## INDUKSI  TUNAS  DARI  EKSPLAN  NODUS  JERUK  KASTURI ( CITRUS  MICROCARPA  BUNGE.) DENGAN  PENAMBAHAN

## 6- BENZYL AMINO PURINE (BAP) SECARA IN VITRO
Shoots  Induction  of  nodes  (Citrus  microcarpa  Bunge.)  with  addition  6-  Benzyl Amino Purine (BAP) by In Vitro
Defila yanti, Mayta Novaliza Isda. Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Riau
Email: defila.yanti0112@student.unri.ac.id
Abstract Kasturi  orange  (Citrus  microcarpa  Bunge.)  is  a  medicinal  plant  that  contains  chemical compounds from secondary metabolites. Limitations of the seed and slow rate of growth is a challenge in the Kasturi orange plant propagation. Propagation of shoots in the kasturi orange can be produced quickly with shoots induction in vitro. This study aims investigate the influence and determine the concentration of BAP in inducing shoots from nodes kasturi orange explants in  vitro.  This  research  was  conducted  at  the  Integrated  Laboratory,  Department  of  Biology, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, The University of Riau from March - September 2020 using completely randomized design (CRD) which consists of 6 (six) treatments than is control BAP (1,2,3,4,5 mg / L). Results showed BAP had a significantly affect the number of shoots and shoot length. The treatment of 1 mg / L BAP produces the highest number of shoots that 2.50. The highest callus growth was in the treatment of 5 mg / L BAP. The shoot appears fastest time is 12.00 day after planting (DAP) contained in the treatment of 2 mg/L BAP. Keywords : BAP, Citrus microcarpa Bunge., Induction Shoots, In Vitro
Abstrak Jeruk  kasturi  (Citrus  microcarpa  Bunge.)  merupakan  tumbuhan  berkhasiat  obat  yang mengandung senyawa kimia hasil metabolit sekunder. Keterbatasan benih dan laju pertumbuhan yang lambat merupakan tantangan dalam perbanyakan tanaman jeruk kasturi. Perbanyakan tunas pada  jeruk  kasturi  dapat  diproduksi  cepat  dengan  induksi  tunas  secara  in  vitro.  Penelitian  ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh dan menentukan konsentrasi BAP terhadap pembentukan tunas dari eksplan nodus jeruk kasturi menggunakan teknik in vitro. Penelitian dilaksanakan di Laboratorium  Terpadu  Jurusan  Biologi,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Universitas  Riau  dari  bulan  Maret  –  September  2020  dengan  menggunakan  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL)  yang  terdiri  atas  6  perlakuan  yaitu  kontrol,  BAP  (1,2,3,4,5)  mg/L.  Hasil penelitian menunjukan pemberian BAP berpengaruh nyata terhadap jumlah tunas dan panjang tunas.  Perlakuan  1  mg/L  BAP  menghasilkan  jumlah  tunas  yang  paling  banyak  yaitu  2,50. Pertumbuhan kalus yang paling tinggi adalah pada perlakuan 5 mg/L BAP. Waktu muncul tunas tercepat yaitu 12,00 hari setelah tanam (HST) terdapat pada perlakuan 2 mg/L BAP. Kata kunci: BAP, Citrus microcarpa Bunge., Induksi Tunas, In Vitro

## D YANTI, M N ISDA

## PENDAHULUAN
Jeruk kasturi banyak tersebar diseluruh Asia Tenggara  terutama  di  Filipina,  Malaysia, termasuk  Indonesia.  Di  Sumatera  tanaman jeruk  kasturi  banyak  dibudidayakan  di  daerah Sumatera  Barat  dan  Sumatera  Utara.  Menurut Cheong  et  al. (2012).  Jeruk  kasturi  banyak diminati  oleh  masyarakat  sebagai  bahan minuman  dan  sebagai  aroma  makanan (Abdullah  2012).  Jeruk  kasturi  kaya  akan kandungan  metabolit  sekunder  seperti  asam sitrat,  asam  amino,  dan  minyak  atsiri  dan memiliki kandungan vitamin C juga antioksidan  yang  tinggi.  Jeruk  ini  bermanfaat bagi  industri  farmasi  dan  kosmetik  karena kandungan flavonoidnya (Bal 1997; Jamal et al. 2000). Penyediaan bibit jeruk kasturi umumnya diperbanyak  dengan  biji  namun  penggunaan biji sebagai pengembangan memiliki beberapa kelemahan.  Perbanyakan  dengan  biji  akan memerlukan  masa  vegetatif  yang  panjang. Salah satu solusi yang dapat membantu dalam penyediaan bibit jeruk kasturi dengan perbanyakan secara kultur jaringan ( in vitro ).
Zat  pengatur  tumbuh  golongan  sitokinin yang  sering  digunakan  dalam  kultur  jaringan adalah  BAP  karena  BAP  memiliki  efektivitas yang  tinggi  dan  berpengaruh  terhadap  inisiasi tunas,  panjang  tunas  dan  juga  memicu pembentukan  tunas  samping,  pelebaran  daun dan merangsang pembentukan pucuk (Ashraf et al. 2014). Faktor lain yang dapat mempengaruhi  keberhasilan  dalam  induksi tunas  adalah  sumber  eksplan.  Penggunaan nodus  pada  kultur in  vitro sangat  baik  karena pada  nodus  akan  terbentuk  tunas  lateral  dan cabang. Penggunaan nodus lebih cepat daripada bagian tanaman lainnya kecuali biji. Penggunaan  eksplan  nodus  diharapkan  dapat menginduksi tunas yang banyak.
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Miah et  al.
(2008) pemberian 1 mg/l BAP pada media MS dan  BAP  menghasilkan  jumlah  tunas  dari eksplan  nodus Citrus  macroptera Mont. sebanyak 4,88 tunas per eksplan. Penelitian ini bertujuan Mengetahui dan menentukan konsentrasi terbaik BAP terhadap pembentukan tunas  dari  eksplan  nodus  jeruk  kasturi  ( Citrus microcarpa Bunge.)  menggunakan  teknik in vitro.

## METODOLOGI
Penelitian ini menggunakan metode eksperimen  dengan  menggunakan  Rancangan Acak Lengkap (RAL) terdiri dari 6 (enam) taraf
perlakuan  dan  5  (lima)  ulangan,  sehingga didapatkan  30  (tiga  puluh)  unit  percobaan. Perlakuan pada penelitian ini yaitu 0, 1, 2, 3, 4, dan  5  mg/L  BAP  menggunakan  media Murashige  and  Skoog (MS).  Tunas  nodus in vitro dipindahkan  ke  dalam  cawan  petri  yang terdapat sedikit akuades. Tunas nodus kemudian dipotong dengan ukuran panjang ± 1 cm.  Tunas  yang  sudah  dipotong  dimasukan kedalam botol kultur yang berisi media sesuai dengan  perlakuan  dengan  posisi  eksplan ditegakan pada media. Setiap botol terdiri dari 1 (satu) tunas nodus. Setelah selesai penanaman semua  botol  kultur  disimpan  pada  rak  kultur yang  terdapat  di  ruang  inkubasi.  Parameter yang diamati adalah persentase eksplan hidup, waktu muncul tunas.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Persentase  Eksplan  Hidup  dan  Waktu Muncul Tunas

## Persentase Eksplan Hidup (%)
Pemberian  BAP  yang  berbeda-beda  pada media,  mampu    meningkatkan  persentase eksplan hidup 100% hingga 50 HST (Tabel 1). Hal  ini  menunjukkan  bahwa  pada  media  MS sudah  dapat  menunjang  presentase  ekplan hidup.  Eksplan  yang  hidup  juga  dipengaruhi oleh  beberapa  faktor  yaitu:  umur  eksplan, ukuran eksplan dan komposisi media. Eksplan yang digunakan adalah nodus in vitro . Nodus in vitro ini  bersifat  meristematik  sehingga  sel  – selnya  masih  aktif  membelah  dan  memiliki daya regenerasi yang lebih tinggi dibandingkan dengan jaringan tanaman yang tua dan memiliki kemampuan  bertahan  hidup  karena  kondisi in vitro lebih  steril  sehingga  tingkat  kontaminasi terhadap eksplan rendah.
Tingkat  presentase  hidup  eksplan  yang tinggi  dalam  penelitian  ini  juga  dipengaruhi oleh kandungan nutrisi pada media pertumbuhan yang tersedia dalam jumlah yang cukup. Menurut Isda dan Fatonah (2014) media dasar  yang  sering  digunakan  dalam  induksi tunas  adalah  media  Murrashige  Skoog  (MS) media  ini  mengandung  unsur  hara  makro  dan unsur hara mikro sehingga dapat meningkatkan presentase  eksplan  hidup  pada  kultur in  vitro. Eksplan yang hidup pada penelitian ini ditandai dengan eksplan nodus yang bewarna hijau dan segar.

## Waktu Muncul Tunas (Hari)
Pada  penelitian  ini  waktu  muncul  tunas tidak  berpengaruh  nyata  hingga  50  HST. (Tabel  1)  rata  –  rata  waktu  muncul  tunas berkisar antara 12,00  HST – 16,33 HST. Pada hasil  dapat  dilihat  bahwa  waktu  muncul  tunas yang paling cepat adalah pada perlakuan 2 mg/ L  BAP  dengan  rata  –  rata  12,00  HST. Kecepatan  waktu  muncul  tunas  yang  terjadi pada  eksplan  dikarenakan  adanya  interaksi yang tepat antara hormon endogen dari eksplan dengan hormon eksogen. Waktu muncul tunas yang  paling  lama  adalah  5  mg/  L  BAP  yaitu dengan rata – rata 16,33 HST. Penggunaan zat pengatur  tumbuh  dengan  konsentrasi  yang tinggi akan menghambat perkembangan eksplan  nodus  jeruk  kasturi  sehingga  waktu muncul tunas lebih lama.
Pada  penelitian  ini  rata  –  rata  kontrol waktu muncul tunas adalah 16,00 HST. Waktu muncul tunas  pada  perlakuan  kontrol  hasilnya tidak  jauh  beda  dengan  5  mg/L  BAP.  Hal  ini dikarenakan pada kontrol tidak ada penambahan  zat  pengatur  tumbuh  sehingga waktu muncul tunas yang dihasilkan lebih lama sedangkan  pada  5  mg/L  BAP  penggunaan  zat pengatur  tumbuh  dengan  konsentrasi  yang
tinggi menghambat waktu muncul tunas. Karla dan Bhatla (2018) menjelaskan bahwa sitokinin efektif dalam merangsang kerja fisiologis pada tanaman tergantung pada konsentrasi dan jenis tanaman,  pada  konsetrasi  tinggi  berfungsi menghambat kerja fisiologis.
Pengaruh  BAP  dalam  pertumbuhan  awal sangat  dominan,  hal  ini  dikarenakan  bahwa sitokinin  sering  digunakan  untuk  merangsang pertumbuhan dan perkembangan. Hartmann et al . (2002) menyatakan bahwa dengan penambahan  zat  pengatur tumbuh yang sesuai dapat  meningkatkan  aktivitas  pembelahan  sel dalam proses morfogenesis dan organogenesis pada  tanaman.  Penggunaan  konsentrasi  BAP yang  rendah  pada  eksplan  nodus  cenderung mempercepat pembentukan tunas dibandingkan dengan  penggunaan  konsetrasi  BAP  yang tinggi.  Apabila  sitokinin  dalam  media  MS berada  dalam  jumlah  yang  cukup  maka  akan melakukan  pembelahan  yang  lebih  cepat. Penggunaan  2  mg/L  BAP  mempengaruhi pertumbuhan,  mendorong  pembelahan  sel  dan memiliki  tingkat  efektivitas  yang  tinggi terhadap pembentukan tunas sehingga mempercepat waktu muncul tunas.
Tabel 1. Persentase eksplan hidup dan waktu muncul tunas pada media MS dengan penambahan zat pengatur tumbuh Benzyl Amino Purine (BAP) 50 hari setelah tanam
Kode Perlakuan BAP Presentase eksplan hidup (%) Waktu muncul  tunas (HST) (mg/L) P1 Kontrol 100 16,00 ± 1,41 P2 1 100 12,50 ± 0,70 P3 2 100 12,00 ± 3,60 P4 3 100 13,33 ± 1,52 P5 4 100 14,00 ± 2,00 P6 5 100 16,33 ± 2,08

## Pertumbuhan Tunas

## Jumlah tunas
Pada  (Tabel  2)  dapat  dilihat  bahwa jumlah tunas yang dihasilkan adalah pada 1 mg/L BAP yaitu 2,50 tunas. Hal ini diduga karena  peran  fisiologis  sitokinin  BAP dengan konsentrasi yang rendah berpengaruh  pada  kultur in  vitro untuk mendorong pembelahan sel dan pertunasan serta memicu jumlah tunas. Pada pemberian 4  mg/L  BAP  menghasilkan  tunas  yang
sedikit  yaitu  1,00  tunas  .  Penambahan  zat pengatur tumbuh sitokinin dengan konsentrasi yang tinggi pada eksplan nodus menghambat  eksplan  untuk  membentuk tunas,  sehingga  pertumbuhan  tunas  pada eksplan akan berkurang.

## D YANTI, M N ISDA
Gambar  1 .  Pembentukan  tunas  dari eksplan  nodus  dengan  pemberian  1  mg/L BAP
Pada  penelitian  Rohmawati  (2015) multiplikasi  tunas  dari  eksplan  nodus  jeruk siam Citrus nobilus Lour. dengan penambahan 0,5 mg/ L BAP menghasilkan 5 tunas.  hal  ini  sesuai  dengan  dilakukan penelitian ini bahwa pemberian BAP dengan konsentrasi  rendah  akan  menghasilkan jumlah tunas yang lebih banyak dibandingkan  dengan  penggunaan  BAP konsentrasi.tinggi. Pada kontrol menghasilkan  jumlah  tunas  lebih  sedikit dibandingkan dengan perlakuan yang lainnya. Hal ini dikarenakan pada perlakuan kontrol  tidak  adanya  penambahan  zat pengatur tumbuh pada media yang dibutuhkan  untuk  inisiasi nodus.  Selain  itu, kandungan  hormon  endogen  eksplan  juga belum mencukupi untuk pembentukan tunas pada  nodus.  Konsentrasi  zat  pengatur tumbuh  yang  ditambahkan  pada  media merupakan faktor penting dalam
keberhasilan diferensiasi pertumbuhan kultur in  vitro .  Menurut  Rahardja  dan Wiryanta  (2003)  penambahan  zat  pengatur tumbuh  dalam  media  kultur  merupakan komponen penting dalam proses pertumbuhan dan perkembangan tanaman. Panjang tunas PanjangTunas yang terpanjang dihasilkan  pada  pemberian  1  mg/L  BAP yaitu  1,75  cm.  Pertambahan  tinggi  tunas dipengaruhi  dengan  adanya  penambahan zat pengatur tumbuh, khususnya pemberian zat  pengatur  tumbuh  berupa  BAP  dengan konsentrasi yang rendah dapat merangsang pertumbuhan  tinggi  eksplan  sebaliknya penambahan  zat  pengatur  tumbuh  BAP dengan  konsentrasi  yang  tinggi  akan menghambat  pertumbuhan  tinggi  eksplan dan menghasilkan tunas (Bahri 2013). Hal ini  diduga  pada  perlakuan  1  mg/L  BAP perkembangan  eksplan  dan  pembentukan organ  kultur in  vitro disebabkan  oleh kandungan nitrogen pada media MS.
Kharla dan Bhatla (2018) menyatakan bahwa sitokinin berperan dalam pembelahan sel sedangkan auksin berperan dalam pemanjangan sel. Perlakuan dengan penambahan  BAP  menghasilkan  panjang tunas  yang  rata  –  ratanya  tidak  berbeda jauh.
Tabel 2 .  Jumlah tunas dan panjang tunas pada media MS dengan penambahan zat pengatur tumbuh Benzyl Amino Purine (BAP) 50 hari setelah tanam
Kode Perlakuan BAP Jumlah tunas (Tunas) Panjang tunas (Cm) mg/L P1 Kontrol 1,00 ± 0,00 𝑎 1,40 ± 0,00 𝑏𝑐 P2 1 2,50 ± 0,70 𝑐 1,75 ± 0,35 𝑐 P3 2 1,66 ± 0,57 𝑎𝑏𝑐 1,60 ± 0,20 𝑏𝑐 P4 3 2,00 ± 0,00 𝑏𝑐 0,90 ±  0,17 𝑎 P5 4 1,00 ± 0,00 𝑎 1,30 ± 0,26 𝑎𝑏 P6 5 1,33 ± 0,57 𝑎 0,90 ± 0,10 𝑎
Keterangan : Angka yang diikuti oleh huruf yang berbeda pada kolom yang sama menunjukan berbeda nyata (P>0,05) pada uji DMRT pada taraf 5 %.

## 1. Pertumbuhan dan Morfologi kalus
Tabel 3.  Pertumbuhan kalus dan Morfologi Kalus pada media MS dengan penambahan zat pengatur tumbuh Benzyl Amino Purine (BAP) 50 hari setelah tanam
Kode Perlakuan Pertumbuhan kalus Tekstur kalus Warna kalus A1 Kontrol - - - A2 1 mg/L BAP - - - A3 2 mg/L BAP + Kompak Putih A4 3 mg/L BAP + Kompak Putih A5 4 mg/L BAP ++ Kompak Hijau A6 5 mg/L BAP +++ Kompak Putih
Keterangan : tanda negatif ( -) menandakan kalus tidak tumbuh tanda positif (+) menandakan kalus tumbuh

## Pertumbuhan Kalus
Hasil  penelitian  pertumbuhan  kalus  pada (Tabel  3)  didapatkan  hasil  bahwa  perlakuan kontrol  dan  1  mg/L  BAP  tidak  menghasilkan kalus.  Ini  diduga  hormon  endogen  yang terdapat  pada  eksplan  belum  cukup  untuk menginduksi kalus dan hanya mampu membentuk  tunas.  Kemungkinan  kandungan auksin  endogen  dengan  sitokinin  yang diberikan belum seimbang sehingga kalus tidak terbentuk  tetapi  hanya  membentuk  tunas.  Hal ini didukung dengan pernyataan Rosyidah et al.
(2014)  yang  menyatakan  bahwa  beberapa  sel dalam  eksplan  dapat  beregenerasi  menjadi kalus,  sedangkan  yang  lain  tidak  dapat membentuk kalus dikarenakan tidak adanya zat pengatur  tumbuh  yang  ditambahkan  kedalam media  kultur  seperti  pada  kontrol  yang  tidak menggunakan zat pengatur tumbuh. Penambahan sitokinin
berupa BAP
memberikan  respon  pada  eksplan  yaitu menstimulasi  terjadinya  pembelahan  sel  dan poliferasi kalus.
Menurut  Thomy  (2012)  penambahan sitokinin  dengan  konsentrasi  yang  tinggi  akan memacu  pembentukan  kalus,  sedangkan  jika penambahan sitokinin dengan konsentrasi yang rendah  akan  memacu  pertumbuhan  eksplan beregenerasi membentuk organ. Sesuai dengan penelitian yang dilakukan bahwa penggunaan 1 mg/L  BAP  menghasilkan  jumlah  tunas  yang lebih  banyak.  Hal  ini  menunjukan  bahwa penggunaan  konsentrasi  5  mg/LBAP  akan mempercepat pertumbuhan kalus.

## Tekstur Kalus
Pada  penelitian  ini  didapatkan  kalus dengan  tekstur  kompak  dan  bewarna  putih. Menurut Andaryani (2010) terbentuknya kalus dengan  tekstur  kompak  dipacu  oleh  adanya hormon auksin endogen yang diproduksi secara
internal  oleh  eksplan  yang  telah  tumbuh membentuk  kalus  tersebut.  Kalus  kompak mempunyai  tekstur  padat  dan  keras,  yang tersusun dari sel – sel kecil yang sangat rapat. Tekstur  kalus  kompak  dianggap  baik  karena dapat mengakumulasi metabolit sekunder lebih banyak.
Gambar  2 .  Tekstur  kalus  pada  perlakuan  5 mg/L BA P
Warna  kalus  putih  mengindikasikan bahwa  kalus  belum  mengandung  klorofil. Menurut  Arianti  (2012)  kalus  yang  bewarna putih  merupakan  jaringan  embrionik  yang belum  mengandung  kloroplas.  Pertumbuhan kalus  akan  diikuti  dengan  perubahan  warna kalus.  Kalus  muda  bewarna  putih,  kemudian warnanya  akan  berubah  menjadi  hijau  dengan bertambahnya  umur  dan  menandakan  adanya klorofil dan telah terjadi fotosintesis.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  diatas  dapat  disimpulkan bahwa:
1. Pemberian  perlakuan  BAP  berpengaruh nyata  terhadap  jumlah  tunas  dan  panjang tunas  sedangkan  waktu muncul tunas tidak berpengaruh  nyata  terhadap  eksplan  nodus jeruk kasturi.
2. Perlakuan  1  mg/L  BAP  menghasilkan jumlah tunas yang paling banyak yaitu 2,50.

## D YANTI, M N ISDA
Pertumbuhan  kalus  yang  paling  banyak adalah pada perlakuan 5 mg/L BAP dengan tekstur kalus kompak yaitu berwarna putih.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terimakasih  kepada Lembaga  Project  Implementation  Unit  (PIU) Universitas  Riau  yang  telah  membiayai penelitian ini melalui dana Asian Development Bank  (ADB)  yang  tergabung  dalam  proyek Advance Knowledge and Skills for Sustainable Growth (AKSI) untuk tahun ajaran 2020/2021 yang telah diberikan kepada penulis.

## REFERENSI
Abdullah,  M.  PE.  Chong,  and  NA.  Yunus.
2012.  Physical  Properties  of  Musk  Lime
(Citrus  microcarpa). World  Academy  of Science, Engineering and Technolg . 6: 12 -25. Diakses pada tanggal 20/2/2015.
Ashraf MF, MA Aziz, N Kemat, and I Ismail. 2014. Effect of cytokinin types Concentrations and their Interaction on In Vitro Shoot Regeneration of Cholorophytum borivilianum Sant.
Electronic  Journal  of  Biotechnology,  17:
275 – 279.
Bahri,  S.  2013. Pertumbuhan  Jeruk  Manis (Citrus  sinensis)  secara  In  Vitro  akibat Pemberian  Benzil  Amino  Purine  (BAP) . [Skripsi].  Program  Studi  Agroteknologi Sekolah Tinggi Ilmu Pertanian Muhajidin Tolitoli: Tolitoli.
Bal  JS.  1997.  Fruit  Growing.  Kalyani Publishers. New Delhi (IN).
Cheong MW, D Zhu, Sng J, SQ Liu, W Zhou, and  P  Curan.  2012.  Characterisation  of Calamansi  ( Citrus  microcarpa )  part  II: Volatailes, physcochemical properties and Non  –  Volatailes  in  the  Juice. Scirnse Direct . 134(2): 696 – 703. Hartmann HT, Kester DE, Davies FT, Geneve RL.  2002. Plant  Propagation  Principical and Practise Pearson Education Inc. New
Jersey. Upper Saddle River.
Isda, M.N dan S. Fatonah. 2014. Induksi Akar pada Eksplan Tunas Anggrek Grammatophylum scirptum Var. Citrinum secara In  Vitro pada  Media  MS  dengan Penambahan  NAA  dan  BAP. Al  – kauniyah Jurnal Biologi . 7 (2)  : Jamal Y, Praptiwi dan A. Agusta. 2000. Komponen Kimia danAntibakteri Karla G. and S.C. Bhatla. 2018. Cytokinins in Bhatla  S.C.  and  M.A.  Lal  (Eds). Plant
Physsiology, Developmnent and Metabolism. Spinger Nature SingaporeLrd,doi.org/10.1007/978-981- 13-2023-1. Lestari,  E.G.  2011.  Peranan  Zat  Pengatur Tumbuh  Dalam  Perbanyakan  Tanaman Melalui Kultur Jaringan. Jurnal Agrobiogen . 7 (1).
Miah  M,  Nesawar,  S  Islam,  Hadiuzzaman  S. 2008. An Improved Protocol for Multiple Shoot  Regreneration  from  Sedding  and Mature  Explant  of Citrus  macroptera (M.). Plant Tiss. Cult & Biotech . 18 (1): 17
– 24.
Rahardja, P.C. dan W. Wiryanta. 2003. Aneka Cara Memperbanyak Tanaman . Agromedia Pustaka. Jakarta.
Rohmawati  S,  S  Fatonah  dan  MN  Isda.  2015. Multiplikasi  Tunas  In  Vitro  dari  Eksplan Nodus  Jeruk  Siam  ( Citrus  Nobilus Lour)
Asal Kampar dengan Penambahan
Benzylaminopurine (BAP)  dan  Ekstrak Malt. Repository University of Riau.
Rosyidah,  M.,  Ratnasari.,  dan  Rahayu  .  2014. Induksi  Kalus  Daun  Melati  ( Jasminum Sambac ) dengan Penambahan Konsentrasi 6  – Benzyl  Amino  Purine (BAP)  pada Media MS secara In Vitro . Lentera Bio . 3
(3) : 147 – 153.
Thomy,  Z.  2012. Effect  of  Plant  Growth Regulator  2,4  D  and  BAP  on  Callus Growth  of  Plants  Producing  Gaharu (Aquilaria malaccensis Lamk.). Prasiding Semina Hasil Nasional Biologi. Medan, 11 mei 2012.