## CURRENT BIOCHEMISTRY
ISSN: 2355-7877 e-ISSN: 2355-7931 Journal homepage: http://journal.ipb.ac.id/index.php/cbj Journal E-mail: current.biochemistry@gmail.com
Efektivitas Ekstrak Kulit Melinjo ( Gnetum gnemon ) sebagai Penurun Kadar Asam Urat pada Tikus Putih ( Rattus norvegicus ) Hiperurisemia (Effectiveness of Gnetum gnemon Peel Extract as an Antihyperuricemic in White Rats Rattus norvegicus)
Akhmad Endang Zainal Hasan 1 , Husnawati 1* , Chintia Ayu Puspita 1 , Agus Setiyono 2
1 Department of Biochemistry, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, IPB University. Jl. Raya Dramaga, Babakan, Dramaga, Bogor, West Java, Indonesia 16680
2 Department of Clinic, Reproduction and Pathology, Faculty of Veterinary, IPB University.
Jl. Raya Dramaga,Babakan, Dramaga, Bogor West Java, Indonesia. 16680
Received: 13 February 2019 ; Accepted: 6 January 2020
Corresponding author : dr.Husnawati, MSi.; Department of Biochemistry, IPB University, Bogor 16680; Telp/Fax. +62251-8423267; Email: dr.husnawati.1983@gmail.com

## ABSTRACT
Melinjo peel extract is believed to have potential as antihyperuricemic agent, however, in vivo assays have  yet  to  be  conducted  to  prove  the  antihyperuricemic  activity.  The  objectives  of  this  research  were  to analyze antihyperuricemic activity of melinjo peel extract in Sprague Dawley male white rat. A total of 24 rats were divided into 6 groups, which are normal, positive, and negative group, 70% ethanolic extract of melinjo  peel  dose  450  mg/kgBW  (ET  I)  and  dose  900  mg/kgBW  (ET  II),  and  water  extract  of  melinjo  peel dose 93.35 mg/kgBW (EA). The results showed that antihyperuricemic potency of 70% ethanolic extract of melinjo  peel  (ET1  and  ET2)  were  more  effective  than  allopurinol  dose  90  mg/kgBW  with  percentage decrease  of  uric  acid  level  of  50%  and  54%.  Ethanol  extract  of  melinjo peel  was  able to  reduce  uric  acid levels to be in the range of normal values (<5 mg / dL). Body weight gain of rats given ethanol extract of melinjo  peel  dose  450  mg/kgBW  had  values  that  were  close  to  the  normal  group.  Melinjo  peel  extract contained flavonoid, tannins, saponin, and triterpenoid.
Keywords: Antihyperuricemic, IC50, Peel melinjo, Uric acid

## ABSTRAK
Ekstrak  kulit  melinjo  diduga  memiliki  potensi  sebagai  antihiperurisemia,  tetapi  belum  dilakukan penelitian  secara  in  vivo  untuk  membuktikannya.  Penelitian  bertujuan  menganalisis  efektivitas antihiperurisemia  ekstrak  kulit  buah  melinjo  pada  tikus  putih  jantan  galur  Sprague  Dawley.  Sebanyak  24 ekor  tikus  dibagi  ke  dalam  6  kelompok,  yaitu  kelompok  normal,  positif,  negatif,  ekstrak  etanol  70%  kulit melinjo dosis 450 mg/kgBB (ET I), dan dosis 900 mg/kgBB (ET II), serta ekstrak air kulit melinjo dosis 93.35 mg/kgBB (EA). Hasil menunjukkan bahwa ekstrak etanol 70% kulit melinjo (ET1 dan ET2)  memiliki potensi antihiperurisemia yang lebih efektif dibandingkan dengan allopurinol dosis 90 mg/kgBB dengan persentase penurunan kadar asam urat sebesar 50 % dan 54 %. Ekstrak etanol kulit melinjo mampu menurunkan kadar asam urat hewan uji hingga berada di rentang nilai normal (< 5 mg/dL). Pertambahan bobot badan tikus
yang  diberi  ekstrak  etanol  dosis  450  mg/kgBB  memiliki  nilai  yang  mendekati  kelompok  normal.  Ekstrak etanol kulit melinjo mengandung flavonoid, tanin, saponin, dan triterpenoid.
Kata kunci : Antihiperurisemia, Asam urat, IC 50 , Kulit melinjo

## 1. PENDAHULUAN
Asam  urat  merupakan  salah  satu  senyawa kimia  hasil  akhir  dari  metabolisme  purin  dalam tubuh.  Mamalia  selain  primata  tingkat  tinggi memiliki  uratase  yang  mampu  mengubah  asam urat  menjadi  alantoin  yang  merupakan  suatu produk  larut  air.  Manusia  tidak  memiliki  uratase, sehingga  produk  akhir  metabolisme  purin  adalah asam  urat.  Asam  urat  yang  berlebih  tidak mengalami  metabolisme  seluruhnya  di  dalam tubuh,  sehingga  terjadi  peningkatan  kadar  asam urat  dalam  darah  yang  disebut  hiperurisemia (Murray et  al .  2012).  Hiperurisemia  yang  tidak diberi  penanganan akan  meyebabkan  penumpukan kristal  asam  urat  dalam  cairan  sendi  yang  disebut pirai (Putra 2007).
Buah  melinjo  ( Gnetum  gnemon )  dikenal sebagai  salah  satu  sumber  pangan  yang  tinggi purin,  sehingga  sering  dijadikan  pantangan  diet bagi  penderita  hiperurisemia.  Melinjo  merupakan tanaman  asli  Indo-Malaya  yang  sering  ditemukan di  daerah  kering  dan  hutan  basah,  khususnya  di Indonesia  (Kato et  al .  2011).  Kulit  melinjo memiliki  kandungan  flavonoid,  alkaloid,  saponin dan tanin. Senyawa bioaktif flavonoid menurut Eff et  al .  (2016)  dapat  menghambat  aktivitas  enzim xantin  oksidase  melalui  interaksi  dengan  enzim pada  gugus  samping  dan  mekanisme  inhibisi kompetitif.  Antosianin  juga  merupakan  salah  satu golongan flavonoid yang terdapat dalam kulit buah melinjo (Tarmizi et al. 2015).
Berdasarkan  uji in  vitro yang  dilakukan Wulandari  (2012),  ekstrak  etanol  kulit  melinjo memiliki  daya  inhibisi  aktivitas  xantin  oksidase pada  konsentrasi  100  ppm  setara  dengan pemberian  allopurinol  19.9  ppm.  Perlu  dilakukan penelitian  lanjutan  secara in  vivo untuk  melihat memampuan  kulit  melinjo  dalam  menurunkan kadar  asam  urat  dalam  darah.  Penelitian  ini bertujuan menganalisis efektivitas antihiperurisemia  ekstrak  kulit  buah  melinjo  pada tikus putih jantan galur Sprague Dawley pada dua variasi ekstrak, yaitu etanol 70% dan air.

## 2. METODOLOGI
Ekstraksi Kulit Buah Melinjo (Modifikasi Safwan et al . 2016)
Sampel  berupa  kulit  buah  melinjo  yang telah  dipisahkan  dari  bijinya  dibersihkan  dan dirajang  kecil-kecil.  Sampel  ditimbang  terlebih dahulu  sebelum  dikeringkan.  Sampel  kemudian dikeringkan  dengan  dijemur  selama  3  hari  dan dikeringkan  kembali  dengan  oven  pada  suhu  40 selama 1 hari. Sampel yang telah kering ditimbang dan  diblender  hingga  halus,  kemudian  ditentukan kadar airnya. Serbuk kulit buah melinjo diekstraksi dengan cara maserasi dengan etanol 70% selama 3 x  24  jam.  Filtrat  yang  diperoleh  diuapkan  dengan evaporator.  Ekstraksi  kulit  melinjo  juga  dilakukan dengan  pelarut  air.  Ekstrak  yang  diperoleh  lalu diuji  kandungan  Fitokimia  secara  kualitatif (Harborne 2006).

## Perlakuan Hewan Uji
Tikus Sprague  dawley jantan  usia  9 minggu  dengan  berat  badan  150±50  gram, sebanyak  24  ekor  dibagi  menjadi  kelompok  yang diinduksi  hiperurisemia  (20  ekor)  dan  kelompok normal  yang  tidak  diinduksi  hiperurisemia  dan dicekok  akuades  (4  ekor).  Induksi  hiperurisemia dilakukan  dengan  pemberian  jus  hati  ayam  60 gram/kgBB  (Dira  dan  Harmely  2014).  Tikus hiperurisemia  kemudian  dibagi  menjadi  lima kelompok  yaitu:  kelompok  kontrol  positif  (diberi terapi  allopurinol  dosis  90  mg/KgBB);  kelompok kontrol  negatif  (diberi  perlakuan  aquades); kelompok  ET  I  (diberi  Ekstrak  Etanol  dosis  450 mg/KgBB); kelompok ET II (diberi Ekstrak Etanol 900 mg/KgBB); dan kelompok EA (diberi Ekstrak Air  dosis  93.35  mg/KgBB).  Allopurinol,  ekstrak etanol  kulit  melinjo,  dan  ekstrak  air  kulit  melinjo dilarutkan  dalam  Na-CMC  0.5%.  Bobot  badan tikus ditimbang tiap minggu dan kondisi kesehatan tikus diamati.
Hewan  uji  selama  aklimatisasi  diberi pakan  standar  HI  PROVITE  BRAVO  512  dan minum  akuades  secara ad  libitum .  Setelah
aklimatisasi selama satu minggu, konsentrasi asam urat diukur sebagai nilai konsentrasi asam urat hari ke-0  dan  dilanjutkan  dengan  masa  induksi hiperurisemia.  Masa  induksi  dilakukan  selama empat  minggu,  konsentrasi  asam  urat  diukur kembali  sebagai  nilai  konsentrasi  asam  urat  hari ke-28  dan  dilanjutkan  dengan  masa  perlakuan selama satu minggu. Konsentrasi asam urat diukur kembali  sebagai  nilai  konsentrasi  asam  urat  hari ke-35.  Sampel  darah  diambil  dari  vena  ekor  tikus secara  aseptik  dengan  terlebih  dahulu  dilakukan anestesi menggunakan ketamine-xylazine . Pengukuran konsentrasi asam urat dilakukan  menggunakan ReiGed  Diagnostics  Uric Acid secara  spektrofotometri.  Komposisi  reagen dan  sampel  adalah  sebanyak  1000  µL  dan  25  µL, kemudian  tabung  dihomogenkan  dan  diinkubasi selama  10  menit  pada  suhu  37℃.  Absorbansi dibaca  pada  panjang  gelombang  520  nm. Konsentrasi  asam  urat  dapat  dihitung  dengan rumus:
[asam urat] (mg/dL) = A sampel A standar × [standar]
Analisis data konsentrasi asam urat hewan uji  dilakukan  mengunakan  uji  ANOVA  dan  uji  T berpasangan dengan membandingkan nilai konsentrasi asam urat antar kelompok.

## 3. HASIL Konsentrasi Asam Urat Hewan Uji
Konsentrasi  asam  urat  tikus  diukur  pada hari  ke-0,  28  dan  35.  Konsentrasi  asam  urat  pada hari  ke-0  menggambarkan  kondisi  asam  urat hewan uji sebelum dilakukan
induksi
hiperurisemia menggunakan hati ayam.
Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh,  konsentrasi asam  urat  keenam  kelompok  berada  pada  nilai normal  (1.2-5.0  mg/dL)  dan  tidak  berbeda  nyata secara  statistik  (p>  0.05).  Nilai  rerata  konsentrasi asam  urat  dari  lima  kelompok  perlakuan  (n=20) adalah  2.37  ±  0.89  mg/dL,  sedangkan  kelompok normal (n=4) adalah 2.17 ± 0.51 mg/dL (Tabel 1). Konsentrasi asam  urat  hari  ke-28  menggambarkan kondisi  asam  urat  hewan  uji  setelah  dilakukan induksi  hiperurisemia  menggunakan  jus  hati  ayam selama 4 minggu. Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa kelompok perlakuan mengalami  peningkatan  konsentrasi  asam  urat hingga  melebihi  nilai  normal  dan  berbeda  nyata
secara statistik (p < 0.05) dengan kelompok normal yang hanya diberi pakan standar (Tabel 1). Rerata kadar asam urat kelompok perlakuan adalah 6.81 ± 2.15  mg/dL.  Asam  urat  kelompok  perlakuan mengalami  peningkatan  lebih  dari  140%,  jauh berbeda  dibandingkan  dengan  kelompok  normal yang  hanya  meningkat  sebanyak  24%.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  pemberian  jus  hati  ayam selama  4  minggu  berhasil  menginduksi  terjadinya hiperurisemia pada tikus Sprague dawley .
Pengukuran konsentrasi asam urat hari ke- 35  bertujuan  untuk  melihat  pengaruh  pemberian ekstrak  kulit  melinjo  selama  satu  minggu.  Hasil yang  diperoleh  menunjukkan  hanya  ada  3 kelompok  yang  menunjukkan  penurunan  kadar asam  urat  secara  nyata,  yaitu  kelompok  kontrol positif  dan  kelompok  ekstrak  etanol  kulit  melinjo dosis  450  dan  900  mg/kgBB  (Gambar  1).  Ekstrak etanol  kulit  melinjo  mampu  menurunkan  kadar asam urat hewan uji hingga berada di rentang nilai normal  (<  5  mg/dL)  jauh  lebih  baik  dibandingkan kelompok  kontrol  positif  yang  diberi  allopurinol. Kelompok  ET  II  (ekstrak  etanol  kulit  melinjo dosis  900  mg/kgBB)  mengalami  penurunan konsentrasi  asam  urat  terbesar  yaitu  54%, sedangkan kelompok ET I (ekstrak etanol kulit melinjo  dosis  450  mg/kgBB)  mengalami penurunan  asam  urat  sebesar  50%.  Kedua kelompok ini menunjukkan kemampuan menurunkan  asam  urat  yang  lebih  baik dibandingkan  allopurinol  yang  hanya  sebesar 42% (Gambar 2).

## Bobot Badan Hewan Uji
Bobot  badan  hewan  uji  diukur  sejak  masa adaptasi  hingga  akhir  perlakuan.  Gambaran  bobot badan  dari  waktu  ke  waktu  mununjukkan  kondisi kesehatan  hewan  uji  secara  makro.  Normalnya bobot badan akan bertambah seiring bertambahnya waktu/usia.  Bobot  badan  tikus  keenam  kelompok secara  umum  mengalami  peningkatan  dari  awal hingga  akhir  perlakuan  (Gambar  3).  Hal  ini menunjukkan  bahwa  tikus  berada  dalam  kondisi sehat selama masa adaptasi, induksi dan perlakuan.
Berdasarkan  pengamatan  bobot  badan  di akhir  perlakuan,  kelompok  tikus  yang  diberi allopurinol (kontrol positif) menunjukkan persentase  peningkatan  bobot  badan  yang  paling
Hasan et al. – Efektivitas Ekstrak Kulit Melinjo sebagai Penurun Kadar Asam Urat pada Tikus Putih
rendah,  yaitu  hanya  sebesar  30%.  Sedangkan kelompok  ET  I  menunjukkan  peningkatan  yang paling  tinggi  yaitu  sebesar  82%,  mendekati  nilai kelompok  Normal  yang  mengalami  peningkatan bobot  badan  sebesar  79%  (Gambar  4).  Kelompok ET II yang memiliki kemampuan antihiperurisemia paling  tinggi,  menunjukkan  peningkatan  bobot badan  yang  lebih  rendah  daripada  kelompok normal.

## Kadar  Air  Simplisia,  Rendemen  dan Kandungan  Fitokimia  Ekstrak  Kulit  Buah Melinjo
Pengukuran  kadar  air  terhadap  simplisia kulit melinjo dilakukan sebanyak tiga kali ulangan. Rerata  kadar  air  simplisia  kulit  melinjo  yang diperoleh adalah 6.58 ± 0.96 %. Rendemen ekstrak paling besar diperoleh dari ekstrak air kulit melinjo yaitu  sebesar  13.83%  (Gambar  5).  Ekstrak  etanol 70%  kulit  buah  melinjo  ( Gnetum  gnemon L.) dalam  penapisan  senyawa  fitokimia  menunjukkan keberadaan senyawa flavonoid, saponin, tanin, dan triterpenoid  (Tabel  2).  Pengujian  fitokimia  hanya dilakukan  pada  ekstrak  etanol  kulit  melinjo  yang
sudah  terbukti  memiliki  efek  antihiperurisemia secara in  vivo .  Tujuannya  adalah  untuk  melihat kandungan  senyawa  yang  berpotensi  sebagai antihiperurisemia pada kulit buah melinjo.

## 4. PEMBAHASAN
Tikus  memiliki  konsentrasi  asam  urat normal  sekitar  1.2-5.0  mg/dL  (Girindra  1988). Induksi hiperurisemia dilakukan menggunakan hati ayam  karena  memiliki  konsentrasi  senyawa  purin sebesar 243 mg/100 gram hati ayam yang termasuk dalam  kelompok  sumber  purin  sedang  (Diantari 2012).  Makanan  yang  mengandung  kadar  purin tinggi  menyebabkan  enzim  xantin  oksidase  yang aktif lebih banyak dari keadaan normal (Murray et al. 2012). Penelitian yang dilakukan Muhtadi et al (2014)  dan  Suhendi  et  al  (2011)  menggunakan potassium  oksonat  dosis    250    mg/kgBB  untuk menginduksi  kondisi  hiperurisemia  pada  mencit jantan  dalam  waktu  2  jam.  Penelitian  ini  lebih memilih  penggunaan jus  hati  ayam  sebagai nutrisi penginduksi  hiperurisemia  karena  pada  kenyataan di  lapangan,  kondisi  hiperurisemia  lebih  banyak terjadi akibat faktor konsumsi atau diet.
Tabel 1. Rerata perubahan asam urat hewan uji saat fase induksi hiperurisemia
Kelompok Kadar asam urat hewan uji (mg/dL) Persen perubahan asam urat Hari ke-0 Hari ke-28 Normal 2.17 ± 0.51 2.69 ± 0.72 a 24 % Kontrol Positif 2.65 ± 0.76 2.37 ± 0.89 7.44 ± 2.65 b 6.81 ± 2.15 190 % Kontrol Negatif 2.44 ± 0.84 5.94 ± 0.94 b 144 % Ekstrak Etanol I 1.62 ± 0.52 5.75 ± 0.40 b 254 % Ekstrak Etanol II 3.25 ± 0.94 9.08 ± 2.86 b 179 % Ekstrak Air 2.17 ± 0.42 6.94 ± 1.24 b 220 %
Gambar 1. Perubahan konsentrasi asam urat selama 35 hari perlakuan
0 2 4 6 8 10 12 Normal Kontrol (+) Kontrol (-) ET 1 ET 2
EA Kad ar A sam Ur at (m g /d L ) Kelompok Perlakuan H-0 H-28 H-35
Gambar 2. Persentase penurunan asam urat hewan uji setelah satu minggu perlakuan
Gambar 3. Rerata bobot badan tikus sejak masa adaptasi hingga akhir perlakuan
Gambar 4. Persentase peningkatan bobot badan tikus hingga akhir perlakuan
0 50 100 150 200 250 300 350 -7 0 7 14 26 28 35 Hari ke- Bo b o t ti k u s (g ra m )
Normal Kontrol Positif
Kontrol Negatif
Dosis 1 (ET1)
Dosis 2 (ET2) Ekstrak air (EA) 109.8 ±47.7 43.0±25.1 113.8±19.7 130.8±18.2 74.0±18.3 91.8±6.4 0 20 40 60 80 100 120 140 Normal Kontrol
Positif Kontrol Negatif Dosis 1 (ET1) Dosis 2 (ET2) Ekstrak air (EA)
P en in g k atan B o b o t B ad an ( %) Kelompok Perlakuan
Gambar 5. Rendemen ekstrak etanol 70% dan ektrak air kulit melinjo
Tabel 2. Hasil uji fitokimia ekstrak etanol kulit buah melinjo
Pengujian Ekstrak kulit melinjo Alkaloid a. Dragendorf - b. Meyer - c. Wagner + Flavonoid +++ Saponin ++ Tanin ++ Steroid - Triterpenoid +++
Keterangan: kandungan dalam sampel : sedikit (+); banyak (++); banyak sekali (+++); tidak ada (-)
Tikus  memiliki  konsentrasi  asam  urat normal  sekitar  1.2-5.0  mg/dL  (Girindra  1988). Induksi  hiperurisemia  dilakukan  menggunakan hati  ayam  karena  memiliki  konsentrasi  senyawa purin  sebesar  243  mg/100  gram  hati  ayam  yang termasuk  dalam  kelompok  sumber  purin  sedang (Diantari  2012).  Makanan  yang  mengandung kadar  purin  tinggi  menyebabkan  enzim  xantin oksidase  yang  aktif  lebih  banyak  dari  keadaan normal  (Murray  et  al.  2012).  Penelitian  yang dilakukan Muhtadi et al (2014) dan Suhendi et al (2011)  menggunakan  potassium  oksonat  dosis 250    mg/kgBB  untuk  menginduksi  kondisi hiperurisemia  pada  mencit  jantan  dalam  waktu  2 jam.  Penelitian  ini  lebih  memilih  penggunaan  jus hati ayam sebagai nutrisi penginduksi hiperurisemia karena pada kenyataan di lapangan, kondisi  hiperurisemia  lebih  banyak  terjadi  akibat faktor konsumsi atau diet.
Konsentrasi asam urat rata-rata hewan uji setelah  induksi  hiperurisemia  adalah  6.7  ±  2.36 mg/dL.  Hasil  tersebut  mengindikasikan  bahwa konsentrasi  asam  urat  dalam  serum  darah  tikus berada  di  atas  normal  (Gambar  1),  sehingga
hewan  uji  dapat  dikatakan  telah  mengalami hiperurisemia. Induksi hiperurisemia yang dilakukan  selama  28  hari  memberikan  kenaikan konsentrasi  asam  urat  pada  serum  darah  tikus sebesar  197  %  untuk  seluruh  populasi  kelompok tikus yang diinduksi (n=20).
Konsentrasi  asam  urat  serum  pada  tikus kelompok  ET  I  dan  ET  II  berada  pada  kisaran normal  setelah  masa  perlakuan.  Penurunan konsentrasi  asam  urat  tertinggi  terdapat  pada kelompok  tikus  yang  diberi  ekstrak  etanol  kulit melinjo  dosis  900  mg/kgBB.  Persentase  tertinggi kedua  terdapat  pada  kelompok  ET  I  (450 mg/kgBB)  yang  mampu  menurunkan  konsentrasi asam  urat  serum  sebesar  50%.  Penurunan konsentrasi  asam  urat  serum  pada  tikus  kedua kelompok  tersebut  lebih  besar  dibandingkan dengan  kelompok  kontrol  positif  yang  hanya mengalami penurunan 31 %. Hal ini mengindikasikan  bahwa  ekstrak  kulit  melinjo dengan pelarut etanol 70% pada dosis 450 mg/kg dan  900  mg/kg  bobot  badan,  dapat  menurunkan konsentrasi  asam  urat  pada  kisaran  normal terhadap  tikus  hiperurisemia,  lebih  efektif
9.82 % 13.83 % 0 5 10 15 20 Etanol 70% Air R en d em en ( % ) Ekstrak
dibandingkan  dengan  allopurinol  dosis  90  mg/kg bobot  badan.  Persentase  penurunan  konsentrasi asam  urat  paling  kecil  terdapat  pada  kelompok EA,  yaitu  hanya  2.88%  (Gambar  1).  Hal  tersebut dapat  terjadi  karena  konsentrasi  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  (93.35  mg/kgBB)  kurang tinggi  apabila  dibandingkan  dengan  konsentrasi ekstrak  etanol  70%  kulit  melinjo.  Penurunan konsentrasi  asam  urat  setelah  pemberian  ekstrak etanol kulit melinjo menunjukkan bahwa senyawa bioaktif  pada  kulit  melinjo  dapat  menghambat aktivitas  enzim  xantin  oksidase  sesuai  dengan penelitian Wulandari (2012).

## Kadar  Air  Simplisia,  Rendemen  dan Kandungan  Fitokimia  Ekstrak  Kulit  Buah Melinjo
Pengeringan kulit melinjo bertujuan untuk menurunkan  kandungan  air  yang  terdapat  dalam kulit  melinjo  dan  mendapatkan  rendemen  ekstrak yang  lebih  besar.  Penggilingan  dan  pengayakan dilakukan  agar  partikel  bahan  baku  memiliki ukuran yang sama dan luas permukaan yang lebih besar,  sehingga  senyawa  bioaktif  pada  kulit melinjo  lebih  mudah  ditarik  keluar  dari  bahan (Siregar dan Utami 2014). Simplisia kulit melinjo memiliki  kadar  air  sebesar  6.58  ±  0.96  %.  Hasil tersebut menunjukkan simplisia memiliki kualitas yang  baik  sehingga  dapat  disimpan  dalam  waktu lama.
Rendemen  ekstrak  air  kulit  melinjo  lebih tinggi  dibandingkan  ekstrak  etanol  70%  kulit melinjo,  yaitu  13.83%.  Hal  ini  mengindikasikan bahwa  senyawa  bioaktif  yang  terdapat  pada ekstrak  air  kulit  melinjo  lebih  banyak.  Senyawa aktif  pada  kulit  melinjo  umumnya  bersifat  polar, sehingga  akan  mudah  terbawa  pada  pelarut  air saat  ekstraksi.  Saat  kondisi  kesetimbangan,  maka komponen suatu larutan akan terpisah berdasarkan kepolarannya.  Air  memiliki  indeks  kepolaran yang cukup besar, yaitu 10.2 (Harris 2015).
Ekstrak kulit melinjo menunjukkan adanya  kandungan  flavonoid,  tanin,  streoid,  dan saponin (Tabel 2). Flavonoid merupakan senyawa fenolik  tumbuhan  yang  memiliki  cincin  aromatik dengan satu  atau  dua  gugus  hidroksil.
Kelarutannya dalam air sangat baik, sehingga dapat diekstraksi menggunakan air dan etanol
70%.  Umumnya  golongan  ini  terdapat  dalam tumbuhan, terikat pada gula sebagai glikosida.
Flavonoid  terbagi  menjadi  7  kelompok, yaitu antosianin, proantosianin, isoflavon, flavonon, flavonol, flavanol, dan flavon. Flavonoid golongan flavon dan flavonol memiliki daya hambat lebih tinggi terhadap xantin oksidase dibandingkan dengan golongan flavonoid lainnya. Hal ini karena posisi gugus hidroksil pada flavon dan  flavonol  lebih  mudah  menangkap  elektron dari  sisi  aktif  xantin  oksidase  (Cos  et  al.  1998). Menurut  Lin  et  al.  (2002)  senyawa  golongan flavonoid  dengan  struktur  tertentu  yang  memiliki ikatan  rangkap  pada  atom  C2  dan  C3,  memiliki kemampuan  sebagai  inhibitor  kompetitif  xantin oksidase.  Gugus  hidroksil  pada  C5  dan  C7  serta gugus  karbonil  pada  C4  yang  membentuk  ikatan hidrogen,  berperan  dalam  interaksi  inhibitor dengan sisi aktif enzim.
Ekstrak  etanol  kulit  melinjo  mampu menurunkan  kadar  asam  urat  hewan  uji  hingga berada  di  rentang  nilai  normal  (<  5  mg/dL). Ekstrak  etanol  70%  kulit  melinjo  dosis  450 mg/kgBB  dan  900  mg/kgBB  memiliki  potensi antihiperurisemia yang lebih efektif dibandingkan dengan  allopurinol  dosis  90  mg/kgBB  dengan persentase  penurunan  sebesar  50  %  dan  54  %. Pertambahan  bobot  badan  tikus  yang  diberi ekstrak  etanol  dosis  450  mg/kgBB  memiliki  nilai yang mendekati kelompok normal. Ekstrak etanol kulit  melinjo  mengandung  flavonoid,  tanin, saponin, dan triterpenoid.

## 5. DAFTAR PUSTAKA
Cos  P,  Ying  L,  Hu  CJP,  Cimanga  K,  Poel  BV, Pieters L, Vlientinck AJ, Berghe DV. 1998. Structure activity relationship and classification  of  flavonoids  as  inhibitors  of xanthine oxidase and superoxide scavengers. J Nat Prod. 61(1): 71-76.
Diantari  E.  2012.  Pengaruh  asupan  purin  dan cairan  terhadap  kadar  asam  urat  pada wanita  usia  50-60  tahun  di  Kecamatan Gajah Mungkur Semarang [skripsi].
Semarang  (ID):  Universitas  Diponegoro Semarang. Dira, Harmely F. 2014. Uji aktivitas antihiperurisemia  ekstrak  etanol  sambiloto (Androgravis  paniculata  Nees),  Brotowali
(Tinospora  crispa  (L.)  Hook.  &  Thomson), Manggis  (Garcinia  mangostana  L.),  lada hitam  (Piper  ningrum  L.)  dan  jahe  merah (Zingiber  officinale  Rosc.)  secara  in  vivo [prosiding]. Seminar Nasional dan Workshop  Perkembangan  Terkini  Sains Farmasi dan Klinik IV. Padang, 2014.
Eff  ARY,  Rahayu  ST,  Syachfitri  RD.  2016.  Uji aktivitas  penghambatan  xantin  oksidase secara  in  vitro  oleh  isolat  6,4-dihidroksi-4- metoksibenzofenon-2-O-β-D glukopiranosida (C20H22O10) yang diisolasi  dari  mahkota  dewa  (Phaleria macrocarpa  (Scheff.)  Boerl).  Pharm  Sci Res. 3(1): 1-11.
Girindra A. 1988. Biokimia Patologi. Bogor (ID): Pusat Antar Universitas IPB.
Harborne JB. 2006. Metode Fitokimia.
Padmavinata  K,  Soediro  I,  penerjemah.
Terjemahan  dari:  Phytochemical  Methods.
Bandung (ID): Penerbit ITB.
Harris  DC.  2015.  Quantitave  Chemical  Analysis. Lucy  C,  editor.  New  York  (US):  WH Freeman.
Kato H, Samizo M, Kawabata R, Takano F, Ohta T.  2011.  Stilbenoids  from  the  melinjo (Gnetum  gnemon  L.)  fruit  modulate cytokine  production  in  murine  peyer’s patch cells ex vivo. Planta Med. 77(10):1027-1034.
Lin  CM,  Chen  CS,  Liang  YC,  Lin  JK.  2002. Molecular  modeling  of  flavonoids  that inhibits xanthine oxidase. Biochem Biophys Res Com. 294: 167-172.
Muhtadi,  Suhendi  A,  Nurcahyanti  W,  Sutrisna EM.  2014.  Uji  praklinik  antihiperurisemia secara  in  vivo  pada  mencit  putih  jantan galur  Balb-C  dari  ekstrak  daun  salam (Syzigium  polyanthum  Walp)  dan  daun belimbing  wuluh  (Averrhoa  bilimbi  L.). Biomedik. 6(1): 17-23.
Murray  RK,  Bender  DA,  Botham  KM,  Kennely PJ, Rodwell VW, Weil PA. 2012. Biokimia Harper  Edisi  29.  Jakarta  (ID):  Penerbit
Buku Kedokteran EGC.
Putra TR. 2007. Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam Jilid II Edisi IV. Jakarta (ID): EGC.
Safwan,  Adikusuma  W,  Ananda  DR.  2016. Aktivitas  analgetik  ekstrak  etanol  daun melinjo  (Gnetum  gnemon  L.)  pada  mecit
putih  (Mus  musculus  L.)  jantan.  J  Ilmiah Ibnu Sina. 1(1): 71-78.
Siregar YDI, Utami P. 2014. Pemanfaatan ekstrak kulit  melinjo  merah  (Gnetum  gnemon) sebagai  pewarna  alami  pada  pembuatan lipstik. J Kimia Valensi. 4(2): 98-108.
Suhendi  A,  Nurcahyanti,  Muhtadi,  Sutrisna  EM. 2011. Aktivitas antihiperurisemia ektrak air jinten hitam (Coleus ambonicus Lour) pada mencit jantan galur balb-c dan standardisasinya. Majalah Farmasi Indones. 22(2): 77-84.
Tarmizi  E,  Lalasari  LH,  Saragih  R.  2015.  The effect of solvent on the stabilities (color and Fe)  of  anthocyanin  isolated  from  the  red- color-melinjo-peels.  ICCME.  060018-1- 060018-8. doi: 10.1063/1.493872.
Wulandari  S.  2012.  Inhibisi  xantin  oksidase  oleh ekstrak  etanol  kulit  melinjo  (Gnetum gnemon) relatif terhadap allopurinol [skripsi].  Malang  (ID):  Universitas  Negeri Malang.