## Krim Antioksidan Ekstrak Etanol  Kelopak Bunga Rosela (Hibiscus
sabdariffa L.)

## Antioxidant Cream From Ethanolic Extract of Roselle Calyx (Hibiscus
sabdariffa L.)

## ABSTRAK
Awwalina F.
Rodina, Iskandar Sobri, Dhadhang W. Kurniawan
Jurusan Farmasi, Universitas Jenderal Soedirman , Purwokerto e-mail: dhadhang_wk@gmail.com
Kata kunci: Krim, antioxidant, Hibiscus sabdariffa L.
Rosella  ( Hibiscus  sabdariffa L.)  diketahui  memiliki  banyak  senyawa  aktif  yang  berfungsi  sebagai antioksidan  seperti  flavonoid,  polifenol,  antosianin,  dan  vitamin  C.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk membuat  krim  ekstrak  etanol  kelopak  bunga  Rosella  yang  memenuhi  syarat  evaluasi  fisik  dan mengetahui  aktivitas  antioksidan  krim  sebelum  dan  sesudah  penyimpanan.  Ekstrak  etanol  kelopak bunga  rosella  dibuat  dengan  cara  maserasi.  Krim  dibuat  dengan  variasi  konsentrasi  ekstrak  rosella sebesar  0,5%  (b/b),  1%  (b/b),  dan  1,5%  (b/b).  Uji  aktivitas  antioksidan  dilakukan  menggunakan metode  peredaman  DPPH.  Analisis  hasil  untuk  uji  sifat  fisik  dan  stabilitas  bentuk  sediaan menggunakan analisis data secara deskriptif dan ANOVA satu arah dengan taraf kepercayaan 95% dan  uji  aktivitas  antioksidan  krim  sebelum  dan  sesudah  penyimpanan  selama  1  bulan  dilakukan menggunakan  uji-t  berpasangan.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  krim  dari  ekstrak  etanol kelopak  bunga  rosella  memenuhi  syarat  sifat  fisik  dan  stabilitas  selama  penyimpanan.  Semua  krim memiliki  aktivitas  antioksidan  sebelum  dan  sesudah  penyimpanan.  Aktivitas  antioksidan  tertinggi diperoleh  pada  Formula  3  yang  memiliki  nilai  persen  peredaman  DPPH  sebelum  penyimpanan sebesar 61,35% dan sesudah penyimpanan sebesar 59,43%.
Keywords: Cream, antioxidant, Hibiscus sabdariffa L.
Roselle (Hibiscus sabdariffa L.) was known as the flower which many active compounds that act as antioxidants  such  as  flavonoids,  poliphenol,  anthocyanins,  and  vitamin  C. This  study aims  were  to prepare  the  cream  of  ethanolic  extract  of  roselle  calyx  that  qualified  in  physical  properties  and stability evaluation. More over, cover the antioxidant activity of cream preparations before and after storage. roselle extract was prepared by maceration. The creams were made with concentration of roselle extract of 0,5% (w/w), 1% (w/w), and 1,5% (w/w). The antioxidant activity was determined by  DPPH  method.  Analysis  of  test  results  for  physical  properties  and  stability  using  descriptive analyzed and one way ANOVA with 95% confidence level and the antioxidant activity of the cream before  and  after  storage  for  1  month  using  a  paired  t-  test.  The  results  showed  that  cream  of ethanolic extract of roselle calyx can qualified physical properties and stability during storage. All of cream had antioxidant activity before and after storage. The highest antioxidant activity obtained from  Formula  3  which  the  highest  of    the  percent  reduction  of  61,35%  before  storage  and  after storage i.e 59,43%.

## Pendahuluan
Kulit    merupakan    pelindung  utama  tubuh  dari paparan  radikal  bebas  yang  berasal  dari  luar  tubuh. Radikal bebas tersebut dapat berupa sinar UV, polusi udara,  debu,  dan  paparan  dengan  bahan-bahan  kimia eksogen  (Wahyuni,  2005).  Radikal  bebas  dapat merusak  struktur  kolagen  dan  elastin  penyusun  kulit sehingga  kulit  menjadi  kurang  elastis  dan  timbul garis-garis  kerutan,  mengganggu  distribusi  pigmen melanin  dan  melanosit  sehingga  pigmentasi  tidak merata,  dan  merusak  molekul  makro  pembentuk  sel, yaitu  protein,  karbohidrat,  lemak,  dan  DNA  yang dapat  menyebabkan  kanker  pada  kulit  (Jusuf,  2005).
Efek  radikal  bebas  tersebut  dapat  dicegah  dengan penggunaan antioksidan.
Rosella  ( Hibiscus  sabdariffa L.)  merupakan  tanaman obat  yang  memiliki  khasiat  mencegah  penuaan  dini ( anti  aging )  karena  adanya  kandungan  antioksidan. Senyawa  bioaktif  utama  yang  berperan  sebagai antioksidan  adalah  antosianin,  flavonoid,  polifenol dan  asam  askorbat.  Zat  antioksidan  dalam  rosella dapat  menangkap reactive  oxigen  species (ROS)  dan radikal  bebas,  menurunkan  O 2 reaktif,  metabolisme peroksidasi  lemak  menjadi  produk  non  radikal,  dan mencegah generasi radikal bebas (Sarbini, 2007).
Penggunaan  rosella  sebagai  pelindung  kulit  masih jarang  digunakan  oleh  masyarakat,  sehingga  perlu dilakukan  pengembangan  menjadi  suatu  bentuk sediaan topikal yaitu krim. Sifat krim yang disenangi adalah  mudah  dioleskan,  mudah  dicuci  dengan  air, tidak  lengket,  dan  dapat  memberikan  rasa  nyaman bagi  pemakai  karena  mengandung  kadar  air  yang cukup tinggi sehingga dapat menjaga kelembaban dan elastisitas  kulit  (Mitsui,  1997).  Berdasarkan  uraian tersebut maka dilakukan penelitian untuk mengetahui sifat  fisik  dan  stabilitas  sediaan  krim  ekstrak  etanol kelopak  bunga  Rosella  dan  aktivitas  antioksidan sediaan menggunakan metode DPPH.

## Bahan dan Metode
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  antara lain: simplisia kelopak bunga rosella yang diproduksi dari  Salatiga,  Jawa  Tengah,  asam  stearat,  stearil alkohol,  setil  alkohol,  kalium  hidroksida,  metil paraben,  propil  paraben,  gliserin,odoris  stroberi,
aquades,  isopropanol,  etanol  70%,  etanol  96%,  dan pereaksi DPPH.

## Pembuatan Ekstrak
Simplisia  kelopak bunga  Rosella sebanyak  300 gram dimaserasi  dalam  1,5  L  etanol  70%  selama  3  x  24 jam,  kemudian  disaring  menggunakan  corong Buchner.  Ekstrak  tersebut  kemudian  dievaporasi menggunakan rotary  evaporator pada  suhu  40°C (Anokwuru et al. , 2011 dengan modifikasi).

## Pembuatan Krim
Krim  dibuat  dalam  3  formula  dengan  variasi  kadar ekstrak etanol kelopak bunga Rosella. Masing-masing krim  mengandung  ekstrak  etanol  kelopak  bunga Rosella  sebesar  0,5%  b/b,  1%  b/b,  1,5%  b/b  dalam komposisi basis yang sama. Komposisi formula krim dapat dilihat pada Tabel 1 .
Tabel 1 Formula krim Komposisi Krim Formula F1 F2 F3 Ekstrak etanol Rosella (%) 0,5 1,0 1,5 Asam Stearat (%) 13,0 13,0 13,0 Setil alkohol (%) 1,0 1,0 1,0 Stearil alkohol (%) 1,0 1,0 1,0 Metil paraben (%) 0,1 0,1 0,1 Propil paraben (%) 0,05 0,05 0,05 Gliserin (%) 10,0 10,0 10,0 Kalium Hidroksida (%) 0,9 0,9 0,9 Aquades ad 150 150 150 Odoris strawberry Qs Qs qs (Lachman et al. , 1994)
Krim  dibuat  dengan  cara:  bahan  yang  tergolong  fase minyak,  asam  stearat,  stearil  alkohol,  propil  paraben dan  setil  alkohol  dipanaskan  pada  suhu  70°C.  Bahan yang  tergolong  fase  air,  yaitu  kalium  hidroksida, aquades,  gliserin  dan  metil  paraben  dipanaskan  pada suhu  70°C,  diaduk  sampai  larut  sempurna.  Fase  air dicampurkan  sedikit  demi  sedikit  ke  dalam  fase minyak  di  dalam  mortir  kemudian  diaduk  dengan kuat  selama  10  menit  sampai  terbentuk  basis  krim. Setelah  basis  terbentuk,  ekstrak  dicampurkan  ke dalam  basis  krim  tersebut  sedikit  demi  sedikit,  lalu diaduk  perlahan, ditambahkan  odoris  stroberi secukupnya, kemudian didinginkan.

## Evaluasi Krim
Evaluasi  krim  dilakukan  selama  4  pekan  yang meliputi  pengamatan  organoleptis,  pengukuran  pH, pengukuran  viskositas,  uji  homogenitas,  uji  daya sebar, uji daya lekat, dan uji sentrifugasi.

## Pengukuran Aktivitas Antioksidan Krim

## Penyiapan sampel
Sampel  krim  sebanyak  1,0  gram  diekstraksi  dengan etanol  96%  dan  isopropanol  dalam  corong  pisah dengan  perbandingan  8:2  (v/v)  selama  10  menit (Bernatoniene et al. , 2011 dengan modifikasi).
Uji kualitatif dengan larutan DPPH 0,2 %
Larutan  sampel  ditotolkan  pada  kertas  Whatmann kemudian  disemprot  dengan  larutan  DPPH  0,2%. Apabila  di  dalam  larutan  sampel  terdapat  senyawa antioksidan  maka  akan  memberikan  warna  kuning yang intensif.

## Penentuan aktivitas antioksidan
Penentuan  aktivitas  antioksidan  dilakukan  dengan cara  3  mL  larutan  DPPH  101  μM  ditambah  dengan

## 17 | A c t a   P h a r m a c i a e   I n d o n e s i a Maret 2016, 4(1) 15-20 ; ISSN: 2337-8433
masing-masing  1  mL  larutan  sampel.  Larutan didiamkan di tempat gelap selama 30 menit kemudian didiamkan  selama  waktu operating  time larutan sampel yang  telah  diperoleh.  Larutan  ini  selanjutnya diukur  absorbansinya  pada  panjang  gelombang maksimum. Penentuan aktivitas antioksidan dilakukan  sebanyak  3  kali  replikasi  setiap  larutan sampel.
Penentuan persentase peredaman aktivitas antioksidan krim dihitung dengan rumus:
Persen peredaman % 100 A A - A 1 2 1   A 1 =  Absorbansi  DPPH;  A 2 =  Absorbansi sampel

## Analisis Data
Hasil  evaluasi  sifat  fisik  krim  berupa  data homogenitas,  organoleptis  dan  sentrifugasi  dianalisis secara  deskriptif,  sedangkan  hasil  pengukuran  pH, viskositas,  daya  sebar,  dan  daya  lekat,  analisis  data yang  digunakan  adalah  ANOVA  satu  arah  dengan taraf  kepercayaan  95%.  Analisis  data  pengujian aktivitas  antioksidan  krim  dengan  membandingkan persen  peredaman  larutan  sampel  sebelum  dan sesudah  penyimpanan  selama  1  bulan  menggunakan uji-t berpasangan.

## Hasil dan Pembahasan
Ekstrak kental rosella yang diperoleh berwarna coklat kemerahan  dan  berbau  manis  khas  rosella.  Berat
ekstrak  kental  Rosella  yang  didapatkan  sebesar 108,977 gram dari 300 gram simplisia Rosella dengan nilai rendemen sebesar 36,326%.
Pengamatan  organoleptis  krim  rosella  meliputi pengamatan  terjadinya  perubahan  warna,  bau,  dan terjadinya pemisahan fase. Hasil pengamatan organoleptis krim rosella selama 4 pekan penyimpanan  secara  keseluruhan  tidak  menunjukkan adanya  perubahan  baik  dari  warna,  bau  dan pemisahan  fase  ( Tabel  2 ).  Krim  yang  dihasilkan berupa  krim  yang  lembut,  mudah  menyebar, membentuk  konsistensi  setengah  padat,  nyaman digunakan,  cepat  meresap  pada  kulit,  dan  tidak lengket.  Berdasarkan  Tabel  2  menunjukkan  bahwa semakin  banyak  konsentrasi  ekstrak  etanol  rosella yang terdapat pada sediaan maka warna sediaan akan semakin coklat.
Hasil  pengukuran  pH  sediaan  krim  selama  4  pekan penyimpanan  menunjukkan  bahwa  sediaan  krim memiliki  tingkat  keasaman  antara  6-7.  Menurut  SNI 16-4399-1996  nilai  pH  sediaan  sebagai  syarat  mutu pelembab kulit  yang baik berkisar antara 4,5-8. Nilai pH  krim  ekstrak  etanol  kelopak  bunga  rosella  masih berada  dalam  kisaran  nilai  pH  yang  baik  untuk sediaan menurut SNI ( Tabel 3 ).
Tabel 2 Hasil pengamatan stabilitas warna dan stabilitas bau sediaan krim ekstrak etanol kelopak bunga rosella
Lama penyimpanan Stabilitas warna Stabilitas bau (hari) F1 F2 F3 F1 F2 F3 1 PK C CT OS OS OS 2 PK C CT OS OS OS 3 PK C CT OS OS OS 6 PK C CT OS OS OS 7 PK C CT OS OS OS 14 PK C CT OS OS OS 21 PK C CT OS OS OS 24 PK C CT
OS OS
OS
Keterangan: PK (putih kecoklatan), C (coklat), CT (coklat tua), OS (odoris stroberi)
Tabel 3 Data pengukuran pH sediaan krim ekstrak etanol kelopak bunga Rosella
Lama penyimpanan pH* (hari) F1 F2 F3 1 6 6 6 2 6 6 6 3 6 6 6 6 6 6 6 7 6 6 6 14 6 6 6 21 6 6 6
28 6 7 7 * hasil rata-rata dari 3 kali hasil pengukuran
Viskositas krim ekstrak etanol kelopak bunga  rosella diuji  menggunakan  viskosimeter  Brookfield  pada spindle  64s  dengan  kecepatan  1-2  rpm.  Variasi konsentrasi ekstrak etanol rosella dapat mempengaruhi  viskositas  sediaan  krim.  Selama  4 pekan  penyimpanan  krim  ekstrak  etanol  rosella menunjukkan  adanya  kecenderungan  peningkatan viskositas  krim  ( Gambar  1 ).  Hasil  analisis  ANOVA pada  minggu  keempat  menunjukkan  bahwa  nilai  F hitung  (155,165)  lebih  besar  dibandingkan  dengan  F tabel  (19,330)  yang  berarti  adanya  perbedaan  yang signifikan. Hasil uji lanjut BNT menunjukkan adanya perbedaan  yang  signifan  antar  masing-masing formula. Hasil ini menunjukkan bahwa adanya variasi konsentrasi  ekstrak  etanol  kelopak  bunga  rosella dalam  krim  berpengaruh  terhadap  viskositas  krim selama penyimpanan. Hasil pengamatan homogenitas krim  ekstrak  etanol  kelopak  bunga  rosella  selama  4 pekan  penyimpanan,  menunjukkan  semua  formula tidak mengalami perubahan dalam hal homogenitasnya.  Krim  ekstrak  etanol  kelopak  bunga rosella apabila dioleskan pada plat kaca menunjukkan susunan  yang  homogen,  tidak  terasa  adanya  butir- butir kasar pada plat kaca.

## Gambar 1 Hubungan antara lama penyimpanan
dengan viskositas
Daya  sebar  sediaan  krim  ekstrak  etanol  kelopak bunga  rosella  berkisar  4,33-  5,73  cm.  Menurut  Garg et  al (2002),  daya  sebar  yang  baik  yaitu  5-7  cm,  hal ini  menunjukkan  konsistensi  semisolid  yang  sangat nyaman  dalam  penggunaan.  Hasil  pengukuran  daya sebar sediaan krim ekstrak etanol rosella menunjukkan  hasil  yang  tidak  teratur  selama penyimpanan  ( Gambar  2 ).  Berdasarkan  analisis statistik  menggunakan  ANOVA  pada  minggu keempat  didapatkan  bahwa  tidak  terdapat  perbedaan secara  signifikan  pada  keseluruhan  formula  karena  F hitung (0,205) lebih kecil dari F tabel (99330). Hal ini menunjukkan  bahwa  adanya  perbedaan  konsentrasi ekstrak etanol kelopak bunga rosella tidak mempengaruhi daya sebar krim selama penyimpanan.
Hasil  uji  daya  lekat  krim  menunjukkan  peningkatan konsentrasi  ekstrak  etanol  kelopak  bunga  rosella menyebabkan  daya  lekat  krim  semakin  rendah  dan selama  waktu  penyimpanan  krim  selama  4  minggu ada  kecenderungan  daya  lekat  krim  semakin meningkat ( Gambar 3 ).
Gambar 2 Grafik uji daya sebar sediaan krim ekstrak etanol kelopak bunga Rosella
Daya lekat sediaan  semipadat yang baik adalah lebih dari  1  detik,  karena  pada  waktu  tersebut,  sediaan semipadat  efektif  melekat  pada  kulit  sehingga absorbsi  zat  aktif  ke  dalam  kulit  menjadi  optimal (Zats  dan  Gregory,  1996).  Hasil  analisis  ANOVA menunjukkan  bahwa  F  hitung  (30.500)  lebih  besar dari pada F tabel (19.330) yang berarti bahwa adanya variasi  ekstrak  etanol  kelopak  bunga  rosella  pada sediaan  krim  menunjukkan  adanya  perbedaan  yang signifikan. Hasil uji lanjut BNT menunjukkan bahwa adanya  perbedaan  yang  signifikan  diantara  masing- masing formula.  Hal ini  menunjukkan bahwa adanya perbedaan  konsentrasi  ekstrak  etanol  kelopak  bunga rosella  mempengaruhi  daya  lekat  krim  selama penyimpanan.
Gambar 3 Grafik uji daya lekat sediaan krim ekstrak etanol kelopak bunga rosella
Uji  sentrifugasi  dilakukan  pada  kecepatan  2500  rpm selama  15  menit  tiap  minggu.  Cara  ini  dilakukan dengan  tujuan  kontrol  kualitas  sistem  emulsi  dari sediaan  krim  tersebut  (Syukri et  al. ,  2008).  Hasil pengamatan  uji  sentrifugasi  selama  4  minggu
0 50000 100000 150000 1 2 3 4 Vi sko si tas
(c e n tr ip o ise) Lama Penyimpanan (minggu) 0,5% 1% 1,5% 4,4 4,6 4,8 5 5,2 5,4 1 2 3 4 D ay a seb ar ( cm ) Lama penyimpanan (minggu) 0,5% 1% 1,5%
0 0,5 1 1,5 1 2 3 4
D ay a le kat ( d e tik) Lama penyimpanan (minggu) 0,5%
1% 1,5%

## 19 | A c t a   P h a r m a c i a e   I n d o n e s i a Maret 2016, 4(1) 15-20 ; ISSN: 2337-8433
penyimpanan  menunjukkan  bahwa  sediaan  stabil selama  3  minggu  pertama.  Sedangkan  pada  minggu keempat,  Formula  1  dan  Formula  2  menunjukkan adanya  pemisahan  warna  berupa  bagian  yang
berwarna  coklat  di  atas  dan  bagian  yang  berwarna putih  di  bawah  sedangkan  Formula  3  menunjukkan susunan yang homogen ( Tabel 4 ).

## Tabel 4 Data pengamatan uji sentrifugasi sediaan krim ekstrak etanol kelopak bunga rosella
Lama penyimpanan Hasil sentrifugasi (hari) F1 F2 F3 7 Homogen Homogen Homogen 14 Homogen Homogen Homogen 21 Homogen Homogen Homogen 28 Terbentuk 2 warna  Terbentuk 2 warna  Homogen
Pemisahan  warna  yang  terjadi  pada  F1  dan  F2 kemungkinan  disebabkan  ekstrak  rosella  yang  tidak terikat  secara  kuat  dengan  basis  krim  pada  saat pembuatan  krim  sehingga  selama  penyimpanan stabilitasnya  berkurang.  Adanya  gaya  sentrifugal pada  uji  sentifugasi  menyebabkan  bagian  yang memiliki  berat  jenis  yang  lebih  besar  akan  berada  di bawah  (mengendap)  dan  bagian  yang  memiliki  berat jenis yang lebih kecil akan berada di atas (Anggraeni, 2008).  Sediaan  krim  yang  dibuat  masih  memenuhi syarat  stabilitas  secara  fisik,  hal  tersebut  karena sediaan  krim  tersebut  masih  dalam  konsistensi  suatu krim artinya tidak terjadi pemisahan fase minyak dan fase  air.  Sediaan  tersebut  apabila  diaduk  kembali maka  akan  menjadi  suatu  susunan  yang  homogen lagi.
Uji  kualitatif  aktivitas  antioksidan  dilakukan  dengan tujuan  mengetahui  adanya  perubahan  warna  yang terjadi  apabila  suatu  sampel  yang  diperkirakan mengandung senyawa antioksidan direaksikan dengan  radikal  bebas  DPPH.  Uji  kualitatif  dilakukan pada larutan ekstrak 1% b/v dan filtrat hasil ekstraksi krim. Hasil uji kualitatif menunjukkan bahwa terdapat senyawa antioksidan pada larutan ekstrak 1% b/v dan filtrat  hasil  ekstraksi  krim  karena  warna  ungu  tua DPPH  telah  tereduksi  yang  menyebabkan  intensitas warnanya  menjadi  berkurang  dan  warnanya  berubah menjadi kuning (Vankar et al. , 2006).
Uji  kuantitatif  aktivitas  antioksidan  krim  dilakukan sebelum dan sesudah penyimpanan selama 4 minggu. Hasil  uji  kuantitatif    menunjukkan  bahwa  sediaan krim  sebelum  dan  sesudah  penyimpanan  mempunyai aktivitas  antioksidan  ( Tabel  5 ).  Semakin  banyak konsentrasi ekstrak yang terdapat dalam sediaan krim maka kemampuan krim dalam meredam radikal bebas DPPH semakin besar yang ditunjukkan dengan makin besarnya  nilai  persen  peredaman  oleh  karena  itu semakin  besar  aktivitas  antioksidan  yang  terdapat pada krim.
Hasil uji T berpasangan menunjukkan bahwa pada F1 dan  F3  menunjukkan  tidak  adanya  perbedaan aktivitas antioksidan sebelum dan sesudah
penyimpanan.  Sedangkan  pada  F2  menunjukkan adanya  perbedaan  aktivitas  antioksidan  sebelum  dan sesudah penyimpanan.
Tabel 5 . Hasil perhitungan persen peredaman sediaan krim  ekstrak  etanol  kelopak  bunga  rosella sebelum dan sesudah penyimpanan
Formula Persen peredaman * Sebelum Sesudah F1 14,96 % ± 2,58 28,87 % ± 5,57 F2 37,27 % ± 5,19 43,85 % ± 3,44 F3 61,35 % ± 1,50 59,43 % ± 1,44
* hasil rata-rata ± standar deviasi 3 kali replikasi

## Simpulan
Sediaan  krim  ekstrak  etanol  kelopak  bunga  rosella memenuhi  syarat  uji  sifat  fisik  dan  stabilitas  selama penyimpanan.  Sediaan  krim  ekstrak  etanol  kelopak bunga rosella memiliki aktivitas antioksidan  sebelum dan sesudah penyimpanan selama 4 minggu. Semakin banyak  konsentrasi  ekstrak  yang  terdapat  dalam sediaan krim maka aktivitas antioksidan sediaan krim tersebut semakin meningkat.

## Daftar Pustaka
Agnessya,  R.,  2008,  Kajian  Pengaruh  Penggunaan Natrium Alginat dalam Formulasi Skin Lotion, Skripsi ,  Program  Studi  Teknologi  Hasil Perikanan,  Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor.
Anonim,  1996, Standar  Mutu  Sediaan  Tabir  Surya , SNI.16.4399.1996, Badan Standarisasi Nasional, Jakarta.
Anggraeni,  C.  A.,  2008,  Pengaruh  Bentuk  Sediaan Krim,  Gel,  dan  Salep  Terhadap  Penetrasi Aminofilin Sebagai Antiselulit Secara In Vitro Menggunakan Sel DifusiFranz, Skripsi , Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam, Departemen Farmasi, Universitas Indonesia, Jakarta.
Bernatoniene,  J.,  Masteikova,  R.,  Davalgiene,  J.,
Peciura,  R.,  Gauryliene,  R.,  Bernatoniene,  R,. Majiena,  D.,  Lazauskas,  R.,Civinskiene,  G.,
Velziene,  S.,  Muselik,  J.,  dan  Chalupova,  Z., 2011,  Topikal  Application  of  Calendula officinalis (L.) : Formulation and Evaluaton of Hydrophilic Cream With
Antioxidant Activity, Journal of Medical Plants Research, Vol. 5 (6) pp, 868-877. Garg,  A.,  Aggarwal,  D.,  Garg,  S.,  dan  Sigla,  A.K., 2002, Spreading of Semisolid Formulation: An Update, Pharmaceutical Technology , 84-102. Jusuf, N.K., 2005, Kulit Menua, Majalah Kedokteran Nusantara , Vol, 38, No.2, 184-188. Lachman,  L.,  Lieberman,  H.,  dan  Kanig,  J.,  1994, Teori  dan  Praktek  Farmasi  Industri  II ,  Edisi ke Tiga, UI Press, Jakarta.
Mitsui,  W.,  1997, New  Cosmetic  Science ,  Elsevier Science, B.V., Amsterdam. Molyneux,  P.,  2003,  The  Use  of  The  Stable  Free Radical  Diphenylpicrylhydrazyl  (DPPH)  for Estimating  Antioxidant  Activity, J.  Sci. Technol ., 211-219. Sarbini,  D.,  2007,  Optimalisasi  Dosis  Ekstrak  Bunga Rosella  Merah  ( Hibiscus  sabdariffa Linn) Sebagai Anti Aterosklerosis Untuk Menghambat  Aktifasi  NF-κβ    ,  TNF-α  dan ICAM-1  Pada  Kultur  Sel  Endothel  Yang Dipapar Low Density Lipoprotein Teroksidasi, Jurnal  Penelitian  Sains  dan Teknologi, Vol.8, No.2, 99-109. Syukri,  Y.,  Zahliyatu,  S.,  dan  Ulfa,  M.,  2008, Formulasi  Emulsi  Ganda Virgin  Coconut  Oil (VCO) dengan Emulgator Span 80 dan Tween 60, Jurnal  Ilmiah  Farmasi,  Vol.  5,  No.1 ,  25- 35. Vankar, P. S., Tiwari, V., Singh, L. W., dan Swapana,
N.,  2006,  Antioxidant  Properties  of  Some
Exclusive Species of  Zingiberaceae Family of Manipur, Electronic  Journal  of  Agriculture ,  5 (2), 1-6. Voight, R., 1995, Buku Pelajaran Teknologi Farmasi , Edisi V, diterjemahkan oleh  Soewandhi, S.N., Gadjah Mada University Press, Yogyakarta. Wahyuni, T., 2005, Cara Rasional Peremajaan Kulit ,
Health Today, Jakarta.
Zats,  J.L.  dan  Gregory  P.K.,  1996,  Gel, in Liebermann,  H.A.,  Rieger,  M.M., Banker,
G.S.,
Pharmaceutical
Dosage
Forms: Disperse  Systems, Vol.    II, 401-403, 413-414, Marcell Dekker Inc., New York.