## PERBANDINGAN METODE EKSTRAKSI MASERASI DAN SOKLETASI TERHADAP AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN JAMBU BOL ( Syzygium malaccense L.)
Submitted : 5 Mei 2017 Edited : 15 Mei 2017
Accepted : 23 Mei 2017
Henny Nurhasnawati, Sukarmi, Fitri Handayani
Akademi Farmasi Samarinda Email: henny_akfar@yahoo.co.id

## ABSTRACT
Malay  apple  (Syzygium  malaccense  L.)  is  a  plant  that  can  be  used  for  treatment. Antioxidants  have  the  activity  to  reduce  free  radical  compounds  which  is  one  of  the  causes  of the  emergence  of  various  diseases  in  humans.  The  purpose  of  this  study  to  determine  the comparison of methods of maceration and socletation extraction of antioxidant activity of malay apple  leaf.  Research  stages  include  sampling,  plant  determination,  making  of  simplisia, maceration extraction and socletation with 70% ethanol solvent and determine the antioxidant activity  by  UV-Vis  spectrophotometry  with  DPPH  (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)  as  free radical.  The  parameter  is  IC 50 value  that  is  the  concentration  of  antioxidant  compound  which can  cause  50%  loss  of  DPPH  free  radical  activity.  Although  both  methods  show  very  strong antioxidant activity, it can be concluded that the difference in extraction methods has an effect on  the  antioxidant  activity  produced.  The  results  of  antioxidant  activity  test  showed  that socletation  methods  gave  an  average  IC 50 value  of  37.67  ppm,  this  value  is  higher  than maceration  methods  with  an  average  IC 50 value  of  47.80  ppm.  Malay  apple  leaf  has  the potential  as  a  natural antioxidant, although  it  has a  lower  IC 50 value  than  vitamin  C  which  is 9.72 ppm.
Keywords : antioxidant, DPPH, maceration, socletation, Syzygium malaccense L.

## PENDAHULUAN
Jambu
bol termasuk
keluarga Myrtaceae yang dapat dimanfaatkan sebagai antioksidan  alami.  Daun  merupakan  bagian dari  tanaman  jambu  bol  yang  memiliki kandungan flavonoid tertinggi. Studi fitokimia terhadap tanaman ini
mengungkapkan  adanya  flavonoid,  tanin, terpenoid,  dan  minyak  atsiri.  Sedangkan ekstrak  kasar  memiliki  efek  farmakologi sebagai anti inflamasi, analgesik, antipiretik, antifungi, dan antioksidan (1) .
Antioksidan merupakan senyawa yang  dapat  menghambat  oksidasi  dengan cara menangkap radikal
bebas (2) . Antioksidan  alami  yang  terkandung  dalam tumbuhan  umumnya  merupakan  senyawa fenolik  atau  polifenolik  yang  dapat  berupa golongan  flavonoid,  turunan  asam  sinamat, kumarin, tokoferol dan asam-asam polifungsional (3) .
Salah  satu  faktor  yang  berpengaruh terhadap  mutu  ekstrak  adalah  metode  yang digunakan  dalam  proses  ekstraksi.  Maserasi
dan  sokletasi  merupakan  dua  metode ekstraksi  yang  lazim  digunakan.  Penelitian sebelumnya
menunjukkan perbedaan aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol  daun jambu  biji  berdaging  buah  putih  dengan metode maserasi dan sokletasi (4) . Pada penelitian ini aktivitas
antioksidan  ekstrak  etanol  daun  jambu  bol dilakukan  menggunakan  DPPH  (1,1-difenil- 2-pikrilhidrazil)  secara  spektrofotometri. Molekul  DPPH  merupakan  radikal  bebas yang stabil, memberikan warna ungu dengan absorbansi  kuat  pada  panjang  gelombang sekitar 520 nm (5) . Tujuan penelitian ini adalah membandingkan  metode  ekstraksi  maserasi dan  sokletasi  terhadap  aktivitas  antioksidan ekstrak etanol daun jambu bol.

## METODE PENELITIAN Teknik Pengumpulan Data
Bahan  yang  digunakan  adalah  daun jambu  bol.  Bahan  kimia  yang  digunakan yaitu etanol 70%, 1,1-Difenil-2-
Pikrilhidrazil (DPPH) dan vitamin C.
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  spektrofotometri  UV- Vis (Shimadzu), rotary evaporator , seperangkat  alat  maserasi  dan  sokletasi, neraca analitik, mikropipet, blender dan alat- alat gelas.

## Prosedur Penelitian Pembuatan Simplisia
Sampel  yaitu  daun  jambu  bol  yang diambil  dari  daerah  Anggana.  Determinasi tanaman  daun  jambu  bol  dilakukan  di Laboratorium  Fisiologi  Jurusan  Biologi Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam  Universitas  Mulawarman  Samarinda. Daun  jambu  bol  yang  telah  dikumpulkan ditimbang,  dicuci,  ditiriskan  dan  diangin- anginkan sampai kering dan dihaluskan.

## Ekstraksi  Dengan  Metode  Maserasi  dan Sokletasi
Serbuk daun jambu bol sebanyak 50 g ditambahkan  750  ml  etanol  70%  dan direndam  selama  24  jam  sambil  sesekali diaduk.  Hasil  maserat  yang  diperoleh disaring dan dipekatkan dengan tangas air.
Sedangkan  untuk  sokletasi,  sebanyak 50  g  serbuk  daun  jambu  bol  dibungkus dengan  kertas  saring,  dimasukkan  kedalam alat  soklet,  ditambah  750  ml  etanol  70%. Penyarian  dilakukan  sampai  tetesan  siklus tidak  berwarna  lagi.  Ekstrak  cair  yang diperoleh  kemudian  dipekatkan  dengan rotary  evaporator pada  suhu  50°C  dan dipekatkan  kembali  dengan  tangas  air sampai diperoleh ekstrak kental.

## Penentuan Aktivitas Antioksidan
Larutan  DPPH  40  ppm  dengan volume  100  ml  dibuat  dengan  menimbang 0,004 g DPPH dilarutkan dalam etanol 70%. Diambil  sebanyak  3  ml  untuk  diamati serapannya  pada  panjang  gelombang  450- 600 nm.
Larutan  induk  ekstrak  etanol  1000 ppm  dengan  maserasi  dan  sokletasi  dibuat dengan  cara  menimbang  0,01  g  ekstrak etanol daun jambu bol dan dilarutkan dalam etanol  70%.  Larutan  induk  diencerkan sehingga  diperoleh  konsentrasi  20;  40;  60; 80  dan  100  ppm.  Larutan  diambil  masing- masing  sebanyak  2  ml  dan  ditambahkan larutan  DPPH  40  ppm  sebanyak  4  ml,  di inkubasi  selama  30  menit  dan  diamati serapan yang terjadi pada panjang gelombang maksimum. Sebagai pembanding dilakukan cara yang sama untuk vitamin C.
Persentase peredaman antioksidan terhadap  radikal  bebas  dihitung  dengan rumus sebagai berikut [6] :
% I = –
Nilai persen peredaman yang
diperoleh,  dihitung  persamaan  garis  regresi linear  untuk  selanjutnya  ditentukan  harga peredaman  efektif  lima  puluh  persennya (IC 50 ).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi  Daun  Jambu  Bol  ( Syzygium malaccense  L.)  Dengan  Maserasi  dan Sokletasi Hasil determinasi tumbuhan menunjukkan  bahwa  sampel  adalah  spesies
Syzygium  malaccense (L.)  Merr.  &  L.  M. Perry. Daun jambu bol dikeringkan selama ± 7  hari  dengan  tujuan  untuk  menghilangkan kandungan  air  dalam  pelarut  yang  berakibat ekstraksi  menjadi  lebih  sulit,  memerlukan waktu  yang  lama,  rendemen  ekstraksi  yang lebih  rendah  sehingga  efektivitas  dan efisiensi ekstrak berkurang. Daun jambu bol yang telah dikeringkan selanjutnya dihaluskan  dengan  blender  dan  diayak dengan ukuran 60 mesh.
Senyawa  antioksidan  alami  dapat diperoleh  dari  suatu  bahan  alam  atau tanaman  dilakukan  dengan  cara  ekstraksi menggunakan  pelarut  organik.  Ekstraksi dilakukan menggunakan pelarut etanol  yang bersifat  polar  karena  dapat  melarutkan komponen  antioksidan  yang  merupakan golongan  metabolit  sekunder  pada  daun jambu bol.
Tabel 1. Rendemen  ekstrak  etanol  daun
jambu bol No. Metode Ekstraksi Berat Ekstrak (g) Rendemen (%) 1. Maserasi 5,46 10,92 2. Sokletasi 5,78 11,56 Tabel  1  menunjukkan  bahwa  metode sokletasi  menghasilkan  rendemen  lebih besar dibandingkan metode maserasi. Semakin tinggi suhu ekstraksi akan menyebabkan  gerakan  molekul  semakin
cepat,  begitu  juga  dengan  adanya  sirkulasi (pergerakan)  pelarut.  Adanya  faktor  suhu dan  sirkulasi  pelarut  dapat  meningkatkan laju perpindahan massa senyawa antioksidan dari  sel  daun  jambu  bol,  dengan  demikian kontak  zat  terlarut  (solut)  dalam  sampel dengan pelarut semakin sering dan diperoleh ekstrak yang lebih banyak.
Alasan  pemilihan  metode  ekstraksi maserasi  dan  sokletasi  karena  mempunyai banyak  keuntungan  dibandingkan  dengan metode ekstraksi lainnya. Keuntungan utama metode  ekstraksi  maserasi  yaitu  prosedur dan  peralatan  yang  digunakan  sederhana, metode  ekstraksi  tidak  dipanaskan  sehingga bahan  alam  tidak  menjadi  terurai.  Ekstraksi dingin  memungkinkan  banyak  senyawa terekstraksi,  meskipun  beberapa  senyawa memiliki  kelarutan  terbatas  dalam  pelarut ekstraksi pada suhu kamar. Metode ekstraksi cara  panas  (sokletasi)  merupakan  metode ekstraksi  terbaik  untuk  memperoleh  hasil ekstrak  yang  banyak  dan  juga  pelarut  yang digunakan  lebih  sedikit  (efisiensi  bahan) waktu  yang  digunakan  lebih  cepat,  sampel yang  diekstraksi  secara  sempurna  karena dilakukan berulang-ulang.

## Penentuan Aktivitas Antioksidan
Penentuan aktivitas antioksidan dilakukan dengan metode DPPH. Metode ini dipilih  karena  mudah,  cepat,  sederhana  dan mempunyai  tingkat  sensitivitas  tinggi  serta dapat  menganalisa  sejumlah  besar  sampel dalam jangka waktu yang singkat (7) .
Molekul  DPPH  merupakan  radikal bebas  yang  stabil.  Bila  larutan  DPPH dicampur dengan zat yang bisa menyumbangkan  atom  hidrogen,  maka warna  violet  akan  memudar  atau  berubah menjadi  kuning  pucat  karena  adanya  gugus pikril (5) .  Pengukuran  serapan  dilakukan setelah  larutan  didiamkan  selama  15-30 menit  agar  terjadi  interaksi  antara  DPPH sebagai  radikal  bebas  dengan  sampel  yang
diuji (2) .  Perubahan  warna  DPPH  sebagai berikut (5) . NO 2 N . N NO 2 NO 2
Gambar 1. Diphenylpicrylhydrazyl (radikal bebas), warna violet NH N NO 2 NO 2 NO 2
Gambar 2. Diphenylpicrylhydrazine (non radikal), warna kuning pucat
Penangkal  radikal  bebas  DPPH  dapat ditunjukkan  dengan  penurunan  absorbansi.
Absorbansi  yang  terbaca  adalah  molekul
DPPH  sisa  yang  tidak  bereaksi  dengan senyawa
antioksidan. Pengukuran penurunan  absorbansi  pada  larutan  uji dihitung  terhadap  absorbansi  blanko  yaitu larutan  DPPH  dengan  pelarut  tanpa  sampel sebagai  nilai  absorbansi  awal  DPPH sebelum bereaksi dengan larutan uji.
Parameter  yang  digunakan  sebagai interpretasi  hasil  dari  metode  DPPH  adalah IC 50 yang  dapat  didefinisikan  sebagai  nilai konsentrasi senyawa  antioksidan  yang dapat meredam  aktivitas  radikal  bebas  DPPH sebanyak  50%,  semakin  kecil  nilai  IC 50
maka semakin besar aktivitas antioksidannya (5) .
Tabel 2. Aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun jambu bol Sampel IC 50 (ppm) IC 50 rata-rata (ppm) Maserasi 48,05 47,80 47,54 Sokletasi 37,62 37,67 37,72 Pembanding (Vitamin C) 9,80 9,72 9,63 Hasil uji aktivitas antioksidan
menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun jambu  bol  hasil  sokletasi  memberikan  nilai IC 50 rata-rata  sebesar  37,67  ppm.  Nilai  ini lebih  tinggi  daripada  ekstrak  etanol  daun jambu  bol  hasil  maserasi  yaitu  dengan  nilai IC 50 rata-rata sebesar 47,80 ppm.
Ekstrak  hasil  sokletasi  mempunyai aktivitas  antioksidan  yang  sangat  kuat dibandingkan  hasil  maserasi,  hal  ini  dapat terjadi  karena  adanya  pengaruh  suhu ekstraksi, dimana dengan cara sokletasi suhu ekstraksi  dapat  diatur  agar  tidak  merusak komponen  antioksidan  yang  dibutuhkan. Dengan penambahan suhu ekstraksi komponen  antioksidan  yang  dibutuhkan dapat terekstrak sempurna sehingga semakin banyak  komponen  yang  terlarut  maka semakin  besar  aktivitas  antioksidannya (7) . Suhu  pada  proses  sokletasi  mempengaruhi senyawa  fenolik  yang  ditarik.  Semakin tinggi  suhu  ekstraksi,  maka  kelarutan senyawa  fenolik  semakin  meningkat (8) . Meskipun  kedua  metode  menunjukkan aktivitas antioksidan yang sangat kuat, dapat disimpulkan  bahwa  perbedaan  metode ekstraksi  berpengaruh  terhadap  aktivitas antioksidan yang dihasilkan.
Hasil
pengukuran aktivitas antioksidan  vitamin  C  diperoleh  nilai  IC 50 sebesar  9,72  ppm.  Hasil  ini  menunjukkan bahwa  vitamin  C  sebagai  antioksidan sekunder  berfungsi  menangkap  senyawa radikal  serta  mencegah  terjadinya  reaksi
berantai.  Pada  penelitian  ini  vitamin  C digunakan sebagai pembanding dari aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol  daun jambu  bol.  Vitamin  C  mempunyai  polaritas yang  tinggi  karena  banyak  mengandung gugus  hidroksil  sehingga  mudah  diserap oleh tubuh. Oleh karena itu vitamin C dapat bereaksi  dengan  radikal  bebas  dan  mampu menetralisir radikal bebas (9) .
Aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol daun  jambu  bol  memiliki  nilai  IC 50 yang lebih tinggi dibandingkan vitamin C. Hal ini menunjukkan  bahwa  aktivitas  antioksidan vitamin C lebih  tinggi dibandingkan dengan ekstrak  etanol  daun  jambu  bol.  Namun demikian, dilihat dari
aktivitas antioksidannya  ekstrak  etanol  daun  jambu bol  berpotensi  sebagai  alternatif  bahan antioksidan alami.

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat disimpulkan bahwa terdapat pengaruh metode ekstraksi terhadap aktivitas antioksidan  ekstrak  etanol  70%  daun  jambu bol. Meskipun keduanya tergolong memiliki aktivitas  antioksidan  yang  sangat  kuat, aktivitas  antioksidan  terbaik  pada  metode sokletasi  dengan  nilai  IC 50 sebesar  37,67 ppm  sedangkan  nilai  IC 50 pada  metode maserasi yaitu 47,80 ppm.

## SARAN
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk  menemukan  senyawa-senyawa  murni dari  ekstrak  etanol  daun  jambu  bol  dan dikembangkan sebagai obat berbasis herbal.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Figueirôa,  Evellyne  de  O.,  da  Silva  L. C.  N.,  de  Melo,  C.  M.  L.,  et  al.  2013. Evaluation of Antioxidant, Immunomodulatory, and Cytotoxic Action  of  Fractions  from Eugenia uniflora L. and Eugenia malaccensis L.: Correlation with Polyphenol and Flavanoid Content. The
Scientific  World  Journal .  Vol  2013.
Hal: 1-7
2. Pokorny,  J.,  Yanishlieva,  N.,  dan Gordon, M. 2001. Antioxidant in Food:
Practical  Application.  Boca  Raton: CRC Press. Hal: 17, 73. 3. Markham, K. R. 1988. Cara Mengidentifikasi Flavonoid. Terjemahan oleh Kosasih Padmawinata.  Bandung:  Penerbit  ITB. Hal: 1-20. 4. Daud,  M.  F.,  Sadiyah,  E.  R.  dan Rismawati E. 2011. Pengaruh Perbedaan  Metode  Ekstraksi  Terhadap Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol Daun  Jambu  Biji  (Psidium  guajava  L.) Berdaging Buah Putih. Prosiding Seminar Nasional. Bandung: Universitas Islam Bandung. Hal: 55-62 5. Molyneux,  P.  2004.  The  Use  Of  The Stable Free Radical Diphenylpicrylhidrazyl  (DPPH)  For Estimating Antioxidant Activity. Songklanakarin J. Sci. Technol. Vol. 26 (2). Hal: 211-219 6. Kamkar,  A.,  Javan,  A.  J.,  Asadi  F., Kamalinejad M. 2010. The Antioxidative Effect Of Iranian Mentha pulegium Extracts And Essential Oil  In Sunflower  Oil.  Food  and  Chemical Toxicology. Vol 48. Hal: 1796-1800
7. Setyowati,  W.A.E  dan  Damayanti,  D. R.  2014.  Pengaruh  Metode  Ekstraksi Terhadap  Aktivitas  Antioksidan  Kulit Buah  Durian  (Durio  zibethinus  Murr) Varietas  Petruk.  Prosiding  Seminar Nasional  Pendidikan  Sains.  Surakarta: UNS.
8. Mokoginta, E. P., Runtuwene, M. R. J., dan  Wehantouw,  F.  2013.  Pengaruh Metode  Ekstraksi  Terhadap  Aktivitas Penangkal  Radikal  Bebas  Ekstrak Metanol  Kulit  Biji  Pinang  Yaki  (Areca vestiaria  Giseke).  Pharmacon  Jurnal Ilmiah Farmasi. Vol 2(4). Hal: 109-113.
9. Winarsi,  H.  2007.  Antioksidan  Alami dan  Radikal  Bebas:  Potensi  dan Aplikasinya dalam Kesehatan. Yogyakarta: Penerbit Kanisius. Hal: 21- 23.