## EFEKTIVITAS STRAIN BRADYRHIZOBIUM  JAPONICUM YANG DIISOLASI DARI BEBERAPA LOKASI DI ENDE TERHADAP PEMBENTUKAN NODUL DAN PENAMBATAN NITROGEN
PADA TANAMAN KEDELAI ( GLYCINE  MAX L. )

## Kristina Erniyani
Dosen Fakultas Pertanian Universitas Flores Jl. Sam Ratulangi No.1 Ende –Flores, NTT

## ABSTRACT
Bacteria  Bradyrhizobium  spp. Form  nodules  on  soybean  plants,  bind  nitrogen from  the  air  and  menjadikanya  freely  available  to  plants. Amount  of  nitrogen  fixed depends  on  the  ability  of  a  strain  to  form  nodules,  nodule  effectiveness  and environmental  conditions. On  land  -  land  that  had  been  planted  with  soybeans, inoculation with Bradyrhizobium bacteria are often not required.
To test these lands in the district of Ende, NTT has conducted an experiment a factor in the design of Randomized Complete with nine treatment groups. The treatment consists of (i) inoculation with the soybean crop in the ground former Ekoae (R1), (ii) inokuklasi  dengantanah  former  soybean  plants  in  Ndona  (R2),  (iii)  inoculation  of soybean  plants  with  the  soil  used  in  Flores  (R3),  (iv) bradyrhisobium  isolates  from soybean  nodules  in  Ekoae  (R4),  (v)  Bradyrhisobium  isolates  from  nodules  of  soybean plants  in  Ndona  (R5),  (vi)  Bradyrhisobium  isolates  from  nodules  of  soybean  plants  at Flores  (R6),  (vii)  a  commercial  inoculant  legin  (L ),  (viii)  fertilizer  nitrogen  (N),  and (ix) Control (K). all treatment was repeated 4 times. Land used in these experiments is the  land  of  Ndona.The  experiment  was  carried  out  since  2009  until  February  2010 desembar  greenhouse  majoring  in  biology,  mathematics  and  science  faculty,  Udayana University.
The  highest  percentage  of  effective  nodules  on  the  treatment  Bradyrhisobium isolates from soybean nodules in Ndona (R5). Total nitrogen levels at the age of 45 HST is the highest in soybean plants that received 100 kg ha-1urea and soybeans that have a diisolat Bradyrhisobium inoculation of soybean nodules in Ndona (R5). Efficiency and levels  of  symbiotic  nitrogen  fixation  results  obtained  highest  in  soybean  plants  that received  an  inoculation  Bradyrhisobium  diisolat  from  soybean  nodules  in  Ndona (R5).Oven  dry  weight  of  plants  that  form  the  age  of  45  HST  on  all  isolates  are equivalent to oven dry weight of plants at the fertilization of 100 kg ha-1 urea.
The  results  showed  that  the  land  -  the  land  of  Ekoae,  Ndona  and  Flores  have high  Bradyrhisobium  contain  bacteria. Bacteria  Bradyrhisobium  sp. Most  numerous  in the  isolates  from  soybean  nodules  in  Ndona  (R5)  the  most  efficient  form  effective nodules is 82.26% and as high as the 0.52% N fixate. These results indicate that isolates from Ndona Bradyrhisobium been able to form effective nodules on soybeans grown in soil  from  Ndona. The  results  also  indicate  inoculation  with  a  commercial  inoculant dioeroleh not on land - land planted with soybeans used .
Kata Kunci :   Bradyrhisobium sp., penambat nitrogen, tanaman kedelai, tanah dari Ende
AGRICA, 3 (2) : 138– 150 (2010) ISSN : 1979-0368
©Fakultas Pertanian Universitas Flores Ende NTT - Indonesia

## PENDAHULUAN
Kacang  –  kacangan  merupakan sumber  protein  nabati  bagi  manusia maupun  ternak.  Tanaman  kacang  – kacangan mampu memenuhi nitrogennya melalui peningkatan nitrogen  dari  udara  bebas  oleh  bakteri penambat  nitrogen  yang  bersimbiosis dengannya. Penggunaan bakteri penambat  nitrogen  sebagai  pemasok nitrogen  pada  tanaman  kacang  – kacangan memiliki keunggulan dibandingkan  dengan  pupuk  nitrogen anorganik. Keunggulannya ialah membantu proses pelarutan hara, menekan pencemaran lingkungan, meningkatkan kesuburan dan produktivitas tanah, efisiensi penggunaan pupuk dan relative murah (
Simanungkalit dkk. 2006).
Simbiosis  Bradyrhisobium  sp. Dan  tanaman  kacang  –  kacangan berawal  dari  infeksi  jaringan  akar legume oleh Bradyrhisobium sp. Infeksi terjadi  karena  adanya flafonoid yang dihasilkan tanaman inang  yang menarik Bradyrhisobium  sp.  K3e  akar  untuk membentuk nodul ( Rhijin dan Vanderleyden,  1995  ;  kambara,  2008). selain flafonoid , suhu ( Rao, 1994), air tanah ( Jutomo, 1981 ) juga mempengaruhi infeksi akar oleh
Bradyrhisobium sp.
Factor penentu keberhasilan penambatan  nitrogen  dari  udara  oleh
Bradyrhisobium  sp  yaitu  keserasian strain  Bradyrhisobium  sp.    Dengan inang,  mampu  berkompetisi  antaran Bradyrhisobium sp. Dengan mikroorganisme  lain  (  Simanungkalit dkk.  2006  ),  kemampuan  inang  untuk menyediakan nutrisi bagi
Bradyrhisobium  sp.  Yang  bersimbiosis dengannya  (  Atkins,  1987 dalam
Arimurti dkk. 2000 ). Factor lingkungan  juga  berpengaruh  pada keberhasilan penambatan
nitrogen
antara  lain  :  ketersediaan  hara  makro dan  mikro,  kelembapan  tanah,  pH tanah,  suhu  dan  cahaya  mata hari( Freire, 1984 ). Gray  dan Williams ( 1971) menyatakan bahwa perkembangan Bradyrhisobium sp. dalam tanah apabila ada tanaman legum dan populasi Bradyrhisobium sp menurun  jika  tidak  ada  tanaman  legum sehingga  bakteri  Bradyrhisobium  sp. Akan mati dalam waktu ±10 tahun.
Pertumbuhan  tanaman  kedelai
yang diinokulasi dengan isolate Bradyrhisobium  dari  tanaman  kedelai mempunyai  pertumbuhan  lebih  baik dari pada menggunakan isolate
Bradyrhisobium    dari  tanaman  kacang hijau ( Vigna radiate L. ) ( Purwaningsih,  2005b).  Hasil  penelitian Muksin    (2006  )menunjukan  bahwa inokulasi  dengan  tanah  bekas  tanaman kedelai tidak efektif meningkatkan hasil tanamn kedelai walaupun jumlah bakteri Bradyrhisobium tergolong tinggi ( 11,7 x10 5 rhizobia g -1 tanah ), sehingga perlu  dilakukan  penelitian  dengan mengisolasi    Bradyrhisobium  dari daerah  asal  menjadi  biakan  murni  dan mengevaluasi efektivitas simbiosis Bradyrhisobium  yang  digunakan  dalam menambat nitrogen sehingga meningkatkan  produktivitas  tanaman kedelai.
Produksi  tanaman  kedelai  di kabupaten  Ende  pada  tahun  2007 tergolong  rendah  yaitu  13  ton  dengan luas  panen  23  ha  atau  565  kg/ha  (BPS Kabupaten  Ende,  2008).  Penggunaan inokulan komersial belum pernah dilakukan  sehingga  pembentukan  nodul terjadi  oleh  Bradyrhisobium  alami. Kecamatan ndona merupakan salah satu daerah yang berpotensi untuk pengembangan  tanaman  kedelai  dan pemerintah Kabupaten Ende menggalakan penanaman tanaman
kedelai di Ndona.
Hasil  studi  lapang  menunjukan bahwa  tanaman  kedelai  di  Ndona mempunyai  nodul  dengan  diameter paling besar dari nodul tanaman kedelai di Ekoae dan   Kelimutu  yaitu  3  –  5 mm. nodul tanaman kedelai dari Ndona berwarna  merah  dan  tidak  terdapat nodul  yang rusak (  Lampiran 3).  Islami dan  Utomo  (1995)  menjelaskan  nodul yang terbentuk tidak sama
efektifitasnya. Nodul  yang ukuran lebih kecil  dari  normal  umumnya  disebapkan oleh  infeksi  bakteri    Bradyrhisobium yang  tidak  efektif.  Lebih  lanjut  Havlin et  al. (1999)  menyatakan  nodul  yang efektif  cenderung  besar,  bentuk  bulqat lonjong  ( elongated) dengan  ukuran  2  – 4  x  4  –  8  mm  dan  berkelompok  pada akar  primer,  berwarnah  merah  muda sampai  merah.  Nodul  tidak  efektif berukuran  lebih  kecil,  menyebar  di seluruh akar dan berwarnah putih pucat. Volume relative jaringan bakteroid ( 16 % - 50 % dari berat kering nodul ) jauh lebih  besar  pada  nodul  yang  efektif dibandingkan  pada  nodul  tidak  efektif. Warnah  putih  pucat  dari  nodul  tidak efektif disebapkan kekurangan kandungan leghemoglobin ( leguminosae  hemoglobin ).  Menurut Rao(  1994)  nodul  yang  efektif  adalah yang  berukuran  besar,  jika  jaringan nodul  dibelah  dua  pada  bagian  tengah kelihatan berwarna merah karena mengandung leghemoglobin. Nodul
yang  efektif  cenderung  mengumpul pada pangkal akar dan daerah sekitarnya.
Berdasarkan  ulasan  diatas  maka masalah yang hendak dikaji :
Bagaimana potensi bakteri B.
japonicum di dalam tanah pada beberapa  lokasi  di  Ende?,  Bagaimana efisiensi  strain B.  japonicum yang  di isolasi  dari  Ende  untuk  membentuk nodul  efektif  pada  tanaman  kedelai?, Bagaimana  efisiensi  strain B. japonicum yang  diisolasi  dari  Ende
untuk menambat nitrogen pada tanaman kedelai?.dan yang menjadi tujuan dalam penelitian ini adalah : Untuk mengetahui potensi bakteri B. japonicum di  dalam  tanah  dari beberapa lokasi di Ende, Untuk mengetahui efisiensi strain B.
japonicum yang  diisolasi  dari  Ende untuk  membentuk  nodul  pada  tanaman kedelai,  Untuk  mengetahui  efisiensi strain B.  japonicum yang  diisolasi  dari Ende  untuk  menambat  nitrogen  pada tanaman  kedelai.  Adapun  manfaat  dari penelitian ini adalah sebagai pengembangan ilmu pengetahuan khususnya  dalam  fiksasi  nitrogen  dari simbiosis kedelai dengan Bradyrhisobium sp.  Dan  bagi  petani yaitu  sebagai  bahan  dasar  pembuatan inokulan Bradyrhisobium sp.

## METODE
Penelitian  ini  dilaksanakan  di lab.  Mikrobiologi  Jurusan  Biologi Fakultas  MIPA  Universitas  Udayana. Waktu  penelitian  dimulai  Desember 2009 sampai  Maret  2010. Penelitian ini menggunakan
Rancangan Acak Kelompok  Lengkap(RAKL)  dengan perlakuan : R1 = Inokulasi dengan tanah bekas  tanaman  kedelai  di  Ende,  R2  = Inokulasi  dengan  tanah  bekas  tanaman kedelai  di  Ndona,  R3  =  Inokulasi dengan  tanah  bekas  tanaman  kedelai  di Kelimutu,  R4  =  isolat Bradyrhisobium dari  nodul  tanaman  kedelai  di  Ekoae, R5  =  isolat Bradyrhisobium dari  nodul tanaman  kedelai  di  Ndona,  R6  =  isolat Bradyrhisobium dari  nodul  tanaman kedelai  di  Kelimutu,  L  =  inokulan komersial Legin (30 gram / 8 kg benih) atau  tanpa  melalui  perbanyakan  dalam YMB,  N  =  pemupukan  Nitrogen  (dosis 100 kg ha -1 urea) K = tanpa inokulan dan tanpa pemupukan
Bahan  yang  digunakan  antara lain  :  tanah  bekas  tanaman  kedelai, nodul  kedelai,  media Yeast  Mannitol
Kristina : Efektivitas strain Bradyrhizobium japonicumdi, pembentukan nodul,  penghambat nitrogen
Borth dan Yeast  Manitol  Agar ,  NaCL, aquades, congo  red, alcohol  95  %, benih  kedelai,  tisu,  kapas,  alumanium foil,  inokulan  komersial,  pupuk  urea, KCL, TSP, dan ammonium molybdate.
Alat  yang  digunakan  antara  lain :  tabung  reaksi,  shaker  atau  vortex, pipet,  petridish,baker  glass, p H  meter, jarum ose ,  spatula, laminar  flow, autoclave, oven, kulkas, timbangan, pot, mikroskop Olympus, gelas objek, ayakan, (D = 0,02 cm), stirrer, Bunsen, hands prayer, pot plastic dan skop.

## Pelaksanaban percobaab meliputi
1. Isolasi Bradyrhisobium
Bradyrhisobium diisolsi dari nodul kedelai dan dari tanah bekas  pemanenan  kedelai  untuk mendapatkan jumlah bakteri dalam  tanah.  Masing  –  masing diambil  dari  tiga  lokasi  di  Ende dengan ketinggian  yang  berbeda :  di  ekoae  (  Wewaria  )  dengan ketinggian  ±  6  m  dpl,  Ndona  ± 74  m  dpl,  dan  kelimutu  ±  1.248 m dpl
2. Persiapan mediah tanam
Media  tanam  yang  digunakan adalah  tanah  yang  berasal  dari Ndona.  Tanah  dikeringkan  dan dibersikan  dari  sisa  –  sisa tanaman dan kotoran lain, dihancurkan  dan  di  ayak.  Dan dimasukan  kedalam  pot  yang berdiameter 10 cm.
3. Pemupukan TSP,  KCL  dan  ammonium molybdate  diberikan  sebagai pupuk  dasar  pada  saat  tanam.
Dasis  TSP  50  kg  ha -1 ,  KCL  50 kg  ha -1 dan    ammonium molybdate 1 kg ha -1 .
4. Persiapan benih dan inokulasi Benih  yang  digunakan  adalah kedelai varietas anjasmoro, dipilih  berdasarkan  bentuk  dan ukurannya  sehingga  seragam.
Steril  dengan  alcohol  70  % selama  15  menit,  dan  dicuci dengan air steril sebanyak 5 kali. 5. Penanaman
Benih ditanam dalam pot sedalam  1  –  2  cm  dari permukaan  tanah  dan  setiap  pot terdapat 3 – 4 benih, penanaman dilakukan  pada  sore  hari  dan ditutup  dengan  lapisan  tipis tanah guna menjaga kelembaban. Panen Panen  dilakukan  ketika tanaman  pada  stadia  bunga penuh  (reproduktif  2)  atau  pada
45  hst.  (Blanco et  al. 2008). Panen dilakukan secara bersamaan untuk setiap per;lakuan. Variable pengamatan 1. Jumlah  total  populasi  bakteri Bradyrhisobium ( bakteri/g -1 ) Total  populasi  (  bakteri  g -1 )  =
jumlah koloni x factor pengenceran Berat kering contoh tanah /nodul
2. Luas daun per tanaman (cm 2 ) Diukur dengan metode planimetri,  dimana  luas  daun didapat  dari  P  x  L  x  K (konstanta)  dan  dihitung  saat umur 15,30 dan 45 hst.
3. Jumlah total nodum Menghitung  jumlah  nodul  pada akar tanaman setelah dibersihkan  dari  tanah.  Nodul adalah  bintil  akar  yang  terdapat pada  akar  tanaman  pada  saat panen.
4. Jumlah nodum efektif Menghitung  nodul  efektif  pada
setip  perlakuan.  Pengamatan nodul  efektif  adalah  dengan membelah  masing  –  masing nodul yang yang efektif
berwarnah pink atau  kemerahan sedangkan  yang  kurang  efektif berwarnah putih dan skor warnah nodul sebagai berikut : 4 :  nodul  berwarnah red/ merah 3 : nodul berwarnah pink 2 : nodul berwarnah putih 1 :  nodul  berwarnah coklat
atau hijau
5. Efisiensi  jumlah  pembentukan nodul efektif Efisiensi  pembentukan  nodul efektif adalah kemampuan relatif  bakteri  membentuk  nodul efektif. Persentase bradyrhizobium sp. Mampu membentuk nodul efektif dihitung dengan mengklasifikasikan nodul berdasarkan  skor  warnah  nodul, dimana  jumlah  nodul  efektif dibagi  jumlah  nodul  terbentuk dikali 100%.
6. Berat kering nodul efektif Nodul  efektif  dioven  pada  suhu 65 o c sampai beratnya konstan
7. Diameter nodul Mengukur  10  nodul  dari  setiap perlakuan.  Mengukur  dengan menggunakan jangka sorong.
8. Berat  kering  tanaman  tanpa nodul Tanaman  tanpa  nodul  timbang untuk  memperoleh  berat  segar kemudian  di  oven  pada  suhu 65 o c sampai beratnya konstan.
9. Kadar N tanaman Diambil  bagian  diatas  tanaman dari  masing  –  masing  perlakuan
dianalisis di Lab. Dengan
menggunakan  metode kjeldahl dikali  berat  kering  tanaman bagian  atas  tanah  (g  tan -1 )
(Yaman dan Cinosy, 1996 dalam Ogutcu et al. 2008) 10. N fiksasi Kadar  N  pada  tanaman  yang diinokulasi Bradyrhizobium dengan  kadar  N  pada  perlakun pemupukan nitrogen dikali 100%  (Beck et  al. 1993 dalam
Ogutcu et al. 2008). 11. Efisiensi simbiosis

## Analisis data
Data hasil pengamatan dianalisis dengan  analisis  sidik  ragam  sesuai dengan  rancangan  yang  digunakan apabila perlakuan menunjukan pengaruh  nyata  terhadap  variable  yang diamati,  maka  dilanjutkan  dengan  uji
Duncan taraf 5 %. Data yang menunjukan  nilai  koefisien  keragaman diatas  20  %  dilakukan  transformasi untuk  menstabilkan  varians  (  Gomez, dan Gomez, 1995).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
1. Jumlah  Bakteri  Bradyrhizobium sp.  Dalam  Beberapa  Sumber Inokulum
Jumlah  bakteri Bradyrhizobium sp.  Paling  banyak  ditemukan pada  biakan  yang  berasal  dari nodul tanaman kedelai di Ndona yaitu  15  x10 6 bakteri  dan terendah pada inokulan komersial  ligin  dengan  jumlah koloni  4,8  x  10 4 bakteri  (Tabel 5.1)
Kristina : Efektivitas strain Bradyrhizobium japonicumdi, pembentukan nodul,  penghambat nitrogen
Tabel 5.1.  Pengaruh Perlakuan Terhadap jumlah koloni bakteri
No                         Inokulan Jumlah Bakteri gram -1 10 4 10 5 10 6 1 Pada tanah bekas tanaman kedelai di Ekoae
2 Pada tanah bekas tanaman kedelai di Ndona
3 Pada  tanah  bekas  tanaman  kedelai  di kelimutu
4 Pada nodul tanaman kedelai di ekoae
5 Pada nodul tanaman kedelai di Ndona
6 Pada Nodul Tanaman kedelai di Kelimutu
7 Pada Inokulan Komersial Legin _ _ _ _ _ _ _ 7 4 3 _ _ _ 4,8 – – – 10,8 15 7,8 _ 2. Pengaruh  Perlakuan  Terhadap Variabel Pengamatan Hasil analisis statistic menunjukan  bahwa  perlakuan yang  diberikan  pada  tanaman kedelai berpengaruh sangat nyata  (P>0,01)  terhadap  luas daun  pertanaman  umur  45  hst, total  nodul  terbentuk,  jumlah nodul efektif efisiensi pembentukan  nodul  diameter nodul,  berat  segar  nodul,  berat
kering  nodul  kadar  N  tanaman, N fiksasi dan efisiensi simbiosis. Hasil  analisis  statistika  yang bderpengaruh  nyata  (  <0,05) terhadap  tinggi  tanaman  15  hst, luas  daun  pertanaman  30  hst,
berat kering tanaman dan berpengaruh  tidak  nyata  (≥0,05) terhadap variable lainnya (Tabel 5.2) Tabel 5.2.  Pengaruh perlakuan terhadap variabel yang diamati No             Variabel pengamatan Keterangan 1. Tinggi Tanaman Umur 15 hst (cm) 2. Tinggi Tanaman Umur 30 hst (cm)
3. Tinggi Tanaman Umur 30 hst (cm)
4. Luas Daun per Tanaman Umur 15 hst (cm 2 )
5. Luas Daun per Tanaman Umur 15 hst (cm 2 )
6. Luas Daun per Tanaman Umur 15 hst (cm 2 )
7. Luas Daun per Tanaman Umur 15 hst (cm 2 )
8. Luas Daun per Tanaman Umur 15 hst (cm 2 )
9. Total Nodul Terbentuk (nodul tan -1 )
10. Jumlah Nodul Efektif ( nodul tan -1 )
11. Efisiensi pembentukan nodul (%)
12. Diameter Nodul ( cm )
13. Berat Segar Nodul ( g tan -1 ) 14. Berat Kering Nodul Efektif (g tan -1 ) 15. Kadar N (%) 16. N Fiksasi (%) 17. Efisiensi Simbiosis (%)
* tn tn tn * ** tn * ** ** ** ** **
** ** ** ** Keterangan   : * = Berpengaruh nyata ( P < 0,05 ) ** = Berpengaruh sangat nyata ( P < 0,01 ) tn  = berpengaruh tidak nyata( P ≥ 0,05 )
3. Tinggi  Tanaman  Umur  15,  30, dan 45 hst
Hasil  penelitian  menunjukan bahwa  tinggi  tanaman  umur  15 hst  tertinggi  pada  perlakuan pemupukan  nitrogen  (N)  (Tabel 5.3).  Tinggi  tanaman  kemudian meningkat  tetapi  pada  umur  30 dan  45  hst  tidak  ditemukan pengaruh  yang  nyata  antara perlakuan (Tabel 5.3). (Tabel 5.3).  Pengaruh perlakuan terhadap tinggi tanaman umur 15, 30 dan 45 hst No                            Perlakuan Tinggi Tanaman 15 hst 30 hst 45 hst 1 Inokulasi  dengan  tanah bekas tanaman kedelai di Ekoae (R1) 2. Inokulasi dengan Tanah Bekas
Tanaman kedeai di Ndona (R2)
3. Inokulasi dengan tanah bekas Tanaman  kedelai  di  Kelimutu (R3)
4. Isolat Bradyrhisobium dari nodul Tanaman kedelai di Ekoae (R4)
5. Isolat Bradyrhisobium dari nodul Tanaman kedelai di Ndona (R5)
6. Isolat Bradyrhisobium dari nodul Tanaman  kedelai  di  Kelimutu (R6)
7. Inokulan komersial Legin (L)
8. Pemupukan urea (N)
9. Kontrol (K)
30,61c 33,06abc 32,84abc 33,63abc 35,03ab 34,84abc 31,60bc 35,89a 32,91abc 63,01a 67,16a 66,33a 65,98a 68,88a 68,11a 66,23a 67,39a 71,04a 108,27a 116,08a 112,59a 108,28a 105,97a 116,09a 113,93a 126,26a 118,00a Keterangan : Angka – angka yang diikuti dengan huruf yang sama pada kolom yang sama tidak berbeda nyata pada uji Duncan 5% 4. Luas  Daun  Tanaman  Umur  15, 30 dan 45 hst Hasil  penelitian  menunjukan bahwa perlakuan inokulasi bakteri tidak memberikan pengaruh  yang  nyata  terhadap luas dan umur 15 hst. Luas daun umur  30  dan  45  hst  tertinggi pada perlakuan isolat Bradyrhisobium dari nodul tanaman  kedelai  di  Ndona  (R5) atau lebih tinggi sebesar 20,15% dan 16,05 % dari luas daun pada perlakuan  Kontrol  (K)  (Tabel
5.4)
Kristina : Efektivitas strain Bradyrhizobium japonicumdi, pembentukan nodul,  penghambat nitrogen
Tabel 5.4.  Pengaruh perlakuan terhadap Luas Daun Tanaman Umur 15, 30 dan 45 hst
No Perlakuan Tinggi Tanaman 15 hst 30 hst 45 hst 1 2 3 4 5 6
7 8 9 Inokulasi dengan tanah bekas tanaman kedelai di Ekoae (R1) Inokulasi dengan Tanah Bekas Tanaman kedeai di Ndona (R2) Inokulasi dengan tanah bekas
Tanaman kedelai di Kelimutu (R3)
Isolat Bradyrhisobium dari nodul Tanaman kedelai di Ekoae (R4)
Isolat Bradyrhisobium dari nodul Tanaman kedelai di Ndona (R5)
Isolat Bradyrhisobium dari nodul
Tanaman kedelai di Kelimutu (R6) Inokulan komersial Legin (L) Pemupukan urea (N) Kontrol (K) 8,88a 9,35a 9,93a 8,79a 8,95a 9,99a 9,32a 8,88a 9,48a 15,74ab 15,92ab 15,83a 16,70a 17,43a 17,14a 15,66ab 14,46b 13,92b 20,65a 20,80a 20,68a 21,03a 21,53a 21,14a 18,11b 19,24ab 18,07b
Keterangan   : Angka – angka yang diikuti dengan huruf yang sama pada kolom yang sama tidak berbeda nyata pada uji Duncan 5%
5. Berat  Segar  dan  Berat  Oven Kering Tanaman
Hasil berat segar tanaman menunjukan  perbedaan  yang tidak nyata antara semua perlakuan (Tabel 5.5). perlakuan inokulasi Bradyrhizobium menghasilkan berat kering tanaman  umur  45  hst  yang tertinggi  pada  perlakuan  dengan isolate Bradyrhizobim dari nodul tanaman  kedelai  di  Ndona  (R5) yaitu  8,47%  lebih  tinggi  dari perlakuan  inokulasi  legin  (L) dan  8,11  %  lebih  tinggi  dari kontrol (Tabel 5.5)
Tabel 5.5.  Pengaruh perlakuan terhadap berat segar tanaman dan kering oven tanaman umur 45 hst
No Perlakuan Berat segar tanaman ( g tan -1 ) Berat kering oven tanaman ( g tan - 1 ) 1 2 3 4 5 6 7
8 9 Inokulasi dengan tanah bekas Tanaman kedelai di Ekoae (R1) Inokulasi dengan Tanah Bekas Tanaman kedeai di Ndona (R2) Inokulasi dengan tanah bekas Tanaman kedelai di Kelimutu (R3) Isolat Bradyrhisobium dari nodul Tanaman kedelai di Ekoae (R4)
Isolat Bradyrhisobium dari nodul Tanaman kedelai di Ndona (R5) Isolat Bradyrhisobium dari nodul
Tanaman kedelai di Kelimutu (R6) Inokulan komersial Legin (L) Pemupukan urea (N) Kontrol (K) 36,87a 36,98a 37,14a 38,06a 37,90a 37,37a 36,53a 37,16a 36,74a 8,92bc 9,26abc 9,14abc 9,48ab 9,62a 9,59a 8,81c 9,38abc 8,84c Keterangan :  Angka  –  angka  yang  diikuti  dengan  huruf  yang  sama  pada kolom yang sama tidak berbeda nyata pada uji Duncan 5% 6. Jumlah  Total  Nodul  Terbentuk,
Jumlah Nodul Efektif dan Efisien Pembentukan Nodul Efektif Jumlah nodul terbentuk tertinggi dengan perlakuan inokulasi komersial  legin  (L)  yang  lebih tinggi 94,24% dari jumlah nodul terendah (K). pengaruh perlakuan  pemberian  inokulan komersial (L) menunjukan perbedaan  yang  nyata  dengan perlakuan lainnya (Tabel 5.6). Jumlah  nodul  efektif  tertinggi diperoleh pada perlakuan L yaitu lebih tinggi  95,94% dari kontrol (K).  hasil  pada  perlakuan  L tersebut  memberikan  perbedaan yang  nyata  terhadap  perlakuan lain.
Kristina : Efektivitas strain Bradyrhizobium japonicumdi, pembentukan nodul,  penghambat nitrogen
Tabel 5.6.  Pengaruh perlakuan terhadap jumlah nodul terbentuk, jumlah nodul efektif dan efisiensi pembentukan nodul efektif umur 45 hst
No Perlakuan Jumlah nodul terbentuk (nodul tanaman -1 ) Junlah nodul efektif (Nodul tan -1 ) Presentase nodul Efektif (%) 1 2 3 4 5 6 7 8
9 Inokulasi dengan tanah bekas tanaman kedelai di Ekoae (R1) Inokulasi dengan Tanah Bekas Tanaman kedeai di Ndona (R2)
Inokulasi dengan tanah bekas
Tanaman  kedelai  di  Kelimutu (R3)
Isolat Bradyrhisobium dari nodul Tanaman kedelai di Ekoae (R4)
Isolat Bradyrhisobium dari nodul Tanaman kedelai di Ndona (R5)
Isolat Bradyrhisobium dari nodul Tanaman  kedelai  di  Kelimutu
(R6) Inokulan komersial Legin (L) Pemupukan urea (N) Kontrol (K) 7,25b 6,25bc 8,00b 6,00bc 5,75bc 5,00bc 60,75a - 3,50c 15,74ab 15,92ab 15,83a 16,70a 17,43a 17,14a 15,66ab - 1,3c 20,65a 20,80a 20,68a 21,03a 21,53a 21,14a 18,11b - 33,333d Keterangan   :  Angka – angka yang diikuti dengan huruf yang sama pada kolom yang sama
tidak  berbeda nyata pada uji Duncan 5%
 1) Data ditransformasi dengan   5 , 0  x
 Nodul efektif berwarna pink dan kemerahan Efisiensi  pembentukan  nodul efektif  menunjukan  kemampuan  relatif dalam membentuk nodul efektif. Perlakuan inokulasi bakteri Bradyrhizobium sp. Memberikan
persentase pembentukan  nodul  tertinggi pada  perlakuan  isolat Bradyrizobium dari  nodul  tanaman  kedelai  di  Ndoma (R5),  terendah  pada  perlakuan  control (K)  dan  perlakuan  pemberian  inokulan
komersial Legin hanya mampu
membentuk  efektif  yang  lebih  rendah (Tabel 5.6).
5.7 Diameter Nodul dan Berat Kering

## Oven Nodul
Diameter  nodul  efektif  terbesar pada  perlakuan  R5  yaitu  25,57%  lebih tinggi  dari diameter nodul  terkecil pada perlakuan  dengan  inokulan  komersial Legin (Tabel 5.7).
Tabel 5.7.  Pengaruh perlakuan terhadap diameter, berat segar dan berat kering oven nodul
No Perlakuan Diameter nodul (mm) Berat segar nodul (g tan -1 ) BKO nodul Efektif (g tan -1 )
1 2 3 4 5 6
7 8 9
Inokulasi dengan tanah bekas tanaman kedelai di Ekoae (R1) Inokulasi dengan Tanah Bekas Tanaman kedeai di Ndona (R2)
Inokulasi dengan tanah bekas
Tanaman  kedelai  di  Kelimutu (R3)
Isolat Bradyrhisobium dari nodul Tanaman kedelai di Ekoae (R4)
Isolat Bradyrhisobium dari nodul Tanaman kedelai di Ndona (R5)
Isolat Bradyrhisobium dari nodul Tanaman  kedelai  di  Kelimutu
(R6) Inokulan komersial Legin (L) Pemupukan urea (N) Kontrol (K) 3, 52 bc
3,28 bc
3,58 b
3,94 a
3,95 a 3,67 ab 2,72 c - 2,94 c 0,375 c 0,395 c 0,390 c 0,428 bc 0,503 b 0,413 bc 0,775 a - 0,220 d 0,220 bc 0,285 ab 0,283 ab 0,300 a 0,335 a 0,308 a 0,290 ab - 0,163 c Keterangan   :  Angka-angka  yang  diikuti  oleh  huruf  yang  sama  pada  kolom yang sama tidak berbeda nyata pada ujia Duncan 5%
Berat segar nodul   efektif tertinggi      pada      perlakuan dengan inokulan komcisial    Legin  (L)  dan terendah pada kontrol (K). Diantara perlakuan yang diinokulasi  bakteri Bradyrhizobiwn
sp.  dari  Ende  di  dapat  bahwa perlakuan isolat Bradyrhizobiwn
dari nodul      tanaman      kedelai      di
Ndona (R5) lebih      tinggi membentuk nodul efektif
dibandingkan  Rl, R2, R3,  R4 dan R6.      Berat  kering nodul efektif tertinggi  pada  perlakuan  R5  yaitu 51,34 % lebih tinggi dari berat kering nodul  efektif  terkecil  pada  perlakuan kontrol (K) (Tabel 5.7).
5.8  Kadar  Nitrogen  Tanaman, Nitrogen  Fiksasi  dan Efisiensi Simbiosis
Hasil      penelitian    menunjukkan kadar    nitrogen    tanaman    tertinggi pada perlakuan  pemupukan  urea  (N). Pada perlakuan inokulasi bakteri
Bradyrhizobium sp.   menghasilkan  kadar nitrogen      tanaman      tertinggi      pada perlakuan      isolat Bradyrhizobium dari nodul  tanaman  kedelai  di  Ndona  (R5) yang berbeda nyata dengan Rl, R2, R3, R4,  R6,  L  dan  K.  Kadar  nitrogen tanaman terkecil pada kontrol (K) yaitu 1,295 % (Tabel 5.8).
N fiksasi tertinggi pada perlakuan R5 dan terendah pada perlakuan  inokulasi Legin  (Tabel  5.8). Efisiensi pembentukan nodul oleh bakteri Bradyrhizobiwn sp. terhadap kontrol  tertinggi  diperoleh  R5  yang berbeda  nyata dengan  perlakuan  RL R2, R3,  R4,  R6  dan  L  (Tabel  5.8).
Kristina : Efektivitas strain Bradyrhizobium japonicumdi, pembentukan nodul,  penghambat nitrogen
Tabel 5.8.  Pengaruh perlakuan terhadap Kadar Nitrogen Tanaman, Nitrogen Fiksasi dan Efisiensi Simbiosis No Perlakuan Kadar N tanaman (%) N Fiksasi (%) Efisiensi Simbiosis (%) 1 2 3 4 5 6
7 8 9
Inokulasi dengan tanah bekas tanaman kedelai di Ekoae (R1) Inokulasi dengan Tanah Bekas Tanaman kedeai di Ndona (R2) Inokulasi dengan tanah bekas Tanaman  kedelai  di  Kelimutu (R3) Isolat Bradyrhisobium dari nodul Tanaman kedelai di Ekoae (R4)
Isolat Bradyrhisobium dari nodul Tanaman kedelai di Ndona (R5)
Isolat Bradyrhisobium dari nodul Tanaman  kedelai  di  Kelimutu
(R6) Inokulan komersial Legin (L) Pemupukan urea (N) Kontrol (K)
1,470 b 1,503 b
1,398 b
1,543 b
1,815 a 1,540 b 1,378 b 1,998 a 1,295 b 0,175 ab 0,208 ab 0,103 b 0,248 ab 0,520 a 0,245 ab 0,083 b - - 113,757 b 116,358 b 108,635 b 119,464 b 140,833 a 119,612 b 107,185 b - -
Keterangan   :
 Angka – angka yang diikuti dengan huruf yang sama pada kolom yang sama
tidak  berbeda nyata pada uji Duncan 5%
 1) Data ditransformasi dengan   5 , 0  x

## SIMPULAN
Dari analisis yang telah dipaparkan terdahulu dapat disimpulkan sebagai berikut
1. Tanah-tanah dari Ekoae, Ndona, dan Kelimutu telah mengandung bakteri Bradyrhizobium yang tinggi. Isolat dari nodul tanaman kedelai  di  Ndona  (R5)  paling banyak mengandung bakteri
Bradyrhizobium sp.
2. Isolat dari nodul tanaman kedelai  di  Ndona  (R5)  paling efisien membentuk nodul efektif yaitu 82,26 %
3. Isolat dari nodul tanaman
kedelai  di  Ndona  (R5)  paling
tinggi  memfiksasi  N  yaitu  0,52 %

## UCAPAN TERIMA KASIH
Pada  kesempatan  ini  penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada semua  pihak  yang  telah  membantu dengan  caranya  masing-masing  dalam melengkapi tulisan ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Airtur,  M.M.  2004.  Pengaruh  Dosis
Mikoriza dan Tingkat Kadar Air Tanah Terhadap Efisiensi
Penggunaan  Air,  Serapan  P  dan

## AGRICA, VOL.3 NO 2 (2010)
Hasil Kedelai (Glycine max (L.) merr).  Pada  Tanah  Alfisol. (Tesis)  Denpasar:  Universitas
Udayana BPS  Kabupaten  Ende.  2008.  Potensi Komoditi  Industri  Kecil  dan Menengah. Avaliable from: URL: http://www.endekab.go.id/info% 20Harga%20pasar%2010%20ap ril%008.html
Freire,  J.  R.J.  1984.  Important  limiting Factor  in  soil.  In  :  Alexander, M,.  Editor.  Biological  nitrogen fixation  :  ecology,  technology, and  physiologi.  Nem  York  : plenm press. P. 51 – 72
Gray,  T.R.G.,  Williams,  S.T.  1971  soil microorganisms. London : longman group limited. Gomez,  K.A.,  Gomez,  A.A.  2007. Prosedur Statistik Untuk Penelitian Pertanian. Edisi ke 2.
Jakarta: Universitas Indonesia.
Havlin, J.L., Beaton, J.D., Tisdale, S.L., Nelson, W.L. 1999. Soil Fertility and  Fertilizer.  An  Introduction to Nutrient Management. 6 th Ed. New Jersey : Prentice Hall. Islami, T., Utomo, W.H. 1995. Hubungan Tanah, Air dan Tanaman. Semarang: IKIP Press. Jutomo.  1981.  Prospek  Inokulasi  pada Peningkatan  Produksi  Kedelai dan Leguminosa Lainnya. Yogyakarta:  Universitas  Gajah Mada. Muksin, L.K. 2006. Pengaruh Pemakaian  Inokulan  Komersial,
Biakan  Murni  Rhizobium  sp. dan Tanah Bekas Kedelai Terhadap  Pembentukan  Nodul dan Hasil Kedelai (Glycine max (L.)  Merril).  (Tesis)  Denpasar  : Universitas Udayana. Ogutcu,  H.,  Algur,  O.F.,  Elkoca,  E., Kantar, F. 2008. The Determination of Symbiotic Effectiveness of Rhizobium Strains  Isolated  from  Wild Chickpeas  Co;;ected  from  High Altitudes  in  Erzurum.  Turk.  J.
Agric, Turkey. 32 : 241-248. Purwaningsih  S.  2005b. Seleksi  Biak Rhizobium  dari  Wonogiri,  Jawa Tengah  Terhadap  Pertumbuhan Kedelai  (Glycine  max  L.)  pada Media  Pasir  Steril  di  Rumah Kaca. J.  Biodiversitas,  Bogor.
168 – 171.
Rao,  N.S.S.  1994. Mikrobiologi  tanah dan pertumbuhan tanaman. Jakarta  :  Universitas  Indonesia. Hal. 143 – 191 Rhijin,  P.V.,  Vanderleyden,  J.  1995. The Rhizobium – Palnt Symbiosis. Mikrobiological Reviews,  Amerika.  59  :  124  – 142 Simanungkalit, R.DM..,Dkk. 2006. Bakteri Penambat Nitrogen. Dalam : Simanungkalit, R.D.M., Dkk.  Editor  . Pupuk  Organik dan  Pupuk  Hayati. Bogor  : Balai Besar Penelitian Sumberdaya  Lahan  Pertanian. 113 – 140.
Kristina : Efektivitas strain Bradyrhizobium japonicumdi, pembentukan nodul,  penghambat nitrogen