Volume 4, Nomor 2, Desember 2021 e-ISSN : 2598-7453 DOI: https://doi.org/10.31539/bioedusains.v4i2.2423

## ISOLASI DAN KARAKTERISASI BAKTERI ASAL SUMBER AIR PANAS NON-VULKANIK
Rahmad Lingga 1 , Budi Afriyansyah 2 , Reti Septiani 3 , Ina Miranti 4
Universitas Bangka Belitung 1,2,3,4
linkgarahmad@gmail.com 1

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengisolasi  dan  mengarakterisasi  bakteri  yang hidup  di  sumber  air  panas  di  Pulau  Bangka.  Metode  penelitian  yang  digunakan meliputi isolasi bakteri; karakterisasi morfologi, determinasi kelompok Gram dan uji  biokimia;  identifikasi;  dan  uji  ketahanan  suhu  bakteri  termofilik.  Sampel  air panas diperoleh dari 2 lokasi yaitu Desa Pemali dan Desa Permis. Kisaran suhu air panas  di  kedua  lokasi  antara 38ºC sampai 52ºC .  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa terdapat 22 isolat murni yang terdiri atas 9 isolat dari Desa Permis dan 13 isolat  dari  desa  Pemali.  Simpulan,  hasil  karakterisasi  memperlihatkan  seluruh isolat  bakteri  merupakan  bakteri  gram  negatif  dengan  keragaman  ciri  biokimia berbeda.
Kata Kunci : Bakteri Termofilik, Non-Vulkanik, Pulau Bangka

## ABSTRACT
This  study  aims  to  isolate  and  characterize  bacteria  that  live  in  hot  springs  on Bangka  Island.  The  research  methods  used  include  bacterial  isolation; morphological  characterization,  Gram  group  determination  and  biochemical tests;  identification;  and  thermophilic  bacteria  temperature  resistance  test.  Hot water samples were obtained from 2 locations, namely Pemali Village and Permis Village.  The  hot  water  temperature  range  at  both  locations  is  between  38ºC  to 52ºC. The results showed that 22 pure isolates were consisting of 9 isolates from Permis  Village  and  13  isolates  from  Pemali  Village.  In  conclusion,  the characterization  results  showed  that  all  bacterial  isolates  were  gram-negative bacteria with various biochemical characteristics.
Keywords : Thermophilic Bacteria, Non-Volcanic, Bangka Island

## PENDAHULUAN
Pulau Bangka merupakan sebuah pulau  yang masuk dataran Sunda dengan karakteristik  yang  unik.  Pulau  Bangka  merupakan  pulau  yang  memiliki  deposit bahan mineral tambang yang sangat kaya, terutama timah. Di pulau Bangka juga ditemukan sumber air panas yang tersebar di beberapa daerah yaitu di Kabupaten Bangka  Selatan,  Bangka  Tengah  dan  Bangka  Barat.  Karakteristik  sumber  air panas tersebut berbeda dengan sumber air panas lainnya di Indonesia, karena tidak berkaitan  dengan  aktivitas  vulkanik  atau  gunung  berapi  (Widyaningrum  & Kurniawan, 2019).
Sumber  air  panas  merupakan  habitat  hidup  bagi  mikrob  yang  bersifat termofilik,  seperti  halnya  bakteri  termofilik  terutama  kelompok  Actinobacteria, Proteobacteria  dan  Acidobacteria (Ovando-Chacon  et  al.,  2020).  Bakteri
termofilik  dapat  hidup  dan  berkembangbiak  pada  kondisi  suhu  yang  ekstrim, berkisar  antara  45 ºC -122 ºC.  Selain  bakteri,  mikrob  lain  yang  termasuk  ke  dalam organisme termofilik adalah kelompok Arkhaea yang umumnya dapat ditemukan pada sumber air panas di darat maupun laut dalam (El-Gayar et al., 2017).
Karakteristik  hidup  mikrob  pada  lingkungan  ekstrim  seperti  sumber  air panas berkaitan dengan enzim yang beradaptasi  karena memiliki komponen unik yang mampu mempertahankan stabilitas dan konformasi yang fleksibel, sehingga dapat  berfungsi  secara  optimal  pada  kondisi  tersebut  (Sang  et  al.,  2020).  Hasil penelitian menunjukkan stabilitas tersebut  berkaitan dengan keberadaan interaksi elektrostatik  yang  dipengaruhi  oleh  keberadaan  jembatan  garam  pada  struktur protein termofilik (Xia et al., 2018).
Kajian  tentang  mikrob  termofilik  mendapat  perhatian  karena  potensinya sebagai  sumber  material  tahan  panas  seperti  enzim  termofilik. Kelompok  enzim termofilik  yang  banyak  dikenal  antara  lain  Amilase,  Selulase,  Xylanase, Chitinase,  Protease  dan  Lipase  (Alrumman  et  al.,  2018;  Ardhi  et  al.,  2020).  Di Indonesia,  penelitian  mengenai  bakteri  termofilik  telah  banyak  dilakukan,  baik dalam  aspek  keragaman  maupun  potensi  aplikasinya  bagi  industri  (Ardhi  et  al., 2020; Irdawati et al., 2018; Lischer et al., 2020). Akan tetapi, informasi mengenai bakteri  termofilik  asal  sumber air panas non-vulkanik masih sangat  minim.  Oleh karena  itu,  penelitian  ini  dilaksanakan  untuk  mengisolasi  dan  mengarakterisasi bakteri asal sumber air panas non-vulkanik di Pulau Bangka.

## METODE PENELITIAN Pengambilan Sampel
Pengambilan  sampel  air  panas  dilakukan  pada  dua  sumber  air  panas  non- vulkanik yaitu di Desa Pemali dan Desa Permis. Sampel air yang telah diperoleh dipindahkan ke dalam botol steril untuk kemudian dibawa ke laboratorium dalam wadah khusus untuk langsung dilakukan isolasi bakteri pada media.

## Isolasi Bakteri Termofilik
Sampel air panas terlebih dahulu dilakukan pengenceran serial sampai 10 -6 . Masing-masing  pengenceran  kemudian  disebar  ke  media  Nutrient  Agar  (NA) dengan  tiga  ulangan.  Cawan  kemudian  diinkubasi  dan  dilakukan  pengamatan jumlah  dan  ciri  koloni  setelah  24  jam.  Koloni  yang  terbentuk  kemudian dimurnikan untuk dilakukan karakterisasi lanjutan.

## Pewarnaan Gram dan Uji Biokimia
Pewarnaan  gram  dilakukan  untuk  mengetahui  sifat  gram  serta  bentuk  sel isolat  bakteri.  Isolat  bakteri  (usia  24  jam)  diambil  secara  aseptik  dan  diletakkan pada  gelas  objek  yang  steril.  Selanjutnya  objek  lalu  diratakan  dan  difiksasi kembali di atas lampu spiritus, kemudian diteteskan kristal violet 2-3 tetes selama 1  meni  setelah  dingint,  kemudian  dicuci  dengan  air  mengalir  dan  dikeringkan  di udara.  Isolat  bakteri  ditetesi  dengan  Iodium  selama  1  menit,  dicuci  dengan  air mengalir, dikeringkan di udara dan ditetesi dengan Alkohol 96 % selama 30 detik, lalu  dicuci  dengan  air  mengalir  dan  dikeringkan  di  udara,  selanjutnya  ditetesi dengan Safranin  selama  45 detik.  Langkah selanjutnya adalah  gelas objek  dicuci dengan  air  mengalir,  kemudian  diamati  menggunakan  mikroskop  cahaya.
Selanjutnya dilakukan uji biokimia yang meliputi Uji Indol, Uji Voges-Proskauer, uji motilitas, uji TSIA, uji sitrat dan uji metil merah.

## Uji Ketahanan Suhu
Untuk  mengkonfirmasi  karakteristik  termofilik  isolat  bakteri,  dilakukan  uji ketahanan  terhadap  perlakuan  suhu  mulai  dari  40 °C sampai  100 ° C  (interval 10 °C) .  Sebanyak  100  μl  kultur  cair  10 6 CFU/ml  ditambahkan  ke  dalam  900  μl NaCl dan diperlakukan dengan variasi suhu tertentu dan dipertahankan selama 30 menit.  Selanjutnya,  cairan  berisi  kultur  bakteri  tersebut  disimpan  dalam  kotak pendingin dan disebar pada media NA untuk dihitung jumlah koloni yang tumbuh.

## HASIL PENELITIAN

## Karakteristik Sumber Air Panas
Pengambilan sampel air panas dilakukan di dua lokasi berbeda, yaitu Permis dan  Pemali.  Sumber  air  panas  Permis  berlokasi  di  Kecamatan  Simpang  Rimba, Kabupaten  Bangka  Selatan,  sedangkan  sumber  air  panas  Pemali  berlokasi  di Kecamatan Sungailiat, Kabupaten Bangka. Secara umum, sumber air panas pada kedua  lokasi  berupa  sumur  atau  kolam  kecil  pada  permukaan  tanah  (Gambar  1). Air  panas  yang  berasal  dari  kolam  tersebut  kemudian  dialirkan  ke  kolam  yang lebih  besar  untuk  keperluan  pemandian  umum.  Berikut  ini  ditampilkan karakteristik mikroklimat lokasi pengambilan kedua sampel tersebut:
Gambar 1. Sumber Air Panas Non-Vulkanik: (a) Kolam sumber air panas Desa Permis; (b) Air panas yang dialirkan ke kolam pemandian di Desa Pemali
Tabel 1.  Hasil  Pengukuran  Mikroklimat  Titik  Pengambilan  Sampel  di  Desa  Permis  dan
Desa Pemali Stasiun/Kolam Suhu( °C ) pH DO (mg/L) Desa Permis 1 47 6,75 3,57 48 6,76 3,56 44 6,83 2,59 2 51 6,90 4,49 52 6,92 3,54 50 7,16 4,82 a b

## Desa Pemali
1 40 7.21 3,01 40 7.20 3,06 40 7.19 3,19 2 39 7.33 3,69 38 7.25 3,04 39 7.30 3,92
Berdasarkan  hasil  pengamatan  yang  dilakukan  terhadap  parameter  fisika menunjukkan  bahwa  suhu  sumber  air  panas  di  Permis  (47-52 °C )  lebih  tinggi dibandingkan dengan sumber air panas di Pemali (38-40 °C ). Sementara itu, dalam hal  nilai  pH  lokasi  Permis  (kisaran  6,75-7,16)  bersifat  lebih  asam  dibandingkan dengan lokasi Pemali (kisaran 7,19-7,33).

## Isolat Bakteri dari Sumber Air Panas
Berdasarkan  hasil  pemurnian  atas  koloni  bakteri  yang  berhasil  diisolasi, diperoleh sebanyak 22 isolat murni. Dari sumber air panas Desa Pemali diperoleh sebanyak  13  isolat  dan  9  isolat  lainnya  dari  Desa  Permis.  Keseluruhan  isolat tersebut  memiliki  variasi  dalam  karakteristik  morfologi  koloni  meliputi  warna, elevasi, tepi dan bentuk koloni.
Tabel 2.  Karakteristik Koloni Isolat Bakteri dari Sumber Air Panas Desa Pemali dan Desa
Permis No. Kode Isolat Warna Elevasi Margin Bentuk Desa Pemali 1 PL1 Putih Flat Lobate Rhizoid 2 PL2 Putih Umbonate Filiform Circular 3 PL3 Putih Flat Entire Circular 4 PL4 Putih Flat Entire Circular 5 PL5 Putih Flat Entire Circular 6 PL6 Peach Convex Entire Circular 7 PL7 Putih Flat Filiform Circular 8 PL8 Oranye Flat Entire Circular 9 PL9 Oranye Flat Entire Circular 10 PL10 Oranye tua Low convex Entire Circular 11 PL11 Kuning Flat Entire Circular 12 PL12 Kuning Flat Filiform Rhizoid 13 PL13 Kuning, gelap ditengah Umbonate Entire Circular Desa Permis 1 PR1 Kuning Kunyit Convex Smooth Bulat 2 PR2 Putih bening Raised Smooth Bulat 3 PR3 Kuning keruh Flat Irreguler Irregular 4 PR5 Putih susu Raised Smooth Bulat 5 PR6 Coklat muda Raised Smooth Bulat 6 PR7 Putih Raised Smooth Bulat 7 PR9 Kuning Convex Smooth Bulat 8 PR10 Oranye Raised Smooth Bulat 9 PR11 Krim Raised Smooth Bulat

## Karakteristik Isolat Bakteri dari Sumber Air Panas
Karakteristik  sel  dan  pewarnaan  Gram  merupakan  karakteristik  penting yang  diperlukan  untuk  identifikasi  bakteri.  Pewarnaan  gram  didasarkan  pada perbedaan  struktur  dinding  sel  bakteri,  sehingga  menyebabkan  perbedaan  reaksi dalam  permeabilitas  zat  warna  dan  penambahan  larutan  pencuci.  Pada  Tabel  3 ditampilkan  karakteristik  sel  dan  pewarnaan  isolat  bakteri  yang  diperoleh. Keseluruhan  isolat  yang  diperoleh  termasuk  ke  dalam  kelompok  bakteri  Gram negatif  dengan  ciri  warna  sel  pada  akhir  tahapan  pewarnaan  adalah  merah (Gambar  2).  Secara  umum  bentuk  dan  penataan  sel  adalah  bentuk  batang  dan kokus dengan penataan tunggal.

## Gambar 2. Bentuk dan Penataaan Sel serta Karakteristik Gram Isolat Bakteri dari Sumber Air Panas
Semua  isolat  memperlihatkan  warna  merah  setelah  seluruh  tahapan pewarnaan  dilakukan.  Warna  merah  ini  mengindikasikan  bahwa  isolat  bakteri termasuk kelompok bakteri  gram negatif. Selain itu isolat bakteri  juga berbentuk bulat  ( Coccus ),  batang,  batang  pendek  dan sarcina. Sarcina  atau  tetrad  adalah bakteri yang berbentuk bulat dengan susunannya seperti kubus. Secara umum, sel memiliki  ciri  negatif  untuk  uji methyl  red ,  VP,  sitrat  dan  indol.  Isolat  bakteri hanya  memperlihatkan  ciri  positif  untuk  uji  motilitas.  Pengecualian  ada  pada isolat PL2 (positif uji sitrat) dan isolat PL3 (positif uji methyl red ).
Tabel 3. Karakteristik Biokimia Isolat Bakteri Asal Air Panas
No Kode isolat Gram  Bentuk/Penataan Sel MR V P M ot Si t In dol TSI A Identitas Permis 1 PR1 Negatif Kokus/tunggal - - + - - K/K Alcaligenes 2 PR2 Negatif Batang - - + + - M/K Alcaligenes 3 PR3 Negatif Batang/tunggal + - + - - K/K Alcaligenes 4 PR5 Negatif Batang/tunggal - - + - - K/K Alcaligenes 5 PR6 Negatif Batang/tunggal - - + - - K/K Alcaligenes 6 PR7 Negatif Batang/tunggal - - + - - K/K Alcaligenes 7 PR9 Negatif Kokus/diplo - - + - - K/K Alcaligenes 8 PR10 Negatif Batang pendek - - + - - K/K Erythrobacte r 9 PR11 Negatif Batang - - + - - M/K Alcaligenes Pemali 1 PL1 Negatif Kokus - - + - - K/K Neisseria 2 PL2 Negatif Kokus - - + - - K/K Nitrosococc us 3 PL3 Negatif Kokus - - + - - K/K Alcaligenes 4 PL4 Negatif Kokus - - + - - K/K Alcaligenes
5 PL5 Negatif Kokus - - + - - K/K Neisseria 6 PL6 Negatif Kokus - - + - - K/K Neisseria 7 PL7 Negatif Kokus - - + - - K/K Neisseria 8 PL8 Negatif Kokus - - + - - K/K Roseobacter 9 PL9 Negatif Kokus - - + - - K/K Roseobacter 10 PL10 Negatif Kokus - - + - - K/K Roseobacter 11 PL11 Negatif Kokus - - + - - K/K Alcaligenes 12 PL12 Negatif Kokus - - + - - K/K Nitrococcus 13 PL13 Negatif Sarcina - - + - - K/K Alcaligenes
(Keterangan: + = Positif, - = Negatif, K = Kuning, M = Merah)

## Ketahanan terhadap Perlakuan Suhu
Untuk mengkonfirmasi bahwa semua isolat bakteri yang diperoleh memiliki ciri bakteri termofilik, semua isolat diperlakukan dengan suhu 40 °C , 50 °C , 60 °C ,
70 °C ,  80 °C ,  90 °C ,  100 °C .  Pada  Tabel  4  berikut  ditampilkan  ketahanan  isolat bakteri  pada  perlakuan  suhu  berbeda.  Secara  umum,  seluruh  isolat  tidak  mampu tumbuh  setelah  diperlakukan  dengan  suhu  90 °C dan  100 °C .  Dari  kedua  lokasi pengambilan sampel, diperoleh 5 isolat yang tahan terhadap perlakuan suhu 80 °C yaitu  isolat  PR1,  PR5  dan  PR11  (Permis)  dan  isolat  PL1  dan  PL2  (Pemali). Sebagian  besar  isolat  dapat  hidup  pada  perlakuan  suhu  40 °C kecuali  isolat  PR2, PR3, PR7 (Permis), PL4, PL10 (Pemali).
Tabel 4. Ketahanan Isolat Bakteri Termofilik terhadap Perlakuan Suhu
No Kode Isolat Perlakuan suhu 40 °C 50 °C 60 °C 70 °C 80 °C 90 °C 100 °C Permis 1 PR1 + + + + + - - 2 PR2 - - - - - - - 3 PR3 - - - - - - - 4 PR5 + + + + + - - 5 PR6 + + + + - - - 6 PR7 - - - - - - - 7 PR9 + + + + - - - 8 PR10 + + + + - - - 9 PR11 + + + + + - - Pemali 1 PL1 + + + + + - - 2 PL2 + + + + + - - 3 PL3 + + + - - - - 4 PL4 + - - - - - - 5 PL5 + + + + - - - 6 PL6 + + - - - - - 7 PL7 + + - - - - - 8 PL8 + + + - - - - 9 PL9 + + + - - - - 10 PL10 + - - - - - - 11 PL11 + + - - - - - 12 PL12 + + + - - - - 13 PL13 + + + - - - - (Keterangan: + = Positif, - = Negatif)

## PEMBAHASAN
Karakteristik  dari  sumber  air  panas  pada  penelitian  ini  adalah  kandungan oksigen terlarut (DO) yang terbilang rendah. Hal ini dapat dimaklumi sehubungan dengan  karakteristik  air  panas  tersebut  yang  memiliki  suhu  di  atas  suhu  optimal untuk  organisme  lain  yang  berperan  dalam  menghasilkan  oksigen  seperti tumbuhan  air  maupun  organisme  prokariot  fotosintetik.  Hal  ini  juga  berkaitan dengan keberadaan suhu air yang merupakan faktor penentu kadar oksigen terlarut dalam perairan karena dapat mempengaruhi kelarutan oksigen dan karbondioksida (Febiyanto, 2020). Keberadaan oksigen terlarut dalam suatu perairan memainkan peranan penting bagi kehidupan organisme di dalamnya. Hal tersebut dikarenakan peranan  oksigen  yang  sangat  penting  dalam  proses  pembentukan  energi  dalam metabolisme seluler (Hamuna et al., 2018).
Tiap  kolam  didapatkan  isolat  dengan  jumlah  yang  berbeda-beda.  Adanya perbedaan jumlah isolat yang didapatkan pada masing-masing kolam dipengaruhi oleh  kondisi  lingkungan  yang  mendukung  kehidupan  bakteri.  Faktor  biotik  yang terdapat pada lokasi pengambilan sampel di antaranya jumlah kunjungan manusia yang berendam air panas menjadi sumber keanekaragaman bagi mikroorganisme. Sebagaimana  diketahui  bahwa  beberapa  faktor  yang  berpengaruh  dalam keanekaragaman  genetik  dan  metabolisme  setiap  mikroorganisme  yang  hidup  di suatu habitat antara lain derajat keasaman (pH), komposisi gas dan mineral, reaksi oksidasi/reduksi serta nutrisi  yang bervariasi  (Oberbeckmann et  al.,  2018;  Wu et al., 2018).
Hasil  identifikasi  memperlihatkan  bahwa  semua  isolat  yang  diperoleh merupakan  kelompok  bakteri  Gram  negatif.  Bakteri  Gram  negatif  memang dikenal  sebagai  kelompok  bakteri  yang  memerlukan  nutrisi  yang  relatif  lebih sederhana dibandingkan dengan bakteri Gram positif. Hal ini berarti kemampuan kelompok  bakteri  ini  untuk  tumbuh  pada  suatu  lingkungan  lebih  besar dibandingkan  bakteri  gram  positif.  Secara  biokimia,  bakteri  yang  diperoleh memiliki  ciri  yang  hampir  seragam.  Hanya  saja  ada  beberapa  isolat  yang memperlihatkan  kemampuan  untuk  memanfaatkan  sumber  karbon  dengan mekanisme berbeda. Ciri biokimia yang berbeda menjadi indikasi perbedaan cara hidup  bakteri  tersebut,  seperti  kemampuan  dalam  memanfaatkan  sumber  karbon yang  tersedia.  Hal  ini  sejalan  dengan  keberadaan  bakteri  yang  dikenal  memiliki peranan  penting  dalam  siklus  biogeokimia  di  lingkungan  perairan  (Arora- Williams et al., 2018; York, 2018)
Berdasarkan  hasil  uji  ketahanan  suhu,  terlihat  bahwa  semakin  tinggi perlakuan  suhu,  maka  jumlah  isolat  bakteri  yang  mampu  hidup  semakin  sedikit. Namun  secara keseluruhan, rata-rata bakteri  tersebut  mampu hidup  di  suhu  yang tinggi atau dapat dikatakan termasuk ke dalam golongan bakteri termofil. Bakteri termofil merupakan bakteri yang mampu tumbuh pada suhu 45-80°C, bahkan ada yang  mampu  tumbuh  hingga  100°C  (Rantuboi  et  al.,  2018).  Kelompok  bakteri seperti  ini  memiliki  kemampuan  untuk  toleran  terhadap  suhu  lingkungan  yang ekstrim  serta  mampu  untuk  bertahan  hidup  dan  berkembangbiak  pada  kondisi tersebut (Ovando-Chacon et al., 2020).
Isolat  bakteri  termofilik  tersebut  mampu  tumbuh  pada  suhu  tinggi  karena memiliki  enzim  termostabil.  Selain  itu,  protein  yang  terdapat  pada  sel  bakteri tersebut memiliki ikatan hidrofobik dan ikatan ionik yang sangat kuat. Komposisi membran  sel  bakteri  termofilik  tersusun  oleh  asam  lemak  jenuh  yang
menyebabkan  struktur  membran  tersebut  stabil  pada  kondisi  suhu  tinggi (Villanueva  et  al.,  2021).  Selain  itu,  kelompok  bakteri  termofilik  dapat mensintesis  protein  yang  bersifat  tahan  panas  dan  tahan  denaturasi  sehingga mampu  beradaptasi  dengan  kondisi  lingkungan  bersuhu  ekstrim  (Attri  et  al., 2018).
Bakteri  termofilik  merupakan  sumber  potensial  berbagai  enzim  yang penting  untuk  industri  diantaranya  enzim  protease,  amilase,  xylanase  termofilik, dll. Banyak kajian  yang telah  melaporkan potensi enzim termofilik dari berbagai daerah  di  Indonesia  (Arzita  et  al.,  2017;  Irdawati  et  al.,  2018).  Sementara  itu, laporan  mengenai  bakteri  termofilik  non-vulkanik  di  Bangka  Belitung  masih sangat  sedikit.  Penelitian  sejenis  sangat  dibutuhkan  untuk  menggali  lebih  dalam lagi  potensi  bakteri  termofilik  asal  sumber  air  panas  non-vulkanik.  Hal  ini dikarenakan  bakteri  termofilik  merupakan  sumber  daya  alami  potensial  yang dapat  digali  potensi  dan  kemanfaatannya  untuk  berbagai  keperluan  terutama dalam  produksi  enzim  dan  senyawa  lainnya  yang  memiliki  karakteristik  tahan terhadap panas atau suhu tinggi, sehingga sesuai untuk keperluan industri.

## SIMPULAN
Isolat  bakteri  termofilik  yang  diperoleh  pada  penelitian  ini  merupakan bakteri  Gram  negatif  yang  memiliki  karateristik  tahan  terhadap  perlakuan  suhu tinggi.  Isolat  bakteri  termofilik  merupakan  sumber  daya  hayati  potensial  yang dapat  dimanfaatkan  untuk  berbagai  keperluan  misalnya  untuk  keperluan  enzim tahan panas bagi keperluan industri.

## DAFTAR PUSTAKA
Alrumman,  S.,  Mostafa,  Y.  S.  M.,  Al-Qahtani,  S.,  &  Taha,  T.  H.  T.  (2018). Hydrolytic  Enzyme  Production  by  Thermophilic  Bacteria  Isolated  from Saudi Hot Springs. Open Life Sciences , 13 (1), 470–480. https://doi.org/10.1515/biol-2018-0056
Ardhi,  A.,  Sidauruk,  A.  N.,  Suraya,  N.,  Pratiwi,  N.  W.,  Pato,  U.,  &  Saryono.
(2020).  Molecular  Identification  of  Amylase-Producing  Thermophilic Bacteria Isolated from Bukit Gadang Hot Spring, West Sumatra, Indonesia. Biodiversitas , 21 (3), 994–1000. https://doi.org/10.13057/biodiv/d210319
Arora-Williams, K., Olesen, S. W., Scandella, B. P., Delwiche, K., Spencer, S. J., Myers, E. M., Abraham, S., Sooklal, A., & Preheim, S. P. (2018). Dynamics of  Microbial  Populations  Mediating  Biogeochemical  Cycling  in  a Freshwater  Lake. Microbiome , 6 (1),  1–16.  https://doi.org/10.1186/s40168- 018-0556-7
Arzita, A., Syamsuardi, S., Agustien, A., & Rilda, Y. (2017). The Diversity of the Alkaline  Protease  Producers,  Thermophilic  Obligate Bacillus spp.,  from Sungai Tutung Hot Spring, Kerinci, Jambi, Indonesia. Journal of Pure and Applied Microbiology , 11 (4), 1789–1797.
https://doi.org/10.22207/JPAM.11.4.18
Attri,  P.,  Han,  J.,  Choi,  S.,  Choi,  E.  H.,  Bogaerts,  A.,  &  Lee,  W.  (2018).  CAP Modifies  the  Structure  of  a  Model  Protein  from  Thermophilic  Bacteria: Mechanisms  of  Cap-Mediated  Inactivation. Scientific  Reports , 8 (1),  1–10. https://doi.org/10.1038/s41598-018-28600-w
El-Gayar, K. E., Al Abboud, M. A., & Essa, A. M. M. (2017). Characterization of
Thermophilic  Bacteria  Isolated  From  Two  Hot  Springs  in  Jazan,  Saudi Arabia. Journal  of  Pure  and  Applied  Microbiology , 11 (2),  743–752. https://doi.org/10.22207/JPAM.11.2.13
Febiyanto,  F.  (2020).  Effects  of  Temperature  and  Aeration  on  the  Dissolved Oxygen  (DO)  Values  in  Freshwater  Using  Simple  Water  Bath  Reactor:  A
Brief Report. Walisongo Journal of Chemistry , 3 (1), 25-30.
https://doi.org/10.21580/wjc.v3i1.6108
Hamuna, B., Tanjung, R. H. R., Suwito, S., Maury, H. K., & Alianto, A. (2018).
Kajian  Kualitas  Air  Laut  dan  Indeks  Pencemaran  Berdasarkan  Parameter Fisika-Kimia  di  Perairan  Distrik  Depapre,  Jayapura. Jurnal  Ilmu Lingkungan , 16 (1), 35-43. https://doi.org/10.14710/jil.16.1.35-43
Irdawati,  I.,  Syamsuardi,  S.,  Agustien,  A.,  &  Rilda,  Y.  (2018).  Screening  of Thermophilic  Bacteria  Produce  Xylanase  from  Sapan  Sungai  Aro  Hot Spring  South  Solok. IOP  Conference  Series:  Materials  Science  and Engineering , 335 (1), 1-12. https://doi.org/10.1088/1757- 899X/335/1/012021 Lischer,  K.,  Putra,  A.  B.  R.  D.,  Guslianto,  B.  W.,  Avilla,  F.,  Sitorus,  S.  G., Nugraha,  Y.,  &  Sarmoko.  (2020).  Short  Communication:  The  Emergence and  Rise  of  Indigenous  Thermophilic  Bacteria  Exploration  from  Hot Springs in Indonesia. Biodiversitas , 21 (11), 5474–5481. https://doi.org/10.13057/biodiv/d211156 Oberbeckmann,  S.,  Kreikemeyer,  B.,  &  Labrenz,  M.  (2018).  Environmental Factors  Support  The  Formation  of  Specific  Bacterial  Assemblages  on Microplastics. Frontiers in microbiology , 8 , 1–12.
https://doi.org/10.3389/fmicb.2017.02709
Ovando-Chacon,  S.  L.,  Tacias-Pascacio,  V.  G.,  Ovando-Chacon,  G.  E.,  Rosales- Quintero,  A.,  Rodriguez-Leon,  A.,  Ruiz-Valdiviezo,  V.  M.,  &  Servin- Martinez,  A.  (2020).  Characterization  of  Thermophilic  Microorganisms  in The  Geothermal  Water  Flow  of  El  Chichón  Volcano  Crater  Lake. Water (Switzerland) , 12 (8), 1-16. https://doi.org/10.3390/W12082172
Rantuboi, D. Y. P., Gunaedi, T., Simonapendi, M., & Pakpahan, N. (2018). Isolasi dan Identifikasi Bakteri Termofilik dari Sumber Air  Panas di Moso Distrik Muara  Tami  Kota  Jayapura  Provinsi  Papua. J  Biol  Papua , 10 (2),  68–73. https://ejournal.uncen.ac.id/index.php/JBP/index
Sang,  P.,  Liu,  S.  Q.,  &  Yang,  L.  Q.  (2020).  New  Insight  into  Mechanisms  of Protein  Adaptation  to  High  Temperatures:  A  Comparative  Molecular Dynamics  Simulation  Study  of  Thermophilic  and  Mesophilic  Subtilisin- Like  Serine  Proteases. International  Journal  of  Molecular  Sciences , 21 (9), 1-12. https://doi.org/10.3390/ijms21093128
Villanueva,  L., von Meijenfeldt, F. A.  B., Westbye,  A. B., Yadav, S., Hopmans, E.  C.,  Dutilh,  B.  E.,  &  Damsté,  J.  S.  S.  (2021).  Bridging  the  Membrane Lipid Divide:  Bacteria of  the  FCB  Group Superphylum Have the Potential to  Synthesize  Archaeal  Ether  Lipids. ISME  Journal , 15 (1),  168–182. https://doi.org/10.1038/s41396-020-00772-2
Widyaningrum,  Y.,  &  Kurniawan,  W.  B.  (2019).  Karakteristik  Batuan  Penyusun Sumber Mata Air Panas Desa Nyelanding Kecamatan Air Gegas Kabupaten Bangka  Selatan  (Sebuah  Rangkuman). Seminar  Nasional  Penelitian  dan Pengabdian pada Masyarakat , 2–5.
https://journal.ubb.ac.id/index.php/snppm/article/view/1362 Wu, Z., Liu, Q., Li, Z., Cheng, W., Sun, J., Guo, Z., Li, Y., Zhou, J., Meng, D., Li, H., Lei, P., & Yin, H. (2018). Environmental Factors Shaping the Diversity of  Bacterial  Communities  that  Promote  Rice  Production. BMC
Microbiology , 18 (1), 1–11. https://doi.org/10.1186/s12866-018-1174-z
Xia, Y. L., Sun, J. H., Ai, S. M., Li, Y., Du, X., Sang, P., Yang, L. Q., Fu, Y. X., & Liu, S. Q. (2018). Insights into the Role of Electrostatics in Temperature Adaptation:  A  Comparative  Study  of  Psychrophilic,  Mesophilic,  and Thermophilic  Subtilisin-Like  Serine  Proteases. RSC  Advances , 8 (52), 29698–29713. https://doi.org/10.1039/c8ra05845h
York, A. (2018). Environmental Microbiology: Marine Biogeochemical Cycles in a  Changing  World. Nature  Reviews  Microbiology , 16 (5),  259. https://doi.org/10.1038/nrmicro.2018.40