## EFEKTIVITAS VARIASI UKURAN BOTOL MEDIA TANAM
TERHADAP PERTUMBUHAN PLANLET ANGGREK Phalaenopsis
amabilis L.
Aulia Widiawati Fitriana Dewi¹, Praptining Rahayu², Endah Rita Sulistya Dewi³
Universitas PGRI Semarang 1,2,3
widia8424@gmail.com¹

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  variasi  ukuran  botol  media terhadap  pertumbuhan planlet anggrek Phalaenopsis  amabilis L.  Penelitian  ini menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  variasi  satu  faktor  yaitu ukuran  media  botol  (P1:  250  ml,  P2:  500  ml,  dan  P3:  750  ml).  Setiap  variasi perlakuan  diulang  sebanyak  empat  kali.  Hasil  analisis  data  pada  penelitian  ini menggunakan program SPSS 27. Data diuji normalitas dan homogenitas, kemudian dilanjutkan  dengan  uji  ANOVA  ( Analysis  of  Variance )  pada  taraf  5%.  Apabila terdapat  pengaruh  yang  signifikan  maka  dilanjutkan  dengan  uji  Beda  Nyata Terkecil  (BNT).  Hasil  penelitian  menunjukkan  terdapat  pengaruh  penggunaan variasi  ukuran  botol  750  ml  terhadap  parameter  panjang  akar  dan  jumlah  akar. Simpulan,variasi  ukuran  botol  media  tanam  dapat  mempengaruhi  pertumbuhan planlet anggrek Phalaenopsis amabilis L. meliputi panjang akar dan jumlah akar.
Kata Kunci : Kultur jaringan, Phalaenopsis amabilis L., Ukuran botol

## ABSTRACT
This  study  aims  to  determine  the  effect  of  variations  in  media  bottle  size  on  the growth of Phalaenopsis amabilis L. orchid plantlets. This study used a Completely Randomized  Design  (CRD)  with  variations  in  one  factor,  namely  the  size  of  the media bottle (P1: 250 ml, P2: 500 ml, and P3: 750 ml). Each treatment variation was repeated four times. The results of data analysis in this study used the SPSS 27 program. The data was tested for normality and homogeneity, then continued with the  ANOVA  (Analysis  of  Variance)  test  at  the  5%  level.  If  there  is  a  significant influence then proceed with the Least Significant Difference (BNT) test. The results of the research showed that there was an effect of using variations in the size of the 750 ml bottle on the parameters of root length and number of roots. In conclusion, variations  in  the  size  of  the  planting  medium  bottle  can  influence  the  growth  of Phalaenopsis  amabilis  L.  orchid  plantlets  including  root  length  and  number  of roots.
Keywords: Tissue Culture, Phalaenopsis amabilis L., Bottle Size

## PENDAHULUAN
Anggrek  banyak  digandrungi  masyarakat  karena  keindahannya  dan  masa berbunga yang panjang. Bentuk bunganya yang indah dan penyebarannya yang luas menjadikan anggrek sebagai tanaman yang digemari (Dewi et al., 2020). Julukan “Puspa pesona” sudah tidak asing lagi di kalangan pecinta anggrek, karena telah diberikan kepada bunga anggrek Phalaenopsis amabilis L . (Istiqomah et al., 2020). Anggrek Phalaenopsis amabilis L . merupakan anggrek yang umum (Hinsley et al.,
2018). Jenis anggrek yang sangat menarik perhatian adalah anggrek Phalaenopsis karena  nilai  pasarnya  yang  tinggi  sebagai  tanaman  hias  (Meilasari  &  Iriawati, 2016).  Namun  cara  bertani  tradisional  masih  mempunyai  kendala  di  Indonesia sehingga sulit memperoleh benih yang berkualitas.
Perbanyakan  anggrek  secara  konvensional  mempunyai  kendala  fisiologis karena benih anggrek tidak mempunyai endosperm dan pada kondisi alami anggrek hanya  dapat  berkecambah  secara  simbiosis  dengan  herba  mikoriza  (Heriansyah, 2019).  Teknik  budidaya  pada  kultur  jaringan  dilakukan  di  dalam  tempat  untuk melindungi  tanaman  dari  kontaminasi  luar.  Teknologi  kultur  jaringan  memiliki keunggulan  yaitu  mampu  menghasilkan  tanaman  dalam  jumlah  besar  dengan keturunan  yang  identik  dengan  tanaman  induk  dalam  waktu  singkat  dan menghasilkan  tanaman  unggul  bebas  penyakit  (Zahara,  2017).  Subkultur merupakan langkah penting dalam proses kultur jaringan. Tujuan subkultur adalah mengganti media lama dengan media baru agar tanaman tetap ternutrisi dengan baik (Rodinah et al., 2018).
Media  kultur  jaringan  banyak  mengandung  unsur  hara  mikro  dan  makro berupa  garam  anorganik,  gula  sebagai  sumber  energi,  vitamin,  asam  amino,  zat pengatur tumbuh, senyawa organik, bahan pemadat, dan air (Andriani, 2018). Vacin and  Went sering  digunakan  sebagai  media  dasar  untuk  perkecambahan  anggrek (Utami  &  Hariyanto,  2019). Vacin  and  Went memiliki  kemampuan  untuk mendukung pertumbuhan anggrek karena mengandung unsur hara mikro dan makro yang  diperlukan  oleh  tanaman  (Ningsih  et  al.,  2021).  Penambahan  zat  pengatur tumbuh  (ZPT),  vitamin,  bahan  organik,  dan  sukrosa  dapat  mendukung pertumbuhan tanaman secara in vitro (De & Singh, 2018). Penggunaan fitohormon dari  air  kelapa  dalam  media  diperkirakan  dapat  meningkatkan  pertumbuhan tanaman yang dibudidayakan (Sundalangi et al., 2023).
Ukuran botol mengacu pada jumlah media di dalam botol, volume botol, dan ketersediaan  oksigen  di  dalam  botol,  yang  dapat  mempengaruhi  pertumbuhan budidaya. Nilai tukar udara dan elastisitas medium menentukan kelembapan botol. Jika pertukaran gas banyak dan mediumnya padat, kelembapan udara bisa menjadi sangat  rendah  dan  medium  bisa  mengering.  Jumlah  media  yang  tepat  bagi  suatu tanaman  adalah  jumlah  media  yang  dapat  menunjang  pertumbuhan  dan perkembangan  akar  tanaman  serta  memenuhi  kebutuhan  air  dan  unsur  hara tanaman.  Ukuran  botol  tanam  berperan  penting  dalam  menentukan  ketersediaan ruang  bagi  sistem  perakaran  tanaman.  Kapasitas  botol  media  yang  digunakan
sebaiknya  disesuaikan  dengan  ukuran  tanaman  yang  akan  ditanam  untuk menciptakan  lingkungan  yang  tepat  dan  mendukung  pertumbuhan  tanaman  yang optimal.
Ukuran botol bervariasi sesuai dengan kebutuhan kultur jaringan. Botolnya harus transparan dan mampu menahan tekanan dan suhu tinggi. Persyaratan utama botol kultur jaringan antara lain sterilitas, transparansi, ketahanan terhadap bahan kimia,  tahan  suhu  tinggi,  tidak  beracun,  dan  menghindari  kerusakan,  termasuk permukaan  botol  yang  halus.  Kontak  dengan  dinding  botol  akan  mempengaruhi tanaman. Botol yang digunakan dalam penelitian memiliki ukuran yang bervariasi (250 ml, 500 ml, dan 750 ml). Botol media tanam tersedia dalam berbagai bentuk, antara lain Botol media 250 ml dan 500 ml berbentuk silinder, sedangkan botol 750 ml  berbentuk  erlenmayer.  Berdasarkan  permasalahan  di  atas,  penelitian  ini bertujuan untuk mengetahui efektivitas variasi ukuran botol media (250 ml, 500 ml, dan 750 ml) terhadap pertumbuhan planlet anggrek Phalaenopsis amabilis L.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilakukan  dari  Juni  hingga  Agustus  2023  di  Laboratorium Kultur Jaringan Candi Orchid, Semarang. Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan variasi pada satu faktor, yakni ukuran botol media (P1: 250 ml, P2: 500 ml, dan P3: 750 ml). Setiap variasi perlakuan diulang sebanyak empat kali. Peralatan yang digunakan untuk menyiapkan medium Vacin and Went (VW)  pada  penelitian  ini  antara  lain  pisau,  timbangan  digital,  talenan,  blender, panci,  pengaduk,  mesin  cuci,  oven,  gelas  ukur,  botol  medium,  dan  autoklaf,  pH meter,  saringan,  dan  wadah  plastik  besar.  Sterilisasi  kering  biasanya  digunakan pada  peralatan  laboratorium  yang  tidak  basah  dan  tidak  meleleh,  terbakar,  atau berubah  bentuk  jika  terkena  suhu  tinggi.  Botol  kultur  terlebih  dahulu  disterilkan dalam  autoklaf  sebelum  digunakan  sebagai  wadah  media  kultur.  Fungsi  autoklaf disini  adalah  untuk  mensterilkan  media  tanam  dalam  botol.  Peralatan  yang digunakan untuk subkultur antara lain botol, pinset, sendok, cawan petri, penggaris, wadah,  sarung  tangan  karet,  dan  masker.  Bahan  baku  yang  digunakan  dalam pembuatan  media Vacin  and  Went (VW)  adalah  agar-agar,  gula  pasir,  aquades, pisang,  tomat,  air  kelapa  muda,  arang  kelapa,  larutan  NaOH,  dan  larutan  HCl.
Bahan yang digunakan untuk subkultur antara lain media Vacin and Went (VW), planlet anggrek Phalaenopsis amabilis L . , alkohol 70%, sabun, dan iodin.

## Pembuatan Media Vacin and Went
Prosedur  kerja  pada  penelitian  ini  diawali  dengan  membuat  media Vacin and  Went .  Menyiapkan  peralatan  dan  bahan  yang  akan  digunakan.  Menimbang setiap  bahan  sesuai  kebutuhan  untuk  membuat  media  kultur.  Menghaluskan  100 gram  tomat,  lalu  saring  dengan  900  ml  air  suling  dan  tuangkan  ke  dalam  panci. Hancurkan 100 gram pisang, 30 gram sukrosa, dan 6,8 gram agar-agar, kemudian tambahkan  50  ml  air  kelapa  dan  campur  hingga  membentuk  massa  homogen.
Selanjutnya, ukur pH menggunakan pH meter hingga mencapai pH 5,3. Tambahkan air suling hingga volume total mencapai 1,5 liter. Jika pH terlalu asam, sesuaikan dengan  larutan  NaOH.  Jika  terlalu  basa,  tambahkan  larutan  HCl  perlahan-lahan, aduk  rata,  dan  masak  hingga  mendidih.  Setelah  itu,  tuangkan  larutan  media  ke dalam botol kultur sebanyak 60 mL dan tutup rapat. Medium kemudian disterilkan dengan autoklaf pada suhu 121°C selama 1,5 jam. Penting untuk memastikan media kultur  jaringan  disterilkan  secara  efektif  karena  selain  mendukung  pertumbuhan dan  perkembangan  eksplan,  media  juga  berfungsi  sebagai  sumber  potensial kontaminasi.  Media  ini  siap  digunakan  setelah  masa  inkubasi  selama  4  hari  dan telah terbebas dari kontaminan.

## Penanaman Sub Kultur
Setelah  pembuatan  media  tahapan  selanjutannya  adalah  penanaman  sub kultur.  Peneliti  mencuci  tangan  dengan  sabun,  bilas,  dan  tunggu  hingga  kering untuk  mendisinfeksi  tangan.  Menggunakan  sarung  tangan  lateks  dan menyemprotkan  tangan  dengan  alkohol.  Memastikan  alat  dan  bahan  di  dalam wadah  masih  utuh.  Tanaman  anggrek Phalaenopsis  amabilis L.  dikeluarkan  dari botol dan dimasukkan ke dalam cawan petri steril. Tanaman Anggrek Phalaenopsis amabilis L.  yang  letaknya  berdekatan  dan  masih  berisi  media  tanam  dicuci  lalu dipisahkan.  Mengukur planlet anggrek Phalaenopsis  amabilis L.  menggunakan penggaris  dengan  parameter  penelitian  pengukuran  panjang  akar,  jumlah  akar, panjang daun, dan jumlah daun. Tanaman Anggrek Phalaenopsis amabilis L. Tiap botol berisi 5 bibit dan ditanam dalam satu media. Setelah tanam, keluarkan botol dari wadah dan sisihkan. Cuci enkas, semprot dengan alkohol dan lap dengan kain. Kultur diinkubasi pada suhu kamar (25°C).

## Pengambilan Data
Pengambilan data dilakukan pada awal tanam dan setelah 3 bulan budidaya. Mengamati,  mengukur,  menghitung,  mencatat  dan  mendokumentasikan  tanaman berdasarkan  parameter  penelitian  yang  akan  diamati.  Pengukuran  panjang  daun dilakukan secara vertikal, memilih panjang yang paling dominan, mengukur dengan penggaris dari pangkal hingga ujung daun, menhitung rata-rata panjang daun pada setiap  perlakuan,  dan  mencatat  hasilnya.  Pengukuran  jumlah  daun  dengan menghitung  jumlah  rata-rata  daun  pada  setiap  perlakuan  dan  mencatat  hasilnya. Pengukuran  panjang  akar  dilakukan  dengan  memilih  panjang  akar  yang  paling dominan, mengukur dengan penggaris dari pangkal hingga ujung akar, menghitung rata-rata panjang akar pada setiap perlakuan, dan mencatat hasilnya. Pengukuran jumlah  akar  dengan  menghitung  jumlah  rata-rata  akar  pada  setiap  perlakuan  dan mencatat hasilnya.

## Analisi Data
Analisis data pada penelitian ini menggunakan program SPSS 27. Data diuji normalitas dan homogenitas, kemudian dilanjutkan dengan uji ANOVA ( Analysis of  Variance )  pada  taraf  5%  untuk  menguji  pengaruh  setiap  perlakuan  terhadap pertumbuhan planlet anggrek Phalaenopsis amabilis L . Apabila terdapat pengaruh yang signifikan maka dilanjutkan menggunakan uji BNT (Beda Nyata Terkecil ).

## HASIL PENELITIAN
Hasil  pertumbuhan planlet anggrek Phalaenopsis  amabilis L.  setelah diberikan perlakuan variasi ukuran botol media disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1. Perlakuan Variasi Ukuran Botol Terhadap Pertumbuhan Planlet
Ukuran Botol Media Parameter Panjang Akar (cm) Jumlah Akar Panjang Daun (cm) Jumlah Daun (helai) P1 ( Botol 250 ml) 2.2* 6* 2.6 7 P2 (Botol 500 ml) 2.7* 7* 2.5 7 P3 (Botol 750 ml) 3.3* 8* 2.5 6
Keterangan: * = berbeda nyata
Tabel  1.  menunjukkan  adanya  perbedaan  perlakuan  variasi  ukuran  botol media berpengaruh terhadap parameter pertumbuhan panjang akar dan jumlah akar planlet anggrek Phalaenopsis amabilis L.

## Panjang Akar
Pemberian  perlakuan  variasi  ukuran  botol  media  berpengaruh  nyata terhadap  parameter  perumbuhan  panjang  akar planlet anggrek Phalaenopsis amabilis L. Pengaruh perbedaan variasi ukuran botol media terhadap panjang akar disajikan pada Gambar 1.
Gambar 1. Rata-rata Panjang Akar 2,2 2,7 3,3 0 1 2 3 4 P1 (Botol 250 ml) P2 (Botol 500 ml) P3 (Botol 750 ml)
Rata-rata Panjang Akar
Gambar 1.menunjukkan bahwa pemberian perlakuan P1 (ukuran botol 250 ml) memperoleh hasil rata-rata panjang akar tanaman terendah dengan panjang akar tanaman, yaitu 2,2 cm. Pada perlakuan P2 (ukuran botol 500 ml) memperoleh hasil rata-rata panjang akar tanaman, yaitu 2,7 cm. Sedangkan pada perlakuan P3 (ukuran botol 750 ml) memperoleh hasil rata-rata panjang akar tanaman tertinggi dengan panjang akar tanaman, yaitu 3,3 cm.

## Jumlah Akar
Pemberian  perlakuan  variasi  ukuran  botol  media  berpengaruh  nyata terhadap  parameter  perumbuhan  jumlah  akar planlet anggrek Phalaenopsis amabilis L. Pengaruh perbedaan variasi ukuran botol media terhadap jumlah akar disajikan pada Gambar 2.
Gambar 2. Rata-rata Jumlah Akar
Gambar 2. menunjukkan bahwa pemberian perlakuan P1 (ukuran botol 250 ml) memperoleh hasil rata-rata jumlah akar tanaman terendah dengan jumlah akar tanaman,  yaitu  sebanyak  6  akar.  Pada  perlakuan  P2  (ukuran  botol  500  ml) memperoleh hasil rata-rata jumlah akar tanaman, yaitu sebanyak 7 akar. Sedangkan pada perlakuan P3 (ukuran botol 750 ml) memperoleh hasil rata-rata jumlah akar tanaman tertinggi dengan jumlah akar tanaman, yaitu sebanyak 8 akar.

## Panjang Daun
Pemberian  perlakuan  variasi  ukuran  botol  media  tidak  berpengaruh  nyata terhadap  parameter  perumbuhan  panjang  daun planlet anggrek Phalaenopsis amabilis L. Pengaruh perbedaan variasi ukuran botol media terhadap panjang daun disajikan pada Gambar 3.
6 7 8 0 2 4 6 8 10 P1 (Botol 250 ml) P2 (Botol 500 ml) P3 (Botol 750 ml)
Rata-rata Jumlah Akar

## Gambar 3. Rata-rata Panjang Daun
Gambar 3.menunjukkan bahwa pemberian perlakuan P1 (ukuran botol 250 ml)  memperoleh  hasil  rata-rata  panjang  daun  tanaman  tertinggi  dengan  panjang daun  tanaman,  yaitu  2,6  cm.  Pada  perlakuan  P2  (ukuran  botol  500  ml)  dan perlakuan P3 (750 ml) memperoleh hasil rata-rata panjang daun tanaman dengan hasil yang sama, yaitu 2,5 cm.

## Jumlah Daun
Pemberian  perlakuan  variasi  ukuran  botol  media  tidak  berpengaruh  nyata terhadap  parameter  perumbuhan  jumlah  daun planlet anggrek Phalaenopsis amabilis L. Pengaruh perbedaan variasi ukuran botol media terhadap jumlah daun disajikan pada Gambar 4.
Gambar 4. Rata-rata Jumlah Daun
Gambar 4.menunjukkan bahwa pemberian perlakuan P1 (ukuran botol 250 ml) dan P2 (ukuran botol 500 ml ) memperoleh hasil rata-rata jumlah daun tanaman dengan hasil yang sama, yaitu 7 helai. Pada perlakuan P3 (ukuran botol 750 ml) memperoleh hasil rata-rata jumlah daun terendah, yaitu 6 helai.

## PEMBAHASAN
Pada  perlakuan  tehadap  panjang  akar  menunjukkan  bahwa  variasi  ukuran botol media tanam pada perlakuan P3 (ukuran botol 750 ml) memberikan pengaruh dengan  hasil  terbaik  terhadap  pertumbuhan  panjang  akar planlet anggrek Phalaenopsis  amabilis L.,  yaitu  3,3  cm.  Penerapan  variasi  ukuran  botol  media
2,6 2,5 2,5 2,45 2,5 2,55 2,6 2,65 P1 (Botol 250 ml) P2 (Botol 500 ml) P3 (Botol 750 ml) Rata-rata Panjang Daun 7 7 6 5,5 6 6,5 7 7,5 P1 (Botol 250 ml) P2 (Botol 500 ml) P3 (Botol 750 ml)
Rata-rata Jumlah Daun
tanam pada perlakuan P1 (ukuran botol 250 ml) memberikan hasil paling rendah terhadap  pertumbuhan  panjang  akar planlet anggrek Phalaenopsis  amabilis L. yaitu, 2,2 cm.
Hasil  analisis  menunjukan  panjang  akar  tanaman  menunjukan  perbedaan yang  nyata  terhadap  variasi  ukuran  botol  media  tanam.  Akar  tanaman membutuhkan ruang untuk tumbuh dan berkembang. Media tanam dengan volume yang lebih besar menyediakan lebih banyak ruang bagi akar untuk menyebar dan tumbuh lebih panjang. Ukuran botol media yang besar memungkinkan akar dapat tumbuh  dengan  leluasa  untuk  perkembangannya.  Pola  pertumbuhan  akar memperlihatkan volume media yang lebih besar dapat meningkatkan panjang akar. Semakin  besar  volume  media  yang  digunakan  maka  akan  semakin  baik pertumbuhan akar bibit tempuyung (Ari et al., 2016). Penelitian Surata (2012) juga menunjukkan bahwa peningkatan jumlah kantong plastik yang lebih besar terbukti dapat meningkatkan pertumbuhan dan kualitas benih cendana.
Selain itu, komposisi dan kualitas media menjamin aktivitas fisiologis dan morfologi  yang  sesuai  serta  mendukung  proses  pemanjangan  akar.  Ditambah dengan  kondisi  lingkungan  yang  mendukung  tersebut,  kebutuhan  aktivitas meristem  apikal  dapat  terpenuhi  secara  optimal  dan  tanaman  mampu  melakukan proses  fotosintesis  dengan  baik.  Hormon  auksin  yang  terdapat  pada  area  tanam berperan penting dalam pembentukan akar dan merangsang pembelahan sel.
Hormon  auksin  memegang  peran  penting  dalam  pembentukan  akar, merangsang pembelahan sel. IAA (Asam Indol Asetat) merupakan senyawa yang dihasilkan  melalui  sintesis  asam  amino  triptofan  dengan  bantuan  enzim  IAA- oksidase. Senyawa ini berperan sebagai pengatur dalam sejumlah proses fisiologis pada  tumbuhan,  termasuk  dalam  proses  pembesaran,  pembelahan  sel,  serta diferensiasi sel dan jaringan. Auksin juga memicu aktivitas hidrolisis polisakarida, serta  menghasilkan  gula  aktif  yang  diperlukan  untuk  pembelahan  sel  dan pertumbuhan  akar  (Asra  et  al.,  2020).  Kemampuan  suatu  tanaman  untuk mengembangkan  akarnya  merupakan  atribut  internal  yang  ditentukan  oleh simpanan  makanan  yang  terdapat  di  dalam  tanaman  itu  sendiri.  Proses pembentukan  akar  akan  terjadi  bila  cadangan  makanan  yang  dibutuhkan  untuk pertumbuhan akar sudah tersedia dalam jumlah yang cukup.
Pada  perlakuan  tehadap  jumlah  akar  menunjukkan  bahwa  variasi  ukuran botol media tanam pada perlakuan P3 (ukuran botol 750 ml) memberikan pengaruh dengan  hasil  terbaik  terhadap  pertumbuhan  jumlah  akar planlet anggrek Phalaenopsis amabilis L., yaitu sebanyak 8 akar. Penerapan variasi ukuran botol media  tanam  pada  perlakuan  P1  (ukuran  botol  250  ml)  memberikan  hasil  paling rendah terhadap pertumbuhan jumlah akar planlet anggrek Phalaenopsis amabilis L. yaitu sejumlah 6 akar.
Hasil analisis menunjukan jumlah akar tanaman menunjukan perbedaan yang nyata terhadap variasi ukuran botol media tanam. Ukuran botol media yang besar memungkinkan akar dapat tumbuh dengan leluasa untuk perkembangannya. Hal ini
sejalan  dengan  pendapat  Taulabi  et  al.  (2024),  luas  sebaran  akar  dan  kedalaman akar menunjukkan kemampuan akar dalam mencari dan menyerap unsur hara yang mempengaruhi  pertumbuhan  tanaman.  Volume  media  yang  lebih  besar memungkinkan perkembangan sistem akar yang lebih luas dan kompleks. Tanaman cenderung mengembangkan lebih banyak akar untuk memaksimalkan penyerapan nutrisi  dan  air  dari  media  yang  lebih  besar.  Volume  media  yang  memadai membantu  menjaga  kesehatan  akar  dengan  menyediakan  kondisi  yang  optimal seperti kelembaban yang stabil.
Media  kultur  jaringan  banyak  mengandung  unsur  hara  makro  dan  mikro berupa  garam  anorganik,  gula  sebagai  sumber  energi,  vitamin,  asam  amino,  zat pengatur tumbuh, senyawa organik, bahan pemadat, dan air. Tedapat beberapa jenis media kultur in vitro, salah satunya yaitu media V acint & Went (VW) (Andriani, 2018). Senyawa organic dapat berupa dari buah dan sayur salah satunya kelapa. Air kelapa mengandung banyak bahan mineral dan hormon sitokinin dan auksin yang dapat membantu meningkatkan pertumbuhan tanaman (Utami & Hariyanto, 2019). Kandungan  zat-zat  organik  ini  dalam  media  regenerasi  secara  signifikan meningkatkan  pertumbuhan  tanaman,  karena  penambahan  air  kelapa  dan  ekstrak pisang meningkatkan jumlah akar dan panjang akar. Hal ini sesuai dengan pendapat Solihah et al. (2021) yang menunjukkan bahwa penambahan air kelapa berpengaruh terhadap pembentukan akar krisan kultivar Xanne agrihorti.
Pada  perlakuan  tehadap  panjang  daun  menunjukkan  bahwa  variasi  ukuran botol  media  tanam  tidak  berpengaruh  terhadap  pertumbuhan  panjang  daun.  Pada perlakuan  P1  (ukuran  botol  250  ml)  memberikan  hasil  terbaik  terhadap pertumbuhan  panjang  daun planlet anggrek Phalaenopsis  amabilis L.,  yaitu sebanyak 2,6 cm. Penerapan variasi ukuran botol media tanam pada perlakuan P2 (ukuran botol 500 ml) dan pada perlakuan P3 (ukuran botol 750 ml) memberikan hasil yang sama terhadap pertumbuhan panjang daun planlet anggrek Phalaenopsis amabilis L., yaitu 2,5 cm.
Hasil  analisis  menunjukan  panjang  daun  tanaman  tidak  menunjukan perbedaan  yang  nyata  terhadap  variasi  ukuran  botol  media  tanam.  Akan  tetapi pertumbuhan  panjang  daun  tersebut  mencapai  pada  standar  pertumbuhan  yang normal.  Maka  dari  itu  untuk  melakukan  kultur  jaringan  pada planlet anggrek Phalaenopsis amabilis L. dapat menggunakan semua ukuran botol media. Diduga panjang  tanaman  dipengaruhi  oleh  genetik  dan  faktor  lingkungan.  Selain disebabkan oleh genetik pada tanaman, panjang daun juga dapat dipengaruhi oleh lingkungan tempat tumbuh (Rahman et al., 2022). Penelitian tersebut didukung oleh Sari  et  al.  (2024),  yang  menyatakan  faktor  lingkungan  itu  juga  mempengaruhi pertumbuhan vegetative Phalaenopsis amabilis anggrek yaitu suhu perlu dikontrol dengan media tanam yang dapat menjaga kelembaban anggrek.
Pertumbuhan  daun  dipengaruhi  oleh  percepatan  pembelahan  sel  yang mendorong  diferensiasi.  Proses  pembelahan  sel  memerlukan  energi  yang  tinggi, didukung oleh auksin, sitokinin, serta nutrisi seperti nitrogen. ATP, hasil dari proses
respirasi,  digunakan  untuk  mensintesis  senyawa  penting  seperti  protein, karbohidrat, dan lemak (Krisdianto et al., 2020). Senyawa-senyawa tersebut penting dalam pembelahan sel  pada meristem apikal dan  interkalar, yang  mengakibatkan peningkatan panjang daun. Intensitas cahaya, suhu, kelembaban, nutrisi, dan jenis media tanam bisa memiliki pengaruh lebih besar terhadap panjang daun daripada ukuran botol media.
Pada  perlakuan  terhadap  jumlah  daun  menunjukkan  bahwa  variasi  ukuran botol  media  tanam  tidak  berpengaruh  terhadap  pertumbuhan  jumlah  daun.  pada perlakuan P1 (ukuran botol 250 ml) dan P2 (ukuran botol 500 ml) memberikan hasil yang  sama  terhadap  pertumbuhan  jumlah  daun planlet anggrek Phalaenopsis amabilis L. , yaitu sejumlah 7 helai. Sedangkan pada Penerapan variasi ukuran botol media tanam pada perlakuan P3 (ukuran botol 750 ml) memberikan hasil terendah terhadap pertumbuhan jumlah daun planlet anggrek Phalaenopsis amabilis L., yaitu sebanyak 6 helai.
Hasil  analisis  menunjukan  jumlah  daun  tanaman  tidak  menunjukan perbedaan  yang  nyata  terhadap  variasi  ukuran  botol  media  tanam.  Akan  tetapi pertumbuhan  panjang  daun  tersebut  mencapai  pada  standar  pertumbuhan  yang normal.  Maka  dari  itu  untuk  melakukan  kultur  jaringan  pada planlet anggrek Phalaenopsis amabilis L. dapat menggunakan semua ukuran botol media. Hal ini sejalan  dengan  hasil  penelitian  Rahayu  dan  Susanto  (2016)  yang  menyatakan bahwa,  volume media tanam tidak memberikan  pengaruh yang berbeda terhadap variabel  pengamatan  luas  daun,  jumlah  daun,  dan  panjang  tunas  pada  tanaman pamelo.  Selain  itu  hasil  penelitian  lain  oleh  jenis  media  tanam  dengan  volume media  tanam  tidak  memberikan  pengaruh  yang  berbeda  untuk  pertumbuhan  dan hasil  tanaman  melon,  yaitu  tinggi  tanaman,  jumlah  daun,  lebar  daun,  umur penyerbukan, bobot buah, diameter buah, dan tebal daging buah (Elendrya et al., 2023).
Pertumbuhan  jumlah  daun  pada  setiap  eksplan  yang  ditanam  dipengaruhi oleh hubungan dan interaksi antara regulator pertumbuhan yang ada dalam eksplan itu  sendiri  (endogen)  dan  yang  diserap  dari  lingkungan  sekitarnya  (eksogen) (Sulichantini et al., 2021). Jumlah daun yang berkembang lebih lanjut dipengaruhi oleh  faktor  genetik  tanaman  dan  kondisi  lingkungan  seperti  cahaya,  suhu, kelembaban, ketersediaan nutrisi, dan air (Rahman et al., 2022). Meskipun ruang tumbuh  yang  lebih  besar  mungkin  memungkinkan  pertumbuhan  tanaman  secara keseluruhan yang lebih besar, jumlah daun yang dihasilkan lebih banyak terkait erat dengan faktor-faktor lingkungan dan genetika tanaman yang kompleks.
Suhu  mempengaruhi  proses  fisiologis  tanaman  yang  berkaitan  dengan pertumbuhan  tanaman.  Suhu  tinggi  dan  kelembapan  rendah  meningkatkan transpirasi  dan  menghambat  fotosintesis,  sehingga  memperlambat  penyerapan nutrisi.  Namun  jika  suhu  dan  kelembapan  seimbang,  penyerapan  unsur  hara  dan proses  fotosintesis  dapat  berjalan  lancar.Ada  banyak  elemen  yang  turut memengaruhi  jumlah  daun  pada  tanaman,  termasuk  peranan  genotipe  dan
lingkungan. Genotipe dan lingkungan mampu memberikan pengaruh pada jumlah serta dimensi daun, yang pada akhirnya menjadi karakteristik yang membedakan setiap  jenis  tanaman.  Karakteristik  morfologi  tanaman  anggrek  memiliki  potensi untuk memengaruhi pertumbuhan jumlah daun.

## SIMPULAN
Penelitian ini memberikan hasil bahwa pengaruh variasi ukuran botol media tanam dapat mempengaruhi pertumbuhan planlet anggrek Phalaenopsis amabilis L. meliputi panjang akar dan jumlah akar. Pemberian perlakuan pada P3 (botol 750 ml)  memperoleh  hasil  terbaik  parameter  panjang  akar  dan  jumlah  akar.  Variasi ukuran botol 750 ml cenderung direkomendasikan karena memberikan efek yang optimal untuk parameter panjang akar dan jumlah akar.

## DAFTAR PUSTAKA
Andriani, V. (2018). Perbedaan pertumbuhan planlet anggrek bulan (Phalenopsis sp.) secara in vitro dengan penambahan sari ubi kayu (Monihot sp.) dan sari kedelai  (Glycine  max)  pada  media  vw  (Vacint  and  Went)  dan  growmore (32:10:10). Stigma , 11 (1), 37–47. https://jurnal.unipasby.ac.id/index.php/stigma/article/view/1507/2385 Ari,  H.  G.,  Melati,  M.,  &  Aziz,  S.  (2016).  Produksi  bibit  tempuyung  (Sonchus arvensis  L.)  dengan  komposisi  dan  volume  media  tumbuh  yang  berbeda. Jurnal Hortikultura Indonesia , 7 (3), 195–203. https://doi.org/10.29244/jhi.7.3.195-203
Asra, R., Samarlina, R. A., & Silalahi, M. (2020). Hormon tumbuhan . Jakarta: UKI
Press De,  L.  C.,  &  Singh,  R.  (2018).  Organic  production  of  cymbidium  orchids. Acta Scientific Agriculture , 2 (4), 1–6. https://www.researchgate.net/publication/335443737 Dewi, E. R. S., Nurgroho, A. S., & Ulfah, M. (2020). Types of Epiphytic orchids and host plants on ungaran mountain limbangan kendal central java and its potential as orchid conservation area. International Journal of Conservation Science , 11 (1), 117–124. www.ijcs.uaic.ro
Elendrya,  S.,  Sesanti,  R.  N.,  Erfa,  L.,  Sismanto,  S.,  &  Prajaka,  N.  W.  (2023). Pengaruh  berbagai  jenis  dan  volume  media  tanam  terhadap  pertumbuhan dan  hasil  melon  (Cucumis  melo  L.)  dengan  sistem  hidroponik. J.  of Horticulture Production Technology , 1 (1), 20–29. https://jurnal.polinela.ac.id/jht Heriansyah, P. (2019). Multiplikasi embrio somatis tanaman anggrek (Dendrobium sp)  dengan  pemberian  kinetin  dan  sukrosa  secara  in-vitro. Jurnal  Ilmiah Pertanian , 15 (2), 67–78. https://doi.org/10.31849/jip.v15i2.1974
Hinsley, A., De Boer, H. J., Fay, M. F., Gale, S. W., Gardiner, L. M., Gunasekara,
R. S., Kumar, P., Masters, S., Metusala, D., Roberts, D. L., Veldman, S.,
Wong,  S.,  &  Phelps,  J.  (2018).  A  review  of  the  trade  in  orchids  and  its implications  for  conservation. Botanical  Journal  of  the  Linnean  Society , 186 (4), 435–455. https://doi.org/10.1093/botlinnean/box083
Istiqomah, M. A., Setiari, N., & Nurchayati, Y. (2020). Pengaruh media MS dan VW terhadap pertumbuhan planlet anggrek bulan ( Phalaenopsis amabilis L. . Blume). Strategi Sains , 1 (1), 476–480.
Krisdianto, A., Saptiningsih, E., Nurchayati, Y., & Setiari, N. (2020). Pertumbuhan plantlet  anggrek Phalaenopsis  amabilis (L.)  blume  pada  tahap  subkultur dengan  perlakuan  jenis  media  dan  konsentrasi  pepton  berbeda. Metamorfosa: Journal of Biological Sciences , 7 (2), 40. https://doi.org/10.24843/metamorfosa.2020.v07.i02.p06 Meilasari,  D.,  &  Iriawati,  I.  (2016).  Regeneration  of  plantlets  through  PLB
(Protocorm-like  body)  formation  in  Phalaenopsis  ‘join  angle  X  Sogo Musadian. Journal  of  Mathematical  and  Fundamental  Sciences , 48 (3), 204–212. https://doi.org/10.5614/j.math.fund.sci.2016.48.3.2
Ningsih, T. I. S., Nurcahyani, E., Zulkifli, Z., & Irawan, B. (2021). Pertumbuhan planlet anggrek  Cattleya  sp. setelah penambahan ekstrak  tomat (Solanum lycopersicum L.) pada medium vacin and went. Agritrop : Jurnal Ilmu-Ilmu Pertanian (Journal of Agricultural Science) , 19 (2), 158–165. https://doi.org/10.32528/agritrop.v19i2.6465
Rahayu, A., & Susanto, S. (2016). Pertumbuhan tanaman pamelo (Citrus maxima (Burm.) Merr.) pada berbagai komposisi dan volume media tanam. J. Hort. Indonesia , 7 (1), 40–48. https://doi.org/10.29244/jhi.7.1.40-48
Rahman, A., Anugrahwati, D. R., & Zubaidi, A. (2022). Uji daya hasil beberapa genotip  tanaman  sorgum  (Sorghum  bicolor.  L  Moench)  di  lahan  kering lombok  utara. Jurnal  Ilmiah  Mahasiswa  Agrokomplek , 1 (2),  164–171. https://doi.org/10.29303/jima.v1i2.1448
Rodinah, R., Hardarani, N., & Ariani, H. D. (2018). Modifikasi media dan periode subkultur  pada  kultur  jaringan  pisang  talas  (Musa  paradisiaca  Var. Sapientum L.). Jurnal Hexagro , 2 (2), 1–6. https://doi.org/10.36423/hexagro.v2i2.129 Sari, G. M., Ulfah, M., & Mulyaningrum, E. R. (2024). Studi banding media tanam kayu  kopi  dan  papan  pakis  pada  Phalaenopsis  amabilis  pertumbuhan vegetatif pada fase pembibitan. Jurnal, 8 (1), 59–66. https://doi.org/10.22263/jbes/13077
Solihah, S. F., Supriyatna, A., & Adawiyah, A. (2021). Pengaruh konsentrasi air kelapa  (Cocos  nucifera  L.)  terhadap  eksplan  krisan  (Chrysanthemum morifolium)  kultivar  “xanne  agrihorti”  secara  in  vitro. Gunung  Djati Conference Series , 6 , 2021. https://conference.uinsgd.ac.id/index.php/ Sulichantini, E. D., Eliyani, Saputra, A., Nazari, A. P. D., & Susylowati. (2021).
Pengaruh  zat  pengatur  tumbuh  dan  bahan  organik  terhadap  pertumbuhan anggrek tebu Grammatophyllum speciosum Blume secara kultur jaringan.
Jurnal AgroekoteknologiTropikaLembab , 4 (1), 13–19. http://dx.doi.org/10.35941/jatl.4.1.2021.5791.%25p
Sundalangi, G., Mandang, J., & Sompotan, S. (2023). Perlakuan Air kelapa tua , dan BAP pada media MS , VW terhadap protocorm anggrek Dendrobium sp  .  secara  kultur  in  vitro. Agri-SosioEkonomi  Unsrat , 19 (1),  571–578. https://doi.org/10.35791/agrsosek.v19i1.46754
Surata,  I.  K.  (2012).  Pertumbuhan  semai  cendana  (Santalum  album  Linn.)  pada beberapa  ukuran  kantung  plastik  di  daerah  semiarid. Jurnal  Penelitian Kehutanan Wallacea , 1 (1), 13-25. https://doi.org/10.18330/jwallacea.2012.vol1iss1pp13-25 Taulabi, D., Himawati, S., Nurhangga, A., Bidara, I. S., Aprianti, R., Devy, L., & Pitono,  J.  (2024).  Pengaruh  ketinggian  AB mix terhadap  pertumbuhan caisim  menggunakan  modifikasi  hidroponik  sistem Wick.  J.  Hort.
Indonesia, 15 (1), 16-22. http://doi.org/10.29244/jhi.15.1.16-22
Utami, E. S. W., & Hariyanto, S. (2019). In vitro seed germination and seedling development of a rare indonesian native orchid phalaenopsis amboinensis
J.J.Sm. Scientifica , 2019 , Article 8105138 . https://doi.org/10.1155/2019/8105138 Zahara, M. (2017). A review: Micropropagation of Phalaenopsis sp from leaf and flower stalk explants. Jurnal Natural , 17 (2), 91–95. https://doi.org/10.24815/jn.v17i2.8130