## UJI ANTIINFLAMASI FRAKSI ETIL ASETAT KULIT KAYU AKWAY (Drymis piperita) ASAL PAPUA PADA TIKUS (Ratus
norvegicus) JANTAN
Submitted : 3 Desember 2020 Edited : 22 Mei 2020 Accepted : 29 Mei 2021
Rani Dewi Pratiwi, Elsye Gunawan
Jurusan Farmasi, Universitas Cenderawasih  Papua 99351 Indonesia Email : ranidp2987@gmail.com

## ABSTRACT
This study aimed to test the anti-inflammatory effect of ethyl acetate fraction of akway bark (Drymis piperita) on male mice (Hundred norvegicus) and look at pain responses in test animals. The use of akway bark by the local community by boiling and boiling water is then drunk, there are also local people who directly use by chewing. Akway bark anti-inflammatory test and pain response to male rats with a test sample concentration of 200 mg/kg. The method to be used in the study for anti-inflammatory test of akway bark is by the formation of artificial inflammation in the soles of the left foot of male rats while the pain response method uses the Tail flick Method. The test animals were made in 3 groups in each test with a total of 5 heads per group. Group 1 was given positive control (anti-inflammatory testing using mefenamic acid, while pain response test using Na Diclofenac), group 2 was given negative control (CMC) and and group 3 was given a test solution. The test results showed anti-inflammatory activity of ethyl acetate fraction of the skin  had  anti-inflammatory  activity  with  a  percent  anti-inflammatory  power  of  48.47%,  while percent pain resistance of ethyl acetate fraction of the bark akway by 33.02%.

## Keywords : Fraction, Akway Bark, Anti-Inflammatory, Pain Response

## PENDAHULUAN
Beberapa  penelitian  tentang  senyawa fitokimia  penyusun  akway  telah  dilaporkan. Fraksi etanol kulit kayu akway mengandung senyawa  alkaloid,  saponin,  triterpenoid, flavonoid  dan  tanin (1) ,  sedangkan Fraksi metanol  dan  atilasetatnya  mengandung alkaloid, saponin, tanin, flavonoid, terpenoid dan  glikosida (2) .  Fraksi  etanol  daun  akway mengandung aristolon 32,41%, asam linoleat 8,22%  dan  stigmasterol  5,25%  sedangkan kulit  kayunya  mengandung  asam  metoksi karbonat 7,27%, 2,6-dimetoksi fenol 5,72%,
dan asam-2,4-heksadienoat 6,41% (3) .
Penelitian  tentang  komposisi  kimia  minyak atsiri  kulit  kayu  akway    telah  dilaporkan. Minyak  kulit  kayu  akway  (Drimys  piperita Hook.f)  tersusun  atas  senyawa  terpen  dan
turunannya sebesar  80,49%  (monoterpen 66,67%  dan  seskuiterpen  33,33%)  dan senyawa  alifatik  sebesar  4,88%.  Senyawa penyusun  utama  minyak  atsiri  kulit  kayu akway  adalah  α -pinen,  ß-pinen  dan  4- terpineol  dengan  konsentrasi  20,24, 14,88 dan  13,  16% .  Penelitian  Pratiwi  (2020) menunjukkan Fraksi  Etil  Asetat  Kulit  Kayu Akway  memiliki  efek  stimulansia  terhadap tikus (Rattus norvegicus) jantan (4) . Pengembangan  produk  kulit  kayu  akway telah  diteliti  oleh  Halik  dkk  (2021), menghasilkan produk minuman tonikum dari kulit  kayu  akway  yang  memiliki  efek stimulansia terhadap tikus jantan (5) .
Bagian tumbuhan akway yang
dimanfaatkan  oleh  masyarakat  yaitu  bagian kulit kayu dan daun, tumbuhan dan kulit kayu
akway  dapat  dilihat  pada  Gambar  1. Tumbuhan  akway  sering  digunakan  oleh masyarakat Papua, terutama masyarakat yang berdomisili di Distrik Minyambouw. Bagian kayunya  dipercaya  mampu    meningkatkan vitalitas  dan  daya  tahan  tubuh  seseorang meski  harus  berjalan  jauh  dengan  medan yang sangat menantang serta dapat menyembuhkan  sakit  di  persendian  atau peradangan.
Gambar 1. (a) Kulit kayu Akway,
(b) Pohon kayu Akway (6)
Inflamasi  adalah  respon  perlindungan normal  terhadap  cedera  jaringan  yang disebabkan  oleh  trauma  fisik,  bahan  kimia berbahaya,  atau  agen  mikroorganisme. Inflamasi adalah usaha tubuh untuk menginaktifkan atau
menghancurkan organisme penginvasi, menghilangkan iritan, dan  persiapan  tahapan  untuk  perbaikan jaringan (7) . Radang atau inflamasi merupakan proses  respon  tubuh  terhadap  rangsangan merugikan  yang  ditimbulkan  oleh  berbagai
agen  berbahaya  seperti  infeksi,  antibody ataupun  luka  fisik (8) .  Pengobatan  inflamasi pada  umumnya  menggunakan  obat-obat antiinflamasi  non  steroid  (AINS)  seperti golongan  oksikam,  tetapi  memiliki  efek samping pada tukak lambung. Beberapa obat antiinflamasi  juga  memiliki  efek  analgesik. Oleh karena itu pemanfaatan tumbuhan obat dengan khasiat anti inflamasi dan menurunkan  respon  nyeri  perlu  dilakukan untuk  menemukan  alternatif  pengobatan dengan efek samping yang lebih kecil.

## METODE PENELITIAN Alat
Spuit  injeksi  1,0  ml  dan  spuit  injeksi oral  3,0  ml,  sonde,  timbangan  mencit  , stopwatch  dan  alat-alat-gelas,  wadah  kaca, timbangan  analitik,  mortar,  stamper, mixer, vortex, penangas air, alat gelas, sentrifugasi, rotary  evaporator, termometer, hot  plate, oven,  ayakan,  botol  vial,  wadah  kaca, kandang mencit.

## Bahan
Ekstrak  Simplisia  Kulit  Kayu  Akway (Drimys piperita), Tikus  Jantan, Etanol 96%,
Etil, Aquadest, Water for injection,
handscone, masker.

## Pembuatan Fraksi Kulit Kayu Akway
Sebanyak  200  gram  serbuk  simplisia ditimbang  kemudian  diekstraksi  secara maserasi  dengan  menggunakan  etanol  96  % sebanyak  1  L  selama  3  hari  sambil  diaduk setiap satu kali 24 jam. Setelah itu, menyaring dan mengumpulkan maserat untuk dilakukan penguapan  pelarut  menggunakan rotary vacuum evaporate dengan  suhu  50°C sehingga didapatkan ekstrak kental.
Ekstrak  etanol  sebanyak  15  mg  dipartisi menggunakan  corong  pisah  dengan  pelarut yang  etil  asetat.  Ekstrak  etanol  dilarutkan dengan menggunakan etanol:air (1:1)
sebanyak 120 ml lalu dimasukkan  ke dalam corong  pisah  dan di  partisi etil  asetat
sebanyak  20  ml  dengan  pengulangan  3  kali sehingga  total  pelarut  yang  digunakan sebanyak  60  ml.  Ekstrak  yang  didapat dipekatkan menggunakan rotary  vacum evaporator serta disempurnakan pengeringannya dengan menggunakan penangas  air sehingga  didapatkan  ekstrak kental fraksi etil asetat.
Pengujian Respon Nyeri (Analgesik) Uji respon nyeri (Analgesik)
menggunakan  Metode Tail  flick. Uji  respon nyeri  (Analgesik) fraksi kulit  kayu  akway pada  tikus  digunakan  15  ekor  yang  dibagi kedalam  3  kelompok  perlakuan.  Masing- masing  kelompok  terdiri  dari  5  ekor.  Tiap kelompok diberi perlakuan kemudian diinduksi dengan panas yang berasal dari alat tail-flick kemudian  untuk  tiap  tikus diamati waktu  responnya  yang  ditunjukan  dengan menggeser  atau  mengangkatnya  ekor  tikus secara  tiba-tiba.  Kelompok  1  sebagai kelompok kontrol pembanding/kontrol positif yang diberi suspensi asam mefenamat dengan  dosis  63  mg/kgBB,  kelompok  2 sebagai kelompok kontrol negatif yang diberi suspensi CMC Na 0,5%, kelompok 3 sebagai kelompok  uji  fraksi  etil  asetat  kulit  kayu akway dengan dosis 200 mg/kg BB.

## Pengujian Aktivitas Antiinflamasi

## Penelitian  ini  menggunakan  metode
Paw  Edema dengan  menggunakan  15  ekor tikus  yang  kemudian  dibagi  ke  dalam kelompok  yaitu    kelompok  kontrol  negatif, kelompok  kontrol  positif,  dan  kelompok hewan  uji.  Masing-masing  kelompok  terdiri dari 5 ekor tikus. Sebelum diberi perlakuan, semua  tikus  dipuasakan  selama  12-18  jam. Masing-masing hewan ditimbang  dan  diberi tanda  pada  kaki  kirinya,  kemudian  kaki  kiri tikus  dimasukan  kedalam  alat  pengukur volume udema dan dicatat volume awal (Vo) kaki  tikus.  Selanjutnya,  kepada  masing- masing kelompok uji diberi perlakuan secara per oral dengan ketentuan sebagai berikut :
a. Kelompok I (kontrol negatif) sebanyak 5 ekor tikus. Kelompok ini diberi suspensi CMC  1  %  (b/v)  dan  injeksi  dengan karagenan 1 % (b/v).
b. Kelompok  II  (kontrol  positif)  sebanyak 5 ekor tikus. Kelompok ini diberi larutan Natrium  diklofenak  dengan  dosis  200 mg/kg  BB  dan  diinjeksikan  dengan karagenan 1 % (b/v).
c. Kelompok  III  (Fraksi  etil  asetat) sebanyak  5  ekor  tikus.  Kelompok  ini diberi  suspensi  ekstrak  daun  gatal dengan  dosis  200  mg/kg  BB  dan diinjeksi dengan karagenan 1 % (b/v).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Skrining Fitokimia
Berdasarkan  hasil  skrining  fitokimia fraksi etil asetat kulit kayu akway diperoleh hasil sebagai berikut (Tabel 1) :

## Tabel 1. Hasil Skrining Fitokimia Fraksi Etil

## Asetat Kulit Kayu Akway
Metabolisme Sekunder Ektrak Saponin Negatif Tanin Negatif Flavonoid Positif Alkaloid Positif Kuinon Positif Triterpenoid Positif Berdasarkan  hasil  skrining  fitokimia, fraksi etil asetat kulit kayu akway mengandung  senyawa  metabolit  sekunder antara  lain  flavonoid,  alkaloid  kuinon  dan terpenoid.

## Respon Nyeri (Analgesik)
Pengujian  respon  nyeri  (analgesic) dilakukan  dengan  metode Tail flick (jentik ekor). Hewan yang digunakan sebagai objek penelitian  yaitu  tikus  putih  jantan  (Rattus norvegicus), menggunakan tikus putih jantan karena  kondisi  biologisnya  lebih  stabil dibandingkan  tikus  betina.  Tikus  telah  di aklimatisasi  dahulu  selama  7 hari,  dengan
tujuan  untuk  memberikan  waktu  kepada hewan  beradaptasi  dengan  lingkungan  baru dan  untuk  mengurangi  stress. Sebelum dilakukan  perlakuan,  hewan  uji  dipuasakan dan  hanya  diberikan  minum,  hal  ini dilakukan  dengan  tujuan  agar  pada  saat perlakuan  kondisi  hewan  uji  sama  dan makanan  tersebut  tidak  mempengaruhi sampel uji yang diberikan.
Berdasarkan  hasil  pengujian  respon nyeri  (Tabel  2),  fraksi  etil  asetat  kulit  kayu akway dan kontrol positif (Asam Mefenamat) memberikan  perpanjangan  waktu  respon nyeri pada  menit  ke  30,  60,  90  dan  120 setelah pemberian secara oral.
Persentase  Respon  Hambatan  Nyeri (PHN)  fraksi  etil  asetat  kulit  kayu  akway adalah 33,02%, untuk kontrol positif (Asam Mefenamat) yaitu 37,19%, sedangkan kontrol negatif (CMC-Na)  tidak memberikan prosentase  hambatan  nyeri  (0%) (Tabel  3). Berdasarkan  hasil  penelitian,  fraksi  kulit kayu  akway  memiliki  aktivitas  analgetic dilihat  dari  nilai  persentase  hambatan  nyeri yang hampir sama dengan kontrol positif.
Senyawa metabolit yang terkandung di dalam fraksi etil asetat kulit kayu akway salah
satunya yaitu flavonoid. Flavonoid merupakan  senyawa  aktif  yang  dapat  larut dalam pelarut etil asetat. Flavonoid merupakan senyawa yang dapat mempengaruhi pengaturan aktivitas metabolisme  enzim  asam  arakidonat (9) , dimana flavonoid dapat menghambat jalur 5- lipoksigenase  dan  jalur  Siklooksigenase-2 (COX-2) yang memproduksi mediator nyeri, hal  ini  sama  dengan  mekanisme  kerja  dari obat  anti  nyeri  golongan  obat  antiinflamasi non  steroid  (OAINS)  dimana  mekanisme kerja OAINS yaitu menghambat
siklooksigenase  (COX)  dan inhibisi  sintesis prostaglandin (10) .

## Efek Antiinflamasi Fraksi Etil Asetat Kulit Kayu Akway
Pengujian aktivitas antiinflamasi dilakukan dengan menggunakan alat plestimometer dengan  prinsip  pengukuran berdasarkan  hukum Archimedes yaitu  bila suatu  benda  yang  dimasukkan  kedalam  zat cair akan memberikan gaya atau tekanan ke atas  sebesar  volume  yang  didesak  atau dipindahkan.  Hasil  pengamatan  volume edema hewan uji (Tabel 4).

## Tabel 2. Waktu rata-rata aktivitas analgetik
Kelompok Tikus ke- (t) Waktu rata-rata (detik) t 30 t 60 t 90 t 120 Kontrol + (Asmef) 1 2,69 4,37 7,57 10,29 2 2,31 4,29 6,23 9,33 3 5,33 5,81 7,90 8,27 4 1,47 2,07 3,42 7,19 5 3,67 6,93 7,66 10,09 Rata-rata 3,094 4,694 6,556 9,034 Kontrol - (CMC-Na) 1 -0,34 -0,88 -1,31 -1,89 2 -0,38 -3,91 -4,37 -6,49 3 -0,31 -0,78 -1,22 -1,51 4 -1,09 -1,57 -1,98 -2,43 5 -0,3 -0,63 -1,70 -2,20 Rata-rata -0,484 -1,554 -2,116 -2,904
Fraksi Etil Asetat Kulit Kayu Akway 1 0,66 1,31 1,96 5,70 2 0,79 4,11 4,79 5,42 3 1,97 2,64 5,81 7,99 4 0,9 2,91 3,42 4,81 5 0,54 2,24 2,24 5,44 Rata-rata 0,972 2,642 3,644 5,872 Tabel 3. Persentase Hambatan Nyeri (PHN) Kelompok Prosentase hambatan nyeri (%) (rata-rata) Kontrol + (Asmef) 37,19 Kontrol - (CMC) 0 Fraksi Etil Asetat Kulit Kayu Akway 33,02

## Tabel 4. Hasil pengamatan volume edema terhadap perlakuan
Perlakuan Tikus Waktu pengamatan (detik) T0 T30 T60 (1jam) T120 (2jam) T180 (3jam) T240 (4jam) T300 (5jam) T360 (6jam) T24jam Kontrol + Na Diklofenak 1 0,1 0,4 0,35 0,32 0,3 0,3 0,3 0,25 0,15 2 0,2 0,35 0,3 0,3 0,3 0,28 0,25 0,24 0,13 3 0,2 0,35 0,32 0,32 0,32 0,3 0,3 0,27 0,15 4 0,15 0,45 0,44 0,44 0,4 0,37 0,35 0,3 0,21 5 0,2 0,4 0,4 0,36 0,36 0,33 0,29 0,25 0,15 Rata- rata 0,17 0,39 0,362 0,348 0,336 0,316 0,298 0,262 0,158 Kontrol - (CMC) 1 0,3 0,4 0,42 0,45 0,45 0,46 0,47 0,47 0,44 2 0,2 0,35 0,4 0,41 0,43 0,43 0,42 0,4 0,4 3 0,1 0,4 0,45 0,45 0,47 0,5 0,5 0,5 0,48 4 0,15 0,35 0,38 0,4 0,4 0,4 0,42 0,45 0,45 5 0,12 0,4 0,4 0,43 0,44 0,45 0,45 0,45 0,48 Rata- rata 0,174 0,38 0,41 0,428 0,438 0,448 0,452 0,454 0,45 Fraksi  Etil Asetat Kulit Kayu Akway 1 0,12 0,4 0,4 0,4 0,35 0,32 0,3 0,25 0,2 2 0,2 0,36 0,35 0,35 0,33 0,3 0,26 0,23 0,24 3 0,1 0,45 0,41 0,41 0,37 0,3 0,25 0,23 0,22 4 0,11 0,5 0,5 0,45 0,41 0,36 0,3 0,25 0,15 5 0,15 0,4 0,35 0,32 0,3 0,3 0,25 0,21 0,1 Rata- rata 0,14 0,42 0,40 0,39 0,35 0,32 0,27 0,23 0,18
Kelompok  Uji  fraksi  kulit  kayu  akway menunjukkan  peningkatan  volume  radang maksimum  pada  menit  ke-120  dan  volume radang  menurun  mulai  pada  menit  ke-180,
sedangkan pada kelompok Natrium diklofenak sebagai pembanding
menghasilkan pembentukan  volume  radang maksimum pada menit yang sama yaitu menit ke-120  dan  penurunan  volume  radang  pada menit sama juga yaitu menit ke-180.

## Tabel 5. Persen (%) Daya Antiinflamasi
Kelompok Prosentase pengshambatan udem  (%)  (rata- rata) Kontrol + (NA- Doklofenak)) 37,89 Kontrol - (CMC-Na) 0 Fraksi  Etil  Asetat  Kulit Kayu Akway 48,47 Hasil perhitungan persentase
penghambatan  radang  menunjukkan  bahwa kontrol  negatif  (CMC-Na)  tidak  memiliki efek  penghambatan  udem(0%).  Natrium diklofenak  sebagai kontrol  positif  memiliki persentase  penghambatan  udem  sebesar 37,89%,  sedangkan  pada  fraksi  etil  asetat kulit  kayu  akway  memiliki  persentase penghambatan udem sebesar 48,47% (Tabel 5).
Kandungan  senyawa  aktif  pada  fraksi etil  asetat  kulit  kayu  akway  salah satunya yaitu  flavonoid.  Berdasarkan  penelitian Aquila  et  al (2009), flavonoid  yang  berasal dari Cayaponia  tayuya memiliki  aktivitas antiinflamasi  dengan  menghambat  enzim COX-2  dan  iNOS (11) .  Penelitian  yang dilakukan  Choi  et  al  (2012),  melaporkan bahwa senyawa flavonoid yang diisolasi dari Rhus  verniciflua dapat  menekan  ekspresi sintase  oksida  nitrat  yang  diinduksi  (iNOS) dan siklooksigenase-2 (COX-2) (12) . Mediator inflamasi  yang  terlibat  dengan  reaksi inflamasi  dan  reaksi  imun  antara  lain histamin,  eicosanoid,  leukotrien,  bradikinin, Platelet  Activating  Factor (PAF),  nitrit
oksida, neuropeptide dan sitokinin (13) .
Flavonoid  memiliki  kemampuan  memblok siklooksigenase  dan  lipooksigenase  asam arakidonat sehingga sintesis PGE2, leukotrien, histamin, bradikinin dan tromboksan terhambat (14) . Adanya
kemampuan  flavonoid  dalam  menghambat sintesis mediator inilah yang berperan dalam mengurangi edema.

## SIMPULAN
Berdasarkan hasil pengujian antiinflamasi fraksi  etil  asetat  kulit  kayu akway  dapat  disimpulkan  bahwa  fraksi  etil asetat  kulit  kayu  akway  memiliki  aktifitas antiinflamasi dengan persen daya
antiinflamasi  sebesar  48,47%,  sedangkan persen hambatan nyeri fraksi etil asetat kulit kayu  akway  sebesar  33,02%. Saran  untuk penelitian  selanjutnya  antara  lain  :  perlu dilakukan  pengujian  antiinflamasi  dengan metode  yang  lainnya,  melakukan  isolasi senyawa  aktif  yang  ada  di  dalam  ekstrak maupun fraksi kulit kayu akway.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Cepeda,  G.N.  2008.  Daya  hambat Akway  (Drymis  piperita Hook  f.) terhadap pertumbuhan Escherichia coli.
Agrotek. 1(3): 41-50.
2. Cepeda,  G.N,  B.B.  Santoso,  M.M. Lisangan,  dan  I.  Silamba.  2010. Penapisan  fitokimia  Akway  (Dimyris piperita Hook f.). Agrotek. 1(8): 28-33.
3. Paisey,  E.K.  2009.  Kajian  kimia  kayu akway  (Drimys- sp )  sebagai  afrosidiak endemik Papua. Agrotek., 1(6): 16-22.
4. Pratiwi,  Rani  D.,  Simaremare,  Eva.S. 2020. Uji Efek Stimulansia Ekstrak Etil Asetat  Kulit  Kayu  Akway  (Drymis piperita) Asal Papua Pada Tikus (Ratus norvegicus)  Jantan.  Jurnal  Biologi Papua. Vol 2, No 1, Halaman: 37 – 42 5. Halik,  Noviana.,  Pratiwi,  Rani.  D.,
Gunawan,  E.  2021  Pengembangan Produk  Minuman  Tonikum  Kulit  Kayu Akway  (Drymis  piperita hook)  :
Prospek  Bahan  Pangan  Asal  Papua Sebagai  Penambah  Stamina  Tubuh
Secara  In  Vivo.  Skripsi,  Jurnal  Biologi Papua. Vol 13, No 1, Halaman: 44-51 6. Pratiwi, Rani D., Lefaan P.L, Gunawan E,  Simaremare,  Eva.S.,Rusnaeni.  2018.

## Tonic Effect Of The Ethanol Extract Of
Drymis Sp.  Stem  Bark  From  Papua  Of
Mice (Mus musculus), Headway Global Research Consultacy, PTE LTD 7. Harvey Richard A dan Champe Pamela C. 2014. Farmakologi Ulasan Bergambar Edisi 4. ECG, Jakarta. 8. Goodman  and  Gilman.  2006.  The Pharmacological  Basis  of  Therapeutics Eleventh  Edition.  United  States  Of America : The McGraw-Hill Companies, Inc.
9. Chinna Manickam, Devi P. R.,
Fazaludeen  M.  F.  2010.  Evaluation  of Anti-Inflammatory  Activity  of  Justicia gendarussa  Burm.f.  Leaf  Extract  in Adjuvan  Induced  Arthritis  Rats.  Int  J Med Res. 163-169. 10. Neal,  Michael  .J.  2006. At  a  Glance
Farmakologi Medis Edisi ke 5. Penerbit Erlangga. Jakarta.
11. Silvia  Aquila, Rosa  M.Giner, María
C.Recio, Etile  D.Spegazzini, José LuisRíos, Anti-inflammatory  activity  of flavonoids from Cayaponia tayuya roots, Journal of Ethnopharmacology, Volume 121, Issue 2, 21 January 2009, Pages 333-337.
12. Nam  ki  Cho, Ji  Hoon  Choi, Hee  Jung Yang, Eun  JuJ  eong, Ki  Yong  Lee, Young Choong Kim, Sang Hyun Sung. 2012. Neuroprotective and anti- inflammatory  effects  of flavonoids isolated from Rhus verniciflua in
neuronal HT22 and microglial BV2 cell lines, Food  and  Chemical  Toxicology, Volume 50, Issue 6, Pages 1940-1945
13. Nugroho, Agung E, 2012, Farmakologi, Obat-Obat Penting dalam Pembelajaran dan  Dunia  Kesehatan,  Pustaka  Pelajar, Yogyakarta.
14. Sabir, A. 2007. Inflammatory Response on  Rat’s  Dental  Pulp  Following
Application of Propolis- Derived Flavonoids  Extract.  Dentika  Dental Journal. Vol 12,no 1,2007. p 34- 37