## KARAKTERISASI KATEKIN DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK
BUNGA KANGKUNG PAGAR ( Ipomea carnea )
Ermi Abriyani*, Iin Lidia Putama Mursal, Lia Fikayuniar, Hasnimar
Fakultas Farmasi, Universitas Buana Perjuangan Karawang, Jawa Barat, Indonesia *Penulis Korespondensi: ermi.abriyani@ubpkarawang.ac.id

## Abstrak
Tanaman kangkong pagar ( Ipomoea carnea Jacq) ini menurut beberapa penelitian banyak kandungan khasiatnya. Tujuan mengkarakteristik senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada ekstrak etanol  bunga kangkung pagar dan  mengetahui  aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri Pseudomonas  aeruginosa .  Metode  ekstraksi  dengan metode maserasi pada bunga kangkung pagar Kromatografi Lapis Tipis, Fraksinasi dengan metode kromatografi kolom,  dan  pengujian  aktivitas  antibakteri  dengam  metode  difusi  cakram.  Karakterisasi  isolasi  senyawa  dari ekstrak  etanol  dengan  spektroskopi  UV-  Vis  dan  IR.  kemudian  uji  aktivitas  antibakteri  diuji  dengan  variansi konsentrasi  dari  tiga  ekstrak  n-heksana,  etil  asetat  dan  etanol.  Hasil  isolasi  memiliki  titik  leleh  139-140ºC. Analisa  dengan  spektro  UV-Vis  dan  spektroskopi  FTIR  terkarakterisasi  sebagai  golongan  flavan  3-ol  atau katekin dan hasil aktivitas antibakteri terhadap Psudomonas aeruginosa memiliki aktivitas antibakteri yang kuat Kata kunci : Ipomoea carnea Jacq., kromatografi Kolom, FTIR, UV-Vis

## Abstract
According to several studies, Kangkung Pagar (Ipomoea carnea Jacq.) that have many beneficial properties. The aim of this study are to characterize the secondary methabolites from ethanol extract and determine antibacterial activity  against  Pseudomonas  aeruginosa.  Methode  s  of  this  study  are  maceration  by  ethanol,  fractionation  by column  chromatography  and  antibacterial  activity  assay  by  disc  diffusion  method.  Melting  point  of  compound 139-140ºC . The  results  from  characterization  by  Uv-Vis  and  IR  spectroscopy  is  flavan  3-ol  or  catechin.  The result of antibacterial activity against psudomonas aeruginosa had strong level of activity.
Keywords: Ipomea carnea Jacq.,  UV-Vis and IR spectroscopy, Pseudomonas aeruginosa

## PENDAHULUAN
Penggunaan  obat  tradisional  di  kalangan  masyarakat sebagai pengobatan alternatif semakin meningkat WHO menyatakan  sekitar  80%  penduduk  di  dunia  masih menggunakan  obat  tradisional  yang  berasal  dari tanaman  (Verma  et  al.  2011).  Obat  tradisional  dibuat dalam  bentuk  ekstrak  karena  tanaman  obat  tidak  lagi praktis  untuk  digunakan  dalam  bentuk  bahan  utuh (simplisia).  Ekstrak  tersebut  bisa  dalam  bentuk  ekstrak kering,  ekstrak  kental  dan  ekstrak  cair  yang  proses pembuatannya  disesuaikan  dengan  kandungan  bahan aktif serta maksud penggunaannya (Anam et al., 2013).
Salah  satu  tumbuhan  berkhasiat  sebagai  tanaman  obat yang  digunakan  di  beberapa  negara  dan  sangat  banyak dalam pertumbuhannya adalah kangkung pagar (Ipomoea  carne  Jacq)  dari  keluarga  Convolvulaceae
(Sharma  &  Bachheti,  2013).  Tanaman  kangkung  pagar yang  akan  diambil  pada  penelitian  ini  adalah  bagian bunganya.  Penelitian  terdahulu  juga  menjelaskan, tanaman  bunga  kangkung  pagar  memiliki  beberapa kandungan  yaitu  flavonoid,  saponin,  polifenol  dan alkaloid (Abriyani et al., 2021). Menurut Smita dan UK Patil  (2014),  bunga  kangkung  pagar  setelah  dilakukan pengujian  fitokimia,  diperoleh  hasil  screening  bahwa senyawa yang terkandung pada ekstrak etanol dan fraksi kloroform  adalah  alkaloid,  glikosida,  tanin,  kumarin, flavonoid,  terpenoid  dan  sterol.  Menurut  Radji  (2011), salah satu penyakit yang sering terjadi di seluruh dunia, termasuk  Indonesia  adalah  infeksi.  Penyakit  infeksi merupakan  penyakit  yang  paling  banyak  diderita  oleh penduduk  di  negara  berkembang,  termasuk  Indonesia. Salah  satu  penyebab  penyakit  infeksi  adalah  bakteri. Bakteri  merupakan  mikroorganisme  yang  hanya  dapat
dilihat dengan bantuan mikroskop. Menurut Djide et al (2018), bakteri patogen lebih berbahaya dan menyebabkan  infeksi  baik  secara  sporadik  maupun endemik, antara lain Staphylococcus aureus,
Escherichia  coli  dan  Pseudomonas  aeruginosa.  Habitat umum basil gram negatif dari genus Pseudomonas dapat tumbuh  di  antaranya : tanah, air tawar, dan lingkungan laut. Pseudomonas aeruginosa mendapat perhatian lebih karena merupakan patogen oportunis yang menyebabkan penyakit/infeksi pada manusia. Pembasmian Pseudomonas aeruginosa menjadi semakin sulit  karena  kemampuannya  yang  resisten  pada antibiotik (Pang et al., 2019)

## METODE PENELITIAN
Waktu  dan  Tempat  Penelitian  Penelitian  ini dilakukan di Labotatorium Bahan Alam dan Mikrobiologi  Farmasi  Universitas  Buana  Perjuangan Karawang.  Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  Bulan Oktober 2021 sampai dengan Mei 2022.

## Alat dan Bahan Penelitian
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah corong (PYREX), erlenmeyer (IWAKI), beaker glass (IWAKI), gelas  ukur  (PYREX),  tabung  reaksi,  labu  ukur (HERMA),  jarum  ose,  cawan  petri,  kertas  disk,  batang pengaduk,  Hot  plate  (MASPION),  pipet  volume (HERMA), Bola hisap, yellow tip dan blue tip, laminar air  flow  (LAF  AV-100),  autoclave,  vaccum  rotary evaporator (EYELA OSB-2100), waterbath, pipet tetes, plat  tetes,  botol  coklat,  spatula,  pinset,  incubator (GEMMYCO  DIGITAL  #  IN-601),  timbangan  bahan, neraca  analitik  (ADAM  SCIENTIFIC),  lampu  bunsen, vial, rak tabung reaksi, kapas lidi steril, alat maserator, mikropipet, rangkaian alat kolom  kromatografi, chamber, Standar Mc. Farland No. 0.5, aluminium foil, tissue,  Oven  (GEMMYCO  YCO-NO.  1),  Silica  gel (TLC  60  F254  MERCK  1.05554.0001),  pipa  kapiler, lampu UV (λ 254 dan 366 nm) sebagai penampak noda,
Spektrofotometer  UV-VIS  (Thermo  Scientific  33- PPPTS  2017-L205-0006),  Spektrofotometer  IR,  alat titik leleh (MELTING POINT).

## Bahan Penelitian
Bahan  yang  digunakan  yaitu,  bunga  kangkung  pagar ( Ipomoea  carnea Jacq)  (1kg),  Etanol  (C2H3OH),  etil asetat  (C4H8O2),  n-heksana  (C6H14),  Pseudomonas aeruginosa,  media Nutrient Agar (NA), Aquades, NaCl 0,9  %,  DMSO  (Dimetil  Sulfoksida),  antibiotik ciprofloxacin  500  mg,  pereaksi  Dragendorff,  pereaksi Mater,  besi  (III)  klorida  (FeCl3)  1%,  besi  (III)  klorida (FeCl3)  5%,  HCl  2  N,  Natrium  Hidroksida  (NaOH) 10%, ammonia NH 3 ), Magensium (Mg)

## Skrining fitokimia
Adapaun skrining fitokimia yang harus dilakukan antara lain uji kandungan alkaloid, uji kandungan saponin, uji kandungan  flavonoid,  uji  kandungan  tanin,  uji kandungan  steroid  dan  terpenoid,  dan  uji  kandungan polifenol.

## Ekstraksi dan fraksinasi
Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi yakni dangan pelarut  etanol.  Kemudian  di  pekatkan  dengan  rotary evaporator. hasil dari ekstrak kental di tentukan dengan penghitungan persentase rendemen.
ekstrak etanol kemudian di fraksinasi dengan menggunakan  metode  kromatografi  kolom  dan  fasa diamnya  yang  dipakai  adalah  slika.gel  dan  eluen  yang dipakai  variasi  pelarut  non  polar  sampai  dengan  polar atau  variasi  100%  n-heksana  sampai  dengan  100% etanol dengan memakai SGP (system gradien polariry). hasil  fraksinasi  dikumpulkasn  dan  di  uji  dengan kromatografi  lapis  tipis.  hasil  faksinasi  yang  sudah murni  dilanjutkan  dengn  pangujian  titik  lelehnya dengan  melting  point  apparatus  dan  di  karaterisasi dengan  instrument  spektroskopi  UV-Vis  dan  Infra merah.

## Pengujian Bioaktivitas Antibakteri
Pengujian aktivitas antibakteri pada uji diameter daerah hambat (DDH) dilakukan dengan menggunakan metode difusi  cakram  (Kirby-Bauer)  dan  pengujian  aktivitas antibakteri pada konsenstrasi hambat minimum (KHM) dilakukan  dengan  menggunakan  metode  dilusi  padat. Suspensi  bakteri  yang  telah  dibuat  dan  dibandingkan dengan  MC  Farland  0,5  (setara  dengan  108  CFU/mL) diambil sebanyak 1 ml kemudian dipipet menggunakan mikropipet lalu dimasukkan ke dalam cawan petri berisi media  Nutrient  Agar  yang  sudah  mengeras.  Kemudian melakukan penambahan media NA sebanyak 10-15 mL dan  dihomogenkan  dengan  cara  diputar  membentuk angka  8  sehingga  tercampur  merata.  Setelah  media memadat  kemudian  kertas  cakram  yang  telah  ditetesi larutan masing-masing ekstrak dengan konsentrasi yang sudah  ditentukan  sebanyak  20  µl  diletakkan  di  atas media  agar.  Penetasan  larutan  uji  pada  tiap  cakram dilakukan  pada  cawan  petri  kosong.  Dalam  penelitian ini  dilakukan  uji  3  ekstrak  dengan  beberapa  perlakuan konsentrasi untuk melihat zona beningnya diantara lain :  Ekstrak  Etanol  pembuatan  larutan  baku  pada konsentrasi  5000  ppm  lalu  dibuat  variasi  konsentrasi 4500, ppm, 4000 ppm dan 3500 ppm, Ekstrak Etilasetat pembuatan larutan baku pada konsentrasi 5000 ppm lalu dibuat  variasi  konsentrasi  4500,  ppm  dan  4000  ppm, dan  Ekstrak  n-heksana  pembuatan  larutan  baku  pada konsentrasi  1000  ppm  lalu  dibuat  variasi  konsentrasi 900  ppm,  800  ppm,  dan  700  ppm  kemudian  dengan ciprofloxacin  500  mg  sebagai  kontrol  positif  dan DMSO  (Dimetil  Sulfoksida)  sebagai  kontrol  negatif. Setelah  itu  diinkubasi  selama  24  jam  pada  temperatur 37ºC, adanya pertumbuhan bakteri uji dan terbentuknya zona bening di sekitar daerah cakram diamati, kemudian mengukur  diameter  zona  bening  menggunakan  jangka sorong (Rachmatiah et al.., 2020). Adanya daya hambat ekstrak  terhadap  pertumbuhan  bakteri  yang  ditandai zona  bening  di  daerah  sekeliling  kertas  cakram  diukur diameternya  sebagai  diameter  daerah  hambat  (DDH)
dan  kemudian  menentukan  31  konsentrasi  hambat minimum  (KHM).  Penentuan  nilai  KHM  dilakukan dengan mengamati pada konsentrasi berapa mulai tidak terjadi pertumbuhan bakteri yang ditandai dengan tidak terbentuknya  kekeruhan  pada  media  Nutrient  Agar (NA)  (Rachmatiah  et  al..,  2020).  Penentuan  KHM dilakukan  pengamatan  adanya  pertumbuhan  bakteri  uji pada  konsentrasi  ekstrak  terendah  yang  menghasilkan diameter  daerah  habit.  Setelah  masa  inkubasi  berakhir, kekeruhan media yang menunjukkan kepadatan pertumbuhan bakteri uji diamati dan diberi tanda positif (+)  untuk  media  yang  tampak  keruh  dan  diberi  tanda negatif (-) jika media tersebut tidak terdapat kekeruhan (Rachmatiah et al.., 2020).

## Analisa Data
Analisis  data  pada  pengujian  aktivitas  antibakteri dilakukan  dengan  mengukur  zona  bening  dengan menggunakan kertas disk pada masing-masing konsentrasi.  Setelah  itu  dilakukan  analisis  statistic dengan  menggunakan  cara  Analysis  of  Variance (ANOVA).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Determinasi  tanaman  dilakukan  untuk  mengetahui dengan  pasti  nama  latin  dan  jenis  dari  tanamn  yang dipakai  untuk  sampel.  Tanamn  yang  dijadikan  sampel adalah tanaman kangkung pagar (Ipomoea carnea Jacq.) dengan  hasil  determinasi  sesuai  dengan  nomor 074/284/102.20-A/2022.
Hasil  skrining  tanaman  memperlihatkan  kandungan metabolit  sekunder  dari  suatu  tanaman.  Pada  tanaman Ipomea  carnea Jacq  kendungan  metabolit  sekundernya dari  bunganya  adalah  alkaloid,  flavonoid,  tannin  , fenolik,  kuinon,  terpenoid.  Kemudian  berdasarkan ekstrak  etanol  dari  sampel  bunga  tanaman  kangkung pagar  mempunyai  nilai  rendemen  ekstrak  7,08%  yang memiliki  berat  35,3  gram  ekstrak  kental  yang  didapat dari 1 kg sampel.
Ekstrak  etanol  di  fraksinasi  dengan  memakai  metode kromatografi  kolom.  Ekstrak  etanol  dari  bunga kangkong pagar yang di pakai adalah sebanyak 15 gram. fasa diam yang dipakai adalah silika gel dan eluen yang yang digunakan memakai system gradien polarity (SGP) mulai  dari  100%  n-heksana  sampai  dengan  100% etanol,  dengan  tujuan  agar  zat  atau  senyawa  yang terdapat dalam ekstrak dapat terelusi dengan eluen yang sesuai. Hasil fraksinasi yang keluar ditampung kedalam botol  vial,  lalu  dihitung  tiap  tetes  permenit  dengan rentang  standar  yaitu  35-38  tetes  permenit.  Setelah  di fraksinasi  didapatkan  hasil  4  fraksi  gabungan  yakni fraksi A,B, C, dan D seperti table 1 berikut ini;
Tabel. 1 Hasil fraksinasi gabungan metode kromatografi
Berdasarkan  dari  hasil  pengujian  dengan  kromatografi lapis  tipis  dan  eluen  n-heksana  :  etil  asetat  (8:2) dihasilkan  kromatogram  seperti  gambar  1  di  bawah  ini yang dilihat dengan bantuan lampu UV.
Gambar  1.  Fraksi  gabungan  D  yang  dilihat  dengan bantuan lampu UV 366nm
Dari  hasil  kromatogram  dapat  dilihat  spot  noda  yang tampak  lebih  dari  satu  berwarna  biru  terang.  Sehingga dilakukan  pemurnian  dengan  cara  merekolom  dan dihasilkan  1  spot  noda  warna  biru  terang  dengan  hasil faktor  retardasinya  adalah  0,8  cm  dengan  eluen  n- heksana  :  etil  asetat  =  8:2.  nilai  Rf  telah  memenuhi ketentuan  dan  yang  baik  yakni  antara  0,2  - 0,8 (Lestyo
Wulandari,  et  al.  2013).  Hasil  senyawa  yang  sudah murni maka di uji dengan melting point apparatus maka dihasilkan titik leleh kisaran 139-140 o C. Spektrofotometri  UV-Vis  dilakukan  untuk  mengukur panjang  gelombang  maksimum.  Hasil  analisa  spektro uv-vis  yang  didapat  pada  senyawa  dalam  fraksi  etanol bunga kangkung pagar memberikan pita dengan panjang 212,40  nm  dan  273,14  nm.  Gambar  hasil  panjang gelombang yang diperoleh dapat dilihat di bawah ini
Gambar  2.  Hasil  serapan  pada  panjang  gelombang maksimum dari senyawa isolasi
Gambar 3. Spektrum FTIR senyawa isolasi Pada  spektrum  terlihat  beberapa  serapan  yakni  pada bilangan gelombang 3318,07 cm -1 regang O-H, 2880,08- 2927,08  cm -1 regang  C-H  jenuh,  2131,85  nm  ikatan C=C,  1454  nm  memperlihatkan  gugus  fenil,  1045,  99 nm  yang  tajam  regang  C-O  alkohol  dan  eter.  Hasil tersebut  sesuai  dengan  hasil  karakterisasi  yang dilakukan  oleh  Geng  et  al.,  (2019),  yang  membuktikan bahwa standar katekin memiliki serapan pada 3372 cm- 1 yang merupakan gugus O-H (hidroksil), serapan pada bilangan  gelombang  1613,  1518,  1460  cm-1  yang
menunjukkan  gugus  fenil  dan  mengandung  gugus  C-O pada bilangan gelombang 1144 cm-1.

## Gambar 4. katekin

## Hasil pengujian antibakteri
Hasil Uji Antibakteri Penentuan uji aktivitas antibakteri dari diameter zona hambat ekstrak n-heksana, etilasetat, dan  etanol  pada  bunga  kangkung  pagar  dengan  varian pelarut  dan  memiliki  konsentrasi  yang  berbeda-beda ditandai  dengan  adanya  zona  bening  disekitar  kertas cakram  (Paper  disk).  Penentuan  diameter  zona  hambat ini  menunjukkan  bahwa  setiap  ekstrak  dengan  varian pelarut  pada  konsentrasi  yang  berbeda  memiliki tingkatan  aktivitas  yang  berbeda-beda  terhadap  bakteri Pseudomonas aeruginosa. Hasil dari penelitian ini dapat dilihat pada tabel di bawah ini;
Tabel 2 . Diameter daerah hambat (DDH) ekstrak bunga kangkung  pagar  dengan  varian  pelarut  terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa
Dari  hasil  tabel  di  atas  menunjukkan  bahwa  masing- masing  konsentrasi  ektrak  n-heksana,  etilasetat  dan etanol  pada  bunga  kangkung pagar mampu membentuk zona  hambat  pada  media  Nutrien  Agar  yang  telah ditumbuhkan  bakteri  Pseudomonas  aeruginosa.  Hasil yang  telah  diperoleh  dari  pengujian  antibakteri  ekstrak bunga  kangkung  pagar  dengan  3  varian  pelarut  dapat dikelompokkan menjadi 4 bagian sebagai berikut : 1. Lemah, zona hambat ≤ 5 mm,
2. Sedang, zona hambat 5-10 mm,
3. Kuat, zona hambat 10-20 mm,
4. Sangat Kuat, zona hambat ≥ 20 mm
Hasil  data  dari  pengelompokan  di  atas  dapat  diperoleh bahwa ekstrak n-heksana memiliki zona hambat kriteria sedang, tetapi pada konsentrasi 1000 ppm terdapat rata- rata  diameter  yang  melebihi  sedikit  10  mm  sehingga dapat  dikategorikan  kriteria  kuat.  Dari  keempat konsentrasi  ekstrak  n-heksan  yang  memiliki  rata-rata diameter  daerah  hambat  yang  tertinggi  di  konsentrasi 1000  ppm  dan  juga  konsentrasi hambat minimum yang didapat pada konsentrasi 700 ppm karena memiliki zona hambat yang paling kecil. Kemudian pada 3 konsentrasi ekstrak etanol terdapat konsentrasi 4000 ppm dan 5000 ppm  yang  masuk  dalam  kriteria  kuat,  dan  pada konsentrasi  4500  masuk  dalam  kriteria  sedang.  Dari ketiga konsentrasi ekstrak etilasetat yang memiliki rata- rata  diameter  daerah  hambat  tertinggi  diperoleh  pada konsentrasi 4000 ppm dan juga data konsentrasi hambat minimum  yang  diporelah  pada  konsentrasi  4500  ppm karena  memiliki  zona  hambatan  yang  paling  kecil. Kemudian  hasil  data  dari  ke  empat  konsentrasi  ekstrak etanol yang diperoleh menunjukkan 3 konsentrasi (4000 ppm,  4500  ppm,  5000  ppm)  yang  masuk  kedalam kategori  kuat  karena  memiliki  rata-rata  diameter  zona hambat  di  atas  10  mm  dan  pada  konsentrasi  3500  ppm diperoleh  rata-rata  diameter  zona  hambat  kriteria sedang  karena  di  bawah  10  mm.  Dari  hasil  data  pada keempat konsentrasi ekstrak etanol menunjukkan bahwa nilai  rata-rata  diameter  daaerah  hambat  tertingi  yaitu pada  konsentrasi  5000  ppm  dan  konsentrasi  hambat minimum  yang  diperoleh  yaitu  pada  konsentrasi  3500 ppm  karena  memiliki  zona  hambat  yang  paling  kecil. Pengujian  larutan  kontrol  positif  yang  digunakan  pada penlitian  adalah  ciprofloxacin.  Pemilihan  antibiotik ciprofloxacin  sebagai  kontrol  positif  karena  memiliki spektrum  yang  luas  (broad  spectrum).  Hasil  data  yang diperoleh pada tabel di atas menunjukkan bahwa ketiga larutan  kontrol  positif  masuk  kedalam  kriteria  kuat karena memiliki rata-rata diameter zona hambat 10 mm
sampai  20  mm.  Pengujian  larutan  kontrol  negatif  yang digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  DMSO  10%. Kemudian hasil data yang diperoleh pada pengujian ini tidak  terdapat  zona  hambat  yang  terbentuk  di  sekitar kertas cakram/paper disc.

## KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan menggunakan perbandingan spektrum UV, dan IR serta uji  KLT  dengan  pereagen  penampak  noda  didapatkan hasil  karakterisasi  metabolit  sekunder  ekstrak  etanol bunga  kangkung  pagar  (Ipomoea  carnea  Jacq.)  yang mengandung  flavan.  Sehingga  dari  kumpulan  data-data tersebut disimpulkan bahwa struktur senyawa golongan flavan  3-ol  (katekin).  Ekstrak  3  variasi  pelarut  pada bunga kangkung pagar (Ipomoea carnea Jacq.) memiliki perbedaan  aktivitas  antibakteri  dan  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri  Pseudomonas  aeruginosa  yakni pada ekstrak n-heksana masuk kedalam kategori sedang karena  zona  hambat  yang  didapat  5-10  mm  sedangkan pada  ekstrak  etanol  dan  etilasetat  masuk  kedalam kategori kuat karena zona hambatnya ≥10 – 20 mm

## DAFTAR PUSTAKA
A. Sharma and, & Bachheti, R. K. (2013). A Review On
Ipomoea carnea. 4(4), 363– 377.
Abriyani,  E.,  &  Fikayuniar,  L.  (2020).  Screening Phytochemical, Antioxidant Activity and Vitamin C  Assay  From  Bungo  Perak-Perak  (  Begonia Versicolar  Irmsch)  Leaves  .  Asian  Journal  Of
Pharmaceutical
Research,
10(3), 183.
https://doi.org/10.5958/2231-5691.2020.00032.5
Abriyani,  E.,  Fikayuniar,  L.,  &  Safitri,  F.  (2021).
Skrining  Fitokimia  dan  Aktivitas  Antioksidan
Ekstrak Metanol Bunga Kangkung Pagar
(Ipomoea  carnea  Jacq.)  Dengan  Metode  DPPH  ( 2,2-Difenil-1-Pikrilhidrazil). Pharma Xplore,
6(1), 32–42
Anam,  S.,  Yusran,  M.,  Trisakti,  A.,  Ibrahim,  N.,
Khumaidi, A., Ramdanil, & Zubair, M. S. (2013). Standarisasi  Ekstrak  Etil  Asetat  Kayu  Sanrego (Lunasia amara Blanco). Online Jurnal of Natural Science, 2(3), 1–8.
Djide,  M.  Natsir  dan  Sartini.  2008.  Analisis Mikrobiologi Farmasi. UNHAS :  Makassar
Geng,  C.,  Yang,  T.,  Huang,  X.,  Ma,  Y.,  &  Zhang,  X.
(2019).  Antidepressant  potential  of  Uncaria rhynchophylla and its active flavanol , catechin , targeting melatonin receptors. Journal of Ethnopharmacology, 23, 3946.
Radji,  M.,  2011,  Buku  Ajar  Mikrobiologi  Panduan Mahasiswa  Farmasi  dan  Kedokteran,  107,  118, 201-207, 295, Jakarta, Buku Kedokteran EGC.
Verma, R. S., Padalia, R. C., Chauhan, A., Singh, A., &
Yadav,  A.  K.  (2011).  Volatile  Constituents  of Essential  Oil  and  Rose  Water  of  Damask  Rose (Rosa  Damascena  Mill.)  Cultivars  from  North
Indian Hills. Natural Product Research,25(17),1577–1584. https://doi.org/10.1080/14786419.2010.520162