## Antipyretic Activity Test of Combination of Peperomia pellucida
Extract and Andrographis paniculata in Mice (Mus musculus)
Uji Aktivitas Antipiretik Kombinasi Ekstrak Peperomia pellucida dan Andrographis paniculata pada Mencit (Mus musculus)
Khairil Pahmi 1, Muhammad Ricky Ramadhian 2* , Gabena Indrayani Dalimunthe 3
1 Program Studi Farmasi DIII, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Nahdlatul Wathan Mataram, Jl. Merdeka Raya, Karang Pule, Mataram, Indonesia
2 Departemen Mikrobiologi dan Parasitologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Lampung, Jl. Prof. Dr. Ir. Sumantri Brojonegoro, RW.No: 1, Gedong Meneng, Kec. Rajabasa, Kota Bandar Lampung, Lampung, Indonesia
3 Department of Pharmacy, Universitas Muslim Nusantara Al Washiyah, Jalan Guru II Medan, Sumatra Utara, Indonesia
* E-mail: mricky.ramadhian@fk.unila.ac.id

## Article Info:
Received:  27 Juni 2022 in revised form: 19 Juli 2022 Accepted: 22  Agustus  2022
Available Online: 1 September 2022

## ABSTRACT
Pepper  elder  (Peperomia  pellucida)  and  green  chiretta (Andrographis  paniculata)  are  plants  that  have  been  used empirically to reduce fever. Fever is a symptom of a disease characterized  by  a  significant  increase  in  body  temperature. This  study  aimed  to  determine  the  antipyretic  effect  of  the combination of pepper elder herbal extract (P. pellucida) and green chiretta herbal extract (A. paniculata) (80:20) in the male house  mice  (Mus  musculus).  Extraction  was  conducted through maceration using ethyl acetate solvent. The total of 25 male  mice  were  divided  into  5  groups,  namely  a  negative control  group  (Na-CMC  1%),  a  positive  control  group (paracetamol),  and  a  treatment  group  induced  by  a combination of pepper elder herbal extracts and green chiretta herbal extract at the dose of (80 + 20), (40 +10), and (20 + 5) mg/kg BW. DPT vaccine 0.2 ml was used intramuscularly as a fever inducer. The observation was carried out at 30, 60, 90, and  120  minutes  after  treatment.  The  data  obtained  were analyzed using one-way ANOVA followed by the LSD test to determine  the  differences  between  groups.  The  results showed  that  variations  in  the  dose  of  the  combination  of pepper  elder  and  green  chiretta  herbal  extracts  had  an antipyretic effect where the most effective dose was (80 + 20) mg/kg BW due to its stable temperature reduction power and effectiveness  that  are  equivalent  to  paracetamol.  The combination  of  suruhan  herb  extract  (P.  pellucida)  and sambiloto herb (A. paniculata) has potential as an antipyretic Keywords : Antipyretics; Pepper Elder; Peperomia pellucida ; Green Chiretta; Andrographis paniculata
Corresponding Author: Departemen Mikrobiologi dan Parasitologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Lampung Kota Bandar Lampung, Indonesia E-mail: mricky.ramadhian@fk.unila.ac.id
Indonesian Journal of Pharmaceutical Education (e-Journal) 2022; 2 (3): 187 – 196
ISSN : 2775- 3670 (electronic) Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/ijpe/index DOI: 10.37311/ijpe.v2i3.15654
This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0 International license.
How to cite (APA 6 th Style): Pahmi,K.,  Ramadhian,M.R.,  Putri,A.,  Dalimunthe,G.I.2022. Antipyretic  Activity  Test  of  Combination  of Peperomia  pellucida  Extract  and  Andrographis  paniculata  in  Mice  (Mus  musculus) . Indonesian  Journal  of Pharmaceutical  (e-Journal), 2 (3), 187-196.

## ABSTRAK
Tanaman  suruhan  ( Peperomia  pellucida )  dan  sambiloto  ( Andrographis  paniculata )  merupakan tanaman yang telah digunakan secara empiris sebagai penurun demam. Demam merupakan salah  satu  gejala  penyakit  yang  ditandai  dengan  kenaikan  suhu  tubuh  secara  signifikan. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  efek  antipiretik  dari  kombinasi  ekstrak  herba suruhan  ( P.  pellucida )  dan  herba  sambiloto  ( A.  paniculata )  (80:20)  pada  mencit  jantan  ( Mus musculus ). Ekstraksi secara maserasi menggunakan pelarut etil asetat. Sebanyak 25 ekor mencit jantan dibagi menjadi 5 kelompok, yaitu kelompok kontrol negatif (Na-CMC 1%), kelompok kontrol  positif  (paracetamol)  dan  kelompok  perlakuan  yang  diinduksi  kombinasi  ekstrak herba  suruhan  dan  herba  sambiloto  dengan  dosis  (80+20),  (40+10),  dan  (20+5)  mg/kgBB. Digunakan vaksin DPT 0,2 ml secara intramuskular sebagai penginduksi demam. Pengamatan dilakukan pada menit ke-30, 60, 90 dan 120 setelah perlakuan. Data yang diperoleh dianalisis menggunakan  ANOVA  satu  arah  yang  dilanjutkan  dengan  uji  LSD  untuk  mengetahui perbedaan  antar  kelompok.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  variasi  dosis  kombinasi ekstrak  herba  suruhan  dan  sambiloto  memiliki  efek  antipiretik  dimana  dosis  yang  paling efektif  terdapat  pada  dosis  (80+20)  mg/kgBB  karena  memiliki  daya  penurunan  suhu  yang stabil dan efektivitas yang sebanding dengan paracetamol.  Kombinasi ekstrak herba suruhan ( P. pellucida ) dan herba sambiloto ( A. paniculata ) memiliki potensi sebagai antipiretik.
Kata Kunci: Antipiretik; Suruhan; Peperomia pellucida ;  Sambiloto; Andrographis paniculata
1.  Pendahuluan
Demam  merupakan  suatu  respon  tubuh  terhadap  penyakit  yang  ditandai dengan meningkatnya suhu tubuh diatas normal yang diakibatkan oleh meningkatnya pusat pengaturan suhu di hipotalamus [1] . Demam terjadi karena adanya faktor-faktor imunologik yang memicu sel-sel fagosit mononuklear membuat sitokin yang berperan sebagai  pirogen  endogen.  Sitokin  tersebut  memicu  produksi  asam  arakidonat  yang selanjutnya akan diubah menjadi prostaglandin melalui enzim siklooksigenase sehingga terjadi  peningkatan  suhu  pada  pusat  termoregulasi  di  hipotalamus [2] .  Antipiretik merupakan obat yang bekerja untuk menekan suhu tubuh diatas normal yang terjadi ketika  demam.  Obat  ini  bekerja  dengan  mekanisme  penghambatan  enzim siklooksigenase  sehingga  produksi  prostaglandin  dapat  dicegah [3] .  Obat  antipiretik yang  sering  digunakan  di  masyarakat  yaitu  parasetamol  dan  ibuprofen.  Namun penggunaan  obat-obat  antipiretik  sintetik  dalam  jangka  panjang  dapat  memicu terjadinya efek samping ringan maupun efek samping berat. Oleh karena itu alternatif suatu  bahan  herbal  untuk  pengobatan  perlu  dikembangkan  karena  bahan  herbal dianggap lebih aman dan memiliki khasiat seperti pengobatan sintetik.
Salah  satu  tanaman  yang  dapat  digunakan  sebagai  bahan  obat  yaitu  herba suruhan dan herba sambiloto. Tanaman suruhan telah digunakan secara empiris sebagai obat demam, asam urat, sakit perut, sakit kepala, diare hingga hipertensi [4] . Diketahui bahwa  pada  ekstrak  etil  asetat  herba  Suruhan  terdapat  senyawa  flavonoid,  alkaloid, saponin  dan  steroid [3] .  Sedangkan  tanaman  sambiloto  secara  tradisional  digunakan
untuk menurunkan demam tinggi, mengobati malaria, diare, flu, kencing manis, darah tinggi hingga kanker. Tanaman Sambiloto dilaporkan mengandung senyawa metabolit sekunder seperti saponin, alkaloid, flavonoid, tannin dan steroid [5] . Masyarakat sering menggunakan kedua tanaman ini sebagai penurun demam dengan  mengonsumsi  tanaman  tersebut  dalam  bentuk  rebusan.  Kemampuan penurunan  suhu  tubuh  oleh  kedua  tanaman  ini  diperkuat  dengan  penelitian sebelumnya  yang  menyatakan  bahwa  ekstrak  suruhan  dan  sambiloto  memiliki efektivitas  sebagai antipiretik yang diduga karena adanya kandungan senyawa pada tanaman  tersebut  yang bekerja  sebagai  antipiretik  seperti  flavonoid,  alkaloid,  steroid dan  tanin [6] , [7] .  Penelitian  telah  dilakukan  sebelumnya  terhadap  kombinasi  kedua tumbuhan  ini  dimana  kombinasi  ekstrak  herba  suruhan  dan  sambiloto  mempunyai aktivitas antimalaria pada perbandingan 80:20 [8] . Namun belum ada penelitian yang menguji  efektivitas  antipiretik  dari  kombinasi  ekstrak  suruhan  dan  sambiloto. Berdasarkan  hal  tersebut  yang  menjadi  tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui efektivitas antipiretik dari kombinasi ekstrak herba suruhan dan sambiloto dengan  menggunakan  perbandingan  konsentrasi  pada  penelitian  sebelumnya  agar kombinasi kedua tanaman ini mempunyai nilai lebih dalam pengobatan herbal.

## 2.  Metode Alat dan  Bahan
Alat yang digunakan pada penelitian ini yaitu batang pengaduk, blender, gelas beaker,  gelas  ukur,  gunting,  jarum,  mortir,  pipet  tetes, rotary  evaporator, sonde  oral mencit, spuit 1 mL, tabung reaksi, timbangan analitik dan wadah maserasi.
Bahan yang digunakan yaitu alkohol 70%, aquades, asam klorida, ekstrak herba suruhan ( Peperomia pellucida ) dan ekstrak herba sambiloto ( Andrographis paniculata ), etil asetat  (pelarut),  FeCl 3 ,  Liebermann-Burchard,  mencit  jantan ( Mus  musculus ),  Natrium karboksilat  metil  selulosa  (Na-CMC),  paracetamol,  pereaksi  dragendorff  serbuk magnesium dan vaksin DPT.

## Pengambilan dan Preparasi Sampel
Pengambilan sampel suruhan dan sambiloto dilakukan pada pagi hari. Sampel yang  terkumpul  dicuci  menggunakan  air  mengalir  dan  dikeringkan  dengan  cara diangin-anginkan.  Herba  suruhan  dan  sambiloto  yang  telah  kering  disortasi  untuk memisahkan  bahan-bahan  yang  rusak  akibat  kotoran.  Sampel  kemudian  dihaluskan hingga diperoleh serbuk herba suruhan dan sambiloto.

## Pembuatan Ekstrak
Sebanyak 500 gram sampel suruhan dan 450 gram sampel sambiloto diekstraksi masing-masing secara maserasi menggunakan pelarut etil asetat selama 3 kali 24 jam sambil diaduk sesekali. Ekstrak herba suruhan dan sambiloto disaring setiap 24 jam lalu dipisahkan  antara  residu  dan  filtratnya.  Kemudian  residunya  dimaserasi  kembali dengan  pelarut  etil  asetat.  Filtrat  yang  diperoleh  dipekatkan  menggunakan rotary evaporator hingga terbentuk ekstrak kental.

## Uji Skrining Fitokimia

## Alkaloid
Ekstrak herba suruhan dan ekstrak herba sambiloto ditimbang sebanyak 1 gr, masing-masing  dilarutkan  dalam  5  ml  etil  asetat  dan  ditambahkan  5  tetes  pereaksi dragendorff . Positif mengandung alkaloid jika menunjukkan adanya endapan coklat atau orange [9] .

## Flavonoid
Ekstrak herba suruhan dan ekstrak herba sambiloto ditimbang sebanyak 1 gr, masing-masing dilarutkan dalam 5 ml etil asetat dan diendapkan. Diambil filtratnya lalu dimasukkan  dalam  tabung  reaksi,  ditambahkan  2  tetes  HCl  dan  sedikit  serbuk magnesium lalu dikocok. Terbentuknya warna merah, jingga atau ungu menunjukan positif flavonoid [10] . Tanin
Ekstrak herba suruhan dan ekstrak herba sambiloto ditimbang sebanyak 1 gr, masing-masing  dilarutkan  dalam  5  ml  etil  asetat  dan  ditambahkan  1-3  tetes  larutan FeCl 3 . Timbulnya warna biru kehitaman menunjukkan adanya senyawa tanin galat dan jika warnanya hijau kehitaman menunjukkan adanya senyawa fenol [10] .

## Steroid/Triterpenoid
Ekstrak herba suruhan dan ekstrak herba sambiloto ditimbang sebanyak 1 gr, masing-masing dilarutkan dalam 5 ml etil asetat dan ditambahkan larutan Lieberman- Burchard lalu dikocok. Sampel dinyatakan positif mengandung steroid dan terpenoid jika terjadi perubahan warna biru atau ungu pada sampel [10] .

## Saponin
Ekstrak herba suruhan dan ekstrak herba sambiloto ditimbang sebanyak 1 gr, masing-masing  ditambahkan  10  ml  air  panas  dan  dikocok  selama  10  detik.  Jika terbentuk buih setinggi 1-10 cm selama 10 menit  atau lebih  dan tidak hilang dengan penambahan 1 tetes HCl 2N, maka menunjukkan adanya senyawa saponin [9] . Pembuatan Sediaan Uji Pembuatan Suspensi Na-CMC 1% b/v
Na-CMC ditimbang sebanyak 1 gram dan dimasukkan dalam 100 mL air panas (suhu 70 o C) sedikit demi sedikit. Digerus hingga membentuk koloid yang homogen.

## Pembuatan Suspensi Paracetamol
Tablet paracetamol ditimbang sebanyak 10 tablet, kemudian dihitung bobot rata- rata tiap tablet. Semua tablet paracetamol dimasukkan di dalam lumpang dan digerus hingga  halus  dan  homogen.  Kemudian  ditimbang  tablet  paracetamol  yang  telah dihaluskan sebanyak 0,2145 g lalu disuspensikan dalam larutan Na-CMC 1% sebanyak 100 ml.

## Pembuatan Suspensi Ekstrak
Berat ekstrak yang akan disuspensikan ditimbang terlebih dahulu berdasarkan dosis yang akan digunakan. Mula-mula Na-CMC ditaburkan diatas air panas di dalam lumpang lalu digerus hingga homogen, air yang digunakan yaitu 20 kalinya. Biarkan 15 menit hingga Na-CMC mengembang lalu dimasukkan ekstrak sedikit demi sedikit ke dalam lumpang sambil digerus homogen dan dicukupkan dengan aquades sampai 100 ml [11] .

## Pengujian Efek Antipiretik
Hewan  uji  yang  digunakan  yaitu  mencit  ( Mus  musculus )  jantan  yang  sehat sebanyak 25 ekor dengan bobot badan 20-30 gram. Sebelumnya mencit diaklimatisasi selama  1  minggu  yang  bertujuan  untuk  mengkondisikan  hewan  dengan  suasana laboratorium. Hewan uji yang telah diadaptasikan dibagi menjadi 5 kelompok dimana masing-masing kelompok terdiri atas 5 ekor mencit.  Diukur suhu rektal awal  mencit kemudian mencit diinduksi demam menggunakan vaksin DPT sebanyak 0,2 ml secara intramuskular. Setelah 60 menit, suhu rektal mencit diukur kembali kemudian masing- masing kelompok diberi perlakuan sebagai berikut: kelompok 1 (suspensi Na-CMC 1%
b/v), kelompok 2 (suspensi paracetamol 0,2145% b/v), kelompok 3 (suspensi ekstrak suruhan dan sambiloto (80+20) mg/kgBB), kelompok 4 (suspensi ekstrak suruhan dan sambiloto  (40+10)  mg/kgBB),  kelompok  5  (suspensi  ekstrak  suruhan  dan  sambiloto (20+5) mg/kgBB) lalu diamati penurunan suhu tubuh mencit selama 120 menit setiap 30 menit [11] .

## Analisis Data
Data-data  penurunan  suhu  tubuh  mencit  yang  diperoleh  dianalisis menggunakan uji ANOVA satu arah dan uji LSD. Uji ANOVA dinyatakan dalam rata- rata±SD dengan hasil pengujian signifikan apabila p ≤ 0,01. Uji lanjutan LSD dilakukan dengan taraf kepercayaan sebesar 99%.

## 3.  Hasil dan Pembahasan Ekstraksi dan Skrining Fitokimia
Hasil ekstraksi herba suruhan dan sambiloto menunjukkan bahwa sebanyak 500 gram herba suruhan yang diekstraksi secara maserasi menggunakan pelarut etil asetat sebanyak  7000  mL,  menghasilkan  ekstrak  kental  sebanyak  61,85  gram  dan  diperoleh persen rendemen sebesar 12,37%. Sedangkan sebanyak 450 gram herba sambiloto yang diesktraksi  secara  maserasi  menggunakan  pelarut  etil  asetat  sebanyak  5000  mL, menghasilkan  ekstrak  kental  sebanyak  49,68  gram  dan  diperoleh  persen  rendemen sebesar 11,04%. Hasil presentase tersebut menunjukkan proses ekstraksi herba suruhan dan  herba  sambiloto  berlangsung  dengan  baik,  presentase  rendemen  dikatakan sempurna apabila hasilnya berkisar antara 10-15% [12] .

## Skrining Fitokimia
Skrining fitokimia dilakukan untuk mengetahui kandungan senyawa aktif atau senyawa metabolit sekunder yang terkandung pada ekstrak tumbuhan secara kualitatif atau merupakan uji pemeriksaan awal untuk melihat ada atau tidaknya senyawa dalam ekstrak. Hasil skrining fitokimia ekstrak etil asetat herba suruhan dan ekstrak etil asetat herba  sambiloto  sebagaimana  yang  ditunjukkan  pada  Tabel  1  menunjukkan  bahwa ekstrak herba suruhan mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, saponin, steroid dan terpenoid.  Sedangkan  pada  ekstrak  herba  sambiloto  mengandung  senyawa  alkaloid, flavonoid, tanin, dan saponin. Hal ini membuktikan bahwa dalam ekstrak suruhan dan sambiloto terkandung senyawa aktif/senyawa metabolit sekunder.
Pada  uji  alkaloid  terjadi  reaksi  pengendapan  yang  disebabkan  oleh  adanya penggantian ligan sehingga terbentuk endapan berwarna jingga setelah penambahan Dragendorff karena nitrogen dapat membentuk ikatan kovalen koordinat dengan  ion logam K + . Pada uji flavonoid digunakan pereaksi magnesium dan HCl pekat dimana pereaksi  ini  dapat  mereduksi  inti  benzopiron  yang  merupakan  bagian  dari  struktur flavonoid sehingga terjadi perubahan warna menjadi jingga atau merah. Pada pengujian tanin  terjadi  perubahan  warna  ketika  ditambahkan  FeCl 3 ,  hal  ini  karena  FeCl 3 dapat bereaksi  dengan  salah  satu  gugus  hidroksil  yang  terdapat  pada  senyawa  tanin. Pengujian  steroid/triterpenoid  didasarkan  pada  adanya  reaksi  oksidasi  melalui pembentukan  ikatan  rangkap  terkonjugasi  yang  memperlihatkan  munculnya perubahan warna [9] , [13] .
Tabel 1. Hasil Uji Skrining Fitokimia
Sampel Senyawa Pereaksi Hasil Uji Keterangan Suruhan Alkaloid HCl pekat Endapan coklat Positif Flavonoid HCl pekat dan serbuk Mg Merah bata Positif Tanin FeCl 3 Tidak ada perubahan warna Negatif Steroid/Triterpenoid Lieberman Burchard Biru Positif Saponin Air panas Adanya buih  Positif Sambiloto Alkaloid HCl pekat Endapan coklat Positif Flavonoid HCl pekat dan serbuk Mg Merah bata Positif Tanin FeCl 3 Coklat kehijauan Positif Steroid/Triterpenoid Lieberman Burchard Tidak ada perubahan warna Negatif Saponin Air panas Adanya buih  Positif
Pada  pengujian  saponin  terbentuk  buih  yang  stabil  ketika  dikocok  dengan aquades dan ditambahkan dengan HCl, hal ini karena saponin memiliki glikosil sebagai gugus  polar  serta  gugus  steroid  atau  triterpenoid  sebagai  gugus  nonpolar  sehingga bersifat aktif permukaan dan membentuk misel saat dikocok dengan air. Pada struktur misel gugus polar menghadap ke luar sedangkan gugus nonpolar menghadap ke dalam dan keadaan inilah yang tampak seperti busa [14] .

## Pengujian Efek Antipiretik
Pada pengujian efek antipiretik, digunakan vaksin DPT sebagai pemicu demam karena kandungan vaksin tersebut diduga berperan sebagai pirogen eksogen terhadap tubuh  sehingga  menyebabkan  tubuh  menjadi  demam  karena  terjadi  mekanisme pembentukan antibodi terhadap kandungan vaksin tersebut [15] . Pemberian sediaan uji dilakukan  ketika  mencit  mengalami  demam  yang  ditandai  dengan  adanya  kenaikan suhu tubuh. Hewan uji yang mengalami peningkatan suhu sebesar atau lebih dari 0,6 o C dapat dikategorikan telah mengalami demam [16] .
Tabel 2. Rata-rata penurunan suhu tubuh mencit ( O C) Menit ke- Kontrol (-) Kontrol (+) Dosis ekstrak 1 Dosis ekstrak 2 Dosis ekstrak 3 0 37,5 37,0 37,2 37,2 37,1 30 37,6 35,8 35,8 36,0 36,4 60 37,6 35,4 35,1 35,6 36,0 90 37,1 34,5 34,8 35,1 35,5 120 37,1 34,6 34,7 35,1 35,6
Hasil  pengamatan  penurunan  suhu  tubuh  mencit  dapat  dilihat  pada  Tabel  2 dimana  hasil  tersebut  menunjukkan  bahwa  kelompok  1  (kontrol  negatif)  yang diinduksikan dengan Na-CMC tidak menunjukkan adanya perubahan suhu tubuh yang signifikan,  sehingga  dapat  diketahui  bahwa  Na-CMC  tidak  memberikan  pengaruh terhadap penurunan suhu tubuh mencit karena Na-CMC diketahui tidak memiliki efek farmakologi.  Berbeda  dengan  kelompok  2  (kontrol  positif)  yang  diberikan  suspensi paracetamol, terlihat penurunan suhu tubuh yang lebih baik karena mampu mencapai keadaan  yang  normal.  Hal  ini  karena  paracetamol  diketahui  memiliki  aktivitas antipiretik  sehingga  dapat  memperlihatkan  penurunan  suhu  tubuh  yang  cepat  pada kelompok tersebut. Sedangkan untuk kelompok 3 yaitu kombinasi ekstrak Suruhan dan Sambiloto  (80+20)  mg/kgBB  mengalami  penurunan  suhu  yang  cepat  dibandingkan kelompok  4  dan  5  dimana  penurunan  suhunya  hampir  sama  dengan  kelompok paracetamol.  Namun  pada  kelompok  4  dan  5  tetap  terlihat  adanya  penurunan  suhu yang bertahap walaupun membutuhkan waktu yang lebih lama.
Gambar 1. Grafik rata-rata penurunan suhu tubuh mencit setelah perlakuan
Berdasarkan grafik yang ditunjukkan pada Gambar 1, dapat dilihat lebih jelas bahwa  ketiga  dosis  kombinasi  ekstrak  menunjukkan  penurunan  suhu  yang  terjadi secara  bertahap  dimana  hal  ini  menandakan  bahwa  ketiga  ekstrak  tersebut  memiliki aktivitas  antipiretik.  Selain  itu  dapat  dilihat  bahwa  efek  antipiretik  dari  kombinasi ekstrak  dan  sambiloto  meningkat  seiring  dengan  meningkatnya  dosis  ekstrak  yang diberikan pada hewan uji. Hal ini disebabkan oleh semakin tinggi dosis ekstrak yang diberikan  pada  hewan  uji  maka  semakin  banyak  pula  zat  aktif  yang  terkandung  di dalam ekstrak tersebut [17] .
Adanya  penurunan  suhu  tubuh  pada  kelompok  perlakuan  yang  diberikan kombinasi  ekstrak  suruhan  dan  sambiloto  diduga  disebabkan  karena  adanya kandungan senyawa yang memiliki aktivitas antipiretik pada ekstrak tersebut seperti flavonoid,  alkaloid  dan  steroid  dimana  senyawa-senyawa  tersebut  diduga  memiliki mekanisme kerja yang serupa dengan paracetamol yaitu dengan  menghambat enzim siklooksigenase sehingga pembentukan mediator reaksi peningkatan suhu tubuh yaitu prostaglandin akan terhambat [7] , [18] .
32,5 33 33,5 34 34,5 35 35,5 36 36,5 37 37,5 38 Na-CMC Paracetamol Kombinasi 1 Kombinasi 2 Kombinasi 3 0 30
60 90
120

## Analisis Data
Untuk  mengetahui perbedaan bermakna diantara seluruh kelompok perlakuan maka    dilakukan  uji  ANOVA  satu  arah  sehingga  dapat  dilihat  perbedaan  signifikan terhadap  penurunan  suhu  tubuh  antar  tiap  kelompok  perlakuan.  Namun,  sebelum dilakukan  uji  statistik  lebih  lanjut,  dilakukan  terlebih  dahulu  uji  normalitas  dan  uji homogenitas untuk melihat apakah data tersebut tersebar secara homogen [7] . Apabila data yang diperoleh terdistribusi normal dan variasinya homogen, maka pengolahan data dapat dilanjutkan pada uji ANOVA. Hasil pengolahan data menunjukkan bahwa data penurunan suhu  yang diperoleh terdistribusi  normal dan memiliki  variasi  yang homogen sehingga data tersebut dapat dilanjutkan pada analisis berikutnya.
Tabel 3. Hasil analisis Post Hoc dengan uji LSD Perlakuan Kontrol (-) Kontrol (+) Dosis ekstrak 1 Dosis ekstrak 2 Dosis ekstrak 3 Kontrol (-) - 0,001 0,002 0,005 0,020 Kontrol (+) 0,001 - 0,878 0,517 0,215 Dosis 1 0,002 0,878 - 0,619 0,273 Dosis 2 0,005 0,517 0,619 - 0,541 Dosis 3 0,020 0,215 0,215 0,541 - Uji  statistik ANOVA satu arah digunakan untuk menguji  perbedaan rata-rata perlakuan  pada  suatu  percobaan  untuk  lebih  dari  dua  kelompok  dengan  cara membandingkan variansinya [19] . Adapun hasil uji statistik terhadap penurunan suhu mencit yaitu diperoleh nilai signifikan lebih kecil daripada  0,01 (p<0,01) yang berarti bahwa  terdapat  perbedaan  yang  nyata  atau  perbedaan  secara  bermakna  terhadap penurunan suhu antar tiap kelompok perlakuan. Hasil uji lanjutan yaitu uji LSD yang digunakan untuk membandingkan ada tidaknya perbedaan bermakna tiap kelompok dapat dilihat pada Tabel 3. Hasil uji LSD menunjukkan perbedaan yang signifikan atau bermakna bila nilai signifikansi tiap kelompok perlakuan kurang dari 0,01 (≤0,01) [11] . Berdasarkan  hasil  uji  LSD,  dapat  dilihat  bahwa  kelompok  kontrol  negatif memiliki  efek  yang  berbeda  nyata  dengan  kelompok  kontrol  positif  dan  ketiga kelompok ekstrak karena memiliki nilai p< 0,01. Hal ini karena Na-CMC tidak memiliki kandungan  senyawa  yang  berkhasiat  sebagai  antipiretik  sehingga  efeknya  berbeda dengan empat kelompok lainnya. Sedangkan antara kelompok kontrol positif dengan ketiga  kelompok  ekstrak  tidak  menunjukkan  perbedaan  yang  signifikan  terhadap efektifitas  antipiretik  pada  mencit  karena  diperoleh  nilai  signifikansi  >0,01  sehingga dapat  dikatakan  bahwa  ketiga  dosis  ekstrak  tersebut  memiliki  aktivitas  antipiretik. Diantara ketiga dosis ekstrak, diketahui bahwa efek antipiretik tertinggi terdapat pada dosis  ekstrak  suruhan  dan  sambiloto  (80+20)  mg/kgBB  karena  memiliki  nilai signifikansi  yang  lebih  besar  terhadap  kontrol  positif,  sehingga  efektifitas  antipiretik parasetamol  dapat  dikatakan  sebanding  dengan  kombinasi  ekstrak  suruhan  dan sambiloto dosis (80+20) mg/kgBB.

## 4.  Kesimpulan
Kombinasi  ekstrak  herba  suruhan  ( P.  pellucida )  dan  sambiloto  ( A.  paniculata ) memiliki  potensi  sebagai  antipiretik.  Variasi  konsentrasi  (80+20)  mg/kgBB,  (40+10) mg/kgBB,  dan  (20+5)  mg/kgBB    yang  diberikan  pada  mencit  memiliki  efektivitas antipiretik dimana efek antipiretik tertinggi terdapat pada kombinasi ekstrak suruhan ( P. pellucida ) dan Sambiloto ( A. paniculata ) dosis (80+20) mg/kgBB. Adapun potensi efek antipiretik  pada  kedua  tumbuhan  tersebut  dimungkinan  karena  adanya  senyawa
metabolit sekunder yang terkandung didalamnya.

## Referensi
[1]  I. N. D. Lubis and C. P. Lubis, “Penanganan demam pada anak,” Sari Pediatri , vol.
12, no. 6, pp. 409–18, 2016. https://dx.doi.org/10.14238/sp12.6.2011.409-18 .
[2] L. Sherwood, “Human physiology from cells to systems Ninth Edition,” Appetite , vol. 20, no. 3, pp. 404–442, 2016 .
[3] I.  D.  Mawati,  “Uji  Aktivitas  Antihiperurisemia  Ekstrak  Etil  Asetat  Tanaman Suruhan (Peperomia pellucida L. Kunth) pada Tikus Putih Jantan yang Diinduksi Kafein,”  B.S.  thesis,  UIN  Syarif  Hidayatullah  Jakarta:  Fakultas  Kedokteran  dan Ilmu Kesehatan, 2017, 2017 .
[4]  F.  Putrajaya,  N.  Hasanah,  and  A.  Kurlya,  “Daya  Hambat  Ekstrak  Etanol  Daun Suruhan  (Peperomia  pellucida  l.)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri  Penyebab Jerawat  (Propionibacterium  acnes)  Dengan  Metode  Sumur  Agar,” Edu  Masda Journal , vol. 3, no. 2, pp. 123–140, 2019 . http://dx.doi.org/10.52118/edumasda.v3i2.34
[5]  A.  Nugroho,  E.  Rahardiningtyas,  D.  B.  Wicaksono  Putro,  and  R.  Wianto, “Pengaruh  Ekstrak  Daun  Sambiloto  (Andrographis  paniculata  Ness.)  terhadap Daya Bunuh Bakteri Leptospira sp.,” Media Penelitian dan Pengembangan Kesehatan , vol. 26, no. 2, pp. 77–84, 2016. http://dx.doi.org/10.22435/mpk.v26i2.5444.77-84 .
[6]  M.  A.  AL-DABBAGH,  S.  A.  SHIHAB,  and  E.  J.  KADHIM,  “EFFECTS  OF PHENOLIC  COMPOUNDS  EXTRACTED  FROM  SALVIA  FRIGIDA  ON INDUCED HYPERURICEMIA IN MICE,” Asian J Pharm Clin Res , vol. 12, no. 4, pp. 211–217, 2019. http://dx.doi.org/10.22159/ajpcr.2019.v12i4.32096 .
[7] A. Khan, M. Rahman, and S. Islam, “Antipyretic activity of Peperomia pellucida leaves in rabbit,” Turkish Journal of Biology , vol. 32, no. 1, pp. 37–41, 2008 .
[8]  N. Yunarto, H. M. A. Rossyid, and L. A. Lienggonegoro, “Effect of ethanolic leaves extract of Peperomia pellucida (L) Kunth as antimalarial and antioxidant,” Media Penelitian  dan  Pengembangan  Kesehatan ,  vol.  28,  no.  2,  pp.  123–130,  2018. https://doi.org/10.22435/mpk.v28i2.132 .
[9]  E.  S.  Simaremare,  “Skrining  fitokimia  ekstrak  etanol  daun  gatal  (Laportea decumana (Roxb.) Wedd),” PHARMACY: Jurnal Farmasi Indonesia (Pharmaceutical Journal of Indonesia) , vol. 11, no. 1, 2014. http://dx.doi.org/10.30595/pji.v11i1.855 .
[10] R.  Ikalinus,  S.  K.  Widyastuti,  and  N.  L.  E.  Setiasih,  “Skrining  fitokimia  ekstrak etanol kulit batang kelor (Moringa oleifera),” Indonesia Medicus Veterinus , vol. 4, no. 1, pp. 71–79, 2015 .
[11] N. N. Yuliani, J. Sambara, and Y. Setyarini, “Uji Efek Antipiretik Ekstrak Etanol Kulit Batang Faloak (Sterculia sp,) Pada Mencit Putih Jantan (Mus musculus) Yang Diinduksi Vaksi DPT-HB,” Jurnal Info Kesehatan , vol. 14, no. 2, pp. 1208–1226, 2016 . [12]  W.  F.  Dewatisari,  L.  Rumiyanti,  and  I.  Rakhmawati,  “Rendemen  dan  Skrining Fitokimia pada Ekstrak Daun Sanseviera sp.,” Jurnal Penelitian Pertanian Terapan , vol. 17, no. 3, pp. 197–202, 2017. https://doi.org/10.25181/jppt.v17i3.336 .
[13] T. Prashant, K. Bimlesh, K. Mandeep, K. Gurpreet, and K. Harleen, “Phytochemical screening and extraction: A review,” Internationale pharmaceutica sciencia , vol. 1, no. 1, pp. 98–106, 2011 .
[14]  A. I. Habibi, R. A. Firmansyah, and S. M. Setyawati, “Skrining fitokimia ekstrak n- heksan  korteks  batang  Salam  (Syzygium  polyanthum),” Indonesian  Journal  of
Chemical Science , vol. 7, no. 1, pp. 1–4, 2018. https://doi.org/10.15294/ijcs.v7i1.23370 .
[15]  F.  Malik,  A.  Ningsi,  M.  Bafadal,  D.  N.  Saktiani,  and  W.  Wahyuni,  “Uji  efek antipiretik ekstrak etanol buah wualae (Etlingera elatior (jack) RM Smith) terhadap mencit  jantan  (Mus  musculus  L.)  galur  balb/C,” Pharmauho  J  Farm  Sains,  dan Kesehat , vol. 4, no. 1, pp. 11–3, 2018.
http://dx.doi.org/10.33772/pharmauho.v4i1.4622 .
[16]  S.  Kalay,  “Uji  Efek  Antipiretik  Ekstrak  Etanol  Daun  Prasman  (Eupatorium Triplinerve Vahl.) Pada Tikus Jantan Galur Wistar (Rattus Norvegicus L.) Yang Diinduksi  Vaksin  DTP  HB,” PHARMACON ,  vol.  3,  no.  3,  2014. https://doi.org/10.35799/pha.3.2014.5415 .
[17]  H.  Sasongko,  S.  Sugiyarto,  N.  R.  Efendi,  D.  Pratiwi,  A.  D.  Setyawan,  and  T. Widiyani,  “Analgesic  Activity  of  Ethanolic  Extracts  of  Karika  Leaves  (Carica pubescens) In Vivo,” JPSCR: Journal of Pharmaceutical Science and Clinical Research , vol. 1, no. 2, pp. 83–89, 2016. http://dx.doi.org/10.20961/jpscr.v1i2.1938 .
[18]  H.  Wulan,  U.  R.  EM,  and  I.  Puspitaningrum,  “Uji  Efek  Analgetik  Antipiretik Ekstrak Etanol Alfalfa (Medicago sativa) pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar,”
Jurnal Ilmu Farmasi dan Farmasi Klinik , pp. 71–77, 2017.
http://dx.doi.org/10.31942/jiffk.v0i0.1347 .
[19] N.  H.  Latuconsina,  “Uji  Efektivitas  Diuretik  Ekstrak  Etanol  Biji  Salak  (Salacca Zalacca  Varietas  Zalacca  (Gaert.)  Voss)  Pada  Tikus  Putih  Jantan  Galur  Wistar (Rattus Norvegicus),” Pharmacon , vol. 3, no. 3, 2014 .