e-ISSN: 2597-436X

## IDENTIFIKASI KANDUNGAN KLOROFIL GENUS PIPER (SIRIH) SEBAGAI KANDIDAT FOOD SUPPLEMENT
Identification of Chlorophyll Content in Genus Piper (Sirih) as Food Supplement Candidate
Khoirin Maghfiroh
Prodi Ilmu dan Teknologi Pangan, Fakultas Pertanian, Universitas Yudharta Pasuruan Email : ri2nkhoir@gmail.com

## ABSTRACT
Chlorophyll in the higher plants physiology can be chlorophyll A and chlorophyll B. One of the  higher  plants  that  have  limited  benefit  from  the  medication  is  Piper.  Functionally,  the chlorophyll in the Piper can be used as a food supplement that is using physiology systems in the human body. Some among were blood systems, digestive systems and immune systems. The aim of this study is to know the chlorophyll contents of the genus Piper that can be used as a food supplement by identification the quantity of chlorophyll A, chlorophyll B and total amount chlorophyll  based  on  the  color  of  leaf,  as  well  as  to  know  the  quantity  of  chlorophyll  A, chlorophyll  B  and  total  amount  chlorophyll  based  on  different  species.  The  study  was  being conducted which weighted 2 g sample, and then was refined by mashed. The samples that have been  mashed  must  be  extracted  with  acetone  85%.  Analyzing  of  chlorophyll  content  in  Piper was  using  a  spectrophotometer.  Then,  the  data  than  contains  of  Chlorophyll  was  analyzed  by one  way  (ANAVA),  then  the  data  were  analyzed  by  BNT  analysis.  Based  on  the  result  of  the study was indicate that the quantity of Chlorophyll A on Piper betle L. old leaves is 74,57 ppm and  the  quantity of  Chlorophyll  B  on  Piper  betle  L.  young  leaves  is  39,75  ppm. Furthermore, the highest total quantity of the chlorophyll on Piper betle L. old leaves is 109,31 ppm.
Keywords : chlorophyll, piper, food supplement

## ABSTRAK
Klorofil pada tumbuhan tingkat tinggi secara fisiologi dapat berupa klorofil A dan klorofil B. Salah  satu  tumbuhan  tingkat  tinggi  yang  pemanfaatannya  masih  terbatas  pada  pengobatan adalah  Sirih.  Klorofil  pada  tanaman  Sirih  secara  fungsional  dapat  dimanfaatkan  sebagai  food supplement.  yang  mampu  menstimulasi  sistem – sistem  fisiologi  di  dalam  tubuh.  Beberapa  di antaranya  adalah  sistem  peredaran  darah,  pencernaan  dan  pertahanan  tubuh  (imun).  Tujuan penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  kandungan  klorofil  tanaman  genus  Piper  yang  dapat dijadikan  sebagai  kandidat  food  supplement  melalui  identifikasi  jumlah  klorofil  A,  klorofil  B dan klorofil total berdasarkan warna daun serta untuk mengetahui jumlah klorofil A, klorofil B dan  klorofil total  berdasarkan  perbedaan  spesies.  Penelitian  dilakukan  dengan  menimbang  2  g sampel,  kemudian  dihaluskan  dengan  penumbukan.  Sampel  yang  telah  dihaluskan,  diekstrak dengan  aseton  85%.  Analisa  kandungan  klorofil  ekstrak  tanaman  Sirih  menggunakan spektrofotometer.  Data  kandungan  klorofil  dianalisa  menggunakan  analisis  varians  (ANOVA) one  way  yang  dilanjutkan  dengan  uji  BNT.  Berdasarkan  hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa jumlah klorofil A tertinggi terdapat pada daun tua tanaman Sirih Hijau ( Piper betle L.) sebesar 74,57 ppm dan jumlah klorofil B tertinggi terdapat pada daun muda tanaman Sirih Hijau ( Piper betle L.)  sebesar  39,75  ppm.  Sedangkan  jumlah  klorofil  total  tertinggi  terdapat  pada  daun  tua tanaman Sirih Hijau ( Piper betle L.) sebesar 109,31 ppm.
Kata kunci : klorofil, piper, food supplement

## PENDAHULUAN
Klorofil  merupakan  media  dalam fotosintesis. Sebagian besar klorofil tersebar pada  organ  daun.  Reaksi  fotosintesis memerlukan  klorofil  dan  cahaya  untuk menghasilkan  energi.  Bahan  baku  dalam reaksi  fotosintesis  berupa  karbondioksida dan air. Hasil reaksi kedua senyawa tersebut menghasilkan karbohidrat dan oksigen, yang disebut sebagai energi dalam reaksi fotosintesis.  Reaksi  fotosintesis  terjadi dalam  sel.  Bagian  sel  yang  terlibat  dalam reaksi fotosintesis adalah kloroplas. Terdapat  dua  bagian  dalam  kloroplas  yang berperan untuk  fotosintesis,  yaitu  grana dan stroma. Grana terdiri dari tumpukan granum yang berperan dalam reaksi terang. Sedangkan  stroma  memiliki  peran  dalam reaksi  gelap  (Nio  Song  dan  Banyo,  2011). Cahaya berperan penting dalam fotosintesis. Perbedaan spektrum cahaya dapat mempengaruhi laju fotosintesis. Laju fotosintesis dapat  mempengaruhi biosintesis klorofil. Tumbuhan antar spesies dalam satu genus  memiliki  biosintesis  yang  berbeda – beda.  Hal  tersebut  dipengaruhi  oleh  gen yang terdapat pada masing – masing spesies. Gen  tersebut  mengendalikan  enzim  yang berperan  dalam  biosintesis  tetrapirol  yang merupakan  salah  satu  struktur  klorofil (Handoko,  dan  Yunie  2013;  Kurniawan, dkk.,  2010).  Biosintesis  klorofil  pada membran  tilakoid  berupa  klorofil  A  dan  B. Biosintesis klorofil B berasal dari klorofil A. Seiring dengan tingkat per-tumbuhan tanaman,  terutama  pada  organ  daun,  bio- sintesis  klorofil  B  mengalami  peningkatan (Maulid, dan Ainun, 2015).
Klorofil merupakan salah satu metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada semua  tanaman.  Jumlah  metabolit  sekunder dalam  bahan  pangan  dapat  mengalami perubahan  pasca  pengolahan.  Perubahan tersebut  dapat  disebabkan  oleh  berbagai jenis proses pengolahan bahan pangan  yang kurang  tepat.  Hal  tersebut  dapat  meng- akibatkan  penurunan  jumlah  metabolit sekunder  pada  bahan  pangan.  Beberapa proses  pengolahan  yang  mengakibatkan
berkurangnya  jumlah  metabolit  sekunder adalah  penghancuran,  pemotongan  dan  pe- manasan (Kusuma dan Nuri, 2012; Muhamad,  dkk.,  2015).  Penurunan  jumlah metabolit  sekunder  dapat  mengakibatkan berkurangnya  nilai  gizi  pada  bahan  pangan. Zat  gizi  dalam  bahan  pangan  berperan penting untuk menstimulasi seluruh aktivitas sistem  fisiologi  dalam  tubuh  (Departemen Gizi  dan  Kesehatan  Masyarakat  FKUI. 2007).
Berbagai jenis stimulator telah dikembangkan  untuk  meningkatkan  ak- tivitas  sistem  fisiologi  di  dalam  tubuh. Stimulator  dapat  dikembangkan  dalam  ben- tuk obat – obatan ( pharmaceutical ) dan food supplement (nutraceutical) . Beberapa sektor medis  dan  industri  bahan  pangan  saat  ini telah  memanfaatkan Food supplement .  Hal tersebut  didukung  oleh  peresepsi  konsumen yang  saat  ini  cenderung  mem-butuhkan produk  yang  memiliki  banyak  manfaat dalam  tubuh.  Manfaat  tersebut  berupa  nilai kesehatan  dan  konvensional  (Panday,  dkk ., 2010).  Salah  satu  tanaman  yang    pe- manfaatannya  telah  meluas  dalam  bidang pengobatan  adalah  tanaman  yang  berasal dari  genus  Piper  (Sirih).  Beberapa  di antaranya,  Sirih  hijau  ( Piper  betle L.)  dan Sirih merah ( Piper crocatum) telah dimanfaatkan  sebagai  bahan  antibakteri, penurunan  kadar  glukosa,  dan  kolesterol, aktivitas antioksidan serta sistem pertahanan tubuh  (Suliantari,  dkk.,  2012;  Shinta  dan Sudyanto,  2016;  Hermiati  dkk.  2013; Nugroho, 2012). Tanaman pada genus Piper selain  mengandung  berbagai  metabolit sekunder  yang  memilki  manfaat  kesehatan, tanaman tersebut juga mengandung klorofil. Klorofil  merupakan  metabolit  sekunder yang  dapat  dimanfaatkan  sebagai food supplement. Klorofil  yang  bersumber  dari Mikroalga  telah  dimanfaatkan  sebagai pigmen  pewarna  alami  bahan  pangan, stimulasi pertumbuhan jaringan, antioksidan dan  antimutagenik  (Hosikian  dkk.,  2010). Klorofil  dapat  berperan  dalam  kesehatan dan  nutrisi.  Secara  luas  klorofil  telah dimanfaatkan  untuk  pangan  tambahan,
e-ISSN: 2597-436X
pewarna  bahan  pangan,  nutraceutical  dan farmasi (Bishop, dan Heidi, 2012).
Berdasarkan hal tersebut, perlu dilakukan  optimalisasi  potensi  tanaman
Sirih dengan memanfaatkan tanaman
tersebut  sebagai food  supplement . Tujuan dalam penelitian ini adalah untuk mengetahui  kandungan  klorofil  tanaman genus  Piper  yang  dapat  dijadikan  sebagai kandidat  food  supplement  melalui  iden- tifikasi  jumlah  klorofil  A,  klorofil  B  dan klorofil  total  berdasarkan  warna  daun  serta untuk mengetahui jumlah klorofil A, klorofil B  dan  klorofil  total  berdasarkan  perbedaan spesies.

## METODE PELAKSANAAN

## Preparasi tanaman sirih
Tanaman Sirih  yang digunakan dalam penelitian  ini  berasal  dari  daun  muda  dan daun  tua  spesies Piper  betle L.  Serta  daun yang  berasal  dari  daun  tua  spesies Piper crocatum .  Sebelum  dilakukan  ektraksi, tanaman  sirih  disortasi  atau  dilakukan pemilihan.  Selanjutnya,  daun  dicuci  dengan air mengalir..

## Ekstrak tanaman sirih
2 g daun tanaman Sirih dari masing – masing sampel yang telah dicuci, dihancurkan dengan mortal martil.
Selanjutnya,  daun  dimasukkan  dalam  gelas kimia.  Kemudian  masing – masing  sampel direndam dengan 500 ml aceton 85% selama 1 x 24 jam. Selanjutnya sampel difiltrasi.
Analisa Spektrofotometri
`Sampel yang telah difiltrasi, dirunning  dengan  spektrofotometri.  Masing – masing sampel diambil 1 ml. Selanjutnya, sampel dianalisa pada spektrofotometri pada panjang gelombang 663 nm dan 645 nm.

## Analisa statistik
Data  kandungan  klorofil  A,  B  dan total  klorofil  yang  telah  diperoleh,  diuji menggunakan ANOVA  one  way dengan
selang kepercayaan 5%. Kemudian dilanjut- kan  dengan  uji  BNT  untuk  untuk  me- ngetahui tingkat signifikansi antar perlakuan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berikut merupakan data hasil pengamatan kandungan klorofil pada Genus Piper :
Gambar 1. Kandungan klorofil Genus Piper
Berdasarkan  data  jumlah  klorofil genus  Piper,  diketahui  bahwa  jumlah klorofil  A  pada  daun  muda  tanaman  Sirih Hijau  ( Piper  betle L.)  sebesar  63,97  ppm meningkat secara siginifikan dengan jumlah klorofil  A  pada  daun  tua  tanaman  Sirih Hijau  ( Piper  betle L.)  sebesar  74,57  ppm. Namun  keduanya  tidak  berbeda  secara siginifikan  dengan  jumlah  klorofil  A  pada daun  Sirih  Merah  ( Piper  crocatum )  sebesar 70,93  ppm.  Jumlah  klorofil  B  pada  daun muda  tanaman  Sirih  Hijau  ( Piper  betle L.) sebesar  39,75  ppm  tidak  meningkat  secara siginifikan  dengan  jumlah  klorofil  B  pada daun tua tanaman sebesar Sirih Hijau ( Piper betle L.) sebesar 36,39 ppm dan    keduanya tidak  berbeda  secara  siginifikan  dengan jumlah  klorofil  B  pada  daun  Sirih  Merah ( Piper crocatum ) sebesar 35,77 ppm.
Selain  kedua  jenis  klorofil  tersebut, juga  dilakukan  analisa  terkait  jumlah klorofil  total  untuk  mengetahui  jumlah klorofil  secara  keseluruhan  yang  digunakan dalam fotosintesis. Berdasarkan hasil analisa data  jumlah  klorofil  total,  diketahui  bahwa
e-ISSN: 2597-436X
klorofil  total  daun  muda  tanaman  Sirih Hijau  ( Piper  betle L.)  sebesar  102,10  ppm meningkat secara siginifikan dengan jumlah klorofil  total  daun  tua  tanaman  Sirih  Hijau ( Piper  betle L.)  sebesar  109,31  ppm. Namun,  keduanya  tidak  berbeda  secara siginifikan dengan jumlah klorofil total daun Sirih  Merah  ( Piper  crocatum )  sebesar 105,10 ppm.
Berdasarkan  data  hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  kadar  klorofil  total berdasarkan  warna  daun  menunjukkan perbedaan.  Perbedaan  tersebut  dapat  di- sebabkan oleh beberapa faktor, salah satu di antaranya cahaya yang dapat mempengaruhi laju  fotosintesis  (Handoko,  dan  Yunie, 2013).  Klorofil  A  dan  B  memiliki  daya absorbsi  tinggi  terhadap  pigmen  biru  dan ungu,  jingga  dan  merah  namun  memiliki daya  absorbs  rendah  terhadap  pigmen  hijau dan  kuning  hijau  (Nio  Song  dan  Banyo, 2011).  Laju  fotosintesis  dipengaruhi  oleh cahaya, unit klorofil dan rasio klorofil A dan B  (Baker  dan  Hardwick,  1974).  Data  total klorofil dari ketiga sampel tersebut didominasi  oleh  klorofil  A.  hal  tersebut diduga  adanya  proses  pembentukan  klorofil B  oleh  klorofil  A  dalam  reaksi  fotosintesis. Pembentukan klorofil A maupun B dikendalikan  oleh  prekursor  pembentuk kedua klorofil tersebut. Reaksi pembentukan klorofil  A  maupun  B  dikendalikan  oleh protoporfirin  dan  enzim – enzim  yang terlibat dalam reaksi reduksi oksidasi. Selain itu, diduga disebabkan oleh adanya konversi dari gugus metil yang dimiliki klorofil A ke gugus  formil  /  metanoil  (aldehid)  yang dimilik oleh klorofil B. Setiap klorofil yang disintesis  dalam  kloroplas  terdiri  dari klorofil  A  dan  B.  Pembentukan  1  klorofil membutuhkan  8  molekul  5-aminolevulinic acid.  Secara  struktural  molekul  tersebut terletak  di  posisi  akhir  rantai.  Sedangkan gugus metal dan formil berada pada posisi 3 (Wettstein, dkk., 1995).
Perbedaan  spesies  merupakan  salah satu  faktor  yang  mempengaruhi  kadar klorofil.  Setiap  spesies  memiliki  gen spesifik. Berdasarkan hasil pengamatan dari 36  spesies  dari  genus  Piper,  menunjukkan
bahwa  terjadi  perbedaan  yang  siginifikan berdasarkan urutan antar spesies (Chaveerach  dkk.  2016).  Gen  tersebut mengendalikan  enzim  yang  berperan  dalam biosintesis  tetrapirol  yang  merupakan  salah satu  struktur  klorofil  (Handoko,  P.  dan Yunie  F.  2013;  Kurniawan,  dkk.  2010). Klorofil  memiliki  pigmen  tetrapirol  yang dapat dikembangkan sebagai agen fotosensitizer.  Aktivitas  agen  fotosensitizer dapat dipengaruhi oleh lingkungan dan sifat sensitizer  tersebut.  Salah  satunya,  pH  asam dapat  menyebabkan  degradasi  pada  klorofil (Budiyanto,  2008).  Gen,  hormon,  dan lingkungan  merupakan  faktor  yang  saling berkaitan  dalam  reaksi  fotosintesis.  Hal  ini dapat  mempengaruhi  jumlah  klorofil  yang dihasilkan  dalam  reaksi  tersebut.  Klorofil sebagai  salah  satu  metabolit  sekunder  dapat dijadikan sebagai kandidat food supplement . Berdasarkan  data  hasil  pengamatan,  dari kedua  spesies  tanaman  Sirih  berpotensi sebagai  kandidat food  supplement , sehingga perlu  dilakukan  optimalisasi  potensi  ta- naman tersebut. Optimalisasi potensi tanam- an  secara  aplikatif  melalui food  supplement yang  dapat  diolah  kemudian  diproduksi dalam  berbagai  bentuk,  seperti  kapsul, tablet, serbuk dan beberapa bentuk yang lain (Fretes,  dkk,  2012;  Suparmi  dan  Achmad, 2009).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  warna  daun  diketahui bahwa kandungan klorofil tertinggi  terdapat pada  daun  warna  hijau  tua  tanaman  Sirih hijau  (( Piper  betle L.)  sebesar  74,57  ppm. Selain  itu  kandungan  klorofil  pada  daun hijau  muda  dan  tua  tanaman  Sirih  serta tanaman  Sirih  merah  didominasi  oleh klorofil  A.  Berdasarkan  variasi  spesies, kandungan  klorofil  tertinggi  pada  tanaman Sirih  hijau  ( Piper  betle L.)  sebesar  109,31 ppm.

## DAFTAR PUSTAKA
Baker,  N  R  dan  K    Hardwick.  (1974).  A model for the development of
e-ISSN: 2597-436X
photosynthetic  units  in  cocoa  leaves. Proceedings of the Third International Congress on Photosynthesis, Rehovot. Elsevier, Amsterdam pp 1897-1906
Bishop  W  M  dan  Heidi  M  Z.  (2012).
Evaluation  of  Microalgae  for  use  as Nutraceuticals
and Nutritional
Supplements. J Nutr. Food Sci. 2 (5)
Budiyanto  Aji  Wahyu.  (2008).  Pengaruh pengasaman  terhadap  Fotodegradasi Klorofil  a. Jurnal  Matematika  dan Sains 13 (13)
Chaveerach A, Tawatchai T, Arisa S, Pansa A, dan Runglawan S. (2016). Efficient DNA  barcode  regions  for  classifying Piper  species  (Piperaceae). PhytoKeys
70: 1 – 10
Departemen Gizi dan Kesehatan Masyarakat FKUI.  (2007).  Gizi  dan  Kesehatan
Masyarakat. PT Raja Grafindo Persada. Jakarta
Fretes  H.D,  A  B  Susanto,  Budhi  P,  dan Leenawaty  L.  (2012). Karotenoid  dari Makroalgae  dan  Mikroalgae:  potensi kesehatan aplikasi dan bioteknologi. J. Teknologi dan Industri  Pangan XXIII (2)
Handoko  P  dan  Yunie  F.  (2013).  Pengaruh Spektrum  Cahaya  Tampak  terhadap
Laju Fotosintesis Tanamn Air
Hydrilla verticillata. Proceeding Seminar  Nasional X  Pendidikan Biologi FKIP UNS
Hermiati,  Rusli,  Naomi  Y  M,  Mersi  S  S.
(2013).  Ekstrak  daun  sirih  hijau  dan merah sebagai antioksidan pada minyak  kelapa. Jurnal  Teknik  Kimia USU 2 (1)
Hosikian A, Su Lim, Ronald H, dan Michael K  D.  (2010).  Chlorophyll  extraction from  microalgae:  a  review  on  the process engineering aspects.
International  Journal  of  Chemical Engineering . ID 391632
Kuniawan,  Madha,  Munifatul  Izzati,  Yulita Nur  Chayati.  (2010).  Kandungan
klorofil,  karotenoid,  dan  vitamin  c pada  beberapa  spesies  tumbuhan akuatik. Buletin Anatomi dan Fisiologi XVIII (1)
Kusuma  R.A  dan  Nuri  A.  (2012).  Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Buah  Takokak ( Solanum  torvum Swartz.).  Skripsi. Institut Pertanian Bogor.
Mauled R R dan Ainun N L. (2015). Kadar
Total  Pigmen  Klorofil  dan  Senyawa Antosianin Ekstrak Kastuba
(Euphorbia  pulcherrima)  Berdasarkan Umur  Daun.  Proceeding  Seminar Nasional  Konversi  dan  Pemanfaatan Sumber Daya Alam FKIP UNS.
Muhammad  P  H,  Luh  Putu  W,  dan  A  A  M Dewi  Anggreni.  (2015).  Pengaruh suhu  dan  lama  curing  terhadap kandungan  senyawa  bioaktif  ekstrak etanol  bunga  kecombrang  ( Nicolaia speciosa Horan ). Jurnal Rekayasa dan Manajemen Agroindustri 3 (4)
Nio  Song  Ai  dan  Yunia  Banyo,  (2011). Konsentrasi  klorofil  daun  sebagai indikator kekurangan air pada tanaman . Jurnal Ilmiah Sains Universitas  Sam  Ratulangi  Manado 11(2)
Nugroho  Y  A.  (2012).  Efek  pemberian kombinasi  buah  sirih  ( Piper  betle L.) fruit,  daun  miyana  ( Plectranthus scutellarioides (L.) R.BR.) leaf, madu, dan kuning telur terhadap peningkatan aktivitas  dan  kapasitas  fagositosis  sel makrofag. Media  Litbang  Kesehatan 22 ( 1)
Panday  M,  Rohit  K  V  dan  Shubhini  A  S.
(2010).  Nutraceuticals:  New  Era  of Medicine and Health. Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research 3 ( 1)
Shinta  D  Y    dan  Sudyanto.  (2016). Pemberian  air  rebusan  daun  sirih merah  ( Piper  crocatum Ruiz&Pav) terhadap  kadar  glukosa  dan  kolesterol darah  mencit  putih  jantan. Journal  of Sainstek 8(2) : 180-185
e-ISSN: 2597-436X
Suliantari, Betty S L, Jenie dan Maggy T S.
(2012).  Aktivitas  antibakteri  fraksi – fraksi  ekstrak  sirih  hijau  ( Piper  betle L.)  terhadap  patogen  pangan. J. Teknologi dan Industri  Pangan XXIII
(2)
Suparmi  dan  Achmad  S.  (2009).  Mengenal
potensi rumput
laut: kajian pemanfaatan sumber daya rumput laut dari  aspek  industri  dan  kesehatan.
Majalah Ilmiah Sultan Agung 44:  118
Wettstein  D  V,  Simon  G  dan  C  G Kanangara. (1995).
Chlorophyll
biosynthesis. The  Plant  Cell 7:  1039- 1057