## PENETAPAN KADAR FLAVONOID EKSTRAK ETANOL DAUN PACAR KUKU (Lawsonia inermis L.) BERDASARKAN PERBEDAAN CARA PENGERINGAN
Submitted : 3 Oktober 2018 Edited : 10 Desember 2018 Accepted : 20 Desember 2018
Risa Supriningrum*, Nurul Fatimah, Sri Nur Wahyuni
Akademi Farmasi Samarinda Email : risa_akfar@yahoo.com

## ABSTRACT
Leaves  of  Lawsonia  inermis  L. are one  of  the  medicinal  plants  that  have  antibacterial properties,  medicine  for  wounds  on  the  skin,  drugs  for  inflammation  of  the  knuckles  and  as  a nail  dye. One  of  the  active  substances  contained  in  the  henna  leaf  is  flavonoids.  The  level  of active ingredient extract can be influenced by the way of drying simplicia. The purpose of this study  was  to  determine  the  levels  of  flavonoid  ethanol  extract  of girlfriend  nail Lawsonia inermis L. leaves based on simplicia drying method. Research conducted was non-experimental research.  The  stages  of  the  study  included  collecting  samples,  determining  plants,  making simplicia  by  drying  the  wind  and  artificial  drying  with an  oven  at  55 0 C,  extracting  by maceration and determining flavonoid levels by UV-Vis spectrophotometry. The data obtained were analyzed  descriptively. Based  on  the  results  of  the  study,  obtained  flavonoid  levels  of ethanol extract of leaves on wind-dried drying of 6.15% ± 0.1373 and drying with an oven of 7.37% ± 0.2158.
Keywords : Lawsonia inermis L., flavonoid, drying method

## PENDAHULUAN
Tumbuhan  pacar  kuku  sudah  dikenal oleh  masyarakat, tumbuhan  ini  dapat tumbuh  di  pekarangan  rumah.  Sebagian masyarakat  memanfaatkan  daun  pacar  kuku sebagai pewarna kuku karena dapat memberikan  warna  merah pada  kuku.  Daun pacar kuku juga berkhasiat untuk  mengatasi radang  ruas  jari  (panitirium)  dan  luka  pada kulit.  Bagian  lain  dari  tumbuhan  ini  yaitu bunga, biji, kulit, batang dan akar berpotensi untuk mengatasi sakit kepala, arthritis, diare, lepra dan demam (1) .
Daun pacar kuku menghasilkan molekul  berwarna  kuning  kemerahan  yang disebut lawsone.  Molekul  ini memiliki kemampuan  mengikat  protein  sehingga dapat  digunakan  untuk  mewarnai  kulit, rambut, kuku, kain sutra dan woll. Senyawa
ini  merupakan  seyawa  fenol  yang  termasuk dalam  golongan  protein  yang  memiliki kemampuan mewarnai dengan baik (2) . Kandungan  senyawa yang  terdapat  pada ekstrak  daun  pacar  kuku  adalah  senyawa glikosida,  fitosterol,  steroid,  tannin  dan flavonoid (3) .
Flavonoid  merupakan  senyawa  yang termasuk dalam golongan senyawa fenol dan dapat  ditemukan  di  alam.  Zat  warna  ungu, merah,  biru  dan  zat  warna  kuning  dalam tumbuhan  dapat  dipengaruhi  oleh  senyawa flavonoid (4) . Flavonoid  adalah  golongan senyawa yang tidak tahan terhadap pemanasan dan mudah teroksidasi pada suhu tinggi.
Pengeringan  merupakan  usaha  untuk mendapatkan  simplisia  yang  tidak  mudah rusak sehingga dapat disimpan dalam waktu
yang lebih lama, karena dengan mengurangi kadar air dan menghentikan reaksi enzimatik akan dicegah penurunan mutu atau perusakan  simplisia.  Secara  garis  besar  ada dua  cara  pengeringan,  yaitu  pengeringan alamiah dan
pengeringan buatan.
Pengeringan secara alamiah dapat dilakukan dengan sinar matahari langsung atau dengan diangin-anginkan. Pengeringan buatan dapat dilakukan  dengan  menggunakan  lemari pengering  yaitu  oven (5) .  Penelitian  yang dilakukan oleh Novianti (2016) menyatakan, bahwa kadar  flavonoid simplisia  daun singkil  yang  dikeringkan  dengan  cara diangin-angin  pada  suhu  kamar  (25-30 o C) nilainya  lebih  besar  dibandingkan  simplisia yang  dikeringkan  dengan  oven  pada  suhu 60 0 C (6) .  Menurut  Astutik (2016), simplisia daun jambu  bol  yang  dikeringkan  dengan oven  pada  suhu  60 0 C  memiliki  aktivitas antioksidan lebih tinggi dibandingkan pengeringan  dengan  angin  pada  suhu ruang (7) .
Berdasarkan  hal  tersebut, dilakukan penelitian tentang penetapan kadar flavonoid ekstrak  etanol  daun  pacar  kuku (Lawsonia inermis L.) berdasarkan  cara  pengeringan simplisia.
Tujuan penelitian adalah
mengetahui  kadar  flavonoid  ekstrak  etanol daun pacar kuku berdasarkan cara pengeringan simplisia.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  yang  dilakukan adalah penelitian  non  eksperimental,  dilakukan  di Laboratorium  Kimia  dan  Farmakognosi, Akademi  Farmasi  Samarinda.  Tahapan penelitian  meliputi  determinasi  tumbuhan, pengumpulan  sampel,  pembuatan  simplisia, ekstraksi dan penetapan kadar flavonoid.

## Alat
Ayakan mesh 60, desikator, pengaduk kinetik  (Kika  Labortecnik),  micropipet  100- 1000  µL,  oven,  alat-alat  gelas  (Pyrex),
spektrofotometer UV-VIS (Shimadzu), neraca analitik (Excellent), tangas air.

## Bahan
Aquades,  asam  klorida  pekat,  amyl alkohol,  daun  pacar  kuku,  etanol 70%  (One Med),  kuersetin,  kalium  asetat  1  M, aluminium klorida 10%, magnesium.

## Prosedur Penelitian Pengolahan sampel
Sampel  daun  pacar  kuku  diperoleh dari  jalan  Pangeran  Antasari,  Samarinda. Sampel  yang  telah  dipanen  dicuci  dan ditiriskan,  kemudian sebagian  dikeringkan dengan  cara  diangin-angin  pada  suhu  ruang (25-30 0 C) dan  sebagian  dikeringkan  dengan oven  pada  suhu  60 0 C.  Simplisia  dihaluskan dan  diayak  menggunakan  pengayak  mesh 60.

## Ekstraksi
Ditimbang masing-masing 50 g
serbuk  simplisia  dari  dua cara  pengeringan, dimasukkan ke dalam bejana kaca, kemudian  dimaserasi dengan  etanol  70% dan  diaduk  secara  kontinyu  selama  2  jam, lalu didiamkan 24 jam. Selanjutnya disaring dan  ampas  dimaserasi  kembali  dengan  jenis dan  jumlah  pelarut  sama.  Ekstrak  cair (maserat)  yang  diperoleh,  diuapkan  hingga kental, selanjutnya dihitung rendemennya.

## Penetapan kadar air ekstrak
Ditimbang  ekstrak  sebanyak  2  gram di dalam cawan yang telah ditara sebelumnya,  kemudian  dikeringkan  dalam oven  pada  suhu  105 o C  selama  1  jam, didinginkan  dalam  desikator  selama  15 menit.  Kemudian  ditimbang  hingga  bobot tetap.
Perhitungan kadar air
X 100% Keterangan : a = berat cawan kering yang sudah
konstan
b = berat sampel awal c = berat cawan dan sampel

## Uji Kualitatif Flavonoid
Sebanyak  0,5  g  ekstrak  ditambah  10 ml  aquades,  dididihkan  selama  5  menit, disaring.  Filtrat  ditambah  sedikit  serbuk magnesium,  1  ml  asam  klorida  pekat  dan  2
ml  amil  alkohol.  Terbentuk  warna  merah, kuning, jingga pada lapisan amil alkohol (8) .
Penetapan Kadar  Flavonoid dengan
Metode Chang
Larutan induk kuersetin dibuat dengan konsentrasi 200 ppm dan larutan seri standar dengan  konsentrasi  2,  4,  6,  8  dan  10  ppm. Larutan blanko terdiri atas etanol 1,5 ml, 0,1 ml  aluminium  klorida  10%,  kalium  asetat  1
M  dan aquades  untuk mencukupkan volumenya hingga 10 ml. Panjang gelombang
maksimum ditentukan  dengan  cara  mengambil  0,5  ml larutan  standar  4  ppm,  ditambah  1,5  ml etanol,  0,1  ml  aluminium  klorida  10  %, kalium  asetat  1  M  dan  dicukupkan volumenya  dengan  aquades  hingga  10  ml. Absorbansi  diukur  pada  panjang  gelombang 350 - 500 nm.
Kurva  kalibrasi  dibuat  dengan  cara mengambil  0,5  ml  dari  masing-masing larutan  seri  standar,  dimasukkan  ke  dalam labu ukur 10 ml, ditambahkan 1,5 ml etanol, 0,1  ml  aluminium  klorida  10%,  0,1  ml kalium  asetat  1  M  dan  aquades.  Larutan diinkubasi  selama  30  menit,  lalu  serapan diukur pada panjang gelombang maksimum.
Larutan  sampel  ekstrak  daun  pacar kuku  (pengerinngan  angin-angin  dan  oven) masing-masing  dibuat  dalam  konsentrasi 100  ppm.  Lalu  dipipet  0,5  ml,  dimasukkan ke dalam labu ukur 10 ml, ditambahkan 1,5 ml  etanol,  0,1  ml  aluminium  klorida  10%, 0,1  ml  kalium  asetat  1  M  dan  aquades hingga  volume  10  ml,  dikocok  hingga homogen.  Larutan  diinkubasi  selama  30 menit.
Serapan diukur dengan spektrofotometer  pada  panjang  gelombang maksimum.
Kadar  flavonoid  ditentukan  dengan rumus sebagai berikut :
Keterangan : C = Konsentrasi (mg/l) V = Volume Sampel (ml)
Fp = Faktor Pengenceran

## HASIL DAN PEMBAHASAN Pengolahan simplisia
Proses  pengeringan  bahan simplisia dilakukan  dengan  cara  alami  yaitu  diangin- anginkan  selama  7  hari  dan  pengeringan buatan  menggunakan  oven  pada  suhu  55 0 C selama  12  jam.  Proses  pengeringan  sangat penting  dalam  pembuatan  simplisia,karena dengan berkurangnya kadar air dan menghentikan  reaksi  enzimatis  akan  dapat dicegah  penurunan  mutu  dan  perusakan simplisia (5) .  Simplisia  kering  dibuat  serbuk dan  diayak  menggunakan  ayakan  mesh  60, agar  diperoleh  serbuk  halus  dengan  ukuran yang  homogen.  Serbuk  yang  halus  akan lebih mudah diekstraksi karena luas permukaan serbuk simplisia yang
bersentuhan  dengan  cairan  penyari  makin luas (9) .

## Ekstraksi
Serbuk  simplisia  daun  pacar  kuku diekstraksi dengan metode maserasi. Prinsip ekstraksi maserasi adalah penyarian zat aktif yang  dilakukan  dengan  cara merendam serbuk simplisia dengan cairan penyari yang sesuai.  Simplisia  di  maserasi menggunakan pelarut  etanol  70  %.  Pelarut  etanol  70% dipilih sebagai penyari karena dapat menyari sebagian  besar  metabolit  sekunder  yang terdapat dalam serbuk simplisia (10) . Dilakukan  remaserasi  untuk  masing-masing cara  pengeringan  simplisia.  Selanjutnya maserat  diuapkan  hingga  diperoleh  ekstrak kental dan dihitung rendemen ekstrak. Berdasarkan  tabel  1  diketahui,  bahwa pengeringan simplisia dengan oven menghasilkan rendemen lebih banyak dengan  rata-rata  rendemen  38,62%  dan pengeringan angin-angin sebesar 33,11%.

## Tabel 1. Rendemen  Ekstrak  etanol  Daun
Pacar kuku No. Cara Pengeringan Rendemen (%) Rata-rata (%) 1. Oven 39% 38,62% 38,24% 2. Angin-angin 33,94% 33,11% 32,28%

## Penetapan  Kadar  Air  Ekstrak Etanol Daun Pacar Kuku
Penetapan  kadar  air  ekstrak  etanol daun  pacar  kuku  dilakukan  dengan  metode gravimetri.  Prinsip  metode  gravimetri  yaitu menghilangkan  kadar  air  dalam  sampel dengan pemanasan menggunakan oven pada suhu 105 o C agar air yang terikat secara fisik dalam  sampel  dapat  teruapkan  sehingga diperoleh berat konstan (11) .
Hasil  penetapan  kadar  air  ekstrak daun  pacar  kuku  pada  masing-masing perlakuan pengeringan adalah sebagai berikut:

## Tabel 2. Kadar Air  Ekstrak  Etanol Daun

## Pacar Kuku
No. Cara Pengeringan Kadar Air (%) Rata - rata (%) 1. Oven 8,5 8 % 7,5 2. Angin-angin 7 6,75 % 6,5 Rata-rata kadar air
dengan pengeringan  oven  dan  pengeringan  angin- angin. termasuk  dalam  kategori  ekstrak kental, dimana kadar air suatu ekstrak kental nilainya antara 5 sampai 30% (12) . Hasil yang diperoleh  telah  memenuhi  persyaratan  yang telah ditetapkan. Kadar air yang besar dapat menyebabkan pertumbuhan mikroba, karena air merupakan media pertumbuhan mikroba (13) .

## Uji  kualitatif  flavonoid  Ekstrak Daun Pacar Kuku
Uji  kualitatif  flavonoid  terhadap ekstrak daun pacar kuku dimaksudkan untuk memastikan,  bahwa  dalam  ekstrak  tersebut terkandung  senyawa  metabolit  sekunder flavonoid.  Terjadinya  perubahan  warna menjadi  kuning  pada  lapisan  amil  alkohol setelah ditambahkan pereaksi serbuk magnesium,  menunjukkan  bahwa  ekstrak etanol daun pacar kuku pada perbedaan cara pengeringan  positif  mengandung  senyawa flavonoid (8) .

## Kadar Flavonoid Ekstrak Etanol Daun Pacar Kuku
Flavonoid  termasuk  senyawa  fenolik alam  yang  potensial  sebagai  antioksidan (14) . Flavonoid  mengandung  gugus  aromatis terkonjugasi  yang  menunjukkan  serapan kuat pada spektrofotometri
Prinsip  penetapan  kadar  flavonoid dengan  metode  kolorimetri  AlCl 3 adalah pembentukan kompleks antara AlCl 3 dengan gugus  keto  pada  atom  C-4  dan  juga  dengan gugus hidroksi pada atom C-3 atau C-5 yang bertetangga  dari  flavon  dan  flavonol. Kuersetin  digunakan  sebagai  pembanding karena  kuersetin  merupakan flavonoid golongan  flavonol  yang  mempunyai  gugus keto  pada  C-4  dan  memiliki  gugus  hidroksi pada  atom  C-3  atau  C-5  yang  bertetangga dari flavon dan flavonol. Sehingga kuersetin digunakan sebagai larutran induk (15) .
Penetapan kadar flavonoid menggunakan AlCl 3 bertujuan untuk membentuk  senyawa  kompleks  sehingga terjadi  pergeseran  panjang  gelombang  ke arah  visibel (16) ,  sedangkan  penambahan kalium  asetat  bertujuan  untuk  menstabilkan pembentukan kompleks antara AlCl 3 dengan kuersetin (17) .  Hasil  pengukuran  panjang gelombang maksimum larutan baku
kuersetin pada  konsentrasi  4  ppm  yaitu 429.60  nm.  Panjang  gelombang  maksimum tersebut digunakan untuk mengukur serapan
kurva  kalibrasi  dan  sampel  ekstrak  daun pacar  kuku  pengeringan  oven  dan  angin- angin. Berdasarkan kurva kalibrasi diperoleh persamaan regresi linear yaitu y = 0,003605 x + -0,00475  dengan  nilai linearitas sebesar 0,9989.  Hasil  linearitas  yang  mendekati  1 menunjukkan  kurva  kalibrasi  linier  dan terdapat hubungan antara konsentrasi larutan kuersetin dengan nilai absorbansi (18) .
Tabel 3. Kadar Rata-rata Flavonoid Ekstrak
Etanol Daun Pacar Kuku No. Cara Pengeringan Kadar ( % ) Rata - rata kadar ( % ) 1 Oven 7,22% 7,37% 7,53% 2 Angin-angin 6,25% 6,15% 6,06%
Berdasarkan  hasil  pengukuran  secara spektrofotometri  UV-Vis,  dapat  dilihat bahwa  pengeringan  simplisia  dengan  oven dan  angin-angin  memberikan  hasil  kadar flavonoid  yang  berbeda.  Perolehan  kadar flavonoid yang tinggi terdapat pada pengeringan  oven  yaitu  sebesar  7,37%. Pengeringan  menggunakan oven  memiliki kadar  flavonoid  lebih  tinggi  karena  suhu pemanasan yang terjadi di dalam oven lebih merata  dan  sirkulasi  udara  yang  dhasilkan lebih  sempurna  sehingga  mengoptimalkan proses pengeringan. Cara pengeringan menggunakan  oven  merupakan  cara  yang baik  untuk  kandungan  fitokimia  simplisia, selain  dapat  diselesaikan  dalam  waktu  yang singkat, suhu yang digunakan dapat
dimonitor (19) .  Suhu  yang  digunakan  untuk
mengeringkan bahan simplisia
menggunakan  oven  antara  30 o C  sampai 90 o C dengan suhu optimum 60 o C (5).

## SIMPULAN
Kadar  flavonoid  ekstrak  etanol  daun pacar  kuku  pada  pengeringan  simplisia
dengan oven suhu 60 0 C sebesar 7,37 % dan secara angin-angin sebesar 6,15%.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Chaudhary,  G.,  Goyal,  S. dan Poonia,
P. 2010. Lawsonia inermis Linnaeus: A Phytopharmacological Review, International  Jurnal  of  Pharmaceutical Sciences and Drug Research, 2.Hal. 91- 98
2. Zubardiah,  L.,  Nurul.  M.  D. dan Auerkari.  E.  I.  2008.  Kkasiat  Daun Lawsonia  inermis  L Sebagai  Obat Tradisional  Antibakteri.  Dibawakan Pada  Kongres  PGGI  XXIII  Surabaya 19-22.
3. Raja,  W.,  Ovais,  M. dan Dubey,  A., 2013. Phytochemical  Screening  and Antibacterial  Activity  of Lawsonia inermis Leaf  Extract,  International Journal of Microbiological Research.
4. Putri,  A.P.  2011.  Kandungan  Fenol, Komponen  Fitokimia  dan  Aktiitas Antioksidan  Lamun  Dugong  (Thalassis hemprichi). Skripsi.  Bogor:  Fakultas
Perikanan dan Kelautan.
5. Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan Republik  Indonesia,  2005. Penyiapan Simplisia  Untuk  Sediaan  Herbal,

## Jakarta : BPOM RI
6. Novianti ,  D.  2016.  “Pengaruh  Cara
Pengeringan Terhadap Kadar Flavonoid Simplisia Daun Singkil (Premna corymbosa Rottl & Wild)”. Karya Tulis Ilmiah. Akademi Farmasi Samarinda
7. Astutik,  Wahyuli  2016. Pengaruh  cara pengeringan Simplisia Terhadap Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol  daun  Jambu  Bol  (Syzygium malaccense), Karya Tulis Ilmiah. Samarinda : Akademi Farmasi
Samarinda,
8. Harborne, J.B. 1987. Metode Fitokimia, Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis Tumbuhan. Penerjemah: Padmawinata,
K. Terbitan  Kedua.  Bandung: Penerbit ITB.
9. Sapri,  Ana,  F. dan Rizka,  N.,  2014.
“Pengaruh  Ukuran  Serbuk  Simplisia Terhadap  Rendemen  Ekstrak  Etanol Daun  Sirsak (Annona  muricata L.) Dengan  Metode  Maserasi”. Prosiding
Seminar  Nasional  Kimia. Akademi Farmasi. 10. Departemen Kesehatan Republik Indonesia.  2002. Farmakope  Herbal Indonesia. Edisi  Pertama.  Jakarta: Depkes RI.
11. Latifah.  2015.  “Indentifikasi  Golongan
Senyawa  Flavonoid  dan  Uji  Aktivitas Antioksidan  Pada  Ekstrak  Rimpang Kencur(Kaempferia galangal L). Dengan  Metode  DPPH  (1,1-difenil-2- pik rihidrazil)”. Skripsi. Malang: Jurusan Kimia. Universitas Islam Negeri Maulana Ibrahim. 12. Voight,  R.  1995. Buku  Pelajaran Teknologi Farmasi, Diterjemahkan oleh Soendani N. S. UGM Press, Yogyakarta.
13. Supomo., Risa, S. dan Risaldi. J. 2016.
“Karakterisasi  dan  S krining  Fitokimia Daun  Kerahau (Callicarpa  longifolia Lamk.)”. Jurnal  Kimia  Mulawarman.
Vol. 13(2). 14. Salamah,  N. dan Erlinda,  W.  2015. “Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol  Daun  Kelengkeng (Euphoria
longan  (L) Steud.)  Dengan  Metode
Penangkapan  Radikal  2,2’ -difenil-1- pikrilhidrazil”. Pharmaciana. Vol.  5 (1):25-34.
15. Azizah, D.N., Endang, K. dan Fahrauk, F.  2014.  “Penetapan  Kadar  Flavonoid Metode  AlCl 3 Pada  Ekstrak  Metanol Kulit  Buah  Kakao (Theobroma  cacao L.)”. Vol. 2(2).
16. Indriyani,  S.2008.  “Validasi  penetapan kadar  kuarsetin  Dalam  Sediaan  Krim Secara  Kolorimetri  Dengan  Pereaksi AlCl 3 ”. Skripsi.Yogyakarta:Universitas
Sanata Dharma.
17. Wahyulianingsih,  Selpida,  H. dan Abdul,  M.  2016.  “Penetapan  Kadar Flavonoid Total Ekstrak Daun Cengkeh (Syzygium  aromaticum  (L.)  Merr  & Perry) ”. Jurnal Fitofarmaka Indonesia. Vol. 3(2).
18. Pratama,  M.P.A.H.  2016.  “Penetapan Kadar  Flavonoid  Ekstrak  Terpurifikasi
Umbi  Bawang  Dayak  (Eleutherine palmifolia(L.) Merr) Dengan Perbedaan Cara Pengeringan Secara Spektrofotometri UV- Vis”. Karya Tulis Ilmiah. Akademi Farmasi Samarinda.
19. Darfour,  B.,  Asare,  I.,  Ofosu,  D.  2014.
“The  Effect  of  Different  Drying Methods  on  the  Phytochemicals  and Radical  Scavenging  Activity  of  Ceylon Cinnamom  (Cinnamomum  zeylanicum) Plan  Parts. Ghana  Atomic  Energy Commission: Ghana. Hal 138.