## PROFESIONAL HEALTH JOURNAL
Volume 4, No. 2, Juni 2023 (Hal. 415-421) https://www.ojsstikesbanyuwangi.com/index.php/PHJ

## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAN n-HEKSAN DAUN SIRIH HIJAU (Piper Betle L.) PADA BAKTERI Escherichia coli
Larissa Tania a , Lutvita Trisiwi Yuliatiningsih a , Eka Fitri Yanti a
a Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Harapan Bangsa, Jember, Indonesia
E-mail korespondensi: tanialarissa44@gmail.com

## Abstract
Green betel plant ( Piper betle L.) is one type of plant that is widely used for medicine. Betel is a plant that grows from tropical Asia to East Africa and is distributed almost all over Indonesia. Betel leaves contain  essential  oils,  which  are  phenolic  compounds  that  have  antibacterial,  fungicidal,  and bactericidal properties. The aim of this study to determine the antibacterial activity of green betel leaf against Escherichia  coli bacteria.  Green  betel  leaf  was  macerated  with  ethanol  and n -heksan. Antibacterial  activity  test  was  tested  by  agar  diffusion  method.  This  study  used  3  concentrations, namely 20%, 30%,  and 35%, positive control ( Chloramphenicol ) and negative control (DMSO). The result  showed  green  betel  leaf  ethanol  extract  with  concentration  of  35%  can  inhibit  the  growth  of Escherichia  coli by  19.65  ±  7.97  mm,  and  the  result  of  statistical  analysis  showed  a  significant difference  with  a  value  of  p<0,05  at  each  concentration.  The  green  betel  leaf n -heksan  extract  with concentration of 35% can inhibit the growth of Escherichia coli by 10.17 ± 4.25 mm, and the result of statistical analysis showed a significant difference with a value of p<0,05 at each concentration. This study found that betel leaf green extract has the ability as an antibacterial.
Keywords: Green Betle Leaf ( Piper Betle L.), Etanol, n -heksan, Escherichia coli , Antibacterial.

## Abstrak
Salah  satu  tanaman  yang  sering  digunakan  dalam  pengobat  yaitu  sirih  hijau  ( Piper  betle L.).  Sirih hijau banyak ditemui hampir di seluruh wilayah Indonesia, dan tumbuh subur di sepanjang Asia tropis hingga Afrika Timur. Minyak atsiri pada daun sirih hijau tersusun dari komponen senyawa fenol yang mampu  menjadi  senyawa  anti  bakterisidal,  fungisidal,  maupun  germisidal.  Penelitian  ini  bertujuan untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  daun sirih  hijau  terhadap  bakteri Escherichia  coli .  Pembuatan ekstrak daun sirih hijau dilakukan menggunakan metode maserasi menggunakan etanol dan n -heksan. Uji  aktivitas  antibakteri  dilakukan  dengan  metode  difusi  agar.  Penelitian  ini  menggunakan  3 konsentrasi  yaitu  20%,  30%,  dan  35%,  serta  kontrol  positif  ( Chloramphenicol )  dan  kontrol  negatif (DMSO).  Hasil  menunjukkan  ekstrak  etanol  daun  sirih  hijau  konsentrasi  35%  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli dengan  zona  hambat  sebesar  19,65  ±  7,97  mm,  dan hasil analisis  statistik  menunjukkan  perbedaan  signifikan  dengan  nilai  p<0,05  pada  setiap konsentrasi. Ekstrak n -heksan  daun  sirih  hijau  konsentrasi  35%  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri Escherichia  coli dengan  zona  hambat  sebesar  10,17  ±  4,25  mm,  dan hasil analisis  statistik menunjukkan  perbedaan  signifikan  dengan  nilai  p<0,05  pada  setiap  konsentrasi. Hal  ini menunjukkan daun sirih hijau memiliki kemampuan sebagai antibakteri.
Kata kunci: Daun Sirih Hijau ( Piper Betle L.), Etanol, n -heksan, Escherichia coli , Antibakteri

## PROFESIONAL HEALTH JOURNAL
Volume 4, No. 2, Juni 2023 (Hal. 415-421) https://www.ojsstikesbanyuwangi.com/index.php/PHJ

## PENDAHULUAN
Sirih  hijau ( Piper  betle L.)
merupakan  salah  satu  tanaman  yang memiliki  kemampuan  sebagai  antibakteri (Sheikh  dkk.,  2012).  Bagian  daun  dari tanaman  sirih  banyak  digunakan  sebagai bahan  obat  alternatif  untuk  mengobati berbagai  jenis  penyakit  seperti  obat pembersih  mata,  menghilangkan  bau badan,  mimisan,  sariawan,  pendarahan gusi,  batuk,  bronkitis,  keputihan  dan  obat kulit  sebagai  perawatan  untuk  kecantikan atau  kehalusan  kulit.  Rebusan  daun  sirih berkhasiat dapat menghilangkan bau mulut dengan cara dikumur-kumur karena mengandung antiseptik (antibakteri) (Dwivedi & Tripathi, 2014). Minyak  atsiri  banyak  terkandung dalam  daun  sirih  yang  tersusun  atas beberapa komponen kimia yang digolongkan  sebagai  senyawa  fenol  dan senyawa  selain  fenol.  Senyawa-senyawa fenol  penyusun  minyak  atsiri  daun  sirih terdiri  dari  dua  komponen  fenol,  yaitu isomer betel fenol dari kavikol dan eugenol dengan  berbagai  kombinasi  fenol  seperti alil pirokatekol, kavibetol, karvakrol, metal eugenol,  sineol  dan  estragol  (Chibber, 1912).  Dimana  dalam  proses  ekstraksi senyawa-senyawa  yang  ada  dalam  daun sirih  hijau  tersebut  menggunakan  metode maserasi,  yang  sering  digunakan  dalam mengekstraksi  senyawa  dari  tanaman. Selain  itu,  metode  ini  prosesnya  lebih efisien disbanding dengan metode ekstraksi lainnya (Mukhariani, 2014).
Escherichia  coli merupakan  salah satu  bakteri  yang  terdapat  dalam  saluran cerna. Escherichia  coli menjadi  patogen jika jumlah bakteri ini meningkat.
Escherichia coli menghasilkan enterotoksin  yang  menyebabkan  beberapa kasus  diare.  Escherichia  coli  berasosiasi dengan enteropatogenik menghasilkan enterotoksin  pada  sel  epitel  (Jawetz  & Melnick, 2005).
Kemampuan
penghambatan minyak  atsiri  daun  sirih  merah  terhadap bakteri  gram  negatif  lebih  besar  daripada gram positif. Pada ekstrak etanol 70% daun sirih  merah  dengan  konsentrasi  12,5% dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus aureus dengan zona hambat  sebesar  sebesar  9,6  mm  dan Salmonella typhi sebesar  10,9  mm  (Setiari dkk.,  2019).  Perbedaan  zona  hambat  ini disebabkan  oleh  perbedaan  komposisi  dan struktur  dinding  sel  antara  bakteri  gram positif dengan bakteri gram negatif (Jawetz &  Melnick,  2005).  Struktur  dinding  sel bakteri  gram  negatif Escherichia  coli terdiri  dari  tiga  lapisan,  yaitu  membran sitoplasma,  membran  luar,  dan  lapisan  di antara  keduanya  berupa  peptidoglikan yang tipis (Majid, 2009). Berdasarkan latar belakang di atas, maka dilakukan penelitian  untuk  mengetahui  aktivitas antibakteri  ekstrak  etanol  dan n -heksan daun  sirih  hijau  ( Piper  Betle L.)  pada bakteri Escherichia coli.

## METODE
Pembuatan  Ekstrak  Etanol  dan  n- Heksan Daun Sirih Hijau

## PROFESIONAL HEALTH JOURNAL
Volume 4, No. 2, Juni 2023 (Hal. 415-421) https://www.ojsstikesbanyuwangi.com/index.php/PHJ
Daun  sirih  hijau  segar  didapatkan dari  daerah  Panti,  Jawa  Timur.  Daun  sirih hijau dibersihkan dengan air mengalir, dan dikeringkan dengan cara di angin-anginkan selama  3  hari.  Daun  sirih  hijau  kering dihaluskan  menggunakan  blender  dan diayak  untuk  mendapatkan  serbuk  halus. Sebanyak  200  g  serbuk  daun  sirih  hijau direndam  dalam  masing-masing  gelas kimia  menggunakan  1000  ml  etanol  dan 1000 ml n -heksan pada suhu kamar selama 3  hari,  kemudian  disaring  dan  didapatkan filtrat. Filtrat  etanol  dan n -heksan  yang diperoleh dipekatkan dengan rotary evaporator  dengan  suhu  50˚C  sampai didapatkan ekstrak kental.

## Uji Aktivitas Antibakteri
Sebanyak  20  μL  suspensi  bakteri ditanamkan  ke  dalam  media  MHA  dalam cawan  petri.  Selanjutnya  masing-masing paper  disk  dibasahi  larutan  uji  ektrak etanol  dan n -heksan  daun  sirih  hijau dengan  konsentrasi  20%,  30%,  dan  35% untuk  setiap  larutan  uji, chloramphenicol sebagai  control positif dan DMSO sebagai control  negatif,  dan    di  letakkan  pada permukaan  media.  Kemudian  cawan  petri ditutup  kembali  dan  diinkubasi  pada  suhu 37°C  selama  24  jam.  Setelah  24  jam, semua  cawan  petri  dikeluarkan  dari inkubator  dan  dilakukan  pengukuran  zona hambat di sekitar cakram dengan menggunakan  jangka  sorong.  Pengujian dilakukan  dengan  tiga  kali  pengulangan
( triplo ).

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh  kemudian diolah  secara  statistik  dengan Statistical Product  and  Service  Solution (SPSS)
menngunakan  analisis  ANOVA  ver.  22.0 dengan  tingkat  kepercayaan  95%.  Nilai p<0.05  menunjukkan  perbedaan  yang signifikan secara statistik.

## HASIL
Ekstrak etanol daun sirih hijau yang didapat  yaitu  49,29  g.  Rendemen  yang didapatkan  ekstrak  etanol  yaitu  12,32%, bentuk ekstrak tidak kental dan aroma khas daun  sirih  hijau. Ekstrak n -heksan  yang didapatkan  yaitu  sebanyak  10,11  g. Rendeman  yang  didapatkan  ekstrak n - heksan  sebesar  2,53%,  bentuk  kental  dan bau khas daun sirih hijau.
Penguji aktivitas antibakteri ekstrak etanol  dan n -heksan  daun  sirih  hijau terhadap  bakteri Escherichia  coli yang menggunakan metode difusi agar dan zona hambat yang terbentuk dari hasil pengujian diukur menggunakan jangka sorong manual  dengan  ketelitian  milimeter  (mm). Hasil  pengukuran  zona  hambat  dan  rata- rata  diameter  zona  hambat  ekstrak  etanol dan n -heksan daun sirih hijau ( Pipper betle L.) terhadap bakteri Escherichia coli , dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol  dan n -heksan  Daun  Sirih  Hijau terhadap Escherichia coli
Perlakuan dalam Konsentrasi Diameter Zona Hambat (mm) Rata- rata I II III 20%* 17,5 10,4 16,5  14,80 ± 3,84 30%* 21 10,65 22 17,88 ± 6,28 35%* 24 10,45  24,5  19,65 ± 7,97

## PROFESIONAL HEALTH JOURNAL
Volume 4, No. 2, Juni 2023 (Hal. 415-421) https://www.ojsstikesbanyuwangi.com/index.php/PHJ
20%** 6,5 6,5 6 6,33 ± 0,29 30%** 5,5 11,5 8,5 8,50 ± 3,00 35%** 7 8,5 15 10,17 ± 4,25 Chlorampenicol (+) 33,5 33,5 32,5  33,17 ± 0,58 DMSO (-) 7,5 7,25 7 7,25 ± 0,25 Ket: * Ekstrak etanol daun sirih hijau,
**Ekstrak n -heksan daun sirih hijau
Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak  etanol  dan  n-heksana  dengan variasi  konsentrasi  20%,  30%,  dan  35% dengan  tiga  kali  pengulangan  masing- masing,  setelah  diinkubasi  selama  24  jam pada  suhu  37°C  menunjukkan  adanya aktivitas  antibakteri  zona  bening  disekitar ekstrak  etanol  dan  n-heksana  daun  sirih hijau.  Pada  ekstrak  etanol  daun  sirih  hijau konsentrasi 35% menunjukkan zona hambat  terbesar  yaitu  19,65  ±  7,97  mm, diikuti  dengan  konsentrasi  30%  sebesar 17,88  ±  6,28 mm ,  dan  konsentrasi  20% sebesar  14,80  ± 3,84 mm . Hasil uji aktivitas antibakteri  ekstrak  etanol  daun  sirih  hijau menunjukkan  perbedaan  signifikan  secara statistik  dengan  nilai  p<0,05  pada  setiap konsentrasi.  Sedangkan  pada  ekstrak n - heksan  daun  sirih  hijau  konsentrasi  35% menunjukkan  zona  hambat  terbesar  yaitu
10,17 ± 4,25 mm, diikuti dengan konsentrasi  30%  sebesar 8,50  ±  3,00 mm , dan konsentrasi 20% sebesar  6,33 ± 0,29 mm .
Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak n - heksan  daun  sirih  hijau    menunjukkan perbedaan signifikan secara statistik
dengan nilai p<0,05 pada setiap konsentrasi.  Uji  kontrol  positif  antibiotik chloramphenicol menunjukkan  aktivitas antibakteri  yang  ditandai  dengan  adanya zona  hambat  yang  terbentuk  disekitar kertas  cakram  antibiotik  dengan  zona hambat  rata-rata  33,17  ±  0,58  mm,  uji kontrol  negatif  DMSO  menunjukkan aktivitas  antibakteri  yang  ditandai  dengan adanya  zona  hambat  yang  terbentuk disekitar  kertas  cakram  dengan  zona hambat rata-rata 7,25 ± 0,25 mm.

## PEMBAHASAN
Pengujian aktivitas antibakteri ekstrak  etanol  dan n -heksan  daun  sirih hijau dilakukan menggunakan difusi kertas cakram dengan menyiapkan terlebih dahulu sampel ekstrak etanol dan n -heksan daun  sirih  hijau  dilarutkan  dalam  larutan DMSO.  Kemudian  diambil  20  µl  dan dimasukkan  pada  media  yang  telah ditandai  kertas  cakram.  Sebagai  kontrol positif menggunakan
antibiotik chloramphenicol , kontrol negatif menggunakan  DMSO.  Hasil  pengujian antibakteri  diperoleh  konsentrasi  ekstrak etanol  dan n -heksan  daun  sirih  hijau  20%, 30%, 35% dan kontrol positif memberikan respon  hambatan  pada  bakteri Escherichia coli ,  kontrol  negatif  memberikan  respon hambatan pada bakteri Escherichia coli . Pada  konsentrasi  20%,  30%,  35%, kontrol positif dan kontrol negatif membentuk  zona  hambat  pada  medium yang  ditumbuhi  oleh  bakteri Escherichia coli .  Pada  ekstrak  etanol  konsentrasi  35% dapat  membentuk  zona  hambat  dengan rata-rata ukuran sebesar 19,65 ± 7,97 mm, dikategorikan memiliki daya hambat sangat  kuat.  Sedangkan  pada  ekstrak n - heksan konsentrasi 35% dapat membentuk zona  hambat  dengan  rata-rata  ukuran sebesar  10,17  ±  4,25  mm,  dikategorikan memiliki  daya  hambat  kuat.  Hal  ini

## PROFESIONAL HEALTH JOURNAL
Volume 4, No. 2, Juni 2023 (Hal. 415-421) https://www.ojsstikesbanyuwangi.com/index.php/PHJ
didukung  oleh  Pelczar  dkk.  (2008)  yang menyatakan  bahwa  salah  satu  faktor  yang mempengaruhi  aktivitas  bahan  antibakteri, yaitu  konsentrasi  bahan  antibakteri.  Daya hambat  yang  dihasilkan  oleh  bahan antibakteri  akan  semakin  tinggi  apabila konsentrasinya juga tinggi. Pada konsentrasi chloramphenicol (positif) didapatkan  zona  hambat  dengan  rata-rata 33,17  ±  0,58  mm,  dikategorikan  memiliki daya  hambat  sangat  kuat.  Sedangkan kontrol  negatif  didapatkan  zona  hambat dengan  rata-rata  7,25  ±  0,25  mm, dikategorikan  memiliki  daya  hambat  kuat (Susanto dkk., 2012).
Chloramphenicol merupakan zat antibakteri  murni,  sedangkan  ekstrak etanol dan n -heksan daun sirih hijau masih berupa  ekstrak  kasar  yang  mengandung bahan organik lain selain bakteri. Senyawa organik  lain  dapat  menurunkan  aktivitas zat antibakteri dengan cara menginaktivasi dengan  menggunkan  kontak  antara  zat antibakteri  dengan  sel  bakteri  sehingga dapat melindingi bakteri dari zat antibakteri tersebut. Chloramphenicol bekerja dengan menghambat sintesis protein  sel  bakteri  yang  berlangsung  di ribosom (Pelczar dkk., 2008).
DMSO  (dimetyl  sulfoxide)  banyak digunakan  sebagai  pelarut  ekstrak  pda berbagai  penelitian  terkait  uji  antimikroba dan  antibakteri.  DMSO  telah  digunakan sebagai pelarut ekstrak etil asetat Napoleoneae imperalis dan sebagai kontrol negatif  dalam  prosedur  uji  luas  zona hambatnya  terhadap Escherichia  coli , Bacillus subtilis , dan Pseudomonas aeruginosa . Selain itu juga sebagai pelarut ekstrak n -heksan,  kloroform,  etil  asetat, dan metanol daun Cassia tora dan sebagai kontrol  negatif  dalam  prosedur  uji  luas zona  hambat  terhadap Staphylococcus aureus,  Staphylococcus  epidermis dan Bacillus subtilis (Cappucino dan Sherman, 2014; Setiawan dkk., 2020).
Pada  penelitian  ini  diketahui  ekstrak etanol  daun  sirih  hijau  dan  ekstrak n - heksan daun sirih hijau dengan konsentrasi 35%  memiliki  diameter  zona  hambat paling  besar  yaitu  19,65  ±  7,97  mm,  dan 10,17  ±  4,25  mm,  dibandingkan  dengan konsentrasi  20%  dan  30%.  Selain  itu, pengenceran  juga  merupakan  salah  satu faktor  yang  sangat  penting.  Ekstrak  etanol daun sirih hijau konsentrasi 35% memiliki zona  hambat  paling  besar,  karena  semakin tinggi  konsentrasi  ekstrak  maka  semakin banyak  kandungan  bahan  aktif  antibakteri yang  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri Escherichia coli (Adi dkk., 2015). Pada  ekstrak n -heksan  daun  sirih hijau  dengan  konsentrasi  35%  diketahui memiliki diameter paling besar yaitu 10,17 ± 4,25 mm dibandingkan dengan konsentrasi  20%  dan  30%.  Selain  faktor pengenceran,  hal  ini  dapat  disebabkan karena  beberapa  faktor  seperti  kekeruhan suspensi  bakteri,  temperatur  saat  inkubasi, dan  ketebalan  media  agar  (Davis  &  Stout, 1912).
Adanya  perbedaan  diameter  zona hambat  dapat  dipengaruhi  oleh  jenis bakteri  uji  yang  digunakan.  Setiap  bakteri memiliki  kepekaan  yang  berbeda-beda terhadap sampel, dimana satu bakteri akan membentuk  resisten  dalam  dirinya  yang merupakan  mekanisme  alamiah  dalam mempertahankan hidupnya. Selain pengaruh  dari  jenis  bakteri,  perbedaan diameter  zona  hambat  juga  dikarenakan konsentrasi  sampel  (Majid,  2009;  Parija, 2009).
Daun  sirih  mengandung  minyak atsiri yang komponen penyusunnya merupakan  senyawa  fenol  yang  mampu menjadi senyawa anti bakterisidal, fungisidal,  maupun  germisidal.  Minyak atsiri  dan  esktrak  etanol  daun  sirih  juga terbukti mempunyai aktifitas anti cendawan  terhadap  Candida  albicans (Rahmah  &  Rahman,  2010).  Komponen utama minyak astsiri terdiri dari

## PROFESIONAL HEALTH JOURNAL
Volume 4, No. 2, Juni 2023 (Hal. 415-421) https://www.ojsstikesbanyuwangi.com/index.php/PHJ
betlephenol dan beberapa derivatnya diantaranya euganol allypyrocatechine
26,842,5%, cineol 2,4- 4,8%, metil euganol 4,2-15,8%, caryophyllen 3-9,8%, hidroksikavikol,  kavikol  7,2-  16,7%, Kabivetol 2,7-6,2%, estragol,
alilprirokatekol  9,6%,  karvakol  2,2-5,6%, alkaloid, flavonoid, triterpenoid atau steroid,  saponin,  terpen,  fenil  propan, terpinen,  diastase  0,8-1,8%,  dan  tannin 11,3%.  Pada  konsentrasi  0,1-1%  fenol bersifat  bakteriostatik,  sedangkan  pada konsentrasi
1-2% fenol
bersifat bakteriosida (Sidik dkk., 1992).
Zona  hambat  yang  dihasilkan  dari ekstrak  etanol  dan n -heksan  dengan konsentrasi  20%,  30%  dan  35%  terhadap bakteri Escherichia coli memiliki diameter zona  hambat  yang  berbeda-beda,  dan memiliki kriteria serta kekuatan antibakteri yang  berdeda  pula.  Pada  penelitian  ini menunjukkan  bahwa  ekstrak etanol  dan n - heksan  daun  sirih  hijau  memiliki  aktivitas antibakteri  terhadap  pertumbuhan  bakteri Escherichia coli .

## KESIMPULAN DAN SARAN
Pada  penelitian  ini  diketahui  bahwa ekstrak  etanol  dan n -heksan  daun  sirih hijau  mempunyai  aktivitas  antibakteri dengan  kategori  sangat  kuat  terhadap Escherichia  coli ,  dengan  menghambat sintesis protein sel bakteri. Penelitian lebih lanjut dapat dikembangkan dengan menggunakan metode ekstraksi dan metode difusi yang berbeda.

## DAFTAR PUSTAKA
Adi,  G,  Eriawati,  dan  Zuraidah.  (2015). Pengaruh  Pemberian  Ekstrak  Daun Sirih (Piper Sp.) Terhadap Pertumbuhan  Jamur Candida  albicans .
Nasional biotik . Volume 5. Nomor 9.
Cappuccino, J. G. dan N. Sherman. (2014). Microbiology  a  laboratory  manual (10th  Ed) .  San  Fransisco:  Pearson
Education, Inc, Publishing as Benjamin Cummings.
Chibber,  H.M.,  (1912).  The  morphology and  history  of Piper  betle Linn.  (the betel  vine). Journal  Lin.  Soc.  Bot. 41(8):1-10.
Davis  &  Stout.  (1971).  Disc  Plate  Method Of  Microbiological  Antibiotic  Essay. Journal Of Microbiology . Vol 22 No 4.
Dwivedi, V. & Tripathi, S. (2014). Review Study  On  Potential  Activity  Of  Piper Betle. Journal  of  Pharmacognosy  and Phytochemistry . 93(34), p. 9398.
Jawetz  &  Melnick.  Adelberg’s.  (2005).
Medical  Microbiology .  Mc.Graw  Hill Companies  Inc.  Penerbit  Salemba Medika. H. 357-359.
Majid.  (2009). Senyawa  Antibakteri  dan
Mekanisme Kerjanya . Universitas Diponegoro. Semarang.
Mukhriani.  (2014).  Ekstraksi,  pemisahan Senyawa,  dan  Identifikasi  Senyawa Aktif. Jurnal  Kesehatan .  7(12)  :  361- 367.
Rahmah, Nurul & Rahman, Aditya. (2010). “Uji  Fungistatik  Ekstrak  Daun  Sirih (Piper  betle  L.)  terhadap  Candida albicans”. Jurnal  Bioscientae ,  Vol.  7, No. 2. h. 17-24.
Parija, S.C. (2009). Textbook of Microbiology and Immunology. Elsevier , New Delhi. Halaman 182 dan 262.
Pelczar,  Michael  J  dan  Chan,  E.  C.  S.
(2008). Dasar-Dasar Mikrobiologi Jilid I . Jakarta: UI Press.
Setiari Nita, N,M., Ni Putu R., & I Wayan S.W. (2019).  Aktivitas  Antifungi
Kombinasi  Ekstrak  Daun  Sirih  ( Piper

## PROFESIONAL HEALTH JOURNAL
Volume 4, No. 2, Juni 2023 (Hal. 415-421) https://www.ojsstikesbanyuwangi.com/index.php/PHJ
Betle )  dan  Ekstrak  Kulit  Buah  Jeruk
( Citrus  reticulata )  untuk  Menghambat
Pertumbuhan Candida albicans . Jurnal Pendidikan  Biologi  Undiksha .  Vol.  6 No. 2.
Setiawan Arif. M, Retnoningrum Dewi. M, Yahya.  F,  Andika  Ragil.  R,  Sudarni Ayu. D. H. (2020). Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Biji  Jeruk  Siam (Citrus Reticulata) Pada Bakteri Escherichia Coli. Prodi Biologi, Universitas  Billfath,  Siman,  Sekaran,
Kabupaten  Lamongan,  Jawa  Timur,
62261,  Indonesia. Jurnal  Bioteknologi dan  Biosains  Indonesia .  Volume  7
Nomor 2.
Sheikh,  M.,  Abdullah  R.M.,  M.K.,
Meghavanshi  &  Irshad,  M.  (2012). Studies  on  Some  Plant  Extract  for Their  Antimicrobial  Potential  Against Certain  Pathogenic  Microorganisms. American Journal of Plant Sciences . 3.
209 213.
Sidik.,  Soelarko  R.M.,  Somadilaga  R.S, dan  Suwondo,  S.  (1992).  Aktivitas Antibakteri Daun Sirih Terhadap Bakteri Gigivitis dan Baktrei Pembentuk Plak/karies Gigi (Streptococcus mutans). Warta Tumbuhan  Obat  Indonesia .  1(1)  1-4.
Jakarta.
Susanto, D., Sudrajat dan R. Ruga. (2012).
Studi Kandungan Bahan Aktif Tumbuhan  Meranti  Merah  ( Shorea leprosula Miq.) Sebagai Sumber
Senyawa  Antibakteri. Mulawarmnan
Scientifie . 11 (2) : 181-190.