(JPP) Jurnal Kesehatan Poltekkes Palembang Vol. 18, No. 1, Juni 2023, e ISSN 2654-3427 DOI: https://doi.org/ 10.36086/jpp.v18i1

## IDENTIFIKASI METALLO-β-LACTAMASE (MBL) PADA ISOLAT BAKTERI GRAM NEGATIF DI RSUP MOH. HOESIN PALEMBANG

## IDENTIFICATION OF METALLO-β-LACTAMASE (MBL) IN GRAM NEGATIVE BACTERIA ISOLATES IN HOSPITAL OF MOH. HOESIN PALEMBANG
Info artikel      Diterima: 05 Mei 2023      Direvisi: 15 Mei 2022       Disetujui: 10 Juni 2023
Venny Patricia 1 , Ahmad Yani 2 1,2 Poltekkes Kemenkes Banten, Banten, Indonesia (E-mail penulis korespondensi:venny.tlmpolkesten2@gmail.com)

## ABSTRAK
Latar  Belakang: Resistensi  antibiotik  merupakan  ancaman  bagi  efektifitas  pencegahan  dan pengobatan terhadap penyakit infeksi. Setelah penemuan pertama antibiotik beta laktam, jumlah infeksi oleh  bakteri  penghasil  ESBL  terus  meningkat  di  seluruh  dunia.  Klasifikasi  Ambler  membagi  enzim metallo-beta-lactamase (MBL) menjadi tiga kelas, dengan kelas B yang paling umum dan didominasi oleh  bakteri  Enterobactericeae,  yang  merupakan  bagian  dari  bakteri  gram  negatif.  Dengan menggunakan metode fenotif dan genotif untuk mengetahui prevalensi enzim MBL pada isolat bakteri gram negatif, kita dapat mendapatkan data tentang resistensi antibiotik ESBL terutama MBL.
Metode: Penelitian ini berupa studi laboratorik dengan survei klinis secara cross sectional . Konfirmasi fenotif membandingkan Double-disk synergy test (DDST) dengan Combined disk synergy test (CDST). Konfirmasi secara genotif dengan cara mendeteksi gen IMP, VIM dan NDM.
Hasil: Total 87 isolat didapatkan hasil uji DDST positif sebanyak 44(50,6%) isolat dan CDST sebanyak 87(100%) isolat. Konfirmasi MBL secara genotif didapatkan positif hanya pada gen IMP 7(7,9%) isolat, sedangkan pada gen VIM dan NDM semuanya negatif. Data secara  fenotif pada sampel yang positif gen IMP, didapatkan sebagai berikut yaitu DDST positif sebanyak 4(4,5%) dan CDST positif sebanyak 7(7,9%).  Sensitifitas  dari  perbandingan  dua  metode  tersebut  diperoleh  hasil  sebanyak  51.1%  dan Spesifisitas  sebanyak  100%.  bakteri  terbanyak  yaitu K.pneumonia 45(51,1%)  dan E.coli 31(35,2%). Sampel terbanyak sputum 34(38,6%); pus 18(20,5%) serta urine 13(14,8%). Kesimpulan: Metode konfirmasi secara fenotif yang lebih mudah dipakai yaitu menggunakan metode CDST dan masih terdapat gen positif MBL pada isolat gram negatif.
Kata kunci : CDST, DDST, IMP, VIM, NDM

## ABSTRACT
Background: Antibiotic  resistance  threatens  the  effectiveness  of  preventing  and  treating  infectious diseases.  After  the  first  discovery  of  beta-lactam  antibiotics,  the  number  of  infections  by  ESBL- producing  bacteria  has  continued  to  increase  worldwide.  The  Ambler  classification divides  metallo- beta-lactamase (MBL) enzymes into three classes, with class B being the most common and dominated by Enterobacteriaceae bacteria, a subset of gram-negative bacteria. By using phenotypic and genotypic Methods:  to  determine  the  prevalence  of  MBL  enzymes  in  gram-negative  bacterial  isolates,  we  can obtain data on ESBL antibiotic resistance, especially MBL. Methods: This study was a laboratory study with  a  cross-sectional  clinical  survey.  This  research  looks  forward  to  phenotype  confirmation comparing the Double-disk synergy test (DDST) with the Combined disk synergy test (CDST). Confirm genotype by detecting IMP, VIM and NDM genes.
Results: The research have 87 isolates obtained positive DDST test results for 44 (50.6%) isolates and 87 (100%) isolates of CDST. Only 7(7.9%) isolates confirmed positive MBL, while all were negative for the VIM and NDM genes. The phenotypic data on positive samples for the IMP gene were obtained as  follows,  namely  4(4.5%)  positive  DDST  and  7(7.9%)  positive  CDST.  The  sensitivity  of  the comparison  of  the  two  methods  yielded  51.1%  and  a  specificity  of  100%.  the  most  bacteria  were K.pneumonia  45(51.1%)  and  E.coli  31(35.2%).  Most  samples  of  sputum  were  34  (38.6%),  pus 18(20.5%) and urine 13(14.8%).
Conclusion: An easier phenotypic confirmation method is the CDST method, and there are still positive MBL genes in gram-negative isolates.
(JPP) Jurnal Kesehatan Poltekkes Palembang Vol. 18, No. 1, Juni 2023, e ISSN 2654-3427 DOI: https://doi.org/ 10.36086/jpp.v18i1

## Keywords: CDST, DDST, IMP, VIM, NDM

## PENDAHULUAN
Resistensi antibiotik merupakan ancaman bagi efektifitas  pencegahan  dan  pengobatan  terhadap penyakit  infeksi.  Penggunaan  antibiotik  yang berlebihan  sudah  sangat  umum  terjadi  di  dunia, termasuk di Indonesia. Prevalensi penyalahgunaan antibiotik sangat umum terjadi di lingkungan rumah sakit yaitu sekitar 40-50% yang tidak  sesuai  dengan  pedoman  pemakaian antibiotik  lokal  dan  tidak  sesuai  dengan  hasil kultur  mikrobiologi (1) .  Resistensi  bakteri didasarkan pada dua faktor utama. Yang pertama adalah kemampuan bakteri untuk mengembangkan pertahanan diri terhadap antibiotik, dan yang kedua adalah peran manusia, yang  membantu  perkembangan  bakteri  melalui penggunaan  antibiotik  yang  tidak  tepat  dan berlebihan.  Penggunaan  antibiotik  yang  tidak terkontrol  pada  pasien  juga  dapat  menyebabkan resistensi bakteri, toksisitas, dan rawat inap yang lama,  yang  dapat  menyebabkan  kematian  dan morbiditas.  Antibiotik  golongan  beta  laktam merupakan  salah  satu  antibotik  yang  banyak digunakan di zaman sekarang. Setelah penggunaan  ini,  bakteri  gram  negatif  menjadi lebih  tahan  terhadap  antibiotik  daripada  bakteri gram positif, karena mereka memiliki kemampuan  untuk  menginaktivasi  enzim  beta lactamase (2) .
Infeksi bakteri penghasil ESBL telah meningkat  di  seluruh  dunia  sejak  penemuan antibiotik  beta  laktam.  Kelas  beta-laktamase karbapenemase utama, menurut klasifikasi
Ambler,  terdiri  dari  kelas  A  (Klebsiella pneumoniae  carbapenemase-(KPC),  kelas  B (metallo-beta-lactamase-(MBL),  dan  kelas  D (Oxacillinase-(OXA) beta lactamase) (3) . Karbapenemase  yang  paling  banyak  menyebar digolongan bakteri Gram negatif ialah New Delhi Metallo-beta-lactamase.  MBL  merupakan  enzim yang  memiliki  gugus  metal  ion  active  site  yang memiliki  kemampuan  menghidrolisis  antibiotik spektrum  luas  seperti  golongan  carbapenemase. MBL diperantarai plasmid, yang memungkinkannya  bertahan  dan  menyebar  di antara  bakteri  patogen  rumah  sakit.  Ini  dapat menyebabkan  infeksi  nosokomial  dalam  jangka panjang.
Kondisi  gawat  bakteri  resisten  juga  dialami oleh  Indonesia,  dimana  dilaporkan  terjadi resistensi  pada  bakteri  Kleibsiella  pneumoniae sebesar  25-57%  dan  Eschericia  coli  sekitar  32- 56% (4) . Perkembangan nya di Indonesia semakin meningkat  dimana  pada  tahun  2009  ditemukan gen New Delhi metallo-ꞵ-lactamase (blaNDM-1) pada  K.  pneumoniae  dan  pada  tahun  2015  gen CTX-M pembawa ESBL pada E. coli (20%) dan K. pneumoniae (28%) (5) . Penelitian Sabrina, 2019 didapatkan  (4,8%)  dari  35  sampel  mengandung gen  blaIMP (6) . CRE  (Carbapenem-resistant Enterobactericeae)  juga  ditandai  dengan  gen blaVIM diperoleh sekitar 3(14,3%) dari 21 isolat CRE  yang  diperiksa  dengan  PCR,  bakteri    yang diidentifikasi  sebagai  CRE (7) .  Prevalensi  gen CTX-M  juga  terdeteksi  dari  70  sampel  ada 46(65%)  bakteri  K.pneumoniae  di  RSUP  Moh. Hoesin Palembang (8) .

## METODE
Desain  penelitian  yang  digunakan  adalah Deskriptif  dengan  pendekatan  uji  laboratorium, uji  laboratorium  untuk  mengidentifikasi  galur MBL  dengan  pendekatan  survei  klinis  secara cross  sectional pada  isolat  pasien  di  RSUP Moh Hoesin Palembang. Populasi target dari penelitian adalah semua spesimen yang diambil dari pasien suspect  infeksi  yang  melakukan  uji  kultur  dan resistensi  di  Rumah  Sakit  Umum  Pendidikan Moh.Hoesin  Palembang.  Sampel  penelitian adalah  semua  isolat  bakteri  Gram  negatif  dari berbagai sampel yang terdeteksi MDR.

## Kriteria Inklusi
Sampel  yang  diambil  merupakan  spesimen yang telah terdeteksi sebagai isolat bakteri Gram Negatif  dan  terdeteksi  terjadi  resistensi  MDR, isolat  dikatakan  MDR  apabila  resisten  1  (satu) jenis  antibiotik  dari  3  (tiga)/lebih  golongan antibiotik.

## Kriteria Eksklusi
Saat  alat  otomatis VITEK  2  compact  system (bioMeriux)  tidak  menemukan  resistensi  MDR pada isolat bakteri gram positif dan gram negatif maka sampel tersebut dikeluarkan sebagai sampel penelitian.
(JPP) Jurnal Kesehatan Poltekkes Palembang Vol. 18, No. 1, Juni 2023, e ISSN 2654-3427 DOI: https://doi.org/ 10.36086/jpp.v18i1

## HASIL
Sebanyak  624  isolat  dilakukan  pemeriksaan kultur  di  laboratorium  Sub.  Mikrobiologi  Klinik RSUP  Moh.  Hoesin  Palembang.  Penentuan jumlah  sampel  menggunakan  rumus,  didapatkan 88  sampel  dengan  kriteria  bakteri  gram  negatif Multidrug Resistant (MDR) artinya sampel yang masuk pada penelitian ini merupakan sampel yang sudah  resisten  terhadap  lebih  dari  3  antibiotik yang  diujikan.  Sebanyak  88  isolat,  bakteri terbanyak  yaitu K.pneumonia 45(51,1%), E.coli 31(35,2%) dan bakteri lainnya 12(13,6%). Dari 88 isolat,  sampel  terbanyak  sputum  34(38,6%);  pus 18(20,5%)  serta  urin  13(14,8%).  Berdasarkan ruang  perawatan,  terbanyak  berasal  dari  ruang
rawat inap Muri 1 10(11,4%) dan GICU 8(9,1%). Isolat yang resisten terhadap golongan Carbapenem yaitu  pada  antibotik  Meropenem sebanyak  18(20,4%)  dengan  kategori  resisten  16 isolat  (MIC≥16);  1  isolat  (MIC≥8)  dan  1  isolat intermediet (MIC≥4). Pada antibiotik Ertapenem ada  10(11,3%)  isolat  dengan  kategori  resisten (MIC≥8).  Isolat  yang  positif  ESBL  sebanyak  66 isolat yang didominasi oleh bakteri K.pneumoniae 36(54,5%)  dan E.coli 29(43,9%).  Resisten  yang paling banyak pada golongan antibiotik
Ampicillin (AM), Ceftazidime (CAZ),
Ciprofloxacin  (CIP),  Ceftriaxone  (CRO)  dan Cefazolin  (CZ),  untuk  lebih  lengkapnya  dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Profil Isolat bakteri Gram negatif basil
Bakteri patogen penyebab infeksi ∑ Isolat Persentase (%) Escherichia coli 31 35,2 Klebsiella pneumonia 45 51,1 Lainnya 12 13,6 Total 88 99,9

## Tabel 2. Prevalensi ESBL pada Isolat bakteri Gram negatif basil
Bakteri ∑ Bakteri ESBL (n=66) Antibiotik % Resisten Bakteri ESBL E.coli 29 (43,9%) AM 29 (43,9%) CAZ 17 (25,7%) CRO 29 (43,9%) CZ 29 (43,9%) FEP 9 (13,6%) K.pneumoniae 36 (54,5%) AM 36 (54,5%) CAZ 30 (45,4%) CRO 36 (54,5%) CZ 36 (54,5%) FEP 10 (15,1%) Lainnya 1 (1,5%) AM - CAZ - CRO - CZ - FEP -
Ket: AM-Ampicillin; CAZ-Ceftazidime; CRO-Ceftriaxone; CZ-Cefazolin; FEP-Cefepime
Pada  tabel  2,  Jumlah  total  bakteri  bersifat ESBL  ialah  66  isolat.  Bakteri  ESBL  terbanyak yaitu K.pneumoniae 36(54,5%)  dengan  resisten terbanyak  pada  antibiotik  Cefrtiaxone, Cefazolin dan  Ampicillin.  Bakteri  ESBL  terbanyak  kedua ialah E.coli 29(43,9%) dengan resisten terbanyak
pada  antibiotik  Ampicillin,  Cefrtiaxone  dan Cefazolin.
Tabel 3. Prevalensi Jumlah Bakteri yang resisten terhadap Antibiotik Carbapenemase
Bakteri Antibiotik ∑ Bakteri Carbapenem E.coli ETP 1 (3,2%) MEM 1 (3,2%) K.pneumoniae ETP 8 (17,7%) MEM 10 (22,2%) Lainnya ETP 1 (8,3%) MEM 5 (41,6%) Ket: ETP-Ertapenem; MEM-Meropenem
Pada  tabel  3,  Jumlah  total  bakteri  resisten terbanyak  yaitu K.pneumoniae dengan  resisten terbanyak pada antibiotik Meropenem 10(22,2%) dan  Ertapenem  8(17,7%).  Bakteri  kedua  lainnya seperti A.  baumanii dan E.  cloacae dengan resisten  terbanyak  pada  antibiotik  Meropenem 5(41,6%) dan Ertapenem sebesar 1(8,3%).

## Tabel 4. Distribusi Frekuensi Isolat bakteri Gram negatif basil Berdasarkan Jenis Spesimen
SPESIMEN BAKTERI GRAM NEGATIF E.coli K. pneumonia Lainnya Total % Feses 1 1 0 2 2,3 Pus 14 4 0 18 20,5 Sputum 5 26 3 34 38,6 Swab 2 2 1 5 5,7 Urine 8 3 2 13 14,8 Darah 1 5 0 6 6,8 Swab Tenggorokan 0 2 1 3 3,4 Bilasan Bronkus 0 2 3 5 5,7 Lainnya 0 0 2 2 2,3 Total 31 45 12 88 100
Pada  tabel  4,  Jumlah  total  bakteri  terbanyak berdasarkan  jenis  sampel  yaitu K.pneumoniae 45(51,1%)  terbanyak  didapatkan  dari  sampel sputum  sebanyak  26  sampel, E.coli 31(35,2%) terbanyak  didapatkan  dari  sampel  pus  sebanyak 14 sampel. Sampel lainnya tersebar pada sampel sputum,  urine,  swab  dan  bilasan  brokus. Konfirmasi Metallo beta-lactamase (MBL) secara
fenotif  digunakan  metode  DDST  dan  CDST. Metode DDST berdasarkan penelitian sebelumnya menurut (Lee, et al ) dalam Verma, N, et all dapat menggunakan disk ethylenediaminetetraacetic  (EDTA)  (10µ  dalam 0.5M) dan disk antibiotik Imipenem yang diujikan secara sinergi, apabila mendapatkan zona hambat yang  besar  maka  dapat  dikatakan  bahwa  isolat
(JPP) Jurnal Kesehatan Poltekkes Palembang Vol. 18, No. 1, Juni 2023, e ISSN 2654-3427 DOI: https://doi.org/ 10.36086/jpp.v18i1
tersebut  posiitif  MBL,  Pada  metode  CDST menurut  ( Yong,  et al)  dalam  Verma,  N et all menggunakan hanya disk antibiotik Imipenen saja dan  Imipenen  yang  disinergikan  dengan  EDTA, hasil positif apabila zona diameter hambat dengan disk  Imipenem  +  EDTA(≥7mm)  dibandingkan
dengan  hanya  disk  Imipenem  saja (9) .  Total  87 isolat didapatkan hasil uji DDST positif sebanyak 44(50,6%)  isolat  dan  CDST  sebanyak 87(100%) isolat.  Gambar  1  dan  Tabel  2  menggambarkan prevalensi CDST dan DDST.
Gambar 1.  Pengujian DDST dan CDST, untuk uji DDST terlihat zona hambat yang dihasilkan besar. Pada uji CDST pengujian disk IMI + EDTA dihasilkan zona hambat yang lebih besar dibandingkan hanya disk IMI
Tabel 5. Konfirmasi Produksi MBL secara Fenotif pada Isolat Bakteri Gram negatif
Metode deteksi n % EDTA kombinasi tes (CDST) 87 100 EDTA double disk sinergi (DDST) 44 50,6
Konfirmasi  MBL  secara  genotif  didapatkan positif  hanya  pada  gen  IMP  7(7,9%)  isolat, sedangkan  pada  gen  VIM  dan  NDM  semuanya negatif.  Data  secara  fenotif  pada  sampel  yang positif gen IMP, didapatkan sebagai berikut yaitu DDST positif sebanyak 4(4,5%) dan CDST positif sebanyak  7(7,9%).  Dari  hasil  ini  metode konfirmasi  secara  fenotif  yang  lebih  mudah
dipakai  yaitu  menggunakan  metode  CDST. Sensitifitas  dari  perbandingan  dua  metode tersebut  diperoleh  hasil  sebanyak  51,1%  dan Spesifisitas sebanyak 100%. Gambar 2 menggambarkan  gen  yang  terdeteksi  secara genotif, Gambaran konfirmasi secara fenotif dari isolat positif gen IMP ditampilkan pada tabel 3.
Gambar 2. Gen IMP positif pada posisi 232 bp dari sampel 27, 35, 53, 56, 61, 72 dan 80
(JPP) Jurnal Kesehatan Poltekkes Palembang Vol. 18, No. 1, Juni 2023, e ISSN 2654-3427 DOI: https://doi.org/ 10.36086/jpp.v18i1
Tabel 6. Gambaran DDST dan CDST dari isolat positif gen Metallo β-lactamase (MBL)
Jenis Gen teridentifikasi ∑ Isolat (n=88) DDST CDST Pos Neg Pos Neg IMP 7 (7,9%) 4 (4,5%) 3 (3,4%) 7 (7,9%) 0 VIM 0 0 0 0 0 NDM 0 0 0 0 0 Total 7 (7,9%) 4 (4,5%) 3 (3,4%) 7 (7,9%) 0
Pada  tabel  6  dapat  dilihat  didapatkan  gen  IMP yang  positif  sebanyak  7(7,9%)  isolat  dengan konfirmasi  positif  metode  DDST  sebanyak 4(4,5%)  isolat  dan  yang positif  konfirmasi  MBL
menggunakan  metode  CDST  sebanyak  7(7,9%) isolat,  maka  dapat  disimpulkan  metode  CDST lebih  baik  digunakan  untuk  mengkonfirmasi resistensi MBL secara fenotif.

## PEMBAHASAN
Enzim  MBL dominan  dihasilkan  oleh  bakteri Gram negatif patogen dari penelitian ini sebanyak 87 isolat dilakukan konfirmasi fenotif menggunakan Double-disk  synergy  test (DDST) didapatkan hasil positif sebanyak 44(50,6%) dan CDST sebanyak 87(100%) isolat. Pada penelitian sebelumnya didapatkan metode CDST dan E-test didapatkan  111  (85,4%)  dari  total  isolat  1423 positif  MBL (10) .  Pada  penelitian  di  India  juga didapatkan  metode  CDST  menghasilkan  positif MBL  sebanyak  9  (75%)  isolat  dari  jumlah  total sebanyak 12 isolat, sedangkan DDST menghasilkan  positif  MBL  sebanyak  5  (41%) isolat (11) . Pada metode CDST menurut (Yong, et al) menggunakan hanya disk antibiotik Imipenen saja  dan  Imipenen  yang  disinergikan  dengan EDTA, hasil positif apabila zona diameter hambat dengan  disk  Imipenem  +  EDTA(≥7mm) dibandingkan  dengan  hanya  disk  Imipenem  saja (9) .
Pada  penelitian  ini  didapatkan  bakteri K. pneumoniae yang  paling  dominan  sebanyak 45(51,1%)  dari  87  isolat.  Bakteri K.pneumoniae yang sudah resisten terhadap bakteri Carbapenem sebanyak  18  isolat  yang  terdiri  dari  resisten Meropenem  10(22%)  dan  Ertapenem  8(17,7%) dan  memiliki  kecenderungan  juga  menghasilkan enzim MBL. Pada penelitian di India didapatkan bakteri K.pneumoniae sebanyak  124  isolat  dan positif MBL 9(7.26%) (12) . Penelitian lainnya pada pasien Ventilator-associated  pneumonia (VAP), didapatkan Klebsiella spp  sebanyak  13(54,17%) merupakan  bakteri  terbanyak  kedua  setelah bakteri Acinetobacter (13) . Aztreonam adalah satu-
satunya obat beta-laktam yang resistansinya tidak dapat  ditularkan  oleh  isolat  bakteri  penghasil MBL, meskipun demikian, ko-eksistensi mekanisme resistensi lain, seperti beta-laktamase tipe AmpC atau ESBL membuat mereka resisten terhadap aztreonam (14) . Dalam penelitian saat ini, ditemukan  bahwa  setiap  isolat E.coli dan K.pneumoniae dengan  produksi  MBL  resisten terhadap ketiga karbapenem (imipenem, meropenem, dan ertapenem). Selain itu, isolat ini menunjukkan  tingkat  resistensi  yang  tinggi terhadap kombinasi penghambat beta- laktam/beta-laktamase  terhadap  penisilin  dan sefalosporin  generasi  ketiga  yang  diteliti  dalam penelitian  ini.  Isolat  Enterobacteriaceae  yang menghasilkan  MBL  dilaporkan  rentan  terhadap carbapenem yang berbeda seperti piperacillin/tazobactam  dengan  pengujian  difusi cakram.
Konfirmasi secara fenotif dan genotif didapatkan  positif  menggunakan  metode  DDST sebanyak 4 (4,5%), positif menggunakan metode CDST sebanyak 7 (7,9%) dan yang terkonfirmasi gen IMP ada sebanyak 7 isolat sekitar 7,9%. Gen IMP  yang  positif  semua  berasal  dari  bakteri K.pneumoniae , dimana 2 isolat bersifat ESBL dan 5  isolat  bersifat  resisten  Carbapenem.  Sejalan dengan penelitian ini pada isolate di RS Sanglah Bali  dari  68  isolat  didapatkan  9  (10,5%)  isolat yang  terdeteksi  positif  gen  IMP-1 (15) .  Pada penelitian ini spesimen yang paling banyak yang menghasilkan  enzim  MBL  adalah  berasal  dari sputum sebanyak 34(38,6%). Penelitian sebelumnya  didapatkan  kebanyakan  didapatkan berasal  dari  sampel  swab  dan  pus  sebesar
76(44.2%) yang menghasilkan bakteri Klebsiella spp (16) .

## KESIMPULAN DAN SARAN
Penelitian ini menggunakan metode konfirmasi  MBL  menggunakan  2  metode  yaitu DDST dan CDST, metode yang lebih akurat pada penelitian  ini  menggunakan  metode  CDST  yang dibuktikan tingkat positif nya lebih banyak yaitu sekitar  87(100%).  Dari  87  isolat  yang  diperiksa didapatkan  yang  terkonfirmasi  positif  gen  IMP yaitu  sebanyak  7(7,9%)  isolat  yang  semua  nya berasal dari bakteri K.pneumoniae . Sampel isolat terbanyak  berasal  dari  sputum  34(38,6%). Antibiotik yang dominan resisten pada penelitian ini  yaitu  Ceftriaxone,  Cefazolin  dan  Ampicillin. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut terkait gen lainnya yang berperan dalam resistensi antibiotik.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Skema  pembiayaan  'PDP'  dari  Poltekkes Kemenkes Banten menjadi pendukung utama dari berjalannya  penelitian  ini.  Sebagai  apresiasi  atas fasilitas yang diberikan oleh RSUP Moh. Hoesin palembang,  para  peneliti  juga  mengucapkan terima kasih.

## DAFTAR PUSTAKA
1.   Cucunawangsih. ANTIBIOTIK DAN RESISTENSI Penulis Dr. dr.
Cucunawangsih,  SpMK  (K)  1  [Internet]. 2020  [cited  2021  May  8].  Available  from: https://penerbitbukudeepublish.com/shop/bu ku-antibiotik-dan-resistensi/
2.   Bush  K  BP.  Epidemiology  of  β-lactamase- producing  pathogens.  Clin  Microbiol  Rev Am Soc Microbiol. 2020;33(2):1–37.
3.   Taggar  G,  Rheman  MA,  Boerlin  P,  Diarra MS. Molecular epidemiology of carbapenemases  in  enterobacteriales  from humans, animals, food and the environment. Antibiotics. 2020;9(10):1–22.
4.   Dahesihdewi A, Sugianli AK, Parwati I. The surveillance  of  antibiotics  resistance  in Indonesia:  a  current  reports.  Bali  Med  J. 2019;8(2):565.
5.   Parathon  H,  Kuntaman  K,  Widiastoety  TH, Muliawan  BT,  Karuniawati  A,  Qibtiyah  M, et  al.  Progress  towards  antimicrobial resistance  containment  and  control  in Indonesia. Vol. 358, BMJ (Online). 2017. p.
31–5. 6.   Sabrina  T,  Amalia  E,  Patricia  V,  Yuwono, Usman RM. Identification
of bla<inf>IMP</inf> gene carbapenem- resistant  Enterobacteriaceae  (CRE)  isolated from patient infection. In: Journal of Physics: Conference Series. 2019.
7.   Amalia  E,  Sabrina  T,  Yuwono,  Patricia  V, Husna  R,  Augusta  Rosdah  A,  et  al. Identification of carbapenemases enterobacteriaceae  producing  gene  blaVIM in  clinical  isolates.  In:  Journal  of  Physics: Conference Series. 2019.
8.   Liana  P,  Patricia  V,  Agatha  C.  Multidrug- resistant  organisms  (MDRO)  patterns  of GICU  patients  in  Dr  Mohammad  Hoesin Hospital Palembang. In: Journal of Physics: Conference Series. 2019.
9.   Verma  N,  Prahraj  A,  Mishra  B,  Behera  B, Gupta  K.  Detection  of  carbapenemase- producing  Pseudomonas  aeruginosa  by phenotypic  and  genotypic  methods  in  a tertiary  care  hospital  of  East  India.  J  Lab Physicians. 2019;11(04):287–91.
10.   Sinha  S,  Singh  A,  Verma  RK,  Singh  DP, Kumari  S.  Prevalence  of  metallo-beta- lactamases (MBLS) producing Pseudomonas aeruginosa  in  hospitalized  patients  in  rural tertiary care hospital in Uttar Pradesh, India. Int J Res Med Sci. 2018;6(9):3099.
11.   Radhika  A,  Lakshmi  JT,  Ariyanachi  K, Sakthivadivel V. Detection of Metallo Beta- Lactamase  (MBL)  Producing  Pseudomonas aeruginosa  in  a  Tertiary  Care  Hospital, Ghanpur, Medchal, India. Maedica (Buchar) [Internet].  2022;17(1):134–42.  Available from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/35733 755%0Ahttp://www.pubmedcentral.nih.gov/ articlerender.fcgi?artid=PMC9168566
12.   Pandya NP, Prajapati SB, Mehta SJ, Kikani KM, Joshi PJ. Evaluation of various methods for detection of metallo- β-lactamase ( MBL )  production  in  gram  negative  bacilli. 2011;2(3):775–7.
13.   Nusrat T, Akter N, Haque M, Rahman NAA, Dewanjee AK, Ahmed S, et al. Comparative study  of  CDST  &  multiplex  PCR  to  detect MBL  producing  gram-negative  bacilli among  VAP  patients  admitted  in  a  public medical  college  hospital  of  Bangladesh.
Pathogens. 2019;8(3).
14.   Bora  A,  Sanjana  R,  Jha  BK,  Narayan Mahaseth  S,  Pokharel  K.  Incidence  of metallo-beta-lactamase  producing  clinical isolates  of  Escherichia  coli  and  Klebsiella pneumoniae  in  central  Nepal.  BMC  Res
Notes. 2014;7(1):1–7.
15.   Tarini NMA, Fatmawati NND, Mayura IPB. Detection Metallo-beta-lactamase gene IMP-
1  and  IMP-2  of  Pseudomonas  aeruginosa clinical  isolates  in  Sanglah  Hospital  Bali. Asia  Ocean  Biosci  Biotechnol  Consort.
2015;3(1):32–6.
16.   Chowdhury  DRA,  Chowdhury  DAHMSK, Sharmin  DS,  Akter  DN,  Ahmed  DS. Metallo-Beta-Lactamase  Producing  Gram-
Negative  Bacteria  among  Patients  in  a Tertiary  Care  Hospital.  SAS  J  Med. 2022;8(2):106–13.