PENGARUH PEMBERIAN HIDROKUINON TERHADAP PERKEMBANGAN  FETUS  MENCIT  ( MUS  MUSCULUS L.)  SWISS WEBSTER
Rubiyati 1) , Arum Setiawan 2)
AKBID Budi Mulya Jambi 1)
Laboratorium Penelitian dan Pengembangan Terpadu, Universitas Gadjah Mada 2)
E-mail: rubiyati730@ymail.com

## ABSTRACT
Background : Hydroquinone is natural substance chemistry that were using by cosmetics as  bleachers  skin.  The  creams  contains  of  more  than  >2%  hydroquinone  could  cause irritation in the skin. In long usage will caused skin  bluish black and  ochronosis. The aims of this study is to find the effect of hydroquinone to the fetus development.
Method  : The  research  about  the  influence  of  hydroquinone  to  the  mouse  fetal development  has  been  done  on  February  –  April  2014  at  The  Research  Center  (LPPT) Gadjah Mada University Yogyakarta. This research used randomized complite design 5 treatment and 5 replicated. The datas were analyzed with one way Anova and then with Duncan’s  test.  Hydroquinone  administrated  intraperitoneal  injection  at  a  dosage  10 mg/kgbw, 20 mg/kgbw, 30 mg/kgbw in 6 days of gestation.  The remaining animals were used  as  an  untreated  control,  and  placebo  were  given  by  aquades.  at  18 th days  of gestations, twenty five pregnant mice were sacrificed and caesarian sectioned to remove the fetuses and then check fetus body wight, life fetus, dead fetus and morfology fetus. The results showed that administration of hydroquinone to pregnant mice decreased the average number of fetuses, fetal weight, and implantation. The congenital malformation that caused by administration of hydroquinone were neural tube defects, anotia, microtia, Intra Uterine Fetal Defects,  limb defects, tail defects.
It was concluded that hydroquinone administrated to the pregnant mice inhibits the fetal growth, decreased the number of fetal and increased malformation of fetal.
Keywords : Hydroquinone, Mice, Fetal, Malformation, NTDs .

## PENDAHULUAN
Hidrokuinon   adalah bahan kimia larut  dalam  air  dengan  nama  kimia  1,4 Benzenediol .  Sinonimnya  adalah Para- Dihidroxy benzene, Para-Benzenediol & 1 -Hidrokuinon . Kepadatannya berbentuk kristal berwarna cokelat, abu-abu terang. Kandungan  di  atas  2%  dikategorikan sebagai bahan berbahaya bagi kesehatan dan bersifat toksik bagi tubuh.
Hidrokuinon merupakan zat alami ditemukan dibeberapa makanan (jagung/buah-buahan), minuman (diseduh  kopi,    daun  teh  dan  anggur merah) (Deisinger et al. 1996). Pemakaian hidrokuinon telah berkembang  sangat  luas  dalam  berbagai bidang  mulai  dari  bidang  industri, pertanian  dan  kosmetik  sekitar  0,05% diproduksi  dalam  krim  pemutih  kulit Hidrokuinon  dalam  kosmetik  mampu mengelupas  kulit  bagian  luar  dan menghambat pembentukan melanin yang  membuat  kulit  tampak  hitam.
Penggunaan krem hidrokuinon di bawah 1%  dalam  produk  pencerah  kulit  untuk mengontrol hiperpigmentasi telah dianggap  aman  dan  efektif  (Burke, 1982).
Dilaporkan  di  Amerika  Serikat terkait  penggunaan  krem  ini  lebih  dari 2% bisa menyebabkan iritasi kulit, gatal-
gatal,  merah-merah  dan  rasa  panas terbakar.  Dalam  jangka  pemakaian waktu  yang  lama  5-10  tahun  akan mengakibatkan kulit berbintil-bintil seperti  pasir,  dan  warna  hitam  kebiru- biruan/okronosis (Maibach, 1997).
Salah  satu  sifat  dari  hidrokuinon dapat  masuk  dalam  tubuh  manusia melalui saluran pernafasan dan kulit. Zat ini  larut  dalam  air  dan  didistribusikan keseluruh tubuh. Selama produksi rokok zat  ini  berpotensi  dilepaskan  2%  ke udara  bisa  mencemari  lingkungan  dan dapat terhirup oleh manusia terutama ibu hamil  berbahaya  bagi  janinnya  (Taylor, 1995). Dalam pemakaian kosmetik hidrokuinon yang terkandung didalamnya  dengan  mudah  diserap kedalam  tubuh  melalui  pori-pori  kulit dan  dialirkan  keseluruh  tubuh  hingga mencemari  darah  dan  akan  sampai kejanin  yang  sedang  dikandung  dari suplai darah ibu yang membawa oksigen serta  sari-sari  makanan.  Hidrokuinon sangat  berbahaya  terutama  pada  wanita hamil, dapat menyebabkan pertumbuhan janin  terganggu,  bisa  terjadi  keguguran dan cacat lahir (Hutahean, 2002).
Hidrokuinon  dapat  menembus Placenta Barrier yang merupakan selaput  pelindungi  fetus  dari  senyawa yang  membahayakan  setelah  menembus Placenta  Barrier hidrokuinon  akan terakumuluasi dan merusak pertumbuhan  serta  perkembangan  fetus (Darmono, 2001).
Menyikapi  bahaya  hidrokuinon pada  manusia  terutama  ibu  hamil  perlu mendapat  perhatian  khusus  terutama keamanan  dalam  pemakaian  dosis.  Dari literatur  yang  digunakan  kurangnya informasi pengaruh hidrokuinon terhadap perkembangan janin. Efek pemberian Hidrokuinon yang diberikan  pada  induk  mencit  umur kebuntingan 6 hari dapat menyebabkan pertumbuhan janin terganggu,  bisa  terjadi  keguguran,  cacat
lahir  dan  penurunan  jumlah  hasil reproduksi (Hutahean, 2002).
Hidrokuinon merupakan zat teratogen  yang  dapat  menyebabkan terhambatnya osteogenesis yang berakibat pada kecacatan telinga, tungkai dan ekor (Leeson, et al, 1996).
Penelitian  ini  sangat  penting dilakukan  untuk  memberikan  informasi mengenai pengaruhpemberian hidrokuinon selama periode organogenesis  yaitu  tahap  kebuntingan hari  ke  enam  terhadap  perkembangan fetus mencit, terutama terhadap bb fetus, jumlah  fetus  hidup,  fetus  mati,  fetus resorp, serta morfologi fetus mencit.

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan tempat
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan  Februari    sampai  dengan  April 2014,  di  Laboratorium  Penelitian  dan Pengujian  Terpadu  (LPPT)  Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.

## Bahan dan Alat
Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah : hewan uji yaitu 25 ekor  mencit  ( Mus  musculus L.)  betina bunting, umur ± 12 minggu, berat 20–22 g.  Hewan  uji  diberi  pakan  berupa  pellet Par G. Hidrokuinon untuk perlakuan dan akuades  sebagai  pelarutnya.  Alat  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah kandang  untuk  pemeliharaan  hewan percobaan,  jarum  suntik  ukuran  1  ml untuk pemberian perlakuan, satu set alat bedah  ( dissecting  set )  untuk  membedah hewan perlakuan.

## Perlakuan
Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan  5  perlakuan  dan  masing-masing 5 ulangan. Sebelum perlakuan, ditentukan  dosis  perlakuan  hidrokuinon. Dari  hasil  uji  pendahuluan  didapatkan bahwa dosis teratogenik dalam
penelitian  ini  adalah  10mg/kg  bb,  20 mg/kg  bb  dan  30  mg/kg  bb,  dua  puluh lima ekor mencit betina bunting dikelompokkan  menjadi  5  kelompok secara  acak,  masing-masing  kelompok terdiri  dari  5  ekor  mencit.  Dosis perlakuan untuk masing-masing kelompok  adalah  pembanding  (tidak diberi apa-apa), kontrol (akuades 0,2ml) secara intra peritoneal, perlakuan hidrokuinon dosis 10 mg/kgbb, perlakuan hidrokuinon dosis 20 mg/kgbb  perlakuan  hidrokuinon  dosis 30  mg/kgbb,  perlakuan  secara  injeksi peritoneal menggunakan  jarum  suntik berukuran 1 ml pada tahap hari ke enam kebuntingan.

## Pengambilan Data
Pada  hari  ke  delapan  belas kebuntingan  mencit  dimatikan  dengan cara dislokasi leher, kemudian dilakukan laparatomi  untuk  mengeluarkan  fetus dengan  membedah  bagian  abdomen  ke arah  atas  sampai  terlihat  uterus  yang berisi fetus. Fetus dan plasenta dikeluarkan  dengan  memotong  uterus selanjutnya  diamati  apakah  ada  resorbsi pada  uterus  yang  ditandai  dengan adanya  gumpalan  merah  sebagai  tempat tertanamnya  fetus.  Jumlah  fetus  yang diimplantasi pada masing-masing bagian uterus  dihitung,  fetus  hidup,  fetus  mati dan  resorbsi.  Setelah  fetus  dikeringkan dengan  kertas  tissue,  lalu  ditimbang berat masing-masing fetus untuk mengetahui  berat  rata-rata  kelahiran.
Ada  tidaknya  kelainan  secara  visual seperti  bentuk  ekor,  daun  telinga, jumlah jari tungkai depan  dan belakang. Masing-masing  kelompok  perlakuan kemudian  dibandingkan  (Wilson  & Warkany, 1975).

## Analisis Data
Untuk mengetahui adanya
pengaruh  perlakuan  terhadap  jumlah fetus  hidup,  fetus  mati  dan  resorpsi, berat  badan  fetus,  dan  morfologi  fetus pada  kelompok  pembanding  maka  data dianalisa  dengan  uji Analisis  of  Varians ( Anova ), menggunakan program komputer  SPSS  17.00  dan  dilanjutkan dengan  uji  Duncan’s  untuk  melihat perbedaan pengaruh masing-masing perlakuan (Walpole & Myers, 1995).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini mengenai pengaruh hidrokuinon terhadap perkembangan fetus mencit, berat badan induk  mencit  sebelum  dikawinkan  dan berat badan induk mencit umur kebuntingan  18  hari.  Perkembangan fetus  mencit  yang  diamati  meliputi: jumlah fetus hidup, jumlah fetus mati di dalam  uterus  (IUFD),  kecacatan  NTDs. Untuk  pengamatan  morfologi  meliputi berat badan fetus mencit serta mengamati  adanya  kelainan  eksternal pada fetus dan menghitung jumlah fetus yang mengalami kelainan. Sampel dapat dilihat  pada  penjelasan  di  bawah  ini:
Tabel 1 Hasil Uji Homogenitas rerata berat badan induk mencit sebelum dikawinkan
Dosis (mg/kgBB) Jumlah Induk Mencit (Ekor) Berat badan induk mencit (g)  Mean ± SD (p value) K1 (0) K2 (0) K3 (10) K4 (20) K5 (30) 5 5 5 5 5 21,20 ± 0,83 21,00 ± 1,00 21,20 ± 0,83 20,20 ± 0,44 20,80 ± 0,83 0,472
Lavene test, α = 0,05
Dari Tabel 1 didapatkan hasil uji homogenitas berat badan mencit antar kelompok sebelum dikawinkan pada semua perlakuan di peroleh nilai p=0,472 (p>0,05) (lampiran 2). Hal  ini  menunjukkan  bahwa  berat  badan  induk  mencit  sebelum  dikawinkan  pada seluruh kelompok homogen, sehingga persyaratan penelitian eksperimental terpenuhi dan dapat dilanjutkan.
Tabel 2  Rerata berat badan induk mencit umur kebuntingan 18 hari
Dosis (mg/kgBB) Jumlah Induk Mencit (Ekor) Berat Badan Induk (g) Mean ± SD p value KI (0) K2 (0) K3 (10) K4 (20) K5 (30) 5 5 5 5 5 49,20 ± 0,8 a
48,20 ± 1,30 a 48,00 ± 0,70 a.b
46,00 ± 0,70 b 39,00 ± 2,96 c 0,000
Uji Anova p value < 0,05
Keterangan : huruf yang sama dibelakang angka menunjukkan tidak adanya perbedaan
Gambar 1 Histogram Rerata berat badan induk mencit
Dari  Tabel  2  didapatkan  hasil analisis of varian ( Anova ) menunjukkan perbedaan  yang  bermakna  p=0,000 yakni (p< 0,05) (lampiran 2). Pemberian  hidrokuinon  berpengaruh secara  signifikan  terhadap  berat  badan induk  mencit.      Untuk  mengetahui perbedaan  antar  kelompok  perlakuan dilanjutkan  dengan  Uji  Duncan’s,
dimana hasilnya menunjukkan penurunan  berat  badan  induk  mencit
pada  umur  kebuntingan  18  hari  pada dosis  10mg/kgbb  tidak  berbeda  nyata dengan kontrol sedangkan pada dosis 20 mg/kgbb, dan 30 mg/kgbb berbeda nyata dengan kelompok kontrol.
Pada perlakuan dosis 10
mg/kgbb,  20  mg/kgbb,  memberikan pengaruh  yang  sama  terhadap  berat badan induk mencit pada umur kebuntingan  18  hari.  Penurunan  berat badan  induk  mencit  pada  kelompok
,000 5,000 10,000 15,000 20,000 25,000 30,000 35,000 40,000 45,000 50,000 K1 K2 10 20 30 39,00 B e rat B ad an in d u k m e n ci t (g) Kelompok Perlakuan (mg/kgbb) 49,20 48,00 48,00 46,00
perlakuan  dosis  10  mg/kgbb  rata-rata 1,20  g,  pada  perlakuan  dosis    20 mg/kgbb rata-rata 3,20 g  dan pada dosis 30 mg/kgbb penurunan rata-rata 10,20 g. Semakin  tinggi  dosis  yang  diberikan maka  semakin  besar  pula  penurunan berat  badan  induk  mencit.  Dalam penelitian  ini  pemberian  hidrokuinon
terhadap  induk  mencit  setelah  umur kebuntingan 6 hari  mampu menurunkan berat  badan  induk  mencit.  Penurunan berat  badan  induk  mencit  berhubungan erat  dengan  agen  yang  masuk  ke  dalam tubuh  mencit  yang  mempengaruhi  sel- sel  jaringan  dan    metabolisme  sel  (Mc Caskey, et al. , 1997)
Tabel 3 Rerata berat badan fetus mencit antar kelompok Dosis (mg/kgBB) Jumlah Induk Mencit (Ekor) Berat Badan Fetus (g) Mean ± SD p value KI (0) K2 (0) K3 (10) K4 (20) K5 (30) 5 5 5 5 5
1,48 ± 0,18 a
1,45 ± 0,31 a 1,26 ± 0,01 b 1,12 ± 0,52 bc 1,00 ± 0,08 c 0,000
Uji Anova p value < 0,05
Keterangan : huruf yang sama dibelakang angka menunjukkan tidak ada beda nyata.
Gambar 2 Histogram Rerata barat badan fetus mencit 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 1,4 1,6 K1 K2 10 20 30 1,00 B e rat B ad an Fet u s (g) Kelompok Perlakuan (mg/kgbb) 1,12 1,26 1,45 1,48
A B C D E Gambar 3 Kelompok Penurunan Fetus Mencit Keterangan : Fetus A Kelompok pembanding Fetus B Kelompok kontrol Fetus C Kelompok Dosis 10mg/kgbb Fetus D Kelompok Dosis 20mg/kgbb Fetus E Kelompok Dosis 30mg/kgbb
Dari  Tabel  3  dapat  dilihat  hasil Uji Anova menunjukkan  bahwa  berat badan  fetus  mencit  antar  kelompok perlakuan  terdapat  perbedaan  bermakna p =0,000 (p<0,05) (lampiran 2), sehingga dapat  disimpulkan  bahwa  pemberian hidrokuinon  berpengaruh  terhadap  berat badan  fetus  mencit.  Semakin  tinggi dosis  hidrokuinon  maka  rerata    berat badan fetus mencit semakin turun.  Hasil analisis  Uji  Duncan’s  dapat  diketahui bahwa  pemberian  hidrokuinon  dosis  10 mg/kgbb  mempunyai    pengaruh  yang berbeda  dengan    kelompok  kontrol  dan kelompok  pembanding  terhadap  berat badan  fetus  mencit.  Begitu  pula  pada perlakuan  20mg/kgbb  dan  30  mg/kgbb memberikan  pengaruh  yang  berbeda terhadap kelompok kontrol dan kelompok pembanding.
Dari  Tabel  3  dapat  diketahui
bahwa  pemberian  hidrokuinon  terhadap induk  mencit    bunting  cenderung menyebabkan  penurunan  berat  badan fetus  mencit  pada  perlakuan,  jika dibandingkan  dengan  pembanding  dan kontrol.  Analisis  untuk  semua  dosis berbeda nyata. Hal ini berarti hidrokuinon  memberikan  efek  terhadap penurunan  berat  badan  fetus  mencit. Semakin  tinggi  dosis  hidrokuinon  yang
diberikan  akan  semakin  turun  berat badan  fetus  mencit.  Penurunan  berat badan  fetus  akibat  hidrokuinon  diduga disebabkan  oleh  efek  degeneratif  pada perkembangan sel sesuai dengan pendapat Liska (1975) yang menyatakan penurunan  berat  badan  fetus  mencit merupakan respon umum akibat kontaminasi hidrokuinon yang mempunyai  efek  degeneratif  terhadap proliferasi sel, interaksi sel, pengurangan  asam  nukleat  dan  protein selama  embriogenesis.    Hal  tersebut terlihat dari indikasi terjadinya gangguan dan hambatan pertumbuhan. Menurut Shalka (1985) penurunan
berat  badan  fetus  mencit  merupakan bentuk efek paling ringan dan parameter yang sensitif untuk teratogen di bandingkan  dengan  malformasi  dan kematian.  Terjadinya  penurunan  berat badan fetus mencit merupakan perwujudan  dari  adanya  abnormalitas pertumbuhan.
Tabel 4 Rerata jumlah Fetus Hidup, jumlah Fetus Mati dalam uterus (IUFD) Dosis (mg/kgBB Jumlah Induk Mencit (Ekor) Jumlah Fetus Hidup (g) Mean ± SD Jumlah Fetus Resorpsi p value KI (0) K2 (0) K3 (10) K4 (20) K5 (30) 5 5 5 5 5 8,60 ± 0,894 a
9,00 ± 1,581 a 6,80  ± 0,837 b 6,00 ± 1,225 b 4,80 ± 0,837 c 0 0 0 0 0 0,000
Uji Anova p value < 0,05
Keterangan : huruf yang sama dibelakang angka menunjukkan tidak adanya perbedaan.

## Gambar  4 Histogram Rerata  Jumlah Fetus Mencit
Dari  Tabel  4  menunjukkan bahwa  jumlah  fetus  mencit  hidup antar  kelompok    perlakuan  dengan kelompok pembanding dan kelompok kontrol terdapat perbedaan bermakna p<0,05 (p=0,000) (lampiran  2)  maka  dilanjutkan  uji Duncan’s. Hasilnya diketahui bahwa jumlah    fetus  hidup  menurun  seiring dengan  makin  meningkatnya  dosis hidrokuinon. Pada kelompok pembanding  dan  kelompok  kontrol tidak ada perbedaan terhadap jumlah
fetus  hidup. Hidrokuinon pada dosis 10  mg/kgbb  dan  pada  dosis  20 mg/kgbb memberikan pengaruh yang sama  terhadap  penurunan  jumlah fetus hidup, sedangkan pada dosis 30 mg/kgbb  memberi  pengaruh  yang berbeda terhadap jumlah fetus hidup.
Dari  Tabel  4  dapat  dilihat jumlah  fetus  hidup  pada  kelompok kontrol  dan  kelompok  pembanding jika  dibandingkan  dengan  jumlah fetus hidup pada kelompok perlakuan hidrokuinon  cenderung  mengalami
,000 1,000 2,000 3,000 4,000 5,000 6,000 7,000 8,000 9,000 K1 K2 10 20 30 Ju m lah Fet u s (e ko r) Kelompok perlakuan (mg/kgbb) 8,60 9,00 6,80 6,00 4,80
penurunan.  Semakin  besar  dosis yang  diberikan  pada  induk  mencit semakin  menurun  jumlah  fetus  yang dikandungnya.  Penurunan  jumlah fetus pada  penelitian  ini  bisa disebabkan  oleh  kesehatan  dan ketahanan induk mencit yang menurun akibat pemberian hidrokuinon sehingga daya reproduksinya menjadi menurun pula
(Rugh,  1968).  Pemberian  teratogen yang  mengganggu  proses  implantasi pada  akhirnya  akan  menurunkan jumlah  fetus  pada  tiap  induk  mencit (Wilson,  1973).  Jika  suatu  toksikan diberikan  pada  tahap  organogenesis maka senyawa toksikan tersebut akan mempunyai  efektivitas  yang  tinggi untuk menghasilkan kerusakan embrio (Gilbert, 1999). Tabel 5 Rerata jumlah IUFD antar kelompok perlakuan Dosis (mg/kgBB Jumlah Induk Mencit (Ekor) Jumlah IUFD (ekor) p value KI (0) K2 (0) K3 (10) K4 (20) K5 (30) 5 5 5 5 5 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 0,20 ± 0,14 0,431
Uji Anova p >0,05
Gambar 5 Fetus mencit mati dalam uterus (IUFD)
Dari Tabel 5 Uji Anova menunjukkan  bahwa  perbedaan  IUFD antar  kelompok    perlakuan  tidak terdapat    perbedaan  bermakna  ( p value =0,431).  Pada  dosis  30  mg/kgbb IUFD  sebesar  0,20  ±  0,14  sedangkan pada  kelompok  pembanding,  kelompok kontrol  dan  kelompok  perlakuan  dosis 10 mg/kgbb dan dosis 20 mg/kgbb tidak ada  Fetus  Mencit  yang  mengalami IUFD.  Penurunan  rerata  fetus  hidup pada  kelompok  perlakuan  hidrokuinon 30  mg/kgbb  berhubungan  dengan  calon fetus  yang  akan  terbentuk  mengalami kematian  intrauterin.  Embrio  yang
mengalami  perkembangan  sangat  parah akan mati sebelum lahir . Hal ini terjadi karena  kelainan  struktural  maupun fungsional  yang  sangat  besar,  sehingga tidak mampu beradaptasi untuk bertahan hidup (Lu, 1995).
Teratogen mendorong munculnya gangguan sirkulasi darah yang mengandung  agensia  toksik  sehingga berakibat kurangnya energi dalam metabolisme  yang  dapat  mempengaruhi reaksi  spontan  yang  menyebabkan kematian fetus mencit (Meiniel, 1977).
Tabel  6  Rerata  Kelainan  kecacatan  fetus  mencit  dari  induk  yang  diberi       hidrokuinon secara intraperitoneal pada umur 6 hari kebuntingan Dosis (mg/kgBB Jumlah Fetus Hidup (Ekor) Kecacatan Fetus Mencit Cacat Telinga Cacat Tungkai Depan Cacat Jari Tungkai Depan Cacat Tungkai Belakang Cacat ekor KI (0) K2 (0) K3 (10) K4 (20) K5 (30) 43 45 43 30 24 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 0,40 ± 0,25 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 0,20 ± 0,12 0,20 ± 0,12 0,60 ± 0,34 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 0,20 ± 0,13 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 a 0,00 ± 0,00 a 0,20 ± 0,13 b 0,40 ± 0,24 bc 0,80 ± 0,44 c 0,00 ± 0,00 a 0,00 ± 0,00 a 0,20 ± 0,13 b 0,40 ± 0,23 bc 0,80 ± 0,44 c
Dari  Tabel  6  memperlihatkan  bahwa  terjadinya  kelainan  kecacatan  fetus  mencit pada gambar di bawah ini :
A B C D E Gambar 4.6  Kecacatan fetus mencit Keterangan : - A. Cacat tidak ada daun telinga ( anotia )
- B . Cacat tidak ada jari tungkai depan  kiri
- C. Tungkai depan kanan bengkok
- D. Tungkai belakang kiri buntung
- E . Cacat ekor pendek
Berdasarkan uji Anova, diperoleh p<0,05  pada  masing-masing  parameter kejadian  cacat  tungkai  belakang,  cacat ekor,  dan  okronosis.  Berarti  pemberian perlakuan hidrokuinon memberikan pengaruh  yang  signifikan  terhadap kecacatan    dalam  antar  kelompok perlakuan,  sedangkan  pada  kecacatan telinga  (p=0,62)  ditemukan  pada  dosis 30  mg/kgbb  tetapi  belum  berbeda  nyata dengan  kelompok  pembanding  dan kelompok  kontrol,  jari  tungkai  depan
(p=0,431)  ditemukan  hanya  pada  dosis 20  mg/kgbb  dan  belum  berbeda  nyata dengan  kelompok  pembanding  dan kelompok kontrol, tungkai depan (p=0,113)  ditemukan  mulai  dosis  10 mg/kgbb  tetapi  masih  belum  berbeda dengan  kelompok  pembanding  dan kelompok kontrol, IUFD (p=0,431), dan NTDs  (p=0,431)  pada  uji Anova tidak menunjukkan perbedaan yang bermakna.
Cacat  tungkai  belakang  dan  ekor ditemukan  mulai  dosis  10  mg/kgbb  dan meningkat  sesuai  peningkatan  dosis berbeda nyata pada dosis 30 mg/kgbb.
Kecacatan  cenderung  meningkat sesuai  dengan  dosis  yang  diberikan, semakin  tinggi  dosis  yang  diberikan cenderung  semakin  banyak  kecacatan. Kecacatan  terjadi  akibat  agen  masuk  ke dalam  tubuh terakumulasi pada jaringan sel  mempengaruhi  sensitifitas  kanal  sel yang mengakibatkan gangguan mekanisme  pengaturan  Ca 2+ merupakan awal  dari  terjadinya  cedera  sel  yang pada  akhirnya  tidak  bisa  berkembang secara sempurna. Pada fase organogenesis terjadi diferensiasi dimana  sel-sel  membentuk  kelompok khusus  yang  mempunyai  kesamaan fungsi  yang  di  sebut  organ.  Urutan kejadian  organogenesis  menunjukkan bahwa tiap organ dan sistem mengalami masa  kritis  dimana  diferensiasi  harus terjadi  pada  saat  yang  tepat  dari perkembangan pra-lahir. Fase organogenesis  ini  merupakan  fase  yang paling  peka  untuk  terjadinya  kecacatan anatomik yang spesifik sehingga fase ini di  sebut  juga  periode  teratogenik  (Lina, 2008).
Kecacatan  pada  telinga,  tungkai depan,  jari  tungkai  depan,  tungkai belakang  dan  ekor  diduga  disebabkan oleh  terhambatnya  osteogenesis  pada organ tersebut. Osteogenesis merupakan proses pembentukan tulang yang berasal dari embrionic  hyaline  cartilage, proses
ini  dilakukan  oleh  osteoblas.  Apabila nutrien yang di suplai dari induk embrio mengandung  agensia  toksik  maka  akan menyebabkan hambatan dalam pembentukan  tulang  (Leeson, et  al., 1996). Mekanisme secara seluler kelainan  cacat  pada  telinga,  tungkai depan,  jari  tungkai  depan,  tungkai belakang  dan  ekor  terjadi  melalui hambatan  mitosis  sel-sel  kartilago  pada proses  pembentukan  tulang.  Hambatan mitosis  sel-sel  kartilago  terjadi  mulai mekanisme  cAMP  yang  mengontrol hambatan akselerasi pertumbuhan
(Pozner.  dkk.,  1986).  Hal  ini  karena hidrokuinon  mampu  melewati  sawar plasenta  dan  masuk  ke  dalam  cairan intraseluler. Hidrokuinon mampu menghambat aktifitas enzim fosfodiesterase yang menghidrolisis cAMP, sehingga hidrolisis cAMP tertunda yang akibatnya terjadi
peningkatan konsentrasi cAMP di dalam sel-sel  dan  jaringan  fetus  (Pozner,  dkk, 1986).  Diduga  peningkatan  konsentrasi cAMP  di  dalam  sel-sel  yang  berperan dalam osteogenesis pada telinga, tangan, jari,  kaki,  dan  ekor  akan  menghambat osteogenesis pada organ tersebut. Penelitian ini menunjukkan bahwa  pengaruh  hidrokuinon  dapat menimbulkan  abnormalitas  fetus  pada semua kelompok perlakuan dibandingkan dengan kelompok pembanding dan kelompok kontrol tidak terjadi kecacatan. Tabel 7 Rerata NTDs antar kelompok perlakuan Dosis (mg/kgBB) Jumlah Induk Mencit (Ekor) Kecacatan NTDs (ekor) p value K1 (0) K2 (0) K3 (10) K4 (20) K5 (30) 5 5 5 5 5 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 0,20 ± 0,10 0,431 Uji Anova p >0,05
A B
Gambar 7 Fetus yang mengalami NTDs Keterangan : A. diambil darisamping tegak lurus,
B. di ambil dari atas
Dari  Tabel  7    hasil  uji  Anova menunjukkan  bahwa  kecacatan  pada NTDs  antar  kelompok  perlakuan,  tidak terdapat perbedaan bermakna ( p =0,431). Pada  hidrokuinon  dosis  30  mg/kg  bb rerata  kecacatan    NTDs  0,20  ±  0,10 sedangkan  pada  kelompok  pembanding, kelompok kontrol dan hidrokuinon dosis 10 mg/kg bb dan 20 mg/kg bb tidak ada fetus yang mengalami kecacatan NTDs . NTDs  merupakan    :  sel-sel  plat  saraf ( Neural  Plate )  membentuk  sistem  pada janin.  Pada  pertumbuhan  normal  sel-sel tersebut  saling  melipat  satu  sama  lain untuk membentuk bumbung atau tabung saraf  yang  selanjutnya  membentuk menjadi  tulang  punggung  dan  urat sarafnya, setelah beberapa kutub utama/ supperior pole akhirnya membentuk  menjadi  otak.  NTDs  gagal menutup  secara  sempurna  Anensephali ujung  tabung  saraf  gagal  menutup akhirnya  lahir  tanpa  kulit  kepala  hanya ditutupi  selaput  tipis  (Whysner, et  al. , 1995). Menurut penelitian George (1997) yang  dilakukan  pada  ibu  hamil  bahwa penyebab  NTDs  yaitu:    Kekurangan asam  folat,  Vitamin  B,  serta  asap  rokok dan  polusi.  Asap  rokok  dan  polusi adalah 2 hal yang paling jahat bagi janin pada  waktu  kehamilan  muda  yang berpengaruh  pada  perkembangan  sel-sel
sehingga  bayi  lahir  dengan  kulit  kepala tidak terbungkus secara sempurna.
Menurut  laporan  USEPA  (1995) 5x104 kg hidrokuinon dihasilkan pertahun selama produksi rokok.
Hidrokuinon dilepaskan lewat udara  2% selama  produksi  rokok  yang  bisa mencemari  lingkungan  (Taylor,  1995). Bila  pencemaran  tersebut  terhirup  oleh manusia  maupun  hewan  terutama  pada ibu  hamil  bisa  berpengaruh  terhadap perkembangan  embrio  dan  kelainan kerangka janin (Stevenson,  1997).
Sejalan  dengan  penelitian  George (1997)  penyebab  NTDs  adalah  asap rokok  dan  polusi.  Menurut  peneliti pemberian  hidrokuinon  pada  induk mencit  umur  kebuntingan  6  hari  yang diberikan  secara  intraperitoneal  diduga memberikan  efek  langsung  terhadap NTDs  janin  mencit  walaupun  hanya  di dapatkan  satu  ekor  pada  dosis  30 mg/kgbb.
Tabel 8 Rerata Okronosis antar kelompok perlakuan Dosis (mg/kgBB Jumlah Induk Mencit (Ekor) Kecacatan Okronosis (ekor) p value KI (0) K2 (0) K3 (10) K4 (20) K5 (30) 5 5 5 5 5 0,00 ± 0,00 a
0,00 ± 0,00 a 0,00 ± 0,00 a
0,40 ± 0,24 b 0,60 ± 0,54 c 0,030
Uji Anova p <0,05 A
B C D E
Gambar 8 Fetus mencit kulit hitam kebiru-biruan berbintil-bintil (okronosis) Keterangan : Fetus A, B, C, D, E Kecacatan hitam kebiru-biruan pada kulit bagian perut
Dari  Tabel  8  hasil  uji  Anova menunjukkan  bahwa  okronosis  antar kelompok  perlakuan  terdapat  perbedaan bermakna  ( p =0,030).  Semakin  tinggi dosis  hidrokuinon  maka  semakin  besar rerata  okronosis  pada  fetus  sedangkan pada  kelompok  pembanding,  kelompok kontrol dan hidrokuinon dosis 10 mg/kg bb  tidak  ada  fetus  yang  mengalami okronosis.
Berdasarkan  hasil  uji  Duncan’s bahwa pemberian perlakuan hidrokuinon 20mg  dan  30mg  memberikan  pengaruh yang  sama  terhadap  kejadian  okronosis pada  fetus.  Kejadian  okronosis  pada kelompok  4  perlakuan  hidrokuinon 20mg  mengalami  okronosis  2  ekor  dan pada perlakuan  hidrokuinon  dosis  30mg mengalami  okronosis  3  ekor.  Okronosis berbeda  nyata  mulai  pada  dosis  20 mg/kgbb  meningkat  pada  dosis  30 mg/kgbb. Hidrokuinon cenderung merupakan  zat  yang  bersifat teratogenik masuk  kedalam  tubuh  induk  mencit selama kehamilan dan mengikuti sikulasi  darah  yang  dapat  menembus
plasenta  barrier  (Darmono,  2008).  Zat tersebut  terakumulasi  dalam  plasenta serta  cairan  amnion,  dari  plasenta dengan  tali  pusat  fetus  mencit  di hubungkan  dengan  umbilikal  sehingga dengan mudah didifusikan pada jaringan perut  yang  juga  merupakan  jaringan lunak maka terjadilah okronosis (Maibach, 1997).

## SIMPULAN
Hidrokuinon  dapat  berpengaruh terhadap berat badan induk, berat badan fetus,jumlah  fetus  hidup,  fetus  mati dalam  uterus  (IUFD),  morfologi  fetus dan okronosis.

## SARAN
Agar penelitian ini dapat di teliti lebih lanjut  untuk  meneliti histopatologi dari  organ  –  organ  dalam  dari  fetus mencit.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Almahdy,  2004.    Uji  aktivitas Teratogenitas ekstrak Etanol Daun  Inggu  (Ruta  Graveolen Linn)  pada  Mencit  Putih, Jurnal sains  dan  Teknologi  Farmasi, Vol. 9. P.2. 2. American Indutrial, 1978. Hygiene Association “ Hydroquinone ”  Hygiene  Guide Series, Detroid. 3. Barber,  ED,  Hill,  T.,  dan  Schum, DB (1993). Penyerapan Hidroquinon  (HQ)  melalui  Kulit InVitroTikus dan Manusia . Toksikologi hal.168-172 4. Briggs and Calvin, 1987. Ecophysiology  of  photosinthesis. Springerverlag Berlin Heidelberg1: 576-560. 5. Burgaz  S,  Ozcan  M,  1994. Effect of  hydroquinone  (HQ)  on  the development  of  chick  embryos. Drug Chem Toxicol 17:163-174.
6. Cambel,  N.  A;  2000. Biologi.
Edisi  5  jilid  3.  Terjemahan.
Jakarta: Erlangga
7. Carlson and Brewer, 1953. Toxicity  Studies  on  Hydroquinon ,
Proc.  Soc.  Exper.Biol.  Med. 84,684-688.
8. Ciranni,  1988. Benzene and  the genotoxicity  of  its  metabolites. I transplacental  activity  in  mouse fetuses.
9. Cosmetic Ingredient Review (CIR),  1994.  Addendum  to  the final report in the safetyassessment of hydroquinone. Journal  of  the American  College  of  Toxicology
13: 167-230.
10. Cox  and  Phelan,  2009.  Food safety  in  pregnancy: putting  risks into perspective part 1. Contemporary  OB/GYN,  54 , 11, 44. 11. Darmono, 2001. Hidrokinon dalam  Sistem  Biologi  Makhluk
Hidup. Universitas Indonesia .Press. Jakarta. 12. Deisinger, 1996 . Human exposure to naturally occuring hydroquinon. Journal of Toxicology  and  Environmental Health . 47: 101-116. 13. Drobnis,  E.  Z.  1993.Capacitation and  Acrosome.  In  Zinaman,  MJ and Sciali, AR (Editor) Reproductive Toxicology an Infertility. P. 10 14. Easmond, 1987. An interaction of benzene  metabolites  reproduces the  myelotoxity  observed  with benzene exposure. Toxicology and Applied  Pharmacology 91:  85  – 95
15. Frank, C. 1995 Toxicology Dasar: Asas Organ Sasaran dan Penilaian Resiko.(Ed. 2), Penerbit Universitas Indonesia Jakarta. 154-168. 16. Frenk E, Loi.Z.P, 1980, Occupasional Depigmentation due a hydroquinon containing photografik developer contract .Dermatitis 6: 238-239. 17. Gad, El, 1986. Correlation between the induction of micronuclei  in  bone  marrow  by benzene exposure and the excretion of metabolites in urine.
18. George  JD,  Price  CJ,  2001. Evaluation  of  the  developmental toxicity  insoeguenol  in Sprague- Dawley (CD)  rats. Toxicol  Sci
60:112-120 19. Gilbert, Scott. F. 1991 Developmental  Biology. (  3 th
Edition). Sinawer Associates, Inc. Massachusetts, USA. P. 34-37 20. Godlee,  1992.  Skin  lighteners couse  permanent  damage. Br
Med. J. 305:332-333.