## Jurnal Sains Aku a kultur Tropis D e p a r t e m e n A k u a k u l t u r
Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan - Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH, Tembalang, Semarang 50275
Telp. (024) 7474698, Fax.: (024) 7474698 Email: sainsakuakulturtropis@gmail.com , sainsakuakulturtropis@undip.ac.id
PENGARUH ENZIM PAPAIN DAN PROBIOTIK PADA PAKAN BUATAN TERHADAP PEMANFAATAN PROTEIN PAKAN DAN PERTUMBUHAN IKAN MAS ( Cyprinus carpio )
The Effect of Dietary Papain and Probiotic on Feed Protein Utilization and Growth of Carp (Cyprinus carpio)
Sulasi, Sri Hastuti, Subandiyono* Program Studi Budidaya Perairan, Jurusan Perikanan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH, Tembalang, Semarang, Jawa Tengah – 50275, Telp/Fax. +6224 7474698

## ABSTRAK
Ikan  mas ( C. carpio )  merupakan ikan air tawar  yang banyak diminati oleh  masyarakat  karena beberapa keunggulan,  diantaranya  kandungan  protein  yang  cukup  tinggi  dan  harganya  yang  terjangkau.    Budidaya  ikan mas ( C. carpio ) memerlukan pakan buatan sebagai nutrisi untuk menunjang pertumbuhannya . Salah satu aspek terhambatnya  pertumbuhan  adalah  pemanfaatan  pakan  yang  masih  rendah,  hal  ini  terkait  dengan  kecernaan protein  pakan  yang  belum  optimal.    Salah  satu  cara  untuk  meningkatkan  daya  cerna  pakan  adalah  dengan penambahan  enzim  papain  dan  probiotik. Kedua  bahan  tersebut  mampu  menguraikan  ikatan    peptida    dalam protein  sehingga  protein  terurai  menjadi  ikatan  peptida  yang  lebih  sederhana  sehingga  protein  pakan  dapat diserap  dengan  optimal  dan  digunakan    sebagai  deposit  untuk  pertumbuhan.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah mengkaji penambahan enzim papain dan probiotik pada pakan buatan terhadap pemanfaatan protein pakan dan pertumbuhan ikan mas ( C. carpio ).
Ikan  uji  yang  digunakan  adalah  ikan  mas  dengan  bobot  rata-rata  2,88+0,51  g/ekor.  Ikan  mas dibudidayakan selama 40 hari dengan  padat tebar 1 ekor/L.  Penelitian ini menggunakan metode eksperimental dengan rancangan acak lengkap pola faktorial dengan 2 faktor, yaitu enzim papain (A1 = 0,25 g; A2 = 0,50 g/kg pakan) dan probiotik (B1= 10 ml; B2 = 15 ml/kg pakan) dengan 3 kali ulangan.  Perlakuan dalam penelitian ini: perlakuan A1B1 (enzim papain 0,25 g dan probiotik 10 ml/kg pakan), A1B2 (enzim papain 0,25 g dan probiotik 15 ml/kg pakan), A2B1 (enzim papain 0,50 g dan probiotik 10 ml/kg pakan) dan A2B2 (enzim papain 0,50 g dan probiotik  15  ml/kg  pakan).  Data  yang  diamati  meliputi  tingkat  konsumsi  pakan  (TKP),  efisiensi  pemanfaatan pakan (EPP), protein efisiensi rasio (PER), laju pertumbuhan relatif (RGR), kelulushidupan (SR) dan kualitas air meliputi suhu, DO, pH dan ammonia.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa  enzim papain berpengaruh  nyata (P<0,05) terhadap EPP dan PER. Probiotik berpengaruh  nyata (P<0,05) terhadap EPP dan PER, serta terdapat interaksi antara kedua faktor pada variabel  PER.    Kualitas  air  pada  media  pemeliharaan  dipertahankan  pada  kisaran  yang  layak  untuk  budidaya ikan mas ( C. carpio ). Kata kunci :  Papain; Probiotik; Protein; Pertumbuhan; Ikan Mas; Cyprinus

## ABSTRACT
The carp  ( C . carpio )  is  a  freshwater  fish  that  was  highly  favourable  for  human.  The  fish  have  some advantages  including  highly  protein  content  and  economically  values. Culture  of  the  fish    required  digestible nutrients for its growth. Growth is not optimal due to low feed utilization  and protein digestibility of feed that has  not  been  optimal.  Solutions  to  improve  the  digestibility  of  feed  was  the  additing  of  papain  enzyme  and probiotics. Both materials were able to decipher the peptide bonds in proteins, so that the proteins break down into simpler peptide bond, so that the protein absorbed with the optimal feed and used as a deposit for growth. This  research  aimed  to  review  the  effect  of  papain  enzyme  and  probiotics  additing  in  artificial  feed  for  feed protein utilization and growth of carp ( C . carpio ). The fish  trial used was carp ( C . carpio ) with the average  body weight of 2,88±0,51 g/fish. The fish was cultured  for  40  days  with  density  1  fish/L.    This  experimental  research  used  was  method  of  completely randomized  factorial  design  with  two  factors,  papain  enzyme  (A1  =  0,25  g;  A2  =  0,50  g/kg  of  feed)  and probiotics  (B1=  10  ml;  B2  =  15  ml/kg  of  feed).  Each  treatment  has  3  replicates.    The  all  treatments  of  this
research were: treatment A1B1 (papain enzyme 0,25 g and probiotics 10 ml/kg  of feed), A1B2 (papain enzyme 0,25  g  and  probiotics  15  ml/kg  feed),  A2B1  (papain  enzyme  0,50  g  and  probiotics  10  ml/kg  feed)  and  A2B2 (papain  enzyme  0,50  g  and  probiotics  15  ml/kg  of  feed).    The  data  obtained  included  feed  consumption  (FC), feed utilization efficiency (FUE), protein efficiency ratio (PER), relative growth rate (RGR), survival rate (SR); and water parameter quality such as temperatures, DO, pH, and ammonia.
Data  showed  that  papain  enzyme  resulted  affected  significantly ( P<0,05)  to  FUE  and  PER.  Probiotics affected  significantly  (P<0,05)  to  FUE  and  PER.  There  was  interaction  between  the  enzyme  papain  and probiotics  on  PER.  During  the  experiment  period  water  parameter  quality  ranged between  suitable  values  for carp ( C . carpio ) culture.
Keywords : Papain, Probiotics, Protein, Growth, Carp, Cyprinus * Corresponding author : s_subandiyono@yahoo.com

## PENDAHULUAN
Ikan  mas    ( Cyprinus    carpio )  merupakan  salah  satu    jenis    ikan    air    tawar  yang  banyak  diminati  oleh masyarakat  karena  beberapa  keunggulan,  diantaranya  bernilai  ekonomis  penting,  memiliki  kandungan  nutrisi yang tinggi, tahan  terhadap  berbagai jenis  penyakit serta sangat  toleran  terhadap fluktuasi suhu (FAO, 2006), selain itu ikan mas ( C. carpio ) memiliki kandungan asam  lemak yang rendah sehingga mengurangi  peningkatan kolestrol    di  dalam  darah  (Jabeen  dan  Chaudhry,  2011).    Budidaya    ikan  mas  ( C.  carpio )    sangat  dipengaruhi oleh  ketersediaan  pakan  yang cukup, baik  kuantitas  maupun  kualitas.  Penyediaan pakan  buatan memerlukan biaya  yang  relatif tinggi bahkan dapat mencapai 60-70% dari komponen biaya  produksi (NRC, 1993).  Pakan yang diberikan hendaknya dapat dimanfaatkan  dengan  baik  oleh  tubuh, sehingga  ikan  mas  ( C. carpio ) dapat tumbuh dengan  optimal (Erfanto et al ., 2013).  Salah satu aspek terhambatnya pertumbuhan adalah pemanfaatan pakan yang  masih rendah, hal ini terkait dengan kecernaan protein  pakan yang belum optimal.  Salah satu cara untuk meningkatkan daya cerna pakan adalah dengan penambahan enzim papain dan probiotik.
Enzim  merupakan  protein  yang  memiliki  aktivitas  katalisis  untuk  menurunkan  energi  aktivasi    suatu reaksi  sehingga konversi substrat menjadi produk  dapat  berlangsung  lebih  cepat.    Salah  satu  enzim  yang mempunyai  peran  penting  dalam  kehidupan adalah protease, yaitu enzim proteolitik  yang bekerja memecah protein menjadi asam amino (Kusumadjaja dan Dewi, 2005). Salah satu enzim protease eksogenous yang dapat ditambahkan  dalam  pakan  adalah  papain.    Papain    merupakan    enzim    protease    yang    mampu  menghidrolisis protein  menjadi    unsur-unsur    yang    lebih    sederhana    yaitu    peptida    hingga    asam    amino,  sehingga meningkatkan pemanfaatan protein pakan oleh tubuh (Watanabe, 1988).
Selain  penambahan  enzim  papain,  bahan  yang  dapat  digunakan  untuk  meningkatkan  daya  cerna  pakan dengan  kemampuan  memecah  protein  pakan  menjadi  senyawa  yang  lebih  sederhana  adalah  probiotik  dengan kandungan berbagai bakteri.  Menurut Murni (2004), pakan yang berkualitas selain dihasilkan dari sumber bahan pakan  dapat  juga  dihasilkan  dengan  penambahan  enzim  dalam  pakan.    Penambahan  bakteri  probiotik  dapat dijadikan  sebagai  sumber  enzim  dalam  pakan.    Probiotik merupakan  salah  satu  jenis  bakteri    fotosintetik  yang mampu meningkatkan efisiensi pemanfaatan pakan dan pertumbuhan  ikan.  Jenis bakteri  seperti Lactobacillus sp, Actinomycetes sp, Streptomycetes sp, dan ragi sering diperlukan dalam probiotik untuk ditambahkan kedalam pakan  yang  bertujuan  untuk  meningkatkan  daya  cerna  pakan  dengan  meningkatkan  enzim  pencernaan  yang dapat menghidrolisis protein menjadi senyawa lebih sederhana sehingga mudah diserap dan digunakan  sebagai deposit untuk pertumbuhan (Fuller, 1992).
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengkaji  penambahan  enzim  papain  dan  probiotik  pada  pakan buatan terhadap pemanfaatan protein pakan dan pertumbuhan ikan mas ( C. carpio ). Hasil penelitian diharapkan mampu memberikan informasi kepada pembaca pada umumnya dan pembudidaya pada khususnya tentang peran penting  penggunaan  enzim  papain  dan  probiotik  untuk  pertumbuhan  ikan  mas  ( C.  carpio ).    Penelitian  ini dilaksanakan selama 40 hari dimulai dari tanggal 3 Januari hingga 11 Februari 2016 di Balai Benih Ikan (BBI) Mijen, Semarang, Jawa tengah.

## MATERI DAN METODE
Ikan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah ikan mas ( C. carpio ) yang berasal dari Balai Benih Ikan (BBI) Mijen, Semarang  dengan bobot rata-rata 2,88+0,51 g/ekor. Pakan  yang digunakan dalam penelitian ini adalah pakan buatan berbentuk pelet. Pakan uji ditambahkan enzim papain dan probiotik dengan dosis yang berbeda pada masing-masing perlakuan . Enzim papain yang digunakan berasal dari Balai Besar Pengembangan Budidaya  Air  Payau  (BBPBAP)  Jepara  dan  probiotik  yang  digunakan  adalah  probiotik  dengan  kandungan bakteri Lactobacillus  casei dan  ragi Saccharomyces  cerevisiae. Pemberian  pakan  dilakukan  tiga  kali  sehari, yaitu  pukul  08.00,  12.00  dan  16.00  WIB  dengan  metode at  satiation (SNI,  1999). Wadah  pemeliharaan  yang digunakan dalam penelitian ini adalah ember plastik dengan ukuran 20 liter sebanyak 12 buah.
Rancangan  percobaan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  rancangan  acak  lengkap  (RAL)  pola faktorial  (ordo  2x2)  dengan  dua  faktor  yaitu  enzim  papain  (A1=  0,25  g,  A2  =  0,50  g/kg  pakan)  dan  probiotik (B1= 10 ml, B2 = 15 ml/kg pakan) dengan 3 kali pengulangan. Perlakuan dalam penelitian yaitu:
Perlakuan A1B1 : Enzim papain 0,25 g/kg pakan dan probiotik 10 ml/kg pakan Perlakuan A1B2 : Enzim papain 0,25 g/kg pakan dan probiotik 15 ml/kg pakan Perlakuan A2B1 : Enzim papain 0,50 g/kg pakan dan probiotik 10 ml/kg pakan Perlakuan A2B2 : Enzim papain 0,50 g/kg pakan dan probiotik 15 ml/kg pakan Penetapan  dosis  enzim  papain  berdasarkan  label  kemasan,  sedangkan  dosis  probiotik  mengacu  pada penelitian  sebelumnya  yaitu  penelitian  Noviana et  al .  (2014)  bahwa  dosis  terbaik  pemberian  probiotik  cair dengan kandungan bakteri Lactobacillus sp dan ragi adalah 10 ml/kg pakan, dan  penelitian Putri et al . (2012) bahwa  dosis  terbaik  pemberian  probiotik  cair  dengan  kandungan  bakteri Lactobacillus sp  dan  ragi  adalah  15 ml/kg pakan.
Ikan uji diseleksi berdasarkan keseragaman ukuran, kelengkapan organ tubuh dan kesehatan secara fisik. Ikan  uji  yang  telah  diseleksi,  diadaptasikan  selama  seminggu  terhadap  pakan  dan  lingkungan  baru, kemudian dilakukan  pemuasaan  selama  1  hari  sebelum  dilakukan  perlakuan.    Pakan  uji  yang  telah  ditambahkan  enzim papain dan probiotik dianalisis proksimat untuk mengetahui kandungan nutrisinya.  Analisis proksimat pakan uji dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Analisis Proksimat Pakan yang telah Ditambahkan Enzim Papain dan Probiotik (% Bobot Kering)
Pakan Air Abu Lemak Protein Karbohidrat Pakan A1B1 0 15,20 9,48 29,97 45,36 Pakan A1B2 0 12,55 10,16 32,88 44,43 Pakan A2B1 0 11,38 10,88 35,88 41,88 Pakan A2B2 0 10,70 11,19 38,58 39,55
Sumber: Laboratorium Ilmu Gizi dan Teknologi Pangan, Fakultas Ilmu Keperawatan dan Kesehatan, Universitas Muhammadiyah Semarang  (2016)
Data  yang  diamati  dalam  penelitian  ini  meliputi  nilai  tingkat  konsumsi  pakan,  efisiensi  pemanfaatan pakan, protein efisiensi rasio,  laju pertumbuhan relatif, kelulushidupan dan parameter kualitas air.

## Tingkat konsumsi pakan (TKP)
Pemberian  pakan  dilakukan  dengan  metode at  satiation ,  dimana  pakan  yang  dimakan  adalah  nilai  dari tingkat konsumsi pakan.

## Efisiensi pemanfaatan pakan (EPP)
Nilai efisiensi pemanfaatan pakan dapat dihitung dengan rumus Tacon (1987), sebagai berikut:
EPP =
dimana: EPP : Efisiensi pemanfaatan pakan (%)
Wt
: Bobot biomassa ikan pada akhir penelitian (g) Wo : Bobot biomassa ikan pada awal penelitian (g) F : Jumlah pakan ikan yang dikonsumsi selama penelitian (g)

## Rasio efisiensi protein (PER)
Nilai protein efisiensi rasio dihitung menggunakan rumus Tacon (1987), sebagai berikut:
PER = ( Wt-Wo ) x 100%
Pi dimana: PER : Protein efisiensi rasio (%) Wt : Biomassa ikan uji pada akhir penelitian (g) Wo : Biomassa ikan uji pada awal penelitian (g) Pi : Bobot pakan yang dikonsumsi x kadar protein pakan (g)
x 100%
Laju pertumbuhan relatif (RGR)
Laju pertumbuhan relatif dapat dihitung menggunakan rumus Takeuchi (1988), sebagai berikut:
RGR = x100%
dimana: RGR  : Laju pertumbuhan relatif (%/hari) Wo : Bobot biomassa ikan uji pada awal penelitian (g) Wt : Bobot biomassa ikan uji pada akhir penelitian (g) t : Waktu  penelitian (hari)

## Kelulushidupan (SR)
Kelulushidupan dapat dihitung menggunakan rumus Effendi (2002), sebagai berikut:
SR = Nt x 100 %
No dimana:
SR
: Kelulushidupan (%) No : Jumlah ikan uji pada awal penelitian (ekor) Nt : Jumlah ikan uji pada akhir penelitian (ekor)
Data  yang  didapatkan  kemudian  dianalisis  menggunakan  sidik  ragam  (ANOVA)  model  faktorial. Sebelum  dilakukan  ANOVA,  data  terlebih  dahulu  dilakukan  uji  normalitas,  uji  homogenitas,  dan  uji  addifitas untuk mengetahui bahwa data bersifat normal, homogen dan aditif.  Data kualitas air dianalisis secara deskriptif untuk mendukung pertumbuhan.

## HASIL
Hasil penelitian penambahan enzim papain dan probiotik dengan dosis yang berbeda pada pakan buatan terhadap pertumbuhan ikan mas ( C. carpio ) tersaji pada Tabel 2.
Tabel 2.  Nilai Rata-rata Tingkat Konsumsi Pakan (TKP), Efisiensi Pemanfaatan Pakan (EPP), Protein Efisiensi Rasio (PER), Laju Pertumbuhan Relatif (RGR), dan Kelulushidupan (SR) Ikan Mas ( C. carpio ) yang Diberi Pakan Buatan dengan Penambahan Enzim Papain dan Probiotik Selama 40 Hari Pemeliharaan
Variabel yang Diamati Perlakuan A1B1 A1B2 A2B1 A2B2 TKP (g) 98,37±1,52 99,72±0,36 99,99±0,81 98,11±2,80 EPP (%) 70,56±0,49 70,88±0,79 71,43±1,13 74,54+1,68 PER (%) 2,35±0,02 2,16±0,02 1,99±0,03 1,93±0,04 RGR (%/hari) 5,96±0,31 6,12±0,31 6,17±0,40 6,50±0,13 SR (%) 96,67±5,77 100,00+0,00 90,00±10,00 96,67±5,77
Berdasarkan  data  TKP,  EPP,  PER,  RGR  dan  SR  Ikan  Mas  ( C.  carpio )  selama  penelitian  dapat  dibuat grafik seperti pada gambar berikut.
Papain
Papain
(C) (D) (E)
Gambar 1. Grafik Nilai Tingkat Konsumsi Pakan (A), Efisiensi Pemanfaatan Pakan (B), Protein Efisiensi Rasio (C), Laju Pertumbuhan Relatif (D), dan Kelulushidupan (E) pada Ikan Mas ( C. carpio ) yang Diberi Pakan Buatan dengan Penambahan Enzim Papain dan Probiotik dengan Dosis yang Berbeda Selama 40 Hari Pengamatan
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa  enzim  papain  berpengaruh  nyata  (P<0,05)  terhadap  protein efisiensi  rasio  (PER)  dan  efisiensi  pemanfaatan  pakan  (EPP).  Probiotik  berpengaruh  nyata  (P<0,05)  terhadap protein efisiensi rasio (PER) dan efisiensi pemanfaatan pakan (EPP),  namun tidak berpengaruh nyata  (P>0,05) terhadap TKP, RGR dan SR serta terdapat interaksi antara enzim papain dan probiotik pada variabel PER.

## Parameter Kualitas Air
Hasil  pengukuran  kualitas  air  pemeliharaan  ikan  mas  ( C.  carpio )  selama  penelitian  dapat  dilihat  pada Tabel 3.
Tabel 3.  Hasil  Pengukuran  Parameter  Kualitas  Air  pada  Media  Pemeliharaan  Ikan  Mas  ( C.  carpio )  Selama  40
Hari Pengamatan dibandingkan dengan Pustaka Parameter Kualitas Air Kisaran Kelayakan (Pustaka) Suhu 26 – 29°C 25 – 32  C (a) Oksigen Terlarut 5 – 7,8 mg/L > 3 mg/L (b) pH 7– 8 6,5 – 9,0 (a) Amonia 0,13-0,61 mg/L <1 mg/L (c)
Keterangan:  a   = Boyd (1982) b   = Zonneveld et al . (1991) c = Robinette (1976)
Hasil  pengukuran  parameter  kualitas  air  menunjukkan  bahwa  nilai  parameter  kualitas  air  selama penelitian masih berada pada kisaran yang sesuai untuk budidaya ikan mas ( C. carpio ) berdasarkan pustaka dan dipertahankan selalu dalam keadaan layak untuk budidaya.
Papain
Papain Papain

## PEMBAHASAN

## Pemanfaatan Pakan
Pemanfaatan  pakan  pada  ikan  mas  ( C.  carpio )  yang  diamati  adalah  tingkat  konsumsi  pakan,  efisiensi pemanfaatan  pakan  dan  protein  efisiensi  rasio.    Berdasarkan  hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa penambahan enzim papain dan probiotik pada pakan buatan dengan dosis yang berbeda tidak berpengaruh nyata terhadap tingkat konsumsi pakan, artinya semua perlakuan memberikan hasil tingkat konsumsi pakan yang sama. Nilai  tingkat  konsumsi  pakan  pada  tiap  pelakuan  yaitu  A1B1  sebesar  98,37+1,52,  A1B2  99,72+0,36,  A2B1 99,99+0,81 dan A2B2 98,11+2,80 g.  Menurut Rahmawan et al . (2014), tingkat konsumsi pakan  aktual  adalah banyaknya  jumlah  konsumsi pakan yang diberikan  selama masa pemeliharaan.  Menurut Utomo et al . (2005), jumlah  konsumsi  pakan  merupakan  salah  satu  faktor  yang  mempengaruhi  pertumbuhan    ikan  selain  faktor lingkungan  dan  genetik.    Nilai  tingkat  konsumsi  pakan  yang  sama  dari  semua  perlakuan  diduga  karena  pakan yang  ditambahkan  enzim  papain  dan  probiotik  dengan  dosis  yang  berbeda  mempunyai  aroma  yang  sama sehingga  tidak  meningkatkan  nafsu  makan  ikan  atau  tidak  berpengaruh  terhadap  nafsu  makan  ikan.  Menurut Samsudin et al . (2008), pakan yang baik untuk ikan selain ditentukan oleh nilai nutrisinya, dipengaruhi juga oleh aroma pakan, karena aroma mampu  merangsang nafsu  makan ikan.  Menurut Brett (1971), jumlah pakan  yang mampu  dikonsumsi  ikan  setiap  harinya  merupakan  salah  satu  faktor  yang  mempengaruhi  potensi  ikan  untuk tumbuh  secara  maksimal  dan  laju  konsumsi  makanan  harian  berhubungan  erat  dengan  kapasitas  dan pengosongan  perut.    Selain  itu  diduga  yang  mempengaruhi  tingkat  konsumsi  pakan  salah  satunya  adalah  daya tarik  pakan  (atraktan).    Menurut  Khasani  (2013),  atraktan  merupakan  bahan  yang  dicampurkan  dalam  pakan dalam jumlah sedikit untuk meningkatkan asupan pakan ( food intake ), pertumbuhan, dan konsumsi ikan terhadap pakan.  Semakin tinggi daya tarik pakan maka akan menyebabkan ikan semakin tertarik untuk memakan pakan tersebut  yang  dapat  meningkatkan  konsumsi  ikan  terhadap  pakan,  namun  dalam  penelitian  ini,  diduga  pakan buatan  tersebut  memiliki  daya  tarik  yang  sama  baik  dalam  hal  bentuk  maupun  aroma  yang  dihasilkan  dari penambahan  enzim  papain  dan  probiotik  sehingga  nilai  tingkat  konsumsi  pakan  yang  dihasilkan  tidak  berbeda nyata.  Selain daya tarik, hal tersebut diduga karena ikan mas yang digunakan dalam penelitian memiliki umur yang sama sehingga jumlah pakan yang dibutuhkan juga hampir sama.  Menurut Wiyanto dan Hartono  (2003), bahwa    ikan  yang  masih  muda  memiliki  pergerakan  yang  aktif    sehingga  membutuhkan  makanan  yang  cukup banyak dibandingkan dewasa. Sehingga semakin kecil ikan maka nafsu makan semakin besar.
Berdasarkan  hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa  enzim  papain  berpengaruh  nyata  terhadap efisiensi  pemanfaatan  pakan,  begitu  pula  dengan  probiotik  yang  berpengaruh  nyata  terhadap  efisiensi pemanfaatan  pakan,  namun  tidak  terdapat  interaksi  antara  enzim  papain  dan  probiotik  untuk  nilai  efisiensi pemanfaatan  pakan.    Nilai  efisiensi  pemanfaatan  pakan  yang  diperoleh  selama  penelitian  yaitu  A1B1  sebesar 70,56+0,49,  A1B2  70,88+0,79,  A2B1  71,43+1,13  dan  A2B2  74,54+1,68%.    Menurut  Tacon  (1987),  efisiensi pakan merupakan rasio antara pertambahan bobot tubuh dengan jumlah pakan yang diberikan selama penelitian. Penelitian    ini  menunjukkan  hasil    yang    lebih    tinggi  dari  penelitian  Ananda et  al .  (2015)  pada    ikan    patin ( Pangasius  hypopthalmus )    yaitu    sebesar  52,39±1,36%  dengan  penambahan  enzim  papain  dosis  2,25%  yang dihidrolisis pada tepung kedelai.  Hasil penelitian ini diduga bahwa nilai efisiensi pemanfaatan pakan yang lebih tinggi  dikarenakan  pakan  uji  memiliki  kualitas  yang  baik,  karena  pakan  lebih  dapat  dicerna  dan  dimanfaatkan secara  efisien  oleh  ikan  mas,  selain  itu  diduga  perbedaan  spesies,  umur/stadia  ikan  dan  lingkungan mempengaruhi efisiensi pemanfaatan pakan.
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa tidak terdapat interaksi antara kedua faktor, yaitu enzim papain dan  probiotik,  artinya  enzim  papain  ataupun  probiotik,  masing-masing  berjalan  secara  sendiri-sendiri,  hal tersebut  diduga karena kandungan enzim pada masing-masing bahan yaitu enzim  papain ataupun enzim yang dihasilkan oleh bakteri probiotik mampu menghidrolisis senyawa kompleks dalam pakan, seperti protein menjadi asam  amino,  karbohidrat  menjadi  glukosa  dan  bahan  lainnya  dalam  pakan,  sehingga  pakan  yang  diberikan kepada  ikan mas  dapat  termanfaatkan  secara  efisien.  Menurut Halver (1972), semakin tinggi nilai efisiensi pakan  memberikan  gambaran  bahwa  kualitas  pakan  semakin  baik.    Kualitas  pakan  tersebut  tidak  hanya  terdiri dari protein saja, tetapi tersusun atas karbohidrat, lemak dan mikronutrien lainnya.
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa  penambahan  enzim  papain  dan  probiotik  pada  pakan  buatan dengan dosis yang berbeda berpengaruh nyata terhadap nilai protein efisiensi rasio serta terdapat interaksi antara enzim papain dan probiotik pada variabel protein efisiensi rasio.  Menurut Tacon (1987), protein  efisiensi  rasio (PER)    merupakan  perbandingan    antara    pertambahan    bobot    ikan    dan    bobot    protein    pakan    yang dikonsumsi.  PER berfungsi untuk mengetahui jumlah protein yang terserap dalam tubuh ikan.  Hasil penelitian menunjukkan  bahwa  nilai  protein  efisiensi  rasio  tertinggi  adalah  pada  perlakuan  A1B1  yaitu  sebesar 2,35+0,02%. Hasil penelitian ini diduga ikan  mas pada perlakuan  A1B1  mampu  memanfaatkan protein dalam pakan secara baik dan efisien .
Hasil penelitian ini juga menunjukkan bahwa semakin tinggi dosis enzim papain dan probiotik, semakin tinggi  pula  kandungan  protein  dalam  pakan  tersebut,  yaitu  pada  pakan  A2B2.    Hal    ini    diduga    penambahan enzim  papain  dan probiotik saling melengkapi satu sama lain dan memberikan pengaruh yang signifikan yaitu
meningkatkan kadar protein dalam pakan.  Menurut  Arief  (2013), menyatakan bahwa pemberian pakan dengan penambahan  probiotik  mampu  meningkatkan  kandungan  gizi  nilai  protein  dan  menurunkan  serat  kasar  pada pakan.  Namun pada perlakuan A2B2 menunjukkan nilai protein efisiensi rasio yang paling rendah yaitu sebesar 1,93+0,04%.  Hal tersebut sesuai dengan hasil dari penelitian Irawati et al . (2015), semakin tinggi jumlah enzim yang  digunakan  akan  mempengaruhi  banyaknya  protein  yang  dapat    dihidrolisis,    namun    enzim    yang berlebihan    akan  menyebabkan    proses  tersebut  menjadi    tidak    efisien,    yang  menyebabkan    nilai    protein efisiensi    rasio  menjadi    rendah.    Berdasarkan  data  yang  diperoleh,  diduga  bahwa  peningkatan  dosis  enzim papain  mampu  merusak  keseimbangan  atau  konfigurasi  protein  sehingga  menyebabkan  protein  efisiensi  pakan menurun.  Menurut Subandiyono dan Hastuti (2011), protein  yang berkualitas adalah protein  yang  mempunyai nilai kecernaan tinggi serta memiliki konfigurasi dan jumlah asam amino yang mirip dengan konfigurasi maupun jumlah asam amino yang terdapat pada spesies ikan yang diberi pakan.  Penelitian  ini menunjukkan hasil  PER yang    lebih    tinggi  dari  penelitian  Ananda et  al .  (2015)  pada    ikan    patin  ( Pangasius  hypopthalmus )    yaitu sebesar 1,68±0,04% dengan penambahan enzim papain dosis 2,25% yang dihidrolisis pada tepung kedelai.  Hal ini  diduga  karena  spesies  dan  umur  ikan  yang  digunakan  berbeda  dan  pakan  yang  digunakan  juga  berbeda sehingga kandungan nutrisinya juga berbeda.

## Pertumbuhan
Pertumbuhan yang diamati pada penelitian ini adalah laju pertumbuhan relatif (RGR).  Menurut Effendie (1997),  pertumbuhan  adalah  perubahan  ukuran  panjang,  bobot  dan  volume  selama  periode  waktu  tertentu. Berdasarkan  hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa  penambahan  enzim  papain  dan  probiotik  pada  pakan buatan  dengan  dosis  berbeda  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  laju  pertumbuhan  relatif  ikan  mas  ( C.  carpio ), artinya penambahan enzim papain dan probiotik dengan dosis yang berbeda memberikan hasil laju pertumbuhan relatif  yang  sama.    Nilai  laju  pertumbuhan  relatif  menunjukan  hasil  pada  tiap  pelakuan  yaitu  A1B1  sebesar 5,96+0,31,  A1B2  6,12+0,31,  A2B1  6,17+0,40  dan  A2B2  6,50+0,13%/hari.    Penelitian    ini  menunjukkan  hasil yang  lebih  tinggi dari penelitian Irawati et al . (2015) pada  ikan  nila  hitam ( Oreochromis niloticus Bleeker ) dengan bobot rerata 2,49±0,25 g/ekor yaitu sebesar 1,83±0,28%/hari dan penelitian Khodijah et al . (2015) pada ikan lele sangkuriang ( Clarias gariepinus ) dengan bobot rerata 1,38±0,24 g/ekor yaitu sebesar 4,85±0,50 %/hari dengan  penambahan  enzim  papain  dosis  2,25%  yang  dihidrolisis  pada  bahan  baku  pakan.    Nilai  RGR  tersebut juga lebih tinggi dibandingkan dengan penelitian Noviana et al . (2014) pada  ikan  nila  ( Oreochromis niloticus ) dengan  bobot    rerata  4,2+0,13  g/ekor  yaitu  sebesar  3.20±0.19%/hari  dengan  penambahan  probiotik  10  ml/kg pakan.  Hal  ini  diduga   karena  hewan  uji   yang  digunakan   memiliki  spesies  dan  ukuran   yang  berbeda. Tingkat  pertumbuhan  organisme  budidaya  tergantung  pada  spesies,  pakan  dan  lingkungan  serta  umur  ikan. Penelitian  ini  menggunakan  hewan  uji  ikan  mas ( C. carpio ) dengan bobot  rerata 2,88+0,51 g/ekor.  Menurut Effendie (1997), pertumbuhan ikan dipengaruhi oleh dua faktor, yaitu faktor internal yang meliputi sifat genetik dan kondisi fisiologis ikan, serta faktor eksternal yang berhubungan dengan pakan dan lingkungan.
Pertumbuhan    ikan    mas  ( C.  carpio )    terjadi    karena    adanya    pasokan    energi    yang    terdapat    dalam pakan    yang  dikonsumsi,    artinya  pakan    uji  tersebut  memiliki    kelebihan    energi    untuk  pemeliharaan    dan aktivitas  lainnya, sehingga kelebihan  energi  tersebut dapat dimanfaatkan  untuk pertumbuhan.  Menurut Lovell (1989),  bahwa  sebelum    terjadi  pertumbuhan,  kebutuhan  energi  untuk maintenance harus  terpenuhi  terlebih dahulu.  Pakan yang diberikan ke ikan hendaknya memiliki kandungan nutrisi yang lengkap, baik protein, lemak dan karbohidrat serta  mikronutrien  lainnya.  Menurut Subandiyono dan  Hastuti (2011), energi dari karbohidrat maupun lemak harus cukup, sehingga energi dari protein digunakan secara efisien untuk pertumbuhan.  Apabila pakan  kekurangan  energi  non  protein  (karbohidrat  dan  lemak),  maka  ikan  akan  menggunakan  sebagian  dari protein  untuk  mencukupi  kebutuhan  energinya  terlebih  dahulu  sebelum  protein  digunakan  untuk  pertumbuhan. Bilamana protein pakan tidak mencukupi maka ikan tidak akan tumbuh dengan baik.

## Kelulushidupan
Berdasarkan  hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa  penambahan  enzim  papain  dan  probiotik  pada pakan  buatan  dengan  dosis  yang  berbeda  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  nilai  kelulushidupan  ikan  mas ( C.carpio )  selama  penelitian.    Nilai  kelulushidupan  menunjukan  hasil  pada  tiap  pelakuan  yaitu  A1B1  sebesar 96,67+5,77, A1B2 100,00+0,00, A2B1 90,00+10,00 dan A2B2 96,67+5,77%.  Menurut Setiawati et al . (2013), kelulushidupan    merupakan    persentase  organisme    yang    hidup    pada    akhir  pemeliharaan    dari    jumlah organisme yang  ditebar  pada  saat  pemeliharaan dalam suatu wadah. Kelulushidupan pada penelitian ini tinggi, hal ini diduga ikan mas yang dipelihara mampu menyesuaikan diri dengan lingkungan karena berasal dari balai tempat penelitian tersebut sehingga kualitas airnya sudah cocok dengan kebutuhan ikan mas serta tercukupinya pakan untuk ikan mas tersebut.  Menurut Watanabe (1988), bahwa kelulushidupan dapat dipengaruhi oleh faktor biotik  dan  abiotik.  Faktor  biotik  seperti    kemampuan    ikan    dalam    menyesuaikan    diri    dengan    lingkungan. Faktor  abiotik  antara  lain  ketersediaan  pakan  dan  kualitas  media  hidup  yang  sesuai  dengan  kebutuhan  ikan. Selain  itu  nilai  kelulushidupan  yang  tinggi  diduga  disebabkan  karena  adanya  penambahan  probiotik  kedalam semua  pakan  uji.    Probiotik  tersebut  mengandung  bakteri  yang  mampu  meningkatkan  kesehatan  ikan,  hal
tersebut didukung oleh Ahmad (2005), bahwa penggunaan S. cerevisiae dapat berfungsi sebagai imunostimulan untuk  meningkatkan  kesehatan tubuh dengan cara  meningkatkan sistem pertahanan terhadap penyakit-penyakit tertentu, sedangkan menurut Widiyaningsih (2011), Lactobacillus casei selain mampu meningkatkan kecernaan pakan, L. casei membantu membatasi pertumbuhan bakteri patogen dalam usus

## Kualitas air
Kualitas  air  yang  diukur  selama  penelitian  yaitu  suhu  dan  DO  setiap  hari,  pH  seminggu  sekali  dan ammonia  pada  awal  dan  akhir  penelitian.    Berdasarkan  hasil  pengukuran  kualitas  air  yang  telah  dilakukan, didapat  nilai  kualitas  air  masih  dalam  kisaran  layak  untuk  kegiatan  budidaya  ikan  mas  ( C.  carpio )  dan  selalu dipertahankan untuk tetap layak (dapat dilihat pada Tabel 3).  Hasil penelitian tersebut diduga karena penerapan sistem  resirkulasi,  sehingga  kualitas  air  masih  dalam  kisaran  layak.    Menurut  Fauzzia et    al .  (2013),  sistem resirkulasi merupakan  sistem yang memanfaatkan kembali  air  yang sudah digunakan dengan cara memutar air secara  terus-menerus,  dimana  air  dialirkan  ke  dalam  filter  yang  nantinya  akan  dialirkan  kembali  ke  wadah pemeliharaan.    Pendapat  tersebut  didukung  oleh  Djokosetiyanto et    al .  (2006),  bahwa  sistem    resirkulasi merupakan    salah    satu    alternatif  model    budidaya    yang  memanfaatkan    air    secara    berulang    dan    berguna untuk  menjaga  kualitas  air.  Hasil pengukuran suhu selama penelitian yaitu berkisar antara 26–29°C.  Menurut Boyd  (1982),  keadaan    suhu    air  yang    optimal    untuk    pertumbuhan    ikan    mas  adalah    25-32 ○ C,  hal  tersebut diduga  karena  pemeliharaan  ikan  dilakukan  di indoor ,  sehingga  fluktuasi  suhu  tidak  terlalu  tinggi.    Menurut Fujaya (2004), suhu berpengaruh  terhadap  laju metabolisme dan kelangsungan hidup.  Peningkatan suhu 10 0 C menyebabkan peningkatan metabolisme 3-5 kali lipat.
Oksigen  terlarut  yang  diukur  selama  penelitian  berkisar  antara  5–7,8  mg/L.    Menurut  Swingle  (1963), kandungan    oksigen    terlarut    dalam    suatu  perairan    minimum    sebesar    2    mg/L,    sudah  cukup    mendukung terhadap    pertumbuhan  benih    ikan    mas    ( C.  carpio )  secara  normal.  Nilai  oksigen  terlarut  yang  cukup  tinggi tersebut diduga disebabkan karena suplai oksigen yang cukup besar yang berasal dari blower serta dari aerator, selain  itu  jumlah  ikan  juga  mempengaruhi  tinggi  rendahnya  oksigen  terlarut.    Semakin banyak  ikan,  semakin banyak  oksigen  yang  dibutuhkan  sehingga  oksigen  terlarut  rendah.    Meningkatnya  kebutuhan  oksigen  seiring dengan  peningkatan  padat  penebaran  dan  ukuran  ikan,  akibatnya  jumlah  kelarutan  oksigen  dalam  media pemeliharaan semakin berkurang karena oksigen dimanfaatkan ikan untuk respirasi dan juga untuk metabolisme. Menurut Stickney (1979), suplai oksigen di wadah produksi akuakultur sebaiknya berbanding lurus dengan padat penebaran ikan dan jumlah pakan yang dikonsumsi oleh ikan.  Menurut Goddard (1996), oksigen yang semakin berkurang dapat ditingkatkan dengan pergantian air dan aerasi.
Nilai  pH  yang  diperoleh  pada  saat  penelitian  yaitu  7–8.    Menurut  Boyd  (1982),  ikan    dapat    tumbuh dengan  baik  pada  kisaran   pH  antara  6,5-9,0.   Hasil pengukuran ammonia  yang didapatkan berkisar antara 0,13-0,61 mg/L.  Menurut Robinette (1976), ammonia dalam perairan untuk budidaya ikan tidak boleh >1 mg/L. Hal  ini  diduga  disebabkan  karena  penggunaan  metode at  satiation dalam  pemberian  pakannya,  sehingga  tidak banyak  pakan  yang  terbuang  ke  perairan.    Menurut  Widayat et  al .  (2010),  amonia  berasal  dari  sisa  feses, metabolisme, dan sisa pakan  yang  mengendap di dasar  kolam budidaya, sedangkan  menurut Djokosetiyanto et al . (2006) selain itu penyebab meningkatnya amonia diperairan yakni tidak berfungsinya filter dengan baik, serta pergantian  air  kolam  yang  tidak  rutin  yang  menyebabkan  terjadinya  penurunan  kualitas  air.  Kualitas  air  yang baik diduga juga disebabkan karena dilakukan penyiponan setiap dua hari sekali untuk membuang kotoran yang menyebabkan  kualitas  air  media  tetap  dalam  kisaran  layak  bahkan  optimal  untuk  mendukung  kehidupan  ikan mas. Ammonia  yang  berlebih  dapat menjadi  racun bagi  ikan  karena  dapat menyebabkan  iritasi pada insang, menghambat laju pertumbuhan, bahkan  dapat  mengakibatkan  kematian.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Kesimpulan yang dapat diambil dari penelitian ini adalah sebagai berikut:
1. Terdapat interaksi antara enzim papain dan probiotik pada variabel protein efisiensi rasio (PER), namun tidak  terdapat  interaksi  pada  variabel  laju  pertumbuhan  relatif  (RGR),  tingkat  konsumsi  pakan  (TKP), efisiensi pemanfaatan pakan (EPP) dan kelulushidupan (SR).
2. Dosis yang menghasilkan nilai protein efisiensi rasio tertinggi adalah pada perlakuan penambahan enzim papain 0,25 g dan probiotik 10 ml/kg pakan sebesar 2,35+0,02%.

## Saran
Enzim papain dosis 0,25 g dan probiotik 10 ml dalam pakan buatan dapat diterapkan pada budidaya ikan mas ( C. carpio) untuk meningkatkan nilai protein efisiensi rasio dari pakan tersebut.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  penulis  ucapkan  kepada  Bapak  Ir.  Nurdwi  Esto  selaku  Kepala  Balai  Benih  Ikan  (BBI) Mijen  yang  telah  memberikan  fasilitas  selama  penelitian,  serta  Bapak  Nur  dan  Bapak  Rojikin  yang  telah membantu selama penelitian di lapangan, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahmad, R.Z. 2005. Pemanfaatan Khamir Saccharomyces cerevisiae untuk Ternak.Wartazoa, 15(1):49-55. Ananda, T., D. Rachmawati dan I. Samidjan. 2015. Pengaruh Papain pada Pakan Buatan terhadap Pertumbuhan Ikan Patin ( Pangasius hypopthalmus ). Journal of Aquaculture Management and Technology, 4 (1): 47- 53.
Arief,  M.    2013.    Pemberian  Probiotik  yang  Berbeda  pada  Pakan  Komersil  terhadap  Pertumbuhan  Retensi Protein dan Serat Kasar pada Ikan Nila ( Oreochromis sp).  Argoveteriner., 1 (2): 88-98. Boyd,  C.E.  &  Lichtkoppler.  1982.  Water Quality Management  In  Pond  Fish Culture.  Auburn  University, Auburn Alabama, 30pp.
Brett,  J.R.  1971.  Satiation  Time,  Appetite  and  Maximum  Food  Intake  of  Socheye  Salmon  ( Onchorhyncus nerka ). J. Fish. Bd. Canada, 28: 409-415. Djokosetiyanto, D., A. Sunarma dan Widanarni. 2006. Perubahan Ammonia (NH 3 -N), Nitrit (NO 2 -N) Dan Nitrat (NO 3 -N) pada Media Pemeliharaan   Ikan  Nila  Merah  ( Oreochromis sp.)  di  dalam Sistem Resirkulasi. Jurnal Akuakultur Indonesia, 5(1): 13-20. Effendie MI. 2002. Biologi Perikanan. Yayasan Pustaka Nusatama, Yogyakarta,  188 hlm. Erfanto,  F.,  J.  Hutabarat  dan  E.  Arini.  2013.    Pengaruh  Substitusi  Silase  Ikan  Rucah  dengan  Persentase  yang
Berbeda pada Pakan Buatan Terhadap Efisiensi Pakan, Pertumbuhan dan Kelulushidupan Benih Ikan Mas  ( Cyprinus  carpio ).  Journal  of  Aquaculture  Management  and Technology, 2(2): 26-36.
[FAO]  Food  and  Agriculture  Organization  of  the  United  Nations.  2006.  Cultured  Aquatic  Species  Information Programme Cyprinus carpio (Linnaeus, 1758). Fisheries and Aquaculture Department. Fauzzia, M., I. Rahmawati dan I.N. Widiasa. 2013. Penyisihan Amoniak dan Kekeruhan pada Sistem Resirkulasi Budidaya Kepiting  dengan Teknologi Membran Biofilter.  Jurnal Teknologi Kimia dan Industri, 2 (2): 155-161.
Fujaya, Y. 2004. Fisiologi ikan. Rineka Cipta, Jakarta, 133 hlm. Fuller, R. 1992. History and development of probiotics. In Probiotics the scientific Basis. Chapman and Hall. Goddard S. 1996. Feed Management in Intensive Aquaculture. Chapman and Hall. New York. 194 p. Halver, J.E. 1972. The Vitamins. In: J.E. Halver (Ed). Fish Nutrition. Academic Press, New York, pp. 30-103. Irawati, D., D. Rachmawati dan Pinandoyo. 2015. Performa Pertumbuhan Benih Ikan Nila Hitam ( Oreochromis niloticus Bleeker)  melalui  Penambahan  Enzim  Papain  dalam  Pakan  Buatan.  Journal  of  Aquaculture Management and Technology, 4(1): 1-9.
Jabeen.  F.  and  A.  S.  Chaudhry.  2011.  Chemical  compositions  and  fatty  acid  profiles  of  three  freshwater  fish species. Food Chemistry, 125(3): 991–996.
Khasani, I. 2013. Atraktan pada Pakan Ikan: Jenis, Fungsi, dan Respons Ikan.   Media  Akuakultur,  8(2):  127- 133.
Khodijah,  D.,  D.  Rachmawati  dan  Pinandoyo.  2015.  Performa  Pertumbuhan  Benih  Ikan  Lele  Sangkuriang ( Clarias gariepinus ) Melalui Penambahan Enzim  Papain  dalam  Pakan  Buatan. Journal of Aquaculture Management and Technology, 4(2): 35-43.
Kusumadjaja,  A.P.  dan  R.P.  Dewi.  2005.  Penentuan  Kondisi  Optimum  Enzim  Papain  dari  Pepaya  Burung Varietas Jawa (Carica papaya). Indo.J.Chem., 5(2): 147 – 151. Lovell T. 1989. Nutrition ang Feeding of Fish. Van Nostrand Reinhold. New York. Murni. 2004. Pengaruh Penambahan Bakteri Probiotik Bacillus sp. dalam Pakan  Buatan terhadap Aktivitas Enzim  Pencernaan,  Efisiensi  Pakan,  dan  Pertumbuhan  Ikan  Gurami  ( Osphronemus  gouramy Lacepede ). [Tesis]. Program Pascasarjana. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Noviana, P., Subandiyono dan Pinandoyo. 2014. Pengaruh Pemberian Probiotik  dalam  Pakan  Buatan  Terhadap Tingkat Konsumsi Pakan dan Pertumbuhan   Benih  Ikan  Nila  ( Oreochromis  niloticus ).  Journal  of Aquaculture Management and Technology, 3(4): 183-190.
[NRC] National Research  Council. 1993. Nutrient Requirement of Fish. National  Academy Press, Washington D.C., 124p.
Putri, F.S., Z. Hasan dan K. Haetami. 2012. Pengaruh Pemberian Bakteri Probiotik pada Pelet yang Mengandung Kaliandra ( Calliandracalothyrsus ) terhadap  Pertumbuhan  Benih  Ikan  Nila  ( Oreochromis  niloticus ). Jurnal Perikanan dan Kelautan, 3(4): 283-291.
Rahmawan,  H.,  Subandiyono  dan  E.  Arini.  2014.  Pengaruh  Penambahan  Ekstrak  Pepaya  dan  Ekstrak  Nanas terhadap  Tingkat  Pemanfaatan  Protein  Pakan  dan  Pertumbuhan  Lobster  Air  Tawar  ( Cherax quadricarinatus ). Journal of Aquaculture Management and Technology, 3(4): 75-83.
Robinette,  H.R.  1976.  Effect  of  Sublethal  Level  of  Ammonia  on  The  Growth  of  Channel  Catfish  ( Ictalarus punctatus R .) Frog. Fish Culture, 38 (1) : 26-29.
Samsudin R, N Suhenda dan Kusdiarti. 2008. Penentuan Frekuensi Pemberian   Pakan  untuk  Pertumbuhan  dan Sintasan Benih Ikan Baung ( Mystus nemurus ). Teknologi Perikanan Budidaya 2008, 13-19. Pusat Riset Perikanan Budidaya, Jakarta.
Setiawati,  J.E.,  Tarsim,  Y.  T.  Adiputra  dan  S.  Hudaidah.  2013.  Pengaruh  Penambahan  Probiotik  pada  Pakan dengan  Dosis  Berbeda  terhadap  Pertumbuhan,  Kelulushidupan,  Efisiensi  Pakan  dan  Retensi  Protein Ikan  Patin  ( Pangasius  hypophthalamus ).  E-Jurnal  Rekayasa  dan  Teknologi  Budidaya  Perairan,  I  (2)  : 151-162.
[SNI]  Standar  Nasional  Indonesia.  1999.  Benih  Ikan  Mas  ( Cyprinus  carpio Linneaus)  Strain  Majalaya  Kelas Benih Sebar. Badan Standardisasi   Nasional, Jakarta, 5 hlm.
Stickney  RR.  1979.  Principal  of  Warmwater  Aquacultur.  John  Wiley  and  Sons.  Inc.  A  wiley-Interscience Publication. New York. USA. 375 p.
Subandiyono dan S. Hastuti. 2011. Buku Ajar Nutrisi  Ikan. Lembaga   Pengembangan    dan  Penjaminan    Mutu Pendidikan  Universitas Diponegoro, Semarang.  233 hlm.
Swingle, H.  S.  1986. Methods Of Analysis for Water Organic Matter and Pond  Bottom Soils.Used  in  Fisheries Research.  Auburn  University, Alabama.
Tacon. 1987. The   Nutrition   and   Feeding   of Farmed   Fish and Shrimp-A Traning Mannual. FAO of  The United Nations. Brazil. 108 pp.
Takeuchi,  T.    1988.    Laboratory  Work-Chemical  Evaluation  of  Dietary Nutrients.  In: Watanabe, T.  (Ed.).
Fish Nutrition  and Mariculture.  JICA, Tokyo University Fish. pp. 179-229.
Utomo, N. B. P., P. Hasanah dan I. Mokoginta. 2005. Pengaruh Cara Pemberian  Pakan  yang  Berbeda  terhadap Konversi  Pakan  dan  Pertumbuhan    Ikan  Mas  ( Cyprinus    carpio )  di  Keramba  Jaring    Apung.    Jurnal Akuakultur Indonesia, 4  (2): 49-52.
Watanabe, T. 1988. Fish Nutrition and Mariculture. JICA Texbook The General Aquaculture Course. Kanagawa International Fisheries Training Centre Japan International Coopertion Agency, 348 p.
Widayat, W., Suprihatin dan A. Herlambang. 2010. Penyisihan Amoniak dalam  Upaya  Meningkatkan  Kualitas Air  Baku  PDAM-IPA  Bojong  Renged  dengan  Proses  Biofiltrasi  Menggunakan  Media  Plastik  Tipe Sarang Tawon. JAI., 6(1): 64-76.
Widiyaningsih, E. N. 2011. Peran Probiotik untuk Kesehatan. Jurnal Kesehatan,  4(1):14-20.
Wiyanto, R dan Hartono, R. 2003. Lobster Air Tawar Pembenihan dan  Pembesaran.  Penebar  Swadaya.  Jakarta.
38 hlm.
Zonneveld, N., E.A. Huisman, dan J.H. Boon. 1991. Prinsip-Prinsip Budidaya Ikan. Gramedia Pustaka  Utama, Jakarta, 318 hlm.