## Induksi Pematangan Gonad dengan Ovaprim-C: untuk Penyediaan Benih Belut Sawah ( Monopterus albus ) Berkelanjutan

## Priyo Susatyo,  Sugiharto, dan Elly Tuti Winarni
Fakultas Biologi Universitas Jenderal Soedirman
Jl.DR. Soeparno No.63 Karang Wangkal Purwokerto
p_susatyo@yahoo.com
Diterima Juni 2012 disetujui untuk diterbitkan September 2012

## Abstract
Rice  eel  ( Monopterus  albus Zuiew),  have  economical  value  is  high  in  Banyumas,  national  to international  markets,  but  rarely  is  grown  intensively,  the  seed  is  still  dependent  on  the  catch. Reproduction  of  swamp  eel  unlike  other  fish  species  in  the  presence  of  phase  teleostei    intersex  / hermafroditus and in nature only spawn once a year. This study will seek to accelerate the scale seed production with natural canvas with several techniques triggers lust and sex organ maturation eels based preparedness aspects of reproductive anatomy, hormones estradiol and testosterone profiles and the intrinsic need for hormonal regulation and the mechanism for the reproductive cycle of the eel rice. In the first year aims to determine (1) the profile of estradiol and testosterone hormonal parent during the natural reproductive cycle, (2) histologic gonadogenesis (development of the testes and ovaries) eel rice during the natural reproductive cycle was evaluated by measuring fecundity. Results: In the control group, body weight  gradually  decreased  during  the  study.  Unlike  the  control  group,  the  treatment  groups  were observed every two weeks showed an increase in body weight; Results of the study, in the control group (A ), the value of female eels GSI average of the first two weeks until the fourth two weeks is 0.67 % and 0 1.78%. While the treatment group A1 was 1.42% - 4.28% (DM-1 s / d DM-4), for the treatment A2 GSI average value is 2.52% - 7.05%; fecundity eggs increased during induction period; calibration titer two types of hormones in the first two weeks to the fourth two weeks showed improvement when compared with the control group; histological profile of rice eel gonad after induction of ovaprim-C show that up to the fourth two weeks, gonad has reached late-stage yolk globule (advanced primary oocyte), even the most mature oocyte has reached the stage: in male eels up to the fourth two weeks has reached the stage of spermatozoa
Keywords : vitellogenesis, gonadosomatic index(GSI); hermaphrodites

## Abstrak
Belut sawah ( Monopterus albus Zuiew), bernilai ekonomi cukup  tinggi di Banyumas  dan pasaran nasional, tetapi jarang yang membudidayakannya secara intensif, benihnya masih tergantung pada hasil tangkapan. Reproduksi belut sawah berbeda dengan jenis ikan teleostei lainnya dengan adanya fase intersex/hermafroditus  dan  di  alam  hanya  memijah  satu  tahun  sekali.  Penelitian  ini  akan    berupaya mempercepat produksi benih skala kolam terpal alami   dengan beberapa teknik pemicuan birahi dan pematangan  organ  seks  belut  berdasarkan  kesiapan  aspek  anatomi  organ  reproduksi,  profil  hormon estradiol dan testosteron dan  kebutuhan  terhadap  hormonal  intrinsik  tersebut  serta  mekanisme regulasinya  selama  satu  siklus  reproduksi  pada  belut  sawah.  Pada  tahun  pertama  bertujuan  untuk mengetahui (1) profil hormonal estradiol dan testosteron induk selama satu siklus reproduksi alami; (2) gambaran histologis gonadogenesis (perkembangan testis dan ovarium) belut sawah selama satu siklus reproduksi alami yang dievaluasi dengan mengukur fekunditas. Hasil penelitian : Pada kelompok kontrol (A0  tanpa diiduksi Ovaprim) , bobot badan secara gradual menurun selama penelitian.  Berbeda dengan kelompok kontrol, kelompok perlakuan (Perlakuan utama/main plot berupa induksi Ovaprim-C masing- masing 0,25 cc/kg. bobot badan dan 0,50 cc/kg.bobot badan, sedangkan kelompok kontrol adalah intact treatment /tanpa diinduksi; sub plot berupa waktu pengambilan sampel dua mingguan (DM-1, DM-2, DM- 3 dan DM-4 = dua minggu I, II, III dan IV); masing-masing perlakuan diulang tiga kali). yang diamati setiap dua minggu sekali menunjukan kenaikan pada bobot badan; Hasil penelitian, pada kelompok kontrol (A ),
0
nilai IKG belut betina rata-rata dari dua minggu pertama s/d dua minggu keempat adalah  0,67 % dan 1,78 %. Sedangkan pada kelompok perlakuan A adalah 1,42 % - 4,28 % (DM-1 s/d DM-4); untuk perlakuan  A
1 2
nilai IKG rata-rata adalah 2,52% – 7,05%; fekunditas telur meningkat selama periode penginduksian. Peneraan titer kedua jenis hormon di atas dua minggu pertama sampai dengan dua minggu keempat memperlihatkan peningkatan bila dibandingkan dengan kelompok kontrol; profil histologi gonad belut sawah  pasca  penginduksian ovaprim-C memperlihatkan  bahwa  sampai  dengan  penginduksian  dua
Susatyo, Priyo dkk., :  116 - 126 Induksi Pematangan Gonad dengan Ovaprim-C
minggu keempat, gonad telah mencapai stadium late yolk globule (oosit primer lanjut), bahkan sebagian besar oosit telah mencapai stadium mature; pada belut jantan sampai dengan dua minggu keempat telah mencapai stadium spermatozoa
Kata kunci : vitellogenesis, indeks kematangan gonad, gonadogenesis; hermaprodit

## Pendahuluan
Pada  usaha  budidaya  belut,  petani sering  dihadapkan  pada  permasalahan, yakni  kesulitan  untuk  menyediakan  induk apalagi  memilih  bibit,  dan  masih  sangat tergantung  pada  suplai  alami  dari  hasil t a n g k a p a n ,   j u g a   u n t u k   k e p e r l u a n penyediaan protein hewani bagi konsumen dan  pasar.  Pengupayaan  budidaya  belut baik skala rumah tangga ( backyard ) maupun skala yang lebih luas seringkali dihadapkan pada kesulitan yang sama, sehingga bila kita tidak  mengupayakan  suatu  teknik  untuk m e n g h a s i l k a n   b e n i h /   l a r v a ,   m a k a dikhawatirkan akan mengancam kelestarian belut di alam bebas.   Oleh karena itu, perlu d i p i k i r k a n   a g a r   k e b u t u h a n   g u n a pengembangan  pada  budidaya  belut selanjutnya  selalu  diimbangi  dengan kemantapan  dan  ketersediaan  stok  larva yang berkelanjutan.
Menurut  Olivereau  dan  Olivereau (1979); serta Dufour et al . (1988), belut-belut yang  dibudidaya  tidak  menampakkan perkembangan  gonad  yang  lengkap  jika dipelihara pada tempat non alami walaupun untuk  tujuan  membirahikan,  sebab  fungsi hormon gonadotropik - hipofisis berkurang di bawah kondisi akuarium. Alhasil, perlakuan- perlakuan  hormonal  sangat  dibutuhkan untuk  menggertak/  meningkatkan  per- kembangan  gonad  belut.    Tetapi,  pada beberapa  kasus treatment terhadap  gonad kadang  tidak  berhasil  untuk  menginduksi pemasakkan  oosit  dan  ovulasi  termasuk juga  proses  vitellogenesisnya  (Yamauchi dan Yamamoto, 1982).  Oleh karena itu perlu untuk  menyelidiki  regulasi  hormonal  dan perubahan  gambaran  histologi  selama perkembangan gonad (ovarium) belut yang diinduksi  secara  artifisial.    Sebagai  suatu ilustrasi  penguat  adalah seringnya tingkat keberhasilan  teknik  induksi  gonadotropin pada  ikan-ikan  budidaya,  termasuk golongan teleostei.
DiFakultas  Biologi  Unsoed  telah dilakukan  penelitian  oleh  dosen  maupun mahasiswa  untuk  mengidentifikasi  aspek reproduksi  belut indifferent dan  proses pemasakkan  gonad  dari  sudut  pandang
histologis,  tetapi  informasi  tentang  fisiologi reproduksi  dan  endokrinologi  pada perkembangan gonad belut-belut budidaya yang diinduksi secara artifisial masih kurang untuk  melandasi  upaya  budidaya  belut secara  intensif.    Bagaimana  profil  dari hormon  steroid  belut  sawah  melengkapi keberhasilan  perkembangan  gonadnya setelah  perlakuan  injeksi  menggunakan Ovaprim dan juga apakah belut-belut yang dibudidayakan  dapat  digunakan  sebagai materi  penelitian  kelak  setelah  diinduksi secara  artifisial,  bagaimana  gambaran histologis perkembangan ovariumnya.
Tujuan penelitian  ini  adalah  untuk mendeskripsi profil hormon steroid ( estradiol -  17  ,  testosteron )  serum  dan  pada  belut sawah  jantan  dan  betina  yang  dibudidaya setelah  diinjeksi  dengan  Ovaprim  dan perubahan  histologis  yang  terjadi  selama perkembangan  spermatogenesis  testis serta  perkembangan oocyt dalam  ovarium belut  sawah.    Selain  itu    mendiskusikan apakah belut-belut yang dibudidayatersebut dapat  digunakan  sebagai  materi  penelitian pada  induksi  artifisial  untuk  menentukan pertumbuhan testis dan ovariumnya, melalui kegiatan  diskripsi  pengamatan  sediaan mikroskopis pada sel-sel gamet jantan dan betina pasca penginduksian. Manfaat  penelitian  adalah untuk m e n g u p a y a k a n   p e m b e n i h a n   s k a l a laboratorium  dapat  dilakukan.    Juga  untuk ikut  mengatasi  permasalahan  eksplorasi alami  secara  besar-besaran  pada  musim penangkapan,  sehingga  ikut  pula  pada upaya pelestariannya. Penelitian ini adalah langkah  awal  untuk  menuju  kepada eksperimental  lainnya  yang  kemungkinan berkembang,  seperti  pola  makan  belut sawah pada periodisitas skala laboratorium, sehingga  belut  diharapkan  siap  sebagai m a t e r i   p e n e l i t i a n   p a d a   k e g i a t a n eksperimental lainnya.
Materi dan  Metode 1 . Materi penelitian
Materi  utama  :  Materi  penelitian  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah induk  belut  sawah  jantan  dan  betina
Biosfera 29 (3) September 2012

## Induksi Pematangan Gonad dengan Ovaprim-C: untuk Penyediaan Benih Belut Sawah ( Monopterus albus ) Berkelanjutan

## Priyo Susatyo,  Sugiharto, dan Elly Tuti Winarni
Fakultas Biologi Universitas Jenderal Soedirman Jl.DR. Soeparno No.63 Karang Wangkal Purwokerto
p_susatyo@yahoo.com

## Diterima Juni 2012 disetujui untuk diterbitkan September 2012

## Abstract
Rice  eel  ( Monopterus  albus Zuiew),  have  economical  value  is  high  in  Banyumas,  national  to international  markets,  but  rarely  is  grown  intensively,  the  seed  is  still  dependent  on  the  catch.
Reproduction  of  swamp  eel  unlike  other  fish  species  in  the  presence  of  phase  teleostei    intersex  / hermafroditus and in nature only spawn once a year. This study will seek to accelerate the scale seed production with natural canvas with several techniques triggers lust and sex organ maturation eels based preparedness aspects of reproductive anatomy, hormones estradiol and testosterone profiles and the intrinsic need for hormonal regulation and the mechanism for the reproductive cycle of the eel rice. In the first year aims to determine (1) the profile of estradiol and testosterone hormonal parent during the natural reproductive cycle, (2) histologic gonadogenesis (development of the testes and ovaries) eel rice during the natural reproductive cycle was evaluated by measuring fecundity. Results: In the control group, body weight  gradually  decreased  during  the  study.  Unlike  the  control  group,  the  treatment  groups  were observed every two weeks showed an increase in body weight; Results of the study, in the control group (A ), the value of female eels GSI average of the first two weeks until the fourth two weeks is 0.67 % and 0
1.78%. While the treatment group A1 was 1.42% - 4.28% (DM-1 s / d DM-4), for the treatment A2 GSI average value is 2.52% - 7.05%; fecundity eggs increased during induction period; calibration titer two types of hormones in the first two weeks to the fourth two weeks showed improvement when compared with the control group; histological profile of rice eel gonad after induction of ovaprim-C show that up to the fourth two weeks, gonad has reached late-stage yolk globule (advanced primary oocyte), even the most mature oocyte has reached the stage: in male eels up to the fourth two weeks has reached the stage of spermatozoa
Keywords : vitellogenesis, gonadosomatic index(GSI); hermaphrodites

## Abstrak
Belut sawah ( Monopterus albus Zuiew), bernilai ekonomi cukup  tinggi di Banyumas  dan pasaran nasional, tetapi jarang yang membudidayakannya secara intensif, benihnya masih tergantung pada hasil tangkapan. Reproduksi belut sawah berbeda dengan jenis ikan teleostei lainnya dengan adanya fase intersex/hermafroditus  dan  di  alam  hanya  memijah  satu  tahun  sekali.  Penelitian  ini  akan    berupaya mempercepat produksi benih skala kolam terpal alami   dengan beberapa teknik pemicuan birahi dan pematangan  organ  seks  belut  berdasarkan  kesiapan  aspek  anatomi  organ  reproduksi,  profil  hormon estradiol dan testosteron dan  kebutuhan  terhadap  hormonal  intrinsik  tersebut  serta  mekanisme regulasinya  selama  satu  siklus  reproduksi  pada  belut  sawah.  Pada  tahun  pertama  bertujuan  untuk mengetahui (1) profil hormonal estradiol dan testosteron induk selama satu siklus reproduksi alami; (2) gambaran histologis gonadogenesis (perkembangan testis dan ovarium) belut sawah selama satu siklus reproduksi alami yang dievaluasi dengan mengukur fekunditas. Hasil penelitian : Pada kelompok kontrol (A0  tanpa diiduksi Ovaprim) , bobot badan secara gradual menurun selama penelitian.  Berbeda dengan kelompok kontrol, kelompok perlakuan (Perlakuan utama/main plot berupa induksi Ovaprim-C masing- masing 0,25 cc/kg. bobot badan dan 0,50 cc/kg.bobot badan, sedangkan kelompok kontrol adalah intact treatment /tanpa diinduksi; sub plot berupa waktu pengambilan sampel dua mingguan (DM-1, DM-2, DM- 3 dan DM-4 = dua minggu I, II, III dan IV); masing-masing perlakuan diulang tiga kali). yang diamati setiap dua minggu sekali menunjukan kenaikan pada bobot badan; Hasil penelitian, pada kelompok kontrol (A ), 0 nilai IKG belut betina rata-rata dari dua minggu pertama s/d dua minggu keempat adalah  0,67 % dan 1,78
%. Sedangkan pada kelompok perlakuan A adalah 1,42 % - 4,28 % (DM-1 s/d DM-4); untuk perlakuan  A
1 2
nilai IKG rata-rata adalah 2,52% – 7,05%; fekunditas telur meningkat selama periode penginduksian.
Peneraan titer kedua jenis hormon di atas dua minggu pertama sampai dengan dua minggu keempat memperlihatkan peningkatan bila dibandingkan dengan kelompok kontrol; profil histologi gonad belut sawah  pasca  penginduksian ovaprim-C memperlihatkan  bahwa  sampai  dengan  penginduksian  dua
Susatyo, Priyo dkk., :  116 - 126 Induksi Pematangan Gonad dengan Ovaprim-C
minggu keempat, gonad telah mencapai stadium late yolk globule (oosit primer lanjut), bahkan sebagian besar oosit telah mencapai stadium mature; pada belut jantan sampai dengan dua minggu keempat telah mencapai stadium spermatozoa
Kata kunci : vitellogenesis, indeks kematangan gonad, gonadogenesis; hermaprodit

## Pendahuluan
Pada  usaha  budidaya  belut,  petani sering  dihadapkan  pada  permasalahan, yakni  kesulitan  untuk  menyediakan  induk apalagi  memilih  bibit,  dan  masih  sangat tergantung  pada  suplai  alami  dari  hasil t a n g k a p a n ,   j u g a   u n t u k   k e p e r l u a n penyediaan protein hewani bagi konsumen dan  pasar.  Pengupayaan  budidaya  belut baik skala rumah tangga ( backyard ) maupun skala yang lebih luas seringkali dihadapkan pada kesulitan yang sama, sehingga bila kita tidak  mengupayakan  suatu  teknik  untuk m e n g h a s i l k a n   b e n i h /   l a r v a ,   m a k a dikhawatirkan akan mengancam kelestarian belut di alam bebas.   Oleh karena itu, perlu d i p i k i r k a n   a g a r   k e b u t u h a n   g u n a pengembangan  pada  budidaya  belut selanjutnya  selalu  diimbangi  dengan kemantapan  dan  ketersediaan  stok  larva yang berkelanjutan.
Menurut  Olivereau  dan  Olivereau (1979); serta Dufour et al . (1988), belut-belut yang  dibudidaya  tidak  menampakkan perkembangan  gonad  yang  lengkap  jika dipelihara pada tempat non alami walaupun untuk  tujuan  membirahikan,  sebab  fungsi hormon gonadotropik - hipofisis berkurang di bawah kondisi akuarium. Alhasil, perlakuan- perlakuan  hormonal  sangat  dibutuhkan untuk  menggertak/  meningkatkan  per- kembangan  gonad  belut.    Tetapi,  pada beberapa  kasus treatment terhadap  gonad kadang  tidak  berhasil  untuk  menginduksi pemasakkan  oosit  dan  ovulasi  termasuk juga  proses  vitellogenesisnya  (Yamauchi dan Yamamoto, 1982).  Oleh karena itu perlu untuk  menyelidiki  regulasi  hormonal  dan perubahan  gambaran  histologi  selama perkembangan gonad (ovarium) belut yang diinduksi  secara  artifisial.    Sebagai  suatu ilustrasi  penguat  adalah seringnya tingkat keberhasilan  teknik  induksi  gonadotropin pada  ikan-ikan  budidaya,  termasuk golongan teleostei.
DiFakultas  Biologi  Unsoed  telah dilakukan  penelitian  oleh  dosen  maupun mahasiswa  untuk  mengidentifikasi  aspek reproduksi  belut indifferent dan  proses pemasakkan  gonad  dari  sudut  pandang
histologis,  tetapi  informasi  tentang  fisiologi reproduksi  dan  endokrinologi  pada perkembangan gonad belut-belut budidaya yang diinduksi secara artifisial masih kurang untuk  melandasi  upaya  budidaya  belut secara  intensif.    Bagaimana  profil  dari hormon  steroid  belut  sawah  melengkapi keberhasilan  perkembangan  gonadnya setelah  perlakuan  injeksi  menggunakan Ovaprim dan juga apakah belut-belut yang dibudidayakan  dapat  digunakan  sebagai materi  penelitian  kelak  setelah  diinduksi secara  artifisial,  bagaimana  gambaran histologis perkembangan ovariumnya.
Tujuan penelitian  ini  adalah  untuk mendeskripsi profil hormon steroid ( estradiol -  17  ,  testosteron )  serum  dan  pada  belut sawah  jantan  dan  betina  yang  dibudidaya setelah  diinjeksi  dengan  Ovaprim  dan perubahan  histologis  yang  terjadi  selama perkembangan  spermatogenesis  testis serta  perkembangan oocyt dalam  ovarium belut  sawah.    Selain  itu    mendiskusikan apakah belut-belut yang dibudidayatersebut dapat  digunakan  sebagai  materi  penelitian pada  induksi  artifisial  untuk  menentukan pertumbuhan testis dan ovariumnya, melalui kegiatan  diskripsi  pengamatan  sediaan mikroskopis pada sel-sel gamet jantan dan betina pasca penginduksian.
Manfaat  penelitian  adalah untuk m e n g u p a y a k a n   p e m b e n i h a n   s k a l a laboratorium  dapat  dilakukan.    Juga  untuk ikut  mengatasi  permasalahan  eksplorasi alami  secara  besar-besaran  pada  musim penangkapan,  sehingga  ikut  pula  pada upaya pelestariannya. Penelitian ini adalah langkah  awal  untuk  menuju  kepada eksperimental  lainnya  yang  kemungkinan berkembang,  seperti  pola  makan  belut sawah pada periodisitas skala laboratorium, sehingga  belut  diharapkan  siap  sebagai m a t e r i   p e n e l i t i a n   p a d a   k e g i a t a n eksperimental lainnya.

## Materi dan  Metode

## 1 . Materi penelitian
Materi  utama  :  Materi  penelitian  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah induk  belut  sawah  jantan  dan  betina
dengan  bobot  15  -  30  gram,  panjang tubuh 10 - 20 cm (berjenis kelamin betina) dan  ukuran  25  -  50  cm    (berkelamin jantan)  berdasarkan  pengamatan  berat versus panjang tubuh belut (Wisnu, 1981; Setiati, 2003). Induk belut diperoleh dari petani  penangkap  belut  di  desa Mertasari,  kecamatan  Purwonegoro, Kabupaten Banjarnegara.

## Bahan-bahan  yang  digunakan  adalah
Salmon  GnRHa    dan    Domperidone (Ovaprim-C by  Syndel Laboratories, Vancouver) dalam  kemasan  10  cc, akuabides,  zat-zat  kimia  untuk  proses pewarnaan histologi    Haematoxylin  – Eosin ( by Merck ) . Total materi penelitian adalah 80 ekor jantan dan 80 ekor betina. (40  pasang  induk).  Alat-alat  yang digunakan  adalah  petak  kolam    terpal (modifikasi kolam alami) dengan ukuran 400 cm X 200 cm dengan kedalaman  100 cm  (dipetak  menjadi  empat  sub  petak), sebanyak  2unit  kolam;  Pengujian  induk jantan  betina  skala  Laboratorium  untuk p e n g a m a t a n   p e r t u m b u h a n   d a n perkembangan  menggunakan  bak  fiber ber  ukuran  20  cm  x  40  cm  x  20  cm, sebanyak 15 buah. Bak fiber diberi media lumpur  dari  kolam  alami  dengan perbandingan  komposisi  dan  ketinggian m a s i n g   k o m p o i s i s i   m e d i a   y a n g disesuaikan dengan ukuran bak), bagian permukaan diberi genangan air   setinggi 15 cm. Empat buah bak berukuran 60 x 30 x 40 cm; dua buah diisi media lumpur, dua buah bak diisi medi air sumur digunakan untuk  tempat  penyimpanan  sementara sampel  induk  pasca  mijah  sebelum dibedah  untuk  analisis  gonadogenesis dan  analisis  hormonal  dari  serum darahnya,  alat  sirkulasi  air,  aerator,  alat bedah  ( dissecting  set ),  alat  untuk pembuatan  sediaan  histologi,  spuit ( syring ),  alat  untuk  analisis  hormonal serum  dengan  metode ELISA serta reagen-reagen  untuk  analisis  hormonal dan kit  ( kit-oestradiol; kit-testosteron dari Microwell Elisa-Vortez-Diagnostic Automation).
2. Metode Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  secara eksperimental. hewan uji dikelompokkan dalam  dua  kelompok.    A  =  kelompok perlakuan, B = kelompok kontrol diulang sebanyak  empat  kali.    Perlakuan utama/main plot berupa induksi Ovaprim-
C  masing-masing  0,25  cc/kg.  bobot badan  dan  0,50  cc/kg.bobot  badan, sedangkan  kelompok  kontrol  adalah intact treatment /tanpa diinduksi; sub plot berupa  waktu  pengambilan  sampel  dua mingguan (DM-1, DM-2, DM-3 dan DM-4 =  dua  minggu  I,  II,  III  dan  IV);  masing- masing  perlakuan  diulang  tiga  kali. Variabel yang diamati meliputi : a. bobot badan dan bobot gonad,
b. perubahan  Indeks  Kematangan Gonad/gonado  somatic  index  (GSI  = 100 x bobot  gonad/ bobot badan),
c.  level estradiol - 17  dan testosteron e data kuantitatif dan histologis struktur perkembangan ovarium.
L a n g k a h - l a n g k a h   p e l a k s a n a a n penelitian adalah sebagai berikut :
Tahap  persiapan ,  yakni  tahap aklimasi hewan uji. Belut ditangkap dengan alat  yang  disebut  "telik"  (Jawa)  agar  tidak rusak,  dibawa  ke  rumah  Sdr  Triono,  desa Mertasari,  Banjarnegara  untuk  diaklimasi d a l a m   k o l a m   t e r p a l   s e m i   a l a m i penampungan selama tujuh hari, kemudian d i m a s u k k a n   d a l a m   k o l a m   t e r p a l pemeliharaan  yang  telah  dikelola  sebagai media lumpur humus pemeliharaan dengan ketebalan   1 meter yang telah dipersiapkan satu  minggu  sebelumnya.  Selanjutnya adalah  tahap  Penginduksian ,  dengan menggunakan  ovaprim-C  dengan  selang masa  penginduksian  2  minggu  sekali selama  4  minggu.    Perlakuan  utama/main plot  berupa  penginduksian  Ovaprim-C masing-masing 0,25 cc/kg. bobot badan dan 0,50  cc/kg.bobot  badan,  sedangkan k e l o m p o k   k o n t r o l   a d a l a h i n t a c t treatment /tanpa  diinduksi;  sub  plot  berupa waktu  pengambilan  sampel  dua  mingguan (DM-1, DM-2, DM-3 dan DM-4 = dua minggu I,  II,  III  dan  IV);  masing-masing  perlakuan diulang tiga kali.
D i l a n j u t k a n   d e n g a n t a h a p p e n g a m a t a n   d a n   a n a l i s i s ,   y a k n i penimbangan  bobot  belut  dilakukan  pada awal  percobaan  dengan  melakukan pengambilan  serum  darah  sebelum diinduksi  dengan  ovaprim-C,  penimbangan bobot  dan  panjang  tubuh  induk  belut, penghitungan  fekunditas  telur  induk  belut betina,  pengukuran  Indeks  Kematangan Gonad (IKG).   Langkah ini dilakukan setiap dua  minggu  sekali  selama  empat  minggu dengan ulangan tiga kali.  Serum darah belut yang  diperoleh  dianalisis  hormonalnya
118
Penghitungan gonado-somatik indeks ( GSI ) atau Indeks  Kematangan Gonad
Berat gonad
GSI (IKG) = Indeks Kematangan Gonad =     ------------------- x 100%
Berat tubuh
dengan  teknik  MEIA.    Preparasi  sediaan histologis  gonad/ovarium  belut  dilakukan dengan  metode  parafin,  pewarnaan Haematoxylin  -  Eosin,  preparasi  sediaan mikroskop  elektron  hipofisis  resipien  serta dilakukan analisis diskripsi.
Data kuantitatif diekspresikan sebagai rata-rata  (means)    standar  deviation  (SD). Perubahan-perubahan pada rentang waktu
penginduksian  dalam  masing-masing kelompok  perlakuan  dan  perbedaan- perbedaan  di  antara  kelompok  kontrol  dan kelompok  perlakuan  masing-masing  waktu sampling  diindentifikasi  dengan Uji  F (  P< 0,01 berarti significant/berbeda nyata).  Data kualitatif  gambaran  histologi  perubahan struktur  ovarium  selama  perkembangan dianalisis secara diskripsi histologis.
bobot  badan  diberikan  dua  hari  sekali sehingga dianggap setiap hari mendapat jatah  5%),  setelah  genangan  air  di permukaan  media  lumpur  pada  bak pemeliharaan diganti dengan yang baru, kemudian  diaduk  perlahan.  Pelet  pun ternyata  kurang  direspon  belut.  Dicoba menggunakan  cincangan  daging  keong mas yang diletakkan pada genangan air di  permukaan  media  pemeliharaan dalam akuarium dengan pemberian 10% dari bobot induk belut, ternyata direspon oleh induk belut.
P e n i n g k a t a n   b o b o t   b a d a n (Gambar  1)  belut  kelompok  perlakuan (A   dan  A )  pada  dua  minggu  kedua,
1 2
ketiga dan keempat diduga karena erat hubungannya  dengan  hadirnya  telur- telur pada rongga tubuh pada fase awal p r o s e s   p e n y i a p a n   p e m a s a k a n ( vitellogenesis ), tetapi penurunan bobot badan  belut  kelompok  kontrol  sampai dengan  dua  minggu  keempat  belum diketahui penyebabnya.
Hasil  Analisis  variansi  terhadap bobot  badan  belut  uji  betina  adalah pengaruh  main?    induksi  Ovaprim-C tidak  berbeda  nyata  ( P >0.05),  begitu juga  pengaruh  waktu  pengambilan sampel  dua  mingguan.  Interaksi p e r l a k u a n   i n d u k s i   d a n   w a k t u pengambilan  sampel  memberikan pengaruh  yang  berbeda  sangat nyata( P<0.01 ).  Pada  belut  jantan, penginduksian  Ovaprim-C  memberikan pengaruh  yang  berbeda  sangat  nyata, sedangkan  waktu  pengambilan  sampel dua  mingguan  dan  interaksi  keduanya tidak berbeda nyata.
Data  lainnya  berupa  kadar  masing- masing  hormon  steroid  dan  gonadotropin, fekunditas  telur,  dan  Indeks  kematangan gonad  (GSI),  disajikan  dalam  bentuk  tabel dan diagram batang. Profil  gonadogenesis testis  dan  ovarium  disajikan  dalam  bentuk foto,  dan  dianalisis  secara  kualitatif deskriptif.

## Hasil dan Pembahasan

## 1.  Perubahan Bobot Badan
Pada  kelompok  kontrol,  bobot badan  secara  gradual  menurun  selama penelitian.    Berbeda  dengan  kelompok kontrol,  kelompok  perlakuan  yang diamati  setiap  dua  minggu  sekali menunnjukan  kenaikan  pada  bobot badan  (Gambar  1.)  Bobot  badan  awal rata-rata  seluruh  belut  uji  baik kontrol/perlakuan berkisar antara 15 - 20 gam.  Sehingga  bila  dilihat  pada  dua minggu  pertama  bobot  badan  untuk semua  belut  uji  meningkat  (Gambar  1) untuk  kemudian  pada  dua  minggu kedua,  ketiga  dan  keempat  menurun (kelompok kontrol) dan meningkat pada kelompok perlakuan.
S e h u b u n g a n   d e n g a n pelaksanaan  kegiatan  penelitian  yang dilakukan  di  laboratorium,  maka pemberian  pakan  harus  disesuaikan  . Pada  penelitian  pendahuluan  ini,  kami m e n d a p a t k a n   k e s u l i t a n   u n t u k menangani  masalah  pakan.  Pemberian cacing Tubifex sp. segar ke dalam media p e m e l i h a r a a n   t i d a k   p e r n a h dimanfaatkan  oleh  belut  uji.  Dicoba dengan  memberikan  pelet  standar dengan  cara  dibuat  adonan  (10  %  dari
119 Susatyo, Priyo dkk.,
:  116 - 126 Induksi Pematangan Gonad dengan Ovaprim-C
Biosfera 29 (3) September 2012

## Biosfera 28 (3) September 2011
dengan  bobot  15  -  30  gram,  panjang tubuh 10 - 20 cm (berjenis kelamin betina) dan  ukuran  25  -  50  cm    (berkelamin jantan)  berdasarkan  pengamatan  berat versus panjang tubuh belut (Wisnu, 1981; Setiati, 2003). Induk belut diperoleh dari petani  penangkap  belut  di  desa Mertasari,  kecamatan  Purwonegoro, Kabupaten Banjarnegara.

## Bahan-bahan  yang  digunakan  adalah
Salmon  GnRHa    dan    Domperidone (Ovaprim-C by  Syndel Laboratories,
Vancouver) dalam  kemasan  10  cc, akuabides,  zat-zat  kimia  untuk  proses pewarnaan histologi    Haematoxylin  – Eosin ( by Merck ) . Total materi penelitian adalah 80 ekor jantan dan 80 ekor betina.
(40  pasang  induk).  Alat-alat  yang digunakan  adalah  petak  kolam    terpal (modifikasi kolam alami) dengan ukuran 400 cm X 200 cm dengan kedalaman  100 cm  (dipetak  menjadi  empat  sub  petak), sebanyak  2unit  kolam;  Pengujian  induk jantan  betina  skala  Laboratorium  untuk p e n g a m a t a n   p e r t u m b u h a n   d a n perkembangan  menggunakan  bak  fiber ber  ukuran  20  cm  x  40  cm  x  20  cm, sebanyak 15 buah. Bak fiber diberi media lumpur  dari  kolam  alami  dengan perbandingan  komposisi  dan  ketinggian m a s i n g   k o m p o i s i s i   m e d i a   y a n g disesuaikan dengan ukuran bak), bagian permukaan diberi genangan air   setinggi 15 cm. Empat buah bak berukuran 60 x 30 x 40 cm; dua buah diisi media lumpur, dua buah bak diisi medi air sumur digunakan untuk  tempat  penyimpanan  sementara sampel  induk  pasca  mijah  sebelum dibedah  untuk  analisis  gonadogenesis dan  analisis  hormonal  dari  serum darahnya,  alat  sirkulasi  air,  aerator,  alat bedah  ( dissecting  set ),  alat  untuk pembuatan  sediaan  histologi,  spuit ( syring ),  alat  untuk  analisis  hormonal serum  dengan  metode ELISA serta reagen-reagen  untuk  analisis  hormonal dan kit  ( kit-oestradiol; kit-testosteron dari Microwell Elisa-Vortez-Diagnostic Automation).
2. Metode Penelitian Penelitian  ini  dilakukan  secara eksperimental. hewan uji dikelompokkan dalam  dua  kelompok.    A  =  kelompok perlakuan, B = kelompok kontrol diulang sebanyak  empat  kali.    Perlakuan utama/main plot berupa induksi Ovaprim-
C  masing-masing  0,25  cc/kg.  bobot badan  dan  0,50  cc/kg.bobot  badan, sedangkan  kelompok  kontrol  adalah intact treatment /tanpa diinduksi; sub plot berupa  waktu  pengambilan  sampel  dua mingguan (DM-1, DM-2, DM-3 dan DM-4 =  dua  minggu  I,  II,  III  dan  IV);  masing- masing  perlakuan  diulang  tiga  kali.
Variabel yang diamati meliputi : a. bobot badan dan bobot gonad,
b. perubahan  Indeks  Kematangan Gonad/gonado  somatic  index  (GSI  = 100 x bobot  gonad/ bobot badan),
c.  level estradiol - 17  dan testosteron e data kuantitatif dan histologis struktur perkembangan ovarium.
L a n g k a h - l a n g k a h   p e l a k s a n a a n penelitian adalah sebagai berikut :
Tahap  persiapan ,  yakni  tahap aklimasi hewan uji. Belut ditangkap dengan alat  yang  disebut  "telik"  (Jawa)  agar  tidak rusak,  dibawa  ke  rumah  Sdr  Triono,  desa Mertasari,  Banjarnegara  untuk  diaklimasi d a l a m   k o l a m   t e r p a l   s e m i   a l a m i penampungan selama tujuh hari, kemudian d i m a s u k k a n   d a l a m   k o l a m   t e r p a l pemeliharaan  yang  telah  dikelola  sebagai media lumpur humus pemeliharaan dengan ketebalan   1 meter yang telah dipersiapkan satu  minggu  sebelumnya.  Selanjutnya adalah  tahap  Penginduksian ,  dengan menggunakan  ovaprim-C  dengan  selang masa  penginduksian  2  minggu  sekali selama  4  minggu.    Perlakuan  utama/main plot  berupa  penginduksian  Ovaprim-C masing-masing 0,25 cc/kg. bobot badan dan 0,50  cc/kg.bobot  badan,  sedangkan k e l o m p o k   k o n t r o l   a d a l a h i n t a c t treatment /tanpa  diinduksi;  sub  plot  berupa waktu  pengambilan  sampel  dua  mingguan (DM-1, DM-2, DM-3 dan DM-4 = dua minggu I,  II,  III  dan  IV);  masing-masing  perlakuan diulang tiga kali.
D i l a n j u t k a n   d e n g a n t a h a p p e n g a m a t a n   d a n   a n a l i s i s ,   y a k n i penimbangan  bobot  belut  dilakukan  pada awal  percobaan  dengan  melakukan pengambilan  serum  darah  sebelum diinduksi  dengan  ovaprim-C,  penimbangan bobot  dan  panjang  tubuh  induk  belut, penghitungan  fekunditas  telur  induk  belut betina,  pengukuran  Indeks  Kematangan Gonad (IKG).   Langkah ini dilakukan setiap dua  minggu  sekali  selama  empat  minggu dengan ulangan tiga kali.  Serum darah belut yang  diperoleh  dianalisis  hormonalnya

## Penghitungan gonado-somatik indeks ( GSI ) atau Indeks  Kematangan Gonad
Berat gonad GSI (IKG) = Indeks Kematangan Gonad =     ------------------- x 100% Berat tubuh dengan  teknik  MEIA.    Preparasi  sediaan histologis  gonad/ovarium  belut  dilakukan dengan  metode  parafin,  pewarnaan Haematoxylin  -  Eosin,  preparasi  sediaan mikroskop  elektron  hipofisis  resipien  serta dilakukan analisis diskripsi.
Data kuantitatif diekspresikan sebagai rata-rata  (means)    standar  deviation  (SD). Perubahan-perubahan pada rentang waktu
penginduksian  dalam  masing-masing kelompok  perlakuan  dan  perbedaan- perbedaan  di  antara  kelompok  kontrol  dan kelompok  perlakuan  masing-masing  waktu sampling  diindentifikasi  dengan Uji  F (  P< 0,01 berarti significant/berbeda nyata).  Data kualitatif  gambaran  histologi  perubahan struktur  ovarium  selama  perkembangan dianalisis secara diskripsi histologis.
bobot  badan  diberikan  dua  hari  sekali sehingga dianggap setiap hari mendapat jatah  5%),  setelah  genangan  air  di permukaan  media  lumpur  pada  bak pemeliharaan diganti dengan yang baru, kemudian  diaduk  perlahan.  Pelet  pun ternyata  kurang  direspon  belut.  Dicoba menggunakan  cincangan  daging  keong mas yang diletakkan pada genangan air di  permukaan  media  pemeliharaan dalam akuarium dengan pemberian 10% dari bobot induk belut, ternyata direspon oleh induk belut.
P e n i n g k a t a n   b o b o t   b a d a n (Gambar  1)  belut  kelompok  perlakuan
(A   dan  A )  pada  dua  minggu  kedua,
1 2 ketiga dan keempat diduga karena erat hubungannya  dengan  hadirnya  telur- telur pada rongga tubuh pada fase awal p r o s e s   p e n y i a p a n   p e m a s a k a n ( vitellogenesis ), tetapi penurunan bobot badan  belut  kelompok  kontrol  sampai dengan  dua  minggu  keempat  belum diketahui penyebabnya.
Hasil  Analisis  variansi  terhadap bobot  badan  belut  uji  betina  adalah pengaruh  main?    induksi  Ovaprim-C tidak  berbeda  nyata  ( P >0.05),  begitu juga  pengaruh  waktu  pengambilan sampel  dua  mingguan.  Interaksi p e r l a k u a n   i n d u k s i   d a n   w a k t u pengambilan  sampel  memberikan pengaruh  yang  berbeda  sangat nyata( P<0.01 ).  Pada  belut  jantan, penginduksian  Ovaprim-C  memberikan pengaruh  yang  berbeda  sangat  nyata, sedangkan  waktu  pengambilan  sampel dua  mingguan  dan  interaksi  keduanya tidak berbeda nyata.
Data  lainnya  berupa  kadar  masing- masing  hormon  steroid  dan  gonadotropin, fekunditas  telur,  dan  Indeks  kematangan gonad  (GSI),  disajikan  dalam  bentuk  tabel dan diagram batang. Profil  gonadogenesis testis  dan  ovarium  disajikan  dalam  bentuk foto,  dan  dianalisis  secara  kualitatif deskriptif.

## Hasil dan Pembahasan
1.  Perubahan Bobot Badan Pada  kelompok  kontrol,  bobot badan  secara  gradual  menurun  selama penelitian.    Berbeda  dengan  kelompok kontrol,  kelompok  perlakuan  yang diamati  setiap  dua  minggu  sekali menunnjukan  kenaikan  pada  bobot badan  (Gambar  1.)  Bobot  badan  awal rata-rata  seluruh  belut  uji  baik kontrol/perlakuan berkisar antara 15 - 20 gam.  Sehingga  bila  dilihat  pada  dua minggu  pertama  bobot  badan  untuk semua  belut  uji  meningkat  (Gambar  1) untuk  kemudian  pada  dua  minggu kedua,  ketiga  dan  keempat  menurun (kelompok kontrol) dan meningkat pada kelompok perlakuan.
S e h u b u n g a n   d e n g a n pelaksanaan  kegiatan  penelitian  yang dilakukan  di  laboratorium,  maka pemberian  pakan  harus  disesuaikan  . Pada  penelitian  pendahuluan  ini,  kami m e n d a p a t k a n   k e s u l i t a n   u n t u k menangani  masalah  pakan.  Pemberian cacing Tubifex sp. segar ke dalam media p e m e l i h a r a a n   t i d a k   p e r n a h dimanfaatkan  oleh  belut  uji.  Dicoba dengan  memberikan  pelet  standar dengan  cara  dibuat  adonan  (10  %  dari
119 Susatyo, Priyo dkk., :  116 - 126 Induksi Pematangan Gonad dengan Ovaprim-C
Gambar 1. Rerata  Perubahan  bobot  badan  belut  sawah  jantan  dan  betina  yang  disuntik  dengan Ovaprim-C
Figure 1. Weight changes of male and female rice eels injected with Ovaprim-C
Keterangan:    masing-masing nilai mewakili rataan  standar deviasi dari masing-masing perlakuan DM-1; DM-2; DM-3 & DM-4=Waktu pengambilan data, dua minggu  pertama , kedua, ketiga   & keempat A , A , A   = induksi Ovaprim (0,25 cc/kg. bobot badan dan 0,50 cc/kg.bobot badan) pada belut betina 0 1 2 B , B ,  B  = induksi Ovaprim (0,25 cc/kg. bobot badan dan 0,50 cc/kg.bobot badan) pada belut jantan 0 1 2

## 2.   Indeks Kematangan Gonad (IKG)
Peningkatan  indeks  kematngan gonad baik pada kelompok kontrol atau p e r l a k u a n   m e n u n j u k k a n   a d a n y a pengaruh  waktu  dan  penginduksian ovaprim-C.
Menurut  Drori et  al., (1994),  induksi g o n a d o t r o p i n e k s o g e n   a k a n merangsang  terbentuknya  steroid estrogen dan 17  - 20 - progesteron ( 17  - 20    dihidroxy-4-pregnen-3  one/DHP ) yang  mendukung  pemasakan  oosit, menekan atresia pada oosit yang sedang berkembang, estrogen merangsang p e m b e n t u k a n v i t e l l o g e n i n ( y o l k precursor yang  terbentuk  dalam  hati) yang  selanjutnya  akan  merangsang terjadinya proses vitellogenesis ke arah kemasakan  telur.  Diduga,  induksi ovaprim-C yang  baru  berlangsung  dua kali  selama  empat  minggu,  masing- masing  dilakukan  sekali  setiap  dua minggu pada belut-belut uji baru mampu merangsang  proses  awal  pertumbuhan o o s i t   y a n g   d i c i r i k a n   d e n g a n bertambahnya  bobot  gonad.  Profil histologi  gonad  selama  proses  tersebut akan dibahas lebih lanjut.
Hasil  analisis  variansi  Indeks Kematangan  Gonad  belut  betina menunjukkan  baik  penginduksian Ovaprim-C, waktu pengambilan sampel dua  mingguan  maupun  interaksi keduanya  memberikan  pengaruh  yang berbeda  sangat  nyata  ( P <0.05).  Pada awal penelitian  bobot gonad belut betina d i a n g g a p   s a m a ,   y a k n i   d e n g a n mengasumsikan  bahwa  bobot  badan yang rata-rata sama pada awalnya 10 – 20  gram  per  ekor  akan  diikuti  dengan status  gonad  yang  sama.    Sebagai komponen IKG,  maka bobot gonad belut betina  dari  semua  perlakuan  s/d  dua m i n g g u   k e e m p a t   m e n u n j u k k a n peningkatan. (Gambar   2)   Chiba et al. (1994)  menyatakan  bahwa Anguilla anguilla yang  disuntik  dengan  ekstrak hipofisis  salmon  segar  akan  meningkat IKGnya  seiring  dengan  meningkatnya tahap  pemasakan  dan  perkembangan telur  yang  terjadi.Disebutkan  oleh Burzawa  –  Gerard  dan  Dumas  –  Vidal (1991),  bahwa    sidat Anguilla yang disuntik 17  -estradiol dan gonadotropin ikan  karper  akan  meningkat  proses vitellogenesis nya  seiring  dengan
120
peningkatan Indeks Kematangan Gonad (IKG)  dan  bobot  gonad  rata-rata. Menurut  Chiba et  al. (1994),  IKG  sidat Anguilla yang  disuntik  ekstrak  hipofisis salmon  segar  memberikan  nilai  IKG sebesar 25 – 50% dengan kisaran rataan (2,5 %; 12,4 % dan 50 %) setelah 10 – 11
kali penyuntikan, interval masing-masing dua  minggu.  Pada  penelitian  ini  baru berlangsung  empat  kali  penyuntikan dengan  interval  dua  minggu,    sama dengan yang dilakukan pada   penelitian Chiba et al. (1994).
Gambar  2.  Rerata nilai Indeks kematangan gonad belut sawah betina dan jantan yang diinduksi dengan ovaprim-C Figure 2. Gonad maturity index of female and male ricefield eels inducted with o vaprim-C
Keterangan :  masing-masing nilai mewakili rerata  standar deviasi masing-masing perlakuan .
Pada  belut  uji  jantan  sampai dengan  dua  minggu  keempat  IKG menurun,  tetapi  tidak  demikian  dengan bobot testesnya yang meningkat.  Hal ini dikarenakan  selama  pengujian  bobot badan belut jantan meningkat. Hal inilah yang  menyebabkan  profil    IKG  belut jantan  turun.  Hasil  analisis  variansi Indeks Kematangan Gonad belut jantan menunjukkan  baik  penginduksian Ovaprim-C, waktu pengambilan sampel dua  mingguan  maupun  interaksi keduanya  memberikan  pengaruh  yang berbeda sangat nyata

## 3.  Fekunditas Telur
Jumlah  telur    per  gonad  induk betina  sampai  dengan  dua  minggu keempat  tertinggi  dijumpai  pada perlakuan  induksi  Ovaprim-C  0,50 cc/kg.bb.,  yakni    reratanya  281,3  butir 10,6  (Tabel 1). Sebagai informasi bahwa ukuran  diameter  telur  belut  betina berkisar antara 0,85 mm (850 mikron) –
3,0 mm (3000 mikron). Ukuran tersebut dijumpai  pada  belut  betina  yang  telah diinduksi  dengan  Ovaprim-C  0,50 cc/kg.bb.  empat kali dengan interval dua minggu dengan tahapan perkembangan pemasakan  telur  yang  dicapai yakni early yolk globuler stage (oocyte primer) Gambar 3 A, D, E sampai dengan tahap late yolk globular stage (Gambar 3 A, B, C)  yang  dapat  diikuti  selanjutnya  pada pembahasan  histologis  perkembangan pemasakan telur.
Bila dibandingkan dengan ovarium ikan  nilem    ( Osteochillus sp).  yang masak  kelamin  dan  siap  mijah  memiliki ukuran diameter telur terbesar yakni 750 mikron  untuk  tahapan mature  oocyte (Susatyo et  al .,  2000),    maka  ukuran diameter telur belut lebih besar daripada ikan  nilem  dengan  bobot  tubuh  yang relatif    lebih    ringan  dibandingkan dengan ikan nilem (keduanya termasuk teleostei ).
121 Susatyo, Priyo dkk.,
:  116 - 126 Induksi Pematangan Gonad dengan Ovaprim-C
Biosfera 29 (3) September 2012

## Gambar 1. Rerata  Perubahan  bobot  badan  belut  sawah  jantan  dan  betina  yang  disuntik  dengan Ovaprim-C
Figure 1. Weight changes of male and female rice eels injected with Ovaprim-C
Keterangan:    masing-masing nilai mewakili rataan  standar deviasi dari masing-masing perlakuan DM-1; DM-2; DM-3 & DM-4=Waktu pengambilan data, dua minggu  pertama , kedua, ketiga   & keempat A , A , A   = induksi Ovaprim (0,25 cc/kg. bobot badan dan 0,50 cc/kg.bobot badan) pada belut betina
0 1 2 B , B ,  B  = induksi Ovaprim (0,25 cc/kg. bobot badan dan 0,50 cc/kg.bobot badan) pada belut jantan 0 1 2

## 2.   Indeks Kematangan Gonad (IKG)
Peningkatan  indeks  kematngan gonad baik pada kelompok kontrol atau p e r l a k u a n   m e n u n j u k k a n   a d a n y a pengaruh  waktu  dan  penginduksian ovaprim-C.
Menurut  Drori et  al., (1994),  induksi g o n a d o t r o p i n e k s o g e n   a k a n merangsang  terbentuknya  steroid estrogen dan 17  - 20 - progesteron ( 17  -
20    dihidroxy-4-pregnen-3  one/DHP ) yang  mendukung  pemasakan  oosit, menekan atresia pada oosit yang sedang berkembang, estrogen merangsang p e m b e n t u k a n v i t e l l o g e n i n ( y o l k precursor yang  terbentuk  dalam  hati) yang  selanjutnya  akan  merangsang terjadinya proses vitellogenesis ke arah kemasakan  telur.  Diduga,  induksi ovaprim-C yang  baru  berlangsung  dua kali  selama  empat  minggu,  masing- masing  dilakukan  sekali  setiap  dua minggu pada belut-belut uji baru mampu merangsang  proses  awal  pertumbuhan o o s i t   y a n g   d i c i r i k a n   d e n g a n bertambahnya  bobot  gonad.  Profil histologi  gonad  selama  proses  tersebut akan dibahas lebih lanjut.
Hasil  analisis  variansi  Indeks Kematangan  Gonad  belut  betina menunjukkan  baik  penginduksian Ovaprim-C, waktu pengambilan sampel dua  mingguan  maupun  interaksi keduanya  memberikan  pengaruh  yang berbeda  sangat  nyata  ( P <0.05).  Pada awal penelitian  bobot gonad belut betina d i a n g g a p   s a m a ,   y a k n i   d e n g a n mengasumsikan  bahwa  bobot  badan yang rata-rata sama pada awalnya 10 – 20  gram  per  ekor  akan  diikuti  dengan status  gonad  yang  sama.    Sebagai komponen IKG,  maka bobot gonad belut betina  dari  semua  perlakuan  s/d  dua m i n g g u   k e e m p a t   m e n u n j u k k a n peningkatan. (Gambar   2)   Chiba et al.
(1994)  menyatakan  bahwa Anguilla anguilla yang  disuntik  dengan  ekstrak hipofisis  salmon  segar  akan  meningkat IKGnya  seiring  dengan  meningkatnya tahap  pemasakan  dan  perkembangan telur  yang  terjadi.Disebutkan  oleh Burzawa  –  Gerard  dan  Dumas  –  Vidal (1991),  bahwa    sidat Anguilla yang disuntik 17  -estradiol dan gonadotropin ikan  karper  akan  meningkat  proses vitellogenesis nya  seiring  dengan
peningkatan Indeks Kematangan Gonad (IKG)  dan  bobot  gonad  rata-rata. Menurut  Chiba et  al. (1994),  IKG  sidat Anguilla yang  disuntik  ekstrak  hipofisis salmon  segar  memberikan  nilai  IKG sebesar 25 – 50% dengan kisaran rataan (2,5 %; 12,4 % dan 50 %) setelah 10 – 11
kali penyuntikan, interval masing-masing dua  minggu.  Pada  penelitian  ini  baru berlangsung  empat  kali  penyuntikan dengan  interval  dua  minggu,    sama dengan yang dilakukan pada   penelitian Chiba et al. (1994).
Gambar  2.  Rerata nilai Indeks kematangan gonad belut sawah betina dan jantan yang diinduksi dengan ovaprim-C
Figure 2. Gonad maturity index of female and male ricefield eels inducted with o vaprim-C
Keterangan :  masing-masing nilai mewakili rerata  standar deviasi masing-masing perlakuan .
Pada  belut  uji  jantan  sampai dengan  dua  minggu  keempat  IKG menurun,  tetapi  tidak  demikian  dengan bobot testesnya yang meningkat.  Hal ini dikarenakan  selama  pengujian  bobot badan belut jantan meningkat. Hal inilah yang  menyebabkan  profil    IKG  belut jantan  turun.  Hasil  analisis  variansi Indeks Kematangan Gonad belut jantan menunjukkan  baik  penginduksian Ovaprim-C, waktu pengambilan sampel dua  mingguan  maupun  interaksi keduanya  memberikan  pengaruh  yang berbeda sangat nyata

## 3.  Fekunditas Telur
Jumlah  telur    per  gonad  induk betina  sampai  dengan  dua  minggu keempat  tertinggi  dijumpai  pada perlakuan  induksi  Ovaprim-C  0,50 cc/kg.bb.,  yakni    reratanya  281,3  butir 10,6  (Tabel 1). Sebagai informasi bahwa ukuran  diameter  telur  belut  betina berkisar antara 0,85 mm (850 mikron) –
3,0 mm (3000 mikron). Ukuran tersebut dijumpai  pada  belut  betina  yang  telah diinduksi  dengan  Ovaprim-C  0,50 cc/kg.bb.  empat kali dengan interval dua minggu dengan tahapan perkembangan pemasakan  telur  yang  dicapai yakni early yolk globuler stage (oocyte primer) Gambar 3 A, D, E sampai dengan tahap late yolk globular stage (Gambar 3 A, B, C)  yang  dapat  diikuti  selanjutnya  pada pembahasan  histologis  perkembangan pemasakan telur.
Bila dibandingkan dengan ovarium ikan  nilem    ( Osteochillus sp).  yang masak  kelamin  dan  siap  mijah  memiliki ukuran diameter telur terbesar yakni 750 mikron  untuk  tahapan mature  oocyte (Susatyo et  al .,  2000),    maka  ukuran diameter telur belut lebih besar daripada ikan  nilem  dengan  bobot  tubuh  yang relatif    lebih    ringan  dibandingkan dengan ikan nilem (keduanya termasuk teleostei ).
Susatyo, Priyo dkk., :  116 - 126 Induksi Pematangan Gonad dengan Ovaprim-C Biosfera 29 (3) September 2012
Gambar  3. Telur Belut ( Monopterus Albus Zuiew) Segar, dengan Stereo Mikroskop 0,25 X 10 Figure 3. Fresh egg of Monopterus Albus Zuiew under Stereo Mikroskope 0,25 X 10
Keterangan : A, B, C, D, E   =  telur dari belut yang telah mencapai tahapan early yolk gobuler dan late yolk  globular stage (850 mikron – 3000 mikron) A,B dan C = late yolk globular stage
D dan E           = early yolk globular stage A B C D E 1000 ?
Kenyataan  ini  lebih  dapat  untuk mendekatkan  suatu  persepsi    yakni relatif  lamanya  masa  pemasakan  telur pada belut sawah betina di alam bebas. Pada  penelitian  kami  belum    berhasil sampai  dengan  mematangkan  seluruh
induk-induk  belut  betina  perlakuan apalagi  untuk  kebutuhan  memijahkan, w a l a u p u n   s u d a h   d i l a k u k a n penginduksian  Ovaprim-C/ gonadotropin eksogen sampai dengan empat kali.
Tabel  1. Fekunditas Belut Sawah Betina Selama Penelitian Sejak Dua Minggu I (DM-1) s/d Dua Minggu Keempat   (DM-4)
Table 1.   Female paddy eel fecundity during research since Forthnight I (DM-1) to Forthnight IV (DM-4)
Keterangan   :  masing-masing nilai mewakili rataan  standar deviasi masing- masing perlakuan
Fekunditas  mutlak  tertinggi  sebanyak 294  butir  telur  (perlakuan  A2,  DM-4, Tabel    1)  ini  sudah  cukup  baik  untuk menyatakan  bahwa  induk  betina  belut s i a p   m i j a h   ( Ta b e l   1 ) .   M e n u r u t Sumantadinata  (1981),  ikan  belut
berukuran panjang 19 – 28 cm memiliki fekunditas 285 – 427 butir telur   (di alam bebas induk betina belut yang siap untuk mijah mencapai fekunditas antara 300 –
400   butir telur.
Perla- kuan/ Ulangan A 0 A 1 A 2 DM-1 Dm2 DM-3 DM4 DM1 DM2 DM-3 DM-4 DM-1 DM-2 DM-3 DM-4 1 14 38 36 34 53 75 78 126 200 218 263 294 2 9 18 32 50 60 58 88 132 212 225 256 268 3 18 29 41 37 39 83 80 120 193 241 242 282 Rataan SD 13.7 ±4,5 28,3 ±8,1 36,3 ±3,6 40,3 ±6,9 50,6 ±8,7 72,0 ±10,4 82,0 ±4,3 126,0 ±4,8 201,7 ±7,8 228,0 ±9,6 253,7 ±8,7 281,3 ±10,6 122
Gambar  4. Rerata Fekunditas Belut Sawah Betina Yang Disuntik Dengan Ovaprim-C
Figure  4. Average fecundity of paddy eel injected with Ovaprim-C
Keterangan  :  masing-masing nilai mewakili rerata  standar deviasi Perlakuan DM-1; DM-2; DM-3 & DM-4 = Waktu pengambilan data, dua  minggu pertama , kedua, ketiga & keempat
A0, A1, A2  = induksi Ovaprim pada belut betina  (0,25 cc/kg. bobot badan dan 0,50 cc/kg.bobot badan) Hasil  analisis  variansi  terhadap f e k u n d i t a s   t e l u r   b e l u t   b e t i n a menunjukkan bahwa baik penginduksian Ovaprim-C, waktu pengambilan sampel dua  mingguan  maupun  interaksi keduanya memeberikan pengaruh yang berbeda sangat nyata ( P <0.01).
4.  Profil Estradiol  17 dan Testosteron
Tabel  2.  Titer Hormon Estradiol-17 (pg/Ml) dan Testosteron (ng/dl) Belut Jantan dan Betina Selama Penelitian Table 2.   Titer hormone Estradiol-17 (pg/Ml) and Testosteron (ng/dl) of male and female rice eel during research periode Perlakuan Titer Hormone Kontrol  (lart. Saline) Dosis 0,25 cc/kg.bb. Dosis 0,50 cc/kg.bb DM-1 DM-2 DM-3 DM-4 DM-1 DM-2 DM-3 DM-4 DM-1 DM-2 DM-3 DM-4 Estradiol 969 987 974 982 1483 1722 1817 2004 1640 2127 2631 2706 Estradiol 402 426 513 425 663 817 896 792 694 1426 1544 1403 Testosteron 114 101 132 119 136 165 165 194 158 203 287 302 Testosteron 141 138 164 166 152 316 403 384 189 387 512 487
Hasil  pengukuran  titer  kedua  jenis
belut  sawah, gonadotropin hipofisial hormon hormon di atas dilakukan   satu
menstimulasi  perkembangan  gonad minggu  setelah  penyuntikan ovaprim-C
dengan  cara  mengatur  sintesis  dari dua  minggu  pertama  s/d  dua  minggu
steroid-steroid gonad (Goetz, 1983). Dua
keempat  memperlihatkan  peningkatan jenis  steroid  yang  diamati  pada
bila  dibandingkan  dengan  kelompok penelitian  ini  hanya estradiol 17 dan kontrol. testosteron .  Peneliti  lain  yang  pernah Pada  ikan-ikan  teleostei  termasuk mencoba  melakukan  induksi  secara
123 Susatyo, Priyo dkk.,
:  116 - 126 Induksi Pematangan Gonad dengan Ovaprim-C
Biosfera 29 (3) September 2012
Gambar  3. Telur Belut ( Monopterus Albus Zuiew) Segar, dengan Stereo Mikroskop 0,25 X 10 Figure 3. Fresh egg of Monopterus Albus Zuiew under Stereo Mikroskope 0,25 X 10
Keterangan :
A, B, C, D, E   =  telur dari belut yang telah mencapai tahapan early yolk gobuler dan late yolk  globular stage (850 mikron – 3000 mikron)
A,B dan C
= late yolk globular stage D dan E           = early yolk globular stage A B C D E 1000 ?
Kenyataan  ini  lebih  dapat  untuk mendekatkan  suatu  persepsi    yakni relatif  lamanya  masa  pemasakan  telur pada belut sawah betina di alam bebas.
Pada  penelitian  kami  belum    berhasil sampai  dengan  mematangkan  seluruh
induk-induk  belut  betina  perlakuan apalagi  untuk  kebutuhan  memijahkan, w a l a u p u n   s u d a h   d i l a k u k a n penginduksian  Ovaprim-C/ gonadotropin eksogen sampai dengan empat kali.
Tabel  1. Fekunditas Belut Sawah Betina Selama Penelitian Sejak Dua Minggu I (DM-1) s/d Dua Minggu Keempat   (DM-4)
Table 1.   Female paddy eel fecundity during research since Forthnight I (DM-1) to Forthnight IV (DM-4)
Keterangan   :  masing-masing nilai mewakili rataan  standar deviasi masing- masing perlakuan
Fekunditas  mutlak  tertinggi  sebanyak 294  butir  telur  (perlakuan  A2,  DM-4,
Tabel    1)  ini  sudah  cukup  baik  untuk menyatakan  bahwa  induk  betina  belut s i a p   m i j a h   ( Ta b e l   1 ) .   M e n u r u t Sumantadinata  (1981),  ikan  belut
berukuran panjang 19 – 28 cm memiliki fekunditas 285 – 427 butir telur   (di alam bebas induk betina belut yang siap untuk mijah mencapai fekunditas antara 300 –
400   butir telur.
Perla- kuan/
Ulangan
A 0 A 1 A 2 DM-1 Dm2 DM-3 DM4 DM1 DM2 DM-3 DM-4 DM-1 DM-2 DM-3 DM-4 1 14 38 36 34 53 75 78 126 200 218 263 294 2 9 18 32 50 60 58 88 132 212 225 256 268 3 18 29 41 37 39 83 80 120 193 241 242 282 Rataan SD 13.7 ±4,5 28,3 ±8,1 36,3 ±3,6 40,3 ±6,9 50,6 ±8,7 72,0 ±10,4 82,0 ±4,3 126,0 ±4,8 201,7 ±7,8 228,0 ±9,6 253,7 ±8,7 281,3 ±10,6
Gambar  4. Rerata Fekunditas Belut Sawah Betina Yang Disuntik Dengan Ovaprim-C
Figure  4. Average fecundity of paddy eel injected with Ovaprim-C
Keterangan  :  masing-masing nilai mewakili rerata  standar deviasi Perlakuan DM-1; DM-2; DM-3 & DM-4 = Waktu pengambilan data, dua  minggu pertama , kedua, ketiga & keempat
A0, A1, A2  = induksi Ovaprim pada belut betina  (0,25 cc/kg. bobot badan dan 0,50 cc/kg.bobot badan) Hasil  analisis  variansi  terhadap f e k u n d i t a s   t e l u r   b e l u t   b e t i n a menunjukkan bahwa baik penginduksian Ovaprim-C, waktu pengambilan sampel dua  mingguan  maupun  interaksi keduanya memeberikan pengaruh yang berbeda sangat nyata ( P <0.01).
4.  Profil Estradiol  17 dan Testosteron
Tabel  2.  Titer Hormon Estradiol-17 (pg/Ml) dan Testosteron (ng/dl) Belut Jantan dan Betina Selama Penelitian
Table 2.   Titer hormone Estradiol-17 (pg/Ml) and Testosteron (ng/dl) of male and female rice eel during research periode
Perlakuan Titer Hormone Kontrol  (lart. Saline) Dosis 0,25 cc/kg.bb. Dosis 0,50 cc/kg.bb DM-1 DM-2 DM-3 DM-4 DM-1 DM-2 DM-3 DM-4 DM-1 DM-2 DM-3 DM-4 Estradiol 969 987 974 982 1483 1722 1817 2004 1640 2127 2631 2706 Estradiol 402 426 513 425 663 817 896 792 694 1426 1544 1403 Testosteron 114 101 132 119 136 165 165 194 158 203 287 302 Testosteron 141 138 164 166 152 316 403 384 189 387 512 487
Hasil  pengukuran  titer  kedua  jenis
belut  sawah, gonadotropin hipofisial hormon hormon di atas dilakukan   satu
menstimulasi  perkembangan  gonad minggu  setelah  penyuntikan ovaprim-C
dengan  cara  mengatur  sintesis  dari dua  minggu  pertama  s/d  dua  minggu
steroid-steroid gonad (Goetz, 1983). Dua keempat  memperlihatkan  peningkatan
jenis  steroid  yang  diamati  pada
bila  dibandingkan  dengan  kelompok
penelitian  ini  hanya estradiol 17 dan kontrol.
testosteron .  Peneliti  lain  yang  pernah Pada  ikan-ikan  teleostei  termasuk mencoba  melakukan  induksi  secara
123 Susatyo, Priyo dkk., :  116 - 126 Induksi Pematangan Gonad dengan Ovaprim-C Biosfera 29 (3) September 2012
artifisial  terhadap  perkembangan  oosit dan  spermatozoa/ spermatogenesis adalah  Fontaine et  al. (dalam  Chiba et al. ,  1994);    Boetius  dan  Boetius  (1980) serta  Satoh et  al. (1992),  semuanya meneliti  pada  sidat-sidat  Jepang  dan Eropa jenis Silver, sedangkan Yoshikuni dan  Nagahama  (1991)  meneliti  pada karper.
Peyon et  al. (1992)  menyebutkan
bahwa estradiol 17 pada induk betina akan  mempengaruhi  ekspresi  dari beberapa  gen-gen vitellogenin dalam sel-sel hepatocyt yang  nantinya  akan mensintesis protein vitellogenin . Dengan terbentuknya vitellogenin dalam sel hati akhirnya  akan  dialirkan  dalam  aliran darah sampai ke tempat penimbunannya dalam oosit pada proses vitellogenesis . Ditambahkan  oleh  Fostier et  al. (1983)
bahwa estradiol 17 beraksi  pada  sel hepatocyt untuk  mensintesis  protein vitellogenin sebagai  precursor  protein yolk  yang  nantinya  akan  tertampung d a l a m   o o s i t   d a n   m e n g h a s i l k a n pertumbuhan ovarium.
Pada  betina, testosteron yang berada  dalam theca  folliculi dikontrol a k t i v i t a s n y a   o l e h g o n a d o t r o p i n . Selanjutnya testosteron berdifusi masuk ke  dalam granulosa  cells mengalami aromatasi  menjadi estradiol 17 dan memicu  pertumbuhan  oosit.  Pada penelitian  ini,  profil estradiol 17
berkorelasi  dengan  peningkatan  Indeks Kematangan Gonad belut betina. Sesuai dengan  pernyataan  Takashima et  al.
(1979)  bahwa  hormon estradiol 17 meningkat  secara  paralel  dengan p e n i n g k a t a n   I K G   s e r t a   s t a d i u m perkembangan  oosit  pada  sidat-sidat Jepang  yang  diinduksi  secara  artifisial. Pada  penelitian  ini  tidak  diamati  profil vitellogenin.
Menurut Fostier et al. (1983), secara umum pada teleostei, level estradiol 17 dalam  serum  darah  peningkatannya sejajar  dengan  peningkatan  proses vitellogenesis dan  pada  puncak  proses akan  menurun  levelnya,  yakni  pada stadium  pemasakan  oosit  akhir  yang mengakhiri seluruh proses vitellogenesis
L a i n   h a l n y a   d e n g a n   h a s i l pengukuran  terhadap  kedua  jenis hormon  pada  belut  uji  jantan,    titer testosteron maupun estradiol
17 sampai  dengan  dua  minggu  ketiga
meningkat,  tetapi  pada  dua  minggu keempat  menurun.  Hal  ini  dapat dikonfirmasikan  dengan  gambaran histologis sediaan testes belut jantan uji; pada dua minggu keempat lebih banyak dijumpai struktur spermatogonium yang m e r u p a k a n   c a l o n   p e m b e n t u k spermatozoa .    Sampai  dengan  dua minggu  ketiga,  histologis  testes memperlihatkan  suatu  peningkatan stadium  pertumbuhan  sampai  dengan spermatid bahkan  pada  beberapa s e d i a a n   m e n u n j u k k a n   a d a n y a spermatozoa bebas yang relatif banyak memenuhi lumen/rongga seminiferous . Terdapat  dugaan  bahwa  belut  uji telah mengalami spermiasi yakni proses pelepasan spermatozoa dalam  media p e m e l i h a r a a n ,   w a l a u p u n   p a d a kenyataannya  hanya  beberapa  saja yang dapat di stripping , tetapi sebagian besar  belut  uji  sampai  dengan  dua minggu ketiga tidak dapat mengeluarkan semennya  setelah  dilakukan    stripping, sehingga terlihat pada sediaan histologis di  dua  minggu  keempat  belut  uji  baru mengulang    proses spermatogenesis kembali.
Pada  penelitian  ini  baru  selesai diamati  sampai  dengan  dua  minggu k e e m p a t   p a s c a   p e n g i n d u k s i a n , sehingga  belum  dapat  memberikan jawaban seperti yang dijelaskan di atas. Pada  penelitian  ini,  konsentrasi testosteron dalam  serum  darah  belut sawah  agak  lebih  tinggi  daripada  titer estradiol 17 selama vitellogenesis berlangsung. Testosteron dikenal  akan berubah  menjadi estradiol
17 oleh aktivitas enzim aromatase , yang terletak dalam lapisan granulosa (Wingfield dan Grimm,  1977;  Kagawa et  al. ,1982  dan Nagahama,  1987).  Selama  proses vitellogenesis ,  konsentrasi  rendah  dari estradiol 17 dijumpai,  sesuai  laporan penelitian  terhadap  sidat  Jepang  jenis Silver (Yamauchi, 1990) dan pada sidat- sidat Eropa jenis Silver (Leloup-Hatey et al., 1988).
Saat  ini,  beberapa  peneliti  telah mengamati rendahnya enzim aromatase selama proses vitellogenesis pada sidat betina  yang  diinduksi  secara  artifisial (unpublished),  ini  berarti  sama  saja dengan  rendahnya  titer estradiol 17 dalam  serum  darah  yang  disebabkan oleh  rendahnya  aktivitas aromatase
124
selama proses vitellogenesis . Inilah yang merupakan  ciri  khas  profil  hormonal pada belut pada umumnya.
5.  Profil Histologi Ovarium dan Testis Belut Sawah
Pengamatan  mikroskopis  telah dilakukan  pada  gonad/ovarium  belut sawah  betina  yang  disuntik  dengan ovaprim-C . Profil histologi gonad kontrol dua  minggu  I  s/d    IV  memperlihatkan bahwa  oosit  primer  stadium  II  lebih banyak yang tidak melanjutkkan/ lambat perkembangannya,  dan  lebih  banyak yang  mengalami  atresia  sebelum mencapai stadium III atau lebih.
Profil  histologi  gonad  pada  dua minggu  pertama    memperlihatkan banyak oosit primer, vesicula yolk mulai nampak  pada  sitoplasma. Akan  bagus kalau ada bukti gambar histologi agar jelas  yang  mana  oosit  primer  dst  . Red.    Terima  kasih  sarannya,  tapi kami  mempunyai  rencana  publikasi gambaran  histologis  tersebut  pada kesempatan  lain  Bu..... Stadium  oosit lain  juga  dijumpai  yakni  stadium early yolk  globule dan  stadium late  yolk globule .  Pada  sediaan  gonad  ini  tidak dijumpai  adanya  stadium  atresia, dimungkinkan  karena  pemberian/ penginduksian ovaprim-C sebagai pemicu gonadotropin eksogen  mampu memelihara  dan  memfasilitasi  proses pertumbuhan oosit dari stadium awal ke stadium lanjut/maturasi.
Pertumbuhan  yang  terlihat  cepat adalah  pada  gonad  belut  sawah  betina pada  dua  minggu  kedua,  ketiga  s/d keempat  pasca penginduksian ovaprim- C. Beberapa  oosit  stadium late  yolk globule terlihat lebih mendominasi tetapi belum  menunjukkan  fase  lebih  lanjut. Oosit primer dari berbagai stadium masih tampak  berada  di  tepi,  dekat  lamella gonad.  Pada  sediaan  ini  juga  tidak dijumpai  adanya  stadium  atresia/oosit yang mengalami degenerasi.

## Simpulan
Dari  hasil  dan  pembahasan  dapat disimpulkan: (1) Penginduksian  dengan gonadotropin eksogen  ( ovaprim-C )  meningkatkan bobot  badan,  fekunditas  dan  indeks kematangan  gonad  (IKG)  belut  sawah
betina; tetapi relatif menurunkan indeks kematangan gonad belut jantan  sampai dengan  dua  minggu  keempat    pasca induksi,
(2) sampai    dengan  dua  minggu  keempat, titer estradiol 17 dan testosteron meningkat pada belut betina, tetapi pada belut  jantan  menurun  setelah  dua minggu  keempat pasca induksi,
(3)  profil histologi gonad belut sawah pasca penginduksian ovaprim-C memperlihat- kan  bahwa  sampai  dengan  penginduk- sian  dua  minggu  keempat,  gonad  telah mencapai stadium late yolk globule (oosit primer  lanjut),  bahkan  sebagian  besar oosit  telah  mencapai  stadium mature; pada  belut  jantan  sampai  dengan  dua minggu  keempat  telah  mencapai stadium spermatozoa

## Daftar  Pustaka
Boetius,  L.  and  J.  Boetius.  1980. Experimental  maturation  of  female silver  eels, Anguilla  anguilla. Estimates  of  fecundity  energy reserves for migration and spawning. Dana 1 : 1 - 28.
Burzawa-Gerard,  E.  and  A.  Dumas-Vidal, 1991.  Effects  of    17 -  estradiol and carp gonadotropin on vitellogenesis in normal  and  hypophysectomized European  silver  female  eel  ( Anguilla anguilla L.)  employing  a  homologous radioimmuno assay for vitellogenin. J. G e n e r a l   a n d   C o m p a r a t i v e Endocrinology. 84 : 264 - 276.
Chiba, H.; Kenji I.; Kazuwo, H.; Akihiko, H.; Yamauchi, K. 1994. Changes in serum steroid  hormones  and  vitellogenin levels  in  cultured  female  european Anguilla  anguilla during  artificially induced  ovaroian  development. J.
Aquaculture Society. 25. 4: 553 -560.
Drori,  S.;  Ofir,  M.;  Sivan,  B.  and  Yaron,  Z. 1994.  Spawning  indution  in  common carp  by  putitary  extract  or  GNRH superactive  analog  combined  with metoclopramide : analysis of hormone profile, progress of oocyte maturation and  dependence  on  temperature  . J. Aquaculture. 119 : 393 - 404.
Dufour, S.; E. Olpez; F. Le Menn; N. Le Belle; S.  Baloche  dan  Y.A.  Fontaine.  1988. Stimulation  of  Gonadotropin  Release and  of  Ovarian  Development,  by  the
125
Susatyo, Priyo dkk., :  116 - 126 Induksi Pematangan Gonad dengan Ovaprim-C
Biosfera 29 (3) September 2012
artifisial  terhadap  perkembangan  oosit dan  spermatozoa/ spermatogenesis adalah  Fontaine et  al. (dalam  Chiba et al. ,  1994);    Boetius  dan  Boetius  (1980) serta  Satoh et  al. (1992),  semuanya meneliti  pada  sidat-sidat  Jepang  dan Eropa jenis Silver, sedangkan Yoshikuni dan  Nagahama  (1991)  meneliti  pada karper.
Peyon et  al. (1992)  menyebutkan bahwa estradiol 17 pada induk betina akan  mempengaruhi  ekspresi  dari beberapa  gen-gen vitellogenin dalam sel-sel hepatocyt yang  nantinya  akan mensintesis protein vitellogenin . Dengan terbentuknya vitellogenin dalam sel hati akhirnya  akan  dialirkan  dalam  aliran darah sampai ke tempat penimbunannya dalam oosit pada proses vitellogenesis .
Ditambahkan  oleh  Fostier et  al. (1983) bahwa estradiol 17 beraksi  pada  sel hepatocyt untuk  mensintesis  protein vitellogenin sebagai  precursor  protein yolk  yang  nantinya  akan  tertampung d a l a m   o o s i t   d a n   m e n g h a s i l k a n pertumbuhan ovarium.
Pada  betina, testosteron yang berada  dalam theca  folliculi dikontrol a k t i v i t a s n y a   o l e h g o n a d o t r o p i n .
Selanjutnya testosteron berdifusi masuk ke  dalam granulosa  cells mengalami aromatasi  menjadi estradiol 17 dan memicu  pertumbuhan  oosit.  Pada penelitian  ini,  profil estradiol 17
berkorelasi  dengan  peningkatan  Indeks Kematangan Gonad belut betina. Sesuai dengan  pernyataan  Takashima et  al.
(1979)  bahwa  hormon estradiol 17 meningkat  secara  paralel  dengan p e n i n g k a t a n   I K G   s e r t a   s t a d i u m perkembangan  oosit  pada  sidat-sidat
Jepang  yang  diinduksi  secara  artifisial. Pada  penelitian  ini  tidak  diamati  profil vitellogenin.
Menurut Fostier et al. (1983), secara umum pada teleostei, level estradiol 17 dalam  serum  darah  peningkatannya sejajar  dengan  peningkatan  proses vitellogenesis dan  pada  puncak  proses akan  menurun  levelnya,  yakni  pada stadium  pemasakan  oosit  akhir  yang mengakhiri seluruh proses vitellogenesis
L a i n   h a l n y a   d e n g a n   h a s i l pengukuran  terhadap  kedua  jenis hormon  pada  belut  uji  jantan,    titer testosteron maupun estradiol 17 sampai  dengan  dua  minggu  ketiga
meningkat,  tetapi  pada  dua  minggu keempat  menurun.  Hal  ini  dapat dikonfirmasikan  dengan  gambaran histologis sediaan testes belut jantan uji; pada dua minggu keempat lebih banyak dijumpai struktur spermatogonium yang m e r u p a k a n   c a l o n   p e m b e n t u k spermatozoa .    Sampai  dengan  dua minggu  ketiga,  histologis  testes memperlihatkan  suatu  peningkatan stadium  pertumbuhan  sampai  dengan spermatid bahkan  pada  beberapa s e d i a a n   m e n u n j u k k a n   a d a n y a spermatozoa bebas yang relatif banyak memenuhi lumen/rongga seminiferous .
Terdapat  dugaan  bahwa  belut  uji telah mengalami spermiasi yakni proses pelepasan spermatozoa dalam  media p e m e l i h a r a a n ,   w a l a u p u n   p a d a kenyataannya  hanya  beberapa  saja yang dapat di stripping , tetapi sebagian besar  belut  uji  sampai  dengan  dua minggu ketiga tidak dapat mengeluarkan semennya  setelah  dilakukan    stripping, sehingga terlihat pada sediaan histologis di  dua  minggu  keempat  belut  uji  baru mengulang    proses spermatogenesis
kembali.
Pada  penelitian  ini  baru  selesai diamati  sampai  dengan  dua  minggu k e e m p a t   p a s c a   p e n g i n d u k s i a n , sehingga  belum  dapat  memberikan jawaban seperti yang dijelaskan di atas. Pada  penelitian  ini,  konsentrasi testosteron dalam  serum  darah  belut sawah  agak  lebih  tinggi  daripada  titer estradiol 17 selama vitellogenesis berlangsung. Testosteron dikenal  akan berubah  menjadi estradiol 17 oleh aktivitas enzim aromatase , yang terletak dalam lapisan granulosa (Wingfield dan Grimm,  1977;  Kagawa et  al. ,1982  dan Nagahama,  1987).  Selama  proses vitellogenesis ,  konsentrasi  rendah  dari estradiol 17 dijumpai,  sesuai  laporan penelitian  terhadap  sidat  Jepang  jenis Silver (Yamauchi, 1990) dan pada sidat- sidat Eropa jenis Silver (Leloup-Hatey et al., 1988).
Saat  ini,  beberapa  peneliti  telah mengamati rendahnya enzim aromatase selama proses vitellogenesis pada sidat betina  yang  diinduksi  secara  artifisial (unpublished),  ini  berarti  sama  saja dengan  rendahnya  titer estradiol 17
dalam  serum  darah  yang  disebabkan oleh  rendahnya  aktivitas aromatase
124
selama proses vitellogenesis . Inilah yang merupakan  ciri  khas  profil  hormonal pada belut pada umumnya.
5.  Profil Histologi Ovarium dan Testis Belut Sawah
Pengamatan  mikroskopis  telah dilakukan  pada  gonad/ovarium  belut sawah  betina  yang  disuntik  dengan ovaprim-C . Profil histologi gonad kontrol dua  minggu  I  s/d    IV  memperlihatkan bahwa  oosit  primer  stadium  II  lebih banyak yang tidak melanjutkkan/ lambat perkembangannya,  dan  lebih  banyak yang  mengalami  atresia  sebelum mencapai stadium III atau lebih.
Profil  histologi  gonad  pada  dua minggu  pertama    memperlihatkan banyak oosit primer, vesicula yolk mulai nampak  pada  sitoplasma. Akan  bagus kalau ada bukti gambar histologi agar jelas  yang  mana  oosit  primer  dst  . Red.    Terima  kasih  sarannya,  tapi kami  mempunyai  rencana  publikasi gambaran  histologis  tersebut  pada kesempatan  lain  Bu..... Stadium  oosit lain  juga  dijumpai  yakni  stadium early yolk  globule dan  stadium late  yolk globule .  Pada  sediaan  gonad  ini  tidak dijumpai  adanya  stadium  atresia, dimungkinkan  karena  pemberian/ penginduksian ovaprim-C sebagai pemicu gonadotropin eksogen  mampu memelihara  dan  memfasilitasi  proses pertumbuhan oosit dari stadium awal ke stadium lanjut/maturasi.
Pertumbuhan  yang  terlihat  cepat adalah  pada  gonad  belut  sawah  betina pada  dua  minggu  kedua,  ketiga  s/d keempat  pasca penginduksian ovaprim- C. Beberapa  oosit  stadium late  yolk globule terlihat lebih mendominasi tetapi belum  menunjukkan  fase  lebih  lanjut. Oosit primer dari berbagai stadium masih tampak  berada  di  tepi,  dekat  lamella gonad.  Pada  sediaan  ini  juga  tidak dijumpai  adanya  stadium  atresia/oosit yang mengalami degenerasi.

## Simpulan
Dari  hasil  dan  pembahasan  dapat disimpulkan:
(1) Penginduksian  dengan gonadotropin eksogen  ( ovaprim-C )  meningkatkan bobot  badan,  fekunditas  dan  indeks kematangan  gonad  (IKG)  belut  sawah
betina; tetapi relatif menurunkan indeks kematangan gonad belut jantan  sampai dengan  dua  minggu  keempat    pasca induksi,
(2) sampai    dengan  dua  minggu  keempat, titer estradiol 17 dan testosteron meningkat pada belut betina, tetapi pada belut  jantan  menurun  setelah  dua minggu  keempat pasca induksi,
(3)  profil histologi gonad belut sawah pasca penginduksian ovaprim-C memperlihat- kan  bahwa  sampai  dengan  penginduk- sian  dua  minggu  keempat,  gonad  telah mencapai stadium late yolk globule (oosit primer  lanjut),  bahkan  sebagian  besar oosit  telah  mencapai  stadium mature; pada  belut  jantan  sampai  dengan  dua minggu  keempat  telah  mencapai stadium spermatozoa

## Daftar  Pustaka
Boetius,  L.  and  J.  Boetius.  1980. Experimental  maturation  of  female silver  eels, Anguilla  anguilla. Estimates  of  fecundity  energy reserves for migration and spawning. Dana 1 : 1 - 28.
Burzawa-Gerard,  E.  and  A.  Dumas-Vidal,
1991.  Effects  of    17 -  estradiol and carp gonadotropin on vitellogenesis in normal  and  hypophysectomized European  silver  female  eel  ( Anguilla anguilla L.)  employing  a  homologous radioimmuno assay for vitellogenin. J. G e n e r a l   a n d   C o m p a r a t i v e Endocrinology. 84 : 264 - 276.
Chiba, H.; Kenji I.; Kazuwo, H.; Akihiko, H.; Yamauchi, K. 1994. Changes in serum steroid  hormones  and  vitellogenin levels  in  cultured  female  european Anguilla  anguilla during  artificially induced  ovaroian  development. J. Aquaculture Society. 25. 4: 553 -560.
Drori,  S.;  Ofir,  M.;  Sivan,  B.  and  Yaron,  Z. 1994.  Spawning  indution  in  common carp  by  putitary  extract  or  GNRH superactive  analog  combined  with metoclopramide : analysis of hormone profile, progress of oocyte maturation and  dependence  on  temperature  . J. Aquaculture. 119 : 393 - 404.
Dufour, S.; E. Olpez; F. Le Menn; N. Le Belle; S.  Baloche  dan  Y.A.  Fontaine.  1988. Stimulation  of  Gonadotropin  Release and  of  Ovarian  Development,  by  the
125 Susatyo, Priyo dkk., :  116 - 126 Induksi Pematangan Gonad dengan Ovaprim-C Biosfera 29 (3) September 2012
Administration  of  a  Gonadoliberin Against and of Dopamine Antagonist, in  Female  Silver  Eel  Pretreated  with Estradiol.  General  and  Comparative Endocrinology. 70 :20 -30.
Fostier, A.; B. Jalabert; R. Billard; B. Breton and  Y.  Zohar,  1983.  The  Gonnadal Steroids.  Pages  277  -  372,  in  W.S. H o a r ;   D . J .   R a n d a l l   a n d   E . M . Donaldson  (editor).  Fis  Physiology. Volume  IX,  part  A.  Academic
Physiology,  Academic  Press,  New York.
Goetz,  F.W.  1983.  Hormonal  controle  of oocyte  final  maturation  and  ovulation in  fishes. in W.S.  Hoar,  D.J.  Randall and  E.M.  Donaldson,  editors.  Fish physiology  ,  volume  IX,  part  B. Academic Press, New york, USA.
Kagawa,  H.;  Young,  G.;  Adachi,  S.  and Nagahama,  Y.  1982.  Estrdiol  -  17 P r o d u c t i o n   i n   A m a g o   S a l m o n ( Oncorhynchus  rhdurus )  Ovarian Follicles;  Role  of  the  Thecal  and Granulosa  Cells. J.    Gen.  Comp. Endocrinol. 47 : 440 - 448.
Leloup-Hatey,  J.;  A.  Hardy;  K.  Nahoul;  B. Querat and Y. Zohar. 1988. Influence of a gonadotropic treatment upon the ovarian  steroidogenesis  in  the European silver eel ( Anguilla anguilla L.), in  Reproduction in  fish, pp : 127 - 130.
Moeljono, 1996. Study Mikroanatomi Sistem Reproduksi  (Gonad)  Belut  Sawah ( Monopterus  albus Zuiew).  Laporan Penelitian  Fakultas  Biologi  Unsoed. Purwokerto.
Nagahama, Y. 1987. Gonadotropin Action on Gametogenesis  and  Steroidogenesis in  Teleost  Gonads. Zoological Science, 4 : 209 - 222.
Olivereau, M. and J. Olivereau. 1979. Effect of  Estrdiol  -  17    on  the  Cytology  of Liver,  Gonads  and  Pituitary,  and  on Plasma  Electrolytes  in  the  Female Freshwater  Eel. J.  Cell  and  Tissue Research. pp 199 : 431 - 454.
Peyon, P.; Baloche, S. and Burzawa-Gerard,
E.  1992.  Induction  of  vitellogenin synthesis  by  17 -  estradiol  and testosterone in silver eel hapatocytes maintained  in  primary  culture. In  : abstracts,  second  international
symposium  on  fish  endocrinology. Saint Malo, June 1 - 4 , p : 158
Satoh, H.; K. Yamamori and T. Hibiya. 1992. Induced  spawning  of  the  Japanese eel. Nippon Suisan Gakkaishi 58: 825 - 832.
Setiati, N. 2003. Kajian anatomi gonad untuk menentukan  jenis  kelamin  ikan  belut sawah ( Fluta alba ) di kota Semarang berdasarkan  panjang  tubuhnya. Seminar  Nasional  Pengembangan
B i o l o g i   M e n j a w a b   Ta n t a n g a n Kemajuan  Iptek.  (Semarang,  29 April 2002). Semarang.
Susatyo,  P .;  Moeljono; Sugiharto .  2000. Aspek  Hormonal,  Histologi  Gonad, Fekunditas  dan  Waktu  Ovulasi  Nilem ( Osteochilus  hasselti C.V.)  Pasca Induksi  Hipofisis  Awetan  Sapi  dan Ayam  Kampung.  Laporan  Penelitian. Fakultas Biologi Unsoed. Proyek DUE Batch II Unsoed, Purwokerto.
Takashima, Y.; K. Takano and A. Hara. 1979. Changes  in  female-specific  serum protein  during  the  course  of  induced maturation  of  female  Japanese  eels ( Anguilla  japonica ). Bulletin  of  the Faculty  of  Fisheries  Hokkaido University 30 : 50 - 61.
Wingfield,  J.C.  and  A.S.  Grimm.  1977. Seasonal changes in plasma cortisol, testosterone and estradiol - 17   in the plaice, Pleuronectes  platessa L. G e n e r a l   a n d   C o m p a r a t i v e Endocrinology 31: 1 - 11.
Wisnu,  A.T.  1981.  Korelasi  Panjang  dan Berat Tubuh Terhadap Perkembangan Gonad pada Belut Sawah ( Fluta alba Smith).  Skripsi.  Fakultas  Biologi Unsoed, Purwokerto
Yamauchi , K.  and  K.  Yamamoto.  1982. Experiments of Artificial Maturation an Fertilization  of  the  Japanes  Eel ( Anguilla  Japonica ).  p  185  -  189  in
C.J.J.  Richter  and  H.J.  Yh.  Goos ( E d i t o r s ) .   P r a c e e d i n g s   o f   t h e I n t e r n a t i o n a l   S y m p o s i u m   o n reproductive  Physiology  of  Fish. Pudoc. Wageningen.
Yoshikuni,  M.  and  Nagahama,  Y.  1991. E n d o c r i n e   R e g u l a t i o n   o f Gametogenesis  in  Fish. Bull.  inst. Zool.  Acad.  Sin.  Monogr., 16  :  139  - 172.
126
Populasi Tungau Parasit Varroa jacobsoni : Penyebab Kematian Pupa  dan Korelasinya terhadap Produksi Madu Apis cerana pada Sisiran Sarang Membujur dan Melintang

## Hery Pratiknyo dan Darsono
Fakultas Biologi Universitas Jenderal Soedirman
Jl Dr Soeparno 63 Purwokerto 53122 Email: pratiknyohery@yahoo.co.id
Diterima Juli 2012 disetujui untuk diterbitkan September 2012

## Abstract
Bee keeping of local bee ( Apis cerana Fab.) in Purbalingga Regency is spread widely from  25 m to 350 m asl, eventhough quatatively the production is still low. It is caused by parasitic mite attack, Varroa jacobsoni. This mite attack then suck haemolymph of the pupae,  meanwhile if the bee comb cell  consist of more than one mites, the pupae will die, consequently the honey production will decrease. The aims of the research are: 1) to know a mount of individual mite living and caused the death of one bee pupae, .2) to define the correlationship between density of parasitic mite and honey production, 3). To differ parasite mite V. jacobsoni density in longitudinal and cross posision of combs.   Method used was survey with purposive  random  sampling  tehnique  on  two  posision  of  bee  comb,  15  samples  were  taken  in  each posision.   The data were analyzed   by counting the amount of mite living on every dead pupae and the correlation  was  analyzed  for  the  relationship  between  relative  density  of  parasite  mite  and    honey production.  The  result  shows  that  correlation  between  relative  density  of  parasitic  mite  and  honey production is unsignificant. Conclusion of the research are: 1) amount of   parasitic mite living on bee pupae and causing death is 5,80 individual on cross posisition comb and 4,71 individual on longitudinal posision  comb.  2)  correlation  between  relative  density  of  parasitic  mite  and  honey  production  is unsignificant. 3). The relative density of parasitic mite between two posisions of comb is unsignificant.
Key words: density, longitudinal posisiion comb, across posision comb, parasitic mite.

## Abstrak
Budidaya  lebah  madu  lokal  ( Apis  cerana  L )  di  Kabupaten  Purbalingga  tersebar  luas  dari ketinggian 25 sampai 350 m dpl, namun produksinya masih rendah, salah satu penyebabnya adanya serangan parasit tungau Varroa jacobsoni . Tungau parasit ini menyerang pupa   kemudian mengambil cairan tubuhnya dan menyebabkan lebah madu cacat, bahkan jika dalam satu pupa terdapat lebih dari dua  tungau  dapat  menyebabkan  kematian.  Banyaknya  kematian  pupa  ini  diduga  dapat  menurunkan produksi  madu.  Penelitian  ini  bertujuan.  1).Mengetahui    jumlah  individu  tungau  parasit  yang  tinggal dalam sisir sarang sehingga menyebabkan kematian pupa, 2).Menentukan korelasi antara kelimpahan relatif tungau V. jacobsoni dengan produksi madu 3).Membedakan kelimpahan relatif tungau parasit V. jacobsoni yang tinggal di dalam sisir sarang melintang dan membujur. Metode yang digunakan adalah survei dengan teknik pengambilan sampel   secara purposive random sampling pada dua macam stup dengan  arah  sisir  sarang  membujur  dan  melintang  terhadap  arah  pintu  masuk,  setiap    macam  stup dengan arah sisir sarang berbeda diambil 15 sampel. Analisis data dilakukan dengan menghitung jumlah tungau parasit per bangkai lebah, kemudian analisis korelasi antara kelimpahan relatif tungau parasit V. jacobsoni dengan produksi madu serta uji t. Hasil yang diperoleh adalah korelasi antara kelimpahan relatif  tungau  parasit  dengan  produksi  madu  tidak  nyata  dengan  frekuensi  pemarasitan  yang menyebabkan kematian pada     sisir sarang melintang sebesar 33 % dan membujur sebesar 46 %.. Kesimpulan yang dapat diutarakan bahwa. 1). Rata-rata jumlah tungau parasit yang tinggal pada seekor pupa lebah madu dan menyebabkan kematian pupa lebah madu pada sisir sarang melintang sebanyak 5,80 ekor dan pada sisir sarang membujur sebanyak 4,71 ekor. 2). Kelimpahan tungau parasit dengan produksi madu berkorelasi tidak nyata 3). Kelimpahan relatif individu  tungau parasit V. jacobsoni antara sisir sarang melintang dan membujur  terdapat perbedaan yang tidak nyata.
Kata kunci: Kelimpahan relatif, sisir sarang membujur, sisir sarng melintang,tungau parasit.
Pendahuluan T u n g a u V a r r o a   j a c o b s o n i (Oudemans)  merupakan  tungau  parasit yang  hidup  pada  lebah  madu  dari  genus
Apis. Tungau parasit ini hidup dengan cara menghisap  darah  (haemolymph)  lebah madu  dan  menjadikan  lipatan  segmen (sutura)  sebagai  tempat  bersembunyi.