ISSN 2085-2916  e-ISSN 2337-3652 Tersedia daring http://jai.ipb.ac.id J. Agron. Indonesia, April 2019, 47(1):84-89 DOI: https://dx.doi.org/10.24831/jai.v47i1.19502
Induksi Mutasi Tanaman Leunca (Solanum nigrum L.) untuk

## Meningkatkan Keragaman Kandungan Tanin

## Induced Mutation in Black Nightshade (Solanum nigrum L.) to Increase Diversity of Tannin Content
Siti Hartati Yusida Saragih 1 , Syarifah Iis Aisyah 2* , dan Sobir 2
1 Program Studi Pemuliaan dan Bioteknologi Tanaman, Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor 2 Departemen Agronomi dan Hortikultura, Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor (Bogor Agricultural University), Jl. Meranti, Kampus IPB Darmaga, Bogor 16680, Indonesia
Diterima 12 Januari 2018/Disetujui 29 Januari 2019

## ABSTRACT
Black nightshade (Solanum nigrum L.) is one of the indigenous vegetables in Indonesia. The fruit of this vegetable is green and has bitter taste because of its tannin content. The objectives of this study were to get lethal dose 50 (LD 50 ), diversity and to obtain candidates of mutant plants with high and low tannin content in young fruit and ripe fruit of black nightshade. The research was conducted at Pasir Kuda experimental station, Bogor; National Nuclear Energy Agency (BATAN), Jakarta; and postharvest laboratory of the Center for Tropical Horticulture Studies (PKHT IPB), Bogor, from December 2016 to July 2017. Black nightshade accessions of SN 20 and SN 29 were irradiated using doses of 0, 100, 150, 200, and 250 Gy of gamma ray. The LD 50 values for SN 20 and SN 29 were 171.944 Gy and 190.949 Gy, respectively. The analysis of tannin content was performed based on permanganate method by titration using potassium permanganate. The results showed that the highest tannin content of green stage fruit was found in SN20D3.5 with 200 Gy dose and the lowest was found in SN29D1.5 with 100 Gy dose. The highest tannin content of ripe fruit was found in SN20D4.6 with dose of 250 Gy and the lowest was found in SN20D3.1 with dose of 200 Gy. Recommended tannin content for black nightshade is the low tannin content.
Keywords: diversity, gamma ray, indigenous vegetable, irradiation, LD 50

## ABSTRAK
Leunca (Solanum nigrum L.) adalah salah satu sayuran asli di Indonesia. Sayuran ini memiliki buah hijau dan rasa sepat karena adanya kandungan tanin. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mendapatkan Lethal Dosis 50 (LD 50 ), mengetahui keragaan tanaman dan memperoleh kandidat mutan leunca yang memiliki kandungan tanin yang tinggi dan rendah pada buah muda dan buah tua. Penelitian dilaksanakan di kebun percobaan Pasir Kuda, Bogor, di Badan Tenaga Nuklir Nasional (BATAN) Pasar Jumat, Jakarta; dan di Laboratorium Pascapanen Pusat Kajian Hortikultura Tropika (PKHT), Bogor, dari bulan Desember 2016 hingga Juli 2017. Buah leunca aksesi SN20 dan SN29 diiradiasi pada dosis 0, 100, 150, 200, dan 250 Gy. Nilai LD 50 leunca untuk SN 20 dan SN 29 masing-masing adalah 171.944 Gy dan 190.949 Gy. Hasil penelitian menunjukkan bahwa identifikasi kandungan tanin buah muda leunca tertinggi dihasilkan oleh aksesi SN20D3.5 dengan dosis 200 Gy dan kandungan tanin terendah pada aksesi SN29D1.5 dengan dosis 100 Gy. Kandungan tanin buah tua tertinggi dihasilkan oleh aksesi SN20D4.6 dengan dosis 250 Gy dan kandungan tanin terendah terdapat pada aksesi SN20D3.1 dengan dosis 200 Gy. Kandungan tanin yang dianjurkan pada buah leunca adalah kandungan tanin yang rendah.
Kata kunci: iradiasi, keragaman, LD 50 , sayuran asli, sinar gamma, tanin

## PENDAHULUAN
Leunca  ( Solanum  nigrum L.)  merupakan  salah  satu sayuran indigenous atau  sayuran  lokal  yang  dikonsumsi sebagai  obat  ataupun  sayuran.  Setiap  100  g  buah  leunca segar mengandung 90% air, 1.9 g protein, 0.1 g lemak, 7.4g
karbohidrat, 274 mg Ca, 34 mg Fe, 0.5 g karoten, 0.1 mg vitamin B1, dan 17 mg vitamin C (Siemonsma dan Jansen, 1994);  (Sarma  dan  Sarma,  2011).    Buah  leunca  memiliki kandungan  steroid  yang  dapat  dimanfaatkan  sebagai  obat detoks,  diuretik,  anti  hipertensi,  antikanker,  dan  infeksi saluran  kemih  (Edmonds  dan  Chweya,  1997).  Sebagai sayuran lokal, leunca disebut sebagai sayuran minor, selain belum mampu bersaing dengan sayuran mayor yang telah
berkembang  terlebih  dahulu,  leunca  memiliki  rasa  yang kurang disukai, terutama oleh anak-anak (Soetiarso, 2010). Senyawa  flavour  berupa  tanin  merupakan  senyawa  yang menimbulkan rasa yang kurang disukai (Gogoi dan Islam, 2012). Beberapa  cara  dilakukan  dalam  memperbaiki  sifat tanaman, salah satunya adalah dengan program pemuliaan tanaman  dan  bioteknologi.  Program  pemuliaan  tanaman melalui induksi mutasi merupakan cara yang dapat dilakukan untuk  meningkatkan  keragaman  dalam  memperbaiki  sifat tanaman.  Aplikasi  mutasi  dengan  iradiasi  sinar  gamma sudah  banyak  berhasil  dilakukan  pada  banyak  tanaman. Sutjahjo et al. (2014) melaporkan bahwa terdapat keragaman tanaman  tomat  akibat  induksi  mutasi.  Ivanishvili et  al. (2016)  melaporkan  bahwa  efek  radiasi  yang  ditimbulkan dari induksi mutasi mempengaruhi viabilitas dan reproduksi tanaman Lemna. Beberapa penelitian menunjukkan bahwa iradiasi  sinar  gamma  dapat  mengubah  karakter  morfologi tanaman  kunyit  (Anshori et  al .,  2014)  dan  meningkatkan keragaman pada famili Solanum (Ojiewo et al ., 2007). Teknik pemuliaan mutasi yang paling sering dilakukan adalah mutasi fisik karena selain murah juga mempercepat peningkatan keragaman. Ulukapi et al . (2015) melaporkan bahwa  persentase  pertumbuhan  tanaman  terong  dengan perlakuan  induksi  mutasi  memiliki  nilai  LD 50 yaitu  pada dosis  160  Gy.  Penelitian  ini  menseleksi  keragaman  buah leunca dengan berbagai kandungan tanin sehingga diperoleh rasa  yang  disukai  masyarakat.  Dosis  iradiasi  yang  efektif untuk  menginduksi  keragaman  genetik  leunca  belum diketahui, sehingga pada penelitian ini akan diuji perlakuan iradiasi sinar gamma dengan dosis 0 Gy, 100 Gy, 150 Gy, 200 Gy, dan 250 Gy . Nilai  LD 50 bertujuan  untuk  mengetahui  perubahan- perubahan yang terjadi pada generasi M1 akibat berbagai tingkat dosis radiasi sinar gamma, sehingga dapat digunakan untuk acuan penelitian induksi mutasi selanjutnya. Rajarajan et al . (2016) melaporkan bahwa mutasi yang dikehendaki umumnya  berada  pada  kisaran Lethal  Dose (LD 50 )  yaitu dosis yang menyebabkan kematian 50% tanaman. Penentuan LD 50 diperlukan untuk mengetahui dosis yang tepat untuk menghasilkan tanaman mutan. Tujuan penelitian ini adalah untuk  menentukan  LD 50 tanaman  leunca,  memperoleh informasi  tentang  keragaan  leunca  hasil  iradiasi  sinar gamma dan kandidat mutan leunca dengan kandungan tanin rendah.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  dilaksanakan  di  kebun  percobaan  Pasir Kuda, Bogor dengan ketinggian 250 m di atas permukaan laut  (dpl).  Perlakuan  iradiasi  dilakukan  di  Badan  Tenaga Nuklir  Nasional  (BATAN)  Pasar  Jumat,  Jakarta  Selatan. Pengamatan  kadar  tanin  dilaksanakan  di  Laboratorium Pascapanen  Pusat  Kajian  Hortikultura  Tropika  (PKHT) Institut Pertanian Bogor. Penelitian dilaksanakan pada bulan Desember 2016 hingga Juli 2017.
Bahan percobaan yang digunakan adalah biji leunca aksesi  SN  20  dan  aksesi  SN  29.  Populasi  tanaman  hasil iradiasi  disebut  generasi  M1  dan  penanaman  musim
berikutnya  disebut  generasi  M2.  Pada  penanaman  M1, biji  leunca  diradiasi  dengan  menggunakan  sinar  gamma Cobalt 60  melalui  alat irradiator  gamma  chamber 4000 A.  Penelitian  disusun  menggunakan  rancangan  kelompok lengkap  teracak  (RKLT)  dengan  dosis  sebagai  perlakuan. Dosis  yang  digunakan  terdiri  dari  lima  taraf  dosis  yaitu: 0 Gy (kontrol), 100 Gy (D1), 150 Gy (D2), 200 Gy (D3), dan  250  Gy  (D4);  sehingga  total  terdapat  500  tanaman membentuk  generasi  M1.  Genotipe  leunca  generasi  M2 ditanam sebanyak 1,000 per genotipe dan di analisis kadar tanin  pada  masing-masing  dosis.  Pengamatan  dilakukan secara kualitatif dan kuantitatif, karakter kualitatif meliputi bentuk daun dan warna daun. Karakter kuantitatif meliputi tinggi tanaman, umur berbunga, umur panen dan bobot 10 buah per tanaman.
Penentuan LD 50 berdasarkan pada persentase tanaman yang  tumbuh  6  minggu  setelah  iradiasi,  dengan  membuat grafik  regresi.  Regresi  menggunakan software analisis curve fit . Analisis  kadar  tanin  dilakukan  pada  buah  muda generasi  M2  mengikuti  metode  Sulastri  (2009)  dan  Rauf (2016).  Senyawa  tanin  dianalisis  menggunakan  larutan indigocarmin  (C 16 H 8 N 2 NO 2 O 8 S 2 )  dan  kalium  permanganat (KMnO 4 ).  Sebanyak  10  g  buah  leunca  diekstrak  dan dilarutkan  ke  dalam  100  mL  ethanol  96%  kemudian dipanaskan di dalam waterbath selama 2 jam pada suhu 60- 65 o C. Ekstrak didinginkan dan disaring kemudian dilakukan pengujian senyawa tanin pada filtrat hasil ekstraksi dengan menambahkan  kembali  larutan  ethanol  96%  pada  filtrat hasil  ekstraksi  hingga  tanda  batas  erlenmeyer  250  mL. Larutan  filtrat  diambil  sebanyak  25  mL  dan  dimasukkan ke dalam gelas ukur kemudian ditambahkan 25 mL larutan indigocarmin,  dilanjutkan  titrasi  dengan  larutan  KMnO 4 . Penambahan  larutan  KMnO 4 0.1  M  saat  titrasi  dilakukan sampai  larutan  berubah  warna  dari  biru  menjadi  hijau, kemudian  ditetesi  larutan  KMnO 4 lagi  sampai  menjadi warna kuning keemasan. Volume titrasi tersebut dinyatakan sebagai A  ml.  Untuk  penetapan  larutan  blanko  dilakukan tanpa  filtrat  dengan  menuang  sebanyak  25  mL  ethanol 96% ke dalam erlenmeyer dan ditambahkan 25 mL larutan indigocarmin, selanjutnya dilakukan titrasi dengan larutan KMnO 4 . Volume  titrasi  blanko  dinyatakan  sebagai  B  mL. Analisis kandungan tanin diuji sebanyak 9 sampel tanaman secara acak.

## Analisis Data
Analisis  ragam  perlakuan  dosis  diperoleh  dengan software SAS 9.0. Perhitungan koefisien keragaman genetik berdasarkan Poehlman dan Sleeper (2006) dengan rumus:
Keterangan: Kriteria koefisien keragaman genetik (KKG) adalah rendah (0%  ≤  x  ≤  6.60%),  agak  rendah  (6.60%  ≤  x  ≤  13.18%), cukup tinggi (13.18% ≤ x ≤ 19.76%), dan tinggi (19.76% ≤ x ≤ 26.35%).
Analisis kandungan tanin dengan  metode permanganat berdasarkan Rauf (2016) dengan rumus:
KKG = (  2 g / X) x 100%
Keterangan: A = Volume titrasi tanin (mL), B = volume titrasi blanko (mL), N = normalitas KMnO 4 standar, 10 = faktor pengenceran, 1 mL KMnO 4 0.1 N setara dengan 0.004157 g tanin.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Lethal Dosis 50 Leunca
Hasil  iradiasi  sinar  gamma  pada  biji  leunca menggunakan Cobalt 60 dapat menentukan radiosensitivitas pada tanaman leunca. Uji radiosensitivitas bertujuan untuk menetapkan dosis LD 50 , yaitu dosis yang menyebabkan 50% populasi mengalami kematian akibat iradiasi. Hasil analisis curve  fit leunca  aksesi  SN20  diperoleh  model  terbaik yang mewakili data kecambah hidup setelah iradiasi yaitu Polynomial  Fit dengan  persamaan  Y=  79+0.0637667x- 0.00883x 2 +1.77 e–05 x 3 . Berdasarkan model tersebut diperoleh nilai LD 50 leunca aksesi SN20 sebesar 171.944 Gy.  Hasil analisis curve fit tanaman leunca aksesi SN29 menunjukkan model terbaik untuk mewakili data kecambah hidup setelah iradiasi  adalah Polynomial  Fit dengan  persamaan  Y  = 48+0.778x -0.01264x 2 +6.32 E-05 x 3 dengan nilai LD 50 leunca aksesi SN29 sebesar 190.949 Gy. Nilai LD 50 setiap aksesi yang  diuji  mempunyai  tingkat  kematian  pada  tanaman yang  di  radiasi  sehingga  diperoleh  dosis  optimum  dalam menghasilkan  keragaman.  Sutapa  dan  Kasmawan (2016) melaporkan  bahwa  dosis  optimal  pada  pertumbuhan fisiologis tanaman tomat adalah pada dosis 100 Gy.

## Keragaan Mutan Leunca
Karakter  kualitatif  pada  daun  (bentuk  dan  warna daun) menunjukkan adanya keragaman. Perbedaan bentuk dan warna daun yang mencolok antara tanaman kontrol dan tanaman hasil iradiasi diduga akibat adanya mutasi. Mutasi menyebabkan perubahan bentuk ujung daun terbelah pada dosis  150  Gy  dan  tekstur  daun  bergerigi  pada  dosis  100 Gy. Efek mutasi juga menyebabkan adanya tanaman albino pada dosis 200 Gy (Gambar 1). Tanaman albino ini tidak mampu bertahan dan menghasilkan bunga seperti tanaman kontrol.  Albino  merupakan  keadaan  dimana  tanaman mengalami  kekurangan  ataupun  kehilangan  klorofil  daun.
Perubahan fenotipik tanaman akibat mutasi dapat dilihat dari perubahan corak warna dan bentuk daun menjadi beragam. Sari et al . (2015) melaporkan bahwa dosis di atas nilai LD 50 menyebabkan respon tanaman gandum menjadi albino pada dosis 30 Gy.
Dosis iradiasi sinar gamma berpengaruh nyata terhadap rata-rata  tinggi  tanaman  dan  bobot  10  buah  per  tanaman generasi M1, tetapi tidak untuk karakter umur berbunga dan umur  panen  (Tabel  1).  Pengaruh  perlakuan  menyebabkan penurunan tinggi tanaman pada aksesi SN 20 lebih rendah dibanding kontrol, yaitu pada dosis 150 Gy, 200 Gy dan 250 Gy. Pertumbuhan yang lebih rendah juga terdapat pada SN 29  dosis  150  Gy.  Bobot  10  buah  pertanaman  pada  aksesi SN 20 untuk semua perlakuan memiliki nilai lebih rendah dibandingkan dengan kontrol dan aksesi SN 29 dosis 150 Gy secara nyata lebih kecil dibandingkan tanaman kontrol. Efek  mutasi  tidak  selalu  meningkatkan  pertumbuhan tanaman  namun  juga  mengakibatkan  gangguan  fisiologis akibat  mutagen  yang  diberikan.  Meilawati et  al .  (2016) melaporkan  bahwa  iradiasi  sinar  gamma  menyebabkan perbedaan  secara  nyata  dan  acak  pada  warna  dan  bentuk daun tanaman lada.
Pengamatan nilai koefisien keragaman (KK) dilakukan pada  generasi  M2.  Karakter  yang  diamati  menunjukkan adanya  keragaman  pada  karakter  tinggi  tanaman,  tetapi tidak untuk karakter umur panen (Tabel 2). Nilai KK yang tinggi diperlihatkan pada karakter tinggi tanaman aksesi SN 20 dosis 150 Gy, 200 Gy, dan 250 Gy; sebaliknya pada dosis lain nilai KK rendah. Secara keseluruhan, nilai KK umur berbunga  leunca  mutan  M2  tergolong  rendah.  Nilai  KK pada karakter bobot buah aksesi SN 29 secara keseluruhan cukup tinggi, namun pada SN 20 karakter umur berbunga tergolong  rendah  dan  karakter  bobot  buah  agak  rendah. Dhanavel et  al .  (2012)  melaporkan  bahwa  efek  mutasi menyebabkan keragaman secara morfologi  pada tanaman kacang tunggak. Indriatama et al . (2016) melaporkan bahwa keragaman  genetik  secara  keseluruhan  karakter  agronomi tanaman gandum tinggi pada generasi M2. Ulukapi et al. (2015) melaporkan bahwa peningkatan dosis sinar gamma mengakibatkan penurunan jumlah daun dan tinggi tanaman pada  dosis  240  Gy.  Nilai  keragaman  genetik  yang  tinggi pada  karakter  yang  diamati  memungkinkan  dimulainya seleksi populasi leunca pada generasi berikutnya.
1

## A                                      B
C                                   D
Gambar 1. Kandidat mutan daun leunca pada 4 minggu setelah semai (MSS): (A) tanaman kontrol (B) ujung daun terbelah 150 Gy, (C) tanaman albino 200 Gy, (D) tepi daun bergerigi 100 Gy

## Kadar Tanin Buah Leunca
Hasil analisis kadar tanin menunjukkan bahwa iradiasi berpengaruh terhadap tinggi rendahnya kadar tanin dalam buah  muda  dan  buah  tua.  Kadar  tanin  aksesi  buah  muda leunca  SN20  berkisar  antara  0.017-0.097%  dengan  kadar tanin tertinggi yaitu pada genotipe SN20D3.5 dosis 200 Gy sebesar 0.097%, kadar tanin terendah yaitu pada genotipe SN20D4.4  dosis  250  Gy  sebesar  0.017%  dan  tanaman kontrol sebesar 0.030% (Gambar 2).  Kadar tanin buah muda aksesi  SN29  berkisar  0.012-0.055%,  dari  hasil  diperoleh bahwa kadar tanin tertinggi pada genotipe SN29D3.8 dosis 200 Gy sebesar 0.055%, kadar tanin terendah pada genotipe SN29D1.5 dosis 100 Gy sebesar 0.012% dan tanaman kontrol sebesar 0.039% (Gambar 3). Induksi mutasi dengan kadar tanin  rendah  merupakan  kandidat  mutan  yang  diharapkan dari tanaman leunca. Moghaddam et al . (2011) melaporkan
Aksesi Dosis (Gy) Tinggi tanaman (cm) Umur berbunga (HST) Umur panen (HST) Bobot 10 buah pertanaman (g) SN 20 0 132.9a 49.4a 68.8b 14.2a 100 132.6a 48.2a 77.0a 12.8ab 150 116.7ab 48.8a 77.6a 11.9b 200 100.1bc 49.4a 76.6a 10.4c 250 80.8c 49.2a 70.2b 11.7bc SN 29 0 109.6ab 64.8a 78.8a 11.1b 100 108.6ab 64.0a 77.4a 10.7b 150 89.6b 65.4a 76.4a 9.5c 200 116.6ab 65.6a 79.2a 11.9a 250 125.0a 66.6a 76.8a 11.1b Tabel 1. Keragaan dua aksesi leunca generasi M1
Keterangan: Angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama tidak berbeda nyata berdasarkan Tukey pada D Aksesi Dosis iradiasi (Gy) TT UB UP BB KK Kriteria KK Kriteria KK Kriteria KK Kriteria SN 20 0 12.67 Agak rendah 3.34 Rendah 1.57 Rendah 12.29 Agak rendah 100 8.63 Agak rendah 2.67 Rendah 0.66 Rendah 10.53 Agak rendah 150 29.67 Tinggi 7.22 Agak rendah 5.97 Rendah 4.63 Rendah 200 23.58 Tinggi 3.82 Rendah 5.33 Rendah 5.20 Rendah 250 27.92 Tinggi 1.11 Rendah 5.99 Rendah 12.13 Agak rendah SN 29 0 12.83 Agak rendah 3.07 Rendah 0.60 Rendah 13.55 Cukup tinggi 100 8.87 Agak rendah 2.58 Rendah 3.45 Rendah 19.26 Cukup tinggi 150 5.13 Rendah 1.68 Rendah 1.51 Rendah 15.80 Cukup tinggi 200 11.52 Agak rendah 10.84 Agak rendah 2.33 Rendah 17.85 Cukup tinggi 250 4.22 Rendah 9.71 Agak rendah 5.58 Rendah 16.15 Cukup tinggi Tabel 2. Nilai koefisien keragaman tanaman leunca generasi M2
Keterangan: TT= tinggi tanaman; UB = umur berbunga; UP = umur panen; BB = bobot 10 buah per tanaman; KK = koefisien keragaman (%)
0.030 0.068 0.024 0.039 0.044 0.030 0.097 0.017 0.029 0.000 0.020 0.040 0.060 0.080 0.100 Gambar 2.  Persentase kadar tanin buah leunca muda SN20 Aksesi Kadar tanin (%) 0.030 0.068 0.024 0.039 0.044 0.030 0.097 0.017 0.029 0.000 0.020 0.040 0.060 0.080 0.100
bahwa efek mutasi dapat mengubah kandungan flavonoid pada Centella asiatica . Hasil analisis kadar tanin dari buah tua leunca aksesi SN20  berkisar  antara  0.005-0.054%  dengan  hasil  kadar tanin  tertinggi  yaitu  pada  genotipe  SN20D4.6  dosis  250 Gy sebesar 0.054%, kadar tanin rendah yaitu pada genotipe SN20D3.1  dosis  200  Gy  sebesar  0.005%  dan  tanaman kontrol sebesar 0.028% (Gambar 4).  Kadar tanin buah tua aksesi  SN29  berkisar  0.007-0.050%,  dari  hasil  diperoleh bahwa kadar tanin tertinggi pada genotipe SN29D3.9 dosis 200 Gy sebesar 0.050%, kadar tanin terendah pada genotipe SN29D2.10  dosis  150  Gy  sebesar  0.007%  dan  tanaman kontrol sebesar 0.032% (Gambar 5). Kavitha et al . (2014) melaporkan bahwa terjadi perubahan kandungan antioksidan buah Zizypus mauritiana pada dosis 250 Gy dan 1,000 Gy. Buah  leunca  dapat  dikonsumsi  baik  buah  muda ataupun buah tua. Tinggi rendahnya kadar tanin antara dosis perlakuan  masing-masing  nomor  individu  buah  leunca menunjukkan bahwa sifat mutasi dapat mengubah kandungan
metabolisme tanaman. Wulandari (2015) melaporkan bahwa kadar tanin pada buah muda pala lebih tinggi dibandingkan buah  tua.  Kadar  tanin  juga  terlihat  berbeda  pada  kalus daun  jati  belanda  dibandingkan  dengan  bagian  daun  jati belanda yang tua (Syahid et al ., 2010). Anshori et al. (2014) melaporkan  bahwa  kerusakan  fisiologis  menyebabkan perubahan morfologi, perubahan daya adaptasi, dan mutan kondisional tanaman kunyit.
0.039 0.025 0.012 0.046 0.040 0.055 0.043 0.030 0.026 0.000 0.020 0.040 0.060 0.080 0.100 Gambar 3. Persentase kadar tanin buah leunca muda SN29 Aksesi Kadar tanin (%) 0.039 0.025 0.012 0.046 0.040 0.055 0.043 0.030 0.026 0.000 0.020 0.040 0.060 0.080 0.100 0.028 0.038 0.019 0.036 0.035 0.005 0.046 0.034 0.054 0.000 0.020 0.040 0.060 0.080 0.100 Gambar 4. Persentase kadar tanin buah leunca tua SN20 Aksesi Kadar tanin (%) 0.028 0.038 0.019 0.036 0.035 0.005 0.046 0.034 0.054 0.000 0.020 0.040 0.060 0.080 0.100 0.032 0.035 0.027 0.030 0.007 0.042 0.050 0.035 0.047 0.000 0.020 0.040 0.060 0.080 0.100 Gambar 5. Persentase kadar tanin buah leunca tua SN29 Aksesi Kadar tanin (%) 0.032 0.035 0.027 0.030 0.007 0.042 0.050 0.035 0.047 0.000 0.020 0.040 0.060 0.080 0.100

## KESIMPULAN
Aksesi  tanaman  yang  berbeda  memiliki  LD 50 yang berbeda yaitu genotipe SN20 pada 171.944 Gy dan SN29 pada  190.949  Gy.  Iradiasi  sinar  gamma  meningkatkan keragaman  pada  karakter  morfologi  yang  diamati  dan bersifat acak. Iradiasi sinar gamma meningkatkan keragaman kadar tanin pada buah muda aksesi SN20 (0.017-0.097%), buah muda SN29 (0.012-0.055%), buah tua SN20 (0.005- 0.054%),  dan  buah  tua  SN29  (0.007%-0.050%)  sehingga memungkinkan  untuk  mendapatkan  buah  leunca  dengan kadar tanin yang lebih tinggi (0.097%) maupun kadar tanin yang  lebih  rendah  (0.005%)  dibandingkan  aksesi  yang belum  diradiasi.  Perlakuan  iradiasi  sinar  gamma  mampu menghasilkan  mutan  tanaman  leunca  yang  dikehendaki yaitu buah leunca dengan kadar tanin rendah.

## DAFTAR PUSTAKA
Anshori,  S.R,  S.I,  Aisyah,  L.K.  Drusman.  2014.  Induksi mutasi  fisik  dengan  sinar  gamma  pada  kunyit ( Curcuma domestica Val.). J. Hort. Indonesia 5:84- 94.
Dhanavel, D., S. Gnanamurthy, M. Girija. 2012. Effect of gamma  rays  on  induced  chromosomal  variation  in cowpea Vigna  unguiculata (L.)  Walp.  Int.  J.  Curr. Sci. 245-250.
Edmonds,  J.M.,  J.A.  Chweya.  1997.  Black  Nightshades, Solanum  ningrum L.  and  a  Related  Spesies. International  Plant  genetic  Resources  Institute, Australia.
Gogoi,  P.,  M.  Islam.  2012.  Phytochemical  screening  of Solanum nigrum L. and S. myriacanthus dunal from districts of  Upper Assam, India. IOSR 2:455-459.
Indriatama,  W.M.,  Trikoesoemaningtyas,  S.I.  Aisyah,
H.  Soeranto.  2016.  Pendugaan  ragam  genetik  dan heritabilitas  karakter  agronomi  gandum  ( Triticum aestivum L.) hasil berbagai perlakuan teknik iradiasi sinar gamma. J. Ilmiah Aplikasi Isotop Radiasi 12:79- 88.
Ivanishvili,  N.I.,  M.E.  Gogebashvili,  N.Z.  Gvritishvili. 2016.  Gamma  radiation  efect  on  the  parameters  of the population recovery of plants. Ann. Agrarian Sci. 14:319-322.
Kavitha,  C.,  A.  Kuna,  T.  Supraja,  S.B.  Sagar,  T.V.N. Padmavathi,  N.  Prabhakar.  2014.  Effect  of  gamma irradiation on antioxidant properties of ber ( Zizyphus mauritiana ) fruit. J. Food. Sci. Technol. DOI 10.1007/ s13197-014-1359-x.
Meilawati, N.L., N. Bermawie, A. Purwito, D. Manohara. 2016.  Respon  tanaman  lada  ( Piper  nigrum L.) varietas  cinten  terhadap  iradiasi  sinar  gamma.  J. Littri 22:71-80.
Moghaddam, S.S., H. Jaafar, R. Ibrahim, A. Rahmat, A.M. Aziz, E. Philip. 2011. Effects of acute irradiation on physiological  traits  and  flavonoid  accumulation  of Centella asiatica . J. Molecules 16:4994-5007.
Ojiewo,  C.O.,  K.  Murakami,  P.W.  Masinde,  S.G. Agong. 2007.  Mutation  Breeding  of  African  Nightshade ( Solanum Section Solanum ).  Global  Science  Book.
40-52.
Poehlman, J.M., D.A. Sleeper. 2006. Breeding Field Crops.
4 th ed. Iowa State University Press.
Rauf,  R.F.  2016.  Penggunaan  gas  karbon  dioksida  untuk menurunkan  kadar  tanin  buah  kesemek  ( Diospyros kaki L.)  kultivar  Reundeu.  Tesis.  Sekolah Pascasarjana. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Rajarajan,  D.,  R.  Saraswathi,  D.  Sassikumar.  2016.
Determination of lethal dose and effect of gamma ray on germination percentage and seedling parameters in ADT  (R)  47  rice.  Int.  J. Adv.  Biol.  Res.  6.328- 332.
Sari, L., A. Purwito, D. Sopandie, R. Purnamaningsih, E. Sudarmanowati.  2015.  Pengaruh  irradiasi  sinar gamma pada pertumbuhan kalus dan tunas tanaman gandum  ( Triticum  aestivum L.).  J.  Ilmu  Pertanian 18:44-50.
Sarma,  H.,  A.  Sarma.  2011. Solanum  ningrum L.,  a nutraceutical  enriched  herb  or  invasive  weed.  Int. Conf. on Env. and Bio (IPCBEE). 21:106-109
Siemonsma, J.S., P.C.M. Jansen. 1994. Solanum americanum Miller. Dalam Siemonsma, J.S., K. Piluek ( Ed .). Plant Resources of South-East Asia 8:252-255.
Soetiarso,  T.A.  2010.  Persepsi  dan  preferensi  konsumen terhadap atribut produk beberapa jenis sayuran minor. J. Hort. 20:299-312.
Sulastri, T. 2009. Analisis kadar tanin ekstrak air dan ekstrak etanol  pada  biji  pinang  sirih  ( Areca  catechu L.).  J. Chemica. 10:59-63.
Sutapa, G.N., I.G.A. Kasmawan. 2016. Efek induksi mutasi radiasi  gamma 60 Co  pada  pertumbuhan  fisiologis tanaman  tomat  ( Lycopersicon esculentum L.).  J. Keselamatan Radiasi dan Lingkungan 1:5-11.
Sutjahjo,  H.S.,  K.H.  Muttaqin,  L.P.  Ekowahyuni,  S.
Marwiyah. 2014. Induksi Keragaman Genetik Tomat Lokal  Melalui  Iradiasi  Sinar  Gamma.  Prosiding Seminar Hasil PPM IPB 2014.
Syahid,  S.F.,  N.N.  Kristina,  D.  Seswita.  2010.  Pengaruh komposisi  media  terhadap  pertumbuhan  kalus  dan tannin dari daun jati belanda ( Gauzuma ulmifolia L.) secara in vitro. J. Littri 16:1-5.
Togatorop,  E.K.,  S.I.  Aisyah,  M.R.M.  Damanik.  2016. Pengaruh mutasi fisik iradiasi sinar gamma terhadap keragaman genetik dan penampilan Coleus blumei . J. Hort.  Indonesia 7:187-194.
Ulukapi, K., B. Ozdemir, A.N. Onus. 2015 . Determination of proper gamma radiation dose in mutation breeding in eggplant ( Solanum melongena L.). Adv. Environ. Agric. Sci. 149-153.
Wulandari,  A.  2015.  Pemetaan  karakteristik  kimia,  fisik, sensori dan fungsional beberapa jenis pala ( Myristica spp.). Skripsi. Institut Pertanian Bogor. Bogor