## IDENTITAS PENULIS
First Author – as Corresponding author
Nama *
: Halida Adistya Putri Departemen * : Teknologi Produksi Tanaman Perkebunan Institusi * : Politeknik Kelapa Sawit Citra Widya Edukasi No Telp/HP ** : 08115559191 Email * : halida.adistya@cwe.ac.id Orcid ID + : 0000-0002-8539-5624 Google Scholar ID + : https://scholar.google.com/citations?hl=id&user=sHsV1gAAAAJ Second Author Nama * : Aline Sisi Handini
Departemen * : Teknologi Produksi Tanaman Perkebunan Institusi *
: Politeknik Kelapa Sawit Citra Widya Edukasi
No Telp/HP ** : 085649046747
Email * : alinesisihandini@gmail.com Orcid ID + : Google Scholar ID + :
(3) Author
Nama * : Sylvia Madusari
Departemen * : Teknologi Produksi Tanaman Perkebunan
Institusi * : Politeknik Kelapa Sawit Citra Widya Edukasi No Telp/HP ** : 08561001361 Email *
: smadusari@cwe.ac.id Orcid ID + : Google Scholar ID + :
(4) Author
Nama * : Josua Parulian Sitohang Departemen *
: Teknologi Produksi Tanaman Perkebunan Institusi *
: Politeknik Kelapa Sawit Citra Widya Edukasi
No Telp/HP ** : 08561001361 Email * : josua.parulian.sitohang@cwe.ac.id Orcid ID + : Google Scholar ID + :
Dengan menyerahkan manuskrip ini, menyatakan bahwa semua penulis:
1. Telah membaca dan menyetujui naskah dan bertanggung jawab penuh atas isinya
2. Telah membaca dan menyetujui kebijakan hak cipta dan lisensi artikel yang dipublikasikan di JII : Jurnal Ilmiah Inovasi
3. Tidak memiliki konflik kepentingan sehubungan dengan penelitian ini atau pendanaannya.

## OPEN ACCESS
© 2023. Halida Adistya Putri, Aline Sisi Handini, Sylvia Madusari, Josua Parulian Sitohang
Penghambatan Pencoklatan ( Browning ) pada Kultur In Vitro Kelapa Sawit menggunakan Beberapa Antioksidan
Inhibition of Browning in Oil Palm Tissue Culture using Several Antioxidants
Halida Adistya Putri 1* , Aline Sisi Handini 1 , Sylvia Madusari 1 , Josua Parulian Sitohang 1
1 Program Studi Teknologi Produksi Tanaman Perkebunan, Politeknik Kelapa Sawit Citra Widya Edukasi
* halida.adistya@cwe.ac.id

## ABSTRAK
Teknik perbanyakan secara in vitro atau kultur jaringan mulai diaplikasikan untuk perbanyakan kelapa sawit, yang mana terbukti dapat menghasilkan tanaman kelapa sawit dalam jumlah banyak dengan waktu yang relatif lebih singkat.  Kendala utama saat fase inisiasi tanaman yaitu pencokelatan ( browning ) yang menyebabkan gangguan fisiologis tanaman sehingga terjadi kematian pada eksplan in vitro. Senyawa antioksidan merupakan senyawa yang dapat menghambat pencokelatan. Berbagai penelitian telah dilakukan untuk mencegah kemunculan browning pada kultur in  vitro, namun  setiap  komoditas  yang  diuji  memiliki  senyawa  antioksidan  yang  beragam  untuk mendapatkan  antioksidan  terbaik  yang  dapat  menghambat browning. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mendapat senyawa antioksidan terbaik untuk menghambat bahkan meniadakan terjadinya browning pada fase inisiasi kelapa sawit in vitro. Penelitian ini menggunakan  Rancangan  Acak Lengkap (RAL) non faktorial yaitu perlakuan zat antioksidan menggunakan tiga jenis zat antioksidan yaitu arang aktif (2.5 gL -1 ), Polyvinylpyrrolidone (PVP) (2.5 gL -1 ), dan asam akorbat 100 mgL -1 ). Data analisis ragam diuji lanjut menggunakan Duncan Multiple Range Test (DMRT) untuk data yang berbeda nyata pada taraf 5% dengan software STAR ( Statistical Tool for Agriculture Research ).  Hasil  penelitian  menunjukkan  antioksidan  terbaik  untuk  menekan  munculnya  waktu browning dan intensitas browning adalah PVP sebesar 2.5 gL -1 pada tanaman kelapa sawit i n vitro .
Kata kunci — antioksidan, arang aktif,  kelapa sawit, polyvinylpyrrolidone, pencokelatan

## ABSTRACT
Tissue culture have begun to be applied to oil palm propagation, where it is proven to be able to produce large scale of oil palm in short time. The main obstacle during the plant initiation phase was browning which caused plant physiological disturbances resulting in the death of explants in vitro. Antioxidant compounds can inhibit browning in explant in vitro. Various studies have been carried out to prevent the appearance of browning at in vitro cultures, but each tested commodity has various antioxidant compounds to get the best antioxidant that can inhibit  browning.  This  research  aims  to  obtain  the  best  antioxidant  compounds  to  inhibit  or  even  eliminate browning  in  the  initiation  phase  of  oil  palm.  This  study  used  a  non-factorial  Completely  Randomized  Design (CRD), namely treatment of antioxidants using three types of antioxidants namely activated charcoal (2.5 gL -1 ), Polyvinylpyrrolidone (PVP) (2.5 gL -1 ), and acorbic acid (100 mgL -1 ). Data analysis of variance was further tested using the Duncan Multiple Range Test (DMRT) for data that were significantly different at the 5% level using STAR (Statistical Tool for Agriculture Research) software. The results showed that the best antioxidant to reduce browning time and browning intensity was PVP of 2.5 gL -1 in oil palm.
Keywords —  activated charcoal, antioxidant, browning, oil plam, polyvinylpyrrolidone

## 1. Pendahuluan
Kelapa  sawit  merupakan  salah  satu komoditas penting di Indonesia, karena memiliki nilai  ekonomi  yang  tinggi  sebagai  penghasil minyak nabati, sehingga memberikan kontribusi untuk  devisa  negara  [1].  Pentingnya  komoditas tersebut menjadi salah satu tanaman yang banyak dibudidayakan  di  berbagai  daerah  di  Indonesia, terutama  di  Sumatera  dan  Kalimantan  [2]. Perbanyakan tanaman kelapa sawit secara masal dan  cepat  merupakan  salah  satu  upaya  untuk memenuhi  kebutuhan  konsumen  di  Indonesia maupun dunia. Kelapa sawit merupakan tanaman tahunan,  sehingga  perbanyakan  kelapa  sawit membutuhkan  waktu  lebih  lama  dibandingkan tanaman semusim. Teknik perbanyakan secara in vitro atau  kultur  jaringan  mulai  diaplikasikan untuk  perbanyakan  kelapa  sawit,  yang  mana terbukti  dapat  menghasilkan  tanaman  kelapa sawit dalam jumlah banyak dengan waktu  yang relatif lebih singkat [3]; [4]; [5]. Penerapan kultur jaringan  sangat  efisien  untuk  kelapa  sawit, karena  tanaman  ini  hanya  memiliki  satu  titik tumbuh sehingga sulit untuk diperbanyak secara vegetatif,  perbanyakan  tanaman  melalui  biji merupakan  satu-satunya  cara  yang  efektif sebelum  adannya  teknologi  kultur  jaringan tanaman  [6].  Kendala  utama  saat  fase  inisiasi tanaman  yaitu  pencokelatan  ( browning )  yang menyebabkan  gangguan  fisiologis  tanaman sehingga terjadi kematian pada berbagai tanaman kultur jaringan, seperti ulin [7] karet [8], dan jati [9]
Pencokelatan  disebabkan  oleh  senyawa fenolik  yang  dikativasi  oleh  enzim polyphenol oxidase (PPO)  dan  terjadi  saat  eksplan  dilukasi pada  fase  inisiasi  [10].  Pencokelatan  pada  saat inisiasi  regenerasi in  vitro sangat  banyak ditemukan  pada  tanaman  berkayu,  yaitu  kelapa sawit  [11],  kakao  [12],  dan  kopi  [13].  Proses pencokelatan  [14]  pada  fase  inisiasi  regenerasi menyebabkan  kematian  pada  eksplan  yang ditanam.  Proses  pencokelatan  terbagi  menjadi dua  jenis  yaitu  proses  pencokelatan  secara enzimatis  dan  non-enzimatis,  yang  mana ditemukan beberapa senyawa yang mempengaruhi pencokelatan pada kultur jaringan  kelapa  sawit  yaitu  asam  klorogenat, asam  kafeat,  asam  p-kumarat,  dan  asam  ferulat [11].  Proses  pencokelatan  disebabkan  oleh
senyawa  fenol  yang  teroksidasi  membentuk kuinon,  yang mana  kuinon merupakan senyawa yang menyebabkan warna coklat pada sel seperti kalus  sebagai  bentuk  pertahanan  jaringan  dari stres [14].
Senyawa antioksidan merupakan senyawa yang dapat menghambat pencokelatan. Beberapa senyawa  antioksidan  yang  dapat  menghambat pencokelatan yaitu arang aktif [15], Polyvinylpyrrolidone (PVP)  [16],  dan  asam akorbat  [8].  Arang  aktif  menghilangkan pencokelatan dengan cara menyerap phenol dan rendered oksodase  phenol  serta  menghilangkan peroksidase [17]. Penambahan PVP pada media kultur jaringan kelapa dapat menghasilkan kalus dan tidak menyerap auksin, selain itu  fungsinya sebagai  penghambat browning pada  eksplan [16]. Perendaman asam askorbat pada klon karet efektif  menurunkan  pencokelatan  sebesar  30% [8].  Berdasarkan  manfaat  ketiga  jenis  zat antioksidan  tersebut  perlu  dilakukan  pengujian pada  kelapa  sawit in  vitro untuk  menghambat bahkan  meniadakan  terjadinya browning pada fase inisiasi, sebagai salah satu kunci keberhasilan perbanyakan atau regenerasi eksplan.

## 2. Metodologi
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  Autoclave,  Laminar  Air  Flow  Cabinet (LAFC), scalpel,  gunting medis dan alat tanam lainnya. Bahan tanam (eksplan) yang digunakan adalah eksplan kelapa sawit yang berasal umbut (daun  muda)  atau  spear  pada  tanaman  yang berumur lebih dari 1 tahun. Eksplan berasal dari PT.  Dami  Mas  Sejahtera,  Bengkulu,  Sumatera Selatan.

## 2.1. Tahapan Penelitian

## 2.1.1 Penyiapan eksplan
Umbut  atau  spear  yang  telah  diambil sebagai sumber eksplan dilakukan pra sterilisasi atau  sterilisasi  permukaan  sebelum  disterilisasi menggunakan  bahan  sterilan  (alkohol  70%, Tween  20,  dan  Clorox)  di Laminar  Air  Flow. Persiapan eksplan sebelum ditanam pada media perlakuan dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Prosedur persiapan inisiasi eksplan
kelapa sawit in vitro

## 2.1.2 Media Perlakuan
Media dasar yang digunakan adalah media Y3  diperkaya  dengan  1  mgL -1 Thidiazuran (TDZ)  dan  2.4-D  2  mgL -1 .  Media  ditambahkan dengan  beberapa  zat  penghambat  antioksidan, yaitu arang aktif (2.5 gL -1 ) (Kumar et al. , 2019), Polyvinylpyrrolidone (PVP) (2.5 gL -1 ) (Sáenz et al. , 2005), dan asam akorbat 100 mgL -1 ) [8]. Zat antioksidan  berupa  arang  aktif  dan  PVP disterilisasi  menggunakan  autoklaf,  sedangkan larutan  asam  askorbat  disterilkan  dengan milipore filter 0.2µ. Kondisi media pada pH 5.7- 5.8  sebelum  diautoklaf  pada  suhu  121 o C  pada tekanan  1  atm.  Prosedur  atau  diagram  alir penelitian  dilakukan  mulai  dari  persiapan eksplan  hingga  output  penelitian  yang  akan dicapai.  Diagram  alir  penelitian  dapat  dilihat pada Gambar 2.

## 2.2. Rancangan Percobaan
Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan Acak  Lengkap  (RAL)  non  faktorial  yaitu perlakuan  zat  antioksidan  menggunakan  tiga jenis  zat  antioksidan.  Data  analisis  ragam  diuji lanjut  menggunakan Duncan  Multiple  Range Test (DMRT)  untuk  data  yang  berbeda  nyata pada taraf 5% dengan software STAR ( Statistical Tool for Agriculture Research ).
Gambar 2. Diagram alir penelitian

## 2.3. Parameter Pengamatan
Pengamatan yang dilakukan mengacu pada hasil  penelitian  [8]  yaitu  waktu  munculnya browning, jumlah  eksplan  yang  mengalami browning, intensitas  browning,  dan  waktu terjadinya  50%  eksplan  mengalami browning hingga  35  HST  (Hari  Setelah  Tanam)  atau selama  5  MST  (Minggu  Setelah  Tanam). Pengamatan  dilakukan  setiap  minggu  selama  5 MST.  Intensitas browning diukur  berdasarkan beberapa kategori dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Penilaian intensitas browning
Source: Admojo dan Indrianto, 2016 No. Skoring
Keterangan 1 0-0.24 0 - < 1/4 bagian eksplan mengalami browning 2 0.25-0.49 1/4 - < 1/2 bagian eksplan mengalami browning 3 0.50-0.74 1/2 - < 3/4 bagian eksplan mengalami browning 4 0.75 - 0.99 3/4 - <  1 bagian eksplan mengalami browning 5 1.00 Seluruh bagian eksplan mengalami browning

## 3. Hasil dan Pembahasan
3.1.1. Waktu Muncul dan Jumlah Eksplan 50% Mengalami Browning
Pencokelatan atau browning mulai muncul 1-2 minggu setelah tanam (MST). Waktu muncul browning dapat  dilihat  pada  Gambar  3.  Waktu muncul browning tercepat  terdapat  pada perlakuan kontrol  (M0)  dan asam  akorbat  (M4) yaitu 1 MST, sedangkan perlakuan lainnya M1, M2, dan M3 mulai muncul pada saat 2 MST. Hal tersebut  mengindikasikan  asam  akorbat  sebesar 100  mgL -1 muncul  pencokelatan  paling  cepat dibandingkan  perlakuan  antioksidan  lainnya pada eksplan kelapa sawit.
Gambar 3. Waktu muncul dan jumlah eksplan 50% mengalami Browning pada kelapa sawit in vitro, M0 = tanpa antioksidan (kontrol), M1= arang aktif (2.5 gL -1 ), M2= Polyvinylpyrrolidone (PVP) (2.5 gL - 1 )  , M3 = arang aktif (2.5 gL -1 ) + PVP (2.5 gL -1 ), M4= asam askorbat
(100 mgL -1 ).
Penambahan asam askorbat untuk pencegahan browning tergantung pada konsentrasi  yang  digunakan.  Selain  waktu muncul browning , perlakuan antioksidan kontrol (M0)  dan  antioksidan  (M4)  mengalami  waktu munculnya  lebih  dari  50%  eksplan  yang browning lebih  cepat  dibandingkan  perlakuan lainnya. Menurut hasil penelitian [18] penambahan asam askorbat 100 mgL -1 browning muncul  9  HST  (Hari  Setelah  Tanam)  pada tanaman  bambu  dan  pada  penelitian  [19]  asam
askorbat  sebesar  300  mgL -1 dapat  menekan waktu  muncul browning hingga  17  HST  (Hari Setelah Tanam) pada tanaman lili.
Perlakuan penambahan antioksidan dengan arang  aktif  (M1)  atau  PVP  (M2)  maupun keduanya (M3) dapat menekan waktu munculnya browning dibandingkan  kontrol  (Gambar  3). Perlakuan  antioksidan  M1,  M2,  dan  M3  mulai muncul browning saat 2 MST. Hal ini juga terjadi untuk waktu munculnya lebih dari 50% eksplan yang browning , yang mana arang aktif (M1) atau PVP (M2) maupun keduanya (M3) muncul lebih lambat  yaitu 2-3 MST, sedangkan kontrol (M0) dan asam askorbat (M4) muncul lebih cepat yaitu 1 MST. Hasil penelitian ini tidak sejalan dengan penelitian [9] penambahan PVP dan arang aktif sebanyak 0.2 gL -1 pada eksplan jati putih sudah muncul browning setelah  satu  hari  perlakuan. Hal ini diduga karena konsentrasi arang aktif dan PVP  yang  digunakan  pada  penelitian  tersebut lebih rendah, serta perbedaan komoditas eksplan yang digunakan.

## 3.2. Jumlah dan Persentase Intensitas Eksplan Browning
Berdasarkan  Tabel  2  rata-rata  jumlah eksplan browning pada 1 MST perlakuan kontrol (M0)  dan  asam  akorbat  (M4)  mengalami browning paling banyak dibandingkan perlakuan lainnya.  Hal  ini  diduga  konsentrasi  asam askorbat  yang  digunakan  sebesar  100  mgL -1 masih  belum  dapat  menekan  jumlah  eksplan yang mengalami browning pada tanaman kelapa sawit . Menurut [20] penambahan asam askorbat konsentrasi  lebih  tinggi  sebanyak  550  mgL -1 dapat  menekan  jumlah  eksplan  yang browning pada tanaman kenari persia dibandingkan arang aktif dan PVP.
Perlakuan  arang  aktif  (M1)  atau  PVP (M2)  maupun  keduanya  (M3)  mengalami kenaikan jumlah eksplan browning pada saat 2 – 5  MST  (Tabel  2) . Semua  perlakuan  tidak berpengaruh  nyata  saat  4  dan  5  MST.  Hal tersebut menunjukkan konsentrasi ataupun jenis antioksidan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini masih  belum  dapat  menekan  jumlah  eksplan yang mengalami browning pada  eksplan kelapa sawit in  vitro. Hal ini sejalan dengan penelitian [9]  bahwa  penambahan  antioksidan  arang  aktif, PVP,  dan  asam  askorbat  masing-masing
0 1 2 3 4 M0 M1 M2 M3 M4 W ak tu Mu n cu l B ro w n in g ( MST ) Antioksidan Waktu Muncul Awal Browning
Waktu >50% Eksplan Browning
sebanyak  200  mg L -1 pada  tanaman  jati  putih belum  dapat  menekan  jumlah  eksplan  yang mengalami browning, namun dapat memperlambat terjadinya pencokelatan media.
Tabel 2. Rata-rata  jumlah  eksplan browning kelapa  sawit in  vitro menggunakan
beberapa antioksidan Perlakuan Jumlah Eksplan Browning MST 1 2 3 4 5 M0 4.6a 5.0a 5.0a 5.0 5.0 M1 0.0c 5.0a 5.0a 5.0 5.0 M2 0.0c 1.2c 3.4b 4.0 4.0 M3 0.0c 1.4c 4.6ab 4.6 4.6 M4 2.8b 3.2b 3.4b 4.2 4.2 Uji F ** ** * tn tn KK (%) 3.03 T 3.53 T 2.94 T 2.02 T 1.88 T
Keterangan:  M0 = tanpa antioksidan (kontrol), M1=  arang aktif  (2.5  gL -1 ),  M2= Polyvinylpyrrolidone (PVP) (2.5 gL -1 )  , M3 = arang aktif (2.5 gL - 1 ) + PVP (2.5 gL -1 ), M4= asam askorbat (100 mgL -1 ), ** = sangat nyata, tn = tidak nyata, MST  =  Minggu  Setelah  Tanam,  KK  = Koefisein  Keragaman  ,  T=  log  (x+10)  . Angka-angka yang disertai huruf yang sama pada kolom yang sama tidak berbeda nyata berdasarkan  uji  DMRT  ( Duncan  Multiple Range Test)
pada Probability (P<5%).
Eksplan yang mengalami browning sangat rentan  terjadi  karena  adanya  pelukaan  saat penanaman,  hal  tersebut  dapat  mengaktifkan senyawa  fenolik  pada  eksplan.  Menurut  [21] senyawa  fenolik  yang  ditimbulkan  akibat pelukaan  membentuk  senyawa  kuinon  yang merupakan  senyawa  beracun  serta  dapat mematikan  jaringan  eksplan.  Selain  pelukaan, getah  yang  terkandung  dalam  tanaman  kelapa sawit juga menjadi penyebab rentannya eksplan mengalami browning.
Gambar 4. Eksplan browning saat 5 MST (Minggu Setelah Tanam), (a) M0 =
tanpa antioksidan (kontrol), (b) M1=arang aktif (2.5 gL -1 ), (c) M2= Polyvinylpyrrolidone (PVP) (2.5 gL - 1 ), (d) M3 = arang aktif (2.5 gL -1 ) + PVP (2.5 gL -1 ), dan (e) M4= asam askorbat (100 mgL -1 ).
Semua  perlakuan  belum  dapat  menekan jumlah  eksplan browning, namun  perlakuan tersebut memiliki persentase intensitas browning yang  berbeda-beda.  Perlakuan  yang  diberikan penambahan  arang  aktif  (M1)  dan  PVP  (M2) menunjukkan  intensitas browning yang  lebih rendah  yaitu  19  %  dibandingkan  hanya menggunakan  arang  aktif  (36.7%)  maupun kontrol (46.2%) (Tabel 3).
Tabel 3. Rata-rata persentase intensitas eksplan browning kelapa  sawit in  vitro menggunakan beberapa antioksidan
Perlakuan Intensitas Eksplan Browning MST 1 2 3 4 5 M0 85.0a 19.5a 27.0a 32.3a 46.2a M1 0.0c 8.5b 16.2b 27.2a 36.7a M2 0.0c 0.5c 3.0c 8.7b 14.2b M3 0.0c 0.7c 6.7c 12.7b 19.0b M4 3.0b 5.0b 6.7c 12.5b 16.3b Uji F ** ** ** ** ** KK(%) 0.07 T 0.13 T 0.18 T 0.26 T 0.34 T
Keterangan:   M0 = tanpa antioksidan (kontrol), M1= arang aktif  (2.5  gL -1 ),  M2= Polyvinylpyrrolidone (PVP) (2.5 gL -1 )  , M3 = arang aktif (2.5 gL - 1 ) + PVP (2.5 gL -1 ), M4= asam askorbat (100 mgL -1 ), ** = sangat nyata, tn = tidak nyata, MST  =  Minggu  Setelah  Tanam,  KK  = Koefisein  Keragaman  ,  T=  log  (x+10)  . Angka-angka yang disertai huruf yang sama pada kolom yang sama tidak berbeda nyata berdasarkan  uji  DMRT  ( Duncan  Multiple Range Test) pada Probability (P<5%). Persentase  intensitas browning terendah terdapat pada perlakuan hanya dengan penambahan  PVP  (M2)  yaitu  sebesar  14.2% (Gambar 3). Hal tersebut menunjukkan penambahan PVP sebanyak 2.5 gL -1 pada media efektif  menekan  intensitas browning pada
eksplan  kelapa  sawit in  vitro ,  walaupun  belum dapat menekan jumlah eksplan brwoning . Hal ini sejalan dengan penelitian [22] penambahan PVP (200 mgL -1 ) atau arang aktif (100 mgL -1 ) efektif menghambat browning pada  tanaman  kiwi, namun arang aktif bersifat tidak selektif sehingga dapat menyerap nutrisi dan zat pengatur tumbuh pada media.

## 4. Kesimpulan
Perlakuan semua antioksidan belum dapat menekan  jumlah  eksplan  yang  mengalami browning. Antioksidan  terbaik  untuk  menekan munculnya  waktu browning dan  intensitas browning adalah  PVP  sebesar  2.5  gL -1 pada tanaman kelapa sawit i n vitro.

## Daftar Pustaka
[1]  V. Nurmalita, P. A. Wibowo, “Analisis Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Ekspor Minyak Kelapa Sawit di Indonesia,” EEAJ. ,  vol.  8,  no.  2,  pp.  605–619,  Jun. 2019, doi: 10.15294/eeaj.v8i2.31492.
[2]  J.  Horas,  V.  Purba,  T.  Sipayung,  ,  “Perkebunan Kelapa Sawit Indonesia Dalam Perspektif Pembangunan Berkelanjutan,” Masyarakat Indonesia , vol. 43, no. 1, pp. 81-94, 2017, [ Online ]. Available : http://jmi.ipsk.lipi.go.id/index.php/jmiipsk/article/do wnload/717/521.
[3]  T.  A.  Balzon,  Z.  G.  Luis,  and  J.  E.  Scherwinski- Pereira, “New approaches to improve the efficiency of  somatic  embryogenesis  in  oil  palm  (Elaeis guineensis Jacq.) from mature zygotic embryos,” In Vitro  Cellular  and  Developmental  Biology  -  Plant , vol.  49,  no.  1,  pp.  41–50,  Feb.  2013,  doi: 10.1007/s11627-012-9479-3.
[4]  C.  L.  M.  Marbun,  N.  Toruan-Mathius,  Reflini,  C. Utomo,  and  T.  Liwang,  “Micropropagation  of Embryogenic  Callus  of  Oil  Palm  ( Elaeis  guineensis Jacq.)  Using  Temporary  Immersion  System,”
Procedia  Chem ,  vol.  14,  pp.  122–129,  2015,  doi: 10.1016/j.proche.2015.03.018.
[5]  R.  F.  Almeida et  al. ,  “Capacity  for  somatic embryogenesis  of  adult  oil  palm  genitors  (Elaeis guineensis, var. Pisifera) from immature leaf tissues,” South African Journal of Botany , vol. 131, pp. 229– 239, Jul. 2020, doi: 10.1016/j.sajb.2020.02.026.
[6]  D. R. Pratiwi, S. Wening, N. Supena, R. D. Setiowati, Y. Yeni, “Kultur Jaringan Kelapa Sawit: Tantangan dan  Peluangnya,”  vol.  25,  no.  1,  pp.  1-10,  2020, [ Online ]. Available : https://warta.iopri.org/Warta/article/download/8/1.
[7]  T.  C.  Tarampak,  Sulistiawati,  R.  Nirmala,  “Metode Mengatasi Browning pada Eksplan Ulin ( Eusideroxylon  zwageri )  untuk  Inisiasi  Regenerasi Secara In Vitro , “ J. Agroekoteknologi, vol. 1, no. 2, pp.  106-117,  2019,  [ Online ]. Available :  https://e- journals.unmul.ac.id/index.php/agro/article/downloa d/1972/pdf.
[8]  L. Admojo dan A. Indrianto, “Pencegahan Browning Fase  Inisiasi  Kalus  Pada  Kultur  Midrib  Daun  Klon Karet  ( Hevea  brasiliensis Muell.  Arg)  PB  330,” Jurnal Penelitian Karet , vol. 34, no.1, 2016, [ Online ]. Available :
https://ejournal.puslitkaret.co.id/index.php/jpk/articl e/view/220.
[9]  G. Guntur, M. Restu, dan M.  Ummusyahidah A. R., and L. “Aplikasi Berbagai  Zat Antioksidan Sebagai Penghambat Browning Media  Tanam  Eksplan  Jati Putih  ( Gmelina  arborea Roxb)  Secara In-Vitro ,” Jurnal Eboni , vol. 1, no. 1, pp. 1-13, 2019, [ Online ]. Available :
https://ejournals.umma.ac.id/index.php/eboni/article/ view/328
[10]  U.  Setyawati,  A.  Wijayani,  and  E.  Wahyurini, “Pertumbuhan  Planlet  Pisang  Raja  Bulu  Pada Berbagai  Pencahayaan  di  Ruang  Inkubasi  dan Penggunaan  Macam  Zat  Pencegah  Pencoklatan Secara In  Vitro ,” Agrivet ,  vol.  25,  pp.  8-15,  2019,
[ Online ]. Available : https://media.neliti.com/media/publications/360724- none-2a535ec3.pdf
[11]  D.  Destriani,  ”Identifikasi  Senyawa  Fenolat  dan Asam  Amino  Penyebab  Pencokelatan  pada  Kultur Jaringan  Kelapa  Sawit  ( Elaeis  guineensis Jacq.),” skripsi, Institut Pertanian Bogor, 2018.
[12]  Arianto,  Z.  Basri,  M.  U.  Bustamil,  “Induksi  Kalus Dua  Klon  Kakao  ( Theobroma  cacao L.)  Unggul Sulawesi pada Berbagai Konsentrasi 2,4
Dichlorophenoxy  Acetic  Acid Secara In  Vitro ,” e-J. Agrotekbis , vol. 1, no. 3, pp. 211-220, 2013, [ Online ]. Available :
https://media.neliti.com/media/publications/249211- induksi-kalus-dua-klon-kakao-theobroma-c- 097ee22f.pdf.
[13]  A.  Y.  Rismayanti  dan  H.  H.  Nafi’ah,  “Modifikasi Media  Pada  Induksi  Kalus  Kopi  Arabika  ( Coffea arabica L.)  Berbuah  Kuning,”, Jurnal  Agro Wiralodra, vol.  4,  no.  2,  pp.  42-49,  2021,  [ Online ]. Available :
https://agrowiralodra.unwir.ac.id/index.php/agrowira lodra/article/view/60
[14]  F.  I.  Farida  dan  W.  Muslihatin,  “Induksi  Perakaran Teh ( Camellia sinensis L.)
Secara in  Vitro pada  Klon  yang  Berbeda,” Jurnal Sains  dan  Seni ,  vol.  6,  no.  2,  pp.  2337-3520,  2017, [ Online ]. Available : https://ejurnal.its.ac.id/index.php/sains_seni/article/d ownload/26499/4067
[15]  T. Sumathi, S. L. Chawla, S. Patil, and T. R. Ahlawat, “Standardization  of  growing  medium  and  primary nutrients for anthurium cultivation under greenhouse,” Indian Journal of Horticulture , vol. 76, no.  2,  pp.  334–337,  Jun.  2019,  doi:  10.5958/0974- 0112.2019.00052.5.
[16]  L. Sáenz, R. Souza, J. L. Chan, A.  Azpeitia, and C. Oropeza, “C-2,4-Dichlorophenoxyacetic Acid
Uptake  And  Formation  Of  Embryogenic  Calli  In Coconut  Plumular  Explants  Cultured  On  Activated Charcoal-Free  Media,” Rev.  Fitotec.  Mex. ,  vol.  28, no.  2,  pp.  151-159,  2005,  [ Online ]. Available : https://www.researchgate.net/publication/26477669_ 14C-24- dichlorophenoxyacetic_acid_uptake_and_formation _of_embryogenic_calli_in_coconut_plumular_expla nts_cultured_on_activated_charcoal-free_media.
[17]  S. Hutami, “Penggunaan Arang Aktif dalam Kultur In Vitro ,” Berila Biologi , vol. 8, no. 1, pp. 83-89, 2006, [ Online ].
Available : https://e- journal.biologi.lipi.go.id/index.php/beritabiologi/arti cle/view/820.
[18]  A. Helena, R. Restiani, and D. Aditiyarini, “Optimasi Antioksidan  sebagai  Penghambat  Browning  pada
Tahap  Inisiasi  Kultur  In  Vitro  Bambu  Petung (Dendrocalamus asper),” Biota : Jurnal Ilmiah Ilmu- Ilmu Hayati , pp. 86–93, Jun. 2022, doi:
10.24002/biota.v7i2.4715.
[19]  N. K. D. Lestari, N. W. Deswiniyanti, I. A. Astarini, L. M. Arpiwi,” Pencegahan Browning Pada Eksplan
In Vitro Untuk Perbanyakan Tanaman Lilium Longiflorum di
dalam  Inovasi  dan  Aplikasi  Sumber  Daya  Lokal dalam Penelitian dan Pengabdian kepada Masyarakat,” Nov. 2018, pp. 353-362.”.
[20]  S. N. Bhat et al. , “In Vitro Prevention of Browning in Persian  Walnut  (Juglans  regia  L.)  cv.  Sulaiman,”
International Journal of Plant Biology , vol. 13, no. 3, pp. 330–342, Sep. 2022, doi: 10.3390/ijpb13030027.
[21]  Karyanti,  Juanda,  T.  Tajuddin,  ”Kemampuan Tumbuh Eksplan Jatropha Curcas L. pada Media In Vitro Yang  Mengandung  Hormon  IBA  dan  BA,” Jurnal Bioteknologi & Biosains Indonesia , vol. 1, no. 1, pp. 1-8, 2014. [ Online ]. Availabl e: http://ejurnal.bppt.go.id/index.php/JBBI
[22]  L.  Sui,  L.  Kong,  X.  Liu,  and  Y.  Zhang,  “Anti- browning  in  Tissue  Culture  of  ‘Donghong’ Kiwifruit,”  in IOP  Conference  Series:  Materials Science  and  Engineering ,  Institute  of  Physics Publishing, Mar. 2020. doi: 10.1088/1757- 899X/740/1/012195.