  dengan  lama  penyimpanan  yang berbeda berpengaruh
terhadap antioksidan  ASI.  ASI  yang  disimpan dalam suhu freezer 14 hari, 30 hari, dan
60  hari  terjadi  peningkatan  nilai  IC 50 dengan  selisih  yang  relatif  kecil.  Lama penyimpanan mempengaruhi antioksidan ASI,  meningkatnya  IC 50 dalam  ASI menunjukkan adanya penurunan antioksidan oleh pengaruh lama penyimpanan.
Penelitian  ini  penyimpanan  ASI pada  suhu  beku freezer -16 0 C  dengan lama  penyimpanan  14,  30,  dan  60  hari berpengaruh terhadap penurunan antioksidan ASI. Penyimpanan ASI yang lebih  lama  dalam  suhu freezer -16 0 C mulai  dari  hari  ke  14,  30,  dan  60  hari memungkinkan ASI lebih lama mengalami  tekanan  oksidasi,  lama penyimpanan  ASI  menyebabkan  laju oksidasi  meningkat.  Meningkatnya  laju oksidasi menyebabkan antioksidan dalam  ASI  yang  disimpan  menjadi menurun dibandingkan dengan ASI yang disimpan lebih cepat.
Sejalan  dengan  penelitian  lainnya dimana  hasil  penelitiannya  menunjukkan bahwa ada pengaruh lama penyimpanan ASI  0  hari,  4  hari,  8  hari,  dan  12  hari pada suhu -15 0 C terhadap kualitas ASI. Penelitian  lain  tentang  pengaruh  lama penyimpanan  dengan  objek  penelitian yang  berbeda  yaitu  kerusakan  asam lemak  omega-3  menunjukkan  bahwa terdapat  pengaruh  suhu freezer 0 0 C dengan lama penyimpanan 0 hari, 7 hari, dan  30  hari  terhadap  kerusakan  asam lemak omega-3 pada ASI. 18
Penelitian  yang  sejalan  bahwa suhu  penyimpanan  berpengaruh  secara signifikan  terhadap  kadar  taurin  dengan p=0,000  dan  lama  waktu  penyimpanan berpengaruh  secara  signifikan  terhadap kadar  taurin  dengan  p=0,000.  Sehingga semakin lama waktu penyimpanan maka semakin menurun kadar taurin pada ASI dan  semakin  tinggi  suhu  penyimpanan maka  semakin  menurun  kadar  taurin pada  ASI. 17 Penelitian  lain  untuk  faktor
kekebalan menunjukkan bahwa penyimpanan selama 6 bulan pada suhu beku  -20 0 C  dan  -80 0 C  tidak mempengaruhi  konsentrasi  faktor  aktif kekebalan dalam ASI. 19 ASI perah dapat dipertahankan kualitasnya dengan disimpan  dalam  lemari  es  atau  dalam freezer dan  dapat  diukur  secara  kimia, fisik,  maupun  mikrobiologinya.  Langkah- langkah    atau  cara  yang  bisa  digunakan untuk memperpanjang masa penyimpanan ASI dapat diberi perlakuan dengan pasteurisasi, pendinginan, pembekuan, dan pemanasan. 20
Penelitian  lain  dengan  suhu  yang berbeda  dan  kandungan  ASI  yang berbeda  bahwa ASI  yang  disimpan dalam frezeer dan  dikeringkan  dengan waktu  yang  berbeda  hingga  maksimal  3 bulan, pada suhu 4 0 C dan 40 0 C. Bahwa jumlah  konsentrasi  asam  askorbat secara  signifikan  menurun  pada  kedua suhu,  sedangkan  kapasitas  antioksidan hanya menurun pada  suhu 40 0 C. Asam
lemak, γ -tokoferol,  dan δ -tokoferol  tetap
tidak berubah. 21 Pembekuan
penyimpanan  ASI  pada  suhu  -80 0 C
selama  dua  bulan  tidak  menjadi  kondisi optimal untuk mempertahankan kapasitas  antioksidan ASI. 12

## KESIMPULAN
Terdapat  perbedaan  antioksidan  pada ASI  segar  0  hari  (suhu  ruang)  dengan  ASI yang telah mengalami perlakuan suhu dingin dalam refrigerator 2 0 C  lama  penyimpanan  7 hari dan suhu beku dalam freezer -16 0 C lama penyimpanan  14,  30,  dan  60  hari.  Senyawa antioksidan  ASI  lebih  baik  disimpan  pada suhu freezer -16 0 C  dibandingkan  pada  suhu refrigerator 2 0 C. Semakin lama ASI disimpan semakin  menurun  antioksidannya.  ASI  yang akan  disimpan  dalam  waktu  yang  lama sebaikanya  disimpan  dalam  suhu  beku ( freezer ) karena penyimpanan dalam suhu ini baik untuk antioksidan dalam ASI karena ASI disimpan  dalam  suhu  beku  atau freezer penurunan  antioksidanyan  tidak  sebesar perubahan  yang  terjadi  pada  suhu  dingin ( refergerator) .  Perlu  dilakukan  penelitian lanjutan mengenai pengaruh suhu refrigerator dibawah  7  hari  dan  suhu freezer jangka  panjang  dengan  suhu  yang  berbeda dari  penelitian  ini.  Perlu  dilakukan  penelitian lanjutan  spesifik  untuk  antioksidan  yang terkandung dalam ASI.

## TERIMA KASIH
1.  Kemenristekdikti Republik Indonesia

## 2.  Akademi  Kebidanan  Palu  Sulawesi
Tengah, email: akbidpalu.ac.id.

## KEPUSTAKAAN
1. Organization,  U.  N.  C.  F.  and  W.  H. Guideline:  updates  on  HIV  and  infant feeding:  the  duration  of  breastfeeding, and  support  from  health  services  to improve  feeding  practices  among mothers living with HIV. Geneva World Heal. Organ. (2016).
2. Kemenkes  RI. Rencana  Strategis Kementrian  Kesehatan  Tahun  2015- 2019 . Kementerian  Kesehatan  RI (2015).
3. Buonocore,  G.,  Perrone,  S.  & Tataranno,  M.  L.  Oxidative  stress  in the newborn. Oxid. Med. Cell. Longev. 2017, 2–4 (2017).
4. Perrone,  S. et  al. Effects  of  lutein  on oxidative stress in the term newborn: A pilot  study. Neonatology 97,  36–40 (2009).
5. Perrone,  S.,  Tataranno,  M.  L., Stazzoni,  G.  &  Buonocore,  G. Biomarkers  of  oxidative  stress  in  fetal and  neonatal  diseases. J.  Matern. Neonatal Med. 25, 2575–2578 (2012).
6. Yao,  L.,  Friel,  J.  K.,  Suh,  M.  &  Diehl- Jones,  W.  L.  Antioxidant  properties  of breast  milk  in  a  novel  in  vitro digestion/enterocyte  model. J.  Pediatr. Gastroenterol.  Nutr. 50,  670–676 (2010).
7. Oveisi, M. R. et al. Human breast milk provides  better  antioxidant  capacity than  infant  formula. Iran.  J.  Pharm. Res. 9, 445–449 (2010).
8. Yuksel,  S.,  Yigit,  A.  A.,  Cinar,  M., Atmaca,  N.  &  Onaran,  Y.  Oxidant  and antioxidant status of human breast milk during  lactation  period. Dairy  Sci. Technol. 95, 295–302 (2015).
9. Molyneux,  P.  The  Use  of  the  Stable
Free  Radical  Diphenylpicryl-hydrazyl (DPPH)  for  Estimating  Antioxidant Activity. Songklanakarin J. Sci. Technol. 26, 211–219 (2004).
10. Aksu,  T. et  al. The  effects  of  breast milk storage and freezing procedure on interleukine-10 levels and total antioxidant
activity.
J. Matern.
Neonatal Med. 28, 1799–1802 (2015).
11. Xavier,  A.  M.,  Rai,  K.  &  Hegde,  A.  M. Total  antioxidant  concentrations  of breastmilk-an  eye-opener  to  the negligent. J.  Heal.  Popul.  Nutr. 29, 605–611 (2011).
12. Sari, F. N. et al. Antioxidant capacity of fresh  and  stored  breast  milk:  Is  -80°C optimal temperature for freeze storage. J. Matern. Neonatal Med. 25, 777–782 (2012).
13. Akdag,  A. et  al. Storage  at  -80°C Preserves  the  Antioxidant  Capacity  of Preterm  Human  Milk. J.  Clin.  Lab. Anal. 28, 415–418 (2014).
14. Silvestre,  D. et  al. Frozen  breast  milk at  -20°C  and  -80°C:  A  longitudinal study of glutathione peroxidase activity and malondialdehyde concentration. J. Hum. Lact. 26, 35–41 (2010).
15. Marinkovi ć ,  V. et  al. Antioxidative activity  of  colostrum  and  human  milk: Effects  of  pasteurization  and  storage. J.  Pediatr.  Gastroenterol.  Nutr. 62, 901–906 (2016).
16. Chang, Y. C., Chen, C. H. & Lin, M. C. The  macronutrients  in  human  milk change  after  storage  in  various containers. Pediatr. Neonatol. 53, 205– 209 (2012).
17. Ruhana, A., Istiqomah, N. N. & Prijadi, B.  Pengaruh  Waktu  dan  Suhu persiapan  Terhadap  Kadar  Asam Amino  Taurin  pada  ASI. Indones.  J. Hum. Nutr. 3, 60–68 (2016).
18. Aryani,  F.  S.  U.  S.  T.  Jurnal Keperawatan  Intan  Husada,  Vol.4 No.1,  Januari  2017  1. Stud.  Pengaruh Suhu  Penyimpanan  Terhadap  Kadar Asam Lemak Omega-3 Pada Air Susu Ibu 4, 1–10 (2017).
19. Ramírez-Santana,  C. et  al. Effects  of cooling  and  freezing  storage  on  the stability  of  bioactive  factors  in  human colostrum. J. Dairy Sci. 95, 2319–2325 (2012).
20. Chang,  J.  C. et  al. Influence  of prolonged storage process, pasteurization,  and  heat  treatment  on biologically-active human milk proteins.
Pediatr. Neonatol. 54, 360–366 (2013). 21. Lozano,  B.,  Castellote,  A.  I.,  Montes, R.  &  López-Sabater,  M.  C.  Vitamins,

## 216
fatty  acids,  and  antioxidant  capacity stability  during  storage  of  freeze-dried human milk. Int. J. Food Sci. Nutr. 65, 703–707 (2014).