PENGARUH EKSTRAK ETANOL BUAH  PINANG YAKI (Areca vestiaria ) TERHADAP GAMBARAN MAKROSKOPIS ORGAN GINJAL PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR (Rattus norvegicus).
Sriwarni Nani 1) , Widdhi Bodhi 1) , Herny Simbala 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
The crownshaft palm plant (Areca vestiaria) had been used by the people of North Sulawesi for  cure  cancer,  diabetes  and  as  male  contraceptives. The  purpose  of  this  study  was  to  assess  the changes of the ethanol extract of the crownshaft palm nuts (Areca vestiaria) against the macroscopic description of kidney organ in white rat wistarstrain  (Rattus norvegicus).  The study was conducted using  12  rats  as  animal  models  and  divided  into  3  treatment  groups  and  one  control  group  for comparison. Extraction is done by maceration using 96% of ethanol. Extract dose was given daily for the three treatment groups, as much as 7.2 mg, 14.4 mg, and 21,6 mg, respectively. The treatment was conducted for 40 days. The results obtained showed, that in all treatment groups there is no change in coloration,  surface  and  consistency  (normal).   Statistical  test  was  done  by  using  one-way ANOVA, and showed there are no significant differences in the results of the weighing of the rat body weight and  rat  kidney  organ  weights  (p>  0.05).  As  conclusion,  the  three  treatments  applied  in  male  rats wistar strain (Rattus norvegicus) gave no effect to the macroscopic description of the kidney organ.

## Keywords : Dental Plaque, Bacteria, Sensitivity, Antibiotics

## ABSTRAK
Tumbuhan  Pinang  yaki  ( Areca  vestiaria )  digunakan  oleh  masyarakat  sulawesi utara  sebagai bahan  obat  kanker,  diabetes,  diare  dan  kontrasepsi  pria.  Tujuan  penelitian  ini  untuk  mengetahui perubahan ekstrak etanol buah Pinang yaki ( Areca vestiaria ) terhadap  gambaran  makroskopis organ ginjal  pada  tikus  putih    galur  wistar  ( Rattus  norvegicus ).  Penelitian  dilakukan  menggunakan  hewan percobaan    tikus  putih  jantan  galur  wistar  ( Rattus  norvegicus )  berjumLah  12  ekor  yang  dibagi  3 kelompok  perlakuan dan 1 kelompok  kontrol sebagai pembanding. Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi  menggunakan  etanol  96%.  Dosis  ekstrak  yang  diberikan  perhari  untuk  tiga  kelompok perlakuan  yaitu  7,2  mg/mL,  14,4    mg/mL,  dan  21,6  mg/mL.  Perlakuan  dilakukan  selama  40  hari. Hasil  penelitan  menunjukan  bahwa  tidak  adanya  perubahan  terhadap  warna,  permukaan  dan konsistensi (normal). Uji One way ANOVA menunjukkan tidak ada perbedaan bermakna pada hasil penimbangan berat badan tikus dan berat organ ginjal tikus (p > 0.05). Dapat disimpulkan bahwa pada ketiga  perlakuan  yang  diberikan  pada  tikus  putih  jantan  galur  wisar  ( Rattus  norvegicus )  tidak memberi pengaruh terhadap gambaran makroskopis organ ginjal.
Kata Kunci : Pinang yaki, makroskopis, ginjal, tikus putih

## PENDAHULUAN
Berdasarkan  data  WHO  tahun 2007,  sekitar  80%  penduduk  dunia  untuk perawatan  kesehatannya  memanfaatkan obat  tradisional  yang  berasal  dari  ekstrak tanaman. Kecenderungan masyarakat dunia  untuk  kembali  ke  alam  membawa perubahan  dari  pola  konsumsi  obat terhadap  obat-obatan  yang  terbuat  dari bahan alami (Zaenal, 2008).
Pinang  yaki (Areca  vestiaria) adalah  salah  satu  tumbuhan  yang  tumbuh di daerah Sulawesi Utara tepatnya dilereng gunung  Soputan  dan  gunung  Mahawu kabupaten  Minahasa  (Simbala,  2007). Menurut  Simbala  (2006),  Pinang  yaki (Areca  vestiaria) yang  merupakan  sejenis palem  liar,  ternyata  merupakan  tanaman multi  fungsi.  Masyarakat  Sulawesi  Utara biasanya  menggunakan  secara  empiris tanaman iniuntuk menyembuhkan berbagai macam penyakit seperti diabetes dan diare, juga  suatu  obat  kontrasepsi  yang mengandung tanin, flavonoid,
hidrokuinon, triterpenoid dansaponin.
Hasil  penelitian  bioekologi  yang sudah  dilakukan,  Pinang  yaki (Areca vestiaria) merupakan jenis palem endemik Sulawesi yang memiliki karakteristik yang unik  dan merupakan salah satu  komponen penting  dalam  ekosistem  hutan  hujan tropis  dimana  buahnya  sebagai  salah  satu sumber  makanan  bagi  monyet  hitam ( Macaca  nigra )  yang  juga  merupakan satwa  endemik  Sulawesi  (Simbala,  2006). Oleh  masyarakat  sekitar  Taman  Nasional Bogani Nani Wartabone (TNBNW) Pinang yaki (Areca  vestiaria) telah  dimanfaatkan sebagai  obat,  untuk  mengobati  berbagai penyakit.
Infromasi  ilmiah  tentang  Pinang yaki (Areca  vestiaria) perlu  digali, terutama  mengenai  kandungan  aktivitas biologis  seperti  sitotoksik.  Hal  tersebut
dilakukan  sebagai  upaya  meningkatkan kemanfaatan dan
kemungkinan pengembangan Pinang yaki (Areca
vestiaria) sebagai  obat  herbal  tradisional terstandar  ataupun  sebagai  bahan  baku obat.
Pada  panelitian  ini  menggunakan organ  ginjal  karena,  organ  ginjal merupakan  organ  utama  yang  sangat penting  untuk  mengeluarkan  sisa-sisa metabolisme  tubuh,  termasuk  zat-zat toksik yang tidak sengaja masuk ke dalam tubuh, akibatnya ginjal menjadi salah satu organ sasaran utama dari efek toksik.
Berdasarkan  hal  tersebut  di  atas maka  penelitian  ini  sangat  penting dilakukan  untuk  meningkatkan  potensi tumbuhan  obat  tradisional  ( traditional medicine ).  Dengan  melihat  apakah  ada yang  terjadi  pada  organ  ginjal  setelah diberikan ekstrak buah Pinang yaki (Areca vestiaria) dengan  melakukan  pengamatan secara  makroskopis,  sekaligus  bagian  dari upaya  untuk  mendapatkan  ekstrak  dan senyawa  obat  yang  lebih  bermanfaat. Penelitian  ini  diharapkan  dapat  berguna sebagai  usaha  menggali  informasi  ilmiah tanaman  Pinang  yaki (Areca  vestiaria) sebagai  obat  tradisional  dan  kemungkinan pengembangannya.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian ialah Alat : Beaker gelas, batang pengaduk,  blender,  vorteks,  kertas  saring (Whatman  No  42),  ayakan  200  mesh, aluminium foil, rotary evaporator, timbangan  analitik,  oven,  corong  pisah, gelas  ukur,  botol  kecil,  hot  plate, sonifikator, kulkas pendingin, cawan petri, rak  penelitian,  kandang  tikus,  wadah makanan  tikus,  botol  minuman  tikus, kawat  kasa,  dadak  padi,  sonde  lambung
metal, sarung tangan, dispo, tempat otopsi, jarum,  gunting,  pinset,  pisau  bedah  dan toples . Bahan  yang  digunakan  ialah  buah Pinang  yaki  ( Areca  vestiaria )  segar  yang sudah  masak,  etanol  96  %,  aquadest, Latutan CMC 1 %, eter,  makanan (pellet) ayam dan tikus putih jantan galur wistar.

## Prosedur Kerja

## Pembuatan Simplisia
Tahap awal dilakukan
pengumpulan  bahan  baku  buah  Pinang yaki  ( Areca  vestiaria ).  Buah  Pinang  yaki ( Areca  vestiaria )  di  sortasi  basah  untuk memisahkan  kotoran  dan  bahan-bahan asing  dari  biji.  Selanjutnya  buah  Pinang yaki  ( Areca  vestiaria )  dicuci  dibawah  air yang mengalir, ditiriskan kemudian diranjang  kecil-kecil  dengan  mengunakan pisau, selanjutnya dikeringkan dengan cara diangin-anginkan  selama  7  hari.  Sampel kering  kemudian  dihaluskan  mengunakan blender  dan  diayak  menggunakan  ayakan mesh 200 dan didapatkan serbuk simplisia halus.
Pembuatan  Ekstrak  Buah  Pinang  yaki (Areca vestiaria)
Serbuk  dari  buah  Pinang  yaki ( Areca  vestiaria )  ditimbang  sebanyak  400 gr,  kemudian  dimasukkan  didalam  wadah dan dimaserasi dengan pelarut etanol 96 % sebanyak  1000  selama  5  hari  dan  di remaserasi  selama  2  hari,  larutan  tersebut disaring  menggunakan  kain  sifon  dan setelah  itu  disaring  kembali  lagi  dengan kertas  Whatman  No  42  yang  kemudian dimasukkan  kedalam  gelas  erlenmeyer untuk  dipisahkan  residu  dari  filtrat,  filtrat kemudian diuapkan menggunakan vacuum rotary evaporator pada suhu 40 o C sampai diperoleh  ekstrak  etanol  yang  pekat. Ekstrak  etanol  pekat  kemudian  diuapkan didalam  oven  dengan  suhu  40 o C  sampai
kering 1 x 24 jam. Ektrak kering dari Buah Pinang  yaki  ( Areca  vestiaria )  ditimbang dan disimpan.
Pembuatan Larutan CMC 0,5 % Larutan CMC dibuat dengan melarutkan 1 g CMC 1 % ke dalam 30 mL aquadest, dipanaskan sambil diaduk sampai  homogen.  Kemudian  ditambahkan dengan  aquadest  sampai  volume  100  mL kemudian didinginkan.
Pembuatan  Larutan  Ekstrak  Buah Pinang yaki ( Areca vestiaria) Dosis pemakaian buah Pinang yaki ( Areca  vestiaria )  dengan  factor  konversi dosis  dari  manusia  (70kg)  ke  hewan  uji (200g)  dengan  dikalikan  0,018  yaitu  7,2 mg,  14,4  mg,  dan  21,6  mg.  Ekstrak  buah Pinang  yaki  ( Areca  vestiaria )  ditimbang sesuai  dengan  dosis  (0,72  g,  1,44g,  dan 2,16  g)  disuspensikan  dengan  larutan CMC  1  %  dalam  labu  ukur  100  mL kemudian disonifikasi hingga homogen .

## Perlakuan
Pada  penelitian  ini  dilakukan perlakuan selama 40 hari, masing- masing konsentrasi  menggunakan  3  hewan  uji. Ekstrak  Pinang  yaki  ( Areca  vestiaria ) diberikan  sesuai  dengan  dosis,  yang diberikan secara oral dengan menggunakan sonde  lambung  metal  dan  dispo  10  mL dengan  dosis  perhari  1  cc  sonde  lambung dimasukkan melalui mulut sampai esophagus,  dimasukkan  perlahan-  lahan untuk menghindari refluks.

## Pembedahan
Pertama-tama  tikus  yang  akan dibedah dideterminasi dengan cara memasukkan  tikus  kedalam  toples  yang sudah ditetesi cairan eter. Setelah beberapa saat  tikus  di  pindahkan  di  letakkan  diatas baki  parafin  keempat  kaki  tikus  ditusuk dengan  jarum  untuk  mencegah  gerakan
gerakan  yang  mengganggu  pada  saat pembedahan kemudian tikus siap di otopsi pembedahan  diawali  dengan  membelah bagian  perut  bawah  tikus  hingga  bagian dada,  kemudian  organ  diambil  keluar  dari dalam  tubuh  organ  yang  diambil  adalah organ ginjal.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Gambaran  Makroskopis    Tikus  Putih Jantan Galur Wistar (Rattus norvegicus)
Gambaran  makroskopis  tikus  putih jantan  galur  wiatar  ( Rattus  norvegicus) dapat dilihat pada Tabel 1 dibawah:
Tabel 1.  Gambaran makroskopis ginjal tikus putih jantan galur wistar
Kelompok perlakuan Morfologi Organ Ginjal Warna Permukaan Konsistensi A (Kontrol) Merah kecoklatan Licin Kenyal B (A400) Merah kecoklatan Licin Kenyal C (A800) Merah kecoklatan Licin Kenyal D (A1200) Merah kecoklatan Licin Kenyal
A B
C
D
Gambar 1. Hasil pemeriksaan makroskopis organ ginjal dari masing-masing kelompok perlakuan
Dari  hasil  pengamatan  terhadap gambaran  morfologi  ginjal  (Gambar  1).
Menunjukkan  bahwa  pada  perlakuan kontrol,  A400,  A800  dan  A1200  tidak ditemukan  adanya  perubahan  warna  yang
menandakan  organ  ginjal  tersebut  normal. Sedangkan permukaan organ ginjal terlihat licin  (normal)  pada  semua  kelompok perlakuan.  Konsistensi  organ  ginjal  juga normal pada semua perlakuan yaitu kenyal
atau  tidak  mengalami  perubahan  selama penelitian.  Hal  ini  sesuai  pendapat  Rita (2008),  ginjal  yang  normal  berwarna merah kecoklatan, permukaannya licin dan konsistensinya  kenyal.  Tidak  adanya perubahan  yang  bermakna  dari  gambaran makroskopis organ ginjal mungkin dikarenakan akibat kerusakan ginjal belum sampai  pada  tingkat  kerusakan  anatomi. Adapun  pada  perlakuan  A400  ditemukan adanya  tumor  pada  organ  ginjal,  akan tetapi  bukan  disebabkan  oleh  bahan  uji melainkan kemungkinan besar berasal dari infeksi  melalui  makanan,  serbuk  bedding atau  sebelum  digunakan  tikus  telah terinfeksi telur cacing.
Penelitian  yang  dilakukan  oleh Hendriani  (2007),  pada  pengamatan makroskopik  organ  ginjal  menggunakan ektrak  buah  mengkudu  dan  rimpang  jahe gajah,  pada  hasil  pengamatan  tidak menunjukkan  adanya  kelainan  organ secara  makroskopik.  Menurut  penelitian Wahjoedi  (2003),  pada  pemeriksaan makroskopik  organ  ginjal  menggunakan ekstrak  daun  kejibeling  tidak  ditemukan
kelainan  spesifik  atau  masih  dalam  batas- batas normal. Menurut penelitian Wahjoedi (1996),  pemeriksaan  makroskopik  organ ginjal menggunakan infus daun johar tidak menunjukkan  kelainan  dalam  arti  masih dalam  batas-batas  normal.  Menurut penelitian  Nurlaila  (2015),  pemeriksaan makroskopis  menggunakan  ekstrak  air tekelan  tidak  terlihat  adanya  kelainan secara  makroskopis  sehingga  dapat dikatakan  bahwa  pemberian  ekstrak  air tekelen tidak menyebabkan kelainan organ secara  makroskopis.  Menurut  penelitian Hidayatulloh  (2010),  pemberian  ekstrak Valerian secara subkronis tidak memberikan  dampak  toksik  yang  nyata terhadap keadaan makroskopis ginjal.

## Hasil  Penimbangan  Berat  Badan  Tikus Dan  Berat  Organ  Ginjal  Tikus  Putih
Jantan Galur Wistar
Data  rata-rata  hasil  penimbangan berat  badan  tikus  dan  berat  organ  ginjal tikus wistar setelah perlakuan dapat dilihat pada gambar 2 dan 3.
Gambar 2. Diagram Berat Badan Tikus Semua Kelompok Perlakuan
0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 kontrol A400 A800 A1200 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 1,4 kontrol A400
A800
Gambar 3. Diagram Berat Organ Ginjal Semua Kelompok Perlakuan
Dari  diagram  hasil  penimbangan berat badan tikus dan berat organ ginjal di atas  dapat  di  lihat  bahwa  dari  keempat kelompok  perlakuan  yang    menunjukkan penurunan  paling  rendah  terdapat  pada dosis  A400,  diikuti  dengan  dosis  A1200, dan dosis A800.
Di  lihat  pada  hasil  rata-rata penimbangan  berat  badan  tikus  dan  berat badan organ ginjal tiap kelompok perlakuan  diatas  terdapat  perubahan  berat badan  antara  kelompok  perlakuan  dengan kelompok  kontrol  negatif,  terjadinya perubahan  berat  badan  tikus  dan  berat organ  ginjal  dapat  dikarenakan  adanya proses  pertumbuhan  yang  dialami  oleh tikus, dan juga adanya pengaruh pemberian  ekstrak  etanol  buah  Pinang yaki.  Data  diagram  diatas  menunjukkan penurunan  berat  badan  dan  berat  organ ginjal  terendah  terdapat  pada  kelompok perlakuan Dosis A400.
Adapun hasil penelitian oleh Simbala (2007), Uji toksisitas buah Pinang yaki  menggunakan  Metode  BSLT  (Brine Shrimp  Lethality  Test).  pada  penelitian tersebut  konsentrasi  ekstrak  Pinang  yaki (Areca  vestiaria) yang  digunakan  dalam uji toksisitas yaitu 400, 600, 800, dan 1000
ppm. Hasil penelitian menunjukkan ekstrak  biji  Pinang  Yaki (Areca  vestiaria)
memiliki  potensi  bioaktif,  dalam  hal  ini berada  pada  nilai  LC50  sebesar  334.99 ppm,  berarti  pada  konsenrasi  tersebut menyebabkan  kematian  50  %  hewan  uji.
Nilai  tersebut  menunjukkan  bahwa  secara farmakologis  bersifat  toksik  terhadap hewan uji.
Menurut Meyer et al . (1982), Solis et  al .  (1983),  penelitian  National  Centre Institut  (NCl)  Amerika  Serikat,  suatu ekstrak  atau  fraksi  dari  suatu  tanaman dianggap  mempunyai  potensi  bioaktif terhadap  kematian  hewan  uji  jika  dinilai LC50  <  1000  ppm,  hanya  spektrum keaktifannya  masih  sangat  luas,  semakin kecil  nilai  LC50nya,  maka  ekstrak  tadi akan  semakin  toksik.  Hal  inilah  yang menjadi  dasar  adanya  penuruna  berat badan  paling  rendah  pada  kelompok perlakuan A400.
Dari hasil uji anova pada pengujian berat  badan  tikus  menunjukkan  nilai  Sig 0,231  (p  >  0.05)  artinya  tidak  ada perbedaan diantara perlakuan secara statistik.  Sedangkan  dari  hasil  uji  anova pada berat organ ginjal tikus  menunjukkan
nilai Sig 0,729 (p > 0.05) artinya tidak ada perbedaan secara statistik.
Tidak ada perbedaan yang bermakna  secara  statistik  dari  berat  badan tikus dan berat organ ginjal tikus terhadap kontrol negatif.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang didapatkan  bahwa  ekstrak  etanol  buah Pinang  yaki (Areca  vestiaria) tidak berpengaruh terhadap
gambaran
makroskopis  organ  ginjal  pada  tikus  putih jantan  galur  wistar  dan  pada  hasil penimbangan  rata-rata  berat  badan  dan berat organ ginjal tikus di uji menggunakan One  way ANOVA  dengan hasil  pengujian  tersebut  menunjukkan tidak ada perbedaan bermakna antara berat badan  dan  berat  organ  tikus  pada kelompok  perlakuan  kontrol,  perlakuan dosis  A400,  perlakuan  dosis  A800,  dan perlakuan dosis A1200 (p> 0,05).
.

## SARAN
Disarankan untuk
melakukan penelitian  lebih  lanjut  pada  tumbuhan Pinang yaki (Areca vestiaria) mengunakan metode  mikroskopis  agar  didapatkan informasi  lebih  mendalam  sehingga  dapat dijadikan acuan untuk penelitian selanjutnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Alboneh,  S.  2010.  Uji  Toksisitas  Akut
Ekstrak Meniran ( Phyllanthus
Niruri, L)  Terhadap  Ginjal  Mencit.
[ skripsi ]. Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro, Semarang.
Bischoff  J,  Domcrachev  M,  Federen  S,
Hotton  C,  Leipe  D,  Soussov  V,
Sternberg  R, Turner S. 2003. Areca vestiaria
B.  Wahjoedi,  Adjirni,  dan  Pudjiastuti.
2003.  Toksisitas  Subkronik  Ekstrak Kejibeling( Strobilanthus Crispus Bl) Pada  Tikus  Putih. Jurnal  Bahan Alam Indonesia Issn 1412-2855 Vol.
2, No. 4 Cowan,  M.  1999.  Plant  Products  As Antimicrobial Agents. Clinical Microbiology Review . 12(4):564-582 Departemen  Kesehatan.  2006. Kebijakan Obat Tradisional Indonesia . Departemen Kesehatan RI, Jakarta. Guyton, A. C., Hall, J. E. 1997. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran . Edisi 9. Jakarta: EGC.
Guyton  AC,  Hall  JE.  2007 .  Buku  Ajar Fisiologi  Kedokteran. Edisi  11. Jakarta: EGC; h. 326 Hendriani,  R.  2007.  Uji  Toksisitas Subkronis Kombinasi Ekstrak Etanol Buah Mengkudu ( Morinda Citrifolia Linn.)  Dan  Rimpang  Jahe  Gajah ( Zingiber  Officinale Rosc.)  Pada Tikus  Wistar.  [ skripsi ].  Fakultas Farmasi  Universitas  Padjadjaran, Jatinangor.
Hidayat,  M.,  Prahastuti,  S.,  Chikita,  V.,
Safitri,  D.,  Rahmawati,  S.,  and Soemardj,  A.  2016.  Pemberian
Subkronis Kombinasi Ekstrak
Kedelai  Detam  1  dan  Jati  Belanda Tidak  Berefek  Toksik  terhadap Fungsi,  Berat  dan  Histopatologis Ginjal  Tikus  Wistar. Journal  of Medicine and Health Vol. 1 No. 4.
Hidayatulloh,  M.  2010.  Uji  Toksisitas
Subkronis Ekstrak Valerian ( Valeriana officinalis )  Terhadap
Ginjal  Tikus  Wistar. [ skripsi ]
Fakultas  Kedokteran  Universitas Diponegoro, Semarang.
Krinke,  G.  2000.  The  Laboratory  Rat. Academi Press, San Diego
Listyorini,  I.  Puguh.2012.  Uji  Keamanan Ekstrak  Kayu  Jati  ( Tectona  Grandis
L.F )  Sebagai  Bio-Larvasida  Aedes Aegypti  Terhadap  Mencit.  [ Skripsi ] Universitas Negeri Semarang, Semarang. Meyer  BN,  Feriggni  JE,  Putnam  LB, Jacobson DE, Nichols JL, McLaughin.  1982.  Brin  Shrim  :  a
Convenient  General  Bioassay  for Active  plant  Costituens.  Planta Medica. 45:31-34
Mogea,  J.P.  2002.  Palm Diversity  In  Lore
Lindu  National  Park  :  A  Second Preliminary  Styudy.http://www.user gwdg.de/  symp2002/pdf63  Palms Mogea Final.pdf [ 9 Mei 2005].
Mukti,  L.,  Betty,  And  Bangun,  D.
Pengaruh  Pemberian  Ekstrak  Etanol Kulit  Buah  Manggis  ( Garcinia
Mangostana.L )  terhadap  perubahan makroskopis, mikroskopis pada ginjal mencit jantan ( Mus musculus.L ) strain  DDW yang  di papari Monosodium glutamate ( MSG ) dibandingkan dengan vitamin
E.
Nurlaila, Widyarini, S., Wahyuono, S., and
Hakim,  L.  2015.  Ketoksikan  Akut Ekstrak  Air Eupatorium  Riparium
Reg.  Pada  Tikus Sprague-Dawley. Traditional  Medicine  Journal .  Vol. 20 (3).
Ole,  F.  F.  2010.  Kadar  Glukosa  Darah Tikus  Wistar  ( Rattus  norvrgicus)
Setelah  Diberi  Esktrak  Daun  Keji Beling  (strobilanthes  crispus  BL.). [ skripsi ].  Jurusan  Biologi  F-MIPA Unsrat. Manado
Rita,  D.  2008.  Gambaran  Makrokopis  dan Miskrokopis  Hati  Ginjal  Akibat Pemberian Plumbum  Asetat.  [ Tesis ].
Sekolah  Pascasarjana  Universitas Sumatera Utara, Medan
Sherwood, L. 2001. Fisiologi Manusia dari Sel ke Sistem. Penerjemah: Braham, U.  Penerbit  Buku  Kedokteran  EGC, Jakarta. Hal 565-567.
Simbala.,  Rondonuwu  S.,  de  Queljoe  E. 2004. Keanekaragaman  Tumbuhan Obat di Kabupaten Bolaang Mongondo Simbala, 2006. Kajian Etnobotani, Proksimat  dan  Fitokimia  Pinang
Yaki  ( Areca  vestiaria Giseke). Eugenia 2006;12:173-183.
Simbala,  H.  E.  I.  2007.  Keanekaragaman
Floristik  dan  pemanfaatan  Sebagai Tumbuhan Obat di Kawasan Konservasi  II  Taman  Nasional Bogani  NaniWartabone  (Kabupaten Bolaang Mongondow, Sulawesi Utara).  [ Disertasi ].Institut  Pertanian Bogor, Bogor.
Simbala,  H.E.I.  2007.  Uji  Toksisitas  dan Uji  Preklinik Areca  vestiaria /Pinang Yaki sebagai antifertilitas.
Sirois,  M.  2005. Laboratorium  Animal Medicine: Principles and Procedurs . Elsevier Mosby Philadelphia, USA Sugiyanto.  1995. Petunjuk  Farmakologi .
Edisi  IV.  Laboratorium  Farmakologi dan  Toksikologi  Fakultas  Farmasi Universitas Gadjah Mada. Yogyakarta
Suryanto  E.  2012. Fitokimia  Antioksidan . Putra Media Nusantara, Surabaya.
Utomo,  B.  2015.  Pengaruh  Pemberian Gelatin  Tulang  Ayam  Terhadap Gambaran Makroskopis Dan Mikroskopis Hati Dan Ginjal Mencit ( Mus  Musculus ).  [ skripsi ].  Fakultas Peternakan  Universitas  Hasanuddin, Makassar.
Wahjoedi,  B.,  Astuti,  Y.,  Winamo,  W., Pudjiastuti,  Nuratmi,  B.  1996. Penelitian Toksisitas Subkronik Infus Daun  Johar (Cassia  siamea Lamk)
Pada Tlkus Putih . Penelitian
Kesehatan 24 (4).
Wahjoedi,  B.,  Adjirni,  dan  Pudjiastuti.
2003.  Toksisitas  Subkronik  Ekstrak Kejibeling  ( Strobilanthus  Crispus Bl)  Pada  Tikus  Putih. Jurnal  Bahan Alam Indonesia . Vol. 2 No. 4.
Windhartono  W.,  Zainul  K,  Sasmito  E. 2013.  Pengaruh  Infusa  Wortel
( Daucus  Carota L . )  Terhadap Histopatologi  Ginjal  Tikus  Jantan Yang  Diinduksi  Uranium. Jurnal Kedokteran Yarsi . 21 (1) : 033-040.
Wiriadinata  H  .  2002. Tumbuhan  Obat  di Taman  Nasional  Lore  Lindu  Sulawesi Tengah.Prosiding Simposium Nasional  II  Tumbuhan  Obat  dan Aromatik .
Yusuf,  H.  2011.  Uji  Toksisitas  Akut
Ektrsak  Etanol  Daun  Klausena (clausena  anisata  Hook.f.)  Vol.  11 No. 1 Yuzammi, P.Hidayat. 2002. Flora Sulawesi;  Unik,  Endmik  dan  Langka . Yayasan Chevron Dan Texaco Indonesia, Bogor.
Zaenal  N.  2008. Optimalisasi  Produksi Obat Tradisional pada Taman SYIFA di  Kota  Bogor ,Jawa  Barat.  Bogor.
Fakultas Pertanian. Institut Pertanian Bogor. Zuhud, E.A.M. 1994. Pelestarian Pemanfaatan Keanekaragaman Tumbuhan  Obat  Hutan  Tropika
Indonesia. Prosiding  Lokakarya Nasional  Keanekaragaman  Hayati Hutan Tropik Indonesia.