## SALIVA ACIDITY LEVEL TOWARD APPLICATION CASEIN PHOSPHOPEPTIDE - AMORPHOUS CALCIUM PHOSPHATE FOR CHILDREN AGED 8-9 YEARS
Anie Apriani*, Henry Yonatan Mandalas**, William Khoe***

## ABSTRACT
Background: Dental caries is a disease of dental hard tissue that is often found in children. The etiology of dental caries is very diverse and multifactorial, one of which is the decreased acidity of saliva. There are many efforts and ways to reduce the incidence of dental caries, one of which is the application of topical flour  to  the  teeth.  Casein  phosphopeptide –amorphous  calcium  phosphate (CPP-ACP)  as  a  type  of  topical  flour  used  has  been  shown  to  reduce demineralization  and  increase  tooth  remineralization.  This  study  aimed  to determine the acidity level of saliva before and after application of CPP-ACP in children aged 8-9 years.
Methods:  Measurement  of  salivary  acidity  was  measured  using  a  digital  pH meter  in  the  study  sample  of  42  children  consisting  of  23  boys  and  19  girls. Subjects were applied CPP-ACP for 1 month with the routine application once a week, then re-examined the salivary acidity level after 1 month.
Result : The average result of salivary acidity before CPP-ACP application was 6.928 and after CPP-ACP application was 7.0611. The T-test resulted in a very significant  difference  in  the  level  of  salivary  acidity  before  and  after  the application of CPP-ACP.
Conclusion  :  is  that  Tthere  are  differences  in  the  level  of  salivary  acidity  in children aged 8-9 years before and after topical application of CPP-ACP flour.

## PENDAHULUAN
Ilmu pengetahuan kedokteran gigi berkembang  pesat,  sejak  banyaknya  faktor mengenai penyebab karies gigi serta perkembangan  dari karies  tersebut. Pada saat ini, banyak  ahli  berpendapat    bahwa  karies  gigi merupakan suatu penyakit yang dapat mempengaruhi  ke  gigi  lainnya  akibat  dari banyaknya  faktor  penyebab  karies  tersebut. 1 Faktor-faktor kebiasaan diet, kualitas, dan kuantitas plak  gigi,  kualitas  dan  kuantitas  saliva,  usia  dan
imunitas  tubuh,  kebersihan  mulut,  mikroflora  oral, kondisi  gigi  dan  faktor-faktor  genetik  merupakan penyebab yang potensial pada karies gigi. 1,2
Selain    bakteri Streptococcus  mutans sebagai bakteri penyebab karies, saliva merupakan salah  satu  faktor  yang  mempengaruhi  kerentanan jaringan  terhadap  intesitensitas  proses  karies. Lingkungan gigi juga dapat diasamkan oleh tingkat aliran  saliva,  viskositas  dan  pH  saliva. 3 Saliva memiliki peran utama dalam proses karies sebagai lingkungan aktivitas bakteri. 4
* Staff Pengajar Ilmu Kedokteran Gigi Anak Fakutas Kedokteran Gigi Universitas Kristen Maranatha
** Staff Pengajar Ilmu Periodontology Fakutas Kedokteran Gigi Universitas Kristen Maranatha
*** Mahasiswa Fakutas Kedokteran Gigi Universitas Kristen Maranatha
Correspondence: henry.yonatan@dent.maranatha.edu
Keywords:

## Caries,Saliva Acidity
Level , CPP-ACP
Peranan  saliva  sangat  penting  dimulai dengan  pembersihan  permukaan  gigi  secara mekanis  dan  melarutkan  makanan  serta  fungsi lainnya  sebagai  lubrikasi,  pelindung  mukosa, menjaga buffer saliva,  dan  lain  sebagainya. 5 Nilai tingkat  keasaman  saliva  normal  berkisar  5 , 75  dan 6 , 5;  nilai  yang  rendah  menunjukkan  keasaman lingkungan  rongga  mulut  yang  pada  pasien  sehat dapat  berasal  dari  kebersihan  yang  kurang  pada rongga  mulut,  banyaknya  lesi  karies,  akumulasi kalkulus gigi, atau diet yang tidak tepat. 6 Pengujian tingkat  keasaman  saliva  memungkinkan  untuk memprediksi  aktivitas  bakteri  penginduksi  karies. 7 Saliva juga merupakan sumber informasi mengenai kondisi  kesehatan  rongga  mulut,  dan  juga  mudah untuk  mendapatkan  bahan  penelitian.  Pengujian tingkat  keasaman  saliva  bersifat  noninvasif  dan tidak membutuhkan peralatan medis khusus. 8
Aplikasi  fluor  topikal  seperti  varnish  yang digunakan  untuk  mencegah  karies  gigi  telah dilaporkan  oleh  banyak  peneliti  dan  telah dikonfirmasi  sesuai  tinjauan  sistematis  dan  meta analisis.  Beberapa  penelitian  telah  menunjukkan pengaruh  topikal  fluor  dapat  menurunkan  risiko terhadap  karies  gigi.  Topikal  fluor Casein Phosphopeptide –  Amorf  Calsium  Phospat (CPP- ACP)  yang  mengandung  fluor  dapat  mengurangi jumlah S. mutans pada saliva anak, sehingga dapat mengurangi faktor risiko terjadinya karies gigi . 9

## METODE PENELITIAN
Sampel  saliva  diambil  dari  anak  usia  8-9 tahun  di  Sekolah  Dasar  Sukasari  dan  Cibogo Kecamatan  Sukajadi  Kota  Bandung.  Jumlah sampel  berjumlah  42  orang  anak  yang  telah
mengisi informed consent dan telah disetujui komite etik  Fakultas  Kedokteran  Gigi,  Universitas  Trisakti (No 228/S2-Sp/KEPK/FKG/11/2018).
Alat pengukur pH saliva menggunakan pH meter  digital  ( Orion  Star A221/ Stara 2215 – Thermo  Scientific ).  Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian CPP-ACP  yang merupakan  fluor topikal mirip seperti varnish dengan kandungan CPP-ACP. Bentuk sediaan berupa varnish fluor dengan CPP- ACP  (MI  dari  GC corporation  Japan )  (Natrium fluoride 5% w/w dan CPP-ACP 2% w/w).
Pengambilan  sampel  saliva  dilakukan sebelum  aplikasi  CPP-ACP.  Subjek  penelitian melakukan  spiting  ke  tabung  50ml  ,lalu  diukur  pH saliva  dan  dicatat.  Setelah  itu  subjek  penelitian melakukan sikat gigi kemudian diaplikasikan CPP- ACP  ke  seluruh  permukaan  gigi  menggunakan aplikator.  Perlakuan dilakukan satu minggu sekali dan diulang terus selama satu bulan.
Hasil penelitian diuji  menggunakan analisa statistik,  yang  dilakukan  dengan  uji  T  dengan menggunakan software SPSS.

## HASIL PENELITIAN
Hasil  penelitian  terhadap  pengukuran tingkat keasaman saliva pada anak usia 8-9 tahun sebanyak 44 anak 2 anak tidak mengikuti penelitian sampai  akhir  sehingga  jumlah  keseluruhan  yang mengikuti penelitian sebanyak 42 orang anak yang terdiri  dari  anak  laki  laki  23  orang  (54,8%)    dan perempuan 19 orang (45,2%).
Tabel 1. Distribusi Sampel Penelitian
Sekolah Dasar L (%) P (%) Jumlah (%) Sukasari 14 (53,8) 12 (46,2) 26 (100) Cibogo 9 (56,3) 7 (43,7) 16 (100) total 23 (54,8) 19 (45,2) 42 (100)
Hasil  pengukuran  pH  saliva  sebelum aplikasi  topikal  fluor  CPP-ACP  pada  anak  SD Sukasari  yang  terendah  adalah  sebesar    6,91 (sampel  no  1  dan  4)  dan  tertinggi  sebesar  6,98 (sampel no 22). Hasil pengukuran pH saliva setelah aplikasi  topikal  fluor  CPP-ACP  satu  minggu  sekali selama  satu  bulan  yang  terendah  adalah  sebesar 7,03    (sampel  no  14)  dan  tertinggi  sebesar  7,13 (sampel  no  18).  Hasil  memperlihatkan  adanya penurunan  tingkat  keasaman  saliva  sebelum  dan sesudah  pemberian  CPP-ACP  seminggu  sekali
selama satu bulan di SD Sukasari. Rata rata tingkat keasaman  saliva  sebelum  pemberian  CPP-ACP sebesar  6,94    dan  sesudah  aplikasi    CPP-ACP sebesar  7,08.  Hasil  analisa  statistik  dengan menggunakan  uji  T  memperlihatkan  hasil  yang sangat  signifikan  p<0,05  (Diagram  1).  Terdapat perbedaan  selisih  sebesar  -0,14  yang    artinya terdapat kenaikan tingkat keasaman pH saliva pada anak  SD  Sukasari  sebelum  dan  sesudah  aplikasi topikal fluor CPP-ACP (Tabel 2).
.
Diagram 1. Distribusi tingkat keasaman saliva SD Sukasari sebelum dan sesudah aplikasi CPP-ACP

## Tabel 2. Perbedaan pH saliva SD Sukasari sebelum dan sesudah aplikasi CPP-ACP
CPP-ACP (SD Sukasari) N Selisih t ρ Sebelum aplikasi 26 -0,14 -26,09 0,000* Setelah aplikasi 26
Hasil  pengukuran  pH  saliva  sebelum aplikasi  topikal  fluor  CPP-ACP  pada  anak  SD Cibogo  yang  terendah  adalah  sebesar    6,87 (sampel  no  6)  dan  tertinggi  sebesar  7,12  (sampel no 10). Hasil pengukuran pH saliva setelah aplikasi topikal  fluor  CPP-ACP  satu  minggu  sekali  selama
satu  bulan  yang  terendah  adalah  sebesar  6,97 (sampel no 2) dan tertinggi sebesar 7,1 (sampel no 1). Hasil memperlihatkan adanya penurunan tingkat keasaman saliva sebelum dan sesudah pemberian CPP-ACP seminggu sekali selama satu bulan di SD Cibogo. Rata rata tingkat keasaman saliva sebelum
6,8 6,85 6,9 6,95 7 7,05 7,1 7,15 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 p H Sa liv a Sampel Perawatan Varnish Fluor CPP-ACP sebelum sesudah
pemberian  CPP-ACP  sebesar  6,92  dan  sesudah aplikasi  CPP-ACP sebesar 7,03 ( Diagram 2).
Diagram 2. Distribusi tingkat keasaman saliva SD Cibogo sebelum dan sesudah aplikasi CPP-ACP
Hasil  analisa  statistik  dengan  menggunakan  uji  T memperlihatkan  hasil  yang  sangat  signifikan p<0,05.  Hasil  yang  serupa  dengan  SD  Cibogo terdapat selisih sebesar -0,10 yang artinya terdapat
kenaikan  tingkat  keasaman  pH  saliva  pada  anak SD  Cibogo  sebelum  dan  sesudah  aplikasi  topikal fluor CPP-ACP (Tabel 3).
Tabel 3. Perbedaan pH saliva SD Cibogo sebelum dan sesudah aplikasi CPP-ACP
CPP-ACP (SD Cibogo) N Selisih t ρ Sebelum aplikasi 16 -0,10 -5,75 0,000* Setelah aplikasi 16 *signifikan ρ < 0,05
Hasil  penelitian  untuk  semua  sampel penelitian yang terdiri dari anak usia 8-9 tahun SD Sukasari  dan  SD  Cibogo  memperlihatkan  hamper keseluruhan  anak  memiliki  perubahan  tingkat
keasaman saliva, kecuali sampel no 36 yang tidak mengalami  kenaikan  tingkat  keasaman  saliva setelah  diberikan  aplikasi  varnish  fluor  CPP-ACP selama satu bulan  ( Diagram  3)
6,75 6,8 6,85 6,9 6,95 7 7,05 7,1 7,15 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 p H Sal iv a Sampel Perawatan Varnish Fluor CPP-ACP Sebelum Sesudah
Diagram 3. Distribusi tingkat keasaman saliva SD Sukasari dan SD Cibogo sebelum dan sesudah aplikasi CPP-ACP Hasil analisa statistik dengan
menggunakan  uji  T  memperlihatkan  hasil  yang sangat  signifikan  p<0,05.  Hasil  penelitian  dari  2 sekolah  dasar  yang  diteliti  dihasilkan  selisih  -0,13
yang  artinya  terdapat  pula  kenaikan  tingkat keasaman  pH  saliva  pada  anak  SD  Sukasari  dan SD  Cibogo  sebelum  dan  sesudah  aplikasi  topikal fluor CPP-ACP. (Tabel 4).
Tabel 4. Perbedaan  pH saliva SD Sukasari dan Cibogo sebelum dan sesudah aplikasi CPP-ACP
CPP-ACP (SD Sukasari dan SD Cibogo) N Selisih t ρ Sebelum aplikasi 42 -0,13 -15,80 0,000* Setelah aplikasi 42 *signifikan ρ < 0,05

## DISKUSI
Penelitian  ini  menggunakan  varnish  CPP- ACP (MI varnish dari GC corporation Japan ) yang diplikasikan  selama  satu  bulan  sebanyak  4  kali (satu minggu sekali). Nidhi mengemukakan bahwa mekanisme  antikariogenitas  pada  CPP-ACP  yaitu secara  substantial  melokalisasi  ion  kalsium  dan fosfat  pada  plak,  dimana  menyediakan  reservoir bagi ion kalsium fosfat  larut pada permukaan gigi. Di bawah kondisi asam CPP berikatan dengan ACP yang  hancur  dan  disosiasi  untuk  melepaskan  ion kalsium dan fosfat. Mekanisme tersebut ideal untuk mencegah  demineralisasi  email  karena  adanya hubungan terbalik antara kadar kalsium pada saliva dan plak dan kadar fosfat. 10
Berdasarkan  hasil  penelitian  terdapat peningkatan  rata-rata  pH  saliva  sebelum  dan sesudah pemberian varnish CPP-ACP (Tabel 2, 3, dan  4).  Hasil  pengujian  statistik  pengukuran  pH saliva dengan aplikasi CPP-ACP terdapat perbedaan  antara  nilai  pH  saliva  sebelum  dan sesudah  aplikasi  dengan  CPP-ACP.  Dengan demikian,  pemberian  CPP-ACP  pada  permukaan gigi  anak  usia  8-9  tahun  yang  diberikan  setiap minggu  selama  1  bulan  memiliki  efek  terhadap peningkatan pH saliva.
Meskipun saliva memiliki potensi remineralisasi,  remineralisasi  yang  dihasilkan  oleh saliva minimal dan terjadi pada lapisan permukaan lesi email saja. Untuk melakukan deposisi  mineral
6,75 6,8 6,85 6,9 6,95 7 7,05 7,1 7,15 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 p H Sal iv a Sampel Perawatan Varnish Fluor CPP-ACP Sebelum Sesudah
dalam  lesi  email,  pertama  ion  kalsium  dan  fosfat harus menembus lapisan permukaan email, hal ini menjelaskan  bahwa  cairan  CPP  sangat  efisien dalam  remineralisasi  karena  mampu  mengambil asam yang dihasilkan selama terjadinya lesi email. Penelitian ini sejalan dengan penelitian yang telah dilakukan Kargul dkk dengan pemberian CPP-ACP selama 1 bulan menemukan jumlah lesi karies yang mengalami penurunan sebesar 77%. 11
Topikal  fluor  dalam  bentuk  seperti  varnish tersebut  memiliki  kelebihan  dan  keunggulan tersendiri  seperti  varnish  fluor  yang  merupakan metode standar emas terkini untuk melindungi gigi melawan  perkembangan white  spot  lesion dan untuk  mencegah  demineralisaasi.  Hal  tersebut sejalan  dengan  penelitian  Llena  dkk.  yang menyebutkan  bahwa  perbandingan  efektifitas aplikasi  CPP-ACP  fluor  dan  CPP-ACP  secara longitudinal  mencatat  bahwa  setiap  perawatan efektif  sampai  batas  waktu  tertentu  dan  tidak terdapat perbedaan efek di antara keduanya. 12

## KESIMPULAN
Terdapat  perbedan  tingkat  keasaman  saliva  pada anak  usia  8-9  tahun  sebelum  dan  sesudah pemberian  aplikasi  topikal  fluor  CPP-ACP.  Hasil menunjukkan  adanya  peningkatan  pH  saliva setelah  pemberian  CPP-ACP  selama  1  minggu sekali  dalam  kurun  waktu  1  bulan.  Hal  ini  dapat disimpulkan bahwa CPP-ACP dapat meningkatkan ketahanan  gigi  terhadap  proses  demineralisasi dengan cara peningkatan pH dalam saliva.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Fakultas  Kedokteran  Gigi  Universitas Kristen  Maranatha  yang  telah  mendukung  penuh penulis untuk melakukan penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Stookey  GK,  Chin  JR  and  Kowolik  JE. Dental Caries in the Child and Adolescent. Dentistry  for  the  Child  and  Adolescent.
10 th .St. Louis: Mosby Publications: 2015.p.177-204 2. Pinkham JR, Casamassimo PS, Fields HW. Pediatric Dentistry Infancythrough adolescence.  4 th ed.  St.  Louise,  Missouri:
Elsevier Inc; 2005.p. 199-204.
3. Culp DJ, Robinson B, Parkkila S, Pan PW, Cash  MN,  Truong  HN  ,et  al.  Oral Colonization by streptococcus mutans and caries  development  is  reduce  upon detection  of  carbonic  anhydrase  VI expression  in  saliva.  Biochim  Biophys. 2011:1567-76.
4. Yang    F,  Zeng  X,  Ning  K,  Liu  KL,  Lo  CC, Wang  W,  et  al.  Saliva  mikrobiomes distinguish  caries  -  active  from  healthy human populations. ISME J. 2012; 6:1-10.
5. Kardos  T  dan  Kieser  J.  Clinical  Oral Biology. 2 nd ed. New Zealand. 2000; 11: 93- 101.
6. Ahmadi Motamayed F, Goodarzi MT, Hendi SS,  Kasraei  S,  Moghimbeigi  A.  Total antioxidant  capacity  of  saliva  and  dental caries. Med Oral Patol Oral Cir Bucal. 2013; 18: 553-6.
7. Denny  PC.  A  saliva-based  prognostic  test for dental caries susceptibility. J Dent Hyg. 2009;83:175-6.
8. Fudali-Walczak  m,  Raba  G,  Obloza  B. Saliva pH testing in predicting dental caries in  children  age  7-10  years.  Prz  Med  Uniw Rzesz Inst Lekow. 2015;13(2):90-94.
9. Fajriani dan Aini DH. Efek Aplikasi Topikal Casein
Phospopeptide-Amorfphous Calcium  Phospat  dan  Sodium  Fluoride pada  Streptococcus  mutans  saliva  pada anak.  Departemen  Pediatric  Dentistry. Faculty of Dentistry, Universitas Hasanuddin. 10. Nidhi C dan Anuj C. Enhanced Remineralisation  of  Tooth  Enamel  Using Casein Phospopeptide-Amorphous Calcium  Phosphate  Complex  :  A  Review.
Int J Clin Pre Dent. 2018;14(1):1-10.
11. Kargul B, Durmus B dan Bekiroglu N. Effect of  CPP-ACP  on  Remineralisation  of  Early
Caries  Lesions  in  Primary  Teeth.  OHDM.
2017; 16 (3).
12. Llena  C,  Leyda  AM  dan  Forner  L.  CPP- ACP  and  CPP-ACFP  Versus  Fluoride Varnish in Remineralisation on Early Caries Lesions.  A  Prospective  Study.  European Journal of Paediatric Dentistry. 2015;16(3)