Suplementasi Somatotropin Untuk Memperbaiki Performan Tubuh Tikus Umur 6 Bulan dan 1 Tahun
(Somatotropin Supplementation to Improve Body Performance of Six- Month and One-Year Old Male Rats)
La Eddy Dosen Jurusan Biologi Fakultas MIPA Universitas Pattimura Email : ternate76@yahoo.com

## Abstract
Aging is associated with a decrease in somatotropin or growth hormone (GH) secretion by anterior  pituitary.  Somatotropin  affects  the  growth  of  somatic  cells.  The  objective  of  this experiment was to study the effects of somatotropin suplementation on body performances of aged male  rats.  The  experimental  rats  were  assigned  into  a    randomized  block  design  with  a  factorial arrangement. The first factor was age with 2 levels (6 months and 1 year).The second factor was dosage of somatotropin injection with 2 levels (0 and 9 mg/kg BW day). The third factor was the duration of somatotropin   injection  with 2 levels (3 and 6  weeks). The  fourth  factor  was time of slaughtering after somatotropin injection with 2 levels (1 and 14 days). Parameters measured were body  weight,  food  consumption,  total  protein,  total  fat.  The  result  showed  that  somatotropin  has significant effects on body weight, food consumption, total protein, total fat.  It is concluded that somatotropin can body performance of six-months and one-year old male rats.
Key Words: Somatotropin, Body Performace, Rat

## PENDAHULUAN
Hormon pertumbuhan (growth hormone atau GH) merupakan hormon yang disekresikan  oleh  sel  somatotrof  pituitari anterior dengan kontrol hipothalamus, berupa  polipeptida  tunggal  dengan  massa molekul 22 kDa (Bolander, 1994).
Penurunan  kemampuan  sintesis  protein dengan  bertambahnya  usia  diakibatkan  oleh penurunan  sekresi  GH  (Durebex et  al., 1999).  Pada  manusia  umur  20  tahun produksi  GH  turun  14%,  setelah  umur  60 tahun turun 75% atau lebih (Cranton, 2005).
Pemberian  GH  pada  hewan  coba maupun pada manusia yang sudah memasuki  usia  tua  dapat  meningkatkan sintesis  protein  otot  rangka,  meningkatkan fungsi  imun,  meningkatkan  massa  tubuh tidak  berlemak,  dan  ketebalan  kulit  (Klatz dan  Carol,  1998). Tujuan  penelitian  ini adalah untuk
mempelajari khasiat suplementasi somatotropin dalam memperbaiki  berat  badan  dan  komposisi tubuh  tikus  umur  6  dan  12  bulan  dan Manfaat  penelitian  ini  adalah  sebagai  bahan informasi dasar untuk penggunaan somatotropin pada manusia dan hewan.

## METODE PENELITIAN

## Protokol Penelitian
Penelitian  menggunakan  tikus  jantan strain  wistar  48  ekor  dengan  2  dosis penyuntikan  somatotropin  pada  2  kelompok umur  yakni  kelompok  umur  6  bulan  dan  12 bulan. Dosis yang digunakan adalah 0 dan 9 mg/kgBB/hari, disuntik secara intramuskuler. Mula-mula tikus diadaptasikan  dan  diberikan  pakan  dan minum secara ad libitum. Setelah penyuntikan  selama  3  minggu  pada  24  ekor tikus  sesuai  dosis,  sebanyak  12  ekor dieutanasia  untuk  pengambilan  darah  dan pembedahan  sedangkan  12  ekor  sisanya dibiarkan selama 2 minggu tanpa penyuntikan. Hal yang sama dilakukan pada kelompok  tikus  yang  disuntik  selama  6 minggu. Rancangan percobaan yang digunakan  adalah  rancangan  acak  lengkap (RAL)  dengan  pola  faktorial  2  x  2  x  2  x  2. Faktor  pertama  adalah  umur  tikus  yang terdiri atas dua level yaitu umur 6 bulan dan 1  tahun.  Faktor  kedua  adalah  dosis penyuntikan  somatotropin  yang  terdiri  atas dua  level  yaitu    0  mg/kgBB/hari,  dan  9 mg/kgBB/hari.  Faktor  ketiga  adalah  lama penyuntikan yang terdiri atas dua level yaitu selama  3  dan  6  minggu.  Faktor  keempat adalah  waktu  pembedahan  yang  terdiri  atas dua  level  yaitu  0  dan  2  minggu  setelah penyuntikan somatotropin terakhir.
Peubah    yang  diamati  dan  teknik pengukurannya
Bobot badan diukur selama penelitian  dan  konsumsi  pakan  didapatkan dari  jumlah  pakan  yang  diberikan  dikurangi dengan  pakan  sisa.  Komposisi  tubuh  terdiri atas  analisis  kadar  protein,  lemak  dan mineral  pada  karkas.  Pengukuran  kadar protein  dilakukan  dengan  cara  menimbang kurang  lebih  0.5  g  karkas  yang  sudah dihaluskan  dan  memasukkannya ke  dalam labu Khjehdal 100 mL. Kemudian
ditambahkan  kurang  lebih  1  g  campuran selenium dan 10mL  H 2 SO 4 pekat dan Labu Khjehdal  digoyang  sampai  semua  terbasahi oleh  H 2 SO 4. Setelah  itu,  didestruksi  dalam lemari  asam  sampai  jernih  dan  dibiarkan sampai  dingin lalu  dituang  ke  dalam  labu ukur  100  mL  sambil  dibilas  dengan  air suling.  Larutan  dibiarkan  dingin  kemudian volumenya  dipenuhi  sampai  tanda  garis dengan  air  suling.  Setelah  itu  disiapkan penampung    yang    terdiri    atas  10  mL H 3 BO 3 2%    dan    4  tetes  larutan indikator campuran  dalam  Erlenmeyer  100  mL. Sebanyak  5  mL  larutan  contoh  dipipet  dan dimasukkan ke  dalam labu  destilasi.
Sebanyak 5 mL NaOH 30% dan 100 mL air suling  dicampurkan  dan  disuling  hingga volume penampung menjadi kurang lebih 50
mL.  Ujung  penyuling  dibilas  dengan  air suling  lalu  penampung  beserta  isinya dititrasi  dengan  larutan  HCl  atau  H 2 SO 4 0.0222 N. Perhitungan :
V1 x N x  0.014 x  6.25 x  P x 100 Kadar = Protein g contoh
Keterangan :   V1   =  Volume titrasi contoh N    =  Normalitas larutan HCL atau H 2 SO 4 0.0222 P    =  Faktor pengenceran (100/5) Pengukuran  kadar  lemak  dilakukan dengan  cara  menimbang  kurang  lebih  0.5 g karkas  yang  sudah  dihaluskan  kemudian dimasukkan    ke  dalam  tabung  reaksi berskala  10  mL.  Kemudian  ditambahkan khloroform  mendekati  skala,  ditutup  rapat lalu  dikocok  dan  dibiarkan  bermalam. Volume larutan disamakan pada tanda skala 10  mL  dengan  pelarut  lemak  yang  sama kemudian dikocok hingga homogen,
selanjutnya disaring dengan kertas tissue/kertas  saring  ke  dalam  tabung  reaksi. Sebanyak  5  mL  dipipet  ke  dalam  cawan yang  telah  diketahui  beratnya  (ag)    dan dipanaskan  dengan  oven  pada  suhu  100 0 C selama 3 jam atau dibiarkan bermalam. Setelah itu, dimasukkan ke dalam eksikator kurang lebih 30 menit lalu ditimbang (bg). Perhitungan : P (b – a)
Kadar lemak  =                           x 100% berat contoh P = Pengenceran = 10/5
Pengukuran  kadar  mineral  dilakukan dengan cara  mencuci bersih cawan porsolen dengan  air  kemudian  dikeringkan  dalam oven  pada  suhu  105 0 C  selama  1  jam, selanjutnya  didinginkan  dalam  eksikator selama  15  menit  dan menimbang    beratnya (X).  Sebanyak  3  g  karkas  yang  sudah dihaluskan  dan  dimasukkan  ke  dalam porsolen (Y). Cawan beserta isinya dipijarkan di atas nyala bunsen sampai tidak berasap lagi. Kemudian cawan ini dimasukkan  ke  dalam  tanur  listrik  untuk dibakar atau diabukan pada suhu 400-800 0 C. Sesudah  abu  menjadi  putih,  seluruhnya diangkat  dan  didinginkan  dengan  cara memasukannya ke dalam dessikator. Setelah 1  jam  cawan  ditimbang  kembali  dengan
berat  (Z)  Penentuan  kadar  mineral  atau  abu dengan menggunakan rumus:
(Z-X)  x  100% Kadar abu/mineral = Y

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## HASIL
Hasil pengukuran rataan bobot badan tikus  yang  diukur  setiap  minggu  disajikan pada  Gambar  1.  Bobot  badan  tikus  yang diberikan  suntikan  somatotropin  pada  umur 6 bulan maupun 1 tahun cenderung naik bila dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol. Setelah  dibiarkan selama  2  minggu  tanpa penyuntikan  somatotropin,  bobot  badan tikus  menurun    baik  pada  umur  6  bulan maupun 1 tahun.
Hasil  pengukuran  konsumsi pakan  disajikan  pada  Tabel  1.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa tikus umur 1 tahun  mengkonsumsi  pakan  lebih  banyak dibandingkan  tikus  umur  6  bulan  sebesar
17,9%  terlepas  dari  faktor  dosis,  lama penyuntikan, dan waktu pengambilan contoh. Penyuntikan somatotropin menyebabkan  tikus  mengkonsumsi  pakan lebih  banyak  dibandingkan  dengan  kontrol sebesar  26,5%  terlepas  dari  faktor  umur, lama  penyuntikan,  dan  waktu  pengambilan contoh.
Hasil  pengukuran  kadar  protein, lemak  dan  mineral  pada  karkas  disajikan pada Tabel 2. Hasil percobaan menunjukkan bahwa penyuntikan somatotropin meningkatkan kadar protein, tetapi
menurunkan kadar lemak dan meningkatkan kadar abu pada tikus umur 6 dan 12 bulan.
Gambar 1. Rataan bobot badan tikus yang diukur setiap minggu setelah peyuntikan somatoropin.
Tabel 1. Rataan  konsumsi pakan tikus percobaan selama penelitian
Parameter Konsumsi  Pakan (g) Umur LP WPC Dosis 0 mg/kgBB/hari 9 mg/kgBB/hari 1 15,2±1,5 cde 18,3±1,4 bc 3 2 14,2±1,2 ab 16±3,6 bcd TR 14,7 17,22 6 Bln 1 11,4±2,8 de 16,7±1,2 bc 6 2 10,4±0,9 e 15,57±1m3 cd TR 10,9 16,2 TR 12,8 16,7 1 18,4±2,8 bc 23,17±2,7 a 3 2 15,1±1,2 cde 16±1,2 bcd TR 16,73 19,58 12 Bln 1 15,1±2,1 bcd 16,7±2,5 bc 6 2 13,6±2 cde 20,97±1,5 ab TR 14,33 18,33 TR 15,3 18,9
Keterangan: LP=Lama Penyuntikan (3 minggu dan 6 minggu), WPC=Waktu Pengambilan Contoh (1 dan 2), TR=Total  Rataan.  Huruf  yang  sama  pada  baris  dan  kolom  yang  berbeda  menunjukkan perbedaan yang nyata (P<0,05) sesuai parameter.
0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 1 2 3 4 5 6 7 8 Minggu ke B o b o t B a d a n ( g ) Dosis 0, umur 6 bulan
Dosis 9,umur 6 bulan
Dosis 0, umur 1 tahun Dosis 9,umur 1 tahun
Tabel 2. Rataan  kadar protein, lemak, dan mineral pada karkas tikus percobaan
Parameter Kadar protein (%) Kadar lemak (%) Kadar mineral (%) Umur LP Dosis (mg/kgBB/hari) 0 9 0 9 0 9 6 Bln 3 62,2±0,01 bc 67,3±3 a 7,7±1,5 a 5,7±1,3 b 15,9±0,6 ab 17,7±0,7 a 6 64,6±0,7 abc 66,8±2 ab 9,1±0,2 a 5,5±0,5 b 14,4±0,9 abc 14,7±0,3 ab TR 63,4 67,0 8,4 5,6 15,1 16,2 3 64,9±0,6 abc 65,9±2 ab 7,7±1,7 a 5,4±0,3 b 15,0±0,7 abc 15,9±0,5 abc 12 Bln 6 63,8±1,8 bc 67,3±1,2 a 8,3±0,03 a 5,4±0,7 b 1,.4±0,1 bc 15,5±1,3 a TR 64,3 66,6 8,0 5,4 15,7 15,7
Keterangan:  LP=Lama  Penyuntikan  (3  minggu  dan  6  minggu),  TR=Total  Rataan.  Huruf  yang sama  pada  baris  dan  kolom  yang  berbeda  menunjukkan  perbedaan  yang  nyata (P<0,05) sesuai parameter.

## PEMBAHASAN
Penuaan  menyebabkan  penurunan berbagai  fungsi  tubuh. Salah  satu  adalah penurunan  sekresi  hormon  pertumbuhan. Hormon  ini  bekerja  mempengaruhi  sel somatik  atau  sel  tubuh  sehingga  bisa digunakan  sebagai  terapi  untuk menunda penuaan  (Klatz  dan  Kahn, 1998).  Hasil percobaan ini menunjukkan bahwa penyuntikan  somatotropin  meningkatkan bobot  badan  dan  konsumsi  pakan,  hal  ini karena  somatotropin  memacu  metabolisme dan mempengaruhi diferensiasi sel-sel tubuh.  Velasco et  al.  (1998)  menyatakan bahwa  penuaan  sangat  berhubungan  dengan berat  badan,  secara  umum  menyangkut penumpukan lemak (lean body feat),  massa tubuh (lean  body  mass),  dan  komposisi tulang.
Peningkatan  konsumsi  pakan  pada tikus
yang
disuntik somatotropin
berhubungan  dengan  pengaturan  nafsu makan  di  hipotalamus  serta  hormon  lain yang  mengatur  keseimbangan  enegri  tubuh seperti  glukagon  dan  insulin.  Somatotropin berperan  dalam  pengaturan  pusat  lapar  di arcuate  nucleus dan  pusat  kenyang  di ventromedial  nucleus. Scott et  al. (2005) menyatakan  bahwa  interaksi  kedua  daerah otak  inilah  yang  mengatur  nafsu  makan.
Selain
itu somatotropin
mungkin
meningkatkan  kerja  lambung  sehingga makanan  cepat  tercerna  dan  kemudian menimbulkan  rasa  lapar  akibat  kontraksi lambung yang kosong. Popovic et al. (2005) menyatakan
bahwa lambung juga mensekresikan  hormon  ghrelin  yang  efek fisiologinya  merangsang  pusat  lapar  dan sekresi GH.
Peningkatan konsumsi
pakan menyebabkan  peningkatan  bobot  badan, tetapi  peningkatan  bobot  badan  ini  lebih disebabkan  oleh  massa  tubuh (lean  body mass) karena hasil pengukuran kadar protein dan  kadar  lemak  menunjukkan  bahwa penyuntikan  somatotropin  meningkatkan kadar protein dan menurunkan kadar lemak. Hal  ini  mengungkapkan  bahwa  kenaikan bobot badan yang terjadi karena peningkatan  massa  tubuh (lean  body  mass) dan  bukan  karena  penumpukan  lemak. Selain itu somatotropin  meningkatkan  kadar mineral tubuh.
Penyuntikan  hGH  pada  manusia yang  sudah  berumur  tua  selama  6  bulan menyebabkan  penurunan  total  lemak  tubuh bagian  perut  dan  lemak  tubuh  secara keseluruhan (lean body fat) sehingga hal ini sangat  baik  dalam  terapi  antipenuaan (Muzner et  al.,  2001).  Giannoulis et  al. (2006)  menyatakan  bahwa  terapi  hGH dengan  dosis  rendah  juga  meningkatkan massa  tubuh.  Sebelumnya Longorbadi et al.(2000)  menyatakan  bahwa  terapi  hGH pada pasien GHD (growth hormone deficiency)  berpengaruh  pada  komposisi tubuh  dengan  menurunnya  total  lemak tubuh,  peningkatan  massa  tubuh  (lean  body mass)  dan  mempengaruhi  metabolisme tulang.

## SIMPULAN
Setelah  penelitian  dilakukan  dapat disimpulkan bahwa
suplementasi
somatotropin  dapat  memperbaiki  berat badan  dan  komposisi  tubuh  tikus  jantan umur 6 dan 12 bulan.

## DAFTAR PUSTAKA
Bolander FF.1994. Molecular Endocrinology. Academic Press,America. Cranton EM. 2005.Human Growth Hormone  Reverse  to  Aging.  Mount
Rainier Clinic. Inc. Yelm Washinton.
Durebex  CV,  Pierrete  G,  Veronique  C, Natalie G, Josette A.1999. Peripheral injection of growth hormone stimulates  protein  intake  in  aged male and  female Lou rat. AJP-Endo. 276:1105-1111.
Giannoulis GM, Peter HS, Margot U, Louise B, Claire P, Martin W, Carolyn VM, Clare  B,  Finbarr  CM.2006. The effects  of  growth  hormone  and/or testosterone  in  healthy  elderly  men  : a randomized controlled trial. J.Clin.Endocrinol.&  Metabol. 91: 477-484.
Klatz R, Carol K. 1998. Growth Young with hGH.  Harper  Parennial.  New  York. USA.
Longorbadi  S,  Keay  N,  Ehrnborg  C,
Cittadini  A,  Rosen  T,    Dall  R,
Boroujerdi  MA,  Bassett  EE,  Healy
ML,  Pentecost  C,  Wallace  JD,
Powrie  J,    Jorgensen  JO,  Sacca L.2000.  Growth  hormone  (GH) effects on bone and collagen turnover  in  healthy  adults  and  its potential as a marker of GH abuse in sports:  A  Double  Blind,  Placebo- Controlled  Study. J.Clin.Endocrinol
& Metabol. 85 : 1505-1512.
Munzer T, Harman SM, Paul HS, Shapiro E, Colleen C, Michele FB, Thomas ES, Kieran GO, Katherine MP, Carol SC, John  DS,  Marc  RB.2001. Effects  of GH and/or sex steroid administration on  abdominal  subcutaneous  and visceral  fat  in  healthy  aged  women and men. J.Clin.Endocrinol. & Metabol. 86:3604-3610.
Popovic V, Dragana M, Sandra P, Predrag P, Marina  D,  Mirjana  D,  Svetozar  D, Dragan  M,  Goran  C,  Jovana  G,
Carlos  D,  Felipe  FC.2005.Low plasma ghrelin level in gastrectomized patients is accompanied by enhanced sensitivity to  the  ghrelin- induced  growth hormone  release J.Clin.  Endocrinol. & Metabol. 90: 2187-2191