KARAKTERISASI  STOMATA DAUN PEGAGAN ( Centella asiatica (L.) Urban.)

## PADA KETINGGIAN WILAYAH BERBEDA DI PULAU AMBON
Hermalina Sinay 1 , Max H. Lesilolo 2
1 Program Studi Pendidikan Biologi, FKIP Universitas Pattimura
2 SMA Negeri 12 Ambon
Email: herlinbio@yahoo.co.id
ABSTRACT .  The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the  anatomical  structure  of pegagan leaves through stomata characterization at several different locations on Ambon Island. Survey method was used in  this  research.  The  sample  was  taken  in  nine  villages  were  spread  from  lowlands  to  the  highlands  on Ambon Island. The procedure of semi-permanent preparations was done by whole mount method. Stomata characterization was done towards the stomata number, stomata density, and stomata index. The collected data were analyzed by descriptive analysis and performed in the form of table or figure. the research result shows that leaf with high stomata number was tend to high in stomata density and stomata index. Based on this research result, it could be conclude that there are no difference of stomatal structure of Pegagan leaves in all location were sample collected. The difference has shown by numbers, density, and stomatal index. The highest Numbers, density and stomatal index shown on Pegagan leaves in lowland, and the lowest that shown in this research on Pegagan leaves in highland.
Keywords: stomatal, structure, leaf, pegagan

## 1. Pendahuluan
Pegagan  ( Centella  asiatica (L.)  Urban.)  merupakan  tumbuhan  liar  yang  termasuk  famili Umbelliferae/Apiaceae. Di Asia, tumbuhan ini dikenal dengan nama Asiatic Pennywort , Indian pennyworth dan gotu cola (Padua & Bunyapraphatsara, 1999). Secara umum, di Indonesia, tumbuhan ini disebut pegagan, tetapi di beberapa daerah di Indonesia dikenal dengan nama rumput kaki kuda atau antanan (Stennis, 1992).  Sebagai tumbuhan  liar,  pegagan  banyak  ditemukan  di    kebun-kebun,  ladang,  tepi  jalan,  pematang  sawah,  dan  di pekarangan.    Tumbuhan  ini  berasal  dari  Asia  tropik,    dan  bersifat  kosmopolit,  sehingga  memiliki  kisaran agroekologi yang luas dan mampu tumbuh dengan baik di daerah dataran rendah sampai dataran tinggi dengan ketinggian 2500 mdpl baik di tanah lembab, maupun tanah berpasir, ternaungi, maupun di tempat terbuka yang terkena cahaya penuh (Dalimartha, 2000; Sudarsono et al. 2002).
Dengan lingkungan tumbuh yang bervariasi, memungkinkan variasi sifat-sifat fenotipik pegagan, termasuk juga sifat anatomisnya sebagai akibat interaksi dengan faktor lingkungan. Hal ini disebabkan karena tumbuhan meskipun masih sejenis, jika tumbuh pada lingkungan yang sama, dapat berbeda-beda fenotipnya, apalagi pada lingkungan berbeda.
Penampilan yang berbeda pada tanaman yang sejenis yang tumbuh di lingkungan berbeda, disebabkan karena tumbuhan  harus  menyesuaikan  diri  dengan  lingkungannya.  Penyesuaian  tumbuhan  terhadap  lingkungan  dapat diamati pada berbagai level,  baik  morfologi,  anatomi,  fisiologi, bahkan  molekulernya (Menzah, 2012). Li et al (2015) menyatakan bahwa mekanisme adaptasi tumbuhan tinggi ( higher plants ) terhadap lingkungan dapat diamati pada tingkat sel, jaringan dan organ tumbuhan.   Menurut Sundari & Atmaja (2011) ciri-ciri anatomi tanaman yang penting diamati untuk mengetahui hubungan antara tanaman dengan lingkungan adalah stomata pada daun.
Di Pulau Ambon, pegagan tumbuh menyebar pada semua wilayah dari dataran rendah sampai dataran tinggi. Dengan  pertumbuhan  pada  lokasi  yang  berbeda  ini,  memungkinkan  adanya  perbedaan  karakter  anatomi, khususnya stomata.  Xu  & Zhou (2008) menyatakan bahwa stomata  merupakan lubang  pada permukaan daun yang  berfungsi  dalam  pertukaran  gas  antara  daun  dengan  lingkungan,  sedangkan  Hidayat  (1995)  menyatakan bahwa stomata merupakan celah  yang dibatasi oleh dua sel epidermis khusus yaitu sel penutup dan sel tetangga. Menurut Song-Ai & Banyo (2012), stomata merupakan objek yang sering diteliti dan diidentifikasi dalam kaitan dengan upaya  memahami respon tanaman terhadap kondisi lingkungan tumbuh yang bervariasi. Demikian halnya dengan pegagan di Pulau Ambon. Diduga bahwa lingkungan tumbuh yang bervariasi dari dataran rendah sampai dataran tinggi, kemungkinan mempengaruhi karakteristik stomata pada daun pegagan tersebut. Dengan demikian,
maka tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui struktur anatomi daun pegagan melalui karakterisasi stomata pada  beberapa lokasi yang berbeda di Pulau Ambon.

## 2. Metode
Pendekatan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  pendekatan    survei  yaitu  sampel  diambil  pada sembarang tempat di sembilan lokasi ditemukannya tanaman pegagan di Pulau Ambon.  Lokasi penelitian adalah beberapa desa di wilayah Pulau Ambon  yaitu Desa Laha, Desa Hative Besar, Desa Wayame, Desa Poka, Desa Suli, Desa Passo, Desa Lateri,   Negeri Kilang, dan Desa Kusu-Kusu Sereh. Desa-desa ini tersebar dari dataran rendah  sampai  dataran  tinggi  di  Pulau  Ambon.  Pada  satu  lokasi  diambil  2  tanaman    pada  jarak  yang  tidak berdekatan dan dianggap sebagai ulangan.    Dari satu tanaman yang diambil pada satu lokasi, diambil 3 helaian daun.    Dari  satu  helaian  daun  tersebut  dibuat  satu  potongan  daun  berukuran  1x1  cm 2 .  Potongan  daun  tersebut kemudian direndam dalam alkohol 70% dan dibawa ke Laboratorium untuk  dibuatkan preparat semi permanen.
Prosedur  pembuatan  preparat  semi  permanen  untuk  karakterisasi  stomata  dengan  metode whole  mount (Ruzin, 1999, Sinay et al., 2015) . Potongan daun yang sudah dimasukkan dalam alkohol 70% kemudian difiksasi menggunakan FAA (formalin, alkohol 70 %, asam asetat dengan perbandingan 5 : 90 : 5) selama 36 jam. Fiksatif kemudian dibuang, dan diganti dengan  larutan pemutih komersil (klorox) 10 % sampai daun bening transparan. Setelah itu, dilakukan pewarnaan dengan safranin 1 % dalam alkohol 70 % selama 1 menit, dilanjutkan dengan pencucian dalam alkohol bertingkat (70, 80, 90, dan 100 %) masing-masing 3 menit.  Potongan daun kemudian direkatkan  di  atas  kaca  objek  yang  telah  ditetesi  gliserin,    ditutup  dengan  kaca  penutup,  dan  diamati  di  bawah mikroskop,  dan  difoto  menggunakan  kamera  Optilab  yang  terkoneksi  dengan  komputer.  Karakterisasi  stomata yang dilakukan meliputi: jumlah stomata, kerapatan stomata, dan indeks stomata. Perhitungan kerapatan stomata dilakukan  pada  permukaan  bawah  daun  (sisi  abaksial)  pada  lima  bidang  pandang  dengan  pembesaran  400x, menggunakan rumus dari Lestari (2006), Haryanti (2010), dan  Sundari & Atmaja (2011). Kemudian dilakukan perhitungan kerapatan stomata total yang diperoleh dari rata-rata perhitungan pada tiga titik pengamatan dengan rumus dari Lestari (2006). Setelah itu dilakukan perhitungan Indeks stomata (IS)  menggunakan rumus  dari Wallis (1965).    Data  hasil  perhitungan  kerapatan  dan  indeks  stomata  dianalisis  secara  deskriptif  dan  disajikan  dalam bentuk Tabel dan gambar.

## 3. Hasil Penelitian
Pegagan  merupakan  tumbuhan  kosmopolit  yang  penyebarannya  sangat  luas,  tumbuh  liar  pada  sembarang tempat, dan umumnya ditemukan di pesawahan, ladang, pekarangan, dan juga sebagai gulma pada lahan pertanian. Pegagan dapat ditemukan pada semua jenis tanah  yakni berpasir, lempung, alluvial, regosol,  podzolik, sampai tanah humus yang subur. Pegagan juga tumbuh dengan baik di daerah dataran rendah sampai dataran tinggi dan pegunungan.
Lokasi    pengambilan  sampel  tumbuhan  pegagan  dalam  penelitian  ini  adalah  pada  sembilan  desa  di Pulau Ambon. Secara geografis wilayah pulau Ambon berada pada posisi astronomis 03 o -04 o Lintang Selatan dan 128 o - 129 o Bujur Timur (Bandjar, 2014).  Kesembilan lokasi tersebut tersebar dalam beberapa wilayah Kecamatan dan termasuk dalam wilayah administratif  kota Ambon dan Kabupaten Maluku Tengah (Tabel 1).
Tabel 1. Lokasi Pengambilan Sampel Tumbuhan Pegagan
No. Nama Lokasi Kecamatan Kabupaten/Kota Ketinggian dari permukaan  laut (mdpl) Suhu  udara  saat pengambilan sampel 1. Desa Laha Teluk Ambon Baguala Ambon 10-20 30 o C 2. Hative Besar Teluk Ambon Baguala Ambon 10-20 30 o C 3. Wayame Teluk Ambon Baguala Ambon 10-20 30 o C 4. Poka Teluk Ambon Baguala Ambon 10-20 30 o C 5. Passo Teluk Ambon Baguala Ambon 10-10 30 o C 6. Lateri Teluk Ambon Baguala Ambon 10-20 30 o C 7. Suli Salahutu Maluku Tengah 10-20 30 o C 8. Kilang Sirimau Ambon 450-750 29 o C 9. Kusu-Kusu Sereh Sirimau Ambon 450-700 29 o C
Struktur anatomi daun yang diamati dalam penelitian ini  adalah stomata yang meliputi jumlah, kerapatan, dan indeks stomata. Stomata yang diamati adalah pada permukaan bawah (sisi abaksial) daun pegagan ( C. asiatica (L.)  Urban.).    Xu  &  Zhou  (2008)  menyatakan  bahwa  stomata  merupakan  lubang    pada  permukaan  daun  yang berfungsi dalam pertukaran  gas antara daun dengan lingkungan, sedangkan Hidayat (1995) menyatakan bahwa stomata merupakan celah  yang dibatasi oleh dua sel epidermis khusus yaitu sel penutup dan sel tetangga.
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa  tidak terdapat perbedaan struktur stomata baik pada daerah dataran rendah  maupun  dataran  tinggi.  Berdasarkan  hasil  pengamatan,  maka  dapat  dilihat  bahwa  stomata  pada  daun pegagan yang dikoleksi dari 9 lokasi berbeda di Pulau Ambon memiliki struktur yang sama yaitu terdiri dari sel penutup  dan  sel  tetangga.  Sel  penutup    letaknya  sejajar  dengan  lubang  (celah)  stomata.  Hanif et  al., (2016) menyatakan bahwa  sel penutup pada C. asiatica L. Urban berbentuk  ginjal dengan tipe stomata anisositik.  Di bagian  luar  sel  penutup  terdapat  sel  tetangga  yang  bentuknya  berbeda  dengan  sel-sel  penutup.  Diduga  sel-sel tetangga  ini  adalah  sel-sel  epidermis  yang  mengalami  modifikasi  menjadi  sel  tetangga.  Hanif  et  al.,  (2016) menyatakan bahwa  pada daun C. asiatica L. Urban di sekitar sel penutup terdapat sel-sel epidermis  yang disebut sel-sel  subsidair  atau  sel  aksesoris.  Bentuk  sel  tetangga  ini  berbeda  dengan  bentuk  sel  penutup  maupun  sel epidermis di sekitarnya. Jumlah sel tetangga bervariasi. Umumnya dapat diamati terdapat satu, dua, atau tiga sel tetangga dengan bentuk yang tidak beraturan, ada yang besar dan ada yang kecil. Ada yang letaknya sejajar dengan sel penutup, dan ada yang letaknya berlawanan arah dengan sel penutup (Gambar 1 dan Gambar 2).
Epidermis  pada  daun C.  asiatica (L.)  Urban.  memiliki  dinding  yang  tipis  dengan  bentuk  dan  ukuran bervariasi.    Sel-sel  epidermis  ada  yang  berukuran  besar  dan  ada  yang  kecil,  memanjang,  memendek,  atau membulat  bersegilima  atau  bersegi  enam  tidak  beraturan,  serta  tersusun  rapat    tetapi  tidak  searah  atau  tidak beraturan,  tanpa adanya  ruang antar sel  (Gambar 1 dan Gambar 2).
Gambar 1. Stomata daun pegagan ( C. asiatica (L.) Urban.). Ket: sp: sel penutup, st: sel tetangga, ep: epidermis
Gambar 2. Stomata daun pegagan ( C. asiatica (L.) Urban.). Ket: sp: sel penutup, st: sel tetangga, ep: epidermis
Letak stomata menyebar secara tidak teratur. Ini sesuai dengan yang dikemukakan oleh Cason & Gray (2008) bahwa tidak seperti  tumbuhan monokotil yang stomatanya cenderung sejajar, pada dikotil stomata relatif tersusun secara acak dan tidak beraturan. Antara satu stomata dengan stomata yang lain umumnya dibatasi oleh satu sampai dua sel epidermis. Cason  &  Gray (2008) menyatakan bahwa letak stomata  yang tidak  berdekatan ini bertujuan memaksimalkan fungsi stomata dalam pertukaran gas, sehingga tidak terjadi tumpang tindih dalam pertukaran gas.
Berbeda dengan hasil pengamatan struktur stomata, hasil perhitungan  karakter stomata yang meliputi jumlah stomata, indeks dan kerapatan stomata menunjukan adanya variasi pada setiap lokasi.  Hasil perhitungan jumlah, indeks, dan kerapatan stomata daun Pegagan ( C. asiatica (L.) Urban.) ditunjukan pada Gambar 3.
Gambar 3. Jumlah, kerapatan dan indeks stomata daun Pegagan ( C. asiatica (L.) Urban.) pada  beberapa lokasi di Pulau Ambon
Berdasarkan data pada Gambar 3 dapat dilihat bahwa jumlah, kerapatan dan indeks stomata tertinggi adalah pada daerah dataran rendah, dan terendah pada daerah dataran tinggi.  Gambar 3 juga menunjukkan bahwa daun dengan  jumlah  stomata  tinggi,  cenderung  memiliki  kerapatan  stomata  dan  indeks  stomata  tinggi.  Hal  ini menunjukkan bahwa jumlah stomata berbanding lurus  dengan indeks dan kerapatan stomata. Dengan kata lain, semakin banyak jumlah stomata, maka semakin rapat stomata tersebut, dan semakin tinggi indeks stomata.   Hal ini sesuai dengan pendapat Haworth et al. (2010)  yang menyatakan bahwa jumlah/frekuensi stomata berkaitan dengan  dan  dapat  diukur  melalui  indeks  stomata  dan  kerapatan  stomata.  Ini  berarti  bahwa  dengan  mengetahui indeks  dan  kepadatan  stomata  dapat  diketahui  atau  dapat  diprediksi  jumlah  atau  frekuensi  stomata,  karena kepadatan  stomata  merupakan  jumlah  stomata  per  satuan  luas  permukaan  daun,  sedangkan  indeks  stomata merupakan  perbandingan  antara  stomata  dan  epidermis.  Daun  tumbuhan  dengan  jumlah  stomata  tinggi  dapat memiliki jumlah epidermis sedikit dengan ukuran besar atau sebaliknya, jumlah epidermis banyak tetapi berukuran kecil.
Jika  dikaji  berdasarkan  ketinggian  wilayah  lokasi  pengambilan  sampel,  maka  stomata  dengan  jumlah tertinggi adalah lokasi yang termasuk wilayah dataran rendah dengan ketinggian rata-rata  kurang dari 100 mdpl, sedangkan  pada  lokasi  desa  Kilang  dan  Kusu-Kusu  yang  berada  pada  dataran  tinggi,  memiliki  jumlah  stomata yang paling rendah.
Tingginya jumlah stomata pada  daun  tumbuhan pegagan  pada daerah dataran rendah diduga dipengaruhi oleh kondisi lingkungan tempat tumbuh. Kondisi lingkungan tempat tumbuh yang dimaksud adalah ketersediaan cahaya matahari. Perlu dijelaskan bahwa lokasi pengambilan sampel di wilayah dataran rendah adalah di pinggiran jalan  umum  yang  merupakan  wilayah  terbuka  atau  terpapar  cahaya  matahari  penuh.  Dengan  semakin  kuat intensitas cahaya matahari, maka akan mempengaruhi pembentukan stomata selama perkembangan daun. Hasil ini  sejalan  dengan  hasil  penelitan  yang  dilaporkan  oleh  beberapa  peneliti  yang  menemukan  bahwa  jumlah, kepadatan, dan indeks stomata akan meningkat pada perlakuan cahaya tinggi yaitu pada daun tumbuhan misalnya pada Rotala hippuris (Momokawa et al, 2011),  dan pada daun kecambah rape ( Xu-Yang et al. 2017).
Tinggi rendahnya frekuensi, indeks dan kepadatan stomata juga dipengaruhi oleh faktor lain selain intensitas cahaya yaitu konsentrasi CO 2 dan temperatur. Beberapa hasil penelitian menemukan bahwa pada daerah dengan konsentrasi  CO 2 tinggi  dan  suhu  tinggi,  karakteristik  stomata  mengalami  reduksi  yaitu  jumlah,  indeks  dan kepadatan mengalami penurunan (Poole et al. 2000; Lawson et al. 2000; Haworth et al. 2010). Pernyataan ini tentu saja  berbeda  dengan  hasil  penelitian  ini  yaitu  bahwa  pada  daerah  dataran  rendah,  justru  memiliki  karakteristik stomata yang lebih tinggi.  Perbedaan hasil ini dapat saja terjadi, diduga disebabkan karena spesies tumbuhan itu sendiri.  Taub  (2010)  menyatakan  bahwa  ada  spesies  yang  karakter  stomatanya  dapat  menurun,  meningkat  dan tetap  normal  pada  peningkatan  konsentrasi  CO 2 .    Kemungkinan,  pegagan  termasuk  tumbuhan  yang  karakter stomatanya justru  mengalami peningkatan jika berada pada kondisi lingkungan dengan konsentrasi CO 2 tinggi. Hasil penelitian ini menemukan bahwa di dataran rendah, jumlah, indeks, dan kepadatan stomata daun pegagan
Laha Hative Besar Wayame Poka Suli Passo Lateri Kilang Kusu-Kusu Jumlah Stomata 7.4 6.2 5.4 9.2 2.8 2.7 6.9 1.3 2.2 Indeks (%) 23.78 14.43 12.27 24.25 7.78 7.56 23.66 4.34 5.23 kerapatan stomata (stomata/mm2) 0.071 0.055 0.036 0.089 0.027 0.026 0.069 0.011 0.023 0 5 10 15 20 25 30 35 40
justru  tinggi.  Ini  menunjukkan  bahwa  tumbuhan  pegagan  sebenarnya  memberikan  manfaat  yang  baik  terhadap lingkungan  karena  dengan  jumlah  stomata  yang  tinggi  pada  kondisi  lingkungan  CO 2 tinggi,  dapat  membantu menyerap  CO 2 dari  lingkungan.    Sedangkan  dalam  kaitan  dengan  temperatur,  jumlah,  indeks,  dan  kepadatan stomata akan rendah jika berada pada lingkungan dengan suhu tinggi. Namun dalam penelitian ini, daun pegagan di dataran rendah dengan suhu cenderung tinggi justru memiliki jumlah, indeks, dan kepadatan stomata tinggi. Ini berarti  bahwa  pegagan  memiliki  kemampuan  mengatur  sirkulasi  air  dalam  tubuhnya  berkaitan  dengan  laju transpirasi.  Jika  suhu  tinggi  dan  stomata  banyak,  maka  transpirasi  juga  akan  meningkat,  tetapi  peningkatan  ini harus  disesuaikan  dengan  laju  penyerapan  air  oleh  akar  tanaman.  Kemungkinan,    tumbuhan  pegagan  memiliki kemampuan  mengatur  kestabilan  air  dalam  tubuhnya  sehinga  dapat  mengatur  laju  transpirasi  dengan  jumlah stomatanya  yang  banyak,  tetapi  dapat  tetap  tumbuh  pada  suhu  tinggi.  Ini  kemungkinan  juga  dipengaruhi  oleh adanya lapisan kutikula yang terdapat pada permukaan daun pegagan sehingga membantu mencegah penguapan air yang berlebihan, meskipun berada pada suhu tinggi.

## 4. Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian dan pembahasan, maka disimpulkan bahwa tidak ada perbedaan struktur stomata daun  pegagan  pada  semua  lokasi.  Perbdaan  hanya  ditunjukkan  pada  jumlah,  kepadatan,  dan  indeks  stomata. Jumlah, kepadatan dan indeks stomata tertinggi dimiliki oleh daun pegagan di daerah dataran rendah, dan terendah dimiliki oleh stomata di daerah dataran tinggi.

## 5. Daftar Pustaka
Cason, S., & Gray, J. E. (2008). Influence of environmental factors on stomatal development. New Phytologist , (178), 9–23
de  Padua,  L.S.,  Bunyapraphatsara,  N.,  &  Lemmens,    R.H.M.J.  (1999).  Plant  Resources  of  South  East  Asia. Backhuys Publishers, Leiden, 12(1).
Dalimartha, S. 2000. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia 2.  Jakarta: Trubus Agriwidya. 214 hal. Haworth, M.,  Heath, J.,  &  McElwain, J.C.  (2010). Differences in the response sensitivity of stomatal index to atmospheric  CO 2 among  four  genera  of  Cupressaceae  conifers. Annals  Botany ,  105(3),  411–418. Published online 2010 Jan 20. doi:  10.1093/aob/mcp309
Haryanti, S. (2010).  Jumlah dan distribusi stomata pada daun beberapa spesies tanaman dikotil dan monokotil.
Buletin  Agronomi  dan Fisiologi, XVIII (2), 21-28 Hanif, U., Mukhtar, A.,  Ud Din Khan, Z., Hussain,  T., Jabeen, R.,  & Butt, G. Y. (2016).   Anatomical study of two Hydrophytes – Pistia stratiotes L. and Centella asiatica (L.) Urban. BIOLOGIA (PAKISTAN), 62 (1), 151-155
Lestari,  E.G.  2006.  Hubungan  antara  kerapatan  stomata  dengan  ketahanan  kekeringan  pada  somaklon  Padi Gajahmungkur, Towuti dan IR64. Biodiversitas 7 (1): 44-48 Lenny L.R. Kouwenberg Jennifer C. McElwain. (2007).  The effect of light intensity and temperature changes on the  stomatal  and  epidermal  morphology  of  Quercus  kelloggi:  implications  for  paleoelevation reconstruction.  Department of Geology Field Museum of  Natural History 1400 South  Lake Shore Drive Chicago, 60605, IL, USA lkouwenberg@fmnh.org Li, X., Li, Y., Zhang, Z., & Li, X. (2015). Influences of Environmental Factors on Leaf Morphology of Chinese Jujubes. PLoS ONE , 10 (5), e0127825. http://doi.org/10.1371/journal.pone.0127825 .
Menzah, D.B. (2012). Leaf anatomical variation in relation to stress Tolerance among some woody species on the accra plains of Ghana. Journal of Plant Development, 19, 13-22. Momokawa ,  N., Kadono ,  Y.,    & Kudoh ,  H.  (2011).  Effects  of  light  quality  on  leaf  morphogenesis  of  a heterophyllous  amphibious  plant, Rotala  hippuris . Annals  Botany , 108(7),  1299–1306.  Published online 2011 Sep 6. doi: 10.1093/aob/mcr236 Poole, I., Lawson, T., Weyers, J.D.B., Raven, J.A. (2000). Effect of elevated  CO 2 on the stomatal distribution and leaf physiology of Ilnus glutinosa . New Pytologist, 145, 511-521. Ruzin, S.E. Plant Microtechnique and Microscopy. New York Oxford : Oxford University Press Sinay, H., Arumingtyas, E.E., Harijati, N., & Indriyani, S. (2015). Stomata characterization of local corn cultivars which is grown under field condition in Kisar Island Southwest Maluku Regency. Proceeding The 5th Annual Basic Science International Conference, 5(1), 96-99.
Sundari, T.,  & Atmaja, R. P. (2011). Bentuk sel epidermis, tipe dan indeks stomata 5 genotipe kedelai pada tingkat naungan berbeda. Journal  Biologi Indonesia, 7(1), 67-79. Buletin  Agronomi dan Fisiologi, XVIII (2),  21-28
Taub,  D.  (2010)  Effects  of  rising  atmospheric  concentrations  of  carbon  dioxide  on  plants . Nature  Education Knowledge , 3(10) , 21 Van Steenis,C.G.G.J. 1992. Flora. Penerjemah : M.Soeryowinoto, dkk. Cetakan 5. PT.Pradnya Paramita.Jakarta. Wallis, T.E. 1965. Analytical Mycroscopy . Boston Little Brown and Company Xu-Yang, Y., Xiao-Ying, L., Zhi-Gang, X., & Xue-Lei. J. (2017).  Effect of light intensity on leaf microstructure and  growth  of  rape  seedlings  cultivated  under  a  combination  of  red  and  blue  LEDs. Journal  of Integrative Agriculture , 16(1),  97–105.
Xu,  Z.,  &  G.  Zhou.  (2008).  Responses  of  leaf    stomatal  density  to  water  status  and its    relationship  with photosynthesis in a grass. Journal of Experimental Botany , 59, 12: 3317 - 3325