Jurnal Farmasi Indonesia, Maret 2015, hal 41-49
ISSN: 1693-8615 EISSN : 2302-4291 Online : http://farmasiindonesia.setiabudi.ac.id/
Pengaruh Waktu Fermentasi Teh Kombucha terhadap Penurunan Kadar Glukosa Darah pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar dengan Induksi Aloksan
The Influence of Fermentation Time of Kombucha Tea on The Decrease of Glucose Level on White Male Rats Wistar With Induced Aloksan

## NILAM KRISTIANINGTYAS, INARATUL RIZKHY HANIFAH*, ISWANDI
Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi Jln. Letjen Sutoyo-Mojosongo Surakarta-57127 Telp. 0271-852518 * Korespondensi: inaratul_rizkhyhanifah@yahoo.com
(Diterima  3 November 2014, disetujui 15 Januari 2015)
______________________________________________________________________________________________

## ABSTRAK
Diabetes mellitus (DM) merupakan sekelompok gangguan metabolisme yang ditandai dengan nilai kadar gula darah di atas normal. Teh kombucha merupakan minuman hasil fermentasi larutan teh  manis  oleh  ragi  dan  bakteri.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  waktu fermentasi teh kombucha terhadap penurunan kadar glukosa darah pada tikus putih jantan. Hewan uji  diinduksi  dengan  aloksan  dan  dikelompokkan  menjadi  5  kelompok, masing-masing  kelompok terdiri  dari  5  ekor  tikus  putih  jantan.  Kelompok  I  kontrol  negatif  diberi  aquadest,  kelompok  V kontrol  positif  diberi  glibenklamid  dengan  dosis  0,09  mg/200  gram  BB,  kelompok  II,  III  dan  IV diberi  teh  kombucha  dengan  volume  pemberian  5,5  ml.  Perlakuan  dilakukan  selama  2  minggu, kadar glukosa darah diperiksa pada semua kelompok hewan uji pada minggu pertama dan minggu kedua  selama  pemberian  sediaan  uji.  Data  yang  telah  diperoleh  dianalisi  dengan  menggunakan ANOVA satu jalan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa teh kombucha dapat menurunkan kadar glukosa darah dan teh kombucha fermentasi 12 hari menunjukkan kemampuan dalam menurunkan kadar glukosa darah lebih besar dibandingkan dengan teh kombucha fermentasi 4 dan 8 hari.
Kata kunci : teh kombucha, aloksan, glibenklamid, antidiabetes.
______________________________________________________________________________________________

## ABSTRACT
Diabetes  mellitus  is  a  group  of  metabolism  disorders  which  is  characteristic  by  the  blood glucosa  levels.  Kombucha  tea  is  a  fermented  product  of  sweet  tea  due  o  activity  of  yeast  and bacteria.The  research  was  aimed  to  determine  the  influence  of  various  kombucha  fermentation time on the decrease of glucose level in white male rats wistar. The tested animal is were inducted with  aloksan  and  arranged  into  groups.  Each  group  consisted  of  5  white  male  rats.  Group  I  as negative control was treated by aquadest. Group II, III dan IV  were treated by 5,5 ml of 4, 8 and 12 days-fermentation  kombucha  tea, respectively.  Group  V,  as  positive  control  was  treated  by glibenclamide  at  0,09  mg/200  g  BB.  The  treatments  were  conducted  for  two  weeks.  Each  group was observed for glucose levels an the firstand second week. The results were analyzed using one way ANOVA. The  result  showed that  tea  kombucha  is able to  decreaseglucose levels  and  the  12 days  fermented  kombucha  tea  has  ability  to  decrease  glucose  levels  better  than  4  and  8  days fermented tea kombucha.
Keywords: tea kombucha, alloxan, glibenclamide, antidiabetic. ______________________________________________________________________________________________

## PENDAHULUAN
Diabetes mellitus adalah
sekelompok  gangguan  metabolisme  dari lemak,  karbohidrat  dan  protein  yang menyebabkan  gangguan  sekresi  insulin, kerja insulin (sensitivitas), atau keduanya (Dipiro et  al.  2008).  Terapi  DM merupakan  terapi  jangka  panjang  dan memiliki  resiko  efek  samping  dan  biaya pengobatan mahal. Hal ini menyebabkan pasien penderita DM mulai
menggunakan  produk  obat  tradisional.
Penggunaan  obat  modern  dengan  obat tradisional  secara  bersamaan,  memicu interaksi  antara  obat  modern  dengan obat tradisional, interaksi menguntungkan berupa peningkatan efek
penurunan kadar glukosa darah, maupun interaksi berupa efek samping yang tidak dikehendaki (Badole et al. 2008).
Penelitian  ini  menggunakan  teh kombucha.  Teh  kombucha  merupakan hasil  fermentasi  antara larutan  teh  manis dengan  kultur  kombucha  (Kusumah 2008). Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, teh kombucha dapat menurunkan  kadar  gula  darah Rattus norvegicus (Lukitawati 2013). Dashti dan Morshedi  (2000) meneliti  efek  teh kombucha  terhadap  efek  antidiabetes dengan  membandingkan  teh  hitam, kedua teh tersebut
memberikan pengaruh  yang  sama  pada  kadar  gula darah.  Penelitian  lain  tentang  teh kombucha telah dilakukan oleh Simanjuntak  dan  Siahaan (2011),  bahwa teh  kombucha  dengan  konsentrasi  gula 12%  dan  fermentasi  selama  4  hari  lebih disukai  dari  nilai  organoleptik  teh kombucha.
Berdasarkan  latar  belakang  di  atas maka  peneliti  melakukan  penelitian dalam upaya untuk mengetahui pengaruh  hasil fermentasi teh kombucha terhadap  penurunan  kadar  gula  darah sehingga dapat digunakan sebagai alternatif  pengobatan  DM.  Dimana penelitian  ini  menggunakan  hewan  uji tikus putih jantan galur wistar.
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah untuk mengetahui efek teh kombuha dan mengetahui  lama  fermentasi  yang  paling efektif terhadap penurunan kadar glukosa darah pada tikus putih jantan galur wistar yang telah diinduksi aloksan.

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Bahan  uji  yang  digunakan  untuk penelitian  ini  adalah  kultur  kombucha yang  diambil  dari  Surabaya,  Jawa  Timur difermentasi  melalui  media  teh  hitam dari Surakarta, Jawa Tengah. Bahan kimia yang  digunakan  untuk  uji  farmakologi adalah aloksan monohidrat untuk
menginduksi tikus putih jantan,
glibenklamid  sebagai  kontrol  positif, larutan garam fisiologis, aquadest, larutan  CMC  0,5%  dan  reagen  glukosa GOD  PAP  untuk  mengukur  kadar glukosa darah. Hewan uji yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah tikus  putih  jantan  berumur  2-3  bulan dengan  berat  150,0-200,0  gram  yang diperoleh  dari  Laboratorium  Universitas Setia Budi.
Alat Alat yang digunakan untuk
pembuatan  teh  kombucha  adalah  panci stainles  steel ukuran  1  liter  untuk merebus  air,  toples  kaca  dan  kain.  Alat yang  digunakan  untuk  memisahkan serum  terdiri  dari  tabung  serologis  dan sentrifuge tipe T121, dan untuk mengukur  kadar  glukosa  darah  tikus adalah fotometer Stardust FC. Alat untuk pengambilan darah mencit menggunakan pipa  kapiler.  Alat  lain  yang  digunakan yaitu  timbangan  tikus,  neraca  analitik, jarum suntik 1 ml dan alat- alat gelas.

## Pembuatan Teh
Pembuatan  teh  dalam  penelitian  ini sama yang dilakukan pada umumnya. Air 1  liter  terlebih  dahulu  direbus  dengan menggunakan  panci stainless  steel sampai mendidih. Ditambahkan gula 120 gram  dan  teh  hitam  sebanyak  30  gram, diaduk  dan  dibiarkan  beberapa  menit (sekitas 15 menit) hingga gula larut.

## Pembuatan teh kombucha
Teh yang telah dingin disaring untuk memisahkan  air  teh  dari  ampas  teh  lalu dimasukkan ke dalam wadah kaca, kultur kombucha  ditaruh  sebanyak  60  gram. Toples  ditutup  dengan  menggunakan kain  bersih.  Proses  fermentasi  dilakukan selama 4, 8 dan 12 hari.

## Identifikasi Kualitatif Teh Kombucha
Teh  kombucha  10  ml  dikocok  kuat- kuat  selama  10  menit.  Saponin  positif bila terbentuk buih yang mantap setinggi 1 sampai 10 cm dan dengan penambahan  1  tetes  HCl 2N  buih  tidak hilang (Depkes 1987).
Teh  kombucha  ditambah  dengan pereaksi  FeCl 3 5%,  reaksi  positif  jika berwarna hijau violet (Robinson 1995).
Teh  kombucha  yang  diencerkan dengan  sedikit  air  ditambah  serbuk  Mg, 2  ml  alkohol:HCl (1:1)  dan  pelarut  amil alkohol,  campuran  ini  dikocok  kuat-kuat kemudian  dibiarkan  sampai memisah. Reaksi positif jika terjadi warna merah/kuning/jingga  pada  lapisan  amil alkohol (Depkes 1995).
Identifikasi  vitamin  B1  dilakukan dengan  menambah  teh  kombucha  1  ml ditambah  1  ml  pereaksi  Pb-asetat  10% dan  1  ml  larutan  NaOH  terjadi  warna kuning (Depkes 1979).
Identifikasi  vitamin  B3  dilakukan dengan  menambah  teh  kombucha  2  ml dengan 6 ml larutan sianogen bromida P dan  1  ml  larutan  anilina  terjadi  warna kuning emas (Depkes 1979).
Identifikasi  vitamin  C  dilakukan  teh kombucha 2 ml ditambah 4 tetes larutan biru  metilen  P,  lalu  dihangatkan  hingga suhu 40 0 C terjadi warna biru tua. Identifikasi asam karboksilat dilakukan dengan menambah teh kombucha 1 ml beberapa tetes NaHCO 3 5%  terjadi  perubahan  bening  dan terdapat  gelembung  gas  (Fessenden  & Fessenden 1997).
Identifikasi Kualitatif Acetobacter sp. Uji katalase
Kultur  kombucha  diambil  satu  ose kemudian  dioleskan  pada object  glass yang  telah  disterilkan  dengan  alkohol. Object  glass ditetesi  dengan  larutan H2O2  3%,  jika  terdapat  gelembung  gas berarti  uji katalase  tersebut  positif  artinya aktivitas  mikroba  tersebut  menghasilkan enzim katalase (Nainggolan 2009).

## Pewarnaan Gram
Preparat  oles  dibuat  pada object glass, difiksasi di atas api bunsen. Preparat ditetesi dengan larutan Gram A, didiamkan  selama  60  detik  dan  dicuci dengan air mengalir, pada Gram B, C dan D,  dilakukan  sama  seperti  Gram  A. Preparat  ditetesi  dengan  minyak  imersi. Preparat  diamati  dengan  mikroskop  jika sel  berwarna  ungu,  sel  termasuk  gram positif dan jika sel berwarna merah maka termasuk gram negatif (Nainggolan 2009).

## Penyiapan Hewan Uji
Hewan uji dikelompokkan menjadi 5 kelompok,  tiap-tiap  kelompok  terdiri  dari 5  ekor  tikus putih  jantan  galur  wistar. Hewan uji diinduksi aloksan. Kelompok I sebagai kontrol negatif (aquadest), kelompok  II  diberi  teh  kombucha fermentasi  4  hari  dengan  volume pemberian  5,5  ml/200  gram  BB  tikus, kelompok  III  diberi  teh  kombucha fermentasi  8  hari  dengan  volume pemberian  5,5  ml/200  gram  BB  tikus, kelompok  IV  diberi  teh  kombucha fermentasi  12  hari  dengan  volume pemberian 5,5 ml/200 gram BB tikus dan kelompok  V  sebagai  kontrol  positif (glibenklamid). Pemberian perlakuan dilakukan  selama  14  hari.  Pengukuran kadar  glukosa  dilakukan  sebanyak  4  kali, yaitu  kadar  glukosa  awal,  3  hari  setelah diinduksi  aloksan,  7  hari  pemberian perlakuan  dan  14  hari  pemberian perlakuan,  dengan  menggunakan  alat fotometer Stardust FC.

## Analisa Hasil
Data  yang  diperoleh  berupa  kadar glukosa  darah  hewan  uji  pada  saat mengalami kenaikan dan setelah
pemberian teh kombucha. Untuk mengetahui  perbedaan  nyata  diantara perlakukan  diuji  dengan  uji  Anova  satu jalan  lalu  dilanjutkan  dengan  uji  Post Hoc .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tabel 1 dan Gambar 1 menunjukkan perbedaan  rata-rata  kadar  glukosa  darah dari  awal  penelitian  hingga  akhir penelitian  dari  tiap  kelompok.  Kadar glukosa  darah  sebelum  diinduksi  aloksan memiliki  kadar  gula  darah  yang  normal. Namun setelah diinduksi aloksan terdapat kenaikan kadar glukosa darah yang cukup tinggi  meskipun  hewan  uji  belum terkondisikan  DM. Perlakuan  dilakukan selama  14  hari.  Rata-rata  kadar  glukosa darah  perlakuan  7  hari  dan  14  hari menunjukkan bahwa teh kombucha dapat menurunkan  kadar  glukosa  darah.  Teh kombucha  fermentasi  4  hari  mampu menurunkan kadar glukosa darah sebesar 7%  pada  minggu  pertama  sedangkan minggu  kedua  kemampuan  penurunan kadar  glukosa  darah  sebesar  14%.  Teh kombucha  fermentasi  8  hari  memiliki kemampuan  sebesar  8%  pada  minggu pertama  dan  22%  pada  minggu  kedua. Pada  fermentasi  12  hari  memiliki kemampuan  12%  pada  minggu  pertama dan 25% pada minggu kedua. Berdasarkan  persentasi  penurunan  kadar glukosa  darah  pada  tabel  5,  teh kombucha  fermentasi  4  hari  tidak  sebaik teh  kombucha  fermentasi  8  hari  dalam menurunkan  kadar  gula  darah.  Teh kombucha fermentasi 8 hari tidak seefektif teh  kombucha  fermentasi  12  hari  untuk menurunkan kadar gula darah.
Tabel 1. Hasil rata-rata pengukuran kadar glukosa darah tikus pada setiap kelompok perlakuan
Kelompok Kadar glukosa awal (µ/dL) T 0 % kenaikan kadar glukosa setelah induksi aloksan Kadar glukosa setelah diinduksi aloksan (µ/dL) T 1 % penurunan kadar glukosa setelah 7 hari perlakuan Kadar glukosa setelah 7 hari perlakuan (µ/dL) T 2 % penurunan kadar glukosa setelah 14 hari perlakuan Kadar glukosa setelah 14 hari perlakuan (µ/dL) T 3 Kontrol negatif 63,6±13,42 145 156,0±6,63 - 1 157,6±6,98 - 2 160,4±8,35 Teh kombucha fermentasi 4 hari 61,8±12,35 147 153,2±6.14 7 142,2±6,30 14 132,0±6,51 Teh kombucha fermentasi 8 hari 59,0±  9,40 165 156,4±7,12 8 144,0±8,51 22 121,0±8,45 Teh kombucha fermentasi 12 hari 56,8±  9.85 174 156,0±8,51 12 136,8±6,45 25 116,8±4,32 Kontrol positif 59,8±12,67 159 155,0±4,63 10 138,4±4,50 25 115,4±4,33
0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 T0 T1 T2 T3 ka d ar gl u ko sa d ar ah Perlakuan aquadest teh kombucha fermentasi 4 hari dengan volume pemberian 5,5 ml/200 gram BB tikus teh kombucha fermentasi 8 hari dengan volume pemberian 5,5 ml/200 gram BB tikus teh fermentasi 12 hari dengan volume pemberian 5,5 ml/200 gram BB tikus glibenklamid
Gambar 1. Grafik rata-rata kadar glukosa darah.
Teh kombucha merupakan minuman kesehatan yang telah lama dikonsumsi. Di dalam kultur kombucha terdapat
Acetobacter  sp.,  dimana  bakteri  tersebut mengubah  glukosa  menjadi asam  dan vitamin (Simanjuntak  &  Siahaan  2011). Salah  satu  produk  yang  dihasilkan  oleh Acetobacter  sp.  adalah  asam  glukonat yang  berasal  dari  oksidasi  glukosa (Simanjuntak  dan  Siahaan  2011;  Eberl et al 1997).  Asam  glukonat  memiliki  peran dalam  melindungi  membran  sel  dan memperkuat  dinding  usus,  berfungsi dalam penyerapan kalsium dan menurunkan  kadar  glukosa  di  dalam darah (Lukitawati 2013).
Selama  proses  fermentasi,  bakteri Acetobacter  sp. mampu  mengoksidasi glukosa menjadi asam glukonat (Aditiwati dan  Kuanadi  2003).  Penurunan  glukosa
darah  oleh  asam  glukonat  dilakukan dengan  menjaga  penyerapan  kalsium untuk  pembentukan  insulin  oleh  sel-sel beta  pankreas.  Insulin  disekresikan  oleh sel-sel β pada  pulau-pulau  Langerhans membutuhkan  Ca2+  dan  tahap  akhirnya adalah  pelepasan  isi  granula-granula ekresi  empat  insulin  dan  C-peptida dibentuk.  Ketika  rangsangan  glukosa menyebabkan penutupan kanal KATP dan pembukaan  Ca2+-cannel  dan  butiran RRP (readily releasable pool) terletak tepat dibawah  Ca2+-cannel  yang  terkena konsentrasi  tinggi  Ca2+  menyebabkan RRP  melepaskan  granula  atau  eksositosis (Ren et al 2007).
Tabel 2. Hasil identifikasi kandungan senyawa kimia teh kombucha secara kualitatif
Senyawa Keterangan Saponin + Tanin + Flavonoid + Vitamin B1 + Vitamin B3 + Vitamin C + Asam karboksilat + Tabel 3. Hasil kualitatif Acetobacter sp. pada teh kombucha Jenis uji Hasil Pustaka Keterangan Uji katalase Terdapat gelembung gas Terdapat gelembung gas menandakan adanya aktivitas  dari  mikroba tersebut  menghasilkan enzim katalase (Nainggolan 2009). + Pewarnaan gram Warna merah Sel  jika  berwarna  merah maka termasuk dalam gram negatif (Nainggolan 2009). +
Tabel  2  tentang  hasil  identifikasi kandungan  kimia  teh  kombucha  yang dilakukan  secara  kualitatif  menunjukkan bahwa  teh  kombucha  mengandung vitamin  B1,  B3,  vitamin  C  dan  asam glukonat.  Asam  glukonat  dilakukan  uji identifikasi  secara  kualitatif  oleh  peneliti dengan  mengetahui  adanya  kandungan asam karboksilat di dalam teh kombucha.  Teh  kombucha  juga  masih mengandung saponin, tanin dan flavonoid. Saponin dan tanin memberikan  pengaruh  terhadap  DM melalui  mekanisme  yang  berbeda.
Menurut  Prameswari  dan  Widjanarko (2014), saponin bekerja melalui mekanisme menghambat absorpsi glukosa.  Tanin  ini  diketahui  memicu metabolisme glukosa dengan meningkatkan sensitivitas jaringan
terhadap  insulin  sehingga  timbunan glukosa  dalam  darah  dapat  dihindari. Flavonoid  secara  umum  mempunyai fungsi sebagai antioksidan alami.
Hewan uji memberikan respon yang berbeda terhadap teh kombucha. Adanya respon yang berbeda-beda, kemungkinan karena  perbedaan  kandungan  zat  aktif, dimana  yang  berpengaruh  terhadap kadar  glukosa  adalah  asam  glukonat.  Di dalam  teh  kombucha  terdapat  bakteri Acetobacter  sp. yang  mengubah  glukosa menjadi  aldehid  lalu  membentuk  asam karboksilat  dan  berubah  menjadi  asam asetat. Dari produk yang dihasilkan oleh bakteri  tersebut,  terjadi  proses  oksidasi dan menghasilkan asam glukonat (Simanjuntak  dan  Siahaan  2011).  Telah dilakukan uji identifikasi secara kualitatif asam  glukonat  oleh  peneliti.  Dari  hasil identifikasi diperoleh bahwa teh
kombucha  fermentasi  12  hari  terjadi warna  coklat  (warna  teh)  dan  terdapat gelembung gas. Hal tersebut kemungkinan kandungan asam karboksilatnya  sudah  menurun  karena sudah  berubah  menjadi  asam  glukonat, sehingga asam karboksilatnya sedikit dan asam glukonatnya banyak.
Teh kombucha  fermentasi  8  hari  mempunyai warna  merah  pudar  dan  terdapat gelembung gas, kemungkinan kandungan asam karboksilatnya ada yang sudah  berubah  menjadi  asam  glukonat atau masih tetap menjadi asam karboksilat.  Teh  kombucha  fermentasi  4 hari  mempunyai  warna  kuning  bening dan terdapat gelembung gas, kemungkinan masih banyak asam karboksilat yang belum berubah menjadi asam glukonat. Pada minggu pertama pemberian teh fermentasi 4 dan 8 hari tidak menunjukkan  beda  secara  signifikan meski  ada  penurunan  kadar  gula  darah. Fermentasi  8  hari  hanya  memberikan beda nyata  terhadap  kelompok  kontrol negatif  dan  fermentasi  12  hari.  Teh kombucha fermentasi 12
hari memberikan  pengaruh  yang  lebih  efektif terhadap  kadar  gula  darah daripada  teh kombucha  fermentasi  4  dan  8  hari. Namun teh kombucha fermentasi 12 hari dengan kontrol positif tidak jauh berbeda terhadap  kadar  gula  darah.  Pemberian teh  kombucha  selama  2  minggu  didapat bahwa teh kombucha dengan fermentasi 12  hari  tidak  memberikan  beda  secara nyata dengan teh kombucha fermentasi 8 hari dan kelompok kontrol positif. Meski teh  kombucha  mempunyai  kelemahan dalam  proses    pembuatannya,   seperti
merebus  air  harus  dengan  tempat stainlees  steel,  larutan  teh  manis ditaruh dalam  tempat  yang  terbuat  dalam  kaca (Siregar 2003), ditutup dengan kain tetapi tidak  boleh  terlalu  rapat,  bau  yang  asam dan  mempunyai  rasa  yang  asam,  tetapi cukup  memberikan  pengaruh  terhadap kadar gula darah.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang dilakukan  dapat  diperoleh  kesimpulan bahwa  teh  kombucha  memberikan penurunan  kadar  glukosa  darah  secara nyata  pada  tikus  putih  jantan  yang  telah diinduksi aloksan. Fermentasi teh kombucha  selama  12  hari  tidak  jauh berbeda  dengan  teh  kombucha  dengan fermentasi  8  hari  dan  kontrol  positif dalam  memberikan  efek  penurunan kadar  glukosa  darah  pada  tikus  putih jantan yang telah diinduksi aloksan

## DAFTAR PUSTAKA
Aditiwa  P  dan  Kusnandi.  2003.  Kultur campuran dan faktor lingkungan
mikroorganisme  yang  berperan  dalam fermentasi  tea-cider .  Sains  dan  Tek 35 A(2): 147-162.
Badole  SL,  Patel  NM,  Thakurdesai  PA, Bodhankar  SL.. 2008. Interaction  of aqueous extract of Pleurotus pulmonarius  (Fr.)  Quel-Champ. with glyburide  in  alloxan  induced  diabetic mice. Evid  Based  Complement  Alternat Med. 5(2):  159–164.  http:  //www.  jab .zsf.jcu.cz//5-3/badole,pdf. [9 September 2013].
Dashti MH, Morshedi A. 2000. A comparison between  the  effect  of  black  tea  and kombucha tea on blood glucose level in diabetic rat. Sciences.
13(2):
83-87. http://www.medicaljournal-ias.
org/Belgelerim/Belge/DashtiYINJSWGLI Q 65299.pdf. [21 Mei 2013].
[Depkes RI] Departemen Kesehatan Republik Indonesia.  1979. Farmakope  Indonesia. Jilid  III.  Jakarta:  Departemen  Kesehatan
Republik Indonesia. [Depkes]. Departemen  Kesehatan  Republik Indonesia. 1987. Analisis Obat Tradisional. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. [Depkes].  Departemen  Kesehatan  Republik Indonesia.  1995. Farmakope  Indonesia. Edisi IV. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Dipiro  JT,  Talbert  RL,  Yee  GC,  Matzke  GR, Wells BG, Posey LM. 2008. Pharmacotherapy:  A  Pathophysiologic Approach.  Edisi  ke-7. New  York: McGraw – Hill Companies, Inc.
Eberl  L,  Schulze  R,  Ammendola  A, Geisenberger  O,  Erhart  R,  Sternberg  C, Molin  S,  Amann  R.  1997. Use  of  green fluorescent  protein  as  a  marker  for ecology  studies  of  activated  sludge communities. FEMS Microbiology Latters. 149: 77-83. Fessenden  dan  Fessenden.  1997. Kimia Organik.  Jilid  II.  Aloysius  Hadyana Pudjaatmaka, Penerjemah; Jakarta: Erlangga. Terjemahan  dari: Organic Chemistry.
Kusumah AP. 2008. Pengaruh pemberian teh kombucha  dosis  bertingkat  per  oral terhadap  gambaran  histologi  hepar mencit  BALB/C  [Karya  Tulis  Ilmiah]. Semarang: Fakultas Kedokteran Universitas  Diponegoro.  http://www. eprints.Undip.ac.id/24314/1/Angga.pdf. [22 Juli 2013] Lukitawati W. 2013. Pengaruh teh kombucha terhadap glukosa darah Rattus norvegicus. Chemistry 2:  119-124. http://www.journal.unesa.ac.id/ index.php/unesa-journal-of-chemistry/
article/view/1322.pdf. [16 April 2013]
Nainggolan  J.  2009.  Kajian  pertumbuhan bakteri Acetobacter sp. dalam kombucha-rosela merah ( Hibiscus sabdariffa)  pada  kadar  gula  dan  lama fermentasi yang berbeda. [Tesis]. Medan. Universitas Sumatra Utara.
Prameswari  OM,  Widjanarko  SM.  2014.  Uji efek  ekstrak  air  daun  pandan  wangi terhadap  penurunan  kadar  glukosa darah  pada  histopatologi  tikus  diabetes mellitus. Jurnal Pangan dan Agroindustri. 2(2): 16-27 Ren J, Jin P, Wang E, Liu E,  Harlan DM, Li X, Stroncek DF.  2007.  Pancreatic cell therapy for type diabetes: understanding the effect of glucose stimulation on islet in  order  to  produce  better  islet  for transplantation. J Transl Med. 5(1): 1-15.
Robinson  T.  1995. Kandungan  Organik Tumbuhan  Tingkat  Tinggi.  Edisi  6 Padwaminta, penerjemah; Bandung: ITB Bandung.  Terjemahan: The Organic
Constituens of Higher Plants.
Simanjuntak  R,    Siahaan  N.  2011.  Pengaruh Konsentrasi  Gula  dan  Lama  Fermentasi terhadap  Mutu  Teh  Kombucha. Jurnal Ilmiah  Pendidikan  Tinggi. 4(2):  81-92. http://akademik.nommensen-id.org/por tal/public_html/JURNAL/Jurnal_Rosnaw yta_Simanjuntak/Juridikti%20Edit.pdf. [20 Februari 2013].
Siregar  BA.  2003.  Studi  tentang  Pengaruh Jenis  dan  Wadah  Fermentasi  pada Proses  Pembuatan  Teh  Kombucha (Combucha  Tea). [Skripsi].  Medan:  THP FP-USU Library.