## Jurnal Bahana Kesehatan Masyarakat
( Bahana of Journal Public Health ) Vol 5 No 1 p-ISSN: 2580-0590/ e-ISSN: 2621-380X doi: https://doi.org/10.35910/jbkm.v5i1.360

## UJI AKTIVITAS KLOROFIL BEBERAPA JENIS SAYURAN SEBAGAI ANTIBAKTERI TERHADAP
Escherichia coli DAN Staphylococcus aureus
Munira Munira 1* , Novi Yanti 1 , Muhammad Nasir 2
1 Jurusan Farmasi Poltekkes Kementerian Kesehatan Aceh, Banda Aceh
2 Jurusan Biologi Fakultas MIPA Universitas Syiah Kuala, Banda Aceh
* Korespondensi Penulis: munira.ac@gmail.com

## ABSTRAK
Latar  Belakang :  Klorofil  adalah  pigmen  pemberi  warna  hijau  pada  tumbuhan,  alga  dan  bakteri  fotosintetik. Klorofil yang dikandung daun memiliki fungsi sebagai antioksidan, antiinflamasi, dan antibakteri. Penelitian ini bertujuan  untuk  mengetahui  kemampuan  klorofil  dari  beberapa  jenis  sayuran  dalam  menghambat  bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus dan mengetahui perbedaan diameter zona hambat diantaranya. Metode :  Penelitian  ini  bersifat  eksperimental  laboratorium  dengan  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL) yang dibagi dalam 4 perlakuan yaitu aquadest (P0), klorofil daun singkong (P1), klorofil daun kangkung (P2), dan klorofil daun bayam (P3) dengan masing-masing 6 kali pengulangan. Uji mikrobiologi dilakukan dengan menggunakan metode difusi sumuran.
Hasil: Uji Anova menunjukkan bahwa ekstrak klorofil daun singkong, kangkung dan bayam sangat berpengaruh (P=0,000)  dalam  menghambat  pertumbuhan Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus .  Uji  lanjut  Duncan menunjukkan  bahwa  rata-rata  diameter  zona  hambat  terbesar  terhadap Escherichia  coli dibentuk  oleh  klorofil daun singkong (17,66 mm) dan berbeda nyata dengan klorofil daun kangkung (7 mm) dan daun bayam (6,16 mm). Sama halnya terhadap Staphylococcus aureus rata-rata diameter zona hambat terbesar juga dibentuk oleh klorofil daun singkong  yaitu 18,16  mm  dan  berbeda  nyata  dengan  klorofil  daun  kangkung  (6,75  mm)  dan daun  bayam (6,08 mm).
Kesimpulan: Ekstrak klorofil daun singkong, kangkung dan bayam dapat menghambat pertumbuhan Escherichia coli dan Staphylococcus  aureus dengan diameter  zona  hambat  terbesar  dibentuk  oleh  ekstrak  klorofil  daun singkong.
Kata Kunci : klorofil; antibakteri; singkong; kankung; bayam

## CHLOROPHIL ACTIVITY TEST OF SOME TYPES OF VEGETABLES AS AN ANTIBACTERY FOR Escherichia coli AND Staphylococcus aureus

## ABSTRACT
Background: Chlorophyll  is  a  green  color  pigment  in  plants,  algae  and  photosynthetic  bacteria.  The  chlorophyll contained  in  the  leaves  has  a  function  as  an  antioxidant,  anti-inflammatory,  and  antibacterial.  This  study  aims to determine the ability of chlorophyll from several types of vegetables to inhibit Escherichia coli and Staphylococcus aureus and determine the differences in the diameter of the inhibition zone between them.
Methods: This study was a laboratory experimental study using a completely randomized design (CRD) divided into 4  treatments,  namely  aquadest  (P0),  cassava  leaf  chlorophyll  (P1),  kale  leaf  chlorophyll  (P2),  and  spinach  leaf chlorophyll (P3). 6 repetitions each. Microbiological tests were carried out using the well diffusion method. Results: Anova  test  showed  that  the  chlorophyll  extracts  of  cassava,  kale  and  spinach  were  very  influential  (P = 0.000) in inhibiting the growth of Escherichia coli and Staphylococcus aureus. Duncan's further test showed that the largest average inhibition zone diameter for Escherichia coli was formed by cassava leaf chlorophyll (17.66 mm) and was  significantly  different  from  kale  leaf  chlorophyll  (7  mm)  and  spinach  leaves  (6.16  mm).  Similar  to Staphylococcus  aureus,  the  largest average inhibition zone diameter  was also formed  by cassava leaf  chlorophyll, which was 18.16 mm and significantly different from kale leaf chlorophyll (6.75 mm) and spinach leaves (6.08 mm). Conclusion: The chlorophyll extract of cassava leaves, kale and spinach can inhibit the growth of Escherichia coli and Staphylococcus aureus  with the largest  inhibition zone  diameter  formed  by  the  chlorophyll extract  of cassava leaves.
Keywords: chlorophyl; antibacterial; cassava; water spinach; spinach

## PENDAHULUAN
Klorofil merupakan pigmen yang
berperan  penting  dalam  proses  fotosintesis. 1 Klorofil terdapat pada kloroplas dan memberikan  pigmen  yang  berwarna  hijau  pada tumbuhan.  Pada  tumbuhan  tingkat  tinggi, kloroplas  terutama  terdapat  pada  jaringan parenkim  palisade,  dan  parenkim  spons  daun. 2 Klorofil  yang  terkandung  dalam  daun  memiliki kemampuan  sebagai  antioksidan,  antiinflamasi dan  zat  yang  bersifat  menyembuhkan  luka. 3 Selain  itu  klorofil  juga  dapat  berfungsi  sebagai pembantu  terjadinya  detoksifikasi,  antioksidan, antipenuaan dan antikanker. 4,5 Klorofil  dan  turunannya  memiliki fungsi  sebagai  antimutagenik,  antikarsinogenik, menurunkan  serum  kolesterol,  menurunkan trigliserida,  menurunkan  sembelit  dan  juga dapat  digunakan  sebagai  desinfektan,  food suplemen  dan  anti  bakteri. 6–10 Umur  tanaman merupakan salah satu faktor yang mempengaruhi kandungan klorofil. Semakin tua umur  suatu  tanaman  maka  kandungan  klorofil yang  dihasilkan  akan  semakin  tinggi. 11 Beberapa  tanaman  yang  dapat  digunakan sebagai  sumber  klorofil  berasal  dari  kelompok sayur-sayuran  seperti  daun  singkong  ( Manihot esculenta Crantz),  kangkung  ( Ipomoea  aquatic Forssk) dan bayam ( Amaranthus tricolor L.). 12– 14
Daun  singkong  digunakan  sebagai sayuran  dan  juga  bermanfaat  sebagai  obat dikalangan  masyarakat.  Daun  ini  mengandung klorofil yang tinggi yaitu sebesar 27,4467 mg/g. Kangkung  merupakan  tanaman  yang  termasuk ke  dalam  jenis  sayur-sayuran  yang  sangat populer  dan  juga  telah  dimanfaatkan  sebagai obat-obatan dikalangan masyarakat dan kangkung mengandung klorofil sebesar 16.7667 mg/g.  Adapun  bayam  juga  merupakan  sayuran yang memiliki khasiat sebagai obat alami antara lain untuk mencegah osteoporosis, meningkatkan  kadar  hemoglobin  dalam  darah dan  mengobati  luka  bakar.  Bayam  memiliki kandungan  klorofil  yaitu  sebesar  23.0222 mg/g. 15
Beberapa
penelitian telah mengemukakan  bahwa  klorofil  dapat  berfungsi sebagai  antibakteri  diantaranya  penelitian  yang dilakukan  oleh  Dimara  dan  Tien  (2011)  yang menyatakan  bahwa  pigmen  klorofil  dari Caulerpa racemosa dapat menghambat pertumbuhan  bakteri  S taphylococcus  aureus. 16 Staphylococcus aureus merupakan flora normal pada  kulit.  Hal  ini  dikarenakan  kulit  terus menerus  berhubungan  dan  kontak  langsung
dengan  lingkungan  sekitarnya.  Selain  itu Staphylococcus  aureus merupakan  penyebab infeksi yang sering pada manusia. Staphylococcus  aureus dapat  menyebabkan infeksi  pada  luka  bedah,  lesi-lesi  kulit  pada bayi,  abses  payudara  pada  ibu-ibu  dan  mata lengket. 17 Sementara  itu Escherichia  coli juga merupakan flora normal  yang biasanya terdapat pada  saluran  pencernaan  hewan  dan  manusia, dan  dapat  menyebabkan  penyakit  di  saluran pencernaan  dan  saluran  kemih.  Penyakit  yang disebabkan  oleh Escherichia  coli antara  lain diare, sepsis dan meningitis. 18 Mengingat  daun  singkong,  kangkung dan bayam mempunyai kandungan klorofil yang tinggi  dapat berfungsi sebagai antibakteri maka perlu  dilakukan  penelitian  uji  aktivitas  klorofil beberapa  jenis  sayuran  sebagai  antibakteri terhadap Escherichia  coli dan Staphylococcus aureus . Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui  kemampuan  klorofil  dari  beberapa jenis  sayuran  dalam  menghambat  bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus. Penelitian diharapkan dapat menambah pengetahuan  bagi  peneliti  lain  mengenai pengaruh  aktivitas  klorofil  beberapa  sayuran sebagai  antibakteri  terhadap Escherichia  coli dan staphylococcus aureus .

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan Acak  Lengkap  (RAL)  yang  dibagi  menjadi  4 perlakuan dengan masing-masing
6 pengulangan.  Uji  mikrobiologi  dilakukan dengan menggunakan metode sumuran. Parameter  yang  diamati  adalah  diameter  zona hambat. Data  yang telah diperoleh yaitu berupa rata-rata  diameter  zona  hambat  akan  dianalisis dangan menggunakan uji Anova dan dilanjutkan dengan uji Duncan.

## Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  pisau,  mortal,  timbangan analitik,  gelas  ukur, hot  plate , erlenmeyer , beakerglass ,  pipet  ukur,  tabung  reaksi,  rak tabung,  pipet  tetes,  corong  kaca,  batang pengaduk,  autoklaf,  cawan  petri,  bunse,  ose bulat, cotton buds , spidol, penggaris, spektrofotometer, vacum  rotary  evaporator , inkubator.
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  daun  singkong,  daun kangkung dan daun bayam yang di peroleh dari pasar  Lambaro  Aceh  Besar.  Aseton  85%, aquades,  NaCl  0,9%,  asam  sulfat  1%  (v/v),
barium  klorida  1%  (b/v)  bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus  aureus yang  diperoleh dari FKH Universitas Syiah Kuala Banda Aceh, media Nutrien Agar  (NA),  kertas saring,  kertas label, kapas, kertas buram.
Preparasi Sampel 19 Daun  singkong,  daun  kangkung  dan daun bayam yang dibeli di pasar Lambaro Aceh Besar dipisahkan dari kotoran atau benda asing lainnya, diambil helaian daun  urutan 2, 3 atau 4 dari  pucuk,  dicuci  bersih  dengan  air  kemudian ditiriskan. Daun diiris dengan ukuran 0,5 -1 cm dan  ditimbang  masing-masing  daun  sebanyak 80  gram  kemudian  dihaluskan  dengan menggunakan mortar.
Pembuatan Ekstrak Klorofil 19
Masing-masing sampel daun singkong, daun  kangkung  dan  daun  bayam  yang  sudah dihaluskan diekstrak dengan larutan aseton 85% sebanyak  200  mL.  Ekstrak  yang  diperoleh disaring  melalui  corong  kaca  yang  dilapisi kertas saring.

## Penetapan Kadar Klorofil
Larutan  klorofil  dimasukkan  kedalam kuvet  kemudian  dimasukkan  ke  dalam spektrofotometer  UV  Vis,  dinyalakan  sumber cahaya  dan  diukur  absorbansinya  pada  panjang gelombang  645  nm  dan  663  nm.  Kandungan klorofil  dihitung  dengan  menggunakan  rumus menurut harbone sebagai berikut: 5
Klorofil a   = 13,7 × OD 665 - 5,76 OD 649 mg/L Klorofil b = 25,8 ×  OD 649 – 7,7 OD 665 mg/L Total klorofil = 20,0 × OD 649 - 6,1 OD 665 mg/L.
Kemudian masing-masing ekstrak diuapkan dengan vacum rotary  evaporator pada suhu 40-50°C hingga diperoleh ekstrak kental.

## Uji Mikrobiologi
Disiapkan  12    cawan  petri  (6  cawan untuk  uji  bakteri Staphylococcus  aureus dan  6 cawan  untuk  uji  bakteri Escherichia  coli ). Masing-masing dituangkan media NA sebanyak 15-20  mL  dan  didiamkan  hingga  mengeras. Dibuat  sumuran  pada  media  agar  yang  telah padat  dengan  menggunakan cork  borer atau percabangan  pada  masing-masing  daerah  dan ditandai  kemudian  dimasukkan  klorofil  daun singkong,  klorofil  daun  kangkung  dan  klorofil daun  bayam  serta  aquadest  sebagai  kontrol kedalam lubang sumur yang sesuai. Cawan agar diinkubasi  selama  2  x  24  jam  pada  suhu  37°C.
Diameter  zona  hambat  yang  terbentuk  diukur dengan menggunakan penggaris.
.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  uji  kadar  klorofil  menunjukkan kadar  klorofil  dari  sampel  tanaman  yang  diuji, di  mana  daun  singkong  memiliki  total  klorofil yang  tertinggi  yaitu  48.831mg/g,  daun  bayam sebanyak  45.982  mg/g  dan  total  klorofil terendah  adalah  daun  kangkung  6.886  mg/g. Hasil  uji  kadar  klorofil  dapat  dilihat  pada  tabel 1.
Tabel 1. Kadar klorofil daun singkong, daun bayam dan daun kangkung (mg/g) Jenis tanaman Total klorofil Klorofil a Klorofil b Singkong 48.831 27.502 66.818 Bayam 45.982 26.420 59.878 Kangkung 6.886 11.788 9.078
Berdasarkan hasil uji mikrobiologi dapat dibuktikan  bahwa  ekstrak  klorofil  daun singkong,  daun  bayam  dan  daun  kangkung dapat menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus . Pada Bakteri Escherichia coli, rata-rata diameter zona hambat dari ekstrak klorofil daun singkong (P1) adalah sebesar 17,66 mm, ekstrak klorofil  daun  kangkung  (P2)  sebesar  7,00  mm dan  ekstrak  klorofil  daun  bayam  (P3)  sebesar 6,16 mm sedangkan pada perlakuan kontrol (P0) yang  diberi  aquadest  tidak  telihat  adanya  zona hambat.  Setelah  dilakukan  uji  statistik menggunakan  Anova  maka  diperoleh  hasil bahwa  ekstrak  klorofil  daun  singkong,  daun kangkung  dan  daun  bayam  sangat  berpengaruh (P=0,000)  terhadap  pertumbuhan  bakteri Escherichia coli (Tabel 2).
Tabel  2.  Hasil  uji  anova  rata-rata  diameter  zona hambat  (mm)  ekstrak  klorofil  beberapa  sayuran terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli
Perlakuan P Rata- rata SD Nilai p Aquadest 6 0,00 0,000 0,000 Klorofil daun singkong 6 17,66 2,5820 Klorofil daunkangkung 6 7,00 1,8974 Klorofil daun bayam 6 6,16 1,9408
Analisis  selanjutnya  dilakukan  dengan uji  lanjut  Duncan.  Berdasarkan  hasil  uji  lanjut Duncan  menunjukkan  bahwa  rata-rata  diameter zona  hambat  terbesar  terhadap  bakteri E.  coli
dibentuk  oleh  perlakuan  yang  diberi  klorofil daun  singkong  yaitu  sebesar  17,66  mm  dan berbeda  nyata  dengan  perlakuan  yang  diberi klorofil daun kangkung (7 mm) dan daun bayam (6,16 mm). Hasil uji lanjut Duncan dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel  3.  Hasil  uji  lanjut  Duncan  rata-rata diameter  zona  hambat  (mm)  ekstrak  klorofil beberapa sayuran terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli
Perlakuan Diameter zona hambat Rata- rata (mm) ± SD Kategori Daya Hambat Aquadest 0,00 a ± 0,000 Tidak ada daya hambat Klorofil daun singkong 17,66 c ±2,5820 Kuat Klorofil daun kangkung 7,00 b ±1,8974 Sedang Klorofil daun bayam 6,16 b ±1,9408 Sedang
Pada uji terhadap bakteri Staphylococcus aureus rata-rata  diameter  zona  hambat  yang dibentuk  oleh  ekstrak  klorofil  daun  singkong (P1)  adalah  sebesar  18,16  mm,  ekstrak  klorofil daun  kangkung  (P2)  sebesar  6,75  mm  dan ekstrak  klorofil  daun  bayam  (P3)  sebesar  6,08 mm  sedangkan  pada  perlakuan  kontrol  (P0) yang  diberi  aquadest  tidak  telihat  adanya  zona hambat.  Selanjutnya  dilakukan  uji  statistik menggunakan Anova (Tabel 4).
Tabel 4. Hasil uji anova rata-rata diameter zona hambat (mm) ekstrak klorofil beberapa sayuran terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus Perlakuan N Rata- rata SD Nilai p Aquadest 6 0,00 0,000 0,000 Klorofil daun singkong 6 18,16 3,1411 Klorofil daun kangkung 6 6,75 1,4053 Klorofil daun bayam 6 6,08 1,1143
Hasil  uji  Anova  menunjukkan  bahwa ekstrak  klorofil  daun  singkong,  daun  kangkung dan  daun  bayam  sangat  berpengaruh  dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus (P=0,000).  Kemudian dilakukan uji lanjut  Duncan  dan  hasilnya  dapat dilihat pada Tabel 5.
Tabel 5. Hasil uji lanjut Duncan rata-rata diameter zona hambat (mm) ekstrak klorofil beberapa sayuran terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus
Perlakuan Diameter zona hambat Rata-rata (mm)± SD Kategori Daya Hambat Aquadest 0,00 a ± 0,000 Tidak ada daya hambat Klorofil daun singkong 18,16 c ± 3,14 Kuat Klorofil daun kangkung 6,75 b ± 1,40 Sedang Klorofil daun bayam 6,08 b ± 1,11 Sedang
Dari uji lanjut Duncan didapatkan bahwa rata-rata  diameter  zona  hambat  terbesar  juga terdapat  pada  perlakuan  yang  diberi  klorofil daun  singkong  yaitu  sebesar  18,16  mm  dan berbeda  nyata  dengan  perlakuan  yang  diberi klorofil  daun  kangkung  (6,75  mm)  dan  daun bayam  (6,08  mm).  Rata-rata  diameter  zona hambat  klorofil  daun  kangkung  tidak  berbeda nyata dengan klorofil daun bayam.
Dari  hasil  uji  mikrobiologi  terhadap kedua  bakteri  di  atas  dapat  disimpulkan  bahwa ekstrak klorofil daun singkong membentuk rata- rata  diameter  zona  hambat  terbesar  terhadap pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus, yang  kemudian  diikuti oleh  ekstrak  klorofil  daun  kangkung  dan  daun bayam. Perbedaan dalam menghambat pertumbuhan  bakteri  ini  dapat  disebabkan  oleh perbedaan  kandungan  total  klorofil  yang terdapat  pada  masing-masing  daun  sayuran tersebut.
Berdasarkan  hasil  ekstraksi  klorofil yang telah dilakukan pada ketiga sayuran, maka dapat  dibuktikan  bahwa  daun  singkong mengandung  total  klorofil  yang  paling  tinggi yaitu  48.83  mg/g  dan  selanjutnya  daun  bayam sebanyak  45.98  mg/g.  Sementara  daun kangkung  mengandung  klorofil  yang  paling rendah  yaitu  6.89  mg/g  (Gambar.  1).  Hasil penelitian  ini  sejalan  dengan  hasil  penelitian Setiari  dan  Nurchayati  (2009)  yang  melakukan eksplorasi  kandungan  klorofil  pada  beberapa sayuran  yang  sama  dan  diperoleh  total  klorofil daun singkong juga lebih tinggi (27.4467 mg/g) bila dibandingkan dengan daun bayam (23.0222 mg/g) dan daun kangkung (16.7667 mg). 15 Daun  singkong  dan  bayam  memiliki klorofil  yang  lebih  tinggi  karena  singkong  dan bayam merupakan tanaman yang berumur lebih tua  dibandingkan  kangkung.  Sementara  daun kangkung  memiliki  kandungan  klorofil  yang relatif  rendah,  hal  ini  disebabkan  klorofil  pada tanaman  kangkung  tersebar  tidak  hanya  pada organ  daun  saja  namun  juga  dijumpai  pada bagian batang dan kangkung termasuk tanaman yang  memilki  umur  yang  lebih  muda dibandingkan  dengan  singkong  dan  bayam.
Total  klorofil  dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor antara  lain  umur  tanaman,  umur  daun, morfologi  daun  serta  faktor  genetik. 15 Biber mengatakan  bahwa  umur  daun  dan  tahapan fisiologis suatu tanaman merupakan faktor yang menentukan kandungan klorofil. 20 Namun pada penelitian  ini  tidak  dilakukan  pengujian  umur sayuran saat pengambilan sampel.

## Gambar 1. Grafik kadar total klorofil, klorofil a dan klorofil b pada beberapa jenis sayuran
Berdasarkan  Gambar  1  dapat  dilihat bahwa kandungan klorofil a dan klorofil b pada daun  singkong  dan  daun  bayam  lebih  tinggi daripada  daun  kangkung.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  kemampuan  daun  singkong  dan  daun bayam  dalam  menangkap  energi  radiasi  cahaya lebih  efisien  dibandingkan  daun  kangkung. Sehingga  laju  fotosintesis  kedua  tanaman tersebut  lebih  efisien  daripada  daun  kangkung. Klorofil  a  dan  b  berperan  dalam  proses fotosintesis  tanaman.  Klorofil  b  berfungsi sebagai antena fotosintetik yang mengumpulkan cahaya  kemudian  ditransfer  ke  pusat  reaksi. Pusat  reaksi  tersusun  dari  klorofil  a.  energi cahaya  akan  di  ubah  menjadi  energi  kimia dipusat  reaksi  yang  kemudian  dapat  digunakan untuk proses reduksi dalam fotosintesis Jika  ditinjau  dari  jenis  bakteri  yang dihambat  maka  rata-rata  diameter  zona  hambat lebih besar terdapat pada bakteri Staphylococcus aureus dibandingkan Escherichia  coli .  Hal  ini dikarenakan  adanya  perbedaan  struktur  dinding sel  antara  kedua  bakteri.  Struktur  dinding  sel bakteri  gram  positif  ( Staphylococcus  aureus ) berlapis tunggal dan tersusun atas peptidoglikan serta  lipid  dengan  kadar  sedang  sehingga  lebih mudah untuk terbentuknya hambatan. Sedangkan  dinding  sel  bakteri  gram  negatif ( Escherichia  coli )  lebih  sulit  ditembus,  karena struktur dinding sel bakteri ini berlapis tiga yang tersusun  atas  peptidoglikan  dan  lipid  dengan
kadar  yang  tinggi,  sehingga  sulit  untuk dihambat. 21 Menurut  Morales  (2003)  aktivitas antibakteri  dikelompokkan  menjadi  4  kategori yaitu lemah (< 5 mm), sedang (5-10 mm), kuat (<10-20 mm) dan sangat kuat (>20-30mm). jika ditinjau  dari  kategori  zona  hambat,  maka ekstrak  klorofil  daun  singkong  termasuk  dalam kategori  kuat  dan  ekstrak  klorofil  daun kangkung  dan  ekstrak  klorofil  daun  bayam termasuk dalam kategori sedang. 22

## KESIMPULAN
Ekstrak  klorofil  daun  singkong,  daun kangkung  dan  daun  bayam  sangat  berpengaruh terhadap  pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus. Rata-rata  diameter zona  hambat  terbesar  terhadap  bakteri E  coli terdapat  pada  perlakuan  yang  diberi  klorofil daun  singkong  yaitu  sebesar  17,66  mm  dan berbeda  nyata  dengan  perlakuan  yang  diberi klorofil daun kangkung (7 mm) dan daun bayam (6,16 mm).
Rata-rata  diameter  zona  hambat  terbesar terhadap S. aureus juga terdapat pada perlakuan yang diberi klorofil daun singkong yaitu sebesar 18,16 mm dan berbeda nyata dengan perlakuan yang  diberi  klorofil  daun  kangkung  (6,75  mm) dan  daun  bayam  (6,08  mm).  Untuk  penelitian selanjutnya  diharapkan  dapat  mengukur  umur sayuran pada saat pengambilan sampel.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terima  kasih  kami  ucapkan  kepada Direktur Politeknik Kesehatan Kemenkes Aceh, serta  kepada  Ketua  Jurusan  Farmasi  Politeknik Kesehatan  Kemenkes  Aceh  dan  Ketua  Jurusan Biologi FMIPA Unsyiah yang telah memberikan izin kontribusi terhadap pelaksanaan penelitian ini.  Ucapan terimakasih juga kami sampaikan kepada semua pihak yang telah  membantu  penulis  dalam  melakukan penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Krause,  G.  H.  &  Weis,  E.  Chlorophyll fluorescence  and  photosynthesis:  the  basics. Annu. Rev. Plant Biol. 1991;42, 313–349
2. Sumenda,  L.  Analisis  kandungan  klorofil  daun mangga  (Mangifera  indica  L.)  pada  tingkat perkembangan  daun  yang  berbeda.  J.  Bios
Logos 1.(2011.
3. Endo, Y., Usuki, R. & Kaneda, T. Antioxidant effects  of  chlorophyll  and  pheophytin  on  the autoxidation  of  oils  in  the  dark.  II.  The mechanism of  antioxidative action of chlorophyll.  J.  Am.  Oil  Chem.  Soc.  1985;62, 1387–1390.
4. El-Sayed, W. M., Hussin, W. A., Mahmoud, A. A.  &  AlFredan,  M.  A.  The  Conyza  triloba extracts with high chlorophyll content and free radical  scavenging  activity  had  anticancer activity in cell lines. Biomed Res. Int. 2013.
5. Iriyani,  D.  &  Nugrahani,  P.  Kandungan klorofil,  karotenoid,  dan  vitamin  c  beberapa jenis sayuran daun  pada pertanian periurban  di Kota  Surabaya.  J.  Mat.  Sains  dan  Teknol. 2014;15:84–90.
6. Angkasa,  D.  &  Sulaeman,  A.  Pengembangan minuman  fungsional  sumber  serat  dan antioksidan  dari  daun  hantap  (Sterculia oblongata  R.  Brown.).  Dep.  Gizi  Masy.  Inst. Pertan. Bogor. 2012.
7. Liber  JA,  Bryson  AE,  Bonito  G,  Du  ZY. Harvesting  microalgae  for  food  and  energy products. Small Methods. 2020;4(10):2000349.
8. Ferruzzi, M. G., Böhm,  V., Courtney, P.  D. & Schwartz,  S.  J.  Antioxidant  and  antimutagenic activity  of  dietary  chlorophyll  derivatives determined by radical scavenging and bacterial reverse  mutagenesis  assays.  J.  Food  Sci. 2002;67, 2589–2595
9. Mowbray,  S.  The  antibacterial  activity  of chlorophyll. Br. Med. J. 1957;1: 268.
10.  Olatunde,  O.  O.,  Della  Tan,  S.  L.,  Shiekh,  K. A.,  Benjakul,  S.  &  Nirmal,  N.  P.  Ethanolic guava  leaf  extracts  with  different  chlorophyll removal processes: Anti-melanosis,
antibacterial  properties  and  the  impact  on qualities  of  Pacific  white  shrimp  during refrigerated storage. Food
Chem. 2020;341:128251
11.  Setiawati,  T.,  Saragih,  I.  A.,  Nurzaman,  M.  &
Mutaqin,  A.  Z.  Analisis  Kadar  Klorofil  dan Luas  Daun  Lampeni  (Ardisia  humilis Thunberg)  pada  Tingkat  Perkembangan  yang Berbeda  di  Cagar  Alam  Pangandaran.  in
Prosiding  Seminar  Nasional  MIPA.  2016:  27– 28.
12.  Solikhah,  R.,  Purwantoyo,  E.  &  Rudyatmi,  E. Aktivitas  Antioksidan  Dan  Kadar  Klorofil Kultivar  Singkong  Di  Daerah  Wonosobo.  Life Sci. 2019;8:86–95.
13.  Kurniawan,  M.,  Izzati,  M.  &  Nurchayati,  Y. Kandungan klorofil, karotenoid, dan vitamin C pada beberapa spesies tumbuhan akuatik. Anat. Fisiol. 2010;18:28–40.
14.  Fatimah,  S.  Studi  Kadar  klorofil  dan  Zat  besi (Fe)  pada  beberapa  jenis  bayam  terhadap jumlah  eritrosit tikus  putih (Rattus norvegicus) anemia. 2009.
15.  Setiari,  N.  &  Nurchayati,  Y.  Eksplorasi kandungan klorofil pada beberapa sayuran hijau sebagai alternatif bahan dasar food supplement.
Bioma. 2009;11:6–10.
16.  Dimara,  L.  &  Yenusi,  T.  Y.  B.  Uji  aktivitas antibakteri  dan  antioksidan  ekstrak  pigmen klorofil  rumput  laut  Caulerpa  racemosa (Forsskal)  J.  Agardh.  J.  Biol.  Papua. 2011;3:53–58.
17.  Jawetz,  E.  et  al.  Mikrobiologi  kedokteran. Jakarta EGC. 2005.
18.  Brooks,  G.  F.,  Butel,  J.  S.  &  Morse,  S.  A. Jawetz,  Melnick,  &  Adelberg’s  Mikrobiologi Kedokteran,  Edisi  1  Buku  2.  Jakarta  Salemba Med. 2008.
19.  Putri, W. D. R., Zubaidah, E. & Sholahudin, N. Ekstraksi  pewarna  alami  daun  suji,  kajian pengaruh blanching dan jenis bahan pengekstrak. J. Teknol. Pertan. 2012;4.
20.  Biber,  P.  D.  Evaluating  a  chlorophyll  content meter on three coastal wetland plant species. J. Agric. Food Environ. Sci.2007;1:1–11.
21.  Roni,  A.,  Maesaroh,  M.  &  Marliani,  L. Aktivitas antibakteri biji, kulit dan daun pepaya (Carica papaya L.) terhadap bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus. Kartika J. Ilm. Farm.2019; 6:29–33.
22.  Morales,  G.  et  al.  Secondary  metabolites  from four  medicinal  plants  from  northern  Chile: antimicrobial  activity  and  biotoxicity  against Artemia  salina.  J.  Chil.  Chem.  Soc. 2003;48:13–18.