EISSN: 2407-7690 https://ejournal3.undip.ac.id/index.php/jmr

## Penapisan Bakteri Penghasil Antimikroba dari Pasir Pantai Sialang Buah Kecamatan Teluk Mengkudu Kabupaten Serdang Bedagai

## Husnarika Febriani, Ulfa Mashitah*, Efrida Pima Sari Tambunan
Program Studi Biologi Fakultas Sains dan Teknologi, UIN Sumatera Utara Jl. William Iskandar Ps, V, Medan Estate, Kec. Percut Sei Tuan, Deli Serdang, Sumatera Utara 20371 Indonesia *Corresponding author, e-mail : ulfamashitah30@gmail.com
ABSTRAK: Telah dilakukan penelitian penapisan bakteri penghasil antimikroba pada pasir Pantai Sialang  Buah  Kecamatan  Teluk  Mengkudu  Kabupaten  Serdang  bedagai  dalam  menghambat beberapa  mikroba  patogen.  Tujuan  dari  penelitian  ini  untuk  mengetahui  apakah  terdapat  isolat penghasil antimikroba, untuk mengetahui aktivitas antimikroba dari isolat bakteri terhadap mikroba patogen dan melihat bagaimana karakterisasi bakteri pada pasir Pantai Sialang Buah Kecamatan Teluk  Mengkudu  Kabupaten  Serdang  Bedagai.  Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan  Oktober sampai Desember 2020 di Pantai Sialang Buah Kecamatan Teluk Mengkudu Kabupaten Serdang Bedagai. Penelitian ini dilakukan dengan pengujian biokimia sederhana, pengujian fisiologis serta pengujian  aktivitas  antimikroba.  Hasil  dari  penelitian  ini  diperolehi  4  isolat  sebagai  penghasil antimikroba,  dengan  nama  isolat  Sb1a  (1,70  mm),  Sb1b  (1,23  mm),  Sb2a  (0,63  mm),  dan  Sb4a (0,93  mm).  Karakterisasi  bakteri  isolat  pasir  Pantai  Sialang  Buah  Kecamatan  Teluk  Mengkudu Kabupaten  Serdang  Bedagai  pada  isolat  Sb1a,  Sb1b,  dan  Sb4a  ialah  bakteri  gram  positif,  dan Sb2a  ialah  bakteri  gram  negatif.  Semua  isolat  berbentuk  Basil,  dapat  menghasilkan  enzim katalase,  menggunakan  sitrat  sebagai  satu-satunya  karbon  dan  energi,  bergerak  serta  dapat memfermentasikan laktosa dan sukrosa.
Kata kunci: Penapisan; Pasir Pantai; Sialang Buah, Antimikroba
The Screening of Bacteria of Producing Antimicrobial From Sand Beach Of Sialang Buah Kecamatan Teluk Mengkudu Kabupaten Serdang Bedagai
ABSTRACT: Research has been done to screen for antimicrobial-producing bacteria on the sand of  Sialang Buah Beach, Teluk Mengkudu District, Serdang Bedagai Regency in inhibiting several pathogenic  microbes.  The  purpose  of  this  study  was  to  determine  whether  there  were antimicrobial-producing isolates, to determine the antimicrobial activity of bacterial isolates against microbial pathogens and to see how the characterization of  bacteria in the sand of Sialang Buah Beach,  Teluk  Mengkudu  District,  Serdang  Bedagai  Regency.  This  research  was  conducted  from October  to  December  2020  at  Sialang  Buah  Beach,  Teluk  Mengkudu  District,  Serdang  Bedagai Regency.  This  research  was  conducted  by  simple  biochemical  testing,  physiological  testing  and antimicrobial  activity  testing.  The  results  of  this  study  obtained  4  isolates  as  producers  of antimicrobials, with the names of isolates Sb1a (1.70 mm), Sb1b (1.23 mm), Sb2a (0.63 mm), and Sb4a  (0.93  mm).  Bacterial  characterization  of  sand  isolates  from  Sialang  Buah  Beach,  Teluk Mengkudu  District,  Serdang  Bedagai  Regency,  on  isolates  Sb1a,  Sb1b,  and  Sb4a  were  gram- positive  bacteria,  and  Sb2a  were  gram-negative  bacteria.  All  isolates  are  bacilli,  can  produce catalase enzyme,  use citrate as the only carbon and energy, are mobile and can ferment lactose and sucrose.

## Keywords: Screening; Sand Beach; Sialang Buah; antimicrobial

## PENDAHULUAN
Pasir  pantai  Sialang  Buah  memiliki  potensi  yang  sangat  beragam,  dan  belum  banyak ilmuwan  yang  mempelajarinya.  Potensi  antimikroba  yang  dihasilkan  oleh  bakteri  pasir  pantai dapat  dieksplorasi  dengan  memisahkan  bakteri  dari  pasir  pantai  (Das et  al. ,  2006).  Potensi
mikroorganisme yang sangat beragam ini diharapkan dapat menjadi agen antibakteri alami pada penyakit  infeksi  yang  berguna  bagi  banyak  orang  nantinya. Pasir  dapat diklasifikasikan  secara fisik ataupun kandungan mineral penyusunnya (Holtz dan Kovacs, 1981).
Kabupaten  Serdang  Bedagai  memiliki  potensi  laut  dan  pesisir  yang  sangat  besar  dan terletak  tepat  di  seberang  selat  malaka.  Selat  malaka  ialah  saluran  untuk  penangkapan  ikan pada  zona  ekonomi  eksklusif  dan  laut  lepas  (Lubis,  2015).  Pada  pasir  pantai  Sialang  Buah Berwarna abu-abu dan kasar, karena air di pantai yang berlumpur akibat dari pelelangan ikan, pabrik dan sungai pembawa lumpur. ’
Pasir  pantai  Sialang  Buah  memiliki  potensi  yang  sangat  beragam,  dan  belum  banyak ilmuwan yang mempelajarinya (Suendra,1991). Potensi antimikroba yang dihasilkan oleh bakteri pasir pantai dapat dieksplorasi dengan memisahkan bakteri dari pasir pantai (Das et al., 2006). Potensi  mikroorganisme  yang  sangat  beragam  ini  diharapkan  dapat  menjadi  agen  antibakteri alami  pada  penyakit  infeksi  yang  berguna  bagi  banyak  orang  nantinya.  Penyakit  infeksi merupakan  penyebab  utama  morbiditas  dan  mortalita  yang  tinggi,  khususnya  Indonesia  salah satu  negara  yang masih  berkembang.  Mikroorganisme  patogen  penyebab  dari  penyakit  infeksi (Darmadi, 2008). Banyak mikroorganisme patogen juga hidup di luar lingkungan infeksi.
Salah  satu  mikroba  yang  sering  menjadi  ancaman  penyakit  Infeksi  ialah Staphylococcus aureus dan Vibrio  parahaemolyticus ,  menurut  Herlina et  al. (2015)  bahwa  bakteri S.  aureus dapat  menyebabkan  terjadinya  berbagai  jenis  infeksimulai  dari  infeksi  kulit  ringan,  keracunan makanan  sampai  dengan  infeksi  sistemik,  bakteri  ini  merupakan  bakteri  gram  positif.  Untuk Vibrio parahaemolyticus, bakteri ini juga menjadi ancaman terhadap penyakit infeksi, bakteri ini merupakan  bakteri  gram  negatif,  halofilik  dan  penyebab  dari  penyakit  diare,  sementara  untuk jamur  yang  sering  menjadi  infeksi  sehari-hari  ialah Candida  albicans yang  menjadi  penyakit infeksi pada alat kelamin.
Pengunaan antimikroba untuk mencegah infeksi dapat dilakukan. Dalam dunia kesehatan seiring  dengan  meningkatnya  resistensi  bakteri  dan  jamur  maka  perlu  adanya  penemuan  obat baru  (Siregar et  al. ,  2012).  Meningkatnya  jumlah  bakteri  resistensi  antimikroba  sangat memerlukan pengembangan agen antimikroba yang baru (Basarang et al., 2018).

## MATERI DAN METODE
Materi  yang  digunakan  ialah  pasir  pantai  yang  telah  diencerkan  yang  diperoleh  dari  Pantai Sialang Buah  Data penelitian ini akan dianalisis secara deskriptif. Pengujian biokimia sederhana, pengujian  fisiologi  dan  pengujian  aktivitas  antimikroba.  Karakteristik  bakteri  yang  potensial pengahasil antimikroba dilakukan dengan pengujian biokimia sederhana untuk pengujian fisiologis bakteri  meliputi  pewarnaan  gram,  uji  katalase,  uji  motilitas,  uji  TSIA,  dan  pengamatan  morfologi (Irianto, 2006). Pengujian aktivitas antimikroba dilakukan dengan metode uji  aktivitas antimikroba (Lubis, 2015).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Besaran  zona  hambat  yang  terbentuk  dari  isolat  yang  didapati  digunakan  uji  aktivitas antimikroba.  Diduga  isolat  Pasir  Pantai  Sialang  Buah  memiliki  aktivitas  antimikroba  terhadap mikroba patogen.
Adanya perbedaan zona bening di setiap isolat pada masing-masing mikroba uji memiliki arti bahwasanya  adanya  pengaruh  dalam  menghasilkan  metabolit  sekunder  (Lubis,  2015). Pertumbuhan  dimulai  dari  fase  lag  atau  penyesuaian  dimana  fase  ini,  mikroorganisme menyesuaikan  dirinya  dengan  lingkungan  yang  baru.  Selanjutnya  masuk  ke  fase  logaritma, dimana bakteri ini terjadi pembelahan yang sangat cepat, kemudian bakteri memasuki pada fase stasioner,  dimana  pada  fase  ini  pertumbuhan  laju  bakteri  sama  dengan  kematiannya  dan  fase terakhir yaitu fase kematian dimana pada fase ini laju kematian dari bakteri sangatlah besar.
Isolat potensial penghasil antimikroba menghasilkan diameter zona bening meninformasikan bahwa  bakteri  tersebut  mempunyai  komposisi  kimia  sehingga  menghambat  kolonisasi  mikroba lainnya.  Komposisi  kimia  tersebut  memiliki  aktivitas  antimikroba  yang  dapat  berupa  antibiotik, pigmen,  toksin,  dan  enzim  penghambat  (Bonev et  al. ,  2008).  Perbedaan  diameter  zona  hambat
Journal of Marine Research Vol 10, No.4 November 2021, pp. 560-564
masing-masing  bakteri  dan  jamur  ini  dipengaruhi  oleh  tingkat  fermentasi  antimikroba  dalam menghasilkan  metabolit  sekunder  pada  isolat  tersebut.  Menurut Waluyo  (2004)  antimikroba  yaitu suatu  zat-zat  kimia  yang  diperoleh/dibentuk  dan  dihasilkan  oleh  mikroorganisme,  zat  tersebut mempunyai daya penghambat aktifitas mikororganisme lain meskipun dalam jumlah sedikit.
Diameter Zona hambat yang dibentuk oleh isolat potensial dalam penelitian ini bervariasi, hal ini  menunjukan  bahwa  kemampuan  isolat  dalam  menghambat  pertumbuhan  mikroba  uji,  tumbuh dan  membentuk  koloni.  Kemampuan  penghambat  ini  berkaitan  dengan  kolonisasi  bakteri  dalam hal kemampuan menempel, bergerak, dan kemotaksis bakteri pada nutrisi dan materi organik. Ini adalah  salah  satu    bentuk  konflik  antagonistik  yang  mendeskripsikan  seleksi  terbaik  dalam perebutan ruang dan nutrisi pada lingkungan serta efektif untuk mengatur populasi mikroba yang tinggal pada lingkungan yang sama (Imada et al. , 2007).
Agen  antimikroba  mencegah  pertumbuhan  bakteri  dengan  membunuh  sel  dengan  cara menghambat pembentukan dinding sel, menghancurkan permeabilitas membran sitoplasma, yang dapat mengakibatkan keluarnya cairan dari sel, dan memodifikasi molekul protein, asam nukleat, dan protein. Potensi yang diisolasi dari pola kontak bakteri atau quorum sensing, yang mengontrol metabolisme,  digunakan  untuk  menghambat  mikroba  uji.  Ini  adalah  mekanisme  bakteri melepaskan  senyawa  ke  atmosfer  yang  menghambat  pertumbuhan  bakteri  lain.  Antibiotik  dapat dibuat dengan menggunakan metode ini (Hrenovic et al., 2009).
Dilihat  dari  tabel  2  adapun  hasilnya  ialah  untuk  isolat  Sb1a,  Sb1b  dan  Sb4a  menunjukan warna  biru  yang  berupa  gram  positif  dan  berbentuk  batang  ( Basil )  sementara  untuk  isolat  Sb3a menunjukan warna merah yang berupa gram negatif berbentuk batang ( Basil ). Bakteri gram positif dapat  mempertahankan  pewarna  kristal  violet  saat  diwarnai,  menghasilkan  rona  biru  atau  ungu. Bakteri  gram  positif  juga  memiliki  peptidoglikan  yang  kental,  sehingga  zat  biru  tetap  ada  meski berwarna. Bakteri gram negatif, tidak seperti bakteri gram positif, memiliki peptidoglikan tipis yang mencegahnya mempertahankan kandungan kristal violetnya.
Efektivitas  kemampuan  menghambat  isolat  potensial  mengikuti  pola:  bakteri  gram  positif lebih  berhasil  menghambat  bakteri  gram  positif,  bakteri  negatif  lebih  efektif  dalam  menghambat bakteri  gram  negatif.  Bakteri  gram  positif  menghasilkan  bakteriosin  yang  menekan  pertumbuhan bakteri  gram  positif,  sedangkan  bakteri  gram  negatif  menghasilkan  bakteriosin  yang  menekan pertumbuhan bakteri gram negative (Gram et al., 2010)
Tabel 1. Hasil Uji Aktivitas Antimikroba
Nama Isolat Diameter Zona Hambat (mm) Rata-rata (mm) Staphylococcus aureus Vibrio parahaemolyticus Candida albicans Sb 1a 0,1 0,8 3,3 1,70 Sb 1b 0,5 0,9 2,3 1,23 Sb 2a 0,9 0,7 0,3 0,63 Sb 2b - - 0,2 0,06 Sb 3a 0.1 - 2,2 0,76 Sb 3b 0,1 - 0,6 0,23 Sb 4a - 0,9 1.9 0,93 Sb 4b - - 2,4 0,80 Kontrol  30 29 34 31
Tabel 1. Hasil dari Pewarnaan Gram
Kode Sampel Pewarnaan Gram Warna Bentuk Keterangan Sb1a Biru Basil Gram Positif Sb1b Biru Basil Gram Positif Sb 3a Merah Basil Gram Negatif Sb4a Biru Basil Gram Positif
Tabel 2. Hasil dari Uji Katalase
Kode Sampel Hasil Sb1a Terdapat Gelembung Sb1b Terdapat Gelembung Sb3a Terdapat Gelembung Sb4a Terdapat Gelembung
Dilihat  dari  Tabel  3,  Hasil  yang  didapat  dari  semua  isolat  ialah,  menunjukan  hasil  positif dengan  terlihatnya  gelembung-gelembung  O 2 ketika  isolat  diteteskan  H 2 O 2 . Karena  hidrogen peroksida  menonaktifkan  enzim  dalam  sel,  ia  menjadi  racun  bagi  mereka.  Mikroorganisme  yang berkembang  dalam  lingkungan  aerobik  harus  menguraikan  materi  karena  hidrogen  peroksida diproduksi selama metabolisme aerobik (Lay, 1994).

## Tabel 3. Hasil dari Uji Sitrat
Kode Sampel Hasil Sb1a Terjadi perubahan warna Sb1b Terjadi perubahan warna Sb3a Terjadi perubahan warna Sb4a Terjadi perubahan warna
Dilihat  dari  Tabel  4  menunjukan  bahwasanya  semua  isolate  terjadi  perubahan  warna  yang artinya,  mikroorganisme  menggunakan  sitrat  sebagai  satu-satunya  sumber  karbon  dan  energi, asam  dalam  media  kultur  akan  hilang,  meningkatkan  pH  dan  mengubah  warna  media  dari  hijau menjadi  biru,  menandakan  bahwasanya  isolat  menggunakan  sitrat  sebagai  satu-satunya  sumber karbon dan energi.

## Tabel 5. Hasil dari Uji Motilitas
Kode Sampel Hasil Sb1a Motil Sb1b Motil Sb3a Motil Sb4a Motil
Dilihat  dari  Tabel  5  hasil  yang  didapati  semua  isolat  menunjukan  hasil  positif  yang  ditandai dengan adanya rambatan disekitar tusukan medium pertumbuhan. Sesuai dengan pernyataan dari (Irianto, 2006) bakteri bersifat motil (bergerak).

## Tabel 6. Hasil dari Uji TSIA
Kode Sampel Hasil Sb1a Merah-Kuning Sb1b Merah-Kuning Sb3a Merah-Kuning Sb4a Merah-Kuning
Dilihat  dari  Tabel  6  menunjukan  semua  isolat  pada  bagian slant dan butt bewarna  kuning yang artinya isolat tersebut bersifat asam.

## KESIMPULAN
Pada Pasir Pantai Sialang Buah Kecamatan Teluk Mengkudu Kabupaten Serdang  Bedagai terdapat  4  isolat  sebagai  penghasil  antimikroba.  Rata-rata  pengukuran  zona  hambat  terhadap isolat  Sb1a  (1,70  mm),  Sb1b  (1,23  mm),  Sb2a  (0.63  mm)  dan  Sb4a  (0,93  mm)  pada Staphylococcus  aureus,  Vibrio  parahaemolyticus dan Candida  albicans sangat  lemah  untuk menghambat  pertumbuhan  dari  mikroba  uji.  Karakterisasi  bakteri  dari  isolat  dari  Pasir  Pantai Sialang  Buah  Kecamatan  Teluk  Mengkudu  Kabupaten  Serdang  Bedagai  isolat  Sb1a,  Sb1b,  dan Sb4a ialah bakteri gram positif, dan Sb2a ialah bakteri gram negatif. Semua isolat berbentuk Basil, dapat menghasilkan enzim katalase, menggunakan sitrat sebagai satu-satunya karbon dan energi, bergerak serta dapat memfermentasikan laktosa dan sukrosa.

## DAFTAR PUSTAKA
Basarang,  M.  &  Rianto,  R.  2018.  Pertumbuhan  Candida  sp  dan  Aspergillus  sp  dari  Bilasan Bronkus Penderita Tuberkulosis Paru pada Media Bekatul. Jurnal Ilmu Alam dan Lingkungan. 9(18):74-82.
Bonev,  B.,  Hooper,  J.  &  Parisot,  J.  Principles  of  Assessing  Bacterial  Susceptibility  to  Antibiotics Using  The  Agar  Diffusion  Method. Journal  of  Antimicrobial  Chemotherapy 61(6):  1296-1301. DOI: 10.1093/jac/dkn090 Darmadi. 2008. Infeksi Nosokomial Problematika dan Pengendaliannya . Salemba Sadika : Jakarta. Das,  S.,  Lyla,  P.S.  &  Khan,  S.A.  2006.  Marine  Microbial  Diversity  and  Ecology  :Important  And Future Perspective. Journal of Current Science . 90: 1325 -1335.
Gram, L., Melchiorsen, J., & Bruhn, J.B., 2010. Antibacterial Activity of Marine Culturable Bacteria Collected  from  a  Global  Sampling  of  Ocean  Surface  Waters  and  Surface  Swabs  of  Marine Organism. Marine Biotechnology 12: 439-451
Herlina,  N.F.,  Afiati,  A.D.,  Cahyo,  P.D.,  Herdiyani,  Q.  &  Tappa,  B.  2015.  Isolasi  dan  identifikasi Staphylococcus  aureus  dari  susu  mastitis  subklinis  di  Tasikmalaya,  Jawa  Barat .  Prosesing Seminar  Nasional  Masyarakat  Biodiversi  Indonesia. 1(3):413-417.  DOI:  10.13057/psnmbi/ m010305 Hrenovic,  J.  &  Ivankovic,  T.  2009. Survival  of  E.  coli  and  Acinetobacterjunii  at  Various Concentration  of  Sodium  Chloride. EurAsian  Journal  of  Biosciences ,  3:144-15.  DOI: 10.5053/ejobios.2009.3.0.18
Holtz, R.D. & Kovacs, W.D. 1981. An Introduction to Geotechnical Engineering. Prentice Hall : New Jersey.
Irianto, K. 2006. Menguak Dunia Mikroorganisme. Yrama : Bandung. pp: 59-62.
Imada,  C.,  Koseki,  N.,  Kamata,  M.,  Kobayashi,  T.  &  Hamada,  N.  2007.  Isolation  and Characterization  of  Antibacterial  Substances  Produced  by  Marine  Actinomycetes  in  the Presence of Seawater. Actinomycetes, 21(1): 27 –31. DOI: 10.3209/saj.SAJ210104 Lay, B.W. 1994. Analisis Mikroba Di Laboratorium. Jakarta: PT. Raja Grafindo Persada Lubis,  S.S.  2015.  Penapisan  Bakteri  Laut  Penghasil  Antimikroba  Dari  Pesisir  Serdang  Bedagai
Sumatera  Utara. lkawnie  :  Journal  of  Islamic  Science  and  Technology. 1(1):87-96.  DOI: 10.22373/ekw.v1i1.521 Siregar,  A.F.,  Sabdono,  A.  &  Pringgenies,  D.  2012. Potensi  Antibakteri  Ekstrak  Rumput  Laut Terhadap  Bakteri  Penyakit  Kulit  Pseudomonas  aeruginosa,  Staphylococcus  epidermidis,  dan Micrococcus luteus. Journal of Marine Research . 1(2):152-160.
Suendra.  1991.  Buku  pedoman  mata  ajaran  mikrobiologi  lingkungan.  Pusat  Pendidikan  Tenaga Kesehatan Depkes RI : Jakarta.
Waluyo,  L.  2008.  Teknik  dan  Metode  Dasar  dalam  Mikrobiologi . UMM  Press  :  Malang.  pp:  180- 182.