MEDFARM: Jurnal Farmasi dan Kesehatan, Vol 11, No 2, 2022, Hal,185-192 e-ISSN : 2715-9957 p-ISSN: 2354-8487

## UJI TOKSISITAS AKUT FRAKSI N-HEKSAN BAWANG LANANG
HITAM ( Allium sativum L.) PADA MENCIT PUTIH JANTAN
Nurul Adi Aryani 1 , Eka Wisnu Kusuma 2
1,) STIKES Nasional Surakarta
2) STIKES Nasional Surakarta
e-mail: 1) nuruladiaryani@gmail.com

## ABSTRAK
Bawang lanang hitam ialah tumbuhan yang banyak dipakai jadi obat tradisional maka dibutuhkan guna tahu tingkat keamanannya. Penelitian dilakukan secara eksperimental dengan tujuan untuk mengetahui nilai LD 50 dan gejala toksik dari pemberian  fraksi  n-heksan  bawang  lanang  hitam  terhadap  mencit  putih  jantan dengan uji toksisitas akut. Pengamatan dilakukan secara intensif  30 menit, 4 jam pertama setelah perlakuan dan dilanjutkan 24 jam setelah perlakuan dengan dosis oral fraksi n-heksan bawang lanang hitam 2,38 mg/20gBB, 2,97 mg/20gBB dan 3,57  mg/20gBB.  Gejala  toksik  yang  diamati  meliputi  perubahan  berat  badan, tingkah  laku,  perubahan  warna  dan  kerontokan  bulu,  dan  feses.  Dari  hasil pengamatan  menunjukkan  bahwa  fraksi  n-heksan  bawang  lanang  hitam  tidak menimbulkan efek toksik atau masuk dalam kategori  praktis tidak toksik pada hewan uji yang dibuktikan dengan tidak adanya kematian pada hewan uji setelah 24 jam perlakuan.
Kata kunci: Fraksi n-heksan, Bawang Lanang Hitam, Toksisitas Akut

## ABSTRACT
Black garlic is a plant that is widely used as traditional medicine so it is necessary to know the level of safety. The study was conducted experimentally with the aim of knowing the LD 50 value and toxic symptoms of the administration of the n-hexane fraction of black garlic to male white mice with acute toxicity test. Observations were carried out intensively for 30 minutes, the first 4 hours after treatment and continued 24 hours after treatment with oral doses of the n-hexane fraction of black garlic cloves 2,38 mg/20g BW, 2,97 mg/20g BW and  3,57  mg/20g  BW.  Toxic  symptoms  observed  included  changes  in  body  weight, behavior, changes in color and hair loss, and feces. Observations showed that the n-hexane fraction of black onion did not cause toxic effects or was included in the practically non- toxic category in test animals as evidenced by the absence of death in test animals after 24 hours of treatment.
Keywords: Fraction n-heksan, Black Garlic Lanang, Acute Toxicity
MEDFARM: Jurnal Farmasi dan Kesehatan, Vol 11, No 2, 2022, Hal,185-192 e-ISSN : 2715-9957 p-ISSN: 2354-8487

## PENDAHULUAN
Penduduk  dunia  sekarang  condong  hidup  menggunakan  konsep “ back  to nature ” yaitu  dengan  memanfaatkan  bahan-bahan  di  alam  sekitar.  Salah  satu contoh  tanaman  yang  memiliki  banyak  manfaat  yaitu  bawang  lanang  hitam (Sailah dan Maulana,2021).
Black garlic atau bawang lanang hitam merupakan hasil dari bawang putih tunggal  yang  telah  diolah  dengan  suhu  dan  kelembapan  yang  tinggi  tanpa menambahkan zat lain dalam proses pengolahannya (Handayani dkk, 2018). Black garlic memiliki  senyawa  bioaktif  berupa  flavonoid,  asam  amino,  polifenol,  dan juga S-alil  cysteine. Pada  penelitian  Wardhani  dkk,  2020,  dikemukakan  bahwa bawang  lanang  hitam  dapat  digunakan  sebagai  sarana  pengobatan  mulai  dari hipertensi, cardiovaskuler, diabetes hingga kanker.
Mengingat banyak manfaat dari bawang lanang hitam untuk penggunaan tradisional,  simplisia,  dan  atau  fitofarmaka  dibutuhkan  pengetahuan  mengenai keamanan pemakaian bahan tradisional. Guna melihat keamanan tersebut maka dibutuhkan  pengujian  toksisitas  akut.  Maka  dengan  dasar  dan  pertimbangan tersebut, perlu adanya pengujian toksisitas akut fraksi n-heksan bawang lanang hitam.  Penelitian  bertujuan  agar  mengetahui  efek  toksik  yang  mungkin  dapat ditimbulkan  oleh  penggunaan  bawang  lanang  hitam  dengan  nilai  LD 50 pada hewan uji mencit.

## METODOLOGI PENELITIAN
Studi dilaksanakan lewat memakai metode “ eksperimental ” yaitu dengan pemberian fraksi n-heksan bawang lanang hitam kepada hewan uji untuk melihat efek toksisitas yang mungkin timbul.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  dipakai  disini  ialah  wadah  maserasi,  seperangkat  alat  gelas, ayakan 40 mesh, tabung reaksi, batang pengaduk, kertas saring, cawan porselin, rotary evaporator, corong pisah, timbangan, spidol permanen, spuit injeksi, oven.
MEDFARM: Jurnal Farmasi dan Kesehatan, Vol 11, No 2, 2022, Hal,185-192 e-ISSN : 2715-9957 p-ISSN: 2354-8487
Bahan  utama  yaitu  bawang  lanang hitam  ( Allium  sativum  L .),  mencit  putih jantan, etanol 70%, Aquades, n-heksana, HCl P, pereaksi Dragendroff, asam asetat anhidrat, H 2 SO 4 P, FeCl 3 10%.

## Persiapan Sampel
Sampel bawang lanang hitam yang digunakan adalah bawang lanang yang sudah difermentasi dan berwarna hitam yang didapat dari Karanganyar. Sampel yang  diperoleh  selanjutnya  dipotong  kecil-kecil  dan  dioven  pada  suhu  50 o C hingga  kering.  Sampel  yang  telah  kering  selanjutnya  dihaluskan  dengan  cara diblender  dan  diayak  dengan  ayakan  40  mesh  agar  didapat  serbuk  halus simplisia.  Serbuk  yang  didapat  kemudian  dapat  diekstraksi  dengan  metode maserasi menggunakan pelarut yang sesuai.

## Pembuatan Ekstrak
Pembuatan ekstrak dilakukan dengan menggunakan metode maserasi. Serbuk bawang lanang hitam ditimbang sebanyak 800 gram lalu ditambah pelarut etanol 70%  dengan  perbandingan  (1:7,5),  ditutup  serta  dibiarkan  3  hari  dengan pengadukan sesekali, kemudian diserkai. Ampasnya diremaserasi dengan pelarut etanol 70% perbandingan (1:2,5) selama 2 hari kemudian diserkai. Hasil ekstrak dipekatkan  dengan  rotary  evaporator  di  suhu  50 o C.  Ekstrak  yang  diperoleh  di pekatkan menggunakan waterbath sampai terbentuk ekstrak kental.

## Pembuatan Fraksi
Ekstrak  bawang  lanang  hitam  yang  diperoleh  kemudian  difraksinasi menggunakan pelarut air : n-heksan  (1:1), digojog dalam corong pisah dengan sesekali dibuka pengunci untuk membebaskan udara yang terperangkap selama penggojokan,  diamkan  beberapa  saat  hingga  memisah  dan  terbentuk  2  lapisan yaitu lapisan ekstrak dan n-heksana. Setelah memisah tampung hasil  fraksinasi n-heksan dan air, fase air direplikasi sampai 3x dan fraksi n-heksan ditampung. Hasil  fraksinasi  n-heksan  dipekatkan  dengan  waterbath  untuk  menghasilkan fraksi kental.
MEDFARM: Jurnal Farmasi dan Kesehatan, Vol 11, No 2, 2022, Hal,185-192 e-ISSN : 2715-9957 p-ISSN: 2354-8487

## Analisis Data
Untuk mengetahui apakah terdapat efek toksis yang ditimbulkan oleh fraksi n-heksan bawang lanang hitam terhadap hewan uji coba mencit maka dilakukan uji tokisitas. Data yang dikumpulkan adalah hasil dari pengamatan kualitatif dan jumlah  kematian  hewan  percobaan.  Hasil  pengamatan  kualitatif  berupa pengamatan berat badan mencit, kerontokan bulu dan tingkat stress hewan uji.
Sedangkan kematian hewan percobaan dengan penentuan LD 50 .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
1. Hasil  Identifikasi  Kandungan  Senyawa  Kimia  Bawang  Lanang  Hitam ( Allium sativum L.)
Skrining  fitokimia  dilakukan  menggunakan  tabung  reaksi  guna mengidentifikasi kandungan senyawa metabolit sekunder suatu bahan alam. Skrining  fitokimia  yang  dilakukan  dalam  penelitian  kali  ini  meliputi pengujian  flavonoid,  alkaloid,  saponin,  dan  tanin  yang  kemudian  dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Hasil identifikasi senyawa kimia Bawang Lanang Hitam ( Allium sativum L.)
Senyawa Reagen Hasil Uji Kesimpulan Flavonoid Serbuk Mg + HCl P Kuning + Alkaloid Dragendroff Endapan coklat + Saponin Air + HCl Tidak terbentuk busa _ Tanin FeCl3 Hitam kehijauan +
Keterangan: (+) positif  (-)negatif
Hasil pengujian skrining fitokimia senyawa flavonoid ditandai dengan adanya perubahan warna dari bening menjadi kuning, senyawa tanin  terlihat dari  terbentuknya  warna  hijau  kehitaman  serta  alkaloid  ditandai  dengan terbentuknya endapan berwarna coklat.
2. Hasil Uji Toksisitas Akut Fraksi N-Heksan Bawang Lanang Hitam
MEDFARM: Jurnal Farmasi dan Kesehatan, Vol 11, No 2, 2022, Hal,185-192 e-ISSN : 2715-9957 p-ISSN: 2354-8487

## Tabel 2. Hasil pemeriksaan efek toksis
Kelompok Mencit Pengamatan 30 menit Pengamatan 4 jam 24 jam TL Feses Urin Bulu TL Feses Urin Bulu  Hewan uji mati I Kontrol (CMC-Na 0,5%) 1 N N N N N N N N 0 2 N N N N N N N N 3 N N N N N N N N 4 N N N N N N N N II Dosis 2,38 mg/20gBB 1 N N N x N N N X 0 2 N N N x N N N X 3 N N N x N N N X 4 N N N x N N N X III Dosis 2,97 mg/20gBB 1 N N N x N N N X 0 2 N N N x N N N X 3 N N N x N N N X 4 N N N x N N N X IV Dosis 3,57 mg/20gBB 1 N N N x N N N X 0 2 N N N x N N N X 3 N N N x N N N X 4 N N N x N N N X
*Ket : TL  : Tingkah Laku, N : Normal ,  x : tidak terjadi , ✓ = terjadi
Uji toksisitas akut adalah uji pra klinik yang bertujuan mengukur derajat efek  toksik  suatu  senyawa  dalam  waktu  tertentu  setelah  pemberian  dosis tunggal (Mustapa et al., 2015). Tolak ukur kuantitatif yang sering digunakan untuk menyatakan kisaran dosis letal pada uji toksisitas akut adalah LD 50 .
Hewan uji yang digunakan yaitu mencit jantan sebanyak 16 ekor dengan umur  6-8  minggu  dan  berat  15-30  gram.  Hewan  uji  awalnya  dipuasakan terlebih dahulu selama 1 hari agar mengetahui bobot sebenarnya dari hewan uji.  Selanjutnya  mencit  diberikan  sediaan  fraksi  n-heksan  bawang  lanang hitam  sesuai  dengan  perhitungan  dosisnya.  Setelah  dilakukan  pemberian dosis  fraksi  n-heksan  bawang  lanang  hitam  pada  kelompok  percobaan dengan dosis 1, dosis 2, dan dosis 3, hewan belum bisa diberi makan sampai 4 jam  sesudah waktu pemberian. Semua kelompok hewan uji diperhatikan gejala  ketoksikan  yang  terjadi  sesudah  30  menit,  4  jam  sesudah  perlakuan serta  pada  selang  waktu  24  jam,  bila  ada  yang mati,  dicatat  (Nuristika,  V., 2018).
Hasil uji toksisitas pada kelompok pertama setelah dilakukan pemberian larutan CMC-Na sebagai kelompok kontrol, menunjukkan tidak adanya efek toksis yang timbul pada hewan perlakuan. Sehingga pada kelompok pertama
dapat  digunakan  sebagai  kelompok  pembanding  terhadap  hewan  uji  yang diberi perlakuan.
Hasil  uji  toksisitas  yang  diamati  atau  menjadi  faktor  penentu  yaitu perubahan  berat  badan,  perubahan  feses,  pengamatan  tingkah  laku  dan kerontokan bulu hewan uji. Hasil pengamatan dapat dilihat pada tabel 2.
Pada  pengamatan  ke  empat  kelompok  hewan  uji  setelah  pemberian dengan  selang  waktu  pengamatn  30  menit,  4  jam,  dan  24  jam  setelah perlakuan dapat ditarik kesimpulan bahwa fraksi n-heksan yang digunakan tidak menimbulkan efek toksik pada hewan uji. Hal ini dibuktikan dengan tidak adanya hewan uji yang memperlihatkan indikator toksisitas dan tidak ada hewan uji yang mati. Hewan uji tetap berperilaku aktif dan normal seperti biasa.

## SIMPULAN
Berdasarkan data dari penelitian tersebut dapat disimpulkan bahwa fraksi n-heksan bawang lanang hitam dengan dosis 2,38 mg/20g BB; 2,97mg/20gBB; dan 3,57 mg/20gBB belum dapat menimbulkan efek toksisitas akut pada hewan uji mencit.

## DAFTAR PUSTAKA
Agustia,dkk,    2020,  Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Bawang  Hitam  (Black Garlic) Dengan Variasi Lama Pemanasan, Jurnal Biologi , 13(1): 39-50
Darmono, 2009, Farmasi Forensik Dan Toksikologi : Jakarta, UI Press
Depkes  RI,  2000, Parameter  Standar  Umum  Ekstrak  Tumbuhan  Obat :  Jakarta.
Departemen Kesehatan RI
Fithria,  R.F.,  Ririn,  L.W.,  Devi,  N.H.,  dan  Lilis,  R.,  2018,  TOKSISITAS  AKUT INFUSA KULIT ARI KACANG TANAH (Archii hypogea L.), Jurnal Ilmu
Farmasi dan Farmasi Klinik , 15(2) : 62-70
Handayani,dkk, 2018, Isolasi Senyawa Polifenol Black Garlic dan Uji Toksisitasnya Terhadap  Larva  Udang  ( Artemia  salina  Leach ), Jurnal  Ilmu  Kefarmasian
Indonesia, 16(2): 145-149
Heinrich,dkk., 2010, Farmakognosi dan Fitoterapi : Jakarta.EGC
Kulla,Periskila  Dina  Kali,  2016, Skripsi ,  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Dari  Ekstrak Bawang  Lnang  ( Allium  sativum  L .)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Staphylococcus aureus Dan Escherichia coli , Yogyakarta: Fakultas Keguruan
Dan Ilmu Pendidikan Universitas Sanata Dharma.
Lu,  X.,  Li,  N.,  Qiao,  X.,  Qiu,  Z.  and  Liu,  P.,  2017,  Composition  analysis  and antioxidant properties of black garlic extract, J. Food Drug Anal , 25, 340 – 349
Meilani,  Fitri dan Retno Harjanti  H., 2015, Produksi Allicin Dari  Bahan Ekstrak Bawang  Putih  “Lanang”  ( Allium  sativum ). Jurnal  Ilmiah  Kesehatan  Media Husada, 03(02): 111-114
Muliani,  Hirawati.,  2011,  Pertumbuhan  Mencit  (Mus  muculus  L.  )  Setelah Pemberian Biji Jarak Pagar (Jatropha curcas), Bioma , 13(2) : 73-79
Murtisiwi, dan Novena, 2016, Uji Toksisitas Akut Kapsul Bawang Putih Lanang (Allium sativum Lin), Jurnal Ilmiah Manuntung , 2(2): 179-188
Nuristika,V.,  2018, Skripsi :  Uji  Toksisitan  Akut  Black  Garlic  Lanang  Terhadap Mencit  Jantan  Galur  Swiss  Webster,  Tangerang:  Sekolah  Tinggi  Farmasi
Muhammadiyah
Prayudo, dkk. 2015, Koefisien Transfer Massa Kurkumin Dari Temulawak. Jurnal Ilmiah Widya Teknik , 14(1): 26-31
Sailah  dan  Maulana,  2021,  Perubahan  Sifat  Fisikokimia  Selama  Pengolahan
Bawang  Putih  Tunggal  Menjadi  Bawang  Hitam  Menggunakan  Rice
Cooker, Jurnal Teknologi Industri Pertanian , 31(1): 88-97
Sari,  Irna  Rini  Mutia.,  2012, Skripsi, Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Jamur Pleurotus  ostreatus  Dengan  Metode  DPPH  Dan  Identifikasi  Golongan Senyawa Kimia Dari Fraksi Teraktif,  Depok: Universitas Indonesia
Sembiring,N.,  dan  Yoppi,  2019,  A  Review  of  Component  and  Pharmacology Activities of  Black Garlic, Traditional Medicine Journal, 24(3): 178-183
Untari,  Ida.,  2010,  Bawang  Putih  Sebagai  Obat Paling  Mujarab  Bagi  Kesehatan,
Gaster , 7(1): 547-554
Wardhani,dkk., 2020, Nilai Total Flavonoid dalam Black Garlic (Allium sativum
L.)  Berdasarkan  Fraksi  Pelarut  Dan  Aktivitas  Antioksidan, Jurnal
Agroindustri Halal ,  6(1): 20-27