EFEKTIVITAS KOMBINASI EKSTRAK ETANOL KUNYIT (Curcuma longa linn.) DAN COKLAT (Theobroma cacao) SEBAGAI KANDIDAT ANTIDEPRESAN PADA TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus) GALUR WISTAR
EFFECTIVENESS OF COMBINATION ETHANOL EXTRACT OF TURMERIC (Curcuma longa linn.) AND COCOA  (Theobroma cacao) AS AN ANTIDEPRESSANT CANDIDATE IN WISTAR RAT (Rattus norvegicus)
1 Farach Khanifah * , 1 Evi Puspita Sari, 1 Awaluddin Susanto
1 STIKES Insan Cendekia Medika Jombang
Info Artikel Abstrak Sejarah Artikel : Submitted: 15 Meret 2021 Accepted : 17 Juli 2021 Publish Online : 11 September 2021
Latar  belakang :Depresi  merupakan  penyakit  psikologi  yang  sering  terjadi  pada manusia.  Penggunaan  obat  antidepresan  memiliki  efek  samping  dan  dapat menimbulkan  ketergantungan.  Coklat  dapat  meningkat  hormon  dopamin  dan serotonin  sehingga  dapat  memperbaiki  suasana  hati.  Kunyit  memiliki  senyawa aktif  kurkumin  yang  memiliki  aktivitas  antidepresan  melalui  modulasi  pelepasan serotonin  dan  dopamin. Tujuan :Penelitian  ini  bertujuan  mengetahui  efektivitas ekstrak  etanol  kunyit,  ekstrak  etanol  coklat  dan  kombinasi  ekstrak  etanol  kunyit dan  coklat  sebagai  antidepresan  pada  tikus  Rattus  norvegicus  galur  wistar. Metode :Penelitian  ini  adalah  penelitian  eksperimental  dengan  post  test  control group desaign  yang  menggunakan 25 ekor tikus  dan  dibagi  menjadi 5 kelompok yaitu  kelompok  kontrol  positif,  kontrol  negatif,  ekstrak  etanol  kunyit,  ekstrak etanol  coklat  serta  kombinasi  ekstrak  etanol  kunyit  dan  coklat.  Pengujian antidepresan ditentukan berdasarkan immobility time  menggunakan metode swim Forced Test. Hasil pengamatan berupa immobility time dianalisa data dengan one way  ANOVA. Hasil :  kombinasi  ekstrak  etanol  kunyit  dan  coklat  memiliki  nilai rata-rata immobility time yang lebih kecil jika  dibandingkan ekstrak etanol coklat dan ekstrak etanol kunyit dan kontrol negatif. Kesimpulan : ekstrak etanol kunyit dosis 560 mg/kgBB dan ekstrak etanol coklat dosis 0,392mg/20gBB memiliki efek antidepresan.  Efek  antidepresan  kombinasi  ekstrak  etanol  kunyit  dan  coklat  lebih signifikan dibandingkan sediaan tunggalnya
Kata Kunci:
Ekstrak etanol kunyit, Ekstrak etanol coklat, Antidepresan Keywords:
Turmeric ethanol extract, chocolate, antidepressants

## Abstract
Introduction:Depression is a psychological disease that occurs in humans. The use of antidepressant drugs has side effects and can be dependent. Cocoa has reported that  increasing  of  dopaminand  serotonine  hormones  by  chocolate  consumption can  repair  good  mood.  Turmeric  has  the  active  compound  curcumin  which  can help the serotonogenic system and acithelcholine and dopamine.  Objectives: This study  to  determine  antidepressant  effect  of  ethanol  extract  of  turmeric,  ethanol extract  of  cocoa  and  combination  of  ethanol  extract    turmeric  and  cocoa. Methods:  This  research  was  True  Experimental  with  Post  Test  Control  Group Design  used  25  rats  which  were  divided  into  5  groups  with  positive  control groups,  negative  controls,  turmeric  ethanol  extract,  cocoa  ethanol  extract  and  a combination  of  ethanol  extracts  turmeric  and  cocoa.  Antidepressant  testing  was determined  based  on  immobility  time  using  the  swim  Forced  Test  method.  The results  as  immobility  time  data  were  analyzed  by  one-way  ANOVA.  Results:  The combination  of  ethanol  extract  of  turmeric  and  cocoa  had  a  lower  average immobility time value when compared to ethanol extract of cocoa,  ethanol extract of  turmeric  and negative  control.  The  conclusion  of  this  study  is  that  the  ethanol extract of turmeric with a dose of 560 mg / kgBB and a dose of 0.392 mg / 20gBB of  chocolate  ethanol  extract  have  an  antidepressant  effect.  Conclusion  :  The antidepressant effect of the combination ethanol extract of turmeric and cocoa is more significant than the single preparation.
Khanifah F | Efektivitas Kombinasi Ekstrak Etanol ….. Jurnal Wiyata, Vol. 8 No. 2 Tahun 2021

## PENDAHULUAN
Depresi  merupakan  penyakit  psikologi  yang  sering  terjadi  pada  manusia  dan  disertai  oleh beberapa  gejala  biologis  dan  emosional.  Gejala-gejala  emosional  mencakup  perasaansengsara, tidak  acuh,  pesimis,  rendah  diri,  perasaan  bersalah,  perasaan  tidak  puas,  tidak  dapat memutuskan,  dan  kehilangan  motivasi.  Gejala  biologis  mencangkup  menurunnya  berat  badan secara  drastis.  Depresi  diprediksi  menjadi  penyakit  prevalensi  kedua  pada  tahun  2020 ( Sulistyorini dan Sabarisman, 2017 ). Data Riskesdas 2013 memunjukkan prevalensi ganggunan mental emosional yang ditunjukkan dengan gejala-gejala depresi dan kecemasan untuk usia 15 tahun  ke  atas  mencapai  sekitar  14  juta  orang  atau  6%  dari  jumlah  penduduk  Indonesia (Kemenkes,  2016).  Mekanisme  kerja  obat  antidepresan  yaitu  melalui  peningkatan neurotransmisi dengan cara meningkatkan jumlah sinaptik serotonin, norepinefrin dan dopamin (Faryadian,  2014).  Serotonin,  norepinefrin  dan  dopamin  merupakan  neurotransmitter  yang memediasi  suasana  hati  yang  positif,  kebahagiaan,  kepuasan  dan  optimisme  (Farhud,  2014). Penggunaan  obat  antidepresan  seperti selective  serotonin  reupatake  inhibitors (SSRIs), antidepresan  trisiklik  (TCAs)  dan Monoamine  oxidase  inhibitors (MAOIs)  memiliki  efek samping  dan  dapat  menimbulkan  ketergantungan.  Hampir  30%  pasien  depresi  tidak memberikan  respon  terhadap  terapi  obat  dan  70%  pasien  gagal  mencapai  kesembuhan  total (Kulkarni,  2009).  Mayoritas  masyarakat  Indonesia  menggunakan  tanaman  dan  bahan  alam sebagai  bahan  pengobatan  sehingga  perlu  dilakukan  pemilihan  bahan  alam  yang  memiliki senyawa  aktif  seperti  senyawa  aktif  sebagai  antidepresan  dan  perlu  diketahui  mekanisme formakologinya.  Hal  tersebut  dikarenakan  adanya  ketersedian  bahan  alam  yang  sering digunakan sebagai obat.
Sejarah  coklat  ( Theobroma  cacao )  dapat  dikonsumsi  berasal  dari  suku  Aztec  dan  Incan yang  sering  mengkonsumsi.  Coklat  masuk  ke  Indonesia  sejak  zaman  Belanda  sehingga  pada zaman  modern  ini  coklat  sering  menjadi  minuman  kegemaran  masyarakat  Indonesia  karena memiliki  beberapa  kegunaan  dalam  tubuh,  salah  satunya  sebagai  antidepresan  atau  dapat mengurangi stress. Coklat dapat meningkatkan hormon dopamin dan serotonin sehingga dapat memperbaiki mood atau suasana hati (Scholey, 2013).  Selain itu coklat memiliki senyawa aktif polifenol  dan  flavonoid  yang  berfungsi  menurunkan  tekanan  darah  dan  meningkatkan  fungsi neuropsikologis  (Pase,  2013).  Kunyit  ( Curcuma  L )  di  Indonesia  sangat  mudah  tumbuh  dan dijumpai. Kunyit memiliki senyawa aktif kurkumin dan mekanisme kerjanya dapat menghambat enzim  MAO  ( Mono  amin  oxidase) yang  dapat  mengatur  sistem  serotonogenik.  Selain  itu kurkumin  dapat  mengatur  dopamin  sehingga  dapat  berperan  penting  dalam  patofisiologi penyakit  depresi.  Senyawa  aktif  kurkumin  dan  kurkumanoid  pada  kunyit  dengan  dosis  10-80 mg/KgBB menghambat imobilitas dan meningkatkan level serotonin (5HT) dan dopamindengan efek bergantung dosis. Pemberian kurkumin dengan dosis 20 dan 40mg /KgBB. Menghasilkan potensiasiaktivitas  farmakologis,  biokimia  dan  neurokimia  (SA,  2005).  Air  ekstrak  kunyit dengan  dosis  140-560  mg/KgBB  mampu  mengurangi  imobilitas  mencit  sehingga  dapat dikatakan bahwa kurkumin dapat dijadikan sebagai agen antidepresan (Adelina, 2013).
Cara mudah untuk menghilangkan depresi adalah melalui asupan makanan atau minuman karena dapat dengan mudah mengatur dan meningkatkan suasana hati dan dapat mengaktifkan reseptor dopamin di otak (Sigh, 2014). Serotonin berperan dalam pengaturan tidur, nafsu makan dan  fluktasi  suasana  hati  (Parker,  2006).  Minuman  merupakan  segala  sesuatu  yang  dapat diminum  dan  memiliki  nilai  manfaat  bagi  tubuh.  Katagori  minuman  dapat  bermacam-macam seperti  minuman  sebagai  penghilang  rasa  haus,  penambah  stimulus  atau  rangsangan.  Olahan kunyit dan coklat menjadi minuman merupakan termasuk kategori minuman penambah stimulus karena kandungan dalam kunyit dan coklat memiliki kemampuan untuk menstimulasi perbaikan suasana  hati  dan  mengurangi  kecemasan.  Berdasarkan  latar  belakang  tersebut  peneliti  ingin menguji  efektivitas  kunyit,  coklat  dan  kombinasi  kunyit  dan  coklat  sebagai  antidepresan  yang mudah dibuat, murah didapat dan disukai.
Khanifah F | Efektivitas Kombinasi Ekstrak Etanol ….. Jurnal Wiyata, Vol. 8 No. 2 Tahun 2021

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilakukan  secara  eksperimental  murni  laboratorium  ( True  Eksperimental ) dengan rancangan penelitian Post Test only Control Group Design . Perlakuan pada tikus dibagi menjadi  5  kelompok,  antara  lain:  (1)  kelompok  kontrol  negatif  (tikus  diberikan  aquadest),  (2) Kelompok  kontrol  positif  (tikus  diberikan  obat  sentralin),  (3)  kelompok  tikus  diberi  ekstrak etanol  coklat  (4)  kelompok  tikus  diberi  ekstrak  etanol  kunyit,  (5)  kelompok  tikus  diberi kombinasi ekstrak etanol kunyit dan coklat. Obyek penelitian yang digunakan dalam penelitian ini  adalah  25  ekor  tikus  ( Rattus  norvegicus )  jantan  strain Wistar dengan  berat  badan  150-200 gram  dengan  kondisi  sehat.  Teknik  pengambilan  obyek  penelitian  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah dengan cara alokasi random .

## Bahan Penelitian
Bahan  yang  dibutuhkan  rimpang  kunyit,  biji  coklat,  etanol  96%  dan  70%,  akuades,  FeCl3, NaOH 20%, HCl 2 N.

## Pembuatan Ekstrak Etanol Kunyit
Serbuk simplisia kunyit dimasukkan ke dalam wadah, ditambahkan pelarut etanol 96% dengan perbandingan  10:1,  selanjutnya  direndam  24  jam  dan  filtrat  ditampung.  Ampas  disaring kemudian direndam kembali dengan etanol 96% dilakukan sebanyak 3 kali. Filtrat dievaporasi dengan evaporator, dikeringkan dalam oven bersuhu 40º C.

## Pembuatan Ekstrak Etanol Coklat
Biji  coklat  1kg  dibersihkan,  ditiriskan  dan  diangin  angin  hingga  3  hari,  dioven  dengan  suhu 60 o C  selama  2  hari,  diblender,  direndam  dengan  etanol  70%  selama  5  hari  dan  diaduk, diendapkan selama 1-2 hari, disaring, dimasukkan dalam oven bersuhu 40º C selama 2 jam lalu dituang ke botol steril tertutup dan disimpan dalam lemari pendingin.

## Pengkondisian Tikus Stress
Sebelum  melakukan  pengkondisian  stress  maka  diperlukan  kode  etik.  Kode  etik  penelitian  ini didapatkan di STIKes Insan Cendekia Medika Jombang dengan NO. 001 / KEPK / ICME / II / 2020 . Tikus sebanyak 25 ekor diadaptasi selama 1 minggu dengan cara ditempatkan pada sebuah kandang untuk masing-masing kelompok yang berisi 5 ekor tikus pada tiap kandangnya. Selama diaklimatisasi tikus diberi makan berupa pellet. Selanjutnya dibuat stres menggunakan metode tail suspension test / uji penggantungan ekor (Cobra, 2019). Uji penggantungan ekor dilakukan pada hewan uji yang digunakan dengan cara menggantung ekor tikus pada tiang setinggi 50 cm selama 3 menit setiap hari, dimana perlakuan ini dilakukan selama 10 hari (Can, 2012) .
Pengujian  ekstrak  kunyit,  ekstrak  coklat  dan  kombinasi  ekstrak  kunyit  coklat  sebagai antidepresan
Uji  perlakuan  menggunakan  25  ekor  tikus  yang  sudah  diberikan  stressor  dibagi  kedalam  5 kelompok,  yaitu  kelompok  kontrol  negatif  menggunakan  akuades,  kelompok  kontrol  positif menggunakan  obat  Sertraline  dosis  6,5  mg/  kgBB  p.o,  kelompok  ekstrak  etanol  kunyit  yang digunakan  dengan  dosis  560  mg/kgBB  p.o.  kelompok  ekstrak  etanol  coklat  yang  digunakan 0,392mg/20gBB/hari  serta  kelompok  ekstrak  kombinasi  ekstrak  kunyit  dan  coklat.  Pemberian perlakuan  di  atas  dilakukan  selama  14  hari  secara  per  oral  sesuai  dosis  yang  telah  ditentukan. Setelah  diberikan  perlakuan  selama  14  hari  pada  hewan  coba,  dilakukan  uji  efektivitas  anti depresan (Can, 2012).
Uji aktivitas antidepresan Uji aktivitas antidepresan dilakukan dengan menggunakan metode force swimming test . Hewan yang telah diadaptasi dinduksi depresi dengan metode tail suspension test selanjutnya diberikan ekstrak  kunyit  dam  coklat  beserta  kontrol  positif  dan  kontrol  negatif.  Perlakuan  diberikan selama  14  hari  sesuai  dosis  yang  telah  ditentukan.  Setelah  pemberian  ekstrak  selesai, selanjutnya  dilakukan  uji  aktivitas  anti  depresan  dengan  metode force  swimming  test untuk menentukan  data immobility  time .  Uji  tersebut  dilakukan  dengan  cara  memasukkan  tikus  ke dalam gelas silinder yang berdiameter 20 cm dan tinggi 30 cm yang berisi air dengan ketinggian
Khanifah F | Efektivitas Kombinasi Ekstrak Etanol ….. Jurnal Wiyata, Vol. 8 No. 2 Tahun 2021
15 cm. Tikus direnangkan selama 5 menit dan diamati immobility time . Immobility time adalah jumlah waktu tidak bergerak dari seluruh tubuh tikus. Setelah diamati dalam gelas silinder, tikus selanjutnya  dikeluarkan,  dikeringkan  dan  diletakkan  pada  tempat  hangat  kemudian dikembalikan ke kandang (Can, 2012).
Setelah  penelitian,  tikus  diauthanasia dengan  cara  inhalasi  klorofom  didalam  tempat  tertutup. Setelah itu dibungkus rapat dengan plastik dan disimpan dalam pendingin sebelum diauthanasia dengan pembakaran.

## Analisis Data
Hasil immobility  time yang  diperoleh  dianalisis  dengan  uji  ANOVA  untuk  melihat  perbedaan secara bermakna dua kelompok atau lebih pengaruh ekstrak etanol kunyit, ekstrak etanol coklat dan  kombinasi  keduanya  terhadap immobility  time masing-masing  kelompok.  Apabila  terdapat perbedaan,  maka    dilakukan  uji  analisis  LSD  ( Least  Significant  Different )  untuk  mengetahui perbedaan yang bermakna antar perlakuan.

## HASIL PENELITIAN
Hasil immobility time uji  antidepresan  menggunakan  metode FST dalam  penelitian  ini ditunjukkan pada Tabel 1.
Tabel 1 Rerata dan Standar Deviasi immobility time Perlakuan Rerata (detik) Kontrol negatif 147.2 ± 2.39 Kontrol positif 31.8 ± 0.84 Kombinasi Kunyit  Coklat 37.6 ± 1.82 Coklat 56 ± 1.73 Kunyit 86.4 ± 2.07
Data hasil pemeriksaan immobility time selanjutkan dilakukan uji statistik menggunakan uji one  way  anova. Uji  anova  dilakukan  dengan  syarat  data  harus  homogen  dan  berdistribusi normal. Pada hasil uji homogenitas menggunakan Levene’s  test didapatkan nilai signifikan 0.541,  yang  artinya  data  tersebut  homogen.  Hasil  uji  normalitas  data menggunakan Kolmogorov  Smirnov didapatkan  nilai signifikan 0.129,  yang  artinya  data tersebut berdistribusi normal. Pada hasil uji Anova didapatkan nilai p < 0.05 yaitu 0.000, maka Ho ditolak  dan  H1  diterima.  Dapat  disimpulkan  bahwa  ada  perbedaan immobility  time antara kelompok  yang  diberikan  ekstrak  etanol  coklat,  kunyit,  kombinasi,  sertraline  dan  akuades. Karena kesimpulan yang diperoleh terdapat perbedaan, sehingga dilakukan uji Post Hoc untuk mengetahui kelompok mana yang terdapat perbedaan. Hasil uji Post-hoc LSD menunjukkan bahwa nilai  signifikansi  perbedaan  rerata  antar  kelompok  sebesar  0,000  (p<0,05),  sehingga  dapat  dijelaskan bahwa  terdapat  perbedaan  yang  bermakna  nilai immobility  time antar  kelompok  perlakuan. Kombinasi ekstrak  etanol  coklat  dan  kunyit  paling  efektif  jika  dibandingkan  sediaan  tunggalnya karena nilainya  mendekati  kontrol  positif. .  Ekstrak  coklat lebih  efektif jika  dibandingkan  ekstrak  kunyit. Berdasarkan  hasil penelitian  ini,  dapat  disimpulan  bahwa  kombinasi  ekstrak  etanol  kunyit  dan coklat efektif sebagai antidepresan. Kombinasi ekstrak kunyit dan coklat lebih efektif dibanding sediaan tunggal ekstrak coklat dan sediaan tunggal ekstrak kunyit.

## PEMBAHASAN
Berdasarkan tabel 1, dari lima perlakuan yang dilakukan dalam penelitian ini didapatkan nilai rata-rata (mean) immobility time paling kecil pada kontrol positif, sedangkan nilai rata-rata immobility time paling besar adalah pada kontrol negatif. Pada perlakuan menggunakan kombinasi ekstrak etanol kunyit  dan  coklat  memiliki  nilai  rata-rata immobility  time yang  lebih  kecil  jika  dibandingkan perlakuan menggunakan sediaan tunggal ekstrak etanol coklat dan ekstrak etanol kunyit maupun
Khanifah F | Efektivitas Kombinasi Ekstrak Etanol ….. Jurnal Wiyata, Vol. 8 No. 2 Tahun 2021
kontrol negatif, namun lebih besar dibanding kontrol positif. Semakin rendah nilai immobility time dari hewan uji dapat mengindikasikan bahwa hewan uji tersebut tidak sedang dalam  kondisi depresi, sedangkan pada saat kondisi depresi akan terjadi peningkatan durasi immobility time yang menunjukkan keadaan putus asa pada hewan uji. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol coklat dan ekstrak etanol kunyit berpengaruh terhadap immobility time tikus. Baik ektrak etanol maupun ekstrak coklat  efektif  sebagai  anti  depressant.  Kombinasi  dari  kedua  ekstrak  tersebut  memberikan  efek  yang lebih baik dibandingkan jika diberikan sediaan tunggalnya. Pemberian kombinasi ekstrak etanol kunyit dan  coklat  memiliki  nilai  rata-rata immobility  time yang  lebih  kecil  jika  dibandingkan  ekstrak  etanol coklat  dan  ekstrak  etanol  kunyit  dan  kontrol  negatif.  Dalam  penelitian  ini,  penilaian  Aktivitas antidepresan melalui pengukuran durasi immobility time dengan metode forced swimming test . Pengukuran immobility  time dinilai  ketika  hewan  uji  tidak  bergerak  di  dalam  air  dan  berhenti berjuang, serta tetap mengambang bergerak di dalam air atau disertai gerakan yang diperlukan (Puspitasari,  2017).  Imobilitas  dalam  uji  tersebut  diartikan  sebagai  perilaku  tertekan,  dinilai  dengan kemiripan  dengan  sikap  apatis,  kurangnya  dorongan,  dan  retardasi  lokomotor  yang  merupakan karakteristik dari gangguan mood (Smith, 2013). Semakin rendah nilai immobility time dari hewan uji  mengindikasikan  bahwa  hewan  uji  tidak  mengalami  depresi,  sedangkan  ketika  mengalami depresi  akan  terjadi  peningkatan  durasi immobility  time /  keadaan  putus  asa  pada  hewan  uji (Puspitasari, 2017).
Ciri  patofisiologis  depresi  adalah  menipisnya  neurotransmiter  tertentu  di  sistem  saraf  pusat (SSP)  .  Mekanisme  utama  kerja  obat  antidepresan  termasuk  SSRI  dan  SNRI  untuk  meningkatkan ketersediaan  monoamin  seperti  noradrenaline  (NE),  serotonin  (5-HT)  serta  dopamin  (DA).  Teori defisiensi monoamine merupakan etiologi depresi yang paling umum. Khususnya, berdasarkan hipotesis monoamine,  penurunan  tingkat  neurotransmitter  monoamine  termasuk  5-HT  dan  DA  di  otak  dapat menyebabkan  depresi  (Zhang,  2020).  Hasil  penelitian  skirining  fitokimia  ekstrak  sokhletasi rimpang  kunyit  ( Curcuma  longa )  dengan  pelarut  etanol  96% didapatkan  bahwa  Ekstrak rimpang kunyit ( Curcuma longa Linn ) mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, tanin (Cobra, 2019).  Senyawa  alkaloid  memiliki  aktivitas  antidepresan  dengan  cara  menurunkan  kadar hormon adrenokortikotropik,  menghambat enzim monoamine oksidase (MAO), berperan dalam peningkatan kadar serotonin dan BDNF di otak.  Efek antidepresan dimiliki oleh Polifenol dan flavonoid  yang  bekerja  dengan  meningkatkan  hormone  serotonin  (5-HT),  norepinefrin  (NE), dan kadar BDNF otak. Selain itu, aktivitas monoamine oksidase (MAO) dapat diturunkan oleh senyawa  flavonoid  (Puspitasari,  2017).  Komponen biologis aktif yang paling utama dalam Kunyit ( Curcuma  longa )  adalah  kurkumin.  Dalam  pengobatan  tradisional  Tiongkok,  kurkumin  tidak  hanya digunakan  untuk  mengurangi  rasa  sakit,  stres  psikologis  serta  hipokondriasis  ,  tetapi  juga  telah digunakan sebagai komponen aktif yang efektif untuk mengurangi stres, depresi, dan penyakit mental lainnya. Beberapa penelitian  telah membuktikan efek antidepresan kurkumin pada model tikus depresi yang  menunjukkan  efek  terapeutik  yang  sebanding  dengan  obat  antidepresan  konvensional  seperti imipramine dan fluoxetine. Selain itu, banyak uji klinis juga telah dilakukan untuk menilai efektivitas kurkumin dalam pengobatan depresi (Ningtyas et al, 2018).
Efek  antidepresan  kurkumin  adalah  melalui  perlindungan  fungsi  sistem  monoaminergik  dan mengendalikan  pelepasan  neurotransmiter  seperti  dopamin  (DA),  noradrenalin  (NE),  dan  5- hydroxyindoleacetic acid (5-HIAA) (Javelot,  2009). Kurkumin dapat meningkatkan tingkat dopamin dan  serotonin pada  dosis  yang  lebih tinggi  di otak.  Secara  neurokimia,  kurkumin  dapat  menghambat monoamine oxidase (MAO-A dan dosis yang lebih tinggi MAO-B), yang kemudian mengatur tingkat serotonin dan dopamin, yang menunjukkan bahwa sistem monoaminergik mungkin terlibat dalam efek antidepresan  (Zhang,  2020).  Biji  coklat  mengandung  fitokimia  fenolik  dalam  jumlah  sangat  tinggi yang  dikenal  sebagai  flavanol  (flavan-3-ols).  Tikus  yang  diberi  ekstrak  coklat  dosis  harian  yang mengandung flavanol tingkat tinggi menunjukkan peningkatan mobilitas pada forced swimming test , yang  merupakan  indikasi  adanya  efek  antidepresan.  Selain  itu, flavanol  mampu  mengurangi  perilaku seperti depresi yang disebabkan oleh kelelahan kronis pada hewan uji coba (Smith, 2013). Penelitian Lee et al membandingkan kandungan fenolik, flavonoid dan antioksidan total pada anggur merah, teh dan kakao. Dari hasil penelitiannya didapatkan bahwa biji kakao mengandung kadar total fenolat dan flavonoid yang jauh lebih tinggi  daripada teh hitam atau hijau dan anggur merah. Kakao juga memiliki
Khanifah F | Efektivitas Kombinasi Ekstrak Etanol ….. Jurnal Wiyata, Vol. 8 No. 2 Tahun 2021
aktivitas  antioksidan yang lebih tinggi (kakao> anggur merah> teh hijau> teh hitam) (Javelot, 2009). Molekul  antioksidan  pada  coklat  terutama  flavonoid  paling  banyak  ditemukan  dalam  bentuk epicatechin. Zat tersebut memiliki beberapa manfaat terhadap otak diantaranya memasuki otak dan  mendorong  stimulasi  perfusi  otak,  memicu  angiogenesis,  neurogenesis,  dan  perubahan morfologi  neuron.  Coklat dapat  menimbulkan  efek  suasana  hati  yang  positif  serta  mengurangi resiko terjadinya penyakit alzeimer dan stroke. Flavonoid dalam coklat juga berinteraksi dengan kaskade persinyalan yang melibatkan protein dan lipid kinase yang dapat menghambat kematian neuron  dengan  apoptosis  yang  diinduksi  oleh  neurotoksik  seperiti  radikal  oksigen,  serta meningkatkan kelangsungan hidup neuron dan plastisitas sinaptik (Nehlig, 2012).
Berdasarkan hasil penelitian ini, penulis berpendapat bahwa selain monoterapi dengan kunyit atau coklat,  integrasi  dengan  antidepresan  lain    yaitu  kombinasi  kunyit  dan  coklat  mampu  memberikan intervensi yang lebih baik  pada tikus yang  mengalami depresi. Pada hasil penelitian ini tampak hasil immobility time paling baik adalah pada tikus yang diberikan perlakuan kombinasi ekstrak etanol kunyit dengan coklat dibandingkan pada kelompok tikus yang diberikan sediaan tunggal ekstrak etanol kunyit dan esktrak etanol coklat. Baik pada coklat maupun kunyit mengandung beberapa yang senyawa yang mampu menghambat kerja dari enzim monoamine oksidase. Kemampuan menghambat tersebut mengakibatkan  terjadinya  peningkatan  monoamine  yang  selanjutnya  menyebabkan  terjadinya peningkatan  kadar  epinefrin,  norepinefrin,  dan  serotonin.  Efek  yang  ditimbulkan  pada peningkatan  kadar  serotonin  dan  norepineprin  diotak  kemudian  akan  memberikan  efek perbaikan suasana perasaan ( mood ), bertambahnya aktivitas fisik, peningkatan nafsu makan dan waktu tidur yang lebih baik (Puspitasari, 2017). Perbaikan tersebut tampak paling baik adalah pada  kelompok  yang  diberi  perlakuan  ekstrak  kombinasi  kunyit  dan  coklat  yang  dapat  dilihat berdasarkan  peningkatan  aktivitas  fisik,  melalui  penurunan immobility  time pada  pengamatan forced swimming test.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol kunyit dosis 560 mg/kgBB dan  ekstrak  etanol  coklat  dosis  0,392mg/20gBB  memiliki  efek  antidepresan . Efek  antidepresan kombinasi dari ekstrak etanol kunyit dan coklat lebih besar dibandingkan sediaan tunggalnya.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Program  Hibah  Kemenristek  Dikti  Penelitian  Dosen  Pemula,  LP3M  STIKes  Insan  Cendekia Media, Laboratorium Hewan Uji Coba Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga.
Khanifah F | Efektivitas Kombinasi Ekstrak Etanol ….. Jurnal Wiyata, Vol. 8 No. 2 Tahun 2021

## DAFTAR PUSTAKA
Adelina, Rosa. (2013). Kajian Tanaman Obat Indonesia yang Berpotensi sebagai Antidepresan. Jurnal  Kefarmasian  Indonesia  No  1  Vol  3.  Pusat  Biomedis  dan  Teknologi  Dasar Kesehatan, Badan Litbang Kesehatan, Kemenkes RI
Aisyah,  Khoifatun  Putri,  Prasetya,  Ridho  Panggah  Prasetya.,  Kurniati,  L.,  (2017).  Ekstrak Temulawak  untuk  Antidepresan.  ISSN  2407-9189.  The  6Th  University  Research Colloquium 2017. Universitas Muhammadiyah Magelang
Can, A., Dao, DT., Arad, M., CE, Terrilion., Piantadosi, S.C., TD, Gould. (2012). The Mouse Forced Swim Test. Journal of Visuallized experiments.DOI 10.3791/3638.
Casperson S, Lanza L, Albajri E, Nasser. (2019). Increasing Chocolate Sugar Content Enhances Its Psychoactive effects and Intake. Nutrient Article doi : 10.3390/nu11030596
Cobra, L. S., & Amini, H. W. (2019). Skirining Fitokimia Ekstrak Sokhletasi Rimpang Kunyit (Curcuma  longa)  dengan  Pelarut  Etanol  96%.  Jurnal  Ilmiah  Kesehatan  Karya  Putra Bangsa,  1(1),  12-17  Dwiprasetya,  K.,  W.  (2017).  Antidepresan  Non-Psikotropik Kombinasi  Ekstrak  Air  Rimpang  Kunyit  (Curcuma  Longa  L.)  Dan  Ekstrak  Aseton  Kulit Pisang  (Musa  Paradisisaca  L.)  Sebagai  Moodbooster  Pada  Mencit  Stres  Kronis  Ringan. Skripsi yang dipublikasikan UMS.
Farhud D, Malmir M & Khanahmadi M. (2014). Happiness & Health : The Biological factor- Systemic Review Article. Iranian Journal Public Health, 43(11), 1468-1477
Fachry AR, Ferila B, Farhan M. (2013). Ekstraksi Senyawa Kurkuminoid dari Kunyit (Curcuma longa  linn)  sebagai  pewarna  kuning  pada  Proses  Pembuatan  Cat.  Jurnal  Teknik  Kimia 3(19), 10-19
Faryadian  S,  Sydmohammadi  A,  Khosravi  A,  Kashiri  M,  Faryadayn  P,  Abasi  N.(2014). Aqueous  Extract  of  Echium  Amoneum  Elevate  CSF  Serotonin  and  Dopamin  Level  in Depression Rate. Biomedical & Pharmacolology Journal 7 (1), 137-142
Hartati,  Sy.  Balitro.  (2013).  Khasiat  Kunyit  sebagai  Obat  Tradisional  dan  Manfaat  lainnya.
Warta Penelitian dan Pengembangan Tanaman Industri no 2 volume 19
Javelot,  H  et  al.  (2009).  Antidepressant-like  properties  of  cocoa's  polyphenols  The  role  of flavanoids and flavanols on depression. Agro Food Industry Hi-Tech, 20(6), 19-21.
Kementrian  Kesehatan.  (2016).  Peran  Keluarga  Dukung  Kesehatan  Jiwa  Masyarakat.  Jakarta: Kemenkes
Kulkarni S, K., Dhir A, Akula K, Potentials of Curcumin as an Antidepressant. The Scientific World Journal 2009;9: 1233-41.
Nehlig, A. (2012). The neuroprotective effect of cocoa flavanol and its influence on cognitive performance. British Journal of Clinical Pharmacology. 75:3, 716-727
Khanifah F | Efektivitas Kombinasi Ekstrak Etanol ….. Jurnal Wiyata, Vol. 8 No. 2 Tahun 2021
Ningtyas,  A.R.,  Puspitasari,  I.M.,  Sinuraya,  R.K.  (2018).  Review  Artikel  :  Farmakoterapi Depresi Dan Pengaruh Jenis Kelamin Terhadap Efikasi Antidepresan. Farmaka Suplemen Volume 16 No 2. 186-201
Ramlah,  Siti.  (2016).  Karakteristik  Mutu  dan  Citarasa  Cokelat  Kaya  Polifenol.  Jurnal  Hasil Industri Perkebunan No 1 vol 11.Balai Besar Industri Hasil Perkebunan: Makasar
Parker,  G.,  Parker,  I.,  &  Brotchie,  H.  (2006).  Mood  state  effects  of  chocolate.  Journal  of Affective Disorders (92), 149-159. doi: 10.1016/j.jad.2006.02.007
Pase,  M.  P.,  Scholey,  A.  B.,  Pipingas,  A.,  Kras,  M.,  Nolidin,  K.,  Gibbs,  A.,  Wesnes,  K.,  & Stough,  C.  (2013).  Cocoa  polyphenols  enhance  positive  mood  states  but  not  cognitive performance:  A  randomized,  placebo-controlled  trial.  Journal  of  Psychopharmacology 27(5),  451-458  Puspitasari,  L.  (2017).  Ekstrak  etanol  daun  pandan  wangi  (pandanus amaryllifolius  r.)  10%  menurunkan  immobility  time  dan  kadar  kortisol tikus jantan  galur wistar yang depresi. Intisari Sains Medis, 8, 24-30
Rezki  R,  Anggoro  D,  Siswarni  M.  (2015).  Ekstraksi  Multi  Tahap  Kurkumin  dari  Kunyit (Curcuma domestica Valet) Menggunakan Pelarut Etanol. Jurnal Teknik Kimia USU. 29- 34
S.A, Lee., Hong S.S., Han X.H, Hwang J.S., Oh G.J., Lee K.S., Lee M.K., Hwang B.Y., dan Ro J.S.,  Piperine  from  the  fruits  of  Piper  longum  with  Inhibitory  Effect  on  Monoamine Oxidase  and  Antidepressant-like  Activity.  Chem  Pharm  Bull  (Tokyo)  2005;53  (7):  832- 845
Sulistyorini,  W.,  &  Sabarisman,  M.  (2017).  Depresi:  Suatu  Tinjauan  Psikologis. Sosio Informa , 3 (2).