## Journal of Pharmaceutical and Health Research
Vol 4, No 1, Februari 2023, pp. 91 − 96

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i1.3181

## Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Karenda (Carissa carandas Linn.) Terhadap Bakteri Propionibacterium acne dan Staphylococcus epidermidis
Vera Estefania Kaban 1,* , Nasri Nasri 1 , Hariyadi Dharmawan Syahputra 1 , Muhammad Fauzan Lubis 2 , Denny Satria 2
1 Program Studi Farmasi, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Senior, Medan, Indonesia
2 Fakultas Farmasi, Departemen Biologi Farmasi, Universitas Sumatera Utara, Medan, Indonesia Email: 1,* erakaban20@gmail.com, 2 nasri32.xb@gmail.com, 3 dharmawanhariyadi@gmail.com, 4 fauzan.lubis@usu.ac.id,
5 dennysatria@usu.ac.id
Abstrak −Daun Karenda adalah tumbuhan dengan kandungan flavonoid, steroid/triterpenoid, saponin, dan tannin yang mampu sebagai metabolit  antimikroba.  Tujuan  dilakukan    penelitian  ini  untuk  melihat  kemampuan  daun  karenda  sebagai  antibakteri  terhadap pertumbuhan bakteri. Metode penelitian yang dilakukan meliputi pembuatan ekstraksi maserasi dengan etanol 96% sebagai pelarut dan pengujian  aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun  karenda  menggunakan  metode  difusi  agar.  Bakteri  uji  yang  diujikan  adalah Propionibacterium  acne  dan  Staphylococcus  epidermis.  Konsentrasi  ekstrak  yang  digunakan  300,  150,125,  100,  75,  50,  25  dan  5 mg/mL. Berdasarkan pengujian yang dilakukan ektrak etanol daun karenda menunjukkan diameter zona hambat berturut-turut adalah 7,2±0,12  ;  7,8±0,10;  9,7±0,15;  11,23±0,25;  12,43±0,06;  13,57±0,06;  14,20±0,10;  16,47±0,21  untuk  Propionibacterium  acne  dan 8,17±0,06;9,37±0,15;9,80±0,10;10,73±0,15; 11,27±0,12; 12,43±0,06; 13,77±0,06; 15,47±0,12 untuk Staphylococcus epidermis. Dari hasil  pengujian  membuktikan  bahwa  300  mg/mL  adalah  konsentrasi  yang  terbaik  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri Propionibacterium acne dan Staphylococcus epidermis.
Kata Kunci: Propionibacterium Acne; Staphylococcus Epidermis; Daun Karenda; Antibakteri; Ekstraksi
Abstract −Karenda leaves contain flavonoids, steroids or triterpenoids, saponins, and tannins that act as antimicrobial compounds. The aim  of  the  study  was  to  determine  the  antibacterial  activity  of  the  ethanol  extract  of  Karenda  leaves  against  several  acne-causing bacteria. The research method involved characterizing the simplicia of karenda leaves and extract preparation by maceration using 96% ethanol as a solvent. and test the antibacterial activity of the ethanol extract of Karenda leaves using the agar diffusion method. The bacteria used were Propionibacterium acnes and Staphylococcus epidermis. The extract concentrations used were 300, 150, 125, 100, 75, 50, 25, and 5 mg/mL. Based on tests carried out by the ethanol extract of karenda leaves, the diameters of the inhibition zones were 7.2 ± 0.12 respectively; 7.8±0.10; 9.7±0.15; 11.23±0.25; 12.43±0.06; 13.57±0.06; 14.20±0.10; 16.47 ± 0.21 for  Propionibacterium acne and 8.17 ± 0.06; 9.37 ± 0.15; 9.80 ± 0.10; 10.73 ± 0.15; 11.27±0.12; 12.43±0.06; 13.77±0.06; 15.47 ± 0.12 for  Staphylococcus epidermis. he test results proved that 300 mg/mL was the best concentration for inhibiting the growth of Propionibacterium acnes and Staphylococcus epidermis bacteria.
Keywords : Propionibacterium Acne; Staphylococcus Epidermidis; Karenda Leaves; Antibacterial; Extraction

## 1. PENDAHULUAN
Jerawat adalah salah satu masalah yang dapat mengganggu keindahan kulit dan mengurangi rasa percaya diri seseorang (Amalyuri et al., 2022)  Salah satu faktor yang dapat menyebabkan jerawat adalah bakteri Propionibacterium acne dan bakteri  Staphylococcus  epidermidis  (Syahputra  et  al.,  2022).  Saat  ini  banyak  sudah  dikembangkan  berbagai  macam teknologi untuk mengatasi jerawat seperti penggunaan sediaan topical dengan bahan dasar kimiawi, penyinaran dengan sinar UV yang sudah pasti dapat menimbulkan efek samping yang tidak baik untuk kulit, salah satu efek sederhananya adalah mengiritasi kulit atau dapat mengganggu pertumbuhan sel kulit baru (Aliah et al., 2019). Mengatasi jerawat untuk kalangan remaja maupun remaja adalah menggunakan senyawa kimia benzoil peroksida dan asam retinoal, penggunaan antibiotic  seperti  penggunaan  clindamysin  ataupun  doksisiklin  juga  merupakan  salah  satu  alternatif  dalam  mengatasi jerawat, efek samping yang dapat ditimbulkan dari penggunaan antibiotic yang tidak sesuai dengan resep dokter adalah resistensi, dimana resistensi itu sendiri adalah kemampuan bakteri untuk dapat bertahan melawan antibiotic, dengan kata lain antibiotic tidak akan mampu lagi membunuh bakteri. Sehingga harus ditemukan pengembangan antibiotic generasi terbaru (Lubis et al., n.d.). Oleh sebab itu perlu dikembangkan pengobatan yang berasal dari alam dengan minimal efek samping yang mampu menguragi masalah jerawat oleh karena pertumbuhan bakteri.
Tanaman  karenda  (Carissa  carandas  Linn.)  adalah  tanaman  yang  banyak  tumbuh  secara  liar  di  Indonesia khususnya  di  daerah  Kalimantan  yang  memiliki  tinggi  2  –  4  meter  dan  memiliki  ranting  yang  berduri  tajam.  Banyak masyarakat yang masih belum memahami potensi penggunaan tanaman ini sebagai pengobatan. Masih hanya sebagian masyarakat kecil yang mengetahuinya. Tanaman karenda adalah tanaman yang banyak mengandung metabolit sekunder yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri. Penelitian sebelumnya membuktikan bahwa daun karenda memiliki efek sebagai  antikonvulsan,  kardiotonik,  antimikroba  dan  antidiabetes  (Neimkhum  et  al.,  2021).  Kandungan  metabolit sekunder yang dimiliki oleh daun karenda diantaranya adalah flavonoid, sapon dan tannin serta turunan senyawa fenol yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri (Thitilertdecha & Pintathong, 2022). Kandungan senyawa kimia lain yang terkandung dalam daun karenda adalah 4-asam hidroksibenzoat, asam oleanolat, triterpene, triterpene carandinol, asam askorbat dan senyawa fenolik yang masing-masing memiliki efektivitas yang berbeda-beda (Rahayu & Leviana, 2022). Secara  tradisional  daun  karenda  digunakan  masyarakat  dengan  cara  meminum  air  rebusan  daun  karenda  untuk memperoleh manfaat  dari daun karenda. Akan tetapi  hal  tersebut  memiliki  kekurangan diantaranya beberapa senyawa

## Journal of Pharmaceutical and Health Research
Vol 4, No 1, Februari 2023, pp. 91 − 96

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i1.3181
metabolit yang dapat rusak karena tidak tahan terhadap pemanasan atau ketidaksesuaian dosis yang digunakan yang dapat memberikan efek toksik bagi pengguna dan memungkinkan efek lain yang dapat timbul seperti mual, muntah, sakit kepala akibat ketidakcocokan antarra obat dengan pengguna (Khatun et al., 2017).
Ekstrak daun karenda telah diuji memiliki efek sebagai penghambat pertumbuhan bakteri. Penelitian sebelumnya melakukan  aktivitas  antibakteri  dengan  menggunakan  ekstrak  etanol  daun  karenda  terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli,  Klebsiella  pneumoniae,  Pseudomonas  aeruginosa,  Acinetobacter  baumannii, dan  Enterococcus  faecalis.  Pengujian  dilakukan  dengan  metode  difusi  sumuran  dimana  dengan  metode  ini  dilakukan dengan  tujuan  untuk  mengetahui  luas  diameter  daya  hambat  diantara  daerah  pengujian.  Metode  ini  dipilih  karena metodenya lebih mudah dalam melakukan pengukuran luas zona hambat yang terbentuk karena hasil isolate beraktivitas sampai pada bagian bawah permukaan pengujian. Hasil pengujian membuktikan bahwa ekstrak daun karenda memiliki potensi sebagai antibakteri  (Retnaningsih et al., 2019). Pembuatan ekstrak dilakukan dengan metode maserasi, metode ini  dipilih  karena  merupakan  metode  ekstraksi  dengan  cara  sederhana  dan  tidak  memerlukan  alat  yang  besar.  Tujuan penggunaan ekstrak adalah untuk  dapat  menarik  senyawa metabolit  yang terdapat  pada tumbuhan sehingga efek yang dihasilkan lebih baik (Kaban et al., 2022).
Akibat timbulnya berbagai kontra akibat penggunaan oba kimia untuk mengatasi masalah jerawat maka saat ini perlu dilakukan salah satu upaya pengembangan obat tradisional adalah memggunakan daun karenda sebagai salah satu pengobatan  tradisional  untuk  menghalangi  pertumbuhan  bakteri  Propionibacterium  acne  dan  bakteri  Staphylococcus epidermidis. Hal ini dibuat untuk mengurangi efek samping penggunaan obat-obat berbahan dasar senyawa kimia.

## 2. METODOLOGI PENELITIAN

## 2.1 Alat dan Bahan
2.1.1 Alat
Rotary evaporator, autoklaf, oven, incubator bakteri, jangka sorong, Laminar Air Flow (LAF), cawan petri, mikropipet, kawat ose dan alat-alat gelas laboratorium.

## 2.1.2 Bahan
Bakteri  uji  Propionibacterium  acne  dan  bakteri  Staphylococcus  epidermidis,  simplisia  daun  karenda,  DMSO,    Etanol 96%, Media Nutrient Agar (NA), Media Nutrient Broth (NB), aqua destilata

## 2.2.  Pembuatan Ekstrak
Maserasi  adalah metode yang digunakan untuk menghasilkan ekstrak, dimana maserasi  adalah proses ekstraksi  secara perendaman simplisia dengan pelarut yang sesuai. Simplisia dari daun karenda direndam dengan etanol 96 % selama 5 hari, disaring residu diremaserasi dengan menggunakan pelarut etanol 96% selama 2 hari. Filtrate yang sudah ditampung dipekatkan hingga kental dengan menggunakan rotary evaporator (Satria et al., 2022)

## 2.3. Sterilisasi Alat
Peralatan  gelas  yang  digunakan  disterilkan  menggunakan  oven  dengan  suhu  170ᵒC  dalam  waktu  1  jam.  Untuk  media antibakteri disterilkan didalam autoklaf dengan suhu 121ᵒC selama 15 menit (Muhammad et al., 2022).

## 2.4. Pembuatan Media Pengujian
2.4.1. Pembuatan Media Nutrient Agar (NA)
Sejumlah 23 gram serbuk NA dilarutkan dalam 1 L aquadest sambil dipanaskan hingga semua bahan larut.

## 2.4.2. Pembuatan Media Nutrient Broth (NB)
Sejumlah 8 gram serbuk NB dilarutkan dalam 1 L aquadest sambil dipanaskan hingga semua bahan larut.

## 2.4.3. Pembuatan Kultur Bakteri Propionibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis
Pada bakteri Propionibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis diremajakan dengan menggunakan alat-alat yang sudah disterilkan termasuk dengan jarum ose yang digunakan, kemudian diinokulasikan dengan media NA dengan cara menggores, dan diinkubasi dengan suhu 35 ± 2ᵒC hingga 24 jam.

## 2.4.4. Pembuatan Larutan Standar Kekeruhan McFarland
Larutan  yang  digunakan  H 2 SO 4 1% 9,95  dan  0,05  mL  BaCl 2 1%  (Konsentrasi  1,5  x  10 8 CFU/mL).  Larutan  tersebut digocok dan dilihat secara visual apakah larutan sudah memiliki warna kekeruhan yang sama pada inokulum bakteri.

## 2.4.5. Pembuatan Inokulum Bakteri Propionibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis
Pada bakteri  Propionibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis diremajakan dengan menggunakan alat-alat yang sudah  disterilkan  termasuk  jarum  oce  yang  digunakan,  kemudian  suspensi  NB  yang  sudah  dibuat  sebanyak  10  mL

## Journal of Pharmaceutical and Health Research
Vol 4, No 1, Februari 2023, pp. 91 − 96

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i1.3181
diinkubasi dengan temperatur 35 ± 2ᵒC hingga didapatkan kekeruhan transmitan 25% dengan spektrofotometri Uv-Vis (Rani et al., 2022).

## 2.4.6. Pembuatan Sampel Larutan Ekstrak Daun Karenda
Sebanyak 5 gram ekstrak daun karenda ditambahkan bahan dimetil sulfoksida (DMSO) sebanyak 10 mL diaduk dengan vortex hingga larut konsentrasi larutan 300 mg/mL atau 30% (b/v), dan diencerkan konsentrasi 300; 150,125, 100, 75, 50, 25 dan 5 mg/mL (Hafiz et al., 2022).

## 2.4.7. Pengujian Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Karenda
Ekstrak daun karenda diuji dengan uji difusi agar untuk mengetahui ada tidaknya sifat antibakteri. Sampel dimasukkan melalui  serangkaian  tes  untuk  memastikan  konsentrasi  hambat  minimum  (MIC).  Masukkan  0,1  mililiter  bakteri ditambahkan ke dalam cawan petri, lalu tambahkan 20 mililiter media NA yang telah dicairkan. Tunggu hingga mencapai 45  derajat  Celcius,  lalu  homogenkan,  lalu  tunggu  hingga  berubah  menjadi  padat.  Pada  selembar  kertas  yang  telah direndam kurang dari lima belas menit dalam larutan yang mengandung ekstrak kulit asam jawa pada konsentrasi yang telah  ditentukan,  kemudian  ditempatkan  media  dalam  bentuk  padat.  Sampel  kemudian  diinkubasi  pada  suhu  berkisar antara 36 hingga 37 derajat Celcius hingga 24 jam. Setelah itu, diameter zona hambat ditentukan dengan menggunakan alat jangka sorong digital, dengan tiga kali pengulangan (Manullang et al., 2022).

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1 Ekstraksi
Ekstraksi melalui penggunaan etanol sebagai pelarut. Maserasi sampel seberat 500 gram menghasilkan ekstrak sebanyak 161,22  gram.  Persentase  ekstrak  yang  dihasilkan  sebesar  32,24%.  Untuk  menghitung  persentase  rendemen,  cukup bandingkan jumlah total ekstrak yang dihasilkan dengan jumlah total simplisia yang terekstraksi dan hasilnya dikalikan dengan 100. Hasil ekstraksi disajikan pada Tabel 1
Tabel 1. Hasil ekstrasi Simplisia Berat Simplisia  Berat Ekstrak  Rendemen Daun Karenda 500 gram 161,22 gram 32,24%

## 3.2. Uji Aktivitas Antibakteri
Hasil  uji  aktivitas  penghambatan  pertumbuhan  bakteri  yang  dilakukan  pada  bakteri  Propionibacterium  acnes  dan Staphylococcus  epidermidis  disajikan  pada  Tabel  2  berikut.  Pengujian  ini  menggunakan  kedua  mikroorganisme  ini. Diameter zona hambat bakteri diukur dengan jangka sorong digital, dan luas zona bening dihitung dengan rata-rata total garis horizontal dan vertikal pada zona bening terluar. Hasil pengukuran pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil Pengukuran Diameter Zona Hambat bakteri Propionibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis
Konsentrasi ( mg/ml) Diameter Zona Hambat (mm) Propionibacterium acnes Staphylococcus epidermidis P1 P2 P3 X±SD
P1 P2 P3 X±SD 5 7,2 7,2 7,4 7,2 ± 0,12 8,2 8,2 8,1 8,17 ± 0,06 25 8,9 8,8 8,7 7,8 ± 0,10 9,4 9,2 9,5 9,37 ± 0,15 50 9,9 9,8 9,6 9,7 ± 0,15 9,8 9,9 9,7 9,80 ± 0,10 75 11,2 11 11,5  11,23 ± 0,25  10,6  10,7  10,9  10,73 ± 0,15 100 12,5  12,4  12,4  12,43 ± 0,06  11,2  11,4  11,2  11,27 ± 0,12 125 13,6  13,5  13,6  13,57 ± 0,06  12,4  12,4  12,5  12,43 ± 0,06 150 14,2  14,1  14,3  14,20 ± 0,10  13,8  13,8  13,7  13,77 ± 0,06 300 16,3  16,4  16,7  16,47 ± 0,21  15,6  15,4  15,4  15,47 ± 0,12
Telah diuji efektivitas ekstrak daun karenda sebagai penghambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes dan  Staphylococcus  epidermidis.  Ekstrak  tersebut  ternyata  efektif.  Konsentrasi  terkecil  ekstrak  daun  karenda  yaitu  5 mg/mL mampu memberikan nilai diameter zona hambat yang cukup baik. Nilai ini adalah 7,2 ± 0,12 mm untuk tiga kali pengulangan untuk bakteri yang dikenal sebagai Propionibacterium acnes, dan 8,17 ± 0,06 mm untuk bakteri yang dikenal sebagai  Staphylococcus  epidermidis.  Pengujian  sebelumnya  dilakukan  dengan  menguji  aktivitas  ekstrak  etanol  daun karenda  terhadap  penurunan  kadar  gula  darah  dan  pada  pengujian  ini  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun karenda mampu menurunkan kagar gula darah pada mencit yang diinduksi aloksan (Manullang et al., 2022).
Grafik pengaruh konsentrasi ekstrak daun karenda terhadap luas diameter area hambat bakteri dapat dilihat pada Gambar 1 dibawah ini.

## Journal of Pharmaceutical and Health Research
Vol 4, No 1, Februari 2023, pp. 91 − 96

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i1.3181
Gambar 1. Pengaruh konsentrasi ekstrak daun karenda terhadap pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis
Gambar  1  menunjukkan  bahwa  terdapat  pengaruh  yang  signifikan  konsentrasi  ekstrak  daun  karenda  terhadap pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis. Hal ini dapat dilihat dengan memeriksa data yang disajikan pada gambar 1. Diameter zona hambat yang dihasilkan berbanding lurus dengan konsentrasi ekstrak yang  diujikan  Semakin tinggi konsentrasi, semakin lebar diameternya. Semakin besar jumlah  ekstrak yang digunakan, maka semakin besar jumlah metabolit yang dimanfaatkan.
Dari  Tabel  2  dapat  dilihat  bahwa  konsentrasi  ekstrak  daun  karenda  masuk  dalam  antibakteri  katagori  sedang. Pembagian katagori zona hambat antibakteri dapat dilihat pada Tabel 3 dibawah ini.
Tabel 3. Kategori Diameter Zona Hambat Bakteri Diameter Zona Hambat (mm) Kategori < 5 Lemah 5 – 10 Sedang 10 – 20 Kuat >20 Sangat kuat
Dari Tabel 3 dilihat bahwa ekstrak memiliki efek antibakteri kategori sedang hingga kuat (Davis & Stout, 1971). Flavanoid, saponin, tanin, dan triterpenoid merupakan senyawa kimia antibakteri yang terdapat pada daun karanda. Daun Karenda  juga  mengandung  tanin.  Melalui  pembentukan  senyawa  kompleks  tumbuhan  dengan  protein  ekstraseluler dengan  pelarut,  flavonoid  mengerahkan  aktivitas  antibakterinya.  Hal  ini  memungkinkan  flavonoid  menyebabkan kerusakan membran sel bakteri yang kemudian diikuti dengan pelepasan senyawa intraseluler (Akhlaghi & Bandy, 2009). Senyawa  flavonoid  memiliki  kemampuan  untuk menghambat  pertumbuhan  bakteri  melalui  berbagai  mekanisme  yang berbeda.  Salah  satu  mekanisme  ini  menyebabkan  kerusakan  pada  permeabilitas  dinding  bakteri  serta  mikrosom  dan lisosom (Rani et al., 2022). Flavonoid menyebabkan perubahan struktural pada bakteri yang pada akhirnya akan mengarah pada perkembangan efek toksik  sebagai  akibat dari  perubahan struktural tersebut. Gugus senyawa flavonoid memiliki kemampuan  untuk  mendenaturasi  protein  yang  selanjutnya  menyebabkan  kerusakan  pada  dinding  sel  bakteri,  yang kemudian memungkinkan gugus hidroksil tersebut masuk ke dalam dinding sel bakteri yang telah rusak (Arora & Itankar, 2018).
Tanin diketahui memiliki sifat antibakteri karena kemampuannya untuk mengendapkan protein, yang mengganggu proses sintesis protein pada bakteri. Dipercayai bahwa tanin memiliki efek yang sama pada bakteri seperti halnya senyawa fenolik  (Haro  et  al.,  2020;  Lestari,  2015).  Senyawa  ini  memiliki  kemampuan  untuk  memperkecil  ukuran  dinding  sel bakteri sehingga dapat mengganggu permeabilitas membran sel. Ketika permeabilitas sel bakteri terganggu, sel menjadi tidak dapat berpartisipasi dalam aktivitas yang diperlukan untuk hidup. Akibatnya, pertumbuhan bakteri terhambat, dan akhirnya  bakteri  tersebut  mati.  Tanin  mengejar  polipeptida  dinding  sel  yang  menyebabkan  pembentukan  dinding  sel terganggu (Muhammad et al., 2022). Karena tekanan osmotik dan fisik, ini menyebabkan sel bakteri lisis, yang akhirnya mengakibatkan kematian sel bakteri (Harbone, 1973).
Saponin  adalah  bagian  dari  aktivitas  antibakteri  dengan  mekanisme  menghambat  permeabilitas  membran  sel bakteri  dan  bertanggung  jawab  atas  aktivitas  antibakteri.  Pengurangan  tegangan  permukaan  yang  terjadi  akibat  aksi saponin inilah yang menyebabkan peningkatan permabilitas, juga dikenal sebagai kebocoran sel. Jika selaput ini rusak,
0 50 100 150 200 250 300 6 8 10 12 14 16 18 D ia me te r Z o n a H a mb a t (mm)
Konsentrasi (mg/mL)
Propionibacterium acnes Staphylococcus epidermidis

## Journal of Pharmaceutical and Health Research
Vol 4, No 1, Februari 2023, pp. 91 − 96

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i1.3181
itu menimbulkan ancaman yang signifikan terhadap kemampuan bakteri untuk hidup. Senyawa-senyawa tersebut mampu menembus  membran  luar  sel  dan  juga  dinding  selnya  yang  lemah,  setelah  itu  berikatan  dengan  membran  sitoplasma sehingga menjadi terganggu dan menurunkan tingkat keseimbangannya. Hal ini membuat sitoplasma sel bocor, sehingga menyebabkan  kematian  sel.  Antimikroba  yang  membunuh  bakteri  disebut  bakterisida,  dan mereka membunuh  bakteri dengan cara memecahkan membran sitoplasma (Afrose et al., 2010; Syahputra et al., 2022).
Steroid antibakteri yang berhubungan dengan membran lipid, dan kepekaan terhadap komponen steroid yang bisa membuat kebocoran pada liposom. Steroid digunakan untuk mengobati infeksi pada bakteri (Satria et al., 2022). Steroid diketahui  berinteraksi  dengan  membran  sel  fosfolipid,  yang  diketahui  permeabel  terhadap  senyawa  lipofilik.  Interaksi tersebut  dapat  mengakibatkan  penurunan  integritas  membran  serta  perubahan  morfologi  membran sel  yang  keduanya dapat menyebabkan kerapuhan dan lisis sel (Mashunah & Sitorus, 2020)
Besarnya aktivitas antibakteri ekstrak terhadap bakteri uji juga dipengaruhi oleh konsentrasi ekstrak. Berdasarkan data  yang  disajikan  sebelumnya,  dapat  disimpulkan  bahwa  sejauh  mana  ekstrak  menghambat  pertumbuhan  bakteri sebanding dengan konsentrasi ekstrak. Hal ini ditunjukkan dengan bertambahnya diameter zona hambat yang terbentuk, yang menunjukkan bahwa efektivitas bahan uji dalam memerangi mikroba semakin meningkat (Angelina et al., 2015).

## 3.3. Analisis Data
Hasil uji aktivitas antibakteri Propionibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis diolah menggunakan uji One Way ANOVA dengan dua perlakuan dan nilai p-value 0,005 pada program SPSS 22. Sampel berdistribusi normal karena nilai p kurang dari 0,005, menurut temuan tes yang digunakan untuk menilai apakah sampel berdistribusi normal atau tidak. Uji  ANOVA  (analysis  of  variance)  dapat  dilakukan  karena  hasil  uji  normalitas  bakteri  Propionibacterium  acnes  dan bakteri Staphylococcus epidermidis sama-sama memiliki nilai p sebesar 0,001 dan 0,03.
Tes  Post-Hoc,  juga  dikenal  sebagai  tes  Tukey,  kemudian  dilakukan.  Tujuan  dari  pengujian  ini  adalah  untuk menentukan kelompok mana yang memiliki perbedaan nilai paling signifikan pada masing-masing konsentrasi berikut: 5, 25, 50, 75, 100, 125, 150, dan 300. Nilai tersebut berbeda secara signifikan pada masing-masing kelompok. koefisien berikut jika dibandingkan secara berurutan: 8,03967; 3,31200; 2,63333; 1,68100; 1.16333. Angka signifikan diperoleh (Sig.) sebesar 0,000; 0,000; 0,000; 0,000; dan 0,002 jauh lebih rendah dari tingkat signifikansi yang ditetapkan sebesar 0,05 yang menunjukkan adanya perbedaan antara kedua kelompok. Dimungkinkan untuk menarik kesimpulan dari data ini bahwa ada perbedaan yang cukup besar antara rata-rata pada setiap konsentrasi.

## 4. KESIMPULAN
Pengujian ekstrak etanol daun karenda yang diujikan sebagai antibakteri dengan metode difusi agar pada konsentrasi 300; 150,125, 100, 75, 50, 25 dan 5 mg/mL memiliki efektivitas sebagai penghambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes  dan  Staphylococcus  epidermidis.  Konsentrasi  terendah  yaitu  5  mg/mL  efek  aktivitas  memiliki  diameter  zona hambat  7,2 ± 0,12  mm  pada  Propionibacterium  acnes  dan  8,17 ± 0,06  mm  pada  Staphylococcus  epidermidis.  Hal  ini menunjukkan  pada  konsentrasi  terendah  ekstrak  etanol  daun  karenda  memiliki  aktivitas  antibakteri  kategori  sedang sehingga konsentrasi  harus ditingkatkan untuk memperoleh efek maksimal  yaitu konsentrasi  300 mg/mL dengan zona hambat  16,47±0,21  mm  pada  Propionibacterium acnes  dan  15,47 ± 0,12  mm  pada  Staphylococcus  epidermidis  dengan kategiri kuat.

## REFERENCES
Afrose, S., Hossain, M. S., Salma, U., Miah, A. G., & Tsujii, H. (2010). Dietary karaya saponin and Rhodobacter capsulatus ex ert hypocholesterolemic effects by suppression of hepatic cholesterol synthesis and promotion of bile acid synthesis in laying hens. Cholesterol, 2010.
Akhlaghi, M., & Bandy, B. (2009). Mechanisms of flavonoid protection against myocardial ischemia–reperfusion injury. Journal of Molecular and Cellular Cardiology, 46(3), 309–317.
Aliah, A. I., Wahyuni, W., & Bachri, N. (2019). Uji Daya Hambat Formula Gel Ekstrak Etanol Daun Murbei (Morus alba L.) Sebagai Anti Acne Terhadap Bakteri Propionibacterium acne. Jurnal Farmasi Galenika (Galenika Journal of Pharmacy)(e-Journal), 5(2), 206–213.
Amalyuri, A. G., Reveny, J., & Dalimunthe, A. (2022). Antibacterial Potential Of Ethanol Extract Of Tamarind Seed Bark (Tamarindus indica L.) And Formulation Of Anti-Acne Nanogel. International Journal of Science, Technology & Management, 3(3), 598–604. Angelina, M., Turnip, M., & Khotimah, S. (2015). Uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun kemangi (Ocimum sanctum L.) terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus. Jurnal Protobiont, 4(1).
Arora, S., & Itankar, P. (2018). Extraction, isolation and identification of flavonoid from Chenopodium album aerial parts. Journal of Traditional and Complementary Medicine, 8(4), 476–482.
Davis, W. W., & Stout, T. R. (1971). Disc plate method of microbiological antibiotic assay: I. Factors influencing variability and error. Applied Microbiology, 22(4), 659–665.
Hafiz, I., Novilia, L., Husna, N., & Lubis, M. F. (2022). Antibacterial Activity of Water, Ethyl Acetate and n -Hexane Fractions of Pagoda leaves (Clerodendrum paniculatum L.) against Propionibacterium acnes. Research Journal of Pharmacy and Technology, 15(6), 2521–2524.
Harbone, J. B. (1973). Phytochemical Methods London. Chapman and Hall1973.

## Journal of Pharmaceutical and Health Research
Vol 4, No 1, Februari 2023, pp. 91 − 96

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i1.3181
Haro,  G.,  Iksen,  I.,  &  Nasri,  N.  (2020).  Identification,  characterization  and  antibacterial  potential  of  probiotic  lactic  acid  bacteria isolated from naniura (A traditional batak fermented food from carp) against Salmonella typhi.  Rasayan Journal of Chemistry, 13(1), 464–468.
Kaban, V. E., Nasri, N., Dharmawan, H., & Satria, D. (2022). Formulasi dan Uji Efektivitas Sabun Pencuci Tangan dari Ekstrak Daun Pandan (Pandanus amaryllifolius Roxb.) Terhadap Bakteri Salmonella sp. Herbal Medicine Journal, 5(1), 8–12.
Khatun, M., Habib, M. R., Rabbi, M. A., Amin, R., Islam, M. F., Nurujjaman, M., Karim, M. R., & Rahman, M. H. (2017). Antioxidant, cytotoxic and antineoplastic effects of Carissa carandas Linn. Leaves. Experimental and Toxicologic Pathology, 69(7), 469–476.
Lestari, T. (2015). Isolasi dan Identifikasi Senyawa Tanin dari Ekstrak Air Kulit Batang Kelapa Gading (Cocos nucifera var. Eburnea). Jurnal Kesehatan Bakti Tunas Husada: Jurnal Ilmu-Ilmu Keperawatan, Analis Kesehatan Dan Farmasi, 9(1), 22.
Lubis, M. F., Kaban, V. E., Aritonang, J. O., Satria, D., Mulina, A. A., & Febriani, H. (n.d.). ACUTE TOXICITY AND ANTIFUNGAL ACTIVITY OF THE OINTMENT Murraya koenigii ETHANOL EXTRACT.
Manullang,  H.  F.,  Meliala,  L.,  &  Marbun,  V.  E.  (2022).  Uji  Efektivitas  Ekstraks  Etanol  Daun  Karenda  (Carissa  carandas  Linn.) Terhadap Penurunan Kadar Gula Darah Pada Mencit Jantan Dengan Pembanding Glibenklamid. BEST Journal (Biology Education, Sains and Technology), 5(2), 302–307.
Mashunah, E., & Sitorus, S. (2020). Isolasi dan Identifikasi Steroid dari Ekstrak N-Heksana Daun Afrika (Vernonia amygdalina Del.). KOVALEN: Jurnal Riset Kimia, 6(1), 18–22.
Muhammad, M., Nasri, N., Kaban, V. E., Satria, D., & Cintya, H. (2022). Antibacterial Potential Ethanol Extract of Papaya Leaves (Carica papaya Linn.) Towards Salmonella typhi. BEST Journal (Biology Education, Sains and Technology), 5(2), 265–270.
Neimkhum, W., Anuchapreeda, S., Lin, W.-C., Lue, S.-C., Lee, K.-H., & Chaiyana, W. (2021). Effects of Carissa carandas Linn. Fruit, pulp,  leaf,  and  seed  on  oxidation,  inflammation,  tyrosinase,  matrix  metalloproteinase,  elastase,  and  hyaluronidase  inhibition. Antioxidants, 10(9), 1345.
Rahayu,  M.  P.,  &  Leviana,  F.  (2022).  ANTIBACTERIAL  ACTIVITY  OF  KARANDA  (Carissa  carandas)  LEAF  AND  FRUIT EXTRACT TO AGAINST Streptococcus mutans, Escherichia coli, Staphylococcus aureus.  JKPharm Jurnal Kesehatan Farmasi, 4(1), 47–52.
Rani,  Z.,  Nasution,  H.  M.,  Kaban,  V.  E.,  Nasri,  N.,  &  Karo,  N.  B.  (2022).  Antibacterial  activity  of  freshwater  lobster  (Cherax quadricarinatus)  shell  chitosan  gel  preparation  against  Escherichia  coli  and  Staphylococcus  aureus.  Journal  of  Applied Pharmaceutical Science.
Retnaningsih, A., Primadiamanti, A., & Marisa, I. (2019). UJI DAYA HAMBAT EKSTRAK ETANOL BIJI PEPAYA TERHADAP BAKTERI Escherichia coli DANShigella dysentriaeDENGAN METODE DIFUSI SUMURAN. Jurnal Analis Farmasi, 4(2), 122– 129.
Satria,  D.,  Sofyanti,  E.,  Wulandari,  P.,  Pakpahan,  S.  D.,  &  Limbong,  S.  A.  (2022).  Antibacterial  activity  of  Medan  Butterfly  pea (Clitoria ternatea L.) corolla extract against Streptococcus mutans ATCC® 25175 TM and Staphylococcus aureus ATCC® 6538 TM . Pharmacia, 69(1), 195–202.
Syahputra, H. D., Nasri, N., & Kaban, V. E. (2022). Pengujian Potensi Aktivitas Antibakteri dari Daun Cep-cepan (Saurauia cauliflora DC.) dalam Formulasi Sediaan Gel Terhadap Propionibacterium acnes. Herbal Medicine Journal, 5(1), 28–32.
Thitilertdecha, N., & Pintathong, P. (2022). The Antioxidant and Anti-Tyrosinase Activities of Carissa carandas Linn. Fruit Extracts and their Applications in Cosmetics. Indian Journal of Pharmaceutical Sciences, 84(5), 1218–1226.