EFEK EKSTRAK ETANOL DAGING BUAH MAHKOTA DEWA (Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.) TERHADAP PENURUNAN KADAR ASAM URAT PADA MENCIT PUTIH JANTAN YANG DIINDUKSI POTASSIUM OXONATE
THE EFFECT OF ETANOL EXTRACT OF MAHKOTA DEWA PULP ( Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.) TOWARDS THE REDUCTION OF URIC ACID IN WHITE MALE MICE INDUCTED BY POTASSIUM OXONATE
EM. Sutrisna*, Arifah Sri Wahyuni, Ulul Azmi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta em_sutrisna@yahoo.com

## ABSTRAK
Mahkota  dewa  ( Phaleria  macrocarpa (Sceff.)  Boerl.)  merupakan  tanaman  obat  yang digunakan  secara  empiris  sebagai  obat  berbagai  penyakit  salah  satunya  asam  urat.  Asam  urat adalah  produk  akhir  metabolisme  purin  pada  manusia.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui efek ekstrak etanol daging buah mahkota dewa dalam menurunkan kadar asam urat mencit putih jantan  yang  diinduksi  potassium  oxonate  250mg/kgBB.  Dua  puluh  lima  ekor  mencit  jantan  diberi jus  hati  ayam  konsentrasi  10%  3  kali  sehari  selama  2  hari,  lalu  dibagi  menjadi  5  kelompok. Kelompok I kontrol negatif (CMC Na 0,5% p.o 0,5ml/20gBB). Kelompok II kontrol positif (allopurinol p.o 10mg/kgBB). Kelompok III, IV dan V diberi sediaan ekstrak etanol daging buah mahkota dewa dosis  berturut-turut  1,25;  2,5  dan  5g/kgBB.  Kelompok  I-V  dibuat  hiperurisemia  dengan  induksi potassium oxonate 250mg/kgBB secara intraperitoneal 1 jam setelah pemberian sediaan uji. Darah diambil  dari  vena  opthalmicus  2  jam  setelah  pemberian  potassium  oxonate,  serum  ditambah reagen  uric  acid*FS  TBHBA  (2,4,6,tribromo  3-hydroxy  benzoid  acid)  dan  dibaca  kadar  asam uratnya  pada  panjang  gelombang  546  nm.  Data  persentase  penurunan  kadar  asam  urat  diuji dengan  ANAVA  satu  jalan  (taraf  kepercayaan  95%)  dilanjutkan  uji  Bonferroni.  Hasil  penelitian menunjukkan  sediaan  ekstrak  etanol  daging  buah  mahkota  dewa  dosis  1,25;  2,5  dan  5g/kgBB mampu  menurunkan  kadar  asam  urat  pada  serum  darah  mencit  putih  jantan  yang  diinduksi potassium  oxonate.  Ekstrak  etanol  daging  buah  mahkota  dewa  dosis  1,25;  2,5  dan  5g/kgBB mempunyai  potensi  yang  sama  dengan  allopurinol  dosis  10mg/kgBB  dalam  menurunkan  kadar asam urat tetapi kemampuan penurunannya lebih allopurinol.
Kata kunci : Phaleria macrocarpa (Sceff.) Boerl., potassium oxonate, asam urat

## ABSTRACT
Mahkota  dewa  ( Paleria  macrocarpa (Scheff.)  Boerl)  is  a  medical  plant  which  empirically  is used to heal such disease as uric acid. Uric acid is the final product of purin metabolism in human being. This research is purposed to know how the effect of etanol extract of mahkota dewa pulp in reducing  the  level  of  uric  acid  in  white  male  mice  with  inducted  by  potassium  oxonate  250 mg/kgBW. Twenty five of white male mice were given giblets juices with 10% concentration in three times a day during two days,and then devided into 5 groups. The group 1 is negative control (CMC Na  0,5%  p.o  0,5  ml/20gBW).  The  group  2  is  positive  contro  (Allopurinol  p.o  10  mg/kgBW).  The group 3, 4 and 5 were given by etanol extract preparation of mahkota dewa pulp in sequence 1,25; 2,5  and  5  g/kgBW  dosage.  The  group  1-5  were  made  hyperuricemia  with  induction  of  potassium oxonate  250  mg/kgBW  intraperitoneally  during  1  hour  after  giving  the  test  preparation.  Blood  is taken from vena opthalmicus at 2 hour after giving potassium oxonate, the serum added with uric acid reagent *FS TBHBA (2, 4, 6, tribromo 3-hydroxy benzoic acid) and read the level of uric acid at λ  546 nm. The percentage data of  the uric acid  level reducing are tested by  one  way ANAVA (level of validity) and continued by Bonferroni test.The result of this research represents the etanol extract preparation of mahkota dewa pulp 1,25; 2,5 and 5 g/kgBW dosage could reduce the level of uric  acid  in  white  male  of  mice  serum  inducted  by  potassium  oxonate.  Etanol  extract  of  mahkota dewa  pulp  1,25;  2,5  and  5  g/kgBW  dosage  has  the  potential  which  is  same  with  allopurinol  10 mg/kgBW dosage in reducing the level of uric acid but its ability  in reducing uric acid is not as big as allopurinol.
Keywords : Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.), potassium oxonate, uric acid.

## PENDAHULUAN
Asam  urat  adalah  penyakit  gangguan metabolik  yang  disebabkan  penumpukan  asam urat (uric  acid) dalam  jaringan  tubuh  (Anonim, 2009).  Asam  urat  merupakan  produk  akhir metabolisme  purin  yang  dapat  mengendap dalam  jaringan  dan  peradangan  yang  dikenal dengan  nama  gout atau  encok.  Gout  atau  pirai merupakan  penyakit  metabolik  yang  terjadi akibat  tingginya  kadar  asam  urat  dalam  darah (Simon et  al., 2001).  Asam  urat  biasanya menyerang  pria  berumur  lebih  dari  40  tahun dan  perempuan  pascamenopouse.  Salah  satu pemicu  utama  timbulnya  penyakit  asam  urat adalah  perubahan  gaya  hidup  seseorang  yang disertai  dengan  pola  makan  yang  salah (Sudewo,  2004).  Akibat  lebih  lanjut  dari meningkatnya  asam  urat  adalah  pembentukan tofi (kapur) di sekitar sendi, kelainan ginjal serta pembentukan batu urat (Winarto dan Karyasari, 2003).
Penelitian  dan  pengembangan  tanaman obat  telah  berkembang  pesat,  terutama  pada segi farmakologi maupun fitokimianya. Penelitian ini digunakan untuk mencari tanaman  yang  berpotensi  sebagai  tanaman obat.  Salah  satu  tanaman  yang  dikembangkan adalah mahkota dewa. Berdasarkan pengalaman  empiris,  buah  mahkota  dewa sangat  manjur  untuk  menyembuhkan  asam urat.  Selain  itu,  tanaman  tersebut  juga digunakan  untuk  mengobati  berbagai  penyakit yakni  lever,  kanker  dan  tekanan  darah  tinggi (Harmanto,  2001).  Daun  dan  kulit  buah mahkota dewa segar atau yang telah dikeringkan  juga  dapat  digunakan  sebagai antitumor,  disentri  dan  sakit  kulit  (Gotama, 1999).
Beberapa  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan menunjukkan bahwa tanaman mahkota  dewa  mempunyai  potensi  sebagai antiinflamasi  (Siswanto,  2005),  antihistamin (Siswono, 2001) dan memiliki efek penghambatan pada sel kanker leukemia THP- 1  (Kurnia, dkk. ,  2005).  Daging  buah  mahkota dewa  juga  mempunyai  efek  hipoglikemik (Primsa, 2002). Hasil uji keamanan menunjukkan  perasan  daging  buah  segar mahkota  dewa  tidak  mempengaruhi  fungsi ginjal  pada  tikus  putih  jantan  dan  betina  pada pemakaian  jangka  panjang  (Hendra,  2005). Perasan  daging  buah  mahkota  dewa  telah terbukti  efektif  menurunkan  kadar  asam  urat pada ayam jantan jenis Lohman Brown dengan dosis 13,16g/kgBB (Hasturani, 2003).
Berdasarkan  penelitian  Arini  (2003), diketahui  bahwa  daging  buah  mahkota  dewa mengandung  flavonoid.  Ekstrak  etanol  70% daging  buah  mahkota  dewa  mempunyai  kadar relatif  flavonoid  yang  paling  besar  (45,73
µg/mg).  Keefektifan  mahkota  dewa  untuk mengobati  asam  urat  diduga  didasarkan  pada kandungan flavonoidnya. Kemampuan senyawa  tersebut  dalam  menurunkan  asam urat  adalah  dengan  mekanisme  hambatan terhadap  aktivitas xantin  oksidase pada  basa purin  sehingga  akan  menurunkan  produksi asam urat. Dari harga IC 50 flavonoid menyatakan  bahwa  50%  penghambatan xantin oksidase sama  dengan  50%  penurunan produksi  asam  urat.  Jenis  flavonoid  yang berperan  dalam  mekanisme  penghambatan enzim xantin oxidase adalah flavon dan flavonol (Cos et.al. ,  1998).  Flavonoid  dalam  tanaman mahkota dewa dapat berbentuk aglikon maupun glikosida. Kepolaran senyawa flavonoid adalah dari non polar  sampai dengan polar sehingga dapat disari dalam penyari yang non  polar  sampai  dengan  polar  (Markham, 1988).
Allopurinol  digunakan  untuk  mengobati asam urat sejak bertahun-tahun yang lalu, akan tetapi  allopurinol  dapat  menimbulkan  efek samping yaitu kerusakan gastrointestinal, reaksi alergi dan toksisitas pada hati (Mo et.al., 2007).  Selama  ini  penggunaan  mahkota  dewa sebagai  obat  asam  urat  hanya  berdasarkan pada  pembuktian  empiris  dan  pengalaman pengguna.  Berdasarkan  penggunaan  secara empiris  dan  dari  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan  sebelumnya,  maka  ekstrak  etanol daging  buah  mahkota  dewa  berpotensi  untuk dikembangkan  menjadi  fitofarmaka.  Untuk  itu perlu  dilakukan  penelitian  tentang  ekstrak etanol  daging  buah  mahkota  dewa  untuk membuktikan  keefektifannya  sebagai  penurun kadar asam urat. Hasil penelitian ini diharapkan dapat  dijadikan  sebagai  bukti  ilmiah  bahwa tanaman  mahkota  dewa  dapat  dijadikan sebagai  obat  untuk  menurunkan  kadar  asam urat.

## METODE PENELITIAN
Alat  : Oven,  blender,  ayakan,  panci  stainless steel, timbangan analitik (Presica A-SCS),  alat- alat  gelas  (Pyrex),  spuit  injeksi,  jarum  oral ukuran  15  gauge  (Terumo),  timbangan  mencit, pipa  kapiler,  ependorf,  sentrifuge,  alat  vortex, spektrofotometer (Star Dust FC* 15), kuvet dan mikropipet berbagai ukuran.
Bahan  : Daging  buah  mahkota  dewa  ( Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl), mencit putih jantan dengan  berat  badan  20-30  gram  dan  berumur 2-3  bulan, potassium  oxonate p.a.  (Aldrich Chemical  Company),  etanol  70%  teknis,  CMC Na  0,5  %,  allopurinol  p.a.  (Sigma)  dan aquadest  dan  reagen  Uric  Acid  FS  TBHBA (2,4,6,  Tribromo  3-hydroxy  benzoid  Acid)  dari DiaSys.

## JALANNYA PENELITIAN Pengambilan Bahan dan Pembuatan Serbuk Simplisia
Buah  mahkota  dewa  diambil  dari  daerah Tawangmangu,  Karanganyar,  Jawa  Tengah. Buah  dipanen  setelah  masak,  berwarna  merah tua,  baunya  manis,  daging  buahnya  berwarna putih dan berasa sepat.
Buah  mahkota  yang  sudah  dipisahkan dengan bijinya, dicuci dengan air yang mengalir untuk menghilangkan kotoran. Kemudian dikeringkan  dengan  oven  agar  pengeringannya merata dalam waktu cepat dan tidak dipengaruhi  oleh  cuaca.  Selanjutnya  dibuat serbuk  dengan  cara  diblender  hingga  halus. Semakin  halus  serbuk  maka  luas  permukaan akan  semakin  besar,  namun  jika  serbuk  terlalu halus maka serbuk akan lolos dalam penyaringannya.

## Pembuatan Ekstrak Etanol Mahkota Dewa
Pembuatan ekstrak etanol mahkota dewa menggunakan metode maserasi. Serbuk mahkota dewa sebanyak 300 gram dimasukkan ke dalam sebuah bejana tertutup lalu direndam dengan  etanol  70%  sebanyak  1250  ml  hingga semua  bagian  serbuk  terendam  selama  5  hari dengan  beberapa  kali  penggojokan.  Setelah  5 hari  diserkai  dan  diperas.  Kemudian  sari diendapkan  selama  1  malam  lalu  disaring  dan filtratnya disimpan (filtrat 1). Selanjutnya ampas ditambahkan 850 ml etanol 70% hingga semua bagian  ampas  terendam  lalu  ditutup,  dibiarkan selama  2  hari  terlindung  dari  cahaya  sambil diaduk  tiga  kali  sehari.  Kemudian  diserkai  dan diperas.  Sari  etanol  dipindahkan  ke  bejana tertutup,  dibiarkan  di  tempat  sejuk  yang terlindung  dari  cahaya  selama  2  hari  untuk diendapkan  lalu  disaring  (filtrat  2).  Filtrat  1  dan 2  digabung  dan  diuapkan  dengan  evaporator. Kemudian  dipekatkan  dengan  menggunakan cawan  porselin  di  atas  penangas  air  sampai pelarut  menguap  semua  sehingga  didapat ekstrak kental.

## Pemilihan dan Pengadaptasian Hewan Uji
Hewan uji yang digunakan untuk penelitian  adalah  mencit  putih  jantan  galur Swiss dengan  berat  badan  antara  20-30  gram yang  berumur  2-3  bulan.  Pengadaptasian mencit  dilakukan  di  Laboratorium  Farmakologi Fakultas  Farmasi  UMS  selama  1  minggu  dan diberi makanan standar dan minuman aquadest ad libitum.

## Penentuan  Dosis  Ekstrak  Etanol  Daging Buah Mahkota Dewa
Volume  maksimal  yang  dapat  diberikan pada  mencit  dengan  berat  badan  antara  20-30
gram  adalah  1  ml,  tetapi  untuk  volume pemberiannya adalah ½ dari volume maksimal.
Dosis  ekstrak  etanol daging buah mahkota  dewa  diperoleh  dengan  melakukan orientasi  dosis  terlebih  dahulu.  Orientasi  dosis dilakukan  dengan  menggunakan  5  ekor  hewan uji  yang  diberi  sediaan  ekstrak  etanol  dosis tengah  yakni  2,5g/kgBB.  Setelah  itu,  dosis tersebut  akan  diterapkan  seterusnya  pada  uji perlakuan.

## Penentuan  Peringkat  Dosis  Allopurinol  dan

## Potassium Oxonate
Dosis  alopurinol  yang  digunakan  adalah 10mg/kgBB  atau  0,2mg/20gBB,  sedangkan dosis  potassium oxonate yang  digunakan secara  intraperitoneal  pada  mencit  adalah 250mg/kgBB  atau  5mg/20gBB.  Dosis  ini mengacu pada  penelitian sebelumnya (Zhao et a l., 2005).

## Pembuatan Hiperurisemia
Kadar  asam  urat  tinggi  (hiperurisemia) dibuat  dengan  cara  penginduksian potassium oxonate secara  intraperitoneal  dengan  dosis 250  mg/kgBB  atau  5mg/20gBB  pada  mencit  1 jam  setelah  pemberian  sediaan  uji  (Mo et  al , 2007). Akan tetapi sebelum hewan uji digunakan  untuk  penelitian,  diberi  makanan tambahan  berupa  jus  hati  ayam  dengan konsentrasi 10% 3 kali sehari selama 2 hari.

## Uji Pendahuluan dan Uji Perlakuan terhadap Hewan Uji
Sebelum  digunakan  untuk  penelitian, hewan  uji  diadaptasikan  selama  1  minggu  dan diberi makanan tambahan berupa jus hati ayam dengan konsentrasi 10% 3 kali sehari selama 2 hari.  Pengujian  yang  dilakukan  terlebih  dahulu adalah  uji  pendahuluan  untuk  pembuatan model  hiperurisemia.  Sebanyak  9  ekor  mencit putih  jantan  ditimbang  lalu  dibagi  menjadi  3 kelompok masing-masing 3 ekor, yaitu :
1. Kontrol CMC Na 0,5% : diberi CMC Na 0,5% p.o  0,5ml/20gBB,  satu  jam  kemudian  diberi CMC Na 0,5% i.p 0,5ml/20gBB.
2. Kontrol  normal  (aquades)  :  diberi  aquades p.o  0,5ml/20gBB,  satu  jam  kemudian  diberi aquades i.p 0,5ml/20gBB.
3. Kelompok Hiperurisemia : diberi aquades p.o 0,5ml/20gBB,  satu  jam  kemudian  diinduksi dengan potassium oxonate i.p 250mg/kgBB. Induksi  potassium oxonate  dilakukan ketika  terjadi  akumulasi  asam  urat  yaitu  antara jam  09.00  dan  10.00  pagi.  Pengambilan  darah dilakukan pada waktu yang menunjukkan kadar asam urat tertinggi yaitu pada jam ke-2 (Haidari et  al. ,  2008).  Pengujian  selanjutnya  adalah  uji perlakuan,  menggunakan  25  ekor  mencit  yang
telah  ditimbang lalu  dibagi  menjadi 5 kelompok masing-masing 5 ekor, yaitu:
1.  Kontrol negatif :  diberi  CMC  Na  0,5% p.o 0,5ml/20gBB
2.  Kontrol positif :  diberi  allopurinol  p.o 10mg/kgBB atau 0,2mg/20gBB
3.  Ekstrak etanol 1 :  diberi  ekstrak  etanol daging  buah  mahkota  dewa  p.o  dosis 1,25g/kgBB
4.  Ekstrak etanol 2 :  diberi  ekstrak  etanol daging  buah  mahkota  dewa  p.o  dosis 2,5g/kgBB
5.  Ekstrak etanol 3 :  diberi  ekstrak  etanol daging  buah  mahkota  dewa  p.o  dosis 5g/kgBB
Satu  jam  setelah  perlakuan,  diinduksi dengan potassium oxonate secara intraperitoneal  250mg/kgBB.  2  jam  kemudian darah  diambil  melalui vena  opthalmicus dari mata  mencit  menggunakan  pipa  kapiler  lalu darah  ditampung  (  ±  0,5  ml)  dalam  tabung ependorf.  Darah  dialirkan  lewat  dinding  tabung ependorf untuk menghindari terjadinya hemolisis. Darah disentrifugasi dengan kecepatan  5000  rpm  selama  5  menit  untuk mendapatkan  serumnya.  Serum  yang  telah memisah  diambil  dengan  mikropipet  dan ditempatkan  dalam  tabung  ependorf  baru. Serum  dibaca  kadar  asam  uratnya  pada panjang gelombang 546 nm.

## Penetapan Kadar Asam Urat
Kadar asam urat ditetapkan berdasarkan reaksi enzymatic menggunakan  reagen uric acid FS*  TBHBA.  Larutan  sampel  dibuat dengan cara mengambil 20 μl serum ditambah 1000  μl  monoreagen  (4  bagian  Reagen  1 ditambah  1  bagian  Reagen  2).  Serum  yang telah  dicampur  homogen  dengan  pereaksi Uric Acid FS*  TBHBA  diinkubasi  selama  6-8  menit pada  suhu  37ºC.  Selanjutnya  larutan  sampel, standart  dan  blangko  dibaca  kadarnya  dengan menggunakan  spektrofotometer  StartDust  FC* 15 pada panjang gelombang 546 nm.

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh  dari  penelitian  yang berupa  kadar  asam  urat  dalam  darah  dianalisa distribusi normalitasnya menggunakan uji Kolmogorov-Smirnov dan juga homogenitasnya dengan Levene  test .  Data  tersebut  terdistribusi normal  dan  homogen  maka  analisa  dilanjutkan dengan  ANAVA  satu  jalan  dilanjutkan  dengan uji Bonferroni dengan taraf kepercayaan 95%.
Untuk  melihat  potensi  ekstrak  etanol dalam  menurunkan  kadar  asam  urat  pada serum  darah  mencit  putih  jantan  yang  dibuat hiperurisemia  digunakan  persen  penurunan kadar asam urat dengan rumus :
Rata-rata kontrol negatif (CMC Na 0,5%) – kadar setelah perlakuan X 100% Rata-rata kontrol negatif (CMC Na 0,5%)

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Uji Pendahuluan
Uji pendahuluan dilakukan untuk membuat  model  hiperurisemia  pada  mencit putih  jantan  dengan  cara  diinduksi potassium oxonate dosis 250mg/kgBB secara intraperitoneal  antara  pukul  09.00  dan  10.00 (Haidari et  al .,  2008).  Uji  dilakukan  dengan membandingkan  kadar  asam  urat  kontrol  CMC Na  0,5%  dan  kontrol  aquadest  dengan kelompok hiperurisemia  (tabel 1). Dosis potassium oxonate 250mg/kgBB yang digunakan  pada  penelitian  ini  mengacu  pada penelitian  sebelumnya  (Zhao et  al .,  2005). Waktu  pengambilan darah yang  optimal dilakukan pada jam ke-2. Hal  ini didukung oleh penelitian  yang  menyatakan  bahwa  waktu pengambilan  darah  yang  optimal  adalah  pada jam  ke-2  setelah  diinduksi potassium  oxonate 250mg/kgBB  secara  intraperitoneal  (Haidari et al ., 2008).
Tabel  1- Data  Perbandingan  Kadar  Asam  Urat  Kontrol CMC  Na  0,5%  dan  Aquadest  Dengan  Kelompok Hiperurisemia
Perlakuan Hewan uji Kadar Asam Urat (mg/dL) X ±SD (mg/dL) CMC Na 1 2,4 0,5% i.p 2 2,5 2,57±0,21 3 2,8 Aquadest 1 1,8 (normal) 2 2,6 1,80±0,80 3 1,0 Potassium 1 3,4 Oxonate 2 3,6 4,13±1,10 250mg/kgBB (hiperurisemia) 3 5,4
Data  hasil  uji  pendahuluan  diuji  statistik dengan  SPSS  17.0 for  windows. Hasil  uji menunjukkan  bahwa  data  tersebut  terdistribusi normal  dan  variansinya  homogen.  Selanjutnya dilakukan  uji Post-Hoc test Bonferroni  untuk mengetahui  kelompok  mana  yang  berbeda secara bermakna.
Hasil uji Post-Hoc test Bonferroni menunjukkan  bahwa  kelompok  I  (kontrol  CMC Na  0,5%)  tidak  berbeda  bermakna  dengan kelompok  II  (kontrol aquadest )  dengan  nilai signifikansi  0,847  (p>0,05).  Hal  ini  berarti pemberian aquadest tidak mempengaruhi peningkatan  kadar  asam  urat  dalam  serum mencit  jantan  yang  dibuat  hiperurisemia. Kelompok I (kontrol CMC Na 0,5%) menunjukkan  perbedaan  yang  tidak  bermakna dengan  kelompok  III  (kelompok  hiperurisemia) dengan  nilai  signifikansi  0,157  (p>0,05),  yang berarti  bahwa  penggunaan  CMC  Na  0,5% sebagai  pensuspensi  dari potassium  oxonate dapat  mempengaruhi  peningkatan  kadar  asam urat  pada  serum  darah  mencit  jantan  yang dibuat  hiperurisemia,  sehingga  penggunaan CMC Na 0,5% sebagai suspending agent harus dikontrol.  Pengaruh  CMC  Na  0,5%  dalam meningkatkan kadar asam urat ditunjukkan oleh perbedaan nilai SD yang besar antara CMC Na 0,5%  dan  aquadest.  Oleh  karena  itu,  CMC  Na
0,5% yang juga digunakan sebagai suspending agent sediaan  uji  pada  uji  perlakuan  dapat digunakan  sebagai  kontrol  negatif  untuk mengetahui  efek  ekstrak  etanol  mahkota  dewa dalam  menurunkan  kadar  asam  urat  secara tepat.  Pada  kelompok  II  (kontrol  aquadest) menunjukkan  hasil  yang  berbeda  bermakna dengan  kelompok  III  (kelompok  hiperurisemia) dengan  nilai  signifikansi  0,034  (p<0,05).  Hal  ini berarti pemberian potassium oxonate dosis 250 mg/kgBB  mampu  meningkatkan  kadar  asam urat secara nyata dari kondisi normal, sehingga pembuatan model hiperurisemia dapat dikatakan  berhasil.  Menurut  Mo et  al .,  (2007) mencit  dikatakan  hiperurisemia  apabila  kadar asam uratnya mencapai lebih dari 3,3mg/dL.

## Hasil  Uji  Ekstrak  Etanol  Daging  Buah Mahkota Dewa
Tabel 2- Data Kadar Asam Urat Awal ( Baseline ) dan Kadar Setelah Perlakuan pada Serum Mencit Jantan
Kelompok No. HU Kadar awal/ baselin e (mg/dl) Kadar setelah perlakuan (mg/dL) Kontrol Negatif (CMC Na 0,5%)
1 1,1 2,4
2 1,0 2,5
3 1,5 2,8 4 1,2 2,6 5 1,3 2,5 X ± SD = 1,22±0,19 X ± SD = 2,56±0,15 Kontrol Positif (Allopurinol 10mg/kgBB) 1 2,6 1,3 2 1,3 0,5 3 3,1 0,8 4 2,5 1,3 5 1,8 0,8 X ± SD = 2,26±0,71 X ± SD = 0,94±0,35 Ekstrak etanol daging buah mahkota dewa dosis 1,25g/kgBB
1 2,1 1,2
2 2,5
1,4 3 2,6 1,8 4 1,9 1,4 5 1,8 1,0 X ± SD 2,18±0,36 X ± SD = 1,36±0,30 Ekstrak etanol daging buah mahkota dewa dosis 2,5g/kgBB
1 1,7 1,0 2 2,1 1,2 3 2,6 1,4 4 2,8 1,9 5 2,2 1,7 X ± SD = 2,28±0,43 X ± SD = 1,44±0,36 Ekstrak etanol daging buah mahkota dewa dosis 5 g/kgBB 1 2,6 1,2 2 2,1 1,0 3 2,7 1,0 4 2,3 1,0 5 1,8 0,8 X ± SD = 2,30±0,37 X ± SD = 1,00±0,14
Kenaikan kadar
asam urat (hiperurisemia) terjadi pada kadar lebih dari 3,3 mg/dL  (Mo et  al .,  2007).  Kadar  asam  urat
awal/baseline  pada  hewan  uji  masih  dalam batas  normal  (Tabel  2).  Data  baseline  tersebut digunakan  untuk  mengontrol  kadar  awal  asam urat pada hewan uji.
Data kadar setelah  perlakuan pada tabel 2 kemudian diuji statistik dengan SPSS 17.0 for windows . Dari hasil pengolahan data menunjukkan  bahwa  data  kadar  setelah perlakuan  pada  tabel  2  mempunyai  variansi yang homogen dan terdistribusi normal (p>0,05).  Untuk  mengetahui  perbedaan  antara 5  kelompok  tersebut,  maka  dilakukan  uji statistik  analisa  varian  satu  jalan.  Hasil  analisa varian diperoleh nilai signifikansi sebesar 0,000 (p<0,05).  Dan  selanjutnya  dilakukan  uji Post- Hoc test Bonferroni untuk mengetahui kelompok  mana  yang  memiliki  perbedaan secara bermakna (Gambar 1).
Gambar 1- Histogram Antara Kelompok Perlakuan dengan Kontrol Negatif (CMC Na 0,5%) Keterangan : * : Berbeda bermakna dengan kontrol negatif CMC Na 0,5% (p <0,05) Kelompok I : Kontrol Negatif (CMC Na 0,5%) Kelompok II : Kontrol Positif (Allpurinol 10 mg/kgBB) Kelompok  III  :  Ekstrak  etanol  daging  buah  mahkota  dewa dosis 1,25 g/kgBB Kelompok  IV  :  Ekstrak  etanol  daging  buah  mahkota  dewa dosis 2,5 g/kgBB
Kelompok  V  :  Ekstrak  etanol  daging  buah  mahkota  dewa dosis 5 g/kgBB
Dari  hasil  uji Post-hoc test Bonferroni menunjukkan bahwa kelompok I (kontrol negatif CMC  Na  o,5%)  berbeda  bermakna  dengan kelompok  II  (kontrol  positif  Allopurinol)  dan kelompok  III,  IV  dan  V  (variasi  dosis  ekstrak etanol  daging  buah  mahkota  dewa)  dengan nilai  signifikansi  p<0,05.  Hal  ini  berarti  bahwa allopurinol  dan  variasi  dosis  ekstrak  etanol daging  buah  mahkota  dewa  yakni  dosis  1,25; 2,5  dan  5g/kgBB  dapat  menimbulkan  efek penurunan kadar asam urat pada mencit jantan yang  dibuat  hiperurisemia.  Untuk  mengetahui besarnya  potensi  ekstrak  etanol  daging  buah mahkota  dewa,  dapat  digunakan  persentase penurunan kadar asam urat (Gambar 2).
2,56 0.94 * 1.36 * 1.44 * 1.0 * 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 I II III IV V R A TA -R A TA K A D A R A S A M U R A T S E T E LA H P E R LA K U A N (m g/ dL) KELOMPOK PERLAKUAN
Gambar  2- Histogram  Antara  Persentase  Penurunan dengan Kelompok Perlakuan Keterangan : Kelompok I  :  Kontrol Positif (Allopurinol 10 mg/kgBB) Kelompok II  :  Ekstrak  etanol  daging  buah  mahkota  dewa dosis 1,25 g/kgBB
Kelompok III  :  Ekstrak  etanol  daging  buah  mahkota  dewa dosis 2,5 g/kgBB
Kelompok IV  :  Ekstrak  etanol  daging  buah  mahkota  dewa dosis 5 g/kgBB
Data  persentase  penurunan  kadar  asam urat  kemudian  dilakukan  uji  statistik  dengan SPSS  17.0 for  windows .  Hasil  uji  statistik menunjukkan data persentase penurunan kadar adalah  terdistribusi  normal  dan  variansinya homogen. Untuk mengetahui adanya perbedaan terhadap besarnya kadar asam urat yang  ditimbulkan  maka  dilakukan  uji  statistik analisa  ANAVA  satu  jalan  (Lampiran  12).  Lalu dilakukan  uji post-hoc test Bonferroni  untuk mengetahui signifikansi antar perlakuan (Lampiran 13). Hasil uji tersaji di Tabel 3.
Tabel 3- Post-hoc Test Persentase Penurunan Kadar Asam
Urat Antara Kelompok Perlakuan Kelompok I II III IV I 00,256 00,111 10,000 II 10,000 00,465 III 00,209 IV
Keterangan : Kelompok I  :  Kontrol Positif Allpurinol 10 mg/kgBB Kelompok II  :  Ekstrak  etanol  daging  buah  mahkota  dewa dosis 1,25 g/kgBB
Kelompok III  :  Ekstrak  etanol  daging  buah  mahkota  dewa dosis 2,5 g/kgBB
Kelompok IV  :  Ekstrak  etanol  daging  buah  mahkota  dewa dosis 5 g/kgBB
Hasil  uji Post  hoc  test pada  tabel  3 menunjukkan bahwa kelompok I (kontrol positif) tidak berbeda bermakna dengan kelompok II, III dan  IV  (variasi  dosis  ekstrak  etanol  daging buah  mahkota  dewa)  dengan  nilai  p>0,05.  Hal ini  berarti  ekstrak  etanol  daging  buah  mahkota dewa  dosis  1,25;  2,5  dan  5  g/kgBB  berpotensi menurunkan  kadar  asam  urat  pada  mencit jantan yang dibuat hiperurisemia.
Kelompok  II  (ekstrak  etanol  daging  buah mahkota dewa dosis 1,25 g/kgBB) menunjukkan  perbedaan  yang  tidak  bermakna terhadap  kelompok  III  dan  IV  (ekstrak  etanol daging  buah  mahkota  dewa  dosis  2,5  dan  5
g/kgBB)  dengan  nilai  p>0,05.  Begitu  juga antara  kelompok  III  tidak  berbeda  bermakna terhadap  kelompok  IV.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  kelompok  II,  III  dan  IV  mampu menurunkan  kadar  asam  urat  pada  mencit jantan  yang  dibuat  hiperurisemia.  Ekstrak etanol  daging  buah  mahkota  dewa  mempunyai potensi  yang  sama  dengan  allopurinol  dalam menurunkan kadar asam urat, tetapi kemampuannya  tidak  sebesar  kemampuan allopurinol.
Berdasarkan  hasil  penelitian,  sediaan ekstrak  etanol  daging  buah  mahkota  dewa dosis  1,25;  2,5  dan  5  g/kgBB  mampu menurunkan  kadar  asam  urat  berturut-turut sebesar  46,87;  43,75  dan  60,94%  dari  kondisi hiperurisemia.  Salah  satu  senyawa  yang berperan  dalam  menurunkan  kadar  asam  urat adalah  flavonoid  (Cos et.al .,  1998).  Daging buah  mahkota  dewa  diketahui  mengandung flavonoid. Ekstrak  etanol  daging  buah  mahkota dewa  mempunyai  kadar  flavonoid  yang  paling besar  (45,734  µg/mg)  (Arini dkk .,  2003). Flavonoid dalam tanaman mahkota dewa dapat berbentuk aglikon maupun glikosida. Kepolaran senyawa  flavonoid  adalah  dari  non  polar sampai  dengan  polar  sehingga  dapat  disari dalam  penyari  yang  non  polar  sampai  dengan polar (Markham, 1988).
Pernyataan  Markham  (1988)  dikuatkan oleh  penelitian  Setiani  (2010)  bahwa  infusa daging  buah  mahkota  dewa  dosis  2,5  g/kgBB efektif  menurunkan  kadar  asam  urat  darah mencit  putih  jantan  yang  dibuat  hiperurisemia dengan potassium oxonate dosis 250 mg/kgBB sekitar  73,77%.  Sediaan  infusa  daging  buah mahkota  dewa  membutuhkan  dosis  yang  lebih kecil  daripada  sediaan  ekstrak  etanol  dalam menurunkan kadar asam urat. Hal ini dikarenakan  senyawa  aktif  flavonoid  yang terikat  pada  pelarut  adalah  glikosida  yang bersifat polar sehingga lebih larut dalam pelarut polar yaitu air. Keefektifan mahkota dewa pada pelarut  non  polar  dinyatakan  oleh  Habsari (2010)  bahwa  ekstrak  heksan  daging  buah mahkota  dewa  dosis  2,5  g/kgBB  mampu menurunkan  kadar  asam  urat  mencit  jantan yang dibuat hiperurisemia sebesar 71,88%. Hal ini  dimungkinkan  senyawa  aktif  flavonoid  yang tersari pada pelarut non polar seperti n-heksan adalah flavonoid dalam bentuk aglikon. Keefektifan  mahkota  dewa  juga  dibuktikan dalam penelitian Pramita (2010) yang menyebutkan  bahwa  perasan  daging  buah mahkota  dewa  dosis  15g/kgBB  efektif  dalam menurunkan kadar asam urat sebesar 60,16%. Penelitian  pada  sediaan  infusa,  ekstrak  etanol dan ekstrak heksan daging buah mahkota dewa menunjukkan bahwa flavonoid yang terkandung dalam daging buah mahkota dewa dapat tersari pada pelarut polar dan non polar.
63,28 46,87 43,75 60,94 0 20 40 60 80 100 I II III IV R ATA -R ATA PE R SE N TAS E PEN UR UNA N K AD AR AS AM UR AT (% ) KELOMPOK PERLAKUAN
Hasil  penelitian  pada  sediaan  perasan, infusa,  ekstrak  etanol  dan  ekstrak  heksan daging  buah  mahkota  dewa  mempunyai persentase  penurunan  kadar  asam  urat  yang besar.  Hal  ini  mungkin  terjadi  karena  adanya senyawa  lain  selain  flavonoid  yang  tersari  oleh pelarut  pada  masing-masing  sediaan  yang dapat  bertanggung  jawab  dalam  menurunkan kadar asam urat.
Mekanisme  penurunan  kadar  asam  urat pada  penelitian  ini  didasarkan  pada  senyawa flavonoid  yang  terkandung  dalam  daging  buah mahkota  dewa.  Flavonoid  mampu  menurunkan kadar asam urat dengan mekanisme hambatan pada  aktivitas  enzim xantin  oksidase sehingga akan  menurunkan  produksi  asam  urat.  Dari harga  IC 50 flavonoid  menyatakan  bahwa  50% penghambatan xantin  oksidase sama  dengan 50%  penurunan  produksi  asam  urat.  Jenis flavonoid  yang  berperan  dalam  mekanisme penghambatan  enzim xantin  oxidase adalah flavon  dan  flavonol  (Cos et.al ,  1998).  Adanya senyawa  lain  selain  flavonoid  yang  terkandung dalam  mahkota  dewa  kemungkinan  juga  dapat berperan  dalam  menurunkan  kadar  asam  urat. Oleh karena itu  perlu dilakukan penelitian  lebih lanjut untuk mengetahui senyawa tersebut.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian,  ekstrak etanol  70%  daging  buah  mahkota  dewa
( Phaleria  macrocarpa (Scheff.)  Boerl)  dengan dosis  1,25;  2,5  dan  5g/kgBB  mempunyai  efek menurunkan kadar asam urat pada mencit putih jantan  galur Swiss yang  dibuat  hiperurisemia dengan induksi potassium oxonate 250mg/kgBB  sekitar  62,84;  60,66  dan  72,68% . Ekstrak etanol 70% daging buah mahkota dewa juga  mempunyai  potensi  yang  sama  dengan allopurinol dalam menurunkan kadar asam urat, akan  tetapi  kemampuan  menurunkannya  tidak sebesar  kemampuan  allopurinol  dosis  10 mg/kgBB.

## SARAN
1.  Perlu dilakukan uji toksisitas untuk mengetahui  efek  samping  yang  mungkin terjadi  pada  penggunaan  sediaan  dalam jangka pendek dan jangka panjang.
2.  Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut dengan  menggunakan  kontrol  positif  yang berbeda, misal dengan obat asam urat lain.
3.  Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  untuk pemberian  jus  hati  ayam  dalam  jangka waktu  yang  lama  dan  bagaimana  efeknya terhadap kadar asam urat darah.
4. Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  untuk mengetahui  senyawa  lain  selain  flavonoid yang terkandung dalam mahkota dewa yang dapat  berperan  dalam  menurunkan  kadar asam urat .

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim,  2009, Asam  Urat (online),  (http://www.freelist.org/pos/pistons92/asam  urat)  diakses  10 September 2009)
Arini,  S.,  Dani  Nurmawan,  Fin  Alfiani  dan  Triana  Hertiani,  2003,  Daya  Antioksidan  dan  Kadar Flavonoid  Hasil  Ekstraksi  Etanol-Air  Daging  Buah  Mahkota  Dewa  ( Phaleria  macrocarpa (Scheff.) Boerl), Jurnal , Fakultas Farmasi, Universitas Gadjah Mada, Jogjakarta.
Cos,  P.,  Ying,  L.,  Calomme,  M.,  Hu,  J.P.,  Cimanga,  K.,  Poel  V.B.,  Pieters,  L.,  Vlietinck,  A.J  and Berghe,  D.V,  1998,  Structure-Activity  Relationship  and  Clacification  of  Flavonoids  as  Inhibitors  of Xanthine Oxidase and Superoxide Scavengers, Journal of Natural Products, 71-76, Vol. 61
Gotama,  I.B.,  1999, Inventaris  Tanaman  Obat  (V ),  Depkes  Badan  Penelitian  &  Pengembangan Kesehatan : Jakarta.
Habsari,  N.  R.  E.,  2010,  Efek  Ekstrak  Heksan  Daging  Buah  Mahkota  Dewa  ( Phaleria  macrocrpa (Scheff.)  Boerl)  terhadap  Penurunan  Kadar  Asam  Urat  Mencit  Putih  Jantan  yang  Diinduksi Potassium Oxonate, Skripsi , Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta, Surakarta.
Haidari,  Fatemeh.,  Rashidi,  M.R.,  Keshavarz,  Seid.,  Mahboob,  S.A.,  Eshraghian, M.R  and  Shahi, M.M.,  2008, Effect  of  Onion  on  Serum  Uric  Acid  Levels  and  Hepatic  Xanthine Dehydrogenase/Xanthine Oxidase Activities in Hyperuricemic Rats , Journal of Biological Sciences, Tehran University of Medical Sciences, Iran.
Harmanto, N., 2001. Mahkota Dewa Obat Pusaka Para Dewa , Agromedia Pustaka , Jakarta.
Hasturani, E., 2003, Efek Air Perasan Daging Buah Mahkota Dewa ( Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl)  terhadap  Penurunan  Kadar  Asam  Urat  pada  Ayam  Jantan  Jenis  Lohman  Brown, Skripsi , Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Hendra,  P.,  2005,  Toksisitas  Subkronis  Perasan  Daging  Buah  Segar  Mahkota  Dewa  ( Phaleria macrocarpa (Scheff.)  Boerl)  terhadap  Fungsi  Ginjal  Tikus  Jantan  dan  Betina, Jurnal  Penelitian , Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Jogjakarta.
Kurnia, A., Pertamawati, Rifatul dan Hendig, 2005, Efek Penghambat Pertumbuhan Cell-Line THP- 1  Secara  In  vitro  dari  Ekstrak  Etanol  Buah  Mahkota  Dewa  ( Phaleria  macrocarpa Scheff.), Jurnal Artocarpus, Vol.5 No. 2 September 2005, 89-94.
Markham,  K.R.,  1988, Cara  Identifikasi  Flavonoid ,  diterjemahkan  oleh  Padmawinata  K.,  Penerbit ITB, Bandung.
Mo,  Shi-Fu.,  Zhou,  Feng.,  Lv,  Yao-Zhong.,  Hu,  Qing-Hua.,  Zhang,  Dong-Mei.,  and  Kong,  Ling- Dong., 2007, Hypouricemic Action of Selected Flavonoids in Mice : Structure-Activity Relationship , Nanjing University, China.
Pramita, D., 2010, Efek Perasan Daging Buah Mahkota Dewa ( Phaleria macrocrpa (Scheff.) Boerl) terhadap  Penurunan  Kadar  Asam  Urat  Mencit  Putih  Jantan  yang  Diinduksi Potassium  Oxonate, Skripsi , Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta, Surakarta.
Primsa,  E.,  2002,  Efek  Hipoglikemik  Infusa  Simplisia  Daging  Buah  Mahkota  Dewa  ( Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl) pada Tikus jantan Putih, Skripsi , Fakultas Farmasi, Universitas Gadjah Mada, Jogjakarta.
Setiani, L. A., 2010, Efek Infusa Daging Buah Mahkota Dewa ( Phaleria macrocrpa (Scheff.) Boerl) terhadap  Penurunan  Kadar  Asam  Urat  Darah  Mencit  Putih  Jantan  yang  Diinduksi Potassium Oxonate, Skripsi , Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta, Surakarta.
Simon, H., Etikun, M.J, Godine J.E.,Hellen, D.,Kutter, I.,Shellito, and P.C.,Stern, T.A., 2001, Gout Information Service Inc , New York. (http://www.nelcon rected.com).
Siswanto,  A.,  dan  Nunuk  Aries  Nurulita,  2005,  Daya  Antiinflamasi  Infus  Daun  Mahkota  Dewa ( Phaleria  macrocarpa (Scheff.)  Boerl)  pada  Tikus  Putih  ( Rattus  norvegicus )  Jantan, Pharmacon, Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Purwokerto, Jogjakarta.
Siswono,  2001,  Mahkota  Dewa  “Racun”  Irian  yang  Berkhasiat  (online),  (gizinet.com)  diakses  4 Oktober 2001)
Sudewo,  B.,  2004, Tanaman  Obat  Populer  Penggempur  Aneka  Penyakit ,  Agromedia  Pustaka, Jakarta.
Winarto,  W.P.,  dan  Tim  Karyasari,  2003, Memanfaatkan  Bumbu  Dapur  untuk  Mengatasi Aneka Penyakit, Agromedia Pustaka, Jakarta.
Zhao, X., Zhu, X., and Pan, Y., 2005, Effects Of Cassia Oil On Serum and Hepatic Uric Acid Levels In  Oxonate-Induced  Mice  and  Xantine  Dehiydrogenase  and  Xantin  Oksidase  Aktivities  In  Mouse Liver, Journal Of Ethnopharmacology .