METABOLIT SEKUNDER GORGONIA ( Paramuricea clavata )
(Secondary Metaboliti of Gorgonia, Paramuricea clavata)
Albert R. Reo 1 , S. Berhimpon 2 , Roike Montolalu 2
1 Study Program of Aquatic Science, Faculty of Fisheries and Marine Science, Sam Ratulangi University Manado. http://pasca.unsrat.ac.id/s2/ipa/
2 Faculty of Fisheries and Marine Science, Sam Ratulangi University Manado.

## Abstract
Gorgonians  are  important  organisms  living  around  coral  reefs.  They  have high abundance and very important ecological role. They can be found in shalow to  deep  sea.  Gorgonians  belong  to  octoral  taxon  rarely  studied  either  their taxonomy  or  other  aspects.  Some  studies  have  informed  that  gorgonians  can produce  secondary  metabolites  as  anti-bacteria.  These  belong  to  terpenoid, alkaloid, and steroid groups. The objective of this study was to obtain secondary metabolites of gorgonian, Paramuricea clavata , through several analytical steps, i.e. extraction, partition, chromatograpgy, and spectroscopy.  Extraction was done through  5  phases  of  maceration  and  then  continued  with  partition, chromatography, and spectroscopy.
The  secondary  metabolites  detected  in  ethyl  acetate  solvent,  such  as flavonoid, triterpenoid, steroid, and saponin, were the same as those in n-hexane solvent, while not all these compounds were detected in methanol solvent.Steroid was found in all gorgonian samples extracted in all solvent materials used in this study.  Triterpenoid  was  also  detected  in  gorgonian  skin  and  axial  extract  using ethyl  acetate,  n-hexane,  and  methanol.  Saponin  was  detected  in  all  gorgonian extract, except the axial extract using ethyl acetate solvent.
Keywords: Secondary metabolite, Gorgonia, anti-bacteria.

## Abstrak
Gorgonia  merupakan  organisme  penting  yang  hidup  di  sekitar  terumbu karang. Hewan ini memiliki kelimpahan besar dan peranan ekologis yang sangat ppenting. Organisme ini dapat ditemukan di perairan dangkal sampai laut dalam. Gorgonia  termasuk  taksa  octokoralia  yang  jarang  diteliti  baik  taksonominya maupun  aspek-aspek  lain.  Beberapa  penelitian  telah  menginformasikan  bahwa gorgonia  dapat  menghasilkan  metablit  sekunder  sebagai  anti-baketri.  Senyawa- senyawa ini termask golongan terpenoid,  alkaloid dan steroid. Tujuan penelitian ini  adalah  untuk  mendapatkan  metabolit  sekunder  gorgonia  ( Paramuricea clavata )  melalui  beberapa  tahap  analisis,  yaitu    ekstraksi,  partisi,  kromatografi, dan spektroskopi.  Ekstraksi dilakukan melalui 5 tahap maserasi dan dilanjutkan dengan partisi, kromatografi, dan spectroskopy.
Metabolit  sekunder  yang  terdeteksi  pada  larutan  ethil  asetat,  seperti flavonoid, triterpenoid, steroid dan saponin adalah sama dengan pada pelarut n- heksan,  sedangkan  tidak  semua  senyawa  ini  terdeteksi  pada  pelarut  metanol. Steroid  ditemukan  pada  semua  sampel  gorgonia  yang  diekstrak  dalam  semua bahan  pelarut  yang  digunakan  pada  penelitian  ini.  Triterpenoid  terdeteksi  pada ekstrak  kulit  dan  aksial    gorgonia  yang  menggunakan  pelarut  ethil  asetat,  n- hexane, dan methanol. Saponin terdeteksi pada semua ekstrak gorgonia, kecuali ekstrak axial yang menggunakan pelarut ethil asetat.

## PENDAHULUAN
Gorgonia  merupakan  organisme penting  yang  hidup  di  sekitar  terumbu karang.  Gorgonia  memiliki  kelimpahan dan  peranan  ekologis  yang  sangat penting,  gorgonia  dapat  dijumpai  pada perairan  dangkal  hingga  laut  dalam (McFadder et. al., 2006 dalam Rohkayati,  2009).  Gorgonia  merupakan anggota  taksa  oktoral  yang  jarang dipelajari  baik  taksonominya  maupun subjek lainnya.
Penelitian  ini  mempelajari  tentang metabolisme  sekunder  dari  spesies Gergonia  yang  dinamakan Paramuricea clavata .  Organisme  ini  menarik  karena diduga  memiliki  senjata  khusus  yang dapat melawan atau menyerang organisme  lain,  dalam  rangka  menjaga wilayah pertumbuhannya di sekitar terumbu  karang.  Ini  berarti  organisme lain tidak dapat bertumbuh atau mati jika mereka tinggal di satu tempat yang sama di  sekitar  terumbu  karang  yang  didiami Paramuricea  clavata .  Penjelasan  ini memberi kesan bahwa mungkin organisme Paramuricea  clavata mampu memproduksi  sebuah  zat  yang  dapat membunuh  organisme  lain  yang  tinggal pada tempat yang sama.
Metabolit sekunder adalah senyawa  metabolit  yang  tidak  esensial bagi pertumbuhan organism dan ditemukan  dalam  bentuk  yang  unit  atau berbeda-beda  antara  spesies  yang  satu dan  lainnya.  Setiap  organism  biasanya menghasilkan senyawa metabolit sekunder  yang  berbeda-beda,  bahkan mungkin  satu  jenis  senyawa  metabolit sekunder  hanya  ditemukan  pada  satu spesies  dalam  suatu  kingdom.  Senyawa ini  juga  tidak  selalu  dihasilkan,  tetapi haya  pada  saat  dibutuhkan  saja  atau pada fase-fase tertentu. Fungsi metabolit sekunder adalah untuk mempertahankan diri  dari  kondisi  lingkungan  yang  kurang menguntungkan, misalnya untuk
mengatasi  hama  dan  penyakit,  menarik pollinator,  dan  sebagai  molekul  sinyal.
Singkatnya, metabolit
sekunder digunakan  organism  untuk  berinteraksi dengna lingkungannya.
Senyawa metabolit sekunder diklasifikasikan  menjadi  3  kelompok utama, yaitu :
1.  Terpenoid,  sebagian  besar  senyawa terpenoid  mengandung  karbon  dan hydrogen serta disintesis melalui jalur metabolism asam
mevalonat.
Contohnya monoterpena, seskuiterepena,  diterpena,  tritepena dan polimer terpena.
2.  Senyawa yang mengandung nitrogen. Contohnya alkaloid dan glukosinolat.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Prosedur Penelitian
Penelitian ini mempelajari ekstraksi hasil  metabolisme  sekunder  yang  dapat dibagi  dalam  4  tahap  :  1.  Ekstraksi,  2. Partisi; 3. Kromatografi dan 4.
Spektroskopi.  Dalam  penelitian  ini  ada  5 tahap  proses  ekstraksi  dari  sampel Gergonia, ekstraksi pertama yaitu mempersiapkan sampel
beku
Paramuricea  clavata yang  dipotong dalam  ukuran  kecil.  Setelah  itu  ditaruh dalam  wadah  gelas  dan  dimasukkan methanol  dan  diaduk  setiap  waktu. Wadah  gelas  ditutupi  dengan  aluminium foil  untuk  melindungi  dari  cahaya  dan disimpan selama 12 jam.

## Tahap Ekstraksi
Ekstraksi  kedua  dilakukan  dengan menyaring  larutan  ekstraksi  pertama dengan  menggunakan  kertas  saring  dan dikeringkan. Dara pengeringan yang lain adalah dengan menggunakan alat rotary evaporator atau semacam mesin penyaring  berputar.  Prinsip  kerja  dari rotary evaporator adalah untuk menguapkan pelarut ekstraksi dan hanya meninggalkan  senyawa  hasil  diekstraksi disebut  ekstrak.  Selanjutnya  sampel tersebut dimasukkan dalam wadah gelas dan ditambahkan methanol untuk ekstraksi selanjutnya.
Ekstraksi  ketiga  adalah  untuk menyaring larutan methanol dan Gorgonia  setelah  12  jam  dan  masukkan senyawa  ke  rotary  evaporator.  Warna dari  senyawa  pada  ekstraksi  ketiga
menjadi  lebih  warna  coklat  terang, dibanding ekstrak pertama dan kedua.
Ekstraksi  keempat  masih  gunakan metanol  untuk  mengektraksi  Gorgonia. Setelah itu disimpan lagi selama 12 jam, kemudian disaring dan keringkan dengan rotary evaporator.
Ekstraksi kelima merupakan ekstraksi  terakhir  dan  pada  ekstraksi  ini digunakan  kloroform.  Ekstrak  disimpan selama  2  hari  dan  setelah  2  hari
ekstraksi tersebut disaring dengan kertas saring,  dan  warna  dari  senyawa  juga coklat  terang  dan  langsung  dikeringkan dengan rotary evaporator. Proses pengeringan dengan menggunakan kloroform kelihatannya lebih cepat dibandingkan dengan menggunakan methanol  karena  proses  penguapan kloroform  lebih  cepat  dibanding  dengan metanol.

## Tahap Ekstraksi

## Ekstraksi I
(Sampel Gogonia + Metanol)
Ekstraksi II
(Menyaring larutan ekstraksi pertama)
Ekstraksi III
(Menyaring larutan methanol dan Gorgonia)
Ekstraksi IV
(Metanol untuk ekstraksi Gorgonia)

## Ekstraksi V
(menggunakan kloroform)
Gambar 1. Skema Tahap-Tahap Ekstraksi Tahap Partisi Tahap selanjutnya dari metabolisme sekunder adalah partitioning .  Dalam  tahap  ini  sampel dicampur dengan air destilasi sebanyak
300 ml dan etil asetat sebanyak 300 ml, kemudian dikocok. Setelah itu
dimasukkan  ke  dalam  corong  pemisah dan  ditunggu  dan  seterusnya  disekap diantara  destilasi  air  300  ml  dicampur dengan  etil  asetat  300  ml  dan  dikocok dan  dimasukkan  ke  dalam  corong pemisah  dan  ditunggu  selama  5 –  10 menit. Setelah terjadi pemisahan, katup
pengeluaran dibuka untuk mengeluarkan  air  yang  ada  pada bagian bawah corong pemisah, kemudian  sisanya  dimasukkan  ke dalam  erlenmeyer.  Selanjutnya  etil asetat  diletakkan  di  tempat  terpisah pada  tabung  yang  lain.  Tahap  partisi kedua  dilanjutkan  dengan  cara  seperti di  atas  sampai  enam  kali  dengan  200 ml  H 2 O  ditambah  300  ml  etil  asetat setelah  itu  etil  asetat  dicampur  dan dikeringkan  dengan  rotary  evaporator. Prosedur yang sama mengikuti partitioning air dengan butanol.

## Tahap Kromatografi
Proses selanjutnya adalah kormatografi.  Penelitian  selanjutnya akan  digunakan  kromatografi  kolom, untuk  prosedur  kromatografi  kolom adalah sebagai berikut. Sebelum mulai prosedur kromatografi semua peralatan disiapkan, kemudian kertas kromatografi dipotong-potong dan berikan nomor. Gelas tabung kemudian dibersihkan  untuk  kromatografi  dan selanjut disiapkan tabung reaksi sebanyak  75.  Prosedur  kromatografi kolom dapat dibagi dalam tahap berikut ini :
-  Sampel larutan senyawa dikeringkan dengan rotary evaporator dan pompa silica.
-  Gelas  tabung  kromatografi  diisi dengan  silica  gel  dan  tambahkan  N Heksana.
-  Larutan  senyawa  sampel  dilatakkan di  puncak  dari  kolom  dan  mulai titrasi.  Koleksi  dibuat  setiap  75  ml dengan perubahan eluen didasarkan pada kenaikan pelarut sesuai peningkatan muatan kutub.
-  Setelah  itu  sampel  dikeringkan dengan  rotary  evaporator  dan  diberi tanda  pada  kromatografi  kertas  dan sampel  yang  sisa  ditaruh  di  tabung reaksi berdasarkan nomor urut.
-  Di dalam kromatografi kertas penandaan  didasarkan  pada  nomor urut  dan  setelah  nomor  1 –  5 langsung  pada  kromatografi  TLC (Thin Layer kromatografi).
-  Di  dalam  wadah  TLC  ditaruh  N Heksana  dan  etil  asetat  dan  lihat pergerakan larutan.
-  Setelah itu keringkan larutan dengan alat  pengering  dan  celupkan  di dalam larutan contoh (larutan Pancaldi) dapat membantu perubahan  zat  kimia  dan  keringkan lagi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  literatur  review  Teffu, dkk. (2015)  Skrining  fitokimia  dilakukan untuk  memberikan  gambaran  awal
mengenai kandungan gologan senyawa metabolit sekunder yang terdapat dalam simplisia maupun ekstrak. Kendungan metabolit sekunder simplisia  dan  ekstrak  akar  bahar disajikan pada tabel 1. Tabel 1. Hasil uji fitokimia simplisia  dan ektrak kasar gabungan sampel Gorgonia Kompo nen Bioaktif Simpli sia Gorgo nia Jenis ekstrak Kulit Aksial K uli t Aks ial Meta nol Etil As eta n- He k- sa na Meta nol Etil ase tat n- He k- sa na Alkaloid - Mayer  - - + - - + - + - Dragre ndorff - - + - - + - + - Wagner - - + - - + - + Flavono id +  + - +  + - +  + Fenol hidrokui non - - + - + + - +
Steroid  +  + + +  + + +  + Triterpe noid - - - +  + + +  + Tanin +  - - - - - - - Saponi n +  + + +  + + - + Komponen  metabolit  sekunder yang  terdeteksi  pada  palarut  etil  asetat seperti  flavanoid,  triterpenoid,  steroid,
dan saponin
kecenderungan terdeteksinya  sama  pada  pelarut  n- heksana dibandingkan pelarut metanol.
Hasil  penelitian  ini  berbeda  dengan Chen et.  al .  (2003)  yang  melaporkan metabolit  sekunder  hasil  ekstraksi menggunakan  etil  asetat  dari  karang lunak Sinularia arborea berupa diterpenoid dan steroid. Metabolit sekunder  yang  terdeteksi  pada  ekstrak n-heksana pada kulit maupun Gorgonia tergolong dalam senyawa yang bersifat
non  polar  sama  seperti  sifat  pelarut yang  digunakan.  N-heksana  adalah hidrokarbon  alkana  rantai  lurus  yang memiliki  6  atom  karbon  dengna  rumus molekul  C 6 H 14 .  Isomer  heksana  tidak reaktif  dan  digunakan  secara  luas sebagai  pelaurt  inert  dalam  reaksi organik karena heksana bersifat sangat tidak  polar.  Heksana  digunakan  di laboratorium untuk mengekstrak minyak dan lemak (Aziz et. al ., 2009. Metabolit sekunder flavonoid yang  terdeteksi  diduga  berasal  dari warna koloni pada akar bahar.
Manuputty  (2008)  menyatakan  warna koloni  dipengaruhi  oleh  kandungan pigmen dari alga uniseluler zooxanthela yang  hidup  bersimbiosis  di  dalam jaringan koenensimnya.
Metabolit sekunder fenol hidrokuinon  terdeteksi  pada  ekstrak akar  bahar  menggunakan  pelarut  n- heksana dan pelaurt methanol Metabolit sekunder steroid terdeteksi di semua bahan baik
simplisia  maupun  ekstrak  akar  bahar pada berbagai pelarut.
Triterpenoid terdeteksi pada
ekstrak  etil  asetat,  n-heksana  dan methanol  pada  kulit  dan  aksial  ekstrak Gorgonia.
Saponin  terdeteksi  pada  semua ekstrak akar bahar baik di luar maupun pada  aksialnya  kecuali  ekstrak  aksial menggunakan pelarut etil asetat, hal ini menunjukkan secara
keseluruhan ekstrak  mengandung  saponin.  Van Dyck et. al . (2010) melaporkan kandungan  saponin  banyak  terdapat pada  teripang  laut  yang  diekstraksi menggunakan pelarut etanol-air.
Hasil  literatur  review  Teffu, dkk.
(2015),  ekstraksi  dalam  penelitian  ini menggunakan metode
maserasi.
Ekstraksi  dilakukan  secara  bertingkat menggunakan  pelarut  yang  memiliki tingkat kepolaran yang berbeda yaitu n- heksana (nonpolar), etil asetat
(semipolar)  dan methanol  (polar).  Hasil ekstraksi  pada  tabel  2  menunjukkan ekstraksi dengan menggunakan pelarut yang  berbeda  menghasilkan  rendemen yang berbeda juga. Rendemen
terbanyak diperoleh dari ekstrak methanol, n-heksana dan etil asetat. Tabel 2. Rendemen  ekstrak  gabungan sampel Gorgonia Jenis Pelarut Rendemen (%) Kulit Gorgonia Aksial Gorgonia n-Heksana 0,58 0,57 Etil asetat 0,15 0,74 Metanol 6,99 3,44

## KESIMPULAN
1.  Tahap penelitian metabolism sekunder  dan  dari  Gorgonia  yaitu sebagai  berikut  :  Ekstraksi,  Partisi, Kromatografi dan Spektroskopi. 2.  Senyawa metabolisme sekunder yang terdeteksi adalah : Triterpenoid, Steroid, Flavonoid, Sapononin. 3.  Komponen  metabolit  sekunder  yang terdeteksi  pada  palarut  etil  asetat seperti flavanoid, triterpenoid, steroid, dan saponin kecenderungan terdeteksinya  sama  pada  pelarut  n- heksana dibandingkan pelarut metanol.
4.  Metabolit sekunder steroid terdeteksi di  semua  bahan  baik  simplisia maupun  ekstrak  akar  bahar  pada berbagai pelarut.
5.  Triterpenoid  terdeteksi  pada  ekstrak etil  asetat,  n-heksana  dan  methanol pada kulit dan aksial ekstrak Gorgonia.
6.  Saponin  terdeteksi  pada  semua ekstrak  akar  bahar  baik  di  luar maupun  pada  aksialnya  kecuali ekstrak  aksial  menggunakan  pelarut etil asetat.

## DAFTAR PUSTAKA
Adnan,  O.  A.,  A.  D.  Akinpelu,  O.  A. Ogundaini  and  A.  C.  Obafemi. 2007.  Studies  on  Antimicrobial, Antioxidant  and  Phytochemical Analysis  of Urena  labata Leaves. J. Phy. And Nat. Sci. 1 (2): 1-9.
Antonius,  A.  2000.  Threats  to  and Protection of Coral Reefs. University of Vienna, Germany.
Aziz  T,  Ratih  CKN,  Fresca  A.  2009.
Pengaruh  Pelarut  Heksana  dan Etanol,  Volume  Pelarut,  dan
Waktu  Ekstraksi  Terhadap  Hasil Ekstraksi  Minyak  Kopi.  Jurnal Teknik Kimia 1 (16):1-8). Baker  T.  A.,  Wood  J.  B.  Marine Invertebrates of Bermuda. Common  Sea  Fan  ( Gorgonia ventalina ).
Chen  KH,  Dai  CF,  Lu  MC,  Li  JJ,  Chen JJ, Chang YC, Su YD, Wang WH, and  Sung  PJ.  2013.  Secondary Metabolites  from  the  Soft  Coral Sinularia  arborea.  Marine  Drugs
(11):3372-3380.
Cheng  SY,  Huang  KJ,  Wang  SK,  Duh
CY,. 2011. Cappilloquinol: a novel farnesly  quinol  from  the  dongsha atoll soft coral Sinularia capillosa. Marine Drugs (9):1469-1476. doi:10.3390/md9091469. Fabricius  Katherina  and  Alder  Slade Philip, 2001. Soft Corals and Sea
Fans.  New  Citho,  Survey  Hills
Melbourne, Australia.
Fabricius,  K.  and  P.  Alderslade.  2001. Soft  Corals  and  Sea  Fans. Australian  Institute  of  Marine Science  and  The  Museum  and Art  Gallery  of  Northern  Territory,
Australia. Gao CH, Wang YF, Li S, Qian PY, and Qi  SH.  2011.  Alkaloids  and Sesquiterpenes  from  the  South China Sea Gorgonian Echinogorgia pseudossapo. Marine Drugs (9):2479-2487. Gerhart,  D.J.  1983.  The  Chemical Systematics  of  Colonial  Marine Animals: An Estimated Phylogeny of The Order Gorgonaceae Based  on  Terpenoid  Characters. Biol. Bull. 164: 71-81. Grajales,  A.,  C.  Aguilar  and  J.  A. Sanchez. 2007. Phylogenetic Reconstruction  Using  Secondary Structures of Internal Transcribed Spacer  2  (ITS2,  rDNA):  finding the  molecular  and  morphological
gap in Caribean gorgonian corals. BMC Evolutionary Biology. 7 (90):
1-9. Gutierrez, M., T. L. Capson, He’ctor M. Guzma’n, J. Gonza’lez, R. Ortega- Barri’a,  E.  Quin’oa’,  and R.  Riguera.  2006.  Antiplasmodial Metabolites  Isolated  from  the Marine Octocoral Muricea austere. J. Nat. Prod. 4:A-E. Hein Morris, Best Leo R., Pattison Scott and  Arena  Susan.  1993.  Organic and Biochemistry  Wadsworth. Belmont, California.
Ikan,  Raphael.  1991.  Natural  Products A.  Laboratory  Guide.  Acedemi Press. Inc. San Diego, California. Kelman, D., U. Kashman, E. Rosenberg,  A.  Kushmaro  and  Y. Lova.  2006.  Antimicrobial  Activity of  Red  Sea  Corals.  Mar.  Biol.
149:357-363.
Lehniger,  N.  C.  1993.  Prinsiples  of
Biochemestry. Publ. Inc. USA.
Loomis,  T.A.  1978.  Toksikologi  Dasar.
Diterjemahkan  oleh  Imono  A.  D, Edisi III, 3, 228-233, IKIP Semarang-Press, Semarang. Manuputty  AEW.  2008.  Isis  Hippuris Lannaeus 1758: Oktokoral Penghasil  Anti  Virus.  Oseana 33(1):19-24. McFadden, C.S., Scott C. France, Juan A.  Sanchez  and  Phil  Alderslade. 2006.  A  Molecular  Phylogenetic Analysis of the Octorallia (Cnidaria:  Anthozoa)  Based  on Mitochondrial protein-coding sequences. Mol  Phylo  and  Evo . 41: 513-527.
Meyer,  B.N.,  Feringgi,  N.R.,  Putman. 1982. Brine Shrimp: Aconventient General for Active Plant Constituent,  Planta  medica,  45, 31-34. Dalam Dwitmaka, Y, 2001. Identitas Simpleks dan Uji Toksisitas  Akut  Secara  BST Ekstrak kulit batang Pule Alstonia Scholaris  (L)  R.  Br.  Program Pascasarjana UGM. Program
Studi  Ilmu  Framasi,  Jurusan  Ilmu Matematika  dan  Pengetahuan
Alam.
P. Dc. Leenheer, Lambert, Willy E. and Nelis  Hans  J.  1992.3  Modern Chromatography Analysis of Vitamins. Marcell Deckher Inc. P. Dc. Leenheer, W. C. Lambert and I. J. Nelis. 1992. Modern Chromatography  :  Analysis  of Vitamins. Marcell Deckher Inc. Purwoko, A.1998. Uji Toksisitas Ekstrak
Kloroform  dan  Ekstrak  Methanol Beberapa  Jamu  Pengatur  Haid Dengan  BST.  Fakultas  Farmasi
UGM. Yogyakarta. Rohkayati,  E.  2009.  Analisis  Senyawa Antibakteri  Pada  Beberapa  Jenis Karang Gorgonian dan Identifikasi  Berdasarkan  Karakter Spikula. Skripsi FMIPA. Universitas Sebelas Maret. Surakarta. Siswandono, Soekardjo, B. 1995. Kimia Medisinal.  Penerbit  Universitas Airlangga Press. Surabaya. : 351-
354 hlm.
Sun  ZH,  Cal  YH,  Fan  CQ,  Tang  GH, Luo HB and Yin S. 2014. Six New
Tetraprenylated  Alkaloids  from the  South  China  Sea Gorgonian Echinogorgia pseudossapo. Marine Drugs (12) 672-681.
Tanaka,  J.  Trianto,  A.  Musman,  M.
Hamad,  H,  Isa.  Ikuko,  I,  O.  T, Ichiba.  Tatsuo,  H.  Wesley,  Y,  Y. and  Paul  J,  S.  2002.  New Polyoxygenated Steroids Exhibiting  Reversal  of  Multidrug Reistance  from  the  Gorgonian Isis hippuris . University of Ryukus. Japan. Teffu,  Y.H.,  Suwandi,  R.,  Nurjanah. 2015.  Komponen  Kimia  dan Bioaktif  Akar  Bahar  Gorgonian (Genus Rumphella dan Hicksonella)  dari  Pulau  Raijua- Nusa  Tenggaran  Timur.  Jurnal IPHPI,  Volume  18  Nomor  1.  IPB Bogor. Trianto, A., Yan Yan HAS, Ambraiyanto,  Murwani,  R.  2004. Uji  Toksisitas  Ekstrak  Gorgonian Isis  hippuris Terhadap  Nauplius Artemia Salina . Jurnal Ilmu Kelautan. Volume 9 (2) : 61 – 66. ISSN 0853-7291.
Zhao HY, Shao CL, Li ZY, Han L, Cao,
F  and  Wang  CY.  2013.  Bioactive pregnane  steroids  from  a  south china  sea  gorgonian  Carijoa  sp. Molecule (18):3458-3466.