## IDENTIFIKASI KANDUNGAN POLISAKARIDA BETA GLUKAN PADA JAMUR GANODERMA (Ganoderma lucidum)

## Novi Fajar Utami, Sri Wardatun, Fitri Atika Suri
Program Studi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Pakuan
Email : novi.utami@unpak.ac.id

## ABSTRAK
Jamur ganoderma ( Ganoderma lucidum ) menghasilkan senyawa aktif polisakarida beta glukan  yang  berkhasiat  sebagai  antihiperglikemia.  Tujuan  penelitian  ini  untuk mengidentifikasi  senyawa  polisakarida  beta  glukan  serta  mengukur  kadar  rendemen ekstrak air dan ekstrak alkali dari jamur ganoderma. Ekstraksi dilakukan dengan metoda dekoks untuk pelarut air dan metoda maserasi untuk pelarut alkali. Identifikasi dilakukan berdasarkan panjang gelombang maksimum dan gugus fungsi yang terdapat pada isolat hasil Kromatografi Lapis Tipis (KLT) yang dibandingkan dengan senyawa beta glucan standar dari tanaman barley .  Rendemen hasil ekstraksi dengan pelarut air adalah sebesar 2,8% dan rendemen  hasil ekstraksi dengan pelarut  alkali adalah sebesar 5,309%. Hasil identifikasi dengan KLT didapat nilai Rf untuk ekstrak air 0,5875; untuk ekstrak alkali 0,8; dan standar barley 0,625. Panjang gelombang maksimum isolat ekstrak air 268 nm, isolat ekstrak alkali 268 nm dan standar barley 265 nm. Gugus fungsi yang diperoleh baik isolat ekstrak air dan  isolat ekstrak alkali  adalah O-H, C-H, C-OR (eter) yang hasilnya sama dengan standar barley yang menunjukkan adanya senyawa beta glukan.
Kata kunci : Ganoderma lucidum , beta glukan, standar barley

## COMPOUND IDENTIFICATION OF POLISACCHARIDA BETA GLUCAN CONTENT IN MUSHROOM GANODERMA (Ganoderma lucidum)

## ABSTRACT
Ganoderma  mushroom  ( Ganoderma  lucidum )  produce  the  beta  glucans  polisaccharide active  compound  which  show  strong  antihiperglikemic  effect.  The  purpose  of  this research were to identified the beta glucans polysaccharide compounds and  measured the concentrate  of    extract  obtained  from  water  and  alkali  extractions.  The  beta  glucan polysaccharide  compound  was  identified  using  spectrophotometry  and  thin  layer chromatography (TLC) methods, using beta glucans barley as a standard. The decoction method  was  applied  for  water  solvent  and  maceration  methods  for  alkali  solvent.  The concentrate mass obtained from water extract and alkali extract were 2.8% and 5.309% respectively. The Rf detected on chromatogram were 0.5875 for water extract and 0.8 for alkali  extract  meanwhle    the  barley  standard  has  0.625  Rf  value.  The  maximum wavelength  of  isolates  from  water  and  alkali  extracts  were  268  nm  and  268  nm respectively meanwhile the Barley standard has 265 nm. The functional groups obtained from  both  water  and  alkali  extract  isolates  were  O-H,  C-H,  C-OR  (eter)  which  were similar to the barley standard. All the present results indicating the presence of beta glucan compound in ganoderma mushroom.
Keywords: Ganoderma lucidum, beta glucan, barley standard .

## PENDAHULUAN
Ganoderma   adalah  jamur  yang mudah  ditemui  disemua  iklim,  tumbuh pada  kayu  dengan  atau  tanpa  batang, berbentuk  seperti    kipas  berwarna  kuning atau cokelat pada lapisan dalam dan umum digunakan  sebagai  bahan  obat-obatan tradisional Asia. Komposisi jamur terutama  terdiri  dari  air, protein,  lemak, karbohidrat, serat, abu, dan beberapa jenis vitamin danmineral. Seperti
kalsium, kalium, fosfor, magnesium, selenium,  zat  besi,  zinc,  dan  tembaga. Beberapa jenis jamur ganoderma mengandung  bahan  bioaktif  spesifik seperti  ganoderan    asam  ganodermin  dan polisakarida germanium
yangtidak diperoleh  dari    tumbuhan  lain  (Jaelani,
2008). Polisakarida adalah metabolit primer tumbuhan  berupa  rantai  atau  polimer  dari monomer-monomer monosakarida. Polisakarida di alam dihasilkan oleh semua tumbuhan
dan sebagian besar
mikroorganisme  seperti  pada  bakteri, kapang, jamur dan alga,  (Prahastuti et al., 2001). Glukan adalah suatu jenis polisakarida  dengan  monomer  berupa  D- glukosa yang banyak terdapat pada dinding sel bakteri, tumbuhan dan khamir.
Polisakarida
glukan memiliki aktifitas biologis imunomodulator dan anti hiperglikemia  (Wahyudi  dan  Priyanro, 2010).  Berdasarkan  penelitian  Susanto (1998) jamur Ganoderma memiliki kandungan utama senyawa polisakarida, terpenoid,  asam  ganodermik,  germanium, protein, adenosin dan serat  yang memiliki aktivitas sebagai antitumor, meningkatkan oksigen  dalam  otak,  menyeimbangkan fungsi bioelektrik, menurunkan kadar gula dan kolesterol dalam darah,
menghilangkan  racun  dan  menghaluskan kulit. Hasil penelitian Indriani et al., (2015) menyatakan  bahwa  jamur  ganoderma dengan  kandungan  terpenoidnya  dapat menghambat aktivitas enzim
α- glukosidase  dan  dapat  menurunkan  kadar
glukosa  darah  tikus  yang  telah  diinduksi hiperglikemia.
Isolasi  dan  identifikasi  polisakarida beta  glukan  dapat  dilakukan  dengan metode  ekstraksi    berdasarkan  pada  sifat kelarutannya.  Menurut  Widyastuti  (2011) senyawa aktif beta glukan mempunyai sifat larut  dalam  air  dan  alkali  sehingga polisakarida  beta glukan dapat diekstraksi dengan  cara  dekoksi  untuk  ekstraksi dengan  pelarut    air  dan  maserasi  untuk ekstraksi  dengan  pelarut  alkali    (NaOH). Ekstrak  diisolasi  dengan  menggunakan metode  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT). Isolat  beta  glukan  selanjutnya  dilakukan identifikasi dengan menggunakan spektrofotometri UV-Vis dan FTIR (Khopkar,2003). Hasil dari analisis dibandingkan  dengan  standar  Barley, karena  menurut  Widyastuti  (2009)  Barley merupakan salah satu tanaman selain Oats yang  memiliki  kandungan  beta  glukan paling tinggi.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilakukan di
Laboratorium Farmasi Universitas Pakuan Bogor  dan  di  Laboratorium  Akademi Kimia Analis Bogor.

## Bahan
Jamur  Ganoderma  kering,  standar Barley, akuades, natrium hidroksida, asam asetat,  etanol  80%,  astonitril,  butanol, metanol, serta pereaksi untuk uji fitokimia dan uji  karbohidrat.

## Alat
Grinder,  oven,  tanur,  plat  KLT,
chamber , sentrifugase (Camag ® ), freeze dryer (Eyela ® ),  spektrofotometri UV-Vis (Jasco ® ), spektrofotometri
FTIR
(Bruker ® ), refrigerator ,  beserta  alat-alat gelas yang lainnya.
Cara Kerja
Pembuatan Ekstrak Ekstraksi  dilakukan berdasarkan metoda  Widyastuti  (2011)  yaitu  metode dekoksi  untuk    pelarut  air  dan  maserasi untuk  pelarut  alkali  dengan  perbandingan pelarut 1:10. Sebanyak 100 gram simplisia diekstraksi  dengan  1000  ml  akuades  pada suhu  100°C  selama  1  jam  kemudian disaring. Filtrat diinkubasi dengan penambahan 500 ml etanol 80% pada suhu 4°C  selama  1  hari.  Ekstrak  kemudian disentrifugasi dan endapannya dikeringkan dengan mesin freeze dryer.
Residu ekstrak air kemudian digunakan  untuk  ekstraksi  alkali.  residu ditambahkan natrium hidroksida sebanyak 1000 ml kemudian didiamkan selam 2 jam, sesekali dilakukan
pengadukan, selanjutnya  disaring.  Filtrat  dinetralisasi dengan penambahan asam asetat kemudian diinkubasi  pada  suhu  4°C  selama  1  hari. Ekstrak  disentrifugasi  dan  endapannya dikeringkan  dengan  menggunakan freeze dry .  Dihitung  masing–  masing  rendemen ekstrak air dan ekstrak alkali.
Pemeriksaan  mutu  ekstrak  meliputi: rendemen ekstrak, kadar air, kadar abu, uji fitokimia  simplisia  dan  ekstrak,  uji karbohidratn ekstrak.
Analisis Senyawa Beta Glukan
dengan  Kromatografi  Lapis  Tipis (KLT) KLT Analitik
Plat  silika  disiapkan  dan  diatur jarak  antara  batas  penotolan  dan  batas akhir elusi. Chamber diisi dengan eluen asetonitril:butanol:air  (3:6:1)  kemudian dijenuhkan.  Plat  yang  telah  ditotolkan dengan  sampel  dan  standar  Barley dikembangkan  dalam chamber sampai eluen  mencapai batas akhir elusi. Hasil elusi  kemudian  diamati  menggunakan sinar  UV  254  nm  dan  366  nm  dan dihitung  nilai  Rf  dan  dibandingkan dengan nilai Rf standar barley (Mursito, 2012).  Standar barley adalah  senyawa
polisakarida beta glukan yang diperoleh dari tanaman barley .

## KLT Dua Dimensi
Noda pada KLT analitik  dikerok dan ditambahkan  dengan  pelarut  ekstraksi masing-masing    kemudian  disentrifugasi dengan penambahan eluen asetonitril:butanol:air (6:3:1) untuk ektrak air  dan  eluen      asetonitril:methanol  (6:4) untuk  ekstrak  alkali.    Biarkan  masing- masing eluen hingga jenuh. Isolat kemudian  ditotolkan  pada  plat  kemudian dilakukan  elusi  pertama,  setelah  elusi pertama selesai kemudian dilanjutkan elusi kedua.  Hasil  elusi  kedua  diamati  dengan sinar UV pada panjang gelombang 254 nm dan 366 nm, dan dihitung nilai Rf masing- masing elusi. Isolat tunggal hasil elusi dua dimensi  kemudian  diperbanyak  dengan KLT preparatif.

## Identifikasi Senyawa Beta Glukan dengan Spektrofotometri UV-Vis
Disiapkan isolat dari masing-masing ekstrak air dan ekstrak alkali serta standar Barley. Blanko akuades/NaOH dimasukan kedalam  kuvet  pertama,  sampel  ekstrak dimasukan kedalam kuvet kedua kemudian dilakukan  pemindaian  ( scanning ).  Hasil panjang  gelombang  maksimum  akan terdeteksi beserta nilai absorbansi.

## Identifikasi  Senyawa  Beta  Glukan dengan Spektrofotometri FTIR
Masing-masing sebanyak 2 ml isolat sampel  dan  standar  dicampur  dengan  200 mg  serbuk  KBr  kering  hingga  homogen. Campuran tersebut kemudian dimasukkan kedalam  pencetak  cakram,  dilanjutkan dengan scanning cakram  KBr  dengan frekuensi antara 400 – 4000 cm -1 .

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Ekstraksi
Rendemen  hasil  ekstraksi  sample kering jamur ganoderma dengan pelarut air adalah  sebesar  2,8%  dan  rendemen  hasil
ekstraksi  dengan    adalah  sebesar  5,309%. Hasil ini lebih tinggi dibandingkan dengan penelitian  yang dilakukan oleh Indriani et al. (2015)  yang  mendapatkan  rendemen sebesar 0,24% dari ekstrak dengan pelarut air.  Proses  ekstraksi  yang  dilakukan berdasarkan  kelarutan  senyawa  dalam pelarut yang digunakan dapat meningkatkan hasil dari rendemen ekstrak yang didapat (Widyastuti, 2009).
Penampilan  fisik  rendemen  ekstrak  jamur ganoderrma dapat dilihat pada Gambar 1.
a b
Gambar 1. a) ekstrak Alkali, b) ekstrak Air
Hasil  pengujian  kadar  air  ekstrak jamur  Ganoderma  dengan  pelarut  air adalah  5,2345%  dan  kadar  air    ekstrak dengan  pelarut  alkali  adalah  7,3018%. Hasil ini memenuhi syarat kadar air untuk ekstrak  kering  jamur  Ganoderma  yaitu 8,13% (Pranamuda, 2012).
Hasil  uji  fitokimia  menunjukan bahwa jamur ganoderma positif mengandung senyawa golongan terpenoid. Hasil  yang  diperoleh  sesuai  dengan  hasil penelitian  sebelumnya  yang  menyatakan bahwa  jamur  Ganoderma mengandung senyawa  golongan  terpenoid  (Indriani, 2015).
Hasil  uji  karbohidrat  menunjukkan bahwa  ekstrak  mengandung  glukosa  yang merupakan monomer
penyusun polisakarida  beta  glukan  (Akhirunnisa, 2010).
Hasil Analisis Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Hasil  dari  KLT  analitik  diperoleh nilai  Rf  untuk  ekstrak  air  0,5875,  ekstrak alkali  0,8  dan  standar  Barley  0,625. Berdasarkan  perbandingannya  terhadap standar  nilai  Rf  tidak  jauh berbeda menandakan senyawa yang dimiliki hampir sama. Hasil dari KLT analitik dapat dilihat pada Gambar 2.

## A               S               B
Gambar 2. (A) Elusi Ekstrak air (B) Elusi Ekstrak alkali
(S) Elusi Standar Barley
Elusi pertama                       Elusi kedua
Gambar 3 : Hasil KLT dua dimensi isolat air, isolat alkali dan standar Barley
Hasil isolat KLT analitik kemudian dielusi dengan  KLT  dua  dimensi.  KLT  dua dimensi dilakukan untuk memisahkan beta glucan  dari  senyawa-senyawa  lain  yang memiliki kelarutan sama  sehingga didapat senyawa  beta  glukan  agar  senyawa  yang lebih murni. Hasil KLT dua dimensi dapat dilihat pada Gambar 3.
Hasil Analisis Spektrofotometri UV-Vis Berdasarkan  hasil scanning dengan
spektrofotometer
diperoleh panjang
gelombang  maksimum  masing-masing isolat  hasilnya tidak berbeda jauh dengan standar.  Hal  ini  membuktikan  bahwa senyawa yang terdapat pada isolat ekstrak air dan alkali adalah sama dengan standar yaitu beta glukan. Hasil panjang gelombang  maksimum  dapat  dilihat  pada Tabel 1.
Tabel 1. Panjang Gelombang Maksimum
Panjang Gelombang Isolat Maksimum (nm) Standar 265 Ekstrak air 268 Ekstrak alkali 268

## Hasil Analisis Spektrofotometri FTIR
Analisis  beta  glukan  dilakukan dengan  membandingkan peak (puncak) yang  muncul  pada  isolat  sampel  dengan peak standar Barley. Hasil spektrum FTIR dapat dilihat pada Gambar 4.
A B C
Gambar 4 : (A) Isolat ekstrak air, (B) Isolat ekstrak alkali,
(C) Isolat standar Barley
Spektrum yang diperoleh
menunjukkan  bahwa  sampel  dan  standar memiliki  gugus  fungsi  yang  sama  yaitu gugus  O-H,  C-H,  dan  C-OC  (eter).  Hasil tersebut  mengkonfirmasi  bahwa  pada sampel    terdapat  gula  yang  berikatan dengan ikatan glikosida  yang menandakan
bahwa  senyawa  tersebut  adalah  beta glukan.

## KESIMPULAN DAN SARAN Simpulan
Ekstraksi  berdasarkan  kelarutan terhadap  air  dan  alkali  menghasilkan rendemen  ekstrak  air  sebesar  2,8%dan ekstrak  alkali  5,309%.  Berdasaran  data spektrum  FTIR  isolat  ekstrak  air  dan alkali  mengandung  senyawa  beta  glukan yang  ditunjukkan  oleh  adanya  ikatan glikosida yang ditunjukkan oleh gugus O- H, C-H dan C-OC (eter).

## Saran
Perlu  dilakukan  analisis  lanjutan menggunakan spektrofotometri NMR dan
LCMS untuk mengetahui struktur molekul  senyawa  beta  glukan.  Perlu dilakukan  juga  penelitian  lanjutan  untuk mengetahui  aktifitas  antihiperglikemik ekstrak jamur Ganoderma  secara in vitro dan in vivo.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terimakasih kami sampaikan kepada Program Studi Farmasi, Universitas Pakuan, Bogor.

## DAFTAR PUSTAKA
Akhirunnisa, D.F. 2010. Uji Hepatoprotektif Ekstrak Etanol 50% Jamur  Lingzhi  ( G.  lucidum )  Pada Tikus Jantan Yang Diinduksi Parasetamol. Skripsi. Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Surakarta. Indriani,  R.D.,  N.  Suarsan.  dan  I.W. Sudira.  2015.  Kemampuan  Ekstrak
Jamur Lingzhi Dalam  Menghambat α-Glukosidase  dan  Menurunkan Kadar  Gula  Darah  Pada  Tikus Hiperglikemia. Jurnal Veteriner . 16
(2): 220-226.
Jaelani.  2008. Jamur  Berkhasiat  Obat . Pustaka Obor Populer. Jakarta. Hal. 60-78.
Khopkar,  S.M.  2003. Konsep  Dasar Kimia Analitik . Universitas Indonesia  Press.  Jakarta.  Hal  231-
237. Mursito, B.  dan  R.  Sari.  2012.  Elusidasi Struktur Senyawa Beta Glukan Dari Serat  Jamur  Shitake  ( Lentinus edodes  Berk. )  yang  larut  dalam  air menggunakan metode spektrometri. Fitofarmaka . 2 (1): 42-52. Prahastuti,  S.,  R.  Tambunan  dan  R. Rahayu.  2001. Jamur:   Kandungan Kimia Dan Khasiat. Pusat Dokumentasi  dan  Informasi  Ilmiah LIPI. Jakarta. Pranamuda, H., R. Giami dan A.  Pradana. 2012.      Aplikasi      Beta      Glukan Sebagai Bahan Berkhasiat Immunomodulator dan Anti Kanker. Prosiding InSINAS Susanto, A. 1998.  Sifat – Sifat Biokimia Dan Fabrikasi Ganoderma Jamur Pathogen Tumbuhan. Jurnal  Perlindungan Tanaman Indonesia . 4 (2): 83-94.
Wahyudi,  P.  dan  P.  Priyanro.  2010.  Uji Aktivitas Imunomodulator Polisakarida  Jamur  Tiram  Putih ( Pleurotus  ostreatus )  Dan  Jamur Shiitake ( Lentinula edodes ) Berdasarkan Aktivitas Dan Kapasitassel Makrofag Peritoneum
Mencit Secara Invitro. Farmasains. 1 (1): 7-11.
Widyastuti,  N., B.Teguh, G. Reni,
I. Hengky dan W. Priyo. 2011. Analisa kandungan  beta glukan  larut air dan larut  alkali  dari  tubuh buah jamur tiram ( Pleurotus  ostreatus )  dan Shiitake  ( Lentinula  edoses ). Jurnal Sains  dan  Teknologi  Indonesia. 13 (3): 82-191 . Widyastuti, N. 2009. Jamur ShiitakeBudidaya Dan
Pengolahan Si Jamur  Penakluk Kanker . Lily Publisher. Jakarta