*) Peneliti  pada Balai  Besar  Riset Pengolahan  Produk  dan  Bioteknologi  Kelautan dan  Perikanan

## PELUANG DAN TANTANGAN PRODUKSI MIKROALGA SEBAGAI BIOFUEL
Jamal Basmal *)

## ABSTRAK
Biofuel yang  berasal  dari  tanaman  darat  atau  laut  seperti  mikroalga  sudah  mulai  diupayakan untuk  menjadi  energi  alternatif  pengganti  minyak  bumi.  Berdasarkan  hasil  penelitian,  diketahui bahwa  minimal  14  spesies  mikroalga  berpotensi  untuk  menghasilkan biofuel dengan  kandungan minyak  antara  15–77%  dari  bobot  kering  mikroalga.  Untuk  menghasilkan  1  kg  (bk) biomassa diperlukan  media  tumbuh  air  laut  sebanyak  1m 3 .  Di  samping  kandungan  minyaknya  dapat diekstrak,  limbah  padatnya  juga  dapat  dipergunakan  untuk  pakan  ternak  atau  bahan  baku fermentasi  untuk  menghasilkan biomethane .  Tantangan  yang  dihadapi  dalam  meningkatkan produksi biomassa mikroalga  adalah  ketersediaan  karbon  dioksida.  Selain  itu,  dalam  proses ekstraksi  juga  diperlukan  suatu  alat  yang  dapat  memecah  dinding  sel  mikroalga  sehingga kandungan  minyaknya  dapat  diekstrak  semaksimal  mungkin.
KATA KUNCI: mikroalga, biofuel

## PENDAHULUAN
Penggunaan energi fosil seperti minyak bumi untuk keperluan industri dan otomotif telah menghasilkan gas karbon dioksida, sulfur dioksida, asap, dan zat- zat lain yang menjadi  penyebab   terjadinya global warming dan climate  change .  Di  samping  itu, ketersediaan  minyak  bumi  sebagai  energi  tak terbarukan di perut bumi semakin berkurang dan telah berdampak pada krisis ekonomi. Untuk mengatasi hal tersebut, banyak pakar di bidang energi  mencari sumber energi alternatif terbarukan sebagai pengganti minyak bumi.
Indonesia,  sebagai  negara  kepulauan  dengan intensitas  cahaya  matahari  yang  cukup  tinggi, mempunyai prospek potensial untuk mengembangkan energi terbarukan. Telah diketahui bahwa alam perairan Indonesia  kaya  akan  mikrolaga  yang  m ampu memproduksi bioenergy seperti biodiesel, bioethanol, biomethane , dan biohydrogen . Hasil penelitian para pakar telah menemukan bahwa minimal 14 spesies mikroalga potensial  untuk menghasilkan biodiesel dengan  kandungan  minyak  di  dalamnya  berkisar antara 15–77% bobot kering (Chisti, 2007). Kelebihan mikroalga sebagai sumber bioenergy adalah sistem budidayanya yang sederhana dan tidak memerlukan teknologi  tinggi.  Syarat  yang  terpenting  adalah  di lokasi  pembudidayaan  tersedia  intensitas  cahaya m atahari  dan  nutrisi  yang  diper lukan  untuk pertumbuhan  mikroalga.  Di  samping  itu,  sistem pemanenan dapat dilakukan secara  berkelanjutan (setiap  hari).  Perkiraan biomassa yang  dihasilkan untuk 1 m 3 media tanam adalah  1 kg biomassa berat kering. Berdasarkan estimasi tersebut, maka lahan
1ha yang setara dengan 10.000 m 2 akan menghasilkan 10.000 kg biomassa dan apabila dilakukan ekstraksi, akan diperoleh biodiesel antara  1.500  s/d 7.700 L (Chisti,  2007).  Oleh  karena  itu,  jika  ditinjau  dari kemampuan menghasilkan biodiesel, maka dimasa depan  mikroalga  mempunyai  prospek  yang  layak untuk dikembangkan sebagai substitusi minyak bumi yang keberadaannya semakin berkurang. Biofuel yang diproduksi dari mikroalga termasuk ramah lingkungan. Selain itu, mikroalga dalam masa pertumbuhannya dapat memanfaatkan kelebihan karbon dioksida di udara  sehingga  m em punyai  dam pak  posi tif menurunkan efek rumah kaca akibat global  warming dan climate change (Chisti, 2007).

## POTENSI MIKROALGA SEBAGAI SUMBER BIOFUEL
Anon.  (2001)  m enerangkan  bahwa  tanpa m enghitung  kebutuhan  m inyak  diesel,  m aka kebutuhan bahan bakar bensin/premium Indonesia adalah sebanyak 16.103.453 kilo liter (kl), sedangkan produksi Pertamina hanya sebesar 12.000.000  kl. Oleh sebab itu, Amhar (2007) menyatakan bahwa saat ini pemerintah  menggalakkan  tanaman  jarak  pagar ( Jatropha sp.)  untuk biofuel . Kandungan  minyak dalam Jatropha sp. adalah sekitar 1.400 liter/hektar/ tahun. Kandungan ini hanya seperempat dari minyak dalam kelapa sawit (6.000  liter/hektar/tahun). Jika energi  nabati  (jarak/sawit)  diharapkan  dapat menggantikan kebutuhan minyak bumi yakni sekitar 1,2 juta barrel/hari atau 69 milyar liter/tahun, maka diperlukan lahan seluas 49 juta hektar.  Namun dari 107 juta ha lahan pertanian Indonesia, lahan kritis
yang  tersedia  hanyalah  seluas  21,9  juta  ha  (BPS 2003).  Oleh  karena  itu,  tak  heran  jika  sebagian masyarakat keberatan untuk menanam jarak pagar. Kalaupun ada lahan kritis yang dianggap berpeluang, maka umumnya terdapat masalah teknis di lapangan yaitu ketika seorang petani ingin mengolah lahan yang luas  dan  sulit  diakses. Di  samping  itu,  terkadang masih  ada  persoalan  hukum  tentang  kepemilikan tanah tersebut, sekalipun termasuk kategori lahan kritis.  Kalaupun  akhirnya  dapat  menanam,  proses pascapanen dan penjualan minyak jarak juga masih tanda tanya. Substitusi minyak  bumi dengan minyak nabati seperti minyak kelapa sawit, jagung, kedelai, jarak, limbah penggorengan, canola oil , dan  minyak hewan tidak hanya dilakukan di Indonesia tetapi juga telah dilakukan di Amerika Serikat (Felizardo et al. , 2006, Kulkarni &  Dalai, 2006,  Barnwal &  Sharma, 2005). Namun, oleh karena kebutuhan energi semakin meningkat, maka substitusi dengan minyak yang telah disebutkan di atas belum mencukupi. Selain itu, untuk mendapatkan  minyak  nabati  dari  jagung,  kedelai, jarak, dan sawit dibutuhkan waktu yang cukup lama, yaitu berkisar antara 3 bulan–5 tahun, agar tanaman tersebut produktif menghasilkan minyak.
Pohon jarak sebagai penghasil minyak jarak sudah mulai  dibudidayakan  di  Indonesia.  Namun,  masih banyak kendala yang ditemui di  lapangan, seperti tingkat kematangan buah jarak dalam satu pohon tidak seragam. Di samping itu, pendirian pabrik penyulingan minyak  jarak  membutuhkan minimal  lahan  seluas 10.000 ha yang akan menghasilkan minyak sebanyak 1.892.000 liter (Chisti, 2007). Proses pemanenan biji jarak harus dilakukan secara selektif karena tingkat
kematangan biji jarak dalam satu pohon tidak sama. Sebaliknya, mikroalga dapat menghasilkan minyak dalam kisaran antara 1.500–7.700 liter/hektar/panen, sedangkan umur panen untuk satu siklus panen antara 5–7 hari. Hal ini menunjukkan bahwa menggantungkan substitusi minyak dari buah jarak secara ekonomis kur ang  m enguntungk an.  S em ent ara  i tu, menggantungkan  substitusi  minyak  dari  minyak jagung,  kedelai,  dan  minyak  kelapa  sawit  akan berbenturan dengan kepentingan konsumsi pangan manusia dan apabila minyak tersebut tetap diproduksi untuk  mensubstitusi  minyak  bumi  harganya  tidak kompetitif.  Sebaliknya,  persaingan  minyak  yang diproduksi dari mikroalga hampir tidak ada. Pada Tabel 1  dapat  dilihat  luas  lahan  yang  dibutuhkan  untuk menghasilkan biodiesel sebanyak  16.103.453  kl/ tahun yang merupakan kebutuhan Indonesia (Anon., 2001) sebagai pengganti minyak bumi yang digunakan untuk otomotif.
Pada  Tabel  1  dapat  di lihat   bahwa  untuk menghasilkan  minyak  dari  mikroalga  sebesar 16.103.453 kl/tahun hanya dibutuhkan lahan seluas 274 ha, jika estimasi produksi minyak dari mikroalga adalah  sebesar 587.000  l (asumsi  30% minyak  di dalam biomassa berat  kering).  Oleh  karena  itu, pengembangan  mikroalga  sebagai  sumber  bahan baku  minyak  pengganti  minyak  bumi  mempunyai prospek yang dapat diandalkan. Pada Tabel 2 dapat dilihat  persentase  kandungan  minyak  di  dalam mikroalga  dalam  bobot  kering.  Pertum buhan mikroalga  cenderung  m engikuti  pertumbuhan eksponensial dan umumnya dalam waktu yang relatif singkat, yakni selama 3,5 jam telah meningkat 2 kali
1 Jagung 172 93.625.000 2 Canola 446 36.106.000 3 K edele 1.190 13.532.000 4 Jarak 1.892 8.511.000 5 K elapa 2.689 5.989.000 6 S awit 5.950 2.706.000 7 M ik roalga a 136.900 118.000 8 M ik roalga b 587.000 274.000
Re nde m e n m inya k (l/Ha )* Ke butuha n la ha n produksi ** (Ha )
Je nis ta na m a n
No
Sumber: *) Chisti, 2007. a) Asumsi 70% minyak dalam biomassa berat kering, b) Asumsi 30% minyak dalam biomassa berat kering
**)  Anon, 2001. Prediksi kebutuhan untuk memproduksi minyak sebanyak 16.103.543 kl per tahun
Tabel 1. Perbandingan persentase kandungan minyak dari berbagai sumber dan estimasi kebutuhan lahan untuk memproduksi sebanyak 16.103.453 kl minyak
No Jenis mikroalga Kandungan m inyak (% bk*) 1 Botryococcus braunii 25–75 2 Chlorella sp. 28–32 3 Crypthecodinium cohnii 20 4 Cylindrotheca sp. 16–37 5 Dunaliella primolecta 23 6 Isochrysis sp. 25–33 7 Monallanthus salina > 20 8 Nannochloris sp. 20–35 9 Nannochloropsis sp. 31–68 10 Neochloris oleoab undans 35–54 11 Nitzschia sp. 45–47 12 Phaeodactylum tricornutum 20–30 13 Schizochytrium sp. 50–77 14 Tetraselmis sueica 15–23

## Tabel 2. Beberapa mikroalga yang potensial menghasilkan minyak
Sumber: Chisti, 2007
Gambar 1. Jenis mikroalga yang potensial menghasilkan minyak biodiesel .
Sumber:  Anon., 2008
dari  jumlah biomassa awal  (Metting,  1996  dan Spolaore et  al. ,  2006).  Pada  spesies  tertentu, kandungan minyak mikroalga dapat mencapai 80% dari  bobot  kering  (Metting,  1996;  Spolaore et  al., 2006). Akan tetapi, dalam kondisi normal kandungan minyak mikroalga berkisar antara 20–50%. Kelebihan lain dari budidaya mikroalga adalah dapat dipanen setiap hari.
Optimalisasi ekstraksi kandungan minyak tidak hanya didasarkan pada pemilihan spesies mikroalga yang  potensial  menghasilkan  kandungan  minyak tinggi. Akan tetapi juga perlu diperhatikan faktor-faktor seperti  kualitas  air  (suhu,  salinitas,  dan  tingkat kejernihan  air),  nutrisi  yang  diberikan,  serta
keberadaan  sinar  m atahari  dalam   proses fotosintesis.Menurut Banerjee et al . (2002), Metzger & Largeau, (2005), dan Guschina & Harwood, (2006), setiap mikroalga memproduksi hidrokarbon, minyak, dan  minyak  komplek lainnya  yang  bervariasi  baik jumlah dan kualitasnya, sehingga tidak semua minyak dari mikroalga cocok untuk biodiesel tetapi mungkin cocok untuk keperluan lainnya. Pada Gambar 1 dapat dilihat mikroalga yang cukup potensial menghasilkan minyak.

## PRODUKSI MASSAL MIKROALGA
Produksi massal mikroalga akan sangat mahal apabila unsur utama seperti karbon dioksida dan sinar
Nannochloropsis sp. Nitzchia sp. Spirulina sp.
Tabel 3. Kebutuhan karbon, nitrogen, dan fosfor untuk memproduksi 1 ton biomassa bobot kering
Sumber:  Anon., 2008 No Ke butuha n Jum la h (kg/ha ri) 1 Karbon 786 2 Karbon dioksida 2881 3 Nitrogen 81 4 Fosfor 11
Gambar 2. Sistem foto bioreaktor dan racewa y untuk produksi massal biomassa.
Foto bioreaktor
Raceway s
Sumber:  Anon., 2008
matahari tidak tersedia. Oleh sebab itu, faktor utama untuk  memproduksi  massal  mikroalga  adalah ketersediaan  karbon  dioksida  dan  intensitas  sinar matahari    yang  cukup.   Adanya  pemanasan  bumi global warming dan climate change akibat aktivitas industri dan otomotif telah menyebabkan kelimpahan karbon dioksida di udara. Indonesia telah merasakan dampak dari penumpukan karbon dioksida di udara, oleh sebab itu produksi massal mikroalga merupakan hal yang positif untuk mengatasi penumpukan karbon dioksida.  Produksi  massal  mikroalga  di  Indonesia dapat dilakukan sepanjang tahun, tidak seperti negara- negara  subtropis  yang  dingin  yang  hanya  dapat melakukan produksi pada waktu tertentu. Selain itu, nutrisi  yang  dibutuhkan  untuk  produksi  massal mikroalga adalah nitrogen, fosfor, zat besi, dan dalam beberapa  kasus  budidaya  juga  diperlukan  silikon. Nutrient seperti fosfor harus disuplai berlebih karena fosfor  yang  diberikan  umumnya  dalam  bentuk komplek. Oleh karena air laut kaya akan nitrat dan f osf or  sert a mik ronutrient lainny a,  m aka penggunaannya  untuk  produksi  massal  sangat dianjurkan (Molina et al ., 1999). Pada Tabel 3 dapat dilihat  kebutuhan nutrient untuk  pertumbuhan mikroalga.
Biomassa dari mikroalga mengandung 50% karbon per bobot kering dan semua karbon di dalam mikroalga berasal dari karbon dioksida (Sanchez et al. , 2003).
Selanjutnya  dinyatakan  pula  bahwa  untuk memproduksi 100 ton biomassa dibutuhkan 183 ton karbon  dioksida.  Untuk  menghasilkan biomassa secara komersial maka karbon dioksida harus disuplai secara  terus  menerus  agar  jumlah  dan  kualitas mikroalga yang dihasilkan tetap terjamin (Molina et al ., 1999). Pemberian pupuk pada malam hari harus dihentikan. Akan tetapi, pada saat itu biomassa tetap harus  disirkulasi  untuk  menghindari  terjadinya penumpukan biomassa di  bagian  permukaan  air. Diperkirakan  sebanyak  25%  dari biomassa yang dihasilkan pada siang hari akan hilang pada waktu malam hari karena faktor respirasi. Oleh sebab itu, pada    waktu    malam    hari    area    budidaya  harus disuplai dengan  sinar  lampu  dan suhu dijaga antara 20–30 o C  (Chisti,  2007).  Ada  beberapa  metode produksi massal biomassa yang telah dilakukan, salah satunya adalah metode raceway (berbentuk saluran air yang memanjang dengan sistem tertutup) seperti terlihat pada Gambar 2.

## PASCAPANEN MIKROALGA
Para pakar biomassa berpendapat bahwa curah hujan yang sedikit, kisaran  suhu antara 20–30 o C, dan intensitas cahaya matahari yang stabil merupakan kondisi  yang  baik  untuk  pertumbuhan  mikroalga

## J.  Basmal
(Chisti,  2007).  Selain  itu,  lokasi  yang  ideal  untuk produksi massal biomassa sebaiknya dekat dengan sumber  karbon  dioksida  seperti  di  lokasi  industri pengolahan, pengolahan limbah cair, dan pembangkit listrik  “ power  plant ”. Biomassa yang  sedang dikem bangbiakkan  harus  dapat  diatur  sistem pemanenannya  secara  berkelanjutan.  Mengingat ukuran biomassa sangat kecil (mikron), maka proses pemanenannya  dilakukan  menggunakan  filter  di bawah  1  mikron  atau  menggunakan  sentrifugasi, flokulasi, dan sistem aerasi sehingga air membentuk busa  kemudian  alum  (polialuminium  klorida)  dan feroklorida (FeCl 2 ) ditambahkan pada saat pemisahan biomassa. Pemisahan biomassa juga  dapat  pula dilakukan dengan metode ultrasonikasi. Biomassa yang sudah dipanen selanjutnya dikeringkan terlebih dahulu sebelum melakukan proses ekstraksi.
Pemanfaatan  minyak  hasil  pemisahan  dari mikroalga  sangat  bervariasi,  mulai  untuk  tujuan kesehatan sampai dengan biodiesel. Oleh sebab itu, teknik  ekstraksi  yang  dilakukan  juga  berbeda tergantung dari tujuan penggunaannya. Metode yang paling sederhana adalah dengan cara penghancuran ( mec hanic al  c rushing )  k em udi an  dilakukan pengepresan  dengan  menggunakan screw press, expeller press, atau piston press , bahkan pemisahan juga  dapat  dilakukan  dengan  cara  kom binasi pengepresan  dan  penam bahan  bahan  kim ia pengekstrak.  Ada  beberapa  cara  pem isahan kandungan minyak dari biomassa yakni:
• Pemisahan secara kimia
Proses ini umumnya menggunakan benzena, eter, dan  heksana.  Penggunaan  benzena  sebagai pelarut minyak mikroalga harus dilakukan secara hati-hati karena uap benzena yang terserap dapat m enyebabkan  k eracunan.  Benzena  telah diklasifikasikan  sebagai  bahan  karsinogenik (Anon.,  2008).  Limbah    hasil    ekstraksi  (media pelarut)  seperti  heksana dan petroleum eter  harus dapat di daur ulang agar biaya ekstraksi menjadi lebih murah.
• Ekstraksi  secara  enzimatis
Cara ini menggunakan enzim untuk memecahkan dinding sel mikroalga. Proses pemecahan ini dapat
pula  menggunakan  bantuan  air  sebagai  media pelarut enzim. Namun, ekstraksi menggunakan enzim membutuhkan biaya yang relatif lebih mahal daripada menggunakan heksana. Proses ekstraksi secara enzimatis dapat dikombinasikan dengan pemisahan  secara  ultrasonikasi.  Kombinasi  ini disebut sonoenzymatic treatment. Dengan cara ini, ekstraksi  akan  memperoleh  rendemen  minyak yang lebih tinggi dan lebih cepat.

## • Pemisahan secara fisik
Proses ini dilakukan dengan cara mengeringkan mikroalga  terlebih  dahulu  kemudian  dilakukan pengepresan.  Teknik  pemisahan  minyak  dapat menggunakan filter   press,   screw press ,  atau piston  press dengan  tekanan  tertentu.  Untuk mempercepat  proses  pengeluaran  minyak  dari dinding  sel  mikroalga  maka  proses  kombinasi antara bahan kimia dan mechanical press lebih disarankan.
• Osmotic shock
Cara ini menggunakan tekanan osmotik secara tiba- tiba/mendadak  yang  menyebabkan  dinding  sel mikroalga pecah.
• Supercritical fluid
Metode ini umumnya menggunakan  CO 2 cair di bawah tekanan dan suhu tertentu yang kemudian dialirkan ke massa mikroalga sehingga minyak di dalam sel mikroalga dapat diekstrak. Metode ini dapat mengekstrak minyak  dari  dalam mikroalga hingga 100% (Anon., 2008).
• Pemisahan dengan teknik ultrasonikasi
Cara ini menggunakan gelombang ultrasonik untuk memecahkan  dinding  sel  mikroalga  sehingga kandungan minyak di dalam sel mikroalga dapat ditarik keluar (Anon., 2008).

## TANTANGAN
Mikroalga merupakan sumber energi terbarukan yang  dapat  mensubstitusi  sebagian  energi  fosil. Namun, biomassa dalam  m em perbanyak  diri memerlukan  pemupukan  yang  tepat  dan  karbon dioksida yang banyak terdapat pada sisa pembakaran. Diperlukan sebuah bioreaktor karbon dioksida untuk memperoleh karbon dioksida di udara atau pada sisa pembakaran  seperti  pembangkit  listrik  tenaga batubara.
Selain itu, oleh karena minyak di dalam biomassa berada di dalam dinding sel, maka diperlukan suatu alat khusus yang dapat memecah dinding sel untuk menarik minyak keluar.

## PENUTUP
Di  samping  diekstrak  minyaknya  untuk  tujuan pangan maupun non pangan (produk kosmetik dan kesehatan),  mikroalga juga telah digunakan untuk industri  lain  seperti  pembangkit  tenaga  listrik “ bioenergy ”. Selain itu, limbah ekstraksi minyak masih dapat digunakan untuk memproduksi gas metana atau etanol melalui proses fermentasi. Limbah dari hasil
proses  fermentasi  tersebut  juga  dapat  digunakan untuk pakan ternak.
Kemajuan teknologi yang telah mengkonsumsi begitu  banyak  energi  fosil  seperti  minyak  bumi, terproduksinya karbon dioksida, sulfur dioksida, asap, dan  zat-zat  lain  telah  berdampak  pada  terjadinya pemanasan global dan perubahan iklim dunia. Untuk menghindari  hal-hal  tersebut,  maka  telah  dicoba mencari energi alternatif dari minyak nabati seperti, minyak kelapa sawit, jarak pagar, jagung, dan kedelai. Namun, penggunaan minyak kelapa, kedelai, sawit, dan  biji-bijian  menyebabkan  terjadinya  kompetisi antara kebutuhan energi dan pangan. Di sisi lain, untuk memproduksi minyak nabati dari bahan-bahan yang disebutkan di atas akan membutuhkan lahan yang cukup luas, sementara lahan kritis di Indonesia tidak mencukupi.  Alernatif  lain  adalah  memanfaatkan mikroalga yang dapat memproduksi biofuel , karena produksi  m inyak  dari  m ikroalga  lebih  banyak dibandingkan minyak nabati. Hal ini sangat potensial mengingat  pengembang  biakan  mikroalga  tidak memerlukan  teknologi  yang  tinggi  karena  hidup mikroalga sangat tergantung pada intensitas cahaya dan ketersediaan nutrisi. Selain itu, mikroalga juga dapat dipanen setiap hari.

## DAFTAR PUSTAKA
Amhar. 2007. Energi terbaruk an. http:// famhar.multiply.c om/journal/item/86 . Diak ses tanggal  11  Februari  2008.
Anonim. 2001.   Portofolio   bahan   bakar   cair. Program Studi  Teknik  Kimia.    Fakultas    Teknik  Universitas Indonesia.    65    p. Diakses    tanggal    12  Februari 2 0 0 8 . h t t p : / / w w w . p e r t a m i n a . c o m index.php?option=com_content&task=view&id=79&Itemid=406 . Anonymous.  2008a.  Algae  FAQ. www.algaelink.com. Diakses  tanggal  4  Januari  2008.
Anonymous. 2008b. Biodiesel  from  algae-info,  resorces and  links.  biodiesel_algae.html.  www.algaculture biodieselnow.com .  Diakses  tanggal  4  Januari  2008.
A n o n y m o u s . 2 0 0 8 c . M i c r o a l g a e . h t t p : / / i m a g e s . google.co.id/images ?hl=id&q= s pirulina&um =i&ie=UTf-8&s a=N&tab=wi. Diakses  tanggal  4 Januari  2008.
Banerjee, A.,  Sharma,  R.,  Chisti,  Y.,  and  Banerjee,  UC.
2002 .    Botryococcus  braunii :  a  renewable  source  of hydroc arbons  and  other  c hemic als. Crit  Rev Biotechnol, 22 : 245–79.
Barnwal,  B.K.  and  Sharma,  M.P.    2005.  Prospects  of biodiesel  production  from  vegetables  oils  in  India. Renew Sustain Energy Rev. 9 : 363–78.
Chisti.  Y.,  2007.  Biodiesel  from  Microalgae.  Institute  of Techonolgy    and  Engineering,    Massey  University. Biotechnology  Advances 25  (2007)  294–306.
Felizardo,  P.,  Correia,  M.J.N.,  Raposo,  I.,  Mendes,  J.F., Berkemeier, R., and Bordado, J.M. 2006.  Production of  biodiesel  from  waste  frying  oil. Waste  Manag .  26 (5) : 487–94.
Guschina, I.A. and Harwood. J.L. 2006.  Lipids  and lipid metabolism in eukaryotic algae. Prog Lipid Res 2006. 45 : 160–86.
Kulkarni,  M.G.  and  Dalai,   A.K.  2006. Waste  cooking  oil an  economical source   for  biodiesel :  A  review. Ind Eng Chem Res 2006; 45 : 2901–13.
Metting,  F.B.  1996.  Biodiversity  and  application  of microalgae. J.  Ind  Microbiol .  17  :  477–89.
Metzger, P. and Largeau, C. 2005. Botryococcus  braunii : a  rich  source  for  hydrocarbons  and  related  ether lipids. Appl  Microbiol  Biotechnol .  66  :  486–96. Molina.,  Grima,  E.,    Acién.,  Fernández,  F.G.,  García Camacho,  F., and Chisti, Y. 1999.  Photobioreactors: light regime, mass transfer and  scaleup. J.Biotechnol . 70 : 231–47.
Sánchez,    Mirón,    A.,  Cerón.,  García,  M-C.,  Contreras, Gómez,  A., García.,  Camacho, F., Molina., Grima, E., and  Chisti  Y.  2003.  Shear    stress    tolerance    and biochemical  characterization  of Phaeodactylum tricornutum in  quasi  steady-state  continuous  culture in  outdoor  photobioreactors. Biochem  Eng  J. 2003. 16 : 287–97.
Spolaore,  P.,  Joannis-Cassan,  C.,  Duran  E,  Isambert  A. 2006.  Commercial  applications  of  microalgae. J Biosci  Bioeng ;101:87–96.