## ISOLASI DAN IDENTIFIKASI JAMUR ENTOMOPATOGEN SEBAGAI KANDIDAT BIOINSEKTISIDA LALAT RUMAH

## ( MUSCADOMESTICA )
Nofita Septiana 1* , Emantis Rosa 2 , Christina Nugroho Ekowati 3
1,2,3 Jurusan Biologi FM IPA Universitas La mpung, Indonesia
* Email: nofitaseptiana@gmail.co m
Received: May6 th , 2019. Accepted : June 30 th , 2019. Published : June 30 th , 2019

## Abstract
House  flies  (M.  domestic)  are  mechanical  vectors  of  various  diseases  by  microbial  pathogens including  Salmonella  which  causes  typhoid  fever,  Shigella  causes  dysentery,  and  E.  coli  causes diarrhea. Generally, controlling M. domestic uses synthetic insectici des, but it causes resistance and has a negative impact on the environment. Therefore, there is a need for alternative control, namely biological  control using  entomopathogenic  fungal  isolates  as bioinsecticides.  This  study  begins  with the  isolation  of  entomopathogenic  fungi  using  the  moist  chamber  method  with  fly  house  larvae  as insect bait. Fungus that grow on larvae are cultured and purified on PDA medium and then identified. Identification was carried out through macroscopic observations including colon y color and diameter and  microscopic  observations  including  conidia,  conidiophores,  hyphae,  vesicles,  fialids,  and  leg cells. The results of isolation and identification obtained five types of isolates, namely Aspergillus sp. 1, Aspergillus sp. 2, Geotrichum sp., Penicillium sp., and Aspergillus sp. 3.
Keywords: entomopatogenic fungi; identification; isolation; M. domestica

## Abstrak
La lat  ru mah  ( M.  domestica )  me rupakan  vektor  me kanik  berbagai  penyakit  o leh  mikroba  patogen antara lain Salmonella penyebab dema m tifo id, Shigella penyebab disentri, dan E. coli penyebab diare. Pengendalian M.  domestica umu mnya  menggunakan  insektisida  sintetis,  namun  men imbulkan resistensi  dan  berdampak  buruk  bagi  lingkungan.  Oleh  karena  itu,  perlu  dila kukan  pengendalian alternatif  berupa  pengendalian  biologi  menggunakan  isolat  ja mur  entomopatogen  sebagai bioinsektisida.  Penelitian  in i  dia wali  dengan  isolasi  jamur  ento mopatogen  menggunakan metode moistchamber dengan  larva M.  domestica sebagai  serangga  pancingan.  Jamur  yang  tumbuh pada larva dikultur dan dimurn ikan pada med ia PDA la lu diidentifikasi. Identifikasi d ila kukan mela lui pengamatan ma kroskopis  me liputi  warna dan d ia meter  koloni dan  pengamatan  mikroskopis me liputi struktur konidia, konidiofo r, hifa , vesikula, fia lid, dan sel kaki. Hasil isolasi dan identifikasi dipero leh lima  jen is  isolat  yaitu Aspergillus sp.  1, Aspergillus sp.  2, Geotrichum sp., Penicillium sp.,  dan Aspergillus sp. 3.
Kata kunci : identifikasi; isolasi; ja mu r entomopatogen ; M. domestica.

## PENDAHULUAN
Lalat rumah  ( Muscadomestica )  memiliki kisaran  tempat  hidup  yang  luas  (Astuti  & Pradani,  2010;  Ihsan,  2016). M.  domestica mempunyai  siklus  hidup  singkat  dan  daya reproduksi  tinggi  sehingga  populasinya  dapat  meningkat  dengan  pesat  (Astuti  &  Pradani, 2010).  Tingginya  jumlah  populasi M.  domestica dapat  mempengaruhi  higienitas  dan  nilai estetika  lingkungan  (Masyhuda,  Hestiningsih,  &  Rahadian,  2017).  Hal  ini  karena M. domestica berperan sebagai  vektor  mekanik  lebih dari 100 penyakit  yang disebabkan oleh
http://ejournal.radenintan.ac.id/index.php/biosfer/index
mikroba  patogen  diantaranya Salmonella,  Shigella,  Campylobacter,  Escherichia, Enterococcus, Chlamydia . Penyakit yang umum ditimbulkan yaitu demam tifoid, diare, dan disentri (Hastutiek & Fitri, 2013). O leh sebab itu, perlu dilakukan pengendalian populasi M. domestica untuk  mencegah  penyebaran  penyakit.  Pengendalian  yang  umum  dilakukan secara  kimiawi  dengan  insektisida  sintetis,  namun  penggunaan  bahan  kimia  dalam  dosis tertentu dapat  menimbulkan resistensi dan  menyisakan  residu  yang  mencemari  lingkungan (Ardiansyah & Mahajoeno, 2002).
Berdasarkan  informasi  tersebut,  perlu  dilakukan  pengendalian  alternatif  berupa pengendalian  biologi  yang  tidak  menimbulkan  resistensi  dan  ramah  lingkungan.  Dalam prosesnya,  dapat  memanfaatkan  agen  hayati  berupa  jamur  entomopatogen  (Nunilahwati, Herlinda,  Irsan,  &  Pujiastuti,  2013;  Rosmayuningsih,  Rahardjo,  &  Rachmawati,  2014). Jamur  entomopatogen  yang  umum  digunakan  yaitu Bauveriabassiana (Hasyim,  2006; SOETOPO  &  Indrayani,  2015), Metarhiziumanisopliae (Effendy,  Septiadi,  Salim,  & Mazid, 2011; Suprayogi, Marheni, & Oemry, 2014), Verticillium (Ladja,  Bulo, Santoso, & Nurhayati,  2015;  Prayogo,  2012).  Hasil  penelitian  Yunizar,  dkk.,  (2018)  penggunaan M. Anisopliae isolat  dari Orytesrhinoceros hanya  dapat  mengendalikan M.  domestica 50%. Oleh  karena  itu,  perlu  eksplorasi  isolat  jamur  entomopatogen  yang  berasal  dari M. domestica yang berpotensi dapat mengendalikan populasi M. domestica .

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi Jurusan Biologi, Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Universitas  Lampung.  Bahan  yang  digunakan yaitu  larva M.  domestica ,  alkohol  70%,  spritus,  media PotatoDextrose  Agar (PDA),  dan antibiotik  kloramfenikol.  Adapun  Isolasi  dan  Identifikasi  Jamur  Entomopatogen  adalah sebagai berikut:
Isolasi  jamur  dilakukan  dengan metode  Moistchamber dengan  cara  larva M. domestica yang  telah  mati  diletakkan  di  atas  tisu  basah  dalam  cawan  steril  (Gambar  1) kemudian  diinkubasi  selama  7  hari  pada  suhu  25-28 o C  (Reddy,  Antwi,  Shrestha,  & Kuriwada, 2016). Jamur yang tumbuh dikultur pada media PDA selama 3 hari (Gambar 2).
Gambar 1. Metode Moistchamber : (a) Larva M. domestica berjamur, (b) tisu basah
b a
http://ejournal.radenintan.ac.id/index.php/biosfer/index
Gambar 2. Kultur Jamur pada Media PDA: (a) larva M.domestica , (b) koloni jamur
Isolat  yang  tumbuh  pada  PDA  kemudian  dimurnikan.  Isolat  murni  diidentifikasi secara  makroskopis  dan  mikroskopis.  Pengamatan  makroskopis  meliputi  warna  dan diameter  koloniumur  5  hari.  Pengamatan  mikroskopis  melalui  teknik slideculture yang diinkubasi  selama  48  jam  pada  suhu  25-28 o C  (Nadhifah,  Hastuti,  &  Syamsuri,  2016). Pengamatan  meliputi  struktur  konidia,  konidiofor,  ada  tidaknya  sekat  pada  hifa,  vesikula, fialid, dan ada tidaknya sel kaki (Yang et al., 2010).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan  hasil  isolasi,  diperoleh  lima  isolat  jamur  entomopatogen  dengan  kode IL1,  IL2,  IL3,  IL4,  dan  IL5  yang  ditampilkan  pada  Gambar  3.pengamatan  koloni  isolat jamur entomopatogen adalah sebagai berikut.
Isolat IL1 Isolat IL2 Isolat IL3 Isolat IL4 a b
http://ejournal.radenintan.ac.id/index.php/biosfer/index

## Isolat IL5
Gambar 3. Pengamatan Koloni Isolat Jamur Entomopatogen,
Berdasarkan  hasil  pengamatan  makroskopis,  warna  koloniisolat  IL1  yaitu  kuning kecokelatan.  Bentuk koloninya tersebar pada cawan berisi  media PDA. Isolat IL2  memiliki koloni  berwarna  hijau  dengan  bagian  tepi  kekuningan.  Semakin  tua  umur  koloni  jamur, maka warnanya semakin  hijau gelap. Isolat IL3  memiliki  ciri-ciri  maksrokopis  yaitu koloni terdiri atas  filamen-filamen berwarna putih seperti kapas dengan  tepi  yang  halus dan rata. Isolat IL4 koloninya berwarna hijau ke abu-abuan dengan bagian tepi berwarna putih. Isolat IL5  berwarna  hitam  dengan  bagian  tepi  berwarna  putih.  Permukaan  koloninya  kasar  dan menyebar pada media PDA (Gambar 3).
Diameter koloni kelima  isolat jamur entomopatogen diukur pada  umur 5  hari  pada Tabel 1 sebagai berikut.
Tabel 1. Diameter Koloni Isolat Jamur Entomopatogen Umur 5 Hari.
Kode Isolat Diameter koloni (mm) IL1 32 IL2 28 IL3 28 IL4 10 IL5 20
Kelima  isolat  jamur  diamati  secara  mikroskopis  melalui  teknik slideculture . Morfologi mikroskopis isolat IL1 ditampilkan pada Gambar 4 sebagai berikut.
a b e c Perbesaran 40x 2,5 µm d
http://ejournal.radenintan.ac.id/index.php/biosfer/index
Gambar 4. Isolat IL1: (a) hifa, (b)konidiofor, (c)vesikula, (d) sel kaki, (e)konidia.
Berdasarkan  Gambar  4.  Di  atas,  isolatIL1  memiliki  hifa  yang  bersekat  dengan diameter  7,5  µm.  Konidiofornya  hialin,  tegak  dan  sederhana  dengan  panjang  konidiofor 250  µm.  Pada  bagian  atas  konidiofor  terdapat  vesikula  berbentuk  semi  bulat  seperti  gada dengan  ukuran 22,5x17,5  µm. Puncak konidiofornya dikelilingi oleh  fialid berbentuk  labu yang menempel pada vesikula. Konidianya bulat berantai pada ujung fialid tunggal, ukuran konidianya 6,25 µm.
Gambar5. Isolat IL2: (a) hifa, (b)konidiofor, (c)vesikula, (d) sel kaki, (e)konidia, (f)fialid.
Berdasarkan  Gambar  5,  dapat  diketahui  bahwa  isolat  IL2  memiliki  ciri-ciri  yaitu hifa  bersekat  dengan  diameter  7,5  µm.  Panjang  kondiofornya  275  µm,  strukturnya  tegak dan  sederhana.  Pada  puncak  konidiofor  terdapat  fialid  tunggal  yang  me nempel  pada vesikula.  Vesikula  berbentuk  oval  dengan  diameter  25x20  µm.  Ukuran  konidianya  5  µm dengan  bentuk  bulat  berantai  pada  ujung  fialid  berbentuk  labu  ditunjukan  pada  Gambar  5 sebagai berikut.
Gambar 6. Isolat IL3:(a) hifa, (b)konidia,
e e c e c f a b c d e 2,5 µm Perbesaran 40x a b 2,5 µm Perbesaran 40x
http://ejournal.radenintan.ac.id/index.php/biosfer/index
e-ISSN : 2580-4960
Isolat IL3 terdiri atas hifa  hialin  yang bersekat-sekat dan tidak  memiliki konidiofor. Konidia  ( arthospora )  berbentuk  silinder  pendek  atau  menyerupai  batang  dengan  ujung bersekat  membentuk  rantai,  ukuran  konidanya  5  µm  ditunjukan  pada  Gambar  6  sebagai berikut.
.
Gambar 7 . Isolat IL4: a. konidia, b. fialid, c. hifa, d. metula, e. konidiofor.
Hasil  pengamatan  IL4,  diketahui  bahwa  isolat  IL4  memiliki  struktur  morfologi sepeti brush .  Konidianya  bulat  silinder  dengan  diameter  2,5  µm.  Konidia  membentuk untaian  rantai  dan  berada  pada  ujung  fialid  tunggal.  Terdapat  percabangan  metula  yang menyokong  fialid  berbentuk  labu.  Konidiofornya  tegak  dan  bercabang.  Panjang konidiofornya yaitu 22,5-27,5 µm.
Gambar 8. Isolat IL5: (a) konidiofor, (b) konidia, (c) vesikula, (d) fialid.
Isolat IL5  memiliki  hifa  hialin dan  tidak bersekat. Konidiofor Isolat IL5  tegak dan sederhana, panjangnya 255  µm.  Vesikulanya berbentuk bulat dengan diameter 20  µm  yang dikelilingi  oleh  fialid  berbentuk  gada  tunggal.  Konidia  berada  di  ujung  fialid  berbentuk bulat (Gambar 8). Hasil identifikasidisajikan pada Tabel 3.
Tabel 3. Karakter Isolat Jamur Entomopatogen Hasil Identifikasi Kode Isolat Struktur konidia Konidofor Hifa Vesikel Fialid Sel kaki Kesimpulan IL1 Bulat ( globose ) Tegak, sederhana Bersekat Semi bulat Tunggal Ada Aspergillus sp. 1 IL2 Bulat ( globose ) Tegak, sederhana Bersekat Oval Tunggal Ada Aspergillus sp. 2 IL3 Silinder pendek Tidak ada Bersekat Tak ada Tak ada Tak ada Geotrichum sp. 1L4 Bulat ( globose ) Bercabang Bersekat Tak ada Tunggal Tak ada Penicillium sp. 1L5 Bulat ( globose ) Tegak, sederhana Bersekat Bulat Tunggal Ada Aspergillus sp.3
Perbesaran 40x a b c e d b 2,5 µm a a c d 2,5 µm
Perbesaran 40x
b

## S IMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan  hasil  identifikasi,  diperoleh  5  jenis  isolat  jamur  entomopatogen  yaitu Aspergillus sp. 1, Aspergillus sp. 2, Geotrichum sp., Penicillium sp., dan Aspergillus sp. 3
Perlu dilakukannya  uji  lanjutan  untuk  mengentahui efektivitas  isolat  jamur sebagai kandidat bioinsektisida M. domestica.

## DAFTAR PUSTAKA
Ardiansyah,  W.,  &  Mahajoeno,  E.  (2002).  Toksisitas  Ekstrak  Daun  Nimba  (Azadirachta indica  A.  Juss)  pada  Anakan  Siput  Murbei  (Pomacea  canaliculata  L.). BioSMART , 4 (1), 29–34.
Astuti, E. P., & Pradani, F. Y. (2010). Pertumbuhan dan Reproduksi Lalat Musca domestica pada  Berbagai  Media  Perkembangbiakan. Aspirator  Journal  of  Vector-Borne Diseases , 2 (1).
Effendy,  T.  A.,  Septiadi,  R.,  Salim,  A.,  &  Mazid,  A.  (2011).  Jamur  entomopato gen  asal tanah  lebak  di  Sumatera  Selatan  dan  potensinya  sebagai  agensia  hayati  walang sangit  (Leptocorisa oratorius (F.)). Jurnal Hama  Dan Penyakit Tumbuhan Tropika , 10 (2), 154–161.
Hastutiek,  P.,  &  Fitri,  L.  E.  (2013).  Potensi  Musca  domesticaLinn.  Sebagai  Vektor Beberapa Penyakit. Jurnal Kedokteran Brawijaya , 23 (3), 125–136.
Hasyim,  A.  (2006).  Evaluasi  bahan  carrier  dalam  pemanfaatan  jamur  entomopatogen, Beauveria  bassiana  (Balsamo)  Vuillemin  untuk  mengendalikan  hama  penggerek bonggol pisang, Cosmopolites sordidus Germar. Jurnal Hortikultura , 16 (3).
Ihsan, I. M. (2016). Pengaruh Suhu Udara terhadap Perkembangan Pradewasa Lalat Rumah (Musca domestica). Jurnal Teknologi Lingkungan , 17 (2), 100–107.
Ladja, F.  T.,  Bulo,  L. P. P. T. J., Santoso,  T., & N urhayati,  E. (2015). Potensi Cendawan Entomopatogen Verticillium lecanii dan  Beauveria bassiana dalam Mengendalikan Wereng Hijau dan Menekan Intensitas Penyakit Tungro .
Masyhuda,  M.,  Hestiningsih,  R.,  &  Rahadian,  R.  (2017).  Survei  Kepadatan  Lalat  Di Tempat  Pembuangan  Akhir  (TPA)  Sampah  Jatibarang  Tahun  2017. Jurnal Kesehatan Masyarakat (e-Journal) , 5 (4), 560–569.
Nadhifah,  Y.  M.,  Hastuti,  U.  S.,  &  Syamsuri,  I.  (2016).  Isolasi,  Karakterisasi,  Dan Identifikasi Mikoflora Dari Rizosfer Tanah Pertanian Tebu (Saccharum O fficinarum L.)  Sebagai  Bahan  Ajar  K ingdom  Fungi  Untuk  Siswa  Kelas  X  SMA. Jurnal Pendidikan: Teori, Penelitian, Dan Pengembangan , 1 (10), 2023–2030.
Nunilahwati,  H.,  Herlinda,  S.,  Irsan,  C.,  &  Pujiastuti,  Y.  (2013).  Eksplorasi,  isolasi  dan seleksi  jamur  entomopatogen  Plutella  xylostella  (Lepidoptera:  Yponomeutidae) pada pertanaman caisin (Brassica chinensis) di Sumatera Selatan. Jurnal Hama Dan Penyakit Tumbuhan Tropika , 12 (1), 1–11.
Prayogo, Y. (2012). Sebaran dan efikasi berbagai genus cendawan entomopatogen terhadap Riptortus linearis pada kedelai di Lampung dan Sumatra Selatan. Jurnal Hama Dan Penyakit Tumbuhan Tropika , 6 (1), 14–22.
Reddy, G. V., Antwi, F. B., Shrestha, G., & Kuriwada, T. (2016).  Evaluation of  toxicity of biorational  insecticides  against  larvae  of  the  alfalfa  weevil. Toxicology  Reports , 3 , 473–480.
Rosmayuningsih,  A.,  Rahardjo,  B.  T.,  &  Rachmawati,  R.  (2014).  Patogenisitas  Jamur Metarhizium anisopliae terhadap Hama Kepinding Tanah (Stibaropus molginus)(Hemiptera:  Cydnidae)  dari  Beberapa  Formulasi. Jurnal  Hama  Dan Penyakit Tumbuhan , 2 (2), 28–37.
SOETOPO, D.,  & Indrayani, I.  (2015). Jamur entomopatogen Beauveria bassiana: potensi dan prospeknya dalam pengendalian hama tungau. Perspektif , 8 (2), 65–73.
Suprayogi,  S.,  Marheni,  M.,  &  Oemry,  S.  (2014).  Uji  Efektifitas  Jamur  Entomopatogen Beauveria  bassiana  dan  Metarhizium  anisopliae  terhadap  Kepik  Hijau  (Nezara viridula  L.)(Hemiptera; Pentatomidae) pada  Tanaman Kedelai ( Glycine  max  L.) di Rumah Kasa. Jurnal Agroekoteknologi Universitas Sumatera Utara , 3 (1).
Yang, B., Qu, D.,  Zhang, X., Shen, J., Cui, S., Shi, Y., … Meng, J. (2010). Prevalence and characterization  of  Salmonella  serovars  in  retail  meats  of  marketplace  in  S haanxi, China. International Journal of Food Microbiology , 141 (1–2), 63–72.