Uji Aktivitas Antiplasmodium Dari Isolat Kulit Batang Kayu Tammate ( Lannea coromandelica Houtt. Merr.) Secara In-Vitro
Karlina Amir Tahir * , Haeria, Alifia Putri Febriyanti, St. Chadijah, Nursalam Hamzah Department of Pharmacy, Alauddin State Islamic University of Makassar
Article info Abstract History
Submission : 24-12-2019
Review : 29-12-2019 Accepted : 22-02-2020
* Email: karlina.amir@uin- alauddin.ac.id
DOI: 10.33096/jffi.v7i1.591
Keywords: Lannea coromandelica; Antiplasmodium; Antimalaria; Plasmodium falciparum One  of  the  main  causes  of  death  and  a  major  public  health  problem  is malaria. Some  drug resistance and the  limited number of effective  drugs have given the community a sense of worry. This makes the discovery of new antimalarial compounds very necessary. Based on the results of exploration of natural materials, Javanese wood is one of the plants that is efficacious as an antimicrobial and is thought to be efficacious as antiplasmodium. This study was then conducted to find hexan and ethyl acetate isolates from the Java wood fraction (Lannea coromandelica Houtt. Merr.) Which effectively inhibited the development of Plasmodium falciparum in vitro. This research is a follow-up study from previous studies in testing the fraction of Javanese bark against antioxidant activity. The procedure starts from hexan and ethyl acetate isolates with five concentrations of 10 (µg / ml), 1 (µg / ml), 0.1 (µg /  ml),  0.01  (µg  /  ml)  and  0.001  (µg  /  ml)  3D7  strain  of  Plasmodium falciparum  was  measured  based  on  the  average  percent  resistance.  The results of this study indicate that etil asetat isolate have IC 50 2,727 µg/ml, its  mean  moderate  activity  as  antiplasmodium.  While  hexan  isolate  have IC 50 >10 µg/ml its mean not have or low antiplasmodium activity.

## I. Pendahuluan
Malaria  adalah  penyakit  infeksi  yang disebabkan oleh parasit plasmodium yang hidup dan berkembang  biak  di  dalam  sel  darah  manusia. Penyakit ini secara alami ditularkan melalui gigitan nyamuk anopheles betina (Direktur PPBB, 2014).
Artesunate, Amodiaquin, Primaquin digunakan  untuk  lini  pertama  falciparum  tanpa komplikasi. Lini kedua yaitu Kina, tetrasiklin/doksisiklin dan primaquin. Untuk pengobatan  malaria  vivax/ovale  yaitu  pada  lini pertama  tablet  klorokuin  +  tablet  primakuin.  Lalu pengobatan  malaria  vivax/ovale  resisten  klorokuin digunakan  kina  dan  primakuin  dengan  pengaturan dosis  yang  sesuai.  Namun  beberapa  jenis plasmodium dilaporkan mengalami banyak resistensi  terhadap  obat  amodiaquin,  primaquin maupun klorokuin (Putra, 2011).
Peningkatan kasus resistensi parasit malaria  terhadap  obat-obat  yang  digunakan masyarakat  menjadi  perhatian  utama  bagi  peneliti. Kegagalan  pengobatan  bahkan  kematian  dapat terjadi karena resistensi plasmodium (WHO, 2016). Penyebab utama resistensi yaitu karena mutasipada gen-gen  plasmodium.  Hampir  setengah  dari populasi  di  dunia  pada  100  negara  dan  wilayah berisiko malaria bahkan berbagai negara dikawasan Asia Tenggara. Ditahun 2018, Kementrian Kesehatan  Republik  Indonesia  merilis  prevelensi malaria  berdasarkan  riwayat  pemeriksaan  darah menurut  provinsi.  Dimana,  untuk  daerah  endemik
malaria yaitu Papua sebanyak 12%, Papua Barat 9%, NTT 2%, Bengkulu 1,9 %, Maluku Utara 1,8% dan daerah  lain  dibawah  1%  (Kemenkes  RI,  2018). Sedangkan  untuk  resistensi  falcifarum  terhadap klorokuin  telah  ada  sejak  tahun  1973.  Penelitian tahun 1998 di Kalimantan Timur mendapatkan 50% pasien  resistensi  I,  19,6%  resistensi  II  dan  7,5% resistensi  III  terhadap  klorokuin  pun  sama  dengan sulfadoksin-primetamin (Napoleon, 2009).
Resistensi  plasmodium  terhadap  obat-obat sintetik tersebut memberikan artian bahwa perlunya ada  penemuan  obat  baru  sehingga  mampu menggantikan  dan  menekan  resistensi  tersebut mengingat prevelensi malaria masih jauh dari angka yang  diharapkan.  Angka  tersebut  masih  tergolong tinggi  untuk  daerah  endemik,  hal  tersebut mendorong  peneliti  untuk  berupaya  mengurangi resistensi  malaria  tersebut  dengan  berusaha menemukan antimalaria baru, salah satunya melalui eksplorasi  senyawa  aktif  dari  bahan  alam  berupa tanaman  obat  yang  dapat  digunakan  masyarakat untuk mengobati malaria diberbagai daerah endemik di Indonesia bahkan didunia.
Kayu  jawa  dalam  masyarakat  Sulawesi Selatan  dikenal  dengan  sebutan  “tammate  atau  aju jawa” merupakan tanaman yang biasanya dijadikan tanaman pagar, selain itu kayu jawa juga merupakan salah  satu  tanaman  tradisional  yang  digunakan masyarakat sebagai obat (Rahmadani, 2015). Bagian yang sering digunakan masyarakat dalam pengobatan  adalah  kulit  batang.  Kulit  batang
tanaman kayu jawa mengandung metabolit sekunder:  Alkaloid,  terpenoid,  steroid,  saponin, flavonoid, dan glikosida jantung (Wahid A. , 2012).
Berdasarkan  penelitian  sebelumnya  Fraksi F1, Fraksi F2, Fraksi F3, Fraksi F4, Fraksi F5, Fraksi F6,  dan  juga  Fraksi  F7  masing-masing  konsentrasi 100 ppm dilakukan pengujian terhadap Plasmodium falciparum strain  3D7  diukur  berdasarkan  persen hambatan rata-rata. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa semua sampel uji kulit batang kayu  jawa  mampu  menghambat  pertumbuhan  dari Plasmodium  falciparum dengan  nilai  persen hambatan berada diatas 30%. Partisi dan Fraksi yang menunjukkan persen hambatan paling tinggi adalah Partisi  larut  heksan  dengan  nilai  persen  hambatan 89,50 ± 0,77 % dan Fraksi F2 dengan nilai 96,80 ± 0,16  %  (Nursalam  Hamzah,  2017).  Melihat  persen hambatan  tersebut  yang  sangat  berpotensi  untuk disintesis menjadi senyawa baru dalam pengobatan antimalaria mendorong peneliti untuk membuatnya ketahap lanjutan yaitu pembuatan isolat. Hal inilah yang  kemudian  melatar  belakangi  dilakukan penelitian Isolasi Senyawa Aktif Kulit Batang Kayu Jawa  ( Lannea  coromandelica )  dan  Uji  Aktivitas Anti Plasmodium Sebagai Pengobatan Malaria.

## II. Metode Penelitian II.1 Ekstraksi
Bagian  tanaman  yang  digunakan  adalah kulit  batang.  Sampel  diperoleh  dari  Kabupaten Gowa. Sampel dikeringkan dan diserbukkan. Serbuk kering  kulit  batang  kayu  jawa  sebanyak  1800  g diekstraksi  dengan  metode  maserasi  menggunakan metanol 5000 ml.

## II.2 Partisi
Partisi  dilakukan  dengan  metode  partisi cair-padat  sebanyak  20,51  g  menggunakan  pelarut n-heksan  sebanyak  1700  ml,  sehingga  diperoleh partisi larut heksan dan partisi tidak larut heksan.

## II.3 Fraksinasi
Diperoleh  fraksi  hasil  dari  kromatografi cair  vakum,  dilarutkan  lalu  ditotol  pada  lempeng
fraksi yang diperoleh, kemudian dielusi menggunakan eluen yang sesuai. Setelah itu diamati dibawah  lampu  UV  366  nm  dan  254  nm,  dan didapatkan fraksi terbaik. Digabungkan fraksi yang memiliki noda yang hampir sama atau sama.

## II.4 Isolasi
Hasil fraksinasi tersebut kemudian dilakukan  proses  pemurnian  dengan  menggunakan menggunakan metode KLT 2 dimensi.

## II.5 Uji Aktivitas Antiplasmodium
Penelitian  ini  adalah  penelitian  kuantitatif yang dilakukan secara eksperimental dengan metode Desjardins,  dengan  mengukur  inkorporasi  dari hipoksantin  oleh  parasit.  Pertumbuhan  parasit diamati  dari  pemakaian  isotop  hipoksantin  oleh metabolisme  parasit  yang  tumbuh  di  dalam  kultur Setelah kultur diinkubasi 60 jam dan pertumbuhan kultur sehat serta tidak terkontaminasi, ditambahkan 50 ml campuran RPMI dan serum yang mengandung isotop  sebesar  0,25  μCi.  Kultur  dalam  sumuran dicampur agar homogen, kemudian dimasukkan ke dalam candle jar untuk dikultur lagi selama 12 jam pada  37 o C  sehingga  didapatkan  masa  inkubasi  72 jam.  Selanjutnya,  parasit  dipanen  menggunakan pemanenan  sel  semi-otomatik.  Inkorporasi  dari radiolabel  ditentukan  dengan  Liquid  Scintillation Analyzer. Data dari Metode schizont maturation test dan  up  take  3H-hipoksantin  dianalisis  dengan mengukur  persentase  penghambatan  pertumbuhan parasit.  Konsentrasi  penghambatan  50%  (IC 50 ) senyawa  uji  ditetapkan  dengan  analisis  probit, berdasarkan hubungan log kadar senyawa uji dengan % penghambatan pertumbuhan parasit.

## III. Hasil Dan Pembahasan
Hasil penelitian yang diperoleh dari pengujian aktivitas isolat kulit batang kayu jawa terhadap Plasmodium falciparum sebagai anti malaria dapat dilihat pada table 1, 2 dan 3.
Tabel 1. Hasil Pengujian Antiplasmodium terhadap Plasmodium falciparum isolat 1
Konsentrasi (µg/ml) R % Parasitemia % Pertumbuhan % Hambatan % Hambatan rata-rata 0 Jam 48 Jam Kontrol (-) 1 0.91 6.8 5.89 - - 2 0.91 6.75 5.84 - 10 1 0.91 4 3.09 47.54 47.74 2 0.91 3.95 3.04 47.95 1 1 0.91 4.74 3.83 34.97 34.44 2 0.91 4.77 3.86 33.90 0.1 1 0.91 5.19 4.28 27.33 27.28 2 0.91 5.16 4.25 27.23 0.01 1 0.91 5.81 4.9 16.81 16.71 2 0.91 5.78 4.87 16.61 0.001 1 0.91 6.49 5.58 5.26 4.77 2 0.91 6.5 5.59 4.28
Tabel 2. Hasil Pengujian Antiplasmodium terhadap Plasmodium falciparum isolat 2
Konsentrasi (µg/ml) R % Parasitemia % Pertumbuhan % Hambatan % Hambatan rata-rata 0 Jam 48 Jam Kontrol (-) 1 0.91 6.80 5.89 - - 2 0.91 6.75 5.84 - 10 1 0.91 3.49 2.58 56.20 56.61 2 0.91 3.42 2.51 57.20 1 1 0.91 4.17 3.26 44.65 44.76 2 0.91 4.13 3.22 44.86 0.1 1 0.91 5.01 4.10 30.39 30.35 2 0.91 4.98 4.07 30.31 0.01 1 0.91 5.74 4.83 18.00 17.47 2 0.91 5.76 4.85 16.95 0.001 1 0.91 6.35 5.44 7.64 7.59 2 0.91 6.31 5.40 7.53 Tabel 3. Ringkasan hasil uji dan nilai IC 50 No Sampel Konsentrasi (µg/ml) IC50 (µg/ml) 10 1 0.1 0.01 0.001 1 Isolat 1 47.74  34.44  27.28  16,71 4.77 >10 2 Isolat 1 56.61  44.76  30.35  17.47 7.59 2.727
Malaria  adalah  penyakit  infeksi  yang disebabkan oleh parasit plasmodium yang hidup dan berkembang  biak  di  dalam  sel  darah  manusia. Penyakit ini secara alami ditularkan melalui gigitan nyamuk anopheles betina (Direktur PPBB, 2014).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui aktivitas antiplasmodium pada isolat yang diperoleh dari  ekstrak  kayu  jawa  terhadap  Plasmodium falciparum secara in vitro. Hasil uji aktivitas tersebut nantinya akan ditentukan isolat yang manakah yang memiliki aktivitas sebagai antiplasmodium berdasarkan  nilai  IC 50 yang  telah  dihitung berdasarkan  analisis  probit.  Penelitian  ini menggunakan  sampel  kulit  batang  Kayu  jawa, sering  digunakan  masyarakat  sebagai  obat tradisional  untuk  mengobati  berbagai  penyakit. Kayu jawa digunakan untuk luka, mengatasi memar, diare opthalmia, asam urat, keseleo dan disentri. Di Sulawesi  selatan  masyarakat  menggunakan  kulit batang  kayu  jawa  sebagai  obat  luka,  hal  ini disebabkan  kemampuan  kulit  batang  kayu  jawa sebagai  antibakteri,  antimikroba,  antiinflamasi. Batang kayu jawa juga dapat menekan pertumbuhan bakteri  atau  mikroba  patogen  dan  mencegah terjadinya  infeksi  pada  luka  sehingga  kesembuhan luka  dapat  dipercepat,  dan  diduga  memiliki kemampuan sebagai antiplasmodium.
Proses  isolasi  kulit  batang  kayu  jawa diawali dengan sampel kulit batang kayu jawa yang telah  kering  diekstraksi  menggunakan  metode maserasi.  Prinsip  metode  ini  ialah  penyarian  dari suatu sampel dengan cairan penyari untuk menarik semua  komponen  senyawa  yang  terkandung.  Pada pengerjaan  ini  dilakukan  ekstraksi  dengan memaserasi  1800  gram  sampel  kulit  batang  kayu jawa yang telah kering menggunakan cairan penyari metanol  dan  dibiarkan  selama  ±3×24  jam  dan
dilanjutkan  proses  penyaringan  agar  didapatkan hasil  sarian  yang  nantinya  akan  di  pekatkan  untuk mendapatkan ekstrak kental dan sisa sarian akan di di remaserasi kembali.
Hasil fraksinasi tersebut kemudian dilakukan proses pemurnian untuk mengetahui hasil fraksi  tersebut  bisa  dikatakan  isolat  dengan menggunakan  menggunakan  metode  KLT  2 dimensi.  Seperti  yang  diketahui  dalam  studi fitokimia  metode  ini  bertujuan  untuk  mengetahui kemurnian  isolat,dengan  ditampakkannya    noda yang  tunggal  menggunakan  eluen  yang  berbeda. Dari  proses  pemurnian  didapatkan  hasil  masing- masing fraksi memiliki hasil noda yang tunggal dan hasilnya  dapat  dikatakan  isolat.  Hasil  yang kemudian  didapatkan  pada  proses  pemurnian senyawa  tersebut  adalah  fraksi  kayu  jawa  larut hexan kode B4 dan fraksi kayu jawa larut etil asetat kode  B4  masing-masing  memiliki  1  noda.  Dan digunakan sebagai sampel pada penelitian ini yang akan  dilakukan  uji  antiplasmodium.  Sampel  inilah yang  akan  dibuat  menjadi  5  konsentrasi  yaitu  10 µg/ml, 1 µg/ml , 0,1 µg/ml , 0,01 µg/ml  dan 0,01 µg/ml serta satu kontrol negatif.
Sebelum  melakukan  pengujian,  terlebih dahulu kita membuat Medium lengkap dan medium tidak  lengkap.  Dimana  pembuatan  medium  tidak lengkap  dibuat  dengan  mencampurkan  10,4  gram RPMI-1640, 11,9 gram HEPES, 4,2 gram NaHCO 3 , 0,10  gram  hiposantin  dan  1,0  g  gentamisin,  lalu ditambahkan  aqua  DM  sampai  volume  2000  mL. Larutan  disaring  dengan  kertas  saring  berukuran pori  0,22  μm,  dimasukkan  ke  dalam  botol  scot, disimpan  pada  suhu  4 o C.  Medium  ini  diinkubasi dalam inkubator dengan suhu 37 o C dan pH 7,3 – 7,4 sebelum  digunakan.  RPMI  ( Rosewell  Parla Memorial  Institute )  digunakan  sebagai salah  satu
media  yang  menumbuhkan  sel  mamalia,  terutama sel suspensi, contohnya sel limfosit manusia. Selain itu,  media  ini  juga  dapat  digunakan  untuk menumbuhkan  sel  hybrid.  Sedangkan  HEPES (4- (2-hydroxyethyl)  -1-piperazineethanesulfonic  acid) merupakan zat penyangga kimia organik zwitterionic dan dikategorikan sebagai buffer yang baik  untuk  digunakan.  HEPES  tidak  memiliki manfaat  nutrisi  bagi  sel.  Tujuan  ditambahkan  ke media  semata-mata  untuk  menambah    kapasitas buffering  ketika  kultur  sel  membutuhkan  waktu yang  lama  di  luar  inkubator  CO2.  HEPES  banyak digunakan  dalam  banyak  reaksi  biokimia  dan sebagai zat penyangga dalam beberapa media kultur sel.  Penambahan  HEPES  memberikan  buffering tambahan ke media kultur sel  pada pH 7,2 sampai 7,6.  Sedangkan  pembuatan  medium  lengkap dilakukan  dengan  mencampur  medium  tidak lengkap  sebanyak  45  mL  dengan  albumax  5  mL. karena  medium  lengkap  adalah  medium  yang mengandung 10% albumax.
Metode  pembiakan  parasit  dilakukan dengan metode Thawing (1976) dengan menggunakan  candle  jar  untuk  meminimalkan  gas O 2 . Parasit tumbuh optimal pada kondisi gas O 2 yang sedikit  dan  5%  CO 2 (Jensen,  2002).  Sebanyak  2 sampel di uji yaitu isolat 1 (larut hexan) dan isolat 2 (larut  etil  asetat)  dengan  masing-masing  5 konsentrasi yang berbeda, 10, 1, 0,1 , 0,01, dan 0,001 lengkap  dengan  penggunaan kontrol  (-)  yang  akan dilakukan uji. Pada uji aktivitas antiplasmodium in vitro digunakan Plasmodium falciparum strain 3D7 yang  sensitif  terhadap  klorokuin.  Uji  aktivitas dilakukan dengan cara melarutkan bahan uji dalam DMSO kemudian dibuat pengenceran dalam media RPMI  sampai  diperoleh  konsentrasi  akhir  sebesar 10.000  µg/ml.  Pada  larutan  uji  ditambahkan suspensi parasit dengan kadar parasitemia ±1% dan hematokrit  5%.  Kultur  diinkubasi  selama  48  jam pada  suhu  37 o C.  Kultur  kemudian  dipanen  dan dibuat sediaan lapisan darah tipis dengan pewarnaan giemsa  20%.  Selanjutnya  dihitung  persen parasitemia dan persen penghambatan pertumbuhan P.  falciparum  dengan  menghitung  jumlah  eritrosit yang  terinfeksi  setiap  1000  eritrosit  di  bawah mikroskop.
Pewarnaan  Giemsa  merupakan  tehnik standar  untuk  mewarnai  parasite  plasmodium penyebab  malaria,  selain  itu  tehnik  ini  juga digunakan dalam histologi karena mampu mewarnai kromatin,  membran  inti  sel, metachromasia,  dan komponel  sel  lainnya.  Tinta  Giemsa  tersusun  atas campuran  pewarna  eosin,  methylene  blue, dan methylene  azure.  Campuran  methylene  azure dan  methylene  blue  akan  membentuk eosinat yang membuat hasil pewarnaan menjadi lebih stabil.
Uji  aktivitas  antiplasmodium  in  vitro dilakukan  terhadap  isolat,  hasil  fraksi  larut  heksan dan partisi larut etil asetat dengan masing-masing 5 konsentrasi  yang  berbeda.  Data  persentase
parasitemia,  persentase  penghambatan  terhadap  P. falciparum strain 3D7 dengan masa inkubasi 48 jam terdapat pada Tabel 6 dan 7. Dari hasil perhitungan persentase  parasitemia,  selanjutnya  dilakukan perhitungan persentase penghambatan pertumbuhan Plasmodium. Persentase penghambatan pertumbuhan  Plasmodium dihitung dari persentase parasitemia dan kontrol negatif. Persen parasitemia awal  menunjukkan  0,91  %.  Hasil  menunjukkan persen  parasitemia  setelah    inkubasi  pada  kontrol negatif  mengalami  peningkatan  dari  sebelumnya 0,91%  menjadi 6,8% dan 6,75%,  sehingga persen pertumbuhan plasmodium adalah 5.89% dan 5.84%. Pada  kedua  sampel  uji  menunjukkan  persen parasitemia  dan  persen  pertumbuhan  lebih  kecil dibandingkan pada kontrol negatif. Hasil pengolahan data pada tabel 4 bahwa rata-rata persen penghambatan untuk tiap larutan uji masing-masing konsentrasi  pada  isolat  1  yaitu  47.74%,  34.44%. 27.28%,  dan  16.71%  dan  4.77%.  sedangkan  pada isolat 2 yaitu 56.61%, 44.76%, 30.35%, 17.47% dan 7.59%.  Kemudian  dilakukan  analisis  antara konsentrasi  uji  terhadap  persen  penghambatan dengan  menggunakan  analisis  probit  log  untuk mengetahui  nilai  IC 50 atau  konsentrasi  bahan  uji yang  dapat  menghambat  pertumbuhan  parasit sebanyak  50%  untuk  mengetahui  bagaimana aktivitas anti plasmodium isolat tersebut.
Menurut  Koyono  et,  al.  2011  suatu  fraksi ekstrak atau senyawa dinyatakan memiliki aktivitas yang tinggi bila IC 50 < 5 µg/mL, moderat bila 10 > IC 50 > 5 µg/mL dan tidak aktif (inaktif) bila IC 50 > 10  µg/mL.  Menurut  Jurnal  (Filberta,  dkk,  2014) Semakin rendah nilai IC 50 , maka akan semakin baik aktivitasnya.
Hasil IC 50 yang didapatkan pada percobaan ini untuk isolat 1 (Hexan) > 10 µg/mL dan isolat 2 (Etil  asetat)  2,727  µg/mL.  Hasil  tersebut menunjukkan  bahwa  isolat  hexan  tidak  memiliki aktivitas  atau  sangat  lemah  terhadap  anti plasmodium.  Sedangkan  untuk  isolat  etil  asetat memiliki aktivitas tinggi terhadap anti plasmodium. Hal  tersebut  juga  dapat  dilhat  dari  data  yang disajikan  pada  tabel  hasil  pengujian  untuk  isolat 1 pada  %  penghambatan  rata-rata  ternyata  tidak  ada yang mencapai 50%. Oleh karena itu nilai IC 50 pada isolat 1 diatas 10 µg/mL yang menandakan bahwa isolat  1  tidak  aktif  pada  konsentasi  tertinggi  10 µg/mL.  diduga  isolat  1  mampu  melakukan penghambatan  ketika  dilakukan  penambahan konsentrasi diatas 10 µg/mL.
Sebelumnya  telah  dilaporkan  dalam penelitian  Wahid  (2012).  Kayu  jawa  mengandung metabolit  sekunder  seperti  Alkaloid,  terpenoid, steroid,  saponin,  flavonoid,  dan  glikosida  jantung (Wahid,  2012).  Sedangkan  pada  penelitian  (Alam, et.all, 2017) senyawa senyawa fenolik dan flavonoid yang terkandung dalam kayu jawa adalah Quersetin, Isoquersetin,  Leukosianidin,  leukodelpidin,  morin,
kaempferol, Asam
gallat, Epigallocatesin Dyhidroflavonols (Tofazzal, 2000). Derifat  Flavonoid  dan  senyawa  fenolik dalam  kandungan  kayu  jawa  memiliki  aktivitas sebagai  antiplasmodium  yang  telah  dilaporkan dalam  penelitian  yang  berbeda  adalah  senyawa quercetin,  isoquercetin,  kaempferol  (Beroa,  2009), (Hassan,  2013),  (Dondee,  K.  et  al.,,  2016), (Rudrapal, 2017).
Dilaporkan  dalam  penelitian  (Lusiana, 2009.) yang melakukan pengujian Antiplasmodium secara  in  vitro  terhadap  Plasmodium  falciparum strain W2 yang resisten klorokuin dan Plasmodium falciparum  yang  sensitif  klorokuin,  senyawa  yang aktif sebagai antiplasmodium diidentifikasi mengandung golongan senyawa Alkaloid.
Dalam penelitian (Kusumaningrum, 2016) yang  melakukan  pengujian  antiplasmodium  secara in vitro terhadap Plasmodium falciparum strain 3D7 menyatakan  ekstrak  yang  aktif  menghambat pertumbuhan Plasmodium falciparum di identifikasi mengandung golongan senyawa terpenoid.
Dalam  penelitian  (Ihsan,  2017)  yang melakukan  pengujian  antiplasmodium  secara in vitro terhadap  Plasmodium  falciparum  strain  3D7 menyatakan  partisi  dan  fraksi  yang  aktif  sebagai antiplasmodium  memiliki  kandungan  mengandung senyawa  Alkaloid,  Flavonoid,  Fenolik,  dan Terpenoid.
Mekanisme penghambatan terhadap plasmodium untuk golongan senyawa alkaloid telah dilaporkan dapat menghambat pertumbuhan parasit dengan  menghalangi  pertumbuhan  parasit  melalui transport  intraseluler  kolin,  sejumlah  karbon  yang mampu mengkelasi kation seperti Ca2+, Fe2+, dan Mg2+ yang ada di dalam parasit. Kelasi kation  ini menghalangi sejumlah proses sintesis asam nukleat karena enzim ribonukleotida reduktase membutuhkan  logam  transisi  sebagai  kofaktor (Hilou,  2006).  Kemudian  pada  senyawa  golongan terpenoid  juga  telah  diketahui  dapat  menghambat pertumbuhan Plasmodium dengan cara menghambat sintesis  protein  pada  sel  mamalia  dan  juga  parasit malaria  (Pouplin, 2007). Sedangkan pada  senyawa golongan  Flavonoid  sebagai  antiplasmodium memiliki  mekanisme  menghambat  jalur  permeasi baru (NPP) pada membran eritrosit yang terinfeksi plasmodium  serta  mekanisme  lain  yang  belum diketahui (Widyawaruyanti, et al., 2011).

## IV. Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  maka  dapat disimpulkan  bahwa  Isolat  etil  asetat  kulit  batang Kayu  Jawa  ( Lannea  coromandelica Houtt.  Merr.) memiliki aktivitas sangat aktif sebagai antiplasmodium,  sedangkan  isolat  heksan  kulit batang  Kayu  Jawa  ( Lannea  coromandelica Houtt. Merr.) tidak memiliki aktivitas sebagai antiplasmodium.  Nilai  IC 50 pada  isolat  yang
memiliki  aktivitas  sebagai  antiplasmodium  yaitu 2.727 pada isolat 2 (Isolat etil asetat)
V. Ucapan Terima Kasih
Penghargaan  kepada  UIN  Alauddin  atas bantuan Hibah Penelitian Pembinaan
Kapasitas/Kapasitas Pemula tahun 2018.

## Daftar Pustaka
Alam, et.all. (2017). Lannea coromandelica (Houtt.) Merr. Induces Heme Oxygenase 1 (HO-1) Expression  and  Reduces  Oxidative  Stress via  the  p38/c-Jun  N-Terminal  Kinase– Nuclear Factor Erythroid 2-Related Factor 2 (p38/JNK–NRF2)-Mediated Antioxidant Pathway. International Journal Molecular Science, 18(266) , 1-18.
Beroa,  J.  F.-L.  (2009).  Antimalar  ial  compounds isolated  from  plants  used  in  traditional medicine. Journal  of  Pharmacy  and Pharmacology, 61(11) , 1401–1433.
Dondee, K. et al.,. (2016). The protective effect of Moringa  oleifera  leaf  extract  on  liver damage in mice infected with Plasmodium berghei  ANKA. Journal  of  Coastal  Life Medicine, 4(9) , 742-746.
Desjardins, R. C. (1979). Quantitative assessment of antimalarial  activity  in  vitro  by  a semiautomated  microdilution  technique. Antimicrobial  Agents  Chemother,  16(6) , 710-718.
Direktur  PPBB.  (2014). Pedoman  Manajemen Malaria, Direktorat Jenderal Pengendalian  Penyakit  dan  Penyehatan Lingkungan,. Jakarta:: Departemen
Kesehatan Republik Indonesia.
Hassan, S. V. (2013). Activity Guided Isolation and Characterization of Antiplasmodial Agents of  some  Local  medicinal  Plants. Nigerian Journal  of  Basic  and  Applied  Science,  21
(3) , 177-185.
Kusumaningrum, N. A. (2016). Skripsi Uji Aktivitas Antimalaria  Daun  Helianthus  annus  L. dengan Ekstraksi Bertingkatterhadap Plasmodium  falciparum  secara  In  Vitro. Surabaya:  Fakultas  Farmasi  Universitas Airlangga  Departemen  Farmakognosi  dan
Fitokimia.
Lusiana,  H.  (2009.).  Skripsi  Isolation  and  In  Vitro
Antiplasmodial Test of Alkaloid Compounds from Albertisia papuana Becc. Bogor: Institut Pertanian Bogor.
Napoleon,  S.  N.  (2009).  Efikasi  Obat  Kloroquin,
Kina, Artesunat-SP, Artesunat- Amodiquine, Artesunat-Lumafentrin. 418. Nursalam Hamzah, N. W. (2017). Growth Inhibition of Plasmodium falciparum and
Micobacterium . Journal of
Pharmaceutical  and  Medicinal  Sciences , 85-90.
Rudrapal,  M.  &.  (2017).  Plant  Flavonoids  as Potential  Source  of  Future  Antimalarial leads. Journal  in  the  field  of  Pharmacy, 8(1) , 13-18.
Tofazzal,  M.  &.  (2000).  Dihydroflavonols  from Lannea  coromandelica. Phytochemistri, 54(8) , 901-90. Wahid,  A.  (2012). In  Vitro  Phytochemical  and Biological  Investigation  of  Plant  Lannea coromandelica  (Famili:  Anacardiaceae). Bangladesh: Thesis to Departemen Pharmacy East West University. WHO. (2016). Malaria. Indonesia: Kemenkes.