## Penetapan  Kadar  Fenolik  dan  Flavonoid  Ekstrak  dan  Fraksi  Daun  Ghoenu (Abelmoschus manihot L.) serta Uji Antiradikal Secara In Vitro

## Determination of Phenolic and Flavonoid contents of Extract and Fraction from Ghoenu (Abelmoschus manihot L.) Leaves and Its Antiradical In Vitro Test

## Yamin
Fakultas  Farmasi  Universitas  Halu  Oleo,  Kampus  Hijau  Bumi  Tridharma  Anduonohu,  Jl.  H.  E.  A. Mokodompit Kendari 93232
Email: yamin_taeri75@ymail.com

## Abstract
Ghoenu ( Abelmoschus manihot L) is a tropical plant from the Malvaceae family which used as a vegetable and medicinal herb. Empirically, decoction of ghoenu leaf is used as  a  cholesterol-lowering  agent,  analgesic,  kidney  medication,  and  ulcers.  Ghoenu contains  secondary  metabolites  including  flavonoids,  amino  acids,  nucleosides, polysaccharides,  organic  acids,  steroids,  essential  oils.  The  aim  of  this  study  was  to determine the phenolic and flavonoid contents of the ghoenu leaf extract and fraction
and in vitro antioxidant test by using the DPPH (1-1-diphenyl-2-picrahidrazyl). The ghoenu leaves macerated,and the measurement  of  the  total  phenolic  content  was  determined  using  the  Folin-Ciocalteau  method.  Flavonoid  were determined using the aluminum chloride complex colorimeter method. Anti-radical activity was determined using the 2,2-diphenyl-1-picryhidrazyl (DPPH) method. Ethyl acetate fraction showed higher phenolic and flavonoid contents than  methanol  extract,  n-hexane  fraction,  and  water  fraction  with  values  of  28,476  g  GAE/100  g  sample,  26,098  g GAE/100 g sample, 15,905 g GAE/100 g sample, 7,397 g EAG/100 g sample, respectively for phenolic and 49,812 g QE/100 g sample, 44,198 g QE/100 g sample, 41,898 g QE/100 g sample and 24,042 g QE/ 100 g sample, respectively for flavonoids. The ethyl acetate fraction showed very strong antioxidant activity with an IC 50 value at 7,42 µg/mL.
Keyword : Ghoenu, antioxidant, antiradicals, flavonoids, phenolic

## Abstrak
Ghoenu ( Abelmoschus manihot L) merupakan tanaman tropis dari family Malvaceae yang dimasyakat selain digunakan sebagai  sayuran  juga  digunakan  sebagai  bahan  pengobatan  tradisional.  Secara  empiris,  rebusan  daun ghoenu ( A. manihot L) digunakan sebagai penurun kolesterol, analgetik, obat sakit ginjal, maag. Ghoenu mengandung metabolit sekunder antara lain flavonoid, asam amino, nukleosida, polisakarida, asam organik, steroid, minyak volatil. Tujuan penelitian  ini  adalah  untuk  mentukan  kadar  fenolik  dan  flavonoid  ekstrak  dan  fraksi  daun  Ghoenu  ( Abelmoschus manihot L)  serta  uji  antioksidan  secara in  vitro menggunakan  DPPH  ( 1-1-diphenyl-2-picrahidrazyl ).  Daun ghoenu diekstraksi  dengan  menggunakan  metode  maserasi.  Pengukuran  kandungan  fenolik  total  ditentukan  dengan menggunakan  metode  Folin-Ciocalteau,  kadar  flavonoid  ditentukan  dengan  menggunakan  metode  kolorimeter kompleks  aluminium  klorida,  serta  aktivitas  antiradikal  ditentukan  dengan  menggunakan  metode  DPPH.  Fraksi  etil asetat menunjukkan kadar fenolik dan flavonoid yang lebih tinggi dibandingkan ekstrak metanol, fraksi n -heksana dan fraksi  air  dengan  kadar  berturut-turut  sebesar  28,476  g  EAG/100  g  sampel,  26,098  g  EAG/100  g  sampel,  15,905  g EAG/100  g  sampel,  7,397  g EAG/100  g  sampel  untuk fenolik  dan  49,812 g  EK/100  g sampel,  44,198  g  EK/100 g sampel, 41,898 g EK/100 g sampel dan 24,042 g EK/100 g sampel. Fraksi etil asetat menunjukkan aktivitas antioksidan yang sangat kuat dengan nilai IC 50 sebesar 7,42 µg/mL.
Kata kunci: Ghoenu, antioksidan, antiradical, flavonoid, fenolik

## 1. Pendahuluan
Ghoenu ( Abelmoschus  manihot L.)  merupakan tanaman  tropis  dari  family  Malvaceae  yang  dimasyakat selain digunakan sebagai sayuran juga digunakan sebagai
bahan  pengobatan.  Secara  empiris,  rebusan  daun Ghoenu digunakan sebagai penurun kolesterol, analgetik, obat sakit ginjal,  maag  [1].  Tanaman ghoenu juga  digunakan  terapi
Article Info: Received: 31 Januari 2021 Accepted: 1 April 2021 DOI: 10.33772/pharmauho. v7 i1.16545
cedera depresi pasca stroke, luka bakar dan cedera reperfusi iskemik  serebral  [2].  Selain  itu  juga  digunakan  untuk mengobati  bisul,  keseleo,  luka,  tuberkolesis,  radang, bronkritis krosis, sakit gigi, antivirus dan antiinflamasi [3].
Ghoenu mengandung  metabolit  sekunder  antara  lain flavonoid,  asam  amino,  nukleosida,  polisakarida,  asam organik, steroid, minyak volatil, dan lain-lain [4]. Senyawa metabolit  yang  bertanggung  jawab  dalam  menghambat radikal bebas adalah senyawa golongan fenolik, flavonoid, asam askorbat dan sterol [5].
Radikal  bebas  adalah  spesies  molekul  yang mempunyai  elektron  yang  tidak  berpasangan  di  orbital paling  terluar.  Hal  ini  mengakibatkan  molekul  tersebut menjadi sangat reaktif. Dalam jumlah yang banyak radikal bebas ini dapat menyebabkan penyakit degenerative seperti penuaan dini, kanker, gangguan hati, penyakit neurodegenerative,  kardivaskuler  dan  penyakit  ginjal  [6]. Oleh  karena  itu  dibutuhkan  zat  antioksidan  yang  dapat menstabilkan  radikal  bebas.  Hal  ini  disebabkan  zat antioksidan mempunyai peranan penting dalam melindungi kerusakan sel dengan cara menghambat terjadinya melalui penghambatan  atau  penundaan  inisiasi  reaksi  oksidasi berantai  sehingga  dapat  melindungi  kerusakan  sel  dan membantu perbaikan sel tubuh yang rusak [5][13]. Hal ini menjadi dasar untuk dilakukannya penentuan kadar fenolik dan flavonoid ekstrak dan fraksi daun ghoenu ( A. manihot ) serta uji antioksidan secara in vitro dengan menggunakan metode DPPH.

## 2. Metode

## 2.1 Preparasi dan Ekstraksi
Daun ghoenu diperoleh  dari  Kelurahan  Lalodati, Kecamatan  Puuwatu,  Kota  Kendari,  Provinsi  Sulawesi Tenggara. Daun yang diperoleh kemudian disortasi basah, dikeringkan, dan diserbukkan. Sebanyak 350 gram serbuk sampel  daun ghoenu dimaserasi  dengan  metanol  selama 3x24  jam dan  setiap  4  jam dilakukan  pengadukan.  Setiap 24  jam  dilakukan  penyaringan  dan  pergantian  pelarut. Filtrat yang diperoleh dipekatkan dengan rotary evaporator pada suhu 50 0 C hingga diperoleh ekstrak metanol.

## 2.2 Fraksinasi
Fraksinasi  dilakukan  dengan  metode  ekstrasi  cair- cair. Sebanyak 60 gram ekstrak metanol dilarutkan dalam air  hangat,  kemudian  dipartisi  dengan  pelarut  n-heksana sehingga diperoleh fraksi n -heksana. Selanjutnya residu air dipartisi  menggunakan  pelarut  etil  asetat  sehingga diperoleh  fraksi  etil  asetat  dan  fraksi  air.  Fraksi  yang diperoleh kemudian dipekatkan dengan rotary evaporator .

## 2.3 Skrining Fitokimia
Skrining  fitokimia  dilakukan  dengan  menguji kandungan  alkaloid,  flavonoid,  tannin,  terpenoid,  dan saponin [7][8][9].

## 2.4 Penentuan Kandungan Fenolik Total
Penentuan  kandungan  fenolik  total  daun ghoenu dilakukan  dengan  metode  Follin-Ciocalteu  dengan dilakukan  modifikasi  [10].  Sebanyak  1  mL  ekstrak  dan fraksi  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  kemudian ditambahkan 0,4 mL reagen folin ciocalteu dan dibiarkan selama 5-8 menit. Larutan ditambah NO 2 CO 3 7%  sebanyak 4 mL lalu dikocok  sampai homogen dan ditambahkan 10 mL  akuabidestilata.  Campuran didiamkan  selama  2 jam pada suhu ruang, lalu diukur  absorbansinya  menggunakan spktrofotometri  UV-Vis  dengan  panjang  gelombang  750 nm  dengan  pengulangan  (triplo).  Kandung  fenolik  total dinyatakan sebagai gram Ekuivalen asam galat (EAG) per 100 g sampe (EAG/100 g)

## 2.5 Penentuan kadar flavonoid total
Penentuan  kandungan  flavonoid  total  dilakukan dengan  menggunakan  metode  kolorimetri  sebagaimana yang  dilakukan  [11][12].  Sebanyak  1  mL  masing-masing sampel  dan  ditambahkan  3  mL  metanol  p.a  (Merck), kemudian  ditambahkan  0,2  mL    A1C1 3 10%  dan  0,2  mL kalium  asetat  1  M.  kemudian    dicukupkan  dengan akuabidestilata sampai 10 ml. Campuran didiamkan selama 30 menit pada suhu kamar dan diukur absorbansinya pada panjang gelombang 435 nm. Pengukuran dilakukan secara triplo. Kandungan flavonoid total dinyatakan sebagai gram ekuivalen kuersetin (EK) per 100 g sampel (EK/100 g).
2.6 Penentuan Aktivitas Antioksidan
Pengukuran aktivitas
antioksidan dengan
menggunakan  metode  DPPH  [6][14]dengan  modifikasi. Secara  ringkas,  yakni  Masing-masing  konsentrasi  larutan uji  sebanyak  10  µL  dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi. Ditambahkan  metanol  sebanyak  3  mL  dan  larutan  DPPH 0,6 mM sebanyak 2 mL. Selanjutnya campuran diinkubasi dalam  ruangan  gelap  selama  30  menit.  Absorbansi campuran diukur pada panjang gelombang maksimum 517 nm.  Kemampuan  penghambaatn  zat  antioksidan  dihitung berdasarkan persamaan:
% 𝑖𝑛ℎ𝑖𝑏𝑖𝑠𝑖 = 𝐴 𝑏 −   𝐴 𝑠 𝐴 𝑏 𝑥 100%
Dimana, A b = Absorbansi blanko A s = Absorbansi sampel
2.7 Analisis Data
Data yang diperoleh  dianalisis dengan triplicate dan menggambarkan  nilai  rata-rata  yang  dihitung  dengan menggunakan program Microsoft Excel 2016 (Microsoft).

## 3. Hasil dan Pembahasan
Metode  ekstraksi  yang  digunakan  adalah  metode maserasi.  Hal  ini  disebabkan  karena  metode  maserasi nerupakan  metode  yang  menggunakan  peralatan  yang sederhana,  tidak  memerlukan  keterampilan  khusus  serta hemat energi [15]. Ekstrak yang diperoleh kemudian diuji kandungan kimianya dan menunjukkan beberapa golongan metabolit  sekunder.  Hasil  skrining  fitokimia  ekstrak  dan fraksi  daun A.  manihot L  menunjukkan  bahwa  terdapat metabolit  sekunder  alkaloid,  flavonoid,  tannin,  terpenoid. Namun tidak mengandung saponin. Sebagaimana ditunjukkan pada Tabel 1.

## 3.1 Penetapan Kadar Fenolik
Senyawa  fenolik  merupakan  senyawa  metabolit sekunder yang  banyak ditemukan  pada  tumbuhan,  seperti sayuran,  buah-buahan  dan  rempah-rempah.  Senyawa fenolik  menrupakan  zat  antioksidan  alami  dan  berperan sebagai pemulung radikal bebas. Oleh karenanya senyawa fenolik ini memiliki kontribusi sebagai sumber antioksidan yang terkandung dalam bahan makanan, sehingga memiliki aksi  langsung  pada  aksi  antioksidan  dalam  tubuh  [16]. Kekuatan  aktivitas  penangkalan  radikal  DPPH  akan meningkat  dengan  meningkatnya  kadar  senyawa  fenolik seperti  flavonoid,  asam  fenolik  dan diterpen fenolik  [17]. Hal  ini  disebabkan  senyawa  fenolik  memiliki  gugus hidroksil dan gugus o -hidroksi yang memiliki efek terhadap penstabilan  radikal  bebas.    Kekuatan  antiradical  dalam sampel  ditandai  dengan  terjadinya  penurunan  nilai absorbansi [18].
Tabel  2  menunjukkan  kandungan  fenolik  total  dari ekstrak dan fraksi daun ghoenu . Hasil menunjukkan fraksi etil  asetat  mengandung  fenolik  yang  lebih  tinggi dibandingkan  dengan  ekstrak  methanol,  fraksi  n-heksan dan fraksi air dengan kadar secara berturut-turut 28,476 g EAG/100 g sampel, 26,098 g EAG/100 g sampel, 15,905 g EAG/100 g sampel, 7,397 g EAG/100 g sampel.
Tabel 2 . Hasil Kadar fenolik total daun ghoenu
Sampel Kadar Total Fenolik (g EAG /100 g sampel) Ekstrak metanol 26,098 Fraksi etil asetat 28,476 Fraksi n -heksana 15,905 Fraksi air 7,397

## 3.2 Penetapan kandungan flavonoid total
Flavonoid  merupakan  kelompok  senyawa  alami paling  beragam  dan  memiliki  spektrum  sifat  kimia  dan biologis  yang  luas.  Tidak  hanya  memiliki  aktivitas antioksidan,  tetapi  juga  memiliki  khasiat  sebagai  anti karsinogenik  dan  anti  arteriosclerosis  [16].  Flavonoid merupakan  golongan  senyawa  fenolik  yang  memiliki  ciri struktur benzo-piron [19].
Kandungan  total  flavonoid  ditentukan  dengan menggunakan  metode  kolorimetri  aluminium  klorida. Secara  prinsip,  terjadi  kompleks  stabil  antara  Aluminium klorida dengan gugus keto di atom C-4 dengan  hidroksi di C-3  atau  C-5  yang  merupakan  posisi  hidroksi  pada flavonoid  golongan  flavonol  dan  flavon.  Selain  itu  dapat juga  membentuk  kompleks  labil  dengan  hidroksi  pada flavonoid di posisi orto di ring B [20][21].
Berdasarkan data yang tersaji pada Table 3, fraksi etil asetat  meiliki  kadar  flavonoid  yang  tinggi  jika dibandingkan  dengan  ekstrak  methanol,  fraksi  n-heksan serta  fraksi  air,  dengan  nilai  secara  berturut-turut  yaitu 49,812  g  EK/100  g  sampel,  44,198  g  EK/100  g  sampel, 41,898 g EK/100 g sampel dan 24,042 g EK/100 g sampel. Tingginya  kandungan  fenolik  pada  fraksi  etil  asetat menunjukkan  bahwa  senyawa  flavonoid  yang  banyak terkandung  dalam  daun  Ghoenu  menrupakan  flavonoid yang  bersifat  nonpolar.  Tingginya  kandungan  flavonoid pada fraksi etil asetat mengakibatkan kemampun fraksi etil asetat dalam mengambat radikal bebas lebih kuat. Hal ini disebabkan banyaknya gugus hidroksi yang terdapat pada fraksi  etil  asetat.  Hal  ini  sesuai  dengan  penelitian  bahwa fraksi  etil  asetat  biji  langsat  memiliki  kemampuan menangkap radikal bebas lebih kuat dibandingjkan dengan ekstrak  methanol  maupun  fraksi  n-heksan  dan  fraksi  air [12].
Tabel 3 Hasil Kadar flavonoid total Daun ghoenu
Sampel Kadar Total Flavonoid (g EK/100 g sampel) Ekstrak metanol 44,198 Fraksi etil asetat 49,812 Fraksi n -heksana 41,898 Fraksi air 24,042 3.3 Uji Aktivitas Antiradikal
Pengujian antiradikal dalam penelitian ini menggunakan  metode  DPPH.  Hal  ini  disebabkna  karena DPPH merupakan salah satu radikal yang stabil dan waktu pengukuran  yang  singkat  [22].  Selain  itu,  radikal  DPPH juga  merupakan  radikal  yang  banyak  digunakan  untuk melakukan  pengujian  antioksidan  pada  sampel  tanaman
Tabel 1. Hasil skrining fitokimia daun ghoenu Sampel Metabolit sekunder Ekstrak metanol Alkaloid Flavanoid Terpenoid Saponin Tanin Fraksi n -heksana + + + - + Fraksi etil asetat + + + - + Fraksi Air + + + - + + + + - +
[23].  Pengukuran  aktivitas  antioksidan  dengan  metode DPPH  ditandai  dengan  adanya  perubahan  intesitas  warna radikal  DPPH  dari  warna  ungu  menjadi  warna  kuning. Perubahan warna ini disebabkan akibat dari transfer proton dari  senyawa  antioksidan  kepada  radikal  DPPH  sehingga terjadi  ikatan  DPPH-H  ( 1,1-diphenyl-2-picrihydrazin ) [24][25].  Reaksi  yang  terjadi  antara  senyawa  antioksidan dan  radikal  DPPH  sebagaimana  yang  ditunjukkan  pada Gambar 2.
Gambar 2. Skema reaksi zat antioksidan dengan DPPH
Tabel  4  menunjukkan  kekuatan  antioksidan  dari ekstrak dan fraksi daun ghoenu dengan vitamin C sebagai pembanding.  Hasil  tersebut  menunjukkan  bahwa  ekstrak dan fraksi daun ghoune memiliki aktivitas antioksidan yang kuat.  Jika  nilai  IC 50 suatu  sampel  <100  µg/mL  maka tergolong antioksidan yang kuat [26].
Tabel  4. Hasil  uji  aktivitas  antioksidan  ekstrak  dan  fraksi  daun ghoenu
Sampel Nilai IC 50 (µg/mL) Kategori kekuatan [26] Vitamin C 4,54 Kuat Ekstrak Metanol 7,79 Kuat Fraksi Etil Asetat 7,42 Kuat Fraksi N-heksan 12,94 Kuat Fraksi air 13,31 Kuat
Data  Tabel  4  menunjukkan  bahwa  fraksi  etil  asetat memiliki  aktivitas  antioksidan  paling  kuat  dibandingkan dengan  ekstrak  methanol,  fraksi  n-heksana  dan  fraksi  air dengan  nilai  IC 50 secara  berturut-turut  7,42  µg/mL,  7,79 µg/mL,  12,94  µg/mL  dan  13,31  µg/mL.  Hal  ini  sejalan dengan  penelitian-penelitian  lain  yang  menunjukkan bahwa fraksi etil asetat memiliki aktivitas antioksidan yang kuat dibandingkan fraksi lain. Seperti fraksi etil asetat dari kulit  batang raghu ( Dracontomelon  dao )  [11],  fraksi  etil asetat kulit rambutan [27], dan fraksi etil asetat kulit nangka [6].

## 4. Kesimpulan
Ekstrak  dan  fraksi  daun ghoenu menunjukkan aktivitas  antiradical  yang  kuat  yang  diuji  dengan  radikal DPPH  ( 2,2-diphenyl-1-pecryhidrazil ).  Fraksi  etil  aseta memiliki aktivitas antiradikal yang sangat kuat dengan nilai IC 50 sebesar  7,42  µg/mL,  dengan  kadar  fenolik  sebesar
28,476  g  EAG/100  g  sampel  dan  kadar  flavonoid  total sebesar 49,812 g EK/100 g sampel.

## Ucapan Terima Kasih
Ucapan  terima  kasih  kepada  Fakultas  Farmasi Universitas  Halu  Oleo  atas  dukungan  dan  bantuan  dalam pelaksanaan penelitian ini.

## Daftar Pustaka
1. Banne YOS, Ponidjan TS, Dumanauw JM, Antioxidant and hepatoprotective  activity  of  Abelmoschus  manihot  L  leaf fraction against ccl 4 -induced liver damage in rats. Int J of App  Pharmaceutics ,  2019, 11(3) ;2018–20. https://doi.org/ 10.22159/ijap.2019.v11s3.M1009
2. Qiu Y, Ai P, Song J, Liu C, Li Z, Total Flavonoid Extract from Abelmoschus manihot (L.) Medic Flowers Attenuates d-Galactose-Induced  Oxidative  Stress  in  Mouse Liver Through the Nrf2 Pathway, J Medicinal Food , 2017,
20(6) , https://doi.org/10.1089/jmf.2016.3870
3. Wulan  OT,  Indradi  RB,  Review:  Profil  Fitokimia  dan Aktivitas  Farmakologi  Gedi  ( Abelmoschus  manihot (L.) Medik.). Farmaka , 2018, 16(2 );202–209.
4. Luan  F,  Wu  Q,  Yang  Y,  Lu  H,  Liu  D,  Gan  Z,  Zeng  N, Traditional  Uses  ,  Chemical  Constituents  ,  Biological Properties, Clinical Settings , and Toxicities of Abelmoschus manihot L.:  A  Comprehensive  Review, Frontiers  in Pharmacology ,  2020, 11(8) ;1–28. https://doi.org/10.3389 /fphar.2020.01068
5. Ahmed  E,  Ali  AE,  Osman  M,  .  (2020).  Antioxidant Activities of Parsley ( Petroselinum crispum ) on the Induced Biochemical  and  Histopathological  Changes  of  Potassium Bromate-Fed  Rats.  Pakistan  Journal  of  Nutrition,  2020, 19(2) ;80–85, DOI: 10.3923/pjn.2020.80.85
6. Yamin,  Ruslin,  Mistriyani,  Sabarudin,  Ihsan  S,  Armadany FI,  Sahumena  MH,  Fatimah,  WON,  Determination  of  total phenolic and flavonoid contents of jackfruit peel and in vitro test, Food Res , 2021, 5(1) ;84–90, https://doi.org/10.26656/ fr.2017.5(1).350
7. Hafiz I, Ginting M, Yuermaileni Y, The Antioxidant Activity of  Pagoda  Flower  ( Clerodendrum  paniculatum L.)  Ethanol Extract using Visible Spectrophotometric Method. Indonesian J Pharmaceutical and Clinical Res , 2019, 2(2) ; 14–19, https://doi.org/10.32734/idjpcr.v2i2.2060
8. Gul R, Jan SU, Faridullah S, Sherani S, Jahan N, Preliminary Phytochemical Screening, Quantitative Analysis of Alkaloids, and Antioxidant Activity of Crude Plant Extracts from  Ephedra  intermedia  Indigenous  to  Balochistan. Hindawi Scientific World Journal , 2017; 1-7 , https://doi.org/ 10.1155/2017/5873648
9. Thilagavathi  T,  Rajasekar  A,  Institutions  VE,  Doss  V, Preliminary  Phytochemical  Screening  of  Different  Solvent Mediated  Medicinal  Plant  Extracts  Evaluated  Research Article  Preliminary  Phytochemical  Screening  of  Different Solvent  Mediated, Int  Res  J  Pharm ,  2015, 6(4) ;  10–13. https://doi.org/10.7897/2230-8407.06455
10. John  B,  Sulaiman  CT,  George  S,  Reddy  VRK,  Total Phenolics and Flavonoids in Selected Medicinal Plants from Kerala. Int  J  of  Pharmacy  and  Pharmaceutical  Sci ,  2014, 6(1) ;406–408.
11. Yamin, Ruslin, Sartinah A, Ihsan S, Kasmawati H, Suryani, Andriyani  R,  Asma,  Adjeng  ANT,  Arba  M,  Radical scavenging assay and determination Flavonoid and Phenolic total of extract and Fractions of Raghu bark ( Dracontomelon dao (Blanco) Merr), RJPT , 2020, 13(5) ;2335-9, https://doi. org/10.5958/0974-360x.2020.00420.5
N NO 2 O 2 N NO 2 NH NO 2 O 2 N NO 2 AH A Ungu Kuning 1,1-diphenyl-2-picryhidrazyl
1,1-diphenyl-2-picryhidrazin
12. Yamin,  Ruslin,  Sabarudin,  Sida  NA  Kasmawati  H,  Diman LOM,  Determination  of  Antiradical  Activity  ,  Total Phenolic,  and  Total  Flavonoid  Contents  of  Extracts  and Fractions  of  Langsat  ( Lansium  domesticum Coor.)  Seeds, Borneo J of Pharmacy , 2020, 3(4) ;249–256, https://doi.org/ 10.33084/bjop.v3i4.1500
13. Yasmin F, Yusoff NA, Hossain A, Phytochemical Screening and  Pharmacological  Activities  of  the  Ethanolic  Stem Extract of Cleome gynandra , Pakistan J of Nutrition , 2020, 19(4) ;153–159, https://doi.org/10.3923/pjn.2020.153.159 14. Wuttisin N, Nararatwanchai T, Sarikaputi A, Total phenolic, flavonoid, flavonol contents and antioxidant activity of Inca peanut  ( Plukenetia  volubilis L.)  leaves  extracts, Food Research , 5(1) ;216–224, https://doi.org/10.26656/fr.2017.5
(1).346 .
15. Rasul  MG,  Conventional  Extraction  Methods  Use  in Medicinal Plants, their Advantages and Disadvantages. Int J Basic Sciences App Computing , 2(6) ;10–14.
16. Noor  HSM,  Abu  Bakar  MF,  Abu  Bakar  FI,  Ismail  NA, Sanusi  SB,  Mohamed  M,  Phytochemical  content  and antioxidant  activity  of  selected  wild ulam /vegetables consumed by indigenous Jakun community in Taman Negara Johor  Endau  Rompin  (TNJER)  Malaysia,  Food  Research,
2020, 4(1) ;28-33, DOI:10.26656/fr.2017.4(1).179
17. Saha, P., Choudhury, P. R. O. Y., Das, S., & Talukdar, A. D. A. S. (2017). In Vitro Antioxidant Activity of Bark Extracts of  Oroxylum  indicum (L)  Vent. Asian  J  Pharma  Clinical Res ,  2017, 10(8) ;8–11, https://doi.org/10.22159/ajpcr.2017 .v10i8.18977 .
18. Aadesariya  MK,  Ram  VR,  Dave  PN,  Evaluation  of Antioxidant  Activities  by  use  of  Various  Extracts  from Abutilon  Pannosum  and  Grewia  Tenax  in  the  Kachchh Region. MOJ Food Processing Technology , 2017, 5(1) ;216– 230, https://doi.org/10.15406/mojfpt.2017.05.00116
19. Arina NB, Rohman A, The phenolic contents and antiradical activity  of  Indonesian, Int  Food  Research  J ,  2013, 20(3) ; 1119–24.
20. Al-Matani  SK,  Al-wahaibi  RNS,  Hossain  MA,  In  vitro
evaluation of the total phenolic and flavonoid contents and the  antimicrobial  and  cytotoxicity  activities  of  crude  fruit extracts  with  different  polarities  from Ficus  sycomorus . Pacific Science Review A: Natural Science and Engineering ,
2015, 17(3) ;103–108, https://doi.org/10.1016/j.psra.2016. 02.002
21. Sembiring  EN,  Elya  B,  Sauriasari  R,  Phytochemical Screening , Total Flavonoid and Total Phenolic Content and Antioxidant  Activity  of  Different  Parts  of Caesalpinia bonduc (L.)  Roxb., Pharmacogn  J, 2018, 10(1) ;123–127, DOI: 10.5530/pj.2018.1.22
22. Shekhar TC, Anju G, Antioxidant Activity by DPPH Radical Scavenging  Method  of  Ageratum  conyzoides, American  J Ethnomedicine , 2014, 1(4) ;244–249.
23. Jamuna  S,  Paulsamy  S,  Karthika  K,  Screening  of  in  vitro antioxidant  activity  of  methanolic  leaf  and  root  extracts  of Hypochaeris radicata L, (Asteraceae), J Applied Pharm Sci , 2012, 02(07) ;149–154, https://doi.org/10.7324/JAPS.2012. 2722
24. Leorita M, Mardikasari SA, Malaka MH, Sartinah A, Sahidin S,  Aktivitas  Antioksidan  dan  Toksisitas  Akut  Ekstrak. Pharmauho  J  farmasi  Sains  Kesehatan ,  2018, 4(2) ;36-39, http://dx.doi.org/10.33772/ pharmauho.v4i2.6263
25. Lewoyehu  M,  Amare  M,  Comparative  evaluation  of analytical methods for determining the antioxidant activities of  honey:  A  review, Cogent  Food  &  Agriculture ,  2019,
5(1) ;1-24, https://doi.org/10.1080/23311932.2019.1685059 26. Cane HPCA, Saidi N, Mustanir M, Darusman D, Idroes R, Musman  M,  Evaluation  of  antibacterial  and  antioxidant activities of xanthone isolated from orophea corymbosa leaf,
Rasayan  Journal  of  Chemistry ,  2020. 13(4) ;2215–22, https://doi.org/10.31788/RJC.2020.1345818
27. Mistriyani, Riyanto S, Rohman A, Antioxidant activities of rambutan  (Nephelium  lappaceum  L)  peel  in  vitro. Food Research ,  2018, 2(1) ;119–123., https://doi.org/10.26656/fr. 2017.2(1).150
© 2021 by the authors; This article is an open access article distributed under the terms and conditions of the Creative Commons Attribution License ( http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/ ).