BioEksakta: Jurnal Ilmiah Biologi Unsoed Volume 2, Nomor 2 (2020): 280 - 287 E-ISSN: 2714-8564
Pengaruh Cercospora sp. terhadap Kandungan Asam Askorbat pada Mekanisme Patogenisitas Bercak Daun Tanaman Cabai : Kajian secara In Vitro dan In Planta

## Nasriyatun Yuliawati, Aris Mumpuni, Juni Safitri Muljowati
Fakultas Biologi Universitas Jenderal Soedirman Jalan dr. Suparno 63 Purwokerto 53122 Email: nasriyatunyuliawati@gmail.com

## Rekam Jejak Artikel:
Diterima  : 09/04/2019 Disetujui  : 09/07/2020

## Abstract
Red chili is a vegetable commodity that has high economic value in Indonesia. Leaf spot disease caused by the  fungus Cercospora sp. is one of the limiting  factors in red chili production. The occurrence  of  leaf  spot  disease  is  determined  by  the  success  of  the  pathogenesis  by  the  fungus Cercospora sp. In addition, red chilies that are resistant to leaf spot disease have higher ascorbic acid content than vulnerable red chilies. The purpose of this study was to determine the ability to grow  pathogens Cercospora sp.  on  the  medium  which  was  given  ascorbic  acid  and  know  the effect  of  inoculation  of  the  pathogen Cercospora sp.  against  ascorbic  acid  content  in  red  chili leaves  ( C.  annuum L.).  This  study  used  an  experimental  design  with  a  completely  randomized design (CRD). In vitro tests carried out consisted of PDA and PDB medium  which were given ascorbic acid with a concentration of 0 mg.l -1 , 0,25 mg.l -1 , 0,5 mg.l -1 , 0,75 mg.l -1 and 1,0 mg.l -1 . In planta testing was using hot chili red chili varieties, large red chili varieties and curly red chili varieties.  The treatments that  were tested included calculation of disease intensity and ascorbic acid  content  in  red  chili  leaves. In  vitro test  the  main  parameters  observed  were  the  diameter colony  of  the  fungus Cercospora sp.  dan  mycelium  dry  weight. In  planta test  the  main parameters observed were the intensity of the disease, while the supporting parameters were the incubation period of the disease, the content of ascorbic acid in the red chili leaves, temperature and  humidity. Data  obtained  were  analyzed  using Analysis  of  Variance (ANOVA)  at  a  95% confidence level, then the treatment that gave a real or very real difference was followed by the Least  Significant  Difference  test  (LSD).  The  results  showed  that  the  pathogen Cercospora sp. able  to  grow  well  on  the  PDA  medium  and  GDP  medium  which  were  given  ascorbic  acid. Inoculation of pathogen Cercospora sp. can increase ascorbic acid content in red chili leaves. Key words: Ascorbic Acid, Cercospora sp., chili leaf spot, Red chili (Capsicum annuum L.).

## Abstrak
Cabai  merah  merupakan  salah  satu  komoditas  sayuran  yang  bernilai  ekonomi  tinggi  di Indonesia. Penyakit  bercak  daun  yang  disebabkan  oleh  jamur Cercospora sp.  merupakan  salah satu  faktor  pembatas  produksi  cabai  merah.  Terjadinya  penyakit  bercak  daun  ditentukan  oleh keberhasilan patogenesis oleh jamur Cercospora sp. Selain itu, cabai merah yang tahan terhadap penyakit bercak daun memiliki kandungan asam askorbat lebih tinggi daripada cabai merah yang rentan.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  mengetahui  kemampuan  tumbuh  patogen Cercospora sp. pada  medium  yang  diberi  asam  askorbat  dan  mengetahui  pengaruh  inokulasi  patogen Cercospora sp.  terhadap  kandungan  asam  askorbat  pada  daun  cabai  merah  ( C.  annuum L.). Penelitian ini menggunakan eksperimental dengan Rancangan Acak Lengkap (RAL). Uji secara in  vitro percobaan  yang  dilakukan  terdiri  atas  medium  PDA  maupun  PDB  yang  diberi  asam askorbat  dengan  konsentrasi  0  mg.l -1 ,  0,25  mg.l -1 ,  0,5  mg.l -1 ,  0,75  mg.l -1 dan  1,0  mg.l -1 .  Uji secara in  planta yaitu  menggunakan  varietas  cabai  merah hot  chili, varietas  cabai  merah  besar dan  varietas  cabai  merah  keriting.  Perlakuan  yang  dicobakan  meliputi  perhitungan  intensitas penyakit  dan  kandungan  asam  askorbat  pada  daun  cabai  merah.  Uji in  vitro parameter  utama yang  diamati  yaitu  diameter  koloni  jamur Cercospora sp.,  dan  bobot  kering  miselium.  Uji in planta parameter utama yang diamati yaitu intensitas penyakit, sedangkan parameter pendukung yaitu  periode  inkubasi  penyakit,  kandungan  asam  askorbat  pada  daun  cabai  merah,  temperatur dan  kelembapan  udara.  Data  yang  diperoleh  dianalisis  menggunakan Analysis  of  Variance (ANOVA)  pada  tingkat  kepercayaan  95%,  kemudian  perlakuan  yang  memberikan  perbedaan nyata  atau  sangat  nyata  dilanjutkan  dengan  uji  Beda  Nyata  Terkecil  (BNT).  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  patogen Cercospora sp.  mampu  tumbuh  dengan  baik  pada  medium  PDA maupun  medium  PDB  yang  diberi  asam  askorbat.  Inokulasi  patogen Cercospora sp.  dapat meningkatkan kandungan asam askorbat pada daun cabai merah.
Kata  kunci: Asam  Askorbat,  Cercospora  sp.,  bercak  daun  cabai,  Cabai  merah  (Capsicum annuum L.).

## PENDAHULUAN
Cabai  merah  ( Capsicum  annuum L.)  merupakan salah  satu  komoditas  sayuran  yang  bernilai  ekonomi tinggi  di  Indonesia.  Tanaman  cabai  dapat  ditanam  di dataran  rendah  maupun  dataran  tinggi.  Produktivitas cabai  di  Indonesia  masih  tergolong  rendah.  Serangan hama  dan  penyakit  menjadi  salah  satu  penyebab rendahnya  produktivitas  tanaman  cabai  (Bosland  & Votava, 1999).
Produksi  cabai  di  Indonesia  sampai  saat  ini  masih belum  dapat  memenuhi  kebutuhan  masyarakat  secara luas.  Rendahnya  produksi  cabai  disebabkan  oleh berbagai  macam  faktor,  diantaranya  adalah  serangan Organisme  Pengganggu  Tumbuhan  (OPT)  berupa serangga  dan  mikroorganisme  seperti  virus,  bakteri  dan jamur.  Tanaman  cabai  seperti  halnya  tanaman  budidaya lainnya juga tidak terlepas dari infeksi patogen penyebab penyakit.  Penyakit  pada  tanaman  memiliki  intensitas penyakit serta dampak serangan yang berbeda-beda yang mengakibatkan  dapat  menurunkan  hasil  produksi (Warisno & Dahana, 2010).
Penyakit  yang  disebabkan  oleh  jamur  yang  sering ditemukan  pada  tanaman  cabai,  diantaranya  adalah penyakit  bercak  daun Cercospora, penyakit  busuk  buah dan  bercak  ranting  yang  disebabkan  oleh  jamur Colletotrichum  capsici (Fuadi  &  Yusuf,  2005).  Bercak daun Cercospora, penyakit  ini  disebut  juga  bercak  mata katak ( Frog eye spot ). Penyakit ini pertama dilaporkan di Jepang  pada  tahun  1915,  kemudian  di  Amerika  tahun 1924  dan  mulai  tersebar  di  Indonesia  tahun  1985  yang mengakibatkan kehilangan nilai ekonomi  mencapai 15% yang disebabkan oleh penyakit tersebut (INTSOY, 1982).
Penyakit  bercak  daun  ditandai  dengan  gejala terdapat  bercak-bercak  bulat  berukuran  kecil  pada  daun, secara perlahan bercak semakin meluas hingga berukuran 0,5  cm  atau  lebih,  serta  bercak  lama-kelamaan  dapat berlubang. Bagian tengah daun terdapat bercak berwarna coklat  pucat,  sedangkan  tepinya  berwarna  lebih  gelap. Bercak pada daun jika terdapat banyak, maka daun akan cepat  menguning  dan  gugur,  bahkan  daun  akan  gugur tanpa  menguning. Cercospora sp.  mampu  menginfeksi tanaman  cabai  merah  pada  bagian  daun,  batang,  tangkai daun,  maupun  tangkai  buah,  tetapi  jarang  terdapat  pada buah. Daun muda pada tanaman cabai merah lebih rentan terhadap  penyakit  bercak  daun  dibandingkan  dengan daun tua (Semangun, 2000).
Cabai  merah  dikenal  kaya  akan  asam  askorbat, antioksidan  yang  sangat  penting  dalam  kehidupan tanaman.  Menurut  Barth et  al. (2006),  peranan  asam askorbat  dalam  seluruh  fase  pertumbuhan  yaitu  pada pembungaan, penuaan, kematian sel dan respon terhadap patogen  melalui  jaringan  tranduksi  sinyal  yang kompleks.  Menurut  Almatsier  (2004),  asam  askorbat pada  cabai  merah  juga  berfungsi  sebagai  pemeliharaan membran  sel,  meningkatkan  daya  tahan  terhadap  infeksi penyakit.
Tanaman  memiliki  respon  fisiologi  yang  sangat bervariasi  terhadap  berbagai  jenis  tekanan  lingkungan. Tanaman  untuk  mencegah  kerusakan  yang  disebabkan oleh  serangan  patogen  dan  adaptasi  terhadap  perubahan lingkungan,  tanaman  memiliki  mekanisme  baik  secara langsung  maupun  tidak  langsung  untuk  menanggapi rangsangan  patogen.  Asam  askorbat  diproduksi  pada tanaman  sebagai  respon  tidak  langsung  terhadap serangan  patogen  pada  lokasi  yang  berbeda  pada tanaman. Respon ini dapat berupa rentan ataupun resisten terhadap patogen. Asam askorbat berperan penting dalam
resistensi  terhadap  patogenesis  (Khan et  al., 2011). Tanaman  cabai  merah  yang  tahan  terhadap  patogen memiliki kandungan asam askorbat yang tinggi daripada tanaman cabai merah yang rentan. Peranan asam askorbat dapat  dikaji  dalam  hal  ketahanan  tanaman  cabai  merah terhadap  patogen Cercospora sp.,  maka  perlu  dilakukan pengujian  kemampuan  tumbuh Cercospora sp.  pada tanaman cabai merah dalam kaitannya dengan keberadaan asam askorbat secara in vitro dan in planta. Berdasarkan  uraian  diatas  rumusan  masalah  yaitu bagaimana  kemampuan  tumbuh  patogen Cercospora sp. pada  medium  yang  diberi  asam  askorbat.  Apakah  ada pengaruh  inokulasi  patogen Cercospora sp.  terhadap kandungan  asam  askorbat  pada  daun  cabai  merah. adapun tujuan penelitian ini yaitu mengetahui kemampuan  tumbuh  patogen Cercospora sp.  pada medium  yang  diberi  asam  askorbat  dan  mengetahui pengaruh  inokulasi  patogen Cercospora sp.  terhadap kandungan asam askorbat pada daun cabai merah.
Manfaat  penelitian  ini  yaitu  melalui  kajian  secara in  vitro dapat  mengetahui  kemampuan  tumbuh  patogen Cercospora sp. pada medium  yang diberi asam askorbat menunjukkan  isolat  tersebut  memiliki  virulensi  yang tinggi,  serta  melalui  kajian  secara in  planta dapat mengetahui  sifat  ketahanan  tanaman  cabai  merah terhadap  infeksi  patogen Cercospora sp. yang  dapat meningkatkan kandungan asam askorbat pada daun cabai merah.

## METODE
Uji secara In vitro Pengujian in  vitro ini  menggunakan  metode eksperimental dengan Rancangan Acak Lengkap (RAL). Uji  terdiri  dari  5  perlakuan  dengan  5  kali  ulangan. Perlakuan yang dicobakan meliputi :
a. Medium PDA + Asam Askorbat
b. Medium PDB + Asam Askorbat
K1 =  Medium tanpa asam askorbat (0 mg.l -1 ) K2 =  Medium  dengan  konsentrasi  asam  askorbat  0,25 mg.l -1
K3 =  Medium  dengan  konsentrasi  asam  askorbat  0,5 mg.l -1
K4 =  Medium  dengan  konsentrasi  asam  askorbat  0,75 mg.l -1
K5 =  Medium  dengan  konsentrasi  asam  askorbat  1,0 mg.l -1
Peremajaan Isolat Cercospora sp. (Choi et al., 1999) Biakan murni isolat Cercospora sp. diambil 1 plug dengan  bor  gabus  diameter  5  mm  dan  diinokulasi  pada medium PDA pada cawan petri secara aseptis, kemudian diinkubasi pada temperatur ruang selama 14 hari.
Pembuatan  Medium  PDA  yang  diberi  Asam Askorbat (Achmad et al., 2013)
Satu liter medium PDA dibuat dari 500 ml akuades yang digunakan untuk merebus 200 g kentang yang telah dipotong dadu. Air rebusan disaring dengan saringan dan hasil saringannya ditampung dalam beaker glass volume 1000  ml.  Sebanyak  20  g dextrose ,  15  g  agar,  1  g chloramphenicol , asam askorbat sesuai dengan perlakuan dan ditambahkan akuades sampai volume akhir 1000 ml, kemudian dipanaskan menggunakan hot plate dan stirrer. Medium  yang  telah  homogen  selanjutnya  dituang  ke dalam  labu  Erlenmeyer,  kemudian  labu  Erlenmeyer disumbat menggunakan kapas dan disterilisasi
menggunakan autoklaf pada temperatur 121 o C, tekanan 2 atm selama 15 menit.
Inokulasi  Jamur Cercospora sp.  pada  Medium  PDA yang diberi Asam Askorbat (Hanif et al., 2012)
Miselium Cercospora sp. diambil  1  plug  dengan bor  gabus  diameter  5  mm  dan  diinokulasi  pada  medium PDA yang diberi asam askorbat sesuai dengan perlakuan pada  cawan  petri  secara  aseptis,  kemudian  diinkubasi pada temperatur ruang selama 8 hari.
Pengukuran Diameter Koloni Cercospora sp. (Agung, 2016)
Pengamatan  dilakukan  setiap  hari  dengan mengukur  masing-masing  dari  setiap  konsentrasi perlakuan  diameter  koloni Cercospora sp.  Pengukuran diameter  koloni  dapat  dihitung  dengan  menggunakan rumus sebagai berikut:
D = d1+d2 2 Keterangan :
D      : diameter (mm)
d1 : diameter vertikal koloni jamur Cercospora sp. d2 : diameter horizontal koloni jamur Cercospora sp.
Pembuatan  Medium  PDB  yang  diberi  Asam Askorbat (Achmad et al., 2013)
Satu  liter  medium  PDB  dibuat  dari  500  ml akuades  yang  digunakan  untuk  merebus  200  g  kentang yang  telah  dipotong  dadu.  Air  rebusan  disaring  dengan saringan  dan  hasil  saringannya  ditampung  dalam beaker glass volume  1000  ml.  Sebanyak  20  g dextrose ,  1  g chloramphenicol , asam askorbat sesuai dengan perlakuan dan ditambahkan akuades sampai volume akhir 1000 ml, kemudian dipanaskan menggunakan hot plate dan stirrer. Medium  yang  telah  homogen  selanjutnya  dituang  ke dalam labu Erlenmeyer volume 250 ml sebanyak 100 ml, kemudian  labu  Erlenmeyer  disumbat  menggunakan kapas  dan  disterilisasi  menggunakan  autoklaf  pada temperatur 121 o C, tekanan 2 atm selama 15 menit.
Inokulasi  Jamur Cercospora sp.  pada  Medium  PDB yang diberi Asam Askorbat (Hanif et al., 2012)
Miselium Cercospora sp.  diinokulasi  dari medium  PDA  pada  cawan  petri  peremajaan  ke  dalam labu  Erlenmeyer  volume  250  ml  yang  berisi  100  ml medium  PDB  yang  diberi  asam  askorbat  sesuai  dengan perlakuan sebanyak 5 plug dengan bor gabus diameter 5 mm secara aseptis, kemudian diinkubasi pada temperatur ruang selama 14 hari.
Pemanenan dan Penimbangan Bobot Kering Miselium Cercospora sp. (Maharani et al., 2014) Miselium Cercospora sp.  yang  telah  diinkubasi selama  2  minggu  dipanen  dan  disaring  menggunakan kertas  Whatman  no.41.  Alumunium  foil  ditimbang terlebih dahulu, kemudian miselium  yang telah tersaring ditaruh  diatas  alumunium  foil  dan  dikeringkan  dalam oven  pada  temperatur  50-60 o C  selama  24  jam  sampai miselium  kering.  Miselium  yang  telah  kering  ditimbang bobot  keringnya,  kemudian  dikurangi  bobot  alumunium foil dan hasilnya dicatat
.

## Uji secara In planta
Uji  ini  menggunakan  metode  eksperimental dengan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL).  Uji  secara in planta yang  dicobakan  menggunakan  varietas  cabai merah hot  chili, cabai  merah  besar  dan  cabai  merah keriting  masing-masing  diulang  5  kali.  Perlakuan  yang dicobakan meliputi 2 kelompok yaitu:
a. Perhitungan Intensitas Penyakit yaitu:
V1 = Varietas cabai merah hot chili
V2 = Varietas cabai merah besar V3 = Varietas cabai merah keriting P0 = Tidak diinokulasi patogen Cercospora sp. P1 = Diinokulasi patogen Cercospora sp.
b. Pengukuran  Kandungan  Asam  Askorbat  pada Daun  Cabai  Merah  menggunakan  metode Spektrofotometri UV-VIS yaitu:
V1 = Varietas cabai merah hot chili V2 = Varietas cabai merah besar V3 = Varietas cabai merah keriting P0  =  Daun  muda  (bagian  atas)  tanaman  cabai merah
P1  =  Daun  tua  (bagian  bawah)  tanaman  cabai merah
Persiapan Tanaman Uji (Herwidyarti et al., 2013) Media  tanam  berupa  tanah  dan  pupuk  kandang dimasukan  ke  dalam polybag ukuran  20  x  25  dengan perbandingan 1:1, selanjutnya disterilisasi dengan prinsip metode  panas  lembab  menggunakan  drum  dengan temperatur  90-100 o C  selama  5  jam.  Media  tanam  yang telah  disterilisasi,  kemudian  dibiarkan  selama  24  jam agar  temperatur  menurun.  Benih  cabai  merah  disemai pada nampan sampai berumur 30 hari. Benih cabai yang sudah  disemai  selama  30  hari,  kemudian  dilakukan penanaman  bibit  cabai  masing-masing  ditanam  1  bibit setiap polybag.
Pembuatan  Inokulum  Jamur Cercospora sp.  dan Pengujian  Patogenisitas  Jamur Cercospora sp.  pada Daun Cabai Merah (Rusli et al., 2007) Isolat jamur Cercospora sp. berumur 7 hari pada medium  miring  ditambahkan  10  ml  akuades  steril, kemudian  dihomogenkan  dengan vortex. Suspensi konidium  diambil  sebanyak  1  ml  menggunakan mikropipet,  kemudian  dihitung  kerepatannya  dibawah mikroskop dengan menggunakan haemocytometer. Suspensi  konidium Cercospora sp.  yang  digunakan untuk  membuat  suspensi  dengan  konsentrasi  10 5 konidia.ml -1 .  Inokulasi  dilakukan  dengan  cara  semprot suspensi  konidium  pada  permukaan  daun  cabai  merah dengan  menggunakan handsprayer, kemudian  dilakukan pengamatan setiap hari sampai timbulnya gejala penyakit bercak daun pada daun tanaman cabai merah.

## Pengamatan Periode Inkubasi Penyakit
Pengamatan periode inkubasi penyakit dilakukan sejak  satu  hari  setelah  inokulasi  suspensi  konidium Cecospora sp. pada permukaan daun cabai merah selama 14  hari  dengan  cara  mencatat  hari  munculnya  gejala penyakit bercak daun pada setiap perlakuan.
Perhitungan Intensitas Penyakit (Korwa et al., 2009) Pengamatan  intensitas  penyakit  bercak  daun Cercospora sp.  dilakukan  diakhir  perode  inkubasi penyakit. Intensitas penyakit bercak daun Cercospora sp. dihitung dengan menggunakan rumus sebagai berikut:
IP = Σ (n x v) X 100% N x Z
Keterangan: IP   = Intensitas Penyakit (%)
n    =  Jumlah  daun  yang  terinfeksi  setiap  kategori serangan
v  = Nilai skala dari tiap kategori serangan
N   = Jumlah daun yang diamati
V   = Nilai skala dari kategori serangan tertinggi
Nilai kategori serangan (skor) yang dipakai adalah menurut  Mount  &  Lacy  (1982)  yang  dimodifikasi sebagai berikut :
0 = tidak bergejala
1 = Bercak pada daun berdiamater 0,1 cm (0 - 10%)
2 = Bercak pada daun berdiameter 0,5 cm (0 - 30%) 3 = Bercak pada daun berdiameter 1,0 cm (0 - 50%) 4  =  Bercak  pada  daun  berdiameter  1,0-2,0  cm  lebih dari 50%
Hasil  perhitungan  Intensitas  Penyakit,  kemudian dikategorikan  berdasarkan  kriteria  ketahanan  tanaman terhadap  infeksi  penyakit  bercak  daun  berdasarkan  pada Intensitas Penyakit.
Pengukuran  Kandungan  Asam  Askorbat  pada  Daun Cabai Merah (Badriyah & Manggara, 2015)

## Pembuatan Larutan Induk Asam Askorbat
Asam  askorbat  ditimbang  sebanyak  50  mg dilarutkan  dengan  akuades  sebanyak  10  ml,  kemudian dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur  volume  500  ml  dan ditambahkan akuades sampai tanda batas.

## Penentuan  Panjang  Gelombang  Maksimum  Asam Askorbat
Larutan asam askorbat 100 ppm dipipet sebanyak 1  ml  ke  dalam  labu  ukur  50  ml  ditambahkan  akuades sampai  tanda  batas  dan  dihomogenkan.  Diukur  serapan maksimum  pada  panjang  gelombang  260  nm  dengan menggunakan blanko akuades.

## Pembuatan Kurva Standar Asam Askorbat
Larutan  asam  askorbat  100  ppm  dipipet  secara berturut-turut  masing-masing  sebanyak  2  ml,  4  ml,  6  ml dan  8  ml  (4  ppm,  8  ppm,  12  ppm,  16  ppm)  lalu dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur  10  ml,  kemudian ditambahkan akuades hingga tanda batas dan dihomogenkan. Diukur serapan menggunakan spektrofotometer  UV-Vis  pada  panjang  gelombang  260 nm,  kemudian  dibuat  kurva  kalibrasi  antara  konsentrasi (x)  dan  absorbansi  (y)  sehingga  diperoleh  persamaan garis lurus Y = 0,039X + 0,008.

## Penentuan  Kandungan  Asam  Askorbat  dengan Spektrofotometer UV-Vis
Daun  cabai  merah  diambil  bagian  muda  dan  tua masing-masing  sebanyak  1  g  dihaluskan  menggunakan mortar dan pestle, kemudian  ditambahkan  akuades sebanyak  10  ml  lalu  disaring  dan  diambil  filtratnya. Filtrat  yang  diperoleh  dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur 100  ml,  ditambahkan  akuades  sampai  mencapai  tanda batas.  Filtrat  diukur  serapan  menggunakan  Ultraviolet visible (UV-Vis) spektrofotometer pada panjang gelombang 260 nm. Nilai absorbansi dicatat dan dihitung kandungan  asam  askorbat  dengan  rumus  y  =  a+bx.
Dimana x adalah konsentrasi (mg.g -1 ) dan y adalah hasil absorbansi. Nilai a dan b merupakan nilai konstanta dan arah regresi yang diperoleh dari kurva standar.

## Pengukuran  Temperatur  dan  Kelembapan  Udara  di
Green House (Pitojo, 2003) Pengukuran  faktor  lingkungan  dilakukan  di Green House Fakultas  Biologi  Universitas  Jenderal  Soedirman selama  14  hari  dimulai  setelah  inokulasi  patogen  pada tanaman  cabai.  Pengukuran  temperatur  dan  kelembapan udara  diukur  setiap  hari  pada  pagi  hari  pukul  07.00  dan sore  hari  pukul  17.00  setelah  inokulasi  patogen  hingga akhir inkubasi dengan menggunakan termohygrometer .

## Analisis Data
Data  uji in  vitro yang  diperoleh  dianalisis menggunakan Analysis  of  Variance (ANOVA)  pada tingkat  kepercayaan  95%,  kemudian  perlakuan  yang memberikan  perbedaan  nyata  atau  sangat  nyata dilanjutkan dengan Uji Beda Nyata Terkecil (BNT). Data uji in  planta yang  diperoleh  dianalisis  menggunakan Analysis of Variance (ANOVA) pada tingkat kepercayaan 95%, kemudian perlakuan yang memberikan  perbedaan  nyata  atau  sangat  nyata dilanjutkan dengan Uji Beda Nyata Jujur (BNJ) (Steel & Torrie, 1990).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini  isolat Cercospora sp.  yang  diinokulasi  pada  medium  yang  diberi  asam askorbat  mampu  tumbuh  pada  semua  perlakuan.  Rata- rata  diameter  koloni  isolat Cercospora sp.  dan  rata-rata bobot kering miselium menunjukkan perbedaan kemampuan  isolat  tersebut  untuk  tumbuh  pada  medium dengan  konsentrasi  asam  askorbat  yang  berbeda. Kemampuan tumbuh ini ditunjukkan dengan bertambahnya  diameter  koloni  isolat Cercospora sp. pada medium tersebut (Gambar 1.).
Gambar 1.  Daigram  Batang  Rata-rata  Diameter  Koloni (mm)  Isolat Cercospora sp.  yang  ditumbuhkan  pada Medium PDA yang diberi Asam Askorbat.
Keterangan: K1 : medium PDA tanpa asam askorbat K2 : medium PDA dengan konsentrasi asam askorbat 0,25 mg.l -1 K3 : medium PDA dengan konsentrasi asam askorbat 0,5 mg.l -1
K4 : medium PDA dengan konsentrasi asam askorbat 0,75 mg.l -1 K5 : medium PDA dengan konsentrasi asam askorbat 1,0 mg.l -1
Berdasarkan  hasil  penelitian    pertumbuhan  koloni jamur Cercospora sp.  paling  tinggi  yaitu  perlakuan  K5 (medium  PDA  dengan  konsentrasi  asam  askorbat  1,0 mg.l -1 ) dengan rata-rata diameter koloni sebesar 83,4 mm dan  pertumbuhan  koloni  jamur Cercospora sp.  paling rendah  yaitu  perlakuan  K2  (medium  PDA  dengan konsentrasi  asam  askorbat  0,25  mg.l -1 )  dengan  rata-rata diameter  koloni  sebesar  65,2  mm.  isolat Cercospora sp. pada  medium  PDA  yang  diberi  Asam  Askorbat.  Data rata-rata  diameter  koloni Cercospora sp.  dianalisis menggunakan  ANOVA  pada  tingkat  kesalahan  5% Berdasarkan  hasil  uji  ANOVA,  penambahan  asam
83.2 65.2 79.4 76.4 83.4 0 50 100 K1 K2 K3 K4 K5 Konsentrasi Asam Askorbat D ia m et er K o lo n i (m m )
askorbat pada medium PDA berpengaruh nyata terhadap pertumbuhan  diameter  koloni  jamur Cercospora sp.  Hal ini  dikarenakan  patogen Cercospora sp.  tetap  mampu tumbuh  dan  beradaptasi  dengan  lingkungannya  pada medium PDA yang diberi asam askorbat.
Tabel 1.  Hasil  Uji  Lanjut  Beda  Nyata  Terkecil  (BNT) Pengaruh Pemberian Asam Askorbat pada Medium PDA terhadap Diameter Koloni Cercospora sp.
No. Perlakuan Rerata Diameter Koloni (mm) 1. K1 83,20 b 2. K2 65,20 a 3. K3 79,40 b 4. K4 76,40 b 5. K5 83,40 b
Keterangan  :  Angka  yang  disertai  huruf  berbeda  menunjukkan berbeda nyata (p<0,05) K1 : medium PDA tanpa asam askorbat K2 : medium PDA dengan konsentrasi asam askorbat 0,25 mg.l -1 K3 : medium PDA dengan konsentrasi asam askorbat 0,5 mg.l -1 K4 : medium PDA dengan konsentrasi asam askorbat 0,75 mg.l -1 K5 : medium PDA dengan konsentrasi asam askorbat 1,0 mg.l -1
Berdasarkan  hasil  uji  lanjut  BNT  (Tabel  1.), pertumbuhan  koloni Cercospora sp.  pada  medium  PDA yang  diberi  asam  askorbat  menunjukkan  bahwa  pada perlakuan  K2  (medium  PDA  dengan  konsentrasi  asam askorbat  0,25  mg.l -1 )  berbeda  nyata  dengan  perlakuan lainnya  yaitu  perlakuan  K1,  K3,  K4  dan  K5  (medium PDA  dengan  konsentrasi  asam  askorbat  0  mg.l -1 ,  0,5 mg.l -1 , 0,75  mg.l -1 dan  1,0  mg.l -1 ).  Hal  ini  dikarenakan medium  PDA  dengan  konsentrasi  asam  askorbat  0,25 mg.l -1 kurang  sesuai  untuk  pertumbuhan  patogen Cercospora sp.  Hai  ini  berbeda  dengan  pernyataan Muljowati et  al. (2018),  medium  dengan  penambahan asam  askorbat  dengan  konsentrasi  0,5  mg.l -1 memiliki kemampuan tumbuh terbaik untuk pertumbuhan jamur C. acutatum.
Kemampuan  tumbuh  isolat Cercospora sp.  juga ditunjukkan dengan bertambahnya bobot kering miselium.  Bobot  kering  miselium Cercospora sp. menunjukkan bahwa isolat tersebut mampu menggunakan  nutrien  yang  tersedia  pada  medium tersebut.  Secara  umum,  isolat  tersebut  mampu  tumbuh pada  medium  PDB  yang  diberi  asam  askorbat  (Gambar 2.).
Gambar 2.  Diagram  Batang  Rata-rata  Bobot  Kering Miselium (mg) Isolat Cercospora sp. yang ditumbuhkan pada Medium PDB yang diberi Asam Askorbat Keterangan:
K1 : medium PDB tanpa asam askorbat K2 : medium PDB dengan konsentrasi asam askorbat 0,25 mg.l -1 K3 : medium PDB dengan konsentrasi asam askorbat 0,5 mg.l -1 K4 : medium PDB dengan konsentrasi asam askorbat 0,75 mg.l -1 K5 : medium PDB dengan konsentrasi asam askorbat 1,0 mg.l -1
Berdasarkan hasil penelitian bobot kering miselium  jamur Cercospora sp.  paling  tinggi  yaitu perlakuan  K4  (medium  PDB  dengan  konsentrasi  asam askorbat  0,75  mg.l -1 )  dengan  rata-rata  bobot  kering miselium  sebesar  340  mg  dan  bobot  kering  miselium jamur Cercospora sp.  paling  rendah  yaitu  perlakuan  K5 (medium  PDB  dengan  konsentrasi  asam  askorbat  1,0 mg.l -1 )  dengan  rata-rata  bobot  kering  miselium  sebesar 120  mg.  isolat Cercospora sp.  pada  medium  PDB  yang diberi  asam  askorbat  dan  bobot  kering  miselium.  Data rata-rata  bobot  kering  miselium  dianalisis  menggunakan ANOVA  dengan  tingkat  kesalahan  5%.  Berdasarkan hasil  uji  ANOVA,  penambahan  asam  askorbat  pada medium  PDB  berpengaruh  nyata  terhadap  bobot  kering miselium Cercospora sp.
Tabel  2. Hasil  Uji  Lanjut  Beda  Nyata  Terkecil  (BNT) Pengaruh Pemberian Asam Askorbat pada Medium PDB terhadap Bobot Kering Miselium Cercospora sp.
No. Perlakuan Rerata Bobot Kering Miselium (mg) 1. K1 220,00 b 2. K2 220,00 b 3. K3 320,00 c 4. K4 340,00 c 5. K5 120,00 a
Keterangan  :  Angka  yang  disertai  huruf  berbeda  menunjukkan berbeda nyata (p<0,05)
K1 : medium PDB tanpa asam askorbat K2 : medium PDB dengan konsentrasi asam askorbat 0,25 mg.l -1 K3 : medium PDB dengan konsentrasi asam askorbat 0,5 mg.l -1
K4 : medium PDB dengan konsentrasi asam askorbat 0,75 mg.l -1
K5 : medium PDB dengan konsentrasi asam askorbat 1,0 mg.l -1
Berdasarkan  hasil  uji  lanjut  BNT  (Tabel  2.), pertumbuhan  miselium Cercospora sp.  pada  medium PDB  yang  diberi  asam  askorbat  menunjukkan  bahwa perlakuan  K5  (medium  PDB  dengan  konsentrasi  asam askorbat  1,0  mg.l -1 )  berbeda  nyata  dengan  perlakuan lainnya  yaitu  perlakuan  K1,  K2,  K3  dan  K4  (medium PDB  dengan  konsentrasi  asam  askorbat  0  mg.l -1 ,  0,25 mg.l -1 , 0,5  mg.l -1 dan  0,75  mg.l -1 ).  Hal  ini  dikarenakan medium  PDB  dengan  konsentrasi  asam  askorbat  1,0 mg.l -1 kurang  sesuai untuk  pertumbuhan  patogen Cercospora sp.  Medium  PDB  pada  konsentrasi  tersebut memiliki  miselium  yang  tipis  dan  inokulum  pada medium  tersebut  tidak  tumbuh  semua,  sehingga  bobot kering miselium yang dihasilkan lebih sedikit dibandingkan  dengan  konsentrasi  lainnya.  Menurut Muljowati et al. (2018), patogen Cercospora sp. mampu tumbuh  baik  pada  medium  PDB  maupun  medium  PDA yang diberi asam askorbat. Dengan demikian, kemampuan  tumbuh  patogen Cercospora sp.  pada medium  yang  diberi  asam  askorbat  menunjukkan  bahwa isolat tersebut memiliki virulensi yang tinggi.

## Uji secara In planta
Berdasarkan  hasil  uji  ANOVA  dengan  tingkat kesalahan  5%,  menunjukkan  bahwa  inokulasi  patogen Cercospora sp.  berpengaruh  nyata  terhadap  intensitas penyakit  bercak  daun  pada  tanaman  cabai  merah. Menurut  Jumardi  (1972),  intensitas  penyakit  pada  setiap minggu  meningkat  seiring  dengan  pertumbuhan  tinggi tanaman.  Bhat et  al. (2008),  menambahkan  bahwa intensitas penyakit yang disebabkan oleh Cercospora sp. dapat  mencapai  32-44%  bergantung  pada  kondisi lingkungan  yang  mendukung  dan  teknik  budidaya. Gejala  yang  muncul  berupa  bercak-bercak  bulat
220 220 320 340 120 0 50 100 150 200 250 300 350 400 K1 K2 K3 K4 K5 Konsentrasi Asam Askorbat B o b o t Ke ri n g Mi sel iu m ( m g )
berukuran  kecil  pada  permukaan  daun,  bercak  pada bagian  tengah  berwarna  coklat  pucat  dan  bagian  tepi bercak berwarna coklat gelap.
Tabel 3.  Hasil  Uji  Lanjut  Beda  Nyata  Jujur  (BNJ) Pengaruh  Inokulasi  Patogen Cercospora sp.  terhadap Intensitas  Penyakit  Bercak  Daun  pada  Daun  Cabai Merah.
No. Perlakuan Rerata Intensitas Penyakit (%) 1. V1P0 0,000 a 2. V2P0 0,000 a 3. V3P0 0,000 a 4. V1P1 14,440 b 5. V2P1 15,720 b 6. V3P1 17,800 c
Keterangan  :  Angka  yang  disertai  huruf  berbeda  menunjukkan berbeda nyata (p<0,05) V1P0 = varietas cabai merah hot chili tidak diinokulasi patogen V2P0 = varietas cabai merah besar tidak diinokulasi patogen V3P0 = varietas cabai merah keriting tidak diinokulasi patogen V1P1 = varietas cabai merah hot chili diinokulasi patogen V2P1 = varietas cabai merah besar diinokulasi patogen V3P1 = varietas cabai merah keriting diinokulasi patogen
Berdasarkan  hasil  uji  lanjut  BNJ  (Tabel  3.), menunjukkan  bahwa  perlakuan  V1P0,  V2P0,  V3P0 berbeda  tidak  nyata,  hal  ini  dikarenakan  pada  perlakuan tersebut  tanaman  cabai  merah  tidak  diinokulasi  patogen Cercospora sp.  Perlakuan  V3P1  menujukkan  berbeda nyata  dengan  perlakuan  V1P1  dan  V2P1,  hali  ini dikarenakan  tanaman  cabai  merah  varietas  cabai  merah keriting  memiliki  sifat  ketahanan  tanaman  ditunjukkan dengan  respon  Sangat  Tahan  (ST),  sedangkan  varietas cabai  merah hot  chili dan  varietas  cabai  merah  besar memiliki  sifat  ketahanan  tanaman  ditunjukkan  dengan respon Tahan (T) berdasarkan kriteria ketahanan tanaman terhadap  infeksi  penyakit  bercak  daun  berdasarkan  pada intensitas  penyakit.  daun  cabai  merah  sehat  dan  daun cabai merah yang terinfeksi patogen. Menurut Hidayah et al. (2010),  tanaman  dikatakan  tahan  jika  tanaman menunjukkan  respon  dengan  tidak  adanya  gejala penyakit.  Tanaman  yang  tahan  seringkali  ditemukan adanya  kandungan  senyawa  antimikroba  yang  dapat menghambat  perkembangan  patogen  didalam  tanaman tersebut.  Selain  itu,  reaksi  dari  tanaman  yang  tahan karena  adanya  akumulasi  fitoaleksin  dalam  konsentrasi tinggi sehingga dapat membatasi infeksi patogen.
Ketahanan  tanaman  terhadap  serangan  patogen dapat  dilihat  dari  periode  inkubasi  penyakit  yaitu  pada masing-masing  varietas  cabai  merah  memiliki  periode inkubasi  penyakit  dengan  rata-rata  8  hari.  Menurut Lehman  (1928),  jamur Cercospora sp.  pada  tanaman memiliki  periode  inkubasi  rata-rata  8  hari  setelah inokulasi.  Jamur  dapat  bertahan  dalam  biji  dan mengurangi  kemampuan  perkecambahan  biji.  Bercak pada  kotiledon  merupakan  sumber  inokulum  primer untuk infeksi pada daun muda.
Faktor lingkungan merupakan salah satu penyebab perkembangan penyakit bercak daun. Kondisi lingkungan saat penelitian, kelembapan berkisar antara 81-93% pada pagi  hari  dan  69-81%  pada  sore  hari,  sedangkan temperatur  berkisar  antara  21-24°C  pada  pagi  hari  dan 26-28°C  pada  sore  hari.  Berdasarkan  data  yang diperoleh,  dalam  hal  ini  kondisi  lingkungan  yang mendukung  perkembangan  penyakit  bercak  daun. Menurut Bhat et al . (2009), kondisi lingkungan terutama temperatur  dan  kelembapan  berkolerasi  positif  terhadap perkembangan  penyakit  bercak  daun  yang  disebabkan oleh Cercospora sp.  Michereff et  al. (2011),
menambahkan  bahwa  temperatur  yang  sesuai  untuk perkembangan  penyakit  bercak  daun  berkisar  di  atas 25 o C dan kelembapan hingga 90%. Mekanisme jamur Cercospora sp. dalam menyebabkan  penyakit  bercak  daun  pada  tanaman  cabai merah  menurut  Suhardi  &  Wasito  (1990),  dimulai  dari konidium  menempel  pada  permukaan  daun,  kemudian berkecambah  membentuk  tabung  kecambah,  lalu menembus  ke  permukaan  daun  dan  menyebar  keseluruh daun.    Yunasfi  (2008),  menambahkan  bahwa  infeksi patogen  dapat  menyebabkan  terjadinya  perubahan  pada lubang  stomata  yang  dapat  mempengaruhi  laju  asimilasi karena  terhambatnya  laju  aliran CO 2. Adanya  perubahan dalam  fiksasi  CO 2 menyebabkan  terjadinya  aktivitas enzim yang berperan dalam fotosintesis.
Pengaruh  inokulasi  patogen Cercospora sp.  juga ditunjukkan  dengan  bertambahnya  kandungan  asam askorbat pada daun cabai merah. Daun cabai merah yang digunakan  untuk  pengukuran  kandungan  asam  askorbat menggunakan sampel daun muda dan daun tua.
Gambar 3. Diagram Batang Rata-rata Kandungan Asam Askorbat pada Daun Cabai Merah (mg.g -1 ) Keterangan: V1 = varietas cabai merah hot chili V2 = varietas cabai merah besar V3 = varietas cabai merah keriting P0 = daun muda (bagian atas) tanaman cabai merah P1 = daun tua (bagian bawah) tanaman cabai merah
Berdasarkan  hasil  penelitian  pada  Gambar  3. kandungan  asam  askorbat  pada  daun  tua  tanaman  cabai merah  yang  diinokulasi  patogen  maupun  daun  muda yang  terbentuk  selama  periode  inkubasi  penyakit memiliki  kandungan  asam  askorbat  yang  tingggi    filtrat uji  kandungan  asam  askorbat.  Data  kandungan  asam askorbat  dianalisis  menggunakan  ANOVA  dengan tingkat  kesalahan  5%..  Berdasarkan  hasil  ANOVA, inokulasi  patogen Cercospora sp.  berpengaruh  terhadap meningkatnya kandungan asam askorbat pada daun cabai merah.
Tabel 4. Hasil  Uji  Lanjut  Beda  Nyata  Jujur  (BNJ) Pengaruh  Inokulasi  Patogen Cercospora sp.  terhadap Kandungan Asam Askorbat pada Daun Cabai Merah
No. Perlakuan
Rerata Kandungan As. Askorbat (mg.g -1 ) 1. V1P0 271,56 a 2. V2P0 271,86 a 3. V3P0 276,96 a 4. V1P1 282,26 a 5. V2P1 292,22 a 6. V3P1 320,56 b
Keterangan  :  Angka  yang  disertai  huruf  berbeda  menunjukkan berbeda nyata (p<0,05)
V1P0 = daun muda (bagian atas) varietas cabai merah hot chili V2P0 = daun muda (bagian atas) varietas cabai merah besar V3P0 = daun muda (bagian atas) varietas cabai merah keriting
271.56 271.86 276.96
282.26 292.22 320.56 240 260 280 300 320 340 V1 V2 V3 P0 P1 Varietas Cabai Merah Ka n d u n g a n A s. A sk o rbat ( m g .g -1 )
V1P1 = daun tua (bagian bawah) varietas cabai merah hot chili V2P1 = daun tua (bagian bawah) varietas cabai merah besar
V3P1 = daun tua (bagian bawah) varietas cabai merah keriting
Berdasarkan  hasil  uji  lanjut  BNJ  (Tabel  4.), pengaruh  inokulasi  patogen Cercospora sp.  terhadap kandungan asam askorbat menunjukkan bahwa perlakuan V3P1  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  lainnya  yaitu V1P0,  V2P0,  V3P0,  V1P1  dan  V2P1.  Menurut  Om  & Khirbat (2011), varietas cabai merah yang tahan terhadap penyakit bercak daun memiliki kandungan asam askorbat yang  tinggi.  Ayua et  al. (2006),  melaporkan  bahwa kandungan asam askorbat pada daun tua yang diinokulasi patogen  maupun  daun  muda  yang  terbentuk  selama periode  inkubasi  penyakit  memiliki  kandungan  asam askorbat  yang  tinggi.  Hal  ini  dikarenakan  daun  muda aktif  secara  fisiologi  daripada  daun  tua.  Daun  muda memerlukan  lebih  banyak  asam  askorbat  untuk memenuhi proses fisiologisnya, sedangkan daun tua yang diinokulasi  patogen  memiliki  kemampuan  yang  tinggi untuk  mensintesis  asam  askorbat  tetapi  pemanfaatnya lebih rendah.
Patogen Cercospora sp.  mampu  tumbuh  dengan baik  pada  medium  PDA  maupun  medium  PDB  yang diberi asam askorbat menunjukkan bahwa isolat tersebut memiliki  virulensi  yang  tinggi,  serta  dapat  menginfeksi dengan  baik  jika  diinokulasi  pada  daun  cabai  merah. Varietas  cabai  merah  keriting  memiliki  sifat  ketahanan ditunjukkan  dengan  respon  sangat  tahan  terhadap patogen Cercopora sp.  berdasarkan  nilai  intensitas penyakit yang dihasilkan dengan dibuktikannya meningkatkan kandungan asam askorbat pada daun cabai merah sebagai  mekanisme pertahanan terhadap serangan patogen.  Hal  ini  sesuai  dengan  pernyataan  Muljowati et al. (2018), bahwa adanya infeksi patogen pada tumbuhan memberikan  respon  pertahanan  dengan  memproduksi asam  askorbat  berlebih  dibandingkan  pada  kondisi normal.

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  dan  pembahasan  diperoleh kesimpulan  bahwa  patogen Cercospora sp.  mampu tumbuh dengan baik pada medium PDA maupun medium PDB  yang  diberi  asam  askorbat.  Inokulasi  patogen Cercospora sp.  dapat  meningkatkan  kandungan  asam askorbat pada daun cabai merah.

## DAFTAR REFERENSI
Achmad,  Herliyana,  E.N.,  &  Octaviani,  E.A.  2013. Pengaruh  pH,  Penggoyangan  Media,  dan
Penambahan Serbuk Gergaji terhadap Pertumbuhan Jamur Xylaria sp. Jurnal Silvikultur Tropika , 4(2), pp. 57-61.
Agung,  S.  2016.  Efektivitas  Ekstrak  Daun  Mimba, Mengkudu,  Jarak,  Sirih  dan  Serai  sebagai Biofungisida  Penyebab  Penyakit  Antraknosa ( Colletotrichum  gloeosporioides )  pada  Jambu Biji  ( Psidium  guajava )  Secara  In  Vitro. Skripsi. Jurussan Agroteknologi Fakultas Pertanian Universitas Lampung.
Almatsier,  S.  2004. Prinsip  Dasar  Ilmu  Gizi. Jakarta: Gramedia Pustaka Umum.
Ayua,  E.,  Mugalavai,  V.,  Simon,  J.,  Weller,  S.,  Obura, P., & Nyabinda, N. 2016. Ascorbic Acid Content in  Leaves  of  Nightshade  ( Solanums sp.)  and
Spider Plant ( Cleome gynandra ) Varieties Grown Under  Different  Fertilizer  Regimes  in  Western Kenya. African  Journal  of  Biotechnology, 15(7), pp. 199-206.
Badriyah, L., & Manggara, A.B. 2015. Penetapan Kadar Vitamin C pada Cabai Merah ( Capsicum Annuum L.)  menggunakan  Spektrofotometri  UV-Vis. Jurnal Wiyata , 2(1), pp. 25-28.
Barth, C., De-Tullio, M., & Conklin, P.L. 2006. The Role of  Ascorbic  Acid  in  the  Control  of  Flowering Time  and  the  Onset  of  Senescence. Journal  of Experimental Botany, 57(8), pp. 1657-1665.
Bhat, F.A., Dar, G.M., Tell, M.A., & Akmad, M.F. 2008. Froreye  Leaf  Spot  of  Bell  Pepper  in  Kashmir: Prevalence  and  Cause. Kartanataka  J  Agric  Sci, 21(3), pp. 460-461.
Bhat, F.A., Tell, A.M., Ahmad, N.Q., & Ahmed, S. 2009. Host  Range  an  Epidemiology  of Cercospora Capsici. International Journal of Plant Sciences , 4(1), pp. 44-48.
Bosland, P.W., & Votava, E.J. 1999. Peppers : Vegetable and Spice. Capsicum sp. London: CABI publ.
Choi, Y.W., Hyde, K.D., & Ho, W.H. 1999. Single Spore Isolation of Fungi. Journal Fungla Divers , 3, pp. 29-38.
Dharmaputra,  O.S.,  Agustin,  W.G.,  &  Nampiah.  1989.
Penuntun Praktikum: Mikologi Dasar. Departemen Pendidikan dan Kebudayaan. Direktorat Jendral Pendidikan Tinggi Pusat Antar Universitas Ilmu Hayati. Bogor: IPB.
Fuadi,  I.,  &  Yusuf,  R.  2005. Penerapan  Sistem Pengendalian  Hama  Terpadu  pada  Tanaman Cabe . Sagu, pp. 1-5.
Hanif,  A.,  Suryanto,  D.,  &  Nurwahyuni,  I.  2012. Pemanfaatan Bakteri Kitinolik dalam Menghambat Pertumbuhan
Curvularia sp. Penyebab  Penyakit  Bercak  Daun  pada  Tanaman Mentimun. Jurnal  Saintia  Biologi, 1(1),  pp.  33- 39.
Herwidyarti,  K.H.,  Ratih,  S.,  &  Sembodo,  Dad,  R.J. 2013.  Keparahan  Penyakit  Antraknosa  pada Cabai ( Capsicum annuum L.) dan Berbagai Jenis Gulma. Jurnal  Agrotek  Tropika ,  1(1),  pp.  102- 106.
Hidayah,  Nurul,  &  Suhara.  2010. Evaluasi  Ketahanan Aksesi Kapas terhadap Penyakit Layu Fusarium. Malang:  Balai  Penelitian  Tanaman  Tembakau dan Serat.
INTSOY  (International  Soybean  Program).  1982. Compedium  of  Soybean  Disease. J.  B.  Sinclair (Ed). The American Phytopathology Society.
Jumardi.  1972. Budidaya  Tanaman  Kacang  Tanah  dan Kacang  Kedelai .  Jawa  Timur:  Balai  Penelitian Perkebunan Jember.
Khan, T.A., Mazid, M., & Mohammad, F. 2011. Role of Ascorbic  Acid  Against  Pathogenesis  in  Plants. Journal  of  Stress  Physiology  &  Biochemistry, 7(3), pp. 222-234.
Korwa,  A.,  Martanto,  E.A.,  &  Pribadi,  H.S.  2009. Intensitas  Penyakit  Bercak  Daun Cercospora pada  Kacang  Tanah  ( Arachis  hypogaea L.)  di Kampung Aimasi Prafi. Jurnal Agrotek, 1(5), pp. 8-13.
Lehman, S.G. 1982. Frog-eye Leaf Spot of Soybean. Nc. Agric. Exp. Stn. Bull, pp. 369.
Maharani,  M.M.,  Ratnaningtyas,  N.I.,  &  Priyanto,  S. 2014. Penggunaan bebrapa Medium Semisintetik untuk  Produksi  Miselium  Jamur  Mitake  ( Grifola Frondosa (Dickson:  Fr.)  S.  F.  Gray)  Isolat Cianjur dan Ekstraksi Kasarnya. Scripta Biologica , 1(1), pp. 20-21.
Michereff,  S.J.,  Martins,  R.B.,  Noronha,  M.A.,  & Machado, L.P. 2011. Simple Size for Quantification  of Cercospora Leaf  Spot  in Sweet Papper. Journal of Plant Pathology , 93(1), pp. 183-186.
Mount, M.S. & Lacy,  G.H. (eds).1982. Phytopathogenic Prokaryotes . New York: Academic Press.
Muljowati,  J.S.,  Dwiputranto,  U.,  &  Chasanah,  T.  2018. Pengaruh  Asam  Askorbat  terhadap  Pertumbuhan Colletrotrichum  acutatum Simmonds. Prosiding Seminar Nasional dan Call for Ppapers, 8(1), pp. 76-84.
Om,  P.,  &  Khirbat,  S.K.  2011.  Biochemichal  Basis  of Resistance to Fruit Rot ( Colletrotrichum Capsici ) in  Chili  Genotype. Plant  Disease  Research , 26(2), pp. 180.
Pitojo, S. 2003. Benih Cabai. Yogyakarta: Kanisius.
Rusli,  I.,  Mardinus,  &  Zulpadli.  1997.  Penyakit Antraknosa  pada  Buah  Cabai  di  Sumatra  Barat. Prosiding  Kongres  Nasional  XVI. Palembang: Perhimpunan Fitopatologi Indonesia.
Semangun,  H.  2000. Penyakit-Penyakit  Tanaman Hortikultura  di  Indonesia. Yogyakarta:  Gadjah Mada University Press.
Steele,  R.G.D.,  &  Torries,  J.H.  1990. Principle  and Procedures  of  Statistics,  2 nd Edition. New  York: McGraw-Hill Book Co Inc.
Suhardi  &  Wasito,  A.  1990.  Pengaruh  Interval Penyemprotan  Fungisida  dan  Sistem  Tanam terhadap  Insidensi Cercospora  capsici Heald  & Wolf dan Busuk Buah Cabai ( Capsicum annuum L.). Buletin  Penelitian  Hortikultura ,  19(3),  pp. 87-93.
Warisno  &  Dahana,  K.  2010. Peluang  Usaha  dan Budidaya  Cabai .  Jakarta:  PT.  Gramedia  Pustaka Utama.
Yunasfi. 2008. Serangan Patogen dan Gangguan terhadap Fisiologi Pohon. USU Repository, pp. 1-29.