## Current Biochemistry

## CURRENT BIOCHEMISTRY
ISSN: 2355-7877
Homepage: http://biokimia.ipb.ac.id
E-mail: current.biochemistry@gmail.com
Antibacterial activity of Stichopus hermanii and Stichopus variegatus methanol extract (Aktivitas Antibakteri Ekstrak Metanol Stichopus hermanii dan Stichopus variegatus )
Hendra Susanto , Mega Safithri , Kustiariyah Tarman 2, 3
1 Department of Biochemistry, Bogor Agricultural University, Bogor, 16680, Indonesia 2 Department of Aquatic Product Technology, Faculty of Fisheries and Marine Science, Bogor Agricultural University
3 Division of Marine Biotechnology, Center for Coastal and Marine Resources Study Bogor Agricultural University
Received : 3 April 208; Accepted : 0 July 208
Corresponding author: Hendra Susanto; Departemen Biokimia, Jl. Agatis Gd. Fapet Lt. 5, Wing 5, Bogor 6680; Telp. +62820489432; E-mail: hndsusanto976@gmail.com

## ABSTRACT
Since 500 years ago sea cucumber has been used as wound healing medicine. Sea cucumbers are thought to function as a cell growth factor and have the potential as an antibacterial agent. This study aims to determine whether the methanol extract of sea cucumber has antibacterial activity against Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa so that it can be used to help diabetic wound healing of people infected with the same bacteria. The extraction method used was macera- tion with methanol to dried frozen simplicia. The simplicia was obtained by freeze drying to liquid preparation of heated fresh sea cucumber. The antibacterial activity test was performed using well diffusion method. There were no any antibacterial activity found in the two methanol extracts of sea cucumber.
Keywords : antibacterial agent, Stichopus hermanii, Stichopus variegatus
Volume 4 (2):  - , 207

## ABSTRAK
Teripang telah digunakan sebagai obat penyembuhan luka sejak 500 tahun yang lalu. Dalam penyembuhan luka, teripang diperkirakan dapat berfungsi sebagai cell growth factor dan juga ber- potensi sebagai antibakteri. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui apakah ekstrak metanol teri- pang mempunyai aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aerugi- nosa sehingga dapat digunakan untuk membantu penyembuhan luka diabetes yang terinfeksi bakteri yang sama. Metode ekstraksi yang digunakan adalah maserasi dengan pelarut metanol terhadap

## 1. PENDAHULUAN
Di  negara  berkembang,  penyakit infeksi  masih  merupakan  salah  satu  masalah kesehatan masyarakat yang penting. Salah satu obat andalan untuk mengatasi masalah tersebut adalah antimikroba antara lain antibakteri atau antibiotik,  antijamur,  antivirus,  antiprotozoa (Kemkes RI 20). Penggunaan antibiotik yang bijak  dan  rasional  dapat  mengurangi  beban penyakit  infeksi.  Sebaliknya,  penggunaan antibiotik secara luas pada manusia dan hewan yang tidak sesuai indikasi akan mengakibatkan meningkatnya  resistensi  antibiotik  secara signifikan (Kemkes RI 205). Selain penggunaan antibiotik yang bijak dan rasional perlu juga di- cari jenis senyawa baru yang dapat berfungsi se- bagai antibakteri yang akan digunakan terhadap bakteri yang resisten terhadap antibiotik. Salah satu  dari  sekian  banyak  kekayaan  hayati  yang mempunyai  potensi  sebagai  agen  antibakteri adalah teripang. Teripang emas atau Stichopus hermanii yang  telah  diolah  menjadi  air  gamat dan  minyak  gamat  secara  turun  temurun  telah dipakai sebagai obat luka dan peradangan karena diyakini mengandung cell growth factor (Sendih dan  Gunawan  2006). Stichopus  hermanii asal Labuan  Bajo  Perairan  Flores  Nusa  Tenggara Timur  yang  diekstrak  dengan  pelarut  metanol mempunyai  kandungan  senyawa  metabolit sekunder  alkaloid,  saponin  dan  triterpenoid (Zhafira  206).  Ketiga  senyawa  tersebut
berpotensi  sebagai  antibakteri  (Cushnie et  al . 204;  Irfan et al . 204; Maatalah et al . 202).
Penelitian sebelumnya tentang aktivitas antimikroba  teripang  telah  banyak  dilakukan diantaranya  oleh  Sarhadizadeh et  al .  (204), Rasyid  (202),  Nimah et  al .  (202)  dan Roihanah et  al .  (202).  Sarhadizadeh et  al .
(204) menemukan adanya aktivitas antijamur Aspergillus niger dari Stichopus hermanii asal teluk Persia yang diekstrak dengan pelarut etil asetat,  metanol  dan  air-metanol,  sedangkan Rasyid (202) mengidentifikasi adanya aktivitas antibakteri ekstrak metanol teripang yang sama dengan  Sarhadizadeh et  al .  (204)  yaitu  dari perairan  Lampung  Selatan  terhadap Bacilus subtilis , Vibrio  lector dan Staphylococcus aureus . Adapun Nimah et al . (202) melakukan penelitian  terhadap  jenis    teripang  yang  lain yaitu  teripang  pasir  ( Holothuria  scabra )  asal perairan Rembang, ekstrak metanol dan ekstrak etil  asetatnya  diketahui  dapat  menghambat pertumbuhan Pseudomonas aeruginosa . Begitu  pula  dengan  Roihanah et  al .  (202), menggunakan lima pelarut yang berbeda yaitu air,  metanol,  etanol  dan  n-heksan,  ekstrak teripang Holothuria  sp . diketahui  mempunyai daya  hambat  terhadap  pertumbuhan Vibrio harveyi .
Pada penelitian ini dilakukan pengujian aktivitas antibakteri ekstrak metanol Stichopus hermanii asal  Labuan  Bajo  Perairan  Flores
Susanto et al - Antibakteri Ekstrak Metanol Stichopus hermanii dan Stichopus variegatus
simplisia teripang kering beku. Simplisia tersebut diperoleh dengan cara melakukan kering beku se- diaan cair hasil pemanasan teripang segar. Uji aktivitas antibakteri dilakukan menggunakan metode sumuran. Hasilnya tidak ditemukan adanya aktivitas antibakteri dari kedua ekstrak metanol teripang tersebut.
Kata kunci : agen antibakteri, Stichopus hermanii, Stichopus variegatus
Nusa Tenggara Timur terhadap Staphylococcus aureus dan Pseudomonas  aeruginosa ,  kedua bakteri  tersebut  menurut  Banu et  al .  (205) dan  Shashikala et  al .  (206)  merupakan bakteri  terbanyak  menghasilkan  biofilm  pada luka  diabetes,  sehingga  dengan  diketahuinya aktivitas  antibakteri  tersebut,  dapat  diketahui pula  potensinya  sebagai  antibakteri  pada penyembuhan  luka  diabetes,  selain  sebagai antidiabetes  melalui  penghambatan  terhadap aktivitas enzim α-Glukosidase (Mariyanti 2017) dan antioksidan melalui penghambatan terhadap DPPH  (Zhafira  206)  dan  malonilaldehida (Fajarwati 207). Adapun sebagai pembanding dilakukan  pula  penelitian  serupa  terhadap Stichopus variegatus asal Perairan Lampung.

## 2. METODOLOGI
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah Stichopus  hermanii asal Labuan  Bajo  Perairan  Flores  Nusa  Tenggara Timur  dan Stichopus  variegatus asal  Perairan Lampung, keduanya diperoleh dari Pusat Kajian Sumberdaya Pesisir dan Lautan (PKSPL) IPB, Levofloxacin  (Novell),  Sagestam/ Gentamicin Sulfate Cream (Sanbe), S taphylococcus aureus (IPBCC  B666), Pseudomonas  aeruginosa (IPBCC662), nutrient agar (Merck), Mueller- Hinton agar (Hi-Media), akuades, larutan H 2 SO 4 0.36N,  larutan  BaCl 2 •2H 2 O  0.048N,  larutan salin 0.85 %, larutan NaOH 0. M, dan alkohol 70 %.
Peralatan  yang  digunakan  adalah alat freeze  dry (EYELA  FDU  200), rotary evaporator ,  oven  (Memert),  neraca  analitik (Shimadzu), otoklaf (All America 50x), laminar air  flow,  inkubator  (Memert  IN  0),  vortex
(Biosan), mikropipet (Socorex), glass spreader , dan peralatan gelas.

## Tahapan Penelitian Ekstraksi Sampel
Ekstraksi  teripang  dilakukan  meng- gunakan  pelarut  metanol  mengikuti  Zhafira (206)  namun  tidak  dilakukan  pengadukan secara  terus  menerus  selama  proses  maserasi. Langkah  pertama  dibuat  sediaan  cair  teripang mengikuti  Mu’allimah  (207).  Teripang  segar dibersihkan  dan  dipotong  kecil  kemudian dipisahkan  dari  bagian  yang  tidak  diinginkan. Disiapkan  panci  dengan  nyala  api  kecil,  lalu dimasukkan potongan teripang dan dipanaskan selama  ±3  menit.  Tahap  selanjutnya,  sediaan cair teripang yang didapatkan dilakukan kering beku pada suhu -50 °C selama 50 jam sampai semua  air  yang  ada  pada  sediaan  menguap. Sediaan  teripang  kering  dimaserasi  dengan pelarut  metanol  dengan  perbandingan  sediaan kering  dan  pelarut  sebesar  :5.  Maserasi dilakukan  pada  suhu  kamar  selama  48  jam dan  sesekali  dilakukan  pengadukan.  Proses maserasi  dilakukan  beberapa  kali  sampai didapatkan  maserat  berwarna  bening.  Maserat yang diperoleh dipekatkan menggunakan rotary evaporator pada suhu 40 °C sampai berbentuk pasta  dan  dipastikan  tidak  terdapat  pelarut yang  tertinggal.  Pembuatan  sediaan  cair  dan maserasi  dilakukan  di  UPTD  Laboratorium Kesehatan Daerah (Labkesda) Dinas Kesehatan Kota Bogor sedangkan proses kering beku dan pemekatan maserat dilakukan di Puslit Biologi LIPI  Cibinong  dan  Laboratorium  Pusat  Antar Universitas IPB.

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Pengujian  aktivitas  antibakteri  dilaku- kan  di  UPTD  Labkesda  Dinas  Kesehatan Kota  Bogor  menggunakan  metode  sumuran mengikuti Balouiri et al . (206) dan modifikasi Chen et  al . (206). Bioindikator yang diguna- kan  adalah Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas  aeruginosa yang  diperoleh  dari IPB  Cultur  Collection  (IPBCC).  Levofloxacin dan salep Sagestam ( Gentamicin Sulfate Cream ) digunakan  sebagai  pembanding  antibiotik. Levofloxacin  dan  gentamisin  dipilih  karena mempunyai  spektrum  yang  dapat  membunuh bakteri Gram positif dan bakteri Gram negatif. Sampel  uji  yang  dipakai  adalah  sediaan  cair, sediaan  kering  dengan  konsentrasi  50000  μg/ mL  dan  ekstrak  metanol  teripang  yang  telah ditambahkan akuades steril dengan perbandingan ekstrak dan akuades sebesar 5:. Perbandingan ekstrak  metanol  dan  akuades  steril  yang digunakan  dimaksudkan  agar  ekstrak  tersebut dapat dijadikan sediaan oles (topikal) yang akan digunakan pada penyembuhan luka diabetes.
Sebanyak 20 μL larutan suspensi bakteri yang setara dengan larutan baku Mc. Farland 0.5 ditambahkan  ke  dalam  media Mueller-Hinton agar,  diratakan  menggunakan glass  spreader dan  dibiarkan  selama  5  menit.  Pembuatan sumuran  dilakukan  menggunakan  tip  steril. Selanjutnya sebanyak 20 μL sampel uji, kontrol positif  Levofloxacin  500  μg/mL  dan  akuades
steril (kontrol negatif) dipipet dan diteteskan ke dalam sumur-sumur yang telah dibuat. Sampel uji ekstrak metanol yang  digunakan sebanyak 0.045 g dengan salep Sagestam sebagai kontrol positif    dan  akuades  sebagai  kontrol  negatif. Selanjutnya  diinkubasi  pada  suhu  35±2  °C selama 8 jam dan dihitung diameter zona be- ning  yang  dihasilkan  menggunakan  penggaris. Semua  kegiatan  pengujian  dilakukan  secara aseptis.

## 3. HASIL

## Rendemen Ekstrak Metanol
Hasil  ekstraksi  metanol  teripang disajikan  dalam  Tabel  . Stichopus  hermanii menghasilkan  rendemen  ekstrak  metanol terhadap teripang segar sebesar 0.38 %,  lebih banyak dibandingkan Stichopus variegatus yang hanya menghasilkan rendemen sebesar 0.3 %. Begitu pula persentase ekstrak metanol terhadap sediaan kering, sediaan kering terhadap sediaan cair  dan  sediaan  cair  terhadap  teripang  segar, Stichopus  hermanii menghasilkan  rendemen yang  lebih  banyak  dibandingkan Stichopus variegatus . Stichopus  hermanii menghasilkan rendemen  ekstrak  metanol  terhadap  sediaan kering, sediaan kering terhadap sediaan cair dan sediaan  cair  terhadap  teripang  segar  berturut- turut  sebesar  37.58  %,  2.5  %  dan  68.86  %, sedangkan Stichopus  variegatus menghasilkan rendemen  ekstrak  metanol  terhadap  sediaan

## Tabel   Rendemen ekstrak metanol teripang
Rendemen Stichopus hermanii Stichopus variegatus Sediaan cair-terhadap teripang segar (%) 68.86 65.32 Sediaan kering-terhadap sediaan cair (%) 2.5 .06 Ekstrak methanol-terhadap sediaan kering (%) 37.58 7.6 Ekstrak methanol-terhadap teripang segar (%) 0.38 0.3 Nilai merupakan nilai rata-rata (n=2)
Susanto et al - Antibakteri Ekstrak Metanol Stichopus hermanii dan Stichopus variegatus
kering  sebesar  7.6  %,  rendemen  sediaan kering  terhadap  sediaan  cair  sebesar  .06  % dan sediaan cair terhadap teripang segar sebesar 65.32 %.

## Aktivitas Antibakteri
Pengujian  aktivitas  antibakteri  sediaan cair, sediaan kering  dan ekstrak  metanol Sticho- pus hermanii dan Stichopus variegatus terha- dap Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas aureus menunjukkan  tidak  ditemukan  adanya aktivitas  antibakteri  pada  semua  sampel  terse- but,  sedangkan  Levofloxacin  500  μg/mL  yang digunakan sebagai kontrol positif pada pengu- jian aktivitas antibakteri sediaan cair dan kering teripang  mempunyai  zona  hambat  terhadap Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas aeruginosa masing-masing sebesar 27.83 ± 0.5 mm dan 2.33 ± 0.8 mm. Begitu pula dengan pengujian aktivitas antibakteri ekstrak metanol,
kontrol  positif    berupa  Sagestam  ( Gentamicin Sulfate  Cream )  menghasilkan  zona  hambat sebesar 2.38 ± 0.9 mm untuk Staphylococcus aureus dan 8.8 ± . mm untuk Pseudomonas aeruginosa .  Adapun  akuades  yang  digunakan sebagai  kontrol  negatif  pengujian  antibakteri sediaan  cair,  sediaan  kering  maupun  ekstrak metanol  teripang,  tidak  menghasilkan  zona hambat terhadap kedua bakteri uji (Tabel 2 dan Tabel 3 serta Gambar , Gambar 2 dan Gambar 3).

## 4. PEMBAHASAN

## Rendemen Ekstrak Metanol
Secara  umum  sediaan  obat  atau  suple- men  teripang  yang  dipasarkan  adalah  dalam bentuk  cair  dan  kering  yang  pengolahannya dilakukan oleh masyarakat dan industri farmasi (Suryaningrum 2008). Sampel teripang pada pe-

## Tabel 2  Aktivitas antibakteri sediaan cair dan kering
Sampel Uji Zona Hambat (mm) Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa Levofloxacin 500 μg/mL (kontrol positif) 27.83 ± 0.5 2.33 ± 0.8 Akuades (kontrol negatif) 0 ± 0.0 0 ± 0.0 Sediaan cair Stichopus hermanii 0 ± 0.0 0 ± 0.0 Sediaan cair Stichopus variegatus 0 ± 0.0 0 ± 0.0 Sediaan kering Stichopus hermanii 50000 μg/mL 0 ± 0.0 0 ± 0.0 Sediaan kering Stichopus variegatus 50000 μg/mL 0 ± 0.0 0 ± 0.0
Nilai dinyatakan dalam rata-rata ± SD (n=4)
Tabel 3  Aktivitas antibakteri ekstrak metanol
Sampel Uji Zona Hambat (mm) Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa Sagestam (kontrol positif) 2.38 ± 0.9 8.8 ± . Akuades (kontrol negatif) 0 ± 0.0 0 ± 0.0 Ekstrak metanol Stichopus hermanii 0 ± 0.0 0 ± 0.0 Ekstrak metanol Stichopus variegatus 0 ± 0.0 0 ± 0.0
Nilai dinyatakan dalam rata-rata ± SD (n=4)
nelitian ini dibuat menjadi sediaan cair dengan cara  melakukan  pemanasan  terhadap  daging teripang.  Sediaan  cair  tersebut  dihilangkan airnya dengan cara freeze dry sehingga didapat- kan  sediaan  kering  beku.  Simplisia  inilah yang  selanjutnya  dilakukan  ekstraksi  dengan tujuan agar komponen aktif dari teripang dapat diperoleh  sehingga  lebih  berkhasiat  ketika dipakai  sebagai  sediaan  obat  daripada  sediaan cair maupun sediaan keringnya.
Pemilihan metanol sebagai pelarut dalam proses  ekstraksi  dimaksudkan  agar  semakin
banyak  jumlah  komponen  aktif  yang  dapat ditarik.  Menurut  Saifudin  (204)  selain  etanol 70  %,  dan  etanol  96  %,  metanol  merupakan salah  satu  pelarut  utama  dalam  ekstraksi simplisia yang memiliki extracting power (daya ekstraksi) yang luas sehingga semua metabolit sekunder diperoleh melalui tiga kali maserasi.
Rendemen  ekstrak  metanol Stichopus hermanii terhadap  sediaan  kering  yang  di- hasilkan  sebesar  37.58  %  tidak  jauh  berbeda dengan  yang  didapatkan  oleh  Zhafira  (206) yang  melakukan  ekstraksi  terhadap Stichopus
Gambar   Zona hambat sediaan cair teripang  terhadap Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa Akuades (kontrol negatif) Levofloxacin 500 μg/mL (kontrol positif) Sediaan cair
S. variegatus
Sediaan cair
S. hermanii Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa
Gambar 2  Zona hambat sediaan kering teripang  terhadap Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa
Akuades (kontrol negatif) Levofloxacin 500 μg/mL (kontrol positif)
Sediaan kering
S. variegatus 50000 μg/mL Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa Sediaan kering S. hermanii
50000 μg/mL
Susanto et al - Antibakteri Ekstrak Metanol Stichopus hermanii dan Stichopus variegatus
hermanii yang berasal dari perairan yang sama juga dengan pelarut yang sama pula, rendemen yang  dihasilkannya  sebanyak  26.87%.  Perbe- daan tersebut selain dimungkinkan merupakan variasi jumlah komponen aktif yang terkandung dalam  teripang  yang  berasal  dari  spesies  dan perairan asal yang sama, juga akibat pengaruh pengadukan  selama  proses  maserasi,  dimana pada  penelitian  ini  pengadukan  tidak  dilaku- kan  secara  kontinyu.  Pengadukan  merupakan faktor  penting  yang  mempengaruhi  ekstraksi selain ukuran partikel dan pelarut karena dapat berpengaruh pada kelarutan dan waktu kontak komponen yang akan diekstraksi (Dewi 2008).
Hasil  ekstraksi  kedua  jenis  teripang pada penelitian ini lebih kecil dibandingkan eks- traksi yang dilakukan Nimah et al . (202) yang mendapatkan  ekstrak  metanol  teripang  pasir ( Holothuria scabra ) sebanyak 023 mg dari 00 g  teripang  segar  yang  digunakan  atau  sebesar .02 %. Perbedaan jenis simplisia, jenis dan asal teripang yang digunakan diduga menyebabkan tidak samanya ekstrak yang dihasilkan.
Tingginya  rendemen  ekstrak  metanol Stichopus hermanii dibanding Stichopus varie-
gatus yaitu  sebesar  0.38  %  untuk Stichopus hermanii dan  0.3  % Stichopus  variegatus , menjadikan Stichopus  hermanii atau  teripang emas  lebih  potensial  untuk  dimanfaatkan. Stichopus  hermanii juga  telah  dimanfaatkan sejak  lama  sebagai  bahan  pangan  dan  obat- obatan  di  berbagai  negara,  baik  Asia,  Afrika maupun  Pasifik,  misalnya  di  Pulau  Langkawi Malaysia,  pemanfaatan  air  gamat  dan  minyak gamat untuk digunakan sebagai obat tradisional untuk  mengobati  luka  dan  peradangan,  luka lambung,  meningkatkan  vitalitas  tubuh,  dan penyembuhan ibu yang habis melahirkan sudah dikenal sejak 500 tahun yang lalu (Sendih dan Gunawan 2006; Suryaningrum 2008).

## Aktivitas Antibakteri
Hasil  pengujian  aktivitas  antibakteri ekstrak  metanol Stichopus  hermanii dan Stichopus  variegatus terhadap  isolat Pseudo- monas aeruginosa dan Staphylococcus  aureus pada  media Mueller-Hinton  agar tidak  meng- hasilkan zona hambat. Begitu pula pada sediaan cair  dan  sediaan  keringnya.  Tidak  adanya aktivitas antibakteri pada sediaan teripang cair
Gambar 3  Zona hambat ekstrak metanol teripang terhadap Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa Akuades (kontrol negatif) Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa Salep Sagestam (kontrol positif) Ekstrak metanol S. variegatus Ekstrak metanol S. hermanii
dan sediaan teripang kering diduga disebabkan kecilnya  konsentrasi  metabolit  sekunder  yang ada  pada  simplisia.  Bobot  molekul  obat  yang kecil  menyebabkan  diperlukannya  penyarian dan  pemurnian  senyawa  metabolit  sekunder dari  tumbuhan,  bakteri  atau  jamur  (Saifudin 204).  Zona  hambat  yang  tidak  dihasilkan pada  sampel  uji  hasil  ekstraksi  metanol menunjukkan konsentrasi yang rendah dari se- nyawa metabolit sekunder dalam menghambat pertumbuhan Pseudomonas aeruginosa maupun Staphylococcus  aureus ,  sebagai  perbandingan senyawa  metabolit  sekunder  ekstrak  metanol teripang Stichopus hermanii hasil uji fitokimia yang  dilakukan  oleh  Zhafira  (206)  adalah alkaloid,  saponin  dan  triterpenoid.  Cushnie et al .  (204)  mengidentifikasi  setidaknya  ada  0 jenis  alkaloid  yang  sangat  berpotensi  sebagai antimikroba,  enam  jenis  diantaranya  berfungsi sebagai  antibakteri  Gram  negatif  maupun Gram  positif.    Satyanarayana et  al .  (202) mengidentifikasi triterpenoid yang diekstrak dari daun T.  Procumbens mempunyai  daya  hambat terhadap Staphylococcus  aureus ,  sedangkan menurut  Irfan et  al. (204)  triterpenoid  yang diisolasi dari Sphaeranthus indicus . L berfungsi sebagai  antibakteri  terhadap Pseudomonas aeruginosa dan  menghambat  pertumbuhan Staphylococcus  aureus .  Begitu  pula  dengan saponin yang diekstrak dari Anabasis articulata mempunyai zona hambat terhadap pertumbuhan bakteri  sebesar  6.  mm  untuk Pseudomonas aeruginosa dan 3.2 mm untuk Staphylococcus aureus (Maatalah et al . 202).
Ekstrak  metanol  teripang  pasir ( Holothuria  scabra )  asal  Perairan  Rembang pada  konsentrasi  1500  μg/mL  ekstrak  dapat menghambat  pertumbuhan Pseudomonas aeruginosa sebesar 5.7 ± 0.58 mm dan meng-
hambat  pertumbuhan Bacilus  cereus dengan zona hambat sebesar 2.3 ± 0.58 mm (Nimah et al .,  202),  sedangkan  ekstrak  metanol  dengan konsentrasi 18 μg/mL dari Stichopus hermanii asal  Teluk  Persia  tidak  dapat  menghambat pertumbuhan Pseudomonas aeruginosa walau- pun pada konsentrasi tersebut dapat menghambat mikroba Aspergillus niger dengan zona hambat sebesar 38 mm (Sarhadizadeh et al . ,204).
Sarhadizadeh et al . (204) juga menguji aktivitas  antibakteri  ekstrak  metanol  terhadap Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeru- ginosa ,  keduanya  tidak  menghasilkan  zona hambat. Penelitian aktivitas antibakteri ekstrak metanol  teripang  terhadap Staphylococcus aureus juga  dilakukan  oleh  Rasyid  (202). Ekstrak  metanol Stichopus  hermanii asal Perairan  Lampung  Selatan  mempunyai  zona hambat terhadap Staphylococcus aureus sebesar 7  mm  atau  24.4  %  terhadap  kontrol  positif ampisilin.
Adanya  perbedaan  hasil  pengujian aktivitas  antibakteri  ekstrak  metanol  teripang dapat  disebabkan  oleh  beberapa  faktor, diantaranya  metoda  ekstraksi  dan  konsentrasi ekstrak  yang  digunakan.  Ekstraksi  yang dilakukan  pada  penelitian  ini  berupa  maserasi terhadap  simplisia  sediaan  teripang  kering yang  berasal  dari  proses  kering  beku  ( freeze dry )  sediaan  cair  hasil  pemanasan  teripang segar.  Ekstrak  metanolnya  tidak  menghasilkan aktivitas  antibakteri  terhadap Pseudomonas aeruginosa maupun Staphylococcus  aureus . Hal  tersebut  berbeda  dengan  Rasyid  (202) yang  menemukan  adanya  aktivitas  antibakteri terhadap Staphylococcus  aureus dari  ekstrak methanol  dengan  cara  maserasi  tanpa  proses pemanasan,  dimana  maserasi  dilakukan  terha- dap  simplisia  teripang  segar  dan  dilanjutkan
Susanto et al - Antibakteri Ekstrak Metanol Stichopus hermanii dan Stichopus variegatus
sentrifugasi maseratnya. Begitu pula Nimah et al .  (202)  memperoleh  adanya  zona  hambat terhadap Pseudomonas aeruginosa dari ekstrak metanol hasil maserasi simplisia teripang segar dilanjutkan evaporasi pada suhu 38 °C. Adanya tahap pemanasan pada proses ekstraksi diduga berpotensi  menghilangkan  sebagian  metabolit sekunder  yang  terkandung  dalam  sampel teripang.  Menurut Saifudin (204) penggunaan suhu yang terlalu tinggi beresiko menyebabkan degradasi  konsituen  yang  terdapat  dalam simplisia  sehingga  direkomendasikan  untuk menggunakan suhu di bawah 60 °C. Konsentrasi ekstrak metanol yang digunakan Sarhadizadeh et  al .  (204)  yang  jauh  lebih  kecil  dibanding- kan  konsentrasi  ekstrak  yang  digunakan  oleh Nimah et  al .  (202),  sehingga  diduga  ekstrak tersebut  tidak  bersifat  bakteriostatik  terhadap Pseudomonas  aeruginosa ,  walaupun  dengan semakin  tinggi  konsentrasi  sampel  uji  akan menyebabkan  ukuran  molekul  akan  menjadi lebih  besar  yang  ditandai  dengan  bentuk  fisik larutan  menjadi  lebih  kental,  hal  tersebut menyebabkan  proses  difusi  larutan  uji  pada media  agar  menjadi  terhambat  sehingga  zona hambat yang dihasil lebih sedikit (Nurainy et al . 2008).
Faktor  lain  yang  mempengaruhi kandungan  metabolit  sekunder  senyawa  anti- bakteri adalah spesies dan asal bahan hayati ter- sebut. Berbeda dengan metabolit primer (asam amino,  nukelotida,  gula  dan  lipida)  dijumpai hampir pada semua tumbuhan,  metabolit sekun- der  hanya  dijumpai  pada  satu  spesies  atau sekelompok  spesies  tertentu  (Setyorini  dan Yusnawan 206). Ekstrak metanol teripang pada penelitian Nimah et al . (202) yang mempunyai aktivitas  antibakteri  terhadap Pseudomonas
aeruginosa merupakan  jenis  teripang  pasir ( Holothuria scabra ), sedangkan pada penelitian ini aktivitas antibakteri terhadap Pseudomonas aeruginosa diuji menggunakan ekstrak metanol teripang Stichopus  hermanii dan Stichopus variegatus . Bahan hayati yang berasal dari dae- rah yang berbeda menyebabkan kandungan hara tanah  yang  tidak  sama,  perbedaan  kandungan hara  tanah  tersebut  menyebabkan  perbedaan jenis metabolit sekunder yang dihasilkan (Salim et  al. 206).  Hal  inilah  yang  menyebabkan perbedaan  hasil  uji  aktivitas  antibakteri  yang dilakukan, pada penelitian ini dan Sarhadizadeh et  al .  (204)  tidak  ditemukan  zona  hambat dari  ekstrak  metanol  terhadap Staphylococcus aureus , sedangkan Rasyid (202) mendapatkan hasil  sebaliknya,  walaupun  ketiga  penelitian tersebut  menggunakan  ekstrak  metanol  jenis teripang yang sama yaitu Stichopus hermanii .
Pada  penelitian  ini  ekstrak  metanol Stichopus hermanii tidak menghasilkan aktivitas antibakteri  terhadap Pseudomonas  aeruginosa dan Staphylococcus  aureus walaupun  ekstrak dari  jenis  teripang,  asal  dan  metoda  ekstraksi yang sama diketahui mempunyai potensi sebagai antidiabetes  melalui  penghambatan  enzim  α- Glukosidase (Mariyanti 207) dan antioksidan melalui penghambatan terhadap DPPH (Zhafira 206)  dan  malonilaldehida  (Fajarwati  207), sehingga  suatu  spesies  teripang  belum  tentu berpotensi sebagai antibakteri meski mempunyai potensi sebagai antioksidan dan antidiabetes.
Ekstraksi  metanol Stichopus  hermanii menghasilkan  rendemen  sebesar  0.5  %,  se- dangkan Stichopus  variegatus menghasilkan sebesar  0.2  %.  Berdasarkan  uji  aktivitas antibakteri  menggunakan  sediaan  cair,  sedia- an  kering  maupun  ekstrak  metanol  kedua
teripang  tersebut  tidak  menghasilkan  aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa .

## 5. UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terimakasih disampaikan kepada Pusat  Kajian  Sumberdaya  Pesisir  dan  Lautan (PKSPL)  Institut  Pertanian  Bogor  dan  UPTD Labkesda  Dinas  Kesehatan  Kota  Bogor  yang telah memberikan fasilitas dalam pelaksanaaan penelitian ini.

## 6. DAFTAR PUSTAKA
Balouiri M, Sadiki M, Ibnsouda SK. 206. Method of in vitro evaluating antimicrobial activity: a review. Journal of Pharmaceutical Analysis
6:7-79
Banu  A,  Hassan  MMN,  Rajkumar  J,  Srinivasa  S.
205. Spectrum of bacteria associated with diabetic  foot  ulcer  and  biofilm  formation: A  prospective  study. Australasian  Medical Journal 8(9):280–285
Chen Mei X, Alexander Kenneth S, Baki Gabriella. 206.  Formulation  and  evaluation  of antibacterial  creams  and  gels  containing metal ions for topical application. Journal of Pharmaceutics 206:-0
Cushnie TPT, Cushnie B, Lamb AJ. 204. Review- Alkaloids:  An  overview  of  their  antibac- terial, antibiotic-enhancing and antivirulence activities.  I nternational Journal of Antimicrobial Agents 44:377-386
Dewi  KH.  2008.  Kajian  ekstraksi  steroid  teripang pasir ( Holothuria scabra J ) sebagai sumber testosteron  alami.  [Disertasi].  Bogor  (ID)  : Institut Pertanian Bogor
Fajarwati  Y.  207.  Aktivitas  penghambatan malondialdehida  (MDA)  secara in  vitro dan  toksisitas  ekstrak  metanol Stichopus hermanii dan Spirulina platensis . [Skripsi]. Bogor (ID) : Institut Pertanian Bogor
Irfan M, Ahmed S, Sharma M. 204. Antimicrobial activity  of  terpenoids  from Sphaeranthus indicus .  L. A sian  Journal  of  Plant  Science and Research 4():-6
[Kemkes  RI]  Kementerian  Kesehatan  Republik Indonesia. 205. Penggunaan antibiotik bijak dan rasional kurangi beban penyakit infeksi.
[Internet]. [diunduh 208 Maret 7]. Tersedia pada: http://www.depkes.go.id/article/ view/5080000/penggunaan-antibiotik- bijak-dan-rasional-kurangi-beban-penyakit- infeksi.html
[Kemkes  RI]  Kementerian  Kesehatan  Republik Indonesia.  20.  Peraturan  Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 2406/ MENKES/PER/XII/20  tentang  Pedoman Umum Penggunaan Antibiotik.
Maatalah  BM,  Bouzidi  NK,  Bellahouel  S,  Merah B, Fortas Z, Soulimani R, Saidi S, Derdour A.  202.  Antimicrobial  activity  of  the alkaloids  and  saponin  extracts  of Anabasis articulata . Journal  of    Biotechnology  and Pharmaceutical Research 3(3): 54-57
Mariyanti S. 207. Kandungan kimia dan aktivitas penghambatan    alfaglukosidase    secara in  vitro dari  ekstrak  metanol Stichopus hermanii dan Spirulina platensis . [Skripsi]. Bogor (ID) : Institut Pertanian Bogor
Mu’allimah  I.  207.  Aktivitas  antihiperglikemik sediaan pada teripang ( Stichopus hermanii ) dan  spirulina  ( Spirulina  platensis )  tikus putih Sprague  Dawley yang  diinduksi streptozotosin. [Tesis]. Bogor (ID) : Institut Pertanian Bogor
Nimah S, Widodo FA, Agus T. 202. Uji bioaktivitas ekstrak  teripang pasir ( Holothuria scabra ) terhadap  bakteri Pseudomonas  aeruginosa dan Bacillus  cereus . Jurnal  Perikanan (2):-9
Nurainy  F,  Rizal  S,  Yudiantoro.  2008.  Pengaruh konsentrasi  kitosan  terhadap  aktivitas antibakteri  dengan  metode  difusi  agar (sumur). Jurnal Teknologi Industri dan Hasil Pertanian 3(2):7-25
Susanto et al - Antibakteri Ekstrak Metanol Stichopus hermanii dan Stichopus variegatus
Rasyid  A.  202  Identifikasi  senyawa  metabolit sekunder  serta  uji  aktivitas  antibakteri dan  antioksidan  ekstrak  metanol  teripang Stichopus  hermanii.  Jurnal  Ilmu  dan Teknologi Kelautan Tropis 4(2):360-368
Roihanah  S,  Sukoso, Andayani  S.  202. Aktivitas antibakteri  ekstrak  teripang Holothuria  sp . terhadap  bakteri Vibrio  harveyi secara in vitro . Journal of Experimental Life Science 2():-5
Saifudin A. 204. Senyawa Alam Metabolit Sekunder Teori, Konsep, dan Teknik Pemurnian Ed.1 .
Deepublish. Yogyakarta
Salim M, Yahya, Sitorus H, Ni’mah T, Marini. 206. Hubungan  kandungan  hara  tanah  dengan produksi  senyawa  metabolit  sekunder  pada tanaman  duku  ( Lansium  domesticum  Corr var Duku ) dan potensinya sebagai larvasida.
Jurnal Vektor Penyakit 0():-8
Sarhadizadeh N, Afkhami M, Ehsanpour M. 204.
Evaluation  bioactivity  of  a  sea  cucumber, Stichopus  hermanni from  Persian  Gulf.
European Journal of Experimental Biology 4():254-258
Satyanarayana  SB,  Kingsley  J,  Sankaranarayanan S,  Bama  P.  202.  Antibacterial  activity  of different  phytochemical  extracts  from  the leaves  of T.  Procumbens Linn.:  identifica- tion  and  mode  of  action  of  the  terpenoid compound  as  antibacterial. International Journal  of  Pharmacy  and  Pharmaceutical Sciences 4():557-564
Sendih  S,  Gunawan.    2006. Keajaiban  Teripang: Penyembuh Mujarab dari Laut. Agromedia Pustaka.  Jakarta
Setyorini  SD,  Yusnawan  E.  206.  Peningkatan kandungan  metabolit  sekunder  tanaman aneka kacang sebagai respon cekaman biotik. Iptek Tanaman Pangan (2):67-74
Shashikala V. 206. Diabetic foot ulcers and biofilm formation-  The  Culprits. International Journal  of  Biomedical  and  Advance  Re- search 7(9):428-433
Suryaningrum  TD.  2008.  Teripang:  Potensinya sebagai  bahan  nutraceutical  dan  teknologi pengolahannya. Squalen 3(2): 63-69
Zhafira  AG.  206.  Aktivitas  antioksidan  ekstrak metanol teripang emas ( Stichopus hermanii ) dan Spirulina  platensis menggunakan Metode  DPPH.  [Skripsi].  Bogor  (ID)  : Institut Pertanian Bogor
.