Wahyudi,  D. Chilmawati, I. Samidjan, Suminto/ Jurnal Sains Akuakultur Tropis Ed. Maret : 6(2022)1: 129-137.    eISSN:2621-0525
TERAKREDITASI PERINGKAT 4, NO SK:200/M/KPT/2020

## Jurnal Sains Akuakultur  Tropis

## D e p a r t e m e n  A k u a k u l t u r
Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan – Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH, Tembalang, Semarang 50275
Telp. (024) 7474698, Fax.: (024) 7474698 Email: sainsakuakulturtropis@gmail.com , sainsakuakulturtropis@undip.ac.id _____________________________________________________________________________

## PENGARUH RASIO CHELATOR DAN METAL PADA MEDIA KULTUR TERHADAP POLA PERTUMBUHAN DAN KANDUNGAN
PROTEIN SEL DIATOM Thalassiosira sp.
The Effect of Chelators and Metals Ratios on Culture Media to Growth Pattern and Protein Content of Diatom Cells Thalassiosira sp.
Wahyudi, Diana Chilmawati*, Istiyanto Samidjan, Suminto
Departemen Akuakultur, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, S.H., Tembalang, Semarang, Jawa Tengah-50275 *Corresponding authors : dianachilmawati @yahoo.com

## ABSTRAK
Pakan alami belum dapat digantikan oleh pakan buatan dalam kegiatan pembenihan. Thalassiosira sp.  merupakan  salah  satu  pakan  alami  sebagai  pakan  larva  udang.   S a lah  satu  faktor  ya n g me mp e n ga r u h i   pertumbuhan pakan alami fitoplankton adalah mikronutrien. Mikronutrien tidak dapat dimanfaatkan  oleh  fitoplankton  apabila  tidak  didukung  adanya  chelator.  Chelator  berfungsi  untuk mensintesa  mikronutrien  di  dalam  media  kultur  agar  bisa  dimanfaatkan  untuk  proses  metabolisme  sel mikroalga. Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengkaji  pengaruh  rasio  chelator  dan  metal  pada media  walne  terhadap  pola  pertumbuhan  dan  kandungan  protein Thalassiosira sp.  Metode  penelitian eksperimental  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  5  perlakuan  4  ulangan  yaitu perlakuan A (tanpa chelator dan metal), perlakuan B (rasio chelator dan metal = 1:1), perlakuan C (rasio chelator dan metal = 2:1), perlakuan D (rasio chelator dan metal = 3:1) dan perlakuan E (rasio chelator dan  metal  =  4:1).  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  rasio  chelator  dan  metal  berpengaruh  nyata (P<0,05) terhadap nilai kepadatan akhir dan tidak berpengaruh nyata (P>0,05) terhadap nilai waktu lag phase, konstanta pertumbuhan spesifik (SGR) dan puncak populasi. Nilai kepadatan akhir tertinggi pada perlakuan C dengan nilai 50.000 sel/ml. Nilai waktu lag phase, konstanta pertumbuhan spesifik (SGR) dan  puncak  populasi  berturut-turut  berkisar  antara  -2,68  hingga  (-2,73)  hari,  0,354  hingga  0,362  dan 115.883  hingga  122.500  sel/ml.  Kandungan  protein  tertinggi  pada  perlakuan  C  sebesar  52,37%. Perlakuan  rasio  chelator  dan  metal  2:1  berpengaruh  terhadap  pola pertumbuhan  dan  kandungan  nutrisi Thalassiosira sp. Kata kunci: Chelator, metal, pola pertumbuhan, Thalassiosira sp.

## ABSTRACT
The natural feed can not yet be replaced by artificial feed in pursuing activities. Thalassiosira sp. is  one  of  the  natural  feed  as  shrimp  larvae  feed.  One  of  the  growth  factors  in  natural  feed  culture  is
micronutrients. Micronutrients cannot be utilized by phytoplankton if chelators are not supported.  The chelators helps to synthetize the micronutrient in culture media so that it can be used for the metabolism of  microalgae  cells.  The  purpose  of  this  study  was  to  examine  the  influence  of  chelators  with  metals ratios  on  Walne  media  on  the  growth  pattern  and  protein  content  of  Thalassiosira  sp.  Experimental research  method  using  Complete  Randomized  Design  (CRD)  with  5  treatments  4  replays  namely treatment A (without chelators and metals), treatment B (chelators and metals ratio = 1:1), treatment C (chelators  and  metals  ratio  =  2:1),  treatment  D  (chelators  and  metals  ratio  =  3:1)  and  treatment  E (chelators  and  metals  ratio  =  4:1).  The  results  showed  that  the  chelators  and  metals  ratios  had significant effect (P<0.05) on the final density value and had no significant effect (P>0.05) on the lag phase,  growth  rate, and peak  population  values.  The  highest  final  density  value  in  treatment  C  with  a value of 50.000 cells/ml. The lag phase time, specific  growth  rate  (SGR)  and  population  peaks  values  ranged  from  -2.68  to  (-2.73)  days,  0.354  to 0.362 and 115883 to 122.500 sel/ml. The highest protein content in the C treatment was 52.37%. Based on the results can be concluded a comparison chelators and metals ratio 2:1 affect the growth patterns and protein content of Thalassiosira sp
Keywords: Chelator, metal, growth pattern, Thalassiosira sp.

## PENDAHULUAN
Kegiatan budidaya ikan tidak dapat terlepas dari tahap pembenihan. Pakan yang cukup, baik kuantitas maupun  kualitasnya,  sangat  diperlukan  dalam  setiap  tahapan  usaha  perikanan  budidaya.  Sumber  pakan ikan  yang  belum  dapat  digantikan  perannya  terutama  pada  saat  pemeliharaan  larva  adalah  pakan  alami (Chilmawati  dan  Suminto,  2008).    Ifdonal  (2007),  dalam  Widiana et  al. (2013),  menyebutkan  bahwa salah  satu  pakan  alami  yang  biasa  dijumpai  adalah  fitoplankton.  Fitoplankton  memiliki  peran  penting dalam feeding regimes yang diterapkan pada panti pembenihan larva udang. Fitoplankton diberikan pada stadia naupli-5 atau naupli-6 (N5-6) hingga mysis 3 (M-3) karena pada fase ini cadangan nutrisi dalam tubuh udang habis dan perkembangan fisiologis udang belum sempurna sehingga pakan yang diberikan hendaknya  berupa  fitoplankton  dengan  ukuran  kecil  (Nofianti et  al., 2014).  Salah  satu  jenis  plankton yang digunakan sebagai pakan larva udang penaeid adalah Thalassiosira sp. yang memiliki kandungan nutrisi  tinggi  seperti  protein  28±3,3  %,  karbohidrat  23±4,5 %,  lemak  22±2,9  %  dan  zat  abu  27±0,7  % (Nur et al., 2017; Costard et al., 2012; Vega et al., 2004). Nutrien merupakan salah satu faktor yang mempengaruhi pertumbuhan Thalassiosira sp. Nutrien atau unsur  hara  merupakan  parameter  yang  mendukung  pertumbuhan  mikroalga.  Pertumbuhan  mikroalga tidak  hanya  dipengaruhi  oleh  ketersediaan  makronutrien  esensial  yang  memadai  seperti  karbon, nitrogen,  fosfor,  silikat,  tetapi  juga  dipengaruhi  oleh  ketersediaan  mikronutrien  seperti  besi,  mangan, zinc,  kobalt,  copper  yang  mencukupi  dan  sesuai  dengan  kebutuhan  (Regista et  al., 2017).  Anderson (2005),  makronutrien  dan  ion-ion  pada  umumnya  tidak  bersifat toxic bagi  mikroalga  dan  dapat digunakan  dalam  konsenterasi  yang  banyak  untuk  menunjang  pertumbuhan  mikroalga,  akan  tetapi sebaliknya  mikronutrien  memiliki  sifat toxic dan  menghambat  pertumbuhan  mikroalga  apabila digunakan dalam konsenterasi yang berlebih.
Mikronutrien seperti  Fe,  Cu,  Mn,  Zn  dan  Co  tidak  dapat  disintesis  oleh  sel  fitoplankton  jika  tidak didukung dengan adanya zat chelator. Zat chelator berfungsi untuk melancarkan mikronutrien di dalam media  kultur  bisa  dimanfaatkan  untuk  proses  metabolisme  sel  mikroalga  (Suminto  2005  dalam  Jati et al., 2012).  Jackson  dan  Morgan  (1978),  zat  chelator  akan  mendetoksifikasi  air  dengan  mengikat  ion metal  tertentu  yang  bersifat toxic yang  dapat  menghambat  penyerapan  mikronutrien  dan  akan meningkatkan  ketersediaan  ion  metal  yang  dapat  dimanfaatkan  oleh  fitoplankton.  Beberapa  studi  telah dilakukan untuk mengetahui interaksi ketersediaan chelator dan metal terhadap pertumbuhan mikroalga (Jackson dan Morgan, 1978; Sayin et al., 2012; Sunda, 2013). Media walne merupakan salah satu jenis media  yang  umum  digunakan  dalam  proses  kultur  mikroalga  (Trikurti et  al., 2016).  Perbandingan chelator  dan  metal  dimanipulasi  dengan  proporsi  berbeda  dari  penambahan  dan  pengurangan  chelator dan  metal  dalam  media  walne  untuk  menentukan  perbandingan  chelator  dan  metal  yang  akan  diteliti. Belum  banyak  informasi  mengenai  perbandingan  chelator  dan  metal  terhadap  pertumbuhan Thalassiosira sp.sehingga  perlu  adanya  penelitian  ini.  Pengaplikasian  chelator  dan  metal  yang  sesuai
Wahyudi,  D. Chilmawati, I. Samidjan, Suminto/ Jurnal Sains Akuakultur Tropis Ed. Maret : 6(2022)1: 129-137.    eISSN:2621-0525
dengan  kebutuhan  mikroalga  diharapkan  dapat  meningkatkan  pertumbuhan  dan  kandungan  protein Thalassiosira sp.  sehingga  dapat  digunakan  untuk  mendukung  pertumbuhan  dan  kelangsungan  hidup kultivan budidaya. Tujuan dari penelitian ini yaitu untuk mengkaji pengaruh perbandingan chelator dan metal  dalam  media  Walne  terhadap  pertumbuhan Thalassiosira sp.  dan  mengetahui  perbandingan chelator  dan  metal  dalam  media  Walne  yang  memberikan  kandungan  protein  tertinggi  dalam  sel Thalassiosira sp.

## MATERI DAN METODE Materi
Pakan alami Thalassiosira sp. diperoleh dari stok murni dan telah dikembangkan kultur bibit dalam skala  laboratorium  di  PT.  Matahari  Cipta  Sentosa,  Gunungkidul,  Yogyakarta.  Media  budidaya  air  laut diperoleh  setelah  melalui  proses  strerilisasi  menggunakan  klorin  0,06ml/L  dan  thiosulfat  0,02  ml/L (Dinata et  al., 2017).  Media  walne  diperoleh  melalui  proses  pembuatan  berdasarkan  komposisi  media walne yang terdiri dari Media walne terdiri dari NaNO 3 , H 3 BO 3, Na 2 EDTA, NaH 2 PO 4 .H 2 O, FeCl 3 .6H 2 O, MnCl 2 .4H 2 O,  ZnCl 2, CoCl 2 .6H 2 O,  (NH 4 ) 8 Mo 7 O 24 .4H 2 O,  CuSO 4 .5H 2 O,  Thiamine  dan  cyanocobalamin (Walne  1970  dalam  Andersen,  2004).  Penentuan  dasar  perlakuan  perbandingan  chelator  dan  metal menggunakan perhitungan molaritas media walne dan berdasarkan Anderson (2005).

## Metode
Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  metode  eksperimental  dengan  rancangan percobaan yaitu Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 5 perlakuan dan 4 ulangan yaitu perlakuan A (tanpa chelator dan metal), perlakuan B (rasio chelator dan metal = 1:1), perlakuan C (rasio chelator dan metal = 2:1), perlakuan D (rasio chelator dan metal = 3:1) dan perlakuan E (rasio chelator dan metal = 4:1).  Penanaman  bibit Thalassiosira sp.  dilakukan  setelah  menghitung  kepadatan  stok  awal  yaitu sebanyak 1×10 4 sel/ml (Rasdi dan Qin, 2014). Kultur Thalassiosira sp.  dilakukan  dua  kali  yaitu  kultur  pertama  dilakukan  untuk  mengetahui  pola pertumbuhan Thalassiosira sp. dan kultur kedua dilakukan untuk mengetahui kadar protein Thalassiosira sp.  Pemanenan  pada  kultur  keduadilakukan  pada  saat  sel Thalassiosira sp.  berada  pada  akhir  fase eksponensial dan memasuki fase stasioner karena pada fase ini sel Thalassiosira sp. mengandung nutrisi tinggi (Chilmawati dan Suminto, 2008). Kultur menggunakan toples dengan volume 5 liter dan berisi 4 liter  media  air  laut.  Inokulan Thalassiosira sp.  yang  digunakan  dengan  kepadatan  1×10 4 sel/ml  (Rasdi dan  Qin,  2014).  Salinitas  yang  digunakan  berkisar  antara  29-30  ppt  dan  pH  7,8-8,2  (Qingtian  dan Guikum, 2011).

## Variabel Penelitian
Data yang diambil yaitu pola pertumbuhan Thalassiosira sp. yang melipti waktu lag phase, konstanta pertumbuhan spesifik (SGR), puncak populasi, dan kepadatan akhir. a. Waktu lag phase Perhitungan  waktu lag  phase dengan  menggunakan  rumus  (Suminto  dan  Hirayama,  1996  dalam Chilmawati dan Suminto, 2008) yaitu dengan cara menghitung regresi linear selama fase eksponensial dengan rumus:
Y = A + B dimana: Y = logaritma kepadatan sel A = waktu (hari) B = konstanta Dimana waktu lag phase (A) dihitung dengan Y = kepadatan awal kultur, sehingga menjadi rumus: Y = Ak +B
dimana:
Y = logaritma kepadatan sel
A = waktu (Hari) B dan k = hasil perhitungan regresi linear selama fase eksponensial
Wahyudi,  D. Chilmawati, I. Samidjan, Suminto/ Jurnal Sains Akuakultur Tropis Ed. Maret : 6(2022)1: 129-137.    eISSN:2621-0525
TERAKREDITASI PERINGKAT 4, NO SK:200/M/KPT/2020
b. Konstanta pertumbuhan spesifik (SGR) SGR Thalassiosira sp.  dihitung  menggunakan  rumus  yang  pernah  digunakan  dalam  penelitian (Fogg, 1965 dalam Chilmawati dan Suminto, 2008), yaitu:
k=
dimana: K    = konstanta pertumbuhan spesifik Wt  = jumlah sel pada hari ke- t Wo = jumlah sel pada hari ke-0 Δt   = waktu dari 0 – t (hari)
c. Kepadatan sel Thalassiosira sp. Kepadatan harian Thalassiosira sp. dihitung menggunakan haemocytometer pada 400 kotak dengan volume 0,0001 ml, kemudian kepadatan dihitung menggunakan rumus yang berasal dari referensi Nisa et al., (2020), yaitu:
P = Nx10 4 sel/mL dimana: P = kepadatan sel (sel/mL) N = jumlah sel yang terhitung pada 25 kotak Haemocytometer d. Kualitas air
Data kualitas air diambil sebanyak 3 kali selama periode penelitian yaitu pada awal, tengah dan akhir kultur.  Variabel  kualitas  air  yang  diukur  yaitu  salinitas,  suhu  dan  pH.  Alat  ukur  kualitas  air  yang digunakan yaitu refrakometer dan pH meter.
e. Kandungan protein
Analisis kandungan protein pada Thalassiosira sp. menggunakan metode semimikro Kjedhall (SNI, 1992).

## Analisis data
Data  yang  dianalisis  secara  statistik  meliputi  waktu lag  phase ,  laju  pertumbuhan  spesifik  (SGR), puncak  populasi  dan  kepadatan  akhir Thalassiosira sp.  Data  dilakukan  uji  analisis  ragam  untuk mengetahui  pengaruh  perbandingan  chelator  dan  metal  terhadap  pola  pertumbuhan Thalassiosira sp. Apabila hasil menunjukan pengaruh nyata dilanjutkan dengan uji Duncan untuk mengetahui perbedaan nilai tengah antar perlakuan dan perlakuan yang memberikan hasil terbaik. Data kandungan protein dan kualitas air ditabulasi dan dianalisis secara deskriptif.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Pola pertumbuhan Thalassiosira sp. Pola pertumbuhan sel Thalassiosira sp. yang dikultur selama 14 hari meliputi waktu lag phase, SGR (konstanta pertumbuhan spesifik), puncak populasi dan kepadatan akhir tersaji pada Tabel 1.
Wahyudi,  D. Chilmawati, I. Samidjan, Suminto/ Jurnal Sains Akuakultur Tropis Ed. Maret : 6(2022)1: 129-137.    eISSN:2621-0525
TERAKREDITASI PERINGKAT 4, NO SK:200/M/KPT/2020
Tabel 1.  Nilai rata-rata waktu lag phase , SGR (konstanta pertumbuhan spesifik), puncak populasi dan kepadatan akhir Thalassiosira sp. selama 14 hari pengamatan Variabel Nilai Perlakuan A B C D E Waktu Lag Phase (hari) - 2,68±0,18 a - 2,70±0,06 a - 2,71±0,11 a - 2,69±0,10 a - 2,73±0,08 a SGR (per hari) 0,36±0,02 a 0,36±0,01 a 0,36±0,01 a 0,36±0,01 a 0,35±0,01 a Puncak Populasi (log sel/ml) 5,09±0,05 a 5,08±0,02 a 5,07±0,02 a 5,08±0,02 a 5,06±0,03 a Kepadatan Akhir (log sel/ml) 4,14±0,11 a 4,26±0,05 ab 4,69±0,03 e 4,38±0,09 bc 4,41±0,05 cd
Berdasarkan  Tabel  1  nilai  waktu lag  phase terbaik  pada  perlakuan  A  (tanpa  chelator  dan  metal) dengan nilai -2,68 hari. Nilai SGR tertinggi pada perlakuan A (tanpa chelator dan metal) dengan nilai 0,362.  Nilai  puncak  populasi  tertinggi  pada  perlakuan  A  (tanpa  chelator  dan  metal)  dengan  nilai 122.500 sel/ml, sedangkan nilai kepadatan akhir tertinggi pada perlakuan C (rasio chelator dan metal = 2:1) dengan nilai 50.000 sel/ml.
Grafik pertumbuhan Thalassiosira sp.
Berdasarkan hasil penelitian mengenai perbandingan chelator dan metal pada media walne terhadap pola  pertumbuhan  dan  kandungan  protein Thalassiosira sp.,  diperoleh  grafik  pola  pertumbuhan  yang tersaji pada Gambar 1.
Gambar 1. Grafik pertumbuhan Thalassiosira sp. dengan perbandingan chelator dan metal yang berbeda
Berdasarkan  Gambar  1  dapat  dilihat  bahwa  kelimpahan  tertinggi Thalassiosira sp.  selama pengamatan 14 hari adalah pada perlakuan A  (tanpa chelator dan metal) yaitu sebesar 122.500 sel/ml, diikuti  oleh  perlakuan  D  (rasio  chelator  dan  metal  =  3:1)  sebesar  120.000  sel/ml,  perlakuan  B  (rasio chelator dan metal = 1:1) sebesar 119.167 sel/ml, perlakuan C (rasio chelator dan metal= 2:1) sebesar 117.500 sel/ml dan terakhir perlakuan E (rasio chelator dan metal = 4:1) sebesar 115.833 sel/ml.
Kandungan protein Thalassiosira sp.
Berdasarkan  penelitian  diperoleh  hasil  nilai  kandungan  protein Thalassiosira sp.  selama  14  hari pemeliharaan seperti tersaji pada Tabel 2.
4,00 4,10 4,20 4,30 4,40 4,50 4,60 4,70 4,80 4,90 5,00 5,10 5,20 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1011121314 K epa da ta n Sel T ha la ss io sira sp. (L o g s el/m l) Periode Kultur (Hari) Perlakuan A Perlakuan B Perlakuan C Perlakuan D Perlakuan E
Wahyudi,  D. Chilmawati, I. Samidjan, Suminto/ Jurnal Sains Akuakultur Tropis Ed. Maret : 6(2022)1: 129-137.    eISSN:2621-0525
Tabel 2. Nilai kandungan protein Thalassiosira sp. selama 14 hari pemeliharaan Perlakuan Kadar Protein (%) A 20,82 B 27,19 C 52,37 D 47,08 E 31,82
Berdasarkan Tabel 2. Nilai kandungan protein Thalassiosira sp. dari tertinggi ke terendah berturut- turut adalah perlakuan C 52,37%, perlakuan D 47,08%,perlakuan E 31,82%, perlakuan B 27,19% dan perlakuan A 20,82%.

## Kualitas air
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan  diperoleh  nilai  kualitas  air  meliputi  suhu,  derajat keasaman atau power of hydrogen (pH) dan salinitas, hasilnya tersaji pada Tabel 3.
Tabel 3. Nilai variabel kualitas air pada media kultur Thalassiosira sp. selama 14 hari pemeliharaan
Variabel Kisaran Kelayakan Menurut Pustaka Suhu (°C) 21,7-29,6 10-30* Ph 8,0-8,5 8,0-8,7** Salinitas (ppt) 30-35 25-35*** Keterangan:
Baek et al., (2011)* Widianingsih et al. , (2013)** Sanjaya dan Danakusuma (2018)***
Berdasarkan  Tabel  3.  diketahui  bahwa  dan  nilai  kualitas  air  selama  penelitian  sudah  sesuai  untuk pertumbuhan Thalassiosira sp.
Pembahasan 1. Pertumbuhan
Pertumbuhan Thalassiosira sp.  ditandai  dengan  fase  pertumbuhan  dengan  parameter  diantaranya waktu lag  phase, konstanta  pertumbuhan  spesifik,  puncak  populasi  dan  kepadatan  akhir  pengamatan. Perlakuan perbandingan chelator dan metal tidak memberikan pengaruh nyata P(>0,05) pada waktu lag phase, laju pertumbuhan spesifik dan puncak populasi. Nilai waktu lag phase Thalassiosira sp. tertinggi yaitu pada perlakuan tanpa chelator dan metal (A) sebesar (-2 hari 16 jam. Rasio chelator dan metal 4:1 (E)  menghasilkan  nilai lag  phase terendah  sebesar  (-2  hari  18  jam).  Waktu lag  phase menunjukkan lamanya  proses  adaptasi Thalassiosira sp.  terhadap  media  kultur  yang  baru.  Nilai  waktu lag  phase negatif  menunjukkan  bahwa  pada  saat  pengamatan Thalassiosira sp.  tidak  mengalami  fase  adaptasi terhadap media baru. Menurut Regista et al. (2017), umur kultur inokulum yang digunakan merupakan salah satu faktor yang dapat menentukan lamanya fase adaptasi. Fase adaptasi akan berlangsung lebih singkat  atau  tidak  terjadi  proses  adaptasi  sama  sekali  apabila  sel-sel  yang  diinokulasikan  berada  pada fase  eksponensial.  Prayitno  (2020),  meyatakan  bahwa  faktor  yang  mempengaruhi  fase  adaptasi mikroalga salah satunya adalah media kultur yang digunakan sama dengan media kulturinokulan.
Setelah  masa  adaptasi  berakhir  terjadi  fase  pertumbuhan  dipercepat  yang  ditujukkan  dengan  nilai laju  pertumbuhan.  Nilai  laju  pertumbuhan  (k)  menandakan  sel  telah  memasuki  fase  eksponensial. Perlakuan  tanpa  chelator  dan  metal  (A)  menghasilkan  nilai  SGR  tertinggi  sebesar  0,36±0,02  per  hari. Perlakuan  rasio  chelator  dan  metal  4:1  (E)  menghasilkan  nilai  SGR  terendah  yaitu  sebesar  0,35±0,01 per  hari.  Nilai  konstanta  pertumbuhan  spesifik  menggambarkan  kecepatan  pertumbuhan  harian  dari suatu  populasi  mikroalga.  Nilai  konstanta  pertumbuhan  spesifik  yang  lebih  besar  mempunyai  arti bahwa  proses  pembelahan  sel  mikroalga  berlangsung  lebih  cepat  yang  berakibat  pertambahan  sel
Wahyudi,  D. Chilmawati, I. Samidjan, Suminto/ Jurnal Sains Akuakultur Tropis Ed. Maret : 6(2022)1: 129-137.    eISSN:2621-0525
persatuan  waktu  menjadi  lebih  besar.  Tidak  adanya  pengaruh  nyata  dari  chelator  dan  metal  terhadap nilai  SGR  diduga  karena  pertumbuhan  mikroalga  lebih  cenderung  bergantung  kepada  ketersediaan unsur  nitrat  dan  fosfat  sebagai  unsur  utama  yang  digunakan  oleh  mikroalga  untuk  pertumbuhan. Menurut Sigalingging 92019), Nutrien merupakan parameter yang mendukung pertumbuhan mikroalga. Pertumbuhan  mikroalga  sangat  dipengaruhi  oleh  ketersediaan  nutrien  dalam  media  kultur,  khususnya unsur nitrogen.
Fase  eksponensial  (puncak  populasi)  terjadi  setelah  fase  adaptasi  yang  ditandai  dengan meningkatnya  kepadatan  populasi Thalassiosira sp.  secara  signifikan  dalam  rentang  waktu  tertentu. Nilai  puncak  populasi  tertinggi  terdapat  pada  perlakuan  tanpa  rasio  chelator  dan  metal  (A)  sebesar 122500  sel/ml.  Perlakuan  rasio  chelator  dan  metal  4:1  (E)  menghasilkan  nilai  terendah  yaitu  sebesar 115833  sel/ml.  Tidak  adanya  pengaruh  nyata  chelator  dan  metal  terhadap  puncak  populasi  diduga karena tidak adanya fase adaptasi menyebabkan fase eksponensial Thalassiosira sp. terjadi lebih cepat. Hal  ini  dikarenakan  unsur  nutrien  utama  yang  digunakan  untuk  pertumbuhan  seperti  unsur  nitrat  dan fosfat  dalam  masing-masing  perlakuan  masih  tersedia  dalam  jumlah  yang  banyak  untuk  menunjang pertumbuhan  sehingga  peran  mikronutrien  belum  terlihat  secara  signifikan.    Menurut  Fakhri et  al. (2020),  karbon,  nitrogen  dan  fosfor  merupakan  faktor  utama  yang  dapat  mempengaruhi  pertumbuhan mikroalga.  Nitrogen  berperan  dalam  pertumbuhan  dan  pembentukan  DNA,  RNA,  enzim  dan fotosintesis. Buwono dan Nurhasanah (2018), yang menyatakanbahwa nitrat (NO 3 ) merupakan nutrien utama bagi pertumbuhan mikroalga.
Fase  kematian  terjadi  setelah Thalassiosira sp.  pada  masing-masing  perlakuan  mencapai  puncak populasi.  Fase  kematian  ditandai  dengan  kepadatan  populasi  yang  terus  berkurang  dikarenakan  laju kematian  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  laju  pertumbuhan.  Perbandaingan  chelator  dan  metal memberikan  pengaruh  nyata  (P<0,01)  terhadap  nilai  kepadatan  akhir.  Perlakuan  rasio  chelator  dan metal  2:1  (C)  memberikan  nilai  kepadatan  akhir  tertinggi  yaitu  sebesar  50000  sel/ml,  sedangkan  nilai terendah kepadatan akhir terjadi pada perlakuan tanpa chelator dan metal A) yaitu sebesar 12500 sel/ml. Hal ini diduga karena komposisi kandungan nutrien baik makro maupun mikro seperti Fe, Mn, Zn, Co dan  Cu  serta  chelator  didalam  media  perlakuan  C  memiliki  komposisi  yang  seimbang  sehingga memungkinkan  untuk  terjadinya  fase  stasioner  yang  lebih  lama  dan  pada  akhir  penelitian  kepadatan populasi  masih  cukup  tinggi.  Miazek et  al. (2015),  chelator  (berupa  asam  organik  molekuler  rendah atau zat  humat) dalam  media kultur disintesis oleh  mikroalga untuk detoksifikasi  logam. Penambahan EDTA  dalam  budidaya Scenedesmus  subspicatus mengurangi  hambatan  pertumbuhan  oleh  logam  Cu sebanyak  55%.  Asam  humat  mengurangi  tingkat  toksik  Cd 2+ dan  Zn 2+ pada Pseudokirchneriella subcapitata . 2. Kandungan protein
Kandungan  protein  yang  terdapat  pada Thalassiosira sp.  hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa adanya  perbedaan  pada  masing-masing  perlakuan.  Nilai  kandungan  protein Thalassiosira sp.  dari tertinggi  ke  terendah  berturut-turut  adalah  perlakuan  C  52,37%,  perlakuan  D  47,08%,perlakuan  E 31,82%, perlakuan B 27,19% dan perlakuan A 20,82%. kandungan protein mkroalga dipengaruhi oleh faktor  lingkungan  seperti  kualitas  air,  intensitas  cahaya,  usia  kultur  dan  batasan  nutrisi.  Nutrien  yang lengkap  dan  konsentrasi  yang  tepat  menentukan  produksi  biomassa  dan  kandungan  gizi  mikroalga. Pertumbuhan  fitoplankton didukung oleh  ketersediaan EDTA,  yang dapat  mendetoksifikasi ion logam beracun seperti ion cupric dan meningkatkan ketersediaan logam esensial seperti besi yang larut dalam air.  Sayin et  al. (2012),  konsentrasi  EDTA  10-100µM  digunakan  dalam  sebagian  besar  kultur fitoplankton. Konsenterasi lebih dari 100 µM dimungkinkan memiliki efek toksik pada beberapa jenis spesies mikroalga.
3. Kualitas air
Kualitas  air  berperan  sebagai  faktor  pendukung  dalam  pertumbuhan  mikroalga  Hasil  pengukuran nilai  pH  selama  pengamatan  berkisar  antara  8,0-8,5.  Nilai  pH  ini  masih  sesuai  untuk  per  tumbuhan Thalassiosira sp. Menurut Widianingsih et al. (2013), nilai pH untuk tumbuh Thalassiosira pseudonana berkisar  8-8,7.  Peningkatan  nilai  pH  diduga  karena  penambahan  media  media  Walne  dan  proses fotosinteis.  Suminto  (2009),  menyatakan  bahwa  peningkatan  pH  pada  media  kultur  berbanding  lurus dengan  penambahan  bikarbonat  yang  dapat  menghasilkan  CO 2 untuk  dimanfaatkan  dalam  proses fotosintesis. Pertumbuhan sel mikroalga meningkat seiiring dengan meningkatnya nilai pH. Nilai suhu
Wahyudi,  D. Chilmawati, I. Samidjan, Suminto/ Jurnal Sains Akuakultur Tropis Ed. Maret : 6(2022)1: 129-137.    eISSN:2621-0525
TERAKREDITASI PERINGKAT 4, NO SK:200/M/KPT/2020
berdasarkan  hasil  pengamatan  selama  masa  kultur Thalassiosira sp.  berkisar  antara  21,7-29,6°C. Kisaran  suhu  tersebut  masih  sesuai  dengan  kisaran  suhu  optimal  untuk  pertumbuhan  mikroalga. Menurut    Baek et  al. (2011),  populasi  mikroalga Thalassiosira  pseudonona dapat  tumbuh  optimal dengan  kisaran  suhu  10-30°C  pada  air  payau  dan  laut.  Pengukuran  salinitas  selama  pengamatan menunjukkan  nilai  berkisar  antara  30-35  ppt.  Menurut    Sanjaya  dan  Danakusuma  (2018),  salinitas optimum bagi pertumbuhan mikroalga berkisar antara 25-35 ppt. Nisa et al. (2020), salinitas merupakan faktor  yang  dapat  mempengaruhi  kepadatan  mikroalga  dalam  media  kultur.  Fluktuasi  salinitas  yang kurang  ataupun  melebihi  ambang  batas  dapat  menyebabkan  menurunnya  pertumbuhan  mikroalga. Intensitas  cahaya  yang  digunakan  selama  penelitian  sebesar  7500  lux.  Menurut  Muchammad  (2013), intensitas  cahaya  yang  diperlukan  untuk  perumbuhan  mikroalga  berkisar  antara  1000-10000  lux  (15- 150 µmol photon/m 2 S 1 ).

## KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan
Kesimpulan yang dapat diambil berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan adalah sebagai berikut:
1. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  rasio  chelator  dan  metal  pada  media  kultur  berpengaruh  nyata terhadap  nilai  kepadatan  akhir  dan  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  nilai  waktu lag  phase ,  laju pertumbuhan dan puncak populasi sel Thalassiosira sp. Nilai kepadatan akhir tertinggi pada perlakuan C  dengan  nilai  50.000  sel/ml.  Nilai  waktu lag  phase, konstanta  pertumbuhan  spesifik  dan  puncak populasi  berturut-turut berkisar  antara  -2,68  hingga  (-2,73)  hari,  0,354  hingga  0,362  dan  115.883 hingga 122.500 sel/ml.
2. Perlakuan  rasio  chelator  dan  metal  menghasilkan  perbedaan  kandungan  protein  dalam  sel Thalassiosira sp. dimana kandungan protein Thalassiosira sp. tertinggi pada perlakuan rasio chelator dan metal 2:1 sebesar 52,37%. .

## Saran
Saran yang dapat diberikan dalam penelitian ini adalah perlu adanya penelitian lebih lanjutmengenai pengaruh  perbandingan  chelator  dan  metal  dalam  media  kultur  mikroalga  yang  paling  baik  terhadap Thalassiosira sp. dan jenis alga yang lain guna mendapatkan pakan alami yang cukup baik kualitas dan kuantitasnya.

## Ucapan Terima Kasih
Terima  kasih  penulis  ucapkan  kepada  seluruh  pihak PT. Matahari  Cipta Sentosa, Gunungkidul, Yogyakarta yang telah membantu mempersiapkan sarana dan prasarana kegiatan penelitian

## DAFTAR PUSTAKA
Anderson R. 2005. Algal Culturing Tehniques. Aquaculture 154. 239-269 pp. Baek,  S.  H.,  S.  W.  Jung  dan  K.  Shin.  2011.  Effects  of  Themperature  and  Salinity  on  Growth  of Thalassiosira pseudonona ( Bacillariophyceae) Isolated from Ballast Water. Journal of Freshwater Ecology, 26(4): 547-552.
Buwono,  N.  R.,  dan  R.  Q.  Nurhasanah.  2018.  Studi  Pertumbuhan  Populasi Spirulina sp.  pada  Skala Kultur yang Berbeda. Jurnal Ilmiah Perikanan dan Kelautan, 10(1): 26-33.
Chilmawati,  D.  dan  Suminto.  2008.  Penggunaan  Media  Kultur  yang  Berbeda  terhadap  Pertumbuhan Chlorella sp. Jurnal Saintek Perikanan, 4(1): 42-49. Costard,  G.  S.,  R.  R.  Machado,  E.  Barbarino,  R.  C.  Martino  dan  S.  O.  Lourenço.  2012.  Chemical Composition of Five Marine Microalgae that Occur on The Brazilian Coast. International Journal of Fisheries and Aquaculture, 4(9): 191-201.
Dinata, K. D. W.,  A. A. M. D. Anggreni, N. S. Antara. 2017. Pengaruh Konsentrasi Natrium Nitrat dan Natrium  Dehidrogen  Fosfat  pada  Media  Walne  Terhadap  Konsentrasi  Biomassa  dan  Protein Nannochloropsis oculata . Jurnal Rekayasa dan Manajemen Agroindustri, 5(1):40-49. Fakhri,  M.,  P.  W.  Antika,  A.  W.  Ekawatidan  N.  B.  Arifin.  2020.  Pertumbuhan,  kandungan  Pigmen,
Wahyudi,  D. Chilmawati, I. Samidjan, Suminto/ Jurnal Sains Akuakultur Tropis Ed. Maret : 6(2022)1: 129-137.    eISSN:2621-0525
TERAKREDITASI PERINGKAT 4, NO SK:200/M/KPT/2020
danProtein Spirulina plantesis yang dikultur pada Ca(CO 3 ) 2 dengan Dosis yang Berbeda. Journal of Aquaculture and Fish Health, 9(1): 38-47.
Jackson, G.A. dan J. J. Morgan. 1978. Trace Metal ‐ Chelator Interactions and Phytoplankton Growth in Seawater  Media:  Theoretical  Analysis  and  Comparison  with  Reported  Observations. Limnology and Oceanography, 23 (2): 268-282.
Jati, F., J. Hutabarat dan V. E. Herawati. 2012. Pengaruh Penggunaan Dua Jenis Media Kultur Teknis yang Berbeda Terhadap Pola Pertumbuhan, Kandungan Protein dan Asam Lemak Omega 3 EPA ( Chaetoceros gracilis ). Journal of Aquaculture Management and Technology, 1(1): 221-235.
Muchammad,  A.,  E.  Kardena  dan  A.  Rinanti.  2013. Pengaruh  Intensitas  Cahaya  terhadap  Penyerapan Gas  Karbondioksida  oleh  Mikroalga  Tropis Ankistrodesmus sp.  dalam  Fotobioeaktor.  Jurnal Teknik Lingkungan, 19(2): 103-116.
Nisa,  K.,  S.  Hasibuan  dan  Syafriadiman.  2020.  Pengaruh  Salinitas  Berbeda  terhadap  Kepadatan  dan Kandungan Karotenoid Dunaliella salina. Jurnal Perikanan dan Kelautan, 25(1): 27-35. Nur, A., D. A. Widyany dan L. Ruliaty. 2017. Manajemen Pakan pada Produksi Benih Udang Jerbung Penaeus merguiensis. Jurnal Perekayasaan Akuakultur Indonesia, 1(1): 43-56. Prayitno,  J.,  I.  K.  Rahmasari  dan  A.  Rifai.  2020.  Pengaruh  Interval  Waktu  Panen  terhadap  Produksi Biomassa Clorella sp.  dam Melosira sp.  untuk  Penangkapan  Karbon  secara  Biologi.  Jurnal Teknologi Lingkungan, 21(1):23-30.
Qingtian,  Z.  and  H.  Guikum.  2011.  Effect  of  Nitrogen  to  Phosphorus  Ratios  on  Cell  Proliferation  in Marine Micro Algae. Chinese Journal of Oceanology and Lymnology. 27(4): 734-740.
Rasdi,  N.  W.  And  J.  G.  Qin.  2014.  Effect  of  N:P  Ratio  on  Growth  and  Chemical  Composition  of Nannochloropsis oculata and Tisochrysis lutea . J. Appl Phycol. 1-10. Regista,  Ambeng,  M.  Litaay  dan  M.  R.  Umar.  2017.  Pengaruh  Pemberian  Vermikompos  Cair Lumbricus rubellus hoffmeister pada Pertumbuhan Chlorella sp. Jurnal Biologi Makassar, 2(1): 1-
8.
Sanjaya,  F.,dan  E.  Danakusuma.  2018.  Evaluasi  Kerja  Pertumbuhan  Diatom  ( Thalassiosira sp.)  yang Diberi Dosis Silikat. Jurnal Satya Minabahari,1(1): 16-27.
Sayin, S., O. Isik, M. Ozturk, L. H. Uslu dan F. Tunan. 2012. Bioavailability of Iron Speciations and EDTA-iron  Complexes  for Thalassiosira  weissflogii. African  Journal  of  Biotechnology,  11(6): 1523-1528.
Suminto. 2005. Budididaya Pakan Alami dan Rotifer. UPT-Pustaka Universitas Diponegoro, 77 hlmn. Suminto. 2009. Penggunaan Jenis Media Kultur Teknis terhadap Produksi dan Kandungan Nutrisi Sel Spirulina plantesis. Jurnal Saintek Perikanan, 4(2): 53-61.
Trikurti,  I.  K.,  A.  A.  M.  D.  Anggraeni  dan  I.  B.  W.Gunam.  2016.  Pengaruh  Jenis  Media  Terhadap Konsenterasi  Biomassa  dan  Kandungan  Protein  Mikroalga Chaetoceros  calcitrans. Jurnal Rekayasa dan Manajemen Argoindustri, 4(2): 13-22.
Sunda, W. G. 2013. Trace Metal Interactions with Marine Phytoplankton. Biological Oceanography, 6: 411-442.
Vega, B. O. A., S. L. Lorenzo dan  J. L. Ruiz. 2004. Effect of Zeolitic Products in the Nutritive Quality of the Diatom Thalassiosira Weissflogii. Hidrobiológica, 14(1): 69-74.
Widiana, A., A. Kusumorini dan S. Handayani. 2013. Potensi Fitoplankton sebagai Sumber Daya Pakan pada PemeliharaanLarva Ikan Mas ( Cyprinus carpio ) di BBPBAT Sukabumi. Jurnal Biologi, 6(2): 108-11.