Penulis Susi Rahmawati 1 , Ahwan Abdul 1 *, Fadilah Qonitah 1
Afiliasi 1 Program Studi Farmasi, Fakultas Sains, Teknologi dan Kesehatan, Universitas Sahid Surakarta, Jl. Adi Sucipto No. 154 Laweyan, Surakarta, Jawa Tengah, Indonesia.
Kata Kunci  Escherichia coli ESBL  daun bunga telang
 ekstrak etanol
 ekstrak metanol dan antibakteri

## Keywords
 Escherichia coli ESBL
 telang flower leaves
 ethanol extract
 methanol extract and antibacterial
Diterima 9 Mei 2021 Direvisi 5 Juli 2022 Disetujui 3 Agustus 2022
*Penulis Koresponding Ahwan Abdul email: ahwan@usahidsolo.ac.id

## ABSTRAK
Penggunaan antibiotik yang tidak tepat dapat memicu terjadinya resistensi bakteri. Extended Spectrum Beta  Lactamase (ESBL)  adalah  bakteri  yang  resisten  terhadap  antibiotik  golongan  beta  laktam  seperti penisilin,  sefalosporin  dan  monobaktam.  Salah  satu  contoh  dari  bakteri  ini  adalah Escherichia  coli yang mampu menyebabkan sejumlah penyakit seperti infeksi saluran kemih, infeksi saluran pernafasan, sepsis dan  meningitis.  Daun  bunga  telang  ( Clitoria  ternatea  L .)  mengandung  sejumlah  senyawa  yang  memiliki aktivitas  antibakteri  yang  diharapkan  mampu  menjadi  alternatif  untuk  penanganan  infeksi  yang disebabkan  oleh Escherichia  coli ESBL.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri ekstrak etanol dan metanol daun bunga telang terhadap bakteri Escherichia coli ESBL dan membandingkan aktivitas  kedua  ekstrak  tersebut.  Metode  uji  bersifat  eksperimental  yaitu  mengukur  aktivitas  antibakteri ekstrak  dengan  metode disk  diffusion .  Hasil  uji  skrining  fitokimia  yang  dilakukan  menunjukan  bahwa ekstrak yang diuji positif mengandung senyawa flavonoid, alkaloid, fenolik, saponin, tanin dan terpenoid. Hasil  penelitian  terkait  aktivitas  antimikroba  dari  konsentrasi  25%,  50%  dan  100%  ekstrak  metanol menghasilkan  diameter  zona    (7,4  mm,  7,8  mm  dan  8,1  mm),    dan  ekstrak  etanol  (7,3  mm,  7,4 mm,  7,9 mm).  Kontrol  positif  yang  digunakan  yaitu  gentamisin  menghasilkan  zona  hambat  sebesar  9,8  mm.  Hasil tersebut  menunjukan  bahwa  esktrak  metanol  dan  etanol  daun  bunga  telang  mempunyai  aktivitas menghambat  pertumbuhan Escherichia  coli ESBL  dan  terdapat  perbedaanyang  signifikan  pada  diameter zona  hambat  terhadap  ekstrak  etanol  dan  metanol  terhadap  aktivitasantibakteri  dari  kedua  ektrak tersebut berdasarkan analisis statistik dengan  yang dilakukan dengan uji Anov a yaitu dengan nilai p<0,05.

## ABSTRACT
Inappropriate  use  of  antibiotics  can  lead  to  bacterial  resistance.  Extended  Spectrum  Beta  Lactamase (ESBL)  is  a  bacterium  that  is  resistant  to  beta-lactam  antibiotics  such  as  penicillins,  cephalosporins  and monobactams.  One  example  of  this  bacterium  is  Escherichia  coli  which  can  cause  a  number  of  diseases such as urinary tract infections, respiratory infections, sepsis and meningitis. The leaves of the telang flower (Clitoria ternatea L.) contain a number of compounds that have antibacterial activity which are expected to be  an  alternative  for  the  treatment  of  infections  caused  by  ESBL  Escherichia  coli.  This  study  aims  to determine  the  antibacterial  activity  of  ethanol  and  methanol  extract  of  telang  flower  leaves  against Escherichia  coli  ESBL and  to  compare  the  activities  of  the  two  extracts.  The  test  method  is experimental, namely measuring the antibacterial activity of the extract using the disk diffusion method. The results of the phytochemical screening test conducted showed that the extract tested positive contained flavonoids, alkaloids,  phenolics,  saponins,  tannins  and  terpenoids.  The  results  of  the  research  related  to  the antimicrobial  activity  of  the  concentrations  of  25%,  50%  and  100%  methanol  extract  produced  inhibition zone diameters of 7.4 mm, 7.8 mm and 8.1 mm, while the ethanol extracts were 7.3 mm, 7.4 mm. , 7.9 mm. The positive control used, namely gentamicin, produced an inhibition zone of 9.8 mm. These results indicate that the methanol and ethanol extract of telang flower leaves affected the growth of Escherichia coli ESBL and there was a difference in the antibacterial activity of the two extracts based on statistical analysis with the Anova test with p value <0.05.
Perbandingan Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol dan Metanol Daun Bunga Telang ( Clitoria Ternatea L.) terhadap Escherichia Coli ESBL ( Extended Spectrum Beta Lactamase )
Comparison of Antibacterial Activities of Ethanol and Methanol Extracts of Early Flower Leaves (Clitoria Ternatea L.) against Escherichia Coli ESBL (Extended Spectrum Beta Lactamase)
Perbandingan Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol dan Metanol Daun Bunga Telang (Clitoria Ternatea L.) terhadap Escherichia Coli ESBL ( Extended Spectrum Beta Lactamase ) 73

## PENDAHULUAN
Bakteri Escherichia coli merupakan penyebab infeksi diantaranya  infeksi  pada  saluran  sistemik,  Infeksi saluran  kemih  (ISK)  dan  infeksi  pada  janin  (Vila et  al., 2016). Tercatat setidaknya terdapat 180.000 kasus/tahun  ISK  di  Indonesia. Escherichia  coli merupakan  penyebab  utama  dengan  persentase sebesar 16,7% pada kasus ISK (Sumolang et al., 2013). Beta-laktam  adalahkelas  antibiotik  yang  sering digunakan,  termasuk  untuk  pengobatan  ISK  (Singh et al., 2016). Namun, ketidaktepatan pemakaian antibiotik dan  berlebihan  justru  memicu  adanya  resistensi (Flores-Mireles et  al., 2015). Extended  Spectrum  Beta laktamase (ESBL)adalah  jenis  enzim  yang  diproduksi bakteri,  dimana  enzim  ini  dapat  menyebabkan terjadinya Multidrug-resisten organism (MDRO) seperti terhadap antibiotik golongan penisilin, sefalosporin dan aztreonam  generasi  pertama,  kedua  dan  ketiga  (Singh et al., 2016).  Enzim ESBL sendiri dihasilkan oleh bakteri Escherichia  coli dan Klebsiella  pneumonia (Flores- Mireles et  al., 2015).  Sebanyak  35%  kasus  ISK disebabkan  oleh Escherichia  coli ESBL  (dari  323  kasus) dan  45%  disebabkan  oleh Klebsiella  Pneumonia ESBL (dari 69 kasus) (Nazmi et al., 2017).
Akan  tetapi  dengan  adanya  kasus  resistensi antibiotic,  eksplorasi  bahan  alam  harus  terus digalakkan  untuk  mencari  senyawasenyawa  aktif  baru pengganti antibiotic yg ada di pasaran.
Bunga  Telang  menjadi  satu  dari  sekian  jenis tanaman yang dimanfaatkan sebagai obat bahan alam. Bunga  Telang  ( Clitoria  ternatea  L .)  banyak  ditemukan dikawasan  Asia,  salah  satunya  di  Indonesia.  Tanaman ini  tergolong  Family Fabaceae yang  memiliki  bunga berwarna vivid-blue . Secara tradisional, seluruh bagian dari  tanaman  ini  memiliki  berbagai  fungsi  seperti pewarna  makanan,  anti  stress,  stimulansia, infertility , gonorrhea (infeksi  saluran  kemih).  Penggunaan farmakologi  atau  berdasarkan  penelitian  tanaman  ini memiliki  berbagai  aktivitas  seperti  anti  inflamasi, analgetik,  anti  mikroba  dan  anti  karsinogen  (Lijon et al., 2017).  Hal  ini  dikarenakan  berbagai  metabolit sekunder  yang  terkandung  di  dalamnya  antara  lain flavanoid,  alkaloid,  antosianin  glikosida,  fitosterol,  dan lain-lain.
Penelitian yang dilakukan Al-Snafi (2016) membuktikan adanya antibakteri ekstrak etanol bunga telang  terhadap Escherichia  coli yaitu  sebesar  14  mm. Ekstrak air biji bunga telang menunjukan zona hambat maksimum  (22  ±  0,5)  mm  terhadap E.coli pada konsentrasi  0,75  mg.  Ekstrak  air  kalus  bunga  telang menunjukkan  zona  hambat  maksimum  (16  ±  2,0)  mm
terhadap Salmonella  typhi sedangkan  yang  terendah dengan Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus (masing-masing  (12  ±  1)  mm  dan  (12  ±  0.9)  mm. Ekstrak  air  biji  bunga  telang  mempunyai  daya  hambat sebesar 12 mm dan ekstrak metanol daun bunga telang sebesar 26 mm (Chakraborty et al., 2017). Berdasarkan informasi  tersebut,  belum pernah  dilakukan  penelitian terkait  ekstrak  etanol  dan  metanol  daun  bunga  telang terhadap aktivitasnya dalam menghambat E. coli ESBL. Oleh  karena  itu,  muncul  ide  penelitian  untuk membandingkan  aktivitas  antibakteri  kedua  ekstrak tersebut  pada E.coli yang mampu menghasilkan enzim ESBL  yang  diharapkan  dapat  mencari  alternatif pengganti antibiotik pada Multidrug-resisten organism .

## METODE
Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental yang  dilakukan  pada  periode  Desember 2020 sampai Februari 2021.

## Alat dan Bahan
Alat digunakan antara lain  timbangan analitik (Acis BC  500),  bejana  maserasi, blender  (Philips), waterbath ( Memert ) , rotary  evaporator (IKA  HB  10  basic),  jarum ose,  mikroskop  binokuler  (Novel),  oven  (Memert), autoclave (All american) , alat gelas dan jangka sorong. Bahan  penelitian  meliputi  daun  bunga  telang, bakteri Escherichia coli ESBL , FeCl 3 10%, media Mueller Hinton  Agar (MHA)  (Merck),  media  Nutrien  Agar (Merck), Brain-Heart  Infusion (BHI)  (Merck), Mac Conkey (Merck),  media  deret  dan  uji  biokimia,  etanol 96%, metanol, Mayer , Wagner, Dragendorf, HCl, serbuk Mg, anhidrida asetat, kloroform, antibiotik Gentamisin, spiritus, blank  paper  disc ,  aquadest,  pelarut Dimethyl Sulfoxide (DMSO)  10%,  NaCl  0,9%,  reagen Kovac, methyl red dan KOH 40%.

## Pengambilan  Sampel  dan  Pembuatan  Ekstrak  Daun Bunga Telang
Daun  dari  tanaman  bunga  telang  yang  digunakan dalam  penelitian  diambil  dari  Kecamatan  Baki, Sukoharjo,  Jawa  Tengah.  Ekstrak  dibuat  dengan  teknik maserasi  menggunakan  etanol  dan  metanol  masing- masing  dengan  perbandingan  1:10  sesuai  prosedur maserasi menurut Farmakope Indonesia Edisi III.

## Uji Fitokimia
Ekstrak etanol dan metanol daun bunga telang yang diperoleh  kemudian  dilakukan  uji  penapisan  fitokimia seperti  uji  flavanoid,  alkaloid,  fenolik,  tannin,  saponin, terpenoid dan steroid (Abdul, 2018).
Karakterisasi dan Konfirmasi Escherichia coli ESBL Bakteri  uji  ditumbuhkan  pada  media Mac  Conkey Agar,  kemudian  dilakukan  karakterisasi  dengan  uji biokimia pada media KIA,SIM, Urea, Citrat, MR, VP, PAD dan  gula-gula.  Selanjutnya,  dilakukan  konfirmasi  ESBL dengan  melakukan  uji  aktivitas  terhadap  antibiotik ceftazidime dan cefotaksim.

## Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak
Metode  difusi  cakram  dipilih  dengan  memakai media  MHA  (CLSI,  2020).  Ekstrak  etanol  dan  metanol daun bunga telang yang diuji dibuat dalam konsentrasi 25%,  50%  dan  100%.  Kontrol  negatif  yaitu  DMSO  dan antibiotik pembanding  yaitu  gentamisin  10  μg.  Hasil data  kemudian  diuji  statistik Anova menggunakan aplikasi SPSS seri 22.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Pembuatan Ekstrak Daun Bunga Telang
Ekstraksi  dilakukan  dengan  teknik  maserasi menggunakan  metanol  dan  etanol.  Etanol  96%  dipilih karena  tidak  toksik  dan  bersifat  universal  sehingga diharapkan  mampu  menarik  seluruh  senyawa  aktif dalam  sampel  daun  bunga  telang  baik  yang  bersifat polar  sampai  non  polar  (Anief,  2006).  Metanol digunakan karena dari beberapa penelitian sebelumnya
merupakan  pelarut  yang  memberikan  hasil  lebih  baik dalam  hal  penarikan  senyawa  yang  memiliki  aktivitas antibakteri  pada  daun  bunga  telang  (Al-snafi,  2016). Hasil  ekstraksi  sampel  daun  bunga  telang  dengan pelarut metanol dan etanol dapat dilihat di Tabel 1 .

## Uji Fitokimia
Uji  fitokimia  digunakan  sebagai  uji  kualitatif  dalam mengetahui  keberadaan  metabolit  sekunder  dalam ekstrak  metanol  dan  etanol  pada  sampel.  (Nugrahani, Andayani,  &  Hakim,  2016).  Hasil  skrining  fitokimia ekstrak  etanol  dan  metanol  daun  bunga  telang ditunjukan  dalam Tabel  2 .  Hasil  yang  didapatkan ekstrak  etanol  dan  metanol  bunga  telang  mempunyai senyawa  metabolit  sekunder  yang  sama  yaitu flavonoid,  alkaloid,  steroid,  terpenoid,  fenolik,  tanin dan saponin.
Karakterisasi dan Konfirmasi Escherichia coli ESBL Mac Conkey dipilih sebagai media uji karena bersifat selektif dengan adanya kandungan garam empedu dan kristal  violet  yang  mampu  mencegah  berkembangnya kuman  gram  positif.  Media  ini  juga  bersifat  diferensial karena  adanya  kandungan  laktosa  sehingga  mampu membedakan  bakteri  yang  dapat  meragi  laktosa  atau tidak  meragi  laktosa  (Maksum,  2014).  Hasil  yang
Tabel 1. Ekstrak Etanol dan Metanol daun Bunga Telang
Parameter Ekstrak Metanol Ekstrak Etanol Rendemen 17.94 % 17.18 % Organoleptis : • Warna
• Bau
• Rasa
• Bentuk
Hijau kehitaman Tidak berbau Pahit Kental Hijau kehitaman Tidak berbau Pahit Kental Tabel 2. Uji Fitokimia
Uji Reagen Uji Hasil Hasil Uji Ekstrak Etanol Ekstrak Metanol Flavonid Mg + HCl pekat Merah, kuning/Jingga + + Alkaloid Mayer Dragendrorf Endapanputih Endapancoklat + + Steroid- Terpenoid Anhibridaasam Aseta+H 2 SO 4 Hijau (steroid), cincinkecoklatan (terpenoid) + + Fenolik FeCl 3 Hijau biru + + Tanin FeCl 3 Hijau tua + + Saponin HCl Kocok Busastabil + +
Perbandingan Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol dan Metanol Daun Bunga Telang (Clitoria Ternatea L.) terhadap Escherichia Coli ESBL ( Extended Spectrum Beta Lactamase )
diperoleh  dari  isolasi  pada  media MaC  Conkey adalah didapatkan  koloni  terpisah,  bakteri  berbentuk  bulat, licin dan berwarna merah muda. ( Gambar 1 ).
Gambar 1. Inokulasi bakteri Escherichia coli pada Mac Conkey
Karakterisasi Escherichia  coli dilakukan  untuk mengetahui  karakteristik  suatu  bakteri  (terutama bakteri  enterik)  dalam  menggunakan  suatu  senyawa sebagai  sumber  energi.  karakteristik  ini  bisa  dilihat dengan melakukan uji biokimia. ( Tabel 3 ).
Tabel 3. Uji Konfirmasi Escherichia coli ESBL Antibiotik Hasil (mm) Standar  CLSI, 2020 Keterangan Cefotaxime  (30 µg) 12.56 ≤ 27 Resisten Ceftazidime  (30 µg) 19.42 ≤ 22 Resisten
Berdasarkan  hasil  uji  biokimia  dari  seluruh  media yng  digunakan  dapat  disimpulkan  bahwa  bakteri  yang diuji  sesuai  dengan  karakteristik  menurut  Brooke et al (2012) yaitu Escherichia coli mampu meragi karbohidrat termasuk  glukosa  dan  laktosa,  positif  terhadap  uji indol, KIA dengan atau tanpa gas, MR, motil dan negatif terhadap  uji  Citrat,  PAD,  urea  serta  VP  ( Gambar  2, Gambar 3, Gambar 4, dan Tabel 4 ).
Uji  Konfirmasi  ESBL  dilakukan  dengan  tujuan memastikan  kebenaran  bakteri Escherichia  coli yang digunakan  mampu  menyebabkan  resistensi  terhadap antibiotik golongan beta laktam. Antibiotik ceftazidime
dan cefotaxime merupakan golongan sefalosporin yang bekerja  dengan  melakukan  penghambatan  terhadap protein  pengikat  penisilin  yang  merupakan  enzim bakteri  yang  berperan  dalam  perpanjangan  asam amino pada peptidoglikan bakteri. Berdasarkan hasil uji konfirmasi  ESBL  didapatkan  hasil  bakteri Escherichia coli yang  diuji  resisten  terhadap  antibiotik  ceftazidime dan cefotaxime.
Gambar 2. Hasil  uji  biokimia  bakteri Escherichia  coli (a:TSIA,  b:SIM,  C:Urea,  D:Citrat,  e:MR, f:VP, g:PAD, h;Glukosa, i:Maltosa,
j:Manitol, K:Laktosa, l:sakarosa)
Gambar 3. Uji Ekstak Etanol Daun Bunga Telang
Gambar 4. Hasil Uji Ekstak Metanol Daun Bunga Telang
Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak
Uji  aktivitas ekstrak  mtanol  dan  etanol  daun  bunga telang dilakukan dengan metode disk diffusion dimana menurut  CLSI  (2020).  Kontrol  negatif  dalam  penelitian kali ini adalah DMSO 100%. DMSO tidak mempengaruhi hasil  daya  hambat  karena  tidak  memiliki  efek bakterisidal  sehingga  tidak  mempengaruhi  hasil percobaan.  Gentamisin  10  µg  dipilih  sebagai pembanding  karena  termasuk  antibiotik  golongan aminoglikosida yang  merupakan  alternatif  pengobatan infeksi Escherichia  coli selain  golongan  beta  laktam (Dipiro,  Yee,  Haines,  Nolin,  &  Ellingrod,  2020). Gentamisin  berikatan  dengan  ribosom  pada  sub  unit 30S dan menghambat adanya translokasi peptidil tRNA sehingga  mengakibatkan  kesalahan  dalam  pembacaan mRNA  dan  bakteri  tidak  mampu  melakukan  sintesis
protein  yang  penting  untuk  pertumbuhannya  (Pratiwi ST, 2008).
Sampel terdistribusi normal dengan hasil uji sebesar p=0,059  (p>0.05)  pada  uji Kolmogorov  Smirnov dan homogen  dengan  nilai  p=0,050  (p>0,05)  pada  uji Levene, sehingga  memenuhi  syarat  untuk  dilakukan pengujian Two Way Anova. ( Tabel 5 )
Berdasarkan  pengujian  statistik  dengan Two  Way Anova membuktikan  ekstrak  metanol  dan  etanol berbeda  signifikan  dengan  p  =  0,026  (p  <  0,05)  serta berbeda signifikan berdasar konsentrasi ekstrak dengan p=0,000  (p<0,05)  terhadap Escherichia  coli ESBL. Sedangkan untuk hasil uji perbandingan antara ekstrak dan  konsentrasi  didapatkan  hasil  tidak  berbeda signifikan dengan p=0,195.
Tabel 4. Hasil Uji Biokimia Bakteri Escherichia coli
Spesies Escherichia coli Media Hasil KIA Fermentasi Ac/ac H2s - Gas + SIM Indol + Motil + H2S - Urea - Citrat - MR + VP - PAD - Gula Glukosa + Maltosa + Manitol + Laktosa + Sakrosa +
Tabel 5. Uji Distribusi Normal dan Homogenitas Sampel
Data Sampel Daya hambat rata-rata (mm) SD Levene’s Test Kolmogorov Smirnov Test Kontrol negatif 6,0 ± 0,00 0,050* 0,059* Kontrol positif 9,8 ± 0,06 Metanol 25 % 7,4 ± 0,17 Metanol 50% 7,8 ± 0,14 Metanol 100% 8,1 ± 0,13 Kontrol negatif 6,0 ± 0,00 Kontrol positif 9,8 ± 0,06 Etanol 25 % 7,3 ± 0,24 Etanol 50% 7,4 ± 0,21 Etanol 100% 7,9 ± 0,23
Keterangan * : nilai p>0,05 menunjukan sampel homogen dan terdistribusi normal
Perbandingan Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol dan Metanol Daun Bunga Telang (Clitoria Ternatea L.) terhadap Escherichia Coli ESBL ( Extended Spectrum Beta Lactamase )
77
Dilakukan  juga  uji One  Way-Anova pada Tabel  6 , guna mengkonfirmasi signifikansi perbedaan konsentrasi tiap ekstrak.
Hasil  membuktikan  terdapat  konsentrasi  yang menghasilkan perbedaan tidak signifikan (p>0,05) yaitu pada  ekstrak  etanol  konsentrasi  25%  terhadap  50% (nilai  p=0,965);  konsentrasi  50%  terhadap  100% (p=0,058)  dan  ekstrak  metanol  konsentrasi  50% terhadap  100%  (p=0,280).  Namun,  pada  konsentrasi Berdasarkan  data  tersebut  dapat  diketahui  bahwa ekstrak  metanol  menunjukan  daya  hambat  lebih  baik daripada ekstrak etanol terhadap Escherichia coli ESBL meskipun diameter yang dihasilkan tidak jauh berbeda. Peningkatan  konsentrasi  juga  sebanding  dengan peningkatan daya hambat yang terbentuk. ( Tabel 7 ).
Hasil  pengujian  yang  telah  dilakukan  menunjukan
bahwa Escherichia  coli ESBL  yang  diuji  resisten terhadap  gentamisin.  Zona  hambat  gentamisin terhadap Escherichia  coli secara  teoritis  adalah  19-26 mm  (CLSI,  2020).  Hal  ini  menunjukan  bahwa  bakteri yang  diuji  memiliki  potensi  yang  kuat  untuk  dapat menyebabkan  dirinya  resisten  terhadap  berbagai senyawa  uji  termasuk  gentamisin  yaitu  antibiotik golongan aminoglikosida (diluar golongan beta laktam). Kuatnya  sifat  bakteri  tersebut  tentunya  juga berpengaruh  terhadap  hasil  yang  didapat  pada pengujian aktivitas antibakteri ekstrak.
Aktivitas  antibakteri  dikatakan  kuat  bila  diameter yang terbentuk antara 15-20 mm, aktivitas sedang bila diameter 10-14 mm dan aktivitas lemah bila diameter < 9 mm  (Mohd Nazri, Ahmat,  Adnan, Syed Mohamad, & Syaripah Ruzaina, 2011). Hasil uji menunjukkan ekstrak
Tabel 6. Uji konfirmasi perbandingan tiap konsentrasi ekstrak dengan One Way Anova
Sampel Kontrol negatif Kontrol positif Konsentrasi 25% Konsentrasi 50% Konsentrasi 100% Metanol Kontrol negatif - 0,00* 0,00* 0,00* 0,00* Kontrol positif 0,00* - 0,00* 0,00* 0,00* Konsentrasi 25% 0,00* 0,00* - 0,018* 0,01* Konsentrasil 50% 0,00* 0,00* 0,018* - 0,280 Konsentrasi 100% 0,00* 0,00* 0,01* 0,280 - Etanol Kontrol negatif - 0,00* 0,00* 0,00* 0,00* Kontrol positif 0,00* - 0,00* 0,00* 0,00* Konsentrasil 25% 0,00* 0,00* - 0,965 0,021* Konsentrasil 50% 0,00* 0,00* 0,965 - 0,058 Konsentrasi 100% 0,00* 0,00* 0,021* 0,058 - Keterangan * : nilai p<0,05 menunjukan terdapat perbedaan signifikan
Tabel 7. Aktivitas Daya Hambat Ekstrak Etanol dan Metanol terhadap E.coli ESBL
Sampel Uji Konnse trasi Diameters Zona Hambat (mm) Rata-rata ± SD (mm) Two Way Anova 1 2 3 Ekstrak Konsentrasi Ekstrak* Konsentrasi Ekstrak Metanol 25 % 50 % 100 % 7.4 7.7 8.1 7.6 8.0 8.2 7.2 7.8 7.9 7.4 ±0.17 7.8±0.14 8.1±0.13 0.026* 0.000* 0.195 Ekstrak Etanol 25 % 50 % 100 % 7.0 7.2 8.0 7.4 7.4 7.6 7.5 7.6 8.1 7.3±0.24 7.4±0.21 7.9±0.23 Kontrol Negatif 6.0 6.0 6.0 6.0±0.00 Kontrol Positif - - - -
Keterangan * : nilai p<0,05 menunjukan terdapat perbedaan signifikan
etanol dan metanol daun tanaman bunga telang masuk kategori  aktivitas  lemah  sebagai  antibakteri  pada Escherichia coli ESBL.
Mekanisme  Resistensi  bakteri  ESBL  dapat  melalui beberapa  faktor  diantaranya  bakteri Escherichia  coli dapat  menghasilkan  suatu  enzim yaitu  beta  laktamase yang  mampu  memecah  cincin  beta  laktam  sehingga menyebabkan  rusaknya  senyawa  yang  ada  pada antibiotik,  adanya  perubahan  pada penicilin  binding protein (PBP)  sehingga  menyebabkan  perubahan sintesis  pada  dinding  sel  bakteri,  adanya  mutasi  DNA bakteri  atau  munculnya  materi  genetik  yang  spesifik mampu  membatasi  mekanisme  aksi  suatu  antibiotik sehingga  memicu  terjadinya  gen  resisten,  (Pratiwi, 2017)  dan  bakteri  memiliki  kemampuan  untuk membentuk biofilm yang menyebabkan agen antibakteri  gagal  untuk  berpenetrasi  masuk  dalam  sel bakteri. Mekanisme lain dari biofilm adalah membatasi nutrisi  yang  diserap  bakteri  sehingga  bakteri  dapat bertahan pada kondisi kelaparan (Iseppi et al. , 2020).
Kandungan  fitokimia  yang  terdapat  pada  ekstrak juga  berpengaruh  terhadap  hasil  penelitian,  dimana kualitas  dan  kuantitas  senyawa  tersebut  diduga berpengaruh  terhadap  aktivitas  antibakteri  yang diperoleh  (Riyanto,  Nurjanah,  &  Ismi,  2019).  Hasil  ini dapat dilihat dari Tabel 2 .
Mekanisme  aksi  flavanoid  sebagai  antibakteri  yaitu membentuk  ikatan  kompleks  dengan  dinding  sel bakteri, terlebih dengan tingginya lipofilisitas flavanoid juga dapat mengganggu membran sel bakteri. Aktivitas antibakteri  alkaloid  diduga  melalui  penghambatan sintesis  DNA  dan  mekanisme  perbaikan  oleh  asam nukleat (Porras et al., 2020). Senyawa fenolik memiliki aktivitas  antibakteri  yang  kuat  karena  mampu menghancurkan  membran  luar  bakteri.  Perubahan permeabilitas  dan  integritas  dinding  dan  membran  sel bakteri yang menyebabkan kebocoran bahan intraseluler,  seperti  elektrolit,  ATP,  protein,  dan  DNA (Iseppi et al., 2020).
Saponin  memiliki  mekanisme  antibakteri  melalui peningkatan  permeabilitas  membran  sel  sehingga stabilitasnya  terganggu  dan  menyebabkan  hemolisis sel. Tanin bekerja sebagai antibakteri melalui toksisitas tanin  yang  berasal  dari  pembentukan  kompleks  ion logam  oleh  tanin  sehingga  merusak  membran  sel bakteri.  Mekanisme  aksi  terpenoid  adalah  merusak membran  sel  dengan  melarutkan  bagian  lipid  dari bakteri  dan  meningkatkan  permeabilitasnya  (Nomer, Duniaji, & Nocianitri, 2019).
Senyawa fitokimia suatu tumbuhan dapat dipengaruhi  beberapa  faktor  meliputi  kebenaran
tanaman,  genetik,  lingkungan  tempat  tumbuh,  waktu panen dan penanganan paska panen (Saifudin, Rahayu, & Teruna, 2011).

## SIMPULAN
Ekstrak  etanol  dan  metanol  daun  bunga  telang ( Clitoria ternatea L .) mampu menghambat pertumbuhan Escherichia  coli ESBL  dengan  aktivitas lemah  dan  Terdapat  perbedaan  aktivitas  antibakteri ekstrak  etanol  dan  metanol  berdasarkan  hasil  analisa statistik dengan nilai p<0,05.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdul,  A.  (2018).  Identifikasi  dan  Isolasi  Isolat  Non Polar, Semipolar dan Non Polar dari Fraksi Heksana Ekstrak  Etanol  Daun  Sirih  (Piper  Betle  L.)  dengan Metode  Tlc  Scanner  dan  Gc-ms. Jurnal  Ilmiah Farmasi Farmasyifa , 1 (2), 88 – 98.
Al-snafi,  A.  E.  (2016).  Pharmacological  Importance  of Clitoria  ternatea – A  Review. IOSR  journal  of Pharmacy , 6 (3), 68 – 83. Anief,  M.  (2006). Ilmu  Meracik  Obat (Cetakan  Ke). Yogyakarta: Gadjah Mada University Press. Chakraborty, S., Sahoo, S., Bhagat, A., & Dixit, S. (2017).
Studies  on  Antimicrobial  Activity  ,  Phytochemical Screening Tests , Biochemical Evaluation of Clitorea.
International Journal of Research – GRANTHAALAYAH , 5 (1), 197 – 208. https://doi.org/10.5281/zenodo.1040675 CLSI.  (2020). Performance  Standards  for  Antimicrobial Suscepbility  Testing (30th  Editi).  Wayne:  CLSI Supplement M100.
Dipiro,  J.  T.,  Yee,  G.  C.,  Haines,  M.,  Nolin,  T.,  &
Ellingrod, V. (2020). Pharmacotheraphy A Pathophysiologic Approach Eleventh Edition (Eleventh). New York: Mc Graw Hill. Flores-Mireles,  A.  L.,  Walker,  J.  N.,  Caparon,  M.,  & Hultgren,  S.  J.  (2015).  Urinary  Tract  Infections: Epidemiology,  Mechanisms  of  Infection  and Treatment  Options. Nature  Reviews  Microbiology ,
13 (5), 269 – 284.
https://doi.org/10.1038/nrmicro3432
Iseppi, R., Cerbo, A. Di, Aloisi, P., Manelli, M., Pellesi, V., Provenzano, C., Sabia, C. (2020). In Vitro Activity of Essential Oils Against Planktonic Bacteria Involved in Human  Nosocomial  Infections. Antibiotics , 9 (272), 1 – 12.
Lijon, M. B., Meghla, N. S., Jahedi, E., Rahman, M. A., &
Hossain, I. (2017). Phytochemistry and Pharmacological  Activities  of  Clitoria  ternatea.
Perbandingan Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol dan Metanol Daun Bunga Telang (Clitoria Ternatea L.) terhadap Escherichia Coli ESBL ( Extended Spectrum Beta Lactamase ) 79
International Journal of Natural and Social Sciences , 4 (1), 1 – 10.
Maksum, R. (2014). Buku Ajar Mikrobiologi . Bandung. Mohd  Nazri,  N.  A.  A.,  Ahmat,  N.,  Adnan,  A.,  Syed Mohamad, S. A., & Syaripah Ruzaina, S. A. (2011). In vitro  antibacterial  and  radical  scavenging  activities of  Malaysian  table  salad. African  Journal  of
Biotechnology , 10 (30), 5728 – 5735.
https://doi.org/10.5897/AJB11.227
Nazmi,  M.,  Made,  N.,  Mahardik,  A.,  Gunardi,  W.  D., Fakultas,  M.,  Universitas,  K.,  …  Korespondensi,  A. (2017).  Kejadian  Infeksi  Saluran  Kemih  oleh  Bakteri Escherichia  coli dan Klebsiella pneumoniae Extended Spectrum Beta Lactamase : Stu di Kasus di Rumah  Sakit  Swasta  Periode  2012-2015  The Prevalence  of  Urinary  Tract  Infection  Caused  By Extended  Spectrum  Case  Study. Jurnal  Kedokteran Meditek , 23 (62), 54 – 62.
Nomer,  N.  M.  G.  R.,  Duniaji,  A.  S.,  &  Nocianitri,  K.  A. (2019).  Kandungan  Senyawa  Flavanoid  Dan Antosianin Ekstrak Kayu Secang (Caesalpinia sappan L.)  Serta  Aktivitas  Antibakteri  Terhadap  Vibrio cholerae. Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan (ITEPA) ,
8 (2), 216.
https://doi.org/10.24843/itepa.2019.v08.i02.p12 Nugrahani,  R.,  Andayani,  Y.,  &  Hakim,  A.  (2016). Skrining  Fitokimia  Dari  Ekstrak  Buah  Buncis (Phaseolus vulgaris L)  dalam Sediaan Serbuk. Jurnal Penelitian  Pendidikan  IPA  (JPPIPA) , 2 (1),  35 – 42. https://doi.org/ISSN 2460-2582
Porras,  G.,  Chassagne,  F.,  Lyles,  J.  T.,  Marquez,  L., Dettweiler, M., Salam, A. M., … Quave, C. L. (2020). Ethnobotany and the Role of Plant Natural Products
in  Antibiotic  Drug  Discovery. Chemical  Reviews ,  1 – 66. https://doi.org/10.1021/acs.chemrev.0c00922 Pratiwi,  R.  H.  (2017).  “Mekanisme  Pertahanan  Bakteri Patogen  Terhadap  Antibiotik.” Jurnal  Pro-Life , 4 (3), 418 – 429.
Pratiwi ST. (2008). Mikrobiologi Farmasi (Erlangga, ed.). Jakarta.
Riyanto, E. F., Nurjanah, A. N., & Ismi, S. N. (2019). Daya Hambat  Ekstrak  Etanol  Bunga  Telang  (  Clitoria ternatea L) Terhadap Bakteri Perusak Pangan. Jurnal Kesehatan  Bakti  Tunas  Husada:Jurnal  Ilmu  Ilmu Keperawatan, Analis Kesehatan dan Farmasi , 19 (2),
218 – 225.
Saifudin,  A.,  Rahayu,  V.,  &  Teruna,  H.  (2011). Standardisasi Bahan Obat Alam (1 ed.). Yogyakarta:
Graha Ilmu.
Singh, N., Pattnaik, D., Neogi, D. K., Jena, J., & Mallick, B.  (2016).  Prevalence  of  ESBL  in  Escherichia  coli Isolates  Among  ICU  Patients  in  a  Tertiary  Care Hospital. Journal of Clinical and Diagnostic Research ,
10 (9), 19 – 22.
https://doi.org/10.7860/JCDR/2016/21260.8544 Sumolang, S. A. C., Porotu’o, J., & Soeliongan, S. (2013).
Pola Bakteri Pada Penderita Infeksi Saluran Kemih dI BLU RSUP Prof. dr. R. D. Kandou Manado. Jurnal e-
Biomedik , 1 (1), 597 – 601. https://doi.org/10.35790/ebm.1.1.2013.4605
Vila,  J.,  Sáez-López,  E.,  Johnson,  J.  R.,  Römling,  U., Dobrindt,  U.,  Cantón,  R.,  Soto,  S.  M.  (2016). Escherichia  coli:  An  Old  Friend  With  New  Tidings. FEMS  Microbiology  Reviews , 40 (4),  437 – 463. https://doi.org/10.1093/femsre/fuw005