Potensi Ekstrak Daun ( ipomea batatas L.) Sebagai Antibakteri Terhadap Bakteri Gram Negatif Dengan Metode Broth Microdilution

## POTENSI EKSTRAK ETANOL DAUN Ipomea batatas L. SEBAGAI ANTIBAKTERI TERHADAP BAKTERI GRAM NEGATIF DENGAN METODE BROTH MICRODILUTION
Siti Hamidatul ‘Aliyah 1 , Rafiza Putri 1 , Desi Sagita 2*
1 Program Studi Farmasi, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Harapan Ibu Jambi 2 Program Studi Farmasi, Universitas Adiwangsa Jambi email: daisyfarmasi@gmail.com

## Abstract
Indonesia  has  wide  cultivation  of  purple  sweet  potatoes  (Ipomea  batatas  L.) commodities,  particularly  in  Jambi  province.  However,  the  difference  of phytochemical profiles in purple sweet potatoes among geographical regions has not been fully  explored.  The  objective  of  this  research  to  determine  potential  of ethanol extract leaves purple sweet potato as antibacterial agent against bacteria Salmonella sp.  and  Pseudomonas  aeruginosa.  This  study  used  Broth  microdilution  with concentration of 2 mg/mL, 4μg/mL, 8 mg/mL, 16 mg/mL, 32 mg/mL, 64 mg/mL, 128 mg/mL,  256  mg/mL,  512  ug/mL,1024  mg/mL.  Chloramphenicol  used  as  a  positive control  at  the  same  concentration,  minimum  inhibitory  concentration  (MIC) determination made by the 50 seen from the transmittance value the test bacteria and minimum  bactericidal  concentration  (MBC)  by  the  determination  of  the  lowest concentration  in  which  no  visible  bacterial  growth.  Based  on  the  test  microbroth dilution  leaves  purple  sweet  potatoes  had  antibacterial  activity  against  Salmonella sp.  and  Pseudomonas  aeruginosa  with  MIC  64  mg/mL  in  Salmonella  sp.  and  128 ug/mL  Pseudomonas  aeruginosa.  KBM  obtained  512  mg/mL  in  Salmonella  sp.  and 512 ug/mL Pseudomonas aeruginosa.
Keyword:  Ipomea  batatas,  broth  microdilution,  Salmonella,  Pseudomonas aeruginosa, antibacterial, MIC, MBC

## 1. PENDAHULUAN
Mikroorganisme  dapat  melakukan  banyak  kerusakan  dan  kerusakan.  Hal  ini terbukti  dengan  kemampuannya  menginfeksi  manusia,  hewan,  dan  tumbuhan, menyebabkan  penyakit  mulai  dari  infeksi  ringan  hingga  kematian.  Mikroorganisme berbahaya harus dikendalikan untuk mencegah kerusakan maupun kematian (Pelczar et  al.,  2009).  Bakteri  gram  negatif  lebih  patogen  dibandingkan  bakteri  gram  positif sehingga  membahayakan  organisme  inangnya  dan  menyebabkan  infeksi.  Contoh
Potensi Ekstrak Daun ( ipomea batatas L.) Sebagai Antibakteri Terhadap Bakteri Gram Negatif Dengan Metode Broth Microdilution
spesies  bakteri  gram  negatif  diantaranya Salmonella sp.  dan Pseudomonas aeruginosa. Salmonella sp.  yang  masuk  tubuh  inangnya  bersama  makanan  dan minuman  yang  tercemar  dapat  menyebabkan  deman  enterik  (demam  tifoid), bakterimia  dengan  lesi  lokal  dan  enterokolitis.  Bakteri Pseudomonas  aeruginosa merupakan  patogen  oportunistik,  karena  dapat  menyebabkan  kerusakan  pada  sistem imun  tubuh  untuk  memulai  suatu  infeksi. Pseudomonas  aeruginosa dapat menyebabkan infeksi apabila fungsi pertahanan tubuh menurun (Brook et al., 2015). Daun Ipomea batatas L. mengandung flavonoid cukup tinggi (Heriwijaya et al.,
2020).  Darwis  et  al.,  (2009)  melaporkan  bahwa  ubi  jalar  ungu  mengandung antosianin  519  mg/100  gram  berat  basah.  Adanya  senyawa  antosianin  ditandai dengan  warna  ungu  pada  daun  dan  umbi  ubi  jalar  ungu.  Antosianin  mempunyai kemampuan  yang  tinggi  sebagai  antibakteri.  Saati  et  al.,  (2018)  melaporkan  bahwa kandungan utama pada ekstrak kelopak rosella ( Hisbicus sabdariffa L.) yang bersifat sebagai  antibakteri  adalah  antosianin.  Selain  antosianin,  senyawa  fenol  dan  saponin juga berkhasiat sebagai antibakteri dapat berperan sebagai antibakteri (Miranti et al., 2013; Zahro & Agustini, 2013).
Penelitian  sebelumnya  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun Ipomea  batatas L memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dan Bacillus cereus yang merupakan bakteri gram positif . Untuk itu perlu dilakukannya penelitian ekstrak  daun Ipomea  batatas L  menggunakan  bakteri  gram  negatif  (Islam,  2008).
Tujuan  penelitian  ini  untuk  mengetahui  potensi  antibakteri  ekstrak  daun Ipomea batatas L  terhadap  bakteri Salmonella sp  dan Pseudomonas  aeruginosa dengan metode broth microdilution.

## 2. METODE PENELITIAN
2.1 Alat
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  diantaranya  maserator,  timbangan analitik (shimadzu ® ), vacuum rotary evaporator (eyela ® ), erlenmeyer (pyrex ® ), gelas ukur  (pyrex ® ),  beker  gelas  (pyrex ® ),  tabung  reaksi  (pyrex ® ),  mikro  pipet
Potensi Ekstrak Daun ( ipomea batatas L.) Sebagai Antibakteri Terhadap Bakteri Gram Negatif Dengan Metode Broth Microdilution
(eppendorf ® ),  kertas  saring,  pinset,  autoklaf  (hiramaya ® ),  inkubator  (memmert ® ), cawan petri, pipet tetes, kawat ose, lampu spritus, syringe, hot plate (mitseda ® ) , plat tetes, spektro UV-Vis (shimadzu ® ), inkubator shaker (WiseCube ® ).

## 2.2 Bahan
Bahan yang digunakan pada penelitian ini diantaranya daun ubi jalar ungu, etanol 96%,  FeCl3  1%,  magnesium,  HCl  pekat,  kloroform,  H 2 SO 4 pekat,  bakteri  uji Salmonella sp  dan Pseudomonas  aeruginosa (Laboratorium  kesehatan  Jambi), aquadest , nutrient agar, nutrient broth , dan kloramfenikol, dimetil sulfoxide .
2.3 Prosedur Penelitian
a. Pengambilan Bahan
Sampel  penelitian ini  diambil  di  Desa  Lolo  Gedang,  Kecamatan  Bukit  Kerman, Kabupaten  Kerinci.  Sampel  kemudian  dilakukan  pengumpulan  dan  penyediaan simplisia  segar  yang  telah  dibersihkan,  sampel  yang  sudah  bersihkan  kemudian  di rajang.
b. Ekstraksi Sampel
Sampel  basah  ditimbang  seberat  1  kg  selanjutnya  dilakukan  maserasi  dengan pelarut  etanol  96%.  Pelarut  etanol  96%  diganti  sebanyak  tiga  kali  selama  proses maserasi.  Maserasi  dilakukan  selama  tiga  sampai  lima  hari.  Rendaman  tersebut kemudian disaring sari etanolnya, dipisahkan dari ampas. Maserat dikumpulkan lalu diuapkan pelarutnya dan dipekatkan dengan menggunakan vacuum rotary evaporator dengan  suhu  35-45  °C  sampai  volumenya  menjadi  sepersepuluh  bagian,  sehingga diperoleh  ekstrak  kental.  Ekstrak  yang  didapat  yaitu  ekstrak  kental  daun  ubi  jalar ungu.
C. Skrining Fitokimia
Skrining  fitokimia  ekstrak  etanol  daun  ubi  jalar  ungu  dilakukan  untuk mengetahui  adanya  senyawa  berikut:  saponin,  fenol,  flavonoid,  alkaloid,  steroid, triterpenoid (Tiwari et al., 2011; To’bungan et al., 2021).
d. Bakteri Uji
Bakteri uji yang digunakan pada penelitian ini adalah bakteri Salmonella sp. dan
Potensi Ekstrak Daun ( ipomea batatas L.) Sebagai Antibakteri Terhadap Bakteri Gram Negatif Dengan Metode Broth Microdilution
Pseudomonas aeruginosa yang menghasilkan transmitan 25% sesuai  dengan standar 0,5  McFarland  (setara  1,5  x  10 8 CFU/mL).  Nilai  absorban  bakteri  pada  panjang gelombang 625 nm sebesar 0,08-0,10 (Cockerill et al., 2012).
e. Uji Aktivitas Antibakteri Dengan Broth  Microdilution
Bakteri  uji  yang  digunakan  adalah  suspensi  bakteri  yang  setara  dengan  0,5 standar  Mc  Farland.  Sebanyak  5  μL  suspensi  bakteri  ditambahkan  ke  dalam  tabung berisi  10  ml  medium Nutrient  Broth (NB)  kemudian  digojok  selama  15  detik. Selanjutnya, sebanyak 2 ml campuran tersebut dimasukkan dalam tabung reaksi pada tabung ke-2 sampai ke-12. Sebanyak 2 ml larutan ekstrak daun ubi jalar ungu dengan konsentrasi  1024  μg/mL  pada  tabung  kedua  belas.  Campuran  pada  tabung  ke-12, diambil  2  ml  kemudian  dipindahkan  ke  dalam  tabung  ke-11.  Pengenceran  terus dilakukan  sampai  pada  tabung  ketiga  yang  memiliki  konsentrasi  terkecil.  Tabung diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  18-24  jam  kemudian  diamati  tabung  yang memiliki visualisasi jernih (tidak ada pertumbuhan mikroba) (Rahmawati & Bintari, 2014). Nilai konsentrasi hambat minimum (KHM) ditentukan berdasarkan nilai KHM 50  artinya  50%  bakteri  mengalami  kematian  sel  dilihat  dari  nilai  transmitan  bakteri uji (Kaya et al., 2009).
Sebanyak  100  μL  alikuot  dari  tabung  yang  jernih  dipindahkan  dalam  medium Nutrient  Agar dan  diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  18-24  jam  kemudian  diamati. Konsentrasi  terendah  dimana  tidak  terlihat  adanya  pertumbuhan  mikroba  ditetapkan sebagai  konsentrasi  bunuh  minimum  (KBM)  (Lolongan  et  al.,  2016).  Begitu  juga untuk  pengujian  larutan  kloramfenikol  sebagai  kontrol  positif,  pengujian  antibakteri ekstrak etanol daun ubi jalar ungu dilakukan tiga kali pengulangan (triplo).

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1 Hasil Determinasi
Daun  ubi  jalar  ungu  ( Ipomea  batatas L)  di  dapatkan  dari  Desa  Lolo  Gedang Kecamatan  Bukit  Kerman  Kabupaten  Kerinci.  Daun  ubi  jalar  ungu  dapat  dijadikan sebagai  antibakteri  karena  mengandung  flavonoid  cukup  tinggi  (Heriwijaya  et  al.,
Potensi Ekstrak Daun ( ipomea batatas L.) Sebagai Antibakteri Terhadap Bakteri Gram Negatif Dengan Metode Broth Microdilution
2020).  Identifikasi  tanaman  dilakukan  di  Herbarium  Universitas  Andalas  (ANDA). Hasil determinasi menunjukkan bahwa sampel yang digunakan adalah tanaman daun ubi jalar ungu ( Ipomea batatas (L) Lam) dengan family Convolvulaceae.

## 3.2 Hasil Ekstraksi Dan Kandungan Fitokimia Daun Ubi Jalar Ungu
Fungsi daun ubi jalar ungu salah satunya adalah sebagai antibakteri, kandungan ekstrak  daun  ubi  jalar  ungu  ( Ipomea  batatas L)  yang  berpotensi  sebagai  antibakteri adalah senyawa antosianin yang dapat menyebabkan denaturasi dan koagulasi protein bakteri. Senyawa fenol juga dapat berperan sebagai antibakteri dengan cara merusak membran  sel  bakteri.  Mekanisme  senyawa  astringen  fenol  sebagai  antibakteri  yaitu dengan  menginduksi  pembentukan  kompleks  ikatan  fenol  terhadap  enzim  atau substrat  bakteri  dan  pembentukan  suatu  kompleks  ikatan  fenol  dengan  ion  logam yang  dapat  menambah  toksisitas  fenol  (Santi  et  al.,  2011).  Hasil  ekstraksi  daun  ubi jalar ungu didapatkan ekstrak kental daun ubi jalar ungu sebanyak 40,14 g dari daun segar  1  kg  dengan  randemen  4,01%.  Hasil  ekstraksi  dan  fraksinasi  daun  ubi  ungu dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil ekstraksi daun ubi jalar ungu
No Sampel Berat Simplisia (g) Berat Ekstrak (g) Rendemen (%) 1 Ekstrak Etanol 1000 40,16 4,01
Hasil  skrining  fitokimia  ekstrak  etanol  daun  ubi  jalar  ungu  dapat  dilihat  pada tabel 2. Hasil skrining fitokmia ekstrak daun ubi jalar ungu menunjukkan hasil positif untuk senyawa fenol, flavonoid, dan saponin dan hasil negatif untuk senyawa steroid, alkaloid dan terpenoid.
Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia Daun Ubi Jalar Ungu
Sampel Senyawa metabolit sekunder Saponin  Fenol  Flavonoid  Alkaloid  Steroid  Triterpenoid Ekstrak Etanol + + + - - - Keterangan : +  =  Ada,   -  =  Tidak Ada
Potensi Ekstrak Daun ( ipomea batatas L.) Sebagai Antibakteri Terhadap Bakteri Gram Negatif Dengan Metode Broth Microdilution
Penilitian  ini  diawali  dengan  pembuatan  kurva  pertumbuhan  bakteri  untuk mengetahui  fase-fase  pertumbuhan  dari  bakteri,  Bakteri Salmonella sp  jam  ke-0 hingga  jam  ke-4  bakteri  mengalami  fase  lag  dan  pada  jam  ke-6  hingga  jam  ke-12 memasuki  fase  logaritmik  dan  jam  ke-14  hingga  jam  ke-20  bakteri  mengalami  fase stasioner. Sedangkan pada bakteri Pseudomonas aeruginosa fase lag terjadi pada jam ke-0 hingga jam ke-6 dan mengalami fase logaritmik pada jam ke-8 hingga jam ke-12 dan fase stasioner jam ke-14 hingga jam ke-20 (Gambar 1). Uji aktivitas antibakteri pada  penelitian ini  menggunakan  bakteri pada  fase log karena  pada  fase log bakteri mengalami  kegiatan  metabolisme  yang  tinggi  dan  kondisinya  paling  labil  sehingga lebih peka terhadap antibiotik. Bakteri pada fase log  juga memiliki transmittan 25% karena  pada  transmittan  25%  kepadatan  sel  optimal  serta  mencegah  kepadatan  sel yang berlebihan (Rahmawati, 2015).
Gambar 1. Kurva pertumbuhan bakteri Salmonellas sp dan Pseudomonas aeruginosa
Potensi Ekstrak Daun ( ipomea batatas L.) Sebagai Antibakteri Terhadap Bakteri Gram Negatif Dengan Metode Broth Microdilution
Pengujian  potensi  antibakteri ekstrak  daun  ubi  jalar  ungu menggunakan metode broth  microdilution .  Kelebihan  metode  ini  adalah  satu  konsentrasi  bakteri  uji  dapat digunakan untuk mendapatkan konsentrasi optimum. Jenis bakteri gram negatif yang diuji  adalah Pseudomonas  aeruginosa dan Salmonella sp.  Penetapan  Konsentrasi Bunuh  Minimum  (KBM)  menggunakan  parameter  kekeruhan  (ada  pertumbuhan bakteri)  dan  kejernihan  (tidak  ada  pertumbuhan  bakteri)  yang  dilihat  setelah  bakteri diinkubasi selama 18-24 jam pada  suhu 37 o C kemudian diukur transmitannya. Hasil KBM dan KHM bakteri uji disajikan pada tabel 3.
Tabel  3.  Penetapan  Konsentrasi  Bunuh  Minimum  (KBM)  dan  Konsentrasi  Hambat Minimun (KHM) Bakteri Uji
Bakteri Uji Kloramfenikol Ekstrak daun ubi jalar ungu KHM μg/mL KBM μg/mL KHM μg/mL KBM μg/mL Pseudomonas aeruginosa 128 256 256 512 Salmonella sp 64 128 256 512
Ekstrak  daun  ubi  jalar  ungu  memiliki  potensi  sebagai  antibakteri  pada  bakteri Pseudomonas  aeruginosa dengan  nilai  KHM  sebesar  256  μg/mL  dan  nilai  KBM sebesar  512  μg/mL. Ekstrak  daun  ubi  jalar  ungu  juga  berpotensi  sebagai antibakteri pada Salmonella sp  dengan  nilai  KHM  sebesar  256  μg/mL  dan  nilai  KBM  sebesar 512  μg/mL.  Pengujian  nilai  KHM  ekstrak  daun  ubi  jalar  ungu  berdasarkan  jumlah bakteri Pseudomonas  aeruginosa yang  tumbuh  pada  media Nutrient  Agar (NA) adalah  126  CFU  (konsentrasi  128  μg/mL)  dan  41  CFU  (konsentrasi  256  μg/mL).
Sedangkan pada Salmonella sp yang tumbuh pada media Nutrient Agar (NA) adalah 23 CFU (konsentrasi 128 μg/mL) dan 6 CFU (konsentrasi 256 μg/mL).
Kloramfenikol  digunakan  sebagai  kontrol  dengan  konsentrasi  dan  perlakuan yang sama didapatkan KBM adalah 256 μg/mL, dan KHM 128 μg/mL, sedangkan pada Salmonella sp  didapatkan  KBM  128  μg/mL  dan  KHM  64  μg/mL. Kloramfenikol  memiliki  potensi  sebagai  antibakteri  terhadap Pseudomonas
Potensi Ekstrak Daun ( ipomea batatas L.) Sebagai Antibakteri Terhadap Bakteri Gram Negatif Dengan Metode Broth Microdilution
aeruginosa dan Salmonella sp.  Aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  daun  ubi  jalar ungu  tersebut  menunjukkan  adanya  pengaruh  perbedaan  konsentrasi  terhadap  nilai KHM dan KBM. Semakin tinggi konsentrasi maka aktivitas antibakterinya semakin besar. Hasil pengukuran transmitan dari ekstrak daun ubi jalar ungu terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa dan Salmonella sp disajikan pada Tabel 4.
Tabel 4. Hasil pengukuran transmitan Konsentrasi μg/mL Ekstrak daun ubi jalar ungu Kloramfenikol Pseudomonas Aeruginosa Salmonella sp Pseudomonas Aeruginosa Salmonella sp 256 72,75848 75,64646 76,27055 84,45485 512 79,81109 83,37351 85,28645 91,85231 1024 89,39565 91,27858 95,02767 98,21828
Nilai  transmitan  menunjukkan  bahwa  nilai  transmitan  pada Pseudomonas aeruginosa lebih  rendah  daripada Salmonella  sp sehingga  ekstrak  etanol  daun  ubi jalar  ungu  memiliki  potensi  antibakteri  yang  lebih  baik  terhadap Salmonella sp dibandingkan terhadap Pseudomonas aeruginosa . Pseudomonas aeruginosa termasuk bakteri  resisten  alami  yang  tidak  sensitif  terhadap  kloramfenikol.  Berdasarkan  nilai transmitan  semakin  banyak  jumlah  sel  maka  nilai  transmitan  akan  semakin  kecil, semakin tinggi konsentrasi bakteri maka nilai transmitan juga semakin tinggi (Putri et al., 2014).

## 4. KESIMPULAN DAN SARAN

## 4.1 Kesimpulan
Ekstrak etanol daun ubi jalar ungu ( Ipomea batatas L.) memiliki potensi sebagai antibakteri terhadap Salmonella sp dan Pseudomonas aeruginosa .
4.2 Saran
Penelitian  selanjutnya  disarankan  menggunakan  fraksi  daun  ubi  jalar  ungu ( Ipomea batatas L.) pada uji aktivitas antibakteri serta membuat kurva pertumbuhan selama 48 jam agar dapat mengetahui fase kematian.
Potensi Ekstrak Daun ( ipomea batatas L.) Sebagai Antibakteri Terhadap Bakteri Gram Negatif Dengan Metode Broth Microdilution

## 5. REFERENSI
Brook,  G.  F.,  Carroll,  K.  C.,  Butel,  J.  S.,  Morse,  S.  A.,  &  Mietzner,  T.  A.  (2015).
Mikrobiologi Kedokteran : Jawetz, Melnick, & Adelberg. In 27th ed .
Cockerill, F. R., Wikler, M. A., Alder, J., Dudley, M. N., Eliopoulos, G. M., Ferraro,
M.  J.,  Hardy,  D.  J.,  Hecht,  D.  W.,  Hindler,  J.  A.,  Patel,  J.  B.,  Powell,  M., Swenson,  J.  M.,  Thomson,  R.  B.,  Traczewski,  M.  M.,  Turnbrighe,  J.  D., Weinstein, M. P., & Zimmer, B. L. (2012). Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility  Tests  for  Bacteria  That  Grow  Aerobically.  In M07-a9 (Vol.  32, Issue 2).
Darwis,    welly,  Melati,  P.,  Widiyati,  E.,  &  Supriati,  R.  (2009).  Efektivitas  Ekstrak Daun Ubi Jalar Merah (Ipomoea batatas Poir) Terhadap Bakteri Staphylococcus Aureus  Penyebab  Penyakit  Bisul  Pada  Manusia. Jurnal  Ilimiah  Konservasi Hayati , 5 (2).
Heriwijaya, I. P. P. D., Jawi, I. M., & Satriyasa, B. K. (2020). Uji efektivitas ekstrak air daun ubi jalar ungu (Ipomoea batatas) terhadap profil lipid tikus putih jantan galur  wistar  yang  diinduksi  pakan  dislipidemia. Intisari  Sains  Medis , 11 (2). https://doi.org/10.15562/ism.v11i2.584
Islam,  S.  (2008).  Antimicrobial  activities  of  Ipomoea  batatas  (L.)  leaf. Journal  of Food, Agriculture and Environment , 6 (1), 14–17.
Kaya,  E.  G.,  Özbİlge,  H.,  &  Albayrak,  S.  (2009).  Determination  of  the  effect  of Gentamicin against Staphylococcus aureus by using microbroth kinetic system. Ankem Dernegi (Antibiyotik ve Kemoterapi Dernegi - Association of Antibiotics and Chemotherapy, Turkish) , 23 (3).
Lolongan,  R.  A.,  Waworuntu,  O.,  &  Mintjelungan,  C.  N.  (2016).  Uji  konsentrasi hambat  minimum  (KHM)  ekstrak  daun  pacar  air  (Impatiens  balsamina  L.)
terhadap pertumbuhan Streptococcus
mutans.
E-GIGI , 4 (2). https://doi.org/10.35790/eg.4.2.2016.14161
Meri Rahmawati. (2015). Uji Aktivitas Antimikroba Ekstrak Etanol dan Air Rimpang Pacing  (Costus  spiralis)  Terhadap  Bakteri  Escherichia  coli,  Shigella dysenteriae, Salmonella typhimurium, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus Serta Fungi Candida albicans. Skripsi .
Miranti,  M.,  Prasetyorini,  &  Suwary,  C. (2013).  Perbandingan  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak  Etanol  30%  dan  96%  Kelopak  Bunga  Rosella  (Hibiscus
Potensi Ekstrak Daun ( ipomea batatas L.) Sebagai Antibakteri Terhadap Bakteri Gram Negatif Dengan Metode Broth Microdilution
sabdariffaL)Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus. Ekologia , 13 (1).
Pelczar Jr, Michael J, Chan, E. C. S. (2009). Dasar-Dasar Mikrobiologi 2. In Journal of Minimally Invasive Gynecology .
Putri,  A.  A.,  Rasyid,  R.,  &  Rahmatini,  R.  (2014).  Perbedaan  Sensitivitas  Kuman Pseudomonas  Aeruginosa  Penyebab  Infeksi  Nosokomial  Terhadap  Beberapa Antibiotika Generik dan Paten. Jurnal Kesehatan  Andalas , 3 (3). https://doi.org/10.25077/jka.v3i3.112
Rahmawati,  F.,  &  Bintari,  S.  H.  (2014).  Studi  Aktivitas  Antibakteri  Sari  Daun Binahong  (Anredera  cordifolia)  Terhadap  Pertumbuhan  Bacillus  cereus  Dan Salmonella enteritidis. Life Science , 3 (2), 103–111.
Retno  Nur  Santi,  Muhtadi*,  P.  I.  (2011).  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Kulit Dan  Biji  Kelengkeng  (Euphoria  longan  (Lour.)  Steud)  Terhadap  Escherichia coli  Dan  Staphylococcus  aureus  Serta  Toksisitasnya  Terhadap  Artemia  salina Leach. Pharmaceutical Journal of Indonesia , 12 (1), 33–39.
Saati,  E.  A.,  Dyah  Pusparini,  A.,  Wachid,  M.,  &  Winarsih,  S.  (2018).  The anthocyanin  pigment  extract  from  red  rose  as  antibacterial  agent. Malaysian Journal  of  Fundamental  and  Applied  Sciences , 14 (1–2),  184–187. https://doi.org/10.11113/mjfas.v14n1-2.959
Tiwari,  P.,  Kumar,  B.,  Mandeep,  K.,  Kaur,  G.,  &  Kaur,  H.  (2011).  Phytochemical screening  and  Extraction:  A  Review. Internationale  Pharmaceutica  Sciencia , 1 (1).
To’bungan,  N.,  Jati,  W.  N.,  &  Zahida,  F.  (2021).  Toksisitas  Akut  Ekstrak  Etanol Batang  Rumput  Knop  (Hyptis  capitata  Jacq.)  dengan  Metode  Brine  Shrimp Lethality  Test  (BSLT). Biota :  Jurnal  Ilmiah  Ilmu-Ilmu  Hayati , 44 ,  52–57. https://doi.org/10.24002/biota.v6i1.3577
Zahro, L., & Agustini, R. (2013). Uji Efektivitas Antibakteri Ekstrak Kasar Saponin Jamur  Tiram  Putih  (Pleurotus  ostreatus)  Terhadap  Staphylococcus  aureus  dan Escherichia coli. UNESA Journal of Chemistry , 2 (3).