Potensi Madu Kaliandra ( Calliandra sp .) Terhadap Jumlah Sel
Sertoli Tikus Putih Malnutrisi
The Potential of Kaliandra Honey (Calliandra sp.) on Sertoli Cell Counts in Malnourished Albino Rats
Made Bagus Erlangga 1 *, Pudji Srianto 2 , Erma Safitri 2 , Rimayanti 2 , Tatik Hernawati 2 , Herry Agoes Hermadi 2
1 Magister Biologi Reproduksi, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Airlangga, 2 Departemen Reproduksi Veteriner, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Airlangga, Kampus C Mulyorejo, Surabaya, Jawa Timur, Indonesia, 60115.
* Corresponding author : madebagus94@gmail.com

## Abstrak
Penelitian  ini  dilakukan  untuk  menginvestigasi  pengaruh  madu  kaliandra  ( Calliandra  sp .)  terhadap jumlah sel sertoli pada tikus  putih jantan  yang  mengalami  malnutrisi. Sebanyak 24 ekor tikus jantan dibagi menjadi empat kelompok, yakni (K) tanpa perlakuan, (P0) dipuasakan, (P1 dan P2) masing-masing dipuasakan dan  diberikan  madu  konsentrasi  30%  dan  50%  selama  10  hari  setelah  puasa.  Hasil  penelitian  menunjukkan pemberian  madu  kaliandra  dengan  konsentrasi  30%  dan  50%  dapat  meningkatkan  jumlah  sel  sertoli  secara signifikan. Dapat disimpulkan pemberian madu kaliandra dapat memberikan pengaruh positif pada tikus jantan yang mengalami malnutrisi khususnya peningkatan jumlah sel sertoli.
Kata kunci: madu kaliandra, Calliandra sp ., tikus putih, sel sertoli

## Abstract
This study was performed to investigate the effect of calliandra honey (Calliandra sp.) on the number of sertoli cells in malnourished male albino rats. A total of 24 male rats were divided into four groups, i.e. (K) without treatment, (P0) fasted, (P1 and P2) respectively fasted and administered honey concentrations of 30% and  50%  for  10  days  after  fasting.  The  results  showed  that  administration  calliandra  honey  with  a concentration of 30% and 50% significantly increased the number of sertoli cells. It can be concluded that administration calliandra honey can have a positive effect on malnourished male rats, especially in improving the number of sertoli cells.
Keywords: calliandra honey, Calliandra sp., albino rat, sertoli cells
Received: 4 February 2022
Revised: 30 November 2022 Accepted: 20 January 2023

## PENDAHULUAN
Malnutrisi merupakan salah satu permasalahan yang terjadi secara global. Menurut UNICEF (2020), 1 dari 9 orang masih mengalami kelaparan  atau  malnutrisi.  Dari  21,3%  atau  144 juta  anak  di  bawah  usia  5  tahun  mengalami hambatan  pertumbuhan  tinggi  badan  dan  6,9% atau  47  juta  mengalami  kekurusan.  Malnutrisi masih  sering  ditemui  di  berbagai  negara khususnya  negara  di  benua  Asia  dan  Afrika. Menurut UNICEF (2019), Jumlah terbesar kasus malnutrisi  terjadi  di  Asia  dengan  kasus  terbesar
terjadi di Asia selatan. Dari 90% kasus hambatan pertumbuhan tinggi badan, lebih dari 90% kasus kekurusan  terjadi  di  negara-negara  Asia  dan Afrika.  Menurut  UNICEF  (2020),  pengaruh malnutrisi  khususnya  berat  badan  di  bawah normal masih menjadi permasalahan berlanjut di negara-negara  termiskin  dan  jumlah  kasusnya bisa mencapai 10 kali lebih tinggi dibandingkan negara makmur.
Defisiensi  nutrisi  makro  dan  mikro  akibat malnutrisi  dapat  menginduksi  respon  stres  yang merupakan  bagian  dari  mekanisme  pertahanan tubuh  (Gayan et  al .,  2021).  Respon  stres  dapat
mengakibatkan berbagai perubahan salah satunya yaitu  apoptosis.  Apoptosis  menggambarkan kematian  sel  yang  terjadi  secara  teregulasi. Menurut  Yao et  al .,  (2001)  karakteristik  utama apoptosis ditunjukkan melalui kerja protease dan nuklease serta disfungsi mitokondria di dalam sel dengan  membran  plasma  utuh.  Apoptosis  juga ditunjukkan  melalui  ciri lain  seperti  fragmentasi DNA,  tonjolan  pada  membran,  penyusutan ukuran sel, dan dekomposisi komponen seluler.
Kematian sel akibat kondisi malnutrisi dapat mempengaruhi  berbagai  komponen  seluler salah satunya yaitu sel sertoli. Sel sertoli merupakan sel pendukung utama dalam proses spermatogenesis. Sel  sertoli  juga  memiliki  kontribusi  untuk pembentukan blood-testis  barrier .  Kerusakan pada  sel  sertoli  bisa  berujung  pada  gangguan reproduksi pejantan. Menurut Yang et al ., (2015) sebagai satu-satunya sel somatik di jaringan epitel seminiferus,  sel  sertoli  memiliki  fungsi  penting sebagai penjaga keseimbangan aktivitas seluler di organ  testis,  sehingga  kematian  sel  sertoli  dapat mengganggu perkembangan sel sperma di dalam tubulus  seminiferus.  Kematian  sel  akibat malnutrisi dapat dikurangi melalui perbaikan pola makan  dan  pemberian  suplemen.  Terdapat berbagai  bahan  makanan  yang  memiliki  potensi sebagai suplemen untuk kondisi malnutrisi, salah satunya yaitu madu.
Madu  merupakan  bahan  manis  alami  yang diproduksi  oleh  lebah  madu.  Bahan  dasar  madu dapat berasal dari nektar bunga, sekresi tanaman, maupun hasil ekskresi serangga lain (Alimentarius,  2019).  Madu  memiliki  berbagai macam fungsi mulai dari sumber makanan, terapi kesehatan,  komponen  ritual,  hingga  keperluan keagamaan  (Santos-Buelga et  al .,  2017). Berdasarkan komposisinya, madu sebagian besar terdiri  atas  gula  dan  air.  Madu  juga  memiliki komponen  lain  yang  diantaranya  terdiri  atas mineral,  vitamin,  asam  amino,  asam  organik, flavonoid,  senyawa  fenolik,  dan  senyawa aromatik  (Solayman et  al .,  2016).  Komposisi madu  dapat  memiliki  variasi  berdasarkan  dari lokasi  geografis  dan  tanaman  yang  tumbuh  di sekitar sarang lebah.
Salah satu jenis madu yang sering ditemui di negara Indonesia yaitu madu Kaliandra
( Calliandra  sp .).  Secara  organoleptik  madu kaliandra  memiliki  warna kuning,  aroma  wangi, dan rasa manis tanpa disertai rasa pahit. Menurut penelitian  Ustadi et  al .  (2017)  madu  kaliandra mengandung 557,93 mg GAE/100 g asam fenolat, 156,27  mg  QE/100  g  flavonoid,  dan  aktivitas antioksidan  sebesar  3,36  IC50  mg/ml.  Menurut Chayati  (2008),  madu  kaliandra  memiliki  kadar fenol 441,3 mg/100 ml, dan kandungan gula yang terbagi  atas  maltosa  6,71  mg/100  ml,  glukosa 18,50 mg/100 ml, dan fruktosa 28,28 mg/100 ml. Menurut  safitri et  al .  (2016)  pemberian  madu dapat  meningkatkan  mobilisasi  stem  cell  yang dapat terdiferensiasi dan memperbaiki komponen jaringan  testis  seperti  tubulus  seminiferus,  sel leydig, dan sel sertoli. Berdasarkan karakteristik di  atas  perlu  diteliti  lebih  lanjut  manfaat  madu kaliandra  pada  jumlah  sel  sertoli  saat  kondisi malnutrisi.

## METODE PENELITIAN

## Desain Penelitian
Penelitian  telah  diterima  secara  etik penggunaan hewan coba penelitian No.141/KE/2021  dari  Fakultas  Kedokteran Hewan,  Universitas  Airlangga.  Penelitian  ini merupakan jenis penelitian eksperimental laboratoris. Rancangan penelitian yang digunakan adalah rancangan acak lengkap (RAL). Hewan coba untuk penelitian ini yaitu tikus putih jantan  dengan  usia  2-3  bulan  berat  badan  antara 250-300  gram.  Tikus  yang  dipilih  memiliki kondisi kesehatan yang baik dengan kriteria tanpa kecacatan dan terlihat aktif. Pemeliharaan hewan coba  dilaksanakan  di  kandang  hewan  coba, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Airlangga. Uji histologi dilaksanakan di Laboratorium  Patologi,  Fakultas  Kedokteran Hewan, Universitas Airlangga.

## Perlakuan dan Pengambilan Data
Sebanyak 24 Ekor tikus putih jantan dibagi secara acak ke dalam empat kelompok perlakuan. Tiap  kelompok  terdiri  dari  6  ekor  tikus  sebagai pengulangan  perlakuan.  Kelompok  kontrol  (K) terdiri  atas  tikus  jantan  tanpa  perlakuan. Kelompok  P0  terdiri  atas  tikus  jantan  yang
dipuasakan. Kelompok  P1  terdiri atas  kelompok tikus jantan yang dipuasakan dan diberikan madu dengan  konsentrasi  30%  selama  10  hari  setelah puasa. Kelompok P2 terdiri atas tikus jantan yang dipuasakan dan diberikan madu dengan konsentrasi  50%  selama  10  hari  setelah  puasa. Jaringan testis tikus digunakan dalam pembuatan preparat  histologi  untuk  pengamatan  jumlah  sel sertoli. Teknik pembuatan preparat dan pewarnaan  histologi  dilakukan  sesuai  dengan prosedur Laboratorium Patologi, Fakultas Kedokteran  Hewan,  Universitas  Airlangga. Pengambilan data dilakukan berdasarkan rata-rata jumlah sel sertoli pada tubulus seminiferus.

## Analisis Data
Data Jumlah sel sertoli dari hasil penelitian dicatat  menggunakan  program  Microsoft  Excel. Analisis  data  dilakukan  menggunakan  program SPSS  v25.  Analisis  statistik  menggunakan    uji ANOVA.  Hasil  analisis  kemudian  dilanjutkan dengan uji Tukey (p≤0,05).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  perhitungan  jumlah  sel  sertoli menunjukkan  perbedaan  signifikan  dari  antara kelompok  K  dan  P0.  Perhitungan  jumlah  sel sertoli  pada  kelompok  tikus  yang  dipuasakan tanpa  pemberian  madu  kaliandra  (P0)  memiliki nilai lebih rendah secara signifikan dibandingkan dengan  kelompok  tikus  tanpa  perlakuan  (K) (Tabel  1).  Hal  ini  menunjukkan  puasa  selama  5 hari  dapat  menginduksi  kematian  sel  Sertoli akibat  malnutrisi.  Hasil  penelitian  juga  terlihat perbedaan  signifikan  perhitungan  jumlah  sel sertoli kelompok P0 dibandingkan dengan P1 dan P2.  kelompok  tikus  yang  dipuasakan  tanpa pemberian  madu  kaliandra  (P0)  memiliki  nilai lebih  rendah  secara  signifikan  dibandingkan dengan  kelompok  tikus  yang  dipuasakan  dan pemberian madu kaliandra P1 dan P2. Jumlah sel sertoli yang lebih tinggi secara signifikan pada P1 dan P2 menunjukkan pemberian madu kaliandra dapat meningkatkan jumlah sel sertoli pada tikus putih  jantan  dengan  kondisi  malnutrisi.  P2 memiliki  nilai  yang  lebih  tinggi  dibandingkan dengan  P1  (Tabel  1).  Hal  ini  menandakan
terjadinya  peningkatan  jumlah  sel  sertoli  seiring dengan peningkatan konsentrasi madu.
Tabel 1. Jumlah sel sertoli tikus putih pada setiap perlakuan Perlakuan Rata-rata ± Standard deviasi K 11,33 a ±1,86 P0 6,67 b ±3,33 P1 12,33 a ±3,14 P2 13,00 a ±2,61
a,b Superskrip berbeda pada kolom yang sama menunjukkan adanya perbedaan nyata (p<0,05).
Jumlah Sel sertoli pada P0 yang lebih rendah dibandingkan  K  menandakan  adanya  kematian sel. Menurut Rivadeneira et al . (2001) malnutrisi telah  terbukti  mengurangi  ekspresi  keluarga protein Bcl-2. Protein ini memiliki aktivitas anti apoptosis,  sehingga  pengurangan  ekspresi  dapat meningkatkan  jumlah  kejadian  apoptosis.  Hasil serupa juga ditemukan oleh Kasapoğlu dan Cinel (2019)  dimana  malnutrisi  yang  terjadi  secara kronis  pada  hewan  coba  ditunjukkan  dapat mengakibatkan  apoptosis  pada  sel  timus  dan  sel limpa.
Menurut  Fang et  al .  (2017)  kematian  sel pada kondisi malnutrisi dapat merupakan bagian dari proses autofagi. Autofagi merupakan proses degradasi  dan  daur  ulang  sel  untuk  memenuhi kebutuhan  nutrisi.  Nutrisi  yang  di  dapat  dari proses autofagi digunakan dalam mempertahankan fungsi metabolisme dan kemampuan bertahan hidup selama dalam kondisi malnutrisi.  Hal  ini  didukung  oleh  Nobis et  al . (2018) yang menyatakan bahwa malnutrisi dapat menurunkan  regulasi  jalur  rapamycin  (mTOR) yang  berujung  pada  penghambatan  sintesis protein  dan  pengaktifan  proses  autofagi.  Proses autofagi dapat mengakibatkan penurunan jumlah pada  berbagai  tipe  sel  salah  satunya  yaitu  sel sertoli.
Terjadi  peningkatan  jumlah  sel  sertoli  pada P1 dan P2 dibandingkan dengan P0 menandakan pemberian madu dapat meningkatkan jumlah sel sertoli.  Menurut  safitri et  al .  (2016)  madu  dapat memicu jalur sinyal Vascular Endothelial Growth Factor-1 (VEGF-1) untuk mengaktifkan Stem cell factor (SCF)  yang  bekerja  dalam  proses
proliferasi dan diferensiasi stem cell. Hal serupa juga  didukung  oleh  penelitian  Mohamad et  al . (2018)  dimana  bahan  aktif  dalam  madu  seperti flavonoid, asam caffeic, asam dihidroksi benzoat, asam  cinnamic,  dan  asam  ferulat  dapat mengakibatkan  proliferasi dental  pulp  stem  cell (DPSC). Sedangkan menurut Al-Jadi et al . (2014) kandungan gula di dalam madu dapat meningkatkan proliferasi kultur sel fibroblas saat 6 jam.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  dari  hasil  penelitian  dapat disimpulkan  bahwa  pemberian  madu  kaliandra dengan  konsentrasi  30%  dan  50%  dapat  secara signifikan  meningkatkan  jumlah  sel  sertoli  pada tikus  putih  jantan  yang  mengalami  malnutrisi. Hasil  terbaik  didapatkan  pada  pemberian  madu dengan konsentrasi 50% (P2).

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  peneliti  sampaikan kepada  tim  riset  reproduksi  yang  telah meluangkan  waktu  dan  memberikan  dukungan dalam penelitian dan penulisan karya ilmiah ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Alimentarius, codex. (2019). Standrad for honey.
In Standard for honey (4th ed., Vol. 1, pp. 1– 8).  Food  And  Agriculture  Organization  Of The United Nations.
Al-Jadi, A. M., Enchang, F. K., & Yusoff, K. M.
(2014).  The  effect  of  Malaysian  honey  and its major components on the proliferation of cultured  fibroblasts. Turkish  Journal  of Medical Sciences , 44(5), 733–740.
Bogdanov, S., Lüllmann, C., Martin, P., Ohe, W., Russmann,  H.,  Vorwohl,  G.,  Oddo,  L., Sabatini,  A.-G.,  Marcazzan,  G.,  Piro,  R., Flamini,  C.,  Morlot,  M.,  Lhéritier,  J., Borneck,  R.,  Marioleas,  P.,  Tsigouri,  A., Kerkvliet, J., Ortiz, A., Ivanov, T., & Vit, P. (2015).  Honey  quality  and  international
regulatory  standards:  Review  by  the International  Honey  Commission. Bee World , 80, 61–69.
Chayati,  I.  (2008).  Sifat  fisikokimia  madu monoflora dari daerah istimewa Yogyakarta dan Jawa Tengah. Agritech , 28(1), 9–14.
Fang, C., Gu, L., Smerin, D., Mao, S., & Xiong,
X. (2017). The interrelation between reactive oxygen species and autophagy in neurological  disorders. Oxidative  Medicine
and Cellular Longevity , 1(1), 1–17.
Gayan, S., Teli, A., Nair, A., Tomar, G., & Dey,
T.  (2021).  Macro-and  micro-nutrient–based multiplex stress conditions modulate in vitro tumorigenesis  and  aggressive  behavior  of breast  cancer  spheroids. In  Vitro  Models , 1(1), 1–17.
Kasapoğlu,  U.  S.,  &  Cinel,  I.  (2019).
Malnutrition,  apoptosis,  and  autophagy triangle  in  critically  ill  patients. Clinical Science Nutrition , 1(2), 61–66.
Mohamad, M. A. M., Mazlan, M. A., Ibrahim, M., Yusof, A. M., Shamsuddin, S. A. A., Hassan, N.  F.  N.,  Muhammad,  H.,  &  Isa,  M.  L.  M. (2018).  The  effect  of  Malaysian  stingless bee,  Trigona  spp.  Honey  in  promoting proliferation  of  the  undifferentiated  stem cell. Asia Pacific Journal Molecular Biology Biotechnology , 27(1), 10–19.
Nobis, S., Achamrah, N., Goichon, A., L’Huillier, C., Morin, A., Guérin, C., Chan, P., do Rego, J. L., do Rego, J. C., Vaudry, D., Déchelotte, P.,  Belmonte,  L.,  &  Coëffier,  M.  (2018). Colonic Mucosal Proteome Signature Reveals  Reduced  Energy  Metabolism  and Protein  Synthesis  but  Activated  Autophagy during  Anorexia-Induced  Malnutrition  in Mice. Proteomics , 18(15), 1–41.
Rivadeneira, D. E., Grobmyer, S. R., Naama, H.
A., Mackrell, P. J., Mestre, J. R., Stapleton, P.  P.,  &  Daly,  J.  M.  (2001).  Malnutrition-
induced  macrophage  apoptosis. Surgery , 129(5), 617–625.
Safitri, E., Utama, S., Widiyatno, T. V., Sandhika, W.,  &  Prasetyo,  R.  H.  (2016).  Auto- regeneration  of  mice  testicle  seminiferous tubules  due  to  malnutrition  based  on  stem cells mobilization using honey. Asian Pacific Journal of Reproduction , 5(1), 31–35.
Santos-Buelga,  C.,  &  González-Paramás,  A.  M. (2017).  Chemical  composition  of  honey.  In Bee  Products-Chemical  and  Biological Properties. Springer. pp: 43–82.
Solayman,  M.,  Islam,  M.  A.,  Paul,  S.,  Ali,  Y., Khalil, M. I., Alam, N., & Gan, S. H. (2016). Physicochemical  properties,  minerals,  trace elements,  and  heavy  metals  in  honey  of different  origins:  A  comprehensive  review. Comprehensive  Reviews  in  Food  Science and Food Safety , 15(1), 219–233.
UNICEF. (2019). World hunger is still not going down  after  three  years  and  obesity  is  still
growing – UN report. A.
https://www.who.int/news/item/15-07- 2019-world-hunger-is-still-not-going-down- after-three-years-and-obesity-is-still- growing-un-report .
UNICEF.  (2020).  Celebrating  World  Food  Day
with innovation to combat child malnutrition. A. https://www.unicef.org/supply/stories/celeb rating-world-food-day-innovation-combat-
child-malnutrition .
Ustadi,  U.,  Radiati,  L.,  &  Thohari,  I.  (2017).
Bioactive  Components  of  Rubber  Tree Honey  ( Hevea  Brasiliensis )  and  Calliandra ( Calliandra Callothyrsus ) and Kapok Honey ( Ceiba  Pentandra ). Jurnal  Ilmu  Dan Teknologi Hasil Ternak , 12(1), 97–102.
Yang,  Y.,  Huang,  H.,  Ba,  Y.,  Cheng,  X.  M.,  & Cui, L. X. (2015). Effect of oxidative stress on  fluoride-induced  apoptosis  in  primary cultured  Sertoli  cells  of  rats. International Journal of Environmental Health Research ,
25(1), 1–9.
***