EKSPLORASI Bacillus spp. DARI RIZOSFER TANAMAN KARET
( Hevea brasilliensis ) DAN POTENSINYA SEBAGAI AGENS HAYATI
JAMUR AKAR PUTIH ( Rigidoporus sp.)
Riris Butarbutar * , Husda Marwan dan Sri Mulyati
Jurusan Agroekoteknologi Fakultas Pertanian, Universitas Jambi Jl. Raya Jambi – Ma. Bulian KM. 15 Kampus Pinang Masak, Mendalo Darat, 36361
Ririsbutarbutar3@gmail.com (* penullis untuk korespondensi )

## ABSTRAK
Bacillus merupakan  rizobakteri  yang  dapat  menghambat  patogen  tanaman  dengan mekanisme  antagonis  berupa  antibiosis. Bacillus spp.  dapat  mengendaliakan  penyakit jamur akar putih yang disebabkan oleh Rigidoporus sp. pada tanaman karet. Penelitian ini bertujuan  untuk  mendapatkan  isolat  bakteri Bacillus spp.  dari  rizosfer  tanaman  karet  dan potensinya  sebagai  agens  hayati  dalam  mengendalikan  penyakit  jamur  akar  putih  pada tanaman  karet.  Isolasi  bakteri  dilakukan  dari  rizosfer  pertanaman  karet  sehat  dan selanjutnya  untuk  mengetahui  kemampuan  agens  hayati  dilakukan  uji  antagonis  terhadap Rigidoporus sp..  Pelaksanaan  pengujian  bakteri  dilakukan  secara in  vitro dan  dilakukan juga  uji  karakterisasi  bakteri.  Hasil  isolasi  dari  rizosfer  pertanaman  karet  diperoleh  108 isolat  bakteri,  106 isolat  bakteri  negatif hipersensitif, dan 71 isolat  bakteri  yang memiliki kemampuan  menghambat  koloni  jamur  akar  putih  secara in  vitro .  Isolat  bakteri  rizosfer mampu  menekan  pertumbuhan Rigidoporus sp.    sebesar  21,86  %  sampai  46,05  %. Hasil pengamatan  menunjukkan Bacillus sp.  yang  diperoleh  mampu  menghasilkan  enzim  kitinase, menambat  nitrogen,  dan  melarutkan  fosfat,  sehingga  bakteri  ini  mampu  berkompetisi mendapatkan  nutrisi  yang  akhirnya  mengimbas  tanaman  sehingga  tahan  terhadap  jamur  akar putih.
Kata kunci : rizobakteri, Bacillus spp., jamur akar putih, Rigidoporus sp..

## PENDAHULUAN
Tanaman  karet  merupakan  salah  satu  komoditi  perkebunan  penting  di  Indonesia dengan  areal  tanaman  karet  terluas  di  dunia  (Suryana  &  Goenandi,  2007).  Menurut Direktorat jendral perkebunan (2016), Produksi karet di Indonesia seluas 3,6 juta Ha 3,15 juta  ton  sehingga  Indonesia  menduduki  posisi  perkebunan  terluas  di  dunia  dan  jumlah produksi tertinggi kedua setelah Thailand.
Usaha  peningkatan  produksi  perkebunan  karet  sering  mengalami  kendala,  antara lain  masalah  Organisme  Pengganggu  Tanaman  (OPT)  terutama  masalah  penyakit.  Salah satu  OPT  penting  yang  banyak  menginfeksi  tanaman  karet  dan  menimbulkan  kerugian besar adalah jamur akar putih (JAP) yaitu jamur Rigidoporus sp.. Jamur akar putih (JAP) merupakan penyakit tular tanah ( soil borne diseases ) yang dapat bertahan selama bertahun- tahun  didalam  tanah  sebagai  sumber  infeksi  sehingga  sulit  untuk  dilakukan  pengendalian dan  menyebbakan  kerugian  finansial  mencapai  300  milyar  rupiah  setiap  tahunnya  akibat kematian  tanaman  dengan  persentase  yang  berbeda-beda  pada  perkebunan  rakyat  atau perkebunan besar (Situmorang, 2004).
Penggunaan fungisida sintetik yang tidak bijak akan memberikan pengaruh negatif terhadap  komponen  ekologi.  Pengendalian  hayati  merupakan  salah  satu  upaya  untuk mengendalikan  penyakit  jamur  akar  putih  yang  ramah  lingkungan  dan  bersifat berkelanjutan.  Pengendalian  tersebut  menggunakan  bakteri  antagonis  dari  rizosfer tanaman.  Bakteri  yang  hidup  dalam  sistem  perakaran  tanaman  dan  memberikan keuntungan bagi tanaman dikenal sebagai Plant Growth Promoting Rhizobacteria (PGPR). Salah  satu  bakteri  yang  telah  dilaporkan  berpotensi  untuk  dikembangkan  sebagai  agensia hayati adalah bakteri dari kelompok Bacillus yang terdapat di rizosfer tanaman.
Rodríguez  & Fraga  (1999) melaporkan bahwa beberapa strain  dari  genus Bacillus yang  diisolasi  dari  negara  tropis  diketahui  dapat  melarutkan  fosfat  dengan  baik.  Hasil penelitian Arwiyanto et  al . (2007) Bacillus spp. dari rizosfer beberapa tanaman di  daerah pertanaman  tembakau  diisolasi  kemudian  dilakukan  seleksi  langsung  kemampuannya menghambat penyakit lincat yang disebabkan oleh Ralstonia solanacearum terhadap isolat yang  diperoleh  dilapangan.    Hasilnya  menunjukkan  bahwa  6  isolat  diantaranya  mampu menekan patogen in vitro dan mampu menekan perkembangan penyakit di lapangan. Hasil  penelitian  Made et  al .  (2016)  bakteri Bacillus spp.  strain  BS3  memberikan kemampuan  penghambatan  terhadap  patogen Fusarium  oxysporum .  Hambatan  tersebut karena  adanya  pengaruh  senyawa  antibiotik  untuk  merusak  dinding  sel  patogen. Bacillus spp.  juga  dilaporkan  efektif  terhadap  penyakit  pustul  daun  kedelai  yang  disebabkan Xanthomonas campestris pv. glycines (Salemo, 2003).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  memperoleh  isolat Bacillus spp.  dari  rizosfer tanaman  karet  dan  yang  memiliki  potensi  sebagai  agens  hayati  jamur  akar  putih  yang disebabkan  oleh  patogen  jamur  akar  putih  ( Rigidoporus sp .) pada  tanaman  karet  ( Hevea brasilliensis ).

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini dilaksanakan di  Laboratorium Penyakit Tanaman Fakultas Pertanian Universitas  Jambi  dari  bulan  Oktober  2017  sampai  bulan  Desember  2017. Metode penelitian meliputi uji penghambatan pertumbuhan Rigidoporus sp. secara in vitro dan uji karakterisasi bakteri isolat bakteri Bacillus spp.
Isolasi bakteri Bacillus spp. dari rizosfer tanaman kedelai
Sampel  tanah  diambil  dengan  menggunakan  metode purposive  sampling .  Sampel tanah  diambil  dari  rizosfer  tanaman  karet  di  PT.Lestari  Asri  Jaya  Kabupaten  Tebo  dan Perkebunan Rakyat di Desa Selat Kab. Batanghari, yaitu klon PB 260.
Pengisolasian  bakteri  tahan  panas  seperti Bacillus sp.  menggunakan  metode  Eliza et  al (2007).  Tanah  ditimbang  sebanyak  10  g  tanah  dengan  menggunakan  timbangan digital,  kemudian sampel  tanah  yang sudah ditimbang disuspensikan pada 90 ml akuades (air  steril)  dalam erlenmeyer dan  dishaker  dengan  kecepatan  150  rpm  selama  30  menit (Khaeruni et al., 2010). Setelah itu diendapkan beberapa menit  agar terbentuk supernatan yaitu  bagian  air  yang  jernih  yang  berada  dilapisan  atas.  Supernatan  diambil  1  ml  dan diencerkan dengan metode pengenceran berseri sepuluh kali.
Setelah  dilakukan  pengenceran  berseri  10 1 -10 9 diperoleh  suspensi  pengenceran berseri 10 -3 , 10 -5 dan 10 -7 divortex selama satu menit lalu dipanaskan di dalam pemanas air pada suhu 80 0 C selama 30 menit, kemudian di biarkan dingin sebelum disebar pada media. Suspensi  yang  telah  dingin  disebar  sebanyak  0,1  ml  pada  media  TSA  ( Tryptic  Soy  Agar ) yang  sudah  dituangkan  ke  dalam  cawan  petri  kemudian  diratakan  menggunakan glass
beads . Media TSA  yang sudah ditumbuhi bakteri  diinkubasi  selama 24-48 jam (1-2 hari) pada suhu ruang. Koloni yang tumbuh kemudian dimurnikan dengan menggunakan media yang sama.

## Uji reaksi hipersensitif
Bakteri  hasil  isolasi  dari  rizosfer  tanaman  karet  kemudian  dilakukan  uji  reaksi hipersensitif.  Uji  hipersensitif  bertujuan  untuk  mengetahui  patogenesitas  bakteri  hasil isolasi yang dilakukan menggunakan tanaman indikator, yaitu tanaman tembakau berumur 3  bulan  dengan  daun  yang  telah  membuka  sempurna.  Pengamatan  gejala  hipersensitif dilakukan  hingga  48  jam  setelah  inokulasi  dengan  mengamati  gejala  nekrotik  yang terbentuk.  Gejala nekrotik  yang muncul menunjukkan bahwa bakteri  yang diinokulasikan bersifat sebagai patogen bagi tanaman atau bereaksi positif dan sebaliknya.
Perbanyakan jamur akar putih ( Rigidoporus sp.)
Isolat Rigidoporus sp. yang  digunakan  adalah  dari  koleksi  Laboratorium  Penyakit Tanaman  Fakultas  Pertanian  Universitas  Jambi.  Jamur  akar  putih  diremajakan  dengan membuat  inokulum  jamur  berbentuk  lempengan  berdiamater  0,5cm  setebal  1–2  mm dengan  bantuan  bor  gabus  ( cork  borer ) steril  yang  selanjutnya  diinokulasikan  tepat ditengah  media  PDA  kemudian  diinkubasikan  pada  suhu  ruang  selama  2-4  hari  hingga jamur menutupi permukaan cawan petri.
Uji daya hambat Bacillus spp. terhadap Rigidoporus sp. secara in vitro
Pengujian  daya  hambat  isolat  bakteri  terhadap Rigidoporus sp.  pada  media  PDA dilakukan  dalam  dua  tahap,  yaitu  uji  penghambatan  dan  uji Dual  cultur .  Aktivitas penghambatan  diamati  secara  kualitatif  berdasarkan  adanya  zona  hambat  yang  terbentuk disekitar koloni bakteri (Kusdiana et al., 2015). Pengamatan dilakukan pada 7 hari setelah inokulasi  (hsi).  Isolat  bakteri  yang  menunjukkan  adanya  zona  hambat  selanjutnya  diuji terhadap Rigidoporus sp. dengan metode uji ganda.
Gambar  1.  Skema  uji  ganda    isolat  bakteri  terhadap Rigidoporus sp.:  (A)    koloni Rigidoporus sp. ; (B) Isolat bakteri; (R1) Jari-jari koloni Rigidoporus sp. yang menjauhi koloni bakteri; (R2) Jari-jari koloni Rigidoporus sp. yang mendekati koloni bakteri.
Uji  ganda  dilakukan  dengan  menggoreskan  isolat  bakteri  berjarak  3  cm  dari  tepi cawan pada media PDA dan  3 cm dari koloni cendawan Rigidoporus sp.     berdiameter 0,5  cm  (Gambar  1).  Biakan  diinkubasi  pada  suhu  ruang  dan  dilakukan  pengamatan  7  his (hari setelah inokulasi).
Pengamatan dilakukan dengan mengukur jari-jari koloni cendawan Rigidoporus sp. . Persentase  daya  hambat  bakteri  terhadap Rigidoporus sp.  dihitung menggunakan rumus sebagai berikut (Balosi et al ., 2014) .
I = X 100%
Keterangan :
I = Persentase daya hambat (%)
R1  = Jari-jari koloni Rigidoporus sp yang menjauhi koloni bakteri R2  = Jari-jari koloni Rigidoporus sp yang mendekati koloni bakteri
Karkterisasi isolat Bacillus spp.

## Uji kitinolitik
Seleksi  bakteri  kitinolitik  dilakukan  untuk  mengetahui  aktivitas  enzim  yang dimiliki  oleh  bakteri  antagonis  yang  dilakukan  pada  media  koloidal  kitin.  Seleksi dilakukan dengan metode difusi cakram dengan cara meletakkan papper disc yang dibuat dari kertas Whattman berdiameter 6 mm pada permukaan media koloidal kitin yang sudah memadat  di  cawan  petri  menggunakan  pinset  steril.  Pengukuran  zona  bening  dilakukan hingga 7 hari setelah inokulasi (Setia dan Suharjono, 2015).

## Gambar 2. Uji bakteri kitinolitik
Besaran  zona  bening  yang  terbentuk  menunjukkan  besar  kecilnya  aktivitas  enzim kitinase yang dimiliki bakteri uji tersebut. Berdasarkan zona bening yang terbentuk Indeks Kelarutan dapat dihitung menggunakan rumus (Setia dan Suharjono, 2015) :
Keterangan : IK = Indeks kelarutan
Dzb = Diameter zona bening Dk
= Diameter koloni

## Uji fiksasi nitrogen
Bakteri  uji  dikulturkan  pada  media  cair  BNF  ( Biological  Nitrogen  Fixation ). Biakkan  bakteri  pada  media  padat  diambil  sebanyak  1  ose  kemudian  ditumbuhkan  pada media  BNF  lalu  ditutup  menggunakan  kapas.  Pengamatan  dilakukan  dengan  melihat kekeruhan  media  BNF,  apabila  media  berubah  menjadi  keruh,  isolat  tersebut  dapat memfiksasi nitrogen (Isti’anah, 2015).
Dzb Dk Cawan petri

## Uji pelarut fosfat
Isolat bakteri diuji  kemampuannya dalam melarutkan fosfat dengan menggunakan metode difusi cakram, yaitu dengan menumbuhkan biakan bakteri pada media pikovskaya. Media dituangkan kedalam cawan petri hingga media memadat kemudian kertas Whattman ( papper disc ) dengan diameter 6 mm diletakkan pada permukaan media pikovskaya  yang sudah  memadat  tadi  menggunakan  pinset  steril.  Pengujian  ini  dilakukan  sebanyak  2 ulangan  dan  pengukuran  diameter  zona  bening  yang  terbentuk  dilakukan  hingga  7  hari setelah inokulasi (Santosa, 2007) :
Gambar 3. Uji bakteri pelarut fosfat
Keterangan :
Dk = Diameter koloni
Dzb    = Diameter zona ening = Papper disc
Isolat  bakteri    yang  membentuk holozone di  sekitar  koloni  menunjukkan  besar kecilnya  potensi  jamur  pelarut  fosfat  dalam  melarutkan  unsur  P  dari  bentuk  yang  tidak terlarut kemudian dihitung Indeks Kelarutan Fosfat (IKF) dengan menggunakan rumus :
Keterangan : IK = Indeks kelarutan fosfat
Dk = Diameter koloni Dzb
= Diameter zona bening

## Analisis data
Data  hasil  dari  pengamatan  dianalisis  dengan  menggunakan  data  tabulasi  dan secara deskriptif.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil
Uji  penghambatan  bakteri Bacillus spp.  terhadap  pertumbuhan  koloni Rigidoporus sp. secara in vitro
Hasil isolasi bakteri dari rizosfer tanaman kedelai diperoleh 108 isolat Bacillus spp. dan  terdapat  106  isolat  yang  bukan  merupakan  patogen  (negatif  hipersensitif)  serta  71 isolat  yang mampu menghambat pertumbuhan patogen Rigidoporus sp. secara in vitro .
Dk Dzb Cawan petri
Pengujian daya hambat bakteri rizosfer terhadap koloni Rigidoporus sp. dinyatakan bernilai  positif  apabila  terjadi  penghambatan  pertumbuhan  koloni Rigidoporus sp.  dan pengujian bernilai negatif apabila tidak terjadi penghambatan pertumbuhan jamur tersebut.
Tabel 1. Persentase daya hambat Bacillus spp. terhadap Rigidoporus sp. secara in vitro Kode Isolat Uji Antagonis pada Koloni Kode Isolat Uji Antagonis pada Koloni Kode Isolat Uji Antagonis pada Koloni A1-K1 + R1-K2 + R2-K21 - A1-K2 - R1-K3 + R3-K1 + A1-K3 - R1-K4 + R3-K2 - A1-K4 - R1-K5 + R3-I3 + A1-K5 - R1-K6 - R3-K4 + A2-K1 + R1-K7 + R3-K5 + A2-K2 - R1-K8 + R3-K6 + A2-K3 - R1-K9 + R3-K7 + A2-K4 + R1-KI0 + R3-K8 - A3-K1 - R1-K11 + R3-K9 - A3-K2 - R1-K12 + R3-K10 - A3-K3 + R1-K13 - R3-K11 + A3-K4 - R1-K14 + R3-K12 + A3-K5 + R1-K15 - R3-K13 - A3-K6 + R1-K16 - R3-K14 - A4-K1 + R2-K1 - R3-K15 + A4-K2 + R2-K2 + R3-K16 + A5-K1 + R2-K3 + R4-K1 + A5-K2 + R2-K4 + R4-K2 + A5-K5 - R2-K5 + R4-K3 + A5-K6 + R2-K6 + R4-K4 + A5-K7 + R2-K7 - R4-K5 - A5-K8 + R2-K8 + R4-K6 + A5-K9 - R2-K9 - R4-K7 + A5-K10 - R2-K10 + R4-K8 + A5-K11 - R2-K11 + R4-K9 - A5-K12 - R2-K12 + R4-K10 + A5-K13 + R2-K13 + R5-K1 + A5-K14 - R2-K14 + R5-K2 + A5-K15 + R2-K15 + R5-K3 + A5-K16 + R2-K16 - R5-K4 + A5-K17 + R2-K17 + R5-K5 + A5-K18 + R2-K18 + R5-K6 + A5-K19 + R2-K19 - R5-K7 + R1-K1 + R2-K20 - R5-K8 + R5-K9 - + = Terjadi hambatan pertumbuhan koloni Rigidoporus sp.
-
= Tidak terjadi hambatan
Gambar 4. Pengujian daya hambat bakteri Bacillus spp. terhadap Rigidoporus sp. secara in vitro

## Persentase daya hambat dan karakterisasi bakteri
Berdasarkan hasil uji persentase daya hambat, isolat Bacillus sp. juga dilakukan uji karakterisasi  bakteri  sehingga diperoleh  isolat  yang memiliki karakter uji bakteri  dengan masing-masing kemampuan daya hambat yang dimiliki (Tabel 2).
Tabel 2. Hasil uji daya hambat dan uji karakterisasi bakteri.
Kode Isolat Reaksi Hipersensitif Persentase Daya Hambat (%) Indeks Kelarutan Kitin Fiksasi Nitrogen Indeks Kelarutan Fosfat A5-K1 - 35.71 2.58 + 2.00 A5-K6 - 40.28 2.25 + 1.95 R1-K2 - 46.05 0.00 + 0.00 A5-K15 - 21.86 2.55 + 0.00 R2-K17 - 33.75 2.53 + 0.00 R3-K11 - 38.46 0.00 + 1.38 R5-K3 - 35.90 1.62 + 1.52 +
= Positif hipersensitif dan positif menambat nitrogen
- = Negatif hipersensitif
Hasil  uji  karakterisasi  bakteri  menunjukkan  bahwa  bakteri  Bacillus  dari  rizosfer tanaman  karet  memiliki  beragam  karakter  sehingga  mampu  menghambat  pertumbuhan koloni Rigidoporus sp.. Isolat bakteri rizosfer mampu menekan pertumbuhan Rigidoporus sp.    sebesar  21,86  %  sampai  46,05  %.  Penghambatan  21,86  %  yaitu  isolat  A5-K15  dan penghambatan 46,05 % yaitu isolat R1-K2.

## Pembahasan
Berdasarkan  hasil  pengujian in  vitro dari  108  isolat  diperoleh  106  isolat  negatif hipersensitif  dimana  reaksi  hipersensitif  adalah  reaksi  pertahanan  tanaman  terhadap patogen  yang  berkembang  secara  cepat,  dan  71  isolat  bakteri  rizosfer  yang  mampu menghambat  pertumbuhan Rigidoporus sp.  dan  3  isolat  yang  memiliki  tiga  karakter  uji yaitu  isolat  A5-K1,  A5-K6,  dan  R5-K3.  Bakteri  yang  terdapat  pada  rizosfer  tanaman umumnya  memiliki  keragaman  karakterisasi  yang  tinggi,  besar  kemungkinan  diakibatkan karena  mendapatkan asupan energi  dari senyawa metabolit  yang dihasilkan oleh tanaman ke  dalam  tanah  melalui  akar.  Isolat  tersebut  mampu  menekan  pertumbuhan Rigidoporus sp.  ditandai  dengan  adanya  zona  hambat  dan  pertumbuhan  miselium  cendawan  yang menjauhi bakteri rizosfer. Strobel dan Daisy (2003) menyatakan bahwa terbentuknya zona hambat  pada  koloni  bakteri  terhadap Rigidoporus sp.  karena  bakteri  mengandung antibiotik dimana antibiotik digolongkan sebagai metabolit sekunder yang dihasilkan oleh bakteri. Menurut Nagorska et al (2007), beberapa antibiotik yang dihasilkan oleh Bacillus spp. adalah subtilosin A, iturin, fengisin, dan surfactin.
Melliawati et al . (2006) menyatakan bahwa zona hambat yang terbentuk pada cawan petri merupakan sebuah tanda adanya senyawa aktif yang dihasilkan oleh bakteri Bacillus tersebut  mampu  menghambat  pertumbuhan  patogen.  Senyawa  antifungi  dapat mengakibatkan terjadinya pertumbuhan abnormal pada hifa yang mengakibatkan hifa tidak dapat berkembang dengan sempurna (Eliza et al ., 2007). Menurut Hallman et al . (2001) mekanisme  antibiosis  bakteri  Bacillus  dalam  menghambat  pertumbuhan  cendawan berkaitan  erat  dengan  kemampuannya  menghasilkan  enzim  seperti  kitinase,  protease,  dan selulase. Enzim kitinase mampu mendegradasi kitin yang merupakan komponen penyusun dinding sel pada cendawan patogen (Raaijimaker et al , 2008). Adanya senyawa antibiosis berupa  kitin  pada  media  menyebabkan  produksi  kitinase  isolat  tersebut  terpacu  untuk mendegradasi  dinding  sel  jamur.  Saat  kitin  yang  ada  di  media  sudah  terurai,  bakteri
kitinolitik  mengkolonisasi  hifa  jamur  untuk  menguraikan  kitin  yang  ada  pada  dinding  sel jamur.  Zona  bening  yang  terbentuk  disekitar  koloni  disebabkan  karena  isolat  bakteri tersebut menghasilkan enzim kitinase.
Isolat yang memiliki kemampuan menambat nitrogen bebas menunjukkan perubahan media BNF dari bening menjadi keruh. Media BNF tidak mengandung unsur nitrogen pada komposisi  bahannya  sehingga  isolat  yang  dapat  ditumbuhkan  dalam  media  tersebut  ialah isolat yang mampu menambat nitrogen bebas. Bakteri rizosfer mendapatkan asupan energi dari  senyawa  metabolit  yang  dikeluarkan  oleh  tanaman  melalui  akar.  Menurut  Rodriguez &  Fraga  (1999),  senyawa  metabolit  tersebut  dapat  berupa  senyawa-senyawa  gula,  asam amino, asam organik, glikosida, senyawa-senyawa nukleotida, vitamin, enzim dan senyawa indol.  Aktivitas  metabolisme  dan  senyawa  metabolit  yang  dilepaskan  oleh  tanaman  ke dalam tanah melalui akar merupakan faktor yang sangat menentukan keadaan mikrobiologi tanah pada daerah perakaran tanaman. Penelitian yang dilakukan oleh Astuti (2007) bahwa Bacillus sp. dapat memproduksi hormon IAA, melarutkan fosfat, produksi siderofor  yang dapat  membantu  pertumbuhan  tanaman  sehingga  meningkatkan  ketahanan  tanaman. Menurut Chernin et al. (1995), aktivitas kitinolitik terjadi ketika bakteri dapat hidup pada media  yang mengandung kitin  yang digunakan sebagai  sumber karbon dan mendegradasi kitin  menjadi  N-asetilglukosamin.  Bakteri  yang  mampu  menambat  nitrogen  bebas  besar pengaruhnya dalam proses kesuburan tanah, tidak sedikit sumbangan yang diberikan oleh bakteri-bakteri  nitrogen  yang  mampu  menambat  gas  N 2 yang  ada  dalam  udara  untuk dijadikan senyawa N yang diperlukan tanaman.
Rodríguez  &  Fraga  (1999)  melaporkan  bahwa  beberapa  strain  dari  genus Pseudomonas,  Bacillus,  dan  Rhizobium yang  diisolasi  dari  negara  tropis  diketahui  dapat melarutkan  fosfat  dengan  baik.  Hasil  penelitian  sebelumnya,  telah  banyak  ditemukan berbagai  jenis  bakteri  pelarut  fosfat  dengan  luas holozone yang  berbeda-beda  tergantung pada  jenis  bakteri  dan  daerah  asalnya.  Sampel  tanah  yang  diambil  di  kawasan  Cikaniki, Jawa  Barat,  diperoleh  24  isolat  bakteri  pelarut  fosfat  dan holozone yang  paling  luas  juga dibentuk  oleh  Bacillus  yaitu  2,5  cm  (Widawati et  al. 2010).  Mikroba  pelarut  fosfat mensekresikan  sejumlah  asam  organik  seperti  asam-asam  format,  asetat,  propionat, laktonat,  glikolat,  fumarat,  dan  suksinat  yang  mampu  membentuk  khelat  dengan  kation- kation seperti Al dan Fe. Asam tersebut berpengaruh terhadap pelarutan fosfat, sehingga P menjadi tersedia dan dapat diserap oleh tanaman (Rao, 1994).
Hasil  pengamatan  menunjukkan Bacillus sp.  yang  diperoleh  mampu  menghasilkan enzim  kitinase,  menambat  nitrogen,  dan  melarutkan  fosfat,  sehingga  bakteri  ini  mampu berkompetisi mendapatkan nutrisi yang akhirnya mengimbas tanaman sehingga tahan terhadap jamur akar  putih. Pada tabel  2  terlihat  isolat          R1-K2 memiliki persentase daya hambat yang  tinggi  namun  tidak  memiliki  indeks  kitinolitik,  sedangkan  isolat  A5-K1  dengan indeks  kitinolitik  paling  tinggi  tidak  menghasilkan  persentase  daya  hambat  yang  tinggi pula.  Menurut  Verschuere et  al .,  (2000)  pengendalian  hayati  terutama  pada penghambatan  pertumbuhan  dan  perkembangan  patogen  tanaman    tidak  selalu  berkaitan dengan  produksi  senyawa  antibiotik,  namun  ada  mekanisme  lain  seperti  kompetisi  atau persaingan.  Persaingan  terjadi  ketika  terdapat  dua  atau  lebih  organisme  dalam  kondisi secara langsung yang memanfaatkan suatu ruang dan membutuhkan nutrisi yang sama. Hal ini dikarenakan terjadi persaingan dalam memperoleh fosfat, nitrogen, dan nutrisi lain yang dibutuhkan  oleh  bakteri  dan  patogen  sehingga  pertumbuhan  dan  perkembangan  patogen menjadi terhambat.
Mikroba  antagonis  dapat  berfungsi  sebagai  agens  pengendali  patogen  melalui mekanisme  kompetisi,  antibiosis,  parasitisme  atau  ketahanan  yang  terinduksi.  Pengendalian hayati  patogen  menggunakan  mikroorganisme  yang  berasosiasi  dengan  rizosfer  dan  bahan organik merupakan pendekatan yang efisien dan ramah lingkungan (Bargabus et al. 2003).

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil dan pembahasan dari penelitian yang telah dilaksanakan, maka dapat disimpulkan bahwa :
1. Rizobakteri  yang  diperoleh  dari  rizosfer  tanaman  karet  lokasi  PT.  Lestari  Asri  Jaya Kabupaten  Tebo  dan  perkebunan  rakyat  di  Desa  selat,  Kab.  Batanghari  memiliki keragaman karakterisasi yang tinggi.
2. Persentase daya hambat isolat Bacillus spp. terhadap Rigidoporus sp . secar a  in  vitro, yaitu 21,86% - 46,05% .
3. Isolat Bacillus spp.  R1-K2  berpotensi  sebagai  agens  hayati  dalam  mengendaikan Rigidoporus sp. pada tanaman karet.

## Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  lanjutan  untuk  setiap  isolat  bakteri  rizosfer  dalam mengendalikan penyakit jamur akar putih dengan menggabungkan beberapa isolat bakteri rizosfer potensial pada tanaman karet.

## DAFTAR PUSTAKA
Arwiyanto  T,  Asfanudin  R,  Wibowo  A,  Martoredjo  T,  Dalmadiyo  G.  2007.  Penggunaan Bacillus isolat lokal untuk menekan penyakit lincat tembakau Temanggung. Berkala Penelitian Hayati 13: 79-84.
Astuti  RP.  2007.  Rizobakteria Bacillus sp.  Asal  Tanah  Rizosfer  Kedelai  yang  Berpotensi sebagai  Pemacu  Pertumbuhan  Tanaman.  [Tesis].  Sekolah  Pascasarjana  Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Balosi,  F.,  Irwan  Lakani,  &  Johanes  Panggeso.  2014.  Eksplorasi  bakteri  endofit  sebagai  agens pengendali  hayati  terhadap  penyakit  darah  pada  tanaman  pisang  secara in  vitro .  e-J. Agrotekbis 2 (6) : 579-586. ISSN : 2338-3011.
Bargabus  RL,  Zidack  NK,  Sherwood  JE,  Jacobsen  BJ.  2003.  Oxidative  burst  elicited  by Bacillus  mycoides isolat,  Bac  J,  a  biological  control  agent,  occurs  independently  of hypersensitive  cell  death  in  sugar  beet.  Mol  Plant–Micro  Interact.  16:1145–1153. DOI: http://dx.doi.org/10. 1094/MPMI.2003.16.12.1145. Basuki. 1982. Penyakit dan gangguan  pada  tanaman  karet.  Pusat  penelitian  dan  pengembangan  perkebunan. Tanjung Morawa.
Chernin,  K.,  Z.  Ismailov,  S.  Haran  dan  I.  Chet. 1995.  Chitinolytic Enterobacter agglomerans Antagonistic to Fungal Plant Pathogen s. Appl Environ Microbiol 61(5):1720-1726.
Direktorat  Jendral  Perkebunan,  Departemen  Pertanian.  2016.  Pedoman  teknis pengembangan  tanaman  karet.  http://ditjenbun.deptan.go.id.  Diunduh  pada  tanggal 30 november 2017.
Eliza,  Munif  A,  Djatnika  I,  Widodo.  2007.  Karakter  Fisiologis  dan  Peranan  Antibiosis  Bakteri Perakaran  Graminae  terhadap  Fusarium  dan  Pemacu  Pertumbuhan  Tanaman  Pisang.  J. Hortikultura. Vol. 17 No. 2.
Hallmann  J.  2001.  Plant  Interaction  with  Endophytic  Bacteria.  In:  Jeger  MJ,  Spence  NJ.
Editor. Biotic Interaction in Plant-Pathogen Associations. CAB International.
Isti’anah, I. 2015. Karakterisasi Bakteri Penambat Nitorgen dan Penghasil Indole-3-Acetic serta  Aplikasinya  Pada  Bibit  Kelapa  Sawit. Tesis .  Pascasarjana  Institut  Pertanian Bogor.
Khaeruni  A,  Sutariati  GAD,  Wahyuni  S.  2010.  Karakterisasi  dan  Uji  Aktivitas  Bakteri Rizosfer  Lahan  Ultisol  sebagai  Pemacu  Pertumbuhan  Tanaman  dan  Agensia  Hayati Jamur  Patogen  Tular  Tanah  Secara In  Vitr.  J.  HPT  Tropika.  Vol.  10,  No.  2:  123  – 130.
Kusdiana  APJ et  al. 2015.  Pengujian  biofungisida  berbasis  mikroorganisme  antagonis untuk  pengendalian  penyakit  Jamur  Akar  Putih  pada  Tanaman  Karet.  Jurnal penelitian karet. J.Nat. Rubb. Res. Vol 33, No.2: 143-156.
Made,  D et  al .  2016.  Antagonistik  bakteri Pseudomonas spp.  dan Bacillus spp.  terhadap jamur  akar Fusarium  oxysporum penyebab  penyakit  layu  tanaman  tomat. J.Bak.Sar. Vol. 05, No. 01: 2088-2149 .
Melliawati  R,  DN  Widyaningrum,  AC  Djohan  dan  H  Sukiman.  2006.  Pengkajian  bakteri endofit  penghasil senyawa bioaktif untuk  proteksi  tanaman. Biodiversitas. 7(3):221- 224.
Nagorska,  K.,  M.  Bilowski  &  M.  Obuchowski.2007.  Multicelluler  Behaviour  and Production of Wide Variety of Toxic Substances Support  Usage of Bacillus  subtilis as Powerful Biocontrol Agent. Acta Biochimica Polonica 54: 495−508.
Raaijmaker  JM,  TC  Paulitz,  CAZ  Steinberg,  dan  LY  Moenne.  2008.  The  Rhizosphere:  a playground  and  battlefield  for  soilborne  pathogens  and  beneficial  microorganism. Plant Soil. 321(1-2):341-361.
Rao, S. 1994. Mikroorganisme Tanah Dan Pertumbuhan Tanaman. Jakarta: Ed 2. UI-Press.
Rodríguez, H. & Fraga, R. 1999. Phosphate Solubilizing Bacteria and Their Role in Plant Growth  promotion.  Biotechnology  Advances  of  Cuban  Research  Institute  17:  319– 339.
Santosa, Edi. 2007. Metode Analisis Biologi Tanah : Mikroba Pelarut Fosfat. Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Sumberdaya Lahan Pertanian. Bogor.
Salerno, C. M. dan Sagordy, M. A. 2003.Short Communication : Antagonistic Activity by Bacillus  subtillis Against Xanthomonas  campestris pv. glycines Under  Controlled Conditions. Spanish Journal of Agricultural Research (2003) I (2), 55-58.
Setia,  I.N  dan  Suharjono.  2015.  Diversitas  dan  Uji  Potensi  Bakteri  Kitinolitik  dari Limbah92 Udang . Jurnal Biotropika, 3(2): 95-98.
Situmorang  A.  2004.  Status  dan  manajemen  pengendalian  penyakit  akar  putih  di perkebunan karet. Di dalam: Situmorang et al., editor. Strategi Pengelolaan Penyakit Tanaman  Karet  untuk  Mempertahankan  Potensi  Produksi  Mendukung  Industri Perkaretan  Indonesia  Tahun  2020.  Prosiding  Pertemuan  Teknis;  Palembang,  6-7 Oktober 2004. Palembang: Pusat Penelitian Karet. hlm 66-86.
Strobel G dan B Daisy. 2003. Bioprospecting for Microbial Endophytes and Their Natural Products. Microbiology and Molecular Biology Reviews. Microbiol 67:491-502.
Suryana, A.  &  Goenadi, D. H. 2007. Prospek dan Arah Pengembangan  Agribisnis Karet, Edisi kedua. Departemen Pertanian. Jakarta.
Verschuere, L., Geert, R., Patrick, S. dan Willy, V. 2000. Probiotic bacteria as biological control agents in aquaculture. J . Microbiol . Mol. Biol ., 64: 665-671.
Widawati,  S.  2010.  Teknologi  inovatif  Mikroba  Biofertilizer  Untuk  mempercepat Reklamasi  Lahan  Pertanian  Di  Kawasan  Penyangga  Gunung  Salak  Dan  Mikroba Endofitik  Untuk  Agen  Biokontrol Fusarium  oxysporum dan Rhizoctonia  solani . Pusat Penelitian Biologi-LIPI. Jakarta. 6-8p .