## UJI EFEK ANTIBAKTERI EKSTRAK ETIL ASETAT DAN KLOROFORM MENIRAN ( Phyllanthus niruri Linn) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI

## Staphylococcus aureus ATCC 6538 DAN Escherichia coli ATCC 11229 SECARA in vitro
Dwiariawan Tauchid Rahman, EM Sutrisna, Anika Candrasari Fakultas Kedokteran, Universitas Muhammadiyah Surakarta Correspondence to: Anika Candrasari
Email: Anika.Candrasari@ums.ac.id

## ABSTRACT
Meniran is one of traditional plants that contains several compounds such as terpenoid, � avonoid, and alkaloid that role as antibactrial agent. The aims of the research are to determine the antibacteria effect of extract aethyl acetat and chloroform of meniran. This research was conducted as a laboratory experimental by using post test control group design only. The concentration of extract aethyl acetat and chloroform meniran are 5%, 10%, 20%, 40%, and 80%. The result indicate that extract aethyl acetat of meniran have not effect to Escherichia coli. Meanwhile, to Staphyloccus aureus have an effect (p=0,003). The concentration of the extract chloroform meniran are  effective  to  inhibite  the  growth  of  Escherichia  coli  (p=0,029)  and  Staphylococcus  aureus  (p=0,004).  The extract aethyl acetat of meniran have an antibacteria effect to Staphylococcus aureus but not to Escherichia coli. Whereas, the extract chloroform of meniran have an antibacteria effect to Staphylococcus aureus and Escherichia coli.
Keyword  : The  aethyl  acetat  and  chloroform  extract  of  Meniran  (Phyllanthus  niruri  L.),  antibacteria  effect, Staphylococcus aureus and Escherichia coli

## PENDAHULUAN
Pemakaian  herbal  sebagai  obat-obatan tradisional  telah  diterima  luas  di  negara-negara maju  maupun  berkembang  sejak  dahulu  kala, bahkan  dalam  20  tahun  terakhir  perhatian  dunia terhadap obat-obatan tradisional meningkat, baik di  negara  yang  sedang  berkembang  maupun negara-negara  maju. World  Health  Organization (WHO) atau Badan Kesehatan Dunia menyebutkan bahwa  hingga  65%  dari  penduduk  negara  maju menggunakan  pengobatan  tradisional  dan  obat- obat dari bahan alami (Kemenkes RI, 2007).
Indonesia  merupakan  negara  besar  yang terkenal karena keanekaragamannya, salah satunya adalah keanekaragaman hayati  ( megabiodiversity ) khususnya  tumbuhan.  Selain  itu  Indonesia  juga memiliki  keanekaragaman  etnis  yang  memiliki berbagai  macam  pengetahuan  tentang  obat tradisional  yang  menggunakan  bahan-bahan  dari tumbuhan.  Banyak  dari  jenis  tumbuhan  itu  telah
ribuan  tahun  digunakan  oleh  nenek  moyang bangsa  Indonesia  dan  dokter  sebagai  bahan  obat atau  jamu  tradisional  untuk  berbagai  macam penyakit  dan  memberikan  hasil  yang  baik  bagi pemeliharaan  kesehatan  serta  pengobatan  (Mills, 1996).  Di  bumi  ini  diperkirakan  terdapat  40.000 spesies  tumbuhan.    Dari  jumlah  tersebut  sekitar 30.000  spesies  hidup  di  kepulauan  Indonesia dan  sekurang-kurangnya  9.600  spesies  diketahui berkhasiat obat, tetapi baru 300 spesies yang telah dimanfaatkan sebagai bahan baku obat tradisional dan industri obat tradisional (Kemenkes RI, 2007).
Menteri Kesehatan melalui Surat Keputusan Menteri  Kesehatan  Republik  Indonesia  No.381/ MENKES/SK/III  /2007  menetapkan  kebijakan obat  tradisional  nasional  (Kotranas)  yang  antara lain  bertujuan  untuk  mendorong  pemanfaatan sumber daya alam dan ramuan tradisional secara berkelanjutan  ( sustainable  use )  untuk  digunakan dalam  upaya  peningkatan  pelayanan  kesehatan.
Sebagai  implementasi  dari  kebijakan  tersebut
Menteri  Kesehatan  melalui  Peraturan  Menteri Kesehatan No. 003/MENKES/PER/I/2010
tentang sainti � kasi jamu dalam penelitian berbasis pelayanan kesehatan.  Menurut peraturan tersebut pada pasal 1 diterangkan bahwa sainti � kasi jamu adalah pembuktian ilmiah jamu melalui penelitian berbasis  pelayanan  kesehatan,  sedangkan  jamu diartikan  sebagai  obat  tradisional  Indonesia. Sementara itu obat tradisional adalah bahan atau ramuan  yang  berupa  bahan  tumbuhan,  bahan hewan,  bahan  mineral,  sediaan  sarian  ( galenik ), atau  campuran  dari  bahan  tersebut  yang  secara turun temurun telah digunakan untuk pengobatan, dan  dapat  diterapkan  sesuai  dengan  norma  yang ada.
Salah satu tanaman berkasiat obat Indonesia yang  banyak  digunakan  di  masyarakat  adalah meniran  ( Phyllantus  niruri Linn).  Tumbuhan meniran  banyak  mengandung  senyawa  kimia yang memiliki berbagai macam khasiat, salah satu potensinya adalah sebagai antibakteri.
Menurut  penelitian  sebelumnya  yang dilakukan oleh Gunawan, dkk (2008) telah berhasil menganalisis,  mengisolasi,  dan  mengidenti � kasi senyawa  antibakteri  di  dalam  tumbuhan  ini. Senyawa yang dimaksud adalah senyawa terpenoid dengan  metode  Kromatogra � Gas-Spektroskopi Massa. Hasil uji � tokimia menggunakan pereaksi Lieberman-Burchard  tumbuhan  meniran  yang diekstraksi dengan menggunakan metode maserasi dan  sohkletasi  pelarut  n-heksana  menunjukkan bahwa kedua ekstrak tersebut positif mengandung senyawa terpenoid.
Harborne  (1996)  mengatakan  bahwa secara  kimia,  terpenoid  umumnya  larut  dalam lemak  dan  terdapat  di  dalam  sitoplasma  sel tumbuhan.  Biasanya  terpenoid  diekstraksi  dari jaringan tumbuhan dengan memakai eter minyak bumi,  eter  atau  kloroform  dan  dapat  dipisahkan secara kromatogra � pada silika gel atau alumina memakai  pelarut  di  atas.  Pendapat  ini  berbeda dengan yang dilakukan oleh Gunawan, dkk (2008) di atas, sehingga sangat mungkin bahwa zat yang berhasil  diisolasi  berbeda  konsentrasinya  jika menggunakan metode Harborne (1996).
Berdasar  pada  latar  belakang  di  atas, penelitian ini memiliki rumusan masalah  Apakah ada  pengaruh  konsentrasi  ekstrak  etil  asetat  dan kloroform  tumbuhan  meniran  (Phyllantus  niruri Linn)  terhadap  pertumbuhan  bakteri  Escherichia coli dan Staphylococcus aureus? 
Adapun  tujuan  dari  penelitian  ini  adalah untuk  mengetahui  daya  antibakteri  ekstrak etil  asetat  dan  kloroform  tumbuhan  meniran (Phyllantus  niruri  Linn)  terhadap  pertumbuhan bakteri  Escherichia  coli  dan  Staphylococcus aureus.
Manfaat  dari  penelitian  ini  secara teoritis  adalah  menambah  serta  mendukung perkembangan  ilmu  pengetahuan  kesehatan khususnya  di  bidang � tofarmaka  dan  secara praktis akan diperoleh informasi ekstrak etil asetat dan  kloroform  tumbuhan  meniran  (Phyllantus niruri  Linn)  terhadap  bakteri  Escherichia  coli dan Staphylococcus aureus. Informasi ini sebagai salah  satu  bukti  empirik  yang  dapat  digunakan sebagai  landasan  ilmiah  untuk  sosialisasi  dan pemasyarakatan  tumbuhan  obat  Indonesia  serta sainti � kasi  tanaman  obat,  khususnya  tumbuhan meniran (Phyllantus niruri Linn).

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  bersifat  eksperimental laboratorik dengan metode post test control group design  only .  Penelitian  dilaksanakan  di  Lab. Biomedik II Sub Lab. Mikrobiologi FK UMS pada bulan Juli - Oktober 2011 dengan subjek penelitian tumbuhan meniran ( Phyllantus niruri Linn) yang telah  dideterminasi  di  Lab.  Biologi  FKIP  UMS. Tumbuhan  meniran  diekstraksi  dengan  pelarut etil  asetat  dan  kloroform  masing-masing  dengan konsentrasi 5%, 10%, 20%, 40%, dan 80% di Lab. Biomedik III Sub Lab. Farmakologi FK UMS.
Menurut  Harmita  dan  Radji  (2004) konsentrasi  atau  dosis  berturut-turut  dapat diperoleh dengan rumus Progresi Geometris .
Keterangan : Y N = dosis ke-n merupakan dosis pertama R N-1 = merupakan faktor pemacu N  = dosis deret pertama
Maka  perhitungannya  adalah  sebagai berikut:
1.  Konsentrasi 1 = 5%
2.  Konsentrasi 2 = 10%
3.  Konsentrasi 3 = 20%
4.  Konsentrasi 4 = 40%
5.  Konsentrasi 5 = 80%
Y N = Y 1 R N-1
Sementara  itu  bakteri  uji  yang  digunakan adalah Escherichia  coli  ATCC 11229 dan Staphylococcus  aureus  ATCC  6538 ,  merupakan bakteri uji sensitif dan biakan murni yang diperoleh dari Lab. Biomedik II Sub Lab. Mikrobiologi FK UMS.
Variabel independen (bebas) adalah ekstrak kloroform  dan  ekstrak  etil  asetat  tumbuhan meniran  ( Phyllantus  niruri Linn).  Variabel dependen (terikat) adalah efek antibakteri terhadap pertumbuhan  bakteri  uji  ( Escherichia  coli ATCC 11229 dan Staphylococcus  aureus  ATCC  6538 ). Pengujian  efek  antibakteri  menggunakan  teknik difusi sumuran dengan diameter sumur 6 mm. Efek antibakteri  di  ukur  dari  diameter Zona  Hambat (zona jernih) dengan satuan ukur milimeter (mm) pada masing-masing konsentrasi ekstrak etil asetat dan  kloroform  tumbuhan  meniran    ( Phyllantus niruri Linn) terhadap pertumbuhan bakteri uji. Variabel  luar  yang  terkendali  yaitu  asal tanaman,  media Muller  Hinton agar,  pH,  waktu inkubasi, suhu, dan kelarutan ekstrak. Sedangkan variabel  luar  yang  tak  terkendali  adalah metabolisme kuman, umur tumbuhan, dan musim.
Bahan  utama  yang  digunakan  adalah tumbuhan  meniran  ( Phyllantus  niruri Linn) dengan  bahan  penyari  etil  asetat,  kloroform, dan  aquadest  steril.  Bahan  uji  efek  antibakteri menggunakan  media Muller  Hinton agar, Blood Agar  Plate (BAP), McConkey agar, Brain Heart  Infusion (BHI),  Aqubidest  steril,  Standar McFarland , NaCl � siologis, antibiotik Amoxicilin 500  mg  dan  Kloramfenikol  250  mg, suspending agent Dimetilsulfoksida (DMSO) 0,5%.
Diameter  zona  hambat  pertumbuhan Escherichia coli ATCC 11229 dan Staphylococcus aureus  ATCC 6538  dalam  berbagai  konsentrasi ekstrak  etil  asetat  dan  kloroform  di  uji  dengan metode  sumuran.  Metode  ini  umum  digunakan dalam  uji  efek  antibakteri  karena  lebih  efektif untuk  menghambat  pertumbuhan  bakteri  dan  zat aktif  dapat  berdifusi  langsung  tanpa  penghalang kertas cakram (seperti pada metode Kirby Bauer yang  menggunakan  kertas  cakram).  Selain  itu, dengan  metode  ini  dapat  diketahui  luas  zona hambat.  Diameter  zona  hambat  merupakan petunjuk  kepekaan  bakteri  uji.  Semakin  besar zona hambat maka daya antibakteri yang semakin baik (Panagan & Syarif, 2009).
Kontrol positif Amoxicilin dan Kloramfenikol  yang  digunakan  dibuat  dengan
konsentrasi 100% sehingga memberikan diameter zona  hambatan  cukup  besar,  masing-masing  60 mm dan 50 mm.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  pengujian  daya  hambat  berbagai konsentrasi ekstrak etil asetat tumbuhan meniran terhadap  bakteri Escherichia  coli  ATCC 11229 yang disajikan pada tabel 1 menunjukkan bahwa bahwa tidak terdapat efek antibakteri pada kontrol negatif dan tiap-tiap konsentrasi ekstrak etil asetat tumbuhan  meniran  terhadap  bakteri Escherichia coli .
Tabel  2  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etil asetat  tumbuhan  meniran  dengan  konsentrasi 5%  dan  10%  tidak  mempunyai  efek  antibakteri terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus  ATCC 6538.  Zona  hambat  pada Staphylococcus  aureus ATCC 6538  terbentuk  pada  konsentrasi  20%, 40%,  tetapi  diameter  tersebut  lebih  kecil  jika dibandingkan  dengan  diameter  kontrol  positif (Amoxicilin).
Sementara  ekstrak  etil  asetat  baru berpengaruh  terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus pada  konsentrasi  20%, 40%,  dan  80%,  sementara  5%  dan  10%  tidak menunjukkan daya hambat. Hal ini dapat dijelaskan bahwa konsentrasi ekstrak etil asetat yaitu 5% dan 10%  memiliki  konsentrasi  yang  kecil  sehingga belum mampu menyebabkan terjadinya perubahan sistem � siologis  sel  bakteri  uji,  sehingga  bakteri masih  dapat  tumbuh  (Darmayasa,  2008) . Hal  ini terbukti ketika konsentrasi ditambah, daya hambat mulai tampak yaitu pada konsentrasi 20%, 40%, dan 80%.
Peningkatan konsentrasi, tentu akan diikuti dengan  peningkatan  konsentrasi  zat  bioaktif, sehingga  efek  antibakterinya  makin  tinggi  pula. Hal  ini  ditandai  dengan  bertambahnya  diameter zona  hambat.  Sementara  itu  peningkatan konsentrasi dari 40% ke 80% tidak menunjukkan peningkatan yang signi � kan zona hambat. Dengan perkataan lain pada konsentrasi 80% zona hambat yang  terbentuk  lebih  kecil  dibandingkan  dengan konsentrasi  40%.  Hal  ini  dapat  disebabkan  oleh karena kepekatan stok konsentrasi 80% yang lebih pekat sehingga mengurangi daya difusi pada media Muller  Hinton agar.  Dengan  demikian  meskipun konsentrasi  bertambah,  tetapi  banyaknya  zat bioaktif  yang  dapat  berdifusi  ke  dalam  medium lebih  sedikit,  sehingga  pengaruhnya  pada pembentukan zona hambat juga sedikit.
Tabel  3  menunjukkan  bahwa  ekstrak kloroform  konsentrasi  5%,  10%,  20%,  40%, dan  80%  masing-masing  memiliki  zona  hambat terhadap  bakteri  Escherichia  coli,  yang  terbesar terdapat  pada  konsentrasi  40%.  Dari  tabel  4
didapatkan  data  zona  hambat  pada  kelompok perlakuan  konsentrasi  ekstrak  kloroform  mulai konsentrasi 5%, 10%, 20%, 40%, dan 80% dengan zona  hambat  terbesar  terdapat  pada  konsentrasi 80%.
Tabel 1.   Hasil Pengujian Ekstrak Etil Asetat Tumbuhan Meniran dengan Berbagai Konsentrasi terhadap Bakteri Escherichia coli ATCC 11229 (mm)
Replikasi Diameter Zona Hambat Bakteri Escherichia coli ATCC 11229 (mm) Kontrol (-) Aquades Steril Kontrol (+) Kloramfenikol Ekstrak Etil Asetat Tumbuhan Meniran 5% b/v 10% b/v 20% b/v 40% b/v 80% b/v 1 6 50 6 6 6 6 6 2 6 50 6 6 6 6 6 3 6 50 6 6 6 6 6
Tabel 2.   Hasil Pengujian Ekstrak Etil Asetat Tumbuhan Meniran dengan Berbagai Konsentrasi terhadap Bakteri
Staphylococcus aureus ATCC 6538 (mm) Replikasi Diameter Zona Hambat Bakteri Staphylococcus aureus ATCC 6538 (mm) Kontrol (-) Aquades Steril Kontrol (+) Amoxicilin Ekstrak Etil Asetat Tumbuhan Meniran 5% b/v 10% b/v 20% b/v 40% b/v 80% b/v 1 6 60 6 6 8 14 12 2 6 60 6 6 10 13 11 3 6 60 6 6 10 14 11 Rata-rata 6 60 6 6 9,3 13,6 11,3
Tabel 3.   Hasil Pengujian Ekstrak Kloroform Tumbuhan Meniran dengan Berbagai Konsentrasi terhadap Bakteri
Escherichia coli ATCC 11229 (mm) Replikasi
Diameter Zona Hambat
Bakteri Escherichia coli ATCC 11229 (mm)
Kontrol (-) DMSO
Kontrol (+) Kloramfenikol Ekstrak Kloroform Tumbuhan Meniran 5% b/v 10% b/v 20% b/v 40% b/v 80% b/v 1 6 50 11 6 12 12 8 2 6 50 6 10 9 11 6 3 6 50 8 9 6 10 6 Rata-rata 6 50 8,3 8,3 9 11 6,6
Tabel 4.   Hasil Pengujian Ekstrak Kloroform Tumbuhan Meniran dengan Berbagai Konsentrasi terhadap Daya Hambat Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus ATCC 6538 setelah 24 jam
Replikasi Diameter Zona Hambat
Bakteri Staphylococcus aureus ATCC 6538 (mm)
Kontrol (-)
DMSO Kontrol (+) Amoxicilin Ekstrak Kloroform Tumbuhan Meniran 5% b/v 10% b/v 20% b/v 40% b/v 80% b/v 1 6 60 10 12 20 22 24 2 6 60 10 12 16 17 27 3 6 60 11 14 21 25 27 Rata-rata 6 60 10,3 12,6 19 21,3 26
Tabel 5.  Hasil  Uji  Non  Parametrik Mann  Whitney Ekstrak  Etil  Asetat  Meniran  terhadap
Bakteri Staphylococcus aureus ATCC 6538 Kelompok Perlakuan P Hasil Uji Kontrol (-)  - konsentrasi 5% 1,000 Tak berbeda nyata Kontrol (-)  - konsentrasi 10% 1,000 Tak berbeda nyata Kontrol (-)  - konsentrasi 20% 1,000 Tak berbeda nyata Kontrol (-)  - konsentrasi 40% 0,034 Berbeda bermakna Kontrol (-)  - konsentrasi 80% 0,034 Berbeda bermakna Kontrol (+) - konsentrasi 5% 0,025 Berbeda bermakna Kontrol (+) - konsentrasi 10% 0,025 Berbeda bermakna Kontrol (+) - konsentrasi 20% 0,034 Berbeda bermakna Kontrol (+) - konsentrasi 40% 0,034 Berbeda bermakna Kontrol (+) - konsentrasi 80% 0,034 Berbeda bermakna
Berdasarkan hasil uji lanjut, pada data pada Tabel  5 di atas, dapat disimpulkan bahwa (1) tidak terdapat  perbedaan  nyata  antara  kontrol  negatif dengan  perlakuan  beberapa  macam  konsentrasi ekstrak  etil  asetat  meniran  5%,  10%,  dan  20%. Dengan perkataan lain tidak terdapat efek hambatan ekstrak etil asetat meniran 5%, 10%, 20% terhadap
pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus. (2) Efek  hambatan  terdapat  pada  konsentrasi  40% dan  80%.  Rerata  zona  hambatan  pada  ekstrak konsentrasi 40% lebih besar dari pada 80%. Atas dasar itu konsentrasi esktrak etil asetat 40% lebih efektif  untuk  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus aureus.
Tabel 6.  Hasil Uji Non Parametrik Mann Whitney Ekstrak Kloroform Meniran terhadap Bakteri Escherichia coli ATCC 11229 Kelompok Perlakuan P Hasil Uji Kontrol (-)  - konsentrasi 5% 0,121 Tak berbeda nyata Kontrol (-)  - konsentrasi 10% 0,121 Tak berbeda nyata Kontrol (-)  - konsentrasi 20% 0,121 Tak berbeda nyata Kontrol (-)  - konsentrasi 40% 0,037 berbeda bermakna Kontrol (-)  - konsentrasi 80% 0,317 Tak berbeda nyata Kontrol (+) - konsentrasi 5% 0,037 Berbeda bermakna Kontrol (+) - konsentrasi 10% 0,037 Berbeda bermakna Kontrol (+) - konsentrasi 20% 0,037 Berbeda bermakna Kontrol (+) - konsentrasi 40% 0,037 Berbeda bermakna Kontrol (+) - konsentrasi 80% 0,034 Berbeda bermakna
Berdasarkan hasil uji lanjut, pada data pada Tabel  6 di atas, dapat disimpulkan bahwa (1) Tidak terdapat  perbedaan  nyata  antara  kontrol  negatif dengan  perlakuan  beberapa  macam  konsentrasi ekstrak  etil  asetat  meniran  5%,  10%,  dan  20%, serta  80%.  Dengan  perkataan  lain  tidak  terdapat
efek  hambatan  ekstrak  kloroform  meniran  5%, 10%, 20%, dan 80% terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia  coli. (2)  Efek  hambatan  terdapat pada konsentrasi 40%. Atas dasar itu konsentrasi esktrak kloroform 40% efektif untuk menghambat pertumbuhan Escherichia coli.
Tabel 7. Hasil Uji Non Parametrik Mann Whitney Ekstrak Kloroform Meniran terhadap Bakteri
Staphylococcus aureus ATCC 6538 Kelompok Perlakuan P Hasil Uji Kontrol (-)  - konsentrasi 5% 0,034 Berbeda bermakna Kontrol (-)  - konsentrasi 10% 0,034 Berbeda bermakna Kontrol (-)  - konsentrasi 20% 0,037 Berbeda bermakna Kontrol (-)  - konsentrasi 40% 0,037 Berbeda bermakna Kontrol (-)  - konsentrasi 80% 0,034 Berbeda bermakna Kontrol (+) - konsentrasi 5% 0,034 Berbeda bermakna Kontrol (+) - konsentrasi 10% 0,034 Berbeda bermakna Kontrol (+) - konsentrasi 20% 0,037 Berbeda bermakna Kontrol (+) - konsentrasi 40% 0,037 Berbeda bermakna Kontrol (+) - konsentrasi 80% 0,034 Berbeda bermakna
Berdasarkan  hasil  uji  lanjut,  pada  data pada  Tabel    7  di  atas,  dapat  disimpulkan  bahwa terdapat  perbedaan  yang  signi � kan  untuk  setiap penambahan konsentrasi ekstrak
Perbedaan  zona  hambat  yang  terjadi  pada bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli disebabkan  karena  adanya  perbedaan struktur  dinding  sel  antara  kedua  bakteri  yang mempengaruhi  kerja  ekstrak  etil  asetat  sebagai senyawa  antibakteri.  Artinya  ekstrak  etil  asetat tumbuhan meniran baru dapat menimbulkan efek jika  ekstrak  tersebut  dapat  masuk  ke  dalam  sel bakteri  yang  diuji.  Struktur  dinding  sel  bakteri Gram positif lebih sederhana, yaitu berlapis tunggal dengan  kandungan  lipid  yang  rendah  sehingga memudahkan  bahan  bioaktif  masuk  kedalam  sel (Salni et al , 2011). Staphylococcus aureus sebagai bakteri  gram  positif  memiliki  3  lapisan  yaitu selaput  sitoplasma,  lapisan  peptidoglikan  yang tebal dan simpai (Jawetz et al , 2001).
Sementara struktur dinding sel bakteri gram negatif lebih kompleks, berlapis tiga, yaitu lapisan luar lipoprotein, lapisan tengah liposakarida yang berperan  sebagai  penghalang  masuknya  bahan bioaktif  antibakteri,  dan  lapisan  dalam  berupa petidoglikan  dengan  kandungan  lipid  tinggi (Salni et al , 2011). Escherichia coli sebagai gram negatif memiliki lapisan yang lebih kompleks dan berlapis-lapis  yaitu  selaput  sitoplasma,  lapisan tunggal peptidoglikan dan selaput luar yang terdiri dari  lipoprotein  dan  lipopolisakarida.  Adanya perbedaan  struktur  dan  komponen  dinding  sel tersebut  yang  menyebabkan Escherichia  coli sebagai  gram  negatif  lebih  resisten  (Jawetz et
al ,  2001)  dibandingkan  dengan Staphylococcus aureus.
Berdasarkan  pada  hasil-hasil  tersebut efek  antibakteri  ekstrak  kloroform  terhadap pembentukan  zona  hambat  berpengaruh  pada kedua  bakteri.  Pengaruh  ekstrak  kloroform terhadap Escherichia  coli juga  lebih  tampak meskipun  struktur  dinding  sel  bakteri  ini  lebih kompleks . Hal ini dapat dijelaskan kemungkinan pada  ekstrak  kloroform  mengandung  zat  utama alkaloid dan terpenoid yang berpengaruh masing- masing  menghambat  sintesis  dinding  sel  dan mengubah permeabilitas membran sel (Robinson, 2005)  walaupun  tidak  hanya  zat-zat  tersebut saja  yang  mungkin  terkandung  dalam  ekstrak kloroform  tumbuhan  meniran,  sementara  ekstrak etil  asetat  kemungkinan  mengandung � avonoid sehingga  diduga  hanya  memiliki  mekanisme antibakteri dengan cara pengubahan permeabilitas membran sel.
Efek antibakteri ekstrak kloroform tumbuhan  meniran  tampak  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus .  Hal  ini  dapat  terjadi karena  kemungkinan  didukung  oleh  dua  faktor utama,  yaitu  (1)  kandungan  ekstrak  kloroform tumbuhan  meniran  terdiri  atas  dua  macam  zat yang berpengaruh ganda terhadap sel bakteri, yaitu mengubah  permeabilitas  membran  sel  dan  yang kedua  menghambat  sintesis  dinding  sel.  Kedua proses ini membantu mempercepat masuknya zat bioaktif ke dalam sel dan menganggu metabolisme sel sehingga menyebabkan kematian pada sel. (2) Struktur dinding sel bakteri Staphylococcus aureus tergolong  lebih  sederhana  jika  dibandingkan
dengan  struktur  dinding  sel  bakteri  gram  negatif seperti Escherichia coli , sehingga efek antibakteri yang diberikan  lebih nyata.
Menurut  Kardinan  dan  Kusuma  (2004) dalam  Gunawan  dkk  (2008)  herba  meniran mengandung metabolit sekunder seperti � avonoid,  terpenoid,  alkaloid,  dan  steroid. Beberapa  hasil  penelitian  menunjukkan  senyawa terpenoid  memiliki  aktivitas  sebagai  antibakteri yaitu  monoterpenoid  linalool,  diterpenoid  (-) hardwicklic  acid , phytol ,  triterpenoid  saponin, dan triterpenoid glikosida. Sebagai perbandingan penelitian  identi � kasi  senyawa  aktif  antibakteri herba meniran yang dilakukan oleh Gunawan dkk (2008),  tumbuhan  meniran  diekstraksi  dengan metanol dan diidenti � kasi senyawa-senyawa aktif antibakteri dari herba meniran tersebut. Hasil yang didapatkan  ekstrak  yang  mengandung  senyawa terpenoid  memberikan  daya  hambat  antibakteri yang  lebih  baik.  Fraksi  yang  mengandung senyawa  terpenoid  (diterpenoid)  tersebut  diuji pada bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923 dan  membentuk  zona  hambat  sebesar  19  mm sedangkan  fraksi  lain  membentuk  diameter  zona hambat  sebesar  12  mm.  Penelitian  lain  yang dilakukan oleh Manguwardoyo dkk (2008), herba meniran  di  ekstrak  dengan  metode  maserasi  dan re � uk  menggunakan  pelarut  etanol  96%,  etil asetat, dan n-heksan kemudian diuji efek antijamur dan  antibakteri  dengan  metode  difusi  dan  dilusi. Hasil  yang  didapatkan  ekstrak  etanol  96%  pada konsentrasi  96-288  mg/ml  dapat  menghambat pertumbuhan bakteri gram positif Staphylococcus aureus , sedangkan ekstrak etil asetat dan n-heksan tidak memberikan daya hambat terhadap jamur dan bakteri.  Penelitian  uji  aktivitas  antibakteri  herba meniran  yang  dilakukan  oleh  Mangunwardoyo dkk (2008) memiliki kesamaan dengan penelitian ini  dimana  ekstrak  herba  meniran  yang  diuji cenderung  memiliki  aktivitas  antibakteri  pada bakteri gram positif yakni Staphylococcus aureus dan  tidak  memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap gram negatif Escherichia coli .
Penelitian  uji  efek  antibakteri  tumbuhan meniran  ini  masih  terbatas  pada  pengekstrakan bahan  tanaman  dengan  pelarut  yang  kemudian diuji  efek  antibakterinya  tetapi  tidak  dilakukan identi � kasi  lebih  lanjut  terhadap  senyawa- senyawa  yang  terlarut  dalam  ekstrak  tersebut. Sehingga  belum  dapat  dipastikan  senyawa  mana yang benar-benar memiliki efek antibakteri pada
ekstrak etil asetat dan ekstrak kloroform tumbuhan meniran.  Selain  itu  bakteri  uji  yang  digunakan pada penelitian ini merupakan bakteri uji sensitif, sedangkan  masalah  yang  terjadi  di  masyarakat adalah resistensi bakteri terhadap antibiotik.

## KESIMPULAN
Terdapat  efek  antibakteri  konsentrasi ekstrak  etil  asetat  20%,  40%,  80%  tumbuhan meniran  ( Phyllantus  niruri Linn)  terhadap bakteri Staphylococcus aureus ATCC 6538  serta konsentrasi  ekstrak  kloroform  5%,  10%,  20%, 40%,  80%  tumbuhan  meniran  ( Phyllantus  niruri Linn) terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus ATCC 6538.
Tetapi ekstrak etil asetat tumbuhan meniran tidak  menunjukkan  pengaruh  terhadap  bakteri Escherichia  coli  ATCC 11229 . Konsentrasi ekstrak  kloroform  40%  efektif  menghambat bakteri Escherichia coli ATCC 11229. Terdapat  perbedaan  efek  antibakteri konsentrasi  ekstrak  etil  asetat  dan  kloroform. Konsentrasi ekstrak etil asetat hanya berpengaruh pada  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus aureus sedangkan  konsentrasi  ekstrak  kloroform berpengaruh pada pertumbuhan bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus .

## SARAN
Perlu  dilakukan  ident � kasi  lebih  lanjut senyawa-senyawa  aktif  pada  ekstrak  etil  asetat dan  kloroform  tumbuhan  meniran  ( Phyllantus niruri Linn) dan penelitian lebih lanjut mengenai efektivitas antibakteri tumbuhan meniran ( Phyllantus  niruri Linn)  dengan  menggunakan pelarut,  metode  ekstraksi,  maupun  bakteri  uji yang lain.

## DAFTAR PUSTAKA
Gunawan, I W. G., Gede Bawa, I G. A., Sutrisnayanti, N. L., 2008. Isolasi dan Identi � kasi Senyawa Terpenoid  yang  Aktif  Antibakteri  pada Herba  Meniran  (Phyllanthus  niruri  Linn). Jurusan Kimia FMIPA Universitas Udayana. Jurnal  Kimia 2  (1),  Januari  2008  :  31-39. http://ejournal.unud.ac.id/abstrak/j-kim- vol2-no1-gunawan.pdf  (diakses  tanggal  25 Januari 2011)
Harborne,  J.B.,  1996. Metode  Fitokimia,  Penuntun Cara  Modern  Menganalisis  Tumbuhan (Phytochemical  Methods) .  Diterjemahkan oleh  Kosasih  Padmawinata  dan  Iwang Soediro. Bandung. Penerbit ITB.
Harmita,  Radji,  M.,  2004. Analisis  Hayati .  Jakarta. Departemen  Farmasi  FMIPA  Universitas Indonesia.
Jawetz,  Melnick,  Adelberg.,  2001. Mikrobiologi Kedokteran  Edisi.22 .  Penerjemah  Bagian Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas  Airlangga.  Jakarta.  Salemba Medika. Kardinan,  A.,  Kusuma,  F.  K.,  2004. Sehat  dengan Ramuan  Tradisional,  Meniran  Penambah Daya  Tahan  Tubuh  Alami .  Jakarta. AgroMedia Pustaka.
Kemenkes  RI.,  2007. Keputusan  Menteri  Kesehatan Republik  Indonesia,  Nomor  381/MENKES/ SK/III/2007,  Tentang  Kebijakan  Obat Tradisional . http://www.litbang.depkes. go.id/download/regulasi/KMK_381_2007_ OBAT_TRADISIONAL.pdf (diakses tanggal 5 Maret 2011)
Kemenkes  RI.,  2010. Peraturan  Menteri  Kesehatan Republik  Indonesia,  Nomor  003/MENKES/ PER/I/2010,  Tentang  Sainti � kasi  Jamu dalam  Penelitian  Berbasis  Pelayanan Kesehatan .  http://www.hukor.depkes.go.id/ up_prod_permenkes/PMK%20No.003%20 ttg%20Sainti � kasi%20Jamu%20Dalam%20 Penelitian%20Berbasis%20Pelayanan%20 Kesehatan.pdf  (diakses  tanggal  5  Maret 2011)
Mangunwardoyo, W., Cahyaningsih, E., Usia, T., 2008. Uji  Aktivitas  Antimikroba  Ekstrak  Herba Meniran  (Phyllantus  niruri  Linn). Jurnal
Obat Bahan Alam Vol.7 (1). Jakarta.
Panagan,  A.T.,  Syarif,  Nirwan,  2009. Uji  Daya Hambat  Asap  Cair  Hasil  Pirolisis  Kayu Pelawan  (Tristania  abavata)  terhadap Bakteri Escherichia coli . Sumatera Selatan. Jurusan  Kimia  Fakultas  MIPA,  Universitas Sriwijaya.
Robinson,  Trevor.,  1995. Kandungan  Organik Tumbuhan Tinggi (The Organic Constituents of  Higher  Plants) .  Diterjemahkan  oleh Kosasih  Padmawinata.  Bandung.  Penerbit ITB
Salni,  Marisa,  H.,  Mukti,  R.  W.,  2011. Isolasi
Senyawa  Antibakteri  dari  Daun  Jengkol (Pithecolobium lobatum Benth) dan Penentuan  Nilai  KHM-nya .  Sumatera Selatan. Jurusan Biologi FMIPA, Universitas Sriwijaya.