p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
AKTIVITAS FRAKSI ETIL ASETAT KULIT BUAH JERUK NIPIS ( Citrus aurantifolia (Christ) Swing) SEBAGAI ANTIPIRETIK PADA MENCIT

## YANG DIINDUKSI VAKSIN DPT
Satrio Wibowo Rahmatullah*, Eka Fitri Susiani, M. Reza Pahlevi, Guntur Kurniawan, Siti Nurhaliza Leyla
Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Borneo Lestari
Email: satriowibowo@stikesborneolestari.ac.id
Artikel diterima: 26 Agustus 2021; Disetujui: 27 September 2021 DOI: https://doi.org/10.36387/jiis.v6i2.740

## ABSTRAK
Jeruk nipis ( Citrus aurantifolia (Christm.) Swing) mengandung senyawa yang  bermanfaat  sehingga  banyak  digunakan  dalam  pengobatan  tradisional. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antipiretik  dari  fraksi  etil asetat kulit buah jeruk nipis. Hasil uji skrining fitokimia fraksi etil asetat kulit buah  jeruk  nipis  mengandung  senyawa  flavonoid,  saponin,  alkaloid  dan minyak  atsiri.  Sebanyak  25  ekor  mencit  dibagi  menjadi  5  kelompok, kelompok I  kontrol negatif, kelompok II  kontrol  positif, kelompok III, IV, V diberikan  fraksi  etil  asetat  dosis  0,07  %/20gBB,  0,105  %/20gBB  dan  0,14 %/20gBB.  Berdasarkan  hasil  grafik  rata-rata  penurunan  suhu  bahwa  ketiga dosis  tersebut  memiliki  aktivitas  antipiretik  karena  dapat  menurunkan  suhu dan penurunan suhu terbesar pada dosis 0,14 %/20gBB. Berdasarkan hasil uji ANOVA diperoleh nilai sig. 0,000 yang berarti terdapat perbedaan suhu yang bermakna antar  5  kelompok perlakuan. Dan  pada uji Independent Sample  T- test antara kontrol positif dengan  dosis 0,14 %/20gBB menghasilkan nilai sig. 0,601 (>0,05) yang berarti tidak terdapat perbedaan bermakna.
Kata  kunci: fraksi  etil  asetat,  kulit  buah  jeruk  nipis,  C itrus  aurantifolia (Chrstm.) Swing, antipiretik.

## ABSTRACT
Lime  (Citrus  aurantifolia  (Christm.)  Swing)  is  one  of  the  types  of oranges containing elements of compounds that are beneficial, so widely used as traditional medicine. This research aims to know the antipyretic activity of ethyl  acetate  fraction  peel  of  lime.  Phytochemical  screening  test  result fraction ethyl acetate lemon rind contains flavonoids, saponins, alkaloids and essential  oils.  Total  of  25  mice  were  divided  into  5  groups,  group  I  negative control,  group  II  positive  control,  group  III,IV,V  were  given  ethyl  acetate fraction at a dose of 0,07%/gBW,, 0,105%/gBWand 0,14%/gBW. Based on the results  of  graph  average  temperatures  decrease  the  dose  that  the  third  has antipyretic  activity  because  it  can  lower  the  temperature  and  the  largest decreased  in  temperature  at  a  dose  0,14%/gBW.  Based  on  the  test  result ANOVA  obtained  sig.  value  0,000.  which  means  there  is  a  temperature
difference  of  meaning  between  5  group  treatment.  And  on  Independent  Test Sample T-test between a positive control with a dose 0,14%/gBW the value of sig. 0,601 (> 0,05) which means there is no meaningful difference.
Key  words :  Ethyl  acetate  fraction,  lime  rind,  Citrus  aurantifolia  (Chrstm.) Swing, antipiretic

## PENDAHULUAN
Demam  merupakan  penyakit yang sering dialami oleh masyarakat. Demam  dapat  diartikan  sebagai kelainan  pada  sistem  pengaturan suhu  tubuh,  sehingga  suhu  tubuh meningkat  dibandingkan  suhu  tubuh normal.  Suhu  tubuh  normal  berkisar antara  36,5-37,2°C  (Widyasari  & Ratika,  2017).  Antipiretik  adalah senyawa  yang  dapat  menurunkan demam (suhu tubuh tinggi) (Tjay & Rahardja, 2015). Antipiretik merupakan  salah  satu  obat  yang
secara luas paling banyak digunakan. Obat yang biasa digunakan untuk menurunkan
demam adalah parasetamol. Sekitar
175 juta tablet parasetamol dikonsumsi  masyarakat  Indonesia setiap tahunnya ketika gejala demam  muncul  karena  cukup aman, mudah didapat dan harganya terjangkau  (Elly,  2010).  Obat  ini dapat  menurunkan  suhu  tubuh hanya pada keadaan demam,
namun  pemakaian  obat  golongan ini  tidak  boleh  digunakan  dalam jangka  panjang  karena  bersifat toksik.  Efek  samping  yang  sering ditimbulkan  setelah  penggunaan antipiretik adalah respon hemodinamik seperti hipotensi, gangguan  fungsi  hepar  dan  ginjal, oliguria  (kondisi  dimana  jumlah urin  sedikit),  serta  retensi  garam dan air (Hammond & Boyle, 2011).
Menurut  Nogata  dkk.,  (2014) jus butiran daging buahnya memiliki kandungan flavonoid yang  lebih  rendah  dibandingkan pada kulitnya. Berdasarkan skrinning fitokimia fraksi etil asetat kulit buah jeruk nipis ( C.
aurantifolia ) mengandung
golongan senyawa flavonoid, alkaloid  dan  saponin.  Selain  itu kulit  jeruk  nipis  juga  mengandung golongan senyawa minyak atsiri.
Beberapa peneliti menyatakan  bahwa  senyawa  yang memiliki  efek  antipiretik  adalah
p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
flavonoid,  saponin  (Ashfaq  dkk., 2016),  alkaloid  (Sajeesh  dkk., 2011)  dan  minyak  atsiri  (Ravendra dkk.,  2017).  Flavonoid,  alkaloid dan  saponin  telah  menunjukkan aksi  penghambatan  pada  enzim siklooksigenase dan sebagai hasilnya  menghasilkan  aktivitas antipiretik (Maina dkk., 2015).
Berdasarkan  uraian  tersebut, maka  perlu  dilakukan  penelitian lebih  lanjut  terkait  aktivitas  fraksi etil  asetat  kulit  buah  jeruk  nipis sebagai  antipiretik  pada  mencit yang diinduksi vaksin DPT. Vaksin DPT  digunakan  sebagai  induksi karena  dapat  meningkatkan  suhu tubuh mencit secara signifikan.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilakukan  di Laboratorium Bahan Alam, Farmakologi-Toksikologi STIKES Borneo Lestari Banjarbaru. Determinasi  tumbuhan  jeruk  nipis dilakukan  di  Laboratorium  Dasar FMIPA Universitas Lambung
Mangkurat  dan  Pembuatan Ethical Clearence dilakukan  di  Komite  Etik Fakultas  Kedokteran  dan  Kesehatan Universitas Lambung  Mangkurat
dengan No. 68/KEPK-FK UNLAM/EC/III/2019. Penelitian ini dilakukan kepada  5  kelompok  hewan  uji (masing-masing  kelompok  terdiri dari  5  hewan  uji)  yang  diberikan fraksi  etil  asetat  kulit  buah  jeruk nipis dengan 3 konsentrasi berbeda, serta menggunakan kelompok kontrol positif dan negatif.  konsentrasi  fraksi  etil asetat  kulit  buah  jeruk  nipis  yang digunakan  adalah  sebesar  0,07 %/20gBB,  0,105  %/20gBB,  0,14 %/20gBB.  Kontrol  positif  yang digunakan adalah parasetamol, sedangkan  untuk  kontrol  negatif yang  dignakan  adalah  Na-CMC dengan  konsentrasi  0,5%.  Sebelum dilakukan  pengujian  fraksi  etil asetat  kulit  buah  jeruk  nipis kepada hewan uji, dilakukan pengujian  skrining  fitokimia  (uji flavonoid, saponin, steroid, triterpenoid,  dan  alkaloid).  Proses ekstraksi menggunakan metode maserasi  serta  fraksinasi  dengan metode ECC (Ekstraksi Cair-Cair).
Data  yang  diperoleh  dianalisis dengan  SPSS  untuk  mengetahui homogenitas dan normalitasnya.
p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
Untuk  uji  normalitasnya    digunakan
uji Saphiro-wilk karena  sampel
kurang  dari  50,  sedangkan  untuk  uji homogenitasnya digunakan uji Levene .  Apabila  data  terdistribusi normal  dan  homogen  dilanjutkan dengan  uji parametric ANOVA.
Apabila  data  tidak  terdistribusi normal  dan  tidak  homogen  maka dilanjutkan dengan uji non
parametric Kruskal-wallis , dan
apabila  hanya  salah  satu  juga dilanjutkan dengan uji non
parametric Kruskal-wallis . Data
dikatakan homogen atau terdistribusi normal jika nilai signifikan lebih dari 0,05.  Dan  juga  digunakan  uji Independent  Sample  T-test  untuk mengetahui  aktivitas  yang  lebih bagus dari dosis yang diberikan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Fraksinasi  adalah  pemisahan antara  senyawa  yang  diinginkan dengan  senyawa  lain  yang  masih terkandung dalam simplisia tersebut berdasarkan tingkat kepolaran, senyawa  yang diperoleh lebih  murni  dibanding  ekstraksi (Septiarusli  dkk.,  2012).  Oleh karena  itu,  peneliti  menggunakan
metode fraksinasi.
Berdasarkan penelitian Syamsi & Angelia (2019)
menyatakan  bahwa  ekstrak  etanol 96%  jeruk  nipis  memiliki  efek antipiretik  terhadap  mencit  yang telah  diinduksi  demam  dengan vaksin DPT.
Kulit  buah  jeruk  nipis  ( C. Aurantifolia) segar  diproses  sampai didapatkan  simplisia  kering.  Hasil rendemen  simplisia  yang  diperoleh yaitu 38,46%. Serbuk simplisia yang sebelumnya  telah  diayak  kemudian diekstraksi  secara  maserasi  dengan etanol  96%  (1:4)  selama  1x24  jam, dan dilakukan 2x remaserasi didapatkan rendemen ekstrak sebesar 10,48%. Penyerbukan simplisia dapat meningkatkan
luas permukaan  partikel  yang  dapat masuk  ke  dalam  serbuk  dan  akan mengeluarkan  zat  kimia  yang  akan bercampur  dengan  zat  penyari sehingga  proses  penyarian  dapat berlangsung efektif. Kemudian diayak  menggunakan  ayakan  mesh 40. Tujuan dari pengayakan adalah untuk menyeragamkan ukuran serbuk.  Serbuk  simplisia  kemudian disimpan  dalam  wadah  tertutup
p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
rapat.Proses dilanjutkan dengan fraksinasi  secara  ECC  (Ekstraksi
Cair-Cair) hingga didapatkan rendemen  fraksi  etil  asetat  sebanyak 5,6%.  Hasil  skrining  fitokimia  dari fraksi  etil  asetat  kulit  buah  jeruk nipis mengandung flavonoid,
alkaloid, saponin, dan minyak atsiri. Berdasarkan uji aktivitas antipiretik fraksi etil asetat kulit buah jeruk  nipis,  diperoleh  hasil  yang digambarkan  dalam  grafik  yang dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Grafik Rata-rata
Pengukuran Suhu Rektal Mencit
Hasil penelitian ini menunjukkan penurunan suhu yang bervariasi antar kelompok
perlakuan. Kelompok kontrol
negatif  yang  diberi  larutan  Na- CMC  0,5%  merupakan  kelompok yang paling kecil mengalami penurunan suhu dibandingkan kelompok  perlakuan  lainnya.  Hal ini  disebabkan  karena  larutan  Na- CMC  0,5%  tidak  memiliki  efek antipiretik.  Kelompok  perlakuan kontrol positif yang diberi paracetamol  mengalami  penurunan suhu terbesar pada hewan uji, yaitu
≤  37,5 o C.  Penurunan  suhu  yang besar  terjadi  karena  paracetamol memiliki efek antipiretik. Antipiretik mencegah pembentukan prostaglandin dengan jalan
p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
menghambat enzim siklooksigenase (Hastuti & Endrawati, 2016). Penggunaan paracetamol  sebagai  kontrol positif karena paracetamol merupakan antipiretik  yang  secara  umum dipakai  di  masyarakat  dan  mudah didapat.
Kelompok  fraksi  etil  asetat kulit  buah  jeruk  nipis  dosis  1 mengalami  penurunan  suhu,  yaitu < 38 o C. Kelompok dosis 1 memiliki  efek  antipiretik  namun belum  efektif  karena  penurunan suhu yang terjadi masih lebih kecil dibandingkan  dengan  kelompok kontrol  positif  yang  diberikan parasetamol. Pada  kelompok  fraksi etil  asetat  kulit  buah  jeruk  nipis dosis 2 mengalami penurunan suhu yang  besar,  yaitu  ≤  37,5 o C. Sedangkan  pada  kelompok  fraksi etil  asetat  kulit  buah  jeruk  nipis dosis  3  juga  mengalami  penurunan suhu  yang  besar,  yaitu  <  37,5 o C. Penurunan  suhu  pada  kelompok fraksi  etil  asetat  kulit  buah  jeruk nipis  dosis 1, 2  dan  3 mulai terjadi pada  hewan  uji  di  menit  ke-30. Namun  pada  menit  ke-60  dosis  1 dan  dosis  2  mengalami  kenaikan
suhu, sedangkan dosis 3 mengalami  penurunan  suhu.  Dan pada menit ke-180 dosis 3 mengalami  penurunan  suhu  paling besar  dibanding  dosis  1  dan  2. Dilihat pada grafik bahwa kelompok  fraksi  etil  asetat  kulit buah  jeruk  nipis  dosis  3  terjadi penurunan suhu yang besar melebihi  penurunan  suhu  yang tejadi  pada  kelompok  fraksi  etil asetat kulit buah jeruk nipis dosis 1 dan  2,  dan  juga  terlihat  sebanding dengan  penurunan  suhu  kelompok paracetamol.
Dilihat  pada  grafik  rata-rata pengukuran suhu rektal mencit data yang diperoleh menunjukkan adanya  variasi  penurunan  suhu pada  tiap  kelompok  perlakuan. Menurut Putra dkk. (2015) penurunan  yang  bervariasi  ini disebabkan  oleh  banyak  faktor yang mempengaruhi seperti hormon, lingkungan, kondisi lambung, dan dapat pula
disebabkan  oleh  faktor  psikologis seperti  stress  yang  dialami  akibat pengukuran  berulang  pada  rektum mencit.
Kemudian data dianalisis
p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
dengan  SPSS  untuk  mengetahui homogenitas  dan  normalitasnya. Untuk uji normalitasnya digunakan uji Saphiro-wilk . Berdasarkan hasil
dari uji Shapiro-Wilk nilai signifikan dari 5 kelompok
perlakuan  adalah  >  0,05  maka dapat  disimpulkan  bahwa  data terdistribusi normal. Kemudian dilakukan uji Levene yang ditujukan untuk melihat dan mengetahui homogenitas pada sebaran data yang diperoleh.
Berdasarkan  hasil  dari  uji Levene , nilai  signifikan  yang  diperoleh adalah  0,147  yang  berarti  >  0,05 maka  dapat  disimpulkan  bahwa data  yang  dihasilkan  homogen. Karena data yang dihasilkan terdistribusi  normal  dan  homogen, maka uji selanjutnya yang digunakan  adalah  uji  parametrik yaitu  uji Analysis  of  Variance (ANOVA) untuk melihat dan mengetahui  data  yang  diperoleh terdapat  perbedaan  yang  bermakna atau  tidak  terdapat  perbedaan  yang bermakna.  Berdasarkan  hasil  dari uji Analysis of Variance (ANOVA), diperoleh hasil signifikan 0,000 yang dapat
disimpulkan bahwa terdapat perbedaan  suhu  yang  bermakna dari 5 kelompok perlakuan.
Kemudian uji selanjutnya yang dilakukan adalah uji
Independen  T-Test  untuk  melihat perbandingan  antar  2  kelompok perlakuan. Pengujian dilakukan sebanyak  dua  kali  yaitu  pada perlakuan  kontrol  positif  dengan dosis  3  dan  kontrol  negatif  dengan dosis  3.  Dosis  3  digunakan  karena dilihat  pada  grafik  bahwa  dosis  3 yang  menurunkan  suhu  paling besar.  Berdasarkan  hasil  dari  uji Independen  T-Test  antara  kontrol positif  dengan  dosis  3  diperoleh nilai signifikan 0,601 (> 0,05). Hal tersebut  dapat  disimpulkan  bahwa tidak  terdapat  perbedaan  yang bermakna antara suhu yang dihasilkan  oleh  dosis  3  dengan suhu  yang  dihasilkan  oleh  kontrol positif yaitu paracetamol.
Sedangkan hasil dari uji Independen  T-Test  antara  kontrol negatif dengan dosis 3 memperoleh sig  0,001  (<  0,05).  Sehingga  dapat disimpulkan bahwa terdapat perbedaan  yang  bermakna  antara suhu  yang  dihasilkan  oleh  dosis  3
p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
dengan  suhu  yang  dihasilkan  oleh kontrol negatif yaitu Na-CMC.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian ini dapat  disimpulkan  bahwa    fraksi  etil asetat kulit buah jeruk nipis memiliki aktivitas  antipiretik  pada  mencit jantan  yang  diinduksi  vaksin  DPT. Fraksi  etil  asetat  dosis    3  (dosis 0,14%/20  gBB)  merupakan  dosis yang    mampu  memberikan  aktivitas antipiretik terbaik dilihat dari kemampuannya  dalam  menurunkan suhu  yang  tidak  berbeda  bermakna jika  dibandingkan  dengan  kelompok kontrol positif.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti  mengucapkan  terima kasih  yang  sebesar-besarnya  kepada semua  pihak  yang  telah  membantu, terutama  kepada  Yayasan  Borneo Lestari yang telah memfasilitasi baik dukungan finansial maupun
dukungan  sarana  prasarana  lainnya dalam  penelitian  internal  dosen
STIKES Borneo Lestari.
DAFTAR PUSTAKA Ashfaq,  K.,  B.A.  Choudhary,  M. Uzair,  S.N.  Hussain,  M.A. Ghaffari, W. Sarwar.M. Manzoor.  2016.  Antipyretic, Analgesic and Anti- inflammatory  Activities  of Methanol  Extract  of  Root Bark  of  Acaci  Jacquemontii Benth (Fabaceae) in Experimental Animals. Tropical Journal of Pharmaceutical Research . 15(9): 1859-1863. Elly,  F.E.  2010.  Efek  Antipiretik Ekstrak Daun Pare (Momordica charantia I.) Pada  Tikus  Putih  Jantan. Skripsi . Program Sarjana, Universitas  Sebelas  Maret, Surakarta.
Hammond  N.E.  &  Boyle  M.  2011.
Pharmacological Versus Non Pharmacological  Antipyretic Treatments In Febrile Critically  Ill  Adult  Patients: A  Systematic  Review  and Meta-Analysis. Australian Critical Care. 24(1): 4-17. Hastuti  S.  &  S.  Endrawati.  2016. Aktivitas  Antipiretik  Ekstrak Etil Asetat Daun Seligi ( Phyllanthus buxifolius Muell.Arg) Pada Mencit Jantan  Galur  Swiss. Jurnal
Biologi Papua . 8(1): 1-6.
Maina,  G.S,  M.B.  Maina,  N.J.
Muriithi,  M.J.  Kiambi,  J.K.
Kelvin,  A.  Umar,  M.K.  John,
N.W.  Ann,  N.M.  Piero,  M.N. David. 2015. Antipyretic Properties of Dichloromethane: Methanolic Leaf  and  Root  Bark  Extracts of Carissa  edulis in  Rats. Asian  Journal  of  Biomedical
p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
and Pharmaceutical Sciences. 5(43): 12-20.
Nogata,  Y.,  K.  Sakamoto,  H.
Shiratsuchi, T. Ishii, M. Yano, H. Ohta. 2014. Flavonoid  Composition  of Fruit Tissues of Citrus Species. Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. 70(1): 178-192. Putra,  M.P.,  S.  B.  Rahmah,  M. Kusmiati. 2015. Perbandingan Efektifitas Antipiretik  Antara  Ekstrak Etanol Kunyit Putih ( Curcuma  zedoaria Rosc)
dengan Parasetamol pada Tikus Model Demam. Prosiding Pendidikan Dokter. Fakultas Kedokteran Universitas  Islam  Bandung. 1(2). Ravendra, K., P. Om, P. Anil K, K.
Mahesh, I. Valary A, S. Lech. 2017.  Chemical  Composition and  Anti-inflamatory,  Anti- nociceptive  and  Antipyretic
Activity of Rhizome Essential Oil  of Globba  sessiliflora Sims. Collected From Garhwal Region of Uttarakhand. Journal of Herbal Drugs. 8(1): 59-69. Sajeesh,  T.,  K.  Arunachalam,  T. Parimelazhagan. 2011.
Antioxidant  and  Antipyretic
Studies  on Pothos  scandens
L. Asian  Pacific  Journal  of Tropical Medicine. 889-899. Septiarusli,  I.E.,  K.  Haetami,  Y.
Mulyani,  D.  Dono.  2012. Potensi  Senyawa  Metabolit Sekunder  Dari  Ekstrak  Biji
Buah  Keben  ( Barringtonia asiatica ) Dalam proses
Anestesi  Ikan  Kerapu  Macan ( Ephinephelus  fuscoguttatus ). Jurnal Perikanan dan Kelautan. 3(3): 295-299. Syamsi,  N.  &  A.  Andilolo.  2019. Efek Antipiretik Ekstrak Jeruk  Nipis (Fructus  Citrus aurantifolium) Pada  Mencit (Mus musculus). Jurnal Kesehatan Tadulako. 5 (1).
Tjay,  T.  H.  &  K.  Rahardja.  2015.
Obat-obat  Penting , Khasiat, Penggunaan, dan Efek Sampingnya .  PT.  Elex  Media Komputindo, Jakarta. Widyasari,  R.  &  R.  Ratiningsih. 2017. Uji Aktivitas Antipiretik  Ekstrak  Etanol Kulit  Jeruk  Manis (Citrus  x aurantium L ) Terhadap Tikus Putih (Rattus novergicus)
Jantan  Galur  Wistar  Yang Diinduksi Pepton 5%.