Gambaran Populasi Golongan Darah Subgrup A (A 1 , A 2 ) di PMI Kulon Progo
Hieronymus Rayi Prasetya 1 , Bambang Heru Budianto 1 dan Hernayanti 1
1 Fakultas Biologi, UniversitasJenderal Soedirman Email : rayi.prasetya@gmail.com

## Abstract
Subgroup  A 1 and  A 2 are  the  most  important  ones  within  blood  group  A.  Subgroup  A 1 has  A  antigen  more  than  A 2 subgroup possesses, while A 2 subgroup can cause misidentification of blood group due to  its low A antigen content and  genetic  variation.  Misidentification  of  blood  group  will  increase  in  the  risk  of  transfusion  reactions.  This  study aims to describe the A 1 and A 2 subgroup population in Kulon Progo district. Cross sectional sampling technique was applied.  Sample  were  taken  from  donors  of  blood  group  A  in  Kulon  Progo  Red  Cross.  Identification  of  A 1 and  A 2 subgroup was done by using lectin ( Dolichos biflorus extract). The result among 53 samples showed that 96,2% was of A 1 subgroup and 3,8% was of A 2 subgroup.
Key words : subgroup A 1 , subgroup A 2 , population, Kulon Progo

## Abstrak
Subgroup A 1 dan A 2 merupakan yang paling utama dalam subgroup golongan darah A. Subgrup A 1 memiliki antigen A  yang  lebih  banyak  daripada  subgrup  A 2 ,  adanya  subgrup  A 2 dapat menimbulkan  kesalahan  identifikasi  golongan darah  karena  lemahnya  antigen  A  dan  variasi  genetik  yang  dimiliki.  Kesalahan  identifikasi  golongan  darah  akan meningkatkan  resiko  reaksi  transfusi.  Metode  yang  digunakan  adalah cross  sectional. Sampel  diambil  dari  donor dengan golongan darah A di PMI Kulon Progo. Identifikasi subgrup A 1 dan A 2 dilakukan menggunakan lectin (ekstrak Dolichos biflorus). Hasil sebanyak 53 sampel menunjukan 96,2% adalah subgrup A 1 dan 3,8% adalah subgrup A 2 .
Kata kunci : subgrup A 1 , subgrup A 2 , population, Kulon Progo

## Pendahuluan
Golongan  darah  merupakan  polimorfisme yang  terdapat  dalam  darah,  tetapi  biasanya terbatas  pada  antigen  permukaan  sel  darah, terutama  sel  darah  merah.  Penggolongan  darah sistem  ABO  memiliki  beberapa  golongan  darah yang  terbagi  lagi  menjadi  subgrup.  Golongan darah  A  memiliki  subgrup  A 1 ,  A 2 ,  A int ,  A 3 ,  A end (A finn ,  A bantu ),  A x ,  A m ,  A y ,  A el ,  A w .  Subgrup  A 1 dan A 2 merupakan  yang  paling  utama  dalam  subgrup golongan  darah  A  (WHO,  2009;  Daniels,  2002; Svensson, 2011; Thakral et al. , 2004; Goodwin et al. , 2006; Chaudhari et al. , 2008).
Subgrup A 1 memiliki antigen A lebih banyak daripada  subgrup  A 2 . Adanya  subgrup  A 2 dapat membuat  kesalahan  identifikasi  golongan  darah karena  rendahnya  antigen  A  dan  variasi  genetik yang  dimiliki  (Goodwin et  al. ,  2006;  Bryan et  al. , 2006).  Identifikasi  subgrup  menjadi  penting karena  dapat  terjadi kesalahan identifikasi golongan  darah  subgrup  A 2 menjadi  golongan darah  O,  dan  jika  ditransfusikan  kepada  resipien dengan  golongan  darah  O  akan  menimbulkan reaksi  transfusi  (Thakral et  al. ,  2004;  Azarfarin and  Asl,  2009).  Hasil  penelitian  menunjukkan kesalahan  identifikasi  golongan  darah  subgrup  A (A 1 dan  A 2 )  sebesar  9,8%  dan  subgrup  AB (A 1 Bdan A 2 B) sebesar 6,5 % (Bryan et al. , 2006). Oleh  karena  itu,  gambaran  populasi  subgrup  A menjadi  penting  dilakukan  untuk  mengurangi kesalahan  identifikasi  golongan  darah  karena
terbatasnya  stok  darah  dan  menghindari  reaksi transfusi pada resipien.

## Metode
Pelaksanaan  pelitian  dilakukan  pada  bulan Agustus-November 2016. Metode  penelitian  yang digunakan  adalah  survei  dengan  teknik  sampel secara  potong  lintang  ( cross  sectional ).  Populasi dalam  penelitian  ini  adalah  kantong  darah  di  PMI Kulon  Progo  dengan  golongan  darah  A  yang diambil dari pendonor yang datang ke PMI.
Cara Kerja.  Pemisahan  serum  dan  sel. Darah  (1-2  ml)  dimasukkan  kedalam  sebuah tabung  yang  telah  diberi  tanda  sesuai  dengan sampel,  kemudian  diputar/disentrifugasi  2000- 3400  rpm  selama  90-120  detik.  Serum/plasma yang  jernih  dipisahkan  dari  sel  darah  merah kedalam  tabung  lain  yang  telah  diberi  tanda sesuai dengan sampel.
Pembuatan  suspensi  eritrosit  100% .  Sel darah merah pekat sebanyak 8 tetes (atau 0,5 ml) diteteskan kedalam tabung, kemudian ditambahkan saline 0,9%  sebanyak ± 4  ml  -  4,5 ml kedalam tabung (volume ¾ tabung), kemudian dikocok  dengan  pipet  pasteur  hinggga  tercampur rata. Suspensi tersebut diputar/disentrifugasi 2000 rpm  selama  90-120  detik.  Supernatan  tesebut dibuang  dengan  menggunakan  pipet  pasteur, hingga  sel  darah  merah  menjadi  pekat  (100%). Sampai  langkah  kerja  ini  pencucian  sel  darah merah sudah 1x pencucian. Kemudian pencucian diulangi sesuai dengan kebutuhan.
Pembuatan  suspensi  eritrosit  2%  (untuk pemeriksaan subgrup ) .  Sebanyak  0,5  ml saline pH  6,5-7,5  dimasukkan  ke  dalam  tabung  yang bersih  dan  ditambahkan  10  µl packed  cell , dicampur  perlahan.  Suspensi  eritrosit  diinkubasi selama 10 menit pada suhu ruang.
Pemeriksaan  golongan  darah subgrup A 1 dan  A 2 .  1  bagian  volume  reagen  Lorne  Anti-A 1 dengan  1  bagian  volume  suspensi  eritrosit  2% dicampurkan kedalam tabung, kemudian disentrifugasi  selama  20  detik  pada  kecepatan 1000 rcf. Tabung diresuspensi dan dibaca secara makroskopis (ada tidaknya aglutinasi).

## Hasil dan Pembahasan
Sampel diperoleh dari darah EDTA sebanyak 53  sampel.  Hasil  pemeriksaan  pada  populasi golongan  darah  A  di  Kulon  Progo  menunjukkan populasi  A 2 mencapai 3,8%, sedangkan  populasi
A 1 mencapai  96,2%  (Tabel  1).  Populasi  subgrup A 2 di Kulon Progo termasuk sangat kecil. Rendahnya p opulasi A 2 di Kulon Progo juga diduga  disebabkan  oleh  luas  wilayah  dan  jumlah penduduk  yang  kecil  serta  dipengaruhi  oleh  etnik yang ada di DIY.  DIY merupakan salah satu kota besar, sehingga banyak penduduk pendatang dari berbagai  etnik  yang  menetap  di  wilayah  ini.  Etnik berperan  besar  dalam  perbedaan  kemampuan ekspresi  gen  sehingga  akan  mempengaruhi pembentukan antigen dan antibodi dalam golongan  darah.  Hal  ini  selanjutnya  dapat mempengaruhi  hasil  populasi  subgrup  golongan darah  A.  Pada  penelitian  ini  sampel  yang  diambil tidak  dipisahkan  berdasarkan  etnik  tertentu, sehingga  sampel  yang  terambil  adalah  sampel yang  berasal  dari  berbagai  etnik  yang  ada  di Wilayah DIY.
Tabel 1. Hasil identifikasi subgrup golongan darah A (A 1 dan A 2 ) Kode sampel Metode tabung Hasil subgrup Kode sampel Metode tabung Hasil subgrup Kode sampel Metode tabung Hasil subgrup P 1 +4 A ₁ P 19 +4 A ₁ P 37 +4 A ₁ P 2 +4 A ₁ P 20 +4 A ₁ P 38 +4 A ₁ P 3 +4 A ₁ P 21 +4 A ₁ P 39 +4 A 1 P 4 +4 A ₁ P 22 +4 A ₁ P 40 +4 A 1 P 5 +4 A ₁ P 23 +4 A ₁ P 41 +4 A ₁ P 6 +4 A ₁ P 24 +4 A ₁ P 42 +4 A ₁ P 7 +4 A ₁ P 25 +4 A ₁ P 43 +4 A ₁ P 8 +4 A ₁ P 26 +4 A ₁ P 44 +4 A ₁ P 9 - A ₂ P 27 +4 A ₁ P 45 +4 A ₁ P 10 +4 A ₁ P 28 +4 A ₁ P 46 +4 A ₁ P 11 +4 A ₁ P 29 +4 A ₁ P 47 +4 A ₁ P 12 +4 A ₁ P 30 +4 A ₁ P 48 +4 A ₁ P 13 - A ₂ P 31 +4 A ₂ P 49 +4 A ₁ P 14 +4 A ₁ P 32 +4 A ₁ P 50 +4 A 1 P 15 +4 A ₁ P 33 +4 A ₁ P 51 +4 A ₁ P 16 +4 A ₁ P 34 +4 A ₁ P 52 +4 A ₁ P 17 +4 A ₁ P 35 +4 A ₁ P 53 +4 A ₁ P 18 +4 A ₁ P 36 +4 A ₁
Keterangan: - : negatif; +4 : positif 4
Persentase  populasi  A 1 dan  A 2 dapat berbeda  jika  dikaitkan  dengan  negara/wilayah tertentu  atau  dikaitkan  dengan  etnik  tertentu. Populasi A 1 dan A 2 secara  umum di dunia adalah 80% merupakan subgrup A 1 dan 20% merupakan subgrup A 2 (Mehdi, 2013; Hosoi, 2008; Svensson, 2011).  Subgrup  A 2 paling  banyak  terdapat  di Scandinavia  dan  Eropa,  Asia  barat  daya  dan Afrika. Populasi  A2 sangat jarang pada penduduk Amerika  asli  dan  suku  aborigin  di  Australia  dan sangat  jarang  di  Asia  Timur  (Maaf,  2007). Penelitian  di  India  menunjukkan  92%  golongan
darah  A  adalah  subgrup  A 1 dan  8%  adalah subgrup A 2 (Sharma et al. , 2013). Sampai saat ini belum  diketahui  apakah  yang  menyebabkan perbedaan jumlah populasi A 1 dan A 2 , tetapi dapat dihubungkan  dengan  wilayah,  keturunan,  dan etnik tertentu. Sebagian besar penelitian menunjukkan bahwa pola  populasi  A 2 selalu lebih sedikit  daripada  populasi  A 1 apabila  dihubungkan dengan  negara/wilayah  tertentu.  Populasi  A 2 dapat  lebih  banyak  daripada  populasi  A 1 apabila dihubungkan  dengan  etnik  tertentu,  misalnya penelitian pada etnik Sudan menunjukkan
populasi  A 1 40%  sedangkan  populasi  A 2 60  % (Hassan, 2010). Antibodi A 1 yang kadang-kadang ada dalam subgrup  A 2 sering  menimbulkan  masalah  dalam identifikasi  golongan  darah,  dan  menimbulkan kesalahan identifikasi golongan darah AB menjadi B  dan  A  menjadi  O  (Sharma et  al. ,  2013).  Telah dilaporkan  transfusi  30  ml  darah  dengan kesalahan  identifikasi golongan  darah ABO dapat menyebabkan reaksi transfusi  yang fatal (Olsson, 2009).  Hasil  penelitian  yang  pernah  dilakukan menunjukkan  kesalahan  identifikasi  golongan darah  subgrup  A  lebih  besar  daripada  subgrup AB.  Dalam  hal  ini,  kesalahan  identifikasi  subgrup A (A 1 dan A 2 ) sebesar 9,8% dan subgrup AB (A 1 B dan A 2 B) sebesar 6,5 % (Bryan et al. , 2006). ABO discrepancy terjadi  dalam  beberapa kasus identifikasi golongan darah . ABO discrepancy adalah  hasil  identifikasi  golongan darah  yang berbeda antara forward  grouping dan reverse  grouping .  Terdapat  4  kelompok  (Group  I- IV)  dalam  ABO discreprancy. Riwayat  pasien harus diperhatikan apabila terdapat ABO discrepancy .  Lemahnya  antigen  atau  adanya antigen  yang  hilang  adalah  salah  satu  penyebab ABO discrepancy yang  dikelompokkan  dalam grup  II.  ABO discrepancy pada  grup  ini disebabkan oleh adanya golongan darah subgrup, weak  expression antigen  A  atau  B  pada  kasus leukemia  atau  kadang-kadang  pada  penyakit Hodgkin,  dan  karsinoma  kolon  dan  rektum (Mehdi, 2013). Sumber pustaka lain menyebutkan apabila  terdapat  reaksi  yang  lemah  dalam identifikasi  golongan  darah,  maka  terdapat beberapa  kemungkinan,  antara  lain  adanya subgrup  A  dan  B,  penurunan  substansi  H, penurunan  produksi  antigen  yang  berhubungan
dengan  penyakit  dan  kemungkinan  pernah mendapatkan  transfusi  darah  dalam  3  bulan terakhir (Saluja & Singal, 2014; Cid et al., 2012). Transferase  pada  subgrup  A 2 kurang efisien  dalam  menambahkan immunodominant sugars pada GalNAc (N  acetyl  galactosa) sites dan  transferase  ini  hanya  dapat  menambahkan oligosakarida  tipe  1  dan  tipe  2.  Transferase  yang ada  pada  subgrup  A 1 mampu  menambahkan oligosakarida  tipe  1,  2,  3,  dan  4.  Perbedaan  ini akan  menghasilkan  peningkatan  ekspresi  antigen A  pada  eritrosit  pada  individu  golongan  darah subgrup A 1 dan menjadi pembeda secara serologi antara A 1 dan A 2 (Goodwin et al. , 2006). Ekspresi antigen A pada setiap eritrosit A 1 sekitar 810.000- 1.170.000  (dewasa)  dan  250.000-370.000  (bayi baru  lahir),  sedangkan  pada  eritrosit  A 2 sekitar 240.000-290.000  (dewasa)  dan  140.000  (bayi baru lahir) (Hosoi, 2008).

## Simpulan
Berdasarkan  uraian  hasil  dan  pembahasan diperoleh  kesimpulan  bahwa  populasi  golongan darah A di Kulon Progo menunjukkan populasi A 2 sebesar  3,8%,  sedangkan  populasi  A 1 mencapai 96,2%.

## Ucapan Terima Kasih
Pada  kesempatan  ini  diucapkan  terima kasih  kepada  penyandang  dana  yaitu  BPDN KEMENRISTEK  DIKTI,  PMI  Kota  Yogyakarta, PMI  Kabupaten  Gunung  Kidul,  PMI  Kabupaten Sleman,  PMI  Kabupaten  Kulon  Progo,  dan  PMI Kabupaten Bantul.

## Daftar Referensi
Azarfarin,  R.,  Asl,  A.  A.  2009.  Management  of
A2B  Blood  Group  in  a  Patient  for Hypothermic Cariopulmonary Bypass Surgery. M.E.J. Anesth; (20) : 1
Bryan, C.F., Polesky, H., Eisenbrey, A.B.,  Sesok- Pizzini,  D.A.,  Luger,  A.M.,  Smith,  D.M., Susskind,  B.M.  Implications  of  ABO  Error Rates in Proficiency Testing for Solid Organ Transplantation.. Transplantation 2006; (82) : 733 –736
Chaudhari,  S.,  Misra,  R.N.,  Nagpal,  A.K.  2008.
Transfusion  in  Blood  Group  A2B  with  Anti A1 Recipient. MJAFI; (64) : 371-372
Cid, E., Fuente, S.  Yamamoto, M.,  Yamamoto, F. 2012.  ABO  in  the  Context  of  Blood Transfusion  and  Beyond.  Barcelona,  Spain :  Institute  de  Medicina  Predictiva  I Personalitzada del Cancer (IMPPC)
Daniel, G. 2002. Human Blood Group. Blackwell :
Oxford.
Goodwin,  A.J.,  Dudley,  S.L.,  Bushor,  S.F.,
MacPherson,  B.R.,  Fung,  M.K.  2006.
Discrepant  Blood  Typing  Result  in  a  24- Year-Old  Woman  With  a  History  of  an Allograft Bone Marrow Transplant.
Labmedicine; (37) : 7
Hassan,  F.  M.  2010.  Frequency  of  ABO, Subgroup ABO and Rh(D) Blood Groups in Major  Sudanese  Ethnic  Groups.  Pakistan Journal of Medical Research; (49): 1
Hosoi,  E.  2008.  Biological  and  Clinical  aspects  of ABO  Blood  Group  System.  The  Journal  of Medical Investigation; (55); 174-182
Maaf,  B.  H.  2007.  Genetic  Characterisation  of Human  ABO  Blood  Group  Variants  with  a Focus  on  Subgroups  and  Hybrid  Alleles. Doctoral  Thesis.  Division  of  Hematology and  Transfusion  Medicine,  Department  of
Laboratory  Medicine,  Lund  University, Sweden.
Mehdi,  S.R.  2013.  Essential  of  Blood  Banking. India  :  Jaypee  Brothers  Medical  Publishers (P) Ltd. Second Edition
Olsson,  M.  L.  and  Storry,  J.  R.  2009.  The  ABO Blood  Group  System  Revisited:  a  Review and Update. Immunohematology; (25): 2
Saluja,  G.P.,  and  Singal,  G.  L.  2014.  Standard Operating  Procedures  and  Regulatory Guidelines  Blood  Banking.  India  :JAYPEE BROTHERS  MEDICAL  PUBLISHERS  (P) LTD.
Sharma, D. C., Rai, S., Iyenger, S., Jain, B., Sao, S.  2013.  Prevalence  and  Distribution  of ABO  and  Rh-D  Antigens  along  with  Its Subgroups  &  Rare  Types  in  Greater
Gwalior  Region.  Open  Journal  of  Blood Diseases; (3):  69-73
Svensson,  L.  2011.  Chemical  Basis  of  ABO
Subgroups. Sweden : University of Gothenburg.
Thakral, B., Saluja, K., Bajpai, M., Sharma, R. R., Marwaha,  M.  2005.  Importance  of  Weak ABO Subgroups. Labmedicine; (36) : 1
WHO.  2009.  Blood  Group  Serology.  Module  3.  In Safe  Blood  and  Blood  Products.  WHO
Press,  World  Health  Organization,  20 Avenue Appia, 1211 Geneva 27, Switzerland.
WHO  and  OFID.  2013.  Standard  Operating Procedure  For  Blood  Transfusion.  BAN BCT  (Blood  Safety)  Directorate  General  of Health  Services,  Ministry  of  Health  and Family Welfare. India.