UJI EFEKTIVITAS PENURUNAN KADAR GULA DARAH EKSTRAK ETANOL DAUN SENDOK (Plantago major L. ) PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR (Rattus novergicus) YANG DIINDUKSI SUKROSA
Rezchy Dhamuri Ayu 1 , Fatimawali 1 , Gayatri Citraningtyas 1
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Diabetes mellitus is a disease indicated by hyperglycemic and progressive changes of the beta cells  of  pancreas  structure.  The  purpose  of  this  study  was  to  evaluate  the  effect  of  the ethanolic  sendok  ( Plantago  major L.)  leaves  extract  to  decrease  blood  sugar  levels  on  rats strain  wistar  ( Rattus  norvegicus )  induced  with  sucrose.  A  total  of  15  white  male  rats  strain wistar were divided into 5 groups, namely the negative control group, positive control group, groups  of  sendok  leaves  extract  with  doses  were  0.38  g/kg,  0.756  g/kg,  and  1.5  g/kg.  Data were obtained from the examination of fasting blood sugar levels, 30 min after induction of sucrose,  and  at  15,  30,  60,  120  minutes  after  induced  with  extract  in  each  treatment  group. Data were statistically analyzed with Oneway ANOVA and continued with LSD to find out significant  difference  between  treatments.  The  results  shows  that  ethanolic  sendok  leaves extract  with  dose  0,38  g/kg,  0,756  g/kg,  and  1,5  g/kg  body  weight  possess  the  effect  to lowering blood sugar levels of white male rats strain wistar.
Key words : Plantago major , blood sugar levels, Rattus novergicus

## ABSTRAK
Diabetes  mellitus  merupakan  penyakit  yang  ditandai  dengan  hiperglikemia  serta  terjadi perubahan  progresif  terhadap  strup  struktur  sel  beta  pankreas.  Tujuan  dari  penelitian  ini adalah  menguji  efek  ekstrak  etanol  daun  sendok  ( Plantago  major L.)  terhadap  penurunan kadar  gula  daah  pada  tikus  putih  jantan  galur  wistar  ( Rattus  norvegicus )  yang  diinduksikan sukrosa. Sebanyak 15 ekor tikus putih jantan galur wistar dibagi dalam 5 kelompok perlakuan yaitu  kelompok  kontrol  negatif,  kelompok  kontrol  positif,  kelompok  ekstrak  daun  sendok dosis  0,38  g/kgBB,  0,756  g/kgBB,  dan  1,5  g/kgBB.  Data  diperoleh  dari  pemeriksaan  kadar gula darah puasa, 30 menit setelah induksi sukrosa, dan pada menit ke 15, 30, 60, 120 setelah pemberian  sediaan  pada  masing-masing  kelompok  perlakuan.  Data  dianalis  secara  statistika dengan Oneway ANOVAdan dilanjutkan uji  LSD untuk  melihat beda nyata antar perlakuan. Hasil  penelitian  menunjukkan  daun  sendok  dengan  dosis  0,38  g/kgBB,  0,756  g/kgBB,  dan 1,5 g/kgBB memiliki efek menurunkan kadar gula darah tikus putih jantan galur wistar.
Kata kunci : Plantago major , kadar gula darah, Rattus novergicus

## PENDAHULUAN
Perubahan  gaya  hidup  dan  sosial ekonomi akibat urbanisasi dan modernisasi terutama  masyarakat  di  kota-kota  besar  di Indonesia
menjadi penyebab meningkatnya prevalensi penyakit degeneratif dan disinyalir menjadi penyebab  utama  kematian  di  Indonesia. Salah  satu  yang  harus  diwaspadai  adalah diabetes  mellitus  (Sudoyono,  dkk  2007). WHO  mencatat  bahwa  pada  tahun  2006 sekitar  150  juta  orang  berusia  diatas  20 tahun  mengidap  Diabetes  Melitus,  dan jumlah  ini  akan  bertambah  menjadi  300 juta  orang  pada  tahun  2025  (Sustrani, 2006).  Maka  dari  itu  perlu  dikaji  lebih lanjut  mengenai  diabetes  mellitus,  gejala, faktor resiko, pencegahan serta terapi yang tepat  untuk  mengurangi  angka  prevalensi diabetes  melitus  yang  terus  mengalami peningkatan.
Adanya peningkatan jumlah penderita diabetes mellitus setiap tahunnya serta  biaya  pengobatan  yang  mahal terutama apabila disertai dengan komplikasi  klinis  mendorong  masyarakat untuk mencoba obat tradisional yang dapat dipakai sebagai alternatif pengobatan. Oleh sebab  itu  makin  banyak  dikembangkan terapi  dengan  menggunakan  tanaman  obat tradisional  untuk  mengobati  diabetes mellitus (Limawan,1998).
Daun  sendok  ( Plantagon  major L.) sudah  dikenal  oleh  masyarakat  Indonesia sebagai tanaman obat tradisional. Tanaman ini  tumbuh  liar  di  hutan,  ladang,  dan halaman  berumput  yang  agak  lembab, kadang  ditanam  dalam  pot  sebagai tumbuhan obat (Dalimartha, 2005).
Tanaman  ini  mempunyai  banyak  khasiat untuk  mengobati  penyakit  seperti  batu ginjal,  influenza,  demam,  diare,  cacingan pada anak, hipertensi, dan bisul (Wijayakusuma, 1994). Kandungan  kimia  daun  sendok banyak  sekali  antara  lain  asam  salisil, fenolik asam karboksilat, flavonoid termasuk  apigenin  dan  luteolin,  vitamin serta  mineral  termasuk  zink  dan  kalium.
Senyawa  yang  diduga  dapat  menurunkan kadar glukosa darah adalah flavonoid.
Penelitian tentang tanaman ini masih kurang khususnya untuk khasiat antidiabetes.  Berdasarkan  hal  tersebut maka penelitian ini dibuat untuk mengetahui  efektivitas  penurunan  kadar gula  darah  ekstrak  etanol  daun  sendok ( Plantago  major L.)  pada  tikus  putih jantan  galur  wistar  yang  diinduksikan sukrosa.
Penelitian ini dibatasi pada pengujian  daun  sendok  dengan  perbedaan dosis  ekstrak  daun  sendok  terhadap penurunan  kadar  gula  darah  pada  tikus putih  jantan  galur  wistar.  Dan  penelitian ini  bertujuan  menguji  efek  ekstrak  etanol daun  sendok    terhadap  penurunan  kadar gula  darah  pada  tikus  putih  jantan  galur wistar yang diinduksi sukrosa.

## METODOLOGI PENELITIAN Bahan dan Alat
Sampel yang digunakan pada penelitian  ini  ialah  daun  sendok.  Bahan kimia  yang  digunakan  yaitu  etanol  70%, aquades, gula pasir, glipizid, pakan ternak, dan  darah  tikus  putih  jantan  galur  wistar. Alat  yang  digunakan  yaitu  kandang pemeliharaan hewan, sarung tangan, tempat  air  minum  dan  makanan  hewan, alat-alat gelas ( Pyrex ), timbangan analitik, oven,  rotary  evaporator,  ayakan  65  mesh, blender  dan  cawan  petri  ( Pyrex ),  jarum suntik NGT, disposable syringe 5 ml dan 3 ml,  pipet  volumetrik,  sudip,  masker, gunting, alat ukur gula darah ( Nesco multi check )  dan  advantage  test  ( Glucose suitable for selt-testing ).

## Pembagian Kelompok Hewan Uji
Pada  penelitian  ini  menggunakan  15 ekor  tikus  putih  jantan  galur  wistar  yang dibagi  dalam  5  kelompok  perlakuan  yaitu kelompok  kontrol  negatif,  kelompok kontrol  positif,  kelompok  ekstrak  dengan dosis  yang  bertingkat.  Masing-masing kelompok  terdiri  dari  3  ekor  tikus  yang ditentukan secara acak. Sebelumnya semua tikus  dipuasakan  selama  18  jam  tapi  tetap
diberi minum, kemudian diukur kadar gula darah puasanya. Selanjutnya tikus diinduksi  sukrosa  dengan  dosis  1,125 g/kgBB
untuk membuat kondisi hiperglikemia  pada  tikus,  30  menit kemudian  diukur  kadar  gula  darahnya. Setelah itu kelompok kontrol negatif diberi aquades  (K-),  kelompok  kontrol  positif diberi  obat  antidiabetik  oral  yaitu  glipizid (K+), dan kelompok ekstrak diberi ekstrak etanol  daun    Sendok (Plantago  major L. ) dengan  dosis  0,38  g/kgBB  (P1),  0,756 g/kgBB (P2), dan 1,5 g/kgBB (P3). Setelah pemberiaan  sediaan  diukur  kadar  gula darahnya pada menit ke 15, 30, 60.

## Pemberian Larutan Sukrosa
Dosis sukrosa yang digunakan didasarkan pada dosis sukrosa kelinci yaitu 3  g/kgBB  per  oral  (Widyastuti  dan Suarsana, 2011 dalam Kanon, 2012), maka perhitungan  dosis  sukrosa  untuk  tikus adalah 1,5 kg x 3 g/kgBB x 0,25 = 1,125 g/ 200  gram  BB  (0,25  merupakan  faktor konversi  dosis  kelinci  ke  tikus  menurut Harmita, 2006 dalam Kanon, 2012). Dosis  sukrosa  yang  digunakan  dihitung berdasarkan  berat  badan  masing-masing tikus,  kemudian  dilarutkan  dalam  aquades sebanyak 2,5 ml.

## Pengambilan Sampel Daun Sendok
Daun sendok segar 1500 g dikeringkan 3 hari di dalam oven dengan suhu 40˚ C dan diperoleh berat kering 205,79 g.

## Pembuatan Estrak Daun Sendok
Daun  Sendok yang  sudah  dalam bentuk  serbuk  ditimbang  sebanyak  200  g, diekstraksi  dengan  menggunakan  1500  ml etanol 70% dengan cara maserasi selama 5 hari (setiap hari digojok). Ekstrak kemudian  disaring  menggunakan  kertas saring  (filtrat  1),  dan  residu  diekstrak kembali  selama  2  hari  dengan  1200  ml etanol 70% (filtrat 2). Selanjutnya filtrat 1 dan  filtrat  2  dikumpulkan,  diuapkan dengan vacuum evaporator hingga
volumenya  berkurang,  lalu  dikentalkan  di atas waterbath pada suhu 60 ° C.

## Dosis Esktrak Daun Sendok
Konversi dosis untuk manusia dengan  berat  badan  70  kg  pada  tikus dengan  berat  badan  200  g  adalah  0,018. Rata-rata  orang  Indonesia  beratnya  50  kg. Dosis daun Sendok  yang biasa digunakan dalam masyarakat adalah 30 g, maka dosis untuk tikus adalah:
= (70/50 x 30 g) x 0,018)g
= 42 x 0,018 =0,756 g/200 g/BB tikus Dalam  percobaan  digunakan  dosis daun Sendok yang bertingkat:
Kelompok  P1  =  0,5  x  0,756 g/KgBB = 0,38 g/200 g/BB Kelompok  P2  =  1  x  0,756 g/KgBB = 0,756 g/200 g/BB Kelompok  P3  =  2  x  0,756 g/KgBB = 1,5 g/200 g/BB
Ekstrak  ditimbang  sebanyak  0,01  g, 0,02  g,  dan  0,04  g  (setara  dengan  0,38 g/kgBB,    0,756  g/kgBB,  dan  1,5  g/kgBB) kemudian dilarutkan dalam aquades sebanyak 2,5 ml.

## Pemberian Dosis Glipizid
Tiap  tablet  glipizid  mengandung  5 mg  glipizid.  Takaran konversi dosis untuk manusia  dengan  BB  70  kg  pada  tikus dengan  BB  200  g  adalah  0,018.  Rata-rata orang  Indonesia  beratnya  50  kg,  maka dosis untuk tikus adalah:
= 5 mg  x 0,018
= 0,09 mg/200 g/BB tikus
Tablet Glipizid digerus, ditimbang sebanyak  2,5  mg  kemudian  dilarutkan dalam 2,5 ml aquades.

## Analisis Data
Data yang diperoleh dianalisis menggunakan  program  statistika  SPSS ver.18.  Selanjutnya  untuk  mengetahui  ada tidaknya efek pada perlakuan diuji dengan ANOVA, kemudian dilanjutkan dengan uji LSD  untuk  melihat  beda  nyata  antar perlakuan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengujian  efek  ekstrak  etanol  Daun sendok  ( Plantagon  major L.)  terhadap
kadar  gula  darah  tikus  putih  jantan  galur wistar ( Rattus novergicus ) didapatkan hasil sebagai berikut.
Tabel 1 . Hasil Rata-Rata Penurunan Kadar Gula Darah Tikus (mg/dL)
Keterangan :
K(-) : Kelompok kontrol negatif K(+) : Kelompok kontrol positif P 1 : Kelompok ekstrak etanol daun sendok dosis 0,38  g/kgBB P 2 : Kelompok ekstrak etanol daun sendok dosis 0,756 g/kgBB P 3 : Kelompok ekstrak etanol daun sendok 1,5 g/kgBB
Menit 0  : kadar gula darah puasa Menit 30  : kadar gula darah 30 menit setelah diinduksi sukrosa Menit 15  : kadar gula darah 15 menit setelah pemberian sediaan Menit 30  : kadar gula darah 30 menit setelah pemberian sediaan Menit 60  : kadar gula darah 60 menit setelah pemberian sediaan
Gambar 3. Grafik Rata-Rata Kadar Gula Darah Tikus
Pada  penelitian  ini  menggunakan  15 ekor  tikus  putih  jantan  galur  wistar  yang dibagi  dalam  5  kelompok  perlakuan  yaitu kelompok  kontrol  negatif,  kelompok
kontrol  positif,  kelompok  ekstrak  dengan dosis  yang  bertingkat.  Masing-masing kelompok  terdiri  dari  3  ekor  tikus  yang ditentukan secara acak. Sebelumnya semua
0 50 100 150 200 250 0 30 (setelah induksi sukrosa) 15 30 60 120 K(-) K(+) P1 P2 P3
Kelompok Perlakuan
0 30 (setelah induksi sukrosa) 15 30 60 K(-) 52 126 134 138 131 K(+) 40 139 100 57 30 P1 66 162 124 89 61 P2 70 191 116 80 64 P3 67 198 139 127 95
tikus  dipuasakan  selama  18  jam  tapi  tetap diberi minum, kemudian diukur kadar gula darah puasanya. Selanjutnya tikus diinduksi  sukrosa  dengan  dosis  1,125 g/kgBB untuk membuat kondisi hiperglikemia  pada  tikus,  30  menit kemudian  diukur  kadar  gula  darahnya. Setelah itu kelompok kontrol negatif diberi aquades  (K-),  kelompok  kontrol  positif diberi  obat  antidiabetik  oral  yaitu  glipizid (K+), dan kelompok ekstrak diberi ekstrak etanol  daun    Sendok (Plantago  major L. ) dengan  dosis  0,38  g/kgBB  (P1),  0,756 g/kgBB (P2), dan 1,5 g/kgBB (P3). Setelah pemberiaan  sediaan  diukur  kadar  gula darahnya pada menit ke 15, 30, 60.
Setelah  induksi  sukrosa  kadar  gula darah  pada  semua  kelompok  perlakuan mengalami  kenaikan  yang  cukup  tinggi (t 2 ).  Ini  menunjukkan  bahwa  tubuh  tikus telah menyerap glukosa.
Setelah  pemberian  sediaan,  pada kelompok  kontrol  negatif  yang  diberi aquades kadar gula darah tetap mengalami kenaikan  sampai  pada  t 4 ,  yang  berarti aquades  tidak  memberikan  pengaruh  pada kadar  gula  darah  tikus.  Pada  t 5 kadar  gula darah mengalami penurunan, ini menunjukkan telah terjadi eliminasi glukosa pada tubuh tikus.
Kelompok  kontrol  positif  yang  diberi obat  antidiabetik  oral  yaitu  glipizid menunjukkan  penurunan  kadar  gula  darah pada  menit  ke  15  setelah  pemberian glipizid,  dan  terus  menurun  hingga  menit 90.  Penurunan  efek  obat  merupakan konsekuensi  dari  penyerapan  yang  kurang baik  pada  saluran  cerna,  pembuluh  darah atau  peningkatan  ekskresi  melalui  ginjal (Setiawan, 2010).
Kelompok  ekstrak  Daun  Sendok  dosis 0,38 g/kgBB menunjukkan adanya penurunan kadar gula darah (menit 45) dan
terus  mengalami  penurunan  hingga  menit 150. Ini menunjukkan bahwa ekstrak daun sendok  dosis  0,38  g/kgBB  memiliki  efek yang bagus dalam menurunkan kadar gula darah tikus.
Kelompok ekstrak daun sendok dengan  dosis  0.756  g/kgBB  menunjukkan adanya penurunan kadar gula darah (menit 45)  dan  terus  mengalami  penurunan hingga  menit  90.  Ini  menunjukkan  dosis daun  sendok  0,756  g/kgBB  memiliki  efek dalam menurunkan kadar gula darah tikus. Di  menit  150  kadar  gula  darah  tikus kembali mengalami kenaikan, dapat disebabkan  oleh  faktor  patologik  yang menyebabkan  efek  obat  dalam  hal  ini ekstrak  daun  sendok    menurun  (Setiawan, 2010).
Kelompok ekstrak daun sendok dengan  dosis  1,5  g/kgBB  menunjukkan adanya  penurunan  kadar  gula  darah  pada menit  ke  45  dan  terus  mengalami penurunan hingga menit 150. Ini menunjukkan  ekstrak  daun  Sendok  dosis 1,5 g/kgBB memiliki efek dalam menurunkan kadar gula darah tikus.
Dari hasil penelitian tersebut menunjukkan  dosis  ekstrak  daun  Sendok dosis 0,38 g/kgBB, 0,756 g/kgBB, dan 1,5 g/kgBB  memiliki  efek  menurunkan  kadar gula  darah  tikus.  Kandungan  senyawa flavonoid  yang  terkandung  dalam  daun sendok memiliki peranan dalam menurunkan  kadar  gula  darah.  Senyawa Flavonoid  memiliki  aktivitas  hipoglemik atau penurun kadar gula darah (Salindeho, 2010).  Penelitian  Arjadi  dan  Susatyo (2010)  menyebutkan  bahwa  senyawa flavonoid ini dapat menurunkan kadar gula darah  dengan  cara  merangsang  sel  β pankreas untuk memproduksi insulin lebih banyak.

## ANOVA
Kadar_Gula Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between Groups (Combined) 16038.133 4  4009.533  3.090  .034 Linear Term  Contrast 4583.786 1  4583.756  3.541  .072 Deviation  11444.383 3  3814.798  2.940  .053 Within Groups 32434.833  25  1297.693 Total 48472.967  29 Hasil pengujian ANOVA
menunjukkan nilai F hitung sebesar 3,090. Jika dibandingkan F tabel, maka F tabel = 2,76,  sehingga  F  hitung  lebih  besar  dari  F tabel  (3,090>2,76)  dan  dapat  disimpulkan ekstrak  etanol  Daun  sendok  ( Plantagon major L.)  memiliki  efek  menurunkan kadar  gula  darah  tikus  putih  jantan  galur wistar.  Karena  hasil  ANOVA  menyatakan H 1 diterima,  maka  dilanjutkan  dengan  uji
LSD untuk melihat adanya perbedaan nilai rata-rata kadar gula darah antar perlakuan.
Hasil  pengujian  LSD  (Lampiran  7) menunjukkan  kelompok  kontrol  negatif berbeda  dengan  kelompok  ekstrak  dan kelompok  kontrol  positif,  sedangkan kelompok  ekstrak  sama  dengan  kelompok kontrol  positif.  Ini  menunjukkan  bahwa pemberian  ekstrak  daun  sendok  memiliki efek  untuk  menurunkan  kadar  gula  darah.

## Multiple Comparisons
Kadar_Gula
LSD (I) Perlaku an (J) Perlaku an Mean Difference (I-J)  Std. Error Sig. 95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound K(-) K(+) 67.333 * 20.796 .003 24.50 110.16 P1 53.333 * 20.796 .017 10.50 96.16 P2 50.167 * 20.796 .024 7.34 93.00 P3 52.333 * 20.796 .019 9.50 95.16 K(+) K(-) -67.333 * 20.796 .003 -110.16 -24.50 P1 -14.000 20.796 .507 -56.83 28.83 P2 -17.167 20.796 .417 -60.00 25.66 P3 -15.000 20.796 .477 -57.83 27.83 P1 K(-) -53.333 * 20.796 .017 -96.16 -10.50 K(+) 14.000 20.796 .507 -28.83 56.83 P2 -3.167 20.796 .880 -46.00 39.66 P3 -1.000 20.796 .962 -43.83 41.83
P2 K(-) -50.167 * 20.796 .024 -93.00 -7.34 K(+) 17.167 20.796 .417 -25.66 60.00 P1 3.167 20.796 .880 -39.66 46.00 P3 2.167 20.796 .918 -40.66 45.00 P3 K(-) -52.333 * 20.796 .019 -95.16 -9.50 K(+) 15.000 20.796 .477 -27.83 57.83 P1 1.000 20.796 .962 -41.83 43.83 P2 -2.176 20.796 .918 -45.00 40.66
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

## PENUTUP

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat disimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol  Daun sendok ( Plantagon major L.) dengan dosis 0,38  g/kgBB,  0,756  g/kgBB,  dan  1,5 g/kgBB  memiliki  efek  menurunkan  kadar gula  darah  tikus  putih  jantan  galur  wistar yang diinduksi sukrosa.

## Saran
Perlu diadakan penelitian lebih lanjut untuk  menentukan dosis  maksimum,  dosis minimum  dan  dosis  toksik  ekstrak  Daun sendok ( Plantagon major L.).

## DAFTAR PUSTAKA
Arjadi F, Susatyo P. 2010. Regenerasi Sel Pulau  Langerhans  Pada  Tikus Putih (Rattus norvegicus) Diabetes
Yang  Diberi  Rebusan  Daging Mahkota Dewa (Phaleria macrocarp (scheff.)Boerl.). Fakultas  Kedokteran  Universitas
Jendral Soedirman, Purwokerto. Dalimartha,  S.,  2005, Tanaman  Obat  di Lingkungan Sekitar , Puspa Swara, Jakarta
Kanon, M.Q. 2012. Uji Efektivitas Ekstrak Kulit  Buah  Salak  (Salacca  zalacca (Gaertn.)Voss)
Terhadap Penurunan  Kadar  Gula  Darah Tikus  Putih  Jantan  Galur  Wistar (Rattus novergicus L.) Yang Diinduksi Sukrosa [skripsi].
Program  Studi  Farmasi  Fakultas
Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam  Universitas  Sam  Ratulangi, Manado.
Limawan, P.H., 1998, Pemberian Infus Daun Syzygium Polyanthum (Weight) Walp Secara Oral Terhadap Kadar Glukosa Darah
Kelinci Dengan Cara Uji Toleransi Gula , [Skripsi], Fakultas Farmasi Universitas Airlangga, Surabaya. Salindeho,  V.R.  2010. Kadar  Glukosa Darah Tikus Wistar (Rattus novergicus) Setelah Diberi Ekstrak Biji  Alpukat  (Persea  Americana Mill.) [skripsi].  Jurusan  Biologi Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sam Ratulangi, Manado.
Setiawan,  R.  2010. Pengaruh  Pemberian Ekstark  Kelopak  Bunga  Rosela (Hibiscus  sabdariffa  L.)  Terhadap Penurunan  Kadar  Gula  Darah Tikus  Putih  (Rattus  norvegicus) Yang  Diinduksi  Aloksan .  Fakultas Kedokteran  Universitas  Sebelas Maret, Surakarta.
Sudoyono,  A.W.,  B.setiyohadi,  I.  Alwi,
K.M.  Simaddibrata  dan  S.  Setiati. 2007. Buku  Ajar  Ilmu  Penyakit Dalam Edisi Keempat Jilid Ketiga . Balai  Penerbit  Fakultas  kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta.
Sustrani,  dkk.  2006. Diabetes. Jakarta:  PT. Gramedia Pustaka Utama.