## AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN KELOR (Moringa oleifera Lamk.) TERHADAP BAKTERI Escherichia coli PENYEBAB PENYAKIT GANGGUAN PENCERNAAN SECARA IN VITRO
Fajar Husen 1 *, Nuniek Ina Ratnaningtyas 2
1 Departemen Teknologi Laboratorium Medis, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan (STIKes) Bina Cipta Husada, Jl. Pahlawan No. V/6 Tanjung, Purwokerto Selatan, Banyumas, Jawa Tengah, 53144
2 Program Studi Biologi, Fakultas Biologi Universitas Jenderal Soedirman (UNSOED), Jl. Dr. Soeparno No. 63 Karangwangkal, Purwokerto Utara, Banyumas, Jawa Tengah, 53122

## INFO ARTIKEL

## ABSTRAK
Riwayat Artikel : Diterima : 07 Maret 2024 Disetujui : 05 Mei 2024 Daun  kelor  (Moringa  oleifera  Lamk.)  adalah  salah  satu  jenis  tumbuhan tropis  di  Indonesia  yang  banyak  dimanfaatkan  oleh  Masyarakat Indonesia  sebagai  bahan  masakan.  Daun  kelor  diketahui  memiliki banyak  manfaat  salah  satunya  dapat  dikonsumsi  sebagai  asi  booster. Ekstrak  daun  kelor  juga  dilaporkan  memiliki  aktivitas  sebagai  anti- peradangan, anti-bakteri, anti-oksidan, dan beberapa melaporkan sebagai anti-diabetes. Penelitian terkait molekuler docking dari senyawa bioaktif M. oleifera dan uji aktivitas in vitro sebagai anti-bakteri perlu dilakukan untuk  mengetahui  bagaimana  senyawa  bioaktif  yang  terkandung  dalam ekstrak  M.  oleifera  menghambat  pertumbuhan  bakteri  E.  coli.  Metode penelitian  ini  adalah  eksperimental  dengan  rancangan  acak  lengkap (RAL),  terdapat  24  unit  percobaan,  dengan  1  kontrol  positif menggunakan  chloramphenicol.  Dosis  ekstrak M.  oleifera yang digunakan  yaitu  20  mg/Ml,  40  mg/mL,  dan  60  mg/mL.  Ekstrak  M. oleifera  diekstraksi  dengan  menggunakan  metode  maserasi,  dan  pelarut yang  digunakan  adalah  ethanol  96%.  Pengujian  molekuler  docking dilakukan  dengan  menggunakan  software  python  dan  discovery  studio 2021.  Analisis  dilakukan  dengan  one-way  ANOVA,  dan  uji  lanjut dengan  menggunakan  Duncan  multiple  range-test  (DMRT).  Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak daun kelor mampu menghambat pertumbuhan E. coli dengan zona hambat tertinggi adalah 27.30 mm.
Kata Kunci  : Moringa oleifera, antibiotik, Escherichia coli ,
ekstrak , zona hambat

## ARTICLE INFO

## ABSTRACT
Riwayat Artikel : Received : 07 Maret 2024 Accepted : 05 May 2024 Moringa leaves (Moringa oleifera Lamk.) are one type of tropical plant in  Indonesia  that  is  widely  used  by  the  Indonesian  people  as a  cooking ingredient.  Moringa  leaves  are  known  to  have  many  benefits,  one  of which  can  be  consumed  as  an  asi  booster.  Moringa  leaf extract  is  also reported  to  have  activity  as  anti-inflammatory,  anti-bacterial,  anti- oxidant,  and  some  reported  as  anti-diabetic.  Research  related  to molecular  docking  of  M.  oleifera  bioactive  compounds  and  in  vitro activity tests as anti-bacterial need to be done to find out how bioactive compounds contained in M. oleifera extract inhibit the growth of E. coli bacteria.  This  research  method  is  experimental  with  a  complete randomized  design  (CRD),  there  are  24  experimental  units,  with  1 positive control using chloramphenicol. The doses of M. oleifera extract used were 20 mg/mL, 40 mg/mL, and 60 mg/mL. M. oleifera extract was extracted  using  the  maceration  method,  and  the  solvent  used  was  96% ethanol.  Molecular  docking  testing  was  carried  out  using  Pythonw  and discovery studio 2021 software. Analysis was done by one-way ANOVA, and  further  test  using  Duncan  multiple  range-test  (DMRT).  The  results showed  that  Moringa  leaf  extract  was  able  to  inhibit  the  growth  of  E. coli with the highest zone of inhibition being 27.30 mm.
Key words: Moringa oleifera, antibiotic, Escherichia coli, ekstracts, inhibition zone
Jurnal Penelitian dan Pengabdian Kepada Masyarakat UNSIQ, Vol. 11 No. 2, 77 - 83 ISSN(print): 2354-869X | ISSN(online): 2614-3763

## 1. PENDAHULUAN
Penyakit gangguan pencernaan merupakan  salah  satu  penyakit  yang  sangat umum  dijumpai  oleh  masyarakat,  dan  hampir semua  orang  pernah  mengalami  gangguan pencernaan.  Gangguan pencernaan yang umum sekali  ditemukan  adalah  diare.  Penyakit  diare dapat  disebabkan  oleh  infeksi  bakteri  coliform, yaitu Escherichia  coli .  Bakteri E.  coli merupakan bakteri gram negatif, dengan bentuk bulat  ( coccus ).  Bakteri  ini  sebenarnya  hidup normal  (sebagai flora  normal )  pada  saluran pencernaan  manusia,  umumnya  bakteri  ini membantu  dalam  proses  pembusukan  makanan yang  masuk  ke  sistem  pencernaan.  Dalam keadaan yang menguntungkan bakteri ini untuk terus tumbuh, jumlahnya dapat tidak terkendali dan  dapat  mengifeksi  saluran  pencernaan,  hal tersebut  dapat  menyebabkan  penyakit  salah satunya adalah diare. Selain karena pertumbuhan  bakteri  yang  tidak  normal, makanan  yang  telah  terkontaminasi  bakteri E. coli juga  menjadi  salah  satu  penyebab  infeksi saluran  pencernaan  yang  menyebabkan  diare (Husen & Ratnaningtyas 2022).
Pengobatan  penyakit  infeksi  saluran pencernaan  karena  bakteri E.  coli umumnya dapat dengan mudah dilakukan dengan pemberian antibiotik. Masalah seringkali muncul  ketika  masyarakat  kurang  memahami bahwa  penggunaan  antibiotik  yang  diresepkan oleh  dokter  seharusnya  dikonsumsi  sampai habis (sesuai resep), namun terkadang masyarakat  yang  menderita  infeksi  saluran pencernaan karena bakteri berhenti mengkonsumsi  antibiotik  ketika  tubuh  merasa lebih  baik  atau  sudah  tidak  diare.  Hal  tersebut jika  dilakukan  terus  menerus  dapat  menjadi salah  satu  faktor  pemicu  resistensi  antibiotik terjadi,  akibat  konsumsi  yang  tidak  tepat. Beberapa  alasan  yang  umumnya  dijumpai  oleh masyarakat  bahwa  mengkonsumsi  obat  sintesis dapat  memberikan  efek  samping,  padahal  hal tersebut  tidak  sepenuhnya  benar  jika  dilakukan sesuai  aturan.  Untuk  mengatasi  kekhawatiran masyarakat  terkait  penggunaan  obat  sintesis, maka dewasa ini mulai dilakukan pengembangan  obat  herbal,  atau  suplemen
kesehatan yang berbasis alam ( herbal medicine ).  Salah  satu natural  resources yang sangat  banyak  dijumpai  di  Indonesia  adalah tumbuhan daun kelor ( Moringa oleifera Lamk.) (Pratama et al. 2022).
Daun kelor ( M. oleifera Lamk.) merupakan  tumbuhan  yang  cukup  banyak ditemukan  di  Indonesia.  Daun  kelor  umumnya dijumpai  tumbuh  secara  liar  ( wild  plant ),  dan beberapa di budidayakan karena telah diketahui manfaat  dan  kandungan  senyawa  bioaktifnya. Sebelum dikembangkan menjadi berbagi produk  kesehatan, M.  oleifera juga  telah digunakan  oleh  masyarakat  sebagai  obat, suplemen,  atau  sebagai  bahan  masakan.  Daun kelor  umumnya  dijumpai  sebagai  bahan masakan dalam bentuk sediaan sup daun kelor, teh  daun  kelor,  atau  dikonsumsi  dalam  bentuk rebusan. Manfaat yang dipercaya oleh masyarakat  bahwa  rebusan  daun  kelor  dapat memberikan  manfaat  sebagai  asi booster bagi ibu menyusui.
Pengembangan  daun  kelor  sebagai suplemen  kesehatan  telah  membawa  manfaat yang  besar  bagi  masyarakat.  Eksplorasi, identifikasi,  dan  karakterisasi  ekstrak  daun kelor  telah  membawa  banyak  penemuan. Ekstrak  daun  kelor  diketahui  memiliki  banyak aktivitas  biologis  dan  biokimiawi,  seperti antidiabetes,  anti-inflamasi,  antioksidan,  dan anti-bakteri.  Pengembangan  ekstrak  daun  kelor sebagai  anti-bakteri  penting  untuk  dipelajari lebih  lanjut,  mengingat  resistensi  antibiotik terhadap  beberapa  jenis  bakteri  mulai  menjadi masalah  yang  perlu  dipecahkan  dan  diatasi. Resistensi  antibiotik  dapat  menyebabkan  efek samping  seperti  penggunaan  obat  yang  terus menerus  dengan  dosis  tinggi,  meningkatnya ketahanan  bakteri  patogen  penyebab  penyakit, serta  meminimalisir  efektivitas  penyembuhan akibat  infeksi  bakteri  patogen  (Islamiyati  et  al. 2023).
Penelitian  ini  dilakukan  dengan  tujuan untuk  mengetahui  efektivitas  ekstrak M. oleifera yang  diekstraksi  menggunakan  pelarut ethanol  96%  terhadap  bakteri  patogen E.  coli yang menyebabkan penyakit gangguan pencernaan. Keterbaharuan penelitian ini adalah
daun  kelor  yang  digunakan  merupakan  daun kelor hasil budidaya/ dikultivasi oleh masyarakat  lokal  dengan  perlakuan  pemberian pupuk.  Daun  kelor  yang  dibudidayakan  oleh masyarakat  ini  memiliki  ukuran  daun  yang lebih  kecil  dengan  warna  sedikit  lebih  terang. Terdapat  tiga  jenis  percobaan  dengan  dosis bertingkat  yang  berbeda  untuk  mengetahui dosis  mana  yang  efektivitas  terbaik  dalam menghambat pertumbuhan bakteri E. coli .

## 2. METODE

## Rancangan Penelitian
Penelitian  ini  adalah  eksperimental, dengan menggunakan 24 unit percobaan. Setiap percobaan  dilakukan  dengan  duplo  pada percobaan in  vitro .  Dosis  ekstrak  daun  kelor yang  digunakan  adalah  20  mg/mL  dan  40 mg/mL.  Kontrol  positif  yang  digunakan  adalah antibiotik chloramphenicol. Bahan yang digunakan  meliputi  ekstrak  daun  kelor  ( M.
oleifera ), larutan alkohol 96%, Dimetil sulfoksida  (DMSO),  dan  reagent  uji  fitokimia (asam  klorida,  asam  sulfat  pekat,  serbuk magnesium,  Liberman  Bouchard,  dan  aquadest steril).

## Ekstraksi Daun Kelor (M. oleifera)
Ekstraksi
dilakukan dengan menggunakan metode maserasi. Metode maserasi  yang  dilakukan  menggunakan  pelarut alkohol  96%.  Perbandingan  yang  digunakan antara  simplisia  kering  daun  kelor  dan  pelarut adalah  1:1,  1:3,  dan  3:1.  Setiap  tahapan maserasi  dilakukan  selama  24  jam,  kemudian setiap selesai, maserat disaring dengan menggunakan  bantuan  kertas  saring.  Seluruh maserat  daun  kelor  yang  didapatkan  kemudian di  satukan  dan  evaporasi  dengan  prinsip pemanasan  menggunakan  bantuan water  bath pada  suhu  71 o C  dan hotplate dengan  suhu maksimal  75 o C. Ekstrak  kental  yang didapatkan kemudian disimpan pada suhu 5 o C (Ratnaningtyas, Husen, et al. 2022).

## Skrining Senyawa Fitokimia
Skrining  senyawa  fitokimia  dilakukan secara  kualitatif  dengan  menggunakan  reagen uji.  Senyawa  target  yang  akan  diidentifikasi meliputi  flavonoid,  terpenoid,  dan  saponin.
Identifikasi  flavonoid  menggunakan  serbuk magnesium  dan  asam  klorida,  reagen  uji terpenoid  adalah  asam  sulfat  pekat  dan Liberman  Burchard reagent serta  untuk pengujian  saponin  dengan treatment perebusan kemudian  ditambah  1-2  tetes  asam  klorida  dan di  kocok  sampai  terbentuk  busa  stabil  15-20 detik  (tanda  positif).  Skala  tanda  positif  cukup (+),  sedang  (++),  dan  tinggi  (+++).  Perubahan warna  untuk  flavonoid  adalah  merah  muda, merah  tua,  atau  merah  kekuningan,  dan terpenoid  terbentuk  warna  merah  keunguan/ ungu,  dan  terbentuk  endapan  coklat  (steroid) (Ratnaningtyas, Hernayanti, et al. 2022).

## Inokulasi Bakteri
Inokulasi bakteri kultur E. coli dilakukan dengan metode streak plate . Sebanyak  1  ose  isolate  digoreskan  pada permukaan  media  NA.  Penggoresan  dilakukan dengan  menggunakan cotton  bud steril  (sekali pakai).

## Aplikasi Antibiotik Dan Ekstrak
Aplikasi  antibiotik  sebagai  kontrol positif  dilakukan  dengan  meletakan disc antibiotik  chloramphenicol  pada  permukaan media  NA  yang  sudah  diinokulasi  dengan bakteri E.  coli .  Sementara  aplikasi  ekstrak dilakukan dengan menggunakan metode sumuran.  Sebanyak  20,  40,  dan  60  µL  ekstrak yang telah didilusi pada DMSO dipipetkan pada sumuran yang telah dibuat pada media NA yang telah  diinokulasi  bakteri,  kemudian  diteteskan ekstrak  daun  kelor  sebanyak  50  µL  (Husen  & Ratnaningtyas 2022).

## Analisis Data
Data  hasil  pengamatan  dan  pengukuran zona  hambat  pada  uji in  vitro kemudian ditabulasi  dan  dirata-rata.  Hasil  rata-rata kemudian  dianalisis  dengan  one-way  ANOVA, menggunakan software SPPS ver. 26.0. Apabila hasil  analisis  menunjukkan  nilai  signifikansi yang  sesuai,  kemudian  uji  lanjut  dilakukan menggunakan Duncan  multiple  range-test (DMRT), untuk mengetahui Tingkat beda nyata antar  perlakuan.  Data  disajikan  dalam  bentuk tabel  dan chart  histogram dengan  notasi signifikansi (Husen et al. 2021).
3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Jurnal Penelitian dan Pengabdian Kepada Masyarakat UNSIQ, Vol. 11 No. 2, 77 - 83 ISSN(print): 2354-869X | ISSN(online): 2614-3763
Hasil analisis skrining senyawa fitokimia pada ekstrak etanol daun M. oleifera menunjukkan  bahwa M.  oleifera mengandung senyawa flavonoid, terpenid, dan saponin (Tabel 1).
Tabel  1. Hasil  Skrining  Senyawa  Fitokimia Ekstrak Daun Kelor ( M. oleifera )
Senyawa Fitokimia Reagen Uji Hasil Flavonoid Serbuk Magnesium, Asam Klorida (HCl) ++ Terpenoid H 2 SO 4 Pekat (Lieberman Burchard) ++ Saponin Perebusan + HCl +
Hasil  pengujian  flavonoid  menunjukkan nilai  positif  (++)  dengan  perubahan  warna menjadi merah muda. Hasil terpenoid menunjukan hasil positif (++) dengan perubahan warna pada sampel menjadi keunguan, sementara  pengujian  saponin  menunjukan  hasil positif  dengan  terbentuk  gelembung/  busa  yang stabil selama 15-20 detik setelah penambahan 1- 2 tetes asam klorida. Skrining senyawa fitokimia perlu dilakukan untuk mengetahui jenis senyawa yang  dapat  berperan  sebagai  antibakteri.  Hasil zona hambat disajikan pada Gambar 1.
Gambar 1. Zona Hambat ( Inhibtion Zone ) Ekstrak M. oleifera (A); Chloramphenicol
Diketahui  flavonoid  dapat  berperan  sebagai antibakteri  dengan  mengambat  pertumbuhan bakteri  melalui  perusakan  dinding  sel  (Widiani & Pinatih 2020). Terpenoid, steroid, tannin, dan saponin dapat menghambat pertumbuhan bakteri dengan mengganggu permeabilitas dan
integritas  dinding  sel  bakteri  (Islamiyati  et  al. 2023).
Pentingnya  pengujian  terhadap  ekstrak M. oleifera diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah untuk dapat dilakukan pengembangan  antibiotik  herbal  yang  dapat digunakan  khususnya  terhadap  bakteri E.  coli . Resistensi sering  kali  muncul  pada  penggunaan antibiotik  secara  terus  menerus,  peningkatan penggunaan antibiotik dengan dosis tinggi yang tidak  sesuai  aturan,  penggunaan  lebih  dari  satu jenis  antibiotik  secara  bersamaan,  atau  karena mutasi  yang  terjadi  pada  bakteri  target. Pengkategorian sensistivitas bakteri berdasarkan nilai zona hambat standar yang telah ditetapkan disajikan pada Tabel 2.
Tabel  2. Kategori  Sensitivitas  Antibiotik Chloramphenicol Berdasarkan Nilai Zona Hambat No Nilai Standar Kategori 1 ≤ 12 mm Resisten (RT) 2 13 – 17 mm Intermediet  /  (I) Menengah (M) 3 ≥ 18 mm Sensitif (S)
Tabel 2 menunjukan bahwa nilai standar untuk  pengkategorian  sensistivitas  senyawa atau  antibiotik  yang  dapat  menghambat pertumbuhan bakteri terbagi  menjadi tiga jenis. Tiga  kategori  tersebut  meliputi  resisten  dengan nilai  zona  hambat  (IZ)  ≤  12  mm,  intermediet atau  menengah  dengan  nilai  13  –  17  mm,  dan kategori  sensitif  dengan  nilai  ≥  18  mm. Kategori  antibiotik  dan  antibakteri  yang  masih bagus  atau eligible digunakan  adalah  sensitif, karena  memiliki  potensi  dan  kemampuan  yang paling  bagus  dan  efektif  sebagai  antibiotik. Pengakategorian  ini  penting  untuk  dilakukan agar  monitoring  dan  evaluasi  kemampuan antibiotik  dapat  di  pertahankan,  dan  apabila terjadi penurunan kualitas atau efektivitas dapat segera ditindaklanjuti.
Berdasarkan hasil pengelompokan untuk kelompok  percobaan  dengan  menggunakan ekstrak  dosis  20,  40,  dan  60  mg/mL menunjukan hasil yang beragam. Namun secara keseluruhan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  kelor ( M.  oleifera )  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri E. coli . Hasil rata-rata zona hambat dari
A B
ketiga dosis ekstrak M. oleifera yang digunakan disajikan pada Gambar 2.
Gambar  2. Nilai  Rata-Rata  Zona  Hambat Kelompok Perlakuan
Keterangan:  EM1  (Ekstrak  Moringa  Dosis  20  mg/mL), EM2 (Ekstrak Moringa Dosis 40 mg/mL), EM3 (Ekstrak Moringa Dosis 60 mg/mL), AbC (Antibiotik Chloramphenicol). Bar yang  diikuti  dengan  huruf  yang sama tidak berbeda nyata pada p < 0.05.
Gambar  2  menunjukan  bahwa  rata-rata zona  hambat  dari  ketiga  dosis  ekstrak  daun kelor ( M. oleifera ) mengalami peningkatan nilai dari  dosis  20  mg/mL  sampai  60  mg/mL.  Dosis 20  mg/mL  mampu  menghambat  pertumbuhan E. coli dengan zona hambat 19.3 mm, dosis  40 mg/mL  mampu  menghambat  dengan  rata-rata 24.3  mm,  sementara  dosis  60  mg/mL  mampu menghambat  dengan  rata-rata  27.7  mg/mL. hasil  analisis  uji  lanjut  dengan  DMRT menunjukan  bahwa  hasil  sangat  signifkan  dan berbeda  nyata  pada p  <  0.05 .  Nilai  inhibisi tertinggi  adalah  pada  kelompok  dengan pemberian  antibiotik  chloramphenicol  dengan rata-rata  35.33  mm.  jika  dilihat  berdasarkan kategori  sesuai  Tabel  1,  penghambatan  ekstrak M. oleifera dosis 20 mg/mL termasuk ke dalam kelompok atau kategori sensitif, termasuk dosis 40  dan  60  mg/mL.  Namun  jika  dilihat berdasarkan  nilai  pada  masing-masing  ulangan tiap  kelompok  perlakuan  terdapat  sedikit Perbedaan,  terutama  pada treatment dosis  20 mg/mL  ekstrak.  Jumlah  kategori  sensitivitas untuk  masing-masing  ulangan  pada  tiap kelompok perlakuan disajikan pada Gambar 3.
Gambar  3  menunjukan  bahwa  untuk enam  ulangan  untuk  masing-masing  kelompok EM1,  EM2,  dan  EM3  terdapat  ulangan  dengan kategori  senistivitas  “sensitif”  rata-rata  zona hambat  >18  mm.  Namun,  terdapat  3  ulangan pada  kelompok  EM1  dimana  termasuk  ke
dalam  kategori  intermediet  atau  menengah karena nilai rata-rata zona hambat <19 mm/ >12 mm.
Keterangan: AbC:  Antibiotik  Chloramphenicol,  EM1: Ekstrak  Moringa  oleifera  (20  mg/mL),  EM2:  Ekstrak Moringa  oleifera  (40  mg/mL),  EM3:  Ekstrak  Moringa oleifera (60 mg/mL).
Gambar  3. Jumlah  Kategori  Sensitivitas Berdasarkan  Masing-Masing  Ulangan  Pada Tiap Kelompok Perlakuan
Berdasarkan Gambar 3
juga memperlihatkan  bahwa  semua  unit  ulangan pada kelompok EM 2, EM3, dan kontrol positif yang  menggunakan  antibiotik  chloramphenicol masuk ke dalam kategori sensitif (rata-rata zona hambat  >19  mm).  Hal  ini  juga  menunjukan bahwa  ekstrak  daun M.  oleifera yang diekstraksi dengan etanol berpotensi dikembangkan  sebagai  antibakteri/  antibiotik herbal.
Ekstrak daun M. oleifera pada penelitian sebelumnya  juga  menunjukan  potensi  sebagai antibakteri  dengan  menghambat  pertumbuhan E. coli dengan percobaan  in silico dan in vitro. Ekstrak M.  oleifera mampu  menghambat dengan  rata-rata  zona  hambat  24  mm,  dan tergolong  pada  kategori  sensitif,  sementara antibiotik  chloramphenicol  menunjukan  rata- rata penghambatan 54 mm yang juga masuk ke dalam  kategori  sensitif  (Islamiyati  et  al.  2023). Penelitian  terdahulu  pada  pengujian  skrining fitokimia  ekstrak M.  oleifera juga  menunjukan bahwa M. oleifera mengandung senyawa seperti triterpenoid, steroid, flavonoid, alkaloid, fenolat,  dan  tannin.  Kadar  tertinggi  terdapat pada senyawa steroid dengan positif tiga (+++), flavonoid (+++), dan alkaloid (+++). Sementara
35.33 a 19.3 b 24.3 c 27.7 d 0.00 10.00 20.00 30.00 40.00 50.00 AbC EM1 EM2 EM3 Z o na H am ba t (m m ) Kelompok  Perlakuan 3 6 6 6 3 0 1 2 3 4 5 6 7 EM1 EM2 EM3 AbC Jum la h U la nga n Kelompok  Perlakuan S I R
Jurnal Penelitian dan Pengabdian Kepada Masyarakat UNSIQ, Vol. 11 No. 2, 77 - 83 ISSN(print): 2354-869X | ISSN(online): 2614-3763
senyawa  saponin  tidak  berhasil  teridentifikasi (Ikalinus et al. 2015).
Peneitian  lainnya  juga  menunjukan bahwa  potensi  dari  ekstrak  daun  kelor  ( M. oleifera )  mampu  menghambat  pertumbuhan bakteri E.  coli dan S. aureus dengan nilai  zona hambat 22.66 mm dan 20.50  mm (termasuk ke dalam  kategori  sensitif),  pada  penggunaan ekstrak  konsentrasi  80%  (Lusi  2016).  Hasil lainnya  juga  menunjukan  bahwa  ekstrak  etanol daun  kelor  dengan  konsentrasi  50%  mampu menghambat  pertumbuhan S.  aureus dengan nilai  zona  hambat  18.5  mm,  sementara  pada konsentrasi  75%  mampu  menghambat  sebesar 23  mm  (Agustie  Die  &  Samsumaharto  Agung 2013).  Penelitian  yang  menggunakan  ekstrak M.  oleifera yang  diekstraksi  dengan  etanol menunjukan  hasil  yang  lebih  baik.  Etanol merupakan pelarut yang bersifat polar, sehingga mampu  menarik  senyawa  yang  sifatnya  non- polar,  polar,  atau  semi  polar  (Ratnaningtyas, Hernanyanti,  et  al.  2022).  Etanol  cenderung lebih  baik  jika  dibandingkan  pelarut  etil  asetat atau  n-heksan.  Penelitian  lainnya  menunjukan bahwa  pada  aplikasi  ekstrak  etanol  daun  kelor mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri S. aureus dengan rata-rata zona hambat 14.02 mm, lebih  kecil  dibandingkan  kontrol  positif  yang menggunakan amoksisilin (Savitri et al. 2018).

## 4. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  riset  yang  dilakukan ekstrak  etanol  daun  kelor M.  oleifera mampu menghambat  pertumbuhan  bakteri E.  coli dengan  dosis  60  mg/mL  merupakan  dosis terbaik  dengan  rata-rata  nilai  zona  hambat sebesar 27.30 mm. Ekstrak etanol daun kelor ini berpotensi  dikembangkan  sebagai  antibiotik dengan percobaan lebih lanjut.

## 5. DAFTAR PUSTAKA
Agustie Die, A.W. & Samsumaharto Agung, R., 2013.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Maserasi  Daun  Kelor  (Moringa  oleifera Lamk.)  Terhadap  Bakteri  Staphylococcus aureus. Biomedika , 6(2), pp.1–4.
Husen,  F.  et  al.,  2021.  Antidiabetic  effects  and antioxidant properties of the saggy ink cap
medicinal  mushroom,  Coprinus  comatus (Agaricomycetes) on streptozotocin- induced  hyperglycemic  rats. International Journal  of  Medicinal  Mushrooms ,  23(10), pp.9–21.
doi: 10.1615/intjmedmushrooms.2021040020. Husen,  F.  &  Ratnaningtyas,  N.I.,  2022. Inhibitory  Test  of  Gentamicin  Antibiotics Against Escherichia
coli and Staphylococcus  aureus  Bacteria  Using
Disc  Method. Biotropika:  Journal  of Tropical  Biology ,  10(2),  pp.126–131.  doi: 10.21776/ub.biotropika.2022.010.02.06.
Ikalinus, R., Widyastuti, S. & Eka Setiasih, N.,
2015.  Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Etanol Kulit  Batang  Kelor  (Moringa  Oleifera). Indonesia Medicus Veterinus , 4(1), pp.71– 79.
Islamiyati,  D.,  Husen,  F.  &  Ina  Ratnaningtyas,
N.,  2023.  Potensi  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak Moringa oleifera (Lamk.) Terhadap  BakteriI  Escherichia  coli  Secara In  Silico  dan  In  Vitro. Jurnal  Bina  Cipta Husada:  Jurnal  Kesehatan  Dan  Science , 19(2), pp.80–90.
Lusi,  L.R.H.D.F.W.A.,  2016.  Uji  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Daun  Kelor  (Moringa oleifera  L.)  Terhadap  Bakteri  Escherichia coli Dan Staphylococcus aureus. Pharmacon , 5(2), pp.282–289.
Pratama,  S.A.  et  al.,  2022.  Efek  antibakteri kombinasi  ekstrak  daun  kelor  (Moringa oleifera  Lam.)  dan  amoksisilin  terhadap Staphylococcus  aureus  dan  Escherichia coli secara in vitro. Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia , 20(1), pp.23–29.
Ratnaningtyas,  N.I.,  Hernanyanti,  et  al.,  2022.
Antioxidant  activities  and  properties  of Coprinus comatus mushroom both mycelium  and  fruiting  body  extracts  in streptozotocin-induced  hyperglycemic  rats model. Biosaintifika: Journal of Biology &
Biology Education , 14(1), pp.9–21.
Ratnaningtyas,  N.I.,  Husen,  F.,  et  al.,  2022. Eksplorasi , Identifikasi , Dan Karakterisasi Senyawa Fitokimia Coprinus comatus Dan Ganoderma lucidum Menggunakan GC-MS (Gas Chromatography-Mass Spectrometry).
Prosiding  Seminar  Nasional  dan  Call  for Papers:  Pengembangan  Sumber  Daya Perdesaan dan Kearifan Lokal Berkelanjutan XII , 12(1), pp.186–199.
Ratnaningtyas,  N.I.,  Hernayanti,  H.,  et  al.,
2022.  Ethanol  extract  of  the  mushroom
Coprinus comatus exhibits antidiabetic and antioxidant  activities  in  streptozotocin- induced  diabetic  rats. Pharmaceutical
Biology , 60(1), pp.1126–1136. doi:
10.1080/13880209.2022.2074054.
Savitri,  E.  et  al.,  2018.  Uji  antibakteri  ekstrak daun  kelor  (Moringa  oleifera  L.)  terhadap pertumbuhan bakteri
staphylococcus
aureus. Jurnal Ilmiah Mahasiswa
Veteriner , 2(3), pp.373–379. Widiani, P.I. & Pinatih, K.J.P., 2020. Uji Daya Hambat  Ekstrak  Etanol  Daun  Kelor (Moringa  oleifera)  Terhadap  Pertumbuhan Bakteri Methicillin Resistant Staphylococcus  aureus  (Mrsa). Jurnal Medika Udayana , 9(1), pp.22–27.