## Oceana Biomedicina Journal
ocean- biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023
Analisis Perbedaan Kadar Hematokrit dalam Sampel yang Dihomogenisasi Sekunder Sebanyak 8 Kali yang Tidak Dihomogenisasi Sekunder
Difference in Hematocrit Levels in Secondary Homogenized Samples 8 Times And Not Homogenized Secondary
Hotman Sinaga 1 , Rosnita Sebayang 2 , Mustika Sari H 3 , Regina Rengsi 4
1,2,3,4 DIV Teknologi Laboratorium Medis, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Katolik Musi Charitas

## Abstrak
Latar  Belakang: Pemeriksaan  hematologi  merupakan  salah  satu  kegiatan  di  laboratorium klinik.  Pemeriksaan  hematologi  salah  satunya  adalah  pemeriksaan  hematokrit.  Pada pemeriksaan  hematokrit  salah  satu  hal  yang  penting  dalam  tahap  pra  analitik  adalah homogenisasi sampel. Penundaan pemeriksaan  yang terjadi  menyebabkan darah  mengendap oleh karena itu perlu dilakukan homogenisasi sekunder sebelum darah diperiksa  menggunakan alat.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  melihat  adanya  perbedaan  hasil  pemeriksaan    kadar hematokrit dalam sampel yang tidak dihomogenisasi sekunder dan dihomogenisasi sekunder sebanyak  8  kali. Metode: Jenis  penelitian  yang  dilakukan  adalah  pra  eksperimen    dengan menggunakan Static Group Comparation. Subjek penelitian ini adalah mahasiswa/i  Fakultas Ilmu  Kesehatan  Universitas  Katolik  Musi  Charitas  yang  dipilih  secara  Acidental    sampling. Pemeriksaan  kadar  hematokrit  dalam  sampel  menggunakan  alat  Sysmex  XP-100    dengan menggunakan  metode  Apature  Impedance  Counters.  Sampel  diperiksa  dengan  diberi perlakuan tanpa homogenisasi  sekunder dan dihomogenisasi sekunder sebanyak 8 kali. Data hasil  pengukuran  sampel  kemudian  diuji  dengan  menggunakan  uji  Wilcoxon  Sign  Rank dengan tingkat kepercayaan 95%. Hasil: Sampel yang diperiksa sebanyak 30 sampel memiliki rata-rata  hasil  pemeriksaan  kadar  hematokrit  dalam  sampel  yang  diberi  perlakuan  tidak dihomogenisasi  adalah  65%  dan  rata-rata  hasil  pemeriksaan  sampel  dengan  perlakuan dihomogenisasi  sekunder  sebanyak  8  kali  adalah  39,9%.  Hasil  pemeriksaan  tersebut  diuji secara  statistik  dan  menunjukkan  hasil  terdapat  perbedaan  yang  bermakna  p=0,000<0,05. Simpulan: Terdapat  perbedaan  hasil  pemeriksaan  kadar  hematokrit  sampel  yang  tidak dihomogenisasi sekunder dan dihomogenisasi sekunder 8 kali.
Kata kunci: Hematologi, Hematokrit, Homogenisasi, Pra analitik,

## Oceana Biomedicina Journal
ocean- biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023

## RESEARCH STUDY

## Abstract
Background: Hematology  examination  is  one  of  the  activities  in  the  clinical  laboratory. Hematological  examination  is  hematocrit  examination.  At  hematocrit  inspection  one  of  the important things in the pre-analytical stage is the homogenization of samples. The delay in  the examination that occurs causes the  blood to settle therefore  it is necessary to do  secondary homogenization  before  the  blood  is  examined  using  the  tool.  This  study  aims  to  see    a difference in the results of hematocrit levels in samples that are  not homogenized secondary and homogenized secondary 8 times. Method: This type of research is a pre-experiment using Static  Group  Comparation.  The  subject  of  this  study  was  students  of  the  Faculty  of  Health Sciences of Musi Charitas Catholic University who were selected in acidental sampling. The hematocrit  level  check  in  the  sample  uses  the  Sysmex  XP-100  tool  by  using  the  Apature Impedance Counters method. . Samples were treated without secondary homogenization and homogenized 8 times. The sample measurement data was then tested using the Wilcoxon Sign Rank test with a 95% confidence level.Result: The sample examined as many as 30 samples had  an  average  hematocrit  level  test  result  in  samples  given  unhomogenized  treatment  was 65% and the average result of secondary homogenized sample examination was 8 times  39.9%. The  results  were  statistically  tested  and  showed  a  meaningful  difference  of p=0.000<0.05.Conclusion:  There  were  differences  in  the  results  of  hematocrit  levels  of samples that were not homogenized secondary and homogenized secondary 8 times.

## Keywords: Hematology, Hematocrit, Homogenization, Pre analytic

## Latar Belakang
Hematokrit adalah jumlah volume sel darah merah dalam 100 ml atau di nilai dengan % volume darah  (Gandasoebrata,  2017).  Nilai  hematoktrit  digunakan  sebagai  tes  skrining  sederhana untuk mengetahui penyakit anemia sebagai pembanding untuk hitung sel darah merah dengan metode  otomatis  dan  secara  tidak  langsung  untuk  mengetahui  keakuratan  pengukuran hemoglobin  (Putra  and  Sayekti  2017).  Menurut  PerMenKes  RI  No.  1792  tahun  2010  serta Menurut Permenkes RI No 43 tahun 2013, pemeriksaan hemoglobin dibagi dalam tahapan pra analitik, analitik dan pasca analitik. Setiap tahapan yang dilakukan untuk pemeriksaan harus dilakukan dengan baik dan sesuai dengan prosedur yang sudah ditetapkan. Pada pemeriksaan

## Oceana Biomedicina Journal
ocean- biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023
ini  kesalahan  dapat  terjadi,  pada  setiap  tahap  kegiatan  yang  dilakukan  dengan  benar  sesuai prosedur. Potensi kesalahan pada setiap tahap berbeda-beda. Pada tahap pra analitik kesalahan dapat  mencapai  46-61%,  tahap  analitik  kesalahan  dapat  mencapai  7  –  25%  dan  besaran kesalahan  untuk tahap  pasca  analitik  sebesar  14-47%  (Aipassa,  Rahayu,  and  Ariyadi  2020). Sampel  dan  antikoagulan  yang  digunakan  harus  tercampur  baik  dengan  melakukan homogenisasi. Homogenisasi awal antara sampel yang digunakan dengan antikoagulan EDTA disebut  homogenisasi  primer.  Homogenisasi  primer  secara  teknis  sudah  ditetapkan  oleh lembaga,  seperti  CLSI  (Clinical  and  Laboratory  Standards  Institute) (2017),  BD  Vacutainer (2019)  dan  PerMenKes  RI  (Peraturan  Mentri  Kesehatan  Republik  Indonesia)  No.  43  tahun 2013.  Sedangkan  homogenisasi  sekunder  merupakan  homogenisasi  kedua  yang  dilakukan kembali  ketika  akan  melakukan  pemeriksaan.  Beberapa  literatur  dan  jurnal  yang  telah diperoleh  belum  terdapat  rekomendasi  atau  aturan  tentang  homogenisasi  sekunder  (Qurotul Aini  Ramadhani,  Ardiya  Garini  and  Harianja  2019).  Sehubungan  dengan  homogenisasi sekunder yang belum dilakukan pada beberapa penelitian tersebut dan berdasarkan pengamatan di  lapangan  terhadap  frekuensi  dan  cara  yang  tidak  sama  dalam  melakukan  homogenisasi sekunder (Sebayang, Sinaga, and Hutabarat 2021). Maka hal tersebut yang mendasari penulis dalam  melakukan penelitian untuk mengetahui  hasil pemeriksaan hematokrit yang diperoleh dari  perlakuan  homogenisasi  sekunder  sebanyak  8  kali  dan  sampel  yang  tidak  dilakukan homogenisasi sekunder.

## Metoda Penelitian
Jenis  penelitian  ini  adalah  pre-eksperimental.  Penelitian  ini  dilakukan  melihat  pengaruh kadar  hematokrit  menggunakan  sampel  darah  dengan  menggunakan  antikoagulan  EDTA sebanyak 3 mL yang dilakukan di Laboratorium Hematologi Fakultas Ilmu Kesehatan UKMC.
Subjek  penelitian  sebanyak  30  mahasiswa  DIV  Teknologi  Laboratorium  Medis  yang diambil dengan teknik accidental sampling. Pada penelitian ini subjek yang terpilih kemudian dilakukan  pengambilan  darah  sebanyak  3  mL.  Kemudian  sampel  tersebut  dilakukan homogenisasi primer sebanyak 8 kali. Setelah itu sampel didiamkan selama 30 menit kemudian diperiksa.
Sampel kemudian dihomogenisasi sekunder dan diperiksa kadar hematokritnya. Penelitian ini menggunakan metode pemeriksaan Apature Impedance Counters dengan menggunakan alat

## Oceana Biomedicina Journal
ocean- biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023

## RESEARCH STUDY
Sysmex XP-100. Hasil yang telah diperoleh kemudian diuji dengan uji statistik yaitu Wilcoxon Sign Rank

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## HASIL
Pemeriksaan  hematokrit  pada  penelitian  ini  menggunakan  metode  Apature  Impedance Counter  yang  dimana  metode  yang  digunakan  tersebut  harus  dilakukan  verifikasi  metode dengan  cara  menghitung  nilai  presisi,  akurasi  dan  Tea  dari  bahan  kontrol  yang  digunakan sebanyak 10 kali. Bahan kontrol yang digunakan pada penelitian ini yaitu kadar Low (no.Lot 01440821),  Normal  (no.Lot:  01440822)  dan  High  (no.Lot  01440823)  dengan  exp.  Date  29 Agustus 2020. Hasil verifikasi metode yang dilakukan disajikan pada tabel 1.1.
Tabel 1.1 Hasil Verifikasi Metoda Sysmex XP-100 pemeriksaan bahan kontrol hematokrit Uji Kontrol  Hasil
Batas Keterangan Presisi/CV Low 1,5% 2,0%* Diterima Normal 0,3% High 0,55% Akurasi/ Bias Low 1,03%
10%** Diterima Normal   0,2% High 0,25% TEa
Low 3,49%
6%** Diterima Normal 0,89% High 1,35%
*Ketentuan batas keberterimaan menurut Kit Insert
** Ketentuan batas keberterimaan menurut Westgard Quality Control Berdasarkan  tabel  1.1  menunjukkan  bahwa  presisi  metoda  Sysmex  XP-100, pemeriksaan  hematokrit  dengan  menggunakan  kontrol Low sebesar  1,5%,  dengan  kontrol Normal  0,3%  dan  menggunakan  kontrol High sebesar  0,55%.  Untuk  nilai  akurasi menggunakan kontrol Low sebesar 1,03%, kontrol Normal 0,2% dan Kontrol High 0,25% serta

## Oceana Biomedicina Journal
ocean- biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023
Tea Low 3,49%, kontrol Normal 0,89% dan Kontrol High 1,35%. Hasil uji verifikasi metode pemeriksaan hematokrit pada semua  level diatas menunjukkan  bahwa  hasil uji  masih dalam batas yang diperbolehkan atau batas yang diperbolehkan. Berarti bahwa uji verifikasi metode yang dilakukan baik dan dapat diterima.
Sebelum pemeriksaan sampel dilakukan pemantapan mutu internal. Untuk pemeriksaan hematokrit  menggunakan  1  level  kontrol  yaitu  kontrol  kadar  tinggi  (high  level).  Hasil pemantapan mutu internal diperoleh sebesar 45,2 %. Hasil yang diperoleh dikonfersikan dalam satuan Standar Deviasi (SDi)  yaitu 1,1 yang kemudian diplotkan pada grafik Levey  Jenning Chart  kemudian  diinterpretasikan  berdasarkan  aturan  Westgard  Multi-rules.  Hasil  tersebut memenuhi  aturan  dari  Westgard  Multi  Rules  dimana  nilai  yang  diperoleh  tidak  melanggar aturan tersebut sehingga pemeriksaan hematokrit dalam darah dapat dilakukan.
Hasil pemeriksaan kadar hematokrit dalam sampel dapat dilihat pada tabel 1.2
Tabel 1.2 Hasil pemeriksaan No Kode Sampel Tidak dihomogenisasi sekunder (%) Kode sampel Dihomogenisasi sekunder 8 Kali (%) 1 A1 58,7 B1 40,1 2 A2 69,8 B2 39,9 3 A3 62,1 B3 38,3 4 A4 71,9 B4 41,3 5 A5 70,7 B5 36,0 6 A6 68,5 B6 43,1 7 A7 57,6 B7 34,6 8 A8 72,7 B8 36,0 9 A9 72,5 B9 37,6 10 A10 74,6 B10 41,7 11 A11 69,5 B11 47,0 12 A12 63,7 B12 39,5 13 A13 67,2 B13 45,5 14 A14 71,3 B14 39,7 15 A15 64,2 B15 40,4

## Oceana Biomedicina Journal
ocean- biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023
16
A16 64,8 B16 37,7 17 A17 71,0 B17 34,9 18 A18 65,6 B18 39,1 19 A19 62,2 B19 38,4 20 A20 71,9 B20 37,2 21 A21 71,1 B21 44,3 22 A22 67,2 B22 38,4 23 A23 64,8 B23 45,5 24 A24 39,3 B24 39,1 25 A25 71,3 B25 33,2 26 A26 53,7 B26 44,5 27 A27 54,9 B27 47,4 28 A28 59,4 B28 40,4 29 A29 57,7 B29 39,6 30 A30 58,9 B30 36,8
Berdasarkan tabel 1.2 hasil pemeriksaan kadar  hematokrit dalam  sampel  yang diberi perlakuan tidak dihomogenisasi  sekunder  langsung diperiksa  memiliki 1 sampel  yang  masih dalam  batas  normal.  Kadar  hematokrit  sampel  darah  yang  diberi  perlakuan  homogenisasi sekunder sebanyak 8 kali memiliki 6 sampel memiliki hasil yang tidak normal.
Berdasarkan hasil pemeriksaan hematokrit yang diperoleh pada perlakuan sampel yang tidak  dihomogenisasi  sekunder  dan  dihomogenisasi  sekunder  sebanyak  8  kali  dapat  dilihat bahwa  data  tersebut  mengalami  penurunan.  Persentase  penurunan  yang  terjadi  pada  dua kelompok data tersebut dapat dilihat pada tabel 1.3.
Tabel 1.3. Penurunan kadar hematokrit dalam 2 perlakuan
No Tidak dihomogenisasi sekunder (%) Dihomogenisasi sekunder 8 Kali (%) Penurunan (%) 1 58,7 40,1 0,186 2 69,8 39,9 0,299 3 62,1 38,3 0,238

## Oceana Biomedicina Journal
ocean- biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023
4 71,9 41,3 0,306 5 70,7 36,0 0,347 6 68,5 43,1 0,254 7 57,6 34,6 0,230 8 72,7 36,0 0,367 9 72,5 37,6 0,349 10 74,6 41,7 0,329 11 69,5 47,0 0,225 12 63,7 39,5 0,242 13 67,2 45,5 0,217 14 71,3 39,7 0,316 15 64,2 40,4 0,238 16 64,8 37,7 0,271 17 71,0 34,9 0,361 18 65,6 39,1 0,265 19 62,2 38,4 0,238 20 71,9 37,2 0,347 21 71,1 44,3 0,268 22 67,2 38,4 0,288 23 64,8 45,5 0,193 24 39,3 39,1 0,002 25 71,3 33,2 0,381 26 53,7 44,5 0,092 27 54,9 47,4 0,075 28 59,4 40,4 0,190 29 57,7 39,6 0,181 30 58,9 36,8 0,221
Berdasarkan  tabel  1.3  penurunan  kadar  hematokrit  dengan  perlakuan  tidak dihomogenisasi  sekunder  dan  dihomogenisasi  sekunder  memiliki  rata-rata  0,251%  dengan penurunan  tertinggi  sebesar  0,381%  dan  penurunan  terendah  sebesar  0,002%.  Data  hasil penelitian yang telah diperoleh peneliti kemudian disusun di dalam tabel dan dianalisis. Setelah

## Oceana Biomedicina Journal
ocean- biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023
diuji normalitas menghasilkan data yang terdistribusi tidak normal sehingga menggunakan uji hipotesis  Wilcoxon  Sign  Rank.  Berikut  hasil  data  uji  Wilcoxon  Sign  Rank  disajikan  dalam tabel 1.4

## Tabel 1.4 Hasil uji Wilcoxon Sign Rank
Hasil Kadar Hematokrit p-value Tidak dihomogenisasi sekunder 0,000
Berdasarkan tabel 1.4 hasil uji  Wilcoxon Sign Rank Test diperoleh  nilai probabilitas sebesar 0,000 dengan taraf signifikan 0,05 maka dapat diketahui bahwa p<α yang berarti bahwa terdapat perbedaan kadar hematokrit dalam sampel darah yang tidak dihomogenisasi sekunder dan dihomogenisasi sekunder sebanyak 8 kali.

## PEMBAHASAN
Penelitian  ini  dilakukan  dengan  tujuan  untuk  mengetahui  apakah  terdapat  perbedaan  hasil pemeriksaan  kadar  hematokrit  sampel  yang  tidak  dihomogenisasi  sekunder  dan dihomogenisasi  sekunder  sebanyak  8  kali  yang  dilakukan  pada  mahasiswa/i  FIKes  UKMC. Sebelum melakukan pemeriksaan sampel terlebih dahulu dilakukan verifikasi dan pemantapan mutu internal untuk memastikan metode dan prosedur yang digunakan baik Verifikasi metode merupakan  kegiatan  membuktikan  bahwa  metoda  yang  digunakan  bisa  dipakai  oleh laboratorium  yang  bersangkutan  untuk  pemeriksaan  sampel  (Riyanto  2014).  Metode  yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode Apatur Impedance. Hasil verifikasi metode pada penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  metode  tersebut  dapat  digunakan  dan  dipercaya  untuk melakukan pemeriksaan terhadap kadar hematokrit dalam sampel (Riyanto 2014). Verifikasi metode yang digunakan dilakukan terhadap 3 level kontrol, yaitu high, normal, dan low. Semua bahan kontrol yang diperiksa memiliki hasil % CV, % bias dan Tea yang masih dalam batas keberterimaan  (Alshaghdali  et  al.  2019).  Hal  tersebut  berati  bahwa  pada  hasil  penelitian  ini masih masuk dalam batas yang diperbolehkan sehingga batas ketidaktepatan (kesalahan acak) dan  keakuratan  (kesalahan  sistematis  atau  bias)  masih  dapat  ditoleransi  dalam  pengukuran. Berdasarkan nilai batas keberterimaan yang dipakai uji verifikasi metode yang telah dilakukan

## Oceana Biomedicina Journal
ocean- biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023

## RESEARCH STUDY
dalam  level Low ,  Normal  dan High memperoleh  nilai  yang  masih  dalam  rentang  yang diperbolehkan  berarti  bahwa  metode  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  dapat  digunakan untuk  pemeriksaan  sampel  dan  hasil  yang  diperoleh  dapat  dipercaya.  Setelah  dilakukan verifikasi metode yang digunakan selanjutnya dilakukan pemantapan mutu internal. Menurut PerMenKes No.43 tahun 2013 pemantapan mutu internal merupakan kegiatan pencegahan dan pengawasan yang dilaksanakan oleh masing-masing laboratorium yang dilakukan setiap hari oleh petugas yang bertujuan untuk menemukan adanya kesalahan (random dan sistematik) agar dapat segera diperbaiki dan memastikan hasil yang dikeluarkan dapat dipercaya. Pemeriksaan hematokrit  dalam  darah  dapat  dilakukan  apabila  hasil  pemeriksaan  bahan  kontrol  yang diplotkan pada Levey Jenning Chart tidak melanggar aturan Westgard. Hasil pengukuran yang dilakukan  pada  bahan  kontrol  3  (High)  pada  tanggal  14  Agustus  2020  yang  telah  diplotkan pada  Levey  Jenning  Chart  memenuhi  aturan  dari  Westgard  Multi  Rules.  Dimana  nilai  yang diperoleh  tidak  melanggar  Westgard  Multi  Rules  sehingga  pemeriksaan  hematokrit  dalam darah dapat dilakukan. Berdasarkan hasil pengujian  metode yang digunakan telah  layak dan baik untuk pemeriksaan kadar hematokrit dalam sampel. Maka hal yang memungkinkan dapat mempengaruhi hasil pemeriksaan hematokrit adalah pada tahap praanalitik, analitik dan pasca analitik. Pada tahap pra-analitik kesalahan dapat mencapai 46-61%, tahap analitik kesalahan dapat  mencapai  7-25%  dan  besaran  kesalahan  untuk  tahap  pasca-analitik  sebesar  14-47% (Aipassa et.al,2020). Tahap pra analitik untuk persiapan sampel, sampel yang digunakan telah dilakukan  pendataan  subjek  dengan  menggunakan  kuisioner  dan  informed  consent.  Subjek yang  menjadi  sampel  penelitian  tidak  melakukan  aktivitas  fisik  yang  berat  karena  akan menyebabkan  terjadinya  pemindahan  cairan  tubuh  dalam  pembuluh  darah.  Proses  tersebut akan  mengakibatkan  hemokonsentrasi  yang  menyebabkan  kadar  hematokrit  menjadi meningkat.  Faktor  persiapan  pasien  yang  dapat  menggangu  hasil  pemeriksaan  sudah dimimalisir  dengan  cara  pasien  melakukan  istirahat  beberapa  menit  sebelum  pengambilan sampel. Pengambilan sampel pada penelitian ini juga sudah menggunakan orang yang terdidik dan  terlatih  sebagai  plebotomis.  Sehingga  pengambilan  sampel  untuk  pemeriksaan  sudah dilakukan  sesuai  dengan  prosedur.  Setelah  persiapan  sampel  kemudian  dilanjutkan  proses pengolahan sampel yaitu proses homogenisasi. Pengolahan sampel untuk pemeriksaan kadar hematokrit  dibagi  dalam  dua  kelompok  yaitu  sampel  yang  diperiksa  tanpa  homogenisasi sekunder dan sampel yang dihomogenisasi sekunder sebanyak 8 kali. Menurut PerMenKes RI

## Oceana Biomedicina Journal
ocean- biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023
No.1792  (2010)  pengolahan  sampel  pada  tahap  homogenisasi  dapat  mempengaruhi  hasil pemeriksaan  hematokrit  yang  diperoleh.  Homogenisasi  yang  dilakukan  pada  penelitian  ini sebanyak  8  kali  dengan  cara  inversi  atau  membolak-balikkan  tabung  (BD  Vacutainer  2019) dan  (Dennis  J,  Martel,  and  Judy  C.Aqbique  2017).  Sampel  dengan  antikoagulan  yang didiamkan selama 30 menit akan menyebabkan sel-sel darah mengalami proses pengendapan. Pengendapan tersebut terjadi dalam 3 tahap. Tahap pertama pembentukan rouleaux yaitu sel- sel  eritrosit  mengalami  agregasi  dan  membentuk  gumpalan  dengan  waktu  kecepatan pengendapan  yang lambat dalam waktu 10 menit (Liswanti 2014). Tahap kedua yaitu proses sedimentasi  dimana  eritrosit  akan  mengalami  proses  pengendapan  dengan  kecepatan  yang konstan  yang  berlangsung  selama  40  menit.  Tahap  yang  ketiga  adalah  tahap  pemadatan, eritrosit yang mengendap akan mengisi ruang kosong pada tumpukan eritrosit lain di bawah tabung  sehingga  eritrosit  benar-benar  memadat  dan  tahap  ini  berlangsung  selama  10  menit dengan  kecepatan  yang  lambat  (Nugraha,  2017).  Bila  dilakukan  pemeriksaan  darah  pada bagian  bawah  tanpa  dilakukan  homogenisasi  maka  akan  menyebabkan  hasil  pemeriksaan hematokrit  meningkat.  Hasil  dari  pengukuran  kadar  hematokrit  sampel  yang  tidak dihomogenisasi sekunder diperoleh rata-rata sebesar 65,0% Sedangkan hasil pengukuran kadar hematokrit sampel yang diberi perlakuan dihomogenisasi sekunder sebanyak 8 kali diperoleh rata-rata sebesar 39,9%. Bedasarkan hasil analisis deskriptif terhadap kadar hematokrit dalam sampel  yang  tidak  dihomogenisasi  sekunder  dan  sampel  yang  dihomogenisasi  sekunder sebanyak 8 kali semua mengalami penurunan hasil. Rata-rata penurunan yang terjadi sebesar 25%  dengan  penurunan  tertinggi  sebesar  38,1%  dan  penurunan  terendah  sebesar  0,2%. Penurunan  hasil  yang  diperoleh  disebabkan  karena  pada  saat  pengukuran  sampel  dengan kelompok  perlakuan  tidak  dihomogenisasi  sekunder,  sampel  telah  mengalami  tahap pengendapan. Sehingga eritrosit yang terdapat dibagian bawah sampel lebih banyak terhisap oleh  alat  dan  menyebabkan  hasil  pemeriksaan  hematokrit  menjadi  tinggi.  Hasil  pengukuran hematokrit  kemudian  diuji  secara  statistik  dengan  menggunakan  Wilcoxon  Sign  Rank  Test dengan  nilai  kepercayaan  sebesar  95%  dan  diperoleh  nilai  probabilitas  0,000<0,05.  Hal tersebut  dapat  dinyatakan  bahwa  terdapat  perbedaan  hasil  pemeriksaan  kadar  hematokrit sampel  yang  tidak  dihomogenisasi  sekunder  dan  sampel  yang  dihomogenisasi  sekunder sebanyak 8 kali.

## Oceana Biomedicina Journal
ocean- biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023
Perbedaan hasil yang terjadi dapat disebabkan oleh proses aspirasi sampel. Aspiration Probe yang  terdapat  pada  alat  menyedot  sampel  pemeriksaan  pada  posisi  sampel  yang  padat  akan eritrosit. Hal tersebut menyebabkan tingginya kadar hematokrit  yang diperoleh pada sampel yang diberi perlakuan tidak dihomogenisasi sekunder. Karena pada kelompok sampel tersebut sel-sel darah sudah mengalami fase pertama dalam proses pengendapan. Sedangkan kelompok sampel  yang  dihomogenisasi  sekunder  sebanyak  8  kali  sel-sel  terdistribusi  normal  sehingga hasil pemeriksaan tidak memberikan hasil yang tinggi (Yucel, Turhan, and Calci 2016).
Hasil  penelitian  ini  secara  statistik  sejalan  dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh  (Lima- oliveira  et  al.  2014)  dengan  3  perlakuan  (P1)  spesimen  dihomogenisasi  5  kali  kemudian langsung diperiksa. (P2) spesimen ditunggu selama 5 menit kemudian dilakukan homogenisasi sebanyak  5  kali  dan  diperiksa  dan  (P3)  spesimen  tidak  dihomogenisasi  langsung  diperiksa. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  terdapat  perbedaan  yang  signifikan  terhadap  kadar hematokrit yang diperiksa dengan perlakuan (P1) dan (P2). Hal ini terjadi karena darah yang dilakukan penundaan pemeriksaan telah mengalami fase pengendapan sehingga menyebabkan eritrosit  padat  di  bagian  bawah  sampel.  karena  penundaan  tersebut  terbukti  bahwa  hasil pemeriksaan hematokrit yang tidak dihomogenisasi sekunder memiliki hasil yang lebih tinggi dibandingkan dengan kelompok dihomogenisasi sekunder Hasil penelitian ini sejalan dengan penelitian homogenisasi yang dilakukan oleh (Lippi et al. 2007) dengan perlakuan sampel pada tabung  (1)  tidak  dihomogenisasi  didiamkan  selama  30  menit  sampai  60  menit  kemudian diperiksa. Tabung (2) dan (3) dihomogenisasi  inversi sebanyak 6 kali dan 12 kali kemudian didiamkan  selama  30  sampai  60  menit  dan  diperiksa.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa terdapat  perbedaan  yang  signifikan  terhadap  kadar  hematokrit  yang  dihomogenisasi  6  kali kemudian  diperiksa  dan  tidak  dihomogenisasi.  Hal  ini  dikarenakan  sampel  yang  mengalami penundaan  telah  mengalami  pengendapan  sehingga  hasil  hematokrit  sampel  yang  tidak dihomogenisasi  secara  sekunder  memperoleh  hasil  yang  lebih  tinggi.  Penelitian  yang  telah dilakukan  memperoleh  hasil  yaitu  terdapat  perbedaan  yang  signifikan  terhadap  kadar hematokrit dalam  sampel yang tidak dihomogenisasi sekunder dan dihomogenisasi sekunder sebanyak  8  kali.  Perbedaan  hasil  kadar  hematokrit  tersebut  dikarenakan  penundaan pemeriksaan  sampel  yang  dilakukan  sehingga  menyebabkan  terjadinya  tahap  pengendapan pada sampel. Dimana eritrosit sampel yang didiamkan tersebut berada di bagian bawah tabung sehingga  ketika  melakukan  proses  aspirasi  untuk  pemeriksaan  hematokrit  aspirator  probe

## Oceana Biomedicina Journal
ocean- biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023
menghisap  eritrosit  paling  banyak  sehingga  menyebabkan  kadar  hematokrit  menjadi  tinggi. Sedangkan kadar hematokrit pada sampel yang diberi dihomogenisasi sekunder memperoleh hasil yang normal karena sel-sel yang mengalami pengendapan sebelumnya sudah dihilangkan karena proses homogenisasi.
Proses  homogenisasi  tersebut  menyebabkan  distribusi  hematokrit  yang  sebelumnya mengendap  dan  padat  menjadi  terdistribusi  secara  merata.  Maka  dari  itu  homogenisasi sekunder  yang  dilakukan  sebelum  sampel  diperiksa  menggunakan  alat  sangat  penting dilakukan karena akan menyebabkan hasil pemeriksaan hematokrit yang tinggi palsu.

## SIMPULAN
Terdapat  perbedaan  bermakna  pada  hasil  pemeriksaan  sampel  yang  dihomogenisasi sekunder sebanyak 8 kali dan tidak dihomogenisasi sekunder dengan nilai probabilitas sebesar 0,000 <(0,05)

## Daftar Pustaka
Aipassa, Indah, Muji Rahayu, and Tulus Ariyadi. 2020. “PERBEDAAN KADAR UREUM SERUM DAN PLASMA LITHIUM.” 4: 42–46.
Alshaghdali, Khalid, Tessie Y Alcantara, Raja Rezgui, and Charlie P Cruz. 2019. “Indicators in a Hematology Laboratory.”

## Oceana Biomedicina Journal
ocean- biomedicina.hangtuah.ac.id/index.php/journal eISSN 2614-0519 Volume 6 Issue 1: Januari – Juni 2023
Dennis J, Ernst, Anne-Marie Martel, and Judy C.Aqbique. 2017. “Collection of Diagnostic Venous Blood Specimens.” CLSI 7.
Lima-oliveira, Gabriel et al. 2014. “Processing of Diagnostic Blood Specimens : Is It Really Necessary to Mix Primary Blood Tubes after Collection with Evacuated Tube System ?” 12(1).
Lippi, Giuseppe et al. 2007. “Evaluation of Different Mixing Procedures for K2 EDTA Primary Samples on Hematological Testing.” 38(12): 723–25.
Liswanti, Yane. 2014. “GAMBARAN LAJU ENDAP DARAH (METODE SEDIMAT)
MENGGUNAKAN NATRIUM SITRAT 3,8% DAN EDTA YANG DI TAMBAH NaCl 0,85% Yane Liswanti ABSTRACK.” 12(1).
Putra, Gagah, and E Sri Sayekti. 2017. “Perbedaan Hasil Pemeriksaan Mikro Hematokrit Menggunakan EDTA 5% Dan 10%.” Jurnal Insan Cendekia 5(1): 2015–18.
Qurotul Aini Ramadhani, Ardiya Garini, Nurhayati, and Sri Hartini Harianja. 2019.
“PERBEDAAN KADAR GLUKOSA DARAH SEWAKTU MENGGUNAKAN SERUM DAN PLASMA EDTA THE DIFFERENCE OF BLOOD GLUCOSE LEVEL USING EDTA SERUM AND PLASMA Qurotul Aini Nur Ramadhani , Ardiya Garini , Nurhayati , Sri Hartini Harianja Hasil : Hasil Penelitian Menunjukkan Ad.” Jurnal Kesehatan Poltekkes Palembang 14(2): 80–84.
Riyanto. 2014. “Validasi & Verifikasi Metode Uji.” Buku Validasi & Verifikasi Metoda Uji:Sesuai ISP/IEC 17025 Edisi 1.
Sebayang, Rosnita, Hotman Sinaga, and Mustika Sari Hutabarat. 2021. “HOMOGENISASI SEKUNDER TERHADAP KADAR HEMOGLOBIN.” Jurnal Keperawatan Silampari 5(DOI: https://doi.org/10.31539/jks.v5i1.3049 HOMOGENISASI): 444–52.
Vacutainer, BD. 2019. “Order of Draw for Multiple Tube Collections.” : 7417.
Yucel, Cigdem, Turan Turhan, and Esin Calci. 2016. “The Effect of Preanalytical Mechanical Mixing Time on Complete Blood Cell Count Parameters in the Emergency Laboratory The Effect of Preanalytical Mechanical Mixing Time on Complete Blood Cell Count Parameters in the Emergency Laboratory.” (December).