## OPTIMASI RENDEMEN MINYAK MIKROALGA LAUT Nannochloropsis sp. MENGGUNAKAN METODE TEKANAN OSMOTIK NaCl (aq)

## OPTIMATION OF MICROALGAE OIL YIELD OF
Nannochloropsis sp. BY USING NaCl (aq) OSMOTIC SHOCK (NOS) METHOD
Moh. Muhaemin * , Zelang Pasa, Mahrus Ali
Program Studi Ilmu Kelautan, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung Jl. Prof. Dr. Ir. Sumantri Brojonegoro No.1, Bandar Lampung, 35145, Lampung, Indonesia Email: mmuhaemin@gmail.com

## ABSTRAK
Biodisel berasal dari lemak alami seperti minyak nabati atau minyak hewan. Penelitian ini menggunakan jenis  mikroalga  yang  dapat  menghasilkan  produk  dan  berpotensial  sebagai  bahan  bakar  biodiesel  yaitu Nannochloropsis sp.  Tujuan  penelitian  ini  untuk  menentukan  pengaruh  tekanan  osmotik  terhadap rendemen  minyak Nannochloropsis sp.,  menentukan  tekanan  osmotik  optimum,  serta  mengetahui komposisi  kandungan  asam  lemak  pada  mikroalga Nannochloropsis sp.  pada  kondisi  basah  maupun kering. Proses ekstraksi pada penelitian ini menggunakan lima variasi tekanan osmotik yaitu 0, 30, 60, 90  dan  120  atm.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  tekanan  osmotik  berpengaruh  terhadap  kedua rendemen  minyak Nannochloropsis sp.  baik  pada  kondisi  basah  (R=0,890  Sig<0,043)  dan Nannochloropsis sp.  kondisi  kering  (R=0,916  Sig<0,029).  Sehingga,  semakin  tinggi  tekanan  osmotik yang  diberikan  maka  semakin  tinggi  pula  rendemen  minyak Nannochloropsis sp.  basah  maupun rendemen minyak Nannochloropsis sp. kering. maka pada tekanan osmotik 120 atm lah yang baik untuk mengekstrak  minyak Nannochloropsis sp. Nannochloropsis sp.  basah  120atm  (3,96%)  dan  untuk Nannochloropsis sp.  kering  120atm  (2,60%).  Hasil  analisis  Kromatogram  GC  pada  rendemen  minyak Nannochloropsis sp.  didapatkan  13  asam  lemak  diantaranya  lemak  jenuh: octanoate (C8:0), laurate (C12:0), tetradecanoate (C14:0), heptadecanoate (C17:0), arachidate (C20:0), heneicosanoate (C21:0), tricosanoate (C23:0), lignocerate (C24:0)  dan  lemak  tak  jenuh palmitoleate (C16:1), oleic (C18:1), linolelaidic (C18:2), nervonate (C24:1), dan d ocosahexaenoate (C22:6).
Kata Kunci : Biodisel, Nannochloropsis sp., Tekanan Osmotik, Asam Lemak

## ABSTRACT
Biodiesel  is  derived  from  natural  fats  such  as  vegetable  or  animal  oils.  This  study  uses  a  type  of microalgae that can produce products and has the potential as biodiesel fuel, namely Nannochloropsis sp. The purpose of this study was to determine the effect of osmotic shock on the oil yield of Nannochloropsis sp. to determine the optimum osmotic shock, and to determine the composition of fatty acid content in the  microalgae  Nanochloropsis  sp.  in  both  wet  and  dry  conditions.  The extraction  process  in  this  study used  five  variations  of  osmotic  shock,  namely  0,  30,  60,  90  and  120  atm.  The  results  showed  that osmotic shock had an effect on both oil yields of Nannochloropsis sp. both in wet conditions  (R=0.890 Sig<0.043) and Nannochloropsis sp. dry conditions (R=0.916 Sig<0.029). So that the higher the osmotic shock applied, the higher the yield of Nannochloropsis sp. wet and oil yield of Nannochloropsis sp. dry. then  the  osmotic  stress  of  120atm  is  good  for  extracting  the  oil  of Nannochloropsis sp.  Each  result obtained  is Nannochloropsis sp.  wet  atm  120  atm  (3.96  %)  and  for Nannochloropsis sp.  dry  120  atm (2.60 %). Results of GC Chromatogram analysis on oil yield of Nannochloropsis sp. 13 fatty acids were found  including  saturated  fat: octanoate (C8:0), laurate (C12:0), tetradecanoate (C14:0), heptadecanoate (C17:0), arachidate (C20:0), heneicosanoate (C21:0), tricosanoate (C23:0), lignocerate (C24:0)  dan  lemak  tak  jenuh palmitoleate (C16:1), oleic (C18:1), linolelaidic (C18:2), nervonate (C24:1), dan d ocosahexaenoate (C22:6).
Keywords: Biodiesel, Nannochloropsis sp., Osmotic shock, Fatty Acids

## PENDAHULUAN
Bahan  bakar  fosil  merupakan  energi yang  tidak  dapat  diperbaharui.  Seiring dengan  pesatnya  perkembangan  zaman, energi ini mengalami kelangkaan. Persediaan bahan  bakar  yang  semakin  menipis  dengan penggunaan setiap harinya semakin meningkat. Oleh sebab itu, perlu dicari solusi sumber  energi  alternatif  dengan  proses produksi  biaya  yang  rendah  sehingga  dapat bersaing  dengan  bahan  bakar  fosil.  Misalnya dengan  memanfaatkan  mikroalga  sebagai minyak  bumi  dan  sebagai  sumber  energi terbarukan  maka  diciptakanlah  bahan  bakar nabati. Bahan bakar nabati (BBN) diantaranya  adalah  biodiesel  yang  berasal dari mikroalga (Rachmaniah et al . 2010).
Mikroalga  beberapa  tahun  terakhir, telah  banyak  menarik  perhatian  sebagai sumber  produksi  biodiesel.  Mikroalga  juga merupakan  energi  terbarukan  ( re-newable ) dan  ramah  lingkungan.  Mikroalga  adalah organisme  yang  paling  menjanjikan  sebagai sumber biodiesel. Menentukan jenis mikroalga  yang  berpotensial  sebagai  bahan bakar  biodiesel  yaitu  kandungan  lipid  yang tinggi.  Dari  beberapa  jenis  mikroalga  yang diteliti, salah satu jenis mikroalga yang dapat menghasilkan produk
lipid
adalah Nannochloropsis sp.  Menurut  Wijanarko  dan
Putri (2012),
mikroalga
berjenis
Nannochloropsis sp.  mempunyai  kandungan lipid yang berkisar antara 31-68% dari berat keringnya.
Lipid merupakan senyawa dasar pembentuk  bahan  bakar.  Pengambilan  lipid dapat dilakukan dengan ekstraksi menggunakan  tekanan  osmotik.  tekanan osmotik  menyebabkan  kerusakan  mekanis langsung pada selnya berdasarkan pemintalan  kecepatan  tinggi  dengan  manik- manik  halus.  Ekstraksi  dengan  tekanan osmotik  telah  dilakukan  oleh  beberapa peneliti  meng-  gunakan  larutan  NaCl,  asam, dan  basa.  Pada  penelitian  ini  menggunakan ekstraksi  tekanan  osmotik  dengan  larutan NaCl. Dikarenakan NaCl atau yang biasa kita kenal dengan garam ini mampu membuat sel mikrolaga  pecah.  Semakin  tinggi  kandungan NaCl  atau  pekatnya  larutan  akan  membuat dinding sel mikroalga pecah dan mengeluarkan lipid yang banyak. Oleh sebab itu penelitian ini bertujuan untuk menentukan pengaruh tekanan osmotik terhadap rendemen minyak mikroalga Nannochloropsis sp.,  menentukan  tekanan  osmotik  optimum, dan  mengetahui  komposisi  kandungan  asam lemak  pada  mikroalga Nannochloropsis sp.
yang  diekstrak  pada  kondisi  basah  maupun kondisi kering.

## METODE PENELITIAN
Alat  dan  bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  sebagai  berikut: Erlenmeyer, gelas baker, Corong pemisah, Shaker, Rotary evaporator,  water  batth,  Sentrifuge, Tabung falcon,Timbangan analitik, Pipet tetes, Toples kaca,  NaCl,  Metanol  98%,  Heksana  98%, Biomassa Nannochloropsis sp.  basah  dan kering,
GC-MS-QP2010 SHIMADZU,
Akuarium,  earator,  Pupuk  Np,  Salinometer, dan Haemocytometer .
Kultur Nannochloropsis sp. Kultur Nannochloropsis sp.  diawali dengan  menyiapkan  air  laut  sebagai  media kultur.  Air  laut  ditampung  dalam  wadah, disterilkan, diukur salinitasnya dengan menggunakan  alat  salinometer,  dan  disaring dengan  menggunakan  kertas  saring.  Air  laut yang telah steril ditambahkan mesin aerastor lalu  ditambahkan  fitoplankton.  Selanjunya kultur fitoplankton dihitung kepadatan fitoplankton.  Cara  mendapatkan  kepadatan fitoplankton  yang  diinginkan  digunakan rumus pengenceran:
V 1 x N 1 = V 2 x N 2
Keterangan:  V1=Volume  fitoplankton  yang dibutuhkan;  V2  =  Volume  kultur;  N1  = Kepadatan  sel  fitoplankton  stok;  N2  = Kepadatan sel fitoplankton kultur
Pemanenan Nannochloropsis sp. Pemanenan Nannochloropsis sp.  basah dilakukan  dengan  metode  sentrifugasi  (3000 rpm,  10  menit)  untuk  mengurangi  kadar  air dalam  endapan  biomasa Nannochloropsis sp. Kemudian Nannochloropsis sp basah tersebut ditimbang sebanyak 100 gram dan siap untuk diekstrak. Sedangkan untuk sampel mikroalga Nannochloropsis sp  kering  yang sudah  dalam  bentuk  serbuk  langsung ditimbang  sebanyak  10  gram  dan  kemudian siap untuk diekstrak.

## Pembuatan Larutan NaCl
Ada  lima  variasi  tekanan  osmotik  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  0,  30, 60, 90 dan 120 atm. Konsentrasi larutan NaCl yang  digunakan  untuk  lima  variasi  tekanan osmotik dapat dilihat pada Tabel 1.
Konsentrasi  yang  semakin  tinggi  akan meningkatkan  perbedaan  tekanan  osmotik sehingga menghasilkan tekanan yang
semakin  besar.  Hal  ini  dapat  terjadi  karena tidak  semua  NaCl  berangkaian  menjadi sepenuhnya  dua  mol  ion.  Bahkan  beberapa ion  Na+  dan  Cl-  berangkaian  dengan  cepat kembali  menjadi  NaCl  dan  hal  ini  semakin mungkin  terjadi  pada  konsentrasi  yang  lebih besar  (Brown, et  al .  2002).  Rangkaian  NaCl ini  akan  mengurangi  ion  terlarut  dan  faktor Van’t  Hoff  NaCl  selanjutnya  mempengaruhi tekanan osmotik yang diberikan (Dianursanti, 2013).  Oleh  karena  itulah  semakin  besar konsentrasi  NaCl,  semakin  besar yield lipid yang  dihasilkan.  Hal  ini  sesuai  dengan persamaan Van’t Hoff (Ahmad, 2020):
𝜋 =M.R.T.i
Keterangan: π =  Tekanan  osmotik;  M  = Molaritas larutan; i = Indeks Van’t Hoff ; T = Suhu mutlak (273-373 K); R = Konstanta gas ideal (0,082 L.atm/mol.K)
Ekstraksi Minyak Nannochloropsis sp. Ekstrasi minyak dilakukan pada mikroalga Nannochloropsis sp.  kondisi  basah dan  kering  dengan  5  perlakuan  tekanan osmotik  yaitu  0,  30,  60,  90  dan  120  atm. Setiap  perlakuan  baik  pada  kondisi  basah maupun kering dilakukan 3 kali pengulangan (Rachmaniah et  al .,  2010;  Prabakaran  and Ravindran et  al .,  2011;  Yoo et  al., 2012). Adapun  skema  kerja  ekstraksi  minyak Nannochloropsis sp  pada  penelitian  ini  dapat dilihat pada Gambar 1.

## Analisis Asam Lemak
Kandungan
asam lemak Nannochloropsis sp.  dianalisis  menggunakan metode  kromatografi  gas  dan  spektrometer masa  (Borges et  al. 2011).  Sebelum dianalisis minyak Nannochloropsis sp. ditambah  larutan  natrium  metanolik  dan dipanaskan  pada  suhu  60°C.  Kemudian ditambahkan  boron  trifluoride  metanoat, heptan  dan  NaCl  jenuh.  Proses  Analisis dilakukan  di  Laboratorium  Penelitian  dan Pengujian  Terpadu,  Universitas  Gajah  Mada. Menggunakan  GCMS  QP2010  SHIMADZU dengan  kondisi  kolom  AGILENT  7890B dengan  panjang  100  m  dan  diameter  0,25 mm. Gas pembawa menggunakan helium dan
nitrogen.  Keunggulan  meng-gunakan  analisis ini  yaitu  resolusi  dan  sensitifikasi  tinggi, spesifik, fleksibel, dan juga dapat memberikan informasi struktur secara efisien (membutuhkan jumlah sampel sedikit, waktu pemisahan yang dibutuhkan relatif cepat).

## Perhitungan RendemenMinyak
Rendemen  minyak  dari  mikroalga Nannochloropsis sp.  yang  diperoleh  dan dihitung  dengan  menggunakan  metode gravimetri.  Berikut  adalah  persamaan  yang digunakan untuk menghitung hasil rendemen minyak Nannochloropsis sp.  (Suganya  dan Renganathan, 2012):

## Uji Korelsi Person
Data rendemen minyak Nannochloropsis sp.  basah  dan  kering  yang  diperoleh dianalisis  menggunakan  metode  uji  korelasi person  dengan  taraf  kepercayaan  95%  dan kekeliruan  5  %  (Sujarweni  2014,  dalam Fransiskus et  al. (2016).  Analisis  dilakukan untuk  mengetahui  hubungan  antara  tekanan osmotik dengan rendmen minyak Nannochloropsis sp.  basah  dan  kering.  Pada uji korelasi person menggunakan aplikasi IBM SPSS Statistics versi 20.

## Uji Beda Nyata
Uji  beda  nyata  dilakukan  untuk  mengetahui kondisi  tekanan  osmotik  optimum  un-tuk mengekstrak  minyak Nannochloropsis sp. pada  konsisi  basah  maupun  kondisi  kering. Analisis  beda  nyata  ini  dilakukan  pada aplikasi  IBM  SPSS  Statistics  versi  20 menggunakan  uji paired  sampel  test terhadap  rendemen  minyak Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak  pada  kondisi  basah dangan  yang  diekstrak  pada  kondisi  kering. Kemudian  dilakukan  uji  LSD  terhadap masing-masing  perlakuan  tekanan  baik  pada kondisi  basah  maupun  kering.  Uji  ini dilakukan  untuk  mengetahui  nilai  beda  atau tidak  bedanya  terhadap  hasil  rendemen minyak Nannochloropsis sp. Basah dan kering (Fransiskus et al., 2016).

## Tabel 1 . Konsentrasi Larutan NaCl
Tekanan Osmotik (atm) NaCl (g/100 ml) Molaritas (M) 0 0,00 0 30 3,57 0,61 60 7,13 1,22 90 10,70 1,83 120 14,26 2,44 Rendemen (%) = Berat minyak (g) x 100% Berat sampel awal (g)
Dimasukkan ke dalam gelas baker (500 ml)
Shaker 100 rpm, selama 48 jam
Tambahkan Heksana : Metanol (7:3) 100 ml S haker 100 rpm, selama 6 jam
Corong Pemisah
Tambahkan Heksana : Metanol (7:3) 100 ml Shaker 100 rpm, selama 6 jam
Corong Pemisah Diuapkan 60°C Heksana
Gambar 1. Ekstraksi Minyak Nannochloropsis sp.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Komposisi Asam Lemak pada Rendemen Minyak Nannochloropsis sp. Untuk  mengetahui  komposisi  asam lemak penyusun minyak mikroalga Nannochloropsis sp.,  dilakukan  analisis  GC- MS  terhadap  metil  ester  ekstraksi  minyak
mikroalga  dengan  tekanan  osmotik.  Pada analisis  dengan  GC  untuk  rendemen  minyak Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak  pada kondisi  kering  diperoleh  sebelas  (11)  puncak seperti  disajikan  dalam  Gambar  2  (a). Sedangkan pada analisis dengan kromatogram  GC  untuk  rendemen  minyak Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak  pada
Sampel Alga (basah 100 g dan kering 10 g)
Ditambahkan Larutan NaCl 100 ml (0, 30, 60, 90 dan 120 atm)
Sentrifuge (3000 rpm selama 5
menit) Penyaringan Penyaringan Residu Filtrat B (dua lapisan) Filtrat A (dua lapisan) Heksan+Minyak Metanol+Air Ekstrak Minyak
kondisi  basah  diperoleh  tiga  belas  (13) puncak seperti disajikan dalam Gambar 2 (b). Komposisi  asam  lemak Nannochloropsis sp. yang  diekstrak  pada  kondisi  basah  memiliki komposisi  yang  hampir  sama  dengan Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak  pada kondisi  kering.  Hanya  terdapat  perbedaan pada asam octanoate dan
asam docosahexaenoate.
Adapun komposisi senyawa  asam  lemak Nannochloropsis sp. yang  diekstrak  pada  masing-masing  kondisi dapat dilihat pada Tabel 2.
Pada  Tabel  2  dapat  dilihat  bahwa  pada jenis  senyawa  asam  lemak  yang  paling banyak ditemukan adalah pada Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak  pada
kondisi  ba-sah.  Asam  lemak  yang  paling tinggi  konsentrasi  relatifnya  adalah  asam palmitoleate (C16:1)  dengan  nilai  39,36  % untuk Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak pada  kondisi  basah  dan  asam linolelaidic (C18:2)  dengan  nilai  32,15  %  untuk Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak  pada kondisi  kering.  Dimana  pada  penelitian Olofsson et  al. (2012)  asam palmitoleate (C16:1)  adalah  salah  satu  jenis  asam  yang paling dominan pada Nannochloropsis sp. dan juga  hasil  penelitian  ini  lebih  besar  nilainya dibandingkan dengan penelitian Fransiskus et al. (2016)  asam palmitoleate yang  didapat hanya 25,24 %.
(a)
(b)
Gambar 2 . Kromatogram GC Minyak Nannochloropsis sp. (a) Kering (b) Basah
Tabel 2. Komposisi Asam Lemak Nannochloropsis sp. Sampel Basah dan Kering
Asam Lemak Rumus Struktur Nannochloropsis sp. Kondisi Basah (%) Kondisi Kering (%) Asam Lemak Jenuh Octanoate (C8:0) C 8 H 16 O 2 0,12 ± 0,004 - Laurate (C12:0) C 12 H 24 O 2 0,62 ± 0,004 2,10 Tetradecanoate (C14:0) C 14 H 28 O 2 6,96 ± 0,184 6,38 Heptadecanoate (C17:0) C 17 H 34 O 2 4,03 ±  0,158 3,63 Arachidate (C20:0) C 20 H 40 O 2 9,44 ± 0,770 17,83 Heneicosanoate (C21:0) C 21 H 42 O 2 0,70 ± 0,048 0,41 Tricosanoate (C23:0) C 23 H 46 O 2 1,13 ± 0,002 1,73 Lignocerate (C24:0) C 24 H 48 O 2 2,16 ± 0,069 0,80 Total Asam Jenuh 25,16 ± 3,41 32,88 ± 5,91 Asam Lemak Tak Jenuh Palmitoleate (C16:1) C 16 H 32 O 2 39,36 ± 1,025 25,98 Oleic (C18:1) C 18 H 34 O 2 9,28 ± 0,326 8,28 Linolelaidic (C18:2) C 18 H 32 O 2 24,16 ± 0,564 32,15 Nervonate (C24:1) C 24 H 46 O 2 1,00 ± 0,028 0,71 Docosahexaenoate (C22:6) C 22 H 32 O 2 1,06 ± 0,515 - Total Asam Tak Jenuh 74,86 ±16,58 67,12 ±14,80
Senyawa  asam  lemak  yang  memiliki nilai konsentrasi relatif tertinggi kedua adalah linolelaidic (C18:2)  dengan  nilai  24,16  % untuk Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak pada  kondisi  basah  dan  untuk  asam lalmitoleate (C16:1)  dengan  nilai  25,98  % untuk Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak pada  kondisi  kering.  Nilai  diatas  lebih  besar dibandingakan dengan hasil penelitian Fransiskus et  al. (2016)  dimana  asam linolelaidic hanya  1,53  %.  Untuk  asam palmitoleate (C16:1) hasil nilainya tidak jauh berbeda  dengan  penelitian  Harsanto  (2009), sebesar 24,96 %. Selanjutnya senyawa asam lemak  yang  memiliki  nilai  konsentrasi  relatif tertinggi  ketiga  adalah  asam arachidate (C20:0),  baik  untuk Nannochloropsis sp. yang  diekstrak  pada  kondisi  basah  dengan nilai  9,44  %  dan Nannochloropsis sp.  yang diekstrak  pada  kondisi kering  17,83  %.  Nilai diatas lebih besar dibandingkan de-ngan hasil penelitian  Amini et  al .  (2014)  dimana  untuk asam arachidate (C20:0) hanya 2%.
Perbedaan  komposisi  asam  lemak antara Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak pada  kondisi  basah  dan Nannochloropsis sp. yang  diekstrak  pada  kondisi  kering.  Pada penelitian  ini  terlihat  pada  asam octanoate (C8:0) dan asam docosahexaenoate (C22:6). Pada  Tabel  2  dapat  dilihat  kedua  senyawa asam  lemak  tersebut  hanya  ditemukan  pada minyak Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak pada  kondisi  basah.  Asam octanoate (C8:0) yang didapat memiliki  konsentrasi lebih  kecil yaitu  sebesar  0,12  %,  jika  dibandingkan dengan  penelitian  Anggraeni  dan  Shandi (2015), yang menghasilkan konsentrasi asam octanoate (C8:0)  sebesar  6,61  %  dan Kawaroe et al. (2009) sebesar 0,30 %.
Pada
perbedaan asam docosahexaenoate (C22:6) atau biasa disebut dengan  DHA  yang  merupakan  kelompok omega-3.  Asam docosahexaenoate (C22:6) juga  hanya  dihasilkan  pada  minyak  yang diekstrak  pada  kondisi  basah  dengan  nilai konsentrasi  sebesar  1,06  %.  Nilai  ini  lebih kecil dibandingkan dengan penelitian Amini et al. (2014), dimana
nilai asam docosahexaenoate sebesar 2 %. Ini dikarenakan berat mikroalga Nannochloropsis sp.  yang  digunakan  berbeda  dimana  pada penelitian  ini  menggunakan  10  g  dan penelitian  Amini et  al .  (2014)  menggunakan 50 g. Kedua asam ini hanya ditemukan pada Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak  pada kondisi  basah  dikarenakan  pada  saat ekstraksi Nannochloropsis sp. kering mengalami  kofigurasi  pada  ikatan  kimia akibat  pencampuran  larutan  NaCl  dan  juga
pemanasan.  Sehingga  tidak  ditemukannya asam octanoate dan asam docosahexaenoate di Nannochloropsis sp. kering Adapun  jenis  asam  lemak  lain  yang didapat pada penelitian ini yaitu asam laurate (C12:0),  dimana  asam  ini  merupakan  asam lemak jenuh dengan rumus kimia CH3(CH2)10COOH.  Hasil  yang  didapatkan yaitu 0,62 % untuk Nannochloropsis sp. yang diekstrak  pada  kondisi  basah  dan  2,10  % untuk Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak pada  kondisi  kering.  Nilai  diatas  lebih  besar jika dibandingkan dengan penelitian Kawaroe et  al.  (2009) asam  laurate  yang  didapat hanya  0,90  %.  Berikutnya  ada  asam tetradecanoate (C14:0)  asam  ini  juga merupakan  asam  lemak  jenuh  dengan  nama lain  asam  miristat  CH 3 (CH 2 )12COOH.  Hasil yang  didapatkan  yaitu  6,96  %  untuk Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak  pada kondisi basah dan 6,38 % untuk Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak  pada kondisi  kering.  Nilai  diatas  lebih  besar  jika dibandingkan  dengan  penelitian Harsanto (2009), dimana  asam  miristat  yang  didapat hanya  6,20  %.  Hasil  asam  miristat  minyak Nannochloropsis sp.  diketaui  lebih  besar nilainya dibandingkan dengan Chlamydomonas sp. yang hanya 0,49 % dan hasil ini menggunakan ekstrasi maserasi.
Berikutnya  ada  asam heptadecanoate (C17:0)  asam  ini  merupakan  asam  lemak jenuh dengan rumus kimia CH 3 (CH 2 )15COOH. Hasil  yang  didapatkan  yaitu  4,03  %  untuk Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak  pada kondisi basah dan 3,63 % untuk Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak  pada kondisi  kering.  Asam  ini  adalah  asam  lemak yang  jarang  ditemukan  pada  minyak Nannochloropsis sp.  Namun  pada  beberapa penelitian  terdapat  asam  ini  di  mikroalga jenis Chorella  vulgaris akan  tetapi  asam  ini lebih  banyak  ditemukan  pada  ikan.  Hasil yang  didapat  masih  rendah  dibandingkan dengan  penelitian  Edy et  al. (2013)  dimana penelitian  ini  nenggunakan  mikroalga  jenis Chorella  vulgaris dan  hasil  yang  didapat sebesar  16,34  %  .  Ini  dikarenakan  jumlah yang  digunakan  lebih  banyak  dibandingan dengan  penelitian  saat  ini.  Akan  tetapi  jika dibandingkan penelitian Jamal (2010) dengan ikan  Gindara  ( Lepidocybium  flavobrunneum ) dengan  nilai  asam heptadecanoate hanya 0,48%.
Asam  lemak  jenuh  lainnya  ada  asam heneicosanoate CH 3 (CH 2 )19COOH  dengan nilai  0,70%  untuk Nannochloropsis sp.  yang diekstrak  pada  kondisi  basah  dan  0,41% untuk Nannochloropsis sp.  kering.  Asam
tricosanoate CH 3 (CH 2 )21COOH  dengan  nilai 1,13%  untuk Nannochloropsis sp.  yang diekstrak  pada  kondisi  basah  dan  1,73% untuk Nannochloropsis sp.  kering.  Asam lignocerate C 23 H 47 COOH  dengan  nilai  2,16% untuk Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak pada  kondisi  basah  dan  0,80  %  untuk Nannochloropsis sp.  kering.  Ketiga  asam diatas  merupakan  asam  lemak  yang  jarang ditemukan  pada  minyak Nannochloropsis sp. namun ada beberapa
penelitian
menggunakan  mikroalga  jenis  lain  dan ditemukan adanya asam ini. Seperti penelitian Edy et al. (2019) dimana penelitian ini  nenggunakan  mikroalga  jenis Chorella vulgaris dan  hasil  asam tricosanoate yang didapat  sebesar  0,12%.  Hasil  yang  didapat masih rendah dibandingkan dengan penelitian  saat  ini,  dikarenakan  pada penelitian  Edy et  al. (2019)  menggunakan metode hidrolisis. Sedangkan pada penelitian Ratih  (2017)  menggunakan Nannochloropsis sp.  dan  hasil  yang  didapat  yaitu  asam lignocerate dengan  nilai  hanya  0,21%,  nilai ini  lebih  kecil  dibandingkan  hasil  yang didapatkan  oleh  penelitian  saat  ini.  Namun untuk  asam heneicosanoate (C21:0)  jarang ditemukan  untuk Nannochloropsis sp.  akan tetapi asam ini banyak ditemukan dibeberapa penelitian  tentang  minyak  ikan  dan  minyak hewan.  Seperti  penelitian  Jamal  (2010) dengan ikan gindara ( Lepidocybium flavobrunneum ) dengan nilai asam nervonate hanya 0,08 %.
Berikutnya  ada  asam  lemak  tak  jenuh diantaranya  asam oleic (C18:1)  dengan  nilai 9,28  %  untuk Nannochloropsis sp.  yang diekstraksi  pada  kondisi  basah  dan  8,28  % untuk Nannochloropsis sp.  kering.  Asam nervonate (C24:1) dengan nilai 1,00 % untuk Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak  pada kondisi
basah
dan
0,71%
untuk Nannochloropsis sp.  kering.  Asam oleic merupakan  asam  lemak  yang  tak  jenuh dengan struktur kimia CH 3 (CH 2 )7CHCH(CH 2 )7COOH. Nilai yang didapat  pada  penelitian  ini  cukup  tinggi dibandingkan dengan penelitian Amini (2014) yang  hanya  menghasilkan  8%.  Sedangkan untuk  asam nervonate pada Nannochloropsis sp.  jarang  ditemukan  akan  tetapi  asam  ini banyak  ditemukan  dibeberapa  penelitian tentang  minyak  ikan  dan  minyak  hewan. Seperti  penelitian  Jamal  (2010)  dengan  ikan Gindara ( Lepidocybium flavobrunneum ) dengan nilai asam nervonate hanya 0,27%. Adapun  untuk  total  kandungan  asam lemak jenuh untuk Nannochloropsis sp. yang diekstrak  pada  kondisi  basah  25,16  %  dan
32,88  %  untuk Nannochloropsis sp.  kering. Untuk total kandungan asam lemak tak jenuh untuk Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak pada  kondisi  basah  74,86%  dan  67,12% untuk Nannochloropsis sp.  kering.  Ini memperelihatkan bahwa minyak hasil ekstraksi Nannochloropsis sp. basah mempunyai  kadar  komponen  asam  lemak paling  tinggi.  Hal  ini  menimbulkan  dugaan bahwa  penggunaan  panas  dalam  ekstraksi basah dapat menyebabkan asam lemak tidak jenuh  lebih  mudah  tergradasi  sehingga menghasilkan komponen yang tidak teridentifikasi.  Meskipun  jumlah  asam  lemak jenuh Nannochloropsis sp.  lebih  rendah  dari pada  asam  lemak  tak  jenuhnya.  Namun mikroalga Nannochloropsis sp.  mempunya peluang  untuk  dapat  dikembangkan  sebagai penghasil  bahan  baku  biodisel.  Hal  ini  di dukung  oleh  penelitian  Amini et  al .  (2014) mengatakan bahwa mkroalga yang mengandung  asam  lemak  jenuh  dibawah 50%  berpeluang  sebagai  bahan  pembuatan biodiesel.
Total  dari  kandungan  lemak  mikroalga berkisar antara 1 % - 70 % dari berat kering. Kandungan  asam  lemak  biasanya  dalam bentuk  dengan  panjang  C14-C22.  Mereka biasanya  jenuh  atau  tidak  jenuh.  Beberapa spesies  mikroalga  hijau-biru  khususnya berfilamen,  cenderung  memiliki  konsentrasi asam  lemak  jenis  PUFA  ( polyunsaturated fatty  acid) yang  tinggi  mencapai  25  %  -  60 %.  Minyak  yang  dihasilkan  dari  ekstraksi mikroalga jauh lebih tinggi jika dibandingkan dengan  mi-nyak  kelapa  sawit  untuk  luas lahan yang sama (Khan et al . 2009). Mikroalga tidak menimbulkan persaingan  untuk  sektor  pangan  dan  sektor energi. Salah satu jenis mikroalga yang dapat menghasilkan
produk
lipid adalah Nannochloropsis sp., kandungan lipid Nannochloropsis sp. cukup tinggi yaitu 31- 68 %  dari  berat  keringnya  (Chisti,  2007). Dimana  komposisi  asam  lemak  utama  yang terkandung  didalam Nannochloropsis sp. adalah asam palmitat (C16:0) sebesar 45-47 % dan asam oleat (C18:1) sebesar 42-48 % (Chisti,  2007).  Biodiesel  sendiri  terdiri  dari asam  lemak  C12-C22,  sehingga  kandungan asam  lemak Nannochloropsis sp.  yang didominasi  oleh  asam palmitat (C16:0)  dan asam oleat (C18:1) berpotensi menghasilkan biodiesel dengan yield yang tinggi.
Tekanan  Osmotik  terhadap  Rendemen Minyak Nannochloropsis sp.
Hasil  penelitian  dari  dilakukannya ekstrasi terhadap Nannochloropsis sp.
menentukan bahwa rendemen minyak tertinggi  diperoleh  pada  masing-masing perlakuan  tekanan  osmotik  120  atm  dengan nilai  (3,96  %)  untuk Nannochloropsis sp. basah  dan  (2,60  %)  untuk Nannochloropsis sp.  kering.  Kedua  rendemen  ini  tergolong rendah  jika  dibandingkan  dengan  penelitian Fransiskus et  al, (2016)  yang  menghasilkan rendemen minyak Nannochloropsis sp. basah sebesar 5,49% dan penelitian Harsanto et al. (2009), yang menghasilkan rendemen minyak Nannochloropsis sp.  kering  sebesar
37 %.
Adapun rendemen minyak Nannochloropsis
sp. basah dan Nannochloropsis sp.  kering  untuk  masing- masing  perlakuan  tekanan  osmotik  yang dihasilkan  pada  penelitian  ini  dapat  dilihat pada Tabel 3.
Pada  Tabel  3  terdapat  angka  yang ditandai dengan huruf yang sama pada kolom yang  sama,  merupakan  nilai  yang  tidak berbeda  nyata  pada  taraf  kepercayaan  95%. Sedangkan  angka  yang  ditandai  dengan huruf  yang  berbeda  merupakan  nilai  yang berbeda  nyata  pada  taraf  kepercayaan  95%. Hasil  uji  beda  nyata  antar  perlakuan  untuk rendemen  minyak Nannochloropsis sp.  yang diekstrak  pada  kondisi  basah  menunjukkan bahwa  perlakuan  tekanan  osmotik  120  atm berbeda  nyata  dengan  perlakuan  tekanan osmotik  0,  30,  60  atm  (sig<0,05). Sedangkan  hasil  uji  beda  nyata  untuk rendemen  minyak Nannochloropsis sp.  yang diekstrak pada kondisi kering juga menunjukkan  bahwa  perlakuan  tekanan osmotik 120 atm berbeda nyata untuk semua perlakuan tekanan osmotik (sig<0,05).
Perbedaan  antara  rendemen  minyak Nannochloropsis sp. yang diekstrak pada ko- ndisi  basah  dan  kering  juga  terlihat  pada (Gambar  3).  Hasil  uji  korelasi  Person menunjukkan bahwa tekanan osmotik memiliki  korelasi  yang  positif  terhadap
rendemen minyak Nannochloropsis sp. basah yang  nilai  hasilnya  yaitu  sebesar  0,890 dengan  nilai  sig=0,043.  Sedangkan  untuk minyak Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak pada kondisi kering juga menunjukkan bahwa tekanan  osmotik  memiliki  korelasi  positif terhadap nilai rendemen yaitu sebesar 0,916 dengan  nilai  sig=0,029.  Menurut  Sugiyono (2010)  masing-masing  nilai  korelasi  diatas dapat dikatakan berkorelasi dengan sempurna  karena  nilai  yang  dihasilkan  lebih besar  dari  0,80-1,000.  Dikarenakan  uji korelasi bernilai posistif maka dapat disimpulkan  bahwa  semakin  tinggi  tekanan osmotik  yang  diberikan  maka  semakin  tinggi pula  rendemen  minyak Nannochloropsis sp. basah maupun rendemen minyak Nannochloropsis sp.  kering  yang  dihasilkan. Hal  berbeda  dengan  penelitian  Fransiskus et al. (2016) nilai rendemen minyak Nannochloropsis sp.  yang  diekstrak  pada kondisi kering mendapatkan nilai negatif dari korelasi yang kuat.
Berbagai  macam  metode  yang  telah digunakan  untuk  mendapatkan  hasil  ekstrak terbaik  dari  bahan  baku  mikroalga  seperti super critical fluid, pyrolisis, ultraso-und, dan ekstraksi microwave . Menurut penelitian yang telah  dilakukan  oleh  Chen et  al. (2012) menunjukkan bahwa metode ekstraksi dengan  tekanan  osmotik  lebih  unggul  dan menguntungkan dibandingkan dengan metode super  critical  fluid,  eks-traksi microwave,  pyrolysis dan ultrasound .  Proses ekstraksi tekanan osmotik tidak membutuhkan  waktu  yang  lama,  tidak membutuhkan konsumsi energi yang banyak, ramah  lingkungan,  dan  yang  terpenting menghasilkan yield yang tinggi. Produk  yang lebih  bersih  serta  tidak  menghasilkan  limbah yang  berbahaya  (Helmy  Purwanto,  2010). Ekstraksi  yang  digunakan  pada  penelitian  ini yaitu tekanan osmotik dengan larutan NaCl.
Tabel 3. Hasil  Rendemen  Minyak Nannochloropsis sp.  yang  Diekstrak  dengan  Tekanan Osmotik Berbeda
Tekanan Osmotik (atm) Rendemen Minyak Nannochloropsis sp. Kering (%) Basah (%) 0 0,48 ± 0,02 a 0,61 ± 0,02 a 30 0,90 ± 0,13 a 1,36 ± 0,06 a 60 1,08 ± 0,17 a 1,39 ± 0,12 a 90 1,30 ± 0,18 b 1,83 ± 0,68 a 120 2,60 ± 1,29 c 3,96 ± 1,36 b Rerata 1,27 ± 1.26 1,83 ± 0.80
Gambar 3. Hasil  Grafik  Rendemen  Minyak Nannochloropsis sp.  yang  Diekstrak  pada  Kondisi Basah dan Kondisi Kering untuk Setiap Kenaikan Tekanan Osmotik
Larutan yang digunakan untuk memecahkan dinding sel yaitu larutan NaCl. Larutan  NaCl  lebih  efisien  telah  dibuktikan oleh  penelitian  Indrawan et  al .  (2018) dimana  peneliti  menggunkan  metode tekanan  osmotik  dengan  menggunakan lima  konsentrasi  NaCl  yaitu  0,  10,  20,  30, dan 40%. Hasil yang didapat ekstraksi lipid dengan  larutan  NaCl  diperoleh  rende-men optimum  1,49%  pada  konsentrasi  NaCl 20%.  Pada  penelitian  Ahmad et  al. (2014) juga membuktikan tekanan osmotik dengan larutan  NaCl  (5,30  %)  mendapatkan  nilai lebih  besar  dibandingkan  dengan  larutan KCl (4,69 %) dan glukosa (2,81 %)
Penggunaan  metode  tekanan  osmotik pada  penelitian  ini  mendapatkan  hasil rendemen  minyak Nannochloropsis sp. yang  tinggi  jika  dibandingkan  dengan metode  ekstraksi  lain  yang  juga  sama- sama menghancurkan dinding sel. Diantaranya penelitian Bawole et al. (2017) penelitian ini menggunakan
metode
ekstraksi  hidrokarbon  sonikator  dengan teknik  pemanasan  untuk  menghancurkan dinding sel. Dengan hasil rendemen minyak Nannochloropsis sp.  sonikator  hanya  0,71 %  dan  perlakuan  panas  0,58%.  Mikroalga Chlorella sp.  sonikator  hanya  1,08%  dan perlakuan  panas  hanya  0,95  %.  Dan mikroalga Spirulinna sp.  sonikator  hanya 2.01 % dan perlakuan panas 1,21 %. Pada penelitian  Indrawan et  al. (2018)  juga menggunakan  ekstraksi  sonikator  hasil yang didapat hanya 0,27%-1,61%.
Berikutnya  pada  penelitian  Amini  (2014) menggunakan metode sonikator
pemecahan  dinding  sel  dengan  larutan  n- heksana mendapatkan hasil untuk Nannochloropsis sp.hanya  1,54  %  dan untuk Botryococcus braunii hanya 0,84 %.
Terjadinya  hasil  kandungan  minyak rendah  kemungkinan  dikarenakan  pada saat perendaman ekstrasi mikroalga dan n- heksana  belum  sempurna  menembus membran vacuola sebagai  tempat  sumber minyak  didalam  sel.  Hal  ini  didukung pernyataan  dari  Darwis  (2000)  bahwa proses  perendaman  ekstraksi  yang  lama akan  menghasilkan  minyak  yang  semakin tinggi. Pada penelitian Ahmad et al. (2014) juga menunjukkan bahwa metode ekstraksi sokhletasi  dan bligh  &  dry kurang  baik untuk  mengekstrak  biomasa  yang  basah. Hasil  yang  didapat  untuk  sokhletasi  hanya 0,03%  dan bligh  &  dry hanya  1,12%. Ahmad et  al. (2014)  mengatakan,  bahwa hal  ini  diakibatkan  karena  pelarut  seperti heksana dan kloroform tidak larut dalam air sehingga  kontak  antara  biomassa  basah dan pelatur yang tadinya bertindak sebagai pengekstrak lipida akan terhalangi kemampuan ekstraksinya.

## KESIMPULAN
Tekanan osmotik berpengaruh terhadap kedua rendemen minyak Nannochloropsis sp.  baik  pada  kondisi basah (r=0,890 sig<0,043) dan Nannochloropsis
sp. kondisi kering (r=0,916  sig<0,029).  Sehingga  semakin tinggi  tekanan  osmotik  yang  diberikan maka  semakin  tinggi  pula  rendemen minyak Nannochloropsis sp. basah maupun rendemen  minyak Nannochloropsis sp. kering yang didapat. Tekanan osmotik yang baik  untuk  mengekstrasi Nannochloropsis sp.  yaitu  tekanan  osmotik  120  atm. Masing-masing  hasil  yang  didapat  yaitu Nannochloropsis sp.  basah  (3,96%)  dan kering (2,60%). Hasil analisis kromatogram
GC pada rendemen minyak
Nannochloropsis sp.  diketahui  komposisi asam  lemak  didominasi  oleh  Asam  Lemak Jenuh  dengan  8  jenis,  sedangkan  asam lemak tak jenuh hanya 5 jenis.

## REFERENSI
Ahmad,  K.R.  &  Herawati,  N.  2020.  Kimia Fisika  II.  Rafah  Press  UIN  Raden Fatah Palembang. Palembang. 22 hlm Amini,  S.,  Fitriani,  D.,  &  Sugiyono.  2014. Pengaruh Perlakuan Pemecah Dinding
Sel
Batryocaccus braunii
dan
Nannochloropsis sp.  Menggunakan Microwave  dan  Sonikator  Terhadap Minyak  Ynag  Disasilkan.  BBP4BKP. Jakarta. 1-9 hlm.
Anggraeni,  D.  &  Shandi,  A.P.  2015.
Produksi  Biomasa,  Lipid,  dan  Protein Sel Tunggal Mikroalga Nannochloropsis sp. Sebagai Suplemen Makanan. Universitas Udaya. Denpasar. 45 hlm. Bawole, H., Rizald, M.R., & Elvy, L.G. 2017.
Ekstrasi  Hidrokarbon  dari  Beberapa Mikroalga. Jurnal  Pesisir  dan  Laut Tropis, 1(1): 18-23 Borges,  L.,  Joaquin,  Villarreyes,  A.M., D’Oca,  M.G.M., &  Abreu,  P.C.  2011, Effects  of  Flocculants  on  Lipid Extraction  and  Fatty  AcidComposition of  the  Microalgae Nannochloropsis oculata and Thalassiosira  weissflogii .
Biomass and Bioenergy. 35(1): 4449-
4454.
Brown,  T.L.,  LeMay,  H.E.,  &  Bursten,  B.E. 2002. Chemistry. The Central Science
Prentice Hall. 10 hlm Dianursanti,  &  Pijar,  R.  2013.  Peningkatan Perolehan Hasil Lipid dari Nannochloropsis  sp  Menggunakan Metode  Ekstraksi  Kombinasi  Bligh- dryer  dan  Osmotic  Stress. Prosiding STNK TOPI. Fakultas Teknik
Universitas  Indonesia.  Depok .  103- 104 hlm Fransiskus, D., Alimudin, A.H., & Ardiningsih, P. 2016. Ekstraksi Minyak Mikroalga Nannochloropsis oculata Menggunakan Metode Tekanan Osmotik. Jurnal  Ilmu  dan  Terapan Kimia , 1(1): 18-30. Harsanto,  S.  2009.  Analisis  Asam  Lemak Mikroalga Nannochropsis oculata . Institut Teknologi Sepuluh Nopember. Surabaya.
Indrawan,  A.P.,  Winarto,  H.,  &  Tri,  J.R. 2018.  Optimasi  Ekstrasi  Lipid  dari Spirulina  plantensis Menggunakan Tekanan  Osmotik  dengan  Bantuan Gelombang  Ultrasonik  dan  Produksi Metil  Esternya  Secara  Enzimatis.
Berkala MIPA . 25(2): 116-128. Kawaroe,  M.,  Prartono,  T.,  Sunuddin,  A.,
Sari,  S.W.,  &  Augustine,  D.  2009. Mikroalga Potensi dan Pemanfaatannya untuk  Produksi  Bio  Bahan  Bakar. Penerbit IPB Press. Bogor. 151 hlm.
Prabakaran,  P.,  &  Ravindran,  A.D.  2011.  A study  on  Effective  Lipid  Extraction Methods  from  Certain  Fresh  Water Microalgae. Bio  Technology, 39(1): 4589- 4591.
Rachmaniah, O., Setyarini, R.D., & Maulida, L.  2010,  Pemilihan  Metode  Eks-traksi Minyak  Alga  dari  Chlorella  sp.  dan Prediksinya Sebagai Biodiesel. Institut Teknologi Sepuluh November. Surabaya. 10 hlm Wijanarki,  B.,  & Putri,  L.D. 2012. Ekstraksi
Lipid  dari  Mikroalga Nannochloropsis sp.  dengan  Solven  Mrthanol  dan Chloroform. Jurnal  Teknologi  Kimia dan Industri, 1(1): 130-138.
Yoo, G., Park, W.K., Kim, C.W., Choi, Y.E. & Yang,  J.W.  2012.  Direct Lipid Extraction  from  Wet  Chlamydomonas reinhardtii  Biomass  Using  Osmotic Shock. Bioresource Technology, 123(1): 717-122.