## JPBIO (Jurnal Pendidikan Biologi)
Vol. 5, No. 1, April 2020, 46 – 55 //e-ISSN 2540-802X http://jurnal.stkippersada.ac.id/jurnal/index.php/JBIO/index
Senduduk dan ubi jalar ungu sebagai pewarna preparat squash akar bawang merah
CHECK FOR UPDAT
Ivan Eldes Dafrita, Mustika Sari *
Pendidikan Biologi, IKIP PGRI Pontianak, Jl. Ampera No. 88, Pontianak (78116), KAL-BAR, Indonesia, *Korespondensi penulis: mvztika.sari@gmail.com
Informasi artikel ABSTRAK Riwayat artikel: Dikirim       09 Desember 2019 Direvisi       20 Januari 2020 Diterima     10 Maret 2020 Dipublikasi 07 April 2020 Pembuatan  preparat  untuk  pengamatan  sel  atau  jaringan  pada  kegiatan praktikum  membutuhkan  bahan  pewarna.  Bahan  pewarna  yang  sering dugunakan  adalah  bahan  kimia  sintetik.  Eksplorasi  pemanfaatan  bahan pewarna  alternatif  yang  murah  dan  mempunyai  afinitas  tinggi  terhadap komponen  sel  dilakukan  dengan  pemanfaatan  pewarna  alami  yang dihasilkan oleh antosianin yang terdapat pada buah senduduk dan ubi jalar ungu. Penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap (RAL) dengan 1 faktor  perlakuan yaitu waktu pewarnaan  60,  90,  dan  120 menit. Analisis data dilakukan dengan deskriptif kualitatif terhadap kualitas preparat dan kelayakan  preparat.  Berdasarkan  hasil  penelitian  kualitas  preparat  yang diwarnai  dengan  ekstrak  buah  senduduk  dan  ubi  jalar  ungu  menunjukan hasil  terbaik  pada  lama  pewarnaan  90  menit  dengan  persentase  83,33% dan  53,33%.  Kualitas  preparat  yang  diwarnai  dengan  ekstrak  buah senduduk lebih baik daripada yang diwarnai dengan ekstrak ubi jalar ungu Preparat  mitosis  akar  bawang  merah  yang  diwarnai  dengan  ekstrak  buah senduduk  dan  ekstrak  ubi  jalar  ungu  dinyatakan  sangat  layak  untuk digunakan sebagai preparat pada kegiatan praktikum pembelahan sel.
Kata kunci:
Preparat squash, senduduk, ubi jalar ungu, akar bawang merah
ABSTRACT
Keywords:
Squash preparations, melastoma malabathricum, sweet potatoes , onion root tip. Senduduk and sweet potatoes as staining for squash preparations of onion root tip. The exploration for the use of alternative dyes that are cheap and has a high affinity for cell components is carried out by the use of natural dyes produced by anthocyanins found in fruit Melastoma malabathricum, and sweet potato Ipomea batatas var. Ayumurakasi. The study design was a completely randomized design (CRD) with 1 factor, coloring time 60, 90, and  120  minutes.  The  data  analysis  was  performed  by  descriptive qualitative  of  the  quality  of  the  preparations  and  the  suitability  of  the preparations.  Based  on  the  results  of  the  study  the  quality  of  the preparations  stained  with  extracts  of  Senduduk  fruit  and  purple  sweet potato showed the best results in the staining time is 90 minutes with a percentage is 83.33% and 53.33%. The quality of the preparations stained with Senduduk fruit extract is better than that which is colored with purple sweet potato extract. Mitosis specimens of onion root stained with extracts of  Senduduk  fruit  and  purple  sweet  potato  extract  were  declared  very feasible to be used as a specimen for cell division practical activities.
© 2020 Dafrita & Sari This is an open access article under the CC–BY-SA license
Sitasi:  Dafrita,  I.E.,  &  Sari,  M.  (2020).  Senduduk  dan  ubi  jalar  ungu  sebagai  pewarna  preparat  squash  akar bawang merah. JPBIO (Jurnal Pendidikan Biologi), 5(1), 46-55. DOI: 10.31932/jpbio.v5i1.571

## PENDAHULUAN
Cabang ilmu pengetahuan yang mempelajari organisme hidup mulai dari tingkat molekuler sampai tingkat organisme disebut ilmu biologi (Wagiyanti & Noor, 2017 ). Kegiatan pengamatan sel atau jaringan hewan dan tumbuhan  secara  mikroskopik  harus  menggunakan  mikroskop.  Penggunaan  pewarna  pada  kegiatan  praktikum akan memudahkan dalam mengamati preparat sel atau jaringan dengan jelas dan baik (Nurwanti et al., 2013 ). Menurut  Gresby  ( 2013 )  pada  pengamatan  menggunakan mikroskop  dengan  adanya  pewarnaan  pada  preparat maka dapat mempertajam dan memperjelas bagian-bagian sel atau jaringan yang diamati.
Penggunaan bahan pewarna  dalam kegiatan praktikum dan  pengamatan sel atau  jaringan  di lingkungan akademik  menggunakan  pewarna  bersifat  sintetis  dan  jumlahnya  terbatas  (Bisri  &  Wahyuni, 2014 ).  Pewarna sintetis seperti safranin dan methylene blue (MB) relatif banyak digunakan untuk memudahkan pengamatan di bawah mikroskop. Namun, pewarna ini memiliki efek negatif terhadap manusia. Safranin merupakan pewarna kationik  dan  merupakan  salah  satu  kontaminan  berbahaya  yang  telah  ditemukan  dalam  farmasi  dan  limbah pabrik tekstil. Kontaminan ini berbahaya bagi kesehatan manusia karena efek negatifnya pada kulit seperti alergi kulit, sistem pencernaan dan sistem pernapasan (Bayazit, 2014 ). Methylene blue (MB) menyebabkan gangguan kardiovaskular, pusing, demam, sakit kepala, masalah kulit dan anemia. Metilen blue bersifat karsinogenik dan sangat sulit terurai (Patil & Shinde, 2016 ). Selain itu, pewarna sintesis seperti Giemsa, Aceto orcein dan Aceto carmin  yang  digunakan  untuk  pewarnaan  kromosom  selama  fase  meiosis  dan  mitosis  sel  memiliki  kelemahan karena bersifat karsinogenik, toksik dan harga yang mahal (Elqubbi & Asayh, 2017 ).
Penggunaan  pewarna  alami  yang  ramah  lingkungan,  tidak  karsinogenik  dan  dapat  terurai  secara  alami merupakan  solusi  alternatif  untuk  mengatasi  masalah  ketersediaannya  bahan  pewarna  preparat  sintetik. Tumbuhan merupakan sumber pewarna alami yang sangat potensial yang terdapat pada bagian tanaman seperti akar,  kulit  kayu,  daun,  buah,  kayu,  biji,  dan  bunga  (Bhuyan  &  Saikia, 2003 ).  Guna  mengatasi  kendala  pada kegiatan praktikum dan dalam rangka mencari alternatif pewarna yang murah maka perlu dilakukan eksplorasi bahan  alami  lokal  yang  berpotensi  sebagai  bahan  pewarna  dengan  afinitas  tinggi  terhadap  komponen  sel. Antosianin  merupakan  salah  satu  pigmen  alami  yang  dapat  digunakan  sebagai  pewarna  preparat.  Antosianin merupakan kelompok pigmen yang berwarna merah sampai biru, tergolong dalam subtipe senyawa organik dari golongan flavonoid. Antosianin mudah ditemukan pada bagian tumbuhan seperti daun, buah, kelopak dan umbi (Deepak & Omman, 2013 ).
Melastoma  malabathricum atau  senduduk  atau  kemunting  atau cengkodok  atau  senggani  adalah  semak yang termasuk dalam keluarga Melastomaceae. Tumbuhan senduduk banyak ditemukan daerah tropis seperti di Kalimantan  Barat.  Tumbuhan  ini  memiliki  berbagai  manfaat  salah  satunya  pada  bidang  kesehatan  digunakan untuk  mengobati  beberapa  penyakit  seperti  disentri,  pencegahan  bekas  luka  dan  sebagai  agen  anti  inflamasi (Deepak & Omman, 2013 ). Pigmen antosianin pada buah senduduk dapat dimanfaatkan sebagai pewarna alami (Bisri  &  Wahyuni, 2014 ).  Zat  warna  alam  atau  pewarnaan  yang  bersifat  alami  salah  satunya  dengan memanfaatkan kandungan antosianin sebagai pigmen warna. Antosianin merupakan pigmen yang larut dalam air menghasilkan warna dari merah sampai biru. Pigmen ini tersebar luas dalam buah, bunga, dan daun. Deepak & Omman  ( 2013 )  menyebutkan  bahwa  antosianin  pada Melastoma  malabathricum  dapat  digunakan  sebagai pewarna alami pada pengamatan preparat tumbuhan.
Selain  buah  senduduk, tanaman  lain  yang  juga  kaya  akan pigmen  antosianin  sehingga  dapat  digunakan sebagai pewarna alami adalah ubi jalar ungu ( Ipomea batatas var. Ayumurakasi). Ubi jalar memiliki daging umbi yang  berwarna  ungu  hingga  ungu  pekat. Antosianin  pada  ubi  jalar  lainnya  lebih  rendah dibandingkan  dengan kandungan antosianin pada ubi jalar ungu. Potensi pewarna alami dari ubi jalar ungu telah dimanfaatkan dalam kehidupan  masyarakat  terutama  dalam  industri  pangan,  namun  belum  banyak  yang  menggali  potensi pemanfaatannya dalam bidang sains.
Oleh karena itu, maka perlu dilakukan penelitian untuk mengekplorasi manfaat buah senduduk dan ubi jalar  ungu  sebagai  pewarna  alami  pada  pembuatan  preparat  mitosis  sel  akar  bawang  merah.  Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  kualitas  serta  kelayakan  preparat  mitosis  akar  bawang  merah  ( Allium  cepa) menggunakan pewarna alami dari buah senduduk  dan ubi jalar ungu.
Hasil  penelitian  ini  diharapkan  dapat  digunakan  sebagai  panduan  praktis  pada  kegiatan  praktikum  di laboratorium  pada  matakuliah  biologi  umum  dan  mikroteknik.  Salah  satu  kompetensi  yang  dituntut  pada matakuliah tersebut agar mahasiswa dapat mendeskripsikan proses pembelahan mitosis. Kegiatan pembuatan dan pengamatan  preparat  secara  langsung  dapat  meningkatkan  keterampilan  proses  dan  pemahaman  materi pembelahan  mitosis  sel.  Selain  itu,  pemanfaatan  senduduk  dan  ubi  jalar  merupakan  bagian  dari  pemanfaatan potensi lokal dalam pembelajaran biologi.

## METODE PENELITIAN Rancangan Penelitian
Penelitian  ini  menggunakan  eskperimen  kuantitatif  dengan  rancangan  acak  lengkap  (RAL).  Faktor perlakuan  yang  digunakan  adalah  jenis  pewarna  dan  lama  waktu  pewarnaan.  Kelompok  perlakuan  dengan pewarna yang digunakan adalah buah Senduduk dan Umbi Jalau Ungu dan waktu pewarnaan yang digunakan adalah  1  jam,  1,5  jam,  dan  2  jam.  Kelompok  kontrol  dengan  pewarna  sintesis  yaitu  safranin.  Rancangan penelitian yang digunakan pada pewarnaan preparat squash dapat dilihat pada Tabel 1 .
Tabel 1. Rancangan penelitian yang digunakan pada pewarnaan preparat squash
Perlakuan ( jenis pewarnaan) Lama pewarnaan Senduduk 1 jam 1,5 jam 2 jam Ubi jalar ungu 1 jam 1,5 jam 2 jam Safranin 2 menit (standar pewarnaan) Tanpa pewarnaan -
Populasi dan Sampel Penelitian
Populasi  dan  sampel  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  tanaman  senduduk  dan  ubi  jalar  ungu yang  diperoleh  di  hutan  atau  lahan  Pontianak.  Alat  dan  bahan  yang  digunakan  yaitu  spirtus,  kaki  tiga,  kasa, beacker glass ml, kuas, objec glass, deck glass, timbangan digital, gelas ukur, kertas saring, beacker glass, pisau, batang  pengaduk,  cutter  atau  silet,  cawan  petri,  mikroskop  binokuler,  botol  flacon,  aluminium  foil,  kuas  dan kamera. Bahan yang digunaka buah senduduk, ethanol 96%, akuades , akar Allium cepa, HCl 1 N, air, safranin dan aceto arcein 2%.

## Instrumen Penelitian
Pengumpulan  data  dilakukan  dengan  cara  pengamatan  menggunakan  lembar  observasi  dari  hasil  foto preparat.  Hasil  foto  divalidasi  melalui  lembar  observasi  (angket)  oleh  tim  validator  yang  dipilih  berdasarkan keahlian  dalam  bidang  mikrotektik  atau  dosen  yang  mengajar  pada  mata  kuliah  mikrotektik  dan  struktur perkembangan tumbuhan. Angket digunakan untuk memvalidasi hasil foto preparat yang dilihat dari kejelasan preparat dan kekontrasan preparat Kualitas preparat dapat ditentukan berdasarkan indikator kekontrasan warna ( color contrast) dan kejelasan preparat (slide clarity).

## Prosedur Penelitian
Prosedur  penelitian  terdiri  atas  3  tahap  yakni  tahap  pembuatan  ekstrak  buah  senduduk,  tahap perkecambahan  dan  pemotongan  ujung  akar,  dan  tahap  pembuatan  sediaan.  Tahap  pembuatan  ekstrak  buah senduduk  dimulai  dengan  buah  senduduk  dipisahkan  dari  bijinya  kemudian  dihomogenisasi  menggunakan blender. Ekstraksi dilakukan dengan aquades 2:1 (w/v). Ekstraksi selama 24 jam hingga diperoleh substrat. Buah senduduk yang sudah dilarutkan kemudian disaring dengan kertas saring.
Tahap perkecambahan dan pemotongan ujung akar diawali dengan akar bawang merah direndaam dalam air selama 1 minggu. Setelah itu, tumbuh akar dipotong sekitar 3 mm. Waktu pemotongan dimulai pada pukul 07.00 WIB sampai pukul 12.00 WIB dengan interval waktu satu jam yang bertujuan untuk mengetahui waktu mitosis.
Tahap pembuatan sediaan menggunakan metode Squash (Joffry et al., 2012 ). Fiksasi dilakukan dengan larutan asam asetat glasial 45% kurang lebih 10 menit pada suhu 55ºC dalam inkubator. Setelah itu, potongan ujung  akar  tersebut  dicuci  dengan  akuades  sebanyak  3  kali  pengulangan.  Potongan  ujung  akar  dimaserasi menggunakan  larutan  HCl  1  N.  Kelompok  kontrol  dilakukan  dengan  menggunakan  safranin  selama  2  menit pada suhu kamar sedangkan kelompok perlakuan dengan senduduk dan ubi jalar dengan lama pewarnaan 1 jam, 1,5 jam dan 2 jam. Selanjutnya, dilakukan teknik squash. Bagian tepi gelas penutup tersebut diberi kuteks yang bertujuan agar bagian tepi gelas penutup melekat dengan baik serta diberi label. Preparat yang telah diperoleh kemudian diamati dibawah mikroskop.

## Teknik Analisis Data
Analisis data pada penelitian ini adalah deskriptif kualitatif dengan tujuan untuk melihat kualitas preparat dan kelayakan preparat sebagai bahan preparat pada kegiatan praktikum. Data dikumpulkan dengan mengamati objek di bawah mikroskop kemudian dilakukan pemotretan pada masing-masing perlakuan.
Indikator  yang  gunakan  untuk  mengetahui  kualitas  preparat  trediri  atas  kekontrasan  warna  ( colour contrast) dan kejelasan preparat (slide clarity) (Dewi et al., 2017 ). Kekontrasan warna dapat diketahui dengan penyerapan  warna  pada  jaringan  yang  akan  diamati  sedangkan  kejelasan  preparat  dapat  diamati  dengan memperhatikan  beberapa  indikator  yaitu  ada  tidaknya  gelembung  udara,  ketebalan  dan  jelas  tidaknya  inti  sel terwarnai (Wagiyanti & Noor, 2017 ). Kriteria kejelasan preparat dan kekontrasan preparat terdapat pada Tabel 2 .
Tabel 2. Kriteria kejelasan dan kontras preparat ( slide clarity) Aspek Kriteria Indikator Skor Kejelasan Very clear Jika bagian-bagian jaringan dapat dibedakan dengan sangat jelas. .. 3 Clear Jika bagian-bagian jaringan dapat dibedakan dengan jelas. 2 Not clear Jika bagian-bagian jaringan tidak dapat dibedakan dengan jelas. ,, 1 Kontras Highly contrast   Jika  pewarna  hanya  terikat  kuat  pada  bagian  tertentu  dari jaringan (tidak mewarnai semua jaringan). 3 Contrast Jika  pewarna  hanya  terikat  pada  bagian  tertentu  dari  jaringan (tidak mewarnai semua jaringan). 2 Lowly contrast   Jika pewarna diikat ke semua jaringan (mewarnai semua jaringan). .. 1
Menurut Wagiyanti & Noor ( 2017 ) kriteria untuk menentukan kulitas preparat dilakukan berdasarkan Tabel  3 .  Pengukuran  data  hasil  pengamatan  secara  kuantitatif  kualitas  preparat  dapat  dihitung  berdasarkan teknik persentase yakni total skor yang diperoleh dibagi skor tertinggi dikali 100%.
Tabel 3. Kriteria penilaian kualitas preparat
Persentase (%) Keterangan 00 81 - 100 Sangat baik 0 00 61 - 80 Baik 0 00 41 - 60 Cukup baik 0 00 21 - 40 Kurang baik 0 00 0 - 20

## Tidak baik 0
Aspek preparat yang akan divalidasi oleh validator terdiri atas gelembung udara, posisi preparat, identitas preparat  serta  penyerapan  warna.  Kelayakan  preparat  dilakukan  oleh  dosen  ahli  mikroteknik  atau  dosen  yang mengampu mata kulaih anatomi tumbuhan dan struktur perkembangan tumbuhan. Kelayakan preparat sebagai media pada kegiatan praktikum dianalisi dengan cara total skor yang diperoleh dibagi skor tertinggi dikali 100%. Menurut  Ahmad et  al.  (2013)  kriteria  untuk  menentukan  kelayakan  preparat  dilakukan  kualifikasi  penilaian yang dapat dilihat pada Tabel 4 .
Tabel 4. Kriteria kelayakan preparat
Persentase (%) Keterangan 81,25 – 100 Sangat layak 62,50 – 81,24 Layak 43,75 – 62,49 Cukup layak 25,00 – 43,74 Kurang layak < 25 Tidak layak
Kelayakan  preparat  pada  penelitian  ini  dinyatakan  apabila  presentase  kelayakan  sebesar  ≥  62,5%  atau kriterita “layak”. Jika penelaah memberikan nilai dengan kriteria layak maka preparat dapat digunakan sebagai media pada kegiatan praktikum untuk pengamtan pembelahan sel (Ahmad et al., 2013 ).

## HASIL PENELITIAN
Hasil validasi kualitas preparat dengan pewarna alami Melastoma malabathricum dan Ipomea batatas var. Ayumurakasi dapat dilihat pada Tabel 5 . Tabel 5 menyajikan hasil pengamatan dari 30 sampel preparat mitosisi akar Allium cepa  menggunakan pewarna dari buah senduduk dan umbi jalar ungu. Berdasarkan Tabel  5 hasil hasil pengamatan menunjukkan  kejelasan  dan  kekontrasan  yang berbeda. Selain itu variasi lama pewarnaan menunjukkan perbedaan kualitas preparat yang dihasilkan.
Tabel  5.  Hasil  pengamtan  kualitas  preparat  mitosis  akar Allium  cepa  dengan  pewarna  alami  Melastoma malabathricum dan Ipomea batatas var. Ayumurakasi.
Perlakuan Lama pewarnaan Kejelasan dan kekontrasan  Kategori Senduduk 1 jam 70,00% Baik 1,5 jam ... 83,33% Sangat baik 2 jam ,,,, 66,67% Baik Ubi jalar ungu 1 jam 53,33% Kurang baik 1,5 jam ... 36,67% Cukup baik 2 jam ,,,, 33,33% Kurang baik Safranin 100% Kurang baik Tanpa pewarnaan 33,33% Sangat baik
Hasil terbaik diperoleh dari preparat dengan lama pewarnaan 90 menit, sedangkan pewarnaan 60 menit dan  120  menit  menunjukkan  kualitas  yang  lebih  rendah.  Pewarnaan  dengan  ekstrak  ubi  jalar  ungu  juga menunjukkan  perbedaan  kualitas  preparat  yang  dihasilkan.  Hasil  terbaik  diperoleh  dari  preparat  dengan  lama pewarnaan 90 menit, sedangkan pada lama pewarnaan 60 menit dan 120 menit menunjukkan kualitas yang lebih rendah.  Namun  jika  dibandingkan  antara  kedua  pewarna  alami  ini  dapat  disimpulkan  bahwa  pewarna  ekstrak buah senduduk memberikan hasil yang lebih baik dibandingkan pewarna ekstrak ubi jalar. Hal ini tampak dari persentase  kualitas  preparat  yang  kemudian  disimpulan  berdasarkan  kriteria  yang  menunjukkan  digunakan. Preparat  mitosis Allium  cepa  yang  diwarnai  dengan  ekstrak  buah  senduduk  memiliki  kualitas  “sangat  baik” dibandingkan ekstrak ubi jalar dengan kualitas “cukup baik”.
Kelayakan preparat akar Allium cepa dalam penelitian ini dianalisis berdasarkan hasil pengamatan pada empat aspek kelayakan. Empat aspek tersebut antara lain identitas preparat, gelembung udara, posisi preparat dan penyerapan warna oleh jaringan. Hasil penelitian ditampilkan dalam Tabel 6 .
Tabel  6.  Kelayakan  preparat  mitosis  akar Allium  cepa  dengan  pewarna  alami  Melastoma  malabathricum  dan Ipomea batatas var. Ayumurakasi.
Aspek Senduduk Ubi jalar ungu 60' 90' 120' 60' 90' 120' Identitas 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00 Gelembung udara 2,60 3,00 2,80 2,60 3,00 2,80 Posisi 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00 Penyerapan warna 2,20 2,40 2,00 1,20 1,60 1,20 Persentase 90,00 95,00 90,00 81,67 88,33 83,33 Kesimpulan Sangat layak  Sangat layak  Sangat layak  Sangat layak  Sangat layak  Sangat layak
Berdasarkan Tabel 6 analisis kelayakan preparat mitosis Allium cepa dengan pewarna alami Melastoma malabathricum  dan  Ipomea  batatas  var.  Ayumurakasi  menunjukkan  nilai  persentase  diatas  80%.  Hal  ini menunjukkan  preparat  yang  dibuat  layak  untuk  digunakan  dalam  pengamatan  mitosis.  Preparat  dengan  nilai kelayakan terbaik  diperoleh  dari  preparat  yang  dibuat  dengan  lama  pewarnaan  90  menit,  baik  untuk pewarna ekstrak buah senduduk maupun ekstrak ubi jalar ungu. Kelayakan terbaik dihasilkan oleh pewarna ekstrak buah senduduk dengan lama pewarnaan 90 menit.
Hasil pegamatan preparat Mitosis Akar Allium cepa dengan pewarna alami Melastoma malabathricum dan Ipomea batatas var. Ayumurakasi dapat dilihat pada Gambar 1 dan Gambar 2 . Kelompok perlakuan yang digunakan pada penelitian ini terdiri atas jenis pewarna dan lama waktu pewarnaan. Sebagai kontrol digunakan pewarna safranin dengan lama waktu standar yang digunakan. Penelitian ini menggunakan pewarna alami yang
berasal dari ekstrak buah senduduk ( Melastoma malabathricum) dan ekstrak ubi jalar ungu (Ipomea batatas var. Ayumurakasi).
A                                                             B Gambar 1. Perbandingan hasil perlakuan: A. Tanpa pewarnaan; B. Pewarnaan dengan Safranin.
Gambar 2.   Perbandingan  hasil  antara  pewarnaan  dengan  ekstrak  senduduk  dan  ekstrak  ubi  jalar  ungu  untuk masing-masing lama pewarnaan.
Pewarnaan dengan ekstrak senduduk: A. Pewarnaan 60 menit; B. Pewarnaan 90 menit; C. Pewarnaan 120 menit.
Pewarnaan  dengan  ekstrak  ubi  jalar  ungu:  D.  Pewarnaan  60  menit;  E.  Pewarnaan  90  menit;  F. Pewarnaan 120 menit.

## PEMBAHASAN
Pewarna  yang  biasa  digunakan  untuk  pengamatan  mitosis  akar  bawang  merah  adalah  pewarna  sintetis aceto-orcein  dan  safranin.  Namun,  sulitnya akses  untuk  memperoleh  pewarna  ini  masih menjadi  kendala  bagi sekolah saat melakukan kegiatan praktikum. Pewarna ini hanya tersedia di supplier tertentu dengan harga yang mahal.  Selain    itu,  beberapa  pewarna  sintesis  diketahui  bersifat  karsinogenik  sehingga  diperlukan  penanganan khusus  saat  digunakan  (Adeel et  al., 2009 ).  Oleh  karena  itu  diperlukan  alternatif  pengganti  pewarna  sintetis dengan harga terjangkau dan menghasilkan kualitas yang  baik, misalnya dengan pewarna alami dari tumbuhan yang ada di lingkungan sekitar. Pewarna alami telah digunakan secara ekstensif dalam industri tekstil, makanan, dan  obat-obatan.  Bakteri  akan  lebih  mudah  menguraikan  sisa  penggunaan  bahan  pewarna  alami  jika dibandingkan pewarna sintetik (Handayani & Rahmawati, 2012 ). Pewarna alami juga tidak mengandung racun dan unsur karsinogen yang berbahaya bagi kesehatan manusia.
Penelitian  ini  menggunakan  pewarna  alami  yang  berasal  dari  ekstrak  buah  senduduk  ( Melastoma malabathricum)  dan  ekstrak  ubi  jalar  ungu  (Ipomea  batatas  var.  Ayumurakasi).  Senduduk  adalah  tumbuhan dengan habitus semak yang termasuk dalam famili Melastomaceae. Bunganya memiliki kelopak berwarna hijau berbentuk piala dengan lima sepal berwarna kemerahan serta lima mahkota berwarna keunguan. Menurut Joffry ( 2012 )  buah  seduduk  berbentuk  seperti  buah  beri  dengan  bukaan  iregular,  mengandung  banyak  biji  tanpa endosperm yang dikelilingi oleh daging buah berwarna ungu ( Gambar 3 ). Tumbuhan ini telah digunakan untuk mengobati beberapa macam  penyakit seperti disentri  dan  pencegahan bekas  luka  dan  sebagai agen  anti  infeksi (Deepak & Omman, 2013 ). Liana ( 2010 ) menyatakan klasifikasi tanaman senduduk sebagai berikut.
Gambar 3. Bunga dan buah senduduk
Flavonoid,  saponin  dan  tanin  golongan  nobotanin  merupakan  metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada buah senduduk. Antosianin, tanin, asam lemak, kaempferol, dan sterol di temukan pada bunga sendudk (Liana, 2010 ).  Tumbuhan  lain  yang  mengandung  antosianina  adalah  umbi  pada  ubi  jalar  ungu.  Ciri  morfologi tumbuhan  ini  merambat  dan  bercabang  batang  membelit  dan  bergetah  ( Gambar  4 ).  Menurut  Liana  ( 2010 ) kedudukan tanaman ubi jalar ungu dalam tata nama (sistematika) sebagai berikut.
,,,,,,,,,,,, Divisi : Spermatophyta ,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,, Class : Dicotyledonae ,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,, Order : Convolvulales ,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,, Family : Convolvulaceae ,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,, Genus : Ipomea ,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,, Species : Ipomea batatas ,,,,,,,,,,,,,,,,, Divisi Class Order Family Genus Species : Spermatophyta ,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,, : Dicotyledonae ,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,
: Myrtales ,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,
: Melastomataceae ,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,
: Melastoma ,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,
: Melastoma malabathricum D. Don
,,,,,,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,
Gambar 4. Tanaman ubi jalar ungu ( Ipomea batatas var. Ayumurakasi)
Kandungan  pigmen  antosianin  pada  umbi  ubi  jalar  ungu  disebabkan  adanya  kandungan  antosianin. Antosianin  merupakan  pigeman  hidrofilik  golongan  flavonoid  yang  terdapat  pada  tumbuhan  yang  berwarna merah,  biru  dan  ungu.  Contoh  metabolit  sekunder  yang  termasuk  dalam  golongan  antosianin  yang  sering ditemukan  adalah  delphinidin,  petunidin,  pelargonidin,  cyanidin  dan  malvidin.  Terdapat  23  jenis  pigmen antosianidin (aglikon) yang ditemukan hingga saat ini ( Kusumaningrum et al., 2014 ).
Variabel  perlakuan  yang  digunakan  adalah  sumber  pewarna  alami  yang  digunakan  dan  lama  waktu pewarnaan. Sumber pewarna alami diekstrak dengan menggunakan aquades sebagai pelarut.  Pigmen antosianin dapat  larut  dalam  pelarut  organik  yang  bersifat  polar  maupun  pelarut  yang  bersifat  netral  misalnya  akuades (Julita et  al., 2014 ). Ekstraksi  pigmen  antosianin  dari  buah  senduduk  dan  ubi  jalar  dilakukan  dengan menggunakan metode maserasi yang dilakukan selama 24 jam Ekstrak buah senduduk dan ubi jalar ungu dibuat dengan perbandingan 2:1. Sebagai pembanding digunakan 2 kontrol, yaitu preparat mitosis yang dibuat tanpa pewarnaan dan dengan pewarna safranin.
Berdasarkan  hasil  penelitian  diperoleh  data  bahwa  preparat  mitosis  akar Allium  cepa  tanpa  pewarnaan menunjukkan tidak kontrasnya preparat serta tidak jelasnya setiap bagian jaringan. Preparat seperti ini tidak layak untuk digunakan dalam pembelajaran ( Gambar IA ). Sebaliknya, preparat yang diwarnai dengan pewarna sintetis safranin menunjukkan hasil yang sangat baik ( Gambar IB ). Setiap bagian yang diamati dapat dibedakan dengan jelas serta kontras antar bagian. Preparat yang diwarnai dengan ekstrak buah senduduk menunjukkan kejelasan dan kekontrasan paling baik saat diwarnai selama 90 menit dengan persentase kualitas 83,33%, sementara pada lama pewarnaan 60 menit dan 120 menit memperlihatkan hasil dengan kualitas yang lebih rendah ( Tabel 6 ). Hal ini kemungkinan disebabkan pewarnaan selama  60 menit tidak menyediakan cukup waktu  bagi  inti sel  untuk mengikat  pigmen antosianin dari ekstrak buah senduduk. Pada  lama  pewarnaan 120 tidak menunjukkan hasil yang baik mungkin dikerenakan preparat terlalu lama dalam dicairan pewarna segingga menyebabkan lisisnya sel. Selain itu sel mengalami kerusakan dan penguraian substansi-substansi yang ada dalam sel menyebabkan gagalnya ikatan  antara  intisel  dengan  pigmen  antosianin  ( Gambar  1 ).  Genesika  &  Pratiwi  ( 2018 )  menyebutkan  bahwa pewarnaan pada kromosom sel akar bawang merah tergantung dari ikatan pewarna dengan DNA. Ikatan tersebut terjadi karena adanya ikatan hidrogen pada DNA yang bersifat elektronegatif dengan oksigen dan nitrogen pada DNA dengan zat yang terdapat pada pewarna yang digunakan.
Preparat  yang  diwarnai  dengan  ekstrak  ubi  jalar  ungu  menghasilkan  kualitas  yang  jauh  lebih  rendah. Kualitas terbaik tampak pada lama pewarnaan 90 menit dengan persentase kualitas sebesar 53,33% yang berada pada kriteria “cukup baik”. Penyebabnya mungkin dikarenakan kandungan antosianin yang ada dalam ubi jalar ungu rendah. Hal ini terlihat pada saat ekstraksi dimana ekstrak yang didapat tidak menghasilkan warna yang pekat. Kadar pigmen yang rendah mengakibatkan tidak optimalnya ikatan antara antosianin dengan kromosom ( Gambar 2D , 2E dan 2F ).  Pembuatan preparat mitosis Allium cepa harus memperhatikan sifat jaringan, pigmen pewarna, pelarut yang digunakan untuk ekstraksi, serta kondisi kerja optimalnya.
Antosianin merupakan senyawa yang tidak stabil. Ketidakstabilan antosianin dipengaruhi oleh beberapa faktor antara  lain  pH,  cahaya,  panas  serta  rentan  mengalami  degradasi.  Antosianin  memiliki  sifat  kimia  tidak dapat larut dalam larutan netral atau basa dan dapat larut dalam asam. Semakin asam pH pelarut yang digunakan makan akan semaik banyak pigmen yang dapat terlarut dalam bentuk kation flavium (Ali et al., 2013 ; Setiono, 2013 ). Hal ini disebabkan keadaan yang semakin asam menyebabkan dinding sel vakuola yang pecah semakin banyak sehingga pigmen antosianin semakin banyak yang terekstrak (Setiawan et al., 2015 ; Sikhruadong et al., 2009 ). Dari beberapa pendapat tersebut dapat disimpulkan bahwa proses ekstraksi antosianin akan lebih optimal jika digunakan pelarut yang bersifat asam.
Selain kualitas preparat, penelitian ini juga menelaah kelayakan preparat yang dibuat agar dapat digunakan dalam  pembelajaran.  Telaah  dilakukan  dengan  menggunakan  indikator  yang  dimodifikasi  dari  Ahmad et  al.
( 2013 ). Ada empat  indikator  yang  digunakan,  yaitu  identitas  preparat,  gelembung  udara,  posisi  preparat,  dan penyerapan warna.
Pembuatan  preparat  metode squash  merupakan  salah  satu  metode  pembuatan  preparat  yang  sering digunakan  untuk  pengamatan  mitosis.  Preparat  mitosis  akar Allium  cepa  yang  diwarnai  dengan  ekstrak  buah senduduk  menunjukkan  hasil  “sangat  layak”  untuk  semua  indikator.  Demikian  pula  untuk  preparat  yang diwarnai dengan  ekstrak ubi jalar  ungu,  juga menunjukkan hasil “sangat  layak”. Hasil ini  untuk semua  variasi lama  pewarnaan,  yaitu  pada  60  menit,  90  menit,  dan  120  menit.  Namun  demikian,  untuk  memperlancar keefektifan pembelajaran dan memastikan konsep mitosis dapat diterima dan dipahami oleh siswa, harus dipilih preparat dengan hasil terbaik. Preparat terbaik dipilih berdasarkan persentase kualitas dan persentase kelayakan tertinggi. Dalam penelitian ini, preparat terbaik adalah mitosis akar Allium cepa yang diwarnai dengan ekstrak buah senduduk ( Melastoma malabathricumi) selama 90 menit.
Secara keseluruhan hasil penelitian ini menunjukkan bahwa terdapat alternatif pewarna alami yang dapat digunakan  dalam  pengamatan  mikroteknik  jaringan  tumbuhan.  Pengamatan  mitosis  akar Allium  cepa  dapat digunakan ekstrak buah senduduk ( Melastoma malabathricumi) dengan lama pewarnaan 90 menit. Tumbuhan ini mudah ditemukan di lingkungan sekitar kita sehingga diharapkan dapat dimanfaatkan dalam pembelajaran. Media  pembelajaran  berupa  preparat  dapat  digunakan  untuk  menunjang  kegiatan  kegiatan  praktikum  dapat dengan  menggunakan  preparat.  Mata  kuliah  dengan  kompetensi  pengamatan  sel  atau  jaringan  seperti  biologi umum,  anatomi  tumbuhan,  histologi  serta  mikrobiologi  sangat  membutuhkan  media  pembelajaran  berupa preparat.  Pembuatan  preparat  yang  baik  menentukan  kualitas  praparat  secara  keseluruhan.  Solusi  untuk mendapatkan alternatif pewarnaan yang digunakan untuk pembuatan preparat adalah dengan enggunaan pewarna alami.  Jika  dapat  menghasilkan  preparat  yang  baik  secara  mandiri  maka  keterbatasan  preparat  sebagai  media pembelajaran  di  laboratorium  akan  dapat  diselesaikan  dan selanjutnya  secara  tidak  langsung  akan  mendukung kemajuan kualitas program studi.

## SIMPULAN
Kualitas preparat mitosis akar bawang merah ( Allium cepa) yang diwarnai dengan ekstrak buah senduduk ( Melastoma  malabathricum)  dan  ubi  jalar  ungu  (Ipomea  batatas  var.  Ayumurakasi)  menunjukan  hasil  terbaik pada lama pewarnaan 90 menit yaitu sebesar 83,33% (sangat baik) dan 53,33% (cukup baik). Preparat mitosis akar  bawang  merah  ( Allium  cepa)  yang  diwarnai  dengan ekstrak  buah  senduduk (Melastoma  malabathricum) dan ekstrak ubi jalar ungu ( Ipomea batatas var. Ayumurakasi) dinyatakan sangat layak untuk digunakan sebagai preparat  pada  kegiatan  praktikum  pembelahan  sel.  Pewarnaan  dengan  ekstrak  buah  senduduk  ( Melastoma malabathricum)  lebih  baik  daripada  yang  diwarnai  dengan  ekstrak  ubi  jalar  ungu  (Ipomea  batatas  var. Ayumurakasi).
UCAPAN TERIMAKASIH
Terima kasih kami ucapkan kepada IKIP PGRI Pontianak yang membiayai kegiatan penelitian ini melalui pendanaan APBS tahun anggaran 2019 untuk kegiatan hibah dana penelitian kompetitif.

## REFERENSI
Adeel, S., Ali, S., Bhatti, I., & Zsila, F. (2009). Dyeing of cotton fabric using pomegranate ( punica granatum) aqueous extract. Asian Journal of Chemistry, 21(5), 3493-3499 . https://www.researchgate.net/publication/268050774_Dyeing_of_cotton_fabric_using_pomegranate_ Punica_granatum_aqueous_extract
Ahmad., Budiono., & Pratiwi. (2013) . The development of plant tissue preparation media using alternative dye of  henna  leaves  ( lawsonia  inermis)  filtrate.  Jurnal  Pendidikan  Biologi  UNESA,  2(1),  52-58. https://jurnalmahasiswa.unesa.ac.id/index.php/bioedu/article/view/1544/1170
Ali,  F.,  Ferawati,  &  Arqomah,  R.  (2013). Ekstraksi  zat  warna  dari  kelopak  bunga  rosella  (study  pengaruh konsentrasi  asam  asetat  dan  asam  sitrat. Jurnal  Teknik  Kimia,  19(1),  26-34. http://jtk.unsri.ac.id/index.php/jtk/article/view/126/124
Bayazit,  S.  (2014).  Investigation  of  safranin  o  adsorption  on  superparamagnetic  iron  oxide  nanoparticles (SPION)  and  multi-wall  carbon  nanotube/spion  composites. Desalination  and  Water  Treatment,  52, 37-39.  DOI: 10.1080/19443994.2013.821045 Bhuyan, R., & Saikia, C.N. (2003). Extraction of natural colourants from roots of morinda angustifolia roxb. - their identification and studies of dyeing characteristics on wool. Indian Journal of Chemical Technology,
10(2), 131–136.
http://nopr.niscair.res.in/bitstream/123456789/22708/1/IJCT%2010%282%29%20131-136.pdf Bisri,  &  Wahyuni.  (2014).  Ekstrak  kelopak  bunga  rosella  ( hibiscus  sabdariffa  l.)  sebagai  pewarnaan  alternatif alami  preparat  section  tanaman  cabe  merah  besar  ( capsicum  annuum  l.).  Prosiding  Biology  Education Conference, 11(1), 214-221. https://jurnal.uns.ac.id/prosbi/article/view/7710/6876
Deepak, P., & Omman. (2013). Use of dye extract of melastoma malabathricum linn. for plant anatomical. Acta Biologica Indica, 2(2), 456-460. http://www.bioscipub.com/journals/ abi/pdf/456-460.pdf Dewi,  A.Y.,  Purwanti,  &  Nurwidodo.  (2017).  Kualitas  preparat  section  organ  tanaman  srikaya  ( annona squamosa) dengan pewarna alami filtrat  dau jati muda (tectona grandis) sebagai sumber belajar biologi sma.
Prosiding Seminar Nasional III, 3(1), 95-105. http://research-
report.umm.ac.id/index.php/research-report/article/view/963/1176
Elqubbi,  Huda,  &  Asyah,  E.A.  (2017).  Chromosome  staining  natural  dyes  from punica  granatum  and  beta vulgaris. EN Nutricion, 11(4), 142-146. https://www.ecronicon.com/ecnu/pdf/ECNU-11-00381.pdf Genesiska,  &  Pratiwi,  H.  (2018).  Extract  of  dragon  fruit  pulp  ( hylocereus  polyrhizus)  potentially  stain chromosomes  of  red  onion  ( allium  ascalonicum).  Biogenesis,  6(2),  93-97.  DOI: 10.24252/bio.v6i2.4835
Gresby,  A.  (2013).  Pemanfaatan  filtrat  daun  jati  muda  ( tectoria  grandis)  sebagai  bahan  pewarna  alternatif pembuatan preparat maserasi batang cincau rambat ( cyclea barbata), (Skripsi tidak diterbitkan), Program Studi Pendidikan Biologi, Universitas Muhammadiyah Malang, Malang.
Handayani, P.A., & Rahmawati, A. (2012). Pemanfaatan kulit buah naga (dragon fruit) sebagai pewarna alami makanan  pengganti  pewarna  sintetis. Jurnal  Bahan  Alam  Terbarukan,  1(2),  19-24. https://journal.unnes.ac.id/nju/index.php/jbat/article/view/2545/2598
Joffry, M.S., Yob, N.J., Roffie, & Zakaria. (2012). Melastoma malabathricum (l.) smith ethnomedicinal uses, chemical  constituents,  and  pharmacological  properties:  a  review. Journal  of  Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, 2012, 1-48.  DOI: 10.1155/2012/258434
Julita,  I.,  Isda,  &  Lestari.  (2014).  Pengujian  kualitas  pigmen  antosianin    pada  bunga  senduduk  ( melastoma malabathricum l.) dengan penambahan pelarut organik dan asam yang berbeda, JOM FMIPA, 1(2), 1-7. https://s3.amazonaws.com/academia.edu.documents/51137135/4064-7968-1-SM.pdf
Kusumaningrum ,  H.P.,  Lunggani,  A.T.,  &  Nurhakim,  M.A.  (2014).  Chromosomes  and  mitotic  cell  division phase  in  onion  roots  after  24  hours  acetoorcein  soaking  time. Bioma,    14(2),  46-48.  DOI: 10.14710/bioma.14.2.46-48
Liana, I. (2010). Aktivitas antimikroba fraksi dari ekstrak metanol daun senggani (melastoma candidum d.don) terhadap  staphylococcus  aureus  dan  salmonela  typhimurium  serta  profil  kromatografi  lapis  tipis  fraksi teraktif, ( Skripsi tidak diterbitkan). Universitas Semarang.
Nurwanti,  M.,  Budiono,  D.,  &  Pratiwi.  (2013).  Pemanfaatan  filtrat  daun  muda  jati  sebagai  bahan  pewarna alternatif  dalam  pembuatan  preparat  jaringan  tumbuhan. BioEdu,  2(1),  112-114. https://jurnalmahasiswa.unesa.ac.id/index.php/bioedu/article/view/1621/1177
Patil,  M.A.,  &  Shinde,  J.K.  (2016).  Adsorption  of  methylene  blue  in  waste  water  by  low  cost  adsorbent bentonite  soil. International  Journal  of  Engineering  Science  and  Computing,  6(9),  2160-2167. https://pdfs.semanticscholar.org/4856/cf67c47daf1846b74ae171f3662f1507a971.pdf
Setiawan,  M.A.W.,  Nugroho,  E.,  &  Lestario.  (2015).  Ekstraksi betasianin  dari  kulit  umbi  bit  (beta  vulgaris) sebagai  pewarna  alami. Jurnal  Ilmu  Pertanian  (AGRIC),  27(1&2),  38-43.  DOI: 10.24246/Agric.2015.V27.I1.P38-43
Setiono,  Monica,  &  Avriliana,  D.A.  (2013).  Penentuan  Jenis  solven  dan  ph  optimum  analisis  senyawa delphinidin dalam kelopak bunga rosella dengan metode spektrofotometri uv-vis. Jurnal Teknologi Kimia dan Industri, 2(2), 91-96. http://ejournal-s1.undip.ac.id/index.php/jtki
Sikhruadong, S., Tanomtong, & Wonkaonol, W. (2009). Chromosome staining of crinum lily ( crinum asiatum l) using natural dyes. Cytologia, 74(1), 17-25. DOI: 10.1508/cytologia.74.17
Wagiyanti,  H.,  &  Noor,  R.  (2017).  Red  dragon  fruit  ( hylocereus  costaricensis  britt.  et  r.)  peel  extract  as  a natural  dye  alternative  in  microscopic  observation  of  plant  tissues:  the  practical  guide  in  senior  high school. Indonesian Journal of Biology Education, 3(3), 232-237. DOI: 10.22219/jpbi.v3i3.4843