## PENGECAMBAHAN BIJI DAN PERTUMBUHAN SEEDLING PHALAENOPSIS HIBRIDA IN VITRO PADA DUA MEDIA DASAR DENGAN ATAU TANPA ARANG AKTIF
Yusnita 1 dan Yivista Handayani 2 1 Laboratorium Ilmu Tanaman, Fakultas Pertanian Universitas Lampung. Jl. Prof. Dr. Sumantri Brojonegoro no. 1 Bandar Lampung 35145.
2 Dinas Tanaman Pangan dan Hortikultura Kabupaten Tanggamus, Lampung E-mail: yusnita.said@yahoo.com

## ABSTRACT
IN VITRO SEED GERMINATION AND SEEDLING GROWTH OF PHALAENOPSIS HYBRIDS AS INFLUENCED BY BASAL MEDIA AND ACTIVATED CHARCOAL. Two consecutive experiments that aimed to investigate effects of basal media and activated charcoal (AC) on (1) in vitro seed germination and (2) in vitro seedling growth of Phalaenopsis hybrids were conducted.  Phalaenopsis seeds taken from sterilized ripe pods were sown aseptically on MS or Growmore medium with or without 2 g/l AC, then the protocorms produced were counted after two months of culture. The same combinations of basal media and AC were used to grow protocorms produced from previous experiment for another two months, then the growth of seedlings were measured.  The two experiments were arranged in a completely randomized design with three replicates. Each experimental unit consisted of four culture bottles each of which contained the same amount of seeds (in the first experiment) or five protocorms (in the second experiment).  Data were subjected to analysis of vari - ance and if there was any significant F result (s), the means were separated using least significant difference at P≤ 0.05. Results of the first experiment showed that for in vitro germination of Phalaenopsis seeds, Grow - more medium produced significantly higher number of protocorms campared to MS, and addition of AC in both media significantly decreased the number of protocorms.   Results of the second experiment showed that for in vitro growth of Phalaenopsis seedlings, either MS or Growmore medium resulted in the same seedling growth.  However, addition of 2 g/l AC in the media significantly increased seedling growth as shown by higher values in plant height, number and length of roots as well as seedling fresh weight. So, it was concluded that Growmore medium was better than MS for in vitro seed germination and the same as MS for seedling growth of Phalaenopsis.  The addition of AC in the medium was inhibitory for seed germination, but stimulatory for seedling growth.
Keywords : activated charcoal,  basal media, Phalaenopsis, seed germination, seedling  growth.

## PENDAHULUAN
Anggrek merupakan salah satu tanaman ang- gota famili Orchidaceae yang banyak menarik per- hatian para pengemar tanaman hias. Phalaenopsis merupakan salah satu genus anggrek yang digemari masyarakat karena masa segar bunganya  yang relatif lama dan bentuknya yang indah.  Nilai ekonominya yang relatif tinggi   memberikan prospek pasar yang cukup cerah dan membuat Phalaenopsis hibrida ter- masuk salah satu anggrek yang mendominasi pasar anggrek di dunia.    Dihasilkannya klon dan hibrida anggrek baru unggul merupakan salah satu kunci ke- berhasilan usaha di bidang peranggrekan nasional. Salah satu cara untuk menghasilkan hibrida baru anggrek adalah dengan melakukan hibridasasi dilan- jutkan dengan perbanyakan vegetatif  hasil-hasil si- langan yang mempunyai sifat-sifat unggul (Yusnita, 2011). Anggrek Phalaenopsis spesies maupun hib- rida dapat digunakan sebagai tetua persilangan untuk menghasilkan hibrida baru yang sesuai dengan ke- inginan pasar. Namun hasil penelitian menunjukkan bahwa tidak semua pasangan anggrek Phalaenopsis
dapat disilangkan dan tidak semua tanaman anggrek dapat diserbukkan sendiri dan menghasilkan biji. Persilangan antara dua tetua anggrek Phalaenop- sis hibrida berwarna merah bertotol dan putih telah dilakukan dan telah didapatkan polong buah berbiji yang dipanen pada umur 4 bulan 2 minggu setelah penyerbukan.
Pengecambahan biji anggrek pada umumnya dilakukan secara in vitro atau secara asimbiotik.  Hal ini karena secara alami, biji anggrek sulit berke- cambah akibat morfologi biji dan faktor lingkun- gan  perkecambahan yang tidak sesuai. Sulitnya biji anggrek berkecambah secara alami disebabkan oleh ukuran embrio yang sangat kecil (dengan diameter ± 0,1 mm), tanpa disertai endosperm, sebagai cadan- gan makanan, jika terdapat cadangan makanan jum- lahnya sangat sedikit (George dan Debergh, 2008). Tingkat keberhasilan perkecambahan  biji anggrek se- cara alami sangat rendah. Untuk dapat berkecambah dengan keberhasilan tinggi, biji anggrek umumnya memerlukan kondisi aseptik in vitro dengan suplai energi dan hara mineral yang lengkap pada media kul- turnya.  Formulasi media yang dapat digunakan un- tuk pengecambahan biji anggrek di antaranya adalah

## Yusnita dan Handayani: Pengecambahan dan pertumbuhan seedling Phalaenopsis
Knudson C, Vacin dan Went,  dan Murashige dan Skoog (1962) (MS) yang mengandung garam-garam mineral esensial untuk pertumbuhan kecambah biji anggrek (Yusnita, 2010).  Pengecambahan biji berb- agai spesies anggrek secara asimbiotik in vitro telah dilaporkan oleh banyak peneliti (Stewart dan Kane, 2006; Yamazaki dan Miyoshi, 2006; Ramadiana et al ., 2007; Hossain, 2008; Ramadiana et al .,  2008). Keberhasilan pengecambahan Phalaenopsis schil- leriana dan P. stuartiana dilaporkan oleh Kim dan Kim (1996) menggunakan media VW+jus tomat+20 g sukrosa.  Pada pengecambahan biji anggrek P. ama- bilis , Ramadiana et al . (2007) mendapatkan bahwa media ½ MS+ pepton merupakan formulasi terbaik. Hasil penelitian tersebut menunjukkan bahwa media ½ MS+pepton  lebih baik daripada Vacin & Went atau Knudson C+pepton untuk pengecambahan biji Pha- laenopsis amabilis , sedangkan penggunaan pupuk Hyponex hijau dengan atau tanpa pepton menghasil- kan persentase perkecambahan paling rendah.
Walaupun demikian, media kultur yang terdiri dari pupuk lengkap selain Hyponex mungkin dapat digunakan untuk mengecambahkan biji Phalaenop- sis dengan efektifitas yang tidak kalah baik diband - ingkan dengan formulasi lain, mengingat kandungan nutrisi pupuk lengkap yang berbeda-beda.  Salah satu pupuk lengkap yang dapat dicoba efektivitasnya seb- agai bahan media dasar untuk anggrek adalah pupuk lengkap Growmore biru (NPK 32-10-10). Pupuk ini mengandung unsur hara makro dan mikro yang leng- kap, dengan kandungan nitrogen yang lebih tinggi daripada Hyponex hijau. Pada percobaan pengecam- bahan biji Dendrobium hibrida, Ramadiana et al. (2008) mendapatkan bahwa media Growmore biru menghasilkan perkecambahan biji dan pertumbuhan protokorm anggrek Dendrobium hibrida yang sama baiknya dengan media ½ MS jika ditambah dengan pepton.
Arang aktif merupakan bahan adenda dalam media kultur yang sering digunakan untuk tujuan ter- tentu, misalnya untuk pengakaran tunas atau untuk tujuan lain. Arang aktif dilaporkan berpengaruh posi- tif untuk pertumbuhan in vitro seedling Dendrobium (Syaputri, 2009) dan meningkatkan pertumbuhan akar pada tunas anthurium in vitro (Sismanto, 2009). Pengaruh penambahan arang aktif ke dalam media pengecambahan biji anggrek Phalaenopsis perlu di- pelajari. Arang aktif adalah bahan adenda untuk me- dia kultur jaringan yang mempunyai sifat sebagai penyerap racun dan menghitamkan media (Hossain, 2008), sehingga dapat merangsang pertumbuhan akar. Penambahan arang aktif  ke media dasar MS atau pu- puk lengkap Growmore biru mungkin dapat mening- katkan perkecambahan biji dan pertumbuhan seedling Phalaenopsis .

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Ilmu Tanaman, Fakultas Pertanian Universitas Lampung mulai bulan Januari sampai dengan bulan Mei tahun
2010.  Penelitian ini terdiri dari dua percobaan yang berurutan, yaitu (1) pengaruh media dasar dan arang aktif terhadap pengecambahan biji in vitro anggrek Phalaenopsis hibrida, dan (2) pengaruh  media dasar dan arang aktif terhadap pertumbuhan seedling Pha- laenopsis in vitro . Pada percobaan 1, polong biji yang sudah ma- sak tetapi belum pecah, yaitu yang telah berumur 4 bulan 2 minggu setelah penyerbukan disterilisasi dan bijinya disemaikan secara aseptik di media MS atau Growmore, dengan atau tanpa penambahan 2g/l arang aktif.  Sterilisasi polong dilakukan di dalam laminar air-flow cabinet dengan cara merendam sambil men- gocoknya di dalam larutan 30% pemutih pakaian (± 1,5% NaOCl) selama 15 menit lalu membilasnya dengan air steril tiga kali. Setelah itu, polong dice- lup ke dalam spritus dan dibakar sampai nyala api di permukaan polong hilang.  Pembakaran dilakukan dua kali. Setelah itu, polong diletakkan di atas cawan petri steril, dipotong di kedua ujungnya dan dibelah di kedua sisinya sehingga biji-bijinya tampak.  Pena- naman biji dilakukan dengan menaburkan sejumlah biji yang volumenya diusahakan sama menggunakan ujung spatula.  Setelah biji disemaikan, botol ditutup kembali dan diletakkan di rak kultur.
Percobaan ini dilaksanakan dalam rancan- gan acak lengkap dengan 3 ulangan. Setiap satuan percobaan terdiri dari empat botol kultur yang pada masing-masing permukaan medianya disebarkan biji Phalaenopsis secara merata. Setelah dua bulan, dilakukan penghitungan terhadap jumlah protokorm yang mencerminkan jumlah biji yang berkecam- bah  per botol.  Media yang menghasilkan proto- korm dengan jumlah terbanyak dianggap mempunyai persentase perkecambahan 100 %.  Persentase perke- cambahan pada botol yang lain dihitung dengan membandingkannya dengan botol yang menghasil- kan persen perkecambahan tertinggi tersebut, lalu di- kalikan 100%.
Pada percobaan 2, protokorm Phalaenopsis yang didapatkan dari media perkecambahan biji pada percobaan 1 kemudian dipilih yang seragam ukuran- nya dan ditransfer secara aseptik ke media baru yang sama untuk studi pertumbuhan seedling .  Setelah berumur dua bulan sejak pemindahan protokorm di- lakukan pengamatan terhadap beberapa variabel yang mencerminkan pertumbuhan seedling , yaitu tinggi tanaman, jumlah daun, jumlah akar, panjang akar dan bobot basah seedling . Percobaan ini juga dilak- sanakan dalam rancangan acak lengkap dengan  tiga ulangan.  Setiap unit percobaan terdiri dari empat botol, yang masing-masing ditanami  lima protokorm Phalaenopsis yang seragam.  Data dianalisis ragam- nya  dan  jika  nilai  F-nya  menunjukkan  signifikansi, maka perbedaan nilai variabel yang diukur diuji lebih lanjut dengan uji beda nyata terkecil (BNT) pada taraf 0,05. Semua media yang digunakan ditambah den- gan 20 g/l sukrosa, 150 ml/l air kelapa dan diatur pH-nya menjadi 5.8 sebelum ditambah dengan 7 g/l bubuk agar-agar sebagai pemadat media. Sterilisasi
media dilakukan dengan autoklaf pada suhu 121 0 C dan tekanan 1,5 kg/cm 2 selama 15 menit. Semua kul- tur dipelihara di rak-rak kultur dalam ruang bersuhu 26 ± 2 0 C dengan penerangan lampu fluoresens berin - tensitas ± 1000 lux secara terus menerus.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil percobaan 1, yaitu pengaruh media dasar dan arang aktif terhadap perkecambahan biji in vitro Phalaenopsis hibrida menunjukkan bahwa baik me- dia dasar maupun arang aktif yang ditambahkan ke media dasar secara signifikan mempengaruhi perke - cambahan biji Phalaenopsis (Gambar 1).  Pada Gam- bar 1 terlihat bahwa media Growmore tanpa arang aktif merupakan media yang lebih baik daripada me- dia MS untuk pengecambahan biji Phalaenopsis , dan penambahan arang aktif ke dalam kedua media dasar tersebut justru menekan pengecambahan biji.  Media MS tanpa arang aktif menghasilkan sebanyak 268 protokorm, sedangkan media pupuk Growmore tanpa arang aktif menghasilkan 600 protokorm. Penamba- han arang aktif ke dalam media MS maupun Grow- more, secara drastis menurunkan jumlah protokorm yang dihasilkan, yaitu berturut-turut menjadi dan 44,6 protokorm pada media MS, dan hanya 5,3 protokorm pada media Growmore.
267,6 600 44,6 5,3 0 100 200 300 400 500 600 700 MS Growmore Tanpa arang aktif Dengan arang aktif Ju m lah P rot ok or m p er b ot ol Media dasar pengecambahan biji
Gambar 1 . Jumlah Protokorm perbotol pada perkecambahan biji Phalaenopsis hibrida in vitro pada umur dua bulan setelah persemaian biji.
Jika perkecambahan biji pada botol yang menghasilkan jumlah protokorm terbanyak dianggap mempunyai persentase perkecambahan 100 % dan perkecambahan pada botol yang lain dibandingkan dengan botol yang menghasilkan persen perkecamba- han tertinggi tersebut, maka rerata persentase perke- cambahan biji Phalaenopsis pada media MS atau Growmore dengan atau tanpa arang aktif dapat dili- hat pada Gambar 2.  Dari Gambar 2 tersebut terlihat bahwa media perkecambahan biji yang menghasilkan rerata persentase perkecambahan tertinggi adalah me- dia Growmore tanpa arang aktif (85,5 %), hampir tiga kali lebih tinggi dibandingkan perkecambahan biji pada media MS tanpa arang aktif yaitu 30%.  Media MS maupun Growmore dengan penambahan 2 g/l arang aktif hanya menghasilkan persen perkecamba- han berturut-turut sebesar 6 %  dan 0,07%.
30 85,5 6,3 0,07 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 MS Growmore Tanpa arang aktif Dengan arang aktif Pe rs en p er ke ca m ba ha n bi ji ( % ) Media dasar pengecambahan biji
Gambar 2 . Pengaruh media dasar dan arang aktif terhadap persentase perkecambahan biji Phalaenopsis hibrida in vitro pada umur 2 bulan setelah persemaian biji.
Gambar 3(a-d) menunjukkan penampilan kul- tur yang mewakili keempat perlakuan yang dicobakan untuk pengecambahan biji Phalaenopsis. Tampak dari gambar tersebut, bahwa protokorm yang dihasil- kan pada media Growmore tanpa arang aktif paling banyak (3c), diikuti media MS tanpa arang aktif (3a) yang hanya menghasilkan protokorm kurang-lebih sepertiga dari yang dihasilkan di media Growmore tanpa arang aktif.  Gambar 3b dan 3d menunjukkan bahwa penambahan arang aktif ke media MS maupun media Growmore hanya menghasikan beberapa pro- tokorm saja, namun media MS menghasilkan lebih banyak protokorm dibandingkan media Growmore.
a b c d Gambar 3. Protokorm Phalaenopsis hibrida pada media MS tanpa arang aktif (a), MS dengan arang aktif (b), Growmore tanpa arang aktif (c), dan Grow more dengan arang aktif (d) pada umur 2 bulan setelah penyemaian biji.
Hasil analisis ragam pada pecobaan 2, yaitu pengaruh media dasar dan arang aktif terhadap per- tumbuhan seedling Phalaenopsis menunjukkan bahwa penggunaan media MS atau Growmore tidak berpengaruh terhadap semua variabel yang diamati, yaitu tinggi tanaman, jumlah daun, jumlah akar, pan- jang akar, dan bobot basah tanaman, namun pemberi- an arang aktif secara signifikan berpengaruh terhadap semua variabel tersebut kecuali jumlah daun.  Tidak
Yusnita dan Handayani: Pengecambahan dan pertumbuhan seedling Phalaenopsis terdapat interaksi antara media dasar dan arang aktif dalam mempengaruhi semua variabel pertumbuhan yang diamati (Tabel 1). Hasil uji beda nyata terkecil (BNT) pada taraf 0.05 untuk variabel tinggi tanaman, jumlah akar, panjang akar dan bobot basah tanaman disajikan pada Tabel 2.
Tabel 1. Hasil analisis ragam  berbagai variabel pertumbuhan seedling Phalaenopsis pada dua media dasar (MS atau Growmore), dengan atau tanpa arang aktif. Variabel Media dasar (M) Arang aktif (A) Interaksi (MxA) Tinggi tanaman tn * tn Jumlah daun tn tn tn Jumlah akar tn * tn Panjang akar tn * tn Bobot basah tanaman (g) tn * tn
Keterangan: * nyata; tn= tidak nyata berdasarkan analisis ragam pada P ≤ 0,05.
Tabel 2. Pengaruh arang aktif terhadap tinggi tana- man, jumlah akar, panjang akar dan bobot basah seedling Phalaenopsis pada media pembesaran seedling in vitro selama dua bulan. Perlakuan Tinggi tanaman (cm) Jumlah akar Panjang akar (cm) Bobot ba- sah tana- man (g) Tanpa arang aktif 1,97 b 1,9 b 2,76 b 2,11 b Dengan arang aktif 3,07 a 5,9 a 3, 26 a 3,25 a
Keterangan: dua nilai pada kolom yang sama yang diikuti oleh huruf yang sama tidak berbeda nyata berdasar- kan uji BNT pada taraf nyata 0,05.
Pada Tabel 2 dapat dilihat bahwa media den- gan arang aktif menghasilkan seedling Phalaenopsis yang lebih tinggi (3,07 cm) dibandingkan dengan media tanpa arang aktif (1,97 cm). Jumlah akar seed- ling Phalaenopsis di media dengan arang aktif lebih banyak (5,9) dibandingkan dengan tanpa arang aktif (1,9). Akar yang dihasilkan di media dengan arang aktif lebih panjang (3,26 cm) dibandingkan dengan yang dihasilkan di media tanpa arang aktif, dan se- bagai kumulatif dari semua variabel pertumbuhan, bobot basah seedling Phalaenopsis di media dengan arang aktif juga lebih besar (3,25 g) dibandingkan dengan di media tanpa arang aktif (2,11 g). Representasi penampilan visual seedling Pha- laenopsis di dua media dasar dengan atau tanpa arang aktif dapat dilihat pada Gambar 4.  Pada gambar ini terlihat bahwa seedling yang ditumbuhkan di media dengan arang aktif, baik MS maupun Growmore (kan- an) mempunyai ukuran yang lebih besar dibanding- kan dengan yang ditumbuhkan di media tanpa arang aktif (kiri). Penampilan dan ukuran seedling yang ditumbuhkan di media MS (atas) dengan Growmore
(bawah)  tidak begitu berbeda walaupun di media tan- pa arang aktif seedling yang ditumbuhkan di media MS sedikit lebih besar daripada di media Growmore.
Gambar 4. Representasi penampilan seedling Phalaenop- sis pada  media MS (atas) dan Growmore (bawah) tanpa arang aktif  (kiri) dan dengan arang aktif (kanan).
Pengecambahan biji diikuti dengan pemeli- haraan seedling in vitro merupakan bagian dari akti- vitas yang harus dilakukan dalam pemuliaan anggrek (Yusnita, 2010), termasuk Phalaenopsis .  Ramadi- ana et al ., (2007) melaporkan bahwa dari berbagai formulasi media untuk pengecambahan biji in vitro Phalaenopsis amabilis yang semuanya ditambah den- gan pepton, media ½ MS (Murashige & Skoog, yang garam-garam makro-nya dikurangi menjadi seten- gahnya),  menghasilkan persentase perkecambahan dan pertumbuhan yang tertinggi diikuti oleh Knud- son C dan Vacin & Went.  Penggunaan media pupuk lengkap Hyponex hijau (NPK 20:20:20) dengan atau tanpa pepton pada percobaan tersebut menghasilkan persen perkecambahan dan pertumbuhan protokorm yang paling rendah.  Dalam penelitian ini, media pupuk lengkap Growmore (NPK 32:10:10) terbukti menghasilkan jumlah protokorm per botol dan persen perkecambahan biji Phalaenopsis hibrida yang lebih besar dibandingkan dengan media MS pada umur dua bulan sejak penyemaian biji.  Di samping itu untuk perumbuhan protokorm menjadi seedling pada dua bulan berikutnya, media Growmore juga menghasil- kan pertumbuhan tanaman yang tidak berbeda dengan media MS.  Hasil ini bisa sangat bermanfaat untuk para penganggrek karena untuk pengecambaan biji maupun pembesaran seedling Phalaenopsis in vitro , pupuk lengkap Growmore dapat digunakan sebagai alternatif media kultur terhadap penggunaan formu- lasi media MS yang lebih mahal. Media Growmore untuk kultur in vitro Phalaenopsis ini teriri dari 2 g/l pupuk Growmore biru ditambah dengan 150 ml/l air kelapa dan 20 g/l sukrosa.  Hasil percobaan ini konsisten dengan hasil yang dilaporkan oleh Rama- diana et al. (2008), yaitu bahwa media Growmore menghasilkan perkecambahan biji dan pertumbuhan protokorm anggrek Dendrobium hibrida yang sama baiknya dengan media ½ MS jika ditambah dengan pepton.
MS MS + arang aktif Growmore Growmore + arang aktif
Faktor kedua yang dipelajari dalam penelitian ini adalah penambahan 2 g/l arang aktif ke dalam me- dia dasar untuk pengecambahan biji dan pertumbuhan seedling Phalaenopsis .  Fenomena yang menarik dari hasil percobaan ini adalah bahwa pada pengecambah- an biji Phalaenopsis hibrida,  penambahan arang aktif ke dalam media MS atau Growmore justru menekan pengecambahan biji yang ditunjukkan oleh sangat sedikitnya protokorm yang dihasilkan dibandingkan dengan media tanpa arang aktif.  Namun demikian, pada periode dua bulan berikutnya, yaitu masa per- tumbuhan protokorm menjadi seedling, penambahan arang aktif ke dalam media MS atau Growmore ter- bukti mampu meningkatkan pertumbuhan seedling yang  ditunjukkan  oleh  peningkatan  yang  signifikan pada tinggi tanaman, jumlah akar, panjang akar dan bobot basah seedling.
Pada pengecambahan biji, hasil percobaan ini berbeda dengan yang dilaporkan oleh Hossain (2008), yaitu bahwa penambahan 2 g/l arang aktif ke dalam media Phytamax (Sigma, USA) dan media Mitra dapat meningkatkan persen perkecambahan biji anggrek Epidendrum ibaguense Kunth.  masing-ma- sing sebesar 10% dibandingkan kontrolnya. Namun, pengaruh positif arang aktif terhadap pertumbuhan seedling Phalaenopsis pada percobaan ini konsisten dengan yang dilaporkan oleh Syaputri (2009), yaitu bahwa pemberian 2 g/l arang aktif ke dalam media Growmore dapat menghasilkan pertumbuhan seed- ling Dendrobium  in  vitro yang lebih baik diband- ingkan dengan tanpa arang aktif.  Hal ini menun- jukkan bahwa respons biji anggrek terhadap media pengecambahan bergantung pada spesiesnya. Spe- sies anggrek yang berbeda dapat memberikan tang- gapan yang berbeda terhadap suatu komponen media kultur.  Mengingat sifat arang aktif yang merupakan adsorbent non-selektif kuat yang jika ditambahkan ke dalam media dapat menyerap gas dan senyawa- senyawa beracun maupun komponen media kultur (Moshkov et al ., 2008), maka untuk pengecambahan biji anggrek Phalaenopsis hibrida yang tidak mem- punyai cadangan makanan, adsorbsi oleh arang aktif mungkin telah mengurangi energi dan nutrisi yang sangat diperlukan biji Phalaenopsis untuk berkecam- bah. Untuk dapat berkecambah, biji Phalaenopsis mungkin lebih sensitif terhadap kekurangan suplai energi dan nutrisi dibandingkan dengan biji anggrek spesies lainnya.  Kebutuhan akan energi dan nutrisi pada biji Phalaenopsis yang dikecambahkan diduga lebih besar dibandingkan dengan kebutuhannya un- tuk pertumbuhan seedling ketika sudah muncul akar. Oleh karena itu pengaruh positif arang aktif baru ter- lihat signifikan untuk pertumbuhan seedling.  Arang aktif yang ditambahkan ke dalam media kultur dapat berfungsi untuk menyerap senyawa-senyawa beracun yang mungkin dikeluarkan oleh tanaman yang dikul- turkan (Fridborg et al., 1978)  atau senyawa-senyawa penghambat pertumbuhan yang dihasilkan oleh kom- ponen media ketika diautoklaf (Weatherhead et al. , 1979) dan membuat kondisi gelap yang merangsang pertumbuhan akar pada tanaman yang dikulturkan
(Bhadra dan Hossain, 2003). Ketika protokorm Pha- laenopsis sudah membentuk akar, penyerapan hara dan pertumbuhan akar seedling di media Growmore atau MS yang diberi arang aktif kemungkinan men- jadi lebih baik karena kondisi gelap pada media dan berkurangnya senyawa-senyawa penghambat per- tumbuhan yang mungkin dikeluarkan oleh seedling. Dari hasil yang dikemukakan di atas dapat di- simpulkan bahwa formulasi media Growmore tan- pa arang aktif lebih baik daripada media MS untuk pengecambahan biji Phalaenopsis hibrida, sedangan media Growmore atau MS dengan penambahan arang aktif menghasilkan pertumbuhan seedling yang lebih baik dibandingkan dengan media tanpa arang aktif.

## KESIMPULAN
Medium Growmore lebih baik dari pada me- dium MS untuk perkecambahan benih dan berpenga- ruh sama dengan MS untuk pertumbuhan Phalaenop- sis. Penambahan AC di dalam medium menghambat perkecambahan benih tetapi mendorong pertumbu- han bibit.

## DAFTAR PUSTAKA
Bhadra, S.K and M.M. Hossain. 2003. In Vitro ger- mination and micropropagation of Geodorum densiflorum (Lam.) Schltr., an endangered orchid species. Plant Tissue Cult. 13(2): 165-171.
Fridborg, G., M. Pedersen, L-E. Landstrom and T. Er- iksson. 1978. The effect of activated charcoal on tissue cultures: adsorption of metabolites inhibit- ing morphogenesis. Physiol. Plant 43: 104–106.
George, E.F. and P.C. Debergh. 2008. Micropopaga- tion: Uses and Methods. In: E.F. George, M.A. Hall and G-J. De Klerk (Eds). Plant Propagation By Tissue Culture. 3 rd Edition Volume 1.  Spring- er. Dordrecht, The Netherland. p 29-64. Hossain, M.M. 2008. Asymbiotic seed germination and in vitro seedling development of Epiden- drum ibagunse Kunth. (Orchidaceae). Afric. J. Biotech. 7(20): 3614-3619. Kim, S-Y and M-S Kim. 1996. Organic complex ad- ditives on seed germination of Phalaenopsis schilleriana . Kor. Intl. Agri. 10(3): 57-62. Moshkov, I.E., G.V. Novikova, M.A. Hall, E.F.
George. 2008. Plant Growth Regulators III: Gib- berellins, Ethylene, Abscisic acid, their analogues and inhibitors; Miscellaneous compounds. In: EF George, MA Hall and G-J De Klerk (Eds). Plant Propagation By Tissue Culture. 3rd Edition Volume 1.  Springer. Dordrecht,The Netherland. p 227-281.
Murashige, T. and F. Skoog. 1962. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tis- sue cultures. Physiol. Plant 15:473-497.
Ramadiana, S., R.D. Hidayati, D. Hapsoro dan Yus- nita. 2007. Pengaruh Pepton terhadap pengecam- bahan biji anggrek Phalaenopsis amabilis dan Dendrobium hybrids In Vitro . Prosiding Seminar

## Yusnita dan Handayani: Pengecambahan dan pertumbuhan seedling Phalaenopsis
Nasional Hasil Penelitian Yang Dibiayai oleh Hibah Kompetitif. Dalam rangka Purnabakti Prof. Jajah Koswara. Institut Pertanian Bogor, Bogor, 1-2 Agustus 2007. Ramadiana, S., A.P. Sari, Yusnita dan D. Hapsoro. 2008. Hibridisasi, Pengaruh dua jenis media dasar dan pepton terhadap perkecambahan biji dan pertumbuhan protokorm anggrek Dendro - bium hibrida secara in vitro . Prosiding Seminar Nasional Sains dan Teknologi-II Universitas Lampung, 17-18 November 2008. Sismanto. 2009. Studi Perbanyakan Anthurium Gel- ombang Cinta ( Anthurium plowmanii ) Secara In Vitro . Thesis Magister Agronomi. Universitas Lampung. 88 hlm.
Stewart, S.L. and M.E. Kane. 2006. Asymbiotic seed germination and in vitro seedling development of Habenaria macroceratitis (Orchidaceae), a rare Florida terrestrial orchid. Plant Cell Tiss.
Org. Cult. 86:147-158. Syaputri, G.  2009.  Pengaruh Arang Aktif dan Kon- sentrasi Bubur Pisang terhadap Pertumbuhan Seedling Anggrek Dendrobium Hibrida In Vitro . Skripsi Fakultas Pertanian.  Universitas Lam- pung.
Weatherhead, M.A., J. Bardon, G.C. Henshaw. 1978.
Some effects of charcoal as an additive to plant tissue culture media. Z. Pflanzenphysiol. 89:141- 147. Yamazaki, J. and K. Miyoshi. 2006. In vitro asymbi- otic germination of immature seeds and forma- tion of protocorm by Caphalanthera falcata (Or- chidaceae). Ann. Bot. 98:1197-1206. Yusnita, 2010. Perbanyakan In Vitro Tanaman Ang- grek. Penerbit Universitas Lampung. Bandar Lampung.
Yusnita, 2011. Pemuliaan Tanaman Untuk Menghasil- kan Anggrek Hibrida Unggul. Penerbit Lembaga Penelitian Universitas Lampung. Bandar Lam- pung.
o