## UJI TOKSISITAS DAN SKRINING FITOKIMIA TEPUNG GABAH PELEPAH AREN (Arenga pinnata) 1)
Meiske S. Sangi 2) , Lidya I. Momuat 2) , Maureen Kumaunang 2)
1) Penelitian Dibiayai DIPA UNSRAT Tahun 2012
2) Program Studi Kimia FMIPA Universitas Sam Ratulangi Jl. Kampus Unsrat Manado, 95115 e-mail: meiske_sangi@yahoo.co.id;  lmomuat@yahoo.com; maureen273@yahoo.com

## ABSTRAK
Telah  dilakukan  penelitian  uji  toksisitas  dan  skrining  fitokimia  tepung  pelepah  aren.  Tepung pelepah  aren  secara  tradisional  digunakan  oleh  masyarakat  Tomohon  sebagai  obat  untuk menghilangkan  gatal-gatal  dan  luka  bakar  pada  kulit,  namun  pemanfaatan  ini  belum  dikenal secara  luas  di  Sulawesi  Utara.    Pemanfaatan  tepung  pelepah  aren  sebagai  obat  tradisional  ini belum banyak dilaporkan dalam literatur bahkan belum ada yang meneliti tentang sifat toksik dan kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada  tepung  pelepah  aren.    Tujuan penelitian  dalam  pengujian  toksisitas  adalah  untuk  mengetahui  apakah  tepung  pelepah  aren bersifat  toksik  atau  tidak  selanjutnya  menentukan  nilai  LC 50 -nya  untuk  mengetahui  jumlah konsentrasi  penyebab  ketoksikan  tepung  pelepah  aren.  Metode  yang  digunakan  untuk  pengujian toksisitas adalah dengan menggunakan larva udang jenis Artemia salina Leach . Dalam metode ini A. salina Leachdipakai sebagai bioindikator. Metode ini mudah dikerjakan, murah, waktu deteksi singkat  dan  dapat  dipertanggungjawabkan.  Hasil  yang  diperoleh  dari  ekstrak  etanol  tepung pelepah  aren  bersifat  toksik  dengan  nilai  LC 50 -nya  adalah  6,295  ppm  dan  hasil  pengujian fitokimia  menunjukkan  bahwa  tepung  pelepah  aren  mengandungsenyawa  metabolit  sekunder yaitu  alkaloid  yang  ditunjukkan  dengan  pembentukan  endapan jingga  ketika  direaksikan  dengan pereaksi dragendorf, triterpenoid  yang ditunjukkan dengan perubahan warna jingga pada sampel dan tanin yang ditunjukkan dengan pembentukan endapan putih ketika direaksikan Gelatin.
Kata kunci: pelepah aren, skrining fitokimia dan uji toksisitas

## TOXICITY TEST AND PHYTOCHEMICAL SCREENING ON
PALM SUGAR LEAF MIDRIB FLOUR (Arenga pinnata)

## ABSTRACT
A  study  of  toxicity  test  and  phytochemical  screening  on  sugar  palm  midrib  flour  had  been conducted. The flour is traditionally used as medicine to relieve itching and skin burn, although the use is not widely known in North Sulawesi. Utilization of this flour as a traditional medicine had  not  been  widely  reported  in  the  literatures  and  the  toxicity  and  content  of  secondary metabolites contained in the sugar palm midrib had not been studied. The purpose of this research was to determine the toxicity of the flour and the value of LC 50 in order to find the concentration that  causes  its  toxicity.  The  research  method  involved  the  use  of  Artemia  salina  Leach  shrimp larvae as a bioindicator. This method was easy to perform, inexpensive, had short detection time, and reliable. The results showed that the ethanol extracted  flour was toxic and had LC 50 value of 6,295 ppm. The phytochemical screening showed that the flour contained secondary metabolite of alkaloid which was indicated by orange precipitation by using reagent Dragendorf, of triterpenoid which  was  indicated  by  orange  discoloration,  and  of  tannin  which  was  indicated  by  white precipitate by using gelatin.
Keywords: sugar palm midrib, phytochemical screening and toxicity test

## PENDAHULUAN

## Latar Belakang
Indonesia kaya akan keanekaragaman hayati yang dapat dimanfaatkan dalam semua aspek  kehidupan  manusia.  Obat  tradisional adalah  salah  satu  bentuk  nyata  pemanfaatan sumber  daya  hayati  tersebut.  Pemanfaatan keanekaragaman hayati dalam bentuk penggunaan obat-obat tradisional ini merupakan  alternatif  yang  dinilai  lebih ekonomis  karena  penggunaan  obat-obatan yang  diolah  secara  modern  sulit  dijangkau harganya oleh kebanyakan orang.
Tanaman  aren  merupakan  sumber daya  hayati  yang  banyak  dimanfaatkan  oleh masyarakat. Tanaman aren banyak tumbuh di daerah tropis seperti Sulawesi Utara.
Berdasarkan  informasi  yang  diperoleh  dari masyarakat  di  Sulawesi  Utara  khususnya masyarakat  Tomohon,  tepung  pelepah  aren dapat  dimanfaatkan  sebagai  obat  tradisional untuk  menghilangkan  penyakit  gatal-gatal dan luka bakar pada kulit. Namun pemanfaatan  tepung  pelepah  aren  sebagai obat tradisional belum banyak diketahui oleh masyarakat secara luas. Masyarakat Sulawesi Utara  selama  ini  banyak  memanfaatkan tanaman  aren  untuk  pemenuhan  kebutuhan hidup sehari-hari seperti batang dimanfaatkan sebagai  bahan  baku  pembuatan  kerajinan, ijuk  dimanfaatkan  dalam  pembuatan  sapu, daun  dimanfaatkan  sebagai  bahan  dekorasi, buah dimanfaatkan dalam pembuatan kolang- kaling, air nira yang dihasilkan dimanfaatkan untuk  pembuatan  gula  merah  dan  juga sebagai  bahan  utama  untuk  minuman tradisional  beralkohol  yang  dikenal  dengan sebutan cap tikus.
Pemanfaatan  tepung  pelepah  aren sebagai  obat  tradisional  ini  belum  banyak dilaporkan  dalam  literatur  bahkan  belum  ada yang  meneliti  tentang  sifat  toksik  dan kandungan senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada tepung pelepah aren.
Pengujian  toksisitas  dilakukan  untuk mengetahui  apakah  tepung  pelepah  aren bersifat toksik atau tidak selanjutnya menentukan nilai LC 50 -nya untuk mengetahui jumlah  konsentrasi  penyebab  ketoksikan tepung pelepah aren. Salah satu metode yang baik  digunakan  untuk  pengujian  toksisitas adalah  dengan  menggunakan  larva  udang jenis Artemia  salina Leach . Dalam  metode ini A. salina Leachdipakai sebagai
bioindikator.  Metode  ini  mudah  dikerjakan, murah,  waktu  deteksi  singkat  dan  dapat dipertanggungjawabkan.
Sampel yang bersifat toksik
disebabkan  oleh  adanya  kandungan  senyawa metabolit sekunder. Oleh karena itu dilakukan  pengujian  metabolit  sekunder untuk  mendeteksi  golongan  senyawa  kimia yang  terdapat  dalam  sampel.  Metode  ini merupakan  salah  satu  dari  pendekatan  yang lazim  digunakan  untuk  mencari  komponen senyawa  kimia  tanaman  yang  memiliki aktivitas  biologi.  Biasanya,  tanaman  yang dapat  dimanfaatkan  sebagai  obat  memiliki sifat  toksik  (racun)  terhadap  penyakit  karena adanya  senyawa  metabolit  sekunder  yang terdapat dalam tanaman tersebut.

## METODE PENELITIAN

## Prosedur Penelitian
Ekstraksi tepung pelepah aren - Sebanyak 100 gram tepung pelepah aren dimasukkan  ke  dalam  gelas  kimia  1000 mL,  ditambahkan  etanol  sampai  kira- kira  1  cm  diatas  permukaan  ekstrak, diaduk  selama  5  menit  kemudian didiamkan selama 24 jam.
- Saring  menggunakan  kertas  saring  jenis Whatman no. 42 dan filtratnya dimasukkan kedalam botol.
- Ampasnya ditambahkan lagi etanol sama seperti pada perlakuan no. 1
- Saring  lagi  seperti  pada  perlakuan  no.  2 dan  ditambahkan  dalam  botol  pada perlakuan  no.2,  perlakuan  dilakukan sampai filtrat kelihatan agak jernih.
- Filtrat  tersebut  dimasukkan  dalam  labu Evaporator yang telah ditimbang beratnya.
- Selanjutnya  dievaporasi  pada  suhu maksimum  45 o C  sampai  diperoleh ekstrak etanol tepung pelepah aren yang pekat.
- Ekstrak  yang  diperoleh  ditimbang  dan disimpan  dalam  Desikator  sebelum digunakan untuk pengujian toksisitas.

## Uji Toksisitas Menggunakan Larva
A. salina Leach Penyiapan Larva A. salina Leach Larva  udang  disiapkan  dengan  cara menetaskan telur A. salina Leach selama dua
hari  sebelum  dilakukan  pengujian.  Penetasan dilakukan dengan cara merendam telur udang tersebut  ke  dalam  gelas  piala  1000  mL  yang berisi  air  laut  buatan.  Air  laut  buatan  dibuat dengan melarutkan 20 g garam tak beryodium  ke  dalam  1  L  air  kran,  disaring dan  diaerasi.    Setelah  48  jam  perendaman, telur  menetas  dan  menghasilkan  larva A. salina Leachyang  siap  digunakan  dalam pengujian (Indrayani et al. , 2006).

## Penyiapan Sampel
Sebanyak  40  mg  ekstrak  sampel, dilarutkan  dengan  20  mL  air  laut  buatan untuk membuat larutan uji dengan
konsentrasi 2000 ppm.  Dari larutan uji 2000
ppm,  selanjutnya  dibuat  lagi  larutan  dengan konsentrasi 100, 50, 25 dan 12,5 ppm dengan cara  pengenceran.  Untuk  kontrol  (0  ppm) dilakukan  tanpa  penambahan  ekstrak  (Sirait, 2001).

## Uji Toksisitas
Larutan  uji  dengan  konsentrasi  100, 50,  25 dan 12,5  ppm,  masing-masing  dipipet sebanyak 6 mL dimasukkan ke dalam tabung reaksi  dan  ditambahkan  10  ekor  larva  udang yang telah berumur 2 hari.  Setiap konsentrasi dilakukan dua kali pengulangan dan dibandingkan  dengan  kontrol.    Pengamatan  I dilakukan selama 6 jam dengan selang waktu 1 jam.  Selanjutnya pengamatan II dilakukan pada 12, 18 dan 24 jam.  JumLah larva udang yang mati dihitung tiap 6, 12, 18 dan 24 jam (Sirait,  2001).    Analisis  data  perhitungan LC 50 dilakukan dengan cara data % kematian ditransformasikan  ke  dalam  log  konsentrasi (Keostoni, 1985).
Uji  golongan  senyawa  metabolit  sekunder tepung  pelepah  aren  (Houghton  dan Raman, 1998 dan Miranda, 1986)

## Uji alkaloid
Sampel  sebanyak  0,05  g  ekstrak etanol  ditambahkan  kloroform  secukupnya, selanjutnya  ditambahkan  10  mL  amoniak dalam kloroform. Larutan disaring dan filtrat dimasukkan  ke  dalam  erlenmeyer  kemudian ditambahkan 10 tetes H 2 SO 4 2 M. Campuran dikocok  dengan  teratur,  dibiarkan  beberapa lama  sampai  terbentuk  dua  lapisan.  Lapisan atas  dipindahkan  pada  tiga  tabung  reaksi, masing-masing  2,5  mL.  Ketiga  larutan  diuji dengan  pereaksi  Meyer,  Dragendorf  dan Wagner.
Apabila
terbentuk endapan
menunjukkan bahwa sampel tersebut mengandung alkaloid, dengan pereaksi Meyer  menghasilkan  endapan  berwarna putih, dengan pereaksi Dragendorf
menghasilkan  endapan  berwarna  merah jingga dan dengan pereaksi Wagner menghasilkan endapan berwarna coklat.

## Uji saponin.
Ekstrak  sebanyak  1  mL  ditambah  10 mL  air  dikocok  kuat-kuat.  Sebagai  blanko, digunakan 10 mL alkohol dan sedikit air. Bila pada tabung sampel terdapat buih setinggi 3,5 cm dan stabil selama 10 menit, maka ekstrak mengandung glikosida saponin.
Uji Triterpen Steroida jenuh (uji Liebermann-Buchard) Sampel sebanyak 50-100 mg
diletakkan  pada  plat  tetes  dan  ditambahkan asam  asetat  sampai  semua  sampel  terendam, dibiarkan  15  menit  kemudian  6  tetes  larutan dipindahkan  ke  dalam  tabung  reaksi  dan ditambahkan  2-3  tetes  asam  sulfat  pekat. Perubahan  warna  yang  terjadi  diamati  dan intensitas  warna  yang  dihasilkan  digunakan sebagai ukuran relatif kandungan triterpenoid  dan  steroid  dalam  sampel. Adanya  triterpenoid  ditunjukkan  dengan terjadinya  warna  merah  jingga  atau  ungu, sedangkan adanya steroid ditunjukkan dengan terbentuknya warna biru.

## Uji Flavonoid
Satu gram sampel dimasukkan dalam labu erlenmeyer dan ditambah etanol 25 mL. Kemudian  dipanaskan  sampai  mendidih  dan disaring.  Filtrat  yang  diperoleh  diuapkan sampai  volume  pelarut  tinggal  setengahnya. Filtrat  dibagi  menjadi  dua,  tabung  pertama blanko  dan  tabung  kedua  ditambah  beberapa tetes  etanol,  dikocok  kemudian  ditambahkan serbuk  magnesium  dan  teteskan  5  M  asam klorida.  Bila  timbul  warna  merah  maka ekstrak mengandung flavonoid.

## Uji Tanin
Sampel  sebanyak  2  gram  dihaluskan dan  ditambahkan  metanol  dan  di  saring. Filtratnya  ditambahkan  NaCl  10%  dan disaring.  Filtrat  dibagi  menjadi  2  bagian. Masing-masing  ditetesi  dengan  gelatin  10% dan FeCl 3 10%. Jika ada endapan menunjukkan  positif  tanin  sebaliknya  jika
tidak  ada  endapan  menunjukkan  negatif tanin.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Analisis toksisitas
Hasil analisis untuk toksisitas dengan menggunakan  larva  udang A.  salina L.  pada ekstrak  etanol  tepung  pelepah  aren  dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel  1.  Mortalitas  larva  padaekstrak  etanol tepung pelepah aren Waktu (jam) Konsentrasi (ppm) 0 12,5 25 50 100 1 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 6,5 5 0 4 3 7,5 7,5 6 0 4 5 9 8,5 12 0 4 7 10 10 18 0 5 8,5 10 10 24 0 7 8,5 10 10 % Kematian 0 70%  85%  100%  100% LC 50 6,295 ppm
Ket. Mortalitas larva diperoleh dari rata-rata dua ulangan
Pada  perlakuan  yang  dilakukan, keadaan  lingkungan  dari  setiap  tabung kontrol  dan  tabung  uji  dibuat  sama  seperti pada waktu penetasan telur larva dengan cara tetap  memberikan  aerasi  pada  setiap  tabung agar apabila terjadi kematian larva udang hal tersebut  bukan  disebabkan  oleh  daya  tahan larva  yang  sudah  menurun  terhadap  faktor- faktor  luar  akan  tetapi  kematian A.  salina Leach  disebabkan  oleh  sifat  toksik  dari ekstrak  yang  digunakan.  Dari  pengamatan dapat  dilihat  bahwa A.  salina Leach  yang berada  pada  kontrol  tidak  menunjukkan mortalitas.Pada  tabung  uji  100  ppm  mulai menunjukkan  mortalitas  pada  jam  ke  4  dan untuk  tabung  uji  12,5;  25  dan  50  ppm  mulai menunjukkan  mortalitas  pada  jam  ke  5.  Hal ini  menunjukkan  bahwa  semakin  besar  nilai konsentrasi  ekstrak,  maka  mortalitas  pada A. salina Leach  semakin  besar.  Hal  ini  sesuai dengan  Lu  (1995)  yang  menyebutkan  bahwa setiap  zat  kimia  bila  diberikan  dengan  dosis yang  cukup  besar  akan  menimbulkan  gejala- gejala.Menurut  Nurhayati et  al. (2006),  efek
toksisitas  dianalisis  dari  pengamatan  dengan persen kematian.
% 100 % x Uji Larva Jumlah Mati yang Larva Jumlah Larva 
Dengan  mengetahui  kematian  larva, kemudian  dicari  angka  probit  melalui  Tabel dan dibuat persamaan garis:
Y = BX + A Dimana, Y= Log Konsentrasi dan X = Angka Probit.
Dari  persamaan  tersebut  kemudian dihitung  LC 50 dengan  memasukkan  nilai probit (50% kematian).
Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh pada tabel 1 menunjukkan  bahwa banyaknya mortalitaslarva  udang  pada  konsentrasi  0; 12,5;  25  dan  100  ppm  dan  persentasi mortalitas pada jam ke-24. Pada konsentrasi 0 ppm persentasi kematiannya sebesar 0%, 12,5 ppm persentasi kematiannya sebesar 70%, 25 ppm persentasi kematiannya sebesar 85%, 50 ppm  persentasi  kematiannya  sebesar  100% dan 100 ppm persentasi kematiannya sebesar 100%.    Grafik  hubungan  antara  persentasi kematian  larva  dan  nilai  LC 50 dapat  dilihat pada Gambar 1.
Pada  Gambar  1  terlihat  persamaan regresi  linear  dari  grafik    di  atas  digunakan untuk mencari nilai LC 50 dengan memasukkan angka 50% sebagai x, sehingga diperoleh  nilai  y  =  1.817x  –  0.051.  Nilai  y menunjukkan  log  konsentrasi  dari  ekstrak etanol.  Konsentrasi  ekstrak  etanol  adalah antilog  dari  90.799  yaitu  6,295.  Hal  ini berarti kemampuan sampel untuk membunuh 50%  dari A.  salina Leach    pada  saat konsentrasi ekstrak mencapai 6,295 ppm.
Menurut  Meyer  dalam  Astuti  (2001) melaporkan bahwa suatu ekstrak menunjukkan  aktivitas  ketoksikan  dalam  uji toksisitas  jika  ekstrak  dapat  menyebabkan kematian  50%  hewan  uji  pada  konsentrasi  < 1000  ppm.  Berdasar  dari  pernyataan  tersebut maka  ekstrak  etanol  dari  tepung  tangkai pelepah  aren  bersifat  toksik.  Hal  ini ditunjukkan  dari  nilai  LC 50 yang  diperoleh yaitu pada konsentrasi 6,295 ppm.

## Kandungan  senyawa  metabolit  sekunder pada tepung tangkai pelepah aren
Hasil  Kandungan  senyawa  metabolit sekunderekstrak  tepung  pelepah  aren  dapat dilihat pada Tabel 2 berikut ini.
0 1.0969
1.3979 1.6989 2 y = 1.817x - 0.051 R² = 0.963
-0.5 0 0.5 1 1.5 2
2.5 0% 50% 100% 150%
Gambar 1. Grafik hubungan antara persentasi kematian larva dan nilai LC 50
Tabel  2.  Kandungan senyawa metabolit sekunder ekstrak etanol tepung  pelepah aren.
Senyawa Warna Awal Warna Akhir Endapan Hasil Keterangan Alkaloid Keputih- putihan Meyer: Bening Dragendorf: Jingga Wagner: Cokelat Kehitaman - Kuning - - ++ - Terbentuk Endapan Saponin Cokelat (Sampel) Cokelat (Sampel) Cokelat (Sampel) - Tidak terbentuk buih Triterpenoid/ Steroid Kuning Pucat Jingga - ++ Mengandung Triterpenoid Flavonoid Kuning Pucat Kuning Pucat - - Serbuk Mg tidak bereaksi. Tanin Kuning Pucat FeCl 3 : Kuning Kecokelatan Gelatin: Putih Susu Kuning Tua Putih +++ Terjadi perubahan warna dan ada endapan. Keterangan: (-): Tidak ada(++): Agak Banyak (+): Sedikit (+++): Banyak
Uji  fitokimia  ini  dilakukan  secara kualitatif  dan  hasilnya  menunjukkan  bahwa tepung    pelepah  aren  mengandung  beberapa senyawa  metabolit  sekunder  yaitu  alkaloid, triterpenoid dan tanin.
Penapisan Alkaloid Pada penapisan alkaloid, penambahan pereaksi Meyer akan menyebabkan terbentuknya endapan
berwarna putih yang menunjukkan hasil yang positif mengandung senyawa alkaloid. Proses  yang  sama  juga  dilakukan  pada
penambahan pereaksi Dragendorf dan Wagner.    Pada  pereaksi  Dragendorf  akan terbentuk  endapan  berwarna  merah  jingga sedangkan  untuk  pereaksi  Wagner  akan terbentuk  endapan  berwarna  coklat.Prinsip dari  metode  analisis  ini  adalah  reaksi pengendapan  yang  terjadi  karena  adanya penggantian ligan.Atom nitrogen yang mempunyai  pasangan  elektron  bebas  pada alkaloid  dapat  mengganti  ion  iodo  dalam pereaksi-pereaksi  tersebut.Pereaksi  Meyer mengandung  merkuri  klorida  dan  kalium iodida.  Pereaksi  Dragendorf  mengandung
0 1.0969 1.3979 1.6989 2 y = 1.817x - 0.051 R² = 0.963 -0.5 0 0.5 1 1.5 2 2.5 0% 50% 100%
150%
O C O CH 3
CH 3 C O O C O CH 3 OH CH 3 C OH O
kalium  iodida  dan  bismuth  subnitrat  dalam asam  asetat  glasial.    Pereaksi  Wagner mengandung  iod  dan  kalium  iodida.  Dalam pengujian ini  yang  terbentuk  endapan  adalah dengan  pereaksi  dragendorf.  Diduga  hal  ini
disebabkan  oleh  karena  kandungan  senyawa alkaloid  yang  sedikit  pada  sampel  sehingga hanya  satu  pereaksi  yang  sensitif  bereaksi terhadap sampel (persamaan reaksi1).
Persamaan Reaksi 1:
Pereaksi Dragendorf: Bi(NO 2 ) 3 + 4KI → K 3 [BiI 4 ] + KNO 2
K 3 [BiI 4 ] + → K 3 [Bi( )] + 4I Penapisan Saponin Arcuri dalam Makang (2005), menyatakan  saponin  memiliki  glikosil  yang berfungsi  sebagai  gugus  polar  dan  gugus terpenoid/steroid  sebagai  gugus  non-polar. Senyawa yang memiliki gugus polar dan non- polar  bersifat  aktif  permukaan  sehingga  saat dikocok dengan air saponin dapat membentuk misel.    Pada  struktur  misel,  gugus  polar menghadap  ke  luar  sedangkan  gugus  non- polarnya  menghadap  ke  dalam.    Keadaan inilah  yang  tampak  seperti  busa,  namun dalam  analisis  ini  sampel  tidak  memiliki kemampuan untuk membentuk busa.

## Penapisan Terpenoid/Steroida Jenuh
Kandungan  terpenoid/steroid  dalam tumbuhan diuji dengan menggunakan metode Liebermann-Buchard  (asam  asetat)  yang nantinya  akan  memberikan  warna  merah jingga  atau  ungu  untuk  terpenoid  dan  biru untuk  steroid.    Pada  penambahan  pereaksi Liebermann-Buchard,  molekul-molekul  asam anhidrida  asetat  dan  asam  sulfat  akan berikatan dengan molekul senyawa terpenoid/steroid sehingga menghasilkan reaksi  yang  tampak  pada  perubahan  warna. Dari  hasil  penapisan  terpenoid  dan  steroid yang dilakukan, ternyata sampel mengandung senyawa terpenoid (persamaan reaksi 2).
Persamaan Reaksi 2:
+ H 2 SO 4 +

## Penapisan Flavonoid
Robinson (1995), menyatakan bahwa penambahan  serbuk  magnesium  dan  asam klorida  pada  pengujian  flavonoid  akan menyebabkan tereduksinya senyawa flavonoid  yang  ada  sehingga  menimbulkan reaksi  warna  merah  yang  merupakan  ciri adanya  flavonoid  pada  sampel.    Namun dalam analisis ini serbuk Mg tidak memberikan reaksi reduksi senyawa flavonoid sehingga larutan uji tidak memberikan perubahan warna.

## Penapisan Tanin
Pada  penambahan  larutan  besi  (III) klorida 10% diperkirakan larutan ini bereaksi dengan  salah  satu  gugus  hidroksil  yang  ada pada  senyawa  tanin.    Hasil  reaksi  tersebut yang akhirnya menimbulkan warna.  Pereaksi besi  (III)  klorida  dipergunakan  secara  luas untuk mengidentifikasi senyawa fenol termasuk  tanin.    Hasil  pengujian  yang dilakukan pada tabung reaksi yang menggunakan  larutan  besi  (III)  klorida menunjukkan  terjadinya  perubahan  warna dan  pembentukan  endapan.  Begitu  juga dengan menggunakan gelatin 10% (persamaan reaksi 3).
Me N N Me N N
Persamaan Reaksi 3:
FeCl 3 + 3HCl  + Fe

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
1. Ekstrak  etanol  tepung  pelepah  aren bersifat  toksik  dengan  nilai  LC 50 -nya adalah 6,295 ppm.
2. Hasil  pengujian  fitokimia  menunjukkan bahwa tepung pelepah aren mengandungsenyawa  metabolit  sekunder yaitu  alkaloid  yang  ditunjukkan  dengan pembentukan endapan  jingga ketika direaksikan  dengan  pereaksi  dragendorf, triterpenoid  yang  ditunjukkan  dengan perubahan  warna  jingga  pada  sampel  dan tanin yang ditunjukkan dengan pembentukan endapan putih ketika direaksikan Gelatin .

## Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih lanjut  mengenai  struktur  senyawa  aktif  yang terkandung  dalam  tepung  tangkai  pelepah aren.

## DAFTAR PUSTAKA
Ajay,  M.,  H.  M.  Cheng,  A.  M.  Mustafa  dan M.  R.  Mustafa.  2005.  A  Comparative Study  on  Antioxidant  Activity  of Flavonoids:
Structure-Activity
Relationships. Malaysian  Journal  of
Science (24): 187-190 Anonim.    2000.    Parameter  Standar  Umum Ekstrak  Tumbuhan  Obat.   Departemen Kesehatan Republik Indonesia Rektorat  Jenderal  Pengawasan  Obat dan  Makanan,  Direktorat  Pengawasan Obat Tradisional.  Jakarta.
Astuti,  M.  D.  2001.  Penapisan  Metabolit Sekunder  Pada  Limbah  Ekstrak  Air Tubuh  Ganoderma  lucidum  Dengan Uji  Toksisitas  Larva  Udang ( Artemia salina Leach) [skripsi].  FMIPA.  IPB, Bogor.
Burda,  S.  dan  W.  Oleszek.    2001. Antioxidant  and  Antiradical  Activities of  Flavonoids. J.  Agric.  Food  Chem .
49: 2774-2779.
Dinas Perkebunan. 2007. Budidaya Tanaman Aren.
http://petaniwahid.blogspot.com/2008_08_01 _archive.htmL [11 Agustus 2009]
Gunawan,  D  dan  S.  Mulyani.    2004.    Ilmu Obat  Alam  (Farmakognosi)  Jilid  1. Penebar Swadaya.  Jakarta.
Harborne,  J.B.  1987.  Metode  Fitokimia,
Penuntun  Cara  Moderen  Menganalisis Tumbuhan. Terjemahan K. Pahmawinata  dan  I.  Soediro,    ITB. Bandung. Houghton,  P.J.  dan  A.  Raman.  1998. Laboratory Handbook for the Fractionation  of  Natural  Extracts. Chapman & Hall. London.
Indrayani,  L.,  Soetjipto,  H.,  Sihasale,  L. 2006.    Skrining  Fitokimia  dan  Uji Toksisitas  Ekstrak  Daun  Pecut  Kuda (Stachytarpheta  jamacensis  L.  Vahl) Terhadap Larva Udang Artemia Salina Leach . Fakultas Sains dan Matematika  Universitas  Kristen  satya Wacana, Salatiga.  Journal. 12 : 57-61. Koestoni,  T.    1985.      Analisis  Probit, Kelompok  Peneliti  Hama.    Balai Penelitian Hortikultura. Lembang.
HO OH OH COOH O OH OH COOH HO OH O COOH HO O OH COOH
Lu,  F.C.  1995.  Toksikologi  Dasar . Asas, Organ  Sasaran,  dan  Penilaian  Resiko. Edisi  ke-2.  Terjemahan  Edi  Nugroho. UI, Jakarta.
Mamahit,  C.  2009.  Analisis  Senyawa Metabolit  Sekunder  dan  Uji Toksisitas pada  Ekstrak  Etanol  Tepung  tangkai pelepah  aren (Spilanthes  acmella L.). [skripsi].  FMIPA UNSRAT. Manado.
Makang,  V.M.A.    2005 . Analisis  Fitokimia Tumbuhan Obat di Kabupaten Minahasa  Utara.    [Skripsi].  FMIPA UNSRAT.  Manado. Miranda,  S.R.  1986. The  Phytochemical,
Microbiological  Screening  of  Medical Plant. Unesco University of Philipines.
Mursyidi,  A.    1990.    Analisis  Metabolit Sekunder.  UGM Press.  Yogyakarta.
Nurhayati, A., Nurlita, A., Rachmat, F. 2006.
Uji Toksisitas Ekstrak Euchema Alvarezii  terhadap
Artemia  Salina sebagai  Studi  Pendahuluan  Potensi Anti Kanker. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan alam Institut Teknologi Sepuluh November, Surabaya. Akta  Kimindo Vol.  2  (1)  : 41-46.
Oey  Kam  Nio.    1989.    Zat-zat  Toksik  Yang
Secara  Alamiah  Ada  Pada  Bahan Makanan Nabati. http://www. kalbe.co.id . [6 Oktober 2009]