Uji Efektivitas Ekstrak Etanol Daun Angsana ( Pterocarpus Indicus Willd ) sebagai Biolarvasida terhadap Larva Nyamuk Culex Sp .
Mohammad Ihsan Abdurrozak * , Livia Syafnir
Prodi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Islam Bandung, Indonesia.
* mohammadihsan35@gmail.com, livia.syafnir@gmail.com
Abstract. Mosquitoes  are  often  associated  with  health  problems  because  mosquito  bites  not  only  cause itching but some species can also transmit various types of parasites that are harmful to human health. One of them is Culex sp mosquito which is a class of infectious insects (vectors). This study aimed to test the activity  of  compounds  in  angsana  leaf  extract  (Pterocarpus  indicus  Willd)  as  biolarvasides  on  Culex  sp. mosquitoes  and  determine  the  concentration  of  LC50  value  needed.  Extraction  was  carried  out  by maceration method using 70% ethanol solvent. The extract collected was then tested biolarvaside activity on Culex sp. The study subjects were divided into 8 treatment groups, namely aquades (negative control), 0.05%,  0.1%,  0.2%,  0.5%,  1%,  2%  and  ABATE  0.1%  (positive  control).  Each  group  contained  20 mosquito larvae with three replications (triplo). Observations were made for 24 hours at intervals of 1 hour, 4  hours,  8  hours,  12  hours  and  24  hours.  The  biolarvaside  activity  of  angsana  leaf  extract  was  analyzed using  the  probit  method.  Based  on  the  results  of  the  Probit  analysis,  the  LC50  value  was  0.83%.  These results indicate that the angsana leaf extract (Pterocarpus indicus Willd) was effective as a biolarvaside.
Keywords: Angsana leaves, biolarvaside, LC50, Culex Sp.
Abstrak. Nyamuk  sering  dikaitkan  dengan  masalah  kesehatan  karena  gigitan  nyamuk  tidak  hanya menimbulkan gatal saja tetapi beberapa spesies nyamuk juga dapat menularkan berbagai jenis parasit yang berbahaya  bagi  kesehatan  manusia.  Salah  satunya  yaitu  nyamuk  Culex  sp  yang  merupakan  golongan serangga penular (vektor). Penelitian ini bertujuan untuk pengujian aktivitas senyawa dalam ekstrak daun angsana (Pterocarpus indicus Willd) sebagai biolarvasida pada nyamuk Culex sp dan penentuan nilai LC50. Ekstraksi  dilakukan  dengan  metode  maserasi  menggunakan  pelarut  etanol  70%,  Ekstrak  yang  diperoleh kemudian diuji aktivitas biolarvasida pada nyamuk Culex sp. Subjek penelitian dibagi menjadi 8 kelompok perlakuan, yaitu akuades (kontrol negatif), 0,05%, 0,1%, 0,2%, 0,5%, 1%, 2% dan ABATE 0,1% (kontrol positif).Setiap kelompok berisi 20 ekor larva nyamuk dengan tiga kali pengulangan (triplo) . Pengamatan dilakukan  selama  24  jam  dengan  interval  1jam,  4jam,  8jam,  12jam  dan  24jam.  Aktivitas  biolarvasida ekstrak  daun  angsana  dianalisis  dengan  menggunakan  metode  probit.  Berdasarkan  hasil  analisis  Probit didapatkan  nilai  LC50  berada  pada  konsentrasi  0,83%.Hasil  tersebut  menunjukkan  bahwa  Ekstrak  daun angsana (Pterocarpus indicus Willd) efektif sebagai biolarvasida.
Kata Kunci: Daun angsana, biolarvasida, LC50, Culex Sp.

## A. Pendahuluan
Nyamuk  sering  dikaitkan  dengan  masalah  kesehatan  karena  gigitan  nyamuk  tidak  hanya menimbulkan gatal saja tetapi beberapa spesies nyamuk juga dapat menularkan berbagai jenis parasit  yang  berbahaya  bagi  kesehatan  manusia.  Nyamuk  yang  memiliki  kemampuan menularkan  penyakit  ini  disebut  dengan  vektor  (Widoyono,  2008).  Nyamuk  Culex  sp merupakan  golongan  serangga  penular  (vektor).  Nyamuk  yang  termasuk  dalam  genus  Culex dikenal sebagai vektor penular arbovirus, demam kaki gajah dan malaria pada unggas. Nyamuk genus  ini  merupakan  nyamuk  yang  banyak  terdapat  disekitar  kita.  Selain  itu,  nyamuk  ini termasuk  serangga  yang  beberapa  spesiesnya  sudah  dibuktikan  sebagai  vektor  penyakit,  di samping dapat mengganggu kehidupan manusia karena gigitannya.
Sejauh ini pengendalian serangga umumnya dilakukan menggunakan pestisida sintetik. Penggunaan  pestisida  sintetik  dianggap  efektif,  praktis,  manjur  dan  dari  segi  ekonomi  lebih menguntungkan.  Namun  demikian  penggunaan  pestisida  sintetik  secara  terus-menerus  dan berulang-ulang  dapat  menimbulkan  pencemaran  lingkungan,  kematian  berbagai  macam  jenis makhluk  hidup  dan  resistensi  dari  hama  yang  diberantas.  Salah  satu  alternatif  yang  dapat digunakan dalam mengatasi permasalahan yang diatas adalah dengan penggunaan bahan alami (biolarvasida).  Biolarvasida  dapat  diperoleh  dari  berberapa  jenis  tanaman  yang  mengandung senyawa yang berpotensi untuk membunuh jentik nyamuk (Nofyan, dkk. 2013)
Tumbuhan angsana (Pterocarpus indicus Willd) merupakan salah satu tumbuhan hutan yang  biasa  digunakan  sebagai  tempat  berteduh.  Tumbuhan  ini  termasuk  kedalam  suku Fabaceae.  Tumbuhan  ini  digunakan  sebagai  tumbuhan  penghijau  disemua  kota  besar  di Indonesia.  Pterocarpus  indicus  dikenal  dengan  nama  Sono  kembang  dan  Cendana  Merah (Direktorat  Pembenihan  Tanaman  Hutan,  2002).  Berbagai  penelitian  telah  dilakukan  untuk memastikan  sekaligus  memanfaatkan  senyawa  yang  terkandung  di  dalamnya,  namun  belum diketahui  bagaimana  aktivitasnya  sebagai  biolarvasida.  Junanto  et.al  (2008),  menyebutkan bahwa daun angsana memiliki beberapa senyawa metabolit sekunder, di antaranya yaitu tanin, polifenol,  flavonoid,  saponin  dan  triterpenoid.  Diantara  senyawa-senyawa  tersebut,  ada beberapa  senyawa  yang  dapat  dimanfaatkan  dan  berpotensi  sebagai  biolarvasida,  yaitu polifenol, flavonoid, saponin dan tanin.
Berdasarkan  latar  belakang  di  atas,  maka  dapat  dirumuskan  beberapa  permasalahan sebagai  berikut  :  apakah  daun  angsana  (Pterocarpus  indicus  Willd)  dapat  digunakan  sebagai alternatif baru dalam penghambatan pertumbuhan nyamuk, dan berapakah konsentrasi ekstrak yang  dibutuhkan  untuk  mencapai  efek  toksisitas  yang  diinginkan.  Selanjutnya,  tujuan  dari penelitian  ini  untuk  menguji  aktivitas  senyawa  dalam  ekstrak  daun  angsana  (Pterocarpus indicus  Willd)  sebagai  biolarvasida  pada  nyamuk  Culex  sp  dan  penentuan  konsentrasi  LC50 ekstrak yang dibutuhkan hingga dapat mematikan larva nyamuk sebanyak 50%.

## B. Landasan Teori
Larvasida  merupakan  suatu  bahan  insektisida  yang  mampu  menghambat  siklus  hidup  atau membunuh stadium larva pada habitat aslinya atau pada potensial habitatnya. Suatu  larvasida nyamuk    yang  efektif    harus    memiliki  kerja    yang    cepat  persisten  pada  berbagai  tempat perindukan nyamuk, baik pada air yang bersih maupun pada air yang tercemar (Haeni, 2008). Selama  ini  pengendalian  nyamuk  sebagai  vektor  penyakit  umumnya  dilakukan  dengan menggunakan pestisida sintetik. Namun, hal ini perlu diwaspadai karena penggunaan pestisida sintetik secara terus menerus akan menimbulkan pencemaran lingkungan, kematian   berbagai makhluk hidup lain dan menyebabkan hama pengganggu atau larva  nyamuk  menjadi resisten, bahkan  dapat  menyebabkan  mutasi  gen  pada  spesies    ini.  Beberapa  metabolit  sekunder  yang dapat  memberikan  efek  larvasida  salah  satunya  yaitu  golongan  senyawa  alkaloid,  saponin, tanin, dan flavonoid.
Tumbuhan angsana (Pterocarpus indicus Willd) merupakan salah satu tumbuhan hutan yang  biasa  digunakan  sebagai  tempat  berteduh.  Tumbuhan  ini  termasuk  ke  dalam  suku Fabaceae.  Tumbuhan  ini  digunakan  sebagai  tumbuhan  penghijau  disemua  kota  besar  di Indonesia.  Pterocarpus  indicus  dikenal  dengan  nama  Sono  kembang  dan  Cendana  Merah
(Direktorat Pembenihan Tanaman Hutan, 2002). Kandungan senyawa kimia yang dimiliki oleh daun  angsana  ini  menunjukan  tes  yang  positif  terhadap  adanya  senyawa  fenol,  flavonoid, saponin, triterpenoid, dan tannin (junanto,dkk.2008).
Nyamuk  Culex  mempunyai  ukuran  kecil  sekitar  4-13  mm  dan  tubuhnya  rapuh.  Pada kepala  terdapat  probosis  yang  halus  dan  panjangnya  melebihi  panjang  kepala.  Probosis  pada nyamuk betina digunakan sebagai alat untuk menghisap darah, sedangkan pada nyamuk jantan digunakan  untuk  menghisap  zat-zat  seperti  cairan  tumbuh-tumbuhan,  buah-buahan  dan  juga keringat.  Nyamuk  Culex  sp  merupakan  golongan  serangga  penular  (vektor).  Nyamuk  yang termasuk dalam genus Culex dikenal sebagai vektor penular arbovirus, demam kaki gajah dan malaria  pada  unggas.  Nyamuk  genus  ini  merupakan  nyamuk  yang  banyak  terdapat  disekitar kita(Sutanto, dkk.2011).

## Ekstraksi
Ekstraksi  merupakan  pengambilan  bahan  aktif  dari  suatu  tanaman,  dapat  dilakukan  dengan ekstraksi. Dalam proses ekstraksi ini, bahan aktif akan terlarut oleh zat penyari yang sesuai sifat kepolarannya.  Metode  ekstraksi  dipilih  berdasarkan  beberapa  faktor  seperti  sifat  dari  bahan mentah  obat,  daya  penyesuaian  dengan  tiap  macam  metode  ekstraksi  dan  kepentingan  dalam memperoleh ekstrak yang sempurna atau mendekati sempurna (Ansel, 1989).

## C. Hasil Penelitian dan Pembahasan
Bahan  yang  digunakan  adalah  daun  dari  tumbuhan  angsana  (Pterocarpus  indicus  Willd). Terlebih  dahulu  dilakukan  determinasi  terhadap  daun  angsana,  yang  dilakukan  di  Institut Teknologi Bandung. Kemudian dilakukan beberapa tahap yaitu pencucian, kemudian dilakukan perajangan  dan  dikeringkan.  Setelah  sampel  bahan  disiapkan  maka  dilakukan  skrinning fitokimia,  penetapan  parameter  standar  simplisia  dan  ekstrak,  ekstraksi  dan  pengujian biolarvasida menggunakan metode analisis probit yang menghasilkan nilai LC50.
Penapisan  fitokimia  merupakan  tahapan  awal  dalam  melakukan  identifikasi  golongan senyawa  metabolit  sekunder  yang  terkandung  dalam  daun  angsana.  Hasil  penapisan fitokimia pada  simplisia  yaitu  terkandungnya  senyawa  tanin,  polifenolat,  saponin,  triterpenoid  dan sesquiterpenoid  sedangkan  di  dalam  ekstrak  terkandungnya  senyawa  flavonoid,  tanin, polifenolat,  saponin,  triterpenoid  dan  sesquiterpenoid  dari  hasil  penapisan  fitokimia  di  dalam daun  angsana  menunjukan  bahwa  terdapat  salah  satu  perbedaan  kandungan  senyawa  antara simplisia  dan  ekstrak  dimana  senyawa  flavonoid  hanya  didapatkan  pada  ekstrak  saja, dikarenakan senyawa pada simplisia masih kompleks dibandingkan dengan ekstrak.
Pemeriksaan  karakteristik  simplisia  dilakukan  melalui  pengujian  parameter standar  spesifik  dan  non  spesifik  meliputi  pengujian  organoleptis,  kadar  sari  larut  air, kadar  sari  larut  etanol,  kadar  abu  total,  kadar  abu  tidak  larut  asam,  kadar  air,  susut pengeringan. Pemeriksaan karakteristik ini untuk menjamin agar simplisia yang diteliti memenuhi persyaratan yang ditetapkan.
Tabel 1 Hasil penetapan parameter standar simplisia daun angsana
Untuk  mendapatkan  ekstrak  dari  daun  angsana maka  dilakukan  proses  ekstraksi.
Simplisia daun angsana yang dilakukan  menggunakan  metode maserasi dengan pelarut etanol 70%. Ekstraksi ini dilakukan selama 3 hari dengan penggantian pelarut setiap 24 jam. Dimana penggantian pelarut bertujuan untuk memaksimalkan proses pengambilan kandungan senyawa dalam  simplisia,  karena  jika  pelarut  tidak  diganti  maka  kemungkinan  yang  terjadi  adalah pelarut mencapai tingkat jenuh sehingga tidak mampu lagi untuk menarik kandungan senyawa yang terdapat dalam simplisia.
Setelah itu ekstrak cair yang diperoleh dipekatkan dengan Rotary Vacuum Evaporator . Dari  hasil  pemekatan  dan  penguapan  didapatkan  rendemen  ekstrak  kental  daun  angsana sebanyak 19,88%.
Kemudian  ekstrak  kental  dibuat  larutan  dengan  dengan  konsentrasi  masing-masing 0,05%;  0,1%;  0,2%;  0,5%;  1%;  2%  dan  digunakan  akuadest  sebagai  kontrol  negatif.  Larutan kontrol negatif ini berfungsi untuk meyakinkan bahwa akuades yang digunakan sebagai pelarut ekstrak dan ABATE tidak memiliki aktivitas atau menyebabkan kematian larva nyamuk Culex Sp.  ABATE  sebagai  kontrol  positif,  digunakan  sebagai  pembanding.  Penelitian  ini  dilakukan dengan  pengulangan  sebanyak  3  kali  (triplo)  untuk  mendapatkan  data  yang  lebih  baik  dan akurat. Masing-masing konsentrasi dan kontrol diisi dengan 20 ekor larva.
Tabel 2. Hasil uji biolarvasida
Hasil  uji  biolarvasida  ( Tabel  2 )  dilihat  dari  jumlah  larva  nyamuk  yang  mengalami kematian. Kematian larva tersebut terjadi karena senyawa-senyawa yang terkandung di dalam ekstrak  bereaksi.  Saponin  yang  terkandung  dalam  ekstrak  dapat  menurunkan  aktivitas  enzim pencernaan  dan  penyerapan  makanan  pada  larva.  Selain  itu,  saponin  juga  dapat  merusak membran  kutikula  pada  larva  sehingga  menyebabkan  kematian  terhadap  larva  (Pedro,  et al.2014:23-32).  Selain  saponin,  senyawa  lain  yang  dapat  berpotensi  dalam  kematian  larva  ini yaitu senyawa flavonoid dan tannin. Kedua senyawa ini dapat memberikan efek sebagai racun pernafasan sehingga system pernafasan larva mengalami kerusakan dan akhirnya menyebabkan kematian  terhadap  larva.  (Pradani.  2009:81-85)  Jumlah  kematian  larva  berbeda-beda  dan terlihat dari perbedaan konsentrasi yang digunakan. Pada kontrol negatif tidak terlihat kematian larva  nyamuk.  Sedangkan  pada  kontrol  positif,  ABATE  yang  digunakan  memiliki  aktivitas yang  kuat  untuk  menghambat  pertumbuhan  larva.  ABATE  ini  memiliki  mekanisme  yaitu menghambat  kerja  enzim  asetilkolinesterase  maupun  pseudokolinesterase  dengan  mencegah hidrolisa dan inaktifasi asetilkolin pada serabut saraf sehingga terjadi hambatan transmisi sinyal syaraf dan kerusakan pada sistem syaraf simpatis-parasimpatis, syaraf perifer dan syaraf pusat (Gholivand et al., 2014). Kemudian dilakukan analisis probit yang diperoleh dari tabel probit. Selanjutnya  dilakukan  penentuan  nilai  LC 50 dari  ekstrak  daun  angsana  terhadap  larva nyamuk dengan nilai y = 5 sehingga log konsentrasi yang  menyebabkan 50% kematian dapat diperoleh. Nilai y = 5 diperoleh dari 50% kematian larva nyamuk Culex, pada tabel probit nilai 50 dapat memberikan nilai 5. Nilai LC 50 ( Lethal Concentration 50) adalah konsentrasi senyawa atau  zat  yang  dapat  menyebabkan  kematian  pada  50%  hewan  uji.  Selain  itu  menurut  WHO (2005)  konsentrasi  larvasida  dianggap  efektif  apabila  dapat  menyebabkan  kematian  larva  uji antara  10-95%.  Berdasarkan  pernyataan  di  atas,  dapat  dikatakan  bahwa  ekstrak  daun  angsana efektif  sebagai  larvasida,  hal  ini  ditandai  dengan    pada  konsentrasi  0,5%  sudah  dapat memberikan efek kematian sebesar 48%. Kemudian hasil LC 50 yang diperoleh adalah 0,83 %. Hasil tersebut diperoleh dari persamaan regresi linier y = 3.8901x + 5.3135, dengan nilai R 2 = 0.081.  Dari  hasil  LC 50 yang  diperoleh,  dapat  dikatakan  bahwa  ektrak  daun  angsana  memiliki
toksisitas akut dan termasuk dalam kriteria “sangat beracun” terhadap hewan uji. Hal ini sesuai dengan pendapat Bernad dalam jurnal Ismatullah (2014), bahwa toksisitas akut yang dikatakan sangat  beracun  berada  pada  kisaran  <1%,  beracun  1-10%,  cukup  beracun  10-50%,  sedikit beracun 50-99% dan tidak beracun pada kisaran 100%.

## D. Kesimpulan
1. Dari  hasil  penelitian  yang  dilakukan  terhadap  larva  nyamuk  Culex  sp,  ekstrak  daun angsana  yang  digunakan  terdapat  senyawa  yang  berpotensi  sebagai  biolarvasida  di antaranya yaitu flavonoid, polifenolat, tannin, saponin.
2. Nilai konsentrasi LC50 ekstrak daun angsana adalah sebesar 0,83 %.

## E. Saran
Untuk dilakukan penelitian selanjutnya lebih baik digunakan jenis nyamuk yang berbeda, dan dilakukan  isolasi  terhadap  senyawa  yang  terkandung  agar  dapat  diketahui  senyawa  potensial yang dimiliki oleh daun angsana sebagai biolarvasida.

## Daftar Pustaka
[1] Ansel, H. 1989. Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi.Terjemahan Farida Ibrahim.Jakarta: Universitas Indonesia Press.
[2] Direktorat  Pembenihan  Tanaman  Hutan.(2002).  Pterocarpus  indicus  Willd.  Dorthe Joker.Bandung. No.22
[3] Gholivand, K., Valmoozi, A.A.E., and Bonsali, M. 2014. Synthesis and crystal structure of new abate analogue as cholinesterase inhibitor: molecular docking, QSAR Study, and hydrogen bonding analysis of solid state. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 62(25), p.5761-5771.
[4] Haeni, I. N. 2008. Uji Laboratorium Pemberian Insect Growth Regulator Pyriproxyfen terhadap  Pertumbuhan  dan  Perkembangan  Larva  Aedes  aegypti  dan  Aedes  albopictus Asal  Bantul.  Daerah  Istimewa  Yogyakarta.[Tesis].  Universitas  Gajah  Mada: Yogyakarta.
[5] Ismatullah,  A.  2014.  Uji  Efektivitas  Larvasida  Ekstrak  Daun  Binahong  (Anredera cordifolia (Ten) Steenis) terhadap Larva Aedes Aegypri Instar III. Fakultas Kedokteran Universitas Lampung, Lampung
[6] Junanto,  T.,  Sutarno,  dan  Supriyadi  2008.  Aktivitas  Antimikroba  Ekstrak  Angsana (Pterocarpus  indicus  Willd)  terhadap  Bacillus  subtilis  dan  Klebsiella  pneumonia. Bioteknologi 5(2): 63-69. ISSN: 0216-6887.
[7] Nofyan Erwin, Hanifa Marisa, dan Mustafa Kamal. 2013. Eksplorasi Biolarvasida Dari Tumbuhan  Untuk  Pengendalian  Larva  Nyamuk  Aedes  aegypti  Di  Sumatera  Selatan. Prosiding Semirata FMIPA Universitas Lampung.
[8] Pedro  M.  Gutierrez,  Aubrey  N  A,  Bryle  Adrian  L.,Eugenio,  and  Santos  MFL.  2014. Larvicidal  Activity  of  Selected  Plant  Extracts  against  the  Dengue  vector  Aedes aegyptiMosquito. Int. Res. Journal BiologicalSci3(4), 23-32.
[9] Pradani F. Y. 2009.Indeks Pertumbuhan Larva Aedes aegyptiL. Yang Terdedah Dalam Ekstrak  Air  Kulit  Jengkol  (Pithecellobium  lobatum).  Jurnal  Kesehatan1(2):  81- 85Widoyono. Penyakit Tropis: Epidemiologi, Penularan, Pencegahan dan Pemberantasannya,II. Jakarta: Erlangga, 2008.
[10] Sutanto, Inge, Ismid, S., Syarifudin P., Saleha, Sungkar. 2008. Parasitologi Kedokteran. Edisi Keempat. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia.
[11] Widoyono. Penyakit Tropis: Epidemiologi, Penularan, Pencegahan dan Pemberantasannya, II. Jakarta: Erlangga, 2008.
[12] World  Health  Organization.  2005.  Guidelines  for  Laboratory  and  Field  Testing  of Mosquito Larvicides. Geneva