POTENSI DAUN PALA ( Myristica fragrans Houtt)

## SEBAGAI SUMBER FENOLIK
Muammar Fawwaz 1 , Siti Nurdiansyah A, Muzakkir Baits Fakultas Farmasi, Universitas Muslim Indonesia
1 muammar.fawwaz@umi.ac.id

## ABSTRACT
Phenolic  is  a  compound  that  having  an  aromatic  ring  with  one  or  more  hydroxyl  groups.  Phenolic compounds  in  foods  can  be  grouped  into  simple  phenols  and  folic  acid.  This  study  aimed  to  determine  the  total phenolic content of the leaf extract of nutmeg (Myristica fragrans Houtt). Leaves of nutmeg extracted using 70% ethanol, then the extract conducting qualitative analysis by reaction with FeCl 3 as specific reagent. The result of this reaction is green solution, it means there are phenolic compound in the extract. The quantitative process of total phenolic  was  analyzed  by  UV-Vis  spectrophotometry.  A  comparison  used  in  this  analysis  is  gallic  acid;  it  is  a standard reference in the determination of total phenolic content. Sample measured at a wavelength of 860.7 nm, which is the maximum wavelength of gallic acid. Total average content of phenolic is 183.56-mgGAE/g extract. The ethanol extract of nutmeg’s leaves have high total phenolic content, which means it is potential as antioxidant.
Keywords: Nutmeg leaf, total phenolic, UV-Vis Spectrophotometry

## I. PENDAHULUAN
Indonesia memiliki sumber daya    genetik pala yang  besar  dengan  pusat  keragaman  tanaman  yang berada  di  kepulauan  Maluku.  Keragaman  tanaman tertinggi  ditemukan  di  Pulau  Banda,  Siau,  dan  Papua (Hadad  dan  Hamid,  1990).  Sebagai  pusat  keragaman genetic  ( center  of  diversity ),  Indonesia  harus mengambil peran yang lebih besar dalam pengelolaan, pengembangan,  dan  pemanfaatan  tanaman  ini.    Pala sebagai  sumber  daya  pertanian,  perlu  dikelola  dan dimanfaatkan  secara  optimal  guna  mendukung pembangunan pertanian Indonesia yang berkelanjutan.
Daun  pala  mengandung  minyak  atsiri, senyawa  utama  minyak  atsiri  pada  daun  pala  adalah myristicin (Puslitbang Perkebunan 2014). Minyak atsiri yang  berasal  dari  biji  dan  fuli  pala  banyak  digunakan untuk industry obat-obatan, parfum dan kosmetik.
Pala  dikenal  sebagai  tanaman  rempah  yang memiliki  nilai  ekonomis  dan  multiguna  karena  setiap bagian  tanaman  dapat  dimanfaatkan  dalam  berbagai industri.  Daun  pala  merupakan  salah  satu  bagian tanaman yang belum banyak termanfaatkan. Rastuti et al .  (2013)  memaparkan  bahwa  senyawa  yang terkandung  pada  daun  pala  diantaranya  alkaloida, triterpenoid,  tanin,  dan  2  flavonoid  (Rastuti et  al ., 2013).
Komponen flavonoid yang terdapat pada daun pala  menunjukkan  keberadaan  senyawa  fenolik, sehingga  perlu  untuk  dilakukan  penelitian  mengenai kandungan  fenolik  total  pada  ekstrak  daun  pala. Komponen  fenolik  ini  penting  mengingat  peranannya yang  besar  dalam  pengobatan  dan  pencegahan timbulnya penyakit termasuk sebagai antioksidan.

## II. METODE PENELITIAN
A. Pengabilan dan Pengolahan Sampel
Pengambilan  sampel  daun  pala  ( Myristica fragrans Houtt)  di  Kota  Ambon,  dengan  cara mengambil  daun  yang  masih  segar  kemudian dibersihkan  dari  kotoran  yang  melekat  pada  daun menggunakan  air  mengalir.  Daun  yang  telah dibersihkan kemudian di gunting-gunting, dirajang dan diangin-anginkan  selama  beberapa  hari  (tidak  boleh terkena  sinar  matahari  langsung).  Setelah  kering, sampel diserbukan dan siap diekstraksi.

## B. Metode Ekstraksi
Serbuk  daun  pala  ditimbang  100  gram, dimaserasi menggunakan pelarut etanol 70%, dibiarkan selama 3 hari dalam wadah tertutup dan terlindung dari cahaya  matahari  langsung  sambil  diaduk  secara periodik, setelah 3 x 24 jam dilakukan penyaringan dan ampasnya  dimaserasi  kembali  dengan  cairan  penyari yang  baru.  Maserasi  dilakukan  sebanyak  3  kali  dan diperoleh  ekstrak  etanol  cair.  Hasil  penyarian  yang diperoleh kemudiaan diuapkan menjadi ekstrak kental.

## C. Analisis Kualitatif
Senyawa  golongan  fenolik  dapat  dideteksi dengan menggunakan FeCl 3 1%. Dimana pengujiannya yaitu sebanyak 1 gram sampel dilarutkan dengan etanol 70%. Larutan yang dihasilkan diambil sebanyak 1 mL kemudiaan  ditambahkan  2  tetes  larutan  FeCl 3 . Terbentuknya  warna  hijau  atau  hijau  kebiruan menunjukkan adanya senyawa fenolik dalam sampel.

## D. Analisis Kuantitatif
1. Pembuatan larutan induk asam galat
Larutan  standar  asam  galat 1000 ppm  dibuat dengan  cara  menimbang 5 mg asam galat  dilarutkan dengan etanol 70% p.a. hingga volume 5 mL.

## 2. Pembuatan larutan
Na 2 HCO 3 7%
Sebanyak 1,75 g Na 2 HCO 3 ditambah 15 mL air suling,  kemudian  dididihkan  sampai  serbuk Na 2 HCO 3 larut  sempurna.  Setelah  itu  didiamkan  selama  24  jam, disaring  dan  diencerkan  dengan  air  suling  sampai volume 25 mL.
3. Penentuan λ maks
Penentuan panjang gelombang maksimum asam galat dilakukan dengan mengukur larutan asam galat 25 ppm  pada  range  panjang  gelombang  845-875  nm. Panjang gelombang 860.7 nm menunjukkan absorbansi maksimum  sehingga  merupakan  panjang  gelombang maksimum asam galat.

## 4. Pembuatan kurva baku asam galat
Dibuat deret konsentrasi 20, 30, 40, 50, dan 60  ppm  dari  larutan  induk,  kemudian  masing- masing  dipipet  0,3  mL  dan  ditambahkan  1,5  mL reagen Folin-Ciocalteu lalu  digojok,  didiamkan selama  3  menit.  Setelah  itu  ditambahkan  1,2  mL
larutan Na 2 HCO 3 7% digojok homogen, kemudian didiamkan  selama  10  menit  pada  suhu  kamar. Semua larutan diukur absorbansinya pada panjang gelombang  860,7  nm,  kemudian  dibuat  kurva kalibrasi  dengan  menggunakan  persamaan  regresi linier.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil Penelitian
Tabel  1 .  Hasil  pengujian  kualitatif  senyawa  fenolik ekstrak etanol Daun Pala Sampel Pereaksi Warna Ket Ekstrak Etanol daun Pala FeCl 3 Hijau (+) Tabel 2 . Kurva kalibrasi larutan standar asam galat Konsentrasi (µg/L) Absorbansi 20 0.315 30 0.436 40 0.575 50 0.707 60 0.892 y = 0.0143x + 0.015 Tabel 3 . Perhitungan kadar rata-rata asam galat ada ekstrak etanol daun pala menggunakan spektrofotometri UV-Vis
Replikasi Absorbansi (Y) Kandungan FenolikAwal (mg/L) Kandungan  Fenolik (mg GAE/g Sampel) Rata-rata Kandungan Fenolik (mg GAE/g Sampel) I 0,567 38,601 193,005 183,565 II 0,527 35,804 179,02 III 0,526 35,734 178,67

## B. Pembahasan
Senyawa  fenolik  merupakan  senyawa  yang bersumber  dari  beragam  tumbuhan.  Senyawa  ini mempunyai  ciri,  yaitu  cincin  aromatic  yang mengandung  satu  atau  dua  gugus  OH.  Senyawa fenolik  di  alam  terdapat  sangat  luas  mempunyai variasi struktur yang luas, mudah ditemukan di semua tanaman,  daun,  bunga  dan  buah.  Ribuan  senyawa fenolik di alam telah diketahui strukturnya antara lain flavonoid, fenol monosiklik sederhana, fenil propanoid,  polifenol  (lignin,  melanin,  tannin),  dan kuinon fenolik (Fauzia, 2008).
Metode  ekstraksi  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  maserasi,  dimana  ekstraksi merupakan salah satu langkah awal dalam melakukan penyiapan sampel. Metode ini juga sederhana, mudah dan  tidak  menggunakan  proses  pemanasan  serta dilihat  dari  simplisia  yang  digunakan  berupa  daun
yang memiliki tekstur lunak. Pelarut yang digunakan untuk ekstraksi sampel daun pala ( Myristica fragrans Houtt)  yaitu  etanol  70%.  Pemilihan  etanol  70% sebagai  pelarut  bertujuan  untuk  mengekstraksi senyawa-senyawa  yang bersifat polar dan non polar. Senyawa  fenolik  dapat  terlarut  oleh  pelarut  seperti etanol karena mempunyai gugus hidroksil (Ukieyanna, 2012). Etanol 70% mampu mengekstrak senyawa fenolik lebih banyak dari pada etanol dengan kemurnian yang tinggi (Bimakr, 2010).
Ekstrak  yang  diperoleh  dilanjutkan  dengan uji kualitatif untuk memastikan ada tidaknya senyawa fenolik  dalam  ekstrak  daun  pala.  Ekstrak  yang dilarutkan dengan etanol 70%, larutan yang dihasilkan diambil sebanyak 1 mL kemudian ditambahkan 2 tetes FeCl 3 .  Terbentuk  warna  hijau  atau  hal  ini  yang menunjukan adanya senyawa fenolik pada sampel.
Asam  galat  direaksikan  dengan  reagen Folin-Ciocalteau akan  menghasilkan  warna  kuning yang menandakan bahwa mengandung fenol, setelah itu ditambahkan dengan larutan Na 2 HCO 3 menghasilkan  warna  biru.  Intensitas  warna  biru ditentukan dengan banyaknya kandungan fenol dalam larutan  sampel.  Semakin  besar  konsentrasi  senyawa fenolik dalam sampel semakin pekat warna biru yang terlihat,  penambahan  Na 2 HCO 3 pada  uji  fenolik bertujuan untuk membentuk suasana basa agar terjadi reaksi reduksi Folin-Ciocalteau oleh gugus hidroksil dari fenolik di dalam sampel (Ismail, Runtuwena dan Fatima, 2012).
Hasil pengukuran absorbansi larutan standar asam  galat  yang  diperoleh  dimasukan  kedalam microsoft  excel  untuk  mendpatkan  kurva  kalibrasi larutan  standar  asam  galat  berupa  grafik  kurva konsentrasi  (C)  versus  absorbansi  (A).  Berdasarkan gambar  dapat  dilihat  bahwa  kurva  kalibrasi  dengan persamaan  regresi  yaitu  y  =  0,0143x  +  0,015;  pada pengukuran absorbansi yang ditunjukan dengan nilai koefisien  korelasi  (r)  sebesar  0,993,  nilai  (r)  ini mendekati  angka  1  yang  menunjukan  bahwa persamaan  regresi  tersebut  adalah  linier.  Untuk menguatkan  data  linieritas  ini  maka  dilanjutkan dengan  perhitungan  Vx 0 dan  diperoleh  nilai 1,39% (<5%)  menunjukkan  bahwa  korelasi  yang  terbentuk linier.
Pada  penelitian  ini  diperoleh  kandungan fenolik  total  yang  ditentukan  berdasarkan  absorbansi sampel  pada  instrument  spektrofotometer  UV-Vis. Diperoleh tiga data dari tiga kali replikasi yaitu 0,567; 0,527  dan  0,526.  Selanjutnya  data  ini  dimasukkan dalam  perhitungan  kadar,  sehingga  diperoleh  kadar fenolik total rata-rata pada ekstrak daun pala sebesar 183,56 mgGAE/g ekstrak.

## IV. KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  daun  pala  ( Myristica fragrans Houtt) mengandung senyawa fenolik total. Kadar fenolik total ekstrak daun pala sebesar 183,56 mgGAE/g ekstrak.

## DAFTAR PUSTAKA
Bimakr,  M.,  2010,  Comparison  of  Different Extraction  Methods  for  The  Extraction  of Major  Bioactive  Flavonoid  Compounds from Spearmint ( Mentha Spicata L.) Leaves. Food Bioprod Process .1-9. Fauziah,  L.,  2008,  Studi  Dimerisasi  Asam.  FMIPA, UI: Jakarta. Hadad,  E.A.,  A.  Hamid.    1990,  Mengenal  berbagai plasma nutfah pala di daerah Maluku Utara.
Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat, Bogor
Ismail,  Jefriyanto,  Max  R.J  Runtuwene,  danFeti Fatimah,  2012,  Penentuan  total  fenolik  dan uji aktivitas antioksidan pada Biji Dan Kuat Buah Pinang Yaki ( Areca vestiaria Giseke). Universitas Sam Ratulangi: Manado Murtijaya,  J.,  dan  Lim  Y.Y.,  2007,  Antioxidant Properties of Phylanthus amarus Extracts as Affected  by  Different  Drying  Methods, LWT-Food Sci. Technol.
Puslitbang  Perkebunan.  2014.  Pendugaan  jenis kelamin  tanaman  pala            dengan  analisis kandungan  myristicin  pada  daun.  InfoTek Perkebunan
Viranda,  P.M.,  2009,  Pengujian  Kandungan  Ekstrak Buah Tomat ( Lycopersicum esculentum var. pyriforme) Secara Spektrofotometri.
Fakultas  Kedokteran  Universitas  Indonesia: Jakarta