Dari hasil perhitungan rendemen di atas didapatkan rendemen ekstrak etil asetat sebesar 10,03%,
2. Fraksinasi ekstrak etil asetat
Tahapan fraksinasi pada ekstrak etil asetat dilakukan untuk  melacak  aktivitas  sitotoksisitas  dari  masing  – masing fraksi yang diperoleh sampai didapatkan fraksi yang mempunyai aktivitas sitotoksik yang paling kuat 50mg,  jahe  25mg,  mempunyai  efek  antiasma  yang sama dengan Telfast® sebagai kontrol positif.

## Tabel 2. Hasil fraksinasi ekstrak etil asetat
Fraksi ke Pengamatan secara visual Efluen Penyusun Berat ( mg ) 1 (A) Merah bata 59, 60, 61 508,8 2 (B) Coklat kemerahan 62, 63, 64, 65,66 1387 3 (C) Coklat kemerahan 67, 68 957 4 (D) Coklat agak tua 69, 70, 71, 72, 73 1369 5 (E) Coklat tua 74,75,76,77,78,79,80 867 6 (F) Coklat tua 81, 82, 83, 84, 85, 86 388
3. Penentuan kualitatif fraksi etil asetat
Dari  hasil  penentuan  kualitatif  fraksi  etil  asetat terhadap  alkaloid,  flavonoid  dan  fenolik  maka didapatkan hasil yang positif yaitu flavonoid dan fenolik. Uji kualitatif yang dilakukan menggunakan KLT dan hasil yang didapatkan diamati secara UV 254 nm, UV 366 nm dan secara visible
3.1 KROMATOGRAM  FENOLIK
Sampel : Ekstrak umbi sarang semut Visibel                         UV 254 nm                UV 365 nm Visibel                         UV 254 nm                UV 365 nm
Gambar 1. Hasil uji kualitatif  KLT fenolik
P : Pembanding Fenol E.merck S : Sampel : K1, K2, K3 Analisa: Kualitatif Senyawa Fenolik
Metode     : TLC Fase Diam : Silika gel 60 F 254 Fase Gerak: Metanol – Asam Formiat 10% (95-5) Pereaksi     : Ferri Chloride Warna spot di bawah sinar UV 254 nm : redam Warna spot senyawa fenolik : hijau kelabu - kelabu Senyawa fenolik terdeteksi    : K1 Rf. 0.75 K2 Rf. 0.75 K3 Rf. 0.75 3.2. KROMATOGRAM  FLAVONOID Sampel : Ekstrak umbi sarang semut
Gambar 2. Hasil uji kualitatif  KLT flavonoid
P : Pembanding Rutin S : Sampel : K1, K2, K3 Analisa       : Kualitatif Flavonoid Metode     : TLC Fase Diam : Cellulosa Fase Gerak: Etil Asetat – Asam Formiat – Asam Asetat – Air (100-11-11-27) Pereaksi     : Amoniak
Warna spot di bawah sinar UV 254 nm : redam Warna spot flavonoid: kuning Flavonoid terdeteksi  : K1 Rf. 0.88 K2 Rf. 0.88 K3 Rf. 0.88 4. Penentuan aktivitas sitotoksik ekstrak etil asetat serta masing – masing fraksinya
Uji sitotoksik ini digunakan pelarut DMSO disertai control  uji  menggunakan  DMSO.  Pengaruh penggunaan berbagai konsentrasi pelarut DMSO
pada  kematian  sel  HeLa  menunjukkan  bahwa kontrol pelarut dengan konsentrasi tertinggi 0,1 % ada pengaruh sedikit pada kematian sel HeLa. Hal ini  dapat  dilihat  pada  morfologi  sel  HeLa  pada control pelarut dan kontrol negative.

## A                                                    B
Gambar 3. Foto mikroskopik morfologi sel HeLa tanpa perlakuan pelarut/ control sel (A) dan (B) dengan control pelarut medium penumbuh dengan konsentrasi 0,1 % Sel hidup
Pada  penelitian  ini  ekstrak  etil  asetat  mempunyai aktivitas toksik pada sel HeLa yang dapat ditunjukkan dengan penampakan sel dengan perlakuan ekstrak etil  asetat  pada  Fraksi  A  dan  B  sedangkan  pada Fraksi  C,  D,  E  da n  F  pada  konsentrasi  200  ;  100  ;
50  ;  25  dan  12,5    ìg/ml  sel  HeLa  masih  banyak yang  hidup  dapat  dilihat  berdasarkan    morfologi sel HeLa pada Gambar 4. (A-F) = A
Gambar 4. Pengaruh ekstrak etil asetat pada Fraksi (A – F) perwakilan = A pada konsentrasi 200 ; 100 ; 50 ; 25 dan
12,5  ìg/ml terhadap morfologi sel HeLa
Jumlah  morfologi  sel  HeLa  yang  paling  banyak adalah pada kelompok Media control (x). Sel HeLa setelah  diberi  ekstrak 200  ;  100  ;  50  ;  25  dan 12,5 ìg/ml pada Fraksi A dan B mengalami kematian tetapi  pada  Fraksi  C,  D,  E  dan  F  sel  HeLa  masih banyak yang hidup :                           = Sel HeLa Mati ; = Sel HeLa Hidup
Keterangan :
Sel mati tidak akan mereduksi MTT ( Microculture
Tetrazolium Salt ) yang ditunjukkan pada Gambar 5.

## Setelah Penambahan MTT
Gambar 5. Pengaruh ekstrak etil asetat setelah penambahan MTT pada Media control (X) dan Fraksi (A – F) perwakilan = A dengan konsentrasi 200 ; 100 ; 50 ; 25 dan 12,5  ìg/ml terhadap morfologi sel HeLa
Keterangan : Setelah pemberian MTT Jumlah sel HeLa yang paling  banyak  adalah  pada  kelompok  Media control (x). Sel HeLa setelah diberi ekstrak 200 ;
100 ; 50 ; 25 dan 12,5  ìg/ml pada Fraksi A dan B mengalami kematian tetapi pada Fraksi C, D, E  dan  F  sel  HeLa  masih  banyak  yang  hidup  : = Sel HeLa Mati ;           = Sel HeLa Hidup

## KESIMPULAN
Dari hasil penelitian dan pembahasan maka dapat diambil kesimpulan yaitu :
Dua  fraksi  yang  bersifat  sitotoksik  kuat  yaitu  fraksi satu (A) dan fraksi dua (B) dengan LC50 =  60.97 ìg/ml dan 71.86 ìg/ml  sedangkan fraksi tiga (C), empat (D), lima (E), dan  enam  (F)  tidak  bersifat  sitotoksik  pada  sel  HeLa dengan  harga  LC50  >  100  ìg/ml  yaitu  29730898ìg/ml, 13980.373ìg/ml  dan 2667076808 ìg/ml

## DAFTAR PUSTAKA
Ahkam Subroto, M., dan Hendro Saputro, Gempur Penyakit Dengan Sarang Semut, Jakarta, 2006
Akowuah, G.A.,Zhari I., Norhayati I., Sadikun A., and Khamsah, S.M., 2004, Sinensetin, eupatorin, 3'-hydroxy-5,6,7,4'-tetra methoxy flavone and Rosmarinic Acid Contents and Antioxidative Effect of Orthosiphon stamineus from Malaysia, J Food Chem, 87, 559-566
Anonim, Dyeing Reagents for Thin Layer and Paper Chromatography, E.Merck, Darmstadt, Germany, 1978,p. 52, no. 166.
Anonim, 1985, Cara Pembuatan Simplisia, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, 1, 9-19, 108-110.

## Dyah Susilowati, Vivin Nopiyanti