## Uji Efektifitas Daya Hambat Sabun Cair Cuci Tangan di Kota Surabaya Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherechia Coli secara in Vitro
Ira Purbosari* 1
1 Program Studi Farmasi, Fakultas Sains dan Kesehatan, Universitas PGRI Adi Buana Surabaya, Indonesia
*E-mail: ira_purbosari@unipasby.ac.id

## ABSTRACT
Currently, the rise of the corona disease (Covid-19) has become a worldwide pandemic which has been declared by Who to be the center of attention around the world. One of the prevention efforts is to wear a mask and wash hands. Hand washing is done by using liquid soap and rinsing with soapy water. The degree of acidity (pH) of soap serves to inhibit the growth rate and kill bacteria. This research is to see the antibacterial activity of unbranded and branded liquid soap products and have distribution permits that are traded freely in the marketplace. Using the disc diffusion technique method, the zone of inhibition is  determined.  In  this  study,  a  positive  control  was  used,  namely  liquid  soap  that  already  had  a  distribution  permit  and  a negative  control  in  the form  of  aquadest.  The  test  results  obtained  that  the  diameter  of  the  inhibition  zone for  liquid  soap, namely S. aureus in liquid soap, was 27.7 mm and in positive control was 24.9 mm. Meanwhile, in E.coli, the average diameter of the inhibition area in liquid soap was 29.3 mm and in positive control was 32.8 mm. This is influenced by the concentration of antiseptic, soap composition, antibacterial, and pH of the soap, as well as bacterial cell wall components and dilution. And from the results of statistical analysis using the Tukey test method, it was found that there was a significant difference in liquid soap (p-value 0.000) which was significant in inhibiting the rate of bacterial growth.
Keywords: bacterial growth, escherichia coli , hand washing, inhibition test, liquid soap, staphylococcus aureus

## ABSTRAK
Saat ini meningkatnya penyakit corona (Covid-19) menjadi pandemik di seluruh dunia yang dinyatakan oleh Who menjadi pusat perhatian di seluruh dunia. Salah satu upaya pencegahan yaitu dengan memakai masker dan mencuci tangan. Mencuci tangan  yang dilakukan  adalah dengan  memakai sabun cair dan  membilasnya dengan air  mengalir sabun. Derajat keasaman (pH) sabun berfungsi menghambat laju pertumbuhan dan membunuh bakteri. Penelitian ini untuk melihat aktivitas antibakteri dari produk sabun cair yang tidak bermerek dan yang telah bermerek dan memiliki ijin edar yang diperjualbelikan secara bebas di marketplace. Pada penelitian ini  memakai metode teknik difusi cakram yang ditentukan zona hambatanya. Pada penelitian ini  menggunakan    kontrol  positif  yaitu  sabun  cair  yang  sudah  memiliki  ijin  edar  serta  kontrol  negatif  berupa  aquadest. Didapatkan hasil uji Diameter Daerah hambat sabun cair yaitu pada  S.aureus pada sabun cair adalah 27,7 mm dan pada kontrol positif adalah 24,9 mm. Sedangkan pada E.coli rata-rata diameter daerah hambatan pada sabun cair yaitu 29,3 mm dan pada kontrol positif adalah 32,8 mm. Hal tersebut dipengaruhi adanya konsentrasi antiseptik, komposisi sabun , antibakteri, serta pH sabun,    serta  komponen  dinding  sel  bakteri  dan  pengenceran.  Serta  dari  hasil  analisa  statistik  dengan  metode  uji  Tukey didapatkan  data  adanya  perbedaan  bermakna  pada  sabun  cair  (p-value  0.000  )  yang  siginifikan  dalam  menghentikan  laju perkembangbiakan bakteri.
Keywords: sabun cair, cuci tangan, staphylococcus  aureus , escherechia coli , pertumbuhan bakteri, uji daya hambat

## 1. Pendahuluan
Wabah Covid-19 (pengakit virus Corona-19) telah menjadi pusat  perhatian  di  seluruh  dunia.  Dimana  saat  ini  ada  213 negara  yang  sudah  mengkonfirmasi  Covid-19.  Diantaranya terdapat  kasus  kematian  di  Asia  Tenggara  sebesar  44.592 kasus  yang  terkonfirmasi  [1].  Di  Indonesia  kasus  Covid-19 terkonfirmasi  pertama  kali  ditemukan  pada  2  Maret  2020 dimana  ada  dua  data  yang  terkonfirmasi  [2].  Dalam  upaya pencegahan Covid-19, maka tindakan pencegahan sederhana yang  dapat  dilakukan  adalah  dengan    mencuci  tangan  dan memakai  masker  secara  teratur  dan  menyelutuh  untuk memperlambat  penyebaran  SARS-CoV-2  [3].  Dimana mencuci  tangan  yang  dapat  dilakukan  adalah  dengan  sabun dan  dibilas  dengan  air  mengalir  [4].  Akhir-akhir  ini  banyak sekali  bermunculan  berbagai  produk  sabun  dimana mengandung antiseptik. Dimana salah satu contohnya adalah sabun cair yang terdapat kandungan antiseptik. Dengan sabun cair, mencuci tangan  akan terasa lebih mudah penyimpanan dan  lebih praktis dalam penggunaannya [5]. Pada sabun cair mengandung  triclosan  ,  heksalorofen  dan  bithionol,  dimana antiseptik  ini  digunakan  untuk  memperkuat  daya  anti bakterinya. Dimana dikataakan bahawa menurut Nugraha A.P (2016)  triclosan  sebagai  antiseptik  yang  dikaitkan  isu resistensi antibiotik , kesehatan alergi, dan adanya gangguan pada  sistem  hormon.  Oleh  karena  triclosan  dengan  kadara yang  diijinkan  untuk  sabun  antiseptik  sebesar  0,3%.  Dan kadar terlalu  rendah  ataupun terlalu  tinggi  maka  bisa  terjadi resistensi terhadap triclosan [6]. Habitat mikroorganisme yang ada ditangan terdiri atas flora sementara (transient) dan flora menentap  (resident).  Flora  transient  bisa  sampai  ke  lapisan kulit  superfisial,  dimana  lebih  cocok  untuk  diangkat  oleh kebersihan  tangan  rutin,  pada  mikroorganisme  ini  biasanya tidak berkembang biak di kulit, namun  mereka berkembang biak  di  permukaan  kulit.  Menurut  Ferreira  et  al  dikatakan bahwa  mencuci  tangan  dengan  sabun  cair  atau  antiseptik dimana hal itu tidak bisa merubah flora normal pada kulit [7] [8] Pada saat mencuci tangan dengan sabun cair  maka akan efisien dan efektif bila memakai air yang mengalir. Pada sabun cair mengandung zat yg bersifat bakteriostatik dan bakterisid. Dimana  derajat  keasaman  (pH)  juga  mempunyai  fungsi membunuh serta menghambat bakteri [9].
S . aureus merupakan  bakteri  yang  patogen  dimana  semua orang bisa mengalami infeksi karena bakteri ini di sepanjang hidup  [10].  Pada  bakteri Escherecia  coli merupakan  bakteri gram negatif yang berada di dalam saluran cerna. Bakteri ini bertransmisi lewat fekal-oral yang tingkat kualitas kebersihan individu yang dibawah normal [11].
Pada  penelitian  untuk  melihat  aktivitas  antibakteri  dari sabun cair yang tidak bermerek dan yang telah bermerek dan memiliki  ijin  edar  dimana  diperjualbelikan  secara  bebas  di marketplace .  Penelitian  ini    metode  menggunakan  metode teknik  difusi  cakram  dimana  ditentukan  zona  hambatanya.
Menggunakan    kontrol  positif  yaitu  sabun  cair  yang  sudah memiliki ijin edar  dan kontrol negatif berupa aquadest.

## 2. Materials and Methods

## 2.1 Sampel
Sampel yang dipakai pada penelitian ini yaitu  sabun cair yang belum  memiliki  ijin  edar  BPOM.  Sebagai  kontrol  positif digunakan  sabun  cair  memiliki  ijin  edar  BPOM  atau kemenkes, sedang air mengalir sebagai kontrol negatif. Sabun cair yang telah memiliki ijin edar digunakan sebagai kontrol positif untuk memberikan perbandingan hasil dengan sampel sabun cair  yang tidak  memiliki  ijin edar. Dimana sabun cair yang  sudah  memiliki  ijin  edar  maka  bisa  dipastikan  bahwa proses  pembuatan  dari  aspek  formulasi  dan  keefektifan terjamin  mutunya.  Sedang  air  sebagai  kontrol  negatif  tidak mempunyai aktivitas antibakteri.

## 2.2 Alat & Bahan
Pada  penelitian  ini  digunakan  media  agar  padat mueller hinton sebagai media pembiakan bakteri, bunsen, ose, vortex , petri  dish , blank  disc ,  kapas  swab,tabung  inokulum, mikropipet,  tabung  erlenmeyer,  pinset,  rak  tabung, beaker glass , auotoklaf , jangka sorong, pembakar bunsen, aluminium foil,  lemari  es.  Bahan  penelitian  antara  lain  adalah  Mueller- Hinton  agar  (MHA),    nutrient  broth,  Nutrient  Agar  (NA), aquadest.

## 2.4 Metode
Metode  pada  penelitian  ini  adalah  ekperimental  dimana dilakukan pada sabun cair  yaitu  sabun cair tanpa  merek dan tanpa  ijin BPOM, kontrol positif digunakan sabun cair  yang sudah  berijin  edar  dan.  Sedang  untuk  kontrol  negatif  nya digunakan air (aquadest).

## 2.5 Prosedur Kerja
Setiap  sampel  diberi  inisial    masing-masing  pada  cawan petri.  Media  kultur  yang  digunakan  adalah Mueller  Hinton (Gambar 1) steril dimana dilakukan inokulasi dengan bakteri E . coli dan S.aureus . Kemudian  gunakan  kapas  steril  yang dicelupkan ke dalam tabung reaksi yang berisikan inokulum. Setelah  beberapa  menit,  pada  suhu  kamar  inokulum mengering  lalu  segera  ditutup  dengan  penutup.  Kemudian pada  tahap  selanjutnya  cakram  disk  dimasukkan  ke  dalam beaker glass, dimana berisi larutan yaitu masing-masing sabun cair dan air (aquadest) selama 15 menit kemudian media agar dimasukkan, dimana dalam media agar telah berisikan bakteri Staphylococcus  aureus dan  satunya Escherecia  coli .  Lalu gunakan  pinset  lakukan  inkubasi  selamam  1x24  jam. Kemudian  cawan  petri    diinkubasi  selama  18-24  jam  pada suhu 36±1 o C,  replikasi  sebanyak tiga kali,  setelah  itu  hitung rata-rata zona hambat. Untuk pengukuran zona hambat diukur dengan bantuan kaliper digital (mm) Gambar 2.
Gambar 1 Media agar Mueller Hinton yang telah di
inokulasikan dengan S . aureus
Gambar 2 Pengukuran Zona Hambat Bakteri
Gambar 3 Diameter Daerah Hambat sabun uji dan kontrol positif pada perlakuan A Gambar 4 Diameter Daerah Hambat pada sabun uji dan kontrol positif pada perlakuan B Gambar 5 Diameter Daerah  Hambat pada kontrol positif dan sabun uji pada perlakuan C
Gambar 6 Zona Hambat Sabun cair dan kontrol positif pada perlakuan A Gambar 7 Diameter Daerah Hambat sabun uji dan kontrol positif pada perlakuan B
Gambar 8 Zona Hambat Sabun cair dan kontrol positif pada perlakuan C

## 3. Hasil dan Pembahasan
3.1 Hasil Ukur Zona Hambat Bakteri S. aureus
Pada  pengujian  daya  hambat  bakteri Staphylococcus aureus pada  sabun  cair  yaitu  yang  tidak  bermerek  dan  yang telah  menjdapat  ijin  edar  BPOM  tersaji  pada  Tabel  1.  Pada hasil uji di atas, sabun antiseptik cair dimana berisi antiseptik triclosan dengan  2%  sampai  10%  konsentrasi  ini menghentikan  laju  perkembangbiakan  bakteri  yaitu  semakin konsentrasi tinggi maka semakin banyak kadar triclosan yang ada  dalam  antiseptik  tersebut.  Maka  daya  bunuh  semakin besar.  Maka  semakin  pentingnya  sabun  cair  dalam  menjaga kebersihan yaitu dalam mencuci tangan [12].
Tabel 1 Data Diameter Zona Hambat Sabun Cair  terhadap Bakteri Staphylococcus aureus
Dari  gambar  3,  gambar  4  dan  gambar  5,  terdapat  zona hambat pada kedua sampel  yaitu pada sabun cair yang tidak bermerek  dan  sabun  cair  yang  bermerek  (kontrol  positif). Dimana  pada  sabun  cair  tersebut  sama-sama  memiliki  zona hambat  yang  sama-sama  kuat  yaitu  ≥20  mm.  Dimana  pada sabun  cair  dan  kontrol  positif  mengandung  triclosan  yaitu dapat  efeketif  membunuh  bakteri,  dilihat  dari  zona  bening disekitar sampel.

## 3.2 Data Hasil Pengukuran Zona Hambat Bakteri E. coli
E. coli pada sabun cair  yaitu  yang tidak  bermerek dan yang telah menjdapat ijin edar BPOM uji daya hanbat bakteri tersaji pada Tabel 2.
Tabel 2 . Zona Hambat Sabun Cair  pada E.coli
Gambar 6, gambar 7 dan gambar 8, terdapat zona hambat pada kedua sampel yaitu pada sabun cair yang tidak bermerek dan sabun  cair  yang  bermerek  (kontrol  positif).  Dimana  pada sabun  cair  tersebut  sama-sama  memiliki  zona  hambat  yang sama-sama  kuat  yaitu  ≥20  mm.  Pada  kontrol  positif  zona hambat  lebih  kuat  dibanding  sabun  cair  yang  tidak  ada  ijin edar.  Kontrol  positif  mengandung  triclosan  yaitu  dapat
efeketif  membunuh  bakteri  bisa  dilihat  dari  zona  bening disekitar sampel.
Berdasarkan hasil analisa dan pengamatan , sabun cair pada Staphylococcus  auresus nilai  daya  hambat  jauh  lebih  besar daripada  kontrol  positif,  sedangkan  pada  bakteri Escherecia coli, kontrol positif memiliki daya hambat lebih baik terhadap bakteri E.coli dibandingkan sabun uji [13].
Pada penelitian ini ada perbedaan pertumbuhan E . coli dan S. aureus . Dimana dipengaruhi oleh dinding sel bakteri. Pada E.coli bakteri  dengan  gram  negatif  yang  memiliki  struktur dengan dinding sel yang lebih kompleks dari dinding bakteri dengan  gram  positif  yaitu  S. aureus .  Terlihat  dimana sitoplasma pada lapisan luar membran yaitu periplasmik yang mengandung  peptidoglikan  lebih  tipis  dimana  dibandingkan S . aureus serta  tidak  berikatan  unsurnya.  Hal  ini  membantu E. coli menghindari aktivitasnya dari bahan akif sabun dengan adanya asam lemak [14].
Pada  tabel  3yaitu    Greenwood  membagi  rata-rata  zona bening terhadap hambatan perkembangbiakan  bakteri
Rata-rata  Diameter  Zona Bening Respon Hambatan Pertumbuhan > 20 mm Kuat 16- 20 mm Sedang 10-15 mm Lemah ≤ 10 mm Sangat Lemah
Pada hasil uji satististik dengan Anova memperlihatkan p- value  yaitu  signifikan  dengan  nilai  0,000,  berarti  p- value <0,05,  bahwa  keputusan  yang  diambil  adalah  menerima  H1 yamng  berarti  kontrol  yang  digunakan  dalam  uji  diameter daya  hambat  berbeda.  Memperlihatkan  bahwa  sabun  cair (kontrol positif) bermakna bisa menghentikan laju pertumbuhan  bakteri.  Dengan  Triklosan  daya  antiseptiknya mampu menghambat proses sintesa dari asam lemak, sehingga dari  asam  lemak  yang  diperlukan  oleh  bakteri  untuk  bisa membentuk  dinding  sel  itu  tidak  jadi  terbentuk,  karena antiseptik bisa masuk lewat dinding sel dari bakteri, akibatnya bakteri akan mengalami kematian.
Disebakan  pada  penelitian  ini  menerima  H1,  maka  perlu dilanjutkan dengan uji lanjutan yaitu menggunakan metode uji Tukey  didapatakan  hasil  yaitu  p-value  =0,000  artinya signifikan  menunjukkan  bahwa  rata-rata  sabun  cair  yang digunakan  sebagai  uji  berbeda  dengan  rata-rata  kontrol negatif.  Dikarenakan  pada  sabun  cair  sebagai  bahan  uji memiliki  zat  antiseptik  dibandingkan  kontrol  negatif.  Dan juga memiliki p-value <0,000 dimana signifikan yang berarti rata-rata kontrol negatif serta  kontrol positif berbeda, kontrol positif  dengan  ijin  Kemenkes/BPOM  konsisten  dalam pencampuran zat antiseptiknya, memperlihatkan pengaruhnya menghambat laju pertumbuhan bakteri.
Kode Zona hambat (mm) Rata- Rata (mm) 1 2 3 Sabun Cair 10,7 12,8 12,5 27,7 Control (+) 10,9 10,5 10,5 24,9 Control (-) 0 0 0 0
Kode Zona hambat (mm) Rata- Rata (mm) 1 2 3 Sabun Cair 13,5 11,3 13,3 29,3 Control (+) 11,5 17,6 11,3 32,8 Control (-) 0 0 0 0
Dari hasil uji analisa Tukey terhadap pengujian  kontrol dan  bakteri  didapatkan  hasil  adanya  perbedaan  jenis  bakteri tidak memberikan  pengaruh  terhadap  daya  hambat dikarenakan nilai p-value  > 0,05.

## 4. Kesimpulan
Dapat disimpulkan dari penelitian ini bahwa dari penelitian ini  mengenai  uji  zona  hambat  dan  hasil  uji  analisa  statistik dilakukan  pada  bakteri  secara  in  vitro  adalah  dua  sampel sabun  bisa  menahan  laju  perkembangbiakan  bakteri Staphylococcus aureus dan Escherechia coli. Dan sabun cair antiseptik  yang  mendapat ijin BPOM atau Kemenkes  adalah paling  efektif  menghambat  pertumbuhan  kedua  bakteri tersebut.

## 5. Ucapan Terima Kasih
Kami sampaikan terima kasih untuk Universitas PGRI Adi Buana Surabaya dimana atas bantuan serta dukungan sehingga penelitian ini bisa berjalan lancar.

## Daftar Pustaka
[1] World  Health  organization  (WHO),  (2020).  Corona  Virus (Covid-19). New York
[2] Kampf et al, 2020.Persistence of coronaviruses on inanimate surfaces and their inactivation with biocidal agents.Journal of Hospital Infection 104(2020) 246-251
[3] Xia  ma  et  al,  2020.Potentiaence  of  coronal  utilities  of  mask wearing and instant hand hygiene for fighting SARS-CoV-2.
Journal of Medical  Virology 2020;1-5
[4] Burton et al, 2011.The Effet of Handwashing with Water or Soap on  Bacterial  Contamination  of  Hands.Int.J.environ.Res.Public Health 2011, 8,97-104
[5] Loho,  T.,Utami,L.,effectivity  Test  of  Antiseptic  Solution  17o Triclosan  against  Satphylococcum  aureus,  Escherichia  coli, enterococcus  faecalis,  and  Pseudomonas  aeruginosa,  majalah Kedokteran  Indonesia,  57(6),  175-178,  departemen  Patologi Klinik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta.2007
[6] Who, 2009. WHO Guidelines on hand Hygiene in Health care
[7] Widmer,2000. Replace  hand  washing  with  Use  of  a  Waterless Alcohol hand Rub?. Clinical Infectious Disease 2000;31;136-43
[8] Mwambete KD, Lyombe F.Antimicrobial activity of Medicated soaps  commonly  used  by  dar  es  salaam  resicents  in Tanzania.Indian Journal
of Pharmaceutical sciences.2011;7391):92-8 [9] Selvamohan  T,  Sandhya,  V.  Studies  on  bactericidal  strains. Journal of Microbiology and Biotechnology Research.2012;2(5):646-50.
[10] Greenwood,  2000.  Detection  of  antibiotic  resistance  in  vitro. International Journal of Antimicrobial agents 14(4):303-6
[11] Brooks GF, Butel JS, Morse SA.jawetz Melnick, & adelberg’s medical microbiology. Edisi ke-25. United State of America: The McGraw-Hill Companies, Inc;2010.
[12] Putra IA.Uji Efek Antibakteri Ekstrak etanol Kulita batang Salam (syxygium  polyanthum  weight  walp)  terhadap  staphylococcus aureus dan eschereccia coli secara in vitro. Padang: Universitaa andalas; 2013.
[13] Aliyu  MS,  Tijjani  MB,  doko  MHI,  Garba  I,  Ibrahim  MM, Abdulkadir SM,  et al.  Antimicrobial activity of sabulun  solo a local tradisional  medicated soap.Nigerian Journal of  Basic and Applied Science.2012;20(1): 35-8
[14] Oranusi US, Akanade VA, dahunsi SO.Assesment of microbial quality  and  antibacterial  activity  of  commonly  used  hand washes. Journal of Biological and Chemical Research.2013;30(2):570-8