Versi Online: http://journal.ipb.ac.id/index.php/jtip DOI: 10.6066/jtip.2015.26.2.155 Hasil Penelitian

## PENGARUH  KONSUMSI  TEMPE  KEDELAI  GROBOGAN  TERHADAP PROFIL  SERUM,  HEMATOLOGI  DAN  ANTIOKSIDAN  TIKUS
[Effect  of Grobogan Soybean Tempe Consumption on Rats’ Serum Profiles,
Hematology, and Antioxidant]
Made Astawan 1) * , Tutik Wresdiyati 2) , dan Jefriaman Sirait 1)
1) Departemen Ilmu dan Teknologi Pangan, Fakultas Teknologi Pertanian, Institut Pertanian Bogor, Bogor
2) Departemen Anatomi, Fisiologi dan Farmasi, Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor, Bogor
Diterima 12 Mei 2015 / Disetujui 25 September 2015

## ABTRACT
Tempe  is  a  potential  source  of  protein  for  250  million  people  in  Indonesia.  Indonesian  soyb ean demand reached 2.2 million tons per year, and 1.3 million tons of which are used for tempe production. Approximately  70%  of  the  soyb eans  are  imported  from  different  countries.  To  improve  national  food security, it is important to use local soybean as a raw material. Therefore, this study used Grob ogan local soyb ean  as  raw  material.  The  purpose  of  this  study  was  to  evaluate  the  impact  of  the  consumption  of tempe (from local soyb ean Grob ogan) in the long term, ie over a 90 -day sub chronic test using rats as a model.  Parameters  measured  were  serum biochemical  profile,  hematology, malonaldehyde  (MDA),  and superoxide dismutase (SOD) in liver and kidney organs of rats. Th is research was conducted using three groups of rats which were fed tempe, boiled soyb ean, and casein as a source of protein in the ration. Data feed convertion efficiency showed that tempe of Grobogan soybean had a better protein quality than that of boiled soybean and casein. As compared to the groups of rats fed with b oiled soybean and casein, the group fed with tempe had a higher HDL cholesterol, however no significant difference was ob served  in the hematological parameters, MDA and SOD in liver and kidney organs. This suggests consumption of tempe made from Grob ogan soyb ean in the long term does not have a negative impact on health.
Keywords: hematology, tempe Grob ogan soybean, MDA, serum profile, SOD

## ABSTRAK
Tempe  merupakan  sumber  protein  yang  sangat  potensial  bagi  250  juta  penduduk  Indonesia. Kebutuhan kedelai Indonesia mencapai 2.2 juta ton/tahun, dan 1.3 juta ton di antaranya digunakan untuk produksi  tempe.  Sekitar  70%  dari  kedelai  tersebut  diimpor  dari  berbagai   negara.  Untuk  meningkatkan ketahanan  pangan  nasional,  sangat  penting  untuk  menggunakan  kedelai  lokal  sebag ai  bahan  baku pembuatan  tempe.  Oleh  karena  itu  penelitian  ini  menggunakan  kedelai  lokal  Grobogan sebagai  bahan bakunya. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasi dampak konsumsi tempe (dari kedelai lokal Grobogan) dalam jangka panjang, yaitu melalui uji subkronis selama 90 hari dengan menggunakan tikus percobaan. Parameter yang diamati adalah profil biokimia serum, hematologi, malonaldehida  (MDA), dan superoksida dismutase (SOD) pada organ hati dan ginjal tikus percobaan. Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan  tiga  kelompok  tikus  yang  diberi  pakan  tempe,  kedelai  rebus  dan  kasein sebagai sumber protein di dalam ransum. Data feed convertion efficiency menunjukkan tempe kedelai Grobogan memiliki kualitas  protein  yang  lebih  baik  dibandingkan  kedelai  rebus  dan  kasein.  Dibandingkan  dengan  tikus kelompok kedelai rebus dan kasein, maka tikus kelompok tempe memiliki kolesterol HDL yang lebih tingg i, tetapi tidak berbeda nyata pada parameter hematologi, MD A dan SOD  hati dan ginjal tikus percobaan. Hal ini menunjukkan konsumsi tempe dari kedelai Grobogan dalam jangka panjang tidak berdampak negatif terhadap kesehatan.
Kata kunci: hematologi, tempe kedelai Grobogan, MDA, profil serum, SOD

## PENDAHULUAN
1
Dewasa  ini  kebutuhan  kedelai  nasional  sangat besar,  rata-rata  mencapai  2. 2  juta  ton  per  tahun (Astawan et  al .,  2015).  Sekitar  70%  dari  kedelai
*Penulis Korespondensi: E-mail:  mastaw an@yahoo.com
tersebut  diimpor  dari  berbagai  negara.  Untuk meningkatkan  ketahanan  pangan  nasional,  sangat penting  untuk  menggunakan  kedelai  lokal  sebagi bahan  baku pembuatan  tempe.
Sekitar 1.3 juta ton kedelai per tahun digunakan untuk  pembuatan  tempe,  yang  merupakan  sumber protein  murah  bagi  masyarakat  Indonesia  (Astawan et  al. ,  2014).  Tempe  merupak an  pangan  olahan hasil  fermentasi  kedelai  oleh  kapang Rhizopus sp. Proses  ferment asi  akan  mengubah  kedelai  menjadi tempe  yang  memiliki  aroma,  citarasa,  tekstur, penampilan,  nilai  gizi,  dan  daya  cerna  yang  lebih baik  (Nout  dan  Kiers,  2005).  Selain  mengandung protein  yang  tinggi,  tempe  juga  mengandung isoflavon  yang  dapat  menangkal  radikal  bebas (Watanabe et  al., 2007;  Astuti,  2008;  Utari et  al., 2010; Astawan, 2013). Beberapa khasiat tempe bagi kesehatan  adalah  menurunkan  risiko:  penyakit jantung  dan strok e, osteoporosis,  kanker,  gangguan pencernaan, overweigt dan  obesitas,  serta  diare (Babu et  al., 2009).  Konsumsi  tempe  juga  dapat menurunkan  senyawa  malonaldehida  dan  glukosa darah  (Desminarti et  al., 2012).  Seiring  dengan  per- kembangan  produk  olahan  tempe,  pertumbuhan konsumsi  tempe  nasional  juga  meningkat.  Rat a-rata konsumsi  tempe  nasional  mencapai  8,5  kg/kapita/ tahun  (Astawan,  2015).  Di  masa  mendatang konsumsi  tempe  dan  produk  turunannya  ak an semakin  meningkat,  terutama  akibat  meningkatnya jumlah  vegetarian  di dunia.
Dalam  rangka  unt uk  meningkatkan  ketahanan, kedaulatan dan kemandirian pangan nasional sesuai amanah  Undang-undang  Pangan  No.  18  tahun 2012,  maka  sangat  penting  untuk  menggunak an kedelai  lokal  sebagai  bahan  baku  pembuat an tempe.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  memberik an bukti  ilmiah  dampak  kons umsi  tempe  kedelai Grobogan  dalam  jangka  panjang  terhadap  profil biokimia  serum,  hematologi,  kadar  malonaldehida, serta  superoksida  dismutase  pada  organ  hati  dan ginjal tikus percobaan. Sebagai pembanding diguna- kan  kedelai  rebus  dan  kasein.  Cara  penyiapan kedelai  rebus  persis  sama  dengan  pada  pembuat an tempe,  hanya  bedanya  tidak  mengalami  proses fermentasi.  Dalam  hal  ini  kedelai  rebus  digunak an sebagai pembanding untuk melihat pengaruh proses fermentasi  pada  pembuatan  tempe  terhadap  profil serum, hematologi  dan  antioksidan.

## BAHAN  DAN METODE

## Bahan
Bahan  baku  yang  digunakan  adalah  kacang kedelai  ( Glycine  max )  variet as  Grobogan  yang diperoleh  dari  petani  di  Grobogan,  Jawa  Tengah. Tikus  percobaan  yang  digunakan  adalah  tikus  putih jantan  galur  S prague  Dawley umur  28  hari  yang diperoleh  dari  BPOM  RI,  Jakarta.  Bahan-bahan yang  digunakan  unt uk  pembuat an  ransum  tikus adalah  tepung  tempe,  tepung  kedelai  rebus,  kasein, pati  jagung,  c arboximethylcelulose (CMC)  (Sigma-
Aldrich,  USA),  minyak  jagung,  campuran  mineral dan  campuran  vitamin.

## Pembuatan tempe
Proses  pembuatan  tempe  dimulai  dengan pembersihan  kedelai,  perendaman  dengan  air selama  1  jam,  perebusan  selama  30  menit,  peren- daman dalam air perebus selama 12 jam (hingga pH sekitar  4,0-4,5),  pemisahan  kulit  ari,  pencucian hingga  bersih,  penirisan,  penambahan  ragi,  penge- masan, dan  fermentasi  selama  40  jam.

## Pembuatan tepung tempe
Pembuatan  tepung  tempe  dilakukan  dengan cara  pengirisan  tempe  menggunakan slicer, pem- blansiran  dengan  uap  panas  (tekanan  1  bar  selama 2  menit),  pengeringan  oven  dengan  suhu  60°C selama  8  jam,  penggilingan  dengan disc  mill (Crompt on  Greves,  India) , dan  pengayakan  dengan saringan  60 mesh.

## Pembuatan tepung kedelai rebus
Pembuatan  tepung  kedelai  rebus  dimulai  dari pembersihan  atau  penyortiran  kedelai,  perendaman selama  6  jam,  perebusan  selama  30  menit,  pengu- pasan  kulit  ari  kedelai,  penirisan,  pengeringan dengan  oven  pada  suhu  60°C,  penepungan  dengan disc mill, dan  penyaringan  dengan  ayakan  60 mesh.

## Pembuatan ransum
Pembuatan  rans um  tikus  percobaan  dibeda - kan  berdasarkan  sumber  prot ein,  yaitu  tepung tempe,  tepung  kedelai  rebus,  dan  kasein  sebagai kontrol.  Jumlah  ransum  yang  diberikan  disesuaik an dengan  kebutuhan  harian  tikus  dan  komposisinya disesuaikan  dengan  standar  AOAC  (2005),  yang terdiri  dari:  prot ein  10%,  lemak  8%,  air  5%,  serat 1%,  vitamin  1%,  mineral  5%,  dan  karbohidrat  70% (Muchtadi et al., 1992).

## Analisis  proksimat  sampel
Analisis  proksimat  dilakukan  pada  tepung tempe,  tepung  kedelai  rebus,  dan  kasein.  Hasil analisis  akan  menjadi  acuan  dalam  formulasi ransum  tikus  percobaan.  Analisis  proksimat  terdiri dari  analisis  kadar  air  (metode  oven,  AOAC,  2005), analisis  kadar  abu  (metode  pengabuan  kering, AOAC,  2005),  analisis  kadar  lemak  (metode Soxhlet,  AOAC,  2005),  analisis  kadar  protein  kasar (metode  Kjedhal,  AOAC,  2005),  dan  analisis  serat kasar  (metode  asam  basa  k uat,  AOAC,  2005). Kadar  karbohidrat  ditentukan  secara by difference .

## Masa adaptasi tikus  percobaan
Penelitian  ini  menggunakan  tikus  percobaan sebagai  model  yang  telah  mendapatkan Ethical Approval dari  Ketua  Komisi  Etik  Hewan  IPB  (A CUC No:  06-2013  IPB ).  Tik us  yang  digunakan  dalam penelitian  diadaptasikan  terlebih  dahulu  selama  tiga
hari  dengan  pemberian  ransum  standar  (kas ein sebagai  sumber  protein)  dan  air  minum  secara ad libitum .  Tikus  ditempatkan  dalam  kandang  secara individual  dengan  kondisi  cahaya  dan  ventilasi  yang cukup  pada  suhu  ruang  (sekitar  20-25°C).  Masa adaptasi  bertujuan  untuk  membiasakan  tikus  ter- hadap  lingkungan  percobaan.

## Seleksi tikus  dan kelompok perlakuan
Setelah  masa  adaptasi,  tikus  diseleksi  ber - dasarkan  keseragaman  bobot  tubuh  dan  dik e- lompokkan  menjadi  tiga,  yaitu  kelompok  tikus  yang diberi  ransum  standar  (kas ein),  ransum  tepung tempe,  dan  ransum  tepung  kedelai  rebus.  Setiap tikus  dalam  satu  kelompok  memiliki  perbedaan bobot  kurang  dari  10  gram  dan  antar  kelompok memiliki perbedaan  maksimal 5  gram.

## Masa percobaan
Selama 90  hari  mas a  percobaan,  tikus diberikan  ransum  sesuai  dengan  kelompok  per- lakuannya  dan  air  minum  secara ad  libitum. Tikus dikandangkan  secara  individual  dengan  kondisi cahaya  dan  ventilasi  yang  cukup  pada  suhu  ruang (sekitar  20-25°C).  Selama  masa  percobaan,  di- lakukan  pengamatan  konsumsi  ransum  setiap  hari dan  berat  badan  tikus setiap enam  hari  sekali.

## Persiapan serum  dan organ
Pada  akhir  masa  percobaan,  dilakukan  pem - bedahan  terhadap  semua  tikus.  Tikus  dibius  meng- gunakan campuran larutan k etamine (Ilium, Australia)  dan xylazine (Interchemie,  Netherland). Darah  diambil  dari  jantung  dengan  menggunak an syringe (B D, Belgium) , dimasukkan ke dalam tabung sentrifus,  disentrifus  pada  3000  rpm  selama  10 menit, dan dipisahkan serumnya. S erum yang diper- oleh  dimasukkan  ke  dalam test  tube (Eppendorf, Germany)  untuk  dianalisis.  Organ  tikus  (ginjal  dan hati)  diambil  dengan  gunting  bedah  dan  pins et, ditimbang  dengan  neraca  analitik,  dimasukkan  ke dalam  wadah plastik dan dibekukan untuk keperluan analisis selanjutnya.

## Analisis  hematologi dan serum
Analisis  hematologi  dilakukan  sesuai  Aboderin dan  Oyetayo  (2006),  yaitu  dengan  menggunak an 0,5  mL  darah  yang  dimasukkan  ke  dalam  tabung yang  diberi  anti-koagulan  ethylene  diamine  tetra- acetic acid (E DTA)  (BDH, USA ). Analisis hematologi meliputi kadar hemoglobin, eritrosit, leukosit, trombosit,  dan  hematok rit,  yang  dilakukan  dengan alat hematology  analyzer  (Medonic  M-series  Hae- matology  Analyz er, Boule  Medical  Stockholm Sweden).  Profil  serum  meliputi  kadar  glukosa, kolesterol,  trigliserida, high  density  lipoprot ein (HDL) ,  low  density  lipoprot ein (LDL),  ureum,  asam urat, serum glutamic  oxaloa-cetic  transaminase
(SGOT), serum  glutamic  pyruvic  transaminase (SGPT),  protein  total, dan  albumin.

## Analisi s  kadar  malonaldehida  hati  dan  ginjal (AOAC,  2005)
Sebanyak  1  gram  hati  atau  ginjal  dihanc urkan dalam  kondisi  dingin  dengan  5  mL  larutan Phosphat Buffer  Saline (PBS)  (Sigma-Aldrich,  USA)  yang mengandung  11, 5  gram  KCl/L.  Homogenat  yang diperoleh  kemudian  disentrifus  pada  4000  rpm selama  10  menit  sampai  diperoleh  supernat an jernih.  Selanjutnya  1  mL  supernatan  hati,  ginjal  atau larutan  kerja  (standar)  1,1-3, 3-tetraethoxypropane (TEP)  (Sigma-Aldric h,  USA)  dicampur  dengan  4,0 mL  larutan  HCl  0,25  N  dingin  yang  mengandung 15%  trichloroacetic  acid  (TCA)  (Merck,  Germany), 0,38%  thiobarbituric  acid  (TBA)  (Merck,  Germany), dan  0,5%  butylatedhydroxytoluene  (BHT)  (Merck, Germany),  kemudian  divortex.  Campuran  yang diperoleh  dipanaskan  pada  suhu  80°C  dengan menggunakan  penangas  selama  1  jam.  Setelah dingin,  campuran  disentrifus  3,500  rpm  selama  10 menit.  Supernatan  jernih  diuk ur  absorbansinya  pada 532 nm dan diplotkan pada kurva standar  TEP untuk menghitung  kadar  malonaldehida  (MDA)  sampel.

## Analisi s  aktivita s  superoksida  di smuta se  hati dan ginjal (Misra  dan Fridovich,  1972)
Sampel  hati  atau  ginjal  dihancurkan  dan diekstraksi  dengan  buffer  fos fat  pH  7,  dengan  per- bandingan  1:10.  Hasil  ekstraksi  disentrifus  dengan kecepatan  3000  rpm  dengan  jari-jari  sentrifus sebesar  17,90  cm  selama  10  menit  dalam  keadaan dingin.  Pengukuran  serapan  dilakukan  dengan  cara memasukkan  2800  µL  buffer  natrium  karbonat  pH 10,2;  100  µL  sampel  supernatan  yang  mengandung superoksida  dismutas e  (SOD)  dan  100  µL  larut an epinefrin  ke  dalam  tabung  reaksi.  Kemudian serapan  dibaca  pada  panjang  gelombang  480  nm pada  menit  ke 1, 2, 3, dan  4.

## Analisis  data
Data  ditampilkan  sebagai  nilai  rata-rata  ± standar  deviasi.  Data  dianalisis  menggunakan  uji ragam analysis  of  variance (ANOVA)  pada  taraf signifikansi  0,05.  Uji  beda  lanjut  dilakuk an  dengan uji  Duncan.  Pengolahan  data  menggunakan  prog- ram  SPSS versi  16.0  (Chicago,  USA).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Proksimat  sampel
Analisis  proksimat  dilakukan  untuk  mengetahui komposisi  kimia  sampel  (Tabel  1).  Analisis  prok- simat  menunjukkan  kandungan  protein,  abu,  serat kasar  dan  air  pada  kedelai  hampir  sama  dengan tempe.  Perbedaan  ant ara  tempe  dan  kedelai
terdapat  pada  kualitas  zat  gizinya.  Tempe  memiliki kualitas  zat  gizi  yang  lebih  baik  disbandingk an kedelai,  akibat  proses  fermentasi  yang  mengubah komponen  karbohidrat,  protein  dan  lemak  menjadi lebih  sederhana  (Nout  dan  Kiers,  2005).  Babu et  al . (2009)  melaporkan bahwa fermentasi  kedelai menjadi  tempe  dapat  meningkatkan  daya  cerna karbohidrat  karena  adanya  enzim  α-galaktosidase yang mendegradasi rafinosa, stakiosa dan beberapa oligosakarida.
Tabel  1.  Komposisi  kimia  tepung  tempe  dibanding- kan kasein dan  tepung  kedelai  rebus
Parameter (%) Kasein Tepung Tempe Tepung Kedelai Rebus Kadar protein 89,4 ± 2,1 51,7 ± 2,0 51,1 ± 3,5 Kadar lemak 0,3 ± 0,0 25,4 ± 1,6 25,3 ± 1,7 Kadar abu 0,6 ± 0,1 1,8 ± 0,1 2,6 ± 0,2 Kadar serat kasar 0,5 ± 0,0 6,5 ± 0,5 7,6 ± 0,5 Air 9,0 ± 0,1 4,3 ± 0,4 5,5 ± 0,5 Karbohidrat 0,7 ± 0,0 16,8 ± 1,2 15,6 ± 1,0
Berdasarkan  hasil  analisis  proksimat  sampel, kemudian  ditentukan  formulasi  rans um  yang  akan diberikan  kepada  tikus  percobaan  (Tabel  2).  Pada ransum  kelompok  tikus  yang  diberi  tempe  dan kedelai  rebus  tidak  ditambahkan  CMC  karena tepung  tempe  dan  tepung  kedelai  rebus  sudah  me- ngandung  s erat  kasar  yang  cukup  untuk  kebutuhan harian  tikus percobaan.
Tabel  2.  Komposisi  ransum  tikus  percobaan  ber- dasarkan  sumber  protein  per  1000  g
Komponen Penyusun (g) Kelompok Perlakuan (Sumber Protein) Kasein Tepung Tempe Tepung Kedelai Rebus Sampel protein 112 193 196 Minyak jagung 80 31 30 Mineral mix 49 46 45 Vitamin mix 10 10 10 CMC 9 - - Air 39 42 39 Pati jagung 701 678 680
Kenaikan  berat  badan  tikus  dan  konsum si ransum
Jumlah  konsumsi  ransum  dan  kenaikan  berat badan tikus pada ketiga kelompok perlakuan selama 90  hari  percobaan  disajikan  pada  Tabel  3.  Jumlah konsumsi  ransum  tikus  kelompok  kasein  nyata  lebih tinggi  ( P <0,05)  dibandingkan  tikus  kelompok  tempe dan  kelompok  kedelai  rebus.  Hal  ini  dikarenak an
kedelai  dan  tempe  memiliki  indeks  glikemik  yang rendah  (Astawan,  2009;  Astawan,  2013)  sehingga dapat  mempertahankan glukosa  darah  stabil, sehingga  tikus  tidak  mudah  lapar.  Tempe  juga mengandung serat pangan yang menyebabkan tikus lebih  cepat  kenyang  (Mursyid et  al .,  2014).  Semakin besar  jumlah  konsumsi  ransum  seharusnya  mem- berikan  kenaikan  berat  badan  yang  semakin  tinggi, namun  hasil  yang  diperoleh  pada  Tabel  3  ternyata berbeda. Kelompok tikus yang  diberi  rans um kasein, walaupun  memiliki  jumlah  konsumsi  rans um  ter- besar,  tetapi  tidak  mengalami  kenaikan  berat  badan tertinggi.  Kenaikan  berat  badan  tikus  kelompok tempe ny ata lebih tinggi ( P <0,05)  dibandingkan tikus kelompok  kedelai  rebus,  tetapi  tidak  berbeda dengan  tikus  kelompok  kasein.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  kualit as  protein  tempe  lebih  baik  disbanding- kan  protein  kedelai  rebus,  tetapi  setara  dengan protein  kasein.  Hal  ini  didukung  oleh  hasil  penelitian Mursyid et  al .  (2014)  yang  melaporkan  kualitas protein  tempe  setara  dengan  protein  kasein.
Tabel  3.  Konsumsi  ransum,  kenaik an  berat  badan dan food convertion efficiency tikus setelah
90  hari percobaan Parameter Selama Percobaan Perlakuan (Sumber Protein) Kasein Tepung Tempe Tepung Kedelai Rebus Total konsumsi ransum (g) 1983 ± 109 b 1813 ± 81 a 1797 ± 51 a Kenaikan berat badan (g) 239 ± 26 ab 271 ± 26 b 231 ± 20 a Food convertion efficiency (%) 12 ± 1 a 15 ± 2 b 12 ± 1 a
Keterangan:  Nilai  yang  diikuti  oleh  huruf  yang  berbeda pada  baris  yang  sama  menunjukkan  berbeda  nyata ( P <0,05)
Semakin  tinggi  nilai food  convertion  efficienc y (FCE )  maka  semakin  tinggi  tingkat  efisiensi  peng- gunaan  ransum,  demikian  sebaliknya.  Dat a  yang disajikan  pada  Tabel  3  menunjukkan  FCE  tikus kelompok  tempe  nyata  lebih  tinggi  ( P <0,05)  diban- dingkan  tikus  kelompok  kasein  dan  kelompok kedelai  rebus.

## Rasio  berat organ dengan berat badan
Data pada  Tabel 4 menunjukkan berat relatif (% terhadap  bobot  tubuh)  organ  hati,  testis  dan  ginjal tikus  tidak  berbeda  nyata  ( P >0,05)  antar  perlakuan. Hal  ini  disebabkan  oleh  as upan  protein  pada  ketiga kelompok  tikus  yang  tidak  berbeda  nyata  satu  sama lain.  Hal  ini  juga  menunjukkan  konsumsi  tempe  dan kedelai  rebus  dalam  jangk a  panjang  tidak  menim- bulkan  dampak  samping  (pembengkakan)  pada organ  tikus.  Hal  ini  sejalan  dengan  hasil  penelitian Suwarno et  al .  (2013)  yang  menyatakan  pemberian ransum  tempe  dari  kedelai  transgenik  dan  non- transgenik  tidak  berpengaruh  terhadap  berat  relatif organ  tikus percobaan.
Tabel  4.  Berat  relatif  organ  terhadap  bobot  tubuh tikus setelah  90 hari  percobaan Kelompok Perlakuan Berat Relatif Hati (%) Berat Relatif Testis (%) Berat Relatif Ginjal (%) Kasein 3,0 ± 0,2 a 0,9 ± 0,1 a 0,5 ± 0 a Tepung tempe 3,0 ± 0,1 a 0,9 ± 0,1 a 0,5 ± 0 a Tepung kedelai rebus 3,0 ± 0,2 a 0,9 ± 0,1 a 0,5 ± 0,1 a
Keterangan: Nilai yang diikuti oleh huruf yang sama pada kolom  yang  sama  menunjukkan  tidak  berbeda  nyata ( P >0,05)

## Biokimia serum
Analisis  biokimia  serum  merupakan  para-mater yang  sensitif  untuk  mengamati  kesehatan  tikus  dan untuk  mengetahui  ada  atau  tidaknya  kelainan  pada darah  dari  ketiga  perlak uan.  Analisis  biokimia  serum darah  dapat  dilihat  pada  Tabel  5.  Kandungan karbohidrat  pada  ransum  yang  tidak  berbeda  jauh menjadikan  kadar  gluk osa  darah  ketiga  kelompok tikus  tidak  berbeda  nyata  ( P >0, 05).  Faktor  pada tempe yang  dapat menurunkan kadar gluk osa darah adalah  protein,  isoflavon,  serat  pangan  dan  indeks glikemik yang  rendah  (Villegas et al., 2008).
Kadar  kolesterol,  LDL  dan  trigliserida  serum ketiga  kelompok  tikus  tidak  berbeda  nyata  satu sama  lainnya  (Tabel  5).  Tabel  5  juga  menunjukkan nilai  kolesterol  HDL  tikus  kelompok  tepung  tempe nyata  lebih  besar  ( P <0,05)  dibandingkan  nilai  HDL kelompok  tikus  lainnya.  Sebaliknya,  nilai  kolesterol LDL  tikus  kelompok  tepung  tempe  tidak  berbeda dengan  kelompok  kasein  dan  tepun g  kedelai  rebus. Keberadaan  asam  oleat,  linoleat  dan  linolenat  pada tempe  berpotensi unt uk meningkatkan k olestrol  HDL dan  menurunkan  kolesterol  LDL.  Tingginya  kadar HDL  mengurangi  terjadinya  pengendapan  dan  pem- bentukkan  plak  dalam  sistem  peredaran  darah (Astawan et  al. ,  2005).  Berdasarkan  hasil  analisis HDL  yang  diperoleh,  tempe  dapat  dijadikan  pangan
alternatif  untuk  meningkatkan  HDL  darah  sehingga dapat  digunakan  unt uk  mencegah  peny akit  kardio- vaskuler.  Hasil  meta-analisis  terbaru  terhadap  20 parallel-design  studies dan  23 crossover  studies, melaporkan  bahwa  konsumsi  rutin  1-2  porsi  (15-30 g)  prot ein  kedelai  setiap  hari  berpengaruh  secara nyata  terhadap  perbaikan  profil  lipoprotein  serum dalam  penurunan  risiko  penyakit  jantung  coroner (Anderson  dan  Bush, 2011).
Nilai  kreatinin,  asam  urat  dan  SGOT  tikus  pada ketiga  kelompok  tidak  berbeda  nyata  ( P > 0,05).  Hal ini  membuktikan  bahwa  konsumsi  tempe  dan kedelai  rebus  tidak  meningkatkan  nilai  kreatinin, asam  urat  dan  ureum  dalam  darah.  Dengan demikian  persepsi  masyarakat  bahwa  konsumsi tempe  secara  terus -menerus  dalam  jangka  waktu lama  dapat  meningkatkan  as am  urat,  tidak  terbukti pada  penelitian  ini.  Hal  ini  sejalan  dengan  hasil penelitian  Messina et  al .  (2011)  yang  menunjukkan tidak  satupun  dari  enam  studi  epidemiologi  yang diidentifikasi  memberikan  bukti  bahwa  konsumsi kedelai  menyebabkan  peningkatan  sirkuasi  asam urat,  hiperurisemia,  atau  gout.  E valuasi  terhadap data  dari  lima  studi  intervensi  pada  manusia menunjukkan  protein  kedelai  tidak  meningkatkan kadar  asam  urat  di  dalam  serum,  sehingga konsumsi  pangan  berbahan  kedelai  seperti  yang biasa  dilakukan  di  Asia  tidak  relevan  secara  klinis dianggap  sebagai  penyebab  kenaikan  asam  urat (Messina et  al., 2011).  Kadar  SGP T  tikus  kelompok ransum tempe tidak berbeda nyata dengan kelompok kasein dan kedelai rebus. Tingginya kadar SGPT  dalam  darah  umumnya  menunjukkan  kerja fungsi  hati  yang  terganggu.  Pada  penelitian  ini, kenaikan S GP T pada kelompok kedelai  rebus belum berdampak  pada  kerusakan  hati,  yang  ditunjukkan oleh  tidak  adanya  perbedaan  berat  relatif  organ  hati terhadap  bobot  tubuh  (Tabel  4).  Nilai  prot ein  total dan  albumin  ketiga  kelompok  tikus  tidak  berbeda nyata (Tabel  5).
Tabel  5.  Profil  biokimia  serum  tikus  yang  diberi  pakan  kasein,  tepung  tempe  dan  tepung  kedelai  rebus setelah  90 hari  percobaan Parameter Kelompok Perlakuan (Sumber Protein) Kasein Tepung Tempe Tepung Kedelai Rebus Glukosa darah (mg/dL) Kolesterol (mg/dL) Trigliserida (mg/dL) HDL (mg/dL)
LDL (mg/dL) Kreatinin (mg/dL) Asam urat (mg/dL) SGOT (U/L) SGPT (U/L) Total protein (g/dL) Albumin (g/dL)
241 ± 41,9 a 62,4 ± 8,7 a 55,8 ± 4,6 a
47,4 ± 6,5 a
34,6 ± 3,9 a
0,8 ± 0,1 a 0,6 ± 0,3 a 101,8 ± 20,9 a
40,6 ± 6,3 a
6,6 ± 0,5 a
3,2 ± 0,3 a
216,2 ± 18,9 a
58,2 ± 7,9 a
51,4 ± 8,6 a
63,0 ± 5,7 b 33,6 ± 4,2 a 0,8 ± 0,1 a 0,4 ± 0,2 a 84,2 ±1 2,7 a
46,0 ± 9,2 ab 6,2 ± 0,2 a
3,2± 0,1 a
202,4 ± 11,7 a 57,4 ± 6,6 a
48,4 ± 5,8 a
54,8 ± 4,3 a
34,2 ± 5,8 a
0,7 ± 0,1 a
0,4 ± 0,2 a
114,0 ± 39,2 a
55,6 ± 13,9 b
6,2 ± 0,2 a
3,2 ± 0,1 a
Keterangan: Nilai yang diikuti oleh huruf yang berbeda pada baris yang sama menunjukkan berbeda nyata ( P <0,05)
Hal  ini  mendukung  penggunaan  tempe  dan kedelai  rebus  sebagai  pangan  alternatif  pengganti susu.  Dengan  demikian  konsumsi  tempe  dan kedelai  rebus  dapat  membantu  menormalkan  kadar total  protein  dan  albumin  serum.  Hasil  penelitian  ini sejalan  dengan  hasil  penelitian  lainny a  yang  me- laporkan  bahwa  pemberian  ransum  kasein  dan kedelai  non-transgenik  tidak  berpengaruh  pada parameter  serum  darah  (Qi et  al., 2012;  Daleprane et  al., 2009;  Appenzeller et  al., 2008;  Maskar et  al . , 2015).

## Hematologi darah
Analisis  hematologi  merupakan  analisis  darah yang  digunakan  untuk  mengetahui  kadar  hemo- globin,  leukosit,  hemat okrit,  eritrosit,  dan  t rombosit. Turner et  al. (2008)  menjelaskan  bahwa  tujuan analisis  hemat ologi  adalah  mengamati  kelainan hematologi  seperti  jumlah  dan  fungsi  sel  darah, membantu  mendiagnosis  peny akit  infeksi,  serta mengetahui  kelainan  sistemik pada  ginjal  dan  hati.
Perlakuan  pemberian  ketiga  jenis  ransum selama  90  hari  tidak  berpengaruh  nyata  ( P >0,05) terhadap  nilai  hemoglobin  dan  leukosit  tikus  per- cobaan  (Tabel  6).  Hal  ini  menunjukkan  konsumsi tempe  dan  kedelai  rebus  memberikan  asupan  zat besi  yang  cukup  untuk  sintesis  hemoglobin.  Kadar hemoglobin  tikus  pada  ketiga  kelompok  perlakuan berkisar  13,4-13,8  g/ dL.  Menurut  Arrington  (1972), nilai  normal  hemoglobin  pada  tikus  percobaan adalah  12,0-17,5  g/dL.  Dengan  demikian  kadar hemoglobin  tikus  pada  ketiga  kelompok  perlakuan tergolong  normal.  Nilai  leukosit  ketiga  kelompok tikus  berkisar  7,4-8, 3  ribu/mm 3 ,  masih  masuk  dalam kategori  normal,  yaitu  dalam  kisaran  5-25  ribu/mm 3 (Arrington,  1972).  Dengan  demikian  konsumsi tepung  tempe  dan  tepung  kedelai  rebus  tidak menimbulkan  kelainan  pada  leukosit.
Nilai  trombosit  tikus  kelompok  ransum  tempe nyata  lebih  tinggi  ( P <0,05)  dibandingkan  tikus  pada kelompok  ransum  kedelai  rebus,  namun  tidak  ber- beda  nyata  dengan  tikus  kelompok  ransum  kasein. Tingginya  nilai  trombosit  yang  diperoleh  pada  tikus kelompok  ransum  tempe  dapat  mendukung  peng- gunaan  tempe  sebagai  pangan  alternatif  untuk meningkatkan  nilai trombosit pada penderita  demam berdarah.  Nilai  eritrosit  tikus  kelompok  ransum tempe tidak berbeda  dengan tikus kelompok ransum kasein  dan  kedelai  rebus.  Hasil  analisis  eritrosit  ini
mendukung  penggunaan  tempe  sebagai  bahan alternatif  unt uk  meningkatkan  jumlah  eritrosit  pada penderita  anemia.  Jumlah  eritrosit  tikus  pada  ketiga kelompok  perlakuan  berada  pada  kisaran  normal, yaitu  7,2-9,6  juta/mm 3 (A rrington,  1972).  Dengan demikian  konsumsi  tempe  dan  kedelai  rebus  dapat mencegah  terjadinya  anemia  akibat  menurunnya jumlah  eritrosit.
Tabel  6.  Nilai  hematologi  tikus  yang  diberi  pakan
kasein,  tepung  tempe  dan  tepung  kedelai rebus  setelah  90 hari  percobaan Parameter Kelompok Perlakuan (Sumber Protein) Kasein Tepung Tempe Tepung Kedelai Rebus Hemoglobin (g/dL) 13,6 ± 0,7 a 13,8 ± 0,3 a 13,4 ± 0,3 a Leukosit (ribu/mm 3 ) 7,4 ± 2,8 a 7,4 ± 0,5 a 8,3 ± 1,8 a Trombosit (ribu/mm 3 ) 583,2 ± 42,0 ab 606,8 ± 22,9 b 524,0 ± 63,6 a Eritrosit (juta/mm 3 ) 8,1 ± 0,5 b 8,0 ± 0,2 ab 7,5 ± 0,4 a
Keterangan:  Nilai  yang  diikuti  oleh  huruf  yang  berbeda pada  baris  yang  sama  menunjukkan  berbeda  nyata ( P <0,05)

## Kadar malonaldehida hati dan ginjal
Astuti et  al. (2009)  menyebutkan  malonal - dehida  (MDA )  merupakan  hasil  proses  oksidasi lemak tidak jenuh jamak oleh senyawa radikal bebas di  dalam  tubuh,  sehingga  MDA  dapat  digunak an sebagai  indikator  keberadaan  radikal  bebas  dan indikator  kerusakan  oksidatif  membran  sel  di  dalam tubuh.  Hati  merupakan  organ  yang  memiliki  fungsi utama  dalam  menyimpan,  melakuka n  metabolisme dan  biosintesis  zat  gizi.  Ginjal  merupakan  organ yang  berfungsi  untuk  mengeluarkan  kotoran  dari sistem saluran kemih, menyaring kotoran dari  darah, dan  menyerap  nutrisi  penting  ke  aliran  darah (Odden et  al., 2014).  Kedelai  dan  tempe  merupak an bahan  pangan  alami  yang  mengandung  antioksidan berupa  isoflavon.  Isoflavon  mampu  merangsang ekspresi  Cu-Zn  SOD  yang  dapat  melindungi  sel  dari stress  oksidatif  (Astuti et  al., 2009).  Pemberian ransum  y ang  berbeda  memberikan  hasil  yang  ber- beda  nyata  ( P <0,05)  pada  kadar  malonaldehida (MDA )  organ  hati  dan  ginjal  tikus  percobaan  (Tabel 7).
Tabel  7.  Kadar  malonaldehida  dan  superoksida  dismut ase  pada  hati  dan  ginjal  tikus  yang  diberi  pakan kasein, tepung  tempe  dan  tepung  kedelai  rebus  setelah  90 hari  percobaan Kelompok Perakuan Kadar MDA (µmol/G) Kadar SOD (µmol/G) Hati Ginjal Hati Ginjal Kasein 19,6 ± 4,8 b 13,4 ± 1,2 b 344,1 ± 75,0 a 439,6 ± 0,7 a Tepung tempe 15,3 ± 1,4 ab 10,6 ± 2,1 ab 367,9 ± 0,5 a 451,5 ± 21,2 a Tepung kedelai rebus 9,9 ± 1,3 a 8,0 ± 0,7 a 379,9 ± 75,0 a 439,6 ± 0,5 a
Keterangan: Nilai yang diikuti oleh huruf yang berbeda  pada kolom yang sama menunjukkan berbeda nyata ( P <0,05)
Nilai  MDA  hati  dan  MDA  ginjal  tikus  kelompok ransum tempe tidak berbeda ny ata ( P >0,05)  dengan tikus  kelompok  ransum  kasein  dan  kelompok ransum  kedelai  rebus.  Hasil  ini  sejalan  dengan penelitian  sebelumnya  yang  melaporkan  bahwa tempe  mampu  mengurangi  atau  menghilangk an radikal  bebas  karena  adanya  isoflavon  yang  dapat mencegah  terjadinya  peroksidasi  lipid  (Desminarti et al., 2012).  Menurut  Astawan  (2008)  kadar  isoflavon total  yang  terdapat  pada  kedelai  ment ah  sebes ar 140 mg/100 g  bahan, lebih tinggi dibandingk an yang terdapat  pada  tempe  yaitu  sebesar  50  mg/100  g bahan.  Namun  isoflavon  yang  terdapat  pada  tempe sudah  dalam  bentuk  bebas  (aglikon)  akibat  adanya proses  fermentasi  sehingga  lebih  mudah  diserap oleh  tubuh  unt uk  digunakan  sebagai  antioksidan (Utari et  al., 2010;  Astuti,  2008).  Kandungan  iso- flavon  pada  tempe  mampu  membantu  aktivitas antioksidan  SOD  dalam  menghambat  terbentuknya radikal  bebas  (Astuti et  al., 2009).  Di  dalam  tubuh, isoflavon  dan  SOD  sama -sama  berperan  sebagai antioksidan  yang  dapat  menghambat  proses  oksi- dasi  lemak  menjadi  MDA.  Hal  inilah  yang  me- nyebabkan  kemampuan ransum  tempe  sama dengan  ransum  kedelai  dalam  menekan  terbentuk - nya  MDA  pada  organ  hati  dan  ginjal  tikus  per- cobaan.

## Kadar superoksida  dismutase  hati dan ginjal
Enzim  superoksida  dimutase  (S OD)  memiliki peran  penting  dalam  sistem  pertahanan  tubuh, terutama  terhadap  aktivitas  senyawa  oksigen  reaktif yang  dapat  menimbulkan  stress  oksidatif.  SOD dalam  tubuh  mempunyai  aktivitas  mengatalisis radikal superoksida  (O 2 )  menjadi  hidrogen  peroksida dan  oksigen.  Konsumsi  ransum  kasein,  tepung tempe,  dan  tepung  kedelai  rebus  tidak  berpengaruh nyata  ( P >0,05)  terhadap  kadar  enzim  SOD  organ hati  dan  ginjal  tikus  percobaan  (Tabel  7).  Hal  ini kemungkinan  disebabkan  oleh  dua  hal,  yaitu  kadar MDA yang terbentuk pada organ hati dan  ginjal tikus belum  terlalu  banyak  sehingga  tidak  berdampak pada  penurunan  SOD,  atau  karena  kadar  isoflavon pada  tempe  dan  kedelai  rebus  mampu  mengatasi serangan  radikal  bebas  pada  kedua  organ  tersebut.

## KESIMPULAN
Food  convertion  efficiency tikus  kelompok tempe ny ata lebih tinggi ( P <0,05)  dibandingkan tikus kelompok  kasein  dan  kelompok  kedelai  rebus.  Hal ini  menunjukkan  kualitas  protein  tempe  dari  kedelai lokal  Grobogan  lebih  baik  dibandingkan  kasein. Konsumsi  tempe  kedelai  Grobogan  dalam  jangka panjang  tidak  berpengaruh  terhadap  organ  tubuh, terutama  pada  hati,  ginjal  dan  testis  tikus  per- cobaan.  Konsumsi  tempe  dari  kedelai  Grobogan
dalam  jangka  panjang  juga  tidak  menimbulk an kelainan  pada  biokimia  serum  dan  hematol ogi  tikus percobaan.  Dibandingk an  dengan  tikus  kelompok kedelai  rebus  dan  kasein,  maka  tikus  kelompok tempe  memiliki  kolesterol  HDL  yang  lebih  tinggi, tetapi  tidak  berbeda  nyata  pada  parameter  hema- tologi,  MDA  dan  SOD  hati  dan  ginjal  tikus  per- cobaan.  Hal  ini  menunjukkan  konsumsi  tempe  dari kedelai  Grobogan  dalam  jangka  panjang  tidak berdampak  negatif  terhadap  kesehatan.

## UCAPAN  TERIMA KASIH
Peneliti  mengucapkan  terima  kasih  kepada pemberi  dana  penelitian,  yaitu  Direktorat  Penelitian dan  P engabdian  kepada  Masyarakat,  Direktorat Jenderal  Pendidikan  Tinggi,  Kementerian  Ristek Dikti,  melalui  skema “Hibah  Kompetensi  2015”  atas nama  Made  Astawan.

## DAFTAR PUSTAKA
Aboderin  FI,  Oyet ayo  VO.  2006.  Haematological studies  of  rats  fed  different  doses  of  probiotic, Lactobacillus  plantarum ,  isolated  from  ferment - ing  corn  slurry. Pak  J  Nutr  5:  102-105.  DOI:
10.3923/pjn.2006.102.105.
Anderson  JW,  Bush  HM.  2011.  Soy  protein  effects on  serum  lipoproteins:  a  quality  assessment and  meta-analysis  of  randomized  controlled studies. J Am Coll Nutr  30:  79-91.
[AOAC]  Association  of  Official  Analytical  Chemist.
2005.  Official  Method  of  Analysis  of  The Association of Official Analysis Chemist. Washington  DC  (USA):  AOAC Inc.
Appenzeller  LM,  Munley  SM,  Hoban  D,  Skyes  GP, Malley  LA,  Delaney  B.  2008.  Subchronic  feed - ing  study  of  herbicide-tolerant  soybean  DP - 356Ø43-5 in sparague-dawley rats. Food  Chem Toxicol  46:  2201-2213.  DOI:  10.1016/j.fct. 2008.02.017.
Arrington  LR.  1972.  Introductory  Laboratory  Animal Science.  8-9. The  Interstate  P rinters  & Publishers,  Inc., Danville,  Illinois.
Astawan  M,  Wresdiy ati  T,  Hart anta  AB.  2005. Pemanfaatan  rumput laut sebagai sumber serat pangan  untuk  menurunkan  kolesterol  darah tikus. J Hayati  12: 23-27.
Astawan  M.  2008.  Sehat  dengan  Tempe,  Panduan Lengkap  Menjaga  K esehat an  dengan  Tempe. Jakarta  (ID):  Dian  Rakyat.
Astawan M. 2009. Panduan Karbohidrat  Terlengkap.
25-34.  Dian  Rakyat, Jakarta.
Astawan  M.  2013.  Soy  story.  Food  Review  V III:  46- 51
Astawan  M,  Adiningsih  NR,  Palupi  NS.  2014. E valuasi  kualitas  nuget  tempe  dari  berbagai varietas  kedelai.  Pangan:  Med  Kom  Informasi 23: 244-255.
Astawan  M,  Wresdiyati  T,  Saragih  AM.  2015. E valuasi  mutu  protein  tepung  tempe  dan tepung  kedelai  rebus  pada  tikus  percobaan.  J Mutu Pangan  2: 11-17.
Astawan  M.  2015.  Rumah  Tempe  Indonesia:  a Cent er  of  Excellenc e  for  Tempe  Industry. Conference  Handbook:  International  Confe - rence  on  Tempe.  Yogyakarta,  February  15-17 th
2015.
Astuti  S.  2008.  Isoflavon  kedelai  dan  potensinya sebagai  penangkap  radikal  bebas.  J  Teknol Industri  Hasil  Pert 13: 126-136.
Astuti  S,  Muchtadi  D,  Astawan  A,  Purwantara  B, Wresdiyati  T.  2009.  Pengaruh  pemberian  te- pung  kedelai  kaya  isoflavon  terhadap  kadar malonaldehida,  aktivitas  superoksida  dismu- tase  testis  dan  profil  Cu,  Zn-SOD  tubuli  semi - niferi  testis  tikus  jantan.  J  Teknol  Industri Pangan  20: 129-134.
Babu  PD,  Bhakyaraj  R,  Vidhyalakshmi  R.  2009.  A low cost  nutritious  food  “Tempeh”-a  review. World  J Dairy  Food  Sci 4: 22-27.
Daleprane  JB,  Feijo  TS,  Boaventura  GT.  2009.
Organic and genetically modified soybean diets: consequences  in  growth  and  hematological indicators  of  aged  rats.  Plant  Food  Hum  Nut r 64: 1-5.  DOI:  10.1007/s11  130-008-0101-0.
Desminarti S, Rimbawan, Anwar F, Winarto A. 2012. Efek  bubuk  tempe  instan  terhadap  kadar malonadehid  (MDA )  serum  tikus  hiperglikemik. J Kedokteran  Hewan  6: 197-205.
Maskar DH, Hardinsyah,  Damayanthi E, Astawan M, Wresdiyati  T.  2015.  Effects  of  genetically  modi- fied  (GM)  soybean  and  tempe  consumption  on blood  profile,  malondialdehyde  (MDA)  level  and superoxide dismutase (S OD) activity of Sprague-Dawley rats.  Int  J  Sci  Basic  Appl  Res 23: 271-285
Messina  M,  Messina  V L,  Chan  P.  2011.  Soy  foods, hyperuricemia  and  gout:  a  review  of  the epidemiologic  and  clinical  data.  Asia  Pac  J  Clin Nutr  20: 347-358
Misra  HP,  Fridovich  I.  1972.  The  role  of  superoxide anion  in  the  autoxidation  of  epinephrine  and  a simple  assay  for  superoxide  dismutase.  J  Biol Chem  247:  3170-3175.
Muchtadi  M,  Palupi  NS,  Astawan  M.  1992.  Metode Kimia Biokimia dan Biologi dalam E valuasi Nilai Gizi  Pangan  Olahan.  67-74  Pusat  Antar Universitas  Pangan  dan  Gizi,  Institut  Pertanian Bogor,  Bogor.
Mursyid,  Astawan  M,  Muchtadi  D,  Wresdiyati  T,
Widowati  S,  Bintari  SH,  Suwarno  M.  2014. E valuasi  nilai  gizi  protein  tepung  tempe  yang terbuat  dari  varietas  kedelai  impor  dan  lokal.  J Pangan  23: 33-41.
Nout  MJR,  Kiers  JL.  2005.  Tempe  fermentation, innovation  and  functionality:  update  into  the third  millenium.  J  Appl  Microbiol  98:  789-805. DOI:  10.1111/j.1365-2672.2004.02471.x.
Odden  MC,  Amadu  AR,  Smit  E,  Lo  L,  Peralta  CA. 2014.  Uric  acid  levels,  kidney  function,  and cardiovascular  mort ality  in  US  adults:  national health and nutrition examination survey (NHANES)  1988-1994  and  1999-2002.  Am  J Kidney  Dis  64:  550-557.  DOI:  10.1053/j.ajkd. 2014.04.024.
Qi  X,  He  X,  Luo  Y,  Li  S,  Zou  S,  Cao  S,  Tang  M, Delaney  B,  Xu  W,  Huang  K.  2012.  Subchronic feeding  study  of  stacked  trait  genetically - modified  soy bean  (3Ø5423  ×  40-3-2)  in sparague-dawley  rats.  Food  Chem  Toxicol  50:
Suwarno  M,  Astawan  M,  Wresdiyati  T,  Widowati  S,
Bintari  SH,  Mursyid.  2013.  E valuasi  keamanan tempe  dari  kedelai  trans genik  melalui  uji subkronis  pada  tikus. J Veteriner  15: 353-362.
Turner  A H,  Pike  MJ,  Francis  MA.  2008.  Haema- tology  what  does  your  blood  test  mean  ?. http:// mams.rmit.edu.au/hgfc58lk9pwc1.pdf  [19  Mei 2015].
Utari  DM,  Rimbawan,  Riyadi  H,  Muhilal,  Purwan- tyastuti.  2010.  Pengaruh  pengolahan  kedelai menjadi tempe dan pemasakan tempe terhadap kadar  isoflavon.  J  Penel  Gizi  Makanan  33:  148- 153.
Villegas R, Gao Y T, Yang G, Li HL, Elasy TA, Zheng W, Shu  XO.  2008.  Legume  and  soy  food  intake and  the  incidence  of  type  2  diabetes  in  the Shanghai women’s health study. Am J Clin Nutr 87: 162-167.
Watanabe  N,  Fujimoto  K,  Aoki  H.  2007.  Antioxidant activities  of the  wat er soluble fraction in tempeh like  fermented  soybean  (GABA-tempeh).  Int  J Food  Sci  Nutr  58:  577-587.  DOI:  10.1080/09 637480701343846.
3256-3263.  DOI:  10.1016/j.fct.2012.06. 052.