Agro Bali : Agricultural Journal                                                                                     e-ISSN 2655-853X Vol. 7 No. 2: 575-590, July 2024 https://doi.org/10.37637/ab.v7i2.1816

## Uji Kemampuan Bacillus spp. dalam Menghambat Ganoderma boninense Pat. Penyebab Penyakit Busuk Pangkal Batang Kelapa Sawit Secara in Vitro

## Ability Test of Bacillus spp. in Inhibiting Ganoderma boninense Pat. the Causal Agent of Oil Palm Basal Stem Rot Disease in Vitro
Yetti Elfina 1  , Sukendi 2 , Efriyeldi 2 , Agus Sutikno 2
1 Doctoral Program in Environmental Science, Postgraduate Program, Universitas Riau, Pekanbaru, Indonesia
2 Environmental Science Study Program, Postgraduate, Universitas Riau, Pekanbaru, Indonesia
 Corresponding author email: yetti.elfina@lecturer.unri.ac.id
Article history : submitted: March 21, 2024; accepted: July 20, 2024; available online: July 31, 2024 Abstract.  Basal  stem  rot  (BSR)  is  a  disease  that  causes  a  decline  in  oil  palm  productivity.  BSR  caused  by Ganoderma  boninense Pat .  An  alternative  environmental  control  that  can  be  done  is  biological  control. Bacillus spp. is one alternative way of biological control. This study aims to test the inhibitory ability of Bacillus spp. and get the species of Bacillus spp. that can inhibit G. boninense and determine the ability of Bacillus spp. in affecting  the  morphology  of    G.  boninense  causing  BSR  of  oil  palm  in  vitro.  The  research  was  conducted experimentally and consisted of 7 treatments and 4 replicates. The treatment was to test the ability of Bacillus spp. in inhibiting G. boninense The treatments were: without Bacillus spp, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus cereus, Bacillus pseudomycoides, Bacillus velezensis 1, Bacillus velezensis 2, Bacillus velezensis 3.  The obtained data were analyzed statistically with variance analysis using SPSS version 25. The results were followed by duncan's new  multiple  range  test  (DMRT)  at  the  5%  level.  The  results  showed  that  Bacillus  spp.  namely  B. amyloliquefaciens, B. cereus, B. pseudomycoides, B. velezensis 1, B. velezensis 2 and B. velezensis 3 were able to inhibit  G. boninense but 3 Bacillus spp. namely B. cereus, B. pseudomycoides and B. amyloliquefaciens were not able  to  produce  inhibition  zone.  B.  velezensis  2  was  better  at  inhibiting  G.  boninense  with  78,05%  inhibition, 58,8% inhibition zone, and 92,49% filtrate inhibition. Bacillus spp. can affect the macroscopic and microscopic characteristics  of  G.  boninense,  causing  G.  boninense  to  be  unable  to  produce  conidia  and  inhibiting  the germination of G. boninense spores.
Keywords: Bacillus spp.; basal stem rot; Ganoderma boninense; oil palm
Abstrak. Penyakit  busuk  batang  akar  (BPB)  merupakan  salah  satu  penyakit  yang  menyebabkan  menurunnya efisiensi kelapa sawit. BPB disebabkan oleh Ganoderma boninense Pat . Alternatif pengendalian penyakit ini yang dapat dilakukan adalah dengan pengendalian hayati menggunakan Bacillus spp, karena bersifat ramah lingkungan.. Tujuan  penelitian  untuk  menguji  kemampuan Bacillus spp.    yang  dapat  menghambat G.  boninense dan menentukan kap Bacillus spp. dalam mempengaruhi  morfologi G. boninense penyebab BPB pada kelapa sawit secara in vitro . Penelitian dilakukan secara eksperimen dan terdiri dari 7 perlakuan dan 4 ulangan. Perlakuan yang digunakan,  yaitu:  tanpa Bacillus spp., Bacillus  amyloliquefaciens,  Bacillus  cereus,  Bacillus  pseudomycoides, Bacillus  velezensis  1,  Bacillus  velezensis  2,  Bacillus  velezensis  3 .  Data    hasil  pengamatan  dianalisis  dengan Analysis of Varians (ANOVA dan dilanjutkan dengan uji lanjut Duncan New Multiple Range Test ( DMRT) pada taraf 5% menggunakan program SPSS versi 25. Data hasil pengamatan yang diperoleh dilanjutkan dengan uji jarak berganda  duncan  (DMRT)  pada  taraf  5%.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa Bacillus spp.  yaitu B. amyloliquefaciens,  B.  cereus,    B.  pseudomycoides,  B.  velezensis  1,  B.  velezensis  2 dan B.  velezensis  3 mampu menghambat G. boninense namun 3 Bacillus spp. yaitu B. cereus, B. pseudomycoides dan B. amyloliquefaciens tidak mampu menghasilkan zona hambat. B. velezensis 2 lebih baik dalam menghambat G. boninense dengan daya hambat  78,05%,  zona  hambat  58,8%,  daya  hambat  filtrat  92,49%. Bacillus spp.  mampu  mempengaruhi karakteristik  makroskopis  dan  mikroskopis G.  boninense ,  dapat  menyebabkan G.  boninense tidak  mampu menghasilkan konidia serta dapat menghambat perkecambahan spora G.boninense .
Kata kunci: Bacillus spp.; busuk pangkal batang; G. boninense; kelapa sawit

## PENDAHULUAN
Kelapa  sawit  merupakan  komoditas penting sebagai sumber pendapatan masyarakat  dan  perdagangan  luar  negeri, sehingga banyak dikembangkan di Indonesia,
salah  satunya  di  Wilayah  Riau  dengan  luas lahan  pada  tahun  2021  yaitu  2,71  juta  ha dengan  produksi  mencapai  7,84  juta  ton dengan  produktivitas  2,89  t.ha -1 ,  pada tahun 2022 luas lahan menurun menjadi 1,73 juta ha
Agro Bali : Agricultural Journal                                                                                     e-ISSN 2655-853X Vol. 7 No. 2: 575-590, July 2024 https://doi.org/10.37637/ab.v7i2.1816
serta terjadi penurunan produksi kelapa sawit menjadi  4,09  juta  ton  dengan  produktivitas 2,36  t.ha -1 (BPS,  2023;  BPS,  2024). Penurunan produktivitas kelapa sawit di Riau disebabkan oleh teknik  budidaya yang belum optimal, jenis tanah,  faktor lingkungan yang kurang menguntungkan serta adanya gangguan penyakit. Evizal, R & Prasmawati, (2022) menyatakan salah satu penyakit yang sering mengganggu perkebunan kelapa sawit adalah penyakit busuk pangkal batang (BPB).
Jamur Ganoderma spp.  merupakan patogen  penyebab  penyakit  BPB  yang menyerang  tanaman  kelapa  sawit . Pohon kelapa  sawit  yang  diincar  diserang G. boninense memiliki  jumlah  daun  tombak janur/daun  muda  yang  lebih  banyak  dari perkiraan, pelepah patah dan berada di dekat batang  kelapa  sawit.,  terdapat  tubuh  buah disekitar pangkal batang, serta akar adventif menjadi  lapuk  (Castillo. et  al. ,  2022). Gangguan penyakit BPB dalam waktu enam bulan,  dapat  menyebabkan  perkebunan kelapa  sawit  mengalami  kerugian  ekonomi yang  signifikan  sebesar  43%  (Khoo  & Chong,  2023)  BPB  Penyakit  busuk  pangkal batang  berpotensi  memperpendek  umur produktif  tanaman  kelapa  sawit  selain menimbulkan  kerugian  ekonomi  secara langsung. (Dahang et al. , 2021) . Berdasarkan ini,  perlu  tindakan  pengendalian  agar penyakit ini tidak menyebar dan menimbulkan kerugian yang besar.
Tindakan  pengendalian  penyakit  ini yang  telah  dilakukan  antara  lain  sanitasi sumber  inokulum,  pembuatan  parit  isolasi, pengaturan  jarak  tanam,  serta  penggunaan fungisida  sintetis.  Upaya  tersebut  dinilai belum  efektif  dan  juga  fungisida  sintetis berdampak buruk bagi lingkungan penggunaan fungisida sintetis meninggalkan residu  pada  tanaman,  tanah,  air  dan lingkungan.  (Ivayani et al ., 2018). Alternatif pengendalian    dapat  digunakan  untuk mengurangi  penggunaan  fungisida  sintetik adalah pengendalian hayati.
Pengendalian hayati dapat menggunakan Bacillus spp. Bakteri ini memiliki kemampuan  untuk  mengkolonisasi  akar
tanaman  dan  menghasilkan  antibiotik  yang dapat mencegah tumbuhnya patogen, terutama  patogen  yang  ditularkan  melalui tanah.  (Anjarsari et  al .  2021). Bacillus spp. dikenal  sebagai  bakteri  yang  mampu menghasilkan metabolit sekunder antara lain antibiotik. Bacillus spp.  juga  menghasilkan enzim  ekstraseluler  sebagai  bagian  dari aktivitas penghambatan lainnya. Dinding sel jamur dapat dipecah oleh enzim ekstraseluler seperti -glukanase, kitinase, dan protease(Flori et  al .,  2020). Bacillus spp. menghasilkan enzim seperti amilase, protease, lipase, selulase, xilanase, pektinase, aminotransferase,  barnase,  peroksidase  dan laccase  (Ngalimat et  al .,  2021).  Hasil penelitian  Sibagariang  (2019)  menemukan bahwa  jumlah  produksi  kitinase  dan glukanase yang dihasilkan oleh bakteri dapat mempengaruhi  hasil  daya  hambat.  Kitinase dan  glukanase  adalah  enzim  hidrolitik  yang dapat  menghidrolisis  kitin  dan  ikatan  β- glukan  yang  mana  merupakan  komponen penting penyusunan dinding sel jamur. Maka dengan  dihasilkan  senyawa  tersebut  akan menekan pertumbuhan dinding sel jamur.
Bacillus spp. dapat menghambat pertumbuhan hifa jamur Rigidoporus microporus sebesar  80,56%  pada  tanaman karet (Sungtong ,et  al .,  2021) . Strain  bakteri B.  amyloliquefaciens yang  diisolasi  dari tanaman  tomat  (Ajilogba et.  al .,  2016). B. velezensis mampu  menghambat  patogen Colletotrichum coccodes sebesar 67,8% pada tanaman kentang Cui et al . (2019) . B. cereus dapat  menghambat  pertumbuhan  jamur patogen Colletotrichum  fructicola sebesar 90,55%  pada  tanaman  cabai  rawit ( Purba et al .  (2021). B.  pseudomycoides dapat menekan Fusarium oxysporum sebesar 100% pada  tanaman  cabai  (Yanti et  a l.  (2018) Elfina, (2020) menemukan 6 isolat rhizobacteri  yaitu B.  amyloliquefaciens,  B. cereus, B. psudomycoides, B. velezensis 1 , B. velezensis  2 dan B.  velezensis 3 yang  dapat menghambat pertumbuhan Fusarium oxysporum  f.sp.  cepae  menyebabkan  layu fusarium pada bawang merah . Isolat Bacillus spp.  tersebut  relatif  baru  dan  perlu  diuji
Agro Bali : Agricultural Journal                                                                                     e-ISSN 2655-853X Vol. 7 No. 2: 575-590, July 2024 https://doi.org/10.37637/ab.v7i2.1816
kemampuan  daya  hambat   terhadap  patogen lain,  misalnya G.  boninense penyebab penyakit BPB kelapa sawit.

## METODE

## Rancangan Penelitian
Penelitian  ini  menggunakan  rancangan acak lengkap (RAL) dengan tujuh perlakuan dan empat kali ulangan sehingga diperoleh 28 satuan  percobaan,  dengan  masing-masing satuan percobaan terdiri dari dua cawan petri, sehingga totalnya terdapat 56 cawan petri. Prosedur Pelaksanaan Isolasi  dan  Identifikasi  Jamur  Penyebab BPB
Pengambilan  sampel  tubuh  buah  jamur yang  diduga  penyebab  BPB  kelapa  sawit yaitu  jamur G.  boninense diperoleh  dari kebun kelapa sawit masyarakat di Desa Deli Makmur,  Kecamatan  Kampa,  Kabupaten Kampar. Sampel tanaman yang telah diambil selanjutnya dimasukkan kedalam plastik dan dibawa  ke  Laboratorium  untuk  diisolasi. Isolasi  jamur  penyebab  penyakit  BPB  pada kelapa  sawit  dilakukan  dengan  metode penanaman  jaringan  di  media  PDA.  Jamur yang  tumbuh  pada  media  PDA  dipindahkan ke dalam cawan petri yang baru. Isolat yang diduga G.  boninense diperbanyak  untuk dilakukan  identifikasi  secara  makroskopis dan mikroskopis. Isolat yang telah diidentifikasi diremajakan untuk mendapatkan isolat yang homogen.
Persiapan Bacillus spp.
Isolat murni Bacillus berupa B. amyloliquefaciens, B. cereus,
B.
pseudomycoides, B.  velezensis  1 , B. velezensis 2 dan B. velezensis 3 diperoleh dari penelitian  sebelumnya  dan  diremajakan kembali untuk kepentingan penelitian.
Uji Daya Hambat
Uji daya hambat secara in vitro menggunakan metode dual culture Munif et al . (2012)  yang    di  modifikasi,  dilakukan  dalam cawan petri berdiameter 9 cm berisi media PDA. Bacillus spp.  digoreskan  pada  dua  sisi  media dengan jarak 1 cm dari tepi. Isolat Ganoderma sp. yang  berumur  10  hari  dengan  diameter  0,5  cm diletakkan pada  titik tengah media. Pengamatan dilakukan  terhadap  daya  hambat  pertumbuhan
miselium Ganoderma sp.  dimulai  dari  hari pertama  pengamatan  hingga  koloni Ganoderma sp. pada tanpa perlakuan memenuhi cawan petri Uji  Zona  Hambat Bacillus spp.  terhadap G. boninense
Uji  zona  hambat  secara in  vitro menggunakan metode dual culture (Munif et al. ,  2012)  di  modifikasi,  dilakukan  dalam cawan petri selebar 9 cm yang berisi  15 mL media  PDA. Bacillus spp.  digoreskan  pada dua sisi media dengan jarak 1 cm dari tepi. Di tengah-tengah  media  ditempatkan  isolat G. boninense berumur 10 hari dengan diameter 0,5  cm.  Zona  hambat  yang  dihasilkan  oleh Bacillus spp. diamati.
Uji  Daya  Hambat  Filtrat  Bacillus  spp. terhadap G. boninense
Metode  pembuatan  filtrat Bacillus spp. mengikuti metode yang dikemukakan
Purba et  al. (2021)  Uji  daya  hambat  filtrat Bacillus spp. terhadap G. boninense dilakukan dengan mengambil filtrat Bacillus spp.  sebanyak  40  mL  dicampur  dengan  60 mL  media  PDA  (pengenceran  40%). Potongan G. boninense 0,5 cm diletakkan di tengah-tengah media. Selanjutnya diinkubasi pada temperatur ruang sampai 10 hari setelah inkubasi (HSI) (Purba et al. , 2021).
Perhitungan Kerapatan Spora G. boninense Setelah Aplikasi Bacillus spp.
Perhitungan  kerapatan  spora  jamur G. boninense dilakukan  dengan  membuat suspensi  jamur G.  boninense dan Bacillus spp.  Pembuatan  suspensi G.  boninense dilakukan dengan air suling steril sebanyak 5 mL  digunakan  untuk  melepaskan  miselium jamur  yang  tumbuh  pada  media  PDA. Dengan  menyapu  permukaan  media  dengan sikat  kecil  yang  steril,  spora  yang  ada  pada permukaan media akan terlepas dan terbawa bersama aquades pada saat proses pencucian.. Proses  pencucian  dilakukan  sebanyak  dua kali.  Untuk  melepaskan  dan  menyebarkan spora  jamur  dalam  suspensi  yang  disebut larutan  induk,  air  pencuci  dimasukkan  ke dalam tabung reaksi dan dikocok selama lima menit  dengan  mixer  pusaran.  Setelah  itu, suspensi  larutan  induk  diencerkan  dengan
Agro Bali : Agricultural Journal                                                                                     e-ISSN 2655-853X Vol. 7 No. 2: 575-590, July 2024 https://doi.org/10.37637/ab.v7i2.1816
cara mencampurkan 1 mL dengan 9 mililiter air  suling  (10 -1 )  dan  dikocok  selama  lima menit  dengan  vorteks  mixer.  Pengenceran dilakukan  secara  bertahap  hingga  kepadatan spora G. boninense mencapai 4.10 5 konidia.ml -1 . (Rambe, 2019)

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Karakteristik Jamur Ganoderma boninense Penyebab Penyakit BPB sebelum perlakuan Bacillus spp.
Karakteristik G.  boninense jamur patogen    BPB  kelapa  sawit,  mencakup karakteristik  makroskopis  dan  mikroskopis sebelum  aplikasi Bacillus spp.  merujuk (Hamzah et  al .(  2021)  dan  (Badalyan et  al.
(2019) .  Hasil pengamatan dapat dilihat pada Tabel 1.
Hasil pengamatan karakteristik makroskopis Ganoderma sp. yang diperoleh setelah  perlakuan Bacillus spp.  yaitu berwarna putih/putih krem, berbentuk bundar,  terdapat  konsentris  jamur  berbentuk cincin,  arah  penyebaran  ke  samping, miselium  tumbuh  bergelombang,  bertekstur halus  dan  tebal.  Hal  ini  sejalan  dengan penelitian Hamzah et al. (2021) bahwa koloni G.  boninense berwarna  putih  kekuningan hingga  kecoklatan,  bertekstur  halus  dan terdapat  konsentris.    Pertumbuhan  miselium biasanya  lambat;  miselium  baru  dapat mengisi cawan petri berdiameter 9 cm dalam waktu 10 hingga 12 hari.
Tabel 1. Hasil identifikasi karakteristik (10 HSI) dan (14 HSI) jamur G. boninense di media PDA sebelum aplikasi Karakteristik Morfologi Hasil Penelitian Hasil Penelitian Terdahulu Makroskopis: Hamzah et al ., 2021 Warna Koloni Putih/ putih kekuningan Putih/putih kekuningan hingga kecoklatan Arah Penyebaran Tumbuh ke samping Tumbuh ke samping Bentuk Miselium Tumbuh bergelombang, bertekstur halus dan tebal Bertekstur halus, tebal, sedikit bergelombang dan padat Konsentris Koloni Terdapat konsentris koloni berbentuk lingkaran cincin Terdapat konsentris koloni berbentuk cincin. Mikroskopis: Badalyan et al ., 2019 Bentuk kristal Berbentuk kristal segi enam Berbentuk kristal Bentuk Konidia Oval - Bentuk Hifa Hifa bersekat, memiliki clamp connection, hifa bergelembung, terdapat sel cuticular Terdapat clamp connection, hifa bergelembung, terdapat sel cuticular Ukuran basidiospora 7,10 x 3,88 µm - Ukuran konidia 2,42 x 1,53 µm - Gambar 1 memperlihatkan
pertumbuhan G.  boninense tampak  atas  dan tampak  bawah,  pertumbuhan  tampak  atas  5 HSI  miselium  berwarna  putih,  7  HSI  mulai terlihat putih kekuningan dan 10 HSI terlihat putih  kekuningan  semakin  jelas,  sedangkan tampak  bawah  menunjukan  hal  yang  sama pada 5 HSI, 7 HSI dan 10 HSI.  Pertumbuhan tampak  bawah  10  HIS  terlihat  putih kecoklatan pada titik pusat cawan petri . Karakteristik mikroskopis sebelum diberikan  perlakuan Bacillus spp. (Gambar 2) menunjukkan  bahwa Ganoderma sp.
memiliki  hifa  bersekat,  terdapat clamp connection, hifa  bergelembung,  terdapat  sel cuticular dan terdapat kristal. Menurut Yu & Chong  (2018), Ganoderma sp.  memiliki clamp connection yang merupakan ciri khas untuk  jamur  dalam  phylum  Basidiomycota. Furtado  (1966)  menyatakan  bahwa clamp connection terbentuk  ketika  pembelahan  sel sudah terjadi dan membentuk sel yang baru, sedangkan  Money  (2016)  menjelaskan bahwa  pada  hifa  yang  belum  mengalami pembelahan  sel  dapat  membentuk clamp connection yang belum sempurna.
Gambar 1. Karakteristik makroskopis koloni jamur G. boninense sebelum diberikan perlakuan Bacillus spp . tampak atas dan tampak bawah.
Gambar  2 .  Karakteristik  mikroskopis  jamur G.  boninense perbesaran  10x40  sebelum  diberikan perlakuan Bacillus spp,
Daya Hambat dan Zona Hambat Bacillus spp. terhadap G. boninense
Hasil pengamatan daya hambat Bacillus spp.  terhadap G.  Boninense menunjukan bahwa B.  velezensis  2,  B.  velezensis  3,  B. velezensis 1, B. pseudomycoides, B. amyloliquefaciens dan B.  cereus dapat menghambat pertumbuhan jamur G. Boninense .  Hal  ini  terjadi  karena  menurut Saputra et  al .  (2015), Bacillus spp. menghasilkan metabolit sekunder antara lain antibiotik ( Tabel 2 dan Gambar 3 ).
Hasil  penelitian  ini  yang  menunjukkan daya hambat B. velezensis 2, B. velezensis 3 dan B.  velezensis  1 memiliki  kemampuan sebagai agens pengendali hayati jamur G. boninense karena  memiliki  persentase  daya hambat  lebih  besar  dari  50%.  Kemampuan daya hambat Bacillus spp. dapat dilihat pada Gambar  3 .  Tiga  bakteri  tersebut    tergolong agens hayati yang potensial untuk mengendalikan  patogen  karena  memiliki kemampuan  dalam  menghambat  patogen lebih  dari  50%.  Hasil  ini  sejalan  dengan
A. Clamp connection B.  Kristal C. Sel cuticular D. Hifa bergelembung E.   Konidia F. Konidiofor G. Hifa bersekat H.   Basidiospora 5 HSI 7 HSI 10 HSI 5 HSI 7 HSI 10 HSI
Mariana et  al. (2020)  bahwa  agens  hayati yang potensial untuk mengendalikan patogen karena memiliki kemampuan dalam menghambat  patogen  lebih  dari  50%. Oktania et  al .  (2018)  menyatakan  bahwa Bacillus spp.    tergolong    memiliki mekanisme    antagonis    berupa    antibiosis
yang  dapat  menghambat  patogen  tanaman dengan  menghasilkan  antibiotik.  Saputra et al. (2015),juga  menemukan  bahwa    bahwa Bacillus spp.  mampu  menghasilkan  daya hambat  merupakan  indikasi  mekanisme antibiosis.
Tabel 2. Daya hambat dan zona hambat Bacillus spp. terhadap G. boninense (10 HSI)
Bacillus spp. Daya hambat (%) Zona Hambat (%) Tanpa Bacillus spp. 0,00 a 0,00 a B. cereus 35,13 b 0,00 a B. amyloliquefaciens 39,72 c 0,00 a B. pseudomycoides 42,63 c 0,00 a B. velezensis 1 63,47 d 42,68 b B. velezensis 3 74,30 e 44,38 b B. velezensis 2 78,05 f 58,80 c
Keterangan: Angka-angka yang diikuti oleh huruf kecil yang tidak sama adalah berbeda nyata menurut hasil uji DMRT pada taraf 5% setelah ditransformasi dengan arc sin √𝑝
Gambar 3 . Daya hambat dan zona hambat Bacillus spp. terhadap G. boninense
Bacillus velezensis 2 , B. velezensis 3 dan B.  velezensis 1 memiliki  kemampuan  daya hambat  yang  lebih  besar  dibandingkan dengan B. pseudomycoides, B. amyloliquefaciens dan B.  cereus dalam menghambat  pertumbuhan Ganoderma sp. Lim et  al. (2017)  menyatakan  bahwa B. velezensis menghasilkan  senyawa  antifungi yang mudah menguap yang dapat menghambat  pertumbuhan  miselium  jamur patogen  dalam  cawan  petri  tertutup,  dengan memproduksi  senyawa  volatil  seperti  di-
metilsulfoksida,  1-butanol  dan  asetoin, diantaranya  asetoin  ditemukan  sebagai metabolit utama yang mudah menguap
B.  cereus,  B.  amyloliquefaciens dan B. pseudomycoides memiliki daya hambat lebih kecil dari 50%. Menurut penelitian Hidayah, &  Yulianti    (2014) B.  cereus mampu menghambat pertumbuhan jamur tular tanah seperti Sclerotium rolfsii sebesar 33%. Daya hambat  yang  dihasilkan B.  cereus tergolong rendah  karena  dibawah  <50%.  Penelitian Hadi et  al. (2021) menemukan  strain B.
Tanpa perlakuan B. cereus B. amyloliquefaciens B. pseudomycoides B. velezensis 1 B. velezensis 3
B. velezensis 2
cereus yang memiliki kemampuan antagonis rendah,  karena  tidak  dapat  menghasilkan zona hambat.
Hasil daya hambat pada setiap perlakuan Bacillus spp.  memiliki  persentase  yang bervariasi, perbedaan ini karena Bacillus spp. memiliki  metabolit  sekunder  yang  berbeda. Menurut   Flori et al .( 2020) Kapasitas isolat bakteri dalam menghasilkan senyawa penghambat yang berbeda menjadi penyebab terjadinya  variasi  diameter  daya  hambat masing-masing  bakteri . Saputra  et  al.(2015) merekomendasikan  bahwa  perbedaan  daya hambat  dapat  disebabkan  oleh  perbedaan fisiologis mikroorganisme dalam penggunaan suplemen di media.
Tabel  2  menunjukkan  bahwa  perlakuan tanpa Bacillus spp, B. cereus, B. amyloliquefaciens dan B.  pseudomycoides tidak  memiliki  zona  hambat,  berbeda  nyata dengan B. velezensis 3, B. velezensis 1 dan B. velezensis 2 yang memiliki zona hambat. Hal ini terjadi karena perbedaan spesies Bacillus spp. yang digunakan, sehingga berbeda pula kemampuannya  dalam  menghasilkan  zona hambat.
Perlakuan B.  velezensis  2 memiliki daya  hambat  sebesar  78,05%  dan  zona hambat  sebesar  58,80%,  berbeda  nyata dengan  perlakuan  lainnya. B.  velezensis merupakan    salah  satu  spesies  bakteri  yang lebih potensial untuk mengendalikan patogen G.  boninense.    Hal  ini  ditunjukkan  dengan adanya  zona  hambat  di  sekitar  koloni  yang dapat menghambat pertumbuhan G. boninense yang menandakan adanya mekanisme  antibiosis.  Saputra et  al. ,  (2015) dalam  penelitiannya  menemukan  bahwa Bacillus spp.  mampu  menghasilkan  zona hambat.  Zona  hambat  merupakan  indikasi adanya  mekanisme  antibiosis.  Bawantari et al, (2020) menambahkan bahwa zona hambat terjadi  akibat  adanya  produksi  senyawa antifungi yang dihasilkan oleh bakteri untuk mengurangi  populasi  patogen  tanaman melalui kompetisi dan antibiotik.
B.  velezensis  2 memiliki  daya  hambat dan zona hambat yang lebih besar dibanding perlakuan lainnya yakni daya hambat sebesar
78,05%  dan  zona  hambat  sebesar  58,80%, lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  perlakuan lainnya. B. velezensis 2 , B. velezensis 1 dan . velezensis  3 merupakan  bakteri  potensial ditunjukkan  dengan  adanya  zona  hambat disekitar  koloni  yang  dapat  menghambat pertumbuhan G. boninense yang menandakan adanya mekanisme antibiosis. Hal ini sesuai dengan pendapat Saputra et al . (2015), bahwa Bacillus spp.  mampu  menghasilkan  zona hambat  merupakan  indikasi  mekanisme antibiosis.    Bawantari et  al. (2020) menambahkan  bahwa  zona  hambat  terjadi akibat  adanya  produksi  senyawa  antifungi yang dihasilkan oleh bakteri untuk mengurangi  populasi  patogen  tanaman melalui kompetisi dan antibiotik.  Perlakuan B. velezensis 2 memiliki  daya hambat sebesar 78,05%  dan  zona  hambat  sebesar  58,80%, berbeda  nyata  dengan  perlakuan  lainnya. B. velezensis  2 , B.  velezensis  1 dan B. velezensis  3 merupakan  bakteri  potensial ditunjukkan  dengan  adanya  zona  hambat disekitar  koloni  yang  dapat  menghambat pertumbuhan G. boninense yang menandakan adanya mekanisme antibiosis. Hal ini sesuai dengan pendapat Saputra et al . (2015), bahwa Bacillus spp.  mampu  menghasilkan  zona hambat  merupakan  indikasi  mekanisme antibiosis.    Bawantari et  al. (2020) menambahkan  bahwa  zona  hambat  terjadi akibat  adanya  produksi  senyawa  antifungi yang dihasilkan oleh bakteri untuk mengurangi  populasi  patogen  tanaman melalui kompetisi dan antibiotik.
Margani et  al. (2018)  menyatakan bahwa Bacillus spp.  mampu  menghambat pertumbuhan Rhizoctonia solani pada media PDA  dengan  menghasilkan  zona  hambat yang  mengindikasikan  bahwa Bacillus spp. dapat  menghasilkan  senyawa  antibiotik. Wang et  al .  (2023)  menyatakan  untuk melawan infeksi Colletotrichum gloeosporioides , B.  velezensis menyisakan sebagian dari media tumbuh untuk menciptakan lebih banyak senyawa antimikroba dengan membentuk zona hambat.  Menurut    Li et  al .,  (2023)  adanya zona  hambat  disekitar  koloni B.  velezensis
yang  menunjukkan  bahwa  bakteri  tersebut memiliki kemampuan menghasilkan siderofor.
B.  cereus , B.  amyloliquefaciens dan B. pseudomycoides tidak  dapat  menghasilkan zona hambat, karena diduga tidak menghasilkan antibiotik. Mekanisme penghambatan  lain  dari Bacillus spp. termasuk kompetisi untuk ruang dan nutrisi, sintesis senyawa volatil, dan enzim ekstraseluler , oleh  sebab  itu  tidak  semua Bacillus spp.  menghasilkan  zona  hambat terhadap . boninense .  Abdallah et al. (2017)
menyatakan  bahwa Bacillus spp.  mampu menghasilkan  enzim  hidrolase  dinding  sel. Enzim ini efektif dalam menekan pertumbuhan  patogen tanaman  karena  dapat mengurai  dan  memecah  komponen  dinding sel patogen tanaman.
Daya  Hambat  Filtrat  Bacillus  spp. terhadap G. boninense
Hasil  analisis  ragam  pada  Tabel  3 menunjukkan bahwa perlakuan filtrat Bacillus spp.  berpengaruh  nyata  terhadap pertumbuhan  jamur G.  boninense Hasil pengamatan dapat dilihat pada Gambar 4 .
Tabel 3. Daya hambat filtrat Bacillus spp. terhadap G. boninense (10 HSI)
Bacillus spp. Daya hambat filtrat (%) Tanpa Bacillus spp. 0,00 a B. cereus 78,04 b B. amyloliquefaciens 83,33 c B. pseudomycoides 91,38 d B. velezensis 3 91,94 d B. velezensis 1 92,22 d B. velezensis 2 92,49 d
Keterangan: Angka-angka yang diikuti oleh huruf kecil yang tidak sama adalah berbeda nyata menurut hasil uji DMRT pada taraf 5% setelah ditransformasi dengan arc sin √𝑝
Hasil  pengamatan  daya  hambat  filtrat Bacillus spp. terhadap G. Boninense yakni B. velezensis 2, B. velezensis 3, B. velezensis 1, B. pseudomycoides, B. amyloliquefaciens dan B.  cereus berbeda  nyata  dengan  perlakuan tanpa Bacillus spp.  Hasil  ini  menunjukkan bahwa  aktivitas  antibiosis  yang  dihasilkan Bacillus spp.  dapat  menekan  perkembangan organisme G.  boninense senyawa  metabolit tambahan yang dihasilkan oleh Bacillus spp. telah  berdifusi  dengan  filtrat,  senyawa metabolit yang dihasilkan mampu memenuhi zona tumbuh G. Boninense. Hasil penelitian Shahid et  al. (2021)  menyatakan  bahwa Bacillus spp. menghasilkan metabolit sekunder berupa iturin, surfactin, bacillibactin,  bacillaene,  bacilysin,  fengycin dan macrolactin. Hasil pengamatan perlakuan Bacillus  spp.  dapat  dilihat  pada Gambar  4 . Hasil  pengamatan  perlakuan  filtrat B. pseudomycoides , B. velezensis 1 , B. velezensis 2 , B. velezensis 3 dapat
menyebabkan jamur G. boninense tidak dapat tumbuh  dengan  baik  karena  metabolit sekunder  yang  dihasilkan  ( Gambar  4 ). Menurut hasil penelitian Swidergall & Ernst (2014),  metabolit Bacillus spp.  dapat merusak  dinding  sel  atau  struktur  membran jamur,  deformasi  struktur  dinding  sel,  atau mempengaruhi potensi elektrokimia membran  dan  keseimbangan  ion  dan akhirnya  menyebabkan  kematian  jamur. Dinding sel adalah target utama bagi senyawa antifungi yang dihasilkan bakteri.
Perbedaan diameter koloni G. Boninense pada  setiap  perlakuan  diyakini  disebabkan oleh kemampuan Bacillus spp. menghasilkan berbagai  senyawa  untuk  filtratnya.  Pitasari dkk  (2018)    menyatakan  bahwa  perbedaan daya hambat yang dihasilkan oleh organisme mikroskopis  dapat  terjadi  karena  perbedaan jenis dan ukuran metabolit opsional penghambat  yang  dihasilkan  oleh  setiap isolat.
Gambar 4 . Daya hambat filtrat Bacillus spp. terhadap G. boninense Karakteristik
Makroskopis
dan Mikroskopis G. boninense setelah Aplikasi
Bacillus spp.
Karakteristik
makroskopis dan
mikroskopis G.  boninense setelah  aplikasi
Bacillus spp.  dengan  memperhatikan  warna koloni,  arah  penyebaran,  tekstur  miselium dan bentuk konidia dari jamur tersebut, dapat dilihat  pada Tabel  4 , Gambar  3 dan Gambar 5 .
Tabel 4. Karakteristik makroskopis (10 HSI) dan mikroskopis (14 HSI) G. boninense setelah aplikasi Bacillus spp.
Perlakuan Pengamatan makroskopis dan mikroskopis Warna koloni Arah Penyebaran Tekstur Miselium Bentuk Konidia Tanpa Bacillus spp.  Putih Tumbuh ke samping Halus, tebal, bergelombang Oval B. amyloliquefaciens Putih Tumbuh ke samping Halus dan tipis Tidak menghasilkan konidia B. cereus Putih Tumbuh ke samping Halus dan tipis Tidak menghasilkan konidia B. pseudomycoides Putih kemerahan Tumbuh ke samping Halus dan tipis Tidak menghasilkan konidia B. velezensis 1 Putih, kemerahan pada tepi Tumbuh ke samping Halus dan tebal Tidak menghasilkan konidia B. velezensis 2 Putih kemerahan pada tepi Tumbuh ke samping Halus dan tebal Tidak menghasilkan konidia B. velezensis 3 Putih, kemerahan pada tepi Tumbuh ke samping Halus dan tebal Tidak menghasilkan konidia Perlakuan Bacillus
spp. dapat mempengaruhi  perubahan  morfologi G. boninense Karakteristik  makroskopis G. boninense setelah aplikasi Bacillus spp. dapat dilihat pada Tabel 5 dan Gambar 3 , terlihat bahwa B. velezensis 1, B. velezensis 2 dan B. velezensis 3 dapat menghambat pertumbuhan
hifa  sehingga  hifa  tidak  dapat  tumbuh memenuhi cawan petri. Perlakuan B. cereus,
B. amyloliquefaciens dan B. pseudomycoides terlihat  miselium  hampir memenuhi  cawan  petri,  namun  hifa  yang berada  di  sekitar  bakteri  menjadi  tipis  dan tidak tumbuh melewati bakteri. Hal ini terjadi
Tanpa perlakuan B. cereus B. amyloliquefaciens
B. pseudomycoides
B. velezensis 3 B. velezensis 1
B. velezensis 2
diduga  karena Bacillus spp.  menghasilkan senyawa  metabolit  sekunder  yang  dapat menghambat  pertumbuhan  miselium  jamur G.  boninense yaitu  kitinase  serta  glukanase. Hasil  penelitian  .  Sibagariang  (2019) menemukan  bahwa  jumlah  kitinase  dan glukanase  yang  diproduksi  oleh  organisme mikroskopis dapat berdampak pada efek daya penghambatan. Enzim hidrolitik kitinase dan glukanase mampu menghidrolisis ikatan kitin dan  -glukan  yang  merupakan  komponen penting  dinding  sel  jamur.  Oleh  karena  itu, senyawa  yang  dihasilkan  akan  mencegah pertumbuhan dinding sel jamur.
Senyawa  antibiotik  yang  dihasilkan Bacillus juga dapat menyebabkan perubahan warna koloni jamur maupun warna media di sekitar  jamur G.  boninense Berdasarkan Tabel  5  dan Gambar  3 dapat  dilihat
miselium G.  boninense tanpa  perlakuan Bacillus spp.  koloni  jamur  berwarna  putih kekuningan,  sedangkan  pada  perlakuan B. pseudomycoides berwarna  putih  kemerahan, pada perlakuan B. velezensis 1, B. velezensis 2 dan B.  velezensis  3 jamur G.  boninense mengeluarkan  warna  merah  di  sekitar koloninya.  Hal  ini  diduga G.  boninense mengeluarkan enzim sebagai bentuk pertahanan  saat  diaplikasikan Bacillus spp. Menurut  hasil  penelitian.    Siddiqui et  al. (2019)  jamur G.  boninense memiliki kemampuan  untuk  menghasilkan  enzim laccase.      Lakshmanan  &  Sadasivan (2016)menambahkan  bahwa  enzim  laccase dapat menghambat pertumbuhan mikroorganisme  antagonis  seperti Bacillus spp.  Fungsi  enzim  laccase  dikaitkan  dengan respon pertahanan jamur.
Gambar 5 . Karakteristik  mikroskopis G. boninense setelah aplikasi Bacillus spp. perbesaran 10x40. a) Tanpa Bacillus spp.,  b) B. amyloliquefaciens , c) B. cereus , d) B. psedomycoides , e) B. velezensis 1, f) B. velezensis 2 , g) B. velezensis 3 .
Perlakuan Bacillus spp. mampu mempengaruhi bentuk hifa dapat dilihat pada Gambar  5.  Akibat  pengaruh  senyawa  yang dihasilkan  oleh Bacillus spp.  yang  diduga mengandung senyawa antibiotik dan antijamur,  terjadi  pertumbuhan  abnormal pada hifa G. boninense . yang mengakibatkan abnormal  pada  hifa G.  boninense Perlakuan B.  cereus menyebabkan  hifa G.  boninense membengkok, hal ini terjadi diduga karena B. cereus menghasilkan  enzim  protease  yang
dapat    menyebabkan  hifa G.  boninense membengkok.    Anjarsari et  al. (2021) menyatakan bahwa terjadinya pembengkokan  hifa  dikarenakan Bacillus spp.  mampu  menghasilkan  enzim  protease, amilase dan selulase yang menyebabkan hifa Phytophthora palmivora membengkok. Perlakuan B . pseudomycoides dan B. velezensis 2 menyebabkan hifa G. boninense membengkak serta perlakuan B . amyloliquefaciens menyebabkan  hifa G.
A. Hifa normal B. Hifa keriting C. Hifa membengkok D. Hifa membengkak E. Hifa memendek F. Hifa membengkak
G. Hifa lisis
Agro Bali : Agricultural Journal                                                                                     e-ISSN 2655-853X Vol. 7 No. 2: 575-590, July 2024 https://doi.org/10.37637/ab.v7i2.1816
boninense keriting,  hal  ini  diduga  karena adannya metabolit sekunder berupa fengycin yang dihasilkan bakteri.  Zhang et al . (2022) menyatakan Bacillus spp.  menghasilkan metabolit  sekunder  berupa  fengycin  mampu menyebabkan hifa Alternaria solani membengkak. Xiao et al . (2021) menguatkan bahwa Bacillus spp.  mampu  menyebabkan hifa  menjadi  keriting  yang  menandakan adanya  kerusakan  pada  membran  hifa  yang diakibatkan aktivitas fengycin.
Perlakuan B.  velezensis 3  menyebabkan hifa G. boninense mengalami lisis. Lisis pada hifa  diduga  terjadi  karena  adanya  aktivitas enzim lipase. Wang et al. (2022) mengemukakan enzim lipase yang dihasilkan Bacillus spp.  berupa  selulase, glukanase,  protease  dan  kitinase  yang berfungsi  sebagai  antifungi  pada  patogen jamur  sehingga  dapat  memecah  komponen dinding jamur (lisis). Perlakuan B. velezensis 1 menyebabkan hifa G. boninense memendek.  Menurut      Santos et  al. (2018) Bacillus sp. mampu menghasilkan metabolit sekunder  berupa  nisin  A  yang  memiliki kemampuan menghambat sintesis dinding sel patogen  yang  mengakibatkan  terjadinya pemendekan hifa.
Panjang dan Lebar Konidia  G. boninense setelah Aplikasi Bacillus spp.
Tabel  5  menunjukkan  bahwa  perlakuan Bacillus spp.  menyebabkan G.  boninense tidak mampu menghasilkan konidia. Berdasarkan  hasil  pengamatan  mikroskopis dengan  perbesaran  10x40,  tidak  ditemukan adanya konidia G. boninense Menurut  Sha et al.  Bacillus spp.  menghasilkan  metabolit
antimikroba yang menghambat pertumbuhan hifa  dan  konidia  patogen. Bacillus spp. mampu  meluruhkan  dinding  sel  patogen menggunakan  enzim  yang  berbeda  untuk mengurangi  keparahan  penyakit  blas  pada padi.
Perlakuan Bacillus spp. mampu menghambat  perkecambahan  konidia G. Boninense. Hal ini sesuai penilaian  Gao et al. (2015) menyatakan bahwa Bacillus sp. dapat menekan  perkecambahan  konidia,  susunan appresoria  patogen,  menghambat  kemajuan haustoria dan pemanjangan hifa. Menurut Hu et  al. (2019) salah  satu  senyawa  yang dihasilkan Bacillus spp.  adalah  iturin  dan fengycin.  Senyawa  ini  diyakini  mampu menghambat proses pengaturan racun intraseluler  pada  parasit  patogen  dan menyebabkan  lisis  miselium  dan  konidia.. Menurut  hasil  penelitian    Han et.,al. (2015) Bacillus spp.  dapat  menghasilkan  senyawa antagonis  dan  menghambat  perkecambahan Colletotrichum acutatum dan Colletotrichum gloeosporioides .  Senyawa  yang  dihasilkan berupa  glycerol,  L-arabinose,  ribose,  D- glucose, D-fructose, D-mannose, D-manitol, L-sorbitol, arbutin, esculin, salicin, cellobiose,  sucrose  dan  trehalose.  Menurut hasil penelitian Kim et al. (2021) Bacillus sp. mampu menghambat perkecambahan konidia Colletotrichum gloesporioides .
Kerapatan  Spora  G.  Boninense  setelah Aplikasi Bacillus spp.
Hasil  analisis  ragam  pada  Tabel  5 menunjukkan bahwa perlakuan Bacillus spp. berpengaruh  nyata  terhadap  pertumbuhan spora jamur G. boninense .
Tabel 5. Kerapatan spora G. boninense setelah aplikasi Bacillus spp. (10 HSI)
Bacillus spp. Jumlah (CFU/ml) Tanpa Bacillus spp. 4,31 x 10 5 a B. cereus 3,74 x 10 5 b B. amyloliquefaciens 0 c B. pseudomycoides 0 c B. velezensis 1 0 c B. velezensis 2 0 c B. velezensis 3 0 c
Keterangan: Angka-angka yang diikuti oleh huruf kecil yang tidak sama adalah berbeda nyata menurut hasil uji DMRT pada taraf 5%
Tabel  5  menunjukkan  jumlah  spora G. boninense lebih  tinggi  terdapat  pada  tanpa perlakuan Bacillus spp. sebanyak 4,31 x 10 -5
CFU/ml. berbeda nyata dengan perlakuan B. cereus jumlah  spora  sebesar  3,74  x  10 -5 . Perlakuan B. amyloliquefaciens,
B.
pseudomycoides,  B.  velezensis  1,  velezensis 2,  B.  velezensis  3 dapat  menekan perkecambahan spora G. boninense sehingga menyebabkan G.  boninense tidak  mampu tumbuh,  karena  Bacillus  spp  mampu menghasil metabolit sekunder  berupa enzim yang  dapat  menekan  pertumbuhan G. boninense Menurut    Heo et  al. (2023) Bacillus spp.  menghasilkan  enzim  hidrolitik yang  dapat  menghambat  perkecambahan spora Colletotrichum spp.
Zhang et  al. (2023)  menyatakan  bahwa Bacillus spp. memiliki kemampuan penghambatan yang kuat terhadap perkecambahan  spora  dan  pertumbuhan miselium. Bacillus spp. menghasilkan senyawa  volatile  yang  mampu  menghambat perkecambahan spora jamur.  Mendizábal & Falconí ( 2021)menambahkan bahwa Bacillus spp.  memiliki  sifat  antifungi  yang dapat mengganggu aktivitas spora serta dapat menyebabkan kerusakan pada hifa patogen.

## SIMPULAN
B.  amyloliquefaciens,  B.  cereus,  B. pseudomycoides,  B.  velezensis  2 lebih mampu  menghambat  jamur G.  boninense dengan  daya  hambat  78,05%,  zona  hambat 58,80%  dan  daya  hambat  filtrat  92,49%. Bacillus spp. mampu mempengaruhi karakteristik  makroskopis  dan  mikroskopis G.  boninense ,  dapat  menyebabkan G. boninense tidak  mampu  menghasilkan konidia serta dapat menghambat perkecambahan spora G.boninense . Sebaiknya dilakukan penelitian lanjutan tentang  uji senyawa metabolit sekunder yang dihasilkan Bacillus spp.  untuk  mengetahui antibiotik dan enzim yang dihasilkan bakteri tersebut dan melajyjan  karakterisasi fisiologi isolat B.  velezensis  2 untuk  mengetahui mekanisme  daya  hambatnya  terhadap
Ganoderma sp.  secara  khusus  dan  patogen lain secara umum.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdallah, R. A. B., C. Stedel, C. Garagounis, A. Nefzi, H. J. Khiareddine, K. K. Papadopoulou & M. D. Remadi. (2017). Involvement of lipopeptide antibiotics and chitinase genes and induction of host defense in suppression of fusarium wilt by endophytic Bacillus spp. in tomato.
Crop Protection . 99(2): 45-58. https://doi.org/10.1016/j.cropro.2017.05
.008
Ajilogba, C.F., Babalola, O.O., & Ahmad F.
(2016).  Antagonistic  effect  of  Bacillus species in biocontrol of tomato fusarium wilt. Ethno  Med. 7(3):  205-216. http://dx.doi.org/10.1080/09735070.201 3.11886462
Anjarsari,  D.T.,  Prasetyawati,  E.T.m & Wuryandari, Y. (2021). Uji daya hambat Bacillus spp.  terhadap Phytophthora palmivora penyebab  penyakit  busuk buah kakao. Seminar Nasional Agroteknologi  Fakultas  Pertanian  UPN “Veteran” Jawa Timur .14-21.
https://doi.org/10.11594/nstp.2022.2003
Badalyan, A. M., Gharibyan, N. G., Lotti, M.,
& Zambonelli, A. (2019). Morphological and  ecological  screening  of  different collections of medicinal white-rot bracket  fungus Ganoderma  adspersum (Schulzer) Donk (Agaricomycetes,
Polyporales). Italian Journal of Mycology . 48(2): 1-15. http://dx.doi.org/10.6092/issn.2531-
7342/9092
Badan  Pusat  Statistik.  (2024).  Luas  Areal Tanaman  Perkebunan  (Hektar),  2020- 2022. Badan Pusat Statistik. Jakarta.
Badan  Pusat  Statistik.  (2023).  Produksi Perkebunan  (Ton),  2020-2022.  Badan Pusat Statistik. Jakarta.
Bawantari,  N.  K.  S.,  Suprapta,  D.  N., & Khalimi  K.  (2020).  Uji  Antagonistik Bacillus  siamensis dan Paenibacillus
polymyxa terhadap Colletotrichum gloeosporioides
KLCR2 penyebab penyakit  antraknosa  pada  buah  cabai rawit  ( Capsicum  frutescens L.). Jurnal AgroekoteknologiTropika. 9(3):  189- 197. Retrieved from https://ojs.unud.ac.id/index.php/JAT/arti cle/download/63170/36046
Castillo, S.Y., Rodríguez, M.C., González, L. F.,  Zúñiga,  L.  F.,  Mestizo,  Y.  A., Medina,  H.  C.,  Montoya,  C.,  Morales, A.,  Romero,  H.  M., & Sarria,  G.A. (2022). Ganoderma  zonatum is  the causal agent of basal stem rot in oil palm in Colombia . Journal of Fungi . 8 (230): 1-14. https://doi.org/10.3390/jof8030230
Cui, Y., Märtlbauer, E., Dietrich, R., Luo, H., Ding, S., & Zhu, K. (2019). Multifaceted toxin profile, an approach toward a better understanding  of  probiotic Bacillus cereus . Crit. Reviewin Toxicology. 49(4): 342–356. https://doi.org/10.1080/10408444.2019. 1609410
Dahang, D., Nainggolan, L.P., Sembiring, R., Sembiring. S., Tarigan, S., Rajagukguk, B.H., & Karo, S.B. (2021). Pengendalian penyakit  ganoderma  pada  kelapa  sawit dengan  menggunakan  jamur  endofitik hendersonia. Jurnal
Masyarakat
Mandiri . 5(2) : 548-559. Retrieved from
https://journal.ummat.ac.id/index.php/j mm/article/view/4090/pdf
Elfina,  Y.  (2020).  Potensi  Rhizobakteri
Indegenus dan Kitosan untuk Mengendalikan Penyakit Moler Fusarium  oxysporum f.sp cepae pada
Tanaman  Bawang  Merah.  Laporan Kemajuan  Penelitian  Disertasi  (Tidak dipublikasikan). Universitas
Padjajaran. Bandung.
Evizal,  R & Prasmawati,  F.  E.  (2022).
Penyakit  busuk  pangkal  batang  dan performa  produktivitas  kelapa  sawit. Jurnal agrotropika . 21(1):47-54. Retrieved from https://jurnal.fp.unila.ac.id/index.php/JA
T/article/view/5617/pdf
Flori,  F.,  Mukarlina & Rahmawati.  (2020). Potensi antagonis isolat bakteri Bacillus spp.  asal  rhizosfer  tanaman  lada  ( Piper nigrum L.)  sebagai  agen  pengendali jamur Fusarium sp.  JDF . Bioma .  5(1):
111–120.
https://doi.org/10.20956/bioma.v5i1.992 3 Furtado,  J.  S.  (1966).  Significance  of  the clamp-connection in the basidiomycetes. Persoonia .  4(2):  125- 144. Retrieved from https://repository.naturalis.nl/pub/53219 9/PERS1966004002003.pdf
Gao, X., Gong, Y., Huo, Y., Han, Q., Kang, Z.,  &  Huang,  L.  (2015).  Endophytic Bacillus  subtilis strain  EIR-J  is  a promising  biocontrol  agent  for  wheat powdery mildew. BioMed Res. International . 2015(1): 1-8.
https://doi.org/10.1155/2015/462645
Hadi,  A.  E.,  Khalisha,  A.,  Pambudi,  A., & Effendi, Y. (2021). Potential of bacteria consortium  as  growth  controller  of pathogenic  fungi Fusarium  oxysporum
F.sp. cubense (Foc). The 7th
International Conference on Sustainable Agriculture and Environment: Earth and Environmental Science. 1-11. https://doi.org/10.1088/1755-
1315/637/1/012029
Hamzah, A., Saputra, R., Puspita, F., Nasrul, B.,  Irfandri & Depari,  N.  S.  (2021). Ganoderma  diversity  from  smallholder oil  palm  plantations  in  peatlands  of Kampar  District,  Indonesia  based  on mycelia morphology and somatic incompatibility.
Biodiversitas. 22(1): 16-22. https://doi.org/10.13057/biodiv/d220103 Han, J. H., Shim, H., Shin, J. H., & Kim, K. S.  (2015).  Antagonistic  activities  of Bacillus spp.  strains  isolated  from  tidal flat  sediment  towards  anthracnose pathogens Colletotrichum acutatum and C. gloeosporioides in South Korea. Plant Pathology  Journal. 31(2):  165-175. https://doi.org/10.5423%2FPPJ.OA.03.2 015.0036
Hidayah,  N & Yulianti,  T.  (2014).  Uji antagonisme Bacillus  cereus terhadap Rhizoctonia  solani dan Sclerotium rolfsii . Buletin  Tanaman  Tembakau, Serat  dan  Minyak  Industri .  7(1):  1-8. https://dx.doi.org/10.21082/bultas.v7n1. 2015.1-8
Heo,  Y.,  Lee,  Y.,  Balaraju,  K.,  &  Jeon.  Y. (2023).  Characterization  and  evaluation of  Bacillus  subtilis  GYUN-2311  as  a biocontrol  agent  against  Colletotrichum spp.  on  apple  and  hot  pepper  in  Korea. Front.
Microbiol . 14:1322641. https://doi.org/10.3389/fmicb.2023.132264

## 1
Hu,  X.,  Roberts,  D.  P.,  Xie,  L.,  Qin,  L.,  Li, Y., Liao, X., Han, P., Yu, C., & Liao, X. (2019).  Seed  treatment  containing Bacillus  subtilis  BY-2  in  combination with other Bacillus isolates for control of
Sclerotinia sclerotiorum on oilseed rape.
Biological Control. 133: 50-57. https://doi.org/10.1016/j.biocontrol.201 9.03.006 Ivayani,  Faishol,  F.,  Sudiharta,  N., & Prasetyo, J. (2018). Efektivitas beberapa isolat Trichoderma sp. terhadap keterjadian penyakit bulai yang disebabkan oleh Peronosclerospora maydis dan  pertumbuhan  tanaman jagung  ( Zea  mays ). Jurnal  Penelitian Pertanian Terapan . 18(1): 39-45. http://dx.doi.org/10.25181/jppt.v18i1.64
1
Khoo,  Y.  W & Chong,  K.  P.  (2023).
Ganoderma boninense : general
characteristics  of    pathogenicity  and methods  of  control. Frontiers  in  Plant Science. 14(1156869):
1-17. https://doi.org/10.3389%2Ffpls.2023.11
56869
Kim,  Y.  S.,  Lee,  Y.,  Cheon,  W.,  Park,  J., Kwon,  H.  T.,  Balaraju,  K.,  Kim,  J., Yoon,  Y.  J., & Jeon,  Y.  (2021). Characterization  of  Bacillus  velezensis AK-0 as a biocontrol agent against apple bitter  rot  caused  by  Colletotrichum gloeosporioides. Scientific Reports.
11(626). https://doi.org/10.1038/s41598- 020-80231-2
Lakshmanan, Divya & Sadasivan, C. (2016). Trichoderma  viride laccase  plays  a crucial  role  in  defense  mechanism against antagonistic organisms. Frontiers  in  Microbiology .  7(741):  1-5. https://doi.org/10.3389/fmicb.2016.00741
Li, Z., Li, J., Yu, M., Quandahor, P., Tian, T.,
& Shen,  T.  (2023). Bacillus  velezensis FX-6 suppresses the infection of Botrytis cinera and  increases  the  biomass  of tomato  plants. Plos  One .  18(6):  1-17. https://doi.org/10.1371/journal.pone.028 6971
Lim, S. M., Yoon, M. Y., Choi, G. J, Choi, Y. H., Jang, K. S, Shin, J. S., Park, H. W., Yu,  N.  H.,  Kim,  Y.  H., & Kim,  J.  C.
(2017). Diffusible and volatile antifungal compounds produced by an antagonistic Bacillus velezensis G341 against variouss  phytopathogenic  fungi. Plant Pathology  Journal. 33(5):  488-498. https://doi.org/10.5423%2FPPJ.OA.04.2 017.0073
Margani,  R.,  Hadiwiyono & Widadi,  S.
(2018).  Utilizing  bacillus  to  inhibit  the growth  and  infection  by  sheath  bligh pathogem, Rhizoctonia  solani in  rice. The  4th  International  Conference  on Sustainable
Agriculture and Environment:  Earth  and  Environmental Science. 1-7. https://doi.org/10.1088/1755-
1315/142/1/012070
Mariana, K. U. Dewi, Samharinto & Budi, I. S. (2020). Potential of fungi isolate as a biological  control  of  white  root  disease ( Rigidoporus sp.)  on  rubber  plants. Tropical  Wetland  Journal .  6(1):  10-16. http://dx.doi.org/10.20527/twj.v6i1.82
Mendizabal,  V.Y.,  &  Falconi  C,  E.  (2021).
Bacillus  subtilis  CtpxS2-1  induces systemic  resistance  against  anthracnose in Andean lupin by lipopeptide production.  Biotechnol  Lett,  43:  719- 728. https://doi.org/10.1007/s10529-020-
03066-x
Money,  N.  P.  (2016).  Fungal  Diversity. Miami University, Oxford. USA. Munif,  A.,  Wiyono,  S., & Suwarno.  (2012).
Isolasi bakteri endofit asal padi gogo dan potensinya sebagai agens biokontrol dan pemacu pertumbuhan.
Jurnal
Fitopatologi  Indonesia. 8(3):  57-64. https://doi.org/10.14692/jfi.8.3.57
Ngalimat,  M.  S.,  Yahaya,  R.  S.  R.,
Baharudin, M. M. A., Yaminudin, S. M., Karim,  M.,  Ahmad,  S.  A., & Sabri,  S.
(2021). A review on the biotechnological applications  of  the  operational  roup
Bacillus amyloliquefaciens . Microorganisms. 9(614) : 1-18.
https://doi.org/10.3390/microorganisms 9030614
Oktania, P., Marwan, H. & Asniwita. (2018).
Potensi Bacillus spp.  dari  rhizosfer tanaman  kedelai  untuk  mengendalikan penyakit  rebah  kecambah  ( Sclerotium rolfsii Sacc.). Agroecotania . 1(1): 19-32. https://doi.org/10.22437/agroecotania.v 1i1.5333
Pitasari,  A.,  Ali,  M. & Elfina,  Y.  (2018).
Isolasi  dan  uji  antagonis  bakteri endofit dari  tanaman  bawang  merah  ( Alllium ascalonicum L.) terhadap jamur Alternaria porri Ellis Cif. Jurnal Online Mahasiswa Faperta . 5(1): 1-12. Retrieved from https://jom.unri.ac.id/index.php/JOMFA PERTA/article/view/18750/18122
Purba,  K.  S.,  Khalimi,  K., & Suniti,  N.  W.
(2021).  Uji  aktivitas  antijamur Bacillus cereus terhadap Colletotrichum fructicola KRCR  penyebab  penyakit antraknosa  pada  buah  cabai  rawit ( Capsicum frutescens L.). Jurnal Agroekoteknologi Tropika . 10(1): 50-58. Retrieved from https://ojs.unud.ac.id/index.php/JAT/arti cle/view/70102
Rambe, I.P.  (2019). Uji Resistensi Tanaman Karet ( Hevea brasiliensis ) Klon IRR Seri 400  terhadap  Penyakit  Gugur  Daun ( Pestalotiopsis sp.) di Lapangan. Skripsi (Tidak dipublikasikan). Universitas Muhammadiyah Sumatera Utara.
Santos, J. C. P., Sousa, R. C. S., Otoni, C. G., Moraes,  A.  R.  F.,  Souza,  V.  G.  L., Medeiros,  E.  A.  A.,  Espitia,  P.  J.  P., Pires,  A.  C.  S.,  Coimbra,  J.  S.  R., & Soares, N. F. F. (2018). Nisin and other antimicrobial peptides: Production, mechanisms of action and application in active  food  packaging. Innovative  Food Science and Emerging Technologies . 48:
179-194.
https://doi.org/10.1016/j.ifset.2018.06.0 08
Saputra,  R.,  Arwiyanto,  T., & Wibowo,  A. (2015). Antagonistic activity and identification  of  some  isolates  of Bacillus spp.  against  bacterial  wild disease  ( Ralstonia  solanacearum )  in some  varieties  of  tomato.  Prosiding
Seminar Nasional Masyarakat Biodiversitas  Indonesia.  1116-1122. https://doi.org/10.13057/psnmbi/m0105
25
Sha, Y., Huang, Y., Zhu, Y., Sun, T., Luo, Z.,
Qiu,  Y., et  al .  (2020).  Efficient Biosynthesis  of  Low-Molecular-Weight Poly-γ-Glutamic Acid Based on
Stereochemistry  Regulation  in  Bacillus Amyloliquefaciens.  ACS  Synth.  Biol.  9 (6), 1395–1405. https://doi.org/10.1021/acssynbio.0c000
80
Shahid, I., Han, J., Hanook, S., & Malik, K.
(2021).  Profiling  of  metabolites  of Bacillus  spp.  and  their  application  in sustainable  plant  growth  promotion  and biocontrol. Frontiers in Sustainable Food
Systems. 5(605195): 1-13. http://dx.doi.org/10.3389/fsufs.2021.605
195
Sibagariang,  A.  (2019).  Uji  Potensi  Bakteri Antagonis  sebagai  Agen  Pengendali Hayati  Penyakit  Layu  Fusarium  dan Pemacu  Pertumbuhan  Tanaman  Krisan ( Chrysanthemum sp.).  Skripsi  (Tidak dipublikasikan).  Universitas  Sumatera Utara. Medan.
Siddiqui, Y., Surendran, A., & Faishal, E. M. M. (2019). Inhibition of lignin gegrading enzymes  of Ganoderma spp.:  an
Agro Bali : Agricultural Journal                                                                                     e-ISSN 2655-853X Vol. 7 No. 2: 575-590, July 2024 https://doi.org/10.37637/ab.v7i2.1816
alternative  control  of    basal  stem  rot disease  of  oil  palm. International Journal  of  Agriculture  and  Biology . 22(2):
523-530. http://dx.doi.org/10.17957/IJAB/15.1095
Sungtong,  S.,  Pengnoo,  A., & Boonyapipat, P.  (2021).  Efficacy  of Bacillus spp.  in controlling soilborne pathogen Rigidoporus  microporusunder control conditions. Sungklanakarin  Journal  of Plant  Science .  8(1):  34-43.  Retrieved from
https://www.sjplantscience.com/index.p hp/ojs/article/view/48/23 Swidergall,M & Ernst, J. F. (2014). Interplay between Candida  albicans and  the antimicrobial  peptide  armory. Eukaryot
Cell. 13: 950-957. https://doi.org/10.1128/ec.00093-14 Wang, L & Zhu, T. (2023). Strong opponent of walnut anthracnose Bacillus velezensis and its transcriptome analysis. Microorganism . 11(8): 1-22. https://doi.org/10.3390/microorganisms
11081885
Wang,  W.,  Zhao,  J. & Zhang,  Z.  (2022). Bacillus metabolites: compounds, identification and anti- Candida albicans mechanism. Microbiol. Res . 13(2): 972- 984. https://doi.org/10.3390/microbiolres130 40070
Xiao, J., Guo, X., Qiao, X., Zhang, X., Chen, X., & Zhang,  D.  (2021).  Activity  of fengycin  and  iturin  A  isolated  from
Bacillus subtilis Z-14 on
Gaeumannomyces graminis  Var. tritici and  soil  microbial  diversity. Front. Microbiol . 12(682437):
1-14.
https://doi.org/10.3389/fmicb.2021.682437
Yanti,  Y.,  Warnita.,  Reflin & Busniah,  M.
(2018).  Indigenous  endophyte  bacteria
ability to control Ralstonia and Fusarium wilt disease on chili pepper.
Biodoversitas . 19(4): 1532-1538.
https://doi.org/10.13057/biodiv/d190446 Yu,  G & Chong,  K.  P.  (2018).  Selected biomarkers  from  oil  palm-Ganoderma infected  tissues  for  detection  of  basal stem  rot  disease. Western  Mindanao State  University  Research  Journal. 37(7): 1-13. Retrieved from
https://www.researchgate.net/profile/Kh im- Chong/publication/330011060_Selected _Biomarkers_from_Oil_Palm- Ganoderma_Infected_Tissues_for_Dete ction_of_Basal_Stem_Rot_Disease/link s/5c29ee60a6fdccfc70732b61/Selected- Biomarkers-from-Oil-Palm-Ganoderma- Infected-Tissues-for-Detection-of- Basal-Stem-Rot- Disease.pdf?_tp=eyJjb250ZXh0Ijp7ImZ pcnN0UGFnZSI6InB1YmxpY2F0aW9 uIiwicGFnZSI6InB1YmxpY2F0aW9uI n19
Zhang, D., Qiang, R., Zhou, Z., Pan, Y., Yu, S., Yuan, W., Cheng, J., Wang, J., Zhao, D.,  Zhu,  J., & Yang,  Z.  (2022).
Biocontrol  and  action  mechanism  of Bacillus subtilis lipopeptides’ fengycins against Alternaria  solani in  potato  as assessed  by  a  transcriptome  analysis.
Front.  Microbiol ,  13(861113):  1-18. https://doi.org/10.3389/fmicb.2022.8611 13
Zhang, L., Wang, Y., Lei, S., Zhang, H., Liu, Z.,  Yang,  J  &  Niu,  Q.  (2023).  Efect  of volatile  compounds  produced  by  the cotton endophytic bacterial strain Bacillus sp. T6 against Verticillium wilt.
Microbiology , 23 (8) : 1-13. https://doi.org/10.1186/s12866-022-02749-
x