## ANALISIS ZAT PEWARNA RHODAMIN B PADA KERUPUK YANG BEREDAR DI KOTA MANADO

## Sherly Dawile, Fatimawali, Frenly Wehantouw
Program Studi Farmasi FMIPA Universitas Sam Ratulangi

## ABSTRACT
Rhodamine B dye in the form of a crystalline powder green or reddish purple, odorless, and dissolves  easily  in  bright  red  solution  berfluoresan  as  textile  dyes.  Rhodamine  B  is  still  no food products were found to contain rhodamine B dye such as crackers, sauces, ice and other pastries. The purpose of this study is to investigate and determine the levels of rhodamine B on crackers circulating in the city of Manado. Sampling sites crackers are 4 market in the city of  Manado  is  Tuminting  Market,  Market  Paal  2,  Market  Market  Bersehati  45  and  45. Samples  with  ammonia  to  soak  interesting  rhodamine  B  dye  using  wool  yarn,  followed  by identification using thin layer chromatography (TLC) and then in detection with UV light 254 nm  and  366  nm.  The  reading  levels  of  rhodamine  B  using  UV-Vis  spectrophotometry.  The results  showed  that  of  the  ten  samples  tested  with  three  times  obtained  one  positive  sample containing rhodamine B with an average concentration value of rhodamine B in a sample of 45 markets in the sword of 0.28 mg/ml. Based on these results, some crackers circulating in Manado City Market unsafe consumed.
Keywords: Rhodamine B, Crackers, spectrophotometry and Thin Layer Chromatography

## ABSTRAK
Rhodamin  B  merupakan  zat  pewarna  berupa  serbuk  kristal  berwarna  hijau  atau  ungu kemerahan,  tidak  berbau,  serta  mudah  larut  dalam  larutan  warna  merah  terang  berfluoresan sebagai  bahan  pewarna  tekstil.  Rhodamin  B  saat  ini  masih  ada  produk  makanan  yang ditemukan mengandung  rhodamin B sebagai pewarna seperti kerupuk, saus, es dan kue-kue lainnya.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  dan  menentukan  kadar  rhodamin  B pada  kerupuk  yang  beredar  di  Kota  Manado.  Lokasi  pengambilan  sampel  kerupuk  adalah  4 pasar di Kota Manado yaitu Pasar Tuminting, Pasar Paal 2, Pasar 45 dan Pasar Bersehati 45. Sampel  di  rendam  dengan  ammonia  untuk  menarik  zat  pewarna  rhodamin  B  menggunakan benang  wol,  dilanjutkan  dengan  identifikasi  menggunakan  kromatografi  lapis  tipis  (KLT) kemudian  di  deteksi  dengan  sinar  UV  254  nm  dan  366  nm.  Pembacaan  kadar  rhodamin  B menggunakan  spektrofotometri  UV-Vis.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  dari  sepuluh sampel  yang  diperiksa  dengan  tiga  kali  penggujian  didapat  satu  sampel  positif  mengandung rhodamin B dengan kadar nilai rata-rata rhodamin B pada sampel dari pasar 45 pada pedang satu  sebesar  0,2815722  µg/ml.  Berdasarkan  hasil  penelitian  ini,  beberapa  kerupuk  yang beredar di Pasaran Kota Manado tidak aman dikomsumsi.
Kata Kunci : Rhodamin B, Kerupuk, Spektrofotometri dan Kromatografi Lapis Tipis

## PENDAHULUAN
Rhodamin  B  adalah  zat  pewarna berupa  kristal  yang  tidak  berbau  dan berwarna hijau atau ungu kemerahan  yang beredar di pasar untuk industri sebagai zat pewarna  tekstil  (Wirasto,  2008).  Dengan mengkomsumsi  rhodamin  B  yang  cukup besar dan berulang-ulang akan menyebabkan iritasi pada saluran penapasan,  iritasi  pada  kulit,  iritasi  pada mata,  ritasi  pada  pencernaan,  keracunan, gangguan  fungsi  hati  dan  kanker  hati. Penelitian  yang  sudah  dilakukan  oleh Mudjajanto  dari  Institut  Pertanian  Bogor (IPB),  menemukan  zat  pewarna  rhodamin B  pada  produk  makanan  industri    rumah tangga  seperti  kerupuk,  sirup,  cendol, manisan, sosis, minuman ringan, ikan asap dan  kue-kue  lainnya  (Wirasto,  2008). Beberapa produsen yang menjual makanan dan  minuman  yang  menggunakan  zat pewarna  rhodamin  B  yang  dilarang tersebut  memiliki  warna  yang  cerah, praktis digunakan, harganya relatif murah, serta  tersedia  dalam  kemasan  kecil  di pasaran  untuk  memungkinkan  masyarakat umum  membelinya  (wirasto,  2008  dan Budianto, 2008).
Kerupuk merupakan produk kering yang  dibuat  dari  tapioka  atau  tepung  lain dengan  menggunakan  bahan  yang  sesuai dengan  jenis  makanan  lainnya.  Kerupuk biasanya  digunakan  sebagai  makanan ringan  dan  juga  jajanan  bagi  anak-anak sekolah, warung-warung dan rumah makan.  Kerupuk  mudah  diperoleh  di pasaran Kota Manado. Beberapa pedagang di  pasaran  yang  menjual  kerupuk  dengan penampilan  yang  menarik  dan  tahan terhadap  berbagai  kondisi  lingkungan, dengan cara mewarnai dengan warna yang beragam.

## METODOLOGO PENELITIAN
Metode  penelitian  ini  merupakan deskriptif  laboratorium yaitu  dengan melakukan  observasi  pada  kerupuk  yang dicurigai  mengandung  rhodamin  B  dan dilanjutkan  dengan  melakukan  analisis
sampel  di  laboratorium  (Widana  dan Yuningrat, 2007).
Beberapa  variasi  penelitian  adalah T 1 :  Kerupuk  pada  penjual  satu  dari  pasar tuminting,  T 2 :  Kerupuk  pada  penjual  dua dari  pasar  tuminting,  T 3 :  Kerupuk  pada penjual  tiga  dari  pasar  tuminting,  P 1 : Kerupuk  pada  penjual  satu  dari  pasar  paal 2, P 2 : Kerupuk pada penjual dua dari pasar paal 2, P 3 : Kerupuk pada penjual tiga dari pasar  paal  2,  45 1 :  Kerupuk  pada  penjual satu  dari  pasar  45,  45 2 :  Kerupuk  pada penjual  dua  dari  pasar  45,  B 1 :  Kerupuk pada  penjual  satu  dari  pasar  bersehati  45, B 2 :  Kerupuk  pada  penjual  dua  dari  pasar bersehati 45.
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian  yaitu  Erlenmeyer,  Timbangan analitik (Preeisa XB 220A), Corong pisah, Labu takar, Gelas kimia, Gelas ukur, Pipet, batang  pengaduk,  spektrofotometer  UV- Vis (PG Instrument T 80 UV-Vis), Hot plate ANKE,  oven  ,  kertas  saring  (Whatman No.1) dan chamber.
Bahan-bahan yang digunakan dalam  penelitian  yaitu  10  macam  kerupuk berbeda-beda  merek  berwarna  merah, benang wool, akuades, etanol 70%, larutan asam klorida, larutan ammonia, n-butanol, etil asetat, asam asetat, lempeng kromatografi lapis tipis.
Lokasi pengambilan sampel kerupuk  yaitu  4  pasar  yang  ada  di  Kota Manado  yaitu  pasar  tuminting,  pasar  paal 2, pasar 45 dan pasar bersehati 45. Sampel kerupuk sudah tersedia dalam plastik kecil dengan bermacam-macam merek yang ada dipasar,  sampel  diambil  dari  tiap-tiap empat  penjual  yang  ada  di  pasar  Kota Manado,  kemudian  sampel  di  kemas  dan dibawa  ke  laboratorium  Farmasi  F-MIPA UNSRAT.
Ekstraksi  dan  pemurnia  dalam pembuatan larutan uji berdasarkan penelitian Utami dan Suhendi, 2009.
1. Sampel  kerupuk  ditimbang  sebanyak 10  gram  dimasukkan  ke  dalam Erlenmeyer kemudian direndam dalam  20  ml  larutan  ammonia  2  %
(yang  dilarutkan  dalam  etanol  70%) selama semalaman.
2. Larutan  disaring  filtratnya  dengan menggunakan  kertas  saring  whatman No. 1.
3. Larutan  dipindahkan  ke  dalam  gelas kimia  kemudian  dipanaskan  di  atas hot plate.
4. Residu  dari  penguapan  dilarutkan dalam  10  ml  air  yang  mengandung asam  (larutan  asam  dibuat  dengan mencampurkan  10  ml  air  dan  5  ml asam asetat 10%).
5. Benang  wol  dengan  panjang  15  cm dimasukkan  ke  dalam  larutan  asam dan  didihkan  hingga  10  menit, pewarna  akan  mewarnai  benang  wol, kemudian benang diangkat.
6. Benang wol dicuci dengan air.
7. Kemudian  benang  dimasukkan  ke dalam  larutan  basa  yaitu  10  ml ammonia 10% (yang dilarutkan dalam etanol 70%) dan didihkan.
8. Benang wol akan melepaskan pewarna,  pewarna  akan  masuk  ke dalam larutan basa.
9. Larutan basa yang di dapat
selanjutnya  akan  digunakan  sebagai cuplikan sampel pada analisis kromatografi lapis tipis.
Pembuatan  larutan  baku  rhodamin B dilakukan dengan membuat larutan baku dengan  konsentrasi  20  ppm.  Selanjutnya dibuat  larutan  baku  dengan  konsentrasi masing-masing  0.5;  1;  1,5;  2;  3;  5;  6;  7,5 ppm.  Pelarut  yang  digunakan  adalah larutan HCl 0,1 N (Putri, 2009).
Identifikasi  sampel  pada  plat  KLT berukuran  20  x  20  cm  diaktifkan  dengan cara  dipanaskan  dalam  oven  pada  suhu 100 0 C selama 30 menit. Sampel ditotolkan pada  plat  KLT  dengan  menggunakan  pipa kapiler  pada  jarak  1,5  cm  dari  bagian bawah plat, jarak antara noda adalah 2 cm. Kemudian  dibiarkan  beberapa  saat  hingga mengering.  Plat  KLT  yang    telah mengandung  cuplikan  dimasukkan  ke dalam  chamber  yang  lebih  terdahulu  telah dijenuhkan  dengan  fase  gerak  berupa  n- butanol  :  etil  asetat  :  ammonia  (10:4:5).
Dibiarkan hingga lempeng terelusi sempurna,  kemudian  plat  KLT  diangkat dan  dikeringkan.  Diamati  warna  secara visual  dan  dibawah  sinar  UV,  jika  secara visual  noda  berwarna  merah  jambu  dan dibawah  sinar  UV  254  nm  dan  366  nm berfluoresensi  kuning  atau  orange,  hal  ini menunjukkan  adanya  rhodamin  B  (Ditjen POM,  2001;  Djalil  et  al  dalam  Utami  dan Suhendi, 2009; Putri, 2009).
Penetapan kadar rhodamin B adalah dari masing-masing larutan dimasukkan  ke  dalam  kuvet,  kemudian  di ukur secara spektrofotometri cahaya tampak  pada  panjang  gelombang  500-600 nm.  Untuk  menghitung  kadar  rhodamin  B dalam  sampel  dapat  di  hitung  dengan menggunakan  kurva  kalibrasi  dengan persamaan regresi y=bx ± a.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tabel  1.  Hasil  pemeriksaan  kualitatif  rhodamin  B  pada  sampel dengan metode kromatografi lapis tipis.
No. Perlakuan Visual Sinar UV Tinggi Bercak (cm) Harga Rf 254 366
1 Baku pembanding rhodamin B Merah Jambu Kuning Orange 13,5 cm 0,78 2 T 1 - - - - - 3 T 2 - - - - - 4 T 3 - - - - - 5 P 1 - - - - - 6 P 2 - - - - - 7 P 3 - - - - - 8 45 1 Merah jambu Kuning - 13,1 0,76 9 45 2 - - - - - 10 B 1 - - - - - 11 B 2 - - - - -
Dari  Tabel  di  atas  dapat  dilihat bahwa  sepuluh  sampel  yang  telah  diuji dengan  dua  kali  pengujian  (duplo),  yaitu sembilan  sampel  T 1, T 2, T 3, P 1, P 2, P 3, 45 2, B 1, dan  B 2 negatif  tidak  mengandung rhodamin B dan satu sampel dari pasar 45 1 positif  mengandung  rhodamin  B.  Hal  ini dapat  dilihat  dangan  fluoresensi  kuning
pada  KLT  yang  di  sinari  lampu  UV dengan panjang gelombang 366 nm.
Gambar 1. Lempeng KLT yang menunjukkan adanya rhodamin B pada sampel. Keterangan : 45 1 : Kerupuk pada penjual satu dari pasar 45
Penetapan Kadar 1.  Panjang  Gelombang  Maksimum Larutan Baku Rhodamin B
Penentuan panjang
gelombang maksimum  larutan  baku  rhodamin  B  pada konsentrasi  3,5  ppm  dengan  panjang gelombang 500-600 nm. Hal ini dilakukan karena  larutan  rhodamin  B  merupakan larutan  berwarna.  Rhodamin  B  dengan konsentrasi  3,5  ppm  diperoleh  panjang gelombang 558 nm.

## 2.  Kurva  Kalibrasi  Larutan  Baku Rhodamin B
Pembuatan  kurva  kalibrasi  larutan baku  rhodamin  B  dilakukan  dengan membuat  larutan  baku  dengan  konsentrasi 20  ppm.  Selanjutnya  dibuat  larutan  baku dengan  konsentrasi  masing-masing 0.5;  1; 1,5;  2;  3;  5;  6;  7,5 ppm,  kemudian  di  ukur serapannya  pada  panjang  gelombang  558 nm.
Gambar 2. Kurva kalibrasi larutan baku rhodamin B
Hasil  perhitungan  persamaan  regresi kurva kalibrasi di atas diperoleh persamaan  garis  y  =  0,1275x  +  0,0081 dengan  koefisien  korelasi  (r)  sebesar 0,989.  Hasil  kolerasi  yang  terdapat  positif antara  kadar  dan  serapan,  artinya  dengan meningkatnya konsentrasi maka absorbansi juga akan meningkat. 3. Kadar Rhodamin B Pada Sampel Penetapan kadar rhodamin B dilakukan dengan menggunakan
spektrofotometer sinar tampak pada panjang gelombang 558 nm.
Tabel  3.  Kadar  rhodamin  B  pada  sampel  di  pasar  45  pada penjual satu Sampel Keterangan warna larutan uji Perlakuan Kadar (µg/ml) Rata- rata 45 1 Bening 1 0,27 0,29 0,28
Keterangan : 45 1 : Kerupuk pada penjual satu dari pasar 45
Dari  tabel  di  atas  dapat  dilihat dengan  kadar  rhodamin  B  dalam  kerupuk. Hal  ini  membahayakan  konsumen,  karena semakin banyak rhodamin B masuk dalam tubuh  maka  besar  efek  toksik  yang  akan timbul.
Rhodamin  B  ditambahkan  pada kerupuk untuk menambah kualitas pewarna  agar  lebih  menarik  sehingga konsumen lebih tertarik untuk membelinya.  Selain  itu  banyak  penjual masih  menggunakan  rhodamin  B  yang praktis  digunakan  dan  harganya  relatif murah  serta  tersedia  dalam  kemasan  kecil di pasaran sehingga memungkinkan masyarakat umum untuk membelinya.

## KESIMPULAN
Dari hasil penelitian diperoleh sampel 45 1 positif  mengandung  rhodamin  B. Rhodamin  B  pada  sampel  dari  pasar  45 1 yaitu sebesar 0,28 µ g/ml.
Saran 1.  Bagi  konsumen  agar  lebih  hati-hati dalam membeli kerupuk untuk di komsumsi.
2.  Pemerintah  dalam  hal  ini  lebih  intensif bagi  dinas  kesehatan  agar  memperketat pengawasan      dan  pemeriksaan  pada
y = 0.1275x + 0.0081 r = 0.981 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 0 2 4 6 8 A b so rb a n si
Konsentrasi (ppm)
kerupuk sehingga tidak ada penggunaan zat  pewarna  rhodamin  B  yang  tidak diizinkan.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim. 1985. Permenkes RI No. 239/Menkes/Per/1985  tentang  Zat Warna  Tertentu  yang  Dinyatakan sebagai Bahan Berbahaya. Departemen Kesehatan, Jakarta. Anonim.  1999.  Cara  Produksi  Makanan yang Baik. Panduan Industri Rumah Tangga. Departemen Kesehatan RI. Jakarta. Budianto, P. E. 2008. Analisis Rhodamin B Dalam  Saos  dan  Cabe  Giling  Di Pasaran Kecamatan Laweyan Kotamadya Surakarta dengan dengan Metode Kromatografi Lapis  Tipis.  Fakultas  Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta,Surakarta. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1992. Direktorat Pengawas  Obat  dan  Makanan, Peraturan  Menteri  Kesehatan  RI No. 722/Menkes/Per/IX/1988, Tentang Bahan Tambahan Makanan.  Edisi  II,  Jilid  II  1992. Departemen Kesehatan RI, Jakarta. Ditjen  POM  RI.  2001.  Metode  Analisis PPOMN. Ditjen POM Jakarta.
Djarismawati.,
Sugiharti., dan R. Nainggolan.  2004.  Pengetahuan Perilaku  Pedagang    Cabe  Merah Giling dalam Penggunaan Rhodamin  B  di  Pasar  Tradisional
di  DKI  Jakarta.  Jurnal  Ekologi Kesehatan. 3:7-12.
Hastomo,  A.  E.  2008.  Analisis  Rhodamin
B  dan  Metanil  Yellow  Dalam  Jelly Di  Pasaran  Kecamatan  Jebres
Kotamadya Surakarta dengan Metode  Kromatografi  Lapis  Tipis. Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta, Surakarta. Putri,  W.  K.  A.    2009.  Pemeriksaan Penyalahgunaan Rhodamin
B sebagai  Pewarna  Pada  Sediaan Lipstik  yang  Beredar  Di  Pusat Kota  Medan.  Fakultas  Universitas Sumatera Utara, Medan.
Utami,  W  dan  Suhendi,  A.  2009.  Jurnal
Analisis Rhodamin B Dalam Jajanan  Pasar  Dengan  Metode Kromatografi Lapis Tipis. Penelitian  Sains  dan  Toksikologi. 10 (2): 148-155, Surakarta. Widana,  G.  A.  B  dan  Yuningrat.  N.  W. 2007.  Analisis  Bahan  Pewarna Berbahaya Pada Sediaan Kosmetika  Di  Wilayah  Kecamatan Buleleng Kabupaten Buleleng.
Jurusan  Analisis  Nimia  Fakultas MIPA Undiksha, Denpasar.
Wirasto.  2008.  Analisis  Rhodamin  B  dan Metanil  Yellow  dalam  Kecamatan Laweyan  Kotamadya  Surakarta dengan Metode Kromatografi Lapis  Tipis.  Fakultas  Farmasi Universitas Muhammadiyah, Surakarta.