Isolasi dan Identifikasi Kapang Saprofitik pada Sampel Tanah di Sekitar Kawasan Gunung Gamalama, Ternate

## Muhammad Ilyas
Pusat Penelitian Biologi Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia, Bogor

## Abstract
Microorganisms,   such   as   mould   and   bacteria,   have   important   roles   in   organic   matter decomposition; and this process is fundamental to maintain soil structure and fertility. Moulds have hypha with filament structures that can penetrate to the substrates. Their enzymatic capability is higher than that of bacteria, especially in decomposing organic compounds like lignin and cellulose. The objective of the study was to  isolate and identify saprophytic mould inhabiting soil of Mount Gamalama, Ternate, North Moluccas. The mould isolation was based on sample dillution method with   Rose   Bengal   Cloramphenicol  Agar   isolation   media.   The   abundance   of  saprophytic   mould counted by measuring  the  average Colony  Forming  Unit (CFU)/ml  of all  mould colonies which grown on isolated media by Total Plate Count (TPC) method. The diversity of isolated mould was identified   based   on   phenotypic   characters   by   observing   both   macroscopic   and   microscopic morphology. The result showed that the average of mould colonies were between 13,30 x10 4 and 78,15 x10 4 CFU/ml. Identification based on morphology from selected mould isolates showed that 25 fungal taxa and two groups of unidentified fungal isolates were identified.
Key words : isolation, identification, mould, soil samples, Mount Gamalama

## Pendahuluan
Kapang   tanah   memiliki   peran   yang   sangat   penting   pada   proses   dekomposisi senyawa organik dalam hutan dan habitat terestrial lainnya.   Peran penting kapang dalam daur karbon dan proses penguraian serasah dan bahan organik dalam tanah telah banyak dikaji sebelumnya (Cromack dan Caldwell, 1992; Bills dan Polishook, 1994; Lodge, 1997). Sebagai   organisme   pengurai   kapang   memiliki   keterlibatan   dalam   transformasi   nutrisi dalam tanah. Kapang saprofitik yang digolongkan sebagai kapang pelapuk putih ( white- rot fungi ) dan coklat ( brown-rot fungi ) merupakan mikroba pengurai yang potensial karena mampu   menghasilkan   sejumlah   metabolit   untuk   mengurai   bahan   organik   dan persenyawaan   karbon   terutama   lignoselulosa   (Munir et   al., 2002;   Lynd et   al., 2002). Proses penguraian persenyawaan karbon oleh kapang saprofitik diantaranya dengan cara menghasilkan persenyawaan oksalat untuk menarik kalsium pada dinding sel, memutus ikatan hemisellulosa, dan depolarisasi selulosa (Green et al , 1991; Dutton dan Evans, 1996). Keberlangsungan proses penguraian bahan organik oleh kapang saprofitik sangat menentukan keseimbangan daur materi dalam tanah dan lebih lanjut akan menentukan tingkat kesuburan dan kualitas tanah.
Pulau   Ternate   adalah   wilayah   kepulauan   yang   terletak   di   pesisir   barat   Pulau Halmahera,   Provinsi   Maluku   Utara.   Pulau   Ternate  memiliki   luas   daratan   133,   74   km 2 , terletak pada koordinat 0°50`- 2°10` LU dan 126°20`- 128°05` BB. Topografi Pulau Ternate sebagian besar bergunung dan berbukit dengan tipe tanah regosol dan rensina. Di Pulau Ternate terdapat dua gunung vulkanik, yaitu Gunung Gamalama dan Gunung Tuanane. Gunung Gamalama memiliki bentuk stratovolcano dengan puncaknya yang berketinggian 1.715 m dpl. Gunung Gamalama memiliki hutan montana ( montane forest ) pada kisaran ketinggian 1200--1500 m dpl dan hutan ericaceous pada ketinggian di atas 1500 m dpl (Anonim, 2009).
Sebagai   daerah   penghasil   rempah-rempah,   sebagian   kawasan   Pulau   Ternate mengalami konversi tanah dari hutan menjadi kawasan perkebunan. Konversi tersebut
akan   mempengaruhi   kondisi   edafik   dan   kualitas   tanah.   Kualitas   sampel   tanah   dapat dianalisis melalui uji kimiawi dan uji biologis. Uji biologis kualitas tanah dapat dilakukan dengan   mengisolasi   dan   mengidentifikasi   mikroba   guna   mengetahui   kelimpahan   dan keragaman mikroba yang terdapat di dalamya. Penelitian ini dilakukan berkaitan dengan uji biologis sampel tanah yaitu untuk mengisolasi dan mengidentifikasi kapang saprofitik pada sampel tanah di kawasan sekitar Gunung Gamalama, Ternate, Maluku Utara.

## Materi dan Metode
Pengambilan   sampel   tanah   dilakukan   secara   acak   pada   beberapa   titik sampling di sekitar kawasan Gunung Gamalama, Ternate pada berbagai tingkat ketinggian  tempat  (Tabel 1).  Sampel tanah  diambil  sebanyak  0,5 kg  dengan menggali   tanah   pada   kedalaman   0--15   cm   dan   diukur   derajat   keasamannya dengan  menggunakan soil   tester .  Tanah   kemudian  dimasukkan  dalam  kantung plastik hitam ( polybag ) berukuran 1 kg dan dikumpulkan dalam box khusus untuk dianalisis di laboratorium.
Tabel 1.  Deskripsi   sampel   tanah   pada   berbagai   tingkat   ketinggian   tempat   di   sekitar kawasan Gunung Gamalama, Ternate, Maluku Utara
Table 1. Description of sampling sites in  Mount Gamalama, Ternate, North Moluccas
No Lokasi sampling Posisi GPS Ketinggian tempat (m dpl) pH tanah Deskripsi sampel 1 MG 500 000.47.001 N 127.21.325 E 514 6,5 Tanah perkebunan pala ( Myristica fragans ) 2 MG 750 000.47.252 N 127.21.118 E 742 6,9 Tanah perkebunan cengkeh ( Syzigium aromaticum ) 3 MG 1000 000.47.764 N 127.20.749 E 1000 6,9 Tanah hutan heterogen 4 MG 1250 000.47.705 N 127.20.864 E 1253 6,0 Tanah dengan vegetasi pandan (Pandanaceae) 5 MG 1500 000.47.881 N 127.20.686 E 1463 6,9 Tanah hutan heterogen
Isolasi kapang dilakukan dengan menggunakan metode pengenceran sampel (Ando et al ., 2003; Ilyas et al. , 2006). Teknik pengisolasian kapang yang terdapat pada ampel tanah dilakukan dengan tahapan kerja sebagai berikut; 10 g sampel tanah ditimbang dan dimasukkan ke dalam tabung erlenmeyer berisi 90 ml akuades steril (pengenceran 10 -1 ), kemudian   dihomogenkan   dengan   voteks   (sediaan   I).   Sebanyak   1   ml   sediaan   I dimasukkan   ke   dalam   9   ml   akuades   steril   (pengenceran   10 -2 ),   lalu   divorteks   sampai homogen   (sediaan   II).  Selanjutnya   dengan   langkah   yang  sama  dilakukan   pula   proses pengenceran   berikutnya   sampai   diperoleh   pengenceran   sampel   10 -3 (sediaan   III). Sebanyak 200 µl sediaan II dan III dituang pada cawan petri berdiameter 9 cm berisi media Rose   Bengal   Cloramphenicol  Agar ,   lalu   disebar   dengan   menggunakan spatula drygalskii .   Masing-masing   perlakuan   tersebut   dibuat   sebanyak   tiga   ulangan.   Biakan diinkubasi pada suhu ruang selama 3--7 hari. Koloni kapang yang tumbuh dihitung rerata koloninya (CFU)/ml. Data rerata kerapatan koloni selanjutnya dianalisis regresi dengan menggunakan   program   SPSS   13   untuk   mengetahui   korelasi   antara   ketinggian   lokasi sampling dengan rerata kerapatan koloni kapang.
Koloni kapang yang tumbuh selama proses isolasi, dimurnikan dengan propagasi koloni   yaitu  memotong   dan  mentransfer  secara  aseptik  sebagian   miselium   kapang   ke dalam media kultur baru (Alexopoulos et al ., 1996).   Isolat-isolat kapang yang tumbuh
pada media isolasi Rose Bengal dipilih dan ditransfer ke dalam cawan Petri berdiameter 6 cm berisi media PDA. Koloni selanjutnya diinkubasi dalam inkubator pada suhu 27º C selama 3--7 hari sampai bersporulasi.  Isolat kapang yang telah murni kemudian diamati secara makroskopis dan mikroskopis untuk proses identifikasi.  Koloni yang telah murni dan tumbuh dengan baik selanjutnya dipilih dan ditanam kembali dalam tabung reaksi berisi agar miring ( slant ) (PDA) sebanyak dua kali ulangan.
Kapang   yang   telah   diisolasi   dan   dimurnikan   kemudian   diidentifikasi.   Identifikasi kapang dilakukan berdasarkan ciri dan karakter fenotipik. Identifikasi fenotipik berupa ciri dan karakter morfologi berdasarkan panduan Ellis (1971), Domsch et.al . (1980), Webster (1980),   Samson et   al .   (1995),   Barnett   dan  Hunter   (1998),   dan   Gandjar et   al .   (1999). Identifikasi ciri dan karakter morfologi dilakukan baik secara makroskopis maupun secara mikroskopis.  Secara makroskopis karakter yang diamati meliputi; warna dan permukaan koloni (granular, seperti tepung, menggunung, dan licin), tekstur, zonasi, daerah tumbuh, garis-garis radial dan konsentris, warna balik koloni ( reverse color), dan tetes eksudat (exudate   drops) .     Pengamatan   secara   mikroskopis   diantaranya   meliputi;  keberadaan septa pada hifa, pigmentasi hifa, ada tidaknya clamp connection pada hifa, bentuk dan ornamentasi spora (vegetatif dan generatif), bentuk dan ornamentasi tangkai spora, dan lainnya.

## Hasil dan Pembahasan
Hasil   penghitungan   rerata   jumlah   koloni   kapang   dari   sampel  tanah   Gunung Gamalama  berkisar antara  13,30x10 4 dan 78,15x10 4 koloni/ml.  Rerata kerapatan koloni kapang tertinggi dicapai oleh sampel tanah MG 500 yang diambil pada ketinggian 514 m dpl sedangkan kerapatan terendah didapat pada sampel MG 1000 (1000 m dpl).  Data rerata koloni kapang pada setiap lokasi pengambilan sampel disajikan pada Tabel 2.
Tabel 2.  Rerata koloni kapang (CFU/ml) pada sampel tanah sekitar kawasan Gunung Gamalama, Ternate, Maluku Utara
Table 2.  The mean of fungal colonies (CFU/ml) from soil sample of Mount Gamalama, Ternate, North Moluccas
No. Lokasi pengambilan sample Ketinggian tempat (m dpl) Rerata kerapatan koloni kapang (CFU/ mL) 1 MG  500 514 78,15x10 4 2 MG  750 742 15,78x10 4 3 MG 1000 1000 13,30x10 4 4 MG 1250 1253 51,80x10 4 5 MG 1500 1463 20,00x10 4
Hasil   analisis   antara   ketinggian   lokasi   sampling   dengan   jumlah   rerata  kerapatan koloni   kapang   menggunakan   analisis   regresi   5%   pada   SPSS   13   tidak   menunjukkan adanya   korelasi.  Hal   tersebut   menunjukkan   bahwa   kelimpahan   kapang   tidak   hanya dipengaruhi oleh ketinggian tempat. Kelimpahan kapang sangat dipengaruhi faktor-faktor lingkungan  lainnya  seperti   kelembaban,   suhu,   derajat   keasaman   (pH),  ketersediaan nutrien, dan  faktor mikroklimatik (Kuter, 1986;  Alexopoulos et al ., 1996;  Lodge, 1997). Kelimpahan   tertinggi   pada   sampel   MG   500   menunjukkan   bahwa   kondisi   lingkungan khususnya ketersediaan materi organik pada lokasi sampling tersebut mendukung untuk pertumbuhan   kapang.  Kapang   tergolong   organisme   heterotrof   dan   umumnya   bersifat saprofit . Senyawa   organik   dibutuhkan   sebagai   sumber   nutrisi   untuk   pertumbuhannya. Ketersediaan  senyawa   organik  dalam   tanah  akan  menyokong  pertumbuhan  optimum kapang saprofitik.
Hasil identifikasi  fenotipik  terhadap isolat kapang  memperoleh 27 kelompok  taksa kapang yang berbeda secara morfologi. Hasil isolasi dan identifikasi kapang dari sampel tanah Gunung Gamalama dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3.  Hasil identifikasi morfologi kapang pada sampel tanah sekitar kawasan Gunung Gamalama, Ternate, Maluku Utara
Table 3.  Saprophytic fungal  taxa isolated from soil of  Mount Gamalama, Ternate, North Moluccas
No Takson kapang Ketinggian tempat (m dpl)
5 14 74 2 10 00 12 53 14 63 1 Arthrobotrys sp. 0 + 0 0 0 2 Aspergillus flavus Link + + 0 + 0 3 Aspergillus fumigatus Fres 0 + + 0 0 4 Aspergillus japonicus Saito + 0 0 0 0 5 Aspergillus niger van Tieghem + + 0 + + 6 Aspergillus oryzae (Ahlburg) Cohn + 0 0 0 0 7 Aspergillus terreus Thom + 0 0 0 0 8 Chaetomium sp. 0 + 0 0 + 9 Cladosporium cladosporioides (Fres.) de Vries + 0 + + 0 10 Cladosporium herbarum (Pers.) Link + 0 0 0 0 11 Curvularia lunata (Wakker) Boedijn + + 0 + 0 12 Eupenicillium sp. 0 0 + + + 13 Fusarium oxysporum Schlehlt.: Fr. + + 0 0 0 14 Fusarium sp. 0 0 0 + 0 15 Gliocladium  virens + + 0 + 0 16 Neurospora sp. + + 0 0 0 17 Nigrospora sp. 0 0 0 + 0 18 Penicillium griseofulvum Dierckx + 0 + + 0 19 Penicillium purpurogenum Stoll 0 0 + 0 0 20 Penicillium sp. 1 + 0 + 0 + 21 Penicillium sp. 2 + 0 + + 0 22 Rhizopus oryzae Went & Prinsen Geerl 0 + + + + 23 Syncephalastrum racemosum Cohn 0 + 0 0 0 24 Trichoderma harzianum Rifai + + 0 0 + 25 Trichoderma sp. + + 0 + 0 26 Isolat steril koloni miselia berwarna putih hingga krem + + + + + 27 Isolat steril koloni miselia berwarna coklat gelap ( dematiaceous ) + + 0 0 +
Keterangan: (+)  =   ada/ ditemukan (0)   =  tidak ditemukan
Identifikasi morfologi dilakukan pada isolat kapang yang ditumbuhkan pada media PDA,   diinkubasi  pada  suhu   27º  C,  dan  umur  isolat   7--10  hari.Identifikasi   berdasarkan karakter morfologi terhadap kapang saprofitik yang terisolasi menunjukkan 14 kelompok marga   yaitu Arthrobotrys, Aspergillus (6   jenis), Chaetomium,   Cladosporium (2   jenis), Curvularia, Eupenicillium , Fusarium (2 jenis), Gliocladium, Penicillium (4 jenis), Rhizopus , Syncephalastrum, dan Trichoderma (2   jenis).   Selain   itu   terdapat   dua   kelompok   isolat kapang   steril   yang   tidak   teridentifikasi   secara   morfologi   karena   selama   inkubasi   pada media PDA tetap steril dan tidak membentuk struktur reproduksi baik seksual maupun aseksual.
Keragaman isolat kapang terbanyak terdapat pada sampel tanah MG 500. Pada sampel   tanah   MG   500   terisolasi   sebanyak   18   taksa   kapang   yang   berbeda.   Adapun keragaman kapang terendah terdapat pada sampel tanah MG 1500 (1463 m dpl) yang terisolasi sebanyak delapan kelompok taksa kapang.
Hasil   isolasi   dan  identifikasi   menunjukkan   bahwa   kapang  marga Aspergillus dan Penicillium dapat   ditemukan   di   hampir   semua   stasiun   sampling. Aspergillus dan Penicillium adalah   kapang   saprofitik   umum   yang   bersifat   kosmopolit   yaitu   dapat ditemukan di berbagai tipe habitat (Domsch et al ., 1980; Samson et al. , 1995).   Kapang marga Aspergillus memiliki habitat yang kosmopolit dan merupakan marga yang besar dengan   lebih   dari   180   jenis   anamorf   dan   70   nama   teleomorf   (Samsons et   al .   1995). Kapang Pencillium memiliki habitat kosmopolit dan jenis yang beragam. Kapang tersebut umumnya bersifat saprofit dan beberapa bersifat parasit pada tumbuhan tinggi (Samson et.al ., 1995).
Kapang   saprofitik  lain   yang  ditemukan   adalah   marga Arthrobotrys,   Chaetomium, Eupenicillium, Fusarium, Gliocladium, Neurospora, dan Trichoderma . Selain itu, kapang dari suku Dematiaceae  seperti marga Cladosporium,   Curvularia , dan Nigrospora serta anggota   Zygomycetes   yaitu   marga Rhizopus dan Syncephalastrum juga   diisolasi . Mekanisme   dan   peran   kapang   saprofitik Arthrobotrys,   Aspergillus,   Cladosporium, Chaetomium,   Fusarium,   Gliocladium,   Penicillium ,   dan Trichoderma dalam   mengurai materi organik selulosa dalam berbagai tipe ekosistem telah banyak dikaji dan dilaporkan sebelumnya   (Kader et   al. ,   1999;   Peciulyte,   2007).  Kapang   marga Chaetomium selain bersifat saprofitik juga tergolong kapang termofilik yang dapat tumbuh dengan baik dan bersporulasi   pada   suhu   hingga   40º   C.   Kapang   tersebut   memiliki   kemampuan   untuk menguraikan   senyawa   organik   khususnya   selulosa   dalam   waktu   yang   singkat   karena memiliki aktivitas selulolitik yang sangat kuat (Gandjar et al ., 1999). Kapang Trichoderma dapat tumbuh dengan cepat melebihi kecepatan tumbuh kapang lain diantaranya karena memiliki aktivitas selulolitik yang kuat (Singh dan Sharma, 2002; Muhammad dan Amusa, 2003). Trichoderma umumnya   bersifat   saprofitik,   tetapi   beberapa   jenis   bersifat   parasit pada   kapang   lain   (Barnett   dan   Hunter,   1998).   Kapang Trichoderma memiliki   sebaran kosmopolit baik di daerah tropis maupun subtropis dan telah banyak diisolasi dari tanah, rizosfir,   serasah   tumbuhan   tinggi,   buah   dan   sayuran,   pupuk   kandang,   kompos,   dan berbagai limbah industri (Domsch et al ., 1980; Samsons et al., 1995).
Sebagian isolat kapang saprofitik yang terisolasi dari sampel tanah sekitar kawasan Gunung   Gamalama   pada   media   kultur   PDA tidak   menunjukkan   adanya   pembentukan struktur reproduksi baik seksual maupun aseksual dan tetap steril selama masa inkubasi. Struktur   reproduksi   merupakan   karakter   yang   penting   untuk   identifikasi   berdasarkan morfologi khususnya untuk menentukan taksa kapang pada tingkatan takson marga dan jenis. Identifikasi isolat fungi steril dengan menggunakan pendekatan molekuler seperti perbandingan sekuen DNA menjadi hal yang umum dilakukan (Horton dan Burns, 2001). Namun demikian, pendekatan molekuler tersebut tidak selalu dapat diterapkan khususnya untuk mengidentifikasi isolat fungi steril hingga pada tingkatan taksa jenis dan strain. Hal tersebut   disebabkan   karena   pendekatan   molekuler   terbentur   pada   sedikitnya   jumlah referensi database sekuen   DNA yang   tersedia   dibandingkan   dengan   tingginya   tingkat keanekaragaman fungi. Pendekatan identifikasi pada isolat fungi steril berdasarkan ciri dan   karakter   fenotip   atau   morfologi   tetap   dapat   diterapkan   sebagai   alternatif   proses pengidentifikasian   meskipun   tidak   dapat   menggolongkan   isolat   fungi   sampai   pada tingkatan taksa yang lebih rendah (Bills dan Polishook, 1994).

## Kesimpulan
Hasil penghitungan menunjukkan bahwa rerata kelimpahan koloni kapang saprofitik pada sampel tanah sekitar kawasan Gunung Gamalama, Ternate, propinsi Maluku Utara berkisar antara 13,30 x10 4 dan 78,15 x10 4 koloni/ ml.  Rerata kerapatan koloni kapang tertinggi   dicapai  oleh  sampel  tanah MG  500 yang  diambil  pada  ketinggian   514 m  dpl sedangkan   kerapatan  terendah   didapat  pada  sampel   MG  1000   yang  disampling   pada ketinggian 1000 m dpl. Hasil identifikasi berdasarkan karakter dan ciri morfologi terhadap
kapang saprofitik yang terisolasi menunjukkan terdapat 14 kelompok marga kapang yaitu Arthrobotrys, Aspergillus (6   jenis), Chaetomium,   Cladosporium (2   jenis), Curvularia, Eupenicillium , Fusarium (2   jenis), Gliocladium,   Penicillium (4   jenis), Rhizopus , Syncephalastrum, dan Trichoderma (2 jenis).

## Daftar Pustaka
Alexopoulos, C.J., Mims, C.W. and Blackwell, M., 1996. Introductory mycology . 4 th ed. John Wiley & Sons, Inc., Toronto.
Ando,   K.,   Nakhashima,   C.,  Park,   J-Y.,   and  Otoguro,   M.,   2003.   Workshop   on  isolation methods of microbes.   Biotechnology Center-NITE & Research and Development Center for Biotechnology-LIPI, Cibinong: 24--26 Juni 2003.
Anonim,,   2009.   Kondisi   geografis   Pulau   Ternate.   www.damandiri.or.id/file/ ernesiscadewiibab5pdf. 24 November 2009. pk. 09. 35. WIB.
Barnett, H.L. and Hunter, B.B.,  1998. Illustrated genera of imperfect fungi . 4 th ed. APS Press, Minnesota.
Bills, G.F. and Polishook, J.D., 1994. Abundance and diversity of microfungi in leaf litter of lowland rain forest in Costa Rica. Mycologia . 86(2), 187--198.
Cromack,   K.   and   Caldwell,   B.A.,   1992.   The   role   of   fungi   in   litter   decomposition   and nutrient cycling. In : Carroll, J.C. and D.T. Wicklow (eds.). The Fungal Community: Its Organizations and Role in the Ecosystems. 2 nd ed. Marcel Dekker, New York.
Domsch, K.H., Gams, W. and Anderson, T.H., 1980. Compendium of soil fungi. Vol 1. Academic Press, London.
Dutton, M.V. and Evans, C.S., 1996. Oxalate production by fungi: Its role in pathogenicity and ecology in the soil environment. Canadian Journals of Microbiology . 42, 881-- 895.
Ellis, M.B. 1971. Dematiaceous hyphomycetes . Commonwealth Mycological Institute, Kew Surrey.
Gandjar, I., Samson, R.A., van den Tweel-Vermeulen, K., Oetari, A. dan Santoso, I., 1999. Pengenalan kapang tropik umum . Yayasan Obor Indonesia, Jakarta.
Green, F., Larsen, M.J., Winandy, J.E. and Highley, T.L., 1991. The role of oxalic acid in incipient brown-rot decay. Material und Organismen . 26(3), 191-213.
Horton, T.R. and Burns, T.D., 2001. The molecular revolution in ectomycorrhizal ecology: Peeking into the black box. Molecular Ecology . 52, 577--586.
Ilyas, M., Rahmansyah, M. dan Kanti, A., 2006. Seri panduan: Teknik isolasi fungi . LIPI- Press, Jakarta.
Kader, A.J., Omar, O. and Feng, L.S., 1999. Isolation of cellulolytic fungi from the Bario highland, Sarawak. ASEAN Review of Biodiversity and Environmental Conservation.
Kuter, G.A., 1986. Microfungal populations associated with the decomposition of sugar maple leaf litter. Mycologia . 78, 114--126.
Lodge, D.J., 1997. Factors related to diversity of decomposer fungi in tropical rain forests. Biodiversity and Conservation . 6, 681--688.
Lynd,   L.R.,   Weimer,  P.J.,   van   Zyl,   W.H.   and   Pretorius,   I.S.,   2002.   Microbial   cellulose utilization:   Fundamentals   and   biotechnology. Microbiology   and   Molecular   Biology Reviews . 66(3), 506--577.
Muhammad,  S.  and Amusa,  N.A.,  2003.   In-vitro  inhibition  of  growth of  some seedling blight   inducing   pathogens   by     compost   inhabiting   microbes. African   Journal   of Biotechnology . 2(6): 161-164.
Munir, E., Hattori, T. and Shimada, M., 2002. A new glucose metabolism in wood-rotting fungi. Procceding   of   The   4 th International   Wood   Science   Symposium. Serpong, Indonesia 2-5 September 2002.LIPI-JSPS Core University Program In The Field of Wood Science. 336--340.
Peciulyte,   D.   2007.   Isolation   of   cellulolytic   fungi   from   waste   paper   gradual   recycling materials. Ekologija . 53(4), 11--18.
Samson, R.A., E.S. Hoekstra, J.C. Frisvad, and O. Filtenborg. 1995. Introduction to food borne fungi . 4 th ed.  Ponsen & Looyen, Baarn.
Singh, A. and Sharma, S., 2002. Composting of crop residue trought treatment with microorganisms and subsequent vermicomposting. Bioresource Technology . (85),
107--111.
Webster, J., 1980. Introduction to fungi . 2 nd ed. Cambridge University Press, Melbourne.