PENGARUH EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK ( Annona muricata L.) TERHADAP SUHU TUBUH PADA MENCIT ( Mus musculus) JANTAN YANG DIINFEKSI BAKTERI Salmonella typhi
THE EFFECT OF ETHANOL EXTRACT OF SOURSOP LEAVES (ANNONA MURICATA L.) ON BODY TEMPERATURE IN MALE MICE (MUS MUSCULUS) INFECTED WITH BACTERIA SALMONELLA

## TYPHI
AMINAH SYARIFUDDIN 1 , CUCU ARUM DWI CAHYA 2 , AMELYA CHYNTIA BR SIHOMBING 3
INSTITUT KESEHATAN MEDISTRA LUBUK PAKAM Jl. Sudirman No.38, Petapahan, Kec. Lubuk Pakam, Kab. Deli Serdang, Sumatera Utara *email : syarifuddinami6@gmail.com DOI: 10.35451/jfm.v6i1.1929

## Abstrak
Daun  sirsak (Annona  muricata  L.) merupakan  tanaman  yang  punya banyak manfaat bagi kesehatan yang dapat diperoleh dari buah, daun, dan biji. Daun sirsak mengandung saponin, flavonoid, tanin dan alkaloid yang  dapat  berperan  sebagai  antiseptik-disinfektan  maupun  sebagai antibakteri. Senyawa flavonoid dapat dimanfaatkan sebagai obat luka, antijamur,  antimikroba,  antikanker,  dan  antivirus.  Di  masyarakat, pemanfaatannya  dilakukan  dengan  cara  merebus  daunnya  lalu meminum  air  rebusannya.  Riset  ini  bertujuan  untuk  menentukan efektivitas  ekstrak  etanol  daun  sirsak  sebagai  antibakteri  terhadap Salmonella typhi sehingga demam dapat diturunkan. Dosisnya antara lain 100; 150; 200; 250 mg/kg BB. Tablet kloramfenikol sebagai kontrol positif.  Suhu  tubuh  tertinggi  mencit  sebelum  diberi  perlakuan  berada pada suhu 37,6 o C, sementara  yang terendah pada suhu 36,8 o C. Setelah diberikan perlakuan, suhu tertinggi diperoleh adalah 42,2 o C. Sedangkan kenaikan suhu terendah yaitu suhu 40,2 o C. Berdasarkan analisis data menunjukkan bahwa ada perbedaan signifikan pada suhu tubuh setelah di  uji  pada  uji  t-test  dengan  nilai  0,000  <  0,05.  Hasil  tersebut membuktikan bahwa suhu tubuh yang pada awalnya normal pada tahap aklimatisasi  mengalami  peningkatan  suhu  tubuh  saat  terinfeksi Salmonella typhi . Hasil uji One-Way ANOVA juga menunjukkan adanya pengaruh terhadap penurunan suhu tubuh yang terinfeksi Salmonella typhi.  Dari  beberapa  dosis,  dosis  EDDS  100  mg/kg  BB  telah  mampu menurunkan suhu tubuh rata-rata 36,5°C.
Kata Kunci: Antibakteri; Salmonella typhi ; Demam tifoid; Daun Sirsak Abstract
Soursop leaves (Annona muricata L .) are a plant that has many health benefits that can be obtained from the fruit, leaves, and seeds. Soursop leaves contain saponins, flavonoids, tannins, and alkaloids which can act as an antiseptic-disinfectant or as an antibacterial. Flavonoid compounds can be used as wound medicine, antifungal, antimicrobial, anticancer, and antiviral. In society, it is used by boiling the leaves and then drinking the boiled water. This research aims to determine the effectiveness of soursop leaf ethanol extract as an antibacterial against Salmonella typhi so that fever can be reduced. Doses include 100; 150; 200; and 250 mg/kg  BW.  No  treatment  was  given  as  a  negative  control  and chloramphenicol  tablets  as  a  positive  control.  The  highest  body temperature of mice before treatment was 37.6 o C, while the lowest was 36.8 o C. After being given treatment, the highest temperature obtained was  42.2 o C.  Meanwhile,  the  lowest  temperature  increase  was  40.2 o C. Based on data analysis, it shows that there is a significant difference in body  temperature  after  being  tested  using  the  t-test  with  a  value  of 0.000  <  0.05.  These  results  prove  that  body  temperature  which  was initially normal during the acclimatization stage experienced an increase in body temperature when infected with Salmonella typhi. The results of the  One-Way  ANOVA  test  also  showed  an  effect  on  reducing  body temperature  infected  with  Salmonella  typhi.  From  several  doses,  the EDDS dose of 100 mg/kg BW was able to reduce body temperature by an average of 36.5°C.
Keywords: Antibacterial; Salmonella  typhi; typhoid  fever;  soursop leaves (Annona muricata L.)
1.  PENDAHULUAN
masuk dan berkembang biaknya  suatu  mikroorganisme. Organisme  berukuran  mikroskopik terdiri  dari  mono  atau  poli  sel seperti bakteri,  fungi, parasit  serta virus (Novard et al , 2019). World Health Organization (WHO)  memprediksi bahwa jumlah kematian  karena  demam  tifoid mencapai 600.000 atau 70% terjadi di  Asia.  Jumlah  penderita  demam tifoid  di  Indonesia  berkisar  81%. Demam  tifoid  berada  pada  posisi ke-3 dari 10 penyakit terbanyak di rumah  sakit.  Jika  diperiksa  maka hanya  ditemukan  suhu  tubuh  naik saja.  S almonella  typhi merupakan penyakit  infeksi  sistemik  dengan
durasi demam yang panjang (Nisa,
2019).
Demam tifoid merupakan penyakit  endemik  yang  banyak muncul  di  negara  berkembang karena  adanya  bakteri Salmonella typhi . Infeksi Salmonella sering terjadi melalui oral akibat konsumsi makanan
atau air
yang terkontaminasi (Risa et al , 2019). Besarnya  jumlah  morbiditas dan mortalitas akibat demam tifoid menyebabkan  banyak    pihak  yang berusaha dalam menemukan solusi yaitu  modalitas  baru  antibiotik. Solusinya  adalah  obat-obat  herbal tradisional  yang  dikembangkan sebagai  antibiotik  di  masa  depan
(PN, P., & Hendrayana, 2020). Pengobatan demam tifoid dapat ditangani melalui pemberian antibiotik. Antibiotik dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri yang  umumnya  dipiakai  antibiotic
amoksilin,
Chloramphenicol,
ciprofloxacin, dan trimetoprin (Paul,
2017). Masa kini, masyarakat lebih mudah dalam mengakses antibiotik untuk digunakan, sementara penggunaan antibiotik tanpa aturan dokter dapat mengakibatkan pengguna resisten terhadap antibiotik. Resistensi antibiotik akan membuat  penyakit  sulit  untuk sembuh (Warbung, 2013).
Dalam  usaha  untuk  menekan penggunaan
antibiotik, maka dicarilah  alternatif  yaitu  tumbuhan obat  yang  dapat  berperan  sebagai antibiotik alami. Masyarakat cenderung suka untuk
mengkonsumsi  obat  tradisional karena  harga  terjangkau,  mudah diperoleh, efek samping rendah dan lebih aman (Utami, 2013).
Daun  sirsak  ( Annona  muriata L.) berasal  dari  daratan  Amerika Selatan,  didaerah  amazon  Brazil pada awalnya. Daun sirsak biasanya mengandung  senyawa  alkaloid, flavonoid,  tanin,  saponin,  dan steroid.  Senyawa  flavonoid  dan fenolik  dari  daun  sirsak  diketahui memiliki
bioaktivitas
sebagai antibiotik  (C 6 H 5 OH)  (Gawa  dkk, 2020).  Selain  itu  dapat  juga berperan  sebagai  antioksidan  dan antikanker (Putri et al , 2022).
Penelitian yang telah dilakukan oleh  Ana  Khoirun  Nisa  dan  Zainul Arifin  menyatakan  bahwa  daun sirsak ( Annona muricata L.) dengan konsentrasi 100% dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri Salmonella  typhi akibat  adanya senyawa aktif. Berdasarkan
paparang  di  atas,  peneliti  merasa perlu untuk
melakukan uji
efektivitas  daun  sirsak  terhadap bakteri Salmonella  typhi sebagai penyebab penyakit demam tifoid.

## 2. METODE PENELITIAN Rancangan Penelitian
Penelitian  ini  merupakan  jenis penelitian eksperimental laboratorik dengan rancangan
penelitian post  test  only  control group  design. Dimana  alat  yang digunakan  antara  lain  autoklaf, blender,  cawan  petri,  erlenmeyer, gelas  kimia,  jarum  ose,  labu ekstraksi,  inkubator,  termometer digital,  tabung  reaksi,  penangas air, rotary  evaporator,    dan timbangan  analitik.  Sementara bahan  penelitian  yaitu  ekstrak etanol  daun  sirsak,  suspensi  Na- CMC 0,5% dan etanol 96%.

## Prosedur Kerja Preparasi Sampel
Sampel  diambil  dari  tanaman sirsak  di  Jl.  Galang  Lubuk  Pakam. Sampel  daun  sirsak  dibersihkan dengan  air  bersih.  Kemudian dipotong-potong  dan  keringkan selama  3  hari.  Lalu  dihaluskan dengan blender  sehingga diperoleh simplisia.

## Ekstraksi
Sampel  daun  sirsak  diekstrak menggunakan  metode  maserasi. Sebanyak 250 gram simplisia daun sirsak  dimaserasi  dalam  2500  mL alkohol  96%  selama  5  hari. Kemudian ditutup dengan aluminium foil tertutup rapat. Filtrat disaring dan disimpan dalam wadah tertutup  dan  residu  dimaserasi kembali  hingga  diperoleh  filtrat seluruhnya  dan  diuapkan  dengan rotary  evaporator dan  dilanjutkan
dalam  waterbath  hingga  diperoleh ekstrak  kental.  Ekstrak  ditimbang dan  disimpan  dalam  wadah  gelas tertutup sebelum  diuji.

## Sterilisasi Alat
Alat-alat  seperti  erlenmeyer, cawan
petri, tabung reaksi disterilkan  terlebih  dahulu.  Lalu dibungkus menggunakan aluminium foil, kemudian disterilkan  dalam  autoklaf  pada suhu 121°C selama 15 menit.

## Pembuatan Suspensi Bakteri
Bakteri dikembangbiakkan pada nutrient  agar selama  24  jam (Suhu  37°C).  Kemudian  bakteri dimasukkan ke dalam tabung reaksi berisi  5  mL  NaCl  fisiologi  0,9%. Suspensi diukur
kekeruhannya dengan larutan Mcfarland pada 1,5 x 10 8 CFU/mL (Kandou, 2016).

## Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sirsak
Ekstrak  daun  sirsak  dibuat dalam  beberapa  dosis,  yaitu  100; 150;  200;  dan  250  mg/kg  BB. Ekstrak  daun  sirsak  dengan  Na- CMC 0,5% dibuat menjadi suspensi dengan
menimbang Na-CMC sebanyak  50  mg  dan  diberi  air panas serta digerus hingga homogen.  Ekstrak  daun  sirsak dicukupkan dalam volume aquadest 10 ml. Pembanding atau kontrol positif adalah kloramfenikol dengan dosis  65  mg/kg  BB  yang  telah dikonversikan kepada mencit. Kloramfenikol digerus dengan menambahkan  larutan  Na-CMC 0,5%. Kemudian
dicukupkan volume dengan aquadest 10 ml. Pengujian Terhadap Hewan Uji Hewan terdiri atas 6 kelompok yang  tiap  kelompok  berisi  4  ekor
hewan  yang  sudah  diaklimatisasi dalam  14  hari.  Kelompok  1  bebas dari perlakuan apapun, sementara kelompok  2,  3,  4,  5  dan  6 diinfeksikan  0,2  ml  suspensi bakteri Salmonella  typhi secara oral. Pengobatan diberikan setelah 24  jam  terinfeksi  dan  hewan  uji puasa selama 8 jam.  kelompok 3; 4,  5;  6  masing-masing  diberikan dosis  100;  150;  200;  dan  250 mg/kg  BB  ekstrak  daun  sirsak. Pengamatan suhu tubuh hewan uji dilakukan setelah
pemberian pengobatan.

## Analisis Data
Analisis  data  menggunakan  uji t-test yang  bertujuan  untuk membandingkan suhu sebelum dan sesudah  induksi Salmonella  typhi . Uji
ANOVA
dilakukan untuk menganalisa data setelah diberikan ekstrak etanol daun sirsak.

## 3. HASIL PENELITIAN
Hasil pengukuran
suhu tubuh mencit sebelum dan setelah diinfeksi  bakteri Salmonella  typhi diukur  menggunakan  satuan  suhu derajat Celsius seperti yang ditampilkan pada tabel 1.
Tabel 1. Hasil Pengukuran Suhu Sebelum Dan Setelah Diinfeksi Bakteri Salmonella typhi Perlakuan Hasil Pengukuran Suhu Tubuh Sebelum ( o C) Setelah ( o C) K+ 36,8 40,9 K1 36,5 40,2 K2 36,7 40,9 K3 36,7 42,2 K4 37,6 41,8 (Purba IE et al, 2016. 99-108)
Suhu tubuh tertinggi mencit sebelum diberi perlakuan adalah pada
perlakuan  K4  yaitu  pada  suhu 37,6 o C,  sementara    yang  terendah pada  perlakuan  K1  yaitu  sebesar 36,8 o C. Setelah diberikan perlakuan, suhu  tertinggi  diperoleh  adalah
42,2 o C
pada
perlakuan K3.
Sedangkan kenaikan  suhu terendah pada    K1    yaitu  suhu  40,2 o C.  Hasil pengukuran  suhu  tubuh    setelah induksi  bakteri  dan  pemberian  obat ditampilkan pada tabel 2.

## Tabel 2. Hasil Pengukuran Suhu Tubuh Setelah Pemberian Pengobatan
Perlakuan Hasil Pengukuran Suhu Tubuh Setelah Induksi Bakteri  Setelah Pemberian Pengobatan H5 H6 H7 K+ 40,9 38,4 36,8 36,5 K1 40,2 37,4 36,5 35,8 K2 40,9 36,8 36,5 36,7 K3 42,2 36,9 36,3 36,7 K4 41,8 37,6 35,8 36,6 4. PEMBAHASAN Hasil  pengamatan  pada  kontrol negatif tanpa perlakuan menunjukkan  bahwa  tidak  terjadi peningkatan  suhu  tubuh  dari  hari pertama
hingga hari terakhir pengamatan.  Kontrol  negatif  tidak mengalami  perubahan  sama  sekali.
Sementara
kelompok
B yang diinfeksi  bakteri Salmonella  typhi dan  diberi  antibiotik  kloramfenikol mengalami  perubahan  suhu  tubuh menjadi  40,9°C . Namun  suhu kembali  normal  setelah  diberi antibiotik  pada  hari  ke-6  dan  ke-7. Pada  hari  ke-5  suhu  tubuh  mencit belum  kembali  normal.  Sehingga dapat dinyatakan bahwa pemberian antibiotik  berhasil  mengembalikan suhu tubuh pada mencit.
Kelompok C mengalami
peningkatan  suhu  tubuh  setelah  24 jam  diinfeksi  bakteri Salmonella typhi yaitu  40,2°C. Hewan  uji  coba mengalami  perubahan  penurunan suhu tubuh pada hari ke-5, ke-6 dan ke-7 yang menyebabkan terganggunya  proses  metabolisme dalam tubuh mencit sehingga terjadi penurunan suhu
tubuh atau mengalami demam.
Pada  kelompok  D  suhu  tubuh sebelum  diinduksi  bakteri  36,7°C dan setelah 24 jam terinfeksi bakteri suhu  tubuh  menjadi  40,9  °C. Pemberian  ekstrak  dosis  II  (150 mg/kg  BB)  terhadap  kelompok  D terjadi  perubahan  penurunan  suhu tubuh  pada  hari  ke-5  hingga  ke-7. Sehingga  dapat  dinyatakan  bahwa ekstrak  etanol  daun  sirsak  mampu memperbaiki  suhu  tubuh  mencit yang sudah terinfeksi bakteri Salmonella typhi.
Pada  kelompok  E  suhu  tubuh setelah  dinfeksi  bakteri  42,2°C. Pemberian  ekstrak  dosis  III  (200 mg/kg BB),  pada kelompok E terjadi perubahan  penurunan  suhu  tubuh pada hari ke-5 hingga ke-7.
Pada  kelompok  F  yaitu  suhu tubuh  sebelum  diinduksikan  bakteri 37,6  °C  dan  mengalami  kenaikan suhu  setelah  24  jam  terinfeksi dengan  suhu  41,8°C.  Pemberian ekstrak  dosis  IV  (250  mg/kg  BB) terjadi  perubahan  penurunan  suhu tubuh  37,6°C.  Pada  hari  ke-6  dan ke-7  terjadi  perubahan  penurunan suhu tubuh lagi. Dengan dosis IV ini dapat  menurunkan  suhu  tubuh tetapi sedikit dalam penurunannya.
Semakin  besar  dosis  maka efektivitasnya  pun  semakin  besar. Pemilihan  kloramfenikol  sebagai kontrol  positif  menunjukkan  ada efektifitas antibakteri. Kloramfenikol bekerja dengan menghambat sintesis protein bakteri dan menghambat enzim peptidil transferase.
Uji homogenitas varian memiliki nilai  0,161  yang  artinya  data homogen  sehingga  dapat  dilakukan uji ANOVA One-Way
dengan signifikansi  sebesar  0,789  yang artinya  5  kelompok  punya  rerata yang seimbang.

## 5. KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  daun  sirsak dapat  menurunkan  demam  tifoid pada  mencit  dengan  dosis  100; 150;  200;  dan  250  mg/kg  BB. Ekstrak  etanol  daun  sirsak  pada dosis  100  mg/kg  BB  mampu menurunkan  demam  pada  hewan coba  dengan  rata-rata  suhu  36,5 °C.

## DAFTAR PUSTAKA
Elisabeth  Purba,  I.  et  al.  (2016)
„Program Pengendalian Demam  Tifoid  di  Indonesia: Tantangan dan Peluang‟, Media Penelitian dan Pengembangan Kesehatan, 26(2). 40 doi: 10.22435/mpk.v26i2.5447.99 -108 Gawa, A., Une, S., & Maspeke, P. N. (2020). Uji Aktivitas Antimikroba  Ekstrak  Daun Sirsak Terhadap Sifat Mikrobiologi Telur Asin. Jambura  Journal  of  Food Technology , 2 (2), 13-22. Kandou,  L.A.,  Fatimawali.,  dan
Widdhi, B., (2016), Uji
Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Etanol  Rimpang  Lengkuas
Merah  (Alphina  purpurata (Vieill)  k.  Schum)  terhadap Bakteri Klebsiella pneumoniae Isolat Sputum Penderita Bronkitis  Secara  In  Vivo,  J. Ilmiah  Farmasi  FARMACON, 5,3, 131-137
Nisa,  A.  K.  (2019). Daya  Hambat Ekstrak  Daun  Sirsak  (Annona Muricata Linn) Terhadap Pertumbuhan Bakterisalmonella Typhi (Doctoral  dissertation,  Stikes Insan Cendekia Medika Jombang). Novard,  M.  F.  A.,  Suharti,  N.,  & Rasyid,  R.  (2019).  Gambaran bakteri penyebab infeksi pada anak berdasarkan jenis spesimen dan pola resistensinya  di  laboratorium RSUP  Dr.  M.  Djamil  Padang tahun 2014-2016.
Jurnal Kesehatan  Andalas , 8 (2S),
26-32.
Paul,  U.  K.  (2017).  Typhoid  Fever- Recent  Management. API- Medicine Updat, 64-7
PN,  P.,  &  Hendrayana,  M.  A. (2020).Efek  Ekstrak  Metanol Daun Sirsak (Annona muricata) Dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Salmonella  typhi  Secara  In Vitro.
Putri,  N.  M.,  Arisanty,  D.,  & Hilbertina,  N.  (2022).  Potensi Ekstrak  Daun  Sirsak  Dalam Menginduksi  Apoptosis  Sel Kanker  Serviks  HeLa. Jurnal Ilmu  Kesehatan  Indonesia ,
3 (1), 16-21.
Risa  MI,  Ismawati  I,  Budiman  B, Sofia  H,  Garna  H.(2019). Pengaruh  Kebiasaan  Buang Air  Besar  (BAB)  terhadap Kejadian  Demam  Tifoid  di RSUD Al-Ihsan Bandung Periode Maret – Mei Tahun 2018. J Integr Kesehat Sains.1(1):16 – 20. Utami  P.  (2013).  Umbi  Ajaib Tumpas  Penyakit.  Jakarta: Penebar swadaya Warbung,  Y.  Y.  (2013).  Daya
hambat  ekstrak  spons  laut Callyspongia sp terhadap pertumbuhan bakteri
Staphylococcus  aureus. E- GiGi, 1 (2). Zaid,  Z.,  Indrianto,  A.  P.,  & Adityaningrat  HF.(2021).We
Need  Protection:  Reviewing Corporate Responsibilities And Strategies In Protecting Employees During The Pandemic.  Journal  Health  & Science:  Gorontalo  Journal Health And Science
Community, 5(2), 278-287.