Volume 7, Nomor 1, Juli 2021                                       Media Modifikasi Tepung Ikan Teri, Rumput Laut ...

## MEDIA MODIFIKASI TEPUNG IKAN TERI, RUMPUT LAUT, UBI JALAR UNGU DAPAT MEMPERCEPAT PERTUMBUHAN MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS
Rohmi 1 , Maruni Wiwin Diarti 1  , Yunan Jiwintarum 2
1 Prodi D.IV Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Mataram
2 Prodi D.III Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Mataram

## ARTICLE INFO ABSTRACT
Article history Submitted : 2020-09-07
Revised : 2021-05-29 Accepted : 2021-07-02

## Keywords:

## Fish meal
Mycobacterium tuberculosis
Purple sweet potato Seaweed
The  common  growth  medium  used  to  growth M.  Tuberculosis is  Lowenstein-Jensen. Examination by culture method has several disadvantages: the incubation period is too long  to  calculate  the  growth  of M.  Tuberculosis that  reaches  8  weeks  to  be  able  to declare negative results. Aims is research to know the result of growth rate and growth rate  of M.  Tuberculosis from  combination  formulation  media  of  local  food  of  sea  fish meal  ( Stolephorussp ),  Purple  Sweet  Potato  flour  ( Ipomoea  batatas )  and Euchema Spinosum Seaweed  flour  called  TURLM  media  (Grass  Sweet  Teri  Sea  Medium). Research is an exploratory research in laboratory, using three forms of TURLM media formulation  and  Loweinstein-Jensen  media  comparator,  data  collected  in  the  form  of growth speed and fertility rate of M. Tuberculosis , descriptive data analysis. The results showed  that  TRULM  media  formulas  1,  2,  and  3  can  show  the  growth  of M. Tuberculosis coloccus of ATCC 25177, with the best growth rate in TURLM Formula 3 medium  which is similar to LJ control media. Fertility growth rate of M. Tuberculosis ATCC 25177 TURLM medium The best formula is TRULM Formula 3 whose fertility rate is equal to growth in Loweinstein-Jensen (LJ) control media. The conclusion of this research  is  that  TURLM  formula  3  media  can  be  used  as  growth  media  of M. Tuberculosis which  can  accelerate  the  growth  of M.  Tuberculosis and  show  good fertility rate.
Kata Kunci:
Tepung ikan teri Mycobacterium tuberculosis Ubi jalar ungu Rumput laut Media  pertumbuhan  yang  umum  digunakan  untuk  menumbuhkan M.  Tuberculosis adalah Lowenstein-Jensen. Pemeriksaan  dengan  metode  kultur  memiliki  beberapa kelemahan yaitu masa inkubasi yang terlalu panjang untuk menghitung pertumbuhan M. tuberculosis yang  mencapai  8  minggu  untuk  bisa  menyatakan  hasil  negatif.  Penelitian ini  bertujuan  untuk  mengetahui  hasil  kecepatan  pertumbuhan  dan  angka  pertumbuhan M.  Tuberculosis dari  media  formulasi  kombinasi  pangan  lokal  tepung  ikan  terilaut ( Stolephorus sp),  tepung  Ubi  Jalar  Ungu  ( Ipomoea  batatas )  dan  tepung  Rumput  Laut Euchema  Spinosum yang  disebut  dengan  media  TURLM  (Teri  Ubi  Rumput  Laut Medium).  Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksploratorik  di  laboratorium,  dengan menggunakan  tiga  bentuk  formulasi  media  TURLM  dan  pembanding  media Loweinstein-Jensen, data yang dikumpulkan berupa kecepatan pertumbuhan dan angka kesuburan M.  Tuberculosis ,  analisis  data  secara  deskriptif.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  media  TRULM  formula  1,  2,  dan  3  dapat  menunjukkan  adanya pertumbuhan  koloni M.  Tuberculosis ATCC  25177,  dengan  kecepatan  pertumbuhan yang paling baik pada media TURLM Formula 3 yang sama dengan media kontrol LJ. Angka kesuburan pertumbuhan M. Tuberculosis ATCC 25177 media TURLM formula yang  paling  baik  adalah  TRULM  Formula  3  yang  angka  kesuburannya  sama  dengan pertumbuhan pada  media  kontrol Loweinstein-Jensen (LJ).  Kesimpulan dari  penelitian ini  bahwa  media  TURLM  formula  3  dapat  digunakan  sebagai  media  pertumbuhan M. Tuberculosis yang dapat mempercepat pertumbuhan M. Tuberculosis dan menunjukkan angka kesuburan yang baik.
 Corresponding Author:
Maruni Wiwin Diarti Prodi D.IV Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Mataram Telp. 082236371510/ 087865117411 Email: maruniwiwindiarti@yahoo.com

## PENDAHULUAN
Kejadian  tuberkulosis  disebabkan  oleh Mycobacterium  Tuberculosis ,  sebagian  besar
kuman  TB  menyerang  paru,  tetapi  dapat  juga mengenai organ tubuh lainnya. Pewarnaan yang berguna  untuk  melihat  morfologi  bakteri  ini

## Jurnal Kesehatan Manarang
Volume 7, Nomor 1, Juli 2021, pp. 07 – 15 ISSN 2528-5602 (Online), ISSN 2443-3861 (Print) Journal homepage: http://jurnal.poltekkesmamuju.ac.id/index.php/m
adalah  pewarnaan  tahan  asam,  misalnya pewarnaan Zeihl-Neelsen ataupun  Kinyon Gabbet  (Crofton,  Horne,  &  Miller,  2002). Media  pertumbuhan  yang  umum  digunakan untuk menumbuhkan
Mycobacterium Tuberculosis adalah Lowenstein-Jensen menggunakan malasit green untuk menghambat bakteri  lain  kemudian  memodifikasi  dengan citrat  dan  phosphat.  Komposisi  dari  asam  fatty dan protein esensial untuk metabolisme bakteri. Glyserol  bersumber  dari  karbon  dan  energi yang  dibutuhkan  untuk  tipe  human tubercle bacillus daripada  bovine  tipe.  Asparagin  dan RNA  ditumbuhkan  untuk menyediakan  sumber nitrogen  dan  stimulant  pertumbuhan  koagulasi dari  albumin  telur  perlu  diperhatikan  selama proses  mencampurkan  telur  dengan  media, jangan  dalam  keadaan  panas  karena  dapat mengakibatkan kematangan pada telur. Inspirasi  menyediakan  medium  solid  untuk inokulasi  kultur  spesimen  dari  mikroba  selalu berisi  campuran  kontaminasi  mikroorganisme sehingga mengharuskan menggunakan antibiotic selektif di dalam media untuk isolasi. Asam  nalidixic  menghambat  bakteri  gram  (-). Lincomycin  menghambat  bakteri  gram  (+). Cycloheximide menekan jamur saprofit (Crofton et al., 2002).
Diagnosa  tuberculosis  sampai  saat  ini masih  ditegakkan  berdasarkan  pemeriksaan sputum  secara  mikroskopis  langsung  dengan pewarnaan  Bakteri  Tahan  Asam  (BTA), dilanjutkan  dengan  pemeriksaan  kultur  untuk konfirmasi  identifikasi  yang  keperluan  uji sensitivity  antibiotika.  Umumnya  kultur  biakan menggunakan  media Loewenstein  Jensen (LJ). Pemeriksaan  dengan  metode  kultur  memiliki beberapa  kelemahan  yaitu  masa  inkubasi  yang terlalu panjang untuk menghitung pertumbuhan M.  Tuberculosis yang  mencapai  8  minggu untuk bisa menyatakan hasil negatif. Komposisi media  LJ  yang  relatif  menggunakan  bahan- bahan  yang  mahal  dan  memerlukan  pembuatan yang  khusus  yang  memerlukan  ketelitian (Patrick  R.  Murray  &  Rosenthal,  2007). Beberapa  penelitian  terdahulu  yang  mencari bahan alternatif untuk pertumbuhan M. tuberculosis antara  lain  penelitian  Srigede,  L., Zaetun,  S.,  dan  Getas,  I.  W.  (2013)  yang membuktikan bahwa Mycobacterium Tuberculosis dapat  tumbuh  pada  media  Agar Nutrien  dengan  penambahan  tepung  cacing ( Lumbricus  rubellous ),  penelitian  Munawaroh, A. L.dkk (2015) yang berhasil membuat media
Coco  blood  malachite  green (CBM)  yaitu media  kultur  dengan  komposisi  air  kelapa muda, malachite  green ,  darah  domba,  agar darah, dan gliserol dengan  hasil nilai spesifitas 96,6%  dan  sensitivitas  100%  dan  media  CBM lebih  cepat  dan  sensitif  daripada  LJ,  namun  LJ lebih spesifik daripada CBM. Penelitian Maria, N  dan  Rosnita,  S  (2018)  membuktikan  bahwa Mycobacterium Tuberculosis tumbuh pada base agar darah yang ditambahkan air kelapa dengan konsentrasi  100%.  Pertumbuhan  terjadi  dengan lama  inkubasi  14  hari  pada  suhu  28 0 C  dan 37 0 C.  Belum  adanya  informasi  secara  ilmiah yang  mengeksplorasi  formulasi  bahan  alami dari  campuran  tepung  ikan  teri,  ubi  jalar  ungu dan  rumput  laut  sebagai  media  alternatif pertumbuhan M. Tuberculosis terutama terhadap  kecepatan  pertumbuhan  koloni  dan angka kesuburan pertumbuhan M. Tuberculosis yang merupakan kebaharuan dari hasil penelitian ini.
Permasalahan  dari  kelemahan  media kultur  ini  mendasari  pencarian  bahan-bahan alam  sebagai  bahan  alternatif  yang  dapat digunakan untuk pertumbuhan M. Tuberculosis , dengan  membuat  analisis  formula  untuk eksplorasi formula pertumbuhan M. Tuberculosis yang  bersifat  eksperimen  di laboratorium  menggunakan  kombinasi  tepung ikan  teri  laut ( Stolephorus sp), tepung  Ubi Jalar Ungu  ( Ipomoea  batatas )  dan  tepung  Rumput Laut Euchema  Spinosum yang  diberi  nama media  TURLM  (Teri  Ubi  Rumput  Laut Medum).  Kandungan  kimia  dari  rumput  laut Eucheuma  spinosum adalah  keraginan  (65%), protein, karbohidrat, lemak, serat kasar, air dan abu. Keraginan merupakan polisakarida tersulfatkan  dimana  kandungan  ester  sulfatnya adalah 28 – 35% (Horboruw, 2012; Suparmi & Sahri, 2009).
Kandungan  nutrisi  ubi  jalar  ungu  lebih tinggi  bila  dibandingkan  ubi  jalar  varietas  lain, terutama  kandungan  lisin,  Cu,  Mg,  K,  Zn  rata- rata  20%.  (Kumalaningsih,  2007;  Hardoko Liana  H,  dan  Tagor,  M.  2010).  Kandungan nutrisi/gizi  pada  ikan  teri:  banyaknya  ikan  teri yang diteliti ( food weight ) = 100 gr, bagian ikan teri  yang  dapat  dikonsumsi  ( Bdd/Food  Edible ) =  100 %  kandungannya  adalah  energi  ikan  teri = 74 kkal, jumlah kandungan protein ikan teri = 10,3  gr,  lemak    ikan  teri  =  1,4  gr,  karbohidrat ikan  teri  =  4,1  gr,  kalsium  ikan  teri  =  972  mg, fosfor  ikan  teri  =  253  mg,  zat  besi  ikan  teri  = 3,9  mg,  Vitamin  A  ikan  teri  =  42  IU,  Vitamin
B1 ikan teri = 0,24 mg, Vitamin C ikan teri = 0 mg. (Fahmi, A 2012; Wiwit, P. 2015).
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui  hasil  kecepatan  pertumbuhan  dan angka  pertumbuhan M.  Tuberculosis ATCC 25177 dari  media  formulasi  kombinasi  pangan lokal  tepung  ikan  terilaut  ( Stolephorus sp), tepung  Ubi  Jalar  Ungu  ( Ipomoea  batatas )  dan tepung  Rumput  Laut Euchema  Spinosum yang disebut  dengan  media  TURLM  (Teri  Ubi Rumpu  Laut  Medium).  Eksplorasi  formula pangan  lokal  yang  dalam  penelitian  ini diharapkan  memberikan  hasil  pertumbuhan M. tuberculosis yang  baik,  lebih  cepat,  murah  dan menghasilkan nilai positivitas yang tinggi.

## METODE PENELITIAN Proses Sampling
Besar  unit  penelitian  yang  dibutuhkan  untuk mengetahui  kemampuan  formula  modifikasi media  pertumbuhan M.  Tuberculosis yang terbuat  dari  tepung  ikan  teri  laut,  tepung  ubi jalar  ungu  dan  tepung  rumput  laut  dengan penambahan  gliserol  dalam  formula  media  1, formula  media  2  dan  formula  media  3  adalah sebanyak 12 unit (3 perlakuan formula x 4 kali ulangan). Teknik pengambilan sampel menggunakan  teknik Non  Random  Purposive Sampling bentuk tepung.

## Prosedur Penelitian
Pembuatan  Tepung  Ikan  Teri  Laut ( Stolephorus sp), ikan teri kering digiling halus kemudian  diayak  dan  disimpan  dalam  botol tertutup  rapat.  Pembuatan  Tepung  Ubi  Jalar Ungu ( Ipomoea batatas ), ubi jalar ungu dikupas dan  dipotong  kecil-kecil,  dikering  anginkan pada  panas  matahari  selama  3  hari.  Ubi  jalar ungu  yang  sudah  kering  digiling  halus  dan diayak,  kemudian  disimpan  dalam  botol tertutup rapat. Pembuatan Tepung Rumput Laut Euchema Spinosum, rumput laut digiling halus, dikering  anginkan  sampai  kering  dan  diayak. Serbuk  tepung  disimpan  dalam  botol  tertutup rapat.
Pembuatan  modifikasi  Media  TURLM (Teri  Ubi  Rumput  Laut  Medium)  untuk Pertumbuhan M.  Tuberculosis adalah  media modifikasi  yang  terbuat  dari  tepung  ikan  teri laut,  tepung  ubi  jalar  ungu  dan  tepung  rumput laut  dengan  penambahan  gliserol  dengan katagori formula media 1 (tepung ikan teri laut 16,7  gram,  tepung  ubi  jalar  ungu  15  gram, Tepung  Rumput  Laut  1,5  gram,  agar-agar  15
gram,  Gliserol  12  ml,  Aquadest  1000    ml), formula  media  2  (Tepung  Ikan  Teri  Laut  33,4 gram,  tepung  ubi  jalar  ungu  30  gram,  tepung rumput laut 3 gram, agar-agar 15 gram, Gliserol 12ml, Aquadest 1000  ml) dan  formula  media 3  (Tepung  Ikan  Teri  Laut  50,1  gram,  Tepung Ubi Jalar Ungu 45 gram, Tepung Rumput Laut 4,5  gram,  agar-agar  15  gram,  Gliserol  12  ml, Aquadest  1000  ml.  Masing-masing  campuran formula dimasukkan dalam beker glass dipanaskan  sampai  mendidih,  dimasukkan dalam  tabung  ulir  sebanyak  7  ml,  disteril  121 derajat  Celsius  selama  15  menit,  medium dimiringkan  sampai  membeku,  selanjutnya dilakukan  uji  stabilitas  medium  sebelum digunakan.
Pembuatan  media  kontrol Loweinstein Jensen (LJ)  7245  dari  Acumedia.  Uji  stabilitas media formulasi dilakukan dengan menginkubasi  media  dalam  inkubator  suhu 37 0 C  selama  4  hari  sebelum  digunakan  untuk pengujian. Hasil uji stabilitas media dilihat ada tidaknya pertumbuhan bakteri kontaminan. Jika tidak  terdapat  bakteri  kontaminan  media  bisa digunakan. Pada pembuatan Kultur M. Tuberculosis yang  digunakan  adalah  koloni M. Tuberculosis ATCC 25177 yang telah di kultur pada media LJ berumur 3 – 4 minggu.
Sebelum  dilakukan  inokulasi  pada media  formulasi  penelitian,  maka  isolate M. Tuberculosis ATCC  25177  di  homogenisasi pada media midlebrook 7H9 steril dalam tabung yang  di  dalamnya  ditambahkan  dengan glass beads steril  sehingga  pada  saat  homogenisasi koloni M.  Tuberculosis ATCC  25177  tersebar merata. Homogenisasi dilakukan dengan divortex  sampai  homogen,  kekeruhan  suspensi M.  Tuberculosis ATCC  25177  dibandingkan dengan standart kekeruhan 1 Unit Mc. Farland (pencampuran    BaCl 2 1%  sebanyak  1  ml  dan H 2 SO 4 1%  sebanyak  9  ml)  jumlah  sel M. Tuberculosis ATCC 25177 setara dengan 0,3 x 10 9 /ml. Suspensi M. Tuberculosis ATCC 25177 dimasukkan  1000  ul  ke  dalam  masing-masing tabung media TURL dan Media kontrol LJ dan diinkubasi  dalam  incubator  suhu  37 0 C  dengan pengamatan  maksimal  selama  8  minggu  sesuai standart  dengan  pengamatan  pertumbuhan untuk perhitungan kecepatan tumbuh dan angka kesuburan setiap hari. Ciri morfologi koloni M. Tuberculosis adalah  kasar,  kering,  rapuh, tengah  bertumpuk  dengan  tepi  berjejas  tipis;
kadang-kadang  tipis  dan  menyebar,  berwarna kuning muda ( cream ).
Untuk    mendapatkan  hasil  kecepatan pertumbuhan M.  Tuberculosis dan  angka kesuburan pertumbuhan M. Tuberculosis dilakukan  pengamatan  setiap  hari  dengan  batas waktu  pengamatan  maksimal  8  minggu.  Jika dalam  waktu  8  minggu  tidak  terdapat pertumbuhan M. Tuberculosis yang dibandingkan dengan medium kontrol Loweinstein-Jensen ,  maka  dapat  dinyatakan bahwa  media  TRULM  tidak  dapat  digunakan untuk pertumbuhan M. Tuberculosis .
Analisis Data Data dari hasil pengamatan kecepatan pertumbuhan  koloni  dan  angka  kesuburan
pertumbuhan  koloni M.  Tuberculosis ATCC 25177  pada  masing-masing  media  sederhana TRULM dan media kontrol LJ dianalisis secara deskriptif.  Etik  penelitian  didapatkan  dari komisi  etik  fakultas  kedokteran  Universitas Mataram .

## HASIL PENELITIAN
Data Kecepatan Pertumbuhan M. Tuberculosis  ATCC  25177  pada  Media TURLM  (Teri  Ubi  Rumput  Laut  Medium) dan Media Kontrol Loweinstein-Jensen (LJ)
Hasil pengamatan kecepatan pertumbuhan M.  Tuberculosis pada  media TURLM  (Teri  Ubi  Rumput  Laut Medium)  dan media  Kontrol Loweinstein-Jensen (LJ)  dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel  1.  Kecepatan  Pertumbuhan  Koloni  M.  Tuberculosis  ATCC  25177  berdasarkan
Waktu Inkubasi Media Ulangan Kecepatan Pertumbuhan M. Tuberculosis ATCC 25177 1 s.d 4 hari 5 s.d 6 hari  7 s.d 9 hari 10 s.d 14 hari TURLM FI 1 - - - + 2 - - - + 3 - - - + 4 - - - + TURLM F2 1 - - + + 2 - - + + 3 - - + + 4 - - + + TURLM F3 1 - + + + 2 - + + + 3 - + + + 4 - + + + Kontrol LJ 1 - + + + 2 - + + + 3 - + + + 4 - + + + Keterangan : TURLM F1 : Teri Ubi Rumput Laut Medium Formula 1 TURLM F2 : Teri Ubi Rumput Laut Medium Formula 2 TURLM F3 : Teri Ubi Rumput Laut Medium Formula 3 Kontrol LJ : kontrol Loweinstein-Jensen - (negatif) : belum terlihat pertumbuhan koloni M. Tuberculosis ATCC 25177 + (positif)
: terlihat pertumbuhan koloni M. Tuberculosis ATCC 25177
Tabel  1  menunjukkan  hasil  bahwa perbedaan komposisi dari media alternatif yang tersusun  dari  bahan  alam  tepung  ikan  teri, rumput  laut  dan  ubi  jalar  ungu  menunjukkan kecepatan  waktu  tumbuh  dari M.  Tuberculosis ATCC  25177  yang  berbeda.  Pengamatan kecepatan  pertumbuhan  dilakukan  selama  14
hari,  hari  1  sampai  dengan  ke  4  pada  semua formula TURLM  dan  media  standart  LJ  belum menunjukkan pertumbuhan koloni M. Tuberculosis ATCC  25177.  Pertumbuhan  baru terlihat  pada  hari  ke  5  masa  inkubasi.    Hasil pertumbuhan M.  Tuberculosis ATCC  25177 yang  tercepat  terdapat  pada  formula  tiga
(TURLM  F3)  yang  kecepatan  pertumbuhannya sama  dengan  media  standart Loweinstein- Jensen (LJ).  Formula  tiga  dan  media  standart LJ  menunjukkan  hasil  pertumbuhan  positif sejak  hari  ke  lima  waktu  inkubasi.  Formula  2 baru menunjukkan pertumbuhan M. Tuberculosis ATCC  25177  pada  hari  ke-7 waktu  inkubasi  dan  formula  1  pada  hari  ke  10 waktu inkubasi. Hasil pertumbuhan M. Tuberculosis ATCC  25177  yang  paling  lambat terdapat pada formula  satu (TURLM F1).
Data    Angka  Kesuburan  Pertumbuhan  M.

## Tuberculosis  ATCC  25177  pada  Media
TURLM  (Teri  Ubi  Rumput  Laut  Medium) dan Media Kontrol Loweinstein- Jensen (LJ)
Angka  kesuburan  pertumbuhan M. Tuberculosis ATCC  25177    diamati  dari  hari
terlihat  munculnya  koloni M.  Tuberculosis ATCC 25177 sampai hari batas maksimal besar koloni  yang  tumbuh  (tidak  pada  koloni  yang melebar),  batas  maksimum  pengamatan  angka kesuburan  ini  adalah  8  minggu.  Angka Kesuburan Pertumbuhan meliputi :
1  =  makroskopis  tidak  ada  pertumbuhan, mikroskopis terdapat kuman tahan asam
2 =  koloni lebih kecil dari kepala jarum
3 =  koloni sebesar kepala jarum
4 =  koloni sebesar 1 x 1 mm 3 atau lebih (John Crofton; Norman Horne dan Fred Miller, 2002)
Adapun hasil pengamatan Angka kesuburan pertumbuhan M. Tuberculosis ATCC 25177  pada  media  TURLM  (Teri  Ubi  Rumput Laut Medium) dan  media Kontrol Loweinstein- Jensen (LJ) dapat dilihat pada tabel  2.

## Tabel 2 Angka Kesuburan Pertumbuhan Koloni M. Tuberculosis ATCC 25177 berdasarkan Waktu Inkubasi
Media Ulangan Angka Kesuburan Pertumbuhan M. Tuberculosis ATCC 25177 Minggu I (Pertama) 1 s.d 4 hari 5 s.d 6 hari 7 s.d 9 hari 10 s.d 14 hari 15 s.d 21 hari 22 s.d 27 hari 24 s.d 34 hari TURLM FI 1 1 1 1 2 2 1 1 2 1 1 1 2 2 1 1 3 1 1 1 2 1 1 1 4 1 1 1 2 1 1 1 TURLM F2 1 1 1 2 2 1 1 2 2 1 1 2 2 1 1 2 3 1 1 2 2 1 1 2 4 1 1 2 2 1 1 2 TURLM F3 1 1 2 2 3 2 2 2 2 1 2 2 3 2 2 2 3 1 2 2 3 2 2 2 4 1 2 2 3 2 2 2 Kontrol LJ 1 1 2 2 3 2 2 2 2 1 2 2 3 2 2 2 3 1 2 2 3 2 2 2 4 1 2 2 3 2 2 2 Keterangan : TURLM F1 : Teri Ubi Rumput Laut Medium Formula 1 TURLM F2 : Teri Ubi Rumput Laut Medium Formula 2 TURLM F3 : Teri Ubi Rumput Laut Medium Formula 3 Kontrol LJ : kontrol Loweinstein-Jensen - (negatif)
: belum terlihat pertumbuhan Koloni M. Tuberculosis ATCC 25177 + (positif)
: terlihat pertumbuhan koloni M. Tuberculosis ATCC 25177
Tabel  2  menunjukkan  hasil  angka kesuburan pertumbuhan M. Tuberculosis ATCC 25177  dengan lama waktu inkubasi maksimal 8 minggu (34 hari). Hari 1 sampai dengan hari ke 4 angka kesuburan pertumbuhan M. Tuberculosis ATCC 25177 pada semua formula
media  TURLM  dan  media  standart  LJ menunjukkan  angka  1  yang  artinya  secara mikroskopis  positif  BTA  namun  secara makroskopis  belum  terlihat  adanya  koloni pertumbuhan M. Tuberculosis ATCC 25177.
Angka  kesuburan  pertumbuhan M. Tuberculosis ATCC  25177  yang  paling  baik ditunjukkan  pada  pertumbuhan  di  media TURLM  formula  3  yang  menunjukkan  hasil sama  dengan  media  standar  LJ.  Angka kesuburan  pertumbuhan  pada  formula TURLM 3  pada  hari  ke  5  s.d  7  adalah  2  yang  artinya koloni  lebih  kecil  dari  kepala  jarum,  hari  ke  8 sampai  dengan  ke  14  adalah  3  yang  artinya koloni  sebesar  kepala  jarum  dan  hari  ke  15 sampai dengan 34 adalah 4 yang artinya koloni sebesar 1 x 1 mm 3 atau lebih. Angka kesuburan pertumbuhan M.  Tuberculosis ATCC  25177 yang paling lambat terdapat pada formula 1.

## PEMBAHASAN
Karakteristik
pertumbuhan
M.
Tuberculosis merupakan  bakteri  aerob  obligat dan  memperoleh  energi  dari  oksidasi  banyak senyawa karbon sederhana. Peningkatan tekanan  CO 2 akan  meningkatkan  pertumbuhan M. Tuberculosis . Aktifitas biokimia M. Tuberculosis tidak khas, dan kecepatan pertumbuhan M. Tuberculosis jauh lebih lambat dari  pada  sebagian  besar  bakteri.  Waktu pembelahan basil tuberculosis adalah sekitar 18 jam.  Sifat M.  Tuberculosis yang  lambat  pada waktu  pembelahan  menyebabkan  koloni  pada kultur  pertumbuhan  umumnya  baru  tampak setelah 4 s.d 8 minggu pertumbuhan.
Kultur M.  Tuberculosis dari  dahak penderita  merupakan gold  standart untuk menegakkan  diagnose  TB.  Media  yang  umum digunakan  adalah  media Loweinstein-Jensen (LJ)  dan  Ogawa  medium  yang  mengandung mineral,  elektrolit,  protein  dari  suspense  telur, karbohidrat  dari  tepung  kentang,  dan malacit green untuk  menghambat  pertumbuhan  bakteri lain  direkomendasikan  sebagai  isolasi,  kultur dan studi kerentanan terhadap obat. Pertumbuhan  pada  media  LJ  dan  Ogawa  akan timbul koloni antara waktu minggu ke 2 sampai minggu  ke  6  dan  batas  pengamatan  maksimal sampai  minggu  ke  8.  Media  standar  LJ    dan Ogawa relative mahal, sehingga dalam penelitian  ini  mengali  beberapa  sumber  bahan alam  yang  mudah  ditemukan  di  masyarakat, yang  harganya  relatif  murah  sebagai  bahan dasar dalam pembuatan media untuk pertumbuhan M. Tuberculosis seperti pengembangan  formula  Tepung  Teri  Laut,  Ubi jalar  ungu  dan  rumput  laut  yang  dalam penelitian ini dinamakan media TURLM.
Hasil  penelitian  untuk  identifikasi kecepatan pertumbuhan M. Tuberculosis dilihat dengan mulai munculnya koloni M. Tuberculosis pada  media  TRULM  dan  LJ sebagai media pembanding (kontrol)
menunjukkan bahwa hasil kecepatan pertumbuhan M.  Tuberculosis ATCC  25177 pada media TURLM dan media kontrol LJ yang diamati  perhari  pada  minggu  I  (pertama).  Pada media  TURLM  Formula  1  pada  minggu pertama  sampai  hari  ke-7  belum  menunjukkan adanya  pertumbuhan  koloni M.  Tuberculosis ATCC 25177, pertumbuhan koloni baru terlihat pada media TURLM Formula 2 pada hari ke -7, dan  TURLM  formula  3  pada  hari  ke-5  dengan ciri  pertumbuhan  koloni  cirri  morfologi  koloni M.  Tuberculosis bulat,  sedikit  kasar,  kering, rapuh,  tengah  bertumpuk  dengan  tepi  berjejas tipis;  kadang-kadang  tipis  dan  menyebar, berwarna  coklat  keruh.  Pertumbuhan  koloni pada media kontrol LJ juga terlihat pertumbuhan  mulai  pada  hari  ke-5,  dengan  ciri morfologi  koloni M.  Tuberculosis adalah sebagai  berikut:  kasar,  kering,  rapuh,  tengah bertumpuk  dengan  tepi  berjejas  tipis;  kadang- kadang  tipis  dan  menyebar,  berwarna  kuning muda ( cream ).
Hasil  pengamatan  pada  minggu  II (kedua)  terlihat  kecepatan  pertumbuhan  media TURLM  Formula  1  pada  minggu  kedua  mulai menunjukkan pertumbuhan koloni M. Tuberculosis ATCC  25177  pada  hari  ke-10, sedangkan pada media media TURLM Formula 2,  TURLM  formula  3  dan  media  LJ menunjukkan pertumbuhan koloni yang semakin  banyak  dan  besar.  Hasil  penelitian  ini membuktikan  bahwa  dari  formulasi  media TURLM ketiga formula menunjukkan kemampuan dalam menumbuhkan M. Tuberculosis ATCC  25177,  dengan  hasil kecepatan yang terbaik pada formula TURLM 3 yang  hasil  kecepatan  pertumbuhannya  sama dengan  media  standart  LJ.  Kemampuan menumbuhkan M.  Tuberculosis ATCC  25177 disebabkan  karena  sumber  bahan  pembuatan media dapat menggantikan karbohidrat, protein, mineral  serta  elektrolit  yang  terdapat  pada media  LJ.  Komposisi  Tepung  ikan  teri,  tepung ubi  jalar  ungu  dan  tepung  rumput  laut  dapat memenuhi  kebutuhan  nutrisi M.  Tuberculosis , karena  pada  Ikan  Teri  adalah  bahan  makanan hewani  laut  yang  biasa  dikonsumsi  oleh masyarakat  Indonesia.   Ikan  Teri  mengandung energi sebesar 74 kilo kalori, protein 10,3 gram,
karbohidrat 4,1 gram, lemak 1,4 gram, kalsium 972 miligram, fosfor 253 miligram, dan zatbesi 3,9  miligram.   Selain  itu  di  dalam  Ikan  Teri juga  terkandung  vitamin  A  sebanyak  42  IU, vitamin  B1  0,24  miligram  dan  vitamin  C  0 miligram. Hasil tersebut didapatkan dari melakukan  penelitian  terhadap  100  gram  Ikan Teri,  dengan  jumlah  yang  dapat  dimakan sebanyak 100 %.
Informasi  rinci  komposisi  kandungan nutrisi/gizi  pada  ikan  teri  yaitu  bahwa banyaknya ikan teri yang diteliti ( Food Weight ) =  100  gr,  bagian  ikan  teri  yang  dapat dikonsumsi  ( Bdd/Food  Edible )  =  100  % kandungannya  adalah  Energi  Ikan  Teri  =  74 kkal, jumlah kandungan protein ikan teri = 10,3 gr,  lemak  ikan  teri  =  1,4  gr,  karbohidrat  ikan teri = 4,1 gr, kalsium ikan teri = 972 mg, fosfor ikan teri = 253 mg, zat besi ikan teri = 3,9 mg, vitamin a ikan teri = 42 iu, vitamin b1 ikan teri =  0,24  mg,  vitamin  c ikan teri =  0  mg  (Fahmi, A 2012; Wiwit, P.2015).
Ubi  jalar  ungu  mengandung  pigmen anthosianin yang lebih tinggi daripada ubi jalar jenis  lain.  Pigmennya  lebih  stabil  bila dibandingkan  anthosianin  dari  sumber  lain seperti  kubis  merah, elderberries , bluberries dan  jagung  merah.  Komposisi  kimia  ubi  jalar adalah air 50 – 81%, protein 1 – 2,45,lemak 1,8 –  6,4%,  karbohidrat  8  –  29%,  gula  pereduksi 0,5 – 7,5%, abu 0,9 – 1,4 %, tiamin 0,1 %, asam Askorbat  25  gr/100  g  dan  riboflavin  0,06  %. Kandungan  nutrisi  ubi  jalar  ungu  lebih  tinggi bila  dibandingkan  ubi  jalar  varietas  lain, terutams  kandungan  lisin,  Cu,  Mg,  K,  Zn  rata- rata  20%.  Ubi  jalar  merupakan  sumber karbohidrat  dan  sumber  kalori  yang  cukup tinggi.  Ubi  jalar  juga  merupakan  sumber vitamin  dan  mineral,  vitamin  yang  terkandung dalam  ubi  jalar  antara  lain  vitamin  A,  vitamin C,  thiamin  (vitamin  B1)  dan  ribovlavin. Sedangkan mineral dalam ubi jalar di antaranya adalah  zat  besi  (Fe),  fosfor  (P),  dan  kalsium (Ca).
Kandungan  lainnya  adalah  protein, lemak,  serat  kasar  dan  abu.  Total  kandungan antosianin  bervariasi  pada  setiap  tanaman  dan berkisar  antara  20  mg/100  g  sampai  600 mg/100  g  berat  basah.  Total  kandungan antosianin  ubi  jalar  ungu  adalah  519  mg/100g berat  basah  (Kumalaningsih,  2007;  Hardoko Liana  H,  dan  Tagor,  M.  2010).  Kandungan kimia dari rumput laut Eucheuma spinosum adalah  keraginan  (65%),  protein,
karbohidrat,  lemak,  seratkasar,  air  dan  abu. Keraginan  merupakan  polisakarida  tersulfatkan dimana  kandungan  ester  sulfatnya  adalah  28- 35%.  Komposisi  kimia  yang  dimiliki  rumput laut Eucheuma  spinosum yaitu  Komposisi Kadar  air  21,90  (%)  Protein  5,12  (%)  Lemak 0,13  (%)    Karbohidrat  13,38  (%)  Serat  kasar 1,39  (%)  Abu  14,21  (%)  Mineral    52,85  ppm Ca0,180 ppm Fe,768 ppm Cu 0,21 mg/100g Pb 2,26 mg/100g Vit B43 mg/100g, (Thiamin) Vit B dan (Ribolavin)  Vit  C  (Horboruw,  2012; Suparmi  &  Sahri,  2009).  Komposisi  media alam  yang  kaya  akan  karbohidrat,  protein  dan mineral  sangat  potensial  untuk  alternatif  media pertumbuhan M.  tuberculosis ,  seperti  yang terdapat  pada  formula  media  TURLM  dalam penelitian ini.
Penelitian  ini  juga  sejalan  dengan penelitian  Anisful  L  tahun  2015  yang  mencari bahan  alam  yang  kaya  protein  dan  mineral seperti media yang dihasilkan dalam penelitiannya yaitu media Coco Blood Malachite  Green (CMB)  dengan  menggunakan air kelapa dari jenis kelapa Cocos nucifera dan serbuk agar darah yang membuktikan kecepatan pertumbuhan M.  Tuberculosis lebih  cepat  dari media  LJ.  Kebaharuan  dari  hasil  penelitian  ini yang membedakannya dengan penelitian penelitian  tentang  eksplorasi  bahan  alam  untuk pertumbuhan M. Tuberculosis adalah belum ada penelitian yang mengeksplorasi bahan alam dari kombinasi tepung ikan teri, rumput laut dan ubi jalar ungu sebagai alternatif media pertumbuhan M. Tuberculosis .
Angka  kesuburan  pertumbuhan M. tuberculosis ATCC  25177    merupakan  koloni yang  tumbuh  pada  medium  pertumbuhan dengan  mengamati  dari  terlihat  munculnya koloni M.  Tuberculosis ATCC  25177  sampai hari  batas  maksimal  besar  koloni  yang  tumbuh (tidak  pada  koloni  yang  melebar),  batas maksimum  pengamatan  angka  kesuburan  ini adalah 8 minggu. Hasil penelitian membuktikan bahwa  pada  media  TURLM  (Teri  Ubi  Rumput Laut Medium) dan  media Kontrol Loweinstein- Jensen (LJ) yang diamati perhari pada minggu I (pertama).  Pada  media  TURLM  Formula  1 sampai  hari  ke-7  pada  minggu  pertama menunjukkan  angka  kesuburan  1  karena secara makroskopis tidak ada pertumbuhan, mikroskopis  terdapat  Bakteri  Tahan  Asam (BTA) M. Tuberculosis ATCC 25177, sedangkan pada media media TURLM Formula 2 angka kesuburan pertumbuhan pada hari ke 1
sampai dengan ke 6 adalah angka kesuburan 1, mulai  hari  ke-7  pada  pengamatan  minggu  I angka  kesuburannya  2  yaitu  sudah  muncul koloni  yang  besarnya  lebih  kecil  dari  kepala jarum. Pada TURLM formula 3  dan  media LJ menunjukkan  angka  kesuburan  pertumbuhan  1 pada  hari  ke  1  sampai  dengan  hari  ke  4, sedangkan  pada  hari  ke  5  sudah  mulai  muncul koloni dengan angka kesuburan pertumbuhan 2 sampai  pengamatan  pada  hari  ke-7  pada minggu pertama.
Hasil angka kesuburan pertumbuhan M. Tuberculosis ATCC 25177 pada media TURLM  dan  media  kontrol  LJ  yang  diamati perhari  pada  minggu  II  (kedua)  adalah  pada media TURLM Formula 1 menunjukkan angka kesuburan  1    pada  hari  ke  8  dan  ke  9  karena secara  makroskopis  tidak  ada  pertumbuhan, mikroskopis  terdapat  Bakteri  Tahan  Asam (BTA) M.  Tuberculosis ATCC  25177,  mulai hari  ke  10  sampai  dengan  hari  ke  14 menunjukkan  angka  kesuburan  2  karena  sudah muncul  koloni M.  Tuberculosis ATCC  25177 dengan  ukuran  lebih  kecil  dari  kepala  jarum, sedangkan pada media media TURLM Formula 2 angka kesuburan pertumbuhan pada hari ke 8 sampai dengan ke 14 adalah angka kesuburan 2. Pada    TURLM  formula  3    dan    media  LJ menunjukkan angka  kesuburan pertumbuhan 3, dimana  koloni  yang  tumbuh  sebesar  kepala jarum mulai hari ke 8 sampai dengan  pada hari ke 14.
Hasil angka kesuburan pertumbuhan M. Tuberculosis ATCC 25177 pada media TURLM  dan  media  kontrol  LJ  yang  diamati perhari  pada  minggu  III  (tiga).  Pada  media TURLM  formula  1  menunjukkan  angka kesuburan  konstan  (tetap)    pada  hari  ke  15 sampai  dengan  21  yaitu  angka  kesuburan pertumbuhan 2, sedangkan pada media TURLM formula 2 angka kesuburan pertumbuhan pada hari ke 15 sampai dengan ke 21  adalah  angka  kesuburan  3.  Pada    TURLM formula  3  dan    media  LJ  menunjukkan  angka kesuburan  pertumbuhan  4  yaitu  koloni  yang tumbuh  lebih  besar  dari  kepala  jarum.  Hasil angka kesuburan pertumbuhan M. Tuberculosis ATCC  25177  pada  media  TURLM  dan  media kontrol  LJ  yang  diamati  perhari  pada  minggu IV  (empat).  Pada  media  TURLM  formula  1 menunjukkan  angka  kesuburan  konstan  (tetap) pada  hari  ke  21  sampai  dengan  27  yaitu  angka kesuburan pertumbuhan 2, pada media TURLM formula  2  angka  kesuburan  pertumbuhan  pada
hari ke 21 sampai dengan ke 27 adalah konstan (tetap)  adalah  angka  kesuburan  3.    Pada TURLM formula 3 dan media LJ menunjukkan angka kesuburan pertumbuhan 4 pada pengamatan hari ke 21 sampai dengan 27 pada minggu  ke  IV  (empat)  adalah  konstan  (tetap) yaitu  koloni  yang  tumbuh  lebih  besar  dari kepala jarum. Hasil angka kesuburan pertumbuhan M.  Tuberculosis ATCC  25177 pada media TURLM dan media kontrol LJ yang diamati perhari pada minggu V (lima).
Pada  media  TURLM  formula  1 menunjukkan  angka  kesuburan  konstan  (tetap) pada  hari  ke  28  sampai  dengan  34  yaitu  angka kesuburan pertumbuhan 2, pada media TURLM formula 2 angka kesuburan  pertumbuhan pada hari ke 28 sampai dengan ke 38 adalah konstan (tetap)  adalah  angka  kesuburan  3.  Pada TURLM formula 3 dan media LJ menunjukkan angka kesuburan pertumbuhan 4 pada pengamatan hari ke 28 sampai dengan 38 pada minggu  ke    V  (lima)    adalah  konstan  (tetap) yaitu  koloni  yang  tumbuh  lebih  besar  dari kepala jarum. Karena pada minggu ke V (lima) pertumbuhan  tetap,  tidak  terjadi  perkembangan angka kesuburan pertumbuhan M. Tuberculosis ATCC  25177  oleh  sebab itu  maka  pengamatan angka  kesuburan  pertumbuhan  sampai  pada minggu ke V (lima).
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa  media  TURLM  baik  formula  1,2  dan  3 memiliki  kemampuan  dalam  pertumbuhan M. Tuberculosis ,  dengan  kecepatan  pertumbuhan dan  angka  kesuburan  yang  terbaik  adalah  pada formula  TRULM  3.  Walaupun  hasil  kecepatan pertumbuhan dan angka kesuburan pertumbuhan  yang  dihasilkan  dari  media formula  TURLM  baik,  tetapi  media  ini memiliki kelemahan yaitu tidak bisa digunakan untuk  inokulasi M.  Tuberculosis pada  plate karena rentan dengan kontaminasi jamur, hal ini terbukti  dengan  beberapa  kali  penelitian pertumbuhan  menggunakan  plate  hasilnya terkontaminasi oleh jamur jenis Aspergillus Sp , sehingga  pembiakan  menggunakan  tabung reaksi  20cc  atau  tabung  reaksi  ulir,  sesuai standar tempat media pertumbuhan M. Tuberculosis sehingga  perlu  dipikirkan  cara modifikasi medium TURLM dengan menambahkan bahan-bahan selektif yang dapat menghambat  pertumbuhan  jamur  dan  bakteri kontaminan.  Kelemahan  lain  dari  penelitian  ini adalah  tidak  diketahui  pola  sensitivitas  dan spesifisitas  media  formula  TURLM  baik  dari
segi kecepatan pertumbuhan maupun dari angka kesuburan.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Media  formulasi  kombinasi  pangan  lokal TURLM  (Teri  Ubi  Rumpu  Laut  Medium) formula 3 dapat mempercepat pertumbuhan dan angka kesuburan pertumbuhan M. Tuberculosis ATCC 25177.  Disarankan agar dilakukan studi lanjutan  dengan  melakukan  penelitian  tentang pola spesifisitas dan sensitivitas media TURLM Formula 3 dengan pembanding media Loweinstein-Jensen menggunakan sampel dahak  dari  penderita  TBC.  Menggunakan jumlah  sampel  yang  representatif  dan  studi lanjutan dengan melakukan penelitian modifikasi  komposisi  media  TURLM  dengan penambahan  zat-zat  selektif  untuk  mencegah pertumbuhan bakteri kontaminan dan jamur.

## DAFTAR PUSTAKA
Anisful  LM,  Hidayati  DYN  dan  Utami  YW, 2015. Studi Komparasi media kultur Coco
Blood  malachite  Green (CBM)  dengan Loweinstein-Jensen (LJ) untuk Diagnostik  cepat,  Spesifik,  dan  Sensitif pada Sputum Pasien Suspek
Tuberculosis. Majalah kesehatan FKUB . Crofton,  S.  J.,  Horne,  N.,  &  Miller,  F.  (2002). Tuberkulosis  Klinis .  Jakarta:  Widya Medika.
Fahmi,  A.  (2012). Kadar  protein  dan  Ca  pada Ikan Teri Asin Hasil Pengasinan dengan Abu  Pelepah  Kelapa .  Surakarta:  Naskah Publikasi  Fakultas  Keguruan  dan  Ilmu Pendidikan  Universitas  Muhammadiyah Surakarta.
Hardoko  Liana  H,  &  Tagor,  M.  (2010).
Pemanfaatan  Ubi  Jalar  Ungu  (Ipomoea batatas L.Poir0 sebagai pengganti
Sebagian  Tepung  Terigu  dan  sumber
Antioksidan  pada  Roti  Tawar.  J.Teknol dan  Industri  Pangan,Vol.XXI  No.1 (pp.
25–32). pp. 25–32.
Horboruw,  M.  W.  (2012).  Kandungan  Iodium Telur  Pertama  Ayam  Fast  Pullet  yang diberi  Pakan  Rumput  Laut  (Gracillaria edulisd). Agrinimal  (Jurnal  Ilmu  Ternak dan Tanaman) , Volume 2 N , 79–90. Kumalaningsih,  S.  (2007). Antioksidan  Alami Penangkal  Radikal  Bebas .  Surabaya:
Trubus Agrisarana.
Munawaroh,  A.  L.,  Hidayati,  D.  Y.  N.,  & Utami,  Y.  W.  (2015).  Studi  Komparasi Media  Kultur Coco  Blood  Malachite Green (CBM) dengan Lowenstein Jensen (LJ)  untuk  Diagnosis  Cepat,  Spesifik, dan  Sensitif pada  Sputum  Pasien  Suspek Tuberkulosis. Majalah Kesehatan FKUB ,
2 , 79–91.
Maria.  N  &  Rosnita,  S.  (2018).  Pengaruh Pemberian  Air  Kelapa  ( Cocos  nucifera. L )  pada  Media  Agar  Darah  terhadap Pertumbuhan  Bakteri Mycobacterium Tuberculosis .  Jurnal  Kesehatan  Volume 9, Nomor 3.
Patrick  R.  Murray,  &  Rosenthal,  K.  S.  (2007). Buku Ajar Mikrobiologi . Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.
Srigede,  L.,  Zaetun,  S.,  &  Getas,  I.  W.  (2013).
Perbedaan  Pertumbuhan Mycobacterium tuberculosis pada  Media  Agar  Nutrien dengan  Penambahan  Tepung  Cacing ( Lumbricus rubellous ) dibandingkan dengan Pertumbuhan pada Media
Loweinstein  Jensen. Media  Bina  Ilmiah ,
7 (5), 36–42.
Suparmi, & Sahri, A. (2009). Mengenal Potensi Rumput  Laut :  Kajian  Pemanfaatan Sumber  Daya  Rumput  Laut  dari  Aspek Industri  dan  Kesehatan. Sultan  Agung Volume XILIV No 118 , 95–116. Wiwit,  P.  (2015). Kandungan  Kadar  Protein dan Air dalam Ikan Teri (Stolephorus Sp) Asin  dengan  Oven  sebagai  alternative Pengganti Panas Matahari .