Uji Daya Anthelmintik Ekstrak Etanol Biji Petai Cina ( Leucaena leucocephala, Lmk. de Wit ) terhadap cacing gelang ( Ascaridia galli schrank) Secara In Vitro
Recta Olivia Umboro 1 ,Dedent Eka Bimmahariyanto S 2 ,Ade Sukma Hamdani 3 Program Studi S1 Farmasi Fakultas kesehatan Universitas Nahdlatul Ulama NTB umboroolivia@gmail.com, dedenthariyanto@gmail.com , ade.sukmahamdani18@gmail.com

## Abstrak
Biji petai cina ( Leucaena leucocephala, Lmk. de Wit ) dalam pengobatan tradisional mempunyai khasiat  sebagai  anthelmintik,  susah  tidur  ( insomnia ),  bengkak,  radang  ginjal,  dan  diabetes. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek anthelmintik ekstrak etanol biji petai cina ( Leucaena leucocephala,  Lmk.  de  Wit )terhadap  cacing  gelang  ( Ascaridia  galli Schrank)  secara in  vitro ,  dan mengetahui  konsentrasi  ekstrak  etanol  biji  petai  cina  ( Leucaena  leucocephala,  Lmk.  de  Wit )yang sebanding dengan mebendazol 0,5% (b/v). Penelitian ini bersifat eksperimental yang menggunakan probit. Rancangan percobaan pada penelitian ini adalah post test dengan satu sebagai kontrol negatif yaitu  NaCl  0,9%,  satu  sebagai  kontrol  positif  yaitu  mebendazol  0,5%,  dan  empat  kelompok perlakuan  dengan  variasi  konsentrasi  5%,  10%,  15%  dan  20%.  Data  yang  diperoleh  berupa kematian cacing, diuji statistik uji Anava 1 jalan dengan taraf kepercayaan 95% dan metode probit. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol biji petai cina ( Leucaena leucocephala, Lmk. de Wit ) dengan konsentrasi 10%, 15% dan 20% (b/v) mempunyai efek anthelmintik. Konsentrasi yang setara  dengan  mebendazol  0,5%  sebagai  anthelmintik  adalah  10%  b/v.  Perlu  dilakukan  penelitian tentang  uji  daya  anthelmintik  ekstrak  etanol  biji  petai  cina  ( Leucaena  leucocephala,  lmk.  De wit )terhadap  jenis  cacing  yang  lain  serta  uji  daya  anthelmintik  menggunakan  biji  petai  cina ( Leucaena leucocephala, lmk. De wit ) dengan bentuk sediaan lain.
Kata kunci : Anthelmintik, Biji Petai Cina,Ascaridia Galli Schrank.

## Abstract
Leucaena  leucocephala,  Lmk.  de  Wit has  properties  in  traditional  medicine  as  anthelmintic, disturbed sleep (insomnia), swelling, inflammation of the kidneys, and diabetes. This study aims to determine anthelmintic potency of ethanol extract of Leucaena leucocephala, Lmk. de Wit against roundworms (Ascaridia galli Schrank) in vitro, and knowing the concentration of ethanol extract of Leucaena  leucocephala,  Lmk.  de  Wit as  potency  as  mebendazol  0.5%  (w/v).  This  research  is  an experimental  use  probit.  The  experimental  design  of  this  study  is  the  first  post  test  as  a  negative control  of  0.9%  NaCl,  one  as  a  positive  control,  namely  mebendazol  0.5%,  and  four  treatment groups  with  various  concentration  of  5%,  10%,  15%  and  20%.  Data  obtained  in  the  form  of  the death of worms, tested one way  ANOVA test statistics with a confidence level of 95% and probit methods.  The  results  showed  that  ethanol  extract  of Leucaena  leucocephala,  Lmk.  de  Wit with  a concentration of 10%, 15% and 20% (w/v) has the effect of anthelmintic. Concentration equivalent to 0.5% as anthelmintic mebendazol is 10% (w/v). Need to do research on the anthelmintic activity test  of  ethanol  extract  of Leucaena  leucocephala,  Lmk.  de  Wit to  other  types  of  worms  and anthelmintic activity test using Leucaena leucocephala, Lmk. de Wit with other dosage forms.
Keywords : Anthelmintic, Leucaena Leucocephala, Lmk. De Wit, Ascaridia Galli Schrank.

## PENDAHULUAN
Infeksi  cacing  merupakan  salah  satu penyakit  yang  paling  umum  tersebar  dan menjangkiti  lebih  dari  2  miliar  manusia  di seluruh  dunia.  Walaupun  tersedia  obat-obat
baru  yang  lebih  spesifik  dengan  kerja  lebih efektif,  eradikasi  penyakit  cacing  masih  tetap merupakan  suatu  masalah  karena  kondisi sosial-ekonomi  di  beberapa  bagian  dunia. Jumlah  manusia  yang  dihinggapinya  juga
semakin bertambah akibat migrasi, lalu-lintas, dan  kepariwisataan  udara  modern.  Proyek- proyek  irigasi  untuk  meningkatkan  agrikultur dapat pula menyebabkan perluasan kemungkinan  infeksi  (Tjay  dan  Rahardja, 2002).
Pada umumnya, cacing jarang menimbulkan  penyakit  serius,  tetapi  dapat menyebabkan  gangguan  kesehatan  kronis yang merupakan suatu faktor ekonomis sangat penting.  Di  Negara-negara  berkembang, termasuk  Indonesia,  penyakit  cacing  adalah penyakit rakyat umum yang sama pentingnya dengan, misalnya, malaria atau TBC. Infeksinya  pun  dapat  terjadi  simultan  oleh beberapa jenis cacing sekaligus. Diperkirakan bahwa lebih dari 60% anak-anak di Indonesia menderita  suatu  infeksi  cacing  (Tjay  dan Rahardja, 2002).
Pengobatan kecacingan dapat dilakukan dengan 2 cara, secara farmakologis maupun non
farmakologis. Secara farmakologis  pada  pengobatan  kecacingan Ascaridia  galli Schrank  dapat  menggunakan mebendazol, sedangkan secara non farmakologis  dapat  digunakan  biji  petai  cina ( Leucaena  leucocephala,  Lmk.  de  Wit )atau dalam  bahasa  Jawa  dikenal  dengan  istilah lamtara  atau  mlandhing,  ternyata  mempunyai manfaat  yang  cukup  besar.  Tanaman  ini mengandung  beberapa  zat  yang  bermanfaat bagi tubuh, seperti kalsium, lemak, fosfor, zat besi,  protein,  serta  vitamin  A,  B1,  dan  C. Adapun bijinya mengandung mimosin, leukanin,  protein,  dan  leukanol.  Tanaman  ini bisa  dimanfaatkan  sebagai  obat  untuk berbagai  macam  penyakit.  Seperti  obat cacing,  melancarkan  buang  airbesar,  untuk mengobati patah tulang, susah tidur ( insomnia ),  bengkak,  radang  ginjal,  dan diabetes.  Akar  tanaman  ini  juga  dapat dimanfaatkan  untuk  melancarkan  datang bulan (Nurarofah, 2010).
Dari berbagai zat kimia yang terkandung  pada  biji  petai  cina,  yang bermanfaat  sebagai  obat  cacing  adalah mimosin.  Mimosina  ( mimosine ,  asam  β-3- hidroksi-4  piridon  amino)  adalah  alkaloid yang  merupakan  asam  β-amino.  Senyawa  ini bersifat toksik  dan  pertama  kali  diisolasi dari putri  malu  ( Mimosa  pudica ).  Strukturnya mirip  dengan  asam  amino  struktural  tirosina.
Dalam pencernaan hewan ruminansia, mimosina  dirombak  menjadi  3,4-  dan  2,3- dihidroksi piridon (3,4- dan 2,3-DHP). Racun ini  ditemukan  pula  pada  semua  anggota Mimosa dan Leucaena ,  termasuk  lamtoro (petai  cina).  Dalam  beberapa  jurnal  ilmiah diketahui bahwa senyawa ini dapat menghambat replikasi DNA (Anonim, 2010).
Oleh  karena  banyaknya  masyarakat yang menggunakan petai cina dalam kehidupan  sehari-hari  baik  sebagai  masakan ataupun  untuk  pengobatan  tradisional,  maka perlu dilakukan penelitian untuk membuktikan kebenaran adanya efek anthelmintik  ekstrak  etanol  biji  petai  cina pada cacing Ascaridia galli Schrank secara in vitro .

## METODOLOGI
A. ALAT DAN BAHAN 1. Alat :
a. Alat  pembuat  serbuk  terdiri  atas blender dan ayakan No 30M.
b. Alat-alat  untuk  KLT  terdiri  atas chamber, beker glass, batang pengaduk,  gelas  ukur  dan  silika  gel GF 254.
c. Alat  untuk  pembuatan  ekstrak  etanol biji petai cina adalah soxhlet,
rotavapor dan corong pisah.
d. Alat  untuk  uji  daya  Anthelmintik adalah  beker  glass,  batang  pengaduk kaca,  gelas  ukur,  labu  takar,  pinset, waterbath,  termometer,  toples  untuk menyimpan cacing.
2. Bahan :
a. Bahan  utama  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  biji  petai  cina ( Leucaena leucocephala, Lmk. de Wit ) yang diperoleh dari daerah
Bandungan,  Ungaran.  Sediaan  yang digunakan  adalah  ekstrak  biji  petai cina.
b. Hewan  percobaan  yang  digunakan untuk  penelitian  ini Ascaridia  galli Schrank  yang  diambil  dari  tempat pemotongan  ayam  di  pasar  Kobong Semarang.
c. Bahan  lain  yang  digunakan  untuk pembuatan ekstrak etanol adalah asam asetat  10%,  etanol  96%,  NH 4 OH pekat, aquades dan NaCl 0,9%.
d. Bahan  untuk  uji  daya  anthelmintika terdiri  atas  mebendazol,  larutan  NaCl 0,9%,  aqua  destilata  dan  air  panas 50°C.
e. Bahan untuk kromatografi
1) Fase  gerak untuk deteksi alkaloid adalah  khloroform  :  metanol (90:10).
2) Bahan  pereaksi  semprot  untuk alkaloid adalah Dragendorff,
yang  dibuat  dari  dua  larutan persediaan  :  (1)  0,6  g  bismuth subnitrat  dalam  2  ml  HCl  pekat dan  10  ml  air;  (2)  6  g  kalium iodida  dalam  10  ml  air.  Larutan persediaan ini dicampur dengan 7 ml HCl pekat dan 15 ml air.

## PROSEDUR PENELITIAN
1. Determinasi tanaman Determinasi dilakukan di Laboratorium
Ekologi  dan  Biosistematik,  Fakultas MIPA Jurusan Biologi, Universitas Diponegoro  Semarang  untuk  mengetahui kebenarannya dari biji petai cina ( Leucaena Leucocephala, Lmk. de Wit ).
2. Determinasi cacing
Determinasi  dilakukan  di  laboratorium di Laboratorium Ekologi dan Biosistematik,  Fakultas  MIPA  Jurusan Biologi, Universitas Diponegoro Semarang  untuk  memastikan  cacing  yang digunakan  adalah  cacing Ascaridia  galli Schrank.
3. Uji kelangsungan hidup Enam  puluh  ekor  cacing  masing  – masing 10 ekor jantan dan 10 ekor betina dimasukkan dalam  beker glass  yang telah berisi
NaCl fisiologis, kemudian diinkubasi  selama  3  jam  lalu  diamati apakah  cacing  mati  atau  tidak.  Cacing diperkirakan  mati  apabila  lumpuh  tidak bergerak  di  bagian  dasar  beker  glass  dan berwarna  pucat.  Bila  tidak  bergerak cacing dimasukkan dalam air panas 50°C, bila  cacing  tetap  diam,  cacing  dianggap sudah  mati,  tetapi  bila  masih  bergerak berarti cacing masih hidup.
4. Pembuatan simplisia Biji  petai  cina  yang  sudah  tua  dan kering  digoreng  tanpa  minyak  dan diblender  halus  (dibuat  bubuk)  dan
diayak.  Kemudian  disimpan  sebelum dilakukan percobaan.
5. Pembuatan ekstrak etanol biji petai cina Konsentrasi  ekstrak  etanol  biji  petai cina  ( Leucaena  leucocephala,  Lmk.  de Wit )  yang  digunakan  pada  percobaan  ini adalah 5%, 10%, 15%, dan 20% (b/v).
Ekstrak  bahan  aktif  dari  biji  petai cina  diperoleh  dengan  cara  ekstraksi  secara soxhletasi  dengan  etanol  96%.  Dalam  proses soxhletasi  dilakukan  penggantian  sampel selama  6  jam  sekali,  hasil  dari  soxhletasi  ini berupa  cairan  berwarna  hijau  kekuningan. Setelah  dilakukan  soxhletasi  dilanjutkan dengan proses rotary menggunakan Rotavapor,  ini  bertujuan  untuk  memisahkan etanol dan alkaloid. Rotary dihentikan apabila cairan  sudah  agak  kental  seperti  gel. Kemudian  hasil  dari  rotary  dituang  ke  dalam corong  pisah,  ditambahkan  asam  asetat  dan penambahan NH 4 OH pekat. Ekstrak berada di bagian  bawah.  Hasil  dari  pembuatan  ekstrak etanol biji petai cina ini berupa ekstrak kental berwarna  coklat  gelap.  Kemudian  dibuat ekstrak biji petai cina dengan kadar 5%, 10%, 15%  dan  20%.  Untuk  pembuatan  konsentrasi 5%  diambil  hasil  ekstrak  5  g  ditambahkan aquadest  sampai  100  ml.  Untuk  konsentrasi 10%, 15% dan 20% dibuat sesuai penimbangannya.  Kemudian  dibubuhi  NaCl 0,9% sebanyak 0,9 g dalam setiap konsentrasinya. 6. Pembuatan larutan pembanding Sebagai pembanding
digunakan  obat  sintetik  yaitu  mebendazol dengan dosis 0,5 % b/v. Larutan ini dibuat dengan cara melarutkan 0,5 g mebendazol dalam 100 ml NaCl 0,9 % b/v. Larutan ini berguna  sebagai  kontrol  positif,  sedang kontrol  negatifnya  digunakan  larutan NaCl 0,9 % b/v.
7. Uji  daya  anthelmintik  terhadap  cacing Ascaridia galli Shcrank Perlakuan
perendaman menggunakan  300  ekor  cacing  betina yang  dibagi  6  kelompok,  dan  setiap kelompok terdiri atas 5 beker glass. Setiap beker  glass  berisi  30  ml  larutan  dan  10 ekor  cacing Ascaridia  galli Schrank betina.
Kelompok I :      beker  glass berisi larutan mebendazol 0,5% b/v
Kelompok II :      beker  glass berisi larutan NaCl 0,9% b/v Kelompok III :  beker  glass  berisi ekstrak  biji  petai  cina  dengan  konsentrasi 5% b/v Kelompok IV : beker glass berisi ekstrak  biji  petai  cina  dengan  konsentrasi 10% b/v Kelompok V : beker glass berisi ekstrak  biji  petai  cina  dengan  konsentrasi 15% b/v Kelompok VI : beker glass berisi
ekstrak  biji  petai  cina  dengan  konsentrasi 20% b/v
Kemudian diinkubasikan pada suhu  37°C,  selama  3  jam.  Untuk  melihat apakah  cacing  mati,  paralisis  atau  masih normal  setelah  diinkubasi,  cacing–cacing tersebut  diusik  dengan  batang  pengaduk. Jika cacing diam, pindahkan ke dalam air panas  pada  suhu  50°C.  Apabila  dengan cara  ini  cacing  tetap  diam,  berarti  mati, tetapi  jika  masih  bergerak  cacing  hanya paralisis. Setiap hasil pengamatan dicatat.
8. Uji kromatografi Ekstrak  biji  petai  cina  ditotolkan pada  lempeng  silika  gel  GF  254  yang telah diaktifkan terlebih dahulu.
Pengembangan dilakukan setelah penotolan selesai dan totolan sudah benar – benar kering. Identifikasi alkaloid Fase diam : silika gel GF 254 Fase gerak :  CHCl 3 :  metanol (90:10) Pembanding : piridin Identifikasi dilakukan dengan menggunakan : a. Sinar UV 254 nm
b. Sinar UV 365 nm
c. Pereaksi semprot adalah Dragendorff
d. Hitung harga Rf

## Analisis Data Penelitian
Data  pengamatan  yang  diperoleh dianalisis  dengan  Anava  satu  jalan  dengan taraf  kepercayaan  95%.  Apabila  signifikan (<0,05)  dilanjutkan  dengan  Tuckey  Test untuk  mengetahui  adanya  perbedaan  tiap perlakuan.  Jika  berbeda  signifikan  (>0,05) dilanjutkan  metode  probit  dengan  cara menghitung LC 50 .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
1. Determinasi Tanaman Tanaman yang digunakan untuk penelitian telah dideterminasi di Laboratorium  Ekologi  dan  Biosistematik, Fakultas MIPA Jurusan Biologi, Universitas  Diponegoro  Semarang.  Hasil determinasi  tanaman  petai  cina  sebagai berikut :
1b,  2b,  3b,  4b,  6b,  7b,  9b,  10b,  11b,  12b, 13b,  14a,  15b.  golongan  9.  Tanaman dengan  daun  majemuk  dan  tersebar.  197a, 198b, 200b, 201a. familia 58. Mimosaceae . 1a, 2b, 3b, 4b, 5a. genus Leucaena. Spesies Leucaena  leucocephala  Lmk .  (Lamtoro gung, petai cina).
Berdasarkan  hasil  determinasi  dapat diperoleh  kepastian  bahwa  tanaman  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah Leucaena leucocephala Lmk . atau tanaman petai cina.
2. Determinasi    cacing Ascaridia  galli
Schrank Cacing yang digunakan untuk penelitian diambil dari tempat pemotongan ayam di pasar kobong Semarang dan telah dideterminasi di Laboratorium Ekologi dan Biosistematik,  Fakultas  MIPA  Jurusan Biologi, Universitas Diponegoro Semarang. Hasil determinasi cacing Ascaridia  galli  sebagai  berikut  :Tubuh semitransparan,  berukuran  besar,  warna putih  kekuning-kuningan,  bulat,  langsing, memanjang, dan umumnya berbentuk pita. Tubuh  dilapisi  dengan  cuticula  ekstern selulair  yang  tebal,  elastik  serta  bergaris halus,  mempunyai  empat  garis  membujur berwarna keputih-putihan yang memanjang  sepanjang  tubuh,  satu  di bagian  dorsal,  satu  di  bagian  ventral  dan dua  di  bagian  lateral.  Pada  bagian  ujung anterior  terdapat  mulut  yang  dilengkapi dengan  tiga  buah  bibir  bulat,  satu  bibir dorsal  dengan  dua papillae rangkap  dan dua bibir lateroventral dengan dua papillae tunggal.  Pada  kedua  sisi  tubuh  terdapat sayap  pipih  yang  membentang  sepanjang tubuh.  Anus  merupakan  celah  melintang pada  ujung  posterior  di  bagian  permukaan ventral.  Individu  jantan  mempunyai  ujung posterior  melengkung  tajam  ke  arah ventral  tubuh  dengan  dua spiculae yang
menonjol  dari  lubang  kelamin  jantan  dan tidak mempunyai penis pre-cloaca, cervical  tidak  dijumpai.  Individu  betina tubuhnya  lurus  dan  lubang  kelamin  atau vulva  terletak  di  bagian  mid  ventral; kurang  lebih  sepertiga  panjang  tubuh  dari ujung anterior.
3. Pembuatan ekstrak etanol biji petai cina Ekstrak  adalah  sediaan  pekat  yang diperoleh  dengan  mengekstraksi  zat  aktif dari  simplisia  nabati  atau  hewani  dengan menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian  semua  atau  hampir  semua pelarut  diuapkan  dan  serbuk  yang  tersisa diperlakukan sedemikian hingga memenuhi  baku  yang  telah  ditetapkan (Depkes RI, 1995).
Tahap  pembuatan  ekstrak  etanol  biji petai  cina  yaitu  biji  petai  cina  yang  sudah tua digoreng tanpa minyak. Untuk pembuatan serbuk dilakukan dengan menghaluskan simplisia dengan menggunakan  blender  dan  diayak  supaya diperoleh  serbuk  yang  lebih  halus  dan dapat  larut  sempurna  dengan  pelarutnya yaitu etanol 96%.
Ekstrak  bahan  aktif  dari  biji  petai  cina diperoleh  dengan  cara  ekstraksi  secara soxhletasi  dengan  etanol  96%.  Dalam proses  soxhletasi  dilakukan  penggantian sampel  selama  6  jam  sekali,  hasil  dari soxhletasi ini berupa cairan berwarna hijau kekuningan.  Setelah  dilakukan  soxhletasi dilanjutkan dengan proses rotary menggunakan  Rotavapor,  ini  bertujuan untuk  memisahkan  etanol  dan  alkaloid. Rotary  dihentikan  apabila  cairan  sudah agak  kental  seperti  gel.  Kemudian  hasil dari rotary dituang ke dalam corong pisah, tambahkan  asam  asetat  dan  penambahan amoniak, ini bertujuan untuk mendapatkan alkaloid  dalam  bentuk  garam.  Tetapi  pada penambahan  asam  asetat  dan  amoniak tidak  dilakukan  pengontrolan  pH,  ini merupakan  variabel  pengacau.  Ekstrak etanol  biji  petai  cina  dalam  corong  pisah berada  di  bagian  bawah.  Hasil  dari pembuatan ekstrak etanol biji petai cina ini berupa  ekstrak  kental  berwarna  coklat gelap.
Proses  pembuatan  ekstrak  etanol  biji petai  cina  dalam  penelitian  ini  digunakan
1500g  biji  petai  cina  yang  sudah  tua  dan dihasilkan ekstrak kental 77,25g.
4. Kromatografi Uji  kromatografi  digunakan  untuk mengetahui adanya  senyawa alkaloid pada ekstrak etanol biji petai cina. Kromatografi yang digunakan adalah Kromatografi Lapis Tipis (KLT), merupakan metode pemisahan fisikokimia, cara  pemisahan ini memerlukan fase  diam  (lapisan  penyerap), fase  gerak  (pelarut  pengembang),  larutan pembanding  (campuran  uji  atau  baku), bejana  pemisah  ( chamber ),  sejumlah cuplikan  (senyawa  yang  akan  dipisahkan) dan  pendeteksi  (pereaksi  semprot).  (Stahl, 1985).  Fase  gerak  yang  digunakan  yaitu kloroform  :  metanol  (90  :  10).  Fase  diam yang  digunakan  adalah  silika  gel  GF 254 , dimana  merupakan  jenis  penyerap  fase diam pada KLT yang mempunyai mekanisme  adsorpsi  dan  dapat  digunakan untuk  pemeriksaan  alkaloid.  Larutan  baku pembanding yang digunakan adalah piridin.  Hasil  kromatografi  lapis  tipis dimungkinkan terdapat kandungan alkaloid,  hal  ini  dapat  dilihat  dengan  sinar UV 254 nm terjadi peredaman  dan dengan UV  365  nm  terdapat  bercak  yang memberikan warna coklat. Setelah disemprot  dengan  pereaksi  dragendrorff dihasilkan warna orange atau bercak coklat jingga  berlatar  belakang  kuning  dengan harga  Rf  alkaloid  mimosin  0,6  dan  harga Rf  piridin  0,72,  ini  menunjukkan  bahwa dalam  ekstrak  etanol  biji  petai  cina mengandung alkaloid. Hasil uji KLT dapat dilihat pada gambar terlampir.
5. Anthelmintik Pada  uji  daya  anthelmintik  dari  biji petai  cina  langkah  awal  yang  dilakukan adalah  uji  kelangsungan  hidup  cacing jantan  dan  cacing  betina  pada  media tertentu. Media yang digunakan yaitu NaCl fisiologis  (NaCl  0,9%  b/v).  Penentuan lama  hidup  cacing  dimulai  saat  cacing direndam  dalam  media  sampai  semua cacing  dalam  rendaman  mati.  Pengamatan dilakukan  setelah  3  jam  dalam  inkubator. Uji  kelangsungan  hidup  dapat  dilihat  pada table I.
Tabel I. Hasil uji kelangsungan hidup cacing Ascaridia galli Schrank jantan dan betina dalam media NaCl 0,9% b/v No Media Jenis kelamin Rata-rata jumlah kematian cacing 1 NaCl 0,9% b/v Jantan 5 2 NaCl 0,9% b/v Betina 0 Tabel I menunjukkan
hasil uji
kelangsungan  hidup  cacing  jantan  dan  betina ini memperlihatkan bahwa cacing jantan lebih cepat mati dibandingkan dengan cacing betina karena  cacing  betina  mempunyai  ukuran tubuh  lebih  besar  dan  lebih  panjang  daripada cacing  jantan  (Nugroho,  1983)  sehingga untuk  uji  selanjutnya  digunakan  cacing betina.
Langkah  selanjutnya  dilakukan  uji  daya anthelmintik  biji  petai  cina  secara in  vitro dengan  metode  rendaman  menggunakan Mebendazol 0,5 % b/v sebagai kontrol positif dan  larutan  NaCl  0,9  %  b/v  sebagai  kontrol negatif.  Sebagai  perlakuan  yaitu  digunakan ekstrak  etanol  biji  petai  cina  5  %  b/v,  10  % b/v,  15  %  b/v,  dan  20  %  b/v.  Pada  uji  daya anthelmintik  ini  setiap  perlakuan  diberikan penambahan  tween,  yang  bertujuan  sebagai emulgator karena ekstrak etanol biji petai cina tidak  dapat  larut  dalam  larutan  garam fisiologis.  Secara  deskriptif  hasil  uji  daya anthelmintik dapat dilihat pada gambar 8.
Gambar 8. Kurva hubungan antara % kadar ekstrak etanol biji petai cina vs % rata-rata kematian cacing Gambar  8  menunjukkan  bahwa semakin tinggi  kadar  ekstrak etanol  biji petai cina  maka  semakin  tinggi  pula  jumlah kematian cacing.
Hasil  uji  daya  anthelmintik  ekstrak etanol  biji  petai  cina  terhadap  cacing
Ascaridia  galli Schrank  pada  pengamatan setelah 3 jam inkubasi dapat dilihat pada tabel II.
Tabel II. Hasil uji daya anthelmintic ekstrak etanol biji petai cina terhadap cacing Ascaridia galli Schrank secara in vitro setelah 3 jam inkubasi
Tabel  II  menunjukkan  bahwa  cacing  mati dalam  setiap  rendaman  ekstrak  etanol  biji petai  cina  pada  semua  konsentrasi  dan  pada control  positif  mebendazol  0,5%.  Kematian cacing pada rendaman ekstrak etanol biji petai cina disebabkan karena terjadinya penghentian ambilan glukosa, sehingga cacing  kekurangan  energy  untuk  bertahan hidup.
Perhitungan analisis varian yang dilakukan dengan  program  SPSS  menghasilkan  data seperti tabel III.
Tabel III. Hasil analisis uji daya anthelmintik secara anava
Keterangan:  DB(Derajat  bebas),  JK  (Jumlah kumulatif), KR (kuadrad rerata).
Tabel III menunjukkan harga signifikansinya  =  0,000  <  0,05  signifikan artinya keenam perlakuan mempunyai perbedaan yang bermakna.
Untuk  mengetahui  adanya  perbedaan perlakuan  maka  dilanjutkan  dengan  uji Tuckey  test.  Hasil  uji  Tuckey  test  dapat dilihat pada tabel 4.
R 2 = 0.9709 y = 3.96x + 13 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 % Kadar % R a ta -r a ta K e m a ti a n C a c ing
Tabel IV. Hasil uji Tuckey test perlakuan dan kontrol
Tabel  IV  menunjukkan  bahwa  rata-rata jumlah  kematian cacing  pada  sediaan  ekstrak etanol biji petai cina10% b/v dengan rata-rata jumlah kematian cacing pada media Mebendazol  0,5%  b/v  tidak  ada  perbedaan yang  bermakna.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa ekstrak  etanol  biji  petai  cina10  %  b/v mempunyai  daya  anthelmintik  yang  sama dengan  sediaan  Mebendazol  0,5%  b/v. Sedangkan  rerata  jumlah  kematian  cacing pada  ke  empat  sediaan  ekstrak  etanol  biji petai  cina5%,  10%,  15%,  20%  b/v  dengan rerata  jumlah  kematian  cacing  pada  media NaCl 0,9 % b/v ada perbedaan bermakna. Hal ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  biji petai  cina  berbeda  dengan  kelompok  kontrol negatif.  Kesimpulan  keseluruhan  berarti ekstrak  etanol  biji  petai  cina  10%,  15%  dan 20% b/v mempunyai daya anthelmintik.
Tingkat  toksisitas  dari  ekstrak  etanol biji  petai  cina  dapat  ditentukan  dengan melihat harga LC 50 . Harga LC 50 menunjukkan konsentrasi yang menyebabkan kematian 50% hewan  uji.  Harga  LC 50 yang  semakin  kecil menunjukkan  toksisitas  yang  semakin  besar. Harga  LC 50 dihitung  dengan  metode  analisa probit.  Analisa  probit  dihitung  persen kematian  diubah  menjadi  nilai  probit  dengan menggunakan  tabel  probit,  kemudian  dibuat kurva  hubungan  antara  log  konsentrasi  (X) dan  nilai  probit  (Y)  dengan  memasukkan angka  probit  5  ke  persamaan  garis  lurus, diperoleh harga log konsentrasi yang menyebabkan  kematian  50%  hewan  uji. Persentase dan probit dapat dilihat pada tabel V.
Tabel V. Persentase dan probit kematian cacing Ascaridia galli Schrank
Keterangan:  nilai  probit  diperoleh  dari konversi  harga  persen  kematian  dari  tabel probit (Anonim, 1979)
Hasil  analisis  probit  dapat  dilihat  di lampiran.  Hasil  analisis  probit  menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  biji  petai  cina mempunyai harga LC 50 = 11,22% b/v, artinya pada  konsentrasi  tersebut  ekstrak  etanol  biji petai  cina  dapat  menimbulkan  50%  kematian cacing,  dan  ini  juga  berarti  bahwa  kadar optimal dari ekstrak etanol biji petai cina yang berdaya anthelmintik adalah 11,22% b/v. REFERENSI  11pt, Times New Roman bold
Anonim, 2010, Mimosina ,
http://wikipedia.com/ ,  diakses  tanggal 29 april 2010.
Nurarofah,  CS,  2010, Khasiat  Tanaman  dan Buah-buahan , http://khasiat-petai- cina.htm/ diakses tanggal 2 mei 2010. Tjay  dan  Rahardja,  1970, Obat-Obat  Penting Khasiat  dan  Penggunaannya ,  180-186, Edisi III, Jakarta.
Tjay  dan  Rahardja,  1986, Obat-Obat  Penting Khasiat  dan  Penggunaannya ,  213,  Edisi IV, Jakarta.