Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup
Volume 22, Nomor 1, April 2022, Hal.9-17 https://journal.unpak.ac.id/index.php/ekologia

## POTENSI EKSTRAK CODIUM, HALIMEDA, DICTYOTA, CHONDRUS, GLACILLARIA SEBAGAI SUMBER PIGMEN DAN ANTIOKSIDAN ALAMI
Tri Saptari Haryani 1 , Uswatun Hasanah 2 , Oom Komala 1 , Intan Lestari 1 , Dina Agustina 1 1 Program Studi Biologi, FMIPA Universitas Pakuan 2 Program Studi Kimia, FMIPA Universitas Pakuan * e-mail: trisaptari@unpak.ac.id
diterima: 26 Maret 2022; direvisi: 14 April 2022; disetujui: 14 April 2022

## ABSTRAK
Makroalga termasuk salah satu sumber daya hayati laut yang memiliki peranan penting dari segi ekonomi, sumber pangan maupun obat yang bermanfaat bagi kesehatan. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan sumber pigmen dan antioksidan alami ekstrak alga Codium, Halimeda, Dictyota, Chondrus, dan Glacillaria dengan menggunakan pereaksi aseton, Folin Ciocalteu, dan 1,1-Diphenyl-2-Picrylhydrazil (DPPH). Metode penelitian ini meliputi pengambilan sampel, pengukuran kadar air dengan gravimetri, pembuatan ekstrak metode maserasi, pengujian fitokimia secara kualitatif, uji sumber pigmen terhadap klorofil a, klorofil b, total klorofil, uji total fenol, dan uji aktivitas antioksidan. Hasil pengujian fitokimia diperoleh semua sampel memiliki senyawa golongan flavonoid, alkaloid, sedang ekstrak Halimeda dan Gracillaria tidak memiliki terpenoid. Hasil pengujian sumber pigmen nilai tertinggi diperoleh pada ekstrak Chondrus yaitu sebesar 10,0038 mg/g, dari hasil pengujian aktivitas antioksidan, diperoleh semua ekstrak sampel termasuk golongan dengan kekuatan sedang (Nilai IC50) berkisar antara 100-500).
Kata Kunci: Ekstraksi Makroalga, Sumber Pigmen, Antioksidan alami.

## POTENTIAL EXTRACTS CODIUM, HALIMEDA, DICTYOTA, CHONDRUS, GLACILLARIAAS A SOURCE OF PIGMENTS AND NATURAL ANTIOXIDANTS

## ABSTRACT
Macroalgae is one of the marine biological resources that has an important role in terms of economy, as a source of food and medicine that is beneficial to health. This study aims to determine the source of natural pigments and antioxidants extracts of algae Codium, Halimeda, Dictyota, Chondrus, and Glacillaria using acetone, Folin Ciocalteu, and 1,1-Diphenyl-2- Picrylhydrazil (DPPH) reagents. The method includes sampling, measuring water content by gravimetry, making extracts using maceration method, qualitative phytochemical testing, pigment source test for chlorophyll a, chlorophyll b, total chlorophyll, total phenol, and antioxidant activity. Phytochemical test results obtained that all samples contained flavonoid compounds, alkaloids, while Halimeda and Gracillaria extracts did not have terpenoids. The results of the test for the pigment source were the highest value obtained in Chondrus extract, which was 10.0038 mg/g. And from the results of antioxidant activity testing, all sample  extracts were obtained including the group with moderate strength (IC50 value) ranging from 100-500).
Keywords: natural antioxidants, macroalgae extract, source of pigments

## PENDAHULUAN
Makroalga  atau  rumput  laut  adalah sumber daya hayati yang banyak dijumpai di perairan laut indonesia, yang pertumbuhannya  secara  alami  maupun diperoleh  dari  hasil  budidaya (Putnarubun dan Valentine, 2020).
Makroalga  merupakan  organisme fotosintesis  sejati, sehingga  hanya  dapat tumbuh di zona "fotik" di wilayah pesisir, tempat cahaya masih dapat menembus untuk menunjang  terjadinya proses fotosintesis, dengan kedalaman maksimal sebagian besar makroalga adalah 35-45 meter (Haryani dkk, 2020). Makroalga memiliki kandungan senyawa  polisakarida  seperti  alginat,  agar- agar, karaginan, serta  senyawa bioaktif salah satunya pigmen yang terdapat di dalamnya (Merdekawati dan Susanto, 2009). Berbagai macam pigmen rumput laut meliputi klorofil pada rumput  laut  hijau ( Chlorophytha ), fukosantin pada rumput  laut  cokelat ( Phaeophyta ), dan fikoeretin  pada rumput laut  merah  ( Rhodophytha ) (Kasanah et al .,
2015). Pigmen tersebut  memiliki  fungsi sebagai  antioksidan (Zulfikar dkk,  2017). Sebagai  pewarna,  dan  juga mempunyai banyak  manfaat  bagi  kesehatan. Komposisi senyawa  bioaktif,  teristimewa pigmen rumput  laut yang sangat bervariasi memberikan keunikan tersendiri yang hingga saat  ini  belum  banyak  terungkap (Sanger dkk, 2018).
Antioksidan merupakan suatu zat yang dapat menghambat, mencegah serta menunda terjadinya proses reaksi oksidasi (Firdiyani dkk, 2015). Antioksidan ini dibagi menjadi dua jenis yaitu antioksidan sintetik dan antioksidan alami (Yamin dkk,  2018). Penggunaan senyawa antioksidan sebagai obat saat ini makin berkembang seiring dengan makin meningkatnya jumlah radikal bebas, karena sifat radikal bebas ini dapat mengoksidasi elektron yang ada disekitarnya sehingga apabila terus menerus dibiarkan maka akan menimbulkan suatu penyakit. Sebelumnya telah dilakukan penelitian mengenai antioksidan. Menurut hasil
penelitian Kallswari et al ., (2016) bahwa ekstrak sulfat polisakarida dari Codium sp. menunjukkan adanya aktivitas antioksidan sebesar 850 mg/L. Ekstrak etanol dari Dictyota barteyresiana menujukkan adanya senyawa fenolik dengan persen penghambatan radikal bebas melalui metode DPPH pada konsentrasi 0,15 mL sebesar 910 mg/L (Durairaj et al., 2020). Ekstrak metanol Chondrus crispus dengan menggunakan metode DPPH menunjukkan nilai sebesar 840  mg/L  pada  konsentrasi  200  μg (I.Alkhalaf, 2020). Dalam Gazali dkk (2019), dituliskan bahwa ekstrak etanol Halimeda opuntia memberikan antioksidan dengan nilai IC50 sebesar 143,63 mg/L. Menurut Sari dkk. (2015), ekstrak kering dari fraksi etanol Euchema spinosum dapat dijadikan sebagai sumber antioksidan alami dengan IC50 sebesar 472,14 μg/mL. Senyawa antioksidan alami perlu dikembangkan agar mampu meredam radikal bebas yang dapat mencemari tubuh manusia. untuk memenuhi hal tersebut pencarian senyawa antioksidan alami diarahkan kepada sumber daya alam laut terutama alga yang memang  sangat melimpah di Indonesia (Amel, dkk., 2016). Menurut Fausiah et al . (2019), pigmen adalah zat warna alami pada makroalga yang terbentuk berdasarkan serapan panjang gelombang. Dalam Pesang (2020) disimpulkan bahwa pada rumput laut Ulva sp, Padina australis terkandung pigmen klorofil a, klorofil b, xantofil, feofitina dan karoten. Tujuan dari penelitian ini yaitu menentukan kandungan senyawa aktif, sumber pigmen, dan antioksidan alami jenis- jenis makroalga.

## BAHAN DAN METODE
Waktu dan Tempat Penelitian Penelitian  dilakukan pada bulan Agustus–November di Laboratorium Biologi dan Laboratorium Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu  Pengetahuan  Alam, Universitas Pakuan.
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup

## Alat dan Bahan Penelitian
Alat yang digunakan dalam penelitian ini antara lain: kain batis, corong, botol gelap, rotary evaporator, cawan  uap, gelas  arloji, desikator, timbangan  analitik, grinder, labu ukur, mikropipet, pipet ukur, aluminium foil, tabung  reaksi, ayakan mesh 30, oven, GC- MS, dan spektofotometer UV-Vis Bahan yang digunakan berupa rumput laut Codium, Halimeda, Dictyota, Chondrus, Glacillaria yang diperoleh dari Pantai Cikadal, Kawasan Geopark, Ciletuh. Etanol, metanol, aseton, pereaksi  dragendroff, pereaksi  mayer, pereaksi  Lieberman burchard, serbuk magnesium, akuadest, HCL, kloroform, asam galat, larutan DPPH 0,4 mM, asam askorbat, gelatin 1%, Na 2 CO 3 7,5%, reagen Folin-Ciocalteu , ammonia 10%, dan metanol pro analisis.
Metode Penelitian Pengukuran Kadar Air Pengukuran  kadar air simplisia  untuk masing-masing serbuk alga Codium, Dictyota,  Halimeda, Chondrus ,  dan Gracillaria , menggunakan metode gravimetri dengan cara memanaskan sampel ke dalam suhu 105°C hingga diperoleh bobot konstan yang tidak lebih dari 0,25% dari penimbangan sebelumnya. Pertama  cawan dikeringkan pada suhu 105°C +  1 jam. Setelah  itu, cawan  diletakkan  dalam desikator dan sampel ditimbang sebanyak 2 gr. Selanjutnya sampel dimasukkan ke dalam oven 105°C selama  +  3 jam. Kemudian sampel  dimasukkan  kembali  ke  dalam desikator,  lalu ditimbang hingga diperoleh bobot konstan yang tidak lebih dari 0,25% dari berat penimbangan sebelumnya. Selanjutnya dilakukan penghitungan rumus kadar air (S. Maureen dkk, 2016). Rumus : % Kadar air simplisia = B-C B-a
Keterangan: A = Berat cawan kosong (g)
B = Berat cawan porselain dengan sampel (g) sebelum di oven C = Berat cawan porselain dengan sampel

## (g) setelah di oven
Pembuatan Ekstrak Serbuk alga ditimbangsebanyak 100 g dilakukan  ekstraksi  dengan  cara  maserasi menggunakan  pelarut  etanol  96% sebanyak 1000 mL selama 3x24 jam proses ini dilakukan secara bertahap dengan menuangkan  pelarut  pertama  sebanyak 400 mL, pelarut  kedua  sebanyak 300 mL, dan pelarut  ketiga  sebanyak 300 mL.  Pelarut etanol 96% sebanyak 400 mL dituangkan ke dalam botol gelap yang telah berisi simplisia serbuk alga. Maserat didiamkan selama 1x24 jam, sesekali diaduk dengan jangka waktu 6 jam sekali pada suhu ruang dan didekantasi. Maserat yang sudah didapatkan lalu disaring dengan  menggunakan  kain batis sehingga diperoleh  filtrat dan residu. Residu yang sudah  didapatkan pada maserasi  pertama kemudian  diulangi  sebanyak  dua kali sehingga diperoleh tiga filtrat. Semua filtrat yang telah  didapatkan  dari  hasil  maserasi selanjutnya dievaporasi menggunakan rotary evaporator pada suhu 40°C. Hasil evaporasi akan  diperoleh  ekstrak  kental dan dihitung rendemen ekstrak (Minarno, 2015). Rumus :
Rendemen ekstrak = Berat ekstrak yang diperoleh X 100% Berat awal simplisia
Pengujian Fitokimia Ekstrak Pengujian  fitokimia  dilakukan  secara kualitatif untuk mendeteksi senyawa bioaktif yang terdapat  dalam  ekstrak  sampel penelitian. Pengujian  fitokimia  ini  meliputi uji alkaloid, uji flavonoid, uji tanin, uji saponin, uji steroid, dan uji terpenoid pada ekstrak tersebut.
a. Uji Alkaloid Ekstrak  alga sebanyak 1 g dikocok dengan 5 mL metanol dan 3 mL ammonia, dipanaskan pada suhu 60 o C sambil dikocok 15 menit. Larutan disaring, lalu filtrate dipekatkan hingga lebih kurang 3 mL, kemudian ditambah 5 mL HCl 1N. Larutan sebanyak 1 mL dimasukkan ke dalam  2 tabung reaksi. Tabung 1 ditambahkan pereaksi Dragendoff dan tabung 2
ditambahkan pereaksi Mayer. Adanya senyawa alkaloid ditandai dengan terbentuk endapan berwarna jingga pada tabung 1 sedangkan terbentuk endapan putih dan kuning pada tabung 2 (Hanani, 2015).
b. Uji Flavonoid Ekstrak alga sebanyak 1 g dilarutkan dalam 3 mL etanol diambil ditambahkan 0,1 g serbuk magnesium, kemudian ditambahkan 4-5 tetes HCl, kemudian dikocok. Warna lembayung hingga merah yang terbentuk menunjukan positif adanya flavonoid (Hanani, 2015).
c. Uji Tanin Ekstrak alga sebanyak 1 g dididihkan dengan 50 ml air selama 15 menit, kemudian didinginkan dan disaring. Filtrat sebanyak 1 mL  ditambahkan larutan gelatin 1% dan diperhatikan adanya endapan (Hanani, 2015).
d. Uji Saponin Ekstrak alga sebanyak 1 g di kocok dengan 10 mL air, akan menghasilkan busa yang stabil dengan penambahan HCl (Hanani, 2015).
e. Uji Steroid dan Terpenoid Ekstrak alga sebanyak 1 g dilarutkan dalam 3 mL  klorofom, kemudian dipipet sambil disaring menggunakan pipet yang disumbat dengan kapas. Filtrat ditempatkan dalam cawan kemudian dibiarkan menguap hingga kering. Selanjutnya, diteteskan 2 hingga 3 tetes pereaksi Liebermann Burchard. Terbentuknya warna ungu menunjukkan adanya triterpenoid, sedangkan terbentuknya warna biru hijau menunjukan adanya golongan steroid (Harborne, 1987).
Pengujian Pigmen Klorofil Larutkan 20 mg ekstrak alga dengan aseton ke dalam 50 mL labu ukur dan ukur menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang 300-700 nm (Sanger dkk, 2018).

## Penetapan Kadar Total Fenol
Pembuatan larutan Induk Asam Galat Asam galat dibuat konsentrasi 50 mg/L dengan  cara  menimbang  serbuk  asam  galat
sebanyak 0,05 g ke dalam labu ukur 100 mL dengan  penambahan  aquadest  kemudian di homogenkan. Dibuat konsentrasi 2, 4, 6, 8, dan 10 mg/L ke dalam labu ukur 10 ml lalu ditambahkan aquadest sampai tanda batas. Pembuatan NaCO 3 Ditimbang Na 2 CO 3 sebanyak 7,5 g dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur 100 mL kemudian  dilarutkan  dengan  menggunakan aquadest sampai tanda batas.
Pembuatan Kurva Baku Asam Galat Larutan induk asam galat yang telah dibuat konsentrasinya dipipet 1 mL, selanjutnya ditaruh pada tabung reaksi, tambahkan 5 mL folin ciocalteu, ditambahkan 4 mL Na 2 Co 3 . Kemudian divortex dan diinkubasi pada waktu inkubasi optimum.
Pembuatan Larutan Uji Larutkan ekstrak alga 50 mg dengan aquadest di labu ukur 10 mL hingga mencapai tanda batas (10 mg/L). Diambil 2 mL dimasukkan pada tabung reaksi, tambahkan aquades hingga 10 mL, ambil 1 mL lalu tambahkan 5 mL folin ciocalteu, 4 mL Na 2 Co 3, vortex,  dan  diinkubasi pada waktu inkubasi optimum.

## Pengujian Antioksidan
Pembuatan DPPH (0,4 mM) Serbuk DPPH ditimbang sebanyak 7,9 g, kemudian dimasukkan ke dalam labu ukur 50 mL setelah itu ditambahkan methanol p.a sampai tanda batas lalu dihomogenkan. PembuatanLarutan Blanko Diambil 600 μL DPPH dimasukkan ke dalam  tabung  reaksi  ukur  dengan ditambahkan  metanol  p.a  sampai 3 mL, setelah itu divortex dan diinkubasi selama 30 menit pada suhu 37°C.
Larutan Induk Standar Vitamin C (500 mg/L) Sebanyak 10 mg asam askorbat ditempatkan pada labu ukur 20 mL, untuk selanjutnya ditambahkan metanol hingga tanda batas (500 mg/L).
Penetapan Panjang Gelombang Maksimum DPPH Dipipet 600 μL larutan DPPH 0,4 mM, tambahkan 3 mL metanol p.a, homogenkan,
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup
dan inkubasi sampai 30 menit di suhu kamar. pada panjang gelombang 500-520 nm dilakukan pengukuran serapannya sehingga dapat diperoleh panjang gelombang maksimum.
Optimasi Waktu Inkubasi Dipipet 600 μL larutan DPPH 0,4 mM ditambahkan metanol p.a sampai tanda batas 3 mL. Selanjutnya dilakukan pengukuran di menit 10, 20, 30, 40, 50, dan 60 hingga diperoleh optimasi waktu inkubasi yang lebih stabil.
Pembuatan Deret Larutan Standar Vitamin C Dibuat standar asam askorbat dari larutan stok pada konsentrasi 1, 2, 3, 4, 5, dan 6 mg/L. Selanjutnya ditambahkan metanol p. a  sebanyak  3  mL,  tambahkan  600  μL larutan DPPH 0,4 mM ke dalam labu ukur, vortex, dan inkubasi menggunakan spektofotometer UV-VIS  pada  waktu inkubasi optimal, sehingga diperoleh serapan pada panjang gelombang maksimum. Pembuatan Larutan Uji Larutkan 10 mg setiap ekstrak alga bersama metanol p.a di labu ukur 20 ml sampai tanda batas. Kemudian dibuat masing-masing konsentrasi  20, 40, 60, 80 dan 100 mg/L, tambahkan  600μL  DPPH, selanjutnya tambahkan metanol p.a hingga 3 ml, vortex dan inkubasi pada waktu inkubasi yang optimum.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengadaan Bahan Penelitian Bahan  penelitian  berupa  makroalga yang diperoleh dari Pantai Cikadal, Ciletuh yaitu dari jenis Codium, Halimeda, Dictyota, Chondrus, dan Gracillaria, Masing-masing jenis  diperoleh  sebanyak  3 Kg untuk selanjutnya  dibuat  ekstrak  kental  guna pengujian  fitokimia,  Pengujian sumber pigmen,  kadar total fenol, dan  aktivitas antioksidan.

## Pembuatan Ekstrak Bahan Penelitian
Bahan penelitian terlebih dahulu dibuat menjadi  serbuk  sebanyak 350 gram, kemudian  dibuat  ekstrak  menggunakan pelarut etanol 96% dengan metode maserasi bertahap  (3 x 24 jam). Hal ini  dikarenakan bahwa pelarut etanol 96% merupakan pelarut yang paling sesuai  untuk  mengekstraksi semua golongan senyawa termasuk senyawa metabolit  sekunder.  Hasil  dari  ekstraksi berupa ekstrak kental, siap untuk dilakukan pengujian  fitokimia, sumber pigmen,  kadar total fenol, dan pengujian aktivitas antioksidan.
Pengujian Fitokimia Pengujian fitokimia dilakukan secara kualitatif untuk mendeteksi senyawa bioaktif yang terdapat  dalam  ekstrak alga Codium , Dictyota,  Halimeda , Chondrus dan Gracillaria. Pengujian fitokimia ini meliputi uji alkaloid, uji flavonoid, uji tanin, uji saponin, uji steroid, dan uji terpenoid pada ekstrak  tersebut. Hasil pengujian  fitokimia selengkapnya tersaji dalam Tabel 1.
Tabel 1. Hasil Pengujian Fitokimia No.  Golongan Senyawa Hasil Pengujian Ekstrak Sampel Codium  Halimeda  Dictyota  Chondrus  Gracillaria 1 Alkaloid + +
+ + +
2 Flavonoid + + + + + 3 Tanin - + - + + 4 Saponin + + + + + 5 Terpenoid - + - - + 6 Steroid + - + + -
Faktor yang berpengaruh pada pengujian  fitokimia  ini  adalah  pelarut  yang digunakan  karena  pelarut  memiliki  peran dalam menarik komponen senyawa fitokimia yang terdapat dalam sampel bahan tanaman. Faktor lain yang sangat berpengaruh  yaitu faktor lingkungan (R. Adi dkk , 2019).
Pengujian Sumber Pigmen Pengujian  sumber pigmen bertujuan untuk mengetahui sumber klorofil yang terkandung pada masing-masing alga sesuai dengan pengukuran dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 300 sampai 700 nm.  Hasil yang didapatkan pada panjang gelombang 664 nm dan 610 nm. Data lengkap mengenai serapan yang diperoleh dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil Sumber Pigmen Sampel Panjang Gelombang (nm) Total Klorofil mg/g Klorofil a 663 nm Klorofil b 610 nm Codium 0,728 0,017 2,31814 Halimeda 0,112 0,628 1,3011 Dictyota 0,120 0,021 10,00379 Chondrus 0,758 0,628 6,91514 Glacillaria 0,123 0,622 8,21259 Pengujian Kadar Total Fenol
Pengujian  kadar total fenol  dilakukan menggunakan  metode Folin  Ciocalteu ( Zubia et al ., 2007) dengan tahapan seperti tertera dalam Metode kerja. Nilai absorbansi dan konsentrasi  dari  asam  galat  kemudian dimasukkan  ke  dalam  grafik.  Untuk mendapatkan persamaan regresi linier. Nilai pada persamaan  regresi linier digunakan
untuk  menyetarakan  kadar  polifenol  pada larutan uji dengan kadar fenolik pada asam galat. Kadar fenolik total yang diperoleh hasilnya  di  dapat  sebagai mg Setara  Asam Galat/g berat  kering (mg  SAG/g). Pengukuran absorbansi menggunakan Panjang gelombang 765 nm dalam waktu 30 menit.  Hasil kadar total fenol dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil Kadar Total Fenol No Ekstrak Sampel Nilai Absorbansi Rata-rata Kadar total Fenol (mg SAG/g) Ulangan 1 Ulangan 2 1 Codium 0,090 0,089 0,090+0.0007 6,58 2 Halimeda 0,675 0,673 0,674+ 0.0014 86,40 3 Dictyota 0,071 0,070 0,071+0.0007 3,90 4 Chondrus 0,113 0,112 0,113+0.0007 18,71 5 Gracillaria 0,145 0,149 0,147+0.0028 14,37 Berdasarkan pengujian total fenol yang didapatkan bahwa alga H alimeda memiliki kadar total fenol tertinggi sebesar 86,40 mg SAG/g. Semakin besar nilai absorbansi yang didapatkan maka kandungan senyawan fenol makin tinggi, sehingga aktivitas antioksidannya  tinggi.  Hal  ini  dapat  dilihat dari terbentuknya warna biru
yang pekat (Dewantara dkk , 2021).  Faktor yang berpengaruh terhadap Kadar total fenol yaitu jenis pelarut yang digunakan (Hapsari dkk, 2018). Cahaya dan suhu  pemanasan yang sangat tinggi juga berpengaruh terhadap penurunan  kadar total fenol yang ada di dalam suatu sampel (Anggraeni dkk, 2015). Selain itu juga jenis alga, habitat, dan kondisi pertumbuhan pada alga (Machu et al., 2015).
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup

## Pengujian Aktivitas Antioksidan
Antioksidan adalah suatu molekul yang dapat menunda, mencegah, dan menghambat reaksi oksidasi (pelepasan elektron) dimana antioksidan  ini  mendonorkan  satu  elektron (atom hidrogen) kepada  radikal  bebas, sehingga  radikal  bebas  dapat  lebih  stabil. Aktivitas  antioksidan  dianalisis  dengan metode radical scavenging activity (RSA) DPPH sebagaimana  dijelaskan  dalam Molyneux, P. (2004). Pada pengujian  ini menggunakan  metode DPPH ( 1,1-difenil-2- pikrihidrazil ), pada konsentrasi  ekstrak  20, 40, 60, 80, 100 mg/L, serta spektrofotometer dengan Panjang gelombang yang didapatkan yaitu pada panjang gelombang 516  nm dengan absorbansi yaitu 0,713. dapat dilihat pada Tabel 4.
Tabel 4. Panjang GelombangMaksimum
Panjang gelombang (nm) Absorbansi 510 0,705 511 0,708 512 0,710 513 0,711 514 0,712 515 0,713 516 0,713 517 0,713 518 0,713 519 0,710 520 0,708 Kemudian dilakukan
penentuan optimasi  waktu  inkubasi yang bertujuan untuk  mengetahui  waktu  yang  dibutuhkan oleh suatu  zat agar dapat  bereaksi  secara maksimal sehingga didapatkan nilai serapan yang lebih stabil. Penentuan optimasi waktu inkubasi  dapat  dilihat pada Tabel 5.  Hasil penentuan  inkubasi  menunjukkan  bahwa pada menit ke-30 memiliki  waktu  serapan yang lebih stabil.
Tabel 5. Optimasi Waktu Inkubasi Waktu (menit) Absorbansi 10 0,478 20 0,479 30 0,482 40 0,472 50 0,471 60 0,470 Penentuan antioksidan ini menggunakan vitamin C atau yang lebih dikenal  dengan  asam  askorbat  sebagai kontrol positif. Larutan vitamin C ini dibuat ke dalam beberapa konsentrasi 1, 2, 3, 4, 5, dan  6 mg/L, sehingga  diperoleh  persamaan linear y = 13,51+1,773 dengan  koefisien korelasi (r) 0,999. Persamaan linier tersebut digunakan untuk menentukan nilai IC50 dari larutan  vitamin C. Sehingga  diperoleh  nilai IC50 sebesar 3,57 mg/L. Menurut (Hanafi et al., 2017)  bahwa  aktivitas  antioksidan  dapat digolongkan  menjadi  antioksidan  kuat  jika nilai IC50 < 100 mg/L, Antioksidan Sedang nilai IC50 100-500, dan Lemah  berada dikisaran 500-1000 mg/L. Berdasarkan hasil pengujian  antioksidan  ekstrak  etanol 96% Codium , memiliki IC50 sebesar 291,54 mg/L. Halimeda memiliki IC50 sebesar 146,35 mg/L, Dictyota memiliki IC50 sebesar 359,48 mg/L, Chondrus memiliki nilai IC50 sebesar 172,67 mg/L  dan Glacilaria memiliki IC50 sebesar 188,13 mg/L. Sehingga masing-masing alga tersebut memiliki  antioksidan  sedang, hal  ini disebabkan oleh beberapa faktor yaitu suhu, lama waktu pengeringan (Husni dkk, 2014). Lamanya waktu penyimpanan (Saputra dkk, 2018), serta  jenis alga, habitat, dan kondisi pertumbuhan pada alga (Machu et al., 2015).
KESIMPULAN Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan sebagai berikut :
a. Dari hasil  pengujian  sumber pigmen, diperoleh  jenis Chondrus mempunyai nilai total klorofil tertinggi yaitu 10,00379 mg/g dibanding dengan jenis alga lainnya.
b. Dari hasil pengujian aktivitas antioksidan, diperoleh nilai IC50 berkisar antara 100– 500, sehingga ekstrak Codium , Dictyota , Halimeda , Chondrus , dan Gracillaria , aktivitas antioksidannya termasuk golongan sedang.
SARAN a. Perlu  dilakukan  pengujian  lebih  lanjut aktivitas  ekstrak  makroalga  sebagai antibakteri maupun antifungi.
b. Perlu  dilakukan  analisis  golongan senyawa  ekstrak  makroalga  sebagai sumber  antioksidan  alami  menggunakan metode GC-MS.

## UCAPAN TERIMA KASIH
1. Ketua Yayasan Pakuan  Siliwangi, Universitas Pakuan
2. Rektor Universitas Pakuan
3. Ketua Lembaga Penelitian dan Pengabdian Masyarakat, Universitas Pakuan
4. Dekan  Fakultas  Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Pakuan.
5. Para anggota  peneliti dan teknisi yang telah  membantu  selama  penelitian berlangsung, serta semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu, yang telah membantu dan memberikan  dukungan selama pelaksanaan penelitian ini

## DAFTAR PUSTAKA
Ai Nio, S., dan Banyo, Y. (2011). Konsentrasi Klorofil Daun Sebagai Indikator Kekurangan Air pada Tanaman. Jurnal Ilmiah Sains. 11(2). 168-173.
Larasati  A.,  Wathoni  N.  (2017).  Manfaat Alga Merah (Rhodopyta) sebagai Sumber Obat dari Bahan Alam. Majalah Farmasetika. 2(1). 16-19. Anggraeni, F.D.A., Santoso, U., dan Cahyanto, M.N. (2015). Aktivitas Antioksidan Ekstrak Berbagai Hasil Olah Ubi Jalar. Jurnal Teknologi Pangan . 6(2). 43-50.
(AOAC) Association of Analytical Chemist Publisher.  (2005).  Official Methods of Analysis  of the Association of Official
Analytical Chemist.  Arlington Virginia USA: The Association of Official Analytical Chemist, Inc.
Chojnacka, K., Saeid, A., Witkowska, Z., and Tuhy U. (2012). Biologically Active Compounds in Seaweed Extracts – The Prospects Application. The Open Conference Proceedings Journal. 3 (suppl-1-M4). 20-28. Dwimayasanti R, dan Dedy K. (2018). Komunitas  Makroalga di Perairan Tayando-Tam, Maluku Tenggara. Oseanologi dan Limnologi di Indonesia . 3(1). 39-48. FauziahA.,  Bengen,  D.G. &  Kawarne.  M. (2019).  Hubungan  Antara  Ketersediaan Cahaya  Matahari  Dan  Konsentrasi PigmenFotosintetikDiPerairanSelatBali. J.IlmuKelaut.Trop . 11(1). 37–48. Firdaus  M.  (2013).  Indeks  Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Rumput  Laut Cokelat  ( Sargassum  aquifolium ) .  Jurnal Pengolahan  Hasil  Perikanan  Indonesia . 16(10).42-47. Ghazali, M., Nurhayati. (2018). Peluang Dan Tantangan  Pengembangan  Makroalga Non Budidaya sebagai Bahan Pangan Di Pulau Lombok. J.agrotek . 5(2). 135-140. Gioele C, Sanfilippo M, Aliko V, Spano N, Spinelli A, and Manganaro A. (2017). Gracilariagracilis, Source of Agar: a Short Review. Current Organic Chemistry. 21(5). 380-386. Hapsari, A.M., Masfria, dan Dalimunthe, A. (2018). Pengujian kandungan total fenol ekstrak  etanol  tempuyung ( Shoncus arvensis L.). Tropical Medicine
Conference Sciences . 01. 284-290.
Haryani, TS, Triastinurmiatiningsih, Dede Giwang M., Zulkhoir. (2020). Keanekaragaman Dan Kelimpahan Makroalga Dan Tumbuhan Mangrove di Kawasan Geopark, Ciletuh, Pelabuhan Ratu, Kabupaten  Sukabumi. Biotika . 18(2). 1-6.
Husni, A., Putra, D.F., dan Lelana, I.Y.B. 2014. Aktivitas Antioksidan Padina sp. pada berbagai  suhu dan lama pengeringan. JPB Perikanan. 9(2). 165- 173.
Kurniawan,  R.  (2017).    Keanekaragaman Jenis Makroalga di Perairan  Laut Desa Teluk  Bakau  Kabupaten  Bintan Kepulauan Riau. Tanjung pinang. Universitas Maritim Raja Ali Haji.
Lumbessy, S.Y., Setyowati D.N., Mukhlis A., Lestari D.P., Azhar F. (2020). Komposisi Nutrisi  dan  Kandungan  Pigmen Fotosintesis  Tiga  Spesies  Alga  Merah ( Rhodophyta sp.) Hasil Budidaya. Journal of Marine Research . 9(4). 431- 438.
Machu, L., Misurcova, L., Ambrozova, J.V., Orsavova, J., Micek, J., Sochor, J., and Jurikova, T. (2015). Phenolic Content and Antioxidant Capacity in Algal Food Products. Molecules. 20. 1118-1113. Madhavarani, A & Ramanibai, R. (2014). In- vitro  Antibacterial  Activity  of Kappaphycus alvarezii. Extracts
Collected  from  Mandapam  Coast, Rameswaram, Tamil Nadu.
International  Journal  of  Innovative Research in science, Engineering and Techhnology . 3(1). 2319–8753. Marianingsih P., Evi A., dan Teguh S. (2013).  Inventarisasi dan Identifikasi Makroalga di Perairan  Pulau  Utung Jawa. Prosiding Seminar FMIPA Universitas Lampung . Merdekawati,  W  &  Susanto,  A.B.  (2009). Kandungan  dan  Komposisi  Pigmen Rumput  Laut  serta  Potensinya  untuk Kesehatan. Squalen . 4(2). 41–47. Muzaki, A.F., Setyati, W.A., Subagiyo, Pramesti R. (2018). Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Rumput  Laut Halimeda macroloba dari Pantai Teluk Awur, Jepara, Jawa Tengah. Jurnal Enggano. 3(2). 144-145. Nishihara G. N, Ryuta T, &  Tadahide N. (2004). Photosynthesis & growth rates of Laurencia brongniartii J. Agardh (Rhodophyta, Ceramiales) in preparation for cultivation. Netherlands. Journal of Applied Phycology. 16. 303-308. Pesang, M.D., James Ngginak, Alfred Gasper
Onisimus Kasedan Coni Lisandra Balle
Bisilissin.  (2020).  Komposisi  Pigmen pada Ulva sp., Padina australis dan Hypnea sp.  Dari  Pantai Tablolong Provinsi Nusa Tenggara Timur. Jurnal Kelautan tropis . 23(2). 225-233. Sanger, G. Bertie Elias Kaseger, Lexy Karel Rarung, Lena Damongilala. (2018). Potensi Beberapa Jenis Rumput Laut Sebagai Bahan Pangan Fungsional, Sumber Pigmen dan Antioksidan Alami. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia. 21(2). 208-217. Saputra, S.D., Sampepana, E., dan Susanty, A.  (2018). Pengaruh  Kemasan  Botol, suhu, dan lama penyimpanan Sirup Ekstrak  Bawang Tiwai ( Eleutheriana americana Merr) Terhadap Metabolik Sekunder dan Mikroba. Jurnal  Riset Tekonologi Industri. 12(2). 156-165. Sukiman.  (2011).  Biodiversitas dan Potensi Ganggang Merah (Rhodophyta) di Perairan  Pantai Jawa Barat. Bogor: Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor.
Trono G.V, dan Ganzon-Fortes E.T. (1988).
Philippine Seaweed. Philippines: Metro Manila. Verbruggen  Heroen and Wiebe H.C.F Kooistra.  (2004).  Morphological characterization of lineages withinthe calcified tropical seaweed genus Halimeda (Bryopsidales,
Chlorophyta). European Journal of Phycology. 39. 213-228. Wai M. K, Thida N, Soe P. P. K, and U. Soe- Htun.  (2009).  The Morphology & Distribution of the Genus Codium (Bryopsidales,  Chlorophyta) from Myanmar. Journal of the Myanmar Academy of Arts & Science. VII(9). 2- 11. Waryono Tarsoen. (2001). Biogeografi Alga Makro (Rumput) Laut Di Kawasan Pesisir Indonesia . Malang: Seminar Ikatan Geografi Indonesia (IGI).