## Penggunaan Minyak Ikan dalam Ransum Ayam Kampung terhadap Profil Lemak Darah
Anhar Faisal Fanani 1* , Nurul Fajrih 1 dan Wa Laili Salido 2
1 FakultasSains dan Teknologi, Universitas Nahdlatul Ulama Lampung Jl. Hanafiah Lintas Timur, Mataram Marga, Kec. Sukadana, Lampung Timur. 34194
2 Fakultas Peternakan, Universitas Halu Oleo Jl. H.E.A. Mokodompit Kampus Hijau Bumi Tridharma, Kambu, Kendari. 93232
*Email korespondensi: anharfaisalf@yahoo.com
(Diterima: 4-11-2018; disetujui 25-11-2018)

## ABSTRAK
Tujuan  penelitian  adalah  mengevaluasi  level  penambahan  minyak  ikan  lemuru  dalam  ransum ayam  kampung  terhadap  profil  lemak  darah.Materi  penelitian  yang  digunakan  adalahayam  kampung betina umur 24 minggu. Bahan pakan yang digunakan adalah minyak ikan lemuru, bekatul, jagung giling, bungkil  kedelai,  minyak  sawit,  tepung  ikan,  dan  premix  multi  mineral  dan  vitamin.  Metode  penelitian menggunakan  rancangan  acak  lengkap  (RAL).    Perlakuan  yang  diberikan  adalah  T 0 =  Penggunaan minyak ikan lemuru sebanyak 0%, T 1 = Penggunaan minyak ikan lemuru sebanyak 2%, T 2 = Penggunaan minyak ikan lemuru sebanyak 4%, T 3 = Penggunaan minyak ikan lemuru sebanyak 6%. Parameter yang diamati  adalah  kolesterol  total,  kadar High  Density  Lipoprotein (HDL)  dan Low  Density  Lipoprotein (LDL)  darah  ayam  kampung.  Data  dianalisis  menggunakan  analisis  variansi  yang  dilanjutkan  uji duncan.Hasil penelitian menunjukkan bahwa perlakuan dengan minyak ikan lemuru pada level tertinggi berpengaruhnyata (P<0,05)  terhadap  kolesterol  total, kadar  HDL  dan  LDL  darah.Kesimpulan  penelitian adalah  pemberian  minyak  ikan  lemuru  sampai  6%  dapat  digunakan  dalam  campuran  pakan  ayam kampung.
Kata kunci : Profil lemak darah, ayam lokal, minyak ikan lemuru

## ABSTRACT
The aimed of the study was to evaluate the level of addition lemuru fish oil in the ration of local chicken on the blood fat profile. The research materials used was female local chickens aged 24 weeks. The feed materials used are lemuru fish oil, rice bran, milled corn, soybean meal, palm oil, fish meal as well as multimineral and vitamin premix. The research method using a complete by randomized design. The treatments are given wereT0= lemuru fish oil as much as 0%, T1 = lemuru fish oil as much as 2%, T2 = lemuru fish oil as much as 4%, T3 = lemuru fish oil as much as 6%. The observed variables were total  cholesterol,  levels  of  high-density  lipoprotein  (HDL)  and  low-density  lipoprotein  (LDL)  of  local chicken blood. The data were analyzed using analysis of variance and was continued with Duncan test. The  results  showed  that  the  treatment  with  lemuru  fish  oil  at  the  highest  level  had  a  significant  effect (P<0.05)  on  total  cholesterol,  HDL  levels,  and  LDL  blood.  The  conclusion  of  the  study  is  that  the provision of lemuru fish oil up to 6% can be used in native chicken feed mix.
Keywords : The blood fat profile, local chicken, lemuru fish oil

## PENDAHULUAN
Peningkatan  produksi  dan  reproduksi unggas  khususnya  ayam  lokal  dipengaruhi oleh faktorgenetik  dan  manajemen.  Faktor  manajemen diantaranya adalah pakan yang diberikan. Peningkatkan  produksi  berupa  telur  dan  daging telah  diupayakan  dengan  pemberian  pakan  sesuai kebutuhan.  Kekawatiran    masyarakat  terhadap
produk unggas karena pada produk yang dihasilkan mengandung  kolesterol  yang  tinggi.  Sehingga, untuk  meningkatkan  kualitas  dapat  diupayakan dengan menghasilkan produk rendah kolesterol.
Kolesterol  terdapat  di  dalam  darah bersama  dengan  trigliserida,  fosfolipid,  dan apoprotein  membentuk  lipoprotein.  Lipoprotein di  darah,  yaitu  kilomikron, Very  Low  Density
Terakreditasi Ditjen Penguatan Riset dan Pengembangan, Kemenristekdikti Keputusan No: 21/E/KPT/2018, Tanggal 9 Juli 2018
http://ojs.uho.ac.id/index.php/peternakan-tropis
Lipoprotein (VLDL), Low  Density  Lipoprotein (LDL)  dan High  Density  Lipoprotein (HDL) (Hartini  &  Okid,  2009).  Kadar  kolesterol  dapat dipengaruhi oleh pakan yang dikonsumsi ternak. Lemak  yang  tinggi  dalam  pakan  akan mengakibatkan  terjadinya  kenaikan  kadar  LDL dalam  darah  yang  merupakan  lipoprotein  yang kaya  akan  kolesterol  (Nurul,  2016),  sehingga perlu  upaya  untuk  menghasilkan  produk  ternak yang rendah kolesterol yaitu dengan penggunaan minyak ikan lemuru.
Minyak  ikan  telah  dilaporkan  memiliki berbagai  efek  yang  bermanfaat  bagi  kesehatan, antara  lain  anti  karsinogenik,  anti  aterogenik,anti- diabetes,  dan  efek  stimulasi  kekebalan  tubuh (Mariod et al ., 2015). Pakan dengan kandungan asam  lemak  tidak  jenuh  terdapat  pada  bahan pakan  nabati  dan  minyak  ikan  yakni  pada minyak  ikan  lemuru.  Ikan  lemuru  merupakan ikan yang hidup di perairan selat bali, sementara minyak  ikan  lemuru  merupakan  limbah  hasil pengelolaan ikan lemuru dari proses pengalengan dan proses pembuatan tepung ikan. Minyak ikan lemuru saat ini belum dimanfaatkan secara maksimal, tetapi berpotensi  sebagai  sumber  asam  lemak  tidak jenuh, sehingga dapat digunakan sebagai bahan penyusun pakan ayam.
Pemberian  asam  lemak  tak  jenuh  yang berasal  dari  minyak  ikan  lemuru  dalam  ransum ayam  kampung  merupakan  upaya  untuk meningkatkan  kadar  HDL  dan  menurunkan kadar  Kolesterol  total  dan  LDL  darah.  Minyak ikan  lemuru  yang  telah  mengalami  ekstraksi mempunyai  kandungan  asam  lemak  tak  jenuh
ganda  Omega-3  sebesar  34,9  %  (Amiluddin, 2014).  Hal  tersebut  didukung  oleh  hasil penelitian  Mariod et  al .,  (2015)  bahwa pemberian minyak ikan pada level 3% ke dalam ransum  ayam  petelur,  mampu  meningkatkan berat  telur  dan  persentase  produksi  telur dibandingkan  perlakuan  kontrol.  Selanjutnya oleh  penelitian  Adebisi et  al .  (2017)  menemu- kan  bahwa  penambahan  minyak  ikan  sebesar 0,75%  +  minyak  kacang  kedelai  0,75%  nyata menurunkan  (P<0,05)  LDL  darah  ayam  petelur namun  tidak  terhadap  kolesterol  darah  dan trigliserida.  Oleh  karena  perlu  dilakukan penelitian terkait profil lemak darah pada ayam lokal yang diberi minyak ikan lemuru.

## MATERI DAN METODE
Materi  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  ayam  kampung  betina  umur  24 minggu  dengan  bobot  badan  berkisar  1,6-1,7 kg. Ayam diletakkan secara acak pada kandang batre  individu  dengan  ukuran  40x30x40  cm. Pakan  untuk  perlakuan  terdiri  dari  4  perlakuan yang  diulang  sebanyak  lima  kali  dan  setiap ulangan terdiri dari 3 ekor sehingga totalkeseluruhan  berjumlah  60  unit  percobaan. Bahan pakan yang digunakan antara lain tepung ikan,  minyak  kelapa  sawit,  bungkil  kedelai, bekatul,  jagung  giling,  CaCO3,  multi  vitamin dan  mineral  mix  serta  bahan  perlakuan  yakni minyak ikan lemuru. Ransum penelitian disusun dengan  iso  protein  dan  energi  seperti  pada Tabel 1.

## Tabel 1. Ransum percobaan dan kandungan nutrien
Susunan Ransum To T 1 T 2 T 3 Bahan Pakan Jagung giling 48,4 40 30 27 Bekatul 26 33 41,5 42 Bungkil kedelai 14 13,5 13 13,5 Tepung ikan 9 9 9 9 Minyak ikan lemuru 0 2 4 6 Minyak kelapa sawit 0,3 0,2 0,2 0,2 CaCO3 2 2 2 2 Premix multi vitamin dan mineral 0,3 0,3 0,3 0,3 Total 100,00 100,00 100,00 100,00 Kandungan Nutrien: Energi metabolis (kkal/kg) 2739,10 2740,50 2736,05 2896,50 Protein kasar(%) 17,05 16,95 17,10 17,42 Serat kasar (%) 5,02 5,61 6,02 6,29 Lemak kasar (%) 6,65 8,5 8,64 6,86 Ca (%) 2,61 2,46 2,57 2,54 P (%) 1,29 1,24 1,23 1,33
Pakan  perlakuan  dilakukan  selama  6 minggu  yang  sebelumnya  dilakukan  pendahulu- an  selama  1  minggu  dengan  ransum  tanpa minyak  ikan  lemuru,  pada  saat  pendahuluan sebelumnya  ayam  diberi  vaksin  ND.  Pemberian ransum dibatasi sebanyak 110gram/ekor/hari dan air  minum  diberikan  secara  tak  terbatas. Pemberian  ransum  dilakukan  2  kali  sehari  yakni pada  pukul  07.00  dan  16.00.  Perlakuan  yang diteliti adalah sebagai berikut:
T 0 =  Penggunaan minyak ikan lemuru 0% T 1 =  Penggunaan minyak ikan lemuru 2% T 2 =  Penggunaan minyak ikan lemuru 4% T 3 =  Penggunaan minyak ikan lemuru 6%
Parameter yang diukur dalam penelitian ini adalah  profil  lemak  darah  yang  meliputi kolesterol  total,  kadar High  Density  Lipoprotein (HDL)  dan Low  Density  Lipoprotein (LDL) darah  pada  ayam  kampung.  Sampel  darah diambil satu ekor ayam tiap ulangan, pengambilan darah dilakukan pada akhir penelitian. Darah diambil melalui vena pectoralis sebanyak 3 ml dengan spuit syringe ukuran 5 ml. Syringe  yang  digunakan  pada  masing-masing sampel  berbeda,  selanjutnya  sampel  darah dimasukkan  ke  dalam  tabung  EDTA.  Sampel darah  yang  diperoleh  disentrifuge  dengan kecepatan  3.500  rpm  kurang  lebih  10  menit. Supernatan  berupa  serum  diambil  dengan  pipet steril dan ditempatkan pada tabung evendorf dan siap  untuk  dianalisis  (Nurul,  2016).  Data  yang diperoleh  selanjutnya  dianalisis  menggunakan analisis  variansi  yang  dilanjutkan  dengan  uji duncan.

## HASIL
Low  density  Lipoprotein  (LDL)  merupa- kan  agen  pengangkut  yang  mengandung  25% protein,  kolesterol  sebesar  45%  dan  sisanya fospolipid  serta  trigliserida.  Berdasarkan  data pada  Tabel  2  menunjukkan  bahwa  pemberian minyak ikan lemuru pada ransum ayam kampung
berpengaruh nyata (P<0,05) terhadap kadar LDL serum  darah,  hal  tersebut  disebabkan  karena Omega-3  mampu  menghambat  biosintesis  lemak dihati. Menurut Marks et al. (2000) bahwa kadar LDL  dapat  dipengaruhi  oleh  asupan  pakan  yang dikonsumsi.  Dijelaskan  lebih  lanjut  bahwa peningkatan konsumsi pakan juga dapat mempengaruhi  kadar  lemak  darah.  Rataan konsumsi pakan yang tidak mengandung minyak ikan lemuru adalah 96,74 gram, sedangkan rataan konsumsi  pakan  yang  mengandung  minyak  ikan lemuru 2% adalah 98,78 gram, 4% adalah 100,66 gram,  dan  konsumsi  pakan  yang  mengandung minyak ikan lemuru 6% memiliki rataan tertinggi yaitu  101,13  gram.  Dalam  penelitian  ini  terjadi sedikit  peningkatan  konsumsi  pakan  pada perlakuan  khususnya  T3  dengan  nilai  konsumsi tertinggi  namun  dengan  pemberian  minyak  ikan lemuru  mampu  menurunkan  kadar  LDL  seperti yang diharapkan.
Penurunan  tersebut  dapat  dihubungkan dengan  pemberian  minyak  ikan  lemuru  terhadap kadar  LDL  darah.  Hal  ini  sesuai  dengan penelitian  (Chashnidel et  al., 2009)  yang mendapat  hasil  kadar  LDL  darah  semakin  turun pada penambahan asam lemak tidak jenuh. Asam lemak  tak  jenuh  ganda  cenderung  menurunkan kadar kolesterol darah dan mengurangi kelengketan keping-keping darah. Kadar kolesterol  darah  mempunyai  hubungan  erat dengan kadar LDL darah karena LDL mengandung kolesterol yang paling banyak yaitu 55%.
Pengangkutan lemak diatur melaui 2 jalur, yaitu  jalur  eksogen  dan  endogen.  Jalur  eksogen yaitu penyerapan lemak dalam bentuk trigliserida  dan  kolesterol  yang  berasal  dari pakan melalui usus disertai dengan pembentukan  kilomikron  serta  beredar  dalam darah.  Jalur  endogen  terjadi  sintesis  partikel VLDL  oleh  hati  yang  mengandung  apoprotein serta akan diedarkan melalui aliran darah.
Tabel  2.    LDL  ( Low  Density  Lipoprotein ),  HDL  ( High  Density  Lipoprotein )  dan  Kolesterol  Total  Darah Ayam Kampung
Parameter Perlakuan T0 T1 T2 T3 LDL (mg/dl) 42,57±14 a 27,63±12 b 30,55±4 ab 24,36±11 b HDL (mg/dl) 41,22±10 ab 40,36±9 b 44,24±19 ab 49,64±14 a Kolesterol Total (mg/dl) 140,77±15 a 141,79±18 ab 135,47±8 b 115,22±11 b
Superskrip berbeda pada kolom/baris yang sama menunjukkan perbedaaan secara signifikan (P<0,05)
VLDL  akan  kehilangan  trigliserida  menjadi LDL  karena lipoprotein  lipase (LPL)  yang diaktifkan  oleh  apoprotein.  Partikel-partikel LDL  yang  kaya  kolesterol  dibawa  ke  jaringan tubuh  menjadi  membran,  membentuk  steroid atau  mengendap  dipembuluh  darah.  LDL  akan ditangkap  reseptor  jaringan  pada  membran plasma selanjutnya protease lisosom mengkatalis  hidrolisis  LDL.  Protein  LDL didegradasi menjadi asam  amino (Ngili, 2009). Berdasarkan  jalur  endogen,  Mansoub  (2011) berpendapat bahwa asam lemak Omega-3 dapat menurunkan kadar VLDL darah yang merupakan agen pembentuk LDL darah. Fungsi dari asam lemak tidak jenuh khususnya Omega- 3 yang dapat menurunkan biosintesis kolesterol dan  sifatnya  tidak  menempel  pada  pembuluh darah,  sehingga  hal  tersebut  menguntungkan bagi kesehatan.
Pemberian  minyak  lemuru  kurang mampu  memberikan  pengaruh  nyata  (P>0,05) pada kadar HDL darah, kecuali pada perlakuan T3 dengan nilai tertinggi. Penelitian Monfaredi et  al. (2011)  yang  menggunakan  minyak kedelai pada ransum ayam broiler mendapatkan hasil beda nyata (P<0,05) pada kadar HDL. Hal ini  mungkin  disebabkan  karena  imbangan asam-asam lemak yang belum sesuai khususnya asam lemak tidak jenuh yang terdapat pada ikan lemuru.  Suripta  &  Astuti  (2007)    menyatakan bahwa  pemanfaatan  Omega-3  dalam  pakan tergantung  pada  keseimbangan  asam  lemak lainnya,  terutama  imbangan  Omega-6    dan Omega-3  agar  dapat  diabsorbsi  secara  optimal, sehingga  asam-asam  lemak  tersebut  dapat dimanfaatkan tubuh.
Rataan  kadar  HDL  dalam  darah  ayam kampung yang diberi ransum dengan perlakuan minyak  ikan  lemuru  berkisar  antara  40,36 mg/dl sampai 49,64 mg/dl. Hazim et al. (2010) mendapatkan  kadar  HDL  puyuh  yang  diberi minyak  biji  matahari  sebesar  71,8  mg/dl. Zuprizal et  al .  (2002)  menyatakan  kandungan HDL  darah  itik  betina  yang  diberi  perlakuan minyak  ikan  lemuru  dan  minyak  kelapa  sawit 64,35 mg/dl. Pemberian ransum dengan minyak ikan  lemuru  6%  lebih  tinggi  kadar  HDL  darah bila dibandingkan dengan minyak ikan lemuru4%,  2%,  dan  0%.  Peningkatan  tersebut berkaitan  dengan  semakin  meningkatnya  asam lemak tidak jenuh pada ransum yang mengandung  minyak    ikan  lemuru  terhadap kadar HDL. Hasil penelitian ini sejalan dengan penelitian  Chashnidel et  al. (2009)  yang menunjukkan  peningkatan  kadar  HDL  dengan
adanya  peningkatan  penambahan  minyak  ikan dan    Rezaei et  al. (2008)  dengan  penambahan minyak kedelai pada pakan.
Pembentukan  HDL  dimulai  dari  sintesis Apoprotein  dan  fospolipid  di  hati  yang membentuk  partikel  HDL.  Partikel-partikel  ini sewaktu  beredar  dalam  sirkulasi  menyerap kolesterol  dari  jaringan  dengan  bantuan adenosine triphospate binding cassete transporter-1 (ABC-1) yang berfungsi mengeluarkan  kolesterol  dari  makrofag . Lesitin kolesterol asil transferase (LCAT) mengesterifikasi kolesterol dalam HDL. Linder (2006)  menyatakan  bahwa  peningkatan  HDL dapat  dipengaruhi  oleh Lesitin  kolesterol  asil transferase (LCAT).  Asam  lemak  tidak  jenuh Omega-3  dapat  menstimulan  pada  proses esterifikasi  kolesterol.  Selain  itu  asam  linoleat merupakan asam lemak paling banyak ditranfer dari fosfatidilkolin atau lesitin pada  kolesterol membentuk  ester linoleoil  kolesterol pada pembentukan  HDL  (Ngili,  2009) . Fraksi  ester kolesterol  ini  dapat  berpindah  jika  kebutuhan meningkat  ke  VLDL  selanjutnya  berubah menjadi LDL untuk ikut serta dalam metabolisme  membran  dan  steroid,  selain  itu diserap  oleh  hati  untuk  sintesis  VLDL  atau diekskresikan dalam empedu.
Absorpsi  lemak  merupakan  masalah khusus,  karena  tidak  seperti  hasil  akhir pencernaan,  zat-zat  ini  tidak  larut  dalam  air. Penyerapan  zat  ini  dipermudah  oleh  kombinasi dengan  garam  empedu,  karena  kombinasi  ini merupakan suatu susunan yang larut dalam air. Garam  empedu  dibebaskan  dalam  sel  mukosa yang  dapat  dipergunakan  lagi.  Trigliserida dihidrolisis  enzim  lipase  menjadi  asam  lemak, bersama  kolesterol,  dan  fospolipid  akan diemulsi  oleh  garam  empedu  menjadi  misel. Widodo (2005) menyatakan misel akan diserap epitel  usus  yang  akan  cepat  berubah  menjadi trigliserida, fospolipid, dan kolesterol selanjutnya  masuk  kedalam  peredaran  darah dalam  bentuk  kilomikron  dan  dideposit  pada jaringan atau dibawa ke hati.
High
Density Lipoprotein(HDL) merupakan lipoprotein yang mempanyai kandungan  protein  paling  tinggi  daripada lipoprotein  lainnya.  Kandungan  protein  HDL berkisar  antara  54  sampai  65%.  HDL mempunyai fungsi yang penting dalam mengikat  kelebihan  kolesterol  beserta  esternya dan  mengangkutnya  bersama  aliran  darah  dari sel tepi ke sel hati.
Pemberian minyak ikan lemuru berpengaruh  nyata  (P<0,05)  pada  kolesterol total  kecuali  R1.  Kolesterol  didalam  tubuh diserap  dalam  bentuk  asam  kolat,  di  hati dikonjugasikan  dengan  bahan  lain  membentuk garam empedu yang membantu pencernaan dan penyerapan  lemak.  Kolesterol  diedarkan  ke seluruh  sel  oleh  LDL  dan  HDL.  Menurut George  &  Michael  (2010) Low  density lipoprotein merupakan  komponen  lipoprotein yang  memiliki  peran  terbesar  membawa kolesterol  ke  jaringan  tubuh  yang  digunakan dalam  pembentukan  membran  atau  menjadi hormon  steroid. High  density  lipoprotein memiliki peran yang bertentangan dengan LDL, yaitu  membawa  kolesterol  dan  lipoprotein lainnya  yang  sudah  terakumulasi  dari  sel  dan membawa  kolesterol  kembali  ke  hati  untuk selanjutnya diekskresikan dalam empedu (Gropper & Smith, 2009).
Menurut  Murray et  al. (1999)  kolesterol yang  tidak  diperlukan  akan  dikeluarkan bersama  dengan  ekskreta  dalam  bentuk  garam empedu  dan  dalam  bentuk  hormon-hormon steroid  netral.  Jalur  utama  pembuangan kolesterol  dari  tubuh  yakni  melalui  konversi oleh  hati  menjadi  asam  empedu,  yaitu  asam kholat  dan chenodeoxy  cholic yang  berkaitan dengan  glisin  atau  taurin  membentuk  garam empedu. Selanjutnya diekskresikan oleh empedu  kedalam  duodenum,  sebagian  besar asam  empedu  direabsorpsi  oleh  hati  melalui sirkulasi yang selanjutnya disekresikan kembali dalam  empedu.  Asam  empedu  yang  tidak diserap  akan  didegradasi  oleh  mikroba  usus besar  dan  diekskresi  melalui  ekskreta  (Daud et al., 2007).

## KESIMPULAN
Kesimpulan  penelitian  adalah  dengan pemberian  minyak  ikan  lemuru  sampai  pada level  6%  mampu  mempengaruhi  profil  lemak darah  serta  dapat  digunakan  dalam  campuran pakan ayam kampung.

## DAFTAR PUSTAKA
Adebisi  F.  A.,  R.O.  Babatunde,  &  O.O.
Jeremiah. 2017. Influence of four dietary oils  on  selected  blood  constituents  in egg-type chickens. Journal of
Agricultural Sciences 62:251-263.
Amiluddin  I.,  Dian  A.,  &  R.  Erna.  2014.
Pengaruh  penambahan  ikan  lemuru ( Sardinella
longiceps )
terhadap
karakteristik  folikel  dan  siklus  ovulasi pada  ayam  ras  petelur.  Jurnal  Ilmu  dan Teknologi Peternakan Tropis 1(1):45-53.
Chashnidel,  H.,  H.  Moravej,  A.  Towhidi,  F.
Asadi & S. Zeinodini. 2010. Influence of different levels of n-3 supplemented (fish oil)  diet  on  performance,  carcass  quality and fat status in broilers. African Journal of Biotechnology 9(5):687-691.
Daud,  M.,  W.G.  Piliang  &  I.P.  Kompiang. 2007.  Persentase  dan  kualitas  karkas ayam pedaging yang diberi probiotik dan prebiotik dalam ransum. JITV 12(3):167- 174.
George  H.R. &   C.P.  Michael.  2010.  High- density  lipoprotein  heterogeneity  and function  in  reverse  cholesterol  transport. Curr Opin Lipidol 21(3):229-238.
Gropper,  S.S.,  &  J.L.  Smith.  2009.  Advanced Nutrition  and  Human  Metabolism.  6th Edition. Wadsworth. Belmont.
Hartini,  M.  &  P.A.  Okid.  2009.  Kadar kolesterol  darah  tikus  putih  ( Rattus norvegicus )  hiperkolesterolemik  setelah perlakaun  VCO.    Bioteknologi  6(2):55- 62.
Hazim J.,  Al-Daraji, Ali S.,  Al-Hassani, H.A. Al-Mashadani,  W.K.  Al-Hayani  &  H.A. Mirza. 2010. Effect of dietary supplementation with sources of omega-3 and omega-6 fatty acids on certain blood characteristics  of  laying  quail.  J.  Poult. Sci. 9(7):689-694.
Linder,  M.C.  2006.  Biokimia  Nutrisi  dan Metabolisme  dengan  Pemakaian  secara Klinis. UI Press. Jakarta.
Mansoub,  N.  H.  2011.  Effect  of  fish  oil  fed  a low-protein diet  on performance,  carcass characterizes and blood indices in broiler chicks.  Journal  of  Biological  Research 2(3):113-120.
Marks,  D.B.,  D.  Allan,  &  M.  Collen.  2000. Biokimia Kedokteran Dasar. Alih bahasa Brahm U. EGC. Jakarta.
Mariod A. A, A.E.M. Manahil, E.S. Mohamed, &  H.  Tjahjono.  2015.  Effect  of  addition of fish oil on the performance parameters of  laying  hens  and  the  fatty  acid composition  of their  egg  yolk.  American
Journal of Food Science and Health 1:38- 42.
Monfaredi,  A.,  M.  Rezaei,  &  H.  Sayyahzadeh. 2011.  Effect  of  supplemental  fat  in  low energy  diets  on  some  blood  parameters and  carcass  characteristics  of  broiler chicks.  South  African  Journal  of  Animal Science 41(1):24-32.
Murray,  R.K.,  D.K.  Granner,  P.A.  Mayes,  & V.W.  Rodwell.  1996.  Biokimia  Harper. EGC. Jakarta.
Ngili,  Y.  2009.  Biokimia  Metabolisme  dan Bioenergitika. Graha Ilmu. Yogyakarta.
Nurul,  F.  2016.    Blood  cholesterol,  LDL  and hdl in crossbred local chicken feed inulin of  dahlia  tubers  as  a  prebiotic.  Chalaza Journal of Animal Husbandry 1:1-5.
Sacher. R. A., A. Richard, & McPherson. 2004. Tinjauan Klinis Hasil Pemeriksaan
Laboratorium Edisi 11. EGC. Jakarta.
Suripta,  H.  &  P.  Astuti.  2007.  Pengaruh Penggunaan  Minyak    Lemuru  dan Minyak  sawit  dalam  ransum  terhadap rasio asam  lemak  omega-3 dan omega-6 dalam  telur  burung  puyuh  ( Coturnix coturnix  japonica ).  Journal  Indonesia Tropical Agricultur 32(1):22-27.
Widodo,  W.  2005.  Nutrisi  dan  Pakan  Unggas Kontekstual. UMM. Malang.
Zuprizal,  T.N.  Cuk,  Indratiningsih,  &  H.  Sri. 2002.  Studi  Transfer  Omega-3  yang Berasal dari Limbah Industri Pengolahan Ikan  terhadap  Komposisi  Kimia  Telur Berbagai  Jenis  Unggas.  Lemlit-UGM. Yogyakarta.