## UJI DAYA ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL RAMBUT JAGUNG TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Porphyromonas gingivalis

## ANTIBACTERIAL POTENCY OF CORN HAIR EXTRACT AGAINTS BACTERIAL GROWTH OF Porphyromonas gingivalis
Sulistiawati 1 , Ifadah 2 , Ulfa Yasmin 3 , Yasmin Athiroh 4 1,2 Departemen Periodonsia, Departemen Pedodonsia, Fakultas Kedokteran, Universitas Sriwijaya
3 Departemen Pedodonsia, Fakultas Kedokteran, Universitas Sriwijaya
4 Bagian Kedokteran Gigi dan Mulut, Universitas Sriwijaya Email Koresponden : sulistiawati@fk.unsri.ac.id

## ABSTRAK
Latar  Belakang: Penyakit  periodontal  merupakan  penyakit  kesehatan  gigi  dan  mulut  terbanyak urutan kedua di Indonesia. Pencegahan penyakit periodontal untuk menghambat pertumbuhan plak seperti pada bakteri Porphyromonas gingivalis dapat dilakukan secara kimiawi, bahan alami seperti rambut jagung dapat digunakan sebagai alternatif pencegahan secara kimiawi karena memiliki sifat antibakteri
Metode: Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental  laboratoris.  Kelompok  perlakuan menggunakan  ekstrak  rambut  jagung    dengan  konsentrasi  25%,  50%,  dan  75%  yang  diperoleh melalui  metode  maserasi.  Kontrol  positif  menggunakan  klorheksidin  glukonat  0,2%,  dan  kontrol negatif  berupa    akuades.  Uji  konsentrasi  hambat  minimum  (KHM)  dan  uji  konsentrasi  bunuh minimum (KBM) dilakukan menggunakan metode dilusi serta uji daya hambat menggunakan metode difusi cakram.
Hasil: Hasil uji KHM pada penelitian ini tidak dapat ditentukan karena terhalang oleh warna ekstrak yang gelap. Hasil uji KBM ditetapkan pada konsentrasi 50%. Hasil uji zona hambat menunjukkan ekstrak  rambut jagung konsentrasi 75%  memiliki diamater zona hambat yang  paling besar namun masih lebih rendah dibandingkan dengan klorheksidin glukonat 0,2%.
Kesimpulan: Ekstrak rambut jagung ( Zea mays saccharata Sturt ) terbukti memiliki daya antibakteri terhadap pertumbuhan bakteri Porphyromonas gingivalis . Kata kunci : Antibakteri, Porphyromonas gingivalis , rambut jagung

## ABSTRACT
Background:Periodontal  disease  is  the  second  most  frequent  dental  and  oral  health  problem  In Indonesia.  Prevention  of  periodontal  disease  to  inhibit  plaque  growth  can  be  done  chemically, natural materials such as corn silk can be used as an alternative to chemical prevention because it has antibacterial properties.
Methods:This  study  was  an  experimental  laboratory.  The  treatment  group  used  corn  hair  extract with  concentrations  of  25%,  50%,  and  75%  obtained  through  maceration  methods.  The  positive control used 0.2% chlorhexidine gluconate, and the negative control was used aquades. Minimum Inhibitory  Concentration  and  Minimum  Bactericidal  Concentration  test  were  conducted  using dilution methods and inhibition test using disc diffusion methods.
Results:The  results  of  the  Minimum  Inhibitory  Concentration  test  in  this  study  could  not  be determined because the dark color of the extract blocked it,. The results of the Minimum Bactericidal Concentration test were set at a concentration of 50%. The results of the inhibition zone test showed corn  hair  extract  concentration  of  75%  had  the  largest  inhibition  zone  diameter,  but  still  lower compared to 0.2% chlorhexidine gluconate
Conclusion: Corn hair extract has antibacterial potency against the growth of P. gingivalis. Keywords :Antibacterial, corn hair, Porphyromonas gingivalis.

## PENDAHULUAN
Penyakit periodontal adalah suatu inflamasi dan  kerusakan  yang  terjadi  pada  jaringan pendukung  gigi.  Periodontitis  dan  gingivitis merupakan  penyakit  periodontal  yang  paling umum terjadi. 1 Periodontitis menempati urutan tertinggi  kedua  dalam  masalah  kesehatan  gigi dan mulut di Indonesia, berdasarkan data Riset Kesehatan  Dasar  tahun  2018  sebanyak  74,1% masyarakat mengalami penyakit periodontitis. 2
Etiologi  utama  dari  periodontitis  dapat disebabkan oleh plak bakteri yang ada pada gigi dan poket periodontal. 3 Bakteri dapat membentuk  toksin  yang  dapat  membuat gingiva  menjadi  iritasi  dan  merusak  jaringan pendukung  gigi. 4 Porphyromonas  gingivalis merupakan  salah  satu  bakteri  yang  dapat menyebabkan  periodontitis  maupun  gingivitis yang banyak dijumpai pada plak subgingiva. 5
Berbagai metode seperti mekanik, kimiawi, dan alami dapat dilakukan untuk menghambat pertumbuhan  plak.  Kontrol  plak  dengan metode  mekanik  dapat  dilakukan  dengan  cara menyikat  gigi  dan  metode  kimiawi  dapat dilakukan  dengan  berkumur  obat  kumur  yang mengandung senyawa antibakteri. 6 Obat kumur yang  telah  direkomendasikan  pada  perawatan penyakit  periodontal  adalah  klorheksidin,  ia memiliki  sifat  antiplak  serta  dapat  membatasi pertumbuhan dari bakteri. Penggunaan klorheksidin  jangka  panjang  tidak  dianjurkan karena  kemungkinan  dapat  menghasilkan beberapa  efek  samping  seperti  sensasi  rasa terbakar,  iritasi  pada  mukosa,  dan  gangguan pada pengecapan. 7 ˒ 8
Bahan alami dapat menjadi alternatif karena memiliki efek samping yang lebih sedikit jika dibandingkan  dengan  bahan  kimia. 9 Bahan alami  memiliki  aktivitas  sebagai  antibakteri karena dapat menghasilkan senyawa metabolit sekunder. 10 Salah satu bahan alami yang telah terbukti  dalam  penelitian  memiliki  senyawa metabolit  sekunder  adalah  rambut  jagung. 11
Laporan  penelitian  dari  Bhaigyabati,  dkk memiliki hasil bahwa rambut jagung mengandung senyawa seperti flavonoid, tanin, fenol,  alkaloid,  steroid,  glikosida,  terpenoid, dan  antrakuinon. 12 Rambut  jagung  juga memiliki karakteristik sebagai obat tradisional. 13 Rambut jagung jarang dipandang oleh  masyarakat  sehingga  sering  dibuang  dan belum dimanfaatkan secara efektif. 14
Berdasarkan  penelitian  yang  ditemukan  oleh Feng,  dkk  bahwa  air  dan  ekstrak  etanol  dari
rambut jagung memiliki sifat sebagai antibakteri. 15 Haslina  dan  Sri  Untari  juga menyebutkan  hal  yang  sama  namun  daya antibakteri ekstrak rambut jagung lebih efektif pada gram negatif dibandingkan gram positif. 13 Berdasarkan hal yang telah dijelaskan pada pendahuluan  ini,  maka  peneliti  tertarik melakukan  penelitian  uji  daya  antibakteri ekstrak  etanol  rambut  jagung  ( Zea  mays saccharata  Stu rt)  terhadap  pertumbuhan bakteri Porphyromonas gingivalis .

## METODE
Penelitian dilaksanakan pada bulan November-Desember  2021  di  Laboratorium Mikrobiologi  Farmasi  Fakultas  Matematika dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam  Universitas Sumatera  Utara.  Subjek  penelitian  adalah bakteri Porphyromonas  gingivalis ATCC 3327.  Besar  sampel  dalam  penelitian  ini sebanyak enam tiap kelompok perlakuan yang ditentukan  menggunakan  rumus  Lemeshow. Penelitian  ini  telah  diberikan  izin  etik  dari Komite  Etik  Penelitian  Kedokteran  dan Kesehatan  (KEPKK)  Fakultas  Kedokteran Universitas Sriwijaya No. 299-2021. Semua alat di sterilisasi sebelum dilakukan penelitian. Rambut jagung yang bewarna coklat dikeringkan  dan  diblender.  Pelarut  yang digunakan pada proses maserasi adalah etanol 96%.  Setelah  proses  maserasi  hasil  yang didapatkan dipisahkan dari residu dan dipekatkan  menggunakan rotary  evaporator sehingga menghasilkan ekstrak rambut jagung 100%. Ekstrak dilakukan pengenceran menggunakan  aquades  untuk  mendapatkan konsentrasi 25%, 50%, dan 75%.
Uji KHM dan KBM menggunakan metode dilusi,  media  yang  digunakan  pada  uji  KHM berupa Brain Heart Infussion Agar dan pada uji KBM Brucella Blood Agar 5%. Kelompok uji berupa ekstrak rambut jagung konsentrasi 25%, 50%, 75%, klorheksidin glukonat 0,2% sebagai kontrol  positif,  dan  akuades  sebagai  kontrol negatif.  Seluruh  kelompok  uji  sebanyak  1  ml dan media uji KHM sebanyak 20 ml dituangkan ke tabung reaksi, lalu tetesi bakteri Porphyromonas  gingivalis sebanyak  1  ml  dan homogenkan  menggunakan  Vortex.  Tabung reaksi dilakukan inkubasi selama 48 jam pada suhu 37 °C. Pengamatan hasil uji KHM dapat dilakukan secara visual untuk melihat kejernihan  dan  kekeruhan  pada  tabung  reaksi.
Uji KBM diawali dengan mensubkultur seluruh tabung pada uji KHM ke media uji KBM pada cawan petri. Semua sampel dilakukan inkubasi selama  24  jam  pada  suhu  37  °C,  setelah  itu hitung  jumlah  koloni  bakteri  untuk  hasil  uji KBM.
Uji  daya  hambat  ekstrak  rambut  jagung terhadap  bakteri Porhyromonas  gingivalis dilakukan menggunakan metode difusi, media yang  digunakan  berupa Brucella  Blood  Sheep yang  telah  dihomogenkan  dengan  bakteri  uji. Kertas cakram yang disiapkan berukuran 5 mm, masing-masing  dilakukan  perendaman  pada kelompok  uji.  Setelah  terendam,  ambil  kertas cakram menggunakan pinset lalu letakkan pada permukaan  media  secara  perlahan.  Semua sampel dilakukan inkubasi selama 24 jam pada suhu 37 °C, setelah itu ukur zona daya hambat menggunakan jangka sorong.
Seluruh  data  yang  didapat,  selanjutnya dilakukan analisis menggunakan SPSS Statistik ver.  26.0.  Data  hasil  penelitian  dilakukan  uji normalitas menggunakan uji Shapiro-Wilk dan uji  homogenitas  menggunakan  uji Levene’s Test .  Selanjutnya,  uji  Kruskal-Wallis  dapat dilakukan  untuk mengetahui ada atau tidaknya pengaruh  berbagai  konsentrasi  ekstrak  etanol rambut jagung terhadap bakteri Porphyromonas gingivalis.

## HASIL
Hasil penelitian pada uji konsentrasi hambat minimum  (KHM)  ekstrak  rambut  jagung terhadap pertumbuhan bakteri Porphyromonas gingivalis tidak  dapat  ditentukan  karena terganggu  oleh  warna  ekstrak  yang  pekat sehingga tidak dapat dilihat secara visual oleh peneliti untuk menentukan hasil yang didapatkan.
Gambar 1.  Hasil uji dilusi KBM (a)Ekstrak rambut jagung 25% (b)Ekstrak rambut jagung 50% (c)Ekstrak rambut jagung 75% (d)Kontrol negatif (e)Kontrol positif
Hasil  uji  KBM  dapat  dilhat  secara  visual pada gambar 1, berdasarkan hasil  perhitungan bahwa ekstrak rambut jagung pada konsentrasi 50% dan 75% dapat membunuh seluruh bakteri Porphyromonas  gingivali s,  sedangkan  pada konsentrasi  25%  masih  terdapat  bakteri Porphyromonas gingivalis yang masih tumbuh, namun  masih  lebih  sedikit  jika  dibandingkan dengan  kelompok  negatif.  Dari  hasil  tersebut dapat disimpulkan bahwa nilai dari konsentrasi bunuh minimum yaitu pada konsentrasi 50%.

## Tabel 1. Hasil diameter zona hambat
Sampel Rerata Zona Hambat (mm) Ekstrak rambut jagung 25% Ekstrak rambut jagung 50% Ekstrak rambut jagung 75% Kontrol positif Kontrol negatif 12.08 20.29 24 30.95 0

## Gambar 2.  Hasil uji daya hambat
Hasil  uji  daya  hambat  yang  ditunjukkan pada  tabel  1  dan  gambar  2  menunjukkan kontrol positif dan seluruh konsentrasi ekstrak rambut jagung memiliki sifat antibakteri karena mampu  menghambat  bakteri Porphyromonas gingivalis .  Sedangkan,  kontrol  negatif  tidak menunjukkan  adanya  zona  hambat  terhadap bakteri Porphyromonas gingivalis .

## PEMBAHASAN
Keterbatasan  mata  manusia  melihat  secara visual  untuk  mengamati  kekeruhan  pada ekstrak  yang  pekat  membuat  hasil  uji konsentrasi  hambat  minimum  pada  penelitian
ini tidak dapat ditentukan. Terdapat penelitian memiliki  hasil  yang  sama,  seperti  yang dilaporkan  oleh  Eka  Selvia,  dkk  menyatakan bahwa  jika  ekstrak  bewarna  gelap  dan  pekat maka  peneliti  tidak  dapat  mengamati  untuk menentukan nilai konsentrasi hambat minimum. 16 Destik  Wulandari  dan  Desi Purwaningsih  melaporkan  jika  media  yang digunakan berupa Brain Heart Infusion (BHI) dan  bercampur  dengan  ekstrak  yang  gelap maka  akan  sangat  sulit  peneliti  untuk mengamati  kejernihan  pada  tabung  reaksi. 17
Peneliti menyarankan metode dengan pengujian  turbidimetri  dan  spektrofotometri atau  metode  lainnya  dapat  dicoba  untuk penelitian  selanjutnya  agar  memperoleh  hasil yang lebih maksimal.
Uji  konsentrasi  bunuh  minimum  memiliki hasil  yang  sama  seperti  penelitian  yang disampaikan oleh Akyunul Jannah, dkk bahwa bakteri  yang  terbunuh  akan  semakin  banyak jika  konsentrasi  ekstraknya  semakin  tinggi. 11
Terbukti  bahwa  pada  ekstrak  25%  masih terdapat  pertumbuhan  bakteri  sebesar  148 CFU/ml sedangkan pada konsentrasi 50% dan 75% sudah tidak ada pertumbuhan bakteri. Uji  difusi  cakram  memiliki  hasil  bahwa seluruh  konsentrasi  ekstrak  rambut  jagung memiliki  zona  hambat  yang  lebih  kecil dibandingkan  dengan  kontrol  positif,  hal  ini mungkin dapat disebabkan bahwa klorheksidin glukonat  memiliki  perlekatan  yang  lama  dan kuat  pada  permukaan  bakteri. 18 Laporan penelitian dari Zulfan M. Alibasyah, dkk juga memiliki  hasil  bahwa  kelompok  ekstrak memiliki  zona  hambat  yang  lebih  kecil terhadap  bakteri Porphyromonas  gingivalis jika dibandingkan dengan klorheksidin glukonat 0,2%. 19
Davis  dan  Stout  menyatakan  bahwa kekuatan  daya  antibakteri  dapat  dibedakan berdasarkan tingkatan (lemah dengan diameter zona  hambat  <5  mm,  medium  5-10  mm,  kuat 10-20  mm,  dan  sangat  kuat  >20  mm), berlandaskan  kategori  tersebut  ekstrak  etanol rambut  jagung  25%  kategori  kuat,  50%  dan 75%  termasuk  kategori  sangat  kuat.  Ekstrak rambut jagung memilki kategori yang kuat dan sangat  kuat  dapat  disebabkan  karena  bakteri Porphyromonas  gingivalis merupakan  bakteri gram  negatif  sehingga  memiliki  lapisan peptidoglikan  yang  sangat  tipis,  hal  ini membuat  bakteri  mudah  dimusnahkan  oleh senyawa  metabobit  sekunder. 20 Kemampuan daya  antibakteri  juga  didukung  senyawa
metabolit  sekunder  yang  banyak  dari  jagung dan  memiliki  berbagai  mekanisme  yang berbeda.  Flavonoid  dapat  menghambat  fungsi membran  sel,  alkaloid  dengan  mengganggu komponen  penyusun  peptidoglikan  pada bakteri, saponin dapat meningkatkan tegangan permukaan pada dinding sel, serta tanin dengan cara  mengerutkan  membran  sel  sehingga permeabilitas sel dapat terganggu. 21 ˒ 22 ˒ 23 ˒ 24 ˒ 25

## KESIMPULAN DAN SARAN
Ekstrak  etanol  rambut  jagung  ( Zea  mays saccharata  Sturt )  terbukti  memiliki  daya antibakteri  terhadap  bakteri Porphyromonas gingivalis dengan  konsentrasi  ekstrak  yang paling efektif membunuh bakteri dimulai pada konsentrasi  50%,  serta  daya  antibakteri  yang dihasilkan akan semakin besar jika konsentrasi ekstrak semakin tinggi.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Saputri  D.  Gambaran  radiograf  pada penyakit  periodontal.  J  Syiah  Kuala Dent Soc. 2018;3(1):16
2. Balitbang  Kemenkes  RI.  Laporan nasional  riskesdas  2018.  Lembaga
Penerbit Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan(LPB). Jakarta; 2019. 195 p
3. Octavia  M,  Soeroso  Y,  Kemal  Y. Clinical  effect  after  scaling  and  root planing in chronis periodontitis with 4- 6 mm deep pocket. Dentika. 2015;18(3):212.
4. Andriani I, Chairunnisa FA. Periodontitis kronis dan penatalaksanaan kasus dengan kuretase. Insisiva Dent J. 2019;8(1):26–7.
5. How  KY,  Song  KP,  Chan  KG. Porphyromonas gingivalis : An overview of periodontopathic pathogen  below  the  gum  line.  Front Microbiol. 2016;7:4–9.
6. Penda  PAC,  Kaligis  SHM,  Juliatri. Perbedaan  indeks  plak  sebelum  dan sesudah  pengunyahan  buah  apel.  e- GIGI. 2015;3(2).
7. Reddy  S.  Essentials  of  clinical periodontology  and  periodontics.  3rd
ed.  New  Delhi:  Jaypee  brothers medical; 2011. 66 p.
8. Bathla S. Periodontics revisited. 1st ed. New  Delhi:  Jaypee  brothers  medical; 2011. 61 p.
9. Alfizia  KZ,  Kornialia,  Utami  SP. Pengaruh  berkumur  dengan  seduhan daun  sirih  merah  terhadap  nilai  plak pada  pemakai  piranti  ortodonti  cekat.
B-Dent. 2016;3(1):24. 10. Compean K., Ynalvez R. Antimicrobial activity of plant secondary metabolities: a riview. Res J Med Plant. 2014;8.
11. Jannah A, Rachmawaty DU, Maunatin A.  Uji  aktivitas  antibakteri  rambut jagung  manis  (Zea  mays  ssaccarata Strurt) terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Alchemy. 2017;5(4):133–6. 12. Bhaigyabati  T,  T  K,  J  R,  K  U.
Phytochemical consistuents and antioxidant activity of various extracts of  corn  silk(Zea  mays.L).  RJPBCS. 2011;2(4):112–9.
13. Haslina,  Untari  S.  Pengaruh  waktu ekstraksi  dan  konsentrasi  ekstrak rambut jagung (corn silk) terhadap pH, total  fenol  dan  aktivitas  antibakteri.  J
Pengemb Rekayasa dan Teknol. 2017;13(2):58–60.
14. Parle  M,  Dhamija  I.  Zea  maize:  a modern  craze.  Int  Res  J  Pharm. 2013;4(6):39–43.
15. Feng  X,  Wang  L,  Tao  M,  Zhou  Q, Zhong  Z-H.  Studies  on  antimicrobial activity  of  ethanolic  extract  of  maize silk. African J Microbiol Res. 2012;6(2):335–8.
16. Selvia E, Hamid AA, Wahjuni ES. Uji efek  antimikroba  ekstrak  ethanol stroberi  (Fragaria  vesca  L.)  terhadap Staphylococcus epidermidis. Maj
Kesehat FKUB. 2014;1(2):81–5.
17. Wulandari  D,  Purwaningsih  D.  Uji aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol daun suruhan (Peperomia pellucida L. Kunth)  terhadap  bakteri  Shigella
dysentriae. J Farm Indones. 2016;13(2):175. 18. Lakhani N, Vandana K. Chlorhexidine-an  insight.  Int  J  Adv Res. 2016;4(6):1321–8.
19. Alibasyah  ZM,  Andayani  R,  Farhana A.  Potensi  antibakteri  ekstrak  jahe (Zingiber  officinale  Roscoe)  terhadap Porphyromonas  gingivalis secara  in vitro.  J  Syiah  Kuala  Dent  Soc. 2016;1(2):147–52.
20. Fajrina  A,  Bakhtra  DDA,  Eriadi  A, Putri  WC,  Wahyuni  S.  Uji  aktivitas antibakteri  ekstrak  etanol  rambut jagung ( Zea mays L .) terhadap bakteri Streptococcus mutans dan Porphyromonas gingivalis . Farm
Higea. 2021;13(2).
21. Darsana  IGO,  Besung  INK,  Mahatmi H.  Potensi  daun  binahong  (Anredera cordifolia  (tenore)  Steenis)  dalam menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia  coli  secara  in  vitro. Indones Med Veterinus. 2012;1(3):337–51. 22. Bontjura  S,  Waworuntu  OA,  Siagian KV.  Uji  efek  antibakteri  ekstrak  daun leilem  (Clerodendrum  Minahassae  L.) terhadap bakteri Streptococcus mutans. Pharmacon. 2015;4(4).
23. Sundu  R,  Handayani  F.  Uji  aktivitas antibakteri  ekstrak  etanol  umbi  paku atai  merah  (Angiopteris  ferox  Copel) terhadap  Propionibacterium  acnes.  J Ilm Kefarmasian. 2018;2(2):75–82.
24. Liling V V, Lengkey YK, Sambou CN, Palandi  RR.  Uji  aktivitas  antibakteri ekstrak etanol daun sembung (Blumea balsamifera L.) terhadap bakteri penyebab  jerawat  propionibacterium acnes. J Biofarmasetikal Trop.
2020;3(1):112–21.
25. Salim AN, Sumardianto S,  Amalia U.
Efektivitas serbuk simplisia biji pepaya sebagai  antibakteri  pada  udang  putih
(Penaeus merguensis) selama penyimpanan dingin. JPHPI. 2018;21(2):188–91.