## PROFIL GC-MS DARI EKSTRAK DAUN RHIZOPHORA APICULATA DARI PESISIR TELUK TOMINI, SULAWESI TENGAH DENGAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN ANTIOKSIDAN
GC-MS PROFILE OF RHIZOPHORA APICULATA LEAF EXTRACT FROM THE COAST OF TOMINI BAY, CENTRAL SULAWESI WITH ANTIBACTERIAL AND ANTIOXIDANT ACTIVITY
Didit Kustantio Dewanto 1* , Roni Hermawan 1 , Muliadin 1 , Putut Har Riyadi 2 , Siti Aisiah 3 , dan Wendy Alexander Tanod 4 *
1 Sekolah Tinggi Perikanan dan Kelautan – STPL Palu, Palu Jalan Soekarno Hatta KM. 6 Kampus Madani, Palu, 94118 Sulawesi Tengah
2 Departemen Teknologi Hasil Perikanan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Diponegoro, Jalan Prof. Soedarto, SH Tembalang, Semarang, 50275 Jawa Tengah
3 Program Studi Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Kelautan, Universitas Lambung Mangkurat, Jalan Ahmad Yani KM 36, SH Banjarbaru, 70714 Kalimantan Selatan
4 Jurusan Perikanan dan Kebaharian, Politeknik Negeri Nusa Utara Jalan Kesehatan No.1, Sawang Bendar, Tahuna, 95812, Sulawesi Utara
*Corresponding author email: wendytanod@gmail.com
Submitted: 30 October 2020 / Revised: 20 March 2021 / Accepted: 28 April 2021 http://doi.org/10.21107/jk.v14i1.8904

## ABSTRACT
Mangroves are plants with good tolerance to salinity changes, developing a chemical defense system with  pharmacological  value.  This  study  aimed  to  obtain  a  GC-MS  profiles  of  Rhizophora  apiculata mangrove  leaves  extract,  which  could  scavenge  DPPH  radicals  and  inhibit  the  growth  of  Listeria monocytogenes,  Salmonella  typhimurium,  and  Pseudomonas  aeruginosa.  The  research  included sampling,  extraction  (maceration  with  MeOH:DCM),  identification  of  chemical  profiles  using  GC-MS spectra  analysis,  assaying  for  antibacterial  activity  (well  diffusion  method),  and  antioxidants  (DPPH radical  scavenging).  Mangrove  leaves  sampling  was  carried  out  on  Laemanta,  Parigi  Moutong, Central Sulawesi. Based on the leaves’ characteristics and tips, the types of roots, fruits, and flowers, the  mangrove  leave  samples  were  identified  as  R.  apiculata.  The  GC-MS  profiles  of  R.  apiculata leaves  extract  was  dominated  by  mome  inositol  (75.6%).  The  antibacterial  assay  showed  at  a concentration  of  100  mg/mL  of  R.  apiculata  leaves  extract  showed  weak  to  strong  antibacterial activity, with the inhibition  zone diameter of  P. aeruginosa (1.22 ± 0.39 mm),  S. typhimurium (3.00 ± 1.20  mm),  and  L.  monocytogenes  (17.22  ±  1.26  mm).  The  leaves  extract  of  R.  apiculata  showed antioxidant  activity,  with  an  IC 50 value  of  96.68  ±  0.68  µg/mL.  Based  on  the  results,  the  mangrove leaves  of  R.  apiculata  extracts  showed  potential  antibacterial  and  antioxidant  activity.  This  study indicated that  R. apiculata from Central Sulawesi were potential  mangroves to discover and develop antibacterial and antioxidant agents.
Keywords: GC-MS, Listeria monocytogenes, Parigi Moutong, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium.

## ABSTRAK
Mangrove  merupakan  tumbuhan  dengan  toleransi  baik  terhadap  perubahan  salinitas,  sehingga mengembangkan  suatu  sistem  pertahanan  kimia  yang  bernilai  farmakologis.  Penelitian  ini  bertujuan mendapatkan profil senyawa dengan GC-MS dari ekstrak daun mangrove Rhizophora apiculata yang dapat menangkap radikal DPPH dan menghambat pertumbuhan Listeria monocytogenes, Salmonella typhimurium, dan Pseudomonas aeruginosa. Penelitian meliputi pengambilan sampel, ekstraksi daun mangrove  (maserasi  dengan  MeOH:DCM),  identifikasi  profil  senyawa  dengan  analisis  spektra  GC- MS,  pengujian  aktivitas  antibakteri  (metode  difusi  sumur)  dan  antioksidan  (penangkapan  radikal DPPH). Pengambilan sampel daun mangrove dilakukan di pesisir Desa Laemanta, Kabupaten Parigi Moutong, Sulawesi Tengah. Berdasarkan karakteristik bentuk dan ujung daun, jenis akar, buah, dan
bunga, sampel daun mangrove terindentifikasi  Rhizophora apiculata. Profil GC-MS dari ekstrak daun R.  apiculata  didominasi  oleh  senyawa  mome  inositol  (75,6%).  Hasil  pengujian  antibakteri  pada konsentrasi  100  mg/mL  ekstrak  daun  R.  apiculata  menunjukkan  aktivitas  antibakteri  yang  lemah sampai  kuat,  dengan  diameter  zona  hambat  pada  P.  aeruginosa  (1,22  ±  0,39  mm),  dan  S. typhimurium  (3,00  ±  1,20  mm),  L.  monocytogenes  (17,22  ±  1,26  mm).  Ekstrak  daun  R.  apiculata menunjukkan aktivitas antioksidan dengan nilai IC 50 sebesar 96.68 ± 0.68 µg/mL.  Berdasarkan hasil pengujian  ekstrak  daun  mangrove  R.  apiculata  menunjukkan  aktivitas  antibakteri  dan  antioksidan. Penelitian  ini  mengindikasikan  bahwa  R.  apiculata  asal  Sulawesi  Tengah  menjadi  mangrove  yang potensial dijadikan sebagai agen antibakteri dan antioksidan.
Kata  Kunci:  GC-MS,  Listeria  monocytogenes,  Parigi  Moutong,  Pseudomonas  aeruginosa, Salmonella typhimurium.

## PENDAHULUAN
Mangrove merupakan tumbuhan yang tumbuh di  hutan  tropis  dan  banyak  dimanfaatkan sebagai  sumber  kayu,  bahan  makanan,  dan pakan ternak (Bandaranayake, 2002). Tumbuhan mangrove memiliki banyak manfaat bagi  kehidupan  manusia,  mulai  dari  manfaat ekologi  hingga  manfaat  sebagai  sumber makanan  dan  farmasi  (Nurjanah et al .,  2015). Mangrove  merupakan  salah  satu  vegetasi hutan  tropis  dan  pemanfaatan  terkait  potensi substansi bioaktifnya yang bernilai farmasetikal (Latief et al ., 2015) belum banyak dilakukan.  Mangrove  merupakan  tumbuhan dengan  toleransi  baik  terhadap  perubahan salinitas,  tumbuh  di  daerah  muara  sungai  dan daerah intertidal tropis dan subtropis. Mangrove beradaptasi  terhadap  tekanan lingkungan  dengan  mengembangkan  suatu sistem  pertahanan  kimia  yang  memiliki aktivitas  biologis  (Agoramoorthy et  al .,  2008 dan  Jithesh et  al .,  2006).  Hasil  penelitian melaporkan  mangrove  menunjukkan  respons antibakteri  karena  mengandung  komponen alkaloid, minyak atsiri, asam fenolik, flavonoid, kuinin, tannin, dan terpenoid (Ravikumar et al .,
2010 dan Jithesh et al ., 2006). Selain itu, telah dilaporkan  sekitar  349  metabolit  dari  ekstrak mangrove bernilai farmakologis, seperti antibakteri dan antioksidan (Prabhu & Guruvayoorappan, 2012).
Antibakteri merupakan substansi yang digunakan untuk mengendalikan pertumbuhan bakteri  patogen.  Mekanisme  penghambatan terhadap  pertumbuhan  bakteri  oleh  bahan antibakteri dapat berupa perusakan dinding sel dengan  cara  menghambat  pembentukannya atau  mengubahnya  setelah  selesai  terbentuk, perubahan  membran  sitoplasma  sehingga menyebabkan keluarnya bahan inti dari dalam sel,  perubahan  molekul  protein  dan  asam nukleat,  penghambatan  kerja  enzim,  dan penghambatan  sintesis  asam  nukleat  dan protein  (WHO,  2014).  Substansi  antibakteri dapat bekerja secara bakteriostatik, bakteriosidal,  dan  bakteriolitik  berdasarkan
sifat  toksisitas  selektifnya  (Parekh  &  Chanda, 2007).  Hasil  penelitian  telah  melaporkan munculnya strain bakteri yang  resisten terhadap  agen  antimikroba  yang  telah  ada (Levy  &  Marshall,  2004).  Resistensi  terhadap agen antibakteri meningkatkan risiko ancaman terhadap  kesehatan  manusia  dari  bakteri patogen.
Antioksidan  merupakan  substansi  yang  dapat menghambat  atau  mencegah  oksidasi  sel (Halliwell  &  Whiteman,  2004).  Antioksidan berfungsi  melindungi  sel  dari  kerusakan  yang disebabkan oleh radikal bebas karena subtansi antioksidan dapat memberikan elektronnya  pada  molekul  radikal  bebas  agar menjadi  stabil  (Lobo et  al .,  2010  dan  Pham- Huy et  al .,  2008).  Antioksidan  merupakan substansi  yang  penting  bagi  kesehatan manusia.  Substansi  antioksidan  penunjang kesehatan manusia terhadap berbagai macam penyakit, seperti arterosklerosis, kardiovaskular, menghambat proses aging dan pengobatan  dalam  terapi  kanker  (Loo et  al .,
2007).  Moskovitz,  Yim,  &  Chock  (2002) menyatakan  penyakit  manusia  seperti  aging, kanker, inflamasi, kardiovaskular dan neurodegenerative  erat  hubungannya  dengan oksidasi sel karena radikal bebas. Oleh karena itu,  substansi  antioksidan  sangat  dibutuhkan sebagai  suplemen  dalam  melindungi  tubuh serta  membantu  menyembuhkan  beragam penyakit manusia (Gao & Xiao, 2012).
Propinsi  Sulawesi Tengah  memiliki  luas hutan mangrove sebesar 26.536,1 Ha yang tersebar di Kabupaten Donggala, Poso, Banggai, Buol, Toli-Toli, Morowali, Banggai Kepulauan, Touna dan  Parigi  Moutong  (Jabir,  2014).  Penelitian sebelumnya telah melaporkan potensi antibakteri  dan  antioksidan  dari  ekstrak  daun mangrove  yang  dikoleksi  dari  Teluk  Palu, Sulawesi Tengah, yaitu  potensi ekstrak  etanol dan  etil  asetat  daun  mangrove Avicennia sp. yang  menunjukkan  aktivitas  antibakteri  yang moderat terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus  aureus (Alhaddad et  al .,
2019),  dan  potensi  antioksidan  moderat
sampai  sangat  kuat  dari  ekstrak  etanol  daun mangrove Rhizophora sp., Sonneratia sp., dan Avicennia sp.,  yang  dikoleksi  dari  Teluk  Palu dengan  nilai  IC 50 46.05  ±  0.18  sampai  103.95 ±  0.38  µg/ml  (Dewanto et  al .,  2018).  Akan tetapi, potensi antibakteri dan  antioksidan dari mangrove  yang  dikoleksi  dari  pesisir  Teluk Tomini,  kabupaten  Parigi  Moutong,  Sulawesi Tengah  belum  pernah  dilaporkan.  Damanik  & Djamaludin  (2012)  melaporkan  luas  vegetasi mangrove  Tahun  2010  di  kabupaten  Parigi Moutong  3.127,98  Ha.  Salah  satu  jenis mangrove  yang  vegetasinya  tersebar  di kabupaten  Parigi  Moutong,  yaitu Rhizophora apiculata (Naharuddin,  2020  dan  Lisna et  al ., 2017).
Oleh  karena  itu,  penelitian  ini  mengevaluasi potensi  antibakteri  dan  antioksidan  ekstrak daun  mangrove Rhizophora apiculata yang dikoleksi dari pesisir Teluk Tomini. Perbedaan lokasi sampling daun mangrove dapat mempengaruhi  potensi  aktivitas  biologis  dan komposisi substansi  bioaktif  dari suatu organisme (Cheng & Cheng, 2015 dan Mudgal et al .,  2013).  Dengan  melihat  manfaat  dan potensi  mangrove  yang  dikoleksi  dari  pesisir pantai Sulawesi Tengah, maka tujuan penelitian  ini, yaitu mendapatkan profil senyawa  ekstrak  daun  mangrove R.  apiculata yang  menunjukkan  aktivitas  antioksidan  dan menghambat  pertumbuhan  bakteri  patogen Listeria monocytogenes , Salmonella typhimurium , dan Pseudomonas aeruginosa .

## MATERI DAN METODE Lokasi Pengambilan Sampel
Teluk  Tomini  merupakan  salah  satu  teluk terbesar  di  Indonesia,  dengan  luas  perairan kira-kira  6  juta  Ha  (Damanik  &  Rignolda, 2012).  Teluk  Tomini  dikelilingi  oleh  3  wilayah provinsi,  yaitu  Sulawesi  Utara,  Gorontalo,  dan Sulawesi  Tengah  dan  14  kabupaten/kota. Kabupaten  Parigi  Moutong  merupakan  salah satu  Kabupaten  yang  terletak  di  Sulawesi Tengah,  Indonesia  dan  memiliki  vegetasi hutan  mangrove.  Pengambilan  sampel  daun mangrove R.  apiculata dikoleksi  dari  wilayah pesisir  Teluk  Tomini  di  Desa  Laemanta, Kabupaten  Parigi  Moutong,  Sulawesi  Tengah, Indonesia  pada  koordinat 0°11’05.6”  LS  dan 120°00’32.9” BT.

## Bahan yang Digunakan
Nutrient  agar  (Merck),  nutrient  broth  (Merck), bacteriological  agar  (Hi-media),  akuades, diklorometana  (Merck),  metanol  (Merck),  1,1- Diphenyl-2-picrylhydrazyl, radikal bebas (DPPH,  Merck),  asam  galat,  Na 2 CO 3 yang
dibeli  dari  CV.  Amani  Media  Malang  and  CV. Intraco Makassar, Indonesia.

## Sampel Daun Mangrove
Pengambilan  sampel  daun  mangrove R. apiculata dilakukan  pada  bulan  April  2020 pada  kondisi  cuaca  cerah  dan  cahaya matahari terik. Sampel daun mangrove diambil secara  acak  dari  satu  pohon  mangrove R. apiculata . Identifikasi mangrove menggunakan pedoman Noor et al .,  (2006) dengan mengamati  karakteristik  bentuk,  ujung  daun, jenis akar, buah, dan bunga.

## Ekstraksi
Sebanyak  500  g  sampel  daun  mangrove R. apiculata dikeringkan  dengan  menggunakan oven  (Finco  OV50)  pada  suhu  60 o C.  Setelah kering,  sampel  dihaluskan  sampai  menjadi tepung.  Lalu  100  g  tepung  daun R.  apiculata dimaserasi  dalam  metanol:  diklorometana  (1:
1) selama 48 jam (Putra et al ., 2016 dan Hsiao et  al .,  2015).  Setelah  itu  disaring  dan dikeringkan dengan Rotary Vacuum
Evaporator (EYELA N-1100). Proses maserasi dilakukan  sebanyak  tiga  kali.  Kemudian, ekstrak  yang  telah  kering,  ditimbang  dan dsimpan dalam lemari pendingin.

## Skrining Profil Kimia dengan GC-MS
Profil  kimia  dari  ekstrak  daun  mangrove R. apiculata diskrining menggunakan Gas Chromatography  Mass  Spectrometry-GCMS (Hewlett-Packard 6890), dengan kolom Agilent 19091S-433  HP-5MS  yang  memiliki  panjang 30  m  dan  diameter  250  µm.  Sebanyak  1  µL ekstrak  daun R.  apiculata (dilarutkan  dengan metanol)  diinjeksikan  ke  GC-MS.  Gas  helium digunakan sebagai gas pembawa dengan laju alir  1  mL/menit  dan  suhu  oven  diatur  pada 325°C.  Suhu  oven  awal  adalah  150°C  yang ditahan  pada  2°C/menit.  Prosesi  ini  berjalan selama 10°C/menit dan kemudian ditingkatkan menjadi 240°C dengan waktu tahan selama 11 menit.  Total  waktu  yang  berjalan  adalah  22 menit dengan rentang pemindaian adalah 50 - 550  amu.  Skrining  profil  struktur  kimia didasarkan  pada  analisis  pola  fragmentasi spektrum  massa  dan  dibandingkan  dengan spektrum massa pada database profil senyawa  National  Institute  of  Standards  and Technology (NIST) dan Wiley.

## Pengujian Antibakteri
Aktivitas  antibakteri  menggunakan  metode difusi  sumur  pada  cawan  petri  seperti  yang ditunjukkan  oleh  Balouiri et  al .  (2016)  dengan
modifikasi. Modifikasi dilakukan dengan menambahkan  komposisi  nutrient  agar  dari  2 g dengan 2 g agar bakteriologis dalam 100 mL akuades  sebagai  media  dasar.  Metode  difusi sumur menggunakan dua lapisan media, yaitu lapisan  media  dasar  dan  lapisan  media pembenihan. Media dasar dibuat dengan cara melarutkan nutrient agar dan agar bakteriologis,  lalu  disterilkan  dan  dituang  ke cawan  petri.  Lapisan  media  pembenihan dibuat  dari  70%  nutrient  agar  dalam  100  mL akuades,  kemudian  dimasukkan  ke  dalam tabung berisi 9 mL, dan disterilkan. Selanjutnya,  pada  media  pembenihan  hangat ditambahkan  1  mL  bakteri  uji  dengan kepadatan  1×10 7 Koloni/mL  (larutan  bakteri dibandingkan dengan larutan standar McFarland-Hi-media).
Isolat Listeria monocytogenes ATCC  49594, Pseudomonas aeruginosa ATCC  27853,  dan Salmonella typhimurium ATCC  13311,  diperoleh  dari
Laboratorium Mikrobiologi Fakultas
Kedokteran  Universitas  Brawijaya  Malang. Media  pembenihan  yang  telah  ditambahkan bakteri  uji  divorteks,  lalu  dituang  ke  atas lapisan  media  dasar.  Setelah  media  agak mengeras,  dibuat  lubang  sumur  dengan  jarak tertentu.  Pada  masing-masing  sumur  diisi  50 µL  ekstrak  daun R.  apiculata dengan konsentrasi 50, 100, 200, 300 dan 400 mg/mL, dan  diinkubasi  pada  suhu  37ºC  selama  24 jam.  Ciprofloxacin  10  mg/mL  dan  Pine  Oil  1% digunakan sebagai kontrol pembanding. Setelah itu diamati dan diukur zona hambatnya. Semua data pengukuran eksperimental  dilakukan  dalam  tiga  ulangan dan  dinyatakan  sebagai  mean  ±  standar deviasi (n = 3). Hasil pengukuran zona hambat dievaluasi berdasarkan nilai Minimum Inhibitory  Concentration (MIC)  dan Minimum Bactericidal  Concentration (MBC)  dengan metode Bloomfield (1991). Nilai MIC ditentukan  dengan  memplotkan  antara  ln konsentrasi ekstrak pada sumbu x, sedangkan pada  sumbu  y  merupakan  nilai  kuadrat  zona hambat. Perpotongan dari regresi linier y = a + bx dengan sumbu x sebagai nilai Mt. Nilai MIC adalah  0,25  ×  Mt  dan  nilai  MBC  adalah  4  × MIC.

## Pengujian Antioksidan
Aktivitas antioksidan ditentukan menggunakan metode  penangkapan  radikal  bebas  DPPH (Dewanto et al .,  2018  dan  Molyneux,  2004). Sebanyak  25  mg  ekstrak  daun R.  apiculata yang ditempatkan dalam wadah. Lalu, ditambahkan  etanol  sebanyak  125  mL, sehingga  diperoleh  konsentrasi  ekstrak  200 µg/mL.  Setelah  itu,  dibuat  seri  pengenceran
20,  40,  60,  80,  100  µg/mL.  Sebuah  alikuot  2 mL  dari  larutan  ekstrak  dari  tiap  konsentrasi ditambahkan  ke  2  mL  larutan  DPPH  50  μM. Campuran  dihomogenisasi  dan  dibiarkan selama  30  menit  dalam  ruangan  gelap  pada suhu  ruang,  sebelum  dilakukan  pengukuran penyerapan  radikal  bebas  pada  panjang gelombang  517  nm  dengan  Spektrofotometer (UV-VIS spectrophotometer T90+ PG
Instruments  Ltd).  Nilai  absorbansi  larutan DPPH juga diukur dan ditentukan berdasarkan nilai  IC 50 ( The  half  maximal  inhibitory concentration ).  Vitamin  E  digunakan  sebagai kontrol  pembanding.  Lalu,  persentase  inhibisi diplot  pada  sumbu  y  dan  sumbu  x  sebagai konsentrasi  ekstrak  yang  dilarutkan,  untuk memperoleh persamaan regresi linier (y=a+bx). Nilai  IC 50 ditentukan  sebagai konsentrasi  larutan  ekstrak  yang  diperlukan untuk  menangkap  radikal  bebas  DPPH sebesar  50%.  Pengujian  dilakukan  dengan tiga  kali  pengulangan  dan  hasil  pengukuran diekspresikan dengan standar deviasi.
Persentase inhibisi sampel dihitung menggunakan persamaan:

## Persentase Inhibisi (%) =
Absorbansi blanko   ̶  absorbansi sampel
Absorbansi blanko × 100%..........1

## Pengujian Kandungan Total Fenol
Kandungan  total  fenol  ekstrak  daun R. apiculata dievaluasi  berdasarkan metode Folin –Ciocalteu (Lamuela-Raventós, 2017 dan Blainski et al .,  2013).  Tahap  pertama  adalah pembuatan  kurva  standar  asam  galat,  yaitu sebanyak  25  mg  asam  galat  ditimbang,  lalu dilarutkan  dengan  etanol:  air  (1:1)  sampai volume  25  mL.  Larutan  asam  galat  dibuat dengan  konsentrasi  seri  pengenceran  5,  20, 40,  60,  80,  dan  100  mg/L.  Tiap  konsentrasi pengenceran  asam  galat  diambil  1  mL  dan ditambahkan  10  mL  aquadest.  Kemudian ditambahkan  1  mL  reagen  Folin –Ciocalteu (homogenisasi). Setelah itu, didiamkan selama 8  menit,  lalu  ditambahkan  3  mL  larutan Na 2 CO 3 20% (homogenisasi). Kemudian didiamkan  selama  2  jam  pada  suhu  ruangan. Nilai absorbansi diukur pada panjang gelombang 750 nm. Kurva standar asam galat dibuat  dengan  konsentrasi  asam  galat  (mg/L) dengan nilai absorbansi.
Tahap  kedua,  yaitu  sebanyak  25  mg  ekstrak daun R.  apiculata dilarutkan  dengan  25  mL larutan etanol: air (1:1).  Kemudian dari larutan ekstrak, diambil 1 mL dan ditambahkan 10 mL aquadest  +  1  mL  reagen  Folin –Ciocalteu (homogenisasi). Setelah itu didiamkan selama
8  menit  dan  ditambahkan  3  ml  Na 2 CO 3 20% (didiamkan  selama  2  jam  pada  suhu  ruang). Kemudian  diukur  nilai  absorbasi  dari  ekstrak dengan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 750 nm yang memberikan warna  biru.  Total  fenolik  ditentukan  dengan menggunakan persamaan regresi kurva standar asam galat.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Karakteristik Sampel
Berdasarkan  karakteristik  bentuk  dan  ujung daun,  jenis  akar,  buah  dan  bunga,  maka sampel daun mangrove yang digunakan dalam penelitian ini  diidentifikasi sebagai Rhizophora apiculata . Pohon R. apiculata dapat mencapai ketinggian  30  m  dengan  diameter  batang mencapai  50  cm.  Sistem  perakaran R. apiculata memiliki  bentuk  yang  khas  hingga mencapai ketinggian 5 m, dan kadang-kadang memiliki  akar  udara  yang  keluar  dari  cabang. Kulit  kayu  berwarna  abu-abu  tua.  Daun R. apiculata seperti  berkulit,  berwarna  hijau  tua dengan  hijau  muda  pada  bagian  tengah. Panjang  gagang  daun R.  apiculata berukuran 17-35 mm dan warnanya kemerahan. Daun R. apiculata berbentuk  elips  menyempit,  dengan ujung  meruncing  dan  berukuran  7-19  ×  3,5-8 cm.  Kepala  bunga R.  apiculata kekuningan yang  terletak  pada  gagang  berukuran  kurang dari  1,4  cm,  dan  berjumlah  2  bunga  per kelompok. Daun mahkota R. apiculata berjumlah 4; berwarma kuning-putih, tidak ada rambut,  dan  panjangnya  0,9-1,1  cm.  Kelopak
bunga berjumlah 4, berwarna kuning kecoklatan dan melengkung.

## Profil  Kimia  Ekstrak  Daun  Mangrove Rhizophora apiculata
Hasil  skrining  profil  kimia  ekstrak  daun R. apiculata menggunakan  GC-MS  terdeteksi  35 puncak (29 senyawa), dengan rentang retensi time 2.756 - 21.907 menit. Akan tetapi, hanya terdapat  13  puncak  (10  senyawa)  dengan kualitas  di  atas  85%.  Skrining  profil  kimia ekstrak  daun R.  apiculata didominasi  oleh senyawa  mome  inositol  (75.6%).  Mome inositol  merupakan  senyawa  yang  banyak terdapat  di  tumbuhan  hijau.  Senyawa  turunan inositol  dilaporkan  merupakan  konstituen utama  dari  famili  Rhizophoraceae  (Richter et al .,  1990).  Konstituen  turunan  inositol  juga telah  dilaporkan  dari R.  mucronata dan R. sytlosa dengan  sifat  antiviral,  antiulcer  dan antidiabetes  (Usman et  al .,  2019;  Revathi et al ., 2014; Arora et al ., 2014; dan Bandaranayake, 2002). Mome inositol merupakan  senyawa  yang  umum  terkandung dalam ekstrak tumbuhan dengan sifat antibakteri  dan  antioksidan  (Sivakumar,  2019; Sunita  &  Manju,  2017;  dan  Venkata et  al .,
2012).  Selain  itu,    mome  inositol  dilaporkan sebagai anti-alopecic, anti-sirosis, anti- neuropatik, kolesterolitik, lipotropik dan pemanis (Das et al ., 2014). Hasil skrining profil kimia  ekstrak  daun R.  apiculata dengan  GC- MS dapat dilihat pada Tabel 1 .
Tabel 1 . Skrining profil kimia ekstrak daun Rhizophora apiculata dengan GC-MS
No Nama Senyawa Formula Berat Molekul (g/mol) Waktu Retensi (Menit) Area (%) Kualitas (%) 1 3-fluoro-2,5-dimethyl-2,4-hexadien C 6 H 8 OS 128,19 3,562 1,13 86 2 2-Furancarboxaldehyde, 5- (hydroxymethyl)- C 7 H 7 FO 126,13 5,815 0,17 94 3 2,6-Octadien-1-ol, 3,7-dimethyl- C 10 H 18 O 154,25 6,037 1,11 94 6,181 0,48 94 4 Phenol, 2-propyl- C 9 H 12 O 136,19 7,780 0,59 86 5 1,4-benzenediol, 2-(1-methylpropyl)- C 10 H 14 O 2 166,22 8,969 0,08 90 6 Trans-isoelemicin C 12 H 16 O 3 208,25 11,983 0,35 86 7 Mome inositol C 6 H 12 O 6 180,16 13,859 18,47 87 14,368 23,71 92 14,674 33,42 92 9 Neophytadiene C 20 H 38 278,50 17,518 1,43 91 18,617 0,37 89 10  Pentadecanoic acid, 14-methyl-, methyl ester C 17 H 34 O 2 270,50 21,907 1,21 99

## Aktivitas Antibakteri
Evaluasi aktivitas antibakteri dari ekstrak daun R.  apiculata dilakukan  dengan  mengamati zona  hambat  yang  terbentuk  dari  isolat L.
monocytogenes , S.  typhimurium ,  dan P. aeruginosa .  Hasil  pengukuran  diameter  zona hambat  dari  ekstrak  daun  mangrove R. apiculata dibandingkan  dengan  kontrol  dapat dilihat pada Gambar 1 .
Listeria monocytogenes
Salmonella typhimurium Pseudomonas aeruginosa
Gambar 1 . Diameter Zona Hambat dari Ekstrak Daun Mangrove R. apiculata Ekstrak daun mangrove R. apiculata menunjukkan  ukuran  zona  hambat  yang beragam terhadap pertumbuhan L. monocytogenes , S.  typhimurium dan P. aeruginosa .  Menurut  kategori  zona  hambat oleh  Paudel et  al .  (2014),  terdapat  empat kategori  aktivitas  antibakteri:  sangat  kuat
(zona hambat ø >20 mm), kuat (zona hambat, ø  15-20  mm),  moderat  (zona  hambat  ø  10-15 mm),  dan  lemah  (zona  hambat  ø  <10  mm). Ekstrak daun mangrove R. apiculata menunjukkan  potensi  antibakteri  dari  sangat kuat  hingga  lemah  terhadap  bakteri L.
monocytogenes , S.  typhimurium dan P. aeruginosa .
Gambar  1 menunjukkan  ekstrak  daun R. apiculata lebih kuat menghambat pertumbuhan  bakteri  gram  positif,  yaitu L. monocytogenes daripada bakteri gram negatif, yaitu S. typhimurium dan P. aeruginosa . Hal ini diduga  karena  bakteri  gram  negatif  memiliki lapisan  tambahan  pada  struktur  dinding  sel yang dikenal dengan membran luar. Membran ini  tersusun  atas  lipopolisakarida  (LPS), matriks  porin,  dan  lipoprotein.  Membran khusus  molekul  protein  (porin)  pada  bakteri gram  negatif  dapat  memfasilitasi  difusi  pasif senyawa  hidrofilik  dengan  berat  molekul rendah.  Molekul  yang  bersifat  hidrofilik  lebih mudah  melewati  LPS  daripada  yang  bersifat hidrofobik  (Jawetz et  al .,  2005).  Bakteri  gram negatif memiliki ujung hidrofilik yaitu karboksil,
asam  amino,  dan  hidroksil  sehingga  bakteri gram negatif peka terhadap senyawa antibakteri  polar  (Madigan et  al .,  2000). Resistensi  bakteri  gram  negatif  dan  gram positif  terhadap  senyawa  antibakteri  berbeda. Bakteri gram negatif umumnya sensitif terhadap senyawa antibakteri polar, sedangkan  bakteri  gram  positif  lebih  sensitif terhadap senyawa antibakteri non-polar (Brannen  &  Davidson,  1993).  Perbedaan sensitivitas  bakteri  gram  positif  dan  gram negatif  berkaitan  dengan  struktur  di  dalam dinding  sel,  seperti  ketebalan  peptidoglikan (adanya  reseptor,  pori,  dan  lipid),  sifat  ikatan silang, dan aktivitas enzim autolitik. Komponen tersebut  merupakan  faktor  yang  menentukan penetrasi,  pengikatan,  dan  aktivitas  senyawa antibakteri  (Tanod et  al .,  2018).  Evaluasi  MIC dan  MBC  ekstrak  daun R.  apiculata terhadap tiga bakteri uji disajikan pada Tabel 2 .
Tabel  2 .  MIC  and  MBC  Ekstrak  Daun  Mangrove Rhizophora  apiculata terhadap  Bakteri  Uji  dengan Metode Bloomfield
Bakteri Uji Persamaan regresi R 2 MIC (mg/mL) MBC (mg/mL) Listeria monocytogenes y = 148.79x – 380.61 0.96 0.64 2.56 Salmonella typhimurium y = 39.364x – 165.08 0.77 1.05 4.19 Pseudomonas aeruginosa y = 6.4161x – 26.825 0.74 1.05 4.18 Tabel  2 menunjukkan  terdapat  perbedaan minimum inhibitory concentration dan minimum  bacteriocidal  concentration  antara bakteri uji. Perbedaan ini disebabkan perbedaan  komposisi  dinding  sel.  Bakteri L. monocytogenes merupakan  bakteri  Gram positif,  sedangkan S.  typhimurium dan P. aeruginosa termasuk  bakteri  Gram  negatif. Bakteri  Gram  postitif  memiliki  dinding  sel dengan lapisan peptidoglikan tebal yang relatif mudah rusak, sehingga agen antibakteri dapat melewatinya dengan cukup mudah. Sedangkan pada bakteri Gram negatif meskipun  dinding  selnya  memiliki  lapisan peptidoglikan  yang tipis, akan tetapi  dilindungi oleh  membran  luar.  Membran  luar  pada bakteri  Gram-negatif  menjadi  penghalang yang efektif, mengatur jalannya molekul besar seperti  agen  antibakteri  ke  dalam  sel. Sebaliknya, lapisan peptidoglikan berpori yang tebal  pada  dinding  sel  bakteri  Gram-positif memberikan  akses  yang  lebih  besar  ke  agen antibakteri (Breijyeh et al., 2020; Zhang et al ., 2018; Mai-Prochnow et al ., 2016).
Pengujian  aktivitas  antibakteri  pada  penelitian ini  menggunakan  ciprofloxacin  10  mg/mL  dan pine  oil  1%  sebagai  kontrol  pembanding. Ciprofloxacin 10 mg/mL menunjukkan kemampuan  menghambat  ketiga  bakteri  uji dengan  kategori  sangat  kuat.  Ciprofloxacin
merupakan  agen  antibakteri  yang  termasuk golongan  fluorokuinolonagen.  Ciprofloxacin bersifat  stabil  dan  berdifusi  dengan  baik  pada media  agar.  Ciprofloxacin  merupakan  agen antibakteri spektrum luas dan dapat menghambat  sebagian  besar  jenis  bakteri patogen (Jin et al ., 2019). Ciprofloxacin efektif melawan  bakteri  Gram-negatif,  tetapi  kurang efektif  melawan  bakteri  Gram-positif  (Marfuati et  al .,  2017).  Chalkley  &  Koornhof  (1985) melaporkan  ciprofloxacin  dapat  membunuh S. aureus pada konsentrasi 0.5 µg/mL. Ciprofloxacin  dilaporkan  dapat  menghambat pertumbuhan E.  coli , S.  aureus ,  dan P. aueruginosa (Mughal et al ., 2009), sedangkan
(Masadeh et al ., 2014) melaporkan ciprofloxacin menghambat E. coli dengan baik.
Bila dibandingkan dengan ekstrak R. apiculata , hasil pengujian menunjukkan ekstrak  daun R.  apiculata dapat  menghambat dengan baik L. monocytogenes yang merupakan  bakteri  Gram  positif.  Hal  ini didukung dengan hasil penelitian yang melaporkan  ekstrak  pranajiwa  ( Euchresta horsfieldii )  yang  didominasi  oleh  senyawa mome  inositol,  efektif  dalam  menghambat bakteri  Gram  positif Staphylococcus  aureus (Prihantini et  al .,  2018).  Pine  oil  merupakan bahan  aktif  dari  tumbuhan  pinus.  Fekih et  al .
(2014)  melaporkan  minyak  dari  tumbuhan
pinus
didominasi oleh
senyawa monoterpenoid.  Ekstrak  pinus  dilaporkan efektif menghambat bakteri Gram postif seperti L.  monocytogenes (Tillah et  al .,  2017).  Hasil pengujian  menunjukkan  pine  oil  tidak  mampu menghambat  pertumbuhan P.  aeruginosa . Hasil pengujian ini didukung oleh Sulistyaningsih et  al .  (2012)  yang  melaporkan pine  oil  2,5%  tidak  efektif  menghambat pertumbuhan P.  aeruginosa .  Hal  ini  diduga karena P.  aeruginosa merupakan  bakteri dengan  kombinasi  sifat  ketahanan  alami terhadap  agen  antibakteri  dan  kemampuan memperoleh  sifat  resistensi  baru  melalui mutasi (Stover et al ., 2000). Bila dibandingkan dengan  kontrol  pembanding,  ekstrak R. apiculata 300 dan 400 mg/mL cukup menjanjikan dalam  menghambat bakteri Gram postif,  karena  menunjukkan  kekuatan  yang hampir  sebanding  dengan  kekuatan  pine  oil 1% dan ciprofloxacin 10 mg/mL.
H asil penelitian sebelumnya telah membuktikan  bahwa  ekstrak  daun  mangrove genus Rhizopora sebagai  antibakteri,  yaitu R. mucronata dilaporkan menghambat S. aureus , E. coli dan Klebsiella pneumoniae (Mangrio et al .,  2016  dan  Nurdiani et  al .,  2012), P. aeruginosa (Tarman et al ., 2013), Streptococcus sp., Proteus  vulgaris , Proteus mirabilis dan Salmonella  typhi (Sahoo et  al .,
2012).  Ekstrak  daun R.  mangle dilaporkan dapat  menghambat S.  aureus , S.  typhi , Mycobacterium smegmatis , Bacillus subtilis , P. aeruginosa dan E.  coli (Cruz et  al .,  2015). Sedangkan  pada  ekstrak  butanol R.  apiculata dilaporkan  menunjukkan  efek  antibakteri  yang
kuat terhadap Corynebacterium sp., S. aureus , dan Vibrio cholera , ekstrak heksan menunjukkan daya hambat terhadap
Corynebacterium sp.  dan Mycobacterium sp., sedangkan  ekstrak  methanol  dan  kloroform menunjukkan efek antibakteri moderat terhadap E.  coli , V.  cholerae , Salmonella sp.,
Corynebacterium sp., S. aureus , P. aeruginosa , Shigella sp., Klebsiella sp., Enterobacter sp.  dan Mycobacterium sp. (Ramalingam & Rajaram, 2018).

## Pengujian Aktivitas Antioksidan
Penelitian  ini  juga  mengevaluasi  aktivitas antioksidan ekstrak daun R. apiculata menggunakan  metode  penangkapan  radikal DPPH.  Penurunan  intensitas  cahaya  ungu radikal  DPPH,  berbanding  lurus  dengan peningkatan konsentrasi radikal DPPH.
Reduksi  warna  ungu  DPPH  disebabkan  oleh reaksi  molekul  hidrazil  difenil-2-pikril  dengan atom hidrogen yang dilepaskan oleh komponen molekul ekstrak, sehingga terbentuk  senyawa  hidrazin  difenil  pikril  dan menyebabkan DPPH berubah warna dari ungu menjadi  kuning  (Huliselan et  al .,  2015). Aktivitas antioksidan menunjukkan kemampuan  suatu  substansi  bioaktif  dalam menghambat  reaksi  oksidasi  yang  dinyatakan sebagai  persentase  penghambatan  (Dewanto et  al .,  2019).  Pada  penelitian  ini  dilakukan pengukuran  persentase  penangkapan  radikal DPPH  untuk  ekstrak  daun  mangrove R. apiculata dan  vitamin  E  digunakan  sebagai kontrol pembanding, seperti yang dapat dilihat pada Gambar 2 .
Gambar 2 . Persentase Inhibisi Ekstrak Daun Mangrove Rhizophora apiculata dibandingkan dengan vitamin E

## Dewanto et al.,Profil GC-MS dari Ekstrak Daun Rizophora
Ekstrak daun R. apiculata dievaluasi juga efek inhibisi  radikal  DPPH  untuk  penentuan  IC 50 ( Tabel 3 ). Ekstrak daun R. apiculata menunjukkan  aktivitas  antioksidan  karena mampu mendonasikan atom hidrogen/ elektron untuk bereaksi dengan radikal DPPH. Menurut  Blois  (1958)  terdapat  empat  kategori aktivitas  antioksidan:  sangat  kuat  (IC 50 <50
µg/mL),  kuat  (IC 50 antara  50-100  µg/mL), sedang  (IC 50 berkisar  antara  100-150  µg/mL) dan  lemah  (IC 50 berkisar  antara  150-200 µg/mL).  Hasil  pengujian  menunjukkan  bahwa peningkatan
konsentrasi ekstrak
meningkatkan  persentase  inhibisi  radikal DPPH.
Tabel 3 . Nilai IC 50 dari Ekstrak Daun Mangrove Rhizophora apiculata dengan menggunakan Metode Penangkapan Radikal DPPH, dibandingkan dengan vitamin E.
Ekstrak Daun IC 50 (µg/mL) Rhizophora apiculata 96.68 ± 0.58 Vitamin E 15.87 ± 4.47
Hasil  penelitian  ini  didukung  dengan  hasil penelitian sebelumnya yang melaporkan potensi  antioksidan dari  ekstrak  mangrove genus Rhizophora ,  yaitu  ekstrak  etanol, butanol,  etil  ester,  dan  air  dari R.  apiculata dengan kisaran IC 50 9.68 ± 1.86 sampai 23.72 ±  1.94 μg/mL pada konsentrasi DPPH 0,1 nM (Gao & Xiao, 2012). Selain itu esktrak daun R. mangle menunjukkan  nilai  IC 50 0.15±0.02 mg/ml pada konsentrasi DPPH 0.0219% (Cruz et  al .,  2015).  Ekstrak  daun R.  apiculata dilaporkan  IC 50 pada  kisaran  6-7 μg/mL  pada konsentrasi  DPPH  125  μM  (Wahyuni et  al ., 2015). Ekstrak mangrove R. apiculata dilaporkan  menunjukkan  84%  penangkapan radikal  DPPH  (1  mM)  (Ramalingam  & Rajaram, 2018).  Senyawa polyisoprenoid dari daun R.  mucronata menunjukkan  IC 50 27620 µg/mL  pada  konsentrasi  DPPH  60  µg/mL (Sumardi et  al .,  2018).  Ekstrak  metanol  dan etil asetat ekstrak daun R. apiculata dilaporkan IC 50 berkisar  80-100  ppm  pada  konsentrasi DPPH  0.1  mM  (Ridlo et  al .,  2019)  Ekstrak daun R.  mucronata menunjukkan  nilai  IC 50 6.65±0.10  µg/mL  pada  konsentrasi  DPPH
0.135 mM (Adhikari et al ., 2016).
Vitamin E  sebagai  kontrol  pembanding memiliki  satu  gugus  hidroksil.  Pengujian menunjukkan  vitamin  E  merupakan  agen antioksidan  yang  sangat  kuat.  Dari  studi literatur,  nilai  IC 50 vitamin  E  berkisar  antara 0.72  -  23  µg/mL,  tergantung  dari  konsentrasi DPPH  yang  digunakan  (Cruz et  al .,  2015; Cheng et al ., 2013; Melannisa et al ., 2011; Da’i &  Triharman,  2010;  Yassa et  al .,  2009;  dan Rohman et al ., 2007).

## Pengujian Kandungan Total Fenol
Hasil  pengujian  kandungan  total  fenol  dari ekstrak  daun R.  apiculata sebesar  3646.53  ±
7.00  mg  GAE/g  ekstrak  kering,  dengan persamaan  regresi  asam  galat  y  =  0.0101x –
0.0318.  Penelitian  sebelumnya  melaporkan kandungan  total  fenol  ekstrak  etanol  dan  etil asetat  daun R.  apiculata sebesar  50-60  mg GAE/g (Ridlo et al ., 2019).
Mangrove  adalah  tumbuhan  habitat  pasang surut, mengalami variasi harian dalam tekanan abiotik  yang  dapat  mempengaruhi  proses morfologi,  fisiologis,  biokimia  dan  molekuler secara negatif  (Dasgupta et al ., 2012). Variasi tekanan  lingkungan  dapat  memicu  produksi reactive  oxygen  species (ROS).  Substansi antioksidan  dan  antibacterial  yang  terdapat pada  tanaman  mangrove  diduga  merespon variasi  tekanan  lingkungan  dan  memproduksi subtansi  yang  dapat  menstabilkan  ROS (Thatoi et al .,  2014).  Dengan  demikian, mengindikasikan  daun  mangrove R.  apiculata merupakan sumber potensial senyawa antibakteri  dan  antioksidan  yang  dapat dimanfaatkan sebagai sumber sediaan fitofarmaka  yang  bermanfaat  bagi  kesehatan manusia.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Penelitian  ini  telah  mengeksplorasi  potensi antibakteri  dan  antioksidan  ekstrak  daun Rhizophora  apiculata .  Hasil  skrining  profil kimia dari ekstrak daun R. apiculata dilaporkan didominasi  senyawa  mome  inositol.  Ekstrak daun R.  apiculata 300  mg/mL  menunjukkan kemampuan yang potensial dalam menghambat  bakteri  Gram  positif Listeria monocytogenes .  Ekstrak  daun R.  apiculata memperlihatkan  efek  antioksidan  dengan  IC 50 96.68  ±  0.58  µg/mL  pada  konsentrasi  DPPH 50 μM  dan  kandungan  total  fenol  sebesar 3646.53  ±  7.00  mg  GAE/g.  Oleh  karena  itu, ekstrak daun R. apiculata perlu dipurifikasi dan diidentifikasi  lebih  lanjut  kandungan  senyawa bioaktfnya,  karena  masih  terdapat  22  puncak dari  analisis  GC-MS  dengan  kualitas  dibawah 85%.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Semua  penulis  mengucapkan  terima  kasih kepada  Direktorat  Riset  dan  Pengabdian kepada  Masyarakat,  Deputi  Penguatan  Riset dan  Pengembangan,  Kementerian  Riset  dan Teknologi / Badan Riset dan Inovasi Nasional, Republik  Indonesia  yang  telah  membiayai penelitian  ini  melalui  hibah  penelitian  skema penelitian  dosen  pemula  tahun  2020  (No. 189/SP2H/AMD/LT/DRPM/2020). Para penulis juga mengucapkan terima kasih kepada Ketua Sekolah  Tinggi  Perikanan  dan  Kelautan  Palu yang telah memberikan fasilitas dan dukungan untuk menyelesaikan penelitian ini.  Tidak lupa juga  semua  penulis  juga  berterima  kasih kepada  Siti  Khalimatu  Sa'diah,  S.Pi.,  Fatma, S.Pi.,  dan  Moh.  Ahdiat,  S.Pi.  yang  membantu pengujian di laboratorium.

## DAFTAR PUSTAKA
Adhikari, A., Ray, M., Das, A. K., & Sur, T. K. (2016).  Antidiabetic  and  antioxidant activity  of  Rhizophora  mucronata  leaves (Indian sundarban mangrove): An in vitro and in vivo study. Ayu , 37 (1), 76.
Agoramoorthy,  G.,  Chen,  F.  A.,  Venkatesalu, V.,  Kuo,  D.  H.,  &  Shea,  P.  C.  (2008). Evaluation  of  antioxidant  polyphenols from  selected  mangrove  plants  of  India. Asian Journal of Chemistry , 20 (2), 1311. Alhaddad, Z. A., Tanod, W. A., & Wahyudi, D. (2019).  BIOAKTIVITAS  ANTIBAKTERI DARI  EKSTRAK  DAUN  MANGROVE Avicennia sp. Jurnal
Kelautan:
Indonesian  Journal  of  Marine  Science and Technology , 12 (1), 12-22.
Arora,  K.,  Nagpal,  M.,  Jain,  U.,  Jat,  R.  C.,  & Jain,  S.  (2014).  Mangroves:  A  novel gregarious  phyto  medicine  for  diabetes. International  Journal  of  Research  and Development in Pharmacy & Life Sciences , 3 (6), 1231-1244.
Balouiri,  M.,  Sadiki,  M.,  &  Ibnsouda,  S.  K. (2016).  Methods  for  in  vitro  evaluating antimicrobial activity: A review. Journal of pharmaceutical analysis , 6 (2), 71-79.
Bandaranayake,  W.  M.  (2002).  Bioactivities, bioactive compounds and chemical constituents of mangrove plants. Wetlands  ecology  and  management , 10 (6), 421-452.
Blainski, A., Lopes, G. C., & De Mello, J. C. P. (2013).  Application  and  analysis  of  the folin ciocalteu method for the determination  of  the  total  phenolic content  from  Limonium  brasiliense  L. Molecules , 18 (6), 6852-6865.
Blois, M. S. (1958). Antioxidant determinations
by  the  use  of  a  stable  free  radical. Nature , 181 (4617), 1199-1200.
Bloomfield,  S.  F.  (1991).  Methods  For
Assesing Antimicrobial Activity In Mechanism  of  Action  of  Chemical Biocides Thesis Study and Explanation.(S..  Denyer  &  BW  Hogo, Eds.). Brannen, A., & Davidson, P. (1993). Antimicrobial  in  foods .  Marcel  Dekker. New York.
Breijyeh, Z., Jubeh, B., & Karaman, R. (2020).
Resistance  of  Gram-negative  bacteria  to current antibacterial agents and approaches  to  resolve  it. Molecules , 25 (6), 1340.
Chalkley,  L.  J.,  &  Koornhof,  H.  J.  (1985). Antimicrobial  activity  of  ciprofloxacin against Pseudomonas aeruginosa, Escherichia  coli,  and  Staphylococcus aureus  determined  by  the  killing  curve method:  antibiotic  comparisons  and synergistic interactions. Antimicrobial agents  and  chemotherapy , 28 (2),  331- 342.
Cheng,  F.,  &  Cheng,  Z.  (2015).  Research progress  on  the  use  of  plant  allelopathy in  agriculture  and  the  physiological  and ecological  mechanisms  of  allelopathy. Frontiers in plant science , 6 , 1020. Cheng, K. C., Wu, J. Y., Lin, J. T., & Liu, W. H. (2013).  Enhancements  of  isoflavone aglycones,  total  phenolic  content,  and antioxidant  activity  of  black  soybean  by solid-state  fermentation  with  Rhizopus spp. European  Food  Research  and Technology , 236 (6), 1107-1113. Cruz,  S.  M.,  Marroquín,  N.,  Alvarez,  L.  E., Chang,  D.  E.,  &  Cáceres,  A.  (2015). Evaluation  of  Mangrove  (Rhizophora mangle L.) products as coloring, antimicrobial  and  antioxidant  agents. International  Journal  of  Phytocosmetics and Natural Ingredients , 2 (1), 12-12. Da’i,  M.,  &  Triharman,  F.  (2010).  Uji  aktivitas penangkap  radikal  DPPH  (1,  1-difenil-2- pikrilhidrazil)  isolat  alfa  mangostin  kulit buah manggis (Garcinia mangostana L.).
Damanik,  R.,  &  Rignolda,  D.  (2012). Atlas Mangrove  Teluk  Tomini .  Sustainable Coastal  Livelihoods  and  Management Program. Makassar.
Das,  S.,  Vasudeva,  N.,  &  Sharma,  S.  (2014).
Chemical  composition  of  ethanol  extract of Macrotyloma  uniflorum (Lam.)  Verdc  . using GC-MS spectroscopy. Organic and Medicinal Chemistry Letters , 4 (13).
Dasgupta, N., Nandy, P., Sengupta, C., & Das,
S. (2012). Protein and enzymes regulations  towards  salt  tolerance  of
some  Indian  mangroves  in  relation  to adaptation. Trees - Structure and
Function , 26 (2), 377 –391.
Dewanto,  D.  K.,  Finarti,  F.,  Hermawan,  R., Ndobe, S., Riyadi, P. H., & Tanod, W. A. (2019).  Aktivitas  antioksidan  ekstrak karang  lunak  asal  Teluk  Palu,  Sulawesi Tengah,  Indonesia. Jurnal  Pascapanen Dan Bioteknologi Kelautan Dan Perikanan , 14 (2), 163 –178. Dewanto,  D.  K.,  Tanod,  W.  A.,  Finarti,  F.,  & Renol, R. (2018). Screening of antiradical activity  from  some  central  Sulawesi mangroves. Pharmaciana , 8 (1),  155 – 168.
Fekih, N., Allali, H., Merghache, S., Chaïb, F., Merghache, D., El Amine, M., Djabou, N., Muselli, A., Tabti, B., & Costa, J. (2014). Chemical  composition  and  antibacterial activity of Pinus halepensis Miller growing  in  West  Northern  of  Algeria. Asian Pacific Journal of Tropical Disease, 4 (2), 97 –103.
Gao,  M.,  &  Xiao,  H.  (2012).  Activity-guided isolation  of  antioxidant  compounds  from Rhizophora  apiculata . Molecules , 17 (9), 10675 –10682.
Halliwell,  B.,  &  Whiteman,  M.  (2004). Measuring reactive species and oxidative damage  in  vivo  and  in  cell  culture:  how should  you  do it  and  what  do  the  results mean? British  Journal  of  Pharmacology , 142 (2), 231 –255.
Hsiao,  T.-H.,  Sung,  C.-S.,  Lan,  Y.-H.,  Wang, Y.-C.,  Lu,  M.-C.,  Wen,  Z.-H.,  Wu,  Y.-C., &  Sung,  P.-J.  (2015).  New anti- Inflammatory cembranes from the cultured  soft  coral Nephthea  columnaris .
Marine Drugs , 13 (6), 3443 –3453. Huliselan,  Y.  M.,  Runtuwene,  M.  R.  J.,  & Wewengkang,  D.  S.  (2015).  Antioxidant activity  of  ethanol,  ethyl  acetate  and  n- hexane  extract  from  seswanua  leaves ( Clerodendron squamatum
Vahl.). Pharmacon , 4 (3), 155 –163.
Jabir,  M.  (2014).  Peran  masyarakat  terhada pengelolaan  ekosistem  hutan  mangrove di  kelurahan  kabonga  besar  Kecamatan
Banawa Kabupaten Donggala. GeoTadulako , 2 (4), 1 –17.
Jawetz, Melnick, & Adelberg. (2005). Mikrobiologi  kedokteran.  (Edisi  Ke-2). EGC Buku Kedokteran. Jakarta.
Jin,  C.,  Gibani,  M.  M.,  Pennington,  S.  H.,  Liu, X.,  Ardrey,  A.,  Aljayyoussi,  G.,  Moore, M.,  Angus,  B.,  Parry,  C.  M.,  Biagini,  G. A., Feasey, N. A., & Pollard, A. J. (2019). Treatment  responses  to  azithromycin and ciprofloxacin in uncomplicated Salmonella  typhi infection:  A  comparison
of clinical and microbiological data from a controlled  human  infection  model. PLoS Neglected  Tropical  Diseases , 13 (12),
e0007955.
Jithesh, M. N., Prashanth, S. R., Sivaprakash,
K. R., & Parida, A. K. (2006).
Antioxidative  response  mechanisms  in halophytes : Journal  of  Genetics , 85 (3),
237 –254. Lamuela-Raventós,  R.  M.  (2017).  Folin- Ciocalteu  method  for  the  measurement of  total  phenolic  content  and  antioxidant capacity. In R. Apak, E. Capanoglu, & F.
Shahidi (Eds.),
Measurement of Antioxidant Activity and Capacity: Recent Trends  and  Applications (First,  pp.  107 – 115). John Wiley & Sons Ltd.
Latief,  M.,  Nazarudin,  &  Nelson.  (2015).
Aktivitas  antioksidan  ekstrak  daun  dan buah  prepat  ( Sonneratia  alba )  Asal Tanjung  Jabung  Timur  Propinsi  Jambi. SEMIRATA 2015 Bidang MIPA BKS-PTN
Barat Universitas Tanjungpura, Pontianak , 171 –179.
Levy, S. B., & Marshall, B. (2004). Antibacterial resistance worldwide: causes,  challenges  and  responses. Nature Medicine , 10 (12), S122 –S129. Lisna,  Malik,  A.,  &  Toknok,  B. (2017).  Potensi vegetasi  hutan  mangrove  di  wilayah pesisir pantai desa khatulistiwa kecamatan  Tinombo  Selatan  Kabupaten Parigi  Moutong. Warta  Rimba , 5 (1),  63 – 70.
Lobo,  V.,  Patil,  A.,  Phatak,  A.,  &  Chandra,  N. (2010).  Free  radicals,  antioxidants  and functional  foods:  Impact  on  human health. Pharmacognosy  Reviews , 4 (8),
118 –126.
Loo,  A.  Y.,  Jain,  K.,  &  Darah,  I.  (2007). Antioxidant and radical scavenging activities of  the  pyroligneous  acid  from  a mangrove  plant, Rhizophora  apiculata . Food Chemistry , 104 (1), 300 –307. Madigan,  M.  .,  Martinko,  J.,  &  Parker,  J. (2000). Brock  Biology  of  Microorganisms (9th ed.). Prentice-Hall Inc.
Mai-Prochnow,  A.,  Clauson,  M.,  Hong,  J.,  & Murphy, A. B. (2016). Gram positive and Gram  negative  bacteria  differ  in  their sensitivity  to  cold  plasma. Scientific Reports, 6 (38610), 1 –11. Mangrio,  A.,  Rafiq,  M.,  Naqvi,  S.  H.,  Junejo, S.,  Mangrio,  S.,  &  Rind,  N.  (2016). Evaluation  of  phytochemical  constituents and  antibacterial  potential  of Avicennia marina and Rhizopora  mucronata from Indus Delta of Pakistan. Pakistan Journal of Biotecnology , 13 (4), 259 –265.
Marfuati,  N.,  Rakhmawatie,  M.  D.,  &  Akmalia,
N. R. (2017). The effectivity of ciprofloxacin on The growth of uropatogenic Escherichia  Coli in  Vitro. Jurnal  Kedokteran  Muhammadiya , 2 ,  1 –
7.
Masadeh,  M.  M.,  Alzoubi,  K.  H.,  Khabour,  O.
F., & Al-azzam, S. I. (2014).
Ciprofloxacin-induced antibacterial activity is attenuated by phosphodiesterase  inhibitors. Current
Therapeutic Research , 77 , 14 –17. Melannisa, R., Da’i, M., & Rahmi, R. T. (2011). Radical  scavenging  activity  assay  and determination of total phenolic content of ethanol  extract  three  curcuma  genus rhizomes and figerroot rhizome ( Boesenbergia  pandurata ). Pharmacon , 12 (1), 40 –43.
Molyneux,  P.  (2004).  The  use  of  the  stable free  radical  diphenylpicryl-  hydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity. Songklanakarin Journal of Science and Technology , 26 , 211 –219. Moskovitz,  J.,  Yim,  M.  Bin,  &  Chock,  P.  B. (2002).  Free  radicals  and  disease. Archives of Biochemistry and Biophysics , 397 (2), 354 –359.
Mudgal, S., De Toni, A., Lockwood, S., Salès, K.,  Backhaus,  T.,  &  Sorensen,  B.  H. (2013). Study on the environmental risks of medicinal products . Mughal, M. S. N., Asghar, M. T., Zia, M. A., & Ismail,  T.  (2009).  Comparison  of  the antibacterial  activities  of  different  brands of  Ciprofloxacin. Revista  UDO  Agrícola ,
9 (3), 700 –704.
Naharuddin.  (2020).  Struktur  dan  Asosiasi Vegetasi  Mangrove  di  Hilir  DAS  Torue, Parigi Moutong, Sulawesi Tengah. Jurnal Sylva Lestari , 8 (3), 378 –389.
Noor, Y. R., Khazali, M., & Suryadiputra, I. N. . (2006). Panduan  pengenalam  mangrove di Indonesia (Kedua). Wetlands International Indonesia Programme.
Nurdiani,  R.,  Firdaus,  M.,  &  Prihanto,  A.  A. (2012).  Phytochemical  screening  and antibacterial  activity  of  methanol  extract of mangrove plant ( Rhyzophora mucronata )  from  Porong  River  Estuary. Journal  Basic  Science  and  Technology , 1 (2), 27 –29.
Nurjanah,  N.,  Jacoeb,  A.  M.,  Hidayat,  T.,  & Shylina,  A. (2015).  Bioactive  compounds and  antioxidant  activity  of  lindur  stem bark ( Bruguiera gymnorrhiza ).
International  Journal  of  Plant  Research , 1 (5), 182 –189.
Parekh,  J.,  &  Chanda,  S. (2007).  Antibacterial and  phytochemical  studies  on  twelve species  of  Indian  medicinal  plants.
African  Journal  of  Biomedical  Research , 10 (May), 175 –181. Paudel, B., Bhattarai, H. D., Kim, I. C., Lee, H., Sofronov,  R.,  Ivanova,  L.,  Poryadina,  L., &  Yim,  J.  H.  (2014).  Estimation  of antioxidant,  antimicrobial  activity  and brine  shrimp  toxicity  of  plants  collected from  Oymyakon  region  of the  republic  of Sakha (Yakutia), Russia. Biological Research , 47 (1), 1 –6.
Pham-Huy,  L.  A.,  He,  H.,  &  Pham-Huy,  C.
(2008).  Free  Radicals,  Antioxidants  in Disease  and  Health  Lien. International Journal of Biomedical Science , 4 (2), 89 –
96.
Prabhu, V. V., & Guruvayoorappan, C. (2012).
Phytochemical  screening  of  methanolic extract  of  mangrove Avicennia  marina (Forssk.) Vierh. Pelagia Research Library Des Phamacia Sinica , 3 (1), 64 –70.
Prihantini,  A.  I.,  Krisnawati,  Rahayu,  A.  A.  D.,
Nugraheni, Y. M. M. A., & Samawandana,  G.  (2018).  Uji  fitokimia dan aktivitas antibakteri tumbuhan pranajiwa  ( Euchresta horsfieldii  (Lesch.) Benn.). Jurnal Ilmu Kehutanan, 12 , 223 – 233.
Putra,  M.  Y.,  Murniasih,  T.,  Swasono,  R.  T., Wibowo,  J.  T.,  Saputri,  A.  N.  C., Widhiana,  M.  R.,  &  Arlyza,  I.  S.  (2016). Secondary metabolites and their biological  activities  in  Indonesian  soft coral  of  the  genus Lobophytum . Asian Pacific  Journal  of  Tropical  Biomedicine ,
6 (11), 909 –913.
Ramalingam,  V.,  &  Rajaram,  R.  (2018). Enhanced  antimicrobial  ,  antioxidant  and anticancer activity of Rhizophora apiculata :  An  experimental  report. 3 Biotech , 8 (4), 1 –13.
Ravikumar,  S.,  Gnanadesigan,  M.,  Suganthi,
P., & Ramalakshmi, A. (2010). Antibacterial potential of chosen mangrove  plants  against  isolated  urinary tract  infectious  bacterial  pathogens. International  Journal  of  Medicine  and Medical Sciences , 2 (3), 94 –99.
Revathi,  P.,  Jeyaseelan  Senthinath,  T.,
Thirumalaikolundusubramanian,  P.,  & Prabhu,  N.  (2014).  An  overview  of antidiabetic  profile  of  mangrove  plants. International  Journal  of  Pharmacy  and Pharmaceutical Sciences, 6 (3), 1 –5. Ridlo, A., Supriyantini, E., & Sedjati, S. (2019).
Kandungan  total  fenolat  pada  ekstrak Rhizophora sp  dari  Teluk  Awur,  Jepara.
Jurnal Kelautan Tropis , 22 (1), 27 –34.
Richter, A., Thonke, B., & Popp, M. (1990). 1d- 1-O-methyl-muco-inositol in Viscum
album and members of the
Rhizophoraceae. Phytochemistry,  29 (6),
1785 –1786.
Rohman,  A.,  Riyanto,  S.,  &  Hidayat,  N.  K. (2007). Antioxidant activity, total phenolics  and  total  flavonoid  contents  of Mengkudu  ( Morinda  citrifolia L)  Leaves.
Agritech , 27 (4), 147 –151.
Sahoo,  G.,  Mulla,  N.  S.  S.,  Ansari,  Z.  A.,  & Mohandass,  C.  (2012).  Antibacterial activity of mangrove leaf extracts against human  pathogens. Indian  Journal  of Pharmaceutical  Sciences , 74 (4),  348 –
351.
Sivakumar, T. (2019). Phytochemical screening  and  gas  chromatography- mass  spectroscopy  analysis  of  bioactive compounds  and  biosynthesis  of  silver nanoparticles  using  sprout  extracts  of Vigna radiata l. And their antioxidant and antibacterial  activity. Asian  Journal  of Pharmaceutical  and  Clinical  Research , 12 (2), 180 –184.
Stover,  C.  K.,  Pham,  X.  Q.,  Erwin,  A.  L., Mizoguchi,  S.  D.,  Warrener,  P.,  Hickey, M.  J.,  Brinkman,  F.  S.  L.,  Hufnagle,  W. O., Kowalik, D. J., Lagrou, M., Garber, R. L.,  Goltry,  L.,  Tolentino,  E.,  Yuan,  Y., Brody, L. L., Coulter, S. N., Folger, K. R., Kas,  A.,  Larbig,  K.,  …  Olson,  M.  V. (2000).  Complete  genome  sequence  of Pseudomonas  aeruginosa PAO1,  an opportunistic pathogen. Nature, 406 (August), 959 –964.
Sulistyaningsih,  L.,  Koendhori,  E.  B.,  & Ramadhani. (2012).
Benzalkonium chloride  and  pine  oil-containing  cleaning fluid is not effective against Pseudomonas  aeruginosa . Folia  Medica Indonesiana, 48 (3), 121 –125.
Sumardi,  Basyuni,  M.,  &  Wati,  R.  (2018). Antimicrobial  activity  of  polyisoprenoids of  sixteen  mangrove  species  from  North Sumatra,  Indonesia. Biodiversitas , 19 (4), 1243 –1248.
Sunita, A., & Manju, S. (2017). Phytochemical examination  and  GC-MS  analysis  of methanol  and  ethyl-  acetate  extract  of root  and  stem  of Gisekia pharnaceoides Linn.  (Molluginaceae)  from  Thar  Desert, Rajasthan,  India. Research  Journal  of
Pharmaceutical , Biological and Chemical Sciences , 8 (4), 168 –174. Tanod, W. A., Aristawati, A. T., Putra, M. Y., & Muliadin.  (2018).  Soft  coral  ( Sinularia sp.)  extracts  with  antibacterial  activity. Omni-Akuatika , 14 (1), 108 –117.
Tarman, K., Purwaningsih, S., & Negara, A. A.
A.  P.  P.  (2013).  Aktivitas  antibakteri ekstrak  daun  bakau  hitam  ( Rhizopora mucronata )  terhadap  bakteri  penyebab
diare.
Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia , 16 (3), 249 –258. Thatoi, H. N., Patra, J. K., & Das, S. K. (2014).
Free  radical  scavenging  and  antioxidant potential  of  mangrove  plants:  A  review. Acta  Physiologiae  Plantarum , 36 (3),
561 –579.
Tillah,  M.,  Batubara,  I.,  &  Sari,  R.  K.  (2017). Antimicrobial and Antioxidant Activities of Resins  and  Essential  Oil  From  Pine ( Pinus  merkusi i, Pinuso  ocarpa , Pinus insularis ) and Agathis ( Agathis loranthifolia ). Biosaintifika:  Journal  of Biology  &  Biology  Education,  9 (1),  134 – 139.
Usman, Muh Amir, M., Erika, F., Nurdin, M., & Kuncoro,  H.  (2019).  Antidiabetic  activity of  leaf  extract  from  three  types  of mangrove  originating  from  Sambera coastal  region  Indonesia. Research Journal  of  Pharmacy  and  Technology,
12 (4), 1707 –1712. Venkata,  R.  B.,  Samuel,  L.,  Pardha,  S.  M.,
Narashimha,  R.  B.,  Naga,  V.  K.  A., Sudhakar,  M.,  &  Radhakrishnan,  T. (2012).  Antibacterial,  antioxidant  activity and  GC-MS  analysis  of Eupatorium odoratum . Asian Journal
of
Pharmaceutical  and  Clinical  Research ,
5 (Suppl 2), 99 –106. Wahyuni, W. T., Darusman, L. K., & Surya, N. K.  (2015).  Potency  of Rhizophora spp. extracts  as  antioxidants  and  inhibitor  of acetylcholinesterase. Procedia Chemistry in  International  Symposium  on  Applied Chemistry , 16 , 681 –686.
WHO,  World  Health  Organization.  (2014).
Antimicrobial resistance. In Bulletin of the World  Health  Organization (Vol.  61, Issue 3).
Yassa,  N.,  Masoomi,  F.,  Rankouhi,  S.  R.,  & Hadjiakhoondi,  A.  (2009).  Chemical composition  and  antioxidant  activity  of the  extract  and  essential  oil  of Rosa damascena from  Iran,  population  of Guilan. DARU Journal of Pharmaceutical Sciences , 17 (3), 175 –180.
Zhang, Z., Chen, M., Yu, Y., Pan, S., & Liu, Y.
(2018). Antimicrobial susceptibility
among Gram-positive and Gram- negative
blood-borne pathogens collected  between  2012-2016  as  part  of the Tigecycline Evaluation and Surveillance Trial. Antimicrobial
Resistance and Infection Control, 7 (152),
1 –13.