Agri- SosioEkonomi Unsrat, ISSN (p) 1907– 4298, ISSN (e) 2685-063X , Sinta 5, Volume 19 Nomor 1, Januari 2023 : 571 – 578

## Perlakuan Air Kelapa Tua, Dan BAP Pada Media MS, VW
Terhadap Protocorm Anggrek Dendrobium sp. Secara Kultur In vitro
Treatmen Of Old Coconut Water, And BAP On MS, V&W Media On The Protocorm Of Dendrobium sp. Orchids By In Vitro Culture
Grace Sundalangi (1)(*) , Jeany Mandang (2) , Saartje Sompotan (2)
1) Mahasiswa Program Studi Agronomi, Fakultas Pertanian, Universitas Sam Ratulangi, Manado
2) Dosen Program Studi Agronomi, Fakultas Pertanian, Universitas Sam Ratulangi, Manado
*Penulis untuk korespondensi: gracesundalangi07@gmail.com
Naskah diterima melalui e-mail jurnal ilmiah agrisosioekonomi@unsrat.ac.id
: Minggu, 02 Oktober 2022
Disetujui diterbitkan : Sabtu, 28 Januari 2023

## ABSTRACT
This study aims to obtain accurate results from the concentration of old coconut water and BAP on Vacin and Went and Murashige and Skoog media on the growth of Dendrobium sp. through in vitro culture. The method used in this study was a completely randomized design consisting of 8 treatments and 8 replications. Each replication consisted of 2 bottles so that a total of 128 bottles, namely A0 (control, without using old coconut water), A1 (12.5% old coconut water), B0 (control, without using BAP), B1 (BAP 0.5 mg/L ), and used 2 types of media (Murashige and Skoog) and (Vacin and Went).  The  variables  observed  included  the  number  of  protocorm,  wet  weight,  dry  weight,  and  pH  of  the  media.  The results showed that the concentration of old coconut water and BAP had a significant effect on the number of protocorm, fresh weight, and pH of the media on Dendrobium sp. The best treatment obtained was VA1B1 (12.5% old coconut water, 0.5 ppm BAP) with a media pH of 5.0 V A1B1, the number of protocorm V A1B1 49.57, and VA1B1 0.008 g which had the best results compared to other treatments.
Keywords : old coconut; murashige-skoog; vaccine-went; protocorm

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan hasil yang tepat dari konsentrasi air kelapa tua dan BAP pada media Vacin  and  Went dan Murashige  and  Skoog pada  pertumbuhan  anggrek Dendrobium sp . melalui  kultur in vitro . Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah rancangan acak lengkap yang terdiri dari 8 perlakuan dan 8 ulangan. Masing-masing ulangan terdiri dari 2 botol sehingga seluruhnya berjumlah 128 botol yaitu A0 (control, tanpa menggunakan air kelapa tua), A1 (air kelapa tua 12.5%), B0 (control, tanpa menggunakan BAP), B1 (BAP 0.5 mg/L),  dan  menggunakan  2  jenis  media (Murashige  and  Skoog) dan (Vacin  and  Went). Variabel  yang  diamati meliputi jumlah protocorm, berat basah, berat kering, pH media. Hasil penelitian menunjukkan bahwa konsentrasi air  kelapa  tua  dan  BAP  berpengaruh  nyata  terhadap  jumlah  protocorm,  berat  basah,  dan  pH  media  pada  tanaman anggrek Dendrobium sp.  Perlakuan  terbaik  yang  diperoleh  yaitu  V  A1B1  (air  kelapa  tua  12.5%,  BAP  0.5  ppm) dengan  pH  media  V  A1B1  5.0,  jumlah  protocorm  V  A1B1  49.57,  dan  VA1B1  0.008  g  yang  memiliki  hasil  yang terbaik dari perlakuan lain.
Kata kunci : kelapa tua; murashige-skoog; vacin-went; protocorm
Perlakuan Air Kelapa Tua, dan BAP pada Media MS, VW………………….…....(Grace Sundalangi, Jeany Mandang, Saartje Sompotan)

## PENDAHULUAN

## Latar Belakang
Anggrek  merupakan  tanaman  hias  yang banyak  diminati  masyarakat  karena  ketahanan dan  keindahannya.  Kebutuhan  pasar  akan anggrek  berkualitas  di  Indonesia  dari  tahun  ke tahun  terus  meningkat.  Tanaman  anggrek tergolong  dalam  famili Orchidaceae dan  telah lama  dikenal  oleh  masyarakat  sebagai  tanaman hias maupun bunga potong. Anggrek merupakan  tanaman  yang  pertumbuhannya lambat dibandingkan dengan tanaman hias lain, sedangkan  permintaan  akan  anggrek  terus meningkat (Bey et al., 2006).
Anggrek Dendrobium merupakan  salah satu  genus  anggrek  yang  memilki  daya  tarik yang  tinggi,  dengan  bentuk,  warna  dan  ukuran yang  beraneka  ragam. Dendrobium memiliki kekhasan  tersendiri,  yaitu  dapat  mengeluarkan tangkai  bunga  baru  di  sisi-sisi  batangnya. Dendrobium memilki  tipe  sympodial  bersifat epifit (Widiastoety et al. , 2010).
Permasalahan yang dihadapi dalam budidaya  anggrek  adalah  ketersediaan  bibit bermutu yang belum terpenuhi dan penanganan pasca  panen  yang  kurang  baik.  Jumlah  bibit yang  terbatas  karena  perbanyakan  anggrek secara generatif sulit dilakukan karena biji tidak mempunyai endosperm sebagai cadangan makanan.
Cara  untuk  mengatasi  masalah  tersebut diperlukan  perbanyakan  secara In  Vitro yang akan  menghasilkan  benih  dengan  kualitas  yang lebih baik serta mempercepat proses pertumbuhan  maupun  produktivitas  tanaman anggrek. Kultur In Vitro dalam bidang pertanian terutama  agronomi  banyak  manfaatnya  antar lain untuk perbanyakan yang akan menghasilkan  tanaman  bermutu  dan  perbaikan tanaman  untuk  menghasilkan  jenis  baru  yang lebih unggul. Kultur jaringan tanaman merupakan  perbanyakan  yang  menggunakan eksplan  yang  kecil  menumbuhkan  pada  media yang  aseptik  dan  mengerjakannya  secara aseptik. Multiplikasi mikropropagasi merupakan kegiatan perbanyakan calon tanaman  baru  secara  yang  dilakukan  dengan cara  merangsang  pertumbuhan  tunas  tanaman
baik  secara  langsung  maupun  melalui  induksi kalus terlebih dahulu (Wetherell, 1976).
Keberhasilan  dalam  penggunaan  metode kultur  jaringan  sangat  bergantung  antara  lain media  kultur  jaringan  banyak  macamnya diantaranya. Vacin  and  Went (VW)  dan Murashige  and  Skoog (MS). Vacin  and  Went (VW)  adalah  media  dasar  yang  digunakan dalam  kultur  jaringan  tanaman  anggrek.  Media ini  merupakan  media  sederhana  yang  hanya terdiri dari senyawa-senyawa yang mengandung unsur  hara  makro  dan  mikro  yang  dalam penggunaannya  untuk  media  tanam  anggrek sering  ditambahkan  bahan  organik  (Sucandra, 2015).  Menurut  Rupawan  (2014),  komposisi media  VW  merupakan  komposisi  media  yang paling  umum  digunakan  dalam  perbanyakan anggrek  secara In  Vitro .  Komposisi  media  ini sering  digunakan  sebagai  media  inisiasi, proliferasi,  dan  perakaran.  Media Murashige and  Skoog (MS)  mengandung  garam-garam mineral dalam jumlah yang tinggi dan senyawa N  dalam  bentuk  NO3  dan  NH4+.  Pada  media ini  ditambahkan  zat  pengatur  tumbuh  yang diperlukan  bagi  pertumbuhan  dan  diferensiasi eksplan.
Media  kultur  jaringan  berisi  campuran berbagai  nutrisi  dan  hormon  tanaman.  Bahan alami  yang  sering  digunakan  dalam  kultur jaringan adalah air kelapa. Salah satu komponen yang  terdapat  dalam  air  kelapa  adalah fitohormon.  Penambahan  fitohormon  dari  air kelapa  ke  dalam  media  diduga  meningkatkan pertumbuhan  kultur.  Sitokinin  (zeatin,  zeatin riboside, zeatin glukosida) yang terdapat dalam air  kelapa  walaupun  jumlahnya  kecil,  ternyata dapat menyongkong pertumbuhan dan meningkatkan  jumlah  tunas.  Seperti  telah dijelaskan bahwa IAA berperan dalam: pembesaran  sel,  penghambat  mata  tunas samping,  aktivitas  cambium,  pembentukan jaringan  xylem  dan  floem.  Sitokinin  lebih berperan  dalam  pembentukan  tunas  adventif dan tunas lateral.
Sitokinin merupakan zat pengatur tumbuh yang  sangat  berperan  dalam  proses  proliferasi sel, menginduksi pembelahan sel serta pembentukan dan perkembangan tunas, mengaktifkan  pucuk  tunas  lateral  yang  dorman
Agri- SosioEkonomi Unsrat, ISSN (p) 1907– 4298, ISSN (e) 2685-063X , Sinta 5, Volume 19 Nomor 1, Januari 2023 : 571 – 578
serta  memperlambat  penuaan  ( semescence ) (Romeida,  2013). Benzyl  Amino  Purine (BAP) merupakan kelompok sitokinin turunan adenine paling  aktif  dalam  proses  pembelahan  sel  dan efektif dalam pembentukan tunas.
Untuk  melihat  perbedaaan  menggunakan air  kelapa  Tua  sebagai  sumber  ZPT  alami dengan  kombinasi  BAP  dan  menggunakan  dua jenis  media  yaitu  media Vacin  and  Went dan Murashige  and  Skoog yang  dapat  memicu Dendrobium sp. dalam pertumbuhan.
Tujuan Penelitian Penelitian ini bertujuan untuk membandingkan  antara  media Murashige  and Skoog, Vacin and Went dengan penambahan air kelapa  tua  dan  BAP  terhadap  pertumbuhan anggrek Dendrobium sp. pada kultur In-Vitro.

## Manfaat penelitian
Manfaat  dari  penelitian  ini  adalah  salah satu sumber informasi bagi pengguna anggrek: 1. Untuk dapat mengetahui media VW dan MS dengan penambahan air kelapa tua dan BAP yang  tepat  untuk  pertumbuhan  anggrek Dendrobium sp. pada kultur In-Vitro. 2. Untuk  dapat  mengetahui  apa  manfaat  air kelapa  dan  BAP  bagi  pertumbuhan  anggrek Dendrobium sp . pada kultur In-Vitro.

## METODE PENELITIAN
Waktu dan Tempat Penelitian Penelitian dilaksanakan pada bulan Agustus  sampai  dengan  Desember  2021  di Laboratorium  Kultur  Jaringan  Bioteknologi Fakultas  Pertanian  Universitas  Sam  Ratulangi Manado.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan:  botol  kultur,  pipet tetes,  gelas  ukur,  spatula,  petridish,  gelas  ukur, erlenmeyer,  timbangan  analitik,  pH  meter,  hot plate  and  stirrer,  autoclav,  laminar  air  flow, pinset,  scalpel,  mata  pisau,  lampu  Bunsen, batang pengaduk, panci, kompor dan rak kultur, kertas lakmus.
Tanaman  Anggrek  ( Dendrobium sp.), media  MS,  media  VW,  agar-agar,  gula,  BAP, HCl 0,1, NaOH 0,1, alkohol 70%, alkohol 90%, air  kelapa  tua,  spritus,  tissue,  almunium  foil, aquades.

## Metode Pengambilan Sampel
Penelitian  dilaksanakan  menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan perlakuan  yaitu  Air  Kelapa  Tua  dan  BAP  pada media MS dan media VW:
1. konsentrasi air kelapa tua yang terdiri dari 2 taraf
A0 :  (tanpa air kelapa tua) A1 : Air Kelapa Tua ( 12,5%) 2. konsentrasi BAP yang terdiri dari 2 taraf B0 : (Tanpa BAP)
B1 : BAP (0,5 ppm)
3. Ada 2 Jenis Media digunakan yaitu:
1) Media MS 50% (Murashige And Skoog)
2) Media VW 50% (Vacin And Went) Dengan  demikian  diperoleh  8  gabungan perlakuan, yaitu:
M  A0B0  :  MS  50%  +  tanpa  air  kelapa  tua  + tanpa BAP
M  A0B1  :  MS  50%  +  tanpa  air  kelapa  tua  + BAP 0,5 ppm M  A1B0  :  MS  50%  +  air  kelapa  tua  12,5%  + tanpa BAP M  A1B1  :  MS  50%  +  air  kelapa  tua  12,5%  + BAP 0,5 ppm V  A0B0  :  VW  50%  +  tanpa  air  kelapa  tua  + tanpa BAP V  A0B1  :  VW  50%  +  tanpa  air  kelapa  tua  + BAP 0,5 ppm V  A1B0  :  VW  50%  +  air  kelapa  tua  12,5%  + tanpa BAP V  A1B1  :  VW  50%  +  air  kelapa  tua  12,5%  + BAP 0,5 ppm
Dengan  jumlah  ulangan  disetiap  perlakuan adalah  8  ulangan,  masing-masing  ulangan  2 botol maka jumlah total botol kultur adalah 128 botol.

## Prosedur kerja
1. Persiapan Sampel Penelitian
Sampel  yang  digunakan  dalam  penelitian ini yaitu eksplan anggrek Dendrobium sp. yang
Perlakuan Air Kelapa Tua, dan BAP pada Media MS, VW………………….…....(Grace Sundalangi, Jeany Mandang, Saartje Sompotan)
diambil  dari  tunas  bersih,  yang  diperbanyak  di Laboratorium  Kultur  Jaringan  Bioteknologi Fakultas  Pertanian  Unsrat  Manado.  Eksplan yang digunakan untuk perlakuan adalah eksplan yang memiliki ukuran yang sama.
2. Sterilisasi Alat Alat-alat  tanam,  seperti  cawan  petridis, gagang  scalpel,  pinset,  gunting,  sebelum digunakan  harus  distrilkan  terlebih  dahulu. Begitu  juga  botol  kultur  kosong,  botol  berisi akuades,  botol  berisi  kapas,  atau  lipatan  kertas tisu kering. Sterilisasi alat maupun bahan untuk penanaman ini umumnya dilakukan menggunakan autoklaf pada suhu 121℃ selama 30 menit. 3. Pembuatan larutan stok Media MS (Murashige  and  Skoog), &  Media  VW (Vacin  and  Went) ,  dengan  penambahan  Air Kelapa Tua, BAP.
Larutan Media MS (Murashige and Skoog) Perlakuan MS (g) AK (%) BAP (mg/L) Gula (g) Agar (g) MS (A0B0) 2,22 0 0 15 g 4 g MS (A0B1) 2,22 0 0,5 mg 15 g 4 g MS (A1B0) 2,22 12.5 % 0 15 g 4 g MS (A1B1) 2,22 12.5 % 0,5 mg 15 g 4 g Larutan Media VW (Vacin and Went) Perlakuan VW (g) AK (%) BAP (mg/L) Gula (g) Agar (g) VW (A0B0) 0,83 g 0 0 15 g 4 g VW (A0B1) 0,83 g 0 0,5 mg 15 g 4 g VW (A1B0) 0,83 g 12.5 % 0 15 g 4 g VW (A1B1) 0,83 g 12.5 % 0,5 mg 15 g 4 g
4. Penanaman Eksplan
Eksplan yang steril dipindahkan ke media perlakuan  di  dalam  LAFC  (Laminar  Air  Flow Cabinet),  sebelumnya  LAFC  (Laminar  Air Flow  Cabinet)  disterilisasi  dengan  sinar  UV. Setelah  eksplan  dipindahkan  ke  dalam  botol kultur,  botol  kultur  ditutup  dengan  almunium foil.
5. Pemeliharaan Kultur
Eksplan  yang  telah  ditanam  di  dalam botol  kultur  diletakkan  pada  rak  kultur.  Botol- botol  yang  berisi  eksplan  disusun  dengan  rapi sehingga  memudahkan  dalam  pengamatan. Untuk mengurangi tingkat kontaminasi, dilakukan  penyemprotan  disekitar  botol  kultur dengan  menggunakan  alkohol  70%  setiap  hari hingga eksplan tumbuh.

## Variabel Pengamatan
1. Jumlah protocom (hitung sebelum penanaman di dalam botol, sampai pengamatan terakhir).
2. Berat  basah  kultur  dapat  diketahui  dengan cara menimbang kultur pada akhir penelitian.
3. Berat kering kultur hasil kultur Dendrobium sp. yang ditimbang, ditutup dengan menggunakan aluminium  foil kemudian  di oven  dengan  suhu  100℃  hingga  beratnya konstan (pada akhir penelitian).
4. Mengukur pH media (diukur pada awal dan akhir penelitian).

## Analisis Data
Data yang diperoleh dari hasil pengamatan  dianalisis  dengan  menggunakan Analysis  of  Varian (ANOVA)  pada  taraf  5% dan  jika  pengaruhnya  nyata  dilanjutkan  dengan Uji Beda Nyata Terkecil (BNT) pada taraf 5%. Pengolahan  dan  analisis  data  dilakukan  dengan menggunakan software microsoft excel 2010.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Data Awal dan Akhir pH Media
Berdasarkan  hasil  analisis  ragam  untuk pH media awal dan media akhir pada protocorm anggrek  didapatkan  bahwa  penggunaan  media MS dan V&W, air kelapa tua, dan zat pengatur tumbuh  (BAP)  dengan  konsentrasi  yang berbeda-beda  sehingga  memberikan  pengaruh nyata terhadap pertumbuhan protocom anggrek. Rerata pH media pada protocom anggrek dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel  1  menunjukkan  pada  perlakuan media tanam yang menggunakan air kelapa pH
Agri- SosioEkonomi Unsrat, ISSN (p) 1907– 4298, ISSN (e) 2685-063X , Sinta 5, Volume 19 Nomor 1, Januari 2023 : 571 – 578
media  lebih  tinggi,  dibandingkan  dengan perlakuan media tanam yang tidak menggunakan air  kelapa. Sehingga media  yang menggunakan air kelapa memberikan pH media lebih kecil, dibandingkan dengan perubahan pH media  yang  tidak  menggunakan  air  kelapa hasilnya  lebih  besar.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  semakin  besar  konsentrasi  air  kelapa yang  ditambahkan,  maka  semakin  kecil perubahan pH media.
Makin  kecil  perubahan  pH  media  juga menunjang pertumbuhan yang lebih baik karena penyerapan  hara  dari  media  tidak  terhambat. Penyerapan  hara  paling  baik  pada  pH  sekitar 5,8  karena  semua  hara  dalam  media  berada dalam  bentuk  tersedia  (George  &  Sherrington, 1984), demikian juga dengan zat tumbuh dalam keadaan stabil.
Penggunaan  air  kelapa  baik  sebagai substitusi  media  maupun  sebagai  pelengkap terbukti mendorong pertumbuhan kultur. Pemberian  air  kelapa  12.5%  pada  media tanam nyata  dapat  meningkatkan  pH  media  tanam, semakin  besar  konsentrasi  air  kelapa  yang ditambahkan  ke  media  perubahan  pH  makin kecil. Selama inkubasi kultur maka akan terjadi penurunan  pH  media,  sebagaimana  yang didapatkan  Skirvin et  al, (1986)  untuk  kultur kalus Cucumis dalam dua hari menurunkan pH media  dari  5.11  menjadi  4.55;  6.63  menjadi 4.58.
Pada  Tabel  1  pH  menunjukkan  bahwa penambahan  air  kelapa  perubahan  pH  media dapat ditekan. Keasaman media yang terlampau rendah  dan  tinggi  dapat  berakibat  buruk terhadap  pertumbuhan  kultur  terutama  melalui pengaruhnya  terhadap  absorbsi  garam-garam, fitohormon  dan  kestabilan  vitamin  Pierik (1987), juga pengaruh langsungnya terhadap pH sitoplasma, khloroplast dan vakoula.
Air  kelapa  dapat  menjadi “buffer” disebabkan  karena  dalam  air  kelapa  tersebut terdapat  asam  amino  dan  asam  organik.  Asam amino  seperti  telah  dijelaskan  pada  bagian terdahulu  memilki  muatan  positif  dan  negatif tergantung  pH.  Jika  H+  ditambah  ke  media maka ion tersebut akan bergabung dengan grup karboksil  asam  amino  sedang  apabila  H- ditambah  maka  terjadi  kombinasi  dengan  H+
yang  dilepaskan  molekul-molekul  asam  amino (Mandang, 1993).
Asam organik seperti asam malat merupakan  asam  yang  hanya  sebagian  kecil fraksi  molekulnya  dapat  berdisosiasi.  Asam tersebut  memiliki  hampir  sama  semua  dengan ion-ion  hydrogen  yang  dapat  dititrasi  dalam bentuk ion-ion H+ potensial.
Data Awal dan Akhir Jumlah Protocorm Berdasarkan analisis ragam jumlah protocom  tunas  anggrek  menunjukkan  bahwa penggunaan media MS dan VW, air kelapa tua, ditambahkan  dengan  zat  pengatur  tumbuh (BAP)  dengan  konsentrasi  yang  berbeda-beda memberi  pengaruh  sangat  nyata  terhadap jumlah  protocorm  dari  sejak  awal  penanaman sampai pada umur 15 MST pada tunas anggrek.
Keterangan: Angka yang diikuti oleh huruf yang sama, tidak berbeda nyata berdasarkan Uji BNT 5%
Dari  Tabel  2  dapat  dilihat  bahwa  jumlah protocorm  yang  terbanyak  dihasilkan  oleh perlakuan V A1B1 dengan bertambahnya 40.38 protocorm. Sedangkan jumlah protocorm terendah  dihasilkan  oleh  perlakuan  M  A0B0 dengan  bertambahnya  protocorm  sebanyak 16.48.  Dalam  uji  statistika  menunjukkan  hasil yang berbeda nyata pada perlakuan V A1B1.
Hal  ini  menunjukkan  bahwa  multiplikasi protocorm  pada  tanaman  anggrek  di  pengaruhi oleh  efek  sinergis  dari  hormone  dan  sitokinin pada  konsentrasi  yang  tepat.  Menurut  Nurbaity (2004), bahwa efek air kelapa yang mengandung sitokinin pada pertumbuhan menjadi lebih baik bila dalam media juga diberi auksin  yang  bersifat  sinergis  dan  berinteraksi dengan baik.
Perlakuan Air Kelapa Tua, dan BAP pada Media MS, VW………………….…....(Grace Sundalangi, Jeany Mandang, Saartje Sompotan)
Berdasarkan Maryani (2005), zat pengatur tumbuh  sitokinin  berperan  dalam  pembelahan sel dan morfogenesis. Pembelahan sel, morfogenesis  dan  pengaturan  pertumbuhan merupakan  proses  yang  sangat  penting  dalam pembentukan protocorm dan selanjutnya diikuti pembentukan tunas.
Hal  ini  menunjukkan  bahwa  penambahan air  kelapa  ke  dalam  media  memberikan pengaruh  nyata  dalam  meningkatkan  jumlah protocorm  pada  tanaman  anggrek Dendrobium sp.  Menurut  Hendaryono  &  Wijayani  (1994), pemberian sitokinin dengan kadar yang relative tinggi, diferensiasi eksplan akan cenderung kea rah  pembentukan  tunas.  Menurut  George  & Sherrington  (1984),  pertumbuhan  tunas  aksilar dan  tunas  lateral  dapat  dirangsang  dengan penambahan  ZPT  sitokinin  ke  dalam  media tumbuh.

## Berat Basah Protocorm Anggrek
Berdasarkan  analisis  ragam  berat  basah protocom anggrek menunjukkan bahwa penggunaan  media  MS  dan  V&W,  air  kelapa tua,  ditambahkan  dengan  zat  pengatur  tumbuh (BAP)  dengan  konsentrasi  yang  berbeda-beda memberikan  pengaruh  nyata  terhadap  berat basah pada protocom anggrek dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel  3.  Rerata  Berat  Basah  Protocom  Anggrek  pada  Umur 15 Minggu Setelah Tanam (MST) Perlakuan MEDIA Murashige and Skoog (MS) 50% Vacin and Went (VW) 50% AK 0 (%) AK 1 (%) AK 0 (%) AK 1 (%) BAP 0 mg/L 0.26 a 0.41 a 0.32 ab 0.47 ab BAP 0.5 mg/L 0.35 a 0.51 ab 0.38 ab 0.53 b BNT 5% 0.22
Keterangan:  Angka  yang  diikuti  oleh  huruf  yang  sama,  tidak berbeda nyata berdasarkan Uji BNT 5%
Dari Tabel 3 dapat dilihat pada media MS dan  VW  bahwa  yang  menggunakan  air  kelapa tua  sebanyak  125  mg/L  dan  BAP  0.5  mg/L hasilnya  lebih  tinggi  0.53.  dibandingkan  tanpa menggunakan  air  kelapa  tua  dan  BAP.  Hal  ini dikarenakan  hormon  sitokinin  yang  tepat  dapat memicu pertumbuhan daun, dan tunas sehingga berat basah kultur juga semakin berat. Menurut Niknejad et  al. (2011),  konsentrasi  dan komponen  media  yang  tepat  serta  kondisi
lingkungan  yang  sesuai  dapat  mempengaruhi proses-proses terjadinya diferensiasi, pertumbuhan  dan  perkembangan  eksplan. Menurut  Pandiangan  &  Siahaan  (2002), menyatakan bahwa kebanyakan eksplan menghasilkan  auksin  dan  sitokinin  endongen. Dalam kultur jaringan penambahan auksin dam sitokinin  eksogen  sebagai  zat  pengatur  tumbuh diberikan untuk memperoleh efek pertumbuhan.

## Berat Kering Protocorm Anggrek
Berdasarkan  analisis  ragam  berat  kering protocorm  anggrek  menunjukkan  penggunaan media MS dan VW, air kelapa tua, ditambahkan dengan  zat  pengatur  tumbuh  (BAP)  dengan konsentrasi  yang  berbeda-beda  memberikan pengaruh  nyata  terhadap  berat  kering  pada protocorm anggrek dapat dilihat pada Tabel 4.
Tabel 4. Rerata Berat Kering Protocorm Anggrek pada Umur
15 Minggu Setelah Tanam (MST) Perlakuan MEDIA Murashige and Skoog (MS) 50% Vacin and Went (VW) 50% AK 0 (%) AK 1 (%) AK 0 (%) AK 1 (%) BAP 0 mg/L 0.005 a 0.007 c 0.006 b 0.008 d BAP 0.5 mg/L 0.006 b 0.008 d 0.007 c 0.008 d BNT 5% 0.0009
Keterangan:  Angka  yang  diikuti  oleh  huruf  yang  sama,  tidak berbeda nyata berdasarkan Uji BNT 5%
Pada  Tabel  4  dapat  dilihat  bahwa penggunaan  air  kelapa  tua  125  mg/L,  tanpa maupun  dengan  BAP  pada  media  MS  dan  VW meningkatkan  berat  kering  protocom  anggrek dibandingkan  dengan  pada  media  tanpa  air kelapa  tua  dan  BAP.  Perlakuan  air  kelapa  125 mg/L dan BAP 0.5 mg/L merupakan konsentrasi optimum dalam menghasilkan berat kering  tertinggi.  Dengan  rata-rata  berat  kering tinggi  kultur  0.008  g.  berat  kering  terendah dihasilkan pada perlakuan yang tidak menggunakan air kelapa dan BAP.
Hal  ini  dikarenakan  hormon  sitokinin yang  tepat  dapat  memicu  pertumbuhan  daun, dan  tunas  sehingga  berat  basah  kultur  juga semakin berat.  Menurut Niknejad et al. (2011), konsentrasi  dan  komponen  media  yang  tepat serta  kondisi  lingkungan  yang  sesuai  dapat mempengaruhi proses-proses terjadinya diferensiasi,  pertumbuhan  dan  perkembangan eksplan.  Menurut  Pandiangan  &  Siahaan
Agri- SosioEkonomi Unsrat, ISSN (p) 1907– 4298, ISSN (e) 2685-063X , Sinta 5, Volume 19 Nomor 1, Januari 2023 : 571 – 578
(2002), menyatakan bahwa kebanyakan eksplan menghasilkan auksin dan sitokinin endongen.
Dalam  kultur  jaringan  penambahan  auksin dam  sitokinin  eksogen  sebagai  zat  pengatur tumbuh  diberikan  untuk  memperoleh  efek pertumbuhan.  Berat  kering  merupakan  berat tanaman yang hanya berisi kandungan
metabolisme setelah kandungan airnya dihilangkan  melalui  pengeringan.  Produksi tanaman  akan  lebih  akurat  dinyatakan  dengan berat  kering,  karena  berat  kering  tidak dipengaruhi oleh kandungan air.
Purnamaningsih  &  Misky  (2011),  menyatakan bahwa  pertumbuhan  yang  baik  mencerminkan adanya  bobot  kering  yang  tinggi  karena penyerapan unsur hara dan zat pengatur tumbuh digunakan untuk membenruk sel-sel baru.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Berdasarkan penelitian dapat disimpulkan bahwa  pertumbuhan  anggrek Dendrobium sp. lebih  baik  pada  media Vacin  and  Went di bandingkan  pada  media Murashige  and  Skoog . Penambahan  air  kelapa  tua,  dan  BAP  dapat meningkatkan  multiplikasi  protocorm  pada kedua  media Murashige  and  Skoog dan Vacin and Went . Saran Berdasarkan hasil penelitian kultur jaringan merupakan salah satu teknik perbanyakan  lebih  baik  karena  dengan  teknik kultur jaringan bisa mendapatkan tanaman yang steril/bersih.

## DAFTAR PUSTAKA
Bey,  Y.,  W.  Syafitri,  dan  Sutrisno.  2006. Pengaruh  pemberian  Giberelin  (GA3).  dan air  kelapa  terhadap  perkecambahan  bahan biji  anggrek  bulan  (Phalaenopsis  amabilis BL). Secara In Vitro, 2 (2):41-46.
George,  E.F.,  &  P.D.  Sherrington.  1984 .  Plant Propagation  by  Tissue  Culture .  Exegetics Limited. England.
Hendaryono,  D.P.,  &  S.A.  Wijayani.  1994.
Teknik  Kultur  Jaringan .  Penerbit  Kanisius.
Yogyakarta.
Mandang, J.P. 1993. Peranan Air Kelapa dalam
Kultur Jaringan Tanaman Krisan (Chrysanthemum  morifolium). Disertasi . Bogor. Institut Pertanian Bogor.
Maryani,  Y.Z.  2005.  Penggandaan  Tunas Krisan  Melalui  Kultur  Jaringan. Ilmu Pertanian , 12(1):51-55.
Niknejad, A. Kadir, M.A. Kadzimin, S.B. 2011. Full  Length  Research  Paper  In  Vitro  Plant Regeneration  From  Protocoms  Like  Bodies (PLBs).  And  Callus  Of  Phalaenopsis Gigantea (Epidendroideae: Orchidaceae). A.
J. Biotech , 10(56):11808-11816.
Nurbaity.  2004.  Pengaruh  pemberian  Air Kelapa  dan  NAA  Terhadap  Pertumbuhan Tunas  Anggrek  Cattleya  secara  In  Vitro.
Universitas Sumatera Utara. Medan.
Pandiangan,  D.  &  P.  Siahaan.  2002.  Produksi
Alkaloid  dari  Kalus  Tapak  Dara. Prosiding Seminar Nasional MIPA. Manado, UNSRAT.
Pierik,  R.L.M.  1987.  In  Vitro  culture  of  higher plants. Martinus Nijhoff Publishers.
Dordrecht . 344 p.
Purnamaningsih,  R.  dan  Misky,  A.  2011. Pengaruh BAP dan NAA Terhadap Induksi Kalus  dan  Kandungan  Artemisinin  dari
Artemisia annua L, 10(4):16-23.
Romeida.  2013.  Peran  Zat  Pengatur  Tumbuh
Auksin dan Sitokinin Terhadap Pertumbuhan Semai Anggrek Phaleonopsis. Fakultas Biologi Unsoed. Banteran.
Perlakuan Air Kelapa Tua, dan BAP pada Media MS, VW………………….…....(Grace Sundalangi, Jeany Mandang, Saartje Sompotan)
Rupawan.  2014.  Lampiran  Komposisi  Medium
Murashage and
Skoog. www.ITS- Undergraduate-13519-Enclosuve-list-pdf. Diakses tangggal 4 Mei 2021.
Sucandra.  2015.  Uji  Pemberian  Beberapa
Konsentrasi  Glisin  Pada  Media  Vacin  And Went Terhadap Pertumbuhan Planlet
Anggrek (Dendrobium sp). Secara In Vitro.
Fakultas Pertanian Riau.
Wetherell,  D.F.  1976.  Plant  Tissue  Culture Series.  Avery  Publishing  Grub,  Inc.  New, Jersey.
Widiastoety, D., N. Solvia., M. Soedarjo. 2010.
Potensi Anggrek Dendrobium Dalam Meningkatkan Variasi Dan Kualitas Anggrek  Bunga  Potong. Jurnal  Litbang
Pertanian , 29(3): 102-103.