Jurnal Kedokteran Universitas Palangka Raya ISSN 2355-0015 EISSN 2723-5890
https://e-journal.upr.ac.id/index.php/JK DOI: 10.37304/jkupr.v12i1.12879
EFEKTIVITAS EKSTRAK BUAH SENDUDUK ( Melastoma malabathricum L.) SEBAGAI PEWARNA APUSAN DARAH TEPI

## EFFECTIVENESS OF SENDUDUK FRUIT EXTRACT  (Melastoma malabathricum L.) AS AN STAINING PERIPHERAL BLOOD SMEARS
Iqlila Romaidha*, Mega Silvia Madani, Larantika Hidayati, Rima Agnes Widya Astuti Program Studi DIII Teknologi Laboratorium Medis, STIKES Borneo Cendekia Medika, Pangkalan Bun,
Kalimantan Tengah, Indonesia. * email: iqlilaromaidha12@gmail.com
( Naskah diterima: 15 Maret 2024. Disetujui: 28 April 2024)
Abstrak .  Sediaan  apusan  darah  merupakan  salah  satu  pemeriksaan  yang  penting  dalam  mendiagnosis  penyakit. Jaminan  mutu  pemeriksaan  apusan  darah  dapat  dinilai  dengan  kualitas  pewarnaan.  Teknik  pewarnaan  yang  umum digunakan  adalah  pewarna  giemsa.  Pewarnaan  giemsa  dinilai  memiliki  nilai  jual  yang  tinggi  dan  tidak  ramah lingkungan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  efektivitas  ekstrak  buah  senduduk  sebagai  alternatif pewarnaan  pada  sediaan  apusan  darah  tepi.  Metode  penelitian  adalah  deskriptif  kualitatif  dengan  desain  penelitian true eksperimental . Buah senduduk dilakukan ekstraksi dan dibuat variasi konsentrasi dari ekstrak pekat dan akuades dengan  konsentrasi 20%, 40%, 60%, 80% dan 100% dilakukan pewarnaan pada apusan darah.  Hasil penelitian ini menunjukkan  pada  konsentrasi  20%,  40%  dan  60%  morfologi  sel  darah  merah  &  inti  sel  leukosit  terlihat. Konsentrasi 80% dan 100% morfologi eritrosit, inti sel leukosit terlihat jelas, morfologi trombosit dapat dibedakan dengan  sel  darah  lain.  Penelitian  ini  mampu  menjadi  salah  satu  alternatif  pewarnaan  apusan  darah  tepi  untuk mengamati morfologi eritrosit dan inti sel leukosit dengan konsentrasi 100%.
Kata Kunci : Pewarnaan, Buah Senduduk, Sediaan Apusan Darah, Morfologi Sel Darah
Abstract. Peripheral blood smears  is an important examination in diagnosing disease. Quality blood smear be assessed  by  the  quality  of  staining.  Coloring  technique  commonly  used  is  Giemsa  dye.  However,  Giemsa considered  high  selling  value  and  not  environmentally  friendly.  This  study  aims  to  determine  effectiveness senduduk fruit extract as an alternative coloring for peripheral blood smears. The research method descriptive- qualitative  with  true  experimental  research  design.  Senduduk  fruit  was  extracted  and  varied  concentrations  of concentrated extract and distilled water were made with concentrations of 20%, 40%, 60%, 80%, and 100% and stained the blood smear. The results of this study show concentrations 20%, 40%, and 60%, the morphology of red blood cells and leukocyte nuclei was visible. At concentrations of 80% and 100%, leukocyte cell nuclei are clearly  visible,  platelet  morphology  can  be  distinguished  with  another  blood  cells.  This  research  can  be  an alternative  to  staining  peripheral  blood  smears  to  observe  the  morphology  of  erythrocytes  and  leukocyte  cell nuclei at a concentration of 100%
Keywords : Staining, Senduduk Fruit, Blood Preparation, Blood Cell Morphology

## PENDAHULUAN
Darah  berasal  dari  bahasa  Yunani  yaitu hemato, hemo dan  haima. Darah  memiliki peranan penting dalam kehidupan manusia. Darah berfungsi sebagai  alat  transportasi  zat,  melawan  serangan kuman, serta berbagai fungsi lain. Darah merupakan  jaringan  ikat  cair  yang  terdiri  dari plasma darah, sel darah merah, sel darah putih dan keping darah (trombosit) 1 .
Salah  satu  pemeriksaan  diagnosis  penyakit yaitu  dengan  pembuatan  apusan  darah.  Metode apus merupakan metode mikroteknik yang digunakan  untuk  pembuatan  sediaan.  Struktur  sel darah  dapat  diamati  dengan  pembuatan  apusan
darah.  Sediaan  apus  tidak  terlepaskan  dari  proses diagnostik.  Sediaan  apus  darah  dapat  dibagi menjadi  sediaan  apus  darah  tipis  dan  sediaan  apus darah  tebal.  Pemeriksaan  apus  darah  tipis memerlukan  jumlah  darah  yang  sedikit,  perubahan morfologi sel darah lebih jelas 2 . Jaminan  mutu  pemeriksaan  dari  sediaan apusan  darah  dapat  dinilai  dari  pewarnaan  sediaan apus darah tipis. Perawarna  yang digunakan antara lain  pewarna  Giemsa,  pewarna  Wright,  pewarna Leishman  dan  pewarna  May-Grunwald.  Pewarna Giemsa  merupakan  pewarna  yang  paling  umum digunakan.  Giemsa  memiliki  kandungan  zat  kimia antara  lain,  methylene  blue,  azur  dan  eosin. Methylen  azur  serta  eosin  memberikan  warna  di
inti  sel,  methylen  blue,  zat  pewarna  sitoplasma.
Giemsa  dinilai  tidak  ramah  di  lingkungan  dan
memiki  harga  yang  cukup  tinggi.  Oleh  karena  itu, pengembangan penelitian dilakukan untuk menemukan pewarna alternatif yang dapat digunakan  sebagai  alternatif  tambahan  pewarna giemsa 3 . Pengembangan pewarna alami dari biodiversitas tanaman di Indonesia sebagai pengganti  pewarna  apusan  darah  tipis  dari  Giemsa mulai  dikembangkan,  salah  satu  tanaman  yang berpotensi  sebagai  pewarna  alami  adalah  buah Senduduk ( Melastoma malabathricum L.). Senduduk  memiliki  senyawa  antosianin  yang tinggi, dengan warna ungu pekat. Berdasarkan hasil penelitian,  senyawa  antosianin  mampu  menjadi pewarna  alami  pada  apusan  darah  tipis,  dengan menggunakan buah naga 4 , ubi ungu 5 dan jamblang 6 .
Ekstrak  senduduk  dengan  warna  ungu mengandung senyawa antosianin yang cukup tinggi yaitu 204,9847 mg/L menggunakan pelarut alkohol (etanol)  95% 7 .  Senyawa  antosianin  ini  cukup banyak dan baik digunakan untuk pewarnaan alami pada  sediaan  apus  darah  tepi.  Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  efektivitas  ekstrak buah  senduduk  dengan  variasi  konsentrasi  20%, konsentrasi  40%,  konsentrasi  60%,  konsentrasi 80%  dan  konsentrasi  100%  sebagai  alternatif pewarnaan giemsa pada sediaan apus darah tepi

## METODE
Penelitian  dilakukan  pada  bulan  Maret  – Oktober  2023  di  Laboratorium  Medis  Program Studi  Diploma  Tiga  Analis  Kesehatan,  STIKES Borneo  Cendekia  Medika  Pangkalan  Bun.  Desain penelitian  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini merupakan  desain  true  experimental8  dan  hasil pengamatan dideskripsikan menggunakan tabel dan gambar.  Ekstraksi  buah  senduduk  dilakukan dengan  metode  maserasi.  Buah  senduduk  yang telah  ditimbang,  dihaluskan  serta  ditambahkan etanol  96%  hingga  terendam  dan  dilakukan inkubasi  pada  botol  gelap  selama  1x24  jam. Maserat  dilakukan  pemekatan  dengan  rotary evaporator.  Hasil  ekstrak  pekat,  dibuat  variasi konsentrasi  20%,  40%,  60%,  80%  dan  100% dengan  melarutkan  ekstrak  pekat  dan  akuades dengan rumus (M 1 .V 1 = M 2 .V 2 ).
Sampel  Darah  diambil  dengan  responden sebanyak  25  orang  mahasiswa  STIKES  Borneo Cendekia  Medika,  dengan  pengisian  kuisioner sebagai  data  tambahan  &  memastikan  kriteria inklusi terpenuhi. Pengambilan darah vena dilakukan  menggunakan  sistem  terbuka  ( open system ) menggunakan tabung vakum yang berisikan  antikoagulan  EDTA.  Pengambilan  darah pada  bagian  vena  mediana  cubiti.  Vena  ditusuk
dengan  lubang  jarum  menghadap  keatas  dengan sudut kemiringan antara jarum dan kulit adalah 15- 30°.  Selanjutnya,  darah  dimasukkan  dalam  tabung vakum EDTA, dan dihomogenkan 10 .
Darah  diambil  menggunakan  pipet  tetes dan  diteteskan  pada  preparat  ( object  glass ).  Kaca pendorong ( object glass ) diletakkan pada sudut 30° -  45°  di  depan  tetesan  darah,  ditarik  garis  lurus hingga  ujung  preparat  membentuk  apusan  darah tepi  yang  tipis  dan  selanjutnya  ditunggu  hingga mengering 11 . Kontrol positif pewarnaan preparat sediaan apusan darah tepi menggunakan pewarnaan giemsa.  Pewarnaan  giemsa  dimulai  dengan  proses fiksasi yang dilakukan dengan meneteskan methanol  pada  preparat  selama  2-3  menit. Selanjutnya  tahap  pewarnaan  dilakukan  dengan meneteskan  larutan  giemsa  hingga  semua  apusan tergenangi  dan  dibiarkan  selama  20  –  30  menit. Preparat dilakukan pembilasan dengan air, kemudian  dikeringkan  pada  suhu  ruang  dan dijauhkan  dari  cahaya  matahari  langsung.  Preparat lalu  diamati  menggunakan  mikroskop  perbesaran 100x objektif 2 . Preparat sediaan apusan darah tepi menggunakan  pewarnaan  ekstrak  buah  senduduk, dimulai  dengan  meneteskan  metanol  ke  atas preparat  selama  5  menit.  Selanjutnya,  tahap pewarnaan  dilakukan  dengan  meneteskan  larutan ekstrak buah senduduk masing –  masing konsentrasi  hingga  semua  apusan  tergenangi  dan dibiarkan  selama  20  –  30  menit.  Preparat  yang telah  terwarnai,  selanjutnya  dibilas  dengan  air mengalir kemudian dilakukan penngeringan. Preparat  yang  telah  dilakukan  pewarnaan,  diamati menggunakan mikroskop perbesaran 100x objektif 12 .  Analisis  data  dari  sediaan  apus  darah tepi  yang  diwarnai  menggunakan  ekstrak  buah senduduk  pada  setiap  konsentrasi  disajikan  secara deskriptif dengan mendeskripsikan data berdasarkan  hasil  pengamatan  dengan  tabel  dan gambar.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada penelitian ini, maserat buah senduduk ( Melastoma malabathricum L.) dipekatkan  pada  alat  rotary  evaporator  dengan waktu  50  menit  menggunakan  suhu  50 0 C.  Hal  ini didasarkan  pada  senyawa  antosianin  stabil  pada suhu  40  –  50 0 C  dengan  pH  3-5.  Pigmen  dan  suhu tersebut,  mampu  dipergunakan  untuk  menjaga intensitas  warna  ungu  antosianin  yang  terdapat pada  senduduk.  Ketika  suhu  yang  digunakan melebihi  suhu  tersebut,  senyawa  antosianin  rusak dan  akan  membuat  antosianin  berubah  menjadi warna coklat-keunguan 17 .
Gambar 1.  Gambaran Morfologi Eritrosit, Leukosit dan Trombosit Pada Perbesaran (A) Konsentrasi 20 %, (B) Konsentrasi  40  %,  (C)  Konsentrasi  60  %,  (D)  Konsentrasi  80  %,  (E)  Konsentrasi  100  %,  (F) Kontrol Positif (Giemsa), (G) Kontrol Negatif (Akuades)
Konsentrasi  buah  senduduk  20  %,  40%, 60%, 80% dan 100% menunjukan bahwa morfologi eritrosit terwarnai dengan jelas. Hal ini disebabkan oleh morfologi eritrosit mampu berinteraksi dengan senyawa  antosianin  yang  terkandung  dalam  buah senduduk.  Ekstrak  buah  senduduk  yang  bersifat
asam mampu berinteraksi dengan keadaan basa dari sitoplasma  dan  hemoglobin  sehingga  morfologi eritrosit  teramati  dengan  baik  dan  jelas 6 .  Pada semua  konsentrasi  yang  digunakan  morfologi  sel darah  merah  dan  inti  sel  leukosit  terlihat  jelas, sentral  polar  terlihat  jelas  pada  konsentrasi  40  %,
Leukosit Eritrosit Trombosit (A) (B) Leukosit Eritrosit Trombosit Eritrosit Leukosit Trombosit Eritrosit Leukosit Trombosit (C) (D) Eritrosit Leukosit Trombosit (E) (F) Eritrosit Leukosit Trombosit (G) Eritrosit Leukosit
60 %, 80 % dan 100%. Konsentrasi 80% dan 100%
morfologi eritrosit dan inti leukosit leukosit terlihat
jelas  dengan  morfologi  trombosit  dapat  dibedakan dengan sel darah yang lain.
Pada konsentrasi 60 % dan 80 % terdapat debris/artefak  pada  apusan  darah  tepi.  Hal  ini dimungkinkan  karena  resuspensi  ekstrak  dan endapan  pada  saat  pengocokan.  Penggunaan pewarna  apusan  darah  tepi  seperti  pada  Giemsa, larutan stock giemsa tidak diperbolehkan melakukan pengocokan atau dilakukan pengadukan dikarenakan  endapan/kristal  giemsa  naik  di permukaan  sehingga  menyebabkan  artefak  pada apusan  darah 18 .  Pada  konsentrasi  100%  eritrosit, trombosit,  inti  sel  terlihat  jelas.  Pada  kontrol negatif  menggunakan  akuades,  sel  darah  merah terlihat  namun  tidak  dapat  menunjukan  sentral polar  dan  pada  leukosit  tidak  terwarnai  baik  pada inti  sel,  sitoplasma  dan  granula.  Pada  kontrol positif menggunakan giemsa, eritrosit, leukosit dan trombosit  terwarnai  dengan  baik  dan  mampu dibedakan  dengan  sel  darah  lain.  Inti  sel, sitoplasma  dan  granula  leukosit  terlihat  dengan jelas.
Alternatif  pewarnaan  pada  pemeriksaan mikroskopis dari sediaan darah secara empiris telah dipublikasikan sebagai pengganti giemsa, diantaranya menggunakan ubi ungu bahwa konsentrasi  80%  dapat  menampilan  morfologi eritrosit secara jelas dan konsentrasi 100% eritrosit tampak  terwarnai  bertumpuk  yang  mengakibatkan pengamatan  lapang  pandang  lebih  gelap 12 .  Ekstrak kol  ungu,  sel  eritrosit  terwarnai  dengan  jelas,  akan tetapi  leukosit  dan  trombosit  tampak  buram,  pucat dan  hampir  tidak  terlihat 13 .  Sedangkan,  infusa bunga telang mampu mewarnai sel eritrosit, namun tidak  dapat  mewarnai  leukosit 7 .  Pengggunaan ekstrak  buah  senduduk  mampu  membedakan morfologi  trombosit  dibandingkan  sel  darah  lain dengan jelas pada konsentrasi 100 %. Ekstrak buah senduduk  yang  dari  buah  segar  tanpa  pengeringan dan  pemanasan  yang  langsung  dilakukan  maserasi pada  tempat  gelap  serta  tertutup  dan  dilakukan ekstraksi  menggunakan  alat  rotary  evaporator dalam  suhu  yang  stabil  50°C  dapat  menghasilkan senyawa antosianin dengan warna ungu-kemerahan yang dapat mewarnai nukleoprotein dalam trombosit,  sehingga  morfologi  trombosit  dapat teramati  dan  dapat  dibedakan  dengan  sel  darah yang  lain 4 .  Pada  konsentrasi  80%  morfologi trombosit  dapat  dibedakan  dengan  sel  darah  lain,
namun  lebih  pucat  dibandingkan  pada  konsentrasi 100%. Sedangkan, pada konsentrasi 20 %, 40% dan 60% morfologi trombosit terlihat sangat pucat.
Hasil  penelitian  ini  menunjukan  sitoplasma leukosit  hampir  seluruhnya  terwarnai  pada  semua konsentrasi. Namun, warna yang dihasilkan terlihat sangat  pucat.  Berbeda  halnya  dari  pewarnaan giemsa,  sitoplasma  akan  berwarna  biru-ungu  yang merupakan  efek  Romanowsky  dari  gabungan pewarna azure B dan eosin Y dimana efek ini mirip dengan  pigmen  antosianin.  Hasil  pewarnaan  dari ekstrak senduduk menunjukan sitoplasma terwarnai samar, Hal ini dikarenakan tidak adanya unsur biru romanowsky yang dapat diserap oleh sitoplasma di pewarnaan 14 .
Gambaran inti sel leukosit pada konsentrasi  80  %  dan  konsentrasi  100  %  tampak jelas  terwarnai.  Sedangkan,  konsentrasi  20%,  40% dan  60%  tampak  lebih  pucat.  Kandungan  dalam ekstrak  buah  senduduk  berpotensi  mewarnai  DNA dan  kromatin  seperti  pada  kandungan  eosin  Y  dan azure  B  dari  pewarna  giemsa.  Eosin  Y  dapat melakukan  pewarnaan  granula  eosinofil  yang bersifat basa. Azure B dapat mewarnai RNA, DNA dan  kromatin  yang  merupakan  komponen  sel bersifat  asam.  Kontras  warna  ungu  dihasilkan  dari Efek  Romanowsky  terhadap  DNA.  Antosianin yang  terkandung  di  dalam  ekstrak  buah  senduduk hanya  mampu  mewarnai  inti  sel  leukosit  dengan menghasilkan  warna  ungu  kemerahan  yang  sangat mirip dengan efek Romanowsky 15 . Secara struktural  antosianin  mampu  berikatan  dengan purin.  Antosianin  mengandung  kationik  dalam struktur kimianya, sehingga menghasilkan interaksi diantara  polinukleotida  dan  molekul  antosianin  di dalam nukleus. Pewarnaan yang terdeteksi pada inti sel  yang  diwarnai  dengan  antosianin  memiliki reaksi yang sama 16 .

## KESIMPULAN
Ekstrak buah senduduk dengan konsentrasi  80  %  dan  konsentrasi  100%  pada sediaan  apusan  darah  tepi  mampu  mewarnai eritrosit  dan  inti  leukosit  dengan  jelas.  Namun, tidak  mampu  mewarnai  granula  dari  leukosit  dan trombosit  secara  optimal.  Sehingga,  ekstrak  buah senduduk  memiliki  potensi  sebagai  pengganti pewarna  giemsa  pada  sediaan  apusan  darah  tepi

## DAFTAR PUSTAKA
1. Prasetyaningsih,  Y.  Darah  &  Komponennya. In:  Maharani,  E.A,  editor.  Hematologi Teknologi  Laboratorium  Medik.  Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC;2019.p.21.
2. Wuan,  A.0.  Teknik  Pembuatan  Sediaan  Apus Darah. In: Maharani, E.A, editor. Hematologi Teknologi  Laboratorium  Medik.  Jakarta: Penerbit  Buku  Kedokteran  EGC;2019.p.183- 1842w8`1.
3. Puasa,  R.  2017.  Studi  Perbandingan  Jumlah Parasit  Malaria  Menggunakan  Variasi  Waktu Pewarnaan  Pada  Konsentrasi  Giemsa  3%  di Laboratorium RSUD Dr. H. Chasan Boesoirie
Ternate. Jurnal Riset
Kesehatan. 2017;6(2):23–27.  doi:  10.31983/  jrk.v6i2 .2929.
4. Ifadah, R. A., Wiratara, P. R. W., dan Afgani, C.  A.  Ulasan  Ilmiah:  Antosianin  dan Manfaatnya untuk Kesehatan. Jurnal Teknologi  Pengolahan  Pertanian.  2021;3  (2). 11 - 21. doi:10.35308/jtpp.v3i2.4450.
5. Sari,  A.N.,  Masrillah.  Morfologi  Sel  Darah Pada Apusan Darah Tepi (SADT)
Menggunakan Pewarna Alternatif Ekstrak Kol Ungu  ( Brassica  oleracea L.).  Prosiding Seminar  Nasional  Biotik  [Internal];2021  19 Desember 2021.
6. Ardila,  R.,  Afnita,  Z.,  Sari,  A.N.,  Diningrat, D.S.  Ekstrak  Kulit  Buah  Jamblang  ( Sygyzium cumini )  Sebagai  Pewarna  Alternatif  Preparat Apusan  Darah  Tepi  (SADT).  In:  Prosiding Sixth  Postgraduate  Bio  Expo  2021  [Internal]; 2021  27  Oktober  2021,  Medan.  Avalilable from: UNIMED Digital Library http://digilib.unimed.ac.id/45855/3/Text.pdf.
7. Khasanah,  N.A.H.,  Husen,  F.,  Yuniati,  N.I. Pewarnaan  Sediaan  Apusan  Darah  Tepi (SADT)  Menggunakan  Infusa  Bunga  Telang ( Clitorea ternatea ). Jurnal Bina Cipta Husada. 2023;19(1):73-74.
8. Soesilo,  T.D.  Ragam  dan  Prosedur  Penelitian Tindakan.  Satya  Wacana  University  Press: Salatiga; 2019. 86-89 p.
9. Nugraha, G. Panduan Pemeriksaan Laboratorium  Hematologi  Dasar.  Trans  Info Media: Jakarta;2017.
10.  Nugraha,  G.  Teknik  Pengambilan  dan Penanganan  Spesimen  Darah  Vena  Manusia
untuk Penelitian. LIPI Press: Jakarta; 2022.46 p
11.  Yayuningsih,  D.,  Prayitno,  H.,  Mazidah. Hematologi. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC;2018.
12.  Salnus, S., Arwie, D. Ekstrak Antosianin Dari Ubi  Ungu (Ipomoea  batatas L.)  Sebagai Pewarna  Alami  Pada  Sediaan  Apusan  Darah Tepi.  Jurnal  Media  Analis  Kesehatan. 2020;11(2):93-94. doi: 10.32382/mak.
v11i2.177.
13.  Sari,  A.N.,  Masrillah.  Morfologi  Sel  Darah Pada Apusan Darah Tepi (SADT)
Menggunakan Pewarna Alternatif Ekstrak Kol Ungu  ( Brassica  oleracea L.).  Prosiding Seminar  Nasional  Biotik  [Internal];2021  19 Desember  2021,  Aceh.  Available  From: https://jurnal.ar-raniry.ac.id/index.php/  PBio tik/ article/view/11660/6218.
14.  Dogbevi, K, S., Ngo, B. K D., Branan, K. L., Gibbens,  A. M., Grunlan, M. A., dan Gerard, L.  C.  A  Thin  Whole  Blood  Smear  Prepared Via Pumpless
Microfluidics.
Springer.2021;25  (7):  25  –  29.  doi:10.1007/ s10404-021-02457-4.
15.  Susilawati,  E.,  Artati,  dan  Salnus  S.  Studi Potensi Ekstrak Antosianin dari Kulit Manggis  (Garcinia  mangostana)  sebagai Pewarna  Apusan  Darah  Tepi  (ADT)  dalam melihat  Gambaran  Leukosit.  Jurnal  TLM Blood  Smear.  2021;2(1).6–12.  doi:10.37362/ jmlt.v2i1.434.
16.  Suebkhampet, A., and Sotthibandhu, P. Effect of  Using  Aqueous  Crude  Extract  from Butterfly  Pea  Flowers  ( Clitoria  Ternatea L.) as  a  Dye  on  Animal  Blood  Smear  Staining. Suranaree J. Sci. Technol. 2021;19(1):15-19.
17.  Nusrullah, H.H dan Syahrir, M. The Effect of Temperature  and  Heating  Time  on  The Stability  Pigments  of  Citric  Acid  Extract  on Red Dragon Fruit Skin ( Hylocereus polyrhizus ) and Applications in Food Materials.  Journal  Chemica.  2021;22(1).46- 50.doi:https://doi.org/10.35580/chemica.v21i2 .17985.
18.   Kementerian  Kesehatan  Republik  Indonesia. Modul  Pelatihan  Mikroskopis  Malaria  Bagi Tenaga  ATLM.  Kementerian  Kesehatan  RI: Jakarta;2020.