## ISSN: 2614-7416

## KAJIAN  KONSENTRASI  IAA  DAN  BAP  PADA  MULTIPLIKASI  PISANG  RAJA  BULU  IN  VITRO  DAN AKLIMATISASINYA 1)
Eddy Triharyanto 1) , Retno Bandriyati Arniputri 1) , Endang Setia Muliawati 1) , Ellyvia Trisnawati 2)
1) Staf Dosen Program Studi Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Sebelas Maret
2) Mahasiswa S1 Program Studi Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Sebelas Maret Author Contact: eddytriharyanto@yahoo.co.id

## ABSTRACT
Banana is a tropical fruit plant that popular in people. The availability of Raja Bulu banana seedling insufficient to cover  the  needs.  Problems  in  commercial  banana  cultivation  is  the  least  availability  of  clonal  superior  seeds. Multiplication in tissue culture technique can potentially overcome all limitations of Raja Bulu conventional seedling. So that, the objective of this research was to multiplicate an amount of Raja Bulu banana shoot using plant growth regulator in MS medium to initially produce shoot organs. The multiplication was done by Completely Randomized Design  with  2  factor  of  IAA  (0;  0,5;  1  ppm)  and  BAP  (0,  2,  4  ppm).  The  data  were  analyzed  by  ANOVA  and  the mean compared using Duncan’s pairwise comparisons at p = 0,05. The acclimatization was design by Completely Randomized Block Design with 3 different media of palm fiber, bagasse, and banana  pseudo stem then analyzed by  ANCOV.  The  results  showed  there  was  interaction  of  IAA  and  BAP  on  variables  at the  appearance  of  shoots and the leaf appearance in multiplication. The medium without IAA and contained BAP 2 ppm showed the highest mean number of shoot but it was not cost effective  with other treatment in this multiplication.  Giving IAA 0,5 ppm with  BAP  4  ppm  accelerated  when  the  shoots  appear  and  when  the  leaves  appear  on  multiplication  Raja  Bulu banana. There was no significant interaction or influence of IAA and BAP on plant height, leaf number, and pseudo stem  diameter  as  acclimatization  variable  with  3  medium  used.  The  percentage  of  acclimatization  success  is 76,5%.
Keywords: Plant Growth Hormone, Palm Fiber, Bagasse, Banana Pseudo Stem

## AGROTECHNOLOGY RESEARCH JOURNAL
Triharyanto E,  Arniputri R  B, Muliawati E  S,  Trisnawati  E.  2018.  Studies  concentration  of  IAA  and  BAP  on multiplication of raja bulu banana in vitro and the acclimatization. Agrotech Res J 2(1): 1-5.
Triharyanto E,  Arniputri R  B, Muliawati E  S, Trisnawati  E. 2018. Kajian konsentrasi IAA  dan BAP pada multiplikasi pisang raja bulu in vitro dan aklimatisasinya . Agrotech Res J 2(1): 1-5.

## PENDAHULUAN
Pisang  merupakan  komoditas  buah  tropika  yang digemari masyarakat dan  buahnya bisa  dimakan segar (Meldia  dan  Wahyuni  2014).  Ketersediaan  bibit  pisang terutama  varietas  Raja  Bulu  belum  memadai  dalam mencukupi  kebutuhan  masyarakat.  Kendala  dalam penyediaan  bibit  dalam  skala  komersial  adalah ketersediaan bibit unggul klonal yang seragam, kultur in vitro merupakan  alternatif  dalam  penyediaan  bibit unggul tanaman pisang Raja Bulu yang seragam dalam waktu  singkat  dan  mengatasi  kebutuhan  tempat  serta tenaga kerja dibandingkan perbanyakan secara konvensional.  Menurut  Husain  et  al.  (2012)  sebagai sebuah teknologi baru, kultur jaringan tanaman memiliki dampak yang besar pada bidang pertanian dan industri, melalui  penyediaan  tanaman  yang  dibutuhkan  untuk memenuhi  permintaan  yang  semakin  meningkat  di dunia.
Tunas  pisang  dalam  pertumbuhannya  secara konvensional  di  lapangan  sering  mengalami  hambatan dan  membutuhkan  waktu  yang  lama.  Berdasarkan permasalahan tersebut maka perlu dilakukan penelitian kultur  jaringan  terutama  pada  tahap  multiplikasi  pisang Raja Bulu dengan perlakuan ZPT(zat pengatur tumbuh) agar dapat memacu pertumbuhan tunas dan menghasilkan  benih  yang  banyak.  Penelitian  ini bertujuan untuk mengkaji konsentrasi ZPT(zat pengatur
tumbuh)  auksin  (IAA)  dan  sitokinin  (BAP)  yang  tepat dalam  menghasilkan  tunas  pada  tahap  multiplikasi untuk  selanjutnya  diaklimatisasi  sebagai  bibit  pisang Raja  \Bulu  yang  berkualitas  baik  dan  seragam  melalui penyediaan bibit dengan in vitro .

## METODE PENELITIAN
Penelitian  dilaksanakan  secara  bertahap  dimulai dengan  persiapan  alat  dan  bahan,  tahap  multiplikasi, tahap  aklimatisasi  selama  Oktober  2016  hingga  Mei 2017  di  Laboratorium  Fisiologi  Tumbuhan  dan Bioteknologi  dan  di  Screen  Rumah  Kaca  A  Fakultas Pertanian  Universitas  Sebelas  Maret.  Alat  yang digunakan dalam penelitian antara lain: petridish, gelas ukur,  pipet,  botol  kultur,  timbangan  analitik,  pH  meter, autoclave , Laminar  Air  Flow (LAF),  pinset,  gunting, scalpel , hotplate dan stirrer ,  lampu  spiritus,  rak  kultur, penggaris,  kotak  Styrofoam,  dan  botol  plastik.  Bahan yang digunakan, eksplan pisang Raja Bulu, larutan stok media  MS,  agar-agar,  sukrosa/gula  pasir,  desinfektan (Alkohol  70%),  aquades  steril,  ZPT  (auksin:  IAA, sitokinin: BAP), bagase, serat aren, pelepah pisang.
Penelitian  multiplikasi  merupakan  percobaan  2 faktor dengan menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL),  yang  terdiri  dari  penambahan  zat  pengatur tumbuh  (ZPT)  IAA  dan  BAP  dengan  konsentrasi  yang berbeda-beda  untuk  setiap  perlakuan.  Faktor  I  adalah konsentrasi  IAA:  I1  =  0  ppm;  I2  =  0.5  ppm;  I3  =  1.0
*Fak. Pertanian UNS Surakarta Jl. Ir. Sutami 36 A Surakarta
Kajian Konsentrasi IAA dan BAP pada Multiplikasi Pisang Raja Bulu In Vitro dan Aklimatisasinya (Eddy Triharyanto, Retno Bandriyati Arniputri, Endang Setia Muliawati, Ellyvia Trisnawati)
ppm. Faktor II adalah konsentrasi BAP: B1 = 0 ppm; B2 = 2 ppm; B3 = 4 ppm.
Pelaksanaan  penelitian  dimulai  dengan  tahap multiplikasi  sebagai  berikut:  sterilisasi  alat,  pembuatan larutan  stok,  pembuatan  media,  penanaman  eksplan, pemeliharaan, kemudian dilanjutkan tahap aklimatisasi. Data  yang  diperoleh  pada  multiplikasi  dianalisis berdasarkan  uji  F  (Anova)  dengan  taraf  kepercayaan 95%. Jika perlakuan tidak berpengaruh nyata terhadap variabel  respon  maka  data  dianalisis  menggunakan grafik.  Tahap  Aklimatisasi  yang  merupakan  tahap lanjutan  dirancang  secara  RAKL  dan  dianalisis menggunakan  analisis  kovarian  (Ancov)  dengan variabel covarian tinggi tanaman awal, diameter batang awal,  dan  jumlah  daun  awal.  Tanaman  diaklimatisasi pada  media:  bagase,  serat  aren,  dan  pelepah  pisang. Variabel  pengamatan  pada  tahap  ini  yaitu:  tinggi tanaman, jumlah daun, dan diameter batang semu.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ruang  Laboratorium  penyimpanan  botol  untuk multiplikasi  ini  bersuhu  25-28 o C  dan  terdapat  lampu fluorescent dengan intensitas cahaya antara 1000-4000 ft-c  (1000-4000  lux)  sebagai  sumber  cahaya.  Eksplan untuk multiplikasi berasal dari inisiasi tunas pisang Raja Bulu  oleh  Kebun  benih  hortikultura  KBH  Salaman, Magelang. Kendala yang dialami dalam multipliksi pada penelitian  ini  yaitu  adanya  kontaminasi  yang  terjadi pada  beberapa  botol  perlakuan.  Menurut  Karjadi  dan Buchory  (2008),  kontaminasi  merupakan  salah  satu faktor  yang  menyebabkan  gangguan  pertumbuhan  dan perkembangan  pada  kultur  jaringan  bahkan  akibat terkontaminasi,  eksplan  dapat  mati  sebelum  tumbuh menjadi  plantlet.  Penyebab  terjadinya  kontaminasi diduga  akibat  proses  pengerjaan  yang  kurang  steril ketika penanaman pada media kultur.
Tahap aklimatisasi dilakukan untuk melihat prosentase pertumbuhan bibit asal in vitro.  Aklimatisasi ini  dilakukan  secara  hidroponik  pada  tiga  media  yang berbeda  untuk  melihat  prosentase  keberhasilannya. Jumlah  tanaman  yang  hidup  pada  akhir  penelitian  62 tanaman  dengan  prosentase  keberhasilan  aklimatisasi sebesar 76,5%.
Multiplikasi
Rostiana  dan  Deliah  (2007)  menyatakan  bahwa salah  satu  keberhasilan  dalam  perbanyakan  dengan kultur  jaringan  adalah  pembentukan  akar.  Kemunculan akar  ditandai  dengan  adanya  benjolan  putih  pada eksplan  bonggol pisang  dibagian  bawah yang terpendam  media  MS.  Menurut  Yatim  (2016),  jumlah akar penting bagi pertumbuhan eksplan/ tanaman pada kultur  jaringan  in  vitro.  Jumlah  akar  yang  semakin banyak  bagus  untuk  penyerapan  nutrisi  dari  media. Tunas  yang  muncul  pada  eksplan  menunjukkan keberhasilan  tahap  multiplikasi  pada  kultur  jaringan. Sesuai  dengan  tujuan  dari  penelitian  ini  maka diharapkan adanya kombinasi perlakuan dapat memberikan  respon  terhadap  kemunculan  tunas  pada eksplan,  terutama  jumlah  tunasnya.  Selain  itu  jumlah daun,  tinggi  tunas,  panjang  akar,  dan  berat  plantlet menjadi  indikator  penting  dalam  multiplikasi.  Zat pengatur tumbuh dari golongan auksin dapat menginisisasi  akar  dan  memacu  perkembangan  akar cabang  pada  kultur  jaringan  (Davies  2004)  sedangkan zat  pengatur  tumbuh  dari  golongan  sitokinin  dapat menstimulasi  pembentukan  tajuk  atau  tunas  pada plantlet  (Gaba  2005).  Beberapa  eksplan  menghasilkan auksin  dalam  jumlah  cukup,  namun  untuk  menunjang pertumbuhan  kultur  jaringan  mereka  membutuhkan tambahan  auksin  dari  luar,  yaitu  dari  penambahan pengatur  pertumbuhan  tanaman  dan  senyawa  organik (Hartati et al. 2017).
Rata-rata  saat  muncul  akar,  jumlah:  tunas;  akar; daun,  tinggi  tunas,  panjang  akar,  berat  plantlet  pisang Raja  Bulu  pada  perlakuan  IAA  dan  BAP  (Tabel  1) menunjukkan pertumbuhan tunas yang hampir seragam yang  menandakan  keberhasilan  pertumbuhan  bibit secara  in  vitro.  Menurut  Sulandjari  (2008)  terdapat berbagai pengaruh sitokinin terhadap proses metabolisme.  Sebuah  penelitian  yang  telah  dilakukan menunjukkan  bahwa  sitokinin  memainkan  peran penting  dalam  sintesis  asam  amino,  asam  nukleat  dan protein. Dengan demikian maka kemunculan tunas pun berbeda-beda tergantung dari konsentrasi BAP (sitokinin) yang diberikan.
Tabel  1  Rata-rata  saat  muncul  akar,  jumlah:  tunas;  akar;  daun,  tinggi  tunas,  panjang  akar,  berat plantlet pisang Raja Bulu pada perlakuan IAA dan BAP
Variabel Pengamatan Min Max ̅ Sd Saat Muncul Akar (hst) 5,75 13,50 9,63 5,90 Jumlah Tunas 1,50 3,25 2,38 1,30 Jumlah Akar 5,75 13,00 9,38 3,95 Jumlah Daun 3,75 7,00 5,38 2,16 Tinggi Tunas (cm) 17,30 21,08 19,19 3,16 Panjang Akar (cm) 14,55 23,70 19,13 5,51 Berat Plantlet (gram) 4,98 8,97 13,95 3,77
Keterangan: ̅ = Rata-rata; Sd = Simpangan Baku
Model  regresi  (Gambar  1)  yang  sesuai  untuk menggambarkan  pengaruh  interaksi  IAA  dan  BAP terhadap  saat  muncul  tunas  pisang  Raja  Bulu  yaitu model kurva linear dengan persamaan BAP 1 (R² = 1). Model  tersebut  menunjukkan  ketepatan  model  100% pada variabel saat muncul tunas oleh interaksi IAA dan
BAP  1,  pemberian  IAA  menunjukkan  kecenderungan mempercepat saat muncul tunas tanpa pemberian BAP (BAP  0  ppm).  Persamaan  BAP  2  (R²  =  0.995) menunjukkan  ketepatan  model  99%,  Pemberian  IAA memperlambat  saat  muncul  tunas  pada  BAP  2  ppm. Sedangkan  pemberian  IAA  bersamaan  dengan  BAP  3
(4 ppm) seperti yang ditunjukkan gambar 1 mempercepat  saat  muncul  tunas  pada  multiplikasi pisang Raja Bulu. Menurut Yatim (2016), sitokinin BAP dikenal  untuk  mengurangi  dominasi  meristem  apikal dan  menginduksi  pembentukan  tunas  adventif  dari eksplan meristematik pisang.
Keberhasilan  kultur  jaringan  ditandai  dengan  laju pertumbuhan yang meningkat. Seiring dengan
pertumbuhan  plantlet  maka  akan  terjadi  proses organogenesis. Pada kultur jaringan, kemunculan daun terjadi  setelah  terbentuknya  tunas  pada  eksplan. Berdasarkan  uji  anova  diketahui  pemberian  IAA maupun  BAP  saja  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap saat muncul daun, namun interaksi antara IAA dan BAP menunjukkan  adanya  pengaruh  nyata  saat  muncul daun  dengan  kombinasi  perlakuan  yang  diberikan
Gambar 1 Hasil Analisis Regresi Interaksi IAA dan BAP Terhadap Saat Muncul Tunas (HST)
Model  regresi  (Gambar  2)  yang  sesuai  untuk menggambarkan  pengaruh  interaksi  IAA  dan  BAP terhadap  saat  muncul  daun  pisang  Raja  Bulu  yaitu model  kurva  linear.  Persamaan  BAP  1  (R²  =  0.923) menunjukkan ketepatan model 92% dan pemberian IAA menunjukkan  kecenderunga  grafik  turun  yang  berarti semakin  ditambah  IAA  akan  semakin  mempercepat saat  muncul  daun  tanpa  adanya  penambahan  BAP. Persamaan  BAP  2  (R²  =  1),  model  tersebut menunjukkan    ketepatan  100%  terhadap  variabel  saat muncul  daun  yang  dipengaruhi  oleh  interaksi  IAA  dan BAP  bahwa  kombinasi  pemberian  IAA  dengan  BAP  2 ppm  memperlambat  kemunculan  daun.  Sedangkan
pemberian  IAA  dengan  BAP  4  ppm  seperti  yang ditunjukkan gambar 2 memiliki kecenderungan mempercepat kemunculan daun dengan pemberian IAA 0,5  ppm.  Saat  muncul  daun  tercepat  yaitu  pada pemberian  IAA  0,5  ppm  dan  BAP  4  ppm.  Hal  tersebut sejalan  dengan  pernyataan  Sitohang  (2006)  yang menyatakan bahwa daun akan terbentuk dan berkembang dengan sendirinya setelah tunas terbentuk. Secara alami, sitokinin dapat terbentuk pada akar dan ditranslokasikan ke bagian tanaman yang lain, salah  satunya  pada  daun.  Pembentukan  daun dipengaruhi  oleh  konsentrasi  sitokinin  BAP  yang diberikan.
Gambar 2 Hasil Analisis Regresi Interaksi IAA dan BAP Terhadap Saat Muncul Daun (HST)
Model  regresi  (Gambar  2)  yang  sesuai  untuk menggambarkan  pengaruh  interaksi  IAA  dan  BAP terhadap  saat  muncul  daun  pisang  Raja  Bulu  yaitu model  kurva  linear.  Persamaan  BAP  1  (R²  =  0.923) menunjukkan ketepatan model 92% dan pemberian IAA menunjukkan  kecenderunga  grafik  turun  yang  berarti semakin  ditambah  IAA  akan  semakin  mempercepat saat  muncul  daun  tanpa  adanya  penambahan  BAP. Persamaan  BAP  2  (R²  =  1),  model  tersebut
menunjukkan    ketepatan  100%  terhadap  variabel  saat muncul  daun  yang  dipengaruhi  oleh  interaksi  IAA  dan BAP  bahwa  kombinasi  pemberian  IAA  dengan  BAP  2 ppm  memperlambat  kemunculan  daun.  Sedangkan pemberian  IAA  dengan  BAP  4  ppm  seperti  yang ditunjukkan gambar 2 memiliki kecenderungan mempercepat kemunculan daun dengan pemberian IAA 0,5  ppm.  Saat  muncul  daun  tercepat  yaitu  pada pemberian  IAA  0,5  ppm  dan  BAP  4  ppm.  Hal  tersebut
30 25 20 15 10 5
0
sejalan  dengan  pernyataan  Sitohang  (2006)  yang menyatakan bahwa daun akan terbentuk dan berkembang dengan sendirinya setelah tunas terbentuk. Secara alami, sitokinin dapat terbentuk pada akar dan ditranslokasikan ke bagian tanaman yang lain, salah  satunya  pada  daun.  Pembentukan  daun dipengaruhi  oleh  konsentrasi  sitokinin  BAP  yang diberikan.

## Aklimatisasi
Aklimatisasi  dilakukan  secara  hidroponik  pada  tiga media  yang  berbeda  untuk  melihat  prosentase keberhasilannya.  Plantlet  dari  dalam  botol  kultur  yang telah  dipindah  pada  masing-masing  media  aklimatisasi kemudian diletakkan pada styrofoam yang berisi larutan nutrisi  dengan  konsentrasi  yang  telah  ditetapkan dipasaran.  Plantlet  hasil  multiplikasi  sebelumnya dengan  perlakuan  P1  sampai  P9  dari  dalam Laboratorium diaklimatisasi pada masing-masing perlakuan  media  substrat  dan  diulang  sebanyak  3  kali maka  terdapat  81  plantlet  yang  diaklimatisasi.  Pada akhir  penelitian,  jumlah  tanaman  yang  hidup  sebanyak 62. Hal tersebut menunjukkan keberhasilan aklimatisasi 76,5%.
Seperti  halnya  pendapat  dari  Rostiana  dan  Seswita (2007) bahwa salah satu keberhasilan dalam perbanyakan melalui kultur jaringan adalah pembentukan  akar.  Maka  hal  pertama  yang  akan mengalami penyesuaian dengan lingkungan (aklimatisasi)  adalah  akar  tanaman,  baik  secara jumlahnya,  panjang,  maupun  kemampuan  penyerapan nutrisi  oleh  akar  tersebut.  Maka  untuk  mengurangi kelayuan  yang  terjadi,  dilakukan  penutupan  dengan sungkup  plastik  UV  agar  tanaman  menyesuaikan  diri dengan lingkungan dari dalam laboratorium baik berupa suhu,  intensitas  cahaya,  maupun  kelembabannya sehingga  tidak  terjadi  banyak  penguapan  atau transpirasi  oleh  tanaman  dan  tanaman  mampu beradaptasi.  Triharyanto  et  al.  (2014)  menyatakan bahwa  aklimatisasi  berguna  untuk  mengurangi  stres, karena  perbedaan  lingkungan  in  vitro  dengan  kondisi lingkungan di lapangan.
Tinggi  tanaman  merupakan  ukuran  pertumbuhan yang  paling  mudah  diamati  (Sitompul  dan  Guritno 1995).  Tinggi  tanaman  merupakan  parameter  yang paling sering digunakan untuk mengetahui pertumbuhan  dan  pengaruh  suatu  perlakuan  terhadap hasil  tanaman.  Plantlet  pisang  hasil  multiplikasi  yang berhasil  dilakukan  aklimatisasi,  selanjutnya  dilakukan pengukuran  tinggi  tanaman  pada  semua  tanaman setiap  minggu  dan  dicatat,  kemudian  disajikan  analisis data pada tabel 2.
Berdasarkan tabel analisis kovarian  tersebut diketahui  bahwa  tinggi  tanaman  awal  mempengaruhi pertambahan  tinggi  tanaman  pada  aklimatisasi  namun media  aklimatisasi,  perlakuan,  dan  ulangan  tidak mempengaruhi  tinggi  tanaman.  Menurut  Fatmawati (2008),  bibit  yang  dihasilkan  dari  kultur  jaringan mempunyai  keunggulan,  antara  lain  mempunyai  sifat identik  dengan  induknya,  selain  itu  kecepatan  tumbuh bibit juga lebih cepat dibandingkan dengan perbanyakan konvensional. Keunggulan tersebut didukung  juga  dengan  pertumbuhan  tanaman  yang
seragam.  Pada  tabel  2  dapat  dilihat  tinggi  tanaman berdasarkan  perlakuan  di  laboratorium,  setelah  di aklimatisasi  tidak  berpengaruh  nyata.  Menurut  Marlina dan Rusnandi (2007) pada penelitian planlet anthurium, keberhasilan  aklimatisasi  dipengaruhi  oleh  penyiapan planlet  yang  baik  selama  masa  multiplikasi  dalam laboratorium  dan  proses  aklimatisasi  di  lapang  secara bertahap,  begitu  juga  partambahan  tinggi  tanaman yang merupakan indikator untuk menunjukkan keberhasilan aklimatisasi.
Semakin  banyak  jumlah  daun  maka  akan  semakin banyak tanaman menghasilkan fotosintat untuk cadangan  makanan.  Tanaman  yang  berdaun  banyak transpirasinya  juga  lebih  besar,  sehingga  akan  lebih mudah mengalami kelayuan. Berdasarkan hasil analisis kovarian  tabel  2,  jumlah  daun  awal  dan  ulangan berpengaruh  terhadap  jumlah  daun  pada  akhir  masa aklimatisasi. Pemberian BAP dan IAA pada multiplikasi yang  telah  dilakukan  tidak  mempengaruhi  jumlah  daun pada  aklimatisasi  dengan  tiga  media  berbeda. Berdasarkan  penelitian,  tanaman  yang  menghasilkan rata-rata  jumlah  daun  terbanyak  adalah  tanaman pisang  Raja  Bulu  yang  diaklimatisasi  pada  media Bagase. Hal tersebut dikarenakan media bagase lunak, mudah  menyerap,  dan  menahan  larutan  nutrisi sehingga  akar  tanaman  dapat  beradaptasi  dengan mudah.  Seperti  percobaan  yang  dilakukan  oleh Julhendri  et.  al.  (2013),  menunjukkan  bahwa  jumlah daun  yang  dihasilkan  banyak  pada  tanaman  yang ditanam  di  media  cocopeat  dan  pakis  yang  mudah mengikat air, memiliki aerase dan  draenase  yang  baik, serta  bertekstur  lunak  sehingga  mudah  ditembus  oleh akar tanaman.
Tanaman  pisang  memiliki  batang  semu,  yang terbentuk  dari  pelepah  daun  yang  saling  melingkupi, sedangkan  batang  aslinya  terdapat  pada  pangkal tanaman  dekat  dengan  bonggol  dan  berada  didalam media  tanam.  Pengukuran  diameter  batang  ini dilakukan  dengan  cara  mengukur  batang  semu tanaman  pisang  yang  berada  pada  pangkal  batang dibawah  pelepah  daun  pertama.  Fotosintat  hasil fotosintesis  umumnya  akan  tersimpan  di  bagian  umbi dan  batang  tanaman,  begitu  juga  dengan  tanaman pisang.  Sehingga  tanaman  dengan  daun  yang  banyak dapat  berfotosintesis  dengan  optimal  dan  memiliki ukuran batang yang relatif lebih besar.
Hasil  analisis  kovarian  diameter  batang  tabel  2 menunjukkan  bahwa  diameter  batang  pada  akhir aklimatisasi dipengaruhi oleh diameter batang awal dan ulangan yang digunakan. Pemberian BAP dan IAA tidak berpengaruh  nyata  terhadap  diameter  batang  pada semua media aklimatisasi yang digunakan. Tunas yang tinggi  dan  vigor  menandakan  tunas  tersebut  sehat  dan cadangan  makanan  yang  terdapat  pada  batang  lebih banyak  dibanding  yang  tidak  tinggi.  Cadangan makanan dapat digunakan untuk metabolisme sementara  hingga  tunas  dapat  memperoleh  hara  dan air  dari  lingkungan  tumbuh  yang  baru  (Julhendri  et.  al. 2013).  Penggunaan  media  yang  bisa  menyerap  dan menyimpan  nutrisi  lebih  banyak  akan  membuat  akar lebih mudah menyerap nutrisi sehingga akan mendukung  pertumbuhan  tanaman  terutama  diameter batang.  Menurut  Muliawati  et  al.  (2017)  media
aklimatisasi  bagasse  dan  sekam  kukus  yang  tersusun atas  selulosa  akar  tanaman  mampu  menyerap  nutrisi sehingga  tersedia  bagi  perakaran  planlet  pisang  Raja Bulu.
Tabel  2  Hasil  Analisis  kovarian  pengaruh  Konsentrasi IAA dan BAP pada pisang Raja Bulu terhadap variabel tinggi tanaman, jumlah daun, dan diameter batang pada aklimatisasi Perlakuan Variabel Pengamatan Tinggi Tanaman Jumlah Daun Diameter Batang Perlakuan Laboratorium 0,402 ns 0,117 ns 0,076 ns Awal aklimatisasi (Concomitant variable) 0,004* 0,056* 0,000* Ulangan 0,147 ns 0,005* 0,001* Media 0,431 ns 0,794 ns 0,232 ns
Adanya  kompetisi  antar  tanaman  dalam  menyerap nutrisi dan cahaya matahari, berbeda dengan lingkungan di dalam laboratorium ketika plantlet berada pada tahap multiplikasi sehingga pada tahap aklimatisasi  ini  individu  tanaman  akan  beradaptasi  dan saling  mengalami  kompetisi  selama  pertumbuhan berlangsung.
Berdasarkan pengamatan selama penelitian, tanaman  yang  diaklimatisasi  pada  media  pelepah pisang  memiliki  ciri  khas  batang  yang  ramping  dan relatif lebih tinggi dibanding dengan plantlet pada media aren  dan  bagase.  Tanaman  yang  diaklimatisasi  pada media  bagase  memiliki  diameter  batang  yang  lebih besar dan pertumbuhan tanaman terlihat paling subur.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Terdapat  interaksi  antara  perlakuan  IAA  dan  BAP terhadap  variabel  saat  muncul  tunas  dan  saat  muncul daun.  Kombinasi  perlakuan  tanpa  IAA  dan  BAP  2  ppm menghasilkan  jumlah  tunas  terbanyak  namun  tidak berbeda  nyata  dengan  perlakuan  lainnya.  Pemberian IAA  0,5  ppm  bersamaan  dengan  BAP  4  ppm mempercepat saat muncul tunas dan saat muncul daun pada multiplikasi pisang Raja Bulu. Pemberian IAA dan BAP  terhadap  variabel  tinggi  tanaman,  jumlah  daun, dan diameter batang pada aklimatisasi tidak berpengaruh  nyata  sedangkan  tinggi  tanaman  awal, jumlah  daun  awal,  dan  diameter  batang  awal mempengaruhi  hasil  akhir.  Prosentase  keberhasilan akimatisasi dilapang sebesar 76,5%

## Saran
Saran  yang  diberikan  adalah  penggunaan  IAA  dan BAP  yang  lebih  tinggi  lagi  pada  multiplikasi  agar menghasilkan  tunas  yang  banyak.  Pada  aklimatisasi sebaiknya  dilakukan  pemilihan  media  yang  tepat untuk meningkatkan keberhasilannya.

## DAFTAR PUSTAKA
Davies P J 2004.  Plant  hormones: biosynthesis, signal transduction,  action.  London:  Kluwer  Academic
Publisher.
Fatmawati  A  2008.  Kajian  konsentrasi  BAP  dan  2,4-D terhadap indukasi kalus tanaman Artemisia annua L . secara  in  vitro.  Fakultas  Pertanian  Universitas Sebelas Maret. Surakarta.
Gaba V B 2005. Plant growth regulators in plant tissue culture and development. in : trigiano and gray. Plant Development  and  Bioechnology.  London:  CRC Press.
Hartati  S,  Arniputri  R  B,  Soliah  L  A  and  Cahyono  O 2017.  Effects  of  organic  additives  and  naphthalene acetid  acid  (NAA)  application  on  the  in  vitro  growth of  Black  orchid  hybrid  (Coelogyne  pandurata Lindley). Bulgarian J of Agricultural Science. 23 (6): 951–957
Hussain A, Qarshi I A, Nazir H, dan Ullah I 2012. Plant tissue  culture:  current  status  and  opportunities. www.intechopen.com.  Diakses  pada  17  Juni 2017.
Julhendri,  Gultom  H,  dan  Fathurrahman  2009. Aklimatisasi  tanaman  Anthurium  ( Anthurium Sp.) dengan  berbagai  media  tumbuh  dan  pupuk  daun Growquick. J dinamika pertanian. 28(2): 103-112. Karjadi dan Buchory  2008. Pengaruh komposisi media dasar,  penambahan  bap,  dan  pikloram  terhadap induksi  tunas  bawang  merah.  J  Hortikultura.  18(1): 1-9.
Marlina    N,  Rusnandi  D.  2007.  Teknik  aklimatisasi planlet  anthurlum  pada  beberapa  media  tanam. Buletin Teknik Pertanian. 12(1): 38-40.
Meldia dan Wahyuni 2014.  Perbanyakan  benih pisang ambon melalui kultur jaringan.
http://balitbu.litbang.pertanian.go.id.  Diakses  pada 14 Juni 2017.
Muliawati E S, Arniputri R B, Nandariyah, Utomo S N C. 2017.  Aklimatisasi  planlet  pisang  varietas  raja  bulu kuning berbasis sistem hidroponik substrat . Agrotech Res J 6(2): 1-6.
Rostiana  O,  Seswita  D  2007.  Pengaruh  Indole  Butyric Acid  dan  Naphtaleine  Acetic  Acid  terhadap  induksi perakaran tunas Piretrum [ Chrysanthemum Cinerariifolium  (Trevir.)vis. ]  klon  Prau  6  secara in vitro .  Buletin  penelitian  tanaman  rempah  dan  obat (BUL LITTRO).
Sitohang  N  2006.  Multiplikasi  propagula  pisang barangan  ( Musa  paradisiacal  L. )  berbagai  jumlah tunas,  dalam  media  MS  yang  diberi  BAP  pada berbagai  konsentrasi.  Fakultas  Pertanian  UNIKA Santo Thomas Sumatera Utara, Medan. J Penelitian Bidang Ilmu Pertanian. 4(1): 11-17.
Sitompul  S  M,  Gritno  B  1995.  Analisis  pertumbuhan tanaman. Yogyakarta: UGM Press.
Sulandjari  2008.  Ekofisiologi  dan  Budidaya  tanaman obat pule pandak ( R. serpentina benth .). Surakarta: UNS Press.
Triharyanto E, Budiastusi S, Purnomo D 2014. Effect of Paclobutrazol and Auxin on Growth Plantlet of Garlic Varieties in in Vitro Culture. J of Agricultural Science and Technology. 762-766.
Yatim  H  2016.  Multiplikasi  pisang  raja  bulu  ( Musa paradisiaca L.  AAB  group)  pada  beberapa konsentrasi  benzyl  aminopurine  (BAP)  secara  in vitro. J Agroteknologi. 4(3): 1989-1995.