## POTENSI SENYAWA DERIVAT 2- AMINOIMIDAZOLE SEBAGAI AGEN
AJUVAN TERHADAP INFEKSI MULTIDRUG-RESISTANT

## ACINETOBACTER BAUMANNII MELALUI SIFAT ANTIBIOFILM DAN RESENSITISASI ANTIBIOTIK
Grady Krisandi 1 , Aditya Parawangsa 1
1 Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran, Universitas Indonesia, Jakarta

## ABSTRAK
Pendahuluan: Resistensi antibiotik pada infeksi yang terjadi di rumah sakit atau hospital- acquired infection (HAI) merupakan masalah besar yang dialami pelayanan kesehatan. Hal tersebut diperparah dengan tren resistensi antibiotik yang lebih banyak pada bakteri gram negatif. Acinetobacter  baumannii adalah  salah  satu  bakteri  gram  negatif  yang menyebabkan  HAI  dan  memiliki  resistensi  berbagai  antibiotik  atau multidrug-resistant (MDR).  Oleh  karena  itu,  tinjauan  pustaka  ini  akan  meninjau  senyawa  yang  dapat meresensitisasi antibiotik pada A. baumannii yang sangat dibutuhkan. Salah satu zat yang berpotensi  adalah  2-aminoimidazole  (2-AI)  yang  terdapat  pada  spons  laut Leucetta dan Clathrina di perairan Indonesia. Metode: Artikel  ini  disusun  menggunakan  metode literature  review ,  menggunakan  23 sumber yang berasal dari jurnal hasil literature searching dari search engine (Google dan Google Scholar) dan pusat data daring (PubMed dan SCOPUS). Pembahasan: 2-AI  memiliki  berbagai  senyawa  turunan  yang  diikuti  oleh  farmakofor.  2- Aminoimidazole  triazole  (2-AIT)  adalah  salah  satu  turunan  potensial  dengan  sifat antibiofilm  untuk  meresensitisasi Acinetobacter  baumanii .  Optimasi  gugus  ekor  2-AIT dilakukan  dengan  beberapa  metode  seperti  reaksi  kimia  organik  sederhana  dan cross- coupling Suzuki-Miyaura. Senyawa tersebut bekerja sebagai antibiofilm dengan mengikat protein bfmR, yang berperan langsung dalam pembentukan biofilm. Toksisitas senyawa ini pada uji hemolisis dan C. elegans relatif rendah.
Simpulan: 2-AI memiliki sifat antibiofilm sehingga dapat membuat difusi obat ke dalam A. baumannii menjadi lebih efektif dan sensitive. Keamanan 2-AI juga telah dibuktikan secara in  vitro dan in  vivo. Kedua  hal  tersebut  menyimpulkan  bahwa  2-AI  yang  berasal  dari berbagai  spons  laut perairan  Indonesia  berpotensi  untuk  meresensitisasi  antibiotik  pada multidrug-resistant Acinetobacter baumannii .
Kata Kunci: 2-aminoimidazole, Acinetobacter baumannii , antibiofilm

## Tinjauan Pustaka

## 2-AMINOIMIDAZOLE DERIVATIVES AS A POTENTIAL ADJUVANT AGENT FOR MULTIDRUG-RESISTANT
ACINETOBACTER BAUMANNII THROUGH ANTIBIOFILM AND ANTIBIOTIC RESENSITIZATION

## ABSTRACT
Background: Antibiotic resistance in hospital-acquired infection (HAI) is a big problem for healthcare. It becomes worse by the trend of antibiotic resistance that is more common in gram-negative bacteria. Acinetobacter baumannii is a gram-negative bacteria that causes HAI and is considered multidrug-resistant. Therefore, this literature review will review an agent  that  has  the  potential  to  resensitize  A.  baumannii,  2-aminoimidazole  found  in  sea sponges  Leucetta  and  Clathrina  and  rich  in  Indonesian  seas  is  a  potential  agent  to resensitize antibiotics in A. baumannii.
Methods:  Literature  searching  worked  using  specific  keywords  in  the  search  engine (Google and Google Scholar) and online databases (PubMed and SCOPUS). Twenty-three studies from various journals were retrieved.
Discussion:  2-AI  has  various  derivative  compounds  followed  by  pharmacophores.  2- Aminoimidazole triazole (2-AIT) is one of the potential derivates with antibiofilm character to resensitize Acinetobacter baumannii. Optimization of the tail group 2-AIT carries out by several  methods  such  as  simple  organic  chemical  reactions  and  Suzuki-Miyaura  cross- coupling. The optimized group works as an antibiofilm by binding to the bfmR protein, which plays a role in forming biofilms. The toxicity of this compound in the hemolysis test and C. elegans is relatively low.
Conclusion: 2-AI has an antibiofilm activity that allows antibiotic diffusion in A. baumannii blocked  by  biofilm.  This  activity  enables  the  resensitization  of  A.  baumannii  towards antibiotics.  The  safety  of  2-AI  has  also  been  proven  in  vitro  and  in  vivo.  These  findings conclude that 2-AI that extracted in sea sponges from Indonesian seas can be an agent to resensitize antibiotics in multidrug-resistant A. baumannii.
Keywords: 2-aminoimidazole, Acinetobacter baumannii, antibiofilm
1.  PENDAHULUAN Resistensi  antimikroba  merupakan masalah yang dihadapi sistem
pelayanan kesehatan dan bidang kedokteran terapeutik sejak penggunaan dan  pengembangan  antibiotik  pertama kali di seluruh dunia. Resistensi antimikroba  terjadi  saat  penyakit  yang disebabkan  mikroorganisme  tidak  dapat disembuhkan  dengan  obat-obatan  yang umumnya dapat
menyembuhkan penyakit  tersebut.  Keadaan  resistensi antimikroba  dunia  saat  ini  sudah  cukup mengkhawatirkan dengan mortalitas 700.000  kematian  per  tahun  di  seluruh dunia  dan  akan  meningkat  hingga 10.000.000  kematian  per  tahun  pada tahun  2050.  Masalah  tersebut  juga memengaruhi  berbagai  sektor,  antara lain  adalah  ekonomi,  politik,  sosial, biologi,  dan  ekologi.  Hal  ini  tentunya berbahaya  karena  akan  meningkatkan kemungkinan penyakit
menular
berbahaya dan merugikan yang terutama terjadi  di  rumah  sakit  atau hospital- acquired infection . 1,2
Hospital-acquired  infection (HAI) adalah  penyakit  menular  yang  diterima pasien saat menerima pelayanan kesehatan atau masyarakat yang sedang berada di rumah sakit. Di seluruh rumah sakit  dunia,  prevalensi  HAI  diperkirakan mencapai 9% atau sekitar 1,4 juta pasien rawat  inap.  Asia  Tenggara  termasuk sebagai  wilayah  dengan  prevalensi  HAI paling banyak setelah Mediterania Timur. HAI  yang  paling  sering  terjadi  adalah infeksi  oleh  bakteri  sehingga  antibiotik merupakan  solusi  penanganan  yang sering  diberikan.  Karena  hal  tersebut, penggunaan  antibiotik  menjadi  sering tidak tepat guna. Ketidaktepatan penggunaan antibiotik
memicu
munculnya bakteri resisten antibiotik. 3,4 Bakteri  resisten  antibiotik  terdapat pada  golongan  bakteri  gram  positif
maupun  bakteri  gram  negatif.  Dalam kurun  waktu  sekitar  10  tahun  terakhir, tren  bakteri  resisten  antibiotik  terdapat lebih  banyak  pada  bakteri  gram  negatif. Tren  tersebut  terjadi  karena  penemuan antibiotik  baru  yang  efektif  terhadap bakteri  gram  negatif  sangat  sedikit. 4 Bakteri gram negatif yang saat ini cukup berbahaya dan cukup sering menginfeksi pasien  saat  dirawat  inap  adalah  bakteri
Acinetobacter spp. 5 Acinetobacter adalah keluarga bakteri  gram  negatif,  yang  secara spesifik  merupakan  bakteri  pemicu Hospital Acquired Infection (HAI). Spesies  utama  yang  menyebabkan kehebohan akhir-akhir ini adalah Acinetobacter  baumannii .  Spesies  ini diketahui menyebabkan penyakit pneumonia,  infeksi  pada  kulit,  aliran darah,  meningitis,  dan  saluran  kemih  di rumah sakit. 5
Hal  ini  diperparah  dengan  laju mutasinya  yang  sangat  cepat  sehingga sekarang  terdapat  strain A.  baumannii yang  resistensi  antibiotik  spektrum  luas seperti cephalosporin, beta-laktam,
aminoglikosida, kuinolon, dan
karbapenem. 6 Di  Indonesia, multidrug resistant A. baumannii telah ditemukan di berbagai  rumah  sakit.  Penelitian  di RSUP  Adam  Malik  pada  tahun  2012 memprediksikan prevalensi A. baumannii pada  berbagai  spesimen  klinis  masih belum  terlalu  tinggi  dengan  hasil  isolat yang ditemukan sebanyak 644 dari 3693 spesimen  klinis.  147  diantaranya  yang resisten  terhadap  antibiotik  golongan karbapenem.
Penemuan
tersebut menimbulkan  ancaman  yang  cukup mengkhawatirkan  karena  isolat  yang resisten  terhadap  karbapenem  pada umumnya juga resisten terhadap semua golongan  antimikroba.  Hal  ini  juga disebabkan pengekspresian enzim metallo-beta-lactamase kelas  B  yang ada  pada  materi  genetik  yang  mudah ditransfer  antara A.  baumannii .  Ini mengimplikasikan  bahwa  adanya  strain yang  resisten  terhadap  karbapenem dapat  menimbulkan A.  baumannii lain yang menjadi resisten terhadap karbapenem. 7 Multidrug  resistant  A. baumannii juga  ditemukan  pada  RS Cipto  Mangunkusumo  yang  dibuktikan melalui  penelitian  di  ICU  RSCM  pada tahun  2011,  yang  menunjukkan  dari isolat Gram-negative bacilli yang resisten
terhadap karbapenem
( multidrug resistant ), terdapat A. baumannii dengan prevalensi tertinggi, yaitu 50,5%. 8 Penelitian  di  RSUD  Dr.  Soetomo  pada tahun  2015-2016  juga  didapatkan  sifat multidrug  resistant .  Penelitan  tersebut menemukan  strain multidrug  resistant lebih  banyak  daripada yang  tidak. 6 Berbagai penelitian tersebut memastikan keberadaan multidrug resistant A.
baumannii di berbagai wilayah Indonesia sudah cukup mengkhawatirkan.
Keberadaan multidrug  resistant  A. baumannii di wilayah Indonesia ditambah kekhawatirannya dengan kemampuan A. baumannii membentuk biofilm. A. baumannii yang telah membentuk biofilm akan menjadi semakin resisten terhadap antimikroba  karena  adanya  matriks ekstraseluler yang melindungi dari berbagai  paparan  kimiawi  maupun  fisik dan  difusi  obat  yang  gagal.  Karena  hal tersebut, untuk meningkatkan efektivitas antimikroba,  maka  diperlukan  agen antibiofilm. 9,10
Terdapat  beberapa  senyawa  kimia dengan berat molekul relatif rendah yang dapat  menjadi  antibiotik  dengan  cara kerja yang mentarget lingkungan sekitar bakteri patogen, salah satunya adalah 2- aminoimidazole  (2-AI).  2-AI  adalah senyawa  alkaloid  sederharna  berkarbon tiga  yang  menjadi  inti  bagi  senyawa- senyawa  yang  dihasilkan  oleh  spons laut.  Riset  30  tahun  terakhir  baru menguak  bahwa  banyak  senyawa- senyawa  alkaloid  ini  yang  mempunyai struktur  dan  aktivitas  biologik  yang unik. 11
Oleh karena itu, tinjauan pustaka ini bertujuan  untuk  menjelaskan  cara  kerja 2-AI yang berpotensi membuat pengobatan bakteri resisten antimikroba menjadi lebih efektif ke depannya.

## 2.  METODE
Metode  yang  digunakan  dalam penulisan  tinjauan  pustaka  ini  adalah dengan  pencarian  dan  tinjauan  literatur dari  berbagai  pusat  data  daring  dan search  engine .  Pusat  data  daring  yang digunakan untuk mencari literatur adalah PubMed  dan  SCOPUS,  sedangkan search  engine yang  digunakan  adalah Google  dan  Google  Scholar.  Pencarian dilakukan  dengan  menggunakan  kata kunci 2-aminoimidazole , antibiofilm , antibiotic  resistance ,  dan Acinetobacter
baumannii .  Literatur  yang  masuk  dalam tinjauan  pustaka  ini  adalah  pustaka dengan  tahun  terbit  dari  2009-2019  dan relevan  dengan  yang  ingin  ditinjau.  Dari hasil  pencarian  literatur,  23  literatur relevan  dan  digunakan  untuk  tinjauan pustaka ini.

## 3. PEMBAHASAN
Acinetobacter  baumannii memiliki berbagai faktor virulensi yang mendukung patogenesis. Beberapa faktor  virulensi  juga  membentuk  biofilm yang menyebabkan resistensi antimikroba pada Acinetobacter baumannii . Faktor virulensi yang pertama  adalah  porin  ompA  yang  dapat menginduksi  apoptosis  pada  sel  epitel manusia  dengan  melepaskan  molekul proapoptotik  atau  melalui monopartite nuclear  localization  signal ,  menempel pada sel epitel manusia dengan interaksi bersama fibronektin, menyebabkan resistensi antimikroba dengan meningkatkan minimal inhibitory concentration ,  dan  membantu  dalam pembentukan  biofilm.  Faktor  virulensi lain  adalah  polisakarida  kapsul  yang melindungi Acinetobacter baumannii dari serum  inang  dan  berbagai  antimikroba. Kedua  faktor  virulensi  tersebut  secara langsung maupun tidak langsung diregulasi  oleh bfmR yang  berfungsi sebagai  protein  regulator  respons  dari sistem
dua komponen bakteri
Acinetobacter baumannii . 5,9-13 Selain meregulasi faktor virulensi, bfmR juga meregulasi fungsi lain. Fungsi lain
tersebut berkaitan dengan
upregulation dari ekspresi gen bfmR saat adanya  molekul quorum  sensing yang meningkatkan kemampuan pembentukan biofilm dengan pembentukan Csu pili. Csu pili merupakan basis struktural dari pembentukan  biofilm  pada  permukaan abiotik.  Dengan  pengetahuan  tersebut, biofilm  pada  permukaan  abiotik  dapat dihancurkan dengan menargetkan senyawa  yang  dapat  mengganggu ekspresi gen bfmR. 9,14
Senyawa yang berpotensi dengan aktivitas tersebut adalah senyawa turunan  2-AI  dan  berasal  dari  genus spons  laut  yang  banyak  ditemukan  di perairan Indonesia. Genus spons laut ini adalah Leucetta dan Clathrina .  Ada beberapa  cara  untuk  menghasilkan
senyawa  alkaloid  ini,  bisa  dengan ekstraksi  langsung  dari  spons  laut,  atau dengan  melakukan  sintesis  kimia  di  lab baik dengan prekursor 2-AI, atau dengan hasil  ekstraksi  lalu  dimodifikasi.  Namun, untuk  menciptakan  senyawa  turunan yang paling efektif dan spesifik,
belakangan  ini  lebih  banyak  dilakukan sintesis  langsung  di  lab.  Hal  ini  tidak berarti  senyawa  alkaloid  turunan  2-AI yang  diekstraksi  langsung  lebih  buruk, melainkan mempunyai fungsi farmakofor dengan reseptor yang berbeda sehingga sedikit  perubahan  dari  struktur  senyawa tersebut  dapat  mempengaruhi  kerja farmakodinamiknya  dalam  tubuh  sesuai yang  kita  inginkan.  Sebagai  contoh, Naamidine  tipe  A  diketahui  mempunyai potensi  antitumor  dengan  berperan sebagai antagonis dari reseptor Epidermal Growth Factor (EGF),
dibandingkan  dengan  Naamidine  tipe  H yang bersifat sitotoksik spesifik pada sel HeLa. 11,15,16
Khusus biofilm sendiri, ada beberapa  senyawa  potensial  untuk mendispersikan  biofilm  dari  bakteri- bakteri patogen seperti Multi-drug resistant Acinetobacter
baumannii (MDRAB)  (ATCC  16909).  Salah  satu senyawa  derivat  2-AI  yang  prominen bersifat  antibiofilm  baik  pada  jamur ataupun  bakteri  adalah  derivat  dari  2- aminoimidazol triazol (2-AIT). Percobaan menginkubasi  biofilm  jamur Candida albicans yang telah dikembangkan pada pelat mikrotiter 96 lubang selama 24 jam dengan  perlakuan  dan  tanpa  perlakuan 2-AIT,  lalu  pelat  dibersihkan  dengan  air untuk menghilangkan jamur sisa, lalu tiap lubang  diberikan crystal  violet untuk menandai  kadar  biofilm,  dan  diukur dengan spektrofotometri dengan panjang gelombang  540  nm.  Hasil  tersebut menunjukkan  tingkat  dispersi  biofilm dibandingkan kontrol sebesar 12%. 17
Gambar 1. Struktur dasar 2- Aminoimidazole Triazol (2-AIT). 17
Gambar 2. Struktur 2-AIT yang digunakan dalam percobaan pertama pada Candida albicans. 17 Percobaan lainnya menggunakan 2-AIT menguji microdilution  susceptibility  assay untuk menentukan keberadaan
efek
resensitisasi senyawa ini. Hasil menunjukkan pada bakteri MDRAB yang diberikan 2-AI T pada konsentrasi 75 μM terbukti memiliki efek resensitisasi bakteri  terhadap  antibiotik,  dimana  hasil MIC  menurun  lebih  dari  dua  kali  lipat pada  pemberian  antibiotik  Imipenem (penurunan  8  kali  lipat  dari  16  μM/mL menjadi  2  μM/mL)  dan  antibiotik Ciprofloxacin (penurunan 4 kali lipat dari 64 μM/mL menjadi 16 μM/mL). 18
Tabel 1. Hasil uji microdilution susceptibility assay 2-AIT dengan perlakuan antibiotik berbeda pada berbagai bakteri tipe Multi-drug resistant Acinetobacter baumannii (MDRAB) dan
Methicillin-resistant Staphylococcus
aureus (MRSA). 18 Organism and antibiotic MIC μg/mL of: Drug alone Drug with 45 μM a of compound 1 Drug with 75 μM a of compound 1 MRSA Penicilin G 32 4 Tetracycline 16 16 Methicilin 256 64 Ciprofloxacin 4 2 Compound I 64 MDRAB Imipenem 16 2 Ciprofloxacin 64 16 MDRAB 3340, imipenem 64 8 MDRAB AB0043, imipenem 16 4 MDRAB UH8407, imipenem 1 0.125
Dengan mengetahui  struktur dasar 2-AIT dan berdasarkan uji hubungan struktur dan aktivitas,
selektivitas  dan  aktivitas  2-AIT  dapat dimodifikasi  pada  struktur  ekor  dari  2- aminoimidazole,  penelitian  ini  berlanjut dengan membentuk banyak kemungkinan  struktur  ekor  di  bawah  ini dan menguji efektivitasnya pada beberapa jenis bakteri, seperti Multi-drug resistant Acinetobacter
baumannii (MDRAB) (ATCC 19606). 17
Gambar 3. Hasil sintesis gugus ekor senyawa 2-AIT dengan berbagai reagen a) i:
(COCl) 2 , CH 2 Cl 2 , DMF (cat.), ii: CH 2 N 2 , Et 2 O/CH 2 Cl 2 , iii: HBr (82 %); b) Boc-guanidin, DMF, RT (59%); c) azida, CuSO 4 , Na-askorbat, EtOH, CH 2 Cl 2 , H 2 O; d) asam trifluoroasetat, CH 2 Cl 2 (58 –94 % dengan dua langkah). 17
Hasil  percobaan  menunjukkan gugus varian 7u yang mempunyai 7 unit metilen  terletak para dari  gugus  amida bersifat  potensial  antibiofilm  dengan memberikan  nilai  IC 50 dan  EC 50 paling baik  bila  dibandingkan  dengan  gugus varian lain yaitu 1.9 μM dan 7.9 μM. 17 Selain  dengan  cara  di  atas, gugus  ekor  pada  senyawa  2-AIT  dapat dibentuk  variasinya  dengan  sintesis Suzuki  Miyaura  cross-coupling untuk memperbanyak jenis gugus ekor sehingga kita dapat memperoleh
senyawa  potensial  terbaik.  Percobaan kali ini menguji toksisitas, efektivitias zat mendispersi  biofilm,  dan  konsentrasi minimum  zat  yang  diperlukan  untuk menghambat  aktivitas  bakteri  (MIC). Hasil  menunjukkan  bahwa  terdapat  5 varian  (8g-j  dan  8n)  bersifat  potensial
dengan  mendispersikan  biofilm  sekitar lebih  dari  94%  pada  konsentrasi  awal 100  μM.  Uji  toksisitas  dengan  IC 50 menunjukkan penurunan aktivitas bakteri drastis sehingga kemungkinan varian ini bersifat  bakterisidal.  Uji microdilution susceptibility assay dengan rentang 400 – 0.395 μM dilakukan untuk menentukan nilai  MIC,  dan  didapatkan  varian  8h,  8i, dan  8j  mempunyai  sifat  antibakterial yang cukup kuat (konsentrasi diatas 6.25 –  12.5  μM  akan  mematikan  seluruh bakteri  pada  kultur).  Sedangkan  uji efektivitas mendispersikan biofilm dilakukan seperti percobaan sebelumnya pada  pelat  mikrotiter  96  lubang,  dan didapatkan  senyawa  8i  paling  potensial dalam mendispersikan
biofilm Acinetobacter  baumannii pada  angka
EC 50 pada 44.70 μM. 18,19
Gambar 4. Hasil sintesis gugus ekor senyawa 2-AIT dengan sintesis Suzuki Miyaura cross-coupling. 19
` Terdapat struktur dasar lain yang diubah  dari  senyawa  2-AIT  untuk meningkatkan efektivitas senyawa untuk mendispersi  biofilm,  seperti  dengan melakukan substitusi ganda pada karbon nomor  4  dan  5  dengan  memperhatikan uji  hubungan  struktur  dan  aktivitas. Senyawa  16ae  menunjukkan  potensial
antibiofilm  terbaik  dengan  angka  IC 50 11.28 μM dan EC 50 44.61 μM. Ada pula struktur  turunan  2-AIT  lainnya,  yang melibatkan  penggunaan  gugus  aril, namun  hanya  satu  varian  aril  yang bernilai signifikan pada dispersi biofilm A. baumannii. 20,21
Gambar 5. Hasil sintesis gugus ekor senyawa 2-AIT dengan varian gugus ekor senyawa 4,5 disubtituted 2-AIT. 20 Penjelasan bagaimana senyawa turunan  2-AI  dapat  berpengaruh  pada dispersi  biofilm  secara  biomolekular dapat  dijelaskan  dengan  aktivitasnya pada  protein  spesifik  pada  bakteri Acinetobacter baumannii , yaitu bfmR. Uji binding antara  senyawa  turunan  2-AI dengan  sisi  aktif  bfmR  dapat  dideteksi dengan  peningkatan  titik  leleh  BfmR. Beberapa varian berikut memiliki kemampuan  untuk  berikatan  dengan protein bfmR, dibuktikan dengan
semakin  kecil  nilai  IC 50 variannya,
semakin baik fungsinya. 22
Selanjutnya dilakukan pengujian microdilution  susceptibility  assay untuk menentukan  nilai  MIC  bakteri  dengan perlakuan  senyawa  AGL-600,  AGL-726, dan  AGL-833  beserta  dengan  antibiotik, dan  semua  kombinasi  antara  senyawa turunan  2-AI  tersebut  dengan  antibiotik konvensional  rata-rata  memberikan  nilai MIC yang baik pada konsentrasi tertentu (penurunan  lebih  dari  2  kali  lipat sebelumnya). 22
Gambar 6. Beberapa varian senyawa turunan 2-AI yang potensial mendispersi biofilm pada A. baumannii dengan berikatan spesifik pada protein bfmR, dibuktikan dengan nilai IC 50 masing-masing. 22
Tabel 2. Hasil uji microdilution susceptibility assay senyawa turunan 2-AI potensial dengan kombinasi antibiotik konvensional. 22
Hal  ini  sesuai  dengan  dasar modelling interaksi  antara  senyawa turunan  2-AI  dengan  protein  bfmR,  dan dari  temuan  tersebut  dapat  diajukan model  inhibisi  protein  yang  berkaitan dengan  ekspresi  gen  terkait  biofilm. Penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  2-AI secara spesifik menyasar protein bfmR. 22 Beberapa eksperimen dengan 2- AIT  yang  dikerjakan  menyertakan  uji toksisitas  dengan  menghitung  angka hemolisis  darah  menggunakan  darah
domba  sebagai  pembanding,  dan  nilai HD 50 berkisar antara 200 – 800 μM (4,5). Jurnal  lain  juga  memberikan  data toksisitas  senyawa  turunan  2-AIT  pada C. elegans dimana nilai IC 50 berada pada kisaran  470  μM  hingga  lebih  dari  1000 μM  (9).  Uji  ini  mengimplikasikan  bahwa senyawa  2-AIT  selain  potensial  sebagai pengobatan  mempunyai  nilai  toksisitas yang  relatif  kecil  pada  hewan  uji  dan layak dilanjutkan hingga tingkat manusia. 23
Gambar 10. Modelling protein QseB pada Francisella spp. dan BfmR pada Acinetobacter baumannii dan Model hipotetik inhibisi senyawa turunan 2-AI yang berkaitan dengan
ekspresi gen pembentuk biofilm. 22 4.  KESIMPULAN Resistensi Antimikroba adalah kondisi di mana mikroba telah membangun kekebalan terhadap satu atau lebih obat yang  seharusnya  dapat  membunuhnya. Spektrum resistensi antimikroba tentunya  akan  berbeda  di  luar  rumah sakit dibandingkan di dalam rumah sakit karena perbedaan pola konsumsi antibiotik.  Hal  ini  diperparah  dengan terdapat  struktur  biofilm  yang  membuat antibiotik  semakin  sulit  bekerja,  apalagi pada  bakteri  terkait  infeksi  rumah  sakit seperti Acinetobacter  baumannii. Alih- alih  berpikir  untuk  membuat  antibiotik baru, kita dapat
menggunakan pendekatan  berbeda  untuk  membuat pengobatan  antibiotik  yang  telah  ada menjadi  lebih  efektif  dengan  senyawa turunan 2-aminoimidazole
yang mempunyai  sifat  antibiofilm  melalui interaksi  dengan  gen bfmR untuk menghancurkan  biofilm  yang  membuat
bakteri lebih peka terhadap antibiotik. Uji keamanan pun telah dilakukan secara in vitro dan in  vivo pada C.  elegans ,  yang menyimpulkan bahwa senyawa-senyawa turunan
2-aminoimidazole
jelas mempunyai  potensi  untuk  membantu mengatasi  resistensi  antimikroba  di masa depan.

## DAFTAR PUSTAKA
1.  Balsalobre  LC,  Dropa  M,  Matté  MH. An overview of antimicrobial resistance  and  its  public  health significance .  Brazillian  Journal  of Microbiology. 2014 Apr 18;45(1):1-5.
2. O’Neill  J. Review  on  antimicrobial resistance:  tackling  a  crisis  for  the health  and  wealth  of  nations . London:  Review  on  Antimicrobial Resistance; 2014. < https://amr- review.org/sites/default/files/AMR%2 0Review%20Paper%20-
%20Tackling%20a%20crisis%20for
%20the%20health%20and%20wealt h%20of%20nations_1.pdf >
3.  Hapsari AP, Wahyuni CU, Mudjianto
D. Pengetahuan  petugas  surveilans tentang identifikasi healthcare-
associated  infections  di  Surabaya.
Jurnal  Berkala  Epidemiologi.  2018 Aug 30;6(2):130-8.
4.  Kurniawati AFS, Satyabakti P,
Arbianti N. Perbedaan risiko multidrug resistance organisms (MDROs)  menurut  faktor  risiko  dan kepatuhan  hand  hygiene. Jurnal Berkala  Epidemiologi.  2015  Sep 3;3(3):277-89.
5.  Lee C, Lee JH, Park M, Park KS, Bae IK,  Kim  YB, et  al . Biology  of
Acinetobacter baumannii: pathogenesis,  antibiotic  resistance mechanisms, and prospective treatment options. Frontiers  in Cellular  and  Infection  Microbiology. 2017 Mar 13;7:55.
6.  Sutandhio S, Widodo ADW, Alimsardjono L, Wasito EB. Perbandingan  distribusi  dan  pola kepekaan  Acinetobacter  baumannii terhadap  antimikroba  di  RSUD  Dr. Soetomo Surabaya periode Januari- Maret  2015,  April-Juni  2015,  dan Januari-Maret  2016. Jurnal  Widya Medika Surabaya. 2018 Apr;4(1):18- 23.
7.  Mayasari E, Siregar C. Prevalence of Acinetobacter  baumannii  isolated from  clinical  specimens  in  Adam Malik  Hospital. Majalah  Kedokteran Andalas. 2014 Apr;37(1):1-7.
8.  Karuniawati A, Saharman YR, Lestari DC. Detection of carbapenemase  encoding  genes  in Enterobacteriace, Pseudomonas aeruginosa, and Acinetobacter baumannii  isolated  from  patients  at Intensive Care Unit Cipto Mangunkusumo  Hospital  in  2011 . Acta Medica Indonesiana.  2013 Jan
1;45(2):101-6.
9.  Eze EC, Chenia HY, Zowalaty MEE. Acinetobacter  baumannii  biofilms: effects  of  physicochemical  factors,
virulence, antibiotic
resistance determinants,  gene  regulation,  and future antimicrobial treatments. Infection and Drug Resistance. 2018 Nov 15;11:2277-99. 10.  Yang  C,  Su  P,  Moi  S,  Chuang  L .
Biofilm  formation  in  Acinetobacter
baumannii: genotype-phenotype correlation .  Molecules.  2019  May 14;24(10):1849.
11.  Hassan WH, Al-Taweel AM, Proksch P. Two new imidazole alkaloids from
Leucetta chagosensis sponge . Saudi Pharmaceutical Journal. 2009;17(4):295 –8.
12.  Russo  TA,  Manohar  A,  Beanan  JM, Olson R, MacDonald U, Graham J, et al . The response regulator bfmR is a potential drug target for Acinetobacter  baumannii. mSphere.
2016 May 11;1(3):1-19.
13.  Kim  SY,  Kim  MH,  Kim  SI,  Son  JH, Kim  S,  Lee  YC, et  al . The  sensor kinase  BfmS  controls  production  of outer membrane vesicles in Acinetobacter baumannii. BMC Microbiology. 2019 Dec 21;19(1):301. 14.  Pakharukova N, Tuittila M, Paavilainen S, Malmi H, Parilova O, Teneberg S, et al. Structural basis for
Acinetobacter baumannii biofilm
formation. Proceedings of the
National Academy of Sciences of the United States of America. 2018 May 22;115(21):5558-63.
15.  Singh  RP,  Lovely  CJ. The  Leucetta alkaloids: synthetic aspects. Bioactive Natural Products Studies in Natural Products Chemistry. 2019;:43 –79.
16.  Koswatta  PB,  Lovely  CJ. Structure and  synthesis  of  2-aminoimidazole alkaloids from Leucetta and Clathrina sponges. Natural  Product  Reports. 2011;28(3):511 –28.
17.  Rogers  SA,  Bero  JD,  Melander  C. Chemical  synthesis  and  biological screening of 2-aminoimidazole- based bacterial and fungal antibiofilm agents. ChemBioChem. 2010;11(3):396 –410.
18.  Rogers SA, Huigens RW, Cavanagh J,  Melander  C. Synergistic  effects between conventional antibiotics and 2-aminoimidazole-derived antibiofilm agents. Antimicrobial  Agents  and Chemotherapy.
2010Aug;54(5):2112 –8.
19.  Reyes S, Iii RWH, Su Z, Simon ML, Melander C. Synthesis and biological activity of 2-aminoimidazole triazoles accessed  by  Suzuki –Miyaura cross- coupling. Organic  &  Biomolecular Chemistry. 2011;9(8):3041.
20.  Su  Z,  Peng  L,  Worthington  RJ,
Melander  C. Evaluation  of  4,5- disubstituted-2-aminoimidazole- triazole conjugates for antibiofilm/antibiotic  resensitization activity against MRSA and Acinetobacter baumannii. ChemMedChem.  2011;6(12):2243 – 51. 21.  Bunders CA, Richards JJ,  Melander C. Identification of aryl 2- aminoimidazoles as biofilm inhibitors in Gram-negative bacteria. Bioorganic  &  Medicinal  Chemistry Letters. 2010;20(12):3797 –800.
22.  Milton  ME,  Minrovic  BM,  Harris  DL, Kang B, Jung D, Lewis CP, et al . Re- sensitizing
multidrug resistant bacteria  to  antibiotics  by  targeting bacterial response regulators: characterization  and  comparison  of interactions between 2- aminoimidazoles  and  the  response regulators  bfmR  from  Acinetobacter baumannii and QseB from Francisella spp. Frontiers in Molecular Biosciences. 2018;5.
23.  Stowe SD, Tucker AT, Thompson R, Piper A, Richards JJ, Rogers SA, et al. Evaluation  of  the  toxicity  of  2- aminoimidazole  antibiofilm  agents using  both  cellular  and  model organism systems. Drug and Chemical Toxicology. 2012;35(3):310 –5.