## Jenis Pelarut Metanol Dan N-Heksana Terhadap
Aktivitas Antioksidan Ekstrak Rumput Laut Gelidium sp.
Dari  Pantai Drini Gunungkidul – Yogyakarta

## Wahyu Bagio Leksono*, Rini Pramesti, Gunawan Widi Santosa dan
Wilis Ari Setyati
Departemen Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH. Tembalang, Semarang 50275 Email : wbagio14@gmail.com

## Abstract

## Type of Solvent Methanol And N-Hexane Against Antioxidant Activity Seaweed Extract Gelidium sp. From Drini Beach Gunungkidul – Yogyakarta
Gelidium  sp.  the  one  of  red  seaweed  which  has  potential  as  natural  antioxidant.  The researh was to know the activity of methanol extract, n-hexane Gelidium sp., and determined total phenolic  compound  of  pigments  (chlorophyll  a  and  carotenoid).  Decriptive  explorative  method was used in this research and it was taken from Drini Beach, Gunungkidul, Yogyakarta. Maseration to this sample was done by methanol as solvent, evaporated by rotary evaporator and partitied by n-hexane solvent with separatory funnel. Antioxidant activity was determined by transfer electron method using DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl) as free radicals. Total phenolic compound being tested using Folin-Ciocalteu solution with gallic acid as standard and measured at a wavelength of 725 nm, while the chlorophylls were spectrophotometry method and measured at a wavelength of 663 nm and 646 nm as well as carotenoids were measured at a wavelength of 470 nm. The results showed  that  IC 50 value  of  methanol  extract  was  340,10  ppm  and  n-hexane  was  66,25  ppm.  IC 50 value  of  methanol  extract  was  categorized  as  very  weak  in  antioxidant  activity,  while  n-heksan extract was categorized as strong. Total phenolic content in each extract were 46,55 and 135,62 (mg  GAE/g  extract),  chlorophyll  a  8,47  and  10,88  (mg/g  extract  sample)  and  carotenoids  50,38 and 84,27 (μmol/g extract sample).
Keywords : Gelidium sp., Antioxidant, DPPH

## Abstrak
Gelidium sp.  merupakan  salah  satu  rumput  laut  merah  yang  berpotensi  sebagai  sumber antioksidan alami. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antioksidan ekstrak metanol dan  n-heksan Gelidium sp.  (segar),  menentukan  kadar  total  fenolat  dan  pigmen  (klorofil  a  dan karotenoid).  Metode  deskriptif  eksploratif  digunakan  dalam  penelitian  ini  dan  diperoleh  diambil dari  Pantai  Drini,  Gunungkidul,  Yogyakarta  dibersihkan  dengan  air  tawar,  dimaserasi  dengan pelarut  metanol,  diuapkan  dengan rotary  evaporator dan  dipartisi  dengan  pelarut  n-heksan menggunakan  corong  pemisah  ( separatory  funnel ).  Aktivitas  antioksidan  ditentukan  dengan metode transfer elektron menggunakan DPPH ( 1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl ) sebagai radikal bebas. Kadar  total  fenolat  diuji  dengan  metode  Folin-Ciocalteu  dengan  asam  galat  sebagai  larutan standar  dan  diukur  pada  panjang  gelombang  725  nm.  Kadar  klorofil  a  diukur  dengan  metode spektrofotometri  pada  panjang  gelombang  663  nm  dan  646  nm  sedangkan  kadar  karotenoid diukur pada panjang gelombang 470 nm. Hasil penelitian menunjukkan nilai IC 50 ekstrak metanol sebesar 340,10 ppm dan ekstrak n-heksan 66,25 ppm. Nilai IC 50 ekstrak metanol termasuk kategori aktivitas  antioksidan  sangat  lemah  sedangkan  n-heksana  termasuk  kategori  kuat.  Kadar  total fenolat pada masing-masing ekstrak 46,55 dan 135,62 (mg GAE/g ekstrak), kadar klorofil a sebesar 8,47 dan 10,88 (mg/g sampel) dan kadar karotenoid sebesar 50,38 dan 84,27 (µ mol/g sampel).
Kata kunci : Gelidium sp. , Antioksidan, DPPH

## PENDAHULUAN
Gelidium dapat dimanfaatkan sebagai bahan  baku  pembuatan  agar-agar  dan dibidang  farmasi  sebagai  bahan  dasar antioksidan dan antibakteri karena mengandung senyawa katekin (Kumar et al., 2008).  Salah  satu  pigmen  dominan  rumput laut merah adalah fikoeritrin yang berpotensi sebagai antioksidan. Antioksidan yang umum digunakan adalah antioksidan sintetik, seperti butylated  hydroxyanisol (BHA), butylated hydroxytoluene (BHT), tert- butylhydroquinone (TBHQ)  dan propyl  gallate (PG).  Antioksidan sintetik  bersifat  karsinogenik  dan  dapat menimbulkan  kerusakan  hati,  sehingga permintaan terhadap antioksidan alami terus meningkat.  Salah  satu  alternatif  permintaan antioksidan  alami  berasal  dari  rumput  laut (Nawali et al , 2013).
Penelitian  mengenai Gelidium sp. dapat digunakan sebagai penghasil bioetanol  (Kawaroe et  al., 2014),  sebagai agen anti-inflamasi dan antimikroba (Oumaskour et  al., 2013).  Penelitian  tentang uji  aktivitas  antioksidan Gelidium sp.  telah dilakukan  antara  lain  menggunakan  jenis G. microdon (Paiva et  al., 2012) dan G. sesquipedale (  Metidji et  al., 2015).  Informasi mengenai  aktivitas  antioksidan Gelidium sp. di  Indonesia  umumnya  dan  di  Pantai  Drini khususnya  diduga  belum  ada  sehingga penelitian ini perlu dilakukan.
Hasil  penelitian  (Ku et  al., 2008) Gelidium sp.  mengandung  senyawa  katekin yaitu  antioksidan  yang  kuat,  lebih  kuat daripada  vitamin  E,  C,  dan  betakaroten. Jenis  katekin  yaitu epigallocatechin-gallate (EGCG), epigallocatechin (EGC), epicatechin-gallate (ECG), gallocatechin , dan catechin (Anjarsari,  2016 ). Katekin merupakan  suatu  senyawa  polifenol  yang berpotensi sebagai antioksidan dan antibakteri  (Miller,  1996).  Katekin  bersifat asam  lemah,  sukar  larut  dalam  air,  dan sangat  tidak  stabil  di  udara  terbuka.  Bersifat mudah teroksidasi pada pH mendekati netral (pH  6,9)  dan  lebih  stabil  pada  pH  lebih rendah  (2,8  dan  6,9).  Katekin  mudah  terurai oleh  cahaya. Lim et  al ,  (2010) senyawa katekin  dapat  menghambat  pertumbuhan Staphylococcus aureus , Salmonella
enteritidis ,  dan Escherichia  coli .  Jenis  katekin yang  memiliki  aktivitas  antibakteri  terkuat adalah epigallocatechin (EGC).  Ekstraksi dengan  pelarut  didasarkan  pada  sifat kepolaran  zat  dalam  pelarut  saat  ekstraksi. Senyawa  polar  hanya  akan  larut  pada pelarut polar seperti etanol, metanol, butanol dan  air.  Senyawa non -polar  hanya  dapat larut  pada  pelarut non -polar,  seperti  eter, kloroform dan n-heksana.
Radikal  bebas  adalah  atom,  molekul atau  senyawa  yang  dapat  berdiri  sendiri yang mempunyai elektron tidak berpasangan,  sehingga  bersifat  sangat reaktif  dan  tidak  stabil.  Elektron  yang  tidak berpasangan  selalu  berusaha  untuk  mencari pasangan  baru,  sehingga  mudah  bereaksi dengan  zat  lain  (protein,  lemak  maupun DNA) dalam tubuh. (Winarti,2010),
Radikal  bebas  di  dalam  tubuh merupakan  bahan  yang  sangat  berbahaya. Bahan  radikal  bebas  tersebut  sebenarnya merupakan  senyawa  atau  molekul  yang mengandung  satu  atau  lebih  elektron  yang tidak  berpasangan  pada  bagian  orbital luarnya.  Adanya  elektron  yang  tidak berpasangan yang mengakibatkan senyawa tersebut  sangat  reaktif  untuk  mencari pasangannya.  Caranya  dengan  mengikat atau  menyerang  elektron  molekul  yang berada  disekitarnya.  Yang  diikat  radikal bebas pada umumnya adalah molekul besar seperti lipid, protein, maupun DNA (pembawa sifat). Apabila hal tersebut terjadi, maka  akan  mengakibatkan  kerusakan  sel atau  pertumbuhan  sel  yang  tidak  bisa dikendalikan .
Radikal  bebas  yang  bereaksi  dengan komponen  biologis  akan  menghasilkan senyawa  teroksidasi  yang  dapat  digunakan sebagai penanda kerusakan oksidatif. Komponen  endogen  yang  dapat  diserang oleh  radikal  bebas  adalah  lipid,  protein  dan DNA.  Radikal bebas memiliki reaktivitas yang sangat  tinggi.  Hal  ini  ditunjukkan  karena sifatnya  yang  menarik  dalam  menyerang elektron disekelilingnya. Radikal bebas dapat mengubah  suatu  molekul  menjadi  suatu radikal.  Nilai  IC 50 ( Inhibitor  Concentration ) merupakan  konsentrasi  larutan  substrat  atau sampel  yang  mampu  mereduksi  aktivitas
DPPH  sebesar  50%.  Semakin  kecil  nilai  IC 50 berarti  semakin  tinggi  aktivitas  antioksidan. Secara  spesifik  suatu  senyawa  dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat jika nilai IC 50 kurang dari 50 ppm (IC 50 < 50 ppm), kuat (50 ppm  <  IC 50 <  100  ppm),  sedang  (100  ppm  < IC 50 < 150 ppm), lemah (150 ppm < IC 50 < 200 ppm),  dan  sangat  lemah  (IC 50 >  200  ppm). Strukur  DPPH  radikal  bebas  dan  DPPH  yang telah  bereaksi  dengan  antioksidan  disajikan pada Gambar 1.

## MATERI DAN METODE
Materi yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  rumput  laut  jenis Gelidium sp. segar yang diperoleh dari pantai Drini  Kabupaten  Gunungkidul.  Ekstraksi dilakukan  (Santoso et  al., 2012)  dengan modifikasi  pada  perbandingan  volume sampel  dan  pelarut.  Sampel  ditimbang sebanyak  125  gram  dan  dipotong  kecil  0,5 cm lalu dimaserasi di dalam metanol (teknis) sebanyak    500  mL  selama  2x24  jam  pada suhu ± 28 o C. Larutan extrak diperoleh melalui penyaringan menggunakan kertas Whatman 41  kemudian  dievaporasi  menggunakan vaccum  rotary  evaporator  pada  suhu  40 o C hingga  volume  tersisa  ±125  mL.  Larutan  hasil evaporasi  selanjutnya  difraksinasi  dengan pelarut  n-heksan  menggunakan  corong pemisah  dengan  perbandingan  1:3  hingga terlihat dua lapisan. Lapisan bawah merupakan  metanol  dan  lapisan  atas  n- heksan.  Hasil  filtrat  masing-masing  pelarut dievaporasi  untuk  mendapatkan  ekstrak berupa  pasta.    Rendeman  ekstrak  dihitung menggunakan rumus :
% Rendemen =
Keterangan : Berat ekstrak = (Berat vial + ekstrak) – berat vial kosong (g)
Uji  kandungan  total  fenol  dilakukan untuk  mengetahui  jumlah  total  senyawa fenolat  yang  terdapat  pada  sampel. Pengujian  kadar  total  fenol  (Yangthong et al., 2009)  yaitu  menggunakan  asam  galat sebagai  kurva  standar  untuk  menentukan kadar  fenol  ekstrak.  Asam  galat  digunakan
sebagai standar dengan konsentrasi 0, 10, 20, 30,  dan  40  mg/L.  Ekstrak  sebanyak  5  mg dilarutkan  dalam  2  mL  etanol  p.a  lalu ditambahkan  5  mL  aquades  dan  0,5  mL reagen Folin-Ciocalteau 50  %.  Larutan didiamkan  selama  5  menit  kemudian ditambahkan 1 mL Na 2 CO 3 5% (b/v). Larutan diaduk  supaya  homogen  lalu  diinkubasi dalam  kondisi  gelap  selama  satu  jam.
Absorbansi diukur
menggunakan spektrofotometer UV-Vis pada  panjang gelombang  725  nm.  Nilai  total  fenol  ekstrak dinyatakan dalam “mg Galic Acid Equivalent (GAE)/ g ekstrak
Total fenol =
Keterangan :
a = konsentrasi  asam  galat  dalam sampel uji (mg/Lt)
V = volume total larutan uji (mL)
G = massa ekstrak yang digunakan (g)
1000   =faktor  konversi  terhadap  volume total larutan (mL)
Pengukuran  Klorofil  a  dan  karotenoid (Lichtenthaler, 1987). Ekstrak dari tiap pelarut ditimbang  sebanyak  5  mg,  kemudian dilarutkan dengan konsentrasi 5 mg ekstrak/5mL  aseton  80  %.  Masing-masing konsentrasi  diukur  absorbansinya  pada panjang  gelombang  646  nm,  663  nm,  dan 470  nm.  Kadar  klorofil  dan  karotenoid dihitung berdasarkan rumus:
Klorofil a mg/g sampel (Ca)= 12,21 x A 663 – 2,81 x A 646
Karotenoid µmol/g sampel (Cx+c) =
Keterangan: A 663 = Absorbansi pada panjang gelombang 663 nm A 646 = Absorbansi pada panjang gelombang 646 nm A 470 = Absorbansi pada panjang
gelombang 470 nm V
= Volume ekstrak
Pengujian  aktivitas  antioksidan  dengan prosedur menurut Miliauskes et al. (2004) 3 mL larutan DPPH 0,15 mM ditambahkan kedalam 1,5  mL  ekstrak  pada  konsentrasi  stok  50,  100,
150, 200, dan 250 ppm  diinkubasi  pada  suhu 37 o C  selama  30  menit,  kemudian  diukur absorbansi  menggunakan  spektrofotometer UV-Visible pada panjang gelombang 517 nm. Aktivitas  antioksidan  dihitung  menggunakan rumus :
Penghambat Radikal Bebas (%) =
Keterangan : A  =  Absorbansi  kontrol  negatif  (larutan  DPPH tanpa ekstrak)
B = Absorbansi (sampel uji)
Nilai  penghambat  radikal  bebas  DPPH (%)  digunakan  untuk  menentukan  nilai  IC 50 . Nilai  IC 50 merupakan  besarnya  konsentrasi larutan  uji  untuk  meredam  50  %  aktivitas radikal  bebas.  IC 50 dihitung  dari  persentasi penghambat  radikal  bebas  (%)  dengan menggunakan  persamaan  yang  diperoleh dari kurva regresi linier.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ciri  morfologi  rumput  laut Gelidium sp. yang diperoleh  yaitu thallus panjang 7-8 cm, berwarna  coklat  kemerahan  dan  berbentuk silindris  dengan  percabangan  tidak  teratur yang  keluar  dari stolon. Thallus  mempunyai ranting  pendek  (ramuli)  yang  tumbuh berderet  bersebelahan  pada  percabangan. Karakteristik  pada Gelidium sp.  umumnya ada  ramuli  terletak  berderet  pada  satu  sisi. Hasil  ekstraksi Gelidium sp.  dengan  berat segar  125  gram  dengan  menggunakan  2 pelarut yaitu metanol dan n-heksan ditampilkan pada Tabel 1.
Aktivitas  antioksidan  dihitung  dengan nilai  IC 50 yang  diperoleh  dari  persamaan regresi linier konsentrasi ekstrak terhadap nilai
inhibisi  DPPH.  Berdasarkan  persamaan  ini diketahui  nilai  R 2 ekstrak  metanol  sebesar 0,5329  dan  n-heksana  0,8529.  Nilai  R 2 menunjukkan  korelasi  antara  persen  (%) inhibisi  dan  konsentrasi  ekstrak,  dari  hasil  ini memberikan  korelasi  positif.  Nilai  aktivitas antioksidan  dari  ekstrak  n-heksana    sebesar 94,59 ppm dan metanol 213,28 ppm.  Nilai ini diduga dipengaruhi komponen, seperti fenol, klorofil  a,  dan  karotenoid.  Tiga  komponen tersebut mempunyai hasil yang sinergis, yaitu nilai  dari  ekstrak  n-heksana  lebih  besar dibandingkan  dengan  ekstrak  metanol. Konsentrasi  ekstrak yang digunakan yaitu  50, 100,  150,  200  dan  250  ppm.  Kontrol  positif menggunakan Vitamin C dengan konsentrasi 2, 3,  4, 5 dan 6 ppm.  Nilai absorbansi  DPPH, absorbansi  DPPH  +  ekstrak,  inhibisi  IC 50 pada Tabel 2.
Tabel 1 . Hasil Ekstraksi Gelidium sp.
Pelarut Berat Ekstrak (g) Bentuk Warna Metanol 0,214 pasta hijau tua n-heksan 0,850 pasta hijau tua Nilai IC 50 dihitung menggunakan persamaan  regresi  linier  yang  diperoleh  dari hubungan  konsentrasi  ekstrak  terhadap persen  inhibisi  DPPH.  Hasil  dari  persamaan regresi linier y = 0,1436x + 19,372 untuk ekstrak metanol dan y = 0,370x + 14,951 untuk ekstrak n-heksana.  Berdasarkan  hasil  perhitungan dari  hubungan  konsentrasi  ekstrak  vitamin  C dengan  persen  inhibisi  DPPH  diperoleh persamaan  regresi  linier  y  =  22,401x  – 16,899Hasil  penentuan  aktivitas  antioksidan, total fenol, klorofil a, dan karotenoid  ekstrak Gelidium sp. ditampilkan pada Tabel 2.
Gambar 1. Struktur DPPH (a) Radikal Bebas dan (b) Radikal Bebas yang Telah Bereaksi dengan dengan Antioksidan (Molyneux, 2004).
Ekstrak  rumput  laut Gelidium sp. memiliki  rendemen  ekstrak  metanol  sebesar 0,171 % dan n-heksan sebesar 0,680 %. Hal ini diduga Gelidium sp.  memiliki  senyawa
bioaktif yang bersifat non-polar lebih banyak daripada  senyawa  polar.  Setiap  pelarut memiliki karakter berbeda dalam mengambil senyawa  bioaktif  suatu  sampel  yang
Gambar 2. Rumput Laut Gelidium sp. dari Pantai Drini Gunung Kidul
Gambar 3. Inhibisi Ekstrak Gelidium sp.
y = 0,0274x + 40,681 R² = 0,8622 y = 0,2808x + 31,397 R² = 0,7768 0 20 40 60 80 100 120 0 100 200 300 % Inhib is i konsentrasi (ppm) e ekstrak y = 22,401x - 16,899 R² = 0,9217 -50 0 50 100 150 0 1 2 3 4 5 6 7 % in hi bi si konsentrasi (ppm)
Tabel 2. Nilai IC 50, Total Fenolik, Klorofil a, dan Karotenoid Gelidium sp.
Parameter Jenis ekstrak metanol n-heksan Nilai IC 50 (ppm) 340,10 66,25 Total fenolik ( mg GEA/g ekstrak) 46,55 135,62 Klorofil a (mg/g sampel) 8,47 10,88 Karotenoid (  mol/g sampel) 50,38 84,27
berbeda kepolarannya. Pelarut metanol dan n-heksan  digunakan  dalam  ekstraksi  untuk mendapatkan senyawa berdasarkan tingkat kepolarannya (polar dan non-polar). Sarastani et al. (2002) ekstraksi menggunakan pelarut  dengan  polaritas  berbeda  dapat menghasilkan ekstrak dengan polaritas yang berbeda pula sesuai dengan sifat kepolaran masing-masing ekstrak.
Hasil  ekstraksi  pada  ekstrak  metanol dan  n-heksan  menunjukkan warna  hijau.  Hal ini menunjukkan sampel banyak mengandung  klorofil.  Rumput  laut  merah memiliki  kandungan  pigmen  berupa  klorofil a,  klrofil  d,  fikobiliprotein  (fikoeritirin  dan fikosianin),  karotenoid  dan  xantofil  (Van et al ., 1995)
Ekstrak  sampel  menghasilkan  senyawa bioaktif  berupa  klorofil  a  pada  ekstrak  n- heksan  sebesar  10,88  mg/g  sampel,  lebih tinggi  dibanding  ekstrak  metanol  sebesar 8,47  mg/g  sampel.  Klorofil  termasuk  jenis pigmen non- polar  sehingga  larut  dalam pelarut non -polar  (Richmond  2008).  Kadar klrofil a pada rumput laut merah merupakan yang  paling  kecil  bila  dibanding  dengan rumput  laut  hijau  dan  coklat  (Fleurence  & Levine, 2016)
Kadar  karotenoid  pada  pelarut  n- heksan 84,27 µmol/g sampel, lebih tinggi jika dibandingkan dengan pelarut metanol 50,38 µmol/g  sampel.  Hal  ini  diduga  karotenoid pada  sampel  termasuk  dalam  karotenoid non -polar (α-karoten dan β-karoten). Kandungan  karotenoid  pada  beberapa rumput laut merah beragam dari 0,5 – 52,5 % berat  kering  (Esteban et  al., 2008).  Faktor musim,  lokasi  geografi  tempat  tumbuh,  jenis spesies, umur panen hingga kondisi lingkunga mempengaruhi  ragam  kandungan  pigmen (Fleurence & Levine, 2016)
Aktivitas  antioksidan  pada  sampel dinyatakan  dalam  persen  inhibisi  terhadap radikal  bebas  DPPH.  Persen  inhibisi  didapat dari  pengurangan  nilai  absorbansi  DPPH dengan  absorbansi  DPPH  ditambah  ekstrak. Untuk  menginterpretasikan  hasil,  parameter yang digunakan adalah IC 50 yang merupakan  konsentrasi  suatu  sampel  dalam meredam 50% aktivitas radikal bebas.
Hasil  perhitungan  menunjukkan  IC 50 ekstrak  metanol  rumput  laut Gelidium sp. sebesar  340,10  ppm  dan  ekstrak  n-heksan sebesar  66,10  ppm.  Hasil  ini  menunjukkan ekstrak  n-heksan  memiliki  efektivitas  lebih baik  dalam  meredam  radikal  bebas  DPPH. Mardawati et al. (2008) dalam penggolongan  aktivitas  antioksidan  dari ekstrak  rumput  laut Gelidium sp.  tergolong kuat  pada  ekstrak  pelarut  n-heksan, sedangkan ekstrak pelarut metanol tergolong sangat lemah. Hasil yang berbeda antara  ekstrak  metanol  dan  n-heksan    ini diduga, karena sampel yang diuji merupakan ekstrak kasar. Ekstrak yang belum murni masih mengandung senyawa-senyawa lain  yang  berasal  dari  laut  seperti  garam, nutrient-nutrien,  dan  mineral  yang  dapat menghambat kerja dari senyawa antioksidan.  Hal  ini  didukung  oleh  penelitian yang  dilakukan  Wikanta et  al. (2005), rendahnya  aktivitas  antioksidan  dapat dikarenakan  adanya  zat  pengotor  yang terdapat dalam ekstrak masih tinggi.
Hasil  yang  diperoleh  dari  ekstrak  n- heksan  tergolong  kuat  sedangkan  dari ekstrak  metanol  tergolong  rendah,  namun jika dibandingkan dengan aktivitas antioksidan  rumput  laut  merah  lain  seperti pada  jenis Halymenia  harveyana dan Eucheuma  cottonii (Suryaningrum et  al., 2006)  menghasilkan  IC 50 pada  ekstrak metanol  sebesar  176,5  ppm  sedangkan pada ekstrak n-heksan lebih dari 2000 ppm.
Aktivitas  antioksidan  ekstrak  n-heksan lebih  efektif  dalam  meredam  radikal  bebas dibanding  ekstrak  metanol.  Hal  ini  diduga karena  nilai  senyawa  fenol,  klorofil  a  dan karotenoid menunjukkan nilai dengan pelarut  n-heksan  lebih  tinggi  dibanding metanol. Hal tersebut berpengaruh terhadap aktivitas  antioksidan,  semakin  tinggi  kadar senyawa  tersebut  maka  semakin  kuat aktivitas antioksidannya (Sanger et al ., 2013).
Pengujian total
fenol
bertujuan menentukan senyawa fenolik yang terkandung  di  dalam  sampel,    bila kandungan  senyawa  fenolik  di  dalam sampel  tinggi  maka  aktivitas  antioksidannya akan  tinggi  (Gross,  1991).  Hasil  penelitian menunjukkan hubungan yang  positif, karena nilai  total  fenol  ekstrak  n-heksan  sinergis dengan  aktivitas  antioksidan  ekstrak  n- heksana Gelidium sp.  mengandung  katekin yang  dapat  menjadi  bahan  dasar  sebagai aktivitas  antioksidan  (Kumar et  al., 2008). Katekin merupakan salah satu senyawa hasil turunan fenol. Senyawa fenol yang terdapat pada  ekstrak Gelidium sp.  tidak  dilakukan proses  identifikasi  sehingga  tidak  diketahui senyawa  fenol  apa  saja  yang  terdapat dalam ekstrak.
Klorofil  a  dan  karotenoid  berperan sebagai  antioksidan.  Ditambahkan  (Sangi et al ,  2008)    Triterpenoid  merupakan  salah  satu senyawa yang berpotensi sebagai antioksidan,  biasanya  larut  dalam  pelarut non–polar,  sedangkan  Sheikh et  al ,  (2009) senyawa  fenolik  terbanyak  tidak  selalu terdapat  dalam  pelarut  polar,  namun tergantung  dari  struktur  senyawa  fenoliknya karena pada Turbinaria conoides kadar total fenol  ekstrak  n  -  heksana  lebih  tinggi dibanding  ekstrak  metanol  (Setyati et  a l, 2017). Damogalad et. al. (2013) menyatakan flavonoid  sebagai  antioksidan  dan  klorofil  a dapat  meredam  radikal  bebas  karena adanya  logam  Mg  yang  terkelat  dan kerangka  porfirin  yang  dimilikinya.  Logam yang  terkelat  akan  membuat  radikal  bebas cenderung memberikan elektronnya kepada logam  Mg,  sehingga  dapat  menetralkan karakter  radikal  bebas.  Logam  Mg  pada klorofil  dapat  berpengaruh  pada  aktivitas antioksidan klorofil jika dalam bentuk terkelat bukan dalam bentuk ionik (Gross, 1991).
Setiap  kelas  rumput  laut  memiliki perbedaan  rasio  akumulasi  jenis  karotenoid sebagai  contoh  fukosantin  yang  merupakan salah  satu  jenis  karotenoid  dan  memiliki akumulasi  yang  tinggi  pada  rumput  laut coklat,  sedangkan  β-karoten  akumulasinya cukup  tinggi  pada  beberapa  jenis  rumput laut  merah  (Liu et  al .,  2009)  dan  akumulasi karotenoid  dalam  rumput  laut  dapat dimanfaatkan
sebagai antioksidan. Penghambatan radikal
bebas oleh karotenoid dilakukan oleh β-karoten. Aktivitas antioksidan  β-karoten  dapat  menunjukkan pro-oksidan secara autokatalitik (Limantara & Rahayu, 2008).

## KESIMPULAN
Hasil  penelitian  menunjukkan  nilai IC 50 ekstrak  metanol  sebesar  340,10  ppm  dan ekstrak  n-heksan  66,25  ppm.  Nilai  IC 50 ekstrak metanol termasuk kategori aktivitas antioksidan  sangat  lemah  sedangkan  n- heksana  termasuk  kategori  kuat.  Kadar  total fenolat  pada  masing-masing  ekstrak  46,55 dan 135,62 (mg GAE/g ekstrak), kadar klorofil a  sebesar  8,47  dan  10,88  (mg/g  ekstrak sampel)  dan  kadar  karotenoid  sebesar  50,38 dan 84,27 (µ mol/g ekstrak sampel).

## DAFTAR PUSTAKA
Anjarsari,  I.R.D.  2016.  Katekin  teh  Indonesia: prospek  dan  manfaatnya. Kultivasi.
15(2):99-106
Damogalad, V., Edy, H.J., & Supriati, H.S. 2013.
Formulasi  Krim  Tabir  Surya  Ekstrak  Kulit Nanas  ( Ananas  comosus  L  Merr )  Dan  Uji In  Vitro  Nilai  Sun  Protecting  Factor  (Spf). Pharmacon. 2(2):12-16.
Esteban, R., Martínez, B., Fernández-Marín, B., Maria  Becerril,  J.,  &  García-Plazaola,  J.I. 2009. Carotenoid composition in Rhodophyta:  insights  into  xanthophyll regulation in Corallina elongata . Europ. J. Phycol. 44(2):221-230.
Fleurence,  J.,  &  Levine,  I.  (Eds.).  2016. Seaweed in health and disease prevention . Academic Press. Gross,  J.  1991.  Pigments  in  Vegetable. Chlorophylls  and  Carotenoids.  Van Nostrand Reinhold. New York.
Hoek,  C.,  Mann,  D.,  &  Jahns,  H.M.  1995. Algae:  an  introduction  to  phycology .
Cambridge University Press.
Ku,  K.  J.,  Hong,  Y.H.,  &  Song,  K.  B.  2008. Mechanical  properties  of  a  Gelidium corneum edible film containing catechin and  its  application  in  sausages. J.  Food Sci. 73 (3):  C217-21.  DOI  :  10.1111/j.1750- 3841.2008.00700.x
Kawaroe,  M.,  Rusmana,  I.,  &  Nurafni.  2013.
Production of Bioethanol
from
Macroalgae Gelidium  sp .  Using  Agarase Enzymes  of  Marine  Bacteria.  Bogor. Institut Pertanian Bogor.
Lim,  G.O.,  Jang,  S.A.,  &  Song,  K.B.  2010.
Physical  and  antimicrobial  properties  of Gelidium  corneum/nano-clay  composite film containing grapefruit seed extract or thymol. J. Food Eng. 98 (4):415-420.
Limantara,  L.P  &    Rahayu.  2008.  Prospek Kesehatan Pigmen  Alami .  Prosiding Seminar  Nasional  Sains  dan  Teknologi Pigmen  Alami,  Universitas  Kristen  Satya Wacana, Salatiga, p: 2-42.
Liu,  C.L.,  Huang,  Y.S.,  Hosokawa,  M.,
Miyashita, K., & Hu, M.L. 2009. Inhibition of proliferation  of  a  hepatoma  cell  line  by fucoxanthin in relation to cell cycle arrest and enhanced
gap
junctional intercellular  communication. Chemico- biological interactions . 182 (2-3):165-172.
Metidji, H., Dob, T., Toumi, M., Krimat, S., Ksouri, A., &  Nouasri,  A.   2015.  In vitro screening of secondary
metabolites
and evaluationof  antioxidant,  antimicrobial and  cytotoxic  properties  of Gelidium sesquipedale Thuret  et  Bornet  red seaweed from Algeria.
Miller, N.D.1996. Antioxidant Flavonoid Structure  and  Clinic  Usage.  Throne Research. 2:103-111.
Molyneux,  P.  2004.  The  use  of  the  stable  free radical  diphenylpicrylhydrazyl  (DPPH)  for estimating
antioxidant activity.
Songklanakarin  J.  Sci.  Technol , 26 (2):211-
219.
Nawaly,  H.,  Susanto,  A.B.,  &  Uktolseja,  J.L.
2013. Senyawa Bioaktif dari Rumput Laut sebagai  Antioksidan. Prosiding  Seminar Biologi 10(1):9088
Oumaskour,  K.,  Boujaber,  N.,  Etahiri,  S.  & Assobhel, O. 2013. Anti-Inflammatory and Antimicrobial  Activities  of  Twenty-Three Marine  Algae  from  the  Coast  of SidiBouzid  (El  Jadida-Morocco). Int.  J. Pharm. Pharm. Sci , 5: 1 45-149.
Paiva, L.S., Patarra,  R.F.,  Neto,  A.I., Lima, E. & Baptista, J.A. 2012. Antioxidant activity of macroalgae from the Azores.
Arquipélago. Life and Marine Sciences , 1-
6.
Richmond,  A.  (Ed.)  2008. Handbook  of microalgal  culture:  biotechnology  and applied phycology . John Wiley & Sons. Setyati,  W.  A.,  Zainuddin,  M.,  &  Pramesti,  R. 2017. Aktivitas Antioksidan Senyawa Non- Polar  Dan  Polar  Dari  Ekstrak  Makroalga Acanthophora  muscoides Dari  Pantai Krakal  Yogyakarta. Jurnal  Enggano ,
2 (1):68-77 Santoso,  J.,  Anwariyah,  S.,  Rumiantin,  R.O., Putri,  A.P.,  Ukhty,  N.,  &  Yoshie-Stark,  Y. 2012. Phenol content, antioxidant activity and  fibers  profile  of  four  tropical seagrasses  from  Indonesia. J.  coast. Dev. 15(2):189-196.
Sarastani,  D.,  Soekarto,  S.T.,  Muchtadi,  T.R., Fardiaz,  D.,  &  Apriyantono,  A.  2002. Aktivitas  antioksidan  ekstrak  dan  fraksi ekstrak  biji  atung. J.  Teknol.    Ind.  Pang. 13(2):149-156.
Sanger,  G.,  Widjanark,  S.B.,  Kusnadi,  J.,  & Berhimpon,  S.  2013.  Antioxidant  Activity of  Methanol  Extract  f  Sea  Weeds Obtained  from  North  Sulawesi. Food  Sci. Quality Manag. 19:2224-6088.
Sangi,  M.,  Runtuwene,  M.R.,  Simbala,  H.E.,  & Makang,  V.M.  2008.  Analisis  fitokimia tumbuhan obat di Kabupaten Minahasa Utara. Chem. Prog. 1(1):47-53.
Sheikh, T.Z.B., Yong, C.L., & Lian, M.S. 2009. In vitro  antioxidant  activity  of  the  hexane and  methanolic  extracts  of  Sargassum baccularia and
Cladophora
patentiramea . J.  App.  Sci. 9 (13):2490- 2493.
Wikanta, T., Januar, H.D. & Nursed, M. 2005. Uji Aktivitas  Antioksidan,  Toksisitas  dan Sitoksisitas Ekstrak Alga Merah Rhodymenia  palmate . J.  Pen.  Per.  Ind. 11(4): 41-49
Yangthong,  M.,  Hutadilok-Towatana,  N.,  & Phromkunthong,  W.  2009.  Antioxidant activities  of  four  edible  seaweeds  from the  southern  coast  of  Thailand. Plant Foods Human Nutri. 64(3):218-223.