Jurnal Farmasi Indonesia, November 2014, hal 139-145
Vol. 11 No. 2
ISSN: 1693-8615 EISSN : 2302-4291 Online : http://farmasiindonesia.setiabudi.ac.id/
Uji Aktivitas Hipoglikemik Kombinasi Ekstrak Daun Ceplikan ( Ruellia tuberosa L.) dan Glibenklamid pada Tikus Putih Jantan dengan Induksi Aloksan
Hypoglicemic Activity of Combination Ceplikan (Ruellia tuberosa L.) Leaves Extract and Glibencamide in Male White Rat with Alloxan Induction

## BUNGA YUNIASAKTI, IKA PURWIDYANINGRUM*, MAMIK PONCO RAHAYU
Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi Jln. Letjen Sutoyo-Mojosongo Surakarta-57127 Telp. 0271-852518 * Korespondensi:  can_ika@yahoo.com
(Diterima 16 Juli 2014, disetujui 20 Agustus 2014)
________________________________________________________________________________________________________________________________________________

## ABSTRAK
Diabetes melitus merupakan suatu penyakit atau gangguan metabolisme yang ditandai dengan tingginya  kadar  gula  darah  disertai  dengan  gangguan  metabolisme  karbohidrat,  lipid  dan  protein sebagai  akibat  insufiensi  fungsi  insulin.  Pada  penelitian  ini  daun  ceplikan  ( Ruellia  tuberosa L.) mengandung  senyawa  flavonoid,  saponin  dan  tanin  yang  memiliki  aktivitas  hipoglikemik. Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  efek  hipoglikemik  kombinasi  ekstrak  daun  ceplikan dengan  glibenklamid,  dosis  efektif  pada  kombinasi tersebut, dan  untuk  mengetahui  perbandingan efek  hipoglikemik  pada  penggunaan  ekstrak  tunggal  dengan  kombinasi. Ekstrak  daun  ceplikan diperoleh  dengan  cara  maserasi  dengan  pelarut  etanol  70%.  Kondisi  diabetes  hewan  diperoleh dengan  induksi  aloksan  monohidrat  100  mg/kg  BB.  Kelompok  perlakuan  dibagi  menjadi  6 kelompok.  Kelompok  kontrol  negatif  CMC,  kontrol  positif  glibenklamid  (0,45 mg/kg  BB),  dosis tunggal  ekstrak  daun  ceplikan (937,5 mg/kg  BB),  kombinasi  ekstrak  daun  ceplikan  dan glibenklamid (25%:75%; 50%:50%; 75%:25%). Penetapan kadar glukosa darah diukur dengan alat glukometer  pada  hari  ke-7  dan  ke-14. Hasil  penelitian  menunjukkan  kombinasi  ekstrak  daun ceplikan  dan  glibenklamid  memiliki  aktivitas  hipoglikemik dengan  dosis  efektif pada  kombinasi 50%:50% ; 25%:75%. Penggunaan kombinasi ekstrak daun ceplikan dan glibenklamid mempunyai efek hipoglikemik yang lebih rendah dibanding ekstrak tunggal.
Kata kunci : Ruellia tuberossa L., glibenklamid, aloksan monohidrat, hipoglikemik.
________________________________________________________________________________________________________________________________________________

## ABSTRACT
Diabetes  mellitus  is  a  disease  or  metabolic  disorder  characterized  with  high  blood  glucose level  accompanied  with  carbohydrate,  lipid  and  protein  metabolism  disorder  as  a  result  of insufficient  insulin  function.  In  this  study, ceplikan (Ruellia  tuberossa L.)  leaves  contained flavonoid,  saponin,  and  tannin  with  hypoglycemic  activity.  This  research  aimed  to  find  out  the hypoglycemic  effect  of  ceplikan  leaf  extract  and  glibencamide  combination,  the  effective  dose  of combination,  and  to  find  out  the  comparison  of  hypoglicemic  effect  between  single  extract  and combination  use. The  extract  of ceplikan leaves  was  obtained  using  maceration  method  with ethanol  70%  solvent.  The  diabetic  condition  of  animal was  obtained  using monohidrate  alloxane induction 100 mg/kg BW. The treatment groups were divided into 6: negative control group with CMC, positive control with glibenclamide (0.45mg/kg BW), single dose of ceplikan leaves extract (937.5 mg/kg  BW),  combination  of ceplikan leaves  extract  and  glibenclamide    (25%:75%;
50%:50%; 75%:25%). The blood glucose level was measured using glucometer on the day-7, and day-14. The  result  of  research  showed  that  the  combination  of ceplikan leaves  extract  and glibenclamide had hypoglycemic activity with the effective doses of 50%:50% and 25%:75%). The combination of ceplikan leaves extract and glibenclamide had hypoglycemic effect lower than the single extract did.
Keywords : Ruellia tuberossa L., glibenclamid, monohydrate alloxane, hypoglycemic. ________________________________________________________________________________________________________________________________________________

## PENDAHULUAN
Diabetes  melius  merupakan  suatu penyakit  dimana  kadar  glukosa  dalam darah  meningkat,  penyakit  ini  dapat diterapi  dengan  obat-obat  antidiabetik oral  seperti  glibenklamid.  Glibenklamid bekerja  dengan  cara  memblok  kanal kalium  yang  sensitif-ATP  pada  membran plasma sel β bagian dalam, sehingga bisa menghasilkan  insulin  yang  berpengaruh terhadap  respon  pada  glukosa.  Efek samping  penggunaan  jangka  panjang dari  glibenklamid  dapat  menyebabkan reaksi  hipoglikemik,  termasuk  koma, terutama  pada  pasien  manula  dengan gangguan  fungsi  hati  dan  di  ginjal (Goodman & Gilman 2008). Karena efek samping pada penggunaan jangka
panjang  dari  penggunaan  glibenklamid maka  dilakukan  penelitian  tentang kombinasi daun ceplikan dan
glibenklamid  yang  dapat  menurunkan kadar glukosa dalam darah.
Daun  ceplikan  ( Ruellia  tuberosa L.) merupakan  suatu  tanaman  yang  dapat digunakan sebagai terapi diabetes melitus.  Daun  ini  mengandung  senyawa flavonoid,  saponin  dan  tanin  yang  dapat menurunkan kadar glukosa darah.
Penelitian  terdahulu  menyatakan  bahwa ekstrak  daun  ceplikan  mempunyai aktivitas  hipoglikemik yang  diujikan pada  kelinci  dengan  induksi  aloksan
(Shahwar et  al. 2011).  Hasil  dari penelitian  tersebut  menunjukkan  bahwa ekstrak  daun  ceplikan  mempunyai  dosis tunggal yang efektif sebesar 500 mg/g BB kelinci.  Dari  hasil  penelitian  tersebut, maka  dilakukan  penelitian  lanjutan mengenai  efek  antidiabetik  ekstrak  daun ceplikan  yang  dikombinasikan  dengan obat antiglikemik oral khususnya glibenklamid.  Penelitian  ini  dilakukan untuk  mengkaji  potensi  penggunaan tanaman obat sebagai terapi pendamping dalam  pengobatan  diabetes  melitus sehingga dapat menurunkan dosis antidiabetik oral.
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui efek kombinasi ekstrak daun ceplikan  dan glibenklamid  terhadap penurunan  kadar  glukosa  darah  pada tikus  putih  jantan  dengan  induksi aloksan, untuk mengetahui dosis kombinasi  ekstrak  daun  ceplikan  dan glibenklamid  yang  paling  efektif  dalam memberikan  efek  penurunan  kadar glukosa  darah  pada  tikus  putih  jantan yang  diinduksi  aloksan  dan  untuk mengetahui perbandingan
efek
hipoglikemik  antara    penggunaan  dalam bentuk  ekstrak  tunggal  daun  ceplikan dan
dalam bentuk kombinasi.

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Daun  ceplikan    diperoleh  dari daerah  Pedan,  Klaten,  Jawa  tengah, etanol  70  %,  serbuk  magnesium, alkohol,  amil  alkohol,  HCl 2%,  FeCl 3 , amoniak, CMC, glibenklamid dan
aloksan. Hewan percobaan dalam penelitian ini adalah tikus putih jantan.

## Alat
Alat  yang  digunakan  adalah  pisau, mesin  penggiling  dan  ayakan  nomor  40, seperangkat  alat  maserasi,  evaporator, beaker  glass,  pipet  volume,  botol  putih 100  ml,  alumunium  foil,  labu  takar, timbangan  elektrik,  mortir,  stamfer, batang pengaduk, gelas
ukur,
Glucometer  Easy  Touch, timbangan, jarum suntik, neraca analitik dan alat-alat gelas,  tabung  reaksi, Sterling-Bidwell, Moisture Balance.
Pembuatan  Ekstrak  Daun  Ceplikan dengan Maserasi Serbuk  daun  ceplikan  400  g dimasukkan dalam botol gelap, kemudian  ditambahkan  etanol  70% sebanyak  75  bagian  yaitu  3  liter.  Lalu ditutup  dan  didiamkan  selama  5  hari dengan  pengocokan  berulang.  Setelah  5 hari maserat disaring dan residu  diperas. Etanol  70%  ditambahkan  ke  dalam residu,  diaduk  dan  diserkai  sehingga diperoleh sari sebanyak 100 bagian. Sari diperoleh  dipekatkan  dengan  evaporator hingga didapatkan ekstrak kental. Pelarut yang  masih  tertinggal  diuapakan  di  atas penangas air hingga bebas pelarut. Identifikasi  kandungan  kimia  ekstrak daun ceplikan
Identifikasi Kandungan Kimia Ekstrak Identifikasi saponin dilakukan dengan  menambah  air  (1:1),  lalu ditambah  HCl 2  N,  dikocok  kuat-kuat.
Reaksi positif ditunjukkan dengan terdapatnya busa yang mantap (Harborne 1987). Identifikasi flavonoid dengan menambah 1-2  ml  metanol  panas, ditambah  serbuk  Mg  dan  HCl pekat. Reaksi positif ditunjukan dengan terbentuknya  larutan  warna  merah (Harborne 1987).
Identifikasi  tanin dilakukan  dengan menambah  kalium  besi  (III)  sianida  dan amoniak yang  akan  memberikan  warna merah tua (Harborne 1987).
Pengujian Efek Hipoglikemik terhadap Hewan Uji Tikus ditimbang dan dikelompokkan, dipuasakan terlebih dahulu selama 16 jam. Pada hari pertama dilakukan  pengambilan  darah  awal sebelum tikus diberi perlakuan. Kemudian  dilakukan  pengujian  kadar glukosa  awal  (T0), lalu  diberikan  larutan aloksan  monohidrat  100  mg/kg  BB tikus secara  intraperitroneal.  Setelah  4  hari induksi  larutan  aloksan,  hewan  uji  yang positif DM (KGD >200) dikelompokkan kemudian diambil darahnya (T1).
Pengambilan  darah  dilakukan  pada pembuluh  darah  ekor  lateral.  Masing- masing  kelompok  diberi  larutan  obat glibenklamid  (0,45 mg/kg  BB)  (kontrol positif); ekstrak  daun  ceplikan  (937,5 mg/kg  BB); kombinasi  ekstrak  daun ceplikan dan  glibenklamid  25% :  75% (234,375:  0,3375 mg/kg BB); kombinasi ekstrak  daun  ceplikan dan  glibenklamid
50% :  50% (468,75:  0,225 mg/kg  BB); kombinasi  ekstrak  daun  ceplikan dan glibenklamid  75% :  25% (703,125: 0,1125  mg/kg  BB) secara  oral  pada  pagi hari selama 14 hari. Pengambilan sampel darah  dilakukan  pada  hari  ke-7  dan  ke- 14  untuk  diukur  kadar  glukosa  darah setelah  pelakuan.  Sampel  darah  diambil dari  vena  lateral  ekor  tikus  dengan  cara menusuk  ekor  tikus,  kemudian  darah diteteskan pada strip yang telah dipasang pada  glukometer,  ditunggu  10  detik  dan kadar  glukosa  darah  sampel  darah  dapat dibaca.

## Analisis Hasil
Analisa  statistik  terhadap  penurunan kadar  glukosa  darah  menggunakan  uji Kolmogorov-Smirnov,  dilanjutkan  uji Kruskal-Wallis dan uji Mann-Whitney.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan hasil
identifikasi kandungan  kimia  serbuk  dan  ekstrak daun ceplikan bahwa flavonoid, saponin dan  tanin  dinyatakan  positif  terkandung dalam serbuk dan ekstrak daun ceplikan.
Dalam  penelitian  ini, pengujian hipoglikemik menggunakan metode induksi aloksan dan kadar glukosa darah diukur  dengan  alat  glukometer.  Aloksan
digunakan  sebagai  diabetogen  untuk menginduksi  terjadinya  diabetes  pada tikus.  Karena  aloksan  akan  merusak  sel- sel  penghasil  insulin  yaitu  sel β – pulau Langerhans, bila terjadi kerusakan seluruh  sel β maka  akan  terjadi  diabetes permanen. Data kualitatif rata-rata hasil pengukuran  kadar  glukosa  darah  pada berbagai  kelompok  perlakuan  dan  rata- rata  penurunan  kadar  glukosa  darah dapat dilihat pada Tabel 1.
Gambar  1  menampilkan  kurva hubungan  antara  waktu  dan  kadar glukosa  darah  setelah  pemberian  ekstrak daun  ceplikan.  Dalam  grafik  tersebut terlihat  terjadinya  penurunan  kadar glukosa darah pada kelompok glibenklamid,  kelompok  ekstrak  tunggal daun  ceplikan  dan  kelompok  kombinasi glibenklamid-ekstrak daun ceplikan (25%:75% ; 50%:50% ; 75%:25%) pada hari ke-7 dan ke-14.
Berdasarkan  analisa  statistik  uji Mann-Whitney  untuk  data  hari  ketujuh dan  hari  ke-14,  didapatkan  hasil  tidak ada  perbedaaan  bermakna antara pemberian  dosis  glibenklamid  tunggal dan kombinasi  ekstrak  daun  ceplikan dengan glibenklamid (50%:50%; 25%:75%).
Tabel 2. Rata-rata kadar glukosa darah kombinasi ekstrak daun ceplikan dengan glibenklamid
Kelompok T 0 (mg/dL) T 1 (mg/dL) T 2 (mg/dL) T 3 (mg/dL) I 83,2 ± 7,85 259,6 ± 6,69 263,4±6,18 270,8±5,80 II 83,6 ± 4,82 255,0 ± 5,05 87,4±4,16 83,8±4,27 III 87,2 ± 8,19 256,0 ± 7,44 98,4±1,67 94,2±2,17 IV 84,6 ± 7,26 252,4 ± 5,89 100,4±7,90 98,8±3,03 V 82,8 ± 8,64 252,2 ± 3,50 92,0±3,40 84,0±4,1 VI 83,2 ± 6,09 255,2 ± 4,55 90,2±5,26 85,8±5,6
Gambar 1. Grafik hubungan rata-rata kadar glukosa darah (mg/dL) dengan waktu pemeriksaan kadar glukosa darah.
Tabel 3. Tabel rata-rata penurunan kadar glukosa darah
Kelompok Selisih kadar glukosa darah (mg/dL) ∆ T 1 =T 1 -T 2 ∆ T 2 =T 1 -T 3 I -4,2±3,27 -10±5,39 II 167,6±3,28 171,2±4,43 III 155,8±6,38 163,8±8,87 IV 152,0±8,90 159,6±5,68 V 160,2±6,61 168,2±6,06 VI 166,0±7,97 170,4±8,76
Keterangan Tabel 1, Gambar 1 dan Tabel 3
Kelompok I : Kontrol negatif CMC 0,5 %
Kelompok II    : Glibenklamid dosis tunggal (0.45 mg/kg BB tikus) Kelompok III  : Ekstrak daun ceplikan tunggal (937,5 mg/kg BB tikus) Kelompok IV  : Kombinasi ekstrak daun ceplikan dan glibenklamid 25%:75% Kelompok V  : Kombinasi ekstrak daun ceplikan dan glibenklamid 50%:50% Kelompok VI : Kombinasi ekstrak daun ceplikan dan glibenklamid 75%:25% T0
: Kadar glukosa darah awal T1 : Kadar glukosa darah setelah induksi aloksan T2 : Kadar glukosa darah setelah induksi larutan uji pada hari ke-7 T3 : Kadar glukosa darah setelah induksi larutan uji pada hari ke-14
Tabel  3  menunjukkan  penurunan kadar  glukosa  darah  (mg/dl)  pada kelompok  kontrol  positif,  kelompok ekstrak  daun  ceplikan,  dan  kelompok kombinasi  glibenklamid-ekstrak  daun ceplikan  dengan  variasi  dosis  terjadi peningkatan  nilai  selisih  kadar  glukosa darah  dari  delta  satu  ke  delta  dua.  Dari grafik  tersebut    menunjukkan  bahwa kadar  glukosa  darah  pada  kelompok kombinasi lebih tinggi dibanding dengan kelompok ekstrak tunggal.
Berdasarkan analisa  statistik  uji Mann-Whitney  untuk  data  ∆T1  dan  ∆T2 didapatkan  hasil  tidak  ada  perbedaqan bermakna pada kelompok
uji glibenklamid  tunggal  dengan  kelompok kombinasi  ekstrak  daun  ceplikan dan glibenklamid (50%:50%; 25%:75%).
Mekanisme kerja glibenklamid yaitu dengan  mengurangi  kadar  glukagon dalam  serum,  dan  meningkatkan  insulin pada jaringan target dan reseptor (Mycek et  al. 2001).  Daun  ceplikan  memiliki kandungan  flavonoid,  saponin  dan  tanin sehingga  dapat  menurunkan  kadar glukosa darah. Flavonoid diduga mampu menurunkan kadar glukosa darah karena pada keadaan hiperglikemia akan memicu akumulasi oksigen reaktif sehingga  terjadi  peningkatan  radikal bebas    yang  akan  mengganggu  aktivitas insulin  dengan  menurunnya  fungsi  sel beta  pankreas,  dalam  hal  ini  flavonoid dapat  menekan  jumlah  oksigen  reaktif sehingga  dapat  menetralkan  radikal bebas dan dapat mencegah kerusakan sel beta pankreas yang memproduksi insulin (Badole et al. 2008).
Dari hasil penelitian ini dapat dilihat bahwa  kombinasi  ekstrak  daun  ceplikan
dengan  glibenklamid  memiliki  efek penurunan  kadar  glukosa  darah  yang sebanding  dengan  glibenklamid  tunggal dan  ekstrak  daun  ceplikan.  Ekstrak  daun ceplikan dapat digunakan pada pengobatan  DM  khususnya  pengobatan dengan glibenklamid.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat diambil kesimpulan : Pertama, kombinasi ekstrak daun ceplikan dengan glibenklamid  dapat    menurunkan  kadar glukosa  darah  pada  tikus  putih  yang diinduksi  aloksan. Kedua,  kombinasi ekstrak  daun  ceplikan  dan  glibenklamid pada  dosis  50%:50%  dan 25%:75% memiliki  efek  yang  efektif  dalam menurunkan  kadar  glukosa  darah  pada tikus putih jantan yang diinduksi aloksan. Ketiga,  pemberian  kombinasi  ekstrak daun ceplikan dan glibenklamid mempunyai  efek  penurunan  kadar glukosa darah yang lebih tinggi dibanding  dengan  pemberian  ekstrak tunggal.

## DAFTAR PUSTAKA
Badole SL,  Patel NM,  Prasad  A,  Thakurdesai and  Bodhankar  SL.  2008.  Interaction  of aqueous extract of Pleurotus
pulmonarius  (Fr)  Quel-Champ.  with glyburide  in  alloxan  induced  diabetic mice. Evid  Based  Complement  Alternat Med. 5(2):159-164.
Harborne  JB.  1987. Metode  Fitokimia, Penuntun  cara  Modern  Menganalisa Tumbuhan. Terbitan ke-2. Padmawinata K,  Soediro  I,  Penerjemah; Bandung: ITB.  Terjemahan  dari: Phytochemical
Methods.
Shahwar  D.  Ullaha  S,  Ahmad  M,  Ullah  S, Ahmad N, Khan MA. 2011.
hypoglycemic activity of Ruellia
tuberosa  Linn  (Acanthaceae)  in  normal and  alloxan-induced  diabetic  rabbits.
Iranian  Journal  of  Pharmaceutical
Sciences Spring. 7(2): 1107-1115.
Goodman & Gilman. 2008. Dasar
Farmakologi  Terapi.  Ed  ke-10  Volume ke-2.  Amalia  Hanif et  al.,  Penerjemah; Jakarta:  EGC.  hlm.  1120,  1177-1178. Terjemahan  dari: The  Pharmacological Basis of Therapeutics.
Mycek  MJ,  Richard  RA,  Champe  PC,  Fisher BD. 2001. Farmakologi Ulasan Bergambar.  Edisi  2.  Azwar  Agoes,
Penerjemah;  Jakarta:  Widya  Medika. Terjemahan  dari: Lippincott’s  Illustrated Reviews: Pharmacology.