Uji Penghambatan α -Glukosidase dari Kombinasi Ekstrak Kunyit, Teh Hitam dan Jahe
The α -Glucosidase Inhibition Test from a Combination of Turmeric Extract, Black Tea, and Ginger
Akhmad Endang Zainal Hasan 1a , Dimas Andrianto 1 , Rara Annisaur Rosyidah 1 1 Departemen Biokimia, FMIPA, Institut Pertanian Bogor, Kampus IPB Darmaga, 16680, Indonesia a Korespondensi : Akhmad Endang Zainal Hasan, E-mail: zainalhasan@apps.ipb.ac.id Diterima: 19 – 04 – 2022 , Disetujui: 28 – 04 – 2022

## ABSTRACT
Traditional medicines that can be used as α -glucosidase inhibitors are turmeric ( Curcuma longa L.), black tea ( Camellia sinensis L), and ginger ( Zingiber officinale ). It is necessary to research the use of a combination of tea, turmeric, and ginger in inhibiting the α -glucosidase enzyme. This study aims to determine the optimal combination of extracts of turmeric, black tea, and ginger in inhibiting the α - glucosidase enzyme. The research carried out was the measurement of IC50 values for the inhibition of α -glucosidase of each extract, and the inhibition of the enzyme α -glucosidase in combination. The results  of  the  test  of  ethanol  extract  of  turmeric,  ginger,  and  black  tea  water  extract  obtained  the inhibition value of α -glucosidase with IC50 values of 9.48±0.05 g/mL, 66.64±0.44 g/mL, and 9.52±0.25, respectively.  F7  is  a  combination  of  turmeric,  ginger, and  black  tea  which  produces  the  highest  α - glucosidase inhibition, which is 67.86±0.93%.
Keywords : α -glucosidase inhibition, black tea, diabetes mellitus, ginger, turmeric

## ABSTRAK
Obat  tradisional  yang  dapat  digunakan  sebagai  penghambat  enzim  α -glukosidase  adalah kunyit ( Curcuma longa L.), teh hitam ( Camellia sinensi L), dan jahe ( Zingiber officinale ). Diperlukan penelitian penggunaan paduan teh, kunyit, dan jahe dalam penghambatan enzim α -glukosidase.  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui paduan optimal ekstrak kunyit, teh hitam, dan jahe dalam menghambat enzim α -glukosidase. Penelitian yang dila kukan adalah pengukuran nilai IC50 untuk penghambatan α - glukosidase masing- masing ekstrak, dan penghambatan enzim α -glukosidase secara kombinasi. Hasil pengujian ekstrak etanol kunyit, jahe dan ekstrak air teh hitam diperoleh nilai penghambatan terhadap α -glukosidase  dengan  nilai  IC50  masing-masing  sebesar    9.48±0.05  g/mL,  66.64±0.44  g/mL  dan 9.52±0.25.  Paduan  F7  merupakan  kombinasi  kunyit,  jahe  dan  teh  hitam  yang  menghasilkan penghambatan α -glukosidase tertinggi yaitu sebesar 67.86±0.93%.
Kata kunci : diabetes mellitus, jahe, penghambatan α -glukosidase teh hitam, kunyit
Hasan, A. E. Z., Andrianto, D., & Rosyidah, R. A. (2022).  Uji penghambatan α -glukosidase dari kombinasi ekstrak kunyit, teh hitam dan jahe. Jurnal Agro Industri Halal, 8(1), 137 – 146.

## PENDAHULUAN
Diabetes  mellitus  (DM)  merupakan  suatu  manifestasi  hilangnya  toleransi  terhapap karbohidrat,  gangguan  metabolisme  yang  terjadi  dapat  disebabkan  secara  genetis  maupun klinis (Price & Wilson, 2012). Penyakit ini berhubungan dengan kerja dan atau sekresi insulin yang  pada  awal  terjadinya  dicirikan  dengan  gejala  hiperglikemia.    Menurut  Hakim et  al. (2009),  keluhan  dari  penderita  DM  adalah    polyuria,  penurunan  bobot  badan,  polidipsia, polifagia,  dan  sering  terjadi  kesemutan.  Prevalensi  DM  ini  diperkirakan  sebanyak  578  juta pada tahun 2030 dan akan meningkat sekitar 10.9% pada tahun 2045 (International Diabetes Federation, 2019). Menurut Widiastuti (2020), penyandang DM di Indonesia akan meningkat peringkatnya dari ke 7 menjadi ke 6 pada tahun 2040.
Proses hidrolisis karbohidrat menjadi glukosa dalam saluran pencernaan dimana enzim α -glukosidase merupakan enzim penting yang berperan pada hidrolisis karbohidrat menjadi glukosa.  Menurut  Khatri  &  Juvekar  (2014),  penyerapan  glukoasa  akan  tertunda  akibat penghambatan  enzim  ini.    Adapun  obat  sintetik  untuk  diabetes  dapat  menimbulkan  efek samping  apabila  digunakan  dalam  jangka  panjang  (DiNicolantanio et  al .,  2015;  Nakhaee  & Sanjari, 2013).
Teh hitam ( Camellia sinensis L. Kuntze) menurut Rohdiana (2004) dapat memberikan rasa  segar,  terbukti  tidak  menimbulkan  efek  samping,  dan  dapat  memulihkan  kesehatan badan.   Kandungan komponen senyawa aktif utama dalam teh hitam dari golongan polifenol adalah katekin, theaflavin, epicatechin gallate, dan epigallocatechin (EGC) (Anjarsari, 2016; Susanto et al ., 2014). Menurut Kamiyama et al. (2010); Liu et al. (2016), penghambatan enzim α -glukosidase terutama oleh adanya senyawa theaflavins digallate, epigallocathechin gallate , dan epicatechin gallate.
Kunyit  mengandung  senyawa  aktif  polifenol  seperti  kurkuminoid,  minyak  atsiri,  dan turunan fenilpropana turmeron (Simorangkir, 2020; Herbian et al ., 2009).  Menurut Nurdin et al. (2017),  bahwa  kunyit  berfungsi  sebagai  antidiabetes  dengan  mekanisme  dapat menghambat kerja enzim α -glukosidase.  Menurut Simorangkir (2020), komponen dari kunyit yang secara nyata menghambat enzim α -glukosidase adalah senyawa kurkuminoid.  Bahkan menurut Hasimun et al. (2016), kunyit merupakan salah satu dari Zingiberaceae yang paling tinggi  kemampuannya  dalam  menghambat enzim  α -glukosidase  dan  sebanding  dengan acarbose. Menurut Daily et al. (2015); Riaz et al. (2015), peran jahe ( Zingiber officinaIe Rosc.) sebagai antidiabetes karena mengandung komponen fitokimia yang dapat menghambat enzim α -glukosidase.    Gingerol,  zingeron  serta  derivate  flavonoid  lainnya  merupakan  bahan  yang dapat menghambat enzim α -glukosidase (Yanto et al ., 2016).
Ketiga bahan tersebut berpotensi menghambat kerja enzim α -glukosidase, namun belum ada  informasi  kombinasinya  dalam    menghambat enzim  α -glukosidase.  Oleh  karena  itu, penelitian ini bertujuan melakukan analisis uji in vitro kombinasi ekstrak teh hitam, kunyit, dan jahe terhadap aktivitas inhibisi enzim α -glukosidase serta menentukan kombinasi yang paling optimum.

## MATERI DAN METODE

## Materi
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah ekstrak air teh hitam, ekstrak etanol 70% kunyit, ekstrak etanol 70% jahe oleh PT. Haldin Pacific Semesta, α -glukosidase, akarbose, bufer fosfat 0.1 M pH 7.0, p -NPG, dan Na 2 CO 3
.

## Sampel
Sampel  ekstrak  teh  hitam,  jahe  dan  kunyit  diperoleh  dan  diekstraksi  dari  PT.  Haldin Pacific Semesta Cikarang, Bekasi, Indonesia.
Inhibisi α -Glukosidase  Ekstrak
Metode  yang  digunakan  dalam  pengujian  aktivitas  penghambata α -glukosidase merupakan modefikasi dari metode Sancheti et al. (2009).  Bahan-bahan berikut dimasukkan dalam microwell 96 yaitu 50 μL 0 .1 M buffer fosfat pH 7. 0, 25 μL substrat p -NPG konsentrasi 0. 5 mM, 10 μL larutan sampel, dan 25 μL larutan enzim .   Setelah diinkubasi selama 30 menit pada suhu 37 o C dilakukan penambahan 100 μL Na 2 CO 3 0.2 M untuk menghentikan reaksi. Pengukuran absorbansi dilakukan pada Panjang gelombang 410 nm.   Sample yang disiapkan dalam seri 400, 200, 100, 50, dan 10 µg/mL menggunakan pelarut aquades.  Akarbosa yang digunakan menggunakan variasi konsentrasi 0.1, 0.5, 1.0, 5.0, dan 10.0 μ g/mL. Setelah  nilai  IC 50 dari  masing  sample  diperoleh,  pengukuran  dilanjutkan  dengan menentukan  penghambatan  α -glukosidase  terhadap  sample  kombinasi  teh hitam,  jahe  dan kunyit (Tabel 1).
Tabel 1. Kombinasi teh hitam, kunyit dan jahe Kombinasi TH K J Campuran sampel (IC 50 µg/mL) TH K J F1 (TH) IC 50 0 0 10 0 0 F2 (K) 0 IC 50 0 0 9 0 F3 (J) 0 0 IC 50 0 0 68 F4 (TH-K) ½ IC 50 ½ IC 50 0 5 4,5 0 F5 (TH-J) ½ IC 50 0 ½ IC 50 5 0 34 F6 (K-J) 0 ½ IC 50 ½ IC 50 0 4,5 34 F7 (TH-K-J) 1/3 IC 50 1/3 IC 50 1/3 IC 50 3,33 3 22,67
Keterangan: TH = teh hitam, K = kunyit, J = jahe

## Analisis Data
Data  diolah  menggunakan  program  Microsoft  Excel  2010  dan  SPSS  versi  25  sesuai dengan prosedur dalam Yuningtyas dan Artanti, 2015.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Nilai  IC 50 dari  masing-masing  ekstrak dapat diamati pada  Tabel  2. Nilai  IC 50 tertinggi diperoleh dari ekstrak jahe dengan rata-rata 66.64±0.44 μg/mL sedangkan ekstrak dengan nilai IC 50 terendah diperoleh dari ekstrak kunyit dengan rata-rata 9.48±0.05 μg/mL. Akarbosa sebagai pembanding memiliki nilai IC 50 sebesar 7.17×10 -3 ±0.00 μg/mL. Hasil analisis ragam (ANOVA) esktrak kunyit memiliki nilai IC 50 yang lebih rendah dibandingkan dengan ekstrak teh hitam dan jahe secara signifikan ( p <0,05) (Tabel 2). Mengingat bahwa nilai IC 50 ekstrak teh  hitam,  kunyit,  dan  jahe,  serta  akarbosa  secara  signifikan  (p<0,05),  maka  uji  lanjutan (Duncan) dilakukan. Hasil uji Duncan dengan taraf nyata 5% menunjukkan bahwa ekstrak teh hitam, kunyit, dan jahe berbeda nyata dengan akarbosa, sedangkan ekstrak teh hitam tidak berbeda nyata dengan ekstrak kunyit (Tabel  2). Ekstrak terbaik merupakan ekstrak kunyit dengan  nilai  IC 50 paling  rendah  dibandingkan  ekstrak  lainnya  sedangkan  ekstrak  jahe dianggap sebagai ekstrak dengan aktivitas terendah.
Tabel 2. Nilai IC 50 (μg/mL) ekstrak teh hitam, kunyit, dan jahe serta akarbosa
Sampel IC 50 (μg/mL) Akarbosa (kontrol positif) 7.46×10 -3 ±0.00 a Ekstrak air teh hitam 9.52±0.25 b Ekstrak etanol kunyit 9.48±0.05 b Ekstrak etanol jahe 66.64±0.44 c
Keterangan: Huruf kecil yang berbeda berbeda menunjukkan beda nyata secara statistika (α=0,05). Pengujian dilakukan secara in vitro untuk mengetahui presentase (%) aktivitas inhibisi α - glukosidase  terhadap  ekstrak  yang  digunakan.  Pengujian  aktivitas  inhibisi  α -glukosidase
dilakukan berdasarkan prinsip dasar reaksi enzimatis. Enzim α -glukosidase menghidrolisis substrat  p-nitrofenil-alfa-D-glukopiranosida  ( p NPG)  menjadi  p-nitrofenol  dan  glukosa. Aktivitas  enzim  ditentukan  berdasarkan  hasil  pengukuran  absorbansi  p-nitrofenol  ( p NP) berdasarkan intensitas warna kuning yang terbentuk pada panjang gelombang 405 nm. Reaksi yang  terjadi  akan  dihentikan  dengan  penambahann  Na 2 CO 3 .  Senyawa  pada  tanaman  yang memiliki kemampuan menghambat aktivitas α -glukosidase saat p-nitrofenol yang dihasilkan akan  berkurang  dan  dapat  dilihat  dari  intensitas  warna  kuning  yang  terbentuk  berkurang, semakin jernih warna kuning yang dihasilkan maka glukosa yang dihasilkan semakin sedikit (Holidah et al. 2018; Cihan et al. 2009).
Penelitian yang dilakukan oleh Holidah et al. (2018) menunjukkan nilai IC 50 eksrak air teh hitam yang lebih tinggi dibanding penelitian ini. Penelitian yang dilakukan oleh Holidah et al. (2018) menunjukkan aktivitas penghambatan 50% reaksi pada konsentrasi sebesar 54.86 μg/mL sedangkan pada penelitian ini ekstrak air teh hitam ma mpu menghambat 50% reaksi pada konsentrasi 9.52±0.25 μg/mL (Tabel 2). Penelitian yang dilakukan oleh Hasimun et al. (2016)  menunjukkan  nilai  IC 50 ekstrak  etanol  kunyit  dan  jahe  yang  lebih  tinggi  dibanding penelitian  ini.  Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Hasimun et  al. (2016)  menunjukkan  ekstrak etanol kunyit dan jahe aktivitas penghambatan 50% reaksi berturut-turut pada konsentrasi sebesar 28. 40 μg/mL dan 106 . 60 μg/mL sedangkan pada penelitian ini mampu menghambat 50% reaksi berturut-turut pada konsentrasi 9, 48±0,05 μg/mL dan 66 .64±0. 44 μg/mL (Tabel 2).
Hasil  penelitian  lain  Yang  &  Koh  (2016)  menunjukkan  ekstrak  air  teh  hitam mendapatkan nilai IC 50 sebesar 2. 25 μg/mL, Sabir et al . (2021) menunjukkan ekstrak etanol kunyit  mendapatkan  nilai  IC 50 sebesar  37.10  µg/mL,  dan  Adeyeoluwa et  al .  (2020) menunjukkan ekstrak jahe mendapatkan nilai IC 50 sebesar 1129.72 µg/mL. Faktor lingkungan area  pertumbuhan  tanaman  seperti  faktor  iklim  dan  tanah,  dapat  mempengaruhi  mutu tanaman tersebut. Adanya perbedaan tersebut juga dapat mempengaruhi jumlah kandungan dari  tanaman  teh  hitam,  kunyit,  dan  jahe.  Perbedaan  kandungan  akan  berdampak  pada perbedaan aktivitas suatu tanaman (Holidah et al., 2018).
Tadera et al. (2006) melaporkan bahwa senyawa yang berpotensi menghambat enzim α -glukosidase yang berasal dari teh hitam ( Camellia sinensis L.) dapat dihambat secara efektif oleh  naringenin,  kaemferol,  luteolin,  apigenin,  katekin  dan  epikatekin,  diadzein,  dan epigalokatekin galat. Struktur flavonoid yang memiliki andil dalam penghambatan enzim alfa glukosidase  adalah cincin  C  tidak jenuh  ( unsaturated ),  3-OH,  4-OH,  ikatan  pada  cincin  B di posisi  3’,  dan  gugus  hidroksil  pada  cincin  B.  Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Andersen & Markham  (2006)  menyatakan  bahwa  katekin,  epikatekin,  dan  epigalokatekin  galat terkandung dalam minuman teh hitam berturut-turut sebesar 0,8, 3,7, 6,0 mg/100 g namun belum diketahui mengandung naringenin dan apigenin. Minuman teh hitam juga mengandung kaemferol, mirisetin, dan kuersetin beruturut-turut sebesar 1.5, 0.3, dan 2.1 mg/100 g namun belum diketahui mengandung luteolin.
Kurkumin  menunjukkan aktivitas sebagai antidiabetes dengan penggunaan dosis 300 mg/hari  pada  pasien  diabetes  mellitus  tipe  II.  Kurkumin  menunjukkan  adanya  penurunan massa  tubuh  pasien,  gula  darah  puasa,  HbA1c,  resistensi  insulin,  dan  asam  lemak  bebas (Mancia et  al .  2018).  Kurkumin  dilaporkan  dapat  menurunkan  produksi  glukosa  dari  hati, manambah sensitivitas insulin, menginduksi pengambilan glukosa dengan mengatur Glucose transporter-2 (GLUT2), GLUT3, dan GLUT4 serta menghambat enzim GSK-3 beta (Shome et al., 2016).
Adeniyi  &  Sanusi  (2014)  melaporkan  bahwa  6-gingerol  yang  terdapat  pada  jahe memiliki efek antidiabetik. Efek antidiabetis dari jahe diketahui dari penurunan kadar glukosa darah  puasa  tikus  yang  diberikan  streptozotocin.  Selain  itu,  efek  antidiabetik  jahe  dapat diketahui  dari  pemeriksaan  kadar  glikogen  hepar  pada  pasien  diabetes  mellitus  yang
mengalami penurunan aktivitas enzim glikogen sintase. Pemberian jahe dapat meningkatkan sekresi insulin, sehingga dapat menghambat glukoneogenesis dan glikogenolisis.
Penentuan  IC 50 kontrol  positif  akarbosa  bertujuan  untuk  membandingkan  aktivitas inhibisi  ekstrak  dengan  inhibitor  α -glukosidase  komersial.  Senyawa  akarbosa  merupakan obat komersial untuk mengontrol kadar gula postprandial pada pasien diabetes dengan cara menghambat kine rja enzim α -glukosidase secara kompetitif (Safithri, 2012). Rata-rata nilai IC 50 senyawa akarbosa dihitung berdasarkan data persentase inhibisi akarbosa terhadap α - glukosidase  yang  diperoleh.  Konsentrasi  sampel  yang  memberikan  penghambatan  enzim sebesar 50% dinyatakan dalam nilai IC 50 (Nurfachri, 2020). Menurut Kartika (2014), senyawa dikatakan sangat aktif jika mempunyai nilai IC 50 dibawah 50 μg/mL. Senyawa dinyatakan aktif jika  memiliki  nilai  IC 50 sebesar  50- 100  μg/mL,  sedang  nilai  IC 50 sebesar  101- 250  μg /mL. Senyawa dinyatakan lemah jika memiliki nilai IC 50 sebesar 250- 500 μg/mL, dan tidak aktif jika nilainya lebih dari 500 μg/mL.
Senyawa  akarbosa  mampu  menghambat  α -glukosidase  dengan  nilai  IC 50 yang  sangat rendah  yaitu  sebesar  7.46×10 -3 ±0. 00  μg/mL  (Tabel 2).  Meskipun  penghambatan  akarbosa terhadap enzim α -glukosidase lebih baik dibandingkan dengan ekstrak teh hitam, kunyit, dan jahe, pencarian serta upaya penggunaan obat-obatan herbal tetap menjadi perhatian. Hal ini karena  penggunaan  obat-obatan  herbal  dapat  digunakan  sebagai  alternatif  obat  kimia (sintetik) yang memberikan efek samping yang dirasakan oleh kebanyakan penderita diabetes melitus tipe II seperti diare, flatulensi, dan sakit perut (Kartika, 2014).
Konsentrasi  kombinasi  yang  digunakan  berdasarkan  nilai  IC 50 yang  diperoleh  dari masing-masing  ekstrak.  Adapun  rancangan  kombinasi  yang  digunakan  berurutan  dari rancangan  pertama  yaitu  ekstrak  teh  hitam  (1:0:0),  ekstrak  kunyit  (0:1:0),  ekstrak  jahe (0:0:1), kombinasi ekstrak teh hitam dan kunyit (1/2:1/2:0), kombinasi ekstrak teh hitam dan jahe (1/2:0:1/2), kombinasi ekstrak kunyit dan jahe (0:1/2:1/2), dan kombinasi ekstrak teh hitam,  kunyit,  dan  jahe  (1/3:1/3:1/3).  Berdasarkan  hasil  pengujian  menunjukkan  bahwa rancangan kombinasi dengan aktivitas penghambatan terbesar adalah kombinasi F7 sebesar 67,86±0,93 % dan terendah pada kombinasi F3 sebesar 53,30±0,43 %.  Adapun kombinasi F7 berisi ekstrak teh hitam, kunyit, dan jahe sedangkan kombinasi F3 berisi ekstrak jahe.
Hasil  analisis  ragam  (ANOVA)  pada  penelitian  ini  secara  umum  menunjukkan  bahwa semua  kombinasi  ekstrak  yang  digunakan  secara  signifikan  (p˂0,05)  mampu  menghambat aktivitas  enzim  α -glukosidase. Mengingat  bahwa  aktivitas  inhibisi  enzim  α -glukosidase kombinasi ekstrak teh hitam, kunyit, dan jahe secara signifikan (p<0,05), maka uji lanjutan (Duncan)  dilakukan. Aktivitas  inhibisi  aktivitas  enzim  α -glukosidase  dengan  pemberian ketujuh  kombinasi  ekstrak  teh  hitam,  kunyit,  jahe  yang  digunakan  tampak  berbeda  nyata, sedangkan  kombinasi  F4  (TH-K)  tidak  berbeda  nyata  dengan  kombinasi  F5  (TH-J)  yang ditunjukkan pada Gambar 1.
Berdasarkan  hasil  pengujian  menunjukkan  bahwa  rancangan  kombinasi  dengan aktivitas penghambatan terbesar adalah kombinasi F7 sebesar 67.86±0.93 %  dan terendah pada  kombinasi  F3  sebesar  57.30±0.43  %.  Adapun  kombinasi  F7  berisi  ekstrak  teh  hitam, kunyit, dan jahe sedangkan kombinasi F3 berisi ekstrak jahe.
Hasil  analisis  ragam  (ANOVA)  pada  penelitian  ini  secara  umum  menunjukkan  bahwa semua  kombinasi  ekstrak  teh  hitam,  kunyit,  dan  jahe  yang  menunjukkan  secara  signifikan (p˂0,05)  mampu  menurunkan  aktivitas  enzim  α - glukosidase.  Aktivitas  inhibisi  enzim  α - glukosidase dengan pemberian ketujuh kombinasi ekstrak yang digunakan tampak berbeda nyata,  sedangkan  kombinasi  F4  (TH-K)  tidak  berbeda  nyata  dengan  kombinasi  F5  (TH-J). Pengaruh pemberian kombinasi ekstrak teh hitam, kunyit, dan jahe terhadap aktivitas inhibisi enzim α -glukosidase ditunjukkan pada Gambar 1.
Gambar 1. Aktivitas inhibisi α -glukosidase setelah pemberian kombinasi ekstrak teh hitam, kunyit, dan jahe
Keterangan : Huruf kecil yang berbeda berbeda menunjukkan beda nyata secara statistika (α=0.05) Menurun atau meningkatnya kemampuan aktivitas inhibisi enzim α -glukosidase ekstrak dapat  dikarenakan  ada  atau  tidak  adanya  efek  sinergisme  senyawa  aktif  yang  terkandung didalam  campuran  ekstrak.  Efek  tersebut  dimungkinkan  karena  adanya  interaksi  antara senyawa aktif dalam campuran ekstrak (Pujirahayu, 2019). Berdasarkan penelitian Satoh et al. (2015),  kombinasi  ekstrak  air  teh  hitam  dan  akarbosa  bekerja  secara  sinergis  dalam menghambat  aktivitas  enzim  α -glukosidase.  Rahmadhani (2016)  melaporkan  kombinasi ekstrak air kunyit dan jahe memiliki aktivitas inhibisi enzim α -glukosidase tidak lebih baik dari ekstrak tunggalnya. Hal ini dikarenakan tidak adanya aktivitas sinergisme yang lebih baik dari  ekstrak  tunggalnya.  Fenomena  ini  diduga  karena  senyawa  aktif  bekerja  saling menghambat  atau  antagonis.  Sebaliknya,  Lestari (2019)  menunjukkan  bahwa  kombinasi ekstrak air daun jambu biji dan kunyit mempunyai aktivitas inhibisi enzim α -glukosidase yang lebih baik daripada ekstrak tunggalnya.
Berdasarkan hasil penelitian kombinasi F7 (TH-K-J) menunjukkan hasil aktivitas inhibisi enzim α -glukosidase tertinggi, karena perbandingan konsentrasi ekstrak teh hitam sebesar 3. 33 μg/mL, kunyit sebesar 3 μg/mL, dan jahe sebesar 22 . 67 μg/mL daripada ekstrak tunggal. Selain itu, kombinasi F4 (TH- K) dengan konsentrasi ekstrak teh hitam 5 μg/mL dan k uyit 4.5 μg/mL,  kombinasi  F5  (TH - J)  dengan  konsentrasi  ekstrak  teh  hitam  5  μg/mL  dan  jahe  34 μg/mL,  serta  kombinasi  F5  (K - J)  dengan  konsentrasi  kunyit  5  μg/mL  dan  jahe  34  μg/mL menunjukkan aktivitas inhibisi enzim α -glukosidase lebih tinggi daripada ekstrak tunggalnya. Hal  ini  dapat  dikatakan  bahwa  kombinasi  ekstrak  menghasilkan  interaksi  secara  sinergis. Menurut  Riaminanti et  al. (2016),  sinergisme  dapat  terjadi  ketika  kombinasi  dari  ekstrak dengan  tegas  memperlihatkan  aktivitasnya  melebihi  aktivitas  inhib isi  enzim  α -glukosidase ekstrak tunggal.
Komponen  senyawa  tunggal  kurang  memberikan  efek  sinergis  tetapi  kombinasi  dari berbagai  senyawa  kimia  seperti  flavonoid,  tanin,  alkaloid,  dan  juga  saponin  yang  bekerja secara sinergis dapat memberikan efek yang lebih baik (Riaminanti et al ., 2016). Berdasarkan penelitian  Gupta et  al. (2014),  kombinasi  ekstrak  teh  dan  jahe  menunjukkan  aktivitas antioksidan terbaik daripada ekstrak tunggalnya. Hal ini dikaitkan dengan tingginya jumlah polifenol  pada  teh  seperti  katekin,  epikatekin  galat,  theaflavin  dan  thearubigin,  sedangkan senyawa  polifenol  jahe  seperti  gingerol  dan  shogaol  juga  bertanggung  jawab  dalam meningkatkan aktivitas antioksidan. Kuersetin merupakan flavonoid yang dapat mengurangi aktivitas hiperglikemik dengan cara homeostasis glukosa. Selain itu, kombinasi kuersetin dan kurkumin  dapat  lebih  efektif  dalam  mengontrol  kadar  gula  darah  pada  penderita  diabetes mellitus tipe 2 (Tabatabaei-Malazy et al., 2013).
60.76±0.47 c
58.78±0.82 b 57.30±0.43 a 62.08±0.62 d 62.54±0.89 d 64.48±0.68 e 67.86±0.93 f 54 56 58 60 62 64 66 68 70 % Inh ibi si
Menurut penelitian Syahrir et al. (2016), senyawa aktif antar tanaman jahe didapatkan skor sinergi yang tinggi dan signifikan berdasarkan hasil uji permutasi. Selain itu, senyawa aktif antar tanaman yang berbeda yaitu jahe dan pare serta jahe dan bratawali memiliki skor sinergi yang juga relatif tinggi. Berdasarkan penelitian Rahim et al . (2020), campuran kunyit dan jahe menunjukkan interaksi secara sinergis karena meningkatkan aktivitas antioksidan sebesar  66,22  %  daripada  ekstrak  tunggalnya.  Selain  itu,  kadar  total  flavonoid  yang  tinggi sebesar  695,01  μg/mL memberikan  efek  sinergis  yang  disebabkan  oleh  interaksi  senyawa flavonoid kunyit dengan flavonoid jahe. Menurut penelitian Azzeh (2013), kombinasi ekstrak teh hijau, kayu manis, dan jahe menunjukkan indeks glikemik terendah sebesar 60 (sedang) yang  menunjukkan  bahwa  kombinasi  bahan  aktif  dari  teh  hijau,  kayu  manis  dan  jahe memberikan aksi sinergis dalam menurunkan kadar glukosa postprandial daripada ekstrak tunggalnya.

## KESIMPULAN
Hasil  pengujian  ekstrak  etanol  kunyit,  jahe  dan  ekstrak  air  teh  hitam  diperoleh  nilai penghambatan terhadap α -glukosidase dengan nilai IC50 masing-masing sebesar  9.48±0.05 g/mL, 66.64±0.44 g/mL dan 9.52±0.25. Paduan F7 merupakan kombinasi kunyit, jahe dan teh hitam yang menghasilkan penghambatan α -glukosidase tertinggi yaitu sebesar 67.86±0.93%.

## DAFTAR PUSTAKA
International Diabetes Federation. (2019). IDF diabetes atlas (9 th ed.) . International Diabetes Federation.
Adeniyi,  P.O.,  &  Sanusi,  R.A.  (2014).  Effect  of  ginger  ( Zingiber  officinale )  extracts  on  blood glucose in normal and streptozotocin-induced diabetic rats. Int J of Clinical Nutrition , 2(2), 32-35.
Adeyeoluwa, T. E, Balogun, F. O., & Ashafa, A. O. T. (2020). In vitro comparative assessment of the inhibitory effects of single and combined spices against glucose-synthesizing enzymes. Tropical Journal of Pharmaceutical Research, 19(6), 1209-1214.
Andersen, J., & Markham, A. (eds.). 2006. Flavonoids . CRC.
Anjarsari, I. R. D. (2016). Katekin teh Indonesia: prospek dan manfaatnya. J Kultiv , 15(2), 99- 106.
Azzeh,  F.  S.  (2013).  Synergistic  effect  of  green  tea,  cinnamon  and  ginger  combination  on enhancing postprandial blood glucose. Pakistan Journal of Biological Sciences , 16(2), 74-79.
Chin, F. S., Chong, K. P., Markus, A., & Wong, N. K. (2013). Tea polyphenols and alkaloids content using soxhlet and direct extraction methods. World Journal of Agricultural Sciences , 9(3), 266-270.
Cihan, A. C., Cokmus. C., & Ozcan. B. (2009) . Characterization of thermostable α -glucosidases from  newly  isolated  Geobacillus  sp.  A333  and  thermophilic  bacterium  A343. World  J Microbiol Biotechnol , 25(1), 2205-2217.
Daily, J. W., Yang, M., Kim, D. S., & Park, S. (2015). Efficacy of ginger for treating type 2 diabetes: a systematic review and meta-analysis of randomized clinical trials. Journal of Ethnic Foods , 2(1), 36- 43.
DiNicolantanio, J. J., Bhutani, J., & O’Keefe , J. H. (2015). Acarbose: safe and effective for lowering postprandial hyperglycemia and improving cardiovascular outcomes. Open Heart . 2(1):1- 13.
Gupta, R. K., Chawla, P., Tripathi, M., Shukla, A. K, & Pandey, A. (2014). Synergistic antiokxidant activity of tea with ginger, black pepper dan tulsi. International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Science, 6(5), 477-479.
Hakim, Buraerah, H., Abdullah, Zulkifli, A., & Hanis, M. (2009). Analisis faktor resiko diabetes melitus  tipe  2  di  Puskesmas  Tanrutedong,  Sidenreng  Rappang,  2007. MEDIKA:  Jurnal Kedokteran Indonesia , 35(4), 228-237.
Hasimun, P., Adnyana, I. K., Valentina, R., & Lisnasari, E. (2016). Potential alpha-glucosidase inhibitor from selected zingiberaceae family. Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research , 9(1), 164-167.
Herbian, D., Choi, J. H., El-Aty, A. M. A., Shim, J. H., & Spiteller, M. (2009). Metabolite analysis in Curcuma domestica using various GC-MS and LC-MS separation and detection techniques.
Biomed . Chromatogr , 23(9), 951 – 965
Holidah, D., Yasmin, Christianty, F. M. (2018). Uji antidiabetes ekstrak teh hitam dan teh hijau secara  in  vitro  menggunakan  meode  inhibisi  enzim  α -glukosidase. E-Jurnal  Pustaka Kesehatan , 6(2), 235-239.
Kamiyama, Sanae, Ikeda, Higashi, Minami, Asano. (2010) . In vitro inhibition of α -glucosidases and  glycogen  phosphorylas  by  catechin  gallates  in  green  tea. Food  Chem ,  122(4),  1061- 1066.
Kartika, A. (2014). Kandungan kurkuminoid, inhibisi α -glukosidase dan sitotoksisitas ekstrak dari beberapa aksesi kunyit (Curcuma domestica Val.) . [Skripsi, Institut Pertanian Bogor]. IPB University Scientific Repository.
Khatri,  D.  K.,  &  Juvekar,  A.  R.  (2014) .  Α - glucosidase  and  α -amylase  inhibitory  activity  of Indigofera cordifolia seeds and leaves extract. Int J Pharm Pharm Sci , 6(11), 152-5.
Lestari, N. S. (2019). Pengaruh proposi daun jambu biji dan kunyit dalam campuran minuman herbal  terhadap  penghambatan  aktivitas  enzim α -amilase  dan α -glukosidase. [Skripsi, Universitas Lampung]. LPPM UNILA-IR.
Liu, A., Yu, Z., Zhu, H., Zhang, W., & Chen, Y. (2016) . In vitro α -glucosidase inhibitory activity of isolated  fractions  from  water  extract  of  Qingzhuan  dark  tea. BMC  Complementary  and Alternative Medicine , 16(378), 1-8.
Nakhaee,  A.,  &  Sanjari,  M.  (2013).  Evaluation  of  effect  of  acarbose  consumption  on  weight losing in non-diabetic overweight or obese patients in Kerman. J Res Med Sci . 18(5):391-4.
Nurdin, S. U., Sukohar, A., Ramadhani, O. S. (2017). Antiglucosidase and antioxsidant activities of ginger, cinnamon, turmeric and their combination. Internasional Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Research , 10(1), 296-306.
Nurfachri, N. (2020). Aktivitas antioksidan dan antidiabetes ekstrak daun gandarusa ( Justicia gendarussa Burm. F.) in vitro. [Skripsi, Institut Pertanian Bogor]. IPB University Scientific Repository.
Price, A. S., & Wilson, M. L. (2012). Patofisiologi Vol 2 . EGC.
Pujirahayu, A. D. (2019). Aktivitas antioksidan dan bioaktivitas kombinasi fraksi polifenol daun Syzygium polyanthum dengan Guazuma ulmifolia. [Skripsi, Institut Pertanian Bogor]. IPB University Scientific Repository.
Rahim, N. F. A., Muhammad, N., Abdullah, N., Talip, B. A., & Poh, K. H. (2020). The interaction effect and optimal formulation of selected polyherbal extracts towards antioxidant activity.
Food Research , 4(6), 2042-2048.
Rahmadhani,  O.  S.  (2016).  Uji  penghambatan  aktivitas  enzim  alfaglukosidase  dan  aktivitas antioksidan jahe, kayu manis, kunyit beserta kombinasinya. [Skripsi, Universitas Lampung]. LPPM UNILA-IR.
Riaminanti, N. K., Hartiati, A., & Mulyani, S. (2016). Studi kapasitas dan sinergisme antioksidan pada ekstrak kunyit ( Curcuma domestica Val.) dan daun asam ( Tamarindus indica L.). Jurnal Rekayasa dan Manajemen Agroindustri , 4(3), 93-104.
Riaz, H., Begum, A., Raza, S. A., Khan, Z. M. U. D., Yousaf, H., & Tariq, A. (2015).  Antimicrobial property  and  phytochemical  study  of  ginger  found  in  local  area  of  Punjab,  Pakistan. International Current Pharmaceutical Journal , 4(7), 405-409.
Rohdiana,  D.  (2015).  Teh:  proses,  karakteristik  dan  komponen  fungsionalnya. Food  Review Indonesia , 10(1), 34-37.
Sabir, S. M., Zeb, A., Mahmood, M., Abbas, S. R., Ahmad, Z., & Iqbal, N. (2021). Phytochemical analysis and biological activities of ethanolic extract of Curcuma longa rhizome. Braz. J. Biol , 81(3), 737-740.
Safithri, M. (2012). Kajian mekanisme antihiperglikemik campuran ekstrak daun sirih merah dan  kulit  kayu  manis  yang  berpotensi  sebagai  minuman  fungsional. [Disertasi,  Institut Pertanian Bogor]. IPB University Scientific Repository.
Sancheti,  S.,  Sandesh,  S.,  &  Sung,  Y.  S.  (2009). Chaenomeles  sinensis :  A  potent α -and β - glucosidase inhibitor. Am J Pharm and Toxicol, 4(1), 8-11.
Satoh, T., Igarashi, M., Yamada, S., & Takahashi, N., & Watanabe, K. (2015). Inhibitory effect of black  tea  and  its  combination  with  acarbose  on  small  intestinal  α -glucosidase  activity. Journal of Ethnopharmacology, 161(2015), 147-155.
Shome, S., Talukdar, A. D., & Choudhury, M. D., Bhattacharya, M. K., & Upadhyaya, H. (2016). Curcumin  as  potential  therapeutic  natural  product:  ananobiotechnological  perspective. Journal of Pharmacy and Pharmacology , 68(2016), 1481 – 1500.
Simorangkir, H. A. H. (2020). Mikroenkapsulasi kombinasi curcumin pada kunyit ( Curcuma Longa ) dan  epigallocatechin-3-gallate  (EGCG)  pada  teh  hijau  ( Camellia  Sinensis ):  inovasi terapi pencegahan 145ellitus retinopati pada penderita diabetes mellitus tipe 2. Scientific Medical Journal , 1(2), 1-11.
Susanto,  H.,  Indra,  M.  R.,  &  Karyono,  S.  (2014).  Pengaruh  sari  seduh  teh  hitam  ( Camellia sinensis ) terhadap ekspresi IGF-1, ERK1/2 dan PPAR  pada jalur MAPK (Mitogen Activated Protein Kinase) jaringan lemak viseral tikus wistar dengan diet tinggi lemak. J.Exp. Life Sci , 2(2), 89-97.
Syahrir, N. H. A., Afensi, F. M., & Susetyo, B. (2016). Efek sinergis bahan aktif tanaman obat berdasarkan jejaring dengan protein target. Jurnal Jamu Indonesia , 1(1), 35-46.
Tabatabaei-Malazy, O., Larijani, B., & Abdollahi, M. (2013). A novel management of diabetes by means of strong anti oxidants’ combination. Journal of Medical Hypotheses and Ideas , 7(1),
25 – 30.
Tadera,  Minami,  Takamatsu,  &  Matsuoka.  (2006).  Inhibition  of  alpha-glucosidase  and alphaamylase by flavonoids. J Nutr Sci Vitaminol , 52(2), 149-153.
Widiastuti,  L.  (2020).  Acupressure  dan  senam  kaki  terhadap  tingkat  peripheral  arterial disease pada klien DM tipe 2. Jurnal Keperawatan Silampari , 3(2), 649-706.
Yang, X., & Koh, F. (2016). Evaluation of the in vitro aglucosidase inhibitory activity of green tea polyphenols and different tea types. J Sci Food Agr , 96(3), 777-782.
Yanto,  A.  R.,  Mahmudati,  N.,  &  Susetyorini,  R.  E.  (2016).  Seduhan  jahe  ( Zingiber  officinale Rosce.)  dalam  menurunkan  kadar  glukosa  darah  tikus  model  diabetes  melitus  tipe-2 (NIDDM)  sebagai  sumber  belajar  biologi. Jurnal  Pendidikan  Biologi  Indonesia ,  2(3),  258- 264.
Yuningtyas, S., & Artianti, D. S. (2015) . Aktivitas inhibisi enzim α -glukosidase ekstrak air dan etanol umbi lapis bawang merah ( Allisum ascalonicum ). Fitofarmaka , 5(1), 24-30.