## IDENTIFIKASI DAN ISOLASI SENYAWA GLIKOSIDA SAPONIN DARI BEBERAPA TANAMAN DI INDONESIA
Andien Ravelliani, Hasna Nisrina, Lala Komala Sari, Marisah, Riani Universitas Singaperbangsa Karawang, Indonesia E-mail: ravellianiandien@gmail.com, hasnanisrina08@gmail.com, lalakomalas2903@gmail.com, marisah0352@gmail.com, ynryany@gmail.com
Diterima:
22 Juli 2021 Direvisi: 08 Agustus 2021 Disetujui: 15 Agustus 2021

## Abstrak
Glikosida merupakan  salah  satu  senyawa  metabolit  sekunder yang terdiri atas gabungan dua bagian senyawa, yaitu glikon dan aglikon.  Saponin  merupakan glikosida bagian  aglikon  yang termasuk  kedalam  golongan glikosida triterpena  dan  sterol. Saponin memiliki banyak kegunaan untuk kesehatan diantaranya,  sebagai  immunomodulator,  antivirus,  antitumor, antiinflamasi,  antijamur,  dan  efek  hipokolesterol.  Senyawa glikosida saponin  tersebar  luas  pada  beberapa  tanaman  di Indonesia.  Penulisan review artikel  ini  mengulas  tentang keberadaan  senyawa glikosida saponin  pada  beberapa  tanaman yaitu  Daun  Binahong  ( Anredera  cordifolia ( Ten .) Steenis ), Pelepah  Pisang  Uli  ( Musa  paradisiaca  L .),  Herba  Pegagan ( Centella  asiatica  L.  Urban ),  Daun  Majapahit  ( Cresentia cujete ), dan Daun Bungkus ( Smilax rotundifollia ). Metode yang digunakan  dalam  identifikasi  dan  isolasi  senyawa glikosida saponin  mulai  dari  esktraksi  maserasi,  skiring  fitokimia  dengan cara  uji  saponin  dan  uji  pewarna  Liebermann  Burchard  (LB), fraksinasi  secara  ECC  (Ekstraksi  cair-cair),  metode  pemisahan Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT),  dan  metode  pemisahan lainnya.  Berdasarkan  hasil  dari  beberapa  jurnal  yang  telah ditelaah,  diperoleh  kesimpulan  bahwa  lima  tanaman  tersebut positif mengandung senyawa glikosida saponin.
Kata kunci: glikosida, saponin, isolasi, pemisahan senyawa

## Abstract
Glycosides are a secondary metabolite compound consisting of a combination of  two  parts  of  the  compound, namely  glycons  and aglycones.  Saponins  are  glycosides  in  the  aglycone  part  which are  included  in  the  triterpene  and  sterol  glycosides.  Saponins have  many  health  uses,  including  as  immunomodulators, antiviral,  anti-tumor,  anti-inflammatory,  antifungal,  and hypocholesterol  effects.  Saponin  glycoside  compounds  are widely  distributed  in  several  plants  in  Indonesia.  Writing  a review  of  this  article  reviews  the  presence  of  saponin  glycoside compounds  in  several  plants,  namely  Binahong  leaf  (Anredera cordifolia  (Ten.)  Steenis),  Uli  Banana  Bark  (Musa  paradisiaca L.),  Gotu  Kola  Herb  (Centella  asiatica  L.  Urban),  Majapahit leaf  (Cresentia  cujete),  and Bungkus  leaf  (Smilax  rotundifollia). The  method  used  in  the  identification  and  isolation  of  saponin glycosides,  starting  from  maceration  extraction,  phytochemical screening  by  means  of  saponin  test  and  Liebermann  Burchard
dye  test  (LB),  fractionation  by  ECC,  separation  method  of  Thin Layer  Chromatography  (TLC),  and  other  separation  methods.
Based on the results of several journals that have been reviewed, it  was  concluded  that  the  five  plants  were  positive  for  saponin glycosides.
Keywords: glycosides, saponins, isolation, compound separation

## Pendahuluan
Bahan alam merupakan  kumpulan dari beberapa sumber kimia yang dapat berasal dari  produk  metabolisme  dari  senyawa  sederhana  maupun  senyawa  kompleks  (Najib, 2018).  Pengembangan  obat  herbal  sampai  saat  ini  masih  dilalukan  dengan  pemanfaatan metabolit  sekunder  yang  berpotensi  besar  untuk  dikembangkan  menjadi  obat  (Saifudin, 2014).  Pemanfaatan  ini  didukung  oleh  sebagian  besar  masyarakat  yang  lebih  memilih mengkonsumsi  obat  dari  bahan  alam  maupun  obat  tradisional  yang  memungkinkan  efek samping  yang  ditimbulkan  jauh  lebih  rendah  dibandingkan  obat  kimia  sintesis.  Pada umumnya khasiat tanaman obat disebabkan karena aktivitas senyawa yang terdapat pada suatu  tanaman  tersebut.  Senyawa  tersebut  adalah  metabolit  sekunder  yang  diproduksi oleh tanaman  untuk mempertahankan keberadaannya maupun sebagai sistem pertahanan diri  suatu  tanaman  (Rachman,  Wardatun,  &  Wiendarlina,  2018).  Beberapa  contoh tanaman  di  Indonesia  yang  digunakan  sebagai  obat  dan  digunakan  sebagai  bahan penelitian  untuk  mengindentifikasi  senyawa  biokimia  yaitu,  daun  binahong (Anredera cordifolia  (Ten.) Steenis) ,  pelepah  pisang  uli (Musa  paradisiaca  L.) ,  pegagan (Centella Asiatica  L.  Urban) ,  daun  majapahit (Cresentia  cujete) ,  dan  daun  bungkus (Smilax rotundifolia) .  Beberapa  penelitian  telah  dilakukan  pada  tanaman  tersebut  untuk mengidentifikasi senyawa golongan glikosida yang ada di dalam tamanan tersebut.
Senyawa  glikosida  pada  tanaman  biasanya  berbentuk  β-Glikosida,  adapun glikosida  yang  dapat  dikategorikan  memiliki  khasiat  sebagai  obat  ialah  golongan glikosida  jantung,  saponin,  antarkuinon,  resin,  sianospora,  tannin,  isotianat,  flavonol, sianhidrin,  alkohol,  aldehid,  lakton,  fenol,  dan  lain  sebagainya (Amody  &  Anggreani, 2017) . Berdasarkan penelitian yang dilakukan ini bermaksud untuk mengkaji lebih dalam kandungan  golongan  senyawa  glikosida  yaitu  saponin,  karena  memiliki  aktivitas farmakologi  sebagai  immunomodulator,  antitumor,  antiinflamasi,  antivirus,  antijamur, efek  hipokolesterol  dan  lainnya  (Marni  &  Ambarwati,  2015).  Saponin  termasuk kelompok  senyawa  golongan  glikosida  triterpena  dan  sterol  yang  memiliki  suatu karekteristik  adanya  aglikon  steroid  dan  triterpenoid,  serta  gugus  gula  berupa  buih sehingga saat direaksikan bersama air dan  kemudian dikocok maka terbentuk buih  yang tahan  lama  (Khotimah,  2016).  Saponin  memiliki  sifat  kelarutan  mudah  larut  dalam  air dan  tidak larut dalam eter, rasa pahit, dan saponin lebih baik diekstrasikan dari tanaman dengan jenis pelarut etanol 70%-95% atau biasanya metanol karena saponin bersifat polar maka akan lebih tepat dan mudah larut dari pada jenis pelarut lain (Prayoga, Nocianitri, & Puspawati, 2019).
Rumusan  masalah  dari  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan  pada  beberapa tanaman di Indonesia adalah apakah daun binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) , pelepah  pisang  uli (Musa  paradisiaca  L) ,  pegagan (Centella  Asiatica  L.  Urban) ,  daun majapahit (Cresentia  cujete) ,  dan  daun  bungkus (Smilax  rotundifolia) mengandung senyawa  kimia  saponin,  berapakah  panjang  gelombang  dari  senyawa  saponin  pada tanaman tersebut dengan menggunakan spektrofotometer ultraviolet.
Adapun  tujuan  yang  dilakukan  ialah  untuk  mengidentifikasi  senyawa  biokimia dalam  berbagai  jenis  tanaman  di  Indonesia  dan  mengisolasi  serta  mengidentifikasi kandungan  senyawa  saponin  pada  tanaman  daun  binahong (Anredera  cordifolia  (Ten.) Steenis) , pelepah pisang uli (Musa paradisiaca L.) , pegagan (Centella Asiatica L. Urban) , daun majapahit (Cresentia cujete) , dan daun bungkus (Smilax rotundifolia) .
Manfaat  dari  penelitian  yang  telah  dilakukan  yaitu,  dapat  memberikan  manfaat bagi  pihak  yang  membutuhkan  baik  teori  maupun  praktik  dan  sebagai  informasi  bagi pembaca  maupun  pengembang  ilmu  pengetahuan  dibidang  fitokimia  dan  sintesis mengenai  kandungan  senyawa  saponin  yang  terdapat  pada  tanaman  sampel  dibeberapa percobaan  yang dilakukan, serta menambah  wawasan dan pengetahuan tentang  senyawa saponin  yang  terdapat dibeberapa tanaman di  Indonesia  sebagai  sarana mengembangkan ilmu pengetahuan secara  teoritis  untuk dipelajari dibangku perkuliahan, diharapkan juga memberikan  kontribusi  untuk  mengembangkan  teori  bagi  yang  ingin  melanjutkan penelitian ini.

## Metode Penelitian

## Ekstraksi
Simplisia  daun  majapahit  ditimbang  sebanyak  500  gram,  kemudian  dimasukkan kedalam bejana maserasi. Dimasukkan cairan penyari metanol sebanyak 3 liter, kemudian bejana  ditutup dan didiamkan ditempat yang gelap selama 5 hari. Setelah 5 hari disaring, ekstrak yang diperoleh diupakan dengan rotavapor dan diperoleh ekstrak metanol kental.

## Partisi
Dipartisi  dengan  pelarut  dietil  eter  dan  air  (1  :  1)  sebanyak  50  ml, diulang  3  kali. Hasil partisi yang berupa lapisan air ditambahkan pelarut  n-butanol  (1 : 1) sebanyak 50 ml, diulang 3 kali  ekstrak  n-butanol diuapkan dengan  rotavapor dan didapatkan  ekstrak kental.

## Uji Busa
Serbuk kering sampel sebanyak 0,5 gram dimasukkan kedalam  tabung reaksi, lalu ditambahkan  10  ml  air  mendidih,  didinginkan,    dikocok  hingga  berbusa.  Setelah  lebih dari 10 menit (ukur tinggi busa) busa tidak hilang dengan penambaahan 1 tetes HCl 2 M.

## Uji Pereaksi Warna
Serbuk kering sampel sebanyak 0,5 gram dimasukkan kedalam tabung reaksi,  lalu ditambahkan  5  ml  kloroform.  Dipanaskan  diatas  penangas  sambil  dikocok  dan didinginkan.  Ditambahkan  pereaksi  Lieberman  Burchard  sebanyak  20  tetes.  Reaksi positif  saponin  yaitu  merah,  merah  muda  atau  ungu  dan  biru  perlahan-lahan  menjadi hijau.

## Pemisahan dan Pemurnian Komponen Kimia
Ekstrak  kental  butanol  diidentifikasi  menggunakan  KLT.  Ditotolkan  ke  lempeng GF 366 dan dielusi dengan cairan pengelusi kloroform : metanol : air (13 : 7 : 2). Diamati dibawah  sinar  lampu  UV  366  nm,  lalu  lempeng  disemprot    dengan  H2SO4  10%  v/v. Diangin-anginkan kemudian difiksasi hingga diperoleh warna noda.

## Identifikasi Secara KLTP
Ekstrak  yang  diperoleh  ditotolkan  secara  tegak  lurus  pada  permukaan  lempeng GF366 menggunakan pipa kapiler, lalu dimasukkan ke dalam chamber yang berisi eluen kloroform  :  metanol  :  air  (13  :  7  :  2).  Chamber  ditutup  dan  lempeng  dibiarkan  terelusi,
lempeng dikeluarkan dan diangin-anginkan sampai kering. Diamati penampakan nodanya pada sinar lampu UV 366 nm. Pita-pita yang terbentuk dikeruk dari plat  dan ditampung ke dalam vial sesuai dengan fraksinya.

## Penentuan Spektrum Senyawa Murni Secara Spektrofotometri Infra Merah
Senyawa  murni  dari  fraksi  dicampurkan  dengan  garam  KBr,  lalu  dimasukkan  ke dalam Acculab 2 dengan spektrofotometer infra merah.

## Preparasi Sampel
Herba  Pegagan  dibersihkan  dari  pengotornya,  lalu  diserbukan  dengan  cara dihaluskan dan ditimbang serbuk daun pegagan sebanyak 300 g.

## Ektraksi
Dimaserasi dengan pelarut etanol 96% : air (70 : 30) sebanyak 1500 mL selama 3 hari.  Ampas  dan  endapan  dipisah  dari  filtratnya.  Kemudian  diremaserasi  selama  2  hari dengan pelarut  etanol 96% : air 1100 mL. Filtrat yang didapat diuapkan dan dipekatkan pada suhu 40℃.

## Uji Saponin
Ditimbang ekstrak kental sebanyak 15 mg lalu dimasukkan ke dalam tabung reaksi. Ditambahkan aquadest sebanyak 10 mL kemudian tabung reaksi dikocok vertikal selama 10 detik dan dibiarkan selama 10 detik. Pembentukan busa setinggi 1–10 cm  yang stabil selama  tidak  kurang  dari  10  menit,  menunjukkan  adanya  saponin.  Ditambahkan  1  tetes HCl 2N, busa tidak hilang menunjukkan positif saponin.

## Fraksinasi dengan Kromatografi Kolom
Dibuat  bubur  silica  gel  (fase  diam)  dengan  menimbang  50  g  silica  gel. Ditambahkan  dengan  Eluen  (kloroform  :  metanol  :  air  dengan  perbandingan  30:10:1 v/v/v) secukupnya sambil diaduk hingga menjadi bubur. Dimasukkan Bubur silica gel ke dalam  kolom  kromatografi  yang  telah  dialasi  dengan  glass  wool  melalui  dinding  kolom agar  tidak  terbentuk  gelembung.  Bubur  silica  gel  dimasukkan  hingga  ketinggian  kurang lebih  25  cm  dan  ekstrak  kemudian  dielusi  dengan  menggunakan  fase  gerak  kloroform  : metanol : air dengan perbandingan (30:10:1 v/v/v) sebanyak 50 ml. Fraksi yang diperoleh kemudian  disimpan  dalam  vial  dan  dibungkus  dengan  aluminium  foil  dan  plastik  ikan. Penentuan  fraksi  yang  mengandung  saponin  ditentukan  dengan  menggunakan  metode KLT.

## KLT Hasil Fraksinasi
Plat  Silika  Gel  GF254  dipotong  dengan  ukuran  10  x  10  cm.  Kemudian  diaktivasi pada  suhu  110ºC  selama  30  menit.  Fase  gerak  dibuat  sebanyak  10  mL.  Setiap  fraksi ditotolkan  pada  plat  sebanyak  4  μL.  Plat  dielusi  sampai  jarak  1  cm  dari  batas  atas  plat. Dilakukan  penyemprotan  dengan  menggunakan  anisaldehid  asam  sulfat.  Anisaldehid asam  sulfat  akan  memberikan  warna  ungu  pada  sinar  tampak.  Glikosida  saponin  tanpa perlakuan kimia (pereaksi semprot) di bawah sinar UV 254 nm tidak terjadi pemadaman bercak dan di bawah sinar UV 366 nm bercak tidak berfluorosensi.

## Kromatografi Lapis Tipis Preparatif
Fase  diam  yang  digunakan  plat  Silika  Gel  GF254  dengan  ukuran  10  cm  x  10  cm dan  fase  geraknya  adalah  kloroform  :  metanol  :  air  (65:25:4  v/v).  Larutan  sampel ditorehkan  pada  masing-masing  plat  berulang-  ulang  sampai  terbentuk  pita  dengan
bantuan pipet. Selanjutnya dieluasi dengan 10 mL fase gerak. Plat diamati dibawah sinar UV 254 nm dan UV 366 nm, kemudian bagian pinggir kiri dan kanan plat KLT preparatif disemprot  dengan  pereaksi  Liebermann-Burchard.  Plat  yang  telah  disemprot  dipanaskan pada suhu 85-90oC selama 15 menit. Tandai area yang akan dikerok pada plat yang tidak terkena  pereaksi  Lieberman-Burchard.  Pada  plat  KLTP  dikerok  pita  yang  menunjukan hasil positif namun tidak terkena reagen penampak noda menggunakan spatula dan hasil kerokan kemudian diekstraksi dengan metanol, kemudian disaring.

## KLT Hasil Fraksinasi
Dipilih  subfraksi  yang  memberikan  warna  ungu  pada  KLTP,  ekstrak  etanol  dan fraksi  saponin  triterpenoid  hasil  kromatografi  kolom  lambat.  Masing-masing  ekstrak tersebut dilarutkan dengan 0,5 mL metanol sehingga diperoleh ekstrak yang tidak terlalu pekat. Plat Silika Gel GF254 dipotongdengan ukuran 2 cm x 10 cm, kemudian diaktivasi pada  suhu  110ºC  selama  15  menit.  Fase  gerak  yaitu  kloroform  :  metanol  :  air  (65:25:4 v/v)  dibuat  sebanyak  10  mL.  Larutan  uji  ditotolkan  pada  plat  sebanyak  6  μL.  Plat diletakkan pada chamber yang telah dijenuhkan sebelumnya. Plat dieluasi sampai jarak 1 cm  dari  batas  atas  plat.  Plat  diangin-anginkan  selama  10  menit  untuk  menguapkan  fase gerak pada plat yang masih tersisa dilihat di bawah sinar UV 366 nm dan dicatat nilai Rf.

## Identifikasi Isolat dengan KLT Dua Dimensi
Disiapkan  plat  KLT  silika  gel  60  F254  dengan  ukuran  10  x  10  cm,  plat  dicuci dengan  metanol  dan  di  aktivasi  dalam  oven  pada  suhu  110°C  Selama  30  menit.  Fase gerak  pertama  dibuat  sebanyak  10  mL,  dipipet  sebanyak  6,9  mL  kloroform,  2,7  mL metanol,  dan  0,4  mL  air.  Pelarut  dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur  10  mL,  kemudian digojog hingga homogen. Fase gerak kedua dibuat sebanyak 10 mL, dipipet sebanyak 5,3 mL  kloroform,  2,8  mL  asam  asetat  glasial,  1,1  mL  metanol,  dan  0,7  mL  air.  Pelarut dimasukkan ke dalam labu ukur 10 mL, kemudian dikocok hingga homogen. Isolat hasil KLTP  dilarutkan  dengan  metanol.    Diambil  sebanyak  10  μL  kemudian  ditotolkan  pada plat  KLT.  Plat  dielusi  dengan  eluen  dengan  tingkat  kepolaran  dan  arah  yang  berbeda. Setelah dielusi plat diangin anginkan selama 10 menit untuk menguapkan fase gerak yang masih  tersisa  pada  plat.  Hasil  elusi  diamati  menggunakan  penampak  noda  sinar  ultra violet  254  nm.  Hasil  pengamatan  yang  menunjukkan  satu  bercak  atau  satu  spot  tunggal menandakan  senyawa  isolat  yang  diperoleh  merupakan  senyawa  kimia  tunggal  atau murni.

## Ekstraksi-Fraksinasi
Daun  bungkus  yang  telah  dikeringkan  dibuat  menjadi  serbuk.  Dilakukan  proses esktraksi  secara  maserasi.  Sebanyak  500  gram  serbuk  daun  bungkus  diekstraksi  dengan pelarut etanol 96%. Dipartisi cair-cair dengan pelarut dietil eter dan  n-butanol.  Filtrat di evaporasi dan selanjutnya diuapkan dengan waterbath. Diperoleh ekstrak kental sebanyak 28,46 gram berwarna hijau pekat.

## Uji Busa
Ekstrak  daun  bungkus  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  yang  sudah  berisi aquadest  10  ml  ,  kocok.  Ditambahkan  1  tetes  larutan  asam  klorida  2  M  .  Jika  terbentuk busa stabil dengan ketinggian 1-3 cm selama 30 detik menandakan positif saponin.

## Uji Pewarna
Simplisia  daun  bungkus  sebanyak  0,5  gram  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi yang  telah  berisi  kloroform  10  ml.  Dipanaskan  selama  5  menit  dengan  penangas  air sambil  dikocok.  Ditambahkan  beberapa  tetes  pereaksi  Lieberman  Burchard,  kemudian
diamati.  Jika  terbentuk  cincin  coklat/violet  maka  menunjukkan  saponin  triterpen,  jika terbentuk warna hijau/biru menunjukkan saponin steroid.

## Isolasi KLTP
Ekstrak  n-butanol  diisolasi  secara  KLT  dengan  ditotolkan  menggunakan  pipa kapiler  pada  permukaan  lempeng.  Dielusi  dengan  eluen  kloroform-etanol-air  (10:6:1). Bercak berupa pita diamati dengan penampak sinar UV 254 nm dan 366 nm. Kemudian lempeng disemprot dengan pereaksi Lieberman Bucard dan dipanaskan pada suhu 110°C selama  10  menit.  Pita  yang  terbentuk  dikeruk  dari  plat  kaca,  ditampung  ke  dalam  vial dengan jalur pita. Kemudian dilarutkan dengan etanol lalu disaring.

## Isolasi KLT 2 Dimensi
Setelah diperoleh fraksi tunggal, dilanjutkan dengan KLT 2 dimensi. Fraksi dielusi dengan kloroform : metanol : air (10:6:1) untuk arah 1, dan kloroform-etanol-air (15:6:1) untuk arah 2. Setelah dielusi dideteksi dengan menggunakan lampu UV 366 nm.

## Identifikasi Senyawa Saponin dengan Spektrofotometri Ultraviolet
Filtrat  diidentifikasi  dengan  spektrofotometer  pada  panjang  gelombang  200-400 nm.

## Ekstraksi
Sebanyak  100  gram  simplisia  dimasukkan  ke  dalam  botol  coklat  gelap  bertutup yang  bersih  kemudian  direndam  dengan  etanol  sebanyak  600  ml.  Botol  coklat  gelap ditutup  dan  didiamkan  selama  3  hari  dengan  sesekali  kocok.  Kemudian  hasil  ekstrak disaring  untuk  memperoleh  filtrat  I  dan  simplisia  yang  telah  dieskstrak,  diekstraksi kembali dengan etanol 400 ml dan didiamkan selama 2 hari dengan sesekali kocok. Hasil ekstrak  (filtrat  II)  dicampurkan  dengan  filtrat  I,  kemudian  dievaporasi  pada  suhu  40°C hingga diperoleh ekstrak kental.

## KLT
Ekstrak  dilarutkan  dengan  alkohol  95%  di  totolkan  pada  plat  KLT.  Lempeng kemudian  dielusi  dengan  eluenkloroform  :  metanol  :  aquadest  (13:7:2)  dalam  100  ml. Pengamatan  noda  menggunakan  lampu  UV  254  nm  dan  366  nm.  Lempeng  juga disemprotkan pereaksi Lieberman Burchard dihitung nilai Rf (Retensi Faktor).

## Uji Spektrofotometri UV-Vis
Ekstrak  kental  0,5  gram  dilarutkan  dengan  alkohol  96%  sehingga  menjadi  larutan ekstrak,  yang  diidentifikasi  secara  kualitatif  dengan  spektrofotometri  UV-Vis.  Larutan ekstrak  sebanyak  2  ml  dimasukkan  ke  dalam  kuvet  spektrofotometer  UV-Vis  untuk identifikasi  nilai  absorbansi  senyawa  saponin  pada  panjang  gelombang  maksimal. Pengamatan dilakukan pada range panjang gelombang 200-400 nm dengan interval 5.

## Ekstraksi
Daun binahong yang telah dikumpulkan, masing-masing dibersihkan dari kotoran- kotoran  yang  menempel  (sortasi  basah)  kemudian  dicuci  dengan  air  mengalir  sampai bersih, kemudian ditiriskan untuk menghilangkan air sisa-sisa pencucian. Daun binahong
yang  telah  bersih  dan  bebas  air  pencucian  dikeringkan  di  bawah  sinar  matahari  sampai masingmasing  tanaman  kering,  kemudian  dibersihkan  kembali  dari  kotoran  yang mungkin tidak  hilang saat sortasi kering.  Simplisia  kering tersebut selanjutnya digrinder hingga menjadi simplisia serbuk kemudian diayak dengan ayakan mesh 20 lalu ditimbang untuk  mendapatkan  bobot  akhir  simplisia.  Disimpan  dalam  wadah  yang  kering  dan bersih.

## KLT Analitik
Lempeng alumunium silica gel GF254 Merck disiapkan dengan ukuran panjang 10 cm dan lebar 3 cm. Ekstrak  kental yang  telah dilarutkan dengan alkohol 95%  ditotolkan pada lempeng tepi bawah dan diangin-anginkan beberapa saat.  Lempeng dimasukkan ke dalam chamber  yang berisi eluen yaitu campuran homogen lapisan bawah pelarut antara kloroform  :  metanol  :  akuades  (13:7:2).  Lempeng  dibiarkan  terelusi  hingga  eluen merambat  sampai  pada  tanda  garis  tepi  atas  lempeng  kemudian  dikeluarkan  dan dikeringkan  di  udara.  Pengamatan  noda  menggunakan  lampu  UV  254  dan  366  nm. Lempeng  juga  disemprotkan  dengan  pereaksi  LB  dan  dipanaskan  pada  suhu  110oC selama 10 menit untuk memperjelas warna noda yang terbentuk.

## Isolasi Senyawa Saponin dengan KLT Preparatif
Lempeng preparatif silika gel 60 F254 Merck disiapkan dengan ukuran panjang 20 cm dan lebar 20 cm. Ekstrak kental yang telah dilarutkan dengan alkohol 96% ditotolkan sepanjang  lempeng  tepi  bawah  dan  diangin-anginkan  beberapa  saat.  Lempeng dimasukkan  ke  dalam  chamber  yang  berisi  eluen  yang  telah  dijenuhkan  yaitu  campuran homogen lapisan bawah pelarut antara  kloroform : metanol :  akuades (13:7:2) Lempeng dibiarkan  terelusi  hingga  eluen  mencapai  batas  atas  lempeng  kemudian  dikeluarkan  dan dikeringkan  di  udara.  Pengamatan  noda  menggunakan  lampu  UV  254  dan  366  nm. Lempeng  juga  disemprotkan  pereaksi  Lieberman-Burchard  (LB)  pada  kedua  bagian  tepi dan  bagian  tersebut  dikeringkan.  Noda-noda  yang  terbentuk  pada  bagian  tepi  lempeng dihubungkan  dengan  garis  dari  tepi  satu  ke  tepi  lainnya.  Bagian  dalam  garis  dikerok dengan  membuang  bagian  yang  telah  dipanaskan  dan  dilarutkan  dengan  alkohol  96% sebagai isolat.

## Identifikasi Menggunakan KLT Dua Dimensi
Isolat  yang  telah  diperoleh  kemudian  ditotolkan  pada  lempeng  KLT  G60  F254, dielusi menggunakan 2 eluen dengan tingkat kepolaran dan arah yang berbeda. Hasil elusi diamati menggunakan penampak noda sinar ultra violet 254 nm. Hasil pengamatan yang menunjukkan  satu  spot/bercak  tunggal  menandakan  senyawa  isolat  yang  diperoleh merupakan senyawa kimia tunggal atau murni.

## Identifikasi Senyawa Saponin dengan Spektrofotometri UV-Vis
Isolat  yang  diperoleh  dari  hasil  KLT  preparatif  diidentifikasi  secara  kualitatif dengan  spektrofotometri  UV-Vis.  Isolat  sebanyak  5  ml  dimasukkan  ke  dalam  kuvet spektrofotometer  UV-Vis  untuk  diidentifikasi  nilai  absorbansi  senyawa  saponin  pada panjang  gelombang maksimal. Pengamatan dilakukan pada panjang  gelombang 200-800 nm.
Hasil dan Pembahasan
N No Nama
Tumbuhan
Metode
Analisis Fitokimia Hasil Ekstraksi Fraksinasi 1 Daun Majapahit ( Cresentia cujete ) Maserasi Menggunakan pelarut metanol Metode ECC Ekstrak metanol dipartisi dengan menggunakan pelarut  dietil  eter dan n-butanol. Metode KLT (uji  pemisahan  dan pemurnian) FD= Silica gel GF366. FG=  Kloroform  : metanol : air (13:7:2) Sinar UV 366 nm. Metode KLTP FD  =  Silica  gel GF366. FG  =  Kloroform  : metanol : air (13:7:2). Isolasidengan Metode Uji Spektrofotometri InfraRed Hasil  fraksinasi  yang sudah murni dicampurkan  dengan garam KBr, kemudian dimasukkan ke dalam Acculab 2. Skrining fitokimia Uji Busa Sampel dikocok hingga berbusa, kemudian tinggi busa  diukur  dan  di tetesi HCl. Uji Lierbermaan Bouchard Reagen= Anhidrat asetat dan asam sulfat pekat. Saponin steroid
2 Heba Pegagan (Centellaasiat ica L. Urban) Maserasi Menggunakan pelarut etanol 96% : air (70:30) Metode Kromatografi Kolom FD=  Bubur  silica gel. FG=  Kloroform  : metanol : air (30:10:1). Metode KLT FD= Silica gel GF254. FG=  Kloroform  : metanol : air (65:25:4). Sinar UV 366 nm. Metode KLTP FD=  Silica  gel  GF 254. FG=    Kloroform  : metanol : air Isolasi dengan Metode  KLT  dua dimensi FD= Silica gel G60F254. FG= a. 6,9mL kloroform, 2,7 mL metanol, 0,4 mL air. b. 5,3mL kloroform , 2,8 mL asam  asetat glasial,  1,1 mL metanol, dan  0,7  mL air. Sinar  UV  254
nm
Saponin triterpen
(65:25:4).
Sinar UV 254 nm. Daun Bungkus ( Smilax rotundifolia ) Maserasi Menggunakan pelarut etanol 96% Metode ECC Ekstrak kental sampel dipartisi dengan pelarut dietil  eter  dan  n- butanol. Isolasi dengan Metode KLTP FD= Silica gel G60F254. FG=  Kloroform  : etanol : air (10:6:1) Sinar UV 254 nm. Metode  KLT  dua dimensi FD= Silica gel G60F254. FG=  Kloroform  : etanol : air (15:6:1) Sinar UV 366 nm. Uji Spektrofotometri Ultraviolet Gelombang  200-400 nm. Saponin steroid Pelepah Pisang Uli (Musa Paradisiaca L.) Maserasi Menggunakan pelarut etanol. Metode KLT FD=  Silika  Gel  GF 254. FG=  Kloroform  : metanol: air (13:7:2). Sinar  UV  254  dan 366 nm. Uji Spektrofotometri UV-Vis Dilakukan pada range panjang gelombang 200- 400nm. Uji Busa Sampel dikocok hingga berbusa, kemudian tinggi busa  diukur  dan  di tetesi HCl. Saponin triterpen 3 Daun Binahong ( Anredera cordifolia (Ten.)Steenis) Maserasi Menggunakan pelarut metanol. Metode KLT Analitik FD=  Silika  gel  60 F254. FG=    Kloroform  : metanol: air(13:7:2). Sinar  UV  254  dan 366 nm. Isolasi Metode KLT Preparatif FD=  Silika  gel  60 F254.FG=
Kloroform:  metanol:
air(13:7:2). Sinar  UV  254  dan 366 nm. Metode  KLT  Dua Dimensi FD=  Silika  gel  60 F254.FG=  2  eluen dengan tingkat kepolaran yang Saponin triterpen
Glikosida  merupakan  suatu  senyawa  metabolit  sekunder    yang  berikatan  dengan senyawa  gula  melalui  ikatan  glikosida  (Andar  Subakti,  2018).  Kata  glikosida  memiliki makna, yaitu suatu karbohidrat  atau gula  yang umumnya bersifat oksidator yang disebut dengan glikon. Sedangkan bukan gula disebut sebagai aglikon. Glikosida adalah senyawa alami yang terdiri dari dua bagian yaitu bagian karbohidrat dan bagian bukan karbohidrat. Glikosida  triterpenoid,  steroid,  dan  flavonoid  merupakan  bagian  glikosida    bukan karbohidrat  yang  paling  banyak  ditemukan.  Sedangkan  bagian  karbohidrat  yang  paling banyak ditemukan yaitu glukosa, galaktosa, xilosa, dan arabinosa (Rijai, 2016).
Senyawa  glikosida  dapat  diperoleh  dari  berbagai  macam  tumbuhan  dengan  cara mengisolasinya.  Pemisahan  senyawa  glikosida  ini  dapat  dilakukan  melalui  beberapa tahapan,  mulai  dari  skrinning  fitokimia,  ekstraksi,  fraksinasi,  dan  isolasi.  Pada  uji skrinning fitokimia dilakukan untuk mengetahui kandungan senyawa yang terdapat dalam tumbuhan (Fajarullah, Irawan, & Pratomo, 2014). Kemudian ekstraksi, merupakan proses pemisahan  bahan  alam  dari  campurannya  menggunakan    pelarut  yang  sesuai.  Proses ekstraksi terdiri dari beberpa jenis yaitu maserasi, perkolasi, soxhlet, reflux dan destilasi uap.  pemilihan  jenis  ekstraksi  didasarkan  pada  sifat  bahan  dan  senyawa  yang  akan  di isolasi. Fraksinasi merupakan suatu metode pemisahan senyawa bahan alam berdasarkan kelarutan senyawa  tersebut. Dan  isolasi, merupakan proses pemurnian  atau sepemisahan senyawa bahan alam dengan menggunakan pelarut yang sesuai. Berikut ini adalah contoh tumbuhan yang mengandung senyawa glikosida:

## 1. Majapahit (Cresentia cujete)
Penelitian  yang  telah  dilakukan  terhadap  daun  majapahit  didapatkan  hasil  bahwa daun  majapahit  mengandung  senyawa  saponin  steroid.  Skrinning  fitokimia  yang dilakukan pada penelitian ini adalah uji busa dan uji pewarna Liebermann Bouchard, pada uji busa ekstrak daun majapahit memberikan hasil positif dengan terbentuknya busa lebih dari  10  menit  dan  pada  uji  warna  LB  ekstrak  daun  majapahit  juga  memberikan  hasil positif  dengan  adanya  perubahan  warna  dari  hijau  menjadi  kuning.  Selanjutnya  proses ekstraksi simplisia daun majapahit dilakukan dengan cara maserasi menggunakan pelarut
berbeda
Sinar UV 254 nm.
Uji Spektrofotometri UV-Vis Dilakukan pada panjang  gelombang 200-800 nm. Uji Warna Sampel  dimasukkan kedalam kloroform dan dipanaskan dengan  penangas  air sambil dikocok. Kemudian ditambahkan beberapa tetes lieberman burchard.
metanol  selama  5x24  jam,  setelah  itu  ekstrak  metanol  daun  majapahit  di  pekatkan sehingga diperoleh ekstrak metanol kental. Proses fraksinasi dimulai dengan proses ECC yaitu ekstrak metanol daun majapahit dipartisi dengan  menggunakan dietil eter : air (1:1) proses  ini  diulang  sebanyak  tiga  kali,  kemudian  hasil  partisi  ditambahkan  pelarut  n- butanol dan air (1:1) setelah itu diuapkan dan didapatkan hasil ekstrak metanol sebnayak 17 g dan ekstrak butanol. Setelah itu dilanjutkan dengan metode KLT  dengan fase gerak nya  adalah  kloroform  :  metanol  :  air  (13:7:2)  dan  disemprot  dengan  menggunakan H2SO4  10%  v/v.  Hasil  KLT  menunjukkan  warna  noda  ungu,  jingga  dan  coklat. Selanjutnya  pengujian  KLTP  dengan  menggunakan  eluen  kloroform  :  metanol  :  air (13:7:2), Hasil nya pada fraksi A terdapat 1 noda berwarna kuning sedangkan pada fraksi B dan C terdapat 1 noda berwarna jingga. Kemudian pada fraksi B dilakukan identifikasi ulang  menggunakan  metode  KLT  dua  dimensi  dan  didapatkan  hasil  pada  fraksi  B merupakan  senyawa  tunggal  murni  ditandai  dengan  noda  tunggal  pada  arah  pertama maupun  arah  kedua.  Selanjutnya  melakukan  uji  spektrofotometri  infra  merah  unutk menentukan spektrum senyawa murni, uji ini dilakukan dengan mencampurkan senyawa murni  dari  fraksi  B  dengan  garam  KBr  dan  kemudian  dimasukkan  ke  dalam  Acculab  2 dengan  spektrofotometri  infra  merah,  dan  didapatkan  hasil  adanya  gugus  fungsi  O-H, C=C,  C-C,  dan  C-H  maka  dapat  disimpulkan  bahwa  daun  majapahit  mengandung senyawa saponin (Firawati, 2018).

## 2. Herba Pegagan (Centella asiatica L. Urban)
Penelitian  yang  telah  dilakukan  terhadap  herba  pegagan.  Didapatkan  hasil  bahwa herba  pegagan  mengandung  saponin  triterpen  yang  merupakan  kelompok  senyawa glikosida.  Proses  ekstraksi  daun  pegagan  dilakukan  dengan  cara  maserasi  menggunakan pelarut  etanol  96%  :  air  dengan  perbandingan  70  :  30,  proses  ini  dilakukan  selama  tiga hari  dengan  menggunakan  1500  mL  dan  dua  hari  dengan  menggunakan  1100  mL. Selanjutnya dilakukan uji skrinning untuk melihat ada tidaknya kandungan glikosida pada ekstrak daun pegagan, uji skrinning yang dilakukan adalah uji saponin dan reaksi  positif nya  beruap  terbentuknya  busa  setealh  dikocok  dan  tidak  hilang  setelah  didiamkan maupun  ditetesi  HCl,  pda  uji  saponin  daun  pegagan  positif  mengandung  senyawa saponin.  Proses  fraksinasi  dilakukan  dengan  menggunakan  metode  kromatografi  kolom dan  fraksi  yang  dihasilkan  ditampung  pada  botol  vial  untuk  selanjutnya  diidentifikasi menggunakan KLT. Pada proses KLT eluen yang digunakan adalah kloroform : metanol : aquades (30:10:1) dan jumalah fraksi yang diidentifikasi sebanayk 39 fraksi. Hasil positif pada  sinar  UV  366  nm  ditandai  dengan  terbentuknya  warna  coklat-ungu  setelah disemprotkan  dengan  anisaldehid-asam  sulfat  dan  pada  sinar  UV  254nm  menunjukkan fluoresensi  berwarna  biru-ungu  .  Selanjutnya  dilakukan  uji  KLTP  dengan  eluen kloroform  :  metanol  :  air  (65:25:4  v/v)  diamati  dibawah  sinar  uv  366nm  dan  254nm kemudian disemprot dengan pereaksi LB dan dipanaskan pada suhu 85-90°C. Hasil pada proses KLTP diperoleh 2 pita setelah diamati dengan pita masing-masing berwarna biru gelap  dan  biru  tua.  Setelah  itu  subfraksi  diuji  lagi  dengan  metode  KLT  dan  hasil  positif ditunjukkan  dengan  adanya  spot  berwarna  ungu.  Isolasi  senyawa  saponin  pada  daun pegagan  dilakukan  dengan  menggunkan  metode  KLT  dua  dimensi  dengan  eluen  yang digunakan adalah 6,9 mL kloroform + 2,7mL metanol + 0,4 mL air pada eluen pertama, sedangkan pada eluen kedua digunakan 5,3mL kloroform + 2,8mL asam asetat glasial + 1,1mL  metanol  +  0,7mL  air,  dan  didapatkan  hasil  pada  elusi  I  terbentuk  spot  tunggal berwarna biru pada Rf 0,5 dan apada elusi  II terbentuk spot tunggal berwarna biru pada Rf  0,71.  Berdasarkan  hasil  tersebut  maka  spot  hasil  KLT  berwarna  biru  dengan  Rf  0,5 merupakan  hasil  positif  karena  mendekati  Rf  madecassic  acid,  dan  pada  elusi  II  dengan
Rf 0,71 menunjukkan hasil positif juga  karena mendekati hasil dari nilai Rf asiatic acid (Dewi, 2018).
3. Daun Bungkus (Smilax rotundifolia)
Penelitian  yang  telah  dilakukan  pada  penelitian  ini  didapatkan  hasil  bahwa  daun bungkus  megandung  senyawa  saponin  steroid.  Proses  ekstraksi  yang  dilakukan  yaitu dengan  metode  maserasi  menggunakan  pelarut  etanol  96%  ,  skrinning  fitokimia  ekstrak daun  bungkus  dilakukan  dengan  menggunakan  metode  uji  saponin  dan  uji  LB,  dimana daun  bungkus  memberikan  hasil  positif.  Selanjutnya  proses  fraksinasi  dilakukan  dengan metode ECC yaitu ekstrak dipartisi dengan menggunakan pelarut dietil eter dan pelarut n- butanol  kemudian  hasil  fraksinasi  di  kentalkan  dan  diperoleh  ekstrak  kental  sebanyak 28,46  gram  berwaran  hijau  pekat.  Isolasi  senyawa  glikosida  daun  bungkus  dilakukan dengan  menggunakan  metode  KLTP,  eluen  yang  digunakan  adalah  kloroform  :  etanol  : air  (10:6:1).  Hasil  KLTP  didapatkan  pada  fraksi  A  berwarna  hijau  dengan  nilai  Rf  0,86 dan  pada  fraksi  B  berwarna  hijau  terang  dengan  nilai  Rf  0,79.  Kemudian  dilakukan  uji lebih lanjut pada fraksi B dengan menggunakan metode KLT dua dimensi dengan  eluen untuk arah 1 adalah kloroform : etanol : air (10:6:1) dan untuk arah 2 adalah kloroform : etanol : air (15:6:1), didapatkan hasil berupa adanya spot tunggal pada lempeng silika gel. Kemudian  fraksi  B  diuji  dengan  menggunakan  spektrofotometri  ultraviolet  pada gelombang 200-400 nm dan didapatkan hasil yaitu terdapat serapan sebanyak 0,274 pada panjang gelombang 266,20 nm (Firawati & Iqbal, 2018).
4. Pelepah Pisang Uli (Musa Paradisiaca L.)
Penelitian  yang  telah  dilakukan  didapatkan  hasil  bahwa  pelepah  pisang  uli mengandung  senyawa  saponin  triterpen.  Proses  ekstraksi  yang  dilakukan  dengan menggunakan metode maserasi menggunakan pelarut etanol, Skrinning fitokimia pelepah pisang  dilakukan  dengan  menggunakan  metode  uji  busa    dimana  pada  sampel  ekstrak pelepah  pisang  uli  menghasilkan  busa  dengan  ketinggian  2  cm  dan  bertahan  selama  15 menit.  Selanjutnya  pada  proses  fraksinasi  dilakukan  dengan  menggunakan  metode kromatografi  lapis  tipis  (KLT)  dengan  eluen  yang  digunakan  yaitu  kloroform  :metanol :air  (13:7:2)  dengan  pengamatan  noda  menggunakan  lampu  UV  254  nm  dan  366  nm. Kemudian  lempeng  juga  di  semprotkan  pereaksi  Lieberman  Burchard  didapatkan  hasil KLT berupa bercak noda berwarna kuning dibawah lampu UV 366 nm yang menandakan hasil  positif.  Selanjutnya  diuji  dengan  menggunakan  spektrofotometri  UV-Vis  pada panjang  gelombang  maksimum  220  nm  dengan  nilai  absorbansi  0,639  dengan menggunakan  metode  kromatografi  lapis  tipis  didapatkan  nilai  Rf  senyawa  saponin  dari ekstrak  pelepah  pisang  uli  yaitu  0,825  sedangkan  range  Rf  saponin  yaitu  0,79-0,84.  Hal tersebut  menunjukan  hasil  positif  pelepah  pisang  uli  mengandung  senyawa  saponin triterpen.
5. Daun Binahong (Anredera cordifolia (Ten.)Steenis)
Penelitian yang telah dilakukan didapatkan hasil pada daun binahong mengandung senyawa  saponin  triterpen.  Proses  yang  dilakukan  pada  isolasi  daun  binahong  meliputi proses  ekstraksi  dengan  menggunakan  metode  maserasi  menggunakan  pelarut  metanol penggunaan pelarut metanol bertujuan agar hasil ekstraksi yang dihasilkan lebih banyak. Skrinning  fitokimia  daun  binahong  dilakukan  dengan  uji  warna,  sampel  dimasukkan kedalam kloroform dan dipanaskan selama 5 menit dengan penangas air  sambil dikocok kemudian  ditambahkan  beberapa  tetes  lieberman  burchard  hasil  yang  diperoleh  berupa cincin  warna  coklat-ungu  yang  menandakan  positif  saponin  triterpen.    Kemudian dilanjutkan  dengan  fraksinasi  atau  pemisahan  senyawa  menggunakan  metode menggunakan  metode  KLT  analitik,  fase  diam  yang  digunakan  Silika  gel  60  F254  dan eluen yang digunakan kloroform: metanol: air (13:7:2) selanjutnya dilakukan pengamatan pada  lampu  UV  254  dan  366  nm  kemudian  disemprotkan  pereaksi  lieberman  burchard
didapatkan  hasil  bercak  noda  berwarna  gelap  atau  ungu.  Selanjutnya  diisolasi menggunakan  metode    KLT  preparatif  dengan  fase  diam  yang  digunakan  Silika  gel  60 F254  dan  eluen  yang  digunakan  kloroform:  metanol:  air  (13:7:2)  selanjutnya  dilakukan pengamatan pada lampu UV 254 dan 366 nm dan hasil yang diperoleh berupa noda gelap berwarna keunguan, kemudian untuk meyakinkan reaksi warna yang terjadi sekitar 1 cm panjang  plat  dikerok  dan  direaksikan  dengan  pereaksi  LB  (Lieberman  Burchard)  hasil yang  diperoleh  berwarna  coklat.  Menunjukan  hasil  yang  sama  dengan  uji  warna  yang telah dilakukan sebelum nya. Selanjutnya hasil dari metode KLT preparatif diidentifikasi dengan  menggunakan  KLT  dua  dimensi  untuk  mengetehui  keberadaan  isolat  tunggal dengan  menggunakan  fase  diam  silika  gel  60  F25  dengan  2  eluen  yang  berbeda kepolarannya  dan  diamati  pada  lampu  UV  254  nm  hasil  yang  didapatkan  terdapat  satu noda  tunggal  (Baderos,  2017).  Kemudian  diidentifikasi  menggunakan  Spektrofotometri UV-Vis  memliki  nilai  absorbansi  senyawa  saponin  sebesar  3,565  pada  panjang gelombang maksimum 211.

## Kesimpulan
Penulis  memperoleh  kesimpulan,  lima  tanaman  tersebut  positif  mengandung senyawa  glikosida  saponin.  Pada  Daun  Binahong  (Anredera  cordifolia  (Ten.)  Steenis), Pelepah  Pisang  Uli  ( Musa  paradisiaca  L. ),  dan  Herba  Pegagan  ( Centella  asiatica  L. Urban )  saponin  yang  terkandung  merupakan  saponin  triterpen.  Sedangkan  pada  Daun Majapahit  ( Cresentia  cujete )  dan  Daun  Bungkus  (Smilax  rotundifollia),  saponin  yang terkandung  merupakan  saponin  steroid.  Secara  umum,  identifikasi  dan  isolasi  senyawa glikosida  saponin  dilakukan  dengan  cara  mengekstraksi  sampel  secara  maserasi  dan dipartisi  menggunakan  pelarut  polar  seperti  methanol,  etanol,  dan  n-butanol,  dilakukan skrining  fitokimia  dengan  uji  saponin  dan  uji  pewarna  Liebermann  Burchard  (LB), diisolasi  dengan  menggunakan  KLT  dan  KLTP,  kemudian  dilakukan  uji  pemurnian dengan menggunakan KLT 2 Dimensi.

## Bibliografi
Andar Subakti, N. I. Nyoman. (2018). Skrining Fitokimia Dan Analisis Total Fenol Pada Lulur Tradisional Bali Tangi . Yogyakarta: Jurusan Analis Kesehatan. Amody, Zahira, & Anggreani, Kamila. (2017). Identifikasi Senyawa Glikosida Pada Akar Gebang  (Corypha  Utan)  Asal  Desa  Landayya  Kabupaten  Bantaeng.  Majalah Farmasi Nasional, 14(1), 8–13.
Baderos,  Ahmad.  (2017). Pemisahan  senyawa  steroidfraksi  petroleum  eter  alga  merah (Eucheuma  cottonii)  dengan  metode  kromatografi  lapis  tipis  dan  identifikasi menggunakan  LC-MS .  Jawa  Timur:  Universitas  Islam  Negeri  Maulana  Malik Ibrahim.
Dewi, N. L. A. (2018). Pemisahan, Isolasi, dan Identifikasi Senyawa Saponin dari Herba Pegagan (Centella asiatica L. Urban). Jurnal Farmasi Udayana, 68-76.
Firawati,  F.  (2018).  Isolasi  dan  Identifikasi  Senyawa  Saponin  Ekstrak  Butanol  Daun Majapahit  (Cresentia  cujete)  dengan  Metode  Romatografi  Lapis  Tipis  dan Spektrofotometri  Infra  Merah.  Jurnal  Ilmiah  Pena:  Sains  dan  Ilmu  Pendidikan, 10(1), 12-17.
Fajarullah,  Aulia,  Irawan,  Henky,  &  Pratomo,  Arief.  (2014).  Ekstraksi  Senyawa Metabolit  Sekunder  Lamun  Thalassodendron  Ciliatum  Pada  Pelarut  Berbeda. Repository UMRAH .
Firawati,  F.,  &  Pratama,  M.  I.  (2018).  Isolasi  dan  Identifikasi  Senyawa  Saponin  Daun Bungkus (Smilax rotundifolia) Menggunakan Metode Spektrofotometri Ultraviolet. Jurnal Farmasi, 6(2), 115-121.
Khotimah,  Khusnul.  (2016). Skrining  fitokimia  dan  identifikasi  metabolit  sekunder senyawa  karpain  pada  ekstrak  metanol  daun  Carica  Pubescens  Lenne  &  K.  Koch dengan  LC/MS  (Liquid  Chromatograph-tandem  Mass  Spectrometry) .  Jawa  Timur:
Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim.
Marni,  Marni,  &  Ambarwati,  Retno.  (2015).  Khasiat  jamu  cekok  terhadap  peningkatan berat badan pada anak. KEMAS: Jurnal Kesehatan Masyarakat , 11 (1), 102–111. Najib, Ahmad. (2018). Ekstraksi senyawa bahan alam . Yogyakarta: Deepublish. Prayoga,  Dewa  Gede  Eka,  Nocianitri,  Komang  Ayu,  &  Puspawati,  Ni  Nyoman.  (2019).
Identifikasi  senyawa  fitokimia  dan  aktivitas  antioksidan  ekstrak  kasar  daun  pepe (gymnema reticulatum br.) pada berbagai jenis pelarut. Jurnal Ilmu Dan Teknologi Pangan , 8 (2), 111–121.
Rachman, Arif, Wardatun, Sri, & Wiendarlina, Ike Yulia. (2018). Isolasi dan Identifikasi Senyawa  Saponin  Ekstrak  Metanol  Daun  Binahong  (Anredera  cordifolia  (Ten.) Steenis). Jurnal Online Mahasiswa (JOM) Bidang Farmasi, 1(1).
Rijai,  Laode.  (2016).  Senyawa  glikosida  sebagai  bahan  farmasi  potensial  secara  kinetik. Journal of Tropical Pharmacy and Chemistry, 3(3), 213–218.
Rikomah,  S.  E.,  &  Elmitra,  E.  (2017).  Identifikasi  Senyawa  Saponin  Ekstrak  Etanol Pelepah  Pisang  Uli  (Musa  paradisiaca  L.).  SCIENTIA:  Jurnal  Farmasi  dan Kesehatan, 7(1), 56-60.
Saifudin,  Azis.  (2014). Senyawa  alam  metabolit  sekunder  teori,  konsep,  dan  teknik pemurnian . Yogyakarta: Deepublish.
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-ShareAlike 4.0 International License.