## UJI DAYA HAMBAT PERASAN BUAH JERUK PURUT CITRUS Hytrix
TERHADAP BAKTERI Staphylococcus aureus SECARA IN VITRO
Rinaldy Eq Dwi putra 1) , Herriyannis Homenta 1) , Vonny N.S Wowor 1)
1) Program Studi Pendidikan Dokter Gigi Fakultas Kedokteran UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Staphylococcus  aureus  is  a  type  of  normal  flora  in  the  mouth  that  may  be  pathogenic  in certain  conditions.  These  bacteria  including  Gram  positive  bacteria  and  the  bacteria  that  cause abscesses  in  the  oral  cavity. These  bacteria  grow  rapidly  in  the  anaerobic  environment  and  very difficult destroyed with standard antibiotic regimen. Kaffir Lime fruit is a fruit that contains essential oils  that  have  inhibitory  to  bacteria  by  destroying  the  cell  wall  and  inhibit  the  formation  of  the bacterial cell wall. This research was conducted purely laboratory experimental in vitro with the study design  post  test  only  control  group  design. This  study  aims  to  determine  the  inhibitory  Kaffir  Lime Fruit juice Citrux Hytrix on the growth of Staphylococcus aureus bacteria testing using Kirby-bauer. The  results  showed  the  formation  of  inhibition  zone  Kaffir  Lime  fruit  juice  on  the  growth  of Staphylococcus aureus amounted to 13.05 mm.  The conclusion of this research is Kaffir Lime Citrus fruit  juice  hytrix  have  inhibitory  effect  on  the  growth  of  Staphylococcus  aureus  bacteria  in  the  oral cavity.
Keywords : Inhibition test, Fruit Kaffir Lime, Staphylococcus aureus.

## ABSTRAK
Staphylococcus  aureus adalah  sejenis  flora  normal  dalam  mulut  yang  dapat  bersifat  patogen pada  kondisi  tertentu.  Bakteri  ini  termasuk  bakteri  Gram  Positif  dan  merupakan  bakteri  penyebab abses  di  rongga  mulut.  Bakteri  ini  tumbuh  cepat  pada  lingkungan  yang  anaerobik  dan  sangat  sulit dimusnahkan  dengan  regimen  antibiotik  standar.  Buah  Jeruk  Purut  merupakan  sejenis  buah  yang memiliki kandungan minyak atsiri yang memiliki daya hambat terhadap bakteri dengan cara merusak dinding  sel  dan  menghambat  terbentuknya  dinding  sel  bakteri.Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental laboratoris murni yang dilakukan secara in vitro dengan rancangan penelitian post test only control group design. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui daya hambat perasan Buah Jeruk Purut Citrux  Hytrix terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus dengan  menggunakan metode  pengujian  Kirby-Bauer.  Hasil  penelitian  menunjukkan  terbentuknya  zona  hambat  perasan buah Jeruk Purut terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus sebesar 13,05 mm.Kesimpulan pada  penelitian  ini  adalah  perasan  buah  Jeruk  Purut Citrus  hytrix memiliki  daya  hambat  terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus yang terdapat di rongga mulut.
Kata kunci : Uji daya hambat, Buah Jeruk Purut, Staphylococcus aureus.

## PENDAHULUAN
Profil  kesehatan  gigi  dan  mulut  di Indonesia  menggambarkan  bahwa  dari  12 jenis  penyakit  gigi  dan  mulut  yang  diderita masyarakat  yang  berobat  di  rumah  sakit pemerintah  pusat  dan  pemerintah  daerah, kelainan  periodontal  adalah  salah  satu penyakit yang banyak diderita oleh masyarakat, kebersihan  mulut  yang  kurang terjaga  dengan  baik,  merupakan  salah  satu penyebab  gangguan  kesehatan  gigi  dan mulut,  termasuk  penyakit  periodontal  dan karies gigi (Anonim, 2013).
Karies gigi merupakan masalah kesehatan gigi dan mulut yang sering terjadi di  Indonesia.  Berdasarkan  hasil  Riset Kesehatan Dasar (Riskesdas) Nasional tahun 2013, prevalensi nasional masalah kesehatan gigi  dan  mulut  mencapai  25,9%  dan sebanyak  14  provinsi  di  Indonesia  memiliki prevalensi  masalah  gigi  dan  mulut  di  atas prevalensi nasional dan prevalensi kesehatan gigi  dan  mulut  di  Sulawesi  Utara  mencapai 23,5%.  Prevalensi  nasional  karies  aktif 43,4%  sebanyak  11  provinsi  memiliki prevalensi  karies  aktif  dan  salah  satunya adalah Sulawesi Utara (Anonim, 2013). Staphylococcus aureus merupakan salah satu  bakteri  Gram  positif  berbentuk  bulat yang  merupakan  bakteri  patogen  bagi manusia. Staphylococcus  aureus dikenal sebagai  mikroorganisme  patogen  yang dihubungkan  dengan  berbagai  sindrom klinis.  Bakteri  ini  merupakan  bakteri patogen utama pada manusia yang menyebabkan berbagai penyakit secara luas. Staphylococcus aureus juga dapat menginfeksi  jaringan  atau  alat  tubuh  lain yang  menyebabkan  timbulnya  penyakit dengan  tanda-tanda  yang  khas  seperti nekrosis,  peradangan  dan  pembentukan abses  (Bhargavi et  al ,  2010). Dalam  mulut,
bakteri  ini  dapat  menyebabkan  abses dentogen.  Pemberian  antibiotik  dalam  dosis dan  jenis  yang  tepat  diperlukan  untuk menangani  berbagai  kasus  infeksi  yang terjadi.
Beberapa tahun terakhir perhatian pemerintah  Indonesia  terhadap  pemanfaatan obat  herbal  di  bidang  kesehatan  terus meningkat. Banyak penelitian yang ditujukan  untuk  mengembangkan  bahan herbal  sebagai  sumber  obat  yang  memiliki daya hambat terhadap bakteri. Bahan herbal dapat  mengurangi  efek  samping  dan memiliki nilai yang lebih ekonomis (Yuliani dkk,  2011). Jeruk  purut  ( Citrus  hystrix) merupakan  salah  satu  jenis  tanaman  yang berasal  dari  genus  Citrus,  merupakan tanaman  penghasil  minyak  atsiri.  Tanaman ini  banyak  dimanfaatkan  untuk  pengobatan, karena kandungan yang dimilikinya.
Daun dari tanaman jeruk purut digunakan sebagai bahan utama dalam obat- obatan  tradisional.  Daun  jeruk  purut mengandung  alkaloid,  polifenol,  minyak atsiri,  tannin,  flavonoid.  Berdasarkan  hasil penelitian yang dilakukan Yuliani menyatakan bahwa minyak atsiri daun jeruk purut  memiliki  daya  hambat  terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia  coli (Joko,  2010).  Selain  itu buah jeruk purut mengandung setidaknya 21 macam  kumarin,  4  di  antaranya  adalah bergamottin, N-(iminoetil)-L-ornithine (L- NIO), oksipeucedanin ,  5-[(6′,7′-dihidroksi- 3′,  7′-dimetil-2-oktenil)  oksi  psoralen. Kumarin adalah senyawa metabolik sekunder berupa minyak atsiri yang terbentuk  dari  turunan  glukosa  non  atsiri saat  penuaan  atau  pelukaan.  Daging  buah juga  mengandung  saponin  dan  flavonoid (Joko,  2010) d engan  demikian  daun  dan buah jeruk purut memiliki efek farmakologis
sebagai antiseptik dan mengandung antioksidan yang sangat tinggi.
Berdasarkan  kandungan  dan  manfaat obat  herbal  tersebut  peneliti  tertarik  untuk menguji  daya  hambat  perasan  buah  jeruk purut  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus secara In vitro.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental  laboratorik  secara in  vitro , dengan  rancangan  penelitian post  test  only control  group  design . Penelitian  dilakukan di  laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas Kedokteran  UNSRAT  pada  bulan  Oktober- April 2016. Subjek dari penelitian ini adalah Staphylococcus  aureus .  Variabel  penelitian ini  yaitu  Perasan  buah  jeruk  purut  dan Pertumbuhan
Staphylococcus
aureus .
Perasan  buah  jeruk  purut  adalah  Perasan Buah  jeruk  purut, diperoleh  dari  1  buah jeruk  purut di  mana  airnya  mengandung senyawa-senyawa  kimia  yang  bermanfaat sehingga  dapat  menyembuhkan  berbagai penyakit. Pertumbuhan Staphylococcus aureus adalah  pertumbuhan  dari  bakteri  uji setelah  diberikan  perlakuan  dan  diinkubasi selama
24 jam. Pertumbuhan Staphylococcus  aureus dilihat  dari  zona bening  yang  tidak  terbentuk.  Zona  bening yang  terbentuk  menunjukan  pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureuss terhambat oleh  bahan  uji.  Zona  bening  yang  terbentuk diukur  menggunakan  jangka  sorong  dan dinyatakan dalam satuan milimeter.
Metode  pengujian  yang  digunakan dalam penelitian ini ialah metode modifikasi Kirby-Bauer  dengan  menggunakan  cawan petri. Media MHA disediakan sebanyak lima cawan  petri  dengan  15  buah  cawan,  lima sumur  pertama  yang  sudah  terbentuk  pada media agar di lima cawan petri diisi dengan
Perasan  buah  jeruk  purut,  lima  cawan berikutnya  sebagai  control  positif  diisi klindamisin,  lima  cawan  lainnya  diisi dengan  aquades  sebagai  kelompok  kontrol negatif.  Cawan  petri  selanjutnya  diinkubasi dalam  inkubator  pada  suhu  37ºC  selama  24 jam.  Setiap  cawan  petri  berisi  satu  cawan kelompok  intervensi,  satu  sumur  kelompok kontrol  positif  dan  satu  sumur  kelompok kontrol negatif.
Penilaian  zona  hambat  digolongkan menjadi  (1)  tidak  ada  zona  hambat,  (2) lemah yaitu zona hambat kurang dari 5 mm, (3)  sedang  yaitu  zona  hambat  5-10  mm,  (4) kuat  yaitu  zona  hambat  11-20  mm,  (5) sangat  kuat  yaitu  zona  hambat  21-30  mm pada  penelitian  Davis  dan  Stout  pada  tahun 1971.

## HASIL PENELITIAN
Pengujian  daya  hambat  dilakukan dengan  mengukur  diameter  zona  hambat yang  terbentuk  pada  media  NA  yang diinkubasi  bakteri Staphylococcus  aureus selama 24 jam pada suhu 37˚C. Pada media NA tampak  pembentukan zona hambat pada cakram  satu  yang  direndam  dalam  perasan buah  Jeruk  Purut  dan  cakram  dua  yaitu Klindamisin,  tetapi  tidak  terbentuk  zona hambat  pada  cakram  ketiga  yang  direndam dengan  Aquades.  Gambar  hasil  pengukuran zona hambat dapat dilihat pada   tabel 1.
Tabel  1.  Perbandingan  diameter  zona hambat terhadap Staphylococcus aureus Cawan petri Diameter zona hambat (mm) Perasan buah jeruk purut Klindamisin (Kontrol +) Aquades (Kontrol -) I 12,8 22,5 0 II 11,8 19,8 0 III 13,05 17,5 0 IV 13,0 16,7 0 V 14,6 20,8 0 Total 65,7 97,30 0 Rerata 13,05 19,46 0
Data  pada  Tabel  1  menunjukkan  bahwa terdapat  zona  hambat  yang  terbentuk  di sekitar sumur yang diberi perasan buah jeruk purut,  tetapi  lebih  kecil  dibandingkan dengan antibiotik klindamisin.

## PEMBAHASAN
Menurut  Bell  pada  tahun  1984,  dalam Suciawati  A,  bahwa  suatu  bahan  dikatakan memiliki aktivitas antibakteri apabila diameter zona hambat lebih besar atau sama dengan  6  mm  (Suciati  dkk,  2012).  Pada penelitian  David  dan  Stout  pada  Tahun 1971,  aktivitas  antibakteri  dikatakan  sangat kuat jika mempunyai zona hambat mencapai 20 mm atau lebih, zona hambat antara 11-20 mm    termasuk  kategori  kuat,  zona  hambat antara 5-10 mm masuk  kategori  sedang dan zona  hambat  5  mm  atau  kurang  masuk kategori lemah. Berdasarkan hasil pengamatan  yang  dilakukan  pada  setiap pengujian di lima cawan petri memperlihatkan  adanya  zona  hambat  yang terbentuk  di  sekitar  cakram  yang  diberi perasan  buah  jeruk  purut.  Rerata  diameter zona  hambat  yang  dihasilkan  perasan  buah jeruk  purut  sebesar  13,05  mm.  Berdasarkan
penelitian tersebut  maka perasan buah jeruk purut  tergolong  memiliki  kemampuan  kuat dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri

## Staphylococcus aureus.
Perbandingan  hasil  perasan  buah  jeruk purut  dengan  klindamisin  menunjukan bahwa disk cakram yang diberi perasan buah jeruk purut lebih kecil dari disk cakram yang diberi  klindamisin  sedangkan  pada  cakram yang diberi aquades tidak menunjukan zona hambat.  Hasil  diameter  perasan  buah  jeruk purut  lebih  kecil  dari  Klindamisin,  hal  ini dipengaruhi oleh minimal inhibitory concetration klindamisin  telah  diketahui sedangkan  untuk  kemampuan  perasan  buah jeruk  purut  belum  diketahui  konsentrasi paling tepat untuk menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus . Lebarnya  zona  hambat  dapat  dijadikan ukuran  untuk  melihat  kekuatan  senyawa bioaktif  yang  terkandung  dalam  perasan buah  jeruk  purut.  Semakin  lebar  zona hambat  yang  terbentuk  maka  semakin  kuat senyawa bioaktif yang menghambat pertumbuhan bakteri. Perasan yang menunjukkan zona hambat yang kecil bukan berarti sampel tersebut kurang efektif, tetapi dapat disebabkan tidak diukurnya konsentrasi  sampel  uji  yang  digunakan  atau kadar hambat minimumnya  belum diketahui (Setiabudy, 2008).
Menurut Tanu, dalam Setiabudy R suatu bahan antibakteri tertentu aktivitasnya dapat meningkat bila kadar antibakterinya ditingkatkan melebihi kadar hambat minimumnya,  dengan  demikian  ekstrak bawang  bombay  dapat  menghasilkan  zona hambat yang lebih besar apabila ditingkatkan melebihi kadar hambat minimum.
Klindamisin merupakan antimikroba yang bersifat bakteriostatik maupun
bakterisida.
Klindamisin
menunjukan diameter  zona  hambat  yang  lebih  besar karena  memiliki  spektrum  luas  dalam menghambat bakteri. Antibiotik ini mempunyai  mekanisme  dalam  membunuh bakteri  itu  dengan  cara  mencegah  sintesa protein dari bakteri (Waji, 2009).
Hasil penelitian menunjukkan klindamisin  memiliki  diameter zona hambat yang  lebih  besar  dari  jeruk  purut.  Hasil  ini menunjukkan  bahwa  klindamisin  memiliki kemampuan  anti  bakteri  dari  jeruk  purut karena  memiliki  spektrum  luas  dalam menghambat
pertumbuhan
bakteri.
Antibiotik ini mempunyai mekanisme membunuh  bakteri  dengan  cara  mencegah sintesis  protein  dari  bakteri. Klindamisin merupakan antimikroba yang bersifat bakteriostatik maupun bakterisida.
Aquades  tidak  memiliki  zona  hambat, pemilihan  aquades  sebagai  control  negatif karena  aquades  bersifat  netral  dan  tidak memiliki kandungan anti bakteri.
Hasil penelitian menunjukkan kemampuan  buah  jeruk  purut  dalam menghambat  bakteri Staphylococcus  aureus karena  kandungan  minyak  atsiri  yang terdapat  didalam  buah  jeruk  purut  yang dapat  merusak  dinding  sel  sehingga  bakteri terhambat. flavonoid yang bersifat antibakteri  dapat  merusak  integritas  dinding sel  sehingga  dapat  menghambat  atau membunuh bakteri.

## SARAN
1. Diharapkan  dapat  dilakukan  penelitian lanjut  mengenai  daya  hambat  perasan buah jeruk purut sehingga dapat diketahui minimal  inhibitory  concentration (MIC) ekstrak  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus .
2. Diharapkan  agar  ada  penelitian  lebih lanjut  mengenai  efektivitas  antibakteri perasan  buah  jeruk  purut  sebagai alternatif pengobatan di bidang kedokteran gigi khususnya dalam mengobati  abses  dan  penyakit  infeksi rongga mulut lainnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim. 2013. Laporan hasil riset kesehatan  dasar  (Riskesdas)  nasional , Badan  penelitian  dan  pengembangan kesehatan  departemen  kesehatan  RI,
Jakarta.
Bhargavi S, Gopala V, Mukkanti K, Dinesh B,  Krishna  P.  2010.  Increasing emergence  of  antibacterial  resisteance mainly  in  uropathogens:  southest  part of  india. International  journal  of microbiology research ;2(1): p.1-7
Joko  S.  2010. Bertani  jeruk  purut .
Yogyakarta:Pustaka baru press ; hal 1- 17.
Setiabudy  R.  2008. Antimikroba .  In:
Farmakologi dan terapi edisi 5. Tanu I. Jakarta: EGC; h.585
Suciati  A,  Wardyanto,  Sumino,  2012. Efektifitas  daun Rizhapora  mueronata dalam menghambat Aeromonas salmonicida dan Vibrio Harvey.
Jurnal rekayasa dan budidaya perairan . Unila.;1(1)
Waji  RA,  Sugrani  A.  2009. Makalah  kimia organic bahan alam Flavonoid (quercetin). Program S2 Kimia Fakultas matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Unshas. h .4-10
Yuliani R, Peni I, Septi S.R. 2011. Aktivitas
antibakteri  minyak  atsiri  daun  jeruk purut  (Citrus  hystrix)  z  terhadap Staphylococcus
aureus dan Escherichia  coli. Pharmacon. ;  12(2):
50-4.