## Pemanfaatan Enzim Bromelin dari Tepung Nanas ( Ananas comosus L. Merr) untuk Menurunkan Kadar Kafein Kopi pada Proses Pembuatan Sirup Kopi
Azhara Rumba Hapsari 1 , R.TD Wisnu Broto 1 , Eny Apriyanti 2
Program Studi Teknologi Rekayasa Kimia Industri, Departemen Teknologi Industri Sekolah Vokasi, Universitas Diponegoro
Jl. Prof. Soedarto, SH. Tembalang, Semarang, 50275 Indonesia Departemen Teknik Kimia, Universitas Pandanaran Jl. Banjarsari Barat No.1Tembalang, Semarang, Jawa Tengah50268, Indonesia Email: azhara.rumba.hapsari@gmail.com

## Abstrak
Penelitian ini bertujuan untuk melihat pengaruh pemakaian tepung nanas dengan waktu ekstraksi, sehingga dapat menurunkan kadar kafein kopi arabica dengan menggunakan tepung nanas yang mengandung enzim bromelin  terhadap  penurunan  kadar  kafein  pada  pembuatan  sirup  kopi.  Metode  yang  digunakan  adalah ekstraksi. Variabel tetap pada percobaan ini yaitu berat bubuk kopi,  variabel bebas untuk percobaan yaitu variasi waktu, massa dan suhu pemasakan kopi sedangkan variabel terikat adalah kondisi kadar kafein. Hasil dari  penelitian  ini  adalah  analisa  yang  dilakukan  yaitu  analisa  kadar  kafein  dan  analisa  gula.  Kadar  kafein diperoleh hasil pada waktu 3 jam suhu 50°C dan massa 28 gram merupakan hasil terbaik penurunan kafein yang menghasilkan kadar kafein 1,48 %, sedangkan untuk kadar gula diperoleh 48,77%. Hal ini dikarenakan massa  tepung  nanas  dan  waktu  ekstraksi  yang  lama  sehingga  enzim  bromelin  dari  tepung  nanas  dapat terekstrak dan dapat menurunkan kadar kafein.

## Kata Kunci
: Enzim Bromelin, Kafein Kopi, Kadar Gula

## Abstract

## Utilization Of Bromelin Enzyme from Pineapple Flour (Ananas comosus L. Merr) to Reduce Coffee Caffeine Levels in Coffee Syrup Making Process
This study aims to see the effect of using pineapple flour with extraction time so that it can reduce the caffeine content of Arabica coffee using pineapple flour containing the enzyme bromelain on the reduction of caffeine levels in the manufacture of coffee syrup. The method used is extraction. The fixed variable in this experiment is the weight of the powder coffee, the independent variable for the experiment is the variation of time, mass, and temperature  of  coffee  cooking,  while  the  dependent  variable  is  the  condition  of  caffeine  content  and  sugar analysis. Caffeine content was obtained at a time of 3 hours at a temperature of 50°C and a mass of 28 grams wes  the  best  results  for  decreasing  caffeine  which  resulted  in  a  caffeine  content  of  1.48%  while  for  a  sugar content of 48,77% it was obtained. This is due to the mass of pineapple flour and the long  extraction time so that the bromelain enzyme from pineapple flour can be extracted and can reduce caffeine levels.
Keywords: Bromelain Enzyme, Coffee Caffeine, Sugar Level

## PENDAHULUAN
Kopi  merupakan  jenis  tumbuhan  yang mengandung  kafein  dan  dapat  diolah  menjadi
minuman  lezat.  Saat  ini  kopi  menjadi  minuman paling  disukai  masyarakat  dunia  setelah  air  dan teh  (Cornelis,  2019).  Selain  itu,  kopi  juga merupakan  salah  satu  hasil  perkebunan  yang
memiliki  nilai  ekonomis  yang  cukup  tinggi  di antara tanaman perkebunan lainnya dan berperan penting  sebagai  sumber  devisa  negara  (Aprilia et al., 2018).  Kopi  merupakan  salah  satu  komoditas ekspor  penting  dari  Indonesia  (Faturrahman et al., 2021) Permintaan  kopi  Indonesia  dari  waktu  ke waktu  terus  meningkat  karena  seperti  kopi Robusta  mempunyai  keunggulan  bentuk  yang cukup  kuat  serta  kopi  Arabika  mempunyai karakteristik  cita  rasa  yang  unik  (Yoansyah et  al., 2020).  Penyangraian  proses  pembentukan  aroma dan citarasa pada biji kopi yang dilakukan dengan menggunakan  suhu  yang  tinggi.  Selama  proses penyangraian  faktor  yang  harus  diperhatikan adalah  suhu  dan  lama  penyangraian  serta pengadukan  yang  dilakukan  hingga  akhir  proses agar  panas  terdistribusi  secara  merata  pada  biji kopi ( Agustina et al., 2019).
Kopi robusta memiliki  kadar kafein sebesar lebih tinggi dibanding kopi arabika ( Usman et al., 2015).  Tingkat  kematangan  buah  kopi  arabika mempengaruhi  kandungan  senyawa  kimia  dalam biji  kopi,  terutama  kafein.  Kadar  kafein  dalam  biji kopi berbeda tergantung pada tingkat kematangan  saat  buah  kopi  dipanen  (Latunra et al., 2021).  Kopi  dijadikan  sebagai  sediaan  baru  di bidang  kopi  yaitu  sirup  kopi,  namun  walaupun kandungan kafein dalam kopi arabika tidak terlalu tinggi,  sebagian  orang  masih  sensitif  terhadap kafein,  sehingga  kadar  kafein  tetap  perlu diturunkan, sehingga agar sirup ini bisa dinikmati oleh  berbagai  kalangan  ( Kuncoro et  al., 2018). Pada  proses  penurunan  kafein  dengan  cara dekafeinasi merupakan proses pengurangan kadar kafein  pada  bahan  yang  mengandung  kafein seperti  pada  kopi,  teh  atau  coklat  (Purba  dan Andaka 2018)
Soxhlet  adalah  suatu  metode  analisis dengan  prinsip  kerja  sebagai  berikut.  Pada soxhletasi  pelarut  pengekstrak  yang  ada  dalam labu  soxhlet  dipanaskan  sesuai  dengan  titik didihnya sehingga menguap. Uap pelarut ini naik melalui pipa pendingin balik sehingga mengembun  dan  menetes  pada  bahan  yang diekstraksi.  Pelarut  ini  merendam  bahan  dan  jika tingginya  sudah  melampaui  tinggi  pipa  pengalir pelarut  maka  ekstrak  akan  mengalir  ke  labu soxhlet  (Pargiyanti,  2019).  Selanjutnya  larutan menguap melalui pendingin udara yang berfungsi
untuk  mengembunkan  uap  menjadi  larutan  yang akan  kembali  terkumpul.  Sirkulasi  terjadi  apabila larutan  melalui  batas  lubang  pipa  samping soxhlet.  Hasil  ekstraksi  yang  baik  jika  sudah melalui sirkulasi secara berulang-ulang.
Proses  ekstraksi  ini  menggunakan  tepung nanas  karena  didalam  Nanas (Ananas  comosus  L. Merr) mengandung  Enzim  yaitu  enzim  bromelin (Nuraeni et  al ,  2021).  Enzim  ini  bisa menghancurkan senyawa protein dan gel (Larasati et  al., 2017).  Sehingga  enzim  bromelin  dapat menurunkan  kadar  kafein  kopi  menjadi  lebih rendah.

## METODOLOGI
Bahan yang dipakai untuk pembuatan sirup kopi  rendah  kafein  adalah  bubuk  kopi  Arabica yang  diperoleh  dari  perkebunan  kopi  didaerah pemalang tepatnya di desa gunung sari, selain itu ada  bahan  lain  yaitu  gula,  nanas  dan  air. Sedangkan untuk peralatan yang digunakan untuk proses  produksi  sirup  yaitu  seperangkat  alat ekstraksi,  hot  plate,  gelas  ukur,  timbangan, thermometer,  labu  ukur,  kertas  saring,  buret, Erlenmeyer, pipet tetes batang pengaduk, corong pemisah dan botol kaca.
Pada  penelitian  ini  yang  termasuk  variabel tetap  adalah  massa  bubuk  kopi  15  gram,air  250 mL, dan waktu mixing  kopi dengan gula yaitu 20 menit.  Sedangkan  untuk  variabel  bebas  yaitu  : Waktu  saat  ekstraksi  menggunakan  2  jam,  3  jam, dan  4  jam.  Menggunakan  massa  tepung  nanas sebanyak  15  gram,  20  gram,  dan  25  gram  untuk suhu pemasakan kopi yang digunakan yaitu 40°C, 50°C, dan 60°C.
Variabel  terikat  pada  penelitian  ini  adalah kondisi  kadar  kafein  pada  hasil  penelitian.  Cara kerja  yaitu  dengan  menyiapkan  pelarut  bubuk kopi  arabica  yang  diseduh  ditimbang  sebanyak 15 gram, lalu dilarutkan dengan air sebanyak 200 mL. Membuat tepung nanas dengan cara kupas 2 buah  nanas  potong  dan  dikeringkan,  setelah buah  nanas  kering  lalu  dihaluskan  dengan menggunakan grinder setelah halus disaring agar mendapatkan  tepung  nanas  yang  halus.  Tepung nanas  dimasukan  kedalam  kertas  saring  yang sudah  dibentuk  silinder,  lalu  dimasukkan kedalam alat ekstraksi soxhlet, selanjutnya bagian atas  dipasang  pendingin  balik  dan  bawahnya
dipasang  labu  leher  tiga.  Ekstraksi  dilakukan dengan  menggunakan  larutan  kopi  sesuai variabel sebanyak 250  mL  dimasukkan  ke dalam labu  leher  tiga.  Sesudah  dilakukan  pemanasan sesuai variabel 2 jam,3 jam dan 4 jam digunakan suhu  sesuai  dengan  titik  didih.  Kopi  yang  sudah terekstraksi,  lalu  dicampur  dengan  gula dipanaskan  dengan  suhu  sesuai  variabel  yaitu 40°,  50°,  dan  60°  setelah  itu  dinginkan  lalu dimasukan  kedalam  botol  kaca  dalam  kondisi dingin agar mudah untuk dianalisis.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Produksi  sirup  kopi  dengan  penurunan konsentrasi kafein menggunakan enzim bromelain pada  bubuk  nanas  ( Ananas  Comosus  L.  Merr ), dilakukan  sampel  pada  16  sampel  untuk mendapatkan  kadar  kafein  singkat.  Penelitian sirup  kopi  ini  menggunakan  variabel  bebas  dan juga  variabel  tetap.  Variabel  bebas  meliputi konsentrasi massa bubuk nanas, suhu pencampuran  dan  waktu  ekstraksi.  Sedangkan variabel  tetapnya  meliputi  berat  kopi,  air  yang digunakan  untuk  membuat  sirup,  dan  waktu pencampuran  gula  dengan  ekstrak  kopi  yang dihasilkan.  Pembuatan  variabel  dalam  penelitian ini  menggunakan  metode  Response  Surface Methodology  (RSM)  standard  design  factor/ blok/run : 3/1/16.

## Analisis Kadar Kafein pada Produksi sirup kopi
Kafein (C8H10N402) dengan rumus bangun 1,3,7  trimethilxantin  adalah  sejenis  purin psikostimulan  alkaloid  merupakan  serbuk  putih biasanya  menggumpal,  memiliki  titik  lebur  pada 235°-237°  (Riyanti et  al., 2020).  Kafein  memiliki bentuk  kristal  padat  dan  dimorfik,  memiliki  rasa pahit, dan tidak berbau (Koch et al., 2017). Kafein merupakan  komponen  yang  menghasilkan  rasa dan aroma pada kopi.
Penurunan  kafein  pada  Tabel  1  sudah memenuhi  bahkan  dibawah  standart  SNI 2983:2014.  Pada  Tabel  1  maksimum  kafein  ini terjadi  pada  suhu  50°C  massa  28  gram  dengan lama  waktu  3  jam.  Hal  ini  dikarenakan  enzim bromelin  yang  terkandung  dalam  tepung  nanas bisa  menghancurkan  homogen  protein  & Mengganggu penyususnan gel gelatin. Sedangkan untuk  kafein  mempunyai  sifat  yang  hampir  sama dengan protein. Salah satu penentu meningkatnya kadar  kafein  adalah  suhu.  Ketika  suhu  meningkat jeda antara molekul akan semakin melebar hal ini terjadi  pada  padatan  kopi  tersebut.  Padatan  kopi akan  mudah  ditembus  air  apabila  difusivitas pelarut  air  &  perenggangan  molekul  semakin tinggi  sebagai  akibatnya  kafein  yang  masih  ada pada  kopi  dapat  terekstrak  dengan  sempurna (Putri dan Ulfin, 2015; Zarwinda dan Sartika, 2019 ).
Tabel 1. Kadar Kafeinn Kopi
Run Waktu (Jam) Massa (gram) Suhu (°C) Kadar Kafein 1 2 15 40 1,77 2 2 15 60 1,78 3 2 25 40 1,74 4 2 25 60 1,69 5 4 15 40 1,77 6 4 15 60 1,71 7 4 25 40 1,57 8 4 25 60 1,51 9 1 20 50 1,87 10 4 20 50 1,64 11 3 11 50 1,72 12 3 28 50 1,48 13 3 20 33 1,76 14 3 20 66 1,64 15 3 20 50 1,79 16 3 20 50 1,76
Dari  data  hasil  analisa  sirup  kopi  dengan penurunan  kadar  kefein  menggunakan  enzim bromelin  dari  tepung  nanas,  maka  diperoleh response  fitted  surface  methodology  (Gambar  1). Pada Gambar 1 memperlihatkan hubungan antara kadar  kafein, massa dan waktu. Sedangkan untuk Gambar 2 memperlihatkan hubungan antara kadar kafeain, suhu dan waktu. Dengan data percobaan maka  diperoleh  analisis  regresi  berganda persamaan  polynomial  tingkat  dua  sebagai pengganti  kandungan  kadar  kafein  sebagai berikut:
Y  =  1,774360 – 0,175269X 1 -  0,253950X 2 -
0,054917X 3 -  0,011051X 1 2 -  0,209040X 2 2 - 0,046406X 3 2 – 0,167500X 1 X 2 – 0,027500X 1 X 3 – 0,022500X 2 X 3
Optimasi  produksi  sirup  kopi  pada penurunan  kadar  kafein  menggunakan  enzim bromelin dari tepung nanas jumlah percobaan 16 run  dengan  perlakuan  beda  massa,  suhu  dan waktu.  Dengan  mengetahui  harga  koefisien determinasi  (R2)  dapat  menunjukan  keakuratan model  ini.  Nilai  R2  menjadi  ukuran  banyaknya variabilitas  nilai  respon  yang  dapat  diamati  dan dijelaskan  oleh  interaksi  variabel  percobaan.
Sehingga  dapat  disimpulkan  jika  harga  R2  nilai perkiraan  model  mendekati  nilai  hasil  percobaan. Model  dikatakan  bagus  dalam  memprediksi respon  apabila R2 dekat dengan 1 (Paramita  dan Yulianto  2019).  Pada  percobaan  ini  nilai  koefisien determinasi (R2=0,98) sehingga variabilitas respon dapat dijelaskan oleh model (Tabel 2).
Pada  umumnya,  untuk  mengkonfirmasi model  yang  diterapkan  atau  digunakan  tersebut sudah  sesuai  dan  memberikan  perkiraan  yang memadai ke nilai aktual digunakan plot diagnostik (plot  grafik).  Kecuali  jika  model  menunjukkan kecocokan  yang  memuaskan,  penyelidikan  dan pengoptimalan permukaan respons yang digunakan  kemungkinan  akan  memberikan  hasil yang  kurang  bagus/salah.  Plot  diagnostik/grafik menjelaskan  kedekatan  nilai  perkiraan  model dengan  nilai  hasil  percobaan.  Pada  gambar tersebut,  masing-masing  nilai  yang  diperoleh dibandingkan dengan nilai prediksi yang dihitung dengan model RSM.
Titik-titik data plot pada (Gambar 3) terletak disekitar  garis  lurus,  hal  ini  menunjukkan kesesuaian  yang  memadai  antara  nilai  prediksi dan  aktual.  Namun,  masih  ada  dugaan penyebaran data dengan data normal, maka dapat disimpulkan data berdistribusi normal.
Gambar 1. Response fitted surface variabel massa dan waktu terhadap kadar kafein
Metana: Media Komunikasi Rekayasa Proses dan Teknologi Tepat Guna

## Tabel 2. Data Estimasi Efek
Factor Effect Estimates; Var.; Kafein (%); R-sqr= .98478; Adj:.96196 (percobaan rsm.sta) 3 factor, 1 Blocks, 16 Runs; MS Residual= .0013211 DV; Kafein (%) Effect Std.Err. t(6) P -95.% Cnf.Limt +95.% Cnf.Limt Coeff. Std.Err .Coeff -95.% Cnf.Limt +95.% Cnf.Limt Mean/Interc. 1.774360  0.06626  69.2412  0.000000  1.711656  1.837064  1.774360  0.025626  1.711666  1.837064 (1)Waktu(jam)(L) -0.175269  0.019671  -8.9101  0.000111  -0.223402  -0.127136  -0.087635  0.009836  -0.111701  -0.063588 Waktu(jam)(Q) -0.011051  0.023883  -0.4627  0.669890  -0.069491  0.047390  -0.005525  0.011942  -0.034745  0.023695 (2)Massa(gram)(L)  -0.253950  0.019671  -12.9100  0.000013  -0.302083  -0.205817  -0.126975  0.009835  -0.151041  -0.102909 Massa(gram)(Q) -0.209040  0.023883  -8.7626  0.000123  -0.267481  -0.150600  -0.104520  0.011942  -0.133740  -0.075300 (3)Suhu(°C)(L) -0.054917  0.019671  -2.7918  0.031502  -0.103050  -0.006784  -0.027459  0.009835  -0.611525  -0.003392 Suhu(°C)(Q) -0.046406  0.023883  -1.9430  0.100021  -0.104846  0.012034  -0.023203  0.011942  -0.052423  0.006017 1L by 2L -0.167500  0.026701  -6.6172  0.000622  -0.230388  -0.104612  -0.083750  0.012851  -0.115194  -0.062306 1L by 3L -0.027500  0.025701  -1.0700  0.325766  -0.090388  0.035388  -0.013750  0.012851  -0.045194  0.017694 2L by 3l -0.022500  0.025701  -0.8754  0.414997  -0.086388  0.040388  -0.011250  0.012851  -0.042694  0.020194
Gambar 2. Response fitted surface variabel Suhu dan waktu terhadap kadar kafein

## Gambar 3 . Perbandingan data percobaan dan perkiraan kadar kafein

## Analisis Kadar Gula pada Produksi sirup kopi
Hasil  analisa  kadar  gula  total  sirup  kopi menggunakan  metode  SNI  01  2892  1992 diperoleh  hasil  48,77%.  Sedangakn  untuk  standar SNI  sirup  minimal  kadar  gula  adalah  65%  maka dapat  disimpulkan  bahwa  kadar  gula  untuk  sirup kopi ini belum memenuhi standar SNI (Fitri et al., 2017).  Hal  ini  terjadi  karena  jumlah  konsentrasi gula  berpengaruh  dengan  kualitas  sukrosa  yang dihasilkan  apabila  kadar  gula  jumlahnya  semakin ditambah,  maka  semakin  meningkat  juga  kadar sukrosa  yang  dihasilkan  (Asmawati et  al., 2019). Pada  penelitian  ini  gula  yang  digunakan  hanya 300  gram  dan  air  sebanyak  250  mL,  ketika dipanaskan  kemungkinan  sebagian  sukrosa tereduksi  menjadi  glukosa  dan  fruktosa.  Apabila sukrosa  dipanaskan  secara  terus  menerus  sampai mencapai titik leburnya yaitu suhu 67-70°C selama 10  menit  maka  akan  terjadi  proses  karamelisasi. Proses ini merupakan pemecahan molekul sukrosa menjadi fruktosa dan glukosa, dengan suhu yang tinggi  dapat  melepaskan  molekul  air  dan  gula sehingga  terbentuk  glukosa  dan  fruktosa
(dehidrasi)  ( Indriaty et  al., 2016).  Dengan terjadinya  proses  karamelisasi  ini  menyebabkan kandungan  sukrosa  pada  sirup  kopi  menjadi rendah pada saat dianalisis.

## KESIMPULAN
Pada penelitian ini menggunakan metode ekstraksi dengan tujuan untuk menurunkan kadar kafein  pada  sirup  kopi  dengan  menggunakan tepung nanas. Analisa yang dilakukan yaitu analisa kadar kafein dan analisa gula dari hasil penelitian proses  produksi  sirup  kopi  rendah  kafein  dengan metode  ekstraksi,  diperoleh  hasil  pada  waktu  3 jam  suhu  50°C  dan  massa  28  gram  merupakan proses terbaik penurunan kafein yang menghasilkan  kadar  kafein  1,48  %.  Hal  ini dikarenakan  massa  tepung  nanas  dan  waktu ekstraksi yang lama sehingga enzim bromelin dari tepung  nanas  dapat  terekstrak  dan  dapat menurunkan kadar kafein. Sedangkan pada analisa kadar  gula  dari  sirup  kopi  yang  memiliki  kadar kafein  paling  rendah  menghasilkan  48,77% dimana kadar gula ini belum memenuhi SNI yaitu
minimal kadar gula 65%. Hal ini dikarenakan saat terjadi  pemanasan  sebagian  sukrosa  tereduksi menjadi  gula-gula  yang  lebih  sederhana  yaitu glukosa  dan  fruktosa.  Proses  ini  menandakan bahwa  pemasakan  dengan  suhu  yang  tinggi berpengaruh  terhadap  pengurangan  kadar  gula sehingga  sukrosa  yang  dihasilkan  pada  saat dianalisa kadarnya memiliki kadar yang rendah.

## DAFTAR PUSTAKA
Agustina, R., Nurba, D., Antono, W. & Septiana, R. 2019. Pengaruh Suhu dan Lama Penyangraian terhadap  Sifat  Fisik – Kimia  Kopi  Arabika  dan Kopi  Robusta. Prosiding  Seminar  Nasional Inovasi  Teknologi  Untuk  Masyarakat,  Banda Aceh, 20 Juni 2019, pp.285-299 Aprilia,  F.A.,  Ayuliansari,  Y.,  Putri,  T.,  Azis,  Y.M.,
Camelina,  D.W.  &  Putra,  R.M.,  2018.  Analisis kandungan  kafein  dalam  kopi  tradisional gayo  dan  kopi  lombok  menggunakan  HPLC dan spektrofotometri UV-Vis. Biotika ,
16(2):38-39.
Asmawati, A., Sunardi, H. & Ihromi, S., 2019. Kajian persentase  penambahan  gula  terhadap komponen mutu sirup buah naga merah. Jurnal Agrotek Ummat , 5(2):97-106.
Cornelis,  C.M.  2019.  The  Impact  of  Caffeine  and Coffee  on  Human  Health. Nutrients  Journal, 11(2):p.416
Faturrahman,  F.,  Yusuf,  A.R.H.  &  Oktaviana,  B.L., 2021. Inovasi Biji Kopi Robusta Menjadi Kopi Coklat Sebagai Sumber Penghasilan Masyarakat  Dusun  Monggal  Bawah,  Desa
Genggelang. Jurnal PEPADU , 2 (1), pp.68-74.
Fitri, E., Harun, N. & Johan, V.S. 2017. Konsentrasi gula  dan  sari  buah  terhadap  kualitas  sirup belimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi l.). Jurusan Teknologi  Pertanian,  Fakultas  Pertanian, Universitas Riau, Pekanbaru.
Indriaty,  F.,  Sjarif,  S.R.,  Riset,  B.  &  Manado,  S.I.,
2016.  Pengaruh  Penambahan  Sari  Buah Nenas  pada  Permen  Keras. Jurnal  Penelitian Teknologi Indonesia , 8(2):129-40.
Koch, W.A.K., & Widelski, J. 2017. Alkaloids. Lublin,
Poland: Medical University of Lublin.
Kuncoro,  S.,  Sutiarso,  L.,  Nugroho,  J.  &  Mashitoh,
R.E.  2018.  Kinetika  Reaksi  Penurunan  Kafein dan  Asam  Klorogenat  Biji  Kopi  Robusta
melalui Pengukusan Sistem Tertutup. Agritech , 38(1):105-111.
Larasati,  S.,  Basuki,  F.  &  Yuniarti,  T.,  2017. Pengaruh  Jus  Nanas  dengan  Konsentrasi Berbeda  terhadap  Derajat  Pembuahan  dan Penetasan  Telur  Ikan  Patin  ( Pangasius pangasius ). Journal of Aquaculture Management and Technology , 6(4):218-225. Latunra,  A.  I.,  Johannes,  E.,  Mulihardianti,  B.  & Sumule,  O.  2021.  Analisis  Kandungan  Kafein Kopi (Coffea arabica) Pada Tingkat Kematangan Berbeda Menggunakan Spektrofotometer  UV-VIS. Jurnal  Ilmu  Alam dan  Lingkungan ,  12(1):45-50.  DOI:  10.2095 6/jal.v12i1.13096
Nuraeni, F., Maulana, I.T. & Syafnir, L., 2021. Kajian Pustaka  Karakterisasi  Enzim  Bromelin  pada Nanas  ( Ananas  comosus (L.)  Merr.)  dari Berbagai  Negara  terhadap  Pengaruh  Suhu dan pH. Prosiding Farmasi , pp.786-793.
Paramita,  V.  &  Yulianto,  M.E.  2019,  September. Response  surface  analysis  on  the  microwave integrated-rumen based extraction of natural vanillin  from  cured  vanilla  pods. Journal  of Physics: Conference Series , 1295(1): p. 012016 Pargiyanti,  P.  2019.  Optimasi  Waktu  Ekstraksi Lemak  dengan  Metode  Soxhlet  Menggunakan Perangkat  Alat  Mikro  Soxhlet. Indonesian Journal of Laboratory , 1(2):29-35. Purba, R.R.T.P. & Andaka, G., 2018. Dekafeinasi Biji Kopi Robusta melalui Proses Ekstraksi dengan Pelarut  Aquadest  (Variabel  Jumlah  Pelarut dan  Kecepatan  Pengaduk  terhadap  Kadar Kafein Terekstraksi). Jurnal Inovasi Proses , 3 (1):10-15.
Putri,  D.D.  &  Ulfin,  I.  2015,  Pengaruh  Suhu  dan Waktu Kadar Kafein dalam Teh Hitam. Jurnal Sains Dan Seni ITS, 4(2):105-108
Riyanti, E., Silviana, E. & Santika, M., 2020. Analisis Kandungan  Kafein  Pada  Kopi  Seduhan Warung  Kopi  di  Kota  Banda  Aceh. Lantanida Journal , 8 (1):1-12. Usman,  D.,  Suprihadi,  A.  &  Kusdiyantini,  E.,  2015. Fermentasi  kopi  robusta  (Coffea  canephora) menggunakan  isolat  bakteri  asam  laktat  dari feces  luwak  dengan  perlakuan  lama  waktu inkubasi. Jurnal Akademika Biologi , 4(3):31-40. Yoansyah,  A.,  Ibrahim,  A.  &  Abidin,  Z.  2020. Analisis  Kemitraan  Petani  Kopi  Dengan  PT
Nestle Dan Pengaruhnya Terhadap Pendapatan  Petani  Kopi  Di  Kecamatan Sumber  Jaya  Kabupaten  Lampung  Barat. Journal  of  Tropical  Upland  Resources ,
2(2):191-203.
Zarwinda,  I.  &  Sartika,  D.  2019.  Pengaruh  Suhu
Dan  Waktu  Ekstraksi  Terhadap  Kafein  Dalam Kopi. Lantanida Journal , 6(2):180-191.