## 77 | A c t a   P h a r m a c i a e   I n d o n e s i a September 2018, 6(2) 77-80 ; E-ISSN: 2621-4520
Aktivitas Antifungi Esktrak Etanol Daun Kamboja Merah ( Plumeria rubra L.) Terhadap Pityrosporum ovale
Antifungal Activity of Plumeria rubra L. Ethanolic Leaves Extract Against Pityrosporum ovale

## ABSTRAK    ABSTRAK
Rizki Akbar Ramadhan*, Rehana,
Muhamad Salman Fareza
*Jurusan  Farmasi,  Universitas
Jenderal  Soedirman.Jalan.    Prof.
Dr. HR. Boenyamin 708, Purwokerto  Utara,  Banyumas, Jawa Tengah, Indonesia. rizkiakbarramadhan5@gmail.com
Kata kunci : Daun Kamboja
Merah, Antifungi, Ekstrak, P. ovale
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui metabolit sekunder dan konsentrasi hambat minimum (KHM) dari ekstrak etanol daun kamboja merah ( Plumeria rubra L.)  terhadap  fungi Pityrosporum  ovale penyebab  ketombe.  Ekstrak diperoleh dengan metode maserasi dalam pelarut etanol. Kandungan kimia pada ekstrak  diidentifikasi  dengan  kromatografi  lapis  tipis.  Aktivitas  antifungi dilakukan  dengan  metode  dilusi  padat  untuk  memperoleh  nilai  KHM.  Hasil penelitian  menunjukkan  ekstrak  etanol  daun  kamboja  merah  mengandung flavonoid dan terpenoid. KHM yang didapat adalah 1750 ppm.
Keywords : Plumeria rubra leaves , Antifungi, Extract, P.ovale This  study  aims  to  determine  the  secondary  metabolites  and  MIC  from  the ethanol  extract  of  Plumeria  rubra  leaves  to  Pityrosporum  ovale  causes dandruff. The extract was prepared by a maceration method which was later identified by thin layer chromatography. Antifungal activity was performed by testing extract solution at the concentrations of 3500 ppm, 1750 ppm, 1575 ppm, 1400 ppm, 1225 ppm, 1050 ppm, and 875 ppm then compared with negative control of DMSO 5% and positive control i.e. ketoconazole 10 ppm with solid dilution method. The results showed that the extract contained flavonoids and terpenoids. The MIC found is 1750 ppm.

## Pendahuluan
Ketombe  merupakan  infeksi  mikroorganisme  atau adanya pengeluaran kelenjar keringat yang berlebihan di  kulit  kepala  yang  salah  salah  satunya  disebabkan oleh  fungi Pityrosporum  ovale (Cappuccino,  2013). Pengobatan masalah ketombe hingga saat ini biasanya menggunakan  zat  aktif  bahan  kimia  seperti ketokonazol, zinc  pyrithione (ZPT),  dan  selenium sulfida  yang  terdapat  dalam  bentuk  sediaan  shampo. Selain  bahan  kimia,  beberapa  penelitian  telah melaporkan  penggunaan  bahan-bahan  alam  sudah mulai  dikembangkan  sebagai  alternatif  untuk mengatasi permasalahan ketombe. Salah satu tanaman memiliki  potensi  untuk  diteliti  sebagai  antifungi P. ovale adalah kamboja merah ( Plumeria rubra ).
P. rubra merupakan tanaman dari famili Apocynaceae  yang  berasal  dari  daerah tropis  Amerika  (Manisha  dan  Aher, 2016). Secara  empiris  daun  tanaman  ini digunakan  untuk  mengobati  berbagai penyakit  seperti  peradangan,  rematik, bronkhitis,  batuk,  kolera,  disepsia,  dan demam (Rekha dan Jayakar, 2011). Daun kamboja  merah  dilaporkan  memiliki kandungan  seperti  flavonoid,  alkaloid, tanin,  dan  terpenoid.  Selain  itu,  ekstrak daun  kamboja  merah  juga  telah dilaporkan memiliki aktivitas antibakteri, antijamur, dan antikanker (Baghel et al. , 2010; Rekha dan Jayakar, 2011; Jarin et

## 78 | A c t a   P h a r m a c i a e   I n d o n e s i a
September 2018, 6(2) 77-80 ; E-ISSN: 2621-4520
al .,  2008).  Sebagai  antijamur,  daun kamboja merah juga sudah diteliti dapat menghambat  pertumbuhan  beberapa fungi seperti Candida albicans , Aspergillus  niger , Aspergillus  ustus dan Aspergillus ochaceus (Jarin et al , 2008).
Saat  ini  belum  ada  laporan  potensi  dari ektrak etanol yang berasal daun kamboja merah  sebagai  antijamur P.  ovale .  Oleh karena  itu,  kami  melakukan  penelitian mengenai uji aktivitas antifungi P. ovale dari ekstrak daun kamboja merah.

## Bahan dan Metode

## Bahan
Daun  kamboja  merah,  etanol  70%, metanol p.a, CHCl 3 p.a., plat silika gel 60F 254, pereaksi Dragendroff,  peraksi sitroborat , larutan  H 2 SO 4 10%, media Sabouraud Dextrose Agar (SDA), NaCl p.a, DMSO p.a., isolat fungi P. oryzae , ketokonazol p.a.
Ekstraksi dan uji fitokimia
Sebanyak  2  kg  serbuk  daun  kamboja merah  yang  berasal  dari  Purwokerto dibuat  dengan  metode  maserasi  selama 3x24  jam  menggunakan  pelarut  etanol 70%.  Setelah  itu,  diidentifikasi  dengan kromatografi  lapis  tipis  menggunakan fase diam plat silika gel 60F 254 dan fase gerak eluen klorofom dan metanol 9:1, kemudian  disemprot  menggunakan pereaksi  dragendroff,  sitroborat,  dan H 2 SO 4 10% (Wagner dan Bladt, 1996).

## Uji aktivitas antifungi
Uji aktivitas antifungi dilakukan dengan metode  dilusi  padat  menggunakan media Sabouraud  Dextrose  Agar (SDA).  Pengujian  dilakukan  dengan cara  membuat  larutan  uji  dari  ekstrak dengan  konsentrasi  3500  ppm,  1750 ppm, 1575 ppm, 1400 ppm, 1225 ppm, 1050  ppm,  dan  875  ppm.  Selanjutnya,
membuat  suspensi  fungi  dengan mengambil isolat fungi P.ovale kemudian  dilarutkan  dalam  larutan NaCl 0,9% yang disesuaikan kekeruhannya  dengan  larutan  standar McFarland  0,5.  Penggunaan  kontrol negatif  menggunakan  larutan  DMSO 5% sedangkan kontrol positif menggunakan ketokonazol 10%,
diinkubasi 2x24 jam kemudian diamati pertumbuhan funginya.

## Analisis data
Data  disajikan  secara  deskriptif  dari hasil metabolit sekunder dan nilai KHM yang didapatkan.

## Hasil dan Pembahasan

## Ekstraksi dan uji fitokimia
Berdasarkan  proses  ekstraksi  yang dilakukan diperoleh rendemen dari hasil ektraksi sebesar 0,217 g ekstrak sebesar 10,86%. Hasil uji identifikasi kandungan ekstrak etanol daun kamboja merah yaitu positif  mengandung  flavonoid  setelah plat  klt  disemprot  dengan  pereaksi sitroborat  timbul  bercak  berwarna  biru, kuning  tua,  atau  hijau    yang berflourosensi  dibawah  UV 366 (Wagner dan  Bladt,  1996).  Hasil  tersebut  sama seperti plat berisi standar Rutin yaitu nilai rf dan timbul warna yang sama (Gambar 1).
Pada  uji  kandungan  terpenoid,  ekstrak etanol memperlihatkan positif
mengndung  terpenoid  karena  setelah disemprot  pereaksi  H 2 SO 4 10%  timbul bercak  berwarna  biru,  kuning,  dan cokelat  (Gambar  2)  (Wagner  dan  Bladt, 1996).

## 79 | A c t a   P h a r m a c i a e   I n d o n e s i a
September 2018, 6(2) 77-80 ; E-ISSN: 2621-4520
(A)                   (B)                     (C)
Gambar 1. Profil KLT uji flavonoid. (A) Profil KLT  uji  flavonoid  yang diamati  dibawah  UV 366 sebelum disemprot sitroborat,  (B) Profil KLT uji flavonoid  yang  diamati  dibawah  UV 366 setelah disemprot sitroborat, (C) Profil KLT Rutin. Fase diam    menggunakan  silika  gel  60F 254 dan    fase gerak  menggunakan  klorofom  :  metanol  (9  :  1), Plat KLT diamati dibawah sinar UV366
(A)                        (B)
Gambar 2. Profil KLT uji terpenoid. (A) Profil KLT uji  terpenoid  yang  diamati  dibawah  UV 366 sebelum  disemprot  H 2 SO 4 10%.  (B)  Profil  KLT uji terpenoid yang diamati dibawah UV 366 setelah disemprot H 2 SO 4 10% . Fase diam  menggunakan silika  gel  60F254  dan  fase  gerak  menggunakan klorofom  :  metanol  (9  :  1),  plat  KLT  diamati dibawah sinar UV 366
Pada  uji  kandungan  alkaloid,  ekstrak pada  senyawa  alkaloid  tidak  terdapat bercak berwarna jingga setelah disemprot pereaksi  dragendroff  sehingga  hasilnya ekstrak etanol daun kamboja merah yang berasal dari Purwokerto negatif mengandung senyawa alkaloid. Ramproshad et  al. (2012)  telah
melaporkan  bahwa  tanaman P.  lubra
yang berasal dari Bangladeh mengandung alkaloid.
(A) (B)
Gambar    3. Profil  KLT  uji  alkaloid  (A)  Profil KLT  uji  alkaloid  sebelum  disemprot  reagen dragendroff,  (B) Profil KLT uji alkaloid setelah disemprot  reagen  dragendroff.  Fase  diam menggunakan  silika  gel  60F 254 dan    fase  gerak menggunakan  klorofom  :  metanol  (9  :  1),  Plat KLT diamati dibawah sinar  tampak
Hasil uji aktivitas antifungi menunjukkan adanya  penghambatan  pada  konsentrasi 3500 ppm dan 1750 ppm ditandai dengan tidak ada pertumbuhan fungi pada cawan petri  sedangkan  pada  konsentrasi  1575 ppm,  1400  ppm,  1225  ppm,  1050  ppm dan 875 ppm terlihat adanya pertumbuhan fungi.
Hasil KHM menunjukkan tidak terdapat pertumbuhan P.ovale pada  konsentrasi 1750  ppm  (Gambar  4)  Hasil  tersebut dapat dikategorikan bahwa ekstrak etanol daun  kamboja  merah  memiliki  aktivitas antifungi  kuat,  karena  memiliki  daya hambat  dibawah  kosentrasi  5000  ppm (Bussman R.W. et al ., 2010)
(A) (B)             (C) (D)                  (E)               (F) (G) (H)                  (I)
Gambar  4 . Cawan  petri berisi konsentrasi 3500 ppm (A), 1750 ppm (B), 875  ppm (C), 1575 ppm (D), 1400 ppm (E), 1225 ppm (F), 1050 ppm (G), kontrol positif ketokonazol 10% (H), dan kontrol negatif DMSO 5% (I).

## Simpulan
Ekstrak  etanol  daun  kamboja  merah ( Plumeria  rubra L)  asal  Purwokerto memiliki  kandungan  flavonoid  dan terpenoid.  Kadar  Hambat  Minimum (KHM)  ekstrak  etanol  daun  kamboja merah  ( Plumeria  rubra L)  didapatkan pada  konsentrasi  1750  ppm  terhadap fungi Pityrosporum ovale .

## Daftar Pustaka
Baghel,  A.S.,  Mishra,  C.K.,  Rani,  A., Sasmal,  D.,  Nema,  R.K,  2010,
Antibacterial  activity  of  Plumeria rubraLinn.  plant  extract, Journal  of Chemical and Pharmaceutical Research , 2(6):435-440. Bussman,  R.W.,  Malca-García,  G.,
Glenn,  A.,  Sharon,  D.,  Chait,  G., Díaz,  D.,  Pourmand,  K.,  Jonat,  B., Somogy,  S.,  Guardado  G.,  Aguirre, C.,  Chan,  R.,  Meyer,  K.,  Kuhlman,
A.,  Townesmith,  A., Effio-Carbajal, J.,  Frías-Fernandez,  F.,  Benito,  M., 2010, Minimum inhibitory concentrations  of  medicinal  plants used in Northern Peru as antibacterial remedies, Journal of Ethnopharmacology 132 (10) : 101– 108. Cappuccino,    J.  G.,  2013, Manual Laboratorium Mikrobiologi Edisi 8 ., diterjemahkan July Manurung, Henrita  Vidhayanti,  EGC,  Jakarta, 229. Jarin,  L.,  Rahman  S.MD,  dan  Anwar,
M.N.,  2008,  Antibacterial  And Antifungal Activity Of Crude Extracts Of Plumeria rubra L . , The Chittagong University Journal  of  Biological Sciences, 3 (1 & 2 ): 87-94.
Manisha,  K.  dan  Aher,  A.N.,  2016, Review  on  traditional  medicinal plant:  Plumeria  rubra, Journal  of Medicinal  Plants  Studies 4(6):  204- 207.
Wagner, H., dan Bladt, S., 1996, Plant Drug  Analysis,  A  thin  layer Chromatography  Atlas , Spinger , Heidelberg, 396-397.
Ramproshad, S., Afroz, T., Mondal, B., Khan,  R.,  Ahmed,  S.,  2012, Screening  of  Phytochemical  and Pharmacological activities  of  leaves of  medicinal  plant Plumeria rubra, International  journal  of  research  in pharmacy    and  chemistry ,  2012,  4: 1001-1007.
Rekha, J.B., dan Jayakar, B., 2011, Anti cancer activity of ethanolic extract of Leaves  of  Plumeria  rubra  (Linn). Current  Pharma  Research ,  1(2): 175-179.
.