Journal Syifa Sciences and Clinical Research Volume 2 Nomor 1, Maret 2020
Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/jsscr , E-ISSN: 2656-9612 P-ISSN:2656-8187
Aktivitas Antihiperkolesterolemia Ekstrak Etanol Daun Stevia Rebaudiana Bertoni Pada Tikus Putih Jantan
Meta Kertika Untari 1* , Ganet Elo Pramukantoro 2
12 Fakultas Farmasi Universitas Setia Budi, Surakarta Jl. Letjend Sutoyo-Mojosongo Surakarta-57127 Telp.0271-852578 * Penulis Korespondensi.Email: meta.kartika@yahoo.com

## ABSTRAK
Hiperkolesterolemia  merupakan  keadaan  terjadinya  peningkatan  kadar  LDL  ( Low  Density Lipoprotein )  dan  kolesterol  total  plasma..Daun  stevia  memiliki  manfaat  untuk  mengatasi hiperkolesterolemia. Tujuan dari penelitian ini adalah memperoleh ekstrak etanol daun Stevia rebaudiana  Bertoni yang  mempunyai  aktivitas  menurunkan  kadar  kolesterol  total  pada penderita hiperkolesterolemia dengan dosis yang efektif.
Metode yang akan dilakukan untuk mencapai tujuan tersebut adalah membuat ekstrak dengan cara maserasi serbuk daun Stevia rebaudiana Bertoni menggunakan pelarut air selama 5 hari. Pengujian aktivitas antihiperkolesterolemia dengan cara memberikan perlakuan pada 20 ekor tikus putih jantan. Tikus dibagi menjadi 5 kelompok perlakuan. Kelompok I kontrol negatif, II kontrol simvastatin, III ekstrak 30 mg/200 g BB, IV  ekstrak 60 mg/200 g BB, V ekstrak 120 mg/200 g BB. Tikus diinduksi propiltiourasil 12,5 mg/hari dan pakan tinggi lemak selama 21 hari, setelah itu tikus diberi sediaan uji selama 14 hari. Kadar kolesterol diukur pada hari ke- 0, ke 21 ke-28 dan ke-35. Metode penetapan kadar kolesterol menggunakan alat Easy Touch. Pada hari ke-35, dilakukan pemeriksaan kadar kolesterol total dan analisa data. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  stevia  memiliki  aktivitas antihiperkolesterolemia,  ekstrak  dosis  30  mg/200  g  BB  memiliki  aktivitas antihiperkolesterolemia yang setara dengan simvastatin Kata Kunci:
Antihiperkolesterolemia, Ekstrak Etanol Daun Stevia Rebaudiana Bertoni, Kolesterol Total.
Diterima: 02-10-19 Disetujui: 15-12-19 Online: 18-02-20
1.

## ABSTRACT
Hypercholesterolemia is a state of increased levels of LDL (Low Density Lipoprotein) and total cholesterol in the plasma. Stevia leaves have benefits to overcome hypercholesterolemia. The aimed of this study was to obtain ethanol extracts of Stevia rebaudiana Bertoni leaves which have  activity  to  reduce  total  cholesterol  levels  in  patients  with  hypercholesterolemia  with effective doses.
The method that will be carried out to achieve this goal was to make extracts by maceration of Stevia  rebaudiana  Bertoni  leaf  powder  using  a  water  solvent  for  5  days.  Testing antihypercholesterolemia activity by giving treatment to 20 male white rats. Rats were divided into 5 treatment groups. Group I was negative control, II was simvastatin control, III extract was 30 mg / 200 g BW, IV extract was 60 mg / 200 g BW, V extract was 120 mg / 200 g BW. The mice were induced by propylthiouracil 12.5 mg / day and high-fat feed for 21 days, after which the rats were given the test for 14 days. Cholesterol levels were measured on days 0, 21st and 28th. The method of determining cholesterol levels uses the Easy Touch tool. On the 35th day, a total cholesterol level was examined and data analysis was performed.
The  results  showed  that  the  ethanol  extract  of  stevia  leaves  had  antihypercholesterolemia activity, extract dose of 30 mg / 200 g BW had antihypercholesterolemia activity which was equivalent to simvastatin.
Keywords:
Antihypercholesterolemia, ethanol extract of bertoni stevia rebaudiana leaves, total cholesterol.
Received: 19-10-02
Accepted: 19-12-15 Online: 2. 20-02-18

## 1. Pendahuluan
Perubahan pola makan masyarakat modern saat ini cenderung mengkonsumsi makanan yang  mengandung  kolesterol,  intensitas  makan  yang  tinggi,  stress  yang  menekan sepanjang  hari,  obesitas  dan  merokok  serta  kebiasaan  mengkonsumsi  fastfood berlebihan sehingga membuat kadar kolesterol darah sangat sulit dikendalikan [3]. Kolesterol adalah bahan utama bagi tubuh untuk mensintesis zat-zat penting, seperti membran  sel  dan  bahan  isolasi  sekitar  sel  syaraf,  hormon  kelamin  dan  anak  ginjal, vitamin D, serta asam empedu. Kolesterol dapat ditemukan pada lemak hewani, kuning telur,  dan  batu  empedu  [10].  Keadaan  kadar  kolesterol  yang  berlebih  sangat mengkhawatirkan karena dapat menyebabkan hiperkolesterolemia.
Hiperkolesterolemia adalah kondisi yang mengalami peningkatan kadar kolesterol LDL (Low  Density  Lipoprotein)  dan  kolesterol  total.  Hiperkolesterolemia  dapat menyebabkan  aterosklerosis  pada  pembuluh  arteri  yang  merupakan  penyempitan pembuluh  darah  di  jantung,  sehingga  meningkatkan  faktor  risiko  penyakit  jantung koroner [1]
Menurut World Health Organization (WHO) pada tahun 2012, penyakit kardiovaskuler merupakan penyebab kematian yang terjadi pada 17.5 juta orang di dunia, salah satunya disebabkan  oleh  penyempitan  pembuluh  darah.  Data  di  Indonesia,  sebanyak  37  % penduduk Indonesia mengalami peningkatan kadar kolesterol darah [15].
Daun Stevia rebaudiana Bertoni mengandung senyawa aktif yaitu steviosida (kurang lebih  sebanyak  4-15%)  [5].  Senyawa  steviosida  memiliki  potensi  sebagai  pengobatan efektif  penyakit  sindrom  metabolik  seperti  hiperglikemia,  hipertensi,  dislipidemia. Steviosida termasuk dalam glikosida [8,13] . Daun Stevia juga dilaporkan sebagai bahan antioksidan alami, yang mempunyai kemampuan mengikat radikal elektron bebas dan superoksida  sehingga  efektif  dalam  menghambat  oksidasi,  terutama  oksidasi  pada senyawa  lipid  [10].  Penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  Surya  (2016)  bahwa  ekstrak etanol daun stevia dosis 300 mg/KgBB dapat mencegah dislipidemia pada tikus Wistar jantan yang diberi diet tinggi kolesterol [11].
Hal  tersebut  mendorong  peneliti  untuk  melakukan  penelitian  mengenai  pengaruh pemberian ekstrak etanol daun stevia terhadap kadar kolesterol total darah tikus putih jantan  wistar  yang  diberi  pakan  diet  tinggi  lemak.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui efektifitas ekstrak etanol daun stevia dalam menurunkan kadar kolesterol total  pada  tikus  putih  jantan  wistar  yang  diberi  pakan  diet  tinggi  lemak  serta mengetahui dosis efektifnya dalam menurunkan kolesterol.

## 2. Metode Penelitian

## 2.1 Alat
Peralatan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu bejana Erlenmeyer 500 ml, beaker glass 500 ml, corong kaca, kain flanel, aluminium foil, timbangan analitik “Mettler A 30” dengan ketelitian 0,0001 gram, tabung rekasi,  gelas ukur dengan ketelitian 0,1 ml, labu
takar 100 ml, pipet tetes, cawan porselin, spatel, batang pengaduk, sonde lambung, spuit 1 ml, Easy Touch.

## 2.2 Bahan
Bahan  utama  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  daun  stevia  (Stevia rebaudiana  Bertoni)  yang  diambil  secara  acak  (random)  dari  Tawang  Mangu,  Jawa Tengah, hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah tikus putih jantan usia 2-2,5  bulan  dengan  berat  antara  80-150  gram  yang  diperoleh  dari  Laboratorium Farmakologi  Universitas  Gadjah  Mada,  Yogyakarta,  aloksan  dan  metformin  yang diperoleh  dari  apotek  sekitar  Surakarta.  Bahan-bahan  sebagai  penunjang  penelitian adalah pelarut aquadest, reagen yang digunakan untuk identifikasi kandungan kimia secara kualitatif yaitu serbuk Mg, larutan Amil : HCl (1 : 1), alkohol, akuadest, reagen Meyer, reagen Dragendroff, HCl 0,5 N..

## 2.3 Pembuatan Sediaan
Pembuatan larutan CMC 0,5% dibuat dengan cara melarutkan lebih kurang 0,5 gram CMC yang telah ditimbang seksama ke dalam air sampai volume 100 ml. Larutan ini digunakan  sebagai  suspending  agent  pada suspensi simvastatin dan ekstrak etanol 70% daun Stevia.
Pembuatan suspensi simvastatin. Simvastatin adalah salah satu obat yang digunakan untuk  menurunkan  kadar  kolesterol.  Dosis  lazim  simvastatin  pada  manusia  dewasa yaitu 10 – 20 mg/hari, maka dosis simvastatin untuk tikus dengan berat badan 200 gram dengan faktor konversi dari  manusia dengan berat badan 70 kg ke tikus yaitu 0,018. Dosis untuk tikus adalah 10 mg x 0,018 = 0,18 mg/200 gr = 0,9 mg/Kg BB tikus. Volume yang diberikan sebanyak 1 ml.
Pembuatan  suspensi  propiltiourasil  (PTU).  Dosis  propiltiourasil  yang  digunakan sebanyak  12,5  mg/hari  dibagi  dalam  2  kali  dosis  pemberian  selama  14  hari. Propiltioiurasil  yang  dibuat  yaitu  dalam  bentuk  larutan.  Dosis  propiltiourasil  dalam sekali  pemberian  yaitu  6,25  mg.  Volume  pemberian  yang  diberikan  sebanyak  1  ml (Kenta et al. 2018).
Pembuatan  pakan  tinggi  lemak.  Pembuatan  pakan  kolesterol  tinggi  untuk  hewan  uji dibuat dengan mencampurkan50 gram kuning telur puyuh, 50 gram kuning telur bebek dalam 800 gram pakan BR standar sehingga jumlah pakan harian baik pakan kolesterol maupun pakan BR standar yang akan diberikan adalah 20 g/ekor/hari dan air minum yang diberikan ad libitum pemberian lemak babi dilakukan secara peroral (Kenta et al. 2018).
Suspensi    ekstrak  etanol  70%  daun  Stevia  dalam  CMC  0,5%  dibuat  dengan  cara melarutkan sejumlah gram bahan yang telah  ditimbang  seksama  ke  dalam  CMC  0,5% .Dosis ekstrak etanol  daun Stevia yang digunakan yaitu 30mg/200 g BB, 30mg/200 g BB dan 30mg/200 g BB tikus.

## 2.4 Uji aktivitas antihiperkolesterolemia
Sebanyak 20 ekor tikus percobaan terlebih dahulu diadaptasikan dengan lingkungan penelitian selama 7 hari dengan diberi pakan standar BR II. Setelah 7 hari, hewan uji dipuasakan selama 12 jam (tetap diberi minum), kemudian hewan uji ditimbang dan diambil darahnya untuk dilakukan pemeriksaan kadar kolesterol periode I (T0). Hewan uji dibagi secara acak menjadi 5 kelompok perlakuan yang terdiri dari 4 ekor tikus pada masing-mamsing kelompok. Pengelompokan hewan uji sebagai berikut:
Kelompok I merupakan kelompok kontrol hiperkolesterolemia, diberikan CMC Na 0,5%.
Kelompok  II  merupakan  kelompok  kontrol  pembanding  positif,  diberikan suspensi simvastatin dengan dosis 0,056 mg/200 g BB.
Kelompok III merupakan kelompok perlakuan I, diberikan ekstrak etanol daun stevia dosis 30 mg/ 200 g BB.
Kelompok IV merupakan kelompok perlakuan II, diberikan ekstrak etanol daun stevia dosis 60 mg/ 200 g BB.
Kelompok V merupakan kelompok perlakuan III, diberikan ekstrak etanol daun stevia dosis 120 mg/ 200 g BB.
Pengambilan darah tikus untuk data kadar kolesterol total awal (t0) diambil pada hari ke-0  setelah  tikus  diadaptasi  di  lingkungan  laboratorium  yang  sebelumnya  telah dipuasakan  selama  12  jam.  Setelah  pengambilan  darah  pada  t0  kelompok hiperkolesterolemia, kelompok hewan uji, kelompok kontrol simvastatin, diberikan diet tinggi  lemak  dan  PTU  selama  21  hari  sesuai  kelompok  hewan  uji  dan  dibaca  kadar kolesterol totalnya untuk mengetahui kondisi hiperkolesterolemia.
Pada  hari  ke-21  dilakukan  pengukuran  kadar  kolesterol  total  masing-masing  tikus, kemudian diberi sediaan uji sesuai kelompok dosis uji yaitu ekstrak etanol daun stevia serta dosis pembanding yaitu simvastatin diukur kadar kolesterol total serum tikus pada semua kelompok untuk mengetahui penurunan kadar kolesterol total.
Pengukuran  kadar  kolesterol  total  awal  bertujuan  sebagai  pembanding  antara  kadar kolesterol awal dengan kadar kolesterol total setelah diberi perlakuan, untuk melihat ada  atau  tidaknya  perubahan  yang  terjadi  setelah  perlakuan  kontrol  positif,  kontrol negatif, serta kelompok perlakuan yang diberi ekstrak etanol daun stevia serta melihat nilai normal pada tikus hiperkolesterolemia dan efektifitas penggunaan ekstrak etanol daun  stevia  dalam  menurunkan  kadar  kolesterol  total  dalam  darah  tikus hiperkolesterolemia.
Pengukuran  kadar  kolesterol  total  dilakukan  setelah  diberi  sediaan  pada  hewan  uji untuk melihat kadar kolesterol total pada tikus selama pemberian ekstrak etanol daun stevia.  Pengukuran  dilakukan  pada  hari  ke  28  dan  hari  ke  35.  Pengukuran  kadar kolesterol total pada hari ke 28 dilakukan untuk melihat apakah ekstrak etanol daun stevia sudah memberikan efektivitas penurunan kadar kolesterol total pada hari ke 28.

## 2.5 Analisis Hasil
Data  yang  diperoleh  diolah  menggunakan  SPSS  for  Windows  Release  17.0.  Uji homogenitas  Shapiro-Wilk  digunakan  untuk  melihat  normalitas  distribusi  data. Distibusi data yang normal memiliki nilai p>0,05 tetapi yang tidak normal memiliki nilai p<0,05.  Setelah  mengetahui  normalitas  distribusi  data,  dilakukan  2  uji  yaitu  uji berpasangan  dan  uji  tidak  berpasangan.  Uji  berpasangan  digunakan  untuk  melihat signifikansi  dari  masing-masing  kelompok  perlakuan  pada  pengukuran  pretest dibandingkan  dengan  pengukuran  kadar  kolesterol  total  hari  ke  21,  28,  35.  Uji berpasangan untuk distribusi data yang normal dilakukan uji Paired T-Test ,sedangkan distribusi data yang tidak normal dilakukan transformasi. Hasil transformasi data yang normal  digunakan  uji  Paired  T-Test,  sedangkan  hasil  transformasi  data  yang  tidak normal digunakan uji Wilcoxon. Uji tidak berpasangan digunakan untuk mengetahui efektivitas  ekstrak  etanol  daun  Stevia  dibandingkan  dengan  simvastatin  (kontrol positif). Efektifitas ditunjukkan dengan cara meilihat selisih penurunan kadar kolesterol total antara pre test, pengukuran kadar kolesterol total hari ke 21, 28 dan 35. Distribusi data yang normal dilakukan Uji Two Way Anova kemudian dilanjutkan dengan Uji Post Hoc,  sedangkan  distribusi  data  tidak  normal  dilakukan  uji  Kruskal-Wallis  yang dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney.
3. Hasil dan Pembahasan
3.1 Hasil pembuatan serbuk daun stevia
Pengeringan daun stevia bertujuan untuk mengurangi kadar air, sehingga mencegah terjadinya  pembusukan  oleh  jamur  dan  terurainya  enzim  yang  menyebabkan penurunan mutu dan perubahan kimiawi. Daun stevia yang sudah kering  sebanyak 5 kg  kemudian  diserbuk,  lalu  diayak  dengan  ayakan  nomor  30.  Penentuan  presentase bobot  serbuk  terhadap  bobot  kering  dilakukan  dengan  cara  menimbang  daun  stevia yang  sudah  kering,  kemudian  dibandingkan  dengan  bobot  daun  stevia  yang  sudah diserbuk.
Dari  bobot  kering  sebanyak  5000  gram  diperoleh  bobot  serbuk  sebesar  800  gram. Persentase rata-rata bobot serbuk terhadap bobot kering daun stevia sebesar 16 %. 3.2 Hasil penetapan kadar kandungan lembab serbuk daun stevia Penetapan  kadar  kandungan  lembab  dilakukan  untuk  mengetahui  kadar  air  suatu bahan.  Kadar  air  yang  terlalu  tinggi  akan  mempermudah  pertumbuhan  jamur  dan bakteri serta perubahan kimiawi dan reaksi enzimatik yang dapat merusak simplisia. Pengukuran  persentase  kadar  kandungan  lembab  daun  stevia  menggunakan  alat moisture  balance dihasilkan  rata-rata  kadar  kandungan  lembab  serbuk  daun  stevia sebesar 3,93 %. Hal ini telah sesuai dengan pustaka Depkes RI (1995) yaitu kadar air untuk simplisia tidak lebih dari 10%, sehingga tidak merusak mutu dan khasiat suatu simplisia [12].

## 3.3 Hasil pembuatan ekstrak etanol daun stevia
Proses ekstraksi yang digunakan dalam penyarian ini adalah metode remaserasi dengan tujuan agar zat aktif yang terambil lebih optimal. Remaserasi dilakukan pada wadah berkaca gelap untuk menghindari sinar matahari langsung. Proses remaserasi dilakukan dalam keadaan tertutup agar etanol tidak menguap pada suhu kamar.
Remaserasi dilakukan selama 8 hari, yakni setelah 4 hari serbuk yang direndam dengan etanol 70% diperas, kemudian ampasnya direndam lagi dengan etanol selama 4 hari. Hasil maserat yang diperoleh kemudian dipekatkan dengan evaporator pada suhu 60 ºC, dan diperoleh berat ekstrak kental sebesar 100 g, kemudian hasil maserat disimpan dalam kulkas agar kandungan kimia yang terkandung dalam ekstrak daun stevia tidak rusak oleh suhu yang tinggi. Hasil rendemen ekstrak etanol daun stevia diperoleh 10% 3.4 Hasil identifikasi kandungan kimia serbuk dan ekstrak etanol daun stevia Identifikasi  kandungan kimia  pada serbuk  dan ekstrak  etanol  daun  stevia  dilakukan untuk  mengetahui  kandungan  kimia  pada  serbuk  dan  ekstrak  daun  stevia  dengan dilakukan  uji  kualitatif  menggunakan  reaksi  warna  untuk  mengetahui  kandungan alkaloid, flavonoid, saponin dan tanin. Hasil identifikasi dapat dilihat pada Tabel 1.

## Tabel 1. Hasil identifikasi kandungan kimia serbuk dan ekstrak etanol daun stevia
No Kandungan Kimia Pustaka Hasil Serbuk Ekstrak 1 Alkaloid Mayer : endapan putih/kuning Dragendrof : endapan cokelat/hitam (Robinson 1991) Mayer  :  endapan putih ( + ) Dragendorf : endapan cokelat ( + ) 2 Flavonoid Merah,  kuning  atau  jingga pada lapisan amil alkohol (Depkes 1995) kuning  pada  lapisan amil alkohol ( + ) kuning pada lapisan amil alkohol ( + )
3 Saponin Buih  yang  stabil  selama tidak  kurang  dari  10  menit setinggi 1-10 cm (Depkes 1995) Terbentuk buih yang stabil ( + ) Terbentuk buih yang stabil ( + ) 4 Diterpen Cincin merah kecoklatan/ungu (Robinson 1991) Cincin ungu ( + ) Cincin ungu ( + )
Berdasarkan hasil  identifikasi kualitatif kandungan kimia  ekstrak etanol daun stevia, dapat dilihat bahwa kandungan kimia seperti alkaloid, flavonoid, saponin, dan tanin dinyatakan positif karena terdapat kesesuaian hasil pengamatan dengan pustaka yang digunakan. Dapat disimpulkan bahwa  ekstrak etanol daun stevia mengandung alkaloid, flavonoid, saponin, dan diterpen.

## 3.5 Hasil uji bebas alkohol
Ekstrak etanol daun stevia dilakukan uji bebas alkohol untuk mengetahui ekstrak etanol daun stevia benar-benar telah bebas alkohol dengan cara esterifikasi.
Hasil  pengujian  menunjukan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  stevia  yang  akan  dibuat sediaan uji telah bebas dari alkohol.

## 3.6 Hasil penimbangan berat badan hewan uji
Penimbangan  berat  badan  tikus  dilakukan  pada  awal  sebelum  perlakuan  hari  ke  0, setiap 3 hari sekali selama pemberian pakan diet tinggi lemak dan induksi PTU, dan dilakukan penimbangan setiap 3 hari sekali selama pemberian perlakuan obat-obatan yang bertujuan untuk dilakukan penyesuaian dosis pemberian suspensi Na CMC 0,5%, simvastatin, ekstrak daun stevia dosis I, dosis II dan dosis III. Setelah tikus diinduksi dengan  pakan  diet  tinggi  lemak  selama  21 hari  dilakukan  penimbangan  berat  badan tikus sebelum dilakukan pengukuran kadar kolesterol total.
Penelitian  ini  menggunakan  tikus  putih  jantan  galur  wistar  sebanyak  20  tikus  yang dibagi dalam 5 kelompok yang masing-masing terdiri dari 4 ekor tikus yaitu kelompok kontrol  negatif  Na  CMC  0,5%,  kelompok  kontrol  positif  simvastatin,  kelompok perlakuan (ekstrak daun stevia dosis I, dosis II dan dosis III). Setelah dilakukan induksi menggunakan  pakan  diet  tinggi  lemak  dan  PTU  selama  21  hari  berat  badan  tikus ditimbang untuk mengetahui kenaikan berat badan tikus selama pemberian pakan diet tinggi  lemak.  Rata-rata  hasil  penimbangan  berat  badan  tikus  setelah  diberi  induksi pakan diet tinggi lemak dapat dilihat pada lampiran.
Data penimbangan berat badan untuk penyesuaian dosis juga untuk melihat apakah terjadi  penurunan  berat  badan  atau  tidak  selama  perlakuan..  Setelah  tikus  diinduksi menggunakan  pakan  diet  tinggi  lemak  dan  PTU  selama  21  hari,  penimbangan  berat badan tikus dilanjutkan setiap 3 hari sekali dan tikus sudah tidak diberi induksi pakan diet  tinggi  lemak  dan  PTU.  Hasil  rata-rata  penimbangan  berat  badan  tikus  selama pemberian perlakuan obat-obatan dapat dilihat pada gambar 1.

## Gambar 1. Rata-rata berat badan tikus
Grafik  di  atas  merupakan  data  selama  pemberian  pakan  tinggi  lemak  dan  selama perlakuan.  Berdasarkan  grafik  di  atas  dapat  dilihat  bahwa  berat  badan  awal  tikus sebelum diberikan pakan diet tinggi lemak dan induksi PTU memiliki  rata-rata <200 gr,kemudian setelah diberikan pakan diet tinggi lemak dan induksi PTU selama 21 hari berat  badan  tikus  mengalami  kenaikan  dan  penurunan  setelah  diberikan  perlakuan. Penurunan berat badan tikus terjadi pada semua kelompok, tetapi pada kelompok yang hanya diberikan suspensi CMC Na 0,5 % penurunan berat badan tidak signifikan. Data penurunan  berat  badan  tikus  selama  diberikan  perlakuan  obat-obatan  dapat  dilihat pada lampiran.
Kemudian  dilakukan  analisis  menggunakan  uji Shapiro-Wilk ,  data  yang  dilakukan analisis adalah selisih berat badan tikus hari ke-0 dan hari ke-14 selama perlakuan. Data penurunan  berat  badan  yang  sudah  dianalisa  menggunakan  uji Saphiro-Wilk menunjukkan bahwa nilai signifikan >0,05 sehingga data yang digunakan terdistribusi normal. Kemudian dilanjutkan uji One way ANOVA yang diperoleh nilai signifikan < 0,05 yang berarti terdapat perbedaan yang bermakna pada masing-masing kelompok. Selanjutnya  dilakukan  Uji Tukey HSD  untuk  menunjukkan  adanya  perbedaan  yang bermakna pada masing-masing kelompok. Hasil uji Tukey HSD menunjukkan terdapat perbedaan  yang  bermakna  antara  kelompok  yang  hanya  diberikan  CMC  Na  0,5  % dengan kelompok yang diberikan ekstrak. Hal  tersebut menunjukkan bahwa ekstrak daun  stevia  dapat  menurunkan  berat  badan  tikus  yang  mempengaruhi  penurunan kadar kolesterol total pada tikus.

## 3.7 Hasil pengukuran kadar kolesterol total
Pengambilan  darah  pada  hewan  uji  dilakukan  melalui  vena  ekor.  Penelitian  ini dilakukan  untuk  mengetahui  efektivitas  pemberian  ekstrak  daun  stevia  terhadap penurunan  kadar  kolesterol  total  serum  darah  tikus  putih  jantan  galur  wistar  yang diberi  pakan  diet  tinggi  lemak  dan  PTU.  Dosis  efektif  adalah  dosis  yang  memiliki kemampuan untuk menurunkan kadar kolesterol total serum darah tikus yang hampir sama  dengan  kontrol  pembanding  yaitu  simvastatin.  Pengujian  ekstrak  daun  stevia dilakukan selama 14 hari setelah tikus dinyatakan hiperkolesterolemia (kadar kolesterol ≥200 mg/dL).
Pengukuran kadar kolesterol total dilakukan pada hari ke-0, hari ke-21, hari ke-28 dan hari  ke-35  dengan  menggunakan  alat Easy  Touch .    Pengukuran  kadar  kolesterol  total pada hari ke-0 dilakukan untuk mengetahui kadar kolesterol total normal pada tikus sebelum diberi induksi pakan  tinggi lemak dan PTU. Pengukuran kadar kolesterol total
0 50 100 150 200 250 300 350 T0 T21 T27 T35 Rat a- ra ta b era t b ad an tik u s (gram ) Waktu (hari) Kontrol negatif (CMC Na) Kontrol positif
(simvastatin)
Ekstrak Dosis 30 mg/200 g BB
Ekstrak Dosis 60 mg/200 g BB
Ekstrak Dosis 120 mg/200 g BB
pada hari ke-21 dilakukan untuk mengetahui peningkatan kadar kolesterol total setelah pemberian pakan  tinggi lemak dan PTU. Pengukuran kadar kolesterol total pada hari ke-28  dan  hari  ke-35  dilakukan  untuk  mengetahui  penurunan  kadar  kolesterol  total setelah pemberian ekstrak daun stevia.
Pemberian pakan diet tinggi  lemak dan PTU mampu meningkatkan kadar kolesterol total dalam darah tikus karena adanya peningkatan kadar kolesterol total pada hari ke- 0 sampai hari ke-21 dan pemberian perlakuan obat-obatan mampu menurunkan kadar kolesterol  total  pada  darah  tikus  karena  terjadi  penurunan  kadar  kolesterol  total terutama pada kelompok kontrol positif simvastatin dan kelompok dosis ekstrak. Rata- rata  kadar  kolesterol  total  pada  hari  ke-0,  hari  ke-21,  hari  ke-28  dan  hari  ke-35  dari masing-masing kelompok perlakuan dapat dilihat pada gambar 2.

## Gambar 2. Rata- rata kadar kolesterol total
Berdasarkan  grafik  pada  gambar  2,  hari  ke-0  menunjukkan  kadar  kolesterol  yang hampir sama karena semua kelompok hewan uji belum mendapatkan perlakuan pakan tinggi  lemak  dan  PTU.  Hari  ke-21  rata-rata  kadar  kolesterol  total  mengalami peningkatan  pada  semua  kelompok  hewan  uji.  Peningkatan  kadar  kolesterol  total disebabkan semua kelompok hewan uji diberi induksi propiltiourasil dan pakan  tinggi lemak yang terdiri dari campuran kuning telur bebek, kuning telur puyuh dan BR serta minyak  babi  yang  diberikan  secara  peroral.  Pemberian  PTU  dapat  menghambat  sel tiroid pada tikus, sehingga produksi hormon tiroid terhambat dan mengakibatkan tikus mengalami hipertiroidisme yang berpengaruh langsung pada metabolisme lipoprotein yaitu  peningkatan  kadar  kolesterol  terutama  LDL  kolesterol  yang  diakibatkan  oleh penekanan metabolik pada reseptor LDL, sehingga kadar kolesterol meningkat [6]. Pengukuran  kadar  kolesterol  dilakukan  pada  hari  ke-7  dan  ke-14  setelah  pemberian ekstrak daun stevia. Data rata-rata kadar kolesterol pada kelompok kontrol negatif pada hari ke-7 dan hari ke-14 menunjukkan tidak adanya penurunan kadar kolesterol total karena  pada  kelompok  kontrol  negatif    hanya  diberikan  CMC  Na  0,5  %.  Pemberian simvastatin, ekstrak daun stevia selama 7 hari menunjukkan adanya penurunan kadar kolesterol total pada ekstrak dosis 30 mg/200 g BB, dosis 60 mg/200 g BB dan dosis 120 mg/200 g BB. Penurunan kadar kolesterol pada kelompok ekstrak dosis 30 mg/200 g BB, dosis 60 mg/200 g BB dan dosis 120 mg/200 g BB dengan kelompok kontrol negatif memiliki nilai signifikan < 0,05 yang berarti terdapat perbedaan yang signifikan antar kelompok, kemudian pada kelompok ekstrak dosis 30 mg/200 g BB, dosis 60 mg/200 g BB dan dosis 120 mg/200 g BB dengan kelompok kontrol positif simvastatin diperoleh
0 50 100 150 200 250 300 350 T0 T21 T28 T35 Kontrol negatif (CMC Na) Kontrol positif
(simvastatin)
Ekstrak Dosis 30
mg/200 g BB
Ekstrak Dosis 60 mg/200 g BB waktu (hari ) Ra ta - ra ta k a da r k o leste ro l to ta l m g /dl
nilai  signifikan  <  0,05  yang  berarti  pada  kelompok  ekstrak  daun  stevia  memiliki perbedaan  yang  signifikan  dengan  kelompok  kontrol  positif  simvastatin  sehingga pemberian ekstrak dan fraksi daun ubi jalar ungu dilanjutkan sampai hari ke-14. Pengukuran  kadar  kolesterol  total  dilakukan  pada  hari  ke-14  menunjukkan  adanya penurunan kadar kolesterol total pada masing-masing kelompok ekstrak daun stevia, namun  penurunan  kadar  kolesterol  total  terbesar  terjadi  pada  kelompok  yang  diberi ekstrak dosis 30 mg/200 g BB.
Pada  kelompok  pembanding  yang  diberikan  suspensi  simvastatin  menunjukkan terjadinya penurunan kadar kolesterol total darah pada tikus. Simvastatin merupakan obat  hiperkolesterolemia  yang  bekerja  sebagai  inhibitor  kompetitif 3-hidroksi-3- metilglutaril koenzimA (HMG-CoA) reduktase, yang mengkatalisis  tahap awal pembatas laju pada biosintesis kolesterol. Kadar kolesterol pada hari ke-7 menunjukkan bahwa pada  pada  kelompok  perlakuan  yang  diberikan  ekstrak  daun  stevia  menunjukkan adanya penurunan namun belum setara dengan kontrol positif simvastatin, hal tersebut terjadi  dikarenakan  reaksi  yang  lambat  pada  obat  tradisional  disebabkan  senyawa- senyawa  berkhasiat  di  dalam  obat  tradisional  membutuhkan  waktu  untuk  menyatu dalam  metabolism  tubuh.  Berbeda  dengan  obat  sintetik  yang  bekerja  dengan  cara meredam  rasa  sakit  dan  gejalanya,  obat  tradisional  bekerja  dengan  berfokus  pada sumber penyebabnya yaitu dengan membangun dan memperbaiki sel-sel jaringan dan organ yang rusak, oleh karena itu penggunaan obat tradisional dibutuhkan waktu yang relatif  lebih  lama  untuk  merasakna  efek  obat  tradisional  dibandingkan  jika menggunakan obat kimia [4]
4. Kesimpulan
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa  ekstrak etanol daun Stevia rebaudiana Bertoni memiliki aktivitas antihiperkolesterolemia yang dilihat dari penurunan kadar kolesterol total darah tikus yang diberi diet tinggi lemak. Serta dosis ekstrak etanol daun Stevia rebaudiana Bertoni yang menurunkan kadar kolesterol total darah paling baik adalah 30 mg/ 200 g BB

## Ucapan Terima Kasih
Pada  kesempatan  ini  peneliti  mengucapkan  terimakasih  kepada  LPPM Universitas Setia Budi yang telah membiayai penelitian ini.

## Referensi
[1] Azima  F,  Muchtadi  D,  Zakaria  RF,  Priyosoeryanto  BP.  2004.  Potensi Antihiperkolesterolemia Ekstrak Cassia vera (Cinnamonum burmanni Nees ex Blume). Jurnal Teknologi dan Pangan 15:2.
[2] Dalimartha S. 2007. 36 Resep Tumbuhan Obat untuk Menurunkan Kolesterol. Jakarta: Penebar Swadaya. hlm 2-4, 28-29.
[3] Goodman A, Gilman H, Limbird LE, editor. 2007. Dasar Farmakologi Terapi. Ed ke-10.  Volume  1.  Tim  Alih  Bahasa  Sekolah  Farmasi  ITB,  penerjemah;  Jakarta: EGC.  hlm  943.  Terjemahan  dari:  Goodman  &  Gilman’s  The  Pharmacological Basis of Therapeutics
[4] Katno M, Prapti IY, Rahmawati N, Mujahid R. 2008. Jawa Tengah: Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Tanaman Obat dan Obat Tradisional.
[5] Misra,  H.,  Soni,  M.,  Silawat,  N.,  Mehta,  D.,  Mehta,  B.K.,  Jain,  D.C.,  2011, Antidiabetic  Activity  of  Medium-Polar  Extract  From  The  Leaves  of  Stevia
Rebaudiana  Bert.  (Bertoni)  on  Alloxan-Induced  Diabetic  Rats,  2011,  J  Pharm Bioallied Sci. 3(2):242-8.
[6] Nofianti T, Windiarti D, Prasetyo Y. 2015. Uji aktivitas ekstrak etanol krop kubis putih  (Brassica  oleracea  L.  var.  capitata)  terhadap  kadar  kolesterol  total  dan trigliserida  serum  darah  tikus  putih  jantan  galur  Wistar.  STIKes  Bakti  Tunas Husada Tasikmalaya.
[7] Ratnani, R.D., Anggraeni, R., 2005, Ekstraksi Gula Stevia Dari Tanaman Stevia Rebaudiana Bertoni, Momentum, 1(2):27 - 32
[8] Riani M., dan Isnawati, M., 2011, Kajian: Khasiat Dan Keamanan Stevia Sebagai Pemanis Pengganti Gula, Media Litbang Kesehatan, Volume 21 Nomor 4, 145- 156.
[9] Tjay,  Tan  Hoan  dan  Kirana  Rahardja,  2007,  Obat-Obat  Penting  Khasiat, Penggunaan  dan  Efek-Efek  Sampingnya,  Edisi  Keenam,  262,  269-271, PT. Elex Media Komputindo, Jakarta
[10] Thomas, J., Glade, M., 2010, Stevia : It’s not just about calories, The Open Obesity Journal, 2 : 101-109
[11] Surya, s.y.,(2016). Pemberian Ekstrak Etanol Daun Stevia (Stevia Rebaudiana) Mencegah  Dislipidemia  Pada  Tikus  (Rattus  Norvegicus)  Wistar  Jantan  Yang Diberikan  Diet  Tinggi  Kolesterol. Tesis. Program  Studi  Ilmu  Biomedik, Universitas Udayana : Denpasar.
[12] Departemen  Kesehatan  republik  Indonesia.1995. Farmakope  Indonesia ,  Edisi  4, Jakarta
[13] Gardana, C., Simonetti, P., Canzi, E., Zanchi, R. and Pietta, P., 2003. Metabolism of  stevioside  and  rebaudioside  A  from  Stevia  rebaudiana  extracts  by  human microflora. Journal of agricultural and food chemistry , 51(22), pp.6618-6622.
[14] Wijayakusuma, Hembing. 2000. Ensiklopedi Milenium Tumbuhan Berkhasiat Obat Indonesia. Jakarta: Penerbit Prestasi Insan Indonesia. hlm 1-2.
[15] World Health Organization. Noncommunicable disease country profiles 2012. Diunduh dari: http://who.int/nmh/countries/idn_en.pdf