Cara Sitasi: Haerani  H.,  Sijid,  S.  A.,  Zulkarnain,  Z.  (2023).  Pengaruh  pemberian  cuka  aren  terhadap  kadar  gula  darah  dan  histopatologi  pankreas  mencit  ( Mus  musculus )  ICR  jantan. Teknosains: Media Informasi dan Teknologi , 17(2), 210-219. https://doi.org/10.24252/teknosains.v17i2.36424
Diajukan 3 Maret 2023; Ditinjau 5 Mei 2023; Diterima 5 Agustus 2023; Diterbitkan 30 Agustus 2023 Copyright © 2023. The authors. This is an open access article under the CC BY-SA license

## Pengaruh pemberian cuka aren terhadap kadar gula darah dan histopatologi pankreas mencit (Mus musculus) ICR jantan
Haerani 1 , St. Aisyah Sijid 1* , Zulkarnain 1
1 Program Studi Biologi Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Islam Negeri Alauddin Makassar Jl. HM. Yasin Limpo 36 Gowa, Sulawesi Selatan, Indonesia. 92113 *E-mail: aisyah.sijid@uin-alauddin.ac.id
Abstrak: Pengobatan  diabetes  mellitus  (DM)  dengan  konsumsi  obat-obatan  kimia  dalam jangka panjang dapat menimbulkan efek samping. Cuka aren menjadi salah satu bahan alami yang  dapat  menjadi  alternatif  pengobatan  DM.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  melihat pengaruh cuka aren dalam berbagai konsentrasi terhadap kadar gula darah dan histopatologi pankreas mencit ( Mus musculus ). Metode penelitian meliputi penentuan dosis aloksan dan cuka aren, pengukuran kadar asam asetat cuka aren, persiapan dan perlakuan hewan coba, pengukuran kadar gula darah mencit, serta pembuatan dan pembacaan preparat histopatologi pankreas mencit. Hasil penelitian menunjukkan bahwa cuka aren dengan rata-rata kadar asam asetat 2,08% mampu menurunkan kadar gula darah mencit dengan persentase tertinggi pada pemberian 0,3 ml cuka aren dengan penurunan sebesar 35% kemudian diikuti dengan dosis 0,2 ml dan 0,1 ml dengan persentase penurunan masing-masing sebesar 25,52% dan 17,94%. Cuka aren juga mampu memperbaiki histopatologi pankreas mencit berdasarkan penurunan tingkat kerusakan sel.
Kata Kunci: cuka aren; diabetes mellitus; histopatologi; kadar gula darah; Mus musculus
Abstract: Diabetes mellitus  treatment  with  long-term  consumption of chemical  drugs can cause side effects. Palm vinegar is one of the natural ingredients that can be an alternative treatment  for  DM.  This  study  aims  to  examine  the  effect  of  palm  vinegar  in  various concentrations on blood sugar levels and pancreatic histopathology of mice ( Mus musculus ). The stages  were determining  the dose of alloxan and palm vinegar, measuring acetic acid levels of palm vinegar, preparing and treating experimental animals, measuring blood sugar levels in mice, and preparing and reading histopathological preparations of the pancreas of mice. The results showed that palm vinegar with an average acetic acid level of 2.08% was able to reduce blood sugar levels in mice with the highest percentage in administration of 0.3 ml of palm vinegar with a decrease of 35% followed by doses of 0.2 ml and 0.1 ml with a reduction  percentage  of  25.52%  and  17.94%  respectively.  Palm  vinegar  was  also  able  to improve the pancreatic histopathology of mice by reducing the level of damage to cells.
Keywords: blood  sugar  levels;  diabetes  mellitus;  histopathology, Mus  musculus ;  palm vinegar

## PENDAHULUAN
iabetes  mellitus  (DM)  merupakan  masalah  kesehatan  utama  bagi  masyarakat secara global. Diabetes mellitus adalah penyakit bersifat menahun yang biasanya ditandai dengan kadar gula darah melebihi batas normal yakni kadar gula darah sewaktu ≥ 200 mg/dl sedangkan kadar darah puasa ≥ 126 mg/dl. Penyakit ini juga sering dijuluki  sebagai silent  killer dikarenakan  sering  tidak  disadari  oleh  penderitanya  dan ketika telah diketahui, biasanya sudah terjadi komplikasi (Hestiana, 2017). World Health Organization (WHO)  memproyeksikan  bahwa  pada  tahun  2030  mendatang,  penyakit diabetes  mellitus  akan  menjadi  penyebab  kematian  ketujuh  di  dunia  (Siddiqui  et  al., 2018).  Di  Indonesia,  penderita  diabetes  mellitus  diperkirakan  sebanyak  21,3  juta (Swastini  et  al.,  2018).  Penyakit  ini  berkaitan  dengan  produksi  hormon  insulin  yang D
berkaitan  dengan  kerja  pankreas.  Jika  sel  pada  pankreas  yaitu  sel  beta  mengalami kerusakan, maka inilah awal mula terjadinya penyakit diabetes mellitus.
Pengobatan diabetes mellitus dapat ditempuh secara medis dengan mengonsumsi obat-obatan  modern  yang  telah  dikembangkan  secara  global  serta  dengan  melakukan suntikan  insulin.  Namun,  pengobatan  secara  medis  bagi  penderita  diabetes  mellitus memiliki biaya yang tinggi sehingga masih bersifat memberatkan bagi sebagian kalangan (Ananta et al., 2016). Selain itu, Penggunaan antidiabetes oral dalam jangka waktu yang panjang  dapat  menyebabkan  timbulnya  efek  samping  bagi  penderita  (Swastini  et  al., 2018). Oleh karena itu, keberadaan obat  herbal atau obat alami yang telah teruji  untuk mengontrol  kadar  gula  darah  sangat  penting  untuk  diketahui.  Mengingat  bahwa keberadaan  obat  alami  dapat  menjadi  pilihan  alternatif  pengobatan  bagi  penderita diabetes mellitus (Ananta et al., 2016).
Cuka  menjadi  salah  satu  bahan  alami  yang  memiliki  kegunaan  dalam  berbagai bidang,  salah  satunya  untuk  pengobatan  suatu  penyakit.  Cuka  dapat  diperoleh  melalui proses  fermentasi  dari  berbagai  jenis  tumbuhan  maupun  buah-buahan.  Cuka  dapat diperoleh  di  sekitar  kita  dengan  cara  yang  mudah  karena  proses  pembuatannya  yang sangat sederhana (Kasim & Yusuf, 2020). Asam asetat merupakan kandungan utama dari cuka yang menjadi salah satu zat yang berpengaruh dalam pengontrolan kadar gula darah. Dalam  hal  ini,  asam  asetat  akan  memberikan  efek  kenyang  yang  lebih  lama  sehingga memperlambat  timbulnya  respon  metabolisme  di  dalam  tubuh  yang  juga  akan meningkatkan  sensitivitas  insulin  untuk  mengubah  glukosa  yang  telah  dikonsumsi menjadi gula otot (Zubaidah, 2015).
Tumbuhan  aren  merupakan  penghasil  cuka  yang  cukup  dikenal  oleh  masyarakat Indonesia.  Tumbuhan  aren  ini  tersebar  hampir  di  seluruh  wilayah  Indonesia  karena merupakan tanaman tropik. Bagian dari pohon ini hampir semuanya dapat dimanfaatkan dalam  berbagai  bidang,  mulai  dari  obat  tradisional,  dijadikan  olahan  makanan  dan minuman, berbagai macam peralatan dan bangunan serta berfungsi pula sebagai tanaman konservasi bagi tanah dan air (Leasa & Matdoan, 2015). Berdasarkan hal tersebut maka dilakukanlah  penelitian  untuk  melihat  pengaruh  cuka  aren  dalam  berbagai  konsentrasi terhadap  kadar  gula  darah  dan  histopatologi  pankreas  mencit  ( Mus  musculus ).  Hal  ini dapat menjadi sumber pengetahuan baru bagi masyarakat bahwa salah satu produk alami dalam hal ini cuka aren memiliki banyak manfaat terutama sebagai alternatif pengobatan maupun pencegahan diabetes.

## METODE PENELITIAN
Jenis  penelitian  yang  digunakan  yaitu  penelitian  bersifat  kuantitatif  dengan pendekatan  eksperimen  dengan  melihat  kadar  gula  darah  dan  histopatologi  pankreas mencit ( M. musculus ) setelah diberi perlakuan cuka aren. Penelitian ini dilaksanakan pada Juni-Oktober 2022 di Green House Biologi Jurusan Biologi Fakultas Sains dan Teknologi UIN  Alauddin  Makassar,  Laboratorium  Patologi  &  Anatomi  Rumah  Sakit  Umum Pendidikan UNHAS dan Laboratorium Patologi & Anatomi Rumah Sakit Haji. Prosedur yang dilakukan pada penelitian ini yaitu:
1. Penentuan dosis aloksan dan cuka aren
Dosis  aloksan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  sesuai  dengan  penelitian sebelumnya yang telah dilakukan oleh Dwica et al. (2020) yaitu 120 mg/kg BB mencit sedangkan untuk dosis cuka aren dapat ditentukan dengan mengalikan dosis pemakaian cuka pada manusia (2 sendok makan = 20cc). Penelitian ini menggunakan tiga dosis yang
diperoleh dengan menaikkan nilai dosis normal, sehingga didapat dosis yaitu dosis 1 (0,1 ml/hari/ekor), dosis 2 (0,2 ml/hari/ekor) dan dosis 3 (0,3 ml/hari/ekor). 2. Pengukuran kadar asam asetat cuka aren
Pengukuran  kadar  asam  asetat  pada  cuka  aren  dilakukan  dengan  metode  Total Asam Tertitrasi (TAT). Pertama, larutan cuka aren ditimbang sebanyak 10 ml. Kemudian dimasukkan ke dalam tabung erlenmeyer dan ditambahkan 100 ml aquadest. Selanjutnya sampel uji tersebut dipipet sebanyak 25 ml dan dimasukkan ke dalam labu erlenmeyer. Sampel kemudian dititrasi dengan larutan NaOH 0,1 N dengan menggunakan indikator phenolptalein (pp)  sebanyak  2-3  tetes  hingga  terjadi  perubahan  warna  menjadi  warna merah muda (Leasa & Matdoan, 2015).
3. Persiapan dan perlakuan hewan coba
Mencit yang digunakan adalah mencit jantan berumur 2-4 bulan dengan berat 25- 40 gram dan dibagi menjadi 5 kelompok perlakuan yang masing- masing terdiri dari 4 ekor mencit yaitu K (Mencit normal), K-( Mencit diabetes), P1(Mencit diabetes + Cuka aren 0, 1 ml), P2 (Mencit diabetes + Cuka aren 0, 2 ml), dan P3 (Mencit diabetes + Cuka aren 0, 3 ml).
Mencit diaklimatisasi dan diberi makan dengan pakan standar (AD1) dan air secara ad  libitum .  Kemudian  dilakukan  pengukuran  kadar  glukosa  darah  awal  mencit Selanjutnya mencit dibuat dalam keadaan diabetes dengan induksi menggunakan aloksan yang  dilarutkan  dengan  0,5  ml  NaCl  0,9%  lalu  diinduksi  pada  mencit  dengan  metode subkutan.  Mencit  yang  digunakan  untuk  perlakuan  selanjutnya  adalah  mencit  dengan kadar glukosa darahnya > 200 mg/dl berdasarkan kadar gula darah sewaktunya (Swastini et al., 2018). Pemberian bahan uji berupa cuka aren yang dilakukan secara oral dengan menggunakan jarum sonde yang diberikan setiap hari pada mencit dengan kurun waktu 21 hari dengan frekuensi pemberian yaitu satu kali sehari (Hardoko, 2020). Pengukuran kadar gula darah mencit dilakukan setiap minggu selama 3 minggu, pada hari ke 0 (setelah mencit diabetes), 7, 14 dan 21 hari menggunakan glukometer. Pada hari ke- 21 mencit dibedah untuk diambil pankreasnya (Zubaidah, 2015). 4. Pembuatan preparat histopatologi pankreas mencit
Pembuatan  preparat  pankreas  dengan  tahapan  yang  terdiri  dari  fiksasi menggunakan  formalin  10%,  pemotongan  spesimen  ( trimming ),  prosesing  sampel, penanaman  sampel  ( embedding )  pada  kaset  jaringan  berisi  parafin,  pemotongan  blok paraffin  ( cutting ),  pewarnaan  organ  ( staining )  dengan Hematoxilin  Eosin (HE)  dan mounting.
Data yang telah diperoleh dalam penelitian kemudian diolah secara statistik dengan menggunakan SPSS dengan analisis Kruskal-Wallis dan Mann-Whitney .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengukuran  kadar  gula  darah  sebelum  induksi  aloksan  dilakukan  sebagai perbandingan kadar gula darah mencit setelah terjadinya diabetes dan setelah pemberian cuka aren. Data yang diperoleh ditunjukkan pada Tabel 1. Untuk melihat pengaruh cuka aren  dengan  dosis  berbeda  yang  diberikan  terhadap  mencit  diabetes,  maka  dilakukan perhitungan mengenai persentase penurunan kadar gula darah mencit yang disajikan pada Tabel 2.

## Tabel 1. Rata- rata kadar gula darah mencit
Kelompok perlakuan Rata-Rata Kadar Gula Darah Mencit mg/dl (Mean ± SD) Nilai P < 0,05 Sebelum induksi aloksan Setelah induksi aloksan Setelah perlakuan cuka aren K 123 ± 29,09 106,25 ± 30,74 132,25 ± 24,14 0,048 K- 114,75 ± 22,56 243,75 ± 61,29 312,75 ± 75,64 P1 137,5 ± 9,95 224,25 ± 22,58 184 ± 53,56 P2 134,5 ± 28,05 313,75 ± 174, 74 233,67 ± 135,63 P3 115,75 ± 9,43 507 ± 80,55 325,67 ± 87,09
Keterangan: Kelompok K, tidak diberi perlakuan diabetes dan cuka aren; Kelompok K- diberi perlakuan diabetes tetapi tidak diberi perlakuan cuka
Tabel 2. Penurunan kadar gula darah mencit ( Mus musculus ) Kelompok perlakuan ∆KGD (mg/dl) Persentase penurunan (%) K -26 -24,47 K- -69 -28,30 P1 40,25 17,94 P2 80,08 25,52 P3 182 35
Keterangan: ∆KGD; Penurunan kadar gula darah (selisih antara kadar gula darah mencit setelah induksi aloksan dan setelah pemberian cuka aren). Tanda (-) menunjukkan tidak adanya penurunan KGD
Data  hasil  pengukuran  kadar  gula  darah  dianalisis  secara  statistik  melalui  uji Kruskal-Wallis  sehingga  didapatkan  hasil  p<0,05  yang  berarti  hasil  yang  didapatkan signifikan. Hal tersebut berarti cuka aren yang diberikan berpengaruh terhadap kadar gula darah mencit. Uji statistik kemudian dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney untuk melihat perbedaan  hasil  dari  setiap  perlakuan  yang  diberikan.  Hasil  yang  didapatkan  yaitu  K- berbeda nyata dengan P1 (p<0,05) dan tidak berbeda nyata (p>0,05) dengan perlakuan lainnya yaitu P2 dan P3.
Penurunan kadar gula darah mencit setelah pemberian cuka aren disebabkan karena adanya  kandungan  asam  asetat  dalam  cuka  aren  tersebut.  Hal  ini  sesuai  yang dikemukakan oleh Sumendap et al. (2015) bahwa secara umum kandungan utama dari cuka aren sama dengan kandungan cuka lainnya yaitu asam asetat (CH 3 COOH). Dalam kultur CaCO 2, asam  asetat akan menurunkan aktivitas dari disakarida sukrase, maltase, trehalase  dan  laktase.  Asam  asetat  ini  bekerja  dengan  cara  memengaruhi  laju pengosongan  pada  lambung  serta  menghambat  aktivitas  enzim  disakarida  sehingga memberikan  efek  kenyang  yang  lebih  lama  dan  memperlambat  timbulnya  respon metabolisme  di  dalam  tubuh  yang  juga  akan  meningkatkan  sensitivitas  insulin  untuk mengubah glukosa yang telah dikonsumsi menjadi gula otot (glikogen) (Zubaidah, 2015).
Otot  rangka  merupakan  jaringan  yang  memiliki  peranan  penting  dalam penyimpanan glukosa sebagai bentuk respon terhadap insulin. Dalam otot rangka, asam asetat bekerja dengan melakukan pemenuhan glikogen. Namun mekanismenya berbeda dari  kerja  asam  asetat  pada  hati.  Pada  otot  rangka,  asam  asetat  akan  meningkatkan kandungan  glikogen,  utamanya  yang  berasal  dari  akumulasi  glukosa-6-fosfat  karena terjadinya  penekanan  glikolisis  yang  tidak  disertai  dengan  oksidasi  asam  lemak. Sedangkan  pada  hati,  asam  asetat  bekerja  dengan  menurunkan  rasio  glikolisis  serta meningkatkan  pemanfaatan  asam  lemak.  Selain  itu,  berdasarkan  beberapa  penelitian, asam asetat akan mengakibatkan peningkatan ekspresi gen dan transporter glukosa tipe 4 (GLUT4) di dalam otot rangka (Petsiou et al., 2014). Di dalam jaringan adiposa dan sel otot, insulin akan merangsang pengiriman glukosa transporter GLUT4 dari dalam sel ke permukaan  sel  yang  kemudian  dijadikan  sebagai  sumber  energi  dan  disimpan  dalam bentuk glikogen (Utama & Arjentinia, 2014). Penelitian yang dilakukan oleh Johnston et
al. (2013) tentang konsumsi cuka komersial ( Bragg Organic Apple Cider Vinegar ) pada saat  makan  bahwa  pada  orang  sehat  yang  memiliki  resiko  menderita  DM  tipe  2  dan melakukan diet sederhana dengan mengonsumsi cuka secara teratur dalam kadar tertentu akan  menurunkan  konsentrasi  glukosa  darah  puasa  (sebelum  makan)  daripada penggunaan antidiabetes oral seperti metformin.
Berbagai  penelitian  tersebut  juga  sejalan  dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh Petsiou  et  al.  (2014)  bahwa  pemberian  cuka  pada  tikus  normoglikemia  (kadar  gula normal) akan mengurangi hiperglikemia postprandialnya. Pemberian cuka tersebut akan bekerja dengan cara menunda penyerapan glukosa makanan di dalam usus melalui proses penghambatan  transporter  glukosa  usus  yang  letaknya  di  sisi  apikal  eritrosit  dari  usus halus. Peneliti mengindikasikan bahwa efek tersebut berkaitan dengan kandungan asam asetat  pada  cuka.  Hamidatun  et  al.  (2011)  menjelaskan  bahwa  asam  asetat  akan meningkatkan  derajat  kemasaman  hasil  pencernaan  ( chyme ).  Kondisi  asam  tersebut menyebabkan  pergerakan  hasil  pencernaan  lambat  menuju  ke  duodeinum  sehingga pelepasan  monosakarida  di  usus  halus  juga  lambat,  bioaksesibilitas  yang  rendah menyebabkan turunnya laju penyerapan  monosakarida dan respon glikemik. Konsumsi cuka akan menstimulasi pengambilan dan penggunaan glukosa pada jaringan perifer.
Berdasarkan  pengamatan  histopatologi  menunjukan  adanya  perbedaan  tingkat kerusakan  pankreas  pada  masing-  masing  mencit  ( M.  musculus ).  Rusaknya  sel  pada pankreas ditandai dengan adanya kematian sel (nekrosis), pembengkakan jaringan karena penambahan  volume  cairan,  vakuolisasi  dan  perubahan  ukuran  pada  sel-  sel  di  pulau Langerhans.  Aloksan  dapat  menghasilkan  oksigen  yang  bersifat  reaktif  yakni  H 2 O 2 (Hidrogen  peroksida)  dan  OH  (Radikal  bebas  hidroksi)  yang  aktif  merusak  molekul biologis, sehingga menimbulkan kerusakan pada sel beta pankreas (Utami, 2019).

## Gambar 1. Struktur histopatologi pankreas mencit kelompok K (perbesaran 400x) menunjukkan sel yang normal
Kelompok  K  memiliki  gambaran  histopatologi  paling  baik  dibandingkan  dengan perlakuan  lainnya.  Histopatologi  pankreas  kelompok  kontrol  normal  memperlihatkan kondisi  pulau  langerhans  yang  normal  dan  sel-selnya  tersebar  secara  merata  pada pankreas  mencit.  Bagian  luar  dari  sel-sel  pulau  Langerhans  mengambil  warna  bersifat eosinofilik  lemah  dan  warnanya  lebih  mudah  dibandingkan  pewarnaan  HE,  sehingga dapat dibedakan dengan mudah bagian eksokrin dan bagian endokrin (pulau Langerhans) yang  menunjukan  batas  yang  jelas.  Selain  itu,  tidak  ditemukan  pula  adanya  nekrosis, degenerasi maupun radang pada sel. Menurut Zubaidah (2015) pulau Langerhans dapat dikatakan  normal  apabila  sel  endokrin  menyebar  secara  merata  serta  bentuk  sel  yang terlihat  seragam  dengan  bentuk  yang  bulat  dan  inti  selnya  tampak  jelas.  Normalnya struktur  pankreas  pada  kelompok  K  disebabkan  karena  tidak  adanya  induksi  aloksan
sehingga  tidak  menimbulkan  kondisi  diabetes  yang  ditunjukkan  dengan  tidak  adanya perubahan struktur histopatologi pankreas yang diamati secara mikroskopik.
Gambar 2. Struktur histopatologi pankreas mencit kelompok K- (perbesaran 400x ) menunjukkan (1) sel radang, (2) nekrosis sel β dan (3) degenerasi sel β
Pada kelompok K- terlihat area pulau Langerhans yang batasnya tidak jelas, serta bentuknya yang tidak teratur dan terjadi penurunan jumlah sel β yang berdampak pada pengecilan diameter pulau Langerhans. Hal ini sesuai dengan penelitian Nubatonis et al. (2015)  bahwa  pulau  Langerhans  pankreas  terdiri  atas  60%  sel  beta  sehingga berkurangnya  sel  beta  juga  juga  menurunkan  ukuran  pulau  Langerhans.  Terjadinya perubahan ukuran dan dan bentuk dari pulau Langerhans sebagai akibat dari terjadinya glukotoksisitas  pada  sel  beta  pankreas  yang  mengakibatkan  menurunnya  massa  sel (Hermawati  et  al.,  2016).  Kejadian  degenerasi  dan  nekrosis  pada  pulau  langerhans ditandai  dengan  adanya  ruang-  ruang  kosong  pada  bagian  tengah  pulau  langerhans (Nubatonis et al., 2015).
Degenerasi  dapat  diartikan  sebagai  kemunduran  sel  atau  kelainan  yang  terjadi dikarenakan  adanya  cedera  pada  sel  (jejas).  Pada  keadaan  ini,  proses  metabolisme  sel terganggu karena cedera yang mengenai struktur yang terdapat didalam mitokondria dan sitoplasma. Degenerasi bersifat reversibel yang berarti dapat kembali ke kondisi awal atau diperbaiki  jika  penyebab  kerusakannya  dihilangkan  dan  akan  bersifat  ireversibel  atau menjadi  awal  dari  kematian  sel  (nekrosis)  apabila  kerusakannya  bertambah  dan  tidak dihilangkan (Nazaruddin et al., 2017). Jenis degenerasi yang terjadi pada sel β pankreas berdasarkan  gambaran  histopatologinya  adalah  degenerasi  vakuola.  Vakuolisasi merupakan  salah  satu  indikasi  adanya  gangguan  permeabilitas  membran  yang menyebabkan  transport  air  meningkat  ke  dalam  sel.  Terganggunya  permeabilitas membran  ini  dikaitkan  dengan  adanya  stres  oksidatif  yang  akhirnya  menyebabkan terbentuknya peroksida lipid atau singkatnya terjadi penimbunan lemak (Abdul-Hamid & Moustafa, 2013). Vakuolisasi ditandai dengan sel membengkak dan vakuola yang terlihat jernih karena cairan  yang masuk  meningkat  dan terakumulasi  di  dalam  sitoplasma  sel, sehingga sitoplasma sel terlihat lebih pucat.
Aloksan menyebabkan terjadinya peningkatan konsentrasi ion kalsium (Ca 2+) dalam beta pankreas yang kemudian mendepolarisasi sel beta pankreas. Menurut Solikhah et al. (2022)  nekrosis  yang  terjadi  pada  sel  beta  pankreas  diduga  terjadi  akibat  depolarisasi membran sel beta pankreas akibat induksi aloksan. Menurut Sijid et al. (2020) nekrosis (kematian  sel)  dimulai  dengan  adanya  perubahan  inti  sel  yang  dapat  dilihat  dari  segi morfologinya. Tahapan awal nekrosis dimulai dengan piknosis, kemudian menimbulkan terjadinya fragmentasi atau pecahnya inti sel (karioreksis) kemudian mengalami kariolisis atau  hancurnya  inti  sel  dan  akhirnya  menyebabkan  sel  mengalami  nekrosis.  Induksi aloksan  pada  mencit  juga  memicu  terjadinya  sel  radang  sebagai  bentuk  respon  dari jaringan  hidup  yang  disebabkan  oleh  adanya  jejas  (cedera).  Ketika  sel  mengalami
kematian, maka jaringan hidup yang ada di sebelahnya akan memberikan respon terhadap perubahan tersebut dan memberikan reaksi peradangan (Nazaruddin et al., 2017).
Gambar 3. Struktur histopatologi Pankreas mencit kelompok P 1 (perbesaran 400x) menunjukkan (1) sel radang, (2) degenerasi sel β dan, (3) nekrosis sel β
Gambar 4. Struktur histopatologi pankreas mencit kelompok P 2 (perbesaran 400x) menunjukkan (a) nekrosis sel β, (b) sel radang, dan (c) degenerasi sel β
Gambar 5. Struktur histopatologi pankreas mencit kelompok P 3 (Perbesaran 400x) menunjukkan (1) sel radang, (2) degenerasi sel β, dan (3) nekrosis sel β
Pada kelompok mencit diabetes yang diberi perlakuan cuka aren yaitu P 1 (Gambar 3), P 2 (Gambar 4), dan P 3 (Gambar 3), masih terlihat adanya degenerasi sel β, nekrosis sel β, dan sel radang. Namun tingkat kerusakannya lebih sedikit jika dibandingkan dengan kelompok  diabetes  (K-).  Tampak  pulau  Langerhans  mengalami  regenerasi  sel  dengan adanya  pertambahan  kembali  ukuran  pulau  Langerhans,  batas  dari  pulau  Langerhans mulai jelas walaupun berbeda dengan kelompok kontrol (normal), namun berbeda nyata dengan kelompok kontrol negatif.
Pada pengamatan histopatologi pankreas mencit, digunakan metode skoring yang dilihat berdasarkan tingkat kerusakan pada histopatologi yang kemudian dapat menjadi indikator  pembanding  pada  setiap  histopatologi  pankreas  yang  diamati  dan  dianalisis dengan  menggunakan  mikroskop  cahaya.  Parameter  kerusakan  yang  diamati  berupa degenerasi, nekrosis dan sel radang.
Tabel 3. Hasil skoring pemeriksaan histopatologi Kelompok perlakuan Ulangan Degenerasi Nekrosis Sel radang K (1) 0 0 0 K- (1) 4 4 0 (2) 2 2 2 P 1 (1) 1 2 1 (2) 1 0 1 P 2 (1) 1 0 0 (2) 1 2 1 P 3 (1) 1 2 1 (2) 1 2 1
Keterangan: Skor degenerasi; 0= Tidak ada degenerasi, 1= Jumlah sel degeneratif <25% dari seluruh lapang pandang (LP), 4= Jumlah sel degeneratif >76% dari seluruh LP. Skor nekrosis; 0= Tidak ada nekrosis, 2= Jumlah sel nekrotik <25% dari seluruh LP, 4= jumlah sel nekrotik 26- 50% dari seluruh LP. Skor sel radang; 0= Tidak ditemukan sel radang, 1= jumlah sel radang >10 pada seluruh LP
Hasil  skoring  menunjukkan  bahwa  kelompok  mencit  diabetes  tanpa  cuka  aren memiliki tingkat kerusakan yang paling tinggi berdasarkan degenerasi dan nekrosis sel β yaitu >75% mengalami degenerasi dan sekitar 26-50% mengalami nekrosis, serta sel yang mengalami  peradangan  sekitar  11-50  sel  dari  seluruh  lapang  pandang.  Sedangkan kelompok  diabetes  yang  juga  diikuti  dengan  pemberian  cuka  aren  memiliki  tingkat kerusakan yang lebih sedikit, yaitu <25% yang mengalami degenerasi dan nekrosis sel β dan <10 sel yang mengalami peradangan. Hal ini menunjukkan telah terjadi regenerasi pada sel-sel yang terdapat pada pulau Langerhans setelah pemberian cuka aren. Meskipun keadaan pulau Langerhans, baik dari segi ukuran, bentuk dan keadaan selnya belum sama seperti  kelompok  K,  namun  pemberian  cuka  mampu  memberikan  perbaikan  terhadap histopatologi  pankreas  mencit  diabetes  berdasarkan  penurunan  persentase  kerusakan yang terjadi.
Regenerasi yang terjadi setelah pemberian cuka aren berkaitan dengan kandungan antioksidan  yang  terdapat  dalam  cuka  aren.  Cuka  aren  mengandung  senyawa  yang termasuk golongan antioksidan seperti senyawa fenol. Antioksidan merupakan senyawa penangkal radikal bebas yang bekerja dengan cara mendonorkan atom hidrogennya yang dapat mengubah suatu radikal bebas menjadi non radikal atau senyawa yang lebih stabil (Oktavia & Wungkana, 2019). Flavonoid merupakan salah satu senyawa yang tergolong dalam  kelompok  fenol.  Flavonoid  berperan  dalam  meningkatkan  sensitivitas  reseptor insulin  serta  meningkatkan proliferasi sel  beta pankreas  dan sekresi insulin  (Fitriani  & Erlyn, 2019). Flavonoid dapat menstimulasi pengambilan glukosa pada jaringan perifer serta mampu mengatur mengatur ekspresi dan aktivitas enzim yang ada kaitannya dengan jalur  metabolisme  karbohidrat  dan  bertindak  serupa  dengan  insulin  ( insulinomimetic ), dengan memengaruhi mekanisme dari insulin signaling (Setiadi et al., 2020). Selain itu, mekanisme kerja dari flavonoid yang mampu  memperbaiki sel  pada  pulau  Langerhans yaitu melalui peningkatan enzim katalase yang berfungsi memecah hidrogen peroksida menjadi oksigen dan air yang sifatnya tidak berbahaya bagi pertumbuhan sel (Madihah et al., 2016).

## KESIMPULAN
Cuka aren mampu menurunkan kadar gula darah pada mencit ( Mus musculus ) yang diinduksi aloksan. Rata-rata kadar asam asetat pada cuka aren yang digunakan yaitu 2,08 %.  Dosis  efektif  maksimum  cuka  aren  dalam  menurunkan  kadar  gula  darah  mencit sebesar 0,3 ml dengan persentasi penurunan 35% yang diberikan selama 21 hari. Cuka aren juga mampu memberikan perbaikan terhadap pankreas mencit walaupun belum sama
dengan kelompok kontrol normal namun lebih baik jika dibandingkan dengan kelompok diabetes tanpa pemberian cuka aren. Hal ini didasarkan pada penurunan tingkat kerusakan sel dari >75% degenerasi sel β dan 26- 50% nekrosis sel β pada kelompok K- menjadi <25% pada kelompok P1, P2 dan P3. Peradangan sebanyak 11-25 sel pada kelompok K- mengalami  penurunan  menjadi  <10  sel  radang  pada  kelompok  P1,  P2  dan  P3. Berdasarkan hal tersebut, cuka aren dapat menjadi salah satu alternatif dalam menurunkan kadar gula darah dan membantu perbaikan pankreas mencit yang mengalami diabetes.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdul-Hamid,  M.,  &  Moustafa,  N.  (2013).  Protective  effect  of  curcumin  on  histopathology  and ultrastructure of pancreas in the alloxan treated rats for induction of diabetes. The Journal of Basic & Applied Zoology , 66(4), 169–179. https://doi.org/10.1016/j.jobaz.2013.07.003.
Ananta, M. G., Suartha, I. N., & Dharmayudha, A. A. G. O. (2016). Pengaruh partisi etil asetat ekstra buah pare  ( Momordica  charantia )  terhadap  penurunan  kadar  glukosa  darah  tikus  putih  ( Rattus norvegicus ) yang diinduksi streptozotozin. Indonesia Medicua Veterinus , 5(5), 422–429. Dwica,  M.  A.,  Jannah,  S.  N.,  &  JanikaSitasiwi,  A.  (2020).  Uji  aktivitas  antidiabetes  cuka  kulit  nanas ( Ananas comosus L. Merr.) pada tikus putih ( Rattus norvegicus ) jantan galur wistar yang diinduksi aloksan. Pro-Life , 7(2), 188–197.
Fitriani, N., & Erlyn, P. (2019). Aktivitas antidiabetik kombinasi ekstrak etanol daun ciplukan ( Physalis angulata )  dan  daun  gaharu  ( Aquilaria  malaccensis )  pada  tikus  diabetes. Syifa’ MEDIKA: Jurnal Kedokteran dan Kesehatan , 9(2), 70-78. https://doi.org/10.32502/sm.v9i2.1660. Hamidatun,  Mandasari,  O.  K.,  Rosdiana,  I.,  &  Widiyana,  S.  D.  (2011).  Pengaruh  cuka  salak  terhadap penurunan  glukosa  darah  dan  histopatologi  pankreas  tikus  diabetes. Prosiding  Seminar  Pekan Ilmiah Mahasiswa Nasional Program Kreativitas Mahasiswa , 1–6. Hardoko,  M.  (2020).  Studi  aktivitas  antidiabet  cuka  buah  mangrove  pedada  ( Sonneratia  alba )  secara  in vivo. JFMR-Journal of Fisheries and Marine Research , 4(3), 399–407. https://doi.org/10.21776/ub.jfmr.2020.004.03.13.
Hermawati,  C.  M.,  Sitasiwi,  A.  J.,  &  Jannah,  S.  N.  (2020).  Studi  histologi  pankreas  tikus  putih  ( Rattus norvegicus L.) setelah pemberian cuka dari kulit nanas ( Ananas comosus L. Merr ). Jurnal Pro-Life , 7(1), 61-70.
Hestiana,  D.  W.  Faktor-faktor  yang  berhubungan  dengan  kepatuhan  pada  pasien  rawat  jalan  diabetes mellitus  tipe  2  di  Kota  Semarang. Journal  of  Health  Education ,  2(2),  138–145. https://doi.org/10.1080/10556699.1994.10603001.
Johnston, C. S., Quagliano, S., & White, S. (2013). Vinegar ingestion at mealtime reduced fasting blood glucose concentrations in healthy adults at risk for type 2 diabetes. Journal of Functional Foods , 5(4), 2007–2011. https://doi.org/10.1016/j.jff.2013.08.003. Kasim, V. N. A., & Yusuf, Z. K. (2020). Tumbuhan Obat berbasis Penyakit . Semarang: Athra Samudra. Madihah, M., Alfina, F., & Gani, Y. Y. (2016). Blood glucose level and pancreas histological section of mice  ( Mus  musculus L.)  induced  by  alloxan  after  treatment  of Curcuma  mangga Val.  rhizome extract. Jurnal Biologi Udayana , 20(2), 64-68. https://doi.org/10.24843/jbiounud.2016.v20.i02.p04. Nazaruddin,  Z.,  Muhimmah,  I.,  &  Ika  Fidianingsih.  (2017).  Segmentasi  citra  untuk  menentukan  skor kerusakan hati secara histologi. Seminar Nasional Informatika Medis (SNIMed), 8(15), 15–21. Nubatonis,  D.,  Ndaong,  N.  A.,  &  Selan,  Y.  N.  (2015).  The  effect  of  ethanol  extract  of  sambiloto  leaf ( Andrographis  paniculata Nees)  on  pancreatic  histopathology  of  alloxan  induced  diabetic  mice. Jurnal Kajian Veteriner , 3(1), 31–40. Oktavia, F., & Wungkana, J. (2019). Abu pelepah aren ( Arenga pinnata Merr.) sebagai bahan kosmetika perawatan  kulit  wajah  kaya  antioksidan. Biofarm:  Jurnal  Ilmiah  Pertanian ,  14(1),  29-34. https://doi.org/10.31941/biofarm.v14i1.789.
Petsiou, E. I., Mitrou, P. I., Raptis, S. A., & Dimitriadis, G. D. (2014). Efek dan mekanisme kerja cuka pada metabolisme glukosa , profil lipid , dan berat badan . 72 (10), 651–661.
Petsiou, E. I., Mitrou, P. I., Raptis, S. A., & Dimitriadis, G. D. (2014). Effect and mechanisms of action of vinegar on glucose metabolism , lipid profile , and body weight. Nutrition Review s, 72(10), 651– 661. https://doi.org/10.1111/nure.12125.
Setiadi, E., Peniati, E., & Susanti, R. (2020). Pengaruh ekstrak kulit lidah buaya terhadap kadar gula darah dan gambaran. Life Science , 9(2), 171–185.
Siddiqui, F. J., Assam, P. N., de Souza, N. N., Sultana, R., Dalan, R., & Chan, E. S. Y. (2018). Diabetes
control:  Is  vinegar  a  promising  candidate  to  help  achieve  targets? Journal  of  Evidence-Based Integrative Medicine , 23, 1–12. https://doi.org/10.1177/2156587217753004. Sijid, S. A., Muthiadin, C., Zulkarnain, Hidayat, A. S., & Amelia, R. R. (2020). Pengaruh pemberian tuak terhadap  gambaran  histopatologi  hati  mencit  ( Mus  musculus )  ICR  Jantan. Jurnal  Pendidikan Matematika dan Ipa , 11(2), 193–205. https://doi.org/dx.doi.org/10.2648/jpmipa.v11i2.36623. Solikhah, T. I., Rani, C. A., Septiani, M., Putra, Y. A., Rachmah, Q., Solikhah, G. P., Agustono, B., Yunita, M. N., & Purnama, M. T. (2022). Antidiabetic of Hylocereus polyrhizus peel ethanolic extract on alloxan  induced  diabetic  mice. Iraqi  Journal  of  Veterinary  Sciences ,  36(3),  797–802. https://doi.org/10.33899/ijvs.2022.132178.2061.
Sumendap,  H.  K.,  Pesik,  M.  U.,  &  Lagarense,  B.  E.  S.  (2015).  Penggunaan  cuka  aren  ( Arenga  pinnata Merr) dalam pengolahan makanan seafood: Studi eksperimen. Jurnal Hospitality dan Pariwisata , 2(1), 1–107.
Swastini, D. A., Shaswati, G. A. P. A., Widnyana, I. P. S., Amin, A., Kusuma, L. A. S., Putra, A. A. R. Y., &  Samirana,  P.  O.  (2018).  Penurunan  kadar  glukosa  darah  dan  gambaran  histopatologi  pankreas dengan  pemberian  gula  aren  ( Arenga  pinnata )  pada  tikus  jantan  Galur  Wistar  yang  diinduksi aloksan. Indonesia Medicus Veterinus , 7(2), 10-21. https://doi.org/10.19087/imv.2018.7.2.94. Utama, I. H., & Arjentinia, I. P. G. Y. (2014). Ekspresi Glukosa Transporter 4 (GLUT4) Pada Berbagai Organ Tikus Hiperglikemia. [Laporan Penelitian]. Universitas Udayana . Zubaidah, E. (2015). Efek cuka apel dan cuka salak terhadap penurunan glukosa darah dan histopatologi pankreas tikus wistar diabetes. Jurnal Kedokteran Brawijaya , 28(4), 297–301.
https://doi.org/10.21776/ub.jkb.2015.028.04.7.