Penulis Septiana Laksmi Ramayani 1 *, Fitria Rohmawati 2 , Yasmine Savira Rahmadani 2
Afiliasi 1 Prodi  D3  Farmasi,  Politeknik  Kesehatan  Kementerian  Kesehatan  Surakarta,  Jl.  Ksatrian  No  2 Danguran, Klaten, Indonesia.
2Prodi  D3  Farmasi,  Politeknik  Katolik  Mangunwijaya , Jl.  Gajahmada  No.91,  Kembangsari,  Kec. Semarang Tengah, Kota Semarang, Jawa Tengah 50133, Indonesia.
Kata Kunci  Mengkudu, daun
 kadar flavonoid
 aktivitas penangkap radikal
Keywords
 Morinda citrifolia. Leaves
 total flavonoid content
 free radical scavenging
activity
Diterima 25 November 2021 Direvisi 17 Mei 2022 Disetujui 3 Agustus 2022
*Penulis Koresponding Septiana Laksmi Ramayani email: septianaLR@gmail.com

## ABSTRAK
Senyawa flavonoid dalam daun Mengkudu ( Morinda citrifolia ) berkhasiat sebagai penangkap radikal bebas. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh rasio bahan  dan  pelarut  (1:5;  1:10  dan  1:20)  terhadap  kadar  flavonoid  dan  aktivitas penangkapan radikal bebas. Ekstraksi dilakukan dengan metode Microwave Assisted Extractio n  dan  pengujian  aktivitas  penangkapan  radikal  bebas  menggunakan pereaksi  1,1-difenil-2-pikrilhidrazil  (DPPH).  Hasil  penelitian  menunjukkan  rasio bahan-pelarut  pengaruh  bermakna  pada  rendemen,  kadar  flavonoid  dan  aktivitas penangkapan  radikal  bebas.  Rasio  bahan-pelarut  1:20  menghasilkan  rendemen, kadar flavonoid dan aktivitas penangkapan radikal bebas tertinggi dibandingkan rasio bahan-pelarut lainnya.

## ABSTRACT
The flavonoid compound in Noni leaves (Morinda citrifolia) are efficacious as free radical  scavengers.  This  research  aimed  to  know  the  influence  of  the  ratio  of materials  and  a  solvent  (M:S=1:10;  M:S=1:15;  M:S=1:20)  on  the  flavonoid  content and free radical scavenging activity of extract of noni leaves. Extraction was carried out using the Microwave Assisted Extraction method and the free radical scavenging activity were determined by 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH). The results showed that  the  material-solvent  ratio  had  a  significant  effect  on  the  yield,  total  flavonoid content,  and  free  radical  scavenging  activity.  The  material  to  solvent  ratio  1:  20 resulted  in  the  highest  yield,  total  flavonoid  content,  and  free  radical  scavenging activity compared to other solvent-solvent ratios.
Pengaruh Rasio Bahan dan Pelarut terhadap Kadar Flavonoid dan Aktivitas Penangkapan Radikal Bebas Ekstrak Daun Mengkudu ( Morinda citrifolia )
The effect of Material to Solvent Ratio to The Flavonoid Content and Free Radical Scavenging Activity of Extract of Morinda Citrifolia L Leaves
Pengaruh Rasio Bahan dan Pelarut Terhadap Kadar Flavonoid dan Aktivitas Penangkapan Radikal Bebas Ekstrak Daun Mengkudu ( Morinda citrifolia )

## PENDAHULUAN
Radikal bebas merupakan molekul tidak stabil dalam metabolisme sel normal (perubahan kimia yang terjadi di  dalam  sel).  Radikal  bebas  yang  melebihi  kapasitas tubuh,  maka menimbulkan  kondisi yang  disebut  stress oksidatif yang dapat mengubah kondisi fisiologis tubuh dan  mengakibatkan  beberapa  penyakit  (Haider et  al. 2020).  Antioksidan  menetralkan  radikal  bebas  dengan melepaskan beberapa elektronnya sendiri. (Halliwell & Gutteridge 2000). Senyawa antioksidan dapat diperoleh  secara  alami,  salah  satunya  adalah  berasal dari mengkudu ( Morinda citrifolia ).
Tanaman  mengkudu  mengandung  sekitar  160 senyawa  fitokimia  dengan  senyawa  fenolik  menjadi kelompok utama mikronutrien fungsional dan berpengaruh  nyata  terhadap  aktivitas  antioksidannya (Zin et  al. 2007).  Daun  mengkudu  mengandung  5 glikosida  flavonol  yang  merupakan  golongan  senyawa polifenol  (Rohman et  al 2007).  Hasil  identifikasi kromatografi  lapis  tipis,  menunjukkan  bahwa  ekstrak daun mengkudu memberikan efek tajam dan pita yang terdefinisi dengan baik dengan R f 0,5 dan warna kuning yang sama dengan rutin sebagai baku pembandingnya. Rutin  merupakan  glikosida  flavonoid  yang  banyak digunakan sebagai standar dalam identifikasi flavonoid dalam daun (Setyani dan Setyowati, 2018).  Boontha et al. 2016 melaporkan bahwa daun dan buah mengkudu memiliki  aktivitas  sebagai  DPPH radical  scavenging sebesar  1,35  ±  0,02  mg/mL  sedangkan  pada  buah mengkudu  sebesar  1,52  ±  0,04  mg/mL.  Kadar  rutin daun  mengkudu  adalah  0,54±  0,17  %  sedangkan  pada buah  mengkudu  sebesar  0,42±  0,09%.  Hal  ini menunjukkan  daun  mengkudu  memiliki  aktivitas  yang lebih  besar  daripada  buah  mengkudu  karena kandungan  rutin  pada  daun  juga  lebih  besar dibandingkan pada buah mengkudu.
Senyawa  flavonoid  dalam  daun  mengkudu  dapat dihasilkan  melalui  proses  ekstraksi,  salah  satunya secara Microwave  Assisted  Extractio n  (MAE).  Tambun et al. 2021 menyebutkan bahwa metode ekstraksi MAE dapat menghasilkan rendemen terbesar pada ekstraksi daun  sirsak  dibandingkan  metode  maserasi  dan sokletasi. Assisted  Extractio n  (MAE)  menggunakan energi  gelombang  mikro  untuk  meningkatkan  reaksi selektif  secara  cepat  dan  efisien  melalui  pemanasan pelarut.  Efisiensi  MAE  salah  satunya  dipengaruhi  oleh rasio  bahan  dan  pelarut  (Kataoka,  2019).  Efisiensi proses  ekstraksi  ditunjukkan  jika  semakin  sedikit pelarut  yang  digunakan  namun  dapat  menghasilkan kadar  dan  aktifitas  yang  tinggi.  Tujuan  penelitian  ini untuk  mengetahui  pengaruh  rasio  bahan  dan  pelarut
terhadap  kadar  flavonoid  dan  aktivitas  penangkapan radikal bebas ekstrak daun mengkudu.

## METODE Alat
Spektrofotometer  UV- Vis (Shimadzu  UV-1800), microwave (Metrowealth), moisture  analyzer (Ohaus), timbangan analitik (Ohaus), alat gelas (Pyrex).

## Bahan
Serbuk  daun  mengkudu  (Materia  Medika  Batu), Methanol p.a (Merck), 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil (DPPH),  kuersetin  (Sigma  aldrich),  AlCl 3 (Merck), CH 3 COOH.

## Tatacara penelitian
1. Ekstraksi Daun Mengkudu
Ekstraksi  dilakukan  secara  maserasi  berbantu microwave  /  Microwave  Assisted  Extractio n  (MAE). Sebanyak  40  gram  serbuk  simplisia  daun  mengkudu diekstraksi  menggunakan  etanol  96%  dengan  variasi rasio  antara  bahan  dan  pelarut  1:5,  1:10,  1:20  (b/v). Waktu  yang  diperlukan  dalam  proses  ekstraksi  yaitu selama  2  menit,  suhu  <50°C  serta  kekuatan  daya  700 W.  Selama  proses  ekstraksi,  secara  berkala  larutan diradiasi  dalam microwave yaitu  radiasi  10  detik kemudian  dua  menit  dimatikan.  Filtrat  selanjutnya diuapkan  hingga  terbentuk  ekstrak  kental  daun mengkudu  dan  dilakukan  kontrol  kualitas  meliputi  uji organoleptis,  perhitungan  rendemen  dan  susut pengeringan.
2. Uji Kualitatif Senyawa Flavonoid
Uji  kualitatif  dilakukan  dengan  uji  Shinoda menggunakan serbuk Mg dan HCl pekat (Hanani, 2015).
3. Penetapan Kadar Total Senyawa Flavonoid Kadar  flavonoid  ditentukan  menggunakan  AlCl 3 dengan  metode  kolorimetri  (Chang et  al ,  2003). Sebanyak  1  mL  larutan  ekstrak  dan  larutan  standar kuersetin  masing-masing  dimasukkan  dalam  tabung. AlCl 3 10%  sebanyak  1  mL  dan  8  mL  CH 3 COOH  5% dihomogenkan  dan  didiamkan  14  menit.  Panjang gelombang  yang  digunakan  adalah  413,90  nm.  Kadar flavonoid dihitung ekivalen dengan kuersetin (KE)/gram ekstrak (Ramayani 2021).
4. Penentuan Aktivitas Penangkapan Radikal Bebas Penangkapan  radikal  bebas  dilakukan  meggunakan pereaksi  2,2-difenil-1-pikrilhidrasil  (DPPH)  (Molyneux,
2004).  Sebanyak  0,1  mL  larutan  ekstrak  (20  ppm) kemudian dicampur dengan larutan DPPH 0,075mM 4,0 mL. Panjang gelombang yang digunakan adalah 517,15 nm.  Larutan  blanko  yang  digunakan  adalah  larutan DPPH.  Aktivitas penangkapan radikal bebas ditentukan dengan persamaan 1.
Aktivitas penangkapan radikal bebas = 𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜−𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 𝑥 100% ……. (1)
5. Analisis data
Hasil penentuan kadar total senyawa flavonoid dan aktivitas antioksidan di analisa secara statistika dengan metode Analysis  of  Variance (Anova)  dan  uji Post-Hoc Test dengan taraf kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Serbuk daun mengkudu yang digunakan berasal dari Materia  Medika  Batu  yang  ditunjukkan  dengan  surat determinasi  dari  UPT  Laboratorium  Herbal  Materia Medica  Batu.  Serbuk  simplisia  memiliki  pemerian berupa serbuk halus, bau khas mengkudu, warna hijau tua  dan  rasa  pahit  dengan  susut  pengeringan  sebesar 7,57%.  Kandungan  alkaloid  xeronin  dalam  daun mengkudu  menyebabkan  rasa  pahit  (Afandi  2013). Pada Tabel  1 dapat  dilihat  hasil  ekstraksi  daun mengkudu.
Hasil ekstraksi menunjukkan perbedaan rasio bahan dan  pelarut  menghasilkan  organoleptis  yang  sama. Terbentuknya  warna  hijau  kehitaman  pada  ekstrak diakibatkan  karena  adanya  kandungan  klorofil  pada daun yang berubah menjadi kehitaman karena adanya proses  pemanasan  pada  pemekatan  ekstrak.  Rasio bahan-pelarut  berpengaruh  terhadap  rendemen  dan susut pengeringan yang dihasilkan. Rendemen terbesar ditunjukkan dengan rasio bahan pelarut pada rasio 1:20 yang merupakan rasio bahan-pelarut terbesar. Hasil ini sesuai  dengan  hasil  penelitian  Sabtu  et  al.  (2016), rendemen ekstrak daun kadok tertinggi dihasilkan pada rasio bahan-pelarut 1: 30 yang merupakan rasio bahan-
pelarut tertinggi. Semakin banyak pelarut menyebabkan  semakin  besar  kontak  bahan  dengan pelarut,  senyawa  yang  terekstrak  semakin  banyak sehingga  rendemen  semakin  tinggi.  Hasil  analisa stististik  menunjukkan  rendemen  ekstrak  daun mengkudu  dengan  rasio  bahan – pelarut  1: 5  berbeda signifikan  terhadap  rasio  bahan-pelarut  1:10  dan  1:20, sedangkan  rasio  bahan-pelarut  1:10  tidak  berbeda signifikan dengan rasio bahan-pelarut  1:15. Perbedaan tidak signifikan antara rasio bahan-pelarut  1:10 dan 1: 20  disebabkan  karena  pada  kondisi  jumlah  pelarut dinaikkan  dalam  jumlah  tertentu  terjadi  kondisi setimbang atau jenuh sehingga pelarut di luar sel tidak dapat  menarik  senyawa  di  dialam  sel  sehingga rendemen  akan    relatif  menjadi  konstan  (Ahmad et  al 2008).
Ekstrak  daun  mengkudu  selanjutnya  dilakukan  uji kualitatif untuk memastikan adanya senyawa flavonoid dalam  ekstrak  yang  dihasilkan.  Inti  benzopiron flavonoid  direduksi  oleh  serbuk  Mg  dan  HCL  pekat sehingga  terbentuk  garam  flavilium  yang  berwarna merah  atau  jingga.  Hasil  uji  kualitatif  menunjukkan bahwa  ekstrak  daun  mengkudu  dengan  berbagai perbandingan  rasio  bahan-pelarut  menunjukkan  hasil positif  mengandung  senyawa  flavonoid.  Perubahan warna  hijau  kehitaman  pada  ekstrak  menjadi  kuning jingga  menunjukkan  bahwa  flavonoid  dalam  daun mengkudu  merupakan  golongan  flavonol  (Hanani 2015).
Uji  kuantitatif  senyawa  flavonoid  menggunakan larutan  pereaksi  aluminium  klorida  dan  asam  asetat dengan  metode  kolorimetri.    Larutan  baku  yang digunakan  adalah  kuersetin.  Senyawa  kompleks  akan terbentuk  antara  AlCl 3 dan  gugus  hidroksil  pada  atom C-2  atau  C-5  dan  gugus  keto  pada  atom  C-4  pada kuersetin, sehingga terbentuk warna larutan yang lebih kuning  yang  menunjukkan  panjang  gelombang bergeser  ke  arah visible (nampak)  dan  dapat dipertahankan  menggunakan  senyawa  penstabil  asam asetat  (Chang et  al ,  2002).  Hubungan  konsentrasi  dan absorbansi kuersetin dapat dilihat pada Gambar 1 .

## Tabel 1. Hasil Ekstraksi Daun Mengkudu dengan Berbagai Rasio Bahan dan Pelarut
Rasio Bahan - Pelarut Parameter Kontrol Kualitas Organoleptis Rendemen (%) Susut Pengeringan (%) 1:5 (A) Ekstrak kental, hijau kehitaman, khas daun mengkudu, pahit 12,89 ± 0,44 a 3,93 ± 0,12 a 1:10 (B) 17,06 ± 0,83 b 1,66 ± 0,59 b 1: 20 (C) 17,25 ± 0,83 b 2,29 ± 0,51 b
Subscript berbeda p<0,05
Pengaruh Rasio Bahan dan Pelarut Terhadap Kadar Flavonoid dan Aktivitas Penangkapan Radikal Bebas Ekstrak Daun Mengkudu ( Morinda citrifolia )
Hubungan  konsentrasi  dan  absorbansi  kuersetin yang  dihasilkan  memiliki  nilai  korelasi  korelasi  0,999. Nilai  korelasi  mendekati  1  menunjukkan  hubungan linearitas  yang  baik  antara  absorbansi  dengan konsentrasi. Semakin besar konsentrasi, semakin besar absorbansi  yang  dihasilkan.  Persamaan  regresi  linier yang  diperoleh  selanjutnya  untuk  menetapkan  kadar flavonoid  dalam  sampel.  Pada Tabel  2 dapat  dilihat kadar flavonoid ekstrak daun mengkudu.
Tabel  2 menunjukkan  rasio  bahan – pelarut  yang semakin  tinggi  menghasilkan  kadar  senyawa  yang semakin  besar.  Hasil  analisa  statistik  menunjukkan perbedaan  rasio  bahan  dan  pelarut  berpengaruh bermakna pada kadar flavonoid yang dihasilkan. Kadar flavonoid  tertinggi  ditunjukkan  dengan  rasio  bahan – pelarut  1:20.  Hasil  ini  selaras  dengan  hasil  rendemen yang  diperoleh,  yaitu  rendemen  tertinggi  pada  rasio bahan – pelarut  1:  20.  Hasil  ini  menunjukkan  semakin tinggi  rendemen,  semakin  tinggi  kadar  senyawa  yang terkandung.
Aktivitas  penangkapan  radikal  bebas  dievaluasi
menggunakan spektrofotometer UV- Vis dengan metode  DPPH.  DPPH  merupakan  senyawa  radikal bebas.  Prinsip  pengujian  dengan  DPPH  adalah  reaksi penghilangan  warna  dari  DPPH  oleh  senyawa antioksidan.
Ekstrak  daun  mengkudu  dengan  berbagai  rasio bahan-pelarut mampu melunturkan warna ungu DPPH. Larutan  DPPH  berubah  menjadi  warna  kuning  yang menunjukkan  ekstrak  daun  mengkudu  mampu menangkap  radikal  bebas.  Aktivitas  penangkapan radikal  bebas  ekstrak  daun  mengkudu  disebabkan adanya kandungan senyawa flavonoid. Flavonoid dapat menstabilkan Reactive  Oxygen  Species ROS  karena mengandung gusus hidroksil (Panche et al. 2016).
Uji  aktivitas  penangkapan  radikal  bebas  memiliki prinsip  yaitu  pengukuran  absorbansi  radikal  bebas DPPH yang mengalami penurunan akibat penambahan senyawa  antioksidan  (Thangraj  2016).  Larutan  blanko yang  digunakan  adalah  DPPH.  Pada Tabel  3 dapat dilihat  aktivitas  penangkapan  radikal  bebas  ekstrak daun mengkudu.

## Gambar 1. Hubungan Konsentrasi dan Absorbansi Larutan Kuersetin
Tabel 2. Kadar flavonoid Ekstrak Daun Mengkudu dengan Berbagai Perbandingan Rasio Bahan-Pelarut
Rasio Bahan – Pelarut Kadar Flavonoid (mgKE/g ekstrak) 1:5 2,803 ± 0,063 a 1:10 3,621 ± 0,224 b 1:20 4,368 ± 0,224 c Subscript berbeda p<0,05
0,2137 0,3194 0,4202 0,5206 0,6245 y = 0,0051x + 0,1128 R² = 0,9999 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0 20 40 60 80 100 120 Abs orb an si
Konsentrasi (ppm)
Rasio  bahan – pelarut  yang  semakin  tinggi menghasilkan  aktivitas  penangkapan  radikal  bebas semakin  tinggi  juga.  Analisa  statistik  menunjukkan bahwa  perbedaan  rasio  bahan – pelarut  memiliki pengaruh  bermakna  terhadap  aktivitas  penangkapan radikal  bebas,  dengan  hasil  tertinggi  ditunjukkan  pada rasio  bahan – pelarut  1  :  20.  Hasil  ini  selaras  dengan hasil  rendemen  dan  kadar  senyawa  yang  dihasilkan. Rasio  bahan – pelarut  1:20  menghasilkan  rendemen dan  kadar  senyawa  yang  paling  tinggi.  Flavonoid  yang mengandung gugus hidroksil dapat menetralkan radikal bebas  dengan  pengikatan  radikal  bebas  dan  atau dengan  mengkhelat  ion  logam.  Khelasi  logam  dapat mencegah  generasi  radikal  yang  merusak  biomolekul target (Kumar dan Pandey, 2013). Semakin tinggi kadar senyawa  flavonoid  dalam ekstrak  maka  semakin  besar aktivitas  penangkapan  radikal  bebas  (Hardiningtyas et al 2014).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  adanya  korelasi antara  jumlah  rendemen  ekstrak,  kadar  total  senyawa dan aktivitas yang dihasilkan.

## SIMPULAN
Perbedaan  rasio  bahan – pelarut  dalam  proses ekstraksi daun mengkudu berpengaruh bermakna pada kadar  flavonoid  dan  aktivitas  penangkapan  radikal bebas  yang  dihasilkan,  terdapat  korelasi  antara  kadar senyawa  dan  aktivitas  yang  dihasilkan.  Rasio  bahan pelarut  tertinggi  1:20  menghasilkan  kadar  flavonoid dan  aktivitas  penangkapan  radikal  bebas  tertinggi dibandingkan rasio bahan-pelarut lainnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Afandi,  Mochammad  2013.  Aplikasi  Pakan  Komersil Yang Disubstitusikan Tepung Silase Daun Mengkudu Dengan  Inokulan  Khamir  Laut  Sebagai  Pakan  Ikan Sidat  ( Anguilla  bicolor ).  [Skripsi].Surabaya:Fakultas Teknik dan Ilmu Kelautan, Universitas Hang Tuah. Ahmad  AL,  CY  Chan,  SRA  Shukor  and  MD  Mashitah. 2008.  Recovery  of  oil  and  carotenes  from  palm  oil Mill.  effluent. Chemical  Engineering  Journal. 141: 383-386.
Boontha S, Chumchuensanoi A, Charachit W, Deepaen C,  Jareontanakul  C,  2016,  Comparative  Evaluation on  Rutin  Content,  Radical  Scavenging  Activity  and Propoerties  of  Tablet  Prepared  from  Noni Leaf  and Fruit Extracts, International Journal of Science .13 (1) : 17-25
Chang  C  C,  Yang, M  H,  Chern,  J  C. 2002.  Estimation of Total  Flavonoid  Content  in  Propolis  by  Two Complementary  Colorimetric  Methods. Journal  of Food and Drug Analysis. 10: 178-182 Dewi,  Shinta  R,  Ulya,  Naily,  dan  Argo,  Bambang  D.
2018. Kandungan Flavonoid dan Aktivitas
Antioksidan Ekstrak Pleurotus ostreatus. Jurnal Rona Teknik Pertanian. 11(1):1-11
Haider  K,  Haider  M  R,  Neha  K,  Yas  M  S,  2020,  Free Radical  Scavenger:  An  Overview  on  Heterocyclic Advances  and  Medicinal  Prospects, European Journal of Medicinal Chemistry , Vol. 201. Halliwell B dan Gutteridge, J M C. 2000. Free Radical in Biology and Medicine . Oxford University Press. New York.
Hanani  E,  2015. Analisis  Fitokimia .  Buku  Kedokteran
EGC. Jakarta.
Hardiningtyas  S,  D,  Purwaningsih,  S,  Handharyani,  E,
2014, Aktivitas Antioksidan dan Efek Hepatoprotektif Daun Bakau Api-api Putih, JPHPI , 17 (1):80-91.
Kataoka  H,  2019, Pharmaceutical  Analysis:  Sample Preparasion ,  Encyclopedia  of  Analytical  Science,
Third Edition: 107-116
Kumar  S,  Pandey  A  K,  2013,  Chemistry  and  Biological Activities of  Flavonoids:  An Overview, The Scientific World  Journal ,  Volume  2013,  Hindawi  Publishing Corporasion, India
Panche A N, Diwan A D, Chandra S R, 2016, Flavonoid: An Overviwe, J. Nutr Sci . 5(47):1-15
Ramayani S L, Permatasari, E A, Novitasari, I, Maryana, 2021,  Pengaruh  Metode  Ekstraksi  Terhadap  Kadar Total  Fenolik,  Kadar  flavonoid  dan  Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Daun  Mengkudu  ( Morinda citrifolia (L.), Jurnal Ilmu Farmasi dan Farmasi Klinik (JIFKK), 18(1), 40-46
Tabel 3. Aktivitas  Penangkapan  Radikal  Bebas  Ekstrak  Daun  Mengkudu  dengan  Berbagai  Perbandingan  Rasio Bahan-Pelarut
Rasio Bahan-Pelarut Rata-Rata Aktivitas Penangkapan Radikal Bebas 1:5 7,11 ± 0,32 a 1:10 11,50 ± 0,35 b 1:20 14,87 ± 0,34 c
Subscript berbeda p<0,05
Pengaruh Rasio Bahan dan Pelarut Terhadap Kadar Flavonoid dan Aktivitas Penangkapan Radikal Bebas Ekstrak Daun Mengkudu ( Morinda citrifolia )
Rohman  A,  Riyanto,  S,  Hidayati,  N,  K,  2007,  Aktivitas Antioksidan, Kandungan Fenolik Total dan Flavonoid Total Daun Mengkudu, Agritech , 27 (4):147-151) Sabtu R, Awang M A, Hairon H, Talib N A, Aziz R, Suan C L  dan  Taher  Z  M,  2016,  Extraction  of  Piper Sarmentosum  Leaves  (Kadok):  Effect  of  Particle Sizes,  Raw  Material  to  Solvent  Ratio  and  Time  on Yield  of  Extract, 6 th International  Conference  on Biotechnology  for  The  Wellness  Industry ,  Malaysia: Institute  of  Bioproduct  Development,  Faculty  of Chemical  and  Energy  Engineering,  Universiti Teknologi Malaysia
Setyani,  W,  Setyowati,  H,  2018,  Phytochemical investigation  of  noni  (Morinda  citrifolia  L)  leaves extract applicated for sunscreen product, Malaysian Journal  of  Fundamental  and  Applied  Sciences ,  164- 167.
Tambun  R,  Alexander  V,  Ginting  Y,  2021, Performance comparison  of  maceration  method,  soxhletation method,  and  microwave  -assisted  extraction  in extracting  active  compounds  from  soursop  leaves (Annona muricata): A review, IOP Conference Series: Material Science and Engineering 1122 : 012095 Thangraj  P.  2016. Pharmacologycal  Assay  of  Plant- Based  Natural  Products .  Springer  International Publisher. Switzerland.
Zin, Z M, Hamid A A, Osman A, Saari N, Misran A, 2007, Isolation  and  Identification  of  Antioxidative Compound  from  Fruit  of  Mengkudu  (Morinda citrifolia L.), International Journal of Food Properties , 10:2, 363-373