## ALCHEMY : JOURNAL OF CHEMISTRY

## Artikel Penelitian
PENGARUH KARBOPOL DAN PROPILEN GLIKOL TERHADAP LAJU PENETRASI SEDIAAN EMULGEL XANTHONE RICH FRACTION DARI KULIT BUAH MANGGIS ( GARCINIA MANGOSTANA L.)
Sabrina Dahlizar 1 , Putri Alifia Agustina 1 , Narti Fitriana 2 , Abdi Wira Septama 3 , Sofa Fajriah 3 , Herdini 4
1 Program Studi Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan, UIN Syarif Hidayatullah, Jakarta, Indonesia, 15412
2 Program Studi Biologi, Fakultas Sains dan Teknologi, UIN Syarif Hidayatullah, Jakarta, Indonesia, 15412 3 Research Center for Pharmaceutical Ingredient and Traditional Medicine, Badan Riset dan Inovasi Nasional (BRIN), Serpong, Indonesia, 15314
4 Program Studi Farmasi, Fakultas Matematika dan ilmu Pengetahuan Alam, Institut Sains dan Teknologi Nasional, Jakarta,
Indonesia, 12630 INFO ARTIKEL ABSTRAK Riwayat Artikel Diterima 22 Februari 2023 Direvisi 04 April 2023 Tersedia online 01 November 2023 Xanthone Rich Fraction (XRF) derived from mangosteen rind ( G. mangostana L.) contains α -mangostin possessed antioxidant property. It may be used to prevent aging (anti-aging). This study aims to determine the effect of adding Carbopol as a gelling agent and propylene glycol as an enhancer on the physical characteristics and penetration rate of the emulgel. Four different formulas were prepared, F1 without a gelling agent (Carbopol) and enhancer (propylene glycol), F2 without a gelling agent (carbopol), F3 using a gelling agent (carbopol), and F4 using a gelling agent  (carbopol)  and  enhancer  (propylene  glycol).  The  physical  properties  of formulas  such  as  organoleptic  examination,  pH,  viscosity,  homogeneity, spreadability and cycling test were evaluated. Penetration testing was carried out using a Franz  Diffusion cell. The results showed that  F3 and F4 had the best physical stability and there was a difference in the penetration rate of α -mangostin from the four formulas. The amount of α -mangostin expanding the area for 6 hours, F1, F2, F3 and F4 were 228,22 µg/cm2; 251,06 µg/cm2; 852,24 µg/cm2; dan 1.087,15 µg/cm2 respectively. The addition of a combination of Carbopol (gelling agent) and propylene glycol (enhancer) showed the highest penetration rate.
Keywords: Emulgel; α -mangostin; penetration; franz diffusion cell; enhancer
Xanthone  Rich  Fraction (XRF)  yang  berasal  dari  kulit  buah  manggis  ( Garcinia mangostana L.)  mengandung  senyawa  α -mangostin  yang  memiliki  aktivitas antioksidan  yang  sangat  tinggi  sehingga  berpotensi  mencegah  penuaan  ( anti- aging ). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh penambahan karbopol sebagai gelling agent dan propilen glikol sebagai enhancer terhadap karakteristik fisik sediaan serta untuk mengetahui pengaruh penambahan karbopol sebagai gelling agent dan propilen glikol sebagai enhancer terhadap laju penetrasi sediaan emulgel. Formulasi sediaan emulgel dibuat empat formula berbeda yaitu F1 tanpa menggunakan gelling agent (karbopol) dan enhancer (propilen glikol), F2 tanpa menggunakan gelling agent (karbopol), F3 menggunakan gelling agent (karbopol) dan  F4  menggunakan gelling  agent (karbopol)  dan enhancer (propilen  glikol). Evaluasi stabilitas fisik sediaan meliputi pemeriksaan organoleptis, pH, viskositas, homogenitas,  daya  sebar  dan cycling  test .  Uji  penetrasi  dilakukan  dengan menggunakan alat Franz Diffusion Cell . Hasil penelitian menunjukkan F3 dan F4 memiliki  stabilitas  fisik  paling  baik  dan  terdapat  perbedaan  laju  penetrasi α - mangostin dari keempat formula. Jumlah α -mangostin perluas area selama 6 jam, F1,  F2,  F3  dan  F4  berturut-turut  yaitu  228,22  µg/cm 2 ;  251,06  µg/cm 2 ;  852,24
* Email: sabrina@uinjkt.ac.id

## 1. Pendahuluan
Manggis ( Garcinia mangostana L.) merupakan tanaman topikal khas Asia Tenggara yang terkenal dengan sebutan " Queen of Fruits " alias ratu buah yang mempunyai segudang manfaat. Tanaman ini memiliki buah dengan rasa manis, asam, dan berpadu sedikit sepat. Buah manggis mengandung banyak senyawa terutama di bagian kulit buahnya. Kulit buah  manggis  mengandung  lebih  dari  40  senyawa  kimia  yang  sangat  bermanfaat,  salah  satunya  di  bidang  farmasi. Kandungan kimia dalam ekstrak kulit buah manggis telah terbukti memiliki berbagai macam aktivitas farmakologi [1].
Penelitian  terdahulu  membuktikan  aktivitas  farmakologi  dari  senyawa  yang  dikandung  kulit  buah  manggis, diantaranya sebagai antioksidan, anti kanker, anti-inflamasi, anti alergi, antibakteri, antifungi, antivirus, antimalaria dan anti- aging [1]. Pada kulit buah manggis terdapat senyawa polifenol yang cukup banyak, beberapa diantaranya yaitu antosianin, xanthone , tanin dan senyawa fenolat lainnya [2]. Senyawa xanthone sebagai antioksidan dapat menetralisir radikal bebas yang masuk atau yang dihasilkan didalam tubuh, dapat mencegah penuaan organ tubuh, mencegah penyakit jantung, mencegah  kanker  dan  kebutaan,  serta  dapat  meningkatkan  sistem  kekebalan  tubuh. Xanthone juga  dapat  berperan sebagai anti-aging , karena dapat memblokir oksidasi vitamin dan asam lemak tak jenuh ganda (komponen dinding sel saraf)  oleh  radikal  bebas,  sehingga  menekan  kerusakan pada  jaringan  seluler  yang  menyebabkan kulit keriput  karena hilangnya  kolagen  dan  elastisitas  otot,  dan  menekan pigmentasi  dalam  bentuk  flek-flek. Xanthone merupakan  molekul besar  yang  terdir i  dari  berbagai  komponen  penyusun  salah  satunya  yaitu  α -mangostin  [3,4].  Aktivitas anti-aging yang dihasilkan dari ekstrak kulit buah manggis berasal dari α -mangostin.
Dalam penelitian ini, Xanthone Rich Fraction (XRF) yang berasal dari ekstrak kulit buah manggis dan kaya dengan α -mangostin  diformulasikan dalam  bentuk sediaan  emulgel . α -mangostin  memiliki kelarutan yang  rendah di  dalam  air, sehingga  XRF  lebih  cocok  diformulasikan  dalam  bentuk  sediaan  emulgel  [5].  Sediaan  emulgel  memberikan  beberapa keuntungan diantaranya adanya sensasi sejuk dan tidak meninggalkan kesan berminyak saat digunakan, sehingga dapat meningkatkan acceptability pengguna  [6].  Pada  penelitian  ini  digunakan  karbopol  sebagai gelling  agent, karbopol merupakan  senyawa  polimer  sintetik  yang  bersifat  stabil  dan  gel  yang  dihasilkan  akan  memberikan  bentuk  serta penampakan yang baik jernih dan tidak keruh, mempunyai viskositas tinggi pada konsentrasi rendah yaitu sekitar 40.000- 60.000 cP. Pada suhu ruang, karbopol dapat stabil untuk jangka waktu yang lama, dan tetap stabil atau hanya mengalami sedikit perubahan ketika XRF ditambahkan ke dalam formulasi [7].
Evaluasi sediaan emulgel berupa viskositas, daya sebar, pH, homogenitas, dan organoleptis penting dilakukan untuk mengetahui kualitas sediaan yang dihasilkan [8]. Semakin tinggi viskositas emulgel, semakin lambat penetrasi zat aktif. Pengukuran pH dilakukan untuk menghindari terjadinya iritasi kulit yang disebabkan oleh pH formulasi yang tidak sama dengan  pH kulit. Dua tahap kerja  obat topikal  agar  dapat  memberikan  efek  adalah  obat  harus  dapat  keluar  dari  basis menuju ke permukaan kulit dan kemudian berpenetrasi melalui membran lapisan stratum korneum kulit untuk mencapai tempat  aksinya.  Sehingga  diperlukan  uji  penetrasi in  vitro menggunakan  alat Franz  Diffusion  Cell untuk  mengetahui pelepasan  zat  aktif  dari  basisnya  dan  juga  membantu  memberikan  informasi  tentang  hubungan  antara  kulit,  obat  dan formulasi [9].
Penambahan penetration  enhancer bertujuan untuk meningkatkan masuknya  zat  aktif  ke  dalam stratum  corneum sehingga dapat mencapai lapisan dermis dan menimbulkan efek anti-aging dengan menangkap radikal bebas [10]. Salah satu  contoh enhancer yang  banyak  digunakan dalam  sediaan  topikal  yaitu  propilen  glikol [11].  Propilen  glikol  memiliki mekanisme kerja dengan meningkatkan kelarutan bahan aktif di dalam kulit dan akan berinteraksi dengan lapisan stratum corneum sehingga dapat meningkatkan difusi bahan aktif menembus membran sel dan memberikan efek hidrasi pada kulit yaitu  dengan  melunakkan  lapisan  keratin  pada stratum  corneum [12].  Pemilihan  propilen  glikol  sebagai enhancer dikarenakan pengunaannya yang lebih aman, nyaman dan tidak toksik serta viskositasnya yang lebih rendah [7]. Propilen glikol sebagai enhancer pada sediaan topikal banyak digunakan pada konsentrasi 5-10% [7], sedangkan pada penelitian ini konsentrasi propilen glikol yang digunakan yaitu sebesar 5%.
Berdasarkan  latar  belakang  tersebut  maka  dilakukan  penelitian  evaluasi  dan  uji  penetrasi  sediaan  emulgel  XRF dengan atau tanpa karbopol sebagai gelling agent dan propilen glikol sebagai enhancer serta kombinasi keduanya. XRF adalah fraksi aktif yang kaya xanthon termasuk α -mangostin, tingginya kadar α -mangostin ini sangat membantu dalam uji penetrasi karena akan mempermudah pendeteksian. XRF dibuat melalui fraksinasi ekstrak kulit buah manggis dengan
µg/cm 2 ; dan 1.087,15 µg/cm 2 . Penambahan kombinasi karbopol ( gelling agent ) dan propilen glikol ( enhancer ) (F4) menunjukkan laju penetrasi paling tinggi.
Kata kunci: Emulgel ; α -mangostin; penetrasi; franz diffusion cell ; enhancer
pelarut  organik.  Uji  penetrasi  dilakukan  dengan  menggunakan  alat franz  diffusion  cell yang  bertujuan  untuk membandingkan laju penetrasi dari keempat formulasi sediaan.

## 2. Bahan dan Metode

## 2.1. Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini meliputi xanthone rich fraction (BRIN), karbopol (Making Cosmetics, Snoqualmie  United  States),  propilen  glikol,  parafin  cair  (Asian  Oil  Company,  India),  Carbopol),  propilen  glikol  (Dow Chemical Pasific, Singapore), tween 80 (Avantor, United States), span 80 (Nantong Fengyuan Chemical, China), metil paraben  (Sumber  Berlian  Kimia,  Indonesia),  propil  paraben  (Alpha  Chemika,  India),  aquades  (Lux  Chemicals,  Afrika), metanol pro analisis (Emsure, Vietnam), etil asetat pro analisis (Emsure, Vietnam), heksan pro analisis (Emsure, Vietnam), dapar fosfat pH 7,4 (Certipur, United States) dan Whattman membrane dialysis (Cytiva, China).

## 2.2. Optimasi Basis Emulgel
Konsentrasi karbopol yang digunakan sebesar 0,5% (P1), 0,8% (P2) dan 1% (P3).
Tabel 1 Formulasi Optimasi Basis Emulgel Bahan Fungsi Formula (%) P1 P2 P3 Parafin cair Pembawa/ Emollient 5 5 5 Karbopol Gelling agent 0,5 0,8 1 Propilen glikol Enhancer 5 5 5 Span 80 Pengemulsi 0,71 0,71 0,71 Tween 80 Pengemulsi 1,79 1,79 1,79 TEA Alkalizing agent 1 1 1 Metil Paraben Pengawet 0,18 0,18 0,18 Propil Paraben Pengawet 0,02 0,02 0,02 Aquadest Pelarut Ad 100 Ad 100 Ad 100
Pembuatan basis emulgel diawali dengan mengembangkan karbopol dengan cara mendispersikan karbopol di dalam aquadest, kemudian diaduk hingga terbentuk massa gel, dan ditambahkan TEA. Emulsi dibuat dengan mencampurkan fase air dan fase minyak yang sudah dipanaskan di atas waterbath sampai suhu 70 ℃ . Fase air terdiri dari metil paraben, propil paraben, propilen glikol dan tween 80 sedangkan fase minyak terdiri dari parafin cair dan span 80. Setelah mencapai suhu  70 ℃ ,  kedua  fase  dicampur  dengan  menggunakan stirrer selama  15-30  menit  sampai  terbentuk  massa  emulsi. Kemudian  emulsi  ditambahkan  ke  dalam  gel  lalu  ditambahkan  sisa  air  dan  diaduk  hingga  terbentuk  basis  emulgel, kemudian dilakukan evaluasi sediaan. Evaluasi yang dilakukan yaitu, uji organoleptis, pH, viskositas dan homogenitas.

## 2.3. Formulasi Sediaan Emulgel Xanthone Rich Fraction
Pada penelitian ini dibuat empat formula berbeda, F1 tanpa menggunakan gelling agent (karbopol) dan enhancer (propilen glikol), pada F2 tanpa menggunakan gelling agent (karbopol), pada F3 menggunakan gelling agent (karbopol), dan pada F4 menggunakan gelling agent (karbopol) dan enhancer (propilen glikol). Perbedaan formulasi keempat formula bertujuan untuk melihat pengaruh ada atau tidaknya karbopol sebagai gelling agent dan propilen glikol sebagai enhancer serta kombinasi keduanya terhadap laju penetrasi sediaan emulgel XRF.
Tabel 2 Formulasi Sediaan Emulgel Xanthone Rich Fraction Bahan Fungsi Formula (%) F1 F2 F3 F4 Xanthone rich fraction Zat aktif 2 2 2 2 Parafin cair Pembawa/ Emollient 5 5 5 5 Karbopol Gelling agent - - 1 1 Propilen glikol Enhancer - 5 - 5 Span 80 Pengemulsi 0,71 0,71 0,71 0,71 Tween 80 Pengemulsi 1,79 1,79 1,79 1,79 TEA Alkalizing agent - - 1 1 Metil Paraben Pengawet 0,18 0,18 0,18 0,18 Propil Paraben Pengawet 0,02 0,02 0,02 0,02 Aquadest Pelarut Ad 100 Ad 100 Ad 100 Ad 100
Pembuatan sediaan emulgel dilakukan dengan cara mencampurkan emulsi ke dalam basis gel. Emulsi dibuat dengan mencampurkan fase minyak dan fase air. Fase minyak yang digunakan yaitu, parafin cair dan span 80. Fase air yang digunakan yaitu, metil paraben, propil paraben, propilen glikol, tween 80, dan XRF. XRF sebagai antioksidan dimasukkan ke dalam fase air, karena dalam fase air XRF dapat terdispersi dengan baik dengan bahan lainnya. Kedua fase dipanaskan hingga  mencapai  suhu  70 ℃ kemudian  dicampur  hingga  terbentuk  massa  emulsi.  Emulsi  yang  sudah  terbentuk dicampurkan dengan basis gel dengan menggunakan homogenizer .

## 2.4. Evaluasi Sediaan Emulgel Xanthone Rich Fraction

## 2.4.1. Pengamatan Organoleptis
Pengamatan organoleptis dilakukan dengan mengamati warna dan tekstur dari sediaan emulgel secara visual [13].

## 2.4.2. Pengukuran pH
Pengukuran pH dilakukan menggunakan pH meter yang sudah dikalibrasi. Elektroda yang sudah dikalibrasi kemudian dicelupkan ke dalam sediaan emulgel. Pengukuran dilakukan pada masing-masing formula dalam suhu ruang (25 ℃ ±2 ℃ ) [14]. pH sediaan yang baik yaitu rentang 5,5-6,5 sesuai dengan pH kulit [15].

## 2.4.3. Pengukuran Viskositas
Pengukuran viskositas dilakukan dengan menggunakan viskometer Rotavisc me-vi pada suhu 25 ℃ . Masing-masing formula  emulgel  diukur  viskositasnya  dengan  menggunakan  spindle  11  dengan  kecepatan  5 – 120  rpm  [14].  Rentang viskositas sediaan yang diinginkan dalam sediaan ini yaitu 6000-50.000 cps mengikuti rentang nilai viskositas sediaan semisolid menurut SNI 16-4399-1996.

## 2.4.4. Pengamatan Homogenitas
Pengamatan homogenitas dilakukan dengan mengoleskan emulgel di atas kaca objek, lalu ditimpa dengan kaca objek lainnya. Homogenitas ditandai dengan tidak adanya butiran kasar pada kaca objek [16]. Dilakukan untuk melihat sediaan telah tercampur homogen atau tidak.

## 2.5.1. Uji Daya Sebar
Uji  daya  sebar  dilakukan  dengan  meletakkan  sediaan  sebanyak  1  gram  sampel  diletakkan  di  tengah  kaca  bulat berskala, kemudian ditimpa dengan kaca bulat lain atau bahan transparan dengan variasi beban 19 gram, 39 gram, 59 gram,  79  gram  dan  99  gram.  Lalu  didiamkan  selama  satu  menit  pada  setiap  penambahan  beban,  setelah  itu  dicatat diameter persebarannya. Daya sebar yang baik antara 3-5 cm [17]

## 2.5.2. Uji Stabilitas (Cycling Test)
Cycling test dilakukan dengan cara menyimpan sediaan di dalam kulkas dengan suhu 4 ℃ selama 24 jam setelah itu dikeluarkan dan dimasukkan ke dalam oven dengan suhu 40 ℃ selama 24 jam. Kemudian dilakukan sebanyak 6 siklus [18].
2.5. Penetapan Kadar α -mangostin pada Sediaan Emulgel Xanthone Rich Fraction
Penetapan  kadar α -mangostin  dalam  sediaan  dilakukan  dengan  menggunakan  KLT-Densitometer,  terdiri  dari Cammag Linomat  V  sample  Applicator (tempat  untuk  menotolkan  larutan  uji  pada  fase  diam  secara  otomatis),  plat alumunium silica gel 60 F 254 , Cammag UV lamps 254 nm, Cammag twin trough glass chamber 20 × 20 cm (tempat eluasi sampel yang telah ditotolkan pada fase diam dengan fase gerak) yang dijenuhkan dengan fase gerak. Fase gerak (20 mL) yang digunakan yaitu heksan dan etil asetat dengan perbandingan 3:2. Penjenuhan fase gerak dilakukan selama 30 menit pada suhu ruang (25 ± 2 ℃ ). Pemindaian densitometer dilakukan pada Cammag TLC Scanner IV yang dioperasikan oleh CATS software.

## 2.5.3. Pembuatan Larutan Standar α -mangostin
Larutan baku standar α - mangostin dibuat dengan menimbang ± 25 mg standar α -mangostin, lalu dimasukkan ke dalam labu ukur 25 mL dan ditambahkan pelarut methanol sampai tanda batas. Lalu dibuat larutan sari standar α -mangostin dengan konsentrasi 25 ppm; 50 p pm; 125 ppm; 250 ppm; dan 500 ppm. Larutan baku maupun larutan seri standar α - mangostin di vortex selama 1 menit.

## 2.5.4. Pembuatan Larutan Sampel
Sampel F1, F2, F3, dan F4 sediaan emulgel XRF ditimbang sebanyak 1 gram, lalu ditambahkan metanol sebanyak 10 ml. Kemudian di sentrifuse sampai sediaan larut dalam metanol. Dianalisis dengan menggunakan KLT-Densitometer.

## 2.5.5. Optimasi Eluen (Fase Gerak)
Eluen atau fase gerak yang digunakan yaitu heksan dan etil asetat. Pada optimasi fase gerak ini dilakukan dengan membuat variasi perbandingan konsentrasi dari masing-masing fase geraknya, hal ini dilakukan untuk melihat pemisahan senyawa  pada  konsentrasi  berapa  yang  paling  baik  oleh  fase  geraknya.  Variasi  perbandingan  konsentrasi  fase  gerak heksan : etil asetat yang digunakan yaitu, 4:1, 3:2 dan 2:3.

## 2.5.6. Penetapan Kadar α -mangostin dalam Sediaan Xanthone Rich Fraction
Fase diam yang digunakan pada penelitian ini silika gel 60 F 254 10 cm × 8 cm. Sebelum digunakan, silika gel diaktivasi dengan dipanaskan di dalam oven selama 15 menit. Hasil optimasi fase gerak yang sudah dipilih, dibuat dan dimasukkan ke dalam chamber lalu dijenuhkan selama 30 menit. Kemudian, masing-masing larutan standar α -mangostin dan sampel diambil  sebanyak  20 µl menggunakan syringe untuk  ditotolkan secara  otomatis  pada  silika  gel.  Silika  gel  yang sudah ditotolkan kemudian dimasukkan ke dalam chamber yang berisi eluen yang sudah dijenuhkan, kemudian ditunggu selama 20 menit (fase gerak mencapai batas pengembangan). Kemudian plat KLT diambil dan dilihat dibawah lampu UV, lalu dipindai dengan dimasukkan ke Cammag TLC Scanner IV untuk menganalisis kadar α -mangostin dan diukur serapannya dengan panjang gelombang 254 nm.

## 2.6. Uji Penetrasi Sediaan Emulgel Xanthone Rich Fraction
Uji penetrasi sediaan dilakukan dengan menggunakan alat franz diffusion cell . Membran difusi yang digunakan adalah membran  Whattman  dengan  luas  3,14  cm 2 .  Dilakukan  pengujian  terhadap  empat  formulasi  sediaan  emulgel  XRF. Pengukuran  kadar α -mangostin  yang  berpenetrasi  menggunakan  KLT-Densitometri.  Kemudian  dari  hasil  pengukuran, dilakukan perhitungan jumlah α -mangostin yang terpenetrasi dan kecepatan penetrasinya.
Waterbath  dihidupkan  dan  diatur  suhu  yang  diinginkan  yaitu  30  -  60 ℃ .  Kemudian  untuk  mengalirkan  air  dari waterbath ke alat sel difusi, selang silicon dan interconnection dipasang ke alat franz diffusion cell sebagai penstabil suhu. Luas membran yang digunakan yaitu 3,14 cm 2 . Sekitar 1 gram sediaan emulgel XRF diratakan pada permukaan membran Whattman. Membran diletakkan diantara kompartemen donor dan reseptor. Kompartemen reseptor berisi dapar fosfat pH 7,4 dan metanol sebanyak ±21 mL pada suhu 37±1 ℃ , kemudian diaduk dengan magnetic stirrer dengan kecepatan 300 rpm. Proses ini dilakukan selama 360 menit. Kemudian, ambil cuplikan dari kompartemen reseptor pada menit ke-0, dan 360 sebanyak 3 mL dengan menggunakan spuit, volume cuplikan yang terambil segera diganti dengan dapar fosfat pH 7,4 dan metanol dengan volume yang sama. Cuplikan yang diperoleh kemudian diukur serapannya menggunakan HPTLC (High Performance Thin Layer Chromatography) atau KLT-Densitometri [19].

## 3. Hasil dan Pembahasan
3.1 Evaluasi Fisik Optimasi Basis Emulgel
Tabel 3 Hasil Evaluasi Fisik Optimasi Basis Emulgel Evaluasi Formula P1 P2 P3 Organoleptis Massa emulgel encer, putih agak bening, bau khas bahan Massa emulgel agak encer, putih agak bening, bau khas bahan Massa emulgel kental, putih susu, bau khas bahan pH 5,54 ± 0,11 5,42 ± 0,08 5,39 ± 0,27 Viskositas 4405 ± 195,79 7012 ± 48,78 7470 ± 487,67 Homogenitas Homogen Homogen Homogen Keterangan:
P1 : Karbopol 0,5% P2 : Karbopol 0,8% P3 : Karbopol 1%
Hasil pengamatan organoleptis (Tabel 3) pada optimasi basis menunjukkan bahwa pada P1 menghasilkan sediaan emulgel yang encer, pada P2 menghasilkan bentuk emulgel yang agak encer, sedangkan pada P3 menghasilkan bentuk emulgel  yang  kental.  Perbedaan  dari  ketiga  formula  tersebut  dapat  disebabkan  oleh  konsentrasi gelling  agent yaitu karbopol yang digunakan. Semakin tinggi konsentrasi karbopol yang digunakan maka semakin kental konsistensi sediaan emulgel.
Hasil pemeriksaan pH pada P1, P2 dan P3 berturut-turut yaitu 5,54 ± 0,11; 5,42 ± 0,08; dan 5,39 ± 0,27. Menunjukkan urutan pH dari yang terendah yaitu P3<P2<P1 (Tabel 3), hal tersebut menunjukkan bahwa semakin tinggi konsentrasi karbopol yang digunakan maka pH sediaan akan semakin asam karena karbopol memiliki pH yang cenderung bersifat
asam oleh karena itu perlu ditambahkannya zat pembasa seperti Triethanolamine (TEA) untuk meningkatkan pH sehingga pH sediaan dapat sesuai dengan pH kulit [7].
(a) (b) (c)
Gambar 1 Sifat Alir Optimasi Basis Emulgel, P1 (a), P2 (b), P3 (c)
Hasil pemeriksaan viskositas pada P1, P2 dan P3 berturut-turut yaitu, 4405 ± 195,79; 7012 ± 48,78; dan 7470 ± 487,67. Dimana, P3>P2>P1, menunjukkan bahwa peningkatan konsentrasi karbopol dapat meningkatkan kekentalan atau nilai viskositas. Hasil pemeriksaan viskositas sediaan basis emulgel karbopol menurun seiring dengan meningkatnya rpm atau kecepatan, hal tersebut menunjukkan bahwa sediaan ini memiliki sifat alir pseudoplastis (Gambar 1), dimana tegangan geser aliran pseudoplastis akan meningkat seiring dengan meningkatnya laju geser.
Hasil  pengamatan  homogenitas  menunjukkan  P1,  P2  dan  P3  menghasilkan  sediaan  yang  homogen  dan  tidak terdapat partikel kasar. Persyaratan homogenitas yang baik yaitu sediaan yang tidak terdapat gumpalan maupun butiran kasar [14].

## 3.1.1. Hasil Evaluasi Pemilihan Basis Terbaik
P1 memiliki hasil evaluasi yang kurang baik pada viskositas, karena memiliki nilai yang kurang dari 6000 cps sehingga tidak memasuki nilai rentang viskositas emulgel yang baik menurut SNI (1996). P2 dan P3 keduanya memiliki hasil yang baik pada setiap uji evaluasi, namun P2 memiliki bentuk yang agak encer sehingga berdasarkan pertimbangan pada semua formula, maka  dapat  disimpulkan bahwa  P3  dengan  konsentrasi karbopol  1%  menghasilkan sediaan  dengan  evaluasi paling baik dan formula ini yang akan digunakan untuk pembuatan sediaan emulgel XRF.
3.2 Evaluasi Fisik Sediaan Emulgel Xanthone Rich Fraction Hasil  pengamatan  organoleptis  keempat  formula,  F1  dan  F2  memiliki  bentuk  emulsi  yang  cair  karena  tidak ditambahkan gelling agent pada kedua formula. Sedangkan pada F3 dan F4 memiliki bentuk emulgel pada umumnya. F1 dan  F2  memiliki  warna  berupa  putih  kekuningan, sedangkan F3  dan F4 memiliki  warna  kuning  kecoklatan.  Kemudian, keempat formula memiliki bau yang sama yaitu bau khas dari XRF (Tabel 4).
Hasil pemeriksaan pH pada F1, F2, F3 dan F4 berturut-turut yaitu 4,87; 4,7; 5,49; dan 5,21. pH F3 dan F4 lebih besar dibandingkan dengan F1 dan F2 karena pada F3 dan F4 terdapat gelling agent yaitu karbopol yang juga ditambahkan
dengan TEA sehingga meningkatkan pH sediaan. Kemudian, F2 dan F4 yang menggunakan propilen glikol memiliki pH yang lebih rendah dibandingkan F1 dan F3 yang tidak menggunakan propilen glikol, hal tersebut dikarenakan propilen glikol yang mempunyai pH yang bersifat asam yaitu 3-6 sehingga dapat menurunkan pH sediaan [20]. Namun pH keempat sediaan masih memasuki rentang pH kulit yaitu 4,5 – 6,5.
(a) (b)
Gambar 2 Sifat Alir Sediaan Emulgel XRF, F3 (a), F4 (b)
Hasil  pemeriksaan  viskositas  pada  F1,  F2,  F3  dan  F4  berturut-turut  yaitu  883,33;  860;  16033,33;  dan  15902. Viskositas F1 dan F2 tidak memasuki rentang viskositas sediaan emulgel sedangkan viskositas F3 dan F4 memiliki nilai viskositas  yang  memenuhi  rentang  viskositas  sediaan  emulgel.  F4  memiliki  viskositas  yang  lebih  rendah  dari  F3,  hal tersebut dapat disebabkan oleh adanya penambahan propilen glikol pada F4. Penambahan eksipien lain seperti propilen glikol yang memiliki konsistensi cair dapat menyebabkan menurunnya viskositas sediaan emulgel [21]. Hasil pemeriksaan viskositas  sediaan  basis  emulgel  karbopol  menurun  seiring  dengan  meningkatnya  rpm  atau  kecepatan,  hal  tersebut menunjukkan bahwa sediaan ini memiliki sifat alir pseudoplastis.
Hasil  pengamatan  homogenitas  pada  F1  dan  F2  terjadi  pemisahan  emulsi,  ketidakhomogenan  tersebut  ditandai dengan zat aktif yang tidak terdispersi sempurna di dalam sediaan, hal ini dikarenakan tidak digunakannya karbopol yang berperan sebagai  gelling  agent.  Sedangkan pada  F3  dan F4 menunjukkan sediaan  yang  homogen  dan  tidak  terdapat partikel kasar.
Hasil pengujian daya sebar F4 memiliki daya sebar yang lebih tinggi dibandingkan dengan F3 dikarenakan, pada F4 ditambahkan bahan eksipien lain yaitu propilen glikol (enhancer) yang membuat viskositas sediaan menurun. Semakin kecil  viskositas  akan  meningkatkan  kelarutan,  dan  viskositas  dapat  mempengaruhi  kemampuan  penyebaran  emulgel, semakin tinggi viskositas sediaan topikal maka akan semakin tinggi pula waktu kontaknya pada kulit, namun kemampuan daya sebar sediaannya menurun [22].
Tabel 4 Hasil Evaluasi Sediaan Emulgel Xanthone Rich Fraction Evaluasi F1 F2 F3 F4 Organoleptis Sebelum cycling test Emulsi cair, putih kekuningan, bau khas xanthone Emulsi cair, putih kekuningan, bau khas xanthone Emulgel kental, kuning kecoklatan, bau khas xanthone Emulgel kental, kuning kecoklatan, bau khas xanthone
Setelah cycling tes t
Emulsi cair, putih kekuningan, bau khas xanthone Emulsi cair, putih kekuningan, bau khas xanthone Emulgel kental, kuning kecoklatan, bau khas xanthone Emulgel kental, kuning kecoklatan, bau khas xanthone Homogenitas Sebelum cycling test Tidak homogen, terjadi pemisahan emulsi Tidak homogen, terjadi pemisahan emulsi Homogen, tidak terdapat partikel kasar Homogen, tidak terdapat partikel kasar Setelah cycling tes t Tidak homogen, terjadi pemisahan emulsi Tidak homogen, terjadi pemisahan emulsi Homogen, tidak terdapat partikel kasar Homogen, tidak terdapat partikel kasar pH Sebelum cycling test 4,85 ± 0,02 4,75 ± 0,09 5,49 ± 0,03 5,21 ± 0,04 Setelah cycling tes t 4,72 ± 0,03 4,63 ± 0,03 5,39 ± 0,05 5,15 ± 0,03
Evaluasi F1 F2 F3 F4 Viskoitas Sebelum cycling test 883 ± 21,79 860 ± 29,31 16033,33 ± 268,56 15902 ± 576,38 Setelah cycling tes t 850 ± 25,24 795 ± 26,06 16027,67 ± 485,37 15233 ± 798,59 Rheologi Sebelum cycling test - - Pseudoplastis Pseudoplastis Setelah cycling tes t - - Pseudoplastis Pseudoplastis Daya sebar Sebelum cycling test - - 4,17 ± 0,06 4,4 ± 0,1 Setelah cycling tes t - - 4,4 ± 0,1 4,57 ± 0,2 Keterangan: F1: tanpa gelling agent (karbopol) dan enhancer (propilen glikol)
F2: tanpa gelling agent (karbopol) F3: menggunakan gelling agent (karbopol)
F4: menggunakan gelling agent (karbopol) dan enhancer (propilen glikol)
Hasil uji stabilitas ( cycling test ) menujukkan bahwa pada pengamatan organoleptis dan homogenitas tidak terjadi perubahan  baik  sebelum  maupun  setelah cycling  test ,  sedangkan  pada  pemeriksaan  pH,  viskositas  dan  daya  sebar mengalami  sedikit  penurunan  nilai  (Tabel  4).  Penurunan  tersebut  dapat  dipengaruhi  oleh  perubahan  suhu  pada  saat penyimpanan sediaan, selain itu penurunan pH dapat disebabkan oleh karbopol yang bersifat asam dan penambahan TEA yang kurang mampu menutupi sifat asam tersebut. Namun, walaupun menurun nilai pH masih di dalam rentang pH kulit. Dari semua hasil pemeriksaan dapat disimpulkan bahwa sediaan emulgel XRF F3 dan F4 memiliki stabilitas yang baik secara fisik.

## 3.3 Penetapan Kadar α -mangostin dalam Sediaan Emulgel Xanthone Rich Fraction
Penetapan kadar dilakukan dengan metode KLT-densitometer karena mudah dilakukan, cepat, sederhana, memiliki spesifikasi yang tinggi, cukup sensitif dan teliti, serta biaya yang dikeluarkan relatif murah [23]. Pada penelitian sebelumnya fase  gerak  yang  digunakan  untuk  α -mangostin  yaitu  campuran  dari  heksana  dan  etil  asetat,  untuk  menentukan konsentrasinya  dibuat  perbandingan  konsentrasi  yaitu,  4:1,  3:2,  dan  2:3.  Hasil  optimasi  eluen  menunjukkan  bahwa kombinasi heksan dan etil asetat dengan perbandingan 3:2 memberikan hasil pemisahan yang paling optimal dibandingkan konsentrasi 4:1 dan 2:3.
Tabel 5 Hasil Kadar α -mangostin dalam Sediaan Emulgel Xanthone Rich Fraction
Formula Kadar α -mangostin (%) F1 0,4014 ± 0,07 F2 0,4114 ± 0,02 F3 0,4129 ± 0,06 F4 0,4423 ± 0,08 Keterangan:
F1: tanpa gelling agent (karbopol) dan enhancer (propilen glikol)
F2: tanpa gelling agent (karbopol) F3: menggunakan gelling agent (karbopol)
F4: menggunakan gelling agent (karbopol) dan enhancer (propilen glikol)
Berdasarkan hasil penetapan kadar α -mangostin (Tabel 5) yang didapat pada F1, F2, F3 dan F4 berturut-turut yaitu 0,4014%; 0,4114%; 0,4129%; dan 0,4423%. Perbedaan hasil kadar α -mangostin pada keempat formula dapat disebabkan oleh  penggunaan  eksipien  yang  berbeda.Salah  satu  faktor  yang  mempengaruhi  penetrasi  obat  melalui  kulit  adalah viskositas sediaan. Adanya karbopol pada F3 dan F4 dapat meningkatkan viskositas sediaan karena dapat membentuk lapisan gel, namun dapat memberikan pelepasan obat dengan cara terkontrol yaitu efektif meningkatkan durasi pelepasan obat untuk memperpanjang efek terapeutik. Selain itu, adanya propilen glikol pada F4 juga menyebabkan nilai viskositasnya lebih rendah daripada F3 sehingga F4 akan mudah untuk rilis daripada F3. Propilen glikol bekerja dengan meningkatkan kelarutan bahan obat sehingga dapat meningkatkan difusi obat menembus membran sel dan memberikan efek hidrasi pada  kulit  dengan  melunakkan  lapisan  keratinin  pada  stratum  corneum  yang  dapat  meningkatkan  jumlah  obat  yang terpenetrasi melalui kulit [28].

## 3.4 Uji Penetrasi Sediaan Emulgel Xanthone Rich Fraction
Pada pengujian penetrasi in vitro harus diperhatikan kelarutan dari zat aktif, α -mangostin harus dapat terlarut dalam cairan kompartemen reseptor yang akan digunakan. Zat aktif yang bersifat hidrofobik akan sukar larut dalam kompartemen
reseptor  hidrofilik. α -mangostin  memiliki  kelarutan  yang  rendah  dalam  air  sehingga  perlu  dilakukan  penambahan pensolubilisasi pada medium reseptor untuk membantu meningkatkan kelarutan [24]. Sehingga pada penelitian ini media kompartemen yang digunakan yaitu campuran larutan dapar fosfat pH 7,4 dan methanol dengan perbandingan 4:1. Larutan dapar fosfat pH 7,4 dipilih sebagai simulasi dari cairan biologis tubuh manusia kemudian dicampur dengan metanol pada medium reseptor sebagai pensolubilisasi.
Berdasarkan hasil uji penetrasi menunjukkan bahwa pada menit ke-360 jumlah α -mangostin F1, F2, F3, dan F4 yang terpenetrasi  secara  berturut-turut  yaitu  228,22  ±  4,682  µg/cm 2 ;  251,06  ±  6,242  µg/cm 2 ;  852,24  ±  9,269  µg/cm 2 ;  dan 1087,15 ± 7,519 µg/cm 2 (Tabel 6). Hasil perhitungan persentase α -mangostin F1, F2, F3, dan F4 berturut-turut yaitu 18,06 ± 2,619%; 19,17 ± 0,508%; 65,35 ± 8,124%; dan 78,58 ± 15,132%. Jika diurutkan  jumlah α -mangostin maupun persentase α -mangostin yang berpenetrasi dari yang terbesar hingga paling kecil adalah F4>F3>F2>F1.
Hasil tersebut menunjukkan bahwa jumlah α - mangostin dan persentase α -mangostin paling tinggi yang berpenetrasi adalah F4, yang disebabkan oleh adanya penambahan gelling agent dan enhancer yaitu karbopol dan propilen glikol. F1 dan F2 tidak ditambahkan karbopol sebagai gelling agent sehingga memiliki bentuk sediaan emulsi cair yang encer dan memiliki viskositas yang rendah.
Jumlah  dan  persentase  α -mangostin  F4  lebih  besar  daripada F3  dikarenakan oleh  adanya  penambahan propilen glikol  sebagai enhancer pada  F4.  Propilen  glikol  bekerja  dengan  meningkatkan  kelarutan  zat  aktif,  sehingga  dapat meningkatkan difusi obat melalui membran dan dapat melembabkan kulit dengan melunakkan lapisan keratin pada stratum korneum sehingga meningkatkan jumlah zat aktif yang terpenetrasi melalui kulit [12]. Selain itu, penambahan propilen glikol juga dapat menyebabkan rendahnya viskositas pada F4 sehingga dapat meningkatkan penetrasi zat aktif melalui kulit. Viskositas sediaan dapat berkaitan dengan laju penetrasi dimana nilai viskositas berbanding terbalik dengan laju penetrasi. Semakin tinggi viskositas sediaan maka semakin sulit zat aktif terlepas dari pembawanya [25] . Oleh karena itu, jumlah α - mangostin dan persentase α -mangostin F3 lebih rendah daripada F4.
Tabel 6 Hasil Uji Penetrasi dan Fluks Sediaan Emulgel Xanthone Rich Fraction
Formula Jumlah α -mangostin (µg/cm 2 )
% Jumlah α -mangostin Fluks α -mangostin (µg/cm 2 .jam) Menit ke-360 Menit ke-360 Menit ke-360 F1 228,22 ± 4,682 18,06 ± 2,619 38,03 ± 0,78 F2 251,06 ± 6,242 19,17 ± 0,508 41,84 ± 1,04 F3 852,24 ± 9,269 65,35 ± 8,124 142,04 ± 1,54 F4 1087,15 ± 7,519 78,58 ± 15,132 181,19 ± 1,25 Keterangan: F1: tanpa gelling agent (karbopol) dan enhancer (propilen glikol)
F2: tanpa gelling agent (karbopol) F3: menggunakan gelling agent (karbopol) F4: menggunakan gelling agent (karbopol) dan enhancer (propilen glikol)
Fluks  merupakan  nilai  yang  digunakan  untuk  mengetahui  kecepatan  laju  penetrasi  zat  aktif  (Tabel  6).  Nilai  fluks diambil pada saat keadaan sedang steady state yang mengikuti hukum Fick I [26]. Menurut penelitian sebelumnya, keadaan steady state dicapai setelah menit ke-300. Faktor yang dapat mempengaruhi yaitu viskositas sediaan. Viskositas yang meningkat dapat menurunkan penetrasi zat aktif ke dalam kulit karena kemampuan difusi sediaan yang menurun  [27]. Viskositas F1 dan F2 yang rendah menyebabkan cepat rilisnya zat aktif pada menit awal sehingga pada saat keadaan steady state laju rilis zat aktifnya sudah menurun. Berbanding terbalik dengan F3 dan F4 yang memiliki viskositas lebih besar menyebabkan laju rilis zat aktifnya baru meningkat pada saat kondisi steady state . Kemudian, penambahan propilen glikol  sebagai enhancer memberi  pengaruh  dengan  meningkatnya  penetrasi  F4  dibandingkan  dengan  F3  yang  tidak ditambahkan propilen glikol.

## 4. Kesimpulan
Penambahan  Karbopol  dan  propilen  glikol  memberikan  pengaruh  pada  karakteristik  fisik  sediaan  emulgel.  Hasil evaluasi menunjukkan bahwa F3 dan F4 yang menggunakan karbopol lebih stabil dibandingkan F1 dan F2 yang tidak menggunakan  karbopol.  Penambahan  propilen  glikol  juga  dapat  mempengaruhi  viskositas  sediaan  yaitu  dengan menurunkan kekentalan pada F4. Karbopol dan propilen glikol mampu meningkatkan laju penetrasi sediaan emulgel XRF. Jumlah α -mangostin yang berpenetrasi dan fluks α -mangostin dalam sediaan emulgel XRF pada F4 menunjukkan angka tertinggi.

## Ucapan Terima Kasih
Terimakasih kepada UIN Syarif Hidayatullah Jakarta dan Badan Riset dan Inovasi Nasional (BRIN) Serpong Indonesia yang telah membantu memfasilitasi dan mendanai penelitian ini.

## Daftar Pustaka
[1]   Chaverri, J. P., Rodriguez, N. C., Ibarra, M. O., and Rojas, J. M. P., “ Medicinal Properties of Mangosteen (Garcinia Mangostana L.) ,” Food and Chem. Toxicol, vol. 46, no. 10, pp. 3227-3239, oct. 2008.
[2]  Zhou, L. Y., Zhou, F. R., Hua, Y., “ A new xanthone glycoside from Polygala crotalarioides ,” Chin Tradit Herb Drugs, vol, 42, no. 7, pp. 1261-1263. 2011.
[3]   Paramawati, R., Dahsyatnya Manggis untuk Menumpas Penyakit , p. 72, Jakarta: PT Agromedia Pustaka, 2010.
[4]   Cahyana, A. H., Potensi Antioksidan Xanthone pada Buah Manggis, Jakarta: Makalah Temu Teknis Mekanisasi dan Hortikultura, 2005.
[5]  Larson, R. T., Lorch, J. M., Pridgeon, J. W., Becnel, J. J., Clark, G. G., Lan, Q., “The Biological Activity of Alpha - Mangostin, a Larvicidal Botanic Mosquito Sterol Carrier Protein- 2 Inhibitor,” Journal Med. Entomol, vol. 47, no. 2, pp 255. 2010.
[6] Singla, V., Seema, S., Joshi, B. dan Rana, A. C., “Emulgel: A New Platform for Topical Drug Delivery,” International Journal of Pharmaceutical and Biological Sciences , vol. 3, no. 1, pp. 485-498. 2012.
[7]  Rowe, R. C., et al ., Handbook of Pharmaceutical Excipients, 5 th Ed, London: The Pharmaceutical Press, 2006. [8]   Supomo, S. & Astri, N. K., “Formulasi Gel Antioksidan Ekstrak Kulit Buah Manggis ( Garcinia mangostana L.) dengan basis Carbopol,” Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, vol. 1, no. 1, pp. 50-60. 2016.
[9]   Walters, K. A., Dermatological and Transdermal Formulations , Cardiff: Marcel Dekker, Inc, 2002.
[10] Songkro, S., “An overview of skin penetration Enhancer: penetration enhancing activity, skin irritation potential and mechanism of action,” Songklanakarin Journal of Science and Technology, pp. 299-314. 2009.
[11] Lane, M. E., “Skin Penetration Enhancers,” Int. J. Pharm, pp. 12-21. 2013.
[12]   Williams, A. C., and Barry, B. W., “Penetration Enchancers,” Adv. Drug Deliv, pp. 603-618. 2004.
[13]   Khullar, R., Deepinder, K., Nimrata, S. dan Seema, S., “Formulation and Evaluation of Mefenamic Acid Emulgel for Topical Delivery,” Saudi Pharmaceutical Journal, no. 20, pp. 63-67. 2012.
[14]  Depkes RI., Farmakope Indonesia, Edisi VI, Jakarta: Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan Makanan Departemen Keseharan Republik Indonesia, 2020.
[15]  Tranggono, R. I, dan Latifah, F., Buku Pegangan Ilmu Pengetahuan Kosmetik , Jakarta: PT. Gramedia Pustaka Utama, 2007.
[16] Anggraeni, Y., Sabrina, dan Pertiwi, P. L., “Formulasi Gel Masker Peel Off Ekstrak Air Bongkahan Gambir (Uncaria gambir Roxb.) Dengan Basis Kitosan dan Polivinil Alkohol,” pp. 1 -14. 2012.
[17]  Laverius, M. F., “ptimasi Tween 80 dan Span 80 Sebagai Emulsifying Agent dalam Sediaan Emulgel Photoprotektor Ekstrak Teh Hijau ( Camellia Sinensis L.)”, skripsi, Fakultas Farmasi, Universitas Sanat Dharma, Yogyakarta, 2011.
[18] Saadah, D. N., Suyanti, E., “ Formulasi Emulgel Antijerawat Minyak Nilam ( Patchouli oil ) Menggunakan Tween 80 dan Span 80 sebagai Pengemulsi dan HPMC sebagai Basis Gel,” Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia, vol. 3, no.
2. 2017.
[19] Dzulhi, S., Anwar, E., dan Nurhayati, T., “Formulation, Characterization and In Vitro Skin Penetration of Green Tea (Camellia sinensis L.) Leaves Extract- Loaded Solid Lipid Nanoparticles,” Journal of Applied Pharmaceutical Science, vol. 8, no. 8, pp. 057-062. 2018.
[20] Misnamayanti.,  Sugihantoro,  Hantoro.,  dan  Fauziyah,  B.,  “Pengaruh  Variasi  Konsentrasi  Propilen  Glikol  sebagai Enhancer terhadap Sediaan Transdermal Patch Ibuproven In Vitro, ” J. Islamic Pharm, vol. 4, no. 2, pp. 27-31. 2019. [21] Nutrisia, A. S., “Formulasi dan uji stabilitas fisik sediaan gel ekstrak daun ketepeng cina ( Cassia alata L.),” Jurnal Kefarmasian Indonesia, vol. 5, no. 1, pp. 80. 2015.
[22] Garg, A., Aggarwal, D., Garg, S., dan Singla, A. K., “Spreading of Semisolid Formulations” Journal of Pharmaceutical Technology, pp. 84-105. 2002.
[23] Jung, A. H., Su, B. N., Keller, W. J., Mehta, R. G., dan Kinghorn, A. D., “Antioxidant xanthones from the pericarp of Garcinia mangostana (Mangosteen),” Journal of Agricultural and Food Chemistry, vol. 54, no. 6, pp. 2077-2082. 2006.
[24] Tsai,  Y. H., Fang,  J.  Y.,  Wu,  P. C.,  dan Huang,  Y.  B.,  “ In  Vitro  Permeation  Study  og Capsaicin  and  Its  Synthetic Derivates from Ointment Bases Using Various Skin Types,” International Journal of Pharmaceutics, pp. 126-128.
1995.
[25]   Dahlizar, S., Futaki, M., Okada, A., Ya tomi, C., Todo, H., dan Sugibayashi, K., “Combined Use of N -Plamitoyl-Glycine- Histidine  Gel  and  Several  Penetration  Enhancers  on  the  Skin  Permeation  and  Concentration  of  Metronidazole,” International Journal of Pharmaceutics, vol. 10, no. 4, pp. 1-15. 2018.
[26] Dragicevic, C. N., Winter, S., Stupar, M., Milic, J., Krajisnik, D., Gitter, B., dan Fahr, A., ”Temoporfin -loaded Liposomal Gels: Visceolastic Properties and In Vitro Skin Penetration,” International Journal of Pharmaceutics, vol. 373, pp. 77- 84. 2009.
[27]  Martin, A., Swarbick, J., & Cammarata, A., Farmasi Fisik Jilid II, edisi ke-3, Jakarta: UI Press, 1983.
[28] Berkó S, Balázs B, Sütő B, Erős G, Gál B, Sztojkov -Ivanov A, et al. Monitoring of skin penetration and absorption with a new in vivo experimental model. Farmacia. 2014;62(6):1157 – 63.