Jurnal Kesehatan Manarang, Volume 8, Nomor 3, Agustus 2022, pp. 168 – 178 ISSN 2528-5602 (Online), ISSN 2443-3861 (Print) doi: https://doi.org/10.33490/jkm.v8i2.656

## Manarang
VARIASI DOSIS SPRAY EKSTRAK ETANOL Solanum Melongena L. DAN Cananga Adorata TERHADAP PERUBAHAN GEJALA TOKSIK, FUNGSI HEPAR, DAN HISPATOLOGI MENCIT (Mus Musculus)
Zainal Fikri 1 , Yunan Jiwintarum 1 , Maruni Wiwin Diarti 1  , Hady Anshory Tamhid 2 1 Jurusan Teknologi Laboratorium Medis Poltekkes Kemenkes Mataram
2 Fakultas Farmasi Universitas Islam Indonesia Yogyakarta
ARTICLE INFO

## ABSTRACT
Article history Submitted : 2018-11-07 Revised : 2019-03-03 Accepted : 2019-03-04 The purpose of this study was to determine toxic symptoms (loss of reflex), enzyme activity  of  SGOT  and  SGPT,  and  liver  histopathology  of  experimental  mice  (Mus musculus)  exposed  to  a  combination  formulation  of  96%  ethanol  extract  spray  of Solanum melongena L. and Cananga adorata flower oil. True experimental research design with Post Test Only Control Group Design, this study used 4 treatment groups and  1  control  group,  data  collected  in  the  form  of  toxic  symptoms  (loss  of  reflex),
SGOT  enzymatic  activity,  and  liver  histopathological  picture  of  experimental  mice (Mus musculus). Which was analyzed by One Way Anova and Descriptive test. The results  showed  that  the  changes  in  toxic  physical  symptoms  (loss  of  reflexes)  of experimental  mice  (Mus  musculus)  after  30  minutes  of  spraying  were  strange reactions to walking around without direction, sensitivity to touch, changes in social interaction colliding with each other, lethargy, eye opacity and excessive blinking, respiratory rate. increased, which returned to normal at 4 hours to 168 hours after spraying. The activity of the SGOT and SGPT enzymes after 168 hours of spraying showed that the higher the dosage of the formulation, the higher the activity of the SGOT  and  SGPT  enzymes,  but  the  increase  was  still  within  normal  limits,  the histopathological  results  of  liver  morphology  grading  at  various  research  doses showed Normal and Mild. Conclusion: Solanum melongena L. and Cananga adorata flower  oil  combined  did  not  cause  pathological  effects  in  experimental  mice  (Mus musculus).
Keywords: Solanum melongena L extract ; Cananga adorata extract ;
Mus musculus ; Spray ; Toxicity

## ABSTRAK
Kata Kunci:
Ekstrak Solanum melongena L; Ekstrak Cananga adorate;
Mus musculus ,
Spray ,
Toksisitas.
This is an open access article under the CC BY-SA
license: Tujuan dari penelitian ini untuk mengetahui gejala toksik (hilangnya reflex), aktivitas enzim  SGOT  dan  SGPT,  gambaran  histopatologi    hepar  hewan  coba  mencit  ( Mus musculus )    yang  terpapar  formulasi  kombinasi  sediaan spray ekstrak  etanol  96% Solanum melongena L. dan minyak bunga Cananga adorata . Rancangan penelitian true experimental dengan desain Post Test Only Control Group Desig n, penelitian ini menggunakan 4 kelompok perlakuan dan 1 kelompok control, data yang dikumpulkan berupa gejala toksik (hilangnya reflex), aktivitas enzimatik  SGOT,  dan Gambaran histopatologi  hepar hewan coba mencit ( Mus musculus ) yang dianalisis dengan uji One Way Anova dan Deskriptif. Hasil penelitian menunjukkan perubahan gejala fisik toksik  (hilangnya  reflex)  hewan  coba  mencit  ( Mus  musculus )  setelah  30  menit penyemprotan  adalah  reaksi  aneh  berkeliling  tanpa  arah,  sensitif  naik  terhadap sentuhan,  perubahan  interaksi  sosial  saling  bertabrakan,  lesu,  opasitas  mata  dan berkedip berlebihan, laju pernapasan naik, yang kembali normal pada 4 jam sampai dengan 168 jam setelah penyemprotan. Aktivitas enzim SGOT dan SGPT  setelah 168 jam  penyemprotan  menunjukkan  semakin  tinggi  dosis  formulasi  semakin  tinggi aktivitas  enzim  SGOT  dan  SGPT  namun  peningkatan  tersebut  masih  dalam  batas normal,  hasil  histopatologi  grading  morfologi  hepar  pada  berbagai  dosis  penelitian menunjukkan gambaran Normal dan Mild. Kesimpulan Solanum melongena L. dan minyak  bunga Cananga  adorata yang  dikombinasikan  tidak  menimbulkan  efek patologis pada hewan coba mencit ( Mus musculus ).

##  Corresponding Author:
Maruni Wiwin Diarti Jurusan Teknologi Laboratorium Medis Poltekkes Kemenkes Mataram Telp. 082236371510 Email: maruniwiwin73@gmail.com

## PENDAHULUAN
Pencegahan dan pengendalian  kasus deman berdarah yang disebabkan oleh vektor nyamuk Aedes aegypti salah  satunya  dengan  pengendalian  populasi  nyamuk Aedes  aegypti ,  seperti  penggunaan insektisida kimia yang mengandung organofosfat. Penggunaan bahan kimia dalam jangka waktu lama dapat menyebabkan efek buruk pada manusia dan lingkungan. Pengendalian vektor secara mekanik dan biologi merupakan pengendalian vektor yang lebih ramah terhadap lingkungan dari pada menggunakan bahan-bahan kimia sintetis (Grisales et al, 2013; Lima et al, 2011; David et al., 2018) . Sehingga saat ini banyak dilakukan penelitian yang mengarah pada pemanfaatan tumbuh-tumbuhan sebagai insektisida hayati untuk meminimalkan efek samping akibat bahan kimia (Dalpadado et al., 2021) . Tumbuhan    alam    antara  lain  bunga Cananga  adorata , Beta  vulgaris pada  buah, Nicotina tabacum pada daun, Evodia suaveolens pada daun, Patura metel linn aeus pada daun, Citrus hystrix pada bagian daun dan kulit, Citrus aurantifolia pada daun dalam bentuk ekstrak dan minyak atsiri dapat digunakan sebagai insektisida alami. Insektisida hayati berbahan dasar tumbuhan memiliki kemampuan untuk mengendalikan vektor, antara lain pemberantasan jentik  dan nyamuk dewasa. Pestisida jenis ini juga bersifat biodegradable sehingga  tidak  merusak  lingkungan,  dan  umumnya  tidak  berbahaya  bagi manusia, hewan, dan lingkungan karena residunya cepat hilang (Sopi, 2016; Musdalifah, 2016; Iqbal Elka Putra, 2021) .
Senyawa  beracun  yang  bersifat  racun  kontak,  racun  pernafasan,  dan  racun  perut  inilah  yang memberikan efek membunuh pada pestisida hayati. Untuk memperlambat pertumbuhan  Ae. Aegypti bentuk larva dan nyamuk, dapat menggunakan insektisida nabati yang mengandung zat aktif termasuk alkaloid,  saponin,  flavonoid,  tanin,  triterpenoid,  dan  polifenol.  Flavonoid  merusak  saraf  yang mengontrol  pernapasan  di  sejumlah  organ  penting  serangga,  yang  mengakibatkan  kematian.  Bahan kimia terpenoid termasuk saponin, mengikat sterol bebas dalam saluran pencernaan makanan, di mana sterol  itu  sendiri  berfungsi  sebagai  prekursor  hormon  ecdysone,  aktivitas  saponin  ini  dalam  tubuh serangga mengakibatkan terganggunya hormon ecdysone untuk mencegah terganggunya proses molting serangga, jumlah sterol bebas dalam tubuh serangga harus dikurangi. Selain itu, saponin beracun bagi mamalia berdarah dingin dan mampu menghancurkan sel darah merah. Pada Aedes sp, zat glikoalkaloid berfungsi  sebagai  racun  kontak.  Disfungsi  membran  dapat  terjadi  dari  kapasitas  glikoalkaloid  untuk mengikat 3 hidroksi sterol dalam membran. Enzim asetilkolinesterase juga dapat dihambat oleh bahan kimia  ini.  Karena  itu,  asetilkolin  menumpuk  di  sistem  saraf,  yang  dapat  menyebabkan  masalah pencernaan, kondisi neurologis, dan bahkan kematian (Sopi, 2018) . Senyawa  glikolkaloid  berfungsi  sebagai  racun  kontak  pada  nyamuk Aedes  sp. Kemampuan glikoalkaloid  untuk  mengikat  dengan  membran  3β-hidroksi  sterol  dapat  mengakibatkan  gangguan fungsi membran. Zat ini juga dapat menghambat kerja enzim asetilkolinesterase. Hal ini menyebabkan akumulasi  asetilkolin  dalam  sistem  saraf,  sehingga  akumulasi  asetilkolin  dapat  mengakibatkan  cacat pencernaan,  gangguan  saraf  dan  bahkan  kematian (Kandita  et  al,  2015; Idris,  2021; M.  Saleh  et  al., 2017) .
Salah  satu  jenis  tanaman  yang  menghasilkan  minyak  atsiri  dan  memiliki  aroma  yang  harum adalah bunga kenanga. Bahan aktif dalam minyak atsiri memiliki kekuatan untuk menghentikan kontak langsung  antara  nyamuk  dan  manusia,  yang  menghentikan  penyebaran  penyakit  yang  dibawa  oleh gigitan nyamuk kepada manusia (Hidayati et al, 2015) . Cananga odorata memiliki aroma harum khas dan  kandungan geraniol, linalol, dan eugenol yang tidak disukai oleh nyamuk. Bunga Cananga odorata juga mengandung minyak atsiri saponin, flavonoida dan poilifenol  yang dapat menyebabkan kematian larva Ae.  aegypti (Widyastuti  &  Jannah,  2015) .    Selain  itu,  bunga Cananga  odorata memiliki  efek sebagai antioksidan,  antimikroba,  antibiofilm,  anti  inflamasi,  antivektor,  repellent,  anti  diabetes, anti fertilitas dan anti melanogenesis (Rahma Yulis et al, 2020; Anggia, et al, 2014; Meiskia Agung et al., 2022) .
Maserasi merupakan metode yang digunakan untuk mendapatkan ekstrak etanol buah Solanum melongena.    Kandungan  zat  aktif    fitokimia  yang  diperoleh  antara  lain  senyawa  flavonoid,  tanin, glikosida,  steroid,  alkaloid dan  terpenoid (Saleh  G,  2015; Anis  N  2018) dari  hasil  penelitiannya membuktikan bahwa Solanum melongena L dalam bentuk ekstrak dengan konsentrasi 80% membunuh 84%  nyamuk  Aedes  sp,  60%  konsentrasi  membunuh  68%  nyamuk  Aedes  sp  dan  40%  konsentrasi membunuh 44% nyamuk Aedes sp. Ekstrak  Solanum melongena dapat digunakan sebagai insektisida alami karena berpengaruh signifikan terhadap kematian nyamuk Aedes sp. dan menyebabkan kematian

## 50% dan 90% nyamuk (LC
50 dan LC 90 ) pada konsentrasi 49.124% dan 81.343%. Kelemahan dari hasil penelitian  ini  belum  diketahui  data  kuantitatif    pengaruh  waktu  kontak  per  jam    dari  buah Solanum melongena L. dalam bentuk ekstrak etanol 96% terhadap jumlah kematian nyamuk Aedes sp. Kandungan  bahan aktif dalam buah Solanum melongena L. Varietas Sembalun yang dibuat dalam bentuk ekstrak etanol 96% berdasarkan hasil penelitian Fikri dkk., (2020) yaitu senyawa tannin total ekuivalen  sebanyak  4,11  %  b/b,  total  alkaloid  ekuivalen  quinine  sebanyak  100,22  ug/g  dan  total flavonoid ekuivalen rutin sebanyak  3,55 %b/b. Hasil penelitian Fikri dkk., (2020) juga membuktikan bahwa waktu kontak 1 jam antara spray ekstrak etanol 96% buah Solanum melongena L dengan nyamuk Aedes sp menunjukkan kematian 50%, kematian 75% setelah 6 jam dan  kematian 100% setelah  kontak 24 jam. Dalam penelitian ini menunjukkan bahwa Solanum melongena L. dalam bentuk ekstrak etanol 96% menggunakan paparan waktu  kontak yang berbeda  dapat menyebabkan kematian pada nyamuk Aedes Sp. Kelemahan dari penelitian ini belum dieksplorasi efek samping yang dibuktikan dengan hasil uji  gejala  toksik  dan  efek  pada  organ  hati  dengan  menggunakan  hewan  coba,  sehingga  aman  untuk diaplikasikan pada masyarakat.
Hewan  coba  yang  digunakan  adalah  mencit  ( Mus  musculus )  jantan  yang  terpapar  formulasi kombinasi  sediaan  spray  ekstrak  etanol  96% Solanum  melongena  L. dan  minyak  bunga Cananga adorata ),parameter  yang  diamati  adalah  gejala  toksik  (hilangnya reflex ),  aktivitas  enzim  SGOT  dan SGPT, gambaran histopatologi  hepar hewan coba mencit ( Mus musculus ) sehingga hasil penelitian ini dapat  membuktikan  I  segi  gejala  toksik  dan  efeknya  pada  organ  hati  sebelum  diaplikasikan  pada masyarakat.

## METODE Jenis Penelitian
Penelitian  ini  bersifat true  eksperiment dengan  desain Post  Test  Only  Control  Group  Design , Penelitian ini menggunakan 4 kelompok perlakuan dan 1 kelompok kontrol.  Kelompok kontrol di spray dengan akuades sedangkan kelompok perlakuan di spray dengan Solanum  melongena L. Dalam bentuk ekstrak  dan Cananga  adorata dalam  bentuk    minyak  atsiri    dengan  perbandingan  2  :  1  yang  dibuat menjadi 4 kelompok dosis.

## Persetujuan Etik Penelitian
Penelitian  ini  mendapatkan  persetujuan  etik  dari  Komisi  Etik  Fakultas Kedokteran  Universitas Mataram nomor 185/UN18.F7/ETIK/2021 tanggal 18 Mei 2021 dengan rekomendasi penelitian dapat dilakukan, tidak ada potensi pelanggaran etik.

## Lokasi dan Waktu Penelitian .
Penelitian  ini  berlokasi  di  laboratorium  Teknologi  Laboratorium  Medis  Poltekkes  Kemenkes Mataram dan Laboratorium Farmasi Universitas Islam Indonesia Jogjakarta. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan April 2021 s.d Oktober 2021.

## Populasi, sampel dan Subyek Penelitian
Populasi dari penelitian ini adalah  buah Solanum melongena L I dari  desa Sembalun Lombok Timur dan bunga Cananga adorata dengan warna kuning  dari kelurahan Cakranegara. Sampel berupa buah Solanum  melongena L  . dalam  bentuk  ekstrak  etanol  96%    dan Cananga  adorata dalam  bentuk minyak atsiri.  Subyek penelitian  digunakan hewan coba mencit ( Mus musculus ) jantan berumur 2 – 3 bulan dengan berat badan 25 – 30 gram. Penentuan jumlah hewan coba didasarkan pada rumus Charan.

## Teknik Pengambilan Sampel
Teknik pengambilan sampel dan subyek dalam penelitian ini adalah purposive sampling .

## Variabel Penelitian
Variabel bebas buah Solanum melongena L. dan minyak atsiri bunga Cananga adorata dalam bentuk formulasi sediaan spray berbagai dosis. Variabel terikat (variabel dependent ) yaitu Gejala toksik (hilangnya reflex) hewan coba mencit ( Mus musculus ), Aktivitas enzimatik  SGOT,SGPT hewan coba mencit ( Mus musculus ) dan Gambaran histopatologi  hepar hewan coba mencit ( Mus musculus ).
Instrumentasi dan bahan penelitian : 1. Pembuatan ekstrak : r otary evaporator , gelas beaker, g elas ukur, paper cup , aspirator.
2. Alat pemeliharaan dan terminasi hewan : kandang mencit, talenan bedah, beker gelas 1000 ml, alat bedah, jarum injeksi, pinset,  timbangan analitik.
3. Pemeriksaan SGOT/SGPT : spektrofotometer yang sudah dikalibrasi, kit SGOT, kit SGPT.
4. Pemeriksaan Histopatologi : mikrotom, alat prossesing jaringan, casset tissue , bak pewarnaan.
5. Bahan yang digunakan untuk pembuatan ekstrak dan minyak antara lain buah terung ungu, bunga kenanga, etanol 96%,aquadest.
6. Bahan  yang  digunakan  untuk  pemeriksaan  SGOT  dan  SGPT  yaitu  serum/plasma  mencit,  reagen SGOT, SGPT, akuadest.
7. Bahan yang digunakan untuk pemeriksaan Histopatologi yaitu antara lain paraffin, etanol Obsolut dan  etanol  dengan  konsentasi  bertingkat  96%  s.d  70%  untuk  proses  dehidrasi,  xylol,  parafin, pewarnaan H-E, formalin buffer phosphate pH 7.

## Cara pengumpulan data terdiri dari :
1. Pembuatan ekstrak etanol 96% buah terung ungu dengan metode maserasi.
2. Pembuatan  minyak bunga kenanga dengan metode destilasi (Penyulingan) : Penyulingan cara kukus ( water and steam distillation ) atau indirect distillation di laboratorium Farmasi UII Yogyakarta.
3. Persiapan  dan  Aklimatisasi  Hewan  Coba  mencit  ( Mus  musculus )  dan  perlakuan :  Penelitian  ini menggunakan  mencit  ( Mus  musculus )  karena  beberapa  alasan,  antara  lain,  mudah dikembangbiakkan, mudah dipelihara, dan fisiologinya diperkirakan identik dengan manusia. Jenis kelamin mencit jantan dengan umur 2 – 3 bulan, berat 25 – 30 gram, secara fisik sehat, tidak ada kelainan anatomi yang tampak (Tumor atau cacat anggota tubuh). Aklimatisasi hewan coba selama 7  hari  terhadap  air,  makanan,  udara  dan  kondisi  laboratorium.  Kandang  yang  digunakan  dalam pemeliharaan dan aklimatisasi menggunakan kandang yang terbuat dari bak plastik yang dilengkapi dengan lorong bermain dan botol minuman, dengan alas dari sekam yang dilapisi tissue, sehingga mencit  merasa  nyaman.  Sekam  diganti  setiap  2  minggu  sekali  untuk  menghindari  penumpukan faeses  dan  urine  mencit.  Berdasarkan  perhitungan  tersebut,  untuk  mendapatkan  4  dosis digunakan  kelipatan  antar  dosis  sebesar  10,  sehingga  perhitungan  dosis  yang  akan  diberikan yaitu:
a. Dosis 1 = 0,125mg/25gBB/ml atau 5mg/KgBB.
b. Dosis2 = 1,25mg/25gBB/ml atau 50mg/KgBB.
c. Dosis 3 = 12,5 mg/25 gBB/ml atau 500mg/KgBB.
d. Dosis 4 = 125 mg/25 gBB/ml atau 5.000mg/KgBB.
4. Perubahan Gejala – gejala fisik normal menjadi gejala fisik toksik (hilangnya reflex) hewan coba mencit  ( Mus  musculus )  berupa  gejala  berat  badan  mencit,  reaksi  aktivitas,  reaksi  yang  aneh, sensitivitas terhadap rasa sakit, sensitivitas terhadap bunyi, sensitivitas terhadap sentuhan, interaksi social, ekor abnormal, perilaku agresif, kelemahan, tremor, iritasi mata, defekasi, kencing, salvasi, pernafasan, dan kematian.
5. Pengukuran aktivitas SGOT dan SGPT menggunakan Prosedur dengan Subtract start dan Prosedur dengan Sampel start . Sampel yang digunakan adalah plasma.
6. Histopatologi  organ  hepar  menggunakan  metode  Farafin.  Evaluasi  gambaran  abnormal  yang ditunjukkan  oleh  hepar  yang  diamati    berupa  gambaran  steatosis, ballooning  cells dan  inflamasi jaringan  juga  diamati  dan  dinilai  dengan  3  tingkatan  yaitu: grade  mild: dijumpai  adanya  2-3 steatosis, ballooning cell occasional pada zona 3, dan inflamasi minimal (bisa tidak dijumpai sama sekali), grade  moderate: steatosis lebih  tersebar, ballooning  cell tampak  nyata  pada  zona  3,  dan inflamasi  ( mild  to  moderate )  dan grade  severe :  steatosis sudah  meluas dan  terkumpul  di  zona  3 , ballooning cell meluas di zona 3, dan inflamasi meluas.

## Analisis data
Hasil pengolahan dan uji statistik yang diperoleh disajikan dalam bentuk tabel dan grafik.  Untuk analisis gejala toksik (hilangnya reflex ) dianalisis secara deskriptif, Untuk data kadar SGOT dan SGPT
dianalisis  dengan  uji  statistik One  Way  Anova atau  sederajat  dan  untuk  perubahan  fisik  toksik  serta gambaran histopatologi dianalisis dengan deskriptif.

## HASIL PENELITIAN Hasil Pengamatan Perubahan Gejala Fisik Toksik (Hilangnya Reflex)
Hasil perubahan gejala fisik toksik (hilangnya reflex) hewan coba mencit ( Mus musculus )  pada kelompok kontrol dan berbagai dosis terlihat dari waktu 30 menit sampai dengan 168 jam penyemprotan hewan coba tidak ada yang mengalami gejala fisik toksik berat dan kematian. Dosis tunggal Solanum melongena L. dalam bentuk  ekstrak etanol 96% dan Cananga adorata dalam bentuk minyak atsiri pada pengamatan LD50% maupun LD90% pada mencit ( Mus musculus ) tidak menimbulkan kematian. Rerata perubahan gejala – gejala fisik  pada hewan coba mencit ( Mus musculus ) pada kelompok berbagai dosis penelitian menunjukkan adanya gejala fisik toksik (hilangnya reflex ) terjadi pada kondisi penurunan berat badan 0,5 gram dari 26 gram menjadi 25,5 gram pada jam ke 12 s.d 168 jam  setelah penyemprotan formulasi kombinasi ekstrak terungu ungu dan minyak bunga kenangga dosis 3, aktivitas fisik menurun sampai  30 menit setelah penyemprotan dan aktivitas kembali normal setelah 4 s.d 168 jam setelah penyemprotan. Perubahan gejala fisik toksik (hilangnya reflex) hewan coba mencit ( Mus musculus ) lainnya setelah 30 menit penyemprotan adalah reaksi aneh berkeliling tanpa arah, sensitive naik terhadap sentuhan, perubahan interaksi sosial saling bertabrakan, lesu, opasitas mata dan berkedip berlebihan, laju  pernapasan  naik,  perubahan  ini  kembali  normal  pada  4  jam  sampai  dengan  168  jam setelah penyemprotan.

## Hasil Pengukuran Aktivitas SGOT dan SGPT
Hasil  pengukuran  aktivitas  enzim  SGOT  dan  SGPT  setelah  perlakuan  baik  pada  kelompok kontrol maupun pada kelompok perlakuan dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Aktivitas enzim SGOT dan SGPT  pada hewan coba mencit (Mus musculus) pada berbagai
variasi dosis. Klp Aktivitas Enzim SGOT dan SGPT  pada Kelompok Kontrol dan Berbagai Variasi Dosis (U/I) SGOT SGPT 1 2 3 4 5 Total Re rata 1 2 3 4 5 Total Re rata Kontrol negatif 23,8 25,0 24,4 24,6 24,2 122 24,4 18,4 17,4   19,4   18,6 18,2   92 18,4 Dosis 1 27,8 29,0 28,4 28,6 29,2 143 28,6 20,4 21,4   19,4   20,8 20,0   102 20,4 Dosis  2 31,4 30,8 29,6 31,4 29,8 153 30,6 23,6 25,8   25,0   24,6 25,0   124 24,8 Dosis 3 32,8 31,9 32,0 32,4 32,9 162 32,4 26,2 25,2   27,2   26,0 26,4   131 26,2 Dosis 4 33,9 33,7 35,1 33,4 34,9 171 34,2 27,2 29,2   28,0   28,4 28,2   141 28,2
Hasil  uji  statistik  menggunakan Uji  One  Way  Anona menunjukkan  hasil  sebagai terdapat pada tabel 2.
Tabel 2 Hasil Uji Statistik Parameter Rerata Nilai F P SGOT 0.021 0.999 Kontrol Negatif 28.9500 ± 3.02916 Dosis 1 28.6000 ± 3.17490 Dosis 2 29.2500 ± 3.49237 Dosis 3 29.0250 ± 3.60220 Dosis 4 29.1750 ± 4.02782 SGPT Kontrol Negatif 22.1500 ± 3.44625 0.013 1.000 Dosis 1 22.4500 ± 3.88973 Dosis 2 22.7500 ± 3.97115 Dosis 3 22.5000 ± 3.40392 Dosis 4 22.4000 ± 3.92258

## Hasil  Evaluasi Histopatologi Hewan Coba Mencit (Mus musculus)
Evaluasi  gambaran  abnormal  yang  ditunjukkan  pada  hepar  akibat  terpapar  dengan Solanum melongena L .  dalam  bentuk  ekstrak etanol  96%    dan Cananga  adorata dalam  bentuk  minyak  atsiri menggunakan  berbagai  dosis,  terlihat  adanya  gambaran  steatosis, ballooning  cells dan  inflamasi jaringan juga diamati dan dinilai dengan 3 tingkatan yaitu: grade mild: dijumpai adanya 2-3 steatosis, ballooning cell occasional pada zona 3, dan inflamasi minimal (bisa tidak dijumpai sama sekali). grade moderate: steatosis lebih  tersebar, ballooning  cell tampak  nyata  pada  zona  3,  dan  inflamasi  ( mild  to moderate ) grade severe : steatosis sudah meluas dan terkumpul di zona 3 , ballooning cell meluas di zona 3, dan inflamasi meluas. Adapun hasil evaluasi gambaran histopatologi dapat dilihat pada tabel 3.
Tabel 3. Hasil histopatologi grading morfologi hepar pada berbagai dosis penelitian
Kelompok Grading Jumlah Persentase Kontrol negatif Normal 5 100% Mild 0 0 % Moderate 0 0 % Severe 0 0 % Dosis 1 Normal 4 80% Mild 1 20% Moderate 0 0% Severe 0 0% Dosis 2 Normal 4 80% Mild 1 20% Moderate 0 0% Severe 0 0% Dosis 3 Normal 3 60% Mild 2 40%% Moderate 0 0% Severe 0 0% Dosis 4 Normal 3 60% Mild 2 40%% Moderate 0 0% Severe 0 0%

## PEMBAHASAN
Efek gejala toksik (hilangnya reflex ), aktivitas enzim SGOT dan SGPT, gambaran histopatologi hepar  hewan  coba  mencit  ( Mus  musculus )    yang  terpapar  semprotan Solanum  melongena  L. dan Cananga adorata dengan kombinasi dosis 0,125mg/25gBB/ml atau 5mg/KgBB, 1,25mg/25gBB/ml atau  50mg/KgBB,  12,5  mg/25  gBB/ml  atau  500mg/KgBB,  125  mg/25  gBB/ml  atau 5.000mg/KgBB  tidak  menimbulkan  keadaan  patologis  dan  kematian,  sehingga  aman  digunakan sebagai bahan alternatif larvasidal alami.
Perubahan gejala – gejala fisik  pada hewan coba mencit ( Mus musculus ) pada kelompok kontrol menunjukkan kondisi normal, yang berarti tidak ada menunjukkan keadaan menjadi gejala fisik toksik (hilangnya reflex ). Kelompok dosis 1 menunjukkan hasil data rata – rata perubahan gejala – gejala fisik pada  hewan  coba  mencit  ( Mus  musculus )  pada  kelompok  dosis  1  ada  keadaan  gejala  fisik  toksik (hilangnya reflex ). Gejala fisik toksik (hilangnya reflex ) terjadi pada kondisi penurunan berat badan 0,5 gram  dari  30  gram  menjadi  29,5  gram  pada  jam  ke  12  s.d  168  jam  setelah  penyemprotan  formulasi kombinasi  ekstrak  terungu  ungu  dan  minyak  bunga  kenangga  Dosis1  =  0,125mg/25gBB/ml  atau 5mg/KgBB,  aktivitas  fisik  menurun  sampai    30  menit  setelah  penyemprotan  dan  aktivitas  kembali normal setelah  4  s.d 168  jam  setelah  penyemprotan.  Perubahan  gejala  fisik  toksik  (hilangnya  reflex) hewan  coba  mencit  ( Mus  musculus )  lainnya  setelah  30  menit  penyemprotan  adalah  reaksi  aneh berkeliling tanpa  arah,  sensitif  naik  terhadap  sentuhan,  perubahan  interaksi  sosial  saling  bertabrakan, lesu, opasitas mata dan berkedip berlebihan, laju pernapasan naik, perubahan ini kembali normal pada 4 jam sampai dengan 168 jam setelah penyemprotan.
Kelompok perlakuan dosis 2 menunjukkan bahwa data rata – rata perubahan gejala – gejala fisik pada hewan coba  mencit  ( Mus musculus )  pada  kelompok  dosis 2  dosis 2  =  1,25mg/25gBB/ml  atau 50mg/KgBB  terdapat  keadaan  gejala  fisik  toksik  (hilangnya reflex ).  Gejala  fisik  toksik  (hilangnya reflex ) terjadi pada kondisi penurunan berat badan 0,5 gram dari 26 gram menjadi 25,5 gram pada jam ke 12 s.d 168 jam setelah penyemprotan formulasi kombinasi ekstrak terungu ungu dan minyak bunga kenangga dosis 2 = 1,25 mg/25 gBB/ml atau 50mg/KgBB, aktivitas fisik menurut sampai  30 menit setelah  penyemprotan  dan  aktivitas  kembali  normal  setelah  4  s.d  168  jam  setelah  penyemprotan. Perubahan gejala fisik toksik (hilangnya reflex) hewan coba mencit ( Mus musculus ) lainnya setelah 30 menit  penyemprotan  adalah  reaksi  aneh  berkeliling  tanpa  arah,  sensitif  naik  terhadap  sentuhan, perubahan  interaksi  sosial  saling  bertabrakan,  lesu,  opasitas  mata  dan  berkedip  berlebihan,  laju pernapasan  naik,  perubahan  ini  kembali  normal  pada  4  jam  sampai  dengan  168  jam  setelah penyemprotan.
Kelompok dosis 3 menunjukkan bahwa data rata – rata perubahan gejala – gejala fisik  pada hewan coba mencit ( Mus musculus ) pada kelompok dosis 3 = 12,5 mg/25 gBB/ml atau 500mg/KgBB terdapat keadaan gejala fisik toksik (hilangnya reflex ). Gejala fisik toksik (hilangnya reflex ) terjadi pada kondisi penurunan berat badan 0,5 gram dari 26 gram menjadi 25,5 gram pada jam ke 12 s.d 168 jam setelah penyemprotan formulasi kombinasi ekstrak terungu ungu dan minyak bunga kenangga dosis 3, aktivitas fisik menurun sampai  30 menit setelah penyemprotan dan aktivitas kembali normal setelah 4 s.d 168 jam setelah penyemprotan. Perubahan gejala fisik toksik (hilangnya reflex) hewan coba mencit ( Mus  musculus )  lainnya  setelah  30  menit  penyemprotan  adalah  reaksi  aneh  berkeliling  tanpa  arah, sensitif naik terhadap sentuhan, perubahan interaksi sosial saling bertabrakan, lesu, opasitas mata dan berkedip berlebihan, laju pernapasan naik, perubahan ini kembali normal pada 4 jam sampai dengan 168 jam setelah penyemprotan.
Kelompok dosis 4 menunjukkan bahwa data rata – rata perubahan gejala – gejala fisik  pada hewan coba mencit ( Mus musculus ) pada kelompok dosis 4 = 125 mg/25 gBB/ml atau 5.000mg/KgBB Gejala fisik toksik (hilangnya reflex ) terjadi pada kondisi penurunan berat badan 0,5 gram dari 26 gram menjadi  25,5  gram  pada  jam  ke  12  s.d  168  jam  setelah  penyemprotan  formulasi  kombinasi  ekstrak terungu ungu dan minyak bunga kenangga dosis 3, aktivitas fisik menurun sampai  30 menit setelah penyemprotan  dan  aktivitas  kembali  normal  setelah  4  s.d  168  jam  setelah  penyemprotan.  Perubahan gejala  fisik  toksik  (hilangnya  reflex)  hewan  coba  mencit  ( Mus  musculus )  lainnya  setelah  30  menit penyemprotan  adalah  reaksi  aneh  berkeliling  tanpa  arah,  sensitif  naik  terhadap  sentuhan,  perubahan interaksi sosial saling bertabrakan, lesu, opasitas mata dan berkedip berlebihan, laju pernapasan naik, perubahan ini kembali normal pada 4 jam sampai dengan 168 jam setelah penyemprotan.
Hasil perubahan gejala fisik toksik (hilangnya reflex) hewan coba mencit ( Mus musculus )  pada kelompok kontrol dan berbagai dosis terlihat dari waktu 30 menit sampai dengan 168 jam penyemprotan pada hewan coba  tidak  ada  yang  mengalami  kematian,  sehingga  dosis tunggal    formulasi  kombinasi sediaan spray ekstrak etanol 96%  buah Solanum melongena L. dan minyak bunga Cananga adorate bersifat aman  pada  hewan  coba.  Sifat  keamanan  dari  ekstrak Solanum  melongena ini  sejalan  dengan hasil penelitian yang menggunakan ekstrak batang Solanum melongena sebagai immunbooster. Batang terung ungu dalam bentuk ekstrak menunjukkan bahwa kandungan flavonoid total dan kuersetin  adalah 62,38 mgQE/g dan 427,61 mgRE/g, total ekstrak fenolik batang terong adalah 190,47 mgGAE/g, yang tergolong  tinggi.  Uji  penghambatan  denaturasi  protein  pada  30  menit  menunjukkan  bahwa  ekstrak batang  terong,  natrium  diklofenak,  dan  albumin  memiliki  nilai  persentase  denaturasi  masing-masing sebesar 14,70%, 1,30%, dan 25,84. Karena efektif mencegah denaturasi protein, ekstrak batang terong dapat digunakan sebagai agen anti kanker L. K. Ratri, dkk,(2022).
Hasil  penelitian  untuk  melihat  efek  spray  formulasi  kombinasi  sediaan  spray  ekstrak  etanol Solanum  melongena  L. terhadap  faal  hepar  melalui  pengamatan  aktivitas  enzim  SGOT  dan  SGPT, menunjukkan aktivitas enzim SGOT dan SGPT  pada hewan coba mencit  ( Mus musculus ) setelah 168 jam penyemprotan. Semakin tinggi dosis formulasi kombinasi ekstrak terung ungu dan minyak bunga kenangga semakin tinggi aktivitas enzim SGOT dan SGPT,  peningkatan tersebut masih dalam keadaan normal.
Hasil uji statistik menggunakan Uji One Way Anona menunjukkan  hasil sebesar 29,17 U/I pada kadar SGOT dan 22,75 U/I pada SGPT dengan nilai p  masing-masing sebesar 0,999 dan 1,000 lebih besar dari 0,05 artinya tidak ada pengaruh perlakuan dosis terhadap peningkatan kadar SGOT dan SGPT. Salah satu faktor yang menyebabkan tidak ada pengaruh perlakuan dosis terhadap peningkatan kadar SGOT dan SGPT yakni besarnya aktivitas antioksidan yang diperoleh dari ekstrak etanol buah Solanum melongena L. dan bunga Cananga adorate sangat lemah. Hal tersebut diperkuat dengan hasil penelitian yang dilakukan oleh yakni golongan antioksidan berupa alkaloid dan flavanoid yang terkandung dalam buah Solanum melongena L .  setelah dilakukan ekstrak etanol diperoleh IC 50 bernilai 535,89 µg/mL pada  menit  ke-29  dan  385,06  µg/mL  pada  menit  ke-58.  Apabila  IC 50 bernilai  151-200  µg/mL  maka terkategori lemah (Wayan et al., 2014) . Hal ini dikarenakan aktivitas antioksidan pada ekstrak etanol buah terong ungu hanya ditentukan oleh senyawa-senyawa antioksidan yang dapat larut (terekstraksi) dalam etanol (pelarut polar) seperti senyawa golongan polifenol. Aktivitas antioksidan yang dikandung oleh Cananga  adorate yang  efek  insektisidanya  kuat  dibuktikan  juga  oleh    hasil  penelitian  yang dilakukan  dengan  memperoleh  nilai  IC 50 yakni  883,80 µg/mL.  Hasil  penelitian  membuktikan  bahwa bunga Cananga odorata dapat digunakan sebagai hepatoprotektor pada Rattus norvegicus , dosis yang terbukti efektif yang memiliki efek yang sama dengan obat hepatoprotektor yaitu dosis 800 mg/kg BB yang dibuktikan dengan penurunan kadar enzim SGOT dan SGPT.
Hasil evaluasi gambaran histopatologi grading morfologi hepar pada kelompok kontrol 100% normal,  kelompok  Dosis  1  dan  2  terdapat  80%  grading  normal,  dan  20%    berbagai  dosis  penelitian menunjukkan  gambaran  Normal  dan Mild yaitu  ditandai  dengan grade  mild: dijumpai  adanya  2-3 steatosis, ballooning  cell  occasional pada  zona  3,  dan  inflamasi  minimal  (bisa  tidak  dijumpai  sama sekali).  Kelompok  dosis  3  dan  4.  Menurut Klaassen  (2013) ,  kerusakan  hepar  karena  zat  toksik dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor,  seperti  jenis  zat  kimia  yang  terlibat,  dosis  yang  diberikan,  dan lamanya  paparan  zat  tersebut  seperti  akut,  subkronik  atau  kronik.  Nilai  skor  perubahan  struktur histopatologi sel hepar semakin meningkat sesuai dengan kenaikan dosis ekstrak etanol 96%  dari buah Solanum melongena L. dan minyak atsiri bunga Cananga adorate .
Hasil penelitian ini sejalan dengan hasil penelitian bahwa membuktikan gambaran mikroskopis jaringan hati mencit BALB/C jika ekstrak valerian dikonsumsi dengan dosis P2 (0,55x dosis lama yang sama) atau lebih, gambaran histopatologi hati berbeda nyata dibandingkan tidak mengonsumsi ekstrak valerian.  Hal  ini  sering  sesuai  dengan  konsep  hubungan  antara  konsentrasi  dan  respons,  yaitu  pada kisaran dosis tertentu, konsentrasi obat pada reseptor dapat menyebabkan efek terapeutik, tetapi dapat menyebabkan efek toksik. Dimana semakin tinggi konsentrasinya, semakin besar responsnya (respons terapeutik dan respons toksik (Woro, 2016) .

## KESIMPULAN DAN SARAN
Variasi  dosis  kombinasi    buah Solanum  melongena  L. alam  bentuk  ekstrak  etanol  96%  dan Cananga  adorata dalam  bentuk  minyak  atsiri    tidak  menunjukkan  efek  patologis,  sehingga  dapat digunakan sebagai bahan alternatif insektisida alami yang potensial untuk pengendalian nyamuk Aedes sp yang murah, mudah diaplikasikan dalam masyarakat serta aman bagi lingkungan.

## DAFTAR PUSTAKA
Dalpadado, R., Gunathilaka, N., Amarasinghe, D., & Udayanaga, L. (2021). A Challenge for a Unique Dengue Vector Control Programme: Assessment of the Spatial Variation of Insecticide Resistance Status amongst Aedes aegypti and Aedes albopictus Populations in Gampaha District, Sri Lanka. BioMed Research International , 2021 , 1–8. https://doi.org/10.1155/2021/6619175 David,  M.  R.,  Garcia,  G.  A.,  Valle,  D.,  &  Maciel-de-Freitas,  R.  (2018).  Insecticide  Resistance  and Fitness: The Case of Four Aedes aegypti Populations from Different Brazilian Regions. BioMed Research International , 2018 , 1–12. https://doi.org/10.1155/2018/6257860
Fikri, Z., Ernawati, F., & Jiwintarum, Y. (2020). Formulasi Sediaan Spray Ekstrak Etanol 96% Buah Terung Ungu Panjang (Solanum Melongena L.) dan Bunga Kenanga (Cananga Adorata)Terhadap Kematian  Nyamuk  Aedes  Sp. Jurnal  Analis  Medika  Biosains  (JAMBS) , 7 (1),  56. https://doi.org/10.32807/jambs.v7i1.177
Grisales,  N.,  Poupardin,  R.,  Gomez,  S.,  Fonseca-Gonzalez,  I.,  Ranson,  H.,  &  Lenhart,  A.  (2013). Temephos Resistance in Aedes aegypti in Colombia Compromises Dengue Vector Control. PLoS Neglected Tropical Diseases , 7 (9), e2438. https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0002438
Hidayati, A. U., Suhirman, S., & Wahyudiati, D. (2018). Pengaruh Ekstrak Bunga Kenanga (Canangium odoratum)  dan  Bunga  Kamboja  Kuning  (Plumeria  acuminata)  Terhadap  Mortalitas  Nyamuk Rumah (Culex quenquiefasciatus). Biota , 8 (2), 190–198. https://doi.org/10.20414/jb.v8i2.68 Idris, S. A. (2021). Uji Efektivitas Ekstrak Buah Balongga (Cucumis Melo L. Forma Agrestis) sebagai Insektisida Alami Terhadap Nyamuk Aedes Sp. Meditory : The Journal of Medical Laboratory , 9 (2), 118–128. https://doi.org/10.33992/m.v9i2.1441
Iqbal Elka Putra, F. (2021). Peran Tanaman sebagai Insektisida Nabati terhadap Gigitan Nyamuk Aedes AEGYPT  Vektor  Demam  Berdarah  Dengue. Essential:  Essence  of  Scientific  Medical  Journal , 18 (2), 1. https://doi.org/10.24843/ESTL.2020.v18.i02.p01
Kandita,  R.  T.,  Aisyah,  R.,  &  Putri,  W.  B.  (2015).  Uji  Efektivitas  Ekstrak  Buah  Leunca  (Solanum Nigrum  L.)  sebagai  Insektisida  terhadap  Nyamuk  Aedes  Aegypti  dan  Anopheles  Aconitus. Biomedika , 7 (2), 35–42. https://doi.org/10.23917/biomedika.v7i2.1898 Klaassen, C.  D.  (2013). Casarett & Doull’s Toxicology: The Basic Science of Poisons (9th  ed.,  Vol. 1236). McGraw-Hill New York.
https://accesspharmacy.mhmedical.com/book.aspx?bookID=2462
Lima, E. P., Paiva, M. H. S., de Araújo, A. P., da Silva, É. V. G., da Silva, U. M., de Oliveira, L. N., Santana, A. E. G., Barbosa, C. N., de Paiva Neto, C. C., Goulart, M. O., Wilding, C. S., Ayres, C. F. J., &  de  Melo  Santos, M. A.  V. (2011).  Insecticide  Resistance  n  Aedes Aegypti  Populations From Ceará, Brazil. Parasites & Vectors , 4 (1), 5. https://doi.org/10.1186/1756-3305-4-5
Meiskia Agung, S. F., Sudirga, S. K., & Darmadi, A. A. K. (2022). Effectiveness of Kenanga (Cananga Odorata  (Lam).)  Flower  Extract  to  Inhibit  The  Growth  of  Colletotrichum  Acutatum  (Jenkins &Amp;  Winstead)  Causes  of  Anthracnose  Disease  in  Chili  (Capsicum  Annum  L.)  Plant. SIMBIOSIS , 10 (1), 109. https://doi.org/10.24843/JSIMBIOSIS.2022.v10.i01.p10
Rahma Yulis, P.  A.,  Putri,  A.  M., Muham,  A.  oca,  Anggraini,  S.,  &  Maisarmah,  S. (2020).  Analisis Kualitatif Kandungan Bunga Kenanga (Cananga Odorata) Secara Fitokimia dengan Menggunakan Pelarut Etanol. Journal of Research and Education Chemistry , 2 (1), 43. https://doi.org/10.25299/jrec.2020.vol2(1).4783
Saleh, G. S. (2015). Chemical Detection of some Active Compounds in Egg Plant (Solanum melongena) Callus as Compared with Fruit and Root Contents. International Journal of Current Microbiology and Applied
Sciences , 4 (5),
160–165. https://www.ijcmas.com/vol-4-
5/Ghoson%20S.%20Saleh.pdf
Saleh, M., Susilawaty, A., Syarfaini, S., & Musdalifah, M. (2017). Uji Efektivitas Ekstrak Kulit Buah Jeruk  Nipis  (Citrus  aurantifolia)  Sebagai  Insektisida  Hayati  Terhadap  Nyamuk  Aedes  aegypti.
Higiene: Environmental Health Journal , 3 (1), 26–30. https://journal.uin- alauddin.ac.id/index.php/higiene/article/view/2761
Sopi,  I.  I.  P.  B.  (2018).  Pengendalian  Vektor  Demam  Berdarah  Dengue  (DBD)  Menggunakan Insektisida Nabati Ekstrak Tanaman. In Jurnal Penyakit Bersumber Binatang (Vol. 3, Issue 2, pp. 54–61). http://r2kn.litbang.kemkes.go.id:8080/handle/123456789/83396
Wayan, M. N., Nyoman, S. I., & Putu, E. Y. (2014). Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Dari  Ekstrak  Etanol  Buah  Terong  Ungu  (Solanum  Melongena  L.). Jurnal  Kimia  (Journal  Of Chemistry) , 8 (2). https://doi.org/10.24843/JCHEM.2014.v08.i02.p01 Widyastuti,  R.,  &  Jannah,  W.  (2015).  Pengaruh  Konsentrasi  Rebusan  Bunga  Kenanga  (Cananga Odorata)Terhadap  Kematian  Larva  Aedes  Aegypti. Analisis  Kesehatan  Sains , 4 (2),  284–288. http://journal.poltekkesdepkes-sby.ac.id/index.php/ANKES/article/view/290
Woro, S. (2016). Farmakologi. In Farmakologi ulasan bergambar. Jakarta: Widya Media . Kemenkes RI. http://bppsdmk.kemkes.go.id/pusdiksdmk/wp-content/uploads/2017/08/Farmakologi- Komprehensif.pdf