## UJI DAYA HAMBAT EKSTRAK RIMPANG LENGKUAS PUTIH
( Alpinia galanga L. Swartz) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI
Klebsiella pneumonia e ISOLAT SPUTUM PADA PENDERITA

## PNEUMONIA RESISTEN ANTIBIOTIK SEFTRIAKSON
Puput Herawati Said Hasan 1) , Fatimawali 1) , Widdhi Bodhi 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
White  galangal  rhizome  (Alpinia  galanga  L.  Swartz)  is  one  of  the  plants  which  has  the antibacterial properties from the zingiberaceae family. Empirically it can treat various diseases such as  chest  pain,  throat  inflammation,  stomach  inflammation,  rheumatism,  diabetes  and  skin  diseases. White  galangal  rhizome  contains  flavonoids,  tannins,  quinones  and  terpenoids.  This  study  aims  to determine the antibacterial activity of white galangal rhizome extract (Alpinia galanga L. Swartz) and test  its  inhibition  against  the  growth  of  Klebsiella  pneumoniae  bacteria  which  are  resistant  to ceftriaxone antibiotics. The white galangal rhizome was extracted by maceration method using 96% ethanol  solvent  and  antibacterial  activity  was  tested  using  the  disc  and  well  method  with  a concentration  difference  of  100%,  75%,  50%,  25%  and  12.5%.  The  results  showed  that  white galangal rhizome extract (Alpinia galanga L. Swartz) had antibacterial activity against the bacterium Klebsiella pneumoniae and could inhibit the growth of Klebsiella pneumoniae bacteria. On the disc method for concentrations of 100%, 75%, 50%, 25%  and 12.5%, the inhibitors were categorized as medium.  Whereas  in  the  well  method  for  concentrations  of  100%  and  75%,  the  inhibitors  were categorized as strong, for concentrations of 50%, 25%, and 12.5%, which have a medium category.
Keywords : White Galangal Rhizome (Alpinia galanga L. Swartz), Klebsiella pneumoniae

## ABSTRAK
Rimpang  Lengkuas  putih  ( Alpinia  galanga L.  Swartz ) merupakan  salah  satu  tanaman  yang memiliki  khasiat  sebagai  antibakteri  dari  family  zingiberaceae.  Secara  empiris  dapat  mengobati berbagai  penyakit  seperti  nyeri  dada,  radang  tenggorokkan,  radang  lambung,  rematik,  diabetes  dan penyakit  kulit.  Rimpang  Lengkuas  putih  mengandung  senyawa  flavonoid,  tanin,  kuinon  dan terpenoid.  Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui aktivitas  antibakteri  ekstrak  rimpang  Lengkuas putih  ( Alpinia  galanga L.  Swartz ) dan  menguji  daya  hambatnya  terhadap  pertumbuhan  bakteri klebsiella  pneumonia e  yang  resisten  terhadap  antibiotik  seftriakson.  Rimpang  Lengkuas  putih diekstraksi  dengan  metode  maserasi  menggunakan  pelarut  etanol  96%  dan  dilakukan  pengujian aktivitas antibakteri dengan menggunakan metode cakram dan sumuran dengan perbedaan konsentrasi 100%, 75%, 50%, 25% dan 12,5%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak rimpang Lengkuas putih  ( Alpinia  galanga L.  Swartz)    memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri Klebsiella pneumoniae dan  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Klebsiella  pneumoniae .  Pada  metode cakram  untuk  konsentrasi  100%,  75%,  50%,  25%  dan  12,5%  memiliki  daya  hambat  yang dikategorikan sedang. Sedangkan pada metode sumuran untuk konsentrasi 100% dan 75%  memiliki daya hambat yang dikategorikan kuat, untuk kosentrasi 50%, 25%, dan 12,5% memiliki daya hambat yang dikategorikan sedang.
Kata Kunci : Rimpang lengkuas putih (Alpinia galanga L. Swartz), Klebsiella pneumoniae

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  negara  yang terkenal  akan  keanekaragamannya,  salah satu keanekaragaman hayati (megabiodiversity)  khususnya  tumbuhan yaitu  Lengkuas  putih  ( Alpina  galanga L. Swartz ). Lengkuas  putih  ( Alpinia  galanga L.  Swartz ) merupakan  tanaman  obat tradisional  yang  sudah  digunakan  secara turun  temurun  dan  khasiatnya  sudah terbukti  secara  empiris  dapat  mengobati berbagai  penyakit  seperti  nyeri  dada, radang  tenggorokan,  pelega  tenggorokan, radang lambung, rematik, diabetes, tuberculosis,  penyakit  ginjal,  liver,  obat kuat dan penyakit kulit seperti panu, kurap, eksim,  jerawat,  koreng  dan  bisul  (Sinaga, 2005).  Rimpang  Lengkuas  putih (Alpina galanga L. Swartz ) memiliki  khasiat  yang sudah  dibuktikan  secara  ilmiah  sebagai antibakteri, antijamur, antikanker, antitumor,  antioksidan  dan  sitotoksik (Hernani  dkk.,2007).  Rimpang  Lengkuas putih  mengandung  kurang  lebih  1% minyak  atsiri  berwarna  kuning  kehijauan. Selain itu rimpang Lengkuas juga mengandung  resin  yang  disebut  galangol, kristal  berwarna  kuning  yang  disebut kaemferid, galangin, kadinen, heksabidrokadalen  hidrat,  kuersetin  dan amilum  (sinaga,  2005).  Hasil  penapisan fitokimia  menujukkan  bahwa    ekstrak  etil asetat dan ekstrak etanol rimpang Lengkuas  putih  mengandung  flavonoid, tanin,  kuinon  dan  steroid  atau  terpenoid. Rimpang Lengkuas putih memiliki kandungan senyawa flavonoid yang diduga dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri yang  telah  resisten  terhadap  antibiotik (Kusriani dan shofia, 2015).
Pneumonia adalah peradangan parenkim paru dimana asinus terisi dengan cairan  dan  sel  radang,  dengan  atau  tanpa disertai  infiltrasi  sel  radang  ke  dalam dinding  alveoli  dan  rongga  interstisium (Mukty  dan  Alsagaff,  2010).  Penyakit  ini sering  menyerang  anak  balita,  namun dapat  juga  ditemukan  pada  orang  dewasa. Proses  infeksi  pneumonia  adalah  infeksi akut  yang  mengenai  jaringan  paru-paru (alveoli). Gejala pneumonia pada umumnya antara lain demam, sesak napas, napas  dan  nadi  berdenyut  lebih  cepat, dahak  berwarna  kehijauan  atau  seperti karet. Salah satu baktri penyebab pneumonia yaitu Klebsiella  pneumoniae ( Misnadiarly, 2008).
Terapi pengobatan pneumonia yang disebabkan oleh bakteri Klebsiella pneumoniae dapat menggunakan antibiotik sefalosporin (cefixime, seftriakson),
penisilin (ampisilin) dan kuinolon (Ciprofloxacin). Tetapi tingginya penggunaan  antibiotik  yang  tidak  tepat dikalangan masyarakat saat ini menyebabkan  tejadinya  masalah  resistensi antibiotik.  Menurut  penelitian  Harum (2018)  bakteri klebsiella  pneumoniae merupakan  bakteri  penyebab  penyakit pneumonia yang resisten terhadap antibiotik seftriakson. Permasalahan resistensi  terjadi  ketika  bakteri  berubah yang  menyebabkan  hilangnya  efekvifitas obat  atau  senyawa  kimia  yang  digunakan untuk mengobati infeksi. Berdasarkan hal- hal  diatas  mendorong  penulis  untuk melakukan  penelitian  tentang  Uji  Daya Hambat  Ekstrak  Rimpang  Lengkuas  Putih ( Alpinia  galanga L.  Swartz ) Terhadap Pertumbuhan Bakteri
Klebsiella Pneumoniae Isolat Sputum Pada Penderita
Penyakit  Pneumonia Resisten  Antibiotik

## Seftriakson.

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan  Juni  sampai  September  2018  di Laboratorium Mikrobiologi, Program studi Farmasi  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan  Alam, Universitas  Sam Ratulangi Manado.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini yaitu  gelas  ukur  ( Pyrex ),  Erlenmeyer ( Pyrex ),  tabung  reaksi  ( Pyrex ),  corong, ayakan mesh 200,  pisau,  timbangan analitik  (aeADAM ® ),    blender  ( Philips ), sudip,  beker  gelas  ( Pyrex )),  cawan  petri ( Pyrex ), autoklaf (ALP), Laminar  Air Flow (N-Bioteck), incubator (MMM Group), Ose, pingset,  L  glass, pipet mikro (ecopippette™), mistar berskala (Combo ®) aluminium  foil ,  kertas  saring,  kertas  lebel dan spritus.
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  meliputi  rimpang  Lengkuas  putih ( Alpinia galanga L.Swartz), bakteri
Klebsiella
pneumoniae , antibiotik ciprofloxacin, aquadest, etanol 96%, H 2 SO 4  1% ,  BaCl 2 .2H 2 O  1,175%,  NaCl 0,9%, media Nutrient Agar, kertas cakram,
Larutan standar Mc. Farland , 0,5.

## Prosedur Kerja
Pengambilan Sampel
Sampel  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  ialah  rimpang  Lengkuas putih  ( Alpina  galanga L.  Swartz ) yang diambil  dari  daerah  puncak  Rurukan kecamatan  Tomohon  Timur,    Kabupaten Minahasa  Selatan,  Provinsi  Sulawesi Utara.    Sampel  yang  diambil  yaitu  bagian rimpang tanaman Lengkuas putih.

## Preparasi Sampel
Pada  tahap  awal  sampel  rimpang Lengkuas  putih  ditimbang  dengan  berat 1,5 kg. Kemudian dicuci dibawah air yang mengalir,  ditiriskan  dan  dirajang  kecil- kecil.  Setelah  itu  dikeringkan  (diangin- anginkan)  selama  7  hari  kemudian dihaluskan sampai menjadi serbuk simplisia yang halus dan diayak menggunakan  ayakan mesh 200,  hingga diperoleh serbuk yang halus dan homogen. Serbuk  halus  tanaman  Lengkuas  putih diperoleh 150 gram.

## Pembuatan Ekstrak
Metode  yang  digunakan  untuk mengekstrak  rimpang  Lengkuas  putih ( Alpina  galanga L.  Swartz ), yaitu  dengan menggunakan  metode  maserasi.  Sebanyak 150  gram  serbuk  simplisia  dimasukkan kedalam  wadah  yang  tertutup  rapat kemudian  diekstraksi  dengan  750  mL etanol 96% pada suhu kamar selama 5 hari sambil  sesekali  diaduk.  Setelah  5  hari sampel  disaring  dengan  menggunakan kertas saring menghasilkan filtrat satu, sisa sampel  diremaserasi  dengan  450  mL pelarut  etanol  96%  selama  2  hari  sambil sesekali  diaduk  kemudian  disaring  dengan kertas  saring  menghasilkan  filtrat  dua. filtrat satu dan filtrat dua dikumpulkan dan diuapkan dengan waterbath selama 24 jam pada  suhu  40 0 C,  sehingga  diperoleh ekstrak kental Lengkuas putih.

## Sterilisasi Alat
Sterilisasi  alat  dilakukan  sebelum peralatan  digunakan,  yaitu  peralatan  yang akan  digunakan  dicuci  terlebih  dahulu hingga bersih, kemudian dibungkus dengan aluminium foil setelah itu dimasukkan  ke  dalam    autoklaf  untuk
sterilisasi  pada  suhu  121 0 C  selam  15 menit.
Pembuatan  Media  Dasar  dan  Media Pembenihan
Media Nutrient  Agar ( NA ) dibuat dengan  cara    menimbang  bubuk nutrient agar sebanyak  5,6  gram  kemudian dimasukkan  kedalam  erlenmeyer,  lalu dilarutkan  dalam  200  mL  aquades  dan diaduk sampai homogen. Kemudian ditutup  dengan aluminum  foil .  Setelah  itu media  disterilkan  dengan  autoklaf  selama 15  menit  dalam  suhu  121 0 C.  Kemudian didinginkan  sampai  suhu  ±  45-50 0 C.
Media  dasar  dan  media  pembenihan digunakan dalam pembuatan media pengujian  sebagai  lapisan  dasar  dan lapisan kedua.
Regenerasi Bakteri Uji
Bakteri Klebsiella pneumoniae
yang  akan  di  ujikan  terlebih  dahulu  harus diregenerasikan. Hal pertama yang dilakukan  yaitu  membuat  media  miring nutrient agar (NA). Media (NA) dituangkan kedalam tabung reaksi, kemudian  diletakkan  pada  posisi  miring dan  didiamkan  hingga  agar  memadat. Selanjutnya  bakteri  uji  diambil  dengan jarum  ose  steril  lalu  ditanamkan  pada media agar miring  dengan cara digoreskan biakan dari stok bakteri ke permukaan agar dan  diinkubasi  pada  suhu  37 0 C  selama  24 jam.
Pembuatan  Larutan Mc.  Farland 0,5 (Standar Kekeruhan)
Larutan  H 2 SO 4 1%  sebanyak  9,95
mL dicampurkan dengan larutan BaCl 2 .2H 2 O  1,175%  sebanyak  0,05  mL dalam  erlenmeyer.  Kemudian  dikocok sampai  terbentuk  larutan  yang  keruh. Kekeruhan  ini  dipakai  sebagai  standar kekeruhan suspensi bakteri uji (Borges dan Bresson, 2004).

## Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Bakteri uji pada media agar miring diambil  dengan  jarum  ose  steril  lalu disuspensikan  dengan  cara  dimasukkan  ke dalam  tabung  yang  berisi  5  mL  larutan NaCl steril 0,9%. Suspensi yang terbentuk disetarakan  kekeruhannya  dengan  larutan Mc. Farland 0,5.

## Larutan Stok
Dibuat  larutan  stok  10  g  /  10  mL. Dari larutan stok ini akan dibuat larutan uji dengan  seri  konsentrasi  75%,  50%,  25% dan  12,5%  .  Seri  konsentrasi  ini  dibuat dengan  cara  pengenceran  menggunakan rumus :

## Larutan Kontrol Positif
Larutan  kontrol  positif  dibuat  dari sediaan  obat  tablet  ciprofloxacin  500  mg, dengan  cara  satu  tablet  ciprofloxacin digerus. Setelah itu ditimbang sebanyak 50 mg  dan  dilarutkan  dalam  50  mL  aquades. Selanjutnya  dibuat  dengan  cara  diambil  1 mL  larutan  dan  ditambahkan  aquades hingga  10  mL  untuk  memperoleh  larutan ciprofloxacin 5µg/50µl.

## Uji Aktivitas
a. Metode Cakram
Pada pengujian aktivitas antibakteri dengan  menggunakan  metode  cakram, yaitu Sebanyak 30 mL media nutrient agar (NA) dituangkan  kedalam  masing-masing 3  cawan  petri  dan  didinginkan  hingga menjadi  padat  dalam  cawan  petri  steril. Kemudian  dimasukkan  1  mL  suspensi bakteri klebsiella  pneumoniae lalu  disebar biakan  bakteri  menggunakan  L  glass  agar suspensi  tersebar  merata  pada  media  lalu didiamkan  suspensi  tersebut  selama  10
M 1 x V 1 = M 2 x V 2
menit  agar  suspensi  terserap  pada  media. Setelah itu kertas cakram yang mengandung ciprofloxacin (Kontrol positif),  kertas  cakram  yang  direndam dalam  aquades  (Kontrol  negatif),  kertas cakram  yang  direndam  dalam  larutan  uji kosentrasi  100%,  75%,  50%,  25%  dan 12,5%  diletakkan  pada  cawan  petri menggunkan  pinset  steril.  Selanjutnya semua media diinkubasi kedalam inkubator  selama  24  jam  pada  suhu  37 0 C lalu  diameter  zona  bening  yang  terbentuk diukur dengan penggaris millimeter.

## b. Metode Sumuran
Pada pengujian aktivitas antibakteri dengan  menggunakan  metode  sumuran dengan 2 lapisan media nutrient agar yaitu lapisan  dasar  dibuat  dengan  menuangkan masing-masing 15 mL media nutrient agar ke masing-masing 3 cawan petri kemudian dibiarkan  memadat.  Setelah  memadat, permukaan  lapisan  dasar  ditanam  7 pencadang  baja  yang  diatur  jaraknya  agar daerah pengamatan tidak bertumpu.
Selanjutnya  suspensi  bakteri  dicampurkan kedalam  media nutrient  agar kemudian dituangkan  15  mL  media nutrient  agar pada  tiap  cawan  petri  yang  diletakkan pencadang  sebagai  lapisan  kedua.  Setelah lapisan kedua memadat, pencadang diangkat  secara  aseptik  dari  masing- masing  cawan  petri  menggunakan  pingset steril.  Sehingga  terbentuk  sumur-sumur lalu  pada  masing-masing  lubang  sumuran diisi  dengan  larutan  uji,  larutan  kontrol positif  dan  kontrol  negatif  masing-masing 50 µl. Selanjutnya semua media diinkubasi kedalam  inkubator  selama  24  jam  pada suhu 37 0 C.
Pengukuran Zona Hambat
Pengamatan  dilakukan  setelah  24 jam  masa  inkubasi  yaitu  diamati  zona bening  yang  terbentuk  disekitar  kertas cakram  dan lubang sumuran, dimana zona bening  (clear  zone)  merupakan  petunjuk adanya respon penghambatan pertumbuhan  bakteri  oleh  suatu  senyawa antibakteri  dalam  ekstrak  (Hermawan dkk,2007).  Lalu  diameter  zona  bening yang terbentuk diukur dengan menggunakan penggaris millimeter kemudian  dikategorikaan  kekuatan  daya antibakterinya  berdasarkan  penggolongan Davis dan Stout (1971).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Identifikasi Sampel
Identifikasi sampel rimpang Lengkuas putih ( Alpina galanga L. Swartz ) dilakukan  di  Laboratorium  Taksonomi Tumbuhan  Program  Studi  Biologi  FMIPA UNSRAT  Manado.  Tujuan  dilakukan identifikasi sampel adalah untuk membuktikan  kebenaran  sampel  rimpang Lengkuas putih (Lampiran 1).

## Hasil Ekstraksi
Sampel  basah  rimpang  Lengkuas putih  diperoleh  1,5  kg,  dikeringkan  dan dihaluskan  menghasilkan  serbuk  simplisia sebanyak 150 gram, selanjutnya diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan  pelarut  etanol  96%  dan diperoleh  filtrat  sebanyak  1050  mL, kemudian  diuapkan  dengan waterbath pada suhu 40 0 C sehingga diperoleh ekstrak kental sebanyak 10 gram. Hasil perhitungan  randemen  ekstrak  rimpang Lengkuas  putih  diperoleh  hasil  randemen sampel  sebesar  10%,  randemen  ekstrak sebesar 0,95% dan randemen total  sebesar 6,7%.
Uji Aktivitas
a. Metode Cakram
Tabel 1. Hasil Pengukuran Diameter Zona Hambat menggunakan Metode Cakram
Perlakuan Diameter Zona Hambat (mm) Rata-rata UI UII UIII Kontrol (- ) 0 0 0
0 Kontrol (+) 18,5 20 20 18,83 100% 8,5 8,25 9 8,58 75% 8 7,25 8 7,25 50% 7 9,25 9 8,41 25% 6,5 8 10 8,16 12,5% 7,25 8 8 7,75

## b. Metode Sumuran
Tabel 2. Hasil Pengukuran Diameter Zona Hambat menggunakan Metode Sumuran Perlakuan Diameter Zona Hambat (mm) Rata-rata UI UII UIII Kontrol (-) 0 0 0 0 Kontrol (+) 20,5 24,5 24,5 23,16 100% 18 18 21,5 19,16 75% 16,5 11 23,5 17 50% 9 9 9.5 9,16 25% 9 8,25 9,5 8,91 12,5% 8,5 9 8,5 8,66

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa
1. Ekstrak  rimpang  Lengkuas  putih (Alpinia  galanga L.  Swartz ) memiliki aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri Klebsiella  pneumoniae dan  dapat menghambat pertumbuhan bakteri
Klebsiella pneumonia e  yang  resisten terhadap antibiotik seftriakson
2. Pada metode cakram untuk konsentrasi  100%,  75%,  50%,  25% dan  12,5%    memiliki  daya  hambat yang
dikategorikan sedang. Sedangkan  pada  metode  sumuran untuk  konsentrasi  100%  dan  75% memiliki daya hambat yang dikategorikan kuat dan untuk kosentrasi  50%,  25%,  dan  12,5%
memiliki daya hambat yang dikategorikan sedang.

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut tentang  potensi  antibakteri  dari  zat  aktif yang  terdapat  dalam  ekstrak  tanaman Lengkuas  putih  ( Alpinia  galanga L. Swartz ).

## DAFTAR PUSTAKA
Ansel,  H.  C.,  2005, Pengantar  Bentuk Sediaan  Farmasi, diterjemahkan oleh  Ibrahim,  F.,  Edisi  IV,  605- 619, Jakarta, UI Press.
Anonim, 1993, Dasar-Dasar Pemeriksaan
Mikrobiologi, Bagian Mikrobiologi,  Fakultas  Kedokteran Universitas Gajah Mada, Yogyakarta. Backer,  C.  A.  &  van  den  Brink,  R.  C.  B., 1965, Flora of Java: Apermatophytes only Voloume  I, N.  V.  P.  Noodhoft-
Groningen-The Netherlands , 116.
Borges,  M.,  2004.  Plant  Products  as
Antimicrobial Agents.
Clinical
Microbiology Review, 12 (4). 564- 582)Maize. Biocontrol .  49:  315- 322.
Cowan,  M.,  T.,  and  Bresson,  W.  2004.
Delivery  Methods  for  Introducing Endophitic  Bacteria  into  Maize.
Biocontrol . 49: 315-322. Departemen Kesehatan Republik Indonesia (1995). Farmakope Indonesia .Edisi IV. Jakarta :
Depkes RI
Depkes RI, 1978. Materia Medika Jilid II. Jakarta :  Departemen  Kesehatan Republik Indonesia.
Depkes RI, 1987. AnalisiS Obat Tradisional. Jilid I, Jakarta.
Ditjen  POM  Depkes  RI,  2000. Parameter Standart Umum Ekstrak Tumbuhan
Obat .  Jakarta,  3-6,  11-13,  17,  31-
33. Dzen, Sjoekoer. M, dkk. 2003. Bakteriologik Medik . Malang: Bayumedia.
Davis,  Stout.  1971. Disc  Plate  Method  Of Microbiological  Antibiotic  Essay. Journal  Of  Microbiology.  Vol  22
No 4.
Dwijendra, I. M. 2014. Aktivitas Antimikroba  dan  Karakterisasi Senyawa Fraksi Spos Lamellodysidea  herbacea  yang Diperoleh  dari  Teluk  Manado. Skripsi .  Program  Studi  Farmasi
FMIPA Universitas Sam
Ratulangi, Manado.
Eko  Prayoga,  2013. Perbandingan  Efek Ekstrak  Daun  Sirih  Hijau  (Piper betle  L.)  dengan  Metode  Difusi Disk  dan  Sumuran  Terhadap
Pertumbuhan Bakteri Staphylococus  aureus.  Skripsi . Fakultas  Kedokteran  dan  Ilmu Kesehatan: Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta. Gillespie,  Stephen  H.,  Bamford,  Kathleen B.,  2009, At  Glance  Mikrobiologi Medis dan Infeksi, 18-19, Erlangga,  Jakarta. Essay. Journal Of Microbiology. Vol 22 No 4.
Gandjar, I.G.,  Abdul,  2008. Kimia Farmasi Analisis. Pustaka Pelajar, Yogyakarta.
Harmita,  Radja  M.  2008. Buku  ajar analisis  hayati .  Jakarta:  EGC; 2008. h. 12-3.
Hernani  TM  dan  Christina  W.  2007.
Pemilihan Pelarut pada Pemurnian Ekstrak Lengkuas (Alpinia
Galanga) secara Ekstraksi  . Jurnal
Pascapanen. 4(1):    1-8.
Harum  Latuharhary,  2018. Isolasi  dan
Identifikasi  Biomolekuler  Bakteri Penyebab Penyakit Pneumonia yang  Resisten  Terhadap  Antibiotik Seftriakson  DI  RSUP.  DR.  R.  D. KANDOU. Skripsi. Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam:  Universitas  Samratulangi Manado.
Harjadi,  W.  1993. Ilmu  Kimia  Analitik
Dasar. Jakarta: Penerbi PT.
Gramedia Pustaka Utama.
Hermawan, A., Hana, W., dan Wiwiek, T. 2007.  Pengaruh  Ekstrak  Daun  Sirih (Piper betle L.) Terhadap
Pertumbuhan Staphylococus  aureus
dan Escherichia coli dengan Metode
Difusi Disk. Universitas Erlangga.
Jawetz,  E.,  Melnick,  J.,  dan  Adelberg,  E.,
2005, Mikrobiologi  Kedokteran ,
362, Salemba Medika, Jakarta.
Kusriani, R.H.,dan Shofia Az Zahra, 2015,
Skrinning Fitokimia dan Penetapan Kadar Senyawa Fenolik  Total  Ekstrak  Rimpang Lengkuas  Merah  dan  Rimpang
Lengkuas  Putih  ( Alpinia  galangal L.),  Prosiding  Seminar  Nasional Penelitian  dan PKM Kesehatan ,
Vol. 1, N0. 1, Hal. 295-302.
Misnadiraly, 2008. Penyakit Infeksi
Saluran  Nafas  Pneumonia  Pada Anak,  Orang  Dewasa  dan  Usia Lanjut. Pustaka Obor Populer.
Jakarta.
Mukty  Abdul,  H.,  Alsagaff  Hood,  2010.
Dasar  —  dasar  Ilmu  Penyakit Paru , Surabaya : Erlangga.
Sarro,  A.D.,  G.D.  Sarro.  2001.  Adverse Reactions  to  Fluoroquinolones.  An Overview  on  Mechanism  Aspect.
Current  Medicinal  Chemistry .  8
:371- 384.
Suharsaputra, U. Penyebab Penyakit
Pneumonia. www.google.co.id .
Diakses pada tanggal 3 maret 2013. Suryanto,  E.  2012. Fitokimia  Antioksidan . Putra Media Nusantara, Surabaya.