PERSILANGAN JAMUR TIRAM COKLAT ( Pleurotus. cytidiosus ) DENGAN JAMUR TIRAM PUTIH (Pleurotus. ostreatus) VARIETAS Grey oyster MENGGUNAKAN METODE FUSI MISELIUM MONOKARION
Evi Jakiyah 1) , Hasni Ummul Hasanah 1) , Dwi Nur Rikhma Sari 1)
1 Program Studi Pendidikan Biologi, FP.MIPA IKIP PGRI JEMBER
E-mail : evizakiya15@gmail.com
CROSSING OF BROWN OYSTER MUSHROOM ( Pleurotus. cytidiosus ) WITH WHITE WHEAT MUSHROOM ( Pleurotus. ostreatus ) Gray oyster VARIETY

## USING FUSION MYSELIUM MONOKARION METHOD

## ABSTRACT
Pleurotus cytidiosus has the advantage of long endurance, body texture and moisture  content  slightly  thick. Peurotus  ostreatus Grey  oyster  variety  has the  advantage  of  long  endurance,  wide  body  shape  and  also  a  little  water content. To obtain superior variety of both species of fungus, it is necessary to cross using the monocaryon  fusion mycelium. The purpose of this study to  determine  whether  the  mycelium  monokaryon  fusion  methods  can  be used to cross P. cytidiosus with P. ostreatus Grey oyster variety. The results showed that the mycelium monokaryon fusion method can be used to cross P.  cytidiosus with P.  ostreatus Grey  oyster  variety  marked  with  contact zones  mycelium  makroscopically,  while  microscopically  there  is  a connection  structure  of  the  wedge.  The  characteristics  of  mycelium  of  the cross  appear  to  be  attached  or  united,  uneven  and  smoother.  Growth  of mycelium dikaryon, faster than monokaryon mycelium.
Keywords:  Monokaryon  Mycelium  Fusion, Pleurotus.  cytidiosusy, Pleurotus ostreatus Grey oyster Variety

## ABSTRAK
Jamur tiram coklat (Pleurotus. cytidiosus) memiliki keunggulan daya tahan lama,  tekstur  tubuh  yang  tebal,  dan  kadar  air  sedikit.  Jamur  tiram  putih (Pleurotus ostreatus varietas Grey oyster ) memiliki keunggulan daya tahan lama, bentuk tubuh lebar, dan kadar air sedikit. Untuk mendapatkan varietas unggul  dari  kedua  spesies  jamur,  maka  perlu  dilakukan  persilangan menggunakan  metode  fusi  miselium  monokarion.  Tujuan  penelitian  ini untuk  mengetahui  apakah  metode  fusi  miselium  monokarion  dapat digunakan untuk persilangan P. cytidiosus dengan P. ostreatus varietas Grey oyster.  Tahap  awal  dalam  penelitian  ini  yaitu  pembibitan,  kemudian dilanjutkan  persilangan  menggunakan  metode  fusi  miselium  monokarion hingga terbentuk zona kontak kedua miselium dan struktur sambungan apit. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  metode  fusi  miselium  monokarion dapat  digunakan  untuk  persilangan P.  cytidiosus dengan P.  ostreatus varietas  Grey  oyster  yang  ditandai  dengan  zona  kontak  miselium  secara makroskopik,  sedangkan  secara  mikroskopik  terdapat  struktur  sambungan
apit.  Karakteristik  miselium  hasil  persilangan  (dikarion)  terlihat  berlekatan atau menyatu, tidak merata dan lebih halus. Pertumbuhan miselium dikarion lebih cepat dibandingkan miselium monokarion.
Kata  kunci:  Fusi  miselium  monokarion, Pleurotus  cytidiosusy,  Pleurotus ostreatus varietas Grey oyster

## PENDAHULUAN
Jamur  tiram  ( Pleurotus sp. ) merupakan  salah  satu  jamur  konsumsi  yang  bernilai tinggi,  paling  mudah  dibudidayakan  karena  dapat  tumbuh  diberbagai  macam  substrat dan  memiliki  kemampuan  adaptasi  terhadap  lingkungan  yang  tinggi.  Kandungan  zat gizi  jamur  tiram  adalah    protein  (10,5-30,4%),  lemak  (1,7-2,2%),  karbohidrat (56,6%),  thiamin  (0,20  mg),  riboflavin  (4,7-4,9  mg),  niasin  (77,2  mg),  dan  kalsium (314,0 mg). Jamur tiram ( Pleurotus sp. ) terdiri dari beberapa varietas  yaitu jamur tiram putih ( Pleurotus floridae ), jamur tiram coklat ( Pleurotus. cytidiosus) , jamur tiram putih (  Pleurotus.  ostreatus) varieta s Grey  oyster , jamur  tiram  kuning (Pleurotus citrinipileatus) , jamur tiram abu ( Shimeji grey ) dan jamur tiram merah muda (Pleurotus flabellatus).
Jamur  tiram  coklat  ( P.  cystidiosus) dan  jamur  tiram  putih  varietas  Grey  oyster merupakan salah satu jenis dari jamur tiram yang memiliki keunggulan berbeda dengan jamur tiram  yang lainnya. Jamur tiram coklat  memiliki daya  tahan  lama,  tekstur tubuh yang tebal  dan kadar air sedikit (Agriflo, 2012).  Di sisi lain memiliki kelemahan  yaitu jumlah  rumpun  yang  sedikit  sehingga  perlu  disilangkan  dengan  jamur  tiram  yang memiliki  rumpun  banyak  dan  unggul  yaitu  jamur  tiram  putih (P.  ostreatus) varietas Grey  oyster  untuk  menghasilkan  varietas  baru  yang  unggul.  Jamur  tiram  putih (P. ostreatus) varietas  Grey  oyster  memiliki  daya  tahan  lama,  membentuk  rumpun  dalam satu media dan bentuk tubuh lebar (Saputra, 2014).
Jamur  tiram  putih (P.  ostreatus) varietas  Grey  oyster  ini  merupakan  jamur  hasil persilangan  jamur  tiram  putih  dengan  jamur  tiram  coklat.  Jamur  ini  memiliki  tubuh buah berwarna abu-abu ketika masih muda, tetapi menjadi memutih setelah dewasa dan
dapat dibuat  ekstrak untuk  menghambat pertumbuhan bakteri  patogen  (Meilina, 2015). Jamur  tiram (Pleurotus sp. ) dikarion  memiliki  pertumbuhan  lebih  cepat  dibandingkan monokarion (Wijayanti, 2016).
Jamur  tiram  coklat (P.  cystidiosus) dan  Jamur  tiram  putih (P.ostreatus) varietas Grey  oyster  juga  memiliki  sifat  yang  tahan  lama  dibandingkan  jamur  tiram  yang  lain sehingga diharapkan menghasilkan varietas baru  yang memiliki daya tahan lebih lama. Produksi  yang  baik  pada  budidaya  jamur  dilakukan  dengan  memanfaatkan  keragaman morfologi  lebih  berpeluang  mencapai  keberhasilan  apabila  didukung  oleh  keragaman genetiknya  untuk  menghasilkan  varietas  baru  yang  lebih  unggul  melalui  persilangan (Herliyana et al ., 2011). Persilangan jamur tiram (Pleurotus sp. ) dapat dilakukan dengan beberapa cara termasuk fusi miselium, fusi protoplasma, dan transformasi genetika.
Metode fusi miselium monokarion merupakan salah satu metode yang praktis dan ekonomi  untuk  menghasilkan  varietas  baru  dari  jamur  tiram coklat ( P.  cytidiosus) dengan  jamur  tiram  putih (P.  ostreatus) varietas  Grey  oyster,  dimana  proses keberhasilan  persilangannya  ditandai  dengan  struktur  sambungan  apit  pada  kedua miselium monokarion.
Metode  fusi  miselium  monokarion  merupakan  dua  kultur  miselium  monokarion dengan  tipe  kawin  yang  berbeda  ditumbuhkan  dalam  satu  media  tumbuh sehingga dengan sendirinya kedua miselium tersebut berfusi untuk membentuk miselium dikarion (Sutrisna,  2011).  Tujuan  penelitian  ini  untuk  mengetahui  apakah  penggunaan  metode fusi  miselium  monokarion  dapat  digunakan  untuk  persilangan  jamur  tiram  coklat  ( P. cystidiosus) dengan  jamur  putih  ( P.  ostreatus) varietas  Grey  oyster . Persilangan menggunakan  metode  fusi  miselium  monokarion  suatu  cara  yang  tepat  karena  praktis dan  dapat  dijangkau  dari  segi  ekonomis.  Dari  hasil  penelitian  ini  diharapkan  dapat menghasilkan  luaran  yaitu  terbentuknya  varietas  baru  jamur  tiram  hasil  persilangan yang  lebih  unggul  dari  sifat  indukannya  sehingga  diperoleh  bibit  varietas  baru  dari jamur  tiram.  Maka  dari  itu  penelitian  ini  menggunakan  metode  fusi  miselium monokarion  untuk  persilangan  jamur  tiram  coklat  ( P.  cytidiosus )  dengan  jamur  tiram putih (P. ostreatus) varietas Grey oyster .

## MATERIAL DAN METODE

## Tempat dan Waktu
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  deskriptif  kuantitatif  dengan quasy  experiment / eksperimental  semu  yang  dilakukan  di  Laboratorium  Biologi  FP.  MIPA  IKIP  PGRI Jember pada bulan Juli 2017.

## Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini yaitu: cawan petri, gelas ukur, erlenmeyer, tisu,  kapas,  aluminium  foil,  timbangan  neraca,  botol.  Sedangkan  untuk  bahan  yang digunakan  yaitu:  jamur  tiram  Coklat  ( P.  cystidiosus), jamur  tiram  putih (P.  ostreatus) varietas  Grey  oyster , alkohol  70  %,  alkohol  95%,  akuades  steril,  kertas  coklat,  kapas dan spiritus.

## Prosedur Penelitian
Pembibitan Jamur Tiram ( Pleurotus sp.)
Proses  pembuatan  media  kultur  jaringan  jamur  tiram  coklat  ( P.  cystidiosus dan  jamur tiram  putih (P.  ostreatus) varietas  Grey  oyster  menggunakan  PDA  ( Potato  Dextrose Agar) ditambahkan  dengan aquades  100  ml.  Sterilisasi alat  dan  bahan  di autoklaf dilanjutkan  penanaman.  Setelah  sterilisasi  di  autoklaf,  media  dituangkan  ke    dalam cawan  petri,  kemudian  dibiarkan  selama  beberapa  menit  media  di  dalam  cawan  petri padat, dilanjutkan penanaman dari tubuh buah jamur diinokulasi  ke dalam  cawan petri dan disimpan ke dalam kotak steril. Pertumbuhan jamur diamati, setelah itu dipisahkan antara  yang  terkontaminasi  dengan  kultur  yang  tumbuh  baik.  Kultur  yang  tidak terkontaminasi  diamati  selama  pertumbuhannya  mencapai  miselium  penuh    hingga dapat diturunkan pada proses berikutnya yaitu persilangan.

## Persilangan Fusi Miselium Monokarion
Tujuan  utama  dari  persilangan  yaitu  menggabungkan  karakteristik-karakteristik  yang diinginkan  dari  jamur  tiram  coklat  dan  jamur  tiram  abu-abu.  Hasil  dari  penanaman, setelah miselium di dalam cawan petri tumbuh penuh, mengambil miselium dari jamur
tiram coklat dan jamur tiram abu-abu ditumbuhkan ke dalam satu media PSA F1 dengan jarak  1  cm.  Selanjutnya  persilangan  miselium  diinkubasi  pada  suhu  ruang  27 o C-29 o C hingga  terbentuk  zona  pertemuan.  Isolat  hibrid  hasil  persilangan  ditandai  dengan struktur sambungan apit (Wijayanti, 2016).
Parameter Pengamatan
Data  yang  diperoleh  berupa  ada tidaknya  sambungan  apit  yang diamati  pada beberapa titik  pengamatan  di  bawah  mikroskop  yang  menunjukkan  keberhasilan  persilangan antara  jamur  tiram  coklat  ( P.  cystidiosus) dengan  jamur  tiram  putih (P.  ostreatus) varietas Grey oyster dengan menggunakan metode fusi miselium monokarion.
Teknik Analisis Data
Teknik pengujian dengan metode fusi miselium monokarion dianalisis secara deskriptif untuk  struktur  sambungan  apit  secara  mikroskopik  dan  zona  kontak  miselium  secara makroskopik.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada penelitian ini digunakan jamur tiram coklat (Pleurotus sp.) dan jamur tiram putih (P.  ostreatus) varietas  Grey  oyster.  Pemilihan  kriteria  jamur  tiram  coklat (P. cytidiosus) didasarkan menurut Agriflo (2012) bahwa jamur tiram coklat (P. cytidiosus) memiliki  tekstur  yang    lebih  tebal,  daya  simpan  lebih  lama,  dan  kadar  air  sedikit. Pemilihan  jamur  tiram  putih (P.  ostreatus) varietas  Grey  oyster  berdasarkan  Saputra (2014) memiliki daya tahan lama, bentuk tubuh lebar, dan kadar air sedikit.
Sebelum  persilangan  dilakukan  pembuatan  bibit  F0  jamur  tiram  coklat (P. cytidiosus) dan  jamur  tiram  putih (P.  ostreatus) varietas  Grey  oyster,  yang  sudah  siap panen usia 2-3 hari dengan spesifik jamur indukan tunggal dengan teknik menempatkan jaringan  tubuh  buah  masing-masing  ke  dalam  cawan  petri  yang berisi  Potato  Dextrose Agar  (PDA).  Media  yang  paling  umum  digunakan  untuk  menumbuhkan  jamur  adalah media Potato Dextrose Agar (PDA). Bahan baku utama media ekstrak kentang dengan penambahan sumber karbon dextrosa.
Untuk tahap selanjutnya metode fusi miselium monokarion yaitu
Bibit  F0  Jamur  tiram  coklat (P.  cytidiosus) dan  Jamur  tiram  putih (P.  ostreatus) varietas Grey oyster  dipisahkan  antara  yang terkontaminasi  dengan  yang tumbuh baik. Hal ini sama dengan penelitian  yang dilakukan oleh Zaelani (2010) bahwa kultur  yang terkontaminasi  terjadi  pada  media  dan  kultur  yang  terkontaminasi  dipisahkan  dengan yang tumbuh baik kemudian diturunkan ke dalam proses berikutnya  yaitu persilangan . Pertumbuhan  bibit  F0  jamur  tiram  coklat  diperoleh  selama  20  hari,  miselium  tumbuh tebal  sedang  mengembang  dan  merata  pada  media  PDA  di  dalam  cawan  petri. Pertumbuhan bibit F0 jamur tiram abu-abu diperoleh selama 15  hari  miselium  tumbuh mengembang  lebat  atau  tebal  dan  merata  pada  media  PDA  di  dalam  cawan  petri (Gambar 1).
a b
Gambar 1. (a) Bibit F0 Jamur tiram abu-abu;(b) Bibit F0 jamur tiram coklat
Persilangan dengan menggabungkan masing-masing miselium monokarion jamur tiram coklat dengan jamur tiram  abu-abu, di inokulasi ke  media Potato Sukrose Agar (PSA) seperti penelitian yang dilakukan oleh Wijayanti (2016) bahwa kultur yang tumbuh baik diinokulasi ke media PSA dengan jarak 1 cm untuk persilangan (Gambar 2).
a b
Gambar 2. Proses persilangan antara jamur tiram cokelat dan abu-abu
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  metode  fusi  miselium  monokarion  dapat digunakan untuk persilangan jamur tiram coklat (P. cytidiosus) dengan jamur putih ( P. ostreatus) varietas  Grey  oyster  ditandai  terjadinya  zona  kontak  antara  kedua  miselium monokarion dan struktur sambungan apit (Gambar 3 dan 4).
Gambar 3 . F0 Jamur Tiram hasil persilangan
Gambar 4. Hasil persilangan jamur tiram cokelat dan jamur tiram abu-abu pada titik lokasi pengamatan. Gambar a dan b menunjukkan terjadinya persilangan ditandai dengan adanya sambungan apit; c dan d tidak terjadi persilangan
Hal  ini  sama  dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Zaelani  (2010)  bahwa  miselium dikarion  terjadi  adanya  zona  kontak  antara  kedua  miselium.  Secara  makroskopik karakteristik miselium hasil persilangan (dikarion) tumbuh berlekatan atau menyatu dan tidak  merata  (Gambar  3).  Secara  mikroskopik  isolat  dikarion  terdapat  struktur sambungan  apit  yang  menandai  keberhasilan  persilangan  menggunakan  metode  fusi miselium monokarion.
Struktur  sambungan  apit  merupakan    struktur  khusus  keberhasilan  persilangan yang  menandai  adanya  penggabungan  kedua  nukleus  monokarion  dari  sel-sel  hasil pembelahan  mitosis  ketika  fase  pertumbuhan  dan  perkembangan  pada  metode  fusi miselium  monokarion  (Wijayanti,  2016).  Mufidah  (2011)  menyatakan  bahwa penelitian varietas  yang berasal dari spesies sama diduga kompatibel dalam melakukan persilangan.  Penelitian  ini  sejalan  dengan  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh Mursyidah (2016) yang menyatakan bahwa telah terjadi persilangan antara Jamur tiram putih ( Pleurotus sp.) dengan King Oyster ( P. eryngii) diperoleh jamur hasil persilangan menggunakan  metode  fusi  miselium  monokarion  yang  ditandai  dengan  struktur sambungan apit.
Keserasian dua  monokarion berbeda dikendalikan  secara  genetik  oleh dua faktor  yaitu lokus  A  dan  lokus  B.  Setiap  lokus  memiliki  banyak  alel  (multialel)  dan  biasanya
disimbolkan  dengan  angka  yang  ditempatkan  setelah  huruf  lokus  (Zaelani,  2010). Seperti  A1B1  dan  A2B2, yang  berarti  lokus  A  dan B  masing-masing  diikuti  oleh alelnya, alel  inilah  yang disebut  tipe kawin. Keserasian dalam perkawinan terjadi pada monokarion yang dipasangkan memiliki tipe kawin yang berbeda artinya alel-alel pada kedua  lokus  di  antara  dua  monokarion  yang  dipasangkan  berbeda  sehingga menghasilkan miselium dikarion.

## KESIMPULAN
Metode fusi miselium monokarion dapat digunakan untuk persilangan jamur tiram coklat (P. cytidiosus) dengan jamur tiram abu-abu ( P. greyoyster) yang ditandai dengan zona kontak antara kedua miselium monokarion secara makroskopik, sedangkan secara mikroskopik terbentuk struktur sambungan apit.

## DAFTAR PUSTAKA
Agriflo. 2010. Jamur: Info Lengkap dan Kiat Sukses Agribisnis. Jakarta: Agriflo.
Herliyana E.N, I.Z Sirefar dan O. Permana. 2011. J Hort. 21(3): 225-231.
Meilina, L. 2015. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Jamur Tiram ( P. ostreatus) Varietas Grey Oyster Pada Bakteri Patogen Salmonella typhi Sebagai Sumber Belajar
Mursyidah.  2016.  Analisis  Betaglukan  pada  Persilangan  Jamur  tiram  putih (P. ostreatus) dengan  King  Oyster (Pleuotus  eryngii) Menggunakan  Ftir. Tesis . Institut Pertanian Bogor.
Mufidah,  A. A. 2011. Persilangan Intra dan Inter Spesies Jamur Tiram (Pleurotus sp. ).
Tesis. Universitas Brawijaya.
Saputra,  A.  2014.  Formulasi  Komposisi  Media  Tanam  Terhadap  Pertumbuhan  dan Hasil  Jamur  Tiram  Putih  ( P.  ostreatus) Varietas  Grey  Oyster  (Pleurotus  sp.). Skripsi. IKIP PGRI Jember.
Sutrisna, A. 2011. Pemuliaan Jamur tiram putih ( Pleurotus sp.) Antara Isolat BNK dan BBR. Skripsi. Institut Pertanian Bogor.
Wijayanti,  E.  2016.  Pemuliaan  Jamur  tiram  putih  dan  Peningkatan  Produksi  dengan Memanfaatkan Substrat Sisa Budidaya. Tesis. Institut Pertanian Bogor.
Zaelani,   A.F.   2010.   Isolasi   dan   Identifikasi   Genetik   Monokarion   Jamur   Tiram ( Pleurotus sp ). Skripsi. Institut Pertanian Bogor.