## UJI DAYA HAMBAT PERASAN BUAH JERUK SIAM BANJAR ( Citrus reticulata)

## TERHADAP PERTUMBUHAN Shigella dysenteriae
Eka Kumalasari, Muhammad Arsyad, Reza Nur Rahman Akademi Farmasi ISFI Banjarmasin Email: ekakumalasari260989@gmail.com

## ABSTRAK
Jeruk siam ( Citrus reticulata ) merupakan jenis jeruk yang banyak terdapat di Kalimantan Selatan dan merupakan varietas unggul nasional dengan nama jeruk siam Banjar. Buah jeruk mengandung metabolit sekunder flavonoid, alkaloid dan saponin yang menyebabkan terjadinya kerusakan permeabilitas dinding sel bakteri. Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  daya  hambat  perasan  buah  jeruk siam banjar terhadap pertumbuhan Shigella dysenteriae . Penelitian yang dilakukan adalah penelitian eksperimental laboratorium. Uji daya  hambat  perasan  buah  jeruk  siam  banjar  ( Citrus  reticulata) terhadap pertumbuhan Shigella dysenteriae dilakukan dengan metode difusi yang dilakukan di Laboratorium Bakteriologi Balai Veteriner Banjarbaru.
Hasil  skrining  fitokimia  menunjukkan  bahwa  perasan  buah  jeruk  siam banjar mengandung alkaloid, saponin, dan flavonoid. Hasil penelitian menunjukkan bahwa  perasan  buah  jeruk  siam  banjar  memiliki  daya  hambat  terhadap pertumbuhan Shigella  dysenteriae secara  in  vitro dengan  konsentrasi  25%,  50%, 75%  dan  100%.  Semakin  tinggi  konsentrasi  perasan  buah  jeruk  siam  banjar, semakin besar diameter zona hambat yang dihasilkan.
Kata Kunci : Daya Hambat, Perasan Buah Jeruk Siam banjar, Citrus reticulata, Shigella dysenteriae .

## ABSTRACT
Siam orange ( Citrus reticulata ) is kind of orange which a lot in Sout Borneo and  a  national  top  variety  called  banjar  siam  orange.  Orange  contains  secondary metabolites  flavonoids,  saponins,  alkaloids  which  cause  damage  bacteria  cell  wall permeability. Objective of this study is to find out inhibition siam orange fruit squeeze to Shigella dysenteriae growth.
This study is an experimental research laboratory. Inhibition test of siam banjar orange ( Citrus reticulata ) fruit squeeze to Shigella dysenteriae growthwas conducted with  diffusion  methodwhich  performed  at  Bacteriology  Laboratory  of  Banjarbaru Center Veterinary.
Result  of  phytochemicals  screening  showedthat  banjar  siam  orange  fruit squeeze contain alkaloids, saponins, and flavonoids. Result of the study showed banjar siam orange fruit squeeze has the ability to inhibite Shigella dysenteriae growth with 25%,  50%,  75%  and  100%  concentrations.  The  higher  concentration  of  banjar  siam orange squeeze, the greater diameter of inhibition zone result.
Keyword : Inhibition, Banjar Siam Orange Squeeze, Citrus reticulata, Shigella dysenteriae .

## PENDAHULUAN
Disentri  merupakan  suatu infeksi  yang  menyebabkan  tukak  di colon  yang  ditandai  dengan  gejala khas  yang  disebut  sebagai  sindroma disentri,  yakni:  sakit  di  perut  yang sering  disertai  dengan  tenesmus, berak-berak,  dan  tinja  mengandung darah  dan  lendir.  Adanya  darah  dan lekosit  dalam  tinja  merupakan  suatu bukti bahwa kuman penyebab disentri tersebut menembus dinding kolon dan bersarang di bawahnya. Wabah umumnya  terjadi  pada  kelompok homoseksual, pada
kondisi “crowding”,  ditempat-tempat  dimana sanitasi  lingkungan  dan  kebersihan perorangan  rendah  seperti  di  penjara, tempat  penitipan  anak,  panti  asuhan, rumah  sakit  jiwa  dan  pada  tempat pengungsi yang padat.
Ada  empat  spesies  Shigella, yaitu Shigella flexneri, Shigella dysentriae, Shigella boydii dan Shigella  sonnei .  Pada  umumnya S. flexneri,  S.Boydii  dan  S.  dysentriae paling  banyak  ditemukan  di  negara berkembang seperti Indonesia.
Sebaliknya S.  sonnei paling  sering ditemukan  dan S.  dysentriae paling sedikit  ditemukan  di  negara  maju.
Antibiotik  terpilih  untuk  infeksi
Shigella adalah ampisilin, kloramfenikol, sulfametoxazol-
trimetoprim.  Beberapa  sumber  lain menyebutkan bahwa kanamisin, streptomisin dan neomisin merupakan antibiotik  yang  dianjurkan  untuk kasus- kasus infeksi Shigella.
Masalah resistensi kuman Shigella  terhadap  antibiotik  dengan segala aspeknya bukanlah merupakan suatu  hal  yang  baru.  Shigella  yang resisten terhadap multiantibiotik (seperti S.  dysentriae )  ditemukan  di seluruh  dunia  dan  sebagai  akibat pemakaian  antibiotika  yang  tidak rasional.
Hal inilah yang menyebabkan berkembangnya
pengobatan  dengan  bahan  alam  saat ini, selain dapat menekan biaya, bahan alam  juga  mudah  didapat  di  sekitar kita.  Salah  satu  bahan  alam  yang sering kita temui dan yang sering kita konsumsi  yakni  perasan  buah  jeruk siam banjar.
Jeruk  siam  banjar  merupakan produk  Kalimantan  Selatan  yang dikukuhkan  melalui  SK  Menteri
Pertanian Nomor:
862/Kpts/TP.240/II/1998  tanggal  4
November 1998 sebagai buah
unggulan  nasional.  Jeruk  ini  lazim dikonsumsi oleh sebagian besar warga
Kalimantan Selatan.
Hal ini
dikarenakan  rasanya  yang  manis  dan segar,  harga  yang  relatif  terjangkau serta  mudah  didapat  oleh  masyarakat Kalimantan Selatan.
Berdasarkan  penelitian  yang telah dilakukan Razak dkk. (2013), air perasan  buah  jeruk  nipis  ( Citrus aurantifolia) memiliki  daya  hambat
terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus secara in vitro.
Hasil  dari  beberapa  penelitian  juga mengatakan  bahwa  tanaman  citrus banyak mengandung senyawa flavonoid, saponin, tanin dan alkaloid
yang mana senyawa tersebut berkhasiat sebagai antibakteri.
Berdasarkan penelitian tersebut penyusun  tertarik  untuk  meneliti potensi  daya  hambat  perasan  buah jeruk  siam  banjar  yang  merupakan produk unggulan di provinsi
Kalimantan Selatan terhadap pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae. Metode Penelitian Jenis  penelitian  ini  adalah
penelitian eksperimental yang
dilakukan pada bulan November 2013 sampai  dengan  Januari  2014  di Laboratorium Bakteriologi Balai Veteriner Banjarbaru.
Populasi  dari  penelitian  ini adalah  buah  jeruk  siam  banjar  yang berumur  ±  4  bulan  yang  diambil  dari kebun jeruk di Kecamatan Mandastana  Kabupaten  Barito  Kuala. Sampel  pada  penelitian  ini  adalah perasan buah jeruksiam banjar dengan konsentrasi  25%,  50%,  75%  dan 100%.
Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini adalah cawan petri, oshe kolong,  tabung  reaksi,  gelas  beker, spuit  1  ml,  spuit  5  ml,  sarung  tangan steril, batang pengaduk, jangka sorong,  standar  Mc  Farland  1, autoklaf, lampu spiritus, kertas saring, saringan  plastik,  rak  tabung,  tabung reaksi,  kertas  cakram  kosong.  Bahan yang dipakai pada penelitian ini adalah biakan Shigella  dysenteriae ,  media MHA, perasan buah jeruk siam banjar, aquades,  kertas  cakram  Metronidazol 500 mg, alkohol 96%.
Penelitian  di  awali  dengan dilakukannya skrining fitokimia untuk mengetahui senyawa yang terkandung didalam  perasan  buah  jeruk  siam
banjar,  dengan  metode  uji  tabung menggunakan  pereaksi-pereaksi  yang sesuai  untuk  golongan  senyawa  yang akan  di  uji  yaitu  alkaloid,  polifenol, tanin, flavonoid dan saponin.
Uji mikrobiologi pada penelitian  ini  menggunakan  metode difusi dengan merendam zat yang akan di  uji  pada paper  disc kemudian dilektakkan  dipermukaan  media  yang sudah  disebarkan  suspensi  bakteri. Kemudian  diinkubasi  selama  24  jam pada suhu 37°C. Penilaiannya berdasarkan  daerah bening atau yang disebut zona hambat yang
mengartikan  jika  terdapat  daerah bening maka zat yang di uji memiliki kemampuan untuk menghambat
pertumbuhan bakteri.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Jeruk siam banjar dideterminasi  di  Laboratorium  Riset Program  Studi  Pendidikan  Biologi FKIP Universitas Lambung
Mangkurat  Banjarmasin.  Determinasi ini bertujuan untuk mengetahui takson pada  tingkat  familia,  genus,  species dan  varietas  dari  jeruk  siam  banjar yang akan digunakan dalam penelitian.
Penelitian  ini  diawali  dengan melakukan  skrining  fitokimia  untuk mengetahui  kandungan  senyawa  apa saja  yang  terdapat  pada  perasan  buah jeruk siam banjar.  Hasil  dari skrining fitokimia  diketahui  bahwa  perasan buah  jeruk  siam  banjar  mengandung senyawa flavonoid, saponin, polifenol, dan  alkaloid  yang  berpotensi  sebagai antibakteri.
Selanjutnya dilakukan pengujian daya hambat hambat perasan  buah  jeruk  terhadap  Bakteri Shigella  dysenteriae menggunakan metode  difusi.  Pada  uji  penelitian suspensi  bakteri Shigella  dysenteriae diambil 0,2 ml dan kemudian ditanam pada  media  Mueller  Hinton  Agar dengan  cara  disebarkan  merata  pada seluruh  permukaan  agar.  Setelah  itu, suspensi bakteri dalam media tersebut diberi  perlakuan  dengan  meletakkan disk  yang  mengandung  perasan  buah jeruk  siam  banjar  ( Citrus  reticulata ) dengan  konsentrasi  25%,  50%,  75% dan  100%.  Aquadest  sebagai  kontrol negatif  serta  Metronidazol  50  μg sebagai  kontrol  positif.  Setelah  itu diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam.Replikasi  yang  dilakukan  pada penelitian ini adalah sebanyak 5 kali.
Setelah  diinkubasi  pada  suhu 37°C  selama  24  jam,  maka  akan terbentuk zona hambatan. Zona hambatan  ini  adalah  suatu  daerah bening  yang  berasa  di  sekitar  disk yang  membentuk  suatu  lingkaran. Zona hambatan inilah yang kemudian diukur  menggunakan  jangka  sorong yang memiliki ketelitian 0,05 mm.
Dari  uji  penelitian  diperoleh data sebagai berikut :
Tabel 1. Hasil Diameter Zona Hambat dalam Uji Penelitian Konsentrasi Diameter (mm) Diameter rata-rata (mm) I II III IV V Aquades 8 8 8 8 8 8 Metronidazole 50 µg 13,4 13,4 14,1 14 14,5 13,88 25% 10,9 11,1 12,1 11,3 11,1 11,3 50% 11,5 12,2 13,1 11,5 12,4 12,08 75% 12,6 12,8 13,6 12,3 12,9 12,84 100% 13,7 14,1 13,8 14,5 14 14,02
Berdasarkan  tabel  1.  di  atas dapat  dilihat  adanya  perbedaan  rata- rata  diameter  zona  hambatan  pada masing-masing  kelompok  perlakuan. Semakin  tinggi  konsentrasi  perasan yang  digunakan,  semakin  besar diameter zona hambatan yang terbentuk. Kelompok perlakuan dengan  aquades  (kontrol  negatif) tidak  menunjukkan  adanya  zona hambatan, sedangkan pada kelompok perlakuan dengan Metronidazol 50 μg (kontrol  positif)  menunjukkan  rata- rata diameter zona hambatan terbesar terhadap pertumbuhan Shigella
dysenteriae yaitu sebesar 13,88 mm.
Seluruh  zona  hambatan  yang terbentuk pada semua tingkat konsentrasi  lebih  kecil  dibandingkan dengan  zona  hambatan  metronidazol 50  μg  kecuali  konsentari  perasan
jeruk Siam Banjar 100%. Dilihat dari rata-rata hasil penelitian pada tabel 1. perasan  buah  jeruk  siam  banjar konsentrasi 25 % menghasilkan zona hambatan sebesar 11,30 mm, konsentrasi 50 % menghasilkan zona hambatan sebesar 12,08 mm, konsentrasi 75 % menghasilkan zona hambatan  sebesar  12,84  mm  dan konsentrasi  100  %  menghasilkan zona  hambatan  sebesar  14,02  mm. Sedangkan  metronidazol  50  μg  rata- rata  menghasilkan  diameter  zona hambatan sebesar 13,88 mm. Hal ini menunjukkan bahwa efek antibakteri perasan  buah  jeruk  siam  banjar terhadap Shigella  dysenteriae sedikit lebih besar
dibandingkan metronidazol 50 μg.
Jika  diameter  zona  hambatan perasan  buah  jeruk  siam  banjar
dikurangi dengan diameter disk yakni 8  mm,  maka  rata-rata  diameter masing-masing  perlakuan  menjadi  : 25%  =  3,30  mm;  50%  =  4,08  mm; 75%  =  4,84  mm;  dan  100%  =  6,02 mm.  Hasil  tersebut  menunjukkan bahwa  semakin  besar  konsentrasi perasan  buah  jeruk  siam  banjar, semakin  besar  pula  diameter  zona hambat  yang  dihasilkan  terhadap pertumbuhan Shigella dysenteriae .Hal  ini  sesuai  dengan penelitian Razak dkk (2013)
mengenai  Uji  Daya  Hambat  Air Perasan  Buah  Jeruk  Nipis  ( Citrus aurantifolia )  Terhadap  Pertumbuhan
Bakteri Staphylococcus aureus
Secara  In  Vitro  yang  menunjukkan bahwa  semakin  besar  konsentrasi perasan  buah  jeruk  nipis,  semakin besar pula diameter zona hambat yang dihasilkan  terhadap  pertumbuhan Staphylococcus  aureus dengan  rata- rata  diameter  zona  hambat  pada masing-masing  konsentrasi  yaitu  : 25% = 5,167 mm; 50% = 6,167 mm; 75% = 7,5 mm; dan 100% = 10,5 mm.
Zona hambatan yang
terbentuk  pada  semua  kelompok perlakuan  perasan  buah  jeruk  siam banjar  menunjukkan  bahwa  terdapat
daya  hambat  terhadap  pertumbuhan Shigella dysenteriae . Terdapat perbedaan  zona  hambatan  yang terbentuk pada masing-masing konsentrasi. Semakin
tinggi konsentrasi  perasan  buah  jeruk  siam banjar  yang  digunakan,  semakin besar  diameter  zona  hambat  yang dihasilkan.  Hal  ini  karena  semakin besar  kandungan  flavonoid,  saponin dan  alkaloid  dalam  perasan  buah jeruk siam banjar.
Menurut  Wilson  dan  Gisvold (1982) dalam Sabir (2005) disebutkan bahwa flavonoid menyebabkan terjadinya  kerusakan  permeabilitas dinding  sel  bakteri,  mikrosom,dan lisosom sebagai hasil interaksi antara flavonoid  dengan  DNA  bakteri Saponin  bekerja  sebagai  antibakteri dengan mengganggu stabilitas membran sel bakteri sehingga menyebabkan  sel  bakterilisis,  jadi mekanisme  kerja  saponin  termasuk dalam  kelompok  antibakteri  yang mengganggu  permeabilitas  membran sel bakteri yang menyebabkan keluarnya berbagai komponen penting  dari  dalam  sel  bakteri  yaitu protein, asam nukleat dan nukleotida (Ganiswarna,    1995)  .Sedangkan
alkaloid  menurut  Robinson  (1995)
dapat mengganggu komponen penyusun  peptidoglikan  pada  sel bakteri  sehingga  lapisan  dinding  sel tidak  termasuk  secara  utuh  dan menyebabkan  kematian  sel  tersebut .Hal  ini  sesuai  dengan  pendapat Pelczar  dan  Chan  (2005)  yang mengatakan  bahwa  makin  tinggi suatu  zat  antimikroba  akan  semakin cepat  sel  mikroorganisme  terbunuh atau terhambat pertumbuhannya.
Uji  normalitas  data  dilakukan
dengan uji Sahapiro-Wilk dikarenakan  jumlah  data  ˂50.
Didapatakan  nilai  signifikansi  diatas
0,05 yang menunjukkan data terdistribusi normal. Selanjutnya data diuji homogenitasnya dengan menggunakan Levene Test , didapatkan  nilai  signifikansi  diatas 0,05  (0,080)  yang  menunjukkan
varians data homogen. Data terdistribusi  normal  dan  homogen, maka  syarat  uji one  way  Anova terpenuhi. Data diolah dengan menggunakan Statistical  Producy and  Service  Solution  (SPSS)  21  for Windows (Dahlan,2013).
Data diuji dengan One Way Anova digunakan  untuk  mengetahui  apakah
terdapat  perbedaan  antara  keenam kelompok  perlakuan..  Uji  One  way Anova dengan tingkat kemaknaan (α) 0,05 didapatkan nilai signifikan ˂0,05 sehingga H0 ditolak dan H1 diterima dan  disimpulkan  terdapat  perbedaan diameter  zona  hambatan  antara keenam kelompok perlakuan (Dahlan, 2013).
Menurut  Dahlan  (2013) Post-Hoc Analysis digunakan untuk menentukan apakah terdapat perbedaan  yang  bermakan  antar kelompok perlakuan. Terdapat perbedaan  yang  signifikan  antar perasan buah jeruk siam  banjar pada semua  tingkat  konsentrasi,  kecuali konsentrasi  25%  dengan  konsentrasi 50%, konsentrasi 50% dengan konsentrasi  75%  serta  konsentrasi 100%  dengan  metronidazol  50  mcg. Hal  ini  disebabkan  rata-.  rata  zona hambatan  yang  dihasilkan  oleh masing-masing konsentrasi tidak berbeda  jauh  yaitu  konsentrasi  25  % sebesar 11,30 mm dengan konsentrasi 50%  sebesar  12,08  mm,  konsentrasi 50%  sebesar  12,08  mm  dengan konsentrasi  75%  sebesar  12,84  mm serta konsentrasi 100% sebesar 14,02 mm dengan metronidazol 13,88 mm.
Oleh  karena  itu  keenam  kelompok perlakuan menunjukkan daya hambat yang  tidak  jauh  berbeda  secar signifikan terhadap pertumbuhan Shigella dysenteriae (Dahlan,2013).

## KESIMPULAN
Dari  hasil  penelitian  yang  dilakukan dapat  diambil  kesimpulan  sebagai berikut  :  Perasan  buah  Jeruk  Siam
Banjar memiliki daya hambat terhadap pertumbuhan Shigella
dysenteriae secara  in  vitro.  Perasan buah  Jeruk  Siam  Banjar  dengan konsentrasi 25 %, 50 %, 75 % dan 100 % memberikan diameter zona hambat dengan rata-rata masing-masing sebesar 11,30 mm;  12,08 mm;  12,84 mm dan 14,02 mm.

## DAFTAR PUSTAKA
Dahlan,  M.S.  2013, Statistik  Untuk Kedokteran dan Kesehatan, Edisi 5,  Salemba  Medika,  Jakarta, Indonesia.
Ganiswarna,  S.  1995, Farmakologi dan  Terapi, Edisi  4,  Penerbit  UI, Jakarta,  Indonesia  cit  Darsana, I.G.O., Besung, I.N.K., dan Mahatmi,  H.,  2012,  Potensi  Daun
Binahong (Anredera  cordifolia (Tenore) Steenis) Dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Escherichia Coli Secara In
Vitro,Indonesia Medicus Veterinus , 2012 1(3) :337 – 351.
Heinrich,  M.,  Barnes,  J.,  Gibbsons S.and  Williamson,  E.M.  2010,
Farmakognosi  dan  Fitoterapi ,
EGC, Jakarta. Indonesia
Irianto, K. 2006, Mikrobiologi Menguak Dunia Mikroorganisme ,  Jilid  1,  Yrama Widya, Bandung, Indonesia. Notoatmojo,  S.  2005, Metodologi Penelitian Kesehatan, Edisi
Revisi,  Bineka  Cipta,  Jakarta,
Indonesia.
Pelczar  dan  Chan,  1986, Dasar- Dasar Mikrobiologi Jilid I , diterjemahkan  oleh  Ratna  Siri Hadioetomo, Teja Imas, S. Sutami,
Sri Lestari, Universitas Indonesia, Jakarta Razak,  A.,  Djamal,  A.,  Revilla,  G.
2013,  Uji  Daya  Hambat  Perasan Air  Buah  Jeruk  Nipis  ( Citrus aurantifolia s .) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus  aureus Secara  In Vitro,  Jurnal  Kesehatan  Andalas, 2(1):5-8. Robinson,  T.,  1995, Kandungan Organik  Tumbuhan  Tinggi ,  edisi keenam, Departement of Biochemistry University of Massachussetts, diterjemahkan oleh  Kosasih,  P.,  Penerbit  ITB,
Bandung. Hal : 157, 161, 198.
Wilson and  Gisvold.  1982, Kimia Farmasi  dan  Medisinal  Organik , Edisi 8, Dirjen Dikti dan Kebudayaan, Jakarta. Indonesia cit Sabir, A., 2005, Aktivitas Antibakteri  Flavonoid  Propolis
Trigona  sp Terhadap  Bakteri Streptococcus  mutans (in  vitro), Majalah  Kedokteran  Gigi ,  Juli- September2005, hal 135-141.