p-ISSN : 2442-6032 e-ISSN :  2598-9979
DOI : 10.35311/jmpi.v9i2.394
Pengaruh Jenis Pelarut Terhadap Kadar Fenolik dan Flavonoid Total Daun Kesambi ( Schleichera oleosa . L ) Asal kabupaten Gowa
Nursamsiar 1* ,  Alfad  Fadri 1 ,  Marwati 2 ,  Fitriyanti  J.  Sami 1 ,  Nur  Syam  Hidayah  Rahma  Ismail 1 , Henny Kasmawati 3
1 Departemen Analisis Farmasi dan Kimia Medisinal, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Almarisah Madani 2 Departemen Biologi Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Almarisah Madani 3 Fakultas Farmasi, Universitas Halu Oleo

## ABSTRAK
Daun  kesambi  ( Schleichera  oleosa L.)  merupakan  tanaman  yang  banyak  digunakan dalam  pengobatan  karena  mengandung  metabolit  primer  maupun  sekunder  seperti fenolik dan flavonoid. Efek farmakologi dari tanaman ini merupakan sumbangan dari adanya senyawa golongan fenolik dan flavonoid. Penarikan kandungan senyawa dari tanaman  dipengaruhi  oleh  tingkat  kepolaran  pelarut  berdasarkan  prinsip like  dissolve like. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui kadar flavonoid dan fenolik total pada daun kesambi dengan variasi cairan penyari. Simplisia kering daun kesambi diekstraksi menggunakan berbagai pelarut dengan metode ultrasonic assisted extraction (UAE) yang dimulai  dengan  n-heksan  dan  dilanjutkan  secara  berturut-turut  dengan  etil  asetat, aseton dan  metanol. Penentuan kadar fenolik dan flavonoid total dari semua ekstrak daun  kesambi  dilakukan  secara  kolorimetri  dengan  menggunakan  reagen  kimia  dan absorbansinya  diukur  dengan  menggunakan  spektrofotometer  UV-Visible.  Hasil penelitian menunjukkan Kadar fenolik total pada ekstrak daun kesambi diperoleh hasil ekstrak aseton sebesar 355,3 ± 3,74 (mgEAG/g), ekstrak etil asetat sebanyak 158,3 ± 3,33 (mgEGA/g), ekstrak metanol 86,2 ± 1,08 (mgEAG/g) dan ekstrak n-heksan 18,5 ± 0,45 (mgEGA/g). Sementara itu, kadar flavonoid total ekstrak daun kesambi diperoleh hasil ekstrak etil asetat 166,3 ± 3,72 (mgEQ/g), ekstrak aseton 61,4 ± 2.60 (mgEQ/g), ekstrak metanol 65,7 ± 0,65 (mgEQ/g) dan ekstrak n-heksan sebesar 33,7 ± 0,83 (mgEQ/g). Kadar fenolik total tertinggi diperoleh pada ekstrak aseton dan kadar flavonoid total tertinggi diperoleh pada ekstrak etil asetat.
Kata Kunci : Daun Kesambi, Fenolik, Flavonoid, Pelarut, Schleichera oleosa L.

## ABSTRACT
Kesambi  leaves  (Schleichera  oleosa  L.)  are  plants  that  contain  saponins,  tannins, alkaloids, steroids, phenolics, and flavonoids. The compounds that play the most role in causing pharmacological effects are flavonoids and phenolic compounds, which are source of antioxidants. The solubility of the solvent in the extract will affect the content of the extracted compounds based on the principle of like dissolves like. This study was conducted to determine the total flavonoid and phenolic content at different levels of solvent  types.  The  dried  simplisia  of  kesambi  leaves  was  extracted  using  various solvents by the ultrasonic assisted extraction (UAE) method, starting with n-hexane and continuing successively with ethyl acetate, acetone, and methanol. The determination of flavonoid and total phenolic content of each sample was done colorimetrically, and the  absorbance  of  each  sample  was  measured  using  a  UV-visible  spectrophotometer. The results showed that the total phenolic content in kesambi leaf extract was obtained from  acetone  extract  of  355.3  ±  3.74  (mgEGA/g),  ethyl  acetate  extract  of  158.3  ±  3.33 (mgEGA/g), methanol extract of 86.2 ± 1.08 (mgEGA/g), and n-hexane extract of 18.5 ± 0.45 (mgEGA/g). While the total flavonoid content of kesambi leaf extract was obtained, the results were ethyl acetate extract (166.3 ± 3.72 mg EQ/g), acetone extract (61.4 ± 2.60 mg EQ/g), methanol extract (65.7 ± 0.65 mg EQ/g), and n-hexane extract (33.7 ± 0.83 mg EQ/g). conclusion The highest total phenolic content was obtained in acetone extract, and the highest total flavonoid content was obtained in ethyl acetate extract.
Keywords : Kesambi leaves, Phenolic, Flavonoid, Solvent, Schleichera oleosa L.
Sitasi: Nursamsiar, Fadri, A., Marwati, Sami, F. J., Ismail, N. S. H. R., Kasmawati, H. (2023). Pengaruh Jenis Pelarut Terhadap Kadar Flavonoid Total Daun Kesambi ( Schlechera oleosa L.) Asal Kabupaten Gowa. Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia, 9(2), 253-261. https://doi.org/10.35311/jmpi. v9i2.394
Submitted: 27 September 2023 Accepted: 10 November 2023 Published: 23 Desember 2023
*Penulis Korespondensi:

## Nursamsiar
Email: n.siar@yahoo.co.id
Jurnal Mandala Pharmacon
Indonesia is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License

## PENDAHULUAN
Kesambi ( Schleichera oleosa L.)
merupakan  keluarga Sapindaceae yang  secara tradisional  digunakan  untuk  mengobat beberapa penyakit. Kesambi banyak ditemukan  diberbagai  daerah  di  Indonesia diantaranya  di  Jawa,  Nusa  Tenggara  Barat, Sumatera,  dan  Sulawesi  Selatan.  Kesambi ditemukan  tumbuh  di  daratan  rendah  yang beriklim kering sampai ketinggian 600 mdpl. Selain  di  Indonesia,  tumbuhan  kesambi  juga banyak  ditemukan  di  lembah  Himalaya  dan Sri  Langka.  Tumbuhan  kesambi  ditemukan banyak tumbuh di pulau Jawa, Bali, Sulawesi, Maluku,  dan  Nusa  Tenggara  (Heyne,  1998). Tanaman ini bisa tumbuh pada daerah kering dengan  suhu  maksimum  35-47  ºC  dan  suhu minimum  2,5  ºC.  Pohon  kesambi  umumnya memiliki  ketinggian  ±  25  m,  batang  tegak, berkayu,  permukaan  kasar,  dan  warnanya coklat  kotor.  Daunnya  tunggal,  lanset, berseling, panjang 11-25 cm, lebar 2-6 cm, tepi rata,  ujung  lancip  dan  berwarna  hijau.  Salah satu  bagian  dari  tanaman  kesambi  dapat menghasilkan  minyak  yang  lebih  umum dikenal  sebagai  minyak  makassar  yaitu  biji kesambi.
Berbagai bagian dari tanaman kesambi seperti daun, buah, dan kayu telah digunakan oleh  masyarakat  di  Jawa  untuk  mengobati berbagai  penyakit  seperti  penyakit  kulit, rematik,  disentri,  jerawat,  sakit  perut,  dan sengatan ular (Situmeang et al. , 2022, Ghosh et al. ,  2011,  Hanifah,  2020,  Thind et  al. ,  2011). Pemanfaatan  kesambi  sudah  dikenal  sejak dulu. Dalam  industri, minyak yang diperoleh dari buah kesambi dapat manfaatkan sebagai sumber  biodiesel  (Silitonga et  al. ,  2015). Penelitian sebelumnya telah banyak menyatakan  kesambi  mengandung  senyawa metabolit  primer  seperti  gula,  asam  amino, protein, dan klorofil, dan metabolit sekundernya  adalah  alkaloid,  terpenoid, senyawa  fenolik,  tanin,  flavonoid,  dan  lain- lain  (Khandekar,  Bobade  and  Ghongade, 2015).
Daun
Kesambi
diketahui
mengandung  senyawa  flavonoid  dan fenolik (Nursamsiar,  2021),  pengamatan  yang  telah
dilakukan pada bagian abaksial daun kesambi (Schleichera  oleosa) menunjukkan  hasil  positif adanya senyawa terpenoid, alkaloid, flavonoid,  fenol,  tanin  dan  lipofil (Rahayu, Pratiwi and Mubarakati, 2021) . Daun Kesambi yang diekstraksi dengan cairan penyari etanol dan  etil  asetat  dengan  metode  refluks  telah dilaporkan  memiliki  kandungan  flavonoid berturut-turut  sebanyak  62,1±0,98  mgEQ/g (tanpa hidrolisis),
57±0,23 mgEQ/g (hidrolisis), 40,7±0,77 mgEQ/g (tanpa
hidrolisis)  dan  39,8±0,18  mgEQ/g  (hidrolisis) (Nursamsiar et al. , 2021).
Senyawa  fenolik  merupakan  bagian dari  metabolit  sekunder  yang  banyak ditemukan  pada  spesies  tumbuhan  dengan struktur  yang  beranekaragam.  Struktur senyawa  terdapat  dalam  bentuk  glikosida atau aglikon, matriks atau senyawa bebas dan sebagian besar terdiri dari struktur terpolimerisasi  atau  monomer.  Senyawa fenolik  yang  terdapat  pada  tumbuhan diantaranya  senyawa  fenolik  sederhana seperti  asam  fenolik  sampai  senyawa kompleks  seperti  tanin.  Senyawa  tersebut diketahui dapat berperan sebagai pertahanan terhadap sinar ultraviolet (UV), patogen, dan predator lainnya (Balasundram, Sundram and Samman, 2006). Senyawa fenolik bertanggungjawan  atas  rasa  pahit  buah karena  interaksinya  dengan  glikoprotein ludah.  Fenolik  diketahui  menyebabkan perbedaan  rasa  dan  warna  pada  berbagai buah. Diantara tumbuhan yang mengandung fenolat  adalah  lignan,  tanin,  asam  fenolik, stilbena,  dan  flavonoid  (Alara,  Abdurahman and  Ukaegbu,  2021).  Fenolik  memiliki  sifat sebagai antioksidan yang berkontribusi pada peneuruan  risiko  penyakit  kronis  seperti kanker  dan  penyakit  jantung  ((Rice-Evans, Miller and Paganga, 1996). Fenolik juga telah dilaporkan dapat membantu melindungi kulit dari kerusakan akibat sinar UV dan penuaan dini (Nichols and Katiyar, 2010).
Flavonoid  adalah  senyawa  metabolit sekunder  yang  banyak  ditemukan  dalam berbagai  tanaman,  termasuk  didalamnya tanaman  obat.  Flavonoid  adalah  polifenol utama  dalam  makanan  manusia.  Secara
struktural, flavonoid tersusun atas inti flavan dengan 15 atom karbon yang tersusun dalam 3 cincin sepeti C6-C3-C6 berlabe A, B, dan C. ada  enam  subkelompok  flavonoid  yaitu flavon, flavanon, flavonol, flavanol, antosianin, dan isoflavon. Pengelompokan ini berpusat  pada  keadaan  oksidasi  cincin  C pusat  dalam  struktur  flavonoid.  Perbedaan struktur masing-masing subkelompok sebagian  disebabkan  oleh  pola  dan  derajat hidroksilasi, prenilasi, glikosilasi, atau metoksilasi.  Flavonoid  yang  paling  umum adalah quersetin, catecin, narigenin, cyanidin- glikosida,  dan  daidzein  (Dai  and  Mumper, 2010, D’Archivio et al. , 2007).

## METODE PENELITIAN Alat
Alat yang digunakan dalam penelitian adalah sonikator, perangkat alat gelas (Iwaki, Pyrex),  bunsen,  cawan  porselin,  mikropipet (Dragon  lab),  oven  (Memmert  UN-30),  vial, rotary evaporator (Buchi,
R-300),
spektrofotometer  UV-Vis  ( Shimadzu ® -1800 ), neraca analitik ( Mettler toledo ).

## Bahan
Bahan  tumbuhan  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  daun  kesambi  ( Schleichera oleosa) yang  diambil  dari  kabupaten  Gowa Sulawesi  Selatan.  Bahan  kimia  yang  digunakan antara  lain  metanol,  etil  asetat,  aseton,  n-heksan, Etanol p.a (Merck, Germany), aquadest (waterone), Na 2 CO 3 ,  (Merck, Germany), reagen folin ciocalteau (Merck, Germany), HCl (Merck, Germany), FeCl 3 (Merck, Germany), amoniak, pereaksi dragendorf, pereaksi  mayer,  pereaksi  wagner  dengan  grade teknis,  H 2 SO 4 (Merck,  Germany) , asam  asetat anhidrat  (Merck,  Germany),  dan  kloroform  (JT- Baker),  asam  galat  (Merck,  Germany),  kuarsetin (Merck,  Germany),  AlCl 3 (Merck,  Germany), Natrium Asetat (Merck, Germany).

## Preparasi sampel
Sampel  tanaman  diperoleh  dari  dari Desa  Sicini,  Dusun  Siriya,  Kecamatan  Parigi, Kabupaten  Gowa, Provinsi  Sulawesi  Selatan. Identifikasi terhadap spesies tanaman Kesambi  dilakukan  di  Laboratorium  Biologi, Universitas  Negeri  Makassar  dengan  nomor
specimen
051/SKAP/2018.
Sampel dibersihkan  dengan  cara  dicuci  dengan  air mengalir  agar  kotoran  yang  menempel  pada sampel dapat dihilangkan, kemudian dilakukan  sortasi  basah.  Sampel  kemudian dirajang  untuk  memperkecil  ukuran  dan dikeringkan dalam oven simplisia pada suhu 40ºC selama 2 x 24 jam.

## Ekstraksi
Simplisia  kering  daun  kesambi  (375 kg)  diekstraksi  menggunakan  berbagai pelarut  (n-heksan,  etil  asetat,  aseton  dan metanol)  dengan  metode ultrasonic  assisted extraction (UAE).  Simplisia  dimasukkan kedalam wadah ekstraktor kemudian ditambahkan  pelarut  n-heksana  sampai semua  bagian  simplisia  terendam.  Ekstraksi dilakukan  berulang  hingga  diperoleh  filtrat yang  jernih.  Residu  kemudian  diekstraksi selanjutnya dengan menggunakan pelarut etil asetat,  aseton  dan  metanol  dengan  metode yang  sama  pada  n-heksana.  Masing-masing dari  filtrat  yang  diperoleh  dipekatkan menggunakan vakum rotary evaporator sehingga  akan  diperoleh  ekstrak  heksan,  etil asetat,  aseton  dan  metanol.  Rendemen  yang diperoleh  dihitung  dengan  rumus  sebagai berikut:
Rendemen = berat ekstrak/berat simplisia x 100%

## Analisis Kualitatif
Analisis  kualitatif  golongan  senyawa dilakukan  pada  ekstrak  kental  sebagai berikut:
1. Flavonoid Ekstrak ditimbang ± 1g dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi. Ekstrak ditambahkan serbuk magnesium dan 2-4 tetes HCl  pekat,  kemudian  campuran  dikocok. Warna  jingga  yang  terbentuk  menunjukkan adanya  flavonoid  golongan  flavonol  dan flavanon, sedangkan warna mencolok seperti merah,  kuning,  atau  coklat  menunjukkan adanya  flavonoid  (Rahayu,  Kurniasih  and Amalia, 2015). 2. Uji Fenolik
Ekstrak sebanyak ± 1 g dimasukkan ke dalam  tabung  reaksi  dan  ditambahkan  FeCl 3 5%  sebanyak  2–3  tetes.  Senyawa  fenol
ditunjukkan jika terjadi perubahan warna biru kehitaman (Jones and Kinghorn, 2012).

## Pembuatan Larutan Kurva Baku Kuersetin
Larutan  baku  kuersetin  dibuat  seri konsentrasi  2;  4;  6;  8;  dan  10  μg/mL  dengan cara  memipet  sebanyak  0,1;  0,2;  0,3;  0,4,  dan 0,5  mL  larutan  stok  100  μg/mL.  Kemudian larutan dimasukkan ke dalam labu ukur 5 mL dan  ditambahkan  0,2  mL  AlCl3  (10  %b/v), ditambahkan  masing-masing  dengan  0,1  mL natrium  asetat  1  M  dan  dicukupkan  dengan etanol  p.a  hingga  5  ml.  Larutan  dicampur sampai  merata  dan  didiamkan  selama  30 menit  pada  suhu  ruang.  Masing-masing konsentrasi larutan kuersetin yang diperoleh ditentukan  absorbansinya  pada  panjang gelombang 450 nm (Do et al., 2014).

## Pembuatan Larutan Kurva Baku Asam Galat
Larutan  baku  asam  galat  dibuat dengan  cara  memipet  sebanyak  0,1;  0,2;  0,3; 0,4,  dan  0,5  mL  larutan  stok  100  μg/mL  ke dalam  labu  tentukur  5  mLdan  ditambahkan 0,2  mL  reagen  folin  ciocalteau  dan  0,2  mL Na2CO3  (10%  b/v).  Kemudian  dicukupkan dengan  aquadest  hingga  5  mL  sehingga diperoleh  deret  konsentrasi  2  ppm,  4  ppm,  6 ppm, 8 ppm, dan 10 ppm. Larutan dicampur hingga  merata  kemudian  diinkubasi  selama 30  menit  pada  suhu  ruang.  Masing-masing konsentrasi  asam  galat  yang  diperoleh kemudian diukur absorbansinya pada panjang gelombang 760nm (Do et al., 2014).

## Penentuan Kadar Flavanoid Total
Kadar  flavonoid  pada  semua  ekstrak ditentukan  dengan  cara  menimbang  sampel sebanyak 10 mg dan dilarutkan dengan etanol p.a hingga 10 mL dalam labu tentukur. Semua sampel  dipipet  kedalam  labu  tentukur  5  mL sebanyak 0,2 mL dan ditambahkan AlCl3 (10 %b/v)  sebanyak  0,2  mL,  natrium  asetat  1  M sebanyak 0,1 mL dan dicukupkan volumenya. Campuran  kemudian  dicampur  hingga homogen  lalu  didiamkan  selama  30  menit pada  suhu  ruang.  Serapan  dari  masing- masing  sampel  ditentukan  pada  panjang gelombang 450 nm (Do et al., 2014).
Penentuan Kadar Fenolik Total
Pengujian  kadar  fenolin  pada  semua ekstrak  dilakukan  dengan  cara  menimbang ekstrak  sebanyak  10  mg  dan  dilarutkan dengan  aquadest  hingga  10  mL.  masing- masing  sampel  dipipet  sebanyak  1,6  mL kedalam labu ukur 5 mL dan ditambahkan 0,2 mL reagen folin ciocalteau dan 0,2 mL larutan Na2CO3 (10% b/v) dan dicukupkan volumenya  dengan  aquades  hinggal  5mL. Larutan  dicampur  hingga  merata  lalu didiamkan selama 30 menit pada suhu ruang. Serapan  dari  semua  sampel  diukur  pada panjang gelombang 760 nm (Do et al., 2014).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tanaman  kesambi  berasal  dari  family dari Sapindaceae mengandung  senyawa  kimia seperti  alkaloid,  saponin,  fenolik  dan  tannin, flavonoid,  dan  fitosterol  (Bhatia  et  al.,  2013, Muthukrishnan & Sivakkumar, 2018). Pengolahan sampel melalui empat tahap yaitu tahap  sortasi  basah,  pencuci,  perajangan  dan pengeringan. Sortasi basah merupakan tahapan  untuk  memisahkan  sampel  dari kotoran (Depkes RI, 2000). Pencucian dengan air  mengalir  untuk  membersihkan  kotoran yang  menempel  pada  sampel  dan  tahapan selanjutnya adalah tahapan perajangan untuk mengubah ukuran sampel menjadi lebih kecil sehingga  proses  pengeringan  menjadi  lebih cepat dan mempermudah kandungan senyawa dalam sampel dapat terlarut kedalam cairan  penyari  (Nursamsiar,  2021). Tahap terakhir  adalah  pengeringan  dengan  oven simplisia suhu 40°C selama 2 x 24 jam. Melalu proses pengeringan ini maka kadar air sampel berkurang sehingga kerusakan dan penurunan mutu dari sampel dapat dihilangkan meskipun disimpan dalam waktu yang  lama  (Fahmi,  Herdiana  and  Rubiyanti, 2020).
Simplisia kemudian diekstraksi dengan ultrasonic  assisted  extraction (UAE) yang dimulai dengan n-heksan dan dilanjutkan  secara  berturut-turut  dengan  etil asetat,  aseton  dan  metanol.  Ekstraksi  UAE merupakan metode ekstraksi yang dikembang untuk  meningkatkan  kemampuan  ekstraksi senyawa  bioaktif  dari  tanaman.  Ekstraksi
dengan  bantuan  ultrasonik  juga  diketahui ramah  lingkungan  dan  menghabiskan  lebih sedikit  energi  dan  waktu  serta  memberikan hasil  senyawa  fenolik  yang  lebih  tinggi dibandingkan  dengan  metode  konvensional seperti  maserasi,  refluks  dan  soklet  (Oroian, Ursachi  and  Dranca,  2020),  (Rodrigues et  al. , 2020).  Penelitian  lain  juga  melaporkan kandungan  fenolik  dan  flavonoid  yang diperoleh dari sampel dedak gandum dengan menggunakan  metode  ekstraksi  ultrasonik
lebih banyak dibandingkan dengan menggunakan teknik ekstraksi secara konvensional (Iftikhar et al. , 2020).
Rendemen yang diperoleh dari proses ekstraksi  <10%  dengan  rendamen  terbesar diperoleh  pada  pelarut  aseton  sebesar  2,52% (Tabel  1).  Hasil  analisis  secara  kualitatif  dari keempat ekstrak daun kesambi menunjukkan bahwa keempat ekstrak mengandung senyawa  golongan  flavonoid  dan  fenolik (Tabel 2).
Tabel 1. Rendemen Ekstrak Daun Kesambi
No. Pelarut Bobot (g) % Rendemen Simplisia Ekstrak 1 n-heksan 375 4,308 1,15 2 Etil asetat 375 3,588 0,96 3 Aseton 375 9,468 2,52 4 Metanol 375 0,651 0,17 Tabel 2. Analisis kualitatif Ekstrak Daun Kesambi No. Ekstrak Fenolik Flavonoid 1 n-heksana + + 2 Etil asetat + + 3 Aseton + + 4 Metanol + +
Keterangan: (+) positif mengandung golongan senyawa uji
Kadar  fenolik  total  dari  sampel tanaman kesambi ditetapkan dengan menggunakan  metode  Folin  Ciocalteau. Metode ini adalah metode yang paling umum digunakan  untuk  menentukan  kandungan fenolik total dalam tanaman karena pengerjaan  yang  lebih  sederhana.  Selain  itu, reagen  Folin  Ciocalteau  dapat  bereaksi dengan  senyawa  fenolik  yang  terkandung dalam  sampel  menghasilkan  campuran berwarna sehingga bisa ditentukan absorbansinya dengan spektrofotometer.
Kadar  fenolik  total  dalam  sampel  dengan reagen Folin Ciocalteu absorbansinya ditentukan  pada panjang  gelombang  765  nm (Pourmorad, Hosseinimehr and Shahabimajd, 2006).  Dalam  penelitian  ini  digunakan  salah satu jenis fenolik alami dan stabil yaitu asam galat. Asam galat merupakan senyawa fenolik turunan asam hidroksibenzol yang tergolong asam fenolik sederhana (Fadhilah et al. , 2021).
Reaksi  antara  asam  galat  dengan reagen Folin Ciocalteau yang akan membentuk larutan berwarna kuning sebagai pertanda bahwa fenolik. Penambahan larutan Na 2 CO 3 untuk  memberikan  suasana  basa. Suasana basa ini dapat mendisosiasi hidrogen pada  senyawa  fenolik  menjadi  ion  fenolat (Ukieyanna,  2012).  Selama    proses  reaksi, senyawa fenolik bereaksi dengan reagen Folin Ciocalteau  karena  adanya  gugus  hidroksil yang berinteraksi menjadi kompleks berwarna  biru  (molibdenum-tungsten)  yang dapat  dianalisis  dengan  spektrofotometer. Semakin  pekat  warna  biru  yang  terbentuk menunjukkan  konsentrasi  ion  fenolat  yang semakin  tinggi.  Ion  fenolat  akan  mereduksi asam heteropoli (fosfomolibdat-fosfotungstat) menjadi  kompleks  molibdenum-tungsten sehingga  warna  yang  dihasilkan  semakin pekat (Senet et al. , 2018).
Hasil analisis terhadap larutan standar asam  galat  kemudian  dibuat  kurva  kalibrasi
dan diperoleh persamaan regresi linear yang diperoleh  yaitu  y=0,0849x+0,0151  dengan koefisien  korelasi    (r)    0,9975.  Kadar  fenolik dari  masing-masing  ekstrak  daun  kesambi dilakukan  dengan  cara  3x  replikasi.  Hasil penentuan  kadar  fenolik  total  (tabel  3) diperoleh  kadar  tertinggi  terdapat  pada ekstrak aseton sebesar 355,3 ± 3,74 (mgEGA/g) kemudian ekstrak etil asetat sebanyak 158,3 ±
3,33  (mgEGA/g),  ekstrak  metanol  86,2  ±  1,08 (mgEGA/g)  dan  ekstrak  n-heksan  18,5  ±  0,45 (mgEGA/g).  Hal  ini  sama  dengan  hasil penelitian  yang  telah  dilaporkan  pada tanaman  daun  alpukat  menyatakan  bahwa larutan  penyari  aseton  lebih  baik  dalam menyari senyawa golongan fenolik dibandingkan dengan larutan penyari metanol maupun etanol (Pontoan, 2016).
Gambar 1. Grafik hubungan konsentrasi baku dan absorbansi  asam galat
Tabel 3. Kadar Fenolik Total pada ekstrak daun kesambi No. Ekstrak Kadar Fenolik Total (mgEAG/g) 1 n-heksan 18,5 ± 0,45 2 Etil Asetat 158,3 ± 3,33 3 Aseton 355,3 ± 3,74 4 Metanol 86,2 ± 1,08 Keterangan:   mgEAG/g = Miligram Ekuivalen asam Galat per gram sampel Pengukuran dilakukan dengan replikasi tiga (3)
Kadar  flavonoid  total  pada  sampel ditentukan berdasarkan pembentukan warna. Larutan  berwarna  terbentuk  karena  adanya reagen  AlCl 3 10%  dan  natium  asetat  5%. Reagen  AlCl 3 akan  membentuk  interaksi dengan  gugus  hidroksil  dan  keton  yang berdekatan pada senyawa golongan flavonoid. AlCl 3 akan bereaksi dengan gugus keton  pada  C4  dan  gugus  OH  pada  C3 (flanovol) atau C5 pada senyawa flavon atau flavonol membentuk senyawa kompleks yang stabil  berwarna  kuning.  Quersetin  adalah salah  satu  jenis  senyawa  golongan  flavonoid yang  digunakan  sebagai  standar  pada penetapan  kadar  flavonoid  karena  quersetin memiliki  gugus    keto    pada   atom    C-4    dan
juga gugus hidroksil pada atom C-3 dan C-5 yang  bertetangga  (Sembiring,  Elya  and Sauriasari, 2018).
Dari kurva kalibrasi diperoleh persamaan  regresi  linier  yaitu  y=0,0759x  - 0,0156  dengan  nilai  koefisien  kolerasi  (r)  = 0,9994.  Penetapan  kadar  flavonoid  dari ekstrak  daun  Kesambi  dilakukan  dengan replikasi    3x.  Dari  hasil  penelitian  diperoleh kadar  flavonoid  seperti  yang  terlihat  pada tabel  4  pada  ekstrak  n-heksan  sebesar  33,7  ± 0,83 (mgEQ/g), ekstrak etil asetat 166,3 ± 3,72 (mgEQ/g), ekstrak aseton 61,4 ± 2,60 (mgEQ/g) dan  ekstrak  metanol  65,7  ±  0,65  (mgEQ/g). hasil penentuan kadar flavonoid menunjukkan  bahwa  ekstrak  etil  asetat
y = 0,0849x + 0,0151 R² = 0,9975 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 2 4 6 8 10 12 Abs o rba ns i Konsentrasi Kurva Baku Asam Galat
memiliki  kandungan  flavonoid  yang  paling tinggi  dibandingkan  dengan  aseton,  metanol dan  yang  paling  rendah  pada  ekstrak  n- heksan  daun  Kesambi.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  larutan  penyari  etil  asetat  lebih  kuat
menyari  kandungan  flavonoid  yang  ada dalam sampel daun Kesambi. Diduga bahwa kandungan  flavonoid  yang  terkandung bersifat  semipolar  yang  lebih  larut  dalam pelarut semipolar.
Gambar 2. hubungan konsentrasi terhadap absorbansi Kuarsetin Tabel 4. Kadar Flavonoid Total pada ekstrak daun kesambi
No. Ekstrak Kadar Fenolik Total (mgEQ/g) 1 n-heksan 33,7 ± 0,83 2 Etil Asetat 166,3 ± 3,72 3 Aseton 61,4 ± 2,60 4 Metanol 65,7 ± 0,65 Keterangan:   mgEQ/g = Miligram Ekivalen Kursetin/gram sampel;
Pengukuran dilakukan dengan replikasi tiga (3)

## KESIMPULAN
Kadar fenolik total pada ekstrak daun kesambi  diperoleh  hasil  ekstrak  aseton sebesar  355,3  ±  3,74  (mgEGA/g),  ekstrak  etil asetat  sebanyak  158,3  ±  3,33  (mgEGA/g), ekstrak  metanol  86,2  ±  1,08  (mgEGA/g)  dan ekstrak  n-heksan  18,5  ±  0,45  (mgEGA/g). Sedangkan kadar flavonoid total ekstrak daun kesambi  diperoleh  hasil  ekstrak  etil  asetat 166,3  ±  3,72  (mgEQ/g),  ekstrak  aseton  61,4  ± 2,60  (mgEQ/g),  ekstrak  metanol  65,7  ±  0,65 (mgEQ/g) dan ekstrak n-heksan sebesar 33,7 ± 0,83  (mgEQ/g).  Kadar  fenolik  tertinggi diperoleh  pada  ekstrak  aseton  dan  kadar flavonoid tertinggi diperoleh pada ekstrak etil asetat.  Dari  hasil  penelitian  ini  diharapkan dapat menjadikan refrensi bagi peneliti
selanjutnya  dalam  pengembangan bahan alam khususnya tanaman Kesambi.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima kasih penulis ucapkan kepada Kementrian  Pendidikan,  Kebudayaan,  Riset dan  Teknologi  atas  support  dana  dalam penelitian  pada  hibah  Penelitian  Kerjasama Dalam Negri tahun 2023.

## DAFTAR PUSTAKA
Alara,  O.  R.,  Abdurahman,  N.  H.  and Ukaegbu,  C.  I.  (2021)  ‘Extraction  of phenolic compounds: A review’, Current
Research in Food Science . doi:
10.1016/j.crfs.2021.03.011.
Balasundram, N., Sundram, K. and Samman,
S. (2006) ‘Phenolic compounds in plants and
agri-industrial by-products: Antioxidant  activity,  occurrence,  and potential  uses’, Food  Chemistry ,  99(1). doi: 10.1016/j.foodchem.2005.07.042.
y = 0,0759x - 0,0156 R² = 0,9994 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 2 4 6 8 10 Abs o rba ns i Konsentrasi Kurva Standar Kuarsetin
Bhatia, H. et al. (2013) ‘A review on Schleichera oleosa:
Pharmacological and environmental  aspects’, Journal  of Pharmacy Research , 6(1). doi:
10.1016/j.jopr.2012.11.003.
D’Archivio,  M. et  al. (2007)  ‘Polyphenols, dietary  sources  and  bioavailability’,
Annali  dell’Istituto  Superiore  di  Sanita , 43(4).
Dai,  J.  and  Mumper,  R.  J.  (2010)  ‘Plant phenolics: Extraction, analysis and their antioxidant  and  anticancer  properties’,
Molecules .
doi: 10.3390/molecules15107313.
Depkes  RI  (2000)  ‘Parameter  standar  umum ekstrak tumbuhan obat : Jakarta Departemen Kesehatan Republik
Indonesia’, Edisi IV .
Do,  Q.  D. et  al. (2014)  ‘Effect  of  extraction solvent  on  total  phenol  content,  total flavonoid  content,  and  antioxidant activity  of  Limnophila  aromatica’, Journal  of  Food and Drug  Analysis ,  22(3). doi: 10.1016/j.jfda.2013.11.001.
Fadhilah, D. E. et al. (2021) ‘Penetapan Kadar
β-karoten dalam Buah Tomat (Lycopersicum esculentum Mill.) Berdasarkan Ketinggian Tempat Tumbuhnya dengan Metode Spektrofotometri  UV-Vis’, Prosiding
Seminar  Nasional  Kesehatan ,  1.  doi: 10.48144/prosiding.v1i.751.
Fahmi,  N.,  Herdiana,  I.  and  Rubiyanti,  R.
(2020)  ‘Pengaruh  Metode  Pengeringan Terhadap Mutu Simplisia Daun Pulutan (Urena lobata L.)’, Media Informasi , 15(2). doi: 10.37160/bmi.v15i2.433.
Ghosh,  P. et  al. (2011)  ‘Triterpenoids  from Schleichera oleosa of darjeeling foothills and  their  antimicrobial  activity’, Indian Journal  of  Pharmaceutical  Sciences ,  73(2). doi: 10.4103/0250-474X.91568.
Hanifah, L. (2020) ‘The Influence Of Kesambi Leaf  Extract  (Schleichera  oleosa)  On
Proliferation  Granulosa  Cell  Goat Ovarium (Caprus aegagrus HIRCUS) In Vitro’, Jurnal Biota , 6(1). doi: 10.19109/biota.v6i1.4372.
Iftikhar, M. et al. (2020) ‘Study on optimization of  ultrasonic  assisted  extraction  of phenolic  compounds  from  rye  bran’, LWT , 134. doi: 10.1016/j.lwt.2020.110243.
Jones,  W.  P.  and  Kinghorn,  A.  D.  (2012) ‘Extraction of plant secondary metabolites’, Methods  in  Molecular Biology ,  864.  doi:  10.1007/978-1-61779- 624-1_13.
Khandekar, U., Bobade, A. and Ghongade, R.
(2015)  ‘Evaluation  Of  Antioxident Activity  ,  In  -  Vitro  Antimicrobial Activity  And  Phytoconstituents  Of Schleichera  Oleosa  (  Lour  .  )  Oken’, International  Journal  of  Biological  & Pharmaceutical  Research  .  International Journal  of  Biological  &  Pharmaceutical Research Journal , 6(2).
Muthukrishnan, S. and Sivakkumar, T. (2018)
‘Physicochemical evaluation, preliminary phytochemical
investigation,  fluorescence  and  TLC analysis  of  leaves  of  schleichera  oleosa (Lour.) Oken’, Indian Journal of
Pharmaceutical  Sciences ,  80(3).  doi: 10.4172/pharmaceutical-
sciences.1000387.
Nichols,  J.  A.  and  Katiyar,  S.  K.  (2010)  ‘Skin photoprotection by natural polyphenols: Anti-inflammatory, antioxidant
and DNA repair mechanisms’, Archives  of  Dermatological Research . doi: 10.1007/s00403-009-1001-3.
Nur,  S. et  al. (2021)  ‘Penentuan  Kadar Flavonoid Dari Ekstrak Etanol Dan Etil Asetat  Daun  Kesambi  (Schleichera oleosa. L)’, Acta Pharmaceutica Indonesia , 46(2), pp. 33–37. doi:
10.5614/api.v46i2.15772.
Nursamsiar,  Khairuddin,  Jumarni,  Marwati,
N.  (2021)  ‘Pengaruh  Jenis  Cairan Penyari terhadap Aktivitas Antioksidan
Daun Kembang Bulan (Tithonia
diversifolia  (Hemsi.)  A.Grey)  dengan Metode  ABTS’, PHARMACY:  Jurnal Farmasi Indonesia , 18(02), pp. 316–323.
Nursamsiar (2021) ‘Penentuan Kadar
Flavonoid Dari Ekstrak Etanol Dan Etil Asetat  Daun  Kesambi  (Schleichera oleosa. L)’, Acta Pharmaceutica Indonesia , 46(2), pp. 33–37.
Oroian, M., Ursachi, F. and Dranca, F. (2020) ‘Influence  of  ultrasonic  amplitude, temperature, time and solvent concentration  on  bioactive  compounds extraction  from  propolis’, Ultrasonics
Sonochemistry , 64. doi: 10.1016/j.ultsonch.2020.105021. Pontoan, J. (2016) ‘Uji Aktivitas Antioksidant Dan  Tabir  Surya  Dari  Ekstrak  Daun Alpikat (Persea americana M.)’,
Indonesia Natural Research Pharmaceutical Journal , 1(1).
Pourmorad,  F.,  Hosseinimehr,  S.  J.  and Shahabimajd,  N.  (2006)  ‘Antioxidant activity,  phenol  and  flavonoid  contents of  some  selected  Iranian  medicinal plants’, African  Journal  of  Biotechnology , 5(11). doi: 10.1055/s-2007-987042.
Rahayu,  S.,  Kurniasih,  N.  and  Amalia,  V.
(2015)  ‘Ekstraksi  Dan  Identifikasi Senyawa  Flavonoid  Dari  Limbah  Kulit Bawang  Merah  Sebagai  Antioksidan
Alami’, al-Kimiya , 2(1). doi:
10.15575/ak.v2i1.345.
Rahayu, T., Pratiwi, R. I. A. and Mubarakati,
N.  J.  (2021)  ‘Profil  Metabolit  Daun Kesambi (Schleichera oleosa) Berdasarkan Analisis Histokimia dan In Silico’, Metamorfosa:  Journal  of  Biological Sciences , 8(1). doi: 10.24843/metamorfosa.2021.v08.i01.p17. Rice-Evans,  C.  A.,  Miller,  N.  J.  and  Paganga, G. (1996) ‘Erratum: Structure-
antioxidant  activity  relationships  of flavonoids  and  phenolic  acids  (Free
Radical Biology and Medicine (1996) 20
(933-956))’, Free  Radical  Biology  and Medicine . doi: 10.1016/S0891-
5849(96)90046-5.
Rodrigues,  L.  M. et  al. (2020)  ‘Camu-camu bioactive  compounds  extraction  by ecofriendly sequential processes (ultrasound  assisted  extraction  and reverse osmosis)’, Ultrasonics Sonochemistry , 64. doi: 10.1016/j.ultsonch.2020.105017.
Sembiring,  E.  N.,  Elya,  B.  and  Sauriasari,  R.
(2018)  ‘Phytochemical  screening,  total flavonoid and total phenolic content and antioxidant activity of different parts of Caesalpinia bonduc (L.) Roxb’,
Pharmacognosy Journal , 10(1). doi:
10.5530/pj.2018.1.22.
Senet,  M.  R.  M. et  al. (2018)  ‘Penentuan Kandungan  Total  Flavonoid  Dan  Total Fenol  Dari  Akar  Kersen  (Mutingia Calabura)  Serta  Aktivitasnya  Sebagai Antioksidan’, Jurnal Kimia . doi: 10.24843/jchem.2018.v12.i01.p03.
Silitonga, A. S. et al. (2015) ‘Schleichera oleosa L  oil  as  feedstock  for  biodiesel production’, Fuel , 156. doi:
10.1016/j.fuel.2015.04.046.
Situmeang,  B. et  al. (2022)  ‘Aktivitas Antioksidan  Dan  Antibakteri  Dari Fraksi  Ekstrak  Metanol  Kulit  Batang Kesambi  (Shleichera  Oleosa)’, Jurnal Kimia , 16(1), p. 53. doi: 10.24843/jchem.2022.v16.i01.p07.
Thind,  T.  S. et  al. (2011)  ‘In  vitro  antiradical properties and total phenolic contents in methanol extract/fractions from bark of Schleichera oleosa (Lour.) Oken’, Medicinal  Chemistry  Research ,  20(2).  doi: 10.1007/s00044-010-9297-2.
Ukieyanna,  E.  (2012)  ‘Aktivitas  Antioksidan, Kadar  Fenolik,  dan  Flavonoid  Total Tumbuhan Suruhan (Peperomia pellucida L. Kunth)’, Jurnal MIPA IPB .