Accredited by Ministry of Research, Technology
DOI: https://doi.org/10.35799/jis.21.1.2021.31172 and Higher Education No: 28/E/KPT/2019 Available online at https://ejournal.unsrat.ac.id/index.php/jis
Patogenisitas Beauveria bassiana (Bals.) Viull. yang Diisolasi dari Beberapa Jenis Inang Terhadap Kepik Hijau, Nezara viridula L. (Hemiptera: Pentatomidae)
Parluhutan Siahaan 1 * ) , Jusak Wongkar 2), Susan Wowiling 2) Rowland Mangais 1)
1) Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sam Ratulangi, Manado, Indonesia
2) Balai Perlindungan dan Pengujian Mutu Tanaman Pangan dan Hotikultura, Dinas Pertanian dan Peternakan Daerah Provinsi Sulawesi Utara, Manado, Indonesia
* Corresponding Author : luhut.siahaan68@unsrat.ac.id

## ABSTRAK
Kepik Hijau ( Nezara viridula L.) merupakan hama penting bagi beberapa tanaman pangan seperti kedelai,   padi   dan   jagung.   Salah   satu   upaya   untuk   mengendalikan   hama   adalah   dengan pemanfaatan    entomopatogen,    seperti    virus,    bakteri    maupun    jamur.    Salah    satu    jamur entomopatogen   yang berpotensi untuk dieksploitasi adalah Beauveria bassiana yang mempunyai berbagai jenis inang. Belum diketahui patogenesitas B. bassiana yang diisolasi dari beberapa jenis inang terhadap hama kepik hijau ( N. viridula ), untuk itulah penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk  mengetahui  patogenesitas B.  bassiana yang  diisolasi  dari    inang  yang  berbeda  terhadap hama  kepik  hijau  ( N.  viridula ).  Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium  Agens  Hayati  (LAH) Kalasey, Balai Perlindungan dan Pengujian Mutu Tanaman Pangan dan Hortikultura (BPPMTPH), Dinas Pertanian dan Peternakan Daerah Provinsi Sulawesi Utara.   Penelitian dilakukan secara in- vitro dengan  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  6  perlakuan  yaitu  (Kontrol negatif , N1: suspensi B. bassiana isolat WBC (wereng batang coklat), N2: suspensi B. bassiana isolat  Jati  Sari  sebagai  kontrol  positif  (rekomendasi  Kementan),  N3:  suspensi B.  bassiana isolat Paraeucosmetus  pallicornis (kepik  hitam),  N4:  suspensi B.  bassiana isolat Leptocorisa  acuta (walang  sangit)  dan  N5:  suspensi B.  bassiana isolat Scotinopara  coarctata (kepinding  tanah). Perlakuan  menggunakan  konsentrasi  atau  kerapatan  konidia  10 9 /ml  air,  dengan  5  ulangan.  Data dianalisis  dengan  Uji  Anava  95%  dan  analisis  probit  untuk  menentukan  LT 50 ( Lethal  Time 50). Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  jamur B . bassiana isolat  Jati  Sari  memiliki  patogenisitas tertinggi  dengan  membunuh  kepik  hijau  ( N.  viridula )  sampai  100%  pada  hari  ke-5  HSP  (hari setelah perlakuan),  sedangkan  isolat lain semuanya  pada hari  ke-6 HSP. Nilai   LT 50 (waktu yang dibutuhkan untuk membunuh 50% serangga uji) terdapat pada isolat P. pallicornis yaitu  2,1 hari. Persentasi  mortalitas  pada  hari  ke-3  HSP  tertinggi  terdapat  pada  perlakuan  isolat P.  pallicornis dengan  rata-rata  mortalitas  sebesar  78%  diikuti  isolat L.  acuta dan S.  coarctata masing-masing sebesar  68%      dan  isolat  Jati  sari  sebesar  58%,  sedangkan  mortalitas  terendah  terdapat  pada perlakuan  isolat  WBC  yaitu  sebesar  32%.  Tidak  ada  perbedaan  patogenisitas  yang  signifikan diantara isolat Jati Sari, P. pallicornis, L. acuta maupun S. coarctata kecuali isolat WBC.
Kata kunci : Beauveria bassiana; Entomopatogen; Nezara viridula
Pathogenicity of Beauveria bassiana (Bals.) Viull. Isolated from Several Host Species Against Green Ladybug, Nezara viridula L. (Hemiptera: Pentatomidae)

## ABSTRACT
Green Ladybugs ( Nezara viridula L.) are important pests for several food crops such as soybeans, rice and corn. One of the efforts to control this pest is the use of entomopathogens, such as viruses, bacteria and fungi. One of the entomopathogenic fungi that has the potential to be exploited is the fungus Beauveria bassiana . The fungi B. bassiana has various of hosts. There are no data on the pathogenicity   of B.   bassiana isolated   from   several   host   species   against   green   ladybugs ( Nviridula ), for that reason this study was conducted with the aim of knowing the pathogenicity of B. bassiana isolated from different hosts against green ladybugs ( N. viridula ).. This research was conducted  at Laboratory of Biological Control Agents,  the Center  for the Protection  and Quality Testing of Food Crops and Horticulture, the Regional Agriculture and Livestock Service Office of
North  Sulawesi  Province.  The  research  was  conducted  in-vitro  using  a  completely  randomized design  (CRD)  with  6  treatments,  namely  (Negative  control,  N1:  suspension B.  bassiana ,  WBC isolate  (brown  planthopper),  N2: B.  bassiana suspension,  Jati  Sari  isolate  as  a  positive  control (Ministry of Agriculture Recommendation), N3 : B. bassiana suspension isolate Paraeucosmetus pallicornis (black ladybug), N4: suspension B. bassiana isolate Leptocorisa acuta (Rice ear bug) and  N5:  suspension B.  bassiana isolate Scotinopara  coarctata (rice  black  bug)  Treatment  using conidia  concentration  or  density  10 9 /  ml  water,  with  5  replications.  Data  were  analyzed  with Anava test 95% and probit analysis to determine LT 50 (Lethal Time 50). The results showed that the fungus B. bassiana Jati Sari isolate had the highest pathogenicity, because this isolate was able to kill green ladybugs ( N viridula ) to 100% on the 5th day of DAT (the day after treatment), while the other isolates were  all on the 6th DAT.  While  the  value  of  LT 50 (time  needed to kill  50% of the insect test) was found in P. pallicornis isolates which were 2,1 days of DAT. Because LT 50 in all isolate treatments was between the 2nd and 3rd day of DAT, the Anava test for mortality was carried out  on  the  3rd  day  of  DAT.  The  highest  percentage  of  mortality  on  the  3rd  day  of  DAT was found in the treatment of P. pallicornis isolates with an average mortality of 78% followed by L.  acuta and S.  coarctata isolates  each  at  68%  and  Jati  sari  isolates  at  58%,  while  the  lowest mortality  was  found  in  the  treatment  of  WBC  isolates,  namely  32%.  There  was  no  significant difference  in  pathogenicity  between  Jati  Sari, P.  pallicornis,  L.  acuta and S.  coarctata isolates except for WBC isolates.
Keywords: Beauveria bassiana; Entomopatogen; Nezara viridula
(Article History:  Received 11-11-2020; Accepted 27-02-2021; Published 06-03-2021)

## PENDAHULUAN
Kepik  Hijau  ( Nezara  viridula L.) merupakan  salah  satu  hama polifag terbesar di  dunia  yang  berkembang  baik  di  daerah tropis   dan   subtropis   benua   Eropa,   Asia, Afrika  dan  Amerika  (Knight  &  Gurr,  2007). Kepik  hijau  menjadi  hama  penting  bagi beberapa   tanaman   pangan   seperti   kedelai, padi dan jagung. Kepik hijau juga menyerang tanaman  kacang  panjang,  cabai,  kapas,  jeruk dan tanaman polong lainnya (Prayogo, 2013). Nimfa  dan  imago  kepik  hijau  merusak tanaman  dengan  dengan  cara  menusukkan stiletnya pada buah dan biji dari tanaman lalu menghisap    cairan    pada    buah    dan    biji sehingga  mengakibatkan  kerusakan  (Afrinda et  al .,  2014).  Stadia  nimfa  maupun  imago hama  kepik  hijau  mempunyai  peluang  yang sama  besar  dalam  menyebabkan  kerusakan tanaman,  dimana      kehilangan  hasil  akibat serangan  hama  kepik  hijau  dapat  mencapai 80% (Correra & Azevedo, 2002).
Pengendalian  hama  kepik  hijau  yang dilakukan  oleh  petani  pada  umumnya  masih menggunakan pestisida sintetik yang dilakukan  secara  intensif.    Penggunaan pestisida  sintetik  secara  terus-menerus  dapat menimbulkan  berbagai  dampak  negatif, diantaranya  terbunuhnya  musuh  alami  dan akumulasi  residu  pestisida  (Suprayogi et  al ., 2015).  Salah  satu  alternatif  yang  dilakukan untuk    mengurangi    dampak    negatif
penggunaan pestisida sintetik agar aman  bagi lingkungan,    adalah    dengan    pengendalian hama  terpadu  (PHT)  meliputi  pengendalian secara  kultur  teknis  dan  pengendalian  hayati, sedangkan  pestisida  hanya  digunakan  bila perlu (Hasna et al. , 2012).
Salah  satu  komponen  dalam  PHT adalah pemanfaatan entomopatogen.
Entomopatogen merupakan   salah   satu   jenis bioinsektisida  yang  dapat  digunakan  untuk mengendalikan hama tanaman. Jamur entomopatogen  yang  sudah  diketahui  efektif mengendalikan  hama  penting  pada  tanaman pertanian  adalah B.  bassiana (Bals.)  Viull. Pemanfaatan  jamur  entomopatogen  dalam pengendalian  hama karena mempunyai kelebihan  yaitu  kapasitas  reproduksi  yang tinggi,  siklus  hidupnya  pendek, dapat membentuk  spora  yang  tahan  lama  di  alam walaupun dalam kondisi yang tidak menguntungkan (Afrinda et al ., 2014). Jamur
B.  bassiana dilaporkan  sebagai  agensi  hayati yang  tersebar  luas  dan  sangat  efektif mengendalikan  sejumlah  spesies  serangga hama      termasuk      rayap,  kutu  putih  dan beberapa jenis kumbang (Soetopo & Indrayani, 2007).
Hasil  penelitian  Brotodjojo et  al . (2020),  Aplikasi B. bassiana dengan konsentrasi  30  g/L  terhadap Hypothenemus hampei menghasilkan  mortalitas  tercepat ( Mortality  time  and  Lethal  Time 50%)  yaitu
pada 14,14 hari setelah perlakuan.    Penelitian yang  dilakukan  oleh  Bayu & Prayogo (2017) menunjukkan  bahwa  aplikasi B.  Bassiana sebanyak  empat  sampai  enam  kali  dapat menekan  populasi Empoasca sp., Riptortus linearis , dan Maruca testulalis. Hasil penelitian  Hajek et  al .  (2020)  menemukan bahwa aplikasi tunggal B. bassiana mengurangi nimfa L. delicatula instar keempat sebesar  48%  setelah  14  hari.  Aplikasi B. bassiana pada L. delicatula dewasa  di  taman yang    sama    menghasilkan  43%  kematian setelah  14  hari.    Penelitian  Permadi et  al . (2019)    menemukan    bahwa  aplikasi B. Bassiana menyebabkan  kematian  terhadap hama N. viridula sebesar 66,67 %.
Penelitian-penelitian
mengenai patogenitas B.  bassiana terhadap  kepik  hijau dan  serangga-serangga  lain  telah  banyak dilakukan,    namun    belum    diketahui bagaimana  patogenesitas B.  bassiana yang diisolasi  dari  jenis  inang  yang  berbeda  dan diaplikasikan terhadap kepik hijau. Penelitian ini bertujuan  untuk  mengetahui patogenesitas B.  bassiana yang  diisolasi  dari    inang  yang berbeda  terhadap  hama  kepik  hijau  ( N. viridula ).

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  telah  dilaksanakan  pada bulan  Juli-Agustus  2020  di  Laboratorium Agens Hayati (LAH), Balai Perlindungan dan Pengujian  Mutu  Tanaman  Pangan  dan Hortikultura  (BPPMTPH),  Dinas  Pertanian dan  Peternakan  Daerah  Provinsi  Sulawesi Utara.  Alat          yang  digunakan  adalah erlenmeyer ,  gelas  ukur,  botol  plastik, shaker, handsprayer , autoclaf ,    lampu    bunsen, laminar  air  flow,  petridish ,    saringan,  pipet tetes, haemocytometer .
Penelitian   dilakukan   secara in-vitro dengan     menggunakan     Rancangan     Acak Lengkap (RAL) dengan 6 perlakuan yaitu:
1) Kontrol negatif,
2)  WBC: B.  bassiana isolat  WBC  (wereng batang coklat),
3)  JS: B.  bassiana isolat  Jati  Sari  sebagai kontrol positif (rekomendasi Kementan),
4) PP: B. bassiana isolat P. pallicornis (kepik hitam),
5)  LA: B.  bassiana isolat L.  acuta (walang sangit) dan
6)   SC: B.   bassiana isolat S.   coarctata (kepinding tanah).
Perlakuan  menggunakan  konsentrasi atau kerapatan  konidia  10 9 /ml  air,  dengan  10 ekor  kepik  hijau  nimfa  instar  III    dan  5 ulangan.

## Perkembangbiakan Serangga Kepik Hijau
Kelompok  nimfa  maupun  imago  kepik hijau  diperoleh  dari  lahan  pertanaman cabai di      kebun      percobaan      (KP)      Balai Perlindungan Tanaman Pangan dan Hortikultura  Desa  Kalasey.  Kelompok  nimfa pada  isntar  III  yang  diperoleh  dari  lapangan kemudian   dimasukkan   ke   dalam   kurungan kain  kasa  untuk  dilakukan rearing . Setiap kurungan  diisi  tanaman  cabai  yang  terbebas dari  residu  insektisida  kimia.  Nimfa  maupun imago  kemudian  dipelihara  di  dalam   rumah kaca.  Masing-masing  stadia  nimfa  yang umurnya  sama  dimasukkan  ke  dalam  satu kurungan  untuk  menghindari  kompetisi  antar umur  stadia  serangga.    Selanjutnya,  10  ekor nimfa  instar  tiga  diamasukan  kedalam  botol plastik  yang  berisi daun dan buah cabai  yang sudah dicuci bersih untuk pakan nimfa.
Perbanyakan Jamur Entomopatogen B. bassiana
Isolat Jamur B. bassiana yang digunakan   sebagai   perlakuan   adalah   hasil eksplorasi di  Kecamatan Dumoga  Kabupaten Bolaang    Mongondow    Provinsi    Sulawesi Utara  pada  tahun  2020  berasal  dari  serangga Nilaparvata lugens, Leptocorisa sp , Paraeucosmetus sp dan    Scotinopara sp . Isolat  Jamur B.  Bassiana yang  berasal  dari Jati  Sari  digunakan  sebagai  pembanding. Isolat  Jamur  dikulturkan  pada  media potato dextrose  agar (PDA)  di  dalam  cawan  Petri. Setelah   berumur   14   hari   setelah   inokulasi (HSI),   isolat  Jamur  diperbanyak  pada  media beras  dengan  tujuan  untuk  memproduksi konidia  dalam  jumlah  yang  optimal.  Beras sebagai  calon  media  tumbuh  sebelumnya dicuci  menggunakan  air,  setelah  bersih kemudian  direndam  di  dalam  air  selama  dua jam. Setelah direndam, dimasukkan ke dalam kantong   plastik   kemudian   diikat.   Media beras  disterilisasi  di  dalam autoclave pada temperatur 121°C selama 30 menit kemudian dibiarkan   hingga   dingin.   Setiap   kantong plastik  yang  berisi  media  beras  diinokulasi dengan  suspensi B.  bassiana pada  100  g media.
Aplikasi Suspensi Konidia Jamur B. bassiana
Jumlah  konidia  dihitung  menggunakan
haemocytometer hingga memperoleh kerapatan  konidia  10 9 /ml.  Biakan  Jamur B. bassiana dengan  kerapatan  konidia  10 9 /ml, selanjutnya dimasukkan ke dalam erlenmeyer yang  dicampur dengan  air kemudian dikocok menggunakan shaker selama  kurang  lebih  30 menit  dengan  tujuan  merontokkan  konidia yang  terbentuk.    Selanjutnya  disaring  meng- gunakan  kain  kasa  halus  untuk  memisahkan konidia dengan media biakan jamur. Aplikasi pada  masing-masing  perlakuan  dilakukan pada  sore  hari  dengan  cara  menyemprotkan suspensi  konidia  sebanyak  10  ml  pada serangga uji sebanyak 1 kali. Setiap dua hari, cabai  sebagai  pakan  nimfa  yang  diuji  diganti dengan cabai yang segar.

## Pengamatan dan Analisi Data
Pengamatan  dilakukan  setiap  hari dengan  menghitung  mortalitas  nimfa setelah   disemprot   jamur B.   bassiana.
Data  yang  diperoleh  dianalisis  dengan SPSS,  untuk  mencari  LT 50 ( Lethal  Time 50)  menggunakan  analisis  probit  dan analisis varian dengan uji Anava. Bila ada perbedaan antara perlakuan dilanjutkan
dengan  uji  beda  nyata  terkecil pada taraf α 5%.
HASIL DAN PEMBAHASAN

## Mortalitas
Jamur  entomopatogen B.  bassiana mampu menginfeksi serangga  kepik hijau ( N. viridula ),  dan  mempengaruhi  mortalitas  dari kepik  hijau.  Rata-rata  mortalitas  kepik  hijau untuk   setiap   perlakuan   isolat B.   bassiana dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar  1  menunjukkan  rata-rata mortalitas  kepik  hijau  untuk  setiap  isolat B. bassiana dari hari ke-1 sampai ke-6 HSP (hari setelah  perlakuan).  Hari  pertama  HSP menunjukkan  bahwa B.  bassiana isolat L. acuta,  S.  coarctata dan P.  pallicornis telah mampu  membunuh  kepik  hijau  dengan mortalitas  diatas  20%,  berbeda  dengan  isolat Jati  Sari  dan  WBC  yang  pada  hari  pertama setelah  perlakuan  belum  mampu  membunuh serangga kepik hijau. Isolat WBC menunjukkan  mortalitas  yang  lebih  lambat dibandingkan    dengan    isolat    lainya, sedangkan  isolat  Jati  Sari  menunjukkan mortalitas  yang  lambat  di  hari  pertama  dan kedua, tetapi mengalami percepatan pada hari ketiga  sampai  hari  kelima.  Isolat  Jati  Sari hanya  membutuhkan  waktu  lima  hari  setelah aplikasi untuk membunuh kepik hijau dengan presentasi  100%,  dibandingkan  dengan  isolat lainnya  yang  membutuhkan  waktu  enam  hari untuk membunuh kepik hijau hingga 100%.
Gambar 1 . Grafik persentase mortalitas kepik hijau ( N. viridula ) setelah aplikasi beberapa isolat B. bassiana
Gambar 2. Nilai LT 50 perlakuan isolat WBC, Jati Sari, P. pallicornis,  L. acuta, S. coarctata dan  Kontrol
Gambar  3. Hasil  analisis  terhadap presentase  kematian pada  hari  ketiga; Huruf kecil yang sama diatas bar menunjukkan tidak berbeda nyata berdasar uji BNT pada α 5%.
Lethal Time 50 (LT 50 ) Patogenisitas  jamur B.  bassiana dapat dinilai  berdasarkan  waktu  yang  dibutuhkan untuk membunuh serangga  kepik  hijau. Nilai LT 50 yaitu waktu  yang dibutuhkan insektisida untuk  dapat  mematikan  50%  dari    populasi serangga   uji   setelah   jangka waktu   tertentu (Gambar 2).
Hasil analisis data menunjukkan tingkat mortalitas  tertinggi  terdapat  pada  perlakuan isolat P.    pallicornis dengan    rata-rata mortalitas  sebesar  78  %, diikuti L.  acuta dan S.   coarctata sebesar   68   %   dan   Jati   Sari sebesar  58  %.  Mortalitas  terendah  terdapat pada perlakuan isolat WBC sebesar 32 % dan pada  kontrol  negatif  yang  tidak  terdapat serangga yang mengalami kematian.
Nilai    LT 50 untuk  jamur  isolat  WBC, Jati  Sari, P.  pallicornis,  L.  acuta dan S. cotinopara secara    berturut-turut    adalah  3,6 hari; 2,9 hari;  2,1 hari;  2,5 hari dan 2,8 hari. Berdasarkan  nilai  LT 50 dari  masing-masing isolat    didapatkan  waktu    yang    dibutuhkan
untuk   mematikan   serangga  uji  sebesar  50% yang  tercepat     adalah  isolat P.  pallicornis yaitu  2,1 hari. LT 50 waktu  yang   dibutuhkan untuk   mematikan   serangga  uji  sebesar  50% paling  lambat    pada  isolat  WBC  yaitu    3,6 hari.
Nilai LT 50 menunjukkan bahwa kemampuan  jamur B.  bassiana dari  kelima isolat   memiliki   kemampuan   patogenisitas yang hampir  sama.  Hal  ini  dilihat  dari waktu yang  dibutuhkan  oleh  kelima  isolat  untuk membunuh  kepik  hijau  sebanyak  50%  dari populasi berada pada kisaran dua sampai tiga hari setelah aplikasi. Kemampuan patogenisitas  isolat P.  pallicornis lebih  cepat dibandingkan isolat lainnya.

## Persentase Mortalitas pada Hari Ketiga
Analisis  rata-rata  persentase  mortalitas kepik  hijau  dilakukan  pada  hari  ketiga  HSP. Berdasarkan  uji  Anava  ada  perbedaan  yang signifikan pada rata-rata persentase mortalitas di antara perlakuan. Hasil uji BNT menunujukkan  bahwa  perlakuan  isolat  Jati
Sari, P. pallicornis, L. acuta , dan S. coarctata tidak  berbeda  nyata,  tetapi  berbeda  nyata dengan  isolat  WBC  dan  kontrol  negatif (Gambar 3).
Hasil    analisis    menunjukkan    bahwa isolat P. pallicornis, L. acuta , dan S. coarctata yang  diisolasi  dari  daerah  Dumoga  mampu menyaingi  isolat  Jati  Sari  yang  merupakan rekomendasi   Kementrian   Pertanian   sebagai entomopatogen  pengendali  hama.    Jamur B.bassiana mampu menginfeksi dan membunuh  stadia  nimfa  maupun  imago. Semakin  muda  umur  nimfa,  semakin  rentan terhadap  infeksi  jamur B.  bassiana (Prayogo,
2013).   Kematian   nimfa   kepik   hijau   yang terinfeksi   jamur B.   bassiana mulai   terjadi pada satu  hari setelah perlakuan (HSP). Pada saat  nimfa    mengalami  kematian  belum terdapat tanda-tanda miselium   tumbuh   pada organ    kepik    hijau.  Miselium    jamur B. bassiana baru   tampak pertama   kali   pada umur   lima   hari   setelah perlakuan (HSP).
Penularan  jamur  ini  dari  satu  inang kepada inang   yang   lainnya   dapat   terjadi melalui kontak langsung dengan individu yang terinfeksi. Akan tetapi, induk yang sakit tidak menularkannya pada telur yang dihasilkannya. Seperti   pada   jenis-jenis   jamur   yang   lain, maka  jamur B.  bassiana juga  memerlukan suhu  dan  kelembapan  yang  cukup  baik ( favorable ) untuk pertumbuhan dan perkembangannya.  Suhu  optimum  untuk pertumbuhan  yang  baik  adalah  sekitar  28°C (Siahaan  &  Saimima,  2020).  Tubuh    imago yang terinfeksi oleh B. bassiana ditandai oleh tumbuhnya   miselia  berwarna  putih  (Gambar 4) dan mengeras seperti mumi.
N. viridula mulai   menunjukan   gejala terinfeksi  pada  1  HSP,  hal  ini  tampak  dari tumbuhnya  meselia  berwarna  putih  pada kutikula  serangga,  gangguan  motorik  seperti kejang-kejang  dan  gerakan  yang  menjadi lambat. Siahaan & Saimima (2020) menjelas- kan  mekanisme  infeksi B.  bassiana terhadap serangga   dimulai   melalui   kutikula.   Mula- mula sporulasi terjadi pada cadaver serangga dan  spora  terlepas  ke  udara.  Spora  akan menempel pada kutikula serangga  dan terjadi perkecambahan.  Proses  inisiasi  hifa  akan dibantu  oleh  enzim  kitinase  dan  amilase hingga menembus kedalam epidermis. Selanjutnya  enzim  lipase  dan  protease membantu  menembus  lapisan  epidermis menuju hemocoel .  Saat  inisiasi  selesai  hifa akan  tumbuh  membentuk  miselium  dan
melepaskan  racun  golongan dekstruksin dan mikotoksin sehingga  serangga  kehilangan kontrol  atas  tubuhnya,  pada  tahap  lanjut serangga  akan  mengalami  gangguan  motorik yang  nampak  seperti  kejang-kejang,  gerakan menjadi  lambat,  dan  akhirnya  tubuh  tidak dapat   digerakan.   Pada   tahap   ini   miselium akan  tumbuh  memenuhi  bagian  dalam  tubuh serangga  dan  berkembang  dengan  cepat. Proses  ini  berlanjut  sampai  serangga  benar- benar  mati.  Miselium  akan  terus  tumbuh sampai  menembus  ruas-ruas  tubuh  serangga dan mengalami sporulasi.
Gambar 4. Nimfa kepik hijau yang dikolonisasi miselium jamur B. bassiana yang  berbentuk seperti mumi
Kemampuan B.  bassiana dalam mendegradasi   dinding   integumen   serangga diakibatkan  oleh  kandungan  enzim  kitinase yang  besar,  hal  ini  sesuai  dengan  beberapa laporan  menyebutkan  bahwa  sebagian  besar jamur  entomopatogen  memiliki  kandungan enzim  kitinase  yang  cukup  besar  sehingga sangat  toksik  dalam  mendegradasi  dinding integumen serangga (Fang et al., 2005;  Lu et al., 2005; Zhu et al., 2008).
Keberhasilan      jamur  entomopatogen dalam menginfeksi serangga hama dipengaruhi oleh  beberapa faktor diantaranya lingkungan  dan  viabilitas  spora.  Jamur entomopatogen  untuk  dapat  berkecambah memerlukan  keadaan    yang  lembab.  Selain itu  kemampuan  jamur  entomopatogen  dalam menginfeksi  hama  juga  dipengaruhi  oleh jumlah  spora  dan  viabilitasnya.  Menurut Surtikanti & Yasin (2009) keberhasilan jamur entomopatogen  sebagai  pengendali  hama dipengaruhi  oleh  faktor  lingkungan  (suhu, kelembaban),  jumlah  spora,  viabilitas  spora (daya kecambah) dan virulensi yang memiliki infektifitas yang rendah atau sebaliknya.
B. bassiana juga memiliki  kemampuan dalam   mengendalikan   berbagai   jenis   hama pada  tanaman.  Hasil  penelitian  Gargita et  al .
(2017) B.            bassiana cukup    efektif menginfeksi Helopeltis spp.   karena   waktu yang     diperlukan     hanya     4     hari     untuk membunuh Helopeltis spp. Pengujian formulasi  di lapangan menunjukkan formulasi B. bassiana efektif mengendalikan Helopeltis spp. yaitu pada konsentrasi formulasi 20 gram dilarutkan  dalam  satu  liter  air  merupakan konsentrasi  yang  paling  baik  dengan  jumlah cucukan paling sedikit.  Hasil penelitian Intarti et  al .  (2020)  mendapatkan  aplikasi  agen Hayati B.  bassiana mampu  mengendalikan hama Thrips sp.  Apliaksi B.  bassiana konsentrasi 20 ml L-1 dapat efektif mencegah hama Thrips sp.  pada   tanaman cabai   rawit varietas      dewata      F1      sebesar  99,53% dibandingkan dengan kontrol negatif. Aplikasi jamur B.    bassiana pada    taraf konsentrasi 10%  terhadap  mortalitas  larva  efektif  dan efisien,  karena  mampu  membunuh  larva 76,67%  pada  hari  ke-7,  membuat  larva  sakit sebanyak    7,67    ekor    pada    perubahan kesehatan,  dan  meminimalisir  perubahan stadia lanjut larva sebanyak 1,22 ekor (Ardan et al ., 2019). Perlakuan  kombinasi  antara  agensi hayati   dan   pestisida   nabati   telah   banyak dilakukan,  dengan  tujuan  meningkatkan mortalitas  hama  target.  Hasil  penelitian menunjukkan  masih  sangat  sedikit  jamur B. bassiana yang  kompatibel  dengan  pestisida nabati.    Seperti    hasil    penelitian    yang dilakukan  Susanti et  al .  (2016)  menemukan
bahwa uji
kompatibilitas jamur entomopatogen B.  bassiana dengan  pestisida nabati     ekstrak     daun     babadotan     tidak kompatibel.    Hasil  uji  menunjukkan  bahwa ekstrak  daun  babadotan  menghambat  daya kecambah  konidia,  pertumbuhan  koloni,  dan sporulasi.

## KESIMPULAN
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa mortalitas  100  %  dicapai  pada  hari  kelima dan  keenam  HSP.  Mortalitas  100  %  tercepat terdapat   pada   kontrol   positif,   yaitu   hari kelima  HSP. nilai   LT 50 dari   masing-masing isolat  didapatkan  berada diantara 2,1 sampai 3,6 hari. LT 50 tercepat  terdapat pada isolat P. pallicornis yaitu   2,1  hari,  dan  LT 50 paling lambat  terdapat  pada  isolat  WBC  yaitu    3,6 hari.  Persentasi  mortalitas  tertinggi  pada  hari ketiga  HSP  terdapat  pada  perlakuan  isolat P. palicornis dengan rata-rata mortalitas sebesar
78  %  diikuti  isolat L.  acuta dan S.  coarctata masing-masing  sebesar  68  %  dan  isolat  Jati Sari sebesar 58 %, akan  tetapi keempat isolat ini  tidak  berbeda  nyata.  Mortalitas  terendah terdapat  pada  perlakuan  isolat  WBC  sebesar 32  %  yang  berbeda  nyata  dengan  isolat  lain dan  juga  kontrol.  Isolat  lokal  yang  berasal dari   inang P.   palicornis,   L.   acuta dan S. coarctata memiliki  patogenisitas  yang  sama dengan isolat Jari Sari.

## DAFTAR PUSTAKA
Afrinda,  D.,  Salbiah, D.,  &  Laoh, J.H.  2014. Uji  Beberapa  Konsentrasi Beauveria bassiana Vuillemin Lokal Dalam Mengendalikan  Hama  Kepik  Hijau ( Nezara viridula L.) (Hemiptera: Pentatomidae)  pada  Tanaman  Kedelai ( Glycine    max L.). Jurnal    Faperta, (1)2 :1- 10.
Ardan,    I.    M., Nurdiana, D. & Maesyaroh,
S.S. 2019. Aplikasi Jamur Entomopatogen  ( Beauveria  bassiana ) dan  Ekstrak  Tumbuhan ( Ageratum conyzoides L.)  terhadap  Larva Plutella xylostella L. Jurnal  JAGROS, (3)2 :  84- 99.
Bayu,  M.S.Y.I.  &  Prayogo,  Y.  2017.  Field efficacy  of  entomopathogenic  fungi Beauveria  bassiana (Balsamo.)  for  the management  of  mungbean  insect  pests. International  Symposium  on  Food  and Agro-biodiversity (ISFA) ke 2.
Brotodjojo, R.R., Solichah,R., Widyaningtyas, A.  &    Wicaksono,  D.  2020.  Effects  of Culture Media on Viability of Beauveria bassiana and  Its  Pathogenicity  Against Coffee  Bean  Borer  ( Hyphotenemus Hampei ). Proceeding    International Conference on Science and Engineering,
3 : 49-53.
Fang,  W.G.,  Leng, B.,  Xiao, Y.H.,  & Pei, Y. 2005.  Cloning  of Beauveria  bassiana chitinase gene Bbchit1 and its application to  improve  fungal  strain  virulence.
Applied and Environmental Microbiology, ( 71)1 :363-370.
Correra, F.B.S., & Azevedo, J. 2002. Soybean seed damage by different species of stink bugs.
Agricultural and Forest Entomology, (4)2 :145-152.
Gargita,  I.W.D.,  Sudiarta,  I.P.  &  Wirya, G.N.A.  2017.  Pemanfaatan  Patogen Serangga  ( Beauveria  bassiana Bals.) untuk  Mengendalikan  Hama  Penghisap
Buah  Kakao  ( Helopeltis spp.)  di  Desa Gadungan, Kecamatan Selemadeg
Timur,  Kabupaten  Tabanan. E-Jurnal Agroekoteknologi Tropika, (6)1 :11-20. Hajek,  A.E.,  Jenkins,  N.E.,  Roush,  R.T.,
Rost,  J.P.  &  Biddinger,  D.  J.    2020.
Applications  of Beauveria  bassiana (Hypocreales: Cordycipitaceae) to Control Populations of Spotted Lanternfly  (Hemiptera:  Fulgoridae),  in Semi-Natural Landscapes and on Grapevines. Environmental Entomology , 49(4) : 854–864.
Hasnah,  Sussana  &    Husin,  S.      2012. Keefektifan  Jamur Beauveria  bassiana Vuill  terhadap  Mortalitas  Kepik  Hijau Nezara viridula L. pada Stadia Nimfa dan Imago. Jurnal Floratek, (7)1 : 13-24.
Intarti,  D.Y.,  Kurniasari,  I.  &  Sudjianto,  A.
2020. Efektivitas Agen Hayati Beauveria bassiana dalam  Menekan  Hama Thrips sp. pada Tanaman Cabai Rawit
( Capcisum          frutescens L.). Jurnal Agrovigor , 13(1): 10–15.
Knight,  K.M.M.  &  Gurr  GM.  2007.  Review of Nezara     viridula (L.) management strategies  and   potential for  IPM  in  field crops  with  emphasis on  Australia. Crop Protection, 26(1): 1-10.
Lu,  Z.X.,  Laroche,  A.  &  Huang,  H.C.  2005. Isolation and characterization of chitinase from      Verticillium      lecanii. Canadian Journal   of   Microbiology, (51)12 :1045- 1055.
Permadi,  M.A.,  Lubis,  R.A.,  Mukhlis, Pahlawan,  L.A.  &  Abdi,  S.  2019.
Efication  of  Some Entomopatogen
Fungus  on  Green    Ladybug    Imago ( Nezara  Viridula Linnaeus)  (Hemiptera: Pentatomidae). Budapest  International Research  in  Exact  Sciences  (BirEx) Journal, (1)2 : 21-28.
Prayogo,  Y.  2013.  Patogenisitas  Jamur Entomopatogen Beauveria bassiana
(Deuteromycotina:  Hyphomycetes) pada Berbagai  Stadia  Kepik  Hijau  ( Nezara viridula L.). Jurnal HPT Tropika, (13)1: 75–86.
Siahaan,  P.  &  Saimima,  A.  2020.  Agens-
Agens Hayati Sebagai Pengganti Insektisida Sinteti k . Patra Media Grafindo, Bandung. Soetopo,  D.  &  Indrayani,  I.  2007.  Status Teknologi dan Prospek Beauveria bassiana Untuk  Pengendalian Serangga
Hama Tanaman Perkebunan Yang Ramah  Lingkungan. Jurnal  Perspektif, (6)1 : 29-46.
Suprayogi,    Marheni,    &    Oemry,  S.    2015.
Test Effectivity of Fungi Entomopathogen Beauveria bassiana and Metarhizium  anisopliae Against  Green Stink  Bug  ( Nezara      viridula L.) (Hemiptera:  Pentatomidae)  in  Soybean ( Glicyne max L.) at Screen House. Jurnal Online       Agroekoteknologi, (3)1 : 320- 327.
Surtikanti  &  Yasin,  M.  2009.  Keefektifan Entomopatogenik Beauveria  bassiana Vuill.  Dari  Berbagai  Media  Tumbuh terhadap
Spodoptera litura F. (Lepidoptera: Noctuidae) di Laboratorium.  Balai  Penelitian Tanaman
Serelia. Prosiding  Seminar  Nasional Serelia .
Susanti,  S.,  Wibowo,  L.  &  Indriyati.    2016. Kompatibilitas  Jamur  Entomopatogen Beauveria  bassiani Vuill.  Dan  Pestisida Nabati  Ekstrak  Daun  Babadotan  untuk Mengendalikan  Hama  Kepik  Hijau  di Laboratorium. J. Agrotek Tropika , 4(1) :
49-54.
Zhu,  Y.,  Pan, J.,  Qiu,  J .   & Guan, X.  2008. Isolation  and  characterization  of  a chitinase  gene  from  entomopathogenic fungus Verticillium  lecanii .  Brazilian Journal    of   Microbiology, (39)2 :  314- 320.