p-ISSN 2354-6565 / e-ISSN 2502-3438 DOI: 10.26874/kjif.v8i1.299
EFEK HEPATOTOKSIK PEMBERIAN SUBAKUT TRITERPEN TOTAL DARI Centella asiatica Linn. PADA TIKUS PUTIH JANTAN DEWASA GALUR WISTAR
Erjon 1 , Kamaluddin 2 , Theodorus 2
1 STIFI Bhakti Pertiwi Palembang
2 Fakultas Kedokteran UNSRI
Corresponding author email : erjonplg@gmail.com

## Abstrak
Senyawa aktif utama dari Centella asiatica Linn. adalah triterpen total. Centella asiatica dilaporkan  dapat  menyebabkan  nekrosis  sel  hati.  Telah  diteliti  efek  hepatotoksik pemberian  subakut  triterpen total  dari  Centella  asiatica  pada  tikus  putih jantan  dewasa galur Wistar. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengevaluasi pemberian dosis tunggal triterpen total dari Centella asiatica terhadap gambaran histopatologi dan fungsi hati tikus. Dari hasil penelitian menunjukkan adanya peningkatan aktivitas SGOT dan SGPT yang berbeda  bermakna  (ANOVA  one  way,  p<0,05)  pada  setiap  kelompok  perlakuan. Peningkatan dosis pemberian triterpen total menunjukkan korelasi positif yang bermakna (Pearson  Correlation,  p  <0,05)  dengan  peningkatan  aktivitas  SGOT  dan  SGPT. Peningkatan aktivitas SGOT dan SGPT tidak melebihi pada batas rentang normal.  Dari gambaran  histopatologi,  pada  kelompok  kontrol  dan  perlakuan  tidak  ditemukan kerusakan histopatologi sel hati.
Dari hasil penelitian disimpulkan bahwa pemberian subakut triterpen total pada dosis  21, 42, 84 mg/kgBB/hari selama 6 minggu dapat meningkatkan aktivitas SGOT dan SGPT dan belum ditemukan kelainan histopatologi sel hati.
Kata kunci :  histopatologi, nekrosis, SGOT, SGPT
Hepatotoxic effect of subacute administration of the total triterpenic of Centella asiatica Linn. in the adult male white Wistar rats .

## Abstract
The  main  active  compound  of  the  Centella  asiatica  Linn.  is  total  triterpenic.  Centella asiatica was reported to be causing for liver cell necrosis. Hepatotoxic effect of the total triterpenic  of  Centella  asiatica  given  for  6  weeks  in  the  adult  white  Wistar  rats  was evaluated. This research aimed to evaluate the effect of single dose administration of total triterpenic of Centella asiatica to liver histopathologic image and function in rats. The  result  showed  that  there  was  a  significant  increase  (ANOVA  one  way,  p  <0,05)  of SGOT and SGPT activity in each treatment of the groups. The increase activity of SGOT and  SGPT  was  significantly    dosing  dependent  to  the  total  triterpenic  (Pearson Correlation,  p  <0,05).  The  increase  of  SGOT  and  SGPT  activities  did  not  exceed  the normal  range.  From  the  histopathologic  examination,  in  both  control  and  treatment groups  there  had  no  found  damaged  in  the  liver  cell.  It  could  be  concluded  that  the subacute administrtion of total triterpenic from Centella asiatica at dose 21, 42 and 84
mg/kgBW/day  during  six  weeks  could  activate  the  SGOT  and  SGPT  activity  without damaging liver cell as well at that moment.
Keywords :  histopathologic, necrosis, SGOT, SGPT

## Pendahuluan
Indonesia merupakan negara kepulauan yang memiliki keanekaragman hayati. Lebih dari 25% spesies tumbuhan berbunga  yang  ada  di  dunia  tumbuh  di Indonesia.  Lebih  dari  40  %  dari  spesies tersebut  adalah  tumbuhan  asli  Indonesia (Kusmana  and  Hikmat  2015).  Sebagian dari tumbuhan tersebut digunakan
sebagai bahan obat. Salah satu tumbuhan berkhasiat  obat  adalah Centella  asiatica yang  dikenal  dengan  nama  pegagan (Prakash et al., 2017).
Telah  dilaporkan  banyak  senyawa aktif dalam tumbuhan pegagan antara lain senyawa  asiatikosida,  isotankunisida, tankunisida, madekassosida, brahmosida, brahminosida,  asam  brahmat,  asam madasiatat, mesoinositol, centellosa, karotenoid, garam-garam mineral seperti kalium,  natrium,  magnesium,  kalsium, besi  dan  tannin  (Saxena  and  Pal  2016; Hashim et al., 2011). Senyawa glikosida triterpenoid asiatikosida mempunyai efek farmakologis  seperti  antiinflamasi  (Park et  al.,  2017;  Jing  et  al.,  2018)), antioksidan  dan  antidiabetik  (Dewi  and Maryani, 2015), antihipertensi (Harwoko et al., 2014, antihiperglikiemia (Kabir et al.,    2014)  dan  neuroprotekstif  (Orhan, 2012; Gray et al., 2018), antikeloid (Bian et al., 2013), antiepilepsi (Visweswari et al.,  2010),  antitumor  (Yingchun  et  al., 2019),  meningkatkan  fungsi  memori (Binti Mohd Yusuf Yeo et al., 2018) dan
proteksi membrane peritoneal dan mencegah fibrosis peritoneal (Zhao et al., 2020).
Pada  penelitian  sebelumnya  telah dilaporkan  efek  toksik  penggunaan pegagan  terhadap  hati  seperti  Jorge  and Jorge  (2005)  melaporkan  bahwa  tiga orang  wanita  didiagnosa  mengalami granulotoma hepatitis setelah
menggunakan Centella asiatica .
Triterpen  dari tumbuhan  lainnya juga telah  dilaporkan  mempunyai  efek  toksik diantaranya  triterpen  glikosida  dari tanaman  holothurian  ( Psolus  fabricii )
dapat menghambat enzim Na + /K + ATPase  otak  tikus  (Gorshkova  et  al., 1989).  Jorge  and  Jorge  (2005),  juga melaporkan  mekanisme  toksik  triterpen saponisida pentasiklik yaitu dapat mengubah  permeabilitas  membran  sel dengan  cara  berinteraksi  dengan  lapisan lemak, dengan kekuatan anti ATPasenya dapat  menghambat  transpor  natrium. Peningkatan  kadar  natrium  di  dalam  sel dalam keadaan depolarisasi dapat menghambat reuptake glutamat  dan menginduksi  kematian  sel  (Rang  et  al., 2011).
Penelitian ini bertujuan untuk melihat efek  hepatotoksik  pemberian  subakut triterpen  total  terhadap  peningkatan aktivitas SGOT dan SGPT serta gambaran histopatologi sel hati. Kesimpulan dari penelitian ini memberikan informasi keamanan
DOI: 10.26874/kjif.v8i1.299
penggunaan Centella asitica pada manusia. Metode
Alat. Alat yang  digunakan berupa pisau, erlenmeyer,  gelas  ukur,  beker  glass, lumpang dan stamfer, timbangan analitik, timbangan  hewan,  kandang  hewan, kandang  metabolik,  plate  form,  alat injeksi, dan peralatan bedah, kapas, tisu, mikrotom  putar,  pinset,  cetakan  kertas, baki  objek,  wadah  pewarnaan,  kaca objek,  cover  glass,  mikroskop  dan kamera mikroskop.
Bahan. Bahan  yang    digunakan  adalah triterpen  total  dari Centella  asitica , larutan  NaCl  fisiologis,  aqua  destilata, NaCMC 0,5 %, larutan fiksatif bouin, zat warna hematoksilin-eosin, alkohol, parafin, dan xylol.
Hewan  percobaan .  Hewan  percobaan yang  digunakan adalah tikus putih jantan yang  berumur  2-3  bulan  dengan  berat badan  180-200 gram.
Penyiapan  Hewan  Percobaan. Tikus diaklimatisasi  dalam  ruangan  penelitian selama  satu  minggu  dan  dipuasakan selama  18  jam  (minum  tetap  diberikan) sebelum diberikan perlakuan. Tikus yang digunakan adalah tikus yang sehat yakni berat  badan  selama  aklimatisasi  tidak mengalami perubahan lebih dari 10% dan secara  visual  menunjukkan  prilaku  yang normal.
Dosis  Pemberian. Dosis  triterpen  total dari pegagan yang digunakan adalah 20, 40, dan 80 mg /kgbb.
Pembuatan  Sediaan  Uji. Triterpen  total dari  pegagan  dilarutkan    dalam  air  yang telah  ditambahkan  surfaktan  tween  20 sebanyak  2%  dari  volume  sediaan   pada pH 7.
Pengelompokan Perlakukan pada Tikus dan Lama Pemberian. Sebelum diberikan  perlakuan,  tikus  dipuasakan selama 18 jam, dan dikelompokan secara acak  menjadi  4  kelompok  (1  kelompok kontrol  dan  3  kelompok  perlakuan). Triterpen total dengan dosis 20, 40 dan 80 mg/kgBB diberikan peroral pada kelompok perlakuan sekali sehari selama 6  minggu  dan  kelompok  kontrol  diberi dengan air suling.
Pemeriksaan  SGPT dan  SGOT. Darah tikus  yang  diambil  melalui  pembuluh darah  vena  lateralis  disentrifuge  pada kecepatan  3000  rpm  sampai  serum terpisah.  Kadar  SGOT  dan  SGPT ditentukan  dengan  FotometerBioSystem Pointe-360,  dinyatakan  dalam  U/l  (P Sharma, 2014) .

## Pegamatan  Sediaan  Histopatologis.
Pengamatan  dilakukan  pada  pembesaran 100 sampai 1000 kali terhadap perubahan yang  terjadi  pada  sel  hati  meliputi nekrosis dan pelemakan sel hati
(Maulina, 2018). Parameter Pengukuran. Parameter yang  diteliti  meliputi  jumlah  sel  yang mengalami  nekrosis,  jumlah  perlemakan sel hati, kadar enzim SGOT dan SGPT.
Analisis Data. Analisis data yang berupa jumlah  perlemakan,  nekrosis  sel  hati, kadar  SGOT  dan  SGPT  dalam  darah secara statistik dengan  ANOVA one way dan Pearson  Correlation dengan tingkat kemaknaan 95%.

## HASIL dan PEMBAHASAN

## Hasil
Hasil  penelitian  meliputi  kenaikan kadar  SGOT  dan  SGPT  dan  kelainan histopatologi hati yang meliputi nekrosis dan perlemakan sel hati. Nilai SGOT dan SGPT  dapat  dilihat  pada  Tabel  1, sedangkan  kelainan  histopatologi  hati dapat dilihat pada Tabel 2 dan Gambar 1.
Tabel  1.   Nilai  kadar  SGOT  dan  SGPT    darah  tikus  putih  jantan  dewasa  galur  Wistar setelah 6 minggu pemberian air suling, triterpen total dari Centella  asiatica dengan 21, 42 dan 84 mg/kgBB/hari. Dosis Triterpen total (mg/kgBB/hari) SGOT (U/L) SGPT (U/L) 0 79,83 ± 6,676 a 72,17 ± 3,545 a 21 90,17±7,859 ab 86,83±7,859 ab 42 146,17± 5,076 ab 143,83 ± 6,463 ab 84 178,33 ± 13,292 ab 170,17 ± 7,679 ab
Sumber : Hasil pemeriksaan di Laboratorium Kesehatan Daerah Sumatera Selatan Keterangan : a  :  kontrol berbeda bermakna dengan semua dosis pemberian triterpen total b  :  pemberian titerpen total berbeda bermakna untuk setiap dosis pemberian triterpen total
Tabel 2.  Gambaran histopatologi sel hati tikus putih jantan dewasa galur Wistar setelah 6 minggu pemberian air suling, triterpen total dari Centella asiatica dengan 21, 42 dan 84 mg/kgBB/hari Pemeriksaan Kontrol 21 mg/kgBB 42 mg/kgBB 84 mg/kgBB Jumlah sel nekrosis Tidak ada Tidak ada Tidak ada Tidak ada Jumlah perlemakan Tidak ada Tidak ada Tidak ada Tidak ada Sebukan limfosit  Sedikit diantara hepatosit  dan vena sentarlis Sedikit disekitar  vena sentaralis Sedikit  dekat segitiga portal Sedikit  sekitar vena  sentralis dan duktus biliaris Hepatosit dengan sitoplasma jernih Tersebar ditepi jaringan Tersebar ditepi jaringan Tersebar ditepi jaringan Tersebar ditepi jaringan
Sumber : Hasil pemeriksaan di Laboratorium Patologi Anatomi RSMH Palembang
Gambar 1. Histopatologi sel hati tikus (pembesaran 400 kali) setelah 6 minggu pemberian A. Air suling. B. triterpen total dengan dosis 21mg/kgBB, C. triterpen total dengan dosis 42 mg/kgBB dan D. triterpen total dengan dosis 84 mg/kgBB (tidak terlihat adanya nekrosis dan perlemakan sel hati
Pembahasan Kadar  serum  glutamat  oksaloasetat transaminase  (SGOT)  dan  serum glutamat piruvat
transaminase (SGPT).
Pemberian  triterpen  total  dengan dosis  21,  42  dan  84  mg/kgBB/hari selama 6 minggu pada tikus putih jantan dewasa  galur  Wistar  menyebabkan adanya peningkatan kadar SGOT sebesar 223%  dan  SGPT  sebesar  236%  . Terjadinya peningkatan kadar SGOT dan SGPT  ini  diduga  berhubungan  dengan efek  toksis  triterpen  total  terhadap  sel
hati .  Efek timbulnya peradangan ringan pada  sel  hati  sehingga  enzim  glutamat oksaloasetat  transaminase dan enzim glutamat piruvat transaminase dikeluarkan  dari  depositnya  dan  masuk ke dalam sirkulasi darah sehingga terjadi peningkatan enzim ini di dalam darah.
Jika  dibandingkan  dengan  harga normal  aktivitas  SGOT  yaitu  70–400 U/L  dan  aktivitas  SGPT  adalah  25-200 U/L  (Shayne,  1992),  maka  semua kelompok perlakuan yang diberi
triterpen  total  dengan  21,  42  dan  84 mg/kgBB/hari selama 6 minggu  kadar
SGOT  dan  SGPT  masih  berada  pada rentang harga normal.
Dari  hasil  uji  statistik  ANOVA  satu arah terlihat perbedaan bermakna semua kelompok  perlakuan  dengan  kelompok kontrol  maupun  sesama  kelompok perlakuan terhadap peningkatan aktivitas SGOT dan SGPT (p<0,05).
Peningkatan dosis triterpen total dari dosis  21,  42  dan  84  mg/kgBB/hari selama  6  minggu  yang  meningkatkan kadar SGOT sebesar  90,17 ± 7,859 U/L, 146,17 ±5,076 U/L dan 178,33 ± 13,292 dan  aktivitas  SGPT  sebesar  86,17  ± 7,859  U/L,  143,83  ±6,463  U/L  dan 170,17 ± 7,679 U/L. Dari analisa statistik dengan Pearson  Correlation terlihat korelasi positif (r=0,916) yang signifikan dari  peningkatan    dosis  terhadap peningkatan  aktivitas  SGOT  dan  SGPT (p<0,05).

## Gambaran histopatologi sel hati tikus.
Setelah  pemberian  triterpen  total dengan dosis 21 mg/kgBB, 42 mg/kgBB dan 84 mg/kgBB selama 6 minggu pada tikus  putih  jantan  dewasa  galur  wistar walaupun  terjadi  peningkatan  aktivitas SGOT  dan  SGPT  dari  tikus  yang diberikan air suling sebagai kontrol. Hati tikus  secara histopatologi masih berada dalam keadaan normal tidak menunjukan terjadinya  nekrosis  maupun  perlemakan sel  hati  yang  diberi  air  suling  maupun yang  diberi  triterpen  total  dengan  dosis 21, 42 dan 84 mg/kgBB/hari.
Dengan demikian pemberian triterpen total pada dosis tersebut tidak mengganggu keutuhan sel hati tikus atau tidak menimbulkan
kelainan histopatologi sel hati. Hal ini terlihat dari hasil pemeriksaan histopatologi sel hati. Terjadinya peningkatan kadar SGOT dan SGPT tersebut diduga karena adanya peradangan ringan yang bersifat reversibel  pada  sel  hati  sehingga stabilitas sel akan terganggu. Gangguan
stabilitas sel akan menyebabkan peningkatan permeabilitas membran sel. Dengan peningkatan permeabilitas membran sel, enzim GOT dan GPT yang terdapat di sitoplasma  akan keluar dari sel hati masuk ke dalam sirkulasi darah. Maka akan terlihat peningkatan aktivitas SGOT dan SGPT pada darah.
Mekanisme  kerjanya  diperkirakan berhubungan dengan metabolit dan atau nonmetabolit dari senyawa triterpen total yang  dapat  menghambat  enzim  Na + /K + ATPase ( Gorshkova et al., 1989).  Pada keadaan  normal    kanal  Na + /K + ATPase berfungsi  mengatur  pertukaran  ion  Na + di  dalam  sel  dengan  ion  K + di  luar  sel ( efluks Na + dan influks K + ).  Gangguan enzim      Na + /K + ATPase  oleh  metabolit dan  atau  non  metabolit  triterpen  total maka fungsi kanal Na + /K + ATPase akan terhambat, efluks ion Na + dan influks ion
K + akan terganggu. Akibatnya
konsentrasi  ion  Na + di  dalam  sel  akan tetap  meningkat.  Peningkatan  kadar  ion Na + di  dalam  sel  pada  saat  depolarisasi bisa  menghambat  reuptake  glutamat. Glutamat  pada  konsentrasi  rendah berfungsi  sebagai  transporter  protein. Pada  konsentrasi  yang  tinggi  glutamat dapat  menyebabkan  gangguan  pada  sel (Rang et al., 2011).
Peningkatan  konsentrasi  ion  Na + di dalam sel juga diikuti dengan peningkatan konsentrasi air dan menyebabkan  peningkatan  osmotik  sel. Sel akan mengalami edema (peradangan) dan permeabilitas membran  sel  akan  lebih  meningkat. Mitokondria,  retikulum  endoplasmik dan  sistim  intrasel  lainnya  mengalami dilatasi  dengan  fungsi  yang  menurun. Gangguan  pada  mitokondria,  retikulum endoplasmik  dan sistim intrasel lainnya ini  tidak  dapat    diamati  dengan mikroskop biasa. Sehingga sel hati tikus secara seluler masih terlihat utuh.
Di  samping  itu  akan  menyebabkan inaktivasi enzim Ca +2 transporting
DOI: 10.26874/kjif.v8i1.299
ATPase. Enzim Ca +2 transporting ATPase  ini  terdapat  pada  membran plasma  dan retikulum  endoplasma  yang berfungsi untuk memelihara keseimbangan Ca +2 .  Konsentrasi Ca +2 di dalam  sel  adalah  0,1  µ mol/L  lebih rendah  dari  di  luar  sel  yang  besarnya  1 mmol/L.  Dengan  inaktivasi  enzim  Ca +2 transporting ATPase akan mengakibatkan gangguan pada kanal ion Ca +2 /Na + exchange , sehingga ion Ca +2 di dalam  sel  tidak  dapat exchange dengan ion  Na + yang  berada  di  luar  sel. Konsentrasi ion  Ca +2 di  dalam  sel  akan tetap meningkat. Peningkatan konsentrasi  ion  Ca +2 di  dalam  sel  dapat dapat memacu aktivasi enzim degradasi yang tergantung terhadap kalsium seperti fosfolipase,  endonuklease.    Aktivasi enzim  fosfolipase  akan  mendegradasi fosfolipid  membran  sel  (Rang  et  al., 2011).
Pada penelitian ini diperkirakan aktivasi enzim fosfolipase tidak sampai mendegradasi  membran  sel  hanya menimbulkan  peradangan  ringan  yang bersifat reversibel.

## Kesimpulan
Dari  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan  tentang  pemberian  triterpen total dari Centella asitica dapat disimpulkan  bahwa  pemberian  triterpen total  dari Centella  asitica selama  6
minggu  dengan  dosis  21,  42  dan  84 mg/kgBB/hari dapat meningkatan aktivitas SGOT dan SGPT dibandingkan dengan kontrol dan menunjukkan korelasi positif antara peningkatan dosis dengan peningkatan aktivitas SGOT dan SGPT. Berdasarkan gambaran histopatologi  pemberian  triterpen  total dari Centella  asitica selama  6  minggu pada  dosis 21, 42 dan 84 mg/kgBB/hari belum ditemukan kelainan histopatologi sel hati.

## Daftar Pustaka
Bian,  D.,  Zhang,  J.,  Wu,  X.,  Dou,  Y., Yang, Y., Tan, Q., Xia, Y., Gong, Z., &  Dai,  Y.  (2013).  Asiatic  acid isolated from centella asiatica inhibits TGF- β 1-induced collagen expression in  human  keloid  fibroblasts  via PPAR- γ activation. International Journal of Biological Sciences, 9(10),
1032–1042. https://doi.org/10.7150/ijbs.7273
Binti  Mohd  Yusuf  Yeo,  N.  A.,
Muthuraju, S., Wong, J. H., Mohammed,  F.  R.,  Senik,  M.  H.,
Zhang,  J.,  Yusof,  S.  R.,  Jaafar,  H., Adenan,  M.  llham,  Mohamad,  H., Tengku  Muhammad,  T.  S.,  &
Abdullah, J. M. (2018). Hippocampal amino-3-hydroxy-5-methyl-4- isoxazolepropionic acid GluA1 (AMPA  GluA1)  receptor  subunit involves  in  learning  and  memory improvement  following  treatment with Centella  asiatica extract  in adolescent  rats.  Brain  and  Behavior, 8(9), 1–14. https://doi.org/10.1002/brb3.1093 Dewi,  R.  T.,  &  Maryani,  F.  (2015). Antioxidant and α -Glucosidase Inhibitory  Compounds  of Centella
Asiatica .  Procedia  Chemistry,  17,
147–152.
https://doi.org/10.1016/j.proche.2015
.12.130
Jorge,  O.  A.,  &  Jorge,  A.  D.  (2005). Hepatotoxicity  associated  with  the ingestion of Centella asiatica . Revista Española de Enfermedades Digestivas, 97(2), 115–124. https://doi.org/10.4321/s1130- 01082005000200006 Gorshkova,  I.  A.,  Gorshkov,  B.  A.,  &
Stonik, V. A. (1989). Inhibition of rat brain  Na+-K+-ATPase  by  triterpene glycosides from holothurians. Toxicon, 27(8), 927–936.
https://doi.org/10.1016/0041- 0101(89)90104-9 Gray,  N.  E.,  Zweig,  J.  A.,  Caruso,  M., Martin, M. D., Zhu, J. Y., Quinn, J. F.,
&  Soumyanath,  A.  (2018). Centella asiatica increases hippocampal synaptic density and improves memory  and  executive  function  in aged mice. Brain and Behavior, 8(7),
1–11. https://doi.org/10.1002/brb3.1024 Harwoko,  Pramono,  S.,  &  Nugroho,  A. E.  (2014).  Triterpenoid-rich  fraction of centella asiatica leaves and in vivo antihypertensive activity. International  Food  Research  Journal, 21(1), 149–154 Hashim, P., Sidek, H., Helan, M. H. M., Sabery,  A.,  Palanisamy,  U.  D.,  & Ilham, M. (2011). Triterpene composition  and  bioactivities  of
centella  asiatica .  Molecules,  16(2),
1310–1322. https://doi.org/10.3390/molecules160 21310 Jing, L., Haitao, W., Qiong, W., Fu, Z.,
Nan, Z., & Xuezheng, Z. (2018). Anti inflammatory effect of asiaticoside on human  umbilical  vein  endothelial cells induced by ox-LDL. Cytotechnology,  70(2),  855–864. https://doi.org/10.1007/s10616-018-
0198-4 Kabir, A. U., Samad, M. B., D’Costa, N. M.,  Akhter,  F.,  Ahmed,  A.,  &
Hannan,  J.  M.  A.  (2014).  Anti- hyperglycemic activity of Centella
asiatica is partly mediated by carbohydrase inhibition and glucose- fiber  binding.  BMC  Complementary and Alternative Medicine, 14. https://doi.org/10.1186/1472-6882- 14-31 Kusmana,  C.  and  Hikmat,  A.  (2015)
“Keanekaragaman  hayati  flora  di Indonesia.    Journal  of  Natural Resources and Environmental
Management,  5(2),  p.  187.  doi:
10.29244/jpsl.5.2.187 Maulina  M.  (2018).    Zat  yang mempengaruhi  histopatogi  hepar, Cetakan pertama Unimal Press Orhan, I. E. (2012). Centella asiatica (L.) Urban:  From  traditional  medicine  to modern medicine with neuroprotective  potential.  Evidence- Based Complementary and Alternative Medicine, 2012. https://doi.org/10.1155/2012/946259 Park, J. H., Choi, J. Y., Son, D. J., Park, E. K., Song, M. J., Hellström, M., & Hong, J. T. (2017). Anti- inflammatory effect of titrated extract of  Centella  asiatica  in  phthalic anhydride-induced allergic dermatitis animal  model.  International  Journal of  Molecular  Sciences,  18(4),  1–14. https://doi.org/10.3390/ijms1804073 8 Prakash,  V.,  Jaiswal,  N.,  &  Srivastava, M.  (2017).  A  review  on  medicinal properties of Centella asiatica. Asian Journal of Pharmaceutical and
Clinical  Research,  10(10),  69–74. https://doi.org/10.22159/ajpcr.2017.v 10i10.20760 P Sharma, O. (2014). Clinical Biochemistry of Hepatotoxicity. Journal  of  Clinical  Toxicology, 04(01).  https://doi.org/10.4172/2161-
0495.s4-001
Rang, H.P., M.M, Dale and J. M Ritter. (2011),  Pharmacology,  7th.  Ed. Churcill Livingstones, Edinburgh Saxena,  R.,  & Pal, Y.  (2016). Pharmacognostic review and phytochemical  screening  of  Centella asiatica  Linn.  Journal  of  Medicinal Plants  Studies  JMPS,  132(44),  132–
135.
Shayne,  (1992).  Animal  Models  In
Toxicology.  New  York  :  Marcel Dekker, Inc,.
Visweswari,  G.,  Siva  Prasad,  K., Lokanatha, V., & Rajendra, W.
DOI: 10.26874/kjif.v8i1.299
(2010).  The  antiepileptic  effect  of
Centella  asiatica  on  the  activities  of Na + /K+ , Mg2+ and Ca2+ -ATPases in rat brain during pentylenetetrazol- induced  epilepsy.  Indian  Journal  of
Pharmacology, 42(2),
82–86.
https://doi.org/10.4103/0253- 7613.64504 Yingchun,  L.,  Huihan,  W.,  Rong,  Z., Guojun, Z., Ying, Y., & Zhuogang, L.
(2019). Antitumor activity of asiaticoside against multiple myeloma  drug-resistant  cancer  cells is  mediated  by  autophagy  induction, activation  of  effector  caspases,  and inhibition of cell migration, invasion, and stat-3 signaling pathway. Medical Science  Monitor,  25,  1355–1361. https://doi.org/10.12659/MSM.91339 7 Zhao, J., Shi, J., Shan, Y., Yu, M., Zhu, X.,  Zhu,  Y.,  Liu,  L.,  &  Sheng,  M.
(2020). Asiaticoside inhibits TGF- β 1- induced mesothelial-mesenchymal
transition and oxidative stress via the
Nrf2/HO-1  signaling  pathway  in  the human peritoneal mesothelial cell line HMrSV5.  Cellular  and  Molecular Biology Letters, 25(1). https://doi.org/10.1186/s11658-020- 00226-9