Jurnal Pharmascience, Vol. 07 , No.01, Februari 2020, hal: 72 - 83 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 https://ppjp.ulm.ac.id/journal/index.php/pharmascience

## Research Article

## Isolasi Jamur Endofitik Rumput Mutiara
( Hedyotis corymbosa (L.) Lamk.) dan Analisis
Potensi Sebagai Antimikroba
Pratika Viogenta 1,2 * , Siti Nurjanah 2 , Yuli Wahyu Tri Mulyani 2
1 Prodi Farmasi FMIPA, Universitas Lambung Mangkurat,  BanjarBaru 2 FMIPA, Universitas Tulang Bawang, Bandar Lampung *Email: pratika.viogenta@ulm.ac.id

## ABSTRAK
Jamur  endofit  merupakan  jamur  yang  hidup  di  dalam  jaringan  atau  organ tanaman yang tidak bersifat patogen. Jamur ini dapat menghasilkan beberapa zat yang sama  seperti  tanamannya.    Rumput  mutiara  ( Hedyotis  corymbosa (L.)  Lamk) merupakan jenis rumput liar yang biasa hidup di tanah lembab. Tujuan penelitian ini adalah  untuk  mengetahui  keanekaragaman  mikroba  endofit  rumput  mutiara.  Metode dari penelitian ini meliputi isolasi jamur endofit dari batang, daun, akar, bunga rumput mutiara,    identifikasi  jamur  yang  berhasil  diisolasi,  pengukuran  diameter  laju pertumbuhan  jamur  endofit  dan  uji  daya  hambat  antimikroba  dari  jamur  endofit. Hasil  penelitian  didapatkan  tujuh  jenis  jamur  endofit  yang  berhasil  diisolasi  dari rumput  mutiara  (batang,  daun,  akar dan bunga).  Setelah  diindentifikasi  ketujuh  jenis kapang,  yaitu  2  jenis  dari  genus  Aspergillus  yaitu A.  niger dan A.  parasiticus yang berhasil  diisolasi  dari  akar,  batang,  daun  rumput  mutiara,  Penicillium  berasal  dari akar  rumput  mutiara , Geotrchihum  dari  batang,  Chrysosporium  dari  daun, Rhizoctonia    dan  Phytophthora  dari  bunga.  Pada  ketujuh  jamur  endofit  ini  fase  lag terjadi  hari  pertama  dan  fase  eksponensial  terlihat  pada  hari  kedua  sampai  hari ketujuh. Aspergillus  niger memiliki  daya  hambat  terhadap E.coli,  St.  aureus,  Sh. disentriae, dan P.aeruginosa masing-masing  9.95mm,  8.96mm,  10.51mm,    dan  9.26mm. Chrysosporium  dan  Phytophthora  mengahambat  C.  albicans  sebesar  11.3mm  dan 3.63mm.
Kata Kunci: Rumput mutiara, jamur endofit, antimikroba.

## ABSTRACT
Endophytic  fungi  are  fungi  that  live  in  plant  tissues  or  organs  that  are  not pathogenic. This fungus can produce some of the same substances as the plant. Pearl grass (Hedyotis  corymbosa  (L.)  Lamk)  is  a  type  of  weed  that  normally  lives  in  moist  soil.  The purpose  of  this  study  was  to  determine  the  diversity  of  endophytic  pearl  grass  microbes. The  methods  of  this  study  include  the  isolation  of  endophytic  fungi  from  stems,  leaves, roots,  and  flowers    of  pearl  grass,  identification,  measurement  of  the  diameter  of
endophytic  fungi  growth  rate  and  antimicrobial  inhibition  test  of  endophytic  fungi.  The results  showed  seven  types  of  endophytic  fungi  that  were  isolated  from  pearl  grass.  After identifying  the  seven  types  of  molds,  namely  2  types  of  the  genus  Aspergillus  namely A.niger  and  A.parasiticus  which  were  successfully  isolated  from  roots,  stems,  pearl  grass leaves,  Penicillium  derived  from  pearl  grass  roots,  Geotrchihum  from  the  stems, Chrysosporium  from  leaves,  Rhizoctonia  and  Phytophthora  from  flowers.  In  these  seven endophytic  fungi  the  lag  phase  occurs  the  first  day  and  the  exponential  phase  is  seen  on the  second  day  to  the  seventh  day.  Aspergillus  niger  has  inhibitory  properties  against E.coli,  St.aureus,  Sh.disentriae,  and  P.aeruginosa  9.95mm,  8.96mm,  10.51mm  and 9.26mm, respectively. Chrysosporium and Phytophthora inhibit C. albicans by 11.3mm and 3.63mm.
Keywords: Pearl grass, endophytic fungus, antimicrobial

## I. PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  negara  yang berada  di  kawasan  tropis  dengan  beragam tumbuhan obat yang dimilikinya.
Keberagaman  jenis  tumbuhan  yang  ada merupakan  sumber  plasma  nutfah  yang sangat  berharga.  Berbagai  jenis  tanaman diketahui  mengandung  senyawa-senyawa bioaktif  yang  berpotensial  sebagai  obat- obatan. Sebagian senyawa bioaktif berasal dari interaksi  antara tanaman dan mikroba endofit (bakteri, jamur, actinomycetes).
Jamur  endofit  merupakan  jamur  yang tumbuh  pada  berbagai  jaringan  tanaman diantaranya  daun,  biji,  buah,  batang,  akar dan  umbi  akar.  Jamur  endofit  dapat menghasilkan  senyawa  bioaktif  yang karakternya  mirip  atau  sama  dengan senyawa  yang  diproduksi  oleh  tumbuhan inangnya. Senyawa bioaktif tersebut memiliki  manfaat  sebagai  antibakteri, antifungi, antivirus, antikanker,
antidiabetes, antimalaria dan imunosupresif (Strobel dan Daisy, 2003).
Senyawa  aktif  dari  jamur  endofit tumbuhan obat memiliki aktivitas antibakteri  yang  lebih  besar  dibandingkan aktivitas senyawa aktif tumbuhan inangnya  (Haniah,  2008).  Selain  itu, penggunaan  jamur  endofit  jauh  lebih efisiensi  karena  siklus  hidup  jamur  lebih singkat dibandingkan siklus hidup tumbuhan inangnya sehingga dapat menghemat  waktu  produksi  dan  tidak memerlukan  ruang  yang  besar  untuk memproduksi  senyawa  antibakteri  dengan skala  besar.  Pemanfaatan  jamur  endofit juga  bisa  menjaga  kelestarian  tumbuhan obat terutama jenis tumbuhan yang langka. Tumbuhan  tidak  perlu  dieksploitasi  terus menerus sehingga menyebabkan kepunahan. Kelebihan yang dimiliki jamur endofit  berpotensi  untuk  dikembangkan menjadi sumber bahan obat.
Jamur  endofit  telah  berhasil  diisolasi dari berbagai tumbuhan obat dan memiliki kemampuan  menghambat  bakteri  patogen. Sebanyak  3  isolat  jamur  endofit  daun cincau (2 isolat genus Aspergillus sp dan 1 isolat genus Absidia sp) berpotensi sebagai antibakteri  terhadap Salmonella  typhi (Nursulistyarini,  2014),  Jamur  endofit daun kelor dapat menghambat
pertumbuhan Escherichia
coli ,
Staphylococcus    aureus , Pseudomonas aureginosa ,  dan S.  typhi (Izza,  2011).
Jamur  endofit  daun  dan  rimpang  bangle hantu memiliki aktivitas antibakteri terhadap E.coli dan S.aureus (Fauzana,
2011).
Rumput  mutiara  ( Hedyotis  corymbosa
[L.] Lamk.) merupakan salah satu tumbuhan  obat  yang  digunakan  oleh penduduk  Indonesia  secara  empirik  untuk memelihara  kesehatannya  sejak  lama, tanaman  ini  termasuk  kedalam  famili tumbuhan  Rubiaceae.  Metabolit  sekunder rumput  mutiara  mengandung  20  senyawa aktif  berasal  dari  kelompok  flavanols, monoterpen, triterpen, cycloterpenes, seskuiterpen,  phenolik,  asam  organik, flavon.  Beberapa  fungsi  penting  dari senyawa-senyawa  tersebut  diantaranya sebagai antioksidan, antibakteri, antiinflamasi, antikanker, antitumor, antileukemik,  hepatoprotektor,  antialergi, ekspektoran, hipoglikemia, antitusif, analgesik,    hipokolesterolemik  dan  agen
kemoprotektif  (Khusnul et  al ,  2017).
Fraksi  n-heksana,  metilen  klorida  ,  etil asetat,  butanol    ekstrak  rumput  mutiara memiliki  kemampuan  sebagai  antibakteri terhadap Shigella  dysentri,  Salmonella paratyphii,  Pseudomonas  auroginosa,  B. substilis,  S.  aureus dan E.coli (Wijayanti, 2017).
Besarnya  potensi  rumput  mutiara  sebagai antimikroba  dan  berpeluang  besar  adanya mikroba  endofit  yang  berinteraksi  dengan rumput  mutiara  maka  penelitian  ini penting  dilakukan  untuk  mengetahui mikroba  endofit  rumput  mutiara  yang berpotensi sebagai agen antimikroba.

## II. METODE

## A. Medium isolasi jamur endofit
Medium  yang  digunakan  untuk pertumbuhan jamur endofit dalam penelitian ini menggunakan metode Yunianto et  al .,  dimodifikasi  (Yunianto et al , 2012).  Bubuk rumput mutiara  15g dan agar-agar  15g  dilarutkan  dengan  akuades 1000 ml dan dipanaskan sampai mendidih. Selanjutnya  media  di  sterilisasi  dengan autoklaf  selama  15  menit  pada  suhu 121 °C, tekanan 1.5 atm.

## B. Isolasi  jamur  endofit  dari  jaringan rumput mutiara
Jamur  endofit  diisolasi  dari  rumput mutiara    sehat  yang  diambil  bagian  daun, akar  dan  batang  yang  muda  dikarenakan
mengandung  banyak  asam-asam  organik dan  senyawa  fenol.  Senyawa  tersebut mencegah  perkembangan  patogen.  Bagian daun,  akar  dan  batang  rumput  mutiara kemudian  dicuci  dengan  air  mengalir selama  5  menit.  Setelah  pencucian dilakukan  sterilisasi  permukaan  dengan merendam  rumput  mutiara  dalam  larutan etanol    70%  selama  1  menit,  NaOCl selama  5  menit,  dan  etanol    70  %  selama 30  detik.  Kemudian  rumput  mutiara dibilas  dengan  akuades  steril  5  detik dengan  tiga  kali  ulangan  kemudian dikeringkan dengan tissue steril ± 1 menit. Bagian permukaan akar, batang  dan daun disayat,  bagian  dalam  permukaan  daun, batang  dan  akar  diletakkan  pada  medium isolasi  mikroba  endofit.Rumput  mutiara diinkubasi  selama  (1-14)  x  24  jam,  jamur endofit  yang  tumbuh  dimurnikan  pada media PDA.

## C. Identifikasi Jamur Endofit
Jamur  endofit  yang  telah  diinkubasi selama  (2-14)  x  24  jam  pada  suhu  kamar diidentifikasi berdasarkan ciri-ciri
makroskopis dan mikroskopis. Pengamatan  makroskopis  dengan  cara
langsung melihat warna koloni (pigmentasi  koloni)  dan  pola  penyebaran koloni jamur endofit.
Pengamatan  ciri-ciri  mikroskopis meliputi  ada tidaknya spora atau  konidia, rhizoid, tipe hifa, bentuk spora dan konidia
dengan menggunakan mikroskop. Identifikasi jamur endofit dilakukan berdasarkan  referensi  Burnett  dan  Hunter (1998) dan Watanabe (2002).

## D. Aktivitas  Antimikroba  dari  Isolat Jamur Endofit terhadap Patogen
Uji  aktivitas  antimikroba  dilakukan dengan  uji  antagonis  metode  difusi  agar. Mikroba yang digunakan yaitu Escherichia  coli , Salmonella  typimurium , Pseudomonas aeruginosa , Shigella dysentriae , Staphylococcus  aureu dan Candida  albicans .  Sebelumnya  suspensi mikroba  dengan  kepadatan  sesuai  dengan 1  Mc  Farland  dituang  di  cawan  petri .Kemudian  media  NA  dituangkan  di cawan  petri  dan    dihomogenkan  sehingga suspensi  mikroba  bisa  rata.  Pada  isolat jamur  endofit  yang  telah  tumbuh  pada media  PDA  diambil  dengan  ukuran  5x  5 mm  dan  kemudian  diletakkan  di  tengah- tengah media NA yang telah diinokulasikan patogen. Kemudian diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 °C (Virgianti dan Dewi, 2015).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## A. Isolasi  Jamur  Endofit  Rumput Mutiara
Isolasi  jamur  endofit  dari  suatu tanaman  yang berbeda bahkan dari bagian tanaman yang berbeda  dari satu tumbuhan inang  memiliki  keragaman  jenis  isolat
jamur  yang  berbeda.  Proses  isolasi  jamur endofit  dilakukan  dari  setiap  organ tumbuhan rumput mutiara. Pada pertumbuhan  jamur  di  media  isolasi selama  4  hari  pada  suhu  25˚C  ditemukan empat  belas    isolat  jamur  endofit  rumput mutiara. Dari keempat belas  jenis tersebut terdapat  tujuh  jenis  isolat  yang  berbeda pada  bentuk,  warna  dan  teksturnya. Berdasarkan buku identifikasi yang digunakan  ketujuh  jenis  jamur  tersebut termasuk  ke  dalam  genus  2  isolat  dari genus yang sama yaitu Aspergillus ke lima isolat  lain  berasal  dari  genus  Penicillium, Geotchium,  Rhizoctonia,  Chrysosporium, dan  Phytophthora.  Hasil  pemurnian  jamur endofit  dari  setiap  sampel  dapat  dilihat pada Gambar 1 dan Gambar 2.
Isolat A1, A2.1, A4, B1, B2, D1, D2, D3  didapatkan  dari  bagian  akar,  batang dan  daun  rumput  mutiara.  Isolat  ini mempunyai  ciri-ciri  warna  permukaan koloni  hitam  kecoklatan,  pinggir  warna kuning atau putih,  pigmentasi koloni krem kehijauan, tipe pertumbuhan koloni menyebar,  dan  tekstur  permukaan  koloni halus,  hifa  berseptat,  mempunyai  metula, vesikel,  konidiofor,  konidia  satu  sel berbentuk bulat. Hasil pengamatan makrokopis  dan  mikroskopi  isolat  A1, A2.1,  A4,  B1,  B2,  D1,  D2,  D3  sesuai dengan karakter Aspergillus sp. Berdasarkan buku identifikasi genus Aspergillus  memiliki  ciri-ciri  konidia  satu
sel,    konidiofor  dengan  sel  apikal  yang menggembung  yang  mengandung  banyak phialides.  Berdasarkan  warna  koloni  yang dimiliki  koloni  ini  berwarna  hitam  sesuai dengan  salah  satu  ciri  dari Aspergillus niger .  Ciri  lain  dari Aspergillus  niger yakni  konidiofor hialin atau coklat pucat, tegak, sederhana, berdinding tebal, dengan sel-selkaki    pada  dasarnya,  mengembang pada  apeks  pembentuk  vesikel  globose, kepala konidia terbagi menjadi lebih dari 4 kolom konidia longgar dengan lebih dari 4 fragmen  apikal,  terdiri  dari  konidia catenulate  (lebih  dari  15  konidia)  berasal dari phialides uniseriate atau biseriate pada coklat pucat, vesikel globose dan phialides meruncing akut di apex. Conidia phialosporous,  cokelat,  hitam,  bulat,  halus bergetar (Watanabe, 2002) .
Isolat  A2.2  ditemukan  pada  bagian akar  rumput  mutiara  yang  memiliki  ciri- ciri  warna  permukaan  koloni  hijau beludru, pinggir berwarna putih, pigmentasi koloni kuning, tipe pertumbuhan  koloni  radial,  dan  tekstur permukaan  koloni  halus  hifa  berseptat, mempunyai  fialid,  mempunyai  metula, konidiofor,  konidia  satu  sel  berbentuk bulat.  Hasil  pengamatan  makroskopis  dan mikroskopis  isolat  A2.2  sesuai  dengan karakter yang dimiliki oleh genus Penicillium . Berdasarkan hasil identifikasi dengan  acuan  Watanabe  (2002)  bahwa Penicillium mempunyai  ciri-ciri  konidia
bersel  tunggal,  konidiophores  tanpa  sel apikal  menggelembung,  konidia  hyaline, konidiophore  berkembang  dengan  baik, konidia  kering,  konidiophores  hialin, agregat spora berturut-turut, konidia globose, conidiophores mengandung penisilin (Watanabe, 2002).
Isolat  A11  ditemukan  pada  akar yang mempunyai ciri-ciri warna permukaan  koloni  hijau  kekuningan, pinggir  warna  putih,  pigmentasi  koloni krem  kehijauan,  tipe  pertumbuhan  koloni menyebar,  dan  tekstur  permukaan  koloni halus,  hifa  berseptat,  mempunyai  metula,
vesikel,  konidiofor,  konidia  satu  sel berbentuk bulat. Hasil pengamatan makroskopis  dan  mikroskopis  isolat  A11 sesuai  dengan  karakter Aspergillus sp. Menurut  Watanabe  (2002)  menyatakan bahwa Aspergillus sp.  memiliki  ciri konidia  satu  sel,    konidiofor  dengan  sel apikal yang menggembung yang mengandung banyak phialides. Berdasarkan  buku  identifikasi  isolat  A11 merupakan Aspergillus  parasitic yang memiliki ciri-ciri konidiofor tegak, sederhana,  kasar  di  permukaan,  dengan sel-sel  kaki  pada  dasarnya,  membengkak di  puncak  membentuk  vesikel  globose, kepala  konidia  radial  yang  terdiri  dari konidia  catenulate  yang  ditularkan  pada fialida  uniseriate  atau  jarang  biseriat: kepala konidia berwarna hijau kekuningan, radial, berbentuk columnar. Konidia phialosporous, hijau pucat, globose, echinulate (Watanabe, 2002).
Isolat  B12  ditemukan  pada  batang yang mempunyai ciri-ciri warna permukaan koloni hijau kecoklatan, pigmentasi koloni hitam, tipe pertumbuhan koloni  radial,  dan  tekstur  permukaan koloni  kasar,  hifa  berseptat,  mempunyai konidia  (arthoconidia).  Hasil  pengamatan makroskopis  dan  mikroskopis  karakter isolat  B12  sesuai  dengan  karakter  yang dimiliki  oleh  genus  Geotrichum yaitu kurangnya konidiofor, konidia arthrosporous,  terminal  atau  intercalari,
Gambar  1 .  Pengamatan  makroskopik  jamur  endofit rumput mutiara. A1 = Aspergillus niger , A2.2 = Penicillium, A11 = Aspergillus parasiticus , B12  =  Geotrichum,    D11=  Chrysosporium, Bu1 = Phytophthora capsici , Bu3= Rhizoctonia .
Gambar  2. Pengamatan  mikroskopik  jamur  endofit  rumput mutiara.  A1  = Aspergillus  niger ,  A2.2  = Penicillium,  A11  = Aspergillus  parasiticus ,  B12  = Geotrichum,    D11=  Chrysosporium,  Bu1  = Phytophthora capsici , Bu3= Rhizoctonia.
aerial  pada  permukaan  agar  dari  hifa merayap,  hialin,  silinder,  berbentuk  laras, subglobose, 1-sel, sering guttulate. Chlamydospores subglobose, soliter, ditanggung  di  sterigmata  pada  hifa (Watanabe, 2002).
Isolat  D11  ditemukan  pada  daun yang mempunyai ciri - ciri warna permukaan koloni putih, pigmentasi koloni krem, tipe pertumbuhan koloni konsentris, dan  tekstur  permukaan  koloni  radial,  hifa berseptat,  konidia  satu  sel  berbentuk  oval. Hasil pengamatan makroskopis dan mikroskopis  isolat  D11  sesuai  dengan karakter genus Chrysosporium yaitu mempunyai
ciri konidiophore
berdiferensiasi buruk, seperti hifa vegetatif,  sebagian  besar  tegak  dan bercabang  secara  tidak  teratur,  hialin, konidia  (aleuriospora  atau  arthrospora) hialin,  bersel  1,  globose  untuk  pyriform, terminal  atau  intercaral,  tunggal  atau dalam  rantai  pendek,  biasanya  dengan bekas  luka  basal  yang  luas,  bersifat saptofit    menggambarkan  konidia  sebagai aleurospories (Barneet dan Hunter, 1998).
Isolat Bu1 diisolasi pada bunga yang memiliki ciri-ciri warna permukaan koloni putih,  pigmentasi  koloni  putih,  tipe pertumbuhan  koloni  radial,  dan  tekstur permukaan  koloni  halus,  hifa  tidak berseptat, tidak ada sporangispora, sporangia  berbentuk  ellipsodial.  Hasil pengamatan makroskopis dan mikroskopis
isolat  Bu1  sesuai  dengan  karakter  yang dimiliki  oleh  genus  Phytophthora  yaitu hifa  aseptate,  tidak  ada  sporangiospore, sporangia  berbentuk  globose,  zoospora dibedakan  dalam  sporangia.  Berdasarkan identifikasi isolat Bu1 merupakan Phytophthora capsici Leonian yang memiliki  ciri-ciri  sporangia  berbentuk ellipsoidal  panjang,  sering  berbentuk segitiga,  atau  tidak  beraturan,  papillate khas,  seringkali  2  sampai  3  papilla  per sporangium.  Zoospora  berkembang  di dalam  sporangia.  sporangiofor  mudah patah  dan  terlepas,  organ  seksual  tidak terbentuk chlamydospores jarang terbentuk,  bundar,  berdinding  tebal  dan heterothallic (Watanabe, 2002).
Isolat  Bu3  diisolasi  pada  bagian bunga mempunyai ciri-ciri warna permukaan koloni hijau kecoklatan, pigmentasi koloni hitam, tipe pertumbuhan koloni  radial,  dan  tekstur  permukaan koloni  kasar,  hifa  berseptat,  tidak  ada konidia.  Hasil  pengamatan  makroskopis dan mikroskopis karakter isolat Bu3 sesuai dengan  karakter  yang  dimiliki  oleh  genus Rhizoctonia yaitu  konidia tidak terbentuk, hifa  berwarna  coklat  pucat,  bercabang sudut  dengan  cabang  samping  bersekat dekat  hifa  utama,  dan  menyempit  pada dasarnya, sel monilioid biasanya terbentuk,  sclerotia  diskrit  atau  agregat, berwarna  coklat  pucat  sampai  coklat,
berbagai  bentuk  dan  ukuran  (Watanabe, 2002).

## B. Laju  pertumbuhan  diameter  jamur endofit
Laju  pertumbuhan  diameter  jamur endofit  yang  dilakukan  7  hari  didapatkan jamur  Aspergillus  relatif  lebih  cepat tumbuh  dibandingkan  jamur  Penicillium, Geotrichum,Chrysosporium,  Phytophthora. dan Rhizocotonia (Gambar 3)
Pada  jamur  kode    Geotrichum, Chrysosporium, Phytophthora dan Rhizoctonia  ini  fase  lag  terjadi  pada  hari pertama sedangkan jamur Aspergillus baik dengan A.  niger dan A.  parasiticus serta Penicillium  fase  lag  terjadi  sebelum  24 jam  atau  hari  ke  nol.  Fase  log  atau  fase eksponensial merupakan fase pertumbuhan optimum  dan  terjadinya  peningkatan jumlah  sel  secara  cepat.  Pada  jamur Aspergillus niger fase log terjadi pada hari pertama  hingga  hari  keempat  selama empat  hari  terjadi  pertambahan  diameter hifa  dari  18.14  mm  menjadi  90.10  mm, sedangkan Aspergillus parasiticus fase log terjadi  pada  hari  pertama  hingga  hari ketujuh dengan pertambahan diameter hifa selama  tujuh  hari  dari  10.75  mm  menjadi 78.27  mm.  Pada  jamur  Penicillium  fase log  terjadi  pada  hari  pertama  hingga  hari ketujuh,  selama  tujuh  hari  pertambahan hifa  dari  6.43  mm  menjadi  22.21  mm. Pada  jamur  Geotrichum  fase  log  terjadi
pada hari kedua hingga hari ketiga, selama dua  hari  tersebut  pertambahan  hifa  dari 2.40  mm  menjadi  38.08  mm,  jamur Chrysosporium  fase  log  terjadi  pada  hari kedua    hingga  hari  ketujuh  dengan pertambahan  diameter  hifa  dari  4.26  mm menjadi  90.07  mm,  jamur  Phytophthora fase  log  terjadi  pada  hari  kedua    hingga hari ketujuh dengan pertambahan diameter hifa  dari  4.08  mm  menjadi  50.11  mm. Pada  jamur  Rhizoctoria  fase  log  terjadi pada  hari  kedua    hingga  hari  ketujuh dengan  pertambahan  diameter  hifa  dari 5.00 mm menjadi 39.61 mm.
Berakhirnya fase logaritmik kemudian diikuti pada fase stasioner. Pada fase  ini  sel  mulai  melambat,  sehingga jumlah  sel  yang  hidup  hampir  sama dengan  sel  yang  mati  karena  dipengaruhi oleh  nutrisi  yang  mulai  habis.  Pada  fase stasioner merupakan saat metabolit sekunder  mulai  dihasilkan.  Fase  stasioner yang  terjadi  pada  jamur A.  niger terjadi hari  ke-5  dan    jamur  kode  Geotrichum terjadi  pada  hari  ke-4.  Sedangkan    jamur Penicillium,
A.
parasiticus , Chrysosporium, Phytophthora dan Rhizoctonia belum terlihat mengalami fase stasioner hingga hari ke-7.

## C. Aktivitas antibakteri jamur endofit
Hasil pengujian aktivitas antimikroba  kelima  isolat  jamur  endofit rumput  mutiara  yang  diperoleh  terhadap
pertumbuhan keenam mikroba uji ( E. coli, St.  aureus,  P.aeruginosa,  Sh.  dysentriae, Sa.  typimurium dan C.  albicans )  dapat dilihat pada Tabel I.
Rata-rata  diameter  zona  hambat setiap  isolat  jamur  endofit  menunjukkan hasil  yang  berbeda-beda.  Isolat  A2.1 mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri E.  coli,  St.  aureus,    Sh.  disentriae, dan P.aeruginosa .  Namun,  isolat  ini  tidak mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri E.  coli,  St.  aureus,    Sh.  disentriae, dan P.aeruginosa .  Namun,  isolat  ini  tidak mampu menghambat pertumbuhan dari Sa. typimurium dan C. albicans .
Tabel I. Diameter zona hambat isolat jamur endofit rumput mutiara terhadap mikroba uji
Nama Isolat Rata-rata diameter zona hambat (mm) Ec Sa St Sd Pa Ca A. niger 9.95 8.97 0 10.51 9.26 0 Penicillium 0 0 0 0 0 0 A. Parasitucus 0 0 0 0 0 0 Chrysosporium 0 0 0 0 0 11.3 P.capsici 0 0 0 0 0 3.63
Kemampuan isolat menghambat pertumbuhan  bakteri  gram  positif  dan negatif berbeda karena perbedaan
komposisi  dari  dinding  sel  bakteri. Dinding  sel  bakteri  gram  negatif  tersusun dari  lipopolisakarida  dan  protein.  Lapisan dinding sel ini lebih tebal jika dibandingkan  dengan  penyusun  dinding sel  bakteri  gram  positif  yang  berupa peptidoglikan. Dinding sel yang tebal tentu akan  membuat  bakteri  lebih  mampu bertahan hidup jika terpapar senyawa yang dapat  merusak  dinding  selnya  (Powthong et  al ,  2013).  Ekstrak  jamur  endofit  lebih efektif  terhadap  bakteri  gram  positif  dan jamur  dibandingkan  bakteri  gram  negatif (Sadrati et al, 2013). Namun, hasil dari uji daya antimikroba isolat A2.1 menunjukkan tidak adanya pengaruh sifat
pengelompokan gram terhadap daya hambat  antimikroba  yang  dihasilkan  oleh isolat  A2.1.  Tidak  ada  hubungan  yang signifikan  antara  daya  hambat  senyawa yang  dihasilkan  jamur  endofit  dengan pengelompokan bakteri  berdasarkan  gram. Faktor  yang  justru  sangat  mempengaruhi sintesis  metabolit  sekunder  yang  berperan sebagai  antimikroba  adalah media tumbuh dari  fungi/kapang  itu  sendiri  (Ding et  al , 2010).
Isolat  A2.2  dan  A11  tidak  memiliki daya hambat terhadap pertumbuhan semua mikroba  uji.  Isolat    D11  dan  Bu1  hanya mampu  menghambat  pertumbuhan  dari C. albicans masing-masing sebesar 11.30 mm dan  3.63  mm.  Ketidaksamaan  nilai  zona hambat yang dihasilkan setiap isolat jamur
Gambar  3. Laju  pertumbuhan  hifa  jamur endofit rumput mutiara
endofit  disebabkan  karena  jenis  jamur menghasilkan  metabolit  antimikroba  yang dihasilkan  juga  berbeda-beda.  Aktifitas suatu  antibiotik  memiliki  spesifikasi  dan efektifitasnya dalam menghambat pertumbuhan  mikroba  (Mukhlis et  al, 2018).  Selain  itu,  banyaknya  metabolit sekunder  yang  dihasilkan  disebabkan  oleh penyerapan  nutrien  pada  saat  fermentasi oleh jamur endofit ( Elfina et al , 2014).
Variasi  kondisi  kultur  seperti  jenis nutrisi  dan  periode  inkubasi  dalam  media pra-fermentasi  dan /  atau fermentasi  dapat secara  kualitatif  memodifikasi  produksi metabolit  sekunder.  Selain  itu,  medium pertumbuhan mempengaruhi massa miselia  dan  peningkatan  metabolisme sekunder terutama peptide sebagai sumber nitrogen  (Elias et  al ,  2006).  Kondisi tempat  tumbuh  yang  sesuai  menjadi  salah satu  faktor  yang  mempengaruhi  ekspresi enzimatik yang berperan dalam memproduksi  metabolit  sekunder.  Jamur yang jenisnya sama tapi hidup pada media atau  tumbuhan  inang  yang  berbeda  akan menghasilkan senyawa metabolit sekunder yang berbeda (Elias et al, 2006; Borges et al , 2009).
Kondisi optimal juga memainkan peran penting dalam hal pembentukan produk diantaranya periode inkubasi, pH, suhu dan aerasi. Kondisi optimum dari jamur marine yaitu periode inkubasi 144 jam, pH 8 dan 7, suhu  25 ° C dan 30 ° C,
aerasi dengan kecepatan agitasi 150 rpm (Anuhya et al , 2017).

## IV. KESIMPULAN
Penelitian  ini  dapat  disimpulkan bahwa  hasil  dari  isolasi  jamur  endofit rumput  mutiara  terdapat  7  jamur  endofit dari  tumbuhan  rumput  mutiara  yang diindentifikasi  yaitu  2  jenis  dari  genus Aspergillus  yang  dari  akar,  batang,  daun rumput  mutiara,  Penicillium  berasal  dari akar  rumput  mutiara,  Geotrchihum  dari batang, Chrysosporium dari daun, Phytophora    dan  Rhizoctonia  dari  bunga. Pada jamur Geotrichihum, Chrysosporium, Phytophora    dan  Rhizoctonia  ini  fase  lag terjadi hari pertama dan  fase  eksponensial terlihat  pada  hari  kedua.  Pada  jamur Aspergillus,  Penicillium fase eksponensial terjadi dari hari pertama. Jamur Aspergillus  kode  A1  fase  stationer  terjadi sampai hari ke-5 dan Geotrichum  dan hari ke-4 memasuki fase stationer. Kemampuan  antimikroba    jamur  endofit memiliki  daya  hambat  yang  berbeda-beda terhadap  mikroba  patogen E.  coli,  St. aureus,  Sa.typimurium,  Sh.  disentriae,  P. aeruginosa dan C. albicans.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti  mengucapkan  terima  kasih kepada  KEMENRISTEK    DIKTI    yang telah  memberikan  bantuan  dana  melalui Hibah        Penelitian        Dosen        Pemula Tahun Pelaksanaan 2019

## DAFTAR PUSTAKA
Anuhya G., Jyostna V, Aswani.
K.Y.V.V., Bodaiah. B., Sudhakar. P, 2017, Influence of Physico-Chemical
Parameters on Secondary Metabolite
Production by Marine Fungi, International  Journal  of  Current Pharmaceutical  Research ;  9(5)  : 112-118.
Barnnet,  H,  L  and  Hunter,  B,B,  1998, Illustrated  Genera  of  Imperfect Fungi .  American  Phytopathological Society Press, USA.
Borges,  K.  B.,  Borges,  W.  D.  S.,  Durán- Patrón,  R.,  Pupo,  M.  T.,  Bonato,  P. S.,  &  Collado,  I.  G.,  2009, Stereoselective Biotransformations
Using Fungi as Biocatalysts, Tetrahedron  Asymmetry ;20(4)  : 385– 397.
Ding,  T.,  Jiang,  T.,  Zhou,  J.,  Xu,  L.,  &
Gao,  Z.  M.,  2010,  Evaluation  of Antimicrobial Activity of Endophytic Fungi from Camptotheca acuminate (Nyssaceae), Genetics and
Molecular  Research ;  9(4)  :  2104– 2112.
Elfina  D.,  Atria.  M.,  Rodentsia.  MR., 2014, Isolasi dan Karakterisasi Fungi Endofit  dari  Kulit  Buah  Manggis ( Garcinis  mangostana L.)  sebagai Antimikroba Terhadap Candida albicans,  Staphylococcus  aureus, dan Escherichia coli, JOM, 1-4.
Elias.B.C,  Said.  S.,  Albuquerque.S.E.,
Pupo.  M.T.,  2006,  The  influence  of Culture Conditions on The Biosynthesis of Secondary Metabolites by Penicillium
verrucosum Dierck, Microbiological Research ;161(3) : 273-280.
Fauzana  S.,  2011,  Isolasi  dan  potensi bakteri endofitik penghasil antibiotika  dari  tanaman  sirih  merah ( Piper  crocatum Ruiz  &  Pav.),
Skripsi ,  Jurusan  Biologi  Fakultas
Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam Universitas Andalas, Padang.
Haniah  M.,  2008,  Isolasi  jamur  endofit dari  daun  sirih  ( Piper  Betle L.) sebagai antimikroba terhadap Escherichia  coli,  Staphylococcus aureus dan Candida albicans , Skripsi , Fakultas Sains dan Teknologi  Universitas  Isam  Negeri Malang, Malang.
Izza  I.,  2011,  Isolasi,  Karakteristik  dan identifikasi  bakteri  endofit  dari tanaman  mahkota  dewa  ( Phaleria macrocarpa ) yang berpotensi
sebagai penghasil antimikroba, Skripsi , Program studi Biologi Fakultas Sains dan Teknologi Universitas  Islam  Negeri  Sunan Kalijaga, Yogyakarta.
Khusnul,  Wahyuni  H.S.,  Virgianti  D.P., 2017,  Identifikasi  Jamur  Endofit Pada Daun Cincau  ( Cyclea  barbata Miers.)  dan  Uji  Antagonis  Terhadap Salmonella typhi . Jurnal Kesehatan Bakti  Tunas  Husada ;  17(2)  :  406-
413.
Mukhlis.  D.K.,  Rozirwan.,  Hendri.  M.,
2018, Isolasi dan Aktivitas Antibakteri Jamur Endofit Mangrove Rhizophora  apiculata dari  Kawasan Mangrove Tanjung Api-Api Kabupaten Banyuasin Sumatera
Selatan, Maspari  Journal ;  10(2)  : 151-160.
Nursulistyarini  F.,  2014,  Isolasi  dan identifikasi bakteri  endofit penghasil antibakteri dari daun tanaman binahong ( Anredera cordifolia (Ten.)  Steenis), Skripsi ,  Program studi  Biologi  Fakultas  Sains  dan Teknologi  Universitas  Islam  Negeri Sunan Kalijaga, Yogyakarta.
Powthong, P., Jantrapanukorn, B., Thongmee, A., & Suntornthiticharoen, P., 2013, Screening of Antimicrobial
Activities  of  the  Endophytic  Fungi Isolated  from Sesbania  grandiflora (L.),  Pers. Journal  Agricultural
Sciences  Technology ;15:  1513– 1522.
Sadrati,  N.,  Daoud,  H.,  Zerroug,  A.,
Dahamna, S., & Bouharati, S., 2013, Screening  of  Antimicrobial  and Antiaxidant  Secondary  Metabolites Endophytic  Fungi  Isolated  from Wheat  ( Triticum  durum ), Jounal  of Plant  Protection  Research ;  53(2):
128–136.
Strobel, G.  dan  Daisy,  B.,  2003, Bioprospecting for microbial endophyte  and  their  natural  product,
Microbiology and Moleculer Biology
; 67: 491-502.
Virgianti,  Dewi  P.,  2015,  Uji  Antagonis
Jamur Tempe ( Rhizopus sp.)
Terhadap  Bakteri  Patogen  Enterik,
Jurnal Biosfera ; 3(2) : 162, 2015.
Watanabe T., 2002, Pictorial Atlas of Soil and  Seed  Fungi  :  Morphologies  of Cultured  Fungi  and  Key  to  Species . Second  Edition,  CRC  Press  ,  New York.
Wijayanti  T.,  2017,  Skrining  Senyawa Metabolit Sekunder Ekstrak Rumput Mutiara  ( Hedyotis  Corymbosa (L.) Lamk.)  Dengan  Metode  GC-MS. Jurnal Florea ; 4(1) : 24-35.
Yunianto  P,  Rosmalawati  S,  Rachmawati I,  Suwarso  WP  and  Sumaryono  W, 2012,  Isolation  and  Identification  of Endophytic  Fungi  from  Srikaya Plants  ( Annona  squamosa )  Having Potential  Secondary  Metabolite  as
Anti- Breast Cancer Activity, Microbiology ; 6 (1) : 23-29,