## ANTIDIABETIC ACTIVITY TEST OF BITTER GOURD EXTRACT AS INHIBITOR OF αGLUCOSIDASE ENZYME BY IN SILICO

## UJI AKTIVITAS ANTIDIABETES EKSTRAK BUAH PARE SEBAGAIINHIBITOR ENZIM αGLUKOSIDASE SECARA IN SILICO
Kezya Bonita Wowor 1)* , Widhi Bodhi 1) ,  Olvie S. Datu 1) , Axl L. L Windah 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115 *bonitakezya30@gmail.com

## ABSTRACT
Diabetes  mellitus  is  a  metabolic  disorder  that  interferes  with  the  metabolism  of  carbohydrates,  fats,  and proteins. This study aims to determine the types of bioactive  compounds contained  in bitter melon extract and to analyze interaction of targeted compounds against the α -glucosidase enzyme using the in silico approach. The results of the analysis using GCMS used toobtain information on bioactive compounds that will be used as ligands to be attached to the α-glucosidase enzyme. Furthermore, the potential ability of each compound as antidiabetic  was  test  using  PyRx  applicationand  Acarbose  was  its  control.  This  research  proves that  the compound Spirost-8-en-11 one, 3 hydroxy, (3ß,5a,14ß, 20ß, 22ß, 25R) with a binding affinity of -9.0 kcal/mol and  Cholesta-8,24-dien  -  3-ol,  4-methyl-,  (3ß,4a)-  with  a  binding  affinity  of  -8.3  kcal/mol  have  a  good conformation. From this study can be concluded that the two compounds can be developed as antidiabetic.
Keywords : Bitter Melon (Momordica charantia), antidiabetic, α - Glucosidase enzyme, molecular docking

## ABSTRAK
Diabetes melitus merupakan kerusakan metabolisme yang mengganggu metabolisme karbohidrat, lemak, dan protein. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui jenis senyawa bioaktif yang terkandung dari ekstrak buah Pare  dan  menganalisis  interaksi  senyawa  yang  ditargetkan  terhadap  enzim  α-  Glukosidase  menggunakan pendekatan  in  Silico.  Hasil  dari  analisis  menggunakan  GCMS  digunakan  untuk  mendapatkan  informasi senyawa  -  senyawa  bioaktif  yang  akan  dijadikan  ligan  untuk  ditambatkan  pada  enzim  α  –  glukosidase. Selanjutnya kemampuan potensial setiap senyawa sebagai antidiabetes diuji menggunakan aplikasi PyRx dan kontrolnya  adalah  Acarbose.  Penelitian  ini  membuktikan  bahwa  senyawa  Spirost-8-en-11  one,  3  hydroxy, (3ß,5a,  14ß,  20ß,  22ß,25R)  dengan  binding  affinity  -9.0  kkal/mol  dan  Cholesta-8,24-dien-3-ol,  4-methyl-, (3ß,4a)-  dengan  binding  affinity  -8.3  kkal/mol  memiliki  konformasi  yang  baik.  Penelitian  ini  dapat disimpulkan bahwa  kedua senyawa tersebut dapat dikembangkan sebagai antidiabetes.
Katakunci : Buah Pare (Momordica charantia), antidiabetes, enzim α- Glukosidase, docking molekuler

## PENDAHULUAN
Diabetes  melitus  (DM)  merupakan  kerusakan metabolisme  yang  mengganggu  metabolisme karbohidrat,  lemak,  dan  protein.  Kondisi  ini  akan meningkatkan kadar gula dalam darah menjadi di atas normal (hiperglikemia) yang diakibatkan oleh menurunnya sekresi dan aktivitas  insulin (Hardoko et al ., 2014).
Masyarakat Indonesia menggunakan tanaman  berkhasiat  obat sebagai  salah  satu  upaya dalam menanggulangi masalah kesehatan. pengetahuan  tentang  tanaman  berkhasiat  obat diketahui berdasarkan pengalaman dan keterampilan  yang  secara  turun  temurun  telah diwariskan  dari  satu  generasi  ke  generasi berikutnya . Indonesia  merupakan  salah  satu negara pengguna tumbuhan obat terbesar di dunia bersama negara lain di Asia, seperti Cina  dan India (Susiarti, 2015).
Buah Pare (Momordica charantia) merupakan sayuran  yang  memiliki  rasa  pahit.  Buah  pare memiliki berbagai kandungan seperti asamfenolik, flavonoid,  karotenoid,  triterpenoid,  dan  pitosterol yang  dapat  berfungsi  sebagai  antidibetes(Yuda et al .,2013).
Berdasarkan  penelitian  oleh  Adyana  dkk (2016),  penggunaan  ekstrak  etanol  buah  pare terbukti  dapat  menurunkan  gulah  darah  tikus. Kandungan kimia buah pare yang berkhasiat dalam pengobatan adalah saponin, flavonoid,triterpenoid polifenon, alkaloid, momordisin, glikosida cucurbitacin,  charantin,  asam  butirat,  asam palmitat, asam linoleat, dan asam stearat (Suartha et al ., 2016).
Uji in  silico adalah  suatu  istilah  untuk percobaan atau uji yang dilakukan dengan metode docking  molecular.  Uji in  silico telah  menjadi metode yang digunakan untuk mengawali penemuan  senyawa  obat  baru  dan  untuk meningkatkan  efisisensi  dalam  optimasi  aktivitas senyawa  induk.  Kegunaan  uji in  silico adalah memprediksi,  memberi  hipotesis , memberi penemuan  baru  atau  kemajuan  dalam  pengobatan dan terapi (Hardjono, 2013).

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  Laboratorium Penelitian  dan  Pengujian  Terpadu  Universitas Gadjah Mada (LPPT UGM) untuk proses analisis GCMS  dan  di  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan  Alam  Universitas  Sam  Ratulangi
Manado untuk proses penambatan molekuler selama bulan Januari 2022 hingga Maret 2022.

## Alat dan Bahan Alat Perangkat Keras & Lunak
Laptop  ASUS  dengan  spesifikasi  Intel Celeron  N3350  CPU  1.10GHz,  RAM  2  Gb. Laptop terhubung dengan internet. System operasi Windows 10 Home Sinlge Language 64 bit, Biovia Discover Studio 2021, Autodock Vina, Py Rx, protein Data Bank , Pubchem, CASTp, SCFB IO

## Struktur tiga dimensi Reseptor
Struktur  tiga  dimensi  dari  reseptor  α  – glukosidase  diunduh  dari  situs  Protein  Data  Bank dengan PDB ID : 3W37.

## Struktur tiga dimensi Ligan
Struktur  tiga  dimensi  ligan  yaitu  senyawa- senyawa bioaktif dari buah Momordica charan tia . Diunduh  dari situs PubChem.

## Laboratorium Basah
Alat  yang  digunakan  ialah  blender,  ayakan mesh 80, timbangan analitik, oven, alat-alat gelas, wadah, Gas  Chromatography  Mass  Spectrometry (GCMS).

## Bahan
Bahan yang digunakan ialah daging Buah Pare ( Momordica  charantia )  yang  dibeli  dari  pasar, pelarut metanol.

## Prosedur Penelitian Penyiapan Sampel
Sampel yang digunakan yaitu buah Pare yang diperoleh  di  Pasar  Girian,  kota  Bitung,  Sulawesi Utara.  Buah  tersebut  kemudian  dibersihkan  dari pengotor  dan  dicuci  dibawah  air  mengalir  sampai bersih. Setelah itu sampel dikeringkan dengan cara di  oven  dengan  suhu  ±  40°C.  Selanjutnyasampel yang  telah  kering  dihaluskan  sampai  menjadi serbuk.  Serbuk  kemudian  diayak  menggunakan ayakan  mesh 80 sehinggadidapatkan serbuk halus dan homogen.
Pembuatan   Ekstrak   Metanol    Buah    Pare (Momordica charantia)
Buah  pare  yang  sudah  kering  kemudian diekstraksi dengan metode maserasi, sebanyak 0.5 g serbuk simplisia buah pare dimasukkan ke dalam micro  tube yang  telah  berisi  sampel  tersebut di vortex selama 3 menit dan didiamkan selama 24 jam. Selanjutnya, larutan di vortex kembali selama 1 menit dan disentrifugasi dengan kecepatan 9000 rpm  selama  3 menit.  Supernata
larutan metanol digunakan selanjutnya dalam proses GCMS.

## Identifikasi senyawa Bioaktif menggunakan GCMS
Proses identifikasi menggunakan alat GCMS menghasilkan  daftar  senyawa  yang  di  dalamnya terdapat campuran  gas dan berat molekul masing –  masing  senyawa  bioaktif  yang  disajikan  dalam bentuk kromatogram. Pengujian ini akan dilakukan di Laboratorium Penelitian dan Pengujian  Terpadu  Universitas  Gadjah  Mada (LPPT UGM).

## Penentuan sisi aktif Reseptor
Sisi aktif  dari  reseptor yang  akan digunakan diidentifikasi dengan menggunakan situs CASTp.

## Penambatan Molekuler dengan Autodock Vina
Makromolekul  dan  ligan  dimasukkan  dalam PyRx  dan  dilakukan  proses  penyiapan  ligan, penyesuaian  grid  box,  dan  proses  komputasi penambatan  molekuler  antara  ligan-ligan  dan reseptor.

## Analisis dan Visualisasi
Ligan  yang  mempunyai  energi  ikatan  yang baik selanjutnya dianalisis untuk melihat posisidan orientasi  ligan  tersebut  pada  makromolekul,  serta asam amino yang terikat, juga ikatan yang terjadi menggunakan Biovia Discovery Studio 2021.

## Analisis Lipinski’s Rule Of Five
Analisis  ini  ditentukan  dalam  merancang  obat yang  aktif  secara  oral.  Perhitungan  Rule  of  Five senyawa-senyawa bioaktif buah Pare menggunakan aplikasi SCFBIO prediction.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  pengujian  GCMS  dari  ekstrak  metanol buah  Pare  terdapat  23  komponen  senyawa  yang berhasil  dideteksi  (Gambar  1).  Penggunaan  kro matografi  gas  dipadukan  dengan  spektrometri massa merupakan instrumen yang digunakanuntuk pemisahan  dan  identifikasi.  Menghasilkan  data senyawa  yang  akurat  dan  lengkap  denganstruktur molekulnya.  Kromatografi  gas  mampumembaca senyawa  dengan  konsentrasi  terendah,sehingga metabolit sekunder dalam tanaman dapat teridentifikasi  dengan  hasil  berupa  kromatogram dan spektrum massa. (Al-Rubaye et al. , 2017).
Senyawa yang diekstraksi dari Buah Pare pada Tabel 1. Binding affinity ligan murni yang diekstrak dari  buah  pare  terhadap  reseptor  α-  glukosidase pada Tabel 2. Lipinski’s Ro5 dari dua senyawa yang diperdiksi  sebagai  penghambat  enzim  α  – Gukosidase  (PDB  ID  :  3W37)  pada  Tabel  3. Acarbose  merupakan  obat  antidiabetes  yang berfungsi menghambat kerja enzim α  – glukosidase, digunakan sebagai control positif.
Ketepatan  ligan  untuk  berikatan  dengan reseptor  dilihat  dari  residu  asam  amino  yang berinteraksi  dalam  pengikatan  ligan  dan  reseptor. Gambar  2.  menunjukkan  asam  amino  yang berinteraksi residu reseptor enzim α – glukosidase dengan ligan Spirost-8-en-11-one,3-hydroxy- ,(3β,5a,14β,  20β,22β,25R)-  dalam  bentuk  3D  (A) dan 2D (B).
Tabel 1 . . Senyawa yang diidentifikasi menggunakan analisis GCMS dari ekstrak metanol Buah Pare
Peak RT Nama Senyawa Nama Senyawa Nama Senyawa Retent Area #Hit1 #Hit2 #Hit3 (%) 1 5.02 9-Hexadecenoic acid 9-Octadecenoic acid (Z)-, hexyl ester 9- Octadecenoic acid (Z)-, 2- 65,41 hydroxy-1- (hydroxymeth yl)ethyl ester 2 15,22 9,12,15- Octadecatrienoic acid, 2-phenyl-1,3- dioxan-5-yl ester Phorbol Cholesta-8,24-dien- 3-ol, 4-methyl-, (3ß,4a)- 10.14 15.60  9-Octadecenoic acid, 1,2,3-propanetriyl ester, (E,E,E)- 9-Octadecenoic acid (Z)-, 2-hydroxy-1- (hydroxymethyl)ethyl ester 9-Octadecenoic acid, (2- phenyl-1,3-dioxolan-4- yl)methyl ester, cis- 2.30 16.93 Ethyl iso-allocholate 9-Octadecenoic acid, 1,2,3-propanetriyl ester, (E,E,E)- Octadecenoic acid (Z)-, 2-hydroxy-1- (hydroxymethyl)ethyl ester 0.81 17.82 Cyclopropane Ethyl iso- Cyclopropanedodeca 2.29 5 butanoic acid, 2-[[2-[[2-[(2- pentylcyclopr opyl)methyl]c yclopropyl]m ethyl]cyclopr opyl]methyl]-, methyl ester allocholate noic acid, 2- octyl-, methyl ester 6 18.23 Ethyl iso- allocholate Hexadecanoic acid, 1- (hydroxymethyl)-1,2- ethanediyl ester 1-Heptatriacotanol 2.73 19.50 9-Octadecenoic acid 9- Octadecenoic 10- Octadecenoic 2.71 7 (Z)-, 2-hydroxy-1- (hydroxymethyl)ethyl ester 19.64 Ethyl iso- allocholate 19.72 Cyclopropaneb acid, 1,2,3- propanetriyl ester, (E,E,E)- h y l] c acid, methyl ester p y l
] 3 4
10 21.12 Docosanoic acid, 1,2,3-propanetriyl ester 22.62 3-Pyridinecarboxylic acid, 2,7,10- tris(acetyloxy)- 1,1a,2,3,4,6,7,10,11,1 1a-decahydro- 1,1,3,6,9-
pentamethyl-4-oxo- 4a,7a-epoxy-5H- cyclopenta[a]cyclopro pa[f]cycloundecen- 11-yl ester, [1aR- (1aR*,2R*,3S*,4aR*, 6S*,7S*,7aS*,8E,10R
*,11R*,11aS*)]-
12 23.29 4H- Cyclopropa[5',6']benz[ 1',2':7,8]azuleno[5,6- b]oxiren-4-one, 8- (acetyloxy)- 1,1a,1b,1c,2a,3,3a,6a,6
b,7,8,8a-dodecahydro-
3a,6b,8a-trihydroxy- 2a-(hydroxymethyl)-
1,1,5,7-tetramethyl-,
(1aa,1bß,1cß,2aß,3aß,6 aa,6ba,7a,8ß,8aa)- 13 29.56 8,14-Seco-3,19- epoxyandrostane- 8,14-dione, 17- acetoxy-3ß-methoxy-
4,4-dimethyl-
Oleic acid, 3- (octadecyloxy)propyl ester Hexadecanoic acid, 1a,2,5,5a,6,9,10,1 0a-octahydro- 5,5a-dihydroxy-4- (hydroxymethyl)- 1,1,7,9- tetramethyl-11- oxo-1H-2,8a-
methanocyclopent a[a]cyclopropa[e]c yclodecen-6-yl ester, [1aR- (1aa,2a,5ß,5aß,6ß, 8aa,9a,10aa)]-
8,14-Seco-3,19- epoxyandrostane- 8,14-dione, 17- acetoxy-3ß-methoxy- 4,4-dimethyl- 4H- Cyclopropa[5',6']benz[ 1',2':7,8]azuleno[5,6- b]oxiren-4-one, 8- (acetyloxy)- 1,1a,1b,1c,2a,3,3a,6a,6 b,7,8,8a-dodecahydro- 3a,6b,8a-trihydroxy- 2a-(hydroxymethyl)- 1,1,5,7-tetramethyl-, (1aa,1bß,1cß,2aß,3aß,6 aa,6ba,7a,8ß,8aa)- Z-5-Methyl-6- heneicosen-11-one Spirost-8-en-11-one, 3-hydroxy-, (3ß,5a,14ß,20ß,22ß,25 R)- 5H- Cyclopropa[3,4]benz[ 1,2-e]azulen-5-one, 3,9,9a-tris(acetyloxy)- 3-[(acetyloxy)methyl]- 2-chloro- 1,1a,1b,2,3,4,4a,7a,7b, 8,9,9a-dodecahydro- 4a,7b-dihydroxy- 1,1,6,8-tetramethyl-, [1aR- (1aa,1bß,2a,3ß,4aß,7aa ,7ba,8a,9ß,9aa)]- 5H- Cyclopropa[3,4]be nz[1,2-e]azulen-5- one, 3,9,9a- tris(acetyloxy)-3-
[(acetyloxy)methyl]
-2-chloro-
1,1a,1b,2,3,4,4a,7a,
7b,8,9,9a- dodecahydro-4a,7b- dihydroxy-1,1,6,8- tetramethyl-, [1aR- (1aa,1bß,2a,3ß,4aß, 7aa,7ba,8a,9ß,9aa)] - 2.27 1.92 0.81 3.63 11
Tabel 2. Binding affinity ligan murni yang diekstrak dari Buah Pare terhadap reseptor α- Glukosidase
Identitas PubChem Ligan Binding affinity (kkal/mol) 3W37 22296112 Spirost-8-en-11-one, 3-hydroxy-, (3ß,5a,14ß,20ß,22ß,25R)- -9.0 22212495 Cholesta-8,24-dien-3-ol, 4-methyl-, (3ß,4a)- -8.3 62726 Docosanoic acid, 1,2,3-propanetriyl ester -8.1 5363175 3-Pyridinecarboxylic acid, 2,7,10-tris(acetyloxy)-1,1a,2,3,4,6,7,10,11,11a- decahydro-1,1,3,6,9-pentamethyl-4-oxo-4a,7a-epoxy-5H- cyclopenta[a]cyclopropa[f]cycloundecen-11-yl ester, [1aR- (1aR*,2R*,3S*,4aR*,6S*,7S*,7aS*,8E,10R*,11R*,11aS*)]- -7.7 442070 Phorbol -7.6 550132 8,14-Seco-3,19-epoxyandrostane-8,14-dione, 17-acetoxy-3ß-methoxy-4,4- dimethyl- -7.3 554084 Cyclopropanebutanoic acid, 2-[[2-[[2-[(2- pentylcyclopropyl)methyl]cyclopropyl]methyl]cyclopropyl]methyl]-,  methyl ester -7.4 558038 5H-Cyclopropa[3,4]benz[1,2-e]azulen-5-one, 3,9,9a-tris(acetyloxy)-3- [(acetyloxy)methyl]-2-chloro-1,1a,1b,2,3,4,4a,7a,7b,8,9,9a-dodecahydro-4a,7b- dihydroxy-1,1,6,8-tetramethyl-, [1aR-(1aa,1bß,2a,3ß,4aß,7aa,7ba,8a,9ß,9aa)]- -7.2 6452096 Ethyl iso-allocholate -7.2 538184 4H-Cyclopropa[5',6']benz[1',2':7,8]azuleno[5,6-b]oxiren-4-one, 8-(acetyloxy)- 1,1a,1b,1c,2a,3,3a,6a,6b,7,8,8a-dodecahydro-3a,6b,8a-trihydroxy-2a- (hydroxymethyl)-1,1,5,7-tetramethyl-, (1aa,1bß,1cß,2aß,3aß,6aa,6ba,7a,8ß,8aa)- -6.9 99931 Hexadecanoic acid, 1-(hydroxymethyl)-1,2-ethanediyl ester -6.1 5364673 9-Octadecenoic acid, 1,2,3-propanetriyl ester, (E,E,E)- -6.1 5367489 9,12,15-Octadecatrienoic acid, 2-phenyl-1,3-dioxan-5-yl ester -6.2 622252 Hexadecanoic acid, 1a,2,5,5a,6,9,10,10a-octahydro-5,5a-dihydroxy-4- (hydroxymethyl)-1,1,7,9-tetramethyl-11-oxo-1H-2,8a- methanocyclopenta[a]cyclopropa[e]cyclodecen-6-yl ester, [1aR- (1aa,2a,5ß,5aß,6ß,8aa,9a,10aa)]- -5.9 25642 10-Octadecenoic acid, methyl ester -5.3 5363254 Z-5-Methyl-6-heneicosen-11-one -5.2 552099 Cyclopropanedodecanoic acid, 2-octyl-, methyl ester -5.1 91692401 Oxiraneundecanoic acid, 3-pentyl-, methyl ester, trans- -5.1 537071 1-Heptatriacotanol -4.7 5366356 9-Octadecenoic acid, (2-phenyl-1,3-dioxolan-4-yl)methyl ester, cis- -4.7 21159937 Oleic acid, 3-(octadecyloxy)propyl ester -4.5 5319879 9-Octadecenoic acid (Z)-, 2-hydroxy-1-(hydroxymethyl)ethyl ester -5.6 444254 Acarbose -8.0
Ekstraksi  metanol  pada  Tabel  2  dapat  lihat bahwa terdapat  1 ligan  dari  ekstrak  metanol  buah Pare yang memiliki binding affinity tertinggi. Ligan tersebut  yaitu Spirost-8-en-11-  one,  3-  hydroxy-, (3ß,5a,14ß,20ß,22ß,25R)- dengan nilai - 9.0 kkal/mol. Senyawa lain seperti Cholesta-8,24- dien-3-ol,  4-methyl-,  (3ß,4a)- menunjukkan  nilai binding  affinity  yaitu  -8,  3  kkal/mol  yang  mana lebih  baik  dibandingkan  dengan  kontrolnya  yaitu Acarbose  dengan  nilaienergi  bebas  -8.0  kkal/mol. Dipilihnya  ligantersebut  dibandingkan  ligan  lain yang memilikinilai yang lebih rendah dikarenakan setelah  divisulisasi  ada  dua  ligan  tersebut  yang memiliki ikatan yang kuat yang nantinya menjadi salah satuparameter penentu kestabilan konformasi yang dibentuk antara ligand dan enzim target.
Tiga  parameter  yang  biasanya  dipertimban gkan saat menghitung hasil penambatan
molekuler yaitu binding affinity, interaksi residual asam  amino  yang  terlibat,  dan  energi  ikatan hidrgoen (Ladokun et al ., 2018).
Hasil  docking  molekuler  divisualisasikan dengan  Program  BIOVIA  Discovery  Studio  2021 dalam  3D  dan  2D.  Interaksi  terjadi  dalam  bentuk interaksi hidrofobik, ikatan hidrogen, dan interaksi elektrostatik.  Semakin  banyak  ikatan  hidrogen yang terbentuk dengan residu asam amino, semakin kuat  ikatannya,  dan  skor  energi  akan  lebih rendah dan lebih stabil . Ikatan hidrogen merupakan gaya tarik-menarik  antar  molekul  yang  berinteraksi dengan  atom  elektronegatif  seperti  flour  (F), nitrogen  (N),  dan  oksigen  (O).  Semakin  banyak ikatan hidrogen yang terbentuk dengan residu asam amino  makai  katan  akan  semakin  kuat dan  energi skornya akan semakin rendah dan stabil (Shah and Misra, 2011).
Tabel 3 . Lipinski’s Ro5 dari dua senyawa dan binding affinity yang tinggi untuk diperdiksi sebagai
penghambat enzim α – Gukosidase Ligan RotB HBA HBD Violation (≤500g/mol) (<10) (≤10) (≤5) (≤5) Spirost-8-en-11-one, 3-hydroxy-, 428.290 (3ß,5a,14ß,20ß,22ß,25R)- Cholesta-8,24-dien-3-ol, 4-methyl-, 398.350 0 4 4 1 1 1 4.18 0 7.22 1
(3ß,4a)-
(A)
(B)
Gambar 2 . (A) Interaksi reseptor α- glukosidase dengan ligan Spirost-8-en-11-one, 3-hydroxy-, (3ß,5a,14ß,20ß,22ß,25R)- dalam bentuk 3D. (B) Diagram 2D menunjukkan jenis residu asam amino yang terbentuk antara ligan dan reseptor
Hasil residu asam amino dapat terlihat dalam struktur 2D, hal ini menunjukan adanya ketepatan pengikatan  antara  ligan  dengan  asam  amino  pada makromolekul.  Hasil  anilisis  molekuler  docking Gambar  2  antara  reseptor  α-  glukosidase  (3W37) dan hasil GCMS senyawa Spirost-8-en-11-one, 3- hydroxy-, (3ß,5a,14ß,20ß,22ß,25R)- memiliki interaksi dengan 12 residu asam amino yaitu Lys- A:412,  Asn-A:417,  Gly-A:424,  Phe-A:419,  Ile- A:420,  Asp-A:440,  His-A:514,  Gly-A:516,  Tyr- A:515,  Met-A:513,  Asn-A:517,  Asp-A:423. Ikatan antara reseptor α - glukosidase  dan senyawa ini mengahasilkan asam amino lisina (Lys) dirantai A no 421, interaksi yang tercipta ialah conventional hydrogen bond..
Dalam visualisasi ligan memiliki jenis ikatan yang berbeda-beda ditandai dengan perbedaan dari setiap jenis residu seperti interaksi van der Waals (warna hijau muda tanpa garis putus- putus), ikatan hidrogen  konvensional  (warna  hijau  tua  dengan garis  putus-putus),  ikatan  pi-sigma  (warna  ungu dengan garis putus-putus), ikatan alkyl dan pi-alkyl (warna  merah  muda  dengan  garis  putus-putus) (Zubair et al ., 2020).
Dalam merancang obat yang aktif secara oral harus  memenuhi  kriteria Lipinski’s  Rule  of  Five . Kriteria Lipinski’s  Rule  of  Five sebagai  berikut:
(1) Ikatan hidrogen donor kurang dari 5, (2) ikatan hidrogen akseptor kurang dari 10, (3) berat molekul kurang dari 500 dan (4) Nilai log P tidak lebih dari 5  .  oleh  karena  itu,  setiap  penambatan  senyawa apakah  memenuhi  aturan  ini  atau  tidak.  (Shaji, 2018).
Pada Tabel 3 dari 23 senyawa hasil Uji GCMS hanya  ada  dua  senyawa  yang  memenuhi parameters Lipinski’s Rule of Five. Hanya terdapat 1  penyimpangan  pada  senyawa  kedua  yaitu  pada nilai Log P ligan Cholesta-8,24-dien-3- ol, 4-methyl- , (3ß,4a)-. Oleh karena itu, setiap docking senyawa diperiksa apakah memenuhi Ro5 Lipinski. Aturan ini digunakan untuk menentukan apakah senyawa kimia tertentu memiliki sifat kimia dan fisik yang akan  digunakan  sebagai  obat  aktif  yang  dapat diambil secara oral pada manusia da mengevaluasi kemiripan obat (Lipinski, 2004)

## KESIMPULAN
1. Terdapat  kemungkinan  23  komponen senyawa  yang  berhasil  di  ekstrak  dari pelarut  metanol  buah  pare  yang  memiliki Similarity Index (SI) yang berbeda .
2. Penambatan senyawa bioaktif yang diidentifikasi dalam buah pare dipilih dua senyawa  terbaik  yang  memiliki  hasil konformasi  dan binding  affnity terhadap enzim  α-  Glukosidase.  Kedua  senyawa tersebut  yaitu Spirost-8-en-11-one,  3- hydroxy-, (3ß,5a,14ß,20ß,22ß,25R)-
dengan binding  affnity -9.0  kkal/mol  dan
Cholesta-8,24-dien-3-ol,
4-methyl-,
(3ß,4a)- dengan binding  affnity yaitu  -8.3 kkal/mol. Hasil ini lebih tinggi dibandingkan  dengan  nilai bindingaffinity dari ligan kontrolnya yaitu -8.0. Penelitian ini  dapat  disimpulkan  bahwa  kedua senyawa  tersebut  sangat  potensial  untuk dijadikan  sebagai  senyawa  yang  dapat menghambat enzim α- Glukosidase.

## SARAN
1. Untuk  selanjutnya,  penelitian  ini  dapat dilanjutkan dengan menggunakan
AutoDock,  GOLD,  SLIDE,  Surflex,  dan DOCK  untuk  mengatahui  perbandingan hasil antara perangkat lunak tersebut.
2. Hasil  ini  merupakan  prediksi  aktivitas biologi  dari  senyawa  bioaktif  buah  Pare melalui pemodelan terkomputasi.Sehingga perlu  dilakukan  uji in  vitro dan in  vivo mengetahui  aktivitas  senyawa-  senyawa tersebut.

## DAFTAR PUSTAKA
Adnyana, D. P. A., Dewa Ketut Meles, Wurlina, S. Z.,  &  Suwasanti,  N.  (2016).  Efek  Anti Diabetes  Buah  Pare  ( Momordica charantia Linn . ) Terhadap Kadar Glukosa Darah  ,  Sel  Penyusun  Pulau  Langerhans dan  Sel  Leydig  pada  Tikus  Putih Hiperglikemia . Acta Veterinaria Indonesiana , 4(2) , 43–50.
Abdullah,  S.  S.,  Putra,  P.  P.,  Antasionasti,  I., Rundengan, G., Suoth, E. J., Abdullah, R. P. I., & Abdullah, F. (2021). Analisis Sifat Fisikokimia,
Farmakokinetik
dan
Toksikologi  Pada  Pericarpium  Pala ( Myristica  fragransa )  Secara  Artificial Intelligence.  Chemistry  Progress, 14(2) , 81–92.
Al-Rubaye,  A.  F.,  I.  H.  Hameed,  dan  Moh.  J. Kadhim.  2017.  A  Review:  Uses  of  Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GCMS)  Technique  for  Analysis  of Bioactive  Natural  Compounds  of  Some Plants. International Journal of Toxicological and Pharmacological
Ladokun,  O.  A.,  Abiola,  A.,  Okikiola,  D.,  and Ayodeji,  F.  2018.  GC-MS  and  Molecular
Docking  Studies  of  Hunteria  umbellata Methanolic  Extract  As  a  Potent  Anti-
Diabetic. Informatics in Medicine Unlocked . 13: 1–8.
Lipinski,  C.  A.  2004.  Lead-  and  Drug-Like
Compounds:          The
Rule-of-Five
Revolution. Drug  Discovery  Today: Technologies . 1(4): 337–341.
Putra,  P.P.;  Abdullah,  S.S.;  Rahmatunisa,  R.; Junaidin,  J.;  Ismed,  F.,  2020,  Structure, activity,  and  drug-likeness  of  pure compounds
of Sumatran lichen
( Stereocaulon halei ) for the targeted ACE2 protein in
COVID-19 disease. Pharmaciana, 10(1) , 135 Shah  TR,  and  Misra  A.  2011. Proteomics . Challenges  in  Delivery  of  Therapeutic Genomics and Proteomics, Gujarat.
Shaji,  D.  2018.  Molecular  Docking  Studies  of
Human MCT8 Protein With Soy isoflavones in Allan-Herndon-Dudley Syndrome (AHDS). Journal of Pharmaceutical Analysis . 8(5): 318–323 Suartha IN, Swantara IMD, Rita WS. 2016. Ekstrak etanol  dan  fraksi  heksan  buah  pare ( Momordica  charantia )  sebagai  penurun kadar glukosa darah tikus diabetes. Jurnal
Veteriner 17 (1): 30-36.
Susiarti,  S.  (2015).Pengetahuan  dan  Pemanfaatan
Tumbuhan  Obat  Masyarakat  Lokal  Di PulauSeram, Maluku. Pros SemNasMasyBiodivIndon . 1(5): 1083- 1087. Yuda  IKA,  Anthara  MS,  Dharmayudha  AAGO. 2013. Identifikasi golongan senyawakimia estrak  etanol  buah  pare (Momordica charantia) dan  pengaruhnya  terhadap penurunan kadar glukosa darah tikus putih jantan  (rattus  novergicus)  yang  diinduksi aloksan. Buletin Veteriner Udayana 5 (2): 87-92.
Zubair, M. S., Maulana, S., dan Mukaddas, A. 2020. Penambatan  Molekuler dan  Simulasi
Dinamika Molekuler Senyawa Dari Genus
Nigella Terhadap Penghambatan Aktivitas Enzim  Protease  HIV-1. Jurnal  Farmasi Galenika (Galenika  Journal  of  Pharmacy) (e- Journal) . 6(1): 132–140.