## Kandungan Total Fenolat pada Ekstrak
Rhizophora sp Dari Teluk Awur,

## Jepara
Ali Ridlo * , Endang Supriyantini dan Sri Sedjati
Departemen Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro Jl. Prof Sudharto, SH., Tembalang, Semarang, Indonesia 50275
Email : aliridlo26@gmail.com

## Abstract
Total Phenolic Contents of Extract Mangroves Rhizophora sp. from Teluk Awur, Jepara
The  antioxidant  activity and  total phenolic  content  of  18  extracts  from  different plant  parts (leaves and stem bark) of 3 mangroves R. mucronata,  R. apiculata andR. stylosa from Teluk Awur, Jeparawere examined. The content of total phenolics in the extracts was calculated as gallic acid equivalent  (GAE)  and  antioxidant  activity  was  estimated  as  IC 50 values  using  1,1-diphenyl-2- picrylhydrazyl  (DPPH).  The  samples  were  extracted  with  n-hexane,  ethyl  acetate,  and  methanol respectively. The result showed that ethyl acetate extract of stem bark of R. apiculata holded the highest antioxidant activity with IC 50 47.52ppm. Rates of total phenolic content ranged from 5.15 ± 1.02 to 64.79 ± 2.75 mg GAE/g.There was a significant correlation between total phenolic content and antioxidant activity. The results indicated promising mangrove Rhizophora sp. for the utilization as significant source of natural antioxidant.
Keywords : antioxidant activity; DPPH; mangrove; Rhizophora sp.; total phenolics

## Abstrak
Telah dilakukan uji kandungan total fenolat dan aktivitas  antioksidan 18 ekstrak dari bagian tanaman (daun dan kulit batang) 3 spesies mangrove asal Teluk Awur Jepara, yaitu mangroves R. mucronata,    R.  apiculata dan R.  stylosa .  Kandungan  total  fenolat  ditentukan  sebagai  ekuivalen asam galat ( GAE ) dan  aktivitas antioksidan ditentukan berdasar Inhibition Concentration 50 (IC 50 ) dengan  menggunakan  radikal  bebas  DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) .  Sampel  diekstraksi secara bertngkat menggunakan n-heksana, etil asetat dan metanol. Hasil penelitian menunjukkan ekstrak  etil  asetat  kulit  kayu  mangrove R.  apiculata memiliki  aktivitas  antioksidan  terbaik  dengan IC 50 47.52ppm. Nilai kandungan total fenolat ekstrak berkisar antara 5.15 ± 1.02 sampai  64.79 ± 2.75 mg  GAE/g.  Terdapat  korelasi  kuat  antara  kandungan  total  fenolat  dengan  aktivitas  antioksidan. Hasil ini menunjukkan bahwa mangrove Rhizophora sp. dapat dijadikan sebagai sumber senyawa antioksidan alami.
Kata kunci : aktivitas antioksidan; total fenolat; DPPH; mangrove; Rhizophora sp.

## PENDAHULUAN
Rhizophora merupakan tumbuhan mangrove  yang  banyak  terdapat  di Indonesia,3  jenis  diantaranya  ditemukan  di Teluk  Awur  Jepara  yaitu R.  mucronata , R. apiculata dan R.  stylosa .  Secara  tradisional tanaman  mangrove  telah  dimanfaatkan sebagai  bahan  makanan  dan  minuman, sayuran, bahan penyamak kulit ( tanning ), zat
warna, pelangsing, antidiare dan antimuntah (Abidin et  al .,  2013).  Ekstrak  tanaman mangrove  menunjukkan  aktivitas  biologis seperti antibakteri, antimalaria, anti- karsinogen,  dan  antiviral  (Mohsen  &  Ammar, 2009;  Abidin et  al .,  2013;  Mouafi et  al .,  2014; Yogananth, et  al .,  2015;  Cruz et  al ., 2015).Beberapa  kajian  menunjukkan  bahwa tumbuhan mangrove juga berpotensi sebagai  antioksidan  (Banerjee et  al .,  2008;
Jurnal Kelautan Tropis Maret 2019 Vol. 22(1):27 –34
Mohsen and Ammar, 2009; Patra et al ., 2011; de-Faria et  al .,  2012;  Jacoeb et  al ., 2013;Purwaningsih et al., 2013; Suh et al ., 2014; Cruz et  al .,  2015;  dan  Paputungan et  al ., 2017).
Senyawa fenolat merupakan metabolit skunder  yang  banyak  terdapat  dalam tumbuhan dan berperan dalam pertumbuhan, reproduksi dan pertahanan diri (Pawar  and  Dasgupta,  2016). Rhizophora sp. mengandung senyawa fenolat benzophenon,  flavonoid,  asam  fenolat, tannin  dihidroflavonol,  asam  kafeat,  asam vanilat,  asam  p-hidroksi  benzoate,  asam lemak,  alkaloid, kumarin, fenol dan polifenol, quinon, resin, saponin, fitosterol, xanthoprotin, pigmen  dan  gula  (Abidin et  al., 2013). Senyawa  fenolat  seperti  asam  fenolat, flavonoid,  quinon,  lignan,  stilbena  dan  tanin dalam  mangrove  dapat  berfungsi  sebagai penangkap radikal bebas (Roby et al ., 2013). Radikal  bebas  seperti Reactive  Oxygen Species  (ROS),Reactive  Nitrogen  Species (RNS) dan Reactive
Sulfur Species (RSS ) dihasilkan  darireaksi  oksidasi  dalam  sel  dan dapat  memicu  terjadinya  reaksi  berantai ( chain  reaction )  dalam  sel.Radikal  bebas menyerang  semua  biomolekul,  terutama asam  lemak  tak  jenuh  ganda  penyusun membran sel membentuk lipidperoksida yang bersifat  sangat  merusak.  Radikal  bebas merupakan  salah  satu  penyebab  timbulnya berbagai penyakit degeneratif seperti kanker,  aterosklerosis,  stroke,  jantung,  gagal ginjal,  hipertensi,  katarak,  dan  penuaan  dini (Saha et  al. ,  2008).  Aktivitas  radikal  bebas dalam  tubuh  dapat  diredam  dengan pemberian antioksidan (Mohsen  dan  Ammar 2009).  Antioksidan  merupakan  spesies  kimia pemberi  elektron  ( electron  donor )  atau reduktan yang dapat menghambat, mencegah  atau  memperlambat   reaksi oksidasi.  Antioksidan  bekerja  dengan  cara mendonorkan elektron atau hidrogen kepada  radikal  bebas  sehingga  menjadi stabil(Nimse dan Pal, 2015).
Senyawa  flavonoid  (fenolat)  dapat berfungsi  sebagai  antioksidan  (Malik et  al ., 2017). Potensial reduksi radikal flavonoid lebih rendah  daripada  radikal  alkil  peroksil  dan superoksida,  sehingga  flavonoid  dapat
mereduksi  /  menonaktifkan  dan  meredam radikal  bebas.  Polifenol  bersifat  multifungsi karena  dapat  berperan  sebagai  agen pereduksi,  pendonor  hidrogen,  peredam terbentuknya  oksigen  singlet  ( 1 O 2 ),  radikal oksigen,  dan  pengkhelat  logam  (Hamlaoui,
2018). Senyawa fenolat/flavonoid
memproteksi  DNA  dari  radikal  hidroksil * OH. Kompleks  flavonoid-Cu  atau  flavonoid-Fe mencegah  terbentuknya ROS (Lü et  al ., 2010).  Senyawa  fenolat    memutus  reaksi berantai  radikal  bebas  dan  mendonorkan atom hidrogennya membentuk radikal bebas stabil. Struktur dan letak gugus hidroksil  (-OH) dalam  senyawa  fenolat  berperan  penting terhadap  aktivitas  antioksidan  (Nimse  dan Pal,
2015). Aktivitas
antioksidan mengindikasikan
adanya kemungkinan aktivitas  biologis  lainnya,  karena  antioksidan mampu
menghilangkan gangguan
metabolik  dan  keadaan  patologik  seperti kardiovaskular, respiratorik, infeksi, peradangan,  karsinogenesis  dan  penuaan. Antioksidan membantu mengatasi kerusakan oksidatif  akibat  radikal  bebas  atau  Spesies Oksigen Reaktif. Kerusakan oksidatif ini terlibat dalam patogenesis berbagai penyakit seperti alzheimer,  parkinson,  dan sklerosis  lateral amiotopik ,  penyakit  pada  gigi  dan  gusi (periodontal) penyakit kardiovaskular, hipertensi,  dan  diabetes  (Waddington et  al ., 2008).
Penelitian  ini  bertujuan  menentukan aktivitas  antioksidan  ekstrak  daun  dan  kulit batang    mangrove R.    mucronata , R. apiculata dan R.  stylosa dari  Teluk  Awur Jepara  dengan  metode  transfrer  elektron  / hidrogen  menggunakan  radikal  bebas  DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil) secara in vitro .

## MATERI DAN METODE
Dalam  penelitian  menggunakan  daun dan kulit batang mangrove R. mucronata, R. apiculata dan R.  stylosa yang  diambil  dari kawasan  mangrove  Teluk  Awur  Jepara. Sampel  diambil  dari  4  tegakan  yang berbeda,  dicampur,  kemudian  dibersihkan dan  dicuci  dengan  air  tawar,  dicacah, dikeringkan,  kemudian  digiling  sampai  halus (Banerjee et al., 2008)
Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi
bertingkat berturut-turut menggunakan pelarut n-heksana, etil asetat, dan metanol (Suh et al ., 2014). Sampel halus sebanyak    50  g  dimaserasi  dalam  400  mL  n- heksana selama  24  jam pada suhu ruang ± 27 o C, lalu disaring. Residu dimaserasi kembali selama 2 jam lalu disaring, filtratnyadiuapkan menggunakan rotary  evaporator pada  suhu 37 o C.  Residu  dimaserasi  kembali  berturut- turut  dalam  etil  asetat  dan  metanol  dengan cara  yang  sama  seperti  di  atas,  kemudian dievaporasi sampai diperoleh ekstrak.

## Uji Aktivitas Peredaman Radikal Bebas DPPH
Tiga    mL    larutan    ekstrak  dengan konsentrasi 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400 ppm ditambah 1 mL DPPH 0,1 mM, kemudian diinkubasi    selama  30    menit    pada  suhu ruang (27 o C) dan diukur absorbansinya pada panjang gelombang
516,5
nm.
AktivitasPeredaman  radikal  DPPH  dihitung menggunakan  rumus  (Suh et  al. ,  2014). Aktivitas  antioksidan  dinyatakan  dalam IC 50 yang  dihitung  dengan    regresi  linier antara  konsentrasi  ekstrak  versus  aktivitas peredaman (%).

## Pengukuran Kandungan Total Fenolat
Uji  kandungan  total  fenolat  dilakukan menggunakan reagen Folin-Ciocalteu dengan  asam  galat  sebagai  standar (Mohsen  dan  Ammar,  2009).  Disiapkan sebanyak  2  mL  Asam  galat  dengan konsentrasi  5,  10,15,  20  dan  25  ppm, kemudian  ditambahkan  5  mL    akuades  dan 0,5 mL reagen Folin-Ciocalteu, lalu didiamkan selama  3  menit.  Setelah  itu  ditambahkan  1 mL  larutan  Na 2 CO 3 5%  dan  diinkubasi  pada suhu  ruang  (28 o C)  selama  1  jam  dalam kondisi  gelap.  Larutan  tersebut  diukur absorbansinya  pada  panjang  gelombang 725  nm.  Cara  yang  sama  dilakukan  pada masing-masing  ekstrak.  Kandungan  total fenolat dihitung menggunakan rumus (Ghafar, 2010).

## Analisis Data
Data  dianalisis  dengan    uji  regresi  dan korelasi untuk menduga korelasi antara kadar
total  senyawa  fenolat  terhadap  aktivitas peredaman  radikal  bebas  DPPH.  Normalitas dan homogenitas data diuji dengan ANOVA.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada ketiga jenis mangrove, rendemen ekstrak metanol selalu lebih tinggi dibandingkan dengan ekstrak etil asetat dan n-heksana,  sedangkan  ekstrak  n-heksana hampir  selalu  paling  rendah(Tabel  1). Rendemen  tertinggi  dicapai  pada  ekstrak metanol  kulit  batang R.  mucronata ,  yaitu 25,38  %,  diikuti  ekstrak  metanolkulit  batang R. apiculata dan  ekstrak  metanol  daun R. mucronata. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  kulit batang  dan  daun  mangrove  lebih  banyak mengandung  senyawa  polar  seperti  alkohol, aldehid  dan  fenol  daripada  senyawa  semi polar dan non polar seperti hidrokarbon dan asam lemak (Abdurahman et al ., 2016).
Dalam satu spesies mangrove, rendemen  ekstrak  kulit  batang  selalu  lebih besar  daripada  daun,  yang  berarti  kulit batang  lebih  banyak  mengandung  zat ekstraktif  daripada  daun  (Banerjee et  al., 2008;  Malik et  al., 2017).  Kandungan  total fenolat  bervariasi  diantara  ketiga  spesies Rhizophora sp.  Secara  umum  ekstrak  kulit batang mengandung lebih banyak senyawa fenolat  daripada  daun.  Kulit  batang mangrove Rhizophora sp. Banyak mengandung  senyawa  golongan  fenolat seperti  polifenol,  flavonoid,  katekin  dan tannin yang berfungsi struktural dan pertahanan  diri  (Abdurahman et  al .,  2016). Kandungan total fenolat kulit batang berkisar antara  5,39mg  GAE/g  (ekstrak  metanol  kulit batang R. apiculata ) sampai 64,79 mg GAE/g (ekstrak etil asetat kulit batang R. apiculata) , sedangkan  pada  daun  antara  5,13  mg GAE/g(ekstrak  n-heksana  daun R.  stylosa ) sampai  54,48  mg  GAE/g(ekstrak  etil  asetat daun R.  apiculata )  (Gambar  1).  Hasil  ini sesuai  dengan  mangrove  dari  Setiu  Wetland Malaysia (Malik et al. , 2017)
Hasil  penelitian  juga  menunjukkan senyawa  fenolat  dapat  terekstraksi  dengan ketiga  pelarut  yang  digunakan,  sehingga diduga  ketiga  jenis  mangrove  tersebut mengandung  senyawa  fenolat  yang  bersifat non  polar,  semi  polar  dan  polar  dengan
komposisi yang berbeda. Menurut Close dan McArthur (2002), kadar total fenolat tumbuhan  mangrove  bervariasi  tergantung pada spesies, bagian tanaman (kulit batang, daun  dan  akar)  dan  kondisi  lingkungannya, serta  kadarnya  meningkat  pada  lingkungan yang tertekan (Banerjee et al ., 2008; Rahim et a.l , 2008; Suh et al ., 2014).
Uji  aktivitas  antioksidan  terhadap  18 ekstrak  menunjukkanIC 50 ekstrak  kulit  batang berkisar  antara  47,52  ppm  sampai  289,52 ppm,  sedangkan  untuk  ekstrak  daun  antara 72,15 ppm sampai 342,94 ppm (Gambar 2).
Terdapat  1  ekstrak  memiliki  aktivitas sangat  kuat  (IC 50 <  50  ppm)  yaitu  ekstrak  etil asetat  kulit  batang R.  apiculata ,  3  ekstrak memiliki aktivitas kuat (IC 50 50 – 100 ppm) yaitu ekstrak n-heksana kulit batang R. mucronata, ekstrak  etil  asetat  daun R. apiculata dan  ekstrak  metanol  daun R. stylosa . Lima ekstrak  memiliki aktivitas sedang (IC 50 100  –  150  ppm),  3  ekstrak  memiliki aktivitas  lemah  (IC 50 150  –  200  ppm)  dan  6 ekstrak  bersifat  sangat  lemah  (IC 50 >  200 ppm).
Ada  korelasi  kuat  (0,693)  antara  total fenolat  dengan  aktivitas  antioksidan  (IC 50 ) dengan  R 2 =  0,481.  Uji  ANOVA  menunjukkan bahwa kandungan total fenolat berpengaruh  terhadap    IC 50 .  Semakin  kuat aktivitas antioksidan (IC 50 semakin kecil) yang ditunjukkan  pada  ekstrak  etil  asetat  kulit batang R. apiculata , ekstrak metanol daun R. stylosa ,  ekstrak  n-heksana  kulit  batang R. mucronata dan  ekstrak  etil  asetat  daun R. apiculata , kadar fenolat cenderung semakin tinggi.  Hasil  ini  sesuai  dengan  aktivitas antioksidan ekstrak mangrove dari Sundarban  (India)  (Banerjee et  al .,  2008), mangrove R.  stylosa dari  Micronesia  (Suh et al .,  2014),  dan  ekstrak  daun  mangrove  dari Setiu Wetland Malaysia (Malik et al. , 2017).
Senyawa  fenolat  berfungsi  sebagai pelindung  tumbuhan  dari  kerusakan  akibat cahaya yang berlebihan dengan carabertindak  sebagai  antioksidan,  dan melindungi  mangrove  dari  kerusakan  akibat herbivori, patogen, dan radiasi sinar ultraviolet( photodamage )(Banerjee et  al ., 2008;  Kenneth  dan  belema,  20117;  Pawar dan  dasgupta,  2018).  Kemampuan  ekstrak
Tabel 1 . Hasil Ekstraksi Kulit batang dan daun Mangrove dari Teluk Awur Jepara
No Spesies Pelarut Berat Ekstrak (g) Rendemen (%) 1 R. mucronata Kulit batang Heksana 0,15 ± 0,06 0,32 Etil asetat 0,75 ± 0,10 1,50 Metanol 12,69 ± 1.45 25,38 Daun Heksana 0,64 ± 0,09 1,28 Etil asetat 2,64 ± 0,54 5,28 Metanol 11,21 ± 2,76 22,42 2 R. apiculata Kulit batang Heksana 0,15 ± 0,07 0,30 Etil asetat 0,35 ± 0,11 0,72 Metanol 11,34 ± 1,89 22,68 Daun Heksana 1,15 ±0,44 2,30 Etil asetat 1,12 ± 0,13 2,25 Metanol 3,44 ± 0, 68 6,88 3 R. stylosa Kulit batang Heksana 0,16 ± 0,08 0,31 Etil asetat 0,16 ±0,05 0,33 Metanol 9,67 ± 1,23 19,35 Daun Heksana 0,72 ± 0.17 1,45 Etil asetat 1,25 ± 0.29 2,50 Metanol 4,05 ± 1,09 8,11
Gambar  1 . Kandungan total fenolat ekstrak mangrove
Gambar 2 . IC 50 Ekstrak mangrove
untuk  meredam  radikal  DPPH  terutama disebabkan  sifat  ekstrak  yang  mampu berperan  sebagai  agen  pereduksi,  karena potensial reduksi  radikal fenolat lebih rendah daripada radikal alkil peroksil dan superoksida, sehingga fenolat dapat mereduksi  /  menonaktifkan  dan  meredam radikal  bebas.  Senyawa  fenolat  bereaksi lebih  kuat  dengan  radikal  peroksil  daripada dengan  DPPH  (Foti et  al .,  2008).Senyawa polifenol  bersifat  multifungsi  karena  dapat berperan sebagai agen pereduksi, pendonor hidrogen,  dan  peredam  radikal  oksigen,
bahkan  sebagai  pengkelat  logam  pada beberapa kasus (Rice-Evans et al. , 1996).
Senyawa  fenolat  bekerja  sebagai antioksidan melalui pemutusan reaksi berantai  ( chain  reaction )  radikal  dan mendonorkan atom hidrogen dari gugus –OH atau  elektro  sehingga  dihasilkan  radikal bebas yang lebih stabil (Nimse dan Pal, 2015) melalui  dua  mekanisme  reaksi  yaitu  (1) Hydrogen  Atom  Transfer  (HAT), kecepatan reaksinya  dengan  DPPH  tergantung  pada energy  barrier pemindahan  atom  H.  Jika
0 10 20 30 40 50 60 70 R. mucronata(batang) R. mucronata(daun) R. apiculata(batang) R. apiculata(daun) R. stylosa(batang) R. stylosa(daun) Tot a l fenola t ( m g GA E/ g ) Heksan Etil asetat Metanol 0 50 100 150 200 250 300 350 400 R. mucronata(batang) R. mucronata(daun) R. apiculata(batang) R. apiculata(daun) R. stylosa(batang)
R. stylosa(daun)
IC 50 (pp m ) Heksan Etil asetat Metanol
entalpi  disosiasi  ikatan  antioksidan-H  rendah, maka  energi  barrier  juga  rendah,  yang berarti reaksi akan terjadi semakin cepat dan semakin mudah memberikan atom H kepada DPPH.Reaksi  ini  juga  dipengaruhi  oleh  posisi atom  H  ortho  dan  gugus  NO 2 ortho    pada kedua  cincin  fenil  DPPH  (Foti et  al .,  2008). Mekanisme  (2)  adalah Single  Electron
Transfer - Proton
Transfer
( SET-PT ), yang berlangsung  melalui  3  tahap  reaksi  yang melibatkan  transfer  elektron  dari  reduktor kepada DPPH diikuti dengan transfer  proton kepada  DPPH  sehingga  terbentuk  DPPH-H non radikal (Foti et al ., 2008; Hamlaoui et al ., 2018),  delokalisasi  elektron  dalam  molekul DPPHdan  intensitas  warna  unguberkurang (berubah  menjadi  kuning  muda)  (Molyneux, 2004).
Reaksi  DPPH  dengan  senyawa  fenolat berbanding  lurus  dengan  jumlah  hidrogen dari gugus hidroksil, struktur molekul dan posisi gugus  hidroksil  (-OH)  pada  senyawa  fenolat. Senyawa  fenolat  yang  mempunyai  gugus hidroksil pada posisi ortho dan para terhadap gugus–OR, biasanya memiliki aktivitas antioksidan yang kuat (Hamlaoui et al ., 2018). Aktivitas peredaman radikal bebas DPPH oleh ekstrak  mangroveRhizophora    membuktikan bahwa  mangrove  memiliki  kemampuan sebagai  antioksidan  serta  menggambarkan keefektifan,  kemampuan  pencegahan  dan mekanisme  perbaikan  dalam  mengatasi kerusakan pada sistem biologis (Vimala et al. , 2003).

## KESIMPULAN
Hasil uji terhadap 18
ekstrak menunjukkan bahwa 1 ekstrak  etil asetat kulit batang R.  apiculata memiliki  aktivitas antioksidan  sangat  kuat,3  ekstrak  memiliki aktivitas  antioksidan  kuat  yaitu  ekstrak  n- heksana kulit batang R. mucronata, ekstrak etil asetat  daun R.  apiculata dan  ekstrak metanol  daun R.  stylosa .  Limaekstrak memilikiaktivitas  sedang,  3  ekstrak  memiliki aktivitas lemah, dan 6 ekstrak bersifat sangat lemah.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdurahman, N. H., Nitthiya, J. & Omer, M. S. 2016. Composition and Biological
Activities  as  Mangrove  Plants. Australian J. Basic App. Science . 10(4):114-139
Abidin,    N.A.Z.,  Halim,  N.H.A.  &  Me.  R.  2013. Basic Study of Chemical Constituents in R. Species. The  Open  Conference  Proc.  J. 4(Suppl-2, M7):27-28.
Banerjee,  D.S.  Chakrabarti,  A.,    Hazra,  K., Banerjee,  S.,  Ray,J.  &  Mukherjee,B.  2008. Antioxidant  activity  and  total  phenolics of  some  mangroves  in  Sundarbans African J. Biotechnol . 7(6):805-810, Cruz  S.  M.,  Marroquín,  N.,  Alvarez,  L.  E., Chang,  D.E.  &  Cáceres,  A.  2015. Evaluation  of  Mangrove  ( Rhizophora mangle L.)  products  as  coloring, antimicrobial  and  antioxidant  agents. J. Phytocosmetics  and  Natural  Ingredients , 2:1210-1215.
de-Faria,  F.M.,  Almeida,  A.C.A.,  Luiz-Ferreira, A.,  Takayama,  C.,  Dunder,  R.J.,  da  Silva, M.A.,  Salvador,  M.J.,  Abdelnur,  P.V., Eberlin,  M.N.,  Vilegas,  W.  &  Toma,  W., 2012.  Antioxidant  Action  of  Mangrove Polyphenols  against  Gastric  Damage Induced  by  Absolute  Ethanol  and Ischemia-Reperfusion  in  the  Rat. The  Sci. World J. 2012:9 pages Foti,  M.C.,  Daquino,  C.,  MackieI,  D.,  DiLabio,
G.A.  &  Ingold,  K.U.  2008.  Reaction  of
Phenols with The 2,2-Diphenyl-1-
picrylhydrazyl  Radical.  Kinetics  and  DFT Calculation  Apllied  to  Determine  ArO-H
Bond Dissosiation Enthalpies and Reaction  Mechanism. J.  Org.  Chem.
73:9270-9282
Ghafar, M.F.A., Prasad, K.N., Weng & Ismail,A.. 2010.  Flavonoid,  Hesperidine,  Total Phenolic  Contents  and  Antioxidant Activities  from  Citrus  Species. African  J. Biotechnol. 9(3):326-330 Hamlaoui, I., Bencheraiet, R., Bensegueni, R. & Bencharif,  M.,  2018  Experimental  and Theoritical  Study  on  DPPH  Radical Scavenging Mechanism of Some
Calchone  Quinoline  Derivatives. J.  Mol. Structure . 11(56):385–389.
Jacoeb, A.M., Purwaningsih, S., & Rinto. 2011.
Anatomi, Komponen Bioaktif dan Aktivitas  Antioksidan  Daun  Mangrove Api-api (Avicennia marina) . J. Pengolahan  Hasil  Perikanan  Indonesia. 14(2):143-152. Kenneth, E.M. & Belema, T. 2017.
Comparative  Evaluation  of  The  Phenolic
and Antioxidant propertise of Tke Leaves, Root,  Stem  Bark  of Annona  muricata . J. Pharmacog. Phytochem. 6(2):274–278. Lü,  J.M.,  Lin,  P.H.,  Yao,  Q.  &  Chen,  C.  2010.
Chemical and Molecular Mechanisms of Antioxidants  :  Experimental  Approaches and  Model  Systems. J.  Cell.  Mol.  Med. 14(4):840-860
Malik, N.H., Zin, Z.M., Razak, S.B.A., Ibrahim, K. &  Zainol,  M.K.  2017.  Antioxidative Activities  and  Flavonoids  Contens  in Leaves of Selected Mangrove Species in Setiu  Wetland  Extracted  Using  Different Solvent. J. Sustain.Sci. Manag. 3:24–34 Maurya,  S.  &  Singh,  D.  2010.  Quantitative Analysis  of  Total  Phenolic  Content  in Adhatoda  Vasica  Nees  Extracts, Int.  J.
Pharm. Tech Res. 2(4):2403-2406
Mohsen,  S.M.  &  Ammar,  A.S.M.  2009.  Total Phenolic  Contents  and  Antioxidant Activity  of  Corn  tassel  Extracts. J.  Food Chem. 11(2):595-598.
Molyneux,  P.  2004.  The  Use  of  Stable  Free
Radical Diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for Estimating Antioxidant Activity. Songklanakarin. J. Sci. Technol. 26(2):211- 219.
Mouafi,  F.E.,    Abdel-Aziz,  S.M.  Bashir,  A.A.  &
Fyiad,  A.A.  2014.  Phytochemical  Analysis and  Antimicrobial  Activity  of    mangrove Leaves ( Avicenna marina and Rhizophora stylosa ) Against Some Pathogens. World  App.  Sci.  J. 29(4):547- 554
Nimse,  S.B.  &  Pal,  D.  2015.  Free  Radicals,
Natural  Antioxidants,  and  Their  Reaction Mechanisms. The  Royal  Soc.  Chem.
5:27986–28006
Patra,  J.K.,  Dhal,  N.K.  &  Thatoi,  H.N.  2011.  In vitro  bioactivity  and  phytochemical screening  of  Suaeda  maritima  (Dumort): A mangrove associate from Bhitarkanika, India. Asian Pacific J. Trop. Med. 4(9):727-
734
Paputungan, Z.,  Wonggo, D. & Kaseger, B. E.
2017. Uji Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan  Buah  Mangrove Sonneratia alba Di  Desa  Nunukan  Kecamatan Pinolosian Kabupaten Bolaang Mangondow  Selatan. J.  Media  Teknol.
Hasil Perikanan. 5(3):190-196
Pawar, S.S. & Dasgupta, D. 2018.
Quantiﬁcation  of  Phenolic  Content  from Stem-Bark  and  Root  of Hugonia  mystax Linn.  using  RP-HPLC. J.  King  Saud University Sci. 30:293-300 Purwaningsih,  S.,  Salamah,  E.,  Sukarno,  A.Y.P.
& Deskawati, E., Aktivitas Antioksidan Dari Buah  Mangrove  ( Rhizophora  mucronata Lamk) Pada Suhu Yang Berbeda. J. Hasil Pengolahan Perikanan
Indonesia.
16(23):199-206
Rahim,  A.A.,  Rocca,  E.,  Steinmetz,  J.,  Kassim, M.J.,  Ibrahim,  M.S.  &  Osman,  H.  2008.
Antioxidant activity of mangrove Rhizophoraapiculata bark  extracts. Food Chem. 107:200-207.
Rice-Evans,  C.,  Miller,  N.J.  &  Paganga,  G. 1996.  Structure  Antioxidant  Activity Relationships  of  Flavonoids  and  Phenolic Acids. Free  Radical  Biol.  Med. 20(7):933- 956
Roby,  M.H.H.,  Sarhan,  M.A.,  Selim,  K.A.H.  &
Khalel, K.I., 2013. Evaluation of antioxidant  activity,  total  phenols  and phenolic  compounds  in  thyme  ( Thymus vulgaris L .), sage ( Salvia officinalis L .), and marjoram  ( Origanum  majorana  L .) extracts .  Industrial  Crops  and  Products,
43:827–831.
Saha,  M.R.,  Hasan,  S.M.R.,  Akter,  R.,  Hossain, M.M.,  Alam,  M.S.,  Alam,  M.A.  & Mazumder,  M.E.H.,  2008.  In  vitro  free radical  scavenging  activity  of  methanol extract of the leaves of Mimusops elengi linn. Bangladesh J.  Veteriner  Med. 6(2):197-200
Suh,  S.S.,  Hwang,  J.M.,  Park,  H.S.  &  Lee,  T.K. 2014.  Phenol  content,  antioxidant  and tyrosinase inhibitory activity of mangrove plants in Micronesia. Asian Pacific J. Trop.
Med. 7(7):531-535 Vimala,  S.,  Adenan,  M.I.,  Ahmad,  A.R.  & Shahdan,  R.  2003.  Nature’s  Choice  to Wellness  Antioxidant  Vegetables/Ulam. Forest  Research  Institute  Malaysia,  Kuala Lumpur, 31-33.
Waddington,  R.J.,  Moseley,  R.  &  Embery,  G. 2008.  Periodontal  Disease  Mechanisms: Reactive  Oxygen  Species:  A  Potential Role  in  The  Pathogenesis  of  Periodontal Diseases. Oral Diseases , 6(3):138-151.
Yogananth,  N.,  Anuradha,  V.,  Ali,  M.Y.S.,
Muthezhilan,  R.,  Chanthuru,  A.  &  Prabu, M.M.,  2015.  Chemical  properties  of essential  oil  from  Rhizophora  mucronata
mangrove leaf against malarial mosquito Anopheles stephensi and filarial mosquito Culex  quinquefasciatus. Asian  Pacific  J. Trop. Disease , 5:S67-S72.