AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL, ETIL ASETAT, DAN n- HEKSANA BATANG TURI PUTIH ( Sesbania grandiflora (L.) Pers.) DENGAN METODE DPPH ( 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl )
Jamilatur Rohmah 1* , Ida Agustini Saidi 2 , Chylen Setiyo Rini 1 , Devi Arvindani Masyitha 3 , Dewi Nurdiah Ramadhani 3 , Hesti Putri Wulandari 3
1 Prodi Teknologi Laboratorium Medis, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Muhammadiyah Sidoarjo
2 Prodi Teknologi Hasil Pertanian, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Muhammadiyah Sidoarjo
3 Mahasiswa Prodi Teknologi Laboratorium Medis, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Muhammadiyah Sidoarjo
* email: jamilaturrohmah@umsida.ac.id
Received 03 April 2020 Accepted 28 May 2020

## Abstrak
Turi ( Sesbania grandiflora (L.) Pers.) merupakan jenis tanaman yang tersebar luas di wilayah Indonesia  dan  termasuk  dalam  famili  Fabaceae  serta  memiliki  potensi  sebagai  antioksidan alami. Tujuan dari penelitian ini yaitu untuk mengetahui aktivitas antioksidan ekstrak etanol, etil  asetat, dan n-heksana  dari batang  turi putih ( Sesbania grandiflora (L.) Pers.). Penentuan aktivitas  antioksidan  dilakukan  dengan  metode  DPPH  menggunakan  alat  spektrofotometer UV-Vis. Tanaman turi yang digunakan berasal dari Mojosari, Mojokerto. Simplisia daun turi dimaserasi  dengan  berbagai  pelarut  organik  seperti  etanol,  etil  asetat,  dan  n-heksana  selama 24  jam.  Hasil  ekstraksi  kemudian  dilakukan  uji  fitokimia,  KLT  dan  aktivitas  antioksidan. Hasil penelitian yang diperoleh menunjukkan bahwa ekstrak etanol, etil asetat, dan n-heksana batang turi putih ( Sesbania grandiflora (L.) Pers.) memiliki aktivitas antioksidan (IC 50 ) yang termasuk ke dalam aktivitas antioksidan yang sangat kuat terhadap radikal DPPH dengan nilai IC 50 masing-masing  ekstrak  yaitu  ekstrak  etanol  sebesar  24,30  ppm  ,  ekstrak  etil  asetat sebesar 26,98 ppm, dan  n-heksana sebesar 25,33 ppm. Sehingga tanaman turi putih (batang) dapat  menjadi  salah  satu  sumber  zat  bioaktif  antioksidan  alami  untuk  mencegah  terjadinya penyakit yang disebabkan oleh radikal bebas.
Kata kunci: antioksidan, batang Sesbania grandiflora (L.) Pers., DPPH, variasi pelarut.

## Abstract
Turi  ( Sesbania  grandiflora (L.)  Pers.)  is  a  type  of  plant  that  is  widespread  in  Indonesian territory  and  belongs  to  the  Fabaceae  family  and  has  potential  as  a  natural  antioxidant.  The purpose of this study was to determine the antioxidant activity of ethanol, ethyl acetate, and n- hexane  extracts  from  white  turi  ( Sesbania  grandiflora (L.)  Pers.)  stems.  Determination  of antioxidant activity was carried out by the DPPH method using a UV-Vis spectrophotometer. The turi plants used originated from Mojosari, Mojokerto. Simplisia turi leaves macerated on ethanol,  ethyl  acetate,  and  n-hexane  solvents  for  24  hours.  The  extraction  results  are  then subjected to phytochemical tests, TLC and antioxidant activity. The results obtained showed that  ethanol,  ethyl  acetate,  and  n-hexane  extract  white  turi  stem  ( Sesbania  grandiflora (L.) Pers.) have antioxidant activity (IC 50 ) which is included in the very strong antioxidant activity against  DPPH  radicals  with  IC 50 values  respectively  of  each  extract  was  ethanol  extract  at 24.30 ppm, ethyl acetate extract at 26.98 ppm, and n-hexane at 25.33 ppm. So that the white
turi  plant  (stems)  can  be  one  source  of  natural  antioxidant  bioactive  substances  to  prevent disease caused by free radicals.
Keywords: antioxidant  activity,  Sesbania  grandiflora  (L.)  Pers.  stems,  DPPH,  various extraction solvents.

## Pendahuluan
Radikal  bebas  merupakan  salah  satu penyebab  penyakit  yang  menyerang  sel tubuh  manusia.  Radikal  bebas  terdapat dalam  tubuh  manusia  sebagai  hasil samping  dari  proses  pembentukan  energi. Radikal  bebas  dalam  jumlah  sedikit dibutuhkan  tubuh  untuk  membantu  sel darah  putih  membunuh  kuman.  Apabila terlalu banyak, mereka mampu menyerang sel-sel  tubuh  yang  sehat,  menyebabkan mereka kehilangan atruktur dan fungsinya. Sel dapat berfungsi buruk atau mati jika ini terjadi  (Ames et  al .,  1993;  Kunwar  and Priyadarsini,  2011).  Oleh  karena  itu diperlukan  senyawa  antioksidan  yang dapat  menyumbangkan  satu  atau  lebih elektron  pada  radikal  bebas  sehingga radikal  bebas  dapat  diredam/ditangkal. Antioksidan  merupakan  zat  yang  dapat menetralkan  radikal  bebas,  atau  suatu bahan  yang  berfungsi  mencegah  sistem biologi  tubuh  dari  efek  yang  merugikan yang  timbul  dari  proses  ataupun  reaksi yang menyebabkan oksidasi yang berlebihan  (Ames et  al .,  1993;  Almey et al ., 2010).
Terdapat  dua  macam  antioksidan menurut  jenisnya,  yaitu  antioksidan  alami dan sintetik ( Meenakshi et al ., 2009) . Jenis antioksidan  yang  diperoleh  dari  hasil ekstraksi  bahan  alam  yang  berpotensi menangkap  radikal  bebas  disebut  dengan antioksidan  alami.  Sedangkan  antioksidan yang  berasal  dari  hasil  sintesis  secara kimia  disebut  dengan  antioksidan  sintetik. Penggunaan  antioksidan  sintetik  seperti BHT  ( butylated  hydroxytoluene ),  asam benzoat,  BHA  ( butylated  hydroxyanisole ), dan  TBHQ  ( tert-butylhydroquinone )  pada
berbagai  produk  kosmetik,  obat,  makanan maupun minuman, dapat memberikan efek toksik  dan  karsinogenik  pada  tubuh manusia  ( Chen et  al., 1996;  Ukieyanna, 2012 ).  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa  BHT  dan  BHA  jika  digunakan  dan dikonsumsi dalam jangka waktu yang lama dapat  menyebabkan  tumor  dan  kerusakan hati  pada  hewan  uji  (Andarwulan et  al ., 1996).  Sehingga  dengan  adanya  efek samping  tersebut  perlu  dilakukan  usaha untuk  mencari  antioksidan  alami  yang berasal  dari  tumbuhan  salah  satunya  yaitu dari  tumbuhan  turi  putih  ( Sesbania grandiflora (L.) Pers.).
Tumbuhan turi ( Sesbania grandiflora (L.) Pers.) adalah tanaman jenis pepohonan yang  banyak  dijumpai  di  daerah  pedesaan yang  merupakan  tanaman  dalam  famili Fabaceae.  Tanaman  ini  seluruh  bagiannya bermanfaat  bagi  manusia . Selama  ini pemanfaatan tanaman turi oleh masyarakat masih  terbatas,  masyarakat  kebanyakan hanya memanfaatkan pada bagian bunganya  saja  yaitu  untuk  dikonsumsi sebagai  lalapan.  Akan  tetapi,  bagian  daun dan  batang  dari  tanaman  turi  ini  kurang termanfaatkan  (Azwar,  2010).  Menurut Makalalag et  al. ,  (2011)  daun  turi  putih mengandung  senyawa  saponin  dan  tanin yang berkhasiat sebagai antioksidan (Sukandar  dan  Rizki,  2013).  Penggunaan ekstrak  batang  turi  pada  penelitian  ini sebagai  sumber  antioksidan  alami  karena lebih aman dan hampir tidak terdapat  efek negatif  dari  bahan  tersebut  yang  dapat mengganggu  kesehatan  manusia  (Isfahlan et al ., 2010).
Penelitian  Fitriansyah, et.al .  (2017)
menunjukkan bahwa ekstrak n-heksan, etil asetat, dan etanol daun Sesbania sesban (L. Merr)  memiliki  aktivitas  antioksidan  IC 50 1,1- Diphenyl -2- picrylhydrazyl (DPPH) < 50  g/ml  dan  dapat  diklasifikasikan sebagai  antioksidan  yang  sangat  kuat. Ekstrak  etanol Sesbania  sesban memiliki kandungan  fenolik  total  tertinggi  (5,18  g GAE  (Gallic  Acid  Equivalent)/100  g)  dan kadar  flavonoid  total  tertinggi  (4,56  g  QE (Quercetin  Equivalent)/100  g),  sedangkan total kadar karotenoid tertinggi (4,56 g BE (Berat  Ekivalen)/100  g)  pada  ekstrak  n- heksana.  Total  kandungan  fenolik  dalam ekstrak  daun Sesbania  sesban memiliki korelasi  yang  signifikan  dan  negatif dengan  aktivitas  pembersihan  IC 50 DPPH mereka.  Tanaman Sesbania  sesban (L. Merr)  yang  digunakan  diperoleh  dari Ujung Berung, Bandung.
Penelitian sebelumnya yang dilakukan  oleh  Rohmah,  Rachmawati,  dan Nisak  (2018)  menyebutkan  bahwa  ekstrak aseton  daun  dan  batang  turi  putih ( Sesbania  grandiflora )  memiliki  aktivitas
antioksidan  IC 50 masing-masing  sebesar 56,5707  ppm  dan  54,2608  ppm  yang termasuk  ke  dalam  antioksidan  kuat terhadap radikal DPPH. Aktivitas antioksidan tidak berbeda secara signifikan antara ekstrak aseton  daun dan batang turi putih ( Sesbania grandiflora ). Tetapi berbeda  signifikan  dibandingkan  dengan aktivitas  antioksidan  asam  askorbat  yang masuk  dalam  kategori  sangat  kuat.    Oleh karena itu diperlukan penelitian selanjutnya  dengan  menggunakan  pelarut ekstraksi lainnya dengan tingkat kepolaran yang  berbeda  yaitu  pelarut  etanol,  etil asetat,  dan  n-heksana.  Karena  pelarut dengan  polaritas  yang  berbeda  dapat mempengaruhi  jenis  dan  jumlah  senyawa metabolit  sekunder.  Sehingga  dengan penggunaan  pelarut  yang  berbeda  dapat diketahui  pelarut  yang  mampu  menarik senyawa metabolit sekunder yang memiliki aktivitas  antioksidan  yang  paling  tinggi dengan  harga  EC 50 atau  IC 50 yang  paling rendah.
Metode Alat dan Bahan
Alat-alat yang  digunakan yaitu penggiling, ayakan, nampan, rotary vacuum evaporator (Buchi), bejana kromatografi, plat KLT SIL G/UV 254 , pipa kapiler, penggaris, lampu UV 254 dan 366 nm,  selotip,  pensil,  gunting,  neraca analitik,  spektrofotometer  UV-Vis  VWR 1600PC, kertas saring, dan alat-alat gelas.
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian ini antara lain:  batang  turi putih ( Sesbania  grandiflora (L.)  Pers.) yang didapat  dari  kota  Mojosari  Mojokerto, etanol  (teknis),  etil  asetat  (teknis),  n- heksana (teknis),
1,1-Diphenyl-2-
picrylhydrazyl (DPPH),  DMSO,  asam askorbat, kloroform, pereaksi Mayer (HgCl 2 ,  aquadest),  pereaksi  Dragendrorff (KI,  aquadest,  bismut  subnitrat,  asam asetat  glasial),  pereaksi  Wagner  (I 2 ,  KI, aquadest),  ammonia,  H 2 SO 4 ,  serbuk  Mg, HCl  pekat,  butanol,  CH 3 COOH  glasial, HCl  2N,  FeCl 3 10%,  NaCl  10%,  NH 4 OH pekat, Na 2 CO 3 2%, SbCl 3 , MeOH, CHCl 3 . Reagen  yang  digunakan  adalah  reagen  p.a kecuali disebutkan lain.

## Prosedur Identifikasi Tanaman
Tanaman  turi  yang  akan  digunakan diidentifikasi  terlebih  dahulu di  Lembaga Ilmu  Pengetahuan  Indonesia  (LIPI)  Balai Konservasi Tumbuhan  Kebun  Raya  Purwodadi, Pasuruan,  Jawa  Timur  untuk  mengetahui taksonominya.  Pengidentifikasian  bahan baku  ini  dilakukan  dengan  mengirim
tumbuhan  turi  putih  dari  bagian  akar hingga bunga.
1) Pembuatan Simplisia
Sampel yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  batang  turi  putih ( Sesbania  grandiflora (L.)  Pers.)  yang segar  dan  utuh  yang  diperoleh  dari Mojosari,  Mojokerto  sebanyak  11,2  kg. Batang  turi  kemudian  dicuci  bersih  dalam air  mengalir  dan  dikeringkan  di  bawah sinar  matahari  tidak  langsung.  Batang kering selanjutnya ditimbang dan dihaluskan  lalu  diayak  sehingga  diperoleh serbuk  batang  turi  (serbuk  simplisia) (Ngibad,  2013).  Serbuk  batang  turi kemudian  ditimbang  dan  disimpan  dalam wadah tertutup.

## 2) Ekstraksi Maserasi
Serbuk  batang  turi  putih  ditimbang sebanyak  @800  gram  lalu  ditambahkan dengan  pelarut  etanol  sebanyak  1600  ml (1:2)  dan  diaduk  menggunakan batang pengaduk. Kemudian dimaserasi selama 24 jam.  Hasil  maserasi  lalu  disaring  dan didapatkan filtrat hasil perendaman.
Residu dilakukan remaserasi sampai diperoleh hasil ekstrak yang berwarna agak jernih. Selanjutnya filtrat dipekatkan menggunakan rotary  vacuum  evaporator hingga  diperoleh  ekstrak  pekat  dan pelarutnya  kembali  (Ningdyah,  et  al., 2015).  Prosedur  di  atas  diulangi  dengan pelarut  yang  berbeda  yaitu  pelarut  etil asetat  dan  n-heksana.  Kemudian  masing- masing  ekstrak  pekat  dilakukan  uji fitokimia  dan  uji  KLT  serta  uji  analisis penangkal radikal bebas.

## 3) Uji Kualitatif Fitokimia
Uji  Kualitatif  Fitokimia  dilakukan dengan  mengacu  pada  Kristanti,  dkk. (2006):
a) Tanin (Pereaksi FeCl 3 )
Ekstrak  batang  turi  putih  pada berbagai  pelarut  masing-masing  sebanyak 1  ml  dan  dipanaskan  selama  beberapa menit.  Kemudian  ditambahkan  FeCl 3 1% beberapa tetes.

## b) Alkaloid
Masing-masing  sebanyak  1  mL ekstrak  ditambahkan  kloroform  dan  NH 3 . Lalu  dipanaskan  di  atas  penangas  air. Ditambahkan  1  tetes  H 2 SO 4 pada  masing- masing  tabung  reaksi.  Tabung  pertama ditambahkan  pereaksi  Mayer.  Tabung kedua ditambah pereaksi Wagner. Sedangkan  tabung  ketiga  ditambahkan pereaksi Dragendroff.

## c) Flavonoid
Masing-masing  sebanyak  1  ml ekstrak ditambahkan ke dalam 3 ml etanol 70%  kemudian  dikocok,  dipanaskan  dan dikocok  kembali.  Lalu  disaring  dan diambil  filtratnya.  Filtrat  ditambahkan serbuk  Mg  sebanyak  0,1  gram  dan  3  tetes HCl pekat.

## d) Saponin
Masing-masing  sebanyak  1  ml ekstrak  ditambah  10  ml  aquades  dan didihkan  dalam  penangas  air.  Kemudian campuran  tersebut  dikocok  dan  dibiarkan 15 menit.
e) Steroid
Sampel 1 ml masing-masing ditambahkan  3  ml  etanol  70%  (v/v)  dan  2 ml H 2 SO 4 pekat dan CH 3 COOH.

## f) Triterpenoid (Uji Liebermann-

## Burchard)
Ekstrak  maserasi  sebanyak  1  ml masing-masing ditambahkan 2 ml kloroform dan 3 ml H 2 SO 4 pekat.
g) Fenolik
Sebanyak 1 ml sampel ditambahkan  NaCl  1%  (b/v)  dan  gelatin 10% (b/v).
4) Uji KLT Uji pendahuluan analisis
antioksidan  ekstrak  batang  turi  putih  pada berbagai  pelarut  ekstraksi  dengan  metode kromatografi  lapis  tipis  (KLT)  dilakukan untuk  mendapatkan  nilai  Rf.  Fase  diam yang  digunakan  pada  metode  ini  adalah silika  gel  F 24 dengan  ukuran  60  mesh  dan fase gerak yang digunakan untuk mengelusi  yaitu  etil  asetat  dan  etanol dengan  perbandingan  1:4.  Sejumlah  kecil ekstrak  etanol,  etil  asetat,  dan  n-heksan batang  turi  putih  ditotolkan  pada  fase diam, kemudian dielusikan dalam chamber kromatografi. Selanjutnya plat KLT diamati  berkas  nodanya  di  bawah  lampu UV pada panjang gelombang 254 dan 366 nm.  Noda  yang  dihasilkan  lalu  ditandai dan  dihitung  nilai  Rf-nya  ( retardation factor ) (Sa’adah, 2010).
5) Uji  Antioksidan  Ekstrak  Etanol,  Etil Asetat,  dan  n-Heksana  Batang  Turi Putih (Sesbania grandiflora (L.) Pers.) dengan  Metode  DPPH  (1,1-Diphenyl- 2-picrylhydrazyl)
Aktivitas antioksidan ekstrak etanol,  etil  asetat,  dan  n-heksana  batang turi  putih  dilakukan  menggunakan  metode DPPH  menurut  Ningdyah,  dkk  (2015) dengan sedikit modifikasi:
a) Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Larutan DPPH 0,01% (b/v) dimasukkan  ke  dalam  kuvet.  Selanjutnya dibaca nilai absorbansinya dengan panjang gelombang 511-517 nm. Panjang gelombang  maksimum  memiliki  nilai absorbansi tertinggi.

## b) Penentuan Kurva Standar
Pembuatan  larutan  untuk  kurva standar  yaitu  dengan  menimbang  0,01 gram  Kristal  DPPH  yang  diencerkan dengan  metanol  pada  labu  ukur  100  ml sehingga  diperoleh  kadar  100  ppm. Selanjutnya  dibuat  variasi  konsentrasi  dari larutan stok (5, 10, 15, 20, dan 25 ppm).

## c) Analisis  Antioksidan  dengan  Metode DPPH  dengan  Spektrofotometer  UV- Vis
Ekstrak  etanol,  etil  asetat,  dan  n- heksan  batang  turi  putih  masing-masing sebanyak  0,01  gram  diencerkan  dengan metanol pada labu ukur 100 ml. Selanjutnya  dibuat  variasi  konsentrasi  dari larutan  stok  sampel  (5,  10,  15,  20,  dan  25 ppm). Pembuatan larutan DPPH dilakukan menggunakan cara yaitu menimbang 0,004 gram  kristal  DPPH  dalam  labu  ukur  100 ml.  Selanjutnya  3  ml  sampel  dengan masing-masing  variasi  konsentrasi  yang berbeda  ditambahkan  3  ml  larutan  DPPH 0,004%,  proses  inkubasi  dilakukan  selama 30  menit  pada  suhu  ruang.  Kemudian membaca absorbansinya dengan alat spektrofotometri  UV-Vis  pada  panjang gelombang  517  nm.  Kemudian  membuat larutan  pembanding  menggunakan  asam askorbat (variasi konsentrasi 5, 10, 15, 20, dan  25  ppm).  Pembacaan  nilai  absorbansi asam  askorbat  dilakukan  sama  seperti pembacaan  nilai  absorbansi  untuk  sampel. Setiap  pengukuran  dilakukan  pengulangan sebanyak 5 kali.  Analisis  antioksidandapat diketahui  dari  hasil  data  absoransi  dengan cara  menghitung  dengan  rumus  sebagai berikut (Sayuti & Yenrina, 2015):
Daya antioksidan = Absorban blanko−Absorban sampel Absorban blanko x 100 % (1)
Selanjutnya  dihitung  regresi  dari  kurva tersebut  sehingga  dapat  dihitung  nilai  IC 50 ( Inhibitory  Concentration )  =  konsentrasi
untuk  menghambat  atau  meredam  50% jumlah radikal bebas.

## Hasil dan Pembahasan
a. Identifikasi Tanaman
Identifikasi  bahan  baku  batang  turi putih dilakukan di Lembaga Ilmu
Pengetahuan Indonesia (LIPI) Balai Konservasi Tumbuhan Kebun Raya Purwodadi, Pasuruan, Jawa Timur.
Pengidentifikasian bahan baku ini dilakukan dengan mengirim tumbuhan turi putih  dari  bagian  akar  hingga  bunga. Tujuan  identifikasi  bahan  baku  daun  turi putih  yaitu  mengetahui  dan  memastikan kebenaran  bahan  baku  yang  digunakan, yaitu  merupakan  tanaman  turi  putih dengan  nama  latin Sesbania  grandiflora (L.) Pers.
b. Pembuatan Simplisia
Pembuatan simplisia dilakukan dalam tiga tahap  yaitu tahap sortasi basah, pencucian,  pengeringan,  dan  penghalusan bahan  (Prasetyo  &  Inorah,  2013).  Sortasi basah merupakan tahapan pencucian bahan dengan  memisahkan  bahan  dari  kotoran (Depkes  RI,  1985).  Pencucian  merupakan tahapan  membersihkan  batang  turi  putih dari  kotoran  yang  menempel  dengan menggunakan  air  yang  mengalir.  Tahap pengeringan batang turi putih dilakukan di
bawah  sinar  matahari  tidak  langsung dengan  maksud agar  senyawa  aktif  pada batang  turi  tidak  rusak  karena  panas. Tujuan  dari  proses  pengeringan  ini  adalah untuk  menghilangkan  kadar  air  sehingga sampel  tidak  mengalami  kerusakan  dan penurunan mutu walaupun disimpan dalam waktu  yang  lama (Prasetyo  &  Inoriah, 2013).  Tahapan  terakhir  dari  pembuatan simplisia  yaitu  tahap  penghalusan  bahan. Pada  tahap  ini,  batang  turi  yang  sudah dikeringkan dihaluskan dengan cara digiling  sehingga  diperoleh  bahan  dalam bentuk  serbuk.  Tujuan  dari  tahap  ini  yaitu untuk memperkecil ukuran bahan sehingga akan  memperluas  permukaan  bahan  yang akan  berinteraksi  dengan  pelarut  dan mempermudah  komponen  bioaktif  yang terkandung larut dalam simplisia (Cahyanine,  Estiasih  &  Nisa,  2008). Simplisia  serbuk  batang  turi  putih  yang diperoleh  berwarna  coklat  muda  serta aroma  batang  turi  putih  yang  khas  masih melekat  pada  simplisia  batang  turi  putih. Berikut  ini  merupakan  hasil  berat  sampel batang  turi  putih  ( Sesbania  grandiflora (L.) Pers.) yang digunakan dalam penelitian ini:
Tabel 1. Hasil simplisia batang turi putih ( Sesbania grandiflora (L.) Pers.) Jenis Sampel Parameter (gram) Berat basah Berat kering Berat serbuk Batang turi putih 11200 5700 2400 Berdasarkan pada Tabel 1
didapatkan  hasil  berat  basah,  berat  kering, dan  berat  serbuk  batang  turi.  Pada  batang kering  mengalami  penyusutan  sebesar
50,89% (b/b) dari batang basah. Penyusutan ini disebabkan oleh
menguapnya  kadar  air  yang  ada  pada sampel  (batang  basah)  pada  saat  proses pengeringan.  Menguapnya  kadar  air  saat proses  pengeringan  ini  bertujuan  untuk menjaga  kualitas  simplisia  agar  tidak
menjadi  media  tumbuhnya  mikroba/jamur sehingga  simplisia  tidak  akan  mudah membusuk (Mabruroh, et al ., 2015).
c. Ekstraksi Maserasi
Tujuan ekstraksi menggunakan pelarut  dengan  polaritas  yang  berbeda yaitu  untuk  memperoleh  jenis  dan  jumlah senyawa metabolit sekunder dan mengetahui  tingkat antioksidan  pada masing-masing ekstrak yang sesuai dengan
kelarutannya  sehingga  dapat  digunakan sebagai  rujukan  untuk  mengetahui  potensi bioaktivitas tertinggi suatu senyawa, karena  dimungkinkan  pada  pelarut  yang berbeda  potensi  bioaktivitas  dan  senyawa
aktif yang terkandung didalamnya berbeda pula  (Ames, et  al .,  1993).  Dari  proses ekstraksi maserasi diperoleh hasil rendemen  simplisia  batang  turi  putih seperti  yang  tertera  pada  Tabel  2.
Tabel 2. Hasil ekstrak pekat daun turi ( Sesbania grandiflora (L.) Pers.) pada berbagai pelarut ekstraksi
Sampel Parameter Hasil Ekstrak Etanol Etil Asetat n-Heksana Batang turi putih Serbuk simplisia 800 gram 800 gram 800 gram Ekstrak pekat 4,165 gram 9,872 gram 5,618 gram Rendemen 0,520 % 1,234 % 0,702%
Berdasarkan  pada  Tabel  2  di  atas, hasil  rendemen  ekstrak  yang  paling  besar yaitu  pada  ekstrak  etil  asetat.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  kandungan  senyawa dalam  batang  turi  putih  cenderung  larut pada  pelarut  etil  asetat.  Perbedaan  nilai rendemen tersebut  diduga disebabkan oleh sifat  pelarut  dalam  melarutkan  senyawa metabolit sekunder  yang berbeda  (Depkes, 2000).

## d. Uji Kualitatif Fitokimia
Uji  fitokimia  yang  dilakukan  pada ekstrak  etanol,  etil  asetat,  dan  n-heksana batang  turi  putih  ( Sesbania  grandiflora (L.) Pers.) meliputi uji alkaloid, flavonoid, tanin,  saponin,  steroid,  triterpenoid,  dan fenolik.  Hasil  uji  fitokimia  ekstrak  batang turi putih ( Sesbania grandiflora (L.) Pers.) dapat dilihat pada Tabel 3:
Tabel  3. Hasil  uji  fitokimia  ekstrak  etanol,  etil  asetat,  dan  n-heksana  batang  turi  putih ( Sesbania grandiflora (L.) Pers.) Uji Fitokimia Pereaksi Kesimpulan (+) / (-) Etanol Etil Asetat  n-Heksana Alkaloid Mayer + + + Wagner + + + Dragendorf + + - Flavonoid Mg + HCl pekat + etanol + - + Saponin - + + + Steroid Libermann-Burchard - + + Triterpenoid Kloroform+H 2 SO 4 pekat + + + Fenolik NaCl 10% + Gelatin 1% + - - Tanin FeCl 3 1% + + -
Berdasarkan  hasil  uji  fitokimia (Tabel  3)  pada  ekstrak  etanol  batang  turi putih  ( Sesbania  grandiflora (L.)  Pers.) mengandung  senyawa  alkaloid,  flavonoid, saponin,  triterpenoid,  fenolik,  dan  tanin.
Sedangkan  pada  ekstrak  etil  asetat  batang turi putih ( Sesbania grandiflora (L.) Pers.) mengandung  senyawa  alkaloid,  saponin, steroid,  triterpenoid,  dan  tanin.    Dan  pada ekstrak n-heksan batang turi putih
( Sesbania grandiflora (L.) Pers.) mengandung  senyawa  alkaloid,  flavonoid, saponin, steroid, dan triterpenoid. Berbedanya kandungan senyawa metabolit sekunder ini dikarenakan adanya perbedaan kepolaran pelarut ekstraksi yang digunakan.  Selain  itu,  senyawa  yang  sama ataupun  kelompok  senyawa  yang  sama dimungkinkan untuk disintesis atau ditimbun  pada  organ  yang  berbeda.  Kadar senyawa  metabolit  sekunder  yang  berbeda akan  mempengaruhi  analisis  antioksidan (Del Bano et al., 2003).
e. Uji KLT
Uji  KLT  pada  penelitian  ini,  fase diam  yang  digunakan  yaitu  plat  GF 254 . Sedangkan  fase  gerak  yang  digunakan yaitu  eluen  etanol:etil  asetat  (4:1)  yang merupakan  eluen  terbaik  dibandingkan dengan n-heksan:etil asetat (4:1),
metanol:etil asetat:n-heksan (8:3:1), karena tidak didapatkan warna noda yang terbentuk.  Maka,  dengan  menggunakan eluen  etanol:etil  asetat  (4:1)  dihasilkan noda  pada  plat.  Hasil  uji  Kromatografi Lapis Tipis (KLT) pada ekstrak batang turi putih  ( Sesbania  grandiflora (L.)  Pers.)
ditunjukkan pada Gambar 1 dan Tabel 4. (a) (b) (c)
Gambar  1. Hasil  uji  KLT,  (a)  ekstrak etanol,  (b)  etil  asetat,  dan  (c)  n-heksana  batang  turi putih ( Sesbania grandiflora (L.) Pers.)
Tabel  4. Hasil  uji  KLT  ekstrak  etanol,  etil  asetat,  dan  n-heksana  batang  turi  putih ( Sesbania grandiflora (L.) Pers.) Ekstrak Nomor Noda Nilai Rf Etanol 1 0,51 2 0,66 3 0,80 Etil Asetat 1 0,66 2 0,77 3 0,82 4 0,91 n-Heksana 1 0,49 2 0,58 3 0,69 4 0,67
5 0,69 6 0,79
Berdasarkan  hasil  pada  Tabel  4  dan Gambar  1,  diperoleh  warna  noda  yang berbeda.  Hal  ini  disebabkan  karena  dalam satu  tanaman  dapat  mengandung  jenis senyawa yang bermacam-macam meskipun  dalam  satu  golongan  senyawa yang  sama  (Pokorni,  et  al.,  2001).    Hasil uji  kromatografi  lapis  tipis  di  atas,  untuk ekstrak  etanol  batang  turi  putih  diperoleh tiga  noda.  Noda  pertama  didapatkan  nilai Rf  0,51  yang  diduga  adalah  senyawa triterpenoid.  Hal  ini diperkuat  oleh Setiadi (2014) yang menyatakan nilai Rf triterpenoid berada pada Rf 0,31 dan 0,51. Pada noda kedua dan ketiga diperoleh nilai Rf  0,66  dan  0,80  yang  diduga  adalah senyawa  tanin.  Hal  ini  didukung  oleh Mukholifah  (2014)  bahwa nilai  Rf  tanin berada pada Rf 0,68; 0,81; dan 0,96. Serta oleh  oleh  Nursidika,  Saptarini  &  Rafiqua (2014)  menyatakan  bahwa  nilai  Rf  tanin yaitu berada pada Rf 0,6.
Pada  ekstrak  etil  asetat  batang  turi diperoleh  empat  noda.  Noda  pertama memiliki  nilai  Rf  0,66;  noda  kedua  Rf 0,77;  noda  ketiga  Rf  0,82;  dan  noda keempat  Rf  0,91.  Menurut  penelitian Mukholifah (2014), nilai  Rf 0,66 dan 0,82 menunjukkan  bahwa  terdapat  senyawa tanin  pada  ektrak  batang  turi.  Sedangkan pada  nilai  Rf  0,77  diduga  mengandung senyawa  alkaloid.  Pada  noda  4  hasil mengacu pada senyawa triterpenoid dengan  nilai  Rf  0,91.  Hal  tersebut didukung  dengan  penelitian  Maulana (2018)  yang  menyebutkan  bahwa  terdapat senyawa  alkaloid  dengan  nilai  Rf  sebesar 0,7;  0,76;  0,74  dan  juga  terdapat  senyawa triterpenoid  dengan  nilai  Rf  sebesar  0,91; 0,92; dan 0,95.
Sedangkan  pada  ekstrak  n-heksana batang  turi  diperoleh  enam  noda. Nilai  Rf berurutan 0,49 (noda 1); 0,58 (noda 2); dan
0,69  (noda  3)  yang  diduga  senyawa triterpenoid, flavonoid, dan steroid. Sedangkan  pada  nilai  Rf  0,67  (noda  4); 0,69  (noda  5);  dan  0,79  (noda  6)  yang diduga  senyawa  steroid  dan  saponin. Menurut  penelitian  Khasanah  (2015) bahwa  identifikasi  kandungan  senyawa dengan  nilai  Rf  berturut-turut  0,325;  0,45; 0,55;  serta  0,95  menunjukkan  positif adanya senyawa terpenoid. Peneliti lainnya oleh  Marliana et  al .  (2005) yang menyebutkan  bahwa  dengan  nilai  Rf  0,54 dan  0,92  merupakan  positif  adanya kandungan  senyawa  flavonoid  serta  nilai Rf  0,79  dan  0,84  yang  merupakan  positif adanya  kandungan  senyawa  saponin. Sedangkan nilai Rf pada penelitian Ilyas et al .  (2015)  dengan  nilai  Rf  masing-masing 0,2;  0,6;  dan  0,8  menunjukkan  bahwa senyawa  tersebut  merupakan  salah  satu senyawa golongan steroid.
f. Uji AntioksidanEkstrak Daun Turi Putih (Sesbania grandiflora (L.) Pers.) dengan Metode DPPH (1,1-Diphenyl- 2-picrylhydrazyl)
1) Penentuan Panjang Gelombang

## Maksimum
Pengujian  daya  antioksidan  diawali dengan  penentuan  panjang  gelombang maksimum.
Penggunaan panjang gelombang  maksimum  bertujuan  untuk memaksimalkan kepekaan pengukuran sampel  (Gandjar  &  Rohman,  2007). Penentuan  panjang  gelombang  maksimum suatu  senyawa  dapat  berbeda  berdasarkan kondisi  dan  alat  yang  berbeda.  Pada pengukuran  penangkal  radikal  bebas, panjang  gelombang  maksimum  berada antara 514-519 nm dengan
spektrofotometer  UV-Vis  (VWR-1600PC) (Rohmah,  Rachmawati,  dan  Nisak,  2018).
Pada  penelitian  ini,  dilakukan  penentuan panjang gelombang maksimum antara 514- 519 nm. Berikut merupakan hasil
penentuan  panjang  gelombang  maksimum (Gambar 2):
Gambar 2. Penentuan panjang gelombang maksimum
Berdasarkan kurva penentuan
panjang  gelombang  maksimum    pada Gambar  1,  didapatkan  panjang  gelombang maksimum  yaitu  pada  516  nm.  Hal  ini didukung  oleh  penelitian  Nasution  et  al (2015),  bahwa  panjang  gelombang  yang diukur pada rentang 400-800 nm menunjukkan panjang gelombang
maksimum  daya  antioksidan  pada  panjang gelombang 516 nm . Maka, pada penelitian ini pengukuran aktivitas antioksidan ekstrak daun turi putih ( Sesbania grandiflora (L.)  Pers.)  pada  berbagai pelarut  diukur  pada  panjang  gelombang 516 nm.

## 2) Pembuatan Kurva Standar
Pembuatan  kurva  standar  bertujuan sebagai  kalibrasi  alat  yang  digunakan. Pembuatan  kurva  standar  yang  dilakukan yaitu membuat larutan induk DPPH ( 1,1-2-
pycrylhydrazyl )  konsentrasi  100  ppm. Kemudian,  larutan  induk  divariasikan dalam berbagai  variasi  yaitu 5, 10, 15, 20, dan  25  ppm.  Hasil  kurva  standar  yang diperoleh ditunjukkan pada Gambar 2.
Berdasarkan pada Gambar 3,
diperoleh  persamaan  regresi  linier    (y)  = 0,0249x  +  0,0489  dengan  nilai  R 2 = 0,9742.  Nilai  R 2 bertujuan  mengetahui linieritas suatu kurva. Semakin linier kurva yang  terbentuk  maka  nilai  R 2 akan mendekati  nilai  1  (Sukindro,  2011).  Nilai R 2 diartikan  sebagai  nilai  koefisien determinasi yaitu angka yang menunjukkan kemampuan variabel
independen  dalam  menerangkan  variabel dependen.  Nilai  yang  mendekati  nilai  1 menunjukkan variabel-variabel independen hampir semua memberikan informasi yang dibutuhkan  untuk  memprediksi  variabel dependen
(Ghozali, 2012).
0,847 0,8472 0,8475 0,8465 0,8455 0,842 0,841 0,842 0,843 0,844 0,845 0,846 0,847 0,848 513 514 515 516 517 518 519 520 A b sorb an si Panjang Gelombang (nm)
Gambar 3 . Penentuan kurva standar
3) Uji Antioksidan dengan Metode DPPH
Penentuan aktivitas antioksidan ekstrak  etanol,  etil  asetat,  dan  n-heksana batang  turi  putih  pada  penelitian  ini dilakukan  menggunakan  metode  DPPH. Metode  DPPH  merupakan  metode  yang mudah,  murah,  dinilai  memiliki  tingkat keakuratan  tinggi,  dan  praktis  (Molyneux, 2004).  Reaksi  yang  terjadi  pada  pengujian
antioksidan  dengan  metode  DPPH  yaitu DPPH bereaksi dengan senyawa antioksidan untuk memberikan atom hidrogen,  maka  warna  ungu  dari  larutan akan  berubah  menjadi  warna  kuning terang.  Reaksi  antioksidandengan  metode DPPH digambarkan sebagai berikut (Gambar 4):
Gambar 4. Reduksi radikal DPPH dengan antioksidan (Mani, et.al., 2011)
Serapan  warna  violet  diukur  pada panjang  gelombang  517  nm  (Widyastuti, 2010). Setelah mengetahui  absorbansi  dari daya  antioksidandari  ekstrak  etanol,  etil asetat,  dan  n-heksana  batang  turi  putih ( Sesbania  grandiflora (L.)  Pers.),  maka dapat  diketahui  nilai  IC 50 .  Nilai  IC 50
merupakan nilai yang menyatakan
konsentrasi  yang  dibutuhkan  oleh  ekstrak untuk  meredam  50%    dari  radikal  bebas (DPPH)  (Tristantini  et  al.,  2016).  Apabila
nilai  IC 50 <  10  maka  dinyatakan  memiliki daya  antioksidan  yang  sangat  kuat. Berdasarkan  hasil  (Gambar  5)  absorbansi ekstrak  etanol,  etil  asetat,  dan  n-heksana batang  turi  putih  ( Sesbania  grandiflora (L.)  Pers.)  dengan  larutan  pembanding asam  askorbat  menunjukkan  semakin tinggi konsentrasi ekstrak batang turi putih dan  asam  askorbat,  maka  nilai  absorbansi yang  diperoleh  semakin  kecil.  Hal  ini disebabkan karena semakin tinggi
y = 0,0249x + 0,0489 R² = 0,9743 - 0,2000 0,4000 0,6000 0,8000 0 5 10 15 20 25 30 Ab so rb an si (ƛ 5 1 6 n m ) Konsentrasi (ppm)
konsentrasi  ekstrak  dan  asam  askorbat maka maka  semakin  banyak  kandungan senyawa  metabolit  sekunder  pada  larutan untuk  menangkap  radikal  bebas  (DPPH) sehingga  warna  ungu  dari  larutan  DPPH semakin  berkurang.  Hal  ini  menyebabkan serapan yang terjadi mengalami penurunan
(Susanti & Kusbandari, 2016). Selanjutnya dari  hasil  absorbansi  yang  diperoleh, dihitung  prosentase  daya  antioksidan ekstrak  etanol,  etil  asetat,  dan  n-heksana batang  turi  putih  ( Sesbania  grandiflora (L.)  Pers.)  dengan  asam  askorbat  yang dapat dilihat pada Gambar 6.
Gambar  5 . Grafik  absorbansi  ekstrak  etanol,  etil  asetat,  dan  n-heksana  batang  turi  putih ( Sesbania grandiflora (L.) Pers.) terhadap DPPH pada λ 516 nm
Gambar  6. Grafik  prosentase  inhibisi ekstrak  etanol,  etil  asetat,  dan  n-heksana  batang  turi putih ( Sesbania grandiflora (L.) Pers.) terhadap DPPH
Berdasarkan hasil % inhibisi antioksidan  pada  Gambar  6,  didapatkan hasil  semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak batang  turi  putih  dan  asam  askorbat semakin tinggi pula persentase inhibisinya. Hal  tersebut  terjadi  karena  semakin  tinggi konsentrasi  maka  semakin  banyak  pula
kandungan senyawa metabolit pada ekstrak sehingga senyawa metabolit tersebut dapat mendonorkan  atom  H  pada  radikal  bebas DPPH  dan  membentuk  ikatan  DPPH-H yang lebih stabil (Sayuti & Yenrina, 2015). Semakin  banyak  ikatan  stabil  DPPH-H, maka  semakin  menurun  intensitas  warna
0,000 0,100 0,200 0,300 0,400 0,500 0,600 5 10 15 20 25 Ser ap an D PPH p ad a λ 51 6 nm Konsentrasi (ppm) etanol etil asetat n-heksana asam askorbat 0 20 40 60 80 100 5 10 15 20 25 % Inh ibis i r at a- ra ta Konsentrasi (ppm) etanol etil asetat n-heksana asam askorbat
serapan (Mabruroh, 2015). Apabila intensitas  warna  serapan  menurun,  maka absorbansi  akan  rendah  sehingga  persen daya antioksidan semakin tinggi (Sayuti & Yenrina,  2015). Hal  tersebut  dapat ditunjukkan  pada  reaksi  DPPH  dengan senyawa  antioksidan  pada  Gambar  3. Hal ini  terjadi  pula  dengan  asam  askorbat, dimana asam askorbat merupakan antioksidan  sekunder  yang  mempunyai kemampuan  menangkap  radikal  bebas
lebih  stabil  karena  memiliki  2  atom hidrogen. Sehingga semakin banyak ikatan DPPH-H  yang  terbentuk,  larutan  akan berubah  menjadi  warna  kuning  dan absorbansi  asam  askorbat  menjadi  rendah (Gambar  7).  Apabila  absorbansi  semakin rendah, maka persentase
antioksidansemakin besar (Mabruroh,
2015).  Berikut  merupakan  reaksi  ekstrak dan asam askorbat dalam meredam radikal bebas (DPPH):
Gambar 7. Reaksi asam askorbat dengan DPPH (radikal bebas) (Mani, et.al., 2011)
Asam  askorbat  atau  vitamin  C mempunyai  aktivitas  antioksidan  yang sangat kuat. Hal tersebut dikarenakan sifat asam  askorbat  yang  lebih  stabil.  Struktur asam  askorbat  yang  lebih  stabil  dapat mendonorkan  dua  atom  hidrogen  kepada radikal  bebas  DPPH  dan  akan  membentuk radikal  L-askorbil  yang  stabil  (Gambar  6) (Mani, et  al .,  2011).  Tanin  mempunyai daya  antioksidan  yang  cukup  kuat  karena dipengaruhi  oleh  kestabilan  strukturnya. Senyawa tanin termasuk ke dalam senyawa golongan flavonoid yang  merupakan
senyawa  pereduksi  yang  baik  dan  dapat menghambat  reaksi  oksidasi  dengan  baik. Senyawa tanin akan mendonorkan atom H sebagai  peredam  radikal  bebas  DPPH, sehingga terjadi penstabilan radikal senyawa  tanin.  Kestabilan  struktur  tanin juga  dapat  disebabkan  oleh  kedudukan gugus  hidroksi  pada  posisi  orto,  yakni gugus  -OH  yang  terikat  pada  atom  C nomor  3  dan  nomor  4  dalam  cincin  B. Struktur orthohidroksil meningkatkan aktifitas antioksidatif senyawa tanin (Hermawan and Setyawan, 2003).
Gambar 8. Grafik nilai IC 50 masing-masing zat uji 24,30 26,98 25,33 4,93 0 5 10 15 20 25 30 etanol etil asetat n-heksana asam askorbat Akt iv it as Ant io ks ida n (IC 50 )
Hasil  aktivitas  antioksidan  dengan metode  DPPH  terlihat  pada  Gambar  8, menunjukkan bahwa  ketiga ekstrak batang turi  putih  memiliki  aktivitas  antioksidan yang masuk ke dalam kategori sangat kuat. Namun  jika  dibandingkan  pada  ketiga ekstrak,  ekstrak  etanol  memiliki  kekuatan aktivitas  antioksidan  yang  paling  tinggi dibandingkan  ekstrak  n-heksana  dan  etil asetat  batang  turi  putih.  Dengan  urutan kekuatan aktivitas antioksidansebagai berikut: ekstrak etanol > ekstrak n-heksana >  ekstrak  etil  asetat  batang  turi  putih.  Hal ini  dipengaruhi  oleh  kandungan  senyawa aktif  yang  terekstrak  pada  masing-masing pelarut. Dimana pada ekstrak etanol batang turi  putih  pada  uji  fitokimia  mengandung senyawa  alkaloid,  flavonoid,  saponin, triterpenoid, fenolik, dan tanin. Sedangkan pada  ekstrak  etil  asetat  batang  turi  putih ( Sesbania grandiflora (L.) Pers.) mengandung  senyawa  alkaloid,  saponin, steroid,  triterpenoid,  dan  tanin.    Dan  pada ekstrak n-heksan batang turi putih
( Sesbania grandiflora (L.) Pers.)
mengandung  senyawa  alkaloid,  flavonoid, saponin, steroid, dan triterpenoid..
Perbedaan  kandungan  senyawa  aktif  ini turut  mempengaruhi  aktivitas  antioksidan tiap  ekstrak. Dari  berbagai  senyawa  yang terkandung  tersebut  diduga  menyebabkan adanya sinergisme, sehingga dapat membuat  antioksidan  pada  ekstrak  batang turi  putih  stabil.  Senyawa  bioaktif  yang terdapat  pada  ekstrak  batang  turi  dengan pelarut  etanol  lebih  berperan  aktif  sebagai antioksidan  dalam  menangkal  radikal bebas  DPPH.  Berarti  senyawa  bioaktif yang berperan sebagai penghambat radikal bebas  dari  ekstrak  batang  turi  dapat terekstrak  baik  jika  menggunakan  pelarut etanol.  Hal  tersebut  dapat  didukung  dari penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh Rohmah,  Rachmawati,  dan  Nisak  (2018) menunjukkan  bahwa  pada  ekstrak  aseton
daun  dan  batang  turi  putih  ( Sesbania grandiflora )  memiliki  daya  antioksidan dengan  nilai  IC 50 sebesar    56,5707  ppm dan  54,2608  ppm..  Perbedaan  nilai  IC 50 tersebut  dapat  dipengaruhi  banyaknya kandungan  senyawa  metabolit  sekunder pada  tumbuhan  turi  dan  tingkat  kepolaran pelarut  yang digunakan.  Namun  demikian, kandungan  senyawa  metabolit  sekunder pada  tumbuhan  turi  juga  dipengaruhi  oleh keadaan lingkungan sekitar tempat tumbuhnya pohon seperti kesuburan tanah, kelembaban,  suhu,  sinar  matahari,  dan ancaman  di  sekitar  tumbuhan  tersebut tumbuh.
Nilai  IC 50 ketiga  ekstrak  batang  turi putih  jika  dibandingkan  dengan  nilai  IC 50 asam  askorbat,  ketiga  ekstrak  memiliki aktivitas antioksidan yang lebih lemah. Hal tersebut  terjadi  karena  asam  askorbat memiliki sifat stabil dan dapat mendonorkan  dua  atom  hidrogen  pada radikal bebas yang nantinya akan membentuk  L-askorbil  stabil akibatnya aktivitas  antioksidanasam  askorbat  lebih kuat  dibandingkan  dengan  ketiga  ekstrak batang turi putih (Fitriansyah et al., 2017).

## Kesimpulan
Ekstrak  etanol,  etil  asetat,  dan  n- heksana  batang  turi  putih (Sesbania grandiflora (L.)  Pers.)  memiliki  aktivitas antioksidan yang masuk ke dalam kategori sangat  kuat  dengan  nilai  IC 50 masing- masing  ekstrak  yaitu:  ekstrak  etanol  daun sebesar  24,30  ppm,  ekstrak  etil  asetat sebesar  26,98  ppm,  dan  n-heksana  sebesar 25,33  ppm.  Ekstrak  yang  memiliki aktivitas  antioksidan  yang  paling  tinggi yaitu pada ekstrak  etanol  batang  turi  putih dengan kategori aktivitas yang sangat kuat. Sehingga tanaman turi putih (batang) dapat menjadi  salah  satu  sumber  zat  bioaktif antioksidan alami untuk mencegah terjadinya  penyakit  yang  disebabkan  oleh
radikal bebas.

## Ucapan Terima Kasih
Terima  kasih  disampaikan  kepada Universitas Muhammadiyah Sidoarjo  yang telah  mendanai  penelitian  ini  serta  kepada pihak-pihak  yang  membantu  pelaksanaan penelitian.

## Daftar Pustaka
Ames,  B.N.,  Shigenaga,  M.K.,  Hagen, T.M.,  1993.  Oxidants,  antioxidants, and  the  degenerative  diseases  of aging. Proc.  Natl.  Acad.  Sci. 90: 7915-7922. Retrieved from https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/836 7443/
Almey, A., Khan, A.J., Zahir S., Suleiman M.,  Aisyah  Rahim  K.,  2010.  Total phenolic  content  and  primary antioxidan activity of methanolic and ethanolic  extract  of  aromatic  plants’ leaves. International  Food  Research Journal .  17  :  1077-88.  Retrieved from http://ifrj.upm.edu.my/17%20%2804 %29%202010/%2828%29%20IFRJ-
2010-
035%20Kamarul%5B1%5D.pdf Andarwulan ,  N.,  H.  Wijaya,  dan  D.T. Cahyono. 1996. Aktivitas antioksidan  dari  daun  sirih  ( Piper betle L). Teknologi  dan  Industri Pangan .  Hal  29-30.  Retrieved  from https://repository.ipb.ac.id/handle/12 3456789/55567 Cahyanine,  M.  Estiasih,  Teti.  dan  Nisa, Khoirun,  F.  2008.  High-tocopherol fraction  from  rice  bran  ( Oryza sativa )  prepared  by  low-temperature solvent crystallization. Jurnal Teknologi  Pertanian ,  5(3),  pp.165- 72. Retrieved from https://pdfs.semanticscholar.org/7db9 /08e8e60a7d2f10c55f85c255412a34 d87b76.pdf?_ga=2.266633293.2140
261529.1597904048- 1404393480.1597904048
Chen,  HM.,  Koji,  M.,  Fumio,  Y.,  Kiyoshi N.  1996.  Antioxidant  activity  of designed  peptides  based  on  the antioxidative  peptide  isolated  from digest of a soybean protein , J. Agric.
Food Chem . 44: 2619-2623. doi.org/10.1021/jf950833m
Del  Bano,  M.J.,  Lorente,  J.,  Castillo,  J., Garcia, O. B., Del Rio, J. A., Ortuno, A.,  Quirin,  K.  W.,  and  Gerard,  D. 2003.  Phenolic  diterpenes,  flavones, and  rosmarinic  acid  distribution during  the  development  of  leaves, flowers,  stems,  and  roots  of R osmarinus  officinalis ,  Antioxidant Activity, Journal of Agricultural and Food  Chemistry ,  Vol.  51  (15)  :
4247−4253. doi.org/10.1021/jf0300745 Departemen Kesehatan RI. 1985. Farmakope Indonesia . Jakarta: Ditjen POM. Departemen Kesehatan RI. 2000.
parameter  standar  umum  ekstrak tumbuhan obat . Cetakan Pertama, 3- 11,  17-19,  Dikjen  POM,  Direktorat Pengawasan Obat Tradisional.
Fitriansyah ,  S.N.,  I.  Fidrianny,  K.  Ruslan. 2017.  Correlation  of  total  phenolic, flavonoid  and  carotenoid content of Sesbania  sesban (L.  Merr)  leaves extract  with  DPPH  scavenging activities. Int.  J.  Pharmacogn. Phytochem. Res. 9(1): 89-94. doi: 10.25258/ijpapr.v9i1.8046 Gandjar,  I.  G. dan Rohman,  A.  2007. Kimia  farmasi  analisis .  Yogyakarta: Pustaka Pelajar.
Ghozali ,  I.  2009. Aplikasi  Multivariate dengan  Program  SPSS .  Semarang: BP UNDIP
Gowry ,  S.  S.,  &  Vasantha,  K.  2010. Phytochemical screening and antibacterial  activity  of Syzygium cumini (L.)  (Myrtaceae)  leaves extracts. International  Journal  of PharmTech  Research ,  1569-1573. Retrieved from https://d1wqtxts1xzle7.cloudfront.net /31144347/PT_95__1569- 1573_.pdf?1366320240=&response-
content- disposition=inline%3B+filename%3 DPhytochemical_screening_and_anti bacteria.pdf&Expires=1597908967& Signature=ONktZvZubkXauBiq0foe KXNp~Vo2ufnFW~aOexjZee3jJ3C RdvHqEuDW6v~Oa2xgyRxdL6aDj zIH0rJLnppplCK1LpZpDsOcZzP90 C6DJqmQhpSvs58cVV1pNVw4KE 13C0ycO2- J3xod9aGblaoSP6M1Z9c2GpbdqEF MExK-7vl1nvNhh5re7J7vr0f4- lr1pwhIkX7ENWYIKkThMSoq7Rw QorLBwClI-Eq5Fpcl-rxqOb- rlhm9mKLuNAt9d9RClaPa7cIhy04 4zOdjpGRmjisO9kq0ORXRIHjJy5w z4daB75jQ6jIzHFDO7KgBYPJtvvA zjBlAl4HbW8L0u25uXQ__&Key- Pair- Id=APKAJLOHF5GGSLRBV4ZA Hernawan,  U.E.,  Setyawan,  A.D.  2003.
Review: ellagitanin, biosintesis, isolasi, dan aktivitas biologi. Biofarmasi ,  1(1):  25-38.  Retrieved from https://core.ac.uk/download/pdf/1234 5761.pdf
Ilyas,  A.,  Iin,  N.,  dan  Irmayanti.  2015. Senyawa  golongan  steroid  dari ekstrak  n-heksana  kulit  batang  kayu bitti  ( Vitex  Cofassus )  dan  uji toksisitas  terhadap Artemia  salina
Leach. Chimica  et  Natura  Acta ,  3 (3). doi.org/10.24198/cna.v3.n3.9220
Isfahlan, A.J., Mahmoodzadeh, A., Hassanzadeh, A., Heidari, R., Jamei,
R.  2010.  Antioxidant  and  radical activities  of  phenolic  extracts  from iranian  almond  ( Prunus  amygdalus ) hulls  and  shells. Turkish  Journal  of
Biology , 34(2):165-173. doi.org/10.3906/biy-0807-21 Khasanah, L.U., Anandito, R.B.K., Utami, R.,
Kusumaningrum, P., dan
Waningsih,M.  2014.  Reduksi  sisa pelarut  etanol  oleoresin  kayu  mania ( Cinnamomum  burmannii ). Jurnal Teknologi  Industri  Pertanian .  Vol.
24(1), 53-60. Retrieved from https://journal.ipb.ac.id/index.php/jur naltin/article/view/8089
Kristanti,  A.N.,  Nanik,  S.S.,  Mulyadi,  T., dan  Bambang,  K.  2006. Buku  ajar fitokimia .  Surabaya:  Universitas Airlangga.
Kunwar,  A.,  and  Priyadarsini  K.I.  2011. Free  radicals,  oxidatives  stress  and importance of antioxidants in human health. J.Med Allied Sci ., 1(2): 53-60. Retrieved from https://www.bibliomed.org/mnsfullte xt/154/154- 1449484220.pdf?1597906195 Kwen,  Y.T.S.  2011.  Daya  antioksidan ekstrak  etanol  bunga  turi  merah ( Sesbania  grandiflora )  secara  in vitro. Skripsi .  Surabaya:  Fakultas Farmasi.  Universitas  Katolik  Widya Mandala  Surabaya.  Retrieved  from http://repository.wima.ac.id/437/
Mabruroh,  A.I.,  2015.  Uji  aktivitas antioksidan  ekstrak  tanin  dari  daun rumput bambu (Lophatherum gracile Brongn)  dan  identifikasinya. Skripsi. Malang: Fakultas Sains dan
Teknologi,  Universitas  Islam  Negeri Maulana  Malik  Ibrahim  Malang.
Retrieved  from  http://etheses.uin- malang.ac.id/3229/
Makalalag, W. I., Wullur, A., dan wiyono, W., 2013. Uji ekstrak daun binahong ( Anredera
cordifolia
Steen.)
terhadap kadar gula darah pada tikus putih  jantan  galur  Wistar  ( Rattus norvegicus ) yang Diinduksi Sukrosa.
Pharmacon  Jurnal  Ilmiah  Farmasi . 2:28-34. doi.org/10.35799/pha.2.2013.883 Mani, R.P., Awanish, P., Shambaditya, G., Poonam,  T.,  Kumudhavalli,  V., Pratap,  S.S.,  2011,  Phytochemical screening  and in-vitro evaluation  of antioxidant activity and antimicrobial activity  of  the  leaves  of Sesbania sesban  (L.)  Merr.  Free  Rad.  Antiox. 1, 3. doi.org/10.5530/ax.2011.3.9
Marjoni, R. 2016. Dasar-Dasar Fitokimia, Jakarta: Trans Info Media, Hlm 1-38. Marliana,  S.  D.  2005.  Skrining  fitokimia dan  analisis  kromatografi  lapis  tipis komponen  kimia  buah  labu  siam ( Sechum  edule Jacq.  Swartz.)  dalam ekstrak etanol. Biofarmasi. Vol 3 (1): 26-31.  ISSN:  1693-2242.  Retrieved from eprints.uns.ac.id/id/eprint/843
Meenakshi,  S.,  D.  M.  Gnanambigai,  S.  T. Mozhi,  M.  Arumugam  and  T.
Balasubramanian. 2009. Total flavonoid  and  in  vitro  antioxidant activity of two seaweed of Rameshwaram Coast. Global Journal of Pharmacology , 3 (2) : 59- 62. Retrieved from http://citeseerx.ist.psu.edu/viewdoc/d ownload?doi=10.1.1.321.4225&rep= rep1&type=pdf
Molyneux,  P.,  2004.  The  use  of  the  stable free  radical  diphenylpicrylhydrazyl (DPPH)  for  estimating  antioxidant activity. Songklanakarin  J.  Sci.
Technol .  26(2)  :  211-219.  Retrieved from
http://www.thaiscience.info/Journals/ Article/SONG/10462423.pdf Mukholifah.  2014.  Identifikasi  tanin  dan penentuan  eluen  terbaik  dari  ekstrak etanol  70%  daun  pepaya (Carica papaya) dengan metode kromatografi  lapis  tipis, Jurnal
Biologi, Malang,  Universitas  Islam Negeri  Maulana  Malik  Ibrahim Malang. Retrieved from https://www.academia.edu/17031884
/Identifiasi_Senyawa_Tanin_dan_Pe nentuan_Eluen_Terbaik_dari_Eksrak _Etanol_70_Daun_Pepaya_Carica_p apaya_dengan_Metode_Kromatograf i_Lapis_Tipis
Nasution,  P.  A.,  Batubara.  R.,  dan
Surjanto.  2015.  Tingkat  kekuatan antioksidan dan
kesukaan masyarakat terhadap teh daun gaharu ( Aquailaria malaccensis Lamk) berdasarkan  pohon  induksi  dan  non- induksi. Jurnal  Pertanian .  Sumatera Utara.  Program  Studi  Kehutanan Fakultas
Pertanian
Universitas Sumatera  Utara.  Retrieved  from https://media.neliti.com/media/public ations/158327-ID-tingkat-kekuatan- antioksidan-dan-kesukaa.pdf Ningdyah,  A.  W,  Alimuddin,  A.H,
Jayuska,  A.  2015.  Uji  toksisitas dengan  metode  BSLT  ( Brine  Shrip
Lethality Test ) terhadap hasil fraksinasi  ekstrak kulit  buah Tampoi ( Baccaurea  marcocarpa ). Jurnal
Kimia Khatulistiwa . Vol.4(1). Retrieved from http://jurnal.untan.ac.id/index.php/jk kmipa/article/view/11732
Nursidika,  P.,  Saptarini,  O.,  Rafiqua,  N. 2014.  Aktivitas  antimikroba  fraksi ekstrak  etanol  buah  Pinang  ( Areca catechu L)  pada  bakteri Methicillin Resistant
Staphylococcus  aureus . MKB . Vol.46 No.2. doi.org/10.15395/mkb.v46n2.280
Pokorni,  J.,  Yanishlieva,  N.,  and  Gordon,
M. (2001). Food practical applications, New York: CRC Press. Prasetyo dan Inoriah, E. 2013. Pengelolaan budidaya tanaman obat-obatan (bahan simplisia). Bengkulu: Badan Penerbitan Fakultas Pertanian UNIB. Rohmah,  J.,  Rachmawati,  N.R.,  Nisak,  S.
2018. Perbandingan daya antioksidan ekstrak  aseton  daun  dan  batang  turi putih ( Sesbania Grandiflora ) dengan metode DPPH ( diphenylpycrylhydrazyl) . Prosiding Seminar  Nasional  Hasil  Riset  dan Pengabdian  (SNHRP-I). 665-675. Retrieved from eprints.umsida.ac.id/id/eprint/5927
Rosahdi, T.D., Susanti, Y., & Suhendar, D. 2015.  Uji  aktivitas  daya  antioksidan biopigmen  pada  fraksi  aseton  dari mikroalga  chlorella  vulgaris. Jurnal UINSGD , Vol. IX, hh. 1-16. Retrieved from https://journal.uinsgd.ac.id/index.php /istek/article/view/167
Tristantini,  D.,  Ismawati,  A.,  Pradana,  B. T.,  &  Gabriel,  J.  2016.  Pengujian aktivitas  antioksidan  menggunakan metode  DPPH  pada  daun  Tanjung ( Mimusops  elengi L).  Universitas Indonesia, 2. Retrieved from http://jurnal.upnyk.ac.id/index.php/k ejuangan/article/view/1547
Sa’adah,  L.,  Hayati,  E.K.,  dan  Fasyah,  G.
2010.  Fraksinasi  dan  identifikasi senyawa  tanin  pada  daun  blimbing wuluh  ( Averrhoa  bilimbi L.). Jurnal
Kimia .  Vol.  4,  No.2:  192-200. Retrieved from https://ojs.unud.ac.id/index.php/jche m/article/view/2804/1993 Sayuti,  K.  dan  Yenrina,  R.,  2015.
Antioksidan  alami  dan  sintetik. Universitas Andalas. Padang.
Setiadi,  A.D.  2014.  Uji  toksisitas  dan identifikasi  awal  golongan  senyawa aktif  ekstrak  metanol  dan  n-heksana teripang  pasir  ( Holothuria  scarba ) kering  pantai  Sekotong  Lombok Barat . Skripsi . Jurusan Kimia. Fakultas sains dan Teknologi.
Universitas  Islam  Negeri  Maulana Malik  Ibrahim  Malang.  Retrieved from http://etheses.uin- malang.ac.id/8244/
Sukandar, D., Rizki, A.E. 2013. Karakterisasi senyawa aktif
antioksidan  dan  antibakteri  ekstrak etanol  buah  namnam  ( Cynometra cauliflora L.). Jurnal  Valensi .  3(1): 34-38. ISSN: 1978-8193. doi.org/10.15408/jkv.v3i1.327
Sukindro.  2011.  Analisis  kadar  fosfor dalam  kacang  hijau  dengan  metode spektrofotometri  UV-Vis  di  Pasar Pekanbaru. Skripsi. UIN  Sultan Syarif  Kasim  Riau,  Pekanbaru.
Retrieved from repository.uin-
suska.ac.id/id/eprint/1331
Kusbandari, A., Susanti, H. 2017. Kandungan beta karoten dan aktivitas  penangkapan  radikal  bebas terhadap DPPH (1,1-difenil 2- pikrilhidrazil)  ekstrak  buah  blewah (Cucumis melo var. Cantalupensis L) secara spektrofotometri UV- VISIBEL. Jurnal Farmasi Sains dan Komunitas ,  Vol.14  No.1  Mei  2017, hlm. 37-42. Retrieved from https://e- journal.usd.ac.id/index.php/JFSK/arti cle/view/562 Ukieyanna, E., 2012. Aktivitas antioksidan,  kadar  fenolik,  dan flavonoid  total  tumbuhan  Suruhan ( Peperomia  pellucida L.  Kunth). Skripsi. Fakultas  Matematika  dan Ilmu  Pengetahuan  Alam  Institut
Pertanian Bogor, Jawa Barat. Retrieved from https://repository.ipb.ac.id/jspui/bitst
ream/123456789/58960/1/G12euk.pd f
Widyastuti,  N. 2010.  Pengukuran  aktivitas antioksidan dengan metode CUPRAC,  DPPH,  dan  FRAP  serta korelasinya dengan fenol dan flavonoid pada enam tanaman.
Bogor:  Departemen  Kimia  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam Institut  Pertanian  Bogor. Retrieved from repository.ipb.ac.id/handle/12345678 9/26745