## Jurnal Agrotek Tropika
Journal homepage: https://jurnal.fp.unila.ac.id/index.php/JA
FEKTIVITAS  EKTRAK  BIJI Annona  muricata DAN Schleicera  oleosa TERHADAP MORTALITAS IMAGO Callosobruchus maculatus Fabrichus

## THE  EFFECTIVENESS  OF  SEED  EXTRACTS  FROM  Annona  muricata  AND Schleicera oleosa ON THE MORTALITY OF ADULT Callosobruchus maculatus Fabrichus
Fransiska Paskalia Bria, Petronella Syahyanti Nenotek * , Yasinta Letak Kleden, I Wayan Mudita, Yosefina Rofina Yuliaty Gandut, Rika Ludji, dan Agustina Etin Nahas
Fakultas Pertanian, Universitas Nusa Cendana, Kota Kupang, Indonesia * Corresponding Author. E-mail address: petronella.nenotek@staf.undana.ac.id

## PERKEMBANGAN ARTIKEL:
Diterima: 30 Juli 2023 Direvisi: 13 September 2024 Disetujui: 15 September 2023

## KEYWORDS:
Annona muricata, Callosobruchus maculatus, botanical insecticide, Pest, Schleicera oleosa

## KATA KUNCI:
Annona muricata, Callosobruchus maculatus, hama, insektsida nabati, Schleicera oleosa
© 2024 The Author(s). Published by Department of Agrotechnology, Faculty of Agriculture, University of Lampung.

## ABSTRACT
Callosobruchus maculatus is one of the post-harvest pests on green bean. Eating activity reduces the quality and quantity of green beans. Control with fumigants can cause residues and inhibit green bean germination. One  environmentally  friendly  control  technology  is  a  botanical  insecticide  from  Annona  muricata  and Schleicera oleosa seeds, with the aim of determining the effect of A. muricata and S. oleosa seed extracts on the  mortality  of  C.  maculatus  imago.  Research  at  the  Plant  Pest  Laboratory,  Agiculture  of  Faculty,  Nusa Cendana University, using a Completely Randomized Design (CRD). The treatment was the concentration of each exctract, namely 0.06%; 0.125%, 0.25%; 0.5%; 1%; and control. Each treatment was repeated three times. Each replication was infested with 10 pairs of C. maculatus imago. Observable varieable are mortality and symptoms of death. Mortality data were calculated 24 hours after treatment (HAT) to 72 HAT. Mortality data  were  analyzed  using  the  POLO  PC  program.  Annona  muricata  and  S.  oleosa  caused  the  death  of  C. maculatus imago. The mortality of C. maculatus imago given S. oleosa seed extract was 96.66% at the highest concentration (1%). At the same concentration of S. oleosa seed, mortality was 88.33%. The LC50 and LC95 value of soursop seed extract against imago C. maculatus were 0.10% and 0.81%, while for S. oleosa seed extract LC50 and LC95 were 0.12% and 1.50%. Seed extracts of A. muricata and S. oleosa seed extracts from dryland areas on Timor Island have the potential to be developed as a bonatical insecticide .

## ABSTRAK
Callosobruchus maculatus merupakan salah satu hama pascapenan pada biji kacang hijau. Aktivitas makan dari hama ini menyebabkan menurunnya kualitas dan kuantitas biji kacang hijau. Pengendalian dengan fumigant  insektisida  nabati  dapat  menyebabkan  residu  pada  biji  kacang  hijau  dan  menghambat perkecambahan biji kacang hijau pada saat tanam. Oleh karena diperlukan teknologi pengendalian yang ramah lingkungan, salah satunya adalah menggunakan insektisida nabati dari biji Annona muricata dan Schleicera oleosa . Kandidat insektisida nabati dari dua tumbuhan asal Pulau Timor belum pernah diuji. Oleh  karena  itu  perlu  dilakukan  penelitian  dengan  tujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  ektrak  biji A. muricata dan S.  oleosa terhadap  mortalitas  imago C.  maculatus. Penelitian ini  dilaksanakan  di Laboratorium  Hama  Tumbuhan.  Rancangan  yang  digunakan  adalah  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL). Perlakuan menggunakan metode kontak yaitu residu pada permukaan cawan. Setiap perlakuan terdiri dari lima konsentrasi yaitu 0,06%; 0,125%, 0,25%; 0,5%; 1 %; dan kontrol. Setiap perlakuan diulang tiga kali. Pada setiap ulangan diinfestasi dengan 10 pasang imago C. maculatus. Varieable pengamatan adalah mortalitas dan gejala kematian. Data mortalitas dihitung 24 Jam Setelah Perlakuan (JPS) sampai dengan 72 JPS. Data mortalitas dianalisis menggunakan program POLO PC. Ekstrak biji A. muricata dan S. oleosa menyebabkan kematian imago C. maculatus . Kematian imago C. maculatus yang diberi dengan ekstrak biji sirsak  sebesar  96,66%  pada  konsentrasi  tertinggi  (1%).  Sedangkan  pada  ekstrak  biji  kusambi  pada konsentrasi yang sama mortalitas sebesar 88,33%. Hasil analisis probit menunjukan bahwa nilai LC 50 dan LC 95 ekstrak biji sirsak terhadap imago C. maculatus sebesar 0,10% dan 0,81%, sedangkan untuk esktrak biji kusambi LC 50 dan LC 95 sebesar 0,12% dan 1,50%. Dengan demikian ekstrak biji A. muricata dan S. oleosa asal daerah lahan kering di Pulau Timor memiliki potensi untuk dikembangakan sebagai insektisida nabati .

## 1. PENDAHULUAN
Kacang  hijau  merupakan  salah  satu  komoditas  unggulan  pada  beberapa  daerah  di  Nusa Tenggara Timur seperti di Kabupaten Belu dan Kabupaten Sabu Raijua. Kacang hijau asal Belu telah memperoleh serftifikat sebagai varietas nasional dengan nama varietas Kacang Hijau Forebelu. Salah satu kendala yang dihadapi oleh petani ataupun pengumpul pascapanen kacang hijau adalah adanya serangan Callosubruchus maculatus . Hama ini merupakan hama utama pada berbagai jenis kacang- kacangan diantaranya Vigna ungiculata ; (Gad et al ., 2021; Kalpna et al ., 2022), Phaseolus vulgaris (Mssillou et  al .,  2022),  dan Vigna  radiata (Hakim  &  Irhamni,  2019;  Tambingsila et  al .,  2022). Kelompok  kacang-kacang  yang  berwarna  hijau  dan  hitam  mengandung  karbohidrat  dan  protein sebesar 98% dan vitamin, kalsium, besi dan karoten sebesar 8% yang disukai oleh kumbang bruchid (Mssillou et  al .,  2022).  Larva  dan  imago C.  maculatus menyerang  bagian  kotidolen  sehingga menyebabkan kehilangan hasil berkisar 10%-20% (Kalpna et al ., 2022). Pengendalian C.  maculatus di  gudang  penyimpanan  menggunakan  fumigant  berbahan  aktif fosfin. Penggunaan fumigant sintetik yang tidak bijaksana dapat menimbulkan terjadinya resistensi, residu,  dan  mencemari  lingkungan  (Alves et  al .,  2019;  Dutra et  al .,  2016;  Niu et  al .,  2013).  Hasil penelitian (Alves et al ., 2019) menunjukkan bahawa fumigant fosfin dapat membuat stresnya benih dan menghambat perkecambahan gabah padi. Oleh karena itu diperlukan teknologi pengelolaan hama ramah lingkungan dan tidak berdampak negatif terhadap organisme lain, seperti insektisida nabati.
Lebih dari 100 spesies tumbuhan telah diketahui mengandung senyawa metabolit sekunder yang bersifat sebagai insektisidal, diantaranya adalah Ageratum conyzoides, Chromolaena odorata , Syndrella nodiflora , Nicotiana tabacum , Ricinus communis, Annona squamosa , Anonna muricata , Piper sp, Tephrosia vogelii , dan lain-lain (Amoabeng et al ., 2014; Sakul, 2017a). Kandungan fitokimia yang telah  teridentifikasi  diantaranya  adalah  minyak  atsiri,  alkaloid,  flavonoid, glycoside ,  ester,  asam asetat, pitertrin, piretrum, rotenone, quassia, rynia, sabadilla, asetonegin, terpenoid, dll (Anjum et al ., 2022;  Gavamukulya et  al .,  2017;  Grdisa  &  Grsic,  2013,  2013;  Hikal et  al .,  2017;  Mariyah,  2020). Senyawa-senyawa  tersebut  dapat  mematikan  serangga  uji,  repellent,  antifedant,  attraktan, menghambat ganti kulit, menghambat perkembangan serangga dan mengenkapulasi inang (Hikal et al ., 2017; Isman, 2020).
Beberapa  peneliti  telah  melaporkan  bahwa A.  muricata dapat  mematikan  beberapa  hama diantaranya Plutela xylostella , Spodoptera litura , dan C. maculatus (Gavamukulya et al ., 2017; Sakul, 2017). Belum ada laporan pengaruh senyawa metabolit sekunder dari Schleichera oleosa terhadap hama,  namun  beberapa  peneliti  melaporkan  bahwa S.  oleosa berperan  sebagai  antimikroba, antikanker, dan antioksidan (Anjum et al ., 2022; Gagana et al ., 2020). Hasil penelitian Moon et al ., (2009)  menyatakan  bahwa  bagian  kulit  batang,  daun,  dan  biji  dari S.  oleosa dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli , Staphylococcus  aureus , Salmonella  typhii ,  dan Klebsiella pneumoniae .
Beberapa peneliti sebelumnya melaporkan bahwa A. muricata dapat mematikan C. maculatus , namun perlu diuji juga pengaruh A. muricata dari daerah lahan kering di Pulau Timor Nusa Tenggara Timur  (NTT)  yang  memiliki  topografi  dan  faktor  iklim  yang  berbeda  di  daerah  lain.  Perbedaan tersebut memungkin juga perbedaan komposisi jenis dan konsentrasi senyawa metabolit sekunder A.  muricata asal  NTT.  Sedangkan  pengaruh S.  oleosa terhadap C.  maculatus belum  ada  laporan. Dengan demikan perlu dilakukan kajian dengan tujuan untuk mengetahui efektivitas ekstrak daging biji A. muricata dan A. oleosa terhadap imago C. maculatus .

## 2. BAHAN DAN METODE
2.1. Proses Pembuatan Ekstrak Biji A. muricata dan S. oleosa serta Perbanyakan Serangga Uji
Penelitian  ini  telah  dilaksanakan  di  Laboratorium  Hama  Tumbuhan  Fakultas  Pertanian, Universitas Nusa Cendana, pada bulan Juli sampai dengan September 2022. Biji A.muricata diperoleh disekitar  Desa  Sillu,  Kecamatan  Fatuleu,  Kabupaten  Kupang  (titik  koordinat  -10 0 .039253S, 124 0 04572E)  sedangkan  biji S.  oleosa diperoleh  disekitar  Desa  Sanleo  Kecamatan  Malaka  Timur, Kabupaten  Malaka  (titik  koordinat  9 0 .459461S,  124 0 9402E).  Kedua  bahan  tersebut dikeringanginkan pada suhu ruangan kemudian dikeluarkan kulit bijinya untuk mendapatkan daging bijinya. Daging biji dihaluskan dengan menggunakan blender untuk memperoleh tepung. Masing- masing tepung direndam dengam metanol selama 24 jam, kemudian disaring dengan menggunakan kertas wathman No. 42. Suspensi hasil saringan dievaporasi pada rotary evaporator. Bekas larutan metanol direndam kembali pada masing-masing ampas daging biji sirsak dan kusambi, kemudian disaring dan dilakukan evaporasi. Kegiatan tersebut dilakukan sebanyak 4 kali sampai larutan ampas biji A. muricata dan S. oleosa mendekati bening.
Perbanyak  serangga  uji  dilakukan  dengan  mengambil  kacang  hijau  yang  sudah  terinfestasi Callosobruchus maculatus kemudian dimasukkan ke dalam stoples (tinggi 15 cm dan diameter 6 cm) untuk diperbanyak. Imago C. maculatus diinfestasikan sebanyak 10 pasang imago C. maculatus pada 50 gram kacang hijau. Setelah 4 hari, imago C. maculatus dikeluarkan dari stoples perbanyakan dan telur yang berada dalam stoples dibiarkan hingga keturuan pertama (F 1 ) muncul. Selanjutnya imago C. maculatus yang berumur 0-24 jam digunakan untuk penelitian. Pengujian ektrak minyak kusambi dan sirsak dibuat pada konsentrasi 0,03%; 0,06%; 0,125%; 0,25%; 0,5%; 1% dan kontrol. Setiap perlakuan  diulang  tiga  kali.  Masing-masing  ekstrak  minyak A.  muricata dan S.  oleosa diencerkan dengan  menggunakan  pelarut  campuran  pelarut  aseton  dan  metanol  pada  konsentrasi  1,2% kemudian ditambahkan dengan aqudest sampai pada volume yang diinginkan. Sedangkan kontrol menggunakan campuran pelarut aseton dan metanol pada konsentrasi 1,2% dan aquadest.

## 2.2. Pengujian
Eksperiment  ini  menggunakan  metode  residu  pada  permukaan  cawan.  Sebanyak  5  ml suspense  ekstrak  dari  masing-masing  perlakuan  dibasahi  secara  merata  pada  bagian  permukaan cawan  petri,  kemudian  dikeringanginkan  selama  ±15  menit.  Sebanyak  10  gram  kacang  hijau dimasukan ke dalam cawan perlakuan dan diinfestasikan dengan serangga uji sebanyak 10 ekor.
Pengamatan  mortalitas C.  maculatus dilakukan  selama  72  jam  dengan  interval  waktu pengamatan  24  jam  setelah  aplikasi.  Variabel  yang  diamati  adalah  gejala  dan  tingkat  kematian serangga  setelah  24  Jam  Setelah  Perlakuan  (JSP).  Pengamatan  mortalitas  serangga  uji  dilakukan dengan menghitung C. maculatus yang mati pada masing-masing konsentrasi ekstrak bahan nabati.

## 2.3. Analisis Data
Data  mortalitas C.  maculatus dianalisis  menggunakan  analisis  probit  POLO  PC  untuk mengetahui  nilai  toksisitas  LC 50 dan  LC 95 (LeOra  Software  1987).    Gejala  kematian  serangga  uji dideskripsi.
3. HASIL DAN PEMBAHASAN
3.1. Karakteristik Ekstark Biji Annona muricata dan Biji Schleicera oleosa
Minyak biji sirsak dan kusambi memiliki ciri yang berbeda. Ekstrak biji sirsak berwarna coklat kehitaman dan tidak beraroma. Ekstrak minyak biji kusambi berwarna kuning, tingkat kekentalan minyak lebih tinggi dibandingkan dengan minyak biji sirsak, dan tidak beraroma.
Ciri  khas  dari  kedua  minyak  tersebut  juga  dijelaskan  oleh  beberapa  peneliti  sebelumnya. Ekstrak etil asetat biji sirsak menghasilkan minyak berbentuk kental, berwarna coklat tua dan tidak berbau (Amalia et al ., 2019). Minyak biji kusambi yang diekstraksi dengan metanol berbentuk pasta (Mariyah, 2020).

## 3.2. Perubahan Perilaku Imago Callosobruchus maculatus setelah Diberi Perlakuan
Imago C. maculatus yang terpapar oleh perlakuan masing-masing konsentrasi ekstrak biji A. muricata dan S.  oleosa memperlihatkan  perubahan  perilaku  yang  sama  sebelum  mati.  Hasil pengamatan  awal  menunjukkan  bahwa  aktivitas  gerak  dari  serangga  uji  perlahan-lahan  menjadi lambat, ukuran tubuh relatif kecil dibandingkan dengan kontrol, dan terjadi kematian. Serangga uji yang mati akibat dari semakin melemah beraktivitas mencari makanan sehingga tidak memperoleh energi selama proses metabolisme.
Racun yang terdapat di dalam ekstrak A. muricata dan S. oleosa masuk ke dalam tubuh serangga uji melalui system pernapasan dan melalui pada pori-pori yang terdapat pada kutikula tungkai dan alat mulut. Racun tersebut dibawa masuk ke dalam system peredaran darah dan mengalirkan ke seluruh  tubuh  sehingga  imago C.  maculatus mengalami  desikasi  dan  kematian.  Sementara  imago yang  mati  mengalami  perubahan  warna  menjadi  pudar.  Sementara  pada  kontrol  (hanya  diberi agristik dan aseton) tidak mengalami gejala tersebut. Bioaktivitas senyawa aktif di dalam A. mricata menyebabkan aktivitas hama terhambat, kehilangan nafsu makan dan sampai pada tahapan berhenti makan  sehingga  gerakan  hama  melemas,  kehilangan  energi,  warna  tubuh  menjadi  pucat,  dan akhirnya mati (Asmanizar et al ., 2020; Mulyawati, 2010). Mortalitas imago C. maculatus disebabkan adanya peranan senyawa asetogenin. A. muricata memiliki senyawa acetogenin dari jenis annonin yang memiliki toksisitas terhadap serangga hama dari  ordo  Lepidoptera,  Coleoptera,  Hemiptera,  dan  Diptera  (Komansilan et  al .,  2012).  Asetogenin masuk ke dalam tubuh serangga melalui melalui kutikula atau lubang-lubang alami dan menganggu sistem  syaraf.  Asetogenin  bekerja  dengan  cara  menghambat  pernafasan  pada  ikatan  NADH ( Nicotinamide Adenine Dinucleotida ) yang menyebabkan penurunan kadar ATP ( Adenosinatrifosfat /energi)  sehingga  menghambat  transport  elektron  ke  mitokondria  dalam respirasi  sel.  Hal  ini  mengakibatkan  proses  pembentukan  energi  metabolik  menjadi  terhambat sehingga  serangga  uji  menjadi  lemas  dan  kemudian  mati.  Senyawa  ini  dapat  menghambat  kerja enzim asetil kolinesterase yang berperan untuk transmisi impuls saraf yang dihantarkan dari satu neuron  ke  neuron  lain  melalui  sinaps  oleh  neurotransmitter.  Apabila  enzim  asetil  kolinesterase terhambat maka keaktifan saraf normal akan terganggu maka akan menyebabkan impuls saraf akan ditransmisi  secara  terus  menerus  sehingga  terjadi  koordinasi,  kejang-kejang,  lemah,  dan  terjadi kematian pada serangga uji (Colom et al ., 2010; Stupp et al ., 2020)
Senyawa  metabolit  sekunder  pada S.  oleosa adalah  fenolik,  tanin,  saponin,  terpanoid  dan flavonoid (Holil & Griana, 2020). Manfaat kandungan flavonoid sendiri yaitu sebagai penghambat nafsu makan serangga. Senyawa saponin yang terdapat pada biji kusambi ini dapat berfungsi sebagai anti-feeding  terhadap  serangga.  Sedangkan  kandungan  bahan  aktif  tanin  bekerja  sebagai  racun kontak dan racun perut.
3.3.  Toksisitas  Ekstrak  Daging  Biji A.  muricata dan S.  oleasa terhadap  Mortalitas  Imago

## Callosobruchus Maculatus
Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak daging biji A. muricata dan S. oleasa memberikan pengaruh terhadap mortalitas imago C. maculatus . Mortalitas imago C. maculatus lebih tinggi pada perlakuan  ekstrak  biji A.  muricata dibandingkan  dengan  ekstrak  S.  olease  (Tabel  1).  Persentase mortalitas C. maculatus mencapai 96,66% pada perlakuan konsentrasi 1% ekstrak biji A. muricata sedangkan pada perlakuan ekstrak biji S. olease , mortalitas kumbang C. maculatus sebesar 88, 33%. Berdasarkan data pada Tabel 1 terlihat bahwa A. muricata dan S. olease memiliki kemampuan untuk  meracuni C.  maculatus yang  berbeda,  walaupun  diuji  pada  konsentrasi  yang  sama.  Hal  ini menggambarkan bahwa masing-masing ekstrak memiliki senyawa metabolit sekunder yang berbeda yang berperan untuk meracuni serangga uji. Coria-Tellez et al ., (2018) telah mengidentikasi senyawa alkaloid,  asetogenin,  fenol,  dan  minyak  atsiri  pada  bagian  daun,  biji,  batang,  dan  buah  dari A. muricata.
Golongan  asetogenin  yang  terdapat  di  dalam  biji A.  muricata yang  beracun  adalah Annomontacin , Annomontacin-cis , Annoncin-cis , Annoncin-10-0ne,cis -, Annoreticuiiiiin-cis , Arianacin, corossolin , corossolene , Gigantetrocin A, Gigantetrocin B, Gigantetronenin , Goniothalamicin ,  Cis- goniothalamicin , javoricin , longiforicin , muricatetrici A,B; muricin A,  B,  C,  D,  E,  G,  H,  I; murisolin , solamin , xylomaticin , bullatalicin , gigantecin , Cis-squamostatin A,  D; Annoccatacib A, asiminecin , bullatacin , rolliniastatin 1,2; squamocin . Senyawa-senyawa beracun yang terdapat di dalam golongan lain adalah annomuricatin A, B; annomuricatin .  Terdapat 44 senyawa acetogenin yang di isolasi dari spesies Annnona sp dan menunjukkan sifat insektisidal pada jentik nyamuk. Senyawa  metabolit  sekunder  yang  terkandung  di  dalam  biji S.  olease adalah  dari  golongan alkaloid,  terpenoid,  fenol,  flavonoid,  dan  saponin  (Ghosh et  al .,  2011;  Goswami  &  Singh,  2018; Muthukrishnan  &  T,  2017).  Senyawa-senyawa  tersebut  juga  terdapat  pada  tumbuhan  lain  yang memiliki  sifat  insektisidal,  antifeedant,  dan  sebagai  senyawa  pertahanan  diri  (Tlak  Gajger  &  Dar, 2021; Ogbonna et al 2016). Senyawa terpenoid yang terkandung di dalam jagung bersifat sebagai pertahanan diri terhadap berbagai jenis serangan hama pada jagung, selain itu senyawa tersebut juga memberikan sinyal pada predator dan parasitoid untuk mempredasi dan memarasit inang (Block et al .,  2019;  Boncan et  al .,  2020).  Senyawa  terpenoid  bekerja  di  dalam  serangga  hama  dengan  cara menghambat  pertumbuhan  dan  perkembangan  hama,  bersifat repellent, dan  juga  menghambat perkecambahan dan benih pada gulma, dan berperan sebagai antimikroba (ShiChao et al ., 2019).
Tabel 1. Mortalitas imago Callosobruchus maculatus yang diberi perlakuan esktrak biji A . muricta dan biji S. oleosa Jenis Ekstrak Konsentrasi (%) Mortalitas (%) Biji A. muricata Kontrol 0,00 0,06 33,33 0,125 53,33 0,25 78,33 0,50 88,33 1,00 96,66 Biji S. oleosa Kontrol 0,00 0,06 23,33 0,125 48,33 0,25 73,33 0,50 83,33 1,00 88,33
Tabel 2. Perkembangan mortalitas imago C. maculatus yang diberi perlakuan ekstrak biji A. muricata dan S. olease
Jenis Ekstrak Konsentrasi (%) Mortalitas (%) Waktu Pengamatan 24 JSP 48 JSP 72 JSP Biji A. muricata Kontrol 0,00 0,00 0,00 0,06 6,66 15,00 33,33 0,125 11,66 30,00 53,33 0,25 20,00 45,00 78,33 0,50 21,66 51,66 88,33 1,00 25,00 58,33 96,66 Biji S. olease Kontrol 0,00 0,00 0,00 0,06 3,33 11,66 28,33 0,125 11,66 28,33 48,33 0,25 18,33 41,66 73,33 0,50 21,66 48,33 83,33 1,00 23,33 51,66 88,33
Keterangan: JSP (Jam Setelah Perlakuan).
Mortalitas imago C. maculatus nampak 24 jam setelah diberi perlakuan dengan ekstrak biji A. muricata dan S. olease pada semua konsentrasi (Tabel 2). Hal ini menggambarkan bahwa racun yang terkandung di dalam masing-masing ekstrak mulai bekerja pada tubuh serangga uji dengan cara yang berbeda sehingga 24 JSP sudah ada serangga yang mati. Racun yang masuk terus bekerja di dalam tubuh serangga secara perlahan-lahan sehingga terjadi peningkatan mortalitas pada 48 JSP dan 72 JSP.  Racun  masuk  ke  dalam  tubuh  serangga  uji  melalui  sistem  pernapasan  dan  pori-pori  yang terdapat di dalam kutikula serangga uji. Racun tersebut dibawa ke dalam mitokondria melalui darah dan sistem syaraf sehingga mengganggu respirasi yang kekurangan energi. Serangga mulai lamban beraktivitas, lemas dan menyebabkan kematian.
Senyawa  asetogenin  bekerja  menghambat  mitokondria  kompleks  1  dan  menghambat ubiguinon yang berhubungan dengan oksidasi di dalam sel membrane plasma yang menyebabkan apoptosis  (Coria-Téllez et  al .,  2018).  Selain  menghambat  mitokondria  kompleks  1,  senyawa asetogenin  menghambat  oksidasi  NADH  sehingga  menggagnggu  dan  merusak  respirasi  yang menyebabkan fungsi sel terganggu (Isman & Akhtar, 2007).
Asetogenin  yang  dihasilkan  oleh  biji A.  muricata menyebabkan  toksisitas  pada  beberapa serangga  yang  dikaji  oleh  penelti  lain,  misalnya  larva  dan  imago Aedes  albopictus dan Culex quinquefasciatus (Ravaomanarivo et al ., 2014), kecoa dan Tenebrio melitor, Spodoptera litura (Irwan et  al .,  2021),  menghambat  aktivitas  makan  larva P.  xylostella ,  menghambat  pertumbuhan  dan perkembangan larva dan pupa serta mematikan larva P. xylostella (Prédes Trindade et al ., 2011) Pada penelitian lain ektrak A. muricata 1 g/L yang diekstraksi dengan etanol menunjukkan bahwa kemapuan ektrak tersebut mematikan iamago C. maculatus sebesar 88% pada 72 jam setelah perlakuan  (Adeoye  &  Ewete,  2011).  Diduga  bahawa  konsentrasi  asetogenin  pada A.  muricata di daratan Pulau Timor lebih tinggi dibandingkan dengan daerah lain sehingga pada pada perlakuan yang sama kemampuan untuk mematikannya lebih tinggi. Artinya bahwa pada kondisi lingkungan mempengaruhi komposisi senyawa metabolit sekunder tumbuhan. Kemungkinan lain bahwa proses esktaksi A.  muricata dengan  menggunakan  metanol  menghasilkan  jumlah  jenis  dan  konsentrasi senyawa metabolit sekunder lebih tinggi dibandingkan dengan menggunakan pelarut etanol.
Tabel  3.  Pendugaan  parameter  ekstrak  biji  sirsak  dan  ekstrak  biji  kusambi  terhadap  imago Callosobruchus maculatus
LC 50 LC 95 Jenis Ekstrak a ± GB b b ± GB b (SK 95%) b (SK 95%) b % % Biji A. muricat 1,81 ± 0,18 1,84 ± 0,22 0,10 0.07 - 0,13 0,81 0,57 - 1,38 Biji S. oleosa 1,37 ± 0,15 1,53 ± 0,19 0,12 0,09 – 0,16 1,50 0,95 – 3,10
Keterangan: Masing-masing ekstrak, b α = intercept regresi probit, b = kemiringan regresi probit, GB = galat baku, SK = selang kepercayaan

## 3.4  Pendugaan toksisitas ekstrak biji sirsak dan biji kusambi terhadap imago Callosobruchus maculatus
Hasil analisis probit nilai Latel Consentrate (LC50 dan LC95) menunjukkan bahwa ekstrak biji A.  muricata lebih  toksik  terhadap  imago C.  maculatus dibandingkan  dengan  ekstrak  biji S.  oleosa (Tabel 3). Pada konsentrasi 0,10% ekstrak A. muricata dapat mematikan imago C. maculatus sebesar 50%  sedangkan  untuk  mematikan  50%  serangga  uji  diperlukan  konsentrasi  0,12%  ektrak  biji S. oleosa . Pendugaan toksisitas pada 95% serangga uji diperlukan 0,18% ekstrak biji A. muricata dan 1,25% ektrak biji S. oleosa .
Toksisitas LC50 ekstrak biji A. muricata lebih toksik terhadap C. maculatus sebesar 1,20 kali daripada ekstrak biji S. oleosa . Sedangkan pada LC95 ekstrak biji A. muricata lebih toksik 1,85 kali daripada ekstrak biji S. oleosa . Ekstrak biji A. muricata lebih efektif yang mengendalikan imago C. maculatus dibandingkan  dengan  ekstrak S.  oleosa .  Akan  tetapi  ekstrak  biji S.  oleosa berpotensi sebagai insektisida nabati karena toksisitasnya telah mencapai lebih dari 80% pada konsentrasi 1%.

## 4. KESIMPULAN
Ektrak biji A. muricata dan S. oleosa asal daratan Pulau Timor Nusa Tenggara Timur berpotensi sebagai insektisida nabati terutama pada hama gudang Callosubruchus maculatus. Pada konsentrasi 0,10% ekstrak biji A. muricata dan 1,50% ekstrak biji S. oleosa dapat mematikan 95% (LC 9 ) imago C. maculatus .

## 5. UCAPAN TERIMA KASIH
Kegiatan  penelitian  ini  dapat  terlaksana  berkat  dukungan  dari  pimpinan  dari  Fakultas Pertanian  Universitas  Nusa  Cendana  yang  telah  memberikan  bantuan  penelitian  melalui  in  kind seperti penggunaan sarana dan prasarana Laboratorium Hama Tumbuhan.  Kepala Balai Penelitian Obat  dan  Aromatik  Bogor  yang  telah  membantu  tim  peneliti  untuk  melakukan  proses  ektraksi minyak  biji A.  muricata dan S.  oleosa sesuai  dengan  prosedur.  Selain  in  kind,  peneliti  juga mendapatkan  dana  stimulus  dari  Program  Studi  Agroteknologi  Faperta  Undana.  Oleh  karena  itu, pada kesempatan ini tim peniliti mengucapkan terima kasih kepada Dekan Fakultas Pertanian, Ketua Program Studi Agroteknologi, Kepala Lab Ilmu Hama Tumbuhan dan Kepala Balai Tanaman Obat dan Aromatik Bogor.

## 6. DAFTAR PUSTAKA
Adeoye, O. & F, Ewete. 2011. Potentials of Annona muricata Linnaeus ( Annonaceae ) as a botanical insecticide  against Callosobruchus maculatus  Fabricius  (Coleoptera:  Bruchidae). Journal  of Agriculture, Forestry and the Social Sciences . 8(2): 147–151.
Alves, M. de S., I.M. Campos., D. Brito, de M.C. Cardoso., E.G. Pontes., & de M.A.A. Souza. 2019. Efficacy of  lemongrass  essential  oil  and  citral  in  controlling Callosobruchus  maculatus (Coleoptera: Chrysomelidae), a post-harvest cowpea insect pest. Crop Protection. 119: 191–196.
Amoabeng, B. W., G.M. Gurr., C.W. Gitau, & P.C. Stevenson, 2014. Cost: benefit analysis of botanical insecticide use in cabbage: Implications for smallholder farmers in developing countries. Crop Protection . 57 : 71–76.
Anjum, N., M.D.J. Hossain., F. Aktar., M.R. Haque., M.A. Rashid., & Md. R. Kuddus. 2022. Potential in vitro and in vivo Bioactivities of Schleichera oleosa (Lour.) Oken: A Traditionally Important Medicinal Plant of Bangladesh. Research Journal of Pharmacy and Technology. 113–121. Asmanizar,  A.,  D.  Siregar.,  &  A.A.  Manullang.  2020.  Pengaruh  ekstrak  kasar  biji  sirsak  ( Annona muricata L.)  terhadap  hama  kepik  penghisap  polong  ( Nezara  viridula L.)  (Hemiptera: Pentatomidae) pada tanaman kedelai ( Glycine max L. Merr.). Agriland: Jurnal Ilmu Pertanian . 8 (1): 84–88.
Block,  A.  K.,  M.M.  Vaughan.,  E.  A.  Schmelz,  &  S.A.  Christensen.  2019.  Biosynthesis  and  function  of terpenoid defense compounds in maize ( Zea mays ). Planta . 249(1): 21–30.
Boncan, D. A. T., S.S.K. Tsang., C. Li., I.H.T, Lee., H.M. Lam., T.F. Chan., & J.H.L. Hui. 2020. Terpenes and Terpenoids  in  Plants:  Interactions  with  Environment  and  Insects. International  Journal  of Molecular Sciences .
Colom,  O.  Á.,  A.  Salvatore.,  E.  Willink.,  R.  Ordóñez.,  M.I.  Isla.,  A.  Neske.,  and  &  A.  Bardón.  2010. Insecticidal,  Mutagenic  and  Genotoxic  Evaluation  of  Annonaceous  Acetogenins. Natural Product Communications . 5(3): 391–394.
Coria-Téllez, A. V., E. Montalvo-Gónzalez., E.M. Yahia., & E.N. Obledo-Vázquez. 2018. Annona muricata : A comprehensive review on its traditional medicinal uses, phytochemicals, pharmacological activities, mechanisms of action and toxicity. Arabian Journal of Chemistry . 11(5): 662–691.
Dutra, K. D. A., J. V. De Oliveira., D.M.D. A. F. Navarro., D.R.E.S. Barbosa., & Santos, J.P.O. 2016. Control of Callosobruchus  maculatus (FABR.)  (Coleoptera:  Chrysomelidae:  Bruchinae)  in Vigna unguiculata (L.)  WALP.  with  essential  oils  from  four Citrus spp.  plants. Journal  of  Stored Products Research. 68: 25–32.
Gad, H. A., G.F. Abo Laban., K.H. Metwal., F.S. Al-Anany., & S.A.M. Abdelgaleil. 2021. Efficacy of ozone for Callosobruchus  maculatus and Callosobruchus  chinensis control  in  cowpea  seeds  and  its impact on seed quality. Journal of Stored Products Research . 92: 101786.
Gagana, S. L., B.E. Kumaraswamy., & M.B. Shivanna. 2020. Diversity, antibacterial and antioxidant activities  of  the  fungal  endophytes  associated  with Schleichera  oleosa (Lour.)  Merr. South African Journal of Botany .  134: 369–381. Gavamukulya, Y., F. Wamunyokoli., & H. A. El-Shemy. 2017. Annona muricata : Is the natural therapy to most disease conditions including cancer growing in our backyard? A systematic review of its research history and future prospects. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine . 10(9): 835–848. Ghosh, P., A. Mandal., M. Chakraborty., P. Chakraborty., M. Rasul., & A. Saha. 2011. Triterpenoids from Schleichera  oleosa of  Darjeeling  foothills  and  their  antimicrobial  activity. Indian  Journal  of Pharmaceutical Sciences. 73(2): 231.
Goswami, S. & R. Singh. 2018. In vitro assessment of anthelmintic and alpha-amylase inhibition of schleichera  oleosa  (Lour.)  oken  leaf  extracts. Asian  Journal  of  Pharmaceutical  and  Clinical Research. 11 : 487–491.
Grdiša,  M.,  &  K.  Gršić.  2013.  Botanical  Insecticides  in  Plant  Protection. Agriculturae  Conspectus Scientificus . 78 (2): 85–93.
Hakim,  L.  &  I.  Irhamni.  2019.  Perubahan  perilaku Callosobruchus  maculatus Faaabricius  terhadap warna cahaya pada kacang-kacangan di penyimpanan. Jurnal Agro . 6 (1): 15–23. Hikal, W. M., R. S. Baeshen., & H.A.H.  Said-Al Ahl. 2017. Botanical insecticide as simple extractives for pest control. Cogent Biology . 3 (1): 1404274.
Holil,  K.  &  T.P.  Griana.  2020.  Analisis  Fitokimia  dan  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Daun  Kesambi (Schleira oleosa) Metode DPPH. Journal of Islamic Pharmacy . 5 (1): 28-32.
Irwan, Z., W.F.W. Kamarudin., U.A.S Korish., A.S. Rusli, A.S., & S. Sallehuddin. 2021. Effectiveness of Annona squamosa and Annona muricata Seed Extracts as Ingredients in Bio-pesticides Spray.
IOP Conference Series: Materials Science and Engineering . 1176 (1): 012007-012017. Isman, M.B. 2020. Botanical Insecticides in the Twenty-First Century—Fulfilling Their Promise? . Annual Review of Entomology . 65: 233–249.
Isman, M. B., & Y. Akhtar. 2007. Plant Natural Products as a Source for Developing Environmentally Acceptable  Insecticides.  In  I.  Ishaaya,  A.  R.  Horowitz,  &  R.  Nauen  (Eds.), Insecticides  Design Using Advanced Technologies (pp. 235–248). Springer.
Kalpna., Y. A. Hajam., & R. Kumar. 2022. Management of stored grain pest with special reference to Callosobruchus maculatus , a major pest of cowpea: A review. Heliyon .  8(1): e08703-e08715. https://doi.org/10.1016/j.heliyon.2021.e08703
Komansilan,  A.,  A.L.  Abadi.,  B.  Yanuwiadi,  &  D.A.  Kaligis.  2012.  Isolation  and  Identification  of Biolarvicide from Soursop (Annona muricata Linn) Seeds to Mosquito ( Aedes aegypti ) Larvae. International Journal of Engineering , 12 (03): 28-32.
Mariyah, Y. 2020. Uji fitokimia dan aktivitas antioksidan ekstrak Kesambi ( Schleichera oleosa (Lour.) Oken)  dengan  pelarut  metanol  Phytochemical  test;  leaves;  seeds  and  peels  of  Kesambi ( Schleichera  oleosa (Lour.)  Oken);  total  phenolic  content;  antioxidant  activity (Schleichera oleosa ( Lour .) Oken ; [Undergraduate, Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim].
Moon, A., A. Khan., & B. Wadher. 2009. Biotherapeutic antibacterial potential of Schleichera oleosa against drug resistant isolates. Journal of Pure and Applied Microbiology. 3(1): 181–186. Mssillou, I., H. Saghrouchni., M. Saber., A.J. Zannou., A. Balahbib., A. Bouyahya., A.  Allali., B. Lyoussi., & E. Derwich. 2022. Efficacy and role of essential oils as bio-insecticide against the pulse beetle Callosobruchus  maculatus (F.)  in  post-harvest  crops. Industrial  Crops  and  Products . 189 : 115786.
Mulyawati, A.P. 2010. Uji Efektivitas dan Identifikasi Senyawa Ekstrak Biji Sirsak ( Annona muricata Linn.)  yang  bersifat  Bioaktif  Insektisida  Nabati  terhadap  Hama  Thrip s [Undergraduate, Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim].
Muthukrishnan, S., & T, S. 2017. In Vitro Studies to Assess the Antidiabetic Potential of Schleichera oleosa (Lour) Oken leaves. Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research . 10 (7), 280-283. Niu, X., L. Mi., Y. Li., A. Wei., Z. Yang., J. Wu., D. Zhang., & X. Song. 2013. Physiological and biochemical responses  of  rice  seeds  to  phosphine  exposure  during  germination. Chemosphere . 93 (10): 2239–2244.
Ogbonna OA., P.C. Obbonnna., & M.C. Dike. 2019. Phytochemical screening, Quantitative estimates of Bioactive compounds in Spondias mombin and Azadirachta indica. Reseach Journal of Chemical Sciences. 6(1): 38-40.
R. C. Prédes Trindade., J. De Souza Luna., M.R. Ferreira De Lima., Da P.P. Silva., & A. E. Goulart Sant’ana. 2011. Larvicidal activity and seasonal variation of Annona muricata (Annonaceae) extract on Plutella  xylostella (Lepidoptera:  Plutellidae). Revista  Colombiana  de  Entomología . 37(2): 223–227.
Ravaomanarivo,  L.H.R.,  H.A.  Razafindraleva.,  F.N.  Raharimalala.,  B.  Rasoahantaveloniaina.,  P.H. Ravelonandro., & P. Mavingui. 2014. Efficacy of seed extracts of Annona squamosa and Annona muricata (Annonaceae)  for  the  control  of Aedes  albopictus and Culex  quinquefasciatus (Culicidae). Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine. 4 (10): 798–806. Sakul, E.H. 2017. Impact of Botanical Insecticides Derived from Pangium edule Reinw AND Annona muricata L.  seed  extracts  on  the  “gay  gantung”  diamondback  moth, Plutella  xylostella L. Agrotech Journal . 2 (2): 27–35.
ShiChao, X., D. HuanHuan., Z. XiaoJing., & Z. ZhenDong. 2019. Research progress in screening and bioactivity  of  terpenoid  botanical  pesticides. Chemistry  and  Industry  of  Forest  Products . 39(1): 1–12.
Stupp,  P.,  M.  Rakes.,  D.C.  Oliveira.,  L.N.  Martins.,  F.C.S.  Geisler.,  L.P.  Ribeiro.,  D.E.  Navaand,  &  D. Bernardi.  2020.  Acetogenin-Based  Formulated  Bioinsecticides  on Anastrepha  fraterculus : Toxicity and Potential Use in Insecticidal Toxic Baits. Neotropical Entomology. 49(2): 292–301. Tambingsila,  M.,  A.  Salu,  A.M.,  &  N.  Pakaya,  N.  2022.  Daya  Toksisitas  Piper  Betle  Terhadap  Hama Kacang Hijau ( Callosobruchus maculatus ) di Tempat Penyimpanan. Agropet . 19(1): 1–8. Tlak Gajger, I., & S.A. Dar. 2021. Plant Allelochemicals as Sources of Insecticides. Insects . 12(3): 189-210.