Volume 10, Nomor 1, Tahun 2021, Halaman 1-9                                Submitted: 21 Agustus 2020
Online di : http://ejournal3.undip.ac.id/index.php/jnc/ Accepted: 5 Maret 2021

## PENGARUH FORMULASI TEPUNG IKAN HARUAN, TEPUNG BUAH DAN BIJI LABU KUNING PADA BISKUIT TERHADAP KANDUNGAN GIZI DAN DAYA TERIMA
Christina Erawati Mumpuni 1 , Tri Ardianti Khasanah 2*
1 Fakultas Teknobiologi PK Bionutrisi dan Inovasi Pangan, Universitas Surabaya, Jl. Tenggilis Mejoyo, Kali Rungkut, Kec. Rungkut, Kota Surabaya, Jawa Timur 60293, Indonesia
2 Fakultas Kesehatan Masyarakat, Prodi Gizi, Universitas Binawan Jl. Kalibata Raya – Dewi Sartika No. 25-30, Kramat Jati, Jakarta Timur, 13630, Indonesia
* Korespondensi : E-mail: ardianti@binawan.ac.id

## ABSTRACT
Background: One of the nutritional problems on a toddler is stunting. Some research said that some nutrition content has an impact on linear growth in stunting cases such as protein, zinc, iron, and vitamin A.  Haruan fish flour, pumpkin seed and fruit flour are local resources which rich in that nutrition, so they suitable for the substitution of wheat flour on biscuit product in the effort to prevent stunting problem.
Objectives: The purpose of this study is to know the effect of biscuit formulation (Haruan Pumpkin Biskuit=HPB) with haruan fish flour (HFF), pumpkin fruit flour (PFF), and pumpkin seed flour (PSF) on protein, zinc, iron, and vitamin A also the acceptance levels of biscuit for toddlers.
Methods: This study uses the experiment method with design random complete (RAL). It has consisted of 4 treatments and  3  replications.  Biscuit  formulation  with  wheat  flour:  HFF:  PSF:  PFF  are P0  (100%:0%:0%:0%),  P1 (50%:20%:20%:10%),  P2  (50%:15%:15%:20%),  P3  (50%:10%:10%:30%). Data  analysis  of  protein,  zinc,  iron,  and vitamin A content using one-way ANOVA, while the acceptance level uses Friedman analysis on color, aroma, texture, and taste.
Results: The results showed that HPB formulations have no significant difference in protein content (p>0.05) and vitamin A  content (p>0.05).  HPB  formulations  have  a  significant  difference  in  zinc (p<0.05) ,  iron  content  (p <0.05), and acceptance (p<0.05).
Conclusion:  HPB formulations  have  a  positive  effect  on  zinc  and  iron  content.  There  is  a  significant  increasing  zinc content  on  formulation  with  a  higher  portion  of  HFF,  PSF,  and  lower  portion  of  PFF.  On  the  other  side,  there  is  a significantly increasing iron content on formulation with a higher portion of PFF and a lower portion of HFF, PSF. Keywords: Biscuit; Haruan; Pumpkin; Iron; Zinc.

## ABSTRAK
Latar Belakang : Salah satu masalah gizi pada balita adalah stunting. Beberapa penelitian sebelumnya telah menemukan kandungan gizi yang memiliki pengaruh pada pertumbuhan linear tubuh dalam kasus stunting seperti protein, seng, zat besi dan vitamin A. Tepung ikan haruan (HFF), tepung biji labu kuning(PSF) dan tepung buah labu kuning (PFF) adalah bahan  lokal  yang  cukup  mengandung  gizi  tersebut  sehingga  cocok  digunakan  sebagai  bahan  tambahan  pada  produk biskuit untuk balita.
Tujuan : Penelitian ini bertujuan untuk  mengetahui pengaruh  formulasi  biskuit (HPB) yang terdiri dari tepung terigu, HFF, PSF dan PFF  terhadap kadar protein, seng, zat besi, vitamin A, dan   daya terima biskuit untuk balita. Metode : Penelitian ini bersifat eksperimen menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 4 perlakuan dan 3 kali replikasi. HPB dibuat dengan proporsi tepung terigu: HFF: PSF: PFF masing-masing adalah P0 (100%:0%:0%:0%), P1 (50%:20%:20%:10%), P2 (50%:15%:15%:20%),  P3(50%:10%:10%:30%). Analisis data  pengaruh  formulasi  HPB terhadap kandungan gizi  menggunakan one  way  anova , sedangkan untuk daya terima  menggunakan analisis friedman pada warna, aroma, tekstur, dan rasa.
Hasil : Uji statistik yang dilakukan menyatakan bahwa formulasi HPB tidak beda nyata (p>0,05) terhadap kadar protein dan vitamin A. Sebaliknya, formulasi HPB beda nyata (p<0,05) terhadap kadar seng, zat besi dan daya terima biskuit. Simpulan  : Formulasi  HPB  memiliki  pengaruh  positif  terhadap  kadar  seng  dan  zat  besi  biskuit.  Kadar  seng  biskuit semakin meningkat pada formulasi dengan persentase HFF, PSF makin besar dan PFF makin kecil. Sebaliknya, kadar zat besi semakin meningkat, pada formulasi dengan persentase PFF makin besar dan HFF, PSF makin kecil.
Kata Kunci : Biskuit; Ikan Haruan; Labu kuning; Zat Besi; Seng
PENDAHULUAN Masa balita merupakan masa penting pertumbuhan  pada  anak.  Asupan  zat  gizi  yang
melalui  makanan  dan  hidup  sehat  pada  periode  ini akan  menentukan  bagaimana  pertumbuhan  dan perkembangan anak dimasa akan datang. 1 Kurangnya
asupan  zat  gizi  pada  anak  dapat  menyebabkan beberapa masalah gizi, salah satunya adalah stunting. Menurut World  Health  Organization (WHO) tahun  2013, stunting merupakan  kegagalan  untuk mencapai  pertumbuhan  optimal  yang  dialami  sejak masa  lampau  sehingga  menyebabkan  pencapaian pertumbuhan  yang  tidak sempurna. Stunting didefinisikan  sebagai  indeks  tinggi  badan  menurut umur (TB/U) kurang dari minus dua standar  deviasi (-2SD)  atau  dibawah  rata-rata  standar  yang  ada. Stunting pada anak merupakan hasil jangka panjang konsumsi  kronis  diet  berkualitas  rendah  yang dikombinasikan  dengan  mobilitas,  penyakit  infeksi, dan masalah lingkungan. 2
Indonesia  merupakan  negara  tertinggi  ketiga untuk  angka stunting di  Asia  Tenggara. 4 Indonesia masih  memiliki  masalah stunting dengan  prevalensi sebesar 36,4%. Berdasarkan data Pemantauan Status Gizi masyarakat tahun 2017 prevalensi balita stunting di Provinsi Kalimantan Selatan sebesar 34,2%, salah satu  prevalensi  balita stunting tertinggi  di  Provinsi Kalimantan  Selatan  yaitu  di  Kotabaru  sebesar 46,7%. 3 Permasalahan stunting yang terjadi di Kalimantan  Selatan,  memunculkam  suatu  keperluan adanya  produk  makanan  alternatif  yang  dapat mengurangi  atau  mencegah  kejadiannya.  Salah satunya  berupa  biskuit,  karena  biskuit  adalah  salah satu  jenis  makanan  yang  digemari  oleh  semua kalangan  usia,  baik  bayi  hingga  dewasa.  Biskuit banyak disukai karena rasanya yang enak, bervariasi, harga relatif murah, serta cukup mengenyangkan dan produksi  biskuit  mudah  diperkaya  dengan  zat  gizi yang  diperlukan  penderita stunting ,  diantaranya adalah protein, seng, zat besi dan vitamin A.
Pola makan yang kurang baik akan berpengaruh terhadap  asupan  zat  gizi  yang  berperan  pada pertumbuhan  anak  sehingga  berpengaruh  terhadap kejadian stunting . 5 Asupan  makanan  yang  tidak seimbang berkaitan dengan kandungan zat gizi dalam makanan  yaitu  karbohidrat,  protein,  lemak,  mineral, vitamin,  dan  air  merupakan  salah  satu  faktor  yang dikaitkan  dengan  terjadinya stunting . 6 Defisiensi  zat gizi  mikro  juga  berpengaruh  terhadap  pertumbuhan linear. 7 Defisiensi  zat  gizi  protein  dan  vitamin  A dapat mempengaruhi kejadian stunting pada balita. 8 Protein  berfungsi  sebagai  pembentuk  jaringan baru di masa pertumbuhan dan perkembangan tubuh, memelihara,  memperbaiki  serta  mengganti  jaringan yang  rusak. 9 Anak  mengalami  defisiensi  asupan protein  yang  lama  meskipun  asupan  energinya tercukupi akan mengalami keterlambatan pertumbuhan tinggi badan. 10 Selain asupan protein, anak-anak juga mempunyai  risiko  mengalami  kekurangan  seng  dan zat besi. Keadaan ini disebabkan oleh meningkatnya kebutuhan seng dan zat besi pada masa pertumbuhan,
asupan seng dan zat  besi yang kurang pada masa anak menyebabkan terhambatnya  pertumbuhan  pada anak sehingga  jika  berlangsung  dalam  waktu  lama  dapat menyebabkan stunting. 12 Defisiensi  seng  juga berhubungan  dengan  menurunnya  fungsi  kekebalan yang  diukur  dengan  perubahan  dalam  beberapa komponen  sistem  kekebalan  yang  terjadi  selama defisiensi  seng.  Konsekuensi  dari  perubahan  fungsi kekebalan  adalah  resistensi  terhadap  penyakit infeksi. 13
Bahan baku lokal yang dapat dikembangkan dan dapat  memberikan  asupan  protein  dan  seng  (Zn) adalah ikan haruan dan labu kuning. Selain digemari karena cita rasanya yang lezat, ikan haruan  memiliki daya  saing  khusus,  antara  lain  kadar  protein albuminnya  yang  sangat  tinggi,  sehingga  diminati pula  sebagai  bahan  baku  produk  kesehatan  dan industri farmasi. 14 Tepung ikan haruan memiliki nilai gizi yang tinggi terutama kandungan proteinnya yang kaya  akan  asam  amino  essensial,  terutama  lisin  dan metionin.
Tanaman  labu  kuning  banyak  ditemukan  di Kalimantan  Selatan,  terutama  di  Kabupaten  Tanah Bumbu bahan labu kuning ini berlimpah di pasaran. Berdasarkan catatan Dinas Pertanian dan Holtikultur Provinsi  Kalimantan  Selatan  tahun  2011  luas tanaman labu kuning 2,725 hektar dengan luas panen 2,215  ton/hektar  Perbanyakan  tanaman  ini  dapat dilakukan  dengan  biji.  Tanaman  ini  tidak  tahan terhadap hujan yang terus-menerus. Pertumbuhannya memerlukan  kelembapan  udara  yang  tinggi,  tanah yang  gembur,  dan  mendapat  sinar  matahari  penuh dengan drainase yang  baik  tanaman  ini  lebih  baik dirambatkan. 15
Biji  labu  kuning  memiliki  kandungan  yang berkhasiat  seperti  asam  amino,  Zn  (seng),  Mg (magnesium),  asam  lemak  utama  (linoleat,  oleat, palmitat,  dan  stearat),  vitamin  E  (tokoferol), karetenoid,  sterol,  kriptoxantin,  sesquit  terpenoid monosiklik  dan  inhibitor  tripsin  yang  dapat menghambat peroksida yang berubah menjadi radikal bebas  dan  mampu  mengoksidasi  asam  lemak  tidak jenuh dalam membran sel. 16
Labu  kuning  bisa  dimanfaatkan  sebagai  bahan fortifikasi makanan yang baik. Untuk tujuan tersebut, labu kuning diolah menjadi produk yang tahan lama disimpan  seperti  tepung.  Tepung  labu  kuning merupakan  salah  satu  alternatif  untuk  mengatasi permasalahan  gizi.  Tepung  labu  kuning  berpotensi sebagai  pendamping  terigu  dalam  berbagai  produk olahan  pangan  sehingga  produk  olahan  yang ditambah dengan labu kuning mempunyai warna dan rasa  yang  menarik. 17 Sementara  itu,  biji  labu  juga digunakan untuk membuat biskuit, selain memaksimalkan  potensi  labu  (memimalkan  limbah) biji  labu  memiliki  banyak  keunggulan  seperti kandungan  asam  amino  dan  seng. Tujuan  dari
penelitian  ini  adalah  untuk  untuk  mengetahui pengaruh formulasi tepung ikan haruan, tepung    biji dan  buah  labu  kuning  terhadap kadar protein, seng (Zn), zat besi (Fe), vitamin A dan daya terima biskuit.

## METODE
Jenis  penelitian  ini  bersifat  eksperimental  dan bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  formulasi biskuit dengan tepung ikan haruan, tepung buah dan biji  labu  ( Haruan  Pumpkin  Biskuit  =HPB )  terhadap kadar  protein,  seng,  zat  besi,  vitamin  A  dan  daya terima  (warna,  tekstur,  aroma  dan  rasa)  biskuit sebagai makanan alternatif pada kasus stunting . Ikan haruan ( Ophiocephalus striatus) diperoleh dari pasar Banjarbaru,  Kalimantan  Selatan.  Ikan  haruan dibersihkan  lalu  dipisahkan  daging  dan  tulangnya. Daging  ikan  dikukus  10-15  menit,  tulang  ikan
dipresto  1-1,5  jam  lalu  dikeringkan  bersama  sama dalam  oven  suhu  60 0 C  selama  52  jam.  Ikan  kering lalu  diblender  dan  diayak  dengan  ayakan  40  mesh. Tepung  labu  kuning  diperoleh  dari  produsen  di Yogyakarta,  sementara  tepung  biji  labu  kuning diperoleh  dari  pembelian online dari  Jakarta.  Proses pembuatan  tepung  ikan  dan  pengujian  zat  besi dilakukan  di  Laboratorium  Biokimia  Universitas Lambung  Mangkurat  Kalimantan  Selatan  bulan Maret - April 2019.
Rancangan  penelitian  yang  digunakan  adalah rancangan  acak  lengkap  (RAL)  dengan  4  perlakuan dan 3 kali replikasi. Variabel bebas adalah perlakuan formulasi  tepung  terigu  tepung  ikan  haruan,  tepung biji  dan  buah  labu  kuning  (Tabel  1)  sedangkan variabel  terikat  adalah  kadar  protein,  seng,  zat  besi, vitamin A, dan daya terima.
Tabel 1. Variasi Perlakuan Penelitian
Data  yang  dikumpulkan  pada  penelitian  ini adalah  data  kuantitatif  berupa  data  primer  yaitu  uji kadar  protein  dengan  metode Kjeldahl ,  vitamin  A dengan  spektrofotometri  uv-vis,  zat  besi  dengan metode AAS pada panjang gelombang 510nm, kadar seng  dengan  metode  AAS  pada  panjang  gelombang 213,9  nm,  dan  uji  daya  terima  dengan  metode Hedonic  Scale  Scoring dengan  25  panelis  semi terlatih  mahasiswa  S1  Gizi  STIKes  Husada Borneo,Banjarbaru,  Kalimantan  Selatan.  Untuk mengetahui  ada  tidaknya  perbedaan  rata-rata  kadar protein,  seng,  zat  besi,  vitamin  A  dan  daya  terima diantara perlakuan formulasi maka  uji statistik yang digunakan adalah one-way anova.

## HASIL
Penelitian  pembuatan  biskuit  dengan  substitusi tepung ikan haruan, tepung biji dan buah labu kuning ini  telah  dilakukan  dan  didapatkan  hasil  yang disajikan  pada  Tabel  2.  Kadar  protein  yang  paling tinggi terdapat pada perlakuan P2 dengan nilai rata – rata  7,90%,  sedangkan  yang  paling  rendah  terdapat pada  perlakuan  P0  dengan  nilai  rata  –  rata  7,73%. Berdasarkan  uji  statistik  analisis  sidik  ragam (One Way  Anova) nilai  p>0.05  maka  kadar  protein  pada setiap perlakuan tidak berbeda nyata. Nilai rata – rata kadar  seng  biskuit  yang  paling  tinggi  terdapat  pada perlakuan  P1  dengan  nilai  rata  –  rata  32,28
mg/100gram, sedangkan yang paling rendah terdapat pada  perlakuan  P3  dengan  nilai  rata  –  rata  26,64 mg/100gram.
Berdasarkan  uji  statistik  analisis  sidik  ragam (One  Way  Anova) diperoleh  nilai  p<0,05  maka  ada beda  nyata  nilai  kadar  seng  pada  masing-masing perlakuan  formulasi  sehingga  dapat  dilanjutkan dengan  uji  perbandingan  ganda  ( tuckey )  untuk melihat kombinasi perlakuan yang berbeda. Berdasarkan  analisa  uji tuckey didapatkan  bahwa perlakuan P3 dengan P2 (p<0,05) berbeda nyata.
Nilai rata – rata kadar zat besi biskuit yang paling tinggi terdapat pada perlakuan P3 dengan nilai rata – rata 13,5mg/100gram, sedangkan yang paling rendah terdapat pada perlakuan P1  dengan nilai rata  – rata 6,9 mg/100gram. Berdasarkan uji statistik (One Way Anova) diperoleh  nilai  p<0,05  maka  ada  beda  nyata kadar  zat  besi  pada  masing-masing  perlakuan formulasi  sehingga  dapat  dilanjutkan  dengan  uji perbandingan ganda (tuckey) untuk melihat kombinasi  perlakuan  yang  berbeda.  Berdasarkan analisa  uji tuckey didapatkan  bahwa  perlakuan  P0 dengan  P3,  P1  dengan  P3  dan  P2  dengan  P3,  P3 dengan P0; P3 dengan P1; P3 dengan P2 nilai kadar zat besinya berbeda nyata (p<0,05).
Kadar vitamin A tertinggi pada perlakuan P3 dengan nilai rata – rata 85,33mcg/100gram, sedangkan paling rendah terdapat pada perlakuan P1 dengan nilai rata – rata 61,51mcg/100gram.
Bahan Formulasi Tepung Terigu, Tepung Ikan Haruan, Tepung Biji dan Buah Labu Kuning (%) P0 P1 P2 P3 Tepung Terigu 100% 50% 50% 50% Tepung Ikan Haruan (HFF) 0% 20% 15% 10% Tepung Biji Labu Kuning (PSF) 0% 20% 15% 10% Tepung Labu Kuning (PFF) 0% 10% 20% 30%
Tabel 2. Kadar Zat Gizi Per 100 gram Variabel Mean ± SD Sig. Anova Kadar Protein Biskuit 0,940 P0 (100%;0%;0%;0%) 7,73 ± P1 (50%;20%;20%;10%) 7,87 ±  0,31 P2 (50%;15%;15%;20%) 7,90 ± 0,198 P3 (50%;10%;10%;30%) 7,89 ± 0,188 Kadar Seng Biskuit P0 (100%;0%;0%;0%) 29,98 ± 0,008 P1 (50%;20%;20%;10%) 32,28 ± P2 (50%;15%;15%;20%) 27,54 ± P3 (50%;10%;10%;30%) 26,64 ± Kadar Zat Besi Biskuit P0 (100%;0%;0%;0%) 8,1 0,001 P1 (50%;20%;20%;10%) 6,9 P2 (50%;15%;15%;20%) 8,7 P3 (50%;10%;10%;30%) 13,5 Kadar Vitamin A Biskuit P0 (100%;0%;0%;0%) 61,51 0,089 P1 (50%;20%;20%;10%) 67,76 P2 (50%;15%;15%;20%) 81,13 P3 (50%;10%;10%;30%) 85,33 Daya Terima Warna Biskuit P0 (100%;0%;0%;0%) 3,56 <0,001 P1 (50%;20%;20%;10%) 3,08 P2 (50%;15%;15%;20%) 2,80 P3 (50%;10%;10%;30%) 2,60 Daya Terima Aroma Biskuit P0 (100%;0%;0%;0%) 3,80 <0,001 P1 (50%;20%;20%;10%) 2,44 P2 (50%;15%;15%;20%) 3,00 P3 (50%;10%;10%;30%) 2,92 Daya Terima Tekstur Biskuit P0 (100%;0%;0%;0%) 3,00 0,003 P1 (50%;20%;20%;10%) 3,28 P2 (50%;15%;15%;20%) 2,84 P3 (50%;10%;10%;30%) 2,68 Daya Terima Rasa Biskuit P0 (100%;0%;0%;0%) 3,12 <0,001 P1 (50%;20%;20%;10%) 3,20 P2 (50%;15%;15%;20%) 2,84 P3 (50%;10%;10%;30%) 2,56
Berdasarkan uji statistik analisis sidik ragam (One Way Anova) nilai p>0,05 maka kadar vitamin A pada  masing-masing  perlakuan  tidak  berbeda  nyata. Daya terima panelis terhadap warna biskuit tertinggi adalah  perlakuan  P0  dengan  nilai  rata-rata  3,56, sedangkan  yang  terendah  adalah  pada  perlakuan  P3 dengan nilai rata-rata 2,60. Data daya terima panelis terhadap  aroma  biskuit  tertinggi  adalah  pada perlakuan  P0  dengan  nilai  rata-rata  3,80,  sedangkan yang terendah adalah pada perlakuan P1 dengan nilai rata-rata  2,44.  Daya  terima  panelis  terhadap  tekstur biskuit  yang  tertinggi  adalah  pada  perlakuan  P1 dengan nilai rata-rata 3,28, sedangkan yang terendah adalah pada perlakuan P3 dengan nilai rata-rata 2,68.
Daya  terima  panelis  terhadap  rasa  biskuit  tertinggi adalah pada perlakuan P1 dengan nilai rata-rata 3,20, sedangkan terendah adalah pada perlakuan P3 dengan nilai  rata-rata  2,56.  Hasil  uji  statistik Friedman menunjukkan nilai p<0,05, maka daya terima panelis terhadap warna, aroma, tekstur dan rasa biskuit pada masing-masing perlakuan berbeda nyata.

## PEMBAHASAN
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  kadar protein  biskuit  tertinggi  adalah  7,90  %  (P2)  dengan proporsi tepung terigu 50%, HFF 15%, HSF 15%, dan HFF  20%  sedangkan  kadar  protein  biskuit  pada perlakuan kontrol (P0) yaitu  sebesar 7,73 % dengan
proporsi tepung terigu 100%, HFF 0%, PSF 0%, dan PFF  0%.  Hasil  ini  menunjukkan  bahwa  pembuatan biskuit menggunakan proporsi tepung terigu, tepung ikan  haruan,  tepung  biji  dan  buah  labu  mampu meningkatkan  kadar  protein  dibandingkan  dengan biskuit  kontrol  (P0)  yang  hanya  menggunakan proporsi tepung terigu 100%. Kenaikan kadar protein dengan penambahan tepung labu kuning juga terjadi pada  penelitian  Priyono 18 yaitu  dengan  substitusi tepung labu kuning 60% dan tepung beras 40%  dan diperoleh kadar protein sebesar 8,25%. Hal ini karena penambahan tepung labu kuning dengan jumlah besar akan  meningkatkan  jumlah  protein  pada  biskuit. 19 Namun  demikian, kadar  protein  pada  tiap-tiap perlakuan  tidak  beda  nyata,  karena  rata-rata  kadar protein  tiap  perlakuan  tidak  jauh  berbeda.  Hal  ini kemungkinan  karena  penambahan  proporsi  tepung ikan  haruan,  sebagai  bahan  yang  memiliki  potensi protein  tinggi,  pada  tiap  perlakuannya  tidak  jauh berbeda  dan  adanya  faktor  denaturasi  protein  saat penepungan  maupun  pembuatan  biskuit.  Pada penelitian  ini  rata-rata  kadar  protein  biskuit  pada setiap  perlakuannya  sudah  memenuhi  standar  jika dibandingkan  dengan  kriteria  SNI  biskuit  yaitu minimal  5%  dalam  100gram  bahan.      Kebutuhan protein  perhari  tergantung  dari  umur,  jenis  kelamin, dan aktivitas fisik. Balita umur 1-3 tahun kebutuhan protein per hari sebanyak 26gram. 20 Dalam 1 keping biskuit dengan berat kurang lebih 5gram mengandung protein P0 (0,38gram), P1 (0,39gram), P2 (0,40gram), dan P3 (0,39gram).
Berdasarkan  PSG  (Pedoman  Gizi  Seimbang) untuk  satu  kali  makanan  selingan  adalah  10%  dari kebutuhan AKG, maka didapatkan kebutuhan protein dari makanan selingan perhari balita umur 1-3 tahun adalah  2,6gram.  Jadi,  biskuit  perlakuan  P2  (biskuit dengan  kadar  protein  tertinggi)  dapat  memenuhi kebutuhan  protein  balita  umur  1-3  tahun  dengan konsumsi sekitar 7 keping biskuit. Kecukupan protein merupakan  pertimbangan  utama  penentuan  takaran saji  karena  protein  sangat  dibutuhkan  bayi  untuk proses pertumbuhan. 21 Seng  berperan  dalam  sintesis  DNA  dan  RNA yang  penting  dalam  replikasi  dan  diferensiasi kondrosit  dan  osteoblast,  transkripsi  dan  sintesis. Kebutuhan  seng  secara  fisiologis  meningkat  pada periode  pertumbuhan  cepat  akibat  terjadinya  proses replikasi DNA, transkripsi DNA dan fungsi endokrin (Gibson, 2006). Seng sangat penting untuk mencegah terjadinya stunting dan  diperlukan  dalam  proses pertumbuhan dan perkembangan anak. 20
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  kadar seng tertinggi adalah 32,28mg (P1) dengan proporsi tepung  terigu  50%,  HFF  20%,  PSF  20%,  dan  PFF 10%,  sedangkan  kadar  seng  terendah  adalah  biskuit pada  perlakuan  P3  dengan  proporsi  tepung  terigu 50%,  HFF  10%,  PSF  10%,  dan  PFF  30%.  Hal  ini
menunjukkan  bahwa  semakin  banyak  proporsi tepung ikan haruan dan tepung biji labu kuning maka semakin meningkatkan kadar seng.
Kebutuhan  seng  per  hari  balita  umur  1-3  tahun sebanyak 4 mg. 21 Kandungan seng yang terdapat pada setiap  perlakuan  biskuit  yaitu  P0  (29,98mg),  P1 (32,28mg), P2 (27,54mg), dan P3 (26,64mg)  dalam 100gram  biskuit  sehingga  dalam  setiap  1  keping biskuit  dengan  berat  5  gram  mengandung  seng  P0 (1,49mg),  P1  (1,61mg),  P2  (1,37mg)  dan  P3 (1,33mg). Berdasarkan PGS (Pedoman Gizi Seimbang)  untuk  makanan  selingan  yaitu  10%  dari kebutuhan  AKG,  maka  didapatkan  kebutuhan  seng dari makanan selingan perhari balita umur 1-3 tahun adalah 0,4 mg sehingga setiap 1 keping biskuit sudah berlebih memenuhi kebutuhan.
Sumber seng pada biskuit dapat berasal dari susu skim,  kuning  telur,  dan  tepung  biji  labu  kuning. Jumlah  susu  skim  dan  kuning  telur  yang  digunakan sama  pada  semua  formulasi.  Kadar  seng  tertinggi terdapat pada perlakuan P3 dengan substitusi tepung terigu 20%, tepung  garut 35%, tepung kedelai 25%, dan  tepung  ubi  jalar  kuning  20%  yaitu  1,50mg/100 gram. 22 Kedelai  mengandung  faktor  antinutrisi seperti antitripsin dan asam fitat yang dapat mengikat mineral  terutama  kalsium,  seng,  zat  besi,  dan magnesium  sehingga  bioavailabilitasnya  rendah. Pada  hasil  penelitian 23 ,  terhadap  sorghum  yang direndam  lalu  direbus  mengalami  penurunan  kadar seng  karena  larutnya  seng  pada  medium  saat  proses perebusan. 24 Nilai  kadar  seng  bubur  bayi  instan dengan substitusi tepung ikan patin dan tepung labu kuning  berkisar  antara  0,46-0,48g/ml  dan  tidak berbeda nyata antar formulasi.
Zat besi merupakan microelement yang esensial bagi  tubuh.  Zat  ini  terutama  diperlukan  dalam hemopobesis yaitu pembentukan molekul hemoglobin (Hb).  Apabila  jumlah  zat  besi  dalam bentuk  simpanan  cukup,  maka  kebutuhan  untuk pembentukan sel darah merah dalam sumsum tulang akan  selalu terpenuhi. Akan tetapi bila simpanan zat besi  berkurang  dan  jumlah  zat besi  yang  diperoleh dari  makanan  kurang  dari  kebutuhan,  maka  akan terjadi  ketidakseimbangan zat besi didalam tubuh . 25 Anak-anak mempunyai resiko mengalami kekurangan  zat  besi.  Keadaan  ini  disebabkan  oleh meningkatnya  kebutuhan  zat  besi  pada  masa pertumbuhan,  asupan  zat  besi  yang  kurang  pada masa anak menyebabkan terhambatnya pertumbuhan  pada  anak  sehingga  jika  berlangsung dalam waktu lama dapat menyebabkan stunting .
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  kadar zat  besi  tertinggi  adalah  13,5mg/100  gram  biskuit (P3) dengan proporsi tepung terigu 50%, HFF 10%, PSF  10%,  dan  PFF  30%,  sedangkan  kadar  zat  besi terendah  adalah  biskuit  pada  perlakuan  P1  yaitu sebesar  6,9mg/100  gram  biskuit  dengan  proporsi
tepung  terigu  50%,  HFF  20%,  PSF  20%,  dan  PFF 10%.  Penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  dengan substitusi tepung buah labu kuning dapat meningkatkan  kandungan  zat  besi  pada  produk biskuit. Tingginya kandungan zat besi produk biskuit pada perlakuan P3 disebabkan oleh substitusi tepung buah  labu  kuning  yang  lebih  tinggi  dibandingkan dengan  perlakuan  yang  lain.  Karena  buah  labu kuning  mengandung  zat  besi  sebesar  1,4mg/100 gram,  semakin  banyak  penambahan  tepung  buah labu kuning maka semakin tinggi kandungan zat besi pada biskuit yang dihasilkan. 26
Kebutuhan zat besi  balita umur 1-3 tahun per hari adalah  8  mg 27 ,  sehingga  kebutuhan  zat  besi  dari makanan  selingan  untuk  balita  1-3  tahun  adalah  0,8 mg  (10%  dari  kebutuhan  AKG  (Pedoman  Gizi Seimbang).  Dalam  setiap  1  keping  biskuit  dengan berat  kurang  lebih  5  gram  mengandung  zat  besi  P0 didapatkan  0,41  mg,  perlakuan  P1  didapatkan  0,35 mg, perlakuan P2 didapatkan 0,44 mg, dan perlakuan P3  didapatkan  0,68  mg.  Oleh  karena  itu,  kebutuhan zat besi balita  umur 1-3 tahun dapat dicapai  dengan konsumsi biskuit perlakuan P3 sebanyak 1-2 keping biskuit.
Balita  sangat  membutuhkan  vitamin  A  untuk kesehatan mata dan penglihatan, membantu memelihara  kulit  agar  tetap  sehat  dan  mencegah kuman  penyakit,  vitamin  A  berperan  penting  dalam regulasi sistem kekebalan tubuh, sehingga defisiensi vitamin  A  dapat  meningkatkan  kerentanan  terhadap infeksi. 28 Sumber  vitamin  A  pada  biskuit  sebagian besar  berasal  dari  tepung  labu  kuning  dengan  kadar 180,0 (SI)/100 gram. 29 Hasil penelitian pada tabel 2 menunjukkan bahwa vitamin  A  tertinggi  adalah  pada  perlakuan  P3  yaitu sebesar  85,33  mcg  dengan  proporsi  tepung  terigu 50%, HFF 10%, PSF 10%, dan PFF 30%, sedangkan kadar  vitamin  A  terendah  adalah  biskuit  pada perlakuan  P1  yaitu  sebesar  61,51  mcg  dengan proporsi tepung terigu 50%, HFF 20%, PSF 20%, dan PFF  10%.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  semakin banyak  proporsi  tepung  buah  labu  kuning  yang ditambahkan,  maka  semakin  meningkat  kadar vitamin A pada biskuit.  Meskipun demikian, secara statistik  kadar  vitamin  A  untuk  tiap-tiap  perlakuan formulasi  tidak  berbeda  nyata.  Hal  ini  dapat  terjadi salah satunya karena sensitivitas vitamin A terhadap suhu tinggi baik pada proses pembuatan tepung labu maupun biskuit.
Pengukuran  vitamin  A  pada  biskuit  juga dilakukan  oleh  Aini 22 dan  diperoleh  hasil  biskuit dengan kadar β-karoten (provitamin A) tertinggi yaitu 153,33  µg/100gram.  Kadar  β-karoten  dapat berkurang  dan  mengalami  kerusakan  karena  proses pengolahan.  Struktur  ikatan  rangkap  β-karoten mudah  teroksidasi  pada  proses  pemanasan  suhu tinggi. Pengolahan roti substitusi tepung labu kuning
dengan  proses  pemanggangan  pada  suhu  ±160⁰C selama 15 menit menurunkan kadar β-karoten sebesar 68,5%.  Jumlah  penurunan  semakin  besar  dengan peningkatan suhu dan waktu pemanggangan. 30 Hal ini yang  menyebabkan  total  karoten  pada  biskuit semakin tinggi seiring dengan meningkatnya proporsi tepung  labu  kuning.  Selain  itu,  karotenoid  banyak terkandung pada pangan nabati seperti buah dan sayur dan tetapi pada kacang hijau kadar karotennya hanya sedikit. 31
Hasil  penelitian  menunjukkan  perlakuan  P3 memiliki  kadar  vitamin  A  sebesar  85,33  mcg  dan kandungan  vitamin  A  lainnya  yaitu  perlakuan  P0 (61,51  mcg),  P1  (67,76  mcg),  serta  P2  (81,13  mcg) per 100 gram biskuit. Setiap 1 keping biskuit dengan berat  5  gram  mengandung  vitamin  A  sebesar    3,07 mcg  (P0),  3,38  mcg  (P1),  4,05  mcg  (P2),  dan  4,26 mcg  (P3),  sehingga  untuk  memenuhi  Pedoman  Gizi Seimbang  untuk  satu  kali  makanan  selingan  yaitu 10%  dari  kebutuhan  AKG  sebesar  40  mcg  dapat diperoleh dari sekitar 10-11 keping biskuit P3.
Secara  umum  daya  terima  warna  biskuit  yang disukai  oleh  panelis  yaitu  biskuit  P0  (3,56), sedangkan  daya  terima  warna  yang  kurang  disukai oleh panelis pada perlakuan P3 (2,60). Hal ini karena penambahan proporsi tepung buah labu kuning yang semakin  banyak,  sehingga  menyebabkan  kecerahan biskuit  semakin  pekat  dan  kurang  disukai  oleh panelis.
Pada formulasi P3 warna biskuit yang dihasilkan terlalu  pekat  hal  tersebut  karena  adanya  kandungan beta  karoten  buah  labu  kuning  sangat  tinggi  yaitu sebesar 180 SI. 32 Penggunaan labu kuning pada ketiga formula yaitu berbeda masing-masing 10%, 20% dan 30%.  Hasil  pengukuran  warna  pada  sampel  P1,  P2, dan  P3  menunjukkan  interprestasi  warna  masing- masing  adalah  kuning,  kuning,  dan  coklat  agak kuning.  Hal  ini  diduga  selain  pengaruh  dari  labu kuning, juga dipengaruhi karena banyaknya penggunaan tepung ikan haruan dan tepung biji labu kuning. Selain itu proses pemanggangan juga diduga menjadi  faktor  yang  mempengaruhi  atribut  warna sesuai  pernyataan  Koeswardhani  bahwa  tingkat warna kecoklatan pada produk makanan yang dioven mengalami  reaksi maillard atau  biasa  disebut browning . 33
Aroma  makanan  banyak  menentukan  kelezatan makanan tersebut. Oleh karena itu, aroma merupakan salah satu faktor dalam penentuan mutu, dalam hal ini aroma  makanan  lebih  banyak  sangkut  pautnya dengan alat panca indera pencium. Aroma yang khas dan  menarik  membuat  makanan  lebih  disukai konsumen  sehingga  perlu  diperhatikan  dalam pengolahan suatu bahan makanan.
Secara  umum  daya  terima  aroma  biskuit  yang disukai  oleh  panelis  yaitu    perlakuan  P0  (3,80), sedangkan  nilai  terendah  adalah  pada  perlakuan  P1
(2,44).  Persentase  subtitusi  tepung  ikan  yang  tinggi dapat menyebabkan aroma amis yang cukup tajam. 24 Aroma suatu produk terdeteksi ketika zat yang mudah menguap (volatile) dari produk tersebut terhirup dan diterima  oleh  sistem  penciuman.  Semakin  tinggi proporsi  tepung  ikan  gabus  menyebabkan  semakin rendah daya terima terhadap aroma, yang ditimbulkan  dari  aroma  khas  ikan  yang  amis. Pemakaian perisa ( flavoring ) dapat digunakan untuk mengurangi aroma amis. 34 Penelitian  ini  juga  menggunakan  bahan  pangan biji  dan  buah  labu  kuning  yang  dapat  menimbulkan aroma yang khas pada biskuit. Hal ini sesuai dengan penelitian 35 tentang penggunaan labu kuning sebagai sumber  antioksida  dan  pewarna  alami  pada  produk mie  basah  menyatakan  bahwa  tepung  labu  kuning memiliki aroma yang khas dan berbeda dengan aroma tepung  terigu.  Hal  ini  mengakibatkan  mie  yang dihasilkan memiliki aroma khas labu kuning.
Tekstur pada produk biskuit berhubungan dengan komposisi  dan  jenis  bahan  baku  yang  digunakan. Tepung  terigu  merupakan  komponen  utama  pada sebagian  besar  adonan  biskuit  memberikan  tekstur yang  elastis  karena  kandungan  glutennya  dan menyediakan tekstur padat setelah dipanggang.
Secara  umum  daya  terima  tekstur  biskuit  yang disukai  oleh  panelis  adalah  perlakuan  P1  (3,28), sedangkan  nilai  yang  terendah  adalah  perlakuan  P3 (2,68).  Biskuit  dengan  penambahan  tepung  labu kuning dan tepung ikan haruan yang semakin tinggi memiliki  tekstur  yang  kurang  sempurna,  tetapi 36 tepung labu kuning mempunyai kualitas tepung yang baik  karena  mempunyai  sifat  gelatinisasi  yang  baik, dengan  demikian  dapat  membentuk  adonan  dengan konsistensi, kekenyalan, viskositas maupun elastisitas  yang  baik.  Hal  tersebut  disebabkan  oleh minimnya kadar air yang rendah disebabkan oleh sifat higroskopis  pada  konsentrat  protein  ikan. 37 Pradipta dan Widya  menyatakan bahwa kadar air yang rendah membutuhkan  waktu  yang  lebih  lama  untuk menghasilkan  tekstur  biskuit  yang  sempurna. 38 Hal ini juga didukung oleh pendapat Suarni bahwa biskuit merupakan  sejenis  makanan  kering,  sehingga  kadar air sangat menentukan mutu dari biskuit oleh karena itu  kadar  air  perlu  dibatasi  5-10%,  karena  dapat mengakibatkan  tekstur  biskuit  kurang  renyah  jika melewati batas tersebut. 39 Rasa merupakan faktor kedua yang menentukan cita  rasa  makanan  setelah  penampilan  makanan  itu sendiri. Apabila penampilan makanan yang disajikan merangsang  saraf  melalui  indera  penglihatan sehingga  mampu  membangkitkan  selera  untuk mencicipi makanan itu, maka pada tahap berikutnya cita  rasa  makanan  itu  akan  ditentukan  oleh rangsangan  terhadap  indera  pencium  dan  indera pengecap. 31
Secara  umum  daya  terima  rasa  biskuit  yang disukai oleh panelis yaitu pada perlakuan P1 (3,20), sedangkan  daya  terima  rasa  yang  kurang  disukai panelis  adalah  perlakuan  P3  (2,56).  Tekstur  dan konsistensi bahan akan mempengaruhi cita rasa yang ditimbulkan  oleh  bahan  tersebut.  Perubahan  tekstur atau  viskositas  bahan  dapat  ditimbulkan  oleh  bahan tersebut  dapat  merubah  bau  dan  rasa  karena  dapat mempengaruhi  kecepatan  timbulnya  rangsangan terhadap sel reseptor olfaktori dari kelenjar air liur.
Pembuatan  biskuit  dengan  penambahan  tepung labu  kuning  dan  ikan  lele,  hasil  uji  daya  terima terhadap  rasa  menunjukkan  bahwa  rasa  biskuit dengan penambahan tepung labu kuning dan ikan lele 20% disukai oleh anak SD, karena rasanya manis dan gurih. 40 Kandungan  gula  tepung  labu  kuning  cukup tinggi,  yaitu  50,49%  dari  total  karbohidrat  sehingga tepung labu kuning dapat berperan dalam memberikan rasa manis pada produk olahannya. 36

## SIMPULAN
Proporsi  tepung  terigu,  tepung  ikan  haruan, tepung  biji  dan  buah  labu  kuning  tidak  memiliki pengaruh  terhadap  kadar  protein  dan  vitamin  A biskuit. Sementara itu, proporsi tepung terigu, tepung ikan haruan, tepung biji dan buah labu kuning terbukti memiliki pengaruh terhadap kadar seng, zat besi dan daya terima (warna, tekstur, rasa dan aroma) biskuit.
Terdapat  beberapa  saran  terkait  penelitian  ini yaitu  pada  penelitian  selanjutnya  yang  akan memproduksi  tepung  maupun  biskuit  secara komersial, perlu dilakukan  uji  umur simpan terlebih dahulu. Selain itu kemasan tepung labu dan biji labu sebaiknya  dipisah  supaya  kadar  vitamin  A  yang terkandung  dalam  tepung  labu  tidak  mudah  hilang dan  juga  kadar  lemak  dalam  tepung  biji  labu  tidak mudah teroksidasi.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Brown, J. E. Nutrition Through the Life Cycle. Wardworth: Cengage Learning. 2011.
2. Al-Rahmad  AH,  Miko  A,  Hadi  A.  Kajian stunting  pada  anak  balita  ditinjau  dari pemberian  ASI  eksklusif,  MPASI,  status imunisasi  dan  karakteristik  keluarga  di  Kota Banda  Aceh.  Jurnal  Kesehatan Ilmiah Nasuwakes, 2013; 6(2): 169-184.
3. Kementerian  Kesehatan  RI.  Buku  Saku Pemantauan  Status  Gizi  Tahun  2017. Jakarta: Kementrian Keseharan RI. 2018.
4. World  Health  Organization.  Stunted  Growth and Development. Geneva: WHO. 2017.
5. Aramico  B,  Sudargo  T,  Susilo  J.  Hubungan sosial ekonomi, pola asuh, pola makan dengan stunting  pada  siswa  sekolah  dasar  di
Kecamatan  Lut  Tawar  Kabupaten  Aceh Tengah.  Jurnal  Gizi  dan  Dietetik  Indonesia, 2013; 1(3): 121-130
6. UNICEF.  Improving  Child  Nutrition:  The achievable  imperative  for  global  progress.
New York: UNICEF. 2013.
7. Mikhail  WZA,  Sobhy  HM,  El-Sayed  HH, Khiry SA, Abu Salem HYH, Samy MA. Effect of  nutritional  status  on  the  growth  pattern  of stunted preschool children in Egypt. Academic Journal of Nutrition, 2013; 2(1); 1–9.
8. Suiraoka  IP,  Kusumajaya  AAN,  Larasari  N. Perbedaan konsumsi energi, protein, vitamin a dan  frekuensi  sakit  karena  infeksi  pada  anak balita status  gizi pendek (stunted) dan  normal di  Wilayah  Kerja  Puskesmas  Karangasem  I. Jurnal Ilmu Gizi, 2011; 2(1): 74-82. 9. Ekweagwu  E,  Agwu  AE,    Madukwe  E.  The role of micronutrients in child health: A review of the literature. African Journal of
Biotechnology, 2008; 7(21): 3804-10.
10. Almatsier  S,  Soetardjo  S,  Soekerti  M.  Gizi Seimbang  dalam  Daur  Kehidupan.  Jakarta: Gramedia. 2011.
11. Badan  Pusat  Statistik.  Konsumsi  Kalori  dan Protein  Penduduk  Indonesia  dan  Provinsi Berdasarkan  Hasil  Susenas  September  2016. Jakarta: BPS. 2017.
12. Sundari  E,  Nuryanto,  N.  Hubungan  asupan protein,  seng,  zat  besi,  dan  riwayat  penyakit infeksi  dengan  Z-Score  TB/U  pada  balita. Journal of Nutrition College, 2016; 5(4): 520- 9 .
13. Bahmat,  DO,  Bahar,  H.,  Jus’at,  I.  (2010). Hubungan Asupan Seng, Vitamin A, Zat Besi dan  Kejadian  Pada  Balita  (24-59  Bulan)  Dan Kejadian Stunting Di  Kepulauan  Nusa Tenggara  (Riskesdas  2010).  Nusa  Tenggara: Departement  of  Nutrition  Faculty  of  Healthy Science Esa Unggul University.
14. Laila  L,  Febriyenti  F,  Salhimi  SM,  Baie  S. Wound  healing  effect  of  Haruan  (Channa striatus)  spray.  International  Wound  Journal, 2011; 8(5): 484–91.
15. Ahmad,  I. Pengaruh penambahan tepung  labu kuning (cucurbita moschata) dan tepung terigu terhadap  pembuatan  biskuit.  Universitas Hasanuddin Makassar. Skripsi. 2012.
16. Kim MY, Kim EJ, Kim YN, Choi C, Lee BH. Comparison of the chemical compositions and nutritive values of various pumpkin ( cucurbitaceae )  species  and  parts.  Nutrition Research And Practice, 2012; 6(1): 21-7.
17. Kamsiati E. Peluang pengembangan teknologi pengolahan keripik buah dengan menggunakan penggorengan  vakum.  Jurnal  Penelitian  dan Pengembangan Pertanian, 2010; 29(2): 73-7.
18. Priyono  E,  Ninsix  R,  Apriyanto  M.  Studi pencampuran labu kuning (cucurbita moschata)  dengan  tepung  beras  terhadap karakteristik  biskuit  yang  dihasilkan.  Jurnal Teknologi Pertanian, 2018; 7(1): 8-20.
19. Gibson,  RS.  Zinc:  the  missing  link  in combating micronutrien malnutrition in developing  countries.  Proceedings  of    The Nutrion Society. 2006; 65(1): 51-60.
20. Adriani  M.  Wirjatmadi  .Peranan  Gizi  dalam Siklus  Kehidupan.  Jakarta:  Kencana  Prenada media Group. 2014. p. 112.
21. Syafitri  D.  Pengaruh  subsitusi  tepung  ampas tahu  pada  kue  ulat  sutra  terhadap  kualitas organoleptik  dan  kandungan  gizi.  Universitas Negeri Semarang.Skripsi. 2009.
22. Aini    NQ,  Wirawani  Y.  Kontribusi  MPASI biskuit  substitusi  tepung  garut,  kedelai,  ubi jalar  kuning  terhadap  kecukupan  protein, vitamin A, kalsium dan zink pada biskuit bayi. Journal of Nutrition College, 2013; 2(4): 458- 66.
23. Afify  AEMR,  El-Betagi  HS,  El  Salam  SMA, Omran  AA.  Biochemical  changes  in  phenols, flavonoids, taninns, vitamin E, β - caroten and antioxidant  activity  during  soaking  of  three white sorghum varieties. Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine, 2012; 2(3), 203-9.
24. Diska A.S. Pengembangan cookies dari tepung labu  kuning,  tepung  biji  labu  kuning,  tepung beras,  dan  tepung oncom hitam  yang mengandung  omega-3.  Institut  Pertanian Bogor. Skripsi. 2018
25. Gropper  S,  Smith  JL,  Groft  JL.  Advanced Nutrition  and  Human  Metabolism,  Fifth Edition. USA: Wadsworth. 2009.
26. Kementerian    Kesehatan  RI.  Pedoman  Gizi Seimbang. Jakarta : Kementrian Kesehatan RI. 2014. p.1-4.
27. Kementerian Kesehatan RI. Angka Kecukupan Konsumsi  Protein  dan  Serat  Perhari.  Jakarta: Kementrian Kesehatan RI. 2013.
28. Azrimaidaliza.  Vitamin  A,  imunitas  dan kaitannya  dengan  penyakit  infeksi.  Jurnal Kesehatan  Masyarakat  Andalas,  2007;  1(2): 90-6.
29. Sudarto,  Y.  Budidaya  Waluh.  Yogyakarta: Kanisius. 2000.
30. Ilyas  S.  Kemungkinan  Membuat  Makanan dengan  Kadar  Protein  Ikan  Tinggi.  Badan Penelitian  dan  Pengembangan  Pertanian. Jakarta: Departemen Pertanian. 2001.
31. Gardjito  M.  Pangan  Nusantara:  Karakteristik dan  Prospek  untuk  Percepatan  Diversitifikasi Pangan.  Jakarta:  Kencana  Perdana  Media Group. 2013. p.320-55.
32. Dewey  KG,  Brown  KH.  Update  on  technical issues  concerning  complementary  feeding  of young  children  in  developing  countries  and implications  for  intervention  programs.  Food and Nutrition Bulletin, 2003; 24(1): 5-28.
33. Food and Agriculture Organization. Guidelines on Formulated Complementary Food for Older Infants  and  Young  Children.  In  Codex Alimentarius Commission. Roma. 2010
34. Winarno FG. Kimia Pangan dan Gizi. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama. 2008.
35. Elvizahro  L.  Kontribusi  MP-ASI  bubur  bayi instan  dengan  subtitusi  tepung  ikan  patin  dan tepung  labu  kuning  terhadap  kecukupan protein  dan  vitamin  A  pada  bayi.  Universitas Diponerogo. Skripsi. 2011.
36. Rahmi  SL,  Indriyani,  Suharini.  Penggunaan buah  labu  kuning  sebagai  sumber  antioksida dan  pewarna  alami  pada  produk  mie  basah.
Jurnal Penelitian Universitas Jambi Seri Sains, 2011; 13(2): 29-36.
37. Meilgaard  M,  Civille  GV,  and  Carr  BT. Sensory Evaluation Techniques Fourth
Edition. USA: CRC Press. 2006.
38. Pradipta  IBYV  dan  Widya  DWP.  Pengaruh proporsi tepung terigu dan tepung kacang hijau serta  subtitusi  dengan  tepung  bekatul  dalam biskuit. Jurnal Pangan dan Agroindustri, 2015; 3(3): 793-802.
39. Suarni.  Prospek  pemanfaatan  tepung  jagung untuk  kue  kering  (cookies).  Jurnal  Penelitian dan Pengembangan Pertanian, 2009; 28(2): 63 -71.
40. Rohimah  I,  Sudaryati E, Nasution E. Analisis energi dan protein serta uji daya terima biskuit tepung  labu  kuning  dan  ikan  lele.  Universitas Sumatera Utara. Skripsi. 2012.