http://jurnal.farmasi.umi.ac.id/index.php/fitofarmakaindo/index

## Pengaruh Metode Ekstraksi Terhadap Senyawa Flavonoid Total Ekstrak Etanol Daun Patikan Kebo (Ephorbia hirta)
Fahzlurahman Paokuma, Rezki Amriati Syarif, Ahmad Najib *
Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia, Fakultas Farmasi, Universitas Muslim Indonesia
Article info Abstrak History
Submission : 05-11-2022
Review : 12-01-2023 Accepted : 14-02-2023
* Email: ahmad.najib@umi.ac.id
DOI: 10.33096/jffi.v10i1.964
Kata Kunci: daun Euphorbia (Euphorbia hirta); variasi metode ekstraksi; flavonoid total;spektrofotometer UV-Vis
Euphorbia ( Euphorbia hirta ) merupakan tanaman yang banyak digunakan dalam pengobatan tradisional. Salah satu senyawa aktif yang terdapat pada ekstrak  etanol  daun  Euphorbia  adalah  flavonoid.  Penelitian  ini  bertujuan untuk  mengetahui pengaruh variasi  metode ekstraksi  terhadap kandungan flavonoid  total  pada  ekstrak  daun  Euphorbia.  Ekstraksi  sampel menggunakan  metode perkolasi  dan refluks dengan nilai rendemen untuk metode perkolasi sebesar 4,3% dan metode refluks sebesar 5,3%. Analisis kualitatif  sampel  menggunakan  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT). Penentuan  kadar  flavonoid  total  ekstrak  etanol  daun  Euphorbia  diperoleh dari  data  spektrofotometer  UV-Vis.  Panjang  gelombang  maksimum  yang digunakan adalah 429 nm. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kandungan total  flavonoid  ekstrak  etanol  daun  Euphorbia  untuk  metode  perkolasi adalah 2,32% dan untuk metode refluks adalah 3,21%.

## Abstract
Keywords:
Euphorbia leaves (Euphorbia hirta), extraction method variation, total flavonoid, UV- Vis spectrophotometer Euphorbia (Euphorbia hirta) is a plant widely used in traditional medicine. One  of  the  active  compounds  found  in  the  ethanol  extract  of  Euphorbia leaves  is  flavonoids.  This  research  aimed  to  determine  the  effect  of extraction  method  variation  on  total  flavonoid  content  in Euphorbia  leaf extract. The sample extraction was obtained by percolation and reflux with yield value for the percolation method of 4,3% and reflux method 0f 5,3%.
The qualitative analysis of the samples using Thin Layer Chromatography (TLC).  Determination  of  the  total  flavonoid  content  of  ethanol  extract  of Euphorbia  leaf  is  obtained  from  UV-Vis  spectrophotometer  data.  It measured at the maximum wavelength of 429 nm. The result shows that the total  flavonoid  content  of  ethanol  extract  of  Euphorbia  leaf  for  the percolation  method  is  2.32%  extract  and  for  the reflux  method  is  3.21% extract.

## I. Pendahuluan
Tanaman  patikan  kebo  ( Euphorbia  hirta ) juga diyakini  dapat  dimanfaatkan untuk  mengobati beberapa  penyakit  antara  lain  abses  paru,  bronkitis kronis,  asma,  disentri,  radang  kelenjar  payudara, tipus  abdominalis  dan  peluruh  air  seni  (diuretik) (Hariana, 2007).
Kandungan  senyawa  yang  terdapat  pada patikan kebo  mempunyai  aktivitas sebagai  diuretik yaitu  flavonoid  dimana  mekanisme  kerjanya menghambat  reabsorbsi  Na + ,  K + ,  dan  Cl - sehingga terjadinya peningkatan elektrolit di tubulus sehingga terjadilah diuresis (Anna, 2011).
Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan  oleh  Anita  dkk  (Puspitasari  and Wulandari,  2017),  menunjukkan  bahwa  kadar flavonoid di tiap ekstrak itu berbeda tergantung dari metode  ektraksi  yang  digunakan.  Dalam  hasil penelitian  tersebut  menunjukkan  bahwa  kadar flavonoid  total  ekstrak  etanol  yang  menggunakkan
metode  maserasi  sebesar  0,1879%  b/b  sedangkan kadar  flavanoid  total  yang  menggunakan  metode sokletasi sebesar 0,2158% b/b.a
Berdasarkan  hasil  penilitian  diatas,  maka perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  mengenai kandungan  flavanoid  total  ekstrak  etanol  daun patikan  kebo  ( Euphorbia  hirta )  dengan  metode ekstraksi  yang  berbeda  yang  dalam  hal  ini menggunakan metode perkolasi dan refluks.
II. Metode Penelitian II.1 Pengambilan Sampel
Sampel  penelitian  adalah  daun  patikan kebo (Euphorbia  hirta) yang  diperoleh  dari  Kota Makassar provinsi Sulawesi Selatan.
II.2 Pengolahan Sampel
Daun  patikan  kebo  dipotong  kecil-kecil kira-kira lebarnya 1 cm dan diiris setipis mungkin, hal  ini  dimaksudkan  untuk  mempercepat  proses pengeringan daun patikan kebo. Proses pengolahan
bahan  alamiah  yang  dipergunakan  sebagai  obat dengan melalui cara pengeringan disebut simplisia.

## II.3 Ekstraksi Sampel
Pembuatan  ekstrak  sampel  dilakukan dengan  menggunakan  dua  metode  yaitu  metode perkolasi dan metode refluks.
Dimana  untuk  metode  refluks  pertama- tama  serbuk  simpilisia  patikan  kebo  ( Euphorbia hirta )  di  timbang  sebanyak  50  gram,  kemudian dimasukkan ke dalam labu alas bulat 1000 ml pada mantel pemanas, setelah itu di refluks selama 3 jam lalu  diangkat  dan  di  saring.  Perlakuan  dilakukan sebanyak dua 2 kali. Setelah diperoleh ekstrak cair kemudian  di  ekstraksi  dengan  metode  evaporasi sederhana sehingga diperoleh ekstrak kental etanol.
Sedangkan untuk metode perkolasi serbuk simplisia patikan kebo ( Euphorbia hirta ) ditimbang sebanyak 50 gram, kemudian dimasukkan ke dalam labu  alas  bulat  dan  ditambahkan  etanol  70% sebanyak 100 mL kemudian di diamkan selama 24 jam dan di buka kran biarkan menetes 1 mL/menit sampai  larutan  menjadi  bening.  Tambahkan berulang-ulang etanol 70% sehingga selalu terdapat selapis  cairan  penyari  di  atas  simplisia  hingga diperoleh  perkolat.  Pindahkan  perkolat  ke  cawan untuk  diuapkan menggunakan  evaporasi  sederhana hingga diperoleh ekstrak kental.

## II.4 Uji Kualitatif Flavonoid
Uji  kualitatif  dilakukan  dengan  cara ekstrak  daun  patikan  kebo  ( Euphorbia  hirta ) dilarutkan dengan etanol  70%, kemudian ditotolkan dengan lempeng KLT dan di elusi dengan eluen n- heksan : etil asetat (8:2). Setelah itu bercak diamati pada lampu UV 366 nm dan UV 254 nm, dan disemprot dengan  pereaksi  spesifik.  Pereaksi  yang  sering digunakan  untuk  identifikasi  flavonoid  sebagai pereaksi  semprot  dalam  KLT  adalah  AlCl 3 yang akan  memberikan  warna  kuning  jika  positif mengandung flavonoid.

## II.3. Uji Kuantitatif Flavonoid II.3.1 Pembuatan Larutan Standar Kuersetin
Larutan standar kuersetin ditimbang 10 mg kemudian dilarutkan ke dalam 10 mL metanol untuk 1000 ppm. Dari larutan standar kuersetin 1000 ppm. Kemudian dibuat beberapa konsentrasi 10 ppm, 20 ppm,  30  ppm,  40  ppm,  dan  50  ppm.  Dari  masing- masing  konsentrasi  larutan  standar  kuersetin ditambahkan 3 mL metanol, 0,2 mL AlCl 3 10%, 0,2 mL  kalium  asetat  1M  dan  dicukupkan  dengan aquadestilata  sampai  10  mL.  Setelah  itu  diamkan selama  30  menit  pada  suhu  kamar  dan  ukur absorbansinya  pada  spektrofotometeri  uv-vis (Ahmad et al. , 2015).

## II.3.2 Penetapan Kadar Flavonoid Total
Penetapan  kandungan  flavonoid  total merujuk pada prosedur Chang (Chang et al. , 2002) dengan beberapa modifikasi menggunakan kuersetin sebagai standar. Ditimbang 10 mg ekstrak daun  patikan  kebo  ( Euphorbia  hirta )  dilarutkan dalam 10 mL metanol. Diambil 1 mL ditambahkan 3 mL metanol, 0,2 mL larutan AlCl 3 10%, 0,2 mL kalium  asetat  1M  dan  10  mL  aquadestilata, kemudian didiamkan dalam suhu kamar selama 30 menit.  Kemudian  diukur  absorbansinya  pada spektrofotometer  UV-Vis,  kemudian  dilakukan analisis data.

## III. Hasil dan Pembahasan
Masing-masing  serbuk  daun  patikan  kebo 250  gram  diekstraksi  secara  perkolasi  dan  refluks dengan menggunakan pelarut  etanol 70%, masing- masing  pelarut  yang  digunakan  sebanyak  900  mL untuk perkolasi dan 500 mLuntuk refluks, sehingga menghasilkan  ekstrak  kental  sebesar  10,94  gram dengan  persen  rendamen  sebesar  4,376  %  untuk metode  perkolasi  dan  13,25  gram  dengan  persen rendamen sebesar 5,3% untuk metode refluks (Tabel 1).
Selanjutnya  ekstrak  kental  daun  patikan kebo  ( Euphorbia  hirta ) kemudian  dilakukan pemeriksaan  flavonoid  secara  kualitatif  dengan menggunakan  metode  kromatografi  lapis  tipis (KLT).  Dimana  KLT  itu  sendiri  merupakan  suatu metode  pemisahan  suatu  senyawa  berdasarkan perbedaan  distribusi  dua  fase  yaitu  fase  diam  dan fase gerak. Fase diam yang digunakan adalah silika gel GF254, dan fase geraknya n -heksan : etil asetat
(7:3).  Hasil  dari  uji  kualitatif  masing-masing ekstrak daun patikan kebo ( Euphorbia hirta ) setelah ditotol  pada  lempeng  KLT  dan  disemprot menggunakan  perekasi  AlCl 3 menunjukan  bahwa ekstrak daun patikan kebo ( Euphorbia hirta ) positif mengandung  flavonoid  yang  ditandai  dengan adanya noda yang berwarna kuning (Gambar 1).
Gambar 1. Uji kualitatif flavonoid menggunakan AlCl 3 pada ekstrak metode perkolasi (a) dan metode refluks (b)
a b
Tabel 1. Hasil rendamen ekstrak etanol daun petikan kebo (Euphorbia hirta) Sampel Metode Bobot Serbuk Kering (g) Jumlah Pelarut (mL) Hasil Ekstraksi (g) Rendamen Ekstrak (%) Daun Patikan Kebo ( Euphorbia Hirta ) Perkolasi 250 900 10,94 4,376 Refluks 250 900 13,25 5,3
Gambar 2 . Kurva kuarsetin pada panjang gelombang 429 nm
Tabel 2. Hasil pengukuran absorbansi larutan standar kuarsetin pada panjang gelombang 429 nm
Konsentrasi (ppm) Absorbansi 10 0,224 20 0,305 30 0,441 40 0,569 50 0,649
Gambar 3. Grafik kalibrasi kuarsetin pada panjang gelombang 429 nm
0.00 0.05 0.10 0.15 0.20 400 500 600 700 800 A nm Kuersetin .dsp 1 y = 0,0111x + 0,1034 R² = 0,9914 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0 20 40 60 Abs or b an si Konsentrasi Kuersetin kuersetin Linear (kuersetin)
Tabel 3. Hasil penetapan kadar flavanoid total pada ekstrak etanol daun patikan kebo ( Euphorbia hirta ) dengan metode perkolasi
Ekstrak Replikasi Absorbansi (Y) Kandungan flavanoid awal (mg/mL) Kandungan total flavanoid (mgQE/g eks) Persen flavanoid total (%) Etanol 1 2 3 0.207 0.218 0.220 9,333 10,324 10,504 9,333 10,324 10,504 2,3158
Tabel 4. Hasil penetapan kadar flavanoid total pada ekstrak etanol daun patikan kebo ( Euphorbia hirta ) dengan metode refluks.
Ekstrak Replikasi Absorbansi (Y) Kandungan flavanoid awal (mg/mL) Kandungan total flavanoid (mgQE/g eks) Persen flavanoid total (%) Etanol 1 2 3 0.263 0.253 0.243 14,378 13,477 12,576 14,378 13,477 12,576 3,2047
Untuk  penentuan  analisis  flavonoid  total dilakukan dengan metode kolorimetri Chang et al ., (2002),  tahapan  pembuatan  larutan  standar  yaknii dengan  menggunakan  larutan  standar  kuersetin. Karna warna sampel yang digunakan adalah kuning, hal  ini  berarti  bararti  bahwa  sampel  tersebut menyerap gelombang elektromagnetik pada daerah komplemen warna kuning, yaitu daerah lembayung (violet) dan atau daerah biru. Dapat  diduga bahwa sampel ini mengandung serapan daerah 400-435 nm (violet) dan atau 435-489 (biru).
Hasil  penelitian  ini  diperoleh  kadar flavanoid  total  pada  ekstrak  etanol  daun  patikan kabo ( Euphorbia  hirta ) dengan metode perkolasi sebesar 23,158 mgQE/ g ekstrak, setiap 100 g berat ekstrak kental daun patikan kebo ( Euphorbia hirta ) mengandung flavanoid total setara quersetin sebesar 2,3158%.  Pada  ekstrak  etanol  daun  petikan  kebo ( Euphorbia  hirta )  dengan  metode  refluks  adalah sebesar 32,047 mgQE/ g ekstrak, setiap 100 g berat ekstrak kental daun petikan kebo ( Euphorbia hirta ) mengandung flavanoid total setara quersetin sebesar 3,2047%.  Menurut Wildah  (Wildah,  2001) perlakuan  panas  dapat  membebaskan  dan mengaktifkan  berat  molekul  rendah  dari  sub  unit molekul  polimer  yang  berberat  molekul  tinggi sehingga  efektif  untuk  meningkatkan  kandungan flavanoid dalam tumbuhan.
Dalam hal ini proses ekstraksi dengan cara panas  atau  ekstraksi  refluks dapat  meningkatkan dugaan  flavanoid  yang  terdapat  dalam  ekstrak (Gagola, Suryanto and Wewengkang, 2014).

## IV. Kesimpulan
Kandungan  senyawa  flavonoid  total  pada ekstrak daun patikan kebo ( Euphorbia hirta ) untuk metode  perkolasi  sebesar  23,158  mgQE/g  atau 2,32%  dan  untuk  metode  refluks  sebesar  32,047 mgQE/g atau 3,21%.

## Daftar Pustaka
Ahmad, A.R. et al. (2015) ‘Penetapan Kadar Fenolik dan Flavonoid Total Ekstrak Metanol Buah dan Daun Patikala (Etlingera elatior (Jack) R.M.SM)’, Pharmaceutical  Sciences  and Research , 2(1), pp. 1–10. Anna,  L. (2011) Uji  Diuretik  Ekstrak  Etanol  70% Daun  Petikan  Kebo  (Euphorbia  hirta  L) .
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Chang,  C.-C. et  al. (2002)  ‘Estimation  of  Total Flavonoid  Content  in  Propolis  by  Two Complementary  Colorimetric  Methods’, Journal of Food and Drug Analysis , 10(3), pp. 178–182.
Gagola,  C.,  Suryanto,  E.  and  Wewengkang,  D. (2014)  ‘Perbandingan  Metode  Ekstraksi Maserasi dan terhadap Kadar Fenolik dari Ekstrak  Tongkol  Jagung  (Zea  mays  L)’, PHARMACON  Jurnal  Ilmiah  Farmasi , 3(2), pp. 127–133. Hariana, A. (2007) 812 Resep untuk Mengobati 236 Penyakit . Jakarta: Penebar Swadaya. Puspitasari,  A.D.  and  Wulandari,  R.L.  (2017) ‘Aktivitas  Antioksidan  dan  Penetapan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Etil Asetat Daun Kersen (Muntingia calabura)’, Jurnal
Pharmascience ,  4(2),  pp.  167–175. Available at: https://doi.org/10.20527/jps.v4i2.5770. Wildah, D. (2001) Isolasi dan Identifikasi Flavonoid pada Daun Kemuning . Universitas Hasanuddin.