Abstrak — Cendawan  entomopatogen  termasuk  salah satu patogen  serangga  yang  cukup  penting  karena  dapat  menekan populasi hama di lapangan. Beauveria bassiana merupakan salah satu  cendawan  entomopatogen  yang  memiliki  kelebihan  dalam menginfeksi  hampir  seluruh  ordo  dan  berbagai  stadia  serangga, sehingga  cukup  prospektif  digunakan  sebagai  alternatif pengganti insektisida  kimia.  Variasi  virulensi  dapat dipengaruhi beberapa  faktor,  baik  faktor  dalam,  yaitu  asal  isolat,  maupun faktor luar seperti medium untuk perbanyakan jamur. Sehingga untuk  meningkatkan  virulensi  cendawan  dapat  dilakukan dengan  cara  menumbuhkannya  pada  media  yang  banyak mengandung  kitin  dari  serangga  atau  diinfeksikan  ulang  pada serangga  inang.  Tujuan  dari  penelitian  ini  untuk  mempelajari pengaruh  kitin  terhadap  pertumbuhan Beauveria  bassiana . Metode  yang  digunakan  dengan  cara  menambahkan  kitin serangga  ( Tenebrio  molitor ),  cangkang crustacea ( Penaeus merguiensis ),  dan  cangkang mollusca ( Anadara  inflata )  pada media  pertumbuhan  cendawan.  Berdasarkan  hasil  pengamatan, perlakuan yang paling baik ada pada P 2.2 dengan menunjukkan pertumbuhan  diameter  koloni  lebih  cepat  dibandingkan  lainnya yaitu  mencapai  5.5  cm  dalam  waktu  20  hari.  Serta  karakter koloninya  adalah wholly yang  mengindikasikan  pertumbuhan miselium yang lebih cepat.
Kata  Kunci — Beauveria  bassiana,  cendawan,  entomopatogen, kitin, virulensi.

## I. PENDAHULUAN
ENINGKATAN  prevalensi  serangan  hama  serangga  saat ini  disebabkan  oleh  perubahan  iklim.  Pengendalian  hama serangga saat ini masih mengandalkan penggunaan insektisida kimia, akan tetapi belum menunjukkan hasil positif. Alternatif pengendalian  hama  secara  biologis  menggunakan  hasil metabolit  sekunder  suatu  organisme  tertentu.  Pada  jenis tanaman  tertentu  telah  diketahui  sebagai  insektisida  potensial karena  mengandung  senyawa  aktif  ,  seperti  minyak  esensial, saponin,  tanin,  alkaloid,  fenol,  flavonoid,  alkana,  dan terpenoid  [1].  Selain  itu  juga  dapat  menggunakan  cendawan entomopatogen [2]. Cendawan entomopatogen termasuk salah satu  patogen  serangga  yang  cukup  penting  karena  dapat menekan  populasi  hama  di  lapangan.  Beberapa  jenis cendawan  entomopatogen  yang  telah  dimanfaatkan  untuk mengendalikan hama tanaman perkebunan dan sayuran adalah Metarhizium  anisopliae , Beauveria  bassiana , Paecilomyces sp., Lecanicillium sp., dan Spicaria sp. Pemanfaatan cendawan entomopatogen  untuk  mengendalikan  hama  merupakan  salah satu komponen Pengendalian Hama Terpadu (PHT) [3].
B.  bassiana (Bals.)  Vuil.  merupakan  entomopatogen kosmopolitan,  tumbuh  alami  di  tanah    dan  bersifat  patogen pada  spesies  serangga  tertentu  dan  beberapa  isolat  dari B. bassiana telah  dikomersialkan  [4]. B.  bassiana memiliki koloni  berwarna  putih,  hifa  pendek,  dan  bentuk  spora  bulat [5]. Konidiofor memiliki bagian fertil yang bercabang dengan bentuk zig-zag dan di  ujungnya terbentuk konidia  yang  mirip bola.  Konidia  memiliki  dinding  yang  licin,  diameter  2- 3 μm, dan  bersifat  hidrofob.  Hifa  hialin,  berbentuk  massa  yang berwarna  putih  atau  kuning  pucat,  namun  kadang  berwarna merah  muda  atau  kemerahan  [6]. B.  bassiana merupakan spesies  jamur  yang  sering  digunakan  untuk  mengendalikan serangga. B. bassiana menghasilkan racun (toksin) yang dapat mengakibatkan  paralisis  secara  agresif  pada  larva  dan  imago serangga [7]. Beberapa racun yang telah berhasil diisolasi dari B. bassiana antara lain Beauvericine, Beauverolide, Isorolide, dan zat warna serta asam oksalat [6].
B.  bassiana merupakan  spesies  cendawan  yang  sering digunakan  untuk  mengendalikan  serangga  karena  dapat menginfeksi  hampir  seluruh  ordo  dan  berbagai  stadia serangga,  sehingga  cukup  prospektif  digunakan  sebagai alternatif  pengganti  insektisida  kimia  [8][9].  Beberapa keunggulan  biopestisida  dari  cendawan B.  bassiana sebagai agen  hayati  untuk  pengendalian  hama  antara  lain:  (1)  mudah diperbanyak  atau  dikembang  biakan  di  media  alami  atau buatan,  (2)  tidak  menyebabkan  resistensi  pada  hama  sasaran, (3)  aman  terhadap  lingkungan,  sumber  air,  maupun  ternak, serta  (4)  kualitas  produk  yang  dihasilkan  semakin  meningkat karena produk yang dihasilkan bebas residu [10].
Kelemahan  biopestisida  yang  berasal  dari B.  bassiana adalah penurunan virulensi akibat produksi secara massal pada media  alami.  Variasi  virulensi  dapat  dipengaruhi  beberapa faktor, baik faktor dalam  yaitu asal isolat, maupun faktor luar seperti  media  pertumbuhan  [11].  Kondisi  ini  disebabkan cendawan  entomopatogen  bersifat  parasit  dengan  cara menginfeksi  serangga  inang  sebagai  sumber  makanan  untuk perkembangbiakan  cendawan.  Kitin  merupakan  salah  satu sumber  karbon  yang  sangat  diperlukan  untuk  perkecambahan konidia  cendawan  [12].  Pertumbuhan  hifa  dan  sporulasi dipengaruhi  oleh  keberadaan  nutrien  pada  medium.  Karbon dan  nitrogen  yang  bersumber  dari  komponen  medium merupakan unsur penyusun karbohidrat, asam nukleat, protein dan  lipid.  Molekul-molekul  kompleks  tersebut  merupakan makromolekul utama penyusun sel hifa dan konidia cendawan

## Pengaruh Penambahan Senyawa Berbasis Kitin terhadap Pertumbuhan Cendawan Entomopatogen Beauveria bassiana
Faradiba Lazuardi Rohman, Triono Bagus Saputro, dan Yusmani Prayogo Departemen Biologi, Fakultas Ilmu Alam, Institut Teknologi Sepuluh Nopember (ITS)
Balai Penelitian Tanaman Aneka Kacang dan Umbi (Balitkabi)
e-mail : trionobsaputro@bio.its.ac.id
P
[13]. Isolat yang virulen cenderung memiliki viabilitas konidia yang tinggi.
Sehingga  untuk  meningkatkan  virulensi  cendawan  dapat dilakukan  dengan  cara  menumbuhkannya  pada  media  yang banyak  mengandung  kitin  dari  serangga  atau  diinfeksikan ulang pada serangga  inang.  Oleh  karena itu dalam penelitian ini digunakan penambahan kitin untuk meningkatkan virulensi cendawan  dengan  menggunakan  beberapa  variasi  kitin  yang diperoleh  dari  kitin  serangga  ( Tenebrio  molitor ),  cangkang crustace  ( Penaeus  merguiensis ),  dan  cangkang  mollusca ( Anadara  inflata ). Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mempelajari pengaruh kitin terhadap pertumbuhan B. bassiana .

## II. METODOLOGI
Waktu dan Tempat A.
Perlakuan  dan  pengamatan  pertumbuhan  cendawan B. bassiana dilaksanakan  di  Laboratorium  Biosains  dan Rekayasa  Tumbuhan  Departemen  Biologi  FIA  Institut Teknologi  Sepuluh  Nopember  Surabaya  dan  di  Laboratorium Biopestisida  Balai  Penelitian  Tanaman  Aneka  Kacang  dan Umbi  (BALITKABI).  Perlakuan  selama  persiapan  sampai pemanenan  dimulai  dari  bulan  Agustus    2016  sampai  bulan Januari 2017.
Alat dan Bahan B.
Alat  yang  dibutuhkan  dalam  praktikum  ini  adalah, Autoclave , Laminair  Air  Flow (LAF), Hot  Plate ,  Oven, Timbangan analitik,  Mikroskop compound , Mortar & pestel , Saringan  bertingkat,    Pinset,  Pipet  tetes,  Pisau,    Panci,  Botol kaca  100  ml,  Cawan  petri  diameter  9  cm,    Gelas  ukur,  Gelas beaker,  Gelas  pengaduk,  Jarum  ose,    Penggaris,  Sendok, Corong, Bunsen.
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  antara  lain adalah  isolat  cendawan  entomopatogen B.  bassiana ,  yang diperoleh dari koleksi Laboratorium Biopestisida BALITKABI.  Kitin  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini berasal dari kitin serangga ( T. molitor ), cangkang crustace ( P. merguiensis ),  dan  cangkang  mollusca  ( A.    inflata ).  Bahan lainnya yang dibutuhkan adalah  kentang, dextrose , agar-agar, akuades  steril,  alkohol,  asam  laktat,  spirtus, tissue ,  kapas, kertas label, kertas re-use , cling-wrap dan korek api.
Cara Kerja C.
1) Pemurnian Isolat B. bassiana
Isolat B.  bassiana diperoleh  dari  koleksi  Laboratorium Biopestisida  BALITKABI.  Isolat  dimurnikan  pada  media Potato Dextrose Agar dengan metode Agar Plate sebanyak 20 cawan petri. Kemudian isolat diinkubasi selama 21 hari dalam suhu ruang (27° C).
2) Pembuatan tepung kitin
Kitin  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  berasal  dari integumen  serangga,  cangkang crustacea ,  dan  cangkang mollusca .  Serangga  yang  digunakan  adalah T.  molitor . Cangkang  crustacea  yang  digunakan  adalah  cangkang P. merguiensis .  Cangkang  mollusca  yang  digunakan  adalah cangkang A.  inflata .  Masing-masing  jenis  sumber  kitin tersebut  dikeringkan  dibawah  sinar  matahari  selama  3  hari, kemudian  dilanjutkan  dengan  pengovenan  dalam  suhu  65°  C sampai  kering.  Selanjutnya  ditumbuk  hingga  halus  hingga
menjadi  tepung.  Kemudian  tepung  disaring,  ukuran  lolos saringan 0,600 mm yang digunakan.

## 3) Persiapan media kitin
Masing-  masing  jenis  kitin  sebagai  perlakuan  ditambahkan kedalam  media  tumbuh Potato  Dextrose  Agar (PDA). Penambahan  kitin  berdasarkan  konsentrasi  0,5%  dan  1% dalam  200  ml  media  PDA.  Kemudian  media  disterilisasi dalam autoclave selama  30  menit  pada  suhu  121°  C. Perlakuan  kontrol  hanya  menggunakan  media  PDA  tanpa bahan  kitin.  Setelah  disterilisasi  media  tumbuh  dituangkan kedalam  cawan  petri  berdiameter  9  cm  masing-masing sebanyak  10  ml  dan  ditambahkan  1  ml  asam  laktat  0,5%. Dibuat pengulangan sebanyak 3 kali.
4) Inokulasi cendawan B. bassiana pada media kitin
Isolat  cendawan B.  bassiana yang  sudah  dimurnikan  dan ditumbuhkan  pada  media  PDA.  Pada  umur  21  hari  setelah inokulasi (HSI) koloni dilubangi dengan menggunakan tabung reaksi  steril  diameter  1  cm.  Kemudian  dipindahkan  dengan menggunakan  jarum  ose  kedalam  media  pertumbuhan  yang mengandung  kitin  sesuai  jumlah  perlakuan.  Setelah  itu diinkubasi  dalam  suhu  ruangan  (27°  C).  Inkubasi  dilakukan selama  20  hari,  dan  dilakukan  pengukuran  diameter  koloni setiap 5 hari.
5) Karakter Koloni Cendawan B.bassiana
Pada  umur  20  HSI,  pertumbuhan  koloni  cendawan dikarakterisasi  dengan  membandingkan  pola  pertumbuhan koloni  cendawan  berdasarkan  metode  yang  dikembangkan oleh  Rayner  dan  Boddy  (1988)  meliputi  bentuk  atau  pola koloni, warna koloni dan kecepatan pertumbuhan koloni. 6) Rancangan Penelitian dan Analisis Data
Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap Faktorial  (RAL  Faktorial),  ulangan  tiga  kali.  Dengan  dua faktor  berupa  jenis  dan  konsentrasi  kitin.  Kitin  yang digunakan  ada  tiga  jenis  dan  konsentrasi  yang  digunakan  ada dua yaitu 0,5% dan 1%. Disusun sebagai berikut:
P 1.1 = kontrol tanpa kitin P 1.2 = kontrol tanpa kitin P 2.1 = kitin T. molitor konsentrasi  0,5%; P 2.2 = kitin T.molitor konsentrasi 1%;
P 3.1 = kitin P. merguiensis konsentrasi 0,5%;
P 3.2 = kitin P. merguiensis konsentrasi 1%;
P 4.1 = kitin A. inflata konsentrasi 0,5%; P 4.2 = kitin A. inflata konsentrasi 1%.
Data  yang  diperoleh  dari  hasil  pengamatan  akan  dianalisis ANOVA  menggunakan  software  MINITAB  16  untuk mengetahui pengaruh jenis dan konsentrasi kitin yang berbeda terhadap  peningkatan  pertumbuhan  cendawan B.  bassiana . Apabila  didapatkan  perbedaan  yang  nyata  dilanjutkan  uji Tukey  pada taraf nyata α= 5%.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## A. Hasil Laju Pertumbuhan Koloni B. bassiana
Lebih  lanjut  perlakuan  P  2.2  mempunyai  pertumbuhan koloni  lebih  cepat  dibandingkan  dengan  perlakuan  yang  lain. Diameter koloni telah  mencapai 5,5 cm dalam  waktu 20 hari. Sedangkan  pertumbuhan  B.  bassiana  pada  perlakuan  media tumbuh kitin yang lain hanya mencapai kisaran 3-5 cm.
Tabel 1. Rata-rata diameter koloni B. bassiana pada media pertumbuhan kitin 20 hari setelah inokulasi (HSI)
Jenis Kitin (A) Rata-rata diameter koloni (cm) ± hari Konsentrasi (B) 1 2 1 4.2 ± 0.6 c 4.2 ± 0.6 c 2 4.3 ± 0.1 c 5.5 ± 0.2 a 3 3.4 ± 0.2 d 4.4 ± 0.3 bc 4 4.2 ± 0.5 c 4.8 ± 0.9 b
Keterangan: Angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama tidak berbeda nyata menurut uji Tukey pada taraf nyata 5%.
Jenis kitin: (1) kontrol tanpa kitin   Konsentrasi: (1) 0,5%
(2) T. molitor (2) 1%
(3) P. merguiensis
(4) A. Inflata
Pertumbuhan  koloni B.  bassiana terendah  ada  pada perlakuan P 3.1 yang hanya mampu mencapai 3,4 cm diamater koloninya dalam waktu 20 hari.
Perbandingan diamater tertinggi dan terendah menunjukkan perbedaan  yang  signifikan,  hasil  pengamatan  diameter  koloni secara  lebih  lengkap  dapat  dilihat  pada  (Tabel  1). Pertumbuhan koloni B.bassiana dipengaruhi oleh substrat atau media yang mengandung komponen nutrisi untuk pertumbuhan  cendawan.  Jenis  dan  konsentrasi  kitin  yang ditambahkan  didalam  media  pertumbuhan  memberikan pengaruh terhadap laju pertumbuhan koloni B. bassiana . Pertumbuhan hifa dan  sporulasi  dipengaruhi  oleh keberadaan  nutrien  pada  medium.  Karbon  dan  nitrogen  yang bersumber  dari  komponen  medium  merupakan  unsur penyusun  karbohidrat,  asam  nukleat,  protein  dan  lipid. Molekul-molekul kompleks
tersebut
merupakan makromolekul utama penyusun sel hifa dan konidia cendawan [13].  Substrat  kitin  merupakan  sumber  karbon  dan  nitrogen yang  mendukung  pertumbuhan  miselium  dan  pembentukan konidia  cendawan  [14].  Media  tumbuh  juga  harus mengandung  protein  untuk  pembentukan  spora,  hifa  apikal dan organe [15]. Penelitian ini menggunakan media PDA yang ditambahkan  tepung  kitin  dengan  konsentrasi  berbeda  yaitu 0,5%  dan  1%.  Media  PDA  diketahui  terdapat  20  g  dextrose sebagai  sumber  karbohidrat.  Cendawan  mampu  merombak karbohidrat  dan  bahan-bahan  organik  lainnya  dengan  reaksi enzimatik sehingga lebih mudah untuk asimilasi [16]. Substrat kitin merupakan sumber karbon dan nitrogen yang mendukung pertumbuhan  miselium  dan  pembentukan  konidia  cendawan [14].  Hal  serupa  juga  dibuktikan  dalam  penelitian  Wijaya (2012),  penambahan  kitin  kolodial  5%  (b/v),  10%  (b/v), maupun 15%(b/v) pada biakan Metarhizium majus UICC 295 mengindikasikan  adanya  perbedaan  kecepatan  pertumbuhan hifa [13].

## B. Karakter Koloni B. bassiana
Pengamatan  morfologi  koloni  dilakukan  pada  hari  ke-20 masa inkubasi.
Pada  penelitian  ini  8  perlakuan  yang  diuji  menunjukkan bahwa  koloni B.  bassiana memiliki  empat  karakter  yaitu;  (1) cottony (hifa agak panjang dan  menyebar ke segala arah), (2) velvety (hifa  pendek,  lurus  dan  tebal),  (3) wholly (hifa  atau kelompok hifa agak panjang, menebal, berbentuk seperti wol), (4)  zonate  (garis  atau  segmen  konsentris  dengan  tekstur  yang berbeda (Tabel 2).
Tabel 2 Karakteristik tekstur dan warna koloni B. bassiana pada media pertumbuhan kitin Nama Warna Tekstur Deskripsi P 2.2 Putih Wholly Hifa  atau  kelompok  hifa  agak panjang, menebal, berbentuk seperti wol P 4.2 Putih Cottony Hifa  agak  panjang  dan  menyebar ke segala arah P 3.2 Putih Zonate Garis  atau  segmen  konsentris dengan tekstur yang berbeda P 2.1 Putih Wholly Hifa  atau  kelompok  hifa  agak panjang, menebal, berbentuk seperti wol P 4.1 Putih Cottony Hifa  agak  panjang  dan  menyebar ke segala arah P 1.2 Putih Velvety Hifa pendek, lurus dan tebal P 1.1 Putih Velvety Hifa pendek, lurus dan tebal P 3.1 Putih Zonate Garis  atau  segmen  konsentris dengan tekstur yang berbeda
Keterangan:  P  1.1  dan  P  1.2:  kontrol  tanpa  kitin,  P  2.1  dan  P  2.2:  kitin T.molitor 0,5% dan 1%, P 3.1 dan P 3.2: kitin P. merguiensis 0,5% dan 1%, P 4.1 dan P 4.2: kitin A. inflata 0,5% dan 1%.
Dari  8  perlakuan  yang  mengindikasikan  karakter  koloni cottony ada dua yaitu P 4.1 dan P 4.2 (Gambar 1a). Perlakuan yang  membentuk  karakter velvety ada  dua  yaitu  P  1.1  dan  P 1.2  (Gambar  1b).  Karakter  koloni wholly ada  dua  yaitu  P  2.1 dan  P  2.2  (Gambar  1c).  sementara  itu  yang  membentuk karakter koloni zonate ada dua yaitu P 3.1 dan P 3.2 (Gambar 1d).
Gambar. 1. Karakter koloni B. bassiana yang berbentuk cottony (a), velvety (b), wholly (c), zonate.
Penambahan  kitin  pada  konsentrasi  yang  berbeda  tidak menyebabkan perubahan warna koloni cendawan B. bassiana . Warna  koloni B.  bassiana pada  medium  tumbuh  yang mengandung kitin dari jenis kitin yang berbeda T. molitor , P. merguiensis ,  dan A.  inflata adalah  putih,  namun  dengan bertambahnya  umur  maka  koloni  berubah  menjadi  kuning pucat  dan  sedikit  keruh.  Menurut  Rehner  et  al.  (2011) cendawan B.  bassiana yang  virulen  memiliki  karakter  koloni farinaceous dengan  koloni  berbentuk  kapas  dan  bertepung, koloni  berwarna  putih  kemudian  berubah  menjadi  kuning pucat  [16].  Sedangkan  menurut  Prayogo  (2009)  untuk memperoleh  isolat  cendawan Lecanicillium  lecanii yang virulen harus  menseleksi karakter koloni  yang bersifat wholly dengan  pertumbuhan  miselium  lebih  cepat,  miselium  seperti
a
b c d
berbulu, warna putih kapas, dan mampu memproduksi konidia dalam  jumlah  berlimpah.  Pada  perlakuan  P  2.2    memiliki karakter  koloni wholly dan  merupakan  koloni  yang pertumbuhannya  lebih  cepat  dibandingkan  dengan  perlakuan yang  lain.  Karakter  koloni  berhubungan  dengan  karakter fisiologi  yang  lain  seperti  virulensi,  produksi  konidia,  dan periode waktu kecambah [17].

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  pengamatan Beauveria  bassiana yang ditumbuhkan  pada  media  kitin  yang  berbeda  dengan konsentrasi berbeda memberikan pengaruh. Laju pertumbuhan diameter  koloni  tertinggi  ada  pada  (P  2.2) B.  bassiana yang ditumbuhkan di media kitin T. molitor dengan konsentrasi 1%, diameter mencapai 5,5 cm dalam waktu 20 hari masa inkubasi dan  memiliki  karakter  koloni wholly .  Sedangkan  laju pertumbuhan  terendah  ada  (P  3.1)  pada B.  bassiana yang ditumbuhkan  di  media  kitin P.  merguiensis dengan konsentrasi  0,5%,  diameter  hanya  mencapai  3,4  cm  dalam waktu 20 hari dan memiliki karakter koloni zonate .

## DAFTAR PUSTAKA
[1]  K.  I.  Purwani,  D.Ermavitalini,  T.  Nurhidayati,  S.  Nurhatika,  and  T.  B. Saputro, “ Exploration  of  Potential  Plants  as  a  Bio-Insecticide  at  ITS Surabaya Campus, ” KnE Life Sci , vol. 2, p. 662, 2015.
[2]  S. Ondiaka, N. . Maniania, G. H. . Nyamasyo, and J. . Nderitu, “ Virulence of  The  Entomopathogenic  Fungi  Beauveria  bassiana  and  Metharizium anisopliae  to  Sweet  Potato  Weevil  Cylas  puncticollis  and  Effects  on Fecundity and Egg Viability, ” Ann Appl Biol , vol. I – II, pp. 18 – 22, 2008. [3]  N.  Jai,  S.  Rana,  A.  Kanojiya,  and  S.S  Shandu, “ Characterization  of Beauveria  bassiana  Strains  Based  on  Protease  and  Lipase  Activity  and Their  Role  In  Patogenicity, ” J  Basic  Appl  Mycol ,  vol.  I – II,  pp.  18 – 22, 2008.
[4]  Y.  Prayogo,  W.  Tengkano,  and  Marwoto, “ Prospek  Cendawan Entomopatogen  Metarhizium  anisopliae  Untuk  Mengendalikan  Ulat Grayak Spodoptera litura Pada Kedelai, ” J. Litbang Pertan. , vol. 24, no. 1, 2005.
[5]  A.  Nuraida  and  H.  A, “ Isolasi,  Identifikasi  dan  Karakterisasi  Jamur Entomopatogen Dari Rizosfir Pertanaman Kubis, ” J Hort , vol. 19, no. 4, pp. 419 – 432, 2009.
[6]  P.  .  Purnama,  S.  .  Nastiti,  and  J.  Situmorang, “ Uji  Patogenitas  Jamur Beauveria bassiana  (Bals.) Terhadap Aphis  craccivora  Koch, ” BioSmart , vol. 5, no. 2, pp. 81 – 88, 2003.
[7]  S.  Mahr, “ The  Entomopathogen  Beauveria  bassiana, ” University  of Winconsin, Madison, ” Madison, 2016.
[8]  N.  N.  Meyling  and  J.  Eilenberg, “ Ecology  of  The  Entomopathogenic Fungi  Beauveria  bassiana  and  Metarhizium  anisopliae  in  Temperate Agroecosystems:  Potential  for  Conservation  Biological  Control, ” Biol. Control Elsevier , vol. 43, 2007.
[9]  G.  V.  .  Reddy,  Z.  Zhoo,  and  R.  .  Humber, ““ Laboratory  and  Field Efficacy of Entomopathogenic Fungi for The Management of The Sweet Potato  Weevil,  Cylas  formicarius  (Coleoptera:  Brentidae), ” J  Invertebr Pathol , vol. 122, pp. 10 – 15.
[10] R.  Khosvari,  J.  .  Sendi,  A.  Zibaee,  and  Shokrgozar, “ Virulence  of  Four Beauveria  bassiana  (Bals.)  (Asc:  Hypocreales)  Isolates  on  Rose  Sawfly Arge  Rosae  Under  Laboratory  Condition, ” J.  King  Saud  Univ.  Sci ,  vol. 27, no. 1, pp. 42 – 53.
[11] S.  Herlinda,  D.  .  Muhammad,  P.  Yulia,  and  Suwandi, “ Kerapatan  dan Viabilitas  Spora  Beauveria  bassiana  Akibat  Subkultur  dan  Pengayaan Media,  Serta  Virulensinya  Terhadap  Larva  Plutella  xylostella  (Linn.), ” JHPT Trop. , vol. 2, pp. 70 – 80.
[12] Y. Tanada and H.K. Kaya, Insect Pathology . New York: Academic Press, 1993.
[13] C.  K.  Wijaya, “ Pengaruh  Penambahan  Kitin  Kolodial  10%  Pasa Metarhizium  majus  UICC  295  Menginfeksi  Larva  Oryctes  rhinoceros Linnaeu. ”
[14] C.  Baretto,  A.  Staat,  Schrank,  and  M.  .  Vainstein, “ Distribution  of Chitinases  in  The  Entomopathogenic  Metharizium  anisopliae  and  Effect of  N-acetylglucosamine  in  Protein  Secretion, ” Curr. Microbiol. ,  vol.  48, pp. 102 – 107.
[15] P.  P.  Taurisia,  W.  Meitini,  Proborini,  and  I.  Murhantoro, “ The  Effect  of Media on The  Growth and Biomass of  Fungi Alternaria alternata (Fries) Keissler, ” J. Biol. , vol. 19, no. 1, 2015.
[16] S. . Rehner, A. . Minnis, C. . Sung, J. . Luangsa-ard, L. Devotto, and R. . Humber, “ Phylogeni adn Systematics of The Anamorphic Entomopathogenic  Fungi  Genus Beauveria, ” Mycologia ,  vol.  103,  no.  5, pp. 1055 – 1073. [17] Y.  Prayogo, “ Kajian  Cendawan  Entomopatogen  Lecanicillium  lecanii (Zimm.)  (Viegas)  Zare  &  Gams  Untuk  Menekan  Perkembangan  Telur Hama  Pengisap  Polong  Kedelai  Riptortus  linearis  (F.)  (Hemiptera: Alydidae), ” Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor.