## The Effect of Calcium Hydroxideon Mortality of Ascaridia galli In Vitro
Pengaruh Kalsium Hidroksida Terhadap Mortalitas Cacing Ascaridia galli In Vitro
1) Inggarsetya Syah Audini, 2) Setiawan Koesdarto, 3) Ira Sari Yudaniayanti, 4) Setyawati Sigit, 2) Sri Mumpuni S, 2) Agus Sunarso
1) Student, 2) Department of Parasitology Veteriner, 3) Department of Veterinary Clinic, 4) Department of Basic Veterinary Medicine. Faculty of Veterinary Medicine, Universitas Airlangga.

## Abstract
Ascaridiasis can be happened in either broiler or hens that can caused decrease of meat and egg productions. Ascaridiasis is a parasite that is most often found in poultry and cause high economic losses. This research was conducted to determine the anthelmintic effect of calcium hydroxide [Ca(OH)₂] on mortality of Ascaridia galli in vitro . In this research used Ascaridia galli with length 7-11 cm without differentiating their sex. The concentrations of calcium hydroxide [Ca(OH)₂] for immersion the Ascaridia galli were 0,01%, 0,02%, 0,025% and 0,03% as treatment group, respectively. The negative control  used  aquadest.  Observation death A.galli worm and analysis of the data at the 2 hour, 4 hour, 6 hour, 8 hour, 10 hour and 12 hour. The result showed that  the  increase  of  concentration  increased  mortality  of Ascaridia  galli .  Percentage  of  death worm A.galli at the 12th hour on concentration ,01%, 0,02%, 0,025% and 0,03% was 20%, 55%, 75% and 100%. ANOVA test showed significant difference between control and treatment group (p<0.05). Duncan multiple range test was seen the best treatment was the biggest mortality in concentration of 0,03%.
Keywords : Calcium hydroxide, Ascaridia galli , Anthelmintic.

## Pendahuluan
Ascaridiasis  merupakan  penyakit  endo- parasit  helminth  pada  peternakan  unggas  yang disebabkan  oleh  cacing Ascaridia  galli ( A.  galli ). Kasus ascaridiasis tergolong tinggi, terutama pada negara  beriklim  tropik  yang  dapat  menimbulkan kerugian  ekonomi  (Beriajaya  dkk.,  2006). Prevalensi di Asia Tenggara (Indonesia, Malaysia, Thailand,  Filipina,  Kamboja,  Vietnam,  Brunei, Laos  dan  Myanmar)antara  41-92%  (Foster,  2013). Di  Indonesia,  prevalensi  tergolong    tinggi  yaitu antara  60-90%  (Margono,  2000).  Kejadian  pada infeksi  berat  dapat  menimbulkan  kematian  dan kerugian karkas sejumlah 2.240.000–3.148.000 ton pertahun (Kusumamiharja, 1992).
Penularan  penyakit  terjadi  secara  langsung yaitu  dengan  tertelannya  telur A.  galli infektif bersama  pakan  atau  minum,  dapat  juga  melalui cacing  tanah  yang  terkontaminasi  oleh  telur A. galli (Subekti  dkk.,  2013).  Anthelmintik  yang
biasanya  digunakan  peternak  dan  dijual  di pasaran  adalah  anthelmintik  sintetis  yang harganya relatif mahal misalnya adalah piperazin dan  albendazole.  Adanya  masalah  tersebut mendorong  upaya  pencarian  anthelmintik  yang murah  dan  mudah  dalam  mendapatkannya (Hastuti,  2008).  Material  kalsium  hidroksida merupakan  zat  padat  yang  berwarna  putih  dan amorf  berasal  dari  kapur  tohor  yang  mudah didapatkan  dengan  harga  yang  murah.  Kapur tohor (quick  lime) dihasilkan  dari  batu  gamping yang  dikalsinasikan  (Sukandarrumidi,  1999; Widowati, 2006).
Kalsium  hidroksida  dapat  melepaskan  ion OH - yang  dapat  menginaktifasi  enzim  dan merusak  membran  sitoplasma  dengan  jalan merusak  fosfolipid  pada  membran  sitoplasma. Inaktifasi enzim dan rusaknya membran sitoplasma  berakibat  terganggunya  transfer nutrisi  dan  menyebabkan  sel  keracunan  ion OH -
(Estrela et al, 1995; Kavitha, 2005).  Terhambatnya kerja  enzim  dapat  menyebabkan  proses  meta- bolisme  pencernaan  cacing  terganggu  sehingga cacing  kekurangan  tenaga.  Membran  sitoplasma cacing  yang  mengalami  kerusakan  dapat  menye- babkan cacing menjadi paralisis dan mati (Tiwow dkk.,  2013).  Berdasarkan  hal  tersebut  diharapkan kalsium  hidroksida  [Ca(OH)2]  mampu  mem- bunuh cacing A. galli .
Bertitik  tolak  dari  hal  tersebut,  diperlukan penelitian  tentang  pengaruh  kalsium  hidroksida [Ca(OH)2]  terhadap  mortalitas  cacing A.  galli  in vitro .

## Bahan dan Metode Penelitian
Penelitian tentang Pengaruh Kalsium Hidroksida  Terhadap  Mortalitas  cacing Ascaridia galli ini  telah  dilakukan  di  Laboratorium Helmintologi,  Departemen  Parasitologi,  Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Airlangga, Surabaya.  Penelitian  berlangsung  pada  bulan November - Desember 2014. Penelitian ini meng- gunakan  cacing A.  galli yang  memiliki  panjang tubuh 7 – 11 cm, yang diambil dari usus halus ayam yang  terinfeksi  cacing A.  galli di  pasar  Larangan, Sidoarjo.  Bahan  yang  digunakan  pada  penelitian ini  adalah  kalsium  hidroksida  [Ca(OH)2]  Merck, NaCl fisiologis dan aquades.
Cacing A.galli diperoleh  dari  bagian  usus halus  ayam.  Cacing  diambil  satu  persatu  dengan menggunakan  pinset  anatomis  melalui  tahapan preparasi.  Usus  ayam  yang  diperoleh  disayat secara  longitudinal  sehingga  isi  usus  dapat diamati.  Cacing A.  galli dewasa  yang  diperoleh ditampung  dan  dibersihkan  didalam  cawan  petri yang  berisi  NaCl  fisiologis.  Penelitian  ini menggunakan cacing A.galli dewasa berukuran 7 – 11 cm tanpa memperhatikan jenis kelamin. Cacing A.  galli yang  digunakan  sebanyak  10  ekor  pada setiap  ulangan  dalam  perlakuan  (Putri,  2007;
Mighra,  2007;  Moerfiah,  Mustabadihardjah  dan Winardiana, 2012).
Pembuatan  larutan  kalsium  hidroksida [Ca(OH)2] dilakukan dengan cara mencampurkan kalsium  hidroksida  [Ca(OH)2]  ditambahkan dengan  aquades.  Pembuatan  larutan  kalsium hidroksida  dilakukan  dengan  empat  konsentrasi yang  berbeda,  yaitu  larutan  kalsium  hidroksida konsentrasi  0,01%,  0,02%,  0,025%,  0,03%  dan kontrol  (aquades  tanpa  kalsium  hidroksida). Untuk melihat cacing A. galli setelah di inkubasi, apakah mati, paralisis atau masih hidup dilakukan pengusikan  pada  cacing  dengan  menggunakan pengaduk  kaca.  Cacing  yang  hidup  ditandai dengan  adanya  pergerakan.  Jika  tidak  terdapat pergerakan  cacing  dipindahkan  dalam  air  panas bersuhu  50ºC.  Apabila  cacing  diam  setelah dipindahkan  dalam  air  tersebut,  hal  ini menunjukkan bahwa cacing mengalami kematian, namun  bila  terdapat  pergerakan  pada  cacing menandakan  bahwa  cacing  mengalami  paralisis (Putri , 2007).
Pada penelitian ini menggunakan Rancangan Acak  Lengkap  (RAL)  (Kusriningrum,  2010).  Data yang  diperoleh  dianalisis  dengan  uji  F  (ANOVA) yang  kemudian  dilanjutkan  dengan  uji  jarak berganda  Duncan  untuk  menemukan  perlakuan mana  yang  memberikan  hasil  terbaik  dari penelitian  ini.  Analisis  statistik  menggunakan Statistical Program Service and Solution (SPSS) for windows 21 (Santoso, 2000).

## Hasil dan Pembahasan
Hasil  kumulatif  kematian  cacing A.  galli dapat  dilihat  pada  Tabel  4.1  .  Berdasarkan  hasil tersebut  didapatkan  rata-rata  persentase  kemati- an  cacing A.  galli pada  semua  perlakuan  dalam waktu pengamatan jam ke-2, ke-4, ke-6, ke-8, ke- 10  dan  ke-12  adalah  seperti  yang  disajikan  pada Tabel 1 dan Gambar 1.
Tabel 1 . Persentase Kematia3n Cacing Ascaridia galli
Keterangan LKH 0,01%: larutan kalsium hidroksida 0,01%, LKH 0,02%: larutan kalsium hidroksida 0,02%, LKH 0,025%: larutan kalsium hidroksida 0,025%, LKH 0,03%: larutan kalsium hidroksida 0,03%.
Perlakuan
Waktu Pemeriksaan
Jam ke-2 Jam ke-4 Jam ke-6 Jam ke-8 Jam ke-10 Jam ke-12 Aquades 0 0 0 0 0 0 LKH 0,01% 0 2,5 7,5 12,5 17,5 20 LKH 0,02% 0 7,5 17,5 30 42,5 55 LKH 0,025% 7,5 15 27,5 47,5 57,5 75 LKH 0,03% 15 25 35 65 85 100
Gambar 1. Grafik mortalitas cacing A. Galli.
Dari  data  persentase  dan  grafik  yang tercantum  dapat  diketahui  bahwa  kematian cacing A.  galli pada  perlakuan  perendaman dengan  larutan  kalsium  hidroksida  0,03% merupakan yang paling banyak dan paling cepat, sedangkan  pada  perendaman  aquades  tidak menunjukkan adanya kematian hingga jam ke-12. Analisis  statistik  dengan  Anova  serta  uji  jarak Duncan untuk jam  ke-2, jam ke-4, jam ke-6, jam ke-8,  jam  ke-10  dan  jam  ke-12  dapat  dilihat  pada Gambar 1
Hasil  pengamatan  jam  ke-2  dapat  diketahui bahwa  tidak  ada  kematian  dari  cacing A.  galli pada perlakuan dengan aquades, larutan kalsium hidroksida  0,01%  dan  larutan  kalsium  hidroksida 0,02%,  namun  telah  terdapat  cacing  yang mengalami  kematian  pada  larutan  kalsium hidroksida  0,025%  dan  pada  larutan  kalsium hidroksida  0,03%.  Hasil  analisis  statistik  pada pengamatan  jam  ke-2  menggambarkan  tidak adanya  perbedaan  yang  nyata  antara  perlakuan dengan  perendaman  aquades,  larutan  kalsium hidroksida  0,01%  dan  larutan  kalsium  hidroksida 0,02%  namun  berbeda  nyata  pada  perlakuan perendaman  menggunakan  larutan  kalsium hidroksida 0,025% dan larutan kalsium hidroksida 0,03%  yang  berarti  kedua  larutan  ini  sudah memberikan pengaruh terhadap mortalitas cacing A. galli pada jam ke-2.
Hasil pengamatan pada jam ke-4 menunjukkan  telah  ada  kematian  dari  cacing A. galli baik  pada  perendaman  larutan  kalsium hidroksida  0,01%,  larutan  kalsium  hidroksida 0,02%,  larutan  kalsium  hidroksida  0,025%  dan larutan  kalsium  hidroksida  0,03%,  sedangkan
pada  perendaman  aquades  tidak  terdapat  ke- matian  cacing A.  galli .  Analisis  statistik  pada pengamatan jam ke-4 menunjukkan bahwa tidak ada  perbedaan  yang  nyata  antara  perlakuan dengan  perendaman  aquades,  larutan  kalsium hidroksida  0,01%  dan  larutan  kalsium  hidroksida 0,02%  namun  berbeda  nyata  pada  perlakuan perendaman  menggunakan  larutan  kalsium hidroksida 0,025% dan larutan kalsium hidroksida 0,03%    yang  berarti  larutan  kalsium  hidroksida 0,01% dan larutan kalsium hidroksida 0,02% tidak terlalu  memberikan  pengaruh  pada  jam  ke-4 karena  kedua  larutan  ini  tidak  berbeda  nyata dengan aquades.
Hasil analisis statistik pada pengamatan jam ke-6,  ke-8,  ke-10  dan  ke-12  menunjukkan  bahwa terdapat  perbedaan  yang  nyata  antara  perlakuan perendaman aquades, larutan kalsium hidroksida 0,01%, larutan kalsium hidroksida 0,02%, larutan kalsium  hidroksida  0,025%  dan  larutan  kalsium hidroksida  0,03%.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa tiap  perlakuan  memiliki  pengaruh  yang  berbeda terhadap mortalitas cacing A. galli pada jam  ke-6, ke-8, ke-10 dan ke-12.
Persentase kematian cacing A.galli pada jam ke-12 seperti yang disajikan pada Tabel 1, dengan perendaman  larutan  kalsium  hidroksida  0,01% sebesar  20%,  perendaman  larutan  kalsium hidroksida  0,02%  sebesar  55%,  perendaman larutan  kalsium  hidroksida  0,025%  sebesar  75% dan  perendaman  larutan  kalsium  hidroksida 0,03% sebesar 100%. Konsentrasi larutan kalsium hidroksida  yang  memberikan  pengaruh  terbaik terhadap mortalitas cacing A. galli adalah larutan kalsium  hidroksida  0,03%,  hal  itu  dikarenakan larutan kalsium hidroksida 0,03% dapat menyebabkan kematian 100% pada cacing A. galli . Kalsium hidroksida pada konsentrasi tertentu  melepaskan  ion  OH ‾ yang  akan menginaktifasi  enzim  dan  merusak  membran sitoplasma.  Semua  sel  hidup  baik  eukariotik maupun  prokariotik  memiliki  lapisan  yang disebut  membran  sitoplasma  yang  mengatur keluar    masuknya  material  yang  diperlukan. Membran  sitoplasma  eukariotik  dan  prokariotik tersusun  atas  lapisan  fosfolipid  dan  protein. Protein  merupakan  bagian  yang  terdapat  pada membran  sitoplasma  yang  berfungsi  sebagai pembawa yang melayani transfer nutrisi. Kalsium hidroksida  dapat  menginaktifasi  enzim  yang  ada didalam  membran  sitoplasma  dan  merusak
2 4 6 8 10 12 Aquades LKH 0,01% LKH 0,02% LKH 0,025% LKH 0,03% Pe rse n Jam ke - 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
fosfolipid yang menyebabkan rusaknya membran sitoplasma.  Ketika  membran  sitoplasma  rusak, maka  berakibat  terganggunya  transfer  nutrisi sehingga sel mengalami keracunan ( Estrela et al ., 1995;  Kavitha.,  2005;  Lieberman,  2013;  Kimball, 2008). Menurut Tiwow dkk, (2013), membran sito- plasma  cacing  yang  rusak  dapat  menyebabkan cacing  paralisis  dan  terhambatnya  kerja  enzim dapat menyebabkan  proses  metabolisme pencer- naan  cacing  terganggu  sehingga  cacing  keku- rangan  nutrisi  yang  pada  akhirnya  cacing  akan mati karena kekurangan energi.
Hasil  pengamatan  terhadap  perendaman cacing A. galli dengan aquades pada jam ke-2, ke- 4, ke-6, ke-8, ke10, dan ke-12 menunjukkan bahwa tidak  terdapat  cacing A.  galli yang  mati  hingga pada jam ke-12.

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  dan  rangkaian pembahasan yang telah diuraikan, maka diperoleh kesimpulan  bahwa  larutan  kalsium  hidroksida 0,01%,  0,02%,  0,025%,  dan  0,03%  memiliki pengaruh terhadap mortalitas cacing A. galli dan larutan  kalsium  hidroksida  0,03%  merupakan konsentrasi  yang  menyebabkan  kematian  100% pada cacing A. galli pada jam ke-12 secara in vitro .

## Daftar Pustaka
Kusumamihardja,  S.  1992.  Parasit  dan  Parasitosis Pada  Ternak  dan  Hewan  Piaraan  di  Indo- nesia.  Pusat  Antar  Universitas  IPB.  Bogor. 435.
Lieberman, M and Allan D.M. 2013. Basic Medical Biochemistry.  Lippincolt  Williams  and Wilkins. Philadelphia. 154.
Margono, S.S. 2000. Nematoda Usus, Dalam Buku: Ganda  Usaha.  Parasitologi  Kedokteran  Edisi ke 3. Balai Penerbit FKUI. Jakarta. 9-26.
Mighra,  B.A.  2007.  Uji  Efektifitas  Daya  Anthel- mintik  Perasan  Buah  Segar  dan  Infus  Daun ( Ananas comosus L.) Terhadap Ascaridia galli Secara  Invitro.  Fakultas  Kedokteran.  Univ- ersitas Diponegoro. 9.
Moerfiah,  Mustabadihardjah  dan  Y.  Winardiana.
2012. Efektivitas Ekstrak Etanol Biji Labu
Merah ( Cucurbita moschata ) Sebagai Anthelmintik  Terhadap  Cacing Ascaridia galli Secara In Vitro Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam. Universitas Pakuan.
7.
Putri, DP. 2007. Uji Efektifitas Daya Anthelmintik Carica  papaya (Infus  Akar,  Infus  Biji,  Infus daun) Terhadap Cacing Ascaridia galli Secara In  Vitro  [Skripsi].  Fakultas  Kedokteran. Universitas Diponegoro. 8.
Santoso,  S.  2000.  SPSS  Statistik  Parametrik.  PT. Elex  Media  Komputindo  Kelompok  Grame- dia. Jakarta.169-173.
Subekti,  S.  1990.  Khasiat  Pemberian  Rimpang Temulawak  ( Curcuma  xanthoriza Roxb) Terhadap  Ascaridiasis  Pada  Ternak  Ayam. Lembaga  Penelitian.  Universitas  Airlangga, Surabaya.
Subekti,  S.,  S,Koesdarto,  Kusnoto,  S.M  Sosiawati,
H.  Puspitasari.  2005.  Penuntun  Praktikum Helmintologi  Veteriner.  Laboratorium  Hel- mintologi.  Bagian  Parasitologi.  Fakultas Kedokteran  Hewan.  Universitas  Airlangga. Surabaya. 31.
Subekti, S., S.Koesdarto, S.Mumpuni dan Kusnoto. 2013.  Buku  Teks  Helminthiasis  Veteriner. Surabaya:  Pusat  Penerbitan  dan  Percetakan Universitas Airlangga. 79-82.
Sukandarrumidi,  1999.  Bahan  Galian  Industri. Yogyakarta : Universitas Gadjah Mada Press. 56.
Tiwow, D.W.Bodhi dan N.S.Kojong. 2013. Uji Efek Ekstrak  Etanol  Biji  Pinang  (Arecha  catechu) Terhadap  Cacing Ascaris  lumbricoides dan Ascaridia  galli secara  in  vitro.  Jurnal  Ilmiah Farmasi. UNSRAT Vol.2 No.2. 76.
Widowati,  E.  2006.  Pengaruh  Lama  Perendaman Dengan  Larutan  Kapur  Tohor  [Ca(OH)2] Pada Kulit Buah Manggis Terhadap Kualitas Kembang  Gula  Jelly  (Skripsi).  Fakultas  Tek- nik Universitas Negeri Semarang. 14.