Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Sukun ( Artocarpus altilis ) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli
Antibacterial Activity of Ethanol Extract of Breadfruit Leaf ( Artocarpus altilis ) Against Staphylococcus aureus and

## Escherichia coli Bacteria
Fuan Maharani Fiana 1 , Naelaz Zukhruf Wakhidatul Kiromah 1* , Ery Purwanti 2
1 Farmasi, Farmasi, STIKES Muhammadiyah Gombong, Jln. Yos Sudarso 461, Gombong, Indonesia
2 Keperawatan, Keperawatan, STIKES Muhammadiyah Gombong, Jln. Yos Sudarso 461, Gombong, Indonesia *E-mail: naela.zukhruf18@stikesmuhgombong.ac.id
Received: 3 Februari 2020; Accepted: 1 Juli 2020; Published: 6 Juli 2020

## Abstrak
Diare disebabkan oleh infeksi bakteri terutama Staphylococcus aureus dan Escherichia coli . Daun sukun (Artocarpus altilis) diketahui mengandung senyawa flavonoid, alkaloid, saponin, dan tannin yang dapat dimanfaatkan sebagai antibakteri. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui aktivitas ekstrak etanol daun sukun  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli .  Pembuatan  ekstrak  daun  sukun menggunakan  metode  maserasi  dengan  pelarut  etanol  96%.  Hasil  uji  tabung  dan  uji  KLT  ekstrak  daun sukun positif kandungan flavonoid dan tanin yang berpotensi sebagai antibakteri. Uji antibakteri dilakukan menggunakan  metode disc  diffusion (tes  Kirby-Bauer)  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli yang diinkubasi selama 1 x 24 jam. Konsentrasi ekstrak yang diujikan yaitu 10%, 15% dan 20%. Kontrol positif menggunakan antibiotik eritromisin dan kontrol negatif menggunakan aquades. Identifikasi kandungan kimia tanaman dilakukan dengan uji tabung dan KLT. Hasil inkubasi ekstrak daun sukun  dengan  konsentrasi  10%,  15%  dan  20%  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus rerata  diameter zona hambat berturut-turut yaitu 3,67, 3,50 dan 2,67 mm dengan kontrol positif diameter zona hambat 18,5 mm, kontrol negatif diameter zona hambat 0 mm. Hasil inkubasi ekstrak daun sukun dengan konsentrasi 10%,  15%  dan  20%  terhadap  bakteri Escherichia  coli rerata  diameter  zona  hambat  berturut-turut  yaitu 5,33, 3,17 dan 3,33 mm dengan kontrol positif memiliki diameter zona hambat 28,5 mm dan kontrol negatif diameter zona hambat 0 mm.  Aktivitas ekstrak etanol daun sukun terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli termasuk dalam kategori lemah . Kata Kunci : Daun sukun, Artocarpus altilis , Antibakteri, Staphylococcus aureus, Escherichia coli.

## Abstract
Diarrhea  is  caused  by  bacterial  infections,  especially  Staphylococcus  aureus  and  Escherichia  coli.  The breadfruit  leaves  (Artocarpus  altilis)  are  known  contain  flavonoid  compounds,  alkaloids,  saponins,  and tannins which can be used as antibacterial. This research was conducted to determine the ethanol extract of the breadfruit leaves against Staphylococcus aureus and Escherichia coli bacteria. The manufacture of the breadfruit leaf extract was using a maceration method with 96% ethanol solvent. The result of the tube test and the TLC test was positive, the breadfruit leaf extract containing flavonoids and tannins which have potential as antibacterial. The antibacterial test was carried out using the disc diffusion method (Kirby- Bauer test) against Staphylococcus aureus and Escherichia coli bacteria incubated for 1 x 24 hours. The extract  concentrations  tested  were  10%,  15%  and  20%.  The  positive  control  was  using  erythromycin antibiotics and the negative control was using aquades. The identification of the chemical content of plants is  done  by  tube  test  and  the  TLC  test.  The  results  of  incubation  of  the  breadfruit  leaf  extract  with concentrations of 10%,  15% and  20% against Staphylococcus aureus bacteria,  the  average diameter  of inhibitory zones respectively were 3.67, 3.50 and 2.67 mm with the positive control diameter of inhibition zone was 18.5 mm, the negative control diameter of inhibition zone was 0 mm. The results of incubation of the breadfruit leaf extract with concentrations of 10%, 15% and 20% against Escherichia coli bacteria, the average diameter of inhibitory zones respectively were 5.33, 3.17 and 3.33 mm with the positive control inhibition  zone  diameter  of  28.5  mm  and  the  negative  control  of  inhibition  zone  diameter  of  0  mm.  The
activity of ethanol extract of the breadfruit leaves against the Staphylococcus aureus and Escherichia coli bacteria is categorized weak.
Keywords: The breadfruit leaves, Artocarpus altilis, Antibacterial, Staphylococcus aureus, Escherichia coli.

## PENDAHULUAN
Infeksi  bakteri  merupakan  salah  satu penyebab  penyakit  diare.  Bakteri  tersebut adalah Staphylococcus aureus dan Escherichia coli (Oroh et al, 2014). Menurut Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia tahun 2016, prevalensi diare yang menyebabkan  kematian  sebesar  3,04% (Depkes RI, 2017). Data kasus penyakit diare di  Jawa  Tengah  tahun  2017  sebesar  55,8% menurun  dari  tahun  sebelumnya  pada  tahun 2016  sebesar  68,9% (DinKes  Jateng,  2017), walaupun  menunjukkan  presentase  yang menurun namun diare masih menjadi pemicu penyebab  kematian.  Berdasarkan  data  Profil Kesehatan  Kebumen  tahun  2016  telah ditemukan    8  kasus    (2,99%)  diare  sebagai penyebab kematian bayi dari 20.44 kelahiran hidup (DinKes Kebumen, 2017). Berdasarkan data diatas penyakit diare akibat dari bakteri harus tetap diwaspadai.
Sekitar  10-20%  penyakit  diare  yang memerlukan  terapi  antibiotik  sebagai  akibat dari infeksi (Purnamasari, 2014). Penggunaan antibiotik yang tidak rasional dapat menyebabkan  resistensi  bakteri,  selain  itu penggunaan  antibiotik  spektrum  luas  dalam jangka waktu yang lama dapat menyebabkan supra infeksi (Wijaya, 2010).
Tanaman  dapat  menjadi  salah  satu alternatif  pengobatan  dalam  mengurangi resistensi  terhadap  antibiotik  (Pandey  and Mishra, 2010). Tanaman yang dapat dimanfaatkan  sebagai  obat  salah  satunya adalah tanaman sukun ( Artocarpus altilis ) . Daun  sukun  secara  umum  dikalangan masyarakat dimanfaatkan sebagai obat herbal.  Tanaman  daun  sukun  memiliki kandungan  alkaloid,  flavonoid,  tanin  dan saponin (Rumouw, 2017). Kandungan senyawa  tanin  dan  flavonoid  mempunyai aktivitas  sebagai  antiseptik  dan  antibakteri (Sa, 2016).
Penelitian  Djamil  (2017)  menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  daun  sukun  dengan
konsentrasi 30, 40, 50, 60% dapat menghambat  pertumbuhan Staphylococcus aureus dengan  diameter  berturut-turut  14,5 mm,  18,1  mm,  22  mm, dan  27  mm (Djamil, 2017). Penelitian Retnaningsih (2016) ekstrak etanol daun sukun menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia  coli pada  konsentrasi 100% sebesar 11,3 mm,  sedangkan terhadap bakteri Shigella  dysenteriae pada konsentrasi 80% sebesar 6,39 mm (Retnaningsih,  2016) . Ekstrak  etanol  daun sukun  pada  konsentrasi  10,  15,  dan  20% mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  epidermis yang  merupakan bakteri gram positif (Wulaisfan and Hasnawati, 2017).
Gombong  merupakan  wilayah  yang termasuk  dalam  Kabupaten  Kebumen,  di wilayah  Kabupaten  Kebumen  berdasarkan data tercatat tanaman sukun yang menghasilkan  pohon  sukun (Artocarpus altilis) sebanyak 3.378 (Badan Pusat Statistik, 2018) . Berdasarkan  uraian  diatas  maka dilakukan  penelitian  uji  ekstrak  etanol  daun sukun  yang  tumbuh  di  wilayah  Gombong terhadap bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli dengan  tujuan  untuk mengetahui  aktivitas  ekstrak  etanol  daun sukun  ( Artocarpus  altilis )  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli .

## METODE PENELITIAN Bentuk Penelitian
Penelitian ini merupakan suatu penelitian eksperimental yang dilaksanakan di Laboratorium  Fakultas  Farmasi  STIKES Muhammadiyah Gombong pada bulan April- Mei  2019  untuk  pembuatan  ekstrak  kental daun sukun Artocarpus altilis) . Uji Antibakteri  dilakukan  di Laboratorium Mikrobiologi  Fakultas  Farmasi  Universitas Ahmad Dahlan pada bulan Mei-Juli 2019.

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah  gelas-gelas  kimia  (Pyrex),  blender
(Maspion), timbangan analitik, oven, autoklaf,  inkubator, rotary  evaporator, waterbath, chamber, UV detektor, jarum ose, kapas  steril,  cawan  petri,  jangka  sorong, pinset, laminar air flow (LAF).
Bahan  yang digunakan dalam penelitian ini  adalah  daun  sukun (Artocarpus  altilis) yang  berasal  dari  wilayah  Gombong.  Etanol 96%,  serbuk  magnesium,  HCl  pekat,  larutan FeCl3  10%,  HCl  2N,  pereaksi  Mayer, pereaksi  Dragendorff,  aquadest,  silika  GF 254, n-butanol, asam asetat glasial, ammonia pekat,  etil  asetat,  n-heksan,  reagen  semprot FeCl3. Larutan kuersetin sebagai pembanding senyawa  flavonoid  dan  larutan  asam  tanat sebagai  pembanding  tanin.  Bahan  untuk  uji antibakteri  yaitu  NA  ( Nutrient  Agar ),  NaCl 0,9%, antibiotik erythromycin 500 MG.

## Determinasi Tanaman
Determinasi dilakukan untuk mengetahui kebenaran  dari  tanaman  apakah  bahan  uji penelitian  yang  akan  digunakan  pada penelitian  ini  benar  merupakan  daun  sukun ( Artocarpus altilis ).
Pembuatan Simplisia Daun
Sukun
(Artocarpus altilis) Daun sukun ( Artocarpus altilis ) diperoleh dari daerah Gombong. Daun sukun yang sudah dikumpulkan dibersihkan dengan air yang mengalir kemudian dipotong-potong dan  dikeringkan  di  suhu  ruang.  Daun  sukun ( Artocarpus  altilis )  yang  sudah  kering kemudian  dihaluskan  dengan  menggunakan blender samapai menjadi serbuk halus.
Ekstraksi Dengan Maserasi
Menimbang  serbuk  daun  ( Artocarpus altilis ) sebanyak  250  gram,  dimasukan  ke dalam wadah, ditambahkan etanol 96% 1,5 L, diaduk  hingga  tercampur,  ditutup  dengan alumunium  foil dan  disimpan  selama  3  hari (terhindar  dari  cahaya  matahari).  Selama perendaman  setiap  hari  diaduk  selama  15 menit,  setelah  3  hari,  disaring  menggunakan kertas  saring  untuk  memisahkan  filtrat  hasil maserasi dari serbuk daun sukun ( Artocarpus altilis )  kemudian  diuapkan  dengan rotary vacuum  evaporator pada  temperatur  40 o C (Bempa et al, 2016). Rendemen ekstrak yang
didapatkan kemudian dihitung dengan menggunakan rumus:
Rendemen =   Bobot ekstrak    x 100% Bobot simplisia

## Skrining Fitokimia Daun Sukun
Uji Tabung

## Uji Flavonoid
Ekstrak daun sukun dipanaskan selama 5 menit kemudian ditambahkan dengan beberapa  tetes  HCl  pekat  dan  serbuk  Mg. Warna merah tua yang muncul menunjukkan positif flavonoid (Djamil, 2017).

## Uji Tanin
Sebanyak  1  mL  larutan  ekstrak  uji direaksikan  dengan  larutan  besi  (III)  klorida 10%,  perubahan  warna  biru  tua,  biru kehitaman atau hitam kehijauan menunjukkan adanya  polifenol  dan  tanin  (Jones  and A.D.Kinghorn, 2006).

## Uji Alkaloid
Ekstrak atau sampel dilarutkan dengan 5 mL  HCl  2N.  Larutan  yang  didapatkan kemudian  dibagi  ke  dalam  3  tabung  reaksi yang  berbeda.  Tabung  pertama  ditambahkan dengan  HCl  2N  berfungsi  sebagai  blanko. Tabung kedua ditambahkan perekasi Dragendorff  sebanyak  3  tetes  dan  tabung ketiga ditambahkan pereaksi Mayer sebanyak 3  tetes.  Terbentuknya  endapan  jingga  pada tabung  kedua  dan  endapan  putih  hingga kekuningan pada tabung ketiga menunjukkan adanya  alkaloid  (Jones  and  A.D.Kinghorn, 2006).

## Uji Saponin
Ekstrak uji dimasukkan ke dalam tabung reaksi, ditambahkan dengan 10 mL air panas, kemudian didinginkan dan dikocok kuat-kuat selama  10  detik.  Terbentuk  buih  yang  stabil selama tidak kurang dari 10 menit setinggi 1- 10 cm pada penambahan HCl 2N, buih tidak hilang (DepKes RI, 1995).
KLT (Kromatografi Lapis Tipis)
Identifikasi menggunakan KLT dilakukan untuk mengetahui apakah kandungan  daun  sukun  ( Artocarpus  altilis ) mengandung  flavonoid  dan  tanin  yang mempunyai  aktivitas  sebagai  antibakteri. Nilai Rf uji KLT dapat dihitung
menggunakan rumus: Nilai Rf dapat dihitung dengan rumus:
Rf = Jarak bercak dari tempat penotolan Jarak elusi

## Uji Flavonoid
Silika  gel  G  60  F  254  dielusi  dengan eluen  n-butanol:asam  asetat  glacial:air  (8:1: 1). Kuarsetin digunakan sebagai pembanding flavonoid.  Kromatogram  dilakukan  dengan pendeteksi uap ammonia pekat. Terbentuknya warna kuning menunjukkan adanya kandungan flavonoid (Robinson, 1995).

## Uji Tanin
Silika  gel  G  60  F  254  dielusi  dengan eluen  etil  asetat:n-heksan  (2:8).  Asam  tanat digunakan  sebagai  pembanding  tanin.  Hasil positif  ditandai  dengan  adanya  bercak  abu- abu pada sinar tampak (Saifudin, 2014).

## Uji Antibakteri

## Sterilisasi Alat Dan Bahan
Alat-alat  gelas  disterilkan  dalam  oven dengan suhu 170ºC selama ± 2 jam, jarum ose dan  pinset  dibakar  dengan  pembakar  diatas api langsung dan media disterilkan menggunakan  autoklaf  pada  suhu  121ºC selama 15 menit (Muljono et al, 2016).

## Pembuatan Media NA (Nutrient Agar)
Sebanyak  23-gram  media  NA  serbuk dilarutkan ke dalam 1 liter aquades ke dalam erlenmeyer  kemudian  dihomogenkan.  Tutup Erlenmeyer  dengan alumunium  foil dan disterilisasi  dalam autoclave dengan  suhu 121ºC  dan  tekanan  2  atm  selama  15  menit (Angelika et al, 2014).
Pembuatan Suspensi Bakteri Dua sampai tiga ose bakteri pada media NA  ( Nutrient  Agar )  yang  sudah  diinkubasi diencerkan  menggunakan  NaCl  0,9%  steril sebanyak 10 mL sampai kekeruhannya setara dengan  larutan standar  0,5 Mc  Farland (Nuria, 2010).
Uji Ekstrak Daun Sukun Terhadap Bakteri Pengujian  aktivitas  antibakteri  ekstrak daun  sukun  dengan  berbagai  konsentrasi menggunakan  metode disc  diffusion (tes Kirby  Bauer ).  Memanaskan  media  NA ( Nutrient  Agar )  kemudian  sebanyak  20  mL dimasukkan  ke  dalam  cawan  petri,  setelah
media  memadat  kemudian  menyelupkan kapas  lidi  steril  ke  dalam  suspense  bakteri, dan diusapkan merata di atas media.
Kertas  cakram  steril  yang  berukuran  6 mm  direndam  selama  15  menit  ke  dalam  10 mL  larutan  (Pramita,  2013)  ekstrak  etanol daun  sukun  yang  mengandung  konsentrasi 10%,  15%,  dan  20%.  Kertas  cakram  yang telah  direndam  ekstrak  ditempatkan  diatas permukaan media pada posisi yang diinginkan.  Kontrol  positif  menggunakan antibiotik  eritromisin  15µg/mL  dan  kontrol negatif menggunakan aquadest . Cawan petri kemudian diinkubasi pada suhu 37 0 C selama 24 jam kemudian diamati zona hambat  yang terbentuk  yang  diinterpresentasikan  dengan melihat  daerah  bening  sekitar  cakram  yang menunjukkan  tidak  adanya  pertumbuhan bakteri (Pramita, 2013).

## Analisa Data
Pengukuran  dimeter  zona  seperti  yang ditunjukkan  pada  Gambar  1  dapat  dihitung dengan rumus =
(D V -D C ) + (D H -D C ) 2 Keterangan: D V : Diameter Vertikal D H : Diameter Horizontal
D C : Diameter Cakram

## Gambar 1. Pengukuran diameter zona hambat
Daya   antibakteri  terbagi menjadi  4 kategori (Davis  and  Stout,  1971)  seperti  yang ditunjukkan Tabel 1.
Tabel 1. Kriteria Daya Antibakteri (Davis & Stout,
1971) Kategori Daya Hambat Diameter Zona Hambat Lemah < 5mm Sedang 5-10 mm Kuat 10-20 mm Sangat Kuat >20 mm

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan  hasil  determinasi  tanaman, sampel  yang  dilakukan  di  Laboratorium Biologi Universitas Ahmad Dahlan Yogyakarta.  Sampel  yang  diambil  adalah daun sukun (Artocarpus altilis) . Hasil dari maserasi daun sukun ( Artocarpus  altilis) dengan  etanol  96% didapatkan  ekstrak  kental  berwarna  hijau pekat dengan berat 75,27 gram dari 950 gram serbuk  daun  sukun (Artocarpus  altilis) dengan nilai rendemen sebesar 7,9%.
Skrining  fitokimia  pada  uji  tabung dilakukan  untuk  menguji  ada  tidaknya golongan  senyawa  yang  berpotensi  sebagai antibakteri  yaitu  flavonoid,  tanin,  alkaloid, dan saponin.  Berdasarkan hasil dari skrining fitokimia  dapat  diketahui  bahwa  ekstrak etanol daun sukun ( Artocarpus altilis) positif memiliki  kandungan  metabolit  sekunder flavonoid,  tanin  dan  negatif  untuk  senyawa metabolit  alkaloid  dan  saponin  seperti  yang ditunjukkan pada Gambar 2 dan Tabel 2.
Hasil  positif  flavonoid  ditandai  dengan timbulnya  warna  merah  tua  (Djamil,  2017),
dan  hasil  positif  tanin  ditandai  dengan timbulnya warna hijau kehitaman (Jones and A.D.Kinghorn,  2006).  Hasil  negatif  pada  uji alkaloid  dikarenakan  tidak  adanya  warna endapan jingga pada saat direaksikan dengan pereaksi  Mayer  dan  tidak  adanya  endapan putih  saat  direaksikan  dengan  pereaksi Dragendrof (Jones and A.D.Kinghorn, 2006) yang  timbul  ketika  direaksi  dengan  pereaksi Mayer  dan  Dragendrof  hanya  timbul  warna endapan  hitam.  Negatif  saponin  ditandai dengan  tidak  adanya  busa  yang  muncul setinggi 1-10 cm dan pada penambahan HCl 2N, buih menghilang (DepKes RI, 1995).
Berdasarkan  uji  KLT  diketahui  ekstrak etanol daun sukun ( Artocarpus altilis) positif memiliki  kandungan  flavonoid  dan  tanin, seperti yang ditunjukkan pada Tabel 3. Hasil identifikasi  flavonoid  diketahui  pada  silica gel  setelah  pemberian  reagen  semprot ammonia pekat terdapat satu bercak berwarna kuning dengn nilai Rf 0,93 pada daun sukun ( Artocarpus  altilis) dan  Rf  0,90  pada pembanding  kuarsetin.  Diketahui  nilai  Rf 0,93  merupakan  senyawa  flavonoid  yang
Gambar 2. Skrining Fitokimia Uji Tabung Ekstrak Etanol Daun Sukun
Tabel 2. Skrining Fitokimia Uji Tabung Ekstrak Etanol Daun Sukun
Uji Senyawa Pereaksi Hasil Uji Senyawa Ket Positif Hasil Flavonoid Mg Serbuk Merah tua Merah tua + Tannin FeCl 3 Hijau kehitaman Hijau kehitaman + Alkaloid Mayer Endapan jingga Endapan hitam - Dragendrof Endapan putih Endapan hitam - Saponin HCl pekat Terdapat busa Tidak berbusa -
ditandai  dengan  bercak  berwarna  kuning menunjukkan  adanya  kandungan  flavonoid (Robinson,  1995).  Hal  ini  didukung  pada penelitian yang dilakukan Nuria et al (2009) senyawa  flavonoid  menghasilkan  bercak warna kuning pada nilai Rf 0,98 (Nuria et al, 2009) seperti yang ditunjukkan pada Gambar 3.
Uji  KLT  ekstrak  etanol  daun  sukun
( Artocarpus  altilis) untuk  identifikasi  tanin
dilakukan  pada  silica  gel  setelah  pemberian reagen semprot FeCl 3 10% terdapat 2 bercak pada ekstrak etanol daun sukun dengan nilai Rf  0,625  dengan  bercak  berwarna  abu-abu dan Rf 0,81 dengan bercak warna coklat dan Rf  pembanding  asam  tanat  0,66  dengan bercak berwarna abu-abu. Diketahui nilai Rf 0,625  merupakan  senyawa  tanin  ditandai adanya  bercak  warna  abu-abu  (Saifudin, 2014). Hal ini didukung pada penelitian yang
Gambar 3. Hasil Uji KLT Senyawa Flavonoid:
(a) KLT pada sinar tampak, (b) UV 254 nm, (c) UV 366 nm
Gambar 4. Hasil Uji KLT senyawa tanin: ( a) KLT pada sinar tampak, (b) sinar UV 254 nm, (c) Sinar
UV 366 nm, (d) setelah disemprot FeCl 3

## Tabel 3 Skrining Fitokimia Uji KLT Ekstrak Etanol Daun Sukun
Identifikasi senyawa Eluen Rf Reagen Semprot Bercak Ket Flavonoid Ekstrak etanol daun sukun n-butanol : asam asetat glasial : air (8: 1: 1). 0,93 Ammonia pekat Kuning + Kuarsetin (pembanding) n-butanol : asam asetat glasial : air (8: 1: 1). 0,90 Ammonia pekat Kuning + Tannin Ekstrak etanol daun sukun etil asetat : n- heksan (2 : 8) 0,63 0,81 FeCl 3 Abu-abu Coklat + - Asam tanat (pembanding) etil asetat : n- heksan (2 : 8) 0,66 FeCl 3 Abu-abu +
dilakukan  Qolbi  dan  Yuliani  (2018)  bahwa senyawa  tanin  menimbulkan  warna  abu-abu pada nilai Rf 0,32 (Qolbi and Yuliani, 2018) seperti yang ditunjukkan pada Gambar 4.
Penelitian ini dilakukan dengan membiakkan  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli dalam  media  NA ( Nutrient  Agar )  pada  cawan  petri  dengan meletakkan  kertas  cakram  berukuan  6  mm yang  telah  diberi  ekstrak  daun  sukun (Artocarpus  altilis) pada  konsentrasi  10%, 15%,  dan  20%  dengan  3  kali  percobaan. Kontrol  negatif  menggunakan  akuades. Kontrol positif pada uji antibakteri menggunakan antibiotik eritromisin. Eritromisin merupakan antibiotik berspektrum  luas,  termasuk  dalam  golongan makrolida.  Penggunaannya  efektif  terhadap bakteri gram positif ( Staphylococcus aureus ) dan  bakteri  gram negatif ( Escherichia  coli ). Mekanisme  kerjanya,  yaitu  menghambat sintesis  protein  dengan  cara  berikatan  pada ribosom  subunit  50  S  (Asmat,  2015). Aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  daun sukun (Artocarpus  altilis) terhadap  bakteri
Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli dapat  dilihat  dengan  adanya  zona  hambat yang terbentuk setelah cawan petri diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 0 C. Zona hambat yang  terbentuk  pada  uji  antibakteri  dapat dilihat pada Gambar 5.
Hasil  uji  antibakteri,  kontrol  positif berupa antibiotik eritromisin memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli , sementara kontrol negatif yaitu aquadest tidak memiliki aktivitas antibakteri. Ekstrak dinyatakan  memiliki  aktivitas  antibakteri ditandai  dengan  terbentuknya  area  bening pada sekitar kertas cakram, setelah diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 0 C.
Berdasarkan pengamatan yang dilakukan dengan 3 kali pengujian menunjukkan adanya zona  hambat  yang  terbentuk  dengan  rerata diameter  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus pada  konsentrasi  ekstrak  10%  rerata diameter zona hambat yang terbentuk adalah 3,67 mm.
Konsentrasi ekstrak 15% rerata diameter zona hambat yang terbentuk adalah 3,50 mm
Gambar 5. Uji Antibakteri: bakteri Staphylococcus aureus (a) Uji kontrol positif (PE) dan negatif (NE), (b) uji ekstrak daun sukun 1 (konsentrasi 10%, 2 15%), 3 (20%).  Bakteri Escherichia coli (c ) Uji kontrol positif (PE) dan negatif (NE), (b) uji ekstrak daun sukun 1 (konsentrasi 10%, 2 (15%), 3 (20%),
setelah diinkubasi selama 24 jam dengan suhu 37 0 C
Tabel 4. Hasil pengukuran diameter zona hambat
Sampel Uji Rata-Rata Diameter Zona Hambat (mm) ± SD Staphylococcus aureus Escherichia coli Kontrol positif 18,5 ± 5,89 28,5 ± 3,46 Kontrol negatif 0 ± 0 0 ± 0 Konsentrasi ekstrak 10% 3,67 ± 3,75 5,33 ± 0,58 Konsentrasi ekstrak 15% 3,50 ± 4,09 3,17 ± 0,70 Konsentrasi ekstrak 20% 2,67 ± 2,31 3,33 ± 2,52
dan konsentrasi  20%  ekstrak rerata diameter zona hambat yang terbentuk adalah 2,67 mm, sedangkan  pada  kontrol  positif  rerata diameter zona hambat yang terbentuk adalah 18,5 mm.
Diameter zona hambat terhadap Escherichia  coli pada  konsentrasi  ekstrak 10%  rerata  diameter  zona  hambat  yang terbentuk  adalah  5,33  mm.  Konsentrasi ekstrak  15%    rerata  diameter  zona  hambat yang  terbentuk  adalah  3,17  mm  dan konsentrasi 20% ekstrak rerata diameter zona hambat  yang  terbentuk  adalah  3,33  mm, sedangkan  pada  kontrol  positif  rerata diameter zona hambat yang terbentuk adalah 28,5  mm.  Pada  penelitian  ini,  diketahui konsentrasi  10%  memiliki  diameter  zona hambat lebih besar dari pada konsentrasi 15% dan 20% terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia  coli seperti  yang  ditunjukkan pada Tabel 4.
Diketahui  pada  percobaan  ke  2  uji ekstrak  daun  sukun  ( Artocarpus  altilis ) terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus didapatkan  hasil  0,  hal  ini  kemungkinan dikarenakan  adanya  pengaruh  dari  ekstrak daun  sukun  yang  kurang  hati-hati  saat memasukkan  sampel  pada  media  yang menyebabkan tekontaminasi sehingga menyebabkan komponen kimia yang bersifat antibakteri tidak terbentuk.
Hasil diameter zona hambat ekstrak daun sukun  ( Artocarpus  altilis )  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus pada  konsentrasi ekstrak 10%, 15%, dan 20% termasuk dalam kategori daya hambat yang lemah. Sedangkan,  hasil  uji  terhadap  bakteri Escherichia  coli konsentrasi  10%  termasuk dalam  kategori  daya  hambat  sedang  karena diameter  zona  hambat  yang  terbentuk  lebih dari  5  mm,  dan  untuk  konsentrasi  ekstrak 15%,  20%  termasuk  dalam  kategori  daya hambat  yang  lemah  lemah  karena  diameter zona  hambat  yang  terbentuk  kurang  dari  5 mm (Davis and Stout, 1971).
Berbeda  dengan  penelitian  sebelumnya, yang  menyimpulkan  bahwa  hasil  antibakteri ekstrak etanol daun sukun ( Artocarpus altilis )
terhadap bakteri gram positif pada konsentrasi  15%  dan  20%    termasuk  dalam kategori daya hambat sedang karena diameter zona hambat yang terbentuk lebih dari 5 mm (Wulaisfan and Hasnawati, 2017). Penelitian Retnaningsih  (2016)  juga  menyimpulkan bahwa  ekstrak  etanol  daun  sukun  pada konsentrasi  20%  tidak  mampu  menghambat bakteri Escherichia  coli (Retnaningsih, 2016) .
Aktivitas  ekstrak  etanol  daun  sukun ( Artocarpus  altilis )  dalam  menghambat pertumbuhan bakteri pada penelitian ini lebih aktif dalam menghambat bakteri gram negatif Escherichia  coli dibandingkan  bakteri  gram positif Staphylococcus  aureus. Hal  ini dikarenakan bakteri Escherichia coli merupakan bakteri negatif sedangkan bakteri Staphylococcus  aureus merupakan  bakteri gram positif yang kedua jenis bakteri tersebut memiliki  dinding  sel  yang  berbeda.  Bakteri gram  positif  pada  dinding  selnya  memiliki lapisan  peptidoglikan  yang  tebal  dan  kaku, sementara bakteri gram negatif pada dinding selnya  memiliki  lapisan  peptidoglikan  yang tebal  dan  kaku,  sementara  bakteri  gram negatif pada dinding selnya memiliki lapisan peptidoglikan yang tipis sehingga dinding sel pada  bakteri  gram  negatif  mudah  rusak (Sudarmi et al, 2017).
Perbedaan hasil antibakteri ekstrak daun sukun ( Artocarpus altilis ) pada bakteri  gram positif dengan penelitian sebelumnya dimana konsentrasi  15%  dan  20%  termasuk  dalam kategori sedang, sementara pada penelitian ini lemah  kemungkinan  dikarenakan  ekstrak etanol  sukun  ( Artocarpus  altilis )  pada penelitian  ini  hanya  mengandung  senyawa tanin  dan  flavonoid.  Kemampuan  suatu ekstrak  dalam    menghambat  pertumbuhan bakteri  dapat  dipengaruhi  oleh  konsentrasi ekstrak  dan  golongan  senyawa  antimikroba yang  dihasilkan  oleh  ekstrak  tersebut (Sudarmi  et  al,  2017).  Senyawa  flavonoid berfungsi sebagai antibakteri dengan menyebabkan terjadinya kerusakan permeabilitas dinding sel bakteri, mikrosom, lisosom  sebagai  hasil  interaksi  antara
flavonoid  dan  DNA  (Cushnie  and  Lamb, 2005).  Senyawa  tanin  sebagai  antibakteri yaitu  dengan  menghambat  enzim reverse transkiptase dan DNA topoisomerase sehingga sel bakteri tidak terbentuk (Nuria et al,  2009).  Alkaloid  serta  saponin  dapat berfungsi sebagai antibakteri senyawa
alkaloid sebagai antibakteri memiliki
kemampuan mengganggu komponen penyusun  peptidoglikan  pada  sel  bakteri, sehingga  lapisan  dinding  sel  tidak  terbentuk secara  utuh  dan  menyebabkan  kematian  sel (Darsana  et  al,  2012),  sementara  senyawa saponin  bekerja  dengan  cara  memecah  atau melisis dinding bakteri (Karlina, 2013).
Berdasarkan  uraian  di  atas,  daun  sukun ( Artocarpus  altilis )  yang  tumbuh  di  wilayah
Gombong, memiliki aktivitas antibakteri pada konsentrasi  ekstrak  10%,  15%  dan  20%. Namun dalam hal ini belum cukup dikatakan potensial.    Potensi  aktivitas  antibakteri  dari suatu ekstrak dinyatakan apabila zona hambat yang  terbentuk  minimal  sebesar  1,4  cm (Angelica, 2013).

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  daun  sukun  ( Artocarpus altilis )  mengandung  senyawa  flavonoid  dan tanin.  Hal  ini  ekstrak  etanol  daun  sukun ( Artocarpus altilis ) dengan konsentrasi 10, 15, dan 20% terhadap bakteri Staphylococcus dan Escherichia coli berdasarkan rata-rata diameter  zona  hambat  mayoritas  termasuk kategori lemah.

## Daftar Pustaka
Angelica, N. 2013. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Dan Kulit Batang Kayu Manis ( Cinnamomum  burmannii  (Nees  &  Th.  Nees ))  Terhadap Escherichia  coli Dan Staphylococcus aureus . JIFFK : Jurnal Ilmu Farmasi Dan Farmasi Klinik, 2(2).
Angelika, G. P., Agung, S., & Pujiyanto, S. 2014. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Tumbuhan Euphorbia  hirta  L.  Terhadap  Ralstonia  solanacearum,  Escherichia  coli,  Dan Staphylococcus aureus Secara In Vitro. Jurnal Biologi, 3 (2), 49–58.
Asmat,  M.  A.  Bin.  2015.  Uji  Sensitivitas  Antibiotika  Pada  Isolat  Lapang Staphylococcus aureus . Departemen  Ilmu Penyakit Hewan Dan Kesmavet  Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor.
Badan Pusat Statistik. 2018. BPS Provinsi Jawa Tengah. Badan Pusat Statistik.
Bempa,  S.  L.  P.,  Fatimawali,  &  Parengkuan,  W.  G.  2016.  Uji  Daya  Hambat  Ekstrak  Daun Sukun  (Artocarpus  altilis)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Streptococcus  mutans. Pharmacon Jurnal Ilmiah Farmasi, 5(4), 655–656.
Cushnie,  T.  P.  T.,  &  Lamb,  A.  J.  2005.  Antimicrobial  activity  of  flavonoids.  International Journal of Antimicrobial Agents, 26(5), 343–356.
Darsana,  I., Besung,  I.,  & Mahatim,  H.  2012. Potensi Daun Binahong ( Anredera Cordifolia (Tenore)  Steenis )  dalam  Menghambat  Pertumbuhan  Bakteri Escherichia  coli secara  In Vitro. Indonesia Medicus Veterinus, 1(3), 337–351.
Davis, W. W., & Stout, T. R. 1971. Disc plate method of microbiological antibiotic assay. II. Novel procedure offering improved accuracy. Applied Microbiology, 22(4), 666–670.
Departemen Kesehatan Republik, I. 1995. Farmakope Indonesia. Vol. IV. Jakarta.
Departemen  Kesehatan  Republik,  I.  2017.  Profil  Kesehatan  Indonesia  2016.  In  Profil Kesehatan Indonesia Tahun 2016.
Dinkes  Jateng.  2017.  Profil  Kesehatan  Provinsi  Jawa  Tengah  2017.  Vol.  3511351.  Jawa

## Tengah
Dinkes Kebumen. 2017. Profil Kesehatan Kabupaten Kebumen 2016. Kebumen
Djamil, M. I. 2017. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Sukun ( Artocarpus altilis ) Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus Secara In Vitro. Program Studi Kedokteran Hewan Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin Makassar.
Jones, W. P., & A.D.Kinghorn. 2006. Extraction of Plant Secondary Metabolites. In: Sarker, S.  D.,  Latif,  Z.  and  Gray,  A.  I.,  eds.  Natural  Products  Isolation.  2nd  Ed.  New  Jersey: Humana Press. P.341-342.
Karlina,  Y.  C.  2013.  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Herba  Krokot  ( Portulaca  oleracea  L .) terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli . LenteraBio , 2 (1), 87–93.
Muljono, P., . F., & Manampiring, A. E. 2016. Uji aktivitas antibakteri ekstrak daun mayana jantan ( Coleus atropurpureus Benth) terhadap pertumbuhan bakteri Streptococcus Sp . dan Pseudomonas Sp . Jurnal E-Biomedik, 4(1), 164–172.
Nuria, M. C. 2010. Antibacterial Activities From Jangkang ( Homalocladium platycladum (F. Muell) Bailey ) Leaves. Jurnal Ilmu-Ilmu Pertanian , 6(2), 9–15.
Nuria, M. cut, Faizatun, A., & Sumantri. 2009. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Jarak Pagar (Jatropha Curcas L) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia  coli ATCC  25922,  Dan Salmonella  typhi ATCC  1408.  Jurnal  Ilmu-Ilmu Pertanian.
Oroh, S. B., Kandou, F. E. F., Pelealu, J., & Pandiangan, D. 2014. Uji Daya Hambat Ekstrak Metanol Selaginella  delicatula Dan  Diplazium  dilatatum  Terhadap  Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli . Jurnal Mikrobiologi , 1(1), 240–247.
Pandey, R., & Mishra, A. 2010. Antibacterial Activities of Crude Extract of Aloe Barbadensis to Clinically Isolated Bacterial P. Applied Biochemistry and Biotechnology, 160(5), 1356– 1361.
Pramita, F. Y. 2013. Naskah publikasi skripsi formulasi sediaan gel antiseptik ekstrak metanol daun  kesum.  Program  Studi  Farmasi  Fakultas  Kedokteran  Universitas  Tanjungpura Pontianak.
Purnamasari,  N.  D.  2014.  Evaluasi  Terapi  Diare  Pada  Pasien  Anak  Di  Puskesmas  Nguter Kecamatan Nguter  Kabupaten Sukoharjo Tahun  2012.  In  Fakultas Farmasi  Universitas Muhammadiyah  Surakarta.  Jakarta:  Badan  Penelitian  dan  Pengembangan  Kesehatan Departemen Kesehatan RI.
Qolbi, N. and Yuliani, R., 2018. Skrining Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol 70% Sepuluh Daun  Tanaman  Terhadap  Klebsiella  Pneumoniae. Pharmacon:  Jurnal  Farmasi Indonesia, 15 (1), pp.8-18.
Retnaningsih, A. 2016. Uji Daya Hambat Ekstrak Daun Sukun ( Artocarpus altilis ) Terhadap Pertumbuhan  Bakteri  Escherichia  coli  Dan  Shigella  dysenteriae.  Journal  of  Chemical Information and Modeling, 2(2), 97–100.
Robinson, J. T. 1995. Kandungan Organik Tanaman Tingkat Tinggi, Edisi VI diterjemahkan oleh Padmawinata, K.
Rumouw,  D.  2017.  Identifikasi  Dan  Analisis  Kandungan  Fitokimia  Tumbuhan  Alam
Berkhasiat  Obat  Yang  Dimanfaatkan  Masyarakat  Sekitar  Kawasan  Hutan  Lindung Sahendaruman. Jurnal LPPM Bidang Sains Dan Teknologi, 4(2).
Sa-Anis.  2016.  Formulasi  Sediaan  Salep  Ekstrak  Etanol  Daun  Kirinyuh (Euphatorium odoratum L.) Sebagai Penyembuh Luka Terbuka Pada Kelinci. e-print UMS, 1–15.
Saifudin,  A.  2014.  Senyawa  Alam  Metabolit  Sekunder  (Teori,  Konsep,  dan  Teknik Pemurnian). In Deepublish, Yogyakarta.
Sudarmi, K., Bagus, I., Darmayasa, G., & Muksin, I. K. 2017. Uji Fitokimia Dan Daya Hambat Ekstrak  Daun  Juwet (Syzygium  cumini) Terhadap  Pertumbuhan Escherichia  coli Dan Staphylococcus aureus Atcc . (September), 47–51.
Wijaya,  Ayu.  Ariani.  2010.  Diare  Pada  Pasien  Rawat  Inap  Di  Rumah  Sakit  Umum  Daerah Kabupaten  Karanganyar  Tahun  2009.  Fakultas  Farmasi  Universitas  Muhammadiyah Surakarta Surakarta.
Wulaisfan, R. and Hasnawati, H., 2017. Uji Daya Hambat Ekstrak Daun Sukun ( Artocarpus Altilis ) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus Epidermidis. Warta Farmasi, 6 (1), pp.90-99.
.