J. Kartika Kimia , November 2021, 4, (2), 66-72 Journal homepage : http://jkk.unjani.ac.id/index.php/jkk P-ISSN: 2655-1322     E-ISSN: 2655-0938

## Analisis Rhodamin-B pada Saos yang Beredar di Sekitar STIKes Bhakti Husada Mulia Madiun dengan Metode KLT dan Spektrofotometri UV-Vis
Analysis of Rhodamine-B in Sauce Circulating Around STIKes Bhakti Husada Mulia Madiun Using TLC and UV-Vis Spectrophotometry Methods
Mohamad Afif Rahmadhi * , Susanti Erikania, Yetti Hariningsih Program Studi S1 Farmasi Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Bhakti Husada Mulia Madiun, Jawa Timur E-mail: mohamadafifrahmadhi@gmail.com
DOI: https://doi.org/10.26874/jkk.v4i2.82
Received : 11 Sept 2021, Revised : 30 Nov 2021, Accepted : 30 Nov 2021, O nline : 30 Nov 2021

## Abstrak
Saos  adalah  bahan  penyedap  dan  penambah  cita  rasa  masakan  yang  berbentuk  kental  dan  berwarna merah. Pada saos dicurigai mengandung Rhodamin-B sebagai bahan pewarna karena memiliki warna merah  terang  atau  berflouresensi.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menganalisis  secara  kualitatif  dan kuantitatif  Rhodamin-B  pada  saos  yang  beredar  di  sekitar  STIKes  Bhakti  Husada  Mulia.  Metode penelitian  ini  menggunakan  5  sampel  saos  dianalisis  kualitatif  secara  KLT  menggunakan  fase  diam silika gel GF 254 dan fase gerak n-butanol:etil . asetat:ammonia (10:4:5), dan dianalisis kuantitatif secara Spektrofotometri  UV-Vis  dengan  penentuan  panjang  gelombang  maksimal  400-800  nm  dengan konsentrasi  3  ppm.  Hasil  analisis  kualitatif  secara  KLT  menunjukkan  4  dari  5  sampel  positif mengandung  Rhodamin-B  muncul  noda  berwarna orange pada  lampu  UV  254nm  dan  berfluoresensi kuning pada lampu UV 360 nm, sedangkan nilai Rf pada sampel B sebesar 0,57; sampel C sebesar 0,58; sampel D sebesar 0,58 dan sampel E sebesar 0,58; dibandingkan dengan standar Rhodamin-B yaitu 0,55. Hasil  analisis kuantitatif  secara Spektrofotometri  UV-Vis pada  panjang  gelombang  maksimal  558nm dengan nilai absorbansi 0,538A didapatkan kadar Rhodamin-B pada sampel B sebesar 1,216 ± 0,004 μg/ml; sampel C 2,278 ± 0,005 μg/ml; sampel D 1,681 ± 0,007 μg/ml dan sampel E 0,776 ± 0,004 μg/ml. Kesimpulan didapatkan sampel C memiliki kadar Rhodamin-B paling tinggi dibandingkan sampel B, D dan E.
Kata Kunci : KLT, Rhodamin-B, Saos, Spektrofotometri UV-Vis

## Abstract
Sauce is a flavoring and flavor enhancer that is thick and red in color. The sauce is suspected to contain Rhodamine-B  as coloring  agent  because  a  bright  red  color fluorescence. This study  aims to  analyze qualitatively  and  quantitatively  Rhodamin-B  in  the  sauce  circulating  around  STIKes  Bhakti  Husada Mulia. This research method used 5 sauce samples, analyzed qualitatively by TLC using silica gel GF 254 stationary  phase  and  mobile  phase  n-butanol:ethyl . acetate:ammonia  (10:4:5),  and  quantitatively analyzed  by  UV-Vis  Spectrophotometry  with  maximum  wavelength  determination  400-800  nm  with concentration  3  ppm. The  results of  qualitative  analysis by  TLC  showed  that  4  of  5  positive  samples containing Rhodamine-B appeared orange stains on a 254 nm UV lamp and yellow fluorescence on a 360nm UV lamp, while the Rf value in sample B was 0.57; sample C was 0.58; sample D was 0.58 and sample E was 0.58, compared to the Rhodamine-B standard of 0.55. The results of quantitative analysis UV-Vis  spectrophotometry  at  maximum  wavelength  of  558nm  with  absorbance  value  0.538  A,  the Rhodamine-B  content  in  sample  B  was  1.216μg/ml±0.004;  sample  C  2.278μg/ml±0.005;  sample  D 1.681μg/ ml±0.007 and sample E 0.776μg/ml±0.004. The conclusion is sample C has the highest levels of Rhodamine-B compared to samples B, D and E.
Keywords: TLC, Rhodamine-B, Sauce, and UV-Vis Spectrophotometry

## 1 Pendahuluan
Makanan  adalah  hal  yang  sangat  penting dalam  kehidupan  sehari-hari,  sehingga  makanan yang  kita  makan  bukan  hanya  harus  bergizi, namun juga harus sehat dan aman dalam arti tidak mengandung  mikroorganisme  dan  bahan-bahan kimia  yang  dapat  menyebabkan  keracunan penyakit  [1].  Saos  merupakan  salah  satu  produk makanan yang digemari oleh masyarakat sebagai pelengkap, contohnya sebagai pelengkap makanan  seperti  bakso,  mie  ayam,  pentol  dan gorengan. Saos dibuat  dari  bahan  baku  buah  dan sayuran  dan  berbentuk  pasta,  serta  mempunyai rasa dan aroma yang membangkitkan selera. Saos yang umumnya  beredar  di  Indonesia  adalah  saos cabai  dan  saos  tomat.  Saat  ini  banyak  terjadi i perkembangan  di  bidang  industri i makanan  dan minuman yang bertujuan untuk menarik perhatian para konsumen. Sehingga, produsen makanan dan minuman  menambahkan  zat  tambahan  atau food additive dalam  produknya,  seperti  zat  pengawet, pemanis, pewarna, penyedap rasa dan aroma, dan lain-lain [2].
Warna  makanan  dan  minuman  dapat digunakan sebagai kriteria dasar dalam penentuan kualitas makanan. Warna juga dapat mempengaruhi persepsi akan rasa. Oleh karena itu, warna  memberikan  pengaruh  besar  terhadap konsumen dalam memilih suatu  produk makanan atau  minuman  [1].  Saat  ini  banyak  terjadi penyalahgunaan  pemakaian  pewarna  sintetis untuk bahan pangan, misalnya zat pewarna tekstil dan  kulit  untuk  mewarnai  bahan  pangan.  Salah satu  bahan  tambahan  pangan  yang  berbahaya terhadap  kesehatan  adalah  rhodamin-B.  Jenis- jenis makanan jajanan yang ditemukan mengandung  bahan-bahan  berbahaya  ini  yaitu sirup, saos, dan manisan [2].
Rhodamin-B  adalah  zat  warna  sintetik  yang biasanya  digunakan  sebagai  pewarna  tekstil.  Zat warna  sintetik  ini  berbentuk  serbuk  kristal,  tidak berbau,  berwarna  merah  kebiruan,  dalam  bentuk larutan  berwarna  merah  terang  (berflouresensi kuat).  Zat  warna  tambahan  ini  dilarang penggunaannya  dalam  produk-produk  pangan. Rhodamin-B dapat menyebabkan iritasi pada mata, iritasi kulit, iritasi saluran pernafasan, keracunan, dan gangguan hati [3].
Saos  yang  beredar  di  sekitar STIKes Bhakti Husada Mulia Madiun cukup banyak, di mana dari saos tersebut memiliki warna yang mencolok. Hal tersebut  sesuai  dengan  ciri-ciri  produk  yang mengandung  Rhodamin-B  yaitu  berwarna  cerah mengkilap  dan  lebih  mencolok,  terkadang warnanya  tidak  homogen,  terdapat  gumpalan
warna pada produk, pada produk tidak mencantumkan  merek,  kode,  label,  informasi kandungannya,  atau  identitas  lengkap  lainnya. Kandungan  Rhodamin-B  dapat  diidentifikasi dengan  menggunakan  berbagai  metode  analisis [4].
Berdasarkan  uraian  di  atas  peneliti  tertarik untuk meneliti kadar Rhodamin-B pada saos yang beredar  di  sekitar  STIKes  Bhakti  Husada  Mulia Madiun.  Penelitian  ini  menggunakan  metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dan spektrofotometri  UV-Vis.  Metode  Kromatografi Lapis Tipis (KLT) digunakan untuk mengidentifikasi keberadaan zat pewarna Rhodamin-B sedangkan Spektrofotometri UV-Vis digunakan untuk mengetahui kadar Rhodamin-B.

## 2 Metode Penelitian Bahan
Saos  Tomat,  HCl  0,1N  (PA),  methanol  (PA), Rhodamin-B  Standar,  ,  Asam,  Asetat  10%  (PA), n -butanol,  Aquadest,  Silika  Gel  GF 254 ,  Benang Wol, Etil Asetat (PA), Ammonia 2% (PA) dalam etanol 70% dan Ammonia 10% (PA) dalam etanol 70%.

## Alat
Instrumen  spektrofotometer  UV-Vis  ( Thermo ), Hot  plate  (Faithful), sentrifugasi, waterbath (Faithful) ,  timbangan  elektrik (Ohaus) ,  chamber, plat KLT, pipa kapiler, dan alat gelas yang umum terdapat di laboratorium.

## Preparasi Sampel KLT
Ditimbang  sebanyak  10  gram  sampel  saos tomat yang dicurigai mengandung (Rhodamin-B) dimasukkan  ke  dalam  Erlenmeyer,  direndam dalam 20 mL larutan amonia 2% (yang dilarutkan dalam  etanol  70%  selama  12  jam).  Filtrat  dari larutan  disaring  menggunakan  kertas  saring Whatman  no.  42,  dipindahkan  ke  dalam beaker glass kemudian dipanaskan di atas hot plate . Sisa dari  hasil  penguapan  dilarutkan  dalam  10  ml  air yang  mengandung  asam  (larutan  asam  dibuat dengan  mencampurkan  5  ml  asam  asetat  10% dengan  10  ml  air).  Pengambilan  warna  merah menggunakan benang wol sepanjang 15 cm yang dimasukkan  ke  dalam  larutan,  didihkan  hingga pekat,  pewarna  akan  mewarnai  benang  wol, kemudian  benang  diangkat.  Benang  wol  dicuci dengan air, dimasukkan ke dalam larutan basa 10 ml  amonia  10%  (yang  akan  dilarutkan  dalam etanol  70%)  kemudian  didihkan  hingga  pekat. Benang  wol  akan  melepaskan  pewarna,  pewarna akan  masuk ke  dalam  larutan  basa. Larutan  basa
yang  didapat  selanjutnya  digunakan  sebagai cuplikan sampel pada analisis KLT.

## Pembuatan Fase Gerak
Proses KLT dilakukan dengan menggunakan fase gerak/eluen (n-butanol : etil asetat : amonia) (10 : 4 : 5) sebanyak 50 ml. Dengan diambil n-butanol 26,3 ml, etil asetat 10,5 ml, dan amonia 13,2 ml. Fase diam yang i digunakan adalah silika gel GF 254 .

## Pembuatan Larutan Standar Rhodamin-B
Ditimbang Standar Rhodamin-B 25 mg, dilarutkan  dalam  25  ml  metanol  dan  diperoleh larutan  baku  Rhodamin-B  dengan  konsentrasi 1000 ppm.

## Analisis Kualitatif Saos secara KLT
Penotolan  larutan  standar  dan  sampel  ditotolkan menggunakan  pipa  kapiler.  Tujuannya  untuk mendapatkan  penotolan  kecil,  karena  penotolan yang  baik  harus  sekecil  mungkin  untuk menghindari pelebaran noda dan jika sampel yang digunakan terlalu banyak maka dapat menurunkan resolusi,  penotolan  dilakukan  sebanyak  4x replikasi. Plat diamati di bawah sinar UV dengan panjang gelombang 254 dan 366 nm.

## Preparasi Sampel Spektrofotometri UV-Vis
Menimbang  2  gram  sampel  lalu  dimasukkan  ke dalam  cawan  penguap  lalu  ditambahkan  7  tetes HCl dan ditambahkan 15 ml metanol. Dipanaskan di atas waterbath selama 15 menit. Disentrifugasi selama 4 menit . Lalu ditambahkan natrium sulfat anhidrat secukupnya untuk menjernihkan larutan, kemudian disaring dan diamati dengan spektrofotometri UV-Vis.

## Pembuatan Larutan Baku
Ditimbang Standar Rhodamin-B 25 mg, dilarutkan dalam 25 ml HCl 0,1 N dan diperoleh larutan  baku  Rhodamin-B  dengan  konsentrasi
1000  ppm.    Selanjutnya  dibuat  seri  larutan  baku dengan konsentrasi 1 ppm, 2 ppm, 3 ppm, 4 ppm, dan 5 ppm dengan cara dipipet 10 µL, 20  µL, 30 µL, 40 µL, dan 50  µL ditambahkan dengan HCl 0,1 N sampai 10 ml.

## Pembuatan Larutan Blanko
Pembuatan larutan blanko dilakukan dengan cara diambil  1  ml  HCl  pekat  10  N  dimasukkan  labu ukur  100  ml  dan  ditambahkan  aquadest  sampai batas.

## Penentuan Panjang Gelombang Maksimum
Dipipet 30 µL larutan baku Rhodamin-B standar, dimasukkan ke dalam labu ukur, ditambah dengan HCl  0,1  N  ad  10  ml  sehingga  menghasilkan larutan  konsentrasi  3  ppm.  Selanjutnya  dibaca Penentuan Panjang gelombang maksimal dilakukan  pada  rentang  panjang  gelombang  400- 800 nm. Puncak maksimum yang dihasilkan dari spektro merupakan panjang gelombang maksimum dari Rhodamin-B. Penetapan Kadar
Rhodamin-B Secara

## Spektrofotometri UV-Vis
Sampel  diukur  secara  spektrofotometri  UV-Vis pada  panjang  gelombang  maksimum.  Kadar Rhodamin-B  dalam  sampel  dihitung  dengan menggunakan persamaan regresi linear hasil dari kurva  kalibrasi  perbandingan  antara  konsentrasi dengan  absorbansi,  yaitu  dengan  persamaan regresi linier : y = bx+a.

## 3 Hasil dan Pembahasan
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  4  dari  lima sampel yang diuji, positif mengandung Rhodamin-B. Hal ini dikarenakan nilai Rf antara sampel dengan baku sejajar atau saling mendekati dengan  selisih  nilai  ≤  0,2    dengan  standar Rhodamin-B [5].
Tabel 1. Hasil Uji Kualitatif dari Sampel Saos Secara KLT
Sampel Nilai Rf Rata - Rata Rf Keterangan 1 2 3 4 5 Standar Rhodamin-B 0,6 0,52 0,56 0,56 0,52 0,55 - Sampel saos A 0 0 0 0 0 0,00 Negatif Sampel saos B 0,6 0,6 0,56 0,56 0,52 0,57 Positif Sampel saos C 0,6 0,6 0,6 0,56 0,52 0,58 Positif Sampel saos D 0,6 0,6 0,6 0,56 0,52 0,58 Positif Sampel saos E 0,6 0,6 0,6 0,56 0,52 0,58 Positif
Keterangan : (Positif) Mengandung Rhodamin-B, (Negatif) Tidak mengandung Rhodamin-B
Penentuan Panjang Gelombang Maksimal secara Spektrofotometri UV-Vis
Pada penentuan panjang gelombang maksimum  larutan  standar  Rhodamin-B  dengan pelarut HCL 0,1 N secara spektrofotmetri UV-Vis diperoleh  hasil  yaitu  558  nm dengan  nilai absorbansi 0,538 A (Gambar 1).
Gambar 1. Spektrum serapan larutan rhodamin-B dalam  pelarut  HCl  pada  rentang  panjang gelombang 400-800 nm

## Pembuatan Kurva Baku Rhodamin-B
Persamaan  regresi  linear  dari  perbandingan konsentrasi  standar  Rhodamin-B  dan  absorbansi memperoleh hasil yaitu y = 0,1548x + 0,0744.
Gambar 2. Kurva kalibrasi larutan rhodamin-B pada rentang Konsentrasi 1 - 5 ppm.

## Penetapan  Kadar  Rhodamin-B  dalam  Sampel Saos
Penampakan  fisik  kelima  sampel  saos  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  ditampilkan  pada Gambar  3.  Kadar  rhodamin-B  pada  setiap  sampel ditunjukkan pada Tabel 3.
Gambar 3. Sampel Saos
Tabel 3. Hasil Perhitungan Kuantitatif Sampel
Sampel Saos Absorbansi Kadar Rhodamin-B pada sampel (μg/ml) Rata-rata Kadar Rhodamin-B (μg/ml) ± SD A1 - - - A2 - - A3 - - A4 - - A5 - - B1 0,263 1,218 1,216 ± 0,004 B2 0,263 1,218 B3 0,262 1,212 B4 0,262 1,212 B5 0,263 1,218 C1 0,426 2,271 2,278 ± 0,005 C2 0,427 2,278 C3 0,427 2,278 C4 0,427 2,278 C5 0,428 2,284 D1 0,336 1,690 1,681 ± 0,007 D2 0,335 1,683 D3 0,335 1,683 D4 0,333 1,671 D5 0,334 1,677 E1 0,194 0,773 0,776 ± 0,004 E2 0,195 0,779 E3 0,195 0,779 E4 0,194 0,773 E5 0,195 0,779
Penetapan  kadar  Rhodamin-B  pada  sampel menggunakan  persamaan regresi  linear  yaitu  y  = 0,1548x + 0,0744 di mana y = absorbansi dan x = konsentrasi.  Tabel  di  atas  menunjukkan  bahwa empat dari lima sampel mengandung Rhodamin-B dengan kadar sampel B = 1,216 ± 0,004., Sampel C = 2,278 ±  0,005.,  Sampel  D  =  1,681  ±  0,007., sampel E = 0,776 ± 0,004.
Saos  adalah  salah  satu  bahan  pelengkap makanan  yang  berbentuk  cairan  kental  pada umumnya berfungsi sebagai bahan penyedap dan penambah  cita  rasa  masakan.  Saat  ini  begitu banyak  terjadi  perkembangan  di  bidang  industri makanan  dan  minuman  yang  bertujuan  untuk menarik  perhatian  para  konsumen.  Sehingga diperlukan  bahan  tambahan  pangan  seperti  zat pewarna  tambahan.  Saos  tomat  dengan  harga murah  seringkali  ditambahkan  dengan  pewarna sintetik  yang  penggunaannya  dilarang  seperti Rhodamin-B.
Pada  penelitian  analisis  Rhodamin-B  pada saos  tomat  menggunakan  metode  kromatografi lapis tipis dan spektrofotometri UV-Vis. Pemilihan  saos  tomat  dikarenakan  banyak  jurnal penelitian  yang  menyebutkan  bahwa  saos  tomat mengandung  senyawa  Rhodamin-B,  sedangkan Rhodamin-B  sendiri  termasuk  bahan  berbahaya
menurut  Peraturan  Menteri  Kesehatan  Nomor: 472/Menkes/Per/V/1996, dikarenakan dalam struktur Rhodamin-B mengandung klorin (senyawa  halogen),  sifat  halogen  adalah  mudah bereaksi  atau  memiliki  reaktivitas  tinggi  yang akan  berusaha  mencapai  kestabilan  dalam  tubuh dengan berikatan dengan senyawa-senyawa dalam tubuh kita, sehingga pada akhirnya akan memicu kanker  pada  [6].  Metode  yang  digunakan  adalah KLT yang memiliki kelebihan dapat mengidentifikasi  pemisahan  komponen  dengan pereaksi  warna,  fluoresensi,  dan  menggunakan radiasi sinar ultra violet. Sedangkan spektrofotometri    UV-Vis  digunakan  untuk menghitung  kadar  Rhodamin-B  pada  sampel, dikarenakan  metode  spektrofotometri    UV-Vis dapat  menganalisa  larutan  dengan  konsentrasi yang sangat kecil.
Pada  analisis  kualitatif  Rhodamin-B  pada saos tomat secara KLT fase diam yang digunakan adalah silika gel GF 254 , sedangkan fase gerak yang digunakan adalah  n-butanol  :  etil asetat  :  amonia (10:4:5). Pemilihan silika gel GF 254 karena mampu memisahkan hampir semua jenis zat, dan silika gel GF 254 memiliki  polaritas  yang  sama  dengan Rhodamin-B yaitu bersifat polar.
Hasil penotolan  sampel  saos pada  plat  KLT menghasilkan nilai Rf sampel A 0., sampel B 0,57., sampel  C  0,58.,  sampel  D  0,58.,  sampel  E  0,58. Nilai  Rf  paling  mendekati  standar  Rhodamin-B yaitu sampel B dengan nilai Rf 0,57 dan nilai Rf terjauh  adalah  sampel  A  dengan  nilai  Rf  0. Sedangkan  noda  warna  totolan  yang  muncul adalah  warna orange pada  lampu  UV  254  dan warna  kuning  pada  lampu  UV  366,  hal  ini menunjuk  kan  adanya  Rhodamin-B  pada  sampel saos.  Identifikasi  kualitatif  menggunakan  KLT memiliki kelebihan bahan mudah didapatkan, alat yang sederhana dan dapat memisahkan zat dengan mudah dan cepat.
Penetapan kadar Rhodamin-B menggunakan spektrofotometri  UV-Vis  yang  pertama  kali dilakukan  yaitu  menentukan  λ  maksimal.  Hasil yang diperoleh dari penentuan λ maksimal larutan Rhodamin-B adalah 558 nm. Panjang gelombang serapan maksimum yang didapat berbeda dengan literatur λ 557 nm. Perbedaan λ 1 nm masih dalam batas  toleransi  yang  diperkenankan  dalam Farmakope  Indonesia  Edisi  V  Tahun  2014  yaitu kurang lebih 3 nm [5].
Pembuatan  kurva  baku  menghasilkan persamaan  kurva  baku  y  =  0,1548x  +  0,0744 dengan koefisien korelasi (r) sebesar 0,991. Hasil korelasi  yang  mendekati  1  artinya,  terdapat linieritas  yang  baik  antara  konsentrasi  dengan absorbansi,  hal  ini  menunjukkan  semakin meningkatnya  konsentrasi  maka  absorbansinya juga  meningkat. Hubungan  antara  absorbansi terhadap  konsentrasi  akan  linier  (A≈C)  apabila nilai absorbansi larutan antara 0,2-0,8 (0,2 ≤ A < 0,8) atau sering disebut sebagai daerah berlakunya hukum Lambert-Beer dengan lebar sel 1 cm.
Penambahan larutan HCl PA 0,1 N berfungsi untuk mendestruksi senyawa-senyawa yang ada di dalam sampel dan menstabilkan Rhodamin-B agar tidak  berubah  dari  bentuk  terionisasi  menjadi netral dan ditambahkan  15  ml  metanol  berfungsi sebagai  pelarut  karena  Rhodamin-B  bersifat sangat  mudah  larut  dalam  alkohol.  Penambahan natrium sulfat anhidrat berfungsi untuk menjernihkan  larutan,  sehingga  sumber  cahaya dari  spektrofotometri  UV-Vis  dapat  menembus larutan dan dapat diterima oleh detektor.
Hasil  penelitian  4  dari  5  jenis  sampel  saos yang  beredar  pada  penjual  pentol  di  sekitar STIKes Bhakti Husada Mulia Madiun
menunjukkan bahwa sampel yang memiliki kadar Rhodamin-B yang paling tinggi yaitu sampel saus C  dengan  jumlah  kadar  sebesar  2,278  μg/ml  ± 0,005, sedangkan yang memiliki kadar Rhodamin- B  yang  paling  rendah  yaitu  sampel  E  dengan
jumlah kadar sebesar 0,776 μg/ml ± 0,004. Dalam hal  ini  sesuai  dengan  hasil  ekstraksi  yang diperoleh di mana sampel C memiliki warna yang merah merona sehingga kadarnya lebih tinggi dan sampel  E  memiliki  warna orange sehingga kadarnya paling kecil.
Kandungan  Rhodamin-B  pada  sampel  saos tomat yang  ditemukan  perlu  mendapatkan perhatian  lebih  bagi  konsumen,  khususnya  pada penjual  pentol    di  sekitar  STIKes  Bhakti  Husada Mulia  Madiun  mengingat  Rhodamin-B  adalah pewarna  sintetik.  Pemerintah  telah  melarang penggunaan  zat  pewarna  Rhodamin-B  pada makanan  dalam  Peraturan  Menteri  Kesehatan Nomor:  472/Menkes/Per/V/1996  dan  Rhodamin- B  bukan  termasuk  bahan  tambahan  pangan  pada Peraturan  Menteri  Kesehatan  RI  Nomor  033 Tahun  2012.  Namun  masih  banyak  produsen makanan,  yang  menggunakan  zat-zat  pewarna berbahaya  seperti  pewarna  tekstil  atau  cat  yang pada  umumnya  mempunyai  warna  yang  lebih cerah,  lebih  stabil  dalam  penyimpanan,  dan harganya  lebih  murah,  sedangkan  produsen pangan  belum  menyadari  bahaya  dari  pewarna- pewarna tersebut.

## 4 Kesimpulan
Analisis kualitatif Rhodamin-B pada sampel saos secara  KLT  menggunakan  fase  diam  silika  gel GF 254 dan  fase  gerak  n-butanol  :  etil  asetat  : ammonia (10 : 4 : 5) diperoleh hasil bahwa empat dari  kelima  sampel  saos  positif  mengandung Rhodamin-B,  dengan  nilai  Rf  sampel  saos  B sebesar 0,57., sampel saos C sebesar 0,58., sampel saos  D  sebesar  0,58  dan  sampel  saos  E  sebesar 0,58.  Dibandingkan  dengan  standar  Rhodamin-B yaitu  0,55.  Analisis  kuantitatif  Rhodamin-B menggunakan spektrofotometri UV-Vis diperoleh panjang gelombang mksimal 558 nm dengan nilai absorbansi 0,538 A. Persamaan regresi linier yang diperoleh  adalah  y  =  0.1548x  +  0.0744.  Kadar Rhodamin-B yang terdapat pada sampel saos yang beredar  di  sekitar  STIKES  Bhakti  Husada  Mulia Madiun yaitu pada sampel B sebesar 1,216 μg/ml ± 0,004;  sampel C sebesar 2,278 μg/ml ± 0,005; sampel D sebesar 1,681μg/ml ± 0,007 dan sampel E sebesar 0,776 μg/ml ± 0,004 di mana sampel C memiliki  kadar  Rhodamin-B  paling  tinggi dibandingkan dengan sampel B, D dan E.

## Daftar Pustaka
[1].  Giovani MB. Analisis Zat Pewarna Rhodamin  B  Pada  Saos  Bakso  Tusuk  Yang Beredar Di Sekitar Kampus Universitas Sam Ratulangi Manado. Pharmacon. 2017;6(4).
[2].  Winarti A. Analisis Kadar Rhodamin-B Pada Saus  Dengan  Metode  Spektrofotometri  Uv- Vis. Karya Tulis Ilmiah. 2019;
[3].  Samosir  AS,  Bialangi  N,  Iyabu  H.  Analisis Kandungan  Rhodamin  B  pada  Saos  Tomat yang Beredar di Pasar Sentral Kota Gorontalo
dengan Menggunakan Metode Kromatografi Lapis Tipis ( KLT ). J Entropi. 2018;13(1):4.
[4].  Mamoto  LV,  Citraningtyas  FG.  Analisis rhodamin b pada lipstik yang beredar di pasar kota manado. J Ilm Farm. 2013;2(02):61–7.
[5].  Departemen  kesehatan  Republik  Indonesia. Farmakope  Indonesia  Ed  V.  V.  Jakarta: Kementerian Kesehatan RI; 2014. Jakarta.
[6].  Dewi Sri P. Pengaruh Rhodamine B Peroral Dosis Bertingkat Selama 12 Minggu terhadap Gambaran Histomorfometri Limpa. 2013