Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 5(2), Oktober 2020, 387-396 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK GANGGANG HIJAU (Ulva lactuca L.) DENGAN VARIASI KONSENTRASI PELARUT ETANOL 60%, 75%, DAN 96% MENGGUNAKAN METODE DPPH (1,1-difenil-2- pikrilhidrazil)

## Desti Kameliani, Nina Salamah, Any Guntarti*
Fakultas Farmasi Universitas Ahmad Dahlan
*Email: any_guntarti@yahoo.co.id
Artikel diterima: 10 Juli 2020; Disetujui: 17 September 2020 DOI: https://doi.org/10.36387/jiis.v5i2.534

## ABSTRAK
Radikal  bebas  memberikan  efek  negatif  yaitu  mempercepat  terjadinya  penuaan dini  akibat  stress  oksidatif  yang  berperan  dalam  proses  penuaan.  Peenelitian sebelumnya  ekstrak  etanol  ganggang  hijau Spyrogyra dan Ulva  lactuca L. memiliki  aktivitas  antioksidan  dengan  metode  DPPH.  Tujuan  penelitian  adalah mengetahui  potensi  ekstrak  ganggang  hijau  ( Ulva  lactuca L.)  dengan  variasi konsentrasi  pelarut  sebagai  antioksidan  dengan  metode  DPPH  serta  mengetahui harga  IC 50 ekstrak  etanol  yang  dibandingkan  dengan  asam  galat.  Ekstraksi maserasi  dengan  pelarut  etanol  60%,  75%,  dan  96%    kemudian  dilakukan  uji kualitatif  kandungan  senyawa  aktif  ekstrak U.  lactuca L.  Aktivitas  antioksidan ekstrak etanol U. lactuca L. spektrofotometri menggunakan pereaksi DPPH ( 1,1- difenil-2-pikrilhidrazil )  untuk  mendapatkan  persen  penghambatan  radikal  bebas. Hasil  dianalisis  secara  statistik  menggunakan  SPSS  dengan  taraf  kepercayaan 95%  (p=0,05).  Hasil  analisis  bahwa  aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol  96% U. lactuca L.  lebih  besar  daripada  ekstrak  etanol  60%  dan  75%.  Aktivitas antioksidan  ekstrak  etanol  60%,  75%,  dan  96%,  nilai  IC 50 berturut-turut  adalah 441,70  mg/ml  ;  242,10  mg/ml  dan  2,04  mg/ml.  Nilai  IC 50 standar  asam  galat adalah  3,92  x  10 -3 mg/ml.  Berdasarkan  uji  aktivitas  antioksidan  yang  dilakukan, kesimpulan  bahwa  asam  galat  memiliki  kekuatan  antioksidan  yang  kuat, sedangkan  ketiga  ekstrak  etanol  60%,  75%  dan  96% U.  lactuca L.    memiliki kekuatan antioksidan yang sangat lemah.
Kata kunci : ekstrak etanol Ulva lactuca L. , fenolik, antioksidan, DPPH.

## ABSTRACT
Free radicals give a negative effect. According to earlier research, Spyrogyra and Ulva  lactuca  L.  have  an  anti-oxidant  activity.  This  research  aim  to  knowing  the extract potential of green algae (Ulva lactuca) with variety concentration solvent as  anti-oxidant  by  DPPH  method,  and  finding  the  price  of  IC 50 ethanol  extract which compared with Galat acid. Extraction technic was maseration with ethanol solvent  60%,75%,  and  96%  which  is  implemented  a  qualitative  test  of  extract active compound of U. lactuca Antioxidant activity of U. lactuca extract measured with  spektrofotometri  by  using  DPPH  (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil)  method  to  get
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 5(2), Oktober 2020, 374- p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
percentation of free radical resistor. The analytical result using SPSS, statistically got  95%  credibility  (p=0,05).  This  research  showed  that  activity  of  antioxidant ethanol extract 96% of U. lactuca was higher than ethanol extract 60% and 75%. Activity  of  antioxidant  ethanol  extract  60%,75%,  and  96%  which  confirmed  by value  of  IC 50 continously  are  441,70  mg/ml  ;  242,10  mg/ml  dan  2,04  mg/ml. Whereas the value of IC 50 galat acid standard is 3,92 x 10 -3 mg/ml. Based on tests of conducted antioxidant activity, the gallic acid has a strong antioxidant power, U. lactuca have a very weak antioxidant power
Keyword: ethanol extract of  Ulva lactuca L ., phenolic, antioxidant, DPPH.

## PENDAHULUAN
Penuaan  adalah  suatu  proses biologis  kompleks  sebagai  hasil  dari penuaan  intrinsik  (dari  dalam  tubuh
seperti genetik) dan penuaan ekstrinsik  (dari  lingkungan).  Faktor ekstrinsik  yang  paling  berpengaruh dalam proses penuaan adalah radikal bebas  (Nana  et  al.,  2012).  Radikal bebas dapat memberikan efek negatif
yaitu mempercepat terjadinya penuaan  dini  akibat  terjadinya  stress oksidatif  yang  berperan  penting dalam  proses  penuaan  (Putrawan et
al ., 2014).
Antioksidan didefinisikan sebagai senyawa yang mampu
menunda, memperlambat atau
menghambat  reaksi  oksidasi  (Renee
et  al .,  2014).  Berdasarkan  sumber
perolehannya ada 2 macam
antioksidan,  yaitu  antioksidan  alami
dan  antioksidan  buatan  (sintetik)
(Cheng et  al .,  2016).Kekhawatiran
akan  kemungkinan  efek  samping yang belum diketahui dari antioksidan  sintetik  menyebabkan antioksidan  alami  menjadi  alternatif yang  sangat  dibutuhkan  (Ipandi et al ., 2016).
Hampir  di  setiap  tanaman memiliki  aktivitas  antioksidan,  tidak terkecuali  tanaman  yang  hidup  di laut  seperti  ganggang.  Di  dalam ganggang  hijau  ( Ulva  lactuca L.) mengandung  senyawa  melatonin. Melatonin berfungsi sebagai
antioksidan, yaitu melalui aksi penangkapan  radikal  bebas  secara langsung  dan  meningkatkan  enzim antioksidan  (Lobo et  al, 2010).
Komponen fenolik dapat menghambat  oksidasi  lipid  dengan menyumbangkan atom hidrogen kepada  radikal  bebas  (Septiana  and Ari asnani, 2012).
Perlu penggunaan metode pengukuran  antioksidan  yang  tepat.
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 5(2), Oktober 2020, 374- p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
Metode uji aktivitas antioksidan yang
digunakan  pada  penelitian ini  adalah metode DPPH ( 1,1-Difenil-2- pikrilhidrazil ). Metode DPPH memberikan  informasi  reaktivitas senyawa  yang  diuji  dengan  suatu radikal  stabil.  DPPH  memberikan serapan kuat
pada panjang
gelombang  517  nm  dengan  warna
violet gelap. Semakin kecil nilai IC 50 menunjukkan semakin tinggi
aktivitas antioksidannya (Rivai et al. ,
2013).
Dalam  proses  ekstraksi  suatu bahan  tanaman,  banyak  faktor  yang
dapat mempengaruhi kandungan senyawa  hasil  ekstraksi  diantaranya: jenis  pelarut,  konsentrasi  pelarut, metode ekstraksi, dan suhu (Senja et al. ,  2014).  Perbedaan  konsentrasi
etanol akan mempengaruhi
banyaknya  fenolik  yang  terlarut selama  proses  ekstraksi  (Yuli et  al .,
2013).  Tingginya  konsentrasi  pelarut
etanol menunjukkan
turunnya
polaritas  pelarut  (Mardaningsih e  t al. , 2012).
Pada penelitian ini, konsentrasi etanol  60%,  75%,  dan  96%  pada proses  ekstraksi  senyawa  aktif  dari
U.  lactuca L.  dilakukan  untuk
mengetahui  pengaruh  konsentrasi pelarut  etanol  terhadap  aktivitas antioksidan dengan menangkal radikal  bebas  DPPH.  Nilai  aktivitas antioksidan  akan  dinyatakan  dengan IC 50 yang  merupakan  konsentrasi penghambatan radikal bebas sebanyak 50%.

## METODE PENELITIAN
Pembuatan Ekstrak: Ekstrak secara maserasi, ditimbang sejumlah serbuk 100  g  ,ditambahkan  etanol  dengan variasi  konsentrasi  yaitu  60%,  75%, dan  96%  direndam  dalam  cairan penyari dengan beberapa kali pengadukan  pada  temperatur  kamar (Anonim,  2008).  Maserat  disaring, diuapkan  dengan rotary  evaporator pada  suhu  50˚C,  ekstrak  kental selanjutnya  ditimbang  dan  dihitung rendemennya.
Penetapan Susut Pengeringan
Serbuk  : Sebanyak  1  gram  serbuk kering U.  lactuca L.  dimasukkan  ke dalam Halogen  Moisture  Analyzer selama  15  menit  pada  temperatur 105˚C (Anonim, 2008)
Penetapan  Kadar  Air  Ekstrak:
Penetapan kadar air ekstrak
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 5(2), Oktober 2020, 374- p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
dilakukan menggunakan alat destilasi toluen (Anonim, 2008).
Uji kualitatif
Uji  polifenol :  Sebanyak  1  ml sampel  uji  ditambahkan  FeCl 3 3 tetes.
Uji Aktivitas Antioksidan
Uji  pendahuluan :  Larutan  sampel ditambah  dengan  pereaksi  DPPH 0,15  mM.  Jika  terjadi  perubahan warna  dari  ungu  menjadi  kuning
maka sampel positif dapat menangkap radikal bebas. Uji Aktivitas Penghambatan
Radikal  Bebas  DPPH: Penentuan waktu  operasional  :  Larutan  uji  dan larutan  Asam  galat  masing-masing sebanyak  1,0  ml  ditambah  dengan 1,0  ml  DPPH  0,15  mM.  Diamati absorbansinya  selama  90 menit  pada panjang  gelombang  517  nm  (Kelly, G.S., 2011).

## Analisis Hasil Penelitian
Persen  penghambatan  radikal  bebas dihitung  dengan  rumus  sebagai berikut :
% inhibisi = Ac − As
Ac x100 Ac : Absorbansi kontrol negatif As : Absorbansi sampel
Berdasarkan data-data yang
diperoleh  dibuat  persamaan  garis
regresi. Berdasarkan persamaan regresi  selanjutnya  ditentukan  besar konsentrasi  penghambatan  radikal 50% (IC 50 ).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penetapan Susut Pengeringan
Serbuk U. lactuca L.
Penetapan  susut  pengeringan serbuk U.  lactuca L.  ini  dilakukan
dengan  menggunakan  alat Halogen Moizturizer Analyzer. Susut
pengeringan  serbuk  sebesar  6,47  ± 0,28%.  Nilai  tersebut  kurang  dari batas  maksimum  yang  ditetapkan Farmakope  Herbal  yaitu  kurang  dari 10%. Susut pengeringan perlu dilakukan  untuk  mengetahui  kadar air  dan  senyawa  menguap  lainnya dalam  serbuk  simplisia  yang  telah dikeringkan  dan  untuk  memastikan simplisia  aman  dari  tumbuhnya kapang    dan  jamur  yang  dapat menurunkan kualitas simplisia (Anonim, 2008).
Dari hasil di atas menunjukkan bahwa susut pengeringan dari serbuk simplisia U. lactuca L. adalah kurang dari  10%,  sehingga  dapat  dikatakan
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 5(2), Oktober 2020, 374- p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
bahwa  simplisia  tersebut  memenuhi syarat.Hasil penetapan susut pengeringan  serbuk  ganggang  hijau dapat dilihat pada tabel I. Tabel 1. Hasil penetapan moisture content dari serbuk U. lactuca L. Replikasi  Suhu (˚C) Bobot (gram) Susut pengeringan (%) X ± LE (%) CV(%) 1 105 1,041 6,63 6,47 ± 0,28 3,16 2 105 1,025 6,24 3 105 1,026 6,54
Pembuatan  Ekstrak  Etanol  U.
lactuca L.
Pembuatan  ekstrak  etanol U.
lactuca L.  dengan  metode  maserasi.
Etanol yang  digunakan  dengan
variasi  konsentrasi  yaitu  60%,  75%
dan 96%. Variasi konsentrasi bertujuaa untuk mengetahui banyaknya  zat  yang  tersari  dalam
ganggang  hijau.    Hasil  rendemen ekstrak  etanol U.  lactuca L.  dapat dilihat pada Tabel II.
Penetapan  Kadar  Air  Ekstrak  U.
lactuca L.
Penetapan  kadar  air  dengan destilasi  toluen  (Anonim,  2008). Hasil  penetapan  kadar  air  ekstrak dapat dilihat pada Tabel III.
Tabel 2. Hasil Rendemen Ekstrak dari U. lactuca L. Simplisia Konsentrasi pelarut etanol Bobot serbuk (gram) Bobot ekstrak (gram) Rendemen (%) Ganggang hijau 60% 100,0065 16,5126 16,51 75% 100,0248 17,4567 17,45 96% 100,0108 13,1759 13,17
Tabel 3. Hasil Penetapan Kadar Air Ekstrak U. lactuca L. Sampel uji Kadar Air (%) X ± SD (%) CV (%) Replikasi 1 Replikasi 2 Ekstrak etanol 60% 7,38 7,58 7,48 ± 0,14 1,89 Ekstrak etanol 75% 8,65 8,77 8,71 ± 0,08 0,97 Ekstrak etanol 96% 6,96 7,06 7,01 ± 0,07 1.01 Hasil  penetapan  kadar  air untuk  ekstrak  etanol  60%,  75%,  dan 96%  berturut-turut  adalah  7,48  ± 0,14%;  8,71  ±  0,08%;  dan  7,01  ±
0,07%.  Berdasarkan  hasil  penetapan kadar air diperoleh, memenuhi persyaratan  yaitu  >  dari  10% (Anonim,  2008).  Ada  hubungan
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 5(2), Oktober 2020, 374- p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
antara  rendemen  dan  kadar  air.
Rendemen  ekstrak  etanol  96%  lebih kecil  dibandingkan  ekstrak  etanol 60%  dan  75%,  hal  ini  mungkin disebabkan  karena  kadar  air  pada ekstrak  etanol  96%  yang  lebih
rendah.  Dengan  rendahnya  kadar  air pada  ekstrak,  menyebabkan  kadar senyawa  aktif    di  dalam  ekstrak etanol 96% lebih banyak ( Badarinath et al ., 2010). Tabel 4. Hasil Uji Senyawa Polifenol dengan FeCl 3 Sampel Sebelum penambahan FeCl 3 Sesudah penambahan FeCl 3 Keterangan hasil Ekstrak etanol 60% Hasil positif. Terbentuk warna hijau kehitaman Ekstrak etanol 75% Hasil positif. Terbentuk warna hijau kehitaman Ekstrak etanol 96% Hasil positif. Terbentuk warna hijau kehitaman
Gambar 1. Reaksi Uji Polifenol dengan FeCl 3 (Kelly et al ., 2011)
Uji  Kualitatif  Senyawa  Aktif  pada Ekstrak U. lactuca L.
Uji  kualitatif  dilakukan  untuk
memastikan adanya kandungan senyawa-senyawa  di  dalam  ekstrak etanol  60%,  75%,  dan  96% U.
lactuca L. Uji tabung untuk kandungan  polifenol  dan  identifikasi
asam galat disajikan pada Tabel IV.
Ganggang hijau diketahui dapat menghasilkan berbagai senyawa  metabolit  sekunder  yang memiliki aktivitas farmakologi
seperti antioksidan, antikanker, antimikroba    terhadap  bakteri,  virus dan    jamur,  sebagai  pupuk  organik dan  berpotensi  untuk  bioremidasi (Nurhaeni et  al .,  2014).  Pada  uji
OH O OH OH OH OH O O Fe HO OH OH O O O OH +   3Cl Fe 3+
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 5(2), Oktober 2020, 374- p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
kandungan  kimia  ekstrak U.  lactuca
L.  dengan  pelarut  etanol  60%,  75%, dan 96%, dilakukan uji tabung  Hasil uji  tabung  menunjukkan  bahwa
ekstrak etanol U. lactuca L.
mengandung  senyawa  fenolik  dan alkaloid  yang  mempunyai  aktifitas sebagai  antioksidan  juga  (Isnindar et al ., 2011)
Uji Aktivitas Antioksidan dengan

## Metode DPPH
Operating time (OT)
ditetapkan  untuk  mengetahui  waktu pengukuran  yang  tepat  pada  saat reaksi  berjalan  stabil.  Penentuan
Operating  time dilakukan  terhadap salah  satu  konsentrasi  dari  semua larutan  sampel  baik  standar  asam galat  maupun  sampel  ekstrak  dalam waktu 90 menit. Hasil operating time
untuk standar asam galat adalah pada
menit ke 41-51. Sedangkan
absorbansi  sampel  ekstrak  etanol
60%  berlangsung  stabil  pada  menit ke  37-90,  ekstrak  etanol  75%  pada menit  ke  26-51,  dan  ekstrak  etanol 96% pada menit ke 26-60.
Panjang  gelombang  serapan maksimum ditetapkan sebelum
penetapan  aktivitas  antioksidan  baik
standar  maupun  sampel  Secara teoritis,  panjang  gelombang  serapan maksimum  untuk  DPPH  adalah  517 nm,  sehingga  dilihat  dari  hasil penelitian, panjang gelombang serapan  maksimum  yang  diperoleh tidak  berbeda  jauh  dengan  panjang gelombang serapan maksimum teoritis.
Nilai  IC 50 ditentukan  dari persamaan  garis  regresi  linear  yang dibuat  dengan  hubungan  antara konsentrasi larutan uji dengan persen penghambatan radikal
DPPH. Semakin  besar  harga  IC 50 maka semakin kecil aktivitas
penghambatan  radikal  bebas  (Rivai et  al ,  2013).  Dari  hasil  tersebut, ketiga  ekstrak  etanol U.  lactuca L. menunjukkan    aktivitas  antioksidan yang sangat lemah karena mempunyai  nilai  IC 50 lebih  dari  500 ppm (Antonius et al ., 2015)
Hasil pengujian aktivitas penghambatan  radikal  bebas  DPPH oleh  asam  galat  dan  larutan  ekstrak etanol  etanol  variasi  konsentrasi dengan menggunakan parameter
IC 50 ,  disajikan  pada  Tabel  VII
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 5(2), Oktober 2020, 374- p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
Tabel 5. Hasil uji pendahuluan aktivitas antioksidan dengan pemadaman warna
ungu dari DPPH Sampel DPPH sebelum ditambah sampel DPPH sesudah ditambah sampel Keterangan hasil Asam galat Hasil positif. Ekstrak etanol 60% Hasil positif. Ekstrak etanol 75%
Hasil positif. Ekstrak etanol 96% Hasil Posistif
Gambar 3. Reaksi antara radikal DPPH dengan senyawa antioksidan (Dehpour,
2009) Tabel 5 . Nilai IC50 pada asam galat, ekstrak etanol, 60%, 75%, dan 95% No Sampel IC 50 (X± LE) mg/ml CV (%) 1 Asam galat 3,92.10 -3 ± 3,50x10 -6 0,31 2 Ekstrak Etanol 60% 441,70 ± 1,11 0,88 3 Ekstrak Etanol 75% 242,10± 1,41 2,04 4 Ekstrak Etanol 95% 2,04 ± 0,02 4,38
Menurut Jun, et al (2003) tingkat kekuatan  antioksidan  adalah  kuat (IC 50 <50  ppm),  aktif  (IC 50 50-100 ppm),  sedang  (IC 50 101-250  ppm), lemah  (IC 50 250-500  ppm),  dan
sangat  lemah  (IC 50 >500  ppm).
Aktivitas  antioksidan  asam  galat memiliki  nilai  IC 50 yang  lebih  kecil dari  ketiga  ekstrak  etanol  ganggang hijau  yaitu  3,92x10 -3 mg/ml  (3,92
N N NO 2 O 2 N NO 2 +   A   H N N NO 2 O 2 N NO 2 H + A
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 5(2), Oktober 2020, 374- p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
ppm).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa asam  galat  sebagai  pembanding positif memiliki aktivitas antioksidan yang  lebih  tinggi  daripada  ekstrak etanol  60%,  75%,  dan  96%  dan tergolong  kuat  dalam  menghambat radikal  bebas  (Rahmawati et  al .,
2014).

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol U.  lactuca L. dengan  konsentrasi  pelarut  etanol 60%,  75%,  dan  96%  memiliki aktivitas  sebagai  antioksidan  dan nilai IC 50 pada posisi lemah

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim,  2009, Farmakope  Herbal Indonesia , Edisi I, Departemen Kesehatan Indonesia. Antonius,  P.,  Rumengan.,  Desy  A., 2015, Uji Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Alga Dictyosphaeria cavernosa dari  Perairan  Teluk  Manado. Jurnal  LPPM  Bidang  Sains dan Teknologi ,  2(2). Badarinath  A.,  Rao  K.,  Chetty  CS., Ramkanth  S.,  Rajan  T.,  and Gnanaprakash  KA.,  2010, review on In-Vitro Antioxidant Methods: Comparisons, Correlations, and Considerations, International Journal of PharmaTech Research , 1276-1285. Isnindar, Setyowati, R., dan Wahyono,  S., 2011,  Aktivitas Antioksidan  Daun  Kesemek (Diospyros  kaki  L.F)  dengan Metode  DPPH  (2,2-Difenil-1 Pikrihidrazil), Majalah  Obat Tradisional , 16(3), 157-164. Cheng, S.H.,  Khoo,  H.E., Ismail, A., Abdul-Hamid, A., and Barakatun-Nisak,  2016,  M.Y. Influence Of Extraction Solvents On Cosmos Caudatus Leaf  Antioxidant Properties , Iranian Journal of Science and Technology. 40. Dehpour, A.A., Ebrahimzadeh, M.A.,  Fazel,  N.  S.,  and Mohammad, N.S., 2010, Antioksidant Activity of Methanol  Extract  of  Ferula Assafoetida  and  Its  Essential Oil Composition. Grasas Aceite, 60(4), 405-412. Ipandi,  I.,  Triyasmono,  L.,  Prayitno,
B.,  2016,  Penentuan  Kadar Flavonoid Total dan Aktivitas
Antioksidan  Ekstrak  Etanol Daun  Kajajahi  ( Leukcosyke capitellata Wedd. ), Pharmasience ,  3(1): 93-100. Kelly, G.S., 2011, Quersetin, Alternative  Medicine  Review .
16(2):172-194
Lobo,  V.,  Patil,  A.,  Phatak,  A.,
Chandra,  N.,  2010,  Free Radicals,  Antioxidants  and Functional Foods : Impact On Human  Health, Pharmacogn Rev . 4(8): 118-126. Mardaningsih, Fitri, Andriani M.A.M., Kawiji, 2012, Pengaruh  Konsentrasi  Etanol dan suhu Spray Dryer terhadap  Karakteristik  Bubuk Klorofil Daun Alfalfa ( Medicago  sativa L.)  dengan
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 5(2), Oktober 2020, 374- p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
Menggunakan Binder Maltodekstrin. Jurnal Teknosains  Pangan , 1(1): 110-107. Nana, F.W., Hilou, A., Millogo, J.F., Nacoulma, O.G., (2012), Phytochemical  Composition, Antioxidant  and  Xanthine Oxidase  Inhibitory  Activities of Amaranthus  cruentus L . and Amaranthus  hybridus L. Extracts, Pharmaceuticals .
5(6), 613-628. Nurhaeni,, F., Lestari, T., Wahyuono, S., Rohman, A., 2014, Aktivitas Antioksidan Ekstrak  Etanolik  Berbagai Jenis Sayuran Serta Penentuan Kandungan Fenolik dan Kandungan
Totalnya, Media  Farmasi ,
11(2): 167-178. Putrawan, Bahriul, Nurdin, Rahman., Anang,  Wahid,  2014,  Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Salam ( Syzygium Polyanthum ) dengan  Menggunanakan  1,1- Difenil-2-Pikrilhidrazil., J.
Akad.  Kim, 3(3):  143-149, ISSN 2302-6030. Rahmawati,  Rahman,  S.,  Wati,  A.,
Herman,  H.,  Arsyad,  F., 2014,  Test  of  Antioxidant Activity  Leaves  of Scaevola tacadda (Gaertn) Roxb. Using DPPH(1-1-Difenil-2- Pikrilhidrazil), International Research Journal of Pharmacy , 5. Renee, L.B., Kubola, J., Siriamornpun, S., Herald, T.J.,  and  Shi,  Y.C.,  2014, Wheat  bran  particles  size influence  on  phytochemical extracbility  and  antioxidant properties. Jurnal Food Chemistry , 152: 483-490. Rivai,  Harrizul,  Ernira  W.S.,  dan Rusdi, 2013, Pengaruh Perbandingan  Pelarut  Etanol- Air Terhadap Kadar Senyawa Fenolat  Total  dan  Daya Antioksidan dari Ekstrak Daun Sirsak ( Annova muricata L.), Jurnal  Sains dan Teknologi Farmasi, 18(1): 35-42. Senja,  R.Y.,  Elisa  I.,  Akhmad  K.N., dan Erna P.S., 2014, Perbandingan Metode Ekstraksi  dan  Variai  Pelarut Terhadap Rendemen dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kubis Ungu ( Brassica  oleracea L. var. Capitata f. Rubra ). Traditional Medicine Journal, 19(1):43-48. Septiana,  A.T.,  dan  Ari  Asnani, 2012, Kajian Sifat fisikokimia  Ekstrak  rumput Laut coklat Sargassum duplicatum Menggunakan Berbagai Pelarut Metode Ekstraksi,  Agrointek  Volume 6,  No  1,  Universitas  Jendral soedirman, Purwokerto. Yuliarti,  Wulan,  Dewi  K.,  Enny  F., 2013,  Isolasi Identifikasi dan Uji Antioksidan Asam Fenolat Dalam Daun Tempuyung ( Sonchus arvensis L.)  dengan  Metode 1,1-difenil-2-pikrilhidrasil
(DPPH). Chem  Info, 1(1)  : 294-304.