Biofaal Journal; Vol 2, No 2. Desember 2021. Pp 99 – 105. ISSN: 2723-4959 (online)

## EFEK  BIOLARVASIDA  EKSTRAK  ETANOL  DAUN  CENGKEH
( Syzygium aromaticum L.) PENYEBAB MORTALITAS
LARVA NYAMUK Anopheles sp.
Adrien Jems Akiles Unitly 1*) , Debby D. Moniharapon 2) , Fenska Violenta Sapulette 3)
1*,2,3 Jurusan  Biologi,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Universitas  Pattimura, Ambon 1* Corresponding Author e-mail: adebiologi@yahoo.co.id
Informasi
Abstrak.
Kata kunci.
Biolarvasida, Cengkeh, Larva Anopheles sp. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  efek  biolarvasida  ekstrak  etanol  daun cengkeh  penyebab  mortalitas  nyamuk Anopheles sp.  dan  dosis  ekstrak  etanol  daun cengkeh yang efektif sebagai biolarvasida. Penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap  (RAL),  dimana  525  larva Anopheles sp.  dibagi  dalam  7  kelompok  dengan  3 kali  ulangan,  larva Anopheles sp.  diletakan  dalam  21  gelas  plastik,  dimana  masing- masing  plastik  berisi  25  ekor  larva Anopheles sp.  Hasil  yang  diperoleh  dianalisis dengan  Analysis of Variance (ANOVA) dan dilanjutkan dengan uji duncan pada tarif nyata  =  0.05  menggunakan  perangkat  lunak  SAS  dan  dilanjutkan  dengan  uji  beda nyata terkecil untuk mengetahui perbedaan perlakuan yang diberikan. Hasil Penelitian menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  cengkeh  kosentrasi  0.50%,  1%,  1.50%,  2%, 4%,  6%  memiliki  efek  biolarvasida  penyebab  mortalitas  larva  nyamuk Anopheles sp. dengan  konsentrasi  yang  efektif  adalah  6%  dan  persentasi  mortalitas  larva  nyamuk Anopheles sp. sebesar 100% pada jam ke-9.
Received: 3 September 2021 Accepted:29 November 2021 ©2021 Jurusan Biologi FMIPA Unpatti, IAIFI Cab. Ambon

## A. PENDAHULUAN
Indonesia  berada  pada  daerah  tropis  yang  sering  dijangkiti  penyakit,  salah  satunya ialah  penyakit  malaria.  Menurut  survei  kesehatan  rumah  tangga  Indonesia  terdapat  15  juta kasus malaria. Pada tahun 2001 kasus malaria sebanyak 38.000 jiwa (Depkes RI, 2001), pada tahun  2006  dengan  jumlah  2,5  juta  jiwa,  Pada  tahun  2009  sebanyak  1.143.024    jiwa, selanjutnya  pada  tahun  2012  sebanyak  417.819.  Prevalensi  penyakit  malaria  di  Indonesia timur saat ini terdapat 70% kasus malaria, terutama diantaranya Papua, Papua Barat, Maluku, Maluku  Utara,  Sulawesi  dan  Nusa  Tenggara.  Vektor  malaria  di  setiap  daerah    berbeda-beda dan  bersifat  lokal  spesifik  (Depkes RI, 2007).
Upaya pengendalian  nyamuk Anopheles sp . yang  merupakan  vektor  penyakit  ini perlu    dilakukan.  Selain    tindakan    pengobatan    terhadap    penderita  juga  perlu  dilakukan pengendalian  vector  di  lingkungan.    Hal  ini    merupakan    usaha    yang    penting    untuk menurunkan  kasus  malaria. Pada umumnya upaya pengendalian malaria masih terfokus pada penemuan  dan  pengobatan  penderita,  sedangkan  aspek  vektornya  belum  dilakukan  secara maksimal.  Dengan  demikian,  observasi  penting  dilakukan  tentang  beberapa  aspek-aspek bionomic  mengenai  dinamika  aktifitas Anopheles sp.  di  daerah    insiden  tinggi  malaria. Pengembangan  insektisida  alami  merupakan  solusi  terbaik  saat  ini.  Karena  penggunaan insektisida kimia secara terus menerus dapat menyebabkan pencemaran lingkungan, kematian beberapa  jenis  makluk  hidup,  dan  resistensi  dari  serangga  yang  di  berantas  (Yunita et  al ., 2009).
Insektisida    alami    memiliki  bahan    dasar  dari    tumbuhan    yang  bersifat  toksik terhadap serangga dan  mudah terdegradasi  sehingga tidak mencemari  lingkungan dan  relatif aman  bagi  manusia  karena  akan  cepat  menghilang  di  alam  (Kardinan,  2003).  Salah  satu tumbuhan  yang sering digunakan sebagai  insektisida adalah  cengkeh  ( Syzygium aromaticum L.). Cengkeh   digunakan secara empiris di  Maluku sebagai  penolak nyamuk dengan metode pengasapan (membakar daun cengkeh) untuk membunuh nyamuk yang merupakan penyebab vektor penyakit malaria, sehingga di duga cengkeh juga dapat digunakan sebagai biolarvasida alami,  karena  dalam  senyawa  cengkeh  terkandung  beberapa  senyawa  kimia,  diantaranya adalah eugenol, flavonoid, saponin, dan tanin. Eugenol dapat digunakan sebagai antiserangga. Menurut  Kardinan  (2003),  tanaman  cengkeh  dapat  digunakan  sebagai  insektisida  alternatif untuk membunuh vektor malaria karena mengandung minyak atsiri dan eugenol .
Tanaman  cengkeh  ( Syzygium  aromaticum L.)  mengandung  senyawa-senyawa eugenol, caryophyllene, furfural, vanillin, methyl salicylate, pyrocatechol, methyl ketone, dan valeric aldehydes, eugenin, isoeugenitol, isoeugenitin, eugenitin, tannin, mucilage, sitosterol, estigmaterol,  resins.  Selain  itu  cengkeh  mengandung flavonoid , saponin dan  tannin.  Semua senyawanya berperan sebagai biolarvasida. Hal ini sejalan dengan hasil penelitian Kurniawan dan  Pitra  (2013)  ;  Noorhamdani  dan  Rosalia  (2014)  bahwa flavonoid , saponin dan tannin merupakan kandungan fitokimia yang berperan sebagai biolarvasida. Hal ini diakui Aprilianti (2017),    bahwa  kandungan  yang  sama  seperti flavonoid , saponin dan tannin memiliki  efek biolarvasida,  namun  demikian  perlu  dilakukan  uji  laboratorik  untuk  mengetahui  efek biolarvasida  ekstrak  etanol  daun  cengkeh  penyebab  mortalitas  nyamuk Anopheles sp.  dan dosis ekstrak etanol daun cengkeh yang efektif sebagai biolarvasida

## B. METODE PENELITIAN
Rancangan Penelitian. Penelitian ini dilakukan November 2020 sampai Maret 2021 pada  laboratorium  Zoologi  FMIPA  Universitas  Pattimura,  menggunakan  rancangan  acak lengkap (RAL), dibagi 7 kelompok konsentrasi dengan 3 kali ulangan.
Sampel Penelitian adalah larva Anopheles sp. dimana dalam penelitian ini digunakan 525  larva Anopheles sp.  yang  diletakan  dalam  21  gelas  plastik.  21  gelas  plastik  adalah  7 kelompok konsentrasi yang diulangi 3 kali. Masing-masing gelas plastik berisi 25 ekor larva Anopheles sp. (Tabel 1)
Tabel 1. Perlakuan ekstrak etanol daun cengkeh ( Syzygium aromaticum L . ) Konsentrasi Ulangan (Individu) 1 2 3 A A1 A2 A3 B B1 B2 B3 C C1 C2 C3 D D1 D2 D3 E E1 E2 E3 F F1 F2 F3 G G1 G2 G3
Keterangan :  A : Kontrol negatif, B: Konsentrasi 0,50, C: Konsentrasi 1%, D: Kosentrasi 1,50,  E: Konsentrasi 2%, F; Kosentrasi 4% , G: Konsentrasi 6% (Sapulette et al ., 2019).
Pembuatan  Ekstraksi. Daun  cengkeh  diambil  kemudian  dicuci  sebanyak  1  kg kemudian  dikeringanginkan  kemudian  dihaluskan  dengan  menggunakan  blender.  Setelah didapatkan  serbuk  daun  cengkeh  kemudian  dilanjutkan  dengan  proses  ekstraksi  dengan menggunakan metode maserasi. Prosedur pembuatan sebagai berikut :
1. Ditimbang sebanyak 250g serbuk daun cengkeh dan dimasukkan ke dalam erlenmeyer.
2. Setelah itu, ditambahkan 1 liter etanol 70% dan didiamkan selama 24 jam.
3. Setelah  24  jam,  disaring  menggunakan  kertas  saring  Whatman  0,2  sehingga  diperoleh ekstrak cair daun cengkeh. Residu ekstraksi diulang sebanyak 3x.
4. Ekstrak cair dari daun cengkeh yang telah diperoleh, kemudian dipekatkan dengan rotary evaporator.
5. Hasil pemekatan tersebut, diperoleh ekstrak etanol pekat daun cengkeh.
Pengamatan  Larvasida dilakukan  pada  sampel  dengan  prosedur  kerja  sebagai berikut :
1. Penelitian ini menggunakan konsentrasi  0% (A), 0.5 (B), 1% (C), 1.5% (D), 2% (E), 4% (F),  dan  6%  (G).  Daun  cengkeh  ditimbang  500g  dan  untuk  membuat  konsentrasi  0.5% dilakukan  sebagai  berikut  :  ekstrak  daun  cengkeh  ditimbangsebanyak  15g  dimasukan kedalam  beaker  gelas  dan  ditambahkan  aquades  sebanyak  100  ml,  sedikit  demi  sedikit sambil  diaduk  hingga  larutan  menjadi  menyatu.  Selanjutnya  prosedur  yang  sama dilakukan  untuk  membuat  konsentrasi    1%,  1.5%,  2%,  4%,  dan  6%.  Sedangkan  untuk kontrol digunakan aquades sebanyak 100 ml.
2. Ekstrak  daun  cengkeh  ( Syzygium  aromaticum L.)  dimasukkan  ke  dalam  gelas-gelas plastik.  Setelah  itu  masukkan  larva Anopheles sp.  sejumlah  25  ekor  pada  setiap konsentrasi sedangkan pada kelompok kontrol diberikan aquades.
3. Dilabelin setiap gelas-gelas plastik yang sudah ada ekstraksi dan larva Anopheles sp.
4. Pengamatan  dilakukan  selama  3  jam  sekali  dan  dicatat  jumlah  stadium  larva  yang  mati pada setiap perlakuan selama 9 jam.
Analisis data. Hasil yang diperoleh dianalisis dengan Analysis of Variance (ANOVA) dan  dilanjutkan  dengan  uji  duncan  pada  tarif  nyata  =  0.05  menggunakan  perangkat  lunak SAS  dan  dilanjutkan  dengan  uji  beda  nyata  terkecil  untuk  mengetahui  perbedaan  perlakuan yang diberikan.

## C. HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil
Hasil penelitian menunjukkan terdapat variasi mortalitas larva nyamuk Anopheles sp . yang  tersaji  pada  tabel  2.  Perlakuan  pemberian  esktrak  etanol  daun  cengkeh  ( Syzygium aromaticum L.)  konsentrasi  0.5%,  1%  dan  1.5%  pada  larva Anopheles sp . untuk  waktu pengamatan jam ke-3 tidak berbeda nyata dengan kontrol (P>0.05), konsentrasi 0.5% dan 1% pada  larva Anopheles sp  untuk  waktu  pengamatan  jam  ke-3  dan  ke-6  tidak  berbeda  nyata dengan  kontrol  (P>0.05),  konsentrasi  2%,  dan  4%,  dan  6%  pada  jam  ke-3  dan  konsentrasi 1.5%, 2%, 4%, dan 6% pada jam ke-3 dan ke-6 menunjukkan perbedaan nyata (P<0.05), dan perlakuan  konsentrasi  0.5%,  1%,  1.5%,  2%,  4%,  dan  6%  menunjukkan  perbedaan  nyata (P<0.05).  Hasil  penelitian  pada  tabel  2,  menunjukkan  rata-rata  mortalitas  larva  nyamuk Anopheles sp. untuk waktu pengamatan pada konsentrasi 0% untuk jam ke-3 sebesar 0.0, jam ke-6 sebesar 0.0 dan jam ke-9 sebesar 1.3.
Tabel 2. Rataan  mortalitas  larva Anopheles sp.  pada  berbagai  konsentrasi  ekstrak  daun cengkeh ( Syzygium aromaticum L.) setiap 3 jam.
Konsentrasi Ekstrak Etanol Daun Cengkeh ( Syzygium aromaticum L.) Waktu Pengamatan (jam ke-i) Persentasi Mortalitas Jam ke-9 (%) 3 6 9 A = 0% 0.0 ± 0.01 d 0.0 ± 0.01 c 1.3 ± 0.02 e 5.2 B = 0.5% 0.3 ± 0.03 d 2.0 ± 0.02 c 12.0 ± 0.03 d 76.4 C = 1% 0.6 ± 0.02 d 3.0 ± 0.02 c 19.6 ± 0.01 c 78.4 1D = 1.5% 1.3 ± 0.01 cd 7.0 ± 0.02 b 21.3 ± 0.01 b 85.2 E = 2% 3.3 ± 0.03 bc 8.0 ± 0.04 b 22.3 ± 0.02 b 89.2 F = 4% 5.3 ± 0.02 ab 20.6 ± 0.01 a 24.3 ± 0.02 a 97.2 G = 6% 7.6 ± 0.02 a 21.3 ± 0.02 a 25.0 ± 0.01 a 100
Keterangan :  Angka yang diikuti huruf yang berbeda pada kolom yang sama menunjukkan berbeda nyata (P < 0.05). PM : Persentasi mortalitas.
Rata-rata  mortalitas  larva  nyamuk Anopheles sp.  untuk  waktu  pengamatan  pada konsentrasi 0.5% untuk jam ke-3 sebesar 0.3, jam ke-6 sebesar 2.0 dan jam ke-9 sebesar 12.0. Rata-rata  mortalitas  larva  nyamuk Anopheles sp . untuk  waktu  pengamatan  pada  konsentrasi 1%  untuk  jam  ke-3  sebesar  0.6,  jam  ke-6  sebesar  3.0  dan  jam  ke-9  sebesar  19.6.  Rata-rata mortalitas larva nyamuk Anopheles sp . untuk waktu pengamatan pada konsentrasi 1.5% untuk jam  ke-3  sebesar  1.3,  jam  ke-6  sebesar  7.0  dan  jam  ke-9  sebesar  21.3.  Rata-rata  mortalitas larva  nyamuk Anopheles sp . untuk  waktu  pengamatan  pada  konsentrasi  2%  untuk  jam  ke-3 sebesar  3.3,  jam  ke-6  sebesar  8.0  dan  jam  ke-9  sebesar  22.3.  Rata-rata  mortalitas  larva nyamuk Anopheles sp . untuk waktu pengamatan pada konsentrasi 4% untuk jam ke-3 sebesar 5.3,  jam  ke-6  sebesar  20.6  dan  jam  ke-9  sebesar  24.3.  Rata-rata  mortalitas  larva  nyamuk Anopheles sp . untuk waktu pengamatan pada konsentrasi 6% untuk jam ke-3 sebesar 7.6, jam ke-6 sebesar 21.3 dan jam ke-9 sebesar 25.
Hal  ini  memperlihatkan  bahwa  semakin  meningkat  konsentrasi  ekstrak  etanol  daun cengkeh  ( Syzygium aromaticum L.), maka semakin  meningkat  pula mortalitas larva  nyamuk Anopheles sp. (P<0.05). Meningkatnya mortalitas larva nyamuk Anopheles sp. sejalan dengan bertambahnya konsentrasi dan waktu perlakuan (Gambar 1).
Gambar 1. Grafik mortalitas larva nyamuk Anopheles sp. pada setiap kelompok perlakuan
Persentasi  mortalitas  larva  nyamuk Anopheles sp . pada  konsentrasi  0%  (kontrol) sebesar  1.7%,  pada  konsentrasi  0.5%  mortalitas  larva  nyamuk Anopheles sp . sebesar  19%,
0 5 10 15 20 25 30 3 6 9 M o rt a li ta s L a rv a N y a m u k Waktu Pengamatan Mortalitas Larva Nyamuk 0% 0.50% 1% 1.50% 2% 4% 6%
pada konsentrasi 1% mortalitas larva nyamuk Anopheles sp . sebesar 31.0%, pada konsentrasi 1.5% mortalitas larva nyamuk Anopheles sp . sebesar 39.5%, pada konsentrasi 2% mortalitas larva  nyamuk Anopheles sp . sebesar  44.8%,  pada  konsentrasi  4%  mortalitas  larva  nyamuk Anopheles sp . sebesar  67.0%  dan  konsentrasi  6%  mortalitas  larva  nyamuk Anopheles sp . sebesar 100%. Hal ini membuktikan bahwa semakin tinggi persentasi mortalitas larva nyamuk Anopheles sp . sejalan dengan semakin tingginya konsentrasi seduhan daun cengkeh ( Syzygium aromaticum L.) (P<0.05) (Gambar 1).

## Pembahasan
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  mortalitas  larva  terendah  terlihat  pada konsentrasi  0%.  Hal  ini  dapat  disebabkan  karena  belum  diberinya  ekstrak  etanol  daun cengkeh.  Hasil penelitian menunjukkan ekstrak etanol daun cengkeh pada konsentrasi 0.5%, 1%,  1.5%,  2%,  4  dan  6%    mampu  membunuh  larva,  namun  daya  mematikan  paling  tinggi adalah pada konsentrasi  6%. Adanya konsentrasi ekstrak etanol daun cengkeh menyebabkan adanya  kandungan  bahan  aktif  dalam  zat  tersebut  yang  berfungsi  sebagai  biolarvasida  yang mampu  membunuh  dalam  jumlah  besar  (Kardinan  2003).  Daun  cengkeh  mengandung senyawa  fitokimia  berupa  eugenol,  saponin,  flavonoid  dan  tanin  (Juniawan,  2008).  Aroma khas  minyak  cengkeh  ditandai  dengan  adanya  kandungan  eugenol  (Cahyati,  2005).  Saponin ditandai keberadaannya ketika dikocok akan menimbulkan busa, Tannin ditandai dengan rasa sepat atau astringen ketika kontak dengan lidah.
Flavonoid  pada  daun  cengkeh  di  duga  dapat  masuk  melalui  kutikula  yang  melapisi tubuh larva sehingga dapat merusak sistem pernafasan larva. Hal ini sejalan dengan Hayatie et al ., (2015), yang menyatakan bahwa flavonoid masuk ke dalam tubuh serangga melalui sistem pernapasannya  kemudian  menimbulkan  kerusakan  pada  sistem  pernapasan  sehingga  larva mengalami  kesulitan  dalam  mengambil  oksigen  menyebabkan  terjadinya  mortalitas.  Hal  ini dibuktikan  oleh  Haditomo  (2010),  bahwa  posisi  tubuh  larva  yang  berubah  dari  normal disebabkan  oleh  senyawa  flavonoid  yang  masuk  ke  tubuh  larva  sehingga  mengakibatkan kerusakan,  dan  larva  harus  mensejajarkan  posisinya  dengan  permukaan  air  untuk mempermudah  larva  dalam  mengambil  oksigen.  Polifenol  dalam  daun  cengkeh  di  duga mampu  menginhibisi  pencernaan  serangga  (Pratama  2009;  Cania  dan  Setyaningrum  2013), menyebabkan mortalitas.
Selain  polifenol,  saponin  pada  daun  cengkeh  di  duga  menjadi  racun  di  air  dan mengganggu proses pencernaan larva. Aminah et al ., (2001),  menyatakan saponin memiliki sifat  seperti  detergen  sehingga  mampu  meningkatkan  penetrasi  zat  toksin  karena  dapat melarutkan  bahan  lipofilik  dalam  air.  Saponin  juga  dapat  mengiritasi  mukosa  saluran pencernaan.  Saponin  di  duga  mengandung  hormon  steroid  yang  menurunkan  tegangan permukaan  selaput  mukosa  traktus  digestivus  larva  sehingga  dinding  traktus  digestivus menjadi  rusak.  Saponin  merupakan  senyawa  bioaktif  sebagai  zat  toksin,  termasuk  dalam golongan  racun  kontak  karena  dapat  masuk  melalui  dinding  tubuh  larva  dan  racun  perut melalui  mulut  karena  larva  biasanya  mengambil  makanan  dari  tempat  hidupnya.  Selain  itu, saponin  juga  memiliki  rasa  pahit  sehingga  menurunkan  nafsu  makan  larva  kemudian  larva akan mati karena kelaparan.
Zat  lain  yang  terkandung  dalam  daun  cengkeh  adalah  tanin  yang  di  duga  dapat mengganggu  serangga  dalam  mencerna  makanan  karena  tanin  akan  mengikat  protein  dalam
sistem pencernaan yang diperlukan serangga untuk pertumbuhan sehingga proses penyerapan protein  dalam  sistem  pencernaan  menjadi  terganggu.  Menurut  Utami  (2010),  tannin  dapat menurunkan  kemampuan  mencernakan  sari-sari  makanan  dan  memiliki  kemampuan  untuk bereaksi dengan protein dan mengendapkannya menimbulkan masalah pada penyiapan enzim atau protein lain dari beberapa tumbuhan. Senyawa atau unsur yang bersifat toksik atau racun walaupun dalam konsentrasi rendah apabila masuk ke dalam tubuh larva Anopheles sp. akan menimbulkan  reaksi  kimia  dalam    proses  metabolisme  tubuh  yang  dapat  menyebabkan kematian.  Aminah et  al .  (2001),  menyatakan  bahwa  tanin  membentuk  kompleks  dengan protein  yang  kaya  prolin  yang  menyebabkan  inhibisi  sintesis  protein  sel.  Tanin  dapat menekan nafsu makan, tingkat pertumbuhan, dan kemampuan bertahan.
Diketahui bahwa minyak atsiri yang di dalamnya terdapat eugenol pada daun cengkeh, merupakan  senyawa  yang  dapat  mengganggu  pencernaan  serangga.  Hal  ini  dibuktikan  oleh (Cahyati,  2005)  dan  Panghiyangani  (2009),  dimana  eugenol  pada  minyak  atsiri  dapat mempengaruhi susunan saraf yang dipunyai serangga dan tidak terdapat pada hewan berdarah panas yang dapat menyebabkan kematian serangga tersebut.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  kandungan  fitokimia  daun  cengkeh  memiliki respon cepat terhadap mortalitas larva Anopheles sp . adalah saponin, flavonoid dan tanin yang memiliki  kemampuan  biolarvasida  melalui  mekanisme  merusak  membran  sel  atau mengganggu proses metabolisme larva. Hal ini telah dibuktikan oleh Novizan (2002).

## D. KESIMPULAN
Berdasarkan hasil yang telah diperoleh dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol daun cengkeh  kosentrasi  0.50%,  1%,  1.50%,  2%,  4%,  6%  memiliki  efek  biolarvasida  penyebab mortalitas  larva  nyamuk Anopheles sp.  dengan  konsentrasi  yang  efektif  adalah  6%  dan persentasi mortalitas larva nyamuk Anopheles sp. sebesar 100% pada jam ke-9.

## E. DAFTAR PUSTAKA
Aminah NS,  Sigit SH, Partosoedjono  S, Chairul. S. Rarak, D. Metel.  2001. Prostate sebagai larvisida Aedes aegypti . CDK. 131:7–9 .
Aprilianti  E.C.  2017.  Pengaruh  Ekstrak  Daun  Kersen (Muntingia  calabura L ) terhadap kematian  Larva  instar  III Aedes sp.  Under  graduate  Thesis,  Universitas Muhammadiyah Semarang.
Cahyati  A.I.  2005.  Perbedaan  efektivitas  ekstrak  biji  srikaya  ( Annona  aquamosa  Linn .)  dan minyak  atsiri  serai  wangi  ( Cymbopogon  nardus L.)  terhadap  Kematian  Larva Anopheles aconitus. Jr. Kesehatan. Vol.4 no 54 - 58
Cania E, Setyaningrum E. 2013. Uji efektifitas larvisida ekstrak daun legundi ( Vitex trifolia ) terhadap larva Aedes aegypti . Med J Lampung Univ. 2013;2(4):52–60 .
[Depkes  RI]  Departemen  Kesehatan  RI.  2001. Pedoman  Pemberantasan  Vektor. Jakarta: Direktorat Jenderal Pemberantasan Penyakit Menular dan Penyehatan.
[Depkes RI] Departemen Kesehatan RI. 2007. Ekologi dan Aspek Perilaku Vektor, DIT. JEN. PP & PL. Jakarta.
Haditomo I. 2010. Efek Larvasida Ekstrak Daun Cengkeh ( Syzygium aromaticum L.) terhadap Aedes aegepti . Surakarta, Fakultas kedokteran, Universitas Sebelas maret. Hayatie L, Biworo A, Suhartono E. 2015. Aqueous extracts of seed and peel of Carica papaya against Aedes Aegypti . J Med Bioeng. 2015;4(5):417–21 .
Juniawan. 2008. Pemanfaatan Limbah Serbuk Gergaji Kayu, Sekam padi dan Daun Cengkih Untuk  Pengendalian  Penyakit  Pada  Pisang  di  Desa  Labuan  Pandan,  Kec. Sambelia,Kab.  Lombok  Timur. Balai  Pendidikandan  Pelatihan  NTB,  Laporan  Hasil Kegiatan Pengembangan InovasiPertanian Melalui Inisiatif Lokal.
Kardinan  A.  2011.  Penggunaan  pestisida  nabati  sebagai  kearifan  lokal  dalam  pengendalian hama tanaman menuju sistem  pertanian organic. Pengembangan Inovasi  Pertanian . 4(4):262-278.
Kurniawan,  Pitra.  2013. Manfaat  Berbeda  dari  Buah  dan  Daun  Kersen. Majalah:  Tabloit Cempaka
Noorhamdani H.Y. dan Rosalia. D. 2014. Uji Ekstrak Daun Kersen (Muntingia     calabura) Sebagai  Anti  bakteri  Terhadap  Methicillin  resistant Staphylococus  aureus (MRSA) Secara Invitro Malang Universitas Brawijaya.
Novizan.  2002.  Membuat  dan  Memanfaatkan  Pestisida  Ramah  Lingkungan.  Agromedia Pustaka, Jakarta.
Panghiyangani  R,  Rahmiati,  Ahda  N.  2009.Potensi  ekstrak  daun  dewa  ( Gynura pseudochina Ldc)  sebagai  larvisida  nyamuk Aedes  aegypti vektor  penyakit  demam berdarah dengue. J Kedokt Indones. (2):1–5.
Pratama BA, Astuti D, Ambarwati. 2009. Pemanfaatan ekstrak daun pandan wangi ( Pandanus amaryllifolius Roxb.) sebagai larvasida alami. J Kesehatan. 2(2):115– 24.
Sapulette  FV,  Unitly  AJA,  Moniharapon  DD.  2019.  Aktivitas  Larvasida  Seduhan  Daun Cengkeh( Syzygium aaromaticum L.) Terhadap Mortalitas Larva Nyamuk Anopheles sp. Rumphius Pattimura Biological Journal. 1(2): 5-9.
Utami  S.  2010.  Aktivitas  Insektisida  Bintaro  ( Cerbera  adollam Gaertn)  Terhadap  Hama Eurema sp. Pada Skala Laboratorium. Penelitian Hutan Tanaman . 7(4):211-220
Yunita  E.A.,  Suprapti  N.H,  dan  Hidayat  J.W.  2009.  Pengaruh  Ekstrak  daun  Teklan (Eupatorium riparium) terhadap Mortalitas dan Perkembangan Larva Aedes aegypti. Bioma vol. 11, No. 1, Hal. 11-17. Jurusan Biologi FMIPA.