Penulis
Ema Dewanti 1* , Daniek Viviandhari 1 , Nitia Lonica 1 , Safitri Mutia Isnarningtyas 1
Afiliasi 1 Fakultas Farmasi dan Sains, Universitas Muhammadiyah Prof. DR. HAMKA, Jakarta, DKI Jakarta, 13460, Indonesia
Kata Kunci  antifertilitas  bobot testis
 daun Pepaya ( Carica papaya L.)  kualitas spermatozoa
 vesikula seminalis
Keywords  antifertility
 Papaya leaves ( Carica papaya L.)
 sperm quality
 weight of testis
 vesicle seminalis
Diterima 26 Agustus 2019 Direvisi 16 Oktober 2019 Disetujui 09 April 2020 *Penulis Koresponding
Ema Dewanti email: ema_dewanti@yahoo.com

## ABSTRAK
Daun  pepaya  mengandung  senyawa  alkaloid,  flavonoid,  saponin,  dan  tanin  yang  diduga memiliki efek antifertilitas. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui efek antifertilitas dari ekstrak daun pepaya dengan parameter kualitas sperma serta bobot testis dan vesikula seminalis pada tikus putih jantan galur Sprague Dawley. Penelitian ini dibagi menjadi 2 tahap yaitu  ekstraksi  dan  uji  antifertilitas.  Ekstraksi dilakukan  dengan  metoda  maserasi  bertingkat menggunakan  pelarut  etanol,  etil  asetat  dan  n-heksana.  Perlakuan  uji  antifertilitas  terbagi menjadi  delapan  kelompok  yaitu  2  kelompok  kontrol  dan  6  kelompok  perlakuan  (ekstrak etanol 100 dan 150 mg/kg BB, ekstrak etil asetat 100 dan 150 mg/kg BB, ekstrak n-heksana 100 dan 150 mg/kg BB). Ekstrak daun pepaya diberikan secara oral selama 20 hari. Pada hari ke-21 tikus dibedah dan dianalisa kualitas spermatozoa serta diukur bobot testis dan vesikula seminalis. Data yang didapat diuji secara statistik dengan ANOVA satu arah dan dilanjutkan dengan  uji  Tukey  HSD.  Hasil  penelitian  menunjukkan  ekstrak  n-heksana,  ekstrak  etil  asetat dan ekstrak etanol 70% daun pepaya dapat menurunkan jumlah dan viabilitas spermatozoa serta  menurunkan  bobot  testis  dan  vesikula  seminalis.  Ekstrak  yang  paling  baik  dalam mempengaruhi efek antifertilitas adalah ekstrak etanol 70% dosis 150 mg/kgBB.

## ABSTRACT
Papaya  leaves  contain  alkaloid,  flavonoids,  saponins,  and  tannins  which  are  thought  to have antifertility effects. The purpose of this study was to determine the antifertility effects of papaya  leaf  extract  with  sperm  quality  parameters  and  weight  of  the  testes  and  seminal vesicles  in  male  white  rats  Sprague  Dawley  strain.  This  research  was  divided  into  2  stages, extraction  and  antifertility  test.  Extraction was  carried  out  using maceration methods  using ethanol,  ethyl  acetate  and  n-hexane  solvents.  Antifertility  test  treatments were  divided  into eight groups, 2 control groups and 6 treatment groups (ethanol extract at 100 and 150 mg/kg b.wt.,  ethyl  acetate  extract  at  100  and  150  mg/kg  b.wt.,  n-hexane  extract  at  100  and  150 mg/kg  b.wt.).  Papaya  leaf  extract  is  given  orally  for  20  days.  On  day  21th  the  rats  were dissected  and  analyzed  for  the  quality  of  spermatozoa  and  measured  the  weight  of  the testicles  and  seminal  vesicles.  The  data  obtained  were  tested  statistically  with  one-way ANOVA  and  continued  with  the  Tukey  HSD  test.  The  results  showed  that  n-hexane  extract, ethyl acetate extract and 70% ethanol extract of papaya leaves could reduce the number and viability of  spermatozoa  and  reduce  the  weight  of  the  testes  and  seminal  vesicles.  The  best extract  to  influence  the  antifertility  effect  is  70%  ethanol  extract  dose  150  mg/kg  b.wt.
Efek Antifertilitas dari Ekstrak Daun Pepaya ( Carica  papaya L.) pada Tikus Putih Jantan Galur Sprague Dawley
Antifertility  Effects  of  Papaya  Leaf  Extract  (Carica  papaya  L.)  in  Male  White  Mouse  Sprague  Dawley Strain
Dewanti et al .

## PENDAHULUAN
Indonesia  adalah  negara  dengan  urutan  keempat dengan  jumlah  penduduk  terbesar.  Jumlah  penduduk Indonesia di tahun 2019 diproyeksikan sebesar 267 juta jiwa  (Bappenas  2019).  Laju  pertumbuhan  penduduk yang  meningkat  akan  menyebabkan  pemerintah menghadapi  kesulitan  dalam  menyediakan  kebutuhan dasar  penduduk  seperti  sandang,  pangan,  papan  dan pekerjaan serta pendapatan rakyat. Tingkat pendapatan rendah akan menyebabkan bertambahnya pengangguran,  kemiskinan  dan  keterbelakangan negara (BKKBN 2016).
Masalah  kependudukan  di  Indonesia  yaitu  jumlah penduduk yang besar dan laju pertumbuhan penduduk yang  relatif  masih  tinggi  memerlukan  upaya  untuk mengendalikannya. Untuk menekan jumlah penduduk, pemerintah melalui BKKBN mengatasi dengan berbagai cara  salah  satunya  adalah  dengan  menggalakkan Keluarga  Berencana  (KB).  Pelayanan  KB  hampir semuanya  ditujukan  untuk  wanita  dan  memberikan sedikit  perhatian  dalam  penggunaan  kontrasepsi  bagi pria  yang  efektif  dan  konsisten  serta  masih  adanya pertentangan dengan keyakinan agama  (BKKBN 2016). Faktor  penyebab  kurangnya  keikutsertaan  pria  dalam mengikuti  program  keluarga  berencana  antara  lain adalah  kurangnya  pilihan  jenis  kontrasepsi  pria. Metode  kontrasepsi  yang  digunakan  pria  sampai  saat ini  adalah  kondom,  pantang  berkala,  senggama terputus  dan  vasektomi  (Nuraini et  al. 2012). Berdasarkan  penelitian  Sutinah  (2017)  tentang keikutsertaan pria dalam ber-KB  di daerah Jawa Timur dapat disimpulkan bahwa responden pria beranggapan pria  ber-KB  adalah  tabu  (17%),  vasektomi  dapat menyebabkan  impotensi  (22%)  dan  47%  responden tidak pernah mengikuti sosisalisasi KB.
Spermatozoa  merupakan  sel  gamet  pria  yang dihasilkan  dari  organ  reproduksi  jantan  yang  disebut testis.  Selain  memproduksi  spermatozoa,  testis  juga memproduksi hormon testosteron. Hormon testosteron  merupakan  hormon  androgen  yang  dapat mengendalikan  libido  dan  seks  pada  pria.  Hormon testosteron  bersama  dengan  Lutenizing  Hormone  (LH) dan  Folicle  Stimulating  Hormone  (FSH)  bertanggung jawab terhadap spermatogenesis, pematangan sperma, dan  meningkatkan  ekskresi  fruktosa  oleh  vesikula seminalis  sebagai  nutrisi  utama  spermatozoa  (Guyton &  Hall  2008).  Apabila  terjadi  peningkatan  pada spermatogenesis,  maka  akan  disertai  pula  dengan peningkatan  bobot  dan  volume  testis.  Apabila  terjadi penurunan  pada  spermatogenesis  maka  akan  disertai dengan  penurunan  bobot  dan  volume  testis  karena
pengaruh  berkurangnya  sperma  dari  testis  (Oyewopo et al. 2011).
Infertilitas  ditentukan  oleh  kualitas  spermatozoa. Kualitas  meliputi  beberapa  aspek  yaitu  konsentrasi atau  jumlah  spermatozoa,  viabilitas  (daya  hidup) spermatozoa,  morfologi  (bentuk)  spermatozoa  dan motilitas  spermatozoa.  Infertilitas  dapat  terjadi  jika jumlah  sperma  dibawah  normal,  bentuk  sperma  tidak normal  (memiliki  kepala  atau  ekor  yang  normal) (Guyton & Hall 2008).
Salah  satu  upaya  yang  harus  dilakukan  untuk mensukseskan  program  KB  adalah  mencari  alternatif KB  yang  aman  dengan  menggunakan  bahan  alam sebagai  kontrasepsi.  Penggunaan  bahan  alam  sebagai kontrasepsi  banyak  digunakan  oleh  masyarakat pedesaan  mengikuti  kebiasaan  nenek  moyang terdahulu. Disisi lain meningkatnya jumlah akseptor KB pada  wanita  memberikan  dampak  terhadap  krisis logistik kontrasepsi. Terganggunya pasokan logistik dan menurunnya  jangkauan  pelayanan  kontrasepsi  di wilayah  terpencil  dapat  berakibat  meningkatnya kembali  angka  fertilitas.  Hal  yang  perlu  dilakukan adalah  upaya  untuk  mengoptimalkan  penelitian  untuk mencari  bahan-bahan  kontrasepsi  pria  yang  ideal  dan alami,  khususnya  yang  berasal  dari  bahan  alami (Tasmaya 2000).
Salah  satu  bahan  alam  yang  telah  diteliti  sebagai antifertilitas  adalah  tanaman  pepaya.  Pepaya  ( Carica papaya L.)  adalah  tanaman  yang  mudah  ditemui  dan mudah  ditanam  dalam  pekarangan  rumah.  Ekstrak metanol  biji  pepaya  dengan  dosis  100  mg/kg  BB diketahui  memiliki  efek  antifertilitas  terhadap  tikus jantan.  Biji  pepaya  dapat  menurunkan  motilitas spermatozoa,  menghambat  populasi  spermatogonium dan  spermatosit  primer  tikus  jantan.  Biji  pepaya diketahui mengandung senyawa flavonoid, saponin dan tanin (Agustina & Murwani 2013). Pada penelitian yang dilakukan oleh Nkeiruka et. al. (2013) ekstrak metanol daun pepaya pada dosis 200 mg/kg BB dan 400 mg/kg BB dapat menurunkan jumlah sperma dan meningkatkan  jumlah  sperma  abnormal.  Menurut Nkeiruka et.  al. (2013)  senyawa yang  diduga  berperan adalah  papain,  meskipun  mekanisme  pasti  daun pepaya  dalam  menurunkan  jumlah  sperma  belum sepenuhnya  diketahui.  Daun  pepaya  mengandung senyawa  alkaloid,  flavonoid,  glikosida  dan  tanin (Mahatriny et  al . 2014). Selain itu pada daun dan juga akar  mengandung  polifenol  (Depkes  2000).  Daun pepaya  diketahui  berkhasiat  sebagai  anti  kanker, antioksidan,  antidiabetes,  antifertilitas,  antiinflamasi, anthelmintika,  antibakteri,  antimalaria,  dan  untuk
11
pengobatan  demam  berdarah  (Rahayu  &  Tjitraresmi 2016).  Beberapa  senyawa  yang  diduga  memiliki  efek antifertilitas  adalah  flavonoid  (Prasetyaningrum et  al . 2015), selain itu senyawa alkaloid, isoflavonoid, steroid, triterpen dan xanton (Adnan & Pagarra 2000).
Berdasarkan  hal  tersebut  diatas  perlu  dilakukan penelitian  lebih  lanjut  tentang  efek  daun  pepaya sebagai  obat  KB  pria  dengan  menggunakan  3  pelarut yang  berbeda  kepolarannya  yaitu  n-heksan, etil  asetat dan  etanol  70%.  Ekstraksi  dengan  menggunakan  3 pelarut  ini  bertujuan  untuk  menarik  senyawa  yang berbeda  tingkat  kepolarannya,  sehingga  diketahui senyawa  apa  yang  memiliki  potensi  terbaik  sebagai antifertilitas.  Parameter  yang  dilihat  adalah  kualitas spermatozoa, bobot testis, dan vesikula seminalis tikus putih jantan galur Sprague Dawley .

## METODE

## Bahan
Daun  pepaya  yang  diperoleh  dari  BALITRO  Bogor, tikus  putih  ( Rattus  norvergicus )  jantan  galur Sprague Dawley (SD)  dengan  berat  badan  150-250  gram  yang diperoleh dari Fakultas Peternakan Institut Peternakan Bogor,  heksana,  etil  asetat,  etanol  70%,  ketamine- Hameln  (Combiphar,  Indonesia),  serbuk  Mg  (Merck, Germany), HCL pekat, FeCl 3 (Merck, Germany), NaCl, Na CMC, asam asetat anhidrat, H 2 SO 4 pekat, aquadest.
Alat Maserator, vacuum  rotary  evaporator (Eyela, Japan),  mikroskop  (Novel,  China), Improved  nebauer haemocytometer ( China ) , sonde, alat suntik, timbangan analitik (Ohaus, USA), alat bedah minor, pinset.

## Ekstraksi Daun Pepaya
Daun  pepaya  yang  telah  dibersihkan  kemudian dikeringkan  dan  dibuat  serbuk.  Serbuk  daun  pepaya dimaserasi  bertingkat  menggunakan  cairan  penyari yaitu n- heksana,  etil  asetat  dan  etanol  70%.  Masing- masing    maserat  yang  diperoleh  diuapkan  dengan rotary  evaporator hingga  diperoleh  ekstrak  kental. Standarisasi  ekstrak  untuk  ekstrak  daun  pepaya dilakukan perhitungan rendemen dan penetapan kadar air  (Depkes  2008),  serta  penapisan  fitokimia  (Depkes 1995; Hanani 2014).

## Uji Antifertilitas
Penelitian  uji  antifertilitas  ini  telah  disetujui  oleh Komisi  Etik  Penelitian  Kesehatan  UHAMKA  dengan nomor  02/18.03/004.  Tikus  putih  yang  berjumlah  32 diaklimatisasi  dalam  ruang  kandang  selama  7  hari
untuk  mengadaptasikan  hewan  pada  lingkungan  yang baru  dengan  diberi  minum  dan  pakan  standar.  Pada tahap  ini  dilakukan  pengamatan  terhadap  keadaan umum  dan  penimbangan  berat  badan  setiap  hari  agar diperoleh  tikus  yang  sehat  serta  bobotnya  sesuai dengan kriteria yang ingin dipakai.
Tikus  dibagi  dalam  8  kelompok  perlakuan  yaitu  : kelompok  normal  (I),  kelompok  kontrol  NaCMC  (II) diberikan  dengan  NaCMC  0,5%  dan  6  kelompok perlakuan yang diinduksi dengan ekstrak daun pepaya. Kelompok  perlakuan  tersebut  adalah  kelompok perlakuan  ekstrak  etanol  70%  daun  pepaya  dosis  100 mg/kg BB (III), kelompok perlakuan ekstrak etanol 70% daun  pepaya  dosis  150  mg/kg  BB  (IV),  kelompok perlakuan  ekstrak  etil  asetat  daun  pepaya  dosis  100 mg/kg  BB  (V),  kelompok  perlakuan  ekstrak  etil  asetat daun  pepaya  dosis  150  mg/kg  BB  (VI),  kelompok perlakuan ekstrak heksan daun pepaya dosis 100 mg/kg BB  (VII),  kelompok  perlakuan  ekstrak  heksan  daun pepaya dosis 150 mg/kg BB (VIII).
Tikus diinduksi dengan sediaan uji (sesuai kelompok) 1 kali sehari secara oral selama 20 hari. Pada hari ke 21 tikus  dianestesi  dengan  ketamin  dan  kemudian dilakukan pembedahan untuk menimbang bobot testis dan  vesikula  seminalis  serta  mengamati  kualitas spermatozoa  yaitu  menghitung  jumlah,  viabilitas  dan motilitas spermatozoa.
Bagian  testis  dan  vesika  seminalis  diambil  dan diletakkan diatas kaca arloji kemudian ditimbang. Berat testis  dan  berat  vesikula  seminalis  dihitung  dengan rumus:
% bobot testis = % bobot vesikula seminalis =
Pengambilan  spermatozoa  dilakukan  dengan  cara bagian  epididimis  kiri  dan  kanan  disayat  untuk mengeluarkan spermatozoa. Kemudian bagian epidimis tersebut diletakkan dalam cawan petri yang telah berisi larutan  NaCl  fisiologis  dan  dipotong  kecil-kecil  hingga terbentuk  suspensi.  Suspensi  semen  diambil  sebanyak 10  µL  kemudian  disisipkan  kedalam  ruang  hitung hemasitometer.  Jumlah  spermatozoa  pada  5  kamar hitung  dihitung  dengan  menggunakan  rumus  (Rudini 2016) :
Jumlah sperma  = X sperma/ml
Keterangan : N = jumlah sperma pada kotak A, B, C,D, dan E ( Improved nebauer haemocytometer )
Dewanti et al .
Suspensi  spermatozoa  dipipet  sebanyak  1  tetes, kemudian  diletakkan  pada  objek  glass  dan  ditetesi dengan  pewarna  Eosin  2%  setelah  tercampur  ditutup dengan  cover  glass.  Preparat  diamati  dengan menggunakan  mikroskop.  Amati  jumlah  spermatozoa dalam  5  lapangan  pandang  untuk  memperoleh  200 spermatozoa (Simbolon et al. 2013). Kemudian dihitung jumlah  spermatozoa  yang  hidup  dan  mati.  Viabilitas dihitung dengan rumus :
Viabilitas (%)  =
x 100 %

## Analisa Data
Data  yang  diperoleh  berupa  bobot  testis,  bobot vesikula  seminalis,  jumlah  dan  viabilitas  spermatozoa dianalisa  dengan  uji  analisis  varian  (ANOVA)  satu  arah dengan  taraf  signifikansi  95%  (0,05)  kemudian dilanjutkan dengan uji Tukey HSD untuk membandingkan  perbedaan  antar  kelompok  uji (Priyatno 2012).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi Daun Pepaya
Daun  pepaya  yang  diperoleh  dari  BALITTRO  Bogor, dimaserasi  secara  bertingkat  dengan  cairan  penyari heksan, etil asetat dan etanol 70%. Filtrat dari masing- masing cairan penyari diuapkan dan didapatkan ekstrak kental. Standarisasi ekstrak untuk ekstrak daun pepaya adalah  perhitungan  rendemen  ekstrak  dan  kadar  air. Dari  Tabel  1,  terlihat  ekstrak  n-heksan  memiliki
persentase  rendemen  paling  besar  jika  dibandingkan dengan  ekstrak  kental  etanol  70%  dan  ekstrak  etil asetat.  Berdasarkan  hasil  penapisan  fitokimia,  ekstrak n-heksan diketahui mengandung senyawa alkaloid dan flavonoid,  ekstrak  etil  asetat  mengandung  senyawa alkaloid,  flavonoid  dan  saponin,  sedangkan  ekstrak etanol  70%  mengandung  senyawa  alkaloid,  flavonoid, saponin  dan  tanin.  Hal  ini  menunjukan  kandungan senyawa  dalam  daun  pepaya  yang  digunakan  dalam penelitian ini lebih banyak yang bersifat non polar jika dibandingkan dengan senyawa yang bersifat polar dan semi polar meskipun golongan senyawa dalam ekstrak n-heksan memiliki jumlah yang lebih sedikit.

## Uji Antifertilitas
Setelah  mendapatkan  perlakuan  selama  20  hari sesuai  dengan  kelompoknya  masing-masing,  rata-rata persentase  bobot  testis  dan  vesika  seminalis  pada kelompok  perlakuan  mengalami  penurunan  jika dibandingkan dengan kelompok normal. Data selengkapnya tersaji dalam Tabel 2.
Berdasarkan  analisa  statistik,  didapatkan  data persentase  penurunan  bobot  testis  dan  vesika seminalis  terdistribusi  normal  dan  homogen  sehingga analisa  data  dilanjutkan  dengan  uji  ANOVA  satu  arah dengan tujuan mengetahui apakah ada perbedaan yang bermakna  pada  setiap  kelompok  perlakuan  dengan ketentuan  p  <  0,05.  Hasil  uji  data  persentase  bobot testis dan vesikula seminalis masing-masing

## Tabel 1. Karakteristik Ekstrak Daun Pepaya
Jenis Hasil (g) Rendemen (%) Kadar Air (%) Ekstrak kental n heksana 31,85 6,36 2,75 Ekstrak kental etil asetat 8,28 1,65 1,69 Ekstrak kental etanol 70% 15,70 3,14 5,82 Tabel 2. Rata-rata (%) Bobot Testis Terhadap Berat Badan
Kelompok Perlakuan Persentase Bobot Testis (%) Persentase Vesikula Seminalis (%) Kelompok Normal 1,22 0,76 Kelompok Negatif 1,22 0,74 Ekstrak N-heksana 100 mg/kgBB 1,19 0,67 Ekstrak N-heksana 150 mg/kgBB 1,17 0,62 Ekstrak Etil Asetat 100 mg/kgBB 1,13 0,48 Ekstrak Etil Asetat 150 mg/kgBB 1,13 0,48 Ekstrak Etanol 100 mg/kgBB 1,09 0,36 Ekstrak Etanol 150 mg/kgBB 1,05 0,35
menunjukkan  nilai  p  =  0,000,  maka  nilai  tersebut kurang dari 0,05. Analisa tersebut menunjukkan bahwa ekstrak  daun  pepaya  memiliki  pengaruh  secara bermakna  terhadap  penurunan  bobot  testis  dan vesikula  seminalis.  Uji  statistika  dilanjutkan  dengan  uji Tukey HSD  dengan  tujuan  untuk  mengetahui perbedaan  antara  tiap  kelompok  perlakuan.  Pada  uji Tukey HSD  menunjukkan  adanya  perbedaan  yang bermakna  antara  kelompok  normal  dengan  kelompok ekstrak.  Hal  ini  sesuai  dengan  fungsi  testis  sebagai organ  genital  untuk  memproduksi  sperma.  Penurunan berat  testis  (atrofi)  dapat  mengakibatkan  infertilitas. Hal  ini  dapat  mempengaruhi  proses  spermatogenesis yang  pada  akhirnya  akan  mempengaruhi  jumlah  dan kualitas  sperma  (Mayasari  &  Mardiroharjo  2012). Vesikula seminalis adalah bagian dari organ reproduksi
pria  yang  berfungsi  untuk  menampung  sperma. Semakin sedikit sperma yang ditampung dalam vesikula seminalis maka bobot vesikula seminalis akan semakin mengecil.
Jumlah  spermatozoa  dan  prosentase  viabilitas spermatozoa  dari  tiap  kelompok  dapat  dilihat  pada Gambar  1  dan  2.  Data  jumlah  spermatozoa  dan prosentase  viabilitas  spermatozoa  tiap  kelompok dianalisa menggunakan ANOVA 1 arah dan didapatkan nilai  p  <  0,05,  hal  ini  menunjukkan  bahwa  terdapat perbedaan yang bermakna antar perlakuan. Selanjutnya  dilakukan  uji  Tukey  HSD  dengan  tujuan untuk  mengetahui  perbedaan  antar  tiap  kelompok perlakuan. Berdasarkan uji Tukey menunjukan  jumlah spermatozoa  dan  prosentase  viabilitas  spermatozoa pada  kontrol  normal  tidak  berbeda  bermakna  dengan
Gambar 1 . Histogram Jumlah Spermatozoa
Gambar 2 . Histogram Prosentase Viabilitas Spermatozoa 0 20000000 40000000 60000000 80000000 100000000 120000000 140000000 1 2 3 4 5 6 7 8 Keterangan : 1. Kontrol Normal 2. Kontrol Negatif 3. Ekstrak  n- heksan 100 mg/kgBB
4. Ekstrak n- heksan 150 mg/kgBB
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 1 2 3 4 5 6 7 8

## PROSENTASE VIABILITAS SPERMATOZOA
Keterangan : 1.  Kontrol normal 2.  Kontrol negatif 3.  Ekstrak n-heksan 100 mg/kgBB 4.  Ekstrak n-heksan 150 mg/kgBB 5. Ekstrak etil asetat 100 mg/kgBB 6. Ekstrak etil asetat 150 mg/kg BB 7. Ekstrak etanol
Dewanti et al . kontrol  negatif  akan  tetapi  terdapat  perbedaan  yang signifikan  dengan  kelompok  perlakuan.  Semakin  tinggi dosis  ekstrak  semakin  kecil  jumlah  spermatozoa  dan prosentase  viabilitas  spermatozoa.  Dan  ekstrak  yang memiliki  nilai  rata-rata  jumlah  spermatozoa  dan prosentase viabilitas spermatozoa paling rendah adalah ekstrak etanol dengan dosis 150 mg/kg BB. Penurunan prosentase viabilitas spermatozoa hingga dibawah 40% menunjukan  nilai  semen  yang  kurang  baik  dan berhubungan dengan infertilitas.
Dari  hasil  penelitian  diketahui  ekstrak  daun pepaya yang  diberikan  secara  oral  selama  20  hari  dapat menurunkan  bobot  testis  dan  vesika  seminalis  serta dapat  menurunkan  jumlah  spermatozoa  dan  viabilitas spermatozoa.  Dari  ketiga  ekstrak  daun  pepaya  yang memiliki  aktivitas  paling  baik  sebagai  antifertilitas adalah  ekstrak  etanol.  Hal  ini  diduga  disebabkan  oleh kandungan flavonoid dalam ekstrak  daun pepaya yang tertarik  oleh  pelarut  polar.  Daun  pepaya  memiliki kandungan  metabolit  sekunder  yaitu  flavonoid  yang diduga  dapat  menyebabkan  lemahnya  fungsi  sperma. Flavonoid yang terkandung dalam ekstrak daun pepaya dapat  menyebabkan  peningkatan  antioksidan  dalam tubuh. Flavonoid mampu membentuk Reactive Oxygen Species  (ROS)  yang  dapat  merusak  membran  plasma spermatozoa  (Nayanatara et  al. 2008).  Peningkatan kadar  ROS  yang  melampaui  batas  pertahanan antioksidan  tubuh  akan  menghasilkan  stress  oksidatif sehingga  akan  menyebabkan  kerusakan  sel,  jaringan dan  organ.  Tingginya  kadar  ROS  pada  sperma  dapat mengakibatkan  40,88  %  pasien  pria  mengalami infertilitas  (Sikka  2004).  Stress  oksidatif  juga  akan menurunkan  aktivitas  hormon  steroid  yang  berperan untuk  proses  spermatogenesis  (Maneesh et  al. 2005). Kerusakan  membran  plasma  pada  spermatozoa  dapat menyebabkan  pompa  natrium  tidak  lagi  berfungsi dengan  baik  untuk  mengatur  sirkulasi  zat-zat  dari  dan keluar  sel  sehingga  pewarna  Giemsa  masuk  ke  dalam sel  dan  tetap  tinggal  di  dalam  dan  mewarnai spermatozoa  menjadi  biru  terutama  pada  bagian kepala.  Spermatozoa  yang  hidup  memiliki  membran plasma  yang  masih  utuh  sehingga  pompa  natrium dapat berfungsi dengan baik (Delfita 2014).

## SIMPULAN
Pemberian  ekstrak  daun  pepaya  selama  20  hari pada  tikus  putih  jantan  galur  Sprague  Dawley  dapat menurunkan  jumlah  spermatozoa  dan  viabilitas spermatozoa serta dapat menurunkan bobot testis dan vesika seminalis. Ekstrak daun pepaya yang paling baik dalam  menurunkan  jumlah  spermatozoa,  viabilitas
spermatozoa,  bobot  testis,  dan  vesikula  seminalis adalah ekstrak etanol dengan dosis 150 mg/kg BB.

## DAFTAR PUSTAKA
Adnan  dan  H.  Pagarra.  2000.  Pengaruh  Ekstrak Rimpang  Tumbuhan  Pacing  ( Costus  speciosus J.E. Smith)  terhadap  Fertilitas  Mencit  ( Mus  musculus ) IRC Jantan. Universitas Negeri Makasar.
Agustina  D.  dan  H.  Muwarni.  2013.  Pengaruh Pemberian  Jus  Biji  Pepaya  ( Carica  papaya L.) Terhadap  Rasio  Kolesterol  LDL:  HDLTikus Sprague Dawley Dislipidemia. Jurnal  of  Nutrition  College .  2 (3) :  302 - 311
BKKBN.  2016.  Laporan  Kinerja  Instansi  Pemerintah Badan  Kependudukan  dan  Keluarga  Berencana Nasional 2015. https://www.bkkbn.go.id/po- content/uploads/LAKIP_BKKBN_2016.pdf.  [diunduh 2019 Juni 1)
Delfita R., 2014. Potensi Antifertilitas Ekstrak Teh Hitam Pada  Mencit  ( Mus  musculus L.)  Jantan. Jurnal Sainstek . Batu Sangkar. Vol. VI (2) : 181-188. Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia  (Depkes). 1995. Materi Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta (ID) : Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia  (Depkes).. 2000. Parameter Standard Umum Ekstrak
Tumbuhan    Obat. Jakarta.  (ID)  :  Direktorat  Jendral Pengawasan Obat dan Makanan.
Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia  (Depkes). 2008. Farmakope  Herbal  Indonesia .  Edisi  I.  Jakarta (ID):  Direktorat  Jendral  Pengawasan  Obat  dan Makanan.
Guyton  A.  C  and  J.E  Hall.  2008. Buku  Ajar  Fisiologi Kedokteran .  Edisi  11.  Jakarta  (ID)  :  Penerbit  Buku Kedokteran. EGC.
Hanani E. 2014. Analisis Fitokimia . Jakarta (ID) Penerbit Buku Kedokteran. EGC.
Kementerian  Perencanaan  Pembangunan  Nasional (Bappenas).  2019.    Jumlah  Penduduk  Indonesia 2019 Mencapai 267 Juta Jiwa. https://databoks.katadata.co.id/datapublish/2019/0 1/04/jumlah-penduduk-indonesia-2019-mencapai- 267-juta-jiwa. [diunduh 2019 Juni 1)
Mahatriny NN, Payani NPS. Oka IBM. Astuti KW. 2014. Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Etanol  Daun  Pepaya ( Carica papaya L.) Yang diperoleh Dari Daerah Ubud, Kabupaten  Gianyar  Bali. Jurnal  Farmasi  Udayana, Bali . 3 (1) : 8 - 13
Maneesh  M,  Jayalekshmi  H,  Dutta  S,  Chakrabarti  A, Vasudevan  D.  2005.  Role  of  Oxidative  Stress  in Ethanol  Induced    Germ  Cell  Apoptosis-  an
pada Tikus Putih Jantan Galur Sprague Dawley
15
Experimental    Study  in  Rat .  Ind  J  Clin  Biochem .  20 (2): 62-67
Mayasari  D,  Mardiroharjo  N.  2012.  Pengaruh Pemberian  Boraks  Peroral  Sub  Akut  Terhadap Terjadinya  Atrofi  Testis  Tikus  Putih  Jantan  ( Rattus novergicus Strain Wistar). eJournal UMM . 8 (1): 22 – 27.
Nayanatara  A,  Vinodini  N,  Damodar  G,  Ahamed  B, Ramaswamy  C,  dan  Shabarinath  B.R.  2008.  Role  of Ascorbic  Acid  in  Monosodium  Glutamate  Mediated Effect on Testicular Weight, Sperm Morphology and Sperm  Count,  in  Rat  Testis. Journal  of  Chinese Clinical Medicine . 3 : 1-5
Nuraini  T,  Kusmana  D,  Afifah  E.  2012.  Penyuntikan Ekstrak Biji Carica papaya L. Varietas Cibinong pada Macaca  fascicularis L.  Dan  Kualitas  Spermatozoa
Serta Kadar Hormon Testosteron. Makara
Kesehatan . 16 (1) : 9 – 16.
Oyewopo  AOA,  Oremosu  AE,  Akang  N,  Noronha  CC, Okanlawon  AO.  2011.  Effects  of  Aloe  vera  ( Aloe barbadensis )  Aqueous  Leaf  Extract  on    Testicular Weight,  Sperm  Count  and  Motility  of  Adult  Male Sprague Dawley Rats. J.A.M. Sci . 7 (4) : 31-34.
Prasetyaningrum  N,  Muslichah  S,  Hidayat  A  M.  2015. Pengaruh  Ekstrak  Metanol,  Fraksi  N-Heksan  dan Fraksi  Metanol  Biji  Pepaya  ( Carica  papaya L.) terhadap  Motilitas  Spermatozoa  Tikus.  [Skripsi] Jember (ID) : Universitas Jember.
Priyatno  D.  2012. Belajar  Praktis  Parametrik  Dan  Non Parametrik  Dengan  SPSS .  Yogyakarta  (ID)  :  Gaya Media.
Rahayu S, Tjitraresmi A. 2016. Tanaman Pepaya ( Carica papaya L.)  Dan  Manfaat  Dalam  Pengobatan. Farmaka . 14 (1) : 2-10.
Rudini M. 2016. Efektivitas Antidiabetes Ekstrak Etanol Rimpang  Pacing  ( Costus  speciosus )  dan  Taurin Terhadap  Fertilitas  Mencit  Jantan  ( Mus  musculus ) yang  Diinduksi  Aloksan.  [Tesis].  Bandar  Lampung (ID) : Universitas Lampung.
Sikka S C. 2004. Relative Impact of Oxidative Stress on Male  Reproductive  Function. Curr  Med  Chem .  8  : 851-862.
Simbolon, IS. TM. Lubis. T. M. Adam. 2013. Persentase Spermatozoa Hidup pada Tikus Wistar dan Sprague Dawley. Jurnal Medika Veterina . 7 (2) : 79 - 83 Sutinah.  2017.  Partisipasi  Laki-laki  Dalam  Program Keluarga Berencana di Era Masyarakat Postmodern. Masyarakat,  Kebudayaan  dan  Politik .  30  (3)  :  289- 299
Tasmaya  R.  2000.  Menuju  Paradigma  Baru  Keluarga
Berencana. Warta  Demografi .  30  :  33-45.