## EFEKTIVITAS HASIL PEWARNAAN SEDIAAN FESES DENGAN EKSTRAK BUAH NAGA MERAH (Hylocereus polyrhizus) SEBAGAI PENGGANTI EOSIN

## THE EFFECTIVENESS OF THE RESULTS OF STOOL DYEING WITH RED DRAGON FRUIT (Hylocereus polyrhizus) EXTRACT AS A SUBSTITUTE OF EOSIN
1 Ismiy Noer Wahyuni * , 2 Indra Fauzi Sabban 1 D4 PTT, Institut Ilmu Kesehatan Bhakta Wiyata
1 D4 Teknologi Labolatorium Medis ,Institut Ilmu Kesehatan Bhakta Wiyata
Info Artikel Abstrak Sejarah Artikel :
Submitted: 15-10-2022 Accepted : 30-11-2022 Publish Online : 29- 12-2022 Latar  belakang :  Pemeriksaan  sitologi  merupakan  teknik  pemeriksaan  yang digunakan  untuk  diagnosis  awal,  karena  proses  pengerjaan  mudah,  cepat  dan akurat.  Salah  satu  teknik  pemeriksaan  sitologi  adalah  pembuatan  sediaan  feses dengan  metode direct  feses .  Metode  ini  menggunakan  eosin  2%  sebagai  pewarna sediaan.  Akan  tetapi  kelemahan  eosin  adalah  mudah  menguap,  harganya  mahal dan  termasuk  bahan  kimia  berbahaya. Tujuan  penelitian: untuk  menemukan pewarna sediaan feses yang dapat menggantikan eosin sebagai zat warna. Metode Penelitian: penelitian  ini  adalah  penelitian  eksperimen  dimana  pewarna  yang digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  perasan  daging  buah  naga  merah,  perasan kulit  buah  naga  merah,  ekstrak  kulit  buah  naga  merah  dengan  pelarut  etanol,  etil asetat,  dan  metanol  serta  eosin  2%  sebagai  pembanding. Hasil  Penelitian : pewarnaan  sediaan  feses  menunjukkan  adanya  potensi  pada  pewarnaan  sediaan feses  dari  perasan  daging  buah  naga,  diikuti  dengan  perasan  kulit  buah  naga, ekstrak  kulit  buah  naga  dengan  pelarut  metanol,  etanol,  dan  yang  terakhir  etil asetat. Kesimpulan :  Ekstrak  buah  naga  memiliki  potensi  sebagai  pewarnaan sediaan. Saran :  untuk  penelitian  selanjutnya  dapat  diuji  menggunakan  feses manusia.
Kata Kunci: Kecacingan; feses; STH; Sediaan
Keywords: Worms; feces;
STH; preparation

## Abstract
Background: Cytological examination is an examination technique used for initial diagnosis,  because  the  processing  process  is  easy,  fast  and  accurate.  One  of  the cytological examination techniques is the manufacture of stool preparations using the direct feces method. This method uses 2% eosin as a coloring agent. However, the  weakness  of  eosin  is  that  it  is  volatile,  expensive  and  includes  dangerous chemicals. Research objective: to find a stool dye that can replace eosin as a dye. Research Methods: This study was an experimental study where the dyes used in this study were red dragon fruit juice, red dragon fruit peel juice, red dragon fruit peel  extract  with  ethanol,  ethyl  acetate  and  methanol  and  eosin  2%  as  a comparison. Results: staining of faecal preparations showed potential for staining of faecal preparations from dragon fruit juice, followed by dragon fruit peel juice, dragon  fruit  peel  extract  with  methanol,  ethanol,  and  finally  ethyl  acetate. Conclusion:  Dragon  fruit  extract  has  potential  as  a  coloring  agent.  Suggestion: for further research it can be tested using human feces .
Ismiy Noer Wahyuni  | Efektivitas Hasil Pewarnaan Sediaan ….. Jurnal Wiyata, Vol. 9 No. 2 Tahun 2022

## PENDAHULUAN
Sitologi  adalah  bidang  ilmu  yang  mempelajari  tentang  sel,  sitologi  sendiri memiliki  peran  yang  sangat  besar  dalam  diagnostik  atau  pemeriksaan  kesehatan. Sebagai  media  pemeriksaan  kesehatan,  perkembangan  pemeriksaan  sitologi  selalu terjadi.  Pemeriksaan  sitologi  dipilih  dikarenakan  memiliki  proses  yang  mudah,  cepat dan tingkat akurasi hasil yang tinggi. Selain itu, pemeriksaan sitologi masih digunakan untuk  pemeriksaan-pemeriksaan  klinis  seperti  pemeriksaan  urin,  kecacingan,  ataupun pemeriksaan  darah  lengkap  (Martony et  al., 2015).  Sebagai  media  pemeriksaan kesehatan,  tentunya  sitologi  tidak  terlepas  pada  penggunaan  bahan  kimiawi  yang menjadi bahan dalam metode pemeriksaan. Bahan-bahan kimiawi tersebut kebanyakan dapat  menimbulkan  masalah  kesehatan  baik  minor  maupun  major  (Said et  al .,  2021). Salah  satu  bahan  yang  paling  sering  digunakan  dalam  pemeriksaan  sitologi  sebagai pewarnaan  sediaan  adalah  eosin.  Eosin  adalah  cairan  berwarna  merah  yang  digunakan sebagai  pewarnaan  sediaan  sitologi  (Lutfhi et  al .,  2017;  Martony et  al .,  2015).    Akan tetapi,  eosin  bersifat  karsinogenik  yang  terdaftar  sebagai  karsinogen  IARC  kelas-3 (Dwita et al ., 2012).
Penggunaan bahan alami sebagai pengganti bahan kimiawi dapat menjadi solusi, salah satu bahan alami yang dapat digunakan sebagai pengganti eosin adalah buah naga merah. Buah naga merah dengan nama ilmiah Hylocereus polyrhizus adalah salah satu tanaman  yang  memiliki  banyak  potensi.  Selain  sebagai  obat,  buah  naga  merah  juga berpotensi sebagai pewarna.  Menurut penelitian yang dilakukan oleh budi seneto dalam Martony  menjelaskan  bahwa  kandungan  betasianin  dalam  buah  naga  merah  yang menjadikan kulit dan daging buah berwarna merah. Kandungan ini juga dapat dijadikan sebagai  pewarnaan  alami  (Agne et  al .,  2010).  Hal  ini juga dijelaskan dalam penelitian Said et al ., (2021) yang menjelaskan bahwa potensi betasianin dalam buah naga merah memiliki  potensi  yang  besar  sebagai  zat  warna  alami.  Penelitian-penelitian  seperti  ini sudah  sering  dilakukan  sehingga  dalam  penelitian  ini  peneliti  ingin  mengujikan berbagai pelarut untuk mengujikan efektivitas warna yang timbul pada sediaan sitologi (Wahyuni, 2011).

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dirancang  menggunakan  penelitian  berbasis  eksperimen  dimana menggunakan  bahan  ekstrak  buah  naga  merah.  Buah  naga  merah  akan  diekstraksi dengan  menggunakan  berbagai  pelarut  (etanol,  metanol,  dan  etil  asetat).  Dalam penelitian ini pelaksanaan penelitian dilakukan dalam beberapa tahapan yakni: Tahap 1 adalah tahap pengumpulan bahan. Bahan yang dikumpulkan pada tahap ini adalah buah naga  merah.  Buah  naga  merah  akan  dipisahkan  daging  dan  kulit  buah  kemudian dilakukan  pembuatan  ekstrak  dengan  pelarut  (etanol,  metanol,  dan  etil  asetat).  Buah naga  merah  diperoleh  dari  penjual  setempat  kemudian  dicuci  bersih  dan  dipisahkan
antara  daging  buah  dan  kulit.  Kemudian  dilakukan  ekstraksi  dengan  menggunakan metode maserasi dengan pelarut etanol, metanol, dan etil asetat. Untuk pewarna dengan menggunakan  perasan  daging  buah  dan  kulit  buah  naga,  dibuat  menggunakan  cara dihaluskan  secara  terpisah  kemudian  dilakukan  penyaringan  untuk  diambil  sari  dari daging buah naga merah dan kulit buah naga merah (Wahyuni, 2011). Tahap 2 adalah tahapan pengumpulan feses yang dilanjutkan dengan pembuatan sediaan.  Sampel yang akan  digunakan  untuk  pembuatan  sediaan  pada  penelitian  ini  adalah  feses  hewan, khususnya  feses  babi  yang  kemungkinan  untuk  terinfeksi  cacing  tinggi.  Feses  yang sudah  diambil  disimpan  dalam  pot  feses  yang  sudah  berisi  formalin  10%  dengan perbandingan  formalin  dan  feses  1  :  3.  Kemudian,    feses  tersebut  diperiksa menggunakan  metode  direct  feses.  Pembuatan  sediaan  feses  dilakukan  dengan  cara, feses  diambil  dengan  menggunakan  tusuk  gigi  dan  dioleskan  di  atas  kaca  benda, kemudian diteteskan pewarna ekstrak buah naga dengan beberapa pelarut sebanyak satu tetes  dan  dihomogenkan.  Sediaan  yang  sudah  dihomogenkan  ditutup  dengan  kaca penutup dan diperiksa di bawah mikroskop dengan perbesaran 10-40 kali

## HASIL PENELITIAN
Hasil  penelitian  menunjukan  bahwa  penggunaan  ekstrak  buah  naga  dapat  membantu pewarnaan sediaan feses seperti tampak pada gambar dibawah ini:
Gambar 1 . Morfologi telur Ascaris lumbricoides pada feses babi  dengan pewarnaan (A) Eosin 2%, (B) Perasan daging buah naga pembesaran 400X
A B
Ismiy Noer Wahyuni  | Efektivitas Hasil Pewarnaan Sediaan ….. Jurnal Wiyata, Vol. 9 No. 2 Tahun 2022
Gambar 2 . Morfologi telur Ascaris lumbricoides pada feses babi  dengan pewarnaan (A) Perasan kulit buah naga, (B) Ekstrak Etanol, (C) Ekstrak Metanol pembesaran 400X

## PEMBAHASAN
Buah  naga  merah  adalah  buah  yang  sudah  sering  dimanfaatkan  masyarakat Indonesia.  Pemanfaatan  buah  naga  merah  tidak  terlepas  dari  kandungan  yang dimilikinya. Beberapa penelitian menyatakan bahwa buah naga memiliki kandungan zat seperti  senyawa  antioksidan  (fenol,  flavonoid,  vitamin  C  dan  betasianin),  vitamin  B3 (niasin),  serat,  MUFA  (MonoUnsaturated  Fatty  Acid),  dan  PUFA  (PolyUnsaturated Fatty  Acid).  Selain  itu,  buah  naga  berpotensi  untuk  dikembangkan  sebagai  pewarna fungsional  baik  untuk  makanan  maupun  dalam  kajian  sitologi.  Dalam  kajian  Sitologi warna menjadi salah satu karakter penting dalam pemeriksaan terutama memperjelas sel yang akan diamati (Winarti et al ., 2008). Buah naga merah menjadi salah satu alternatif untuk  menggantikan  pewarna  Eosin  karena  terdapat  zat  warna  betasianin.  Betasianin adalah  golongan  zat  warna  alami  yang  sering  digunakan  untuk  mewarnai  merah  dan merupakan  golongan  betalain  (Martony et  al., 2015;  Said  et  al.,  2021;  Lutfhi  et  al., 2017;  Dwita  et  al.,  2012).  Perasan  daging  buah  dan  kulit  buah  naga  merah  dilakukan tanpa  menambahkan  aquades  pada  prosesnya.  Sedangkan,  proses  ekstraksi  kulit  buah dilakukan  metode  maserasi  yang  telah  dimodifikasi  menurut  Hidayah  (2013),  dimana kulit  buah  dikeringanginkan  selama  24  jam  untuk  mengurangi  kadar  airnya  sebelum dilakukan proses ekstraki.
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa penggunaan perasan daging buah naga dapat  membantu  pewarnaan  sediaan  feses  seperti  yang  tampak  pada  Gambar  1.B. Menurut  Hidayah  (2013)  jumlah kandungan betasianin sebesar 186,90 mg  setiap  100g berat  kering  pada  buah  naga  merah.  Betasianin  merupakan  zat  warna  yang  berperan memberikan  warna  merah  dan  merupakan  golongan  betalain  yang  berpotensi  menjadi pewarna  alami  (Martony et  al .,  2015;  Said et  al .,  2021).  Selain  Betasianin,  pada  buah naga  merah  juga  terdapat  senyawa  antioksidan  yang  menghasilkan  warna,  sehingga dapat dijadikan sebagai pewarna alami. Perasan buah naga merah yang dipakai sebagai pewarna alami pada penelitian ini tidak ditambahkan air, murni air yang terkandung di
B C A
dalam buah naga yang digunakan sebagai pewarna preparat. Jika dibandingkan dengan eosin  2%  (Gambar  1.A)  dinding  sel  telur A.lumbricoides lebih  terlihat  jelas  pada perasan  buah  naga  merah  (Gambar  1.B)  karena  warna  yang  tampak  pada  pewarnaan eosin 2% lebih pekat sehingga lapisan-lapisan telur terlihat gelap dan lebih sulit untuk diidentifikasi.  Hal  ini  sesuai  dengan  pernyataan  Masyhura  (2018),  warna  yang dihasilkan  akan  semakin  pekat  pada  kosentrasi  yang  tinggi,  karena  dalam  buah  naga juga terdapat kandungan antosianin yang dapat memberikan warna ungu, sehingga pada konsentrasi yang tinggi maka persentase antosianin juga semakin tinggi sehingga warna ungu akan semakin pekat.
Pada perasan kulit buah naga (Gambar 2.A) baik warna merah atau ungu sudah tidak  muncul  lagi,  karena  kandungan  Betasianin  di  kulit  buah  naga  tidak  sebanyak  di daging  buahnya,  faktor  kematangan  juga  dapat  mempengaruhi  kandungan  Betasianin pada kulit buah naga. Selain itu, juga dipengaruhi oleh pH yang dimiliki oleh kulit buah naga dan daging buah naga yang berbeda. Nilai pH pada daging buah 5,3 dan kulit buah naga  merah  6,4.  Penurunan  nilai  pH  dapat  terjadi  akibat  bertambahnya  kandungan antosianin  dan  betasianin  yang  terdegradasi.  Simanjuntak et  al .,  (2014)  menyatakan bahwa keadaan lingkungan asam akan mengakibatkan pigmen antosianin berada dalam bentuk  kation  flavilium  atau  oksonium  yang  dapat  memberikan  warna.  Disamping  itu proses  ekstraksi  dapat  dilakukan  karena  lingkungan  yang  semakin  asam  akan mengakibatkan  dinding  sel  vakuola  pecah  sehingga  pigmen  betasianin  dan  antosianin semakin  banyak  yang  keluar  dari  sel  (Moulana et  al .,  2012).  Menurut  Pranutik et  al ., (2010), bahwa perubahan warna kulit buah naga akan terjadi dari merah menjadi oranye kemudian  kuning.  Perubahan  warna  ini  dikarenakan  perubahan  komposisi  betasianin menjadi penyusunnya, dimana proses hidrolisis betasianin pada ikatan N=C. Hidrolisis betasianin akan menghasilkan asam betalamat dan sikloDOPA 5-O-glikosida. Selain itu, ekstraksi  pewarna alami umumnya dilakukan dengan  cara  menghancurkan bahan  yang mengandung  zat  warna  dan  merendamnya  menggunakan  berbagai  pelarut  untuk mendapatkan hasil yang optimal. Pelarut yang bersifat polar akan melarutkan antosianin dengan baik, karena betasianin dan antosianin merupakan senyawa polar (Bernad et al ., 2012).
Etanol (Gambar 2.B) dan etil asetat bersifat semi polar sehingga pelarut ini tidak optimal  dalam  melarutkan  Betasianin  yang  bersifat  Polar.  Selain  itu  Etil  asetat  mudah menguap sehingga pelarut ini tidak bisa dipakai untuk pewarna pada preparat sebab etil asetat akan mengering sebelum preparat diamati di bawah mikroskop. Oleh karena itu, tidak  ada  gambar  hasil  Pewarnaan  sediaan  feses  menggunakan  pelarut  Etil  asetat.  Hal ini  juga  dijelaskan  oleh  Agustien  G.S.,  dan  Susanti  (2021),  dalam  penelitiannya menyebutkan  bahwa  etil  asetat  adalah  pelarut  yang  memiliki  kemampuan  penguapan yang  cepat.  Sehingga  sediaan  yang  diberikan  pewarna  dengan  pelarut  asetat  menjadi menguap dan tidak dapat diamati.
Antosianin  yang  terkandung  dalam  kulit  buah  naga  akan  larut  pada  senyawa polar  seperti  metanol  (Gambar  2.C).  Sifat  polar  pada  metanol  akan  dapat  melarutkan
Ismiy Noer Wahyuni  | Efektivitas Hasil Pewarnaan Sediaan ….. Jurnal Wiyata, Vol. 9 No. 2 Tahun 2022
betasianin  dan  memberikan  warna  ungu  pada  sediaa  feses,  namun  karena  metanol memiliki pH di atas 3 menyebabkan betasianin kehilangan warna. Menurut Hermawati et  al .,  (2015)  Pelarut  metanol  dapat  digunakan  untuk  melarutkan  betasianin  dengan catatan harus diasamkan dengan HCl. Selain penambahan HCl, penambahan asam sitrat juga  dapat  digunakan  untuk  menurunkan  pH.  Pada  penelitian  ini  metanol  tidak diasamkan  dengan  HCl  ataupun  asam  sitrat,  sehingga  warna  yang  dihasilkan  tidak optimal.

## SIMPULAN
Dari  hasil  penelitian,  dapat  disimpulkan  bahwa  ektrak  buah  naga  memiliki potensi yang dapat digunakan sebagai pewarnaan sitologi.

## SARAN
Saran yang dapat ditarik dari penelitian ini adalah penggunaan ekstrak buah naga dengan  kontrensi  ekstrak  sebesar  100%  serta  dapat  dilakukan  pengekstrakan  senyawa pewarna  murni  dari  buah  naga  segingga  dapat  dikomersialkan.  Selain  itu,  penggunaan feses manusia dapat dijadikan sebagai sampel untuk pengujian.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Jurnal  ini  adalah  jurnal  luaran  penelitian  dosen  pemula  yang  mendapatkan pendanaan hibah PDP Vokasi berdasarkan Surat Keputusan Nomor
033/E5/PG.02.00/2022  tanggal  27  April  2022  dan  Perjanjian  /  Kontrak  Nomor 159/E5/P6.02.00.PT/2022 tanggal 10 Mei 2022, 011/SP2H/PPKM/LL7/2022 tanggal 23 Juni 2022, 497/R/PN/VI/2022  tanggal  27 Juni 2022 mendapatkan Anggaran Penelitian dengan  judul  “Efektivitas  hasil  pewarnaan  sediaan  feses  dengan  ekstrak  buah  naga merah (Hylocereus polyrhizus) sebagai pengganti eosin”.

## REFERENSI
Agne Erza Bestari Pranutik,  Rum Hastuti ,  Khabibi Khabibi. 2010. Ekstraksi dan Uji Kestabilan Zat Warna Betasianin dari Kulit Buah Naga (Hylocereus polyrhizus) serta  Aplikasinya  sebagai  Pewarna  Alami  Pangan.  Jurnal  Kimia  Sains  dan Aplikasi, vol. 13, no. 2, pp. 51-56, Aug. 2010.
https://doi.org/10.14710/jksa.13.2.51-56
Agustien  Gina  Septiani.,  Susanti.  2021.  Pengaruh  Jenis  Pelarut  Terhadap  Hasil Ekstraksi  Daun  Lidah  Mertua  ( Sansevieria  trifasciata ). Prosiding  Seminar Nasional Farmasi UAD 2021 . ISBN: 978-623-5635-06-4
Bernad, C., Yenie, E., dan Heltina  D. 2012. Ekstraksi  Zat  Warna Dari Kulit  Manggis.
Jurnal Teknik Kimia.
Dwita  Oktiarni,  Devi  Ratnawati,  Desy  Zahra  Anggraini.  2012.  Pemanfaatan  Ekstrak Kulit  Buah  Naga  Merah  (Hylocereus  polyrhizus  sp.)Sebagai  Pewarna  dan Pengawet Alami Mie Basah. Jurnal Gradien Vol.8 No.2 Juli 2012 : 819-824
Hidayah,  Tri.  2013.  Uji  Stabilitas  Pigmen  dan  Antioksidan  Hasil  Ekstraksi  Zat  Warna Alami  dari  Kulit  Buah  Naga  ( Hylocereus  undatus ). Skripsi .  Universitas  Negeri Semarang
Luthfi Octafyan Prakoso, Hany Yusmaini , Maria Selvester Thadeus , Sugeng Wiyono. 2017.  Perbedaan  Efek  Ekstrak  Buah  Naga  Merah  (Hylocereus  polyrhizus)  Dan Ekstrak Buah Naga Putih (Hylocereus undatus) Terhadap Kadar Kolesterol Total Tikus Putih (Rattus norvegicus). J. Gizi Pangan, November 2017, 12(3):195-202
Martony  Oslida,    Zuraidah  Yenni,  Sihotang  Urbanus.  2015.  Analisis  Pewarnaan  Dari Kulit  Buah  Naga  Merah  (Hylocereus  polyrhiizus)  Sebagai  Alternatif  Pewarna Merah  Makanan.  Prosiding  seminar  nasional  Fakultas  Pertanian  Univeristas HKBP Nommensen. ISBN 978-602-97089-0-5
Moulana,  R.,  Juanda.,  Rohaya,  S.,  Rosika,  R.  2012.  Efektivitas  Penggunaan  Jenis Pelarut  dan  Asam  dalam  Proses  Ekstraksi  Pigmen  Antosianin  Kelopak  Bunga Rosella ( Hibiscus sabdariffa L). JTIP. 4 (3): 20-25
Said  Fahmi,  Ida  Rahmawati,  Triwiyatini.  2021.  Gel  Ekstrak  Buah  Naga  Super  Merah (Hylocereus  costaricensis)  Dan  Ubi  Jalar  Ungu  Sebagai  Alternatif  Pewarna (Disclosing solution) Alami Plak Gigi. An-Nadaa: Jurnal Kesehatan Masyarakat. Volume: 8. Nomer: 2. https://ojs.uniska- bjm.ac.id/index.php/ANN/article/view/5754
Simanjuntak,  L.,  Sinaga,  C.,  Fatimah.  2014.  Ekstraksi  Pigmen  Antosianin  dari  Kulit Buah Naga Merah ( Hylocereus polyrhizus ). Jurnal Teknik Kimia USU. 3(2): 25- 29.
Wahyuni  Rekna.  2011.  Pemanfaatan  Kulit  Buah  Naga  Super  Merah  (Hylicereus Costaricensis)  Sebagai  Sumber  Antioksidan  Dan  Pewarna  Alami  Pada Pembuatan Jelly (Use Super Red Dragon Fruit Skin (Hylocereus Costaricensis) As  A  Source  Of  Antioxidants  In  Natural  Dyes  And  Jelly  Making).  Jurnal Teknologi Pangan Vol.2 No.1