## FORMULASI DAN UJI STABILITAS SEDIAAN GEL EKSTRAK TERPURIFIKASI DAUN PALIASA
( Kleinhovia Hospita L .) YANG BEREFEK ANTIOKSIDAN
Suryani 1) , Andi Eka Purnama Putri 1) , Putri Agustyiani 1)
1) Jurusan Farmasi, Fakultas Farmasi Universitas Halu Oleo, Kendari, Sulawesi Tenggara
*Email: Soerysuer@yahoo.com

## ABSTRACT
Paliasa (Kleinhovia hospita L.) is kind of plant in Southeast Sulawesi. Paliasa leaves contain flavonoids which has antioxidant activity. The aims of this study was to determine the formulation of gel  containing  extracts  of  Paliasa  leaves  (Kleinhovia  hospita  L.)  purified  extract  with  variation  of concentration  (1.IC 50 ,  3.IC 50 and  6.IC 50 )  which  have  antioxidant  activity  and  good  stability. Purification Extract was conducted using n-hexane to increase the activity of antioxidant in extract of paliasa  leaves  (Kleinhovia  hospita  L.).  Antioxidant  activity  of  paliasa  leaves  purified  extract  was tested  by  DPPH  method  (1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl)  to  determine  inhibition  concentration  50 (IC 50 ). Stability parameters tested in this research were organoleptic, homogeneity, pH and viscosity. Cycling  test  method  was  conducted  on  gel  for  6  cycles.  Results  of  the  determination  of  activity antioxidant of ethanol extracts and purified extracts of leaves paliasa is 123,70 ppm and 93,52 ppm, while  the  activity  antioxidant  of  the  extract  gel  purified  paliasa  leaves  among  others  1.IC 50 (333,12 ppm), 3.IC 50 (242,13 ppm) and 6.IC 50 (147,31 ppm). Results of stability test showed that all gel were stable  in  homogeneity,  pH  and  viscosity  but  gel  with  3.IC 50 and  6.IC 50 of  paliasa  leaves  purified extract were organolaptic unstable because of color changing after cycling test.
Keywords :  antioxidant  activity,  paliasa  leaves  (Kleinhovia  hospita  L.),  purified  extracts,  gel formulation, gel stability

## ABSTRAK
Paliasa  ( Kleinhovia  hospita L.)  adalah  salah  satu  tumbuhan  di  Sulawesi  Tenggara  yang berkhasiat  sebagai  antiosidan.  Kandungan  senyawa  daun  Paliasa  yang  diduga  berperan  sebagai antioksidan  adalah  flavonoid.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  apakah  formulasi  gel  yang mengandung ekstrak terpurfikasi daun Paliasa konsentrasi 1.IC 50 , 3.IC 50 dan 6.IC 50 memiliki aktivitas antioksidan  dan  stabilitas  yang  baik.  Purifikasi  ekstrak  dilakukan  dengan  menggunakan  pelarut  n- heksan  untuk  meningkatkan  aktivitas  antioksidan  ekstrak  daun  Paliasa.  Penentuan  aktivitas antioksidan ekstrak dan sediaan gel dilakukan  dengan metode DPPH ( 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl ) yang  dinyatakan  dengan inhibition  concentration 50  (IC 50 ).  Pengujian  stabilitas  gel  meliputi  uji organoleptik,  viskositas,  pH,  homogenitas.  Uji  dengan  metode Cycling  test dilakukan  sebanyak  6 siklus.  Hasil  penentuan  aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol  dan  ekstrak  terpurifikasi  daun  paliasa yaitu 123,70 ppm dan 93,52 ppm, sedangkan aktivitas antioksidan gel ekstrak terpurifikasi dau paliasa antara  lain    1.IC 50 (333,12  ppm),  3.IC 50 (242,13  ppm)  dan  6.IC 50 (147,31  ppm) . Hasil  uji  stabilitas menunjukkan sediaan gel stabil dari parameter viskositas, pH dan homogenitas tetapi tidak stabil dari parameter  organoleptik  karena  terjadi  perubahan  warna  sediaan  gel  yang  mengandung  ekstrak terpurifikasi 3.IC 50 dan 6.IC 50 setelah proses cycling test.
Kata kunci : antioksidan, ekstrak terpurifikasi, Paliasa ( Kleinhovia hospita L.), sediaan gel, stabilitas gel

## PENDAHULUAN
Paparan  radiasi  sinar  UV  yang berasal dari sinar matahari dapat menyebabkan  terbentuknya  radikal  bebas dari  ROS  ( Radical  Oxygen  Species )  yang merupakan  molekul  tidak  stabil. Radical Oxygen  Species akan  berikatan  dengan komponen  sel  untuk  menstabilkan  diri, akibatnya  komponen  sel  seperti  lemak, protein  dan  asam  nukleat  akan  rusak. Kerusakan komponen sel-sel tersebut akan menyebabkan  penuaan  dini  pada  kulit (Elsner dan Howard, 2000).
Kosmetika untuk mencegah penuaan dini  pada  kulit  dapat  disajikan  dalam berbagai  bentuk  sediaan  topikal  seperti krim,  salep  ataupun  gel. Bentuk  gel mempunyai  beberapa  keuntungan  antara lain    tidak  lengket,  gel  mempunyai  aliran tiksotropik dan pseudoplastik yaitu  gel berbentuk padat apabila disimpan dan akan segera  mencair  bila  dikocok,  konsentrasi bahan  pembentuk  gel  yang  dibutuhkan hanya sedikit untuk membentuk massa gel yang  baik,  viskositas  gel  tidak  mengalami perubahan yang berarti pada suhu penyimpanan (Lieberman dkk., 1989). Gel yang mengandung antioksidan yang berasal dari alam dapat  digunakan sebagai sediaan  topikal  untuk  menangkal  radikal bebas.
Paliasa  ( Kleinhovia  hospita L.) diketahui  mengandung  senyawa  aktif eleutherol  dan  kaempferol  3-glukosida yang  berfungsi  sebagai  zat  antioksidan (Enos,  2012).  Skrining  fitokimia  yang dilakukan  oleh  Yunita  dkk.  (2009) diperoleh  hasil  bahwa  daun  Paliasa mengandung  senyawa  golongan  alkaloid (2,83%),  flavonoid  (19,78%),  dan  saponin (14,23%). Ekstrak  metanol  daun  Paliasa
menunjukkan  efek  antioksidan  yang  kuat dibandingkan  dengan  vitamin  C  dengan metode 1,1- diphenyl -2- picrylhydrazyl
(DPPH) ( Arung dkk ., 2009 ).
Ekstrak  yang  diperoleh  dari  proses ekstraksi  dengan  menggunakan  pelarut organik  atau  air,  seringkali  mengandung senyawa  yang  tidak  diinginkan  seperti klorofil, tanin, karbohidrat,  lilin, resin  dan sejenisnya. Keberadaan tanin akan menyebabkan kekeruhan selama penyimpanan  atau  proses  berikutnya, sedangkan klorofil, karbohidrat, lilin, resin dan sejenisnya ditinjau dari sudut pandang aktivitas  sangat  jarang  diperlukan  bahkan seringkali  menyebabkan  ketidakstabilan sediaan  ketika  diformulasikan.  Purifikasi ekstrak  adalah  salah  satu  cara  untuk menghilangkan senyawa yang tidak diinginkan.  Purifikasi  ekstrak  diharapkan akan  meningkatkan  khasiat  senyawa  aktif dalam ekstrak (Srijanto dkk., 2012).
Sejauh  ini  ekstrak  terpurifikasi  daun Paliasa  belum  pernah  diformulasikan dalam  bentuk  kosmetik  yaitu  sediaan  gel. Melihat  daun  Paliasa  yang  memiliki khasiat sebagai antioksidan, maka dilakukan penelitian formulasi  sediaan  gel ekstrak  terpurifikasi  daun  Paliasa  sebagai yang  berkhasiat  sebagai  antioksidan. Formulasi  sediaan  gel  dibuat  dalam berbagai konsentrasi untuk melihat pengaruhnya
terhadap
aktivitas antioksidan.

## BAHAN DAN METODE

## BAHAN
Bahan yang  digunakan pada penelitian ini adalah  daun  Paliasa  ( K.  hospita L.)yang didapatkan  di  Kabupaten    Konawe  Utara, Sulawesi Tenggara, radikal DPPH ( sigma ),
etanol  ( teknis ),  n-heksan,  karbopol  940, NaOH,  metil  paraben,  propilen  glikol ( teknis ),  asam  asetat  ( teknis ),  butanol ( teknis ), amonia, plat silika gel ( Merck ® )dan aquadest .

## ALAT
Alat-alat  yang  digunakan  adalah rotary evaporator ( Buchi ® ),  spektrofotometer UV-Vis  ( Spectronic  20D ® ),  timbangan analitik  ( Precisa ® ),  pengaduk  elektrik ( Nanotec  mixer ® ), blender ( Philips ® ), viskometer  rhion  ( Rion  ViscometerVT- 04F ® ),  pH-meter  (Jenway ® ), hot  plate ( Stuart ® ), dan alat–alat gelas ( Pyrex ® ).

## METODE Pembuatan simplisia
Daun  yang  digunakan  ialah  daun yang  tidak  terlalu  muda.  Penyortiran segera dilakukan setelah sampel selesaidipetik.Pencucian  bertujuan  untuk menghilangkan  kotoran  dan  mengurangi mikroba-mikroba  yang  menempel  pada sampel.  Pencucian  dilakukan  dengan menggunakan  air  mengalir  agar  kotoran yang menempel dapat tercuci
bersih.Perajangan
dilakukan untuk
memperluas  permukaan  sampel  sehingga lebih  cepat  kering  tanpa  pemanasan  yang berlebih.
Pengeringan sampel dilakukan dengan  cara  dijemur  di  bawah  sinar matahari  dan  ditutupi  oleh  kain  hitam. Pengeringan dilakukan untuk mengeluarkan atau menghilangkan air dari sampel.Sampel  yang  telah  kering  merata kemudian
dihaluskan dengan menggunakan blender .  Simplisia  daun Paliasa  yang  telah  halus  disimpan  dalam toples  kaca  dan  kedap  udara.  Simplisia disimpan  di  tempat  yang  kering,  tidak lembab,  dan  terhindar  dari  sinar  matahari langsung.

## Ekstraksi
Simplisia daun Paliasa ditimbang
sebanyak  750  g.  Sebanyak  250  g  masing- masing dimasukkan kedalam 3 wadah kaca
(toples).
Etanol
sebanyak1,75liter ditambahkan  kedalam  tiap  wadah  dan dimaserasi selama 3×24 jam. Ekstrak yang dihasilkan kemudian disaring untuk memisahkan  filtrat  dan  residunya.  Filtrat dipekatkan  dengan  menggunakan rotary evaporator se hingga akan diperoleh ekstrak kental.

## Purifikasi ekstrak
Ekstrak  kental  Paliasa  ditimbang kemudian  dilarutkan  dengan  etanol  dan dimasukkan  dalam  corong  pisah.Kedalam larutan tersebut ditambahkan n- heksan.Corong dikocok secara terus menerus, kemudian didiamkan.Setelah terpisah  menjadi  2  lapisan,  maka  lapisan etanol  dan  n-heksan  dipisahkan. Pelarutan dengan  n-heksan  diulangi  sebanyak  5-10 kali  hingga  diperoleh  lapisan n-heksan berubah  warna  menjadi  hijau  terang ( Hernani dkk ., 2007). Larutan hasil pemisahan  tersebut  dikumpulkan  dan dievaporasi  sehingga  didapatkan  ekstrak terpurifikasi dan fase heksan.

## Karakterisasi ekstrak terpurifikasi Uji kadar air
Cawan  porselen  ditimbang  hingga diperoleh  berat  konstan.  Sebanyak  0,5  g ekstrak terpurifikasi daun Paliasa dimasukkan  ke  dalam  cawan  yang  telah diketahui  beratnya,  kemudian  dikeringkan dalam  oven  selama  6  jam  dengan  suhu 100-102°C. Cawan porselen sampel dimasukkan ke dalam desikator selama 15 menit  atau  hingga  dingin,  lalu  ditimbang hingga  diperoleh  berat  kostan.  Penentuan kadar air menggunakan perhitungan sebagai berikut (Depkes RI, 2000):

## (  )
Keterangan : A = berat sampel awal (g)
B  =  berat  cawan  +  sampel  setelah dikeringkan (g)
C = berat cawan kosong (g)

## Uji kadar abu
Cawan  porselen  kering  ditimbang sebagai  berat  kosong.  Sebanyak  0,5  g ekstrak dimasukkan dalam cawan porselen yang  kemudian  dipijarkan  di  dalam  tanur pada  suhu  900°C  sampai  menjadi  abu. Cawan  porselin  kemudian  dimasukkan  ke dalam desikator.Cawan porselen ditimbang  hingga  diperoleh  bobot  yang tetap  dan  stabil.  Kadar  abu  dihitung dengan rumus (Depkes RI, 2000):

## ( )
Keterangan: A = berat ekstrak sebelum diabukan (g) B = berat ekstrak ditambah cawan sesudah diabukan (g) C = berat cawan kosong (g)

## Penetapan  kadar sari larut air
Sebanyak  0,5  g  ekstrak  dimasukkan ke dalam labu ukur, kemudian ditambahkan  campuran  kloroform  2,5  mL dan  air  hingga  mencapai  volume  100  mL sambil  dikocok  berkali-kali  selama  6  jam pertama  kemudian  dibiarkan  selama  18 jam.  Filtrat  disaring,  kemudian  sebanyak 20 mL filtrat dimasukkan ke dalam cawan porselen  yang  telah  ditimbang.  Cawan porselen  dimasukkan  ke  dalam  oven bersuhu 105°C. Cawan porselen ditimbang hingga  diperoleh  bobot  tetap.    Kadar  sari larut  air  dihitung  dengan  rumus  (BSN, 2005):
Persen berat (     )
Keterangan:
W1: berat cawan dan  isinya (g) W2: berat cawan kosong  (g) W  : berat cuplikan kering untuk pengujian (g)

## Penetapan kadar sari larut etanol
Sebanyak  5  g  ekstrak  dimasukkan  ke dalam  labu  ukur,  kemudian  ditambahkan dengan  100  mL  etanol  (96%)  sambil dikocok berkali-kali selama 6 jam pertama dan  didiamkan  selama  18  jam.Filtrat disaring dengan cepat untuk
menghindarkan penguapan etanol.Sebanyak  20  mL  filtrat  dalam porselen  yang  telah  ditimbang  dipanaskan pada  suhu  105°C,  selanjutnya  ditimbang hingga  diperoleh  bobot  tetap.  Kadar  sari larut  etanol  dihitung  dengan  rumus  (BSN, 2005):
(       )
Keterangan: W1 : berat cawan dan  isinya (g) W2 : berat cawan kosong dalam  (g) W  : berat ekstrak yang ditimbang (g)

## Uji kualitatif flavonoid
Ekstrak etanol dan ekstrak terpurifikasi daun Paliasa dilarutkan dengan  etanol  lalu  ditotolkan  pada  plat silika gel. Fase gerak: butanol-asam asetat- air  (4:1:5).Uap  amonia  digunakan  sebagai penampak  noda.  Jika  timbul  warna  coklat setelahpemberian uap amonia menunjukkan  adanyaflavonoid.  Bila  tanpa uap  amonia,di  bawah  sinar  UV  366  nm, flavonoid  akanberfluoresensi  biru,  kuning atau  hijau,  tergantungdari  strukturnya (Marliana, 2007).
Uji aktivitas antioksidan ekstrak terpurifikasi Pengukuran absorbansi sampel
Larutan induk dibuat dengan konsentrasi  1000  ppm  dengan  cara menimbang  ekstrak  terpurifikasi  sebanyak 0,05  g  lalu  diencerkan  dengan  etanol hingga mencapai 50 mL. Variasi konsentrasi  50,  100,  150,  dan  200  ppm dibuat dari larutan induk. Ekstrak terpurifikasi  sebanyak  2  mL  dengan konsentrasi  50  ppm,  100  ppm,  150  ppm dan 200 ppm masing-masing ditambahkan 1  mL  DPPH  100  ppm.  Campuran selanjutnya  dikocok  dan  diinkubasi  pada suhu kamar (26-27°C) selama 30 menit  di tempat  gelap,  kemudian  masing-masing sampel dibaca absorbansinya pada panjang gelombang maksimum DPPH.
Penentuan IC 50
Penentuan aktivitas antioksidan yang dinyatakan dalam  persentase inhibisi  yang dihitung dengan rumus(Putri dkk., 2013):
%I = x 100%
Konsentrasi sampel dan persen inhibisinya diplot masing-masing pada sumbu x dan y pada  persamaan  regresi  linear.  Persamaan tersebut digunakan untuk menentukan nilai IC 50 dari masing-masing sampel
dinyatakan  dengan  nilai  y  sebesar  50  dan nilai x yang akan diperoleh sebagai IC 50 .

## Formulasi gel
Rancangan formula gel ekstrak daun Paliasa  dapat dilihat pada Tabel 1 dengan menggunakan  tiga  variasi  konsentrasi ekstrakterpurifikasi daun Paliasa.
Tabel 1. Rancangan formulasi gel ekstrak terpurifikasi daun Paliasa.
No. Bahan Fungsi Formula Gel 50 g (% b/b) Basis F1 F2 F3 1 2 3 4 5 6 Ekstrak  terpurifikasi daun Paliasa Karbopol NaOH Propilenglikol Metil paraben Aquades Zat aktif Gelling agent Penetral karbopol Emolient humectan Pengawet Pelarut - 1 0,4 15 0,1 ad 100 10 (1.IC 50 ) 1 0,4 15 0,1 ad 100 10 (3.IC 50 ) 1 0,4 15 0,1 ad 100 10 (6.IC 50 ) 1 0,4 15 0,1 ad 100 Keterangan: 1.IC 50 = 1× konsentrasi ekstrak yang menangkal 50% radikal bebas 3.IC 50 = 3× konsentrasi ekstrak yang menangkal 50% radikal bebas 6.IC 50 = 6× konsentrasi ekstrak yang menangkal 50% radikal bebas
Karbopol  dilarutkan  dalam  aquades  yang telah dipanaskan (suhu 70-80°C)
kemudian  diaduk  menggunakan  pengaduk elektrik.  Setelah  busa  hilang  ditambahkan larutan  NaOH  0,2  g  yang  telah  dilarutkan dengan aquades untuk menetralkan karbopol  sehingga  terbentuk  massa  gel yang  mengembang  dan  jernih.  Metil paraben
dilarutkan
dalam propilenglikolselanjutnya ditambahkan
kedalam basis (Djajadisastra dkk., 2009).Ekstrak  terpurifikasi  daun  Paliasa yang  telah  dibuat  dengan  berbagai konsentrasi dimasukkan ke dalam basis gel sebanyak  5  g  kemudian  diaduk  sampai homogen  menggunakan  batang  pengaduk. Gel  yang  telah  jadi  kemudian  diisikan kedalam  wadah  terutup  rapat  untuk dilakukan evaluasi gel lebih lanjut.

## Uji aktivitas antioksidan sediaan gel
Sebanyak  0,05g  masing-masing  gel dilarutkan  denganetanol  dan  diencerkan sampai 50 mL sehingga didapatkan larutan
induk  dengan  konsentrasi  1000  ppm. Setelah  itu,  dibuat  larutan  sampel  dengan konsentrasi  50  ppm,  150  ppm,  250  ppm dan  350  ppm.  Dipipet  masing-masing  2 mL  larutan  sampel  lalu  dicampurkan kedalam 1 mL DPPH 100 ppm. Campuranselanjutnya dikocok dan diinkubasi  pada  suhukamar  selama  30 menit  di  tempat  gelap.Absorbansinya kemudian dibaca pada panjang gelombang maksimum DPPH.

## Uji stabilitas sediaan gel
Cycling test Salah satu cara mempercepat evaluasi  kestabilan  adalah  dengan cycling test .  Uji cycling  test ini  dilakukan sebanyak    6  siklus.  Sediaan  gel  disimpan pada suhu dingin ± 4 ° C selama 24 jam lalu dikeluarkan  dan  ditempatkan  pada  suhu  ± 40 ° C,  proses  ini  dihitung  1  siklus  (Dewi, 2010).
Organoleptik
Analisis  organoleptik  dilakukan dengan  mengamati  perubahan  tekstur, warna,  dan  bau  dari  sediaan  gel  ekstrak terpurifikasi  daun  Paliasa  selama cycling test . Gel biasanya jernih dengan konsistensi setengah padat(Ansel, 1989).

## Pengukuran viskositas
Uji  viskositas  dilakukan  dengan alat Viskosimeter Rion seri VT 04 rotor no 2  dicelupkan  ke  dalam  gel.  Viskositas diketahui  dengan  mengamati  gerakan jarum  penunjuk  viskositas  yang menunjuk pada angka tertentu.

## Pengukuran pH
Gel ditimbang sebanyak
1
gdilarutkan  dalam  10  mL  air  kemudian diukur pH-nya menggunakan pH-meter.

## Homogenitas
Pengujian  homogenitas  dilakukan dengan  cara  sampel  gel  dioleskan  pada
sekeping  kaca  atau  bahan  transparan  lain yang  cocok,  sediaan  harus  menunjukkan susunan  yang  homogen  dan  tidak  terlihat adanya butiran kasar (Depkes RI, 1985).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Standarisasi Ekstrak
Terpurifikasi
Daun Paliasa Pengamatan organoleptic Pengamatan  organoleptik  ekstrak bertujuan sebagai pengenalan awal menggunakan panca indra dengan mendeskripsikan  bentuk,  warna,  bau  dan rasa (Depkes RI, 2000).  Hasil pengamatan organoleptik  Tabel  2  terlihat  perbedaan warna  antara  ekstrak  etanol,  ekstrak terpurifikasi dan fase heksan.
Tabel 2.Hasil pengamatan organoleptik ekstrak etanol ekstrak terpurifikasi dan fase heksan Ekstrak Warna Bau Rasa Bentuk Ekstrak etanol Ektrak terpurifikasi Hijau kehitaman Coklat Khas Paliasa Khas Paliasa Pahit Pahit Ekstrak kental
Ekstrak kental FasHeksan Hijau Khas Paliasa Pahit Ekstrak kental
Hasil  pengamatan  organoleptik  Tabel  1 terlihat  perbedaan  warna  antara  ekstrak etanol,  ekstrak  terpurifikasi  dan  fase heksan.  Ekstrak  etanol  yang  sebelumnya berwarna hijau kehitaman berubah menjadi coklat setelah dipurifikasi disebabkan kandungan klorofil yang sebelumnya  terdapat  dalam  ekstrak  telah larut oleh heksan.
Parameter  spesifik  dan  non  spesifik. Penetapan  parameter  standar  ekstrak
bertujuan  untuk  memperoleh  gambaran karakterisasi ekstrak sebagai upaya standarisasi bahan yang digunakan (Risnafiani dkk., 2015). Pengujian standarisasi  ekstrak  terpurifikasi  meliputi parameter spesifik (kadar sari larut air, dan kadar  sari  larut  etanol)  dan  nonspesifik (kadar  air,  kadar  abu).  Hasil  penetapan parameter  spesifik  dan  nonspesifik  dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil penetapan parameter spesifik dan non spesifik
Parameter Jenis Penetapan Hasil Spesifik Kadar Sari Larut Air 9,98% b/b Kadar Sari Larut Etanol 12,32% b/b Nonspesifik Kadar Air 3,64% b/b
Kadar Abu 1,60% b/b
Hasil  pada  Tabel  3menunjukan  bahwa kadar  sari  larut  etanol  lebih  besar dibandingkan  dengan  kadar  sari  larut  air, artinya  ekstrak  terpurifikasi  lebih  larut dalam etanol daripada dalam air. Kadar air dan  kadar  abu  yang  didapatkan  masih dalam rentang nilai yang memenuhi syarat yaitu kadar air ˂ 5% dan kadar abu ≤ 16% (Depkes RI, 1985).
Uji  kualitatif  flavonoid. Pengujian  ini merupakan uji pendahuluan untuk mengetahui ada tidaknya senyawa flavonoid  yang  terdapat  dalam  sampel serta  untuk  membandingkan  perbedaan sampel saat belum di purifikasi dan setelah purifikasi.
Rf 1 diidentifikasi  sebagai  klorofil  karena saat  diamati  pada  sinar  tampak  terlihat noda  berwarna  hijau  pada  plat  KLT  dan berpendar  merah  di  bawah  sinar  UV  366 nm  (Harbone,  1996).  Rf 2 dan  Rf 3 diduga sebagai  senyawa  flavonoid  karena  setelah pemberian  uap  amonia  menimbulkan warna  coklat  di  bawah  sinar  tampak  dan berpendar biru di bawah sinar UV 366 nm (Marliana, 2007)
Uji aktivitas antioksidan ekstrak terpurifikasi
Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan dengan menggunakan metode
DPPH.  Pada  saat  DPPH  direaksikan dengan  senyawa  yang  bersifat  antioksidan atau peredam radikal bebas maka intensitas warna ungu  akan berkurang dan bila  senyawa  peredam  radikal  bebas  yang bereaksi  jumlahnya  besar  maka  DPPH dapat berubah warna menjadi kuning.
Parameter yang dipakai untuk menunujukkan aktivitas antioksidan adalah Inhibitiory Concentration (IC 50 ). Nilai IC 50 dapat  didefinisikan  sebagai  besarnya konsentrasi yang dapat menghambat aktivitas  radikal  bebas  sebesar  50% (Molyneux, 2003).
Gambar  2. Nilai IC 50 (A) eksrak etanol, (B) ekstrak terpurifikasi
Gambar  2  menunjukan  bahwa  ektrak terpurifikasi memiliki aktivitas antioksidan yang  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan ekstrak yang belum terpurifikasi.

## Uji Aktivitas Sediaan Gel
Pengujian  ini  bertujuan  untuk mengetahui seberapa besar aktivitas
ekstrak  terpurifikasi  daun  Paliasa  setelah diformulasikan  menjadi  sediaan  gel.  Gel dibuat  menggunakan  ekstrak  terpurifikasi daun  paliasa  dengan3  variasi  konsentrasi yaitu 1.IC 50 , 3.IC 50 , dan 6.IC 50 .
Gambar  3  terlihat  bahwa  nilai  IC 50 untuk basis gel  ialah 2206,33 ppm. Menurut  Jun dkk.  (2003)    nilai  IC 50 di  atas  500  ppm sudah tidak memiliki aktivitas antioksidan. Aktivitas  antioksidan  berbanding  terbalik dengan nilai  IC 50 , semakin kecil nilai  IC 50 maka semakin besar aktivitas antioksidannya. Nilai  aktivitas antioksidan akan bertambah seiring dengan bertambahnya  konsentrasi  ekstrak  yang terkandung  dalam  sediaan  gel.  Semakin besar konsentrasi ektrak terpurifikasi maka semakin besar aktivitas antioksidannya.

## Uji Stabilitas Sediaan Gel
Cycling  test. Uji  ini  dilakukan  pada sediaan  dengan  suhu  penyimpanan  yang berbeda  dalam  interval  waktu  tertentu dengan tujuan untuk mempercepat terjadinya perubahan yang biasanya terjadi pada  kondisi  normal.  Hasil  pengamatan sebelum  dan  setelah cycling  test gel selama  6  siklus  menunjukkan  terdapat perubahan warna. Perubahan warna terjadi pada siklus ke 4. Perubahan warna tersebut terjadi akibat proses penyimpanan gel pada suhu panas.
123,70 93,52 0 20 40 60 80 100 120 140 A B IC 50 ( pp m ) 2206,33 333,12 242,13 147,31 0 500 1000 1500 2000 2500 Basis F1 F2 F3 IC 50 ( pp m ) Sediaan Gel
Gambar 3. Nilai IC 50 sediaan gel yang mengandung ekstrak terpurifikasi konsentrasi 1.IC 50 (F1), sediaan gel yang mengandung ekstrak terpurifikasi konsentrasi 3.IC 50 (F2), sediaan gel yang mengandung ekstrak terpurifikasi konsentrasi 6.IC 50 (F3)
Gambar 4. (a) sediaan gel sebelum cycling test, (b) sediaan gel setelah cycling test Uji Organoleptik. Pemeriksaan
organoleptik  meliputi  warna,  bau  dan tekstur  gel  ekstrak  metanol  daun  Paliasa pada  sebelum  dan  sesudah  perlakuan cycling  test .Uji  organoleptik  untuk  warna menunjukan  makin  tinggi  konsentrasi ekstrak  maka  makin  pekat  warna  yang terbentuk.  Hasil pengamatan pada  Tabel  4
dapat  dilihat  tidak  adanya  perubahan    bau serta  tekstur  terhadap  perlakuan cycling test , tetapi terdapat perubahan warna untuk F2  dan  F3.  Faktor  yang  mempengaruhi perubahan  warna  tersebut  yaitu  reaksi browning (pencoklatan)  (Ninik  dkk.,
2007).
Tabel 4 . Hasil pengamatan organoleptik gel sebelum dan sesudah cycling test Sediaan gel Warna Bau Tekstur Sebelum Sesudah Sebelum Sesudah  Sebelum  Sesudah Basis Putih (bening) Putih (bening) Khas karbomer Khas karbomer Tidak lengket Tidak lengket F1 Putih kekuningan Kunig muda Khas Paliasa Khas Paliasa Tidak lengket Tidak lengket F2 Kuning Kuning Kecoklatan Khas Paliasa Khas Paliasa Tidak lengket Tidak lengket F3 Kuning terang Coklat Khas Paliasa Khas Paliasa Tidak lengket Tidak lengket Viskositas. Viskositas  suatu  sediaan  dapat dipengaruhi oleh beberapa faktor diantaranya  faktor  pada  saat  pencampuran atau  pembuatan  sediaanpemilihan  bahan- bahan  yang  digunakan  serta  ukuran partikel  (Ansel,  1989).  Hasil  pengujian viskositas  gel    (Gambar  5)  menunjukkan bahwa  viskositas  sediaan  gel  semakin bartambah  seiring  dengan  bertambahnya
konsentrasi  ekstrak  terpurifikasi  yang ditambahkan dalam sediaan gel.
Viskositas  sediaan    gel    menurun  setelah proses cycling  test . Cycling  test siklus terakhir  sediaan  gel  disimpan  pada  suhu tinggi.  Suhu  tinggi  akan  memperbesar jarak  antar  partikel  sehingga  gaya  antar partikel  akan  berkurang.  Jarak  yang semakin  besar  menyebabkan  viskositas semakin menurun (Anggraeni dkk., 2012).
a b
Uji pH. Uji pH bertujuan untuk mengetahui  apakah  pH  sediaan  gel  yang dibuat  memiliki  pH  yang  sesuai  dengan pH kulit yaitu 4,5-6,5. Apabila pH sediaan
berada  diluar  interval  pH  kulit  akan menyebabkan  kulit  menjadi  kering  atau bahkan  terjadi  iritasi.  Hasil  uji  pH  dapat dilihat pada Gambar 6.
Gambar 6 . Diagram  hasil uji pH formula sediaan gel  sebelum cycling test [ ] dan setelah cycling test [ ] konsentrasi ekstrak terpurifikasi 1.IC 50 (F1), konsentrasi ektrak terpurifikasi 3.IC 50 (F2), konsentrasi ekstrak terpurifikasi 6.IC 50 (F3)
Perbedaan konsentrasi ekstrak terpurifikasi daun  Paliasa  mempengaruhi  pH  sediaan gel.  Hasil  pengukuran  gel  diperoleh    pH yang  semakin  meningkat  seiring  dengan peningkatan konsentrasi ekstrak terpurifikasi  daun  Paliasa.  Perubahan  pH sediaan gel juga terjadi setelah cycling test.

## Homogenitas
Pengamatan dilakukan
secara visual  diperoleh  hasil  bahwa  formula  gel
tanpa  ekstrak  dan  formula  gel  dengan ekstrak  terpurifikasi  daun  Paliasa  adalah homogen.  Homogenitas  tersebut  dilihat dari  tersebarnya  persamaan  warna,  tidak terdapat  partikel  tidak  larut  dan  tidak terdapat  gumpalan-gumpalanpada  kaca objek. Proses cycling test tidak mempengaruhi homogenitas sediaan gel. KESIMPULAN 366,66 390 433,33 503,33
350 370 413,33 493,33 0 100 200 300 400 500 600 Basis F1 F2 F3 V iskosi tas (cP ) Sediaan Gel 5,58 5,78 5,91 6,11
5,90 6,08 6,29 6,50 0 1 2 3 4 5 6 7 Basis F1 F2 F3 pH Sediaan Gel
Gambar 5. Nilai viskositas sebelum cycling test [ ] dan setelah cycling test [ ] sediaan gel yang mengandung ekstrak terpurifikasi konsentrasi 1.IC 50 (F1), sediaan gel yang mengandung ekstrak terpurifikasi konsentrasi 3.IC 50 (F2), sediaan gel yang mengandung ekstrak terpurifikasi konsentrasi 6.IC 50 (F3)
Ekstrak  terpurifikasi  daun  Paliasa ( K.  hospita L.)  baik  sebelum  maupun sesudah  diformulasikan  menjadi  sediaan gel memiliki aktivitas antioksidan.Aktivitas antioksidan dari ekstrak terpurifikasi daun paliasa disebabkan  kandungan  senyawa  yang terkandung  di  dalamnya,  salah  satunya adalah senyawa flavonoid.Formula sediaan gel ekstrak terpurifikasi daun paliasa stabil ditinjau  dari  parameter  viskositas,  pH, homogenitas  dan  tidak  stabil  ditinjau  dari parameter  organoleptis  karena  terjadi perubahan  warna  setelah  proses cycling test.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  tim  peneliti ucapkan untuk semua pihak yang berkontribusi terhadap pelaksanaan penelitian  ini,  terutama  kepada  pihak Fakultas  Farmasi  yang  telah  menyediakan sarana khususnya laboratorium.

## DAFTAR PUSTAKA
Anggraeni  Y,  Hendradi  E,  dan  Purwanti T.2012.    Karakteristik  Sediaan  Dan
Pelepasan Natrium Diklofenak dalam  Sistem  Niosom  dengan  Basis Gel Carbomer 940. Pharmasciential . Vol 1 (1).
Ansel, H.C. 1989. Pengantar Bentuk Sediaan  Farmasi  Edisi  IV .  Jakarta; Universitas Indonesia Press
Arung ET, Kusuma IW, Purwatiningsih S, Roh  SS,Yang  CH,  Kim  YU, et  al . 2009.  Antioxidant  Activity  and Cytotoxicity  of  the  Traditional Indonesian Medicine Tangohai
(Kleinhovia  hospita  L.) Extract . J.Acupunct Meridian Stud .4; 306-8.
BSN.  2005. Jahe  untuk  Bahan  Baku  Obat. Jakarta ;:  Badan  Standardisasi Nasional.
DepartemenKesehatan  RI.2000. Parameter
Standar  Umum  Ekstrak  Tumbuhan
Obat. Jakarta:
Departemen
Kesehatan RI.
Departemen  Kesehatan  RI.  1985. Materia Medika  IndonesiaEdisi  VI.  Jakarta :
Dirjen Pengawas Obat dan Makanan.
Dewi  RK. 2010. Optimasi  Formulasi Mikroemulsi Sediaan Hormon Testosteron  Undekanoat [Skripsi]. Jakarta:  Universitas  Negeri  Islam Negeri Syarif Hidayatullah.
Djajadisastra  J,  Mun’im  A,  dan  Dessy NP.2009. Formulasi Gel Topikal dari Ekstrak Nerii Folium dalam Sediaan
Anti Jerawat. Jurnal Farmasi
Indonesia .4 (4): 210 -216.
Elsner  P  and  Howard  IM.  Cosmeceuticals Drug  Vs  Cosmetics.  New  York: Marcel Dekker Inc; 2000.
Enos.  Mengilmiahkan  Obat  Alamiah.
2012: diambil dari http://www.ristek.go.id .  diakses  1 Maret, 2015.
Harbone  JB,  1996. Metode  Fitokimia  Jilid III. Bandung: Penerbit ITB.
Hernani TM dan Christina W. 2007.Pemilihan Pelarut pada Pemurnian Ekstrak Lengkuas ( Alpinia  Galanga )  secara  Ekstraksi. Jurnal Pascapanen .4(1):1-8.
Jun MHY, J Fong, X, Wan CS, Yang CT, Ho. 2003. Camparison of Antioxidant Activities of Isoflavones Form  Kudzu  Root (Puerarua  labata O) . Journal FoodScience Institute of Technologist .68:2117-2122.
Lieberman,  Rieger  and  Banker.1989.
Pharmaceutical Dosage Form Disperse System . New York: Marcel Dekker Inc;. 495-498.
Markham KR.1988. Cara Mengidentifikasi Flavonoid diterjemahkan oleh
Kosasi Padmawinata. Bandung:
Penerbit ITB.
Marliana  E.  2007.  Analisis  Senyawa Metabolit  Sekunder  dari  Batang
Spatholobus  Ferrugineus (Zoll  &
Moritzi)  Benth  yang  Berfungsi sebagai Antioksidan. Jurnal Penelitian MIPA .1(1).
Molyneux  P.2003.  The  use  of  the  stable free  radikal  diphenylpicrylhydrazyl
(DPPH)  for  estimating  antioxidant activity. Journal
Science ofTechnology .26 (2): 211-219.
Ninik  WY,  Diah  PW,  Mimik  M.2007.
Pengaruh  Perbedaan  Konsentrasi Ekstrak  Etanolik  Umbi  Bengkuang
(Pachyrrhizus  erosus,  Urb) dalam Sediaan Krim terhadap Sifat Fisiknya. Jurnal  Ilmu  Farmasi  dan Farmasi Klinik. . 4(1): 1-3.
Putri  IJ,  Fauziyah,  Elfita,2013.    Aktivitas Antioksidan  Daun  dan  Biji  Buah
Nipah  ( Nypa  fruticans )  Asal  Pesisir
Banyuasin  Sumatera  Selatan  dengan Metode  DPPH .  Maspari  Journal .5 (1): 16-21.
Risnafiani  AR,  Endah  R,  Hilda  A,
2015.Karakterisasi Daun Buncis
( Phaseolus  vulgaris L.  )  daan Identifikasi  Kandungan  Senyawa Steroid dengan Metode Kromatografi Lapis Tipis dan Kromatografi  Cair  Kinerja  Tinggi. Prosiding Penelitian Sivitas
Akademika  Unisba  (Kesehatan  dan Farmasi). Bandung
Srijanto B, Olivia, BP, Lely K, Eriawan R, Sriningsih,2012.  Pemurnian Ekstrak Etanol Sambiloto ( Andrographis Paniculata Ness.)  dengan  Teknik Ekstraksi Cair-Cair. Prosiding InSINas . Jakarta, 29-30 November.
Yunita, Azidi I, dan Radna N,
2009.Skrining Fitokimia Daun Tumbuhan  Katimaha  ( Kleinhovia hospital L.). Sains  dan  Terapan Kimia .  3 (2): 112 – 123.