Muh. Yusuf Idris : Isolasi dan Karakteristik Jamur Pelapuk dari Batang dan Tandan Kosong Kelapa Sawit

## ISOLASI DAN KARAKTERISTIK JAMUR PELAPUK DARI BATANG DAN TANDAN KOSONG KELAPA SAWIT
(Isolation and Characteristic of Fungus Rot of Stem and Empty Fruit Bunches of Oil Palm)
Muh. Yusuf Idris, Sukriming Sapareng * , Irwan Halid
Faculty of Agriculture, Andi Djemma Palopo University, South Sulawesi, Indonesia *Corresponding author : email : miming.mlgke@gmail.com

## ABSTRACT
Rot fungus has the ability to degrade stem and empty fruit bunches oil palm for producing an enzyme that can break down cellulose, hemicellulose, and lignin. Fungal isolates obtained from stem oil palm  which had  rotted  and  empty  fruit  bunches  oil  palm.  Isolates  were  observed  macroscopically  and microscopically. Macroscopic observation includes growth speed, colony color, elevation and the edge of the colony. Microscopic observations include the shape of fungal spores and conidiophores. The research found rot fungi are 32 isolates comprising 17 isolates from oil palm stem decaying and 15 isolates from empty  fruit  bunches  oil  palm.  Trichoderma  isolates  sp3  colony  having  a  diameter  of  highs,  lows  and Absidia sp isolates were grown on PDA.
Keywords : Isolation, characteristic, fungus, empty fruit bunches, oil palm

## PENDAHULUAN
Batang sawit mempunyai masa produktif  secara  umum  lebih  kurang  25 tahun,  setelah  itu  tanaman  sawit  harus diremajakan. Dari peremajaan akan
dihasilkan sejumlah
biomassa.
Mengembalikan biomassa ke areal perkebunan  membutuhkan  waktu  yang lama.  Biomassa  yang  tetap  berada  pada areal  perkebunan  setelah  peremajaan dapat  menjadi  sumber  hara  bagi  tanaman baru.  Agar unsur hara dapat tersedia bagi tanaman,  maka  batang  sawit  yang  sudah ditebang  perlu  terdekomposisi  terlebih dahulu.  Demikian juga hal dengan tandan kosong  kelapa  sawit  (TKKS),  produksi TKKS  diperkirakan  mencapai  30  juta  ton
per  tahun  (Sajab et  al., 2013).    Namun, limbah  ini  belum  dimanfaatkan  secara baik  oleh  sebagian  besar  pabrik  kelapa sawit  di  Indonesia.  Dalam  waktu  yang relatif  panjang,  keberadaan  limbah  ini mendatangkan masalah pencemaran. Pemanfaatan  limbah  ini  diharapkan  akan mengurangi  masalah  serta  mendatangkan keuntungan  jika  dikelola  menjadi  barang yang bernilai dengan menggunakan fungi.
Fungi  mempunyai  kemampuan  untuk mendegradasi  batang  dan  TKKS  karena menghasilkan enzim yang dapat menguraikan  selulosa,  hemiselulosa,  dan lignin.  Batang  sawit  merupakan  bahan berlignoselulosa  seperti  kayu,  kandungan kimia  batang  sawit  adalah  selulosa
Muh. Yusuf Idris : Isolasi dan Karakteristik Jamur Pelapuk dari Batang dan Tandan Kosong Kelapa Sawit
54,38%,;  lignin  23,95%;  abu  2,02%,  dan unsur-unsur  lainnya.  Dengan  pendekatan
bahwa batang sawit bahan berlignoselulosa  maka  dekomposisi  sawit tidak  jauh  berbeda  dengan  dekomposisi kayu  (Bakar,  2003).  Berdasarkan  hal tersebut  pemanfaatan  fungi  pelapuk  kayu yang  sudah  teridentifikasi  memungkinkan untuk  digunakan  dalam  mempercepat proses degradasi pohon sawit.
Kemampuan jamur dalam mendegradasi  lignin  disebabkan  adanya enzim  ekstrseluler  yang  disekresikan  oleh hifa  jamur  (Masai et  al., 2007),  seperti mempercepat  proses  pengomposan  oleh Trichoderma (Sapareng  et  al.,  2017). Eaton  dan  Hale  (1993)  menyebutkan berbagai  enzim  yang  berperan  dalam proses  degradasi  lignin  yang  disekresikan oleh  jamur  pelapuk  putih  meliputi  lignin peroksidase  (LiP),  mangan  peroksidase (MnP),  lakase,  demetoksilase,  H 2 O 2 -
generating enzyme , dan enzim pendegradasi  monomer  seperti  selobiosa dehidrogenase,  asam  vanilat  hidrolase, dan trihidroksi benzendioksigenase. Namun  enzim  ligninolitik  utama  yang dihasilkan jamur adalah lignin peroksidase (LiP),  mangan  peroksidase  (MnP),  dan laktase.

## BAHAN DAN METODE
Isolasi Jamur Endofit.
Batang  kelapa  sawit  dan TKKS dicuci dengan  air  suling,  dipotong  menjadi  1-2 cm.  Permukaan  disterilkan  dengan  tiga kali  perendaman,  pertama  dalam  etanol 70% selama 1 menit, kedua dalam larutan NaOCl  5,25%  selama  5  menit  dan  yang terakhir, dalam larutan etanol 70% selama 0,5  menit.  Komposisi  media  adalah  15  g agar, 15 g bubuk kering dari batang kelapa sawit,  0,2  g  kloramfenikol,  dan  hingga  1 liter  air  suling.  Inkubasi  dilakukan    pada suhu  kamar  (28 o C)  selama  1-3  minggu tergantung  pada  tingkat  pertumbuhan jamur. Koloni jamur kemudian dipindahkan  ke  media  baru  dengan komposisi  15  g  agar,  15  g  Ekstrak  Malt, dan hingga 1 L air suling, dan disesuaikan dengan pH 7,4 hingga 7,8.

## Peremajaan Isolat.
Sebanyak  1  ose  isolat  cendawan  dari kultur  koleksi  dipindahkan  ke  dalam media PDA ( potatoes dextrose agar ) baru. Peremajaan  ini  dilakukan  secara  steril dalam  kabinet  laminar air  flow .  Isolat yang telah dipindahkan kemudian dibiarkan  tumbuh  selama  3-7  hari  pada suhu ruang.
Muh. Yusuf Idris : Isolasi dan Karakteristik Jamur Pelapuk dari Batang dan Tandan Kosong Kelapa Sawit
Pengamatan Morfologi Jamur .
Morfologi jamur diamati secara makroskopik dan
mikroskopik.
Pengamatan secara makroskopis mengacu pada  Shahid et  al. (2013)  yang  meliputi kecepatan  pertumbuhan,  warna  koloni, elevasi dan bentuk tepian koloni. Pengamatan  mikroskopis  diawali  dengan meneteskan  larutan  KOH  di  atas  kaca preparat  lalu  isolat  dicampur  sebanyak satu  ose  (Gams  dan  Bissett,  1998). Preparat  ditutup  dengan cover  glass lalu diamati  bentuk  spora  dan  konidiofornya menggunakan mikroskop cahaya.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Morfologi Jamur
Hasil  isolasi  dan  pemurnian  isolat cendawan  pelapuk  yang  berasal  dari  dua lokasi  yaitu  32  isolat  cendawan  pelapuk, yang terdiri dari 15 isolat hasil isolasi dari batang kelapa sawit yang sudah mengalami  pelapukan  pada  perkebunan rakyat  di  Desa  Pattimang  Kecamatan
Malangke Kabupaten Luwu Utara Propinsi Sulawesi Selatan, dan sisanya 17 isolat  hasil  isolasi  dari  tandan  kosong kelapa  sawit  pada  Pabrik  Kelapa  Sawit Luwu  unit  1,  Desa  Lagego  Kecamatan Burau,  Kabupaten  Luwu  Timur  Propinsi Sulawesi Selatan (Tabel 1).
Tabel 1. Hasil isolasi dan pemurniaan isolat cendawan pelapuk asal TKKS dan batang kelapa sawit
Isolat Sumber Lokasi Jumlah BT Batang Tanaman Kelapa Sawit yang Sudah Melapuk Pekebunan Kelapa Sawit Desa Pattimang 15 TK Tandan Kosong Kelapa Sawit PKS Desa Lagego 17 Total 32
Ket : BT = Batang Tanaman Kelapa Sawit, TK = Tandan Kosong Kelapa Sawit
Isolat  yang  telah  dimurnikan  (32 isolat)  dilakukan  pengukuran  kecepatan pertumbuhan pada media PDA dan dipilih 15  isolat  cendawan  pelapuk  terbaik. Pengamatan menggunakan mikroskop cayaha menunjukkan bahwa isolat terbanyak  pada  TKKS  yaitu  isolat  genus Trichoderma (isolat  TK9,  TK10,  TK14),
pertumbuhannya  sangat  cepat,  memiliki miselium  aerial,  awalnya  berwarna  putih, kemudian berubah menjadi putih kehijauan atau kuning kehijauan ( Trichoderma sp.  1; Trichoderma sp.  3), dan hijau tua dan menggumpal ( Trichoderma sp.  2).  Struktur  hifa, bersekat, konidiofor bercabang dan
Muh. Yusuf Idris : Isolasi dan Karakteristik Jamur Pelapuk dari Batang dan Tandan Kosong Kelapa Sawit
terdapat  fialid  di  setiap  percabangannya. Percabangan  fialid  ada  yang  rapat  ada yang  renggang.    Kumpulan  konidia melekat di ujung fialid, konidia berbentuk bulat  atau  oval  dan  hialin  (Gambar  1). Banyaknya  spora  pada  isolat  berusia  tiga
hari    menandakan    tingkat  pertumbuhan isolat  yang  relatif  cepat.  Jumlah  spora antar  masing-masing  isolat  kurang  lebih sama  menunjukkan  kecepatan  tumbuh yang seragam.
Gambar 1. Hasil isolasi cendawan pelapuk asal TKKS dan batang kelapa sawit
Isolat Koloni Cendawan Mikrokopis Genus Isolat Koloni Cendawan Mikrokopis  Genus BT1 Penicillium sp1 TK9 Trichoderma sp1 BT2 Pleurotus sp TK10 Trichoderma sp2 BT3 Fusarium sp. TK11 Phytophthora sp BT4 Chrysosporium sp TK12 Ulocladium sp BT5 Penicillium sp.2 TK13 Chaetomium sp BT6 Aspergillus sp1 TK14 Trichoderma sp3 BT7 Aspergillus sp2 TK15 Absidia sp TK8 Tramella sp
Muh. Yusuf Idris : Isolasi dan Karakteristik Jamur Pelapuk dari Batang dan Tandan Kosong Kelapa Sawit
Semua  isolat  dengan  pertumbuhan  tinggi menunjukkan percabangan konidiofor yang  cukup  tinggi  dan  berbentuk  seperti piramida.    Hal  tersebut  sesuai  dengan hasil morfologi pertama yang diklasifikasikan  oleh  Rifai  (1969)  bahwa percabangan  konidiofor Trichoderma sp sangat  tinggi  dengan  pola  menyerupai piramida  atau  konikal.    Spora  yang teramati  berwarna  hijau  hingga  keabuan berbentuk  bulat  dan  menyebar  di  sekitar konidiofor.    Athul  dan  Jisha  (2013)  juga menyatakan  bahwa  konidia Trichoderma sp. berbentuk bulat hingga elips, uniselular,  dan  dihasilkan  dari  konidiofor yang  bercabang  seperti  susunan  piramida. Hasil penelitian sebelumnya (Khang et al.
2013)  menunjukkan Trichoderma sp. memiliki  permukaan  yang  rata  dengan struktur  lembut  seperti  wol,  spora  hijau yang  menyebar,  dan  pigmen  kuning-hijau yang  berdifusi  ke  dalam  media  tumbuh. Hal  ini  sesuai  dengan  penelitian  yang telah dilakukan sebelumnya oleh Druzhinina et al. (2006) bahwa Trichoderma a sp erellum merupakan isolat terbanyak  yang  ditemukan  pada  daerah tropikal.Hoyos-Carvajal et al. (2009) juga menyatakan  bahwa  spesies  umum  yang ditemukan pada daerah neotropikal adalah
Trichoderma  a sp erellum diikuti  dengan Trichoderma harzianum .

## Karakteristik Fungi
Pertumbuhan koloni isolat cendawan  pelapuk  pada  hari  ke-7  masa inkubasi  mencapai  7-8  cm  pada  media PDA.  Pertumbuhan  tertinggi  dicapai  oleh 10 isolat yaitu BT1, BT2, BT3, BT4, BT5, BT7,  TK8,  TK9,  TK10,  dan  TK4, sedangkan  pertumbuhan  koloni  terendah dicapai  5  isolat  yaitu  BT6,  TK11,  TK12, TK13, dan TK15.  Kecepatan tumbuh hifa berhubungan  erat  dengan  karakter  yang khas dari masing-masing isolat. Selain itu, juga dipengaruhi oleh genetik, kandungan media  tumbuh,  lingkungan  tumbuh,  suhu dan pH media (Tabel 2).
Morfologi  makroskopik  15  isolat secara  umum  memiliki  permukaan  rata menyerupai  wol  dengan  tepian  berbentuk regular.    Hampir  semua  isolat  berwarna putih, dan hanya dua isolat yang berwarna hijau. Warna yang semakin hijau menandakan  jumlah  spora  yang  semakin banyak.
Keragaman
cendawan dipengaruhi  oleh  media  tumbuhnya. Kandungan bahan organik sangat mempengaruhi  populasi  mikroba  karena bahan organik digunakan sebagai penyusun  tubuh  dan  sumber  energi  bagi
Muh. Yusuf Idris : Isolasi dan Karakteristik Jamur Pelapuk dari Batang dan Tandan Kosong Kelapa Sawit
mikroba.  Kualitas  dan  kuantitas  bahan organik  mempunyai  pengaruh  langsung terhadap  kelimpahan  cendawan  karena kebanyakan cendawan bersifat heterotrofik (Rao, 1982).

## Pengujian Pertumbuhan
Cendawan pelapuk yang telah dimurnikan diuji kemampuan dan kecepatan  tumbuhnya  pada  tiga  jenis media  solid.    Setiap  media  padat mengandung komposisi bahan yang berbeda. PDA mengandung ekstrak kentang,  pepton  pada  MPA,  dan  ekstrak malt  pada  MEA.    Diinkubasi  pada  suhu ruang  dan  dilakukan  sampai  umur  7  hari (Tabel 3).
Semua  isolat  cendawan  pelapuk  dapat tumbuh  pada  tiga  jenis  media  padat tersebut.  Secara  umum,  isolat  dapat memenuhi  cawan  petri  mulai  hari  ke-4 setelah  ditumbuhkan.  Rata-rata  kecepatan pertumbuhan cendawan pelapuk pada hari ke-7  setelah  inkubasi  yaitu  7-8  cm  pada media  PDA,  6-7  cm  pada  media  MEA, dan 5-6 cm pada media MPA (Tabel 3).
Walaupun  semua  isolat  ditumbuhkan pada  media  yang  sama,  yaitu  media  agar yang mengandung ekstrak kentang.
Namun menurut Baon et al. , (2012) selain dipengaruh genetik, variasi koloni mungkin disebabkan oleh kondisi lingkungan  di  daerah  sampel  dan  media pertumbuhan,  termasuk  sumber  karbon, pH dan suhu, dimana sampel diambil pada daerah  yang  berbeda  yaitu  pertanaman kelapa  sawit  dan  TKKS  di  sekitar  Pabrik Kelapa  Sawit.  Perbedaan  warna  koloni dapat dipengaruhi suhu pada uji laboratorium dan ketersediaan nutrisi pada medium.
Walaupun  semua  isolat  ditumbuhkan pada  media  yang  sama,  yaitu  media  agar yang mengandung ekstrak kentang.
Namun menurut Baon et al. , (2012) selain dipengaruh genetik, variasi koloni mungkin disebabkan oleh kondisi lingkungan  di  daerah  sampel  dan  media pertumbuhan,  termasuk  sumber  karbon, pH dan suhu, dimana sampel diambil pada daerah  yang  berbeda  yaitu  pertanaman kelapa  sawit  dan  TKKS  di  sekitar  Pabrik Kelapa  Sawit.  Perbedaan  warna  koloni dapat dipengaruhi suhu pada uji laboratorium dan ketersediaan nutrisi pada medium.
Muh. Yusuf Idris : Isolasi dan Karakteristik Jamur Pelapuk dari Batang dan Tandan Kosong Kelapa Sawit
Tabel  2.  Karakterisasi    morfologi    isolat  cendawan    pelapuk  yang  diisolasi  dari  TKKS  dan batang kelapa sawit
Isolat Warna Koloni Bentuk Tekstur Atas Bawah BT1 Hijau Hijau Bulat kecil-kecil Agak kasar BT2 Putih bersih Putih Menyebar Halus BT3 Putih Putih Lingkaran luar tebal Halus BT4 Putih Putih kecoklatan Mengembang seperti kapas di bagian tengah Agak kasar BT5 Putih Putih kehijauan Pinggir lebih tebal menyebar Halus BT6 Putih hitam Hitam Menyebar tidak merata Agak Kasar BT7 Putih coklat Coklat muda Menyebar, bulat kompak Kasar TK8 Putih kelabu Keabuan Menyebar Agak kasar TK9 Putih kehijauan Hijau Menyebar, tidak merata Kasar TK10 Hijau Hijau Bulat, tidak merata Kasar TK11 Putih Putih Bulat, tepi bergerigi Halus TK12 Hijau Hijau Bulat Halus TK13 Putih kehijauan Hijau Lonjong, tepi membulat Halus TK14 Putih Putih Menyebar Halus kapas TK15 Putih Putih kecoklatan Bulat Halus
Tabel 3. Rata-rata pertumbuhan koloni (cm) isolat cendawan pelapuk asal TKKS dan batang kelapa sawit pada berbagai media tumbuh
Isolat Jenis Media PDA MEA MPA BT1 8.45 8.60 8.00 BT2 9.00 9.00 9.00 BT3 8.10 6.70 5.05 BT4 8.25 7.35 5.65 BT5 7.90 7.80 4.15 BT6 6.60 9.00 8.70 BT7 7.55 9.00 8.40 TK8 9.00 9.00 9.00 TK9 9.00 9.00 9.00 TK10 9.00 9.00 9.00 TK11 4.75 4.10 3.25 TK12 6.15 3.60 2.65 TK13 6.60 3.15 1.95 TK14 9.00 9.00 9.00 TK15 5.70 5.00 4.20
Keterangan : Potato Dextrose Agar (PDA), Malt Peptone Agar (MPA), dan Malt Extract Agar (MEA) .
Muh. Yusuf Idris : Isolasi dan Karakteristik Jamur Pelapuk dari Batang dan Tandan Kosong Kelapa Sawit
Gambar  2  juga  menunjukkan  pada media  PDA  isolat  TK14  mempunyai diameter  koloni  tertinggi,  dan  paling rendah  pada  isolat  TK15.  Ada  7  isolat yang tumbuh maksimal pada semua media setelah  7  hari  inkubasi,  yaitu  isolat  BT2,
BT6,  BT7,  TK8,  TK9,  TK10  dan  TK14. Media  PDA  memiliki  kandungan  nutrisi karbohidrat,  air,  dan  protein  yang  berasal dari  substrat  kentang,  glukosa,  dan  agar- agar.  Media  MEA  memiliki  komposisi nitrogen, karbohidrat, sodium klorida, dan
Gambar 2. Laju pertumbuhan isolat cendawan pelapuk pada tiga jenis media (PDA, MEA dan MPA) selama 7 hari inkubasi
PDA ME A MP A
Muh. Yusuf Idris : Isolasi dan Karakteristik Jamur Pelapuk dari Batang dan Tandan Kosong Kelapa Sawit
agar-agar, sedangkan media MPA memiliki  kandungan  nutrisi  nitrogen, karbohidrat,  sodium  klorida,  pepton,  dan agar-agar.  Kandungan karbon pada media mempunyai  dua  fungsi,  yaitu  pertama untuk metabolisme bagi organisme heterotropik  seperti  jamur.  Kandungan karbon  dalam  bentuk  unsur  C  dibutuhkan untuk  proses  sintesis  dalam  kelangsungan hidup  sel.  Unsur  tersebut  seperti  karbon, asam  nukleat,  material  dinding  sel,  dan sebagai  makanan.  Fungsi  yang  kedua sebagai sumber energi utama yang berasal dari  proses  oksidasi  unsur  karbon  (Chang and Miles, 1989).

## KESIMPULAN
Hasil  isolasi  jamur  pelapuk  berjumlah 32  isolat  yang  terdiri  dari  17  isolat  dari batang kelapa sawit yang melapuk dan 15 isolat  dari  TKKS.  Jamur  dari  batang kelapa sawit yang melapuk yaitu Penicillium sp, Pleurotus sp, Fusarium sp, Chrysosporium sp, Aspergillus sp, dan dari TKKS yaitu Tremella sp, Trichoderma sp, Phytophthora sp, Ulocladium sp, Chaetomium sp  dan Absidia sp.

## Ucapan Terima Kasih
Ucapan  terima  kasih  kepada  DRPM RISTEK  DIKTI  yang  telah  memberikan biaya  hibah  penelitian  pada  Program
Penelitian Terapan (PPT) Tahun
Anggaran 2018.

## DAFTAR PUSTAKA
Athul  SR,  Jisha  MS.  2013.  Screening  of Trichoderma spp  and Pseudomonas spp.  for  their  biocontrol  potential against phytopathogens of Vanilla. Int. J.  of.  Agriculture,  Environment  & Biotechnology 6: 799-806.
Bakar,  E.  S.,  2003.  Kayu  Sawit  Sebagai Substitusi  Kayu  Dari  Hutan  Alam. Forum  Komunikasi  dan  Teknologi dan Industri Kayu 2 : 5-6. Bogor.
Baon,  J.B.,  S.  Wedhastri,  A.  Kurniawan.,
2012.  The  Ability  of  Phosphate Solubilizing  Bacteria  Isolated  from Coffee  Plant  Rhizosphere  and  Their Effects  on  Robusta  Coffee  Seedlings. Journal  of  Agricultural  Science  and Technology. 2:1064-1070.
Chang,  S.T.,  P.G.  Miles.,  1989.  Edible mushrooms  and  their  cultivation.
Florida: CRC Press, Inc. 451.
Druzhinina IS, Kopchinskiy AG, Kubicek CP.  2006.  The  first  one  hundred  of Trichoderma species characterized by molecular  data. Mycoscience 47:  55–
64.
Eaton  RA,  Hale  MDC.  1993. Wood, Decay, Pests and Protection. London: Chapman dan Hall.
Gams W, Bissett J. 1998. Morphology and identification  of Trichoderma . In Trichoderma  and  Gliocladium  (eds.
Kubicek  CP  and  Harman  GE) .
London (USA): Taylor and Francis.
Muh. Yusuf Idris : Isolasi dan Karakteristik Jamur Pelapuk dari Batang dan Tandan Kosong Kelapa Sawit
Hoyos-Carvajal  L,  Orduz  S,  Bissett  J.
2009. Genetic and metabolic biodiversity  of Trichoderma from Colombia  and  adjacent  neotropic regions. J. Fungal Genetics and
Biology V 46: 615–631.
Khang  VT,  Anh  NTM,  Tu  PM,  Tham
NTH. 2013. Isolation and selection of
Trichoderma spp.  exhibiting  high antifungal  activities  against  major pathogens in Mekong Delta.
Omonrice 19: 159-171.
Masai,  E.,  Y.  Katayama,  and  M.  Fukuda, 2007. Genetic and biochemical
investigations  on  bacterial  catabolic pathways  for  lignin-derived  aromatic compounds.  Biosci  Biotechnol  and Biochemist, 71(1): 1-15.
Rao, N.S., 1982. Biofertilizer in Agriculture. Oxford. Oxford and IBH Publishing Co. New Delhi.
Rifai MA. 1969. A revision of the genus Trichoderma . Mycological Papers 116: 1-56.
Sajab,  M.S.,  C.H.  Chia,  S.  Zakaria,  and P.S.  Khiew,  2013.  Cationic  and anionic  modiﬁcations  of  oil  palm empty  fruit  bunch  ﬁbers  for  the removal  of  dyes  from  aqueous solutions.  Bioresource  Technology, 128, 571–577.
Sapareng,  S.,  A.  Ala,  T.  Kuswinanti,  B.
Rasyid, 2017. The Role of Rot  Fungi In  Composting  Process  of  Empty Fruit  Bunches  of  Oil  Palm.  Int.  J.
Curr.  Res.  Biosci.  Plant  Biol.  4(3),
17-22.
Shahid  M,  Srivastava  M,  Sharma  A,
Kumar  V,  Pandey  S,  Singh  A.  2013. Morphological, molecular indentification  and  SSR  marker analysis  of  a  potential  strain  of Trichoderma/Hypocrea for production  of  bioformulation. J.  Plant
Pathol Microb (4)10: 204-211.