## JNPH
Volume 11 No. 1 (April 2023) © The Author(s) 2023
PENGARUH PENAMBAHAN ALFA-SIKLODEKSTRIN PADA SERUM LIPEMIK TERHADAP KADAR KREATININ

## EFFECT OF ADDITIONAL ALFA-CYCLODEXTRIN ON SERUM LIPEMIC ON CREATININE LEVELS
ULLYA RAHMAWATI, SITI NURYANI, DWI PANGESTI JURUSAN TEKNOLOGI LABORATORIUM MEDIS POLTEKKES KEMENKES YOGYAKARTA, YOGYAKARTA, INDONESIA Email: ullya.rahmawati@poltekkesjogja.ac.id

## ABSTRAK
Pendahuluan:  Serum lipemik dapat diamati secara visual pada trigliserida konsentrasi di atas 300 mg/dL (>3,4  mmol/L).  Serum  lipemik  menyebabkan  fotometri  mengalami  interferensi. Serum lipemik mempengaruhi pemeriksaan kimia darah salah satunya kreatinin. Penggunaan alfa-siklodekstrin merupakan salah satu metode alternatif yang digunakan untuk menangani serum   lipemik.   Penelitian   ini   bertujuan   untuk   mengetahui   pengaruh   penambahan   alfa- siklodekstrin pada serum lipemik terhadap kadar kreatinin. Metode : Jenis penelitian Quasi Experimental Design atau eksperimen semu, Desain penelitian ini menggunakan rancangan Posttest   Only   Control   Group   Design.   Sampel   serum   lipemik   sejumlah   45   sampel,   bagian pertama (300 µl) menjadi kontrol pemeriksaan serum lipemik dan disentrifus dengan kecepatan 10.000  g selama 15 menit. Bagian dua (300 µl) ditambahkan alfa-siklodekstrin 0,5% sebanyak 150 µl dan disentrifus dengan kecepatan 3000 rpm selama 10 menit. Bagian ketiga (300 µl) ditambahkan alfa-siklodekstrin 1% sebanyak 150 µl dan disentrifus dengan kecepatan 3000 rpm selama 10 menit. Dari hasil penelitian, data kemudian dianalisis dengan uji One-Way ANOVA SPSS 26.0 for windows. Hasil dan Pembahasan : Rerata dari pemeriksaan kreatinin dengan penambahan alfa-siklodekstrin 0,5% memiliki nilai 1,2 mg/dl ; rerata pemeriksaan kreatinin dengan penambahan alfa-siklodekstrin 1% memiliki nilai 1,1 mg/dl ; dan rerata pemeriksaan kreatinin dengan high speed sentrifugasi memiliki nilai 1,0 mg/dl. Selisih rerata yang alfa- siklodekstrin 0,5% dengan high speed sentrifugasi memiliki nilai 0,2 mg/dl dan selisih rerata alfa-siklodekstrin 1% high speed sentrifugasi memiliki nilai 0,1 mg/dl. Kesimpulan : Dari hasil analisis statistik dengan One-Way ANOVA p (0,707) > 0,05 dinyatakan tidak ada pengaruh penambahan alfa-siklodekstrin pada serum lipemik terhadap kadar kreatinin.

## Kata Kunci: Serum,Lipemik, Alfa-Siklodekstrin, Kreatinin

## ABSTRACT
Intoduction: Lipemic serum can be observed visually at triglyceride concentrations above 300 mg/dL (>3,4 mmol/L). Lipemic serum causes photometry to interfere. Lipemic serum affects blood chemistry examinations, one of which were creatinine. The use of alpha-cyclodextrin is an alternative method used to treat lipemic serum. This study aims to determine the effect of the addition   of   alpha-cyclodextrin   on   lipemic   serum   on   creatinine   levels.  Method:  The   typed research were Quasi Experimental Design. Design of this researched used the Posttest Only Control Group Design. This study used 45 samples of lipemic serum, the first part (300 µl) would   the   control   of   lipemic   serum   examination,   namely   by   centrifuging   high   speed centrifugation at a speed of 10,000 g for 15 minutes. Part two (300 µl) of alpha-cyclodextrin 0,5% was added and centrifuged at 3000 rpm for 10 minutes. Third part (300 µl) of alpha- cyclodextrin 1% was added and centrifuged at 3000 rpm for 10 minutes. From the results of the study data were analyzed by One-Way ANOVA treated with SPSS 26.0 for windows. Result and Discussion: The mean of creatinine examination with the addition of 0,5% alpha-cyclodextrin had a value of 1,2 mg/dl; the mean of creatinine examination with the addition of 1% alpha- cyclodextrin   has   a   value   of   1,1   mg/dl;   and   mean   creatinine   examination   with   high   speed centrifugation had a value of 1,0 mg/dl. Average differencethe alpha-cyclodextrin 0,5% with high   speed   centrifugation   had   a   value   of   0,2   mg/dl   and   a   mean   difference   of   1%   alpha- cyclodextrin high speed centrifugation has a value of 0,1 mg/dl. Conclusion: From the results of statistical analysis with One-Way ANOVA p (0,707) > 0,05, it was stated that there ware no effect of adding alpha-cyclodextrin to lipemic serum on creatinine levels.

## Keywords: Serum, Lipemic, Alpha-Cyclodextrin, Creatinine

## PENDAHULUAN
Serum lipemik terjadi akibat peningkatan konsentrasi   trigliserida   dalam   serum.   Serum lipemik   dapat   diamati   secara   visual   pada trigliserida   konsentrasi   di   atas   300   mg/dL (>3,4 mmol/L).  Pemeriksaan kadar kreatinin merupakan   bagian   dari   pemeriksaan laboratorium   untuk   menegakkan   diagnosa adanya   gangguan   fungsi   ginjal.  Kreatinin serum   sangat   berguna   untuk   mengevaluasi fungsi glomerulus.  Siklodekstrin membentuk kompleks   inklusi   dengan   molekul   lain   baik dalam keadaan padat maupun dalam larutan. Alfa-siklodekstrin adalah sakarida siklik non pereduksi   yang   terdiri   dari   6   unit   glukosa dihubungkan 1-4 α-glycosidic yang dihasilkan oleh   siklodekstrin glucopyranosyltransferase (CGTase, EC 2.4.1.19) pada hidrolisis sirup pati pH netral (6,0-7,0) dan suhu (35-40º C).
Kekeruhan sampel yang disebabkan oleh akumulasi   partikel   lipoprotein.   Partikel terbesar   yang   disebut   kilomikron,   dengan ukuran sampel 70-1000 nm, memiliki potensi
terbesar   dalam   menyebabkan   kekeruhan sampel.  Serum lipemik menyebabkan cahaya yang ditransmisikan akan terpendar sehingga pemeriksaan dengan metode nefelometri dan turbidimetri   akan   mengalami   interferensi [6] . Kekeruhan   dapat   mempengaruhi   absorbansi spektrofotometer   pada   semua   panjang gelombang sehingga menyebabkan kesalahan pada   nilai   analisa. Prosedur   yang direkomendasikan   untuk   menangani   sampel lipemik   adalah   sentrifugasi   menggunakan ultrasentrifugasi   yang   secara   efektif menghilangkan   lipid   dan   memungkinkan pengukuran   sejumlah   besar   analit.   Namun, karena   biayanya   yang   tinggi,   peralatan   ini tidak tersedia di sejumlah besar laboratorium. Salah satu metode penanganan serum lipemik yang   direkomendasikan   menggunakan   alfa- siklodekstrin.
Penelitian ini   bertujuan   untuk mengetahui  pengaruh   penambahan   alfa- siklodekstrin   sebagai   alternatif   untuk mengendalikan   kekeruhan   serum   lipemik akibat   kadar   trigliserida   khususnya   pada
pemeriksaan kreatinin.

## METODE PENELITIAN
Jenis   penelitian Quasi   Experimental Design atau  eksperimen semu.  Sampel yang digunakan untuk kelompok eksperimen yaitu serum   lipemik   yang   diolah   dengan   alfa- siklodekstrin 0,5% dan alfa-siklodekstrin 1%. Digunakan kelompok kontrol  positif  sebagai pembanding   yaitu   serum   lipemik   dengan perlakuan high   speed sentrifugasi.   Desain penelitian   ini   menggunakan   rancangan Posttest   Only   Control   Group   Design . Kelompok   eksperimen   diberi   perlakuan dengan   alfa-siklodekstrin   0,5%   dan   1% sebagai posttest .   Kelompok   kontrol   diberi perlakuan high   speed sentrifugasi.  Data diperoleh   setelah   melakukan   pemeriksaan kreatinin   pada   sampel   serum   lipemik   yang didapat   dari   proses   pemberian   perlakuan penanganan   serum   lipemik   dengan   alfa- siklodekstrin   konsentrasi   0,5%   dan 1%.Variabel bebas dalam penelitian ini adalah penambahan alfa- siklodekstrin 0,5% dan 1% pada   serum   lipemik   dengan high   speed sentrifugasi. Variabel terikat dalam penelitian ini adalah kadar kreatinin pada serum lipemik dengan penambahan alfa-siklodekstrin. Kadar kreatinin diukur menggunakan metode Jaffe Reaction dengan   fotometer.  Data   yang diperoleh   merupakan   data   pemeriksaan penambahan   alfa-siklodekstrin   pada   kadar kreatinin.   Data   yang   diperoleh   merupakan data primer dan berskala rasio. Data primer tersebut dilakukan analisis statistik dilakukan dengan   bantuan   perangkat   lunak   pengolah data SPSS 26 for Windows .

## HASIL PENELITIAN
Hasil   penelitian   dianalisis   secara deskriptif dalam bentuk tabel dan grafik.
Tabel 1. Karakteristik Sampel
Sampel Lipemik Jumlah Sampel 15 Jumlah Kadar Trigliserida Ringan 12 Jumlah Kadar Trigliserida Sedang 3 Jumlah Kadar Trigliserida Berat 0 Kadar Trigliserida Terendah 326,82 mg/dl Kadar Trigliserida Tertinggi 636,17 mg/dl
Sumber : Data Primer Terolah,2022
Kadar kreatinin pada serum lipemik yang diolah   dengan   alfa- siklodekstrin  dan high speed sentrifugasi  dapat  dilihat  pada  tabel berikut ini:
Tabel  2.   Kadar   Kreatinin   Penambahan Alfa-Siklodekstrin 0,5% dan 1%
Sumber : Data Primer Terolah,2022.
Rerata   kadar   kreatinin   yang   diolah dengan   penambahan   Alfa-Siklodekstrin   dan High Speed Sentrifugasi masing-masing dapat diamati dengan grafik berikut :
Kadar Kreatinin Alfa- Siklodekstrin 0,5% Alfa-Siklodekstrin 1% Jumlah Sampel 15 15 Rata-Rata 1,2 1,1 Nilai Tertinggi 3,1 3,0 Nilai Terendah 0,3 0,1
Gambar 1. Grafik Rerata Kadar Kreatinin Serum Lipemik
Tabel 3. Hasil Analisis Statistik No Uji Statistik Hasil Kesimpulan 1. One Sample Shapiro-Wilk High Speed Sentrifugasi p = 0,103 Data berdistribusi normal Alfa- Siklodekstrin 0,5% p = 0,096 Data berdistribusi normal Alfa- Siklodekstrin 1% p = 0,178 Data berdistribusi normal 2. Uji Homogenitas p = 0,417 Data homogen 3. One-Way ANOVA p = 0,707 Tidak Ada Perbedaan

## PEMBAHASAN
Penelitian   yang   dilakukan   yaitu membandingkan   penanganan   serum   lipemik dengan   metode   menggunakan   alfa- siklodekstrin   dengan   metode high   speed sentrifugasi .  Penanganan   sampel   lipemik biasanya   dilakukan   dengan   metode ultrasentrifugasi,   ekstraksi   dan   presipitasi. Metode   ultrasentrifugasi   dan high   speed sentrifugasi   merupakan gold   standart penanganan   serum   lipemik.   Kecepatan high speed sentrifugasi  yang   digunakan   dalam penelitian   ini   sebesar   10.000   g   selama   15 menit.   Dengan   kecepatan high   speed sentrifugasi 10.000 g selama 15 menit dapat menggantikan ultracentrifuge dalam menghilangkan lipemia dalam serum/plasma sesuai.
Serum   lipemik   merupakan   serum   yang berwarna putih keruh atau seperti susu yang disebabkan adanya partikel besar lipoprotein seperti   trigliserida.   Molekul   lipid   tersebut mengganggu   metode   uji   pemeriksaan [10] . Penggolongan tingkat kelipemikan berdasarkan   kadar   trigliserida  dibedakan menjadi   tiga   tingkatan   yaitu   lipemik   ringan jika   kadar   trigliserida   300-499   mg/dl. Lipemik   sedang   jika   kadar   trigliserida   500- 799   mg/dl.   Lipemik   berat   jika   kadar
trigliserida 800-1800 mg/dl termasuk.
Rerata   kadar   kreatinin   dengan high speed sentrifugasi   sebesar   1,0   mg/dl;   rerata kadar   kreatinin   dengan   penambahan   alfa- siklodekstrin   0,5%   sebesar   1,2   mg/dl   dan rerata   kadar   kreatinin   dengan   penambahan alfa-siklodekstrin 1% adalah 1,1 mg/dl. Hasil ini menunjukan bahwa kadar kreatinin dengan penambahan alfa-siklodekstrin 0,5% dan 1% memiliki   nilai   yang   mendekati high   speed sentrifugasi.   Hasil   tersebut   menunjukkan bahwa penelitian ini menunjukkan tidak ada perbedaan penanganan serum lipemik metode alfa-siklodekstrin   0,5%   dan   1%   dengan metode high   speed sentrifugasi.   Hasil penelitian   ini   memiliki   hasil   yang   berbeda dengan   penelitian sebelumnya yang mengukur kadar kreatinin pada serum lipemik dengan Polyethylene   Glycol 6000   8%   dan High Speed Sentrifugasi, penelitian dilakukan pretest dan pos-test sehingga diketahui kadar kreatinin   dengan   presipitasi   memiliki   hasil yang   lebih   rendah   dari   pada   kontrol   yaitu high   speed sentrifugasi.   Namun,   dari penelitian  tersebut  menunjukkan   bahwa metode   presipitasi   dapat   membantu mengurangi lipemik [12] .  Ketika dilakukan uji One-Way ANOVA   didapatkan   signifikasi sebesar 0,707 ( p ≥ 0,05) yang dapat diartikan tidak   ada   pengaruh   penambahan   alfa- siklodekstrin   0,5%   dan   1%   dibandingkan high   speed sentrifugasi   pada   serum  lipemik terhadap   kadar   kreatinin.   Dapat   dikatakan bahwa menggunakan alfa-siklodekstrin 0,5% dan   1%   dapat   membantu   mengurangi kekeruhan   pada   serum   lipemik.   Sesuai dengan  penelitian   yang   sebelumnya  dimana alfa-siklodekstrin 0,5% dan 1% dengan waktu sentrifugasi   10   menit  sudah   optimal   dalam penanganan serum lipemik.
Mekanisme   pembentukan   kompleks diawali   oleh   molekul   lipid   dan   molekul siklodekstrin   yang   saling   mendekat, kemudian   terjadi   pemecahan   struktur   air   di dalam   rongga   siklodekstrin   dilanjutkan dengan   pengeluaran   beberapa   molekul   dari rongga, juga pemecahan struktur air disekitar molekul   lipid   yang   akan   masuk   ke   dalam rongga siklodekstrin, sehingga memindahkan
molekul   air   ke   dalam   larutan.   Proses   ini dilanjutkan   pembentukan   kompleks   dengan interaksi   antara   gugus   fungsi   molekul   lipid dengan   gugus   yang   terletak   dalam   rongga siklodekstrin dan terjadi pembentukan ikatan hidrogen   antara   molekul   lipid   dan siklodekstrin.
Dari   penelitian   yang   telah   dilakukan menunjukan   bahwa   serum   dengan penambahan   alfa-siklodekstrin   menjadikan serum   lebih   jernih   secara   visual.   Hal   ini dikarenakan   molekul   lipoprotein   terikat   dan mengendap   secara   maksimal.   Menggunakan alfa-siklodekstrin adalah salah satu prosedur yang   dapat   dilakukan   dalam   penanganan serum   lipemik.   Supernatan   yang   diperoleh setelah high speed sentrifugasi atau presipitasi dengan alfa-siklodekstrin nampak relatif jelas dibanding   dengan   sampel   asli.  Penanganan serum lipemik dengan alfa-siklodekstrin dari lipemik  ringan  menghilangkan  lebih  banyak lipid   daripada   ultrasentrifugasi.   Kemudian pada   sebuah   penelitian   hasil   pemeriksaan serum lipemik dengan alfa siklodekstrin dan high   speed sentrifugasi   dengan   parameter enzim lipase, menunjukan bahwa kadar enzim lipase serum lipemik yang diolah dengan alfa siklodekstrin   dan high   speed Sentrifugasi tidak memiliki perbedaan yang bermakna.
Penelitian   ini   menggunakan   sampel serum   lipemik   sejumlah   45   sampel   yang memenuhi   kriteria   inklusi   dan   eksklusi. Sebelum   melakukan   pemeriksaan   dilakukan QC   ( Quality   Control )   pada   alat   fotometer Mindray   BA-88  A  untuk   menjamin   akurasi hasil sehingga dapat dipertanggungjawabkan. Serum   lipemik   yang   didapatkan   kemudian diperiksa   kadar   trigliserida   terlebih   dahulu, jika hasil kadar >300 mg/dl maka serum dapat dilanjutkan perlakuan selanjutnya. Dari hasil pemeriksaan   kadar   trigliserida   didapatkan nilai   kadar   trigliserida   tertinggi   sebesar 663,62   mg/dl   dan   nilai   terendah   326,82 mg/dl.

## KESIMPULAN
Tidak   ada   pengaruh   penambahan   alfa- siklodekstrin   pada   serum   lipemik   terhadap
kadar kreatinin. Rerata kadar kreatinin serum lipemik   dengan   penambahan   alfa- siklodekstrin   0,5%   sebesar   1,2   mg/dl   dan alfa-siklodekstrin   1%   sebesar   1,1   mg/dl. Rerata kadar kreatinin serum lipemik dengan high   speed sentrifugasi   sebesar   1,0   mg/dl. Selisih rerata kadar kreatinin serum lipemik penambahan   alfa-siklodekstrin   0,5%   dengan high speed sentrifugasi sebesar 0,2 mg/dl dan selisih   rerata   kadar   kreatinin   serum   lipemik penambahan   alfa-siklodekstrin   1%   dengan high speed sentrifugasi sebesar 0,1 mg/dl.

## SARAN
Penanganan   serum   lipemik   dengan penambahan   alfa-siklodekstrin   0,5%   dapat menjadi salternatif dalam pemeriksaan kadar kreatinin.   Bagi peneliti   selanjutnya disarankan menggunakan serum lipemik yang memiliki kadar trigliserida tinggi.

## DAFTAR PUSTAKA
Biljak,   V.   R.,   Bozicevic,   S.,   Krnac,   M., Radeljak.,  A.,   Lovrencic.,   M.   V.   2016. Serum Delipidation but not High Speed Centrifugation   is   Effective   in   Clearing Lipemia   Interference   in   Serum   Lipase Activity   Measurenment.   De   Gruiter Volume   54   Number   9.   Zagreb: Departement   of   Medical   Biochemistry and   Laboratory   Medicine   Merkur University Hospital Zagreb Croatia.
Castro,   M.J.,   Beatriz   C.E.,   Margarita   E.S.,
Teresa  A.V.,  Carlos   R.R.,   Miguel   P.M., Pilar   C.,   Jose  A.A.D.   2018.   Removing Lipemia   in   Serum/Plasma   Samples:  A Multicenter Study. Annals of Laboratory Medicine Volume 38 Number 6: 518-523
Diaz,  A.B.,   Mohallem   SDN,   dan   Sinisterra R.D.   2003.   Preparation   of   a   Ferrofluid using Cyclodextrin and Magnetite. J Braz Chem Soc 14(6):936-941
Izzati,   A.,   dan   Riyani,   A.2018.   Variasi
Konsentrasi   Alfa   Siklodekstrin   dan Waktu   Sentrifugasi   Dalam   Preparasi Serum   Lipemik   Pada   Pemeriksaan Glukosa   Metode   GOD-PAP.   Skripsi.
Jurnal   Teknologi   Laboratorium   Vol.7, No.1, Maret 2018, pp. 31 – 37.
Kee,   M.   2013.   Pedoman   Pemeriksaan Laboratorium   dan   Diagnostik   Edisi   6. Jakarta: ECG Penerbit Buku Kedokteran.
Lieseke,   C.L.  dan  Zeibig,   E.A.  2017.  Buku Ajar Laboratorium Klinis. Alih Bahasa: Frederica   Ian   Liana,   Herman   Oktavius Ong,   Risalia   Reni   Arisanti,   Rustiana Tasya. Jakarta: EGC.
Munawirah,   A.,  Habibah   Setya   Muhiddin, Liong Boy Kurniawan, dan Ruland DN Pakas.   2019. Interferensi   Sampel Lipemik   Pada   Bayi   Dengan   Lipemia Retinalis   Dikarenakan   Primary   Mixed Hyperlipidemia.   Intisari   Sains   Medis 2019. Volume 10, Number 2: 413-419 P- ISSN: 2503-3638, E-ISSN: 2089-9084 Nikolac,   N.   2013.   Lipemia   :   Causes, Interference,   Mechanisms,   Detection, and   Management.   Biochemia   Medica 2014;24(1):57-67.   Kroasia   :   University
Departement of Chemistry.
Notoatmojo, S. 2014. Metodologi Penelitian Kesehatan. Jakarta : Rineka Cipta. Piyophirapong,   S.,   Wontiraporn.   W.,   dan Sribben,   K.,   2010.   Factitious   Result   in Clinical  Chemistry   Test  Caused  by
Common Endogenous
Interferents.
Siniraj   Medical   Journal.   Volume   62 Number 4, July-August 2010 Sari, W.M.2017. Perbedaan Kadar Kreatinin Pada   Serum   Lipemik   Yang   Diolah Dengan Polyethylene Glycol High Speed 6000   8%   Dan   Sentrifugasi.   Jurnal Teknologi   Kesehatan.   Vol.   13.   No.   1.
Hal. 45– 49.
Sari,   R.L.,   Sistiyono,   dan   Subiyono.2019. Perbedaan   Kadar   Kalsium   Pada   Serum Lipemik   Dengan   Dan   Tanpa Penambahan Alfa-Siklodekstrin. Skripsi. Yogyakarta:   Poltekkes   Kemenkes Yogyakarta. Sharma, A., Karen A., dan Jon W. B. 1990. Flocculation of Serum Lipoprotein with Cyclodextrins:  Application   to  Assay   of Hyperlipidemic   Serum.   Clinical Chemistry, Vol. 36 No. 3, 529-532. Tong,   W.   Q.   2000.   Application   of
Complexation   in   Formulation   of Insoluble Compound, in Water Insoluble Drug   Formation.   Liu   R   (Editor). Englewood: Interpharm Press. https://www.researchgate.net/publication/ 285804832_Applications_of_Complexati on_in_the_Formulation_of_Insoluble_Co mpounds . Diakses pada tanggal 3 April 2022.
World   Health   Organization   (WHO).   2002. Use   of   Anticoagulants   In   Diagnostic Laboratory   Invertigation.   Jakarta   : Departemen   Kesehatan   Republik Indonesia.
Yuliyanti,   A.   T.,   Herlisa   Anggraini,   Andri Sukeksi.   2018.   Perbedaan   Kadar Kreatinin   Serum   Dan   Plasma   Heparin. Skripsi.   Semarang:   Universitas Muhammadiyah Semarang.