http://jurnal.farmasi.umi.ac.id/index.php/fitofarmakaindo/index

## Uji Kandungan Bakteri Escherichia coli Dalam Produk Obat Tradisional Yang Dijual Di Pasar Beringharjo
Ken Zaim Arifin 1 , Nanik Sulistyani 2*
1 Program Studi Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Ahmad Dahlan, Indonesia
2 Departemen Biologi Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Ahmad Dahlan, Indonesia
Article info Abstrak History
Submission : 16-09-2022
Review : 19-01-2023 Accepted : 14-02-2023
* Email: naniksulistyani@gmail.com
DOI: 10.33096/jffi.v10i1.883
Kata Kunci: Escherichia coli; obat tradisional; kapsul Obat  tradisional  Indonesia  sudah  lama  dikenal  dan  digunakan  oleh masyarakat  dalam  menjaga  kesehatan  dan  mengobati  penyakit.  Obat tradisional  harus  memenuhi  persyaratan  mutu  yang  ditetapkan  oleh pemerintah. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kualitas produk obat tradisional  yang  dijual  di  Pasar  Tradisional  Beringharjo  berdasarkan parameter  Angka  Lempeng  Total  (ALT)  dan  cemaran  Escherichia  coli. Sampel  obat  tradisional  diambil  dengan  metode purposive  sampling .  Uji ALT  dilakukan  dengan  menggunakan  media  Plate  Count  Agar  (PCA). Kontaminasi E. coli diuji menggunakan Media TBX Agar. Hasil penelitian menunjukkan Angka Lempeng Total (ALT) pada rentang  (7,0 ± 1,4) x 10 2 sampai  (14,9  ±  1,2)  x  10 5 CFU/mL,  sedangkan  hasil  uji  identifikasi Escherichia  coli menunjukkan  negatif  atau  0  koloni/g.  Merujuk  pada Peraturan  Kepala  BPOM  No.  32  Tahun  2019  tentang  Persyaratan  Mutu Obat  Tradisional,  dapat  disimpulkan  bahwa  berdasarkan  nilai  ALT, sebanyak  80%  produk  obat  yang  diuji  memenuhi  persyaratan  mutu, sedangkan  20%  dari  mereka  tidak  memenuhi  persyaratan.  Pada  uji identifikasi Escherichia coli , semua sampel memenuhi persyaratan.
Abstract Keywords: Escherichia coli; traditional medicine; capsules Indonesian  traditional  medicine  has  long  been  known  and  used  by  the community  in  maintaining  health  and  treating  disease.  Traditional medicines should meet the quality requirements set by the government. This study aims to determine the quality of traditional medicinal products sold at Beringharjo Traditional Market based on the parameters of total plate number  (ALT)  and  Escherichia  coli  contamination.  Traditional  medicine samples  were  taken  by  purposive  sampling  method.  The  ALT  test  was performed using plate count agar (PCA) media. E. coli contamination was tested  using  TBX  Agar  Media . The  results  showed  that  the  Total  Plate Number (ALT) was (7.0 ± 1.4) x 10 2 to (14.9 ± 1.2) x 10 5 CFU/mL, while the Escherichia coli identification test results were negative or 0 colonies/g. Referring to the Regulation of the Head of BPOM No. 32 of 2019 concerning the quality requirements of traditional medicines, it can be concluded that based  on  the  ALT  value,  as  much  as  80%  of  the  drug  products  tested complied with the quality requirements, while 20% of them did not meet the requirements. In the Escherichia coli Identification test, all samples met the requirements.

## I. Pendahuluan
Indonesia memiliki keanekaragaman hayati  yang  sangat  tinggi.  Masyarakat  Indonesia secara  turun-temurun  diajarkan  bagaimana  untuk melestarikan  serta  memanfaatkan  keanekaragaman hayati  tersebut.  Pemanfaatan  keanekaragaman hayati  salah  satunya  adalah  menggunakan  bahan- bahan  herbal  untuk  pengobatan  dalam  bentuk  obat tradisional. Obat tradisional dipercaya dan digunakan  secara  turun-menurun  dari  suatu  daerah
atau  negara  tertentu,  karena  harganya  yang  relatif murah, dan mudah didapat (Katno, 2008).
Sediaan obat tradisional terbuat dari bahan yang  rentan  terhadap  bahaya  mikroba.  Terdapat sampel  yang  tidak  memenuhi  syarat  yang  secara rutin  dilakukan  oleh  Badan  Pengawas  Obat  dan Makanan  (BPOM)  dalam  rangka  pengawasan barang obat tradisional dari berbagai bentuk sediaan yang  beredar  (Damayanti  and Purwantisari,  2020). Persyaratan  mutu  produk  obat  tradisional  di Indonesia  diatur dalam  Peraturan  Kepala  BPOM
nomor 32 tahun 2019 tentang persyaratan mutu obat tradisional.  Produk  obat  tradisional  yang  tidak memenuhi syarat keamanan, mutu dan kemanfaatan dilarang  beredar.  Peraturan  Kepala  (Perka)  BPOM tersebut  antara  lain  menetapkan  persyaratan  mutu produk  obat  jadi  yang  berupa  batas  cemaran mikroba  baik  mikroba  spesifik  seperti Salmonella,
E.  coli,  Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas aeruginosa maupun parameter angka lempeng total.
Perka  BPOM  nomor  32  tahun  2019  tersebut menetapkan batas maksimum pencemaran mikroba dari obat tradisional yaitu angka lempeng total tidak lebih dari 10 5 koloni/g  dan pada bakteri Escherchia coli tidak lebih dari 10 koloni/g (BPOM, 2019).
Banyak masyarakat yang tidak mengetahui keamanan  obat  tradisional,  terutama  yang  belum terdaftar di BPOM untuk kesehatan, atau bagaimana awal pembuatan, pengemasan, pendistribusian, dan penyajian  obat  tradisional.  Dalam  pengobatan tradisional,  proses-proses  ini  memungkinkan munculnya infeksi  mikroba. Oleh karena itu untuk memastikan bahwa produk obat tradisional terutama pada sediaan kapsul yang dijual di pasar tradisional Beringharjo  sebagai  obat  alternatif  yang  dipercaya oleh  masyarakat  layak  untuk  dikonsumsi  dan terjaga.  Pasar  Beringharjo  dikunjungi  oleh  sekitar 16.000  orang  dan  terus  bertambah  setiap  harinya. Kondisi  sanitasi  lingkungan  di  Pasar  Beringharjo, seperti  perilaku  sampah  yang  menumpuk  dan mengeluarkan bau yang tidak sedap, serta aktivitas berjualan  makanan  di  tempat  terbuka  di  jalan, berpotensi  menjadi  sumber  cemaran  mikroba (Januarti,  Agustin  and  Rifai,  2020). Cemaran mikroba  dalam  produk  obat  tradisional  terutama dihasilkan  dari  bahan  baku,  personel,  dan lingkungan  untuk  pengolahan  peralatan  produksi. Dalam  pengobatan  tradisional,  indikator  bakteri aerob  mesofilik  dan  bakteri  koliform  seperti Escherichia  coli merupakan  contoh  kontaminasi mikroba . Oleh  karena  itu,  penelitian  ini  bertujuan untuk  mengukur  potensi  cemaran  mikroba  pada produk  obat  tradisional  yang  dijual  di  pasar tersebut.  Hal  ini  penting  untuk  meningkatkan pemahaman  bagi  masyarakat  maupun  produsen obat tentang kualitas obat tradisional yang beredar di  pasar  tradisional  Beringharjo,  dan  melakukan upaya  untuk  meminimalisir  potensi  cemaran mikroba,  bila  hasil  penelitian  menunjukkan cemaran yang melebihi persyaratan. Pada akhirnya berguna sebagai pencegahan penyakit infeksi .

## II. Metode Penelitian
Penelitian  ini  merupakan  penelitian observasional  deskriptif  yaitu  penelitian  yang bertujuan  hanya  menggambarkan  (mendeskripsi) fenomena  yang  ditemukan  pada  sampel  obat tradisional  sediaan  kapsul  dengan  teknik Spread Plate . Penelitian ini mendeskripsikan nilai ALT dan mengidentifikasi bakteri Escherichia coli
menggunakan  media TBX sebagai  media  yang spesifik.
Sampel  yang  diambil  dalam  penelitian  ini adalah obat tradisional sediaan kapsul yang dijual di Pasar Beringharjo. Dalam penelitian ini menggunakan Purposive  sampling sebagai  metode pengambilan  sampel .  Purposive  sampling adalah teknik  penentuan  sampel  dengan  pertimbangan tertentu (Sugiyono, 2017).

## II.1 Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  yaitu  cawan  petri, tabung reaksi, beaker glass , tabung durham, pipet, otoklaf,  jarum  ose,  ose  bulat,  Spreader,  bunsen, Laminar  Air  Flow ,  inkubator,  alumunium  foil, neraca analitik, magnetic stirrer , rak tabung reaksi, mikropipet, yellow tip, blue tip , vortex, oven. Bahan yang  digunakan  yaitu  Obat  Tradisional  sediaan kapsul  dari  Pasar  Tradisional  Beringharjo,  Bakteri Escherichia Coli ATCC 25922, media TBX , Media PCA , NaCl fisiologis, kapas steril, kemasan plastik steril, alkohol 70%, aquades dan spirtus.

## II.2 Pengambilan Sampel
Sampel  obat  tradisional  diambil  di  pasar tradisional  Beringharjo,  yaitu  di  semua  kios  yang menyediakan obat tradisional. Kriteria sediaan obat tradisonal  yang  diambil  adalah  sediaan  kapsul cangkang  keras  dan  sediaan  padat.  Sampel  obat tradisional  tersebut  kemudian  dikemas  dalam kemasan  plastik  steril  dan  disimpan  pada  wadah yang tertutup rapat.

## II.3 Pembuatan Media
Sebanyak 17,5 g media Plate Count Agar (PCA)  dilarutkan  dalam  1  liter  aquades  steril, kemudian  disterilisasi  menggunakan  autoklaf  pada suhu  121 o C  selama  15  menit.  Selanjutnya  larutan media  didiamkan  hingga  hangat  kuku  sebelum dituangkan pada cawan petri dan didiamkan kembali hingga memadat. Selain itu, dibuat media Triptone Bile  X-Glucuronida (TBX)  sebagai  media  selektif untuk E. coli dengan cara melarutkan 36,5 g media ke  dalam  1  liter  air  suling  steril,  kemudian disterilkan,  dituang  dalam  petri  dengan  cara  yang sama  dengan  pembuatan  media  PC  (Sasongko, 2014).

## II.4 Penentuan angka lempeng total
Sampel obat tradisional ditimbang seksama sebanyak 0,5 g dimasukkan secara aseptis ke dalam tabung  yang  telah  berisi  4,5  ml  larutan  NaCl fisiologis  steril  untuk  pengenceran  10  kali. Selanjutnya  dibuat  seri  pengenceran  dengan  cara yang  sama  untuk  pengenceran  100  kali  dan  1000 kali.  Sebanyak  50  µL  sampel  untuk  tiap pengenceran  diinokulasi  pada  media  Plate  Count Agar  (PCA),  kemudian  diratakan  menggunakan spreader yang  sudah  disterilkan.  Sampel  dibiarkan meresap  ke  media  dan  kemudian  diinkubasi  pada 35-37 o C  selama  18-24  jam  dengan  posisi  petri terbalik (Rosinta, 2019).
II.5 Uji identifikasi E. coli dengan Media TBX Sejumlah 0,5 g sampel (sampel padat) atau 0,5  ml  (sampel  cair)  dengan  seksama,  masukkan secara  aseptic  ke  dalam  4,5  ml  larutan  NaCl fisiologis steril (pengenceran 10 kali). Sebanyak 100 μl  diambil  dengan  pipet  mikro  kemudian diinokulasikan pada media TBX dengan menggunakan speader sampai  merata.  Sampel dibiarkan 5 menit sampai cairan meresap ke dalam media,  lalu  dilakukan  inkubasi  pada  suhu  37 o C selama  18-24  jam.  Setelah  inkubasi,  koloni  yang tumbuh  pada  media  TBX  diamati.  Adanya  koloni biru  kehijauan  menunjukkan  adanya E.  coli dalam sampel (Syarifuddin, Yuliastuti and Pradani, 2020).

## II.6 Analisis Data
Penentuan  Angka  Lempeng  Total  dengan cara  memilih  cawan  dari  satu  tingkat  pengenceran dengan  jumlah  koloni  tertinggi  yang  kurang  dari 250.  Jumlah  koloni  yang  tumbuh  dalam  petri selanjutnya  digunakan  untuk  perhitungan  angka lempeng total (koloni per g atau per mL sediaan) dan dibandingkan  dengan  persyaratan  mutu  obat tradisional.  Peraturan  Kepala  BPOM  menetapkan persyaratan ALT tidak lebih besar dari 10 5 koloni/g
(BPOM, 2019). Rumus Perhitungan ALT (Persamaan 1)
ALT = Jumlah koloni Volume yang ditanam × Faktor Pengenceran   (1)
Identifikasi  cemaran  bakteri Escherichia coli dengan  menggunakan  Media  TBX  dinyatakan positif jika terdapat koloni berwarna hijau kebiruan metalik.  Syarat  cemaran E.  coli menurut  BPOM yaitu  tidak  lebih  dari  10  koloni/g  sampel.  Jumlah replikasi  pada  setiap  uji  dihitung  berdasarkan dengan rumus persamaan 2.
Jumlah replikasi = (t-1) (r-1) ≥ 15 (2) t = banyaknya kelompok perlakuan r = jumlah replikasi
III. Hasil dan Pembahasan

## III.1 Sampel
Berdasarkan kriteria sampling  yang sudah ditetapkan,  diperoleh  10  sampel  obat  tradisional yang semuanya berbentuk kapsul (Tabel I).
Tabel 1 . Data kondisi sampel No Nama Keadaan Sampel Tanggal Kadaluarsa 1 Sampel A Dengan Box & Tersegel, Bentuk sediaan kapsul 01 – 11 – 2024 2 Sampel B Dengan Box & Tersegel, Bentuk sediaan kapsul 01 – 07 – 2023 3 Sampel C Dengan Box & Tersegel, Bentuk sediaan kapsul 19 – 09 – 2022 4 Sampel D Dengan Box & Tersegel, Bentuk sediaan kapsul 15 – 10 – 2023 5 Sampel E Dengan Box & Tersegel, Bentuk sediaan kapsul 10 – 08 – 2023 6 Sampel F Dengan Box & Tersegel, Bentuk sediaan kapsul 30 – 08 – 2023 7 Sampel G Dengan Box & Tersegel, Bentuk sediaan kapsul 09 – 07 – 2023 8 Sampel H Dengan Box & Tersegel, Bentuk sediaan kapsul 22 – 02 – 2024 9 Sampel I Dengan Box & Tersegel, Bentuk sediaan kapsul 01 – 04 – 2024 10 Sampel J Dengan Box & Tersegel, Bentuk sediaan kapsul 23 – 08 – 2024
Pengambilan sampel dilakukan dalam satu waktu  agar  tidak  didapatkan  hasil  yang  bias, selanjutnya  sampel  yang  akan  dilakukan  uji diperiksa terlebih dahulu agar sesuai dengan kriteria dan  dalam  keadaan  tidak  rusak  agar  mendapatkan hasil  yang  baik  dan  benar.  Tabel  I  menunjukkan bahwa  semua  sampel  belum  mencapai  masa kedaluarsa,  karena  masa  kedaluarsa  berada  pada rentang  tahun  2023-2024,  sedangkan  penelitian dilakukan  pada  tahun  2022.  Semua  sempel  juga dalam  keadaan  tersegel  dalam  box.  Dengan demikian,  tidak  ada  potensi  kontaminasi  saat pengambilan  sampel  karena  tertutup  rapat  dan proses berikutnya dilakukan secara aseptis.

## III.2 Nilai Angka Lempeng Total
Pada  pengujian  Angka  Lempeng  Total yang  telah  dilakukan  menggunakan  metode  sebar ( spread plate ). Metode ini dipilih karena penyebaran bakteri  lebih  merata  sehingga  memudahkan  dalam
perhitungan  koloni,  memerlukan  bahan  dan  waktu yang  relatif  banyak  namun  tidak  memerlukan keterampilan  yang  tinggi.  Setelah  ditanam  pada media PCA kemudian  diinkubasi  pada  suhu  ada 35 o C-37 o C  selama  18-24  jam  karena  pada  waktu tersebut  dimungkinkan  bahwa  bakteri  telah mencapai  pada  fase  logaritmik,  posisi  cawan  juga diletakkan secara terbalik agar pada masa inkubasi jika  terdapat  embun  tidak  menetes  pada  media. Sesuai  dengan  Farmakope  Indonesia  VI,  maka cawan  yang  dipilih  untuk  perhitungan  ALT  yaitu satu dari tingkat pengenceran dengan jumlah koloni tertinggi kurang dari 250.
Hasil  yang  diperoleh  dari  uji  Angka Lempeng  Total  Obat  Tradisional  sediaan  kapsul yang  dijual  di  Pasar  Beringharjo  sampel  satu sampai  sepuluh  dengan  dua  kali  replikasi  dapat dilihat pada tabel II.
Tabel 2. Hasil Perhitungan ALT
Sampel Angka Lempeng Total (koloni/g) SD Sampel A 4,3 x 10 4 9,8 x 10 3 Sampel B 9,0 x 10 2 1,4 x 10 2 Sampel C 6,7 x 10 4 1.6 x 10 4 Sampel D 6,9 x 10 4 1,3 x 10 4 Sampel E 2,5 x 10 5 3,6 x 10 4 Sampel F 1,2 x 10 6 3,4 x 10 5 Sampel G 1,2 x 10 5 1,9 x 10 4 Sampel H 1,5 x 10 6 1,2 x 10 5 Sampel I 6,9 x 10 4 9,8 x 10 3 Sampel J 7,0 x 10 2 1,4 x 10 2
Tabel  II  menunjukkan  bahwa  ALT  pada sampel A, B, C, D, E, G, I, J memenuhi persyaratan mutu obat tradisional yang ditetapkan BPOM yaitu tidak lebih dari 10 5 koloni/g, sedangkan pada sampel F  dan  H  tidak  memenuhi  persyaratan  karena  nilai ALT-nya  >10 5 .  Sampel  yang  nilai  ALT-nya memenuhi  syarat  dimungkinkan  karena  produsen telah  melakukan  serangkaian  pembuatan  obat tradisional secara baik dan benar. Hal ini juga bisa disebabkan karena pembuatan obat tradisional telah terjaga  kebersihannya  secara  ketat,  proses pemanasan pada pembuatan obat tradisional sediaan kapsul ini juga bisa menjadi sebab nilai ALT kecil karena  pada  bakteri  tertentu  yang  tidak  tahan pemanasan akan mengalami lisis sehingga cemaran mikroorganisme  bisa  ditekan  dan  tidak  melebihi batas yang telah dipersyaratkan oleh BPOM, faktor kecil lainnya yaitu pada pengemasan yang tersegel secara  baik  sehingga  kemungkinan  tercemar  oleh lingkungan  penjualan  sangatlah  kecil.  Sedangkan pada  hasil  yang  tidak  memenuhi  syarat kemungkinan  besar  bisa  disebabkan  oleh  bakteri bakteri  jenis  termofilik,  hal  ini  ditandai  dengan masih terdapat cemaran bakteri pada semua sampel baik yang telah memenuhi syarat ataupun yang tidak memenuhi  syarat,  bakteri  termofilik  merupakan bakteri  yang  tahan  dan  dapat  tumbuh  pada  suhu tinggi  berkisaran  antara  40-70 o C,  terdapat  3  faktor yang  menyebabkan  bakteri  tersebut  dapat  hidup pada suhu tinggi yaitu memiliki enzim dan protein yang  stabil  pada  suhu  tinggi,  memiliki  membran termostabil, dan mampu mensintesis molekul stabil (Mahestri,  Harpeni  and  Setyawan,  2021).  Faktor kecil  lainnya  yaitu  proses  pembuatan  dan penyimpanan bahan baku yang kurang terjaga yang menyebabkan  tumbuhnya  bakteri  terutama  bakteri termofilik, hal tersebut menjadi kemungkinan yang paling  kecil  karena  tiap  produsen  telah memperhatikan proses pembuatan sebaik mungkin.
Dalam penelitian sejenis, ditemukan bahwa jumlah  cawan  yang  menunjukkan  koloni  bakteri dalam sediaan serbuk (PP) adalah nol; pada sediaan pil  (MR)  adalah  0,5  x  10 5 CFU/g. Ini  adalah  1,1 x 10 5 CFU/g  untuk  kapsul  (LM  dan  SA),  1,6  x 10 5 CFU/g untuk kaplet, dan 0,2 x 10 5 CFU/g untuk
kaplet (SC). Akibatnya, hanya sampel dalam bentuk bubuk  dan  pil  yang  memenuhi  persyaratan  mutu obat  tradisional  yang  dapat  digunakan.  Hal  ini menjadi  catatan  khusus  kepada  produsen  terutama sediaan  kapsul  untuk  mencari  cara  agar  dapat menekan  nilai  ALT  sekecil  mungkin  untuk mencegah  penyakit  yang  ditimbulkan  oleh  bakteri (Wahyuni, Lase and Rivai, 2013).
III.3 Hasil uji identifikasi bakteri Escherichia coli Hasil  uji  identifikasi  adanya  cemaran E. coli dalam  sampel  obat  tradisional  (Tabel  III) menunjukkan bahwa tidak ada satu sampel pun yang menunjukkan  adanya  cemaran E.  coli .  Hal  ini ditandai  dengan  tidak  munculnya  koloni  yang berwarna  biru  kehijauan  setelah  suspensi  sampel ditanam  pada  media  TBX.  Dalam  media TBX, koloni E. coli akan berwarna biru kehijauan karena enzim  β-D-glukoronidase  dalam  bakteri  ini  akan menghidrolisis  senyawa  kompleks  gula-kromogen yaitu  5-bromo,-4-kloro-3-indolil-β-D-glukuronida (BCIG).  Gula  dikonsumsi  oleh  bakteri  tersebut, sedangkan  kromogen  terakumulasi  dalam  sel sehingga  menghasilkan  koloni  berwarna  biru  atau biru  kehijauan  (Anonim,  2000) . Hasil  penanaman pada  media  TBX  terhadap  kontrol  bakteri Escherichia  coli ATCC  25922  (Gambar  1)  juga dihasilkan  warna  tersebut,  sedangkan  pada  uji blangko  (akuades  steril),  tidak  ditumbuhi  bakteri dan  tidak  muncul  warna  biru  kehijauan.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  media  TBX  yang  digunakan masih  bermutu  baik,  sehingga  dapat  digunakan untuk deteksi cemaran E. coli .
Gambar 1. Kontrol Bakteri E. coli (kiri) & Blangko (kanan)
Tabel 3. Identifikasi bakteri Escherichia coli Sampel Media Keterangan Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3 Sampel A TBX Tidak tumbuh koloni Tidak ditumbuhi koloni Tidak ditumbuhi koloni Sampel B TBX Tidak ditumbuhi koloni Tidak ditumbuhi koloni Tidak ditumbuhi koloni Sampel C TBX Tidak ditumbuhi koloni Tidak ditumbuhi koloni Tidak ditumbuhi koloni Sampel D TBX Tidak ditumbuhi koloni Tidak ditumbuhi koloni Tidak ditumbuhi koloni Sampel E TBX Tidak ditumbuhi koloni Tidak ditumbuhi koloni Tidak ditumbuhi koloni Sampel F TBX Tidak ditumbuhi koloni Tidak ditumbuhi koloni Tidak ditumbuhi koloni Sampel G TBX Tidak ditumbuhi koloni Tidak ditumbuhi koloni Tidak ditumbuhi koloni Sampel H TBX Tidak ditumbuhi koloni Tidak ditumbuhi koloni Tidak ditumbuhi koloni Sampel I TBX Tidak ditumbuhi koloni Tidak ditumbuhi koloni Tidak ditumbuhi koloni Sampel J TBX Tidak ditumbuhi koloni Tidak ditumbuhi koloni Tidak ditumbuhi koloni
Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh  dengan tiga kali replikasi yaitu negatif bakteri Escherichia coli karena  tidak  ditemukan  ciri  ciri  yang  spesifik seperti  pada  pembanding  kontrol  bakteri.  Dapat diartikan  bahwa  produk  produk  obat  tradisional sediaan  kapsul  yang  dijual  di  Pasar  Beringharjo telah terbebas dari bakteri patogen Escherichia coli karena bakteri tersebut merupakan indikator sanitasi lingkungan yang kurang bersih terutama pada proses pembuatan  yang  buruk,  tempat  tumbuh  bakteri tersebut  adalah  tempat  yang  sanitasinya  buruk seperti air dan tanah yang tercemar oleh  feses hewan atau  manusia.  Sumber  dari  pencemaran  bakteri tersebut  bisa  berasal  dari  air  yang  digunakan  pada proses pembuatan dan tanah yang merupakan tempat tumbuh  bahan  baku  karena  tidak  dilakukan  proses sterilisasi. Bakteri tersebut sangat tidak diharapkan terdapat  pada  obat  tradisional  karena  dapat menyebabkan berbagai penyakit salah satunya yaitu diare.
Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh  dari penelitian  lain  tentang  pengujian  identifikasi Escherichia  coli dalam  obat  tradisional  sediaan kapsul  untuk  sampel  satu,  dua,  dan  tiga,  diperoleh hasil  negatif Escherichia  coli /g.  Oleh  karenanya, dapat disimpulkan bahwa sampel satu, dua, dan tiga memenuhi  syarat  mutu  obat  tradisional  sediaan kapsul  secara  mikrobiologi  untuk  parameter Escherichia  coli. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  tiap produsen  telah  memperhatikan  dan  mencegah cemaran  bakteri Escherichia  coli dengan  baik
sehingga    dapat  terhindar  dari  bahaya  bakteri pathogen Escherichia coli (Fzathin, 2017) . Namun  di  beberapa  sampel  masih ditemukannya  koloni  bakteri  yang  tumbuh  pada media TBX akan  tetapi  pada  penelitian  ini  tidak melakukan  identifikasi  secara  lebih  lanxjut  oleh karenanya tidak dapat diketahui secara pasti bakteri apa  yang  tumbuh  dalam  sampel  obat  tradisional sediaan kapsul yang dijual di Pasar Beringharjo.

## IV. Kesimpulan
Berdasarkan Persyaratan menurut peraturan  BPOM  Nomor  32  Tahun  2019  Tentang Persyaratan Keamanan dan Mutu Obat Tradisional. Hasil  yang  diperoleh  pada  nilai  Angka  Lempeng Total pada sampel A, B, C, D, E, G, I, J (80%) telah memenuhi syarat, sedangkan pada sampel F dan H (20%)  tidak  memenuhi  syarat.  Pada  Cemaran Bakteri Escherichia coli pada sampel A, B, C, D, E, F,  G,  H,  I,  J  (100%)  negatif Escherichia  coli dan telah memenuhi syarat.
V. Ucapan Terima Kasih
Terimakasih  kepada  Fakultas  Farmasi Universitas Ahmad Dahlan atas penyediaan fasilitas penelitian ini.

## Daftar Pustaka
Anonim  (2000)  ‘Metode  Analisis  PPOMN  2000 Mikrobiologi’, Pusat  Pengujian  Obat  dan Makanan Nasional Badan POM [Preprint]. BPOM (2019) ‘Peraturan BPOM Nomor 32 Tahun
2019  Persyaratan  Keamanan  dan  Mutu Obat  Tradisional’, Badan Pengawas  Obat dan Makanan , pp. 1–37. Damayanti, T. and Purwantisari, S. (2020) ‘Deteksi Escherichia  coli  dalam  Sampel  Obat Tradisional  Jenis  Jamu  Bubuk  di  Balai Besar  Pengawasan  Obat  dan  Makanan (BBPOM)  Semarang’, Jurnal  Akademika Biologi , 9(2).
Fzathin,  R.N.  (2017)  ‘Identifikasi  Bakteri Escherichia  Coli  dalam  Obat  Tradisional Sediaan  Kapsul’, Karya  Tulis  Ilmiah Poltekes  Kemenkes  Jakarta  II [Preprint], (Jakarta). Januarti, F., Agustin, H. and Rifai, M. (2020) ‘Risk Management  for  Visitors  at  Tourism Market:  a  Study  at    Beringharjo  Tourism Market  Yogyakarta)’, Jurnal  Kesehatan Komunitas , 6(1). Available at:https://doi.org/10.25311/keskom.vol6.is s1.489.
Katno  (2008) Tingkat  Manfaat  dan  Keamanan Tanaman  Obat  dan  Obat  Tradisional , Trends in Cognitive Sciences . Mahestri, L., Harpeni,  E.  and  Setyawan,  A.  (2021) ‘Isolasi  dan  Penapisan  Bakteri  Termofilik Pemecah Amilum dan Protein dari Sumber Air  Panas  Way  Panas  Kalianda  Lampung Selatan’, Jurnal Perikanan Dan Kelautan , 26(3),  pp.  161–168.  Available  at: www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/.
Rosinta,  E.M.  (2019)  ‘Uji  Angka  Lempeng  Total pada  Jamu  Pelangsing  Bentuk  Kapsul’, Jurusan  Analisa  Farmasi  dan  Makanan Kemenkes Jakarta II [Preprint].
Sasongko,  H.  (2014)  ‘Uji  Resistensi  Bakteri Escherichia  Coli  dari  Sungai  Boyong
Kabupaten  Sleman  terhadap  Antibiotik
Amoksisilin, Kloramfenikol, Sulfametoxasol, dan Streptomisin’, JURNAL BIOEDUKATIKA , 2(1). Available at:
https://doi.org/10.26555/bioedukatika.v2i1 .4108. Sugiyono  (2017)  ‘Metode  Penelitian  Kuantitatif, Kualitatif Dan R&D’. Syarifuddin, A., Yuliastuti, F. and Pradani, M.P.K. (2020) ‘POTENSI CEMARAN BAKTERI Escherichia  coli  PADA  LIMBAH  CAIR RUMAH  POTONG  AYAM  (RPA) TERHADAP  LINGKUNGAN  DI  KOTA MAGELANG’, Jurnal  Kesehatan ,  13(1),
pp.
46–53. Available at:
https://doi.org/10.23917/jk.v13i1.11101.
Wahyuni,  R.,  Lase,  V.P.  and  Rivai,  H.  (2013) ‘Penentuan  Cemaran  Mikroba  Pada  Jamu Pelangsih  Yang  Beredar  Di  Pasar Tarandam Padang’, Jurnal Farmasi Higea , 5(2).