304 Jurnal Agrotek Tropika 1(3):304-308, 2013 J.  Agrotek    Tropika.    ISSN  2337-4993 Vol. 1,  No. 3: 304 – 308, September 2013

## PENGARUH APLIKASI  BEBERAPA KONSENTRASI FORMULASI  KERING JAMUR Beauveria  bassiana (Bals.)  Vuill.  ISOLAT  TEGINENENG TERHADAP MORTALITAS HAMA PENGISAP BUAH KAKAO (Helopeltis spp.) DI LABORATORIUM
G.A Oka Dwipayana, Purnomo*, Lestari Wibowo & Indriyati
Jurusan Agroteknologi, Fakultas Pertanian Universitas Lampung Jl.Prof. Soemantri Brodjonegoro, No.1, Bandar Lampung 35145 E-mail: gaoka.dwipayana@yahoo.com * Korespondensi, E-mail: purjomo@yahoo.com

## ABSTRAK
Pemanfaatan musuh alami sebagai agensia pengendali hayati mempunyai beberapa keuntungan seperti  mencegah resistensi hama, biaya relatif murah dan aman bagi lingkungan.  Salah satu musuh alami yang dapat digunakan untuk mengendalikan hama adalah jamur B. bassiana. Jamur B. bassiana dapat dibuat dalam bentuk formulasi kering.  Keuntungan dari formulasi kering ini diantaranya dapat disimpan dalam jangka waktu yang lama, praktis, dan mudah diaplikasikan.  Penelitian ini bertujuan untuk menguji pengaruh beberapa konsentrasi formulasi kering jamur B. bassiana isolat Tegineneng terhadap mortalitas hama pengisap buah kakao (Helopeltis spp.).  Pengujian dilakukan di laboratorium menggunakan enam perlakuan yaitu kontrol (aplikasi air steril), aplikasi formulasi kering berbahan aktif  jamur B. bassiana dengan taraf  konsentrasi 5 g l -1 , 10 g l -1 , 15 g l - 1 , 20 g l -1 dan 25 g l -1 air. Percobaan ini disusun menggunakan Rancangan Acak Kelompok (RAK).  Pengelompokan berdasarkan 3   waktu  aplikasi yang berbeda.   Serangga uji yang digunakan adalah pengisap buah kakao  (Helopeltis spp.).  Data  yang didapatkan dianalisis ragam dan dilanjutkan dengan Uji BNT dengan taraf nyata 5%.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa jamur B. bassiana isolat Tegineneng yang dibuat dalam bentuk formulasi kering mampu menyebabkan kematian terhadap serangga uji pengisap buah kakao (Helopeltis spp.).  Mortalitas Helopeltis spp. tertinggi terdapat pada perlakuan 25 g l -1 air formulasi kering jamur B. bassiana isolat Tegineneng sebesar 63,33%.
Kata kunci : Beauveria bassiana, formulasi kering, mortalitas, Helopeltis spp.

## PENDAHULUAN
Kakao merupakan komoditas perkebunan yang peranannya cukup penting bagi perekonomian nasional, khususnya sebagai penyedia lapangan kerja dan sumber pendapatan  negara,  namun  dalam  budidaya  kakao terdapat berbagai kendala.  Menurut Suparno (2001), salah satu kendala yang dihadapi dalam budidaya kakao adalah serangan hama.  Salah satu hama penting pada tanaman kakao adalah  pengisap buah kakao (Helopeltis spp.).
Menurut Sulistyowati & Sardjono (1988 dalam Amini, 2011), hama pengisap buah kakao (Helopeltis spp.) menimbulkan kerusakan dengan cara menusuk dan menghisap  cairan  buah  maupun  tunas-tunas  muda. Serangan pada buah muda menyebabkan matinya buah, sedangkan  serangan  pada  buah  berumur  sedang menyebabkan terbentuknya buah abnormal, akibatnya hasil dan mutu kakao menurun karena biji yang dihasilkan berukuran  kecil.    Selain menyerang  buah,  Helopeltis spp. juga menyerang tunas-tunas muda atau pucuk, yang mengakibatkan mati pucuk (die-back). Serangan berat
dan berulang pada buah dan pucuk dapat menyebabkan penurunan produksi kakao sekitar 36-75%.
Untuk  mendukung  pengembangan  metode pengendalian  hama  yang  berwawasan  lingkungan, diperlukan kajian tentang peranan musuh alami sebagai agensia untuk mengendalikan hama.  Salah satu agensia hayati yang potensial sebagai sarana pengendalian hama adalah jamur Beauveria bassiana (Indriyati, 2009).
Menurut hasil penelitian Yulyanti (2012), jamur B. bassiana isolat Tegineneng menyebabkan mortalitas Helopeltis spp. yang lebih tinggi dibandingkan dengan isolat lain seperti UGM, Trimurjo, Gading rejo dan Bantul. Jamur B.  bassiana isolat  Tegineneng  menyebabkan mortalitas sebesar 67,50%.  Hal ini diduga dipengaruhi oleh kerapatan dan viabilitas spora yang tinggi dari jamur B. bassiana isolat Tegineneng.
Jamur  B.  bassiana  dapat  dibuat  dalam  bentuk formulasi kering.  Keuntungan dari jamur entomopatogen yang  dibuat  dalam  bentuk  formulasi  kering  ini diantaranya adalah dapat disimpan dalam jangka waktu yang  lama,  praktis,  dan  mudah  diaplikasikan. Berdasarkan uraian di atas maka perlu dibuat formulasi
kering dari jamur B. bassiana isolat Tegineneng beserta pengujian formulasi kering tersebut  dalam menimbulkan mortalitas  terhadap    hama  pengisap  buah  kakao (Helopeltis  spp.).
Penelitian ini bertujuan untuk menguji pengaruh aplikasi beberapa konsentrasi  formulasi kering jamur B. bassiana isolat Tegineneng terhadap mortalitas hama pengisap buah kakao (Helopeltis spp.) di laboratorium.

## METODE  PENELITIAN
Penelitian ini dilakukan pada bulan September 2012  sampai  Februari  2013,  di  Laboratorium  Hama Tumbuhan  Fakultas  Pertanian  Universitas  Lampung. Percobaan disusun dalam Rancangan Acak Kelompok yang terdiri atas 6 perlakuan. Setiap perlakuan terdiri dari  3 kelompok waktu aplikasi yang berbeda.  Setiap satu  satuan  percobaan  terdiri  dari  20  ekor  imago Helopeltis spp.  yang  diaplikasikan  dengan  beberapa taraf  konsentrasi formulasi kering jamur B. bassiana. Perlakuan  terdiri  atas  air  steril  sebagai  kontrol  (P0), aplikasi formulasi kering jamur B. bassiana konsentrasi 5  g  l -1 air  (P1),  aplikasi  formulasi  kering  jamur B. bassiana konsentrasi 10 g l -1 air (P2), aplikasi formulasi kering jamur B. bassiana konsentrasi 15 g l -1 air (P3), aplikasi formulasi kering jamur B. bassiana konsentrasi 20 g l -1 air (P4) dan aplikasi formulasi kering jamur B. bassiana  konsentrasi  25  g  l -1 air  (P5).  Data  yang didapatkan dianalisis ragam dan dilanjutkan dengan Uji BNT  dengan  taraf  nyata    5%    kemudian  dilakukan analisis Probit untuk menentukan LC 50 .
Pembiakan serangga dilakukan di laboratorium dengan  menggunakan  inang  alternatif    yaitu  buah mentimun. Sebelum pembiakan terlebih dahulu dilakukan pencarian  indukan Helopeltis spp.  Indukan  serangga terdiri dari imago dan nimfa Helopeltis spp. yang diambil dari  pertanaman  kakao  di  daerah  Brenung, Gedongtataan. Serangga imago dan nimfa dipisahkan dan dimasukkan ke dalam toples plastik  yang sudah diberi pakan buah mentimun di dalamnya dan ditutup menggunakan kain strimin yang diikat menggunakan karet gelang.  Setiap toples diisi + 20 ekor serangga dan 2 buah mentimun. Pakan diganti setiap 2-3 hari sekali. Setelah imago bertelur, buah mentimun yang digunakan sebagai  media  bertelur +  4  buah  dipisahkan  dan ditempatkan pada toples yang baru, ditutup dan diberi label  tanggal.  Setelah  telur  menetas,  maka  nimfa dipindahkan ke dalam toples yang baru dan diberi buah mentimun yang masih segar.  Begitu seterusnya sampai diperoleh jumlah yang diperlukan.
Isolat jamur B. bassiana yang digunakan dalam penelitian  ini  berasal  dari  Tegineneng,  kemudian
dilakukan  isolasi  guna  mempertahankan  dan memperbanyak isolat murni.  Isolasi dilakukan dengan menggunakan media SDA (Sabouraud dextrose agar), lalu diinkubasi selama ± 3 minggu.  Setelah itu, jamur siap digunakan untuk ditumbuhkan pada media beras yang  kemudian  akan  diproses  lebih  lanjut  menjadi formulasi kering.
Pembuatan media beras dilakukan dengan cara mencuci beras sampai bersih kemudian  beras dikukus hingga setengah matang (10 menit).  Setelah itu diangkat dan dimasukkan dalam kantong plastik tahan panas lalu bagian atas plastik yang tidak terisi dirapikan, digulung dan diikat menggunakan karet gelang.  Beras disterilkan dengan autoklaf  pada suhu 120 0 C selama 20 menit, lalu beras diangkat dan dikeringanginkan.
Perbanyakan  jamur B.  bassiana  pada  media beras  dilakukan  dengan  inokulasi  jamur B.  bassiana pada media beras yang telah steril dan dikeringanginkan sebelumnya.  Kantong  plastik berisi beras yang sudah diinokulsi dengan jamur B. bassiana kemudian diberi udara  dan  diikat  dengan  karet gelang lalu  diinkubasi selama 2  minggu.
Teknik  pembuatan  formulasi  kering  jamur B. Bassiana dalam  penelitian ini mengacu pada  metode yang  telah  dilakukan  oleh  Purnomo et  al. (2012). Pembuatan  formulasi  kering  dimulai  dengan mengeringkan  jamur B.  bassiana yang  tumbuh  pada media beras setelah melewati masa inkubasi 2 minggu. Pengeringan dilakukan di dalam lemari pendingin  pada suhu 5 0 C  selama 12 hari.  Setelah  kering lalu dihaluskan dengan  cara  diblender  dan  diayak  sehingga  menjadi tepung biomassa spora.  Bahan pembawa seperti tepung jagung,  kaolin  dan  zeolit  disterilkan  terlebih  dahulu menggunakan  oven  pada  suhu  80 0 C  selama  2  jam. Setelah itu tepung biomasa spora dan bahan pembawa ditimbang sesuai dengan jumlah yang telah ditentukan lalu dicampur di dalam satu kantung plastik (Tabel 1). Setelah formulasi diperoleh, dilakukan penghitungan jumlah spora  sehingga diketahui kerapatan spora atau jumlah spora dalam 1 ml suspensi. Untuk mengetahui kandungan sporanya, diambil 1 g formulasi kering B. bassiana isolat Tegineneng yang berupa bubuk halus dan dimasukkan ke dalam 10 ml aquades, dihomogenkan dengan  rotamixer,  kemudian  dilakukan  pengenceran sampai  10 -3 lalu  dihitung  jumlah  sporanya  dengan bantuan  alat Haemocytometer. Hasil  penghitungan menunjukkan kerapatan spora formulasi kering jamur B. bassiana isolat Tegineneng sebesar 2,85 x 10 6 ml -1 . Pengujian  formulasi  kering  berbahan  aktif    jamur  B. bassiana dilakukan dengan cara melarutkan formulasi kering dengan air.  Setelah itu ditambahkan bahan perata perekat  (indostick)  sebanyak  1ml  l -1 .  Untuk
menentukan  konsentrasi  formulasi  kering  jamur B. bassiana yang digunakan untuk uji utama terlebih dahulu dilakukan uji pendahuluan. Berdasarkan uji pendahuluan tersebut ditentukan  taraf konsentrasi mulai dari 5 g l -1 , 10 g l -1 , 15 g l -1 , 20 g l -1 dan 25 g l -1 air  formulasi kering berbahan  aktif    jamur  B.  bassiana.    Pelaksanaan pengujian  formulasi  kering  dilakukan  dengan memasukkan 20  ekor imago Helopeltis spp.  per  satu satuan    percobaan    ke  dalam  botol  air  mineral  yang dipotong bagian atas dan bagian bawahnya.  Setelah itu pada bagian bawah botol tersebut ditutup dengan kain strimin dan diikat dengan karet gelang.  Formulasi kering yang  sudah  dicampur  dengan  air  dan  bahan  perekat diaplikasikan  menggunakan handsprayer sesuai dengan tingkat dosis yang telah ditentukan.  Selanjutnya serangga yang sudah diaplikasikan dimasukkan kembali ke  dalam  toples  dan  diberi  pakan  mentimun. Pengamatan jumlah Helopeltis spp. yang mati  akibat terinfeksi jamur B. bassiana dilakukan setiap 24 jam sekali selama 10 hari setelah aplikasi. Menurut Wahyono et al. (2007) bahwa mortalitas serangga dapat dihitung menggunakan  rumus seperti berikut :
dengan  M  adalah  mortalitas  serangga  (%),  n  adalah serangga yang mati (ekor), dan N adalah jumlah serangga yang diuji (ekor)
Selain  menghitung  persentase  mortalitas Helopeltis spp. dilakukan juga pengitungan periode letal. Periode letal adalah jangka waktu sejak inokulasi sampai terjadinya kematian.  Periode letal dihitung dengan rumus (Susilo et al.,1993 dalam Indriyati, 2009):
dengan F adalah periode letal, Hi adalah hari ke-, dan Mi adalah jumlah serangga mati (ekor) karena terinfeksi jamur B. bassiana

## HASIL  DAN  PEMBAHASAN
Hasil  percobaan  menunjukkan  bahwa  aplikasi formulasi kering jamur B. bassiana isolat Tegineneng dapat menyebabkan mortalitas Helopeltis spp.  Hal ini ditunjukkan dari hasil pengamatan sejak 1 hsa (Tabel 2).  Pada pengamatan 2 hsa mortalitas Helopeltis spp. tertinggi sebesar 15% terdapat pada aplikasi formulasi kering jamur B. bassiana  konsentrasi 20 g l -1 air,  namun tidak berbeda dengan mortalitas pada perlakuan 10 g l - 1 ,  15  g  l -1 ,  dan  25  g  l -1 air  sebesar  13,33%.  Pada pengamatan 8 hsa mortalitas Helopeltis spp. tertinggi terdapat    pada  aplikasi  formulasi  kering  jamur B. bassiana    konsentrasi  25  g  l -1 air  sebesar  63,33%. Persentase  mortalitas  tersebut  lebih  tinggi  jika dibandingkan dengan perlakuan lain yang konsentrasinya lebih rendah. Nilai mortalitas terendah terdapat pada aplikasi  formulasi  kering  jamur B.  bassiana  dengan konsentrasi  5  g  l -1 air  yang  menyebabkan  mortalitas Helopeltis spp.  sebesar  25%.
Pada tabel 2 dapat dilihat bahwa semakin tinggi konsentrasi formulasi kering jamur B. bassiana yang diaplikasikan semakin tinggi pula persentase mortalitas Helopeltis spp.    Hal  ini  serupa  dengan  pernyataan Ferron  (1981 dalam  Atmadja et  al., 2010),  yang menyatakan  bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi  maka semakin banyak spora yang terkandung di dalamnya. Jumlah  spora  yang  banyak  itu  akan  menyebabkan perkembangan jamur makin cepat dan daya infeksinya makin tinggi.
Hasil  pengamatan  menunjukkan  bahwa Helopeltis spp.  yang  terinfeksi  jamur B.  bassiana menunjukkan gejala awal seperti berkurangmya aktivitas gerak dan aktivitas makan, selanjunya Helopeltis spp. akan  mengalami  kematian.    Menurut    Thomas et  al. (1987 dalam  Deciyanto,  2007)  kematian  serangga biasanya  disebabkan  oleh  kerusakan  jaringan  secara menyeluruh,  karena  toksin  yang  diproduksi  oleh B. bassiana yang disebut beauvericin.  Apabila Helopeltis
Bahan Jumlah (g) Tepung biomassa spora 40 Kaolin 20 Zeolit 20 Tepung jagung 20 Total 100
Tabel 1. Komposisi formulasi kering jamur B. bassiana
            i i i M M H (T) Letal Periode
spp.  yang  mati ditempatkan pada tempat lembab seperti cawan  petri  yang  diberi  tisu  basah  maka  pada  tubuh Helopeltis spp. akan ditumbuhi oleh miselia jamur B. bassiana yang berwarna putih.
Hasil pengamatan menunjukkan bahwa periode letal atau waktu  yang dibutuhkan jamur B. bassiana isolat Tegineneng untuk menyebabkan kematian pada serangga uji Helopeltis spp. tidak berbeda pada seluruh perlakuan, berkisar antara 3,84 hari sampai 4,45 hari setelah aplikasi (Tabel 3).
Analisis probit digunakan untuk mendapatkan  nilai LC 50 , yaitu suatu konsentrasi yang dapat menyebabkan kematian  50%  pada  serangga  hama  yang  diuji (Moekasan, 1993 dalam Negara, 2003).  Berdasarkan
Tabel 2. Persentase mortalitas Helopeltis spp. setelah aplikasi formulasi kering jamur B. bassiana isolat Tegineneng
Perlakuan Mortalitas Helopeltis spp. (%) pada 1 hsa 2 hsa 3 hsa 4 hsa 5 hsa 6  hsa 7 hsa 8 hsa P0 0,00 0,00   a 1,66   a 5,00   a 10,00 a 10,00 a 10,00 a 10,00 a P1 0,00 1,66   a 8,33   b 10,00 ab 16,66 ab 25,00 b 25,00 b 25,00 b P2 3,33 13,33 b 16,66 c 18,33 bc 23,33 bc 26,66 bc 30,00 bc 31,66 bc P3 5,00 13,33 b 20,00 cd 25,00 cd 30,00 cd 33,33 cd 40,00 cd 40,00 cd P4 3,33 15,00 b 23,33 de 26,66 de 33,33 de 41,66 de 46,66 de 50,00 d P5 6,66 13,33 b 26,66 e 35,00 e 43,33  e 48,33 e 58,33 e 63,33 e F hit 1,63tn 11,09* 27,48* 15,35* 7,74* 9,94* 17,12* 21,89* BNT 6,35 5,67 8,78 12,61 12,75 12,53 12,31
Keterangan: angka-angka sekolom  yang diikuti dengan huruf  yang sama dinyatakan tidak berbeda pada uji BNT α = 0,05. P0 = Kontrol, P1= Aplikasi formulasi kering jamur B. bassiana konsentrasi 5 g l -1 air, P2 = Aplikasi formulasi kering jamur B. bassiana konsentrasi 10 g l -1 air, P3 = Aplikasi formulasi kering jamur B. bassiana konsentrasi 15 g l -1 air, P4 = Aplikasi formulasi kering jamur B. bassiana konsentrasi 20 g l -1 air, dan P5 = Aplikasi formulasi kering jamur B. bassiana konsentrasi 25 g l -1 air .
hasil analisis probit nilai LC 50 dari formulasi kering jamur B. bassiana terhadap mortalitas Helopeltis spp.  pada 8  hsa  adalah  pada  konsentrasi  22,57 g  l -1 air.  Hal  ini berarti  pada  aplikasi  formulasi  kering  jamur  dengan konsentrasi  22,57 g l -1 air dapat menyebabkan kematian Helopeltis spp.  sebesar  50%.
Dari hasil penelitian ini terlihat bahwa jamur B. bassiana yang  dibuat dalam bentuk formulasi  kering mampu menyebabkan kematian terhadap serangga uji Helopeltis spp. Formulasi kering dalam penelitian ini mudah dibuat, praktis  dan mudah diaplikasikan sehingga berpotensi untuk digunakan dan dikembangkan di tingkat petani.
Perlakuan Periode letal (hari ) P1 4,45 a P2 3,85 a P3 3,84 a P4 4,43 a P5 4,28 a BNT 0,92
Tabel 3.  Periode letal jamur B. bassiana isolat Tegineneng
Keterangan: angka-angka yang diikuti dengan huruf  yang sama dinyatakan tidak berbeda pada uji BNT α = 0,05. P0 = Kontrol, P1= Aplikasi formulasi kering jamur B. bassiana konsentrasi 5 g l -1 air, P2 = Aplikasi formulasi kering jamur B. bassiana konsentrasi 10 g l -1 air, P3 = Aplikasi formulasi kering jamur B. bassiana konsentrasi 15 g l -1 air, P4 = Aplikasi formulasi kering jamur B. bassiana konsentrasi 20 g l -1 air, dan P5 = Aplikasi formulasi kering jamur B. bassiana konsentrasi 25 g l -1 air .

## KESIMPULAN
Aplikasi  formulasi  kering  jamur B.  bassiana konsentrasi  25  g  l -1 air  menyebabkan  mortalitas Helopeltis spp. sebesar 63,33%.  Nilai ini lebih tinggi dibandingkan dengan perlakuan lain dengan  konsentrasi yang lebih rendah.  Nilai LC 50 dari formulasi kering jamur B.  bassiana  terhadap Helopeltis spp.  adalah  pada konsentrasi  22,57  g  l -1 air.  Periode  letal  jamur B. bassiana pada seluruh perlakuan tidak berbeda berkisar antara 3,84 hari sampai 4,45 hari setelah aplikasi.

## DAFTAR    PUSTAKA
Amini. 2011.  Keberadaan Helopeltis antonii Sebagai Hama Pada Beberapa Tanaman Perkebunan dan Pengendaliannya. Balai Besar  Perbenihan dan Proteksi Tanaman Perkebunan Surabaya.
Atmadja, W.R. 2003.  Status Helopeltis antonii Sebagai Hama Pada Beberapa Tanaman Perkebunan dan Pengendaliannya. J.  Litbang  Pertanian 22(2):57-63.
Deciyanto.  2007.    Status  Teknologi  dan  Prospek

## Beauveria  bassiana  Untuk  Pengendalian
Serangga  Hama  Tanaman  Perkebunan  Yang Ramah Lingkungan.  Balai Penelitian Tanaman
Tembakau dan Serat Malang.
Indriyati.    2009.    Virulensi  Jamur  Entomopatogen
Beauveria  bassiana (Balsamo) Vuillemin
Terhadap Kutu Daun (Aphis spp.) dan Kepik Hijau (Nezara  Viridula). J.  HPT  Tropika    9(2):92-
98.

## Negara, A. 2003.  Penggunaan Analisis Probit Untuk Pendugaan  Tingkat  Kepekaan  Populasi Spodoptera  exigua  Terhadap  Deltametrin  Di
Daerah  Istimewa  Yogyakarta.    Informatika Pertanian. 9 Hlm.
Purnomo, Aeny, T.N., dan Fitriana, Y. 2012. Pembuatan dan Aplikasi Formulasi Kering Tiga Jenis Agensia Hayati  Untuk  Mengendalikan  Hama  Pencucuk Buah dan Penyakit Busuk Buah Kakao.  Laporan Penelitian Hibah Bersaing. Universitas Lampung. Bandar Lampung.
Suparno, T.   2001.  Infestasi Penggerek Buah Kakao Ke  dalam  Perkebunan    Kakao  Di  Kawasan Kerkap, Bengkulu Utara dan Pengendaliannya. J. HPT Tropika 1(1): 11-15.
Wahyono, T.E.  2007. Uji  Patogenitas Agen  Hayati Beauveria  bassiana  dan Metarhizium anisopliae Terhadap  Ulat    Serendang (Xystrocera  festiva). Buletin  Teknik  Pertanian 12(1):27-29.
Yulyanti.    2012.  Kemampuan  Beberapa  Isolat Beauveria  bassiana  (Bals.)  Vuill  Terhadap Mortalitas Helopeltis spp. (Skripsi).  Universitas Lampung.  Bandar Lampung. 51 hlm.