## EVOLUTION AND BIOLOGICAL BASIS OF WEST NILE VIRUS
PERKEMBANGAN DAN DASAR BIOLOGIS VIRUS WEST NILE
Axl Laurens Lukas Windah 1)* , Elly Suoth 1) , Fatimawali 1) , Trina Tallei 2)
1)Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115 2)Program Studi Biologi FMIPA UNSRAT Manado, 95115 *axlwindah2001@gmail.com

## ABSTRACT
West Nile virus is a neurotropic pathogen that can cause West Nile fever or encephalitis. The expansion of west nile virus is strongly influenced by mosquitoes, especially with the type of culex sp and aedes sp. The virus  has  a  single-stranded  RNA  genome  that  is  believed  to  have  very  rapid  adaptation  and  spread. Mutations in west nile virus can occur in both structural proteins and non-structural proteins. In previous studies, it was explained that mutations in the structural protein west nile virus are beneficial because they can reduce mortility by up to 50% in invivo test. However, antiviral drugs and vaccines in humans specific to west  nile  virus  are  still  being  temporarily  developed.  This  review  discusses  more  about  the  development, biological basis and diagnosis of therapy and prevention of the spread of west nile virus.
Keywords: West nile virus, Evolution, Biological Basis, Diagnosis, Treatment and Pevention

## ABSTRAK
Virus  West  Nile  merupakan  patogen  yang  bersifat  neurotropik  yang  dapat  menyebabkan  demam  west  nile maupun ensefalitis. Perluasan dari virus west nile ini sangat dipengaruhi oleh nyamuk terutama dengan jenis culex sp dan aedes sp. Virus ini memiliki genom single-stranded RNA yang dipercaya memiliki adaptasi dan penyebaran yang sangat cepat. Mutasi pada virus west nile dapat terjadi baik pada protein struktural maupun protein  non-struktural.  Pada  penelitian  sebelumnya  dijelaskan  bahwa  mutasi  pada  protein  structural  virus west nile bersifat menguntungkan dikarenakan mampu menurunkan mortilitas hingga 50% pada hewan uji. Namun, Obat antiviral dan vaksin pada manusia yang spesifik terhadap virus west nile ini masih sementara dikembangkan.  Ulasan  ini  membahas  lebih  lanjut  mengenai  perkembangan,  dasar  biologis  serta  diagnosis terapi dan pencegahan dari penyebaran virus west nile.
Kata kunci: Virus west nile, Perkembangan, Dasar Biologis, Diagnosis, Pengobatan dan Pencegahan

## PENDAHULUAN
Virus west nile merupakan anggota famili Flaviviridae dari  genus Flavivirus yang  dapat menyebabkan West  Nile  Fever (WNF)  and West Nile Neuroinvasive Disease (WNND) (Colpitts et al .,2012).  Infeksi  Virus  West  Nile  pada  manusia sebagian  besar  tanpa  gejala,namun,  dalam  sekitar 20%  dari  kasus  infeksi  WNV  menginduksi penyakit  ringan  dengan  influenza  seperti  gejala yang  disebut West  Nile  Fever (WNF),  sementara dalam waktu kurang dari 1% kasus, terutama pada orang  tua  yang  memiliki  sistem  imunitas  yang rendah, hasil infeksi dapat merujuk pada penyakit neuroinvasif  parah  yang  dapat  menyebabkan kematian (Hayes et al .,2005).
Virus  ini  pertama  kali  ditemukan  di Afrika  Timur,  sungai  nil  bagian  barat  Uganda pada  tahun  1937  dan  mulai  mewabah  besar  di Rumania  dengan  kasus  ensefalitis  (peradangan alut pada otak)  (Ikawati et al. , 2014). Perkembangan kasus virus west nile pertama kali ditemukan pada tahun 2014 melalui serum pasien demam  akut  di  pulau  jawa  tahun  2004  dan  pada tahun  itu  juga  telah  menginfeksi  12  warga Surabaya  (Myint et  al. ,  2014).  Perkembangan pengetahuan  mengenai  virus  west  nile  ini  harus segera  dikembangkan  agar  pencegahan  dan pengendalian  infeksi  yang  disebabkan  oleh  virus west nile dapat dilakukan sedini mungkin.
Tinjauan  dilakukan  dengan  menghimpun informasi  dari  berbagai  sumber  termasuk  jurnal, artikel dan buku teks yang berkaitan dengan virus west  nile.  Data  yang  dikumpulkan  berupa perkembangan  dan  dasar  biologis  dari  virus  west niledisusun  secara  sistematis  deskriptif  untuk memberikan  pengetahuan  menyeluruh  terkait virus west nile.

## 1. DASAR BIOLOGIS
A. Klasifikasi
Keluarga  Flaviviridae  memiliki  3  genera yaitu  : flaviviruses ,  yang  termasuk  West  Nile Virus  ,  virus  dengue  (DENV),  dan  virus  demam kuning(YFV);  hepacivirus,  yang  meliputi  virus hepatitis  B  dan  C;  dan  pestiviruses,  yang mempengaruhi  mamalia  berkuku.  Dalam  genus Flavivirus, yang mengandung lebih dari 70 virus, virus  dapat  diklasifikasikan  lebih  lanjut  ke  dalam kelompok  virus tick-borne dan mosquito-borne . Virus mosquito-borne dapat  dibedakan menjadi  2 yaitu clade ensefalitis, atau Serokomplex JE, yang mencakup  west  nile  virus  dan  virus  ensefalitis Jepang  (JEV),  dan  clade  demam  nonensefalitis
atau  hemoragik,  yang  meliputi  DENV  dan YFV,dan ada 10 kompleks serologis / genetik.
Distribusi geografis flavivirus yang ditularkan nyamuk sangat tergantung pada habitat vektor  nyamuk  yang  disukai,  dengan  nyamuk Culex sp dan Aedes sp mentransmisikan flavivirus ensefalitis  terutama  di  belahan  bumi  utara (Lwande et  al., 2014).Seluruh  isolat  virus  West Nile  berasal  dari  satu  serotip  yang  terbagi  dalam dua garis keturunan ( Lineage ) yaitu lineage 1 dan 2.Perbedaan  antara  keduanya  terletak  pada substitusi  dan  delesi  asam  amino  yang  menyusun protein envelope .  Virus  west  nile  lineage  1 berasosiasi  dengan  penyakit  pada  manusia didunia,  sedangkan  lineage  2  hanya  menginfeksi didaerah endemis enzootik Afrika (Lyle, 2001).
B. Struktur virus
WNV  adalah  virion  yang  mengandung genom  RNA  satu  untai  dan  positif-sense.Virus RNA diterjemahkan sebagai poliprotein tunggal.Wilayah    5’  dan  3’  non-coding  genom membentuk  struktur stem-loop yang  membantu dalam replikasi, transkripsi,terjemahan, dan pengemasan. 5’ yang merupakan akhir dari genom mengkodekan  protein  struktural,yang  diperlukan untuk masuknya virus dan fusi serta encapsidation genom  virus  selama  perakitan (Lindenbach,  2001).Struktur  virus  west  nile  ini terdiri atas tiga protein struktural (kapsid, amplop, dan premembran) dan tujuh protein non struktural (NS1,  NS2A,  NS2B,  NS3,  NS4A,  NS4B,  dan NS5)  (Rice,  1996).  Untuk  susunan  genom  dari virus  west  nile  dapat  dilihat  dengan  jelas  pada Gambar 1.
Gambar 1. Skema Genom dari Virus West Nile (Rossi et al., 2010)
Protein  E  pada  virus  west  nile  yang merupakan  protein  struktural  envelope  yang penting  secara  imunologis  dan  menjadi  target utama  respon  imun  inang.  Protein  E  bertugas dalam viral  attachment ,  fusi  membran  dan pembentukan  virion  (Wang et  al .  2001;  Zhang et al .2017).  Protein  ini  memiliki  berat  molekul  53
kD  dan  merupakan  glikoprotein  membran  tipe  I dengan  12  residu  sistein  yang conserved .  Protein E memiliki 3 domain yaitu domain 1 (DI), domain 2  (DII)  dandomain  3  (DIII)  serta  domain transmembran helix (TMD) (Zhang et al. 2017). Protein C memiliki berat molekul sebesar 12-14 kD yang biasa juga disebut sebagai protein inti. Protein ini terlibat dalam berbagai peran non- struktural selama siklus replikasi,termasuk replikasi RNA, translasi, infektivitas dan viabilitas virus.  Fungsi  non-struktural  tersebut  diperoleh dengan  memodulasi signaling  pathways  sel  inang karena  protein  C  adalah  protein  virus  yang pertama kali berinteraksi dengan protein sel inang disitopalsma (Hunt et al ., 2007).
Menurut  Diana  dan  Dharmayanti  (2019), Protein premembran merupakan protein struktural glikosilasi  transmembran  pendek  yang  memiliki fungsi melindungi protein E dari fusi awal dengan membransel  inang  di  dalam  vesikel  golgi kompleks. Protein ini digolongkan dalam prekusor  protein  membran  yang  diekspresikan pada  permukaan  virion  di  sepanjang  protein  E. Pada  virus immature ,  protein  ini  melapisi fusion loop protein E (Elshuber, 2003).
Protein  non  struktural  memiliki  banyak fungsi  yang  beragam,  walaupun  dalam  virus  ini memiliki jumlah protein yang sangat terbatas tapi tiap  virus  memiliki  berbagai  tujuan  selama infeksi. NS1 memiliki bentuk "seluler" dan bentuk yang  disekresikan  dan  sangat  imunogenik  tetapi tidak  memiliki  peran  yang  dijelaskan  dalam perakitan  virion,  meskipun  telah  dilihat  dapat untuk  berperan  dalam  replikasi (Westaway et  al., 2002). NS3 adalah protease virus yang bertanggung  jawab  untuk  membelah  protein nonstruktural  lainnya  dari  polyprotein  virus  dan mengkodekan  aktivitas  enzim,  dan  fungsi-fungsi ini  telah  banyak  diketahui  (Lindenbach,  2001). ProteinmNS5  berfungsi  sebagai  polimerase  virus dan mengkodekan methyltransferase, yang berfungsi  untuk  replikasi  virus.  Beberapa  protein nonstruktural, termasuk NS2A, NS2B, NS4A, dan NS4B,  telah terbukti menghambat satu  atau  lebih komponen  respons  bawaan  terhadap  infeksi  virus (Colpitts et al. 2012).

## C. Mutasi
Virus  dengan  jenis  RNA  dapat  sangat cepat  beradaptasi  terhadap  perubahan  lingkungan dan  dikenal  memiliki  angka  mutasi  yang  tinggi dengan kemampuan evolusi yang cepat.Perubahan kecil  dari  nukleotida/asam  amino  dapat  memiliki pengaruh  terhadap  replikasi  dan  virulensi  virus serta  spesifisitas  inang  (Ebel et  al .  2004).Tingkat keragaman  genetik  dan  populasi  virus  adalah
keseimbangan  antara  positif  atau  seleksi  negative (Domingo et al. , 1998). Studi sebelumnya tentang isolate Virus West Nile di AS 2012 membuktikan bahwa  komposisi  genetik virus tidak menentukan intensitas  wabah  di  tingkat  lokal.  Duggal et  al mencatat  bahwa  komposisi  genetik  virus  yang beredar  di  Texas  pada  tahun  2012  serupa  antara isolat  dari  daerah  yang  tidak  mengalami  wabah besar  (Dallas  County)  dan  daerah  yang  tidak (Montgomery County).
Mutasi  yang  terjadi  secara  selektif  dapat menghasilkan  profil  epidemiologi  dan  gambaran penyakit  yang  diluar  dugaan.  Mutasi  pada  virus west nile dapat terjadi baik pada protein struktural maupun  protein  non-struktural  dan  menghasilkan atenuasi fenotip (Brault et al. 2007; Pachler et al. 2014). Nurjanah dan Damayanti (2019) mengungkapkan  bahwa  perubahan  atau  mutasi yang terjadi baik pada protein struktural dan non- struktural  dapat  dimanfaatkan  untuk  penemuan vaksin karena beberapa mutasi bersifat menguntungkan.Beberapa  penelitian  modifikasi genetik  protein  struktural  dan  non-struktural WNV pun dilakukan untuk mendapatkan antiviral atau  vaksin  yang  berpotensi.  Tan et  al .  (2009) menyatakan bahwa triple mutasi pada ektodomain protein  PrM  menyebabkan  hilangnya  infektivitas WNV pada sel mamalia dan nyamuk secara nyata.
Mutasi  pada  protein  struktural  terjadi pada  protein  E.  mutasi  yang  terjadi  pada  asam amino  Val  159  dapat  mempengaruhi  adaptasi virus  vector  nyamuk culex  sp (Di  Giallonardo et al. 2016). Adaptasi yang terjadi dapat menghasilkan vektor yang baik dalam peningkatan  distribusi  dan  intensitaspenularan virus  west  nilepada  inang.  Mutasi  yang  terjadi motif
N-glycosylation
protein E menyebabkanhilangnya  situs  N-glycosylation, tidak  stabilnya  fusi  Epeptidedan  penurunan replikasi  virus  (Rizzoli et  al. 2015).  Menurut Nurjanah  dan  Damayanti  (2019)  mutasi  yang terjadi  pada  Protein  Non-struktural  mutasi  yang terjadi  mampu  menurunkan  mortalitas  hingga 50%,  menurunkan  patogenitas  dan  meningkatkan imunogenisitas pada mencit.

## 2. EPIDEMIOLOGI
Menurut  WHO  (2017)  umumnya  Infeksi Virus west nile berasal dari gigitan nyamuk yang terinfeksi.  Nyamuk  menjadi  terinfeksi  ketika mereka  memakan  burung  yang  terinfeksi,  yang mengedarkan  virus  dalam  darah  mereka  selama beberapa  hari.  Virus  akhirnya  masuk  ke  kelenjar ludah nyamuk. Selama makan darah di kemudian hari  (ketika  nyamuk  menggigit),  virus  dapat
disuntikkan  ke  manusia  dan  hewan,  di  mana  ia dapat berkembang biak dan mungkin menyebabkan  penyakit.  Virus  ini  juga  dapat ditularkan melalui kontak dengan hewan lain yang terinfeksi,  darah  mereka,  atau  jaringan  lainnya. Sebagian  kecil  infeksi  manusia  telah  terjadi melalui  transplantasi  organ,  transfusi  darah  dan ASI.  Ada  satu  kasus  transplasental  (ibu-ke-anak) transmisi virus west nile yang dilaporkan.
Virus west nile tergolong dalam transmisi siklus  burung-nyamuk-burung.  Meskipun  virus West  Nile  telah  terdeteksi  di  65  spesies  nyamuk dan 326 spesies burung di Amerika Serikat, hanya beberapa  spesies nyamuk Culex  yang mendorong penularan virus di alam dan selanjutnya menyebar ke  manusia  (Petersen et  al. ,  2013).  Virus  West Nile merupakan salah satu jenis dari 70 virus dari keluarga Flaviviridae .dari  genus Flavivirus . Secara  serologis,  virus  West  Nile  adalah  anggota Japanese encephalitis serocomplex , yang mencakup ensefalitis Jepanese virus dan endemic flavivirus  Amerika  Utara, St  Louis  encephalitis virus .  Virus  West  Nile  dapat  ditunjuk  menjadi setidaknya  5  garis  keturunan  filogenetik.Hanya garis  keturunan  1  dan  2  virus  West  Nile  yang memiliki  kaitkan  dengan  wabah  yang  signifikan pada manusia (May et al., 2011).
Gigitan  nyamuk  menyumbang  hampir semua infeksi manusia. West nile virus juga dapat ditularkan  melalui  trombosit  yang  ditransfusikan, sel  darah  merah,dan  plasma  beku  segar  serta melalui jantung, hati, paru-paru, dan transplantasi ginjal. Penularan melalui transplantasi organ telah terjadi  dari  donor  tanpa  viremia  yang  terdeteksi, menunjukkan  penyerapan  virus.  Pada  organ  tak lama  setelah  viremia  telah  dibersihkan  (Petersen et  al., 2013).Virus  West  Nile  mampu  bereplikasi dan  memunculkan  gangguan  di  otak  (yaitu, neurovirulence);  Namun,  prasyarat  pentinguntuk menghasilkan penyakit neuroinvasif pada manusia adalah  virus  harus  memiliki  kapasitas  untuk mendapatkan  akses  ke  sistem  saraf  pusat  (yaitu, neuroinvasiveness). Mekanisme neuroinvasif virus  west  nile  yang  dapat  terjadi  ialah  (1)  virus akan  langsung  melewati  penghalang  darah-otak karena  permeabilitas  vaskular  yang  dimediasi sitokin;  (2)melewati  endotelium  penghalang darah-otak; (3) terjadi mekanisme Trojan horse dimana  jaringan  magrofag  yang  terinfeksi akan  melewati  penghalang  darah-otak  dan  (4) akan  terjadi  transport retrograde  axonal virus  ke sistem  saraf  pusat  melalui  infeksi  olfactory  atau neuron perifer (Cho dan Diamond, 2012).
Menurut  Ikawati et  al (2014),  Pada manusia  masa  inkubasi  virus  West  nile  dapat terjadi  antara  1-6  hari.  Umumnya  penyakit  ini dapat  bergejala  ringan  seperti  demam, menggigil, nyeri  kepala,  nyeri  punggung,  nyeri  otot  secara menyeluruh  dan  sulit  tidur.  Disamping  itu,  dapat pula  ditemukan  gejala  gangguan  gastrointestinal seperti  mual,  muntah,  diare,  dan  nyeri  lambung. Suhu  badan  penderita  dapat  mencapai  40°C  atau lebih.  Pada  umumnya,  pasien  akan  merasa  pulih sepenuhnya.  Pada  beberapa  kasus,  terutama  pada orang-orang  berusia  lanjut,  akan  berkembang menjadi  ensefalitis  ataupun  meningitis  (infeksi pada  lapisan  otak dan  urat  saraf  tulang  belakang) yang  berisiko  menyebabkan  kematian.  Diagnosis yang akurat akan membantu penderita untuk tidak mengalami  tahap  yang  lebih  parah  dari  infeksi virus West Nile.
Meningitis  West  Nile,  mirip  dengan meningitis  yang  disebabkan  oleh  virus  lainnya, Ditandai  dengan  timbulnya  demam  dan  sakit kepala  secara  tiba-tiba  bersama  dengan  tanda- tanda meningeal dan fotofobia.Sakit kepala parah, dan gangguan gastrointestinal yang dapat menyebabkan  dehidrasi  (Sejvar et  al., 2008). Tingkat  keparahan  Ensefalitis  West  Nile  dapat dialami  dari  ringan,keadaan  kebingungan  yang terbatas  pada  diri  sendiri  sampai  ensefalopati berat,  koma,  dan  kematian.  Sering  diamati  juga terdapat  gangguan  ekstrapikramidal  dan  fitur Parkinsonisme dapat dilihat.

## 3. DIAGNOSIS, PENGOBATAN DAN PENCEGAHAN
Deteksi  antibodi  IgM  dalam  serum  atau cairan  serebrospinal  (CS)  menggunakan  tes immunosorbent  terkait  enzim penangkap  antibodi IgM (MAC-ELISA) membentuk landasan diagnosis untuk virus West Nile dalam pengaturan paling klinis. Karena antibodi IgM tidak melintasi penghalang  darah-otak,  kehadirannya  di  CS menunjukkan  infeksi  SSP  (Sistem  Saraf  Pusat). Sebanyak  90%  pasien  dengan  ensefalitis  atau meningitis  sudah  memiliki  antibodi  spesifik  IgM setelah  timbulnya  gejala.  Antibodi  IgM  spesifik virus  West  Nile  mungkin  tidak  terdeteksi  pada awalnya dalam serum atau plasma namun 1 studi menunjukkan  bahwa  hanya  58%  pasien  dengan Demam  West  Nile  memiliki  hasil  MAC-ELISA positif pada klinis presentasi (Tilley et al., 2006). Namun  demikian,  pengujian  MAC-ELISA  fase akut  dan  pemulihan  sera  akan  memberikan diagnosis  definitif.  Pengujian  untuk  IgG  antibodi
tidak  memiliki  kegunaan  dalam  pengaturan diagnostik klinis akut.
Vaksinasi  terbaru  dengan  demam  kuning atau  vaksin  ensefalitis  Jepang  maupun  infeksi baru-baru  ini  dengan  flavivirus  terkait  (misalnya, ensefalitis  St  Louisa  tau  demam  berdarah)  dapat menghasilkan virus West Nile yang positif – IgM hasil  tes  antibodi.  Tes  netralisasi  pengurangan plak  dapat  membantu  membedakan  reaksi  silang serologis  di  antara  flavivirus,  tetapi  tes  ini  hanya tersedia  di  laboratorium  yang  memadai.  Studi sebelumnya membuktikan bahwa 17% dari pasien memiliki  antibodi  IgM  spesifik  virus  West  Nile yang  dapat  dibuktikan  setahun  setelah  infeksi awal;  dengan  demikian,  antibodi  IgM  persisten dari  infeksi  sebelumnya  mungkin  tidak  terkait dengan penyakit saat ini (Busch et al., 2008).
Menurut CDC (2021) belum ada pengobatan  khusus  untuk  penyakit  virus  West Nile  (WNV)  baru  terdapat  manajemen  klinis mendukung. Pasien dengan gejala meningeal yang parah sering memerlukan kontrol rasa sakit untuk sakit  kepala  dan  terapi  antiemetik  dan  rehidrasi untuk  mual  dan  muntah  terkait.Pasien  dengan ensefalitis  memerlukan  pemantauan  ketat  untuk pengembangan tekanan intrakranial yang meningkat  dan  kejang.Pasien  dengan  ensefalitis atau poliomyelitis harus dipantau karena ketidakmampuan  untuk  melindungi  jalan  napas mereka.  Beberapa  Pendekatan  terapeutik  yang diselidiki  termasuk  terapi  peningkatan  imun  γ- globulin,  Virus  West  Nile  -  antibodi  monoklonal penetral spesifik, kortikosteroid, ribavirin, interferon  α-2b,  dan  oligomer antisense (Beasley, 2011; Diamond, 2009).
Belum ada vaksin WNV yang
dilisensikan
untuk digunakan pada
manusia.Dengan tidak adanya vaksin, pencegahan penyakit WNV tergantung pada program pengendalian  nyamuk  tingkat  masyarakat  untuk mengurangi  kepadatan  vektor,  langkah-langkah perlindungan  pribadi  untuk  mengurangi  paparan nyamuk yang terinfeksi, dan skrining donor darah dan  organ.Langkah-langkah  perlindungan  pribadi termasuk  penggunaan  obat  nyamuk,  mengenakan kemeja  lengan  panjang  dan  celana  panjang,  dan membatasi  paparan  di  luar  ruangan  dari  senja hingga  fajar.  Menggunakan  AC,  memasang  layar jendela  dan  pintu,  dan  mengurangi  tempat perkembang  biakan  nyamuk  di  sekitar  rumah, dapat  semakin  mengurangi  risiko  paparan  WNV (CDC, 2021).

## KESIMPULAN
Virus West  Nile merupakan  anggota family  Flaviviridae dari  genus Flavivirus yang tersusun  atas  genomsingle-stranded  (ss)  RNA dengan  struktur  protein  terdiri  atas  tiga  protein struktural (kapsid,  amplop,  dan  premembran) dan tujuh  protein  non  struktural  (NS1,  NS2A,  NS2B, NS3,  NS4A,  NS4B,  dan  NS5).  Virus  west  nile sangat  cepat  beradaptasi  terhadap  perubahan lingkungan  dan  dikenal  memiliki  angka  mutasi yang  tinggi  dengan  kemampuan  evolusi  yang cepat.  Pengobatan  yang  secara  spesifik  maupun vaksin terlisensi masih belum tersedia untuk virus west  nile  akan  tetapi  pada  beberapa  kejadian mutasi pada virus west nile bersifat menguntungkan dikarenakan mampu menurunkan mortilitas hingga 50% pada hewan uji.

## SARAN
Penelitian  dalam  perancangan  antiviral spesifik  maupun  vaksin  untuk  virus  west  nile sangat diperlukan untuk mencegah perkembangan dan  kejadian  buruk  akibat  penyebaran  dari  virus west nile.

## DAFTAR PUSTAKA
Brault  AC,  Huang  CY-H,  Langevin  SA,  Kinney RM, BowenRA, Ramey WN, Panella NA, Holmes  EC,  Powers  AM,Miller  BR. 2007.  A  single  positively  selected  West Nileviral  mutation  confers  increased virogenesis inAmerican crows. Nat Genet. 39 :1162-1166.
Busch  MP,  Kleinman  SH,  Tobler  LH,  et al.2008.Virusand  antibody  dynamics  in acute  West  Nile  virusinfection. J  Infect Dis. ; 198(7) :984-993.
CDC.  2021.  West  nile  Virus.  Diakses  Pada  30 Maret. 2022.https://www.cdc.gov/westnile/health careproviders/healthCareProviders- TreatmentPrevention.html
Cho H, Diamond MS. Immune responses to West Nile virus infection in the central nervous system. Viruses. 2012; 4(12) :3812-3830.
Colpitts T. M., M. J. Conway, R. R. Montgomery, and  E.  Fikrig.  2012.  “West  Nile  virus: biology, transmission, and human infection,” Clinical Microbiology Reviews , 25(4) :635–648.
Colpitts  TM,  Conway  MJ,  Montgomery  RR,
Fikrig  E.2012.West  Nile  Virus:  biology, transmission,  and  human  infection. Clin Microbiol Rev .; 25(4): 635-648.
Di  Giallonardo  F,  Geoghegan  JL,  Docherty  DE,
McLean  RG,Zody  MC,  Qu  J,  Yang  X,
Birren  BW,  Malboeuf  CM,Newman  RM,
Ip  HS,  Holmes  EC.  2016.  Fluid SpatialDynamics  of  West  Nile  Virus  in the  United  States:Rapid  Spread  in  a Permissive  Host  Environment. JVirol . 90 :862-872.
Diamond  MS.  Progress  on  the  development oftherapeutics against
West Nile virus.2009. Antiviral Res. ; 83(3): 214-227.
Diana Nurjanah, NLPI Dharmayanti.2019. Karakteristik  Biologis  Virus  West  Nile dan Keterkaitannya dengan Perkembangan Obat Antiviral dan Vaksin. WARTAZOA.29(3) :119-132.
Domingo  E,  Escarmís  C,  Sevilla  N,  Baranowski
E.1998.  Population  dynamics  in  the evolution  of  RNAviruses. Adv  Exp  Med Biol .; 440 :721–727.
Duggal NK, D'Anton M, Xiang J, Seiferth R, Day
J, Nasci R, et al.2013. Sequence analyses of  2012  WestNile  virus  isolates  from Texas  fail  to  associate  viral  genetic factors  with  outbreak  magnitude .  Am  J TropMed Hyg .; 89 :205–210.
Ebel  GD,  Carricaburu  J,  Young  D,  Bernard  KA,
Kramer LD.2004. Genetic and phenotypic variation of West Nilevirus in New York, 2000-2003. Am  J  Trop  Med  Hyg . 71 :493-
500.
Elshuber  S.  2003.  Cleavage  of  protein  prM  is necessary forinfection of BHK-21 cells by tick-borne encephalitisvirus. J Gen Virol . 84 :183-191.
Hayes,  E.  B.,  Sejvar,  J.  J.,  Zaki,  S.  R.,  Lanciotti, R.  S.,  Bode,  A.  V.,  and  Campbell,G.  L. (2005).  Virology,  pathology,  and  clinical manifestations  of  West  Nile  virusdisease. Emerg. Infect. Dis. 11 , 1174–1179.
Hunt TA, Urbanowski MD, Kakani K, Law L-MJ, BrintonMA, Hobman TC. 2007.
Interactions  between  the  WestNile  virus capsid  protein  and  the  host  cell- encodedphosphatase  inhibitor,  I  2  PP2A. Cell Microbiol . 9 :2756-2766.
Ikawati  Bina,  Widiastuti  Dyah,  Astuti  Puji.2014.
Virus West Nie: Epidemiologi, Klasifikasi dan  Dasar  Molekuler.  Balada 10(21): 97- 102.
Lindenbach  DR,  CM.  2001. Flaviviridae:  the viruses and their replication , p 991–1041.
In Fields BN, Knipe DM, Howley PM (ed), Fields virology, 3rd ed. Lippincott-Raven , Philadelphia, PA. In  Knipe  DM,  Howley  PM  (ed), Fields  virology, 4th  ed.Lippincott  Williams  and  Wilkins ,
Philadelphia, PA.
Lwande,  O.W.,  Venter,  M.,  Lutomiah,  J.  et al.2013.  Whole  genome  phylogenetic investigation  of  a  West  Nile  virus  strain isolated  from  a  tick  sampled  from livestock in north eastern Kenya. Parasites Vectors7 :542
Lyle  RP,  Roehirig  JT.  2001.  West  nile  virus:  a reemergingglobal  pathogen.  Emerging Infectious Diseases.; 7 (4).
May  FJ,  Davis  CT,  Tesh  RB,  Barrett  AD.2011. Phylogeography  of  West  Nile  virus. J Virol .; 85(6): 2964-2974.
Myint  KS,  Kosasih  H,  Artika  IM,  Perkasa  A,
PuspitaM,  Ma'roef  CN,  et  al.2014.    West nile  virus  documented  inIndonesia  from acute febrile illness specimens. Am JTrop Med Hyg . 90 (2) : 260-2.
Pachler K, Lebl K, Berer D, Rudolf I, Hubalek Z, NowotnyN. 2014. Putative new West Nile virus  lineage  inUranotaenia  unguiculata Mosquitoes,  Austria,  2013. Emerg  Infect Dis . 20: 2119-2122.
Petersen  LR,  Brault  AC,  Nasci  RS.2013.  West Nile  virus:  review  of  the  literature. JAMA .; 310(3): 308-315. Rice  CM.  1996. Flaviviradae:  the  viruses  and their replication , p 931–959.
Rizzoli  A,  Jiménez-Clavero  M,  Barzon  L, Cordioli P,Figuerola J, Koraka P, Martina B,  Moreno  A,  NowotnyN,  Pardigon  N, Sanders N, Ulbert S, Tenorio A. 2015.The challenge of West Nile virus in Europe:Knowledge gaps andresearch priorities. Eurosurveillance . 20 :21135.
Rossi  SL,  Ross  TM,  Evans  JD.  West  Nile virus. Clin  Lab  Med .  2010  Mar; 30(1 ):47- 65.
Sejvar  JJ,  Curns  AT,  Welburg  L,  et  al.2008. Neurocognitive  and  functional  outcomes in  personsrecovering  from  West  Nile virus  illness.J  Neuropsychol.; 2(2) :477- 499.
Tan  TTT,  Bhuvanakantham  R,  Li  J,  Howe  J,  Ng M-L.  2009.Tyrosine  78  of  premembrane protein  is  essential  forassembly  of  West Nile virus. J Gen Virol.90 :1081-1092.
Tilley  PA,  Fox  JD,  Jayaraman  GC,  Preiksaitis
JK.2006.  Nucleic  acid  testing  for  West Nile  virus  RNA  inplasma  enhances  rapid diagnosis of acute infectionin symptomatic patients. J Infect
Dis.; 193(10): 1361-1364.
Wang T, Anderson JF, Magnarelli LA, Bushmich S,  Wong  S,Koski  RA,  Fikrig  E.  2001. West  Nile  virus  envelopeprotein:  Role  in diagnosis  and  immunity. Ann  N  YAcad Sci . 951 :325-327.
Westaway  EG,  Mackenzie  JM,  Khromykh  AA.
2002.  Replication  andgene  function  in Kunjin virus. Curr.Top.Microbiol.Immunol . 267 :323– 351.
WHO.  2017.  West  Nile  Virus.  Diakses  pada  29
Maret  2022  https://www.who.int/news- room/fact-sheets/detail/west-nile-virus.
Zhang X, Jia R, Shen H, Wang M, Yin Z, Cheng
A.  2017.Structures  and  functions  of  the envelope glycoprotein inflavivirus infections. Viruses . 9 :338.