PENGGUNAAN PUPUK ORGANIK CAIR HASIL FERMENTASI DARI Azolla pinnata TERHADAP KEPADATAN SEL Spirulina sp
Organic Liquid Fertilizer Use of Azolla pinnata Fermentation Results With Different Doses of Cell Density Spirulina sp
Anggra Wibowo Leksono 1 , Dian Mutiara 2 dan Indah Anggraini Yusanti 2
1) Alumni Fakultas Perikanan Universitas PGRI Palembang
2) Staf Pengajar – Fakultas MIPA Universitas PGRI Palembang
3) Staf Pengajar – Fakultas Perikanan Universitas PGRI Palembang

## Abstrak
Kultur Spirulina sp biasanya menggunakan pupuk komersil sehingga diperlukan adanya pengganti pupuk komersil  yaitu  dengan  penggunaan  pupuk  organik  cair  dari Azolla  pinnata untuk  meningkatkan  hasil produksi  dan  menjamin  ketersediaan  pakan  alami  secara  kontinyu.  Tujuan  dari  penelitian  ini  untuk mengetahui dosis pupuk organik cair  hasil  fermentasi dari Azolla pinnata yang terbaik  untuk  kepadatan sel Spirulina sp,  dan  mengetahui  kepadatan  sel  serta  mengetahui  laju  pertumbuhan  harian Spirulina sp. Penelitian  dilaksanakan  di  Balai  Besar  Pengembangan  Budidaya  Air  Laut  (BBPBL)  Lampung  mulai tanggal  13  Januari  sampai  13  februari  2017.  Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu Rancangan  Acak  Lengkap (RAL), dengan 4 perlakuan dan 3 ulangan. Perlakuan dengan pupuk organik cair hasil fermentasi dari azolla pinnata dengan dosis yang berbeda, perlakuan P1 (12 ml/l), perlakuan P2 (14  ml/l),  perlakuan  P3  (16  ml/l)  dan  perlakuan  P4  (18  ml/l).    Hasil  ansira  kepadatan  sel Spirulina sp menunjukan  berbeda  sangat  nyata.  Kepadatan  Sel Spirulina sp  yang  tertinggi  yaitu  pada  perlakuan  P4 (520x10 4 sel/ml), perlakuan C (474x10 4 sel/ml), perlakuan B (435x10 4 sel/ml) dan P1  (396x10 4 sel/ml). Hasil  ansira  laju  pertumbuhan  harian Spirulina sp  menunjukan  berbeda  tidak  nyata.  perlakuan  P1  (0,39 sel/ml/hari),  perlakuan  P2  (0,40  sel/ml/hari),  perlakuan  P3  (0,41  sel/ml/hari),  dan  perlakuan  P4  (0,42 sel/ml/hari). Hasil  pengamatan  kualitas  air  selama  penelitian  yaitu  :  pH  7,44-7,78,  Suhu  25,77-30,25°C, DO 5,45-6,71 mg/l, Salinitas 25-29 mg/l, dan Amonia 0,066-0,256 mg/l.
Kata Kunci : Spirulina sp, Azolla pinnata , kepadatan, dan pertumbuhan.

## Abstract
Spirulina sp culture usually uses commercial fertilizer so it needs commercial fertilizer replacement that is  by  using  liquid  organic  fertilizer  from Azolla  pinnata to  increase  production  yield  and  ensure continuous  availability  of  natural  feed.  The  purpose  of  this  research  is  to  know  the  dosage  of  liquid organic fertilizer from fermentation of Azolla pinnata which is best for Spirulina sp cell density, and to know cell density and to know the daily growth rate of Spirulina sp. The research was conducted at the Center of Sea Aquaculture Development (BBPBL) Lampung from January 13 to February 13, 2017. The method  used  in  this  research  is  Completely  Randomized  Design  (RAL),  with  4  treatments  and  3 replications.  Treatment  with  liquid  fermented  organic  fertilizer  from azolla  pinnata with  different  dose, P1 treatment (12 ml/l), P2 treatment (14 ml/l), P3 treatment (16 ml/l) and P4 treatment (18 ml/l) . Ansira result of Spirulina sp cell density showed very different. The highest Spirulina sp cell density was in P4 treatment  (520x104  cell/ml),  C  treatment  (474x104  cell/ml),  B  treatment  (435x104  cell/ml)  and  P1 (396x104  cell/ml).  The  result  of  ansira  daily  growth  rate  of Spirulina sp  showed  different  is  not  real. Treatment P1 (0.40 cells/ml/day), treatment P3 (0.41 cells/ml/day), and P4 treatment (0.42 cells/ml/day) day). Water quality observations during the study  were pH 7,44-7,78, temperature 25,77-30,25 ° C, DO 5,45-6,71 mg/l, salinity 25-29 mg/l, and ammonia 0.066-0.256 mg/l.
Keywords : Spirulina sp, Azolla pinnata , density, and growth.

## A. PENDAHULUAN
Spirulina sp  merupakan  jenis  alga  hijau biru berfilamen yang berpotensi untuk dikembangkan lebih luas di Indonesia. Spirulina sp  juga  dikenal  sebagai  pakan  alami untuk pembenihan larva udang dan ikan, karena memiliki    nutrisi  yang  tinggi.  Belay  (2008), menyatakan  bahwa  kandungan  protein  dari Spirulina sp  yaitu  40-60  %,  sedangkan lemaknya cukup rendah yaitu 1,5-12%, dan juga mengandung  vitamin  B1,  B3,  B6,  B12,  pro vitamin  A  dan  vitamin  E.  Mikroalga  sebagai pakan  alami  mempunyai  beberapa  keuntungan, diantaranya  mudah  dikultur,  ukuran  sesuai mulut  larva  udang  dan  ikan,  pergerakannya mampu memberikan rangsangan bagi pemangsa untuk  memakannya,  mampu  berkembang  biak dengan  cepat  dalam  waktu  relatif  singkat sehingga ketersediaannya dapat terjamin sepanjang  waktu,  dan  mikroalga Spirulina sp merupakan  pakan  alami  yang  kaya  protein. (Isnansetyo  dan  Kurniastuty,  1995).  Harrison and  Berges  (2005)  menyatakan  bahwa,  salah satu  cara  untuk  meningkatkan  pertumbuhan mikroalga adalah mengontrol kandungan nutrien  baik  unsur  hara  makro  maupun  mikro dan lingkungan budidaya.
Kultur Spirulina sp biasanya
menggunakan  pupuk  komersil  (Urea,  TSP  dan ZA).  Pada  pupuk  Urea  dan  ZA  terkandung nitrogen sedangkan pada pupuk TSP terkandung fosfat.  Bahan  tersebut  mudah  larut  dalam  air yang  dapat  digunakan  untuk  pertumbuhan spirulina sp.  Penggunaan  berlebih  pupuk anorganik  ini  menghasilkan  limbah  yang  dapat mencemari  dan  membahayakan  organisme diperairan,  oleh  karena  itu  perlu  solusi pemakaian  pupuk  organik  yang  memiliki  unsur hara  makro  dan  mikro  yang  tidak  berbahaya bagi  lingkungan  dengan  biaya  yang  relatif murah  dan  mudah  di  peroleh,  salah  satunya menggunakan media kultur pupuk organik yang berbahan baku tanaman air yaitu Azolla pinnata (Isnansetyo dan Kurniastuty 1995).
Pemanfaatan Azolla  pinnata sebagai pupuk  pada  kultur  mikroalga Chaetoceros sp telah  dicobakan  Indramarwan  (2012),  yang hasilnya  menunjukkan  pupuk  dari Azolla pinnata dapat  meningkatkan  pertumbuhan  sel mikroalga Chaetoceros sp pada kultur laboratorium.  Dewi  (2007)  menyatakan Azolla pinnata memiliki  berbagai  unsur  hara  antara lain  N  (1,96-5,30%),  P  (0,16-1,59%),  Si  (0,16- 3,35%), Ca (0,31-5,97%), Fe (0,04- 0,59%), Mg (0,22-0,66%),  Zn  (26-989  ppm),  Mn  (66–2944 ppm).  Dengan  adanya  kandungan  unsur  hara tersebut  dan  pentingnya  peranan Spirulina sp
sebagai  pakan  alami  bagi  larva  ikan  dan  udang sehingga  memacu  peneliti  untuk  melakukan penelitian  mengenai  penggunaan  dosis  pupuk organik cair hasil fermentasi dari Azolla pinnata yang  berbeda  terhadap  kepadatan  populasi Spirulina sp  pada  skala  laboraturium.  Adapun tujuan  dilakukannya  penelitian  ini  adalah sebagai  berikut  :  1).  Mengetahui  dosis  pupuk organik cair hasil fermentasi dari Azolla pinnata yang  terbaik  untuk  kepadatan  sel Spirulina sp, dan  2).  Mengetahui  kepadatan  sel  dan  laju pertumbuhan harian Spirulina sp yang di kultur dengan  menggunakan  pupuk  organik  cair  hasil fermentasi  dari  A zolla  pinnata dengan  dosis yang berbeda.

## B. METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  telah  dilaksanakan  selama 1  bulan  yaitu  pada  bulan  Januari  –  Februari 2017  yang  bertempat  di  Balai  Budidaya Pengembangan  Air  Laut  Lampung  (BBPBL), Provinsi Lampung.
a. Persiapan wadah dan peralatan
Pada  tahap  persiapan,  terlebih  dahulu dilakukan  pemasangan  lampu  TL  dan  sistem aerasi. Selanjutnya, alat-alat yang akan digunakan sebagai wadah kultur terlebih dahulu disterilisasi  dengan  cara  disemprot  dengan menggunakan  alkohol  70  %.  Air  yang  akan digunakan  sebagai  media  kultur  merupakan  air laut  yang  terlebih  dahulu  di  sterilisasi  dengan cara di rebus.
b. Pembuatan  pupuk  organik  cair azolla pinnata
Azolla  pinnata yang  digunakan  pada penelitian  ini  diperoleh  dari  perairan  rawa. Azolla  pinnata yang  diperoleh  kemudian dilakukan  pencucian  dengan  menggunakan  air sampai  bersih  kemudian  dijemur  dibawah  sinar matahari  sampai  kering.  Setelah Azolla  pinnata kering  kemudian  digiling  menjadi  serbuk sebanyak  200  gram,  selanjutnya  dilarutkan dalam    akuades  sebanyak  1  liter,  probiotik  MA 11  sebanyak  20  ml  dan  gula  pasir  sebanyak  20 gram,  setelah  selesai  bahan  yang  telah tercampur kemudian dilakukan proses fermentasi  selama  7  hari  secara  anaerob kemudian  pupuk Azolla  pinnata yang  telah difermentasi  di  saring  untuk  mendapatkan pupuk dalam bentuk cair (Indramarwan, 2012).
c. Persiapan media kultur Media  kultur Spirulina sp  adalah  pupuk organik  cair Azolla  pinnata, sebelum  dilakukan inokulasi Spirulina sp  pada  skala  laboratorium yaitu  biasanya  mulai  dari  0,5  liter  –  5  liter (Isnansetyo  dan  Kurniastuty  1995).  Pupuk organik  cair Azolla  pinata diberikan  dengan
dosis  yang  berbeda  pada  masing-masing  botol kultur  yang  telah  berisi  air  2  liter  yang  sudah disterilisasi  terlebih  dahulu  dan  diberi  aerasi sebagai pensuplay oksigen dan untuk menghomogenkan  pupuk  dengan Spirulina sp dengan dosis yang berbeda.
d. inokulasi Spirulina sp
Mikroalga yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah Spirulina sp  Mikroalga Spirulina sp  diperoleh  dari  BBPBL  lampung. Inokulasi Spirulina sp  dilakukan  pada  masing- masing  media  yang  telah  diberi  pupuk  organik Azolla  pinnata dengan  dosis  yang  berbeda dengan  kepadatan  10 4 sel/ml  (Suryati,  2002).
Setelah  itu  aerasi  digunakan  sebagai  pensuplay oksigen  dan  untuk  menghomogenkan  pupuk. Pengamatan dilakukan setiap hari  selama 7 hari sampai  pada  Fase  eksponensial  yang  ditandai dengan  naiknya  laju  pertumbuhan  sehingga kepadatan  populasi  meningkat.  Winarti  (2003) menyatakan,  Peningkatan  populasi  ini  terjadi karena  sel  alga  sedang  aktif  berkembang  biak dan adanya pembentukan protein serta komponen  -  komponen  penyusun  plasma  sel yang dibutuhkan dalam pertumbuhan.
Penghitungan  jumlah  bibit Spirulina sp. untuk  kultur  pakan  alami  menggunakan  rumus seperti dibawah ini :
V1 = N2xV 2

## N1
Keterangan: V1 = Volume bibit untuk penebaran awal (ml) N1  =  Kepadatan  bibit/  stock Spirulina sp  (unit/ ml)
V2  =  Volume  media  kultur  yang  dikehendaki (ml) N2  =  Kepadatan  bibit Spirulina sp  yang dikehendaki  (unit/ml)  (Edhy  dan  Kurniawan, 2003).
Jumlah  sel  yang  digunakan  sebagai inokulan  adalah  dengan  kepadatan  awal  yang diinginkan  yaitu  10  x  10 4 sel/ml  dan  volume media  kultur  adalah  2  liter.  Jumlah  kepadatan inokulan  murni Spirulina sp  yaitu  50  x  10 4 sel/ml, Jadi volume bibit kultur yang digunakan pada penelitian yaitu :
V1 = 2.000 ml  x 100.000 sel /ml 500.000 sel /ml
=   400 ml
Sehingga  volume  air  media  yang dimasukan kedalam wadah kultur sebanyak : Volume air media = V2 - V1 = 2.000 ml – 400 ml
= 1.600 ml Metode penelitian yang dilakukan merupakan penelitian eksperimen dengan menggunakan rancangan percobaan acak lengkap  (RAL)  dengan  4  perlakuan  dengan  3 kali  ulangan.  Konsentrasi  yang  digunakan  pada
penelitian ini mengacu pada penelitian Indramarwan,  (2012)  dengan  tahap  perlakuan yang digunakan adalah sebagai berikut: P1    :  Pemberian  pupuk Azolla  pinnata dengan konsentrasi 12 ml/l P2    :  Pemberian  pupuk Azolla  pinnata dengan konsentrasi 14 ml/l
P3    :  Pemberian  pupuk Azolla  pinnata dengan konsentrasi 16 ml/l
P4    :  Pemberian  pupuk Azolla  pinnata dengan konsentrasi 18 ml/l Pengamatan  yang  dilakukan  meliputi  uji proksimat,  kepadatan  Sel,  laju  pertumbuhan spesifik, kualitas air sebagai data penunjang.
a. Uji proksimat Uji Proksimat dilakukan untuk mengetahui  kandungan  Nutrisi  dari Spirulina sp. b. Kepadatan Sel Spirulina sp Pengamatan  kepadatan  sel Spirulina sp dilakukan  setiap  hari  1  kali  selama  24  jam dimulai  dari  ke  -  0  hingga  pertumbuhan mengalami  penurunan.  Pengamatan  dilakukan dengan menggunakan haemacytometer. Haemacytometer dibersihkan  dengan  alkohol 70%  dan  dikeringkan  terlebih  dahulu  dengan tisuue lalu ditutup dengan cover glass. Spirulina sp  yang  akan  dihitung  diteteskan  dengan menggunakan  pipet  tetes  pada  bagian  parit melintang hingga
penuh. Selanjutnya haemacytometer  diamatai  dibawah  mikroskop dengan pembesaran 10 x 10. Kemudian dihitung kepadatannya  dengan  mencacah Spirulina sp yang  terdapat  pada  bujur  sangkar  yang mempunyai sisi 1 mm. Penghitungan jumlah sel Spirulina sp dapat dibantu dengan menggunakan Handcounter .  Kepadatan  sel dihitung  dengan  N  x  10 4 sel/ml,  dimana  N adalah  jumlah Spirulina sp  yang  tercacah dibawah
mikroskop
(Isnansetyo dan
kurniastuty,1995)
c. Laju Pertumbuhan Harian
Laju pertumbuhan harian dihitung dengan persamaan yang digunakan oleh Vhosak (1997), dimana laju pertumbuhan yang dihitung diambil dari kepadatan Spirulina sp yang berada pada  fase  eksponensial  karena  pada  fase  ini terdapat laju pertumbuhan maksimum μ = (ln Nt – ln No) / t
Keterangan: μ     = Laju pertumbuhan harian (sel/ml/hari) N0 = Kepadatan sel Spirulina awal eksponensial (sel/ml) Nt  =  Kepadatan  sel Spirulina maksimum (sel/ml) t      = Selang waktu dari No ke Nt (hari)
d. Parameter Kualitas Air
Parameter  kualitas  air  yang  diamati
adalah  suhu,  pH,  oksigen  terlarut  (DO)  dan amoniak.
Data  populasi Spirulina sp  dianalisis dengan  analisis  sidik  ragam  (ANSIRA)  pada selang  kepercayaan  95%.  Apabila  hasil  uji berbeda nyata maka dilakukan uji lanjut yang di sesuaikan dengan besarnya koefisien keragaman (Hanafiah, 2011).

## C. HASIL DAN PEMBAHASAN
Dari  hasil  pengamatan  yang  telah dilakukan,  diperoleh  data  mengenai  Kepadatan Sel Spirulina sp,  Laju  Pertumbuhan  Harian Spirulina sp, Kualitas Air, Kandungan Nutrisi.
a. Kepadatan Sel Spirulina sp Berdasarkan hasil pengamatan kepadatan selama  penelitian  yang  dilakukan  selama  7  hari kultur  menunjukan  bahwa  pemberian  pupuk organik cair hasil fermentasi dari azolla pinnata dengan  dosis  yang  berbeda  menghasilkan kepadatan  sel spirulina sp  tertinggi  yaitu  pada hari ke-5 dengan kepadatan maksimum rata-rata untuk  perlakuan  P1,  P2,  P3,  dan  P4  yaitu perlakuan  P1  sebanyak  396x10 4 sel/ml,  P2 sebanyak 435x10 4 sel/ml, P3 sebanyak 474x10 4 sel/ml, dan  P4  sebanyak  520x10 4 sel/ml.  Dari masing-masing  perlakuan  dapat  dilihat  bahwa kepadatan  tertinggi  yaitu  pada  perlakuan  P4 mencapai  kepadatan  sebanyak  520x10 4 sel/ml. Data rata-rata kepadatan sel spirulina sp selama kultur 7 hari dapat dilihat pada Tabel 1 Tabel  1. Kepadatan  Rerata  Sel Spirulina sp  (x 10 4 sel/ml) selama 7 Hari Hari Ke- Kepadatan (x 10 4 sel/ml) P1 P2 P3 P4 0 1 2 3 4 5 6 7 10 61 121 224 326 396 302 191 10 71 130 276 357 435 312 220 10 73 136 283 373 474 329 235 10 76 144 305 415 520 348 247
Ket  :   P1, P2, P3,  dan P4  (Angka  miring  merupakan kepadatan maksimum sel Spirulina sp)
a. Fase lag
Fase  lag  pada  setiap  perlakuan  terjadi pada  hari  ke-0  hingga  hari  ke-1.  Fase  lag  atau fase  adaptasi  merupakan  fase  ketika  kepadatan sel  tidak  mengalami  perubahan,  tetapi  ukuran sel  pada  fase  tersebut  meningkat.  Fotosintesis masih aktif berlangsung dan organisme mengalami  metabolisme  tetapi  belum  terjadi pembelahan  sel  sehingga  kepadatannya  belum meningkat.  Fase  lag  diawali  dengan  terjadinya penyesuaian sel terhadap lingkungan baru. Pada saat  adaptasi,  sel  mengalami  defisiensi  enzim
atau  koenzim,  sehingga  harus  disintesis  dahulu guna  berlangsungnnya  aktivitas  biokimia  sel selanjutnya.  Pada  fase  lag  kepadatan  sel  tidak mengalami perubahan, tetapi kepadatan sel pada fase  tersebut  meningkat  (Brock  and  Madigan, 1991).
b. Fase Eksponensial
Fase eksponensial diawali dengan terjadinya pembelahan sel dengan laju pertumbuhan  yang  terjadi  terus  menerus,  fase eksponesial  terjadi  sampai  kepadatan  sel mencapai kepadatan
maksimal. Fase eksponensial terjadi pada hari ke-2 dengan terus mengalami  pembelahan  sel  hingga  kepadatan sel  mencapai  maksimum  yaitu  terjadi  pada  hari ke-5.  Hal  ini  sesuai  dengan  pernyataan Andersen (2005), dimana pada fase eksponensial ditandai dengan
mulai meningkatnya  kepadatan  sel Spirulina sp sampai  mencapai  kepadatan  maksimal.  Waktu penggandaan  yang  tercepat  biasanya  tercapai ketika fase eksponensial, yaitu fase pertumbuhan  ketika  sel-sel  membelah  dengan cepat  dan  konstan  mengikuti  kurva  logaritmik. Pada fase eksponensial Pembelahan sel dipengaruhi  oleh  nutrien  yang  diberikan, cahaya, kualitas air serta lingkungan kultur. Hal tersebut  ditunjukan  oleh  peningkatan  grafik secara  signifikan  dan  percepatan  pertumbuhan pada fase  ini  adalah  sebanding.  Fogg,  (1975) menyatakan  bahwa  semakin  tinggi  dosis  pupuk organik cair dari Azolla pinnata yang digunakan pada  penelitian  akan  menyebabkan  semakin tinggi kepadatan sel Spirulina sp.
c. Fase Stasioner Pada hari ke-6 merupakan fase Stasioner, dimana  kecepatan  pertumbuhan spirulina sp sudah  mulai  menurun.  Pada  fase  stasioner, komposisi  mikroalga  berubah  secara  signifikan karena  terbatasnya  kandungan  nurien  pada media  kultur.  Adanya  penurunan  pertumbuhan disebabkan  oleh    berkurangnya  nutrien  dalam medium  dan  kompetisi  yang  semakin  besar dalam  mendapatkan  nutrien,  serta  ruang  hidup.
(Brown et al ., 1997).
d. Fase kematian
Fase  kematian  pada  kultur Spirulina sp yaitu  terjadi  pada  hari  ke-7.  Dimana  Fase kematian merupakan fase ketika terjadi penurunan  jumlah  atau  kepadatan  mikroalga. Laju  kematian  mikroalga  dipengaruhi  oleh ketersediaan  nutrien,  cahaya,  temperatur  dan umur  mikroalga  itu  sendiri.  Kematian  sel  dapat disebabkan  oleh  mulai  berkurangnya  nutrisi yang tersedia sehingga tidak mampu mendukung  pertumbuhan  sel  (Brown et  al , 1997).  Grafik  kepadatan  sel Spirulina sp  dapat dilihat pada Gambar 1 sebagai berikut.
Gambar 1. Grafik kepadatan sel Spirulina sp. Pola  kepadatan  sel Spirulina sp  masing- masing  perlakuan  cenderung  relatif  sama, namun  secara  grafis  yang  ditunjukan  terlihat bahwa dosis pupuk organik cair hasil fermentasi dari Azolla pinnata yang diberikan dengan dosis tertinggi  menghasilkan  kepadatan Spirulina sp tertinggi  yaitu  pada  perlakuan  P4  dengan  dosis pupuk  organik  cair  hasil  fermentasi  dari Azolla pinnata sebanyak  18  ml/l  dan  kepadatan  sel Spirulina sp  terendah  yaitu  pada  perlakuan  P1 dengan dosis sebanyak 12 ml/l.
Terbatasnya  jumlah  nitrogen  dalam media  pertumbuhan  akan  menghambat  proses fotosintesis  yang  nantinya akan  mempengaruhi kepadatan  populasi  (Indramarwan,  2012).  Hal ini  sejalan  dengan  pernyataan  Borowistka (1988)  bahwa  Nitrogen  dapat  mempengaruhi pertumbuhan Spirulina sp  dalam  kegiatan metabolisme  sel  yaitu  proses  transportasi, katabolisme, asimilasi dan khususnya biosintesis protein karena dengan adanya reaksi enzimatik  yang  dihasilkan  oleh  protein  maka
dapat  mengkonversi  lemak  menjadi  asam lemak. Asam lemak dalam mikroalga terdapat di dalam  sel  yaitu  kloroplas  dan  pembentukannya dipengaruhi  oleh  adanya  transportasi  nitrat melalui  proses  asimilasi.  Mekanisme Spirulina sp dalam menyerap unsur hara dan mineral yaitu melalui  seluruh  bagian  thallus  mikroalga, karena  organ-organ  berupa  akar,  batang  dan daunnya belum terdiferensiasi. (Vonshak, 1997a). Secara visual, terdapat perbedaan warna Spirulina sp  pada  masing-masing  perlakuan yang  dikultur  pada  awal  dan  akhir  penelitian, dimana  adanya  perbedaan  warna  yang  terjadi pada masing-masing perlakuan,  yaitu perlakuan P4  memiliki  warna  hijau  biru  yang  lebih  pekat dibandingkan  perlakuan  P1,  P2,  dan  P3,  hal tersebut menunjukan bahwa adanya peningkatan pertumbuhan  atau  kepadatan  sel  pada  akhir penelitian  dan  pengaruh  pemberian  pupuk terhadap  pigmen  warna Spirulina sp.  Hal tersebut  dapat  dilihat  pada  Gambar  berikut
P1 P2 P3 P4
Gambar 2. Kultur Spirulina sp pada Awal Penelitian
P1
P2
P3
P4
Gambar 3. Kultur Spirulina sp pada Akhir Penelitian
Gambar  2  dan  Gambar    3  menunjukan perbedaan warna pada setiap perlakuan, dimana semakin  besar  dosis  pupuk  organik  cair  hasil fermentasi  dari Azolla  pinnata yang  diberikan maka  akan  menyebabkan  semakin  tinggi pertumbuhan sel Spirulina sp sehingga menghasilkan  warna  hijau-biru  yang  lebih
pekat.  Warna  pada Spirulina sp  berasal  dari pigmen  warna  fikoeritrin  bersama-sama  dengan klorofil dan kadang-kadang fikosianin (Romimoharto dan juwana, 2009).
Selain  pigmen  warna  yang  berperan dalam pemberian warna pada Spirulina sp yaitu nitrogen. Menurut Indramarwan (2012) nitrogen
0 100 200 300 400 500 600 0 2 4 6 8 10 kepadat an se l X 104 se l/m l hair ke perlakuan P1 dosis 12 ml/l perlakuan P2 dosis 14 ml/l perlakuan P3 dosis 16 ml/l perlakuan P4 dosis 18 ml/l P1 P4 P3 P2
yang  terkandung  dalam  air  merupakan  nutrien utama  bagi  fitoplankton  yang  nantinya  akan menghasilkan klorofil. Semakin banyak unsur N yang  digunakan,  maka  kandungan  kandungan klorofilnya  pun  semakin  meningkat,  dimana unsur N diperoleh dari Pupuk organik cair hasil fermentasi  dari Azolla  pinnata. Hal  tersebut dapat  di  buktikan  dari  perbedaan  warna  yang
dihasilkan Spirulina sp  pada  setiap  perlakuan. Perlakuan  P4  18  ml/l  dengan  dosis  pupuk tertinggi  menunjukan  warna  hijau  biru  yang lebih pekat dibandingkan pada perlakuan  P1 12 ml/l,  P2  14  ml/l,  dan  P3  16  ml/l.  Hasil pengamatan  kepadatan Spirulina sp  pada masing-masing  perlakuan  dapat  dilihat  pada Tabel 2 . Tabel 2. Data kepadatan Spirulina sp. Perlakuan Ulangan Jumlah Rata-rata 1 2 3 P1 395 397 396 1.188 396,6 P2 432 435 437 1.304 434,6 P3 474 473 475 1.422 474,0 P4 518 520 521 1.559 519,6 Jumlah 5.473 456,2 Berdasarkan  perhitungan  data  kepadatan sel Spirulina sp  dengan  perlakuan  dosis  pupuk organik cair hasil fermentasi dari Azolla pinnata yang  berbeda  diperoleh  hasil  analisis  sidik ragam  (ANSIRA)  kepadatan  sel Spirulina sp
dengan perlakuan dosis pupuk organik cair hasil fermentasi  dari Azolla  pinnata yang  berbeda terhadap kepadatan sel Spirulina sp dapat dilihat pada Tabel  3
Tabel 3. Hasil Ansira Kepadatan sel Spirulina sp Sumber Keragaman Derajat Bebas Jumlah Kuadrat Kuadrat Tengah FHitung F table (JK) (DB) (KT) 5% Perlakuan 3 25.297 8.432 3.212 ** 4,07 Galat 8 25.318 2,625 Total 11 50.615 Ket: ** = Berpengaruh Sangat Nyata KK:  0,348 % Data hasil analisis sidik ragam kepadatan sel Spirulina sp  dengan  perlakuan  dosis  pupuk organik cair hasil fermentasi  dengan dosis  yang berbeda  dari azolla  pinnata yang  berbeda. (Tabel  3)  menunjukan  hasil  Fhitung  <  Ftabel yaitu  3,31<4,07  pada  taraf    uji  5%  yang  berarti menunjukkan  bahwa  dosis  pupuk  organik  cair hasil  fermentasi  dari azolla  pinnata dengan dosis  yang  bebeda  berpengaruh  sangat  nyata terhadap  kepadatan  sel Spirulina sp  yang  dapat dilihat pada Tabel 3
Tabel 3. Uji Lanjut BNJ Perlakuan Rerata BNJ (0,05) P1 P2 P3 P4 396,6 434,6 474,0 519,6 a b b c
Berdasarkan  data  hasil  Uji  Beda  Nyata Jujur (BNJ) terhadap kepadatan sel Spirulina sp menunjukan  bahwa  P2  dan  P3,  berpengaruh nyata terhadap perlakuan P1, perlakuan perlakuan  P3  berpengaruh  tidak  nyata  terhadap perlakuan  P2  sedangkan  P4  Berbeda  sangat nyata terhadap perlakuan P1. Hal tersebut dapat di  buktikan  dari  perbedaan  kepadatan  sel Spirulina sp  dihasilkan  yang  pada  setiap perlakuan dengan dosis pupuk organik cair yang berbeda  dari azolla  pinnata .  Perlakuan  P4  18
ml/l  dengan  dosis  pupuk  tertinggi  menunjukan kepadatan  sel  tertinggi  sebanyak  520x10 4 sel/ml.dibandingkan pada perlakuan  P1 12 ml/l, P2 14 ml/l, dan P3 16 ml/l, yaitu pada perlakuan P1  sebanyak  396x10 4 sel/ml,  perlakuan  P2 sebanyak 435x10 4 sel/ml, perlakuan P3 sebanyak  474x10 4 sel/ml, dan  perlakuan  P4 sebanyak 520x10 4 sel/ml.
e. Laju Pertumbuhan Harian Spirulina sp Laju  pertumbuhan  harian  merupakan parameter  yang  menggambarkan  kecepatan pertambahan  sel Spirulina sp  per  satuan  waktu. Laju  pertumbuhan  harian  dihitung  sampai  pada saat  tercapai  kepadatan  maksimun.  Laju pertumbuhan  harian spirulina sp  dapat  dilihat pada Tabel 4 Tabel 4 . Data Laju Pertumbuhan Harian
Perlakuan Laju Pertumbuhan Harian (Sel/ml/Hari) P1 P2 P3 P4 0,39 0,40 0,41 0,42
Laju  pertumbuhan  harian Spirulina sp pada  setiap  perlakuan  P1,  P2,  P3  dan  P4  yaitu pada  perlakuan  P1  sebanyak  0,39  sel/ml/hari, perlakuan  P2  sebanyak  0,40  sel/ml/hari, perlakuan  P3  sebanyak  0,41  sel/ml/hari, dan
perlakuan  P4  sebanyak  0,42  sel/ml/hari.  Dari masing-masing  perlakuan  dapat  dilihat  bahwa nilai  Laju  pertumbuhan  tertinggi  didapat  pada perlakuan  P4  yaitu  sebanyak  0,42  sel/ml/hari, dan  nilai  laju  pertumbuhan  terendah  didapat pada  perlakuan  P1  yaitu  sebanyak  0,39 sel/ml/hari.  Dari  tabel  diatas  maka  nilai  laju pertumbuhan  yang  tertinggi,  dapat  ditentukan bahwa pada  perlakuan P4 dibandingkan dengan perlakuan lainnya.
Perbedaan  laju  pertumbuhan  harian pada  setiap  perlakuan  tersebut  disebabkan  oleh kemampuan  sel  dalam  menyerap  unsur  hara yang terdapat dalam media kultur. Hal ini sesuai dengan  pernyataan  Handayani  (2003),  yang menyatakan  bahwa  tidak  semua  bahan  dapat langsung  diserap  dan  dipergunakan  oleh  sel.
Selain  itu,  perbedaan  laju  pertumbuhan  harian juga  dipengaruhi  oleh  faktor  nutrisi  yang terkadung  pada  media  kultur,  Djarijah  (1995) menyatakan  bahwa  media  pupuk  berpengaruh pada laju pertumbuhan karena laju pertumbuhan fotosintesis  mikroalga  dipengaruhi  oleh  faktor nutrisi  yang  terdapat  dalam  media  kultur  yang diberikan.  Berdasarkan  penghitungan  data  laju pertumbuhan  harian Spirulina sp  pada lampiran 6  dengan  perlakuan  dosis  pupuk  organik  cair hasil  fermentasi  dari Azolla  pinnata yang berbeda  diperoleh  hasil  analisis  sidik  ragam (ANSIRA)  laju  pertumbuhan  harian Spirulina sp  dengan  perlakuan  dosis  pupuk  organik  cair hasil  fermentasi  dari Azolla  pinnata yang berbeda  terhadap  kepadatan  sel Spirulina sp dapat dilihat pada Tabel 5
Tabel 5 . Hasil Ansira Laju Pertumbuhan Harian Sumber Keragaman Jumlah Kuadrat Derajat Bebas Kuadrat Tengah FHitung FTabel (JK) (DB) (KT) 5% Perlakuan 3 1,978 0,0006 0,00041 ns 4,07 Galat 8 1,796 0,0025 Total 11 3,774 Ket: ns = Berpengaruh Tidak nyata
KK: 0,976  %
Data hasil analisis sidik laju pertumbuhan  harian Spirulina sp  dengan perlakuan  dengan  dosis  pupuk  organik    cair yang  berbeda.  (Tabel  5)  menunjukan  hasil Fhitung  <  Ftabel  yaitu  0,5<4,07  pada  taraf    uji 5%  yang  berarti  menunjukkan  bahwa  dosis pupuk  organik  cair  yang  berbeda  berpengaruh
tidak  nyata  terhadap  laju  pertumbuhan  harian Spirulina sp
f. Kualitas Air Parameter kualitas air yang diamati pada penelitian  ini  meliputi  pH,  suhu,  DO,  salinitas, dan amoniak. Data kualitas air selama penelitian dapat dilihat pada Tabel 6 Tabel 6. Kualitas Air selama Penelitian. No Parameter Satuan Kisaran Baku mutu* 1 pH - 7,44-7,78 7-9 2 Suhu 0 C 25,77-30,25 25-32 3 DO mg/L 5,45-6,71 Minimal 5 4 Salinitas mg/L 25 – 29 25-30 5 Amoniak mg/L 0,066-0,256 < 1 ppm
* Berdasarkan baku mutu air laut untuk biota laut berdasarkan KEPMEN LH No 51 tahun 2004
1. pH
pH  kualitas  air  pada  pertumbuhan organisme
merupakan
faktor
yang mempengaruhi  kegiatan  enzim.  pH  air    pada penelitian  yitu  bekisar  antara  7,44  -  7,78.  Nilai tersebut  masih  dalam  batas  maksimum,  hal  ini sesuai dengan  KEPMEN LH No 51 tahun 2004 bahwa  kisaran  pH  pada  pertumbuhan Spirulina sp  yaitu  7  -  9.  Nilai  pH  mempengaruhi metabolisme  dan  pertumbuhan  mikroalga  serta dapat  mengubah  ketersediaan  nutrien  dan mempengaruhi  fisiologi  sel Spirulina sp.  pH yang  semakin  meningkat  akan  menyebabkan peningkatan  CO 2 terlarut (Andersen, 2005).
2. Suhu Hasil  pengukuran  suhu  pada  penelitian ini  berkisar  antara  25,77-30,25 o C.  pada  kisaran tersebut Spirulina sp dapat tumbuh dengan baik.
Hal  ini  sesuai  dengan  KEPMEN  LH  No  51 tahun 2004 bahwa kisaran suhu optimum untuk pertumbuhan Spirulina sp  adalah  25-32 0 C  dan pertumbuhannya  akan  lambat  jika  dibawah  13 0 C  dan  diatas  32 0 C.  Suhu  yang  melebihi  suhu maksimum pertumbuhannya akan menyebabkan terhentinya  proses  metabolisme  sel,  karena dapat menonaktifkan bahkan mematikan banyak enzim (Hariyati, 2008).
3. DO
Hasil  pengukaran  DO  selama  penelitian berkisar  antara  5,41-6,92  mg/l.  Kisaran  ini sesuai dengan standar baku mutu KEPMEN LH No  51  tahun  2004    kisaran  oksigen  terlarut untuk kegiatan kultur fitoplankton yaitu berkisar 5,47-7,00  mg/l. Selain merupakan penyumbang utama  dalam  air,  fitoplanton  juga  merupakan pengguna  oksigen  sehingga  DO  merupakan
parameter  kualitas  air  yang  penting  bagi kehidupan fitoplankton.
4. Salinas
Hasil  pengukuran  salinitas  ini  berada pada  kisaran  25-29%.  Kisaran  salinitas  tersebut sesuai dengan  KEPMEN LH No 51 tahun 2004 yang menjelaskan bahwa salinitas 25-30% dapat memacu  pertumbuhan Spirulina sp  yang optimal. Salinitas berpengaruh terhadap orgasme  air  dalam  mempertahankan  tekanan osmotiknya.  Kebanyakan  alga  memperlihatkan terjadinya  hambatan  proses  fotosintesis  setelah dipindahkan pada medium dengan salinitas yang lebih  tinggi  atau  tekanan  osmotik  yang  lebih tinggi  (Hariyati.,  2008).  Untuk  golongan  alga laut  dan  payau,  salinitas  sangat  penting  untuk mempertahankan  tekanan  osmotik  yang  layak antara  protoplasma  dari  organisme  dengan  air
sebagai  lingkungan  hidupnya.  Kadar  salinitas akan  mempengaruhi  tekanan  osmotik  sel sehingga  secara  langsung  akan  mempengaruhi proses metabolismenya (Borowitzka, 1988). 5. Amonia
Kisaran  amoniak  selama  penelitian adalah  0,066-0,256  mg/l.  Kisaran  amoniak selama  penelitian  masih  berada  dalam  kisaran yang  layak  untuk  pertumbuhan Spirulina sp. Fitoplankton  dapat  tumbuh  dan  hidup  dengan baik  pada  kandungan  amoniak  KEPMEN  LH No 51 tahun 2004 yaitu < 1 ppm.
g. Kandungan Nutrisi Spirulina sp Parameter kandungan nutrisi pada penelitian ini meliputi, protein, abu, lemak serat kasar,  karbohidrat  dan  N  total.  Data  analisa kandungan  nutrisi Spirulina sp  dapat  dilihat pada Tabel 7 sebagai berikut. Tabel 7. Kandungan Nutrisi Spirulina sp Kode Sampel Protein % Abu % Lemak % Serat kasar % Karbohidrat %  Total N %
P1 P2 P3 P4 42 43 44 47 7 7 8 9 4,2 4,3 4,4 4,6 8 8 9 10 30 32 33 34 12 14 16 18 Kandungan  nutrisi Spirulina sp  pada penelitian ini yaitu diperoleh kandungan protein tertinggi  yaitu  pada  perlakuan  P4  sebesar  47  % dan  Protein  terendah  yaitu  pada  perlakuan  P1 sebesar  42  %,  kandungan  abu  tertinggi  yaitu pada  pelakuan  P4  sebesar  9  %  sedangkan  yang terendah  yaitu  pada  perlakuan  P1  yaitu  sebesar 7%. dan lemak pada perlakuan P4 sebesar 4,6% dan pada perlakuan P1 sebesar 4,2%, kandungan  serat  kasar  tertinggi  yaitu  pada perlakuan  P4  sebesar  10  %  dan  serat  kasar terendah  yaitu  pada  perlakuan  P1  sebesar  8  %, kandungan  karbohidrat  tertinggi  yaitu  pada perlakuan  P4  sebesar  34%  dan  karbohidrat terendah  yaitu pada perlakuan P1 sebesar 30 % serta  N  total  teringgi  yaitu  pada  perlakuan  P4 sebesar  18%  sedangkan  yang  terendah  yaitu pada perlakuan P1 sebesar 12%.
Pada  masing-masing  perlakuan  dengan dosis yang berbeda terjadi peningkatan kandungan  nutrisi  pada Spirulina sp,  hal tersebut  dikarenakan  kandungan  pupuk  organik cair  hasil  fermentasi  dari  azolla  pinnata  yang diberikan  pada  setiap  perlakuan  mengalami peningkatan, pada pelakuan P1 dengan dosis 12 ml/l,  perlakuan  P2  dengan  dosis  14  ml/l, perlakuan  P3  dengan  dosis  16  ml/l  dan  pada perlakuan  P4  dengan  dosis  18  ml/l.  Belay (2008),  menyatakan  bahwa  kandungan  nutrisi Spirulina sp  diperoleh  dari  pupuk  yang diberikan, semakin tinggi pupuk yang diberikan berpengaruh terhadap kandungan nutrisi Spirulina sp.  Berdasarkan  uji  proksimat  yang
telah dilakukan mengindikasikan bahwa semakin  tinggi  dosis  pupuk  organik  cair  hasil fermentasi  dari  azolla  pinnata  yang  diberikan pada  setiap  perlakuan  memberikan  pengaruh terhadap  kandungan  protein,  abu,  lemak,  serat kasa,  karbohidrat  dan  N  total Spirulina sp. Unsur  hara  yang  terkandung  dalam  pupuk berpengaruh  terhadap  kepadatan  sel Spirulina sp,  Hal  tersebut  dikarenakan  pupuk  merupakan faktor  yang  sangat  penting  untuk  pertumbuhan dan  komposisi  biokimia  mikroalga.  Kondisi nutrien yang  optimum diperlukan untuk mendapatkan nilai produktivitas kultur mikroalga  yang  tinggi  disertai  kualitas  biomasa yang  baik.  Konsentrasi  nutrien  yang  rendah dapat menyebabkan penurunan laju pertumbuhan  karena  sel-sel  alga  kekurangan unsur makanan (Winarti, 2003). Semakin tinggi dosis  pupuk  organik  cair  hasil  fermentasi  dari azolla  pinnata dan  semakin  tinggi  nutrien  yang diberikan untuk kepadatan sel spirulina sp maka semakin  tinggi  kepadatan  sel  yang  dihasilkan oleh spirulina sp.

## D. KESIMPULAN DAN SARAN

## a. Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan diperoleh yaitu :
1. Dosis pupuk organik yang terbaik yaitu pada perlakuan P4 deng dosis 18 ml/l
2. Kepadatan tertinggi sel Spirulina sp tertinggi pada perlakuan P4 yaitu sebesar 520x10 4. sel/ml dan Laju pertumbuhan harian
Spirulina sp  tertinggi  pada  perlakuan  P4 yaitu 0,42 sel/ml/hari.
b. Saran Berdasarkan hasil penelitian yang
diperoleh,  saran  yang  dapat  dianjurkan  adalah sebagai berikut :
1. Diharapkan penelitian selanjutnya
menggunakan  pupuk  organik  cair Azolla pinnata hasil fermentasi dan jenis Mikroalga yang  berbeda,  agar  mendapatkan  hasil penelitian yang lebih baik.
2. Penelitian  ini  hendaknya  dapat  dijadikan sebagai  salah  satu  alternatif  untuk  kultur pakan alami Spirulina sp dengan penggunaan  pupuk  organik  cair  hasil fermentasi  dari Azolla  pinnata yang  sesuai sehingga mendapatkan hasil yang sempurna.

## DAFTAR PUSTAKA
Andersen, R.A. 2005 . Algal Culturing Technique . Elsevier academic press. UK.
Arifin,  Z.  1996. Keefisienan  Nitrogen  dari Azolla  pinnata  dan  urea    terhadap Pertumbuhan  dan  Produksi  Tanaman
Padi  (Oryza  sativa)  Varietas  IR-36 . Jurusan  Tanah,  Fakultas  Pertanian. Institute Pertanian Bogor. Bogor. Belay.  2008.  A., Spirulina ( Spirulina sp.) Production  and  Quality  Assurance, inGershwin,  M.  E  and  A. Belay,  (Eds.), Spirulina  in  Human  Nutrition  and Health , CRC Press , California, 2-26. Borowitzka,  M.A.  1988. Algae  growth  media and  sources  of  cultures .  In:  Borowitzka M.A.  &  Borowitzka  L.J.  (eds.), Micro- algal Biotechnology. Cambridge University  Press :  Cambridge.  pp.  456- 465
Borowitzka,  A.M.,  and  Lesly  B.  J.  1988. Microalgal  Biotechnology .  Cambridge University Press, Australia.
Brock,  T.D.  and  Madigan,  M.T.  1991. Biology of  Microorganisms.  Sixth  ed.  Prentice- HallInternational , Inc. 44
Brown, M. R., Jeffrey, S. W., Volkman, J. K., &
Dunstan,  G.  A.  1997. Nutritional Properties of Microalgae for Mariculture. Aquaculture . 151: 315-331. Dewi,  I.R.  2007.Fikasi  N Biologis  Pada Ekosistem Tropi s. Makalah Biofertilisasi. Pascasarjana UNPAD. 69 hal
Djarijah,  A.  B.  1995. Pakan  Ikan  Alami .
Cetakan I. Yogyakarta. Penerbit. Kanisius.
Edhy, W.A., dan Kurniawan. 2003. Plankton di
Lingkungan  PT.  Central  pertiwi  Bahari.
Suatu Pendekatan Biologi dan Manajemen  Plankton  dalam  Budidaya
Udang .  Mitra  Bahari:  Lampung.  hal.  3- 29. Fogg.  G.  E.  1975. Algae  culture    and phytopolankton ecologi . 2nd Ed. Penerbit. University  of  Winconsin  Press, Madisson . P. 19. Handayani  L.  2003. Pertumbuhan  Spirulina platensis  yang  Dikultur  dengan  Pupuk Komersil  dan  Kotoran  Puyuh .  Jurusan Budidaya  Perairan,  Fakultas  Perikanan dan  Ilmu  Kelautan,  Institut  Pertanian Bogor, Bogor.
Hanafiah,  K.A.  2011. Rancangan  Percobaan: Teori  dan  Aplikasi .  PT.  Raja  Grafindo Persada. Jakarta.
Haryati,  R.  2008. Pertumbuhan  dan  Biomassa Spirulina  sp.  dalam  Skala  Laboratoris . Jurnal  BIOMA  Universitas  Diponegoro. Vol. 10, No. 1, Hal. 19-22 Harrison,  P.  J.  and  J.  A.  Berges.  2005. Marine Culture  Media.  In  :  R.A.  Andersen (Eds).  Algal  Culturing  Techniques. National Institute Enveronmental Studies . Academic press. America. p. 21- 60.
Indramarwan.  2012.  Pengaruh  konsentrasi pupuk azolla  pinnata terhadap  Populasi chaetoceros sp.  sUniversitas  Airlangga. Surabaya.
Isnansetyo,  A  dan  Kurniastuty,  1995, Teknik Kultur  Phytoplankton  dan  Zooplankton . Kanisius. Yogyakarta Hal. 34-85 Keputusan  Menteri  Lingkungan  Hidup  No  51 Tahun  2004  tentang Baku  Mutu  Air Laut . Romimoharto,  K.  Dan  S.Juwana.  2009. Biologi Laut .  Ilmu  Pengetahuan  Tentang  Biota Laut. Penerbit. Djambatan, Jakarta. Suryati.  2002 .  Pemanfaatan  Limbah  Cair Pabrik Gula (LCPG) untuk Pertumbuhan
Spirulina sp . Fakultas Perikanan
Universitas Brawijaya. 74 hal.
Winarti. 2003. Pertumbuhan Spirulina platensis Yang  Dikultur  Dengan  Pupuk  Komersil (Urea, TSP, dan ZA) dan Kotoran Ayam . Jurusan  Budidaya  Perairan,  Fakultas Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan,  Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Vonshak A. 1997a. Spirulina: Growth, Physiology and Biochemistry . Di dalam:Vonshak  A,  editor. Spirulina platensis (Arthrospira): Physiology,
Cellbiology  and  Biotechnology.  Taylor
&  Francis  Ltd.,  Bristol,  USA.  hlm.  46- 47.