http://ojs.serambimekkah.ac.id/index.php/sjat Vol. 2  No. 2 Thn. 2020                                                                                                    E-ISSN: 2684-9879

## S J A T
Analysis of Coliform and Colifecal Total Pollution Test on Various Types of Drinking Water Using the MPN (Most Probable Number) Method
Wanda Aulya 1) , Fadhliani 1) , Vivi Mardina 1)
1 Program Studi Biologi, Fakultas Teknik, Universitas Samudra, Jl. Prof.Syarief Thayeb, Meurandeh, Langsa Lama, Kota Langsa, Aceh, Indonesia 24416
*email: vmardina@unsam.ac.id

## Article Info
Article history: Received : 11/25/2020
Received in revised: 11/26/2020
Accepted:
12/05/2020

## Abstract
Water is a renewable natural resource whose existence is very much needed by the life of living things because water is the main source for life. Water is also the most severe substance caused by pollution. The mandatory parameters for determining microbiological quality of drinking  water  are  total  non-fecal  Coliform  bacteria  and  Coliform fecal  (Escherichia  coli).  Coliform bacteria are  a  group  of microorganisms  commonly  used  as indicators,  where these  bacteria can  be  a  signal  to  determine  whether  a  water  source  has  been contaminated  by  bacteria  or  not,  while  fecal  Coliform  bacteria  are indicator  bacteria  polluting  pathogenic  bacteria  originating  from human  feces  and  warm-blooded  animals  (mammals)  .  The  water inspection  method  in  this  study  uses  the  MPN  (Most  Probable Number) method which consists of 3 tests, namely, the presumption test,  the  affirmation  test,  and  the  reinforcement  test.  The  results showed  that  of  15  drinking  water  samples  8  samples  were  tested positive for Coliform bacteria with the highest total bacterial value of sample  number  1,  15  (210/100  ml),  while  7  other  samples  were negative. From 8 positive Coliform samples only 1 sample was stated to  be  negative  fecal  Coliform  bacteria  and  7  other  samples  were positive  for  Coliform  fecal  bacteria  with  the  highest  total  bacterial value of sample number 1 (210/100 ml).
Keywords: Water, Coliform non-fecal, Coliform fecal (Escherichia coli)

## Abstrak
Abstrak Air  merupakan  sumber  utama  kehidupan  yang  mudah  mengalami  pencemaran.  Parameter wajib penentuan kualitas air minum secara mikrobiologi adalah total bakteri Coliform non-fecal dan Coliform fecal (Escherichia coli). Bakteri Coliform merupakan golongan mikroorganisme yang lazim digunakan sebagai indikator, dimana bakteri ini dapat menjadi sinyal untuk menentukan suatu sumber air  telah  terkontaminasi  oleh  bakteri  atau  tidak  sedangkan  bakteri  Coliform  fecal  adalah  bakteri indikator  pencemar  bakteri  patogen  yang  berasal  dari  tinja  manusia  dan  hewan  berdarah  panas (mamalia).  Metode  pemeriksaan  air  pada  penelitian ini  menggunakan  metode MPN  (Most  Probable Number) yang terdiri dari 3 pengujian yaitu, uji praduga, uji penegas, dan uji penguat. Hasil penelitian menunjukkan  dari  15  sampel  air  minum  8  sampel  air  minum  dinyatakan  positif  tercemar  bakteri Coliform dengan nilai total bakteri tertinggi sampel nomor 1, 15 (210/100 ml), sedangkan 7 sampel lainnya negatif. Dari 8 sampel positif Coliform hanya 1 sampel dinyatakan negatif bakteri Coliform fecal  dan  7 sampel  lainnya  positif bakteri  Coliform fecal  dengan  nilai  total  bakteri tertinggi  sampel nomor 1 (210/100 ml).
Kata kunci : Air minum, Coliform non-fecal, Coliform fecal (Escherichia coli)

## PENDAHULUAN
Air sebagai penyusun tubuh organisme  (75%  dan  68%  pada  sel tumbuhan  dan  hewan)  merupakan  media pelarut senyawa organik, tempat berlangsungnya reaksi biokimia dan berfungsi memoderasi suhu tubuh (Campbell, 2002). Agrippina (2019) meyatakan  bahwa  keadaan  tubuh  4-5  hari tanpa  asupan  air  dipastikan  tidak  mampu bertahan hidup karena air berperan penting pada proses metabolisme tubuh.
Kebutuhan  asupan  air  khususnya  air minum  untuk  masyarakat  luas  mendorong berkembangnya  industri  depot  air  minum isi  ulang  seperti  di  wilayah  Medan.  Depot air  minum  adalah  industri  kecil  yang mengolah air baku menjadi air minum dan menjualnya  langsung  kepada  pembeli dengan  kemasan  berupa  galon  (Afif et  al ., 2015). Kehadiran depot air minum isi ulang merupakan wujud aplikasi masyarakat sehat karena
memudahkan
masyarakat memperoleh  air  minum  yang  murah  dan layak untuk diminum (Yunus, 2017).
Menurut Afif et al ., (2015) air minum yang  aman  adalah  air  bersih  yang memenuhi  syarat  fisika,  kimia,  radioaktif dan  mikrobiologi  sebagaimana  tetapan pemerintah. Secara mikrobiologi, syarat air minum  yang  layak  dikonsumsi  adalah  air yang  bebas  dari Escherichia  Coli (tidak ditemukan E.coli pada  100  mL 3 ).  Hal  ini didukung oleh peraturan nomor
492/MENKES/PER/IV/2010 yang
menyebutkan bahwa air minum tidak boleh mengandung  bakteri  patogen.  Nutrisionis Oetoro (2010) mencirikan air minum  yang aman memiliki karakteristik tidak berwarna, berbau, berasa, serta bebas logam berat dan bakteri.
Kualitas air minum isi ulang dijamin dengan  kewajiban  pihak  industri  kecil untuk menguji kualitas produknya
(diutamakan uji mikrobiologis) di Laboratorium  yang  ditunjuk  pemerintah sekurang-kurangnya dalam 6 (enam) bulan sekali  (Afif, et  al .,  (2015).  Pengujian mikrobiologi  diutamakan  menguji  kadar fecal  coliform dan coliform  non-fecal di dalam  air  menggunakan  metode Most Probable  Number (MPN).  Metode  MPN ditujukan  untuk  melakukan  pemeriksaan kualitatif dan kuantitatif mikroba golongan coliform .  MPN  terdiri  atas  4  tahap  (a)  tes perkiraan ( presumtive test ), (b) tes penegasan  ( confirmative  test ),  (c)  tes pelengkap  ( completed  test ),  dan  (d)  tes identifikasi  ( identification  test )  berupa pewarnaan gram.
Sehubungan  dengan  hal  itu,  maka perlu  dilakukan  pemeriksaan  laboratorium uji  kandungan  bakteriologis coliform  non- fecal dan coliform fecal pada beberapa jenis air minum di wilayah Medan sebagai upaya pencegahan  penyakit  dan  meningkatkan sanitasi kebersihan.

## METODE PENELITIAN
Pengujian  ini  menggunakan  bahan utama  sampel  air  minum  dari  depot  air minum  isi  ulang  di  wilayah  Medan  Bahan pendukung  lain  adalah  iodium,  safranin, kristal violet, alkohol 96%, minyak emersi, LB ( Lactose Broth ), BGLB ( Brilliant Green Lactose Broth ), EMBA ( Eosin Metilen Blue Agar ), aquades, spiritus, dan kapas. Metode pengujian  yang  digunakan  adalah  metode MPN  dengan  prosedur  kerja  sebagai berikut:
a. Sterilisasi Alat
Seluruh peralatan dan medium pertumbuhan mikroba yang akan digunakan disterilkan  dengan  autoklaf  (121 o C  ,  1 ATM) selama 15 menit.
b. Penyiapan Media
Media  yang  digunakan  pada  pengujian ini  adalah Media Lactose  Broth (LB) , Media Brilliant  Green  Lactose  Broth (BGLB) , Media Eosin Methylene Blue Agar (EMBA). Masing-masing media ditimbang sesuai  takaran  yang  tertera  pada  botol media.

## c. Teknik Pemeriksaan Air Minum
Metode MPN dilakukan untuk
pemeriksaan  kualitas  air  minum  secara bakteriologis yang terdiri dari:
1. Uji Praduga ( Presumtive test )
Media Lactose  Broth disiapkan  dengan ragam seri 3-3-3 yang masing-masing diisi sample  air  minum  10ml,  1ml,  dan  0,1ml. Selanjutnya  diinkubasi  dengan  suhu  37 0 C selama 2x24 jam.
2. Uji Penegas ( Confirmative test )
Sample  air  minum  pada  media Lactose Broth positif  dilanjutkan  tanam  ke  media Brilliant Green Lactose Broth mengunakan jarum  ose sebanyak  2  seri.  Selanjutnya diinkubasi 1 seri dengan suhu 37 0 C selama 24  jam  untuk non-fecal sedangkan  1  seri diinkubasi  pada  suhu  40 0 C  selama  24  jam untuk fecal .
3. Uji Penguat ( Complete test )
Sample  positif  pada  media Brilliant Green  Lactose  Broth ditanam  ke  media Eosin  Methylene  Blue  Agar menggunakan jarum  ose  secara  zig-zag  sebanyak  2  seri. Kemudian diinkubasi 1 seri pada suhu 37 0 C selama 24 jam dan 1 seri diinkubasi dengan suhu  44 0 C  selama  24  jam.  Amati pertumbuhan koloni pada permukaan media Eosin Methylene Blue Agar.
4. Pewarnaan Gram
Diambil  1  koloni  yang  terpisah  dari permukaan  media Eosin  Methylene  Blue Agar kemudian disuspensikan di atas objek glass dan difiksasi di atas bunsen 3-4 kali. Selanjutnya  setelah  dingin  ditetesi  larutan gentien  violet  2-3  tetes  selama  1  menit,
dibilas dengan air, ditetesi kembali dengan larutan  Iodine  2-3  tetes,  dan  diamkan selama 1 menit. Dicuci dengan alkohol 96% hingga  warna  violet  menghilang,  segera dibilas  kembali  dengan  air,  tetesi  dengan larutan  safranin  2-3  tetes,  diamkan  selama 30  detik,  dibilas  kembali  dengan  air. Selanjutnya  dibiarkan  preparat  hingga mengering.
Untuk memperjelas pengamatan pada perbesaran lensa objektif 100x, emersi oil digunakan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
1. Uji Praduga ( Presumtive test )
Presumtive  test digunakan  untuk mengetahui  hadirnya  bakteri Coliform dalam sampel air minum. Sampel difermentasikan  pada  media  LB  tabung ragam  seri  3-3-3.  Data  hasil  penelitian terhadap  15  sampel  air  minum  pada  uji praduga  disajikan  pada  Tabel  1  dan dokumentasi dapat dilihat pada Gambar 1.
Tabel 1. Hasil Uji Praduga ( Presumtive Test )
Kode
Sample Jumlah Tabung Keterang an 3 x 10ml 3 x 1ml 3 x 0,1ml 1 3 3 3 Positif 2 2 1 1 Positif 3 0 0 0 Negatif 4 0 0 0 Negatif 5 3 2 1 Positif 6 0 0 0 Negatif 7 0 0 0 Negatif 8 2 1 0 Positif 9 0 0 0 Negatif 10 3 0 0 Positif 11 3 3 3 Positif 12 1 0 0 Positif 13 0 0 0 Negatif 14 0 0 0 Negatif 15 3 3 3 Positif
Keterangan: angka di dalam tabel menunjukan jumlah tabung durham  positif uji praduga (terdapat gelembung gas).
Gambar  1.  Hasil  positif  uji  praduga tercemar bakteri Coliform
2. Uji Penegas ( Confirmative Test )
Hasil positif ditandai dengan
terbentuknya    gelembung  udara  di  dalam tabung durham (Gambar 2). Hasil
confirmative test yang diperoleh pada suhu
37 0 C disajikan dalam Tabel 2 dan pada suhu 44 0 C tertera pada Tabel 3 sebagai berikut:
Tabel 2 Hasil Uji Penegas ( Confirmative Test ) BGLB Suhu 37 o C Kode Sample Coliform BGLG suhu 37 o C Indeks MPN/100ml Keterangan 10ml  1ml 0,1ml 1 3 2 2 210 Positif Coliform 2 2 1 0 15 Positif Coliform 5 2 0 1 14 Positif Coliform 8 0 0 0 < 3 Negatif Coliform 10 3 0 0 23 Positif Coliform 11 2 2 1 28 Positif Coliform 12 3 0 0 23 Positif Coliform 15 3 2 2 210 Positif Coliform
Terdapat gelembung udara Terdapat gelembung udara Terdapat gelembung udara
Tabel 3 Hasil Uji Penegas ( Confirmative Test ) BGLB Suhu 44 o C Kode
Sample Coliform BGLG suhu 37 o C Indeks MPN/100ml Keterangan 10ml 1ml 0,1ml 1 3 2 2 210 Positif Colifecal 2 2 1 0 15 Positif Colifecal 5 2 0 0 9 Positif Colifecal 8 0 0 0 < 3 Negatif Colifecal 10 3 0 0 23 Positif Colifecal 11 2 2 1 28 Positif Colifecal 12 0 0 0 < 3 Negatif Colifecal 15 3 1 0 43 Positif Colifecal
3. Uji Penguat ( Complete Test )
Complete  test dinyatakan  positif  jika ditemukan  koloni  berwarna  hijau  dengan kilap  logam  (metalik).  Hasil  pertumbuhan koloni ditampilkan pada Gambar 3.
(A)
(B)
Gambar 3 (a) Media EMBA pada 37 o C, dan (b) Media EMBA pada 44 o C

## 4. Pewarnaan Gram
Uji  selanjutnya  adalah  pewarnaan gram,  bertujuan  untuk  membedakan antara  bakteri  Gram  positif  dan  Gram negatif, dapat dilihat pada Gambar 4.
Gambar 4. Hasil uji pewarnaan gram perbesaran 100x

## PEMBAHASAN
Metode  MPN  terdiri  dari  4  tahapan dalam  pengujian  bakteriologis  pada  suatu bahan  makanan  atau  minuman.    Tahapan pertama  pada  metode  ini  ialah presumtive test. Test  awal  ini  digunakan  untuk menganalisis  hadirnya  bakteri Coliform dalam  sampel  air  minum.  Sampel  yang
difermentasikan  pada  media  LB  tabung ragam  seri  3-3-3  menunjukkan  hasil  pada tabel 4.  Berdasarkan data uji praduga dari 15  sampel  pada  tabel  4,  terdapat  8  sampel (53,3%)  yang  dinyatakan  positif  telah tercemar  bakteri Coliform dan  7  sampel lainnya  negatif  (46,7%).  Hadirnya  bakteri Coliform pada  suatu  sampel  ditandai dengan  terbentuknya  gas  dan  perubahan warna  media  LB  menjadi  kuning  keruh pada tabung durham (Gambar 1).
Greenberg et al . (1992) menjelaskan bahwa adanya  gas  dan  asam  karena  enzim α-D- Glucosidase yang  dihasilkan  oleh bakteri Coliform .  Enzim  ini  berfungsi  sebagai katalisator hidrolisa laktosa membentuk gas dan  asam  atau  aldehid.  Adapun  perubahan warna  medium  LB  disebabkan  kandungan laktosa  pada  medium  difermentasikan menjadi  alkohol  dan  membentuk  asam karboksilat.  Asam  karboksilat  ini  yang membuat  medium  berwarna  kuning  dan terlihat  keruh (Widiyanti, 2004).  Beberapa jenis  bakteri  yang  mampu  memfermentasi laktosa adalah Escherichia coli ,
Clostridium  Klebsiella , Streptococus ,  dan Aerobacter , (Kartini, 2019).
Uji  selanjutnya  adalah  uji  penegasan dengan  menggunakan  media Brilliant Green  Lactose  Broth (BGLB).  Uji  ini bertujuan untuk mengevaluasi/ menentukan/memperkuat  hasil  positif  dari uji praduga bahwa perubahan warna dan gas yang terbentuk benar disebabkan fermentasi laktosa oleh bakteri Coliform . Pemeriksaan dilakukan  dengan  menginokulasi  seluruh hasil positif sampel pada media BGLB, lalu diinkubasikan  selama  24  jam  dengan  dua seri, yaitui pada suhu 37 0 C dan suhu 44 0 C. Berdasarkan  hasil confirmative  test (Tabel 2) pada suhu 37 0 C menunjukkan sampel air positif  bakteri Coliform yang  ditandai dengan  terjadi  pembentukan  gelembung udara  pada  media Brilliant  Green  Lactose
Broth (BGLB).  Hasil  tersebut  kemudian dikonversikan  dengan  tabel  MPN  ( Most Probable  Number )  yang  menggunakan ragam  seri  3:3:3  (Lampiran.  1).  Hasil  dari nilai  indeks  MPN  adalah  jumlah  total bakteri Coliform yang ada di dalam 100 ml sampel air minum.
Nilai  indeks  MPN  dari  yang  paling rendah  sampai  yang  tertinggi  pada  sampel air  minum  berturut-turut  adalah  sampel nomor  8  (<  3/100  ml),  sampel  nomor  5 (14/100 ml), sampel nomor 2 (15/100 ml), sampel  nomor  10,  12  (23/100  ml),  sampel nomor 11 (28/100 ml) dan sampel nomor 1, 15  (210/100  ml).  Berdasarkan  Surat Keputusan Dirjen POM Nomor : 037267/B/SK/VII/89  (Tabel  4.2)  bahwa batas  cemaran  MPN Coliform per  ml sampel  adalah  <  3.  Nilai  indeks  MPN  ini menunjukkan  bahwa  hanya  1  sampel  air minum  yang  diteliti  memenuhi  standar mutu  yang  dikeluarkan  oleh  Dirjen  POM dan  7  sampel  lainnya  yang  diteliti  tidak memenuhi  standar  mutu  yang  dikeluarkan oleh  Dirjen  POM.  Namun,  dari  8  sampel yang diuji tersebut hanya memenuhi standar mutu tidak masuk dalam rentang aman yang dipersyaratkan  oleh  Standar  Nasional Indonesia  (SNI)  7388  tahun  2009  yang menyebutkan  bahwa  syarat-syarat  uji cemaran  secara  mikrobiologi Coliform untuk air minum adalah < 2/100 ml (Badan Standardisasi Nasional, 2009).
Hasil confirmative test (Tabel 3) pada media  BGLB  di  suhu  44 0 C  menunjukkan dari  8  sampel  positif  bakteri,  hanya  2 sampel negatif bakteri Coliform fecal dan 6 sampel air minum  lainnya positif tercemar bakteri Coliform  fecal dan  hasil  tersebut kemudian dikonversikan dengan tabel MPN (Most Probable Number) yang menggunakan  ragam  seri  3-3-3.  Hasil  dari nilai  indeks  MPN  adalah  jumlah  total bakteri Coliform  fecal yang  ada  di  dalam
100  ml  sampel  air  minum.  Nilai  indeks MPN dari yang paling rendah sampai yang tertinggi  pada  sampel  air  minum  berturut- turut  adalah  sampel  nomor  8,  12  (<  3/100 ml),  sampel  nomor  5  (9/100  ml),  sampel nomor  2  (15/100  ml),  sampel  nomor  10 (23/100 ml), sampel nomor 11 (28/100 ml), sampel  nomor  15  (43/100  ml)  dan  sampel nomor  1  (210/100  ml).  Artinya  dari  8 sampel  air  minum  tersebut  memilliki kualitas  mikrobiologis  buruk  dan  tidak aman  untuk  dikonsumsi/digunakan  karena sudah  positif  tercemar  bakteri Coliform non-fecal maupun Coliform fecal .
Uji  yang  terakhir  yaitu complete  test yang bertujuan untuk mengetahui hadirnya E. coli pada  sampel  dengan  menggunakan media Eosin Methylen Blue Agar (EMBA). Pemeriksaan  bakteri Escherichia  coli dilakukan  dengan  menginokulasi  sampel yang  telah  ditanam  dalam  media  uji konfirmasi,  pada  medium  selektif  yaitu, Eosin  Methylen  Blue  Agar (EMBA). Medium  ini  bersifat selektif  dalam menumbuhkan E.  coli karena  dalam medium  ini mengandung eosin  yang  dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri  gram positif  dan  hanya  dapat  menumbuhkan bakteri gram negatif. Bila biakan terdapat E. coli maka  asam  yang  dihasilkan  dari fermentasi akan menghasilkan warna koloni yang spesifik untuk bakteri Escherichia coli yaitu  koloni  yang  berwarna  hijau  dengan kilap logam.
Adapun  mekanisme  penampakan warna  tersebut  adalah  adanya  eosin  dalam medium tersebut berfluoresensi atau memancarkan cahaya sehingga
menghasilkan kilap logam atau metalik, dan terjadi  reaksi  antara methylen  blue dan bakteri E.  coli yang  ada  pada  medium  LB sehingga  warna  kuning  berubah  menjadi warna hijau metalik (Aulia, 2013).
Hasil  uji  penguat  bakteri Coliform fecal yang  terlihat  pada  media  EMBA menunjukkan  bahwa  koloni  yang  tumbuh bukan  merupakan  koloni  dari  bakteri Escherichia coli namun  dari golongan coli lainnya,  artinya  salah  satu  sampel  yang telah  diinokulasikan  pada  media  EMBA negatif  adanya  bakteri Escherichia  coli karena  koloni  yang  tumbuh  pada  media Eosine  Methylene  Blue  Agar (EMBA) berwarna merah muda pada suhu 37 0 C dan koloni  berwarna    hitam  di  suhu  44 0 C. Menurut Cappuccino & Natalie (2002) ciri- ciri  bakteri Coliform  fecal yang  tumbuh pada medium Eosine Methylene Blue Agar
(EMBA) berwarna hijau metalik.
Berdasarkan hasil uji bakteri Coliform fecal yang  telah  dijelaskan  diatas  sesuai  dengan yang  dikemukakan  Ni  Putu  dan  Ni  Luh (2004),  bahwa  koloni  bakteri  golongan Coliform fecal yang tumbuh pada medium Eosine  Methylene  Blue  Agar (EMBA) berwarna  kehijauan,  biru  ungu,  kehijauan dengan  kilap  metal  atau  hijau  metalik  dan bakteri  golongan Coliform  non-fecal , berwarna lain.
Berdasarkan peraturan Kepala Badan Pengawasan Obat dan Makanan nomor HK 00.06.1.52.4011  batas  maximum  MPN
Escherichia  coli <  3  CFU/ml.  Fardiaz (1993)  menyebutkan  bahwa E.  coli termasuk  golongan Coliform dan  secara normal  hidup  di  dalam  usus  besar  dan kotoran  manusia  dan  hewan  sehingga digunakan  secara  luas  sebagai  indikator pencemaran.
Escherichia coli adalah bakteri Gram negatif,  berbentuk  batang  dan  tidak membentuk  spora.  Sel Escherichia  coli memiliki  ukuran  panjang  2,0–6,0  μm, tersusun  tunggal  berpasangan. Escherichia coli tumbuh  pada  suhu  10–40 0 C  dengan suhu optimum 37 0 C. Hasil pewarnaan Gram pada  salah  satu  sampel  positif  bakteri
Coliform  yaitu  memiliki  ciri-ciri  koloni sebagai  berikut:  berbentuk  batang  (basil), bewarna  kemerahan  untuk  menentukan spesies bakteri batang Gram negatif.

## KESIMPULAN
Hasil  uji  pemeriksaan  cemaran bakteri diketahui bahwa dari 15 sampel air minum  yang  dinyatakan  positif  tercemar bakteri  Coliform  berjumlah  8  sampel (53,3%),  dan  7  (46,7%)  sampel  lainnya dinyatakan negatif.
Nilai  indeks  MPN  (jumlah  total bakteri Coliform) dalam 100 ml sampel air minum  yang  paling  rendah  sampai  yang tertinggi  berturut-turut  adalah  sampel nomor  8  (<  3/100  ml),  sampel  nomor  5 (14/100 ml), sampel nomor 2 (15/100 ml), sampel  nomor  10,  12  (23/100  ml),  sampel nomor 11 (28/100 ml) dan sampel nomor 1, 15 (210/100 ml).
Nilai  indeks  MPN  (jumlah  total bakteri  Coliform  fecal)  dalam  100  ml sampel air minum dari  yang paling rendah sampai yang tertinggi berturut-turut adalah sampel  nomor  8,  12  (<  3/100  ml),  sampel nomor  5  (9/100  ml),  sampel  nomor  2 (15/100 ml), sampel nomor 10 (23/100 ml), sampel  nomor  11  (28/100  ml),  sampel nomor 15 (43/100 ml) dan sampel nomor 1 (210/100 ml).
Bakteri  Coliform  yang  ditemukan memiliki  ciri-ciri  koloni  yaitu:  berbentuk batang  (basil),  bewarna  kemerahan,  dan spesies bakteri gram negatif.

## DAFTAR RUJUKAN
Afif F, Erly, Endrinaldi. (2015). Identifikasi Bakteri  Escherichia  Coli  pada  Air Minum  Isi  Ulang  yang  Diproduksi Depot  Air  Minum  Isi  Ulang  di Kecamatan  Padang  Selatan.  Jurnal Kesehatan Andalas. 4(2): 377 – 380.
Agrippina F.D. (2019). Identifikasi Coliform  Dan  Escherichia  Coli  Pada Air Minum Dalam Kemasan
(AMDK)  Di  Bandar  Lampung. Majalah  Teknologi  Agro  Industri
(Tegi), 11 (2): 54 – 57.
Aulia,  F.N.  (2013).  Analisis  Keberadaan Mikroba  pada  Air  Baku  PDAM Kabupaten  Situbondo.  Universitas Jember: Tugas Akhir.
Badan  Standardisasi  Nasional.  (2009). Batas  Maksimum  Cemaran  Mikroba dalam  Pangan  Standar  Nasional Indonesia (SNI) 7388.
BPOM. RI. (2008). Pengujian Mikrobiologi Pangan,  Pusat  Pengujian  Obat  Dan Makanan Badan Pengawas Obat Dan Makanan Republik Indonesia.
Cappuccino,  J.G  &  N.  Sherman.  (2002). Microbiology  a  Laboratory  Manual.
Menlo Park Califfornia, The
Benjamin/Cummings Publishing Company, Inc., C.
Danial, Prima Rizky. (2011). Uji Kelayakan Sumber  Mata  Air  Sungai  Tanggi Sebagai  Air  Bersih.  Skripsi,  Jurusan Kesehatan Masyarakat Fakultas Ilmu- ilmu Kesehatan dan Keolahragaan.
Departemen Kesehatan RI. 2010. Peraturan Menteri  Kesehatan  No.  492  Tahun 2010 tentang Persyaratan Kualitas Air Minum.
Greenberg AE, Clesceri LS and Eaton AD. 1992.  Standar  Methods  For  The
Examination Of Water And Wastewater, Washington DC,
American Public Health Association, American  Water  Works  Association & Water Environment Federation.
Kartini,  Sri.  (2019).  Analisis  Cemaran Coliform,  Colifecal  dan  Salmonella typhi  Pada  Makanan  Jajanan  di
Sekolah  Dasar  Kecamatan  Tampan
Pekanbaru. JOPS (Journal of Pharmacy and Science). Vol. 3(1): 1-
9.
Ni  Putu,  R.,  et.all.  (2004).  Analisis
Kualitatif  Bakteri  Koliform  Pada Depo  Air  Minum  Isi  Ulang  Di  Kota Singaraja Bali. Jurnal Ekologi Kesehatan . Vol. 3(1):64-73.
Peraturan  Menteri  Kesehatan  RI  No,
492/MENKES/PER/IV/2010  tentang
Persyaratan  Kualitas  Air  Minum, Departemen Kesehatan RI, 2010.
Widiyanti,  R.  (2004).  Analisis  Kualitatif Bakteri  Coliform  Pada  Depot  air Minum  Isi  ulang  Di  Singaraja  Bali. Jurnal Ekologi Kesehatan . Vol 3(1).
Yunus,  Reni.  (2017).  Analisis  Bakteri
Coliform  Pada  Air  Minum  Isi  Ulang di  Wilayah  Poasia  Kota  Kendari. Jurnal Teknologi Kesehatan .
13(2):71-76.