## DETEKSI DINI MIKROFILARIASIS PENYEBAB KAKI GAJAH PADA KONTAK SERUMAH YANG BELUM MENIMBULKAN GEJALA BERBASIS MOLEKULER
Ka’bah 1* , Zulkarnain 2
1 Prodi D-IV Teknologi Laborotaorium Medis Fakultas Teknologi Kesehatan Universitas Megarezky Jl. Antang Raya No. 43, Makassar, Sulawesi Selatan, Indonesia. 90234 *E-mail: kabah.paharu@gmail.com
2 Jurusan Biologi Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri Alauddin Makassar Jl. Sultan Alauddin No. 63, Gowa, Sulawesi Selatan, Indonesia. 92113
Abstrak: Filariasis (penyakit kaki gajah) merupakan penyakit menular yang banyak  terjadi  di  daerah  tropis  yang  disebabkan  oleh  cacing Mikrofilaria. Penularan penyakit ini terjadi melalui gigitan nyamuk sebagai vektor dalam penyebaran penyakit tersebut. Vektor penularan Filariasis di Indonesia yang telah teridentifikasi  adalah spesies dari genus Anopheles, Culex, Mansonia, Aedes dan Armigras. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengidentifikasi Mikrofilariasis pada  kontak  serumah  dengan  metode Polymerase  Chain Reaction. Pada penelitian ini digunakan pasien kontak serumah karena kontak serumah merupakan keluarga terdekat penderita filariasis yang tinggal dalam satu  rumah  dalam  jangka  waktu  tertentu  yang  berpotensi  tertular Mikrofilariasis akibat  adanya  gigitan  nyamuk  dari  penderita.  Penelitian  ini merupakan  penelitian  observasional  dengan  jumlah  sampel  sebanyak  32 sampel  kasus.  Sampel  kasus  merupakan  sampel  dari  masyarakat  kontak serumah  di  wilayah  Kabupaten  Pangkajene  Kepulauan.  Pada  penelitian  ini digunakan  primer  spesifik  untuk  mengidentifikasi Mikrofilariasis. Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  jumlah  sampel  yang  telah  dilakukan pengujian, didapatkan 5 sampel positif yang ditandai dengan munculnya pita pada saat divisualisasikan di GelDoc dengan 100bp dan 120bp sehingga dapat disimpulkan bahwa ditemukan Mikrofilariasis pada kontak serumah dengan metode molekuler.
Kata Kunci : mikrofilariasis ; molekuler; kontak serumah
Abstract: Filariasis (Elephantiasis disease) is an infectious disease that often occurs  in  the  tropics  caused  by  Microfilariae  worms.  Transmission  of  this disease occurs through mosquito bites as a vector in the spread of the disease. The vectors of filariasis transmission in Indonesia that have been identified are species of the genera Anopheles , Culex , Mansonia , Aedes and Armigras . This study  aims  to  identify  microfilariasis  in  household  contacts  using  the polymerase chain reaction method. In this study,  household contact patients were  used  because  household  contacts  are  the  closest  family  of  filariasis sufferers  who  live  in  one  house  for  a  certain  period  of  time  who  have  the potential  to  be  infected  with  microfilariasis  due  to  mosquito  bites  from sufferers. This study is an observational study with a sample of 32 cases. The case  sample  is  a  sample  of  community  contact  at  home  in  the  Pangkajene
Islands  Regency.  In  this  study,  specific  primers  were  used  to  identify microfilariasis. The results showed that the number of samples that had been tested, obtained 5 positive samples which were indicated by the appearance of bands  when  visualized  in  GelDoc  with  100bp  and  120bp  so  that  it  can  be concluded  that  microfilariasis  was  found  in  household  contact  with  the molecular method.
Keywords: household contact; microfilariasis; molecular

## PENDAHULUAN
emakin  meningkatnya  kejadian filariasis di  wilayah  Kabupaten  Pangkajene Kepulauan  (Pangkep)  menjadi  masalah  kesehatan  baru  bagi  Dinas  Kesehatan Pemerintah Provinsi Sulawesi Selatan. Semakin meningkatnya kejadian filariasis dari tahun ke tahun sehingga pemerintah provinsi mengambil langkah eliminasi filariasis tahun  2020  dengan  membagikan  obat  gratis  pada  masyarakat  penderita filariasis ,  data terbaru menunjukan bahwa penderita filariasis masih tergolong tinggi, sehingga dengan melakukan  penelitian  ini  peniliti  bermaksud  untuk  mendeteksi mikrofilariasis guna mengungkap pola peyebaran filariasis kontak lingkungan serumah. Di  Indonesia  penyakit filariasis tersebar  luas  hampir  di  seluruh  provinsi. Berdasarkan hasil survei pada tahun 2000 tercatat sebanyak 1.553 desa di 647 puskesmas tersebar 231 kabupaten provinsi sebagai lokasi yang endemis, dengan jumlah kasus kronis 6.233  orang.  Hasil  survei  laboratorium  melalui  pemeriksaan  darah  kapiler,  rata-rata mikrofilaria  rate (Mf rate )  3,1  %  berarti  sekitar  6 juta  orang  mempunyai  risiko tinggi untuk ketularan karena penularan nyamuk tersebar luas (Dewi, 2018).
Pada tahun 2018, terdapat 10.681 kasus filariasis tersebar di 34 provinsi. Angka ini menurun  dibandingkan  angka  sebelumnya.  Hal  ini  dikarenakan,  beberapa  kasus dilaporkan  meninggal  dunia  dan  adanya  perubahan  diagnosis  sesudah  dilakukan konfirmasi kasus klinis kronis yang dilaporkan tahun sebelumnya (Kemenkes RI, 2019). Kasus filariasis di Indonesia sejak tahun 2003 sampai tahun 2009 mengalami peningkatan sebanyak  5.194  kasus.  Jumlah  kasus  klinis filariasis yang  dilaporkan  pada  tahun 2009 adalah yang tersebar di 401 kabupaten/kota. Filariasis di Indonesia disebabkan oleh tiga spesies mikrofilaria ,  yaitu Wuchereria  bancrofti,  Brugia  malayi, dan Brugia  timori . Mikrofilaria mempunyai ciri khas dalam reproduksinya mikrofilaria tidak mengeluarkan telur  tetapi  mengeluarkan mikrofilaria (larva  cacing)  dan  ditularkan  oleh Arthropoda (nyamuk).  Daerah  endemis filariasis pada  umumnya  terdapat  di  daerah  yang  padat penduduk (Mutiara & Anindita, 2016).
Keadaan lingkungan sangat berpengaruh terhadap cacing filaria , biasanya endemis di daerah hutan dan rawa seperti Sumatera, Sulawesi, Nusa Tenggara Timur, dan Irian Jaya. Mikrofilaria rate tertinggi di Indonesia sejak tahun 2001 terdapat di Provinsi Aceh, Nusa  Tenggara  Timur  dan  Sulawesi  dengan  kisaran  antara  6,9-11,6 Mikrofiaria  rate . Hasil survei cepat/metode pemetaan cepat (Rapid Mapping) tahun 2000 oleh Departemen Kesehatan melaporkan bahwa di Aceh terdapat 1908 kasus, di NTT terdapat 1.706 dan Sulawesi Selatan 1.564 kasus kronis filariasis . Ketiga provinsi tersebut mewakili daerah lain dengan kasus kronis tersebar di Indonesia (Irianto, 2014).
Diagnosis  molekuler  merupakan  metode  diagnosis  yang  bertujuan  untuk memahami  mekanisme  molekuler  suatu  penyakit  pada  setiap  individu  pasien. Pemeriksaan  menggunakan  metode  berbasis  molekuler  adalah  teknik  yang  dapat
S
digunakan  untuk mendeteksi  parasit  melalui  urutan  basa  nitrogen  (DNA)  suatu  parasit dengan  menggunakan  reaksi  rantai  polymerase  ( Polymerase  Chain  Raction/ PCR). Teknik  ini  mampu  memperbanyak  DNA  sehingga  dapat  digunakan  untuk  mendeteksi parasit pada cryptic infection (Sutanto et al., 2008).
Keunggulan  menggunakan  metode Polymerase  Chain  Reaction (PCR)  memiliki tingkat spesifitas dan sensitivitas yang sangat tinggi dibanding pemeriksaan metode yang lain  hal  ini  dikarenakan  pemeriksaan  metode  PCR  mengidentifikasi  DNA mikrofilaria langsung  dengan  cara  memperbanyak  atau  menggandakan  potongan-potongan  DNA sebelum  dilakukan  pemeriksaan.  Hal  ini  berbeda  dengan  prinsip  pemeriksaan  apusan darah tepi dengan menggunakan darah kapiler dan pengamatan menggunakan mikroskop yangmana tekniknya membutuhkan waktu yang lama dan sangat memungkinkan adanya pelaporan  hasil  yang  negatif  palsu.  Berdasarkan  latar  belakang  tersebut,  peneliti bermaksud untuk melakukan penelitian tentang deteksi mikrofilariasis kontak lingkungan serumah  dengan  penderita,  guna  mengungkap  pola  penularan  fiariasis  secara  dini  dan cepat  menggunakan  metode  PCR  untuk  meminimalisir  adanya  pelaporan  hasil  yang keliru. Hal ini didasarkan pada kualitas pemeriksaan metode PCR yang memiliki tingkat spesifitas dan sensitivitas yang sangat tinggi.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Mei-Juli 2021. Lokasi pengambilan sampel pada penelitian ini adalah di rumah penduduk yang memiliki riwayat penderita kaki gajah yang  terletak  di  Kabupaten  Pangkajene  Kepulauan,  sedangkan  pengolahan  sampel dilaksanakan di Laboratorium Molekuler HUM RC Universitas Hasanuddin
Populasi  dalam  penelitian  ini  adalah  keluarga  penderita  penyakit filariasis yang memiliki  kontak  serumah  dengan  penderita  yang  terletak  di  Kabupaten  Pangkajene Kepulauan. Sampel dalam penelitian ini adalah sampel darah keluarga yang menderita filariasis sebanyak 20 sampel di Kabupaten Pangkajene Kepulauan. Prosedur kerja pada penelitian ini meliputi:
1. Pra-Analitik
Sampel  dari  penelitian  ini  adalah  menggunakan  dara  vena  keluarga  penderita filariasis yang memiliki kontak  serumah dengan penderita yang terletak di Kabupaten Pangkajene  Kepulauan  yang  masing-masing  sebanyak  2–3  mL  yang  ditampung menggunakan  tabung  EDTA.  Data  pasien  dikumpulkan  berdasarkan  hasil kuisioner/wawancara.
2. Analitik
Untuk ekstraksi DNA, sebanyak 200ul sampel darah ( Whole blood ) dimasukkan ke dalam  tabung mikrocentrifuge 1,5  ml  steril  lalu  ditambahkan  20ul  Proteinase  K, dihomogenkan  dengan  cara pipetting ,  kemudian  diinkubasi  pada  60 0 C  selama  5  menit kemudian tambahkan 200ul buffer GSB (Geneid) kemudian vortex dan inkubasi kembali pada suhu 60 0 C selama 2 menit, selanjutnya tambahkan etanol absolut (96%) dan vortex selama 10 detik, pindahkan semua campuran tersebut ke dalam spin colomn , sentrifugasi pada kecepatan 14.000 xg selama 1 menit. Buang collection tube yang berada di bawah spin column ganti dengan collection tube yang baru kemudian tambahkan 400ul buffer W1 lalu sentrifugasi selama 30 detik dengan kecepatan 14.000 xg kemudian buang cairan yang ada pada collection tube , kemudian tambahkan 600ul was buffer (Geneid) sentrifuge selama 30 detik, lalu buang cairan pada collection tube dan sentrifuge kembali selama 3 menit buang collection tube dan letakkan mikrocentrifuge (1,5) steril pada bagian spin colomn . Selanjutnya tambahkan 100ul elution buffer diamkan selama 3 menit kemudian
sentrifugasi dengan kecepatan 14.000 xg selama 30 detik, cairan yang mengandung DNA yang  tertampung  pada  lubang mikrocentrifuge disimpan  pada  -4 0 C  untuk  digunakan sebagai templet PCR.
3. Mix PCR Menyiapkan tube 0,2  mL  dan  pipetkan  12,3ul  PCR mix ke  dalam tube 0,2ul kemudian  menambahakan primer  forward dan reverse sebanyak  masing-masing  0,5ul setelah itu  menambahkan sampel sebanyak 2,5ul lalu menambahkan 9ul sehingga total keseluruhan 25ul.
4. Amplifikasi
Kondisi  amplifikasi  terdiri  dari  pra  denaturasi  94⁰C  selama  5  menit  1  siklus, denaturasi 94°C selama 15 detik kemudian dilanjutkan dengan anneling 55°C selama 30 detik, dan ekstensi pada suhu 72°C selama 30 detik diulang sebanyak 35 siklus. Ekstensi final dilanjutkan pada suhu 72°C selama 10 menit.
5. Pemeriksaan Elektroforesis
Membuat agarose dalam gelas Erlenmeyer sebanyak 100 ml larutan TE kemudian menambahkan  2  gr  gel  agarose,  0,5  ul  ethidium  bromide  dan  memanaskan  dalam microwave sampai mendidih, setelah itu diamkan beberapa saat sampai suhunya sekitar 60 0 C, kemudian tuangkan dalam cetakan agar yang menggunakan sisir sebagai well -nya, diamkan sekitar 1 jam sampai mengeras. Kemudian campurkan 10ul DNA sampel yang telah diPCR dengan 1ul loading buffer dengan pipetting kemudian memasukkan ke dalam well setiap  sampel  dan  penanda,  bila  semua  sampel  sudah  dimasukan  jalankan elektroforesisnya yang telah berisi TBE dengan menyalakan listrik dari negatif ke positif pada  400  mA,  100volt,  selama  45  menit.  Kemudian  diamati  pada  lampu  UV  ( UV transiluminator ).  Hasil  amplifikasi  DNA mikrofilaria ditandai  dengan  adanya band berwarna (pita DNA) dengan ukuran target 500 bp.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  visualisasi  elektroforesis  dan  amplifikasi  DNA  dengan  teknik Polymerase Chain  Reaction (PCR)  terhadap  sampel  darah  keluarga  pasien  penderita filariasis ditunjukkan pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil pemeriksaan sampel darah keluarga pasien penderita filariasis No Kode Keterangan Hasil 1 M Marker + 2 1 Sampel 1 - 3 2 Sampel 2 - 4 3 Sampel 3 - 5 4 Sampel 4 - 6 5 Sampel 5 - 7 6 Sampel 6 - 8 7 Sampel 7 - 9 8 Sampel 8 - 10 9 Sampel 9 - 11 10 Sampel 10 + 12 11 Sampel 11 - 13 12 Sampel 12 - 14 13 Sampel 13 + 15 14 Sampel 14 - 16 15 Sampel 15 -
17 16 Sampel 16 - 18 17 Sampel 17 + 19 18 Sampel 18 + 20 19 Sampel 19 - 21 M Marker + 22 20 Sampel 20 - 23 21 Sampel 21 - 24 22 Sampel 22 - 25 23 Sampel 23 - 26 24 Sampel 24 - 27 25 Sampel 25 - 28 26 Sampel 26 - 29 27 Sampel 27 - 30 28 Sampel 28 - 31 29 Sampel 29 - 32 30 Sampel 30 - 33 31 Sampel 31 + 34 32 Sampel 32 -
Gambar  hasil  penelitian  identifikasi mikrofilariasi kontak  serumah  di  Kabupaten Pangkajene Kepulauan ditunjukkan pada Gambar 1 dan Gambar 2.
Gambar 1. Hasil visualisasi pita DNA pada sampel 1-19
Gambar 2. Hasil visualisasi pita DNA pada sampel 01-32
54_ Teknosains: Media Informasi Sains dan Teknologi, Volume 16, Nomor 1, Januari-April 2022, hlm. 49-56
Berdasarkan  hasil  visualisasi  pada  Gambar  1  dan  2  merupakan marker dengan ukuran  100bp. Marker DNA  berfungsi  sebagai  penanda  posisi  molekul  DNA  yang bermigrasi untuk menentukan perkiraan ukuran basa-basanya. Penanda digunakan untuk menetukan  ukuran  DNA  hasil  amplifikasi.  Pada  sampel  1-9  didapatkan  hasil  negatif terlihat  bahwa  tidak  munculnya  pita  pada  saat  divisualisasikan  di  bawah GelDoc , sedangkan sampel 10 didapatkan hasil positif hal ini ditandai dengan munculnya pita pada saat  divisualisasikan  dengan  ukuran  120bp.  Sampel  11-12  negatif  terlihat  bahwa  tidak adanya muncul pita pada saat divisualisasikan dibawah GelDoc , sampel 13 positif yang ditandai dengan munculnya pita pada saat divisualisasikan dengan ukuran 120bp, sampel 14-16  didapatkan  hasil  negatif  terlihat  bahwa  tidak  adanya  muncul  pita  pada  saat divisualisasikan dibawah GelDoc , sampel 17-18 positif yang ditandai dengan munculnya pita  pada  saat  divisualisasikan  dengan  ukuran  120bp,  dan  sampel  19  negatif  terlihat bahwa tidak adanya muncul pita pada saat divisualisasikan di bawah GelDoc .
Pengambilan  sampel  pada  penelitian  ini  di  wilayah  Kabupaten  Pangkajene Kepulauan, sampel darah vena diambil pada malam hari 20:00 hingga 00:00 Wita dini hari, hal ini karena filariasis melakukan aktivitas di dalam peredaran darah pada malam hari (Wahyono,2010). Sampel dimasukkan ke dalam cool box , dan dikirimkan ke Kota Makassar  untuk  dilakukan  identifikasi.  Preparasi  awal  sampel  yaitu  200  ul,  20  ul proteinase K dan diinkubasi 5 menit pada suhu 60°C, proteinase K untuk menghancurkan protein yang dapat menghambat proses amplifikasi. Selanjutnya ditambahkan 200 ul GSB atau lisis buffer untuk melisiskan dinding sel, selanjutnya dtambahkan etanol 96% 100ul untuk memudahkan presipitasi DNA dan Komponen bukan DNA akan berada di bagian endapan,  setelah  itu  dipindahkan  ke  dalam  tabung  baru spin  column steril  1,5  ml. ditambahkan W1 400 ul, dan disentrifugasi kosong selama 1 menit dalam 13.000 rpm, buang endapan di bawah spin column , tambahkan 600 ul W2, centrifuge 1 menit 13.000 rpm dibuang endapannya, selanjutnya centrifuge kosong selama 3 menit dalam 13.000 rpm. Setelah itu pipet elution buffer 200 ul dan dicentrifuge 3 menit dalam 13.000 rpm. Selanjutnya dilanjutkan dengan MIX PCR dengan cara disiapkan tube 0,2 ml dan pipetkan 12,3 ul PCR MIX ke dalam tube 0,2 ul kemudian ditambahakan primer forward dan reverse sebanyak masing-masing 0,5 setelah itu tambahkan sampel sebanyak 2,5 ul lalu  tambahkan  9  ul  sehingga  total  keseluruhan  25  ul.  Kemudian  dilanjutkan elektroforesis untuk menggerakan molekul-molekul DNA dari kutub negatif ke positif.
Pada  penelitian  ini  sampel  yang  digunakan  sebanyak  32  sampel,  ditemukan  5 sampel yang positif (15,6%) dengan kode sampel 10, 13, 17, 18, dam 31 yang ditandai terbentuknya  pita  pada  target  100bp  dan  120bp.  Pada  wilayah  Kecamatan  Paga merupakan  daerah  yang  tergolong  endemik  karena  penyebaran  penyakit filariasis disebabkan oleh nyamuk Mansonia, Anopheles, dan Culex. Dapat menular melalui vektor nyamuk sebagai inang perantara, sedangkan manusia atau monyet dan anjing merupakan inang spesifik. Karena kontak serumah akan membiarkan dampak peningkatan terjadinya filariasis khususnya pada wilayah Kecamatan Paga. Oleh karena itu penderita filariasis harus mematuhi protokol kesehatan sehingga dengan adanya penelitian ini menggunakan teknik Polymerase  Chain  Reaction (PCR)  dapat  memberikan  informasi  kepada  daerah setempat bahwa dengan teknik tersebut dapat dengan cepat dan tepat serta mengurangi penularan filariasis .
Pada penelitian ini, sesuai dengan data tahunan Kabupaten Pangkajenne Kepulauan tahun 2019 total kasus sebanyak 28 orang. Dari penelitian oleh Supali (2010) beberapa Desa di Kabupaten Alor prevalensi mikrofilaria (mf rate ) >1% oleh karena itu meskipun telah  dilakukan  pengobatan  massal  di  Kabupaten  Alor  tetapi  setelah  itu  dilakukan
evaluasi  secara  random  dari  2.500  orang  diperoleh  4  orang  masih  positif mikrofilaria tetapi  dengan  densitas mikrofilaria yang  masih  rendah,  kejadian  infeksi  berulang filariasis salah  satu  faktornya  adalah  pengobatan  yang  tidak  akurat  ini  akibat  dari pengobatan  yang  lama  (Purwantyastuti,  2010).  Faktor  lain  dari  penularan filariasis ini adalah  kontak  serumah  yang  diperantarai  oleh  nyamuk Anopheles sp.  sebagai  vektor (Willa & Noshirma, 2015).
Namun  pada  penelitian  ini  dari  10  kepala  keluarga  dengan  sampel  sebanyak  32 ditemukan  27  negatif,  ini  menunjukan  bahwa  pada  wilayah  tersebut  dengan  kontak serumah  dapat  dijadikan  sebagai  indikator  edukasi  dalam  mencegah  peningkatan filariasis .  Kementerian  Kesehatan  Republik  Indonesia  menganjurkan  agar  masyarakat mengonsumsi obat pencegah filariasis secara rutin, kebersihan di lingkungan rumah juga sangat penting, karena penyebaran penyakit filariasis sangat berbahaya bagi masyarakat.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  di  Wilayah  Kabupaten  Pangkajenne  Kepulauan, metode  molekuler dengan  menggunakan  32  sampel  kontak  serumah  penderita mikrofilariasis didapatkan  5  sampel  yang  mengandung  DNA mikrofilariasis ditandai dengan adanya pita yang terbentuk pada posisi 110 bp, sedangkan 27 sampel lainnya tidak mengandung DNA mikrofilariais.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahdy. R. G. Muhammad. (2016). Hubungan Pengetahuan dan Sikap Tentang Pencegahan Filariasis Dengan Praktek  Minum  Obat  Dalam  Program  Pemberian  Obat  Masal  Pencegahan  (Pomp)  Filariasis Kelurahan  Kuripan  Kertoharjo  Kota  Pekalongan  2015 . [Skripsi].  Semarang:  Universitas  Negeri Semarang.
Almet,  J.,  Wuri,  D.  A.,  Detha,  A.  I.  R.,  &  Mogi,  D.  A.  (2019).  Status  resistensi  vektor  filariasis  asal Kabupaten Sikka terhadap insektisida permethrin . Jurnal Kajian Veteriner , 7(2), 121-127. Andnyana, N. W. D., Laumalay, H. M., & Tallan, M. M. (2019). Penentuan nyamuk Anopheles spp. sebagai vektor Filariasis di  Kabupaten  Sumba  Timur  dan  Sumba  Barat  Provinsi  Nusa  Tenggara  Timur.
Media Penelitian dan Pengembangan Kesehatan , 29(2), 177-188.
Anorital., Dewi, R. M., & Palupi, K. (2016). studi kajian upaya pemberian obat pencegah masal filariasis terhadap pengendalian penyakit infeksi kecacingan . Jurnal Biotek Medisiana Indonesia , 5(2), 95- 103. https://doi.org/10.22435/jbmi.v5i2.1667.
Arsin, A. A. (2016). Epidemiologi Filariasis di Inonesia . Makassar: Masagena Press. Budiarto, B. R. (2015). Polymerase Chain Reaction (PCR): Perkembangan dan perannya dalam diagnostik kesehatan. BioTrends , 6(2), 29-38. Feranisa, A. (2016). Komparasi antara Polymerase Chain Reaction (PCR) dan Loopmediated Isothermal Amplification (Lamp)  dalam  diagnosis  molekuler . ODONTO  Dental  Journal ,  3(2),  145-151. http://dx.doi.org/10.30659/odj.3.2.145-151. Handoyo, D., & Rudiretna, A. (2000). Prinsip umum dan pelaksanaan Polymerase Chain Reaction (PCR). Unitas , 9(1), 17-29. Ibrahim, N., & Nurul, I. I. (2019). Ha’i Bou : Perspektif lokal penyakit Filariasis di Maukaro, Ende, Nusa Tenggara Timur. Jurnal Emik , (2)1. Irianto, K (2013). Parasitology Medis. Bandung: AlfaBeta. Kementerian  Kesehatan  Republik  Indonesia.  (2018). Menuju  Indonesia  Bebas  Filariasis .  INFODATIN. ISSN 2442-7659. Kementerian Kesehatan Republik Indonesia. (2019). Situasi Filariasis di Indonesia . INFODATIN. ISSN 2442-7659.
Melayanie.  G.,  &  Andiarsa,  D.  (2017).  Program  eliminasi  limpatic Filariasis di  indonesia .  JHECDs : Journal of Health Epidemiology and Communicable Diseases , 3(2), 63-70. Munawwaroh, L., & Pawenang, E. T. (2016). evaluasi program eliminasi filariasis dari aspek perilaku dan perubahan lingkungan. Journal of Public Health . 5(3), 195-204. https://doi.org/10.15294/ujph.v5i3.10013.
Mutiara. hanna, Anindita. (2016). Filariasis: Pencegahan Terkait Faktor Risiko. Majority , 5(3).
Natadisastra,  D.  (2009) .  Parasitologi  Kedokteran  Ditinjau  Dari  Orang  Tubuh Yang  Diserang .  Jakarta: EGC.
Nugroho.  S.  (2018).  Program  nasional  untuk  eliminasi fiariasis limfatik:  Studi  kasus  di  Kabupaten Pekalongan Jawa Tengah. Vectora , 10(2), 95-102. https://doi.org/10.22435/vk.v10i2.1057. Nurjazuli, N., Dangiran, H. L., & Bari’ah, A. A. (2018). Analisis spasial kejadian filariasis di Kabupaten
Demak Jawa Tengah . Jurnal Kesehatan Lingkungan Indonesia , 17(1), 46-51.
https://doi.org/10.14710/jkli.17.1.46-51.
Onggang, F, S. (2018). Analisis faktor faktor terhadap kejadian filariasis type Wuchereria bancrofti , dan Brugia malayi di wilayah Kabupaten Manggarai Timur Tahun 2016. Jurnal Info Kesehatan , 16(1),
1-20. https://doi.org/10.31965/infokes.Vol16.Iss1.165.
Putri, S. F. E. (2017). Interpretasi Hasil Pemeriksan Mikrofilaria Berdasarkan Variasi Waktu Pada Suspect Filariasis di  Kecamatan  Landono  Kecamatan  Konda  dan  Kenyamatan  Kabangka.  [Skripsi]. Kendari: Kementerian Kesehatan Republik Indonesia Politeknik Kesehatan Kendari. Rahanyamtel,  R.,  Nurjazuli,  N.,  Sulistiyani,  S.  (2019).  Faktor  Lingkungan  dan  Praktik  Masyarakat Berkaitan  Dengan  Kejadian  Filariasis  di  Kabupaten  Semarang. Jurnal  Kesehatan  Lingkungan Indonesia . 18(1), 8-11. https://doi.org/10.14710/jkli.18.1.8-11 . Roziyah,  I,  A.  (2015).  Hubungan  Kondisi  Fisik  Lingkungan  dan  Perilaku  Masyarakat  Dengan  Kejadian Filariasis  di  Kelurahan  Padukuhan  Kraton  Kota  Pekalongan  Tahun  2015 . [Skripsi].  Semarang:
Fakultas Ilmu Keolahragaan Universitas Negeri Semarang.
Setyaningtyas, D. E.,  Yuana, W. T., &  Rahayu, N.  (2017). Keberhasilan pengobatan massal  filariasis di Kecamatan Kusan Hulu Kabupaten Tanah Bumbu Provinsi  Kalimantan Selatan . BALABA ,  13(2), 133-142.
Soedarto. (2011). Buku Ajar Parasitology Kedokteran . Jakarta: Sagung Seto.
Sofiah. L. (2017). Skrining Infeksi Filaria Pada Mahasiswa Kedokteran UIN Syarif Hidayattulah Jakarta. [Skripsi].  Jakarta:  Fakultas  Kedokteran  dan  Ilmu  Kesehatan  Universitas  Islam  Negeri  Syarifudin Hidayatullah.
Surja. S. S., Padmasutra, L., Joprang, F. S., Yolanda, H., Cindy., Makimian, R., Jukiani, M., Wijaya, M.,
& Celine. (2019). Atlas Parasitologi Kedokteran. Jakarta: Universitas Katolik Indonesia Atma Jaya. Sutanto. Inge, Dkk. (2008) . Parasitologi Kedokteran. Jakarta:  Fakultas kedokteran Universitas Indonesia. Syamsuni.  (2019 ).  Statistik  dan  Metode  Penelitian.  Dengan  Implementasi  Pembelajaran  Android. Yogyakarta: KBM Indonesia Widiastuti,  P.  (2015).  Karakteristik  Host  dan  Lingkungan  Penderita Filarisis di  Kabupaten  Tangerang Tahun 2015. [Skripsi]. Jakarta: Fakultas Kedokteran Dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarifudin Hidayatulah.
Zulkoni,  A.  (2011) .  Parasitology  Untuk  Keperawatan  Kesehatan  Masyaarakat dan  Teknik  Lingkungan . Yogyakarta: Nuha Medika.