## DAYA REDUKSI MERKURI ISOLAT BAKTERI YANG DIISOLASI DARI  URINE PASIEN DI PUSKESMAS BAHU MANADO

## Fatimawali 1
Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
The  aim  of  this  research  was  to  analyze  mercury  reduction  power  from  patient  urine  with teeth  amalgam  which  used  for  mercury  detoxification.  The  research  was  descriptive  which isolate 5 samples of patient urine from  Bahu PUSKESMAS. Bacteria were grow in a media wich  consist  of  5,  10,  20,  40  and  60  ppm  of  HgCl 2 .  Bacteria  which  grow  in  the  highest concentration of mercury were identified and tested it reduction power against HgCl 2 . The  result  shows  that  there  were  3  isolates  which  bacteria  can  grow  with  HgCl 2 60  ppm namely  Isolate  U1.3, U3.1,  and  U3.3.  Identification result found that  isolate U1.3  and  U3.1 were positive  gram  bacteria, rod,  and motil,  although U3.3  was negative gram  bacteria, rod and not motil. Result of mercury reduction shows that in  24 hours, the three isolates reduce 100%  mercury  in  nutrient  broth,  it  concluded  that  isolates  were  highly  resistant  mecury bacteria. It can be used to detoxify mercury.
Key words : mercury reduction, urine, PUSKESMAS

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menganalisis  daya  reduksi  merkuri  dari  urine  pasien  dengan tumpatan  amalgam  gigi  yang  dapat  digunakan  untuk  detoksifikasi  merkuri.  Penelitian  ini bersifat  deskriptif,  dimana  bakteri  diisolasi  dari  5  sampel  urine  pasien  yang  berobat  di  poli gigi Puskesmas Bahu, yang mengalami tumpatan amalgam gigi. Bakteri ditumbuhkan dalam media  yang  mengandung  5,  10,  20,  40  dan  60  ppm  HgCl 2 .  Bakteri  yang  tumbuh  pada konsentrasi  HgCl 2 paling  tinggi,  dilakukan  identifikasi  mikrobiologi,  dan  diuji  daya reduksinya terhadap merkuri HgCl 2 .
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa,  terdapat  3  isolat  bakteri  dapat  tumbuh  dalam  media nutrient  broth  dengan  kadar  HgCl 2 60  ppm  yaitu  Isolat  U1.3,  U3.1,  dan  U3.3.  Hasil identifikasi mikrobiologi dari ketiga isolat ini, diperoleh bahwa isolat U1.3 dan U3.1 adalah bakteri  Gram  positif,  berbentuk  batang,  dan  motil,  sedangkan  U3.3  adalah  bakteri  Gram negative,  berbentuk  batang  dan  tidak  motil.  Hasil  uji  daya  reduksi  terhadap  merkuri  HgCl 2 , menunjukkan  bahwa  dalam  waktu  24  jam,  ketiga  isolat  dapat  menurunkan  100%  kadar merkuri  dalam  media  nutrient  broth,  dengan  demikian  ketiga  isolat  bakteri  yang  diperoleh merupakan  bakteri  resisten  merkuri  yang  sangat  tinggi,  sehingga  dapat  digunakan  dalam penelitian selanjutnya dalam proses detoksifikasi merkuri..
Kata kunci : reduksi merkuri, urin, PUSKESMAS

## PENDAHULUAN
Sumber utama merkuri pada kebanyakan  orang  adalah  tambalan  gigi amalgam, khususnya amalgam yang tercampur  dalam  air  liur.  Kebanyakan merkuri  dalam  air  liur  adalah  organik, sejak bakteri mulut dan organisme lainnya dalam  tubuh  mengubah  metil  merkuri anorganik menjadi bentuk merkuri organik. Merkuri dari amalagam mengandung  metil  yang  disebabkan  oleh bakteri  dan Candida  albicans yang terdapat  di  dalam  mulut  dan  usus.  Sekali saja uap merkuri (metil merkuri) dikonversikan  menjadi  merkuri  anorganik dalam  sel  atau  otak,  maka  merkuri  tidak akan  bisa  keluar  dari  membran  sel  atau blood-brain  barrier. Merkuri adalah logam non  radioaktif  yang  paling  beracun  yang ada  di  lingkungan.  Sangat  beracun  bagi manusia  dan  dalam  jumlah  berapa  pun berbahaya  bagi  sel  dan  jaringan  tubuh manusia.  Sifat merkuri yang sangat toksik ini,  membuat  banyak  peneliti  yang melakukan penelitian tentang detoksifikasi merkuri. Salah satu usaha untuk detoksifikasi  merkuri  dapat  dilakukan dengan  menggunakan  mikroorganisme resisten  merkuri,  misalnya  bakteri  resisten merkuri. Detoksifikasi merkuri oleh bakteri  resisten  merkuri  terjadi  karena bakteri  resisten  merkuri  memiliki  gen resisten  merkuri,  merOperon  (Silver  and Phung, 1998). Struktur merOperon berbeda untuk setiap jenis bakteri. Umumnya  struktur  merOperon  terdiri  dari gen  metaloregulator  (merR),  gen  transfor merkuri (merT, merP, merC), gen merkuri reduktase (merA) dan organomerkuri liase (merB).    Bakteri  yang  hanya  memliki  gen merkuri  reduktase  (merA)  disebut  bakteri resisten  merkuri  spectrum  sempit.  Ada beberapa bakteri  yang memiliki selain gen merA,  juga  gen  merB  maka  bakteri tersebut  disebut  bakteri  resisten  merkuri spectrum  luas.  MerA  mempunyai  fungsi mereduksi  ion  merkuri  yang  toksik menjadi  logam  merkuri  Hg(O)  yang kurang  toksik  dan  mudah  menguap  pada suhu  kamar,  sedangkan  merB  mempunyai
fungsi  mengkatalisis  pemutusan  ikatan merkuri-karbon sehingga dihasilkan senyawa  organik  dan  ion  Hg(II)  (Barkay T, 2003).
Penumpatan  atau  penambalan  gigi merupakan salah satu cara untuk mempertahankan  gigi  karies  agar  tidak dicabut.  Berbagai  macam  bahan  tumpatan dikenal  dalam  kedokteran  gigi , misalnya  : amalgam,  akrilik  resin  nirpasi,  komposit berbasis resin,  seng fosfat. Sampai saat  ini amalgam merupakan bahan tumpatan yang paling  banyak  dikembangkan  dan  diuji dibandingkan bahan tumpatan lain, karena awet,  mudah  digunakan,  tidak  mudah pecah  dan  relatif  murah  . Merkuri  yang merupakan  kandungan  utama  amalgam merupakan logam berat  alamiah  yang bisa berdampak buruk bagi kesehatan manusia. Keracunan  merkuri  dapat  menyebabkan kerusakan  sistem  saraf  pusat,  kerusakan ginjal,  kerusakan  paru-paru,  pada  janin dapat  menimbulkan  cacat  mental,  buta, dan serebral palsy, dan bisa meningkatkan angka kematian (Pamuryanto R, 2007).
Diketahui  bahwa  bakteri  yang resisten  terhadap  merkuri  mempunyai kemampuan  untuk  menurunkan  toksisitas atau detoksifikasi merkuri melalui mekanisme  enzimatis.  Bakteri  ini  mampu untuk  mereduksi  ion  Hg 2+ menjadi  Hg 0 oleh  enzim  merkuri  reduktase  (Silver  and Phung,  2005). Oleh  karena  itu,  penelitian ini  bertujuan  mencari  gambaran  bakteri pereduksi  merkuri  pada  pasien  tumpatan amalgam  untuk  diteliti  lebih  lanjut potensinya  demi  menghindari  efek-efek paparan merkuri pada tubuh manusia.

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  selama    3 bulan  yaitu  pada  bulan  Agustus  2012 sampai    Oktober  2012,  yang  dilaksanakan di  Laboratorium    Bioteknologi  FMIPA UNSRAT Manado.

## Alat dan Bahan Penelitian
Alat  –alat  yang digunakan pada penelitian meliputi  pH  meter,  termometer,  autoklaf,
inkubator,  cawan  petri,  tabung  reaksi, jarum  ose,  erlenmeyer,  gelas  ukur, beker glass ,  spatula,  timbangan  analitik,  pipet ukur, pipet tetes, kaca slide/objek, mikroskop,  lampu spritus, tabung durham, tabung hush, aluminium foil, plastik wrap, mikropipet, tabung ependorf, sarung tangan dan hotplate.
Bahan yang digunakan yaitu limbah  pertambangan  (Tanah)  dan  bahan kimia  yang  digunakan  seperti  aquades, alkohol, nutrient  agar,  nutrient  broth , NaCl, yeast ekstrak,  peptone,  safranin, kristal  violet,  kaldu  karbohidrat/ fenol  red (maltosa,  glukosa,  laktosa), motility  test medium , simon  citrate  agar , Triple  Sugar Iron (TSI) agar , MT-3 agar.
Pengambilan Sampel dan Uji resistensi Merkuri dari Bakteri
Sampling dilakukan dengan mengambil  urine  dengan  volume  0,5-1  ml pada  pasien  poli  gigi  dengan  tumbatan amalgam  dengan  bantuan disposable injection (tanpa jarum suntik).
Urine  disuspensikan  ke  dalam buffer  saline  0,9%.    Sebanyak  100  µL larutan jernih sampel yang telah disuspensi dalam  buffer  salin  diinokulasi  pada  media nutrient  broth ( yeast  extract 2  g/L, bacto pepton 5  g/L,  NaCl  5  g/L)  yang mengandung  0,  10,  20,  40  dan  60  mg/l HgCl 2 dan  diinkubasi  pada  temperatur  37 o C selama 24 jam.

## Identifikasi Mikrobiologi
Media  yang  mengandung  HgCl 2 paling tinggi yang dapat ditumbuhi bakteri resisten  merkuri,  dilakukan  isolasi  bakteri dan  ditumbuhkan  pada  media  nutrient agar.  Selanjutnya  dilakukan  identifikasi terhadap  pewarnaan  Gram,  morfologi (bentuk) dan motilitas.

## Uji Daya Reduksi  Merkuri dari Bakteri Resisten Merkuri
Diambil  1 Öse Bakteri  resisten merkuri  tinggi  dari  media  agar  padat.
Ditanam  dalam  media  nutrient  broth  yang mengandung  50  mg/l  HgCl 2 .  Diinkubasi pada suhu 37 o C  selama 1 jam , 12 jam dan 24  jam.  Pada  akhir  inkubasi,  ditambahkan H 2 SO 4 pekat  2  tetes  untuk  membunuh bakteri   untuk  selanjutnya dianalisis kadar merkuri  dengan  metode  analisis  CVAAS dan  dilakukan analisis blanko.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Uji Resisten Merkuri dari Bakteri
Hasil pemeriksaan resistensi merkuri HgCl 2 bakteri  yang diperoleh dari 5  sampel  urine  ditampilkan  pada  Tabel  1. Sebanyak  20  isolat  yang  berasal  dari  5 sampel  urine  tumbuh  pada  media  NB dengan  konsentrasi  HgCl 2 10  mg/l,  17 isolat  yang  tumbuh  pada  konsentrasi HgCl 2 20 mg/l dan 15 isolat  yang tumbuh pada  konsentrasi  HgCl 2 40  mg/l,  serta 3 isolat  yang  tumbuh  pada  konsentrasi HgCl 2 60 mg/l. Bakteri yang tumbuh pada media  dengan  kadar  HgCl 2 5  mg/l  dapat dikatakan bahwa bakteri tersebut memiliki tingkat ketahanan merkuri anorganik tinggi (Canstein et  al dalam  Risa  Nofiani  dan Gusrizal, 2004).  Terdapat perbedaan tingkat  resistensi  dari  ke  20  isolat  bakteri. Perbedaan  resistensi  ini  berhubungan dengan mekanisme respon terhadap merkuri.
Secara  umum,  respon  terhadap kondisi  stress  oleh  bakteri    dapat  melalui beberapa  variasi  mekanisme,  seperti  :  (1) Penghambatan    metabolisme    selluler sehingga  pertumbuhan  sel  terhambat  atau mati.  (2)  Induksi  kerja  operon  resistensi merkuri  sehingga  sel  tetap  hidup  dalam kondisi   stress.  (3) Terbentuknya  plasmid dengan  gen  resistensi  merkuri.  Bakteri yang  hanya  dapat  hidup  pada  media dengan  HgCl 2 5  mg/l,  kemungkinan memiliki  respon  dengan    menghambat metabolisme  selluler  sehingga    sel  bakteri mati,  sedangkan  yang  dapat  hidup  pada konsentrasi  HgCl 2 10  mg/l  atau  lebih besar,    diduga  mengandung  gen  resistensi merkuri  (Smit et al. , 1998).
Tabel  1. Hasil pengujian pertumbuhan bakteri pada media Nutrien Broth (NB) yang mengandung merkuri anorganik (HgCl 2 )
Ketiga  isolat  yang  tumbuh  pada  media nutrient  broth  dengan  kadar  merkuri tertinggi  yaitu 60 mg/l,  adalah U1.3, U3.1 dan  U3.3.  Ketiga  isolat  ini  kemungkinan mempunyai gen resistensi merkuri anorganik (gen resistensi merkuri spectrum sempit.  Terhadap  ketiga  isolat  bakteri resisten  merkuri  yang  diperoleh  ini, dilakukan  penelitian  selanjutnya  untuk mengetahui  genus  atau  jenis  bakteri resisten  merkuri  dan  kemampuannya dalam mereduksi merkuri anorganik HgCl 2.

## Identifikasi Bakteri secara Mikrobiologi
Terhadap  ketiga  isolat  yang  resisten merkuri paling tinggi dilakukan identifikasi mikrobiologi.

## Uji  Pewarnaan  Gram  dan  Bentuk Bakteri
Dalam    uji  pewarnaan  Gram  dapat diketahui  struktur  dinding  sel.  Adanya perbedaan struktur luar dinding sel bakteri gram positif dan gram negatif mengakibatkan    adanya  perbedaan  warna antara  keduanya  pada  akhir  prosedur pewarnaan gram. Bakteri gram positif akan memberikan respon warna ungu atau violet (kadang-kadang  kehitaman).  Bakteri  ini memiliki  dinding  sel  yang  terdiri  dari peptidoglikan  tebal  tanpa  lapisan  protein dan  lipopolisakarida.  Dari  hasil  penelitian didapatkan  2  isolat  merupakan  bakteri Gram  positif  dan  berbentuk  batang  yaitu U1.3 dan U3.1. Bakteri Gram negatif akan memberikan  respon  warna  merah  atau merah  muda.  Bakteri  ini  memiliki  lapisan peptidoglikan  yang tipis  dan mudah pecah
dan dilapisi oleh protein dan lipopolisakarida  pada  bagian  luar.  Hasil penelitian  menunjukkan  1    isolat  bakteri merupakan  bakteri  gram  negatif,  bentuk batang, yaitu isolat U3.3.  Hasil pewarnaan Gram  ini  dapat  dilihat  pada  Tabel  2. Bakteri Gram-positif berwarna ungu disebabkan  kompleks  zat  berwarna  kristal violet  yodium    tetap  terikat  pada  dinding sel  bakteri  meskipun  diberi  larutan pemucat,  sedangkan  bakteri  gram-negatif berwarna  merah  karena  kompleks  tersebut larut  sewaktu  pemberian  larutan  pemucat dan  kemudian  menyerap  zat  warna  kedua (safranin) yang berwarna merah.
Perbedaan hasil perwarnaan ini disebabkan perbedaan  struktur  dinding  sel  kedua kelompok  bakteri  tersebut.  Perbedaan struktur  dinding  sel  bakteri  gram-positif dan  gram-negatif  menyebabkan  perbedaan reaksi  dalam  permeabilitas  zat  warna  dan penambahan  larutan  pemucat.  Sebagian besar  dinding  sel  bakteri  gram-negatif memiliki  kandungan  lipida  yang  tinggi dibandingkan  dengan  sel  bakteri  gram- positif. Lipida ini akan larut dalam alkohol yang  digunakan  sebagai  larutan  pemucat, sehingga  pori-pori  dinding  sel  membesar dan  meningkatkan  daya  larut  kompleks violet  iodium  pada  dinding  sel  bakteri gram-negatif.  Pengujian  ini  bertujuan untuk menentukan karakteristik mikroskop setiap galur bakteri uji.

## Uji Motilitas
Uji motilitas dilakukan pada media semisolid.  Hasil  pengujian  bakteri  ini bervariasi,  ada  yang  motil  dan  non  motil. Dikatakan  motil  atau  uji  motilitas  positif,
maka  akan  terbentuk  perbendaran  atau pelebaran pertumbuhan  di  sekitar tusukan. Hasil  negatif  jika  tidak    ada    perbendaran atau    pelebaran  pertumbuhan  di  sekitar tusukan.  Hasil  uji    menunjukkan    dua isolat  yang  diperiksa  menunjukkan  positif adanya pergerakan bakteri (motil). Motilitas bakteri ini terlihat karena adanya pertumbuhan    melebar  atau    penyebaran yang  berwarna  putih  seperti  akar  disekitar
inokulasi.  Hal  ini  menunjukkan  adanya pergerakan dari bakteri yang diinokulasikan, yang berarti bahwa bakteri ini memiliki flagella (alat gerak)  yang ada pada  permukaan  sel  karena  tidak  semua bakteri memiliki struktur  ini, yang berfungsi dalam pergerakan bakteri. Sedangkan satu isolai U3.3. tidak memperlihatkan adanya pergerakan.
Tabel  2. Hasil Uji Mikrobiologi Bakteri Resisten merkuri
Analisis  Daya  Reduksi  Merkuri  dari Bakteri Resisten Merkuri Anorganik Menurut    Vetriani et  al .,  2004, bakteri resisten merkuri tinggi mengandung mer operon  yng  mengkode flavoenzim,  merkuri  reduktase  yang  dapat mereduksi    ion  Hg 2+ menjadi  Hg 0 yang kurang  toksik.  Pada  penelitian  ini  telah dilakukan uji daya reduksi merkuri bakteri yang  resisten  merkuri    tinggi  yaitu  isolat U1.3, U3.1 dan U3.3 . Isolat ditumbuhkan dalam    media  nutrien  broth    yang mengandung HgCl 2 50 mg/l  selama 1 jam, 12 jam dan 24 jam, dilakukan juga kontrol HgCl 2 dan  media.  Analisis  dilakukan dengan    metode  analisis  CV-AAS.  Hasil analisis  menunjukkan  bahwa  ketiga  isolat bakteri resisten merkuri dapat menurunkan kadar Hg  dalam waktu  1, 12 dan 24 jam. Hasil  pengukuran  konsentrasi    merkuri terlihat pada Tabel 3.
Dari Tabel 3,  terlihat bahwa dalam waktu  1  jam,  bakteri  dapat  menurunkan konsentrasi  merkuri  dalam  media  yaitu isolat  U1.3  :7.6%,  U3.1:  12%,  dan  U3.3  : 21.8%. Dalam waktu 12 jam semua kultur bakteri menurunkan kadar merkuri hampir 100%  dalam  media,  sedangkan  dalam waktu  24  jam,  semua  isolat  dapat menurunkan  kadar  merkuri  sampai  100%. Ketiga isolat bakteri ini diduga mengandung  gen mer A  yang  terlibat dalam  mekanisme  resistensi  merkuri, dimana  gen mer A  yang  menyandi  protein yang  dapat  mereduksi  Hg 2+ menjadi  Hg 0 . Terhadap  ketiga  isolat  bakteri  ini,  dapat dilakukan isolasi DNA genom dan plasmid untuk  analisis  gen mer A  yang  dapat digunakan  untuk  detoksifikasi  merkuri anorganik.
Tabel  3. Analisis Konsentrasi HgCl 2 dengan CV-AAS
Penurunan  konsentrasi  merkuri  dalam kultur  yang  mengandung  bakteri  resisten merkuri karena bakteri tersebut mempunyai  enzim  sitosolik    flavoenzim merkuri  ion  reduktase  yang  mengkatalisis reduksi Hg 2+ menjadi Hg 0 dengan NADPH sebagai donor elektron (Fox and Walsh,1981  ;    Zeroual et  al .,  2003)  .  Hg 0 yang  terbentuk  tereliminasi  dari  sel melalui  difusi  pasif  dibawah  kondisi fisiologik  yang  normal,  karena  tingginya tekanan  uap  dari  logam  merkuri  ini sehingga  terjadi  penguapan  merkuri  dari media  (Chang et  al .,  1993).    Proses  ini merupakan    suatu  detoksifikasi  merkuri dimana  logam  merkuri    yang  terbentuk bersifat volatile sehingga dapat berpenetrasi  keluar    dari  media  (Barkay and Summer, 2003).

## PENUTUP Kesimpulan
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa, terdapat  3  isolat  bakteri  resisten  merkuri anorganik yang dapat tumbuh dalam media nutrient broth dengan kadar HgCl 2 60 ppm yaitu  isolat  U1.3,  U3.1  dan  U3.3.  Hasil identifikasi  mikrobiologi  dari  ketiga  isolat ini,  diperoleh  bahwa  isolat  U1.3  dan  U3.1 adalah  bakteri  Gram  positif,  berbentuk batang,  dan  motil.  Sedangkan  isolat  U3.3 adalah  bakteri  Gram  negatif,  berbentuk batang,  dan  tidak  motil. Hasil  uji  daya reduksi terhadap merkuri anorganik HgCl 2 , menunjukkan bahwa dalam waktu 24 jam,
ketiga  isolat  dapat  menurunkan  100% kadar merkuri dalam media nutrient broth, dengan demikian ketiga isolat bakteri yang diperoleh  merupakan  bakteri  resisten merkuri  anorganik  yang  sangat  tinggi, sehingga dapat digunakan dalam penelitian selanjutnya  dalam  proses  detoksifikasi merkuri.

## Saran
Bakteri  resisten  merkuri  anorganik yang diperoleh pada penelitian ini dilakukan amplifikasi gen resistensi merkuri mer A  untuk  digunakan  dalam proses detoksifikasi merkuri secara enzimatik..

## DAFTAR PUSTAKA
Barkay . T,  Miller  SM,  Summers  AO. 2003.  Bacterial  mercury  resistance from atoms to ecosystems. FEMSMicrobiol Rev, 27: 355-384. Fatimawali,  Billy  Kepel,  Irawan  Yusuf, Rosdiana  Natsir,  Fatmawaty,  2009, “Populasi  Bakteri  pada  Tanah Buangan  Limbah  Merkuri  Tambang Emas di kabupaten Bolaang Mongondow” : Penelitian
Pendahuluan ,  Jurnal  Kedokteran Yarsi,  ISSN:0854-1159,  vol.17  No.2 Mei-Agustus  2009.,  Univ.  Yarsi,
Jakarta.
Iohara  K,  Iiyama  R,  Nakamura  K,  Silver S, Sakai M, Takeshita M, Furukawa K.  2001.  The  Mer  operon  of  a
mercury-resistant Pseudoalteromonas haloplanktis strain  isolated  from  Minamata  Bay. Japan  Appl.  Microbiol  Biotechnol, 56: 736-741.
Kepel  BJ.  2009.  Isolasi  dan  identifikasi bakteri resisten merkuri pads sediment  tanah  buangan  limbah pertambangan emas rakyat di Tatelu, Minahasa  Utara.  FK-Unsrat  :  Hasil penelitian, belum dipublikasikan.
Liebert  CA,  Wireman  J,  Smith  T,
Summers  AO.  1997.  Phylogeny  of Mercury  Resistance (mer) Operons of  Gram-Negative  Bacteria  Isolated from  the  Fecal  Flora  of  Primates.
App  Environment  Microbiol,  63(3):
1066 -1076.
Osborn  AM,  Bruce  KD,  Strike  P,  Ritchie DA.  1997.  Distribution,  diversity
and  evolution  of  the  bacterial mercury  resistance  (mer)  operon. FEMSMicrobiol Rev, 19: 239-262.
Pamuryanto  R.  Dampak  kesehatan  akibat merkuri.
Disampaikan pada lokakarya penutupan kampanye
nasional: Penyadaran bahaya merkuri  dan  penggunaan  teknologi pengolahan  emas  yang  lebih  aman, Kasongan, 21 februari, 2007 Silver  S,  Phung  LT.  2005.  A  bacterial view of the periodic table: genes and proteins  for  toxic  inorganic  ions. J Ind  Microbiol  Biotechnol,  32(11- 12): 587-605.
Suheryanto, Soetarto ES, Sugiharto E, Djohan TS. Bakteri resisten metilmerkuri dari sedimen sungai Sangon Kulonprogo DIY. Berkala ilmiah biologi 2008; 7(2): 43-51