Uji  Aktivitas Antiinflamasi Ekstrak N-Heksane Daun Sukun (Artocarpus altilis)
Terhadap Eritema Pada Kulit Tikus Putih (Rattus novergiccus)
Oleh Radiasi Sinar Uv-C
Antiinflamatory Activity Test N-Hexane Extract of Breadfruit Leaf ( Artocarpus altilis ) for Erythema on Skin White Rat ( Rattus novergiccus ) using UV-C Light Radiation
Desi Suryani Dewi, Intan Zhofir Asyur Lazuardi, Nurlaila Ayu Purwaningsih Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran, Universitas Jember Jalan Kalimantan No. 37 Kampus Tegalboto Jember Kode Pos 68121 email korespondensi: suryanidesi97@yahoo.com

## Abstrak
Radiasi  ultraviolet  (UV)  adalah  bagian  dari  spektrum  radiasi  elektromagnetik  yang  dipancarkan oleh matahari. UV-C memiliki panjang gelombang terpendek dibanding panjang gelombang UV-A dan  UV-B.  UV-C  mampu  menembus  bumi  karena  pengurangan  ozon  di  stratosfer  dan  mampu menyebabkan kanker kulit. Gejala awal dari kanker kulit berupa eritema. Peneliti menggunakan ekstrak N-Heksane daun  sukun  untuk terapi  pada  eritema  kulit  tikus  putih (Rattus  novergiccus) yang terpapar radiasi UV-C selama 168 jam. Tikus dibagi menjadi dua kelompok control dan tiga kelompok  eksperimen.  Kelompok  control  tidak  diberi  terapi  dan  diberi  terapi  dexamethason  1 mg/kgBB/hari  sementara  kelompok  eksperimen  diberikan  ekstrak N-Heksane daun  sukun ( Artocarpus  altilis) dengan  dosis  50  mg/kgBB/hari,  100  mg/kgBB/hari,  dan  200  mg/kgBB/hari. Metode  yang  digunakan  yaitu  eksperimental  murni (true  experimental  design) secara in  vivo dengan rancangan pre test-post test control grup design . Hasil berupa perubahan luas eritema dan perubahan ultrastruktural pada epidermis dan dermis tikus yang diamatai secara mikroskopik pada sebelum dan sesudah terapi pada kulit tikus yang diradiasi sinar UV-C.
Kata  kunci : Ekstrak  N-Heksana  Daun Sukun ( Artocarpus altilis ), tikus putih ( Rattus novergiccus), radiasi UV-C

## Abstract
Ultraviolet radiation (UV) is part of a spectrum of electromagnetic radiation emitted by the sun. UV-C has the shortest wavelength than the wavelength of UV-A and UV-B. UV-C is able to penetrate the earth due to the reduction of ozone in the stratosphere and is capable of causing skin cancer. The initial symptoms of cancer of skin erythema. Researchers used the N-Heksane extract of leaves of breadfruit for the treatment of erythema skin white rat (Rattus novergiccus) were exposed  to UV-C radiation for 168 hours. Rats were divided into two groups of control and three experimental groups. The control group was not given the therapy and were treated dexamethasone 1 mg / kg / day while the experimental group was given the extract N-Heksane leaves of breadfruit (Artocarpus altilis) at a dose of 50 mg / kg / day, 100 mg / kg / day and 200 mg / kg /day. The method used is pure  experimental  (true  experimental  design)  in  vivo  by  design  pretest-posttest  control  group design. Results are extensive changes erythema and ultrastructural changes in the epidermis and dermis rats were observed microscopically before and after therapy in  rats irradiated skin UV-C light.
Keywords : N-Hexane Extract Leaves Breadfruit (Artocarpus altilis), rat (Rattus novergiccus), UV-C radiation

## Pendahuluan
Radiasi  sinar  ultraviolet  (UV)  adalah  bagian dari  spectrum  radiasi  elektromagnetik  yang dipancarkan  oleh  matahari.    Pengurangan ozon  di  stratosfer  sebagai  konsekuensi  dari aktivitas manusia menyebabkan peningkatan tingkat radiasi ultraviolet (UVR) di  tanah.  Ultraviolet  (UV)  dibagi  menjadi  3 kategori  pada  panjang  gelombang  yang berbeda  sebagai  UVA  (400e320  nm),  UVB (320e290  nm)  dan  UVC  (290e200  nm),  dan telah  lama  diketahui  menyebabkan  efek buruk  pada  organisme.  Pada  umumnya, sinar  UV  tidak  dapat  mencapai  permukaan bumi  karena  penyerapan  di  lapisan  ozon (Stolarski et al , 1992;. WHO, 1994). Namun, penemuan  akhir-akhir  ini  menyebutkan bahwa  sinar  UV-C  dapat  menembus  bumi karena penipisan lapisan ozon di stratosfer.
Radiasi UVC sangat penting dan menimbulkan efek berbahaya pada makhluk hidup. Efek yang ditimbulkan berupa kanker kulit,  katarak  dan  sindrom  defisiensi  imun kasus  akan  meningkat  dalam  waktu  dekat (Mayer, 1992;  McKenzie,  Bj  €  orn, Bais,  & Ilyas,  2003).  Setelah  paparan  radiasi  UV, reaksi kulit seperti pigmentasi, lesi, eritema dan  perubahan  ultrastruktur  yang  sel  di epidermis dan dermis.
Kondisi  kulit  pada  eritema  yang  ditandai dengan  kemerahan  atau  ruam  dibagi menjadi beberapa jenis, diantaranya photosensitivity,  eritema  multiforme,  dan eritema nodosum. Fotosensitifitas
disebabkan  oleh  reaksi  terhadap  sinar matahari  dan  cenderung  terjadi  ketika sesuatu,  seperti  infeksi,  obat,  atau  radiasi ultraviolet.  Eritema  merupakan  tanda  awal terjadinya  kanker  kulit  yang  merupakan reaksi inflamasi.
Penanganan  kuratif  dan  rehabilitatif  pada eritema  dapat  menggunakan  tanaman herbal yaitu daun sukun. Dalam daun sukun, terdapat salah satu zat yaitu terpenoid yang telah  digunakan  untuk  tujuan  terapeutik selama  berabad-abad  sebagai  antibakteri, antiinflamasi, agen antitumoral.
Keterbatasan  fasilitas  dan  dana  membuat peneliti  tidak  dapat  mengambil  ekstrak terpenoidnya saja sehingga menggunakan N-
heksana  dalam  pembuatan  ekstrak  daun sukun.
Oleh  karena  itu,  peneliti  mengambil  judul Efek  Antiinflamasi  Ekstrak N-Heksane Daun Sukun (Artocarpus  altilis) terhadap  Eritema pada  Kulit  Tikus  Putih (Rattus  novergiccus) oleh Radiasi Sinar UV-C.

## Metode Penelitian
Penelitian ini menggunakan desain penelitian eksperimental murni (true experimental  design) secara in  vivo dengan rancangan  pre  test- post    test  only  control grup  design .  Jumlah  perlakuan  pada penelitian  ini  ialah  sebanyak  dua  kelompok control  dan  tiga  kelompok  perlakuan berdasarkan  dosis  pemberian  ekstrak N- Heksane daun sukun Pengulangan dilakukan pada tiap kelompok untuk mencegah adanya bias.
Prosedur pada penelitian ini yaitu:
a. Preparasi Sampel Daun Sukun
Daun  sukun  yang  muda  dipilih  untuk ekstraksi,  lalu  disortasi  untuk  memilih daun  sukun  dengan  kualitas  yang terbaik. Daun sukun dicuci, dikeringkan dengan  sinar  matahari,  dihaluskan menggunakan  blender  dan  disaring untuk mendapatkan serbuk daun sukun yang halus.
b. Ekstraksi Daun Sukun
Lima  puluh  gram  serbuk  daun  sukun dimaserasi  dengan  400  mL  pelarut  N- heksana  selama  tiga  hari  dengan penggantian  pelarut  setiap  harinya, dimaserasi  dengan  400  mL  pelarut etanol  selama  tiga  hari  dengan penggantian pelarut setiap harinya dan dimaserasi juga dengan 400 mL pelarut air selama tiga hari dengan penggantian pelarut  setiap  harinya.  Ekstrak  yang diperoleh  disaring  dan  dipekatkan dengan  menggunakan rotary  vacuum evaporator. (Suryanto  dan  Wehantow, 2009)
c. Penentuan dosis ekstrak N-heksana daun sukun
- Perlakuan A  = 50 mg/kgBB/hari
- Perlakuan B = 100 mg/kgBB/hari
- Perlakuan C = 200 mg/kgBB/hari
- Kontrol  positif  =  dexamethason  1 mg/kgBB/hari
- Kontrol negatif=
Aquades 1 ml/200mg
d. Persiapan hewan coba
Hewan  coba  yang  digunakan  adalah tikus  putih  jantan  ( Rattus  norvegicus) dengan  berat  badan  200  gram  dan berusia  2-3  bulan.  Semua  tikus  dicukur punggungnya  dan  diradiasi  sinar  UV-C selama 168 jam.
e. Penghitungan Perubahan Luas Area Eritema Luas eritema dihitung dengan menggunakan penggaris dan diukur luas area eritema setiap 1x24 jam.
f. Pembuatan Preparat Histopatologis
Preparat  dibuat  dengan  melakukan sayatan  pada  punggungnya  dan  diberi pewarnaan Hematoksilin-Eosin. Preparat tersebut dibaca pada perbesaran  400x  dan  1000x  dengan mikroskop  cahaya  dan  dibedakan bentukan dari masing-masing perlakuan. Data yang diambil berupa data numerik dari hasil pengukuran luas eritema pada punggung  tikus  dan  data  kualitatif  dari pemeriksaan histopatologi eritema kulit tikus.

## Hasil Penelitian
a. Luas  Diameter  Eritema  Kulit  Tikus Putih (Rattus novergiccus)
Perubahan  luas  eritema  terbesar adalah  kelompok  kontrol  yang diberikan  obat  deksametason  1 mg/kgBB  dan  yang  terkecil  adalah kelompok  kontrol  negatif  yang diberikan  aquadest  sebanyak  1  ml (gambar 1).
Gambar 1. Perubahan Luas Eritema Pre and Post Test
b. Hasil  Gambaran  Histopatologi  Eritema Kulit Tikus Putih (Rattus novergiccus)
Gambar 2. Bentukan kulit setelah radiasi  sinar UV-C selama 168 jam (sebelum perlakuan)
Indikator  penentu  gambaran  histopatologi yang dapat dilihat yaitu pada lapisan stratum basal  dan  stratum  korneum  pada  lapisan dermis (Mustafa Yel et al , 2014).
1. Sebelum terapi (gambar 2):
- Ditemukan bahwa sel-sel
mengandung  vacuolar  sitoplasma  dan mitokondria, serta inti wrinkled. Agregasi patologis  tonofilaments  dibentuk  di desmosom.  Efek  paling  signifikan  dari UVC  di  stratum  korneum.  formasi kekosongan  dan  unkeratinized  residu sitoplasma  diamati  dalam  sel  horny. Secara  umum,  lacuna  dibentuk  di  sel
horny, massa keratohyalin dibentuk di sel horny yang lebih rendah.
- Struktur lamina basalis rusak, jarak antar  sel  melebar,  vakuola-vakuola terlihat besar dan jumlahnya banyak, dan terjadi deformasi nucleus. Pada  stratum basalis  terlihat  bentukan  vakuolisasi meningkat, deformasi dalam inti terjadi.
Vakuolisasi di sitoplasma dan mitokondria  yang  meningkat,  beberapa vakuola  menjadi  lebih  besar  dan mencapai  nuklir  selaput.  Juga  vakuola besar  yang  terjadi  di  sel  spinosus.  Juga, ada terlihat deformasi di lapisan dermis.
2. Setelah terapi (gambar 3):
- UV  (-)  :  Perubahan  struktur
dibandingkan  sebelum  terapi  tidak terlihat signifikan. Pada stratum korneum  terjadi  kekosongan  pada  sel tanduk. Terdapat sisa-sisa seluler granular  di  stratum  korneum  bahwa transformasi  sel  granular  ke  dalam  sel terangsang  belum  selesai.  Kekosongan terbentuk  di  sel  horny  dan  puing-puing sitoplasma dianggap penting perubahan. Penebalan  yang  terjadi  di  stratum korneum  adalah  dianggap  sebagai respon  epidermal  penting  untuk  radiasi UV-C.
No Kontrol Negatif Kontrol Positif Perlakuan 50 mg/kgBB Perlakuan 100 mg/kgBB Perlakuan 200 mg/kgBB 1. 2.
Gambar 3. Bentukan kulit tikus yang diradiasi sinar UV-C selama 168 jam setelah perlakuan dua hari
- UV (+) : Struktur lamina basalis yang sebelumnya  tidak  beraturan  mengalami perbaikan  dan  lebih  terlihat  rapi dibanding  kelompok  perlakuan,  jarak antar  sel  dibanding  sebelum  terapi menyempit,  vakuola  mengecil.  Pada stratum  korneum  terjadi  kekosongan pada  sel  tanduk  minimal.  Sisa-sisa granuler  minimal  dan  granuler  selular sudah  banyak  yang  terbentuk.  Terjadi penebalan pada stratum korneum
- UV 50 : Struktur lamina basalis yang sebelumnya  tidak  beraturan  mengalami sedikit  perbaikan,  jarak  antar  sel dibanding  sebelum  terapi  sedikit  lebih sempit,  vakuola  sedikit  lebih  kecil  dari sebelumnya.  Pada  stratum  korneum terjadi  kekosongan  pada  sel  tanduk masih banyak.  Sisa-sisa granuler berupa puing-puing  masih  banyak  terbentuk. Penebalan pada stratum korneum masih minimal.
- UV  100  :  Struktur  lamina  basalis
yang sebelumnya tidak beraturan mengalami  sedikit  perbaikan  lebih  dari kelompok  UV  50,  jarak  antar  sel dibanding  sebelum  terapi  lebih  sempit, vakuola mengecil. Pada stratum korneum  terjadi  kekosongan  pada  sel tanduk  jumlahnya  menurun  daripada dosis  sebelumnya.    Jumlah  sisa-sisa granuler  berupa  puing-puing  semakin menurun.  Penebalan  pada  stratum korneum sedikit meningkat.
- UV  200  :  Struktur  lamina  basalis yang sebelumnya tidak beraturan mengalami    perbaikan  lebih  dari kelompok  perlakuan  lainnya  dan  lebih rapi,  jarak  antar  sel  dibanding  sebelum terapi menjadi sempit, vakuola mengecil. Pada stratum korneum jumlah kekosongan  pada  sel  tanduk  sangat menurun  daripada  dosis  sebelumnya. Jumlah  sisa-sisa  granuler  berupa  puing- puing  sangat  minimal.  Penebalan  pada stratum korneum meningkat

## Pembahasan
Peradangan  adalah  respon  biologis  tubuh terhadap  rangsangan  berbahaya,  seperti patogen, luka fisik atau sel yang rusak. Empat tanda-tanda pertama kardinal peradangan - kemerahan  (rubor  Latin),  panas  (kalor), pembengkakan  (tumor),  dan  nyeri  (dolor). Setelah  jaringan  terluka,  ada  peningkatan aliran  darah  ke  daerah  (vasodilatasi), menyusul oleh permeabilitas meningkat dari kapiler yang memungkinkan protein plasma dan leukosit meninggalkan sirkulasi (ekstravasasi).  beredar  leukosit  mematuhi endotel melalui molekul adhesi, bertransmigrasi di endotelium, dan bermigrasi untuk mencapai lokasi cedera, di mana    stimulus  dan  memperbaiki  jaringan. Setelah peradangan telah dicapai  fungsinya harus  secara  aktif  diakhiri  untuk  mencegah kerusakan  yang  tidak  perlu  ke  jaringan. Resolusi peradangan memulai dalam beberapa  jam  pertama  setelah  respon inflamasi  dimulai  dan  terutama  dimediasi oleh  jaringan-penduduk  dan  merekrut makrofag.  program  aktif  dan  terkoordinasi
ini resolusi dikendalikan oleh endogen 'pro- menyelesaikan'  mediator  seperti  lipoxins dihasilkan  dari  asam  arakidonat  (AA), bersama-sama dengan Resolvins dan protectins.  Jika  proses  inflamasi  berlanjut, peradangan  kronis  berlangsung.  Memang, peradangan  kronis  dapat  didefinisikan sebagai  respon  yang  berkepanjangan,  tidak teregulasi
dan maladaptif yang mengakibatkan kerusakan sel, dan
berhubungan dengan banyak kondisi manusia  kronis  dan  penyakit,  termasuk asma,  aterosklerosis,  kanker,  dan  penyakit autoimun. Ciri dari peradangan kronis adalah infiltrasi sel kekebalan mononuklear (monosit,  makrofag,  lymphocyres,  dan  sel plasma).  Sel-sel  ini  direkrut  dari  peredaran oleh rilis stabil faktor kemotaktik.
Data  yang  diperoleh  dari  hasil  pengamatan berupa  luas  area  eritema  dan  gambaran histopatologi  sebelum  dan  sesudah  terapi pada tikus yang dibuat eritema oleh sinar UV selama168  jam.  Perubahan  luas  eritema terbesar  adalah  kelompok  control  positif yang  diberikan  obat  deksametason  1 mg/kgBB dan yang terkecil adalah kelompok control  negative  yang  diberikan  aquadest sebanyak  1  ml.  Sementara  kelompok perlakuan  membuktikan  bahwa  semakin besar  dosis  semakin  besar  perubahan  luas. Gambaran  bentukan  startum  korneum  dan stratum  basalis  pada  kelompok  control negative  tidak  menunjukkan  perubahan yang  signifikan.  Sementara  kelompok control postif yang diberi terapi dexamethason mengalami perbaikan struktur  epidermis  dan  dermis  dibanding sebelum  terapi.  Sedangkan  kelompok perlakuan yang diberikan ekstrak N-Heksane Daun Sukun (Artocarpus altilis)
menunjukkan  semakin  besar  dosis  ekstrak maka  semakin  banyak  perbaikan  pada struktur  bentukan  epidermis  dan  dermis, yaitu  pada  struktur  lamina  basalis  yang mengalami    perbaikan  dan  lebih  rapi,  jarak antar sel dibanding sebelum terapi menjadi sempit,  vakuola  mengecil.  Pada  stratum korneum  jumlah  kekosongan  pada  sel tanduk  sangat  menurun  Jumlah  sisa-sisa granuler  berupa  puing-puing  semakin minimal.  Penebalan  pada  stratum  korneum meningkat

## Kesimpulan
Ekstrak  N-heksana  daun  sukun  berpotensi terhadap  penyembuhan  eritema  yang disebabkan  oleh  radiasi  sinar  UV-C.
Penyembuhan eritema diamati dari perubahan luas eritema akibat radiasi UV-C pada  sebelum  dan  sesudah  terapi  serta perbandingan bentukan
histopatologi stratum  korneum  dan  stratum  basalis  pada setiap  kelompok  perlakuan.    Ekstrak  daun sukun  dengan  dosis  200  mg/kgBB  paling efektif dibanding dosis 50 mg/kgBB dan 100 mg/kgBB. Semakin besar dosis ekstrak maka semakin  besar  perubahan  luas  eritema  dan mempercepat  proses remodeling bentukan kulit secara struktural.

## Daftar Pustaka
Djuanda,  A.  2011. Ilmu  Penyakit  Kulit  dan Kelamin. Jakarta : Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia.
Gunawan,  I.W.,  Bawa,  G.,  Sutrisnayanti,
N.2008. Isolasi dan Identifikasi Senyawa Terpenoid yang Aktif Antibakteri  pada  Herba  Meniran ( Pyllanthus  niruri Linn). Jurnal  Kimia. 2(1):31-39.
Hari, A., Revikumar, D. 2014. Artocarpus : A Review  of  Its  Phytochemistry  And Pharmacology. Journal of Pharma. 9(1)2014:7.
Mariajancyrani,  J.,  Chandramohan,  G., Saravanan,  and  Elayaraja,  A.  2013.
Isolation  and  Antibacterial  Activity  of Terpenoid from Bouganville  glabra
Choicy  Leaves. Asian  Journal  of  Plant
Science and Research. 3(3):70-73.
Pradhan, C., Mohanty, M., Rout, A., Das, A.
B.,  Satapathy,  K.  B.,  Patra,  H. K.2013.Phytoconstituent Screening and  Comparative  Assessment  of Antimicrobial Potentiality of Artocarpus A ltilis Fruit Extracts. Journal University of Agriculture and Technology . Pradhan, C., Mohanty, M., Rout, A.2013.Assessment of The Antibacterial  Potential  of  Breadfruit Leaf  Extracts  Against  Pathogenic Bacteria. Journal University of Agriculture and Technology .
Puspasari,  R.  K.,    Supriyanti,  F.M.,  Solihin,
H.2014. Studi Aktivitas Antibakteri dari Ekstrak Daun Sukun ( Artocarpus altilis ) terhadap Pertumbuhan Bakteri Pseudomonas aeruginosa. Jurnal Sains dan  Teknologi  Kimia. 5(2)  ISSN  2087- 7412.
Suhando,  A.  K.,  Santoni,  A.,  Efdi,  M.  2013. Isolasi Tri terpenoid dan Uji Antioksidan Ekstrak  Kulit  Batang  Sirsak  ( Annona Muricata Linn .).Jurnal  Kimia  UNAND.
2(1):ISSN No. 2303-3401.
Suryanto, E.,Wehantouw, F. 2009.  Aktivitas Penangkap  Radikal  Bebas  dari  Ekstrak Fenolik Daun Sukun ( Artocarpus altilis ). Chemical Prog .1(2).
Yel,  Mustafa,  Huseyin  Turker.  2014. Ultrastructural  Effect  of  Ultraviolet  C Radiation  on  the  Stratum  Basale  of Mole  Rats  Epidermis. Jurnal  of
Radiation  Research  and  Applied
Sciences 7: 406-410.