## 30 VOLUME 12 NOMOR 1 JUNI 2016

## PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK DAUN KELOR ( MORINGA OLEIFERA LAM.)

## TERHADAP SEL KARDIOMIOSIT PADA TIKUS PUTIH ( RATTUS NOVERGICUS STRAIN WISTAR ) DENGAN DIET ATEROGENIK
Cindy  Alverina 1 ,  Desy  Andari 2 ,  Gita  Sekar  Prihanti 3
Fakultas  Kedokteran,  Universitas  Muhammadiyah  Malang,  Jl.  Bendungan  Sutami  188  A  Malang, 65145
Email  :  cindy2206.ca@gmail.com

## ABSTRAK
Hiperkolesterolemia  akan  menyebabkan  aterosklerosis  yang  menjadi  faktor  resiko  yang  kuat  terhadap  penyakit kardiovaskular yang ditandai dengan kerusakan kardiomiosit. Penyakit kardiovaskular menjadi salah satu penyebab kematian terbesar pada usia produktif. Ekstrak daun kelor ( Moringa oleifera lam .) dengan kandungan vitamin C dan beta karoten diduga mencegah  nekrosis  kardiomiosit  sehingga  menurunkan  resiko  penyakit  kardiovaskular.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui pengaruh ekstrak daun kelor ( Moringa oleifera Lam.) terhadap sel kardiomiosit jantung pada tikus putih ( Rattus novergicus strain wistar) dengan diet aterogenik. Penelitian ini menggunakan metode post test only control group design yang terbagi dalam 4 kelompok acak yaitu kelompok kontrol (diet aterogenik) dan 3 kelompok perlakuan (ekstrak daun kelor 200mg/ KgBB, 400mg/KgBB dan 600mg/KgBB). Setiap kelompok terdiri 5 hewan coba dengan perlakuan selama 35 hari. Setiap kelompok dibuat preparat histologi jantung (pewarnaan HE) dan diamati dibawah mikroskop(400x) dengan bimbingan ahli patologi anatomi. Hasil uji one-way ANOVA menunjukkan terdapat perbedaan antar kelompok tikus (p<0,05). Hasil uji post hoc menunjukkan dosis  600mg/KgBB yang  paling  signifikan dalam  mencegah nekrosis kardiomiosit.  Ekstrak daun kelor ( Moringa oleifera lam .) berpengaruh sebesar 78,5% terhadap jumlah nekrosis kardiomiosit, hal ini diduga disebabkan adanya kandungan  vitamin C,  beta  karoten, beta  sitosterol,  flavonoid  dan polyphenol .
Kata Kunci : Ekstrak daun kelor, Diet Aterogenik, Nekrosis Kardiomiosit.

## ABSTRACT
Hypercholesterolemia  cause  atherosclerosis  that  would  be  risk  factor  of  cardiovascular  disease  characterized  by  injured  of cardiomyocytes.  Cardiovascular  disease  one  of   the  bigger  mortality  cause  in  productive  age.  Moringa  leaf   extract  contains  vitamin  C  and beta  carotene  that  might  help  to  prevent cardiomyocytes necrosis  so  it  can  helps  to  decrease  cardiovascular  diseases  risk. This  experiment  to determine  the  effects  of  Moringa  leaf  extract  (Moringa  oleifera  lam.)  to  cardiomyocytes  in  white  rats  (Rattus  novergicus  strain  wistar)  with atherogenic  diet.  Using  post  test  onl y  control  group  design  rats  was  divided  into  4  groups  randomly  that  was  one  control  (atherogenic  diet) and  3  treatment  (moringa  leaf  extract  with  dose  200mg/kgBW,  400mg/kgBW  and  600mg/kgBW  respectively)  groups  which  consist  of 5 rats and treated for 35 days. Histology preparation (HE s taining) of each group was observed under a microscope (400x) with pathologist supervisor  guidance.  One  way  ANOVA  showed  there  were  a  significantly  difference  among  groups  (p<0,05).  Post  hoc  test  showed  that moringa  leaf  extract  in  600mg/KgBW  prevent  the  necrosis  of  cardiomyocytes  most.  Moringa  leaf  extract  had  an  effect  78,5%  to  amount of  cardiomyocyte  necrosis,  it  likely  caused  by  vitamin  C,  beta  caroten,  beta  cytosterol,  flavonoid  and  polyphenol  contents.
Keyword : Moringa  leaf  extract,  Atherogenic  diet,  Cardiomyocytes  necrosis.
PENGARUH PEMBERIAN  EKTRAK DAUN KELOR TERHADAP SEL KARDIOMOSIT 31

## PENDAHULUAN
Hiperkolesterolemia mengacu peningkatan kadar  lipid  dan  kolesterol  dalam  darah  yang menggambarkan  manifestasi  dari  gangguan metabolisme  lipoprotein.  Lipoprotein  yang  paling tinggi kadar kolesterolnya adalah low density lipoprotein (LDL)  yang  apabila  kadarnya  di  dalam  serum tinggi  menjadi  faktor  predisposisi  terbentuknya ateroma.  Hiperkolesterolemia  akan  menyebabkan aterosklerosis yang menjadi faktor resiko yang kuat terhadap penyakit kardiovaskular,  seperti : penyakit jantung  koroner,  gagal  jantung,  hipertensi,  infark miokard akut  dan stroke (Price & Wilson, 2013) . Penyakit kardiovaskular menjadi salah satu penyebab kematian terbesar pada usia produktif. Di Indonesia penyakit  kardivaskular  terutama  penyakit  jantung kororner  dan  stroke  menjadi  perhatian  karena kematian  akibat  kedua  penyakit  ini  diperkirakan akan  terus  meningkat  mencapai  23,3  juta  pada tahun  2030. (KEMENKES  RI.  2014) Kadar  kolesterol  LDL  yang  tinggi merupakan  penjejas  utama  endotel  dan kardiomiosit.  LDL  akan mengalami  oksidasi yang dipengaruh  oleh  protein  dan/atau  asam  lemak menghasilkan  LDL-oks. (Tomkin  GH,  &  Daphne O,  2012) Kemampuan  LDL-oks  dalam  memulai terjadinya aterosklerosis menunjukkan bahwa LDL- oks sangat mudah  menimbulkan terbentuknya sel busa. Pada penelitian sebelumnya didapatkan pada kelompok  dengan  diet  tinggi  lemakterjadi perubahan gambaran histologi jantung yang ditandai dengan  perubahan  struktur  kardiomiosit  tidak beraturan  yang  merupakan  tahap  awal  terjadinya nekrosis,  dan  hipertrofi  yang  ditandai  adanya penebalan  miosit [3,15] .Aisyah  S,  Balqis  U,  Friyan EK, 2014 Hal tersebut karena inaktivasi nitric oxyde (NO) sehingga menyebabkan remodelling ventrikel dan  terjadi  hipertrofi  akibat  mempertahankan perfusi  jaringan  akibat  beban  jantung  yang meningkat  karena  peningkatan  tekanan  darah. (Fantinelli  JC,  et  al.,  2012) Penanganan awal  terhadap risiko penyakit kardiovaskular telah berkontribusi  secara bertahap terhadap  kematian  akibat  penyakit  jantung  dan stroke.  Berbagai  pengobatan  dilakukan  untuk mengurangi  risiko  dan  kematian  akibat  penyakit kardiovaskular.  Terapi  dengan  obat  kimiawi  dan tradisional dapat dilakukan. Secara tradisional salah
satunya  dengan  menggunakan  ekstrak  daun  kelor ( Moringa  oleifera  Lam.). Pohon  kelor  dapat  tumbuh dengan baik di daerah beriklim panas sampai tropis seperti  di  Indonesia  .  Pohon  kelor  juga  toleran terhadap curah hujan. Pembudidayaan pohon kelor juga  mudah,  dapat  dilakukan  pada  skala  rumah tangga, skala kebun maupun skala hutan tergantung kebutuhan. Semua bagian pohon kelor mengandung zat  yang  bermanfaat,  tetapi  kandungan  terbanyak dapat  ditemukan  pada  daun  kelor. (Suwahyono  U, 2008) Daun  kelor  ( Moringa  oleifera  Lam.) mengandung  antioksidan  antara  lain  alkaloids, saponin,  fitosterols,  tannins,  fenolik,  polyphenol dan  flavonoid.  Kadar  Polyphenol  dan  flavonoid pada daun kelor diketahui lebih tinggi dibandingkan daun lain seperti daun labu silam dan daun pakis [19] . Daun  kelor  juga  memiliki  kandungan  vitamin  C 220mg/100g  daun.  Kandungan  vitamin  C  daun kelor ini hampir 4 kali lebih banyak daripada daun lainnya seperti daun kenikir yang memiliki kandungan vitamin  C  64,6mg/100g  daun  dan  daun  pepaya yang memiliki kandungan vitamin C 61,8mg/100mg daun [6,9] . Semua zat yang terkandung tersebut dapat mencegah  LDL-oks.  Berdasarkan  penelitian sebelumnya  diketahui  bahwa  ekstrak  daun  kelor ( Moringa  oleifera  Lam.) dengan  dosis  100mg/kgBB dan 200  mg/kgBB dapat menurunkan kadar LDL (kolesterol  jahat)  dan  meningkatkan  kadar  HDL (kolesterol  baik). (Rajanandh  MG,  et  al.,  2012) Berdasarkan fakta dan teori tersebut, maka dilakukan  penelitian  untuk  mengetahui  pengaruh pemberian  terapi    ekstrak  daun  kelor  ( Moringa oleifera Lam. ) terhadap sel kardiomiosit jantung pada tikus putih ( Rattus novergicus strain wistar) dengan diet aterogenik .

## METODE
Kolesterol plasma terutama lipoprotein yang aterogenik  yaitu  LDL  berperan  khusus  sebagai faktor  risiko  aterosklerosis.  Secara  patofisiologis aterosklerosis  disebabkan karena disfungsi endotel dan inflamasi. Prosesnya diawali dengan berubahnya LDL  menjadi  LDL-oks  akibat  teroksidasi  yang bersifat aterogenik. Dari sisi lain, kadar HDL yang tinggi dapat menurunkan risiko aterosklerosis karena menyebabkan  transpor  kolesterol  nalik  yang merupakan  mekanisme  protektif  dari  progresi aterosklerosis. (Adi PR, 2015)

## 32 VOLUME 12 NOMOR 1 JUNI 2016
Aterosklerosis  akan  memicu  peningkatan beban kerja jantung akibat mempertahankan perfusi jaringan.  Hal  ini  dikarenakan  aterosklerosis  yang menyebabkan  disfungsi  endotel  pembuluh  darah. Peningkatan beban jantung ini yang menyebabkan jantung  mengalami remodelling sebagai  proses kompensasi/adaptasi. (Kowalak  JP,  et  al.,  2014) Selain itu, LDL-oks yang memicu munculnya sitokin proinflamasi  kemudian  akan  menginduksi  INOS ( Inducible  Nitric  Oxyde  Synthase )  dalam  miosit. Peningkatan  jumlah  NO  pada  jantung  diketahui akan menyebabkan kerusakan miokardium. (Hussain SNA,  et.  al.,  1997) Jantung  pada  tikus  secara  makroskopis hampir  sama  dengan  manusia.  Bagian  luar  dapat dilihat  terdapat  apeks,  basis  dan  aurikula  pada kedua  sisinya.  Pada  potongan  longitudinal didapatkan pada  jantung tikus terdiri dari 4 ruang yaitu  2  atrium dan  2  ventrikel . (Treuting MP, et. al., 2012) Secara mikroskopis jantung tikus juga mirip dengan jantung manusia. Kardiomiosit pada jantung tikus terdiri sari serat-serat panjang, bercabang dan juga  terdapat  diskus  interkalatus.  Pada  sekitar  sel jantung  ada  selaput  halus  endomisium  yang  kaya akan  pembuluh  kapiler. (Velickov  A,et. al  2013) Berbagai penelitian tentang Moringa oleifera Lam pada  beberapa  tahun  terakhir  terutama  pada tikus.  Berdasarkan  hasil  penelitian in  vitro pada hewan  dan  manusia  membuktikan  bahwa  semua bagian  dari Moringa  oleifera  Lam memiliki  fungsi baik  secara  fisiologis  maupun  farmakologi. Penelitian sebelumnya yang dilakukan pada manusia mengindikasikan bahwa bubuk daun Moringa oleifera Lam yang  diberikan  secara  oral  diketahui  berguna sebagai  anti-hiperglikemia,  anti  dislipidemia, kemoprotektif,  dan  efek  antioksidan  tanpa menimbulkan  efek  samping. (Stohs  SJ,  &  Hartman MJ, 2015) Analisis  kualitatif  terhadap  ekstrak hidroalkoholik Moringa  oleifera  Lam membuktikan adanya  kandungan  â-sitosterol  sebanyak  0,09%. Kandungan â-sitosterol ini yang menurunkan kadar kolesterol  dengan  cara  menurunkan  konsentrasi LDL  dalam  plasma  dan  menghambat  reabsorbsi kolesterol  dari  sumber  endogen.    Ekstrak Moringa oleifera Lam juga diketahui mengandung antioksidan flavonoids dan polyphenols. Senyawa ini secara signifikan dapat  meningkatkan  SOD  dan  katalase  serta menurunkan kadar lipid peroksidase sehingga dapat menurunkan  kadar  kolesterol  terutama LDL. (Rajanandh  MG,  et.  al,  2012)
Superoksida adalah radikal bebas yang tidak stabil sehingga akan cepat mengalami dekomposisi membentuk  oksigen  dan  hidrogen  peroksidase. Tahapan reaksi jejas sel oleh radikal bebas adalah : 1. Inisiasi, permulaan terbentuknya radikal bebas; 2. Propagasi,  reaksi  yang berkembang  atas  timbulnya radikal  bebas  berupa  transfer  atom  atau penambahan atom; 3. Terminasi, pemusnahan atau inaktifasi radikal bebas baik oleh antioksidan endogen atau  eksogen,  maupun  enzim  superoksida dismutase. (Pringgoutomo S,  et. al,  2006) Tingginya  kadar  LDL  dalam  darah mengakibatkan  molekul  LDL  teroksidasi  dan terbentuknya  lipid  peroksida.  Lipid  peroksida merusak sel endotel pembuluh darah menyebabkan inflamasi  dan  menginisiasi  munculnya  sitokin proinflamasi seperti interleukin-1(IL-1). Dan TNF- á. Sitokin proinflamasi tersebut menginduksi Inducible Nitric  Oxide  Synthase (INOS)  dalam  miosit  dan endotel  vaskular  untuk  memproduksi Nitric  Oxide (NO). Pada penelitian sebelumnya diketahui bahwa jumlah NO yang diproduksi secara berlebih dalam jantung  dapat  menyebabkan  terjadinya  kerusakan miokardium. (Hussain  SNA,  et.  al,  1997) Hidroksil  radikal  merupakan  hasil  dari peroksidasi  lipid  dengan  oksigen  elektron  tunggal yang  berpotensi  memiliki  efek  menghancurkan termasuk  terhadap  sel  otot  jantung.  Jika  tubuh tidak mampu untuk mengkompensasi jumlah SOR yang  berlebihan  dapat  menyebabkan  kematian  sel. Kematian  sel  berupa  nekrosis  merupakan  pola kematian  sel  yang  utama.  Jaringan  nekrotik mengalami  perubahan  nuklear  berupa  basofilia kromatin  memudar  yang  disebabkan  aktifitas DNAase  (kariolisis),  melisutnya  inti  sel  dan peningkatan basofil (piknosis), serta karioreksis yaitu fragmen inti sel  yang piknotik . Untuk  mengendalikan  dan  mengurangi peroksidasi  lipid,  baik  manusia  dalam  aktivitasnya menggunakan antioksidan. Antioksidan alami antara lain vitamin E yang larut lipid dan vitamin C yang larut air. Antioksidan terbagi menjadi dua kelas : 1. Antioksidan preventif yang mengurangi laju inisiasi reaksi berantai; 2. Antioksidan pemutus rantai yang mengganggu  propagasi  reaksi  berantai  inisiasi, propagasi dan terminasi . (Botham KM & Mayes PA, 2012)
PENGARUH PEMBERIAN  EKTRAK DAUN KELOR TERHADAP SEL KARDIOMOSIT 33

## METODE  PENELITIAN
Penelitian  ini  merupakan  penelitian true experimental post test only control group design. Penelitian dilakukan  di  Laboratorium  Biomedik  Fakultas Kedokteran  Universitas  Muhammadiyah  Malang dalam  waktu  1  bulan  mulai  bulan  Maret-April 2017.  Populasi  dalam  penelitian  ini  adalah  tikus putih  ( Rattus  novergicus  strain  wistar ). Sampel  yang digunakan adalah tikus putih jantan ( Rattus norvegicus wistar )  umur  2  bulan,  berat  badan  150-200  gram dan  dalam  kondisi  sehat  yang  ditandai  dengan gerakan  aktif  serta  memiliki  mata  yang  jernih. Sampel dalam penelitian ini terdiri dari 4 kelompok. Sampel  diambil  secara purposive  sampling dari  populasi  tikus  putih  jantan  ( Rattus  norvegicus wistar )  sebagai  hewan  coba.  Pada  penelitian  ini  28 ekor tikus masuk bersamaan pada proses adaptasi. Setelah  proses  adaptasi  selesai,  28  ekor  tikus dikelompokkan  menjadi  4  kelompok,  yaitu  1 kelompok  kontrol  (+)  dan  3  kelompok  dengan perlakuan.  Dua  ekor  tikus  cadangan  dari  masing- masing kelompok yang telah melewati masa adaptasi tetap  diberi  perlakuan,  tapi  tidak  dibedah  di  akhir penelitian  apabila  tikus  tiap  kelompok  tidak  ada yang mati.
Alat  yang  digunakan  untuk  penelitian  ini adalah : kandang pemeliharaan, kandang perlakuan, tempat  makan  dan  minum,  alat  sonde  lambung, gloves, alat bedah, papan bedah, timer, wadah organ. Bahan yang digunakan dalam penelitian ini sebagai berikut  :  tikus  putih Rattus  novergicus  strain  wistar, daun  Kelor  ( Moringa  oleifera  Lam ),  pakan  standart, pakan  diet  aterogenik,  kloroform  ,  formalin  10%.
Pada  penelitian  ini  hari  1-7  dilakukan  proses adaptasi  terhadap  semua  hewan  coba.  Kemudian pada  hari  ke-8  hewan  coba  dibagi  menjadi  4 kelompok  yaitu  kelompok  Kontrol  positif, kelompok terapi ekstrak daun kelor 200 mg/kgBB ,  dosis  400  mg/kgBB,  dosis  600  mg/kgBB. Kelompok  kontrol  positif  diberi  pakan  standart, diet  aterogenik  dan  minum  aquades.  Kelompok yang  diberi terapi  ekstrak  daun kelor diberi pakan standart, diet  aterogenik secara oral  melalui  sonde lambung  dan  minum  aquades,  kemudian  diberi
jantung tikus. Jantung tikus dibuat sediaan histologi kemudian di amati dibawah mikroskop(400x) untuk dihitung  jumlah  sel  kardiomiosit  yang  nekrosis. Hasilnya dianalisis menggunakan One-way ANOVA , uji post hoc, dan uji regresi linier.
HASIL  PENELITIAN Pengamatan  preparat  untuk  menghitung jumlah  sel  nekrosis  pada  jantung  tikus  dilakukan dengan  menggunakan  mikroskop  cahaya  melalui pembesaran  400x  dengan  bantuan  supervisi  yang menunjukkan adanya perbedaan jumlah sel nekrosis antar  kelompok,  seperti  pada  gambar  1  dibawah ini.
Gambar  1.  Gambar  mikroskopis  otot  jantung dengan  pembesaran  400x.A=kelompok  kontrol positif  B=kelompok  perlakuan  1  (  dosis  ekstrak daun  kelor  200mg/kgBB)  C=kelompok  perlakuan 2  (dosis  ekstrak  daun  kelor  400mg/kgBB) D=kelompok  perlakuan  3  (dosis  ekstrak  daun kelor 600mg/kgBB). Tanda panah (à) menunjukkan sel nekrosis.
Hasil pengukuran jumlah sel nekrosis pada jantung tikus ditunjukkan hasil pada tabel 1 Tabel  1. Hasil Pengukuran  Jumlah Sel  Nekrosis
Semua  data  telah  dilakukan  uji  normalitas (Shapiro-Wilk)  dengan  p  =  0,250  dan  uji
Kelo mpok Jumlah sel nekrosis Rata- rata SD 1 2  3 4 5 K(+)  35 35 36 27  26 31,8 4,8 7 P1 20 26 24 23  25 23,6 2,3 0 P2 19 19 23 20  22 20,6 1,8 1 P3 17 15 16 11  17 15,2 2,4 8
ekstrak  daun  kelor  dengan  dosis  200  mg/kgBB, 400  mg/kgBB  dan  600  mg/kgBB  per  sonde  dua jam  setelah  pemberian  diet  aterogenik  selama  28 hari.  Kemudian  pada  hari  ke-36  setiap  tikus dianestesi  dengan  kloroform  per-inhalasi,  setelah itu dilakukan pembedahan untuk mengambil organ

## 34 VOLUME 12 NOMOR 1 JUNI 2016
homogenitas  (Levene)  dengan  p  =  0,007,  maka didapatkan  sebaran  data  normal  dan  varian  data berbeda.  Setelah  dilakukan  uji  normalitas  dan homogenitas kemudian dilanjutkan dengan uji One- way Anova . Hasil analisis One-way Anova menunjukkan bahwa  nilai  p=0,000  yang  berarti  terdapat perbedaan  jumlah  sel  nekrosis    yang  bermakna pada  tiap  kelompok  perlakuan.
Untuk  membuktikan  bahwa  masing- masing  data  tersebut  signifikan  dilakukan  dengan uji post  hoc  tamhane dikarenakan  hasil  uji lavene menunjukkan varian data berbeda. Berikut ini adalah hasil  dari  uji Post Hoc Tamhane. Tabel  2.  Hasil  Uji Post  Hoc  Tamhane
Berdasarkan tabel  analisis uji Post hoc diatas dapat  menjelaskan  bahwa  terdapat    perbedaan penurunan  jumlah  sel  nekrosis  yang  bermakna antara setiap  kelompok perlakuan kecuali kontrol (+)  dengan  P1,  dan  P1  dengan  P2.
Uji selanjutnya adalah uji regresi Linier dan hasilnya sebagai berikut:
Tabel  3.  Hasil  Uji  Regresi  Linier
Uji  regresi  linear  menunjukkan  adanya pengaruh  yang  signifikan  dari  pemberian  ekstrak daun  kelor  ( Moringa  oleifera  lam. )  terhadap  jumlah sel  nekrosis  pada  jantung  tikus  sebesar  78,5% (Adjusted  R 2 =0,785).  Bentuk  persamaan  yang menghubungkan  antara  dosis  daun  kelor  ( Moringa oleifera  lam. )  dengan  jumlah  sel  nekrosis  adalah sebagai  berikut  :
Y  =  A  +  B  (X) Y  =  30,720  -0,026(X) Keterangan:
Y= Jumlah  sel nekrosis A=  B  pada  konstanta B=  B  pada  dosis
Gambar 2. Pengaruh pemberian ekstrak daun kelor  terhadap  jumlah  nekrosis  kardiomiosit Berdasarkan grafik pada gambar 5.2 diatas tampak adanya pengaruh negatif antara pemberian ekstrak  daun  kelor  ( Moringa  oleifera  lam .)  terhadap nekrosis  sel  kardiomiosit.Hal  ini  dapat  diartikan bahwa  tanpa  mempertimbangkan  pengaruh  dari pemberian ekstrak daun kelor ( Moringa oleifera lam. ), maka rata-rata jumlah sel nekrosis pada kardiomiosit tikus  akan  cenderung  tetap  tinggi  secara  konstant 30,720  satuan  (karena koefisien  konstanta  bernilai positif).  Namun  apabila  mempertimbangkan pengaruh  dari  perlakuan  dosis  ekstrak  daun  kelor ( Moringa oleifera lam. ) akan menyebabkan perubahan jumlah sel nekrosis , dimana untuk setiap pemberian dosis  1  mg  akan menurunkan  jumlah sel  nekrosis tikus hingga 0,026 satuan.

## PEMBAHASAN
Minyak jelantah yang diberikan secara oral bersifat toksin karena mengandung peroksida yang tinggi  yang  merupakan  sumber  radikal  bebas. Apabila terpapar terus-menerus akan menyebabkan kerusakan  jaringan  pada  jantung [3] .  Hal  ini  sejalan dengan  penelitian  ini  yang  menunjukkan  bahwa berdasarkan  perhitungan jumlah kardiomiosit pada tiap  kelompok  tikus  terdapat  perbedaan  yang bermakna.  Hasil  uji  analisis One  Way  Anova pada penelitian ini  adalah  p<0,05,  hal  ini  menunjukkan bahwa  terdapat  perbedaan  yang  bermakna  antar kelompok.
Mekanisme terbentuknya sel nekrosis akibat minyak  jelantah  seperti  dijelaskan  pada  penelitian sebelumnya  bahwa  minyak  jelantah  mengandung radikal bebas dengan indikator peroksida (COO*). Radikal bebas ini berikatan dengan O 2 yang berada
K+ P1 P2 P3 + - 0,090 0,027* 0,003* 1 0,090 - 0,280 0,003* 2 0,027* 0,280 - 0,003* 3 0,003* 0,003* 0,031* -
R R 2
Adjusted R 2 Std. Error Durbin- Watson 0,892 a 0,796 0,785 3,14678 1,257
PENGARUH PEMBERIAN  EKTRAK DAUN KELOR TERHADAP SEL KARDIOMOSIT 35 di  dalam  tubuh  membentuk  peroksil  yang mengabsorbsi atm  hidrogen dari molekul lipid tak jenuh. Hal ini menyebabkan reaksi yang menghasilkan peroksida seperti peroksinitrit yang bersifat lipofilik yang menyebabkan peroksida lipid dalam membran dan  di  dalam  sel  ini  yang  terserang  adalah mitokondria.  Sehingga  mitokondria  melepaskan ribosa  dan  retikulum  endoplasmik    dan menyebabkan pemasokan energi untuk memelihara fungsi dan struktur retikulum endoplasmik terlambat dan  sintesis  protein  sangat  menurun  sehingga terjadilah kerusakan sel yang menyebabkan nekrosis. Terbukti pada penelitian ini sel otot jantung rusak yang  ditunjukkan  dengan  inti  sel  yang  mengkerut, gelap  dan bentuknya  tidak  jelas.
Pada  penelitian  sebelumnya  membuktikan bahwa daun kelor memiliki kandungan antioksidan diantaranya  vitamin  C, polyphenol, flavonoid  dan karoten. (Agustina, 2016) Menurut Sandhiutami (2014) vitamin  C  merupakan  antioksidan  alami  yang memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  paling  tinggi. Antioksidan  berfungsi  sebagai  inhibitor  untuk menghambat oksidasi dengan cara bereaksi dengan radikal bebas reaktif membentuk radikal bebas tak reaktif yang relatif stabil. Kandungan beta karoten pada ekstrak daun kelor juga melindungi membran lipid  dari  peroksidasi  dan  sekaligus  menghentikan reaksi rantai dari radikal bebas. Ekstrak daun kelor juga mengandung beta sitosterol yang menurunkan kadar kolesterol dengan cara menurunkan konsentrasi LDL  dalam  plasma  dan  menghambat  reabsorbsi kolesterol  dari  sumber  endogen.    Kandungan flavonoids dan polyphenols secara  signifikan  dapat meningkatkan SOD dan katalase serta menurunkan kadar lipid peroksidase sehingga dapat menurunkan kadar  kolesterol  terutama  LDL.
Antioksidan dapat bekerja sebagai pemberi atom  hidrogen  terhadap  radikal  bebas  dan mengubahnya  menjadi  bentuk  yang  stabil. Antioksidan  juga  dapat  memperlambat  laju autooksidasi sehingga kerusakan pada membran sel dapat  berkurang.  Salah  satu  mekanisme  jantung dalam mengurangi radikal bebas adalah mekanisme scavenging oleh antioksidan. Penangkapan radikal bebas O 2 — dan donasi hidrogen menghasilkan H 2 O 2 yang merupakan senyawa yang stabil. Senyawa H 2 O 2 ini berfungsi sebagai vasodilator sehingga menurunkan ritme  sistem  pembuluh  darah  sehingga  beban jantung  dapat  berkurang.  Hal  ini  sesuai  dengan penelitian  Natasya  (2013)  bahwa  kandungan antioksidan  dapat  menjadi  proteksi  seluler  bagi
jantung sehingga dapat menurunkan kerusakan pada sel  otot  jantung  salah  satunya  dapat  menurunkan nekrosis sel pada  otot jantung.
Pada uji post hoc tamhane sebagai kelanjutan dari  uji One  Way  Anova menunjukkan  p<0,05 sehingga  terbukti  bahwa  pemberian  ekstrak  daun kelor  mencegah  peningkatan  jumlah  sel  nekrosis pada otot jantung tikus putih. Perbedaan jumlah sel nekrosis signifikan dapat dilihat pada dosis 400mg/ KgBB dan 600mg/KgBB jika dibandingkan dengan K+  akan  didapatkan  nilai  p<0,05  yang  berarti kelompok  perlakan  tersebut  datanya  signifikan. Namun,  pada  dosis  200mg/KgBB  jika dibandingkan  dengan  kelompok  K+  didapatkan nilai p>0,05 yang berarti tidak signifikan. Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa ekstrak daun kelor pada  dosis  100mg/KgBB  dan  200mg/KgBB dengan  diet  aterogenik  sudah  dapat  menurunkan kadar  lipid  dalam  darah  yang  merupakan  pemicu terbentuknya  nekrosis  kardiomiosit.  Hal  ini  dapat dikarenakan pada penelitian tersebut efek pemberian ekstrak  daun  kelor  hanya  dilihat  dari  kadar  lipid dalam darah, sedangkan pada penelitian ini peneliti melihat  efeknya  pada  organ  jantung  yang  mana membutuhkan  dosis  yang  lebih  besar  dan  waktu yang  lebih  lama.
Hasil uji regresi linear menunjukkan adanya pengaruh  pemberian  ekstrak  daun  kelor  ( Moringa oleifera  lam. )  terhadap  jumlah  sel  nekrosis  pada jantung  tikus  sebesar  78,5%  (Adjusted R 2 =0,785).Sedangkan  pada  penelitian  tentang pemberian  ekstrak  daun  kelor  dengan  pelarut  air terhadap  kadar  LDL  dan  HDL  dengan  diet aterogenik  menunjukkan  pengaruh  menurunkan kadar  LDL  sebesar  35%  dan  meningkatkan  HDL sebesar  34,5%.  Hal  ini  disebabkan  karena  pada penelitian  ini  peneliti  menggunakan  ekstrak  daun kelor  dengan  pelarut  etanol  70%.  Pada  penelitian Saputra  (2013)  menunjukkan  bahwa  penggunaan etanol 70% berpengaruh lebih besar terhadap kadar antioksidan  yang  diperoleh.  Hal  tersebut  yang menyebabkan  pengaruh  pemberian  ekstrak  daun kelor  pada  penelitian  ini  menunjukkan  pengaruh yang lebih  besar.
Kelemahan dari penelitian ini adalah adanya beberapa faktor yang tidak diteliti tapi memberikan pengaruh. Salah satunya adalah faktor genetik  dari masing-masing tikus yang berbeda, sehingga hal ini dapat  menjadi  faktor  perancu  untuk  penelitian. Selain  itu  juga  terdapat  faktor  lainnya  seperti metabolisme dan sifat dari tiap tikus. Metabolisme

## 36 VOLUME 12 NOMOR 1 JUNI 2016
tikus  yang  berbeda  menyebabkan  responnya terhadap  pemberian  diet  juga  berbeda.  Masing- masing  tikus  juga  memiliki  sifat  berbeda  seperti keinginan makan dan agresifitas. Keinginan makan masing-masing  tikus  berbeda  hal  ini  juga dikarenakan pemberian pakan secara oral sehingga tidak dapat disamakan untuk semua tikus. Agresifitas tikus  juga  berbeda  meskipun  diet  aterogenik diberikan  lewat  sonde  tapi  ada  beberapa  tikus yang sulit dan stres berlebih setelah pemberian diet lewat sonde. Hal-hal tersebut dapat menjadi faktor perancu dalam penelitian ini.

## KESIMPULAN
Kesimpulan  dari  penelitian  ini  adalah  : Ekstrak  daun  kelor (Moringa  oleifera  lam.) dapat mencegah nekrosis kardiomiosit pada jantung tikus putih strain wistar ( Rattus norvegicus strain wistar ) diet aterogenik, ekstrak daun kelor ( Moringa oleifera lam .) mulai  memberikan  efek  mencegah  nekrosis kardiomiosit  pada  dosis  400mg/KgBB,  ekstrak daun kelor ( Moringa oleifera lam. ) berpengaruh sebesar 78,5%  terhadap  jumlah  nekrosis  sel  kardiomiosit.

## SARAN
Saran untuk penelitian selanjutnya adalah : perlu adanya  penelitian  lebih  lanjut  tentang  pengaruh pemberian ekstrak daun kelor ( Moringa oleifera lam. ) terhadap  organ  lain,  perlu  dilakukan  penelitian tentang  pemberian  ekstrak  daun  kelor  dengan metode ekstraksi berbeda, perlu dilakukan penelitian untuk mengetahui parameter antioksidan dari ekstrak daun  kelor  ( Moringa  oleifera  Lam ).

## DAFTAR  PUSTAKA
Adi  PR,  2015,  Pencegahan  dan  Penatalaksanaan Aterosklerosis,  Dalam  :  Setiati  S,  Alwi  I, Sudoyo  AW,  Simadibrata  M,  Setiyohadi  B, Syam  F,  Buku  Ajar  Ilmu  Penyakit  Dalam, 6th edn, Jilid II, Interna Publishing, Jakarta, pp.  1427-1437.
Agustina,  2016,  Aktivitas  Antioksidan  dan Organoleptik  Kombucha  Daun  Kelor dengan  Lama  Fermentasi  dan  Konsentrasi Daun  Kelor  yang  Berbeda,  Universitas Muhammadiyah  Surakarta,  Surakarta,  pp  1- 5.
Aisyah S, Balqis U, Friyan EK, 2014, Histopatologi Jantung Tikus Putih ( Rattus Norvegicus ) Akibat Pemberian  Minyak  Jelantah,  Jurnal  Medika Veterinaria,  Vol.  8,  No.  1,  pp.  87-90. Alvarez  MC,  Candiz  C,  Fantinelli  JC,  Garciarena CD, Console GM,Chiape De Cingolani GE, Mosca  SM,  2008, Is  Cardiac  Hypertrophy  in Spontaneously Hypertensive Rats the Cause or the Consequence  of  Oxidative  Stress ?,  National University  of   La  Plata,  Argentina,  31,  pp. 1465-1476.
Anggraeni N, 2009, Pengaruh Lama Paparan Asap Knalpot  dengan  Kadar  CO  1800  PPM terhadap  Gambaran  Histopatologi  Jantung pada  Tikus  Wistar,  JSC,  6,  pp.  3-11.
Boshra  V,  Tajul  AY,  2013, Papaya  -  An  Innovative Raw  Material  for  Food  and  Pharmaceutical Processing  Industry ,  Health  and  The Enviromental  Journal,  4,  Malaysia,  pp.  68- 75.
Botham KM & Mayes PA, 2012 Lipid yang Penting Secara  Fisiologis,  Dalam  :  Murray  RK, Granner DK, Rodwell VW. Biokimia Harper, 27  edn,  EGC,  pp.  128-138  &  239-240. Cotran Ramzi S, 2007, Jejas, Adaptasi, dan Kematian Sel,  In  :  Asroruddin  M,  Hartono  H, Darmaniah N, Buku Ajar Patologi, 7th edn, EGC,  Jakarta,  pp.  3-30. Cheng SH, Barakatun-Nisak MY, Joseph A, Ismail A, 2015, Potential Medicinal Benefits Of Cosmos Caudatus (Ulam Raja): A Scoping Review , Wolters Kluwer,  Malaysia,  20,  pp.  1000-1006. Daud  Razali,  2007,  Efek  Suplementasi  Vitamin  E Terhadap Perubahan Histopatologis Jantung Mencit yang Diberi Ransum Lemak Tinggi, J.Ked.Hewan,  1,  pp.  3-5.
Fantinelli  JC,  Caldiz  C,  Alvarez  CM,  Garciarena CD,  Cingolani  GDE,  Mosca  CM,  2012, Oxidative  Damage  in  Cardiac  Tissue  from Normotensive and Spontaneously Hypertensive Rats: Effect  of  Ageing ,  University  National  de  La Plata, Argentina,  pp. 141-157. Hussain  SNA,  Giaid  A,  El  Dawiri  Q,  Sakkal  D, Hattori  R,  Guo  Yang,  1997, Expression  of Nitric Oxide Synthases and GTP Cyclohydrolase I in  the  Ventilatory  an  Limb  Muscle  During Endotoxemia , American Journal of Respiatory Cell  and  Molecullar  Biology,  17,  pp.  173- 180.

## PENGARUH PEMBERIAN  EKTRAK DAUN KELOR TERHADAP SEL KARDIOMOSIT 37
Kowalak  JP,  Welsh  W,  Meyer  B,  2014,  Buku  Ajar Patofisiologi,  EGC,  Jakarta,  pp.  138-180. KEMENKES  RI.  2014,  Penanganan  Penyakit Jantung,  viewed  31  May  2015,  < HTTP :// WWW . DEPKES . GO . ID / ARTICLE / VIEW / 14112700011/ PENANGANAN - PENYAKIT -

## JANTUNG - HARUS - SESUAI - ILMU - KEDOKTERAN -

## TERKINI - DAN - MENGUTAMAKAN - KESELAMATAN -
PASIEN . HTML >. Natasya  SO,  Padaga  CM,  Wuragil  DK,  2013, Ekspresi Inducible Nitric Oxide Synthase (INOS) dan  Gambaran  Histopatologi  Jantung  pada Hewan  Model  Tikus  ( Rattus  norvegicus ) Hiperkolesterolemia yang Diberi Terapi Yogurt Susu Kambing, Fakultas Kedokteran Hewan Universitas  Brawijaya,  pp.  1-11. Price & Wilson, 2013, Patofisiologi : Konsep Klinis Proses-Proses  Penyakit,  6th  edn,  EGC, Jakarta,  pp.  581-588.
Pringgoutomo  S,  Himawan  S,  Tjarta  A,  2006, Buku  Ajar  Patologi  I  (Umum),  1st  edn, Sagung  Seto,  Jakarta.
Rahayu,  2007,  Studi  Frekuensi  Penggorengan  dari Minyak  Jelantah  Bermerek  dan  Tidak Bermerek Terhadap Nekrosis Sel Hati, FKIP, UMM,  Malang. Rahmat  H,  2009,  Identifikasi  Senyawa  Flavonoid Pada Sayuran Indigenous Jawa Barat, Fakultas Teknologi Pertanian IPB, Bogor. Rajanandh MG, Satishkumar MN, Elango K, Suresh
B, 2012, Moringa oleifera Lam. A Herbal Medicine for  Hyperlipidemia:  A  Pre-clinical  Report , Department  of   Pharmacology,  J.S.S University,  India,  pp.  790-795.
Romadhoni,  D.A.,  Murwani,  S.,  Oktavianie,  D.A, 2012,  Efek  Pemberian  Ekstrak  Air  Daun Kelor (Moringa oleifera lam.) Terhadap Kadar LDL  danHDL  Serum  Tikus  Putih  (Rattus norvegicus)  Strain  Wistar  Yang  Diberi  Diet Aterogenik,  Fakultas  Kedokteran  Hewan Universitas  Brawijaya,  Malang. Saputra I, Pribandini G, Zulaikah S, Rachimoelloh
M,  2013,  Ekstraksi  Senyawa  Bioaktiv  Dari Daun  Moringa  Oleifera,  Jurnal  Teknik POMITS,  Vol.  2,  No.  1.
Suwahyono  U,  2008,  Khasiat  Ajaib  Si  Pohon  Gaib, Yogyakarta, Lily Publisher. Sandhiutami NMD, Lestari R, Oktaviani T, Sari LY, 2014, Uji Aktivitas Antioksidan Rebusan Daun Sambang Getih  ( hemigraphis  bicolor boerl.)  Dan  Sambang
Solok  ( aerva  sanguinolenta (l.)  Blume)  Secara In Vitro , Universitas Pancasila, pp. 1-4. Stohs  SJ, &  Hartman MJ,  2015, Review of  the  Safety and Efficacy  of  Moringa  Oleifer, viewed  31  May  2015, <http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/ ptr.5325/full> Sumarno,  Puspita  T,  Wahyuningsih  R,  2007,  Peran Antioksidan  Pada  Ekstrak  Tepung  Daun  Kelor ( Moringa oleifera lam .) Terhadap Kadar MDA Hepar Pada  Tikus Rattus  Novergicus  Strain  Wistar yang Dipapar Asap Rokok Akut, Tomkin  GH,  &  Daphne  O,  2012, LDL  as  a  Cause  of Atherosclerosis , Beacon Hospital and Trinity College Dublin 2, Ireland Treuting MP, Ditnzis SM, Frevert CW, Liggitt D, Montine KS,  2012, Comparative  Anatomy  and  Histology  a Mouse  and  Human  Atlas ,  Department  of Comparative Medicine University of  Washington School of  Medicine Seattle, WA, USA, pp. 30-32. Velickov  A,  Jancic  N,  Dinidic  N,  Rancic  I,  Bojanic  N,
Krstic  M,  2013, Histological  and  Histochemical Characteristics  of  Rat  Myocardium  in  Cadmium Toxicosis , Acta Medica Medianae, 52(2), pp. 15-22.