PENGARUH KEPOLARAN PELARUT TERHADAP AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN JAMBU BRAZIL BATU (Psidium guineense L.) DENGAN METODE DPPH

## Noviyanti
Prodi Farmasi FMIPA Universitas Garut Noviyanti@uniga.ac.id

## ABSTRAK
Antioksidan  merupakan  agen free  radical  scavengers artinya  mampu  bekerja mencegah  dan  memperbaiki  kerusakan  tubuh  akibat  radikal  bebas.  Senyawa antioksidan  tersebut  bisa  kita  peroleh  salah  satunya  dari  tanaman  jambu  Brazil batu ( Psidium guineense L.) yaitu dengan mengoptimalkan kandungan senyawa pada ekstraksi dengan konsentrasi pelarut yang berbeda.  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui konsentrasi pelarut  etanol 96%, 70%, dan 50% yang memiliki aktivitas  antioksidan  yang  paling  optimal  dari  daun  jambu  biji  brazil  ( Psidium guineense  L.) dengan  metode  DPPH  ( 2,2,-diphenyl-1-  picrylhydrazyl). Metode Penelitian ini dimulai dari penyiapan simplisia, pengumpulan bahan, determinasi bahan,  pembuatan  simplisia,  pemeriksaan  karaktersitik  simplisia,  penapisan fitokimia, ekstraksi, uji aktivitas antioksidan dengan berbagai konsentrasi pelarut. Hasil  penelitian  dari  penafisan  fitokimia  simplisia  daun  jambu  brazil  batu (Psidium guineense L.) teridentifikasi mengandung senyawa golongan alkaloid, flavonoid, saponin, tanin, kuinon, steroid/ triterpenoid.
Kata kunci: Antioksidan, kepolaran, Psidium guineese L.

## 1. Pendahuluan
Antioksidan   merupakan   substansi   nutrisi   maupun   non-nutrisi   yang biasanya ada dalam bahan pangan. Antioksidan mampu mencegah atau meperlambat terjadinya kerusakan oksidatif dalam  tubuh.  Antioksidan  merupakan  agen free  radical  scavengers artinya  mampu  bekerja mencegah dan memperbaiki kerusakan tubuh akibat radikal bebas. Antioksidan bekerja dengan cara  mendonorkan  satu  elektronnya  kepada  senyawa  yang  bersifat  oksidan  sehingga  aktivitas senyawa oksidan tersebut bisa dihambat(1) . Jambu    brazil    batu    ( Psidium    guineense    L.) merupakan    tanaman    yang  tumbuh  di  semak- semak dengan tinggi pohon 3- 10 kaki (1-3 m), ada pula yang mencapai 23 kaki (7 m). Tanaman ini  tumbuh  berlimpah  di  alam  liar  dan  tumbuh  secara  alami  dan  menyeluruh.  Daun  jambu brazil  batu  ini  mempunyai  khasiat untuk menghilangkan pilek, gejala bronkhitis, antimikoroba dan antibakteri(2). Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  kandungan  senyawa  dari  daun  jambu Brazil batu ( Psidium guineense L.) yaitu flavonoid, tanin dan minyak essensial(2).
Untuk  mengoptimalkan  kandungan  senyawa  pada  ekstrak  daun  jambu  brazil  batu  dapat dilakukan  ekstraksi  dengan  konsentrasi  pelarut  yang  berbeda.  Pelarut  merupakan  salah  satu
faktor  dari    kimia  eksternal    yang  mempengaruhi  mutu    ekstrak.    Dari    salah    satu    hasil penelitian    yang    dilakukan    membuktikan  adanya  perbedaan  aktivitas  antioksidan  yang dipengaruhi  oleh  konsentrasi  pelarut  yang  digunakan.  Perbedaan  aktivitas  antioksidan  pada ekstrak tersebut dikarenakaan  adanya  perbedaan  polaritas  dari  masing-  masing pelarut.  Selain itu, semakin  kecil  konsentrasi  pelarut  organik  yang  digunakan  maka  semakin  kecil pula  biaya yang  dikeluarkan.  Namun  memperbesar  konsentrasi  pelarut  organik saat ekstraksi belum tentu dapat  meningkatkan  aktivitas  antioksidan.  Hal  ini  membuat  perlunya  pertimbangan  dalam pemilihan konsentrasi pelarut.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  konsentrasi  pelarut  etanol  96%,70%, dan 50% yang memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  paling  optimal  dari  daun  jambu  biji  brazil  ( Psidium guineense L.) dengan metode DPPH ( 2,2,-diphenyl-1- picrylhydrazyl).
Dari  hasil  penelitian  diharapkan  dapat  memberikan  sumber  informasi  ilimiah    pada    bidang Kimia  Bahan  Alam  Hayati  dan  informasi  baru  untuk penelitian lebih lanjut sehingga dapat dikembangkan lebih luas sebagai obat dan menambah nilai ekonominya.

## 2. Metode Penelitian
Penelitian  ini  dimulai  dari  penyiapan  simplisia,  pengumpulan  bahan,  determinasi  bahan, pembuatan  simplisia,  pemeriksaan  karaktersitik  simplisia,  penapisan  fitokimia,  ekstraksi,  uji aktivitas antioksidan dengan berbagai konsentrasi pelarut.
Penyiapan  bahan  dimulai  dari  menentukan  bagian  tanaman  yang akan digunakan, pemanenan, sortasi  basah,  pencucian,  perajangan,  pengeringan,  sortasi  kering,      pembuatan      serbuk simplisia,   dan   penyimpanan   simplisia.   Setelah penyiapan  simplisia, dilakukan penafisan fitokimia sebagai langkah awal untuk mengetahui  golongan  senyawa  yang terdapat  pada daun jambu  brazil  batu.  Penapisan  dilakukan  secara  bertahap  mulai  dari  pemeriksaan  alkaloid, flavonoid, saponin, tanin, kuinon, dan steroid/ triterpenoid. Karakterisasi simplisia daun jambu brazil  batu  berupa  pemeriksaan  makroskopik,  penetapan  kadar  air,  penetapan  kadar  abu  total, penetapan  kadar  abu  larut  air,  penetapan  kadar  abu  tidak  larut  asam,  penetapan  susut pengeringan, penetapan kadar sari larut air dan penetapan kadar sari larut etanol.
Dari data hasil penapisan, didapat gambaran mengenai kandungan komponen kimia bahan alam, kemudian dilakukan ekstraksi. Ekstraksi yang dilakukan  adalah  maserasi  dengan  pelarut  etanol 96%,  etanol  70%,  dan  etanol 50% selama 3×24  jam,  dimana setiap 24  jam  sekali  filtratnya disaring  dan  ditampung,  kemudian  ditambahkan  lagi  pelarutnya.  Hasil  maserasi  diupakan pelarutnya dengan menggunakan penguap rotary evaporator sampai dihasilkan ekstrak kental.
Ekstrak etanol  yang sudah kental kemudian dilakukan uji aktivitas antioksidan dengan metode DPPH ( 2,2-diphenyl-1-picrylehydrazyl).

## 3. HASIL PENELITIAN
Pada penelitian ini dilakukan pengumpulan sampel daun tanaman jambu brazil batu dari daerah Cilawu,  Garut.  Sampel  yang  telah  terkumpul  selanjutnya  di  determinasi  untuk  memastikan identitas  daun jambu  brazil  batu  yang akan digunakan dalam penelitian. Determinasi tanaman dilakukan di  Herbarium Bandungense, Sekolah  Ilmu dan Teknologi Hayati,  Institut Teknologi Bandung.  Hasil    determinasi    menunjukkan    bahwa    sampel    yang    digunakan    merupakan Psidium guineense L. dari suku mytaceae (Lampiran 1).
Daun jambu brazil batu yang telah terkumpul kemudian di sortasi basah untuk dipisahkan dari pengotornya dan dari bagian tanaman yang tidak digunakan dalam penelitian dan terbawa pada saat  proses  pengumpulan  daun  jambu  brazil  batu.  Daun  jambu  brazil  batu  kemudian  di  cuci dengan air mengalir kemudian dikeringkan dengan menggunakan lemari pengering. Pengeringan dilakukan untuk menghentikan   rekasi   enzimatik   yang   dapat   menyebabkan   penguraian atau perubahan kandungan kimia yang terdapat pada daun jambu brazil batu. Daun jambu brazil batu  yang  telah  dikeringkan  di  sortasi  kering  untuk  memisahkan  benda-  benda  asing  dan pengotor  lain  yang  masih  tertinggal  pada  daun  yang kering. Selanjutnya daun jambu brazil batu yang sudah kering dihaluskan dengan menggunakan   penggiling   hingga   menjadi   serbuk. Penggilingan   simplisia bertujuan untuk memperkecil ukuran partikel sehingga penetrasi pelarut ke dalam membran sel simplisia semakin mudah dan memungkinkan senyawa yang terkandung dalam bahan lebih banyak  yang tertarik pada saat proses ekstraksi. Serbuk simplisia disaimpan di tempat tertutup baik(8). Selanjutnya   dilakukan   karakterisasi   simplisia   yang   dilakukan untuk mengetahui  mutu  dari  simplisia daun jambu  brazil  batu (Psidium guineense L.) sebagai bahan untuk penelitian yang dibandingkan dengan standar. Karakterisasi simplisia yang pertama dilakukan  yaitu  dengan  pemeriksaan  makroskopik  daun jambu brazil batu (Psidium guineense L.) . pemeriksaan makroskopik dilakukan untuk  identifikasi  dan  mengenal  secara  sederhana dengan  cara  melihat  secara langsung karakter dan ciri khas dari simplisia. Diperoleh simplisia dengan panjang 7 cm dan lebar 4 cm.
Tabel 3.1: Hasil Pemeriksaan Makroskopik Daun Jambu Brazil Batu
NO Parameter Simplisia Hasil Rajangan 1 Bentuk Lonjong 2 Warna Hijau 3 Bau Bau khas daun
Tabel 3.2: Hasil Pemeriksaan Karakteristik Simplisia Daun Jambu Brazil Batu
No Karakterisasi Hasil Pustaka 1 Kadar Air 2% ≤10% 2 Susut Pengeringan 9% - 3 Kadar Abu Total 5,3% - 4 Kadar Abu Tidak Larut Asam 0,7% - 5 Kadar Abu Larut Air 0,3% - 6 Kadar Sari Larut Air 20% - 7 Kadar Sari Larut Etanol 17% -
Pemeriksaan  karakterisitik  dilakukan  dengan  tujuan  untuk  mengetahui  karakter  dari  simplisia dan  juga  untuk  memastikan  agar  simplisia  yang  diteliti  memenuhi  persyaratan  yang  telah ditetapkan sehingga keamanan simplisia yang digunakan terjamin dengan baik.
Penetapan kadar air dilakukan untuk mengetahui nilai kadar air yang terkandung dalam simplisia daun  jambu  brazil  batu  (Psidium  guineense  L.).  Kadar  air  simplisia  sangat  penting  untuk memberikan batasan maksimal kandungan air di dalam simplisia, karena jumlah air yang tinggi dapat menjadi media tumbuhnya bakteri dan jamur yang dapat merusak senyawa terkandung di dalam simplisia. Kadar air yang diperoleh dari hasil karakterisasi menunjukan bahwa simplisia memenuhi persyaratan berdasarkan BPOM tahun 2014 tentang persyaratan mutu obat tradisional yaitu  ≤  10%.  Pada  hasil  karakterisasi,  kadar  air  yang  diperoleh  (2%)      lebih  kecil  dari  susut
pengeringan (8%). Hal ini dikarenakan susut pengeringan dilakukan pada suhu 105 ⁰ C sehingga tidak hanya air yang ikut menguap, tetapi juga senyawa lain seperti minyak atsiri.
Penetapan  kadar  abu  simplisia  dilakukan  untuk  mengetahui  kandungan  mineral  yang  terdapat dalam tempat tanaman tersebut tumbuh, untuk mengontrol jumlah cemaran benda organik seperti tanah dan pasir. Kadar abu total  yang diperoleh daun jambu brazil yaitu 5,3%. Kadar abu larut air  sebesar  %  yang  menunjukkan  jumlah  kandungan  logam  alkali  tanah  dalam  simplisia. Sedangkan kadar abu tidak larut asam yaitu sebesar %.
Pentepan kadar sari larut air dan kadar sari larut etanol dilakukan untuk memberikan gambaran jumlah senyawa yang dapat di sari baik oleh air maupun etanol dari suatu simplisia. Berdasarkan hasil pengujian diperoleh kadar sari larut air yaitu 20% dan kadar sari larut etanol 17%.
Serbuk simplisia yang diperoleh selanjutnya di ekstraksi. Ekstraksi adalah kegiatan  penarikan kandungan  kimia  yang  dapat  larut  sehingga  terpisah  dari bahan  yang  tidak  larut  dengan pelarut  air.  Metode  ekstraksi  yang  digunakan adalah maserasi. Maserasi adalah cara penyarian yang paling sederhana  yaitu dengan cara merendam sampel dalam cairan penyari. Metode ini dipilih karena merupakan metode yang paling sederhana, alatnya mudah didapatkan, dan tidak merusak   kandungan   senyawa   yang   tidak   tahan   panas(10).   Tujuan   utama penggunaan metode  maserasi  disebabkan  karena      karena  sifat  antioksidan  yang  tidak  tahan  panas  dan fungsinya untuk menyari senyawa metabolit sekunder. Akibat adanya perendaman, pelarut akan mempunyai  waktu  interaksi  yang  lama  dengan  sampel,  sehingga  memungkinkan  terjadinya proses pemecahan dinding dan membran sel sampel. Hal ini terjadi  karena perbedaan  tekanan antara  bagian  dalam  sel  dan  luar  sel  sehingga  senyawa  metabolit  sekunder  yang  ada  di dalam sitoplasma akan keluar dan terlarut dalam pelarut organik. Pada proses ini digunakan media kaca karena kaca merupakan media yang tahan terhadap reaksi kimia sehingga tidak membuat ekstrak mudah terkontaminasi(11).
Pelarut  yang  digunakan  adalah  pelarut  etanol  karena  merupakan  pelarut  universal,  pelarut  ini dapat  melarutkan  hampir  semua  senyawa  organik  yang  ada  pada  sampel,  baik  senyawa  polar maupun senyawa  non polar. Penggunaan varian konsentrasi pelarut dilakukan  karena semakin tinggi  konsentrasi etanol maka semakin rendah tingkat kepolaran pelarut yang digunakan(12). Maserasi dilakukan dengan  cara merendam serbuk  simplisia daun jambu brazil batu sebanyak 100 gram untuk masing- masing pelarut etanol 96%, 70% dan 50% selama 3× 24 jam pada suhu kamar dan diaduk sesekali agar mempercepat proses pelarutan senyawa kimia dalam simplisia dengan  pergantian  pelarut  setiap  24  jam.      Ekstrak  yang  diperoleh  kemudian  disaring  dan dipisahkan dari ampasnya, maseratnya dikumpulkan kemudian dipekatkan menggunakan rotary evaporator pada suhu ± 40ºC sampai diperoleh ekstrak etanol 96%, 70% dan daun jambu brazil batu.  Kemudian  ekstrak  kental  ditimbang  untuk  mendapatkan  nilai  rendemennya.  Randemen ekstrak yang diperoleh dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel 3.3: Hasil Randemen Ekstrak Etanol 96%, 70%, dan 50% Daun Jambu Brazil Batu
Sampel Randemen Ekstrak Ekstrak Etanol 96% 22,4% Ekstrak Etanol 70% 27,05% Ekstrak Etanol 50% 18,2% Ekstrak Etanol 96% 22,4%
Hasil    randemen    dari    pelarut    etanol    dengan    konsentrasi    96%    sebesar  22,4%,    rendemen pelarut    etanol    70%    sebesar    27,05%,    dan    randemen    pelarut  etanol  50%  sebesar  18,2%.
Perbedaan  rendemen  disebabkan  kadar  air  pada  perlakuan  bahan  sampel  segar  relatif  masih tinggi dibanding bahan sampel kering yang mengalami proses penjemuran(13).

## 3.1   Penafisan Fitokimia
Penafisan  fitokimia  dilakukan  untuk  mengidentifikasi  kandungan metabolit sekunder yang terkandung dalam simplisia. Penafisan fitokimia yang dilakukan diantaranya pengujian alkaloid, flavonoid, tanin, saponin, kuinon, steroid/ triterpenoid. Hasil penafisan fitokimia yang dilakukan dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel 3.4: Hasil Penafisan Fitokimia Serbuk Simplisia Daun Jambu Brazil Batu
No Senyawa Simplisia 1 Alkaloid + 2 Flavonoid + 3 Tanin + 4 Saponin + 5 Kuinon + 6 Steroid/ Triterpenoid +
Keterangan: + : Terdeteksi -  : Tidak Terdeteksi

## 3.2   Pengujian Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH
Pengujian aktivitas  antioksidan dilakukan dengan menggunakan  radikal bebas 1,1-diphenyl-2- picryhydrazil  (DPPH).  Pengukuran  antioksidan  dengan  metode  DPPH  merupakan  metode pengukuran  antioksidan  yang  sederhana,  cepat  dan  tidak  membutuhkan  banyak  reagen  seperti halnya  metode  lain.  Hasil  pengukuran  metode  DPPH  menunjukkan  kemampuan  antioksidan sampel secara umum, tidak berdasarkan jenis radikal yang dihambat(11).
Prinsip  pengukuran  antioksidan  menggunakan  metode  DPPH  ini  adalah  adanya  perubahan intensitas warna ungu DPPH yang sebanding dengan larutan konsentrasi DPPH tersebut. Radikal bebas DPPH yang memiliki elektron tidak berpasangan akan memberikan warna ungu. Warna akan berubah menjadi kuning saat  elektronnya  berpasangan.  Perubahan  intensitas  warna  ini terjadi  karena adanya peredaman radikal bebas yang dihasilkan oleh bereaksinya molekul DPPH dengan  atom  hidrogen  yang  dilepaskan  oleh  molekul  senyawa  sampel  sehingga  terbentuk senyawa  2,2-diphenyl-1-picrylhydrazine  dan  menyebabkan  terjadinya  peluruhan  warna  DPPH dari ungu ke kuning. Perubahan warna ini akan memberikan perubahan absorbansi pada panjang gelombang maksimum DPPH pada saat diukur menggunakan spektrofometri UV-Vis sehingga akan diketahui nilai aktivitas peredaman radikal bebas yang dinyatakan dengan nilai IC50(14). Pengujian  aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol  96%,  70%  dan  50% beserta  standar  vitamin    C dilakukan  dengan  berbagai  seri  konsentrasi  menggunakan  metode DPPH yang yang kemudian diukur absorbansinya menggunakan Spektrofotometri UV-Vis.
Pengukuran  serapan  dilakukan  pada  panjang  gelombang  517  nm  yang  merupakan  panjang gelombang maksimum hasil pengukuran pada larutan kontrol (DPPH ditambah metanol)  yang memberikan absorban 0,667. Hasil pengujian antioksidan terhadap vitamin C dengan konsentrasi 2 ppm, 4 ppm, 6 ppm, 8 ppm, dan 10 ppm diperoleh % inhibisi radikal bebas DPPH yang dapat
dilihat pada Lampiran  .  Pengujian  aktivitas  antioksidan  vitamin  C  terhadap  radikal  bebas DPPH dilakukan tiga kali pengulangan (Lampiran 2).
Aktivitas  antioksidan  dapat  ditunjukkan  dengan  nilai  IC50.  Nilai  IC50
menggambarkan  tingkat  kekuatan  antioksidan  berdasarkan  penghambatan  radikal  bebas sebanyak 50% dibandingkan dengan kontrol melalui suatu persamaan garis regresi linier yaitu dengan memasukkan nilai konsentrasi x dan persen peredaman sebagai y. Masukkan ke  dalam persamaan  y=  bx+a,  lalu  faktor  y  diganti  dengan  nilai  50  sehingga  diperoleh  nilai  x  yang menunjukkan nilai Inhibition Concentration (IC50).
Pengujian aktivitas antioksidan  yang dilakukan  terhadap  ekstrak etanol 96% daun jambu brazil batu diperoleh nilai IC50 sebesar 6,45 ppm, ekstrak etanol 70% daun jambu brazil batu diperoleh nilai IC50 sebesar 4,68 ppm, dan ekstrak etanol 50% daun jambu brazil batu diperoleh nilai IC50 sebesar 5,02 ppm. Vitamin C sebagai kontrol positif memiliki nilai IC50 sebesar 3,01 ppm. Suatu senyawa  dikatakan  sebagai  antioksidan  sangat  kuat  jika  nilai  IC50  kurang  dari  50  ppm,  kuat untuk  IC50  sebesar 50- 100 ppm, aktivitas sedang apabila memiliki nilai  IC50 sebesar  100- 500 ppm, dan lemah jika  nilai  IC50 lebih besar dari 500 ppm(15). Berdasarkan penggolongan tersebut, ekstrak etanol 96%, 70%, dan 50% daun jambu brazil batu memiliki tingkat kekuatan antioksidan yang sangat aktif karena memiliki nilai rata- rata IC50 6,45 ppm, 4,68 ppm, dan 5,02 ppm,  begitu  pula  dengan  vitamin  C  dengan  rata-  rata  nilai  IC50  3,01 ppm.  Dari  data  tersebut terbukti  bahwa    daun      jambu      brazil      batu      memiliki      kandungan      aktivitas      antioksidan (Lampiran 3).
Aktivitas  antioksidan  dari  ekstrak  etanol  70%  daun  jambu  brazil  batu  lebih  kuat  dari  kedua sampel  lainnya  dengan  nilai  IC50  4,68  ppm,  meskipun  ketiga  sampel  tersebut  tergolong antioksidan  yang  sangat  kuat.  Kuatnya  aktivitas  antioksidan  tersebut  berhubungan  dengan kandungan metabolit sekunder yang tersari  pada  saat  proses  ekstraksi,  atau  sejalan  dengan %  rendemen  yang dihasilkan. Dimana, ekstrak etanol 70% memiliki % rendemen yang paling besar yaitu  27,05  %.  Perbedaan  kandungan  metabolit  sekunder  yang  tersari  saat ekstraksi pada ketiga ekstrak disebabkan karena adanya perbedaan polaritas dari masing- masing pelarut.

## 4. Kesimpulan
Simplisia daun jambu brazil batu (Psidium guineense L.) memiliki karakteristik yang meliputi kadar air sebesar 2%, susut pengeringan 9%, kadar abu total 5,3%, kadar abu tidak larut asam %, kadar abu larut air %, kadar sari larut etanol 17% dan kadar sari larut air 20%. Hasil ini sesuai dengan persyaratan yang telah ditetapkan oleh BPOM dan MMI.
Hasil penafisan fitokimia simplisia daun jambu brazil batu ( Psidium guineense L. ) teridentifikasi mengandung senyawa golongan alkaloid, flavonoid, saponin, tanin, kuinon, steroid/ triterpenoid. Hasil  pengujian  aktivitas  antioksidan  dengan  menggunakan  metode  DPPH  (1,1idiphenyl-2- picryhydrazil) terhadap esktrak etanol daun jambu brazil batu (Psidium guineense L.) 96%, 70% dan 50% menunjukkan aktivitas yang tergolong sangat kuat dengan IC50 rata- rata sebesar 6,45 ppm, 4,68 ppm, dan 5,02 ppm. Ekstrak  etanol  70% memiliki  aktivitas  antioksidan  yang lebih kuat  dari  pada ekstrak etanol 96% dan 50%.

## 5. Daftar Pustaka
1. Winarsi,  H.,  2007, Antioksidan  Alami  dan  Radikal  Bebas,  Potensi  dan Aplikasinya  dalam  Kesehatan, Penerbit  Kanisius,  Yogyakarta.
Vol. 7; No.  1; 2016 Halaman 29-35
2. Ferreira,  PR.,  and  Sarah,  BR,2011, Morphoanatomy,  Histochemistry  and Phytochemistry  of  Psidium guineense Sw (Myrtaceae)  Leaves, Journal of Pharmacy Reseach, ISSN: 0974-6943, 942-944
3. Dirjen,  POM.,  1989., Material  Medika  Indonesia ,  Departemen  Kesehatan Republik Indonesia, Jilid V, Jakarta. Hlm. 536-540.
4. Saifudin,  A.,  dkk.,  2011, Standarisasi    Obat    Bahan    Alam, Graha  Ilmu, Yogyakarta, Hlm. 67- 68, 74.
5. Marliana.  S.,  Suryanti.  V.,  dkk.,  2005, Skrining  Fitokimia  dan  Analisis Kromatografi Lapis Tipis Komponen Kimia Buah Labu Siam ( Sechium edule Jacq. Swartz ) dalam Ekstrak Etanol Biofarmasi ,Vol.3(1), Hlm. 26-
6. Willem, H., Erwin, dkk., 2013, Pemanfaatan Tumbuhan Serai Wangi (Cymbopogen nardus (L.)  RENDLE)  sebagai  Antioksidan  Alami, Jurnal  Kimia  Mulawarman, Vol.10(2), Hlm. 74-79.
7. Djamil,  R,  dan  Anelia,  T.,  2009, Penafisan  Fitokimia,  Uji  BSLT,  dan  Uji Antioksidan  Ekstrak  Metanol  Bebebrapa  Spesies  Papilionaceae, Jurnal  Ilmu Kefarmasian Indonesia, Vol. 7(2), Hlm. 65- 71.
8. BPOM, 1985, Cara Pembuatan  Simplisia, Departemen Kesehatan Repubrik Indonesia, Jakarta, Hlm. 7- 15.
9. BPOM,  2014, Peraturan  Kepala  Badan  Pengawasan  Obat  dan  Makanan Nomor 12 Tahun 2014 Tentang Pesyaratan Mutu Obat Tradisional , BPOM, Jakarta, Hlm. 10.
10. Pertiwi,   RD.,   dkk.,   2016, Uji   Aktivitas   Antioksidan   Ekstrak   Etanol Limbah Kulit Buah Apel (Malus domestica Borkh.) terhadap Radikal Bebas   DPPH   ( 2,2- Diphenyl-1-Picryhidrazil) ,  Jurnal  Ilmiah  Manuntung, Vol. 2(1), Hlm. 81- 92.
11. Matheos,  H.,dkk.,  2104, Aktivitas  Antioksidan  dari  Ekstrak  Daun  Kayu Bulan ( Pisonia alba) , Jurnal Ilmiah Farmasi, Vol. 3(3), Hlm. 239.
12. Shadmani, A., dkk., 2004, Kinetic Studies on Zingiber Officinale, Pakistan. Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol. 17, Hlm. 47- 54
13. Munte,  L.,  dkk.,  2015, Aktivitas  Antioksidan  dari  Ekstrak  Daun  Prasman ( Eupatorium triplinerve Vahl .) , Jurnal Ilmu Farmasi, Vol. 4  (3), Hlm. 46.
14. Astuti   Asih,   IAR.,   dkk, Aktivitas   Antioksidan   Senyawa   Golongan Flavonoid Estrak  Etanol  Daging  Buah  terong  Belanda (Solanum  betaceum Cav.), Jurusan Kimia  FMIPA  Universitas  Udayana, q ISSN 2 1907-9850.