## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 48-53
Identifikasi Bahan Kimia Obat (BKO) Glibenklamid Pada Jamu Antidiabetes Dengan Menggunakan Metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Dan Spektrofotodensitometri
Asmiati Mulkin 1* , Wilmar Maarisit 1 , Douglas Pareta 1 , Reky Palandi 2
1 Program Studi Farmasi, Universitas Kristen Indonesia Tomohon 2 Program Studi Biologi, Universitas Kristen Indonesia Tomohon
*Penulis Korespondensi : asmiatimulkin1@gmail.com Diterima tanggal :  24 Juni 2020; Disetujui tanggal : 30 Juli 2020

## ABSTRAK
Untuk  mengetahui  adanya  kandungan  glibenklamid  dalam  jamu  diabetes,  dilakukan  pengujian  kualitatif yaitu  menggunakan  lempeng  KLT.  Metode  KLT  digunakan  karena  KLT  merupakan  metode  yang sederhana dan cepat. KLT digunakan secara luas untuk analisis obat Penelitian ini untuk mengidentifikasi bahan  kimia  obat  glibenklamid  pada  jamu  antidiabetes  dengan  menggunakan  metode  kromatografi  lapis tipis . Sampel  yang  digunakan  adalah  3  macam  jamu  antidiabetes  yaitu  Delites,Jakeni,Wei  Yi  Wang Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa jamu Wei Yi Wang (0003.K) positif mengandung bahan  kimia  obat  (BKO)  glibenklamid.  Sedangkan  jamu  Delites  (0001.K)  dan  jamu  Jakeni  (0002.K) negatif mengandung bahan kimia obat (BKO). Hal ini dapat dilihat dari nilai Rf masing-masing sampel dan nilai  Rf  dari  baku  pembanding  glibenklamid  dan Spike serta  dipertegas  dengan  hasil  uji spektrofotodensitometri yang menunjukan peak (puncak gelombang) yang sama.
Kata Kunci : glibenklamid, jamu, antidiabetes, KLT

## ABSTRACT
To  find  out  the  presence  of  glibenclamide  content  in  diabetic  herbs,  qualitative  testing  was  carried  out using TLC plates. The TLC method is used because TLC is a simple and fast method. TLC is widely used for drug analysis. This study identified glibenclamide drug chemicals in antidiabetic herbs by using thin layer chromatography methods. The samples used are 3 kinds of antidiabetic herbs, namely Delites, Jakeni, Wei  Yi  Wang  Based  on  the  results  of  the  study  it  can  be  concluded  that  Wei  Yi  Wang  (0003.K)  herbal positively contains glibenclamide medicinal chemicals (BKO). While Delites (0001.K) and Jakeni (0002.K) herbs negatively contain medicinal chemicals (BKO). This can be seen from the Rf value of each sample and the Rf value from the glibenclamide and Spike comparison standards and is confirmed by the results of the spectrophotodensitometry test which shows the same peak (wave peak).
Keywords : glibenclamide, herbs, antidiabetic, TLC

## PENDAHULUAN
Semakin  maraknya  penggunaan  obat tradisional  berdasarkan  khasiat  yang  turun- temurun, semakin memperluas kesempatan terjadinya  pemalsuan  simplisia  bahkan  ada beberapa jamu  yang  mengandung  bahan  kimia
obat  (BKO)  yang  jelas  dilarang  penambahannya, baik secara sengaja maupun tidak sengaja kedalam produk obat tradisional tersebut
Penambahan  BKO  inilah  yang  menjadi nilai  jual  bagi  produsen  untuk  mempercepat khasiat dari jamu tersebut sehingga produk cepat

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 48-53
terjual  dan  produsen  mendapatkan  keuntungan dengan  cepat.  Salah  satu  jenis  obat  tradisional yang  sering  dikonsumsi  masyarakat  adalah  jamu antidiabetes, dimana umumnya penderita diabetes akan  mengkonsumsi obat seumur hidup sehingga kecenderungan  masyarakat  untuk  menggunakan jamu  lebih  besar  dibandingkan  konsumsi  obat kimia  antidiabetes.  Sama  halnya  dengan  jamu lainnya,  pada  jamu  antidiabetes  sering  dijumpai adanya  penambahan  BKO  yaitu  Glibenkalmid sehingga  perlu  dideteksi  kandungan  BKO  dalam jamu [1].
Keberhasilan jamu sebagai pilihan utama untuk  pengobatan  karena  sifat  alaminya  yang terbuat  dari  bahan-bahan  alami  yang  bekerja cenderung  lambat  tetapi  membina,  mudah diperoleh dengan harga yang ekonomis, jauh dari efek  samping  bahkan  tidak  ada  sama  sekali asalkan  digunakan  sesuai  aturan. Sementara  obat modern dengan zat kimianya bekerja lebih cepat, agresif tapi merusak.
Berdasarkan keterangan inilah masyarakat  kita  lebih  memilih  jamu  sebagai pengobatan  apalagi  setelah  mengkonsumsi  jamu tersebut dalam waktu beberapa jam saja konsumen langsung  merasakan  khasiatnya  yang  begitu manjur.  Hanya  berselang  beberapa  waktu kemudian  dirasakan  keluhan  pada  lambung, ginjal,  kepala,  dan  keluhan  lain  karena  efek samping  yang  malah  memperburuk  keadaan penderita.  Keadaan  inilah  yang  sering  kita saksikan di sekitar lingkungan masyarakat bahkan dalam  lingkungan  keluarga  sendiri.  Sangat bertolak  belakang  dengan  Peraturan  Menteri Kesehatan  RI  nomor  007  tahun  2012  pasal  7 menyatakan  bahwa  obat tradisional dilarang
menggunakan  bahan  kimia  obat,  narkotika  atau psikotropika dan atau bahan lain yang berdasarkan penelitian membahayakan kesehatan [2].

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  beaker  gelas,  gelas  ukur, erlenmeyer,  corong  pisah,  pipet  tetes, chamber , aluminium  foil,  kertas  saring,  plat silica  gel , sentrifuge (MPW), multispotter (MLS), penangas air  (IKA  RT  5  power),  sonikator,  lampu  UV (CAMAG).
Bahan  yang  digunakan  adalah  Baku glibenklamid,  ampel  1,  Jamu  Delites,  Sampel  2, Jamu Jakeni, Sampel 3, Jamu Wei Yi Wang , butil asetat , toluene, asam formiat, etil asetat, metanol Prosedur Penelitian
a. Ekstraksi Sampel Jamu
Dilakukan  pada  masing-masing  ketiga macam  sampel.Timbang  sampel  sebanyak  6 gram kemudian ditambahkan dengan 30 ml etil asetat  kemudian  dimasukkan  kedalam  tabung sentrifuge  dan  dikocok  selama  30  menit menggunakan orbital shaker, sampel disentrifuge  dengan  kecepatan  4000  rpm selama  15  menit.  Filtrat  yang  diperoleh disaring  menggunakan  kertas  saring,  ekstrak sampel  diuapkan  diatas  penangas  air  dengan suhu  80 ᴼ c  sampai  kering,  sisa  penguapan diencerkan dengan 5 ml metanol.
b. Pembuatan  Larutan  Glibenklamid  (Baku Pembanding)
Ditimbang seksama 10 mg glibenklamid murni  dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur  5  ml, ditambahkan 2 ml metanol kemudian

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 48-53
disonikasi  hingga  larut  kemudian  diencerkan dengan  metanol  sampai  batas  yang  tertera  di labu ukur.
c. Pembuatan Larutan Spike (baku + sampel).
Diambil  larutan  baku  sebanyak  100  µl menggunakan syringe dan  dimasukkan  ke dalam vial kemudian tambahkan 100 µl larutan sampel dan dikocok sampai homogen kemudian  ditotol  sebanyak  80  µl  pada  plat KLT.
d. Uji Kromatografi Lapis Tipis
Siapkan  plat  KLT  berukuran  20  cm  x  20 cm yang diberi batas atas 3 cm dan batas bawah 2 cm. Pelarut yang akan digunakan terdiri dari 2 eluen yaitu :
1. Eluen  1  terdiri  dari,  butil  asetat  :  toluen  : asam  formiat  (50:50:0,4)  dengan  total volume 100,4 ml.
2. Eluen  2  terdiri  dari,  asam  asetat  :  toluen  : metanol  (45:55:1)  dengan  total  volume
100  ml.  Masukan  kedua  eluen  kedalam masing-masing chamber yang telah disediakan .  Chamber dijenuhkan.  Untuk mengetahui  apakah  eluen  telah  jenuh, gunakan  kertas  saring  yang  diselipkan  ke dalam chamber .  Jika  kertas  saring  sudah basah menandakan chamber sudah terjenuhkan oleh pelarut.
Pentotolan dilakukan pada plat KLT sesuai urutan sebagai berikut :
1. Baku  glibenklamid  (baku  pembanding)
Spike (campuran baku + sampel)
2. Sampel 1, Jamu Delites
3. Sampel 2, Jamu Jakeni
4. Sampel 3, Jamu Wei Yi Wang : Biru A dan  B,  Hijau  A  dan  B  yang  ditotolkan
dengan  menggunakan  alat multispotter pada  plat  KLT  dengan  jarak  2  cm. Pentotolan  dilakukan  sebanyak  2  kali perulangan  karena  menggunakan  2 pelarut (eluen) di bejana ( chamber ).  Plat KLT  kemudian  dimasukkan  kedalam masing-masing chamber untuk  dielusi hingga  mencapai  jarak  rambat  elusi  15 cm dari totolan. Setelah  mencapai jarak elusi,  plat  KLT  dikeluarkan  dan dikeringkan.  Noda  yang  terbentuk  pada plat KLT dilihat dibawah sinar UV 254 nm dan 366 nm kemudian dihitung nilai Rf-nya.
e. Uji Spektrofotodergnsitometri
Sampel yang diidentifikasi positif mengandung BKO glibenkalmid dihitung panjang gelombangnya
menggunakan alat spektrofotodensitometri.

## Analisis Data
Data yang diperoleh dari hasil identifikasi kromatografi lapis tipis dalam bentuk nilai Rf dan panjang  gelombang  maksimum  untuk  sampel yang  postif  mengandung  BKO,  dianalisis  secara deskripsi dalam bentuk tabel.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Sebelum  dilakukan  identifikasi  secara  KLT, terlebih dahulu dilakukan uji organoleptis . Dapat dilihat pada tabel 1 dibawah ini :

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 48-53
Setelah  selesai  uji  organoleptis  maka dilakukanlah  identifikasi  bahan  kimia  obat (BKO)  glibenklamid  pada  jamu  antidiabetes menggunakan  metode  kromatografi  lapis  tipis (KLT).
Hasil yang diperoleh dapat  dilihat pada lempeng silika gel seperti gambar 1 berikut ini.
Gambar  1.  Hasil  Identifikasi  Bahan  Kimia  Obat
(BKO)  Glibenklamid  pada  Ketiga Sampel Jamu Antidiabetes menggunakan KLT dalam 2 campuran eluen (a) (b) Gambar 2. Hasil Identifikasi BKO Glibenklamid  Eluen  1  (a)  Sinar  UV 254 nm dan (b) Sinar UV 366 nm
(a) (b) Gambar  3.  Hasil  Identifikasi  BKO  Glibenklamid Eluen  2  (a) Sinar  UV  254  nm  dan  (b) Sinar UV 366 nm
Tabel  2.    Hasil  Identifikasi  BKO  Glibenklamid Pada Sampel 1 Jamu Delites (0001.K)
Hasil yang diperoleh menyatakan bahwa  pada  baku  dan spike tidak  ada  nilai  Rf yang  sama/hampir  sama  dengan  nilai  Rf sampel 1 jamu delites (0001.K)
Tabel  3.Hasil  Identifikasi  BKO  Glibenklamid Pada Sampel 2  Jamu  Jakeni (0002.K)
Hasil  yang  diperoleh  menyatakan  bahwa pada  baku  dan spike tidak  ada  nilai  Rf  yang sama/hampir sama dengan nilai Rf sampel 2 jamu jakeni (0002.K)

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 48-53
Tabel  4.  Hasil  Identifikasi  BKO  Glibenklamid Pada Sampel 3  Wei Yi  Wang  (0003.K) Biru  dan Hijau
Berdasarkan  Permenkes  RI  No.  007 Tahun  2012  [2]  Tentang  Registrasi  Obat Tradisional  menyebutkan  bahwa  Cara  Produksi Obat  Yang  Baik  (CPOTB)  merupakan  cara pembuatan  obat  tradisional  yang  diikuti  dengan pengawasan  menyeluruh  dan  bertujuan  untuk menyediakan  obat  tradisional  yang  senantiasa memenuhi  persyaratan  bahan  yang  diizinkan. Bahan  yang  digunakan  dalam  produksi  obat tradisional tersebut harus sesuai dengan ketentuan yang  berlaku.  Ketentuan  yang  dimaksud  tidak boleh  mengandung bahan kimia hasil isolasi atau sintetik  yang  berkhasiat  obat.  Hal  ini  terdapat pada  pasal  33  Permenkes  No.  006  Tahun  2012 Tentang Industri dan Usaha Obat Tradisional yang menyatakan bahwa setiap industri dan usaha obat tradisional  berkewajiban  menjamin  keamanan, khasiat/manfaat  dan  mutu  obat  tradisional  yang dihasilkan [3].
Untuk menjamin kebenaran dari simplisia  penyusun  sediaan  jamu  dilakukan pemeriksaan  awal  dengan  mengamati  bentuk organoleptik  simplisia  penyusun.  Pemeriksaan organoleptik  dilakukan  menggunakan  pancaindra dengan  mendeskripsikan  bentuk  warna,  bau  dan rasa.  Pemeriksaan  organoleptis  terhadap  jamu 0001  K adalah memiliki bentuk kapsul,  bau khas
jamu, warna merah dan rasa pahit dan jamu 0002 K  memiliki  bentuk  pil,  warna  coklat,  bau  khas jamu  dan  rasa  pahit.  Sedangkan  pada  jamu  0003 K  memiliki  bentuk  kapsul,  warna biru  dan  hijau, bau khas jamu dan rasa pahit.
Untuk mengetahui adanya  kandungan glibenklamid  dalam  jamu  diabetes,  dilakukan pengujian kualitatif  yaitu  menggunakan lempeng KLT. Metode  KLT  digunakan  karena  KLT merupakan metode yang sederhana dan cepat. KLT digunakan secara luas untuk analisis obat [4].
Hasil  yang  diperoleh  menyatakan  bahwa pada  baku  dan spike mempunyai  nilai  Rf  yang sama dengan nilai Rf sampel 3 jamu Wei Yi Wang (0003.K) Biru A,B dan Hijau A,B
Dari  hasil  penelitian  ini  diketahui  noda sampel  pembanding  glibenklamid  ketika  diamati di  bawah  sinar  UV  254  nm  berwarna  gelap  atau hitam,  sedangkan  ketika  diamati  di  bawah  sinar UV 366  nm tidak  berwarna  karena tidak terdapat senyawa yang berfluorosensi di sinar UV 366 nm.
Hasil  yang  diperoleh  yaitu  nilai  Rf  baku glibenklamid  pada  sampel  0003  K  dengan menggunakan  dua  eluen  yaitu  (0,16  dan  0,41), nilai Rf Spike dengan  menggunakan  dua  eluen yaitu (0,16  dan 0,41).  Nilai  Rf  dari  sampel  0003 K  warna  biru  dengan  menggunakan  eluen  1  dan dilakukan  replikasi  sebanyak  dua  kali  berturut- turut  yaitu  (0,18),  (0,18)  dan  pada  eluen  2  yang dilakukan  repikasi  sebanyak  dua  kali  berturut- turut yaitu (0,41), dan (0,41). Nilai Rf dari sampel 0003 K warna hijau dengan menggunakan eluen 1 dan    dilakukan    replikasi  sebanyak  dua  kali berturut-turut yaitu (0,18), (0,18) dan pada eluen 2 yang  dilakukan  repikasi  sebanyak  dua  kali berturut-turut yaitu (0,41), dan (0,42).

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 48-53
Dari hasil data tersebut dinyatakan bahwa sampel  jamu  yang  diuji  memberikan  hasil  positif mengandung bahan kimia obat glibenklamid pada sampel  jamu  0003  K  yang  ditandai  dengan munculnya bercak yang sama dengan pembandingnya,  dan  memiliki  nilai  Rf  yang hampir sama. Sementara pada sampel jamu 0001 K  dan  jamu  0002  K,  memberi  hasil  negatif mengandung  bahan  kimia  obat  yang  ditandai dengan tidak adanya nilai Rf yang sama dei]kngan pembandingnya.
Untuk  memperkuat  hasil  identifikasi KLT yang menyatakan bahwa jamu Wei Yi Wang (0003.K) positif  mengandung BKO glibenklamid maka  perlu  dipertegas/diperkuat  lagi  dengan  uji spektrofotodensitometri.
Tabel  5.  Hasil  spektrofotodensitometri  BKO glibenklamid pada sampel 3 jamu Wei Yi Wang
Dari  hasil  tabel  diatas  telah  memberikan penegasan  bahwa  antara  baku  glibenklamid  dan Spike mempunyai peak (puncak gelombang) yang sama dengan peak jamu Wei Yi Wang A, B.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa jamu Wei Yi Wang (0003.K) positif  mengandung  bahan  kimia  obat  (BKO) glibenklamid.  Sedangkan  jamu  Delites  (0001.K) dan  jamu  Jakeni  (0002.K)  negatif  mengandung
bahan kimia obat (BKO). Hal ini dapat dilihat dari nilai  Rf  masing-masing  sampel  dan  nilai  Rf  dari baku  pembanding  glibenklamid  dan Spike serta dipertegas dengan hasil uji spektrofotodensitometri  yang  menunjukan peak (puncak gelombang) yang sama.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Susanti.  2017.  Waspada  Obat  Tradisional Mengandung  Bahan  Kimia  Obat. Jurnal  Bahan  Alam  Indonesia.
Yogyakarta. 1 (1) : 18-20
[2] Anonim.  2012.  Peraturan  Mentri  Kesehatan Republik  Indonesia  nomor  007  Tahun 2012. Tentang Registrasi Obat
Tradisional.  Kemenkes RI. Jakarta.
[3] Anonim.  2012.  Peraturan  Mentri  Kesehatan Republik  Indonesia  nomor  006  Tahun 2012.  Tentang  Industri  dn  Usaha  Obat Tradisional.  Kemenkes RI. Jakarta.
[4] Ganjar dan Rohman. 2012. Metode Kromatografi  Lapis  Tipis.  Graha  ilmu. Jakarta