## UJI AKTIVITAS EKSTRAK ETANOL BIJI PETAI CHINA
(Leucaena leucocephala) TERHADAP PENURUNAN KADAR GLUKOSA DARAH  PADA MENCIT PUTIH JANTAN YANG DIINDUKSI GLUKOSA
Ratih Pratiwi Sari, Aditya Maulana Perdana Putra
Akademi Farmasi ISFI Banjarmasin E-mail: ratih_pratiwi_sari@yahoo.co.id

## ABSTRAK
Diabetes mellitus (DM) adalah penyakit metabolik yang ditandai dengan peningkatan kadar glukosa darah akibat gangguan pada sekresi insulin, kerja insulin atau  keduanya.  Biji  petai  cina  ( Leucaena  leucochepala )  diyakini  masyarakat sebagai  salah  satu  tanaman  obat  yang  mampu  mengobati  DM.  Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  apakah  ekstrak  etanol  biji  petai  china  dapat menurunkan kadar glukosa darah mencit dan mendapatkan dosis optimal ekstrak etanol biji petai china yang dapat digunakan untuk menurunkan kadar glukosa darah mencit putih jantan ( Mus musculus ) yang diinduksi glukosa.
Subjek  penelitian  berupa  mencit  putih  jantan  berjumlah  25  ekor  yang dibagi  dalam  5  kelompok,  terdiri  atas  kelompok  1  yang  diberikan  metformin 90mg/kgBB, kelompok 2, 3, 4 yang diberikan ekstrak biji petai china dengan dosis 125mg/kgBB,  250mg/kgBB  dan  500mg/kgBB  serta  kelompok  5  yang  diberi aquadest  0,5ml/20gramBB.  Seluruh  kelompok  diinduksi  glukosa  dengan  dosis 2gr/kgBB  yang  menyebabkan  mencit  putih  jantan  dalam  keadaan  hiperglikemik. Pemeriksaan kadar glukosa darah pada menit ke- 0, 15, 45 dan 60.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  kelompok  yang  diberikan  ekstrak etanol biji petai china dengan dosis 500mg/kgBB dapat menurunkan kadar glukosa darah mencit putih jantan secara signifikan. Nilai signifikansi pada uji GLM yang diperoleh 0,001 (P < 0,05) dengan kadar rata-rata glukosa akhir 114,120mg/dL. Hal tersebut  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  biji  petai  china  dapat  menurunkan kadar glukosa darah.
Keyword: Ekstrak etanol biji petai china, kadar glukosa darah, induksi glukosa

## ABSTRACT
Diabetes mellitus (DM) is a metabolic disease characterized by elevated blood glucose levels due to impairment of insulin secretion, insulin work or both. Seed  chinese  petai  ( Leucaena  leucochepala )  is  believed  to  be  a  community  of medicinal plants capable of treating DM. This study aims to determine whether the chrysanthemum ethanol extract of china can lower blood glucose levels of mice and get  the  optimal  dose  of  chrysanthemum  seed  ethanol  extract  that  can  be  used  to lower blood glucose levels of glucose-induced white glucose ( Mus musculus ).
The subjects of the study were male white mouse 25 divided into 5 groups, consisting  of  group  1  given  metformin  90mg  /  kgBW,  group  2,  3,  4  given chrysanthemum seed extract with dose 125mg / kgBW, 250mg / kgBW and 500mg / KgBW and group of 5 given aquadest 0,5ml / 20gramBW. Whole group induced glucose with dose 2gr / kgBW causing male white mouse in hyperglycemic state. Blood glucose examination at minute 0, 15, 45 and 60.
The results showed that the group given ethanol extract seed chinese petai with  dose  of  500mg/kgBW  can  decrease  the  blood  glucose  level  of  male  white mouse significantly. The significance value in the GLM test obtained was 0.001 (P <0.05) with a mean glucose level of 114.120mg/dL. It shows that the ethanol extract seed chinese petai a can lower blood glucose level.
Keyword: Ethanol extract seed chinese petai, blood glucose level, induction of glucose

## PENDAHULUAN
Penyakit  diabetes  mellitus terjadi  akibat  kerusakan  pankreas, dimana  pankreas  adalah  salah  satu bagian organ yang terdapat pada saraf otonom, apabila pankreas rusak maka tidak  dapat  memproduksi  insulin sehingga  terjadi  peningkatan  kadar gula  darah  akibat  gangguan  pada sekresi  insulin,  kerja  insulin  atau keduanya sehingga menyebabkan gangguan metabolisme glukosa
(Kurniawan, 2011). Menurut International Diabetes  Federation (IDF)  tahun
2013,  lebih  dari  382  juta  orang  di seluruh  dunia  mengalami  DM  dan diperkirakan akan meningkatkan sekitar 55% pada tahun 2030. Proporsi angka kejadian DM tipe 2 adalah 95% dan  tipe  1  hanya  5%  dari  populasi dunia  yang  menderita  DM  4,8  juta orang  meninggal  akibat  penyakit degenerati  ini.  Berdasarkan  studi populasi World  Health  Organization (WHO)  Indonesia  menempati  urutan ke-4  terbesar  dengan  8,24  juta  orang dan  diperkirakan  akan  meningkat menjadi 21,257 juta orang pada tahun
2030, sedangkan posisi urutan diatasnya  yaitu  India,  China  dan Amerika Serikat.
Indonesia  merupakan  negara yang memiliki keanekaragaman hayati yang  juga  kaya  akan  tanaman tradisional.  Terdapat  sekitar  30.000 jenis  tanaman  tradisional  dan  7.000 diantaranya  memiliki  khasiat  sebagai obat  (Sampoerno,  2008).  Salah  satu tanaman yang dapat digunakan dalam pengobatan DM yaitu Biji petai china ( Leucaena leucocephala ). Masyarakat belum  banyak  mengetahui  manfaat dan khasiat terutama untuk menurunkan  kadar  gula  darah  pada penderita DM. Petai china merupakan tanaman  perdu  yang  mengandung  zat aktif seperti flavonoid,
galaktomannan, tannin, mineral seperti  kalsium,  fosfor  dan  besi, vitamin B1, vitamin C dan Vitamin A (Sumarny dkk., 2008).
Pada  penelitian  sebelumnya, biji petai china mengandung
flavanoid, tannin, dan galaktomannan dimana kandungan
tersebut mempunyai  efek  utuk  menurunkan kadar  gula  darah  pada  penderita  DM dan  terbukti  dapat  berperan  juga sebagai  antioksidan  (Sulistyowati,
2007  dan  Sumarny  dkk.,  2008). Berdasarkan  informasi  ilmiah  di atas,
peneliti ingin mengetahui perbandingan kombinasi dengan terapi tunggal  dari  ekstrak  biji  petai  china dan  metformin  dalam  menrunkan kadar  glukosa  darah  mencit  yang diinduksi glukosa.

## METODE PENELITIAN
Jenis penelitian yang digunakan bersifat eksperimental. Populasi  dari  penelitian  ini  adalah semua  ekstrak  Biji  Petai  China  yang terdapat  di  Kecamatan  Bati-Bati Kabupaten  Tanah  Laut.  Hewan  uji yang  digunakan  dalam  percobaan  ini adalah mencit jantan putih yang sehat dengan  umur  ±6-8  minggu  dan  berat badan ±25 gram. Mencit dibagi secara acak  ke  dalam  5  kelompok,  yaitu kelompok  kontrol  normal,  kontrol pembanding  dan  3  kelompok  variasi dosis  bahan  uji  (ekstrak  biji  petai china).  Dalam  uji  ini  jumlah  ulangan tiap  kelompok  yang  digunakan  ialah sebanyak  5,  sehingga  untuk  5 kelompok  diperlukan  25  ekor  mencit jantan putih. Mencit diinduksi glukosa sebanyak  2gr/KgBB  mencit  selama  1 minggu, kemudian sebelum pelaksanaan percobaan mencit
dipuasakan terlebih dahulu selama 18 jam  dengan  tetap  diberi  minum. Kemudian  diambil  sampel  darah  dari vena  ekor  dan  diukur  kadar  glukosa darah puasa. Pengukuran kadar glukosa  darah  dilakukan  dengan menggunakan alat strip glukosa (Putra dkk., 2017).
Kadar  glukosa  darah  puasa yang didapat dinyatakan sebagai kadar glukosa  darah  awal  (T 0 ).  Segera setelah pengukuran 15 menit,
kelompok  kontrol  normal  diberikan aquadest  sebanyak  0,5ml/20grBB,
kelompok kontrol pembanding diberikan  larutan    Metformin  90 mg/kgBB  dan  ketiga  kelompok  dosis masing-masing sebanyak (125 ; 250 ; 500  mg/kgBB).  Lima  belas  menit kemudian, kadar glukosa darah mencit diukur kembali dan dinyatakan sebagai kadar glukosa darah 15 menit setelah  perlakuan  (T 15 ).  Pengukuran kadar glukosa dilakukan kembali pada menit  ke-15,  30,  45,  60,  75  dan  90
setelah pembebanan glukosa.
Sehingga didapat kadar glukosa darah mencit (T 15 , T 30 , T 45 , T 60 , T 75 dan  T 90 ).
Data diperoleh diolah dengan menggunakan SPSS analisis univariat untuk  menghitung  median  terhadap
kadar  glukosa  darah  mencit  tiap kelompok.  Apabila  data  terdistribusi normal menggunakan General Linear Model dilanjutkan  dengan pos  hoc bonferroni ,  sedangkan  apabila  data tidak  terdistribusi  dengan  normal menggunakan Uji Kruskal-Wallis dilanjutkan  dengan pos  hoc  Mann- Whitney berulang dengan koreksi.

## HASIL PENELITIAN
Pada penelitian ini menggunakan  mencit  putih  jantan galur  Swiss  Webster.  Mencit  putih jantan  dipilih  karena  tidak  memiliki hormon estrogen yang dapat mempengaruhi  siklus  estrus  (Sari dkk.,  2017).  Mencit  yang  digunakan untuk  penelitian  dengan  umur  2-3 bulan  dan  berat  badan  20-40  gram, karena  pada  umur  tersebut  proses metabolisme  dalam  tubuh  mencit sudah sempurna sehingga memudahkan dalam melakukan
penelitian  (Erlianawati,  2014).  Satu minggu sebelum pelaksanaan penelitian  mencit  diinduksi  glukosa secara oral dengan dosis 2gram/KgBB.
Dalam  pengujian  penurunan kadar glukosa darah dilakukan dengan menggunakan metode induksi glukosa
oral, yang bertujan untuk meningkatkan  kadar  glukosa  darah sehingga dapat mengetahui kemampuan  kelompok  uji  dalam mengembalikan ke keadaan homeostatis  setelah  kadar  glukosa darah  meningkat  (Kurniawan,  2011). Mencit  terlebih  dahulu  dipuasakan selama ± 16 jam. Sebelum perlakuan, mencit diukur kadar glukosa darahnya terlebih dahulu dan dinyatakan sebagai  kadar  gula  darah  puasa  (T0), kemudian  masing-masing  kelompok diberikan perlakuan secara oral.
Pengujian  dilakukan  dengan menggunakan  pembanding  Aquadest 0,5ml/20grBB sebagai kontrol negatif dan  Metformin  90mg/KgBB  sebagai kontrol  positif  karena  metformin termasuk  golongan  biguanida  yang bekerja menurunkan produksi glukosa di  hepar  dan  dengan  meningkatkan kerja  insulin  di  otot  dan  hati (Tjokroprawiro, 2011), sehingga metformin  efektif  digunakan  sebagai kontol positif dalam penelitian ini.
Ekstrak etanol biji petai china yang  diuji  pada  penelitian  ini  dengan variasi dosis 125mg/KgBB, 250mg/KgBB dan 500mg/KgBB. Sebelumnya dilakukan terlebih dahulu
pembuatan larutan stok yang bertujuan untuk menghindari penimbangan yang berulang-ulang  setiap  kali  membuat varian  dosis.  Pengujian  dilakukan selama 1 jam dengan selang waktu 15 menit yang bertujuan untuk mengetahui  efek  penurunan  kadar glukosa darah serta diharapkan absorbsi  glukosa  darah  ke  jaringan terukur dengan baik.
Pengukuran  kadar  glukosa
darah menggunakan glukometer “NESCO MultiCheck ” karena
mempunyai  cara  kerja  yang  sama dengan metode spektrofotometri sehingga  hasil  yang  didapat  lebih akurat. Prinsipnya yaitu sampel darah yang diuji dimasukkan ke dalam strip glukosa.  Glukosa  dalam  darah  akan bereaksi dengan glukosa oksidase dan kalium  ferisianida  yang  ada  dalam strip  glukosa  dan  dihasilkan  kalium ferosianida.  Kalium  ferosianida  yang dihasilkan sebanding dengan konsentrasi glukosa yang ada di dalam darah (Kurniawan, 2011).
Pengukuran  kadar  glukosa darah dilakukan setiap 15 menit yakni pada menit ke 15, 30, 45, dan 60. Dari hasil pengukuran kadar glukosa darah pada    masing-masing  kelompok
mencit  dan  hasil  pengukuran  kadar glukosa  darah  rata-rata  dari  seluruh
kelompok  uji  pada  masing-masing waktu dapat dilihat pada tabel 1. Tabel 1.   Kadar Glukosa Darah Rata-rata dari Seluruh Kelompok Uji Pada Masing-Masing Waktu KELOMPOK KADAR GULA DARAH RATA-RATA (mg/dL) T0 T15 T30 T45 T60 1 176,360 152,640 136,800 134,280 115,200 2 131,400 119,880 112,720 123,840 107,640 3 176,040 162,360 147,280 150,180 167,040 4 136,760 126,360 114,120 114,120 124,200 5 148,680 117,720 127,080 122,760 129,600 Keterangan :
1. Kontrol Positif (Metformin 500mg)
2. Ekstrak Etanol Biji Petai China Dosis 125mg/KgBB
3. Ekstrak Etanol Biji Petai China Dosis 250mg/KgBB
4. Ekstrak Etanol Biji Petai China Dosis 500mg/KgBB
5. Kontrol Negatif (Aquadest)
Uji kolmogorov-smirnov
menunjukkan nilai signifikansi >0,05.
Hal  ini  menunjukkan  bahwa  semua sampel terdistribusi normal. Selanjutnya  dilakukan  uji  MANOVA melalui  uji  GLM  ( General  Linear Model )  dimana  hasilnya  dapat  dilihat pada tabel 2.
Tabel 2 Hasil Uji GLM ( General Linear Model ) Multivariate Test Pengaruh Sig. Waktu Terhadap Kadar Glukosa Darah Pillai’s Trace 0,001 Interaksi Waktu dan Kelompok Terhadap Kadar Glukosa Darah Pillai’s Trace 0,408
Berdasarkan tabel diatas dapat  dilihat  bahwa  nilai  signifikansi pada  analisis  pertama  adalah  0,001. Karena  nilai  signifikansi  P  <  0,05 maka  dapat  disimpulkan  bahwa  ada perbedaan yang signifikan pada setiap waktu  pengukuran.  Sedangkan  nilai signifikansi pada analisis kedua adalah 0,408.  Karena  nilai  signifikansi  P  > 0,05  maka  dapat  disimpulkan  bahwa tidak terdapat interaksi antara kelompok perlakuan dan waktu pengukuran  kadar  glukosa  darah mencit.  Perbedaan  kadar  glukosa darah mencit antar waktu pengukuran dapat dilihat dari kadar glukosa darah rata-rata ekstrak etanol biji petai china. Hasil pengukuran kadar glukosa darah rata-rata ekstrak etanol biji petai china pada kelompok metformin mengalami penurunan  kadar  glukosa  darah  pada menit ke-15 dan terus menurun hingga menit  ke-60  hal  ini  menunjukkan bahwa  obat  metformin  bekerja  lebih cepat  dibandingkan  dengan  ekstrak etanol  biji  petai  china. Ekstrak etanol biji petai china dengan dosis
500mg/kgBB
menunjukkan
penurunan  kadar  glukosa  darah  yang paling signifikan yaitu pada menit ke- 15 sampai menit ke-45 dan pada menit
ke-60  mengalami  peningkatan  kadar glukosa darah. Sehingga dapat dikatakan  bahwa  ekstrak  etanol  biji petai china dengan dosis 500mg/KgBB  yang  paling  optimal dalam  menurunkan  kadar  glukosa darah pada mencit putih jantan.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian yang  dilakukan,  dapat  disimpilkan bahwa:
1. Nilai  signifikansi  pada  uji GLM yang diperoleh 0,001 (P < 0,05) sehingga dapat dikatakan bahwa ekstrak etanol  biji  petai  china  yang terdapat  di  Kecamatan  Bati- bati  dapat  menurunkan  kadar glukosa  darah  pada  mencit putih jantan.
2. Dosis  optimal  ekstrak  etanol biji  petai  china  yang  dapat digunakan  untuk  menurunkan kadar  glukosa  darah  adalah dosis 500mg/KgBB.

## DAFTAR PUSTAKA
American Diabetes Association, 2009, Diagnosis  and  classification of diabetes. J Diabetes Care . 2009;32 suppl 1 S13-S61
Erlianawati, 2014, ‘Pengaruh minuman berkarbonasi terhadap kadar glukosa darah mencit ( Mus musculus )’, Skripsi , Universitas Muhammadiyah Surakarta, Surakarta Putra, A. M. P., Ratih P.S., Riza A, Uji Aktivitas Hipoglikemik Ekstrak etanol Semut Jepang (Tenebrio  Sp)  pada  Tikus Putih Galur Sprague Dawley yang Diinduksi Aloksan . Jurnal Ilmiah Ibnu Sina. 2(1): 68-73 Sampoerno, 2008, Kebijakan pengembangan  obat  bahan alam Indonesia. 2008. [Diunduh  tanggal  5  Oktober 2016]. Tersedia dari: http://strategic-manage.com/ Sari, R. P., Novia A., Dwi R. P, 2017, Efek  Ekstrak  Etanol  Semut Jepang (Tenebrio Sp) terhadap  Penurunan  Kadar Asam Urat Darah Tikus Putih Jantan .  Jurnal  Ilmiah  Ibnu Sina. 2(2): 197-203
Sumarny  R,  Syamsudin,  Simanjuntak P.,  2008,  Efek  hipoglikemik bioaktif  biji  petai  china dengan menggunakan metode  toleransi  glukosa pada mencit. Universitas
Pancasila. Sulistyowati  E.  2007,  Uji  Aktivits Antioksidan  Biji  Lamtoro ( Leucaena Leucocephala )
Secara  In-Vitro.  Universitas
Yogyakarta. Tjokroprawiro, A., 2011. Hidup Sehat dan Bahagia Bersama Diabetes  Mellitus. Gramedia
Pustaka Utama, Jakarta