Evaluasi ketahanan galur melon madura (Cucumis melo L.) terhadap cucumber mosaic virus
The resistence evaluation of the madurase line melon (Cucumis melo l.) to cucumber mosaic virus
Eva Monica¹, Syaiful Khoiri¹*, Achmad Amzeri¹
¹Program Studi Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Trunojoyo Madura
Jalan Raya Telang, PO. BOX 2 Kamal, Bangkalan Madura 69162 *Email korespondensi: syaiful.khoiri@trunojoyo.ac.id
Diterima: 15 Juni 2022 / Disetujui: 07 Juli 2022

## ABSTRACT
In the cultivation of muskmelon (Cucumis melo L.), there are several obstacles. One of which is the availability of seeds at  the  time  needed.  Melon  cultivation  is  inseparable  from  growth  inhibition,  one  of  which  is  due  to  pests  and  diseases. Overcoming  production  problems  requires  the  assembly  of  high-yielding  varieties  that  are  resistant.  Superior  varieties  are obtained  from  resistant  parents.  Thus,  this  study  aimed  to  evaluate  local  Madura  melon  strains  that  have  resistance  to  the Cucumber mosaic virus (CMV). The research was conducted in a greenhouse for melon cultivation. Leaf samples with symptoms of the disease were brought to the laboratory for genomic extract. DNA amplification was performed by RT-PCR using a pair of primers CMV-1F & CMV-1R. The results showed that the sample was positive for CMV. Based on the experimental results, in general, the G16 line has the best resistance level compared to other lines and comparison lines. In addition, the G8 strain is also quite resistant compared to the comparison line. the G16 and G8 strains have the potential to be used as CMV-resistant parents.
Keywords: disease incidence, molecular, muskmelon, yellow virus.

## ABSTRAK
Tanaman melon (Cucumis melo L.) merupakan salah satu tanaman buah-buahan yang penting dan tanaman melon ini banyak ditanam di berbagai negara. Permintaan dan produksi buah melon yang meningkat harus seimbang dengan ketersediaan benih  melon.  Dalam  budidaya  terdapat  beberapa  kendala  salah  satunya  ketersediaan  benih  pada  waktu  yang  dibutuhkan. Budidaya  tanaman  melon  tidak  terlepas  dari  hambatan  pertumbuhan  salah  satunya  karena  gangguan  hama  dan  penyakit. Mengatasi permasalahan produksi diperlukan perakitan varietas unggul yang tahan. Varietas unggul diperoleh dari tetua yang tahan.  Sehingga  penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengevaluasi  galur-galur  melon  lokal  Madura  yang  memiliki  ketahanan terhadap  Cucumber  mosaic  virus  (CMV).  Penelitian  dilakukan  di  greenhouse  untuk  penanaman  melon,  Program  Studi Agroekoteknologi  Fakultas  Pertanian  Universitas  Trunojoyo  Madura.  Sampel  daun  yang  bergejala  penyakit  dibawa  ke laboratorium  untuk  dilakukan  ekstrak  genom.  Amplifikasi  DNA  dilakukan  dengan  RT-PCR  menggunakan  sepasang  primer CMV-1F & CMV-1R. Hasil konfirmasi menunjukkan sampel positif terinfeksi CMV. Berdasarkan hasil percobaan secara umum galur G16 memiliki tingkat ketahanan terbaik dibandingkan galur lain dan galur pembanding. Selain itu, galur G8 juga cukup tahan dibandingkan galur pembanding. galur G16 dan galur G8 berpotensi digunakan sebagai tetua yang tahan CMV.
Kata kunci: insidensi penyakit, melon, molekuler, virus kuning.

## PENDAHULUAN
Tanaman  melon ( Cucumis melo  L.) merupakan salah satu tanaman buah-buahan yang penting dan tanaman melon ini  banyak  ditanam  di  berbagai  negara.  Tanaman  melon mampu  hidup  di  daerah  tropis  maupun  subtropis  dan  juga memiliki  nilai  ekonomis  yang  tinggi  sehingga  banyak diminati  oleh  masyarakat  didalam  maupun  luar  negri (Amrullah,  2018).  Buah  melon  juga  terkenal  sebagai  buah yang menyehatkan, karena mengandung banyak vitamin dan mineral  didalamnya  yang  sangat  dibutuhkan  oleh  tubuh manusia  (Khumaero.Wida.  W.  et  al.,  2014).  Menurut
Siswanto (2010), 100 g dari buah melon mengandung zat gizi yang  dapat  dimakan  adalah  0,6  g  protein,  17  mg  kalsium, 0,045 mg thiamin, 2,4 IU vitamin A, 30 mg vitamin C, 0,045 mg vitamin B, 0,065 mg vitamin B2, 6 mg karbohidrat, 1 mg niasin,  0,065  mg  riboflavin,  0,4  mg  zat  besi,  0,5  mg nikotianida, 93 ml air, 0,4 g serat, dan 23 kalori. Kandungan kalori, lemak, karbohidrat, vitamin, dan mineral buah melon tersebut banyak dimanfaatkan untuk terapi kesehatan seperti membantu  sistem  pembuangan,  sebagai  anti  kanker, menurunkan resiko stroke dan penyakit  jantung, serta dapat mencegah penggumpalan darah.
DOI: https://doi.org/10.21107/agrovigor.v15i2.14886 Agrovigor : Jurnal Agroekoteknologi http://journal.trunojoyo.ac.id/agrovigor Copyright (c) 2022 Author (s)
Tahun  2016  di  Indonesia  produksi  buah  melon mencapai  177.344  ton,  namun  tahun  2017  produksi  buah melon  mengalami  penurunan  sebanyak  92.434  ton.  Tahun 2018  produksi  buah  melon  mulai  mengalami  peningkatan sebanyak 118.708 ton, tahun 2019 mencapai 122.105 ton dan pada  2020  meningkat  hingga  138.177  ton  (BPS,  2021). Permintaan dan produksi buah melon yang meningkat harus seimbang dengan ketersediaan benih melon, dalam budidaya ada beberapa kendala salah satunya ketersediaan benih pada waktu  yang  dibutuhkan.  Penggunaan  varietas  melon  luar negri  cukup  tinggi  sehingga  kontinuitas  ketersediaan  benih tidak  terjamin,  bahkan  ketersediaan  buaj  yang  berkualitas (Huda & Suwarno, 2017) .
Budidaya tanaman melon tidak terlepas dari hambatan pertumbuhan  salah  satunya  karena  gangguan  hama  dan penyakit. Organisme Penyakit Tanman (OPT) dapat memicu turunnya  hasil  panen  melon  seperti  virus  dan  serangga vektornya.  Virus  penyebab  mosaik  yang  dapat  menginfeksi tanaman Cucurbitaceae yaitu Cucumber aphid borne yellows virus (CABYV), Cucumber  green  mottle  mosaic  virus (CGMMV), Cucumber  mosaic  virus (CMV), Papaya ringspot virus (PRSV), Squash mosaic virus (SqMV), Squash leaf  curl  virus (SLCV), Watermelon  mosaic  virus (WMV), dan Zucchini  yellow  mosaic  virus (ZYMV)  yang  meyerang tanaman  timun  di  Jawa  (Khuluq  et  al.,  2020).  Gejala  yang ditimbulkan sangat bervariasi yaitu seperti pola mosaik warna hijau  tua,  vein-banding  dan  malformasi.  Penularan  dapat terjadi melalui serangga vektor seperti kutu daun yang dapat menimbulkan kerugian secara kualitatif dan kuantitatif pada produksi buah melon(Khuluq et al., 2020).Cara pengendalian virus mosaik dapat dilakukan dengan memutuskan daur hidup kutu  daun  yang  menjadi  vektor  virus  yaitu  dengan  cara melalui  penekanan  populasi  vektor  virus.  Komponen  yang dapat  digunakan  untuk  pengendalian  ialah  penggunaan perangkap kutu daun baki kuning (Moriche), perangkap likat warna kuning dan penggunaan mulsa (Neni, 2011).
Mengatasi permasalahan produksi diperlukan perakitan  varietas  unggul  yang  tahan.  Varietas  unggul diperoleh  dari  tetua  yang  tahan.  Sehingga  penelitian  ini bertujuan  untuk  mengevaluasi  galur-galur  melon  lokal Madura yang memiliki ketahanan terhadap CMV.

## BAHAN DAN METODE

## Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian akan dilakukan di greenhouse, Laboratorium  Proteksi  dan  Lingkungan  Tanaman  Program Studi Agroteknologi Fakultas Pertanian Universitas Trunojoyo  Madura.  Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan Januari  sampai  April  2022.  Adapun  rencana  riset  melalui mengoleksi gejala virus mosaik dan sampel, ekstraksi genom, RT-PCR (amplifikasi cDNA), dan analisis genetik.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu polybag,  ember,  gembor,  kuas,  ajir,  gunting,  penggaris, timbangan analitik, refractometer, alat tulis, cool box , kamera
digital,  microtube,  mortar  dan  alu,  watherbath,  centrifuge, vortex,  micro  pipet  0,5  µ  dan  micro  pipet  10µ,  tupe  pipet, kolom filter, koleksi tabung, pipet volume dan pump, kertas label, PCR, seperangkat alat elektroforesis, UV transluminator,  elemeyer  250  ml  dan  1000  ml,  plastik,  baki steril, dan sarung tangan. Bahan yang digunakan adalah galur melon  (Tabel  1),  mulsa  hitam  perak,  tali  rafia,  tali  gawar, label, furadan 3G, pupuk NPK 16:16:16, pupuk Gandasil D, pupuk KNO3 putih dan KNO3 merah, fungisida (Dithane M- 45  80  WP),  dan  insektisida  (Curacron  500  EC,  Dharmabas 500 EC dan  Abacel 18 EC), daun  yang terserang virus, RB Buffer,  PRB  Buffer,  Dnase  1  Reaction  Buffer,  W1  Buffer, Wash Buffer, ethanol absolut,  -mercaptoethanol , pasangan primer CMV-1F (5′- ACCGCGGGTCTTATTATGGT-3′) & CMV-1R:  5′  ACGGATTCAAACTGGGAGCA3′),  nuclease free  water,  step  one  RT-PCR  kit,  agarose  1,5%,  aquadest, TAE Buffer, pewarna DNA (redsafe IntronBIO), loading dye , dan marker.
Tabel  1.  Bahan  Penelitian  Galur  Kandidat  Tanaman  Melon Unggul Madura
No. Genotipe Hasil Keterangan 1 G7 S0P2 2 G8 S0P5 3 G15 S4P2 4 G16 S4P5 5 G17 Pembanding 1 S0 lonnis 6 G18 Pembanding 2 S0 Honey Globe 7 G19 Pembanding 3 S3 Lonnis 8 G20 Pembanding 4 S3 Honey Globe

## Konfirmasi CMV
Penanaman melon a. Penyemaian
Benih  yang akan disemai terlebih dahulu direndam dengan air selama 2-4 jam. Selanjutnya benih disemai pada polybag semai  yang berukuran 25 x 25 cm  yang telah diisi media  tanam  yaitu  tanah  dan  pupuk  kandang  dengan perbandingan 3:1 yang dicampur dengan sedikit furadan 3G. Benih  disemai  dengan  posisi  radikula  (calon  akar) tumbuh menghadap kebawah agar benih dapat tumbuh dengan baik. Benih yang sudah disemai disiram 2 kali sehari pada pagi dan sore.
b. Pemeliharaan
Penyiraman  tanaman  dilakukan  2  kali  sehari  pada pagi  dan  sore  hari.  Penyulaman  dilakukan  sampai  7  hari setelah  tanam  paling  lambat  15  hari  setelah  tanam  pada tanaman  yang  tidak  tumbuh  atau  mati.  Penyulaman dilakukan dengan cara mengganti dengan tanaman cadangan yang  pertumbuhannya  lebih  baik  agar  pertumbuhannya seragam. Kegiatan ini dilakukan pada sore hari agar tanaman tidak stres karena terkena paparan sinar matahari.
Penyiangan dilakukan 1 minggu sekali dengan cara manual yaitu mencabut gulma secara langsung. Kegiatan ini dilakukan  untuk  mengurangi  persaingan  penyerapan  unsur
hara  antara  tanaman  melon  dengan  gulma  sehingga pertumbuhannya  terganggu.  Penyiangan  ini  dilakukan disekitar  perakaran  tanaman  melon  yang  sudah  mulai tumbuh.
Pemupukan  dilakukan  7  hari  setelah  tanam. Pengaplikasian  pupuk  dilakukan  7  hari  sekali  sampai menjelang waktu panen. Pupuk yang diberikan yaitu pupuk NPK  mutiara  (16:16:16)  dengan  dosis  6  g/tanaman  yang diaplikasikan  pada  umur  7,  14,  21,  28  HST.  Pupuk  KNO3 dengan dosis 7 g/tanaman yang sudah dilarutkan kedalam air yang diaplikasikan pada     umur 35 HST sampai  menjelang waktu  panen.  Pupuk  daun  gandasil  D  diberikan  pada  fase vegetative  tanaman  melon  dengan  dosis  3  g/tanaman  yang diaplikasikan  secara  bersaman  dengan  penyemprotan insektisida  dan  fungisida  untuk  pencegahan  hama  dan penyakit.
Pengendalian  hama  dan  penyakit  dilakukan  secara mekanik  dan  kimia.  Pengendalian  mekanik  dilakukan dengan  cara  sanitasi  lahan,  memangkas  dan  memusnahkan bagian  yang  terserang  hama  penyakit.  Pengendalian  kimia dilakukan  dengan  cara  menyemprotkan  insektisida  dan fungisida ke tanaman dengan jarak waktu masing-masing 1– 2 minggu sekali.
Pemasangan  ajir  bertujuan  untuk  tempat  rambatan pada tanaman melon, serta memudahkan pada perawatannya.  Ajir  yang  digunakan  terbuat  dari  bilah bambu dengan ukuran tinggi sekitar ± 1,5 m. Pemasangan ajir  dilakukan  sebelum  umur  tanaman  7  HST.  Ajir ditancapkan  pada  lubang  tanam  secara  menyerong,  ujung atasnya  condong  kearah  dalam  bedengan,  sehingga  ajir tersebut  saling  bersilangan.  Kemudian  ajir  yang  sudah dipasang tersebut diberi sebilah bambu yang lebih panjang secara horizontal dari ajir yang ditancapkan secara vertikal. Pemberian sebilah bambu secara horizontal bertujuan untuk mempermudah  pengikatan  batang  maupun  sebagai  tempat untuk  menggantung  buah  melon  yang  sudah  besar  agar tidak bersentuhan langsung dengan tanah.
Pemangkasan  dilakukan  untuk  membuang  calon tunas (cabang) yang merugikan, terutam tunas yang muncul pda  ketiak  daun.  Hal  ini  bertujuan  untuk  mendapatkan pertumbuhan vegetatif yang maksimum sehingga produktivitas  tanaman  optimum.  Pemangkasan  cabang dilakukan  dari  ruas  pertama  sampai  degan  ruas  ke-8  dan diatas ruas ke-11, dengan menyisakan 1 helai daun. Cabang pada  ruas  ke  9-11  tidak  perlu  dipangkas  untuk  dijadikan tempat munculnya calon buah yang akan dibesarkan. Bunga pada  ruas  tersebut  memiliki  kualitas  buah  yang  tinggi dengan ukuran buah yang optimum.
Pelilitan  batang  dilakukan  bertujuan  untuk  membantu cabang  tanaman  merambat  pada  ajir,  dimana  untuk selanjutnya  sulur-sulur  yang  sudah  muncul  akat  melekat atau  mengikatkan  diri  pada  ajir  yang  sudah  dipasang. Pengikatan  batang  melon  menggunakan  tali  gawar. Pengikatan  dilakukan  tidak  terlalu  kuat  dan  tidak  terlalu kendor.

## Pengambilan Sampel
Pengambilan sampel dilakukan  menggunakan  sarung tangan dan pisau atau cater agar steril. Sampel tanaman melon
berupa  daun  yang  bergejala  diambil  secara  acak  dengan kriteria  tertentu  ( purposive  sampling) sebanyak  daun bergejala.  Deskripsi  gejala  dan  dokumentasi  menggunakan kamera  digital  dilakukan  pada  masing-maisng  sampel. Sampel  dari  semua  lokasi  dibawa  ke  Laboratorium  dan disimpan pada suhu -80  C (Laili & Damayanti, 2019).

## Ekstraksi Genom
Ekstraksi  Genom  yaitu  ekstraksi  RNA/DNA  total secara  manual  dari  daun  tanaman  yang  bergejala.  Deteksi Cucumber  Mosaic  Virus  , DNA  total  diekstraksi  mengikuti metode Total RNA Mini Kit (Plant) (Control et al., 1979).

## Amplifikasi DNA Virus
Amplifikasi DNA dilakukan dengan metode One-step RT-PCR (Mytaq et al., n.d.) . Amplifikasi Cucumber Mosaic Virus dengan  menggunakan  pasangan  primer  CMV-1F  (5′- ACCGCGGGTCTTATTATGGT-3′) & CMV-1R: 5′ ACGGATTCAAACTGGGAGCA3′)  dengan  target  panjang pita ±382 bp. Amplifikasi dilakukan sebanyak 1 skilus 45  C selama 20 menit, 95  C selama 1 menit, selanjutnya tahap pre denaturasi 95  C selama 20 menit, denaturasi 94  C selama 1 menit, penempelan 55  C selama 1 menit, pemanjangan 72  C selama 1 menit dan pemanjangan akhir 72  C selama 10 menit (Laili & Damayanti, 2019).

## Visualisasi DNA dengan Elektroforesis
DNA  hasil  amplifikasi  dielektroferesis.  Langkah  – langkah  visualisasi  DNA  pertama  pembuatan  TAE  10x dengan cara TAE diambil 10 ml, ditambahkan 90 ml aquadest steril  dimasukkan  dalam  tabung  elemeyer,  dihomogenkan dengan  cara  menggoyangkan  tabung  elemeyer.  Kedua pembuatan  agarose  1,5%  dengan  cara  menghitung  agarose 1,5% x banyaknya sampel, jadi 1,5% x 80 = 1,2 g. Agarose ditimbang sebanyak 1,2 g, ditambahkan dengan larutan TAE 80  ml,  diaduk  sampai  merata,  lalu  dipanaskan  pada microwafe selama 3 – 5 menit dengan suhu medhaigh hingga mendidih, ditunggu hingga larutan hangat kuku, selanjutnya ditambahkan redsafe 5 µL dan dihomogenkan, dicetak pada max  fill,  diatasnya  ditambah  sisir  untuk  penanda  lubang, ditunggu hingga mengeras.
Langkah  ketiga  agarose  yang  memadat  dengan sempurna  ambil  sisirnya,  isi  sumuran  dengan  cairan  TAE hingga  agar  terendam.  Lodingdye  disiapkan  2  µL  diatas plastik  steril  dengan  titik  sesuai  sampel,  lalu  tambahkan  10 µL  sampel  DNA  dan  homogenkan.  Diambil  12  µL  larutan yang  sudah  dihomogenkan  lalu  tanam  diatas  agarose. Dipasang  semua  alat  dan  program  alat  sebagai  berikut  : Method → choose method : 1 → method 1/1 step : 1 → method 1/1 gradient : no → met  hod 1/1 voltage: 50 V → method 1/1 current : 500mA → method 1/1 power : 150 W → method 1/1 time  unit  :  h → method  1/1  timer  :  01:00 → method  1/1  end method  :  no → prosess.  Selanjutnya  matikan  alat elektroforesisnya. Lalu ambil agarosenya dan dipindahkan ke alat  uv  transluminator,  langsung  saja  atur  cahayanya  dan amati bentuk pitanya.

## Penularan CMV pada Galur Melon
Daun  yang  sakit  diambil  sampelnya,  gerus  daunnya dan  ditambahkan  buffer  fosfat  hingga  menghasilkan  cairan perasan  atau  sap.  Daun  tanaman  yang  diuji  ditaburi  dengan karborundom  dan  dibiarkan  15  menit.  Selanjutnya  cairan perasan tanaman yang sakit dioleskan pada dua daun termuda pada tanaman yang diuji dengan searah tulang daun. Dua jam setelah  penularan,  daun  tanaman  uji  dibilas  dengan  air aquades,  hal  ini  berguna  untuk  membersihkan  sisa karborundom pada tanaman uji (Khuluq et al., 2020)

## Parameter Pengamatan

## Periode inkubasi infeksi infeksi virus
Infeksi  laten  adalah  hubungan  antara  parasitis pathogen yang memiliki sifat dominan dalam tanaman inang, dapat merubah menjadi patogen aktif (Nurholis et al., 2015). Periode  laten  sendiri  merupkan  waktu  yang  diperlukan pathogen berada didalam tubuh vektor sampai dapat tertular (Wijaya,  2007).  Periode  laten  inveksi  virus  ini  dilakukan setelah  inokulasi  atau  penularan  CMV  pada  galur  melon, kemudian  dilakukan  pengamatan  disetiap  harinya  hingga menemukan tanda munculnya gejala virus pada tanaman.

## Kejadian Penyakit
Perhitungan  insidensi penyakit  yang disebabkan oleh virus ditentukan berdasarkan hasil positif PCR. Penghitungan insidensi  penyakit  mengikuti  metode  (Laili  &  Damayanti, 2019) dengan formula:
𝐹𝑉 = 𝑛 / 𝑁 𝑥 100%
Keterangan: FV = Frekuensi virus n = Jumlah tanaman positif terdeteksi virus N = Jumlah seluruh tanaman yang diuji

## Keparahan penyakit
Penilaian  skor  penyakit  berdasarkan  pada  variasi gejala  visual  yang  terjadi  (Khuluq  et  al.,  2020).  Skoring penyakit  mosaik  tersaji  pada  Tabel  2.  Sedangkan  kategori ketahanan penyakit  diklasifikasikan dalam enam  kelas  yang tersaji padaTabel 3 (Hermawan & Efendi, 2014).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Konfirmasi isolat CMV
Hasil  deteksi Cucumber  Mosaic  Virus (CMV) menunjukkan hasil positif pada sampel dengan panjang pita ±382 bp (Gambar 1).
Perkembangan Penyakit Mosaik pada Galur melon lokal Madura

## Periode Inkubasi
Hasil  dari  periode  inkubasi  menunjukkan  bahwa gejala penyakit mosaik pertama yang muncul pada hari ke 5 setelah  inokulasi  dan  paling  lambat  muncul  gejala  penyakit mosaik  pada  hari  ke  8  setelah  inokulasi.  Gejala  penyakit
mosaik  yang  muncul  pada  hari  ke  5  setelah  inokulasi  pada sampel  G16  dengan  periode  inkubasi  7,8±0.  Sampel  yang mengalami gejala penyakit paling lambat dengan waktu 8 hari setelah  inokulasi  terdapat  pada  sampel  G8  dengan  periode inkubasi 8,0±0,7.
Gambar 1. Visualisasi DNA hasil amplifikasi dengan primer CMV dengan hasil deteksi positif ditunjukkan pita DNA  berukuran  382  bp.  (M=Marker  100bp  plus, K=kontrol, S=sampel uji)

## Kejadian dan Keparahan penyakit
Kejadian  penyakit  di  amati  pada  hasil  setelah  7  hari setelah  inokulasi  hingga  28  hari.  Hasilnya  menunjukkan bahwa  pengamatan  pada  hari  ke  7  galur  melon  yang  rentan terhadap  penyakit  menunjukan  pada  galur  G16  dengan kejadian penyakit sebesar 11,1% dan galur yang masih tahan terhadap  penyakit  menunjukkan  pada  galur  G8  dengan kejadian penyakit sebesar 0,0%. Hasil pengamatan pada hari ke  14  setelah  inokulasi  menunjukkan  galur  yang  tingkat kejadian  keparahan  semakin  tinggi  mencapai  17,4%  pada galur  G7  dan  G19,  dan  galur  yang  masih  tahan  terhadap penyakit  masih  mencapai  6,7%  pada  galur  G17.  Hasil pengamatan  pada  hari  ke  21  dan  28  setelah  inokulasi presentase kejadian penyakit yang tinggi dan terendah masih sama  seperti  pengamatan  pada  hari  ke  14.  Keparahan penyakit pada galur melon dapat dipresentasikan menggunakan grafik pada (Gambar 2).
Berdasarkan  hasil  pengamatan  pada  28  HSI menunjukkan bahwa hampir semua galur yang diuji memiliki ketahanan  moderat  hingga  tahan.  Hanya  galur  G15  yang memiliki  kategori  ketahanan  moderat  rentan.  Secara  alami, Perkembangan  penyakit  yang  disebabkan  oleh  virus  sangat dipengaruhi oleh galur,  lingkungan seperti suhu,  dan  vektor (Akhtar et al., 2010; Gaswanto & Gunaeni, 2021; Welkie & Pound, 1958).

## Laju Perkembangan penyakit
Hasil  laju  perkembangan  penyakit  dilihat  dari presentase grafik pada (gambar 2) menunjukkan bahwa nilai perkembangan penyakit begitu cepat.  Pengamatan hari ke 7 setelah  inokulasi  nilai  presentase  0%  dan  2%.  Pengamatan hari  ke  14  setelah  inokulasi  mampu  naik  drastis  dari  yang semula  0%  naik  menjadi  6%  pada  galur  G8  dan  yang  2% mampu naik tertinggi 14% pada galur G15. Pengamatan hari
ke 21 setelah inokulasi presentasi dari 4% menjadi 6% pada galur G16 dan presentasi 14% mampu naik 22% pada galur G15. Penganamatan terakhir pada hari ke 28 setelah inokulasi presentasi  6%  naik  16%  pada  galur  G8  dan  presentasi  dari 22%  naik  menjadi  24%  pada  galur  G15.  Nilai  laju perkembangan  penyakit  bervariasi  berdasarkan  keparahan penyakit yang diperoleh.

## Variasi Gejala
Gejala penyakit pada tanaman  melon ( Cucumis melo L. ) memiliki ciri gejala penyakit yang beragam. Gejala yang ditemukan umumnya mosaik hijau, mosaic hijau dan kuning, dan mosaic disertai klorosis serta perubahan bentuk daun atau malformasi (Gambar 3).
Tabel 2. Skor keparahan penyakit Skor Keterangan Gejala 0 Tidak bergejala 1 Gejala mosaik ringan Mosaic hijau, vein banding 2 Gejala mosaik sedang Mosaik hijau dan kuning 3 Gejala mosaik berat Mosaic disertai klorosis 4 Gejala mosaik berat disertai malformasi ringan Mengkerut 5 Gejala mosaik berat disertai malformasi berat Mengkerut, keriting dan kerdil Tabel 3. Kategori ketahanan penyakit berdasarkan keparahan penyakit Skor Keterangan 0 Sangat tahan X ≤ 10 Tahan 10 < X ≤ 20 Moderet tahan 20 < X ≤ 30 Moderet rentan 30 < X ≤ 50 Rentan X > 50 Sangat rentan Tabel 4. Periode inkubasi penyakit mosaik pada melon Genotip Muncul Gejala Pertama (HSI) Periode Inkubasi (hari ± deviasi) G7 7 6,6 ± 1,5 G8 8 8,0 ± 0,7 G15 7 7,2 ± 0,8 G16 5 7,8 ± 0,8 G17 7 8,2 ± 1,3 G18 6 8,0 ± 0,7 G19 6 6,6 ± 0,5 G20 7 7,2 ± 0,4 Keterangan: HSI=hari setelah inokulasi Tabel 5. Kejadian penyakit mosaik pada galur melon Genotip Kejadian Penyakit (HIS) (%) 7 14 21 28 G7 4,3 17,4 17,4 17,4 G8 0,0 8,3 8,3 8,3 G15 4,2 16,7 16,7 16,7 G16 11,1 11,1 11,1 11,1 G17 6,7 6,7 6,7 6,7 G18 5,9 11,8 11,8 11,8 G19 4,3 17,4 17,4 17,4 G20 7,1 14,3 14,3 14,3
Tabel 6. Nilai AUDPC dan indeks ketahanan tanaman Genotip AUDPC Laju Perkembangan Penyakit (r) G7 2,80 0,064 G8 1,40 0,048 G15 3,43 0,074 G16 1,12 0,026 G17 1,26 0,028 G18 1,54 0,038 G19 2,59 0,056 G20 1,61 0,044
Keterangan:  Semakin  besar  nilai  AUDPC  dapat  dideskripsikan  nilai  total  perkembangan  penyakit  semakin  tinggi.  Semakin  besar  nilai  r perkembangan penyakit semakin cepat dan r kecil berarti mampu menahan perkembangan penyakit.
Gambar 2. Grafik perkembangan keparahan penyakit melon yang diinfeksi oleh CMV.
a                                            b                                               c                                                 d
Gambar 3. Variasi gejala infeksi CMV pada galur melon (a= mosaik hijau muda; b=mosaik hijau kekuningan; c=mosaik disertai klorosis; d=malformasi). 0% 5% 10% 15% 20% 25% 30% 7 14 21 28 K epa ra h an pe n y aki t Pengamatan ke- (hari setelah inokulasi) G7 G8 G15
G16
G17
G18 G19 G20
Tabel 7. Perbandingan ketahanan tanaman* Genotipe G7 G8 G15 G16 G17 G18 G19 G20 G7 2,00 0,82 2,50 2,22 1,82 1,08 1,74 G8 0,41 1,25 1,11 0,91 0,54 0,87 G15 3,06 2,72 2,23 1,32 2,13 G16 0,89 0,73 0,43 0,70 G17 0,82 0,49 0,78 G18 0,59 0,96 G19 1,61

## G20
Keterangan:  *Nilai perbandingan diperoleh dari perbandingan nilai AUDPC genotip pada baris dibandingkan  dengan  genotip pada kolom, nilai perbandingan >1 dari satu menunjukkan genotip lebih tahan dari genotip pembanding.

## Tingkat Ketahanan
Hasil tingkat ketahanan pada galur melon paling tahan terhadap  virus  pada  galur  G16  dengan  AUDPC  1,12  laju perkembangan  penyakit  0,026  dan  galur  melon  yang  rentan terhadap  virus  pada  galur  G15  dengan  AUDPC  3,43  laju perkembangan penyakit 0,074.
Perbandingan ketahanan tanaman antar galur menunjukkan  bahwa  G7  lebih  tahan  terhadap  serangan penyakit daripada G8, G16, G17, G18,G19, dan G20. Galur G7  lebih  rentan  terhadap  penyakit  daripada  G15. Perbandingan antara galur G8 lebih rentan terhadap serangan penyakit daripada G15, G18, G19, dan G20. Galur G8 lebih tahan terhadap penyakit daripada G16 dan G17. Perbandingan antara  G15  lebih  tahan  terhadap  penyakit  padripada  G16, G17,  G18,  G19  dan  G20.  Perbandingan  G16  lebih  rentan penyakit daripada G17, G18, G19 dan G20 (tabel 4).
Varietas  tanaman  mampu  memiliki  ketahanan terhadap  serangan  virus  dapat  dipengaruhi  oleh  masing- masing  sifat  dari  varietasnya,  lingkungan  dan  kemampuan virus tersebut untuk menginfeksi tanaman itu. Tanaman yang mampu  menghambat  aktivitas  virus  dalam  sel  tubuh tumbuhan tersebut, maka tanaman tersebut dapat dikategorikan  sebagai  tanaman  yang  tahan  terhadap  virus. Ketahanan  suatu  tanaman  terhadap  pathogen  dapat dikendalikan  oleh  gen  mayor  ketahanan  vertikal  dan ketahanan horizontal (Diyansah, 2012).

## KESIMPULAN
Hasil  konfirmasi  menunjukkan  sampel  positif terinfeksi  CMV.  Berdasarkan  hasil  pengujian  secara  umum galur G16  memiliki tingkat ketahanan terbaik dibandingkan galur  lain  dan  galur  pembanding.  Selain  itu,  galur  G8  juga cukup tahan dibandingkan galur pembanding. galur G16 dan galur  G8  berpotensi  digunakan  sebagai  tetua  yang  tahan CMV. Hal ini ditunjukkan oleh rendahnya laju perkembangan penyakit dan nilai AUDP pada galur uji.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  penulis  sampaikan  kepada Lembaga  Penelitian  dan  Pengabdian  Kepada  Masyarakat Universitas  Trunojoyo  Madura  yang  telah  membiayai sebagian  penelitian  ini  melalui  hibah  penelitian  pemula  dan program MBKM Penelitian tahun 2021.

## DAFTAR PUSTAKA
Akhtar,  K.  P.,  Saleem,  M.  Y.,  Asghar,  M.,  Ahmad,  M.,  & Sarwar,  N.  (2010).  Resistance  of  Solanum  species  to Cucumber  mosaic  virus  subgroup  IA  and  its  vector Myzus persicae. European Journal of Plant Pathology , 128 (4),  435–450.  https://doi.org/10.1007/s10658-010- 9670-5
Amrullah,  A.  R.  (2018). Evaluasi  Interaksi  Genotip XLingkungan  Karakter  Agronomi  dan  Hail  Beberapa Calon Varietas Jagung Hibrida .
Control,  Q.,  Contents,  K.,  &  Information,  O.  (1979). Total RNA Mini Kit ( Plant ) . 1 , 1–2.
Diyansah,  B.  (2012).  Ketahanan  lima  varietas  semangka (Citrullus vulgaris Schard) terhadap infeksi (Cucumber Mosaic Virus). In Skripsi Universitas Brawijaya (Issue December 2012).
Gaswanto, R., & Gunaeni, N. (2021). A promising breeding strategy  for  tomato  resistance  to  Cucumber  Mosaic Virus  based  on  genetic  analysis. E3S  Web  of Conferences , 306 . Hermawan,  E.,  &  Efendi,  D.  (2014). Analisis  Genetik  Sifat Ketahanan Melon ( Cucumis melo L .) terhadap Virus Kuning  Genetic  Analysis  on  Resistance  of  Melon  ( Cucumis melo L . ) to Yellow Virus . 42 (2), 142–149. Huda, A. N., & Suwarno, W. B. (2017). Keragaman Genetik Karakteristik  Buah  antar  17  Genotipe  Melon  ( Cucucmis melo L .) . 8 (April), 1–12.
Khuluq, M., Phaliola., T. agung, & Wijaya,  i nyoman. (2020). Penularan  Virus  Bergejala  Mosaik  Pada  Tanaman Melon ( Cucumis melo L .) Secara Mekanis dan Melalui Vektor . 9 (1), 76–86.
Khumaero.Wida. W., Darda., E., B., S. W., & Sobir. (2014). Evaluasi  Karakteristik  Hortikultura  Empat  Genotipe Melon ( Cucumis melo L .) Pusat Kajian Hortikultura Tropika IPB . 5 (April), 56–63.
Laili, N. U., & Damayanti, T. A. (2019). Deteksi virus pada tanaman  mentimun  di  Jawa  Barat. Agrovigor:  Jurnal Agroekoteknologi , 12 (1), 8–15. Mytaq, D. T., Rt, S., Kit, P. C. R., & One, M. (n.d.). MyTaq TM One - Step RT - PCR Kit . 61 (0), 1–4.
Neni, G. (2011). Penekanan vektor dan virus mosaik komplek dengan  cara  pengendalian  dan  penggunaan  mulsa pada tanaman mentimun ( . 15 (2), 115–126. Nurholis, Sinaga, M., & Tondok, E. (2015). Metode Deteksi
Cendawan  Penyebab  Infeksi  Laten  pada  Buah  Jeruk Impor ( Detection Methods of Fungal Latent Infection on Imported Citrus Fruits ) . 03 , 357–366.
Welkie, G. W., & Pound, G. S. (1958). Temperature influence on  the  rate  of  passage  of  cucumber  mosaic  virus through the epidermis of cowpea leaves. Virology , 5 (2),
362–370.  https://doi.org/https://doi.org/10.1016/0042- 6822(58)90028-X Wijaya, I. N. (2007). Penularan Penyakit CVPD ( Citrus Vein Phloem  Degeneration  )  oleh  Diaphorina  citri Kuwayama  (  Homoptera :  Psyllidae  )  pada  Tanaman Jeruk Siam . 26 (4).