## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## ACUTE TOXICITY TEST OF COMBINATION OF DAYAK ONION (ELEUTHERINE AMERICANA MERR.) AND PINANG YAKI (ARECA VESTIARIA GISEKE) EXTRACTS
AGAINST LUNG ORGANS OF WISTAR MALE WHITE RATS (RATTUS NORVEGICUS).

## UJI TOKSISITAS AKUT KOMBINASI EKSTRAK BAWANG DAYAK
( Eleutherine americana Merr.) DAN PINANG YAKI ( Areca vestiaria Giseke) TERHADAP ORGAN PARU-PARU TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR ( Rattus norvegicus )
1) Khairunnisa M. Thaib, 2) Herny E. I. Simbala , 3) Irma Antasionasti
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT *tyathaib0@gmail.com

## ABSTRACT
Dayak  onions  (Eleutherine  americana  Merr.)  and  Pinang  yaki  (Areca  vestiaria  Giseke)  have  potential  as traditional  medicinal  ingredients.  However,  the  toxic  effect  of  the  combination  of  these  extracts  is  not  yet known. This study aimed to determine the effect of the combination extracts on the lungs of male white rats Wistar  strain  (Rattus  norvegicus)  in  acute  toxicity  testing.  This  type  of  research  was  conducted  using laboratory experimental methods consisting of 18 male white rats of wistar strains. The treatment was carried out for 14 days by observing body weight and macroscopic observations of the rat lungs. The results showed that the administration of combination extracts Dayak Onion and Pinang Yaki for 14 days at dose of 10.8 mg, 14.4 mg, 21.6 mg didn’t cause any damaged based on the macroscopic picture the lungs organ of male white wistar strain (Rattus norvegicus). Based on the results of statistical tests in the combination treatment group proved have a significant weight loss.
Keywords : Dayak  Onion  ( Eletheurine  Americana Merr),  Pinang  Yaki  ( Areca  vestiaria Giseke),  lung macroscopic .

## ABSTRAK
Bawang  dayak  ( Eleutherine  americana Merr.)  dan  Pinang  Yaki  ( Areca  vestiaria Giseke)  memiliki  potensi sebagai  bahan  obat  tradisional.  Namun  belum  diketahui  efek  toksik  penggunaan  dari  kombinasi  ekstrak tersebut. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian oral kombinasi ekstrak terhadap organ paru-paru Tikus putih jantan Galur Wistar ( Rattus norvegicus ) pada pengujian toksisitas akut. Jenis penelitian dilakukan  dengan  metode  eksperimental  laboratorium  terdiri  dari  18  ekor  tikus  putih  jantan  galur  wistar. Perlakuan dilakukan selama 14 hari dengan pengamatan berat badan dan pengamatan makroskopis organ paru – paru tikus. Hasil penelitian menunjukan bahwa pemberian kombinasi ekstrak Bawang Dayak dan Pinang Yaki  selama  14  hari  pada  dosis  10,8  mg/ml,  14,4  mg/ml,  21,6  mg/ml  tidak  memberikan  efek  yang  dapat merusak  berdasarkan  gambaran  makroskopis  pada  organ  paru-paru  tikus  putih  jantan  galur  wistar  ( Rattus norvegicus ).  Berdasarkan  hasil  uji  statistik  pada  kelompok  perlakuan  kombinasi  terbukti  mengalami penurunan berat badan yang signifikan.
Kata  kunci :  Bawang  Dayak  ( Eletheurine  americana Merr ), Pinang  Yaki  ( Areca  vestiaria Giseke), Makroskopis Paru-paru.

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## PENDAHULUAN
Paru-paru adalah organ pada sistem pernapasan  (respirasi)  dan  berhubungan  dengan sistem  peredaran  darah  (sirkulasi).  Fungsinya adalah  menukar  oksigen  dari  udara  dengan karbondioksida  dari  darah.  Paru-paru  terdiri  dari organ-organ  yang  sangat  kompleks.  Bernapas terutama digerakkan oleh otot diafragma (otot yang terletak  antara  dada  dan  perut).  Saat  menghirup udara,  otot  diafragma  akan  mendatar,  ruang  yang menampung  paru-paru  akan  meluas.  Begitu  pula sebaliknya, saat menghembuskan udara, diafragma akan  mengerut  dan  paru-paru  akan  mengempis mengeluarkan udara (Fauci et al 2012).
Bawang dayak ( Eleutherine americana Merr.) digunakan  oleh  masyarakat  setempat  sebagai bahan  obat  tradisional  terutama  bagian  umbinya untuk  mengobati  penyakit  kanker  dengan  cara menumbuk bagian umbinya kemudian diperas dan airnya diminum setiap pada pagi hari selain itu juga ampasnya  bias  ditempel  dibagian  tubuh  yang terkena  kanker  (payudara)  (Simbala,  2015). Kandungan  yang  terdapat  dalam  umbi  bawang dayak  terdiri  dari  senyawa  flavonoid,  saponin, polifenol,  alkaloid,  glikosida,  steroid,  fenolik, tanin, triterpenoid dan kuinon. Senyawa – senyawa yang  terkandung  dalam  bawang  dayak  yang berpotensi  memiliki  peran  sebagai  antioksidan adalah  flavonoid,  fenolik  dan  tanin  (Meitary, 2017).  Dari  hasil  penelitian  yang  dilakukan  oleh (Rizkah dkk, 2020) bahwa ekstrak etanol bawang dayak  yang  berasal  dari  Kelurahan  Mongkonai, Kota  Kotamobagu,  Provinsi  Sulawesi  Utara memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  sangat  kuat dengan nilai IC50 sebesar 41,46 mg/L.
Menurut Simbala (2006) dalam Siti Mamonto (2014)  Pinang  yaki  (Areca vestiaria )  yang merupakan sejenis palem liar, ternyata merupakan tanaman multi fungsi. Masyarakat Sulawesi Utara biasanya menggunakan secara empiris tanaman ini untuk  menyembuhkan  berbagai  macam  penyakit seperti  diabetes  dan  diare,  juga  suatu  obat kontrasepsi  yang  mengandung  tanin,  flavonoid, hidrokuinon, triterpenoid dan saponin.
Samosir  et  al  (2012)  mengatakan  kandungan total  flavonoid  yang  terkandung  pada  ekstrak  biji Pinang  Yaki  segar  sebanyak  7,573  mg/kg.  Total flavonoid  ekstrak  metanol  kulit  biji  Pinang  Yaki dari  metode  sokletasi  didapatkan  sebanyak  2,56 mg/kg (Mamonto et al. 2014).
Berdasarkan uraian diatas, maka penelitian ini dilakukan berdasarkan pengamatan secara makroskopis organ paru-paru lewat hewan uji yaitu tikus putih jantan galur wistar ( Rattus norvegicus ) dengan  pemberian  ekstrak  Kombinasi  Bawang
dayak  ( Eleutherine  americana Merr.)  dan  Pinang Yaki  ( Areca  vestiaria Giseke).  Pengamatan makroskopis  yang  dimaksud  ialah  pengamatan organ  yang  bisa  dilihat  dengan  mata  telanjang tanpa  menggunakan  bantuan  alat  pembesar tambahan.

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Peneliatian
Penelitian ini dilaksanakan di bulan november sampai  desember  2021  di  laboratorium  Farmasi Lanjut,  Program  Studi  Farmasi,  Fakultas  MIPA, Universitas  Sam  Ratulangi,  Manado.  Sampel diambil  di  Desa  Passi  Kabupaten  Bolaang Mangodow  dan  Gunung  mahawu  tomohon Sulawesi Utara.

## Alat dan Bahan Alat
Alat-alat  yang  akan  digunakan  adalah  beaker gelas,  batang  pengaduk,  blender,  vorteks,  kertas saring, ayakan, aluminium foil, timbangan analitik, oven,  corong  pisah,  gelas  ukur,  botol  kecil,  hot plate, Sonifikator, dan cawan petri. Dan untuk pada hewan  uji  adalah,  rak  penelitian  kandang  tikus, Wadah makanan tikus, botol minuman tikus, kawat kasa dan dadak padi. Untuk perlakuan Hewan Uji : Sonde  lambung  metal,  sarung  tangan  dan  dispo. Alat  untuk  pembedahan  :  tempat  otopsi  (baki paraffin), jarum,  gunting,  pinset,  pisau bedah dan toples.

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini yaitu umbi bawang dayak ( Eleutherine Americana Merr.),  pinang  yaki  ( Areca  vestiaria Giseke), etanol  96%,  akuades,  larutan  CMC,  kloroform, makanan (pellet) ayam, Tikus putih jantan Galur Wistar ( Rattus norvegicus ).

## Preparasi Sampel
bawang dayak ( Eleutherine Americana Merr.), pinang  yaki  ( Areca  vestiaria Giseke)  disortasi basah lalu dicuci menggunakan air mengalir hingga bersih dari komponen pengotornya. bawang dayak sampel  yang  digunakan  yaitu  umbinya  dan  pada Pinang  Yaki  hanya  bagian  buahnya.  dirajang (potong  kecil-kecil)  setelah  itu  dikeringkan  ke dalam  oven  pada  suhu  40°C  selanjutnya  sampel yang dikeringkan dihaluskan dengan menggunakan blender (Mamonto, 2014).

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Pembuatan Ekstrak Bawang dayak ( Eleutherine americana Merr.)
Umbi  Bawang  Dayak  ditimbang  sebanyak 500  gr,  diekstraksi  secara  maserasi  menggunakan pelarut  etanol  96%  sebanyak  2500  mL  hingga terendam  sempurna.  Proses  ekstraksi  maserasi dilakukan  dengan  menggunakan  wadah  yang ditutupi dengan aluminium foil dan disimpan pada tempat yang terlindung dari sinar matahari selama 3  hari  sambil  sesekali  diaduk.  Remaserasi dilakukan  sebanyak  2  kali  dengan  pelarut  etanol 96% sebanyak 5000 mL selama masing-masing 3 hari.  Filtrat  etanol  96%  yang  diperoleh  kemudian dikumpulkan  dan  diuapkan  dengan  oven  hingga diperoleh  ekstrak  kental.  umbi  Bawang  dayak. Ekstrak kental tersebut ditimbang dengan menggunakan  timbangan  analitik.  Ekstrak  kental yang  sudah  ditimbang  kemudian  disimpan  dalam wadah gelas yang tertutup untuk digunakan dalam pengujian.
Pembuatan ekstrak Pinang yaki ( Areca vestiaria Giseke)
Pinang  Yaki  ( Areca  vestiaria Giseke)  yang  telah menjadi serbuk simplisia ditimbang sebanyak 500 gram dan dimasukan dalam toples kaca kemudian diekstraksi menggunakan metode maserasi dengan cara  serbuk  simplisia  direndam  dalam  pelarut etanol 96% sebanyak 2500 mL, dibiarkan selama 3 hari pada suhu kamar dan ditutup rapat. Kemudian disaring menggunakan kertas saring. Residu yang diperoleh  dilakukan  remaserasi  selama  3  hari. Filtrat  yang  peroleh  dipekatkan  dengan  cara dievaporasi  pada  suhu  40°C  sampai  diperoleh ekstrak  kental.  Ekstrak  kental  tersebut  ditimbang dengan menggunakan timbangan analitik. Ekstrak kental  yang  sudah  ditimbang  kemudian  disimpan dalam wadah gelas yang tertutup untuk digunakan dalam pengujian.

## Pembuatan  Larutan  CMC  (Carboxymethil Cellulose)
Larutan  CMC  dibuat  dengan  melarutkan  1g CMC  ke  dalam  100  mL  aquadest  dipanaskan sambil  diaduk  sampai  homogen,  kemudian didinginkan.
Pembuatan  Larutan  Ekstrak  Umbi  Bawang dayak ( Eleutherine americana Merr.) Dosis  pemakaian  Ekstrak  Umbi  Bawang dayak  ( Eleutherine  Americana Merr.)  dengan factor konversi dosis dari manusia (70kg) ke hewan uji (200g) dengan dosis (600mg, 800mg, 1200mg) dikalikan 0,018 yaitu 10,8 mg, 14,4 mg dan 21,6mg data tersebut merupakan acuan dari penelitian ini,
dan untuk penelitian ini akan menggunakan dosis 2 ml  per  tikus.  Ekstrak  Umbi  Bawang  dayak ( Eleutherine  americana Merr.)  disuspensikan dengan larutan CMC 1% dalam labu ukur 100 mL. Kemudian disonifikasi hingga homogen.
Pembuatan Larutan Ekstrak Buah Pinang yaki ( Areca vestiaria Giseke)
Pembuatan Larutan Ekstrak Buah Pinang yaki ( Areca  vestiaria Giseke)  Dosis  pemakaian  buah Pinang yaki ( Areca vestiaria Giseke) dengan factor konversi  dosis  dari  manusia  (70kg)  ke  hewan  uji (200g) dengan dikalikan 0,018 yaitu 10,8 mg, 14,4 mg, dan 21,6 mg. Masing-masing 10.8 mg dan 14.4 mg  ekstrak  buah  pinang  yaki  (Areca vestiaria ) disuspensikan  dengan  50  mL  larutan  CMC  1% dalam  labu  ukur  100  mL  kemudian  disonifikasi hingga homogen.
Pembuatan Larutan Ekstrak Kombinasi Bawang  Dayak  ( Eleutherine  Americana Merr.) dan Pinang Yaki ( Areca vestiaria Giseke) Kombinasi  ekstrak  diperoleh  dengan  cara mencampurkan  10.8  mg  ekstrak  pinang  yaki  dan 10.8 mg bawang dayak kosentrasi optimum dengan perbandingan 1:1. Ekstrak pinang yaki dan bawang dayak ditimbang sesuai dosis 0,54 g disuspensikan dengan larutan CMC 1% dalam labu ukur 100 mL kemudian  disonifikasi  hingga  homogen.  Dan penelitian  ini  akan  menggunakan  dosis  2  ml  per tikus.

## Perlakuan
Hewan  yang  digunakan  adalah  Tikus  Putih Jantan Galur Wistar (Rattus norvegicus) Pengujian dilakukan  dengan  5  (Lima)  kelompok  perlakuan dan  1  (satu)  kelompok  control  normal  sebagai pembanding. Masing-masing kelompok terdapat 3 ekor tikus Putih Galur Wistar (Rattus norvegicus) . Pemberian  dosis  terlebihdahulu  di  konversikan menggunakan  factor  konversi  untuk  manusia (70kg)  ke  tikus  (200g)  dengan  dikalikan  0,018. Penelitian dilakukan perlakuan selama 14 hari,masing-masing  konsentrasi  menggunakan  18 hewan  uji.  Ekstrak  Bawang  dayak  ( Eleutherine Americana Merr.),  Pinang  Yaki  ( Areca  vestiaria Giseke) dari kombinasi antara 2 ekstrak diberikan sesuai  dengan  dosis,  yang  diberikan  secara  oral dengan  menggunakan  sonde  lambung  metal  dan dispo  10  mL  dengan  dosis  perhari  2  ml  sonde lambung  dimasukkan  melalui  mulut  sampai esophagus,  dimasukkan  perlahan-lahan  untuk menghindari refluks.

## Pembedahan

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Pembedahan dilakukan pada hari ke 15 dalam masing-masing  3  ekor  tikus  untuk  3  kelompok perlakuan.  Tikus  yang  akan  dibedah  dimatikan dengan  cara  memasukkan  tikus  kedalam  topples yang  sudah  ditetesi  cairan  kloroform.  Kemudian Setelah beberapa saat tikus dipindahkan diletakkan diatas  baki  paraffin,  keempat  kaki  tikus  ditusuk dengan  jarum  untuk  mencegah  gerakan-gerakan yang mengganggu pada saat pembedahan kemudian tikus siap di otopsi pembedahan diawali dengan membelah bagian perut bawah tikus hingga bagian  dada,  kemudian  organ  diambil  keluar  dari dalam tubuh organ yang diambil ialah organ paru- paru.

## Pengamatan Makroskopis
Pengamatan  secara  makroskopis  dilakukan dengan pengamatan warna, konsistensi permukaan serta penimbangan berat hati tikus.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Dalam keterangan layak etik No.043/EC/KEPK- KANDOU/III/2022 Ekstraksi Ekstrak Bawang Dayak ( Eleutherine Americana Merr.)  dan  Pinang  Yaki  ( Areca vestiaria Giseke)
Proses  ekstraksi  menggunakan  pelarut  etanol 96% dengan metode maserasi. Alasan menggunakan pelarut etanol karena pelarut etanol merupakan pelarut universal yang dapat melarutkan  hampir  semua  senyawa  metabolit sekunder  yang  terkandung  dalam  simplisia  dan juga  etanol  memiliki  nilai  toksisitas  yang  lebih rendah  jika  dibandingkan  pelarut  organik  lainnya dan tahan lama serta mudah menguap dibandingkan pelarut non organik. Etanol yang digunakan dalam penelitian  yaitu  etanol  96%  yang  merupakan senyawa polar yang mudah menguap sehingga baik digunakan  sebagai  pelarut  ekstrak.  Pemilihan metode  maserasi  yaitu  agar  dapat menghindari terjadinya kerusakan kandungan kimia yang tidak tahan panas atau bersifat termolabil. Sampel umbi Bawang  Dayak  dimaserasi  selama  3  hari menggunakan  pelarut  etanol  96%  sebanyak  2500 mL  sedangkan  buah  Pinang  Yaki  dimaserasi selama  3  hari menggunakan  pelarut  etanol  96% sebanyak  2500  mL  dan  kedua  sampel  tersebut diremaserasi  sebanyak  2  kali.  Filtrat  yang dihasilkan  untuk  sampel  umbi  bawang  dayak berwarna merah ke hitaman hal ini sesuai dengan penelitian yang dilakukan oleh Greifen (2021) dan filtrat  yang  dihasilkan  untuk  sampel  buah  pinang yaki  yaitu  merah  kecoklatan.  Selanjutnya  filtrat dievaporasi  menggunakan oven dengan suhu 40 o C selama 1x24
jam,  proses  evaporasi  merupakan  suatu  proses penguapan  sebagian  dari  pelarut  sehingga didapatkan larutan zat cair pekat yang berkonsentrasi tinggi (Rizkah dkk, 2020). Setelah filtrat  dievaporasi  didapatkan  ekstrak  kental  dari umbi bawang dayak dan buah pinang yaki .
Pembuatan  Larutan  Ekstrak  Umbi  Bawang Dayak ( Eleutherine americana Merr.) dan Buah Pinang Yaki ( Areca vestiaria Giseke) Ekstrak  kental  tersebut  kemudian  dilarutkan dengan  larutan  CMC  ( Carboxy  Methyl  Cellulose ) masing-masing  sebanyak  50mL  dengan  dibagi menjadi 3 kelompok dosis yaitu 10,8 mg , 14,4 mg dan  21,6  mg.  Ditimbang  sebanyak  3,78g,  5,04  g dan 3,78 g. Penggunaan larutan CMC ini berfungsi mempertahankan kestabilan agar partikel padatannya  tetap  terdispersi  merata  ke  seluruh bagian sehingga tidak mengalami pengendapan.
Gambaran  Makroskopis  Organ  Paru-paru Tikus  Putih  Jantan  Galur  Wistar  ( Rattus norvegicus )
Gambaran  makroskopis  tikus  jantan  galur wistar (Rattus norvegicus) dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel  1.  Gambaran  Makroskopis  Paru-paru  Tikus Putih Jantan Galur Wistar ( Rattus norvegicus ) Kelompok Hewan Uji Warna Konsisten si Bera t Tiku s Berat Orga n Paru- paru Kontrol Putih Kemera han Kenyal, tidak mengeras 208 1,50 gram Dosis I (10,8mg BD) Putih Kemera han Kenyal, tidak mengeras 198 1,52 gram Dosis II (14,4mg BD) Putih Kemera han Kenyal, tidak mengeras 194 1,59 gram Dosis III (10,8 mg PY) Putih Kemera han Kenyal, tidak mengeras 182 1,25 gram Dosis IV (14,4mg PY) Putih Kemera han Kenyal, tidak mengeras 177 1,62 gram Dosis V (21,6mg) Kombinasi Putih Kemera han Kenyal, tidak mengeras 183 1,38 gram
Tabel  1.  memperlihatkan  bahwa  setiap  kelompok perlakukan,  gambaran  makroskopis  organ  paru  –

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
paru memperlihatkan adanya warna putih kemerahan  sama  dengan  kelompok  kontrol. Konsistensi  organ  paru  –  paru  sama  yaitu  kenyal sedangkan berat dan ukuran bervariasi antara satu kelompok dan kelompok lainnya.
Gambar 1 . Kontrol I II III IV
V Gambar  2 .  Gambar  Makroskopis  organ Paru-paru  tikus  putih  jantan Galur Wistar ( Rattus norvegicus ) kelompok perlakuan  I  (Kelompok  dosis 10,8mg BD), kelompok perlakuan  II  (Kelompok  dosis 14,4mg PY), kelompok perlakuan  III  (Kelompok  dosis 10,8mg BD), kelompok perlakuan IV (Kelompok dosis 14,4mg  PY)  dan  kelompok perlakuan  V  (Kelompok  dosis 21,6 kombinasi BD dan PY).
Pada  penelitian  ini  pemberian  kombinasi ekstrak  bawang  dayak  ( Eleutherine  americana Merr.)  dan  Pinang  Yaki  ( Areca  vestiaria Giseke) selama 14 hari tidak menimbulkan perubahan yang signifikan,  gambaran  makroskopis  paru  –  paru tampak normal dan tidak berbeda  bila
dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  kombinasi  ekstrak  bawang dayak  ( Eleutherine  americana Merr.)  dan  Pinang Yaki ( Areca vestiaria Giseke) tidak memberi efek yang dapat merusak organ paru-paru.
Hasil  Penimbangan  Berat  Badan  tikus  putih jantan Galur Wistar ( Rattus norvegicus ) Data rata-rata hasil penimbangan berat badan tikus putih  jantan  galur  wistar  ( Rattus  norvegicus ) sebelum  dan  setelah  perlakuan  dapat  dilihat  pada Gambar 3
Berdasarkan  data  grafik  rata-rata  penimbangan berat badan tikus pada Gambar 7 dapat dilihat pada pemberian  kombinasi  ekstrak  bawang  dayak ( Eleutherine  americana Merr.)  dan  pinang  yaki ( Areca  vestiaria Giseke)  bahwa  perlakuan menunjukkan  penurunan  berat  badan  sedangkan berat  badan  yang  paling  tinggi  terdapat  pada kelompok  kontrol.  Terjadinya  perubahan  berat badan  tikus  pada  kelompok  kontrol  dapat dikarenakan  adanya  proses  pertumbuhan  yang dialami oleh tikus, dan penurunan berat badan tikus pada  kelompok  perlakuan  dapat  dikarenakan adanya  pengaruh  pemberian  kombinasi  ekstrak bawang dayak ( Eleutherine americana Merr.) dan pinang  yaki  ( Areca  vestiaria Giseke).  Untuk memperoleh  data  yang  lebih  spesifik  mengenai pengaruh  kombinasi  ekstrak  bawang  hutan  dan pinang yaki terhadap organ paru-paru tikus wistar dan untuk melihat perbedaan rata – rata untuk setiap perlakuan  maka  dilakukan  uji  statistika  dengan analisis  ANOVA  One  Way.  Syarat  uji  ANOVA yaitu data terdistribusi normal,  varian harus sama atau  homogen,  sampel  bersifat  independen  atau tidak berhubungan satu sama lain (Walpole, 2001). Dilakukan  uji  ANOVA  untuk melihat  apakah  ada perbedaan antara tikus kontrol dan tikus perlakuan. Hasil uji statistik analisis varian satu arah ANOVA One  Way  diperoleh  nilai  F  <  Ftabel  (0,05) menunjukkan  penurunan  berat  badan  secara signifikan  pada  setiap  kelompok  perlakuan dibandingkan  kelompok  normal.
210 200 190 180 170 160
Sebelum Perlakuan Sesudah Perlakuan

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Dimana  setiap  dosis  untuk  masing  –  masing perlakuan menunjukkan efek yang dapat menurunkan berat badan tikus.
Hipotesis H0 = tidak ada perbedaan yang bermakna antara setiap kelompok.
H1 = terdapat perbedaan yang bermakna antara setiap kelompok.
Pengambilan Keputusan : Jika nilai signifikansi > 0.05, maka H 0 diterima Jika nilai signifikansi < 0.05, maka H 0 ditolak
Anova one way Sv df JK RK F obser vasi
F tabel (0.05) Perlakua n 1 75.01 75.0 1 0.84 4.96 Galat 1 0 888.6 6 88.6 7 - - Total 1 1 963.6 7 - Ket : df = derajat bebas perlakuan = (j-1)
galat = (N-1) Total = (1+10) JK = Jumlah kuadrat,(Perlakuan = JKP, Galat = JKG, Total = JKT) RK = rata-rata kuadrat (JK : df) Catatan  :  Total  tidak  perlu  dicari  karena  untuk mencari  F  hanya  menggunakan  Perlakuan  dan Galat.
Didukung oleh hasil penelitian Yusuf (2011), pada  Uji  Toksisitas  Akut  Ekstrak  Etanol  Daun Klausena (Clausena anisata) pada hasil penimbangan  berat  badan  hewan  uji  menunjukan bahwa  perubahan  berat  badan  pada  tikus  yang mendapatkan perlakuan memiliki sedikit perberbedaan  untuk  masing  –  masing  perlakuan baik  kelompok  kontrol  maupun  kelompok perlakuan.  Hal  ini  menunjukan  bahwa  ada perubahan  berat  badan  setelah  pemberian  ekstrak daun klausena dengan berbagai tingkatan dosis (p < 0,05).
Penimbangan berat badan hewan uji dilakukan  sebelum  pemberian  ekstrak,  kemudian hari ke 14 setelah pemberian ekstrak. Berdasarkan pada  tabel,  penimbangan  berat  badan  tikus  pada kelompok perlakuan kontrol, dosis 1, dosis II dan dosis  III  pada  tikus  diperoleh  nilai  rata-rata  berat badan  tikus  mengalami  penurunan  berat  badan, terlihat  dimana  setiap  minggu  berat  badan  tikus menurun.  Perubahan  berat  badan  secara  nyata merupakan  indikator  yang  paling  mudah  terlihat dan menjadi indikator awal adanya efek toksik dari
sampel uji yang diberikan. Berat badan pada studi toksisitas, hewan coba yang mendapat dosis tinggi umumnya kehilangan berat badan yang disebabkan penurunan nafsu makan. (Sireeratawong,2010).
Menurut hasil penelitian yang dilakukan oleh Kuncarli and Djunarko (2014), uji toksisitas subkronis  infusa  daun  Sirih  merah  terhadap gambaran  makroskopis  jantung  pada  hasil penelitiannya pada pengukuran berat badan tikus jantan menunjukkan hasil yang berbeda bermakna antara kelompok perlakuan dan kontrol aquadest, terjadinya perubahan berat badan dapat dikarenakan  proses  pertumbuhan  yang  dialami oleh  tikus  jantan  maupun  betina  dan  adanya pengaruh dari pemberian infusa daun sirih merah, dan  disimpulkan  bahwa  pemberian  infusa  daun Sirih merah maupun kontrol pemberian aquadest menunjukkan peningkatan dan penurunan, namun tidak  menunjukkan  hasil  perbedaan  yang bermakna.
Hasil  Penimbangan  Berat  Organ  paru-paru tikus  putih  jantan  Galur  Wistar  ( Rattus norvegicus )
Gambar  4. Grafik  rata-rata  hasil  penimbangan berat  organ  Paru-paru  tikus  putih  jantan  Galur Wistar ( Rattus norvegicus )
Penimbangan  berat  organ  dilakukan  setelah tikus  dibedah.  Penimbangan  berat  organ  ini bertujuan  untuk  memantau  kondisi  organ  tikus setelah  dilakukan  perlakuan  dan  mengetahui kesehatan  hewan  uji  setelah  perlakuan,  serta memantau  berat  organ  paru-paru  tikus  antar kelompok  kontrol  dengan  kelompok  perlakuan. Penimbangan  berat  organ  paru-paru  tikus  adalah salah satu data pendukung guna melihat pengaruh ekstrak kombinasi pada hewan uji.
Berdasarkan hasil penelitian (Valensia, 2022) pemberian  ekstrak  etanol  umbi  bawang  hutan ( Eleutherine  americana Merr.)  tidak  berpegaruh terhadap  gambaran  makroskopis  pada  organ  hati tikus putih jantan galur wistra ( Rattus norvegicus ) dan hasil penimbangan rata-rata berat badan tikus dan  berat  organ  hati  tikus  pada  grafik  tidak menunjukan  perbedaan  yang  signifikan  antara

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
kelompok  yang diberikan perlakuan dengan dosis 5mg, 10mg, 15mg, dan kelompok kontrol. Hal ini menunjukan  bahwa  ektrak  etanol  umbi  bawang hutan  ( Eleutherine  americana Merr.)  tidak memberikan  efek  yang  dapat  merusak  dan mempengaruhi fungsi kerja hati.

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian maka dapat disimpulkan bahwa :
• Pemberian  ekstrak  kombinasi  bawang dayak  ( Eletheurine  Americana Merr.)
dan  pinang  yaki  ( Areca  vestiaria Giseke)  tidak  memberikan  efek  yang dapat  merusak  berdasarkan  gambaran makroskopis pada organ paru-paru tikus putih  jantan  galur  wistar  ( Rattus norvegicus ).
• Hasil  penimbangan  rata-rata  berat badan  tikus  sebelum  dan  sesudah perlakuan  mengalami  penurunan berat  badan  yang  signifikan  dan berat  organ  paru-paru  tikus  pada grafik  tidak  menunjukan  perbedaan antara  kelompok  yang  diberikan perlakuan dengan dosis 10,8 mg, 14,4 mg, 21,6 mg dan kelompok kontrol.

## Saran
• Disarankan  untuk  dilakukan  penelitian lebih lanjut untuk mengetahui pengaruh kombinasi  ekstrak  bawang  dayak ( Eleutherine  Americana Merr.)  dan pinang  yaki  ( Areca  vestiaria Giseke) secara  mikroskopis  terhadap  gambaran organ paru-paru agar pembaca mendapat informasi yang lebih luas

## Daftar Pustaka
Fauzi, Y, Widyastuti Y. E, Wibawa I. S, Paeru R.  H.  2012. Kelapa  Sawit .  Jakarta :Penebar Swadaya. 236 Hal
Kuncarli,I.Djunarko,  I.2014. Uji  Toksisitas Subkronis  Infusa  Daun  Sirih Merah  (Piper  Crocatum  Ruiz  & Pav) Pada Tikus : Studi Terhadap Gambaran  Mikroskopis  Jantung dan Kadar Sgot Darah. 11(02).
Mamonto,  S.  I.  (2014).  Aktivitas  antioksidan ekstrak  kulit  biji  buah  pinang  yaki (Areca vestiaria giseke)  yang  di ekstraksi  secara  soklet. Pharmacon , 3 (3).
Meitary, N. 2017. Analisis Total Fenol, Flavonoid, Dan  Tanin  Serta  Aktivitas  Antioksidan Empat  Ekstrak  Daun  Jati  Belanda (Guazuma  Ulmifolia). Skripsi.  Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Pandaleke,  S.S.,  Queljoe,  ED.,  Abdullah,  S.S.,
(2022).  Uji  Efektivitas  Ekstrak  Etanol Daun Sirsak ( Annona muricata L. ) Untuk Menurunkan  Kadar  Gula  Darah  Tikus Putih  Jantan  ( Rattus  norvegicus )  Yang Diinduksi  Aloksan, Pharmacon , 11(1) , 1321–1324
Rizkah,  V.  N.  2020. Uji  Aktivitas  Antioksidan Ekstrak  Etanol  Bulubus  Bawang  Dayak (Eleutherine  americana  Merr.)  Dengan
Metode DPPH (1,1-Diphenyl-2- Picrylhydrazyl ). FMIPA UNSRAT,
Manado.
Samosir PA, Runtuwene MRJ, Gayatri C. 2012. Uji Aktivitas Antioksidan dan Total Flavonoid pada  Ekstrak  Etanol  Pinang Yaki  (Areca vestiaria). Jurnal Ilmiah Farmasi UNSRAT (2): 1-6.
Simbala.,  de  Queljoe  E.  2015. Biodiversitas Tumbuhan  Obat  di  Sulawesi  Utara. Putra Media Grafindo Bandung;12.
Takapaha, V. J., Simbala, H. E., & Antasionasti, I.
(2022). Uji In Vivo Ekstrak  Bawang Hutan  ( Eleutherine america Merr.) Terhadap  Gambaran  Makroskopis Organ Hati  Tikus  Putih  Jantan Galur  Wistar ( Rattus  norvegicus). Pharmacon,  11(1), 1335-1341.
Yusuf,  H.  2011.  Uji  Toksisitas  Akut  Ekstrak Etanol  Daun  Klausena  ( Clausena anisate ) (11) (1)