## Standarisasi Simplisia Daun Kenikir ( Cosmos caudatus Kunth) Dari Tiga Daerah Berbeda
Miftahul Jannah M.N (a) , Sumi Wijaya (a)* , Henry Kurnia Setiawan (a)
(a) Fakultas Farmasi, Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya, Indonesia
Kenikir dipercaya sebagai obat penurun suhu tubuh, memperbaiki sirkulasi darah, mengobati diabetes, sebagai anti- aging dan menjaga kekuatan tulang. Saat ini telah banyak produk serbuk daun kenikir dalam bentuk kapsul di  pasaran,  tetapi  belum  ada  data  standarisasi  dari  simplisia  daun  kenikir,  sehingga  penelitian  ini  dilakukan bertujuan untuk mendapatkan profil standarisasi spesifik dan non-spesifik dari simplisia daun kenikir. Parameter spesifik terdiri dari identitas simplisia, organoleptis, kadar sari laut air, kadar sari larut etanol,  penetapan  profil kromatografi  dengan  menggunakan  KLT,  penetapan  profil  spektrum  dengan  menggunakan  spektrofotometer infrared  dan  UV-Vis serta  penetapan kadar senyawa  metabolit sekunder. Parameter non spesifik meliputi susut pengeringan, kadar abu total, kadar abu tak larut asam, kadar abu larut air, pH, dan persen bahan asing. Data yang  diperoleh  merupakan  data  deskriptif  yang  diperoleh  dari  3  lokasi  berbeda.  Hasil  pengamatan  mikroskop daun segar kenikir menunjukkan tipe berkas pembuluhnya adalah kolateral terbuka, jaringan bunga karang atau palisade, dengan tipe stomata anomositik, rambut penutup non-glandullar, kristal Ca-oksalat bentuk pisma dan tipe daun dorsiventral. Hasil kadar sari larut etanol > 23,3%, kadar sari larut air > 13,15%. Hasil skrining fitokimia menunjukkan  adanya  senyawa  flavonoid,  saponin,  polifenol,  steroid  dan  triterpenoid.    Hasil  pengamatan  profil kromatogram  secara  KLT  dengan  fase  diam  silika  gel  F254  dan  fase  gerak  yang  terpilih  adalah n -heksan  :  etil asetat  (7:3).  Hasil  penetapan  kadar  flavonoid  total  >  1,30%,  fenol  >  2,18%.  Nilai  susut  pengeringan  ≤13,5%, sedangkan hasil kadar abu total ≤6,0% dengan kadar abu larut air ≤5,0% dan kadar abu tak larut asam ≤2,0%, pH simpisia untuk pelarut air yaitu 6- 7 dan pada pelarut etanol 4 – 6.
Kata kunci: Simplisia, daun kenikir, profil standarisasi, spesifik, non spesifik

## Standardization of Dried Powder of Cosmos ( Cosmos caudatus Kunth) Leaves from Three Different Areas
Cosmos leaves is also believed to be a medicine to reduce body temperature, improve blood circulation, and treat diabetes, as an anti-aging and to maintain bone strength. There are many cosmos leaf powder products in capsule on  the  market,  but  there  is  no  standardization  of  cosmos  leaf  dried  powder.  Thus,  this  study  was  conducted aiming  to  obtain  specific  and  non-specific  standardization  profiles  of  cosmos  leaves  dried  powder.  Specific parameters  consist  of  identity,  characterization  of  the  macroscopic  and  microscopic  of  the  cosmos  leaf  dried powder,  water  soluble  extract,  ethanol  soluble  extract,  determination  of  chromatographic  profiles  using  TLC, determination of spectrum profiles using infrared and Uv-Vis spectrophotometers and determination of levels of secondary metabolite compounds. Non-specific parameters include shrinkage drying, ash content, acid insoluble ash,  water  soluble  ash,  and  pH  measurement.  The  data  obtained  is  descriptive  data  collected  from  3  different locations  (Batu,  Sidoarjo,  also  Yogyakarta).  The  microscopic  observation  of  the  cosmos  leaves  has  collateral vessels, palisade cell, stomata anomocytic, non-glandular unicellular trichome, prism-shaped Ca-oxalate crystals, and epidermis, and dorsiventral leaf. The results of standardization of dried powder cosmos leaves, have value of soluble ethanol extract >23.3%, water soluble extract contents >13.15%. Contain flavonoid compounds, saponins, polyphenols, steroids and triterpenoids. The results of the observation of the chromatogram profile by TLC with the silica gel F254 stationary phase and the selected mobile phase were n-hexane: ethyl acetate (7: 3). The results of the  determination  of  total  flavonoid  levels  >1.30%,  phenol  >2.18%.  drying  shrinkage  level  ≤13.5%,  while  the results of total ash content ≤6.0% with water soluble ash content ≤5.0% and acid insoluble ash content ≤2.0%, pH measurements of dried powder for water are 6-7 and ethanol 4-6.
Keywords: dried powder, Cosmos leaves, standardization profile, specific, non specific
*Corresponding  author : Sumi  Wijaya,  Fakultas  Farmasi  Unika  Widya  Mandala  Surabaya,  email: sumi@ukwms.ac.id

## PENDAHULUAN
Bangsa Indonesia telah lama mengenal dan menggunakan  tanaman  berkhasiat  obat  sebagai salah  satu  upaya  dalam  menanggulangi  masalah kesehatan. Pengetahuan tentang tanaman berkhasiat  obat  berdasar  pada  pengalaman  dan ketrampilan  yang  secara  turun  temurun  telah diwariskan  dari  satu  generasi  ke  generasi berikutnya  (Lusia,  2006).  Penggunaan  bahan alam  sebagai  obat  tradisional  di  Indonesia  telah dilakukan oleh nenek moyang kita sejak berabad- abad  yang  lalu  terbukti  dari  adanya  naskah  lama pada  daun  lontar  Husodo  (Jawa),  Usada  (Bali), Lontarak  pabbura  (Sulawesi  Selatan),  dokumen Serat  Primbon  Jampi,  Serat  Racikan  Boreh Wulang  Dalem  dan  relief  candi  Borobudur  yang menggambarkan  orang  sedang  meracik  obat (jamu) dengan tumbuhan sebagai bahan bakunya (Sukandar, 2006).
Obat tradisional adalah bahan atau ramuan bahan  yang  berupa  bahan  tumbuhan,  bahan hewan,  bahan  mineral,  sediaan  sarian  (galenik), atau  campuran  dari  bahan  tersebut  yang  secara turun temurun telah digunakan untuk pengobatan,  dan  dapat  diterapkan  sesuai  dengan norma  yang  berlaku  di  masyarakat  (BPOM  RI, 2005). Dalam proses pembuatan Obat Tradisional,  bahan  baku  yang  digunakan  harus memenuhi  persyaratan  mutu,  baik  parameter spesifik  dan  non  spesifik.  Standarisasi  adalah serangkaian  parameter,  prosedur,  dan  cara pengukuran  yang  hasilnya  merupakan  unsur- unsur  terkait  seperti  paradigma  mutu  yang memenuhi standar dan jaminan stabilitas produk. Standarisasi  dilakukan  agar  tanaman  yang  akan digunakan  sebagai  bahan  baku  obat  tradisional memiliki  kualitas  yang  baik  sesuai  dengan persyaratan (BPOM RI, 2005).
Salah satu tanaman yang bisa dimanfaatkan sebagai  bahan  obat  tradisional  adalah  Daun Kenikir  ( Cosmos  caudatus Kunth).  Daun  kenikir merupakan  salah  satu  sayuran  yang  sering dikonsumsi sebagai lalapan dan sebagai salad oleh masyarakat  Malaysia.  Kenikir  memiliki  bau harum  dan  aroma  yang  unik.  Secara  tradisional daun  kenikir  berkhasiat  sebagai  obat  penambah nafsu makan, penguat tulang, lemah lambung dan pengusir serangga (Budi, Wardani, dan Wijayanti, 2008). Daun kenikir digunakan secara tradisional sebagai  obat  penurun  suhu  tubuh,  memperbaiki sirkulasi darah, mengobati diabetes, sebagai anti- aging dan  menjaga  kekuatan  tulang  (karena kandungan  kalsiumnya),  perawatan  terhadap infeksi  mikroorganisme  bersifat  patogen  dan menjaga sistem pernafasan (Amna et al ., 2013).
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Lotulung, Minarti,  dan  Kardono  (2001), Cosmos  caudatus Kunth. memiliki aktivitas antioksidan yang sangat tinggi. Antioksidan yang utama berupa proantosianidin,  glikosida,  klorogenik,  neokloro- genik,  asam  kriptoklorogenik,  katekin.  Kapasitas antioksidan  100  g  daun  segar  kenikir  setara dengan  2.400  mg  asam  askorbat  (Mediani et  al .,
2012).  Pengembangan  obat  dan  nutrisi  yang dilakukan oleh Bunawan et al. (2014) menyimpulkan  bahwa Cosmos  caudatus Kunth kaya akan komponen bioaktif termasuk flavonoid, karbohidrat,  fenol,  mineral,  protein  dan  vitamin sebagai nutrisi tambahan.
Berdasarkan  hasil  beberapa  penelitian diatas membuktikan bahwa daun kenikir memiliki khasiat sebagai antioksidan, penurun suhu tubuh dan penguat tulang karena kandungan kalsiumnya  yang  tinggi,  serta  daun  kenikir dipercaya  sebagai  anti-kanker  yang  diolah menjadi  kapsul  ekstrak  daun  kenikir  serta  teh celup  kenikir  yang  telah  beredar  di  masyarakat. Sejauh  studi  literatur  yang  dilakukan  peneliti, belum  ada  acuan  dan  penelitian  tentang standarisasi  secara  spesifik  dan  non-spesifik  dari daun kenikir sebagai bahan obat tradisional. Oleh sebab  itu  perlu  dilakukan  penelitian  tentang standarisasi daun kenikir.
Standarisasi terhadap daun kenikir dilakukan  baik  pada  simplisia  segar  maupun simplisia kering. Pada daun segar akan dilakukan pengamatan  makroskopis  dan  mikroskopisnya, untuk simplisia kering akan dilakukan penetapan standarisasi spesifik dan non spesifik. Standarisasi  spesifik  yang  dilakukan  adalah identifikasi  simplisia,  pengamatan  organoleptis, pengamatan  mikroskopis,  penetapan  kadar  sari larut  etanol,  penetapan  kadar  sari  larut  air, skrinning  fitokimia,  penetapan  profil  spektrum simplisia  dengan  spektrofotometri  IR,  penetapan profil kromatogram simplisia dengan kromatografi  lapis  tipis,  penetapan  profil spketrum  simplisia  dengan  spektrofotometri, penetapan  kadar  senyawa  metabolit  sekunder. Standarisasi  non  spesifik  yang  dilakukan  antara lain  penetapan  kadar  abu,  kadar  abu  tak  larut asam,  kadar  abu  tidak  larut  air,  penetapan  susut pengeringan  simplisia,  persen  bahan  asing,  dan pengukuran  pH.  Data  yang  diperoleh  merupakan data  deskriptif  yang  mencerminkan  perolehan data dari 3 lokasi yang berbeda.
Daun  kenikir  yang  akan  distandarisasi didapatkan  dari  tiga  lokasi  yang  berbeda  dan memiliki  letak  geografi  yang  berbeda.  Kelompok yang pertama dikoleksi dari Balai Materia Medika Indonesia  (Batu)  terletak  pada  ketinggian  ±  875 meter  di  atas  permukaan  laut  (dpl)  dengan  suhu rata-rata  20-25°C,  kelembaban  udara  sekitar  75- 89%  dan  curah  hujan  2733  mm  per-tahun. Kelompok  yang  kedua  dari  daerah  Jogjakarta yang  terletak  pada  ketinggian  112  meter  di  atas permukaan laut (dpl) dengan suhu rata-rata 21º - 29°C,  kelembaban  udara  sekitar  76%  dan  curah hujan  2157  mm  per-tahun.  Kelompok  ketiga dikoleksi  dari  Kecamatan  Taman  (Sidoarjo)  yang berada  pada  ketinggian  3-10  meter  diatas permukaan laut  (dpl) dengan suhu rata-rata 23,6 °C  -  33,8  °C,  dan  curah  hujan  rata-rata  355  mm (Bapedal  Kota  Sidoarjo,  2011;  Bapedal  Kota Yogyakarta, 2014; Materia Medica Batu, 2014).
Standarisasi  simplisia  kering  daun  kenikir diambil  dari  tiga  daerah  berbeda  dikarenakan jumlah kandungan kimia pada daun kenikir tidak dapat dijamin selalu konstan, karena dipengaruhi oleh variabel bibit, tempat tumbuh, iklim, kondisi (umur  dan  cara  panen).  Standarisasi  simplisia yang  dilakukan  merupakan  tahap  awal  untuk memberi  acuan  persyaratan  mutu  bahan  awal dalam  menunjang  penelitian  berikutnya  dalam pengembangan obat herbal.

## METODE PENELITIAN

## Alat
Alat-alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  yaitu  timbangan  kasar,  timbangan  analitik (Sartorius, Germany),  IR moisture balance (Kett, Germany),  pH  meter  (Cole),  mikroskop  (Carlton, Jerman),  oven  (Memmert,  Germany), chamber KLT,  tabung  reaksi  (Pyrex,  Germany),  cawan porselen,  gelas  ukur  (Pyrex,  Germany),  beaker glass  (Pyrex,  Germany),  Erlenmeyer  (Pyrex, Germany),  labu  ukur  (Pyrex,  Germany),  corong pisah  (Pyrex,  Germany),  corong  gelas,  batang pengaduk,  pipet  tetes,  spatel, waterbath (Cina), bunsen,  kaca  objek, cover  glass ,  lampu  UV  254 nm dan 366 nm.

## Bahan
Bahan  kimia  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu  akuades  (PT  Brataco Chemika,  Indonesia),  etanol  96%  (PT  Brataco Chemika,  Indonesia),  HCl  pekat  (PT  Brataco Chemika,  Indonesia),  amil  alkohol  (PT  Brataco Chemika, Indonesia), amonia teknis (PT Brataco Chemika,  Indonesia),  asam  nitrat  pekat  (PT Brataco  Chemika,  Indonesia),  kalium  iodida teknis  (PT  Brataco  Chemika,  Indonesia), kloroform teknis (PT Brataco Chemika, Indonesia),  butanol  (PT  Brataco  Chemika, Indonesia), n -heksan  (PT  Brataco  Chemika, Indonesia),  etil  asetat  (PT  Brataco  Chemika, Indonesia),  AlCl3  (PT  Brataco  Chemika, Indonesia), metanol teknis, H2SO4 pekat, NaOH, bismut (III) nitrat, FeCl3, kloralhidrat, floroglusin HCl, magnesium, asam asetat glasial, formaldehid,  silika  gel,  kertas  saring,  dan  kertas perkamen.

## Tahapan Penelitian
Pada penelitian akan dilakukan standarisasi simplisia  kering  daun  kenikir  ( Cosmos  caudatus Kunth.).  Serbuk  simplisia  yang  digunakan dikoleksi  dari  tiga  daerah  yaitu  Balai  Materia Medika  Indonesia  Batu,  Kota  Jogjakarta,  dan Sidoarjo.  Standarisasi  yang  dilakukan  meliputi standarisasi  spesifik  dan  non  spesifik  serta pengamatan makroskopis dan mikroskopis.
Standarisasi spesifik yang dilakukan meliputi  identitas,  organoleptis,  mikroskopis, kadar  sari  larut  air,  kadar  sari  larut  etanol, skrining  fitokimia  meliputi  identifikasi  flavonoid, polifenol, alkaloid, saponin, tanin, kuinon, steroid dan  terpenoid,  penetapan  profil  kromatogram dari  simplisia  daun  kenikir  dengan  metode
kromatografi  lapis  tipis  (KLT),  penetapan  profil spektrum  dengan  metode  spektroskopi  infrared UATR,  dan  penetapan  kadar  senyawa  metabolit sekunder  dengan  spektrofotometri  UV-Vis. Parameter  standarisasi  non  spesifik  meliputi susut  pengeringan,  kadar  abu  total,  kadar  abu larut  air,  kadar  abu  tidak  larut  asam,  persen bahan asing, dan penentuan pH.

## Pengamatan Makroskopis dan Mikroskopis
Pengamatan  makroskopis  dilakukan  pada daun kenikir segar yang didapatkan dari Sidoarjo. Tahap  ini  dilakukan  dengan  mengamati  ciri-ciri bagian  daun,  mulai  dari  pengamatan  bentuk daun,  tepi  daun,  tulang  daun,  permukaan  daun, warna  daun,  ukuran  daun,  ujung  daun,  filotaksis daun.  Hasilnya  dapat  dilihat  pada  tabel  1. Pengamatan ini dilakukan menggunakan mikroskop dengan membuat irisan membujur dan melintang  pada  daun  kenikir  segar  ( Cosmos caudatus Kunth).  Media  pengamatan  yang digunakan  yaitu  air,  kloralhidrat  dan  floroglusin HCl.

## Standardisasi Simplisia
Standarisasi  dilakukan  untuk  menentukan profil  standarisasi  dari  simplisia  daun  kenikir ( Cosmos caudatus Kunth) yang berupa parameter spesifik  dan  parameter  non  spesifik.  Parameter spesifik yang diujikan berupa parameter identitas; karakteristik mikroskopis; karakteristik makroskopis;  skrining  fitokimia;  kandungan senyawa terlarut dalam air dan etanol; penentuan profil  kromatogram  dengan  kromatografi  lapis tipis (KLT); dan uji total flavonoid serta polifenol. Parameter  non  spesifik  yang  diujikan  berupa susut pengeringan; pH; kadar abu total, kadar abu tidak  larut  asam  dan  kadar  abu  larut  air  dan persen bahan asing.

## Penetapan Profil Kromatogram Secara KLT
KLT  yang  dilakukan  menggunakan  fase diam  berupa  pelat  silica  gel.  Fase  gerak  yang digunakan  meliputi  butanol  :  asam  asetat  :  air (4:1:5),  Kloroform  : n -Heksan  (9:1),  Metanol  : Kloroform  (6:4),  Kloroform  :  Etil  asetat  (5:5), n - Heksan  :  Etil  asetat  (7:3).  KLT  dilakukan menggunakan chamber .  Sampel  pada  masing- masing  daerah  disiapkan  1  gram  dalam  10  ml (10%) untuk kemudian ditotolkan sebanyak 10 µl, dengan  jarak  penotolan  kurang  lebih  1,5  cm  dari tepi  bawah  pelat.  Plat  yang  sudah  ditotolkan dieluasi  dengan  fase  gerak  yang  sudah  jenuh dengan tinggi pelarut 0,5 cm sampai 1 cm. Setelah proses  eluasi  selesai,  pelat  dikeluarkan  dari chamber .  Pelat  KLT  dikeringkan  di  udara, kemudian  bercak  diamati  mula-mula  secara visibel,  kemudian  dengan  sinar  ultraviolet gelombang pendek (254 nm) dan sinar ultraviolet dengan  gelombang  panjang  (366  nm).  Lempeng KLT  yang  sudah  diamati  menggunakan  UV disemprot  menggunakan  penampak  bercak, kemudian diamati secara visibel dan menggunakan sinar ultraviolet dengan gelombang
panjang  (366  nm)  dan  diambil  gambarnya  untuk proses dokumentasi, kemudian harga Rf dihitung (DepKes RI, 1989).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian yang dilakukan yaitu, standarisasi  simplisia  daun  kenikir.  Simplisia daun kenikir yang digunakan didapatkan dari tiga daerah  berbeda  yaitu  Batu,  Sidoarjo,  dan Jogjakarta.  Pemilihan  daun  kenikir  dikarenakan tanaman  tersebut  mudah  dijumpai  dan  memiliki khasiat  tradisional  yang  secara  turun-temurun telah  dipercaya  untuk  pengobatan  tradisional, yaitu  untuk  penurun  suhu  tubuh,  memperbaiki sirkulasi darah, mengobati diabetes, sebagai anti- aging dan  menjaga  kekuatan  tulang  (karena kandungan  kalsiumnya),  perawatan  terhadap infeksi  mikroorganisme  bersifat  patogen  dan menjaga  sistem  pernafasan  (Amna et  al .,  2013). Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  menetapkan profil  standarisasi  spesifik  dan  non-spesifik  dari simplisia daun kenikir ( Cosmos caudatus Kunth). Simplisia  daun  kenikir  dipilih  dari  tiga  daerah berbeda  karena  kandungan  kimia  pada  daun kenikir  dapat  dipengaruhi  oleh  variabel  tempat
tumbuh,  iklim,  dan  kondisi  (umur  dan  cara panen).
Penelitian  diawali  dengan  pengamatan makroskopik dan mikroskopik daun segar kenikir yang  didapatkan  dari  daerah  Sidoarjo.  Hasil pengamatan didapat panjang daun yaitu 11-17 cm dan  lebar  daun  yaitu  8-12  cm.  Warna  daun  pada bagian  depan  dan  belakang  berwarna  hijau, bentuk  daun  majemuk,  ujung  daun  runcing, bagian  atas  dan  bawah  daun  berbeda,  dimana bagian  atas  halus  dan  bagian  bawah  berambut, tulang  daun  berbagi  menyirip  dan  filotaksisnya berhadapan  (Tabel  1).  Hasil  pengamatan mikroskop  daun  segar  kenikir  menunjukkan  tipe berkas  pembuluhnya  adalah  kolateral  terbuka, dengan  tipe  stomata  anomositik  yaitu  stomata yang  memiliki  sel  tetangga  dengan  bentuk  dan ukuran  yang  sama  dengan  sel  epidermisnya  dan jumlah  lebih  dari  dua.  Tipe  daun  dorsiventral, yaitu daun yang memiliki parenkim palisade pada kedua sisi daun (adaksial dan abaksial). Fragmen spesifik  yang  ditemukan  yaitu  rambut  penutup, kristal  Ca-oksalat  bentuk  prisma  dan  pembuluh kayu dengan penebalan spiral (Tabel 2).
Tabel 1. Hasil Pengamatan Makroskopis Daun Kenikir Parameter Hasil Pengamatan Pustaka (FHI ed.I, 2008) Bentuk Daun majemuk terbagi Daun majemuk terbagi Warna Hijau Hijau Ukuran Panjang 11- 17 cm Lebar 8 – 12 cm Panjang ±25cm Lebar ±15cm Ujung dan pangkal daun Ujung    : Runcing Pangkal : Melebar Ujung    : Runcing Pangkal : Runcing Tepi daun Tidak Rata Rata Tulang daun Menjari Menyirip Filotaksis Berhadapan Berhadapan Tabel 2. Hasil Pengamatan Mikroskopis Daun Kenikir Parameter Hasil Pengamatan Mikroskop Tipe berkas pembuluh Kolateral terbuka Tipe daun Dorsiventral Tipe stomata Anomositik Sel penyusun, trikoma dan inklusi sel Epidermis, parenkim, kolenkim, sklerenkim, rambut penutup tipe multiseluler nonglandular, xylem, floem, klorofil, Kristal ca-oksalat tipe prisma.
Penetapan  profil  standarisasi  yang  dilaku- kan  meliputi  standarisasi  spesifik  dan  non spesifik. Standarisasi spesifik meliputi organoleptis,  mikroskopik,  kadar  sari,  skrining fitokimia,  penetapan  profil  spektrum  secara spektrofotometri  UV,  penetapan  spektrum  secara infrared,  profil  kromatogram  secara  KLT,  dan penetapan  kadar  senyawa  metabolit.  Hasil pengamatan  organoleptis  simplisia  daun  kenikir berupa  serbuk  berwarna  hijau  dan  berbau  khas. Hasil  pengamatan  mikroskopik  simplisia  daun kenikir  mempunyai  berkas  pembuluh  dengan penebalan  spiral,  stomata,  rambut  penutup  tipe multiseluler  nonglandular,    Kristal  ca-oksalat bentuk prisma dan epidermis tulang daun.
Penetapan  kadar  sari  larut  dengan  prinsip melarutkan  simplisia  dengan  pelarut  terpilih (alkohol  dan  air)  tujuannya  untuk  memberikan gambaran  awal  jumlah  kandungan  yang  terlarut dalam  pelarut  tertentu.    Berdasarkan  hasil pengamatan  didapatkan  hasil  %  kadar  sari  larut air yaitu 13,1502 ± 0,6786 untuk Batu, 15,5685  ± 1,5621  untuk  Jojgakarta,  dan  14,1637  ±  0,7281 untuk Sidoarjo, sehingga dapat dinyatakan untuk kadar  sari  larut  air  simplisia  daun  kenikir  yaitu ≥13%.  Kadar  sari  larut  etanol  didapatkan  hasil 24,0158  ±  1,3358  untuk  Batu,  24,1655  ±  1,5280 untuk  Jogjakarta,  dan  22,5836  ±  2,4160  untuk daerah Sidoarjo, sehingga dapat dinyatakan untuk kadar  sari  larut  etanol  simplisia  daun  kenikir
yaitu  ≥22%.  Pada  pustaka  Farmakope  Herbal Indonesia  tahun  2008,  kadar  sari  larut  air simplisia daun kenikir >12,7% dan kadar sari larut etanol  >23,3%,  sehingga  dapat  dikatakan  bahwa simplisia daun kenikir dari ketiga lokasi memiliki kadar  sari  larut  etanol  yang  sesuai  dengan pustaka,  sedangkan  untuk  kadar  sari  larut  air tidak  sesuai  dengan  persyaratan  yang  terdapat pada  pustaka,  hal  ini  disebabkan  oleh  perbedaan letak  tumbuh,  iklim  dan  kondisi  pemanenan  dari ketiga simplisia.
Skrining fitokimia yang dilakukan terhadap simplisia daun kenikir dilakukan untuk mengetahui  kandungan  senyawa  dalam  simplisia daun  kenikir.  Hasil  pengamatan  skrining fitokimia  dengan  metode  tabung  dari  ketiga daerah didapatkan hasil positif pada pengamatan flavonoid,  polifenol,  saponin,  steroid  dan triterpenoid.  Senyawa  alkaloid  tidak  ditemukan dalam  simplisia  daun  kenikir  pada  metode tabung.  Hal  yang  didapatkan  sesuai  dengan penelitian  dari  Hariana  (2005)  dan  Rasdi  dkk (2010) tentang kandungan dari daun kenikir yaitu pada  umumnya  terdiri  dari  flavonoid,  polifenol, saponin,  terpenoid,  dan  minyak  atsiri.  Pada  uji skrinning fitokimia dengan menggunakan metode Kromatografi  Lapis  Tipis,  didapatkan  bahwa simplisia  daun  kenikir  memiliki  kandungan  yang sedikit berbeda dengan hasil dari uji tabung, yaitu pada skrininng KLT didapatkan hasil positif pada alkaloid, hal itu dapat dilihat dengan adanya noda pada plat KLT dengan penyemprotan dragendroff. Hasil  yang  didapatkan  dari  kedua  metode memeliki  perbedaan,  perbedaan  tersebut  diduga pengaruh dari metode yang digunakan. Skrinning fitokimia  dengan  metode  KLT  lebih  memiliki ketepatan  dalam  pemisahan  senyawa  metabolit sekunder.
Pengujian  identifikasi  profil  kromatografi lapis  tipis  dilakukan  terhadap  simplisia  daun kenikir dengan melakukan percobaan menggunakan  berbagai  macam  fase  gerak. Tujuannya  adalah  untuk  memberikan  gambaran awal  komposisi  kandungan  kimia  berdasarkan pola  kromatogram  yang  dihasilkan  dari  eluasi beberapa  fase  gerak dan mendapatkan  fase  gerak terpilih.    Pemilihan  fase  gerak  didasarkan  pada polaritas.    Fase  gerak  yang  digunakan  adalah metanol : kloroform (6:4), butanol : asam asetat : air (4:1:5), kloroform : etil asetat (5:5), n -heksan : etil  asetat  (7:3),  kloroform  : n -heksan  (9:1). Larutan  sampel  ditotolkan  sebanyak  10  μl, pengamatan hasil KLT dilakukan  pada lampu UV 254  dan  UV  366.  Penampak  bercak  yang digunakan adalah AlCl 3 . Digunakannya penampak bercak  AlCl 3 untuk  mengetahui  kandungan senyawa  flavonoid,  adanya  kandungan  flavonoid dalam sampel dapat diketahui dengan munculnya noda  berwarna  kuning  pada  plat  KLT.  Dari  hasil eluasi,  fase  gerak  butanol  :  asam  asetat  :  air dengan  perbandingan  4:1:5  mengahsilkan  noda berwarna  kuning  dengan  intensitas  warna  lebih bagus dibanding fase gerak yang lain, akan tetapi
hasil  pemisahan  dari  butanol  :  asam  asetat  :  air (4:1:5)  sangat  buruk  bahkan  terjadi tailing pada plat. Oleh sebab itu fase gerak yang menghasilkan paling  banyak  bercak  noda  dan  keterpisahannya cukup  baik  dibandingkan  dengan  hasil  eluasi dengan  fase  gerak  lainnya  yang  keterpisahannya lebih  ber-himpitan  antar  noda  atau tailing menjadi  fase  gerak  yang  disarankan,  fase  gerak tersebut adalah n -heksan : etil asetat (7:3). Penetapan  spektrum  dengan  spektrofo- tometri  IR  bertujuan  untuk  menetapkan  profil spektrum  dan  membandingkan  hasil  dari  ketiga daerah.  Hasil  pengamatan  menunjukkan  bahwa simplisia  daun  kenikir  dari  tiga  daerah  berbeda memiliki  spektrum  yang  sama.  Hasil  analisis gugus  fungsi  menunjukkan  adanya  serapan melebar  dengan  intensitas  berbeda-beda  pada tiap  daerah,  bilangan  gelombang  3280  cm -1 yang diduga  serapan  dari  OH-  menunjukkan  adanya flavonoid dan fenol. Panjang gelombang 2917 cm -1 dan 1540 cm -1 menunjukkan adanya serapan C-H dan  C-O  yang  menunjukkan  adanya  senyawa flavonoid,  sedangkan  panjang  gelombang  2917 cm -1 pada serapan  C=C aromatis dan  C=C alifatis menunjukkan  adanyan  steroid  dan  triterpenoid. Serapan  C-N  alifatik  pada  panjang  gelombang 1240  cm -1 menunjukkan  adanya  polifenol,  dan adanya  gugus  NH2,  gugus  C-H  Alifatik  dan  C-N alifatik  yang  menunjukkan  adanya  senyawa alkaloid, sehingga simplisia daun kenikir dari tiga daerah  berbeda  memiliki  daerah  gugus  fungsi 3270–3281 cm -1 , 2917 cm -1 , dan 1502–1504 cm -1 . Penetapan  profil  menggunakan  spektro- fotometri  UV  bertujuan  untuk  identifikasi  dan penentuan  kuantitatif suatu senyawa.  Larutan uji dilakukan  pembacaan  pada  panjang  gelombang 200-600  nm.    Hasil  analisis  spektrum  serapan menunjukkan  bentuk  spektrum  yang  sama  dari ketiga  daerah.  Hal  ini  dapat  dilihat  dari  panjang gelombang maksimum yang dihasilkan tidak jauh berbeda  dari  ketiga  daerah  tersebut.    Salah  satu panjang  gelombang  maksimum  yang  dihasilkan, simplisia  daun  kenikir  dari  ketiga  daerah memberikan  serapan  pada  panjang  gelombang 347,5 – 354,0 nm dimana senyawa flavonoid jenis khalkon  juga  memiliki  panjang  gelombang maksimum  yang  sama  yaitu  pada  340  -  390  nm (Harborne,  1987).  Hasil  ini  sesuai  dengan  hasil skrining  fitokimia  simplisia  daun  kenikir  yang menunjukkan hasil positif senyawa flavonoid.
Penetapan  kadar  flavonoid  dan  fenol  dari simplisia daun kenikir dilakukan secara spektrofotometri. Penentuan kadar fenol simplisia daun  kenikir  dilakukan  dengan  pereaksi Follin ciocalteau dan  Na 2 CO 3 .  Pembanding  yang digunakan  adalah  asam  galat  dan  dari  baku standar  didapatkan  nilai  korelasi  dengan  harga  r hitung  (0,9461).  Kadar  fenol  simplisia  daun kenikir  dapat  dihitung  berdasarkan  nilai absorbansi  sampel  yang  dimasukkan  dalam persamaan baku standar y = 0,0003x  +  0,0801, maka    didapatkan    kadar    fenol    untuk    daerah Batu  2,87  %,  untuk  daerah  Sidoarjo  2,61  %  dan
untuk  daerah  Jogjakarta  2,18  %,  sehingga    kadar fenol  pada  simplisia daun kenikir adalah >2,18% b/b.  Dari ketiga daerah yang memiliki kadar fenol paling  besar  adalah  simplisia  daun  kenikir  dari daerah  Batu.  Hasil  ini  sesuai  dengan  hasil skrining  simplisia  daun  kenikir  dengan  metode KLT  menggunakan  penampak  bercak  FeCl 3 1% yang  menunjukkan  intensitas  warna  dari  daerah Batu  lebih  pekat  dibandingkan  dengan  daerah lainnya,  sehingga  hasil  dari  skrining  tersebut sesuai dengan hasil penetapan kadar fenol total.
Penetapan  kadar  flavonoid  menggunakan metode  kolorimetri  dengan  AlCl 3 pembanding yang  digunakan  adalah  kuersetin  dan  dari  baku standar  didapatkan  nilai  korelasi  dengan  harga  r hitung (0,9933).  Nilai absorbansi yang diperoleh kemudian dimasukkan ke dalam persamaan baku standar  kuersetin  y  =  0,0029x  +  0,02181  maka didapat  kadar  flavonoid  dalam  simplisia  daun kenikir sebesar 2,00 % untuk daerah Batu, 1,87 % untuk  daerah  Sidoarjo  dan  1,30  %  untuk  daerah Jogjakarta,  sehingga  kadar  flavonoid  pada simplisia  daun  kenikir  didapatkan  nilai  >  1,30% b/b.  Dari pengamatan ini didapatkan hasil kadar flavonoid  terbesar  pada  daerah  Batu.  Dari  hasil skrining fitokimia metode KLT dengan penyemprot  AlCl 3 didapatkan  sampel  dari  Batu memberikan  intensitas  warna  yang  lebih  pekat dibandingkan  daerah  lain,  sehingga  hasil  dari skrining  tersebut  sesuai  dengan  hasil  penetapan kadar flavonoid total.
Standarisasi  non  spesifik  meliputi  susut pengeringan,  bobot  jenis,  kadar  abu  total,  kadar abu  tidak  larut  asam,  kadar  abu  larut  air  dan pengukuran  pH.  Penetapan  susut  pengeringan bertujuan  untuk  mendapatkan  rentang  mengenai besarnya  senyawa  yang  hilang  selama  proses pemanasan,  tidak  hanya  air  tetapi  juga  senyawa lain  misalnya  minyak  atsiri  dan  sisa  pelarut organik.    Dalam  penelitian  ini  metode  penetapan susut pengeringan menggunakan metode gravimetri.  Hasil  penetapan  susut  pengeringan simplisia  daun  kenikir  adalah  9,56%  untuk  Batu, 12,88%  untuk  Sidoarjo,  13,2%  untuk  daerah Jogjakarta.  Berdasarkan  hasil  yang  didapat  susut pengeringan  simplisia  daun  kenikir  dapat dinyatakan  ≤13,5%,  hasil  susut  pengeringan paling  besar  pada  simplisia  daun  kenikir  dari daerah Jogjakarta.
Kadar  abu  total  merupakan  bahan  yang dipanaskan  pada  temperatur  dimana  senyawa organik  dan  turunannya  terdestruksi  dan menguap,  sehingga  tinggal  unsur  mineral  dan anorganik.  Parameter  ini  bertujuan  untuk memberikan  gambaran  kandungan  mineral internal  dan  eksternal  yang  berasal  dari  proses awal  sampai  terbentuknya  ekstrak  (DitjenPOM RI,  2000).  Kadar  abu  total  pada  simplisia  daun kenikir  mengindikasi  mineral  baik  internal maupun  eksternal  dengan  kadar  tertentu.  Hasil standarisasi  kadar  abu  total  simplisia  daun kenikir 4,76 % ± 0,62 untuk daerah  Batu; 5,87 % ± 0,87 untuk daerah   Sidoarjo; dan 5,74 % ± 0,98
untuk  daerah  Jogjakarta,  sehingga  dapat dinyatakan  hasil  kadar  abu  total  simplisia  daun kenikir  yaitu  ≤6,0%  hasil  yang  didapat  sesuai dengan  pustaka  yaitu  ≤6,5%.  Pengamatan dilanjutkan dengan kadar abu tak larut asam dan kadar abu larut air.
Kadar  abu  larut  air  dari  ketiga  daerah adalah  3,46  %  untuk  Batu,  4,74  %  untuk  daerah Sidoarjo,  dan  4,54  %  untuk  Jogjakarta,  sehingga dapat  dinyatakan  hasil  kadar  abu  larut  air  dari simplisia  daun  kenikir  dari  tiga  daerah  tersebut adalah  ≤5,0%.  Untuk  kadar  abu  tak  larut  asam didapatkan  hasil  untuk  masing-masing  daerah yaitu,  1,02  %  untuk  daerah  Batu,  1,52  %  untuk Sidoarjo,  dan  1,14  %  untuk  daerah  Jogjakarta, sehingga  dapat  dinyatakan  bahwa  kadar  abu  tak larut  asam  dari  keseluruhan  tiga  daerah  yaitu ≤2,0%.  Hasil  tersebut  jauh  lebih  tinggi  dari pustaka  yaitu  ≤0,5%  hal  ini  dapat  terjadi  karena kandungan  logam  dan  mineral  dari  ketiga simplisia  daun  kenikir  dipengaruhi  oleh  lokasi dan  iklim  tumbuh  tiap  tanaman  dalam  tiap daerah, sehingga hasil yang diperoleh lebih tinggi dari  pustaka,  adanya  kontaminasi  pada  proses pembuatan  simplisia  dari  tiap  daerah  juga  dapat mempengaruhi hasil yang didapatkan.
Pengukuran  pH  dan  persen  bahan  asing dilakukan  untuk  menentukan  batasan  nilai  dari derajat  keasaman  serta  pengotor  dengan  adanya uji  persen  bahan  asing.  Hasil  yang  diperoleh untuk  pH  dalam  media  etanol  yaitu  dengan rentang 4  – 6 dan rentang 6 – 7 untuk media air (Tabel  3).  Sedangkan  untuk  persen  bahan  asing diperoleh  hasil  dari  Batu  yaitu  2,67  %,  2,43  % untuk  Sidoarjo,  dan  3,63  %  untuk  daerah Jogjakarta, dan diperoleh  hasil  penetapan persen bahan  asing  simplisia  daun  kenikir  dari  tiga daerah tersebut adalah 2,67 % untuk Batu, 2,43% untuk Sidoarjo dan 3,63% untuk Jogjakarta.

## KESIMPULAN
1. Hasil  pengamatan  karakterisasi  tanaman segar  daun  kenikir  didapat  panjang  daun yaitu  11-17  cm  dan  lebar  daun  yaitu  8-12  cm. Warna daun pada bagian depan dan belakang berwarna hijau, bentuk daun majemuk, ujung daun  runcing,  bagian  atas  dan  bawah  daun berbeda, dimana bagian atas halus dan bagian bawah  berambut,  tulang  daun  menyirip berbagi  dan  filotaksisnya  silang  berhadapan. Hasil  pengamatan  mikroskop  daun  segar kenikir menunjukkan tipe berkas pembuluhnya  adalah  kolateral  terbuka, dengan  tipe  stomata  anomositik  dan  tipe daun  dorsiventral.  Fragmen  spesifik  yang ditemukan  yaitu  rambut  penutup,  kristal  ca- oksalat  bentuk  prisma  dan  pembuluh  kayu dengan penebalan spiral.
2. Profil  standarisasi  spesifik  simplisia  daun kenikir  secara  organoleptis  berupa  sebuk halus berwarna hiijau dan berbau khas. Hasil kadar  sari  larut  etanol  >  23,3%,  kadar  sari larut  air  >  13,15%.  Hasil  skrining  fitokimia
menunjukkan  adanya  senyawa  flavonoid, saponin,  polifenol,  steroid  dan  triterpenoid. Hasil pengamatan  profil kromatogram  secara KLT dengan fase diam silika gel F254 dan fase gerak  yang  terpilih  adalah n -heksan  :  etil asetat  (7:3).  Hasil  penetapan  kadar  flavonoid total > 1,30%, fenol > 2,18%.
3. Hasil  penetapan  profil  standarisasi  non- spesifik  simplisia  daun  kenikir  didapatkan nilai  susut  pengeringan  ≤13,5%,  sedangkan hasil kadar abu total ≤6,0% dengan kadar abu larut air ≤5,0% dan kadar abu tak larut asam ≤2,0%. Hasil pengukuran pH untuk media air yaitu 6- 7 dan media etanol 4 – 6.
Gambar 1 Hasil KLT simplisa daun kenikir dengan fase gerak n -heksan : etil asetat (7:3). Keterangan: a. Simplisia kering berasal dari Batu; b. Simplisia kering berasal dari Sidoarjo; c, Simplisia kering berasal dari Jogjakarta; 1. Pengamatan pada UV254; 2. Pengamatan pada UV366; 3. Pengamatan pada UV366 setelah penyemprotan dengan AlCl 3 ; 4. Noda yang menunjukkan sampel mengandung flavonoid Tabel 3. Hasil Standarisasi Spesifik dan Non Spesifik
Parameter Standarisasi Jenis Uji Lokasi Tumbuh Kesimpulan Batu Sidoarjo Jogjakarta Spesifik Bentuk Serbuk halus Serbuk kasar Serbuk halus Serbuk halus Bau Bau khas Bau khas Bau khas Khas Warna Hijau pekat Hijau agak kecoklatan Hijau muda Hijau Kadar sari larut etanol (%) 24,01 ± 1,33 22,58 ± 2,41 24,16 ± 1,52 >22% Kadar sari larut air (%) 13,15 ± 0,67 14,16 ± 0,72 15,56  ± 1,56 >13% Total flavonoid 2,00 ± 0,16 1,87 ± 0,19 1,30 ± 0,10 ≥ 1,30  % b/b Total fenol 2,87 ± 0,36 2,61 ± 0,47 2,18 ± 0,18 ≥ 2,18 % b/b Non-spesifik Kadar abu Total (% ± SD) 4,76 ± 0,62 5,87 ± 0,87 5,74 ± 0,98 ≤ 6,0 Kadar Abu Larut Air (% ± SD) 3,46 ± 0,42 4,74 ± 0,65 4,54 ± 0,84 ≤ 5,0 Kadar Abu Tak Larut Asam (% ± SD) 1,02 ± 0,28 1,52 ± 0,24 1,14 ± 0,42 ≤ 2,0 Susut Pengeringan (% ± SD) 9,56 ± 0,61 12,88 ± 0,20 13,20 ± 0,66 ≤ 13,5 pH (Etanol) 5,25 4,8 5,0 4 - 6 pH (Air) 6,2 6,6 6,0 6 - 7
a b c a b c a b c 1 2 3 4

## DAFTAR PUSTAKA
Amna,  O.F.,  Noorain,  H.,  Noriham,  A.,  Azizah,  A.H.,  and Husna, R.N. 2013.  Acute and oral sub acute toxicity study of ethanolic sample of Cosmos caudatus leaf in Sparague dawley Rats, International  Journal  of  Bioscience , Biochemistry  and Bioinformatics . 3 (4): 301-305.
BPOM  RI  [Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan  RI].    2005. Peraturan  Kepala  Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan Republik  Indonesia  Nomor:  HK.00.05.41.1384  tentang Kriteria  dan  Tata  Laksana  Pendaftaran  Obat  Tradisional, Obat  Herbal  Terstandar  dan  Fitofarmaka ,  Jakarta:  Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia.
Bapedal  Kota  Sidoarjo.  2011. Program  Percepatan Pembangunan Sanitasi Permukiman , Sidoarjo: Tim Pelaksana Kelompok Kerja PPSP Kabupaten Sidoarjo 2011.
Bapedal  Kota  Yogyakarta.  2014. Laporan  Status  Hidup Daerah  Kota  Yogyakarta .  Yogyakarta:  Pemerintah  Kota Yogyakarta.
Budi,  R.,  Wardani,  E.,  dan  Wijayanti,  T.  2008.  Pengaruh ekstrak  metanolik  daun  kenikir  ( Cosmos  caudatus Kunth.) terhadap  pemacuan  apoptosis  sel  kanker  payudara. Skripsi , Sarjana Pendidikan Biologi, Universitas Sanata Dharma.
Bunawan,  H.,  Baharum,  S.  N.,  Bunawan,  S.  N.,  Amin,  N,  M., dan Noor, N. M. 2014. Cosmos caudatus Kunth: a traditional medicinal  herb, Global  Journal  of  Pharmacology. 8(3):  420-
426.
Depkes RI [Departemen Kesehatan RI]. 1989. Materia Medika Jilid V, Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Ditjen  POM  RI  [Direktorat  Jendral  POM  RI].  2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat . Cetakan Pertama, Jakarta: Departemen Kesehatan RI.
Harborne,  J.B.  1987. Metode  Fitokimia .  Diterjemahkan  dari Bahasa  Inggris  oleh  Kosasih  dan  Iwang,  Penerbit  ITB, Bandung.
Hariana, A.   2005. Tumbuhan   Obat   dan   Khasiatnya . Seri 2. Penebar Swadaya, Jakarta.
Lotulung,  P.D.N.,  Minarti  dan  Kardono,  L.B.S.  2005. Penapisan  aktivitas  antibakteri,  antioksidan  dan  toksisitas terhadap  larva  udang Artemia  salina ekstrak  tumbuhan Asteraceae, Abstrak , Pusat Penelitian Kimia LIPI.
Lusia,  O.  2006.  Pemanfaatan  obat  tradisional  dengan pertimbangan  manfaat  dan  khasiatnya, Majalah  Ilmu Kefarmasian . 3(1): 01-07.
Materia  Medica  Batu.  2014.  Profil  singkat  Materia  Medica Batu, diakses tanggal 12 Januari 2019, https://materiamedicabatu.wordpress.com/page/3/.
Rasdi, N.H.M., Samah, O.A., Sule, A. and Ahmed, Q.U.  2010.
Antimicrobial studies of Cosmos caudatus Kunth. (Compositae), Journal  of  Medicinal  Plants Research .  4(8): 669-673.
Sukandar,  E.Y.  2006. Tren  dan  Paradigma  Dunia  Farmasi, Industri-Klinik-Teknologi  Kesehatan .  Disampaikan  dalam orasi    ilmiah    Dies    Natalis  ITB,  diakses  Oktober  2018  pukul 14.00, http://itb.ac.id/focus/focus_file/orasi-ilmiah-dies- 45.pdf.