## ANALISIS PROKSIMAT, AKTIVITAS ANTIOKSIDAN, DAN KOMPOSISI PIGMEN Ulva lactuca L. DARI PERAIRAN PANTAI KUKUP

## (Proximate analysis, antioxidant activity, and pigmen composition of Ulva lactuca L. from kukup beach)
Junet Franzisca da Costa a* , Windu Merdekawati b , Ferly Rambu Otu a
a Program Studi Gizi,Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan,Universitas Kristen Satya Wacana b Program Studi Teknologi Pangan, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan,Universitas Kristen Satya Wacana
* Penulis korespondensi Email: junetdacosta@staff.uksw.edu

## ABSTRACT
Seaweed has been widely consumed in Asia include Indonesia, especially coastal community. Seaweed has nutrients and non-nutrients compound that benefit health. Unfortunatelly, information about the potential of edible seaweed is limited. The objective  of this study is to analyze  the total nutrient levels (proximate), antioxidant activity, and pigment composition of Ulva lactuca L. that grow abundantly in Pantai Kukup, Gunung Kidul regency, Central Java. Ulva lactuca L. had 11.53% of water content, 2.94% of  ash content, 5.17% of fat, 17.43% of protein, and 62.93% of carbohydrate. Antioxidant test by using DPPH found that inhibition concentration (IC 50 ) of Ulva lactuca L. was 88890.55 ppm. Ulva lactuca L. contain chlorophyll a, b, and c, neoxanthin, anteraxanthin, dinoxanthin, flavoxanthin, micronone, and vaucheriaxanthin and other unidentified pigments. Ulva lactuca L. has high carbohydrate and protein with low lipid, which is potential as functional food material. Moreover, Ulva lactuca L. showed antioxidant activity, which is prospective in health, pharmaceutical, cosmetic.
Keywords: antioxidant activity, natural pigment, Ulva lactuca L.

## ABSTRAK
Rumput laut telah banyak dikonsumsi di Asia termasuk Indonesia khususnya masyarakat pesisir. Rumput laut kaya akan zat gizi dan non gizi yang bermanfaat untuk menunjang kesehatan tubuh.  Akan tetapi, informasi mengenai potensi rumput laut yang biasa dimakan masih terbatas. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui kadar nutrisi total (proksimat), aktivitas antioksidan, dan komposisi pigmen rumput laut hijau Ulva lactuca L. yang tumbuh di perairan pantai Kukup, kabupaten Gunung Kidul, Jawa Tengah dan dikonsumsi oleh masyarakat di sekitar pantai. Ulva lactuca L. memiliki kadar air 11,53%, kadar abu 2,94%, lemak 5,17,% protein 17,43%, dan karbohidrat 62,93%. Uji  aktivitas  antioksidan  dengan  DPPH menunjukkan konsentrasi penghambatan 50% (IC 50 ) Ulva lactuca L. yaitu 88890.55 ppm. Ulva lactuca L. mengandung pigmen korofil a , b , dan c , neoxantin, anteraxantin, dinoxantin, flavoxantin, micronone, dan vaucheriaxantin dan pigmen lain yang belum teridentifikasi. Ulva lactuca L. memiliki kadar karbohidrat dan protein yang cukup tinggi tetapi rendah lemak sehingga  berpotensi  sebagai bahan baku makanan fungsional.  Aktivitas antioksidan pada Ulva lactuca L.  prospektif  untuk dikembangkan dalam bidang kesehatan, farmasi, dan kosmetik.
Kata kunci : aktivitas antioksidan, pigmen alami, Ulva lactuca L.

## PENDAHULUAN
Rumput laut banyak diteliti pada beberapa dekade terakhir karena mengandung zat-zat gizi dan non gizi yang bermanfaat bagi manusia, baik sebagai sumber bahan makanan maupun sebagai bahan baku pada industri pangan, farmasi, dan kosmetik. Sejak dulu rumput laut telah dimanfaatkan baik sebagai sumber makanan, obat-obatan, bahan baku industri, pupuk, dan makanan hewan ternak. Perancis dan Norwegia mulai merintis pemanfaatan rumput laut untuk pembuatan gelas sejak abad ke-17 (Delaney et al. , 2016), sedangkan Cina dan Jepang sudah mulai memanfaatkan nilai ekonomis rumput laut sejak tahun 1670 sebagai bahan baku obat-obatan, makanan tambahan, kosmetika, pakan ternak, dan pupuk organik (Suparmi dan Sachri, 2009), bahkan temuan arkeologi Jepang menginformasikan bahwa rumput laut sudah dimanfaatkan sejak 6000 BCE – 300 BCE di Jomon dan 300 BCE –  400 CE di Yayoi (Nisizawa et al. , 1987).
Rumput laut termasuk  dalam divisi Thallophyta yaitu tumbuhan yang mempunyai akar, daun,  dan batang yang semu.  Seluruh bagian rumput laut disebut dengan istilah thallus dan diklasifikasikan berdasarkan warna thallusnya ke dalam 4 kelas, yaitu rumput laut hijau ( Chlorophyceae ), rumput laut merah ( Rhodophyceae ), rumput laut coklat ( Phaeophyceae ) dan rumput laut pirang ( Chrysophyceae ) (Atmadja et al. , 1996; Ghosh et al. ,  2012).
Rumput laut kaya akan asam amino esensial, lemak tidak jenuh (omega 3 dan 6), serat kasar, polisakarida (non-pati), mineral (K, Ca, P, Fe, I, dan Na,) serta vitamin (A, B 1 , B 2 , B 6 , B 12 , dan C) (Handayani et al ., 2004; Mendis and Kim, 2011; Sulistyowati, 2013), bahkan kandungan serat pangan pada rumput laut ditemukan lebih tinggi dari tumbuhan darat yakni 33 –  62% (berat kering) (Mendis and Kim, 2011).
Kandungan nutrisi rumput laut berbeda-beda menurut jenisnya. Ma’ruf et
al. (2013) menemukan kadar nutrisi yang berbeda pada Caulerpa racemossa (Chlorophyceae) dan Gracillaria verrucosa ( Rhodophyceae ) dengan kadar karbohidrat, protein, lemak, air, dan abu berturut-turut 48,68%, 21,73%, 8,68%, 92,37% dan 20,91% pada Caulerpa racemossa , dan 72,49%, 4,61%, 3,32%, 80,70% dan 19,57% pada Gracillaria verrucosa . Porphyra sp. juga memiliki kandungan nutrisi yang berbeda dengan Gracillaria verrucosa walaupun sama-sama merupakan jenis rumput laut merah ( Rhodophyceae ) yakni 16,46% karbohidrat, 11,35% protein, 0,42% lemak, 51,20% air, dan 16,46% abu (Sormin, 2011). Dengan demikian, sebagai negara kepulauan yang kaya akan rumput laut, maka eksplorasi kandungan nutrisi rumput laut di Indonesia menjadi penting untuk dilakukan guna menemukan zat-zat nutrisi penting yang bermanfaat bagi manusia terutama di bidang pangan dan kesehatan.
Selain kandungan nutrisi yang kaya, rumput laut juga dilaporkan memiliki aktivitas antioksidan yang tinggi (Wijesekara et al. , 2012; Miyasitha et al. , 2012; Nawaly et al. ,  2013;  Kosanić et al. , 2014). Antioksidan merupakan senyawa yang dapat menghambat reaksi oksidasi dengan cara mengikat radikal bebas dan molekul yang sangat reaktif. Tubuh manusia dapat menetralisir radikal bebas karena tubuh menghasilkan antioksidan alami tetapi jumlahnya tidak cukup untuk menetralkan radikal bebas yang masuk ke dalam tubuh terutama bila jumlah radikal bebas tersebut berlebih. Untuk mencegah efek radikal bebas yang berlebih di dalam tubuh diperlukan sumber antioksidan lain yang berasal dari luar tubuh. Antioksidan dapat diperoleh dari makanan. Selain itu, terdapat juga antioksidan sintetik seperti BHT ( Butylat  Hydroxy Toluena ). Akan tetapi apabila dikonsumsi secara berlebihan dapat menjadi racun bagi tubuh (Djapiala et al. , 2011). Oleh sebab itu, antioksidan alami disinyalir lebih aman untuk digunakan.
Salah satu senyawa antioksidan dari rumput laut adalah pigmen atau zat warna yang memberi warna rumput laut.

## Jurnal Teknologi Pangan dan Gizi
Journal of Food Technology and Nutrition Vol 17 (1): 1-17, 2018.
Karotenoid, pigmen alami berwarna kuning hingga orange, yang terdapat di rumput laut merupakan antioksidan yang potensial (Wijesekara et al. , 2012; Miyashita et al. 2012). Karotenoid adalah pigmen fotosintesis yang secara in vivo membantu klorofil memanen cahaya matahari tetapi sekaligus juga berperan untuk melindungi klorofil dari intensitas cahaya berlebih yang merusak dengan cara memadamkan oksigen singlet dan memerangkap radikal bebas (Gross, 1991; Wang et al., 2004). Peran karotenoid sebagai pelindung klorofil juga terjadi secara in vitro (da Costa et al. ,2007). Baweja et al. (2016) dan Miyashita et al. (2012) menyatakan bahwa karakteristik untuk memadamkan dan memburu radikal bebas merupakan dasar pemanfaatan karotenoid sebagai antioksidan untuk mencegah berbagai penyakit kardiovaskular, kanker, dan penyakit-penyakit kronis lainnya. Selain sebagai antioksidan, karotenoid rumput laut seperti  α-karoten,  β-karoten,  dan  β- kriptoxantin merupakan provitamin A.
Ulva lactuca L. merupakan salah satu jenis rumput laut hijau yang memiliki wilayah sebaran yang sangat luas di dunia, yakni di benua Eropa, Amerika, maupun Asia, termasuk Indonesia ( Algabase ). Ulva lactuca L . disebut juga sebagai sea  lettuce karena talusnya yang lebar seperti bentuk daun,dengan panjang antara 30 –  50 cm (ada yang mencapai 100cm). Masyarakat pesisir pantai  Selatan  Jawa, khususnya wilayah Gunung Kidul selama ini telah memanfaatkan Ulva lactuca L . sebagai bahan pangan. Kondisi perairan yang terhubung dengan Samudera Hindia, dengan arus yang tidak begitu kuat serta substrat berupa  rataan terumbu karang, mendukung pertumbuhan Ulva lactuca L . sehingga tumbuh  melimpah di Pantai Kukup. Pantai Kukup adalah daerah destinasi wisata, sehingga disamping mengkonsumsi langsung  sebagai sayuran, masyarakat di sekitar pantai Kukup juga membuat kerupuk dari Ulva lactuca L. dan dijual sebagai oleh-oleh. Akan tetapi,
kandungan nutrisi Ulva lactuca L. segar maupun yang sudah diproses dari wilayah ini belum diteliti.  Oleh karena itu,  penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kadar total karbohidrat, protein, lemak, abu, dan air pada Ulva lactuca L . serta potensi antioksidan ekstrak kasar dan kandungan pigmen sebagai  informasi  dasar bagi pemanfaatan Ulva lactuca L. secara optimal dalam bidang industri makanan maupun farmasi.

## BAHAN DAN METODE

## Sampel dan Presparasi Sampel
Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah rumput laut yang biasa dikonsumsi oleh masyarakat di pesisir selatan Pulau Jawa, Gunung Kidul. Pengambilan sampel rumput laut dilakukan pada saat air laut surut. Sampel rumput laut yang diperoleh dicuci dengan air laut  untuk menghilangkan kotoran dan epifit yang menempel. Sampel dikemas dalam plastik hitam ( polybag ) dan disimpan dalam cool box yang  telah diisi es batu. Selanjutnya sampel disimpan di dalam freezer sampai analisis selanjutnya dilakukan.
Sampel rumput laut diidentifikasi di Laboratorium Sistematika Tumbuhan Fakultas Biologi Universitas Gadjah Mada, Jogjakarta.

## Analisis Kadar Abu dan Kadar Air
Analisis kadar abu (total mineral) dan kadar air dilakukan secara termogravimetri dengan mengacu metode Sudarmadji et al. (1984). Sampel sebanyak 2 gram dimasukkan ke dalam cawan porselen yang sudah diketahui bobotnya. Sampel untuk analisis kadar  abu (2 gram), diarangkan di atas bunsen dengan nyala api kecil sampai berasap. Selanjutnya dimasukkan ke dalam tanur pada suhu 550°C sampai menjadi abu yang berwarna putih, sedangkan sampel untuk analisis kadar air (2 gram) langsung dimasukkan ke dalam oven dengan suhu 105 o C selama kurang lebih 3 jam. Cawan dari oven dan tanur didinginkan dalam desikator dan
dilakukan penimbangan hingga diperoleh bobot tetap.

## Analisis Kadar Protein
Analisis kadar protein total dilakukan dengan metode Kjedahl menurut Sudarmadji et al. (1984). Sebanyak 1 gram sampel dimasukkan ke dalam labu kjeldahl dan didestruksi menggunakan 20 ml asam sulfat pekat dengan pemanasan sampai larutan berwarna jernih. Larutan hasil destruksi diencerkan dan didestilasi dengan penambahan 10 ml NaOH 10 %. Destilat ditampung dalam 25 ml larutan H 3 BO 3 3 %. Larutan H 3 BO 3 dititrasi dengan larutan HCl standar menggunakan metil merah sebagai indikator. Dari hasil titrasi ini total nitrogen dapat diketahui. Nilai total nitrogen yang diperoleh kemudian dikalikan dengan faktor koreksi 6,25 untuk mendapatkan kadar protein total.

## Analisis Kadar Lemak
Analisis kadar lemak menggunakan metode Soxhlet menurut Sudarmadji et al. (1984). Labu soxhlet dikeringkan dalam oven dan ditimbang bobot awalnya. Sebanyak 2 gram sampel dibungkus dengan kertas saring, kemudian ditutup dengan kapas wool yang bebas lemak. Kertas saring yang berisi sampel tersebut dimasukkan dalam alat ektraksi soxhlet, kemudian dipasang alat kondensor diatasnya dan labu lemak di bawahnya. Pelarut dietil eter dituangkan ke dalam labu lemak secukupnya sesuai dengan ukuran yang digunakan. Selanjutnya dilakukan refluks minimum 5 jam sampai pelarut yang turun kembali ke labu lemak berwarna jernih. Pelarut yang ada di dalam labu lemak didestilasi dan ditampung. Labu lemak yang berisi hasil ekstraksi dipanaskan dalam oven pada suhu 105°C kemudian didinginkan dalam desikator dan dilakukan penimbangan hingga diperoleh bobot tetap.

## Analisis Kadar Karbohidrat
Analisis kadar karbohidrat dilakukan dengan metode Anthrone menurut Sudarmadji et al. (1984). Analisi kadar
karbohidrat dimulai dengan pembuatan kurva standar dengan 0,1 gram glukosa yang dilarutkan dengan  aquades, kemudian di  masukkan kedalam labu takar 250 ml. Selanjutnya dibuat bebeapa seri pengenceran untuk pembuatan kurva standar lalu ditambahkan dengan cepat 5 ml pereaksi anthrone dan didihkan. Setelah didinginkan, absorbansi  dibaca dengan spektrofotometer  pada  panjang gelombang 630 nm. Selanjutnya dilakukan analisis sampel. Sebanyak 1 gram sampel dilarutkan dalam 100 ml aquades setelah itu disaring dengan kertas saring. Sebanyak 5 ml filtrat sampel dimasukkan kedalam tabung reaksi dan ditambahkan HCl 3 ml dan larutan Anthrone 3 ml lalu dihomogenisasi. Setelah itu didihkan selama 10 menit dan didinginkan, kemudian di homogenkan kembali. Intensitas warna yang terbentuk dibaca dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 630 nm.

## Uji  Aktivitas Antioksidan
Uji antioksidan dilakukan dengan menggunakan 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl ( DPPH )  sebagai radikal bebas menurut Banerjee et al. (2005). Sampel diekstraksi dengan menggunakan metanol. Sampel basah sebanyak 5 gram dipotong kecil-kecil (± 1 cm) kemudian dihaluskan lalu dimasukkan  ke  dalam erlenmeyer dan direndam dengan 100 ml methanol selama 1 jam di atas shaker . Larutan hasil perendaman disaring dan filtratnya dievaporasi menggunakan rotary evaporator pada suhu 40ºC. Ekstrak kering selanjutnya dimasukkan ke dalam vial  untuk pengujian. Pengujian dimulai dengan pembuatan seri konsentrasi, yaitu 100, 500, 1000, 2000, 4000, 8000, 16000 ppm. Setiap seri konsentrasi ditambahkan larutan DPPH 0,1 mM  sebanyak 3 ml (1:3  v/v). Selanjutnya sampel dan DPPH divortex selama 1 menit kemudian diinkubasi selama 30 menit pada suhu ruang. Absorbansi diukur menggunakan Spektrofometer U-1240 Shimadzu Mini-UV pada panjang gelombang 517 nm. Nilai Inhibition Concentration (IC 50 ) dicatat sebagai jumlah
Jurnal Teknologi Pangan dan Gizi Journal of Food Technology and Nutrition Vol 17 (1): 1-17, 2018.
konsentrasi sampel untuk mengurangi konsentrasi DPPH sebanyak 50%. Persen penghambatan dihitung dengan rumus :
% penghambat = 𝐴𝑏𝑠 . 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜−𝐴𝑏𝑠 . 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝐴𝑏𝑠 . 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 𝑥 100 %

## Ekstraksi sampel
Sampel rumput laut sebanyak 85.5 gram dipotong kecil-kecil dan ditambah CaCO 3 kemudian diblender dan diekstraksi menggunakan pelarut aseton:methanol 3:7 v/v sebanyak 200 mL. Proses ekstraksi diulang sampai residu berwarna pucat. Hasil ekstraksi disaring kemudian dipartisi menggunakan dietil eter dengan perbandingan 1:1 v/v. Larutan garam jenuh ditambahkan untuk membantu proses pemisahan larutan pigmen (ekstrak kasar). Ekstrak pigmen (lapisan atas) ditampung dan dipekatkan dengan rotary evaporator . Ekstrak pigmen kering yang diperoleh dilarutkan dengan sedikit aseton kemudian ditampung pada botol sampel dan dikeringkan dengan gas N 2 kemudian disimpan di freezer untuk analisis selanjutnya. Seluruh proses ekstraksi sampel dilakukan dalam kondisi cahaya remang pada suhu ruang.

## Identifikasi Pigmen dengan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)
Komposisi pigmen sampel dianalisis menggunakan KCKT LC-20AD (Shimadzu, Kyoto) yang dilengkapi dengan detektor PDA ( photodiode array ) SPD -  M20A pada panjang gelombang 190 –  800 nm. Kolom KCKT yang digunakan adalah RP -  C18 ODS Shim-Pack yang dilengkapi dengan guard coloum . Analisis pigmen mengacu pada metode Hegazi et al. (1998) yang telah dimodifikasi. Elusi pigmen menggunakan sistem elusi gradien campuran methanol:asetonitril  7:3 dengan kecepatan alir 1 mL/menit pada suhu 30 o C selama 60 menit. Ekstrak pigmen kasar dilarutkan dalam 5 mL asetonitril kemudian disaring menggunakan membrane filter whatman  0,2  μm.  Sebanyak  20  μL  filtrat diinjeksi ke kolom KCKT. Komposisi pigmen
dimonitor pada panjang gelombang 430 nm. Kromatogram setiap puncak dianalisis menggunakan acuan pustaka yang menggunakan sampel dan metode yang sama.

## Analisis Data
Data yang diperoleh dianalisis menggunakan Program Ms. Excell 2007 dan Origin 6.1.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Analisis Proksimat
Secara  morfologi,  rumput laut tidak mempunyai akar, batang maupun daun sejati,  keseluruhan bagian tubuh  disebut thallus . Secara taksonomi, rumput laut termasuk dalam divisio Thallophyta . Rumput laut  tumbuh melekat pada substrat berupa  karang, lumpur pasir, batu, dan benda keras lainnya. Sampel rumput laut hijau yang digunakan dalam penelitian ini teridentifikasi sebagai Ulva lactuca Linnaeus ( Ulva lactuca L.) ( Gambar 1 ).
Hasil analisis proksimat rumput laut hijau Ulva  lactuca L. yang merupakan hasil rata-rata dari tiga kali pengulangan diperlihatkan pada Tabel 1. Ulva lactuca L. memiliki kandungan nutrisi berturut-turut karbohidrat total 62,93%, lemak total 5,17%, protein total 17,43%, kadar abu (mineral total) 2,94%, dan kadar air 11,53%.
Kadar karbohidrat total Ulva lactuca L. pada penelitian ini (62,93%) cukup tinggi bahkan ditemukan lebih tinggi dibandingkan dengan penelitian-penelitian sebelumnya. Di Indonesia, kadar kabohidrat total Ulva lactuca L. dari perairan Ujung Genteng, Sukabumi, Jawa Barat adalah 56.48% (Santi et al. , 2012), dari perairan Banten 60,3% (Krisye et al. , 2014) dan perairan Pameungpeuk Jawa Barat 58.1% (Rasyid et al. , 2017). Penelitian terkait analisis proksimat pada Ulva lactuca L. di beberapa negara lain menunjukkan kadar karbohidrat yaitu  59,1% (Rohan-Ghadikalei et al. , 2012), 46,42% (Khairy and El-Shafay, 2013), dan 55,6% (Abdel-Khaliq et al. , 2014).
Gambar 1. Talus Ulva lactuca L
Tabel 1. Hasil Analisis Proksimat Ulva lactuca L. Jenis Nutrisi Kadar Rata-rata (%) Karbohidrat 62,93 Lemak 5,17 Protein 17,43 Abu 2,94 Air 11,53
Dibandingkan dengan jenis lain dari sesama genus Ulva, kadar karbohidrat total Ulva lactuca L. dalam penelitian ini lebih tinggi dari Ulva fasciata yang dilaporkan dari pantai bagian Tenggara India dan Mesir berturut-turut 19,68% (Manivannan et al. 2009) dan 23,7% (Ismail, 2017), akan tetapi masih lebih rendah dari Ulva fasciata yang dilaporkan oleh Rameshkumar et al. (2012) yakni 70,1%. Ulva reticulata dan Ulva rigida juga memiliki kandungan karbohidrat total lebih rendah dari Ulva lactuca L. dalam penelitian yakni berturut-turut 55,77% (Ratana-Arporn and Chirapart, 2006) dan 16, 74% (Frikha et al. , 2011).
Total protein Ulva lactuca L. dalam penelitian ini sebesar 17,43% berat kering. Baweja et al. , (2016) menyatakan bahwa total protein rumput laut hijau dan merah berkisar antar 10 –  48% berat kering dan khusus Ulva Lactuca L . berkisar antara 10 – 26% (Nisizawa et al. , 1987; Fleurence, 1999; Fleurence et al. , 2012).  Dengan demikian kadar protein total Ulva lactuca L. dalam penelitian ini masuk dalam rentang
yang disimpulkan dari hasil penelitian- penelitian sebelumnya.
Kadar protein Ulva lactuca L. yang ditemukan dalam penelitian ini (17,43%) hampir sama dengan beberapa penelitian sebelumnya seperti yang dilaporkan oleh Khairy and El-Shafay (2013), Abdel-Khaliq et al. (2014), dan Rohani-Ghadikolalei et al. (2012) berturut-turut 17,88%, 17,60%, dan 17,10%. Akan tetapi ada beberapa hasil penelitian sebelumnya yang memiliki kadar protein total lebih rendah dari rentang kadar protein total Ulva lactuca L. yang dikemukakan seperti pada hasil temuan Rasyid et al. (2017) sebesar 13,60%, Krisye et al. (2014) sebesar 5,30%, dan Santi et al. , (2012) sebesar 2,85%. Ortiz et al. (2006) mengemukakan hasil kadar protein total Ulva lactuca L. sebesar 27,20%, dimana angka ini lebih tinggi dari rentang yang dikemukakan.
Lemak total Ulva lactuca L. dalam penelitian ini sebesar 5,17% berat kering. Dibandingkan dengan lemak total dari pada penelitian-penelitian sebelumnya maka
Jurnal Teknologi Pangan dan Gizi Journal of Food Technology and Nutrition Vol 17 (1): 1-17, 2018.
kadar lemak total Ulva lactuca L. dalam penelitian ini lebih tinggi dari yang dilaporkan oleh Rohani-Ghadikolaei et al. (2012) (3,60%), Khairy and El-Shafay (2013) (3,57%), Krisye et al. (2014) (2,90%), Santi et al. (2012) (2,24%), dan Abdel-Khaliq et al. (2014) (0,70%), tetapi lebih rendah dari yang dilaporkan oleh Yaich et al. (2011) (7,78%).
Lemak total rumput laut sangat rendah. Khairy and El-Shafay (2013) melaporkan kadar lemak total beberapa rumput laut coklat, merah, dan hijau kurang dari 4% berdasarkan berat kering. Akan tetapi  jika  dibandingkan dengan tumbuhan darat, kandungan polyunsaturated fat ( PUFA ) pada rumput laut lebih tinggi, yang dapat berperan sebagai antioksidan yang kuat untuk mencegah penyakit-penyakit kardiovaskular, osteoarthritis, dan diabetes (Mendis and Kim, 2011). Undaria dan Ulva merupakan genus rumput laut yang kaya akan asam lemak stearidonic (omega 3) dan hexadecatrienoic (omega 6) (Baweja et al. , 2016).
Kadar abu merupakan kandungan total mineral yang dikandung oleh suatu bahan. Kadar abu Ulva lactuca L. dalam penelitian ini sebesar 2.94% berdasarkan berat basah yang mana lebih  rendah dibandingkan dengan kadar abu beberapa penelitian sebelumnya yang berkisar antara 11 – 18 % (Rasyid et al. , 2017; Turan et al. , 2015; Krisye et al. , 2014; Rohani- Ghadikolalei et al. , 2012; Yaich et al. , 2011), bahkan Nisizawa et al. (1987) melaporkan kadar abu Ulva lactuca L. sebesar 22.6%. Kadar air Ulva lactuca L. dalam penelitian ini (11,53%) ditemukan lebih rendah dari yang dilaporkan oleh Rasyid et al. (2017) (16,90%), Turan et al. (2015) (30,89%), dan Krisye et al. (2014) (16,70%), namun masih lebih tinggi dari temuan Abdel-Khaliq et al. (2014) (8.50%) dan Rohani-Ghadikolalei et al. (2012).
Variasi kandungan karbohidrat, protein, lemak, abu, dan air Ulva lactuca L. sangat tergantung dari lingkungan dimana rumput laut ini ditemukan. Letak geografis
sangat mempengaruhi kandungan nutrisi Ulva lactuca L. Kandungan nutrisi dapat bervariasi menurut  kondisi lingkungan pada habitat Ulva lactuca L. (Santi et al. , 2012; Krisye et al. , 2014; dan Rasyid et al. , 2017). Analisis proksimat pada rumput laut yang tumbuh di perairan pada benua Eropa (Polat and Ozogul, 2013, Amerika (Ortiz et al. , 2006; Ryther et al. , 1985) serta  Asia (Khairy and El-Shafay, 2013; Rohani- Ghadikolalei et al. , 2012) dapat menunjukkan hasil yang berbeda. Selain perbedaan tempat dan pengaruh musim (Khairy and El-Shafay, 2013; Polat and Ozogul, 2013; Rohani-Ghadikolalei et al. 2012; Ryther et al. 1985; Fleurence, 1999), kedalaman turut mempengaruhi kandungan dan komposisi nutrisi Ulva lactuca L. (Dere et al. ,  2003). Umur talus juga berpengaruh terhadap kandungan komposisi kimia Ulva lactuca L. yang ditemukan pada penelitian ini dimana sampel yang digunakan masih muda dilihat dari ukuran talus kurang dari 10 cm dan warna talus masih hijau terang.

## Uji Aktivitas Antioksidan
Uji aktivitas antioksidan ekstrak Ulva lactuca L. dalam penelitian ini menggunakan 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl ( DPPH ) sebagai sumber radikal bebas. DPPH banyak dipilih karena radikal bebas ini tergolong stabil (Molyneux, 2004). Ulva lactuca L. dilarutkan dalam methanol (ekstrak methanol) sehingga diharapkan hanya senyawa yang larut dalam methanol misalnya pigmen (klorofil dan karotenoid) dan asam lemak bisa larut, jadi tidak semua komponen seluler sel akan terlarut (Marxen et al. , 2007).
Sebagai radikal bebas, DPPH membutuhkan donor atom hidrogen untuk membuatnya stabil. Penelitian ini akan menguji kemampuan Ulva lactuca L. untuk mendonorkan atom hidrogen kepada DPPH dan meredam aktivitas DPPH. Absorbansi maksimum DPPH pada panjang gelombang 517 nm (Blois, 1958; Molyneux, 2004). Berkurangnya absorbansi DPPH yang dimonitor pada panjang gelombang 517 nm

## Tabel 2. Hasil dari Uji Antioksidan dengan Metode DPPH
Konsentrasi [ppm] Abs. DPPH 517 nm Abs . 517 nm Abs. Terkoreksi 517 nm Persentase Inhibisi (%) 100 0.810 0.003 0.807 2.641920 500 0.808 0.003 0.805 2.849073 1000 0.806 0.003 0.799 3.591116 2000 0.806 0.007 0.798 3.747774 4000 0.798 0.008 0.786 5.146737 8000 0.785 0.012 0.761 8.181700 16000 0.763 0.024 0.739 10.88671 Abs. Blanko 0.829
Gambar 2. Kurva persentase penghambatan konsentrasi ekstrak Ulva lactuca L. terhadap DPPH.
menunjukkan berkurangnya konsentrasi DPPH dalam larutan. Dengan kata lain, ekstrak methanol Ulva lactuca L. yang dicampur dengan DPPH telah bereaksi/menangkap molekul DPPH. Konsentrasi ekstrak methanol Ulva  lactuca L. untuk menangkap dengan molekul DPPH hingga 50% disebut juga dengan Efficient Concentration ( EC 50 ) atau Inhibition Concentration ( IC 50 ) (Molyneux, 2004).
Hasil pengujian aktivitas antioksidan Ulva lactuca L. dari beberapa konsentrasi ekstrak methanol Ulva lactuca L. ditunjukkan pada Tabel 2. Dari kurva tampak bahwa semakin besar konsentrasi ekstrak Ulva lactuca L., semakin besar
persentase  penghambatan terhadap DPPH ( Gambar 2 ) sehingga daya hambat berbanding lurus dengan konsentrasi ekstrak. Berdasarkan persamaan regresi yang dihasilkan dari kurva hubungan konsentrasi ekstrak Ulva lactuca L. terhadap persentase penghambatan pada berbagai seri konsentrasi, maka konsentrasi Ulva lactuca L. yang diperlukan untuk meredam radikal bebas DPPH hingga 50% (IC 50 ) adalah sebesar 88890.55 ppm. Molyneux (2004) menyatakan bahwa semakin kecil konsentrasi IC 50 maka semakin besar aktivitas antioksidan. Dengan kata lain, semakin kecil konsentrasi suatu senyawa yang dapat menghambat
y = 0.00053x + 2.88801 R² = 0.97220 0 2 4 6 8 10 12 0 5000 10000 15000 20000 Pe rs ent as e Pe ng ha m ba ta n ( % ) Konsentrasi Ulva lactuca L. (ppm)
Gambar 3. Kromatogram KCKT ekstrak kasar Ulva lactuca L. yang dideteksi pada panjang gelombang 430 nm. Serapan maksimum setiap puncak yang diberi nomor merupakan pigmen-pigmen yang teridentifikasi pada Tabel 3.
aktivitas DPPH atau radikal bebas lain maka kemampuan antioksidannya semakin tinggi.
Beberapa penelitian yang menguji aktivitas antioksidan Ulva lactuca L. dari wilayah yang berbeda menunjukkan nilai IC 50 yang berbeda-beda pula. Abd. El-Baky et al. (2008) menemukan nilai IC 50 Ulva lactuca L. yang ditumbuhkan di laboratorium dengan air laut alami pada  konsentrasi  16.50  μg/ml,  sedangkan Farvin and Jacobsen (2013) dan Kosanić et al. (2014) mendapatkan nilai IC 50 berturut- turut  sebesar  1266.7  ±  11.0  μg/ml  dan 623.58  ±  2.35  μg/ml  dari  sampel  yang diambil langsung dari perairan pantai.
Dibandingkan dengan penelitian- penelitian sebelumnya, kemampuan Ulva lactuca L. meredam radikal bebas dari DPPH dalam penelitian ini  lebih rendah karena konsentrasi penghambatan 50% yang lebih tinggi dari penelitian-penelitian sebelumnya. Kemampuan untuk menangkap radikal bebas sangat dipengaruhi dengan kandungan senyawa- senyawa bioaktif dalam thallus antara lain
pigmen, senyawa polifenol, dan flavonoid. Ulva lactuca L. yang diuji dalam penelitian ini masih muda sehingga kandungan senyawa bioaktif mungkin masih sedikit. Akan tetapi, Ulva lactuca L. memiliki potensi antioksidan yang perlu untuk diteliti lebih jauh, teutama dengan menguji setiap senyawa bioaktif yang terlarut di dalam ekstrak methanol secara terpisah.

## Komposisi Pigmen
Komposisi  pigmen Ulva lactuca L. dihasilkan dari proses pemisahan ekstrak kasar melalui KCKT yang dilengkapi dengan detektor PDA selama 60 menit. Kromatogram KCKT hasil pemisahan ekstrak kasar Ulva lactuca L. yang merupakan tampilan 3 dimensi fungsi Absorbansi (mAU), waktu tambat (t R ), dan panjang gelombang (nm) menghasilkan 32 puncak serapan maksimum yang dideteksi pada panjang gelombang 430 nm ( Gambar 3 ).
0 10 20 30 40 50 60 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 32 31 30 29 28 27 22 17 24 23 20 21 19 18 13 11 7 6 5 1 A bs or bans i ( m A U ) Waktu Tambat (menit)
Tabel 3. Komposisi Pigmen Ulva lactuca L. yang Dideteksi Pada Panjang Gelombang 430 nm
Puncak tR' tR Eluent (nm) Pigmen Acuan Pustaka 0 2.772 1 1.879 4.651 416, 656 golongan klorofil Hegazi et al. , 1998; Limantara & Heriyanto, 2010, 2 2.103 4.875 397, 423, 613, 669 Klorofilid a Britton, 1995, Hegazi et al. , 1998; Limantara & Heriyanto, 2010 3 2.444 5.216 416, 439, 466, 613, 666 golongan xantofil dan klorofilid a Britton, 1995 4 2.796 5.568 402, 427, 445, 472, 662 golongan xantofil dan klorofil Britton, 1995 5 3.041 5.813 413, 436, 464 Neoxantin Britton, 1995 6 3.415 6.187 416, 440, 470 Dinoxantin Britton, 1995, Jeffrey et al. 1997 7 4.3 7.072 402, 423, 449 Flavoxantin Britton, 1995, Hegazi et al. , 1998; Limantara & Heriyanto, 2010 8 4.908 7.68 421, 441, 468 Micronone Hegazi et al. , 1998 9 5.377 8.149 412, 434, 463 9'cis-neoxantin Hegazi et al. , 1998 10 5.911 8.683 412, 434, 461 9'cis-neoxantin - like Hegazi et al. , 1998 11 7.052 9.824 422, 445, 473 Anteraxantin Britton, 1995; Jeffrey et al. , 1997; Hegazi et al. , 1998; Limantara & Heriyanto,
2010; Heriyanto et al. , 2017 12 8.172 10.944 463, 599, 646 Divinil klorofil b Jeffrey et al., 1997 13 9.207 11.979 430, 463, 577, 604, 656 golongan klorofil b Jeffrey et al., 1997 14 9.985 12.757 464, 603, 653 golongan klorofil b Jeffrey et al., 1997 15 10.561 13.333 465, 653 golongan klorofil b Jeffrey et al., 1997 16 11.02 13.792 420, 441, 468 Vaucheriaxantin Britton, 1995, Jeffrey et al., 1997 17 11.553 14.325 418, 441, 463 Vaucheriaxantin-like Britton, 1995, Jeffrey et al., 1997 18 11.959 14.731 453, 582, 634 Chlorophyll c -like Jeffrey et al., 1997 19 15.607 18.379 440, 656 golongan klorofil b Jeffrey et al., 1997 20 18.529 21.301 465, 600, 650 klorofil b' Hegazi et al. , 1998; Limantara & Heriyanto, 2010 21 19.873 22.645 465, 599, 651 golongan klorofil b' Hegazi et al. , 1998; Limantara & Heriyanto, 2010 22 20.716 23.488 458, 546, 593, 642 Golongan klorofil b Jeffrey et al., 1 997 23 22.455 25.227 458, 599, 652 golongan klorofil b Jeffrey et al., 1 997 24 24.908 27.68 471, 603, 654 golongan klorofil b Jeffrey et al., 1 997 25 26.636 29.408 413, 538, 665 Feofitin a Jeffrey et al., 1 997 26 29.441 32.213 410, 463, 537, 664 golongan feofitin a Jeffrey et al., 1 997 27 30.977 33.749 416, 506, 537, 570, 610, 656 golongan feofitin a Jeffrey et al., 1 997 28 35.681 38.453 430, 583, 614, 664 Klorofil a Jeffrey et al., 1 997, Hegazi et al. , 1998;
Limantara & Heriyanto, 2010, Heriyanto et al. , 2017 29 39.884 42.656 421, 573, 610, 657 golongan klorofil a Jeffrey et al., 1 997, Limantara & Heriyanto, 2010 30 41.559 44.331 412, 537, 573, 610, 663 golongan klorofil a Jeffrey et al., 1 997, Limantara & Heriyanto, 2010 31 48.161 50.933 436, 672 golongan klorofil a Jeffrey et al., 1 997, Limantara & Heriyanto, 2010 32 52.332 55.104 413, 505, 537, 610, 664 golongan feofitin a Jeffrey et al., 1 997, Limantara & Heriyanto, 2010

## Jurnal Teknologi Pangan dan Gizi
Journal of Food Technology and Nutrition Vol 17 (1): 1-17, 2018.
Panjang gelombang 430 nm dipilih karena baik klorofil maupun karotenoid sama-sama mengabsorbsi cahaya pada panjang gelombang ini. Klorofil memiliki serapan maksimum pada panjang gelombang 410, 430, 453, dan 642, dan 662 nm, sedangkan karotenoid memiliki serapan maksimum pada 430 – 470 nm, 470 – 500 nm, dan 500 – 530 nm (Gross, 1991). Identifikasi pigmen dilakukan dengan membandingkan waktu tambat yang dikenal dengan time retention (t R ) dan pola spektra yang merupakan hasil plot fungsi absorbansi (mAU) dan panjang gelombang (nm) pada waktu tambat dimana terjadi serapan maksimum. Hasil identifikasi pigmen setiap puncak ditampilkan pada Tabel 3 . Waktu tambat (t R ) sebenarnya merupakan hasil pengurangan waktu tambat serapan maksimum pigmen (t R ’) dengan waktu tambat eluent (t 0 ) (Pfander and Riesen, 1995; Hegazi et al. ,1998). Waktu tambat eluent (t 0 ) adalah waktu yang dibutuhkan oleh larutan fase gerak (pengelusi) untuk melalui kolom (Pfander and Riesen, 1995) yakni puncak pertama kromatogram KCKT (Britton, 1995). Waktu tambat eluent (t 0 ) pada penelitian ini adalah 2.772 menit.
KCKT memisahkan pigmen berdasarkan kepolarannya. Pemisahan pigmen ekstrak kasar Ulva lactuca L. menggunakan KCKT fase terbalik ( Reverse- phased HPLC ) pada penelitian ini, sehingga pigmen yang keluar terlebih dulu adalah pigmen yang lebih polar (Gross, 1991). Klorofil a dan b bersifat kurang polar, tetapi klorofil c dan turunan klorofil a seperti klorofilid a bersifat polar sehingga dapat dideteksi pada menit-menit awal pemisahan, kemudian diikuti oleh kelompok karotenoid xantofil yang lebih polar dibandingkan dengan kelompok karotenoid karoten.
Berdasarkan komposisi pigmen yang teridentifikasi pada Tabel 3 , kelompok klorofil yang terdeteksi dari ekstrak kasar Ulva lactuca L . adalah klorofil a , b , c , dan turunan kedua jenis klorofil tersebut seperti
klorofilid a , feofitin a , dan juga bentuk epimer klorofil a dan b . Pigmen mirip klorofil c yang teridentifikasi pada t R 11,959 menit dengan serapan maksimum pada 453, 582, dan 634  nm sepertinya bentuk klorofil c baru atau bahkan klorofil jenis baru yang ditemukan tingkat kepolarannya lebih rendah dibandingkan kelompok karotenoid xantofil. Klorofil c biasanya terelusi terlebih dahulu sebelum kelompok karotenoid xantofil pada KCKT fase terbalik (Hegazi et al., 1998; Limantara & Heriyanto, 2010; Heriyanto et al., 2017).
Selain klorofil, pigmen lain yang berhasil dipisahkan oleh KCKT adalah kelompok karotenoid. Identifikasi jenis karoteind dalam penelitian ini tidak hanya didasarkan pada bentuk pola spektra dan panjang gelombang serapan maksimum, tetapi juga berdasarkan persentase rasio puncak III terhadap puncak II (% III:II) setiap spektrum  hasil plot absorbansi dan panjang gelombang masing-masing puncak.
Pola spektrum karotenoid biasanya memiliki tiga puncak serapan maksimum yang disebut dengan fine structure . Serapan maksimum yang membentuk tiga puncak terkait dengan jumlah ikatan rangkap pada struktur karotenoid, sehingga beberapa karotenoid dengan jumlah ikatan rangkap  (kromofor)  yang  sama  seperti  β- karoten, neoxantin, violaxantin, kriptoxantin, dan zeaxantin (9 ikatan rangkap), memiliki pola spektrum yang sama (Gross, 1991; Britton, 1995; Jeffrey et al. , 1997). Posisi tiga puncak serapan maksimum karotenoid sangat dipengaruhi oleh bentuk struktur molekul (kondisi cincin, gugus tertentu antara lain gugus karbonil) dan pelarut (Gross, 1991), oleh sebab itu,ratio posisi tiga puncak serapan maksimum karotenoid dapat membantu untuk membedakan jenis- jenis karotenoid yang memiliki jumlah ikatan rangkap yang sama (Britton, 1995; Jeffrey et al. , 1997).
Persentase rasio III:II sangat membantu dalam proses identifikasi karotenoid. Vaucheriaxantin (puncak 16 pada Gambar 3 ) memiliki serapan
maksimum yang hampir sama dengan violaxantin (420, 441, 468 nm) tetapi memiliki %III:II sebesar  53% yang lebih kecil dari violaxantin (95-98%) (Britton, 1995) sehingga dapat diidentifikasi sebagai vaucheriaxantin. Sebaliknya, puncak 5 pada Gambar  3 teridentifikasi sebagai neoxantin karena walaupun memiliki %III:II yang sama yakni dengan vaucheriaxantin tetapi menunjukkan serapan maksimum pada panjang gelombang yang berbeda, yang lebih mirip ke neoxantin.
Keseluruhan karotenoid yang teridentifikasi dari kromatogram KCKT adalah neoxantin dan turunannya, dinoxantin, flavoxantin, micronone, anteraxantin, dan beberapa kromatogram lain yang tidak teridentifikasi. Semua jenis karotenoid tersebut adalah merupakan kelompok xantofil yang bersifat lebih polar dibandingkan dengan klorofil a , b , dan turunannya, serta kelompok karotenoid karoten seperti α-karoten,  β-karoten,  ε- karoten.
Neoxantin dan anteraxantin merupakan kelompok xantofil yang umumnya ditemukan pada rumput laut hijau (Dumay and Morançais, 2016), dan juga ditemukan dalam penelitian ini. Neoxantin, anteraxantin, vaucheriaxantin, dan fukoxantin adalah jenis xantofil yang memiliki ikatan allenic pada struktur molekulnya (C=C=C), dimana ikatan ini sangat jarang terdapat pada senyawa alami lainnya dan hanya ditemukan pada beberapa jenis alga (Gross, 1991; Jeffrey et al. , 1997; Miyashita et al. , 2011). Ikatan allenic pada fukoxantin disimpulkan oleh Kim dan Pangestuti (2012) sebagai penyebab fukoxantin menjadi pemburu radikal bebas yang baik sehingga memiliki potensi yang besar dalam bidang neutraceutical dan farmaceutical untuk mengganti antioksidan sintetik. Selain itu, pada suatu perlakuan menggunakan fukoxantin dan neoxantin juga memberikan efek supresif terhadap obesitas dimana disimpulkan merupakan pengaruh dari ikatan allenic yang terdapat pada kedua xantofil ini (Kim and Pangestuti, 2012; Shirosaki and Koyama, 2012).
Berdasarkan hasil identifikasi pigmen dari ekstrak kasar Ulva lactuca L. , terlihat bahwa Ulva lactuca L. memiliki 3 jenis karotenoid allenic yakni neoxantin, anteraxantin, dan vaucheriaxantin. Dengan demikian, Ulva lactuca L. memiliki potensi yang sangat besar sebagai antioksidan untuk mencegah dan menghambat munculnya penyakit-penyakit metabolik akibat oksidasi dalam tubuh sehingga pigmen-pigmen ini juga dapat dimanfaatkan secara luas yang terkait dengan kesehatan seperti kosmetik, pangan fungsional, dan farmasi.

## KESIMPULAN
Ulva lactuca L. memiliki potensi yang besar untuk dikembangkan sebagai bahan baku pangan fungsional karena mempunyai kadar karbohidrat dan protein yang cukup tinggi tetapi rendah lemak. Selain kandungan nutrisi yang baik, ekstrak kasar Ulva lactuca L. juga menunjukkan aktivitas antioksidan terhadap radikal bebas DPPH. Ulva lactuca L. juga mengandung pigmen alami dari kelompok klorofil yakni klorofil a , b , dan c , dan kelompok karotenoid antara lain neoxantin, anteraxantin, dinoxantin, flavoxantin, micronone, dan vaucheriaxantin. Setiap pigmen menunjukkan aktivitas bioaktif, dan diantara pigmen yang ada, neoxantin, anteraxantin, dan vaucheriaxantin memiliki ikatan allenic seperti pada fucoxantin yang disinyalir bertanggungjawab terhadap aktivitas antioksidan dan penghambatan terjadinya kanker, obesitas, diabetes, dan penyakit metabolik lainnya. Dengan demikian, Ulva lactuca L. merupakan komoditi yang sangat menjanjikan untuk dikembangkan secara besar-besaran dalam bidang pangan, kesehatan, farmasi, dan kosmetik.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis menyampaikan terima kasih kepada Heriyanto, Ph.D dari Ma Chung Research Center for Photosynthetic Pigment ( MRCPP ) atas komunikasi pendek dan artikel-artikel terkait yang memperkaya ulasan hasil penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdel-Khaliq, A., H. M. Hassan, M. E. Rateb, and O. Hammouda. 2014. Antimicrobial Activity of Three Ulva Species Collected from Some Egyptian Mediterranean Seashores. International Journal of Engineering Research and General Science . 2(5): 648-669 Abd. El-Baky, H. H., F. K. El Bas, and G. S.
El Baroty. 2008. Evaluation of Marine Alga Ulva lactuca L . as A Source of Natural Preservative Ingredient. American-Eirasian J. Agric & Environ.Sci. 3(3): 434 – 444. Algabase.http://www.algaebase.org/search/ species/detail/?species_id=T3ccc55 72f89e4911&sk=0&from=results. Diakses pada 22 Agustus 2017. Atmadja, W.S., A. Kadi, Sulistidjo, dan Rachmaniar. 1996. Pengenalan Jenis-jenis Rumput   Laut. Jakarta. Puslitbang Oseanologi LIPI.
Banerjee, A., N. Dasgupta, and B. De. 2005.  In Vitro Study of Antioxidant Activity of Syzygium cumini Fruit. J.
Food
Chemistry . 90:727-733. doi:10.1016/j.foodchem.2004.04.033
Baweja, P., S. Kumar, D. Sahoo, and I.
Levine, 2016. Biology of Seaweed. In: Seaweed in Health and Disease Prevention .  Edited by J. Fleurence and I. Levine. Elsevier, Inc. Oxford. p . 54
Blois, M.S. 1958. Antioxidant Determinations by the Use of a Stable Free Radical. Nature. 181(4617):1199-1200.
Britton, G. 1995. UV/Visible Spectroscopy,
In: Carotenoids - Spectroscopy ,
edited by. Britton, G., S. Liaaen- Jensen, and Pfander, H.Vol.1B. Birkhäuser Verlag Basel. p.13-62
da Costa, J. F., F. F. Karwur, dan L.
Limantara. 2007. Fotoproteksi Beta Karoten dan Lutein Terhadap Klorofil a Dalam Aseton. Prosiding Seminar Pigmen Nasional 2007 “Back To Nature Dengan Pigmen Alami”. Salatiga, 24 Agustus 2007. Delaney, A., K. Frangoudes, and S.-A. Li. 2016. Society and Seaweed: Understanding the Past and Present. In: Seaweed in Health and Disease Prevention .  Edited by J. Fleurence and I. Levine. Elsevier, Inc. Oxford. p . 8 Dere,  S.,  N.  Dalkiran,  D.  Karacağlu,  G.
Yildiz, and E. Dere. 2003. The determination of total protein, total soluble carbohydrate and pigment contents of some macroalgae collected from Gemlik-Karacaali (Bursa) and Erdek- Ormanlı (Balıkesir)  in  the  Sea  of  Marmara, Turkey. Oceanologia, 45(3):453-471 Dumay, J., and M. Morançais. 2016. Protein and Pigment, In: Seaweed in Health and Disease Prevention . Edited by J. Fleurence and I. Levine. Elsevier, Inc. Oxford. p . 282
Djapiala, F.Y. , L. Montolalu, A.D.Y. dan F.
Mentang. 2011. Kandungan total fenol dalam   rumput laut Caulerparacemosa yang berpotensi sebagai antioksidan. JurnalMedia Teknologi Hasil Perikanan. (1): 5-9 Farvin, K. H. S., and C. Jacobsen. 2013.
Phenolic compounds and antioxidant activities of selected species of seaweeds from Danish coast. Food Chemistry 138 : 1670–1681
Fleurence, J. 1999. Seaweed proteins: biochemical,nutritional aspects and potential uses. Trends in Food Science & Technology 10:25-28.
http://www.life.sci.qut.edu.au/epping/ LQB381ScROLL/Fronteirs_reviews/s eaweed.pdf
Fleurence, J., M. Morançais, J. Dumay, P. Decottignies,V. Turpin, M. Munier, N. Garcia-Bueno, and P. Jaouen. 2012. What are the prospects for using seaweed in human nutrition and for marine animals raised through aquaculture? Trends in Food Science & Technology ,  27:57-61 Frikha, F., M. Kammoun, N. Hammami, R.A.
Mchirgui, L. Belbahri, Y. Gargouri, N. Miled, and F. Ben-Rebah. 2011. Chemical composition and some biological activities of marine algae collected in Tunisia. Ciencias Marinas, 37(2): 113–124
Ghosh, R., K. Banerjee, and A. Mitra. 2012.
Eco-Biochemical Studies of Common Seaweeds in the Lower Gangetic Delta  In : Handbook of Marine Macroalgae. Biotechnology and Applied  Phycology . John Wiley & Sons, Ltd. p .45 – 57.
Gross, J. 1991. Pigments in Vegetables : Chlorophyll and Carotenoids . Van Nostrand Reinhold. New York. 351p Handayani, T., Sutarno, dan A. D.
Setyawan. 2004. Analisis Komposisi Nutrisi Rumput Laut Sargassum crassifolium J. Agardh. Biofarmasi , 2(2):45-52.
Hegazi, M.M.I., Ruzafa, A.P., Almela, L., & Candela, M.E. 1998. Separation and identification of chlorophylls and carotenoids from Caulerpa prolifera , Jania rubens and Padina pavonica by reversed-phase high-performance liquid chromatography. Journal of Chromatography A , 829: 153-159.
Heriyanto,  A. D. Juliadiningtyas,  Y. Shioi1,
L. Limantara, and T. H. P.
Brotosudarmo. 2017. Analysis of
Pigment Composition of Brown Seaweeds Collected from Panjang Island, Central Java, Indonesia. Philippine Journal of Science , 146(3):323-330
Ismail, G. A. 2017. Biochemical composition of some Egyptian seaweeds with potent nutritive and antioxidant properties. Food Sci. Technol , Campinas, 37(2):294-302. http://dx.doi.org/10.1590/1678- 457X.20316
Jeffrey, S.W., R.F.C. Mantoura, and T. Bjørnland. 1997. In: Phytoplankton Pigments in Oceanography: Guidelines to Modern Methods . Edited by. Jeffrey, S.W., R.F.C. Mantoura, and S.W. Wright. UNESCO. p. 449 - 559
Khairy, H.M., and S.M. El-Shafay. 2013.
Seasonal variations in the biochemical composition of some common seaweed species from the coast of Abu Qir Bay, Alexandria, Egypt. Oceanologia , 55(2):435-452. doi:10.5697/oc.55-2.435 Kim, S., and R. Pangestuti. 2012. Biological Activities and Potential Health Benefits of Fucoxanthin Derived from Marine Brown Algae. In: Advances in Food and Nutrition Research – Marine Medicinal Foods, Implications and Applications Macro and Microalga . Edited by. S. Kim
Vol.64. Elsevier Inc.Oxford. p.115- 116 Kosanić,  M.,  B.  Ranković,  and  T. Stanojković. 2014. Biological
activities of two macroalgae from Adriatic Coast of Montenegro. Saudi Journal of Biological Science . 22(4):1-8.
http://dx.doi.org/10.1016/j.sjbs.2014. 11.004
Jurnal Teknologi Pangan dan Gizi Journal of Food Technology and Nutrition Vol 17 (1): 1-17, 2018.
Krisye, M. Kawaroe, dan U. Hasanudin.
2016. Biodegradasi Anaerobik Makroalga Ulva sp. untuk Menghasilkan Biogas dengan Metode Batch . Oseanologi dan Limnologi di Indonesia . 1(1):57-65
Limantara, L. and Heriyanto. 2010. Studi Komposisi Pigmen dan Kandungan Fukosantin Rumput Laut Cokelat dari Perairan Madura dengan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi. Ilmu Kelautan, 15(1):23-32 Ma’ruf, W.F., R. Ibrahim, E.N. Dewi, E.
Susanto, dan U. Amalia. 2013. Profil Rumput laut Caulerpa racemosa dan Gracilaria verrucosa sebagai Edible Food . Jurnal Saintek Perikanan, 9(1):68-74.
Maninvannan, K., G. Thirumaran, G.
Karthikai Devi, P. Anantharaman, and T. Balasubramanian. 2009. Proximate Composition of Different Group of Seaweeds from Vedalai Coastal Waters (Gulf of Mannar): Southeast Coast of India. Middle- East Journal of Scientific Research ,
4(2):72-77
Marxen, K.,  K. H. Vanselow, S. Lippemeier, R. Hintze, A. Ruser,  and U. Hansen. 2007. Determination of DPPH Radical Oxidation Caused by Methanolic Extracts of Some Microalgal Species by Linear Regression Analysis of Spectrophotometric Measurements. Sensors, 7: 2080-2095 Mendis, E. and S. Kim, 2011. Present and Future Prospects of Seaweeds in Developing Functional Foods. In:
Marine Medicinal Foods. Implications and Applications, Macro and Microalgae . Edited by Kim, S.
Academic Press. p.7
Miyashita, K., M. Airanthi, K. Widjaja-Adhi, M. Abe, and M. Hosokawa, 2012. Algal Carotenoids as Potent Antioxidants.  In : Handbook of Marine Macroalgae. Biotechnology and Applied Phycology . John Wiley & Sons, Ltd. West Sussex. p .403  – 414 .
Miyashita, K.,  S. Nishikawa, F. Beppu, T.
Tsukui, M. Abe, and M. Hosokawa. 2011. The allenic carotenoid fucoxanthin, a novel marine nutraceutical from brown seaweeds.
J Sci Food Agric, 91: 1166–1174 Molyneux, P. 2004. The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant Activity. J. Sci. Technol. , 26(2) : 211- 219
Nawaly, H., A.B. Susanto, dan J.L.A.
Uktolseja. 2013. Senyawa Bioaktif dari Rumput Laut Sebagai Antioksidan. Prosiding Seminar Nasional X Pendidikan Biologi FKIP UNS. Juli 2013. https://www.researchgate.net/publica tion/260131089
Nisizawa K., H. Noda, R. Kikuchi, and T.
Watanabe. 1987. The Main Seaweed Foods in Japan. Hydrobiologia , 111/152:5-29.
Ortiz, J.,  N. Romero, P. Robert, J. Araya, J. Lopez-Hernández, C. Bozzo, E. Navarrete, A. Osorio, and A. Rios. 2006. Dietary fiber, amino acid, fatty acid and tocopherol contents of the edible seaweeds Ulva lactuca and Durvillaea antarctica .
Pfander, H. and R. Riesen. 1995.
Chromatography: Part IV High- Performance Liquid Chromatography, In: Carotenoids – Isolation and Analysis , edited by.
Britton, G., S. Liaaen-Jensen, and Pfander, H.Vol.1A. Birkhäuser Verlag Basel. p.145-198.
Polat, S. and Y. Ozogul. 2013. Seasonal proximate and fatty acid variations of some seaweeds from the northeastern Mediterranean Coast. Ocenaologia, 55(2):375-391. doi:10.5697/oc.55-2.375 Ratana-arporn, P. and A. Chirapart. 2006.
Nutritional Evaluation of Tropical Green Seaweeds Caulerpa lentillifera and Ulva reticulate .
Kasetsart J. (Nat. Sci.) 40 (Suppl.) : 75 - 83
Rasyid, A. 2017.  Evaluation of Nutritional Composition of The Dried Seaweed Ulva lactuca from Pameungpeuk Waters, Indonesia. Tropical Life Sciences Research , 28(2):119-125
Rohani-Ghadikolaei, K., E. Abdulalian, and Wing-Keong Ng. 2012. Evaluation of the proximate, fatty acid and mineral composition of representative green, brown and red seaweeds from the Persian Gulf of Iran as potential food and feed resources. J. Food Sci Technol , 49(6):774-780 Ryther, J.H., T. A. DeBusk, and J.E.
Peterson. 1985. Studies of Marine Macroalgae: Saline Desert Water Cultivation and Effects of Environmental Stress on Proximate Composition. A. Report. U.S. Department of Energy. 70 p .
Santy, R.A., T.C. Sunarti., D. Santoso, dan D.A. Triwisari. 2012. Komposisi Kimia dan Profil Polisakarida Rumput Laut Hijau. Jurnal Akuatika ,
3(2):105-114.
Shirosaki, M., and T. Koyama. 2012.
Laminaria japonica as a Food for Prevention of Obesity and Diabetes. In: Advances in Food and Nutrition
Research – Marine Medicinal Foods, Implications and Applications Macro and Microalga . Edited by. S. Kim Vol.64. Elsevier Inc.Oxford. p.201 Soegiarto A, Sulistijo, dan W. S. Atmadja.
1978. Rumput Laut(Algae): Manfaat,
Potensi, dan   Usaha  Budidaya.
Jakarta: LON-LIPI.
Sormin, R.B.D. 2011. Komposisi Kimia dan Potensi Bioaktif Sayur Laut ( Porphyra sp). Prosiding Seminar Nasional: Pengembangan Pulau- pulau kecil, tahun 2011.
Sudarmadji, S. B. Haryono, dan Suhardi. 1989. Analisa Bahan Makanan dan Pertanian. Liberty. Yogyakarta.
Sulistyowati, H. 2013. Struktur komunitas seaweed (rumput laut) di Pantai
Pasir Putih Kabupaten
Situbondo . Jurnal Ilmu Dasar ,4(1):58–61.
Suparmi dan A. Sahri. 2009. Mengenal Potensi Rumput Laut: Kajian Pemanfaatan Sumber Daya Rumput Laut dari Aspek Industri dan Kesehatan. Sultan Agung , 44(118):95-
116. Turan,  F.,    S.  Ozgun,  S.  Sayın,  G. Ozyılmaz. 2015.
Biochemical composition of some red and green seaweeds from Iskenderun Bay, the northeastern Mediterranean coast of Turkey.  J. Black Sea/Mediterranean Environment, 21(3): 239-249
Wang, Y., L. Mao, and Hu, X. 2004. Insight into the Structural Role of Carotenoids in Photosystem I: A Quantum Chemical Ananlysis. Biophys. J . 86:3097-3111.
Wijesekara, I., M. Senevirathne, L.Yong-
Xin, and S. Kim.  2012. Functional Ingredients from Marine Algae as Potential Antioxidants in the Food Industry.  In : Handbook of Marine
Jurnal Teknologi Pangan dan Gizi Journal of Food Technology and Nutrition Vol 17 (1): 1-17, 2018.
Macroalgae. Biotechnology and Applied Phycology . John Wiley & Sons, Ltd. West Sussex. p .400 – 402. Yaich, H., H. Garna, S. Besbes, M. Paquot,
C. Blecker, H. Attia. 2011. Chemical composition and functional properties of Ulva lactuca seaweed collected in
Tunisia. Food Chemistry 128: 895–
901
Zakaria, F. R., Priosoeryanto, B. P., Erniaty, dan Sajida, 2017. Karakteristik Nori dari Campuran Rumput Laut Ulva lactuca dan Eucheuma cottonii. JPB Kelautan dan Perikanan , 12(1):23-30